CN1023322C - 羧基链烯酰胺基头孢菌素类化合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

新抗菌剂7β-(羧基链烯酰基氨基)-3-头孢烯-4-羧酸化合物(I)或其衍生物的制法，该法通过(1)按以下反应式用羧酸链烯酸化合物(III)或其易反应衍生物将7β-氨基-3-头孢烯-4-羧酸化合物(II)酰胺化，(2)将反应产物有选择地脱去保护基和/或(3)使成盐而制得此抗菌剂。式中R是芳基或杂环基，R¹是氢或卤素，R²是单键、亚烷基或硫杂亚烷基，R³是氢原子或形成盐或脂的基团，R⁴是氢或甲氧基，R⁵是氢或头孢菌素3位取代基，R⁶是氢原子或形成盐或酯的基团，X是氧、硫或亚硫酰基。

Description

本发明是关于制备新抗菌剂7β-（羧基链烯酰基氨基）-3-头孢烯-4-羧酸化合物（Ⅰ），或其衍生物的方法。本方法是按下列反应式通过（1）用一个羧基链烯酸化合物（Ⅲ）或其活性衍生物对7β-氨基-3-头孢烯-4-羧酸化合物（Ⅱ）或其有活性的衍生物进行酰胺化;（2）有选择地脱掉保护基和（或）（3）使形成相应的盐来制备这种新抗菌剂：

（这里，R是芳基或杂环基;

R¹是氢或卤素;

R²是一个单键、亚烷基，或硫杂亚烷基;

R³是一个氢原子，或形成盐或酯的基团;

R⁴是氢或甲氧基;

R⁵是氢，或是一个在第3位置上头孢菌素的取代基;

R⁶是一个氢原子，或形成盐或酯的基团;而X是氧、硫或亚硫酰基）。

以下说明在反应式中的各种基团：

R最好选自下列基团之一：苯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、异 噁唑基、可被保护的氨基异噁唑基、噻唑基、任意保护的氨基噻唑基、噻二唑基和氨基噻二唑基。其中更好的是任意保护的氨基噻唑基。在氨基的许多保护基团之中，最好采用具有7到20个碳原子的被任意取代的芳烷基，具有1到8个碳原子的被任意取代的烷基、被取代的苯硫基，具有1到8个碳原子的被取代的亚烷基，具有7到14个碳原子的被取代的芳亚烷基，具有5到8个碳原子的被取代的环亚烷基、酰基（例如：具有1到8个碳原子的被任意取代的链烷酰基、具有2到12个碳原子的被任意取代的低级烷氧羰基、具有8到15个碳原子被任意取代的芳烷氧羰基、琥珀酰基、邻苯二酰基、三烷基硅基、烷氧基二烷基硅基、三烷基锡基），以及类似的基团。

R¹最好是氢或氯。

作为R²一部分的亚烷基是低级亚烷基，最好是具有1到3个碳原子的亚烷基，特别是亚甲基。

作为一个头孢菌素的取代基，R⁵是已熟知的在第3位置上头孢菌素的3-位取代基，其中有：羟基、链烷酰氧基、卤素、烷氧基、烷硫基、链烯硫基、烷基、链烯基、被取代的甲基或类似基团。这里，所述甲基上的取代基可以是吡啶鎓（Pyri d inio）、取代的吡啶鎓、卤素、羟基、烷氧基、酰氧基、烷硫基、卤代烷硫基、氰烷硫基、杂环硫基、三唑基、四唑基、或其它类似基因。上述烷基部分最好是甲基。R⁵最好是氢、乙烯基、氨基甲酰氧甲基、四唑基硫甲基、或噻二唑基硫甲基。

R³或R⁶作为一个羧基上的改性基团，在青霉素和头孢菌素领域内是已知的，因为将这些基团引入或脱去时，对分子的其他部分没有不良作用。有代表性的结合形式是，碱金属或碱土金属盐、烷基胺 盐、芳香碱盐、任意取代的具有1到8个碳原子的烷基酯、具有7到15个碳原子的芳烷基酯、具有6到12个碳原子的芳香酯、具有3到12个碳原子的甲锡烷基酯、具有1到12个碳原子的N-羟氨基酯、具有2到7个碳原子的链烯基酯及类似的基团。作为羧基保护基团时，R³和R⁶最好是：氢、钠、钾、甲基、叔丁基、三氯乙基、甲磺酰乙基、苯基、2，3-二氢化茚基、苄基、氰苄基、卤苄基、甲基苄基、硝基苄基、苯基苄基或类似基团。为制成最后的产物，需要脱去保护基团。这样，只要所用基团能起到保护作用即可，它的结构是不重要的，所以它可被许多等效的基团所代替。

X最好是硫。

由于7-位支链中的双键而形成的两个几何异构体均是抗菌类化合物。其中，R及R¹为顺式位置的异构体是较强的抗菌剂。其它几何异构体（反式）作为制备相应的顺式异构体的中间体，也是有用的。

与化合物（Ⅰ）密切相关的一些化合物，已公布在日本专利出版物上，公告号为10，996（1967），公开号为57-93982（1982），以及比利时专利816408和888389上，这些化合物在杀菌力、肠内或肠外的吸收能力，排泄作用等方面并不比化合物（Ⅰ）优越。

化合物（Ⅰ）是抗菌剂，能够抵抗好氧革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，也能抵抗厌氧菌。特别是：化合物（Ⅰ）具有抗革兰氏阴性菌作用强、吸收力好、排泄快和高分布性等及其它一些显著的优点。因此，此化合物是治疗细菌感染的有效药物。化合物（Ⅰ）作为预防或治疗细菌感染病的药物，可以口服、注射或局部应用，每天剂量为10微克到6克。如果需要还可与常规附加剂或共同起作用的药物例如其它抗菌剂一同配制。被保护的化合物（Ⅰ）作为合成其它的抗菌剂（Ⅰ） 的原料也是有用的。有些R²为亚甲基的化合物（Ⅰ），可在消化器官被吸收，适用于作口服头孢菌素。特别有效的是那些R为2-氨基噻唑-4-基、R³和R⁴为氢，以及R⁵为氢、乙烯基、氰乙烯基、三氟丙烯基、乙酰氧甲基、氨基甲酰氧甲基或噻二唑硫甲基的化合物（Ⅰ）以及它们的盐。

本发明按下述6点实施：

（1）酰胺化

胺（Ⅱ）或其活性衍生物同羧酸（Ⅲ）或其活性衍生物的一般性反应可得出化合物（Ⅰ）或其衍生物。

胺（Ⅱ）的活性衍生物是7-氨基被甲硅烷基、甲锡烷基、亚烷基、易脱去的酰基或类似的基团活化的化合物，或分子中其它的官能团被保护的化合物。

游离酸（Ⅲ）需在缩合剂（碳化二亚胺、羰基化合物、异噁唑鎓盐、酰氨基化合物等）存在下起反应。

羧酸（Ⅲ）的活性衍生物可以是酸酐，例如：对称酐或混合酐（与无机酸、有机酸所成的酸酐、内酐等）、酰基卤、活性酯（烯醇酯、芳基酯、杂环酯、带有N-羟基化合物的酯、二酰基羟胺酯、硫酯以 及类似物），或活性酰胺（芳香杂环酰胺、N-二酰基苯胺）。同上述衍生物一起使用的除酸剂有，例如：无机碱、有机碱、环氧乙烷、吡啶鎓盐、吸附剂及其它类似物。

（2）羧基保护基等保护基团的脱去。

在被保护化合物（Ⅰ）上的酯基，可按下列通常方式脱去酯形成基，例如：

（a）高活性的酯基可用酸、碱、缓冲液或离子交换树脂在水中脱去羧基保护基。当其活性不足时，用常规方法能增加其活性以使酯形成基易于脱掉。

（b）芳烷基酯可在催化剂的存在下，用常规的氢催化还原法脱去羧基保护基。

（c）芳烷基、环丙基甲基、磺酰乙基或类似基的酯，可通过加溶剂分解的方法脱去羧基保护基〔溶剂可用无机酸、路易斯酸（例如：三氯化铝、四氯化锡、四氯化钛）、磺酸（例如：甲磺酸、三氟甲磺酸）、强羧酸（三氟乙酸）或类似溶剂〕。如果需要，可同时在阳离子净化剂（如：苯甲醚、苯硫酚）存在下脱去羧基保护基。

（d）在化合物（Ⅰ）中的氨基保护基，可由常规方法脱去，例如：被取代的烷基、芳烷基、亚烷基、芳亚烷基、链烷酰基、三烷基硅基、三烷基锡基、苯硫基、或含水酸或非含水酸的其它化合物;烷氧基甲酰、芳烷氧基甲酰、芳烷基等，在上述除酸剂存在下，可以用路易斯酸脱去;卤烷氧基羰基、芳烷氧基或类似基可经还原脱去;活性乙酰基可用碱脱去。

在化合物（Ⅰ）中，羟基或类似官能基团的保护基团可用在各种科学和专利文献中已记载的、在青霉素和头孢菌素化学领域内已公知的方法脱去。

（3）盐的形成

在化合物（Ⅰ）的头孢烯核上第4位或在7-取代基中的羧基，可通过同轻金属的碱反应，或同其它羧酸的相应轻金属盐的交换反应形成轻金属盐（Ⅰ）。成盐操作可按本领域的常规方法进行，例如：中和游离酸，蒸去溶剂;或将游离酸在极性有机溶剂中用轻金属的低级羧酸盐处理，然后加入这些盐在其中微溶的极性较低的溶剂使盐析出。溶剂可经过滤除去。

（4）反应条件

上述（1）到（3）的反应，通常在-60℃到120℃，最好在-20℃到80℃进行，反应时间根据反应类型的不同为10分钟到10小时不等。反应在溶剂内完成。其它的常规条件（如：搅拌、振荡、以惰性气体密封、干燥）也可利用。

典型的反应溶剂举例如下：烃、卤代烃、醚、酮、酯、硝基烃、腈、酰胺、亚砜、羧酸、有机碱、醇、水和其它工业用溶剂及其混合物。

（5）反应后处理

用常规方法，从反应混合物中去除杂质，即可得到产物，可用一般后处理法或与上述操作结合起来的方法分离出产物。

（6）原料

本发明所用的原料，可通过本专利申请人同时申请的专利申请案内所描述的任何一个方法获得。

实施例

在下面9个例子中阐述本发明的具体实施方案：

在实施例中，所谓“份”（Part），是指用重量计算的部分，而 “当量”是指同β-内酰胺原始材料相比的克分子当量：符号“顺”（cis）和“反”（trans）表示连接到支链双键上的（酰）氨基和羧基取代的基团的相对位置。产物的物理化学常数汇集在表中。在表内IR以单位cm^-1表示波数;NMR以单位ppm表示化学位移;J值表示耦合常数，单位为HZ。几何异构体的混合物在NMR图谱中，信号产生两个或更多的裂分，化学位移相差显著者，用逗号分开，化学位移相差小者用裂分数（如2，3……）乘以（X）裂分记号（如，s，t，m等）来表示。

所有的浓缩操作是在减压下完成的。

编写字的解释：

AOM＝乙酰氧甲基;BH＝二苯甲基;BU＝丁基;BOC＝叔丁氧基羰基;Bzl＝苄基;Cbz＝苄氧基羰基;在结构式的杂环上的圆圈＝此环是芳族的;exo＝在7-支链酰基上的3，4-双键位置同分异构体;Me＝甲基;MEM＝甲氧基乙氧基甲基;ph＝苯基;PMB＝对甲氧基苄基;PNB＝对硝基苄基;而POM＝三甲基乙酰羟甲基。

实施例1（钠盐）

（1）将表2内的一个羧酸（I、R³和（或）R⁶＝H）（1克）溶解在0.5%碳酸氢钠水溶液（6毫升）内，用盐酸调整PH到7，用醋酸乙酯洗涤，脱盐，再将溶液倒入一个10毫升的小瓶内。用通常方法将其冷冻干燥，可得相应的钠盐（I、R³和（或）R⁶＝Na）粉末。

（2）同样地，把碳酸钠水溶液加入到表2的羧酸（I、R³和（或）R⁶＝H）（1克）在水中的悬浮液内，做成PH为6.5的溶液。将 此溶液脱盐，并倒入10毫升的小瓶内，冷冻干燥以获得上述同样的钠制剂。

（3）把在无菌条件下制备的钠盐（1克）溶入无菌水（4克）中，给患有金黄色葡萄球菌感染的病人每日口服或静脉注射两次，以治疗上述疾病。

（4）把表2上的每一种羧酸溶解在碳酸钠水溶液中即成钠盐溶液检验此钠盐以便得出其最小抑制浓度。用日本化学疗法学会的标准方法检验，得到下列数值：3.1到0.2微克/毫升，能抗生脓性的链球菌C-203;0.8到0.025微克/毫升，能抗大肠埃希氏杆菌。

实施例2（酰胺化）

把7β-氨基化合物（2）（1当量）用与7β-支链对应的羧酸（3）或其活性衍生物进行处理，得到酰胺（1）（表1或2），所用方法如下：

1）将二氯甲烷（10体积）、2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉（1.1当量）、N，N′-二环己基碳化二亚胺（1.1当量）、吡啶（1.5当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物在0℃到室温下，搅拌1～6小时。

2）将醋酸乙酯（10体积）、二-2-吡啶基二硫化物（1.1当量）、三苯膦（1.1当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物在10℃到50℃搅拌2～6小时。

3）将二氯甲烷（3体积）、1，3，5-三吡啶鎓三嗪三氯化合物（4当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物于-10℃到10℃搅拌1～5小时。

4）将四氯化碳（30体积）、4-甲基吗啉（1.5当量）、三-二乙基氨基膦（1.1当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物在-20℃到10℃保持1～5小时。

5）将三氯甲烷（10体积）、二甲基乙烷（10体积）、三乙胺（1.5克分子）、以及羧酸（3）和异丁氧基甲酸的混合酸酐的混合物于温度-5℃到10℃之间搅拌30分钟到6小时。

6）将醋酸乙酯（10体积）、1，2-二氯乙烷（10体积）、4-甲基吗啉（1.5当量）和羧酸（3）的对称酸酐（1.1当量）的混合物回流10分钟到2小时。

7）将二氯甲烷（10体积）、吡啶（1.5当量）、以及羧酸（3）和甲磺酸的混合酸酐（1.1当量）的混合物于-70℃到室温之间搅拌1～3小时。

8）将醋酸乙酯（10体积）、吡啶（1.5当量）、以及磷酸二乙酯和羧酸（3）的混合酸酐（1.5当量）的混合物于温度0℃到10℃搅拌1～5小时。

9）将醋酸乙酯（10体积）、二氯甲烷（10体积）、N-甲基吗啉（1当量）、以及羧酸（3）和二氯磷酸的混合酸酐（1.1当量）的混合物于0℃到室温下，搅拌1～3小时。

10）将二甲基吡啶（1.5当量）、二氯甲烷（10体积）、以及羧酸（3）和一氯磷酸二甲基酰胺的混合酸酐（1.1到2当量）的混合物于温度0℃到30℃搅拌1～4小时。

11）将二氯甲烷（5体积）、三氟乙酸酐（1.5当量）、吡啶（3当量）、和羧酸（3）（1.5当量）的混合物于温度0℃到室温下搅拌1～5小时。

12）将二氯甲烷（10体积）、磷酸二乙酯的酰溴（1.2当量）、4-甲基吗啉（2.5当量）和羧酸（3）（1.2当量）的混合物于温度0℃到室温下搅拌1～3小时。

13）把在头孢烯环上的第4位置上有羧基的胺（2）溶于碳酸氢钠（2.5当量）的水溶液（10体积）中。将羧酸（3）的酰氯（1.1当量）滴加入上述水溶液中。将此混合物在-5℃到室温下保温30分钟到2小时。

14）把在头孢烯环上的第4位置上有羧基的胺（2），用三甲基氯化硅和三乙胺（各为1.2当量）处理，然后，在-30℃下，用吡啶（4当量）和羧酸（3）的酰氯（1.1当量）处理30分钟到2小时，最后将得到的硅烷基酯用酸水解。

15）将溶于二氯甲烷（20体积）内的甲基吡啶（4当量）和羧酸（3）的酰氯（1.2当量）的溶液在0℃到-30℃搅拌30分钟到2小时。

16）将二甲基甲酰胺（2体积）和乙酸乙酯（10体积）的混合物，同三乙胺（1.1当量）和羧酸（3）的酰氯（1.1当量）一起，在温度为0℃到20℃，搅拌30分钟到3小时。

17）将二氯甲烷（30体积）、氰尿酰氯（1.1当量）、吡啶 （4当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物在-30℃到10℃。搅拌5分钟到2小时。

18）将二氯甲烷（3体积）、磷酰氯（1.1当量）、三乙胺（1.5当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物，在-10℃到10℃下，搅拌20分钟到3小时。

19）用三甲基氯化硅和除酸剂处理胺（2），获得相应的N-三甲基硅基化合物。此化合物在0℃到室温下，用磷酰氯（1.5当量）、羧酸（3）（1.2当量）、以及二甲基苯胺（4当量）在二氯甲烷（5份）中处理30分钟到2小时。

20）将二氯甲烷（8体积）、甲硫酰氯（1.5当量）、吡啶（2.5当量）、和羧酸（3）（1.1当量）的混合物在-30℃到0℃搅拌1到1.5小时。

21）将氯仿（3体积）、甲苯（1体积）、甲基吡啶（2当量）、草酰氯（1当量）和羧酸（3）（1.1当量）的混合物于-50℃到10℃搅拌10分钟到2小时。

22）将二氯甲烷（20体积）、吡啶（3当量）、和羧酸（3）（3当量）的苯并三唑酯于10℃到50℃搅拌5小时到30小时。

23）将二氯甲烷（20体积）、2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氢喹啉（2.5当量）和羧酸（3）（2当量）在室温搅拌1到15小时。

24）将二噁烷（10体积）和羧酸（3）的苯二酰亚氨酯（2当量）的混合物在10℃～50℃搅拌2～8小时。

25）将甲基异丁基酮（10体积）和羧酸（3）的琥珀酰亚胺酯（1.5当量）的混合物在0℃～40℃搅拌2～9小时。

26）将羰基二咪唑（1.1当量）、四氢呋喃（10体积）、二甲基乙酰胺（5体积）、和羧酸（3）（1.1当量）的混合物在0℃到室温搅拌1～5小时。

27）将二甲基甲酰胺（5体积）、二甲基苯胺（1.3当量）、羧酸（3）以及由二甲基甲酰胺所制得的维尔斯眉尔试剂（Vilsmeyer    reagent）（1.1当量）的混合物在室温搅拌1-5小时。

28）使二氯甲烷（10体积）、二甲基酰胺（5体积）、N，N′-二环己基碳化二亚胺（1.1当量）、甲基吡啶（1.2当量）和羧酸（3）（1.1当量）一起反应2～24小时。

29）将7-氨基-3-（1-甲基-5-四唑基）-硫甲基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯溶于含有2-（2-苄氧酰胺基-4-噻唑基）-4-苄氧羰基-2-丁烯酸（1当量）的二氯甲烷（50份），于溶液中加入N，N′-二环己基碳二亚胺（1当量）。室温搅拌2小时后，浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯中研制，过滤，除去固体，用柱色谱纯制，得7-〔2-苄氧羰基氨基-4-噻唑基）-4-苄氧羰基-2-丁烯酰氨基〕-3-（1-甲基-5-四唑基）硫甲基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯。收率：90%。

30）在0℃把碳酸氢钠（2当量）、2-（2-苄氧羰基-氨基-4-噻唑基）-4-苄氧羰基-2-丁烯酸（1.2当量）、1-羟基苯并三唑（1.2当量）、N，N′-二环己基碳二亚胺（1.2当量）和二噁烷（5份）加入到溶解在水（10份）和二噁烷（15份）的混合液内的7-氨基-3-吡啶基甲基-3-头孢烯-4-碳酰氯的溶液中。在0℃搅拌3.5小时后用1N的盐酸（5份）酸化并过滤混合物。将滤液和洗涤固体的丙酮（50份）合并，用硅胶色谱法纯化， 冷冻干燥，得到7-〔2-（2-苄氧羰基氨基-4-噻唑基）-4-苄氧基羰基-2-丁烯酰氨基〕-3-吡啶鎓甲基-3-头孢烯-4-羧酸酯。收率：50.8%。

实施例3（脱去羧酸保护基）

1）将溶于二氯甲烷（0.3到3份）、三氟乙酸（0.3到3份）和苯甲醚（0.5到5份）的混合液中的表1中的叔丁基、对甲氧苄基或二苯基甲酯的溶液在-10℃到40℃之间搅拌10分钟到3小时。浓缩此溶液，以除去溶剂和试剂。用苯或醚洗涤残渣，得到相应的酸，其收率为70～90%。

2）在-10℃～10℃之间，把三氯化铝、四氯化锡或四氯化钛（3到12当量）加入到表1列举的叔丁基、苄基、对甲基苄基、对甲氧苄基或二苯基甲基酯的二氯甲烷（5到9份）和苯醚（2到8份）的溶液中。将混合物搅拌1到24小时。用稀盐酸和水洗涤此混合物，干燥，浓缩，得到相应的游离酸，其收率为80到95%。当有叔丁氧羰基氨基、N-叔丁氧基羰基-N-甲氧基乙氧基甲基或苄氧羰基氨基存在时，则氨基上的保护基也被脱去而留下氨基。

3）把90%的甲酸（5到6份）和苯甲醚（2到3份）加到表1列举的叔丁基、苄基、对甲基苄基、对甲氧基苄基或二苯基甲基酯溶液中。将混合物在50℃到60℃搅拌1到4小时，得到相应的羧酸，其收率为40到50%。

4）把醋酸（10份）和锌粉（60份）加到溶于二氯甲烷（60份）的表1中的对硝基苄基酯的溶液中去。在0℃搅拌2小时后，将混合物过滤以除去固体，用水稀释，并用三氯甲烷提取。将提取液用水洗涤，再用碳酸氢钠水溶液提取。水层用盐酸洗到PH＝2，并且用二氯甲烷提取。有机层用水洗，干燥，并减压浓缩，得到相应的游 离酸，其收率为60～80%。

5）上述的酯可用下列方法脱去羧基保护剂：在有相同数量的5%披钯木炭存在下，在二噁烷内、室温下通氢振摇2小时。

6）把三氯化铝（9当量）加入7-〔2-（2-苄氧羰基氨基-4-噻唑基）-4-苄氧羰基-2-丁烯酰氨基〕-3-（1-甲基-5-四唑基）硫甲基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯的苯甲醚（12份）溶液中去。在0℃搅拌4小时后，用5%的碳酸氢钠水溶液中和混合物，过滤除去固体，用乙酸乙酯洗涤。水层用盐酸酸化，并用乙酸乙酯洗涤，使其通过一个HP-20或SP-207（由三菱化学公司生产的合成吸附剂）色谱柱。被吸附的物质用80%的甲醇洗脱，得到7-〔2-（2-氨基-4-噻唑基-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-（1-甲基-5-四唑基）硫代甲基-3-头孢烯-4-羧酸。收率：65%。

7）于7-〔2-（2-苄氧基羰基氨基-4-噻唑基）4-苄氧基羰基-2-丁烯酰氨基〕-3-吡啶鎓甲基-3-头孢烯-4-羧酸在苯醚（2份）中的悬浮液中，于0℃加入三氯化铝（9当量）的苯甲醚（2份）溶液。搅拌3.5小时后，混合物用10%的盐酸酸化，并用乙酸乙酯洗涤。使水层通过一个Diaion    HP-20色谱柱。所吸附的物质用含5%丙酮的水溶液洗脱。将洗脱物冷冻干燥，得到7-〔2-（2-氨基-4-噻唑基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-吡啶代甲基-3-头孢烯-4-羧酸。收率：55%。

8）与上述1）到7）的方法相似，表2所列举的游离羧基化合物，可由表1列举的相应的羧基保护的化合物制备。

9）把2-乙基己酸盐（1.5克分子当量）、三苯基膦（0.5当量） 和四个三苯基膦钯络合物（125毫克）加到7β-〔2-（2-苄氧羰基-氨基噻唑-4-基）-4-烯丙氧基羰基-2-丁烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯（3.75克）（5毫克分子）的二氯甲烷（30毫升）溶液中去。在25℃搅拌1小时后，用醚稀释混合物，以分离出7β-〔2-（2-苄酯基氨基噻唑-4-基）-4-钠代羟基羰基-2-丁烯酰氨基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯。收率94%。将此化合物悬浮于水（10份）中，用4%的磷酸水溶液酸化，以分离出7β-〔2-（2-苄酯基氨基噻唑基-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯。

实施例4（氨基保护基的脱去）

1）将表1列举的叔丁氧基羰基氨基化合物溶解在二氯甲烷（0.3到3份）、三氟乙酸（0.3到3份）和苯甲醚（0.5到5份）的混合溶剂中的溶液在-10℃～40℃搅拌10分钟～3小时。将此溶液浓缩以除去溶剂和试剂。残留物用苯洗涤，则得到表1或表2中列举的相应的氨基化合物，其收率为70～80%。

2）将表1中列举的叔丁氧基羰基、苄氧羰基氨基、甲基苄氧羰基氨基、甲氧基乙氧基甲基氨基或三苯甲基化合物（1份）溶于二氯甲烷（5～9份），苯甲醚（2～8份）的混合溶剂中，将三氯化铝、四氯化锡或四氯化钛（3～12当量）在-10℃～10℃加到上述溶液中，再将混合物搅拌1到24小时。此混合物用稀盐酸和水提取，将水层通过一个HP-20吸附剂柱，则得到在表1或表2中列举的相应的游离的氨基化合物。其收率为60～80%。当有一个叔丁基、苄基、对甲苄基、对甲氧苄基或二苯甲基等的酯基团存在时，则羧基 上的保护基也被脱去而留下游离的羧基。

3）把硫脲或N-甲基二硫代氨基甲酸酯（4当量）和醋酸钠（2当量）加到表1中列举的氯乙酰氨基化合物溶于四氢呋喃（15份）和甲醇（15份）的溶液中，在室温放置过液，浓缩混合物，用乙酸乙酯稀释，盐水洗涤，干燥，再浓缩。残留物经色谱法提纯。得到相应的氨基化合物。

4）把1到3N的盐酸（0.1到3份）加到表1中列举的甲酰胺基、席夫碱、甲硅烷基氨基或三苯甲基氨基化合物的甲酸、乙酸或乙醇（10份）的溶液中。将混合物在室温下搅拌1～3小时。浓缩反应混合物，用二氯甲烷稀释，再用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，再将其干燥并浓缩。残留物用常规方法纯化，得到表1或表2上列举的相应的游离氨基化合物。

5）把5%披钯木炭（0.5份）加到表1上所列举的苄氧羰基氨基化合物的乙醇和乙酸乙酯（30份，1∶1）的溶液中。将混合物加氢振摇，直到原料耗尽。将反应混合物过滤以除去固体，并浓缩，即得表1或表2上所列举的相应的氨基化合物。

实施例5（酯化）

（R³和（或）R⁶＝二苯甲基）

1）把二苯基重氮甲烷（2当量）加到化合物（I、R³和/或R⁶＝H）的二氯甲烷和甲醇（每一种10份重量）的溶液中。搅拌1小时后，用盐酸和水洗涤混合物，干燥，再浓缩。残留物用乙酸乙酯重结晶，即得到相应的二苯甲酯（I、R³和（或）R⁶＝POM）。

2）把新戊酸碘甲基酯（1到2当量），在冰盐水冷却下，加到化合物（I、R³和/或R⁶＝K）的N，N-二甲基酰胺（2～5份） 的溶液中。搅拌15分钟到2小时，用乙酸乙酯将混合物稀释，用冰水及碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥，真空浓缩。残留物从乙酸乙酯中重结晶，即得表3中所列举的羧酸的新戊酰氧基甲基酯。

3）将上面的2）中所述的钾盐用钠盐代替，在同样条件下可得到同样的产物。

4）将上面的2）中所述的新戊酰氧基甲基酯（250毫克）、谷类淀粉（150毫克）、和硬脂酸镁（5毫克）相混合，做成颗粒状，用常规方法装入胶囊。此胶囊（2～3颗胶囊）可供患有大肠杆菌（E.Coli）感染的病人口服，治疗该病。

（R³和/或R⁶＝AOM）

5）用乙酸碘甲基酯可替代上面2）中的新戊酸碘甲基酯，在同样反应条件下，可得到表3所列举的相应的乙酸基甲基酯。

实施例6（胺盐）

于表2中所列举的氨基化合物的稀盐酸溶液中加入乙腈，用过滤方法收集沉淀物，得到收率很高的相应的盐酸盐。

Claims (7)

1、下式所示的7β-(羧基链烯酰基氨基)-3-头孢烯-4-羧酸化合物的制备方法：

式中R为氨基或保护的氨基取代的噻唑基或噻二唑基，

R¹为氢，

R²为低级亚烷基，

R³为氢原子，成盐金属，或是酯形成基团，

R⁴为氢或甲氧基，

R⁵为氢、乙烯基、氰基乙烯基、三氟丙烯基、乙酰氧甲基、氨基甲酰氧甲基、三唑硫甲基、甲基四唑硫甲基，或未被或被氨基、氨甲基或甲基取代的噻二唑硫甲基，

R⁶为氢原子、成盐金属，或酯形成基团，

X为硫或亚硫酰基，

7-酰氨基双键上胺基和羧基取代基为顺式位置，

该方法包括：用下式所示的羧基链烯酸：

(式中R、R¹、R²和R³的定义如上所述)或其易反应衍生物将下式所示的7β-氨基-3-头孢烯-4-羧酸衍生物：

(式中R⁴、R⁵、R⁶和X的意义同上所述)或其易反应衍生物酰胺化，此酰胺化反应中使用3～30份体积选自烃、酯、酮、酰胺和水的溶剂，

此酰胺化反应中还使用1～4当量选自脱水剂和卤化剂的缩合剂，

此酰胺化反应中还使用1～4当量选自叔胺，芳香族碱和无机碱的碱，

此酰胺化反应中还使用1～3当量的易反应的酸衍生物，其选自：

游离酸、酰卤与羟胺衍生物形成的酯、对称酸酐、与卤代链烷酸或磷酸衍生物形成的混酸酐。

此酰胺化反应在-70℃和67℃之间进行10分钟到24小时；

用碱中和下式所示的7β-(羧基链烯酰基氨基)-3-头孢烯-4-羧酸

式中R，R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶和X如上定义，但R³和R⁶至少一个为氢；

或将带有保护基的下式7β-(羧基链烯酰基氨基)-3-头孢烯-4-羧酸去保护

式中X，R，R¹，R²，R³，R⁴，R⁵和R⁶如上定义，但R³，R⁵和R⁶中至少一个带有一个保护基。

2、根据权利要求1的方法，得到下列化合物之一：

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-乙烯基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-三氟丙烯基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-乙酰氧甲基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-氨基甲酰氧甲基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-三唑硫甲基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-噻二唑硫甲基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-丁烯酰氨基〕-3-甲基四唑硫甲基-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-5-羧基-2-戊烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-6-羧基-2-己烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-2-戊烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸，

7β-〔2-（2-氨基噻唑-4-基）-4-羧基-4-甲基-2-戊烯酰氨基〕-3-头孢烯-4-羧酸，

3、根据权利要求1的方法，其中R为可以用苄氧羰基、叔丁氧羰基、甲基苄氧羰基甲酰基、氯乙酰基或亚苄基加以保护的氨基噻唑基。

4、根据权利要求1的方法，其中R²为可带支链的C_1-3亚烷基。

5、根据权利要求1的方法，其中R²为亚甲基。

6、根据权利要求1的方法，其中R³为氢、甲基、叔丁基、苄基、甲基苄基、对甲氧苄基或对硝基苄基。

7、根据权利要求1的方法，其中R⁶为氢、二苯甲基或对甲氧苄基。