CN101348474A - 一种从丹参茎叶中制备丹酚酸b和丹参素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从丹参茎叶中同时分离丹参素和丹酚酸B的方法。其工艺步骤：1.水提取；2.冷藏，离心或过滤；3.提取液调pH值；4.大孔吸附树脂分离丹参素和丹酚酸B；5.真空干燥或喷雾干燥。用本发明方法可同时从丹参茎叶中提取纯化出较高含量的丹参素和丹酚酸B，充分利用了丹参药材资源，成本低，产品质量稳定，可进行大规模生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种从丹参茎叶中制备丹酚酸B和丹参素的方法。
背景技术
丹参以根入药，其茎叶多弃而不用。为了充分利用丹参的上部分药物资源，通过HPLC法对6～10月份紫花丹参茎叶中丹酚酸B和丹参素含量测定结果表明，这两种酚酸类成分含量在7月份达到最高，其中丹参素含量比丹参根中高出一倍以上，且茎叶还含有丹参根中所没有的酚性物。临床使用过程中未发现有任何毒副作用。为降低生产成本，提高收率，可考虑以丹参茎叶代替丹参根作为生产冠心病药物的原料，丹参茎叶中水溶性成分包括：原儿茶醛、丹参素、原儿茶酸和丹酚酸A、B、C、D、E等，其中以丹参素和丹酚酸B的作用显著，它具有显著的抗脂质过氧化，清除自由基和抗血栓的作用。心血管疾病为中老年人的高发病，成功的开发出丹酚酸B系列产品将会为人类防治心血管病做出具大的贡献。
本发明提出的从丹参茎叶中制备丹酚酸B和丹参素的方法，其技术方案是：
1、水提取
采用50℃～60℃的去离子水浸泡，选用浸泡两次效果较好。第一次浸泡，取粉碎好的丹参茎叶，加水量一般为药材量的10～15倍，加热至50℃～60℃保温浸泡10～12小时，分离第一次提取液。第二次浸泡，加水量为药材量的8～12倍，在50℃～60℃保温8～10小时，分离第二次提取液。用50℃～60℃的水浸泡可避免丹酚酸B含量损失。
2、冷藏、过滤
合并两次提取液，在4℃～10℃冷藏24小时，用滤纸板框可除去一些叶绿素等固体杂质。
3、提取液调PH值
提取液用10％的盐酸或硫酸调PH3～4，因为丹酚酸B和丹参素为弱酸性类物质，其在酸性条件下易被大孔吸附树脂吸附，提高分离纯化效果。
4、大孔吸附树脂分离、纯化丹酚酸B和丹参素
(1)树脂柱的活化可采用甲醇、乙醇、碱-水溶液或酸-水溶液。
(2)将上述丹参的水溶液加至已处理好的树脂柱上，用三氯化铁溶液鉴别是否上饱和，若鉴别呈现墨绿色，则停止上样。
(3)用水洗脱丹参素，水洗液减压浓缩至比重为1.15～1.18，用乙酸乙酯萃取4～5次，每次加量为水洗浓缩液体积的2～3倍，萃取液合并可得较纯丹参素。
(4)用40％～70％乙醇洗脱丹酚酸B，洗脱量为7～9倍体积。
5、干燥
醇洗脱液和萃取液分别浓缩至比重为1.20～1.24，采用真空干燥或喷雾干燥，可得高纯度丹酚酸B和丹参素。
具体实施方法：
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细说明。
实施例一：
1、水提取：取丹参茎叶10kg，粉碎，按重量加入12倍量的水，在55℃保温10小时，分离提取液；残渣按原茎叶重量的8倍量加水，60℃保温8小时，分离提取液，将两次提取液合并。冷藏、过滤。提取液在6℃冷藏24小时，用滤纸过滤。
2、提取液调PH值：在滤液中加入10％的盐酸调PH，边加边搅拌，至滤液的PH为3.5。
3、滤液上D301型(南开大学化工厂产品)树脂柱，树脂重量为5kg。以三氯化铁溶液鉴别是否上饱和，用水洗脱丹参素，约10倍量体积，水洗脱液浓缩至比重1.16，用乙酸乙酯萃取4次，每次加量为浓缩的2倍量，再用50％乙醇洗脱丹酚酸B。
4、干燥：减压回收乙酸乙酯萃取液，干燥得152g含量为75.3％的丹参素，50％乙醇洗脱液减压回收真空干燥210g，82％的丹酚酸B。
实施例二：
与实施例一基本相同，所不同的是提取过程为用水100℃煎煮。
实施例三：
与实施例一基本相同，所不同的是提取提取液酸化用的是硫酸。
实施例四：
与实施例一基本相同，所不同的是用的是70％乙醇洗脱丹酚酸B。
Claims (5)
1、一种从丹参茎叶中制备丹酚酸B和丹参素的方法，其工艺步骤为：
步骤一、水提取
取自然晾干或晒干的丹参茎叶粉碎后，用水煎煮或温水浸渍法提取出主要水溶性酚酸类成分。
步骤二、冷藏，离心或过滤
采用冷藏24小时，离心或过滤初步除去提取液中的固体杂质及叶绿素等。
步骤三、酸化提取液
在提取液中加入无机酸调PH值，使提取液的PH为3～4。
步骤四、大孔吸附树脂分离丹参素和丹酚酸B
采用大孔吸附树脂柱分离，色谱柱应先活化，然后将提取液加至色谱柱，用水洗脱丹参素，水洗液再经乙酸乙酯萃取，可得高纯度丹参素。
用醇-水溶液或乙睛-水溶液洗脱，得高纯度的丹酚酸B溶液。
步骤五、干燥。
2、权利要求1所述的制备方法，其特征是：丹参茎叶粉碎后提取的方法可以是煎煮法，也可用温水浸渍法，用冷藏，离心或过滤法除去提取液中的叶绿素等杂质。
3、权利要求1或2所述的制备方法，其特征是：步骤三、酸化提取液，酸为盐酸或硫酸，调节使其PH为3～4。
4、权利要求1或2所述的制备方法，其特征是：步骤四、大孔吸附树脂分离，先用水洗脱丹参素，水洗液浓缩乙酸乙酯萃取后，可得70％以上的丹参素，再用低度或高度醇溶液洗脱得丹酚酸B。
5、权利要求1或2所述的制备方法，其特征是：步骤五、采用真空干燥法或喷雾干燥法。
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