CN101163467B

CN101163467B - 反式氯米芬的制药用途

Info

Publication number: CN101163467B
Application number: CN2006800089841A
Authority: CN
Inventors: J·波多尔斯基
Original assignee: Zonagen Inc
Current assignee: Elastagen Pty Ltd
Priority date: 2005-03-22
Filing date: 2006-03-17
Publication date: 2012-07-18
Anticipated expiration: 2026-03-17
Also published as: US8519004B2; ZA200707774B; CN101163467A; HK1119070A1; US8247456B2; MX2007010659A; JP2015044867A; JP2008534503A; CA3071412A1; EP2392322A2; JP6270281B2; WO2006102232A2; RU2413508C2; WO2006102232A3; NZ560551A; BRPI0609389A2; EP1865938A4; AU2006227243A1; EP1865938A2; AU2006227243B2

Abstract

本发明涉及包含ww-氯米芬的组合物在治疗男性性腺机能减退中的应用。本发明还涉及治疗男性性腺机能减退和其相关病症的方法，包括肌肉量减少、身体性能缺陷、骨密度降低、性欲减少、能力降低、良性前列腺增生减少和不育症。

Description

反式氯米芬的制药用途

发明领域

本发明涉及治疗男性不育症的组合物和方法。尤其是，本发明涉及包含富集反式氯米芬的氯米芬的组合物，及其使用方法。

相关申请的交叉参考

本申请要求2005年3月22日提交的美国临时专利申请第60/664,290号的权益，其内容引入本文以作参考。

背景技术

睾酮是主要的雄激素，在全部的雄性健康中起着重要作用。睾酮对于特定生殖组织(睾丸、前列腺、附睾、精囊和阴茎)和雄性第二性征的发育和维持来说是必需的。其在性欲和勃起功能中起着关键作用，且对于精子发生的启动和维持是必不可少的。睾酮还具有与生殖组织不相关的重要功能。例如，通过增加氮贮留而积极地影响身体组成，氮贮留支持了瘦体重、肌肉大小和肌肉强度。它还作用于骨头上刺激骨形成。

睾酮分泌是一连串的荷尔蒙过程的最终产物。促性腺激素释放激素(GnRH)，分泌于丘脑下部，控制了促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的脉冲式分泌，促黄体激素和促卵泡激素都由垂体前叶分泌。依次地，LH调节睾丸间质细胞中睾酮的产生和分泌，同时FSH帮助诱导精子发生。

睾酮常以“总睾酮”测量。该测量包括结合于性激素结合球蛋白(SHBG)(～44％)，因此是不可生物利用的睾酮，和游离(～2％)或松散地结合于其它蛋白的(非性激素结合球蛋白结合)(-54％)睾酮。

来自世界卫生组织研究的结果显示睾酮昼夜节律地正常分泌，早晨水平较高，大约下午8-10点出现最低水平。见图1。老年男性(平均年龄71岁)在1天中睾酮分泌的这种变换更加不显著。直到此时这种节律的重要性还不为人所知。

在24小时内每10分钟经由留置插管自年轻和老年患者取样。根据Tenover(1987)，年轻男性(年龄范围22岁-35岁，平均27.3岁)的平均24小时总血清睾酮水平为4.9±0.3(±SEM)mg/ml(17.0nmol/L)，而老年男性(年龄范围65岁-84岁，平均70.7岁)具有4.1±0.4mg/ml.(P＜0.5；14.2 nmol/L)的显著较低的平均24小时总血清睾酮水平。

与健康年轻男性的4.8±0.2mg/ml[16.6nmol/L]相比，从老年男性中获得的单个随机样品的总血清睾酮水平(4.0±0.2mg/ml[13.9nnmol/L])也显著较低。

睾酮缺乏可由潜在的疾病或遗传病引起，且也经常是衰老的并发症。例如，原发性性腺机能减退由原发性睾丸衰竭引起。在这种情形中，睾酮水平低，并且垂体促性腺激素(LH和FSH)水平升高。继发性性腺机能减退归因于垂体促性腺激素分泌的不足。除了低睾酮水平之外，LH和FSH水平低或低于正常水平。一些成人睾酮缺乏的后遗症包括许多种类的症状，包括：性欲缺乏、勃起机能障碍、少精液症或精子缺乏、第二性征缺失或退化、肌肉量逐渐减少、疲劳、情感低落和骨质疏松症风险增加。许多这些病症一般称作男性更年期。

美国目前存在着一些睾酮治疗的形式。近来，经皮制剂在市场上受到宠爱。然而，由于阴囊皮肤中高浓度的5α-还原酶，阴囊睾酮贴剂导致了超生理学水平的5α-二氢睾酮(DHT)。还不知道这些增加的DHT水平是否具有任何长期的健康后果。非阴囊系统被认为更加便利，且大多数患者达到了正常范围内的平均血清浓度和正常水平的DHT。不推荐口服睾酮治疗，因为需要替代疗法，这与肝毒性的显著风险相关。

发明概述

本发明涉及施用包含0％-29％重量/重量的(顺式、-Z-、反式-氯米芬)(下文″顺式-氯米芬″)和100％-71％w/w(反式-、E-、顺式-氯米芬)(下文″反式-氯米芬″)或其药学可接受盐的组合物的方法。该组合物可基本上由反式-氯米芬或其类似物组成。

组合物可以在3-30天的时间段内引起睾酮的药理学有效血浆浓度的单次剂量给予患者。单次剂量可为约5到约100mg。单次剂量也可为约12.5到约50mg。单次剂量还可为12.5、25或50mg。时间段可为约7到约15天。时间段也可为约10到约12天。

组合物可给予需要增加睾酮水平的患者。组合物还可给予需要降低胆固醇水平的患者。组合物还可给予需要增加肌肉量的患者。组合物还可给予患有脂肪营养障碍的患者。组合物还可给予需要增加淋巴细胞水平的患者。组合物还可给予需要降低甘油三酯水平的患者。组合物还可给予患有良性前列腺肥大的患者。组合物还可给予患有前列腺癌的患者。组合物还可给予患有男性性腺功能减退症相关病症的患者。性腺机能减退相关的病症可是肌肉量的减少、身体性能受限、骨密度降低、性欲减少、能力降低、良性前列腺增生减少或不育症。

附图的简要说明

图1是表示健康男性(年轻或者年老)正常分泌总血清睾酮的曲线图。

图2显示了氯米芬柠檬酸盐的化学结构。

图3是使用氯米芬、恩氯米芬和珠氯米芬后血清睾酮水平的时间过程图。

图4是用氯米芬、恩氯米芬和珠氯米芬治疗的雄性狒狒的胆固醇水平的时间过程图。

图5显示了Androxal^TM或Androgel

对睾酮水平的影响。

图6显示了Androxal^TM或Androgel

对LH水平的影响。

图7显示了Androxal^TM或Androgel

对FSH水平的影响。

发明详述

本发明提供了增加雄性动物睾酮水平和改善或预防低睾酮水平后遗症的给药方法。本发明是基于停止使用包含反式-氯米芬治疗后，血清睾酮、LH和FSH水平持续增加的惊人发现而作出的。根据长时间的作用，包含反式-氯米芬的组合物可偶尔地或者一些其它非日常方式使用，并且仍然获得了治疗效果。

氯米芬(图2)是与他莫昔芬有关的抗雌激素药，其阻断下丘脑正常的雌激素反馈，然后对脑垂体进行负反馈。这导致了促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的增加。在男性当中，这些促性腺激素水平的增加刺激了睾丸的间质细胞，引起了加高睾酮水平的产生。氯米芬柠檬酸盐具有如下结构：

Ernst等人，J.Pharmaceut.Sci.(55：148(1976)，已经指出氯米芬是两种几何异构体的混合物，它们称作顺式、-Z-、氯米芬(顺式-氯米芬或珠氯米芬)和反式-、E-、氯米芬(反式-氯米芬或恩氯米芬)。根据Ernst等人，反式-氯米芬盐酸盐的熔点为149℃-150.5℃，而顺式-氯米芬盐酸盐的熔点为156.5℃-158℃。

Ernst等人还发现(反式异构体)是抗雌激素的(AE)，而顺式异构体是更加有效和雌激素作用更强的形式，且也曾报导过具有抗雌激素活性。作者将药物对产卵活性的作用归因于两种形式，指出混合物比单独的反式-氯米芬更加有效。反式异构体在下丘脑水平上帮助产卵。雌激素异构体顺式-氯米芬在导致产卵的生理学途径的其它地方促使产卵增加。这些异构体还也被报导具有不同的体内半衰期。而且，还曾报导顺式形式单次剂量超过1个月后还留下残留血液水平。

Vandekerckhove等人(Cochrane Database Syst Rev 2000；(2)：CD000151(2000))发现包括738个男性在内的10个研究显示抗雌激素似乎对内分泌生成具有有益效果，即睾酮，但是没有足够的证据来评价生育力效应。无论氯米芬给药是否增加睾酮水平，可以容易推定的是只要睾丸仍然保留对促性腺激素刺激响应的能力，那么该药物应当积极影响睾酮缺失的副作用。

目前批准的氯米芬是顺式和反式异构体的混合物，顺式异构体以约30％到50％(默克手册)存在用于促进产卵停止的患者的生育力。氯米芬通过启动一连串的内分泌事件而增加产卵作用，内分泌事件在排卵前促性腺激素冲击中达到极点，随后卵泡破裂。推荐该药物以每天总计100mg的剂量使用5天。氯米芬也伴随许多副作用，包括：视力模糊、腹部不适、男子女性型乳房、睾丸肿瘤、血管收缩潮红(vasomotor flushes)、恶心和头痛。而且，其它研究显示氯米芬具有遗传毒性和肿瘤促进作用。这些观察的直接结果是氯米芬以其当前的形式，具有30％到50％的顺式异构体，在慢性睾酮缺乏治疗的长期疗法中不合适。

氯米芬还被用于低睾酮水平男性的介入治疗中。Tenover等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.64：1103，(1987)和Tenover等人，J.Clin. Endocrinol.Metab.64：1118(1987)发现用氯米芬治疗后年轻人和老年人的FSH和LH都增加了。他们还发现男性游离和总睾酮增加，年轻人显示出增加显著。

还进行了研究用于确定是否氯米芬可通过改善精子质量来提高生育力。Homonnai等人Fertil.And Steril 50：801(1988)发现精子浓度增加并计数，而其它没有(参见例如Sokel，等人，Fertil.and Steril.49：865(1988)；Check，等人，Int.J.Fertil.34：120(1989)；Purvis，等人，Int.J.Androl 27：109(1989)；and Breznik，Arch.Androl.27：109(1993).)。一组发现长期治疗正常精子的百分数降低。Shamis，等人，Arch.Androl 27：109(1991)。世界卫生组织的研究显示治疗6个月后精子质量或生育力并未改变。(Anonymous Androl.75：299(1992).)在后分析确认了低质量精子男性的睾酮水平上升，而生育力没有增加(Vanderkerckhove，等人，2000)。研究还显示长期氯米芬治疗似乎对健康没有剧烈的有害作用，尽管4个月后确实显示治疗导致了较低的精子质量。研究已经使男性以25mg每天或100mg每个1天的量使用了18个月。

在1991，Guay等人(Urology 35：377(1991))中，显示氯米芬可治疗男性性功能障碍。他们的前提似乎是性功能依赖于睾酮水平。这一点被显示积极影响雄激素和性功能的早期研究所支持，Davidson，等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.48：955(1979)，研究规定睡眠相关的勃起作为对T的有力响应，Cunningham，等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.70：792(1990)。然而，在1995年，Guay等人(Gray，等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.50：3546(1995))出版了研究，在该研究中他们发现使用氯米芬2个月后LH、FSH和睾酮增加，而对勃起功能障碍无效。可能对年轻男性和特定类型的老年男性有一些益处，但似乎只增加睾酮水平并不足够。睾酮对与睡眠相关的勃起的作用可能被看得太严重了(Herskowitz，等人，J.Psychosomat.Res.42：541(1997))。

根据本发明，包含一种异构体优选反式-氯米芬或如下所述与正常产生混合物不同的预定义的氯米芬的异构体混合物的组合物来增加睾酮水平，同时降低该药物的副作用。因此，本发明提供了用于增加睾酮水平的口服疗法，该疗法没有或减少了与现存氯米芬制剂相关的副作用。

在本发明的一个实施方案中，给予需要或希望增加血清睾酮水平的患者一个或多个剂量的有效量的组合物，该组合物包含1到约200mg剂量的反式-氯米芬(虽然理想剂量的确定与本领域普通技术人员的水平相关)。只要反式-氯米芬与顺式-氯米芬的比例大于1，那么顺式-氯米芬也可存在于组合物中。反式和顺式氯米芬异构体的类似物如上面Ernst，等人.中描述的那些也对本发明的实施有用。

在本发明的另一实施方案中，给予患有与性腺机能减退相关病症的患者一个或多个剂量的有效量的组合物，该组合物包含1到约200mg剂量的反式-氯米芬(虽然理想剂量的确定与本领域普通技术人员的水平相关)。只要反式-氯米芬与顺式-氯米芬的比例大于1，那么顺式-氯米芬也可存在于组合物中。反式和顺式氯米芬异构体的类似物如Ernst，等人.supra中描述的那些也对本发明的实施有用。与性腺机能减退相关的病症包括，但不限于：肌肉量减少、身体性能受限、骨密度降低、性欲减少、能力降低、良性前列腺增生、少精液症或精子缺乏、第二性征缺失或退化、肌肉量减少、疲劳、抑郁和不育症。本发明的组合物可用于治疗患有其它病症的患者，包括但不限于，这些病症描述于U.S.App.Nos.10/427,768(2003年4月提交)、10/712,546(2003年11月12日提交)、60/588,223(2004年7月14日提交)、60/588,130(2004年7月14日提交)和60/588,223(2004年7月14日提交)中。

剂量优选(但不必须)作为剂量方案的部分给予，该剂量方案被设计用于产生模拟或相应于图1描述的正常分泌总血清睾酮曲线的血清睾酮水平。例如，根据图1，优选组合物的剂量可以药物制剂给予，该制剂在上午8点钟左右产生血清睾酮水平峰值。这样的药物制剂可是如美国专利第6,221,399号、日本专利4-312522、Meshali等人，Int.J.Phar.89：177-181(1993)、Kharenko等人，Intern.Symp.Control ReI.Bioact.Mater.22：232-233(1995)、WO 95/35093、Dangprasit等人，Drug.Devel.and Incl.Pharm.21(20)：2323-2337(1995)、美国专利第6,143,353号、6,190,591号、6,096,338号、6,129,933号、6,126,969号、6,248,363中描述制备的缓释制剂和本领域公知的其它缓释制剂的形式。反式氯米芬的剂量可以为5到100mg。反式氯米芬剂量也可以为12.5到50mg。反式氯米芬的剂量还可以为12.5mg、25mg或50mg。

基于包含反式-氯米芬组合物的长效作用，如本文所示，可在3-30天的时期内给予一次剂量，获得于组合物每日给药相当的有益效果。也可在7-15天或10-12天的时期内给予一次剂量。

适当的药物组合物或单位剂型可以是固体的形式，例如片剂或填充胶囊，或者液体，如溶液混悬剂、乳剂、酏剂或填充了上述物质的胶囊，所有这些都口服使用。组合物还可以是无菌注射溶液或胃肠外(包括皮下)使用的乳剂形式。这些药物组合物及其单位剂型可包含常规比例的成分。

根据本发明的组合物还可通过静脉内、皮下、口腔、经粘膜、鞘内、真皮内、脑池内或其它给药途径施用。施用组合物后，可如上所述测量血清睾酮水平，可以改变剂量以获得血清睾酮水平足够的增加从而达到如上所述所需与正常睾酮相关的生理学结果。组合物可每日、非每日或偶尔使用。例如，组合物可以间隔1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天的给药方案使用。

本文所讨论的所有参考文献的全部内容引入本文以作参考。

下述实施例意欲对本发明举例说明，不打算限制附加权利要求所列出的本发明的范围。

实施例1

氯米芬对雄性狒狒血清睾酮和胆固醇的影响

连续12天给予成年、雄性狒狒1.5mg/kg的氯米芬、恩氯米芬(反式-氯米芬)或珠氯米芬(顺式-氯米芬)。分析的样品是在第一次治疗当天给予试验检品之前(第0天)、治疗12天后(第12天)和最后一次治疗7天后(结束或清除)所取的血清。

1.对体重和血清LH、FSH、PRL和睾酮的影响

接受恩氯米芬的组别总血清睾酮显著增加。参见表1。各组在基线时期或在第0天没有差别。治疗7天后(清除期)三组之间也没有差别。然而，与氯米芬和珠氯米芬在第6天(p值分别为0.03和0.00002)和与珠氯米芬在第12天(p＝0.047)相比，恩氯米芬产生了较高水平的睾酮。珠氯米芬明显没有任何程度地增加总血清睾酮。通过变化系数来判断，与接受恩氯米芬的动物相比，接受氯米芬的动物在第6天和之后显示了变化更大的总睾酮水平。当我们观察影响的时间过程时，与基线或第0天的数值相比，可以确定的是仅恩氯米芬在第6天和第12天显著地和统计学上增加了总血清睾酮。而且，恩氯米芬治疗停止后，在第12天和第18天(清除)之间引起了总血清睾酮水平显著地降低。这表明恩氯米芬容易从循环中清除，这与恩氯米芬在人体中的代谢清除率是一致的。恩氯米芬明显比单独的氯米芬更好和更加相容，并且珠氯米芬无效。

表1-血清睾酮水平(ng/dl)

组别	ID	基线 12/3/01	第0天 12/7/01	第6天 12/13/01	第12天 12/20/01	清除期 12/26/01
							CLO	7500 9012 9097	79.01 97.55 158.06	76.15 305.24 102.94	940.97 585.92 151.12	891.5 555.6 318.9	150.9 316.3 143.6
	平均值 SD	111.5 41.3	161.4 125.2	559.3 395.6	588.7 287.7	203.6 97.7
							ENCLO	7223 8021 8369	64.57 166.86 170.45	74.96 133.59 106.47	1223.8 1128.2 1081.1	633.6 1466 1166	307.2 399.2 271
	平均值 SD	134.0 60.1	105.0 29.3	1144.4 72.7	1088.5 421.6	325.8 66.1
							ZUCLO	7438 8292 10098	124.84 104.66 282.29	210.4 67.37 904.82	137.51 169.98 227.95	314.5 406.1 353.0	359.7 860.5 274.1
	平均值 SD	170.6 97.3	394.2 448.0	178.5 45.8	357.9 46.0	498.1 316.8

ANOVA P＝0.61 P＝0.43 P＝0.007 P＝0.57 P＝0.256

K-W P＝0.56 P＝0.84 P＝0.051 P＝0.079 P＝0.252

血清LH或FSH没有变化。总血清睾酮与LH的比率和总血清睾酮的曲线相同，显示不存在依赖性(数据未列出)。在12天的研究过程中体重也未发生改变。研究过程中接受恩氯米芬的组别血清催乳素(PRL)升高，暗示抗雌激素作用已经被部分描述(Ben-Jonathan andHnasko，2001)，且依据男性年龄、睾酮衰退和催乳素升高(Feldman 等人，2002)的事实，这种作用已经被预期。

2.对胆固醇的影响

使用恩氯米芬治疗易于降低血清胆固醇，珠氯米芬增加了相同的参数。初步分析显示胆固醇水平的变化不是统计学显著的，且这些变化在正常范围之内。由于所观察到的两种异构体在一小段时期内倾向于显示对胆固醇水平相反的作用，于是进行了进一步的分析。

详细的分析显示恩氯米芬引起血清胆固醇水平降低8％。相反，用珠氯米芬治疗导致血清胆固醇水平增加22％。使用氯米芬治疗引起血清胆固醇水平轻微升高。假使这两种异构体可选择地具有雌激素激动或拮抗活性，那么恩氯米芬和珠氯米芬对血清胆固醇水平的相反作用就不是意外的。这些结果表明恩氯米芬可用于治疗高胆固醇水平的患者。这些结果还表明，如果长期使用以增加血清睾酮水平的话，珠氯米芬对于血清胆固醇更加温和。

3.对临床化学参数的影响

通过ANOV或Kruskal-Wallis试验测定，对于任何试验参数在研究的开始时三个组别的每个参数的平均值没有差别。所有组别都显示各个参数的正常值，除了(1)血清钠；相关的计算参数，阴离子间隙，在整个试验中9只狒狒全部低；(2)血清葡萄糖；和(3)BUN，恩氯米芬组在第0天都高。治疗第12天和治疗之后7天(清除)，除了氯米芬和珠氯米芬组比恩氯米芬组的阴离子间隙低以外所有组别的任何参数都没有差别。与该组狒狒相关的血清钠和阴离子间隙的值似乎是异常的。

恩氯米芬和珠氯米芬对红细胞数和珠氯米芬对血细胞比容都有实质影响。所有的化合物在第0天或在结束时都降低了平均细胞血红蛋白浓度(MCHC)。平均细胞血红蛋白(MCH)没有改变，平均细胞容积(MCV)增加，降低是可预见的。尽管认为睾酮可能增加血细胞比容，但是仅仅珠氯米芬治疗没有显示统计学差异，这不增加总血清睾酮。显然，应当监测使用珠氯米芬的临床试验中的男性的红细胞数的特征。恩氯米芬将被预期有很少的作用。

虽然发现的值保留在正常范围内，但是12天恩氯米芬治疗对血小板有明显的影响。在此需要考虑的是雄性和雌性狒狒血小板计数的性二形性(雄性279只，雌性348只)。这可能是由荷尔蒙引起的。由于证明恩氯米芬组睾酮增加，在该组中血小板计数的减少对睾酮的影响可能是次要的。而且，使用恩氯米芬的治疗将血小板计数从第0天的水平推向其正常雄性水平，第0天水平是该组正常范围的高点。不必然能预期到恩氯米芬对血小板的有害作用。

所有试验的氯米芬对白细胞(WBC)数都有影响，最显著的是恩氯米芬增加淋巴细胞和嗜曙红细胞的数目。这些作用也不是像它们看起来的那么直接。似乎恩氯米芬对降低血液中粒细胞的百分比有很强的作用。7天清除期之后当该值降低到正常范围以下时作用是强烈的(该时间过程可以反映出需要改变WBC数目相对长的时间)。对于白细胞数目来说，狒狒间的性二形性很小，因此这些作用更像是化合物本身而不是睾酮的变化引起的。然而，当使用WBC计数观察所计算的粒细胞数时，我们没有发现由任何化合物引起的粒细胞计数的差别。同时，淋巴细胞层最令人感兴趣哦。使用恩氯米芬治疗增加了淋巴细胞计数和百分比。鉴于淋巴细胞百分比平均值保留在正常范围内，WBC计数倾向于增加，恩氯米芬对淋巴细胞计数的实际结果是增加了的。嗜曙红细胞的结果是类似的。明确暗示了用于治疗淋巴细胞低的人，例如HIV阳性的人。因为基于恩氯米芬不太可能使淋巴细胞减少的结果，因此可以确定的是其能用于AIDS人群。由于疾病的消耗性作用，这些个体通常使用易于升高睾酮的药物治疗。低肝和肾毒性和对胆固醇和磷脂的有利作用也是要用于HIV阳性患者的任何药物非常有利的属性，由于他们的疾病这些人已经缺乏免疫力。

氯米芬或珠氯米芬组血清葡萄糖的增加在正常范围之内。在第0天血清葡萄糖平均值高的情况下，恩氯米芬治疗没有使之增加。没有证据表明恩氯米芬将对血液葡萄糖有害。

通过AST和ALT酶判断显然对肝功能没有明显副作用。治疗后这些值倾向于降低。血清酶水平的增加将表明肝损伤。尽管治疗期间的差别并不是统计学上显著的，但对于氯米芬组来说在研究结束时ALT/SGPT降低。恩氯米芬和珠氯米芬组的变化都在正常范围之内。怀孕期AST降低；因此诸如珠氯米芬的雌激素激动剂对降低边缘AST水平的作用可能是合理的。碱性磷酸酶(ALP)也在肝脏中被发现，并且在不同疾病状态下升高。ALP降低进一步证明肝脏损伤。血清白蛋白没有发上变化，血清白蛋白也是肝脏产物。长时间期间内强力抑制血清白蛋白可以促成人体内游离血清类固醇激素水平，尽管性激素结合蛋白起着更加重要的作用。由于是底线，给予测定的参数，没有任何化合物与肝脏损伤相联系。

成骨细胞活性和骨疾病都伴随着高血清ALP值。珠氯米芬治疗之后ALP值没有升高，恩氯米芬治疗之后ALP值降低。这种倾向预示着与珠氯米芬相比，使用恩氯米芬结果更加良好。

尽管在氯米芬和恩氯米芬组的研究过程中BUN和BUN/肌酐都改变了，肌酐最终变化的缺乏反对了肾功能不全。肾小球过滤能力的丧失将导致BUN的增加。由于营养缺乏(不像控制环境中那样)或高液体摄取(可能伴随水肿)导致人体BUN减少。并且，尽管恩氯米芬组第0天和第12天之间血清睾酮增加，但是血清肌酐值没有差别，因此阻止了肌肉量在此短暂时间间隔内增加。

在整个研究过程中动物的血清钠水平都比参考值低。氯米芬和珠氯米芬组第12天的血清二氧化碳比参考值高。整个研究过程中所有动物的血清阴离子间隙较低，与钠的结果类似。恩氯米芬将该参数向正常值提升。整个所有治疗期间试验动物中检测的电解质平衡保持令人难以捉摸，但是可能是BUN结果暗示的相同液体紊乱现象的一部分。

前述结果表明在提高总血清睾酮方面恩氯米芬比氯米芬或珠氯米芬更加有效。珠氯米芬明显无效且该缺陷限制了氯米芬用于性腺机能减退的任何使用，特别是由于其半衰期较长，因此随着时间的流逝氯米芬的珠氯米芬成分将在循环中占主导地位。

与珠氯米芬相比，恩氯米芬似乎在所有方面都相对良好，并且经常甚至比氯米芬都好。当考虑恩氯米芬降低胆固醇的倾向时这是特别正确的，肝脏酶反对珠氯米芬的倾向提升了相同的参数。如果其可以显示出淋巴细胞的CD4+亚群没有被降低或升高，那么恩氯米芬增加淋巴细胞计数的令人惊奇的倾向可能对男性AIDS患者有用。

实施例2

使用反式-氯米芬和比值大于1的反式-氯

米芬和顺式-氯米芬的混合物增加男性睾酮水平的方法

给予反式-氯米芬之前，从雄性个体取血样，使用如Matsumoto，等人.Clin.Endocrinol.Metab.56；720(1983)(引入本文以作参考)描述的方法测量睾酮水平。还可如Tenover等人.J.Clin.Endocrinol.Metab.65：1118(1987)描述的方法测量游离或结合于睾酮的性激素结合蛋白(SHBG)，其中该方法描述了通过[³H]二氢睾酮饱和分析和放射性免疫测定来测定SHBG。还测量了非-SHBG-结合的睾酮水平(生物可获得的睾酮)，如根据Tenover等人.J.Clin.Endocrinol and Metab.65：1118(1987).See also Soderguard等人，J.Steroid Biochem 16：801(1982)。也参见Soderguard等人，J.Steroid Biochem 16：801(1982)，引入本文以作参考。

给予患者氯米芬1.5mg/kg的日剂量，其中反式-氯米芬与顺式-氯米芬的比率大于1。监测患者的睾酮水平以调节剂量和给药频率从而使患者达到治疗水平的睾酮。

实施例3

比较Androxal^TM和Androgel

在Advanced Biological Research，Inc.(ABR)Clinical ResearchCenter in Hackensack，New Jersey进行了安慰剂对照的研究，以在性腺机能减退衰退的男性中比较口服施用的Androxal^TM(反式-氯米芬)和Androgel

。Androgel

(Solvay Pharmaceuticals，Inc.)包括在经皮基质中施用外源性睾酮的乳剂。

该研究征集了62名睾酮水平低于300ng/dl(298-1034ng/dl正常)的性腺机能减退的男性，他们被随机分如6个不同的组，3个剂量的Androxal^TM(12.5mg、25mg和50mg)，安慰剂，高和低剂量的Androgel

。在第1和12天将临床期间的每一Androxal^TM和placebo组的半数男性都随机分群以测定Androxal^TM的药代动力学参数和睾酮的周期性变化。安慰剂和Androxal^TM的剂量都以双盲的方式施用。Androgel

乳剂以标签公开的方式施用。经历临床的半数Androgel组患者与研究中的其他患者相似。两周施药之后，跟随患者额外的7到10天以测定他们睾酮水平的状态。与安慰剂不同的Androxal^TM或Androgel

组研究中没有注意到副作用。

1.睾酮水平的影响

所有剂量的Androxal^TM或Androgel 与基线睾酮水平产生了统计学显著的睾酮变化(图5)。低、中和高剂量的Androxal^TM分别平均增加了169、247和294ng/dl，同时Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000012

5G，认可的最低剂量，和Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000013

10G，认可的最高剂量，与基线产生的变化为212和363ng/dl。这些值与使用Androxal^TM获得的变化是统计学无差别的。不能显示Androxal^TM和Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000014

的差别似乎是由使用Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000015

时产生的高度变化的结果引起的。例如，50mg剂量的Androxal^TM15天后将平均总睾酮升至589±172ng/dl，变异系数(CV)为29％，相似于安慰剂组(36％)。另一方面，Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000016

5G和10G分别产生了平均总睾酮值473±289ng/dl和608±323ng/dl，变异系数61％和53％。

Androxal^TM治疗14天后，所有的剂量都与相似于安慰剂组的总睾酮白天模式相关，即早晨高峰，正午谷和晚间升高。不限于理论，该模式可能归因于Androxal^TM的作用方式，这似乎通过如下所示在下丘脑-垂体轴作用而被调节。男性对Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000017

的白天模式几乎是无效的。然而，Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000018

引起的总睾酮的峰值与给药剂量相关，通常超过1,034ng/dl的正常高水平。某些个体对Androgel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D000019

10G能获得超过2500ng/dl的总睾酮高峰水平。

有趣的是，使用Androxal^TM治疗后在随访期(即口服治疗结束后7-10天)血清总睾酮水平仍然高。除此之外，与高剂量的AndroGel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D0000110

1％相比，最高剂量Androxal^TM时的血清总睾酮水平明显较高(p＝0.017，t-test)。

2.对LH和FSH水平的影响

用Androxal^TM治疗产生了性腺机能减退男性患者血清LH水平统计学显著的升高(图6)。与总血清睾酮一样，血清LH水平在随访期(即每日口服治疗停止后7-10天)存在意外的延续，对于3种剂量的Androxal^TM其水平仍然高。通过比较，用AndroGel

Figure DEST_PATH_G200680008984120080108D0000111

治疗最初降低LH，停止后出现了向预治疗水平的明显反弹。

用Androxal^TM治疗也产生了性腺机能减退男性患者血清FSH水平统计学上的增加(图7)。增加FSH的模式相似于LH中看到的那样，即，所有剂量的Androxal^TM都升高了血清 FSH，血清FSH在随访期仍然很高，而AndroGel

抑制了血清FSH水平，治疗停止使得血清FSH向更加相似于预治疗的水平反弹。

3.对其它临床化学参数的影响

还测量了对血清二羟基睾酮(DHT)水平的影响。服用Androxal^TM 的男性产生了从DHT到总睾酮的有利转变。例如与安慰剂组1.07的比率相比，使用50mg剂量Androxal^TM的男性产生了比率为0.83的DHT/TT。通过对比DHT/TT比率，每个Androgel

组都＞1.5。该结果表明使用Androgel的男性DHT比总睾酮增加的快。因此，在Androgel

组男性中，相对于睾酮正常水平的DHT被破坏。

临床化学参数的结果也显示，意想不到的是，使用Androxal^TM的男性产生了甘油三酯非剂量依赖性地减少。2周治疗后甘油三酯平均减少了19.1％。相比安慰剂组降低了5.9％，Androgel

5G和10G分别增加了0.3％和22％。

4.讨论

基于该研究，对于Androxal^TM作为有效疗法我们推断出许多潜在的益处。Androxal^TM以高度一致的方式将总睾酮升高至正常范围，而血清睾酮没有异常的高峰。除此之外，使用反式氯米芬来治疗继发性性腺机能减退的男性提供了新的途径，这有可能可以抵消外源性治疗如Androgel的一个主要副作用。外源性治疗提供了负反馈从而减少FSH和LH的产生。FSH是必要的生殖激素，在雄性动物中刺激精子产生。长期暴露于外源性睾酮，因为其对FSH生成的影响，引起精子合成的减少。导致了由于精子数量引起的暂时不育症的可能，因此结果是睾丸皱缩，因为睾丸的体积与输精管内精子发生的水平相关。FSH水平的升高也表明Androxal^TM可用于治疗男性不育症，包括性腺机能减退的男性。而且，Androxal^TM对血清睾酮、FSH和LH水平的长时间影响显示可以变化的剂量或按照时序安排施用Androxal^TM，或许允许非每日或偶尔式的治疗。

Claims

1.包含0％到29％w/w的顺式-氯米芬和100％到71％反式-氯米芬或其药学可接受盐的组合物在制备以5到100mg反式-氯米芬的单剂量给予雄性患者以治疗良性前列腺肥大或前列腺癌的药物中的应用。

2.根据权利要求1的应用，其中，组合物由反式-氯米芬组成。

3.根据权利要求1的应用，其中，所述剂量为12.5到50mg反式-氯米芬。

4.根据权利要求1的应用，其中，所述剂量为12.5、25或50mg反式-氯米芬。

5.根据权利要求1的应用，其中，所述药物是每周给予的。

6.根据权利要求1的应用，其中，所述药物是每两周给予的。

7.根据权利要求1的应用，其中，所述药物用于治疗良性前列腺肥大。

8.根据权利要求1的应用，其中所述药物每3-30天给予一次。