CN101573358B

CN101573358B - 吡啶并(2,3-d)嘧啶酮化合物及其作为pi3抑制剂的用途

Info

Publication number: CN101573358B
Application number: CN2007800342100A
Authority: CN
Inventors: 恒淼·程; 狄利普·布汉瑞卡尔; 克劳斯·雷普瑞奇·卓斯; 贾桂·伊丽莎白·霍夫曼; 玛丽·凯萨琳·强森; 罗伯特·史蒂文·卡尼亚; 冯·席·奎·李; 米契尔·大卫·奈布; 马森·亚伦·派瑞许; 麦可·布鲁诺·普雷威; 可汉·图温·崔恩
Original assignee: Pfizer Products Inc
Current assignee: Pfizer Products Inc
Priority date: 2006-09-15
Filing date: 2007-09-03
Publication date: 2012-05-30
Anticipated expiration: 2027-09-03
Also published as: CU23783B7; JP2010503653A; HRP20110621T2; CN101573358A; MA30709B1; UY30588A1; CA2663401A1; RS51927B; CY1111911T1; DOP2009000039A; JP4718637B2; ATE514695T1; CU20090040A7; NI200900032A; US8273755B2; AU2007297212B2; WO2008032162A1; NO342357B1; BRPI0716749B8; GEP20115306B

Abstract

本发明涉及新颖的式(I)的4-甲基吡啶并嘧啶酮化合物，

Description

吡啶并(2,3-D)嘧啶酮化合物及其作为PI3抑制剂的用途

本申请要求于2006年9月15日递交的美国临时申请60/845,065、于2007年7月3日递交的美国临时申请60/947,852和于2007年7月30日递交的美国临时申请60/952,628的优先权，上述专利申请通过引用全文插入本文。

技术领域

本发明涉及一种新颖的4-甲基吡啶并嘧啶酮化合物及其盐、其合成及其作为磷酸肌醇3-激酶α(PI3-Kα)酶的调节剂或抑制剂的用途。本发明的化合物适用于调节(例如，抑制)PI3-Kα活性且适用于治疗PI3-Kα介导的疾病或病状，例如与诸如癌症的异常细胞生长相关的疾病状态。

背景技术

磷酸肌醇3-激酶(PI3-K)催化磷脂酰肌醇(PI)第二信使PI(3)P、PI(3，4)P₂及PI(3，4，5)P₃(PIP₃)的合成。(Fruman等人，Phosphoinositide kinases，Annu.Rev.Biochem.67(1998)，第481-507页；Knight等人，A PharmacologicalMap of the PI3-K Family Defines a Role for p 110αin Insulin Signaling，Cell125(2006)，第733-747页)。在适当的细胞环境下，这三种脂质控制多种包括细胞生长、存活、分化及趋化性的生理学过程。(Katso等人，Cellularfunction of phosphoinositide 3-kinases：implications for development，homeostasis，and cancer，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17(2001)，第615-675页)。PI3-K家族包含至少15种具有不同底物特异性、表达模式及调控方式的不同酶，根据其结构同源性细分。癌症中的主要PI3-激酶同功异型物为由催化性(p110α)亚单元及转接子(p85)亚单元组成的I类PI3-Kα。(Stirdivant等人，Cloning and mutagenesis of the p 110αsubunit of humanphosphoinositide 3′-hydroxykinase，Bioorg.Med.Chem.5(1997)，第65-74页)。

由PI3-K产生的3-磷酸化磷脂(PIP₃)充当募集诸如Akt及磷酸肌醇依赖性激酶-1(PDK1)的具有脂质结合域(包括plekstrin同源(PH)区)的激酶的第二信使。(Vivanco及Sawyers，The Phosphatidylinositol 3-Kinase-AktPathway In Human Cancer，Nature Reviews Cancer 2(2002)，第489-501页)。Akt与膜PIP₃的结合引起Akt易位至质膜，从而使Akt与PDK1接触，此造成Akt激活。肿瘤抑制因子磷酸酶PTEN使PIP₃去磷酸化且因此充当Akt激活的负调控剂。PI3-K、Akt及PDK1在包括细胞周期调节、增生、存活、细胞凋亡及运动的许多细胞过程的调控中发挥重要作用，且为诸如癌症、糖尿病及免疫性炎症等疾病的分子机制的重要组分。PI3-K/Akt/PTEN通路的数种组分牵涉肿瘤形成。除生长因子受体酪氨酸激酶外，整合素依赖性细胞粘附及G-蛋白偶合受体直接并且间接经由转接分子激活PI3-K。已确定许多恶性肿瘤中的PTEN(p53之后癌症中最常见突变的肿瘤抑制基因)的功能损失、编码PI3-Kα的PIK3CA基因的致癌突变、PIK3CA基因的扩增及Akt的过量表达。(参见，例如Samuels，等人，High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers，Science304(2004)，第554页；Broderick等人，Mutations in PIK3CA in anaplasticoligodendrogliomas，high-grade astrocytomas，and medulloblastomas，CancerResearch 64(2004)，第5048-5050页)。

因此，PI3-Kα为开发癌症药物的具有吸引力的靶标，因为将期待此类药剂在癌细胞中抑制增生且克服癌细胞对细胞毒素剂的耐受性。人们需要提供能作为良好药物候选物的新颖PI3-Kα抑制剂。它们应具有生物可利用性、代谢稳定性且具有良好的药物动力学性质。

发明内容

本发明的一个实施例为式(I)化合物或其盐：

其中：

R¹为H或可选地被至少一个R⁵基团取代的(C₁至C₆)烷基；

A为3至10元环烷基；

R²为被至少一个R⁶基团取代的(C₁至C₆)烷基；(C₃至C₁₀)环烷基；(C₂至C₉)环杂烷基；(C₆至C₁₄)芳基；(C₂至C₉)杂芳基；-NR^7aR^7b或-N＝CR^8aR^8b，其中所述(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基及(C₂至C₉)杂芳基各自可选地被至少一个R⁹基团取代；

R³为(C₁至C₆)烷基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₈)烯基、(C₂至C₈)炔基、卤素、氰基、-(CH₂)_nC(O)OR¹⁰、-(CH₂)_nC(O)N(R^11aR^11b)、COR¹²、(C₆至C₁₄)芳基或(C₂至C₉)杂芳基，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₈)烯基、(C₂至C₈)炔基、(C₆至C₁₄)芳基及(C₂至C₉)杂芳基可选地被至少一个R⁹取代；

R⁴各自独立地为-OH、卤素、CF₃、-NR^11aR^11b、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烯基、(C₁至C₆)炔基、(C₁至C₆)烷氧基、氰基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基、(C₂至C₉)杂芳基、-C(O)R¹²-C(O)NR^11aR^11b、-S(O)_mR¹²、-S(O)_mNR^11aR^11b 、-NR^11aS(O)_mR¹²-(CH₂)_nC(O)OR¹⁰、-(CH₂)_nC(O)N(R^11aR^11b)、-OC(O)R¹²、-NR^11aC(O)R¹²或-NR^11aC(O)N(R^11aR^11b)，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烯基、(C₁至C₆)炔基、(C₁至C₆)烷氧基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₂)芳基及(C₂至C₉)杂芳基各自可选地被至少一个R¹³基团取代；

R⁵各自独立地为-OH、卤素、CF₃、-NR^11aR^11b、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烷氧基、氰基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基、(C₂至C₉)杂芳基、-S(O)_mR₁₂、-S(O)_mNR^11aR^11b、-C(O)R¹²或-C(O)NR^11aR^11b，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烷氧基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基及(C₂至C₉)杂芳基各自可选地被至少一个R⁹基团取代；

R⁶各自独立地为-OH、(C₁至C₆)炔基、氰基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基、(C₂至C₉)杂芳基、-C(O)R¹²-C(O)NR^11aR^11b、-S(O)_mR¹²、-S(O)_mNR^11aR^11b、-NR^11aS(O)_mR¹²-(CH₂)_nC(O)OR¹⁰、-(CH₂)_nC(O)N(R^11aR^11b)、-OC(O)R¹²、-NR^11aC(O)R¹²或-NR^11aC(O)N(R^11aR^11b)，其中所述(C₁至C₆)炔基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₂)芳基及(C₂至C₉)杂芳基各自可选地被至少一个R¹³基团取代；

R^7a及R^7b各自独立地为H、(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₆)烯基、(C₂至C₆)炔基、(C₃至C₁₀)环烷基或(C₆至C₁₀)芳基，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₆)烯基、(C₂至C₆)炔基、(C₃至C₁₀)环烷基及(C₆至C₁₀)芳基各自可选地被至少一个R⁹基团取代；或R^7a及R^7b可连同氮原子一起形成5至8元杂环基环，其中该杂环基环具有1至3个选自由N、O及S组成的组的环杂原子且其中该5至8元环杂烷基环可选地被至少一个R⁹基团取代；

R^8a及R^8b各自独立地为H、(C₁至C₆)烷基或(C₃至C₁₀)环烷基，其中所述(C₁至C₆)烷基及(C₃至C₁₀)环烷基各自可选地被至少一个R⁹基团取代；

R⁹各自独立地为-OH、卤素、CF₃、-NR^11aR^11b、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烯基、(C₁至C₆)炔基、(C₁至C₆)烷氧基、氰基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基、(C₂至C₉)杂芳基、-C(O)R¹²-C(O)NR^11aR^11b、-S(O)_mR¹²、-S(O)_mNR^11aR^11b、-NR^11aS(O)_mR¹²-(CH₂)_nC(O)OR¹⁰、-(CH₂)_nC(O)N(R^11aR^11b)、-OC(O)R¹²、-NR^11aC(O)R¹²或-NR^11aC(O)N(R^11aR^11b)，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烯基、(C₁至C₆)炔基、(C₁至C₆)烷氧基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₂)芳基及(C₂至C₉)杂芳基各自可选地被至少一个R¹³基团取代；

R¹⁰各自独立地为H或(C₁至C₆)烷基；

R^11a及R^11b各自独立地为H、(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₉)杂芳基或(C₆至C₁₂)芳基，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₉)杂芳基及(C₆至C₁₂)芳基各自可选地被至少一个R¹³基团取代；

R¹²各自独立地为(C₁至C₆)烷基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₉)杂芳基或(C₆至C₁₄)芳基，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₉)杂芳基及(C₆至C₁₄)芳基各自可选地被至少一个R¹³基团取代；

R¹³各自独立地为-OH、卤素、CF₃、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烯基、(C₁至C₆)炔基、(C₁至C₆)烷氧基、氰基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₆至C₁₄)芳基、(C₂至C₉)杂芳基、氨基、羰基、C-酰胺基、亚磺酰基、S-磺酰胺基、C-羧基、N-酰胺基或N-胺甲酰基；

m各自独立地为1或2；

n各自独立地为0、1、2、3或4；且

z各自为独立地选自0、1、2、3、4、5、6、7或8的整数。

该实施例的一个技术方案为上述式(I)化合物，其中A选自由环丁基、环戊基及环己基组成的组。

该实施例的另一个技术方案为上述式(I)化合物，其中R³为(C₆至C₁₄)芳基或(C₂至C₉)杂芳基，其中该(C₆至C₁₄)芳基或(C₂至C₉)杂芳基可选地被至少一个R⁹基团取代。

该实施例的另一个技术方案为上述式(I)化合物，其选自由以下各物质组成的组：2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-溴-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-{[(2S)-2，3-二羟基丙基]氧基}环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-溴-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-({反-4-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；({反-4-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酸甲酯；2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-({顺-4-[2-氨基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-({顺-4-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-({顺-4-[2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-({顺-4-[2-氨基-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-({顺-4-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-{[顺-4-(2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基)环己基]氧基}乙酰胺；2-({反-4-[2-氨基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-{[反-4-(2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基)环己基]氧基}乙酰胺；2-({反-4-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-({反-4-[2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-({反-4-[2-氨基-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；2-氨基-8-[反-3-(2-羟基乙氧基)环丁基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[反-3-(2-羟基乙氧基)环丁基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-[反-3-(2-羟基乙氧基)环丁基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-({反-3-[2-氨基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环丁基}氧基)乙酰胺；2-({反-3-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环丁基}氧基)乙酰胺；2-({反-3-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环丁基}氧基)乙酰胺，或其盐。

本发明的另一个技术方案为式(II)化合物或其盐

其中：

R¹为H或可选地被至少一个R⁴基团取代的(C₁至C₆)烷基；

R²为(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₈)烯基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₅至C₈)环烯基、(C₂至C₉)环杂烷基或-(CH₂)_n(C₆至C₁₄)芳基，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₈)烯基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₅至C₈)环烯基、(C₂至C₉)环杂烷基及-(CH₂)_n(C₆至C₁₄)芳基可选地被至少一个R⁴基团取代；

R³为(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₈)烯基、氰基、-(CH₂)_nC(O)OR^5a或-(CH₂)_nC(O)N(R^5aR^5b)，其中该(C₁至C₆)烷基或(C₂至C₈)烯基可选地被至少一个R⁴基团取代；

R⁴各自独立地为-OH、卤素、CF₃、-NR^5aR^5b、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烷氧基、氰基、(C₃至C₁₀)环烷基、-S(O)_mR^5a、-S(O)_mNR^5aR^5b、-C(O)R^5a或-C(O)NR^5aR^5b；

R^5a及R^5b各自独立地为H、(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₉)杂芳基或(C₆至C₁₄)芳基；

m各自独立地为1或2；且

n各自独立地为0、1、2、3或4。

该实施例的另一个技术方案为式(II)化合物，其中R³为-(CH₂)_nC(O)N(R^5aR^5b)。

该实施例的另一个技术方案为式(II)化合物，其中R²选自由以下基团组成的组：异丙基、烯丙基、环戊基、环丁基、羟基环己基、羟基环戊基、羟基环丁基、羟基环庚基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙基、甲基、环丙基、环丙基甲基、环丙基乙基、2-甲基-2-羟基丙基、3-甲基-3-羟基丁基、甲氧基苯甲基及氯苯甲基。

本发明的另一个技术方案为上述式(II)化合物，其选自由以下各物质组成的组：2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-N-1H-吡唑-5-基-78-二氢吡啶并[23-d]嘧啶-6-甲酰胺；2-氨基-N-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[23-d]嘧啶-6-甲酰胺；8-环戊基-4-甲基-2-甲基氨基-7-氧代基-7，8-二氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸(1H-吡唑-3-基)-酰胺；2-氨基-8-异丙基-4-甲基-7-氧代基-N-1H-吡唑-5-基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺；2-氨基-N-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-8-异丙基-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺；8-环戊基-N-[(1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲基]-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺；8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-N-吡啶-2-基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺；及8-环戊基-N-异噁唑-3-基-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺，或其盐。

本发明的另一个技术方案为式(III)化合物

或其盐，

其中：

R¹为H或可选地被至少一个R⁴基团取代的(C₁至C₆)烷基；

R²为可选地被至少一个R⁴基团取代的螺环基；

R³为(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₈)烯基、氰基、-(CH₂)_nC(O)OR⁵、-(CH₂)_nC(O)N(R^6aR^6b)、(C₆至C₁₄)芳基或(C₂至C₉)杂芳基，其中该(C₁至C₆)烷基或(C₂至C₈)烯基可选地被至少一个R⁴基团取代，且其中该(C₆至C₁₄)芳基或(C₂至C₉)杂芳基可选地被至少一个R⁷基团取代；

R⁴各自独立地为-OH、卤素、CF₃、-NR^6aR^6b、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烷氧基、氰基、(C₃至C₈)环烷基、-S(O)_mR^6a、-S(O)_mNR^6aR^6b、-C(O)R^6a或-C(O)NR^6aR^6b；

R⁵各自独立地为H或(C₁至C₆)烷基；

R^6a及R^6b各自独立地为H、(C₁至C₆)烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、(C₂至C₉)杂芳基或(C₆至C₁₄)芳基；

R⁷各自独立地为-OH、卤素、-NR^6aR^6b、氰基、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烷氧基、(C₃至C₁₀)环烷基、(C₂至C₉)环杂烷基、-S(O)_mR^6a、-S(O)_mNR^6aR^6b、-(CH₂)_nC(O)OR⁵、-(CH₂)_nC(O)N(R^6aR^6b)、-OC(O)R^6a或-NR^6aC(O)R^6b，其中所述(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烷氧基、(C₂至C₉)环杂烷基及(C₃至C₁₀)环烷基各自可选地被至少一个R⁴基团取代；

m各自独立地为1或2；且

n各自独立地为0、1、2、3或4。

本发明的另一个技术方案为选自由以下各物质组成的组的化合物：2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(顺-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己烯-6-基)-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-6-(6-吡咯烷-1-基吡啶-3-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-(顺-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-(6-乙氧基吡啶-3-基)-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-6-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]-8-(顺-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(顺-4-羟基-4-甲基环己基)-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(顺-4-羟基环己基)-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-(乙基氨基)-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-(乙基氨基)-8-(反-4-羟基环己基)-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；2-[(2，2-二氟乙基)氨基]-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，或其盐。

另一实施例为任何上述技术方案与任何与前者一致的其他上述技术方案的组合。

本发明还涉及一种医药组合物，其包含至少一种如本文所述的化合物或其盐及医药学上可接受的载剂或稀释剂。

本发明还涉及一种治疗有需要的哺乳动物体内异常细胞生长或任何PI3-Kα介导的疾病或病状的方法，其包含向该哺乳动物投与治疗有效量的至少一种如本文所述的化合物或其盐的步骤。举例而言，在一实施例中，异常细胞生长为癌性的。在另一实施例中，异常细胞生长为非癌性的。

本发明进一步涉及抑制PI3-Kα酶活性的方法，其包含使PI3-Kα酶与PI3-Kα抑制量的至少一种如本文所述的化合物或其盐接触。

本发明进一步涉及任何如本文所述的化合物或其盐在制造用于治疗哺乳动物体内异常细胞生长的药剂中的用途。

本发明进一步涉及使用本文具体实例及如本文所述的通用合成方法A、B、C、D、E、F、H及I中所展示的方法制造如本文所述的化合物的方法。

本发明进一步涉及任何上述化合物或其盐作为药剂的用途。本发明进一步涉及任何上述化合物或其盐用于制造供治疗异常细胞生长用的药剂的用途。

附图说明

图1示出了2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物152)在PC3肿瘤模型中剂量依赖性抗肿瘤功效的实例。

图2示出了化合物152在SKOV3肿瘤模型中剂量依赖性抗肿瘤功效的实例。

图3示出了化合物152在U87MG肿瘤模型中剂量依赖性抗肿瘤功效的实例。

具体实施方式

如本文所使用的术语″包含″及″包括″以其开放式非限制性意义使用。

术语″卤基″及/或″卤素″是指氟、氯、溴或碘。

术语″(C₁至C₆)″烷基指包括具有1至6个碳原子的直链及支链基团的饱和脂族烃基团。(C₁至C₆)烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基及其类似基团。如本文所使用的术语″Me″及″甲基″意指-CH₃基团。如本文所使用的术语″Et″及″乙基″意指-C₂H₅基团。

如本文所使用的术语″(C₂至C₈)烯基″是指包含2至8个碳具有至少一个碳碳双键的烷基片段。该基团中的碳碳双键可在将产生稳定化合物的沿2至8个碳的链的任何位置。此类基团包括该烯基片段的E与Z异构体。此类基团的实例包括(但不限于)乙烯基、丙烯基、丁烯基、烯丙基及戊烯基。如本文所使用的术语″烯丙基″意指-CH₂CH＝CH₂基团。如本文所使用的术语″C(R)＝C(R)″表示其中各碳被R基团取代的碳碳双键。

如本文所使用的术语″(C₂至C₈)炔基″是指包含2至8个碳原子且具有至少一个碳碳三键的烷基片段。该基团中的碳碳三键可在将产生稳定化合物的沿2至8个碳的链的任何位置。此类基团的实例包括(但不限于)乙炔、丙炔、1-丁炔、2-丁炔、1-戊炔、2-戊炔、1-己炔、2-己炔及3-己炔。

如本文所使用的术语″(C₁至C₈)烷氧基″是指O-烷基，其中该烷基含有1至8个碳原子且为直链、支链或环状。此类基团的实例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、环戊氧基及环已氧基。

如本文所使用的术语″(C₆至C₁₄)芳基″是指衍生自含有6至14个碳原子的芳烃的基团。此类基团的实例包括(但不限于)苯基或萘基。如本文所使用的术语″Ph″及″苯基″是指-C₆H₅基团。如本文所使用的术语″苯甲基″是指-CH₂C₆H₅基团。

如本文所使用的″(C₂至C₉)杂芳基″是指环中具有总计5至10个原子且含有2至9个碳原子及1至4个各自独立地选自O、S及N的杂原子的芳族杂环基团，且其中限制条件为该基团的环不含有两个邻接O原子或两个邻接S原子。杂环基团包括苯并稠环系。芳族杂环基团的实例为吡啶基，咪唑基，嘧啶基，吡唑基，三唑基，吡嗪基，四唑基，呋喃基，噻吩基，异噁唑基，噻唑基，噁唑基，异噻唑基，吡咯基，喹啉基，异喹啉基，吲哚基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，噌啉基，吲唑基，吲嗪基，酞嗪基，哒嗪基，三嗪基，异吲哚基，喋啶基，嘌呤基，噁二唑基，噻二唑基，呋咱基，苯并呋咱基，苯并噻吩基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，喹唑啉基，喹喔啉基，萘啶基及呋喃并吡啶基。C₂至C₉杂芳基可为(若可能)C-连接或N-连接。举例而言，衍生自吡咯的基团可为吡咯-1-基(N-连接)或吡咯-3-基(C-连接)。另外，衍生自咪唑的基团可为咪唑-1-基(N-连接)或咪唑-3-基(C-连接)。

如本文所使用的″(C₂至C₉)环杂烷基″是指环系中具有总计4至13个原子且含有2至9个碳原子及1至4个各自独立地选自O、S及N的杂原子的单环、双环、三环、螺环或四环非芳族基团，且其中限制条件为该基团的环不含有两个邻接O原子或两个邻接S原子。此外，该C₂至C₉环杂烷基可在将产生稳定化合物的任何可利用的原子处含有氧代基取代基。举例而言，该基团可在可利用的碳或氮原子处含有氧代基原子。若化学上可行，则该基团可含有大于一个氧代基取代基。另外，应了解当该C₂至C₉环杂烷基含有硫原子时，该硫原子可被一或两个氧原子氧化以提供亚砜或砜。4元环杂烷基的实例为氮杂环丁烷基(衍生自吖丁啶氮杂环丁烷)。5元环杂烷基的实例为吡咯烷基。6元环杂烷基的实例为哌啶基。9元环杂烷基的实例为吲哚啉基。10元环杂烷基的实例为4H-喹嗪基。所述C₂至C₉环杂烷基的其他实例包括(但不限于)四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、N-哌啶基、N-吗啉基、N-硫代吗啉基、硫氧杂环己基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、六亚甲基亚氨基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂卓基、二氮杂卓基、硫氮杂卓基、1，2，3，6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊环基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑啶基、咪唑啉基、咪唑啶基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、3H-吲哚基喹嗪基、3-氧代基哌嗪基、4-甲基哌嗪基、4-乙基哌嗪基及1-氧代基-2，8-二氮杂螺环[4.5]癸-8-基。

术语″(C₃至C₁₀)环烷基″是指具有总计3至10个碳环原子的饱和单环、稠合、螺环或多环结构。此类基团的实例包括(但不限于)环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚基及金刚烷基。

如本文所使用的术语″螺环″具有其常规含义，即任何含有两个或两个以上环的化合物，其中此类环中的两个共同具有一个环碳。如本文所定义，螺环化合物的环独立地具有3至20个环原子。其优选具有3至10个环原子。螺环化合物的非限定性实例包括螺[3.3]庚烷、螺[3.4]辛烷及螺[4.5]癸烷。

术语″(C₅至C₈)环烯基″是指具有总计5至8个碳环原子的不饱和单环、稠合、螺环结构。此类基团的实例包括(但不限于)环戊烯基、环己烯基。

术语″氰基″是指-C≡N基团。

″醛″基团是指其中R为氢的羰基。

如本文所定义，″烷氧基″基团是指-O-烷基及-O-环烷基。

″烷氧基羰基″是指-C(O)OR。

″烷基氨基烷基″是指烷基-NR-烷基。

″烷基磺酰基″是指-SO₂烷基。

″氨基″是指-NH₂或NRR′基团。

″氨基烷基″是指-烷基-NRR′基团。

″氨基羰基″是指-C(O)NRR′。

″芳基烷基″是指-烷基芳基，其中烷基及芳基如本文所定义。

如本文所定义，″芳氧基″是指-O-芳基及-O-杂芳基。

″芳氧基羰基″是指-C(O)O芳基。

″芳基磺酰基″是指-SO₂芳基。

″C-酰胺基″是指-C(O)NRR′基团。

″羰基″是指-C(O)R。

″C-羧基″是指-C(O)OR基团。

″羧酸″基团是指其中R为氢的C-羧基。

″氰基″是指-CN基团。

″二烷基氨基烷基″是指-(烷基)N(烷基)₂基团。

″卤基″或″卤素″基团是指氟、氯、溴或碘。

″杂脂环氧基″是指杂脂环基-O基团，其中杂脂环基如本文所定义。

″杂芳氧基″是指杂芳基-O基团，其中杂芳基如本文所定义。

″羟基″是指-OH基团。

″N-酰胺基″是指-R′C(O)NR基团。

″N-胺甲酰基″是指-ROC(O)NR-基团。

″硝基″是指-NO₂基团。

″N-磺酰胺基″是指-NR-S(O)₂R基团。

″N-硫代胺甲酰基″是指ROC(S)NR′基团。

″O-胺甲酰基″是指-OC(O)NRR′基团。

″O-羧基″是指RC(O)O基团。

″O-硫代胺甲酰基″是指-OC(S)NRR′基团。

″氧代基″是指羰基片段，因而被氧代基取代的烷基是指酮基。

″全氟烷基″是指其中所有氢原子已被氟原子置换的烷基。

″磷酰基″是指-P(O)OR₂基团。

″硅烷基″是指-Si(R)₃基团。

″S-磺酰胺基″是指-S(O)₂NR-基团。

″亚磺酰基″是指-S(O)R基团。

″磺酰基″是指-S(O)₂R基团。

″硫代羰基″是指-C(＝S)-R基团。

″三卤甲烷羰基″是指Z₃CC(O)基团，其中Z为卤素。

″三卤甲烷磺酰胺基″是指Z₃CS(O)₂NR-基团。

″三卤甲烷磺酰基″是指Z₃CS(O)₂基团。

″三卤甲基″是指-CZ₃基团。

″C-羧基″是指-C(O)OR基团。

术语″被取代″是指特定基团或片段具有一或多个取代基。术语″未被取代″是指特定基团不具有取代基。术语″可选地被取代″是指特定基团未被取代或被一或多个取代基取代。应理解，在本发明的化合物，当某基团表述为″未被取代″或被个数少于使化合物中所有原子的价数饱和的基团″取代″时，则该基团上的剩余价数由氢饱和。举例而言，若C₆芳基(本文亦称为″苯基″)被另一取代基取代，本领域普通技术人员应理解该基团在C₆芳环的碳原子上留有4个开放位置(6个初始位置减去一个本发明的化合物的其余部分键结的位置再减去一个取代基留下4个)。在这种情况下，剩余4个碳原子各自与一个氢原子键结以饱和其价数。类似地，若本发明化合物中的C₆芳基表述为″二取代″，则本领域普通技术人员应理解此是指C₆芳基具有3个仍未被取代的碳原子。该3个未被取代的碳原子各自与一个氢原子键结以饱和其价数。

术语″溶剂化物″用于描述本发明化合物与溶剂分子之间的分子复合物。溶剂化物的实例包括(但不限于)与水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲亚砜(DMSO)、乙酸乙酯、乙酸、乙醇胺、或它们的混合物组合的本发明的化合物。当该溶剂为水时，可使用术语″水合物″。本发明中尤其涵盖一个溶剂分子可与一个本发明的化合物分子缔合，诸如水合物。此外，本发明中尤其涵盖多于一个溶剂分子可与一个本发明的化合物分子缔合，诸如二水合物。另外，本发明中尤其涵盖少于一个溶剂分子可与一个本发明的化合物分子缔合，诸如半水合物。此外，本发明的溶剂化物涵盖为保留化合物的非水合形式的生物效应的本发明的化合物的溶剂化物。

如本文所使用的术语″医药学上可接受的盐″是指保留特定衍生物的游离酸及碱的生物效应且在生物学上或其他方面不是不想要的本发明的化合物的盐。

如本文所使用的术语″医药学上可接受的调配物″是指本发明的化合物或其盐或溶剂化物和与本发明的化合物相容的载剂、稀释剂及/或赋形剂的组合，且其不对其接受者产生危害。医药调配物可由本领域普通技术人员已知的程序制备。举例而言，本发明的化合物可与常见赋形剂、稀释剂或载剂调配且形成为锭剂、胶囊及其类似物。适于此类调配物的赋形剂、稀释剂及载剂的实例包括以下各物：填充剂及增充剂，诸如淀粉、糖、甘露糖醇及硅衍生物；粘合剂，诸如羧甲基纤维素及其他纤维素衍生物、海藻酸盐、明胶及聚乙烯吡咯烷酮；增湿剂，诸如甘油；崩解剂，诸如聚维酮、羟基乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、琼脂、碳酸钙及碳酸氢钠；溶解延缓剂，诸如石蜡；再吸收加速剂，诸如季铵化合物；表面活性剂，诸如鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯；吸附载剂，诸如高岭土及膨润土；及润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙及硬脂酸镁及固体聚乙二醇。最终医药形式视所使用的赋形剂的类型而定可为丸剂、锭剂、散剂、口含剂、药囊剂、扁囊剂或无菌封装散剂及其类似物。另外，尤其涵盖本发明的医药学上可接受的调配物可含有多于一种活性成分。举例而言，此类调配物可含有多于一种本发明的化合物。或者，此类调配物可含有一或多种本发明的化合物及一或多种降低异常细胞生长的其他药剂。

如本文所使用的术语″PI3-Kα抑制量″是指在活体内(诸如，哺乳动物体内)或活体外抑制PI3-Kα的酶活性所需的本发明的化合物或其盐或溶剂化物的量。使用本文所述的方法及本领域普通技术人员所已知的方法，在无需不适当实验的情况下，可确定引起该抑制所需的此类化合物的量。

如本文所使用的术语″抑制PI3-Kα酶活性″是指通过使酶与本发明的化合物接触降低PI3-Kα酶的活体外或活体内(例如，诸如人类的哺乳动物体内)活性或功能。

如本文所使用的术语″PI3-Kα″是指PI3-Kα或其突变体或任何已知PI3-Kα同功异型剪接变体。

如本文所定义，本文所使用的术语″治疗有效量″是指本发明的化合物或其盐的量，当向需要治疗的哺乳动物投与时其足以实现该治疗。因此，本发明的化合物或其盐的治疗有效量为足以调节或抑制PI3-Kα酶的活性以致由PI3-Kα酶的活性介导的疾病状况减少或缓和的量。

术语″治疗″提及哺乳动物、尤其人类体内异常细胞生长或任何PI3-Kα介导的疾病或病状时包括：(i)预防疾病或病状出现于可能易感染该病状的受试者中，如此“治疗”构成对病理病状的预防性治疗；(ii)调节或抑制疾病或病状，即阻止其发展；(iii)减轻疾病或病状，即，引起疾病或病状消退；或(iv)减轻及/或缓和疾病或病状或疾病或病状产生的症状，例如在不解决根本疾病或病状的情况下减轻发炎反应。关于诸如癌症的异常细胞生长，这些术语简单地表示应延长受异常细胞生长影响的个体的预期寿命或应减少疾病的一个或多个症状。

除非另有说明，否则本文所有提及的本发明化合物包括其盐、溶剂化物及复合物，包括多晶型物、立体异构体、互变异构体及其被同位素标记的形式。举例而言，本发明的化合物可为医药学上可接受的盐及/或医药学上可接受的溶剂化物。

除非另有说明，否则如本文所使用的″异常细胞生长″是指不受正常调控机制支配的细胞生长(例如，缺乏接触抑制)，包括正常细胞的异常生长及异常细胞的生长。其包括(但不限于)以下各情形的异常生长：通过表达突变酪氨酸激酶或过量表达受体酪氨酸激酶而增生的肿瘤细胞(肿瘤)；其他其中出现异常酪氨酸激酶激活的增生性疾病的良性及恶性细胞；任何由受体酪氨酸激酶增生的肿瘤；任何由异常丝氨酸/苏氨酸激酶激活增生的肿瘤；其他其中出现异常丝氨酸/苏氨酸激酶激活的增生性疾病的良性及恶性细胞；表达激活的Ras致癌基因的良性与恶性肿瘤；其中Ras蛋白因另一基因的致癌突变而激活的良性与恶性肿瘤细胞；其他其中出现异常Ras激活的增生性疾病的良性及恶性细胞。这些良性增生性疾病的实例为牛皮癣、良性前列腺肥大、人类乳头状瘤病毒(HPV)及再狭窄。″异常细胞生长″还指且包括由酶法呢基蛋白质转移酶的活性所导致的良性与恶性细胞的异常生长。

术语″异常细胞生长″及″过度增生性病症″在本申请中互换使用。

术语″立体异构体″是指具有相同化学组成但在其原子或基团的空间排列方面不同的化合物。术语″对映异构体″尤其指化合物彼此为不重叠镜像的两个立体异构体。如本文所使用的术语″外消旋体″或″外消旋混合物″是指特定化合物的对映异构体的1∶1混合物。另一方面，术语″非对映异构体″是指一对包含两个或两个以上不对称中心且彼此不为镜像的立体异构体之间的关系。

根据本领域的惯例，本文结构式中使用符号

描绘键，其为片段或取代基与核心或主链结构连接的点。根据另一惯例，在本文一些结构式中不明确描绘碳原子及其所键结的氢原子，例如

表示甲基，

表示乙基，

表示环戊基等。

本发明的化合物可具有不对称碳原子。本文可能使用实线(——)、实心楔形(

)或点状楔形(

)描绘本发明的化合物的碳碳键。使用实线描绘不对称碳原子的键意欲表明包括该碳原子处所有可能的立体异构体(例如，特定对映异构体，外消旋混合物等)。使用实心或点状楔形描绘不对称碳原子的键意欲表明仅包括所展示的立体异构体。有可能本发明的化合物可含有多于一个不对称碳原子。在此类化合物中，使用实线描绘不对称碳原子的键意欲表明包括所有可能的立体异构体。举例而言，除非另有说明，否则本发明的化合物可以以对映异构体及非对映异构体或其消旋体及混合物形式存在。使用实线描绘本发明的化合物中一或多个不对称碳原子的键及使用实心或点状楔形描绘同一化合物中其他不对称碳原子的键意欲表明存在非对映异构体的混合物。

若基团，例如″R″在式中描绘为″漂浮″于环系A的上：

则除非另有定义，否则取代基″R″可归于环系的任何原子，只要形成稳定结构，认为环原子中一个环原子上被描绘、暗示或明确定义的氢被置换。环系A可为例如(但不限于)芳基、杂芳基、环烷基、环杂烷基、螺环基或稠环系统。

若基团″R″描述为″漂浮″于含有饱和碳的环系A的上，那么″z″可大于1，认为环A上当前被描绘、暗示或明确定义的氢被置换；则除非另有定义，否则当所得结构稳定时，两个″R″可归于同一碳。举例而言，当R为甲基时，环A的碳上可存在成对二甲基。在另一实例中，同一碳上的两个″R″(包括该碳)可形成环，从而产生螺环(″螺环基″)。

制备/分离单独对映异构体的公知技术包括由合适的光学纯前驱体进行手性合成或使用(例如)手性高压液相色谱(HPLC)拆分外消旋体。或者，可使外消旋体(或外消旋前驱体)与合适光学活性化合物反应，光学活性化合物例如为醇或在化合物含有酸性或碱性片段的情况下为诸如酒石酸或1-苯乙胺的酸或碱。所得非对映异构体混合物可由层析法及/或分步结晶法分离且一或两种非对映异构体由本领域技术人员熟知的方式转化为相应纯对映异构体。本发明的手性化合物(及其手性前驱体)可使用层析法(通常HPLC)在不对称树脂上(其中流动相由含有0至50％、通常2％至20％异丙醇及0至5％烷基胺、通常0.1％二乙胺的烃(通常庚烷或己烷)组成)以对映异构富集形式获得。洗脱液的浓缩可提供富集的混合物。立体异构聚集物可由本领域技术人员已知的常规技术分离。参见，例如E L Eliel的″Stereochemistry of Organic Compounds″(Wiley，New York，1994)，其公开的内容整体以引用的方式并入本文中。

当本发明的化合物含有烯基或亚烯基时，可能为几何顺/反(或Z/E)异构体。当化合物含有(例如)酮或肟基团或芳族片段时，可出现互变异构现象(tautomerism)。互变异构现象的实例包括酮与烯醇互变异构体。单一化合物可展示多于一种类型的异构现象。本发明的范畴内包括本发明化合物的所有立体异构体、几何异构体及互变异构形式，本发明化合物包括具有多于一种类型的异构现象的化合物及一或多种本发明化合物的混合物。顺/反异构体可由本领域技术人员熟知的公知技术例如层析法及分步结晶法分离。

本发明的化合物可呈前药形式投与。因此，自身可能几乎不具有或不具有药理学活性的式(I)化合物的某些衍生物当向哺乳动物投与时可(例如)由水解裂解转化为具有想要活性的式(I)化合物。这些衍生物称为″前药″。前药可(例如)通过使式(I)化合物中所存在的适当官能基被本领域技术人员已知的某些片段置换来产生。参见，例如″Pro-drugs as Novel DeliverySystems″，第14卷，ACS Symposium Series(T Higuchi及W Stella)及″Bioreversible Carriers in Drug Design″，Pergamon Press，1987(E B Roche编辑，American Pharmaceutical Association)，其公开的内容整体以引用的方式并入本文中。此类前药的一些实例包括：酯片段代替羧酸官能基；醚片段或酰胺片段代替醇官能基；及酰胺片段代替伯或仲胺基官能基。举例而言，如以下实例31所展示的化合物为其中醇片段中的氢被酰胺官能基置换的一个实例。置换基团的其他实例为本领域技术人员所知。参见，例如H Bundgaard的″Design of Prodrugs″(Elsevier，1985)，其公开的内容整体以引用的方式并入本文中。也有可能某些式(I)化合物自身可充当其他式(I)化合物的前药。

本发明的盐可根据本领域技术人员已知的方法制备。盐的实例包括(但不限于)乙酸盐、丙烯酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐(诸如氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐及甲氧基苯甲酸盐)、碳酸氢盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁炔-1，4-二酸盐、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、己酸盐、辛酸盐、克拉维酸盐(clavulanate)、柠檬酸盐、癸酸盐、二氢氯化物、二氢磷酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐(edislyate)、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、乙基丁二酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乙醇基砷酸盐(glycollylarsanilate)、庚酸盐、己炔-1，6-二酸盐、己基间苯二酚、海卓胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、γ-羟基丁酸盐、碘化物、异丁酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、乳二酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、偏磷酸盐、甲烷磺酸盐、甲基硫酸盐、单氢磷酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)(双羟萘酸盐(embonate))、软脂酸盐、泛酸盐、苯乙酸盐、苯基丁酸盐、苯基丙酸盐、酞酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、多聚半乳糖醛酸盐、丙烷磺酸盐、丙酸盐、丙炔酸盐、焦磷酸盐、焦硫酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、辛二酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、磺酸盐、亚硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐、甲苯磺酸盐、三乙碘化物(triethiodode)及戊酸盐。

性质上为碱性的本发明的化合物能够与多种无机酸及有机酸形成多种不同的盐。虽然这些盐必须是医药学上可接受的以用于向动物投与，但实践上通常希望最初自反应混合物分离呈医药学上不可接受的盐的本发明的化合物且随后通过用碱性试剂处理使后者简单转化至游离碱化合物且接着使后者游离碱转化为医药学上可接受的酸加成盐。本发明的碱化合物的酸加成盐可在水性溶剂介质或诸如甲醇或乙醇的合适有机溶剂中通过用大体上等当量的量的所选择的矿物酸或有机酸处理碱化合物来制备。蒸发溶剂之后，获得想要的固体盐。通过将适当矿物酸或有机酸添加至溶液中也可从游离碱在有机溶剂中的溶液中沉淀想要的酸性盐。

性质上为酸性的本发明的那些化合物能够与多种药理学上可接受的阳离子形成碱性盐。这些盐的实例包括碱金属盐或碱土金属盐，尤其是钠盐及钾盐。这些盐全部由公知技术制备。用作制备本发明的医药学上可接受的碱性盐的试剂的化学碱为那些与本发明的酸性化合物形成无毒碱性盐的碱。这些无毒碱性盐包括那些衍生自诸如钠、钾、钙及镁等的药理学上可接受的阳离子的盐。这些盐可通过用含有想要药理学上可接受的阳离子的水溶液处理相应酸性化合物且随后蒸发所得溶液至干燥(优选在减压下)来制备。或者，其也可通过将酸性化合物的低碳烷醇溶液与想要的碱金属烷醇盐混合在一起且随后以之前相同的方式蒸发所得溶液至干燥来制备。在两种情况下，优选使用化学计量的量的试剂以确保反应的完成性且想要最终产物的最高产率。

若本发明化合物为碱，则想要盐可由本领域可利用的任何合适方法制备，例如用无机酸或有机酸处理游离碱，这些无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其类似物；这些有机酸诸如乙酸、顺丁烯二酸、丁二酸、扁桃酸、反丁烯二酸、丙二酸、丙酮酸、乙二酸、乙醇酸、水杨酸、诸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸的吡喃糖酸、诸如柠檬酸或酒石酸的α-羟基酸、诸如天冬氨酸或谷氨酸的氨基酸、诸如苯甲酸或肉桂酸的芳族酸、诸如对甲苯磺酸或乙烷磺酸的磺酸或其类似物。

若本发明化合物为酸，则想要的盐可由任何合适方法制备，例如用无机碱或有机碱处理游离酸，这些碱诸如胺(伯、仲或叔三级)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物或其类似物。合适盐的说明性实例包括衍生自以下各物的有机盐：诸如甘氨酸及精氨酸的氨基酸、氨、伯胺、仲胺及叔胺及诸如哌啶、吗啉及哌嗪的环胺；及衍生自以下各物的无机盐：钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝及锂。

在试剂为固体的情况下，本领域技术人员应了解本发明化合物、试剂及盐可以以不同晶体或多晶型形式存在，所有这些均在本发明及所说明的化学式的范畴内。

本发明也包括被同位素标记的本发明的化合物，其中一或多个原子被具有相同原子序数，但原子质量或质量数与自然界中通常可见的原子质量或质量数不同的原子置换。适于包括在本发明的化合物中的同位素的实例包括氢同位素，诸如²H及³H；碳同位素，诸如¹¹C、¹³C及¹⁴C；氯同位素，诸如³⁶Cl；氟同位素，诸如¹⁸F；碘同位素，诸如¹²³I及¹²⁵I；氮同位素，诸如¹³N及¹⁵N；氧同位素，诸如¹⁵O、¹⁷O及¹⁸O；磷同位素，诸如³²P；及硫同位素，诸如³⁵S。例如掺入放射性同位素的某些被同位素标记的本发明的化合物适用于药物和/或底物组织分布研究。鉴于放射性同位素氚³H及碳14 ¹⁴C的引入比较容易且检测简便，它们尤其适用于此目的。被诸如氘²H的较重同位素取代可提供某些由较高代谢稳定性产生的治疗优点，例如，增加活体内半衰期或降低剂量需求，且因此其在一些情况下为优选的。被诸如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O及¹³N的正电子发射同位素取代可适用于检查底物受体占位的正电子发射断层显像(Positron EmissionTopography)(PET)研究。

被同位素标记的本发明的化合物通常可由本领域技术人员已知的公知技术或由类似于本文所述的那些方法的方法使用适当的被同位素标记的试剂代替所使用的未被标记的试剂来制备。

本发明的化合物可以以本领域技术人员认为合适的任何医药形式如下所述调配于医药组合物中。本发明的医药组合物包含治疗有效量的至少一种本发明的化合物及医药学上可接受的惰性载剂或稀释剂。

为治疗或预防PI3-Kα介导的疾病或病状，以合适调配物的形式投与本发明的医药组合物，所述调配物通过将治疗有效量(即，有效实现治疗功效的PI3-Kα的调节、调控或抑制量)的至少一种本发明的化合物(作为活性成分)与一或多种可选自(例如)有助于活性化合物加工为最终医药制剂的稀释剂、赋形剂及助剂的医药学上合适的载剂组合在一起来制备。

所使用的医药载剂可为固体或液体。示例性固体载剂为乳糖、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶(acacia)、硬脂酸镁、硬脂酸及其类似物。示例性液体载剂为糖浆、花生油、橄榄油、水及其类似物。类似地，本发明组合物可包括现有技术已知的延时或缓释物质，诸如为单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯本身或它们与蜡、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、异丁烯酸甲酯或其类似物的组合物。可添加其他添加剂或赋形剂以实现想要的调配物性质。举例而言，可添加生物可用性增强剂，诸如Labrasol、Gelucire或其类似物；或调配因子，诸如CMC(羧基甲基纤维素)、PG(丙二醇)或PEG(聚乙二醇)。例如当制备胶囊调配物时，可添加保护活性成分免受光照、水份及氧化影响的半固体载体的Gelucire

。

若使用固体载剂，则制剂可以以粉末或小球形式压片、置放于硬明胶胶囊中或形成为口含锭或口含剂。虽然固体载剂的量可变化，但通常将在约25mg至约1g。若使用液体载剂，则制剂可为糖浆、乳液、软明胶胶囊、于安瓿或小瓶中的无菌可注射溶液或悬浮液，或非水性液体悬浮液形式。若使用半固体载剂，则制剂可为硬及软明胶胶囊调配物形式。本发明组合物可以适于例如非经肠或经口投药的投药模式以单位剂型形式制备。

为获得稳定的水可溶剂型，可将本发明的化合物的盐溶解于有机酸或无机酸的水溶液(诸如丁二酸或柠檬酸的0.3M溶液)中。若不能获得可溶盐形式，则可将试剂溶解于合适助溶剂或助溶剂的组合中。合适助溶剂的实例包括浓度在0至60总体积％范围内的醇、丙二醇、聚乙二醇300、聚山梨酸酯80、甘油及其类似物。在示例性实施例中，将本发明的化合物溶解于DMSO中且用水稀释。组合物也可呈现活性成分的盐形式在诸如水或等渗盐水或右旋糖溶液的适当水性载体中的溶液的形式。

合适调配物的形式取决于所选择的投药途径。就注射而言，本发明的化合物的试剂可调配为水溶液，优选在诸如汉克斯溶液(Hanks solution)、林格氏溶液(Ringer′s solution)或生理盐水缓冲液的生理学上相容的缓冲液中。就经粘膜投药而言，在调配物中使用适于待渗透的障壁的渗透剂。本领域通常已知这些渗透剂。

就经口投药而言，化合物可通过将活性化合物与现有技术已知的医药学上可接受的载剂组合来调配。这些载剂使得本发明的化合物能够调配为锭剂、丸剂、糖衣药丸、胶囊、液体、凝胶剂、糖浆、浆液、悬浮液及其类似物由待治疗的受试者经口摄取。经口使用的医药制剂可通过如下获得：使用与活性成分(试剂)混合的固体赋形剂，可选地研磨所得混合物且添加合适助剂后加工颗粒剂的混合物(若需要)以获得锭剂或糖衣药丸核心。合适的赋形剂包括：填充剂，诸如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；及纤维素制剂，例如玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、胶状物、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。若需要，可添加崩解剂，诸如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或褐藻酸或诸如海藻酸钠的其盐。

糖衣药丸核心具有合适的包衣。出于此目的，可使用浓糖溶液，其可选含有阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸凝胶、聚乙二醇及/或二氧化钛、漆溶液及合适的有机溶剂或溶剂混合物。可将染料或颜料添加至锭剂或糖衣药丸包衣中以鉴别或表征不同活性剂的组合。

可经口使用的医药制剂包括由明胶制成的推入配合式(push-fit)胶囊以及由明胶及诸如甘油或山梨糖醇的增塑剂制成的软密封胶囊。推入配合式胶囊可含有与诸如乳糖的填充剂、诸如淀粉的粘合剂及/或诸如滑石或硬脂酸镁的润滑剂及可选地稳定剂混合的活性成分。就软胶囊而言，可将活性剂溶解或悬浮于诸如脂肪油、液状石蜡或液体聚乙二醇的合适液体中。另外，可添加稳定剂。经口投与的所有调配物应为适于该投药的剂量。就经颊投药而言，组合物可采用以公知方式调配的锭剂或口含剂的形式。

就经鼻投药或经吸入投药而言，根据本发明使用的化合物可通过使用例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适气体的合适推进剂以由加压包装体或喷雾器的气雾剂喷雾的形式方便地传送。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可通过提供传送计量量的阀门确定。吸入器或吹入器及其类似物中所使用的明胶的胶囊及弹药筒可调配为含有化合物的粉末混合物及诸如乳糖或淀粉的合适粉末基质。

就非经肠投药而言，化合物可调配以供注射，例如快速注射或连续输注。用于注射的调配物可以以具有添加防腐剂的(例如)于安瓿或多剂量容器中的单位剂型存在。组合物可采用诸如在油性或水性载体中的悬浮液、溶液或乳液形式，且可含有诸如悬浮剂、稳定剂及/或分散剂的调配剂。

就非经肠投药而言，医药调配物包括水可溶形式的活性化合物的水溶液。另外，活性剂的悬浮液可酌情制备为油性注射用悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包括脂肪油，诸如芝麻油；或合成脂肪酸酯，诸如油酸乙酯或三酸甘油酯；或脂质体。水性注射用悬浮液可含有增加悬浮液粘度的物质，诸如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。可选地，悬浮液也可含有合适稳定剂或增加化合物溶解性以允许制备高浓度溶液的试剂。

或者，活性成分可呈粉末形式以在使用之前用例如无菌无热原质水的合适载体复原。

除上述调配物外，本发明的化合物也可调配为储槽式制剂(depotpreparation)。这些长效调配物可经植入(例如皮下或肌肉内)或肌肉内注射投与。因此，例如，化合物可与合适的聚合物质或疏水性物质(例如，在可接受油状物中的乳液)或离子交换树脂或例如微溶盐的微溶衍生物一起调配。疏水化合物的医药载剂为包含苯甲基醇、非极性表面活性剂、水可混溶有机聚合物及水相的助溶剂体系。助溶剂体系可为VPD助溶剂体系。VPD为3％w/v苯甲基醇、8％w/v非极性表面活性剂聚山梨酸酯80及65％w/v聚乙二醇300的无水乙醇(补足体积)溶液。VPD助溶剂体系(VPD∶5W)含有用5％葡萄糖在水中的溶液1∶1稀释的VPD。该助溶剂体系溶解疏水化合物效果好且自身在全身性投药后产生低毒性。助溶剂体系的比例在不破坏其可解性及毒性特征的情况下可适当变化。此外，助溶剂组分的特性可能变化：例如可使用其他低毒性非极性表面活性剂替代聚山梨酸酯80；可改变聚乙二醇的片段大小；例如聚乙烯吡咯烷酮的其他生物相容性聚合物可替换聚乙二醇；及用其他糖或多醣替代右旋糖。

或者，可使用疏水性医药化合物的其他传送系统。脂质体及乳液为疏水性药物的传送载体或载剂的已知实例。虽然也可使用某些诸如二甲亚砜的有机溶剂，但通常DMSO的毒性较高。另外，化合物可使用诸如含有治疗剂的固体疏水性聚合物的半透性基质的缓释系统传送。已确定多种缓释物质且其为本领域技术人员所知。取决于缓释胶囊化学性质，其可释放化合物历时数周至多达100天以上。取决于治疗剂的化学性质及生物稳定性，可使用使蛋白质稳定的其他策略。

医药组合物还可包含合适的固相或凝胶相载剂或赋形剂。这些载剂及赋形剂可明显改进可溶性不良药物的生物可用性。这些载剂或赋形剂的实例包括碳酸钙、磷酸钙、糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶及诸如聚乙二醇的聚合物。此外，可使用添加剂或赋形剂，诸如GelucireCapryol、Labrafil

、Labrasol

、Lauroglycol

、Plurol

Peceol

、Transcutol

及其类似物。

另外，医药组合物可并入皮肤贴片中以将药物直接传送至皮肤上。

应了解本发明的药剂的实际剂量应根据所使用的特定药剂、所调配的特定组成、投药模式及特定位点、宿主及待治疗的疾病而变化。鉴于已知化合物的实验数据，本领域技术人员可使用公知的剂量-确定试验来确定一组给定条件下的最佳剂量。就经口投药而言，所使用的示例性每日剂量通常应为每公斤体重约0.001mg至约1000mg，其中治疗过程以适当间隔重复。

此外，本发明的医药学上可接受的调配物可含有含量为约10mg至约2000mg，或约10mg至约1500mg，或约10mg至约1000mg，或约10mg至约750mg，或约10mg至约500mg，或约25mg至约500mg，或约50至约500mg，或约100mg至约500mg的本发明的化合物或其盐或溶剂化物。

另外，本发明的医药学上可接受的调配物可含有含量为约0.5w/w％至约95w/w％，或约1w/w％至约95w/w％，或约1w/w％至约75w/w％，或约5w/w％至约75w/w％，或约10w/w％至约75w/w％，或约10w/w％至约50w/w％的本发明的化合物或其盐或溶剂化物。

可向患有异常细胞生长的诸如人类的哺乳动物单独或以医药学上可接受的调配物的一部分的形式投与本发明的化合物或其盐或溶剂化物，一天一次、一天两次、一天三次或一天四次或甚至更频繁。

关于本发明的化合物，本领域普通技术人员应理解，对每天给予需要该治疗的哺乳动物的特定医药调配物、剂量及给药次数的选择在本领域普通技术人员知识范围内且无需不适当实验即可确定。

本发明的化合物适用于调节或抑制PI3-Kα活性。因此，这些化合物适用于单独或与其他抗癌药剂组合预防及/或治疗诸如癌症的与异常细胞生长相关的疾病状态。

本发明还涉及一种治疗包括人类的哺乳动物体内异常细胞生长的方法，其包含向该哺乳动物投与一定量的如以上所定义的有效治疗异常细胞生长的式(I)化合物或其盐或溶剂化物。

在该方法的一个实施例中，异常细胞生长为癌症，包括(但不限于)间皮瘤、肝胆(肝及胆管)癌、原发性或继发性CNS肿瘤、原发性或继发性脑肿瘤、肺癌(NSCLC及SCLC)、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内黑色素瘤、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、胃肠(胃、结肠直肠及十二指肠)癌、乳癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、阴门癌、霍奇金氏病(Hodgkin′s Disease)、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、睾丸癌、慢性或急性白血病、慢性骨髓白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)赘瘤、原发性CNS淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤(non hodgkins′slymphoma)、脊椎轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、多发性骨髓瘤、胆管癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、成视网膜细胞瘤或一或多种上述癌症的组合。

在本发明的一个实施例中，癌症选自肺癌(NSCLC及SCLC)、头或颈癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、乳癌、肾或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)赘瘤、原发性CNS淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、脊椎轴肿瘤或一或多种上述癌症的组合。

在本发明的另一实施例中，癌症选自肺癌(NSCLC及SCLC)、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌或一或多种上述癌症的组合。

在本发明的另一实施例中，癌症选自肺癌(NSCLC及SCLC)、卵巢癌、结肠癌、直肠癌或一或多种上述癌症的组合。

在该方法的另一实施例中，该异常细胞生长为良性增生性疾病，包括(但不限于)牛皮癣、良性前列腺肥大或再狭窄。

本发明还涉及一种治疗哺乳动物体内异常细胞生长的方法，其包含与抗肿瘤剂组合向该哺乳动物投与一定量的有效治疗异常细胞生长的本发明的化合物或其盐或溶剂化物，该抗肿瘤剂选自由以下各物质组成的组：有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、插层抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗体、细胞毒素、抗激素及抗雄激素。

在本发明的一个实施例中，与本发明的化合物及本文所述的医药组合物组合使用的抗肿瘤剂为抗血管生成剂、激酶抑制剂、pan激酶抑制剂或生长因子抑制剂。优选的pan激酶抑制剂包括Sutent^TM(舒尼替尼(sunitinib))，描述于美国专利第6,573,293号(Pfizer，Inc，NY USA)中。抗血管生成剂包括(但不限于)以下药剂：诸如EGF抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂、VEGFR抑制剂、TIE2抑制剂、IGF1R抑制剂、COX-II(环加氧酶II)抑制剂、MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂及MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂。

优选的VEGF抑制剂包括(例如)阿瓦斯汀(Avastin)(贝伐单抗bevacizumab)，South San Francisco，California的Genentech，Inc.的抗VEGF单克隆抗体。其他VEGF抑制剂包括CP-547,632(Pfizer Inc.，NY，USA)、AG13736(Pfizer Inc.)、ZD-6474(AstraZeneca)、AEE788(Novartis)、AZD-2171、VEGF Trap(Regeneron/Aventis)、凡塔蓝尼(Vatalanib)(亦称为PTK-787、ZK-222584：Novartis & Schering AG)、马库根(Macugen)(哌加他尼钠(pegaptanib octasodium)、NX-1838、EYE-001，PfizerInc./Gilead/Eyetech)、IM862(Kirkland，Washington，USA的Cytran Inc.)及来自Ribozyme(Boulder，Colorado)及Chiron(Emeryville，California)的合成核糖酶安苟酶(angiozyme)及其组合。

适用于本发明的VEGF抑制剂描述于美国专利第6,534,524号及第6,235,764号中，出于所有目的两者均整体并入本文中。其他VEGF抑制剂描述于(例如)WO 99/24440、WO 95/21613、WO 99/61422、美国专利5,834,504、WO 98/50356、美国专利5,883,113、美国专利5,886,020、美国专利5,792,783、美国专利6,653,308、WO 99/10349、WO 97/32856、WO 97/22596、WO 98/54093、WO 98/02438、WO 99/16755及WO98/02437中，所有均整体以引用的方式并入本文中。

其他抗血管生成化合物包括阿曲汀(acitretin)、芬维A胺(fenretinide)、沙力度胺(thalidomide)、唑来膦酸(zoledronic acid)、血管抑制素、阿泼立定(aplidine)、西能替得(cilengtide)、康柏斯达汀A-4(combretastatin A-4)、内皮生长抑素、卤夫酮(halofuginone)、莱比马他(rebimastat)、莱莫瓦布(removab)、莱维立咪(Revlimid)、角鲨胺(squalamine)、乌库雷(ukrain)、维他欣(Vitaxin)及其组合。

可与本发明的化合物组合使用的其他抗增生性药剂包括法呢基蛋白质转移酶的抑制剂及受体酪氨酸激酶PDGFr的抑制剂，包括以下文献中所公开及主张的化合物：美国专利6,080,769、美国专利6,194,438、美国专利6,258,824、美国专利6,586447、美国专利6,071,935、美国专利6,495,564及美国专利6,150,377、美国专利6,596,735、美国专利6,479,513、WO01/40217、美国2003-0166675。上述各专利及专利申请整体以引用的方式并入本文中。

PDGRr抑制剂包括(但不限于)国际专利申请公开第WO01/40217号及第WO2004/020431号中所公开的抑制剂，出于所有目的其内容整体并入本文中。优选的PDGFr抑制剂包括Pfizer的CP-673,451及CP-868,596及其盐。

优选的GARF抑制剂包括Pfizer的AG-2037(哌立群所(pelitrexol)及其盐)。适用于本发明的GARF抑制剂公开于美国专利第5,608,082号中，出于所有目的其整体并入本文中。

可与式(I)化合物及本文公开的医药组合物结合使用的合适COX-II抑制剂的实例包括CELEBREX^TM(塞来昔布(celecoxib))、帕瑞昔布(parecoxib)、德拉昔布(deracoxib)、ABT-963、MK-663(依托昔布(etoricoxib))、COX-189(鲁米昔布(Lumiracoxib))、BMS 347070、RS57067、NS-398、贝克斯曲(Bextra)(伐地昔布(valdecoxib))、帕瑞昔布(paracoxib)、万络(Vioxx)(罗非昔布(rofecoxib))、SD-8381、4-甲基-2-(3，4-二甲基苯基)-1-(4-胺磺酰基-苯基)-1H-吡咯、2-(4-乙氧苯基)-4-甲基-1-(4-胺磺酰基苯基)-1H-吡咯、T-614、JTE-522、S-2474、SVT-2016、CT-3、SC-58125及阿考瑕(Arcoxia)(依托昔布(etoricoxib))。另外，COX-II抑制剂公开于美国专利申请案US 2005-0148627及US 2005-0148777中，出于所有目的其内容整体并入本文中。

在特定实施例中，抗肿瘤剂为塞来昔布(美国专利第5,466,823号)、伐地昔布(美国专利第5,633,272号)、帕瑞昔布(美国专利第5,932,598号)、德拉昔布(美国专利第5,521,207号)、SD-8381(美国专利第6,034,256号，实例175)、ABT-963(WO 2002/24719)、罗非昔布(CAS登记号162011-90-7)、WO 1998/03484中公开的MK-663(或依托昔布)、WO 1999/11605中所公开的COX-189(鲁米昔布)、BMS-347070(美国专利6,180,651)、NS-398(CAS 123653-11-2)、RS 57067(CAS 17932-91-3)、4-甲基-2-(3，4-二甲基苯基)-1-(4-胺磺酰基-苯基)-1H-吡咯、2-(4-乙氧基苯基)-4-甲基-1-(4-胺磺酰基苯基)-1H-吡咯或美侬西康(meloxicam)。

与本发明的化合物及本文所公开的医药组合物组合使用的作为抗肿瘤剂的其他适用抑制剂包括阿司匹林(aspirin)及抑制产生前列腺素的酶(环加氧酶I及II)从而导致前列腺素含量较低的非类固醇消炎药物(NSAID)，其包括(但不限于)以下各物：双水杨酸酯(Salsalate)(Amigesic)、二氟苯水杨酸(Diflunisal)(Dolobid)、布洛芬(Ibuprofen)(Motrin)、酮洛芬(Ketoprofen)(Orudis)、萘丁美酮(Nabumetone)(Relafen)、吡罗昔康(Piroxicam)(Feldene)、萘普生(Naproxen)(Aleve，Naprosyn)、双氯芬酸(Diclofenac)(Voltaren)、吲哚美辛(Indomethacin)(Indocin)、舒林酸(Sulindac)(Clinoril)、托美丁(Tolmetin)(Tolectin)、依托度酸(Etodolac)(Lodine)、酮咯酸(Ketorolac)(Toradol)、噁丙嗪(Oxaprozin)(Daypro)及其组合。

优选的COX-I抑制剂包括布洛芬(Motrin)、磺胺二甲噁唑(nuprin)、萘普生(Aleve)、吲哚美辛(Indocin)、萘丁美酮(Relafen)及其组合。

与本发明的化合物及本文所公开的医药组合物组合使用的靶标药剂包括EGFr抑制剂，诸如爱诺沙(Iressa)(吉非替尼(gefitinib)，AstraZeneca)、它赛瓦(Tarceva)(尔洛替尼(erlotinib)或OSI-774，OSI PharmaceuticalsInc.)、艾比特思(Erbitux)(西图西美(cetuximab)，Imclone Pharmaceuticals，Inc.)、EMD-7200(Merck AG)、ABX-EGF(Amgen Inc.及Abgenix Inc.)、HR3(Cuban Government)、IgA抗体(University of Erlangen-Nuremberg)、TP-38(IVAX)、EGFR融合蛋白、EGF疫苗、抗EGFr免疫微脂囊(HermesBiosciences Inc.)及其组合。优选EGFr抑制剂包括爱诺沙、艾比特思、它赛瓦及其组合。

其他抗肿瘤剂包括那些选自pan erb受体抑制剂或ErbB2受体抑制剂的药剂，诸如CP-724,714(Pfizer，Inc.)、CI-1033(卡纽替尼(canertinib)，Pfizer，Inc.)、赫赛汀(Herceptin)(搓杜滋美(trastuzumab)，Genentech Inc.)、奥密塔克(Omitarg)(2C4、帕妥珠单抗(pertuzumab)，Genentech Inc.)、TAK-165(Takeda)、GW-572016(朗那法替(lonafarnib)，GlaxoSmithKline)、GW-282974(GlaxoSmithKline)、EKB-569(Wyeth)、PKI-166(Novartis)、dHER2(HER2疫苗，Corixa及GlaxoSmithKline)、APC8024(HER2疫苗，Dendreon)、抗HER2/neu双特异性抗体(Decof Cancer Center)、B7.her2.IgG3(Agensys)、AS HER2(Research Institute for Rad Biology &Medicine)、三官能性双特异性抗体(University of Munich)及mAB AR-209(Aronex Pharmaceuticals Inc)及mAB 2B-1(Chiron)及其组合。

优选的erb选择性抗肿瘤剂包括赫赛汀、TAK-165、CP-724,714、ABX-EGF、HER3及其组合。优选的pan erbb受体抑制剂包括GW572016、CI-1033、EKB-569及奥密塔克及其组合。

其他erbB2抑制剂包括以下文献中所公开的那些抑制剂：WO98/02434、WO 99/35146、WO 99/35132、WO 98/02437、WO 97/13760、WO 95/19970、美国专利5,587,458及美国专利5,877,305，各篇文献以引用的方式整体并入本文中。适用于本发明的ErbB2受体抑制剂还公开于美国专利6,465,449及6,284,764及WO 2001/98277中，各篇文献以引用的方式整体并入本文中。

另外，其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：BAY-43-9006(OnyxPharmaceuticals Inc.)、根纳三思(Genasense)(augmerosen，Genta)、盘尼图单抗(Panitumumab)(Abgenix/Amgen)、泽娃灵(Zevalin)(Schering)、贝斯卡(Bexxar)(Corixa/GlaxoSmithKline)、阿巴瑞克(Abarelix)、爱宁达(Alimta)、EPO 906(Novartis)、迪斯德莫来(discodermolide)(XAA-296)、ABT-510(Abbott)、新伐斯他(Neovastat)(Aeterna)、恩扎斯他因(enzastaurin)(EliLilly)、考布斯汀A4P(Combrestatin A4P)(Oxigene)、ZD-6126(AstraZeneca)、黄皮利多(flavopiridol)(Aventis)、CYC-202(Cyclacel)、AVE-8062(Aventis)、DMXAA(Roche/Antisoma)、诺拉曲特(Thymitaq)(Eximias)、替莫达(Temodar)(替莫唑胺(temozolomide)，ScheringPlough)及雷维立米(Revilimd)(Celegene)及其组合。

其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：CyPat(环丙孕酮乙酸酯)、组胺瑞林(Histerelin)(乙酸组胺瑞林)、Plenaixis(abarelix depot)、阿曲生坦(Atrasentan)(ABT-627)、赛特铂(Satraplatin)(JM-216)、沙利度胺(thalomid)(沙利度胺(Thalidomide))、Theratope、Temilifene(DPPE)、ABI-007(太平洋紫杉醇(paclitaxel))、Evista(雷洛西芬(raloxifene))、阿他美坦(Atamestane)(Biomed-777)、Xyotax(聚谷氨酸酯太平洋紫杉醇(polyglutamate paclitaxel))、Targetin(bexarotine)及其组合。

另外，其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：曲扎酮(Trizaone)(替拉扎明(tirapazamine))、阿普思(Aposyn)(埃克苏琳(exisulind))、尼伐斯他(Nevastat)(AE-941)、赛普林(Ceplene)(二盐酸组胺)、奥赛西(Orathecin)(卢比替康(rubitecan))、维如利金(Virulizin)、嘎斯曲姆(Gastrimmune)(G17DT)、DX-8951f(甲磺酸依喜替康)、奥考那斯(Onconase)(拉皮那斯(ranpirnase))、BEC2(米吐莫单抗(mitumomab))、埃思曲因(Xcytrin)(莫特沙芬钆(motexafin gadolinium))及其组合。

其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：CeaVac(CEA)、NeuTrexin(葡萄糖醛酸曲美群赛(trimetresate glucuronate))及其组合。其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：OvaRex(奥拉苟单抗(oregovomab))、奥斯德姆(Osidem)(IDM-1)及其组合。其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：阿德维辛(Advexin)(ING 201)、曲扎酮(替拉扎明)及其组合。其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：RSR13(乙丙昔罗(efaproxiral))、考他拉(Cotara)(131I chTNT 1/b)、NBI-3001(IL-4)及其组合。其他抗肿瘤剂可选自以下药剂：康伐辛(Canvaxin)、GMK疫苗、PEGInteron A、他昔普辛(Taxoprexin)(DHA/太平洋紫杉醇)及其组合。

其他抗肿瘤剂包括Pfizer的MEK1/2抑制剂PD325901、ArrayBiopharm的MEK抑制剂ARRY-142886、Bristol Myers的CDK2抑制剂BMS-387,032、Pfizer的CDK抑制剂PD0332991及AstraZeneca的AXD-5438及其组合。

另外，亦可使用mTOR抑制剂，诸如CCI-779(Wyeth)及雷帕霉素(rapamycin)衍生物RAD001(Novartis)及AP-23573(Ariad)、HDAC抑制剂、SAHA(Merck Inc./Aton Pharmaceuticals)及其组合。其他抗肿瘤剂包括aurora 2抑制剂VX-680(Vertex)及Chk1/2抑制剂XL844(Exilixis)。

以下细胞毒素剂可与本发明的化合物及本文所公开的医药组合物组合使用，例如一或多种选自由以下各物质组成的组：表柔比星(epirubicin)(艾仑斯(Ellence))、多西他赛(docetaxel)(克癌易(Taxotere))、紫杉醇(paclitaxel)、孜尼卡(Zinecard)(右雷佐生(dexrazoxane))、利妥昔单抗(rituximab)(美罗华(Rituxan))、甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)(格列卫(Gleevec))及其组合。

本发明还涵盖本发明的化合物与激素疗法一起使用，该激素疗法包括(但不限于)依西美坦(exemestane)(依西美坦(Aromasin)，Pfizer Inc.)、亮丙瑞林(leuprorelin)(鲁普(Lupron)或柳培林(Leuplin)，TAP/Abbott/Takeda)、安美达锭(anastrozole)(瑞宁得(Arimidex)，Astrazeneca)、苟色林(gosrelin)(诺雷德(Zoladex)，AstraZeneca)、多卡西菲(doxercalciferol)、法屈唑(fadrozole)、福美司坦(formestane)、柠檬酸它莫西芬(tamoxifen citrate)(他莫昔芬(tamoxifen)，诺瓦得士(Nolvadex)，AstraZeneca)、康士得(Casodex)(AstraZeneca)、阿巴瑞克(Praecis)、曲普瑞林(Trelstar)及其组合。

本发明还涉及本发明的化合物与激素治疗剂一起使用，这些激素治疗剂诸如：抗雌激素，包括(但不限于)氟维司群(fulvestrant)、托瑞米芬(toremifene)、雷诺昔酚(raloxifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)、来曲唑(letrozole)(弗隆(Femara)，Novartis)；抗雄激素，诸如比卡鲁胺(bicalutamide)、氟他胺(flutamide)、米非司酮(mifepristone)、尼鲁胺(nilutamide)、Casodex^TM(4′-氰基-3-(4-氟苯基磺酰基)-2-羟基-2-甲基-3′-(三氟甲基)丙酰苯胺，比卡鲁胺(bicalutamide))及其组合。

另外，本发明提供本发明的化合物自身或其与一或多种辅助性护理产品的组合，这些产品为例如选自由以下各物质组成的组的产品：非格司亭(Filgrastim)(优保津(Neupogen))、昂丹司琼(ondansetron)(佐复宁(Zofran))、法安明(Fragmin)、普克特(Procrit)、阿罗西(Aloxi)、伊门得(Emend)或其组合。

尤其优选的细胞毒素药剂包括伊立替康(Camptosar)、艾比特思、爱诺沙、格列卫、克癌易(Taxotere)及其组合。

可使用以下拓扑异构酶I抑制剂作为抗肿瘤剂：喜树碱(camptothecin)、盐酸伊立替康(irinotecan HCl)(伊立替康(Camptosar))、埃多特卡(edotecarin)、卢比替康(orathecin)(Supergen)、依喜替康(exatecan)(Daiichi)、BN-80915(Roche)及其组合。尤其优选的拓扑异构酶II抑制剂包括表柔比星(艾仑斯)。

烷化剂包括(但不限于)氮芥N-氧化物、环磷酰胺、异环磷酰胺(iflsfamide)、美法仑(melphalan)、白消安(busulfan)、二溴甘露醇、卡波醌(carboquone)、塞替派(thiotepa)、雷诺莫司汀(ranimustine)、尼莫司汀(nimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、AMD-473、六甲密胺、AP-5280、阿帕孜醌(apaziquone)、溴他林星(brostallicin)、苯达莫司汀(bendamustine)、卡莫司汀(carmustine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、格鲁佛酰胺(glufosfamide)、异环磷酰胺、KW-2170、马磷酰胺(mafosfamide)及二溴卫矛醇；铂配位烷基化化合物包括(但不限于)顺铂(cisplatin)、卡铂(Paraplatin)(卡铂(carboplatin))、依铂(eptaplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、乐沙定(Eloxatin)(奥赛力铂(oxaliplatin)，Sanofi)或沙铂(satrplatin)及其组合。尤其优选烷化剂包括乐沙定(奥赛力铂)。

抗代谢物包括(但不限于)单独或与以下各物组合的甲胺喋呤(methotrexate)、6-巯基嘌呤核糖苷(6-mercaptopurine riboside)、巯嘌呤(mercaptopurine)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)(5-FU)：亚叶酸(leucovorin)、喃氟啶(tegafur)、UFT、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、阿糖胞苷奥卡磷化物(cytarabine ocfosfate)、依诺他滨(enocitabine)、S-1、力比泰(Alimta)(培美曲唑二钠(premetrexed disodium)，LY231514，MTA)、健择(Gemzar)(吉西他滨(gemcitabine)，Eli Lilly)、氟达拉滨(fludarabin)、5-阿扎胞苷(5-azacitidine)、卡西他宾(capecitabine)、克拉屈滨(cladribine)、克罗拉滨(clofarabine)、地西他滨(decitabine)、依氟鸟氨酸(eflornithine)、乙炔基胞嘧啶核苷(ethynylcytidine)、胞嘧啶阿拉伯糖苷(cytosine arabinoside)、羟基脲、TS-1、美法仑、奈拉滨(nelarabine)、诺拉曲特(nolatrexed)、奥卡磷化物、培美曲唑二钠(disodium premetrexed)、喷司他汀、派利曲索(pelitrexol)、雷替曲赛(raltitrexed)、曲平(triapine)、三甲曲沙(trimetrexate)、阿糖腺苷(vidarabine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞宾(vinorelbine)；或例如欧洲专利申请第239362号中所公开的优选抗代谢物中的一种：诸如N-(5-[N-(3，4-二氢-2-甲基-4-氧代基喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-2-噻吩甲酰基)-L-谷氨酸，及其组合。

抗生素包括插层抗生素且包括(但不限于)：阿柔比星(aclarubicin)、放线菌素D(actinomycin D)、胺柔比星(amrubicin)、脂质体蒽环霉素(annamycin)、阿霉素(adriamycin)、博莱霉素(bleomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、小红莓(doxorubicin)、依沙芦星(elsamitrucin)、表柔比星、伽柔比星(galarubicin)、黄胆素(idarubicin)、丝裂霉素C(mitomycin C)、奈莫柔比星(nemorubicin)、新制癌菌素(neocarzinostatin)、培洛霉素(peplomycin)、吡柔比星(pirarubicin)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、司替美(stimalamer)、链佐星(streptozocin)、伐柔比星(valrubicin)、净司他丁(zinostatin)及其组合。

植物源抗肿瘤物质包括(例如)选自有丝分裂抑制剂的那些物质，例如长春碱、多西他赛(Taxotere)、紫杉醇及其组合。

细胞毒素拓扑异构酶抑制剂包括一或多种选自由以下各物质组成的组的药剂：阿柔比星、胺萘非特(amonafide)、贝洛替康(belotecan)、喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、二氟莫替康(diflomotecan)、盐酸伊立替康(irinotecan HCl)(伊立替康(Camptosar))、埃多特卡、表柔比星(艾仑斯)、足叶乙甙(etoposide)、依喜替康、吉玛替康(gimatecan)、勒托替康(lurtotecan)、米托蒽醌、吡柔比星(pirarubicin)、匹克生琼(pixantrone)、卢比替康、索布佐生(sobuzoxane)、SN-38、他氟普西(tafluposide)、拓朴替康及其组合。

优选的细胞毒素拓扑异构酶抑制剂包括一或多种选自由以下各物质组成的组的药剂：喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、盐酸伊立替康(irinotecan HCl)(伊立替康(Camptosar))、埃多特卡、表柔比星(艾仑斯)、足叶乙甙、SN-38、拓朴替康及其组合。

免疫药物包括干扰素及大量其他免疫增强剂。干扰素包括干扰素α、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ-1a、干扰素γ-1b(阿克替姆(Actimmune))或干扰素γ-n1及其组合。其他药剂包括非格司亭(fllgrastim)、蘑菇多糖(lentinan)、裂皱菌素(sizofilan)、赛拉西(TheraCys)、乌苯美司(ubenimex)、WF-10、阿地白介素(aldesleukin)、阿来组单抗(alemtuzumab)、BAM-002、达卡巴嗪(dacarbazine)、达利珠单抗(daclizumab)、地尼白介素(denileukin)、吉妥珠单抗奥唑米星(gemtuzumabozogamicin)、异贝莫单抗(ibritumomab)、咪喹莫特(imiquimod)、来格司亭(lenograstim)、蘑菇多糖、黑色素瘤疫苗(melanoma vaccine)(Corixa)、莫拉司亭(molgramostim)、OncoVAX-CL、沙格司亭(sargramostim)、他索那明(tasonermin)、特克乐介素(tecleukin)、司玛拉斯(thymalasin)、托西莫单抗(tositumomab)、维如利金、Z-100、埃拉株单抗(epratuzumab)、米吐莫单抗、奥拉苟单抗、哌吐莫单抗(pemtumomab)(Y-muHMFG1)、普维格(Provenge)(德曲奥(Dendreon))及其组合。

生物反应调节剂为更改活有机体的防卫机制或组织细胞的诸如存活、生长或分化的生物反应以引导其具有抗肿瘤活性的药剂。这些药剂包括云芝多糖(krestin)、蘑菇多糖、西佐喃(sizofiran)、皮西板尼(picibanil)、乌苯美司及其组合。

可与本发明的化合物组合使用的其他抗癌剂包括亚利崔托宁(alitretinoin)、阿哌立根(ampligen)、阿曲生坦、贝瑟罗汀(bexarotene)、硼替佐米(bortezomib)、波生坦(Bosentan)、骨化三醇(calcitriol)、埃克苏琳、非那雄安(finasteride)、福莫司汀(fotemustine)、伊班膦酸(ibandronicacid)、米替福新(miltefosine)、米托蒽醌(mitoxantrone)、左旋天冬酰胺酶(1-asparaginase)、丙卡巴肼(procarbazine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、羟基脲(hydroxycarbamide)、培门冬酶(pegaspargase)、喷司他汀(pentostatin)、他扎罗汀(tazarotne)、特西塔(Telcyta)(TLK-286，Telik Inc.)、万珂(Velcade)(伯特马孜(bortemazib)，Millenium)、维A酸(tretinoin)及其组合。

铂配位化合物包括(但不限于)顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奈达铂(nedaplatin)、奥赛力铂(oxaliplatin)及其组合。

喜树碱衍生物包括(但不限于)喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、伊立替康、SN-38、埃多特卡、拓朴替康(topotecan)及其组合。

其他抗肿瘤剂包括米托蒽醌、左旋天冬酰胺酶、丙卡巴肼、达卡巴嗪、羟基脲、喷司他汀、维A酸及其组合。

也可使用能够增强抗肿瘤免疫反应的抗肿瘤剂诸如CTLA4(细胞毒素淋巴细胞抗原4)抗体及其他能够阻断CTLA4的药剂，诸如MDX-010(Medarex)及美国专利6,682,736中所公开的CTLA4化合物；及抗增生性药剂，诸如其他法呢基蛋白质转移酶抑制剂，例如法呢基蛋白质转移酶抑制剂。另外，可与本发明的化合物组合使用的特异性CTLA4抗体包括美国专利6,682,736及6,682,736中所公开的那些抗体，两篇文献以引用的方式整体并入本文中。

可用于本发明的组合方法中的特异性IGF1R抗体包括WO2002/053596中所公开的那些抗体，该文献以引用的方式整体并入本文中。

可用于本发明的特异性CD40抗体包括WO 2003/040170中所公开的那些抗体，该文献以引用的方式整体并入本文中。

还可使用基因疗法药剂作为抗肿瘤剂，诸如TNFerade(GeneVec)，其响应放射疗法表达TNFα。

在本发明的一个实施例中，士他汀(Statins)可与本发明的化合物及其医药组合物组合使用。士他汀(HMG-CoA还原酶抑制剂)可选自由以下各物质组成的组：阿托伐他汀(Atorvastatin)(Lipitor^TM，Pfizer Inc.)、普伐他汀(Provastatin)(Pravachol^TM，Bristol-Myers Squibb)、洛伐他汀(Lovastatin)(Mevacor^TM，Merck Inc.)、辛伐他汀(Simvastatin)(Zocor^TM，Merck Inc.)、氟伐他汀(Fluvastatin)(Lescol^TM，Novartis)、西立伐他汀(Cerivastatin)(Baycol^TM，Bayer)、罗素他汀(Rosuvastatin)(Crestor^TM，AstraZeneca)、洛伐他汀(Lovostatin)及烟酸(Advicor^TM，KosPharmaceuticals)，其衍生物及组合。

在优选实施例中，士他汀选自由阿托伐他汀及洛伐他汀衍生物及其组合组成的组。适用作抗肿瘤剂的其他药剂包括卡都伊特(Caduet)。

在以下制备方法及实例中，″Ac″是指乙酰基，″Me″是指甲基，″Et″是指乙基，″Ph″是指苯基，″BOC″、″Boc″或″boc″是指N-叔丁氧基羰基，″DCM″(CH₂Cl₂)是指二氯甲烷，″DIPEA″或″DIEA″是指二异丙基乙基胺，″DMA″是指N，N-二甲基乙酰胺，″DMF″是指N，N-二甲基甲酰胺，″DMSO″是指二甲亚砜，″DPPP″是指1，3-双(二苯膦基)丙烷，″HOAc″是指乙酸，″IPA″是指异丙醇，″NMP″是指1-甲基2-吡咯烷酮，″TEA″是指三乙胺，″TFA″是指三氟乙酸，″DCM″是指二氯甲烷，″EtOAc″是指乙酸乙酯，″MgSO₄″是指硫酸镁，″Na₂SO₄″是指硫酸钠，″MeOH″是指甲醇，″Et₂O″是指乙醚，″EtOH″是指乙醇，″H₂O″是指水，″HCl″是指盐酸，″POCl₃″是指磷酰氯，″K₂CO₃″是指碳酸钾，″THF″是指四氢呋喃，″DBU″是指1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，″LiHMDS″或″LHMDS″是指六甲基二硅烷基胺基锂(lithium hexamethyldisilazide)，″TBME″或″MTB E″是指叔丁基甲基醚，″LDA″是指二异丙基酰胺锂，″N″是指当量浓度，″M″是指体积摩尔浓度，″mL″是指毫升，″mmol″是指毫摩尔，″μmol″是指微摩尔，″eq.″是指当量，″℃″是指摄氏度，″Pa″是指帕斯卡。

制备方法

本发明的化合物可使用下述反应途径及合成流程使用本领域可用的技术使用可容易获得的起始物质来制备。虽然本发明的某些实施例的制备方法在以下实例中详细描述，但本领域普通技术人员应认识到所描述的制备方法可容易适于制备本发明的其他实施例。举例而言，本发明的非示例性化合物的合成可通过对本领域技术人员而言显而易见的修改进行，例如通过适当保护干扰基团，通过改为现有技术已知的其他合适试剂，或通过进行反应条件的常规修改。或者，本文所指或现有技术已知的其他反应将被视为适于制备本发明的其他化合物。

在一种通用合成方法中，根据方法A制备由3表示的一般结构的化合物。

方法A

其中X为Cl、Br或I的化合物1及其制备描述于WO2005105801中，在40℃至220℃范围内的高温下在例如三乙胺的碱存在下在例如二氧杂环己烷的合适溶剂中通过用式R₁NH₂的胺处理数小时至数天使化合物1转化为化合物2。根据经修改的本领域技术人员已知的Suzuki反应条件通过用式R₃-B(OH)₂的硼酸或相应硼酸酯处理，使化合物2转化为化合物3。

在另一通用合成方法中，根据方法B制备由8表示的一般结构的化合物。

方法B

在50℃至75℃范围内的温度下在N-环己基-N-甲基环己胺、三-叔丁基四氟硼酸鏻、氯化锂及三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)存在下在例如1，4-二氧杂环己烷的合适溶剂中通过与丙烯酸酯反应半小时至数天，使化合物4转化为化合物5。通过氢化使化合物5转化为化合物6。使酯衍生物6水解，接着形成酰胺，产生式8化合物。

在另一通用合成方法中，根据方法C制备由11表示的一般结构的化合物。

方法C

在-40℃至-90℃范围内的低温下在例如THF的合适溶剂中通过用硼酸三甲酯及丁基锂处理，使化合物9转化为化合物10。根据本领域技术人员已知的Suzuki反应条件通过与R₃-X反应使化合物10转化为化合物11。

在另一通用合成方法中，根据方法D制备由16表示的一般结构的化合物。

方法D

在0℃至60℃范围内的温度下在三苯基膦及偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)存在下在例如THF的合适溶剂中使化合物12与式R₂OH的醇反应以提供式13化合物。根据经修改的本领域技术人员已知的Suzuki反应条件通过用式R₃-B(OH)₂的硼酸或相应硼酸酯处理使化合物13转化为化合物14。使用诸如间氯过苯甲酸(MCPBA)的试剂使化合物14氧化以提供化合物15。用式R₁NH₂的胺处理化合物15提供化合物16。

在另一通用合成方法中，根据方法E制备由21表示的化合物。

方法E

在25℃至100℃范围内的温度下在例如氢化钠的碱存在下在诸如DMF的合适溶剂中通过用其中X为Cl、Br或I的R₂X处理使化合物17转化为化合物18。根据本领域技术人员已知的Suzuki反应条件通过用式R₃-B(OH)₂的硼酸或相应硼酸酯处理使化合物18转化为化合物19。使用诸如MCPBA的试剂使化合物19氧化以提供化合物20。在回流条件下在诸如THF的合适溶剂中用式R₁NH₂的胺处理化合物20提供式21化合物。

在另一通用合成方法中，根据方法F制备由28表示的一般结构的化合物。

方法F

在40℃至220℃范围内的高温下在诸如碳酸钾及二异丙基乙基胺的碱存在下在诸如二甲基乙酰胺的合适溶剂中通过与式R₂-NH₂的胺反应数小时至数天，使市售化合物22转化为化合物23。在环境温度下在诸如氯仿或四氯化碳的合适溶剂中通过用N-卤代丁二酰胺处理30分钟至数小时使化合物23转化为其中X为Cl、Br或I的化合物24。在高温下在三-邻甲苯基膦、乙酸钯(II)及三乙胺存在下通过与丙烯酸酯反应使化合物24转化为化合物25。通过在40℃至220℃范围内的高温下将化合物25、硫酚或KOtBu及诸如三乙胺及DBU的有机碱于诸如二甲基乙酰胺的合适溶剂中的溶液加热数小时至数天使化合物25转化为化合物26。在环境温度下在诸如DMF的合适溶剂中通过用N-卤代丁二酰胺处理30分钟至数小时使化合物26转化为化合物27。随后，在70℃至120℃范围内的高温下在例如碳酸钾的碱及双(三苯基膦)氯化钯(II)存在下在诸如DMF及水溶液的合适溶剂中通过与式R₃-B(OH)₂的硼酸或相应硼酸酯反应数小时至数天使化合物27转化为化合物28。

方法F可用于(例如)制备其中R₂为可选地被取代的螺环基的化合物28。

方法G

在手套箱中，将以下各物添加至2.0mL Personal Chemistry微波反应管中：一个三角形搅拌棒、于DMF中的适当芳基卤29溶液(300μL，75μmol，1.0当量，0.25M)、于DMF中的适当硼酸或硼酸酯(300μL，75μmol，1.0当量，0.25M)、于无水THF中的催化剂Pd(PPh₃)₄(300μL，3.75μmol，0.05当量，0.0125M)及于脱气DI水中的K₂CO₃(94μL，188μmol，2.5当量，2.0M)。将微波管用隔片盖密封，且在手套箱外，将反应混合物在Personal Chemistry微波合成仪中在130℃下加热15分钟。将反应混合物转移至13×100mm试管中。将微波管用DMF(1.0mL)洗涤且将洗涤液DMF与最初转移的物质合并。移除溶剂，且将EtOAc(1mL)及DI水(1mL)添加至各管中。搅拌且离心后，将上清液转移至新13×100mm试管中。将水相用新鲜EtOAc(1mL)再萃取两次。将合并的有机相用DI水(1mL)及NaCl水溶液(1mL)反萃取。经针筒过滤器过滤有机相且蒸发滤液。将残余物于DMSO中复原，且使粗物质经HPLC使用具有0.05％TFA的乙腈/水作为移动相在Agilent Zorbax Extend C18管柱上纯化。

方法H

在40℃至220℃范围内的高温下在诸如碳酸钾及二异丙基乙基胺的碱存在下在诸如二甲基乙酰胺的合适溶剂中通过与其中A可选地被C_3-10环烷基取代的式R₂-O-A-NH₂的胺反应数小时至数天，使市售化合物31转化为化合物32。在环境温度下在诸如氯仿或四氯化碳的合适溶剂中通过用N-卤代丁二酰胺处理30分钟至数小时使化合物32转化为其中X为Cl、Br或I的化合物33。在高温下在三-邻甲苯基膦、乙酸钯(II)及三乙胺存在下通过与丙烯酸酯反应使化合物33转化为化合物34。通过在40℃至220℃范围内的高温下将化合物34、硫酚或KOtBu及诸如三乙胺及DBU的有机碱于诸如二甲基乙酰胺的合适溶剂中的溶液加热数小时至数天使化合物34转化为化合物35。在环境温度下在诸如DMF的合适溶剂中通过用N-卤代丁二酰胺处理30分钟至数小时使化合物35转化为化合物36。随后，在70℃至150℃范围内的高温下在例如碳酸钾的碱及双(三苯基膦)氯化钯(II)存在下在诸如DMF及水溶液的合适溶剂中通过与式R₃-B(OH)₂的硼酸或相应硼酸酯反应数小时至数天使化合物36转化为化合物37。

方法I

式34的化合物也可如方法I中所述制备。在40℃至220℃范围内的高温下在诸如碳酸钾及二异丙基乙基胺的碱存在下在诸如二甲基乙酰胺的合适溶剂中通过与式HO-A-NH₂的胺反应数小时至数天，使化合物38转化为化合物39。在室温至100℃范围内的温度下在诸如氢化钠的碱存在下在诸如DMF的合适溶剂中通过与R₂X反应使化合物39使转化为化合物40。在室温至80℃范围内的温度下在乙醇水溶液中通过用羟胺处理使化合物40转化为化合物41。在高温下在三-邻甲苯基膦、乙酸钯(II)及三乙胺存在下通过与丙烯酸酯反应使化合物41转化为化合物34。随后，根据方法H中所述的程序使化合物34转化为式37化合物。

实例

以下所提供的实例和制备方法进一步说明并解释本发明的化合物及其制备方法。实例1至100提供制备本发明的化合物101、104-107、109、113-114、116、120-121、123、129-130、132-133、147-152、179、192、193、247-252、263-264、267-270、275、284及285的详细合成步骤。表1表示使用本文所述的一般方法A-I制备的本发明的化合物。表2表示本发明的化合物的生物化学及细胞数据。表3表示本发明的代表性化合物152的小鼠异种移植功效数据。表4表示异种移植模型中药物动力学与药效(PK-PD)相互关系的数据。

应理解本发明的范围无论如何不受以下实例及制备方法的范围的限制。在以下实例中，除非另有结构式或化学名称说明，具有单一手性中心的分子以外消旋混合物形式存在。除非另有结构式或化学名称说明，那些具有两个或两个以上手性中心的分子以非对映异构体的外消旋混合物形式存在。单一对映异构体/非对映异构体可由本领域技术人员已知的方法获得。

各种起始物质和其他试剂都购自商业供应商，诸如Aldrich ChemicalCompany，且除非另有说明，都在无需进一步纯化的情况下使用。¹H-NMR谱在300MHz或400MHz下操作的Bruker仪器上记录且¹³C-NMR谱在75MHz操作下记录。NMR谱以CDCl₃溶液(以ppm计)形式(适当时)使用氯仿(7.25ppm及77.00ppm)或DMSO-d₆(2.50ppm及39.51ppm)或CD₃OD(3.4ppm及4.8ppm及49.3ppm)或内标物四甲基硅烷(0.00ppm)作为参考标准获得。按需要使用其他NMR溶剂。当报导峰多重性时，使用以下缩写：s(单峰)，d(双峰)，t(三重峰)，m(多重峰)，br(宽峰)、dd(双二重峰)、dt(双三重峰)。给出的耦合常数以赫兹(Hz)计。

实例1.2-氨基-8-环戊基-6-(3-羟基苯基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物147)

向2-氨基-6-溴-8-环戊基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(100mg，0.31mmol)、3-羟基苯基硼酸(50mg，1.2当量)、二氯双(三苯基膦)钯(II)(6.5mg，009mmol)、DMF(2mL)于10mL微波小瓶中的溶液中添加碳酸钾(3M，0.8mL)。在封盖之前，将溶液用N₂脱气10min并在微波反应器中在120℃下加热10min。一旦完成，将反应用1N NaOH(10mL)及EtOAc(50mL)稀释。将EtOAc层分离，经MgSO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。对粗产物进行层析纯化。获得标题化合物(82.1mg，产率79％)。

LRMS：337(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：9.37(1H，s)，7.87(1H，s)，7.19(3H，m)，7.11(1H，s)，7.03(1H，d)，6.74-6.71(1H，m)，6.04-5.99(1H，m)，2.55(3H，s)，2.24-2.22(2H，m)，2.02(2H，m)，1.77-1.75(2H，m)，1.60-1.58(2H，m)。

实例2.2-氨基-6-溴-8-环戊基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(0.80g，2.16mmol)于二氧杂环己烷(5mL)中的溶液中添加氢氧化铵(30％，2.6mL)。随后，将混合物在密封管中在110℃下加热30分钟。将溶液真空浓缩且用乙酸乙酯萃取(3×30mL)。将合并的有机相用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(无水硫酸钠)，过滤且浓缩至干燥以产生呈棕色结晶固体的标题化合物(0.65g，93％)。

LRMS：324(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.34(1H，s)，7.27(2H，bs)，6.01-5.93(1H，m)，2.51(3H，s)，2.16-2.13(2H，m)，2.00-1.98(2H，m)，1.75-1.72(2H，m)，1.57-1.54(2H，m)。

实例3.6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

根据实例2中所述的程序，使用甲基胺(2M于THF中)代替氢氧化铵，以90％的产率获得标题化合物。

LRMS：338(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.36(1H，s)，7.82(1H，bs)，5.98-5.94(1H，m)，2.86(3H，s)，2.51(3H，s)，2.28(2H，m)，1.99-1.97(2H，m)，1.75-1.72(2H，m)，1.62(2H，m)。

实例4.6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(乙基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

根据实例2中所述的程序，使用乙基胺(2M于THF中)代替氢氧化铵，以93％的产率获得标题化合物。

LRMS：352(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.35(1H，s)，7.90(1H，bs)，6.01-5.93(1H，m)，3.34(2H，m)，2.51(3H，s)，2.27(2H，m)，1.96(2H，m)，1.75(2H，m)，1.62(2H，m)，1.15(3H，m)。

实例5.制备2-氨基-8-环戊基-6-(1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物101)

向2-氨基-6-溴-8-环戊基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(100mg，0.31mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(110mg，1.2当量)、二氯双(三苯基膦)钯(II)(6.5mg，009mmol)、DMF(2mL)于10mL微波小瓶中的溶液中添加碳酸钾(3M，0.8mL)。在封盖之前，将溶液用N₂脱气10min并在微波反应器中在120℃下加热10min。一旦完成，将反应用1N NaOH(10mL)及EtOAc(50mL)稀释。将EtOAc层用3N HCl洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。对粗产物进行层析纯化。获得标题化合物(62.5mg，产率65％)。

LRMS：311(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.26(2H，bs)，8.13(1H，s)，7.09(2H，bs)，6.04-5.99(1H，m)，2.59(3H，s)，2.27-2.23(2H，bm)，2.04(2H，bm)，1.77-1.74(2H，bm)，1.62(2H，bm)。

实例6.2-甲基氨基-6-甲腈-8-环戊基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物133)

将6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-甲基氨基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(150mg，0.15mmol)及四乙基氰化铵(946mg，0.30mmol)；DABCO(33mg，0.30mmol)于乙腈(2mL)中的溶液在22℃下搅拌3天。反应由LCMS表明已完成，且将混合物蒸发并送去层析。(70.6mg，产率61％)。

LRMS：284(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.68(1H，s)，8.31(1H，m)，5.90-5.85(1H，m)，2.91(3H，m)，2.51(3H，s)，2.28(2H，bm)，1.96(2H，bm)，1.77(2H，bm)，1.62(2H，bm)。

实例7.8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(化合物123)

将2-甲基氨基-6-甲腈-8-环戊基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(90mg，3.20mmol)于3M HCl(10mL)中的溶液在110℃下搅拌24h。反应由LCMS表明已完成，且将混合物蒸发并送去层析。(32.2mg，产率45％)。

LRMS：302(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.80(1H，bs)，8.68(1H，s)，8.13(1H，m)，7.62(1H，bs)，5.98-5.96(1H，m)，2.91(3H，m)，2.51(3H，s)，2.33(2H，bm)，1.99(2H，bm)，1.78(2H，bm)，1.65(2H，bm)。

实例8.(E)-8-环戊基-6-(2-羟基乙烯基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物120)

将6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(336mg，1.0mmol)、1-(乙烯基氧基)丁烷(501mg，5.0mmol)、N-环己基-N-甲基环己胺(254mg，1.3mmol)、四氟硼酸三-叔丁基鏻(8.70mg，0.03mmol)、氯化锂(127mg，3.0mmol)、三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(27.5mg，0.03mmol)及1，4-二氧杂环己烷(10ml)添加至配备有搅拌棒的反应小瓶中。将反应小瓶用氮冲洗、封盖且在75℃下加热75min。LCMS数据表明获得中间产物乙烯醚及产物(4∶6)。将反应混合物冷却至环境温度，经Celite^TM过滤且用二氧杂环己烷(10ml)洗涤。将滤液及洗涤液合并且添加一水合对-甲苯磺酸(761mg，4.0mmol)。将反应在环境温度下搅拌1h。此时，LCMS数据表明所有中间产物乙烯醚水解为想要产物。在减压下移除溶剂直至获得残余物，且添加乙酸乙酯(120ml)且用碳酸钾水溶液(5wt/v％)、水及盐水洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，且在减压下移除溶剂直至获得黄色固体残余物，将该残余物由煮沸庚烷结晶。冷却至环境温度后，形成黄色晶体且利用过滤收集以在两步后产生标题化合物(190mg，产率62％)。

LCMS：301(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)8.49(s，1H)5.79-6.19(m，1H)5.23-5.76(m，1H)3.10(d，J＝4.78Hz，3H)2.72(s，3H)2.60(s，3H)2.34-2.54(m，2H)1.98-2.15(m，2H)1.80-1.94(m，2H)1.65-1.78(m，2H)。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)8.35(s，1H)7.81-8.21(m，1H)5.75-6.05(m，1H)2.90(t，J＝5.41Hz，3H)2.60(s，1H)2.53-2.57(m，5H)2.20-2.42(m，2H)1.91-2.11(m，2H)1.70-1.85(m，2H)1.52-1.69(m，2H)。

实例9.(E)-3-(8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙烯酸乙酯

将6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(375mg，1.1mmol)、丙烯酸乙酯(442mg，4.42mmol)、N-环己基-N-甲基环己胺(280mg，1.43mmol)、四氟硼酸三-叔丁基鏻(9.61mg，0.03mmol)、氯化锂(42.4mg，3.3mmol)、三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(30.3mg，0.03mmol)及1，4-二氧杂环己烷(10ml)添加至配备有搅拌棒的反应小瓶中。将反应小瓶用氮冲洗、封盖且在75℃下加热75min。将反应混合物冷却至环境温度，经Celite^TM过滤且用乙酸乙酯洗涤。将滤液及洗涤液合并，且在减压下移除挥发性组分直至获得黄色固体残余物。将该固体残余物由煮沸庚烷∶乙酸乙酯(50ml∶50ml)结晶。冷却至环境温度后，形成针状黄色晶体且利用过滤收集以产生呈β-反式异构体的标题化合物(356mg，产率90％)。

LCMS：357(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.88(s，1H)7.71(d，J＝15.86Hz，1H)6.96(d，J＝15.86Hz，1H)6.03(s，1H)5.46(s，1H)4.25(q，J＝7.22Hz，2H)3.09(d，J＝5.04Hz，3H)2.58(s，3H)2.42(s，2H)1.91-2.19(m，3H)1.86(s，2H)1.28-1.37(m，3H)。

实例10.3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙酸乙酯(化合物132)

在500ml Parr^TM反应瓶中，将以类似于实例9的方式获得的(E)-3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙烯酸乙酯(525mg，1.4mmol)溶解于乙醇(150ml)中，且将溶液用氮脱气5min。添加Pd/C(450.0mg)(Aldrich 330108-50G，批次08331KC，以干重计10wt％钯/活性碳，湿Degussa type E101NE/W，水约50％)。将反应在50psi氢下在环境温度下氢化18h。将催化剂过滤且用乙醇(20ml)洗涤。将滤液及洗涤液合并，且在减压下移除挥发性组分直至获得固体残余物。将残余物由煮沸庚烷(30ml)结晶。冷却至环境温度后，形成白色针状晶体且利用过滤收集以产生标题化合物(338mg，产率64％)。

LCMS：373(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.55(s，1H)5.83-6.12(m，J＝17.88，8.81，8.56Hz，1H)5.21(s，1H)4.12(q，J＝7.13Hz，2H)3.38-3.63(m，2H)2.87(t，J＝7.30Hz，2H)2.67(t，J＝7.30Hz，2H)2.53(s，3H)2.31-2.46(m，2H)1.99-2.10(m，2H)1.77-1.91(m，2H)1.63-1.74(m，2H)1.19-1.31(m，6H)。

实例11.3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙酸(化合物130)

在配备有搅拌棒的反应小瓶中，将3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙酸乙酯(167mg，0.45mmol)溶解于THF(5ml)中。将氢氧化锂(35mg，1.46mmol)溶解于水(5ml)中且随后添加至反应小瓶中。将反应混合物在环境温度下搅拌3h。在减压下移除挥发性组分直至获得白色固体残余物。添加盐酸水溶液(3.26mmol，3.26ml 1.0M溶液)。利用过滤收集为标题化合物的白色固体(125mg，产率81％)。

LCMS：345(M+H)⁺。

¹H NMR(D₂O，400MHz)7.54(s，1H)5.56-5.81(m，1H)3.22(q，J＝7.22Hz，2H)2.60(t，J＝7.55Hz，2H)2.31-2.38(m，5H)1.91-2.05(m，2H)1.77-1.90(m，2H)1.58-1.71(m，2H)1.46-1.58(m，2H)1.06(t，J＝7.30Hz，3H)。

实例12.3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)-N，N-二甲基丙酰胺(化合物121)

将3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙酸(94mg，0.27mmol)、二甲胺(1.09mmol，0.55ml 2.0M于THF中的溶液)、三乙胺(27.6mg，0.27mmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU，104mg，0.27mmol)及DMF(3.0ml)添加至配备有搅拌棒的反应小瓶中。将反应混合物在50℃下加热26h。将反应用水(2ml)终止，且在减压下移除挥发性组分直至获得残余物。添加乙酸乙酯(70ml)及水(30ml)且震荡均匀。将有机层分离，用水(2×30ml)、盐水(30ml)洗涤，且经硫酸钠干燥。在减压下移除溶剂直至获得残余物，将其使用二氧化硅(100％石油醚至100％乙酸乙酯)纯化。将级分合并，且移除挥发性组分直至获得为标题化合物的无色油状物(55mg，产率54％)。

LCMS：372(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.66(s，1H)5.85-6.07(m，1H)3.38-3.60(m，2H)3.03(s，3H)2.94(s，3H)2.88(t，J＝7.30Hz，2H)2.68(t，J＝7.43Hz，2H)2.54(s，3H)2.34-2.48(m，2H)1.97-2.14(m，2H)1.78-1.91(m，2H)1.62-1.75(m，3H)1.27(t，J＝7.18Hz，3H)。

实例13.8-环戊基-2-(乙基氨基)-6-(3-羟基丙基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物129)

将3-(8-环戊基-2-(乙基氨基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)丙酸乙酯(60mg，0.16mmol)溶解于乙醇(5ml)及甲醇(2ml)中。将硼氢化钠(18mg，0.48mmol)缓慢添加至反应溶液中。由LCMS监测反应进程。20h后，在环境温度下分批添加更多的硼氢化钠以推动反应完成。将反应用水终止，且在减压下移除溶剂直至干燥。添加水(15ml)且用乙酸乙酯(3×30ml)萃取产物。将有机层经硫酸钠干燥，且在减压下移除溶剂直至获得残余物，将该残余物经HPLC纯化。使TFA盐形式的产物游离碱化(free-based)以产生标题化合物(34mg，产率61％)。

LCMS：331(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.53(s，1H)5.85-6.12(m，1H)3.57-3.65(m，2H)3.51-3.57(m，2H)2.96(s，1H)2.71(t，J＝7.05Hz，2H)2.58(s，3H)2.35(s，2H)1.99-2.12(m，2H)1.79-1.91(m，4H)1.61-1.77(m，3H)1.28(t，J＝7.18Hz，3H)。

实例14.8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-6-(3-羟基苯基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7(8H)-酮(化合物114)

向6-溴-8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(52.5mg，0.133mmol)、3-羟基苯基硼酸(20.5mg，0.149mmol)、碳酸钾(3M，0.06mL)于DMF(1.2mL)中的溶液中添加二氯双(三苯基膦)钯(II)(5mg，0.007mmol)。将混合物用N₂脱气，密封且在110℃下加热30min。将混合物倾入盐水中且用EtOAc萃取。将EtOAc层干燥(无水硫酸钠)，过滤且在减压下浓缩。将粗产物经层析纯化以产生标题化合物(12mg，22％)。

LRMS：409(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：7.73(1H，s)，7.28-7.33(1H，m)，7.09-7.20(2H，m)，6.79-6.89(1H，m)，5.90-6.10(1H，m)，5.13-5.88(1H，m)，3.54(2H，d，J＝6.32Hz)，2.58(3H，s)，2.25-2.49(2H，m)，1.96-2.18(2H，m)，1.79-1.95(2H，m)，1.63-1.77(4H，m)，1.31(6H，s)。

实例15.6-溴-8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(600mg，1.62mmol)及1-氨基-2-甲基丙-2-醇(294mg，2.34mmol)于二氧杂环己烷(6mL)中的溶液中添加三乙胺(1.2mL，8.6mmol)。随后，将混合物在密封管中在110℃下加热1h。将溶液倾入盐水中且用乙酸乙酯萃取。将有机相干燥(无水硫酸钠)，过滤且浓缩直至干燥。将粗产物经硅胶快速层析纯化以产生呈固体的标题化合物(565mg，88％)。

LRMS：395，397(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.07(1H，s)，5.91-6.13(1H，m)，5.46-5.90(1H，m)，3.52(2H，d，J＝6.32Hz)，2.54(3H，s)，2.17-2.43(2H，m)，1.95-2.16(2H，m)，1.76-1.95(2H，m)，1.56-1.74(3H，m)，1.30(6H，s)。

实例16.8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物116)

向6-溴-8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-4-甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(50mg，0.126mmol)、6-甲氧基吡啶-3-基硼酸(21mg，0.137mmol)、碳酸钾(3M，0.06mL)于DMF(1.2mL)中的溶液中添加二氯双(三苯基膦)钯(II)(4.5mg，0.0064mmol)。将混合物用N₂脱气，密封且在110℃下加热30min。在减压下移除溶剂。将粗混合物经层析纯化以产生标题化合物(23.6mg，44％)。

LRMS：424(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.31(1H，d，J＝2.27Hz)，7.97(1H，dd，J＝8.59，2.53Hz)，7.72(1H，s)，6.81(1H，d，J＝8.59Hz)，5.88-6.12(1H，m)，5.28-5.86(1H，m)，3.97(3H，s)，3.55(2H，d，J＝6.32Hz)，2.59(3H，s)，2.26-2.47(2H，m)，1.98-2.17(2H，m)，1.79-1.98(2H，m)，1.65-1.77(3H，m)，1.32(6H，s)。

实例17.8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-6-(嘧啶-5-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物107)

根据实例14的制备中所述的程序，使用6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮代替6-溴-8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，嘧啶-5-基硼酸代替3-羟基苯基硼酸，以10％的产率获得标题化合物。

LRMS：337(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：9.19(1H，s)，9.03(1H，s)，7.80(1H，s)，5.69-6.29(1H，m)，3.11(3H，d，J＝5.05Hz)，2.65(3H，s)，2.27-2.54(2H，m)，1.97-2.25(4H，m)，1.82-1.97(2H，m)，1.51-1.80(2H，m)。

实例18.8-异丙基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物113)

根据实例14的制备中所述的程序，使用6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮代替6-溴-8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，以11％的产率获得标题化合物。

LRMS：340(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)8.31(1H，d，J＝2.02Hz)，7.99(1H，dd，J＝8.72，2.40Hz)，7.71(1H，s)，6.80(1H，d，J＝8.59Hz)，5.72-6.03(1H，m)，3.97(3H，s)，3.09(3H，d，J＝5.05Hz)，2.58(3H，s)，1.65(6H，d，J＝6.82Hz)。

实例19.6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(175mg，0.508mmol)于1，4-二氧杂环己烷(2.5mL)中的搅拌溶液中添加甲基胺(0.80mL，2.0M于THF中，1.6mmol)。将混合物密封且在110℃微波中加热15min。蒸发溶剂且将粗产物用EtOAc/己烷洗涤以产生标题化合物(158mg，76％)。

LRMS：311，313(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.06(1H，s)，5.55-6.19(1H，m)，5.19-5.46(1H，m)，3.07(3H，d，J＝5.05Hz)，2.52(3H，s)，1.62(6H，d，J＝6.32Hz)。

实例20.6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基硫基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(380mg，1.16mmol)于CH₂Cl₂(25mL)中的搅拌及冷却(-20℃)溶液中添加MCPBA(340mg，77％，1.52mmol)。搅拌30min(-20℃至0℃)后，将混合物用饱和NaHCO₃水溶液终止，用EtOAc萃取，干燥且蒸发。将粗产物用EtOAc/己烷洗涤以产生标题化合物(190mg，48％)。

LRMS：344，346(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.78(1H，s)，5.60-5.97(1H，m)，2.92(3H，s)，2.79(3H，s)，1.56(6H，d，J＝6.82Hz)。

实例21.6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向NaH(120mg，5.00mmol)于DMF(15mL)中的悬浮液中添加6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(572mg，2mmol)。将混合物加热至46℃。将溶液稍冷却且添加2-碘丙烷(0.30mL，3.0mmol)。将混合物在46℃下加热30min且随后冷却至室温且在水与乙酸乙酯之间分配。将有机相干燥(MgSO₄)且浓缩。将粗产物经硅胶快速层析使用EtOAc/己烷纯化以产生标题化合物(390mg，59％)。

LRMS：328，330(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.60(1H，s)，5.45-5.99(1H，m)，2.64(3H，s)，2.58(3H，s)，1.54(6H，d，J＝6.82Hz)。

实例22.6-(5-(氨基甲基)-2-氟苯基)-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物104)

向8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基硼酸(30mg，0.099mmol)、3-溴-4-氟苯甲基胺盐酸盐(28.7mg，0.119mmol)、碳酸钾(3M，0.10mL)于DME(0.5mL)及EtOH(0.5mL)中的溶液中添加四(三苯基膦)钯(0)(6mg，0.005mmol)。将混合物用N₂脱气，密封并在微波中在100℃下加热1h。在减压下移除混合物。将粗产物经层析纯化以产生标题化合物(16.4mg，43.3％)。

LRMS：382(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：7.73(1H，s)，7.46(1H，d，J＝6.06Hz)，7.29-7.40(1H，m)，7.07(1H，t，J＝8.84Hz)，6.14-6.73(1H，m)，5.78-6.12(1H，m)，3.84-4.11(2H，m)，3.08(3H，d，J＝4.80Hz)，2.48-2.67(4H，m)，2.32(3H，d，J＝6.57Hz)，1.91-2.06(2H，m)，1.75-1.91(2H，m)，1.51-1.72(2H，m)。

实例23.8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基硼酸

向6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(1.00g，2.94mmol)及硼酸三甲酯(1.40mL，12.6mmol)于THF(60mL)中的搅拌及冷却(-78℃)溶液中添加BuLi(9.5mL，1.6M，15.2mmol)。搅拌20min后，将混合物用少量2N HCl及水终止，用EtOAc(3次)萃取，干燥且蒸发。将粗混合物经硅胶层析纯化以产生标题化合物(157.2mg，18％)。

LRMS：303(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.58(1H，s)，8.57(1H，s)，8.36(1H，s)，7.58-8.03(1H，m)，5.64-6.14(1H，m)，2.79-2.98(3H，m)，2.52-2.62(3H，m)，2.12-2.41(2H，m)，1.87-2.12(2H，m)，1.44-1.86(4H，m)。

实例24.6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物153)

向6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(147mg，0.445mmol)于1，4-二氧杂环己烷(2.5mL)中的溶液中添加甲基胺(1.1mL，2.0M于THF中，2.2mmol)。将混合物密封且在110℃微波中加热10min。在减压下浓缩混合物以产生固体。将粗固体用水及EtOAc洗涤，自DMSO/EtOAc重结晶以产生标题化合物(80mg，61％)。

LRMS：298(M+H)⁺。

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：11.68-12.05(1H，m)，8.50(1H，d，J＝1.77Hz)，8.05(1H，dd，J＝8.59，2.53Hz)，8.02(1H，s)，7.23-7.71(1H，m)，6.86(1H，d，J＝8.59Hz)，3.89(3H，s)，2.86(3H，d，J＝4.29Hz)，2.54(3H，s)。

实例25.6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

根据实例20中所述的程序，使用6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮代替6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基硫基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，将呈粗产物的标题化合物直接用于下一步骤中。

LRMS：331(M+H)⁺。

实例26.6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(50mg，0.17mmol)、6-甲氧基吡啶-3-基硼酸(40.1mg，1.1当量)、二氯双(三苯基膦)钯(II)(6.13mg，0.008mmol)、DMF(2mL)于5mL微波小瓶中的溶液中添加碳酸钾(3M，1.1当量)。在封盖之前，将溶液用N₂脱气10min，并在微波反应器中在100℃下加热1h。将反应倾入20ml盐水中且利用过滤收集沉淀。将其经层析(80％乙酸乙酯/己烷)进一步纯化。获得呈固体的标题化合物(30mg，产率55％)。

LRMS：315.0(ES+)

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：12.54(1H，s)，8.56(1H，d，J＝2.27Hz)，8.20(1H，s)，8.10(1H，dd，J＝8.72，2.40Hz)，6.90(1H，d，J＝8.59Hz)，3.90(3H，s)，2.70(3H，s)，2.57(3H，s)。

实例27.8-环丁基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物109)

根据实例22中所述的程序，使用8-环丁基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮代替6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，以35％的产率获得标题化合物。

LRMS：352(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.31(1H，d，J＝2.02Hz)，7.98(1H，dd，J＝8.72，2.40Hz)，7.71(1H，s)，6.80(1H，d，J＝8.59Hz)，5.76-6.10(1H，m)，5.41(1H，s)，3.97(1H，s)，3.18-3.44(2H，m)，3.12(3H，d，J＝5.05Hz)，2.56(3H，s)，2.24-2.46(2H，m)，2.01(1H，q，J＝10.36Hz)，1.78-1.93(1H，m)。

实例28.8-环丁基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

根据实例24中所述的程序，使用8-环丁基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮代替6-溴-8-异丙基-4-甲基-2-(甲基硫基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，将呈粗产物的标题化合物用于下一步骤中。

LRMS：385(M+H)⁺。

实例29.8-环丁基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并

[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

根据实例12所述的程序，使用6-溴-8-环丁基-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮代替6-溴-8-环戊基-2-(2-羟基-2-甲基丙基氨基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，以78％的产率获得标题化合物。

LRMS：369(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.35(1H，d，J＝2.53Hz)，7.99(1H，dd，J＝8.59，2.53Hz)，7.79(1H，s)，6.82(1H，d，J＝8.59Hz)，5.80-6.13(1H，m)，3.98(3H，s)，3.07-3.41(2H，m)，2.69(3H，s)，2.68(3H，s)，2.29-2.52(2H，m)，1.78-2.11(2H，m)。

实例30.6-溴-8-环丁基-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物100)；6-溴-7-环丁氧基-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶(化合物99)

向6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(500mg，1.75mmol)及环丁醇(164mg，2.27mmol)于THF(40mL)中的溶液中添加三苯基膦(917mg，3.49mmol)及DEAD(852mg，4.89mmol)。2h后，将混合物倾入盐水中，用乙酸乙酯萃取，干燥(无水Na₂SO₄)且蒸发。将混合物经层析纯化以产生化合物100(97mg，16％)及化合物99(180mg，30％)。

LRMS：340，342(M+H)⁺。

化合物100：

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.18(1H，s)，5.78-6.12(1H，m)，3.03-3.34(2H，m)，2.66(3H，s)，2.65(3H，s)，2.25-2.48(2H，m)，1.95-2.18(1H，m)，1.71-1.95(1H，m)。

化合物99：

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.38(1H，s)，5.45-5.74(1H，m)，2.77(3H，s)，2.69(3H，s)，2.53-2.66(2H，m)，2.17-2.37(2H，m)，1.81-1.98(1H，m)，1.65-1.81(1H，m)。

实例31.2-氨基-8-环戊基-6-(1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物106)

向8-环戊基-6-(1-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(80mg，0.17mmol)于5ml 1，4-二氧杂环己烷中的溶液中以氨气鼓泡历时10分钟。将反应管密封且加热至100℃历时30分钟。将反应混合物倾入盐水中且通过滤收集沉淀。随后，将固体再溶解于5ml甲醇中且添加数滴浓HCl且将混合物加热至50℃历时5小时。将反应混合物冷却至室温。经由旋转蒸发(rot vap)移除溶剂且将残余物用乙酸乙酯/己烷粉碎以产生标题化合物(33mg，产率54％)。

LCMS：355.20(ES+)

¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：8.44(s，1H)，8.17(d，J＝4.29Hz，2H)，7.11(s，2H)，6.21-6.02(m，1H)，4.96(s，1H)，4.23(t，J＝5.56Hz，2H)，3.81(t，J＝5.18Hz，2H)，2.64(s，3H)，2.39-2.22(m，2H)，2.19-2.06(m，2H)，1.88-1.74(m，2H)，1.74-1.56(m，2H)。

实例32.8-环戊基-6-(1-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

在室温下，将m-CPBA(209mg，2.0当量)添加至8-环戊基-6-(1-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(200mg，0.46mmol)于10ml二氯甲烷中的溶液中。将其在室温下搅拌2小时。经由旋转蒸发移除溶剂且将残余物经层析(30％至80％乙酸乙酯/己烷)纯化以产生标题化合物(166mg，产率77％)。

LCMS：462.1(ES+)

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.51(s，1H)，8.04(s，1H)，8.01(s，1H)，6.13-6.00(m，1H)，4.61(s，2H)，4.40(t，J＝5.31Hz，2H)，3.97(t，J＝5.31Hz，2H)，3.39(s，3H)，3.30(s，3H)，2.91(s，3H)，2.40-2.28(m，2H)，2.24-2.12(m，2H)，2.03-1.91(m，2H)，1.81-1.70(m，2H)。

实例33.8-环戊基-6-(1-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(200mg，0.56mmol)、1-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑(239mg，1.5当量)、四(三苯基膦)钯(0)(6.13mg，0.05当量)、DMF(2mL)于5mL微波小瓶中的溶液中添加碳酸钾(3M，3.0当量)。在封盖之前，将溶液用N₂脱气10min，并在微波反应器中在100℃下加热30min。将反应倾入20ml盐水中且利用过滤收集沉淀。获得呈固体的标题化合物(208mg，产率86％)。其未经进一步纯化即用于下一步骤中。

LRMS：430.0(ES+)。

实例34.8-环戊基-6-(1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物105)

将8-环戊基-6-(1-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(80mg，0.17mmol)溶解于3ml于THF(1.0M)中的甲基胺中。随后，将反应混合物在微波中加热至100℃历时30分钟。经由旋转蒸发移除溶剂且将残余物再溶解于5ml甲醇中。添加数滴浓HCl，将混合物加热至50℃历时5小时。将反应混合物冷却至室温。经由旋转蒸发移除溶剂且将残余物用乙酸乙酯/己烷粉碎以产生标题化合物(45mg，产率70％)。

LRMS：369.20(ES+)

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.33(s，1H)，7.91(s，1H)，7.84(s，1H)，6.11-5.98(m，1H)，4.34-4.24(m，2H)，4.08-4.00(m，2H)，3.09(d，J＝5.05Hz，3H)，2.65(s，3H)2.50-2.37(m，2H)2.15-2.04(m，2H)1.94-1.83(m，2H)1.79-1.64(m，2H)。

实例35.8-环戊基-6-(3-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物148)

将6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-甲基氨基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(5.00g，14.83mmol)、3-(羟基甲基)苯基硼酸(3.38g，22.24mmol)及Pd(PPh₃)₄(0.685g，0.593mmol)悬浮于甲苯(20mL)、MeOH(10mL)及饱和NaHCO₃(10mL)中且随后加热至100℃过夜。由MS及TLC断定反应已完成。将有机层直接注入管柱中，用CH₂Cl₂洗脱随后用于CH₂Cl₂中的4％MeOH洗脱。将含有如MS所断定的想要物质的级分合并且在真空下蒸发以产生米绿色固体。将其用MeCN粉碎且过滤以产生产物1，4.7g。获得第二产物0.25g。获得第三产物0.10g。基于NMR断定该三种产物具有足够的纯度且将其合并且再用MeCN洗涤以产生固体(4.39g，81.24％)。

元素分析：C₂₁H₂₄N₄O₂的计算值：C 69.21/69.00，H 6.64/6.65，N15.37/15.16。

LRMS(M+H)⁺：365.1

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：7.73(1H，s)7.61(1H，s)，7.53(1H，d，J＝7.57Hz)，7.40(1H，t，J＝7.69Hz)，7.34(1H，d，J＝7.57Hz)，6.04(1H，m)，5.27(1H，s)，4.74(2H，d，J＝6.11Hz)，3.06(3H，d，J＝5.13Hz)，2.56(3H，s)，2.40(2H，m)，2.05(2H，m)，1.66(2H，m)。

实例36.6-溴-8-环戊基-4-甲基-2-(甲基氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

将6-溴-8-环戊基-2-甲烷亚磺酰基-4-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(8.00g，22.04mmol)溶解于100mL CH₂Cl₂，随后以NH₂Me鼓泡3分钟。将反应用CH₂Cl₂稀释且用水洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥且在真空下蒸发溶剂以产生奶白色固体。将物质用CH₂Cl₂稀释且经硅胶层析纯化以产生奶白色固体(7.33g，98.42％)。

LRMS：337.1，339.1(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.06(1H，s)，6.04(1H，s)，5.31(1H，br s)，3.04(3H，d，J＝4.88Hz)，2.51(3H，s)，2.29-2.36(2H，m)，2.03-2.13(2H，m)，1.80-1.89(2H，m)，1.61-1.68(2H，m)。

实例37.8-(4-甲氧基苯甲基)-6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向氢化钠(于矿物油中的60％分散液)(90mg，1.5当量)及无水DMF(5mL)的混合物中添加6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(429mg，1.5mmol)且将混合物在50℃下搅拌30分钟。随后，将溶液稍微冷却且随后逐滴添加于1mL DMF中的对-甲氧基苯甲基氯(281mg，1.2当量)。加热至50℃历时3小时且随后在室温下搅拌过夜。冷却至室温，在水与AcOEt之间分配，将水相用AcOEt进一步洗涤，将所汇集的有机萃取物用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤且经MgSO₄干燥。过滤及溶剂去除提供粗物质，其未经进一步纯化即使用。产量675mg。

LRMS(APCI)406.3/408.3(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)8.19(s，1H)，7.45(d，2H)，6.79(d，J＝8.72Hz，2H)，5.62(s，2H)，3.75(s，3H)，2.64(s，3H)，2.63(s，3H)。

实例38.8-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲基硫基)-6-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

参考JMC 2004，47(16)，第4097页

向溴烯烃(203mg，0.5mmol)于甲苯(5mL)及乙醇(5mL)中的混合物中添加饱和碳酸氢钠(5mL)、四(三苯基膦)钯(29mg，5mol.％)，接着添加苯基硼酸(73mg，1.2当量)。将混合物加热至100℃历时3小时。冷却至室温，用EA及水稀释，分离相，将水相用10mL EA洗涤两次，将合并的有机相用盐水洗涤且经MgSO₄干燥。过滤且汽提以产生浅棕色固体(166mg，82％)。未经纯化即使用。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.87(s，1H)，7.65(d，J＝7.89Hz，2H)，7.38-7.48(m，5H)，7.11-7.20(m，2H)，2.70(s，3H)，2.60(s，3H)，2.35(s，3H)。

实例39.8-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲基磺酰基)-6-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

将甲硫醚(150mg，0.372mmol)、间-氯过苯甲酸(129mg，2当量)于二氯甲烷(5mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。随后移除溶剂且粗物质(232mg)未经纯化即用于下一步骤中。

实例40.8-(4-甲氧基苯甲基)-2-氨基-4-甲基-6-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物149)

将粗砜化合物(220mg)溶解于新鲜制备的饱和氨/THF溶液中且将混合物加热至回流过夜。汽提，在EA与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配，将有机部分用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且汽提。在Biotage快速管柱上使用1∶2己烷/EA纯化。黄色泡沫，55mg(76％)。

LRMS(APCI)：373.4(M+H)⁺。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.77(s，1H)，7.62(d，J＝7.06Hz，2H)，7.51(d，J＝8.72Hz，2H)，7.32-7.43(m，3H)，6.79(d，J＝8.72Hz，2H)，5.55(s，2H)，5.31(s，2H)，3.74(s，3H)，2.59(s，3H)

实例41.8-(4-氯苯甲基)-6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

在室温下，向NaH(90mg，2.25mmol，1.5当量)于DMF(5mL)中的溶液中添加内酰胺化合物(429mg，1.5mmol)且将混合物加热至50℃历时30分钟。冷却至室温，添加溶液形式的于DMF(1mL)中的对-氯苯甲基溴(370mg，1.8mmol，1.2当量)。加热至50℃历时3小时。冷却，用水稀释，萃取3次。将有机部分合并且用盐水洗涤且经MgSO₄干燥，过滤且汽提。橙棕色固体(605mg，98％)(粗产物)。未经进一步纯化即使用。

LRMS(APCI)410.3/412.3(M+H)⁺

¹H NMR(CDCl₃)8.22(s，1H)，7.40(d，J＝8.72Hz，2H)，7.22-7.31(m，2H)，5.63(s，2H)，2.65(s，3H)，2.58(s，3H)。

实例42.8-(4-氯苯甲基)-4-甲基-2-(甲基硫基)-6-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向溴化合物(205mg，0.5mmol)于甲苯/EtOH(5mL及5mL)中的溶液中添加饱和碳酸氢钠水溶液(3mL)、四(三苯基膦)钯(29mg，5mol％)及苯基硼酸(73，0.6mmol，1.2当量)。加热至100℃历时2小时，且随后在室温下使其静置72小时。用EA及水稀释，分离相，将有机相用盐水洗涤且经MgSO₄干燥。过滤且汽提以产生淡黄色固体162mg(80％)。粗物质未经进一步纯化即使用。

LRMS(M+H)⁺：408.5

实例43.8-(4-氯苯甲基)-4-甲基-2-(甲基磺酰基)-6-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向甲硫醚(160mg，0.39mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液中分若干小批添加间-氯过苯甲酸(203mg，3当量)且使所得反应搅拌过夜。随后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(2×)、盐水洗涤且经MgSO₄干燥。过滤且浓缩产生呈白色玻璃状固体的物质(185mg)，其未经纯化即使用。产物很可能为亚砜与砜的混合物(LC MS)。

LRMS(APCI)(M+H)⁺：440.5。

实例44.8-(4-氯苯甲基)-2-氨基-4-甲基-6-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物150)

将来自前面实验的粗物质(150mg，0.35mmol)溶解于新鲜制备的氨/THF溶液中且加热至回流。3小时后，在减压下移除溶剂，将产物在SCX滤筒上分离且在Biotage快速管柱上使用EA/己烷1∶1纯化。淡黄色泡沫(90mg，70％)。

LRMS(APCI)377.4(M+H)⁺，

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：7.80(s，1H)，7.62(d，2H)，7.33-7.46(m，5H)，7.22(d，2H)，5.57(s，2H)，5.27(bs，2H，NH2)，2.60(s，3H)。

实例45.8-(4-氯苯甲基)-4-甲基-2-(甲基硫基)-6-(吡啶-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向如实例41所述制备的溴化合物(150mg，0.366mmol)于甲苯/EtOH(2mL及2mL)中的溶液中添加饱和碳酸氢钠水溶液(1mL)、四(三苯基膦)钯(21mg，5mol.％)及4-吡啶基硼酸(54mg，1.2当量)。将反应混合物加热至100℃历时2小时，且随后在室温下使其静置72小时。用EA及水稀释，分离相，将有机相用盐水洗涤且经MgSO₄干燥。由TLC及LCMS分析粗物质(148mg，96％)且其未经进一步纯化即使用。

LRMS(M+H)⁺：409.2

实例46.8-(4-氯苯甲基)-4-甲基-2-(甲基磺酰基)-6-(吡啶-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

将起始物质(100mg，0.244mmol)及m-CPBA(84mg，2当量)于二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌3小时。汽提至干燥且未经进一步纯化即用于胺解。产量110mg，93％。

LRMS(APCI)(M+H)⁺：441.2

实例47.8-(4-氯苯甲基)-2-氨基-4-甲基-6-(吡啶-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物151)

向来自前面实验的粗产物(砜，80mg，0.181mmol)于THF(4mL)中的溶液中以氨鼓泡历时2分钟且在室温下使溶液封盖静置72小时。在减压下移除溶剂，将残余物在EA与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配(以便从前面实验中移除PhCOOH)。将有机相用盐水洗涤且经MgSO₄干燥。将物质在快速管柱上使用100％EA作为洗脱剂纯化。获得呈黄色粉末的产物42mg(61％)。

LRMS(APCI)m/z 378.4(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO 8.55(bs，2H)，8.23(s，1H)，7.75(d，J＝5.81Hz，2H)，7.33(q，4H)，5.73(s，2H)，5.45(s，2H)，2.58(s，3H)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 1.23-1.34(m，2H)1.45-1.55(m，2H)1.89-1.98(m，2H)2.55(s，3H)2.70-2.82(m，2H)3.48-3.60(m，1H)3.82-3.91(m，3H)4.61(d，J＝4.29Hz，1H)5.16-5.62(m，1H)6.84(d，J＝8.59Hz，1H)7.16(s，2H)7.97(s，1H)8.00(dd，J＝8.72，2.40Hz，1H)8.42(d，J＝2.53Hz，1H)

实例48.反-4-(2-氨基-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

将2-氨基-4-氯-6-甲基嘧啶(1.18g，8.24mmol)、反-4-氨基环己醇(1.00g，6.60mmol)、碳酸钾(1.82g，13.2mmol)及二异丙基乙基胺(1.44mL，8.24mmol)于二甲基乙酰胺(20.0mL)中的混合物在密封管中在160℃下加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，过滤且浓缩滤液。将残余物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-5％)洗脱纯化以提供呈泡沫状固体的标题化合物(1.47g，99％)。

LRMS(M+H)⁺：223

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.14-1.24(m，4H)1.77-1.86(m，4H)1.97(s，3H)3.35-3.40(m，1H)3.57-3.69(m，1H)4.52(d，J＝4.55Hz，1H)5.53(s，1H)5.73(s，2H)6.43(d，J＝4.29Hz，1H)

实例49.反-4-(2-氨基-5-溴-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

向(反-4-(2-氨基-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(1.33g，5.98mmol)于氯仿(15mL)中的溶液中添加N-溴丁二酰胺(1.08g，6.04mmol)。在室温下搅拌1.5hr后，浓缩溶液。将残余物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-5％)洗脱纯化以提供标题化合物(1.14g，63％)。

LRMS(M+H)⁺：301，303

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.14-1.25(m，2H)1.34-1.45(m，2H)1.74-1.85(m，4H)2.17(s，3H)3.34-3.43(m，1H)3.79-3.89(m，1H)4.55(d，J＝4.55Hz，1H)5.83(d，J＝8.34Hz，1H)6.11(s，2H)

实例50.(E)-3-(2-氨基-4-(反-4-羟基环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯

将含有于三乙胺(20mL)中的反-4-(2-氨基-5-溴-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(655mg，2.17mmol)、三-邻-甲苯基膦(298mg，0.979mmol)、丙烯酸乙酯(355μL，3.26mmol)及乙酸钯(II)(73mg，0.33mmol)的密封管抽成真空且回充氮(3×)。将反应混合物在130℃下加热过夜，过滤且浓缩。将残余物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-5％)洗脱纯化以提供标题化合物(364mg，52％)。

LRMS(M+H)⁺：321

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.13-1.22(m，2H)1.24(t，J＝7.07Hz，3H)1.34-1.45(m，2H)1.80(m，4H)2.21(s，3H)3.34-3.41(m，1H)3.90-4.01(m，1H)4.15(q，J＝7.07Hz，2H)4.52(d，J＝4.55Hz，1H)5.95(d，J＝15.92Hz，1H)6.27(d，J＝8.08Hz，1H)6.37(s，2H)7.58(d，J＝15.92Hz，1H)

实例51.2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物153)

向(E)-3-(2-氨基-4-(反-4-羟基环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯(233mg，0.727mmol)于二甲基乙酰胺中的溶液中添加1，5-二氮杂双环[5，4，0]十一碳-5-烯(544μL，3.64mmol)，接着添加叔丁醇钾(1M于THF中，364μL，364mmol)。将所得溶液在150℃下加热过夜，随后浓缩。将残余物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-5％)洗脱纯化。随后，将产物用1∶1的氯仿∶己烷研磨以提供标题化合物(119mg，60％)。

LRMS(M+H)⁺：275

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.18-1.30(m，2H)1.37-1.48(m，2H)1.87-1.94(m，2H)2.45(s，3H)2.70(m，2H)3.46-3.57(m，1H)4.59(d，J＝4.29Hz，1H)5.08-5.61(m，1H)6.13(d，J＝9.60Hz，1H)7.09(s，2H)7.81(d，J＝9.35Hz，1H)

实例52.2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(115mg，0.419mmol)于二甲基甲酰胺(2.0mL)中的溶液中添加N-溴丁二酰亚胺(75mg，0.42mmol)。在室温下搅拌1.5hr后，浓缩溶液。将残余物于甲醇中形成浆液，过滤固体且浓缩滤液且经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-3％)洗脱纯化。合并固体以提供标题化合物(120mg，81％)。

LRMS(M+H)⁺：353/355

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.21-1.32(m，2H)1.43-1.53(m，2H)1.86-1.96(m，2H)2.48(s，3H)2.59-2.71(m，2H)3.46-3.57(m，1H)4.62(d，J＝3.03Hz，1H)5.08-5.76(m，1H)7.26(s，2H)8.34(s，1H)

实例53.2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物152)

将含有2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(105mg，0.297mmol)、碳酸钾(123mg，0.892mmol)及2-甲氧基-5-吡啶硼酸(52mg，0.34mmol)的烧瓶抽成真空且回充氮(2×)。将5∶1的二甲基甲酰胺∶水(1.8mL)的溶液以氩鼓泡历时15min，随后添加至烧瓶中，接着添加双(三苯基膦)氯化钯(II)(10mg，0.015mmol)。将烧瓶配备指形冷凝器，抽成真空且回充氮(2×)，随后加热至100℃历时4hr。将混合物冷却过夜，用甲醇及氯仿稀释，随后经由玻璃纤维过滤器过滤以滤出钯。浓缩滤液且将残余物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-6％)洗脱纯化以提供标题化合物(80，71％)。

LRMS(M+H)⁺：382

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.23-1.34(m，2H)1.45-1.55(m，2H)1.89-1.98(m，2H)2.55(s，3H)2.70-2.82(m，2H)3.48-3.60(m，1H)3.82-3.91(m，3H)4.61(d，J＝4.29Hz，1H)5.16-5.62(m，1H)6.84(d，J＝8.59Hz，1H)7.16(s，2H)7.97(s，1H)8.00(dd，J＝8.72，2.40Hz，1H)8.42(d，J＝2.53Hz，1H)

实例54.6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)-8-((四氢呋喃-3-基)甲基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向6-溴-4-甲基-2-(甲基硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(900mg，3.15mmol)及3-(溴甲基)-四氢呋喃(571mg，3.46mmol)于DMF中的混合物中添加CsCO₃(1.13g，3.46mmol)。在70℃下搅拌7h后且将混合物用水终止且用叔丁基乙基醚(4次)萃取且浓缩。将粗混合物经快速层析使用0-2％MeOH/CHCl₃纯化以产生标题化合物(715mg，61％)。

LRMS：370，372(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)8.25(1H，s)，4.56(2H，m)，3.96(1H，dt，J＝8.15，5.68Hz)，3.72-3.83(2H，m)，3.66(1H，dd，J＝8.59，5.81Hz)，2.81-2.95(1H，m)，2.68(3H，s)，2.62(3H，s)，1.91-2.04(1H，m)，1.71-1.85(1H，m)。

实例55.2-氨基-8-环丁基-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲腈(化合物269)

向2-氨基-6-溴-8-环丁基-4-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(371mg，1.20mmol)于NMP(4mL)中的溶液中添加CuCN(480mg，5.36mmol)。将混合物密封且使用微波照射在220℃下加热30min。将混合物倾入盐水中且过滤以产生固体。将水相用叔丁基甲基醚(3次)萃取，干燥且蒸发。将合并固体经快速层析使用0至3％MeOH/CHCl₃纯化以产生标题化合物(240mg，78％)。

LRMS：256(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)8.66(1H，s)，7.77(2H，d，J＝21.47Hz)，5.68-5.85(1H，m)，2.90-3.11(2H，m)，2.12-2.28(2H，m)，1.85-2.02(1H，m)，1.62-1.80(1H，m)。

实例56.2-氨基-8-环丁基-4-甲基-6-(2-(三甲基硅烷基)乙炔基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

将烧瓶装有Pd(PPh₃)₂Cl₂(84.2mg，0.120mmol)及碘化亚铜(34.3mg，0.180mmol)。经由注射器向其中添加1，4-二氧杂环己烷(12mL)及二异丙基乙基胺(0.84mL，4.8mmol)。引入2-氨基-6-溴-8-环丁基-4-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(371mg，1.20mmol)，且将所得黄色溶液小心以氮充气历时10min。随后经由注射器添加TMS-乙炔(0.50mL，3.6mmol)，且将所得黑色溶液在70℃下搅拌1h。在减压下移除溶剂。将粗固体经硅胶快速层析用CHCl₃洗脱随后用于CHCl₃中的3％MeOH洗脱纯化以提供标题产物(322mg)。

LRMS：327(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)8.06(1H，s)，7.39(2H，s)，5.74-5.97(1H，m)，2.92-3.13(2H，m)，2.49(3H，s)，2.09-2.23(2H，m)，1.86-1.97(1H，m)，1.63-1.81(1H，m)，0.22(9H，s)。

实例57.2-氨基-8-环丁基-6-乙炔基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物270)

向2-氨基-8-环丁基-4-甲基-6-(2-(三甲基硅烷基)乙炔基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(105mg，0.322mmol)于MeOH(7mL)中的搅拌溶液中添加K₂CO₃(50mg，0.36mmol)且将混合物搅拌5h。LC-MS表明完成转化。蒸发溶剂且将残余物经快速层析使用CHCl₃纯化以产生标题化合物(81mg，99％)。

LRMS：255(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)7.95(1H，s)，5.78-5.98(1H，m)，5.25(2H，s)，3.31(1H，s)，3.04-3.25(2H，m)，2.56(3H，s)，2.23-2.40(2H，m)，1.96-2.13(1H，m)，1.73-1.91(1H，m)。

实例58.二乙基氨基甲酸(4-(2-氨基-8-异丙基-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)-1H-1，2，3-三唑-1-基)甲酯(化合物263)

将2-氨基-6-乙炔基-8-异丙基-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(75mg，0.31mmol)及二乙基氨基甲酸叠氮基甲酯(80mg，0.46mmol)悬浮于1∶1t-BuOH/H₂O(4mL)中。向其中添加饱和硫酸铜溶液(0.05mL)且继续搅拌24h。将混合物浓缩且用5mL水稀释。将混合物分离且将有机相用水洗涤且蒸发。使用0-5％MeOH/CHCl₃硅胶快速层析残余物产生标题化合物(88mg，69％)。

LRMS：415(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)8.67(1H，s)，8.61(1H，s)，7.28(2H，br.s.)，6.34(2H，s)，5.88(1H，br.s.)，3.10-3.29(4H，m)，2.60(3H，s)，1.55(6H，d，J＝6.82Hz)，1.05(3H，t，J＝6.95Hz)，0.99(3H，t，J＝6.95Hz)。

实例59.2-氨基-8-异丙基-4-甲基-6-(1H-1，2，3-三唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物264)

向二乙基氨基甲酸(4-(2-氨基-8-异丙基-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)-1H-1，2，3-三唑-1-基)甲酯(38mg，0.092mmol)于MeOH(0.5mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(1.0M，0.20mL，0.20mmol)且将反应混合物在85℃下搅拌2天。由LCMS得到约90％的转化率。蒸发溶剂且将残余物经快速层析用MeOH/CHCl₃(0-5％)洗脱纯化以产生标题物(8mg，30％)。

LRMS：286(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)8.50(1H，br.s.)，8.38(1H，b r.s.)，7.27(2H，br.s.)，5.77-6.03(1H，m)，2.59(3H，s)，1.55(6H，d，J＝6.82Hz)。

实例60.2-氨基-6-(2-羟基嘧啶-5-基)-4-甲基-8-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物267)

将2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-8-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并-[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(42.2mg，0.115mmol)、TMSI(0.10mL，0.70mmol)及无水乙腈(2.3mL)的混合物在82℃下加热1h。冷却至室温后，将混合物用20％NH₄OH溶液处理且浓缩。将混合物经分析组(HPLC)纯化以产生标题化合物(12mg，30％)。

LRMS：355(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)8.63(2H，br.s.)8.10(1H，s)7.23(2H，br.s.)5.54-5.84(1H，m)3.99(2H，dd，J＝11.12，3.79Hz)3.36-3.53(3H，m)2.83-3.06(2H，m)2.56(3H，s)1.46(2H，d，J＝9.85Hz)。

实例61.5-溴-4-氯-6-甲基嘧啶-2-胺

向2-氨基-4-氯-6-甲基嘧啶(5.00g，34.8mmol)于二氯甲烷(240mL)中的混合物中添加溴(1.88mL，36.6mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌1.5小时。将混合物用二氯甲烷(1.3L)稀释且用饱和碳酸氢钠(2×200mL)及盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩以提供5-溴-4-氯-6-甲基嘧啶-2-胺(7.5g，97％)。

LCMS(M+H)：223

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm2.54(s，3H)5.10(s，2H)实例62.5-溴-4-氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶

使含有5-溴-4-氯-6-甲基嘧啶-2-胺(34.8mmol)、2，5-己二酮(6.15mL，52.2mmol)及对-甲苯磺酸(330mg，1.74mmol)于甲苯(100mL)中的混合物的烧瓶配备迪恩-斯达克装置(Dean-stark apparatus)及冷凝器，且将混合物加热至回流。回流过夜后，将溶液冷却至室温且浓缩。将残余物于己烷中形成浆液，过滤且浓缩滤液。将沉淀经快速层析用己烷/氯仿(0-50％)洗脱纯化以提供5-溴-4-氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶(1.60g，15％)。将浓缩滤液经快速层析用己烷/氯仿(10-40％)洗脱纯化以提供5-溴-4-氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶(5.22g，50％)。

LRMS(M+H)⁺：302

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm2.39(s，6H)2.72(s，3H)5.90(s，2H)

实例63.反-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

将5-溴-4-氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶(1.50g，4.99mmol)、反-4-氨基环己醇盐酸盐(1.17g，6.24mmol)及二异丙基乙基胺(2.61mL，15.0mmol)于二甲基乙酰胺(25.0mL)中的混合物在密封管中在160℃下加热过夜。将反应混合物用甲基叔丁基醚(400mL)稀释，用饱和氯化铵(2×)及盐水洗涤、干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将合并的水层用二氯甲烷(3×150mL)萃取，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/甲醇(0.5-3％)洗脱纯化以提供反-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(1.76g，93％)。

LCMS LRMS(M+H)⁺：379/381

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.15-1.26(m，2H)1.46-1.57(m，2H)1.74-1.80(m，2H)1.81-1.87(m，2H)2.26(s，6H)2.41(s，3H)3.35-3.45(m，1H)3.86-3.96(m，1H)4.57(d，J＝4.29Hz，1H)5.76(s，2H)6.82(d，J＝8.34Hz，1H)

实例64.5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-N-(反-4-甲氧基环己基)-6-甲基嘧啶-4-胺

向反-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(1.45g，3.82mmol)于四氢呋喃(40mL)中的冷却(0℃)溶液中添加氢化钠(60％于油中分散液，459mg，11.5mmol)。40分钟后，添加甲基碘(262μL，4.21mmol)且将混合物在0℃下搅拌2小时。移除冰浴且继续搅拌3小时，随后用甲醇终止且浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中且用饱和氯化铵(2×)、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用己烷/甲基叔丁基醚(5-25％)洗脱纯化以提供5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-N-(反-4-甲氧基环己基)-6-甲基嘧啶-4-胺(1.10g，73％)。

LRMS(M+H)⁺：293/295

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.11-1.22(m，2H)1.47-1.58(m，2H)1.78-1.87(m，2H)1.97-2.07(m，2H)2.26(s，6H)2.41(s，3H)3.04-3.14(m，1H)3.23(s，3H)3.90-4.00(m，1H)5.76(s，2H)6.87(d，J＝8.34Hz，1H)

实例65.5-溴-N4-(反-4-甲氧基环己基)-6-甲基嘧啶-2，4-二胺

将5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-N-(反-4-甲氧基环己基)-6-甲基嘧啶-4-胺(1.07g，2.72mmol)及羟基胺盐酸盐(945mg，13.6mmol)于10∶1的乙醇∶水(27.5mL)中的溶液加热至回流历时7小时，随后在室温下过夜。再添加0.5当量羟基胺盐酸盐且将溶液再回流4小时，随后冷却至室温且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/甲醇(0.5-3％)洗脱纯化以提供5-溴-N4-(反-4-甲氧基环己基)-6-甲基嘧啶-2，4-二胺(767mg，89％)。

LRMS(M+H)⁺：315/317

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.09-1.20(m，2H)1.35-1.46(m，2H)1.78-1.88(m，2H)1.96-2.04(m，2H)2.17(s，3H)3.03-3.14(m，1H)3.23(s，3H)3.82-3.92(m，1H)5.91(d，J＝8.34Hz，1H)6.12(s，2H)

实例66.(E)-3-(2-氨基-4-(反-4-甲氧基环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯

在密封管中，将5-溴-N4-(反-4-甲氧基环己基)-6-甲基嘧啶-2，4-二胺(811mg，2.57mmol)及丙烯酸乙酯(559μL，5.15mmol)于三乙胺(25mL)中的溶液以氩鼓泡历时约10分钟。添加四(三苯基膦)钯(0)(297mg，0.257mmol)，密封小瓶且将反应加热至130℃过夜。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(450mL)稀释，用水、0.1N盐酸、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/甲醇(0-10％)洗脱纯化以提供(E)-3-(2-氨基-4-(反-4-甲氧基环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯(674mg，78％)。

LRMS(M+H)⁺：335

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 1.09-1.20(m，2H)1.24(t，J＝7.07Hz，3H)1.34-1.46(m，2H)1.79-1.89(m，2H)1.96-2.05(m，2H)2.21(s，3H)3.03-3.12(m，1H)3.23(s，3H)3.92-4.03(m，1H)4.15(q，J＝7.07Hz，2H)5.96(d，J＝15.92Hz，1H)6.31(d，J＝8.08Hz，1H)6.37(s，2H)7.59(d，J＝15.92Hz，1H)

实例67.2-氨基-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

将(E)-3-(2-氨基-4-(反-4-甲氧基环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯(674mg，2.02mmol)、硫酚(621μL，6.05mmol)、1，5-二氮杂双环(5，4，0)十一-5-烯(1.81mL，12.1mmol)及三乙胺(1.69mL，12.1mmol)于N′，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液在微波中在100℃下加热30分钟，随后在油浴中在100℃下加热过夜。将反应混合物用甲基叔丁基醚稀释且用饱和碳酸钠、盐水、0.1N盐酸、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将合并的水层用二氯甲烷(2×)萃取。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/甲醇(0-5％)洗脱纯化以提供2-氨基-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(482mg，83％)。

LRMS(M+H)⁺：289

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.14-1.25(m，2H)1.45-1.55(m，2H)2.05-2.14(m，2H)2.46(s，3H)2.66-2.77(m，2H)3.26(s，3H)3.29-3.33(m，1H)4.97-5.61(m，1H)6.14(d，J＝9.35Hz，1H)7.11(s，2H)7.82(d，J＝9.35Hz，1H)

实例68.2-氨基-6-溴-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向2-氨基-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(482mg，0.1.67mmol)于二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液中添加N-溴丁二酰亚胺(300mg，1.69mmol)。在室温下搅拌1小时后，将溶液用甲基叔丁基醚稀释且用50％碳酸钠(2×)及盐水洗涤。将合并的水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机相干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将固体用乙醚粉碎以提供2-氨基-6-溴-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(594mg，97％)。

LRMS(M+H)⁺：367/369

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.15-1.26(m，2H)1.49-1.59(m，2H)2.06-2.15(m，2H)2.49(s，3H)2.61-2.73(m，2H)3.17-3.26(m，1H)3.27(s，3H)5.15-5.67(m，1H)7.26(s，2H)8.34(s，1H)

实例69.2-氨基-8-(反-4-甲氧基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物179)

向含有2-氨基-6-溴-8-(反-4-甲氧基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(75mg，0.20mmol)、2-甲氧基-5-吡啶硼酸(37.5mg，0.245mmol)及碳酸铯的小瓶中添加PdCl₂(dppf)1∶1w/CH₂Cl₂，接着添加5∶1的二甲氧基乙烷∶水(3mL，以氩鼓泡脱气)。将小瓶封盖并在微波中在100℃下加热30分钟。将反应混合物浓缩且将粗产物经快速层析用氯仿/甲醇(0-5％)洗脱纯化。将含有想要产物的级分浓缩且将固体用甲基叔丁基醚粉碎以提供2-氨基-8-(反-4-甲氧基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(33mg，40％)。

LRMS(M+H)⁺：396

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 1.16-1.28(m，2H)1.52-1.62(m，2H)2.07-2.17(m，2H)2.55(s，3H)2.72-2.83(m，2H)3.26(s，3H)3.30-3.33(m，1H)3.88(s，3H)5.30-5.63(m，1H)6.84(d，J＝8.59Hz，1H)7.17(s，2H)7.98(s，1H)8.00(dd，J＝8.59，2.53Hz，1H)8.42(d，J＝2.53Hz，1H)

实例70.1H-吡唑-5-三氟硼酸钾

将1H-吡唑-5-硼酸(150mg，1.34mmol)及氟氢化钾(262mg，3.35mmol)于1∶3甲醇/水(2mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将混合物转移至小瓶中，将小瓶密封且将混合物在油浴中加热至100℃历时2小时以产生溶液。将溶液冷却且浓缩。将固体于热丙酮中形成浆液，过滤且将滤液浓缩以提供1H-吡唑-5-三氟硼酸钾(234mg，100％)。

实例71.2-氨基-8-((反)-4-羟基环己基)-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物186)

将2-氨基-6-溴-8-((反)-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(100mg，0.283mmol)、1H-吡唑-5-三氟硼酸钾(98.5mg，0.566mmol)及三乙胺(197μL，1.42mmol)于乙醇(3.0mL)中的混合物以氩鼓泡。添加PdCl₂(dppf)1∶1w/CH₂Cl₂，密封小瓶且将混合物再次以氩鼓泡，随后在微波中在100℃下加热30分钟，随后在150℃下加热60分钟。将反应混合物浓缩且经快速层析用1∶1乙酸乙酯∶氯仿/7N于甲醇中的氨(0.5-7％)洗脱纯化。将含有想要产物的级分合并且浓缩且将固体由甲醇/氯仿重结晶以提供2-氨基-8-((反)-4-羟基环己基)-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(32mg，33％)。

LRMS(M+H)⁺：341

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 1.24-1.35(m，2H)1.44-1.55(m，2H)1.90-1.99(m，2H)2.56(s，3H)2.73-2.84(m，2H)3.50-3.62(m，1H)4.62(d，J＝4.04Hz，1H)5.12-5.74(m，1H)6.93(s，1H)7.14-7.26(m，2H)7.62(m，1H)8.34(s，1H)12.97(m，1H)

实例72.1-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)肼

在室温下，向微波小瓶中添加5-溴-4-氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶(4.95g，16.5mmol)及肼(0.57ml，18.1mmol)、休尼格碱(hunig′s base)(95.74ml，32.9mmol)及二甲基乙酰胺(24ml)。在微波中在100℃下加热30min后。将反应混合物在减压下浓缩至干燥且将残余物用1∶1乙酸乙酯∶甲醇粉碎以获得呈白色固体的重2820mg的想要产物。将母液经管柱层析用30％EtOAc∶己烷洗脱纯化以再产生一批想要产物。该两批料合并以产生呈白色固体的重3620mg的标题化合物，74％。

¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm2.30(s，6H)2.51(s，3H)5.79(s，2H)

实例73.5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基-N-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4-胺

在室温下，向烧瓶中添加1-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)肼(100mg，0.34mmol)、1，4-二溴丁烷(0.04ml，0.37mmol)、休尼格碱(0.18ml，1.01mmol)及DMAC(1.0ml)。在60℃下加热过夜后，将反应混合物冷却至室温且用EtOAc(2ml)稀释，过滤白色固体且在减压下浓缩母液。将所得残余物经管柱层析用30％EtOAc∶己烷洗脱纯化以产生重76mg的标题化合物，64％。

¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm1.78(ddd，J＝6.95，3.41，3.28Hz，4H)2.15(s，6H)2.41(s，3H)2.85-2.92(m，4H)5.67(s，2H)

实例74.N-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(吡咯烷-1-基)丙烯酰胺

在室温下，向5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基-N-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4-胺(3.14g，8.97mmol)于无水二氯甲烷(120ml)及休尼格碱(4.68ml)中的反应溶液中缓慢逐滴添加丙烯酰氯(0.80ml，9.86mmol)于二氯甲烷(30ml)中的溶液。在室温下搅拌60min后，在减压下浓缩反应混合物且将残余物经120g管柱用40％乙酸乙酯∶己烷洗脱纯化以产生重3.5g的白色固体的标题产物，97％。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.72-1.77(m，4H)2.28(s，6H)2.70(s，3H)3.17-3.20(m，4H)5.79(d，J＝11.12Hz，1H)5.85(s，2H)6.30(dd，J＝17.18，2.02Hz，1H)6.75(bs，1H)

实例75.2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲基-8-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向微波小瓶中添加N-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(吡咯烷-1-基)丙烯酰胺(2.0g，4.95mmol)、碳酸银(2.73g，9.89mmol)及无水THF(100ml)。将反应悬浮液以氮鼓泡历时2min，且随后添加四叔(三苯基膦)钯(286mg，0.25mmol)。在70℃油浴中搅拌3h后，将反应混合物冷却至室温且用20ml盐水稀释。在室温下搅拌5min后，将反应混合物经硅藻土垫过滤。用乙酸乙酯洗涤滤饼。分离层。将有机层用20mL盐水洗涤，经碳酸钾干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得残余物经管柱层析用40％EtOAc∶己烷洗脱纯化以产生重480mg的标题化合物，30％。

¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm2.01-2.13(m，4H)2.39(s，6H)2.80(s，3H)3.32-3.39(m，4H)5.86(s，2H)6.72(d，J＝9.85Hz，1H)8.15(d，J＝9.60Hz，1H)

实例76.2-氨基-4-甲基-8-吡咯烷-1-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

向微波小瓶中添加2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-4-甲基-8-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2，3，d]嘧啶-7(8H)-酮(530mg，1.64mmol)、羟基胺盐酸盐(1.14g，16.4mmol)、乙醇(20ml)及水(2.92ml)。将小瓶封盖且在100℃下回流。3h后，将反应混合物在减压下浓缩至干燥且将所得残余物经管柱层析用10％7N于MeOH中的NH₃∶CHCl₃洗脱纯化以产生重296mg的想要产物，74％。

LRMS(M+H)⁺：246.1

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.90-2.00(m，4H)2.47(s，3H)3.16-3.24(m，4H)6.20(d，J＝9.60Hz，1H)7.21(b r.s.，2H)7.84(d，J＝9.60Hz，1H)

实例77.2-氨基-6-溴-4-甲基-8-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

在室温下，经由注射器向2-氨基-4-甲基-8-吡咯烷-1-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(22.0mg，0.09mmol)于无水DMF(1.0ml)及CCl₄(1.0ml)中的悬浮液中添加两滴溴。在室温下搅拌3min后，向反应混合物中添加TEA(0.08ml)。在室温下搅拌1.5h后，将反应混合物在减压下浓缩且将所得残余物经管柱层析用10％7N于MeOH中的NH₃∶CHCl₃洗脱纯化以产生标题化合物(13.0mg，45％)，重25mg的产物，45％。

LCMS(APCI+)324.0

¹H NMR(400MHz，MeOD)δppm2.02-2.14(m，4H)2.57(s，3H)3.32-3.38(m，4H)8.36(s，1H)

实例78.2-氨基-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)-8-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物193)

向烧瓶中添加于DMAC(1.20ml)∶H₂O(0.1ml)中的2-氨基-6-溴-4-甲基-8-(吡咯烷-1-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(21.0mg，0.06mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(20.9mg，0.07mmol)、碳酸钾(25.6mg，0.19mmol)。交替进行抽真空和充N₂使反应混合物脱气。向反应混合物中添加PdCl₂(PPh₃)₂(4.3mg)。在微波中在100℃下加热60min后，将反应混合物在减压下浓缩且将所得残余物经反相管柱用乙腈：0.1％于水中的乙酸洗脱纯化以产生重2.5mg的标题化合物。

¹H NMR(400MHz，MeOD)：2.07-2.18(m，4H)2.66(s，3H)3.35-3.46(m，4H)8.18(s，1H)8.28(bs，2H)

实例79.4-(2-氨基-4-甲基-7-氧代基-8-(吡咯烷-1-基)-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(化合物192)

自产生实例78的反应获得该标题化合物，重3.1mg。

¹H NMR(400MHz，MeOD)：1.58(s，9H)2.00-2.05(m，4H)2.57(s，3H)3.27-3.34(m，4H)8.07(s，1H)8.21(s，1H)8.32(s，1H)

实例80.8-环戊基-6-[1-(2-羟基-2-甲基-丙基)-1H-吡唑-4-基]-4-甲基-2-甲基硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮

在氮下，向8-环戊基-4-甲基-2-甲基硫基-6-(1H-吡唑-4-基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(100mg，0.29mmol)于5ml DMSO中的溶液中添加2，2-二甲基-环氧乙烷(0.03ml，1.20当量)及碳酸钾(40.5mg，1.00当量)。在室温下搅拌反应混合物。两小时后，无反应。将反应混合物加热至100℃历时30min。形成一些产物。继续加热1小时。起始物质消失。将反应混合物在EA/盐水中分配。将EA层干燥且浓缩。将其经层析(10％MeOH/DCM)进一步纯化。在12％的产率下获得15mg产物。

LCMS：414.20(ES+)

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm8.19(1H，s)7.77(2H，d，J＝20.72Hz)7.48(1H，t)5.78-5.96(1H，m)3.92(2H，s)2.54(3H，s)2.43(3H，d，J＝1.26Hz)2.21(2H，s)1.91(2H，s)1.70(2H，s)1.52(2H，s)1.01(6H，s)

实例81.2-氨基-6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-4-甲基-8-吡咯烷-3-基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物247)

在室温下，将TFA(0.56ml，10当量)添加至3-[2-氨基-6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基-7H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-8-基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(328mg，0.725mmol)于2ml二氯甲烷中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应完成且移除溶剂。将残余物在EA/饱和碳酸氢钠中分配。将EA层干燥且浓缩以获得呈固体的标题化合物(237mg，产率92.8％)。

LCMS：353.20(ES+)

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm8.46(1H，d，J＝2.53Hz)8.07(1H，s)8.02(1H，dd，J＝8.72，2.40Hz)7.39(2H，br.s.)6.87(1H，d，J＝8.59Hz)6.23-6.43(1H，m)3.88(3H，s)3.63-3.77(2H，m)3.36-3.45(2H，m)3.14-3.26(1H，m)2.58(3H，s)2.24-2.37(2H，m)

实例82.8-(1-乙酰基-吡咯烷-3-基)-2-氨基-6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-4-甲基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物248)

向2-氨基-6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-4-甲基-8-吡咯烷-3-基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(100mg，0.284mmol)于5ml DMF中的溶液中添加乙酸(17mg，1.0当量)、HATU(108mg，1.0当量)及TEA(0.04ml，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在EA/盐水中分配。将EA层用碳酸氢钠及盐水洗涤，干燥且浓缩。将残余物经层析(10％MeOH/DCM及0.5％TEA)进一步纯化以产生标题化合物(37mg，产率31％)。

LCMS：395.20(ES+)

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm8.44(1H，s)7.94-8.12(2H，m)7.23(2H，br.s.)6.85(1H，d，J＝8.59Hz)6.07-6.41(1H，m)3.83-4.08(4H，m)3.47-3.81(3H，m)2.62-2.82(4H，m)2.53-2.62(3H，m)2.02-2.23(1H，m)

实例83.2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸丁酯

将微波小瓶装有Mo(CO)₆(264mg，1.0mmol)、赫曼环钯(Herrmann′spalladacycle)(23mg，0.025mmol)、[(t-Bu)₃PH]BF₄(15mg，0.050mmol)、2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(353mg，1.0mmol)、DMF(5mL)及丁醇(5mL)。添加DBU(412ml，3.0mmol)，接着在空气下快速密封小瓶。随后，由微波照射将小瓶加热至120℃历时30分钟。冷却后，将反应混合物用水形成浆液且过滤。将沉淀用醚洗涤且干燥以提供253mg 2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸丁酯。

LRMS(M+H)⁺：375

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm0.93(t，J＝7.33Hz，3H)1.24-1.33(m，2H)1.37-1.49(m，4H)1.58-1.69(m，3H)1.92(dd，J＝10.74，3.41Hz，3H)2.52(s，3H)3.47(s，1H)3.54(s，1H)4.18(t，J＝6.69Hz，2H)4.61(d，J＝4.55Hz，1H)7.51(s，2H)8.31(s，1H)

实例84.2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸

将LiOH于H₂O(0.81mL，0.81mmol)中的1M溶液添加至2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸丁酯(0.25g，0.68mmol)于THF(7mL)及MeOH(2mL)中的悬浮液。2.5h后，添加DCM、EtOH、水、盐水、硅藻土及0.7mL 1M HCl。过滤混合物。将有机层分离且利用旋转蒸发浓缩以提供0.25g 2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸。

LRMS(M+H)⁺：319

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.15-1.36(m，3H)1.57(d，J＝11.12Hz，2H)1.56(br.s.，1H)1.94(t，J＝9.73Hz，2H)2.62(s，3H)2.67(br.s.，1H)3.55(br.s.，1H)4.69(br.s.，1H)7.92(d，J＝8.59Hz，1H)7.89(d，J＝2.78Hz，1H)8.68(s，1H)14.14(br.s.，1H)

实例85.2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-N-1H-吡唑-5-基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(化合物251)

将HATU(105mg，0.28mmol)添加至2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸(80mg，0.25mmol)、DMF(2.5mL)及TEA(38μL，0.28mmol)的混合物中。5min后，添加1H-吡唑-5-胺(46mg，0.55mmol)于DMF(0.55mL)中的溶液。19小时后，将混合物用水(约10mL)稀释，离心，随后倾析。将更多的水添加至沉淀中且重复该过程。将所得沉淀悬浮于DCM及甲醇的混合物中且由旋转蒸发浓缩以提供2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基-7-氧代基-N-1H-吡唑-5-基-78-二氢吡啶并[23-d]嘧啶-6-甲酰胺(35mg，37％)。

LRMS(M+H)⁺：384

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.31(q，J＝12.13Hz，2H)1.56(d，J＝9.85Hz，2H)1.96(d，J＝8.34Hz，2H)2.61(br.s.，3H)2.64-2.84(m，2H)3.58(br.s.，1H)4.66(br.s.，1H)5.54(br.s.，1H)6.65(s，1H)7.71(d，J＝5.81Hz，1H)7.67(br.s.，2H)8.79(s，1H)11.90(s，1H)

实例86.8-环戊基-4-甲基-2-甲基硫基-7-氧代基-7，8-二氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸乙酯

将4-环戊基氨基-6-甲基-2-甲基硫-嘧啶-5-甲醛(20.8g，0.083mol)、哌啶(8.2mL)及AcOH(9.4mL)于丙二酸二乙酯(150mL)中的溶液在130℃下搅拌72小时。TLC(石油醚/EtOAc4∶1)表明耗尽约一半起始物质。随后，真空浓缩反应混合物且将残余物经管柱层析(硅胶，石油醚/EtOAc4∶1)纯化以产生呈黄色固体的标题化合物(11.3g，39.4％)。

LRMS：348(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：8.38(s，1H)，5.96-5.91(m，1H)，4.38-4.32(q，2H)，2.63(s，3H)，2.55(s，3H)，2.31-2.28(m，2H)，2.04-2.00(m，2H)，1.83-1.75(m，2H)，1.62-1.58(m，2H)，1.36-1.32(t，3H)

实例87.8-环戊基-2-甲烷亚磺酰基-4-甲基-7-氧代基-7，8-二氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸乙酯

在10℃下，向化合物86(17.0g，0.049mol)于CHCl₃(200mL)中的搅拌溶液中逐份添加m-CPBA(11.0g，0.050mol)。添加后，将所得混合物在室温下搅拌2小时。TLC(石油醚/EtOAc 2∶1)表明起始物质完成耗尽。随后，将反应混合物用饱和Na₂SO₃水溶液(100mL×3)、饱和NaHCO₃水溶液(100mL)及盐水(100mL)依次洗涤，经Na₂SO₄干燥且真空浓缩以产生呈黄色固体的标题化合物(16.0g，90.0％)。

实例88.8-环戊基-4-甲基-2-甲基氨基-7-氧代基-7，8-二氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸乙酯

将实例87(16.0g，0.044mol)、甲基胺(10.15g，0.088mol，27％于EtOH中)、Et₃N(8.9g，0.088mol)及催化量的DMF于乙腈(60mL)中的溶液在N₂气球下回流48小时。TLC(石油醚/EtOAc 1∶2)表明起始物质完全耗尽。随后，真空浓缩反应混合物且将残余物经管柱层析(硅胶，15∶1至4∶1的石油醚/EtOAc)纯化以产生粗产物。由CH₂Cl₂/石油醚(10mL/150mL)重结晶提供呈白色固体的纯标题化合物(10.5g，72.2％)。

实例89.8-环戊基-4-甲基-2-甲基氨基-7-氧代基-7，8-二氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸

将实例88(10.5g，0.032mol)及LiOH·H₂O(2.67g，0.064mol)于EtOH(350mL)及水(50mL)中的溶液在室温下搅拌过夜。TLC(石油醚/EtOAc 1∶2)表明起始物质完成耗尽。在真空下移除EtOH且由1N HCl水溶液(20mL)将残余物酸化至pH值约为5。过滤所得混合物。将滤饼用石油醚(100mL×3)洗涤且在真空下干燥以产生呈白色固体的标题化合物(6.53g，68.0％)。

LRMS：303(M+H)⁺。

¹H NMR(400MHz，DMSO)：8.59(s，1H)，8.12-7.87(d，1H)，6.00-5.97(m，1H)，2.89(s，3H)，2.61-2.56(d，3H)，2.31-2.17(m，2H)，2.05-1.90(m，2H)，1.83-1.70(m，2H)，1.70-1.52(m，2H)

实例90.8-环戊基-4-甲基-2-甲基氨基-7-氧代基-7，8-二氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸(1H-吡唑-3-基)-酰胺(化合物250)

向试管(10×95mm)中110μL 0.1M实例89于DMF中的溶液中添加100μL 3-氨基吡唑于DMF中的0.1M溶液中，接着分别添加110μLHATU及三乙胺0.1M溶液。将反应混合物在80℃下搅拌8h。在真空下移除溶剂后，将残余物于1.2mL DMSO中复原且经受HPLC纯化以获得标题化合物。

LRMS：368(M+H)⁺。

¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)：11.89(s，1H)8.78(s，1H)8.11(s，1H)7.63(s，1H)6.64(s，1H)5.95-6.05(m，1H)2.92(s，3H)1.96-2.14(m，2H)1.74-1.94(m，2H)1.54-1.74(m，2H)。

实例91.2-(2，2-二氟乙基氨基)-8-(4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物275)

在室温下，向2-氨基-8-(4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-[7(8H)-酮(50mg，0.13mmol)于无水DMA(1.0ml)中的溶液中添加叔丁醇钾于THF(0.14ml)中的1M溶液。在室温下搅拌1小时后，向反应混合物中添加1-溴-2，2-二氟乙烷(20.9mg，0.14mmol)。在室温下搅拌16h且在80℃下搅拌4.5h后，将反应混合物冷却至室温且添加叔丁醇钾于THF(0.16ml)中的1M溶液及1-溴-2，2-二氟乙烷(41.8mg，0.28mmol)。在80℃下搅拌16h后，向反应混合物中再添加叔丁醇钾于THF(0.1ml)中的1M溶液及1-溴-2，2-二氟乙烷(62.7mg，0.42mmol)。在80℃下搅拌16h后，向反应混合物中再添加3当量的叔丁醇钾于THF中的1M溶液及3当量的1-溴-2，2-二氟乙烷。在微波中在120℃下加热20min后，将反应混合物冷却至室温且用DMSO稀释，经过滤移除沉淀。将滤液合并且使用逆相管柱用乙腈(0.1％乙酸)及水(0.1％乙酸)洗脱纯化以产生重14.6mg的呈固体的标题化合物。

LCMS(APCI+1)446.3。

¹H NMR(400MHz，MeOD)：1.38-1.54(m，2H)1.61-1.76(m，2H)2.04-2.15(m，2H)2.84(br.s.，2H)3.63-3.72(m，1H)3.86(t，J＝14.53Hz，2H)3.94(s，3H)5.58(br.s.，1H)6.05(t，J＝56.08Hz，1H)6.82(d，J＝8.59Hz，1H)7.91-7.99(m，2H)8.33-8.41(m，1H)。

实例92.反-4-(2-氨基-5-碘-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

步骤1：合成反-4-(2-氨基-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

在3.0L烧瓶中，将2-氨基-4-氯-6-甲基嘧啶(144g，1.0mol)、反-4-氨基环己醇(140g，1.2mol)、AcOH(5mL)于水(0.6L)中的悬浮液混合物在99℃下加热。6h后，在相同温度下将乙酸钠(82.0g，1mol)添加至反应混合物中。48h后，在相同温度下添加NaOH水溶液(50mL，10N)。再历时2天将反应混合物加热至99℃。若经HPLC分析2-氨基-4-氯-6-甲基嘧啶少于2％，则可停止反应。若反应缓慢，则可将另一份NaOH水溶液添加至反应混合物中，只要pH值为约7至8。随后，将反应混合物用碳酸氢钠中和且冷却至0℃。过滤产生反-4-(2-氨基-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(约85％)。湿物质用于下一步骤中。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm1.14-1.24(m，4H)1.77-1.86(m，4H)1.97(s，3H)3.35-3.40(m，1H)3.57-3.69(m，1H)4.52(d，J＝4.55Hz，1H)5.53(s，1H)5.73(s，2H)6.43(d，J＝4.29Hz，1H)

(M+H)⁺223

步骤2：合成反-4-(2-氨基-5-碘-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

在10℃下，经数小时向(1r，4r)-4-(2-氨基-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(58g，0.26mol)于水(0.5L)中的浆液中缓慢添加1.0当量N-碘丁二酰亚胺(59g，0.26mol)。在10℃下搅拌4h后，将反应混合物搅拌过夜且加热至40℃历时数小时。随后，将悬浮液混合物冷却至室温，用NaHSO₃终止。添加0.8当量NaOH(形成丁二酰亚胺钠)且将产物过滤以产生100g湿产物。将产物用叔丁基甲基醚浆化且于100mL甲醇中重结晶来纯化且干燥以提供纯反-4-(2-氨基-5-碘-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(65g，产率72％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.10-1.45(m，4H)1.74-1.90(m，4H)2.21(s，3H)3.34-3.43(m，1H)3.79-3.91(m，1H)4.55(d，J＝4.55Hz，1H)5.40(d，J＝8.34Hz，1H)6.11(s，2H)

(M+H)⁺349

实例93.2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物152)

步骤1：制备(E)-3-(2-氨基-4-(反-4-羟基环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯

原料：

反-4-(2-氨基-5-碘-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇	35g，0.1mol，1.0当量
		丙烯酸乙酯(FW＝100，d＝0.918)	22mL，0.2mol，2.0当量
乙酸钯(FW＝224.5)	675mg，3mmol，0.03当量
		三乙胺(FW＝101，d＝0.726)	28mL，0.2mol，2.0当量
DMF	80mL

程序：

1.将500mL三颈圆底烧瓶装入加热套中，配备机械搅拌器、加料漏斗、热电偶及氮入口。

2.使烧瓶装有反-4-(2-氨基-5-碘-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(35g)、DMF(80mL)、乙酸钯(675mg)、乙酸乙酯(22mL)及三乙胺(28mL)且将反应在搅拌下在约90℃下加热6小时。HPLC分析显示起始物质消失且认为反应完成。将反应混合物经炭、硅藻土及Silicycle过滤以移除大部分钯黑。用庚烷(2×100mL)萃取滤液以移除剩余乙酸乙酯及三乙胺。使DMF级分经受旋转蒸发蒸馏以移除剩余丙烯酸乙酯。剩余DMF溶液(约150mL)未经任何纯化直接用于下一步骤中。

步骤2：制备2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

原料：

2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮溶液	150mL溶液，1.0当量
		PhSNa(FW＝132)	13.2g，0.1mol，1.0当量
PhSH(FW＝110，d＝1.078)	11mL，0.1mol，1.0当量
		DBU(FW＝152，d＝1.018)	61mL，0.4mol，4.0当量
二异丙基乙基胺(FW＝129.24，d＝0.782)	100mL，0.6mol，6.0当量
		二甲基甲酰胺	100mL

程序：

1.将500mL三颈圆底烧瓶装备有机械搅拌器、热电偶、加料漏斗、氮入口及蒸馏装置，装入加热套中。

2.使烧瓶装有来自上一步骤的DMF溶液、PhSNa(13.2g)、PhSH(11mL)、DBU(61mL)、二异丙基乙基胺及DMF(100mL)。将反应混合物在110℃下加热3小时。HPLC分析显示起始物质消失且认为反应完成。

3.在高真空(5psi)下在55℃下浓缩DMF溶液以产生约150mL溶液，将其用500mL叔丁基甲基醚洗涤。分离醚层。将100mL MeOH、600mL水及300mL甲苯添加至反应混合物中，将其在空气下搅拌过夜。过滤产生湿粗2-氨基-8-((1r，4r)-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，其直接用于下一步骤中(16g，50％，粗)。

步骤3：制备2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

原料：

2-氨基-8-((1r，4r)-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(FW＝321)	11.0g，34mmol，1.0当量
		N-溴丁二酰亚胺(FW＝178)	9.2g，52mmol，1.2当量
乙腈/水(1∶1)	200mL

程序：

1.将500mL圆底烧瓶装备有机械搅拌器、热电偶、加料漏斗、氮入口及蒸馏装置，装入加热套中。

2.向2-氨基-8-((1r，4r)-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(11.0g，34mmol)于1∶1乙腈/水(200mL)中的溶液中添加N-溴丁二酰亚胺(9.2g，52mmol)。在室温下搅拌6小时后，浓缩溶液。过滤产生粗产物。

3.将粗产物于50mL叔丁基甲基醚中浆化。过滤产生高纯度的2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(约8g，70％)。

步骤4：制备2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物152)

原料：

2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(FW＝353.21)	13.2g，37.38mmol，1.0当量
		6-甲氧基吡啶-3-基硼酸(FW＝152.94)	7.15g，46.7mol，1.25当量
Cs₂CO₃(FW＝325.8)	36.5g 112.14mmol，3.0当量
		PdCl₂(PPh₃)₂(FW＝816.6)	916mg，1.12mmol，0.03当量
1，2-二甲氧基乙烷(DME)/水	240mL/50mL

程序：

1.将1L三颈圆底烧瓶装入加热套中，配备机械搅拌器、回流冷凝器、干燥管、热电偶及氮入口。

2.将2-氨基-6-溴-8-(反-4-羟基环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(13.2g)、6-甲氧基吡啶-3-基硼酸(7.15g)、Cs₂CO₃(36.5g)、PdCl₂(PPh₃)₂(916mg)及1，2-二甲氧基乙烷(DME)/水(240mL/50mL)装入烧瓶。将反应混合物在80℃下加热至回流历时2小时。HPLC分析显示起始物质消失且认为反应完成。

3.将反应混合物冷却至室温。过滤移除不可溶无机盐。将无机滤饼用热THF剧烈洗涤，与滤液合并。分离水层且萃取THF。蒸发THF且添加无水乙醇且随后蒸发以产生黑色固体。将固体溶解于400mL THF中且在80℃下与60g Silicycle一起加热。过滤且浓缩THF产生粗最终产物。

4.将粗产物(12.0g)于20mL THF及150mL甲醇中浆化且随后加热至回流历时30min。使样品缓慢冷却至23℃过夜。经过滤收集固体且在55℃下在高真空下干燥以获得9.0g 2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物152)。由HPLC确认化合物的纯度，为94％。

实例94.顺-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇

在密封管中，将5-溴-4-氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶(5.00g，17.0mmol)、顺-4-氨基环己醇盐酸盐(2.77g，18.3mmol)及二异丙基乙基胺(8.69mL，49.9mmol)于二甲基乙酰胺(60.0mL)中的混合物在160℃下加热过夜。浓缩反应混合物且将残余物经快速层析用氯仿/甲醇(0-3％)洗脱纯化。浓缩含想要产物的合并级分。将所得胶状物溶解于甲基叔丁基醚(450mL)中且将溶液用50％盐水洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤且浓缩以提供呈橙色泡沫状固体的标题化合物(5.53g，88％)。

(M+H)⁺379，381

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.46-1.57(m，4H)1.59-1.69(m，2H)1.79-1.90(m，2H)2.25(s，6H)2.41(s，3H)3.77(d，J＝2.27Hz，1H)3.90-4.00(m，1H)4.40(d，J＝2.78Hz，1H)5.75(s，2H)6.74(d，J＝8.08Hz，1H)

实例95.2-顺-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己基氧基)乙醇

向顺-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己醇(2.50g，6.59mmol)于二甲基甲酰胺(17.0mL)中的冷却(0℃)溶液中添加氢化钠(60％于油中的分散液，527mg，13.2mmol)。2.5hr后，在0℃下，经1hr逐滴添加1，3，2-二氧杂硫代环戊烷2，2-二氧杂环己烷(1.23g，9.89mmol)于二甲基甲酰胺(7.0mL)中的溶液。0℃下搅拌过夜后，再添加4当量氢化钠，接着每15min以0.25当量份添加1，3，2-二氧杂硫代环戊烷2，2-二氧杂环己烷直至2.25当量。将反应用甲醇终止且浓缩。随后，将残余物用1，4-二氧杂环己烷(200ml)及水(5.0ml)稀释。添加对甲苯磺酸(g mmol)且将混合物加热至40℃历时1.5小时。将溶液冷却至0℃且用固体碳酸氢钠饱和。用水(100mL)稀释且用二氯甲烷(3×500mL)萃取。将合并的有机相用盐水(150mL)洗涤、干燥(MgSO₄)、过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用己烷/甲基叔丁基醚(15-75％)洗脱纯化以提供标题化合物(1.27g，45％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.40-1.50(m，2H)1.51-1.61(m，2H)1.72-1.80(m，2H)1.80-1.88(m，2H)2.26(s，6H)2.41(s，3H)3.39(t，J＝5.43Hz，2H)3.48-3.57(m，3H)3.94-4.03(m，1H)4.50(t，J＝5.56Hz，1H)5.75(s，2H)6.80(d，J＝8.08Hz，1H)

(M+H)⁺424

实例96.2-(顺-4-(2-氨基-5-溴-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己基氧基)乙醇

将2-(顺-4-(5-溴-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己基氧基)乙醇(1.23g，2.91mmol)及羟基胺盐酸盐(1.01g，14.5mmol)于10∶1乙醇∶水(22.0mL)中的溶液加热至回流过夜。浓缩反应混合物且将残余物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0-4％)洗脱纯化以提供标题化合物(697mg，70％)。

(M+H)⁺345，347

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.41-1.50(m，2H)1.51-1.60(m，2H)1.60-1.70(m，2H)1.72-1.81(m，2H)2.17(s，3H)3.38(t，J＝5.43Hz，2H)3.44-3.47(m，1H)3.49(q，J＝5.39Hz，2H)3.86-3.96(m，1H)4.50(t，J＝5.68Hz，1H)5.76(d，J＝8.08Hz，1H)6.09(s，2H)

实例97.(E)-3-(2-氨基-4-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯

在密封管中，将2-(顺-4-(2-氨基-5-溴-6-甲基嘧啶-4-基氨基)环己基氧基)乙醇(695mg，4.03mmol)及丙烯酸乙酯(438μL，4.03mmol)于三乙胺(10mL)中的溶液以氩鼓泡约5分钟。添加四(三苯基膦)钯(0)(232mg，0.201mmol)，密封小瓶且将混合物再次以氩鼓泡(5分钟)。将反应加热至130℃过夜，冷却至室温且浓缩。将残余物溶解于氯仿(500mL)中且用水及盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0-4％)洗脱纯化以提供标题化合物(615mg，84％)。

(M+H)⁺365

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.24(t，J＝7.07Hz，3H)1.38-1.48(m，2H)1.51-1.59(m，2H)1.62-1.73(m，2H)1.77-1.86(m，2H)2.21(s，3H)3.39(t，J＝5.43Hz，2H)3.47-3.53(m，3H)3.97-4.06(m，1H)4.15(q，J＝7.07Hz，2H)4.50(t，J＝5.56Hz，1H)5.95(d，J＝15.92Hz，1H)6.30-6.37(m，3H)7.61(d，J＝15.92Hz，1H)

实例98.2-氨基-8-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮

将(E)-3-(2-氨基-4-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基氨基)-6-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯(615mg，1.69mmol)、硫酚(173μL，1.69mmol)、苯硫酚钠盐(248mg，1.69mmol)、1，5-二氮杂双环(5，4，0)十一碳-5-烯(1.01mL，6.75mmol)及二异丙基乙基胺(1.76mL，10.1mmol)于N′，N-二甲基甲酰胺(11.2mL)中的溶液加热至120℃过夜。浓缩反应混合物且将残余物在甲基叔丁基醚(500mL)与饱和碳酸氢钠(50mL)之间分配。将有机层分离且用50％盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。将合并的水层用氯仿(3×175mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0-6％)洗脱纯化以提供标题化合物(411mg，77％)。

(M+H)⁺319

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm1.15-1.28(m，2H)1.35-1.50(m，2H)1.91-2.04(m，2H)2.46(s，3H)2.83-3.13(m，2H)3.41(t，J＝5.09Hz，2H)3.50-3.61(m，3H)4.65(t，J＝15.26Hz，1H)5.26-5.43(m，1H)6.14(d，J＝9.42Hz，1H)6.86-7.15(m，2H)7.81(d，J＝9.42Hz，1H)

实例99.2-氨基-6-溴-8-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物284)

向2-氨基-8-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(411mg，1.29mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中添加N-溴丁二酰亚胺(253mg，1.42mmol)。在室温下搅拌1小时后，浓缩溶液。将残余物溶解于氯仿(250mL)中且用1N碳酸钠(2×25mL)及盐水(25mL)洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用1∶1乙酸乙酯/7N于甲醇中的氨(0-4％)洗脱纯化以提供标题化合物(382mg，75％)。

(M+H)⁺397，399

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.22-1.31(m，2H)1.37-1.48(m，2H)1.94-2.04(m，2H)2.49(s，3H)2.78-3.03(m，2H)3.42(t，J＝5.31Hz，2H)3.53-3.61(m，3H)4.53-4.79(m，1H)5.33-5.56(m，1H)7.08-7.32(m，2H)8.33(s，1H)

实例100.2-氨基-8-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物285)

将2-氨基-6-溴-8-(顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(50mg，0.13mmol)、碳酸钾(52mg，0.38mmol)及2-甲氧基-5-吡啶硼酸(38mg，0.25mmol)于5∶1二甲基甲酰胺∶水(1.3mL)中的混合物以氩鼓泡5分钟。向混合物中添加双(三苯基膦)氯化钯(II)(9mg，0.13mmol)且立即密封微波小瓶且将混合物再次以氩鼓泡。在微波中在100℃下加热20min后，真空浓缩混合物。将残余物溶解于CHCl₃(60mL)中且用水(10mL)及盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。将粗产物经快速层析用氯仿/7N于甲醇中的氨(0-5％)洗脱纯化以提供标题化合物(50mg，93％)。

(M+H)⁺426

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm1.25-1.33(m，2H)1.39-1.50(m，2H)1.95-2.04(m，2H)2.55(s，3H)2.89-3.12(m，2H)3.42(t，J＝5.18Hz，2H)3.52-3.61(m，3H)3.88(s，3H)4.52-4.79(m，1H)5.37-5.55(m，1H)6.85(d，J＝8.59Hz，1H)6.97-7.20(m，2H)7.97(s，1H)8.00(dd，J＝8.72，2.40Hz，1H)8.42(d，J＝2.02Hz，1H)

表1

实例101.PI3-Kα生物化学检定

使用活体外激酶检定实验评估本发明的化合物对于PI3-Kα的效能。通过测定底物PI(4，5)P₂的磷酸化水平来测量PI3-Kα的活体外活性。在配位体置换萤光偏振(FP)检定实验中，通过与Grip1 PH域结合监测产物PI(3，4，5)P₃的形成，其中与Grip1 PH域复合的经TAMRA标记的PI(3，4，5)P₃被在PI3-Kα反应中所形成的PI(3，4，5)P₃置换，从而导致FP信号减弱。小鼠PI3-KαP110及P85亚单元共表达于昆虫细胞中且共纯化至均质。PI(4，5)P₂得自Cayman。经TAMRA标记的PI(3，4，5)P₃来自Echelon，Grip1 PH域来自Dundee且其他试剂来自Sigma。

所有检定实验均在室温下在Corning固体黑色96孔半面积(half area)板中使用LJL分析器(Molecular Devices)进行。检定缓冲液含有50mMHEPES(pH7.4)、150mM NaCl、5mM DTT及0.05％CHAPS。将干燥粉末PI(4，5)P₂溶解于50mM TRIS(pH8)中以产生1mM储备溶液。随后，将PI(4，5)P₂储备溶液于检定缓冲液中稀释至60μM，且在使用前超声波处理30sec。向检定板中依次添加下列试剂：10μL 60μM PI(4，5)P₂、5μL 4nMPI3-Kα、2 μL于25％DMSO中的化合物、3μL含有200μM ATP及33mM MgCl₂的混合物。反应的最终体积为20μL。将反应混合物在室温下培育35min。随后，将反应用20μL 20mM EDTA停止。反应停止后，将15μL的检定混合物转移至含有480nM Grip1 PH域及12nM经TAMRA标记的PI(3，4，5)P₃的15μL检测混合物的96孔半面积板中。使FP信号扩大40min，然后在535nm下激发且580nm下发射的LJL分析器上读数。

抑制百分率基于以下公式计算：

抑制％＝[1-(FP_化合物-FP_max)/(FP_min-FP_max)]×100，

其中FP_化合物为给定化合物浓度下的FP读数，FP_min为在不存在化合物的情况下PI3-Kα反应的FP信号，且FP_max为在不存在PI3-Kα及化合物的情况下的背景FP信号。通过使用GraphPad Prism曲线拟合程序相对于化合物浓度将FP信号拟合为S形剂量响应方程来确定IC₅₀。

实例102.PI3-Kα细胞检定

使用如下细胞检定实验评估本发明的化合物对于PI3-K的效能。通过测量AKT在丝氨酸473处的磷酸化水平来测定PI3-K在细胞中的活性。在ELISA格式中，使用抗磷酸AKT(Ser473)抗体(Cell Signaling#4058)测量AKT Ser磷酸化。

检定实验使用健康生长的人类乳癌细胞BT20(PI3K突变)。使BT20细胞在10％FBS+GLN(1∶100)+PS(1∶100)+1mM丙酮酸钠+0.1mM碳酸氢钠+非必需氨基酸溶液(1∶100)MEM培养基(MEM+all)中生长。当细胞接近85％+融合时，将细胞用PBS清洗一次且用胰蛋白酶EDTA胰蛋白酶化3分钟。将细胞再悬浮于10％FBS MEM all中且在1400rpm下离心历时5分钟。将细胞再悬浮于0.5％FBS MEM all中且在细胞计数器上计数。将细胞在0.5％FBS MEM all中在96孔平底板中以100微升/孔的体积以25,000个细胞/孔接种。阴性对照孔仅接收100μL无细胞的0.5％FBSMEM all培养基。将板在细胞培养培育箱中在37℃下用5％CO₂培育过夜。

第2天，在0.5％FBS MEM all培养基中准备测试化合物且以1∶3连续稀释获得11个测试浓度。各浓度的化合物均以双份测试。将化合物溶液以25微升/孔添加至细胞板中的相应孔中，且将25微升/孔的载体(于0.5％FBS MEM all中的0.5％DMSO)添加至阴性对照孔(无细胞)中及阳性对照孔(有细胞无化合物)中。将板在细胞培养培育箱中在37℃下用5％CO₂培育1小时。培育1小时后，移除培养基，将100微升/孔的细胞裂解缓冲液添加至细胞板中且在室温下震荡15分钟。15分钟后，将细胞裂解产物转移至ELISA板[用抗磷酸AKT(Ser473)兔子单克隆抗体，Cell signaling，分类号#4058预涂布]中且将板在室温下在轻微震荡下培育2小时。2小时后，清空孔中的内容物，用洗涤缓冲液将板洗涤4次，且将100μL抗AKT1小鼠单克隆检测抗体(Cell signaling，分类号#2967)添加至各孔中，在室温下在轻微震荡下培育1小时。1小时后，清空孔的内容物且将板用洗涤缓冲液洗涤4次且将100μL抗小鼠IgG HRP联结抗体(Cell Signaling，分类号#7076)添加至各孔中，且在室温下在轻微震荡下培育1小时。1小时后，清空孔的内容物，将板用洗涤缓冲液洗涤4次，且将100μL TMB底物溶液(分类号#T0440，Sigma)添加至各孔中，且在室温下在轻微震荡下培育20分钟。显色15分钟后，将100μL停止溶液(1N盐酸)添加至各孔中，且在450nm下将板在ELISA板读数器上读数。

表2.PI3-Kα生物化学及细胞活性数据

化合物编号	PI3-Kα细胞检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定抑制％
				101	0.00349	0.011
102	0.0179	0.015
				103	2.33	0.4
104	10		10μM下43
				105	0.234	0.024
106	0.495	0.045
				107	0.305	0.023
108	0.00382	0.00157	10μM下99
				109	0.0584	0.0063	10μM下99
110	0.106	0.017
				111	0.0161	0.00296
112	0.0742	0.0391
				113	0.0952	0.021
114	1.18	0.11
				115	0.00382	0.00075
116	5.75	0.83
				117	10		10μM下32
118	8.37	1.1
				119	5.71	0.31
120	0.896	0.042
				121	10		50μM下27
122	10
				123	0.65	0.068
124	0.00258	0.008
				125	9.01	1.43
126	5.48	0.856
				127	0.00276	0.00048
128	3.53	0.275
				129	2.75	0.004
130	10	0.054
				131	7.98	3.4
132	10	5.5
				133	0.603	0.06
134	8.3	2.1
				135	0.0461	0.00177
136	0.0263	0.00308
				137	0.019	0.000989
138	0.146	0.0297
				139	0.017	0.00503
140	0.000793	0.00103
				141	10	7.08

化合物编号	PI3-Kα细胞检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定抑制％
				142	1.39	0.792
143	0.669	0.244
				144	0.00305	0.00101
145	0.622	0.168
				146	0.00176	0.000731
147	0.00484	0.000524
				148	0.0147	0.00478
149	＞10	0.31
				150	＞10	1.4
151	＞10	4.9
				152	0.0036	0.024
153	2.76	0.46
				154	0.475	0.018
155	0.0829	0.011
				156	0.169	0.0067
157	0.305	0.044
				158	0.0319	0.0013
159	0.0876	0.0046
				160	1.04	0.15
161	0.934	0.055
				162	0.0472	0.014
163	0.0204	0.0012
				164	1.3	0.036
165	0.0558	0.0012
				166	0.262	0.0095
167	2.36	0.68
				168	0.228	0.13
169	0.34	0.088
				170	10	3.4
171	0.0254	0.0016
				172	0.116	0.015
173	0.322	0.27
				174	0.019	0.0076
175	0.0193	0.0043
				176	0.00466	0.012
177	0.00802	0.0024
				178	0.064	0.031
179	0.00737	0.0039
				180	0.00339	0.0016
181	0.0176	0.012
				182	0.0101	0.0062
183	0.00469	0.009
				184	0.211	0.11
185	0.0152	0.018

化合物编号	PI3-Kα细胞检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定抑制％
				186	0.0252	0.01
187	0.0172	0.0095
				188	0.0718	0.0094
189	0.0212	0.0027
				190	2.69	0.47
191	0.0031	0.0011
				192	0.00508	0.093
193	0.00701	0.028
				194	0.00597	0.0059
195	0.0757	0.023
				196	0.0366	0.0045
197	0.236	0.188
				198	0.262	0.13
199	0.0199	0.0185
				200	0.0714	0.0066
201	0.0153	0.0037
				202	1.67	0.23
203	0.0258	0.02
				204	0.143	0.0075
205	0.0167	0.015
				206	0.0265	0.0082
207	0.0119	0.002
				208	0.00964	0.0294
209	0.064	0.011
				210	0.00677	0.0023
211	0.399	0.078
				212	0.176	0.056
213	0.138	0.017
				214	0.594	0.048
215	0.0221	0.006
				216	0.0456	0.0046
217	0.0135	0.0016
				218	1.02	0.094
219	0.0949	0.014
				220	0.145	0.0077
221	0.0578	0.0028
				222	2.13	0.1
223	0.249	0.022
				224	0.12	0.021
225	0.0366	0.0054
				226	0.0415	0.12
227	0.318	0.029
				228	0.256	0.038
229	0.0179	0.015

化合物编号	PI3-Kα细胞检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定抑制％
				230	0.0339	0.02
231	3.45	0.17
				232	0.0414	0.0089
233	0.0942	0.011
				234	0.314	0.039
235	0.623	0.032
				236	10	0.046
237	0.397	0.012
				238	4.53	0.34
239	1.27	0.3
				240	0.101	0.089
241	0.0793	0.01
				242	0.0884	0.015
243	0.316	0.018
				244	0.437	0.03
245	0.181	0.067
				246	0.172	0.027
247	0.671	0.2
				248	0.127	0.007
249	0.121	0.0063
				250	0.0164	0.00234
251	0.0283	0.00059
				252	0.055	0.0029
253	0.00492	0.019
				254	0.00792	0.0017
255	0.00957	0.002
				256	0.0202	0.0031
257	0.0231	0.011
				258	0.0265	0.088
259	0.0267	0.045
				260	0.0332	0.0039
261	0.0348	0.004
				262	0.0459	0.015
263	10	3.3
				264	0.556	0.062
265		0.00143
				266	0.0493	0.0022
267	10	0.81
				268	2.52	0.3
269	2.09	0.095
				270	0.657	0.11
271	0.042	0,0082
				272	0.0437	0.0044
273	0.0251	0.0023

化合物编号	PI3-Kα细胞检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定IC₅₀μM	PI3-Kα生物化学检定抑制％
				274	0.00781	0.0018
275	0.0468	0.012
				276	0.0051	0.000788
277	0.0206	0.00159
				278	0.0505	0.00130
279	0.0305	0.0029
				280		0.0039
281	＞10	1.2
				282	0.265	0.017
283	0.0722	0.005
				285	0.018	0.0099
286	0.0131	0.00485
				287	0.0389	0.0022
288	0.0053	0.00144
				289	0.0295	0.0176
290	0.0335	0.00758
				291	0.0965	0.0552
292	0.0121	0.00928
				293	0.0153	0.00531
294		0.0026
				295	0.0962	0.0529
296	0.0091	0.0297
				299	0.00735	0.000686
300	0.0132	0.00682
				301	0.137	0.0146
302	0.226	0.0223
				303	0.0205	0.00387
304	0.00768	0.00158
				305	0.148	0.0148
306	0.998	0.0581
				307	0.0829	0.00362
308	0.116	0.0177
				309	0.0193	0.00579
310	0.0555	0.0113
				311	0.0519	0.00411
312	0.256	0.0135
				313	0.376	0.0479
314	0.0508	0.0102
				315	0.0146	0.00311
316	0.0935	0.00665
				317	0.0335	0.00472
318	0.0126	0.00214
				319	0.11	0.00591

实例103.小鼠异种移植功效研究

在皮下异种移植模型中研究实例53中所公开的2-氨基-8-(反-4-羟基环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物152)的活体内功效。选择人类肿瘤细胞系PC3(PTEN缺失)、U87MG(PTEN缺失)及SKOV3(PI3KαH1047K)用于活体内功效研究，这是由于它们不同的遗传背景及相对较高水平的磷酰基AKT S473信号。将细胞植入无胸腺小鼠的后肋中且在开始用化合物152每日经口治疗之前使肿瘤尺寸生长至100-200mm³。各个肿瘤模型中，化合物152展示剂量依赖性抗肿瘤功效，导致PC3退化，SKOV3及U87MG肿瘤生长受抑制。数据列在表3中且代表性实例展示于图1-3中。对所有被测模型而言，1mg/kg是有效的剂量。

动物管理：自Charles River Laboratory获得重约22g的雌性及雄性无胸腺小鼠(6-8周大)。将动物安置在Pfizer动物园处于12h照明/黑暗周期中且所有程序根据辉瑞实验动物管理及使用委员会(Pfizer InstitutionalAnimal Care and Use Committee，IACUC)的规定进行。允许动物随意自由获取啮齿动物食物及水且将动物维持在干净的室内条件下。在研究开始之前，使动物适应至少48h。

细胞系：将所有细胞系在37℃下在加湿5％CO₂培育箱中培养。U87MG神经胶质母细胞瘤细胞系得自美国典型微生物菌种保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)且与补充有15％FBS及2mM谷氨酰胺的DMEM一起培养。PC3前列腺癌细胞系得自美国国家癌症研究所(National Cancer Institute)且在补充有10％FBS及2mM谷氨酰胺的RPMI培养基中培养。SKOV3卵巢癌细胞得自ATCC，经由小鼠传代多次且在补充有10％FBS及2mM谷氨酰胺的McCoy 5A培养基中培养。由密苏里大学动物诊断实验室研究中心(University of Missouri ResearchAnimal Diagnostic Laboratory)就已知种类的鼠类病毒及支原体污染测试所有细胞系。

小鼠异种移植模型：由胰蛋白化收集培养物中的U87MG(神经胶质母细胞瘤)、PC3(前列腺癌症)及SKOV3(卵巢癌症)细胞系。简而言之，将2.5-4×10⁶肿瘤细胞悬浮于用于培养各细胞系的无血清的培养基中且在第0天经皮下(s.c)植入小鼠的后肋区中。当平均肿瘤尺寸为100-200mm³时，植入10-14天后，开始用调配于10％乙醇、40％PEG及50％柠檬酸钠缓冲液中的化合物152或仅载体进行每日治疗。

每周两次测量肿瘤且以(长度×宽度²)/2计算肿瘤体积。当载体处理的动物中肿瘤尺寸达＞1500mm³时或当判断对动物的健康状况具有不利影响时，通常终止研究。研究末期，肿瘤生长抑制百分率值计算为100×(1-[(化合物处理的组的肿瘤体积_最终-肿瘤体积_最初)/(载体处理的组的肿瘤体积_最终-肿瘤体积_最初)])。适当时，各组的肿瘤退化百分率计算为100×(肿瘤体积_最终-肿瘤体积_最初)/(肿瘤体积_最初)。就功效研究而言，各剂量组使用一组12个动物。一组代表性动物在规定的时间被处死，切除肿瘤且从左心室取血样并立即置放于填装硫酸肝素的小瓶中。通常将一半肿瘤固定于10％中性缓冲福尔马林中，石蜡包埋且切片用于免疫组织化学分析。将另一半于液氮中冷冻且稍后加工以产生细胞裂解产物用于靶调节研究。

表3.小鼠异种移植功效数据

细胞系	肿瘤类型	最初肿瘤体积(mm³)	剂量毫克/公斤/天	生长抑制(％)	退化(％)
						PC3	前列腺瘤	126	0.25	45
		126	0.5	62
								124	1	89
		125	2		19
						SKOV3	卵巢瘤	146	0.5	46
		146	1	66
								146	2	82
U87MG	神经胶质瘤	134	0.1	18
								135	0.3	56
		135	1.0	76

实例104.活体内靶调节研究

进行活体内靶调节研究，由ELISA确定化合物152治疗对S473上AKT磷酸化的效果，且由IHC确定化合物152治疗对S235/S236上S6磷酸化的效果。将所切除的肿瘤在干冰上冷冻且使用FAST PREP仪器(Qbiogene)磨碎。简而言之，将冷冻肿瘤置放于Fast Prep基质管中，添加冷裂解缓冲液[20mM HEPES(pH7.5)、150mM NaCl、1.0mMEDTA钠、1％Triton X-100、2.5mM焦磷酸钠、1mM原钒酸钠、1μg/ml亮抑蛋白酶肽及1mM PMSF]且将样品离心5sec，混合且将该过程再重复两次。将样品在冷藏Eppendorf离心机中在14,000RPM下离心20min。收集上清液且由ELISA测定总蛋白及磷酰基AKT(S473)蛋白含量。比较同一时间点从治疗的动物切除的肿瘤中的磷酸化程度与从载体处理的动物切除的肿瘤中的磷酸化程度。将通过在Eppendorf 5417R离心机中在4℃下在3000×g下将个体血样离心5min所获得的血浆样品储存在-80℃下直至其可就药物浓度而进行分析。简而言之，将小鼠血浆中的血浆样品(50μL)或化合物152标准物与乙腈(3μL)混合且注入LC/MS/MS系统，其中在C-18SB苯基(5μM，2.1×50mm，Agilent)反相高效液相色谱管柱上进行分离。使用已知量的化合物所产生的标准曲线对各小鼠血浆样品中抑制剂及内标物(0.5μM丁螺环酮)的量进行定量。在以上所讨论的所有3个模型中，化合物152治疗在S473处产生对pAKT的剂量依赖性抑制。时程及活体内靶调节的剂量反应及血浆抑制剂浓度在上述功效研究末期最后剂量之后测定且数据列在表4中。就U87MG模型而言，pAKT S473靶调节的EC₅₀化合物152血浆浓度计算为24nM且与50％肿瘤生长抑制相关。

表4.异种移植模型中药物动力学及药效(PK-PD)相关性

Claims

1.一种式(I)化合物

或其盐，

其中：

R¹为H或可选地被至少一个R⁵基团取代的(C₁至C₆)烷基；

A为3至10元环烷基；

R²为被至少一个R⁶基团取代的(C₁至C₆)烷基；

R³为卤素或(C₂至C₉)杂芳基，其中所述(C₂至C₉)杂芳基可选地被至少一个R⁹基团取代；

R⁴各自独立地为-OH、卤素、CF₃、-NR^11aR^11b、(C₁至C₆)烷基、(C₁至C₆)烯基、(C₁至C₆)炔基；

R⁵各自独立地为-OH、卤素、CF₃；

R⁶各自独立地为-OH、-(CH₂)_nC(O)N(R^11aR^11b)；

R⁹各自独立地为甲氧基、二甲基氨基或甲基；

R^11a及R^11b各自独立地为H或(C₁至C₆)烷基；

R¹²为(C₁至C₆)烷基；

n各自独立地为0、1或2

z是独立地选自0、1、2、3、4、5、6、7、或8的整数。

2.如权利要求1的化合物或其盐，其中A为环己基。

3.如权利要求1或2的化合物或其盐，其中R³为(C₂至C₉)杂芳基，

其中所述(C₂至C₉)杂芳基可选地被至少一个R⁹基团取代。

4.一种化合物，其选自由以下各物质组成的组：

2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-6-溴-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-(反-4-{[(2S)-2，3-二羟基丙基]氧基}环己基)-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-6-溴-8-[顺-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-6-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-({反-4-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

({反-4-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酸甲酯；

2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-({顺-4-[2-氨基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-({顺-4-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-({顺-4-[2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-({顺-4-[2-氨基-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-({顺-4-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-{[顺-4-(2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基)环己基]氧基}乙酰胺；

2-({反-4-[2-氨基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-{[反-4-(2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-喹啉-3-基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基)环己基]氧基}乙酰胺；

2-({反-4-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-({反-4-[2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-({反-4-[2-氨基-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺；

2-氨基-8-[反-3-(2-羟基乙氧基)环丁基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[反-3-(2-羟基乙氧基)环丁基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-氨基-8-[反-3-(2-羟基乙氧基)环丁基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮；

2-({反-3-[2-氨基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环丁基}氧基)乙酰胺；

2-({反-3-[2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环丁基}氧基)乙酰胺；

2-({反-3-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环丁基}氧基)乙酰胺，或它们的盐。

5.一种化合物，所述化合物为2-氨基-6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其盐。

6.一种化合物，所述化合物为2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其盐。

7.一种化合物，所述化合物为2-氨基-8-[反-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其盐。

8.一种化合物，所述化合物为2-({反-4-[2-氨基-6-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4-甲基-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺或其盐。

9.一种化合物，所述化合物为2-({反-4-[2-氨基-4-甲基-7-氧代基-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺或其盐。

10.一种化合物，所述化合物为2-({反-4-[2-氨基-4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-氧代基吡啶并[2，3-d]嘧啶-8(7H)-基]环己基}氧基)乙酰胺或其盐。

11.一种医药组合物，其包含至少一种如权利要求1至10中任一项的化合物或其盐及医药学上可接受的载剂或稀释剂。

12.权利要求1至10中任一项的化合物或其盐在制造用于治疗有需要的哺乳动物体内异常细胞生长的药物中的用途。

13.如权利要求12的用途，其中所述异常细胞生长是癌性的。

14.权利要求1至10中任一项的化合物或其盐在制造用于抑制PI3-Kα酶活性的药物中的用途。