Verfahren zur Herstellung von N'-[N-(2-Amino-4-oxy-6-pteridyl-methyl)-N-(p-toluol-sulfonyl)- p-amino-benzoyl] -l-glutaminsäure-diäthylester. Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von N'-[N-(2 Amino-4-oxy-6-pteridyl-methyl)-N-(p-toluol- sulfonyl) -p - amino -benzoyl] -1-glutaminsäur e- diäthylester der Formel
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Gemäss der Erfindung wird dieser Ester dadurch erhalten,
dass ein substituierter 1-GlutaminsäLire-diäthylester der Formel
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mit 2,4,5-Triamino-6-oxy-pyrimidin konden siert wird.
Der auf diese Weise erhaltene Ester ist als Zwischenprodukt für die Synthese von Folsäure verwendbar. In den Formeln bezeichnen N' das Stick stoffatom des Glutaminsäurerestes und N das Stickstoffatom des p-Amino-benzoe-säurerestes.
Der N'-[N-(2-Amino-4-oxy-pteridyl-me- thyl) -N- (p-toluol-sulfonyl )-p-amino-benzoyl] - 1-glutaminsäure-diäthylester lässt sich durch Hydrolyse der Äthylestergruppen mit Leich tigkeit in die entsprechende Säure und die letztere durch Abspaltung des p-Toluolsulfo- nylrestes, beispielsweise mittels Bromwasser stoff und einer das Brom bindenden Substanz in Gegenwart einer aliphatischen Carbonsäure, mit Leichtigkeit in eine Verbindung überfüh ren,,
die sich als identisch mit dem Lacto- bacillus-easei-Faktor bzw. dem Vitamin B, der Leber (Folsäure) erwiesen hat.
Die als Ausgangsstoffe in Betracht fallen den Ester können z. B. aus den entsprechen den N-(3,3-Dialkoxy-2-oxy-propyl)-N-(p-tohiol- sulfonyl)-p-amino-benzoesäure-Verbindungen durch Oxydation erhalten werden, indem man die Oxyverbindung und Chromsäureanhydrid in Eisessig löst und das Gemisch während mehrerer Stunden, beispielsweise bei Raum , temperatur, schüttelt. Das Reaktionsgemisch besteht dann im allgemeinen aus einem Ge misch flüssiger und fester Substanzen, aus wel chem die Ketopropylverbindilng nach verschie denen Methoden isoliert werden kann.
Das rohe Produkt kann ohne weitere Reinigung für die Kondensation mit 2,4,5-Triamino-6- oxy-pyrimidin verwendet werden.
Die Kondensation des getoesters mit dem 2,4,5-Triamino-6-oxy-pyrimidin kann Beispiels weise so durchgeführt werden, dass man eine Lösung der Reaktionskomponenten in Äthanol, vorzugsweise bei einem pl, von 4, unter Rück fluss sieden lässt. Man 'kann die Reaktions komponenten aber auch in wässriger oder Eis essiglösung, beispielsweise bei einer zwischen Raumtemperatur und etwa 120 C liegenden Temperatur während einer Dauer von wenigen Minuten bis zu einigen Stunden, erhitzen.
Das Reaktionsprodukt kann durch Abdestillieren des Lösungsmittels oder durch Verdünnen des Gemisches mit Wasser und Abtrennung des unlöslichen Materials isoliert werden. Das er haltene Produkt weist die Form eines trocke nen Pulvers auf, welches praktisch nicht kri stallin ist.
<I>Beispiel:</I> Eine aus 150 mg 2,4,5-Triamino - 6 - oxy- pyrimidin - dihydro - chlorid, 115 mg Natrium- acetat, 2,5 em3 Wasser, 20 em3 Eisessig und 415 mg N'-[N-(3,3-Diäthoxy-2-keto-propyl) N-(p-toluol-sulfonyl)-p-amino-benzoyl]-1-glut- aminsäure-diäthylester bestehende Lösung wird während 45 Minuten im Dunkeln in einer Stickstoffatmosphäre bei Raumtemperatur und dann während 30 Minuten bei 70 C gerührt.
Man destilliert das Lösungsmittel im Vakuum ab und erhält dabei einen Rückstand, der grösstenteils aLis N'-[N-(2-Amino-4-oxy-6-pteri- dyl-methyl)-N-(p-toluol-sulfonyl) -p-amino-ben- zoyl]-1-ghitaminsäiire-diäthylester besteht.
Dieser Ester zersetzt sich oberhalb 200 C ohne zu schmelzen und weist die folgenden physikalischen Eigenschaften auf Ei % (in 0,1n wässrigemNa0H) 120 bei 365 my. 404 bei 216 nu 532 bei 256 mp.
Der als Ausgangsmaterial verwendete N'- [N- (3,3-Diäthoxy-2-keto-propyl )-N- (p-toluol- sulfonyl)-p-amino-benzoyl] -1-gIütaminsäure- diäthylester kann wie folgt hergestellt werden:
1,9 g des Diäthylacetals von 2,3-Oxydo-pro- panal und 5 Tropfen Pyridin werden bei 140 C zu 5 g geschmolzenem N'-[N-(p-Toluol- sulfonyl)-p-amino-benzoyl] -1-glutaminsäLire- diäthylester gegeben. Das Gemisch wird wäh rend etwa 30 Minuten bei 145-150 C ge rührt.
Die stark gefärbte Masse besteht gröss tenteils aus NI- [N-3,3-Diäthoxy-2-oxy-propyl)- N - (p-toluol-sulfonyl )- p-amino-benzoyl]-1-glut- aminsäure-diäthylester. Man löst den auf diese Weise erhaltenen Ester in 35 em3 Eisessig und versetzt die Lösung mit 1,7 g Chromsäure- anhydrid. Das Gemisch wird während etwa 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann filtriert.
Das Filtrat wird mit Wasser verdünnt und mit einem Gemisch von Benzol und Äthylessigester extrahiert. Die organische Schicht wird abgetrennt, mit Wasser säurefrei gewaschen und über wasserfreiem Natrium sulfat getrocknet. Man destilliert hierauf das Lösungsmittel im Vakuum ab und erhält dabei 5,9 g N'-[N-(3,3-Diäthoxy-2-keto-propyl)-N-(p- toluol-siilf onyl) - p - amino-benzoyl ] -1-glutamin- säure-Diäthylester in Form eines gelben Sirups.
Process for the preparation of N '- [N- (2-amino-4-oxy-6-pteridyl-methyl) -N- (p-toluene-sulfonyl) -p-amino-benzoyl] -l-glutamic acid diethyl ester. The present invention relates to a process for the preparation of N '- [N- (2-amino-4-oxy-6-pteridyl-methyl) -N- (p-toluenesulfonyl) -p-amino-benzoyl] -1 -glutamic acid diethyl ester of the formula
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According to the invention, this ester is obtained by
that a substituted 1-GlutaminsäLire diethyl ester of the formula
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is condensed with 2,4,5-triamino-6-oxy-pyrimidine.
The ester obtained in this way can be used as an intermediate for the synthesis of folic acid. In the formulas, N 'denotes the nitrogen atom of the glutamic acid residue and N denotes the nitrogen atom of the p-amino-benzoic acid residue.
The N '- [N- (2-amino-4-oxy-pteridyl-methyl) -N- (p-toluene-sulfonyl) -p-aminobenzoyl] -1-glutamic acid diethyl ester can be hydrolyzed Ethyl ester groups can easily be converted into the corresponding acid and the latter can be easily converted into a compound by splitting off the p-toluenesulfonyl radical, for example by means of hydrogen bromine and a substance that binds the bromine in the presence of an aliphatic carboxylic acid.
which has proven to be identical to the Lactobacillus easei factor or vitamin B, the liver (folic acid).
The starting materials that can be considered the ester can, for. B. from the corresponding to the N- (3,3-dialkoxy-2-oxy-propyl) -N- (p-tohiolsulfonyl) -p-aminobenzoic acid compounds can be obtained by oxidation by adding the oxy compound and chromic anhydride Dissolve in glacial acetic acid and shake the mixture for several hours, for example at room temperature. The reaction mixture then generally consists of a mixture of liquid and solid substances from which the Ketopropylverbindilng can be isolated by various methods.
The crude product can be used for the condensation with 2,4,5-triamino-6-oxy-pyrimidine without further purification.
The condensation of the getoester with the 2,4,5-triamino-6-oxy-pyrimidine can for example be carried out in such a way that a solution of the reaction components in ethanol, preferably at a pI of 4, is allowed to reflux. The reaction components can also be heated in aqueous or glacial acetic acid solution, for example at a temperature between room temperature and about 120 ° C. for a period of a few minutes to a few hours.
The reaction product can be isolated by distilling off the solvent or by diluting the mixture with water and separating off the insoluble material. The product he obtained is in the form of a dry powder which is practically non-crystalline.
<I> Example: </I> One of 150 mg 2,4,5-triamino-6-oxy-pyrimidine-dihydrochloride, 115 mg sodium acetate, 2.5 em3 water, 20 em3 glacial acetic acid and 415 mg N '- [N- (3,3-diethoxy-2-keto-propyl) N- (p-toluenesulfonyl) -p-aminobenzoyl] -1-glutamic acid diethyl ester solution becomes in the dark for 45 minutes stirred in a nitrogen atmosphere at room temperature and then at 70 ° C. for 30 minutes.
The solvent is distilled off in vacuo and a residue is obtained, the majority of which is N '- [N- (2-amino-4-oxy-6-pteridyl-methyl) -N- (p-toluenesulfonyl) - p-amino-benzoyl] -1-ghitaminic acid diethyl ester.
This ester decomposes above 200 C without melting and has the following physical properties: Egg% (in 0.1N aqueous NaOH) 120 at 365 my. 404 at 216 nu 532 at 256 mp.
The diethyl N'- [N- (3,3-diethoxy-2-keto-propyl) -N- (p-toluenesulfonyl) -p-aminobenzoyl] -1-glutamic acid diethyl ester used as starting material can be prepared as follows will:
1.9 g of the diethyl acetal of 2,3-oxydopropanal and 5 drops of pyridine become 5 g of molten N '- [N- (p-toluenesulfonyl) -p-aminobenzoyl] -1 at 140 ° C. -glutaminsäLire- diethyl ester given. The mixture is stirred at 145-150 ° C. for about 30 minutes.
The strongly colored mass consists largely of NI- [N-3,3-diethoxy-2-oxy-propyl) -N- (p-toluene-sulfonyl) -p-amino-benzoyl] -1-glutamic acid diethyl ester . The ester obtained in this way is dissolved in 35 cubic meters of glacial acetic acid and 1.7 g of chromic anhydride are added to the solution. The mixture is stirred for about 2 hours at room temperature and then filtered.
The filtrate is diluted with water and extracted with a mixture of benzene and ethyl acetate. The organic layer is separated, washed acid-free with water and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent is then distilled off in vacuo and 5.9 g of N '- [N- (3,3-diethoxy-2-keto-propyl) -N- (p-toluene-silfonyl) -p-amino- benzoyl] -1-glutamic acid diethyl ester in the form of a yellow syrup.