CN101311166B

CN101311166B - 酪氨酸激酶抑制剂及其制备药物的用途

Info

Publication number: CN101311166B
Application number: CN2007100224708A
Authority: CN
Inventors: 李萍
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2007-05-21
Filing date: 2007-05-21
Publication date: 2011-03-09
Anticipated expiration: 2027-05-21
Also published as: CN101311166A

Abstract

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶来治疗疾病的化合物(I)、其前药、可药用盐以及包含这类化合物的药物组合物。此外，本发明还涉及了应用这类化合物、药物组合物以及通过抑制EGFR受体酪氨酸激酶来预防、控制和治疗癌症的方法。

Description

酪氨酸激酶抑制剂及其制备药物的用途

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶来治疗疾病的化合物、其前药、可药用盐以及包含这类化合物的药物组合物。此外，本发明还涉及了应用这类化合物、药物组合物以及通过抑制EGFR受体酪氨酸激酶来预防、控制和治疗癌症的方法。

背景技术

表皮生长因子受体(EGFR，HER-1，c-erbB-1)是一种跨膜糖蛋白，为erbB酪氨酸激酶受体家族的四成员之一。它在上皮细胞的信号启动及上皮细胞源性肿瘤的信号启动过程中，都起着重要作用。EGFR与其配体的结合可引起胞内受体酪氨酸激酶的自磷酸化并相应地激活细胞增生、分化和存活的信号转导通路；在肺癌、乳腺癌等一系列癌症中，病人预后不良和存活率下降均与EGFR的过度表达有关。例如，组织学研究发现，40％—80％的非小细胞型肺癌病例中出现了EGFR的过度表达。由于EGFR在调节细胞增殖、存活和转移中发挥着关键性作用，所以它成为了一个极具吸引力的治疗靶点，尤其是针对实体瘤方面的治疗。

在过去的二十年间，科研人员在开发具有干扰EGFR活性的抗癌药物方面做了大量的工作。目前，抑制EGFR受体的最常规药理学方法是开发单克隆抗体和小分子抑制剂。单克隆抗体阻碍配体与受体的胞外结构域结合，而小分子抑制剂则通过阻碍受体胞内酪氨酸激酶的磷酸化并抑制随后的信号转导通路的激活来发挥作用。

现已开发了许多能阻止肿瘤生长的EGFR抑制剂。这类抑制剂在一些病例中还能使肿瘤消退。小分子EGFR抑制剂已被证明是一种有效的抗癌药物。在病人临床实验中，Iressa和Tarceva两种小分子抑制剂对多种癌症都表现出了显著的疗效。此外，一些抗体药物(如西妥昔单抗Cetuximab)由于能与EGFR胞外结构域结合，也同样具有很好的抗癌活性。当细胞毒素疗法、化疗法或放疗法与EGFR抑制剂联合应用时，它们的抗癌疗效均可增强。

发明内容

本发明公开了一类通式I的化合物、含这类新化合物的药物组合物以及通过抑制EGFR受体酪氨酸激酶活性来预防、控制和治疗疾病的方法的相关信息。这类化合物对于由EGFR受体信号通路介导的疾病的预防、控制和治疗非常有效，特别是在癌症的防治方面，效果更加显著。除了这类化合物和它们的药物组合物之外，本发明还公开了制备这类化合物的中间体以及这类化合物的制备方法。

本发明的通式I化合物结构式如下：

其中R₁、R₂各自独立地表示氢、C_1～6的烃基、羟基、甲氧基、C_1～6的烷氧基、氨基或C_1～6的烷胺基；

Ar表示苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、五元、六元的取代芳杂环基或其中R₃、R₄各自独立地表示氢、卤素基、C_1～10的烃基、C_1～10的烷氧基、氨基、脲基、三氟甲基、氰基或乙炔基；

R₅、R₈各自独立地表示氢、C1～6的烃基、C_1～6的烷氧基、氨基、卤素、羟基或氰基；R₆、R₇各自独立地表示氢、C_1～10的烷氧基、C_1～10的烃基、氨基、取代氨基、脲基、磺胺基或者苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、五元、六元的取代芳杂环基。

上述通式I化合物的对映异构体、可药用盐或连有药学上可接受载体的前药。

在上述通式I化合物中，R₁、R₂或R₈优选表示氢。Ar优选表示

本发明还优选如下的光学异构体结构：

其中R₃、R₄、R₆、R₇的定义如前。

R₃或R₄优选各自独立地表示氢或卤素。

R₆优选表示氢、甲氧基、

或

R₆更优选表示甲氧基。

R₇优选表示氢、甲氧基、1-(1，2，3-triazole)-(CH₂)₃O-、

Figure S07122470820070614D00003140918QIETU

或

R₇更优选表示1-(1，2，3-triazole)-(CH₂)₃O-或

还优选的化合物是：R₁、R₂或R₈表示氢；R₃、R₄、R₅各自独立地表示氢或卤素；R₆表示甲氧基；R₇表示1-(1，2，3-triazole)-(CH₂)₃O-或

这里述及的化合物或药物组合物也包括其阴离子或阳离子的可药用盐。“可药用盐”是指与酸性基团(如羧基)形成的阴离子盐及与碱性基团(如氨基)形成的阳离子盐。

本发明涉及的化合物也包括其前体药物，即前药。这里所说的前药指在机体内通过水解、代谢、衍生等途径而产生可以发挥预期药效的活性成分的药物。前药本身可能有活性，也可能没有任何活性，但是它必须在安全有效剂量下作用于对象时不产生有害作用。比如其可生物水解的酰胺和酯类化合物即属于前药。可生物水解的酰胺类前药是指药物活性不受影响的酰胺类化合物，或者在机体内可被细胞、组织或人体、哺乳动物及其他动物转化成本发明所涉及的活性化合物的酰胺类化合物。相应的，可生物水解的酯类前药是指本发明涉及的酯类化合物，其活性不受影响，或是在动物体内可转化成活性化合物(I)。

本发明所涉及化合物具有光学中心，其旋光异构体、立体异构体、对映异构体、非对映异构体，以及其外消旋化合物都在我们申请权利要求的范围内。

下面介绍一下本发明通式I化合物的制备方法：

如技术路线1所示，目标化合物由硝基氟代苯酯，即化合物1合成。氟原子先用烷氧基取代，经还原得到中间体苯胺类化合物3，3与4一起缩合形成中间体化合物5；化合物5在Dowtherm条件下成环，得到4—羟基—3—氰基喹啉类化合物；随后再用POCl3或者其他氯化试剂将所得化合物氯化；最后用合适的胺试剂将其耦合，即得目标化合物。

技术路线1

另外，中间体化合物6也可以根据技术路线2合成。

简单来说，从化合物10开始，经过硝化和还原反应可以得到苯胺酯，即化合物12。化合物12再通过成环反应可以得到中间体6，即羟基喹啉类化合物。化合物10可以由相应的羟基前体化合物来制备得到。

技术路线2，4—羟基—3氰基喹啉中间体合成的替代路线

环丙胺可以从市场购得，也可以根据路线3来制备得到。合适的取代乙烯芳基，即化合物14(包括苯基和杂环芳基)，可由其卤代前体化合物制备得到。在催化剂(铜Cu，铑Rh等)的作用下，化合物14与双偶氮醋酸盐发生环化作用，所得主要产物为化合物15，即反式的环丙基羧合物。传统的酯到胺的转化途径如路线3所示。

技术路线3，环丙胺的合成

本发明部分化合物结构如下：

各取代基分别代表：

药理试验证明，本发明的通式I化合物具有抑制EGFR受体酪氨酸激酶活性，能用于制备治疗癌症的药物，所述癌症优选乳腺癌、结肠癌、前列腺癌或肺癌。

下面是部分药理学试验及结果：

一、体外表皮生长因子受体(EGFR)试验：

表皮生长因子受体是从人A431癌细胞的脱落囊泡中用免疫亲和层析法分离得到。磷脂酶Cγ1底物结合部位的序列为His-Lys-Lys-Leu-Ala-Glu-Gly-Ser-Ala-Tyr⁴⁷²-Glu-Glu-Val.底物和受体在室温下反应10min，随后加入2mL，75mM的磷酸终止反应。反应后的溶液用连有肽链的2.5cm磷酸纤维素盘过滤。滤器用75mM磷酸(5倍量)洗，然后用闪烁计数法计数测定内在标示物。空白对照组检测得约100000cpm.本试验得到至少两条独立的剂量效应曲线，同时计算了IC₅₀值。报告值均为平均数据；变异系数约±15％.

二、表皮生长因子(EGF)受体在人体表皮样癌细胞中的自磷酸化作用：

细胞生长至融合后转移到96孔板上，加入Dulbecco’s培养基，含10％的FBS，37℃过夜。次日给药1h，与EGF(100ng/mL)作用20min.单层细胞用0.2mL的RIPA-2缓冲盐溶解；溶胞产物于4℃下离心沉降3000rpm，20min.根据制造商提供的使用说明用ELISA方法检测上清夜中的EGFR自磷酸化作用。

结果表明，本发明的化合物均具有抑制酪氨酸激酶的作用，其中化合物5和31在细胞实验和体外实验中的IC50均<10nM。经验表明，酪氨酸激酶抑制剂具有抗肿瘤作用，在病人临床实验中，Iressa和Tarceva两种小分子抑制剂对多种癌症都表现出了显著的疗效。本发明所描述的化合物体外实验结果与Iressa和Tarceva相比具有相当或更强抑制酪氨酸激酶的活性.

具体实施方式

实施例1

2—氰基—3—(3，4—二甲氧基苯胺基)丙烯酸乙酸酯(19)

3，4—二甲氧基苯胺(30.6g，200mmol)，乙基(乙氧基甲烯基)氰基乙酸盐(33.8g，200mmol)，加80ml甲苯，100℃搅拌1h，之后再在125℃下搅拌15min.随后，蒸干甲苯，残渣用乙酸乙酯重结晶，得40.0g(72％)的黄褐色固体：熔点166-170℃，MS(ES+)m/z[M+H]⁺：277.2.

实施例2

6，7-二甲氧基—4—氧络合—1，4—二羟基喹啉—3—腈(20)

混合搅拌化合物19(40g，145mmol)和1.2L的Dowtherm A，逆流吹热氮气10h；冷却至50℃后，用己烷稀释所得混合物。产物先过滤，再用己烷、二氯甲烷依次洗涤，最后干燥得21.1g(63％)的棕色固体：熔点330-335℃(dec)，氢谱(DMSO-d6)：δ12.57(s，1H)，8.59(s，1H)，7.44(s，1H)，7.03(s，1H)，3.89(s，3H)，3.87(s，3H)；质谱(ES+)m/z[M+H]⁺：231.0.

实施例3

4—氯—6，7—二甲氧基喹啉—3—腈(21)

混合搅拌化合物20(20g，87mmol)和87ml的POCl₃，热回流2h.随后70℃真空干燥除去挥发性物质。残渣与二氯甲烷、水混合，0℃下搅拌，同时固体K₂CO₃边搅拌边缓慢加入，直至pH值调节到8—9。此后再在25℃下搅拌30min，使有机层与水层分离，有机层水洗后干燥，用Celite过滤，浓缩后得米色固体19.8g(92％).所得产物在二氯甲烷中重结晶，得米色固体，其理化常数如下：熔点220-223℃，¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.98(s，1H)，7.54(s，1H)，7.42(s，1H)，4.02(s，3H)，4.01(s，3H).

实施例4

4—(3—溴苯胺基)—6，7—二甲氧基喹啉—3—羧酸乙酯(22)

混合搅拌化合物21(14.8g，50mmol)，反式—苯基环丙胺(55mmol)，吡啶(4.05mL，50mmol)，以及150ml的乙醇，热回流30min.随后挥去乙醇，残渣用CH₂Cl₂和NaHCO₃水溶液分别萃取。有机层用水洗后加MgSO₄干燥、浓缩。产物在乙醇中重结晶，得15.4g(71％)的白色固体。

Claims

1.通式I的化合物或其可药用盐：

其中R₃、R₄各自独立地表示氢或卤素；

R₆表示氢、甲氧基、

R₇表示氢、甲氧基、

2.一种药物组合物，其中含有权利要求1的通式I化合物及药学上可接受的载体。

3.权利要求1化合物用于制备酪氨酸激酶抑制剂的用途。