CN102266519A - 一种治疗结核病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种中药组合物，属于医药领域，具体的说是一种结核丸及其制备方法。由龟甲150g、牡蛎100g、鳖甲100g、地黄100g、熟地黄100g、天冬50g、150g、阿胶100g、北沙参100g、龙骨50g、紫石英50g、麦冬50g、熟大黄25g、白及100g、川贝母100g、蜂蜡100g组成。所述龟甲、鳖甲为醋制，百部为蜜灸，紫石英为煅制。制备方法为：将煎煮法难以提取的药材粉碎为药粉，其余药材提取药液并缩成稠膏，以药粉与浸膏3.5∶1比例混合制得。其有益效果在于：具有滋阴养血、补肺清热，促进肺空洞钙化，疗效好、有效杀灭结合病毒、由纯中药制成，提取纯度高，药物损失少。

Description

一种治疗结核病的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，属于医药领域，具体的说是一种结核丸及其制备方法。 

背景技术

结核病是现代医学名称，祖国医学对此病积累了丰富的临床经验，为结核杆菌在肺内所引起的一种慢性传染疾病，属于一种特殊的炎症，其有各种途径的结核菌感染：包括气道、血液、淋巴系统及直接侵蚀。50年代以来，我国结核病的流行趋势虽有下降，但各地区疫情的控制尚不平衡，仍是当前一个突出的公共卫生问题，是全国十大死亡病因之一。 

有效治疗肺结核的药物，主要是西药；如链霉素、雷米封、利福平、乙胺丁醇、异烟肼等，这些药物的相继合成，更令全球肺结核患者的人数大幅减少，但西药一般具有较大的毒副作用。中医则认为结核病五脏之症均可见到，但易于侵犯和病变的脏腑主要在肺，故称其为肺痨；而发生在骨骼的结核病，称其为骨结核。肺痨主症为咳嗽、咳血、潮热、盗汗、身体渐瘦。临床以肺阴亏损为多见，也可见阴虚火旺、气阴两虚、甚或阴阳两虚，治疗应以补虚培元和治痨杀虫为原则，治疗大法以滋阴为主，补虚重点在肺，同时补脾和补肾，火旺的兼清火，气虚者同时补气，阴阳两虚则滋阴补阳，而且中医方法治疗具有标本兼治、副作用小的效果，因而亟待研发疗效好副作用小的抗结核类中药。 

发明内容

本发明目的在于克服以上技术的不足，提供一种结核丸及其制备方法，其 具有滋阴养血、补肺清热，促进肺空洞钙化的疗效，用于治疗肺结核、骨结核，疗效显著。 

本发明所述的一种结核丸，由以下重量份的原料和药用辅料制成：龟甲150份、牡蛎100份、鳖甲100份、地黄100份、熟地黄100份、天冬50份、百部150份、阿胶100份、北沙参100份、龙骨50份、紫石英50份、麦冬50份、熟大黄25份、白及100份、川贝母100份、蜂蜡100份。 

所述龟甲、鳖甲为醋制，百部为蜜灸，紫石英为煅制。 

本发明所述的一种结核丸的制备方法，采用如下步骤完成： 

a.取上述重量份药物； 

b.取净选后的龟甲、鳖甲加醋拌匀，闷透置锅内，炒至焦黄色，取出，放凉；取净选后的百部，洗净，加炼制的蜜水适量，拌匀，闷透，置锅内，用文火炒至焦黄色，取出放凉；取紫石英，打碎，置无烟炉上煅至红透，取出，放凉，碾碎即得；取地黄，加黄酒拌匀，闷透，置锅内，密闭，隔水加热，炖至黄酒吸尽，取出、晒至稍干时，切厚片、干燥，即得熟地黄；取切片大黄，加酒拌匀，置锅内隔水蒸至内外均呈黑色，即得熟大黄；其余药材净选切片，洗净烘干，即得； 

c.处方中动、矿物药龟甲、牡蛎、鳖甲、龙骨、紫石英、阿胶、川贝母、蜂蜡八味，引用常规的煎煮法难以提出有效成分，故将此八味药加工炮制后粉碎成细粉，过100目筛，出粉率为98％； 

d.处方中地黄、熟地黄、天冬、百部、麦冬、熟大黄、白及、北沙参八味，加水煎煮3次，使总提取液为药材的8倍量，将滤液过滤，滤液浓缩至相对密度为1.30～1.35的稠膏，控制温度在20℃，出膏率为30％以上； 

e.将上述a、b步骤制成的药粉与稠膏混合，加适当辅料，拌匀，炼制成适宜制丸的软材，药粉与浸膏的比为3.5∶1； 

f.将e步骤所述的软材称重，按投料量计算丸重，制丸，70～80℃烘干，用活性碳包衣、打光，包装贮藏，依瓶装丸，密封置阴凉、干燥处，防潮。 

所述药粉与稠膏混合温度越高，成品的溶散时限就越长，因为药粉中含有阿胶、蜂蜡等胶性成分，如果温度太高，其易糊化，增加药物粘度，影响成品的溶散时限，故混合温度应控制在室温20～30℃，以保证成品的质量。 

本发明所述的一种结核丸，其剂型优选为浓缩丸。 

本发明所述的一种结核丸及其制备方法，其有益效果在于：具有滋阴养血、补肺清热，促进肺空洞钙化；抗结核活性强、急性毒性小，有效杀灭结核病毒疗效好，由纯中药制成，提取纯度高，药物损失少的优点；还具有止咳，益肾之功效；在目前临床上用于治疗肺结核、骨结核，结核活动期配合西药化疗减毒增效，减少耐药性，增强抗痨作用，减少肺组织损害方面尤为突出；在结核病的活动期联合西药使用，减少耐药性，增加局部血液循环，增加肺部血药浓度，提高抗痨作用；在结核病稳定期，单独使用抗痨片减少肺组织损伤，加快病理组织修复，巩固疗效，提高机体免疫力，防止复发有显著疗效；便于携带，服用、贮藏方便、稳定性好安全可靠。 

具体实施方式

实施例1： 

a.称取以下最优重量比的原料药备用：龟甲150g、牡蛎100g、鳖甲100g、地黄100g、熟地黄100g、天冬50g、百部150g、阿胶100g、北沙参100g、龙骨50g、紫石英50g、麦冬50g、熟大黄25g、白及100g、川贝母100g、 蜂蜡100g； 

b.取净选后的龟甲、鳖甲加醋拌匀，闷透置锅内，炒至焦黄色，取出，放凉；取净选后的百部，洗净，加炼制的蜜水适量，拌匀，闷透，置锅内，用文火炒至焦黄色，取出放凉；取紫石英，打碎，置无烟炉上煅至红透，取出，放凉，碾碎即得；取地黄，加黄酒拌匀，闷透，置锅内，密闭，隔水加热，炖至黄酒吸尽，取出、晒至稍干时，切厚片、干燥，即得熟地黄；取切片大黄，加酒拌匀，置锅内隔水蒸至内外均呈黑色，即得熟大黄；其余药材净选切片，洗净烘干，即得； 

c.处方中动、矿物药龟甲、牡蛎、鳖甲、龙骨、紫石英、阿胶、川贝母、蜂蜡八味，引用常规的煎煮法难以提出有效成分，故将此八味药加工炮制后粉碎成细粉，过100目筛，出粉率为98％； 

d.处方中地黄、熟地黄、天冬、百部、麦冬、熟大黄、白及、北沙参八味，加水煎煮3次，使总提取液为药材的8倍量，将滤液过滤，滤液浓缩至20℃时相对密度为1.30～1.35的稠膏备用，出膏率为30％以上； 

e.将上述a、b步骤制成的药粉与稠膏混合，加适当辅料，拌匀，炼制成适宜制丸的软材，药粉与浸膏的比约为3.5∶1； 

f.将e步骤所述的软材称重，按投料量计算丸重，制丸，70～80℃烘干，用活性碳包衣、打光，包装贮藏，依瓶装丸，密封置阴凉、干燥处，防潮。 

以下通过实验来进一步阐述本发明所选药物的有益效果，试验包括本发明药物一种结核丸的药效学实验。 

一、取本发明的药物进行以下体外抗结核实验(由兰州医学院药学系药理教研室提供数据) 

(一).实验材料： 

1、药物：结核丸(浓缩丸)含生药1.25/g；结核蜜丸含生药0.56/g，均由甘肃天水岐黄药业有限责任公司提供；利福平由西北合成药厂提供(批号910802.)。 

2、动物：昆明种小白鼠18～22个，雌雄各半，由兰州医学院动物室提供。 

3、菌株：结核分枝杆菌H₃₇R_v(Yycobaclercum tuberc-ulosis～H₃₇R_v)和人型分支杆菌均由甘肃省结核病防治所引进，于罗氏鸡卵斜面上传代，37℃培养两周供试验用。 

(二).试验方法： 

1、最低抑菌浓度(MIC)：将结核丸(浓缩丸)和蜜丸分别浸泡于蒸馏水中，置60℃水浴中，保温8小时，冷却、离心，分离上清液，高压灭菌备用。 

利福平经少量二甲基酰胺(DMP)溶解，定容于容量瓶中，高压灭菌备用。 

参照《抗结核药物实验法》体外试验，将上述溶液和罗氏基础液混合，使成2倍系列稀释各药液浓度，85℃间歇灭菌两次。于斜面接种1×10^-3mg/mL均匀菌悬液0.1mL，其最终接种量为10³活菌单位(CFU)，37℃恒温培养两周，未见结核分枝杆菌的最低浓度(MIC，mg/mL)。 

2、小鼠半数动物存活时间(ST₅₀) 

参照《抗结核药物实验法》动物实验性治疗，选昆明杂种小白鼠，各批动物体重差异不超过3～4g，一般体重为16～18g，雌雄数目各半，随机分组，每组10只，结核丸(浓缩丸)与蜜丸给药组各为3组，给药剂量为：2.0141g/kg体重、1.6112g/kg体重、1.2890g/kg体重；另设为治疗对照组和利福平治疗对照组，利福平治疗对照组剂量为10×10^-3g/kg体重。经鼠尾静脉感染一株人型 结核分枝杆菌H₃₇R_v强毒实验株系0.5mg(湿重，元含活菌单位10⁶)。感染后第4日起灌胃给药，按0.4mL/20g体重给药，每日二次，连续给药3日，记录各组动物死亡数，按Litch-field氏法作图求各组半数动物存活时间及其95％可信限。 

3、半数动物有效剂量(ED₅₀g/kg体重) 

动物选用同ST₅₀实验，将动物随机分组，每组10只，结核丸(浓缩丸)与蜜丸给药组各为5组，给药剂量为：2.5172g/kg体重、2.0141g/kg体重、1.6112g/kg体重、1.2890g/kg体重、1.0312g/kg体重；另设为治疗对照组和利福平治疗对照组，利福平治疗对照组剂量为10×10^-3g/kg。经鼠尾静脉感染一株人型结核分枝杆菌H₃₇R_v强毒实验株系0.5mg，每日一次灌胃给药，记录小鼠存活情况，计算出未给药对照组全部动物死亡时各给药组小鼠存活百分率，按概率单位发法(Bliss)求半数动物有效剂量及其95％可信限。 

4、动物和试验方法用ST₅₀，计算各剂量实验组半数动物存活时间，按下式求得各剂量组ST₅₀相对百分延长： 

以各剂量组的ST₅₀相对百分延长为纵坐标，剂量的对数为横坐标(如图1所示)，做回归直线议程，得ST₅₀％，100％，200％延长所需的剂量，经由下式求得ST₅₀相对百分延长剂量系数： 

5、结果如下： 

5.1结核丸(浓缩丸)和蜜丸在罗氏鸡卵培养基是对人型结核分枝杆菌和人 型结核杆菌H₃₇R_v的最低抑菌浓度比较： 

(MIC mg/ml) 

	结核丸(浓缩丸)	蜜丸	利福平
				人型结核分枝杆菌	38.89	37.50	23.32×10-3
人性结核杆菌H37Rv	0.59	0.61	1.15×10-3

5.2结核丸(浓缩丸)和蜜丸抗小鼠急性实验结核活性比较 

5.3，结核丸(浓缩丸)、蜜丸ED₅₀活性比例 

I＝0.0793 $S{m}_1=0.0793\sqrt{\frac{3-22}{10}}=0.02243$

$S{m}_2=0.0793\sqrt{\frac{2.9-2.05}{10}}=0.02132$

$t=\frac{0.1742-0.1569}{\sqrt{{0.02243}^2-{0.0213}^2}}=0.5590\%$

P＞0.05(质反应取P＝0.05的界限时，t＝1.96故不需查表两工艺产品的ED₅₀无显著差异)。 

5.4、结核丸(浓缩丸)、蜜丸对感染急性实验结核病小鼠半数动物存活时间百分延长活性比较 

结论 

实验结果表明：两种剂型在试管内和小鼠体内表现出较强的抗结核活性，且抗结核活性大体相当，统计学无显著差异。但结核丸(浓缩丸)具有便于携带、服用方便、稳定性较好等优点，是一种较蜜丸更为理想的药品。 

二、结核丸(浓缩丸)的动物急性毒性试验(由兰州医学院药学系药理教研室) 

1.实验材料： 

①药品与试剂：结核丸(浓缩丸)每克含生克1.25g，由甘肃天水岐黄药业 有限责任公司提供；研磨后加蒸馏水配成40％混悬液，共动物实验用。 

②动物：昆明种小鼠，雌雄兼用，20±SD2g，由兰州医学院动物是提供。 

2.方法：急性毒性实验：20±SD2g昆明种小白鼠30只，雌雄各半，禁食不禁水12小时后，ig40％结核丸(浓缩丸)混悬液35mg/kg(最大浓度、最大容量)上、下午各一次，连续观察7天。 

3.结果： 

小鼠一日内给药二次，总给药量为35g生药/kg.d。观察7天，无异常行为出现，未出现任何中毒症状；小鼠进食、粪便、皮毛均正常，生长活动良好，无一小鼠死亡。肉眼尸检主要脏器未见异常。得小鼠ig最大日耐受量为35g生药/kg，相当于推荐的临床人用药量的186倍；表明LD₅₀＞35g生药/kg，即结核丸急性毒性小。 

三、结核丸(浓缩丸)的长期毒性试验由兰州医学院药学系药理教研室提供数据) 

1.实验材料： 

①药物与试剂：结核丸(浓缩丸)(每克含生药1.25g)由甘肃天水岐黄药业有限责任公司；研磨后加蒸馏水配成40％混悬液，供动物试验用。DL-氨基丙酸、硫酸镉、2.4-二硝基苯肼为北京化工厂产品；其它试剂为市售分析纯。 

②动物：Wistar大白鼠，5～6周龄，雌雄各半，由北京实验动物中心供给。 

③仪器：721型分光光度计为上海第三分析仪器厂产品。 

2.实验方法： 

Wistar大白鼠，体重80～100g，在实验室适应一周后，尾尖取血测定SGPT，挑选正常值范围的健康大白鼠120只，按性别、体重和SGPT值均衡分为3组， 每组40只，雌雄各20只。由急毒试验结果表明该药毒性较低，无法测出LD₅₀。根据新药审批办法(1991.9)中有关规定，只设高、低两个剂量组和对照组。 

①高剂量实验组：给药量为4.0g生药/kg，该剂量是药效学试验高剂量(2.014g/kg)的2倍，是小鼠灌胃最大日耐受量的1/8.75，相当于推荐临床人日用量(9.0g/日)的26.7倍； 

②低剂量实验组：给药量为1.5g，略高于药效试验的低剂量(1.289g/kg)，相当于小鼠灌胃最大日耐受量的1/23.3及推荐临床用药量的10倍； 

③对照组：给5ml/kg生理盐水。 

操作：每天上午ig一次，每周6天，连续180天；观察动物生长情况、一般行为，每周称体重一次；给药前及给药后60天、120天180天时尾尖采备，检查血象及肝肾功能。180天时断头处死半数动物，余一半停止给药观察2周后处死。处死的动物进行肉眼尸检，取胸腺、脾、肾上腺、睾丸或子宫称重，计算脏器系数。取心、肝、肺、脾、肾、胃、小肠、睾丸或子宫用10％福尔马林固定，HE染色后进行病理学检查。如高剂量组有明显中毒症状或损害，停药两周后再进行各项测定检查，以观察损害的可逆性。 

结论 

1.本药长期使用对大鼠的生长发育无明显影响，对免疫器官(胸腺、脾)重量无显著影响。 

2.本药长期使用对大鼠红细胞、白细胞、血小板数量均无明显影响，血红蛋白含量也无明显影响。 

3.本药长期使用不损害大鼠肝、肾功能。 

4.长期用药对大鼠重要脏器如：心、肝、脾、肾、肺、胃、肠、睾丸、子 宫等均无明显影响。 

5.参考小鼠急性毒性和药效学试验结果(急性毒性和药效学资料)，得治疗指数＞24.4(ig)，临床使用安全。 

综上所述：本药高、低剂量组长期(180天)灌胃给药，对大鼠无明显毒性。 

Claims (4)

1.一种治疗结核病的中药组合物，其特征在于：是由以下重量配比的原料和药用辅料制成：龟甲150份、牡蛎100份、鳖甲100份、地黄100份、熟地黄100份、天冬50份、百部150份、阿胶100份、北沙参100份、龙骨50份、紫石英50份、麦冬50份、熟大黄25份、白及100份、川贝母100份、蜂蜡100份。

2.一种治疗结核病的中药组合物的制备方法，其特征在于所述方法包含以下步骤：

①粉碎；将此处方中动、矿物药龟甲、牡蛎、鳖甲、龙骨、紫石英、阿胶、川贝母、蜂蜡八味，加工炮制后粉碎成细粉，细度100目，出粉率98％；

②提取：处方中生、熟地黄、天冬、百部、麦冬、熟大黄、白及、北沙参八味，加水煎煮3次，使总提取液为药材的8倍量，将滤液过滤，滤液浓缩成相对密度1.30～1.35，控制温度在20℃备用，出膏率为30％以上；

③制丸：将制成的药粉与稠膏混合，加适当辅料，拌匀混合温度应控制在室温20℃～30℃，炼制成适宜制丸的软材，药粉与浸膏的比约为3.5∶1；按投料量计算丸重，制丸，70～80℃烘干，用活性碳包衣、打光，包装即得。

3.如权利要求1所述的一种治疗结核病的中药组合物，所述龟甲、鳖甲为醋制，百部为蜜灸，紫石英为煅制。

4.如权利要求1所述的一种治疗结核病的中药组合物，其特征在于：其剂型优选为浓缩丸。