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BR112021010351A2 - Análogos de ciclopentil nucleosídeos como antivirais - Google Patents

Análogos de ciclopentil nucleosídeos como antivirais Download PDF

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BR112021010351A2
BR112021010351A2 BR112021010351-1A BR112021010351A BR112021010351A2 BR 112021010351 A2 BR112021010351 A2 BR 112021010351A2 BR 112021010351 A BR112021010351 A BR 112021010351A BR 112021010351 A2 BR112021010351 A2 BR 112021010351A2
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hydrogen
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alkyl
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BR112021010351-1A
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English (en)
Inventor
Minghong Zhong
Guangyi Wang
Original Assignee
Janssen Biopharma, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by Janssen Biopharma, Inc. filed Critical Janssen Biopharma, Inc.
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Abstract

análogos de ciclopentil nucleosídeos como antivirais. a presente invenção refere-se aos análogos de ciclopentil nucleosídeo, composições farmacêuticas que incluem um ou mais análogos de ciclopentil nucleosídeo e métodos de uso dos mesmos para tratar hbv, hdv e/ou hiv.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANÁLOGOS DE CICLOPENTIL NUCLEOSÍDEOS COMO ANTIVIRAIS". Campo da Invenção
[0001] O presente pedido se refere aos campos de química, bioquímica e medicina. Mais particularmente, são aqui revelados análogos de ciclopentil nucleosídeo, composições farmacêuticas que incluem um ou mais análogos de ciclopentil nucleosídeo e métodos de sintetizar os mesmos. Também são descritos aqui métodos de tratamento de doenças e/ou condições virais com um análogo de ciclopentil nucleosídeo, sozinho ou em terapia de combinação com um ou mais outros agentes. Descrição
[0002] Os análogos de nucleosídeo são uma classe de compostos que mostraram exercer atividade antiviral tanto in vitro quanto in vivo e, portanto, foram a matéria de ampla pesquisa para o tratamento de infecções virais. Os análogos de nucleosídeo podem ser convertidos por enzimas hospedeiras ou virais em suas respectivas porções ativas que, por sua vez, podem inibir as polimerases envolvidas na proliferação viral ou celular. A ativação ocorre através de uma variedade de mecanismos, como a adição de um ou mais grupos fosfato e, ou em combinação com outros processos metabólicos.
SUMÁRIO
[0003] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um composto da Fórmula (I), ou a um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outras modalidades descritas na presente invenção se referem a uma composição farmacêutica que inclui um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0004] Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de tratamento de uma infecção causada por HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo de infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV.
[0005] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica.
[0006] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de inibição da replicação de HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medicamento para inibição da replicação do HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), para inibir a replicação de HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica.
[0007] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo da infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HIV. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HIV.
[0008] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por ou HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o ou HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica.
[0009] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de inibição da replicação do HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medicamento para inibir a replicação do HIV, que pode incluir colocar uma célula infectada com HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), para inibir a replicação do HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0010] A Figura 1 mostra exemplos de inibidores da transcriptase reversa não análogos de nucleosídeo (ITRNN's).
[0011] A Figura 2 mostra exemplos de inibidores da transcriptase reversa análogos de nucleosídeo (ITRN 's).
[0012] A Figura 3A mostra exemplos de inibidores da protease de HIV. A Figura 3B mostra inibidores adicionais da protease de HIV, HBV e/ou HDV.
[0013] A Figura 4A mostra inibidores de fusão/entrada do HIV. A Figura 4B mostra inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV.
[0014] A Figura 5 mostra o inibidor de transferência da fita de integrase do HIV (INSTI).
[0015] A Figura 6A mostra compostos antivirais de HIV adicionais. A Figura 6B mostra compostos antivirais adicionais.
[0016] A Figura 7 mostra exemplos de inibidores da maturação viral do HIV, HBV e/ou HDV.
[0017] A Figura 8 mostra exemplos de moduladores de montagem de capsídeo de HIV, HBV e/ou HDV.
[0018] A Figura 9 mostra exemplos de agonistas do receptor X de farnesoide (FXR) anti-HBV e/ou anti-HDV.
[0019] A Figura 10 mostra exemplos de inibidores do fator de necrose tumoral (TNF)/ciclofilina anti-HBV e/ou anti-HDV.
[0020] A Figura 11 mostra exemplos de agonistas do receptor do tipo Toll (TLR) anti-HBV e/ou anti-HDV.
[0021] A Figura 12 mostra exemplos de inibidores da polimerase de HBV e/ou HDV.
[0022] A Figura 13 mostra exemplos de vacinas contra HBV e/ou HDV.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[0023] A família Hepadnavirus é uma família de vírus envelopados que utilizam genomas de DNA circulares parcialmente de fita dupla e parcialmente de fita simples. Esta família inclui um grupo de vírus que causa doença hepática em vários organismos, e é dividida entre dois gêneros: os Avihepadnavírus, que afeta as aves, e os Orthohepadnavírus, que afeta os mamíferos. A hepatite B é um agente causador da hepatite aguda/crônica, e tem um DNA circular de 3,2 kb de fita parcialmente dupla a partir do qual quatro proteínas são sintetizadas: a do núcleo, a da polimerase, a do antígeno de superfície e a do produto do gene X.
[0024] Durante a infecção por hepatite, os vírions do HBV entram nos hepatócitos através de um processo mediado por receptor. A replicação viral ocorre através de um mecanismo de múltiplas etapas. Primeiro, o genoma de DNA circular parcialmente de fita dupla é transcrito pelo maquinário da célula hospedeira e, então, o transcrito de RNA completo é embalado em procapsídeos virais. A transcrição é, então, transcrita reversa dentro do capsídeo pela proteína P, utilizando a atividade de iniciação intrínseca da proteína P. O componente de RNA é, então, degradado por uma atividade intrínseca da RNase H da proteína P, para produzir um DNA circular de fita negativa completo. Finalmente, um DNA de fita positiva parcial subsequente é sintetizado para produzir o conjunto do genoma viral final.
[0025] Os capsídeos virais também podem liberar o genoma circular parcialmente de fita dupla no núcleo das células hospedeiras, onde a síntese da fita complementar à região de fita simples é concluída e as extremidades virais restantes são ligadas para formar o DNA circular covalentemente fechado (cccDNA), que persiste nos núcleos da célula hospedeira e pode ser passado para as células filhas durante a divisão celular. A presença do cccDNA dá origem ao risco de reemergência viral ao longo de toda a vida do organismo hospedeiro. Adicionalmente, os carreadores de HBV podem transmitir a doença por muitos anos. Os indivíduos imunossuprimidos estão especialmente em risco do estabelecimento de infecção por HBV persistente (crônica) ou latente.
[0026] O HDV é um satélite subviral de HBV e, dessa forma, pode se propagar apenas na presença de HBV. Consulte, por exemplo, Shieh, et al., Nature, 329 (6137), páginas 343-346 (1987). A replicação do genoma de HDV de RNA circular de fita simples produz duas formas de uma proteína de ligação ao RNA conhecida como os antígenos delta longo e curto (Ag). Após entrar em um hepatócito, o vírus torna-se não revestido e o nucleocapsídeo é translocado para o núcleo. O vírus, então, usa as RNA polimerases da célula hospedeira, que tratam o genoma de RNA como dsDNA devido à sua estrutura terciária. Três formas de RNA são produzidas durante a replicação: RNA genômico circular, RNA antigenômico complementar circular e um RNA antigenômico poliadenilado linear.
[0027] O HBV e o HDV são transmitidos principalmente pelo sangue ou por contato mucoso, incluindo por atividade sexual. A infecção com HBV e/ou HDV leva a um amplo espectro de doenças hepáticas, variando desde hepatite aguda (incluindo insuficiência hepática fulminante) a hepatite crônica, cirrose e carcinoma hepatocelular. A infecção aguda por HBV e/ou HDV pode ser assintomática, ou apresentar efeitos agudos sintomáticos, incluindo febre, dores de cabeça, dores de articulação e diarreia, levando aos sintomas mais graves de aumento do fígado e/ou icterícia associados a hiperbilirrubinemia conjugada e colestase. A maioria dos adultos infectados com o vírus se recupera, mas 5% a 10% não conseguem eliminar o vírus e se tornam cronicamente infectados. Muitos indivíduos infectados cronicamente têm doença hepática branda persistente (HBV e/ou HDV latente), apresentando agregados linfoides e danos ao duto biliar, esteatose e/ou fibrose aumentada que pode levar à cirrose. Outros com infecção crônica por HBV e/ou HDV desenvolvem a doença ativa, o que pode levar a condições de risco à vida, como cirrose e câncer de fígado. Alguns indivíduos com HBV e/ou HDV latentes podem recidivar e desenvolver hepatite aguda.
[0028] O HIV é um lentivírus que pertence à família Retroviridae. O HIV é um vírus envelopado com um núcleo que consiste em duas cópias de um RNA de fita simples positiva. O HIV depende da transcriptase reversa para transcrição reversa de RNA no DNA, que é incorporado ao genoma hospedeiro como um provirus. O HIV usa a glicoproteína viral 120 (gp 120) para se ligar e infectar os linfócitos T CD4+. Um aumento na carga plasmática viral corresponde a uma diminuição na contagem de linfócitos T CD4+. Os níveis normais de linfócitos T CD4+ são de cerca de 500 a 1.200 células/mL. Dois tipos de HIV foram caracterizados: HIV-1 e HIV-2. O HIV-1 é mais virulento e mais infeccioso, e tem uma prevalência global, enquanto o HIV-2 é menos virulento e é geograficamente limitado. Definições
[0029] A menos que definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados na presente invenção têm o mesmo significado, conforme é comumente compreendido pelo versado na técnica. Todas as Patentes, Pedidos, Pedidos Publicados e outras publicações aqui mencionadas são incorporadas, a título de referência, em sua totalidade, exceto se for declarado em contrário. No caso de haver uma pluralidade de definições para um termo no presente documento, aqueles na sessão prevalecem, exceto se for declarado em contrário.
[0030] Como usado aqui, qualquer(quaisquer) é y grupo(s) "R" como, sem limitação, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, R22 e R23 representam substituintes que podem ser fixados ao átomo indicado. Um grupo R pode ser substituído ou não substituído. Se dois grupos "R" forem descritos como sendo "considerados juntos", os grupos R e os átomos aos quais eles estão ligados podem formar uma cicloalquila, uma cicloalquenila, uma arila, uma heteroarila ou uma heterociclila. Por exemplo, sem limitação, se Ra e Rb de um grupo NRa Rb forem indicados como sendo "considerados juntos," isto significa que eles são ligados covalentemente um ou ao outro para formar um anel: Ra
N Rb
[0031] Além disso, se dois grupos "R" forem descritos como sendo "considerados juntos" com o(s) átomo(s) ao(s) qual(is) ele(s) está(ão) ligado(s) para formar um anel como uma alternativa, os grupos R não se limitam às variáveis ou aos substituintes definidos anteriormente, quando os grupos R não são considerados juntos.
[0032] Sempre que um grupo for descrito como sendo "opcionalmente substituído", este grupo pode ser não substituído ou substituído com um ou mais dos substituintes indicados. De modo semelhante, quando um grupo é descrito como sendo "não substituído ou substituído", se substituído, o(s) substituinte(s) pode(m) ser selecionado(s) dentre um ou mais dos substituintes indicados. Se nenhum substituinte for indicado, entende-se que o grupo "opcionalmente substituído" ou "substituído" indicado pode ser substituído com um ou mais grupo(s) selecionado(s) individualmente e independentemente a partir de alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), heteroaril(alquila), heterociclil(alquila), hidroxila, alcoxila, acila, ciano, halogênio, tiocarbonila, O-carbamila, N-carbamila, O-tiocarbamila, N-
tiocarbamila, C-amido, N-amido, S-sulfonamido, N-sulfonamido, C- carboxila, O-carboxila, isocianato, tiocianato, isotiocianato, nitro, silila, sulfenila, sulfinila, sulfonila, haloalquila, haloalcoxila, tri- halometanossulfonila, tri-halometanossulfonamido, um amino, um grupo amino monossubstituído e um grupo amino dissubstituído. O número e o tipo de átomos presentes em cada um dos grupos deste parágrafo são conforme aqui definidos, exceto onde especificado em contrário.
[0033] Conforme utilizado aqui, "Ca a Cb" em que "a" e "b" são números inteiros, se refere ao número de átomos de carbono em um grupo alquila, alquenila ou alquinila, ou ao número de átomos de carbono no anel de um grupo cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila ou heterociclila. Ou seja, a alquila, alquenila, alquinila, o(s) anel(anéis) da cicloalquila, o(s) anel(anéis) da cicloalquenila, o(s) anel(anéis) da arila, o(s) anel(anéis) da heteroarila ou o(s) anel(anéis) da heteroaliciclila pode(m) conter de "a" a "b", inclusive, átomos de carbono. Dessa forma, por exemplo, um grupo "alquila C1 a C4" se refere a todos os grupos alquila tendo de 1 a 4 carbonos, isto é, CH3-, CH3CH2-, CH3CH2CH2-, (CH3)2CH-, CH3CH2CH2CH2-, CH3CH2CH(CH3)- e (CH3)3C-. Se nenhum "a" e "b" for designado com relação a um grupo alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila ou heterociclila, assume-se o intervalo mais amplo descrito nestas definições.
[0034] Como usado aqui, "alquila" se refere a uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada que compreende um grupo hidrocarboneto completamente saturado (sem ligações duplas ou triplas). O grupo alquila pode ter 1 a 20 átomos de carbono (sempre que ele aparecer aqui, um intervalo numérico como "1 a 20" se refere a cada número inteiro no dado intervalo; por exemplo, "1 a 20 átomos de carbono" significa que o grupo alquila pode consistir em 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono etc., até e incluindo
20 átomos de carbono, embora a presente definição também abranja a ocorrência do termo "alquila" onde nenhuma faixa numérica é designada). O grupo alquila pode também ser uma alquila de tamanho médio tendo 1 a 10 átomos de carbono. O grupo alquila poderia também ser uma alquila inferior com 1 a 6 átomos de carbono. O grupo alquila dos compostos pode ser designado como "alquila C1-C4" ou designações similares. Somente a título de exemplo, "alquila C1-C4" indica que há um a quatro átomos de carbono na cadeia de alquila, isto é, a cadeia de alquila é selecionada dentre metila, etila, propila, iso- propila, n-butila, iso-butila, sec-butila, e t-butila. Os grupos alquila típicos incluem, mas não são limitados a, metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, butila terciária, pentila e hexila. O grupo alquila pode ser substituído ou não substituído.
[0035] Como usado aqui, "alquenila" se refere a um grupo alquila que contém na cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada uma ou mais ligações duplas. Uma alquenila pode incluir de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono ou de 2 a 6 átomos de carbono. Exemplos de grupos alquenila incluem alenila, vinilmetila e etenila. Um grupo alquenila pode ser não substituído ou substituído.
[0036] Como usado aqui, "alquinila" se refere a um grupo alquila que contém na cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada uma ou mais ligações triplas. Uma alquinila pode incluir de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono ou de 2 a 6 átomos de carbono. Exemplos de alquinilas incluem etinila e propinila. Um grupo alquinila pode ser não substituído ou substituído.
[0037] Como usado aqui, "cicloalquila" se refere a um sistema de anel hidrocarboneto completamente saturado (sem ligações duplas ou triplas) monocíclico ou multicíclico. Quando composto de dois ou mais anéis, os anéis podem ser unidos juntos de uma forma fusionada. Por exemplo, o grupo cicloalquila pode conter de 3 a 10 átomos no anel, de
3 a 8 átomos no(s) anel(anéis) ou de 3 a 6 átomos no(s) anel(anéis). Um grupo cicloalquila pode ser não substituído ou substituído. Os grupos cicloalquila típicos incluem, mas não são limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila e ciclo- octila.
[0038] Como usado aqui, "cicloalquenila" se refere a um sistema de anel hidrocarboneto mono- ou multicíclico que contém uma ou mais ligações duplas em ao menos um anel; embora, se houver mais de uma, as ligações duplas não podem formar um sistema pi-elétron completamente deslocalizado por todos os anéis (de outro modo, o grupo seria "arila," conforme definido aqui). Quando composto de dois ou mais anéis, os anéis podem ser conectados juntos de uma forma fusionada. Os grupos cicloalquenila podem conter 3 a 10 átomos no(s) anel(anéis) ou 3 a 8 átomos no(s) anel(anéis). Um grupo cicloalquenila pode ser não substituído ou substituído.
[0039] Como usado aqui, "arila" se refere a um sistema de anel aromático carbocíclico (todo de carbono) monocíclico ou multicíclico (incluindo sistemas de anéis fusionados nos quais dois anéis carbocíclicos compartilham uma ligação química) que tem um sistema pi-elétron completamente deslocalizado por todos os anéis. O número de átomos de carbono em um grupo arila pode variar. Por exemplo, o grupo arila pode ser um grupo arila C6-C14 um grupo arila C6-C10 ou um grupo arila C6. Exemplos de grupos arila incluem, mas não se limitam a, fenila, naftila e azuleno. Um grupo arila pode ser substituído ou não substituído.
[0040] Como usado aqui, "heteroarila" se refere a um sistema de anel aromático monocíclico, bicíclico e tricíclico (um sistema de anel com um sistema pi-elétron completamente deslocalizado) que contém um ou mais heteroátomos (por exemplo, 1 a 5 heteroátomos), isto é, um elemento além de carbono, incluindo, mas não se limitando a,
nitrogênio, oxigênio e enxofre. O número de átomos no(s) anel(anéis) de um grupo heteroarila pode variar. Por exemplo, o grupo heteroarila pode conter 4 a 14 átomos no(s) anel(anéis), 5 a 10 átomos no(s) anel(anéis) ou 5 a 6 átomos no(s) anel(anéis). Além disso, o termo "heteroarila" inclui sistemas de anéis fusionados nos quais dois anéis, como ao menos um anel arila e ao menos um anel heteroarila, ou ao menos dois anéis heteroarila, compartilham ao menos uma ligação química. Exemplos de anéis heteroarila incluem, mas não se limitam a furano, furazano, tiofeno, benzotiofeno, ftalazina, pirrol, oxazol, benzoxazol, 1,2,3-oxadiazol, 1,2,4-oxadiazol, tiazol, 1,2,3-tiadiazol, 1,2,4-tiadiazol, benzotiazol, imidazol, benzimidazol, indol, indazol, pirazol, benzopirazol, isoxazol, benzoisoxazol, isotiazol, triazol, benzotriazol, tiadiazol, tetrazol, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, purina, pteridina, quinolina, isoquinolina, quinazolina, quinoxalina, cinolina e triazina. Um grupo heteroarila pode ser substituído ou não substituído.
[0041] Como usado aqui, "heterociclila" ou "heteroaliciclila" se refere a um sistema de anel monocíclico, bicíclico e tricíclico de três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez, até 18 membros, sendo que os átomos de carbono junto com 1 a 5 heteroátomos constituem o dito sistema de anel. Um heterociclo pode conter, opcionalmente, uma ou mais ligações insaturadas situadas de forma tal, entretanto, que um sistema pi-elétron completamente deslocalizado não ocorre por todos os anéis. O(s) heteroátomo(s) é/são um elemento diferente carbono, incluindo, mas não se limitando a oxigênio, enxofre e nitrogênio. Um heterociclo pode conter, ainda, uma ou mais funcionalidades carbonila ou tiocarbonila de modo que a definição inclui sistemas oxo e sistemas tio como lactamas, lactonas, imidas cíclicas, tioimidas cíclicas e carbamatos cíclicos. Quando composto de dois ou mais anéis, os anéis podem ser unidos juntos de uma forma fusionada. Adicionalmente,
quaisquer nitrogênios em um heteroalicíclico podem ser quaternizados. Os grupos heterociclila ou heteroalicíclicos podem ser não substituídos ou substituídos. Exemplos destes grupos "heterociclila" ou "heteroaliciclila" incluem, mas não se limitam a 1,3-dioxina, 1,3-dioxano, 1,4-dioxano, 1,2-dioxolano, 1,3-dioxolano, 1,4-dioxolano, 1,3-oxatiano, 1,4-oxatina, 1,3-oxatiolano, 1,3-ditiol, 1,3-ditiolano, 1,4-oxatiano, tetra- hidro-1,4-tiazina, 2H-1,2-oxazina, maleimida, succinimida, ácido barbitúrico, ácido tiobarbitúrico, dioxopiperazina, hidantoína, di- hidrouracila, trioxano, hexa-hidro-1,3,5-triazina, imidazolina, imidazolidina, isoxazolina, isoxazolidina, oxazolina, oxazolidina, oxazolidinona, tiazolina, tiazolidina, morfolina, oxirano, N-óxido de piperidina, piperidina, piperazina, pirrolidina, pirrolidona, pirrolidiona, 4- piperidona, pirazolina, pirazolidina, 2-oxopirrolidina, tetra-hidropirano, 4H-pirano, tetra-hidrotiopirano, tiamorfolina, sulfóxido de tiamorfolina, tiamorfolina sulfona e seus análogos benzofundidos (por exemplo, benzimidazolidinona, tetra-hidroquinolina e 3,4-metilenodioxifenila).
[0042] Como usado aqui, "aril(alquila)" se refere a um grupo arila conectado, como um substituinte, através de um grupo alquileno. O grupo alquileno e arila de uma aril(alquila) pode ser substituído ou não substituído. Exemplos incluem mas não se limitam à benzila, 2- fenil(alquila), 3-fenil(alquila) e naftil(alquila).
[0043] Como usado aqui, "heteroaril(alquila)" se refere a um grupo heteroarila conectado, como um substituinte, através de um grupo alquileno. O grupo alquileno e o grupo heteroarila de uma heteroaril(alquila) podem ser substituídos ou não substituídos. Exemplos incluem, mas não se limitam à 2-tienil(alquila), 3- tienil(alquila), furil(alquila), tienil(alquila), pirrolil(alquila), piridil(alquila), isoxazolil(alquila), imidazolil(alquila), e seus análogos benzofundidos.
[0044] Uma "(heterociclil)alquila" se refere a um grupo heterocíclico conectado, como um substituinte, através de um grupo alquileno. O alquileno e a heterociclila de uma heterociclil(alquila) podem ser substituídos ou não substituídos. Exemplos incluem, mas não são limitados a, tetra-hidro-2H-piran-4-il(metila), piperidin-4-il(etila), piperidin-4-il(propila), tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il(metil) e 1,3-tiazinan-4- il(metila).
[0045] "Grupos alquilenos" são grupos de ligação -CH2- de cadeia linear que têm entre um e dez átomos de carbono, de um a cinco átomos de carbono ou de um a três átomos de carbono que formam ligações para conectar fragmentos moleculares por meio de seus átomos de carbono terminais. Exemplos incluem, mas não se limitam a, metileno (-CH2-), etileno (-CH2CH2-), propileno (-CH2CH2CH2-), butileno (-CH2CH2CH2CH2-) e pentileno (-CH2CH2CH2CH2CH2-). Um grupo alquileno inferior pode ser substituído mediante a substituição de um ou mais hidrogênios do grupo alquileno com um substituinte(s) mencionado(s) sob a definição de "opcionalmente substituído."
[0046] Como usado aqui, "alcoxila" se refere à fórmula –OR na qual R é uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, arilalquila, heteroaril(alquila) ou heterociclil(alquila) e é definida na presente invenção. Uma lista não limitadora de alcoxilas inclui metoxila, etexila, n-propoxila, 1-metiletoxila(isopropoxila), n-butoxila, iso-butoxila, sec- butoxila, terc-butoxila, fenoxila e benzoxila. Uma alcoxila pode ser substituída ou não substituída.
[0047] Como usado aqui, "acila" se refere a um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, cicloalquil(alquila), aril(alquila), heteroaril(alquila) ou heterociclil(alquila) conectada, como substituintes, através de um grupo carbonila. Exemplos incluem formila, acetila, propanoíla, benzoíla e acrila. Uma acila pode ser substituída ou não substituída.
[0048] Conforme utilizado aqui, "hidroxialquila" se refere a um grupo alquila no qual um ou mais dos átomos de hidrogênio ou de deutério estão substituídos por um grupo hidroxila. Grupos hidroxialquila exemplificadores incluem, mas não se limitam à 2-hidroxietila, 3- hidroxipropila, 2-hidroxipropila e 2,2-di-hidroxietila. Uma hidroxialquila pode ser substituída ou não substituída.
[0049] Como usado aqui, "haloalquila" se refere a um grupo alquila no qual um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por um halogênio (por exemplo, mono-haloalquila, di-haloalquila e tri- haloalquila). Tais grupos incluem, mas não se limitam a, clorometila, fluorometila, difluorometila, trifluorometila, 1-cloro-2-fluorometila e 2- fluoroisobutila. Uma haloalquila pode ser substituída ou não substituída.
[0050] Como usado aqui, "haloalcoxila" se refere a um grupo –O- alquila no qual um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por um halogênio (por exemplo, mono-haloalcoxila, di-haloalcoxila e tri- haloalcoxila). Estes grupos incluem, mas não se limitam a clorometoxila, fluorometoxila, difluorometoxila, trifluorometoxila, 1-cloro-2- fluorometoxila e 2-fluoroisobutoxila. Uma haloalcoxila pode ser substituída ou não substituída.
[0051] Um grupo "sulfenila" se refere a um grupo "-SR" no qual R pode ser hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila) ou (heterociclil)alquila. Uma sulfenila pode ser substituída ou não substituída.
[0052] Um grupo "sulfinila" se refere a um grupo "-S(=O)-R" no qual R pode ser igual ao definido com relação à sulfenila. Uma sulfinila pode ser substituída ou não substituída.
[0053] Um grupo "sulfonila" se refere a um grupo "SO2R" no qual R pode ser igual ao definido com relação à sulfenila. Uma sulfonila pode ser substituída ou não substituída.
[0054] Um grupo "O-carboxila" se refere a um grupo "RC(=O)O-" no qual R pode ser hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila, conforme definido aqui. Uma O-carboxila pode ser substituída ou não substituída.
[0055] Os termos "éster" e "C-carboxila" se referem a um grupo "-C(=O)OR" no qual R pode ser igual ao definido com relação à O- carboxila. Um éster e uma C-carboxila podem ser substituídos ou não substituídos.
[0056] Um grupo "tiocarbonila" se refere a um grupo "-C(=S)R" no qual R pode ser igual ao definido com relação à O-carboxila. Uma tiocarbonila pode ser substituída ou não substituída.
[0057] Um grupo "tri-halometanossulfonila" se refere a um grupo "X3CSO2-", sendo que cada X é um halogênio.
[0058] Um grupo "tri-halometanossulfonamido" se refere a um grupo "X3CS(O)2N(RA)-" no qual cada X é um halogênio, e RA é hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila.
[0059] O termo "amino", como usado aqui, se refere a um grupo – NH2.
[0060] Como usado aqui, o termo "hidroxila" se refere a um grupo – OH.
[0061] Um grupo "ciano" se refere a um grupo "-CN".
[0062] O termo "azido", como usado aqui, se refere a um grupo – N3.
[0063] Um grupo "isocianato" se refere a um grupo "-NCO".
[0064] Um grupo "tiocianato" se refere a um grupo "-CNS".
[0065] Um grupo "isotiocianato" se refere a um grupo "-NCS".
[0066] Um grupo "mercapto" se refere a um grupo "-SH".
[0067] Um grupo "carbonila" se refere a um grupo C=O.
[0068] Um grupo "S-sulfonamido" se refere a um grupo "-SO2N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), heteroaril(alquila) ou (heterociclil)alquila. Um S-sulfonamido pode ser substituído ou não substituído.
[0069] Um grupo "N-sulfonamido" se refere a um grupo "RSO2N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Um N-sulfonamido pode ser substituído ou não substituído.
[0070] Um grupo "O-carbamila" se refere a um grupo "-OC(=O)N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Uma O-carbamila pode ser substituída ou não substituída.
[0071] Um grupo "N-carbamila" se refere a um grupo "ROC(=O)N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Uma N-carbamila pode ser substituída ou não substituída.
[0072] Um grupo "O-tiocarbamila" se refere a um grupo "-OC(=S)- N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila) ou (heterociclil) alquila. Uma O-tiocarbamila pode ser substituída ou não substituída.
[0073] Um grupo "N-tiocarbamila" se refere a um grupo "ROC(=S)N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Uma N-tiocarbamila pode ser substituída ou não substituída.
[0074] Um grupo "C-amido" se refere a um grupo "-C(=O)N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Um C-amido pode ser substituído ou não substituído.
[0075] Um grupo "N-amido" se refere a um grupo "RC(=O)N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Um N-amido pode ser substituído ou não substituído.
[0076] Um grupo "amina monossubstituída" se refere a um grupo "NHRA" no qual RA pode ser uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, cicloalquil(alquila), aril(alquila), heteroaril(alquila) ou heterociclil(alquila), conforme definido aqui. O RA pode ser substituído ou não substituído. Exemplos de grupos amina monossubstituída incluem, mas não se limitam a, −NH(metila), −NH(etila), −NH(isopropila), −NH(fenila), −NH(benzila) e similares.
[0077] Um grupo "amina dissubstituída" se refere a um grupo "NRARB" no qual RA e RB podem ser, independentemente, uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, cicloalquil(alquila), aril(alquila), heteroaril(alquila) ou heterociclil(alquila), conforme definido aqui; RA e RB podem ser independentemente substituídos ou não substituídos.
Exemplos de grupos amino dissubstituídos incluem, mas não se limitam a, −N(metila)2, −N(fenil)(metila), −N(etil)(metila), −N(etila)2, −N(isopropila)2 e similares.
[0078] O termo "átomo de halogênio" ou "halogênio" como usado aqui, significa qualquer um dos átomos radio-estáveis da coluna 7 da tabela periódica dos elementos, como flúor, cloro, bromo e iodo.
[0079] Quando os números de substituintes não são especificados (por exemplo, haloalquila), pode haver um ou mais substituintes presentes. Por exemplo, "haloalquila" pode incluir um ou mais halogênios iguais ou diferentes. Como outro exemplo, "alcoxiC1-C3- fenila" pode incluir um ou mais grupos alcoxila iguais ou diferentes contendo um, dois ou três átomos.
[0080] Como usado aqui, as abreviações para quaisquer compostos químicos estão, exceto onde indicado em contrário, de acordo com seu uso comum, abreviações reconhecidas, ou de acordo com a Comissão IUPAC-IUB sobre Nomenclatura Bioquímica. Consulte, Biochem. 11: 942-944 (1972).
[0081] Como usado aqui, o termo "base heterocíclica N-ligada" se refere a uma heterociclila contendo nitrogênio opcionalmente substituída ou uma heteroarila contendo nitrogênio opcionalmente substituída que pode ser fixada através de um nitrogênio no anel. A base heterocíclica N-ligada pode ser monocíclica ou multicíclica (como bicíclica). Quando comparado com dois ou mais anéis, os anéis podem ser conectados juntos de uma forma fusionada. Em algumas modalidades, a base heterocíclica N-ligada pode ser uma base de purina N-ligada opcionalmente substituída ou uma base de pirimidina N- ligada opcionalmente substituída. O termo "base de purina" é aqui usado em seu sentido comum como entendido pelos versados na técnica, e inclui os seus tautômeros. De modo similar, o termo "base de pirimidina" é aqui usado em seu sentido comum conforme entendido pelos versados na técnica, e inclui os seus tautômeros. Uma lista não limitadora de bases de purina opcionalmente substituídas inclui purina, adenina, guanina, hipoxantina, xantina, aloxantina, 7-alquilguanina (por exemplo, 7-metilguanina), teobromina, cafeína, ácido úrico e isoguanina. Exemplos de bases de pirimidina incluem, mas não se limitam à citosina, timina, uracila 5, 6-di-hidrouracila e 5-alquilcitosina (por exemplo, 5-metilcitosina). Outros exemplos não limitadores de bases heterocíclicas incluem diaminopurina, 8-oxo-N6-alquiadenina (por exemplo, 8-oxo-N6-metiladenina), 7-deazaxantina, 7-deazaguanina, 7- deaza-adenina, N4,N4-etanocitosina, N6,N6-etano-2,6-diaminopurina, 5- halouracila (por exemplo, 5-fluorouracila e 5-bromouracila), pseudoisocitosina, isocitosina, e outras bases heterocíclicas descritas nas Patentes U.S. N°s 5.432.272 e 7.125.855, as quais estão aqui incorporadas por referência com o propósito limitado de divulgar as bases heterocíclicas adicionais.
[0082] Como usado aqui, o termo "base heterocíclica C-ligada" se refere a uma heterociclila contendo nitrogênio opcionalmente substituída ou uma heteroarila contendo nitrogênio opcionalmente substituída que pode ser fixada através de um carbono no anel. A base heterocíclica C-ligada pode ser monocíclica ou multicíclica (por exemplo, bicíclica). Quando comparado com dois ou mais anéis, os anéis podem ser conectados juntos de uma forma fusionada. Em algumas modalidades, a base heterocíclica C-ligada pode ser uma base imidazo[2,1-f][1,2,4]triazina opcionalmente substituída ou uma base pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, uma base heterocíclica N-ligada e/ou uma base heterocíclica C-ligada pode incluir (um) grupo(s) protetor(es) amino ou enol.
[0083] O termo "α-aminoácido N–ligado" se refere a um α- aminoácido que é ligado à porção indicada através de um grupo amino da cadeia principal ou de um grupo amino monossubstituído. O α- aminoácido δ–N–ligado pode ser fixado através de um dos hidrogênios que fazem parte do grupo amino da cadeia principal ou amino monossubstituído de modo que o α-aminoácido –N–ligado δ seja fixado através do nitrogênio do grupo amino da cadeia principal ou amino monossubstituído. Os α-aminoácidos N-ligados podem ser substituídos ou não substituídos.
[0084] O termo "derivado do éster de α-aminoácido –N–ligado" se refere a um α-aminoácido no qual um grupo ácido carboxílico da cadeia principal foi convertido em um grupo éster. Em algumas modalidades, ó grupo éster tem uma fórmula selecionada a partir de alquil-O-C(=O)-, cicloalquil-O-C(=O)-, aril-O-C(=O)- e aril(alquil)-O-C(=O)-. Uma lista não limitador de grupos éster inclui as versões substituídas e não substituídas dos seguintes: metil-O-C(=O)-, etil-O-C(=O)-, n-propil-O- C(=O)-, isopropil-O-C(=O)-, n-butil-O-C(=O)-, isobutil-O-C(=O)-, terc- butil-O-C(=O)-, neopentil-O-C(=O)-, ciclopropil-O-C(=O)-, ciclobutil-O- C(=O)-, ciclopentil-O-C(=O)-, ciclo-hexil-O-C(=O)-, fenil-O-C(=O)-, benzil-O-C(=O)- e naftil-O-C(=O)-. Os derivados de éster de α- aminoácido N-ligados podem ser substituídos ou não substituídos.
[0085] O termo "α-aminoácido O–ligado" se refere a um α- aminoácido que é ligado à porção indicada através da hidroxila de seu grupo ácido carboxílico da cadeia principal. O α-aminoácido O– ligado pode ser ligado através do hidrogênio que faz parte da hidroxila de seu grupo de ácido carboxílico da cadeia principal, de modo que o α- aminoácido O–ligado seja ligado através do oxigênio ou do grupo de ácido carboxílico da cadeia principal. Os amino α-ácidos O-ligados podem ser substituídos ou não substituídos.
[0086] Como usado aqui, o termo "α-aminoácido" se refere a qualquer aminoácido (aminoácidos convencionais e não convencionais). Exemplos de α-aminoácidos adequados incluem, mas não se limitam à alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Exemplos adicionais de α-aminoácidos adequados incluem, mas não se limitam a, ornitina, hipusina, ácido 2-aminoisobutírico, desidroalanina, citrulina e norleucina.
[0087] Como usado aqui, o termo "fosfato" é usado no seu sentido comum, conforme compreendido pelos versados na técnica, e inclui suas formas protonadas (por exemplo, e ). Como usado aqui, os termos "monofosfato," "difosfato," e "trifosfato" são usados nos seus sentidos comuns, conforme compreendido pelos versados na técnica, e incluem as formas protonadas.
[0088] Os termos "grupo protetor" e "grupos protetores", como usado aqui, referem-se a qualquer átomo ou grupo de átomos adicionado a uma molécula para evitar que os grupos existentes na molécula sejam submetidos a reações químicas indesejadas. Exemplos de porções de grupos protetores são descritos em T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. Ed. John Wiley & Sons, 1999, e em J.F.W. McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry Plenum Press, 1973, ambos dos quais estão aqui incorporados, por referência para o propósito limitado de revelar grupos protetores adequados. A porção de grupo protetor pode ser escolhida de tal forma que elas são estáveis a certas condições de reação e são prontamente removidas em um estágio conveniente com o uso de metodologia conhecida na técnica. Uma lista não limitadora de grupos protetores inclui benzila; benzila substituída; alquilcarbonilas e alcoxilcarbonilas (por exemplo, t-butoxicarbonila (BOC), acetila, ou isobutirila); arilalquilcarbonilas e arilalcoxicarbonilas (por exemplo, benziloxicarbonila); éter metílico substituído (por exemplo, éter metoximetílico); éter etílico substituído; um éter benzílico substituído; éter tetra-hidropiranílico; sililas (por exemplo, trimetilsilila, trietilsilila, tri- isopropilsilila, t-butildimetilsilila, tri-iso-propilsililoximetila, [2- (trimetilsilil)etoxi]metila ou t-butildifenilsilila); ésteres (por exemplo, éster de benzoato); carbonatos (por exemplo, metoximetilcarbonato); sulfonatos (por exemplo, tosilato ou mesilato); cetal acíclico (por exemplo, dimetilacetal); cetais cíclicos (por exemplo, 1,3-dioxano, 1,3- dioxolanos, e aqueles aqui descritos); acetal acíclico; acetal cíclico (por exemplo, aqueles aqui descritos); hemiacetal acíclico; hemiacetal cíclico; ditiocetais cíclicos (por exemplo, 1,3-ditiano ou 1,3-ditiolano); orto-ésteres (por exemplo, aqueles aqui descritos) e grupos triarilmetila (por exemplo, tritila; monometoxitritila (MMTr); 4,4'-dimetoxitritila (DMTr); 4,4',4"-trimetoxitritila (TMTr); e aqueles aqui descritos).
[0089] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" se refere a um sal de um composto que não causa irritação significativa a um organismo ao qual o mesmo é administrado e não anula a atividade e propriedades biológicas do composto. Em algumas modalidades, o sal é um sal de adição de ácido do composto. Os sais farmacêuticos podem ser obtidos reagindo-se um composto com ácidos inorgânicos como ácido halídrico (por exemplo, ácido clorídrico ou ácido bromídrico), ácido sulfúrico, ácido nítrico e ácido fosfórico. Os sais farmacêuticos também podem ser obtidos reagindo-se um composto com um ácido orgânico, como ácidos carboxílicos ou sulfônicos alifáticos ou aromáticos, por exemplo, ácido fórmico, acético, succínico, lático, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, nicotínico, metanossulfônico, etanossulfônico, p- toluenossulfônico, salicílico ou naftalenossulfônico. Os sais farmacêuticos também podem ser obtidos reagindo-se um composto com uma base para formar um sal como um sal de amônio, um sal de metal alcalino, como um sal de sódio ou um sal de potássio, um sal de metal de terra alcalina, como um sal de cálcio ou um sal de magnésio,
um sal de bases orgânicas como diciclohexilamina, N-metil-D- glucamina, tri(hidroximetil)metilamina, C1-C7 alquilamina, ciclohexilamina, trietanolamina, etilenodiamina e sais com aminoácidos como arginina e lisina.
[0090] Os termos e frases usados no presente pedido, e variações dos mesmos, especialmente nas reivindicações anexas, exceto quanto expressamente declarado em contrário, devem ser interpretados como não limitados, ao invés de limitadores. Como exemplos do supracitado, o termo "que inclui" deve ser lido de modo a significar "que inclui, sem limitações", "que inclui, mas não se limita a" ou similares; o termo "que compreende", conforme usado no presente documento, é sinônimo de "que inclui", "que contém", ou "caracterizado por" e é inclusivo ou não limitante e não exclui elementos ou etapas de método adicionais ou não mencionados; o termo "que tem" deve ser interpretado como "que tem pelo menos"; o termo "inclui" deve ser interpretado como "inclui, mas sem limitações"; o termo "exemplo" é usado para fornecer casos exemplificativos do item em discussão, não uma lista exaustiva ou limitadora do mesmo; e o uso de termos como "de preferência", "preferido", "desejado" ou "desejável" e palavras de significado similar não devem ser entendidos de modo a implicar no fato de que determinados recursos são críticos, essenciais, ou até mesmo importantes para a estrutura ou função, mas em vez disso, como meramente destinado a destacar recursos alternativos ou adicionais que podem ou podem não ser utilizados em uma modalidade particular. Além disso, o termo "que compreende" deve ser interpretado de modo sinônimo às frases "que tem pelo menos" ou "que inclui pelo menos". Quando usado no contexto de um processo, o termo "que compreende" significa que o processo inclui pelo menos as etapas mencionadas, porém, pode incluir etapas adicionais. Quando usado no contexto de um composto, composição ou dispositivo, o termo "que compreende"
significa que o composto, composição ou dispositivo inclui pelo menos os recursos ou componentes mencionados, mas também pode incluir recursos ou componentes adicionais.
[0091] Com respeito ao uso de substancialmente quaisquer termos plurais e/ou singulares na presente invenção, os versados na técnica podem mudar do plural para o singular e/ou do singular para o plural conforme seja adequado ao contexto e/ou aplicação. As várias permutações singular/plural podem estar expressamente apresentadas na presente invenção por motivos de clareza. O artigo indefinido "um/uma" não exclui uma pluralidade. O mero fato de que determinadas medidas são mencionadas em reivindicações dependentes mutuamente diferentes não indica que uma combinação dessas medidas não possa ser usada de modo vantajoso. Quaisquer sinais de referência nas reivindicações não devem ser interpretados de modo a limitar o escopo.
[0092] É entendido que, em qualquer composto descrito no presente documento que tenha um ou mais centro quirais, se uma estereoquímica absoluta não for expressamente indicada, então, cada centro pode ser independentemente de configuração R ou de configuração S ou uma mistura das mesmas. Se os compostos aqui descritos têm ao menos um centro quiral, eles podem consequentemente existir como enantiômeros. Quando os compostos possuem dois ou mais centros quirais, os mesmos devem existir adicionalmente como diastereômeros. Portanto, os compostos fornecidos no presente documento podem ser enatiomericamente puros, enatiomericamente enriquecidos, mistura racêmica, diastereomericamente puros, diastereomericamente enriquecidos, ou uma mistura estereoisomérica. Além disso, é entendido que, em qualquer composto descrito no presente documento que tenha uma ou mais ligações duplas que geram isômeros geométricos que podem ser definidos como E ou Z, cada ligação dupla pode ser independentemente E ou Z, ou uma mistura das mesmas. Deve ser entendido que todos esses isômeros e misturas dos mesmos são abrangidos, a menos que seja definido de outra forma.
[0093] De modo semelhante, é entendido que, em qualquer composto descrito, todas as formas tautoméricas também são destinadas a serem incluídas. Por exemplo, todos os tautômeros de bases heterocíclicas conhecidos na técnica são destinados a serem incluídos, inclusive tautômeros de bases de purina e bases de pirimidina naturais e não naturais.
[0094] Deve ser entendido que onde os compostos revelados no presente documento tiverem valências não preenchidas, então, as valências devem ser preenchidas com hidrogênios ou isótopos dos mesmos, por exemplo, com hidrogênio- (prótio) e hidrogênio-2 (deutério).
[0095] Deve ser entendido que os compostos descritos no presente documento podem ser identificados isotopicamente. A substituição por isótopos como deutério pode render determinadas vantagens terapêuticas que resultantes de uma maior estabilidade metabólica, como, por exemplo, meia vida in vivo aumentada ou exigências de dosagem reduzidas. Cada elemento químico conforme representado em uma estrutura de composto pode incluir qualquer isótopo do dito elemento. Por exemplo, em qualquer posição do composto que um átomo de hidrogênio possa estar presente, o átomo de hidrogênio pode ser qualquer isótopo de hidrogênio, inclusive, mas sem se limitar, ao hidrogênio-1 (prótio) e hidrogênio-2 (deutério). Portanto, a referência no presente documento a um composto engloba todas as potenciais formas isotópicas, exceto quando o contexto claramente afirma de outro modo.
[0096] É compreendido que os compostos, métodos e combinações aqui descritos incluem formas cristalinas (também conhecidas como polimorfos, que incluem as diferentes disposições de empacotamento cristalino da mesma composição elementar de um composto), fases amorfas, sais, solvatos e hidratos. Em algumas modalidades, os compostos aqui descritos (incluindo aqueles descritos nos métodos e nas combinações) existem sob formas solvatadas com solventes farmaceuticamente aceitáveis, como água, etanol ou similares. Em outras modalidades, os compostos aqui descritos (incluindo aqueles descritos em métodos e combinações) existem sob forma não solvatada. Os solvatos contêm tanto quantidades estequiométricas quanto quantidades não estequiométricas de um solvente, e podem ser formados durante o processo de cristalização com solventes farmaceuticamente aceitáveis como água, etanol ou similares. Os hidratos são formados quando o solvente é água, ou alcoolatos são formados quando o solvente é álcool. Em geral, as formas solvatadas são consideradas equivalentes às formas não solvatadas para os propósitos dos compostos e métodos fornecidos no presente documento.
[0097] Quando uma faixa de valores for fornecida, é entendido que o limite superior e o inferior, e cada valor intermediário entre o limite superior e o inferior da faixa é englobado nas modalidades. Compostos
[0098] Algumas modalidades da presente invenção referem-se a um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (I)
sendo que: B1 pode ser uma base heterocíclica ligada em C opcionalmente substituída ou uma base heterocíclica ligada em N opcionalmente substituída; R1 pode ser selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, ciano, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída, sendo que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C1-6 pode ser substituída com ao menos um halogênio; R2 pode ser hidrogênio ou fluoro; R3 pode ser hidrogênio ou fluoro; R4 pode ser selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, hidroxila, ciano e uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 pode ser substituída com uma hidroxila ou ao menos um halogênio; R5 pode ser hidrogênio ou hidroxila; R6 pode ser selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, ciano, uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-4 não substituída, sendo que quando a alquila C1-4 ou a alquenila C2-4 são substituídas, a alquila C1-4 e a alquenila C2-4 podem ser independentemente substituídas com ao menos um halogênio; R7 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma acila opcionalmente substituída, um α-aminoácido ligado em O, ,
e ; R10 e R11 podem, independentemente, estar ausentes ou serem hidrogênio, , e
; ou R10 pode ser e R11 pode estar ausente ou ser hidrogênio; R12 pode estar ausente ou ser hidrogênio, uma arila opcionalmente substituída ou uma heteroarila opcionalmente substituída; R13 pode ser um α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido N- ligado opcionalmente substituído; R14 e R15 podem ser independentemente um α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído; R16, R17, R19 e R20 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R18 e R21 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcionalmente substituída, uma –O–alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma –O– arila opcionalmente substituída; R22 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R23, R24 e R25 podem estar independentemente ausentes ou podem ser hidrogênio; R8 e R9 são, independentemente, hidrogênio ou halogênio; e m pode ser 0 ou 1.
[0099] A orientação dos substituintes ligados ao anel ciclobutila pode variar. Por exemplo, cada uma das seguintes Fórmulas (Ia), (Ib), (Ic) e (Id) é um exemplo de uma modalidade de um composto da Fórmula (I).
[0100] (Ia), (Ib),
(Ic) e (Id), ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos compostos anteriormente mencionados.
[0101] Uma variedade de grupos pode estar fixada ao anel ciclopentila. Em algumas modalidades, R6 pode ser halogênio. Por exemplo, R6 pode ser fluoro. Em outras modalidades, R6 pode ser ciano. Em ainda outras modalidades, R6 pode ser um hidrocarboneto substituído ou não substituído, saturado ou insaturado, que inclui de 1 a 4 carbonos. Em algumas modalidades, R6 pode ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 pode ser substituída com ao menos um halogênio. Exemplos de alquilas C1-4 adequadas incluem metila, etila, n- propila, isopropila, n-butila, sec-butila, isobutila e terc-butila. Em algumas modalidades, R6 pode ser uma alquila C1-4 não substituída, como aquelas aqui descritas. Em outras modalidades, R6 pode ser uma alquila C1-4 substituída, sendo que a alquila C1-4 pode ser substituída com ao menos um halogênio. Por exemplo, R6 pode ser uma alquila C1- 4 substituída com 1, 2 ou 3 halogênios, como flúor ou cloro. Quando R6 é substituído com um halogênio (por exemplo, F ou Cl), R6 pode ser uma alquila C1-4 halogenada monossubstituída. Em algumas modalidades, R6 pode ser uma alquila C1-4 substituída com flúor. Em outras modalidades, R6 pode ser uma alquila C1-4 substituída com cloro. Uma lista não limitadora de alquilas C1-4 substituídas com halogênio inclui – CH2F ou – CH2Cl. Em algumas modalidades, o hidrocarboneto em R6 pode incluir (uma) ligação(ões) dupla(s) e/ou tripla(s). Por exemplo, em algumas modalidades, R6 pode ser uma alquenila C2- 4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquenila C2- 4 é substituída, a alquenila
C2- 4 pode ser substituída com um halogênio. Quando um grupo alquila C1-4 substituído está presente em R6, uma alquenila C2-4 substituída pode ser substituída com 1, 2 ou 3 halogênios, como flúor ou cloro. Por exemplo, em algumas modalidades, R6 pode ser uma alquenila C2-4 substituída com flúor. Em outras modalidades, R6 pode ser uma alquenila C2-4 substituída com cloro. Em algumas modalidades, R6 pode ser uma alquenila C2-4 não substituída. Alquenilas C2-4 exemplificadoras incluem etenila, 1-propenila, 2-propenila, 1-butenila, 2-butenila e 3- butenila. Em algumas modalidades, R6 pode ser hidrogênio.
[0102] Os grupos ligados na posição 2' do anel ciclopentila podem variar. Em algumas modalidades, R2 pode ser hidrogênio. Em outras modalidades, R2 pode ser flúor. Em algumas modalidades, R3 pode ser hidrogênio. Em outras modalidades, R3 pode ser flúor. Em algumas modalidades, R2 e R3 podem ser, cada um, hidrogênio. Em outras modalidades, a posição 2' pode ser dissubstituída quando R2 e R3 são, cada um, flúor. Em ainda outras modalidades, R2 pode ser hidrogênio; e R3 pode ser flúor. Em ainda outras modalidades, R2 pode ser flúor; e R3 pode ser hidrogênio.
[0103] Os grupos ligados à posição 3' do anel ciclofenila podem variar. Em algumas modalidades, R4 pode ser halogênio. O halogênio pode ser F, Cl, Br ou I. Em algumas modalidades, R4 pode ser F. Em outras modalidades, R4 pode ser Cl. Em algumas modalidades, R4 pode ser hidroxila (-OH). Em outras modalidades, R4 pode ser ciano (-CN). Em ainda outras modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 pode ser substituída com uma hidroxila ou ao menos um halogênio. Em algumas modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 não substituída (como metila, etila, n-propila, isopropila, n- butila, isobutila, sec-butila e terc-butila). Em outras modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 substituída, sendo que a alquila C1-4 pode ser substituída com ao menos um halogênio. Por exemplo, R4 pode ser uma alquila C1-4 substituída com 1, 2 ou 3 halogênios, como flúor ou cloro. Quando R4 é substituído com um halogênio (por exemplo, F ou Cl), R4 pode ser uma alquila C1-4 halogenada monossubstituída. Em algumas modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 substituída com flúor. Em outras modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 substituída com cloro. Em várias modalidades, a alquila C1-4 substituída com flúor pode ser uma alquila C1-4 substituída com flúor, monossubstituída, como CH2F. Em várias outras modalidades, a alquila C1-4 substituída com cloro pode ser uma alquila C1-4 substituída com cloro, monossubstituída, como CH2Cl. Em algumas modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 substituída com um ou mais grupos hidroxila. Por exemplo, R4 pode ser monossubstituído com hidroxila. Em algumas modalidades, R4 pode ser –CH2OH. Em algumas modalidades, R4 pode ser uma alquila C1-4 substituída com 1 ou 2 grupos hidroxila e 1 ou 2 halogênios (como F ou Cl). Em outras modalidades, R4 pode ser hidrogênio. Em algumas modalidades, incluindo aquelas desse parágrafo, R5 pode ser hidrogênio. Em outras várias modalidades, inclusive aquelas desses parágrafos, R5 pode ser hidroxila.
[0104] Conforme descrito aqui, R8 e R9 podem ser, independentemente, hidrogênio ou halogênio. Em algumas modalidades, R8 e R9 podem ser, cada um, hidrogênio, de modo que o substituinte ligado ao anel ciclopentila seja =CH2. Em outras modalidades, R8 e R9 podem ser, cada um, halogênio. Quando R8 e R9 são, cada um, halogênio, os halogênios podem ser iguais ou diferentes. Por exemplo, R8 e R9 podem ser, cada um, flúor, ou um dentre R8 e R9 pode ser flúor e o outro dentre R8 e R9 pode ser cloro. Em ainda outras modalidades, um dentre R8 e R9 pode ser hidrogênio, e o outro dentre R8 e R9 pode ser halogênio. Em várias modalidades, quando um ou ambos dentre R8 e R9 são halogênio, o(s) halogênio(s) pode(m) ser flúor. Exemplos de substituintes ligados ao anel ciclopentila que incluem um halogênio incluem, mas não se limitam, aos seguintes: =CF2, =CCl2,=CFH, =CClH e =CClF.
[0105] Como com outras posições no anel ciclopentila, o carbono ao qual B1 está ligado pode ser adicionalmente substituído ou não substituído. Em algumas modalidades, R1 pode ser hidrogênio. Em outras modalidades, R1 pode ser halogênio. Halogênios adequados são aqui descritos. Por exemplo, R1 pode ser flúor. Em outras modalidades, R1 pode ser ciano. Em ainda outras modalidades, R1 pode ser uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C1-6 pode ser substituída com ao menos um halogênio. Quando R1 é uma alquila C1-6 não substituída, R1 pode ser metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, terc- butila, pentila (de cadeia ramificada ou linear) ou hexila (de cadeia ramificada ou linear) em várias modalidades aqui descritas. Em várias modalidades, quando R1 é substituído, a alquila C1-6 pode ser substituída com um ou mais halogênios (como 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 halogênios). Exemplos de halogênios adequados estão aqui descritos. Em algumas modalidades, R1 pode ser uma alquila C1-6 mono- halogenada. Em outras modalidades, R1 pode ser uma alquila C1-6per- halogenada. Alquilas C1-6 halogenadas exemplificadoras para R1 incluem –CH2F, –CH2Cl, –CHF2, –CHCl2, –CF3, –CCl3, –CH2CH2F, CH2CF3, –CH2CHClF, –CHFCH2F e –CHClCH2F. Em algumas modalidades, R1 pode ser uma alquenila C2-6 não substituída. Em outras modalidades, R1 pode ser uma alquinila C2-6 não substituída. Quando R1 é um hidrocarboneto C2-6 insaturado, em várias modalidades, R1 pode ser etenila, etinila ou -CH2-CH=CH2.
[0106] Os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, podem ser chamados de análogos de ciclopentil nucleosídeos. Em algumas modalidades, R7 pode ser hidrogênio.
Quando R7 é hidrogênio, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um ciclopentil nucleosídeo.
[0107] Em algumas modalidades, R7 pode ser , sendo que m pode ser 0 ou 1; e R10, R11, R23, R24 e R25 podem estar independentemente ausentes ou podem ser hidrogênio. Quando R7 é , sendo que m pode ser 0 ou 1; R7 pode ser ; e R11, R23, R24 e R25 podem estar independentemente ausentes ou podem ser hidrogênio, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um mono, di e/ou trifosfato de ciclopentil nucleotídeo. Os versados na técnica compreendem que quando R7 é e R10 e R11 estão independentemente ausentes ou são hidrogênio, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um monofosfato. Os versados na técnica também entendem que quando R7 é ; R10 é ; R11, R23, R24 e R25 podem estar independentemente ausentes ou podem ser hidrogênio; e m é 0 ou 1, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um difosfato (quando m é 0) ou trifosfato (quando m é 1). Quando qualquer um dentre R10, R11, R23, R24 e R25 está ausente, os versados na técnica compreendem que o respectivo oxigênio ao qual R10, R11, R23, R24 e R25 são mostrados ligados terá uma carga negativa associada. Por exemplo, quando R10 e R11 estão, cada um, ausentes, R7 pode ser . Como exemplos adicionais, quando R7 é ; R10 é ; R11, R23, R24 e R25 estão ausentes; e m é 0 ou 1, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R7 pode ter as seguintes estruturas: (m é 0) e (m é 1).
[0108] Os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, podem incluir grupo(s) de pró-fármaco. O(s) grupo(s) de pró-fármaco pode(m) estar presente(s) na posição equivalente a R7. Em algumas modalidades, R7 pode ser uma acila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, a acila pode ser não substituída. Em outras modalidades, a acila pode ser substituída. Uma estrutura exemplificadora da acila opcionalmente substituída pode ser –C(=O)R26, em que R26 pode ser uma alquila C1-12 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 monocíclica opcionalmente substituída ou uma fenila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R26 pode ser uma alquila C1-12 não substituída. Em outras modalidades, R26 pode ser uma cicloalquila C3-8 monocíclica não substituída. Em ainda outras modalidades, R26 pode ser uma fenila não substituída. Em algumas modalidades, R7 pode ser –C(=O)R26, sendo que R26 pode ser uma alquila C1-6 não substituída.
[0109] Em algumas modalidades, R7 pode ser um α-aminoácido O- ligado opcionalmente substituído. Exemplos de α-aminoácidos O- ligados incluem alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Em várias modalidades, o α-aminoácido O-ligado pode ser não substituído. Em várias outras modalidades, o α-aminoácido O-ligado pode ser substituído. Em algumas modalidades, R7 pode ser selecionado dentre alanina O-ligada não substituída, valina O-ligada não substituída, leucina O-ligada não substituída e glicina O-ligada não substituída. O α- aminoácido pode ser um α-aminoácido natural. Exemplos de α- aminoácidos O-ligados opcionalmente substituídos incluem os seguintes: , , , , e .
[0110] Em algumas modalidades, R7 pode ser , sendo que um dentre R10 e R11 pode estar ausente, ser hidrogênio ou ; o outro de R10 e R11 pode ser ; R16 e R17 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; e R18 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcionalmente substituída, uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída e uma –O–arila opcionalmente substituída. Em outras modalidades, R7 pode ser , em que R10 e R11 podem ser, cada um, . Em várias modalidades, quando um ou ambos de R10 e R11 são , R16 e R17 podem ser, cada um, hidrogênio; e R18 pode ser uma alquila C1-24 não substituída. Em outras modalidades, ao menos um dentre R16 e R17 pode ser uma alquila C1-24 opcionalmente substituída ou uma arila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R18 pode ser uma alquila C1-24 opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R18 pode ser uma alquila C1-4 não substituída. Em outras modalidades, R18 pode ser uma arila opcionalmente substituída. Em ainda outras modalidades, R18 pode ser uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída, uma –O–arila opcionalmente substituída, uma –O–heteroarila opcionalmente substituída ou uma –O–heterociclila monocíclica opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R18 pode ser uma –O–alquila C1- 4 não substituída.
[0111] Em algumas modalidades, R7 pode ser , sendo que um dentre R10 e R11 pode estar ausente, ser hidrogênio ou
; o outro de R10 e R11 pode ser ; R19 e R20 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; e R21 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcionalmente substituída, uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída e uma –O–arila opcionalmente substituída.
Em outras modalidades, R7 pode ser , em que R10 e R11 podem ser,
cada um, . Em várias modalidades, quando um ou ambos de R10 e R11 são , R19 e R20 podem ser, cada um, hidrogênio; e R21 pode ser uma alquila C1-24 não substituída.
Em várias outras modalidades, quando um ou ambos de R10 e R11 são
, R19 e R20 podem ser, cada um, hidrogênio; e R21 pode ser uma alquila –O–C1-24 não substituída.
Em algumas modalidades, R19 e R20 podem ser hidrogênio.
Em outras modalidades, ao menos um dentre R19 e R20 pode ser uma alquila C1-24 opcionalmente substituída ou uma arila opcionalmente substituída.
Em algumas modalidades, R21 pode ser uma alquila C1-24 opcionalmente substituída.
Em algumas modalidades, R21 pode ser uma alquila C1-4 não substituída.
Em outras modalidades, R21 pode ser uma arila opcionalmente substituída.
Em ainda outras modalidades, R21 pode ser uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída, uma –O–arila opcionalmente substituída, uma –O–heteroarila opcionalmente substituída ou uma –O–heterociclila monocíclica opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R21 pode ser uma –O–alquila C1- 4 não substituída. Em algumas modalidades, um ou ambos de R10 e/ou R11 pode ser um grupo pivaloiloximetila (POM). Em algumas modalidades, R10 e R11 podem ser, cada um, um grupo pivaloiloximetila (POM) e formar um pró-fármaco de bis(pivaloiloximetila) (bis(POM)). Em algumas modalidades, um ou ambos de R10 e/ou R11 pode ser um grupo isopropiloxicarboniloximetila (POC). Em algumas modalidades, tanto R10 quanto R11 podem ser um grupo isopropiloxicarboniloximetila (POC), e formar um pró-fármaco bis(isopropiloxicarboniloximetila) bis(POC)).
[0112] Em algumas modalidades, R7 pode ser , sendo que um dentre R10 e R11 pode estar ausente, ser hidrogênio ou ; o outro de R10 e R11 pode ser ; e R22 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída. Em outras modalidades, R7 pode ser , em que R10 e R11 podem ser, cada um, . Em várias modalidades, R22 pode ser uma alquila C1-24 substituída. Em várias outras modalidades, R22 pode ser uma alquila C1-24 não substituída. Em ainda várias outras modalidades, R22 pode ser uma alquila C1-4 não substituída. Em algumas modalidades, R10 e R11 podem ser, cada um, um grupo S-aciltioetila (SATE) e formar um pró-fármaco do éster de SATE. Em algumas modalidades, R10 e R11 podem ser, cada um, .
[0113] Em algumas modalidades, R7 pode ser , em que R12 pode estar ausente, ser hidrogênio, uma arila opcionalmente substituída ou uma heteroarila opcionalmente substituída; e R13 pode ser um α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído. Em algumas modalidades, R12 pode ser uma fenila opcionalmente substituída. Em outras modalidades, R12 pode ser uma naftila opcionalmente substituída. Em ainda outras modalidades, R12 pode ser uma fenila não substituída. Em ainda outras modalidades, R12 pode ser uma naftila não substituída. Em algumas modalidades, R12 pode ser uma heteroarila opcionalmente substituída, como uma heteroarila monocíclica opcionalmente substituída.
[0114] Em outras modalidades, R13 pode ser um α-aminoácido N- ligado opcionalmente substituído. Em algumas modalidades, R13 pode ser um derivado do éster de α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído. Vários α-aminoácidos são conhecidos pelos versados na técnica, e incluem alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Os derivados de éster do derivado de éster do α-aminoácido N-ligado podem ter uma das seguintes estruturas: alquil C1-6-O-C(=O)-, cicloalquil
C3-6-O-C(=O)-, fenil-O-C(=O)-, naftil-O-C(=O)- e benzil-O-C(=O)-. Em algumas modalidades, o derivado do éster de α-aminoácido N-ligado pode ser um éster alquílico C1-6, cicloalquílico C3-6, fenílico, naftílico ou benzílico de alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano ou valina. Em algumas modalidades, R13 pode ser uma alanina N-ligada, éster isopropílico de alanina N-ligada, éster ciclo-hexílico de alanina N-ligada ou éster neopentílico de alanina N-ligada. Em algumas modalidades, R12 pode ser uma fenila não substituída. e R13 pode ser um éster alquílico C1-6-O-C(=O)-, cicloalquílico C3-6-O-C(=O)-, fenílico-O-C(=O)-, naftílico-O-C(=O)- ou benzílico-O-C(=O)- de alanina N-ligada, glicina N- ligada, N-valina, leucina N-ligada ou isoleucina N-ligada. Em algumas modalidades, quando R7 é , um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo pode ser um pró- fármaco de fosforoamidato, como um pró-fármaco de fosforoamidato de arila.
[0115] Em algumas modalidades, R7 pode ser , sendo que R14 e R15 podem ser independentemente um derivado do éster de α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído. Em várias modalidades, a porção de α-aminoácido do derivado de éster de α- aminoácido N-ligado opcionalmente substituído pode ser selecionada dentre alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Conforme descrito aqui, a porção éster do derivado de éster do α-aminoácido pode ter várias estruturas. Em algumas modalidades, a porção éster do derivado de éster de α-aminoácido N-ligado pode ter uma das seguintes estruturas: alquil C1-6-O-C(=O)-, cicloalquil C3-6-O-C(=O)-, fenil-O- C(=O)-, naftil-O-C(=O)- e benzil-O-C(=O)-. Em algumas modalidades, R14 e R15 podem ser independentemente selecionados dentre alanina N-ligada, éster isopropílico de alanina N-ligada, éster ciclo-hexílico de alanina N-ligada ou éster neopentílico de alanina N-ligada. Em algumas modalidades, R14 e R15 podem ser, cada um, independentemente, um éster alquílico C1-6-O-C(=O)-, cicloalquílico C3-6-O-C(=O)-, fenílico-O- C(=O)-, naftílico-O-C(=O)- ou benzílico-O-C(=O)- de alanina N-ligada, glicina N-ligada, N-valina, leucina N-ligada ou isoleucina N-ligada. Em algumas modalidades, R14 e R15 podem ser iguais. Em algumas modalidades, R14 e R15 podem ser diferentes. Em algumas modalidades, quando R7 pode ser , um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um pró- fármaco de diamida fosfônico opcionalmente substituído.
[0116] Exemplos de grupos derivados de éster de α-aminoácido N- ligado adequados que podem estar presentes em R13, R14 e/ou R15 incluem os seguintes: , , , , , , , , , , , , , ,
, , , , , e .
[0117] A base heterocíclica, B1, presente em um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser ligada através de um nitrogênio (uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída) ou um carbono (uma base heterocíclica C- ligada opcionalmente substituída). Em algumas modalidades, B1 pode ser uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, B1 pode ser uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída.
[0118] Quando B1 é uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída, B1 pode ser, em várias modalidades, uma purina opcionalmente substituída. Em outras várias modalidades, B1 pode ser uma pirimidina opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, B1 pode ser uma guanina substituída, uma adenina substituída, uma timina substituída, uma citosina substituída ou uma uracila substituída. Em outras modalidades, B1 pode ser uma guanina não substituída, uma adenina não substituída, uma timina não substituída, uma citosina não substituída ou uma uracila não substituída.
[0119] Em algumas modalidades, B1 pode ser selecionado dentre: , , , e
;
sendo que: RA2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, halogênio e NHRJ2, sendo que RJ2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, -C(=O)RK2 e – C(=O)ORL2; RB2 pode ser halogênio ou NHRW2, sendo que RW2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, -C(=O)RM2 e –C(=O)ORN2; RC2 pode ser hidrogênio ou NHRO2, sendo que RO2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, -C(=O)RP2 e –C(=O)ORQ2; RD2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, deutério, halogênio, uma alquila C1- 6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-6 opcionalmente substituída; RE2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, hidroxila, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, -C(=O)RR2 e –C(=O)ORS2; RF2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, halogênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-6 opcionalmente substituída; Y1, Y2 e Y4 podem ser, independentemente, N (nitrogênio) ou C (carbono), desde que ao menos um dentre Y1, Y2 e Y4 seja N; Y3 pode ser N (nitrogênio) ou CRI2, sendo que RI2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, halogênio, uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída; Y5 e Y6 podem ser, independentemente, N (nitrogênio) ou CH; cada --------- pode ser independentemente uma ligação simples ou dupla, desde que as ligações simples e as ligações duplas estejam situadas no anel de modo que cada anel seja aromático; RG2 pode ser uma alquila C1-6 opcionalmente substituída; RH2 pode ser hidrogênio ou NHRT2, sendo que RT2 pode ser independentemente selecionado dentre hidrogênio, -C(=O)RU2 e –C(=O)ORV2; e RK2, RL2, RM2, RN2, RP2, RQ2 RR2, RS2, RU2 e RV2 podem ser independentemente selecionados dentre uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída, uma alquinila C2-6 não substituída, uma cicloalquila C3-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquenila C3-6 opcionalmente substituída, uma arila C6-10 opcionalmente substituída, uma heteroarila opcionalmente substituída, uma heterociclila opcionalmente substituída, uma aril(alquila C1-6) opcionalmente substituída, uma heteroaril(alquila C1-6) opcionalmente substituída e uma heterociclil(alquila C1-6) opcionalmente substituída.
[0120] Exemplos de grupos B1 adequados incluem os seguintes: , , , e , sendo que RA2, RB2, RC2, RD2, RE2, RF2, RG2, RH2, Y1, Y2, Y3 e Y5 são aqui fornecidos. Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em algumas modalidades, B1 pode ser
. Em ainda outras modalidades, B1 pode ser
. Em ainda outras modalidades, R1 pode ser
. Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades,
R1 pode ser . Em algumas modalidades, B1 pode ser
. Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades, B1 pode ser . Quando B1 é , em várias modalidades, RG2 pode ser uma etila não substituída e RH2 pode ser NH2.
[0121] Quando B1 é uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída, em várias modalidades, B1 pode ter a estrutura . Em algumas modalidades, B1 pode ser selecionado dentre e . Por exemplo, B1 pode ser ou .
[0122] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma estrutura selecionada dentre:
, , ,
, , ,
, , ,
, , ,
, , e
, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos supracitados.
Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída.
Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída.
Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uma base de purina opcionalmente substituída.
Em outras modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uma base de pirimidina opcionalmente substituída. Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser guanina. Em outras modalidades desse parágrafo, B1 pode ser timina. Em ainda outras modalidades desse parágrafo, B1 pode ser citosina. Em ainda outras modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uracila. Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser adenina. Em algumas modalidades desse parágrafo, R7 pode ser hidrogênio. Em outras modalidades desse parágrafo, R7 pode ser uma acila opcionalmente substituída. Em ainda outras modalidades desse parágrafo, R7 pode ser mono, di ou trifosfato. Em ainda outras modalidades desse parágrafo, R7 pode ser pró-fármaco de fosforamidato, como um pró-fármaco de fosforamidato de arila. Em algumas modalidades desse parágrafo, R7 pode ser um pró-fármaco de fosfato do éster de aciloxialquila. Em outras modalidades desse parágrafo, R7 pode ser um pró-fármaco de S- aciltioetila (SATE). Em ainda outras modalidades, R7 pode ser um pró- fármaco de diamida fosfônica. Em algumas modalidades desse parágrafo, R7 pode ser um α-aminoácido O-ligado opcionalmente substituído, como um daqueles aqui descritos. Em algumas modalida- des desse parágrafo, R6 pode ser selecionado dentre halogênio, ciano, uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-4 não substituída, sendo que quando a alquila C1-4 ou a alquenila C2-4 são substituídas, a alquila C1-4 e a alquenila C2-4 são independentemente substituídas com ao menos um halogênio. Em algumas modalidades deste parágrafo, R6 pode ser selecionado dentre flúor, ciano, uma alquila C1-4 não substituída, -(CH2)1-4F (como -CH2F), -(CH2)1-4Cl (como -CH2Cl), uma alquenila C2-4 não substituída e uma alquinila C2-4 não substituída.
[0123] Os exemplos de compostos adequados de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, incluem, mas não se limitam, aos seguintes:
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, , , , , , , e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos compostos anteriormente mencionados.
[0124] Exemplos adicionais de compostos adequados de Fórmula (I) incluem, mas não se limitam, aos seguintes: ,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
e
, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos compostos anteriormente mencionados.
[0125] Ainda outros exemplos de compostos adequados da Fórmula (I) incluem, mas não se limitam, aos seguintes: , , , , , , , ,
, , e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos compostos anteriormente mencionados.
[0126] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, não é um composto de (i), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que quando R1 é hidrogênio; R2 é hidrogênio ou flúor; R3 é hidrogênio ou flúor; R4 é hidroxila; R5 é hidrogênio; R6 é hidrogênio ou flúor; R8 e R9 são, cada um, hidrogênio e B1 é selecionado do grupo que consiste em , , , , , , e ; nesse caso, R7 não é selecionado do grupo que consiste em: (a) hidrogênio; (b) em que R10 e R11 são, cada um, hidrogênio, ou está(ão) ausente(s); (c)
em que R10 é , R11, R23, R24 ou R25 estão, independentemente, ausentes ou são hidrogênio, e m é 0 ou 1; e (d)
, em que R12 é uma fenila não substituída ou uma naftila não substituída, e R13 é éster isopropílico de alanina, éster isobutílico de alanina ou éster neopentílico de alanina.
Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, não é um composto de (ii), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, quando R1 é hidrogênio; R4 é hidroxila; R5 é hidrogênio; R6 é hidrogênio; R8 e R9 são, cada um, hidrogênio; B1 é selecionado do grupo que consiste em , ,
, , , ,
, , e ; R7 é selecionado do grupo que consiste em: (a) , em que R10 é
, R11, R23, R24 ou R25 estão, independentemente, ausentes ou são hidrogênio, e m é 1; e (b)
, em que R12 é uma fenila não substituída, e R13 é éster isopropílico de alanina, e então, (a) R2 não é hidrogênio quando R3 é flúor; e (b) R2 não é flúor quando R3 é hidrogênio.
Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, não é um composto de (iii), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, quando R1 é hidrogênio; R4 é hidroxila; R5 é hidrogênio; R6 é hidrogênio; R7 é hidrogênio e R8 e R9 são, cada um, hidrogênio; nesse caso, B1 não é selecionado do grupo que consiste em , , ,
, , ,
e . Em algumas modalidades, B1 não é uridina.
Em algumas modalidades, B1 não é citosina.
Em algumas modalidades, B1 não é timidina.
Em algumas modalidades, B1 não é guanina.
Em algumas modalidades, B1 não é adenina.
Em algumas modalidades, B1 não é uma uridina substituída.
Em algumas modalidades, R8 e R9 não são, cada um, hidrogênio.
Em algumas modalidades, R7 não é , em que R12 é uma fenila substituída ou não substituída ou uma naftila substituída ou não substituída.
Em algumas modalidades, R7 não é , em que R12 é uma fenila não substituída ou uma naftila não substituída; e R13 é alanina N-ligada ou um derivado éster de alanina N-ligada (como éster isopropílico de alanina N-ligada, éster isobutílico de alanina N-ligada e éster neopentílico de alanina N-ligada). Em algumas modalidades, R7 é hidrogênio.
Em algumas modalidades, R2 não é hidrogênio.
Em algumas modalidades, R2 não é flúor.
Em algumas modalidades, R3 não é hidrogênio.
Em algumas modalidades, R3 não é flúor.
Em algumas modalidades, R2 não é hidrogênio quando R3 é flúor.
Em algumas modalidades, R2 não é flúor quando R3 é hidrogênio. Em algumas modalidades, R2 e R3 não são, cada um, flúor. Em algumas modalidades, R6 não é hidrogênio. Em algumas modalidades, R6 não é halogênio (por exemplo, flúor). Em algumas modalidades, R5 não é hidroxila. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, não é um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, fornecido na WO 2017/040895 (publicada em 9 de março de 2017), WO 2017040892 (publicada em 9 de março de 2017), WO 2016/182936 (publicada em 17 de novembro de 2016), WO 2016/182935 (publicada em 17 de novembro de 2016), WO 2016/134056 (publicada em 25 de agosto de 2016), WO 2016/134054 (publicada em 25 de agosto de 2016), WO 2017/165489 (publicada em 28 de setembro de 2017) WO 2015/077360 (publicada em 28 de maio de 2015), publicação US N° 2016/0280729 (publicada em 29 de setembro de 2016), WO 2012/094248 (publicada em 12 de julho de 2012), patente US N° 9.156.874 (concedida em 15 de agosto de 2013), WO 2012/094248 (publicada em 12 de julho, 2012), patente US N° 9.095.599 (concedida em 4 de agosto de 2015), publicação US N° 2014/0038916 (publicada em 6 de fevereiro de 2014), WO 2010/091386 (publicada em 12 de agosto de 2010), patente US N°
8.609.627 (concedida em 17 de dezembro de 2013), patente US N°
9.173.893 (concedida em 3 de novembro de 2015), WO 2010/036407 (publicada em 1° de abril de 2010), WO 2010/030858 (publicada em 18 de março de 2010), patente US N° 8.163.707 (concedida em 24 de abril de 2012), WO 2008/089105 (publicada em 24 de julho de 2008), patente US N° 8.440.813 (concedida em 14 de maio de 2013), WO 2003/072757 (publicada em 4 de setembro de 2003), patente US N° 7.285.658 (concedida em 23 de outubro de 2007), patente US N° 7.598.230 (concedida em 6 de outubro de 2009) e/ou patente US N° 7.807.653 (concedida em 5 de outubro de 2010).
[0127] Exemplos de compostos úteis nos métodos aqui fornecidos são descritos por referência aos esquemas sintéticos ilustrativos quanto à sua preparação geral, abaixo, e os exemplos específicos em seguida. Um versado na técnica reconhecerá que, para obter os vários compostos da presente invenção, os materiais de partida podem ser adequadamente selecionados de modo que os substituintes mais desejados sejam utilizados através do esquema reacional com ou sem proteção, conforme for adequado, para resultar no produto desejado. Alternativamente, pode ser necessário ou desejável empregar, em lugar do substituinte mais desejado, um grupo adequado que possa ser carreado através dos esquemas de reação e substituído conforme adequado com o substituinte desejado. Exceto onde especificado em contrário, as variáveis são conforme definido acima em referência à Fórmula (I). As reações podem ser realizadas entre o ponto de fusão e a temperatura de refluxo do solvente, e de preferência entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente. As reações podem ser aquecidas utilizando aquecimento convencional ou aquecimento por micro-ondas. As reações podem, também, ser conduzidas em recipiente de pressão lacrado acima da temperatura de refluxo normal do solvente.
[0128] Compostos exemplificadores úteis nos métodos aqui fornecidos são descritos com referência aos esquemas sintéticos ilustrativos quanto à sua preparação geral, abaixo, e os seguintes exemplos específicos.
ESQUEMA 1
[0129] De acordo com o ESQUEMA 1, um composto de ciclopentanol quiral da fórmula (IV) é preparado por meio de uma redução simétrica de um composto de ciclopentenona comercialmente disponível ou sinteticamente acessível da fórmula (III), em que Ra é tritil (trifenilmetila). Por exemplo, um catalisador quiral catalítico, como o catalisador de metil-CBS e um agente redutor de boro-hidreto, como sulfeto de dimetilborano (BMS: BH3.Me2S) gera (S)-2- ((tritilóxi)metil)ciclopent-2-en-1-ol. Proteção de benzila de um composto da fórmula (IV), empregando brometo de benzila ou cloreto de benzila, e uma base de hidreto de metal alcalino adequada como NaH, KH ou LiH, de preferência NaH; em um solvente adequado, como DMF, e similares; iodeto de tetrabutilamônio (TBAI); a temperaturas na faixa de 0°C até a temperatura ambiente; fornece o álcool protegido por benzila. A desproteção do grupo protetor tritila empregando ácido trifluoroacético e trietilsilano, seguido pela proteção subsequente de Bn, produz o composto protegido por bis-benzila da fórmula (V), onde Rb é Bn.
ESQUEMA 2
[0130] De acordo com o ESQUEMA 2, a oxidação da ligação dupla carbono-carbono de um composto da Fórmula (V), onde Rb é Bn, é realizada com um agente oxidante que proporciona hidroxilação seletiva da ligação dupla carbono-carbono para produzir os compostos de 1,2- diol das Fórmulas (VIa) e (VIb). De preferência, a di-hidroxilação é alcançada com o uso de tetróxido de ósmio como um catalisador e um oxidante, como NMO (N-óxido de N-metilmorfolina) em uma mistura de solvente como THF/água, em temperatura ambiente. A proteção de tritila da mistura de álcool dos compostos das fórmulas (VIa e VIb) é obtida de acordo com procedimentos conhecidos pelo versado na técnica, por exemplo, usando [cloro(difenil)metil]benzeno (cloreto de trifenilmetila, cloreto de tritila ou (TrCl)); um catalisador, como AgNO3; uma base orgânica terciária, como piridina, colidina e similares; em um solvente adequado, como THF, e similares. A fluoração subsequente por tratamento com um agente de fluoração, como DAST, em um solvente adequado, como DCM, e similares, fornece um composto da Fórmula (VII), onde Rb é Bn, e Ra é Trt. ESQUEMA 3
[0131] De acordo com o ESQUEMA 3, empregando-se os métodos conhecidos pelo versado na técnica, uma série de etapas de desproteção e reproteção de um composto da fórmula (VII), onde Rb é Bn, e Ra é Trt, produz um composto da fórmula (VIII), onde Rc é TBS. Por exemplo, a desproteção de Trt é obtida empregando-se ácido trifluoroacético/trietilsilano; A proteção de TBS do álcool correspondente é obtida mediante o uso de TBS-Cl/imidazol; A desproteção de Bn é obtida sob condições hidrogenolíticas; e a proteção de TBS, para finalizar. A oxidação de um composto de álcool da fórmula (VIII), onde Rc é TBS, é obtida com um agente oxidante adequado, como periodinano de Dess-Martin. Em uma modalidade preferencial, um composto da fórmula (VIII) é tratado com periodinano de Dess-Martin; em um solvente adequado, como diclorometano, e similares; em faixas de temperatura de cerca de 0°C a cerca de 25°C; durante um período de cerca de 0,5 a 4 horas; para produzir um composto da fórmula (IX). Um composto de olefina da fórmula (X) é preparado a partir de um composto da fórmula (IX) usando um agente de olefinação como reagente de Tebbe ou um reagente do tipo Wittig, como brometo de metiltrifenilfosfônio; com uma base como t-butóxido de potássio, terc- pentóxido de potássio e similares; em um solvente adequado, como THF, tolueno e similares. Em um método preferencial, o solvente é tolueno e a base é terc-pentóxido de potássio. ESQUEMA 4
[0132] De acordo com o ESQUEMA 4, um composto da fórmula (IX), onde Rc é TBS, reage em uma reação de olefinação do tipo Wittig, conforme anteriormente descrito, para fornecer um composto de olefina da fórmula (X). A hidroxilação de um composto da fórmula (X) é, de preferência, realizada em um solvente adequado com dióxido de selênio, como agente oxidante. A reação é conduzida com ou sem a presença de um hidroperóxido, por exemplo, peróxido de hidrogênio ou um hidroperóxido de alquila, como por exemplo, hidroperóxido de t- butila (TBHP); em um solvente adequado, como diclorometano, clorofórmio ou piridina, ou misturas dos mesmos; a uma temperatura na faixa de cerca de 0°C até 25°C; durante um período de cerca de 2 a 24 horas; para fornecer os compostos de Fórmula (XIa) e (XIb). Um composto da fórmula (XIa) é convertido em um composto da (XIb) primeiro protegendo a porção hidroxila com um grupo protetor de ácido para-nitrobenzoico (PNBA) e, em seguida, desprotegendo com amônia/MeOH.
[0133] De maneira similar, (2R,3S)-3-(benzilóxi)-2-((benzilóxi) metil)-2-fluorociclopentan-1-ona reage em uma reação de olefinação do tipo Wittig, conforme anteriormente descrito, para fornecer (((1R,2S)-2- (benzilóxi)-1-fluoro-5-metilenociclopentil)metóxi)metil)benzeno. A hidroxilação subsequente empregando as condições anteriormente descritas fornece (3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol. ESQUEMA 5
[0134] De acordo com o ESQUEMA 5, um composto comercialmente disponível ou sinteticamente acessível da fórmula (XII), onde Rd é um grupo protetor como pivaloíla (Piv), TIPS (tri-isopropilsilila) e similares, é reduzido empregando-se condições conhecidas pelo versado na técnica. Por exemplo, um composto da fórmula (XII) é reduzido empregando-se um agente redutor, como hidreto de di- isobutilalumínio (DIBAL-H); em um solvente adequado, como THF, e similares; a uma temperatura de cerca -70°C; para fornecer um composto de lactol da fórmula (XIII), onde Rd é Piv ou TIPS (tri- isopropilsilil). Um composto diol da fórmula (XIV) é preparado pela reação de um composto de lactol de fórmula (XIII) com brometo de etinilmagnésio; em um solvente adequado, como THF; a temperaturas na faixa de -70°C até 30°C. O composto de álcool propargílico da fórmula (XIV) é protegido pela reação com cloroformiato de etila; uma base, como piridina, e similares; em um solvente adequado, como DCM; a uma temperatura de cerca de 0°C, para fornecer um composto da fórmula (XV), onde Re é CO2Et.
[0135] O composto de álcool propargílico da fórmula (XIV) é protegido por uma variedade de reagentes adequados, incluindo terc- butil-cloro-dimetil-silano na presença de uma base, como imidazol; em um solvente orgânico adequado, como DMF, DCM e similares; para produzir um composto da fórmula (XV), onde Rm é TBS.
[0136] De maneira similar, 2,3-O-isopropilideno-beta-D- ribofuranose é reagida com brometo de etinilmagnésio, conforme anteriormente descrito, para produzir 1-((4S,5R)-5-((R)-1-hidróxi-2-((4- metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1- ol. A proteção de TBS, conforme anteriormente descrito, fornece (1R)- 1-((4R,5R)-5-(1-((terc-butildimetilsilil)óxi)prop-2-in-1-il)-2,2-dimetil-1,3- dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etan-1-ol. ESQUEMA 6
[0137] De acordo com o ESQUEMA 6, a conversão de um composto de fórmula (XVI), onde Rd é TIPS, no composto derivado de tiocarbonil imodazolida de fórmula (XVII), é obtida mediante a reação de um composto da fórmula (XVI) com 1,1′-tiocarbonilimidazol (TCDI); em um solvente adequado, como DCM e similares; para produzir um composto de tiocarbonil-imidazolida da fórmula (XVII). A subsequente desoxigenação de radical livre de Barton produz um composto da fórmula (XVIII). Por exemplo, um composto da fórmula (XVII) reage com um iniciador radical, como azobisisobutironitrila (AIBN) e similares; hidreto de tri-n-butilestanho; em um solvente adequado, como tolueno, e similares; a temperaturas na faixa de 30°C até 110°C; para produzir o composto desejado da fórmula (XVIII). A desproteção de um composto da fórmula (XVIII), empregando as condições conhecidas pelo versado na técnica, fornece os compostos das fórmulas (XIXa) e (XIXb).
ESQUEMA 7
[0138] De acordo com o ESQUEMA 7, um composto da fórmula (XV), onde Rd é pivaloíla (Piv), e Rc é TBS, é oxidado empregando as condições de periodinano de Dess-Martin, conforme anteriormente descrito. A olefinação subsequente de um composto de α-hidroxicetona empregando as condições anteriormente descritas fornece um composto da fórmula (XX). Por exemplo, a reação com bromometiltrifenilfosforano; uma base como n-BuLi; em um solvente adequado, como THF; fornece um composto da fórmula (XX). A epoxidação da olefina terminal de um composto da fórmula (XX) é alcançada com um reagente como m-CPBA, e similares; em um solvente adequado, como DCM; a temperaturas na faixa de 0°C até 45°C; para fornecer um composto da fórmula (XXI).
[0139] De maneira similar, (1R)-1-((4R,5R)-5-(1-((terc- butildimetilsilil)óxi)prop-2-in-1-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4- metoxifenil)difenilmetóxi)etan-1-ol é oxidado empregando-se as condições de periodinano de Dess-Martin anteriormente descritas para fornecer 1-((4S,5R)-5-((S)-1-((terc-butildimetilsilil)óxi)prop-2-in-1-il)-2,2- dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etan-1-ona. A olefinação de 1-((4S,5R)-5-((S)-1-((terc-butildimetilsilil)óxi)prop-2-in-1- il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etan-1- ona sob as condições anteriormente descritas produz (((S)-1-((4R,5R)- 5-(3-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)prop-1-en-2-il)-2,2-dimetil-1,3- dioxolan-4-il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila. A epoxidação de (((S)-1-((4R,5R)-5-(3-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)prop-1-en-2-il)- 2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila sob as condições anteriormente descritas fornece (((1S)-1-((4R,5S)-5- (2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)oxiran-2-il)-2,2-dimetil-1,3- dioxolan-4-il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila. ESQUEMA 8
[0140] De acordo com o ESQUEMA 8, um composto da Fórmula (XXI), em que Rd é Piv e Rc é TBS, sofre ciclização radicalar catalítica usando dicloreto de titanoceno (Cp2TiCl) como catalisador; na presença de Mn/cloridrato de 2,4,6-colidina ou Zn/2,4,6-colidina/cloreto de trimetilsilila; fornece os compostos das fórmulas (XXIIa) e (XXIIb). A proteção com DMTr é alcançada pela reação com cloreto de 4,4'- dimetoxitritila (DMTrCl); na presença de piridina, dimetilpiridina ou 2,4,6- trimetilpiridina (colidina); AgNO3; em um solvente adequado, como DCM, e similares. A desproteção do grupo protetor TBS empregando as condições conhecidas pelo versado na técnica fornece um composto da fórmula (XIIIa) e (XIIIb), em que Rd é Piv e Rf é DMTr.
[0141] De maneira similar, (((1S)-1-((4R,5S)-5-(2-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)oxiran-2-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4- il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila sofre ciclização radicalar catalítica, conforme anteriormente descrito, para fornecer ((3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol.
ESQUEMA 9
[0142] De acordo com o ESQUEMA 9, um composto de álcool da fórmula (XXIV) onde Rg é MMTr (monometoxitritila) e Rc é TBS; é oxidado sob as condições anteriormente descritas para fornecer o intermediário de aldeído. A formação de oxima subsequente empregando condições conhecidas pelo versado na técnica fornece um composto da fórmula (XXV). Por exemplo, o intermediário de aldeído é reagido com cloridrato de hidroxilamina; em um solvente adequado, como piridina; para produzir um composto de aldozima da fórmula (XXV). Um composto de oxima da fórmula (XXV) é desidratado empregando-se a metodologia de desidratação de oxima convencional. Por exemplo, a reação de um composto de oxima da fórmula (XXV) com 1,1'-carbonildi-imidazol (CDI); em um solvente adequado, como ACN, e similares; a temperaturas na faixa de 0°C até 30°C; para fornecer um composto nitrila de fórmula (XXVI), em que Rg é MMTr (monometoxitritila) e Rc é TBS.
[0143] De maneira similar, 1-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona é oxidada empregando-se as condições anteriormente descritas para fornecer (1S,3S,5S)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil) (fenil) metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)- 2-metilenociclopentano-1-carbaldeído. A formação de oxima empregando as condições anteriormente descritas fornece (E)-5-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5- metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-
carbaldeído oxima. A desidratação da oxima produz (1S,3S,5S)-5- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2- metilenociclopentano-1-carbonitrila.
ESQUEMA 10
[0144] De acordo com o ESQUEMA 10, um composto acetal cíclico da fórmula (XXVI), onde Rg é MMTr (monometoxitritila) e Rc é TBS, sofre desproteção e reproteção empregando as condições conhecidas pelo versado na técnica ou conforme foi anteriormente descrito, para formar um composto de éter silílico cíclico da Fórmula (XXVII), onde Rh é Bz (benzoíla). Um composto de Fórmula (XXVIII) é formado em duas etapas a partir de um composto de Fórmula (XXVII). Em uma primeira etapa, a formação do tiocarbonil imidaxolídeo empregando as condições anteriormente descritas, seguido por uma segunda etapa de desoxigenação de radical livre empregando as condições anteriormente descritas, fornece um composto da fórmula (XXVIII), em que Rh é Bz (benzoíla). A desproteção do grupo protetor benzoíla empregando as condições conhecidas pelo versado na técnica fornece (6aS,8R,9aS)-8- hidróxi-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metilenotetraidrociclopenta[f][1,3,5,2,4] trioxadisilocino-6a(6H)-carbonitrila.
ESQUEMA 11
[0145] Nucleobases, nucleobases modificadas ou análogos de nucleobase do anel da fórmula B comercialmente disponíveis ou acessíveis sinteticamente, são protegidos (e desprotegidos) empregando metodologias estabelecidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ª edição, John Wiley & Sons, 1999.
[0146] Por exemplo, a timina é protegida com benzoíla empregando cloreto de benzoíla (BzCl); uma base, como piridina; em um solvente, como THF, e similares; para produzir a 1,3-dibenzoil-5-metilpirimidino- 2,4(1H,3H)-diona protegida por Bz. A desproteção seletiva de um dos grupos protetores Bz é alcançada usando K2CO3; em um solvente, como dioxano; para produzir 3-benzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona.
[0147] A proteção seletiva do carbamato do grupo amino exocíclico de 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina é obtida sob condições conhecidas pelo versado na técnica. Por exemplo, a reação de 7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina com dicarbonato de di-terc-butila (Boc2O); DMAP; em um solvente adequado, como THF, e similares; fornece o composto protegido com tri-BOC N,N,N-Tri-BOC-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina. A desproteção moderada seletiva de um dos grupos protetores BOC é obtida usando solução aquosa de NaHCO3 em um solvente adequado, como MeOH, para produzir N,N- Di-BOC-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina.
[0148] A amina exocíclica da guanina é seletivamente protegida, por exemplo, pelo tratamento com anidrido isobutírico; a temperaturas na faixa de 30°C até 155°C; em um solvente adequado, como DMF; durante um período de cerca de 4 horas; para produzir N-(6-oxo-6,9-di- hidro-1H-purin-2-il)isobutiramida. A acilação de N-(6-oxo-6,9-di-hidro- 1H-purin-2-il)isobutiramida, empregando um reagente de acilação selecionado dentre um derivado de acila, um haleto de acila como cloreto de acetila e similares, e um anidrido ácido, como anidrido acético, anidrido propiônico, e similares; em um solvente adequado, como DMF; produz N-(9-acetil-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il) isobutiramida. A porção 4-oxo de N-(9-acetil-6-oxo-6,9-di-hidro-1H- purin-2-il)isobutiramida é protegida como a espécie de difenilcarbamato usando, por exemplo, cloreto de difenilcarbamoíla para fornecer difenilcarbamato de 9-acetil-2-isobutiramido-9H-purin-6-ila. A desproteção do grupo protetor de acetila é alcançada em EtOH/água a uma temperatura de cerca de 100°C, durante um período de cerca de 2 h, para produzir difenilcarbamato de 2-isobutiramido-9H-purin-6-ila.
[0149] De acordo com o ESQUEMA 11, um composto de Fórmula (XXXIV) (bem como de fórmulas (XIa), (XIb), (XIXa), (XIXb), (XXIIIa), (XXIIIb) e (6aS,8R,9aS)-8-hidróxi-2,2,4,4-tetraisopropil-7- metilenotetraidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocino-6a(6H)- carbonitrila), onde PG é um grupo protetor adequado, e R1a é H, F, CH2O-DMTr, CN, reage com o anel B, onde o anel B é uma nucleobase ligada a nitrogênio, uma nucleobase modificada ou um análogo de nucleobase; sob condições de Mitsonobu. Por exemplo, usando trifenilfosfina; uma base como azodicarboxilato de di-terc-butila (DIAD), azodicarboxilato de dietila (DEAD) e similares; em um solvente, como THF, ACN, dioxano ou uma mistura dos mesmos; a uma temperatura na faixa de 25 a 110°C; para fornecer um composto da fórmula (XXXV).
ESQUEMA 12
[0150] Empregando os métodos descritos no ESQUEMA 9, os compostos da fórmula (XXIX), onde Rf é DMTr, e o anel B é uma nucleobase ligada a nitrogênio, nucleobase modificada ou análogo de nucleobase; são oxidados empregando-se as condições anteriormente descritas. A formação de oxima e os métodos de desidratação anteriormente descritos fornecem um composto de ciano da fórmula (XXX). ESQUEMA 13
[0151] De acordo com o ESQUEMA 13, a ativação do composto álcool da fórmula (XXXI), onde Rd é Piv, e o anel B é uma nucleobase ligada a nitrogênio, nucleobase modificada ou análogo de nucleobase, como 6-cloro-9l2-purina, adenina, timina, uracila e similares, (cada um opcionalmente protegido com um grupo protetor adequado como Bz, BOC e similares); com anidrido tríflico (TfO2); Piridina, em um solvente adequado, como DCM, e similares; fornece um composto da fórmula (XXIII). A subsequente reação de substituição nucleofílica de um composto sulfonato da fórmula (XXXII), empregando-se os métodos conhecidos pelo versado na técnica, fornece um composto da fórmula (XXXIIII). Por exemplo, a reação com fluoreto de tetrabutilamônio
(TBAF), em um solvente adequado como THF, e similares, produz um composto da fórmula (XXXIII), em que Hal é F. Um composto da fórmula (XXXII) é reagido com LiCl, em um solvente como DMF, a uma temperatura de cerca de 40°C, para fornecer um composto da fórmula (XXXIII), em que Hal é Cl. ESQUEMA 14
[0152] De acordo com o ESQUEMA 14, 4-amino-1-((1S,3S,4S)-3- (fluorometil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidin- 2(1H)-ona é preparada a partir de um composto da fórmula (XXXIII), onde Rd é Piv, Hal é F e o anel B é a nucleobase uracila, primeiramente pela reação com cloreto de 2,4,6-tri-isopropilbenzenossulfonila (TPSCl) na presença de dimetilaminopiridina (DMAP); trietilamina; em um solvente adequado, como acetonitrila e similares; amonólise subsequente com hidróxido de amônio, NH3.H2O, ou uma amina forte; na presença de um solvente orgânico inerte adequado; a temperaturas na faixa de cerca de 10°C a 50°C; durante cerca de uma a 12 horas. A desproteção do grupo protetor Piv empregando condições conhecidas pelo versado na técnica, e conforme descrito, fornece 4-amino-1- ((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil) pirimidin-2(1H)-ona.
[0153] Um composto da fórmula (XXXIII), em que Rd é Piv, Hal é F, e o anel B é o análogo de nucleobase 6-cloro-9λ2-purina, é reagido sob condições de amonólise, como por exemplo, em uma reação com amônia; em um solvente adequado, como THF; a temperaturas na faixa de cerca de 10°C a 50°C; durante cerca de uma a 12 horas. A desproteção subsequente do grupo protetor Piv fornece (1S,2S,4S)-4- (6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-2-(hidroximetil)-3- metilenociclopentan-1-ol. ESQUEMA 15
[0154] Os compostos da fórmula (XXXV) que têm grupos protetores são desprotegidos de acordo com as metodologias estabelecidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ª edição, John Wiley & Sons, 1999, para produzir os compostos da Fórmula (I).
[0155] Por exemplo, compostos com grupos protetores BOC são clivados sob condições ácidas padrão, como TFA, HCl e similares. A desproteção do TBS é obtida mediante o uso de fluoreto de tetrabutilamônio (TBAF). A desproteção de Bz é obtida com amônia ou alcóxido de metal alcalino em álcool, de preferência amônia em metanol ou alcóxido de sódio em metanol, a uma temperatura de −2°C. a 100°C, de preferência de 25°C a 80°C, durante um período de 5 minutos a 3 dias, de preferência de 30 minutos a 4 horas. A desproteção do grupo benzila é alcançada sob condições hidrogenolíticas. A clivagem do éster (Piv. CO2Et, e similares) é obtida sob condições básicas, como por exposição do éster a uma solução metanólica de metóxido de sódio, NaOH/MeOH e similares. A destritilação branda de uma monometoxitritila (MMtr) e 4,4-dimetoxitritila (DMTr) é alcançada sob condições conhecidas pelo versado na técnica. Por exemplo, usando um ácido, como ácido tricloroacético (TCA), ácido trifluoroacético (TFA) e similares, em um solvente adequado como DCM, e similares, à temperatura ambiente, durante um período de uma a 3 horas. A desproteção do carbamato de isobutila é alcançada sob condições neutras ou moderadamente básicas como NaOH/MeOH. ESQUEMA 16
[0156] De acordo com o ESQUEMA 16, um composto de trifosfato de nucleosídeo da Fórmula (IB) é preparado a partir de um composto de nucleosídeo da Fórmula (I) que emprega as condições conhecidas pelo versado na técnica. Por exemplo, a reação do nucleosídeo da Fórmula (I) com fosfato de trimetila, fosfato de trietila e similares; cloreto de fosforila; e N-metilimidazol para fornecer o intermediário monofosfato de nucleosídeo correspondente. A reação subsequente do monofosfato de nucleosídeo com o sal de tetrabutilamônio de pirofosfato, em um solvente adequado como DMF, e similares, fornece o trifosfato da Fórmula (IB). ESQUEMA 17
[0157] De acordo com o ESQUEMA 17, os compostos pró-fármacos de ariloxifosforamidato nucleosídeo da Fórmula (IC) são preparados pelo acoplamento dos compostos de nucleosídeo da Fórmula (I) com fosforocloridato pela ativação do intermediário de imidazólio com NMI (N-metilimidazol) ou por desprotonação 5′ do nucleosídeo com isoPrMgCl, t-BuMgCl e similares, e a subsequente substituição com o clorofosforamidato. Vale notar que essas diferentes abordagens sintéticas geralmente produzem misturas aproximadas de 1:1 dos compostos da Fórmula (IC) como diastereoisômeros no centro de fósforo (isômeros Sp e Rp; em que Ri é alquila C1-8.
[0158] Os compostos da Fórmula (I) podem ser convertidos em seus sais correspondentes com o uso de métodos conhecidos por um versado na técnica. Por exemplo, uma amina da Fórmula (I) é tratada com ácido trifluoroacético, HCl ou ácido cítrico em um solvente como Et2O, CH2Cl2, THF, MeOH, clorofórmio ou isopropanol para produzir a forma de sal correspondente. Alternativamente, sais de ácido trifluoro acético ou de ácido fórmico são obtidos como um resultado de condições de purificação por HPLC em fase reversa. As formas cristalinas dos sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da fórmula (I) podem ser obtidas na forma cristalina por recristalização a partir de solventes polares (incluindo misturas de solventes polares e misturas aquosas de solventes polares) ou a partir de solventes não- polares (incluindo misturas de solventes não-polares).
[0159] Onde os compostos têm, de acordo com esta invenção, ao menos um centro quiral, os mesmos devem existir adicionalmente como enantiômeros. Quando os compostos possuem dois ou mais centros quirais, os mesmos devem existir adicionalmente como diastereômeros. Deve ser entendido que todos esses isômeros e misturas dos mesmos são abrangidos dentro do escopo da presente invenção.
[0160] Os compostos preparados de acordo com os esquemas acima descritos podem ser obtidos como formas únicas, como enantiômeros únicos, por síntese específica quanto à forma ou por resolução. Os compostos preparados de acordo com os esquemas acima podem ser alternativamente obtidos como misturas de várias formas, como misturas racêmicas (1:1) ou não racêmicas (não 1:1). Nos casos em que são obtidas misturas racêmicas e não racêmicas de enantiômeros, os enantiômeros únicos podem ser isolados com o uso de métodos de separação convencionais conhecidos por um versado na técnica, como cromatografia quiral, recristalização, formação de sal diastereomérico, derivatização em adutos diasteroméricos, biotransformação ou transformação enzimática. Nos casos em que forem obtidas misturas regioisoméricas ou diastereoméricas, conforme aplicável, isômeros únicos podem ser separados com o uso de métodos convencionais como cromatografia ou cristalização.
[0161] Em algumas modalidades, a variação dos substituintes sobre um composto aqui descrito, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode fazer com que o fósforo seja um centro quiral. Em algumas modalidades, o fósforo pode estar na configuração (R) Em algumas modalidades, o fósforo pode estar na configuração (S). Exemplos das duas configurações são: e
[0162] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser enriquecido na configuração (R) ou (S) em relação ao fósforo. Por exemplo, uma das configurações (R) e (S) em relação ao átomo de fósforo pode estar presente em uma quantidade > 50%, ≥ 75%, ≥ 90%, ≥ 95% ou ≥ 99% em comparação com a quantidade da outra configuração (R) ou (S) em relação ao átomo de fósforo.
[0163] Ao neutralizar a carga na porção de fosfonato da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, a penetração da membrana celular pode ser facilitada como resultado do aumento da lipofilicidade do composto. Uma vez absorvidos e captados dentro da célula, os grupos fixados ao fósforo podem ser facilmente removidos por esterases, proteases e/ou outras enzimas. Em algumas modalidades, os grupos fixados ao fósforo podem ser removidos por simples hidrólise. Dentro da célula, o fosfonato liberado dessa forma pode, então, ser metabolizado por enzimas celulares no monofosfonato ou no difosfonato ativo (por exemplo, um fosfono difosfato). Além disso, em algumas modalidades, a variação dos substituintes em um composto aqui descrito, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode auxiliar a manter a eficácia do composto através da redução dos efeitos indesejáveis.
[0164] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode agir como um terminador de cadeia de um vírus e inibir a replicação do vírus, sendo que o vírus pode ser HBV, HDV e/ou HIV. Por exemplo, os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, podem ser incorporados em uma cadeia de DNA do vírus (como HBV, HDV e/ou HIV) e, em seguida, nenhum alongamento adicional é observado.
[0165] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma maior estabilidade metabólica e/ou plasmática. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser mais resistente à hidrólise e/ou mais resistente às transformações enzimáticas. Por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter estabilidade metabólica aumentada, estabilidade plasmática aumentada e/ou pode ser mais resistente à hidrólise. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter propriedades aprimoradas. Uma lista não limitadora de exemplos de propriedades inclui, mas não se limita, ao aumento da meia vida biológica, aumento da biodisponibilidade, aumento da potência, uma resposta in vivo sustentada, aumento dos intervalos de dosagem, diminuição das quantidades de dosagem, diminuição da citotoxicidade, redução das quantidades necessárias para tratamento de condições das doenças, redução da carga viral, redução da carga viral plasmática, aumento da contagem de linfócitos T CD4+, redução no tempo de soroconversão (ou seja, do tempo para o vírus se tornar indetectável no soro do paciente), aumento da resposta viral sustentada, uma redução da morbidade ou mortalidade nos resultados clínicos, diminuição ou prevenção de infecções oportunistas, aumento da adesão do indivíduo e compatibilidade com outros medicamentos. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma meia vida biológica maior que 24 horas. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma atividade antiviral mais potente (por exemplo, uma EC50 menor em um ensaio de replicon de HIV, HBV e/ou HDV) em comparação com o padrão atual de tratamento. Composições Farmacêuticas
[0166] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a uma composição farmacêutica, que pode incluir uma quantidade eficaz de um ou mais compostos aqui descritos (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) e um veículo farmaceuticamente aceitável, diluente, excipiente ou combinação dos mesmos.
[0167] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica pode incluir um único diastereômero de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo (por exemplo, um único diastereômero está presente na composição farmacêutica a uma concentração maior que 99% em comparação com a concentração total dos outros diastereômeros). Em outras modalidades, a composição farmacêutica pode incluir uma mistura de diastereômeros de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a composição farmacêutica pode incluir uma concentração de um diastereômero de > 50%, ≥ 60%, ≥ 70%, ≥ 80%, ≥ 90%, ≥ 95% ou ≥ 98%, em comparação com a concentração total de outros diastereômeros. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica inclui uma mistura de 1:1 de dois diastereômeros de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0168] O termo "composição farmacêutica" se refere a uma mistura de um ou mais dos compostos aqui revelados com outros componentes químicos, como diluentes ou veículos. A composição farmacêutica facilita a administração do composto a um organismo. As composições farmacêuticas também podem ser obtidas pela reação de compostos com ácidos inorgânicos ou orgânicos como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, e ácido salicílico. As composições farmacêuticas serão geralmente adaptadas à via de administração específica pretendida. Uma composição farmacêutica é adequada para aplicações humanas e/ou veterinárias.
[0169] O termo "fisiologicamente aceitável" define um veículo, diluente ou excipiente que não impede a atividade biológica e as propriedades do composto.
[0170] Como usado aqui, um "veículo" se refere a um composto que facilita a incorporação de um composto nas células ou nos tecidos. Por exemplo, mas não se limitando, o sulfóxido de dimetila (DMSO) é um veículo comumente utilizado que facilita a absorção de muitos compostos orgânicos nas células ou tecidos de um indivíduo.
[0171] Como usado aqui, um "diluente" se refere a um ingrediente em uma composição farmacêutica que não possui atividade farmacológica, mas pode ser farmaceuticamente necessário ou desejável. Por exemplo, um diluente pode ser usado para aumentar o volume de um fármaco potente cuja massa é pequena demais para fabricação e/ou administração. Ele também pode ser um líquido para a dissolução de um fármaco a ser administrado por injeção, ingestão ou inalação. Uma forma de diluente comum na técnica é uma solução aquosa tamponada por exemplo, mas não se limitando à solução salina tamponada com fosfato que imita a composição do sangue humano.
[0172] Como usado aqui, um "excipiente" se refere a uma substância inerte que é adicionada a uma composição farmacêutica para fornecer, sem limitação, volume, consistência, estabilidade, capacidade de ligação, lubrificação, capacidade de desintegração etc., à composição. Um "diluente" é um tipo de excipiente.
[0173] As composições farmacêuticas aqui descritas podem ser administradas a um paciente humano per se, ou em composições farmacêuticas onde elas são misturadas com outros ingredientes ativos, tal como em terapia de combinação, ou veículos, diluentes, excipientes ou combinações dos mesmos. A formulação adequada é depende da via de administração escolhida. As técnicas para a formulação e administração dos compostos aqui descritos são conhecidas pelos versados na técnica.
[0174] As composições farmacêuticas aqui reveladas podem ser fabricadas de uma forma conhecida, por exemplo, através de processos de mistura, dissolução, granulação, fabricação de drágeas, levigação,
emulsificação, encapsulação, aprisionamento ou formação de comprimidos. Adicionalmente, os ingredientes ativos estão contidos em uma quantidade eficaz para se obter o propósito ao qual se destina. Muitos dos compostos usados nas combinações farmacêuticas aqui reveladas podem ser fornecidos como sais com contraíons farmaceuticamente compatíveis.
[0175] Várias técnicas para se administrar um composto existem na arte, incluindo, mas não se limitando a, aplicação oral, retal, tópica, aerossol, injeção e parenteral, incluindo injeções intramusculares, subcutâneas, intravenosas, intramedulares, intratecais, intraventricular direta, intraperitoneal, intranasal e intraocular.
[0176] Pode-se também administrar o composto a um local em vez de uma forma sistêmica, por exemplo, através de injeção do composto diretamente na área infectada, frequentemente em uma formulação de depósito ou de liberação sustentada. Além disso, pode-se administrar o composto em um sistema de liberação de fármacos direcionado, por exemplo, em um lipossomo revestido com um anticorpo tecido- específico. Os lipossomas podem ser tomados como alvo e absorvidos seletivamente pelo órgão.
[0177] As composições podem, se desejado, ser apresentadas em uma embalagem ou dispositivo aplicador que pode conter uma ou mais formas de dose unitária contendo o ingrediente ativo. A embalagem pode, por exemplo, compreender folha metálica ou plástica, tal como uma embalagem blister. A embalagem ou o dispositivo aplicador pode ser acompanhada(o) de instruções para a administração. A embalagem ou o dispositivo aplicador pode também ser acompanhada(o) de uma nota associada ao recipiente sob a forma prescrita por uma agência governamental que regula a fabricação, o uso ou a venda de fármacos, cuja nota reflete a aprovação pela agência da forma da droga para administração a seres humanos ou animais. Esta nota, por exemplo,
pode ser o rótulo aprovado pelo FDA (U.S. Food and Drug Administration) para fármacos de prescrição, ou a bula aprovada. As composições que podem incluir um composto aqui descrito formulado em um veículo farmacêutico compatível podem também ser preparadas, colocadas em um recipiente adequado, e identificadas para o tratamento de uma condição indicada. Métodos de Uso
[0178] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um método de tratamento e/ou melhora de uma doença ou condição que pode incluir a administração a um indivíduo de uma quantidade eficaz de um ou mais compostos aqui descritos, como um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outras modalidades aqui descritas referem-se a um método de tratamento e/ou melhora de uma doença ou condição que pode incluir a administração a um indivíduo identificado como sofrendo da doença ou condição de uma quantidade eficaz de um ou mais compostos aqui descritos, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0179] Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de tratamento de uma infecção causada por HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo de infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farma- cêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV.
[0180] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descritos (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para tratamento de uma infecção causada por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica aqui descrita. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica aqui descrita.
[0181] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de inibição da replicação de HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medicamento para inibição da replicação do HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), para inibir a replicação de HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos.
[0182] Em algumas modalidades, a infecção por HBV pode ser uma infecção por HBV aguda. Em algumas modalidades, a infecção por HBV pode ser uma infecção por HBV crônica.
[0183] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de cirrose hepática que é desenvolvido por causa de uma infecção por HBV e/ou HDV, que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de cirrose hepática e/ou colocar em contato uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em um indivíduo que sofre de cirrose hepática com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica, que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de cirrose hepática com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar cirrose hepática.
[0184] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de câncer de fígado (como carcinoma hepatocelular) que é desenvolvido por causa de uma infecção por HBV e/ou HDV, que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de câncer de fígado e/ou colocar em contato uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em um indivíduo que sofre de câncer de fígado com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica, que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer de fígado (como um carcinoma hepatocelular) com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar câncer de fígado (como carcinoma hepatocelular).
[0185] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de insuficiência hepática que é desenvolvido por causa de uma infecção por HBV e/ou HDV, que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de insuficiência hepática e/ou colocar em contato uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em um indivíduo que sofre de insuficiência hepática com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica, que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de insuficiência hepática com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar insuficiência hepática.
[0186] Vários indicadores para determinar a eficácia de um método para tratar uma infecção causada por HBV e/ou HDV também são conhecidos pelos versados na técnica. Exemplos de indicadores adequados incluem, mas não se limitam a, uma redução na carga viral indicada pela redução no DNA de HBV (ou carga), antígeno de superfície de HBV (HBsAg) e antígeno e de HBV (HBeAg), uma redução na carga viral plasmática, uma redução na replicação viral, uma redução no tempo para soroconversão (vírus indetectável no soro do paciente), um aumento na taxa de resposta viral sustentada à terapia, uma melhora na função hepática e/ou uma redução da morbidade ou mortalidade nos resultados clínicos.
[0187] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir as titulações virais de HBV e/ou HDV a níveis indetectáveis, por exemplo, de cerca de 10 a cerca de 50 ou de cerca de 15 a cerca de 25 unidades internacionais/mL de soro, ou a menos de cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HBV e/ou de HDV em comparação com a carga viral de HBV e/ou de HDV antes do fornecimento do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HBV e/ou HDV para menos que cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para alcançar uma redução na carga viral de HBV e/ou HDV no soro do indivíduo até um nível indetectável e/ou uma redução de cerca de 1,5-log a cerca de 2,5-log, uma redução de cerca de 3-log a cerca de 4-log, ou uma redução maior que cerca de 5- log em comparação com a carga viral antes da administração do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a carga viral de HBV e/ou HDV pode ser medida antes do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ser fornecido, e novamente após a conclusão de pelo menos uma parte do regime de tratamento com o composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo (por exemplo, 1 mês após o início ou a conclusão).
[0188] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução de ao menos 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100 vezes ou mais reduções na replicação do HBV e/ou do HDV em relação aos níveis de pré-tratamento em um indivíduo, conforme determinado após a conclusão, ou a conclusão de ao menos uma parte do regime de tratamento (por exemplo, 1 mês após o início ou a conclusão). Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação do HBV e/ou do HDV em relação aos níveis de pré- tratamento na faixa de mais de 1 vez, de cerca de 2 a cerca de 5 vezes, de cerca de 10 a cerca de 20 vezes, de cerca de 15 a cerca de 40 vezes, ou de cerca de 50 a cerca de 100 vezes. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação de HBV e/ou de HDV na faixa de mais de 0,5 log, de 1 a 1,5 log, de 1,5 log a 2 log, de 2 log a 2,5 log, de 2,5 a 3 log, de 3 log a 3,5 log ou de 3,5 log a 4 log ou maior da redução da replicação de HBV e/ou HDV em comparação com a redução da replicação de HBV e/ou HDV alcançada pelo padrão de tratamento de HBV e/ou HDV administrado de acordo com o padrão de tratamento, ou pode alcançar a mesma redução que a terapia padrão de tratamento em um período de tempo menor, por exemplo, em um mês, dois meses ou três meses, em comparação com a redução alcançada após seis meses de terapia com padrão de tratamento.
[0189] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para obter uma resposta viral sustentada, por exemplo, uma carga de DNA de HBV e/ou HDV não detectável ou substancialmente não detectável (por exemplo, menor que cerca de 25 ou menor que cerca de 15 unidades internacionais por mililitro de soro) encontrada no soro do indivíduo durante um período de ao menos cerca de um mês, de pelo menos cerca de dois meses, de pelo menos cerca de três meses, de pelo menos cerca de quatro meses, de pelo menos cerca de cinco meses ou de pelo menos cerca de seis meses após o término da terapia.
[0190] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode reduzir a carga viral de HBV e/ou de HDV por ao menos cerca de 10%, ao menos cerca de 20%, ao menos cerca de 25%, ao menos cerca de 30%, ao menos cerca de 35%, ao menos cerca de 40%, ao menos cerca de 45%, ao menos cerca de 50%, ao menos cerca de 55%, ao menos cerca de 60%, ao menos cerca de 65%, ao menos cerca de 70%, ao menos cerca de 75% ou ao menos cerca de 80% ou mais, em comparação com a carga viral de um indivíduo tratado com o padrão de tratamento, em um indivíduo não tratado ou em um indivíduo tratado com placebo. São conhecidos métodos de detecção da carga viral de HBV e/ou HDV pelos versados na técnica, e incluem métodos baseados em imunologia, como por exemplo, ensaios imunossorventes ligados à enzima (ELISA), radioimunoensaios e similares, que detectam anticorpos de HBV e/ou HDV e outros marcadores indicativos da carga viral de HBV e/ou HDV, e combinações dos mesmos.
[0191] Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de inibição da atividade do HIV, que pode incluir colocar em contato uma célula infectada com o HIV com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de inibição da atividade do HIV, que pode incluir administrar a um indivíduo infectado com o HIV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode inibir uma transcriptase reversa viral e, dessa forma, inibir a transcrição do RNA para DNA de HIV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode inibir uma HIV integrase. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode inibir a glicoproteína 120 (gp 120) do envelope viral.
[0192] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo da infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HIV. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HIV.
[0193] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por ou HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o ou HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica.
[0194] Algumas modalidades aqui reveladas se referem a um método de inibição da replicação do HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medicamento para inibir a replicação do
HIV, que pode incluir colocar uma célula infectada com HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), para inibir a replicação do HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica.
[0195] Em algumas modalidades aqui descritas, quando a infecção é causada por HIV e/ou o vírus é o HIV, o indivíduo sofre de uma infecção oportunista (OI). As OIs se aproveitam dos indivíduos com o sistema imunológico enfraquecido. Em algumas modalidades aqui descritas, um indivíduo que tem uma contagem de linfócitos T CD4+ menor que cerca de 200 células/mL tem um risco aumentado de desenvolver uma OI. Em algumas modalidades, as OIs ocorrem quando a contagem de linfócitos T CD4+ é menor que cerca de 500 células/mL. Em algumas modalidades, uma OI ocorre quando uma carga viral de HIV é maior que cerca de 100.000 cópias/mL. Em algumas modalidades, as cargas virais do HIV e/ou as contagens de linfócitos T CD4+ podem ser determinadas por metodologias convencionais de padrão de tratamento, por exemplo, através de ensaios de detecção de HIV por imunoensaio para a detecção de anticorpos de HIV e/ou antígeno p24 de HIV.
[0196] Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de tratamento de uma OI relacionada a uma infecção por HIV selecionada dentre candidíase, bronquite, pneumonite, esofagite, câncer cervical invasivo, coccidioidomicose, criptococose,
criptosporidiose intestinal crônica, doença do citomegalovírus, encefalopatia, herpes simplex, histoplasmose, isosporiose intestinal crônica, sarcoma de Kaposi, linfoma, complexo mycobacterium avium, tuberculose, pneumonia por Pneumocystis carinii, leucoencefalopatia multifocal progressiva, septicemia de salmonela, toxoplasmose do cérebro e síndrome de desperdício em um indivíduo que sofre de uma ou mais das condições supracitadas, que pode incluir fornecer ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto ou de uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método para prevenir e/ou tratar uma ou mais OI em um indivíduo com uma infecção por HIV que pode incluir fornecer ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Também é contemplado um método para reduzir ou eliminar uma ou mais Ois em um indivíduo que tem uma infecção por HCV fornecendo ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Em algumas modalidades, este método pode incluir retardar ou interromper a progressão de uma OI.
Em outras modalidades, o curso da OI pode ser revertido, e a estase ou a melhora da função hepática é contemplada.
Em algumas modalidades, um ou mais dentre candidíase, bronquite, pneumonite, esofagite, câncer cervical invasivo, coccidioidomicose, criptococose, criptosporidiose intestinal crônica, doença do citomegalovírus, encefalopatia, herpes simplex, histoplasmose, isosporiose intestinal crônica, sarcoma de Kaposi, linfoma, complexo mycobacterium avium, tuberculose, pneumonia por Pneumocystis carinii, leucoencefalopatia multifocal progressiva,
septicemia de salmonela, toxoplasmose do cérebro e síndrome de desperdício podem ser tratados mediante o contato de uma célula infectada com HIV com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo).
[0197] Dois tipos de HIV foram caracterizados: HIV-1 e HIV-2. O HIV-1 é mais virulento e mais infeccioso, e tem uma prevalência global, enquanto o HIV-2 é menos virulento e é geograficamente limitado. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser eficaz para tratar o HIV-1. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser eficaz para tratar o HIV-2. Em algumas modalidades, um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) pode ser eficaz para tratar os dois genótipos de HIV (HIV-1 e HIV-2).
[0198] Vários indicadores para determinar a eficácia de um método para tratar uma infecção por HIV são conhecidos pelos versados na técnica. Exemplos de indicadores adequados incluem, mas não se limitam, a uma redução na carga viral, uma redução na carga viral plasmática, um aumento da contagem de linfócitos T CD4+, uma redução na replicação viral, uma redução no tempo de seroconversão (vírus indetectável no soro do paciente), um aumento da taxa de resposta viral sustentada por terapia, uma redução da morbidade ou mortalidade nos resultados clínicos e/ou uma redução na taxa de infecções oportunistas. De modo similar, a terapia bem sucedida com uma quantidade eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) pode reduzir a incidência de infecções oportunistas em indivíduos infectados com HIV.
[0199] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir os títulos virais de HCV a níveis indetectáveis, por exemplo, até cerca de 10 a cerca de 50 ou até cerca de 15 a cerca de 25 unidades internacionais/mL de soro, ou até menos de cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HIV em comparação com a carga viral de HIV antes de fornecer o composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HIV para menos que cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para alcançar uma redução no título viral de HIV no soro do indivíduo na faixa de uma redução de cerca de 1,5- log a cerca de 2,5-log, uma redução de cerca de 3-log a cerca de 4-log, ou uma redução maior que cerca de 5-log em comparação com a carga viral antes do fornecimento do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a carga viral do HIV pode ser medida antes do fornecimento do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e novamente após a conclusão do regime de tratamento com o composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo (por exemplo, 1 mês após a conclusão).
[0200] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para aumentar as contagens de linfócitos T CD4+ de menos que cerca de 200 células/mL até mais que cerca de 1.200 células/mL. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para aumentar as contagens de linfócitos T CD4+ de menos que cerca de 200 células/mL até mais que cerca de 500 células/mL.
[0201] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em ao menos 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100 vezes ou mais reduções na replicação do vírus da imunodeficiência humana em relação aos níveis de pré-tratamento em um indivíduo, conforme determinado após a conclusão do regime de tratamento (por exemplo, 1 mês após a conclusão). Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação do vírus da imunodeficiência humana em relação aos níveis de pré-tratamento na faixa de cerca de 2 a cerca de 5 vezes, de cerca de 10 a cerca de 20 vezes, de cerca de 15 a cerca de 40 vezes ou de cerca de 50 a cerca de 100 vezes. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação do vírus da imunodeficiência humana na faixa de 1 a 1,5 log, 1,5 log a 2 log, 2 log a 2,5 log, 2,5 a 3 log, 3 log a 3,5 log ou 3,5 log a 4 log a mais de redução da replicação do vírus da imunodeficiência humana em comparação com a redução da redução do vírus da imunodeficiência humana alcançada pela terapia do padrão de tratamento, como a terapia incluindo ritonavir em combinação com etravirina, ou pode alcançar a mesma redução que a terapia de padrão de tratamento em um período de tempo menor, por exemplo, em um mês, dois meses ou três meses, em comparação com a redução alcançada após seis meses de terapia de padrão de tratamento.
[0202] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para obter uma resposta viral sustentada, por exemplo, RNA de HIV não detectável ou substancialmente não detectável (por exemplo, menos de cerca de 25 ou menos de cerca de 15 unidades internacionais por mililitro de soro) encontrado no soro do indivíduo durante um período de ao menos cerca de um mês, de pelo menos cerca de dois meses, de pelo menos cerca de três meses, de pelo menos cerca de quatro meses, de pelo menos cerca de cinco meses ou de pelo menos cerca de seis meses após o término da terapia.
[0203] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode reduzir a carga viral de HIV por ao menos cerca de 10%, ao menos cerca de 20%, ao menos cerca de 25%, ao menos cerca de 30%, ao menos cerca de 35%, ao menos cerca de 40%, ao menos cerca de 45%, ao menos cerca de 50%, ao menos cerca de 55%, ao menos cerca de 60%, ao menos cerca de 65%, ao menos cerca de 70%, ao menos cerca de 75% ou ao menos cerca de 80% ou mais, em comparação com a carga viral em um indivíduo não tratado, ou um indivíduo tratado com placebo. Métodos de detecção da carga viral do HIV são conhecidos pelos versados na técnica e incluem métodos baseados em imunologia, como por exemplo, ensaios imunossorventes ligados à enzima (ELISA), radioimunoensaios, e similares, que detectam anticorpos para HIV-1 e/ou HIV-2, antígeno p24 de HIV-1 e outros marcadores indicativos de carga viral do HIV, e combinações dos mesmos.
[0204] Os indivíduos que são clinicamente diagnosticados com infecção por HBV, HDV e/ou HIV incluem indivíduos "naive" (por exemplo, indivíduos que não foram previamente tratados para HBV, HDV e/ou HIV, particularmente aqueles que não receberam previamente ART para HIV, incluindo terapia à base de ritonavir) e indivíduos que não tiveram sucesso no tratamento prévio de HBV, HDV e/ou HIV (indivíduos com "tratamento falho"). Os indivíduos que falharam ao tratamento incluem os "não responsivos" (para HIV, estes são indivíduos nos quais o título do HIV não foi significativamente ou suficientemente reduzido por um tratamento anterior para HIV (≤ 0,5 log de UI/mL)), como por exemplo, uma TÉCNICA anterior, incluindo ritonavir ou outra terapia; e "recidivantes" (para HIV, indivíduos que foram previamente tratados com HIV, por exemplo, que receberam uma TÉCNICA anterior cujo título de HIV diminuiu e, posteriormente, voltou a aumentar). Exemplos adicionais de indivíduos incluem indivíduos com uma infecção aguda por HBV e/ou HDV, indivíduos com infecção crônica por HBV e/ou HDV, e indivíduos que são assintomáticos.
[0205] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado a um indivíduo com tratamento falho que sofre de HBV, HDV e/ou HIV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo não responsivo que sofre de HBV, HDV e/ou HIV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo recidivante sofrendo de HBV, HDV e/ou HIV. Em algumas modalidades, o indivíduo pode ser assintomático, por exemplo, o indivíduo pode ser infectado com HBV e/ou HDV, mas não apresenta quaisquer sintomas da infecção viral. Em algumas modalidades, o indivíduo pode estar imunocomprometido. Em algumas modalidades, o indivíduo está sofrendo com ao menos um dentre o HIV, HBV e/ou HDV.
[0206] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo sofrendo de HBV e/ou HDV cronicamente. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo que está sofrendo de HBV e/ou HDV cronicamente.
[0207] Após um período de tempo, os agentes infecciosos podem desenvolver resistência a um ou mais agentes terapêuticos. O termo "resistência", como usado aqui, se refere a uma cepa viral que apresenta uma resposta atrasada, retardada e/ou nula a um agente(s) terapêutico(s). Em alguns casos, o vírus às vezes muta ou produz variações que são resistentes ou parcialmente resistentes a certos fármacos. Por exemplo, após o tratamento com um agente antiviral, a carga viral de um indivíduo infectado com um vírus resistente pode ser reduzida para um grau menor em comparação à quantidade na redução da carga viral apresentada por um indivíduo infectado com uma cepa não resistente. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo infectado com uma cepa de HBV e/ou HDV que é resistente a um ou mais agentes anti-HBV e/ou anti-HDV diferentes (por exemplo, um agente usado em um padrão de tratamento convencional). Em algumas modalidades, o desenvolvimento de cepas de HBV e/ou HDV resistentes é retardado quando um indivíduo é tratado com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em comparação com o desenvolvimento de cepas de HBV e/ou HDV resistentes a outros fármacos para HBV e/ou HDV (como um agente usado em um padrão de tratamento convencional). Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo infectado com uma cepa de HIV que é resistente a um ou mais agentes anti-HIV diferentes (por exemplo, um agente usado em um padrão de tratamento convencional). Em algumas modalidades, o desenvolvimento de cepas de HIV resistentes é retardado quando um indivíduo é tratado com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em comparação com o desenvolvimento de cepas de HIV resistentes a outros fármacos de HIV (como um agente usado em um padrão de tratamento convencional).
[0208] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrada a um indivíduo para o qual outros medicamentos anti-HBV, anti-HDV e/ou anti-HIV são contraindicados. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo que é hipersensível a um agente antiviral.
[0209] Alguns indivíduos sendo tratados para HBV, HDV e/ou HIV experimentam um rebote da carga viral. O termo "rebote de carga viral", como usado aqui, se refere a um aumento sustentado da carga viral (como ≥ 0,5 log UI/Ml para HIV) acima do nadir antes do final do tratamento. Para o HIV, o nadir é uma diminuição de ≥0,5 log UI/mL a partir da linha de base. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado a um indivíduo que experimenta um rebote da carga viral, ou pode impedir tal rebote da carga viral quando usado para tratar o indivíduo.
[0210] O padrão de tratamento para tratar HBV, HDV e HIV tem sido associado a vários efeitos colaterais (também chamados de efeitos adversos). Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode diminuir o número e/ou a gravidade dos efeitos colaterais observados nos indivíduos sendo tratados com o padrão de tratamento para um vírus específico, como HBV, HDV e HIV. Exemplos de efeitos colaterais para um indivíduo sendo tratado com HBV e/ou HDV incluem, mas não se limitam a, dispepsia, neuropatia, tosse, perda de apetite, acidose lática, lipodistrofia, diarreia, fadiga, insônia, erupção cutânea, febre, mal-estar, taquicardia, calafrios, enxaqueca, artralgias, mialgias, apatia, náusea, vômito, alterações cognitivas, astenia e sonolência. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode diminuir o número e/ou a gravidade dos efeitos colaterais. Por exemplo, o número e/ou a gravidade dos efeitos colaterais observados em indivíduos com HIV sendo tratados com uma TÉCNICA de acordo com o padrão de tratamento. Exemplos de efeitos colaterais de um indivíduo sendo tratado com HIV incluem, mas não se limitam a, perda de apetite, lipodistrofia, diarreia, fadiga, níveis de colesterol e triglicerídeos elevados, erupção cutânea, insônia, febre, mal-estar, taquicardia, calafrios, enxaqueca, artralgias, mialgias, apatia, náusea, vômito, alterações cognitivas, astenia, sonolência, falta de iniciativa, irritabilidade, confusão, depressão, depressão grave, ideação suicida, anemia, baixa contagem de leucócitos e adelgaçamento dos cabelos. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo que interrompeu uma terapia para HBV, HDV e/ou HIV devido a um ou mais efeitos adversos ou efeitos colaterais associados a um ou mais agentes de HBV, HDV e/ou HIV (por exemplo, um agente usado em um padrão de tratamento convencional).
[0211] A Tabela 1 fornece algumas modalidades dos aprimoramentos percentuais obtidos com o uso de um composto da fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em comparação com o padrão de tratamento para HBV, HDV e/ou HIV.
Os exemplos incluem o seguinte: em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, resulta em uma porcentagem de não responsivos que é 10% menor que a porcentagem de não responsivos que recebem o padrão de tratamento.
Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, resulta em uma série de efeitos colaterais que está na faixa de cerca de 10% a cerca de 30% menos em comparação com o número de efeitos colaterais experimentados por um indivíduo que recebe o padrão de tratamento; e em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, resulta em uma gravidade de um efeito colateral (como um dos aqui descritos) que é 25% menor em comparação com a gravidade do mesmo efeito colateral experimentado por um indivíduo que recebe o padrão de tratamento.
Os métodos para quantificar a gravidade de um efeito colateral são conhecidos pelos versados na técnica.
Tabela 1 Porcentagem de Porcentagem de Número de Gravidade dos Porcentagem de Porcentagem de não recuperação da efeitos efeitos recidivas resistência respondedores carga viral colaterais secundários 10% menor 10% menor 10% menor 10% menor 10% menor 10% menor 25% menor 25% menor 25% menor 25% menor 25% menor 25% menor 40% menor 40% menor 40% menor 40% menor 40% menor 40% menor 50% menor 50% menor 50% menor 50% menor 50% menor 50% menor 60% menor 60% menor 60% menor 60% menor 60% menor 60% menor 70% menor 70% menor 70% menor 70% menor 70% menor 70% menor 80% menor 80% menor 80% menor 80% menor 80% menor 80% menor 90% menor 90% menor 90% menor 90% menor 90% menor 90% menor cerca de cerca de 10% a cerca de 10% a cerca de 10% a cerca de 10% a cerca de 10% a 10% a cerca cerca de 30% cerca de 30% cerca de 30% cerca de 30% cerca de 30% de 30% menor menor menor menor menor menor cerca de cerca de 20% a cerca de 20% a cerca de 20% a cerca de 20% a cerca de 20% a 20% a cerca cerca de 50% cerca de 50% cerca de 50% cerca de 50% cerca de 50% de 50% menor menor menor menor menor menor cerca de cerca de 30% a cerca de 30% a cerca de 30% a cerca de 30% a cerca de 30% a 30% a cerca cerca de 70% cerca de 70% cerca de 70% cerca de 70% cerca de 70% de 70% menor menor menor menor menor menor cerca de cerca de 20% a cerca de 20% a cerca de 20% a cerca de 20% a cerca de 20% a 20% a cerca cerca de 80% cerca de 80% cerca de 80% cerca de 80% cerca de 80% de 80% menor menor menor menor menor menor
[0212] Conforme usado no presente documento, um "indivíduo" se refere a um animal que é o objeto de tratamento, observação ou experimento. "Animal" inclui vertebrados e invertebrados de sangue frio ou quente, como peixe, crustáceos, répteis e, em particular, mamíferos. "Mamífero" inclui, sem limitações, camundongos, ratos, coelhos, porquinhos da índia, cachorros, gatos, ovelha, cabras, vacas, cavalos,
primatas, como macacos, chimpanzés e bugios e, em particular, seres humanos. Em algumas modalidades, o indivíduo é um ser humano.
[0213] Conforme usado aqui, os termos "tratar", "tratamento", "terapêutico" ou "terapia" não significam necessariamente cura total ou supressão da doença ou condição. Qualquer alívio de sinais indesejados ou sintomas de uma doença ou afecção, a qualquer extensão pode ser considerada tratamento e/ou terapia. Ademais, o tratamento pode incluir ações que podem piorar a sensação geral do paciente de bem-estar ou aparência.
[0214] Os termos "quantidade terapeuticamente eficaz" e "quantidade eficaz" são usados para indicar uma quantidade de um composto ativo, ou agente farmacêutico, que suscita a resposta biológica ou medicina indicada. Por exemplo, uma quantidade eficaz do composto pode ser a quantidade necessária para prevenir, aliviar ou melhorar os sintomas da doença ou prolongar a sobrevida do indivíduo sendo tratado. Esta resposta pode ocorrer em um tecido, sistema, animal ou ser humano, e inclui alívio dos sinais ou sintomas da doença sendo tratada. A determinação de uma quantidade eficaz é bem dentro da capacidade dos versados na técnica, em vista da revelação fornecida no presente documento. A quantidade eficaz dos compostos revelados no presente documento exigida como uma dose irá depender da via de administração, do tipo de animal, incluindo ser humano, que é tratado, e das características físicas do animal específico em consideração. A dose pode ser adaptada para alcançar um efeito desejado, porém, irá depender de tais fatores como peso, dieta, medicamentos concomitantes e outros fatores que os versados na técnica medicinal irão reconhecer.
[0215] Conforme será prontamente evidente ao versado na técnica, a dosagem in vivo útil a ser administrada e o modo particular de administração irão variar dependendo da idade, do peso, da severidade da doença e da espécie de mamífero tratada, dos compostos específicos empregados, e do usar específico para o qual estes compostos são empregados. A determinação dos níveis de dose eficaz, ou seja, os teores de dosagem necessários para se obter o resultado desejado, podem ser obtidos por um versado na técnica com o uso de métodos de rotina, por exemplo, testes clínicos em seres humanos e estudos in vitro.
[0216] A dosagem pode variar amplamente, dependendo dos efeitos desejados e da indicação terapêutica. Alternativamente, as dosagens podem ser baseadas e calculadas na área superficial do paciente, conforme compreendido pelos versados na técnica. Embora a dosagem exata seja determinada com base no fármaco individual, na maioria dos casos, algumas generalizações relacionadas à dosagem podem ser feitas. O regime de dosagem diário para um paciente adulto humano pode ser, por exemplo, uma dose oral de entre 0,01 mg e 3000 mg de cada ingrediente ativo, de preferência, entre 1 mg e 700 mg, por exemplo, 5 a 200 mg. A dosagem pode ser uma única dose ou uma série de duas ou mais dadas ao longo de um ou mais dias, conforme necessário pelo indivíduo. Em algumas modalidades, os compostos serão administrados por um período de terapia contínua, por exemplo, por uma semana ou mais, ou por meses ou anos. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado menos frequentemente em comparação com a frequência de administração de um agente com o padrão de tratamento. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado uma vez ao dia. Por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado uma vez ao dia a um indivíduo que sofre de uma infecção por HIV. Em algumas modalidades, o tempo total do regime de tratamento com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser menor em comparação com o tempo total do regime de tratamento com o padrão de tratamento.
[0217] Em casos nos quais dosagens humanas para os compostos foram estabelecidas para ao menos algumas condições, as mesmas dosagens podem ser usadas, ou dosagens entre cerca de 0,1% e 500%, com mais preferência, entre cerca de 25% e 250% da dosagem estabelecida para seres humanos. Onde nenhuma dosagem é estabelecida para seres humanos, conforme será o caso para composições farmacêuticas recém-descobertas, uma dosagem humana adequada pode ser inferida dos valores de ED50 ou de ID50, ou de outros valores adequados derivados de estudos in vitro ou in vivo, conforme qualificados por estudos de toxicidade e estudos de eficácia em animais.
[0218] Em casos de administração de um sal farmaceuticamente aceitável, as dosagens podem ser calculadas como a base livre. Conforme será compreendido pelos versados na técnica, em certos casos, pode ser necessário administrar os compostos aqui revelados em quantidades que ultrapassam, ou mesmo ultrapassam muito, a faixa de dosagem preferida declarada acima, de modo a tratar eficazmente e agressivamente doenças ou infecções particularmente agressivas.
[0219] A quantidade e o intervalo das dosagens podem ser ajustados individualmente para fornecer níveis plasmáticos da porção ativa que são suficientes para manter os efeitos de modulação, ou a concentração mínima eficaz (MEC). A concentração mínima eficaz irá variar para cada composto, mas pode ser estimada a partir de dados in vitro. As dosagens necessárias para se obter a concentração mínima eficaz dependerão das características individuais e da via de administração. Entretanto, ensaios de HPLC ou bioensaios podem ser usados para determinar as concentrações plasmáticas. Os intervalos de dosagem podem também ser determinados com o uso do valor da concentração mínima eficaz. As composições devem ser administradas com o uso de um regime que mantém os níveis plasmáticos acima da concentração mínima eficaz por 10 a 90% do tempo, de preferência entre 30 a 90% e, com a máxima preferência, entre 50 a 90%. Em casos de administração local ou absorção seletiva, a concentração local eficaz do fármaco pode não estar relacionada à concentração plasmática.
[0220] Deve ser observado que o médico responsável deve saber como e quando terminar, interromper, ou ajustar a administração devido à toxicidade ou a disfunções de órgãos. De modo contrário, o médico responsável também saberia ajustar o tratamento para níveis maiores se a resposta clínica não fosse adequada (excluindo toxicidade). A magnitude de uma dose administrada no manejo do distúrbio de interesse variará com a severidade da condição a ser tratada e com a via de administração. A severidade da condição pode, por exemplo, ser avaliada, em parte, por métodos de avaliação prognóstica padrão. Adicionalmente, a dose e talvez a frequência da dosagem, também irão variar de acordo com a idade, o peso corporal, e a resposta do paciente individual. Um programa comparável ao discutido acima pode ser usado na medicina veterinária.
[0221] Os compostos aqui revelados podem ser avaliados para a eficácia e toxicidade com o uso de métodos conhecidos. Por exemplo, a toxicologia de um composto específico, ou de um subconjunto de compostos que partilham certas porções químicas, pode ser estabelecida pela determinação da toxicidade in vitro para uma linhagem de células, como uma linhagem de células de mamífero, e de preferência, humana. Os resultados destes estudos são frequentemente preditivos da toxicidade em animais, como mamíferos, ou, mais especificamente, seres humanos. Alternativamente, a toxicidade de compostos específicos em um modelo animal, como camundongos,
ratos, coelhos, ou macacos, pode ser determinada com o uso de métodos conhecidos. A eficácia de um composto específico pode ser estabelecida com o uso de vários métodos reconhecidos, como métodos in vitro, modelos animais, ou testes clínicos em seres humanos. Quando se seleciona um modelo para determinar a eficácia, o versado na técnica pode ser guiado pelo estado da técnica para escolher um modelo, uma dose, uma via de administração e/ou um regime adequado. Terapias de Combinação
[0222] Em algumas modalidades, os compostos aqui descritos, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, podem ser usados em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is). Exemplos de agentes adicionais que podem ser usados em combinação com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, podem ser agentes atualmente usados em um padrão convencional de tratamento para o tratamento de HIV, HBV e/ou HDV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado com um, dois, três ou mais agentes adicionais aqui descritos.
[0223] Em algumas modalidades, quando a infecção é causada por HBV, HBV e/ou HIV, o agente terapêutico adicional pode ser um agente de terapia antirretroviral (ART) como um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da polimerase, um inibidor da protease (PI), um inibidor de fusão/entrada, um interferon, um inibidor de maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um agonista do FXR, um inibidor do TNF/ciclofilina, um agonista de TLR, uma vacina, um inibidor de siRNA ou de DNA circular covalentemente fechado ASO (cccDNA), um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor da secreção de antígeno de superfície (sAg) (por exemplo, HBsAg), outro composto antiviral contra HBV, outro composto antiviral contra HDV e/ou outro composto antiviral contra HIV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0224] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com (um) agente(s) atualmente usado(s) em um padrão de terapia de tratamento convencional. Por exemplo, para o tratamento de HBV e/ou HDV, um composto revelado na presente invenção pode ser usado em combinação com uma terapia de interferon.
[0225] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser substituído por um agente atualmente usado em um padrão convencional de terapia de tratamento. Por exemplo, para o tratamento de HIV, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado no lugar de um inibidor ART convencional.
[0226] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN). Em algumas modalidades, o ITRNN pode inibir uma transcriptase reversa do HBV e/ou do HDV. Exemplos de ITRNNs adequados incluem, mas não se limitam a, delavirdina (Rescriptor®), efavirenz (Sustiva®), etravirina (Intelence®), nevirapina (Viramune®), rilpivirina (Edurant®), doravirina e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou uma combinação dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de ITRNNs inclui os compostos numerados de 1001 a 1006 na Figura 1.
[0227] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN). Em algumas modalidades, o ITRN pode inibir uma transcriptase reversa de HBV e/ou HDV. Exemplos de ITRNs adequados incluem, mas não se limitam a, abacavir (Ziagen®), adefovir (Hepsera®), andoxovir, apricitabina, censavudina, didanosina (Videx®), elvucitabina, emtricitabina (Emtriva®), entecavir (Baraclude®), lamivudina (Epivir®), racivir, estampidina, estavudina (Zerit®), tenofovir desoproxila (incluindo Viread®), tenofovir alafenamida, zalcitabina (Hivid®), zidovudina (Retrovir®) e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou uma combinação dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de ITRNs inclui os compostos numerados de 2001 a 2017 na Figura 2.
[0228] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de protease. Em algumas modalidades, o inibidor de protease pode inibir uma protease de HBV e/ou HDV, por exemplo, NS3/4A. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de protease inclui os seguintes: amprenavir (Agenerase®), asunaprevir (Sunvepra®), atazanavir (Reyataz®), boceprevir (Victrelis®), darunavir (Prezista®) e fosamprenavir (Lexiva®; Telzir®), grazoprevir, indinavir (Crixivan®), lopinavir (Kaletra®), nelfinavir (Viracept®), ritonavir (Norvir®), saquinavir (Fortovase®; Invirase®), simeprevir (Olysio®), telaprevir (Incivek®), danoprevir, tipranavir (Aptivus®), ABT-450 (paritaprevir), BILN-2061 (ciluprevir), BI-201335 (faldaprevir), GS-9256, vedroprevir (GS-9451), IDX-320, ACH-1625 (sovaprevir), ACH-2684 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de protease inclui os compostos numerados de 3001 a 3010 na Figura 3A e 3011 a 3023 na Figura 3B.
[0229] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de fusão/entrada de HIV. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada de HIV podem impedir que o HIV entre nos linfócitos T CD4+. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada, que também são conhecidos como antagonistas de CCR5, podem bloquear as proteínas nas células de linfócitos T CD4+ que são necessárias para a entrada celular do HIV. Exemplos de inibidores de fusão/entrada adequados incluem, mas não se limitam a, enfuvirtida (Fuzeon®), maraviroc (Selzentry®), vicriviroc, cenicriviroc, fostemsavir, ibalizumabe, PRO 140 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de fusão/entrada de HIV inclui os compostos numerados de 4001 a 4007 na Figura 4A.
[0230] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de fusão/entrada de HBV e/ou de HDV. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada podem impedir que o HBV e/ou HDV entrem nos hepatócitos. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV podem bloquear proteínas nos hepatócitos que são necessárias para a entrada celular de HBV e/ou HDV. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV podem se ligar aos polipeptídeos cotransportadores de taurocolato de sódio. Exemplos de inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV adequados incluem, mas não se limitam a, mircludex B, ciclosporina A, ezetimibe e SCYX1454139, HBIG, Ma18/7, KR127, 17.1.41/19,79,5, heparina, suramina, SALP, derivados de ácido taurocólico e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV inclui os compostos numerados de 4008 a 4019 na Figura 4B.
[0231] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de transferência da fita de integrase do HIV (INSTI). Em algumas modalidades, o INSTI pode bloquear a integrase do HIV. Exemplos de INSTIs incluem, mas não se limitam a, dolutegravir
(Tivicay®), elvitegravir (Strivild®; Vitekta®), raltegravir (Isentress®), BI 224436, globoidnan A, cabotegravir, bictegravir, MK-2048 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou uma combinação dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores deINSTIs de HIV inclui os compostos numerados de 5001 a 5008 na Figura 5.
[0232] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com outros compostos antivirais. Exemplos de outros compostos antivirais incluem, mas não se limitam a, bevirimat, BIT225, calanolida A, hidroxicarbamida, miltefosina, seliciclibe, cianovirina-N, grifitsina, scitovirina, BCX4430, favipiravir, GS-5734, mericitabina, MK- 608 (7-deaza-2'-C-metiladenosina), NITD008, moroxidina, ribavirina, taribavirina, triazavirina, ARB-1467, ARB-1740, ARC-520, ARC-521, ALN-HBV, TG1050, Tre recombinase, AT-61, AT-130, BCX4430, favipiravir, umifenovir, brincidofovir, FGI-104, LJ-001, FGI-106, e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de outros compostos antivirais inclui os compostos numerados de 6001 a 6010 na Figura 6A e 6011 a 6033 na Figura 6B. Exemplos adicionais de outros compostos antivirais incluem, mas não se limitam a, uma abzima, uma enzima, uma proteína ou um anticorpo. Exemplos adicionais de outros compostos antivirais incluem, mas não se limitam a, cerageninas, incluindo CSA-54, diarilpirimidinas, intensificadores sinérgicos, fatores de transcrição da proteína dedo de zinco, e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos.
[0233] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor da maturação viral. Em algumas modalidades, o inibidor de maturação viral pode inibir a maturação de HBV e/ou HDV. Exemplos de inibidores de maturação viral incluem, mas não se limitam a, bevimirat, BMS-955176, MPC-9055 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de maturação viral; inclui os compostos numerados de 7001 a 7003 na Figura 7.
[0234] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um modulador de montagem de capsídeo. Em algumas modalidades, o modulador de montagem de capsídeo pode estabilizar o capsídeo. Em algumas modalidades, o modulador de montagem de capsídeo pode promover o excesso de montagem de capsídeo. Em algumas modalidades, o modulador de montagem de capsídeo pode induzir a formação capsídicos de peptídeos de capsídeo. Em algumas modalidades, o modulador de conjunto de capsídeo pode direcionar de maneira errada a montagem de capsídeo (por exemplo, diminuindo a estabilidade do capsídeo). Em algumas modalidades, o modulador de montagem de capsídeo pode se ligar à proteína de núcleo de HBV e/ou HDV. Exemplos de moduladores de montagem de capsídeo incluem, mas não se limitam a, NVR-3-778, AB-423, GLS-4, Bayer 41-4109, HAP-1, AT-1 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de moduladores de montagem de capsídeo inclui os compostos numerados de 8001 a8006 na Figura 8.
[0235] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um agonista do FXR. Exemplos de agonistas do FXR incluem, mas não se limitam a(o): ácido quenodesoxicólico; ácido cólico; ácido obeticólico, ácido ursodesoxicólico; fexaramina; ; ; ; ; ; ; ; ;
; ;
; ;
; ;
; ;
; ;
; ;
; ; ; ; ; ; , e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de agonistas do FXR adicionais inclui os compostos numerados de 9001 a 9006 na Figura 9.
[0236] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor do TNF/ciclofilina. Exemplos de inibidores de TNF/ciclofilina incluem, mas não se limitam, ao infliximabe (Remicade®), adalimumabe (Humira®), certolizumabe pegol (Cimzia®), golimumabe (Simponi®), etanercepte (Enbrel®), talidomida (Immunoprin®), lenalidomida (Revlimid®), pomalidomida (Pomalyst®, Imnovid®), ciclosporina A, NIM811, Alisporivir (DEB-025), SCY-635, DEB-064, CRV-431, e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de TNF/ciclofilina inclui os compostos numerados de 10001 a 10014 na Figura 10.
[0237] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um agonista do TLR. Exemplos de agonistas do TLR incluem, mas não se limitam a, GS-9620, ARB-1598, ANA-975, RG- 7795 (ANA-773), MEDI-9197, PF-3512676, IMO-2055, isatoribina, tremelimumabe, SM360320, AZD-8848 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de agonistas do TLR inclui os compostos numerados de 11001 a 11013 na Figura 11.
[0238] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de polimerase. Exemplos de inibidores de polimerase incluem, mas não se limitam a, telbivudina, beclabuvir, dasabuvir, deleobuvir, filibuvir, setrobuvir, sofosbuvir, radalbuvir, RG7128 (mericitabina), PSI-7851, INX-189, PSI-352938, PSI-661, GS-
6620, IDX-184, TMC649128, setrobuvir, lomibuvir, nesbuvir, GS-9190 (tegobuvir), VX-497 (merimepodib), ribavirina, aciclovir, atevirapina, famciclovir, valaciclovir, ganciclovir, valganciclovir, cidofovir, JK-05 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de polimerase inclui os compostos numerados de 12001 a 12030 na Figura 12.
[0239] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com uma vacina. Exemplos de vacinas incluem, mas não se limitam, ao Heplislav®, ABX-203, INO-1800 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de vacinas inclui aqueles numerados de 13001 a 13003 na Figura 13.
[0240] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um interferon. Exemplos de interferons incluem, mas não se limitam, aos alfa-interferons, beta-interferons, delta-interferons, ômega-interferons, tau-interferons, x-interferons, interferons de consenso e asialo-interferons. Exemplos não limitadores específicos incluem interferon alfa 1A, interferon alfa 1B, interferon alfa 2A, interferon alfa 2B, interferon alfa 2a peguilado (PEGASYS®, Roche), interferon alfa 2a recombinante (ROFERON®, Roche), interferon alfa 2b inalado (AERX®, Aradigm), interferon alfa 2b peguilado (ALBUFERON®, Human Genome Sciences/Novartis, PEGINTRON®, Schering), interferon alfa 2b recombinante (INTRON A®, Schering), interferon alfa
2b peguilado (PEG-INTRON®, Schering, VIRAFERONPEG®, Schering), interferon beta-1a (REBIF®, Serono, Inc. e Pfizer), e interferon alfa de consenso (INFERGEN®, Valeant Pharmaceutical).
[0241] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de cccDNA ASO ou siRNA. Em algumas modalidades, o inibidor de cccDNA ASO ou siRNA pode evitar a formação de cccDNA, eliminar o cccDNA existente, desestabilizar o cccDNA existente e/ou silenciar a transcrição de cccDNA.
[0242] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um agente de silenciamento de gene. Em algumas modalidades, o agente de silenciamento de gene diminui a transcrição de um ou mais genes-alvo. Em algumas modalidades, o agente de silenciamento de gene diminui a tradução de um ou mais genes-alvo. Em algumas modalidades, o agente de silenciamento de gene pode ser um oligodesoxinucleotídeo, uma ribozima, siRNA, um morfolino ou uma combinação de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0243] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de HBx. HBx é um polipeptídeo codificado por hepadnavírus que contribui para a infecciosidade viral. Em algumas modalidades, o inibidor de HBx diminui a atividade de transativação do HBx. Em algumas modalidades, o inibidor de HBx bloqueia ou diminui a ligação de HBx a proteínas celulares de mamíferos. Em algumas modalidades, o inibidor de HBx diminui os blocos de HBx ou diminui o recrutamento de quinases.
[0244] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de secreção de HBsAg. Os antígenos de superfície HBV e HDV são as proteínas encontradas nas novas partículas de HBV e nas partículas subvirais. As partículas subvirais são não infecciosas e são secretadas em excesso significativo em relação ao vírus infeccioso, potencialmente esgotando o sistema imunológico de um indivíduo. Em algumas modalidades, o inibidor da secreção de HBsAg pode reduzir a exaustão imunológica de um indivíduo devido ao antígeno de superfície. Em algumas modalidades, o inibidor da secreção de HBsAg pode promover a resposta imunológica de um indivíduo ao HBV e/ou HDV.
[0245] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de DNA circular covalentemente fechado (cccDNA). Em algumas modalidades, o inibidor de cccDNA pode se ligar diretamente ao cccDNA, pode inibir a conversão de DNA circular relaxado (rcDNA) para cccDNA, pode reduzir ou silenciar a transcrição de cccDNA e/ou pode promover a eliminação do cccDNA existente.
[0246] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, descrito na publicação PCT n° WO 2017/156262, depositada em 9 de março de 2017.
[0247] Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com infecção por HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Outras modalidades aqui descritas se referem-se a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre com a infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem a um método de inibição da replicação de um HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem a um método de inibição da replicação de um HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo infectado com o HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Exemplos de agentes adicionais incluem aqueles aqui descritos, como um inibidor de polimerase, um inibidor de protease (PI), um inibidor de fusão/entrada, um interferon, um agonista do FXR, um agonista do TLR, um inibidor de maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um inibidor de TNF/ciclofilina, uma vacina, um siRNA ou inibidor de cccDNA ASO, um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor de secreção de HBsAg e outro composto antiviral, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0248] Algumas modalidades aqui descritas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com a infecção por HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Outras modalidades aqui descritas se referem a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem a um método para inibir a replicação de um HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas se referem a um método para inibir a replicação de um HIV que pode incluir a administração a um indivíduo infectado com o HIV de uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Exemplos de agentes adicionais incluem aqueles descritos na presente invenção, como os agentes de terapia antirretroviral (ART), como um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da protease (IP), um inibidor de fusão/entrada (também chamado de antagonista do receptor CCR5), um inibidor de transferência de fita da integrase (INSTI) e uma outra terapia antirretroviral para HIV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0249] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado com um ou mais agentes adicionais juntos em uma única composição farmacêutica. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado com um ou mais agentes adicionais como duas ou mais composições farmacêuticas separadas. Por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado em uma composição farmacêutica, e ao menos um dentre os agentes adicionais pode ser administrado em uma segunda composição farmacêutica. Se houver ao menos dois agentes adicionais, um ou mais dos agentes adicionais podem estar em uma primeira composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e ao menos um dos outros agentes adicionais pode estar em uma segunda composição farmacêutica.
[0250] A(s) quantidade(s) de dosagem e o(s) esquema(s) de dosagem ao usar um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agentes adicionais, está(estão) dentro do conhecimento dos versados na técnica. Por exemplo, quando se realiza um padrão convencional de terapia de tratamento com o uso de quantidades de dosagem e esquemas de dosagem reconhecidos na técnica, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado em adição a essa terapia, ou em lugar de um dos agentes de uma terapia de combinação, com o uso de quantidades e protocolos de dosagem eficazes como aqui descritos.
[0251] A ordem de administração de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um ou mais agentes adicionais pode variar. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado antes de todos os agentes adicionais. Em outras modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado antes de ao menos um agente adicional. Ainda em outras modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado concomitantemente com um ou mais agentes adicionais. Ainda em outras modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado após à administração de ao menos um agente adicional. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado após à administração de todos os agentes adicionais.
[0252] Em algumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), pode resultar em um efeito aditivo. Em algumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fármacos de qualquer um dos anteriores), pode resultar em um efeito sinérgico. Em algumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores), pode resultar em um efeito fortemente sinérgico. Em algumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), não é antagonística.
[0253] Como usado aqui, o termo "antagonístico" significa que a atividade da combinação dos compostos é menor em comparação com a soma das atividades dos compostos em combinação quando a atividade de cada composto é determinada individualmente (isto é, como um único composto). Conforme usado no presente documento, o termo "efeito sinergístico" significa que a atividade da combinação dos compostos é maior do que a soma das atividades individuais dos compostos na combinação quando a atividade de cada composto é determinada individualmente. Conforme usado no presente documento, o termo "efeito aditivo" significa que a atividade da combinação de compostos é aproximadamente igual à soma das atividades individuais do composto na combinação quando a atividade de cada composto é determinada individualmente.
[0254] Uma vantagem potencial do uso de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) pode ser uma redução na(s) quantidade(s) necessária(s) de um ou mais compostos das Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) que são eficazes no tratamento de uma condição de doença aqui descrita (por exemplo, por HBV, HDV e/ou HIV), em comparação com a quantidade necessária para alcançar o mesmo resultado terapêutico quando um ou mais compostos das Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) são administrados sem um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a quantidade de um composto nas Figuras 1 a 13 (incluindo de um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores) pode ser menor em comparação com a quantidade do composto nas Figuras 1 a 13 (incluindo um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores), necessária para alcançar a mesma redução da carga viral quando administrado como uma monoterapia. Outra vantagem potencial do uso de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 9 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos) é que o uso de dois ou mais compostos com diferentes mecanismos de ação pode criar uma barreira maior ao desenvolvimento de cepas virais resistentes em comparação com a barreira criada quando um composto é administrado como uma monoterapia.
[0255] As vantagens adicionais do uso de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) podem incluir pouca ou nenhuma resistência cruzada entre um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13
(incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) dos mesmos; diferentes rotas para a eliminação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos); pouca ou nenhuma sobreposição de toxicidade entre um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores); pouco ou nenhum efeito significativo sobre o citocromo P450; pouca ou nenhuma interação farmacocinética entre um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores); maior porcentagem de indivíduos que alcançam uma resposta viral sustentada em comparação com quando um composto é administrado como monoterapia e/ou uma diminuição no tempo de tratamento para alcançar uma resposta viral sustentada em comparação com quando um composto é administrado como uma monoterapia. Exemplos
[0256] Os exemplos específicos a seguir são fornecidos para ilustrar adicionalmente as várias modalidades aqui descritas.
[0257] Para a obtenção dos compostos descritos nos exemplos abaixo, bem como dos dados analíticos correspondentes, foram seguidos os protocolos experimentais e analíticos apresentados a seguir, exceto onde indicado em contrário.
[0258] Exceto onde especificado em contrário, as misturas de reação foram agitadas magneticamente em temperatura ambiente (ta) sob uma atmosfera de nitrogênio. Quando as soluções foram "secas", as mesmas foram geralmente submetidas à secagem com um agente secante como Na2SO4 ou MgSO4. Nos casos em que as misturas, soluções e extratos foram "concentrados", os mesmos foram tipicamente concentrados em um evaporador giratório sob pressão reduzida.
[0259] Cromatografia em gel de sílica de fase normal (FCC) foi realizada em gel de sílica (SiO2) usando cartuchos pré-empacotados.
[0260] A cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa preparatória (RP HPLC) foi realizada em: uma HPLC Gilson 281/215 com uma coluna Xtimate Prep RP18 (5 µM, 25 x 150 mm) ou uma coluna YMC-Actus Triart C18 (5 µM, 30 x 100 mm) e uma fase móvel de 1% de ACN em 0,225% de FA foi mantida por 1 minuto, em seguida, em um gradiente de ACN de 1 a 23% ao longo de 9 minutos, e em seguida, foi mantida a 95% de ACN por 2 minutos, com uma vazão de 25 mL/min.
[0261] Os espectros de massa (MS) foram obtidos em um equipamento de LCMS-TOF G1969A da Agilent. Fase móvel: FA (ácido fórmico) a 0,1% em água (solvente A) e FA a 0,1% em ACN (solvente B); Gradiente de eluição: 0% a 30% (solvente B) durante 3 minutos e mantendo a 30% durante 1 minuto a uma vazão de 1 mL/minuto; Coluna: Fonte de íons Xbridge Shield RP 18 5 um, 2,1*50 mm: Fonte de ESI; Modo iônico: Positivo
[0262] Gás de nebulização: Nitrogênio; Vazão do gás de secagem (N2): 5 l/min; Pressão do nebulizador: 30 psig; Temperatura do gás: Tensão capilar a 325°C: 3,5KV Tensão do fragmentador: 50 V.
[0263] Os espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) foram obtidos nos espectrômetros Bruker 400 MHz ou Varian 400 MHz. Definições para multiplicidade são as seguintes: s = singleto, d = dubleto, t= tripleto, q = quarteto, m = multipleto, br = largo. Será entendido que para compostos compreendendo um próton cambiável, o referido próton pode ou não ser visível em um espectro de RMN dependendo da escolha do solvente usado para executar o espectro de RMN e a concentração do composto na solução.
[0264] Foram gerados nomes de produtos químicos com o uso de ChemDraw Ultra 12.0, ChemDraw Ultra 14.0 (CambridgeSoft Corp., Cambridge, MA, EUA) ou ACD/Name Version 10.01 (Advanced Chemistry).
[0265] Os compostos designados como R* ou S* são compostos enantiopuros, em que a configuração absoluta não foi determinada. Intermediário 1: (1R,3R,4S)-2-Metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol e (1S,3R,4S)-2-metileno-4-((tri- isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol.
[0266] Etapa A: (4S,5R)-4-((Tri-isopropilsilil)óxi)-5-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)di-hidrofuran-2(3H)-ona. O composto do título foi preparado de acordo com os procedimentos descritos na publicação PCT n.° WO 2015/056213 (publicada em 23 de abril de 2015).
[0267] Etapa B: (4S,5R)-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-5-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)tetraidrofuran-2-ol. A uma solução de (4S,5R)-4- ((tri-isopropilsilil)óxi)-5-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)di-hidrofuran-2(3H)- ona (10 g, 22,48 mmols) em THF (tetraidrofurano) (100 mL) foi adicionada uma solução de DIBAL-H (hidreto de di-isobutilalumínio) (1 M, 56,21 mL) por gotejamento a -70°C durante um período de 1 h sob N2. A temperatura foi mantida abaixo de -55°C. A mistura de reação foi agitada a -70°C por mais duas horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com MeOH (metanol) (50 mL) lentamente, e diluída com EA (acetato de etila) (100 mL). O material inorgânico foi filtrado e a torta filtrada foi lavada com EA (100 mL*3). O filtrado foi concentrado a vácuo para fornecer um óleo incolor. A purificação com FCC, SiO2, PE:EA = (100/1 a 20/1) produziu o composto do título (8,2 g, 81,63% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,61-5,30 (m, 1H), 4,77-4,50 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,20 - 4,02 (m, 1H), 3,87-3,59 (m, 2H), 3,44 (m, 1H), 2,24-2,01 (m, 1H), 1,16- 1,03 (m, 42H).
[0268] Etapa C: (2R,3S)-1,3-Bis((tri-isopropilsilil)óxi)hept-6-ino-2,5- diol. A uma solução de (4S,5R)-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-5-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)tetraidrofuran-2-ol (8,04 g, 17,99 mmols) em THF (80 mL) foi adicionada uma solução de bromo(etinil)magnésio (0,5 M, 107,94 mL) por gotejamento a -70°C durante um período de 0,5 h sob N2. A temperatura foi mantida abaixo de -55°C. A mistura de reação foi aquecida até 30°C naturalmente e agitada a 30°C por mais duas horas. A reação foi bruscamente arrefecida por solução saturada de NH4Cl (50 mL) lentamente e, em seguida, diluída com EA (100 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada até a secura sob pressão reduzida. A purificação com FCC, SiO2, PE:EA = (100/1 a 20/1) produziu o composto do título (3,1 g, 36,44% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 4,69-4,70 (m, 1H), 4,13-4,14 (m, 1H), 3,83-3,85 (m, 2H), 3,27-3,29 (m, 1H), 2,73-2,74 (m, 1H), 2,44- 2,45 (m, 1H), 2,09 (s, 1H), 2,04-2,09 (m, 2H), 1,05-1,09 (m, 42H).
[0269] Etapa D: ((5S,6R)-6-hidróxi-5,7-bis((tri-isopropilsilil)óxi)hept- 1-in-3-il) carbonato de etila. A uma mistura de (2R,3S)-1,3-bis((tri- isopropilsilil)óxi)hept-6-ino-2,5-diol (1 g, 2,11 mmols) e piridina (501,85 mg, 6,34 mmols, 512,09 µL) em CH2Cl2 (10 mL) foi adicionado cloroformiato de etila (900 mg, 8,29 mmols, 789,47 µL) e agitada a 0°C durante duas horas. A reação foi bruscamente arrefecida por solução saturada de NaHCO3 (20 mL) lentamente, e então extraída com DCM
(diclorometano) (30 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura (50 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = (100/1 a 20/1) produziu o composto do título (800 mg, 69,42% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,48-5,50 (m, 1H), 4,20-4,25 (m, 3H), 3,74-3,77 (m, 3H), 2,45-2,52 (s, 2H), 1,30-1,31 (m, 2H), 1,01-1,10 (m, 3H), 1,05-1,07 (m, 42H). LCMS; ESI-MS: m/z 567,20 [M+Na]+.
[0270] Etapa E: O-((6R,7S)-9-Etinil-3,3-di-isopropil-2-metil-11-oxo- 7-((tri-isopropilsilil)óxi)-4,10,12-trioxa-3-silatetradecan-6-il) 1H-imidazol- 1-carbotioato. A uma solução de ((5S,6R)-6-hidróxi-5,7-bis((tri- isopropilsilil)óxi)hept-1-in-3-il) carbonato de etila (28,00 g, 51,38 mmols) em DCM (250 mL) foi adicionado TCDI (1,1′-tiocarbonildi-imidazol) (91,57 g, 513,85 mmols). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com água (200 mL) e lavada com salmoura (50 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 20/1 a 5/1) produziu o composto do título (10,4 g, 30,90% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,33 (d, J = 5,60 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,10 - 6,94 (m, 1H), 5,75 - 5,64 (m, 1H), 5,47-5,35 (dd, J = 8,40 Hz, J = 5,20 Hz, 1H), 4,73 - 4,51 (m, 1H), 4,31 - 4,18 (m, 2H), 4,18 - 4,09 (m, 1H), 3,94 (dd, J = 7,00, 10,60 Hz, 1H), 2,56 -2,57 (m, 1H), 2,49 - 2,07 (m, 2H), 1,39 - 1,31 (m, 3H), 1,14 - 0,98 (m, 42H). LCMS: ESI-MS: m/z 655,40 [M+1]+.
[0271] Etapa F ((3R,4S)-2-metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil) carbonato de etila. A uma solução de O-((6R,7S)-9-etinil-3,3-di-isopropil-2-metil-11-oxo-7-((tri-isopropilsilil) óxi)-4,10,12-trioxa-3-silatetradecan-6-il) 1H-imidazol-1-carbotioato (6,00 g, 9,16 mmols) em tolueno (100 mL) foi adicionado AIBN (azobisisobutironitrila) (752,04 mg, 4,58 mmols) e hidreto de tri-n- butilestanho (10,66 g, 36,64 mmols, 9,69 mL) a 25°C. A mistura foi agitada a 105°C durante 3 horas sob N2. A reação foi bruscamente arrefecida com solução de KF (1,0 M, 100 mL) lentamente e, em seguida, extraída com EA (100 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura (100 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = (300/1 a 100/1) produziu o composto do título (3,7 g, 76,37% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,27 (br, d, J = 3,4 Hz, 3H), 4,49-4,35 (m, 1H), 4,15-4,09 (m, 1H), 3,84-3,72 (m, 2H), 3,71-3,52 (m, 2H), 2,53-2,39 (m, 1H), 2,22 (br, d, J = 6,8 Hz, 1H), 1,35-1,31 (m, 3H), 1,06-0,94 (m, 42H).
[0272] Etapa G: (1R,3R,4S)-2-Metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3- (((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol e (1S,3R,4S)-2-metileno-4- ((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol. A uma solução de ((3R,4S)-2-metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)carbonato de etila (900 mg, 1,70 mmol) em EtOH (etanol) (3 mL) foi adicionado NaOEt (289,49 mg, 4,25 mmols). A mistura foi agitada a 25°C por uma hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/1 a 5/1) para produzir (1R,3R,4S)-2-metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3- (((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol (230 mg, 29,59% de rendimento) como um óleo incolor: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,43 (s, 1H), 5,18 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 4,37 (dd, J = 5,40, 10,00 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 5,40, 10,40 Hz, 1H), 3,48-3,33 (m, 1H), 3,09 (d, J = 11,00 Hz, 1H), 2,88 (s, 1H), 2,08-1,94 (m, 2H), 1,17-1,05 (m, 42H); e (1S,3R,4S)- 2-metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri- isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol (95 mg, 12,22% de rendimento) como um óleo incolor: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,28 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,58 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 4,54 - 4,48 (m, 1H), 3,87-3,81 (m, 1H), 3,84 (dd, J = 4,40, 9,80 Hz, 1H), 3,76-3,69 (m, 1H), 2,62 (s, 1H), 2,15 (d,
J = 7,80 Hz, 1H), 1,99-1,94 (m, 1H), 1,10-1,01 (m, 42H); e 80 mg da mistura dos compostos do título. Intermediário 2: (1R,3S,4S)-4-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol.
Método A:
[0273] Etapa A. 2-(hidroximetil)ciclopent-2-en-1-ona. A uma solução de ciclopent-2-en-1-ona (10 g, 121,80 mmols, 10,20 mL) em uma mistura de CHCl3 (150 mL) e MeOH (100 mL) foi adicionado HCHO (13,05 g, 160,78 mmols, 11,97 mL). Em seguida, Me2PPh (fenildimetilfosfina) (841,33 mg, 6,09 mmols) em CHCl3 (100 mL) foi adicionado à mistura acima. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante uma hora. A mistura de reação foi concentrada a vácuo. A purificação (FCC, ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 10~70% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 40 mL/min) produziu o composto do título (24 g, 87,87% de rendimento) como um sólido branco. Esta reação foi configurada em duas bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,51 (dd, J = 1,2, 2,5 Hz, 1H), 4,32 - 4,19 (m, 2H), 3,09 (br s, 1H), 2,58 (td, J = 2,0, 4,4 Hz, 2H), 2,42 - 2,30 (m, 2H).
[0274] Etapa B: 2-((Tritilóxi)metil)ciclopent-2-en-1-ona. A 2- (Hidroximetil)ciclopent-2-en-1-ona (2 g, 17,84 mmols) em DCM (20 mL) foi adicionado DMAP (4-dimetilaminopiridina) (392,24 mg, 3,21 mmols), TrtCl (cloreto de trifenilmetila) (5,22 g, 18,73 mmols) e Et3N (2,71 g, 26,76 mmols, 3,72 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante 16 horas. A reação foi bruscamente arrefecida adicionando H2O (50 mL) e, em seguida, foi extraída com DCM (50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas com MgSO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. A purificação (FCC, ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 5~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 40 mL/min) produziu o composto do título (4,8 g, 75,92% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,79 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,51 - 7,37 (m, 6H), 7,32 - 7,16 (m, 9H), 3,87 (q, J = 2,6 Hz, 2H), 2,72 - 2,55 (m, 2H), 2,47 - 2,31 (m, 2H) ESI-MS: m/z 377,0 [M+ Na]+.
[0275] Etapa C: (S)-2-((Tritilóxi)metil)ciclopent-2-en-1-ol. BH3-Me2S (dimetilsulfeto de borano) (10 M, 5,64 mL, 2 eq.) foi dissolvido em DCM (35 mL) a 0°C. (3aR)-1-Metil-3,3-difenil-3a,4,5,6-tetraidropirrolo[1,2- c][1,3,2]oxazaborol (1 M, 5,64 mL) foi adicionado à solução acima e agitado durante uma hora. Depois disso, a solução de 2- ((tritilóxi)metil)ciclopent-2-en-1-ona (10 g, 28,21 mmols) em DCM (75 mL) foi adicionada por gotejamento em duas horas a 0°C. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com H2O (100 mL) e, em seguida, extraída com DCM (2 X 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (200 mL), secas com MgSO4 e filtradas. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 5~15% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo a30 mL/min) forneceu o composto do título (48 g, 79,55%) como um óleo incolor. Esta reação foi configurada em 6 bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,47 - 7,46 (m, 2H), 7,44 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 7,33 - 7,20 (m, 10H), 5,94 - 5,76 (m, 1H), 4,78 (br d, J = 6,6 Hz, 1H), 3,88 - 3,76 (m, 2H), 2,60 - 2,43 (m, 1H), 2,35 - 2,19 (m, 2H), 2,14 (br s, 1H), 1,85 - 1,73 (m,1H). ESI-MS: m/z 379,1 [M+Na]+.
[0276] Etapa D. (S)-(((5-(Benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metóxi) metanetri-il)tribenzeno. (S)-2-((tritilóxi)metil)ciclopent-2-en-1-ol (46 g, 129,05 mmols) em DMF (dimetilformamida) (460 mL) foi tratado com
NaH (8,26 g, 206,48 mmols, 60% de pureza) e TBAI (iodeto de tetrabutilamônio) (23,83 g, 64,52 mmols) a 0°C e agitado a 0°C durante uma hora. Brometo de benzila (BnBr) (26,49 g, 154,86 mmols, 18,39 mL) foi adicionado a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com água (300 mL) e extraída com EA (3 X 300 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura/água (V/V=250 mL/250 mL). Depois disso, a camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, ISCO®; 40 g de coluna Flash de ® sílica SepaFlash , eluente de 2~10% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 35 mL/min) produziu (S)-(((5- (benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metóxi)metanetri-il)tribenzeno (110 g, 95,44% de rendimento) como um óleo incolor. Esta reação foi configurada em 2 bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,50-7,48 (m, 2H), 7,48-7,46 (m, 3H), 7,39 -7,16 (m, 15H), 6,02 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,72 - 4,64 (m, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,53-4,47 (m, 1H), 3,85-3,77 (m, 1H), 3,73-3,65 (m, 1H), 2,57- 2,45 (m, 1H), 2,38-2,26 (m, 1H), 2,25 - 2,15 (m, 1H), 1,93 (tdd, J = 4,0, 9,0, 13,2 Hz, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z 469,1 [M+Na]+.
[0277] Etapa E. (S)-(5-(Benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metanol. (S)- (((5-(benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metóxi)metanetri-il)tribenzeno (15 g, 33,59 mmols) em DCM (47 mL) foi tratado com trietilsilano (Et3SiH) (6,86 g, 59,03 mmols, 9,43 mL) e ácido trifluoroacético (TFA) (3,83 g, 33,59 mmols, 2,49 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 0,5 h. Em seguida, TFA adicional (1,91 g, 16,79 mmols, 1,24 mL) foi adicionado e agitado a 0°C durante 0,5 hora. A mistura de reação foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (300 mL) e, em seguida, extraída com DCM (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secas em MgSO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 30 mL/min) produziu (S)-(5- (benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metanol (15 g, 57,21% de rendimento) como um óleo incolor. Esta reação foi configurada em 4 bateladas. RMN 1 H (400 MHz, CDCl3) δ 7,38 -7,18 (m, 5H), 5,94-5,73 (m, 1H), 4,71 - 4,66 (m, 1H), 4,62 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 4,32 - 4,20 (m, 2H), 2,55 - 2,42 (m, 1H), 2,34 - 2,17 (m, 2H), 2,14 (br, s, 1H), 1,96 - 1,86 (m, 1H). ESI-MS: m/z 226,8 [M+Na]+.
[0278] Etapa F. (S)-(((5-(Benzilóxi)ciclopent-1-en-1- il)metóxi)metil)benzeno. A (S)-(5-(benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metanol (30 g, 146,87 mmols) em dimetilformamida (DMF) (300 mL) foi adicionado NaH (8,81 g, 220,30 mmols, 60% de pureza) e TBAI (27,12 g, 73,43 mmols) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante uma hora. Em seguida, BnBr (37,68 g, 220,30 mmols, 26,17 mL) foi adicionado a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com água (50 mL) e extraída com EA (100 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura/água (V/V=200 mL/200 mL) e seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 80 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 40 mL/min) para fornecer (S)-(((5-(benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metóxi)metil) benzeno (50 g, bruto) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ =7,37 - 7,23 (m, 10H), 5,93 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 4,70 - 4,64 (m, 1H), 4,61 - 4,53 (m, 2H), 4,52 - 4,46 (m, 2H), 4,25 - 4,10 (m, 2H), 2,55 - 2,44 (m, 1H), 2,34 - 2,25 (m, 1H), 2,25 - 2,14 (m, 1H), 1,98 - 1,87 (m, 1H). ESI-MS: m/z 317,0 [M+Na]+.
[0279] Etapa G. (1S,2S,5S)-5-(Benzilóxi)-1- ((benzilóxi)metil)ciclopentano-1,2-diol e (1R,2R,5S)-5-(benzilóxi)-1- ((benzilóxi)metil)ciclopentano-1,2-diol. Uma amostra de OsO4 (0,1 M,
254,77 mL) e N-óxido de N-metil-morfolino (NMO) (12,93 g, 110,40 mmols, 11,65 mL) foi sequencialmente adicionada a uma solução de (S)-(((5-(benzilóxi)ciclopent-1-en-1-il)metóxi)metil)benzeno (25 g, 84,92 mmols) em THF (400 mL) e H2O (62 mL) a 25°C. Após agitação a 25°C durante 16 horas, a reação foi bruscamente arrefecida pela adição de Na2SO3 (200 g), H2O (500 mL) e EtOAc (1000 mL). A fase orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (500 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4 anidro, filtrados e evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 30 mL/min) para produzir (1S,2S,5S)-5- (benzilóxi)-1-((benzilóxi)metil)ciclopentano-1,2-diol e (1R,2R,5S)-5- (benzilóxi)-1-((benzilóxi)metil)ciclopentano-1,2-diol. (50 g, 89,64% de rendimento) como um óleo amarelo. Esta reação foi configurada em 2 bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,39-7,32 (m, 4H), 7,31-7,23 (m, 6H), 4,59-4,51 (m, 3H), 4,61 (s, 1H), 4,47-4,39 (m, 1H), 4,14 (br d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,88-3,85 (m, 1H), 3,84 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,71 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,10 (s, 1H), 1,66-1,55 (m, 3H), 1,70 - 1,52 (m, 1H). ESI- MS: m/z 351,0 [M+Na]+.
[0280] Etapa H. (1R,2S,5S)-2-(Benzilóxi)-1-((benzilóxi)metil)-5- (tritilóxi)ciclopentan-1-ol. A (1S,2S,5S)-5-(benzilóxi)-1- ((benzilóxi)metil)ciclopentano-1,2-diol e (1R,2R,5S)-5-(benzilóxi)-1- ((benzilóxi)metil)ciclopentano-1,2-diol (25 g, 76,13 mmols) em DCM (250 mL) foi adicionado AgNO3 (25,86 g, 152,25 mmols) e 2,4,6- trimetilpiridina (27,67 g, 228,38 mmols, 30,18 mL) e [cloro(difenil)metil]benzeno (25,47 g, 91,35 mmols). A mistura foi agitada a 25°C durante 1,5 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com água (500 mL) e extraída com DCM (500 mL) e a camada orgânica foi lavada com ácido acético a 10% (AcOH) (500 mL)
e solução saturada de NaHCO3 (500 mL). Depois disso, a camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~15% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 35 mL/min) para produzir (1R,2S,5S)-2-(benzilóxi)-1-((benzilóxi)metil)-5- (tritilóxi)ciclopentan-1-ol (60 g, 55,93% de rendimento, 81% de pureza) como um óleo amarelo. Esta reação foi configurada em duas bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,46-7,23 (m, 25H), 4,52 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,06 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 3,90-3,81 (m, 1H), 3,22 (s, 2H), 1,99 - 1,87 (m, 1H), 1,44-1,33 (m, 3H). LCMS:MS: m/z 593,2 [M+Na]+.
[0281] Etapa I. ((((1S,2R,3S)-3-(Benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2- fluorociclopentil)óxi)metanetri-il)tribenzeno. A (1R,2S,5S)-2-(benzilóxi)- 1-((benzilóxi)metil)-5-(tritilóxi)ciclopentan-1-ol (10 g, 17,52 mmols) em DCM (73 mL) foi adicionado trifluoreto de dietilaminoenxofre (DAST) (7,06 g, 43,80 mmols, 5,79 mL). A mistura foi agitada a -15°C durante 1,5 h. A mistura de reação foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (600 mL) e extraída com DCM (200 mL). A solução resultante foi lavada com salmoura (200 mL), seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 120 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~5% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 25 mL/min) para produzir ((((1S,2R,3S)-3-(benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2- fluorociclopentil)óxi)metanetri-il)tribenzeno (3,6 g, 11,24% de rendimento, 94% de pureza) como um óleo amarelo. Esta reação foi configurada em 3 bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,54-7,19 (m, 25 H), 4,50 - 4,45 (m, 4H), 4,16-4,12 (m, 2H), 3,54 - 3,46 (m, 1H), 3,32- 3,22 (m, 1H), 2,03 -1,95 (m, 1H), 1,38 - 1,31 (m, 3H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -177,68 (s, 1F); LCMS: ESI-MS: m/z 595,1 [M+Na]+.
[0282] Etapa J. (1S,2S,3S)-3-(Benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2-
fluorociclopentan-1-ol. ((((1S,2R,3S)-3-(benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2- fluorociclopentil)óxi)metanotri-il)tribenzeno (3,5 g, 6,11 mmols) em DCM (10 mL) foi tratado com Et3SiH (1,25 g, 10,76 mmols, 1,72 mL) e TFA (696,81 mg, 6,11 mmols, 452,48 µL). A mistura foi agitada a 0°C durante 0,5 h. Em seguida, mais TFA (348,41 mg, 3,06 mmols, 226,24 µL) foi adicionado e agitado a 0°C durante 0,5 h. A mistura de reação foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (100 mL) e, em seguida, extraída com DCM (2 X 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secas em MgSO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de ® sílica SepaFlash , eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 30 mL/min) para produzir (1S,2S,3S)-3- (benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ol (3 g, 74,29% de rendimento, 100% de pureza) como um óleo incolor. Esta reação foi configurada em duas bateladas. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ= 7,40- 7,18 (m, 10H), 4,96 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 4,57 - 4,50 (m, 3H), 4,49-4,43 (m, 1H), 4,04-3,85 (m, 2H), 3,83-3,62 (m, 2H), 2,08-1,87 (m, 2H), 1,61- 1,44 (m, 2H). LCMS: ESI-MS: m/z 352,9 [M+Na]+.
[0283] Etapa K: (((1S,2R,3S)-3-(Benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2- fluorociclopentil)óxi)(terc-butil)dimetilsilano. A uma solução de (1S,2S,3S)-3-(benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ol (3,0 g, 9,08 mmols) em DMF (10 mL) foi adicionado imidazol (3,71 g, 54,48 mmols) e cloreto de terc-butildimetilsilila (TBSCl) (3,42 g, 22,70 mmols). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com H2O (50 mL) e extraída com EA (50 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/1 a 10/1) para produzir (1S,2R,3S)-3-(benzilóxi)-2-(benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentil)óxi)(terc-
butil)dimetilsilano (3,96 g, 98,08% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS: ESI-MS: m/z 445,2 [M+H]+, 467,1 [M+Na]+.
[0284] Etapa L: (1S,2R,3S)-3-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-2-fluoro-2- (hidroximetil)ciclopentan-1-ol. A uma solução de (((1S,2R,3S)-3-(benzi- lóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentil)óxi)(terc-butil)dimetilsilano (2,0 g, 4,50 mmols) em MeOH (100 mL) adicionou-se Pd/C (1,5 g, 10% de pureza) e ácido acético (HOAc) (675,27 mg, 11,24 mmols, 643,11 µL). A suspensão foi desgaseificada a vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada em um balão de H2 (15 psi) a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi removida por filtração e o filtrado foi concentrado em baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo (PE)/acetato de etila = 100/1 a 5/1) para produzir (1S,2R,3S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2- fluoro-2-(hidroximetil)ciclopentan-1-ol (1,1 g, 92,49% de rendimento) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 4,29 - 4,10 (m, 2H), 3,91-3,67 (m, 2H), 2,28-2,13 (m, 1H), 2,11-1,97 (m, 1H), 1,65 (dddd, J = 1,8, 7,4, 12,6, 18,1 Hz, 1H), 1,53 - 1,38 (m, 1H), 1,00 - 0,84 (m, 9H), 0,07 - -0,07 (m, 6H). RMN 19 F (376 MHz, CD3OD) δ = -185,71 (br, dd, J = 15,8, 28,2 Hz, 1F).
[0285] Etapa M: (1S,2R,3S)-3-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-2-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ol. A uma solução de (1S,2R,3S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-fluoro-2-(hidroximetil)ciclopen- tan-1-ol (1,1 g, 4,16 mmols) em DMF (5 mL) foi adicionado imidazol (1,13 g, 16,64 mmols) e TBSCl (940,55 mg, 6,24 mmols). A mistura resultante foi agitada a 25°C durante 12 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com H2O (5 mL). A solução resultante foi extraída com acetato de etila (EA) (2 X 50 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/1 a 10/1) para produzir (1S,2R,3S)-3-
((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-fluorociclo- pentan-1-ol (0,912 g, 57,89% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 4,43 - 4,20 (m, 1H), 4,20 - 3,96 (m, 2H), 3,05 (br, s, 1H), 2,37-2,17 (m, 1H), 2,04-1,93 (m, 1H), 1,80-1,66 (m, 1H), 1,60-1,40 (m, 1H), 1,37-1,22 (m, 1H), 1,02-0,83 (m, 18H), 0,25-0,01 (m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -179,49 (s, 1F).
[0286] Etapa N: (2S,3S)-3-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-2-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ona. A uma solução de (1S,2R,3S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)- 2-fluorociclopentan-1-ol (760 mg, 2,01 mmols) em DCM (15 mL) foi adicionado 1,1,1-triacetóxi-1,1-di-hidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona (periodinano de Dess-Martin/ou DMP) (1,70 g, 4,01 mmols). A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi agitado em EA/PE (10 mL, 10/1) e removido por filtração. O filtrado foi concentrado sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/0 a 30/1) para produzir (2S,3S)- 3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-fluoroci- clopentan-1-ona (0,750 g, 99,21% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 4,54 - 4,42 (m, 1H), 3,84 - 3,70 (m, 2H), 2,60 - 2,44 (m, 1H), 2,27 - 2,09 (m, 2H), 2,09 - 1,92 (m, 1H), 0,88 (d, J = 4,5 Hz, 18H), 0,15-0,05 (m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -182,78 (s, 1F).
[0287] Etapa O: (((1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-fluoro-5- metilenociclopentil)metóxi)dimetilsilano de terc-butila A uma solução de brometo de metil(trifenil)fosfônio (2,13 g, 5,97 mmols) em tolueno (5 mL) foi adicionado 2-metilbutan-2-olato de potássio (3,02 g, 5,97 mmols, 3,47 mL, 25% de pureza) e foi agitada a 25°C durante uma hora. Em seguida, (2S,3S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-(((terc-butildimetilsilil)óxi) metil)-2-fluorociclopentan-1-ona (750 mg, 1,99 mmol) em tolueno (4 mL)
foi adicionada e a mistura foi agitada a 25°C durante 4 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de NH4Cl (30 mL) e extraída com EA (50 mL *2). A solução resultante foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. A purificação (FCC, SiO2, PE) produziu (((1S,2S)-2-((terc- butildimetilsilil)óxi)-1-fluoro-5-metilenociclopentil)metóxi)dimetilsilano de terc-butila (686 mg, 91,95% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1 H (400 MHz, CDCl3) δ 5,30-5,24 (m, 1H), 5,16 (td, J = 2,1, 4,3 Hz, 1H), 4,22 (td, J = 5,9, 11,1 Hz, 1H), 3,82 - 3,58 (m, 2H), 2,64-2,47 (m, 1H), 2,21-2,16 (m, 1H), 2,07-1,97 (m, 1H), 1,88-1,68 (m, 1H), 0,93-0,83 (m, 18H), 0,14-0,00 (m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -182,77 (s, 1F).
[0288] Etapa P: (1S,3S,4S)-4-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol e (1R,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de CH3COOH (6,73 mg, 112,10 µmol, 6,41 µL) em DCM (3 mL) foi adicionado dióxido de selênio (12,44 mg, 112,10 µmol) e 2- hidroperóxi-2-metilpropano (5,5 M, 407,62 µL) a 25°C, e foi agitada a 25°C por 30 minutos. (((1S,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-fluoro-5- metilenociclopentil)metóxi)dimetilsilano de terc-butila (420 mg, 1,12 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado e agitado durante 72 horas. A reação foi diluída com DCM (5 mL) e 1,0 g de gel de sílica foi adicionado. A mistura resultante foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 200/1 a 20/1) para produzir (1S,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol (98 mg, 22,38% de rendimento) como um óleo incolor: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,54-5,45 (m, 2H), 4,74 (br, t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,43 (td, J = 5,4, 7,7 Hz, 1H), 3,86 - 3,57 (m, 2H), 2,21 - 2,07 (m, 1H), 1,89 -1,74 (m, 1H), 0,89 (d, J = 3,0 Hz, 18H), 0,18 - -0,05
(m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ = -167,29 (s, 1F); e (1R,3S,4S)- 4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol (50 mg, 11,84% de rendimento) como um óleo incolor: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,62 (dd, J = 1,1, 3,3 Hz, 1H), 5,49 (dd, J = 1,8, 2,6 Hz, 1H), 4,47 - 4,35 (m, 1H), 4,33 (br d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 11,7,13,2 Hz, 1H), 3,54 - 3,39 (m, 1H), 2,76 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,13 - 2,00 (m, 1H), 1,97- 1,82 (m, 1H), 0,89 (d, J = 3,1 Hz, 18H), 0,15 - -0,04 (m, 12H); RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ= -167,63 (br, 1F). Método B: (1R,3S,4S)-4-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)- 3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol.
[0289] Etapa A: 4-Nitrobenzoato de (1R,3S,4S)-4-((terc-butildime- tilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentila. A uma solução de (1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol (Método A, produto da etapa P, 185 mg, 473,53 µmol) e ácido para-nitrobenzoico (PNBA) (126,62 mg, 757,66 µmol) em THF (2 mL) foi adicionado azodicarboxilato de di-isopropila (DIAD) (287,26 mg, 1,42 mmol, 276,21 µL) e trifenilfosfina (PPh3) (372,60 mg, 1,42 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, PE/EA=100/1 a 70/1) para produzir 4-nitrobenzoato de (1R,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentila (150 mg, 58,68% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS: ESI-MS: m/z 562,2 [M+Na]+.
[0290] Etapa B: (1R,3S,4S)-4-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol. 4- Nitrobenzoato de (1R,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentila (75 mg, 138,94 µmol) µmol) foi tratado com NH3 (7 M, 2 mL em CH3OH). A mistura foi agitada a 25°C durante uma hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, PE/EA=100/1 a 70/1) para produzir (1R,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol (51 mg, 46,98% de rendimento) como um óleo incolor. Intermediário 3: Etapa B. (3R,4S)-4-(Benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol.
[0291] Etapa A: (2R,3S)-3-(Benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2- fluorociclopentan-1-ona. Periodinano de Dess-Martin (3,72 g, 8,78 mmols) foi adicionado a uma solução de (1S,2S,3S)-3-(benzilóxi)-2- ((benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ol (Intermediário 2, produto da Etapa J, 1,45 g, 4,39 mmols) em DCM (20 mL). A mistura resultante foi agitada a 28°C durante duas horas. A mistura de reação foi lavada com água (2 x 100 mL). A camada orgânica resultante foi separada e lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (150 mL) e salmoura (80 mL), e seca com sulfato de sódio anidro. A solução resultante foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~10% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min) para produzir (2R,3S)-3-(benzilóxi)- 2-((benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ona (1,29 g, 89,51% de rendimento) como um óleo incolor. ESI-MS: m/z 351,0 [M+Na]+.
[0292] Etapa B: ((((1R,2S)-2-(Benzilóxi)-1-fluoro-5-metilenociclopen- til)metóxi)metil)benzeno. A uma solução de brometo de metil(trifenil)fosfônio (2,77 g, 7,77 mmols) em tolueno (16 mL) foi adicionado 2-metilbutan-2-olato de potássio (3,92 g, 7,77 mmols, 4,51 mL, 25% de pureza) a 25°C e foi agitada a 25°C durante uma hora. (2R,3S)-3-(benzilóxi)-2-((benzilóxi)metil)-2-fluorociclopentan-1-ona (850,00 mg, 2,59 mmols) em tolueno (6 mL) foi adicionado a 0°C e agitada a 25°C por mais duas horas. A reação foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de NH4Cl (50 mL) e extraída com EA (20 mL*2). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~20% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min) para produzir ((((1R,2S)-2-(benzilóxi)-1-fluoro-5- metilenociclopentil)metóxi)metil)benzeno (798 mg, 94,45% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,36- 7,23 (m, 10 H), 5,34-5,28 (m, 1H), 5,22-5,17 (m, 1H), 4,67-4,58 (m, 4H), 4,18-4,13 (m, 1H), 3,90-3,80 (m, 2H), 2,53-2,44 (m, 2H), 2,02-1,92 (m, 1H), 1,90-1,79 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z 349,1 [M+Na]+.
[0293] Etapa C: (3R,4S)-4-(Benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro- 2-metilenociclopentan-1-ol.
[0294] A uma solução de SeO2 (13,26 mg, 119,48 µmol) em DCM (4 mL) foi adicionado hidroperóxido de terc-butila (TBHP) (5,5 M, 434,49 µL) e CH3COOH (4,78 mg, 79,66 µmol, 4,56 µL) a 25°C, e a solução foi agitada a 25°C durante 30 minutos. ((((1R,2S)-2-(benzilóxi)-1-fluoro-5- metilenociclopentil)metóxi)metil)benzeno (260,00 mg, 796,56 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado e agitado por 50 horas. A mistura de reação foi diluída com DCM (6 mL) e 2 g de gel de sílica foram adicionados. A mistura foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 30/1 a 8/1) para produzir (3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol (0,115 g, 42,16% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ= 7,41-7,18 (m, 10H), 5,74- 5,47 (m, 2H), 4,84-4,55 (m, 5H), 4,41-4,23 (m, 1H), 3,93-3,43 (m, 3H), 2,38-2,17 (m, 1H), 1,98-1,86 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z 365,1 [M+Na]+. Intermediário 4: N,N-Di-BOC-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina.
[0295] Etapa A: N,N,N-Tri-BOC-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina. A uma solução de 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (500 mg, 3,73 mmols) em THF (10 mL) foi adicionado 4-dimetilaminopiridina (DMAP) (45,54 mg, 372,75 µmol) e dicarbonato de di-terc-butila (Boc2O) (4,07 g, 18,64 mmols, 4,28 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi dissolvido em EA (10 mL). A solução resultante foi lavada com (HCl 0,5 N, 10 mL) e salmoura (10 mL), e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 25 mL/min) para produzir o composto do título (0,68 g, 41,99% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,85 (s, 1H), 7,90 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 1,70 (s, 9H), 1,42-1,31 (m, 18H). LCMS: ESI-MS: m/z 435,2 [M+H]+; 457,1 [M+Na]+.
[0296] Etapa B: N,N-Di-BOC-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina. A uma solução de N,N,N-Tri-BOC-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0,650 g, 1,50 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionada solução aquosa saturada de NaHCO3 (10 mL) e foi agitada a 50°C durante uma hora. A mistura de reação foi diluída com água (10 mL) e extraída com EA (10 mL*3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 mL), seca com
Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min) para produzir N,N-Di-BOC-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (366 mg, 73,17% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,65 (s, 1H), 7,55 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 1,46-1,27 (m, 18H). Intermediário 5: Difenilcarbamato de 2-isobutiramido-9H-purin-6-ila.
[0297] Etapa A: N-(6-Oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobutiramida. A uma solução de 2-amino-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona (5 g, 33,08 mmols) em DMF (50 mL) foi adicionado anidrido isobutírico (14,13 g, 89,33 mmols, 14,81 mL) em uma porção a 30°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 155°C durante 4 horas. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e a precipitação foi filtrada para produzir um sólido branco. A torta filtrada foi lavada com EtOH/H2O (1:1, 50 mL*3) e seca sob pressão reduzida. N-(6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin- 2-il)isobutiramida (13,7 g, duas bateladas, 61,93 mmols, 93,59% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO) δ = 13,26 (br, 1H), 12,06 (br, 1H), 11,52 (br, 1H), 8,01 (s, 1H), 2,78 - 2,71 (m, 1H), 1,12 - 1,10 (m, 6H).
[0298] Etapa B: N-(9-Acetil-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobuti- ramida. A uma solução de N-(6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobuti- ramida (3,6 g, 16,27 mmols) em DMF (20 mL) foi adicionado acetato de acetila (4,32 g, 42,31 mmols, 3,96 mL) em uma porção a 30°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante duas horas O solvente foi completamente removido por evaporação sob pressão reduzida para produzir um sólido branco. O resíduo foi suspenso em EtOH (20 mL), filtrado e o precipitado foi lavado com EtOH (5 mL*3) para produzir um sólido branco. N-(9-acetil-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobutiramida (2,9 g, 11,02 mmols, 67,69% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO) δ 12,28 (br, 1H), 11,72 (br, 1H), 8,46 (s, 1H), 2,83 -2,74 (m, 4H), 1,15 (s, 3H), 1,13 (s, 3H).
[0299] Etapa C: Difenilcarbamato de 9-acetil-2-isobutiramido-9H- purin-6-ila. A uma suspensão de N-(9-acetil-6-oxo-6,9-di-hidro-1H- purin-2-il)isobutiramida (2,9 g, 11,02 mmols) em piridina (60 mL) foi adicionado N,N-di-isopropiletilamina (base de Hünig, DIPEA ou DIEA) (2,85 g, 22,03 mmols, 3,84 mL) em uma porção a 25°C sob N2. Após a adição de cloreto difenilcarbâmico (2,81 g, 12,12 mmols), a mistura de reação foi agitada a 25°C durante duas horas. Água (4 mL) foi adicionada à mistura de reação e a mistura resultante foi agitada durante 10 minutos. O solvente foi completamente removido por evaporação sob pressão reduzida para produzir um sólido marrom. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. Difenilcarbamato de 9-acetil-2-isobutiramido-9H-purin-6-ila (6 g, bruto) foi obtido como um sólido marrom.
[0300] Etapa D: Difenilcarbamato de 2-isobutiramido-9H-purin-6-ila. Uma mistura de difenilcarbamato de 9-acetil-2-isobutiramido-9H-purin- 6-ila (5,05 g, 11,02 mmols) em EtOH (40 mL) e H2O (40 mL) foi agitada a 100°C durante duas horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e a precipitação foi filtrada para produzir um sólido marrom. O resíduo suspenso em EtOH (30 mL), filtrado e a torta filtrada foram lavados com EtOH (10 mL*3) para produzir um sólido branco. O difenilcarbamato de 2-isobutiramido-9H-purin-6-ila (3,9 g, 9,37 mmols, 84,98% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO) δ = 10,59 (br, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,48 - 7,30 (m, 11H), 2,80 - 7,77 (m, 1H), 1,09 (s, 3H), 1,07 (s, 3H).
Intermediário 6: 3-Benzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona.
[0301] Etapa A: 1,3-Dibenzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (5 g, 39,65 mmols) em CH3CN (100 mL) adicionou-se piridina (14,70 g, 185,84 mmols, 15,00 mL) em uma porção a 30°C sob N2. Após a adição de cloreto de benzoíla (BzCl) (19,51 g, 138,76 mmols, 16,12 mL), a mistura de reação foi agitada a 30°C durante 12 horas. O solvente foi removido a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo:acetato de etila = 3:1 a 1:1) para produzir 1,3-dibenzoil-5-metilpirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (25 g, duas bateladas, 74,78 mmols, 94,30% de rendimento) como um sólido amarelo pálido. LCMS: ESI-MS: m/z 357,0 [M+Na]+.
[0302] Etapa B: 3-Benzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 1,3-dibenzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (6 g, 17,95 mmols) em dioxano (40 mL) foi adicionado K2CO3 (0,5 M, 17,95 mL) em uma porção a 30°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 30°C durante uma hora. O dioxano foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por recristalização a partir de acetonitrila (5 mL) e água (50 mL) para produzir 3-benzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)- diona (3,8 g, 16,51 mmols, 91,97% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 11,40 (bs, 1H), 7,94 (br, d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,77 - 7,76 (m, 1H), 7,62 - 7,54 (m, 3H), 1,82 (s, 3H). LCMS: ESI-MS: m/z 252,9 [M+Na]+.
Intermediário 7: Pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila.
[0303] Etapa A: (4S,5R)-4-hidróxi-5-(hidroximetil)di-hidrofuran- 2(3H)-ona. A uma solução de (4S,5R)-5-(hidroximetil)tetraidrofuran-2,4- diol (35 g, 260,94 mmols) em H2O (400 mL) foi adicionado Br2 (125,10 g, 782,82 mmols, 40,36 mL) a 0°C, e foi agitada a 25°C durante 16 h. A reação foi bruscamente arrefecida pela adição de Na2SO3 (sólido) a 0°C, e uma solução amarela clara foi obtida que foi concentrada sob pressão reduzida a 35°C para remover o solvente. O resíduo foi dissolvido em EtOH (500 mL) e ajustado para pH=7 usando Na2SO3 (sólido) e, em seguida, foi filtrado. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM/EtOH (900 mL/300 mL) e agitado a 25°C durante 30 minutos e filtrado. O filtrado foi concentrado a vácuo para produzir (4S,5R)-4-hidróxi-5-(hidroximetil)di-hidrofuran-2(3H)-ona bruta (126 g, 953,72 mmols, 91,37% de rendimento) como um óleo incolor. (4 bateladas). RMN 1H (400 MHz, D2O) δ = 4,53-4,45 (m, 2H), 3,85-3,76 (m, 1H), 3,75-3,65 (m, 1H), 2,98 (dd, J = 7,0, 18,6 Hz, 1H), 2,58-2,45 (m, 1H).
[0304] Etapa B: Pivalato de (2R,3S)-5-oxo-2-((pivaloilóxi)metil) tetraidrofuran-3-ila. A uma solução de (4S,5R)-4-hidróxi-5- (hidroximetil)di-hidrofuran-2(3H)-ona (20 g, 151,38 mmols) em piridina (60 mL) foi adicionado cloreto de 2,2-dimetilpropanoíla (41,98 g, 348,18 mmols, 42,84 mL) por gotejamento a 0°C. A mistura foi agitada a 45°C durante 12 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com MeOH (40 mL). A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EA (100 mL) e a solução resultante foi lavada com H2O (100 mL*2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada até a secura sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (PE/EA de 35/1 a 5/1) para produzir pivalato de (2R,3S)-5-oxo-2- ((pivaloilóxi)metil)tetraidrofuran-3-ila (35 g, 116,53 mmols, 76,98% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,25 (td, J = 1,7, 7,4 Hz, 1H), 4,63 (dt, J = 1,4, 3,1 Hz, 1H), 4,41-4,34 (m, 1H), 4,31-4,24 (m, 1H), 3,02 (dd, J = 7,6, 18,9 Hz, 1H), 2,61 (dd, J = 1,8, 18,7 Hz, 1H), 1,22-1,18 (m, 18H).
[0305] Etapa C: Pivalato de (2R,3S)-5-hidróxi-2-((pivaloilóxi)metil) tetraidrofuran-3-ila. A uma solução de pivalato de (2R,3S)-5-oxo-2- ((pivaloilóxi)metil)tetraidrofuran-3-ila (10 g, 33,29 mmols) em THF (100 mL) foi adicionado hidreto de di-isobutilalumínio (DIBAL-H, DIBAL) (1 M, 99,88 mL, 3 eq.) a -60°C, e foi agitada a -60°C durante 3 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com MeOH (50 mL) a -30°C e diluída com EA (100 mL). A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (PE/EA de 30/1 a 3/1) para produzir pivalato de (2R,3S)-5- hidróxi-2-((pivaloilóxi)metil)tetraidrofuran-3-ila (4,2 g, 13,89 mmols, 41,72% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,59-5,65 (m, 1H), 5,12-5,23 (m, 1H), 4,38-4,39 (m, 1H), 4,13-4,24 (m, 2H), 2,33-2,39 (m, 1H), 2,04-2,07 (m, 1H), 1,19-1,26 (m, 18H). LCMS: ESI-MS: m/z= 604,3 [2M + H]+.
[0306] Etapa D: Bis(2,2-dimetilpropanoato de (2R,3S)-2,5-di- hidróxi-hept-6-ino-1,3-di-ila. A uma solução de pivalato de (2R,3S)-5- hidróxi-2-((pivaloilóxi)metil)tetraidrofuran-3-ila (4,2 g, 13,89 mmols) em THF (40 mL) foi adicionado bromoetinil magnésio (0,5 M, 83,34 mL) por gotejamento a -78°C. A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura de reação foi bruscamente resfriada mediante a adição de solução saturada de NH4Cl (50 L) para alcançar pH = 7. A mistura resultante foi extraída com EA (30 mL) e lavada com salmoura (2*30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (PE/EA=15/1 a 3/1) para produzir (2R,3S)- 2,5-di-hidróxi-hept-6-ino-1,3-di-ila (4 g, 12,18 mmols, 87,69% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,03- 5,11 (m, 1 H), 4,34-4,56 (m, 1 H), 4,21-4,25 (m, 1 H), 4,11-4,16 (m, 1 H), 3,94-3,99 (m, 1 H), 2,95-3,02 (br, s, 1 H), 2,46-2,49 (dd, J = 6,15, 2,13 Hz, 1 H), 1,98-2,25 (m, 3 H), 1,20-1,23 (m, 18 H). LCMS: ESI-MS: m/z = 351,1 [M+Na]+.
[0307] Etapa E: Bis(2,2-dimetilpropanoato) de (2R,3S)-5-((terc- butildimetilsilil)óxi)-2-hidróxi-hept-6-ino-1,3-di-ila. A uma solução de bis(2,2-dimetilpropanoato) de (2R,3S)-2,5-di-hidróxi-hept-6-ino-1,3-di- ila (4 g, 12,18 mmols) em DMF (6 mL) foi adicionado imidazol (2,49 g, 36,54 mmols) e terc-butil-cloro-dimetil-silano (2,75 g, 18,27 mmols, 2,24 mL), e foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida por MeOH (10 mL), e extraída com EA (30 mL). A solução resultante foi lavada com salmoura (15 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (PE/EA= 35/1 a 3/1) para produzir bis(2,2- dimetilpropanoato) de (2R,3S)-5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-hidróxi- hept-6-ino-1,3-di-ila (2,5 g, 5,65 mmols, 46,37% de rendimento) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,03-5,15 (m, 1 H), 4,40-4,53 (m, 1 H), 4,06-4,17 (m, 2 H), 3,96-4,01 (m, 1 H), 2,73-2,91 (m, 1 H), 2,42-2,45 (dd, J = 11,04, 2,26 Hz, 1 H), 2,02-2,20 (m, 2 H), 1,19- 1,27 (m, 18 H), 0,89-0,91 (m, 9 H), 0,09 - 0,19 (m, 6 H). LCMS: ESI-MS: m/z = 465,1 [M+Na]+.
[0308] Etapa F Bis(2,2-dimetilpropanoato) de (3S)-5-((terc- butildimetilsilil)óxi)-2-oxo-hept-6-ino-1,3-di-ila. A uma solução bis(2,2-
dimetilpropanoato) de (2R,3S)-5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-hidróxi- hept-6-ino-1,3-di-ila (16 g, 36,15 mmols) em DCM (100 mL) foi adicionado periodinano de Dess–Martin (45,99 g, 108,44 mmols, 33,57 mL) a 0°C, e foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida pela adição de solução saturada de NaHCO3 e de Na2SO3(1:1, 100 mL). A solução resultante foi lavada com salmoura (100 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica (PE/EA= 250/1 a 20/1) para produzir bis(2,2-dimetilpropanoato) de (3S)-5-((terc-butildimetilsilil)óxi)- 2-oxo-hept-6-ino-1,3-di-ila (15 g, 34,04 mmols, 94,18% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,24-5,10 (m, 1H), 4,53-4,40 (m, 1H), 4,23-3,98 (m, 1H), 3,00-2,86 (m, 1H), 2,79-2,64 (m, 1H), 2,41-2,27 (m, 1H), 2,24-2,00 (m, 2H), 1,24-1,02 (m, 18H), 0,88-0,70 (m, 9H), 0,15-0,07 (m, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 463,2 [M+Na]+.
[0309] Etapa G: Bis(2,2-dimetilpropanoato) de (3S)-5-((terc- butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-hept-6-ino-1,3-di-ila. A uma solução de bromometiltrifenilfosforano (648,55 mg, 1,82 mmol) em THF (2,5 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M, 680,82 µL) por gotejamento a 0°C sob N2. A mistura foi agitada a 0°C durante 0,5 h. Uma solução de bis(2,2- dimetilpropanoato) de (3S)-5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-oxo-hept-6- ino-1,3-di-ila (0,5 g, 1,13 mmol) em THF (2,5 mL) foi adicionada por gotejamento a 0°C. A reação foi bruscamente arrefecida por solução saturada de NH4Cl (2 mL) lentamente. A mistura resultante foi extraída com EA (20 mL*2). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL), seca com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo para fornecer o óleo escuro. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=100/1 a 20/1) para produzir bis(2,2-dimetilpropanoato) de (3S)-5-((terc- butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-hept-6-ino-1,3-di-ila (0,3 g, 683,88 µmol,
60,27% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,33 (dd, J = 4,2, 9,3 Hz, 1H), 5,17-5,01 (m, 2H), 4,54-4,43 (m, 2H), 4,33 (ddd, J = 2,1, 6,0, 8,3 Hz, 1H), 2,34-2,27 (m, 1H), 2,08- 1,89 (m, 2H), 1,19-0,99 (m, 18H), 0,84-0,70 (m, 9H), 0,02 (d, J = 13,0 Hz, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 461,2 [M+Na]+.
[0310] Etapa H: Pivalato de (1S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-((R)- 2-((pivaloilóxi)metil)oxiran-2-il)pent-4-in-1-ila. A uma solução de bis(2,2- dimetilpropanoato) de (3S)-5-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-hept- 6-ino-1,3-di-ila (1,3 g, 2,96 mmols) em DCM (20 mL) foi adicionado ácido meta-cloroperoxibenzoico (m-CPBA) (1,80 g, 8,89 mmols, 85% de pureza) a 0°C. A mistura foi agitada a 45°C durante 12 horas. A mistura de reação foi diluída com DCM (15 mL) e bruscamente arrefecida com solução saturada de NaHCO3 (10 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (PE/EA = 70/1 a 20/1) para produzir pivalato de (1S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-((R)-2-((pivaloilóxi)metil)oxiran-2- il)pent-4-in-1-ila (1 g, 2,20 mmols, 74,2% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,22-5,07 (m, 1H), 4,48-4,38 (m, 1H), 4,36-4,28 (m, 1H), 4,27-4,19 (m, 1H), 2,88-2,72 (m, 2H), 2,47-2,40 (m, 1H), 2,13-2,04 (m, 2H), 1,26-1,18 (m, 18H), 0,93-0,85 (m, 9H), 0,12 (d, J = 10,0 Hz, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 455,2 [M+H]+.
[0311] Etapa I: Pivalato de ((1S,3R,5S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)- 1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. Uma mistura de Zn (2,59 g, 39,59 mmols) e Cp2TiCl2(3,28 g, 13,19 mmols, 3 eq.) em THF (70 mL) foi agitada a 25°C durante uma hora sob Ar. Pivalato de (1S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-((R)-2-((pivaloilóxi)metil)oxiran-2- il)pent-4-in-1-ila (2 g, 4,40 mmols) em THF (90 mL) foi adicionado sob Ar e a mistura foi agitada a 25°C durante 16 horas. a mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NH4Cl (50 mL) e agitada durante duas horas. A solução resultante foi extraída com EA (60 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~6,7% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 35 mL/min) para produzir pivalato de ((1S,3R,5S)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,55 g, 1,20 mmol, 13,69% de rendimento) como um óleo incolor; RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 5,33 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,15-5,13 (m, 1H), 5,12 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,51-4,41 (m, 1H), 4,14-4,01 (m, 2H), 3,76 (s, 2H), 2,54-2,44 (m, 1H), 1,76-1,66 (m, 1H), 1,20-1,16 (m, 12H), 0,93-0,87 (m, 12H), 0,12-0,06 (m, 9H); LCMS: ESI- MS: m/z = 479,3 [M+H]+; e pivalato de ((1R,3R,5S)-3-((terc- butildimetilsilil)óxi)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil) metila (1,8 g, 3,94 mmols, 44,80% de rendimento) como um óleo incolor.
[0312] Etapa J: Pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-3-((terc- butildimetilsilil)óxi)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil) metila (1,1 g, 2,41 mmols) em DCM (12 mL) adicionou-se AgNO3 (818,32 mg, 4,82 mmols, 810,21 µL), 2,4,6-trimetilpiridina (colidina) (583,76 mg, 4,82 mmols, 636,60 µL) e cloreto de 4,4'-dimetoxitritila (DMTrCl) (1,22 g, 3,61 mmols). A mistura foi agitada a 25°C por duas horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com MeOH (1 mL) e o solvente foi removido em baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~5% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 22 mL/min) para produzir pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (1,38 g, 1,82 mmol, 75,48% de rendimento,
100% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,27-7,43 (m, 7 H), 7,17-7,24 (m, 2 H), 6,78-6,81 (m, 4 H), 5,26-5,45 (m, 2 H), 5,04-5,08 (dd, J = 9,16, 6,40 Hz, 1 H), 4,45-4,50 (m, 1 H), 4,24- 4,26 (d, J = 11,04 Hz, 1 H), 3,95-4,01 (m, 1 H), 3,78 (s, 6 H), 3,37-3,39 (d, J = 9,03 Hz, 1 H), 3,21-3,23 (d, J = 9,29 Hz, 1 H), 2,34-2,40 (dt, J = 12,55, 6,53 Hz, 1 H), 1,66-1,73 (dt, J = 12,05, 8,91 Hz, 1 H), 1,06-1,14 (m, 9 H), 0,89-1,04 (m, 18 H), 0,05-0,12 (m, 6 H). LCMS: ESI-MS: m/z = 781,4 [M+Na]+.
[0313] Etapa K: Pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila Pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- ((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (1,38 g, 1,82 mmol) foi tratado com fluoreto de tetra-n-butilamônio (TBAF) (1 M, 5,45 mL) a 25°C durante 1,5 h. A mistura foi extraída com EA (50 mL) e lavada com salmoura (50 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 3~17% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 35 mL/min) para produzir pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,989 g, 1,49 mmol, 81,84% de rendimento, 97% de pureza) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,40-7,39 (m, 2H), 7,29 -7,21 (m,7H), 6,82-6,80 (m, 4H), 5,47-5,42 (m, 2H), 5,15-5,11 (m, 1H), 4,53-4,47 (m, 2H), 4,22-4,06 (m, 2H), 3,78 (s, 6H), 3,42-3,32 (m, 2H), 2,49-2,42 (m, 1H), 1,80- 1,71 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 0,97 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 667,2 [M+Na]+.
Intermediário 8: 1-((4S,5R)-5-((S)-1-((terc-butildimetilsilil)óxi)prop-2-in- 1-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etan-1- ona.
[0314] Etapa A. 1-((4S,5R)-5-((R)-1-Hidróxi-2-((4-metoxifenil) difenilmetóxi)etil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1-ol. 2,3-O- Isopropilideno-beta-D-ribofuranose seca (preparada de acordo com Mandal, Sukhendu B. e Achari, Basude Synthetic Communications, 23(9), 1239-44;1993 (7,6 g, 16 mmols) foi dissolvida em 160 mL de brometo de etinilmagnésio a 0,5 M em THF e deixada de um dia para o outro em temperatura ambiente. A reação foi bruscamente arrefecida com solução de NH4Cl e o produto foi extraído com EtOAc. As camadas orgânicas foram secas com NaSO4, evaporadas e purificadas por cromatografia em coluna usando um gradiente de EtOAc em hexano de 10% a 40%. Obteve-se 7,47 g do composto do título (93,7%) como um isômero único. RMN 1H (dmso-d6) δ: 7,44-7,40 (m, 4H), 7,38-7,28 (m, 8H), 6,84-6,82 (m, 2H), 5,87 (s, 1H), 4,42-4,40 (d, 1H), 4,18-3,90 (m, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,21 (s, 1H), 3,08-2,98 (m, 2H), 1,22 (s, 3H), 1,18 (s, 3H).
[0315] Etapa B. (1R)-1-((4R,5R)-5-(1-((terc-butildimetilsilil)óxi)prop- 2-in-1-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi) etan-1-ol À solução de 1-((4S,5R)-5-((R)-1-hidróxi-2-((4-metoxifenil) difenilmetóxi)etil)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1-ol (7,3 g, 15 mmols) em DMF seco (100 mL) foram adicionados imidazol (1,5 g, 22,5 mmols) e TBSCl (3,4 g, 22 mmols). A mistura de reação foi deixada de um dia para o outro em temperatura ambiente, foi bruscamente arrefecida com água e o produto foi extraído com EtOAc. As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, usando gradiente de EtOAc em hexano, de 0 a 25%) produziu o composto do título (7,8 g, 86%). RMN 1H (DMSO-d6) δ: 7,45-7,41 (m, 4H), 7,36-7,24 (m, 8H), 6,88- 6,82 (m, 2H), 5,30 (br,s, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,20-3,95 (m, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,36 (s, 1H), 3,05-2,95 (m, 2H), 1,38 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 0,90 (s, 9H), 0,10 (s, 6H).
[0316] Etapa C: 1-((4S,5R)-5-((S)-1-((terc-Butildimetilsilil)óxi)prop- 2-in-1-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi) etan-1-ona. (1R)-1-((4R,5R)-5-(1-((terc-Butildimetilsilil)óxi)prop-2-in-1- il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etan-1-ol (7,8 g, 13 mmols) e periodinano de Dess-Martin (8,3 g, 20 mmols) em DCM (70 mL) foram agitados de um dia para o outro em temperatura ambiente. A mistura de reação foi bruscamente resfriada com solução de Na2S2O3 e NaHCO3, e extraída com EtOAc. A fase orgânica foi secada com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, gradiente de EtOAc em hexano de 0 a 25%) produziu o composto do título (6,6 g, 85%). RMN 1H (dmso-d6) δ: 7,40- 7,20 (m, 12H), 6,88-6,81 (m, 2H), 4,60 (d, 1H), 4,47 (s, 1H), 4,36-4,31 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,19 (s, 1H), 1,98 (s, 1H), 1,25 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 0,87 (s, 9H), 0,00 (s, 6H). Intermediário 9: (6aS,8R,9aS)-8-hidróxi-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metile- notetraidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocino-6a(6H)-carbonitrila.
[0317] Etapa A. (((S)-1-((4R,5R)-5-(3-((4- metoxifenil)difenilmetóxi)prop-1-en-2-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-
il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila. A uma suspensão de brometo de metiltrifenilfosfônio (3,69 g, 10,3 mmols) em THF (12 mL, 0,87 M) resfriada até 0°C, foi adicionado n-butil-lítio (n-BuLi) por gotejamento (hexanos 2,5 M, 3,8 mL, 9,49 mmols). Após 30 minutos a 0°C, uma solução de 1-((4S,5R)-5-((S)-1-((terc-butildimetilsilil)óxi)prop- 2-in-1-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)-2-((4-metoxifenil)difenilmetóxi) etan-1-ona (Intermediário 8, 1,07 g, 1,88 mmol) em THF (18,8 mL, 0,100 M) foi adicionada por gotejamento através de uma cânula. A solução amarela heterogênea foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A solução heterogênea, agora castanha, foi resfriada até 0°C, bruscamente arrefecida com MeOH e salmoura, e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo para produzir um óleo amarelo. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 15% de EtOAc/hexanos) produziu (((S)-1-((4R,5R)-5-(3-((4-metoxifenil) difenilmetóxi)prop-1-en-2-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1- il)óxi)dimetilsilano de terc-butila como um óleo incolor (0,97 g, 91%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,46-7,20 (m, 12H), 6,83-6,81 (m, 2H), 5,42 (d, J = 0,8, 1H), 4,76 (d, J = 6,0, 1H), 4,22 (dd, J = 7,2, 2,0, 1H), 3,92 (dd, J = 7,2, 5,6, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,67 (d, J = 12, 1H), 3,59 (d, J =12, 1H), 2,36 (d, J = 2,0, 1H), 1,43 (s, 3H), 1,37 (s, 3H), 0,76 (s, 9H), 0,06 (s, 3H), -0,05 (s, 3H).
[0318] Etapa B. (((1S)-1-((4R,5S)-5-(2-(((4-metoxifenil) difenilmetóxi)metil)oxiran-2-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1- il)óxi)dimetilsilano de terc-butila. A uma solução de (((S)-1-((4R,5R)-5- (3-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)prop-1-en-2-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan- 4-il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila (4,74 g, 7,92 mmols) em CH2Cl2 (58 mL, 0,15 M) resfriada até 0°C, foi adicionado ácido 3- cloroperbenzoico (2,13 g, 9,50 mmols) em uma porção. A solução incolor foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com NaHCO3 (aq. sat.) e as duas camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secos (Na2SO4), filtrados e concentrados a vácuo para produzir um óleo amarelo. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 15% de EtOAc/hexanos) produziu (((1S)-1- ((4R,5S)-5-(2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)oxiran-2-il)-2,2-dimetil- 1,3-dioxolan-4-il)prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila, o principal epóxido (2,93 g, 60%) como um óleo incolor e o epóxido secundário (1,38 g, 28%) como um óleo incolor. Epóxido principal: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,47-7,44 (m, 4H), 7,35-7,21 (m, 8H), 6,84-6,82 (m, 2H), 4,83 (d, J = 5,6, 1H), 4,38 (dd, J = 6,4, 2,0, 1H), 3,96 (t, J = 6,0, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,61 (d, J = 11, 1H), 3,18 (d, J = 5,2, 1H), 3,12 (d, J = 10, 1H), 2,78 (d, J = 5,2, 1H), 2,32 (d, J = 1,6, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 0,78 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
[0319] Etapa C: ((3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-4- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol. Um FFR (Nota: todos os FFR usados foram secos a vácuo com uma pistola de calor e resfriados sob um fluxo de Ar(g). THF foi desgaseificado) foi carregado com dicloreto de di(ciclopentadienil)titânio (IV) (Cp2TiCl2) (2,41 g, 9,40 mmols) sob argônio e agitado a seco durante 5 a 10 minutos, e em seguida, evacuado e preenchido com Ar(g). Esse processo foi repetido 3x, tomando cuidado para não suspender o sólido. O THF desgaseificado (63 mL, 0,15 M) foi adicionado e a solução de THF resultante de Cp2TiCl2 foi evacuada e preenchida novamente com Ar; esse processo foi repetido 3x. Zinco (1,84 g, 28,2 mmols) foi adicionado em seguida e mais uma vez, e a solução heterogênea resultante foi desgaseificada uma ou duas vezes. A solução verde escuro resultante foi agitada durante uma hora. Uma solução de (((1S)-1-((4R,5S)-5-(2-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)oxiran-2-il)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il) prop-2-in-1-il)óxi)dimetilsilano de terc-butila (1,93 g, 3,13 mmols) em
THF desgaseificado (31,3 mL, 0,10 M) foi adicionada em um corrente lenta através de uma cânula, seguido por 2 enxágues. A solução azul escuro resultante foi desgaseificada durante o tempo final após a adição do material de partida, e agitada durante 24 horas, período no qual a mesma se tornou uma solução azul muito escura. A essa solução azul intensa resfriada até 0°C, adicionou-se 50 mL de solução aquosa saturada de NH4Cl, que foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi filtrada e concentrada a vácuo para remover a camada orgânica, e foi extraída com EtOAc (2-3x), seca (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo para produzir um óleo espumoso amarelo. Este óleo bruto, ((3aR,4S,6S,6aR)- 6-((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dime- til-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-il)metanol, foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,38-7,36 (m, 4H), 7,29-7,19 (m, 8H), 6,83-6,80 (m, 2H), 5,29 (d, J = 2,0, 1H), 4,90 (d, J = 2,8, 1H), 4,84 (m, 1H), 4,58 (t, J = 5,6, 1H), 4,45 (d, J = 5,6, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,77 (dd, J = 9,6, 4,8, 1H), 3,65 (dd, J = 9,6, 9,6, 1H), 3,29 (d, J = 8,4, 1H), 3,16 (d, J = 8,4, 1H), 2,36 (dd, J = 9,6, 4,8, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,32 (s, 3H), 0,95 (s, 9H), 0,15 (s, 3H), 0,12 (s, 3H).
[0320] Etapa D. (3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-4- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbaldeído. A uma solução incolor de ((3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4- il)metanol (1,93 g, 3,13 mmols) em CH2Cl2 (31,3 mL, 0,10 M) resfriada até 0°C, foi adicionado periodinano de Dess-Martin (1,68 g, 3,76 mmols). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante duas horas, e em seguida, filtrada através de Celite®, lavada com 10 mL de NaHCO3 0,4 M/NaS2O3 0,4 M, extraída novamente com CH2Cl2, seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para produzir um óleo bruto. A purificação (FCC, SiO2, 10% de EtOAc/hexanos) produziu (3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4- carbaldeído como um óleo incolor. Esse óleo incolor foi usado na etapa seguinte (1,92 g, 3,13 mmols).
[0321] Etapa E. (E)-6-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil) difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3] dioxol-4-carbaldeído oxima. A uma solução de (3aR,4S,6S,6aR)-6- ((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2- dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbaldeído (1,92 g, 3,13 mmols) em piridina (pyr) (31 mL, 0,10 M) foi adicionado cloridrato de hidroxilamina (0,87 g, 12,5 mmols) em uma porção, e foi agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc/H2O. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc, e os extratos orgânicos combinados foram secos (Na2SO4), filtrados e concentrados a vácuo para produzir um óleo amarelo claro. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 20% de EtOAc/hexanos) produziu (E)-6-((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4- carbaldeído oxima como um óleo incolor (1,97 g, 3,13 mmols).
[0322] Etapa F. (3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbonitrila. A uma solução de (E)-6-((terc- butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5- metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbaldeído oxima (1,97 g, 3,13 mmols) em acetonitrila (ACN) (31,3 mL, 0,10 M) resfriada até 0°C, adicionou-se 1,1'-carbonildi-imidazol (CDI) (0,761 g, 4,70 mmols) em uma porção. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. Em seguida, o volume foi reduzido para ~ ½ do volume original, e a mistura de reação foi aquecida até 35°C para acelerar a reação. Após duas horas de aquecimento, a mistura de reação foi resfriada e concentrada a vácuo, e particionada entre EtOAc/3-4 mL de H2O. A camada aquosa foi extraída com EtOAc, seca (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo para produzir um óleo bruto. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 10% de EtOAc/hexanos) produziu (3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc-butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3] dioxol-4-carbonitrila como um óleo incolor (1,29 g, 67% em 4 etapas).
[0323] Etapa G. (3aR,4S,6S,6aS)-6-hidróxi-4-(((4-metoxifenil) difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3] dioxol-4-carbonitrila. A uma solução de (3aR,4S,6S,6aR)-6-((terc- butildimetilsilil)óxi)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5- metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbonitrila (1,29 g, 2,11 mmols) em THF (21 mL, 0,10 M) resfriada até 0°C, foi adicionado TBAF (THF 1,0 M, 3,16 mL, 3,16 mmols) por gotejamento. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com gel de sílica, filtrada e concentrada a vácuo para produzir um óleo bruto. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 50% de EtOAc/hexanos) produziu (3aR,4S,6S,6aS)-6-hidróxi-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbonitrila como um óleo incolor (0,957 g, 91%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,41-7,23 (m, 12H), 6,84 (m, 2H), 5,64 (s, 1H), 5,59 (s, 1H), 4,47 (t, J = 5,2, 1H), 4,42 (d, J = 5,2, 1H), 4,38 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,31 (d, J = 9,6, 1H), 3,12 (d, J = 9,6, 1H), 2,32 (d, J = 12, 1H), 1,47 (s, 3H), 1,33 (s, 3H).
[0324] Etapa H. Benzoato de (3aR,4S,6S,6aR)-6-ciano-6-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H- ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ila. A uma solução incolor de (3aR,4S,6S,6aS)-6-hidróxi-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2- dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-carbonitrila (0,957 g, 1,93 mmol) em THF (7,7 mL, 0,25 M) com DMAP (0,047 g,
0,385 mmol) e trietilamina (TEA) (2,69 mL, 19,3 mmols) resfriada até 0°C, adicionou-se cloreto de benzoíla (0,268 mL, 2,31 mmols) por gotejamento. A solução heterogênea foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com NaHCO3 (aq. sat.) e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secos (Na4SO4) filtrados e concentrados a vácuo para produzir um óleo bruto. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 25% de EtOAc/hexanos) produziu benzoato de (3aR,4S,6S,6aR)-6-ciano-6-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro-4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ila como um sólido espumoso branco (0,917 g, 79%).
[0325] Etapa I. Benzoato de (1S,3S,4R,5R)-3-ciano-4,5-di-hidróxi- 3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentila. A 0°C, a um frasco de fundo redondo (FFR) carregado com benzoato de (3aR,4S,6S,6aR)-6-ciano- 6-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-2,2-dimetil-5-metilenotetraidro- 4H-ciclopenta[d][1,3]dioxol-4-ila (0,100 g, 0,166 mmol) foi adicionado TFA:H2O (2,66 mL:2,66 mL, 0,031 M) por gotejamento com boa agitação. Após 2,5 h em temperatura ambiente, a mistura de reação foi coevaporada com 2 mL de tolueno e 2 mL de EtOH, e esse processo foi repetido. O óleo bruto assim obtido foi ressuspenso em EtOH e, com agitação a 0°C, bruscamente arrefecido com 0,50 g de base de amina ligada por resina (~10 equiv.). A mistura de reação foi agitada durante 5 minutos em temperatura ambiente, filtrada e enxaguada com EtOH, e concentrada a vácuo para fornecer um óleo amarelo. A purificação (FCC, SiO2, 3 a 10% de MeOH/DCM) produziu benzoato de (1S,3S,4R,5R)-3- ciano-4,5-di-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentila como um óleo incolor (0,0391 g, 81%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,02 (d, J = 8,0, 1H), 7,49 (t, J = 7,6, 1H), 7,36 (t, J = 8,00, 2H), 5,60 (m, 1H), 5,55 (s, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,82 (d, J = 7,2, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,91 (dd, J = 11,6, 5,2, 1H), 3,77 (dd, J = 11,6, 5,2, 1H).
[0326] Etapa J. Benzoato de (6aS,8S,9S,9aR)-6a-ciano-9-hidróxi- 2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno-hexa-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4] trioxadisilocin-8-ila. A uma solução incolor de benzoato de (1S,3S,4R,5R)-3-ciano-4,5-di-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclo- pentila (0,352 g, 1,22 mmol) em piridina (4 mL, 0,3 M) resfriada até 0°C, 1,1,3,3-tetraisopropil-1,3-diclorodissiloxano (0,438 mL, 1,33 mmol) foi adicionado por gotejamento. A mistura de reação foi lentamente aquecida até a temperatura ambiente em 20 minutos. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A piridina foi removida sob pressão reduzida e particionada entre H2O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 (aq. sat.) e seca (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo para produzir um óleo incolor. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 15% de 5CV, 15% de 2CV, 15 a 30% de 5CV) produziu benzoato de (6aS,8S,9S,9aR)-6a-ciano-9-hidróxi- 2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno-hexa-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4] trioxadisilocin-8-ila como um óleo incolor (0,287 g, 44%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ8,15 (d, J = 6,8, 1H), 7,61 (t, J = 6,8, 1H), 7,48 (t, J = 7,2, 2H), 5,64-5,59 (m, 3H), 4,46 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,16 (d, J = 11, 1H), 3,96 (d, J = 11, 1H), 1,15-1,07 (m, 29H).
[0327] Etapa K. Benzoato de (6aS,8S,9S,9aR)-9-((1H-imidazol-1- carbonotioil)óxi)-6a-ciano-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno-hexa- hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadissilocin-8-ila. Uma solução de benzoato de (6aS,8S,9S,9aR)-6a-ciano-9-hidróxi-2,2,4,4-tetraisopropil- 7-metileno-hexa-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadissilocin-8-ila (0,0306 g, 0,0575 mmol) em dicloroetano (0,6 mL, 0,1 M) com 1,1'- tiocarbonildi-imidazol (0,051 g, 0,287 mmol) e 4-(dimetilamino)piridina (0,015 g, 0,017 mmol) foi aquecida sob refluxo durante 30 minutos, resfriada até 0°C e, com agitação, 1 a 2 mL de MeOH foram adicionados. A mistura de reação foi concentrada a vácuo para remover a maior parte do solvente, diluída com EtOAc e lavada com H2O. A camada aquosa foi extraída com EtOAc, e os extratos orgânicos combinados foram secos (Na2SO4), filtrados e concentrados a vácuo para produzir um óleo amarelo. A purificação (0 a 30% de EtOAc/hexanos) produziu benzoato de (6aS,8S,9S,9aR)-9-((1H- imidazol-1-carbonotioil)óxi)-6a-ciano-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno- hexa-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-ila como um óleo incolor (0,033 g, 89%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,49 (s, 1H), 7,91 (m, 2H), 7,85 (bs, 1H), 7,57 (m, 1H), 7,40 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 6,49 (t, J = 4,0, 1H), 6,18 (m, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,63 (s, 1H), 4,63 (d, J =4,0, 1H), 4,25 (d, J = 11, 1H), 4,10 (d, J = 11, 1H), 1,11-1,03 (m, 28H).
[0328] Etapa L. Benzoato de (6aS,8R,9aS)-6a-ciano-2,2,4,4- tetraisopropil-7-metileno-hexa-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8- ila. Uma solução de benzoato de (6aS,8S,9S,9aR)-9-((1H-imidazol-1- carbonotioil)óxi)-6a-ciano-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno-hexa- hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-ila (0,259 g, 0,403 mmol) em tolueno (tol) (13,5 mL, 0,03 M) com azobisisobutironitrila (AIBN) (0,020 g, 0,121 mmol) e hidreto de tributilestanho (0,324 mL, 1,21 mmol) foi aquecida sob refluxo durante 1,3 h e resfriada até a temperatura ambiente, e concentrada a vácuo para produzir um óleo bruto. A purificação (FCC, SiO2, 0 a 10% de EtOAc/hexanos) produziu benzoato de (6aS,8R,9aS)-6a-ciano-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno-hexa- hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-ila como um óleo incolor (0,208 g, rendimento quantitativo). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 8,09- 8,07 (m, 2H), 7,60-7,56 (m, 1H), 7,47-7,44 (m, 2H), 5,70 (m, 1H), 5,65- 5,64 (m, 1H), 5,55 (m, 1H), 4,25 (dd, J = 12, 6,4, 1H), 4,17 (d, J = 12, 1H), 4,10 (d, J =12, 1H), 2,77-2,71 (m, 1H), 2,31-2,23 (m, 1H), 1,14-1,04 (m, 28H).δ
[0329] Etapa M. (6aS,8R,9aS)-8-hidróxi-2,2,4,4-tetraisopropil-7- metilenotetra-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadissilocino-6a(6H)- carbonitrila. A uma solução de benzoato de (6aS,8R,9aS)-6a-ciano-
2,2,4,4-tetraisopropil-7-metileno-hexa-hidrociclopenta[f][1,3,5,2,4] trioxadissilocin-8-ila (0,127 g, 0,245 mmol) em MeOH (6,5 mL, 0,037 M) resfriada até 0°C, adicionou-se NaOMe/MeOH (0,44 M, 0,14 mL, 0,061 mmol) por gotejamento. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 6 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com NH4Cl (aq. sat.), extraída com EtOAc, seca (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo para produzir o composto do título como um resíduo branco. Este produto bruto foi combinado com um óleo bruto obtido a partir de uma batelada anterior (0,0132 g). A purificação (FCC, SiO2, 23% de EtOAc/hexanos) produziu (6aS,8R,9aS)-8-hidróxi-2,2,4,4- tetraisopropil-7-metilenotetraidrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocino- 6a(6H)-carbonitrila (0,069 g, 62%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,61-5,60 (m, 1H), 5,48 (d, J = 2,0, 1H), 4,45-4,37 (m, 1H), 4,15 (dd, J = 11, 6,0, 1H), 4,12 (d, J = 12, 1H), 3,98 (d, J = 12, 1H), 2,53 (m, 1H), 2,01 (m, 1H), 1,70 (d, J = 8, 1H), 1,13-1,03 (m, 28H). Intermediário 10: N,N-Di-BOC-6-cloro-9H-purin-2-amina.
[0330] O composto do título foi preparado de acordo com to Porcheddu et al., European Journal of Organic Chemistry (2008) 34:5786-5797. Exemplo 1: (1S,2S,4S)-4-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2- fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0331] Etapa A: N,N-Di-BOC-7-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil) óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina. A uma solução de (1R,3S,4S)-4- ((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol (Intermediário 2, 250 mg, 639,91 µmol) e N,N- Di-BOC-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (Intermediário 4, 288,86 mg, 863,88 µmol) em THF (6 mL) foi adicionado PPh3 (503,53 mg, 1,92 mmol, 3 eq.) e seguido por DIAD (388,19 mg, 1,92 mmol, 373,26 µL, 3 eq.) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A reação foi diluída com EA (10 mL) e 1,5 g de gel de sílica foram adicionados. A mistura resultante foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 18 mL/min) para produzir N,N-Di-BOC-7- ((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-amina (320 mg, 70,73% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,74 (s, 1H), 7,22 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 5,94 (br, s, 1H), 5,52 (br, d, J = 3,3 Hz, 1H), 5,05 (br, s, 1H), 4,61 (br, d, J = 6,5 Hz, 1H), 4,11 -3,83 (m, 2H), 2,48-2,27 (m, 2H), 1,44 (s, 18H), 0,98-0,89 (m, 18H), 0,24-0,04 (m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ = -165,66 ppm LCMS: ESI-MS: m/z 707,20 [M+1]+, 729,20 [M+Na]+.
[0332] Etapa B: N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. Uma solução de N,N-Di-BOC-7-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)- 3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (300 mg, 424,31 µmol) em THF (1 mL) foi tratada com TBAF (1 M, 848,62 µL). A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura de reação foi diluída com EA (20 mL). A solução resultante foi lavada com água (20 mL*2), seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=100/1 a 1/2) para produzir N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (185 mg, 91,12% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS: ESI-MS: m/z 479,2, [M +1] +, 501,2 [M+Na]+.
[0333] Etapa C: (1S,2S,4S)-4-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7- il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)- 2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (180 mg, 376,17 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (770,00 mg, 6,75 mmols, 0,5 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante 4 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (5 mL) e sílica gel (500 mg) foi adicionada e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 100/1 a 10/1) para fornecer o composto do título bruto; e adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150*25 mm* 5 um; fase móvel: [água (FA 0,225%)-ACN]; B%: 1%-23%, 9 min) para fornecer (1S,2S,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (37 mg, 34,88% de rendimento, 98,69% de pureza) como um sólido branco e outro produto bruto desejado (9,0 mg) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,06 (s, 1H), 7,11 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 5,87 (br, d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,58 (t, J = 3,3 Hz, 1H), 5,11 - 5,00 (m, 1H), 4,49 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 4,02-3,76 (m, 2H), 2,44-2,24 (m, 2H). RMN 19 F (376 MHz, CD3OD) δ = -168,82 ppm (s, 1F). LCMS: ESI-MS: m/z 279,1 [M+1]+.
Exemplo 2: 2-Amino-7-((1S,3R,4S)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona.
[0334] Etapa A: 4-Cloro-7-((1S,3R,4S)-2-metileno-4-((tri- isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-2-amina. A uma solução de (1R,3R,4S)-2-metileno-4-((tri- isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol (Intermediário 1, 450 mg, 985,01 µmol) e 4-cloro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-2-amina (332,11 mg, 1,97 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado PPh3 (775,06 mg, 2,96 mmols) e DIAD (597,53 mg, 2,96 mmols, 574,55 µL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica (ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~5% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min) para produzir o composto do título (350 mg, 2 banhos, 576,21 µmol, 29,25% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 6,88- 6,84 (m, 1H), 6,41-6,37 (m, 1H), 5,89-5,72 (m, 1H), 5,14 (s, 1H), 4,88 (s, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,58 (s, 1H),3,91-3,82 (m, 1H), 3,82-3,73 (m, 1H), 2,80 (s, 1H), 2,30-2,15 (m, 2H), 1,13 -1,09 (m, 36H), 0,96 - 0,81 (m, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 607,10 [M+H]+.
[0335] Etapa B: 2-Amino-7-((1S,3R,4S)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona. 4- cloro-7-((1S,3R,4S)-2-metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil) óxi)metil)ciclopentil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (400 mg, 658,53 µmol) foi tratada com solução de HCl (10 mL, 6 M) e THF (10 mL) e agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura foi diluída com MeOH e o pH foi ajustado para 7 mediante tratamento com solução aquosa saturada de NaHCO3. A solução foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH= 20/1 a 10/1) e adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: YMC-Actus Triart C18 100*30 mm*5 um; fase móvel: [água (HCl 0,05%)-ACN];B%: 0% a 30%,10 min) para produzir o composto do título (45,2 mg, 163,60 µmol, 24,84% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ: 6,95 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 5,52 (t, J = 9,20 Hz, 1H), 5,37 (s, 1H), 4,41-4,35 (m, 1H), 3,95 (dd, J = 3,4,10,7 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 5,3, 10,5 Hz, 1H), 2,73 (s, 1H), 2,33-2,20 (m, 2H) LCMS: ESI-MS: m/z = 276,90 [M+H]+. Exemplo 3: 1-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona.
[0336] Etapa A: 3-Benzoil-1-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil) óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-5- metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona e 3-benzoil-2-(((1S,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)óxi)-5-metilpirimidin-4(3H)-ona. A uma solução de (1R,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol (Intermediário 2, 200 mg, 511,93 µmol) e 3-benzoil-5-metil-1H-pirimidino-2,4-diona (185,32 mg, 804,97 µmol) em THF (5 mL) foi adicionado PPh3 (421,62 mg, 1,61 mmol) e bis(1,1- dimetiletil)azodicarboxilato (DBAD) (370,70 mg, 1,61 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi diluída com EA (10 mL) e 1,0 g de gel de sílica foi adicionado. A mistura foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de *2 coluna SepaFlash® Flash de sílica, eluente de 0~40% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo 20 mL/min) para produzir 3-benzoil-1-((1S,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (188 mg, 60,91% de rendimento) como um sólido branco; RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,92 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,75-7,58 (m, 1H), 7,58-7,45 (m, 2H), 7,05 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,67 (br, s, 1H), 5,64 (br, d, J = 3,0 Hz, 1H), 5,34 (t, J = 2,9 Hz, 1H), 4,39 (q, J = 4,2 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 14,1 Hz, 2H), 2,39 - 2,15 (m, 1H), 2,00 (ddd, J = 4,4, 9,2, 13,2 Hz, 1H), 1,93 19 (s, 3H), 0,90 (d, J = 19,3 Hz, 18H), 0,17 - 0,05 (m, 12H). RMN F (376 MHz, CDCl3) δ -163,92 ppm; LCMS: ESI-MS: m/z 625,1 [M+Na]+; e 3- benzoil-2-(((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)óxi)-5- metilpirimidin-4(3H)-ona (155 mg, bruto) como um óleo incolor: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,81 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,73-7,63 (m, 1H), 7,62 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,54-7,47 (m, 2H), 5,94 (br, t, J = 5,9 Hz, 1H), 5,46 (br, s, 1H), 5,36 (br, s, 1H), 4,22-4,13 (m, 1H), 3,52-3,30 (m, 2H), 2,27 (br, s, 1H), 2,07- 1,98 (m, 3H), 1,71 (br s, 1H), 0,83 (d, J = 10,8 Hz, 18H), 0,04 - -0,06 (m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -168,52 ppm. LCMS: ESI-MS: m/z 625,1 [M+Na]+.
[0337] Etapa B: 1-((1S,3S,4S)-4-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino- 2,4(1H,3H)-diona. Uma solução de 3-benzoil-1-((1S,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (70 mg, 116,11 µmol) em MeOH (0,2 mL) foi tratada com NH3 MeOH (7 M, 2 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=10/1 a 112) para fornecer 1-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (0,051 g, 88,06% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,06 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,70-5,49(m, 2H), 5,33- 5,12 (m, 1H), 4,41 (q, J = 4,4 Hz, 1H), 3,90-3,80 (m, 2H), 2,31-2,18 (m, 1H), 2,08-1,95 (m, 1H), 1,90 (s, 19 3H), 0,91 (d, J = 8,8 Hz, 18H), 0,13-0,08 (m, 12H). RMN F (376 MHz, CDCl3) δ = -164,18 ppm. LCMS: ESI-MS: m/z 499,3 [M+H]+.
[0338] Etapa C: 1-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. Uma solução de 1-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil) óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)- diona (190 mg, 380,93 µmol) em THF (0,2 mL) foi tratada com TBAF (1 M, 3,80 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, EA/acetona=20/1 a 2/1) duas vezes para fornecer 1-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (75 mg, 71,40% de rendimento, 98,01% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,35 (s, 1H), 5,66-5,55 (m, 2H), 5,28 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 4,38 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 3,93-3,73 (m, 2H), 2,29-2,10 (m, 2H), 1,85 (s, 3H). RMN 19F (376 MHz, CD3CN) δ = -168,28 ppm. LCMS: ESI- MS: m/z 271,1 [M+H]+.
Exemplo 4: 2-Amino-9-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona.
[0339] Etapa A: Difenilcarbamato de 9-((1S,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-2-isobutiramido-9H-purin-6-ila. A uma solução de (1R,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol (Intermediário 2, 140 mg, 358,35 µmol) e difenilcarbamato de 2-isobutiramido-9H-purin-6-ila (preparada de acordo com Milecki et al., Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals (2001) 44: 763-783) (223,84 mg, 537,53 µmol) em THF (5 mL) e dioxano (5 mL) foi adicionado PPh3 (281,97 mg, 1,08 mmol), seguido pela adição de DIAD (217,39 mg, 1,08 mmol, 209,03 µL) por gotejamento. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, PE/EA= 100/1 a 10/1) para produzir difenilcarbamato de 9-((1S,3S,4S)-4-((terc- butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-2-isobutiramido-9H-purin-6-ila (272 mg, bruto) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,98-7,89 (m, 2H), 7,51 - 7,31 (m, 8H), 7,26 - 7,20 (m, 2H), 5,67 (br d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,63 - 5,56 (m, 1H), 5,14 (br s, 1H), 4,63 (q, J = 4,7 Hz, 1H), 4,15 - 4,01 (m, 1H), 3,87 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 2,99 (br s, 1H), 2,51 (br d, J = 7,8 Hz, 1H), 2,40 - 2,28 (m, 1H), 1,29 - 1,28 (m, 6H), 0,92 (d, J = 7,3 Hz, 18H), 0,33 - -0,13 (m, 12H). RMN 19 F (376 MHz, CDCl3) δ = -165,80 (s, 1F). LCMS:ESI-MS: m/z 789,4 [M+H]+.
[0340] Etapa B: N-(9-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)- 2-metilenociclopentil)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobutiramida. Difenilcarbamato de 9-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-2-isobutiramido- 9H-purin-6-ila (135 mg, 171,08 µmol) foi tratado com TBAF (1 M, 1,71 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas sob atmosfera de N2. (A reação foi configurada em duas bateladas). A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH =40/1 a 10/1) para fornecer N-(9-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)- 6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobutiramida (0,051 g, 40,39% de rendimento, 99% de pureza) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,99 (s, 1H), 5,75 - 5,69 (m, 1H), 5,66 (br, d, J = 3,5 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,56-4,46 (m, 1H), 3,99-3,82 (m, 2H), 2,72 (td, J = 6,9, 13,8 Hz, 1H), 2,46-2,36 (m, 2H), 1,22 (d, J = 6,8 Hz, 6H). RMN 19 F (376 MHz, CD3OD) δ = 168,90 (s, 1F). LCMS:ESI-MS: m/z 366,1 [M+H]+.
[0341] Etapa C: 2-Amino-9-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona. Uma solução de N-(9-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)isobutiramida (51 mg, 139,59 µmol) em MeOH (0,5 mL) foi tratada com NH3 MeOH (7 M, 510,00 µL), e a mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto foi triturado com DCM (10 mL) e removido por filtração. A torta do filtro foi dissolvida em água (20 mL), e a fase aquosa foi extraída novamente com EA (10 mL). A fase aquosa foi liofilizada para produzir 2-amino-9-((1S,3S,4S)- 3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H- purin-6-ona (32,3 mg, 78,01% de rendimento, 99,55% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,75 (s, 1H), 5,60 (d,
J = 3,3 Hz, 1H), 5,60 - 5,53 (m, 1H), 5,23 - 5,14 (m, 1H), 4,50 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 4,07 - 3,92 (m, 1H), 3,93 - 3,76 (m, 1H), 2,52 - 2,40 (m, 1H), 2,40 - 2,27 (m, 1H). RMN 19 F (376 MHz, CD3CN) δ = 169,02 (s, 1F). LCMS:ESI-MS: m/z 296,1 [M+H]+. Exemplo 5: 2-Amino-9-((1R,3R,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)- 2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona.
[0342] Etapa A: 6-(Benzilóxi)-9-((3R,4S)-4-(benzilóxi)-3- ((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-2-amina. A uma solução de (3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentan-1-ol (Intermediário 3, 160,00 mg, 467,29 µmol) e PPh3 (367,69 mg, 1,40 mmol, 3 eq.) e 6-benzilóxi-9H-purin-2-amina (169,10 mg, 700,94 µmol) em THF anidro (5 mL) a 0°C foi adicionado DIAD (283,47 mg, 1,40 mmol, 272,57 µL). Após a adição a reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com água (10 mL) e extraída com EA (10 mL*2). A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 mL), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=100/1 a 1/1) para produzir 6-(benzilóxi)-9-((3R,4S)-4-(benzilóxi)-3- ((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-2-amina (0,057 g, 21,17% de rendimento, 98,15% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,65 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,42 -7,27 (m, 10H), 5,63-5,46 (m, 4H), 5,24-5,08 (m, 1H), 4,81 (s, 2H), 4,73-4,59 (m, 4H), 4,41 (br, dd, J = 5,5, 9,5 Hz, 1H), 4,39-4,32 (m, 1H), 4,29-4,19 (m, 1H), 4,09-3,87 (m, 2H), 2,73-2,53
(m, 1H), 2,32-2,16 (m, 1H). RMN 19 F (377 MHz, CDCl3) δ -147,42 (s, 1F), -149,82 (s, 1F). LCMS: ESI-MS: m/z 566,3 [M+H]+.
[0343] Etapa B: 2-Amino-9-((1R,3R,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona. A uma solução de 6-(benzilóxi)-9-((3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-2-amina (40,00 mg, 70,72 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado BCl3 (1 M, 636,45 µL) a -78°C. A mistura foi agitada a -78°C durante duas horas. A reação foi bruscamente arrefecida com (NH31 M/MeOH, 5 mL). A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 100/1 a 5/1) e adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u;fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN];B%: 0% a25%,6 minutos) para produzir 2-amino-9-((1R,3R,4S)-3-fluoro-4- hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6- ona (0,005 g, 23,85% de rendimento, 99,58% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 7,82 (s, 1H), 5,67-5,58 (m, 1H), 5,49 (br, s, 1H), 5,12 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 4,42 - 4,34 (m, 1H), 4,12 - 19 4,02 (m, 2H), 2,74 - 2,66 (m, 1H), 2,23 - 2,14 (m, 1H). RMN F (377 MHz, CD3CN) δ = -154,86 (s, 1F). LCMS: ESI-MS: m/z 296,1 [M+H]+. Exemplo 6: (1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0344] Etapa A: N,N-Di-BOC-9-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil) óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-amina. A uma solução de (1R,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil) óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-
ol (Intermediário 2, Método A, produto da Etapa P, 50,00 mg, 127,98 µmol) e a (64,38 mg, 191,97 µmol) em THF (1 mL) adicionou-se PPh3 (100,71 mg, 383,95 µmol) seguido de DIAD (77,64 mg, 383,95 µmol, 74,65 µL) em THF (0,3 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. A reação foi bruscamente resfriada com água (10 mL) e extraída com EA (15 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/1 a 3/1) para produzir N,N-Di-BOC-9-((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil) óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-amina (42 mg, 46,35% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,81 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 5,81 - 5,71 (m, 1H), 5,61 - 5,56 (m, 1H), 5,12 (br s, 1H), 4,71 - 4,62 (m, 1H), 4,05 - 3,95 (m, 1H), 3,88 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 2,60 - 2,47 (m, 1H), 2,39 (dt, J = 3,6, 8,7 Hz, 1H), 1,45 (s, 18H), 0,93 (d, J = 7,5 Hz, 18H), 0,22 - 0,02 (m, 12H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -165,83 (s, 1F).
[0345] Etapa B: N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)- 2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. N,N-Di-BOC-9- ((1S,3S,4S)-4-((terc-butildimetilsilil)óxi)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)- 3-fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina (42,00 mg, 59,32 µmol) foi dissolvida em THF (0,2 mL), seguido pela adição de TBAF (1 M, 118,64 µL). A mistura foi agitada a 25°C durante 30 minutos. A reação foi diluída com EA (10 mL) e a mistura de reação foi lavada com salmoura (5 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 100/1 a 0/1) para produzir N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)- 2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (22 mg, 76,96% de rendimento, 99,5% de pureza) como um óleo amarelo claro. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,76 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 5,82 - 5,64(m, 2H), 5,17
(br, s, 1H), 4,73 - 4,53 (m, 1H), 4,30 (br, s, 1H), 4,23 -4,14 (m, 1H), 4,08 - 3,97 (m, 1H), 2,86 - 2,63 (m, 1H), 2,86 - 2,63 (m, 1H), 2,57 -2,46 (m, 1H), 1,50 - 1,46 (m, 18H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -164,14 (s, 1F).
[0346] Etapa C: (1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de N,N-Di- BOC-(1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3- metilenociclopentan-1-ol (220 mg, 458,81 µmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (0,2 mL). A mistura foi agitada a 25°C durante uma hora. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 mL). O pH da solução resultante foi ajustada para 7~8 pela adição de duas gotas de NH3 MeOH (7,0 M). 300 mg de gel de sílica foram adicionados, e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 40/1 a 5/1) para fornecer ~130 mg de produto bruto como um óleo amarelo que foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*255 u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN];B%: 3% a 23%, 6,2 min) para fornecer (1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3- metilenociclopentan-1-ol (90 mg, 70,24% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,18- 8,15 (m, 2H), 5,80-5,75 (m, 1H), 5,67 - 5,66 (m, 1H), 5,22-5,21 (m, 1H), 4,56-4,52 (m, 1H), 4,13 - 4,05 (m, 1H), 3,94-3,87 (m, 1H), 2,57 -2,46 (m, 1H), 2,45-2,42 (m, 1H). RMN 19F (376 MHz, CD3CN) δ = -168,30 (s, 1F). LCMS: ESI-MS: m/z 279,8 [M+1]+. Exemplo 7: (1S,2R,4R)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil) -3-metilenociclopentan-1-ol.
[0347] Etapa A: N,N-Di-BOC-9-((1R,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3- ((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina e N,N-Di-BOC-9-((1S,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina.
A uma solução de (3 R,4 S)-4- (benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopentan-1-ol (Intermediário 3, 470,00 mg, 1,37 mmol) e PPh3 (1,08 g, 4,12 mmols) e N- terc-butoxicarbonil-N-(9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (690,49 mg, 2,06 mmols) em THF anidro (8 mL) a 0°C foi adicionada uma solução de DIAD (832,69 mg, 4,12 mmols, 800,66 µL) em THF (2 mL), e agitada a 25°C durante 12 horas.
A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com água (2 mL), e extraída com EA (15 mL*2). A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 mL). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob baixa pressão.
O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=100/1 a 1/1) para produzir dois isômeros puros, que foram purificados por CCF preparatória (tolueno/EA = 5/1) novamente para produzir N,N-Di-BOC-9- ((1R,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopen- til)-9H-purin-6-amina (210 mg, 22,26% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,84 (s, 1H), 8,18 (s, 1H) 7,41-7,20 (m, 10H), 5,79 (br, s, 1H), 5,66 (br, s, 1H), 5,26-5,08 (m, 1H), 4,76-4,60 (m, 4H), 4,36-4,21 (m, 1H), 4,20-4,05 (m, 1H), 3,92 (br, dd, J = 10,2, 18,2 Hz, 1H), 2,85-2,67 (m, 1H), 2,35 -2,17 (m, 1H), 1,46 (s, 18H). RMN 19F (376 MHz, CDCl3) δ -149,82 (s, 1F); LCMS: ESI-MS: m/z 660,2 [M+H]+; e N,N-Di-BOC-9-((1S,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina (255 mg, 23,85%) como um sólido branco: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,75 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,39-7,28 (m, 10H), 5,79 (br, s, 1H), 5,66 (br s, 1H), 5,18 (br, s, 1H), 5,11- 4,94 (m, 1H), 4,73-4,54 (m, 4H), 4,43 (br, d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,10-3,80 (m, 19 2H), 2,75-2,56 (m, 1H), 2,38-2,24 (m, 1H), 1,65-1,48 (m, 18H); RMN F (376 MHz, CDCl3) δ -147,36 (s, 1F); LCMS: ESI-MS: m/z 660,2 [M+H]+.
[0348] Etapa B: 9-((1R,3R,4S)-4-(Benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina. O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 1, Etapa C, usando N,N-Di- BOC-9-((1R,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina ao invés de N,N-Di-BOC- (1S,2S,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0349] Etapa C: (1S,2R,4R)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de 9- ((1R,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclopen- til)-9H-purin-6-amina (29,00 mg, 63,11 µmol) em DCM (1 mL) foi adicionado BCl3 (1 M, 189,33 µL) a -78°C. A mistura foi agitada a -78 °C durante uma hora. A reação foi vertida em NH3/MeOH diluído (~1 M, 5 mL) e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH=100/1 a 20/1) para produzir (1S,2R,4R)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)- 3-metilenociclopentan-1-ol (5 mg, 29% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,22 (s, 1H), 8,21-8,15 (m, 1H), 5,79-5,50 (m, 2H), 5,23-5,00 (m, 1H), 4,45-4,34 (m, 1H), 4,19-4,00 (m, 2H), 2,84-2,72 (m, 1H), 2,30 -2,15 (m, 1H). RMN 19F (376 MHz, CD3CN) δ = -154,89 (s, 1F). LCMS: ESI-MS: m/z 280,1[M+H]+. Exemplo 8: (1S,2R,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroxime- til)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0350] Etapa A: 9-((1S,3R,4S)-4-(Benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3- fluoro-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina. A uma solução de N,N- Di-BOC-9-((1S,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-
metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina (Exemplo 7, produto B da Etapa A, 330,00 mg, 500,19 µmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura de reação foi diluída com DCM (2 mL) e 500 mg de gel de sílica foram adicionados e concentrados sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~5% de DCM/MeOH em 20 mL/min) para produzir 9-((1S,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2- metilenociclopentil)-9H-purin-6-amina (216 mg, 93,98% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,83-8,15 (m, 1H), 8,07-7,75 (m, 1H), 7,62-7,14 (m, 10H), 6,03-5,50 (m, 4H), 5,34-5,08 (m, 1H), 4,84-4,60 (m, 4H), 4,52-4,34 (m, 1H), 4,06-3,76 (m, 2H), 2,66 19 (ddd, J = 2,8, 8,5, 13,6 Hz, 1H), 2,41-2,21 (m, 1H). RMN F (377 MHz, CDCl3) δ = -147,23 (s, 1F).
[0351] Etapa B: (1S,2R,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de 9- ((1S,3R,4S)-4-(benzilóxi)-3-((benzilóxi)metil)-3-fluoro-2-metilenociclo- pentil)-9H-purin-6-amina (60,00 mg, 130,57 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado BCl3 (1 M, 783,44 µL) a -78°C, e agitada a -78 °C durante uma hora. A mistura de reação foi vertida em NH3/MeOH (~1,0 M, 3 mL), e concentrada a baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 100/1 a 10/1) para fornecer (1S,2R,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)- 3-metilenociclopentan-1-ol (25 mg, 68,56% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ= 8,20 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 5,75 (br, s, 1H), 5,64 (dd, J = 2,6, 5,1 Hz, 1H), 5,10 (dd, J = 2,0, 4,5 Hz, 1H), 4,59-4,49 (m, 1H), 4,09-3,90 (m, 2H), 2,49-2,42 (m, 2H). RMN 19F (377 MHz, CDCl3) δ = -147,23 (s, 1F). LCMS: ESI-MS: m/z 280,1 [M+H]+.
Exemplo 9: (1S,2R,4S)-4-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0352] Etapa A: 4-Cloro-7-((1S,3R,4S)-2-metileno-4-((tri- isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidina. A uma solução de (1R,3R,4S)-2-metileno-4-((tri- isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentan-1-ol (Intermediário 1, 470 mg, 1,03 mmol) e 4-cloro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidina (315,98 mg, 2,06 mmols) em THF (10 mL) foi adicionado PPh3 (809,51 mg, 3,09 mmols) e DIAD (624,09 mg, 3,09 mmols, 600,09 µL) a 25°C. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, eluente de 0~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 18 mL/min) produziu 4-cloro-7-((1S,3R,4S)-2-metileno-4- ((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)-7H-pirrolo [2,3-d]pirimidina (412 mg, 67,60% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,61 (s, 1H), 7,27-7,25 (m, 1H), 6,64- 6,55 (m, 1H), 6,04 -5,92 (m, 1H), 5,14 (t, J=2,2 Hz, 1H), 4,64 (t, J=2,2 Hz, 1H), 4,59 (br, s, 1H), 3,90-3,79 (m, 2H), 2,81 (br, s, 1H), 2,34-2,23 (m, 2H), 1,19-0,98 (m, 42H). LCMS: ESI-MS: m/z 592,1 [M+1]+.
[0353] Etapa B: 7-((1S,3R,4S)-2-Metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3- (((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4- amina. A uma solução de 4-cloro-7-((1S,3R,4S)-2-metileno-4-((tri- isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidina (250 mg, 422,01 µmol) em dioxano (1 mL) foi adicionado NH3 H2O (16,25 g, 267,17 mmols, 17,86 mL, 28% de pureza). A mistura foi agitada a 100°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1001 a 2/1) produziu 7-((1S,3R,4S)-2- metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)metil)ciclopentil)- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (0,198 g, 40,94% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,06 (s, 1H), 7,03 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 6,60-6,57 (m, 1H), 5,87 (br, dd, J=7,9, 10,4 Hz, 1H), 5,21- 5,13 (m, 1H), 4,70-4,66 (m, 2H), 3,92 - 3,86 (m,2H), 2,82 (br, s, 1H), 2,42 - 2,29 (m, 1H), 2,29 - 2,18 (m, 1H), 1,21 - 1,05 (m, 42H). LCMS: ESI- MS: m/z 573,2 [M+1]+.
[0354] Etapa C: (1S,2R,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7- il)-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de 7- ((1S,3R,4S)-2-metileno-4-((tri-isopropilsilil)óxi)-3-(((tri-isopropilsilil)óxi)me- til)ciclopentil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (190 mg, 331,61 µmol) em MeOH (6 mL) adicionou-se NH4F (245,63 mg, 6,63 mmols). A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi resfriada e os sólidos resultantes foram removidos por filtração. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. A purificação foi feita (FCC, SiO2, DCM/MeOH de 100/1 a 10/1) e ele foi adicionalmente purificado por separação por SFC (coluna: DAICEL CHIRALPAK AD-H (250 mm*30 mm, 5 um); fase móvel: [NH3.0,1% H2O, MeOH]; B%: 30%- 30%, minutos, RT = 4,488 minutos) produziu (1S,2R,4S)-4-(4-amino- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1- ol (32 mg, 37,07% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,04 (s, 1H), 7,12 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,90-5,71 (m, 1H), 5,19 (br, s, 1H), 4,65 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,46-4,30 (m, 1H), 3,89-3,66 (m, 2H), 2,70 (br s, 1H), 2,42-2,28 (m, 1H), 2,28-2,15 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z 261,1 [M+1]+.
Exemplo 10: 2-Amino-9-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona.
[0355] Etapa A: Pivalato de ((1S,3S,5S)-1-((bis(4-Metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-(6-((difenilcarbamoil)óxi)-2-isobutiramido-9H-purin-9-il)- 2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (Intermediário 7, 900 mg, 1,40 mmol) e difenilcarbamato de 2-isobutiramido-9H-purin-6-ila (Intermediário 5, 871,88 mg, 2,09 mmols) em THF (20 mL) em dioxano (20 mL) foi adicionado PPh3 (1,10 g, 4,19 mmols) em uma porção a 25°C sob N2. Após a adição de DIAD (846,73 mg, 4,19 mmols, 814,17 µL) por gotejamento a 25°C. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. O solvente foi removido a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo: acetato de etila = 5/1 a 3/1). Pivalato de ((1S,3S,5S)- 1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(6-((difenilcarbamoil)óxi)-2- isobutiramido-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (900 mg, 819,59 µmol, 58,72% de rendimento, 95% de pureza) foi obtido como uma espuma amarela pálida. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,63 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,41-7,35 (m, 12H), 7,29-7,23 (m, 7H), 6,83 - 6,81 (m, 4H), 5,61 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,43-5,36 (m, 2H), 5,24 (br d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 3,79 (m, 6H), 3,46 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,31 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 3,01-2,95 (m, 2H), 2,22-2,15 (m, 1H), 1,28 - 1,26 (m, 6H), 1,23 (s, 9H), 1,01 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 1043,5 [M+H]+.
[0356] Etapa B: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-((difenilcarbamoil)óxi)- 2-isobutiramido-9H-purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(6-((difenilcarbamoil)óxi)-2- isobutiramido-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (200,00 mg, 191,72 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (154,00 mg, 1,35 mmol, 0,1 mL) em uma porção a 0°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 20 minutos. A mistura de reação foi vertida em solução aquosa saturada de NaHCO3 para o pH ser ajustado para >8. A mistura foi extraída com EA (30 mL * 3). A solução resultante foi seca em Na2SO4 anidro. O solvente foi removido a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 3/1 a 1/1). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-((difenilcarbamoil)óxi)-2-isobutiramido-9H- purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (320 mg, 3 bateladas, 414,66 µmol, 72,10% de rendimento, 96% de pureza) foi obtido como uma espuma amarela pálida. LCMS: ESI-MS: m/z = 741,4 [M+H]+.
[0357] Etapa C: Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(6-((difenilcarbamoil) óxi)-2-isobutiramido-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1- ((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-((difenilcarbamoil)óxi)-2-isobutiramido-9H- purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (170 mg, 229,47 µmol) e piridina (181,51 mg, 2,29 mmols, 185,21 µL) em DCM (2 mL) foi adicionado anidrido trifluorometanossulfônico (Tf2O ou anidrido tríflico) (97,11 mg, 344,20 µmol, 56,79 µL) por gotejamento a 0°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante uma hora. O solvente foi removido a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/ acetato de etila = 1/2 a 0/1). Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(6-
((difenilcarbamoil)óxi)-2-isobutiramido-9H-purin-9-il)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila (140 mg, 96,23 µmol, 41,94% de rendimento, 60% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo pálido. LCMS: ESI-MS: m/z = 873,3 [M+H]+.
[0358] Etapa D: Pivalato de ((1S,3S,5S)-1-(fluorometil)-3-(2- isobutiramido-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(6- ((difenilcarbamoil)óxi)-2-isobutiramido-9H-purin-9-il)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila (320 mg, 366,59 µmol) em THF (0,5 mL) foi adicionado TBAF (1 M, 3,2 mL) em uma porção a 25°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. O solvente foi removido a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 1/2 a 0/1). Pivalato de ((1S,3S,5S)-1-(fluorometil)-3-(2-isobutiramido-6-oxo-1,6-di-hidro-9H- purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (100 mg, 182,61 µmol, 49,81% de rendimento) foi obtido como uma espuma amarela pálida. LCMS: ESI-MS: m/z = 548,2 [M+H]+.
[0359] Etapa E: 2-Amino-9-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-1-(fluorometil)-3-(2-isobutiramido-6- oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil) metila (100 mg, 182,61 µmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado NaOH (1 M, 1,00 mL) a 25°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. a mistura de reação foi ajustada para pH = 6~7 com solução de HCl 1,0 M e o solvente foi removido a vácuo para produzir 300 mg de produto bruto como um óleo amarelo. 470 mg do produto bruto foram purificados por HPLC preparatória (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u;fase móvel: A: água (NH4HCO3 10 mM)-ACN];B%: 0%--23%, 6 min). 2-amino-9-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-
2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona (47,9 mg, 96% de pureza, 54,8% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. RMN 1 H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,79 (s, 1H), 5,59 -5,54 (m, 1H), 5,23 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,77 - 4,47 (m, 2H), 4,40 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 3,79 (s, 2H), 2,54 (ddd, J = 4,8, 11,0, 13,0 Hz, 1H), 2,24 (dd, J = 8,2, 12,8 Hz, 1H). RMN 19F (376 MHz, CD3OD) δ = -232,9. LCMS: ESI- MS: m/z = 310,1 [M+H]+. Exemplo 11: 4-Amino-1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3-(hidroxi- metil)-2-metilenociclopentil)pirimidin-2(1H)-ona.
[0360] Etapa A: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-Benzoil-2,4-dioxo-3,4- di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (Intermediário 7, 0,0516 g, 80,03 µmol), PPh3 (41,98 mg, 160,05 µmol) e 3-benzoil-1H-pirimidino- 2,4-diona (25,95 mg, 120,04 µmol) em THF (1 mL) foi adicionado DIAD (32,36 mg, 160,05 µmol, 31,12 µL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida para produzir um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 4~25% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,026 g, 30,84 µmol, 38,54% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz,
CDCl3) δ = 8,00-7,91 (m, 1H), 7,91-7,84 (m, 1H), 7,71-7,61 (m, 1H), 7,57-7,48 (m, 2H), 7,43-7,35 (m, 2H), 7,34-7,28 (m, 3H), 7,25-7,17 (m, 4H), 6,84-6,77 (m, 5H), 5,88 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,73-5,62 (m, 2H), 5,30- 5,25 (m, 1H), 5,14 (s, 1H), 4,43-4,31 (m, 2H), 3,81 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,78 (d, J = 0,8 Hz, 6H), 3,31 (s, 1H), 2,26-2,13 (m, 1H), 1,87 -1,85 (m, 1H), 1,22-1,17 (m, 9H), 0,97-0,92 (m, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 865,5 [M+Na]+.
[0361] Etapa B: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4- di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3- benzoil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,026 g, 30,84 µmol) em DCM (0,5 mL) foi adicionado ácido 2,2-dicloroacético (39,77 mg, 308,43 µmol, 25,33 µL). A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de NaHCO3 (1 mL) e extraída com DCM (5 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas até a secura sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 15~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimi- din-1(2H)-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,01 g, 18,50 µmol, 59,97% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,97-7,91 (m, 2H), 7,71-7,63 (m, 1H), 7,56-7,49 (m, 2H), 7,33 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,92-5,87 (m, 1H), 5,70 (s, 1H), 5,40 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,32-5,28 (m, 1H), 5,14 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,22 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,74-3,68 (m, 1H), 3,65 - 3,59 (m, 1H), 2,31 (dd, J = 8,2, 12,6 Hz, 1H), 2,25-2,14 (m, 1H), 1,26-1,23 (m, 9H), 1,22-1,18 (m, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z 563,2 [M+Na]+.
[0362] Etapa C: Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4- di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil) sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(hidroxi- metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,08 g, 147,98 µmol) em DCM (0,5 mL) foi adicionado piridina (117,05 mg, 1,48 mmol, 119,44 µL) e Tf2O (83,50 mg, 295,97 µmol, 48,83 µL, 2 eq.) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por uma hora. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NaHCO3 (5 mL) e extraída com DCM (5 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secas com Na2SO4anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação. Pivalato de ((1R,3S,5S)- 3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno-5-(pivalo- ilóxi)-1-((((trifluorometil) sulfonil)óxi)metil) ciclopentil)metila (0,09 g, bruto) foi obtido como um óleo castanho. LCMS: ESI-MS: m/z = 673,1 [M + H]+, 695,1 [M+Na]+.
[0363] Etapa D: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(2,4-dioxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1R,3S,5S)- 3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila (0,09 g, 133,80 µmol) em THF (1 mL) foi adicionado TBAF (1 M, 401,39 µL). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 horas. A mistura foi diluída com EA (5 mL) e lavada com H2O (5 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~1% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,035 g, 79,82 µmol, 59,66% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z 461,1 [M+Na]+.
[0364] Etapa E: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(4-amino-2-oxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclo- pentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(2,4-dioxo- 3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila (0,035 g, 79,82 µmol) em CH3CN (0,4 mL) foi adicionado DMAP (19,50 mg, 159,64 µmol), Et3N (16,15 mg, 159,64 µmol, 22,22 µL) e cloreto de 2,4,6-tri-isopropilbenzenossulfonila (48,35 mg, 159,64 µmol). A mistura foi agitada a 25°C durante 0,5 h. NH3.H2O (413,64 mg, 10,39 mmols, 454,55 µL, 28% de pureza) foi adicionada à mistura, que foi agitada a 25°C durante 1,5 h. A mistura foi diluída com EA (5 mL) e lavada com NH4Cl (3 mL*3). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~3,2% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(4-amino-2- oxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,025 g, 57,14 µmol, 71,59% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,13 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,04 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 5,69 (s, 1H), 5,30 - 5,27 (m, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,61 - 4,42 (m, 2H), 4,28 - 4,20 (m, 1H), 2,83 (td, J = 6,9, 13,8 Hz, 1H), 2,15 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 1,21 (s, 9H), 1,18 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 438,1 [M+H]+.
[0365] Etapa F 4-Amino-1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidin-2(1H)-ona. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(4-amino-2-oxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,078 g, 178,28 µmol) em MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH (1 M, 1,56 mL). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura foi neutralizada com solução de HCl (1 mL, 1 M) e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 3~18% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). O produto foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 0%-25%, 6 minutos). 4-amino-1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidin-2(1H)-ona (0,018 g, 66,85 µmol, 37,49% de rendimento, 100% de pureza) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,58 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,23 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,75-4,58 (m, 1H), 4,57-4,40 (m, 1H), 4,31 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,78-3,64 (m, 2H), 2,24-2,07 (m, 2H). LCMS: ESI-MS: m/z = 270,2 [M + H]+, 539,3 [2M+H]+. Exemplo 12: 1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona.
[0366] Etapa A: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (Intermediário 7, 500 mg, 775,44 µmol) e 3-benzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (Intermediário 6, 267,78 mg, 1,16 mmol) em THF (10 mL) adicionou-se PPh3 (508,47 mg, 1,94 mmol) em uma porção a 25°C sob N2. Após a adição de DIAD (392,00 mg, 1,94 mmol, 376,93 µL) por gotejamento a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 3/1). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4-
dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (200 mg, 233,37 µmol, 30,10% de rendimento) foi obtido como uma espuma amarela pálida. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,94 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,70 (m, 1H), 7,53 - 7,51 (m, 2H), 7,38 - 7,36 (m, 2H), 7,30 - 7,25 (m, 7H), 7,24 (s, 1H),6,83 - 6,81 (m, 4H), 5,71 (s, 1H), 5,57 (s, 1H), 5,28 (s, 1H), 5,10 (s, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,78 (s, 6H), 3,58 - 3,29 (m, 2H), 2,19 - 2,16 (d, J = 10 Hz, 2H), 1,98 (s, 3H), 1,20 (s, 9H), 0,96 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z 879,5 [M+Na]+.
[0367] Etapa B: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)- 3-(3-benzoil-5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (90,00 mg, 105,02 µmol) em DCM (1 mL) foi adicionado TFA (77,00 mg, 675,30 µmol, 0,05 mL) em uma porção a 0°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante uma hora. A mistura de reação foi vertida em solução aquosa saturada de NaHCO3 (10 mL) e extraída com EA (20 mL* 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas com Na2SO4 e concentradas a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 3/1 a 2/1). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimi- din-1(2H)-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (33 mg, 59,50 µmol, 56,66% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo pálido. LCMS: ESI-MS: m/z = 577,2 [M+Na]+.
[0368] Etapa C: Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1- ((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimi- din-1(2H)-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila
(200 mg, 360,60 µmol) e piridina (285,23 mg, 3,61 mmols, 291,06 µL) em DCM (5 mL) foi adicionado Tf2O (203,48 mg, 721,20 µmol, 118,99 µL) por gotejamento a 0°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante uma hora. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 3:1 a 2:1). Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)- 2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil) metila (220 mg, 320,38 µmol, 88,85% de rendimento) foi obtido como uma espuma amarela pálida. LCMS: ESI-MS: m/z = 709,2 [M+Na]+.
[0369] Etapa D: Pivalato de ((1S,3S,5S)-1-(fluorometil)-3-(5-metil- 2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila. Uma solução de pivalato de ((1R,3S,5S)- 3-(3-benzoil-5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno- 5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila (210 mg, 305,81 µmol) em THF (1 mL) foi tratada com TBAF (1 M, 4 mL) a 25°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 2/1 a 1/1). Pivalato de ((1S,3S,5S)-1- (fluorometil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (95 mg, 178,45 µmol, 58,35% de rendimento, 85% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo pálido. LCMS: ESI-MS: m/z = 453,2 [M+H]+.
[0370] Etapa E: 1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-1-(fluorometil)-3-(5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil) metila (95 mg, 209,94 µmol.) em MeOH (5 mL) adicionou-se NaOH (1 M, 945,82 µL) a 25°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 12 horas. O pH da mistura de reação foi ajustado para 6~7 adicionando solução de HCl 1,0 M. A mistura resultante foi concentrada a vácuo para fornecer 200 mg do produto bruto como um sólido amarelo pálido. 500 mg do produto bruto foram purificados por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN];B%: 0%-27%, 6 min) para fornecer um sólido branco. O sólido foi purificado novamente por SFC (coluna: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm*30 mm, 5 um); fase móvel: [NH3H2O 0,1% IPA]; B%: 45%- 45%, min). 1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (52,7 mg, 98% de pureza) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,40 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,68 (br, dd, J = 8,4, 11,0 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,72 - 4,41 (m, 2H), 4,31 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 3,79 - 3,67 (m, 2H), 2,25 - 2,21 (m, 1H), 2,12 - 2,09 (m, 1H), 1,86 (d, J = 1,0 Hz, 3H). RMN 19F (376 MHz, CD3OD) δ = -232,41. LCMS: ESI-MS: m/z = 285,1 [M+H]+. Exemplo 13: (1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0371] Etapa A: Pivalato de ((1S,3S,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclo- pentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila (Intermediário 7, 0,989 g, 1,53 mmol), 6-cloro-9H- purina (711,19 mg, 4,60 mmols) e PPh3 (61,02 mg, 232,63 µmol) em THF (15 mL) foi adicionado DIAD (930,47 mg, 4,60 mmols, 894,68 µL) em THF (15 mL) por gotejamento lentamente a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 3 horas e, então, agitada a 25°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 5~26% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 22 mL/min) para produzir pivalato de ((1S,3S,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(6-cloro-9H- purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,760 g, 972,70 µmol, 63,42% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,78-8,75 (m, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,42-7,37 (m, 2H), 7,33 -7,27 (m, 6H), 7,26-7,20 (m, 1H), 6,83 (d, J = 8,4 Hz, 4H), 6,38-6,27 (m, 1H), 5,64 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 5,55 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,46 (dd, J = 3,6, 5,4 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,64 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,80 (s, 6H), 3,39 (s, 2H), 2,81-2,69 (m, 1H), 2,34 (ddd, J = 3,6, 8,4, 13,7 Hz, 1H), 1,28 (d, J = 6,4 Hz, 9H), 1,19 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 781,3 [M+H]+.
[0372] Etapa B: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-Cloro-9H-purin-9-il)-1- (hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (6-cloro-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,736 g, 941,98 µmol) em DCM (20 mL) foi adicionado TFA (770,00 mg, 6,75 mmols, 0,5 mL) e Et3SiH (1,46 g, 12,52 mmols, 2 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por 0,5 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com piridina (1 mL) e a mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 10~45% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 22 mL/min) para produzir pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-cloro-9H-purin-9-il)-1- (hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,3 g, 626,35 µmol, 66,49% de rendimento, 100% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,74 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 5,75-
5,65 (m, 1H), 5,49 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 5,38 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,56-4,47 (m, 1H), 4,46-4,38 (m, 1H), 3,82-3,60 (m, 2H), 2,88 (ddd, J = 5,0, 11,0, 13,9 Hz, 1H), 2,41 (ddd, J = 1,5, 8,0, 13,9 Hz, 1H), 1,27 (s, 9H), 1,24 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 479,1 [M+H]+.
[0373] Etapa C: Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(6-Cloro-9H-purin-9-il)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil) metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-cloro-9H-purin-9- il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,272 g, 567,89 µmol) em DCM (3 mL) adicionou-se Tf2O (240,33 mg, 851,83 µmol, 140,55 µL) e piridina (224,60 mg, 2,84 mmols, 229,18 µL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por duas horas. A mistura foi diluída com DCM (5 mL) e lavada com NaHCO3 (5 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 3~19% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 22 mL/min) para produzir pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila (0,235 g, 384,60 umol, 67,72% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS: ESI-MS: m/z = 611,1 [M+H]+.
[0374] Etapa D: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-Cloro-9H-purin-9-il)-1- (fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(6-cloro-9H-purin-9-il)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil)ciclopentil)metila (0,235 g, 384,60 µmol) em THF (2 mL) adicionou-se TBAF (1 M, 1,15 mL). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura foi diluída com EA (5 mL) e lavada com solução saturada de NH4Cl (3 mL). A camada orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®,
eluente de 5~20% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 22 mL/min). O produto foi analisado com SFC (ES5716-281-P1_G2) e adicionalmente separado por SFC (coluna: OJ (250 mm*30 mm, 5 um); fase móvel: NH3H2O 0,1% ETOH]; B%: 20%-20% min) para produzir pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-cloro-9H-purin-9-il)-1-(fluorometil)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,083 g, 150,14 µmol, 39,04% de rendimento, 87% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,77-8,72 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 5,75 - 5,62 (m, 1H), 5,51 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 5,39 - 5,22 (m, 1H), 4,88 (s, 1H), 4,72 - 4,64 (m, 1H), 4,61 - 4,51 (m, 1H), 4,42 (s, 2H), 2,92 - 2,81 (m, 1H), 2,42 (dd, J = 7,8, 13,8 Hz, 1H), 1,26 (d, J = 10,8 Hz, 18H). LCMS: ESI-MS: m/z = 481,1 [M+H]+.
[0375] Etapa E: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)- 1-(fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-cloro-9H-purin-9-il)-1- (fluorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,083 g, 172,57 µmol) em THF (1 mL) adicionou-se NH3 em THF (88,17 mg, 5,18 mmols, 7 M, 15 mL). A mistura foi agitada a 25°C por 12 h. A mistura de reação foi concentrada em baixa pressão para produzir pivalato de ((1S,3S,5S)- 3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,053 g, 114,84 µmol, 66,54% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,32 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 5,67 - 5,56 (m, 1H), 5,69 - 5,55 (m, 2H), 5,47 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 5,32 - 5,22 (m, 2H), 4,88 (s, 1H), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 4,44 - 4,29 (m, 2H), 2,78 (ddd, J = 5,2, 11,1, 14,1 Hz, 1H), 2,36 (dd, J = 8,2, 13,9 Hz, 1H), 1,23 (d, J = 6,6 Hz, 18H). LCMS: ESI-MS: m/z = 462,3 [M+H]+.
[0376] Etapa F (1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)- 2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(fluorometil)-2-metileno-5-
(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,053 g, 114,84 µmol) em MeOH (0,5 mL) foi adicionado CH3ONa (18,61 mg, 344,51 µmol). A mistura foi agitada a 85°C durante 12 horas. O solvente foi concentrado sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 30/1 a 15/1) e adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm*30 mm, 5 µm; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 1%-28%, 8 min) para produzir (1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (0,023 g, 78,42 µmol, 68,29% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,22 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 5,73 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 5,25 (s, 1H), 4,72-4,55 (m, 1H), 4,71-4,55 (m, 1H), 4,53-4,37 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 2,73-2,55 (m, 1H), 2,40-2,21 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 293,9 [M+H]+. Exemplo 14: (1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(clorometil)-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol.
[0377] Etapa A: Pivalato de N,N-Di-BOC-((1S,3S,5S)-3-(6-amino- 9H-purin-9-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)- 1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila (Intermediário 7, 1,1 g, 1,71 mmol), N-terc- butoxicarbonil-N-(9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (1,72 g, 5,12 mmols) e PPh3 (61,02 mg, 232,63 µmol) em THF (15 mL) foi adicionado DIAD (1,03 g, 5,12 mmols, 995,08 µL) em THF (15 mL) por gotejamento lentamente a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 3 horas e, em seguida, a 25°C durante 12 horas. O solvente foi removido sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 5~26% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 35 mL/min). Pivalato de N,N-Di-BOC-((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,895 g, 902,32 µmol, 52,89% de rendimento, 97% de pureza) foi obtido como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,87 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,43-7,37 (m, 2H), 7,33-7,29 (m, 2H), 7,33-7,29 (m, 1H), 7,28 (d, J = 1,8 Hz, 3H), 7,24 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,83 (dd, J = 1,4, 8,9 Hz, 4H), 5,67 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 5,53 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,46 (dd, J = 3,4, 5,4 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,80 (s, 6H), 3,42-3,32 (m, 2H), 2,80-2,67 (m, 1H), 2,39- 2,27 (m, 1H), 1,45 (s, 18H), 1,19 (s, 9H), 1,06-1,00 (m, 9H). LCMS: ESI- MS: m/z = 962,5 [M+H]+.
[0378] Etapa B: Pivalato de N,N-Di-BOC((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de N,N-Di-BOC-((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,775 g, 805,50 µmol) em DCM (5 mL) foi adicionado TFA (765,06 mg, 6,71 mmols, 496,79 µL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 5 horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 mL) e extraída com DCM (5 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 10~45% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 35 mL/min). Pivalato de N,N-Di- BOC((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno- 5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,19 g, 287,98 µmol, 35,75% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,84 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 5,71 (dd, J = 8,2, 10,9 Hz, 1H), 5,50 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,57-4,48 (m, 1H), 4,46-4,39 (m, 1H), 3,82-3,74 (m, 1H), 3,70-3,63 (m, 1H), 2,88 (ddd, J = 5,1, 11,0, 13,9 Hz, 1H), 2,41 (dd, J = 8,5, 13,3 Hz, 1H), 1,47 (s, 18H), 1,28 (s, 9H), 1,25 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 660,3 [M+H]+.
[0379] Etapa C: Pivalato de N,N-Di-BOC-((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil) ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de N,N-Di- BOC((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(hidroximetil)-2-metileno- 5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,220 g, 333,45 µmol) em DCM (1,1 mL) adicionou-se piridina (263,76 mg, 3,33 mmols, 269,14 µL) e Tf2O (188,16 mg, 666,90 µmol, 110,03 µL). A mistura foi agitada a 0°C por duas horas. A mistura foi diluída com DCM (2 mL) e lavada com NaHCO3 (3 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 5~19% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min). Pivalato de N,N-Di-BOC-((1R,3S,5S)-3-(6- amino-9H-purin-9-il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil) óxi)metil)ciclopentil)metila (0,175 g, 221,01 µmol, 66,28% de rendimento) foi obtido como um óleo claro. LCMS: ESI-MS: m/z = 792,5 [M+H]+.
[0380] Etapa D: Pivalato de N,N-Di-BOC-((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-(clorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de N,N-Di-BOC-((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9- il)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)-1-((((trifluorometil)sulfonil)óxi)metil) ciclopentil) metila (0,175 g, 221,01 µmol) em DMF (1,5 mL) adicionou-se LiCl (37,47 mg, 884,03 µmol, 18,10 µL). A mistura foi agitada a 40°C durante duas horas. A mistura foi diluída com EA (5 mL) e lavada com H2O (5 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 3~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 40 mL/min). Pivalato de N,N-Di-BOC-((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(clorometil)-2-meti- leno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil) metila (0,06 g, 88,47 umol, 40,03% de rendimento) foi obtido como um óleo claro. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,82 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 5,76-5,64 (m, 1H), 5,39 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 5,31 (s, 1H), 4,88 (s, 1H), 4,60 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,90 - 3,71 (m, 2H), 2,87 - 2,72 (m, 1H), 2,52 - 2,33 (m, 1H), 1,53 - 1,44 (m, 18H), 1,33 - 1,28 (m, 9H), 1,22 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 700,5 [M+Na]+.
[0381] Etapa E: Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1- (clorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. Pivalato de N,N-Di- BOC-((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(clorometil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,045 g, 66,35 µmol) foi dissolvido em uma solução de TFA (154,00 mg, 1,35 mmol, 0,1 mL) em DCM (0,5 mL), e a mistura foi agitada a 25°C durante 3 horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NaHCO3 (3 mL) e extraída com DCM (5 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4,0 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~6% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). Pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1- (clorometil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,025 g, 52,30 µmol, 78,83% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,30 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 5,70 (s, 2H), 5,62 (dd, J = 8,3, 11,1 Hz, 1H), 5,36 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,31-5,27 (m, 1H), 4,91 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,57 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,91-3,68 (m, 2H), 2,72 (ddd, J = 4,9, 11,5, 14,1 Hz, 1H), 2,39 (dd, J = 7,7, 14,6 Hz, 1H), 1,28 (s, 9H), 1,21 (s, 9H).
[0382] LCMS: ESI-MS: m/z = 478,4 [M+H]+.
[0383] Etapa F (1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(clorometil)- 2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de pivalato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(clorometil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (0,045 g, 94,15 µmol) em MeOH (0,5 mL) adicionou-se CH3ONa (10,17 mg, 188,29 µmol). A mistura foi agitada a 25°C por 12 horas. O solvente foi removido sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 30/1 a 20/1). O material bruto foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 µ; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 0%-30%, 6 min). (1S,2S,4S)-4-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2-(clorometil)-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (0,0124 g, 39,63 µmol, 42,10% de rendimento, 99% de pureza) foi obtido como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,22 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 5,80-5,68 (m, 1H), 5,28 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 3,94-3,84 (m, 3H), 3,84-3,76 (m, 1H), 2,62 (ddd, J = 4,5, 10,9, 13,2 Hz, 1H), 2,33 (dd, J = 8,9, 12,2 Hz, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 309,9 [M+H]+. Exemplo 15: (1S,3S,5S)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-3-(5-metil-2,4-dioxo- 3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila.
[0384] Etapa A: Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-Benzoil-5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (Intermediário 7, 120 mg, 186,11 µmol) e 3-benzoil-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona
(Intermediário 6, 64,27 mg, 279,16 µmol) em THF (3 mL) adicionou-se PPh3 (122,03 mg, 465,27 µmol) a 25°C sob N2. Após a adição de DIAD (94,08 mg, 465,27 µmol, 90,46 µL) por gotejamento a 0°C, a mistura de reação foi agitada a 25°C por mais 12 horas. O solvente foi removido a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 3/1). O pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (100 mg, 61,44% de rendimento, 98% de pureza) foi obtido como uma espuma branca. RMN 1 H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,93-7,91 (m, 2H), 7,68-7,60 (m, 1H), 7,55- 7,44 (m, 2H), 7,49 -7,37 (m, 2H), 7,31-7,26 (m, 7H), 7,15 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,8 Hz, 4H), 5,78 - 5,75 (m, 1H), 5,56 (br, d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,12 (dd, J = 2,3, 19,6 Hz, 2H), 4,11-4,02 (m, 2H), 3,80-3,77 (m, 6H), 3,60-3,58 (m, 1H), 3,29 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,45 - 2,43 (m, 1H), 2,24 (br, dd, J = 8,8, 13,1 Hz, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,03 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 879,3 [M+Na]+.
[0385] Etapa B: 1-((1S,3S,4S)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-5- metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)- il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila (4,4 g, 5,13 mmols) em MeOH (90 mL) foi adicionada solução de NaOH (4 M, 44,00 mL) a 25°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 60°C durante 4 h. O pH da mistura de reação foi ajustado ~8 usando solução de HCl 4 M. A mistura resultante foi extraída com EA (70 mL * 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 mL), seca com Na2SO4 anidro e concentrada a vácuo até produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (DCM/MeOH = 50/1 a 20/1). 1-((1S,3S,4S)-3-((bis(4-
metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metileno- ciclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (3 g, 5,13 mmols, 99,94% de rendimento) foi obtida como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z = 607,1 [M+Na]+.
[0386] Etapa C: 1-((1S,3R,4S)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil)- 5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 1-((1S,3S,4S)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (3 g, 5,13 mmols) e 1H-imidazol (1,05 g, 15,39 mmols) em DMF (9 mL) foi adicionado TBSCl (928,06 mg, 6,16 mmols, 754,52 µL) a 20°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 20°C durante 12 horas. A reação foi vertida em água (50 mL) e extraída com EA (70 mL * 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 mL), seca com Na2SO4 anidro e concentrada a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 3/1 a 1/1). 1-((1S,3R,4S)-3-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4- hidróxi-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (3,3 g, 4,58 mmols, 89,26% de rendimento, 97% de pureza) foi obtida como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,37 (br, s, 1H), 7,44-7,43 (m, 2H), 7,36-7,32 (m, 7H), 7,12 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 6,91 - 6,88 (m, 4H), 5,93 - 5,89 (m, 1H), 4,93 (m, 2H), 4,58 (br d, J = 2,5 Hz, 1H), 3,86 (s, 6H), 3,82 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,68 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,54 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,34 (s, 1H), 3,18 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 2,38 - 2,31 (m, 2H), 1,50 (s, 3H), 0,87 (s, 9H), 0,06 (s, 3H), 0,00 (s, 3H). LCMS: ESI- MS: m/z = 721,3 [M+Na]+.
[0387] Etapa D: 1-((1S,3R,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)- 2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 1-((1S,3R,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil)-5- metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (3,3 g, 4,72 mmols) e colidina (1,43 g, 11,80 mmols, 1,56 mL) em DCE (60 mL) adicionou-se AgNO3 (2,01 g, 11,80 mmols, 1,99 mL) a 20°C sob N2. Após a adição de cloreto de 4,4'- dimetoxitritila (DMTrCl) (3,20 g, 9,44 mmols), a mistura de reação foi agitada a 60°C durante 4 horas. A mistura de reação foi vertida em água (50 mL) e o material inorgânico foi removido por filtração. O filtrado foi separado e a fase aquosa foi extraída com DCM (70 mL * 2). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 mL), seca com Na2SO4 anidro e concentrada a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 5/1 a 2/1). 1-((1S,3R,4S)-4-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (3,3 g, 3,26 mmols, 69,10% de rendimento, 99% de pureza) foi obtida como uma espuma amarela pálida. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,12 (s, 1H), 7,50 - 7,03 (m, 18H), 6,74 - 6,60 (m, 8H), 6,42 (s, 1H), 5,68 (br s, 1H), 4,93 (br s, 1H), 4,66 (m, 1H), 4,09 - 4,02 (m, 2H), 3,99 (br d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,86 - 3,83 (m, 1H), 3,76 - 3,69 (m, 12H), 3,43 - 3,41 (m, 1H), 2,72 (br, d, J = 8,8 Hz, 1H), 1,90- 1,84 (m, 1H), 1,45 (s, 3H), 0,83 (s, 9H), 0,01 (m, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 1024,8 [M+Na]+.
[0388] Etapa E: 1-((1S,3S,4S)-4-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclo- pentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona. Uma solução de 1- ((1S,3R,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclo- pentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (700 mg, 699,11 µmol) em TBAF (1 M, 20 mL) e AcOH (882,00 mg, 14,69 mmols, 840 µL) foi agitada a 50°C durante 12 horas. TEA (5 mL) foi adicionado à mistura de reação. A mistura resultante foi concentrada a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo:acetato de etila = 1:1 a 0:1). 1 - ((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (1 g, duas bateladas, 1,08 mmol, 77,40% de rendimento, 96% de pureza) foi obtida como uma espuma amarela pálida. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 11,21 (br, s, 1H), 7,41 (m, 2H), 7,29-7,19 (m, 12H), 7,07 (m, 4H), 6,88-6,78 (m, 8H), 6,44 (s, 1H), 5,40 (m, 1H), 4,83 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,68 (m, 2H), 4,00 - 3,96 (m, 2H), 3,92 - 3,84 (m, 2H), 3,71 (s, 12H), 2,86 (br d, J = 9,0 Hz, 1H), 1,80 - 1,75 (m, 1H), 1,43 (s, 3H).
[0389] LCMS: ESI-MS: m/z = 909,8 [M+Na]+.
[0390] Etapa F (1S,3S,5S)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído. A uma solução de 1-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-5- metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (100 mg, 112,74 µmol) em DCM (2 mL) e TEA (34,22 mg, 338,21 µmol, 47,07 µL) foi adicionado DMP (143,45 mg, 338,21 µmol, 104,71 µL) em uma porção a 20°C. A mistura de reação foi agitada a 20°C durante 4 horas. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 mL), e em seguida, vertida em solução saturada de Na2S2O3 (5 mL) e solução saturada de NaHCO3 (5 mL), e agitada durante 5 minutos. A fase orgânica foi separada e lavada com salmoura (5 mL), e seca com Na2SO4 anidro. O solvente foi removido a vácuo para produzir uma espuma amarela pálida. (1S,3S,5S)-5-(Bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5- metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1- carbaldeído (120 mg, bruto) foi obtido como uma espuma amarela pálida usada na etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. LCMS: ESI-MS: m/z = 907,4 [M+Na]+.
[0391] Etapa G: (E)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído oxima. A uma solução de (1S,3S,5S)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2- metilenociclopentano-1-carbaldeído (110 mg, 124,29 µmol) em piridina (1 mL) adicionou-se NH2OH HCl (17,27 mg, 248,59 µmol) em uma porção a 20°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 20°C durante 12 horas. O solvente foi removido em baixa pressão e o resíduo foi diluído com EA (20 mL), lavado com água (5 mL) e salmoura (5 mL). A fase orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada a vácuo para produzir uma espuma amarela. (E)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído oxima (85 mg, 94,44 µ mol, 75,98% de rendimento) foi obtido como uma espuma amarela pálida que foi usada na etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. LCMS: ESI-MS: m/z = 922,8 [M+Na]+.
[0392] Etapa H: (1S,3S,5S)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila. A uma solução de (E)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2- metilenociclopentano-1-carbaldeído oxima (800 mg, 888,87 µmol) em ACN (10 mL) foi adicionado CDI (288,26 mg, 1,78 mmol) em uma porção a 20°C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 30°C durante 36 horas. A mistura de reação foi diluída com EA (100 mL) e a solução resultante foi lavada com água (30 mL), salmoura (30 mL) e seca com Na2SO4 anidro. A solução resultante foi concentrada a vácuo para produzir um óleo amarelo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 2/1 a 1/1). (1S,3S,5S)- 5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)- 3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano- 1-carbonitrila (500 mg, 63,14% de rendimento, 99% de pureza) foi obtida como uma espuma amarela pálida. LCMS: ESI-MS: m/z = 904,5 [M+Na]+.
[0393] Etapa I: (1S,3S,5S)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-3-(5-metil-2,4- dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila. A uma solução de (1S,3S,5S)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila (400 mg, 453,51 µmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (616,00 mg, 5,40 mmols, 0,4 mL) a 20°C, e foi agitada a 20°C durante duas horas. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrila (20 mL), e o pH da solução foi ajustada até 8 com solução saturada de NaHCO3. A mistura resultante foi concentrada a vácuo para fornecer 600 mg do produto bruto como um óleo amarelo. 900 mg do produto bruto foram purificados por cromatografia em coluna de gel de sílica (DCM/MeOH = 15/1 a 10/1). (1S,3S,5S)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-3-(5- metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1- carbonitrila (152,2 mg, 97,75% de pureza, 80,7% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,34 (s, 1H), 5,64 - 5,58 (m, 2H), 5,23 (s, 1H), 4,43 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,87 - 3,84 (m, 1H), 3,79 - 3,86 (m, 1H), 2,34 - 2,29 (m, 1H), 2,28 - 2,18 (m, 1H), 1,86 (s, 3H). LCMS: ESI-MS: m/z = 278,1 [M+H]+.
Exemplo 16: (1S,3S,5S)-3-(4-Amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5-hidróxi- 1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila.
[0394] Etapa A: Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-Benzoil-2,4-dioxo-3,4- di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1S,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno- 5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (Intermediário 7, 3 g, 4,65 mmols), PPh3 (2,44 g, 9,31 mmols) e 3-benzoil-1H-pirimidino-2,4-diona (1,51 g, 6,98 mmols) em THF (60 mL) foi adicionado DIAD (1,88 g, 9,31 mmols, 1,81 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C por 12 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 6~23% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min). Pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo-3,4-di- hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (3,3 g, 3,91 mmols, 84,14% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,99-7,90 (m, 2H), 7,69-7,63 (m, 1H), 7,57-7,49 (m, 2H), 7,43-7,36 (m, 2H), 7,27 (s, 7H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,8 Hz, 4H), 5,70 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 5,48 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,23 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,27 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 4,11-4,05 (m, 1H), 3,82 (s, 6H), 3,47-3,37 (m, 2H), 2,25-2,18 (m, 1H), 2,13 (dd, J = 4,8, 10,4 Hz, 1H), 1,16 (s, 9H), 1,09 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 865,5 [M+Na]+.
[0395] Etapa B: 1-((1S,3S,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidino-2,4(1H,3H)- diona. A uma solução de pivalato de ((1R,3S,5S)-3-(3-benzoil-2,4-dioxo- 3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)- 2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (1,73 g, 2,05 mmols) em MeOH (40 mL) foi adicionado NaOH (4 M, 7,70 mL). A mistura foi agitada a 60°C durante 12 horas. A mistura de reação foi neutralizada com solução de HCl (1 M) e extraída com EA (20 mL*3). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~2% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). Foi obtida 1-((1S,3S,4S)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (0,793 g, 1,39 mmol, 67,71% de rendimento) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,95 (s, 1H), 7,40 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,35-7,28 (m, 6H), 7,27 -7,21 (m, 1H), 6,89 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,6 Hz, 4H), 5,78-5,62 (m, 1H), 5,48 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,93 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,86 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,83 - 3,76 (m, 8H), 3,41 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,24 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 2,25 (dd, J = 8,8, 12,2 Hz, 1H), 1,96 -1,80 (m, 1H). LCMS: ESI- MS: m/z = 593,1 [M+Na]+.
[0396] Etapa C: 1-((1S,3R,4S)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil) pirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 1-((1S,3S,4S)-3-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metileno- ciclopentil)pirimidino-2,4(1H,3H)-diona (0,793 g, 1,39 mmol) em DMF (1,8 mL) foi adicionado imidazol (283,82 mg, 4,17 mmols) e TBSCl (314,18 mg, 2,08 mmols, 255,43 µL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura foi diluída com EA (15 mL) e lavada com
H2O (10 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~1% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). Obteve-se 1-((1S,3R,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil) pirimidino-2,4(1H,3H)-diona (0,825 g, 1,20 mmol, 86,68% de rendimento) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,40 (s, 1H), 7,42-7,35 (m, 2H), 7,33-7,27 (m, 4H), 7,26 -7,19 (m, 3H), 7,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,8 Hz, 4H), 5,86 - 5,72 (m, 1H), 5,42 (dd, J = 2,3, 8,0 Hz, 1H), 4,97 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,45 - 4,39 (m, 1H), 3,83 - 3,80 (m, 6H), 3,76 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,70 - 3,64 (m, 1H), 3,46 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,21 (dd, J = 3,1, 5,4 Hz, 2H), 2,33 - 2,23 (m, 1H), 2,04-1,98 (m, 1H), 0,84 (s, 9H), 0,03 (s, 3H), -0,01 (s, 3H). LCMS: ESI-MS: m/z = 707,2 [M+Na]+.
[0397] Etapa D: 1-((1S,3R,4S)-4-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)- 2-metilenociclopentil)pirimidino-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 1- ((1S,3R,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildime- tilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil)pirimidino-2,4(1H,3H)- diona (0,1 g, 146,01 µmol) em dicloroetano (DCE) (0,3 mL) foram adicionados AgNO3 (49,61 mg, 292,02 µmol, 49,11 L), colidina (35,39 mg, 292,02 µmol, 38,59 µL) e 1-[cloro-(4-metoxifenil)-fenil-metil]-4- metóxi-benzeno (74,21 mg, 219,01 µmol). A mistura foi agitada a 50°C durante 1 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com MeOH (2 mL) e o solvente foi removido em baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica (ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 15~45% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min). Obteve-se 1-((1S,3R,4S)-4-(Bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-
(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclopentil)pirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (0,108 g, 107,21 µmol, 73,42% de rendimento, 98% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,48 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,35 (dd, J = 9,0, 13,8 Hz, 4H), 7,30 -7,21 (m, 6H), 7,19-7,18 (m, 1H), 7,15 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,09 (dd, J = 6,0, 8,8 Hz, 4H), 6,85 - 6,70 (m, 8H), 5,38 (s, 1H), 5,11 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,94 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,92 - 4,90 (m, 1H), 4,20 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 4,07 (s, 1H), 3,96 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,76 (dd, J = 2,4, 6,8 Hz, 12H), 3,54 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,06 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 2,09 - 2,03 (m, 1H), 1,28 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 0,89 (s, 9H), 0,07 (d, J = 4,2 Hz, 6H).
[0398] Etapa E: 1-((1S,3S,4S)-4-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclo- pentil)pirimidino-2,4(1H,3H)-diona. 1-((1S,3R,4S)-4-(Bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclopentil)pirimidino-2,4(1H,3H)- diona (0,1 g, 101,29 µmol) foi tratada com TBAF (2 M, 3 mL). [TBAF foi neutralizado com CH3COOH (176,40 mg, 2,94 mmols, 168,00 µL)]. A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 12 horas. A mistura foi diluída com EA (5 mL) e lavada com H2O (5 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada até a secura sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~2% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). Obteve-se 1- ((1S,3S,4S)-4-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidino- 2,4(1H,3H)-diona (0,06 g, 68,73 µmol, 67,85% de rendimento) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,53 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,40 (dd, J = 8,8, 13,8 Hz, 4H), 7,35 - 7,27 (m, 5H), 7,20-7,09 (m, 8H), 6,93 - 6,77 (m, 8H), 5,59 (s, 1H), 5,32 (s, 1H), 5,08 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,23 (dd, J =
6,0, 8,5 Hz, 1H), 4,03-3,90 (m, 2H), 3,86-3,74 (m, 12H), 3,61 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 2,13 - 2,06 (m, 1H), 1,37-1,30 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 895,3 [M+Na]+.
[0399] Etapa F (1S,3S,5S)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído. A uma solução de 1- ((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidino-2,4(1H,3H)- diona (0,06 g, 68,73 µmol) em DCM (0,7 mL) foi adicionado DMP (58,30 mg, 137,46 µmol, 42,56 µL). A mistura foi agitada a 25°C por uma hora. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NaHCO3 (1 mL) e solução saturada de Na2S2O3 (1 mL). A mistura foi extraída com DCM (10 mL*2) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL). A solução resultante foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo de (1S,3S,5S)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído (0,06 g, bruto) como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z = 893,8 [M+Na]+.
[0400] Etapa G: (E)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)- il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído oxima. A uma solução de (1S,3S,5S)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclo- pentano-1-carbaldeído (60 mg, 68,89 µmol) em piridina (0,7 mL) foi adicionado cloridrato de hidroxilamina (9,57 mg, 137,78 µmol). A mistura foi agitada a 25°C durante 0,5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com H2O (5 mL) e extraído com EA (5 mL * 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL), secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer a (E)-5-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-
1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimi- din-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbaldeído oxima (60 mg, bruto) como uma espuma marrom. LCMS: ESI-MS: m/z = 908,3 [M+Na]+.
[0401] Etapa H: (1S,3S,5S)-5-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin- 1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila. A uma solução de (E)-5- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1- carbaldeído oxima (0,71 g, 801,36 µmol) em CH3CN (8 mL) foi adicionado CDI (259,88 mg, 1,60 mmol). A mistura foi agitada a 45°C durante 16 horas. A mistura foi diluída com EA (20 mL) e lavada com H2O (15 mL*2). A camada orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 12 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 17~62% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 30 mL/min). (1S,3S,5S)-5-(Bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1- carbonitrila (0,57 g, 656,70 µmol, 81,95% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,51 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,44-7,37 (m, 4H), 7,34 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,30-7,18 (m, 10H), 7,00 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (ddd, J = 2,8, 4,1, 9,0 Hz, 8H), 5,55 (s, 1H), 5,44 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,21 - 5,11 (m, 2H), 4,05 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 1,0 Hz, 6H), 3,72 (d, J = 9,3 Hz, 6H), 3,41 - 3,35 (m, 1H), 3,29 (s, 1H), 1,06 - 0,97 (m, 1H), 0,95 - 0,84 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 890,3 [M+Na]+.
[0402] Etapa I: (1S,3S,5S)-3-(4-Amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metilenociclopentano-1-carbonitrila. A uma solução de (1S,3S,5S)-5- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1-
carbonitrila (0,57 g, 656,70 µmol) em CH3CN (3 mL) foram adicionados Et3N (132,90 mg, 1,31 mmol, 182,81 µL), DMAP (160,46 mg, 1,31 mmol) e cloreto de 2,4,6-tri-isopropilbenzenossulfonila (397,77 mg, 1,31 mmol). A mistura foi agitada a 25°C durante 0,5 h. NH3.H2O (1,82 g, 14,54 mmols, 2 mL, 28% de pureza, 22,14 eq.) foi adicionada à mistura, e a mistura de reação foi agitada a 25°C durante 1,5 h. A mistura foi diluída com EA (30 mL) e lavada com solução saturada de NH4Cl (15 mL*4). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 20 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~3,2% de gradiente de MeOH/DCM em 30 mL/min). (1S,3S,5S)-3-(4-Amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metilenociclopentano-1-carbonitrila (0,439 g, 496,22 µmol, 75,56% de rendimento, 98% de pureza) foi obtida como uma espuma branca. RMN 1 H (400 MHz, METANOL-d4) δ = 7,51 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,43 - 7,37 (m, 4H), 7,34 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,30 - 7,16 (m, 10H), 7,01 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,84 - 6,75 (m, 8H), 5,64 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,48 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,18 (s, 1H), 5,02 (s, 1H), 4,07 - 4,03 (m, 1H), 3,77 (d, J = 1,8 Hz, 6H), 3,72 (d, J = 8,5 Hz, 6H), 3,41 - 3,33 (m, 2H), 1,16 - 1,09 (m, 1H), 1,01 - 0,90 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 867,2 [M+H]+.
[0403] Etapa J: (1S,3S,5S)-3-(4-Amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5- hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila. A uma solução de (1S,3S,5S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metilenociclopentano-1-carbonitrila (389,00 mg, 448,68 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (7,67 g, 13,46 mmols, 4,98 mL, 20% de pureza). A mistura foi agitada a 25°C por 0,5 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com NH3 (7 M, em MeOH, 1 mL) e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 5~17% de gradiente de MeOH/DCM em 20 mL/min). O material bruto foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 0%-25%, 6 min). (1S,3S,5S)-3-(4-amino- 2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano- 1-carbonitrila (0,0998 g, 376,73 µmol, 83,96% de rendimento, 99% de pureza) foi obtida como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 7,54 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,63 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 5,55 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,15 (s, 1H), 4,43 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,90- 3,83 (m, 1H), 3,80-3,73 (m, 1H), 2,40-2,28 (m, 1H), 2,25-2,16 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 263,1154 [M+H]+. Exemplo 17: (1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-hidróxi-1-(hidroxi- metil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila.
[0404] Etapa A: Pivalato de ((1R,3R,5S)-1-((Bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1R,3R,5S)-3-((terc- butildimetilsilil)óxi)-1-(hidroximetil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil) metila (Intermediário 7, produto da etapa I, 8,8 g, 19,27 mmols) em DCM (90 mL) adicionou-se AgNO3 (6,55 g, 38,54 mmols, 6,48 mL) e colidina (4,67 g, 38,54 mmols, 5,09 mL) em uma porção a 30°C sob N2. 1-[cloro- (4-metoxifenil)-fenil-metil]-4-metoxibenzeno (9,79 g, 28,90 mmols) foi adicionado à mistura a 30°C. A mistura de reação foi agitada a 30°C durante uma hora. O material inorgânico foi removido por filtração e a torta filtrada foi lavada com DCM (100 mL*2). A mistura foi lavada com água (50 mL*2) e salmoura (50 mL). A fase orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 80 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~7% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo) para fornecer pivalato de ((1R,3R,5S)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (10,2 g, 12,63 mmols, 65,55% de rendimento, 94% de pureza) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,40-7,15 (m, 9H), 6,85-6,75 (d, J = 8,8 Hz, 4H), 5,30 -5,22 (d, J = 2 Hz, 1H), 5,15-5,05 (dd, J = 6,4, 8 Hz, 1H), 5,00-4,95 (d, J = 2,8 Hz,1H), 4,50-4,40 (m, 1H), 4,30-4,20 (q, J = 10,8 Hz, 2H), 3,80 (s, 6H), 3,04 (s, 2H), 2,50-2,40 (m, 1H), 1,75-1,62 (m, 1H), 1,20-1,00 (m, 18H), 0,95-0,85 (m, 9H), 0,10-0,04 (d, J = 10 Hz, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 781,40 [M+Na]+.
[0405] Etapa B: Pivalato de ((1R,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma mistura de pivalato de ((1R,3R,5S)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-((terc-butildimetilsilil)óxi)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclo- pentil)metila (17,9 g, 23,58 mmols) em THF (230 mL) foi adicionado TBAF (1 M, 35,37 mL) a 30°C. A mistura de reação foi agitada a 30°C durante uma hora. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 5/1 a 4/1) para produzir pivalato de ((1R,3R,5S)- 1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5-(pivaloilóxi) ciclopentil)metila (14 g, 21,28 mmols, 90,23% de rendimento, 98% de pureza) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,40-7,15 (m, 9H), 6,85-6,75 (d, J = 8,8 Hz, 4H), 5,50 -5,45 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 5,20- 5,08 (m, 2H), 4,55-4,40 (m, 2H), 4,20-4,13 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,80 (s, 6H), 3,10-3,03 (dd, J = 8,8,14 Hz, 2H), 2,46-2,41 (m, 1H), 1,78-1,68 (m, 1H), 1,20-1,00 (m, 18H). LCMS: ESI-MS: m/z = 667,20 [M+Na]+.
[0406] Etapa C: Pivalato de N,N-Di-BOC-((1R,3S,5S)-3-(6-amino- 9H-purin-9-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila. A uma solução de pivalato de ((1R,3R,5S)- 1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-hidróxi-2-metileno-5- (pivaloilóxi)ciclopentil)metila (9 g, 13,96 mmols) em THF (180 mL) foi adicionado PPh3 (9,52 g, 36,29 mmols) e N,N-Di-BOC-9H-purin-6-amina (14,00 g, 41,75 mmols) a 30°C, e em seguida, DIAD (7,34 g, 36,29 mmols, 7,06 mL) foi adicionado por gotejamento a 0°C. A mistura foi agitada a 30°C durante 12 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 4/1) para produzir pivalato de N,N-Di-BOC-((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (15 g, 10,76 mmols, 77,07% de rendimento, 69% de pureza) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,77 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,45 - 7,20 (m, 16H), 6,85 - 6,78 (d, J = 8,8 Hz, 6H), 6,376 (s, 4H), 5,80 – 5,70 (m, 1H), 5,55 - 5,45 (m, 1H), 5,22 (s, 1H), 4,40 - 4,33 (m, 2H), 4,28 - 4,21 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,79 (s, 9H), 3,45 (s, 2H), 2,54 - 2,36 (m, 2H), 2,32 - 2,23 (m, 2H), 1,50 - 1,40 (m, 27H), 1,30 - 1,17 (m, 57H), 1,10 (s, 11H). LCMS: ESI-MS: m/z = 962,50 [M+H]+.
[0407] Etapa D: (9-((1S,3S,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il) carbamato de terc-butila. A uma solução de pivalato de N,N-Di-BOC- ((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-2-metileno-5-(pivaloilóxi)ciclopentil)metila (10 g, 10,39 mmols) em MeOH (150 mL) foi adicionada solução de NaOH (4 M, 33,33 mL), e agitada a 25°C durante 12 horas. H2O (100 mL) foi adicionada, e a mistura foi extraída com EA (200 mL*4). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 80 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®,
eluente de 0~3% de gradiente de MeOH/DCM a 60 mL/min) para fornecer (9-((1S,3S,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-4- hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (3,7 g, 5,33 mmols, 51,28% de rendimento) como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z = 694,3 [M+H]+.
[0408] Etapa E: (9-((1S,3R,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9- ((1S,3S,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc- butila (3,5 g, 5,04 mmols) em DMF (7 mL) foi adicionado imidazol (1,03 g, 15,13 mmols) e terc-butil-cloro-dimetil-silano (1,14 g, 7,57 mmols, 927,26 µL) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura foi diluída com EA (50 mL) e lavada com H2O (50 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 20 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 0~2% de gradiente de MeOH/DCM em 35 mL/min) para fornecer (9- ((1S,3R,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildime- tilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (3,7 g, 4,21 mmols, 83,50% de rendimento, 92% de pureza) como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z = 808,5 [M+H]+.
[0409] Etapa F: (9-((1S,3R,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)- 2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9-((1S,3R,4S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-4-hidróxi-2-metilenociclopentil)-9H- purin-6-il)carbamato de terc-butila (4,7 g, 5,82 mmols) em DCE (13 mL) foi adicionado AgNO3 (1,98 g, 11,63 mmols, 1,96 mL), colidina (1,41 g, 11,63 mmols, 1,54 mL) e 1-[cloro-(4-metoxifenil)-fenil-metil]-4-metóxi-
benzeno (2,96 g, 8,72 mmols). A mistura foi agitada a 50°C durante duas horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com MeOH (10 mL) e o solvente foi removido em baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 8~30% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 40 mL/min) para fornecer (9-((1S,3R,4S)-4- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- (((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il) carbamato de terc-butila (5,8 g, 5,12 mmols, 88,01% de rendimento, 98% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,67 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,48-7,42 (m, 2H), 7,32 (dd, J = 8,8, 13,2 Hz, 4H), 7,25-7,17 (m, 7H), 7,17-7,07 (m, 5H), 6,79-6,65 (m, 8H), 5,57 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 5,04 (s, 1H), 4,76 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,27-4,17 (m, 2H), 4,01 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 2,0 Hz, 6H), 3,74-3,69 (m, 6H), 3,54 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,05-2,99 (m, 1H), 2,12-2,06 (m, 1H), 1,56 (s, 9H), 1,50-1,40 (m, 1H), 0,99-0,86 (m, 9H), 0,10 (d, J = 5,3 Hz, 6H). LCMS: ESI-MS: m/z = 1110,6 [M+H]+.
[0410] Etapa G: (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopen- til)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. (9-((1S,3R,4S)-4-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(((terc- butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (4,4 g, 3,96 mmols, 1 eq.) foi tratado com TBAF (1,5 M, 40 mL, 15,14 eq.) e agitado a 50°C durante 3 horas. A mistura foi diluída com EA (40 mL) e lavada com H2O (30 mL*2). A camada orgânica foi seca com Na2SO4anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 40 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 20~55% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 40 mL/min) para fornecer (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-
9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (2,8 g, 2,70 mmols, 68,10% de rendimento, 96% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,45 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,43 (dd, J = 1,4, 8,0 Hz, 2H), 7,32-7,17 (m, 12H), 7,15-7,08 (m, 4H), 6,79-6,66 (m, 8H), 5,41 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,97 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,28 (dd, J = 6,0, 9,0 Hz, 1H), 4,15-4,12 (m, 1H), 4,08 - 4,05 (m, 1H), 3,76 (d, J = 2,4 Hz, 6H), 3,72 (d, J = 3,3 Hz, 6H), 3,48 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,35 - 3,32 (m, 1H), 2,21 (td, J = 8,7, 13,9 Hz, 1H), 1,76-1,64 (m, 1H), 1,59 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 996,4 [M+H]+.
[0411] Etapa H: (9-((1S,3S,4S)-4-(Bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)- 3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-formil-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9- ((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6- il)carbamato de terc-butila (0,4 g, 401,55 µmol) em DCM (4 mL) foi adicionado DMP (340,62 mg, 803,09 µmol, 248,63 µL). A mistura foi agitada a 25°C por 1 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NaHCO3 (5 mL) e solução saturada de Na2S2O3 (5 mL). A mistura de reação foi extraída com DCM (20 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-formil-2-metilenociclopentil)-9H-purin- 6-il)carbamato de terc-butila bruto (0,39 g, bruto) como uma espuma amarela. LCMS: ESI-MS: m/z = 994,5 [M+H]+.
[0412] Etapa I: (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-((E)-(hidróxi-imino)metil)-2- metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-formil-2-metilenociclopentil)-9H-purin-
6-il)carbamato de terc-butila (0,39 g, 392,30 µmol) em piridina (4 mL) foi adicionado NH2OH HCl (54,52 mg, 784,60 µmol) A mistura foi agitada a 25°C durante 0,5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com H2O (5 mL) e extraído com EA (5 mL * 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-((E)-(hidróxi- imino)metil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc- butila (0,39 g, bruto) como uma espuma amarela. LCMS: ESI-MS: m/z = 1009,4 [M+H]+.
[0413] Etapa J: (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-ciano-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução agitada de (9- ((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-((E)-(hidróxi-imino)metil)-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (0,45 g, 445,92 µmol) em CH3CN (4 mL) foi adicionado CDI (144,61 mg, 891,84 µmol). A mistura foi agitada a 25°C por 12 h. A mistura foi diluída com EA (50 mL) e lavada com H2O (5 mL*2). A camada orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 5/1 a 2/1) e foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 70%-100%, 6 min) para fornecer (9-((1S,3S,4S)-4- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- ciano-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (0,34 g, 336,18 µmol, 75,39% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,14 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,55 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,46 -7,40 (m, 4H), 7,37 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,31-
7,15 (m, 10H), 6,84-6,75 (m, 8H), 5,62 (s, 1H), 5,49 (br t, J = 8,4 Hz, 1H), 4,97 (s, 1H), 4,59 (br, s, 1H), 4,41 (t, J = 4,0 Hz, 1H), 3,76 (s, 6H), 3,72 (d, J = 2,0 Hz, 6H), 3,67 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,39 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 1,70 (ddd, J = 4,7, 8,7, 13,9 Hz, 1H), 1,56 (s, 9H), 1,23-1,15 (m, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 991,5 [M+H]+.
[0414] Etapa K: (1S,3S,5S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-5-hidróxi-1- (hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila. A uma solução de (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-ciano-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il) carba- mato de terc-butila (0,34 g, 343,04 µmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (4,62 g, 8,10 mmols, 3 mL, 20% de pureza). A mistura foi agitada a 25°C por duas horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com NH3 (7 M, em MeOH, 2 mL) e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH=30/1 a 15/1) e foi adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Waters Xbridge 150*25 5 u; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 0%-30%, 6 min) para fornecer (1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-2- metilenociclopentano-1-carbonitrila (0,062 g, 216,56 µmol, 63,13% de rendimento, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,20 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 5,85-5,72 (m, 1H), 5,58 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,06 (s, 1H), 4,57 (br, J = 3,1 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,87 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 2,80 (ddd, J = 4,5, 10,8, 13,3 Hz, 1H), 2,39 (ddd, J = 1,7, 8,2, 13,5 Hz, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 287,1294 [M+H]+.
Exemplo 18: (1S,3S,5S)-3-(2-Amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)- 5-hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila.
[0415] Etapa A. N,N-Di-BOC-(6aS,8S,9aS)-8-(2-amino-6-cloro-9H- purin-9-il)-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metilenotetraidrociclopenta[f][1,3,5,2,4] trioxadissilocino-6a(6H)-carbonitrila. A uma solução de (6aS,8R,9aS)-8- hidróxi-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metilenotetraidrociclopenta[f][1,3,5,2,4] trioxadissilocino-6a(6H)-carbonitrila (Intermediário 9, 0,054 g, 0,131 mmol), N,N-Di-BOC-6-cloro-9H-purin-2-amina (Intermediário 10, 0,145 g, 0,393 mmol) e trifenilfosfina (0,103 g, 0,393 mmol) em THF (1,3 mL, 0,1 M) foi adicionado azodicarboxilato de di-isopropila (0,080 mL, 0,393 mmol). A mistura de reação foi aquecida a refluxo durante 1 h e 10 min, e em seguida foi resfriada e concentrada a vácuo para produzir um óleo laranja. Dois lotes foram combinados e purificados (FCC, SiO2, 0 a 30% de EtOAc/hexanos) para fornecer N,N-Di-BOC-(6aS,8S,9aS)-8-(2- amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metilenotetraidro- ciclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocino-6a(6H)-carbonitrila como um sólido branco espumoso (0,108 g).
[0416] Etapa B. (1S,3S,5S)-3-(2-Amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin- 9-il)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila. A um frasco de fundo redondo carregado com N,N-Di-BOC-(6aS,8S,9aS)-8- (2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2,2,4,4-tetraisopropil-7-metilenotetra- idrociclopenta[f][1,3,5,2,4]trioxadisilocino-6a(6H)-carbonitrila (0,108 g, 0,141 mmol) resfriado até 0°C foi adicionado TFA/H2O (1,25 mL:1,25 mL:, 0,0566 M) por gotejamento. A solução incolor foi agitada em temperatura ambiente durante 48 horas, e então coevaporada com
EtOH (3x), concentrada a vácuo e ressuspensa em THF. A esta solução adicionou-se TBAF (1 equiv.) a 0°C, e em seguida, agitou-se em temperatura ambiente. Outro equivalente de TBAF foi adicionado após duas horas, e em seguida, após uma hora, foi concentrada a vácuo para produzir um óleo amarelo espesso. O óleo bruto foi purificado em HPLC de fase reversa com coluna Phenomenex Synergyi de 4 mícrons Hydro- RP 80 A 250 x 21,2 mm (0 a 50% acetonitrila com tampão de acetato de trietilamônio (TEAA) em H2O com tampão TEAA) para fornecer (1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-5-hidróxi-1- (hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila como um sólido branco (0,0277 g, 59% em duas etapas). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,77 (s, 1H), 5,64 (m, 1H), 5,56 (d, J = 2,8, 1H), 5,53 (m, 1H), 5,08 (d, J = 2,8, 1H), 4,01 (d, J = 12, 1H), 3,82 (d, J = 12, 1H), 2,66 (m, 1H), 2,34 (m, 1H). MS, m/Z 302,95 [M+1]+. Exemplo 19: (1S,2R,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-etinil-2-(hidroximetil) -3-metilenociclopentan-1-ol.
[0417] Etapa A: (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-formil-2-metilenociclopentil)- 9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9- ((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil)metóxi)metil)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6- il)carbamato de terc-butila (Exemplo 17, produto da etapa G, 0,4 g, 401,55 µmol) em DCM (4 mL) foi adicionado DMP (340,62 mg, 803,09 µmol, 248,63 µL). A mistura foi agitada a 25°C durante uma hora. A mistura de reação foi filtrada e bruscamente arrefecida pela adição de solução saturada de NaHCO3 e solução saturada de Na2SO3 (1:1,5 mL). A solução resultante foi lavada com salmoura (2 mL*5). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 1/1) produziu (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- formil-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (388 mg, 390,29 µmol, 97,20% de rendimento) como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z = 994,5 [M+H]+.
[0418] Etapa B: (9-((1S,3R,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-etinil-2-metilenociclopentil)-9H- purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de K2CO3 (187,68 mg, 1,36 mmol) em MeCN adicionou-se 1-dimetoxifosforilpropan-2-ona (75,19 mg, 452,65 µmol, 62,14 µL) e TosN3 (89,27 mg, 452,65 µmol) a 25°C sob N2. A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. (9- ((1S,3S,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil) (fenil) metóxi)metil)-3-formil-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il) carbamato de terc-butila (0,225 g, 226,33 µmol) em MeOH (0,3 mL) e MeCN (0,3 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada a 25°C durante 48 horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com H2O (3 mL) e extraída com EA (5 mL). A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada até a secura sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 2/1) produziu (9-((1S,3R,4S)-4-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3- etinil-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (100 mg, 96,96 µmol, 42,84% de rendimento, 96% de pureza) como uma espuma branca. LCMS: ESI-MS: m/z = 990,5 [M+H]+.
[0419] Etapa C: (1S,2R,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-etinil-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. A uma solução de (9- ((1S,3R,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metóxi)metil)-3-etinil-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (100 mg, 101,00 µmol) em DCM (0,6 mL) adicionou-se TFA (770,00 mg, 6,75 mmols, 0,5 mL) e DCM (0,1 mL) (VTFA: VDCM = 5:1) a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C durante duas horas. A mistura foi neutralizada por NH3 em MeOH (7 M) até pH = 7. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash com gel de sílica (SiO2, DCM/MeOH = 30/1 a 10/1) e adicionalmente purificado por HPLC preparativa (coluna: Xbridge BEH C18, 250*50 mm, 10 µm; fase móvel: [água (NH4HCO3 10 mM)-ACN]; B%: 0%-30%, 9 minutos) para fornecer (1S,2R,4S)-4-(6- amino-9H-purin-9-il)-2-etinil-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (33,1 mg, 100% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,24 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 5,80-5,73 (m,1H), 5,51 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,45-4,42 (m, 1H), 3,98 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,72-2,62 (m, 2H), 2,41 (ddd, J = 3,0, 8,4,13,2 Hz, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 285,9 [M+H]+. Exemplo 20: (1S,2R,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)-3- metileno-2-vinilciclopentan-1-ol.
[0420] Etapa A: (9-((1S,3R,4S)-4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-metileno-3-vinilciclopentil)-9H- purin-6-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de brometo de metil(trifenil)fosfônio;(280,28 mg, 784,60 µmol) em tolueno (0,5 mL) foi adicionado 2-metil-2-butóxido de potássio (396,19 mg, 784,60 µmol, 455,39 µL, 25% de pureza) a 25°C, e foi agitada a 25°C durante uma hora. Em seguida, uma solução de (9-((1S,3S,4S)-4-(bis(4- metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-
formil-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (0,26 g, 261,53 µmol) em tolueno (0,5 mL) foi adicionada à mistura, e a mistura foi agitada a 25°C durante 4 horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NH4Cl (5 mL) e extraída com EA (5 mL*2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ISCO®; 4 g de coluna Flash de sílica SepaFlash®, eluente de 20~40% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo em 20 mL/min) para fornecer (9-((1S,3R,4S)-4- (bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- metileno-3-vinilciclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc-butila (0,18 g, 177,79 µmol, 67,98% de rendimento, 98% de pureza) como uma espuma branca. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,44 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,45 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,31 -7,08 (m, 16H), 6,79-6,64 (m, 8H), 6,58 (dd, J = 10,6, 17,6 Hz, 1H), 5,42 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,31 (br d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,28 (dd, J = 5,2, 9,6 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 6,0, 7,9 Hz, 12H), 3,60 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,22 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 1,96-1,83 (m, 1H), 1,69 (br, d, J = 13,2 Hz, 1H), 1,59 (s, 9H). LCMS: ESI-MS: m/z = 992,4 [M+H]+.
[0421] Etapa B: (1S,2R,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(hidroxime- til)-3-metileno-2-vinilciclopentan-1-ol. A uma solução de (9-((1S,3R,4S)- 4-(bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi) metil)-2-metileno-3-vinilciclopentil)-9H-purin-6-il)carbamato de terc- butila (0,4 g, 403,16 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (7,00 g, 12,28 mmols, 4,55 mL, 20% de pureza). A mistura foi agitada a 25°C por 8 horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com NH3 (7 M, em MeOH, 4 mL) e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, DCM/MeOH = 30/1 a 15/1) para fornecer (1S,2R,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)- 3-metileno-2-vinilciclopentan-1-ol (0,09 g, 310,11 µmol, 76,92% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ = 8,33 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 6,06 (dd, J = 10,9, 17,5 Hz, 1H), 5,72-5,60 (m, 1H), 5,35-5,22 (m, 3H), 5,06 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,57 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 3,80 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 2,49 - 2,39 (m, 1H), 2,27 (ddd, J = 6,5, 8,4, 13,3 Hz, 1H). LCMS: ESI-MS: m/z = 287,9 [M+H]+. Exemplo 21: Síntese de 5'-trifosfatos de nucleosídeo.
[0422] Nucleosídeo seco (0,05 mmol) foi dissolvido em PO(OMe)3 seco (1 mL). N-metilimidazol (0,009 mL, 0,11 mmol) foi adicionado seguido de POCl3 (0,009 mL, 0,11 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 20 a 40 minutos. A reação foi monitorada por LCMS (pelo aparecimento do 5'-monofosfato de nucleosídeo correspondente). Após o término da reação, sal de tetrabutilamônio de pirofosfato (150 mg) foi adicionado, seguido por DMF (0,5 mL) para obter uma solução homogênea. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h, e em seguida, diluída com água (10 mL). Purificação (coluna HiLoad 16/10 com Q Sepharose de alto desempenho: A separação foi feita em um gradiente linear de NaCl de 0 a 1N em tampão TRIS 50 mM (pH 7,5) (tampão B). O trifosfato foi eluído a 75 a 80% do tampão b. As frações correspondentes foram concentradas. A dessalinização foi obtida por HPLC de fase reversa na coluna Synergy 4 micron Hydro-RP (Phenominex). Um gradiente linear de acetonitrila de 0 a 30% em tampão de acetato de trietilamônio a 10 mM (pH 7,5) foi usado para a eluição. As frações correspondentes foram combinadas, concentradas e liofilizadas 3 vezes para remover o excesso de tampão para produzir o 5'-trifosfato de nucleosídeo desejado.
Exemplo 22: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S,5S)-3-(4-Amino-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0423] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,2R,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il)-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 23. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S,5S)-3-(2-amino-4-oxo- 3,4-di-hidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-5-hidróxi-2-metilenociclopentil) metila.
[0424] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 12, usando 2-amino-7-((1S,3R,4S)-4-hidróxi-3-(hidroximetil)- 2-metilenociclopentil)-3,7-di-hidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (Exemplo 2) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 24. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-1-fluoro-5- hidróxi-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2- metilenociclopentil)metila.
[0425] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando 1-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2- metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (Exemplo 3, Etapa A)como o material de nucleosídeo de partida. Exemplo 25. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo- 1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-1-fluoro-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0426] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando 2-amino-9-((1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona (Exemplo 4) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 26. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-fluoro-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0427] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-fluoro-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 6) como o material nucleosídeo de partida.
Exemplo 27: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(4-amino-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-1-fluoro-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0428] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,2S,4S)-4-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 1) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 28. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo- 1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-1-(fluorometil)-5-hidróxi-2-metilenociclopentil) metila.
[0429] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando 2-amino-9-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-1,9-di-hidro-6H-purin-6-ona (Exemplo 10) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 29. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(4-amino-2- oxopirimidin-1(2H)-il)-1-(fluorometil)-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0430] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando 4-amino-1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)pirimidin-2(1H)-ona (Exemplo 11) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 30. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-1-(fluorometil)-5- hidróxi-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenoci- clopentil)metila.
[0431] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando 1-((1S,3S,4S)-3-(fluorometil)-4-hidróxi-3- (hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-5-metilpirimidino-2,4(1H,3H)-diona (Exemplo 12) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 31. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-(clorometil)-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0432] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2- (clorometil)-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 14) como o material nucleosídeo de partida.
Exemplo 32. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-1-ciano-5-hidróxi- 3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentil) metila.
[0433] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,3S,5S)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-3-(5-metil- 2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1- carbonitrila (Exemplo 15) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 33. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(4-amino-2- oxopirimidin-1(2H)-il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0434] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,3S,5S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5- hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila (Exemplo 16) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 34. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0435] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao
Exemplo 21, usando (1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-5-hidróxi-1- (hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila (Exemplo 17) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 35. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo- 1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0436] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H- purin-9-il)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1- carbonitrila (Exemplo 18) como o material nucleosídeo de partida. Exemplo 36. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-etinil-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metila.
[0437] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,2R,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-etinil-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 19) como o material nucleosídeo de partida.
Exemplo 37. Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S,5S)-3-(6-Amino-9H- purin-9-il)-5-hidróxi-2-metileno-1-vinilciclopentil)metila.
[0438] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 21, usando (1S,2R,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2- (hidroximetil)-3-metileno-2-vinilciclopentan-1-ol (Exemplo 20) como o material nucleosídeo de partida. Tabela 1 # MS [M-1] P(α) e P(γ) P(β) 22 499,3 -10,28 (d); -11,6 (t) -23,06 (d) 23 515,2 -6,38 (d) -11,07 (d) -22,64 (t)
24. 509,7 -8,62 (br.s); -11,72 (d) -22,98 (t)
25. 534,6 -11,03 (d); -11,52 (d) -23,38 (t)
26. 518,6 -11,01 (d); -11,79 (d) -23,34 (t) 27 517,4 -6,39 (d); -11,64 (d) -22,58 (t) 28 548,2 -6,32 (d); -12,04 (d) -22,56 (t)
29. 508,8 -9,09 (br.s); -11,48 (d) -23,11 (t) 30 523,5 -11,05 (d); -11,59 (d) -23,46 (t) 31 547,8 -10,93 (d); -11,46 (d); -23,36 (t) 32 516,5 -10,66 (d) -12,52 (d) -23,35 (t) 33 501,6 -6,36 (d); -12,34 (d) -22,59 (t) 34 525,7 -6,31 (d); -12,26 (d) -22,52 (t) 35 541,6 -10,14 d); -12,15 (d) -23,19 (t) 36 524,3 -6,45 (br.s); -11,79 (d) -22,42 (t)
37. 526,7 -10,54 (d); -11,99 (d) -23,31 (t)
Exemplo 38. ((((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-5-hidróxi- 2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0439] Etapa A. (E)-N'-(9-((1S,3R,4S)-3-etinil-4-hidróxi-3-(hidroxime- til)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimidamida. A uma solução em temperatura ambiente de (1S,2R,4S)-4-(6-amino-9H-purin- 9-il)-2-etinil-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 19, 11,6 mg, 0,0419 mmol) em MeOH (1,0 mL) foi adicionado acetal dimetílico de N,N-dimetilformamida (0,1 mL, 89,4 mg, 0,75 mmol). A mistura de reação foi purgada com Ar e agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. O solvente foi evaporado para produzir o composto do título, que foi adicionalmente seco sob alto vácuo de um dia para o outro. (E)-N'-(9-((1S,3R,4S)-3-etinil-4-hidróxi-3-(hidroximetil)- 2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimidamida bruta foi usada na etapa seguinte sem purificação adicional.
[0440] Etapa B. ((((1R,3S,5S)-3-(6-(((E)-(dimetilamino)metileno) amino)-9H-purin-9-il)-1-etinil-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi) (fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. (E)-N'-(9-((1S,3R,4S)-3-etinil- 4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil)-9H-purin-6-il)-N,N- dimetilformimidamida foi dissolvida em THF anidro (1,0 mL) e 1- metilimidazol (NMI) (30 mg, 29 µL, 0,36 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente. 2-((cloro(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila (45 mg, 0,22 mmol) foi, então, adicionado à mistura de reação, e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi concentrada a 35°C sob pressão reduzida e, em seguida, seca sob alto vácuo. O composto do título foi isolado como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp): O ((((1R,3S,5S)-3-(6-(((E)-(dimetilamino)metileno)amino)-9H-purin- 9-il)-1-etinil-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L- alaninato de isopropila foi usado em bruto na etapa seguinte sem purificação adicional.
[0441] Etapa C: ((((1R,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-5- hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. Uma solução de ((((1R,3S,5S)-3-(6-(((E)-(dimetilamino)meti- leno)amino)-9H-purin-9-il)-1-etinil-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi) (fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila e solução de TFA 0,377 M em MeOH-H2O (2,0 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, MeOH/DCM, 0 a 20%) e HPLC preparativa (CH3CN-H2O, 5 a 95%, incluindo ácido fórmico a 0,1%) forneceu o composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp) como um sólido branco macio (4,4 mg). RMN 31P (400 MHz, CDCl3): δ 3,36, 3,13. MS, m/Z 555,6 (M+1)+. Exemplo 39. ((((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-fluoro-5-hidróxi- 2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de neopentila.
[0442] Etapa A. N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)- 2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol. O composto do título foi preparado de maneira similar a (1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-
purin-9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 6).
[0443] Etapa B. N,N-Di-BOC-((((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9- il)-1-fluoro-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L- alaninato. À solução de N,N-Di-BOC-(1S,2S,4S)-4-(6-amino-9H-purin- 9-il)-2-fluoro-2-(hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (1,0 equiv.) em THF seco foi adicionado isoPrMgCl (cloreto de isopropilmagnésio) (solução 1,0 M em THF, 1,5 eq.) seguido pela adição do fosforocloridato adequado (2,0 equiv.) dissolvido em THF anidro (3 mL). A mistura de reação foi agitada durante 5 horas, bruscamente arrefecida com água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, MeOH/DCM de 2% a 15%) produziu o composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp): N,N-Di-BOC- ((((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-fluoro-5-hidróxi-2-metileno- ciclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato (13%). MS (M-1) 651,3.
[0444] Etapa C: ((((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-fluoro-5- hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de neopentila. N,N-Di-BOC-((((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1- fluoro-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato foi tratado com a mistura de acetonitrila e HCl/dioxano 9:1 (v/v) durante 9 h em temperatura ambiente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (HPLC de fase reversa, Phenomenex Synergi de 4 mícrons Hydro-RP 80A 250 x 21,2 cm em gradiente de 25% a 95% de acetonitrila em água, TEAA 10 mM) forneceu o composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp). RMN P31(CD3OD) δ ppm: 3,44, 3,77. MS [M-1] 578,2.
Exemplo 40. ((((1S,3S,5S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-(fluorometil)-5- hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0445] (1S,2S,4S)-4-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 13, 11 mg, 0,037 mmol) foi dissolvido na mistura de acetonitrila seca (0,9 mL) e N- metilimidazol (0,1 mL). 2-((Cloro(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila (preparado de acordo com J. Med. Chem. 2014, 57, 1531−1542) foi adicionado (30 mg, 0,1 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60°C durante 4 horas, em seguida, ela continuou a aquecer a 40°C durante mais 48 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL). A fase orgânica foi lavada com ácido cítrico a 10%, salmoura, foi submetida à secagem (Na2SO4), filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, MeOH em DCM de 2% a 10%) seguida pela repurificação (HPLC de fase reversa em coluna Synergy de 4 mícrons Hydro-RP (Phenominex)/um gradiente linear de acetonitrila de 30 a 100% em tampão de acetato de trietilamônio 10 mM (pH 7,5) foi usado para eluição) forneceu o composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp) com rendimento total de 10%. RMN P31 (CD3OD) δδppmδ3,06, 3,31; MS [M-1] 564,6.
Exemplo 41. ((((1S,3S,5S)-1-ciano-5-hidróxi-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4- di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)- L-alaninato de isopropila.
[0446] O composto do título obtido como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp) foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, Etapa B, usando (1S,3S,5S)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-3-(5- metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclopentano-1- carbonitrila (Exemplo 15) na Etapa B. RMN 31 P (400 MHz, CDCl3): δ 3,20, 3,01. MS, m/Z 547,1 [M+1]+. Exemplo 42. ((((1S,3S,5S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-1-ciano- 5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0447] O composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp) foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, usando (1S,3S,5S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-5- hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenociclopentano-1-carbonitrila (Exemplo 16) em vez de (1S,2R,4S)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-etinil-2- (hidroximetil)-3-metilenociclopentan-1-ol (Exemplo 19) na Etapa a. RMN 31 P (400 MHz, CDCl3): δ 3,12, 2,95. MS, m/Z 532,0 (M+1)+.
Exemplo 43. ((R*)-(((1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9- il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L- alaninato de isopropila.
[0448] A uma suspensão resfriada a 0°C de (1S,3S,5S)-3-(2-amino- 6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-5-hidróxi-1-(hidroximetil)-2-metilenoci- clopentano-1-carbonitrila (Exemplo 18, 0,016 g, 0,053 mmol) em THF (1,0 mL, 0,05 M) foi adicionado cloreto de terc-butilmagnésio (1,0 M THF, 0,12 mL, 0,12 mmol) por gotejamento. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reação foi, em seguida, resfriada até 0°C, e uma solução de (cloro(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila (30 mg, 0,1 mmol) em THF (0,13 mL) foi adicionada por gotejamento. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante duas horas, e em seguida, concentrada a vácuo para produzir um sólido branco. A purificação (HPLC de fase reversa, Phenomenex Synergyi de 4 mícrons Hydro-RP 80 A 250 x 21,2 mm, (0 a 99% durante 25 minutos, acetonitrila com tampão TEAA em H2O com tampão TEAA) produziu dois isômeros (no centro de fósforo): ((R*)-(((1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H- purin-9-il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L- alaninato de isopropila, RMN 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,80 (s, 1H), 7,30- 7,10 (m, 5H), 5,60 (m, 1H), 5,53 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,98 (sept, J = 6,0, 1H), 4,89 (dd, J = 11, 4,8, 1H), 4,59 (d, J = 3,6, 1H), 4,42 (dd, J = 10, 3,6, 1H), 3,99 (dq, J = 8,8, 7,6, 1H), 2,84 (dd, J = 13, 3,6, 1H), 2,31 31 (dd, J = 13, 8,0, 1H), 1,39 (m, 3H), 1,23 (m, 6H). RMN P (400 MHz,
CDCl3): δ 4,05. MS, m/Z 572,10 [M+1]+; e ((S*)-(((1S,3S,5S)-3-(2-amino- 6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil) metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila (Exemplo 44). Exemplo 44. ((S*)-(((1S,3S,5S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9- il)-1-ciano-5-hidróxi-2-metilenociclopentil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alani- nato de isopropila.
[0449] O composto do título foi isolado como o outro isômero do Exemplo 43 puro, porém com estereoquímica desconhecida (no centro de fósforo). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,80 (s, 1H), 7,42-7,22 (m, 5H), 5,61-5,54 (m, 2H), 5,15-5,11 (m, 2H), 5,02 (sept, J = 6,0, 1H), 4,39 (d, J = 4,0, 1H), 4,27 (dd, J = 11, 4, 1H), 3,97 (dq, J = 10, 7,2, 1H), 2,90 (dd, J = 14, 4,0, 1H), 2,22 (dd, J = 14, 8,4, 1H), 1,36 (m, 3H), 1,23 (m, 6H). RMN 31P (400 MHz, CDCl3): δ 3,72. MS, m/Z 572,10 [M+1]+. Ensaios biológicos Exemplo A. Ensaio de ciclo único de HIV
[0450] 24 horas antes da infecção, células humanas do linfoblasto T CEM (ATCC, Manassas, VA, EUA) foram plaqueadas em meio de ensaio (MEM suplementado com FBS 10%, penicilina a 1%/estreptomicina (todos da Mediatech, Manassas, VA, EUA) e DMSO 1% (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, EUA)) a uma densidade de 5 x 105 células/mL (5 x 104 células/poço) em placas brancas de 96 poços. Os compostos diluídos em série foram adicionados às células e incubados de um dia para o outro a 37°C, sob CO2 a 5%. No dia seguinte, as células foram infectadas com HIV NL4-3 pseudotipado com VSV-G, no qual partes do env e do nef eram genes substituídos por Renilla-
luciferase, e as células infectadas foram incubadas durante 72 horas a 37°C, sob CO2 a 5%. O inóculo Viral foi titulado para alcançar um sinal de Renilla-luciferase de aproximadamente 100 vezes em relação ao do plano de fundo. A atividade antiviral foi medida pela adição de 100 uL de reagente Renilla-Glo® (Promega, Madison, WI, EUA) às células infectadas. Após uma incubação durante 10 minutos em temperatura ambiente, a luminescência foi medida em um leitor de placa com multimarcadores Victor X3. (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA). A citotoxicidade das culturas paralelas não infectadas foi determinada pela adição de 100 µL de reagente CellTiter-Glo® (Promega, Madison, WI, EUA), e por incubação durante 10 minutos em temperatura ambiente. A luminescência foi medida em um leitor de placa com multimarcadores Victor X3. Exemplo B. inibição da transcriptase reversa do HIV
[0451] A transcriptase reversa do HIV-1 de comprimento total recombinante (HIVrt) foi adquirida junto à Abcam, N° de catálogo ab63979. A última região de 385 nucleotídeos do anti-genoma do HCV complementar à região 5' não traduzida (c5' UTR) foi sintetizada usando o kit de T7 RNA polimerase Megascript da Ambion (N° de catálogo AM1333). Um oligoDNA serviu como um iniciador de iniciação interno e foi adquirido junto à IDT. Exceto onde especificado em contrário, as amostras de reação consistiram em RNA c5'UTR 20 nM, iniciador de DNA 100 nM e HIVrt 1 nM, misturadas em um tampão contendo Tris pH 7,5 50 mM, KCl 100 mM, ditiotreitol 4 mM (DTT) e MgCl2 12,5 mM. As reações foram iniciadas a 30°C pela adição de trifosfato de adenosina (dATP) 0,1 µM, trifosfato de citosina (dCTP) 0,1 µM, trifosfato de guanosina (dGTP) 1 µM e trifosfato de 3H-timidina (3H-TTP) 0,32 µM, em um volume final de 50 µL. Após incubação de 40 minutos, a reação foi interrompida pela adição de 60 µL de ácido tricloroacético 20% (p/v) resfriado com ATP 500 µM para precipitar os ácidos nucleicos. Após a incubação a 4°C durante uma hora, a amostra foi submetida à filtração em uma placa de 96 poços com múltiplas telas BV de 1,2 µm (Millipore). 40 µL de Microscint-20 (Perkin Elmer) foram adicionados ao poço e as contagens na amostra foram determinadas por um leitor de cintilação de microplacas Trilux Microbeta (Wallac).
[0452] Todos os dados foram analisados com o software GraphPad Prism. A concentração do composto na qual a taxa catalisada por enzima foi reduzida em 50% (IC50) foi calculada ajustando-se os dados à equação Y = % Min + (% Max -% Min)/(1 + X/IC50), onde Y corresponde à porcentagem de atividade enzimática relativa, % Min é a atividade relativa residual na concentração do composto de saturação,% Max é a atividade enzimática máxima relativa e X corresponde à concentração do composto. O Ki foi calculado usando a equação de Cheng-Prusoff presumindo inibição competitiva em relação à incorporação natural de dNTP: Ki = IC50/(1 + [dNTP]/Km), onde [dNTP] é a concentração de dNTP natural e Km é a Km aparente para dNTP. O ensaio de polimerização de DNA dependente de RNA de HIVrt padrão (RdDp) foi usado para determinar os valores de IC50. Exemplo C. Inibição de polimerase de HBV
[0453] A polimerase de HBV de comprimento total recombinante (HBVpol) foi expressa em células SF9 e purificada de acordo com Lanford et al. (Nucleotide priming and reverse transcriptase activity of hepatitis B virus polymerase expressed in insect cells. (Lanford et al., J Virol. 1995; 69(7): 4431-4439). A última região de 385 nucleotídeos do anti-genoma do HCV complementar à região 5' não traduzida (c5' UTR) foi sintetizada usando o kit de T7 RNA polimerase Megascript da Ambion (N° de catálogo AM1333). Um oligoDNA serviu como um iniciador de iniciação interno e foi adquirido junto à IDT. Exceto onde especificado em contrário, as amostras de reação consistiram em RNA c5'UTR 50 nM, iniciador de DNA 500 nM e HIVrt 1 uL, misturadas em um tampão contendo Tris pH 7,5 50 mM, KCl 100 mM, ditiotreitol 4 mM (DTT), DMSO 10% e MgCl2 12,5 mM. As reações foram iniciadas a 30°C pela adição de trifosfato de adenosina (dATP) 46 nM, trifosfato de citosina (dCTP) 17 nM, trifosfato de guanosina (dGTP) 57 µM e trifosfato de 3H-timidina (3H-TTP) 0,32 µM, em um volume final de 50 µL. Após incubação de 120 minutos, a reação foi interrompida pela adição de 60 µL de ácido tricloroacético 20% (p/v) resfriado com ATP 500 µM para precipitar os ácidos nucleicos. Após a incubação a 4°C durante uma hora, a amostra foi submetida à filtração em uma placa de 96 poços com múltiplas telas BV de 1,2 µm (Millipore). 40 µL de Microscint-20 (Perkin Elmer) foram adicionados ao poço e as contagens na amostra foram determinadas por um leitor de cintilação de microplacas Trilux Microbeta (Wallac).
[0454] Todos os dados foram analisados com o software GraphPad Prism. A concentração do composto na qual a taxa catalisada por enzima foi reduzida em 50% (IC50) foi calculada ajustando-se os dados à equação Y = % Min + (% Max -% Min)/(1 + X/IC50), onde Y corresponde à porcentagem de atividade enzimática relativa, % Min é a atividade relativa residual na concentração do composto de saturação, % Max é a atividade enzimática máxima relativa e X corresponde à concentração do composto. O Ki foi calculado usando a equação de Cheng-Prusoff presumindo inibição competitiva em relação à incorporação natural de dNTP: Ki = IC50/(1 + [dNTP]/Km), onde [dNTP] é a concentração de dNTP natural e Km é a Km aparente para dNTP. O ensaio de polimerização de DNA dependente de RNA de HBVpol padrão (RdDp) foi usado para determinar os valores de IC50. Exemplo D. Inibição de HBV em células Hepg2.117
[0455] As células HepG2.117 (com uso de passagem inferior a 25 passagens) foram cultivadas em meio DMEM/F12 50/50 (Corning, REF 10-092 CM) com SFB a 10% (Corning REF 35-011-CV), sulfato G418
250 ug/mL (Corning, REF 30-234-CI), 2 ug/mL de tetraciclina (TEKNOVA, N° de cat. T3325) e 1X penicilina/estreptomicina (Corning, 30-002-CI), (Corning, 30-002-CI). Para cada ensaio, as células foram plaqueadas em meio de ensaio: DMEM/F12 50/50 (Corning, REF. 10- 092-CM), FBS aprovado pelo sistema Tet (Clontech, N° de catálogo 631106) e penicilina/estreptomicina 1x (Corning, 30-002-CI). Determinação da atividade anti-HCV
[0456] A determinação de 50% da concentração inibidora (EC50) dos compostos em células HepG2.117 foi realizada pelo procedimento a seguir. No primeiro dia, as células foram lavadas com PBS duas vezes após a tripsinização das células. Em seguida, as células foram lavadas uma vez com o meio de ensaio. As células foram semeadas de 30.000 a 35.000 células por 100 µL por poço em placas de 96 poços de fundo plano revestidas Biocoat collage. Os compostos de teste foram solubilizados em DMSO a 100% até 100x a concentração final do teste desejada. Cada composto foi, então, diluído seriadamente (1:3) em até 9 concentrações diferentes. Os compostos em DMSO a 100% foram reduzidos para DMSO a 10% por diluição 1:10 no meio de ensaio. Após a incubação das células em uma incubadora a 37°C e sob CO2 a 5% durante 4 horas, 10 uL de compostos de teste diluídos em meio de ensaio foram adicionados à placa de células. A concentração final de DMSO foi de 1%. As células foram incubadas a 37°C durante 96 horas.
[0457] A atividade antiviral foi medida usando um ensaio de reação em cadeia de polimerase quantitativo em tempo real (RT, qPCR) que mede diretamente os números de cópias de DNA viral de HBV do sobrenadante das células HepG2.117. Os iniciadores do núcleo de HBV e as sondas usadas no iniciador direto do núcleo:qPCR foram 5'- CTGTGCCTTGGGTGGCTTT-3' (SEQ. ID. Nº. 1); o iniciador reverso do núcleo foi o 5'- AAGGAAAGAAGTCAGAAGGCAAAA-3' (SEQ. ID. Nº. 2); a sonda do núcleo foi
5'/FAM/AGCTCCAAA/ZEN/TCCTTTATAAGGGTCGATGTCCATG/31A BKFQ/-3' (SEQ. ID. Nº. 3). As sondas direta do núcleo e reversa do núcleo foram usadas em uma concentração final de 1 µM e a sonda do núcleo foi usada em uma concentração final de 0,5 µM. O ensaio de RT qPCR foi ajustado com 10 µL de 2x Quanta Perfecta qPCR ToughMix ROX, 0,1 µL de mistura de iniciador/sonda 200X, 4,0 µL de sobrenadante de célula HepG2.117 (ou padrão para poços de controle) e 5,9 µL de dH2O, para um volume de reagente total de 20 µL por poço. O padrão foi preparado diluindo-se o plasmídeo de DNA de HBV, Psi Check, em tampão TE 10 mM em uma razão de 1:5 em 6 concentrações: 1E6, 0,2E6, 0,04E6, 0,008E6, 0,0016E6 e 0,00032E6 de números de cópias de DNA viral. A RT qPCR (Applied Biosystems e "Quant Studio 6 Flex" da Life Technology) foi realizada durante 5 minutos a 95°C, em seguida, durante 15 minutos a 95°C e por 20 minutos a 60°C para cada ciclo, 40 ciclos no total.
[0458] Os números de cópias do DNA viral do HBV são normalizados para o nível observado na ausência de inibidor, que foi definido como 100%. A EC50 foi definida como a concentração do composto na qual os números de cópias de DNA viral do HBV das células HepG2.117 foram reduzidos por 50% em relação ao seu nível na ausência do composto. Determinação da citotoxicidade nas células HepG2
[0459] A citotoxicidade celular (CC50) contra as células HepG2 foi medida usando um ensaio de viabilidade celular luminescente para determinar o número de células viáveis na cultura com base na quantificação do trifosfato de adenosina (ATP) presente após um período de incubação de 4 dias. No primeiro dia, as células HepG2 foram semeadas a 15.000/100 uL/poço com meio de ensaio contendo DEME (Corning, REF 10-013-CV), SFB a 3% (Coning REF 35-011-CV), 1X de penicilina/estreptomicina (Corning, 30-002-CI), e 1X de aminoácido não essencial em placas de fundo plano de 96 poços Biocoat college. As células foram incubadas em uma incubadora a 37°C com CO2 a 5% durante 4 horas, antes da dosagem do composto. Os procedimentos de diluição do composto e dosagem foram idênticos àqueles delineados em relação à determinação da atividade anti-HBV. Após 96 horas de incubação, a viabilidade celular é normalizada para o nível observado na ausência de inibidor, que foi definido como 100%. Nenhum efeito citotóxico sobre as células HepG2 foi definido como uma concentração citotóxica de 50% (CC50) >100 µM. Tabela 2 Exemplo n° EC50 do HIV (uM) EC50 do HBV (uM) 1 NT 0,0109
2. >33,3333 >10
3. >33,3333 >10
4. 0,0356 <0,0009 5 >33,3333 2,4722 6 2,6836 0,0617 7 >33,3333 >10 8 NT NT 9 >33,33 7,4104 10 0,6621 0,166
11. 0,9106 9,1782 12 >33,33 >10 13 5,0227 >5,5298 14 1,0784 3,4464 15 >33,3333 >10 16 5,8324 >10 17 2,2094 >10 18 0,1203 0,0466 19 0,0665 >10 20 0,5475 >10
Tabela 3 Ex. # IC50 de HIVrt (uM) IC50 de HBVrt (uM) 22 0,1577 NT 23 0,3829 0,0088
24. 0,2666 0,0029
25. 0,2506 0,0099
26. 0,081 0,0082 27 0,0659 0,0072 28 0,749 NT
29. 0,3255 0,38 30 1,3343 NT 31 0,3633 NT 32 0,4763 >1 33 0,0779 0,22 34 >10 NT 35 0,2601 NT 36 0,0331 NT
37. >10 NT Tabela 4 N° Ex EC50 do HIV (uM) EC50 do HBV (uM) 38 0,0506 2,3743 39 0,0139 0,0003 40 0,144 0,0137 41 10,2491 >10 42 10,4341 >10 43 4,248 0,591 44 2,292 0,459
[0460] Ademais, embora o supracitado tenha sido descrito em alguns detalhes por meio de ilustrações e exemplos para propósitos de clareza e entendimento, será entendido pelos versados na técnica que inúmeras e várias modificações podem ser realizadas sem se afastar do espírito da presente revelação.
Portanto, deve ser claramente entendido que as formas reveladas no presente documento são apenas ilustrativas e não são destinadas a limitar o escopo da presente revelação, mas, em vez disso, a cobrir, também, todas as modificações e alternativas abrangidas pelo verdadeiro escopo e espírito da invenção.

Claims (97)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por ter a estrutura: (I) em que: B1 é uma base heterocíclica ligada em C opcionalmente substituída ou uma base heterocíclica ligada em N opcionalmente substituída; R1 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, ciano, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída, em que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C1-6 é substituída com ao menos um halogênio; R2 é hidrogênio ou flúor; R3 é hidrogênio ou flúor; R4 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, hidroxila, ciano e uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 é substituída com uma hidroxila ou ao menos um halogênio; R5 é hidrogênio ou hidroxila; R6 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, ciano, uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-4 não substituída, em que quando a alquila C1-4 ou a alquenila C2-4 são substituídas, a alquila C1-4 e a alquenila C2-4 são independentemente substituídas com ao menos um halogênio;
R7 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, uma acila opcionalmente substituída, um α-aminoácido ligado em O opcionalmente substituído, , e ; R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, , e
, ou estão ausentes; ou
R10 é e R11 está ausente ou é hidrogênio; R12 está ausente, é hidrogênio, uma arila opcionalmente substituída ou uma heteroarila opcionalmente substituída; R13 é um α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído; R14 e R15 são independentemente um α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α- aminoácido ligado em N opcionalmente substituído; R16, R17, R19 e R20 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R18 e R21 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcionalmente substituída, uma –O–alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma –O–arila opcionalmente substituída; R22 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R23, R24 e R25 estão, independentemente, ausentes ou são hidrogênio; R8 e R9 são, independentemente, hidrogênio ou halogênio; e m é 0 ou 1; e desde que um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, não seja um composto de (i), (ii) ou (iii), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (i) quando R1 é hidrogênio; R2 é hidrogênio ou flúor; R3 é hidrogênio ou flúor; R4 é hidroxila; R5 é hidrogênio; R6 é hidrogênio ou flúor; R8 e R9 são, cada um, hidrogênio e B1 é selecionado do grupo que consiste em , , , ,
, , e ; nesse caso, R7 não é selecionado do grupo que consiste em: (a) hidrogênio; (b) em que R10 e R11 são, cada um, hidrogênio, ou está(ão) ausente(s); (c)
em que R10 é , R11, R23, R24 ou R25 estão, independentemente, ausentes ou são hidrogênio, e m é 0 ou
1; e (d) , em que R12 é uma fenila não substituída ou uma naftila não substituída, e R13 é éster isopropílico de alanina, éster isobutílico de alanina ou éster neopentílico de alanina; (ii) quando R1 é hidrogênio; R4 é hidroxila; R5 é hidrogênio; R6 é hidrogênio; R8 e R9 são, cada um, hidrogênio; B1 é selecionado do grupo que consiste em , ,
, , , ,
, , e ; R7 é selecionado do grupo que consiste em: (a) , em que R10 é
, R11, R23, R24 ou R25 estão, independentemente, ausentes ou são hidrogênio, e m é 1; e (b) , em que R12 é uma fenila não substituída, e R13 é éster isopropílico de alanina, e então, (a) R2 não é hidrogênio quando R3 é flúor; e (b) R2 não é flúor quando R3 é hidrogênio; e (iii) quando R1 é hidrogênio; R4 é hidroxila; R5 é hidrogênio; R6 é hidrogênio; R7 é hidrogênio e R8 e R9 são, cada um, hidrogênio; nesse caso, B1 não é selecionado do grupo que consiste em , , , , , , e .
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em:
, , e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos compostos anteriormente mencionados.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: , , , e ; em que: RA2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio e NHRJ2, em que RJ2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C(=O)RK2 e –C(=O)ORL2; RB2 é halogênio ou NHRM2, em que RM2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída, uma cicloalquila C3-8 não substituída, -C(=O)RN2 e –C(=O)ORO2;
RC2 é hidrogênio ou NHRP2, em que RP2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C(=O)RQ2 e –C(=O)ORR2; RD2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída; RE2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, hidroxila, uma alquila C1-6 não substituída, uma cicloalquila C3-8 não substituída, -C(=O)RS2 e –C(=O)ORT2; RF2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída; Y1, Y2 e Y4 são, independentemente, N ou C, desde que ao menos um dentre Y1, Y2 e Y4 seja N; Y3 é N ou CRU2, em que RU2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída; Y e Y6 são, independentemente, N ou CH; cada --------- é independentemente uma ligação simples ou dupla, desde que as ligações simples e as ligações duplas estejam situadas no anel de modo que cada anel seja aromático; RG2 é uma alquila C1-6 não substituída; RH2 é hidrogênio ou NHRV2, em que RV2 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C(=O)RW2 e –C(=O)ORX2; e RK2, RL2, RN2, RO2, RQ2, RR2 RS2, RT2, RW2 e RX2 são independentemente selecionados do grupo que consiste em uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída, uma alquinila C2-6 não substituída, uma cicloalquila C3-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquenila C3-6 opcionalmente substituída, uma arila C6-10 opcionalmente substituída, uma heteroarila opcionalmente substituída,
uma heterociclila opcionalmente substituída, uma aril(alquila C1-6) opcionalmente substituída, uma heteroaril(alquila C1-6) opcionalmente substituída e uma heterociclil(alquila C1-6) opcionalmente substituída.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por B1 ser uma base heterocíclica ligada em C opcionalmente substituída.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por B1 ser .
6. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: e .
7. Composto, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: e .
8. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por B1 ser uma base heterocíclica ligada em N opcionalmente substituída.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por B1 ser uma purina opcionalmente substituída.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por B1 ser uma pirimidina opcionalmente substituída.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: , , , e .
12. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: , , , , , e .
13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser halogênio.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por halogênio ser flúor.
15. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser ciano.
16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 é substituída com um halogênio.
17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquila C1-4 não substituída.
18. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquila C1-4 substituída com flúor.
19. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquila C1-4 substituída com cloro.
20. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquenila C2-4 é substituída, a alquenila C2-4 é substituída com um halogênio.
21. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquenila C2-4 não substituída.
22. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquenila C2-4 substituída com flúor.
23. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser uma alquenila C2-4 substituída com cloro.
24. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por R6 ser hidrogênio.
25. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24, caracterizado por R5 ser hidrogênio.
26. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24, caracterizado por R5 ser hidroxila.
27. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 26, caracterizado por R4 ser halogênio.
28. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 26, caracterizado por R4 ser hidroxila.
29. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 26, caracterizado por R4 ser ciano.
30. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 26, caracterizado por R4 ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 é substituída com uma hidroxila ou um halogênio.
31. Composto, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado por R4 ser uma alquila C1-4 não substituída.
32. Composto, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado por R4 ser uma alquila C1-4 substituída com flúor.
33. Composto, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado por R4 ser uma alquila C1-4 substituída com cloro.
34. Composto, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado por R4 ser uma alquila C1-4 substituída com hidroxila.
35. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 26, caracterizado por R4 ser hidrogênio.
36. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por R1 ser hidrogênio.
37. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por R1 ser halogênio.
38. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por R1 ser ciano.
39. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por R1 ser uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C1-6 é substituída com um halogênio.
40. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por R1 ser uma alquenila C2-6 não substituída.
41. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por R1 ser uma alquinila C2-6 não substituída.
42. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 41, caracterizado por R2 ser hidrogênio.
43. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 41, caracterizado por R2 ser flúor.
44. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 43, caracterizado por R3 ser hidrogênio.
45. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 43, caracterizado por R3 ser flúor.
46. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 45, caracterizado por R8 e R9 serem, cada um, hidrogênio.
47. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 45, caracterizado por R8 e R9 serem, cada um, halogênio.
48. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 45, caracterizado por R8 e R9 serem hidrogênio, e o outro dentre R8 e R9 ser halogênio.
49. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser hidrogênio.
50. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser uma acila opcionalmente substituída.
51. Composto, de acordo com a reivindicação 50, caracterizado por R7 ser uma acila não substituída.
52. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser um α-aminoácido ligado em O opcionalmente substituído.
53. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser um α-aminoácido ligado em O não substituído.
54. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por R7 ser selecionado dentre alanina ligada em O não substituída, valina ligada em O não substituída, leucina ligada em O não substituída e glicina ligada em O não substituída.
55. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser .
56. Composto, de acordo com a reivindicação 55, caracterizado por R10 e R11 serem, cada um, hidrogênio ou estarem ausentes.
57. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por R10 ser ; e R11 ser hidrogênio;
58. Composto, de acordo com a reivindicação 55, caracterizado por m ser 0; R10, R22 e R23 estarem, independentemente, ausentes ou serem hidrogênio.
59. Composto, de acordo com a reivindicação 55, caracterizado por m ser 1; R10, R22, R23 e R24 estarem, independentemente, ausentes, ou serem hidrogênio.
60. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por um de R9 e R10 estar ausente, ser hidrogênio ou , e o outro dentre R9 e R10 ser .
61. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por R9 e R10 serem, cada um, .
62. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por um de R9 e R10 estar ausente, ser hidrogênio ou , e o outro dentre R9 e R10 ser .
63. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por R9 e R10 serem, cada um, .
64. Composto, de acordo com a reivindicação 53, caracterizado por um de R9 e R10 estar ausente, ser hidrogênio ou , e o outro dentre R9 e R10 ser .
65. Composto, de acordo com a reivindicação 53,
caracterizado por R9 e R10 serem, cada um, .
66. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser .
67. Composto, de acordo com a reivindicação 64, caracterizado por R11 ser uma arila opcionalmente substituída.
68. Composto, de acordo com a reivindicação 65, caracterizado por a arila opcionalmente substituída ser uma fenila opcionalmente substituída ou uma naftila opcionalmente substituída.
69. Composto, de acordo com a reivindicação 66, caracterizado por a fenila opcionalmente substituída ser uma fenila não substituída.
70. Composto, de acordo com a reivindicação 64, caracterizado por R11 ser uma heteroarila opcionalmente substituída.
71. Composto, de acordo com a reivindicação 68, caracterizado por R11 ser uma heteroarila monocíclica opcionalmente substituída.
72. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 64 a 69, caracterizado por R12 ser um α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído.
73. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 64 a 69, caracterizado por R12 ser um derivado do éster de α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído.
74. Composto, de acordo com a reivindicação 70 ou 71, caracterizado por R12 ser uma alanina ligada em N, éster isopropílico de alanina ligada em N, éster ciclo-hexílico de alanina ligada em N e éster neopentílico de alanina ligada em N.
75. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado por R7 ser .
76. Composto, de acordo com a reivindicação 74, caracterizado por R13 e R14 serem independentemente um derivado do éster de α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído.
77. Composto, de acordo com a reivindicação 74, caracterizado por R13 e R14 serem independentemente um derivado do éster de α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído.
78. Composto, de acordo com a reivindicação 74 ou 75, caracterizado por R13 e R14 serem independentemente selecionados do grupo que consiste em alanina ligada em N, éster isopropílico de alanina ligada em N, éster ciclo-hexílico de alanina ligada em N e éster neopentílico de alanina ligada em N.
79. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: , , , , , , , , ,
, , , , , e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos supracitados.
80. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: , , , , , ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
,
, ,
, ,
, ,
, , , , e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos supracitados.
81. Composição farmacêutica, caracterizada por compreender uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente, excipiente farmaceuticamente aceitável ou uma combinação dos mesmos.
82. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindicação 81, caracterizado por se destinar ao preparo de um medicamento para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV.
83. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindicação 81, caracterizado por se destinar ao preparo de um medicamento para reduzir a recorrência de uma infecção por HBV e/ou HDV.
84. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindicação 81, caracterizado por se destinar ao preparo de um medicamento para inibir a replicação de um vírus da HBV e/ou HDV.
85. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 82 a 84, caracterizado por compreender ainda o uso de um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em um inibidor da polimerase de HBV e/ou HDV, um agente imunomodulador, um interferon, um interferon peguilado, um inibidor de fusão/entrada viral, um inibidor da maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um inibidor da transcriptase reversa, um inibidor da ciclofilina/TNF, um agonista FXR, um agonista de TLR, um inibidor de cccDNA ASO ou siRNA, um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor de secreção de sAg e uma vacina contra HBV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
86. Método para tratar ou melhorar uma infecção por HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender administrar a um indivíduo sofrendo de infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 81.
87. Método para melhorar ou tratar uma infecção causada por HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica, como definida na reivindicação 81.
88. Método para reduzir a recorrência de uma infecção causada por HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica, como definida na reivindicação 81.
89. Método para inibir a replicação de um vírus da HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica como definida na reivindicação 81.
90. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 86 a 89, caracterizado por compreender ainda o uso de um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em um inibidor da polimerase de HBV e/ou HDV, um agente imunomodulador, um interferon, um interferon peguilado, um inibidor de fusão/entrada viral, um inibidor da maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um inibidor da transcriptase reversa, um inibidor da ciclofilina/TNF, um agonista FXR, um agonista de TLR, um inibidor de cccDNA ASO ou siRNA, um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor de secreção de sAg e uma vacina contra HBV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
91. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica, como definida na reivindicação 81, caracterizado por ser para a preparação de um medicamento para melhorar ou tratar uma infecção causada pelo HIV.
92. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindicação 81, caracterizado por se destinar ao preparo de um medicamento para inibir a replicação de um vírus HIV.
93. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 91 e 92, caracterizado por compreender ainda o uso de um ou mais agentes de terapia antirretroviral (ART) selecionados do grupo que consiste em um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da protease (IP), um inibidor de fusão/entrada (também chamado de antagonista do receptor CCR5), um inibidor de transferência de fita da integrase (INSTI) e de uma outra terapia antirretroviral para HIV, ou de um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
94. Método para tratar ou melhorar uma infecção por HIV, caracterizado por compreender administrar a um indivíduo sofrendo de infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 81.
95. Método para inibir a replicação de um vírus HIV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o vírus HIV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou com um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou com uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 81.
96. Método para melhorar ou tratar uma infecção por HIV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o HIV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 80, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica, como definida na reivindicação
81.
97. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 94 a 96, caracterizado por compreender ainda um ou mais agentes de terapia antirretroviral (ART) selecionados do grupo que consiste em um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da protease (IP), um inibidor de fusão/entrada (também chamado de antagonista do receptor CCR5), um inibidor de transferência de fita da integrase (INSTI) e uma outra terapia antirretroviral para HIV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
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