CN101759732A

CN101759732A - 一种虎杖苷的制备方法

Info

Publication number: CN101759732A
Application number: CN200910234067A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 张翼; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2009-11-20
Filing date: 2009-11-20
Publication date: 2010-06-30

Abstract

本发明涉及一种成本低，产量大，周期短，易于实现工业化的分离提纯虎杖苷的方法。工艺步骤包括水提、大孔树脂吸附、超滤、浓缩、重结晶。采用本发明生产虎杖苷，工艺简单、能源消耗少、纯度高、外观好。

Description

一种虎杖苷的制备方法

技术领域：

本发明涉及虎杖苷的提取纯化工艺，特别是一种应用大孔树脂和膜技术分离纯化虎杖苷的方法。

背景技术：

虎杖苷(虎杖甙，Polydatin)别名云杉新甙、白藜芦醇甙，是主要存在于虎杖的根茎和根中的天然活性成分。

化学名称：3，4’-5-Trihydroxystilbene-3-beta-D-glucopyranoside

分子式：C₂₀H₂₂O₈

分子量：390.40

理化性质：白色针状结晶粉末。易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、碱性溶液，微溶于水。光稳定性比较差。

自然界中，蓼科植物虎杖根、何首乌根、松科库页云杉树皮、桃金娘科桉树属等都含虎杖苷，但干燥虎杖根茎和根中含量最高。但因为产地不同，虎杖中的虎杖苷含量也会有变化。据文献的不完全报道，各地虎杖的虎杖苷含量为1.00～2.58％，其中产自江苏的虎杖中含量为2.24％。【齐辉等.HPLC同时测定虎杖中4种成分的含量[J].中国中药杂志.2006.12(23)：2003-2005】

关于从虎杖中虎杖苷提取的研究已见于国内很多报道，但都存在工艺流程繁琐，生产周期长，溶剂种类多、毒性大、用量大等问题。如詹益兴主编的《绿色精细化工天然产品制造法(第1集)》提到了虎杖苷的乙醇提取法和超声提取法两种方法，但都用到了挥发性强且毒性较大石油醚，不利于工人健康；又如刘瑞源等人的《白藜芦醇甙在大孔吸附树脂上吸附性能的研究》披露了一种用大孔树脂吸附技术生产虎杖苷的方法，但提取液需要放置过夜，而且用到乙醇、苯、乙酸乙酯三种溶剂，进行了多次萃取操作，延长了生产周期，工业可操作性不强；再如中国专利CN1546503报道了一种层析后梯度洗脱得到虎杖苷的方法，洗脱液干燥后直接得到产品，虽然分离了两种主要产物，但由于没有进一步的提纯操作，乙醇也不是最好的虎杖苷提取剂，实际上产品的纯度无法保障。

发明内容：

本发明的目的是为了提供一种生产工艺简单，能源消耗少，成本低，虎杖苷纯度达98％以上，收率大于70％，产量大，产品外观好，易于实现工业化的虎杖苷提取工艺。

本发明的目的是这样来实现的：

①水提：将新鲜虎杖粉碎，加入饱和石灰水提取1.5～2小时，收集提取液，调酸至pH＝7～8，得粗提液；

②大孔树脂吸附：将上述粗提液，通过大孔树脂柱进行饱和吸附，先水洗除杂，再用乙醇洗脱虎杖苷，得虎杖苷洗脱液；

③超滤：将上述虎杖苷洗脱液通过超滤膜除去大分子杂质，得超滤液；

④浓缩：将上述超滤液减压浓缩，回收乙醇，得浸膏；

⑤重结晶：将上述浸膏用乙酸乙酯重结晶3次，即得白色针状结晶产品。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述水提步骤的原料粉碎粒度是40～80目。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述水提条件为：提取用原料重量的6～8倍量饱和石灰水，搅拌进行，温度控制在50～80℃，提取1.5～2小时。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述水提步骤中调酸可选用盐酸、磷酸、硫酸，调酸终点为pH＝7～8。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述大孔树脂可选用D101型、HPD-100型、XAD-2型大孔树脂。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述大孔树脂的洗脱先用去离子水洗大孔树脂柱至无色，再用柱体积5～6倍量的30～40％乙醇洗脱虎杖苷。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述超滤选用截留分子量为500～2000的中空纤维超滤膜系统。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述浓缩步骤溶液浓缩到原体积的1/20～1/10。

上述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述重结晶过程如下：将浓缩后的浸膏用乙酸乙酯常温饱和溶解，减压蒸发结晶，滤出晶体；晶体按照上述条件重结晶2次。

本发明存在以下优点：全过程除了水提外没有加热操作，所以能耗低。利用虎杖苷易溶于碱水，微溶于中性水的性质，通过调节pH就能够有效地控制虎杖苷的溶解和析出，而引入的有机杂质在大孔树脂吸附和水洗后不会残留，因而不会影响产品纯度。大孔树脂的水洗既除去了水溶性杂质，同时也起到了脱色效果，是产品外观更好。乙酸乙酯相对乙醇对虎杖苷有更好的溶解性，用作结晶剂能使虎杖苷的得率和纯度都得到保证。

所以本发明生产工艺简单，能源消耗少，成本低，虎杖苷纯度达98％以上，收率大于70％，产量大，周期短，产品外观好，易于实现工业化。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取10kg新鲜虎杖(虎杖苷含量2.13％)，在粉碎机中粉碎为40目，加入60L饱和石灰水，加热至50℃，搅拌提取1.5小时。将提取液抽滤后用盐酸调节pH为7，得65.1L粗提液。粗提液通过柱体积5L的D101型大孔树脂饱和吸附，用去离子水洗至无色，再用25L 30％乙醇洗脱虎杖苷。虎杖苷洗脱液通过截留分子量500的中空纤维超滤膜系统除去大分子杂质，透过液减压浓缩至1.25L变成浸膏。浸膏用乙酸乙酯饱和吸附，减压重结晶3次，最终得到152g含量为99.4％的虎杖苷白色针状晶体。

实施例2：

取10kg新鲜虎杖(虎杖苷含量2.25％)，在粉碎机中粉碎为60目，加入70L饱和石灰水，加热至70℃，搅拌提取1.75小时。将提取液抽滤后用磷酸调节pH为7.3，得76.4L粗提液。粗提液通过柱体积5L的HPD-100型大孔树脂饱和吸附，用去离子水洗至无色，再用28L 35％乙醇洗脱虎杖苷。虎杖苷洗脱液通过截留分子量1000的中空纤维超滤膜系统除去大分子杂质，透过液减压浓缩至2L变成浸膏。浸膏用乙酸乙酯饱和吸附，减压重结晶3次，最终得到179g含量为98.9％的虎杖苷白色针状晶体。

实施例3：

取10kg新鲜虎杖(虎杖苷含量1.89％)，在粉碎机中粉碎为80目，加入80L饱和石灰水，加热至80℃，搅拌提取2小时。将提取液抽滤后用磷酸调节pH为8，得87.6L粗提液。粗提液通过柱体积5L的XAD-2型大孔树脂饱和吸附，用去离子水洗至无色，再用30L 40％乙醇洗脱虎杖苷。虎杖苷洗脱液通过截留分子量2000的中空纤维超滤膜系统除去大分子杂质，透过液减压浓缩至3L变成浸膏。浸膏用乙酸乙酯饱和吸附，减压重结晶3次，最终得到144g含量为98.2％的虎杖苷白色针状晶体。

Claims

1.一种虎杖苷的制备方法，其特征在于包括以下几个步骤：

④浓缩：将上述超滤液减压浓缩，回收乙醇，得浸膏；

2.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述水提步骤的原料粉碎粒度是40～80目。

3.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述水提条件为：提取用原料重量的6～8倍量饱和石灰水，搅拌进行，温度控制在50～80℃，提取1.5～2小时。

4.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述水提步骤中调酸可选用盐酸、磷酸、硫酸，调酸终点为pH＝7～8。

5.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述大孔树脂可选用D101型、HPD-100型、XAD-2型大孔树脂。

6.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述大孔树脂的洗脱先用去离子水洗大孔树脂柱至无色，再用柱体积5～6倍量的30～40％乙醇洗脱虎杖苷。

7.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述超滤选用截留分子量为500～2000的中空纤维超滤膜系统。

8.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述浓缩步骤溶液浓缩到原体积的1/20～1/10。

9.根据权利要求1所述虎杖苷的制备方法，其特征在于所述重结晶过程如下：将浓缩后的浸膏用乙酸乙酯常温饱和溶解，减压蒸发结晶，滤出晶体；晶体按照上述条件重结晶2次。