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BR112021010236A2 - Análogos de ciclobutil nucleosídeos como antivirais - Google Patents

Análogos de ciclobutil nucleosídeos como antivirais Download PDF

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BR112021010236A2
BR112021010236A2 BR112021010236-1A BR112021010236A BR112021010236A2 BR 112021010236 A2 BR112021010236 A2 BR 112021010236A2 BR 112021010236 A BR112021010236 A BR 112021010236A BR 112021010236 A2 BR112021010236 A2 BR 112021010236A2
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Application number
BR112021010236-1A
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English (en)
Inventor
Minghong Zhong
Guangyi Wang
Original Assignee
Janssen Biopharma, Inc.
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Publication date
Application filed by Janssen Biopharma, Inc. filed Critical Janssen Biopharma, Inc.
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Abstract

ANÁLOGOS DE CICLOBUTIL NUCLEOSÍDEOS COMO ANTIVIRAIS. A presente invenção refere-se aos análogos de ciclobutil nucleosídeo da Fórmula (I), composições farmacêuticas que incluem um ou mais análogos de ciclobutil nucleosídeo e métodos de uso dos mesmos para tratar HBV, HDV e/ou HIV.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANÁLOGOS DE CICLOBUTIL NUCLEOSÍDEOS COMO ANTIVIRAIS".
CAMPO
[0001] O presente pedido refere-se aos campos de química, bio- química e medicina. Mais particularmente, são aqui revelados análo- gos de ciclobutil nucleosídeo, composições farmacêuticas que incluem um ou mais análogos de ciclobutil nucleosídeo e métodos de sintetizar os mesmos. Também são descritos aqui métodos de tratamento de doenças e/ou condições virais com um análogo de ciclobutil nucleosí- deo, sozinho ou em terapia de combinação com um ou mais outros agentes.
DESCRIÇÃO
[0002] Os análogos de nucleosídeo são uma classe de compostos que mostraram exercer atividade antiviral tanto in vitro quanto in vivo e, portanto, foram a matéria de ampla pesquisa para o tratamento de infecções virais. Os análogos de nucleosídeo podem ser convertidos por enzimas hospedeiras ou virais em suas respectivas porções ativas que, por sua vez, podem inibir as polimerases envolvidas na prolifera- ção viral ou celular. A ativação ocorre através de uma variedade de mecanismos, como a adição de um ou mais grupos fosfato e, ou em combinação com, outros processos metabólicos.
SUMÁRIO
[0003] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um com- posto da Fórmula (I), ou a um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outras modalidades descritas na presente invenção referem- se a uma composição farmacêutica que inclui um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0004] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um mé- todo de tratamento de uma infecção causada por HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo de infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farma- cêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composi- ção farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV.
[0005] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quanti- dade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um com- posto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição far- macêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição far- macêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica.
[0006] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de inibição da replicação de HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quanti- dade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medi- camento para inibição da replicação do HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêu- tica. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição far- macêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui des- crito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), para inibir a replicação de HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou com- posição farmacêutica.
[0007] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo da infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um com- posto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas re- ferem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HIV. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exem- plo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HIV.
[0008] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma com- posição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um com- posto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabri- cação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por ou HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o ou HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas re- ferem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quanti- dade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêu- tica.
[0009] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de inibição da replicação do HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medicamento para inibir a replicação do HIV, que pode incluir colocar uma célula infectada com HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo), para inibir a replicação do HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0010] A Figura 1 mostra exemplos de inibidores da transcriptase reversa não análogos de nucleosídeo (ITRNN 's).
[0011] A Figura 2 mostra exemplos de inibidores da transcriptase re- versa análogos de nucleosídeo (ITRN 's).
[0012] A Figura 3A mostra exemplos de inibidores da protease de HIV. A Figura 3B mostra inibidores adicionais da protease de HIV, HBV e/ou HDV.
[0013] A Figura 4A mostra inibidores de fusão/entrada do HIV. A Fi- gura 4B mostra inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV.
[0014] A Figura 5 mostra o inibidor de transferência da fita de inte- grase do HIV (INSTI).
[0015] A Figura 6A mostra compostos antivirais de HIV adicionais. A Figura 6B mostra compostos antivirais adicionais.
[0016] A Figura 7 mostra exemplos de inibidores da maturação vi- ral do HIV, HBV e/ou HDV.
[0017] A Figura 8 mostra exemplos de moduladores de montagem de capsídeo de HIV, HBV e/ou HDV.
[0018] A Figura 9 mostra exemplos de agonistas do receptor X de far- nesoide (FXR) anti-HBV e/ou anti-HDV.
[0019] A Figura 10 mostra exemplos de inibidores do fator de ne- crose tumoral (TNF)/ciclofilina anti-HBV e/ou anti-HDV.
[0020] A Figura 11 mostra exemplos de agonistas do receptor do tipo Toll (TLR) anti-HBV e/ou anti-HDV.
[0021] A Figura 12 mostra exemplos de inibidores da polimerase de HBV e/ou HDV.
[0022] A Figura 13 mostra exemplos de vacinas contra HBV e/ou HDV.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[0023] A família Hepadnavírus é uma família de vírus envelopados que utilizam genomas de DNA circulares parcialmente de fita dupla e parcialmente de fita simples. Esta família inclui um grupo de vírus que causa doença hepática em vários organismos, e é dividida entre dois gêneros: os Avihepadnavírus, que afeta as aves, e os Orthohepadnaví- rus, que afeta os mamíferos. A hepatite B é um agente causador da hepatite aguda/crônica, e tem um DNA circular de 3,2 kb de fita parcial- mente dupla a partir do qual quatro proteínas são sintetizadas: a do nú- cleo, a da polimerase, a do antígeno de superfície e a do produto do gene X.
[0024] Durante a infecção por hepatite, os vírions do HBV entram nos hepatócitos através de um processo mediado por receptor. A replicação viral ocorre através de um mecanismo de múltiplas etapas. Primeiro, o ge- noma de DNA circular parcialmente de fita dupla é transcrito pelo maqui- nário da célula hospedeira e, então, o transcrito de RNA completo é em- balado em procapsídeos virais. A transcrição é, então, transcrita reversa dentro do capsídeo pela proteína P, utilizando a atividade de iniciação in- trínseca da proteína P. O componente de RNA é, então, degradado por uma atividade intrínseca da RNase H da proteína P, para produzir um DNA circular de fita negativa completo. Finalmente, um DNA de fita positiva par- cial subsequente é sintetizado para produzir o conjunto do genoma viral final.
[0025] Os capsídeos virais também podem liberar o genoma circu- lar parcialmente de fita dupla no núcleo das células hospedeiras, onde a síntese da fita complementar à região de fita simples é concluída e as extremidades virais restantes são ligadas para formar o DNA circu- lar covalentemente fechado (cccDNA), que persiste nos núcleos da cé- lula hospedeira e pode ser passado para as células filhas durante a divisão celular. A presença do cccDNA dá origem ao risco de reemer- gência viral ao longo de toda a vida do organismo hospedeiro. Adicio- nalmente, os carreadores de HBV podem transmitir a doença por mui- tos anos. Os indivíduos imunossuprimidos estão especialmente em risco do estabelecimento de infecção por HBV persistente (crônica) ou latente.
[0026] O HDV é um satélite subviral de HBV e, dessa forma, pode se propagar apenas na presença de HBV. Consulte, por exemplo, Shieh, et al., Nature, 329 (6137), páginas 343-346 (1987). A replicação do genoma de HDV de RNA circular de fita simples produz duas formas de uma proteína de ligação ao RNA conhecida como os antígenos delta longo e curto (Ag). Após entrar em um hepatócito, o vírus torna-se não revestido e o nucleocapsídeo é translocado para o núcleo. O vírus, en- tão, usa as RNA polimerases da célula hospedeira, que tratam o ge- noma de RNA como dsDNA devido à sua estrutura terciária. Três formas de RNA são produzidas durante a replicação: RNA genômico circular, RNA antigenômico complementar circular e um RNA antigenômico poli- adenilado linear.
[0027] O HBV e o HDV são transmitidos principalmente pelo sangue ou por contato mucoso, incluindo por atividade sexual. A infecção com HBV e/ou HDV leva a um amplo espectro de doenças hepáticas, vari- ando desde hepatite aguda (incluindo insuficiência hepática fulminante) a hepatite crônica, cirrose e carcinoma hepatocelular. A infecção aguda por HBV e/ou HDV pode ser assintomática, ou apresentar efeitos agu- dos sintomáticos, incluindo febre, dores de cabeça, dores de articulação e diarreia, levando aos sintomas mais graves de aumento do fígado e/ou icterícia associados a hiperbilirrubinemia conjugada e colestase. A mai- oria dos adultos infectados com o vírus se recupera, mas 5% a 10% não conseguem eliminar o vírus e se tornam cronicamente infectados. Mui- tos indivíduos infectados cronicamente têm doença hepática branda persistente (HBV e/ou HDV latente), apresentando agregados linfoides e danos ao duto biliar, esteatose e/ou fibrose aumentada que pode levar à cirrose. Outros com infecção crônica por HBV e/ou HDV desenvolvem a doença ativa, o que pode levar a condições de risco à vida, como cir- rose e câncer de fígado. Alguns indivíduos com HBV e/ou HDV latentes podem recidivar e desenvolver hepatite aguda.
[0028] O HIV é um lentivírus que pertence à família Retroviridae. O HIV é um vírus envelopado com um núcleo que consiste em duas cópias de um RNA de fita simples positiva. O HIV depende da transcriptase reversa para transcrição reversa de RNA no DNA, que é incorporado ao genoma hospedeiro como um provírus. O HIV usa a glicoproteína viral 120 (gp 120) para se ligar e infectar os linfócitos T CD4+. Um aumento na carga plasmática viral corresponde a uma diminuição na contagem de linfócitos T CD4+. Os níveis normais de linfócitos T CD4+ são de cerca de 500 a 1.200 células/mL. Dois tipos de HIV foram caracteriza- dos: HIV-1 e HIV-2. O HIV-1 é mais virulento e mais infeccioso, e tem uma prevalência global, enquanto o HIV-2 é menos virulento e é geo- graficamente limitado. Definições
[0029] A menos que definido de outro modo, todos os termos técni- cos e científicos usados na presente invenção têm o mesmo significado, conforme é comumente compreendido pelo versado na técnica. Todas as Patentes, Pedidos, Pedidos Publicados e outras publicações aqui mencionadas são incorporadas, a título de referência, em sua totali- dade, exceto se for declarado em contrário. No caso de haver uma plu- ralidade de definições para um termo no presente documento, aqueles na sessão prevalecem, exceto se for declarado em contrário.
[0030] Como usado aqui, qualquer(quaisquer) é y grupo(s) "R" como, sem limitação, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, R22 e R23 representam substituintes que podem ser fixados ao átomo indicado. Um grupo R pode ser substituído ou não substituído. Se dois grupos "R" forem descritos como sendo "con- siderados juntos", os grupos R e os átomos aos quais eles estão ligados podem formar uma cicloalquila, uma cicloalquenila, uma arila, uma hete- roarila ou uma heterociclila. Por exemplo, sem limitação, se Ra e Rb de um grupo NRa Rb forem indicados como sendo "considerados juntos," isto significa que eles são ligados covalentemente um ou ao outro para formar um anel: Ra
N Rb
[0031] Além disso, se dois grupos "R" forem descritos como sendo "considerados juntos" com o(s) átomo(s) ao(s) qual(is) ele(s) está(ão) ligado(s) para formar um anel como uma alternativa, os grupos R não se limitam às variáveis ou aos substituintes definidos anteriormente, quando os grupos R não são considerados juntos.
[0032] Sempre que um grupo for descrito como sendo "opcional- mente substituído", este grupo pode ser não substituído ou substituído com um ou mais dos substituintes indicados. De modo semelhante, quando um grupo é descrito como sendo "não substituído ou substitu- ído", se substituído, o(s) substituinte(s) pode(m) ser selecionado(s) den- tre um ou mais dos substituintes indicados. Se nenhum substituinte for indicado, entende-se que o grupo "opcionalmente substituído" ou "subs- tituído" indicado pode ser substituído com um ou mais grupo(s) selecio- nado(s) individualmente e independentemente a partir de alquila, alque- nila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), heteroaril(alquila), heterociclil(alquila), hidróxi, alcóxi, acila, ciano, halogênio, tiocarbonila, O-carbamila, N-carbamila, O-tiocarba- mila, N-tiocarbamila, C-amido, N-amido, S-sulfonamido, N-sulfonamido, C-carbóxi, O-carbóxi, isocianato, tiocianato, isotiocianato, nitro, silila, sulfenila, sulfinila, sulfonila, haloalquila, haloalcóxi, tri-halometanossul- fonila, tri-halometanossulfonamido, um amino, um grupo amino monos- substituído e um grupo amino dissubstituído. O número e o tipo de áto- mos presentes em cada um dos grupos deste parágrafo são conforme aqui definidos, exceto onde especificado em contrário.
[0033] Como usado aqui, "Ca a Cb" em que "a" e "b" são números in- teiros, refere-se ao número de átomos de carbono em um grupo alquila,
alquenila ou alquinila, ou ao número de átomos de carbono no anel de um grupo cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila ou heterociclila. Ou seja, a alquila, alquenila, alquinila, o(s) anel(anéis) da cicloalquila, o(s) anel(anéis) da cicloalquenila, o(s) anel(anéis) da arila, o(s) anel(anéis) da heteroarila ou os anel(anéis) da heteroaliciclila pode(m) conter de "a" a "b", inclusive, átomos de carbono. Dessa forma, por exemplo, um grupo "al- quila C1 a C4" refere-se a todos os grupos alquila tendo de 1 a 4 carbonos, isto é, CH3-, CH3CH2-, CH3CH2CH2-, (CH3)2CH-, CH3CH2CH2CH2-, CH3CH2CH(CH3)- e (CH3)3C-. Se nenhum "a" e "b" for designado com re- lação a um grupo alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila ou heterociclila, assume-se o intervalo mais amplo des- crito nestas definições.
[0034] Como usado aqui, "alquila" refere-se a uma cadeia de hidro- carboneto linear ou ramificada que compreende um grupo hidrocarboneto completamente saturado (sem ligações duplas ou triplas). O grupo alquila pode ter 1 a 20 átomos de carbono (sempre que ele aparecer aqui, um intervalo numérico como "1 a 20" refere-se a cada número inteiro no dado intervalo; por exemplo, "1 a 20 átomos de carbono" significa que o grupo alquila pode consistir em 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono etc., até e incluindo 20 átomos de carbono, embora a presente definição também abranja a ocorrência do termo "alquila" onde nenhuma faixa numérica é designada). O grupo alquila pode também ser uma alquila de tamanho médio tendo 1 a 10 átomos de carbono. O grupo alquila poderia também ser uma alquila inferior com 1 a 6 átomos de car- bono. O grupo alquila dos compostos pode ser designado como "alquila C1-C4" ou designações similares. Somente a título de exemplo, "alquila C1- C4" indica que há um a quatro átomos de carbono na cadeia de alquila, isto é, a cadeia de alquila é selecionada dentre metila, etila, propila, iso- propila, n-butila, iso-butila, sec-butila, e t-butila. Os grupos alquila típicos incluem, mas não são limitados a, metila, etila, propila, isopropila, butila,
isobutila, butila terciária, pentila e hexila. O grupo alquila pode ser substi- tuído ou não substituído.
[0035] Como usado aqui, "alquenila" refere-se a um grupo alquila que contém na cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada uma ou mais li- gações duplas. Uma alquenila pode incluir de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono ou de 2 a 6 átomos de carbono. Exemplos de grupos alquenila incluem alenila, vinilmetila e etenila. Um grupo alque- nila pode ser não substituído ou substituído.
[0036] Como usado aqui, "alquinila" refere-se a um grupo alquila que contém na cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada uma ou mais ligações triplas. Uma alquinila pode incluir de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono ou de 2 a 6 átomos de carbono. Exemplos de alquinilas incluem etinila e propinila. Um grupo alquinila pode ser não substituído ou substituído.
[0037] Como usado aqui, "cicloalquila" refere-se a um sistema de anel hidrocarboneto completamente saturado (sem ligações duplas ou triplas) monocíclico ou multicíclico. Quando composto de dois ou mais anéis, os anéis podem ser unidos juntos de uma forma fusionada. Por exemplo, o grupo cicloalquila pode conter de 3 a 10 átomos no anel, de 3 a 8 átomos no(s) anel(anéis) ou de 3 a 6 átomos no(s) anel(anéis). Um grupo cicloal- quila pode ser não substituído ou substituído. Os grupos cicloalquila típicos incluem, mas não são limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ci- clo-hexila, ciclo-heptila e ciclo-octila.
[0038] Como usado aqui, "cicloalquenila" refere-se a um sistema de anel hidrocarboneto mono- ou multicíclico que contém uma ou mais liga- ções duplas em ao menos um anel; embora, se houver mais de uma, as ligações duplas não podem formar um sistema pi-elétron completamente deslocalizado por todos os anéis (de outro modo, o grupo seria "arila," con- forme definido aqui). Quando composto de dois ou mais anéis, os anéis podem ser conectados juntos de uma forma fusionada. Os grupos cicloal- quenila podem conter 3 a 10 átomos no(s) anel(anéis) ou 3 a 8 átomos no(s) anel(anéis). Um grupo cicloalquenila pode ser não substituído ou substituído.
[0039] Como usado aqui, "arila" refere-se a um sistema de anel aromático carbocíclico (todo de carbono) monocíclico ou multicíclico (incluindo sistemas de anéis fusionados nos quais dois anéis carbocí- clicos compartilham uma ligação química) que tem um sistema pi-elé- tron completamente deslocalizado por todos os anéis. O número de átomos de carbono em um grupo arila pode variar. Por exemplo, o grupo arila pode ser um grupo arila C 6-C14 um grupo arila C6-C10 ou um grupo arila C6. Exemplos de grupos arila incluem, mas não se limitam a, fenila, naftila e azuleno. Um grupo arila pode ser substituído ou não substituído.
[0040] Como usado aqui, "heteroarila" refere-se a um sistema de anel aromático monocíclico, bicíclico e tricíclico (um sistema de anel com um sistema pi-elétron completamente deslocalizado) que contém um ou mais heteroátomos (por exemplo, 1 a 5 heteroátomos), isto é, um elemento além de carbono, incluindo, mas não se limitando a, ni- trogênio, oxigênio e enxofre. O número de átomos no(s) anel(anéis) de um grupo heteroarila pode variar. Por exemplo, o grupo heteroarila pode conter 4 a 14 átomos no(s) anel(anéis), 5 a 10 átomos no(s) anel(anéis) ou 5 a 6 átomos no(s) anel(anéis). Além disso, o termo "heteroarila" inclui sistemas de anéis fusionados nos quais dois anéis, como ao menos um anel arila e ao menos um anel heteroarila, ou ao menos dois anéis heteroarila, compartilham ao menos uma ligação quí- mica. Exemplos de anéis heteroarila incluem, mas não se limitam a furano, furazano, tiofeno, benzotiofeno, ftalazina, pirrol, oxazol, ben- zoxazol, 1,2,3-oxadiazol, 1,2,4-oxadiazol, tiazol, 1,2,3-tiadiazol, 1,2,4- tiadiazol, benzotiazol, imidazol, benzimidazol, indol, indazol, pirazol,
benzopirazol, isoxazol, benzoisoxazol, isotiazol, triazol, benzotriazol, tiadiazol, tetrazol, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, purina, pteri- dina, quinolina, isoquinolina, quinazolina, quinoxalina, cinolina e tria- zina. Um grupo heteroarila pode ser substituído ou não substituído.
[0041] Como usado aqui, "heterociclila" ou "heteroaliciclila" refere-se a um sistema de anel monocíclico, bicíclico e tricíclico de três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez, até 18 membros, sendo que os átomos de carbono junto com de 1 a 5 heteroátomos constituem o dito sistema de anel. Um heterociclo pode conter, opcionalmente, uma ou mais liga- ções insaturadas situadas de forma tal, entretanto, que um sistema pi- elétron completamente deslocalizado não ocorre por todos os anéis. O(s) heteroátomo(s) é/são um elemento diferente carbono, incluindo, mas não se limitando a oxigênio, enxofre e nitrogênio. Um heterociclo pode conter, ainda, uma ou mais funcionalidades carbonila ou tiocarbonila de modo que a definição inclui sistemas oxo e sistemas tio como lactamas, lacto- nas, imidas cíclicas, tioimidas cíclicas e carbamatos cíclicos. Quando composto de dois ou mais anéis, os anéis podem ser unidos juntos de uma forma fusionada. Adicionalmente, quaisquer nitrogênios em um he- teroalicíclico podem ser quaternizados. Os grupos heterociclila ou hete- roalicíclicos podem ser não substituídos ou substituídos. Exemplos des- tes grupos "heterociclila" ou "heteroaliciclila" incluem, mas não se limitam a 1,3-dioxina, 1,3-dioxano, 1,4-dioxano, 1,2-dioxolano, 1,3-dioxolano, 1,4-dioxolano, 1,3-oxatiano, 1,4-oxatina, 1,3-oxatiolano, 1,3-ditiol, 1,3-di- tiolano, 1,4-oxatiano, tetra-hidro-1,4-tiazina, 2H-1,2-oxazina, maleimida, succinimida, ácido barbitúrico, ácido tiobarbitúrico, dioxopiperazina, hi- dantoína, di-hidrouracila, trioxano, hexa-hidro-1,3,5-triazina, imidazolina, imidazolidina, isoxazolina, isoxazolidina, oxazolina, oxazolidina, oxazoli- dinona, tiazolina, tiazolidina, morfolina, oxirano, N-óxido de piperidina, pi- peridina, piperazina, pirrolidina, pirrolidona, pirrolidiona, 4-piperidona, pi- razolina, pirazolidina, 2-oxopirrolidina, tetra-hidropirano, 4H-pirano, tetra-
hidrotiopirano, tiamorfolina, sulfóxido de tiamorfolina, tiamorfolina sulfona e seus análogos benzofundidos (por exemplo, benzimidazolidinona, te- tra-hidroquinolina e 3,4-metilenodioxifenila).
[0042] Como usado aqui, "aril(alquila)" refere-se a um grupo arila conectado, como um substituinte, através de um grupo alquileno. O grupo alquileno e arila de uma aril(alquila) pode ser substituído ou não substituído. Exemplos incluem mas não se limitam à benzila, 2-fenil(al- quila), 3-fenil(alquila) e naftil(alquila).
[0043] Como usado aqui, "heteroaril(alquila)" refere-se a um grupo he- teroarila conectado, como um substituinte, através de um grupo alquileno. O grupo alquileno e o grupo heteroarila de uma heteroaril(alquila) podem ser substituídos ou não substituídos. Exemplos incluem, mas não se limi- tam à 2-tienil(alquila), 3-tienil(alquila), furil(alquila), tienil(alquila), pirrolil(al- quila), piridil(alquila), isoxazolil(alquila), imidazolil(alquila), e seus análogos benzofundidos.
[0044] Uma "(heterociclil)alquila" refere-se a um grupo heterocíclico conectado, como um substituinte, através de um grupo alquileno. O al- quileno e a heterociclila de uma heterociclil(alquila) podem ser substitu- ídos ou não substituídos. Exemplos incluem, mas não são limitados a, tetra-hidro-2H-piran-4-il(metila), piperidin-4-il(etila), piperidin-4-il(pro- pila), tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il(metil) e 1,3-tiazinan-4-il(metila).
[0045] "Grupos alquilenos" são grupos de ligação -CH2- de cadeia linear que têm entre um e dez átomos de carbono, de um a cinco áto- mos de carbono ou de um a três átomos de carbono que formam liga- ções para conectar fragmentos moleculares por meio de seus átomos de carbono terminais. Exemplos incluem, mas não se limitam a, meti- leno (-CH2-), etileno (-CH2CH2-), propileno (-CH2CH2CH2-), butileno (- CH2CH2CH2CH2-) e pentileno (-CH2CH2CH2CH2CH2-). Um grupo alqui- leno inferior pode ser substituído mediante a substituição de um ou mais hidrogênios do grupo alquileno com um substituinte(s) mencio- nado(s) sob a definição de "opcionalmente substituído."
[0046] Como usado aqui, "alcóxi" refere-se à fórmula –OR na qual R é uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, arilalquila, heteroaril(al- quila) ou heterociclil(alquila) e é definida na presente invenção. Uma lista não limitadora de alcóxis inclui metoxila, etexila, n-propoxila, 1- metiletoxila(isopropoxila), n-butoxila, iso-butoxila, sec-butoxila, terc- butoxila, fenoxila e benzoxila. Uma alcóxi pode ser substituída ou não substituída.
[0047] Como usado aqui, "acila" refere-se a um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalque- nila, arila, heteroarila, heterociclila, cicloalquil(alquila), aril(alquila), he- teroaril(alquila) ou heterociclil(alquila) conectada, como substituintes, através de um grupo carbonila. Exemplos incluem formila, acetila, pro- panoíla, benzoíla e acrila. Uma acila pode ser substituída ou não subs- tituída.
[0048] Como usado aqui, "hidroxialquila" refere-se a um grupo al- quila no qual um ou mais dos átomos de hidrogênio ou de deutério estão substituídos por um grupo hidróxi. Grupos hidroxialquila exemplificado- res incluem, mas não se limitam à 2-hidroxietila, 3-hidroxipropila, 2-hi- droxipropila e 2,2-di-hidroxietila. Uma hidroxialquila pode ser substituída ou não substituída.
[0049] Como usado aqui, "haloalquila" refere-se a um grupo alquila no qual um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por um halogênio (por exemplo, mono-haloalquila, di-haloalquila e tri-haloal- quila). Tais grupos incluem, mas não se limitam a, clorometila, fluoro- metila, difluorometila, trifluorometila, 1-cloro-2-fluorometila e 2-fluo- roisobutila. Uma haloalquila pode ser substituída ou não substituída.
[0050] Como usado aqui, "haloalcóxi" refere-se a um grupo –O-al- quila no qual um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por um halogênio (por exemplo, mono-haloalcóxi, di-haloalcóxi e tri- haloalcóxi). Estes grupos incluem, mas não se limitam a clorometoxila, fluorometoxila, difluorometoxila, trifluorometoxila, 1-cloro-2-fluorome- toxila e 2-fluoroisobutoxila. Uma haloalcóxi pode ser substituída ou não substituída.
[0051] Um grupo "sulfenila" refere-se a um grupo "-SR" no qual R pode ser hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (hetero- aril)alquila) ou (heterociclil)alquila. Uma sulfenila pode ser substituída ou não substituída.
[0052] Um grupo "sulfinila" refere-se a um grupo "-S(=O)-R" no qual R pode ser igual ao definido com relação à sulfenila. Uma sulfinila pode ser substituída ou não substituída.
[0053] Um grupo "sulfonila" refere-se a um grupo "SO2R" no qual R pode ser igual ao definido com relação à sulfenila. Uma sulfonila pode ser substituída ou não substituída.
[0054] Um grupo "O-carbóxi" refere-se a um grupo "RC(=O)O-" no qual R pode ser hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloal- quila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (hetero- aril)alquila ou (heterociclil)alquila, conforme definido aqui. Um O-carbóxi pode ser substituído ou não substituído.
[0055] Os termos "éster" e "C-carbóxi" referem-se a um grupo "- C(=O)OR" no qual R pode ser igual ao definido com relação a O-carbóxi. Um éster e um C-carbóxi podem ser substituídos ou não substituídos.
[0056] Um grupo "tiocarbonila" refere-se a um grupo "-C(=S)R" no qual R pode ser igual ao definido com relação a O-carbóxi. Uma tiocarbo- nila pode ser substituída ou não substituída.
[0057] Um grupo "tri-halometanossulfonila" refere-se a um grupo
"X3CSO2-", sendo que cada X é um halogênio.
[0058] Um grupo "tri-halometanossulfonamido" refere-se a um grupo "X3CS(O)2N(RA)-" no qual cada X é um halogênio, e RA é hidro- gênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (hete- rociclil)alquila.
[0059] O termo "amino", como usado aqui, refere-se a um grupo – NH2.
[0060] Como usado aqui, o termo "hidróxi" refere-se a um grupo – OH.
[0061] Um grupo "ciano" refere-se a um grupo "-CN".
[0062] O termo "azido", como usado aqui, refere-se a um grupo – N3.
[0063] Um grupo "isocianato" refere-se a um grupo "-NCO".
[0064] Um grupo "tiocianato" refere-se a um grupo "-CNS".
[0065] Um grupo "isotiocianato" refere-se a um grupo "-NCS".
[0066] Um grupo "mercapto" refere-se a um grupo "-SH".
[0067] Um grupo "carbonila" refere-se a um grupo C=O.
[0068] Um grupo "S-sulfonamido" refere-se a um grupo "- SO2N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidro- gênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), heteroaril(alquila) ou (hete- rociclil)alquila. Um S-sulfonamido pode ser substituído ou não substi- tuído.
[0069] Um grupo "N-sulfonamido" refere-se a um grupo "RSO2N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidro- gênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (hete- rociclil)alquila. Um N-sulfonamido pode ser substituído ou não substi- tuído.
[0070] Um grupo "O-carbamila" refere-se a um grupo "- OC(=O)N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hi- drogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalque- nila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Uma O-carbamila pode ser substituída ou não substituída.
[0071] Um grupo "N-carbamila" refere-se a um grupo "ROC(=O)N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hi- drogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalque- nila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)alquila. Uma N-carbamila pode ser substituída ou não subs- tituída.
[0072] Um grupo "O-tiocarbamila" refere-se a um grupo "-OC(=S)- N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila) ou (heteroci- clil)alquila. Uma O-tiocarbamila pode ser substituída ou não substituída.
[0073] Um grupo "N-tiocarbamila" refere-se a um grupo "ROC(=S)N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidro- gênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (hetero- ciclil)alquila. Uma N-tiocarbamila pode ser substituída ou não substitu- ída.
[0074] Um grupo "C-amido" refere-se a um grupo "-C(=O)N(RARB)" no qual RA e RB podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, hetero- arila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)al- quila. Um C-amido pode ser substituído ou não substituído.
[0075] Um grupo "N-amido" refere-se a um grupo "RC(=O)N(RA)-" no qual R e RA podem ser, independentemente, hidrogênio, deutério,
alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, arila, hetero- arila, heterociclila, aril(alquila), (heteroaril)alquila ou (heterociclil)al- quila. Um N-amido pode ser substituído ou não substituído.
[0076] Um grupo "amina monossubstituída" refere-se a um grupo "NHRA" no qual RA pode ser uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, ci- cloalquil(alquila), aril(alquila), heteroaril(alquila) ou heterociclil(alquila), conforme definido aqui. O RA pode ser substituído ou não substituído. Exemplos de grupos amina monossubstituída incluem, mas não se li- mitam a, − NH(metila), − NH(etila), − NH(isopropila), − NH(fenila), − NH(benzila) e similares.
[0077] Um grupo "amina dissubstituída" refere-se a um grupo "NRARB" no qual RA e RB podem ser, independentemente, uma alquila, uma alquenila, uma alquinila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, arila, heteroarila, heterociclila, cicloalquil(alquila), aril(alquila), hetero- aril(alquila) ou heterociclil(alquila), conforme definido aqui; RA e RB po- dem ser independentemente substituídos ou não substituídos. Exem- plos de grupos amino dissubstituídos incluem, mas não se limitam a, − N(metila)2, − N(fenil)(metila), − N(etil)(metila), − N(etila)2, − N(isopro- pila)2 e similares.
[0078] O termo "átomo de halogênio" ou "halogênio" como usado aqui, significa qualquer um dos dois átomos radio-estáveis da coluna 7 da tabela periódica dos elementos, como flúor, cloro, bromo e iodo.
[0079] Quando os números de substituintes não é especificado (por exemplo, haloalquila), pode haver um ou mais substituintes pre- sentes. Por exemplo, "haloalquila" pode incluir um ou mais halogênios iguais ou diferentes. Como outro exemplo, "alcoxiC1-C3-fenila" pode in- cluir um ou mais grupos alcóxi iguais ou diferentes contendo um, dois ou três átomos.
[0080] Como usado aqui, as abreviações para quaisquer compos- tos químicos estão, exceto onde indicado em contrário, de acordo com seu uso comum, abreviações reconhecidas, ou de acordo com a Co- missão IUPAC-IUB sobre Nomenclatura Bioquímica. Consulte, Bio- chem. 11: 942-944 (1972).
[0081] Como usado aqui, o termo "base heterocíclica N-ligada" refere- se a uma heterociclila contendo nitrogênio opcionalmente substituída ou uma heteroarila contendo nitrogênio opcionalmente substituída que pode ser fixada através de um nitrogênio no anel. A base heterocíclica N-ligada pode ser monocíclica ou multicíclica (como bicíclica). Quando comparado com dois ou mais anéis, os anéis podem ser conectados juntos de uma forma fusionada. Em algumas modalidades, a base heterocíclica N-ligada pode ser uma base de purina N-ligada opcionalmente substituída ou uma base de pirimidina N-ligada opcionalmente substituída. O termo "base de purina" é aqui usado em seu sentido comum como entendido pelos versa- dos na técnica, e inclui os seus tautômeros. De modo similar, o termo "base de pirimidina" é aqui usado em seu sentido comum conforme enten- dido pelos versados na técnica, e inclui os seus tautômeros. Uma lista não limitadora de bases de purina opcionalmente substituídas inclui purina, adenina, guanina, hipoxantina, xantina, aloxantina, 7-alquilguanina (por exemplo, 7-metilguanina), teobromina, cafeína, ácido úrico e isoguanina. Exemplos de bases de pirimidina incluem, mas não se limitam à citosina, timina, uracila 5, 6-di-hidrouracila e 5-alquilcitosina (por exemplo, 5-metil- citosina). Outros exemplos não limitadores de bases heterocíclicas in- cluem diaminopurina, 8-oxo-N6-alquiadenina (por exemplo, 8-oxo-N6-meti- ladenina), 7-deazaxantina, 7-deazaguanina, 7-deaza-adenina, N4,N4-eta- nocitosina, N6,N6-etano-2,6-diaminopurina, 5-halouracila (por exemplo, 5- fluorouracila e 5-bromouracila), pseudoisocitosina, isocitosina, e outras ba- ses heterocíclicas descritas nas Patentes U.S. n°s 5.432.272 e 7.125.855, as quais estão aqui incorporadas por referência com o propósito limitado de divulgar as bases heterocíclicas adicionais.
[0082] Como usado aqui, o termo "base heterocíclica C-ligada" refere- se a uma heterociclila contendo nitrogênio opcionalmente substituída ou uma heteroarila contendo nitrogênio opcionalmente substituída que pode ser fixada através de um carbono no anel. A base heterocíclica C-ligada pode ser monocíclica ou multicíclica (por exemplo, bicíclica). Quando com- parado com dois ou mais anéis, os anéis podem ser conectados juntos de uma forma fusionada. Em algumas modalidades, a base heterocíclica C- ligada pode ser uma base imidazo[2,1-f][1,2,4]triazina opcionalmente substituída ou uma base pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina opcionalmente subs- tituída. Em algumas modalidades, uma base heterocíclica N-ligada e/ou uma base heterocíclica C-ligada pode incluir (um) grupo(s) protetor(es) amino ou enol.
[0083] O termo "α-aminoácido N–ligado" refere-se a um α- aminoá- cido que é ligado à porção indicada através de um grupo amino da cadeia principal ou de um grupo amino monossubstituído. O α-aminoácido δ–N– ligado pode ser fixado através de um dos hidrogênios que fazem parte do grupo amino da cadeia principal ou amino monossubstituído de modo que o α-aminoácido –N–ligado δ seja fixado através do nitrogênio do grupo amino da cadeia principal ou amino monossubstituído. Os α-aminoácidos N-ligados podem ser substituídos ou não substituídos.
[0084] O termo "derivado do éster de α-aminoácido –N–ligado" re- fere-se a um α-aminoácido no qual um grupo ácido carboxílico da ca- deia principal foi convertido em um grupo éster. Em algumas modali- dades, ó grupo éster tem uma fórmula selecionada a partir de alquil-O- C(=O)-, cicloalquil-O-C(=O)-, aril-O-C(=O)- e aril(alquil)-O-C(=O)-. Uma lista não limitador de grupos éster inclui as versões substituídas e não substituídas dos seguintes: metil-O-C(=O)-, etil-O-C(=O)-, n-pro- pil-O-C(=O)-, isopropil-O-C(=O)-, n-butil-O-C(=O)-, isobutil-O-C(=O)-,
terc-butil-O-C(=O)-, neopentil-O-C(=O)-, ciclopropil-O-C(=O)-, ciclobu- til-O-C(=O)-, ciclopentil-O-C(=O)-, ciclo-hexil-O-C(=O)-, fenil-O- C(=O)-, benzil-O-C(=O)- e naftil-O-C(=O)-. Os derivados de éster de α- aminoácido N-ligados podem ser substituídos ou não substituídos.
[0085] O termo "α-aminoácido O–ligado" refere-se a um α-amino- ácido que é ligado à porção indicada através do hidróxi de seu grupo ácido carboxílico da cadeia principal. O α-aminoácido O– ligado pode ser ligado através do hidrogênio que faz parte do hidróxi de seu grupo de ácido carboxílico da cadeia principal, de modo que o α-aminoácido O–ligado seja ligado através do oxigênio ou do grupo de ácido carbo- xílico da cadeia principal. Os amino α-ácidos O-ligados podem ser substituídos ou não substituídos.
[0086] Como usado aqui, o termo "α-aminoácido" refere-se a qual- quer aminoácido (aminoácidos convencionais e não convencionais). Exemplos de α-aminoácidos adequados incluem, mas não se limitam à alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, gli- cina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, li- sina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Exemplos adicionais de α-aminoácidos adequados incluem, mas não se limitam a, ornitina, hipusina, ácido 2-aminoisobutírico, desidroalanina, citrulina e norleucina.
[0087] Como usado aqui, o termo "fosfato" é usado no seu sentido comum, conforme compreendido pelos versados na técnica, e inclui suas formas protonadas (por exemplo, e ). Como usado aqui, os termos "monofosfato," "difosfato," e "trifosfato" são usados nos seus sentidos comuns, conforme compreendido pelos versados na técnica, e incluem as formas protonadas.
[0088] Os termos "grupo protetor" e "grupos protetores", como usado aqui, referem-se a qualquer átomo ou grupo de átomos adicionado a uma molécula para evitar que os grupos existentes na molécula sejam subme- tidos a reações químicas indesejadas. Exemplos de porções de grupos protetores são descritos em T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. Ed. John Wiley & Sons, 1999, e em J.F.W. McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry Plenum Press, 1973, ambos dos quais estão aqui incorporados, por referência para o propósito limitado de revelar grupos protetores adequados. A porção de grupo pro- tetor pode ser escolhida de tal forma que elas são estáveis a certas condi- ções de reação e são prontamente removidas em um estágio conveniente com o uso de metodologia conhecida na técnica. Uma lista não limitadora de grupos protetores inclui benzila; benzila substituída; alquilcarbonilas e alcoxilcarbonilas (por exemplo, t-butoxicarbonila (BOC), acetila, ou isobu- tirila); arilalquilcarbonilas e arilalcoxicarbonilas (por exemplo, benziloxicar- bonila); éter metílico substituído (por exemplo, éter metoximetílico); éter etílico substituído; um éter benzílico substituído; éter tetra-hidropiranílico; sililas (por exemplo, trimetilsilila, trietilsilila, tri-isopropilsilila, t-butildimetilsi- lila, tri-iso-propilsililoximetila, [2-(trimetilsilil)etoxi]metila ou t-butildifenilsi- lila); ésteres (por exemplo, éster de benzoato); carbonatos (por exemplo, metoximetilcarbonato); sulfonatos (por exemplo, tosilato ou mesilato); cetal acíclico (por exemplo, dimetilacetal); cetais cíclicos (por exemplo, 1,3- dioxano, 1,3-dioxolanos, e aqueles aqui descritos); acetal acíclico; acetal cíclico (por exemplo, aqueles aqui descritos); hemiacetal acíclico; hemia- cetal cíclico; ditiocetais cíclicos (por exemplo, 1,3-ditiano ou 1,3-ditiolano); orto-ésteres (por exemplo, aqueles aqui descritos) e grupos triarilmetila (por exemplo, tritila; monometoxitritila (MMTr); 4,4'-dimetoxitritila (DMTr); 4,4',4"-trimetoxitritila (TMTr); e aqueles aqui descritos).
[0089] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a um sal de um composto que não causa irritação significativa a um organismo ao qual o mesmo é administrado e não anula a atividade e propriedades bio- lógicas do composto. Em algumas modalidades, o sal é um sal de adição de ácido do composto. Os sais farmacêuticos podem ser obtidos reagindo- se um composto com ácidos inorgânicos como ácido halídrico (por exem- plo, ácido clorídrico ou ácido bromídrico), ácido sulfúrico, ácido nítrico e ácido fosfórico. Os sais farmacêuticos também podem ser obtidos rea- gindo-se um composto com um ácido orgânico, como ácidos carboxílicos ou sulfônicos alifáticos ou aromáticos, por exemplo, ácido fórmico, acético, succínico, lático, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, nicotínico, metanos- sulfônico, etanossulfônico, p-toluenossulfônico, salicílico ou naftalenossul- fônico. Os sais farmacêuticos também podem ser obtidos reagindo-se um composto com uma base para formar um sal como um sal de amônio, um sal de metal alcalino, como um sal de sódio ou um sal de potássio, um sal de metal de terra alcalina, como um sal de cálcio ou um sal de magnésio, um sal de bases orgânicas como diciclohexilamina, N-metil-D-glucamina, tri(hidroximetil)metilamina, C1-C7 alquilamina, ciclohexilamina, trietanola- mina, etilenodiamina e sais com aminoácidos como arginina e lisina.
[0090] Os termos e frases usados no presente pedido, e variações dos mesmos, especialmente nas reivindicações anexas, exceto quanto ex- pressamente declarado em contrário, devem ser interpretados como não limitados, ao invés de limitadores. Como exemplos do supracitado, o termo "que inclui" deve ser lido de modo a significar "que inclui, sem limitações", "que inclui, mas não se limita a" ou similares; o termo "que compreende", conforme usado no presente documento, é sinônimo de "que inclui", "que contém", ou "caracterizado por" e é inclusivo ou não limitante e não exclui elementos ou etapas de método adicionais ou não mencionados; o termo "que tem" deve ser interpretado como "que tem pelo menos"; o termo "in- clui" deve ser interpretado como "inclui, mas sem limitações"; o termo "exemplo" é usado para fornecer casos exemplificativos do item em dis- cussão, não uma lista exaustiva ou limitadora do mesmo; e o uso de ter- mos como "de preferência", "preferido", "desejado" ou "desejável" e pala- vras de significado similar não devem ser entendidos de modo a implicar no fato de que determinados recursos são críticos, essenciais, ou até mesmo importantes para a estrutura ou função, mas em vez disso, como meramente destinado a destacar recursos alternativos ou adicionais que podem ou podem não ser utilizados em uma modalidade particular. Além disso, o termo "que compreende" deve ser interpretado de modo sinônimo às frases "que tem pelo menos" ou "que inclui pelo menos". Quando usado no contexto de um processo, o termo "que compreende" significa que o processo inclui pelo menos as etapas mencionadas, porém, pode incluir etapas adicionais. Quando usado no contexto de um composto, composi- ção ou dispositivo, o termo "que compreende" significa que o composto, composição ou dispositivo inclui pelo menos os recursos ou componentes mencionados, mas também pode incluir recursos ou componentes adicio- nais.
[0091] Com respeito ao uso de substancialmente quaisquer termos plurais e/ou singulares na presente invenção, os versados na técnica podem mudar do plural para o singular e/ou do singular para o plural conforme seja adequado ao contexto e/ou aplicação. As várias permu- tações singular/plural podem estar expressamente apresentadas na presente invenção por motivos de clareza. O artigo indefinido "um/uma" não exclui uma pluralidade. O mero fato de que determinadas medidas são mencionadas em reivindicações dependentes mutuamente diferen- tes não indica que uma combinação dessas medidas não possa ser usada de modo vantajoso. Quaisquer sinais de referência nas reivindi- cações não devem ser interpretados de modo a limitar o escopo.
[0092] É entendido que, em qualquer composto descrito no presente documento que tenha um ou mais centro quirais, se uma estereoquímica absoluta não for expressamente indicada, então, cada centro pode ser in- dependentemente de configuração R ou de configuração S ou uma mis- tura das mesmas. Se os compostos aqui descritos têm ao menos um cen- tro quiral, eles podem consequentemente existir como enantiômeros.
Quando os compostos possuem dois ou mais centros quirais, os mesmos devem existir adicionalmente como diastereômeros. Portanto, os compos- tos fornecidos no presente documento podem ser enatiomericamente pu- ros, enatiomericamente enriquecidos, mistura racêmica, diastereomerica- mente puros, diastereomericamente enriquecidos, ou uma mistura estere- oisomérica. Além disso, é entendido que, em qualquer composto descrito no presente documento que tenha uma ou mais ligações duplas que ge- ram isômeros geométricos que podem ser definidos como E ou Z, cada ligação dupla pode ser independentemente E ou Z, ou uma mistura das mesmas. Deve ser entendido que todos esses isômeros e misturas dos mesmos são abrangidos, a menos que seja definido de outra forma.
[0093] De modo semelhante, é entendido que, em qualquer com- posto descrito, todas as formas tautoméricas também são destinadas a serem incluídas. Por exemplo, todos os tautômeros de bases hete- rocíclicas conhecidos na técnica são destinados a serem incluídos, in- clusive tautômeros de bases de purina e bases de pirimidina naturais e não naturais.
[0094] Deve ser entendido que onde os compostos revelados no pre- sente documento tiverem valências não preenchidas, então, as valências devem ser preenchidas com hidrogênios ou isótopos dos mesmos, por exemplo, com hidrogênio- (prótio) e hidrogênio-2 (deutério).
[0095] Deve ser entendido que os compostos descritos no presente documento podem ser identificados isotopicamente. A substituição por isótopos como deutério pode render determinadas vantagens terapêuti- cas que resultantes de uma maior estabilidade metabólica, como, por exemplo, meia vida in vivo aumentada ou exigências de dosagem redu- zidas. Cada elemento químico conforme representado em uma estru- tura de composto pode incluir qualquer isótopo do dito elemento. Por exemplo, em qualquer posição do composto que um átomo de hidrogê-
nio possa estar presente, o átomo de hidrogênio pode ser qualquer isó- topo de hidrogênio, inclusive, mas sem se limitar, ao hidrogênio-1 (pró- tio) e hidrogênio-2 (deutério). Portanto, a referência no presente docu- mento a um composto engloba todas as potenciais formas isotópicas, exceto quando o contexto claramente afirma de outro modo.
[0096] É compreendido que os compostos, métodos e combinações aqui descritos incluem formas cristalinas (também conhecidas como po- limorfos, que incluem as diferentes disposições de empacotamento cris- talino da mesma composição elementar de um composto), fases amor- fas, sais, solvatos e hidratos. Em algumas modalidades, os compostos aqui descritos (incluindo aqueles descritos nos métodos e nas combina- ções) existem sob formas solvatadas com solventes farmaceuticamente aceitáveis, como água, etanol ou similares. Em outras modalidades, os compostos aqui descritos (incluindo aqueles descritos em métodos e combinações) existem sob forma não solvatada. Os solvatos contêm tanto quantidades estequiométricas quanto quantidades não estequio- métricas de um solvente, e podem ser formados durante o processo de cristalização com solventes farmaceuticamente aceitáveis como água, etanol ou similares. Os hidratos são formados quando o solvente é água, ou alcoolatos são formados quando o solvente é álcool. Em geral, as formas solvatadas são consideradas equivalentes às formas não sol- vatadas para os propósitos dos compostos e métodos fornecidos no presente documento.
[0097] Quando uma faixa de valores for fornecida, é entendido que o limite superior e o inferior, e cada valor intermediário entre o limite superior e o inferior da faixa é englobado nas modalidades. Compostos
[0098] Algumas modalidades da presente invenção referem-se a um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(I) sendo que: B1 pode ser uma base heterocíclica N-ligada opcional- mente substituída ou uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída; R1 pode ser selecionado do grupo que consiste em hidro- gênio, halogênio, ciano, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C 2-6 não substituída, sendo que quando a alquila C 1-6 é substituída, a alquila C1-6 pode ser substituída com ao menos um halogênio; R2 pode ser selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, hidróxi, ciano e uma al- quila C1-4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C 1-4 é substituída, a alquila C1-4 pode ser substituída com um hidróxi ou ao menos um halogênio; R3 pode ser selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, ciano, uma alquila C1-4 opcionalmente subs- tituída, uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-4 não substituída, sendo que quando a alquila C 1-4 ou a alquenila C2- 4 são substituídas, a alquila C1-4 e a alquenila C2-4 são independente- mente substituídas com ao menos um halogênio; R 4 pode ser selecio- nado dentre hidrogênio, uma acila opcionalmente substituída, um α-
aminoácido O-ligado, , e ; R5 e R6 podem ser, independentemente, hidrogênio ou halogênio; R 7 e R8 po- dem, independentemente, estar ausentes ou serem hidrogênio,
, e ; ou R7 pode ser e R8 pode estar ausente ou ser hidrogênio; R9 pode estar ausente ou ser hidrogênio, uma arila opcio- nalmente substituída ou uma heteroarila opcionalmente substituída; R10 pode ser um α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido N-ligado opcionalmente substi- tuído; R11 e R12 podem ser independentemente um α-aminoácido N- ligado opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-amino- ácido N-ligado opcionalmente substituído; R 13, R14, R16 e R17 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R15 e R18 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidro- gênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcional- mente substituída, uma –O–alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma –O–arila opcionalmente substituída; R 19 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R 20, R21 e R22 podem estar indepen- dentemente ausentes ou podem ser hidrogênio; R 5 e R6 podem ser, independentemente, hidrogênio ou halogênio; e m pode ser 0 ou 1.
[0099] A orientação dos substituintes ligados ao anel ciclobutila pode variar. Por exemplo, cada uma das seguintes Fórmulas (Ia) e (Ib) é um exemplo de uma modalidade de um composto da Fórmula (I).
(Ia) (Ib),
[0100] Uma variedade de grupos pode estar fixada ao anel ciclobu- tila.
Em algumas modalidades, R3 pode ser halogênio.
Por exemplo, R3 pode ser flúor.
Em outras modalidades, R3 pode ser ciano.
Em ainda ou- tras modalidades, R3 pode ser um hidrocarboneto substituído ou não substituído, saturado ou insaturado, que inclui de 1 a 4 carbonos.
Em algumas modalidades, R3 pode ser uma alquila C1-4 opcionalmente subs- tituída, sendo que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 pode ser substituída com ao menos um halogênio.
Exemplos de alquilas C1-4 adequadas incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, sec-butila, isobutila e terc-butila.
Em algumas modalidades, R3 pode ser uma alquila C1-4 não substituída, como aquelas aqui descritas.
Em outras modalida- des, R3 pode ser uma alquila C1-4 substituída, sendo que a alquila C1-4 pode ser substituída com ao menos um halogênio.
Por exemplo, R3 pode ser uma alquila C1-4 substituída com 1, 2 ou 3 halogênios, como flúor ou cloro.
Quando R3 é substituído com um halogênio (por exemplo, F ou Cl), R3 pode ser uma alquila C1-4 halogenada monossubstituída.
Em algumas modalidades, R3 pode ser uma alquila C1-4 substituída com flúor.
Em ou- tras modalidades, R3 pode ser uma alquila C1-4 substituída com cloro.
Uma lista não limitadora de alquilas C1-4 substituídas com halogênio inclui – CH2F ou – CH2Cl.
Em algumas modalidades, o hidrocarboneto em R3 pode incluir (uma) ligação(ões) dupla(s) e/ou tripla(s). Por exemplo, em algumas modalidades, R3 pode ser uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquenila C2-4 é substituída, a alquenila C2-4 pode ser substituída com um halogênio.
Quando um grupo alquila C1-4 substituído está presente em R3, uma alquenila C2-4 substituída pode ser substituída com 1, 2 ou 3 halogênios, como flúor ou cloro.
Por exem- plo, em algumas modalidades, R3 pode ser uma alquenila C2-4 fluoro- substituída.
Em outras modalidades, R3 pode ser uma alquenila C2-4 substituída com cloro.
Em algumas modalidades, R3 pode ser uma alque- nila C2-4 não substituída.
Alquenilas C2-4 exemplificadoras incluem etenila,
1-propenila, 2-propenila, 1-butenila, 2-butenila e 3-butenila. Em algumas modalidades, R3 pode ser hidrogênio.
[0101] A posição oposta ao C=CR5R6 da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no anel ciclobutila, R2, pode ser substituída ou não substituída. Em algumas modalidades, R2 pode ser halogênio. O halogênio pode ser F, Cl, Br ou I. Em algumas moda- lidades, R2 pode ser F. Em outras modalidades, R2 pode ser Cl. Em algumas modalidades, R2 pode ser hidróxi (-OH). Em outras modalida- des, R2 pode ser ciano (-CN). Em ainda outras modalidades, R2 pode ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C 1-4 pode ser substituída com um hidróxi ou ao menos um halogênio. Em algumas modalidades, R2 pode ser uma alquila C1-4 não substituída (como metila, etila, n-propila, iso- propila, n-butila, isobutila e terc-butila). Em outras modalidades, R2 pode ser uma alquila C1-4 substituída, sendo que a alquila C1-4 pode ser substituída com ao menos um halogênio. Por exemplo, R2 pode ser uma alquila C1-4 substituída com 1, 2 ou 3 halogênios, como flúor ou cloro. Quando R2 é substituído com um halogênio (por exemplo, F ou Cl), R2 pode ser uma alquila C 1-4 halogenada monossubstituída. Em algumas modalidades, R2 pode ser uma alquila C 1-4 substituída com flúor. Em outras modalidades, R2 pode ser uma alquila C1-4 substituída com cloro. Em várias modalidades, a alquila C1-4 substituída com flúor pode ser uma alquila C 1-4 substituída com flúor, monossubstituída, como CH2F. Em várias outras modalidades, a alquila C 1-4 substituída com cloro pode ser uma alquila C 1-4 substituída com cloro, monossub- stituída, como CH2Cl. Em algumas modalidades, R2 pode ser uma al- quila C1-4 substituída com um ou mais grupos hidróxi. Por exemplo, R2 pode ser monossubstituído com hidróxi. Em algumas modalidades, R2 pode ser –CH2OH. Em algumas modalidades, R2 pode ser uma alquila C1-4 substituída com 1 ou 2 grupos hidróxi e 1 ou 2 halogênios (como
F ou Cl). Em outras modalidades, a posição oposta ao C=CR 5R6 da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no anel ciclobutila, pode ser não substituída de modo que R 2 possa ser hidro- gênio.
[0102] Como com outras posições no anel ciclobutila, o carbono ao qual B1 está ligado pode ser adicionalmente substituído ou não substituído. Em algumas modalidades, R1 pode ser hidrogênio. Em outras modalida- des, R1 pode ser halogênio. Halogênios adequados são aqui descritos. Por exemplo, R1 pode ser flúor. Em outras modalidades, R1 pode ser ciano. Em ainda outras modalidades, R1 pode ser uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, sendo que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C1-6 pode ser substituída com ao menos um halogênio. Quando R1 é uma al- quila C1-6 não substituída, R1 pode ser metila, etila, n-propila, isopropila, n- butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila (de cadeia ramificada ou li- near) ou hexila (de cadeia ramificada ou linear) em várias modalidades aqui descritas. Em várias modalidades, quando R1 é substituído, a alquila C1-6 pode ser substituída com um ou mais halogênios (como 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 halogênios). Exemplos de halogênios adequados estão aqui descri- tos. Em algumas modalidades, R1 pode ser uma alquila C1-6 mono-haloge- nada. Em outras modalidades, R1 pode ser uma alquila C1-6per-haloge- nada. Alquilas C1-6 halogenadas exemplificadoras para R1 incluem –CH2F, –CH2Cl, –CHF2, –CHCl2, –CF3, –CCl3, –CH2CH2F, CH2CF3, –CH2CHClF, –CHFCH2F e –CHClCH2F. Em algumas modalidades, R1 pode ser uma alquenila C2-6 não substituída. Em outras modalidades, R1 pode ser uma alquinila C2-6 não substituída. Quando R1 é um hidrocarboneto C2-6 insatu- rado, em várias modalidades, R1 pode ser etenila, etinila ou -CH2-CH=CH2.
[0103] Conforme descrito aqui, R5 e R6 podem ser, independente- mente, hidrogênio ou halogênio. Em algumas modalidades, R5 e R6 podem ser, cada um, hidrogênio, de modo que o substituinte ligado ao anel ciclo-
butila é =CH2. Em outras modalidades, R5 e R6 podem ser, cada um, ha- logênio. Quando R5 e R6 são, cada um, halogênio, os halogênios podem ser iguais ou diferentes. Por exemplo, R5 e R6 podem ser, cada um, flúor, ou um dentre R5 e R6 pode ser flúor e o outro dentre R5 e R6 pode ser cloro. Em ainda outras modalidades, um dentre R5 e R6 pode ser hidrogênio, e o outro dentre R5 e R6 pode ser halogênio. Em várias modalidades, quando um ou ambos dentre R5 e R6 são halogênio, o(s) halogênio(s) pode(m) ser flúor. Exemplos de substituintes ligados ao anel ciclobutila que incluem um halogênio incluem, mas não se limitam, aos seguintes: =CF2, =CCl2,=CFH, =CClH e =CClF.
[0104] Os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, podem ser chamados de análogos de ciclobutil nucleosídeos. Em algumas modalidades, R4 pode ser hidrogênio. Quando R4 é hidrogênio, um composto da Fórmula (I), ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um ciclobutil nucleosí- deo.
[0105] Em algumas modalidades, R4 pode ser , sendo que m pode ser 0 ou 1; e R 7, R8, R20, R21 e R22 podem estar indepen- dentemente ausentes ou podem ser hidrogênio. Quando R 4 é , sendo que m pode ser 0 ou 1; R 7 pode ser ; e R8, R20, R21 e R22 podem estar indepen- dentemente ausentes ou podem ser hidrogênio, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um mono, di e/ou trifosfato de ciclobutil nucleotídeo.
Os versados na técnica compreendem que quando R4 é e R7 e R8 estão independentemente ausentes ou são hidrogênio, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um monofosfato.
Os versados na técnica também entendem que quando R4 é ; R7 é ; R8, R20, R21 e R22 podem estar independentemente ausentes ou podem ser hidro- gênio; e m é 0 ou 1, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser um difosfato (quando m é 0) ou trifosfato (quando m é 1). Quando qualquer um dentre R7, R8, R20, R21 e R22 está ausente, os versados na técnica compreendem que o respectivo oxigênio ao qual R 7, R8, R20, R21 e R22 são mostrados liga- dos terá uma carga negativa associada.
Por exemplo, quando R7 e R8 estão, cada um, ausentes, R4 pode ser . Como exemplos adi-
cionais, quando R4 é ; R7 é ; R 8, R20, R21 e R22 estão ausentes; e m é 0 ou 1, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R4 pode ter as seguintes estruturas: (m é 0) e
(m é 1).
[0106] Os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, podem incluir grupo(s) de pró-fármaco. O(s) grupo(s) de pró-fármaco pode(m) estar presente(s) na posição equiva- lente a R4. Em algumas modalidades, R4 pode ser uma acila opcional- mente substituída. Em algumas modalidades, a acila pode ser não subs- tituída. Em outras modalidades, a acila pode ser substituída. Uma es- trutura exemplificadora da acila opcionalmente substituída pode ser – C(=O)R23, em que R23 pode ser uma alquila C1-12 opcionalmente substi- tuída, uma cicloalquila C3-8 monocíclica opcionalmente substituída ou uma fenila opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R23 pode ser uma alquila C1-12 não substituída. Em outras modalidades, R23 pode ser uma cicloalquila C3-8 monocíclica não substituída. Em ainda outras modalidades, R23 pode ser uma fenila não substituída. Em algu- mas modalidades, R4 pode ser –C(=O)R23, sendo que R23 pode ser uma alquila C1-6 não substituída.
[0107] Em algumas modalidades, R4 pode ser um α-aminoácido O- ligado opcionalmente substituído. Exemplos de α-aminoácidos O-liga- dos incluem alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, gluta- mina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Em várias modalidades, o α-aminoácido O-ligado pode ser não substituído. Em várias outras modalidades, o α-aminoácido O-ligado pode ser substituído. Em algumas modalidades, R4 pode ser selecionado dentre alanina O-ligada não substituída, valina O-ligada não substituída, leu- cina O-ligada não substituída e glicina O-ligada não substituída. O α- aminoácido pode ser um α-aminoácido natural. Exemplos de α-amino- ácidos O-ligados opcionalmente substituídos incluem os seguintes:
, , , , e .
[0108] Em algumas modalidades, R4 pode ser , sendo que um dentre R7 e R8 pode estar ausente, ser hidrogênio ou ; o outro de R7 e R8 pode ser ; R13 e R14 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente subs- tituída; e R15 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcionalmente substituída, uma – O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída e uma –O–arila opcional- mente substituída. Em outras modalidades, R4 pode ser , em que R7 e R8 podem ser, cada um, . Em várias modalida- des, quando um ou ambos de R7 e R8 são , R13 e R14 podem ser, cada um, hidrogênio; e R15 pode ser uma alquila C1-24 não substituída; Em outras modalidades, ao menos um dentre R13 e R14 pode ser uma alquila C1-24 opcionalmente substituída ou uma arila opci- onalmente substituída. Em algumas modalidades, R15 pode ser uma al- quila C1-24 opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R15 pode ser uma alquila C1-4 não substituída. Em outras modalidades, R15 pode ser uma arila opcionalmente substituída. Em ainda outras modali- dades, R15 pode ser uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída, uma –O–arila opcionalmente substituída, uma –O–heteroarila opcional- mente substituída ou uma –O–heterociclila monocíclica opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, R15 pode ser uma –O–alquila C1- 4 não substituída.
[0109] Em algumas modalidades, R4 pode ser , sendo que um dentre R7 e R8 pode estar ausente, ser hidrogênio ou ; o outro de R7 e R8 pode ser ; R16 e R17 podem ser, independentemente, selecionados dentre hidrogê- nio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcional- mente substituída; e R18 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída, uma arila opcionalmente substi- tuída, uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída e uma –O–arila opcionalmente substituída. Em outras modalidades, R4 pode ser , em que R7 e R8 podem ser, cada um, . Em várias modalidades, quando um ou ambos de R7 e R8 são , R16 e R17 podem ser, cada um, hidrogênio; e R18 pode ser uma alquila C1-24 não substituída. Em várias outras modalida- des, quando um ou ambos de R7 e R8 são , R16 e R17 podem ser, cada um, hidrogênio; e R18 pode ser uma alquila –O–C1-24 não substituída. Em algumas modalidades, R16 e R17 podem ser hidrogê- nio. Em outras modalidades, ao menos um dentre R16 e R17 pode ser uma alquila C1-24 opcionalmente substituída ou uma arila opcionalmente subs- tituída. Em algumas modalidades, R18 pode ser uma alquila C1-24 opcio- nalmente substituída. Em algumas modalidades, R18 pode ser uma al- quila C1-4 não substituída. Em outras modalidades, R18 pode ser uma arila opcionalmente substituída. Em ainda outras modalidades, R18 pode ser uma –O–alquila-C1-24 opcionalmente substituída, uma –O–arila opcional- mente substituída, uma –O–heteroarila opcionalmente substituída ou uma –O–heterociclila monocíclica opcionalmente substituída. Em algu- mas modalidades, R18 pode ser uma –O–alquila C1-4 não substituída. Em algumas modalidades, um ou ambos de R7 e/ou R8 pode ser um grupo pivaloiloximetila (POM). Em algumas modalidades, R7 e R8 podem ser, cada um, um grupo pivaloiloximetila (POM) e formar um pró-fármaco de bis(pivaloiloximetila) (bis(POM)). Em algumas modalidades, um ou am- bos de R7 e/ou R8 pode ser um grupo isopropiloxicarboniloximetila (POC). Em algumas modalidades, tanto R7 quanto R8 podem ser o grupo isopro- piloxicarboniloximetila (POC), e formam um pró-fármaco bis(isopropiloxi- carboniloximetila) bis(POC)).
[0110] Em algumas modalidades, R4 pode ser , sendo que um dentre R7 e R8 pode estar ausente, ser hidrogênio ou ; o outro de R7 e R8 pode ser
; e R19 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída. Em outras modalidades, R4 pode ser , em que R7 e R8 podem ser, cada um, . Em várias modalida- des, R19 pode ser uma alquila C1-24 substituída. Em várias outras modali- dades, R19 pode ser uma alquila C1-24 não substituída. Em ainda várias outras modalidades, R19 pode ser uma alquila C1-4 não substituída. Em al- gumas modalidades, R7 e R8 podem ser, cada um, um grupo S-aciltioetila (SATE) e formar um pró-fármaco do éster de SATE. Em algumas modali- dades, R7 e R8 podem ser, cada um, .
[0111] Em algumas modalidades, R4 pode ser , em que R9 pode estar ausente, ser hidrogênio, uma arila opcionalmente substitu- ída ou uma heteroarila opcionalmente substituída; e R10 pode ser um α- aminoácido N-ligado opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído. Em algumas moda- lidades, R9 pode ser uma fenila opcionalmente substituída. Em outras mo- dalidades, R9 pode ser uma naftila opcionalmente substituída. Em algumas outras modalidades, R9 pode ser uma fenila não substituída. Em ainda ou- tras modalidades, R9 pode ser uma naftila não substituída. Em algumas modalidades, R9 pode ser uma heteroarila opcionalmente substituída, como uma heteroarila monocíclica opcionalmente substituída.
[0112] Em algumas modalidades, R10 pode ser um α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído.
Em algumas modalidades, R10 pode ser um derivado do éster de α-aminoácido N-ligado opcional- mente substituído.
Vários α-aminoácidos são conhecidos pelos versa- dos na técnica, e incluem alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glu- tamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina.
Os derivados de éster do derivado de éster do α-aminoácido N- ligado podem ter uma das seguintes estruturas: alquil C 1-6-O-C(=O)-, cicloalquil C3-6-O-C(=O)-, fenil-O-C(=O)-, naftil-O-C(=O)- e benzil-O- C(=O)-. Em algumas modalidades, o derivado do éster de α-aminoá- cido N-ligado pode ser um éster alquílico C 1-6, cicloalquílico C3-6, fení- lico, naftílico ou benzílico de alanina, asparagina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tirosina, arginina, histi- dina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, tripto- fano ou valina.
Em algumas modalidades, R10 pode ser uma alanina N- ligada, éster isopropílico de alanina N-ligada, éster ciclo-hexílico de alanina N-ligada ou éster neopentílico de alanina N-ligada.
Em algu- mas modalidades, R9 pode ser uma fenila não substituída. e R 10 pode ser um éster alquílico C1-6-O-C(=O)-, cicloalquílico C3-6-O-C(=O)-, fení- lico-O-C(=O)-, naftílico-O-C(=O)- ou benzílico-O-C(=O)- de alanina N- ligada, glicina N-ligada, N-valina, leucina N-ligada ou isoleucina N-li-
gada.
Em algumas modalidades, quando R4 é , um com- posto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um pró-fármaco de fosforoamidato, como um pró-fármaco de fosforoamidato de arila.
[0113] Em algumas modalidades, R4 pode ser , sendo que R11 e R12 podem ser independentemente um derivado do éster de α-ami- noácido N-ligado opcionalmente substituído. Em várias modalidades, a porção de α-aminoácido do derivado de éster de α-aminoácido N-ligado opcionalmente substituído pode ser selecionada dentre alanina, aspara- gina, aspartato, cisteína, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, tiro- sina, arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano e valina. Conforme descrito aqui, a porção éster do de- rivado de éster do α-aminoácido pode ter várias estruturas. Em algumas modalidades, a porção éster do derivado de éster de α-aminoácido N-li- gado pode ter uma das seguintes estruturas: alquil C1-6-O-C(=O)-, cicloal- quil C3-6-O-C(=O)-, fenil-O-C(=O)-, naftil-O-C(=O)- e benzil-O-C(=O)-. Em algumas modalidades, R11 e R12 podem ser independentemente selecio- nados dentre alanina N-ligada, éster isopropílico de alanina N-ligada, éster ciclo-hexílico de alanina N-ligada ou éster neopentílico de alanina N-ligada. Em algumas modalidades, R11 e R12 podem ser, cada um, independente- mente, um éster alquílico C1-6-O-C(=O)-, cicloalquílico C3-6-O-C(=O)-, fení- lico-O-C(=O)-, naftílico-O-C(=O)- ou benzílico-O-C(=O)- de alanina N-li- gada, glicina N-ligada, N-valina, leucina N-ligada ou isoleucina N-ligada. Em algumas modalidades, R11 e R12 podem ser iguais. Em algumas mo- dalidades, R11 e R12 podem ser diferentes. Em algumas modalidades, quando R4 pode ser , um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser um pró-fármaco de dia- mida fosfônico opcionalmente substituído.
[0114] Exemplos de grupos derivados de éster de α-aminoácido N- ligado adequados que podem estar presentes em R10, R11 e/ou R12 incluem os seguintes: , , , , , , , , , , , , , , , , , , , e .
[0115] A base heterocíclica, B1, presente em um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser ligada através de um nitrogênio (uma base heterocíclica N-ligada opci- onalmente substituída) ou um carbono (uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída). Em algumas modalidades, B1 pode ser uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída. Em algumas mo- dalidades, B1 pode ser uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída.
[0116] Quando B1 é uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída, B1 pode ser, em várias modalidades, uma purina opcional- mente substituída. Em outras várias modalidades, B1 pode ser uma pi- rimidina opcionalmente substituída. Em algumas modalidades, B1 pode ser uma guanina substituída, uma adenina substituída, uma timina subs- tituída, uma citosina substituída ou uma uracila substituída. Em outras modalidades, B1 pode ser uma guanina não substituída, uma adenina não substituída, uma timina não substituída, uma citosina não substitu- ída ou uma uracila não substituída.
[0117] Em algumas modalidades, B1 pode ser selecionado dentre: , , , e ; sendo que: RA2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, halogênio e NHRJ2, sendo que RJ2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, -C(=O)RK2 e – C(=O)ORL2; RB2 pode ser halogênio ou NHRW2, sendo que RW2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substi- tuída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, -C(=O)RM2 e –C(=O)ORN2; RC2 pode ser hidro- gênio ou NHRO2, sendo que RO2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, -C(=O)RP2 e –C(=O)ORQ2; RD2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, deutério, halogênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma al- quenila C2-6 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-6 opcionalmente substituída; RE2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, hidróxi, uma al- quila C1-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, -C(=O)RR2 e –C(=O)ORS2; RF2 pode ser selecionado dentre hidrogênio, halogênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma al- quenila C2-6 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-6 opcionalmente substituída; Y1, Y2 e Y4 podem ser, independentemente, N (nitrogênio) ou C (carbono), desde que ao menos um dentre Y1, Y2 e Y4 seja N; Y3 pode ser N (nitrogênio) ou CRI2, sendo que RI2 pode ser selecionado dentre hi- drogênio, halogênio, uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída; Y5 e Y6 podem ser, independentemente, N (nitrogênio) ou CH; cada --------- pode ser indepen- dentemente uma ligação simples ou dupla, desde que as ligações simples e as ligações duplas estejam situadas no anel de modo que cada anel seja aromático; RG2 pode ser uma alquila C1-6 opcionalmente substituída; RH2 pode ser hidrogênio ou NHRT2, sendo que RT2 pode ser independente- mente selecionado dentre hidrogênio, -C(=O)RU2 e –C(=O)ORV2; e RK2, RL2, RM2, RN2, RP2, RQ2 RR2, RS2, RU2 e RV2 podem ser independentemente selecionados dentre uma alquila C1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída, uma alquinila C2-6 não substituída, uma cicloalquila C3-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquenila C3-6 opcionalmente substi- tuída, uma arila C6-10 opcionalmente substituída, uma heteroarila opcional- mente substituída, uma heterociclila opcionalmente substituída, uma aril(alquila C1-6) opcionalmente substituída, uma heteroaril(alquila C1-6) op- cionalmente substituída e uma heterociclil(alquila C1-6) opcionalmente substituída.
[0118] Exemplos de grupos B1 adequados incluem os seguintes:
[0119] , , , e , sendo que RA2, RB2, RC2, RD2, RE2,
RF2, RG2, RH2, Y1, Y2, Y3 e Y5 são aqui fornecidos. Em algumas moda- lidades, B1 pode ser . Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades, R1 pode ser .
Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em algumas moda- lidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras modalidades, R1 pode ser . Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em algumas modalidades, B1 pode ser . Em ainda outras moda- lidades, B1 pode ser . Quando B1 é , em várias modalidades, RG2 pode ser uma etila não substituída e R H2 pode ser NH2.
[0120] Quando B1 é uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente substituída, em várias modalidades, B1 pode ter a estrutura .
Em algumas modalidades, B1 pode ser selecionado dentre e . Por exemplo, B1 pode ser ou .
[0121] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma estrutura sele- cionada dentre: , , ,
, , ,
e , ou um sal farmaceutica- mente aceitável de qualquer uma das anteriormente mencionadas.
Em al- gumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uma base heterocíclica N-ligada opcionalmente substituída.
Em algumas modalidades desse pa- rágrafo, B1 pode ser uma base heterocíclica C-ligada opcionalmente subs- tituída.
Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser uma base de purina opcionalmente substituída.
Em outras modalidades desse pará- grafo, B1 pode ser uma base de pirimidina opcionalmente substituída.
Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser guanina.
Em outras modalidades desse parágrafo, B1 pode ser timina.
Em ainda outras moda- lidades desse parágrafo, B1 pode ser citosina.
Em ainda outras modalida- des desse parágrafo, B1 pode ser uracila.
Em algumas modalidades desse parágrafo, B1 pode ser adenina.
Em algumas modalidades desse pará- grafo, R4 pode ser hidrogênio.
Em outras modalidades desse parágrafo, R4 pode ser uma acila opcionalmente substituída.
Em ainda outras moda- lidades desse parágrafo, R4 pode ser mono, di ou trifosfato.
Em ainda ou- tras modalidades desse parágrafo, R4 pode ser pró-fármaco de fosforami- dato, como um pró-fármaco de fosforamidato de arila.
Em algumas moda- lidades desse parágrafo, R4 pode ser um pró-fármaco de fosfato do éster de aciloxialquila.
Em outras modalidades desse parágrafo, R4 pode ser um pró-fármaco de S-aciltioetila (SATE). Em ainda outras modalidades, R4 pode ser um pró-fármaco de diamida fosfônica. Em algumas modalidades desse parágrafo, R4 pode ser um α-aminoácido O-ligado opcionalmente substituído, como um daqueles aqui descritos.
[0122] Em algumas modalidades, quando R1 é hidrogênio; R2 é hi- dróxi; R5 e R6 são, cada um, hidrogênio; e B1 é adenina; então, R3 não é hidrogênio. Em algumas modalidades, quando R1 é hidrogênio; R2 é – CH2OH; R5 e R6 são, cada um, hidrogênio; e B1 é adenina ou guanina; então, R3 não é hidrogênio. Em algumas modalidades, R2 não é hidróxi. Em algumas modalidades, R2 não é CH2OH. Em algumas modalidades, R2 não é H. Em algumas modalidades, ao menos um dentre R5 e R6 é halogênio. Em algumas modalidades, R3 não é hidrogênio. Em algumas modalidades, R3 é halogênio (como F), hidróxi, ciano, uma alquila C1-4 não substituída ou substituída, uma alquenila C2-4 não substituída ou substituída ou uma alquinila C1-4 não substituída ou substituída. Em al- gumas modalidades, B1 não é uma adenina não substituída. Em algu- mas modalidades, B1 não é uma guanina não substituída. Em algumas modalidades, R4 não é hidrogênio. Em algumas modalidades, B1 não é uma purina não substituída. Em algumas modalidades, B1 não é uma purina opcionalmente substituída, como uma adenina opcionalmente substituída ou uma guanina opcionalmente substituída.
[0123] Os exemplos de compostos adequados de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, incluem, mas não se limitam, aos seguintes: , ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, , , e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos supracitados.
[0124] Exemplos adicionais de compostos adequados de Fórmula (I) incluem, mas não se limitam, aos seguintes: , , ,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
e , ou um sal farmaceuticamente acei- tável de qualquer um dos supracitados.
[0125] Ainda outros exemplos de compostos adequados da Fór- mula (I) incluem, mas não se limitam, aos seguintes: , , , , , ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos supracitados. Síntese
[0126] Exemplos de compostos úteis nos métodos aqui fornecidos são descritos por referência aos esquemas sintéticos ilustrativos quanto à sua preparação geral, abaixo, e os exemplos específicos em seguida. Um versado na técnica reconhecerá que, para obter os vários compostos da presente invenção, os materiais de partida podem ser adequadamente se- lecionados de modo que os substituintes mais desejados sejam utilizados através do esquema reacional com ou sem proteção, conforme for ade- quado, para resultar no produto desejado. Alternativamente, pode ser ne- cessário ou desejável empregar, em lugar do substituinte mais desejado, um grupo adequado que possa ser carreado através dos esquemas de reação e substituído conforme adequado com o substituinte desejado. Ex- ceto onde especificado em contrário, as variáveis são conforme definidas acima em referência à Fórmula (I). As reações podem ser realizadas entre o ponto de fusão e a temperatura de refluxo do solvente, e de preferência entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente. As reações podem ser aquecidas utilizando aquecimento convencional ou aquecimento por mi- cro-ondas. As reações podem, também, ser conduzidas em recipiente de pressão lacrado acima da temperatura de refluxo normal do solvente.
[0127] Compostos exemplificadores úteis nos métodos aqui forneci- dos são descritos com referência aos esquemas sintéticos ilustrativos quanto à sua preparação geral, abaixo, e os seguintes exemplos específi- cos.
Esquema 1
[0128] De acordo com o ESQUEMA 1, um composto comercialmente disponível ou sinteticamente acessível da fórmula (V), onde PG é benzoíla (Bz), é desprotegido empregando-se as condições conhecidas pelo ver- sado na técnica, para fornecer um composto da fórmula (VI), onde Ra é H, Rb é H e Rd é OH. Por exemplo, dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclo- butano-1,2-di-il)bis(metileno), reage com amônia-metilamina (AMA; MeNH2 a 30%), em um solvente adequado como MeOH, e similares, para fornecer ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0129] Uma série de etapas de proteção e desproteção produz um composto da fórmula (VI), onde Rd é OBn; Rc é H; Rb é H; e Ra é TBDPS. ((1R,2R,3R)-3-Hidroxiciclobutano-1,2-di-il)dimetanol é reagido com ci- clo-hexanona, ácido p-toluenossulfônico (TsOH) e MgSO4 para fornecer (1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano-3,1'-ciclo-hexan]-7-il- metanol. (1R,6R,7R)-2,4-Dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano-3,1'-ciclo-he- xan]-7-ilmetanol é protegido como o éter silílico sob condições conheci- das pelo versado na técnica. Por exemplo, o composto alcoólico (1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano-3,1'-ciclo-hexan]-7-il- metanol é reagido com cloreto de terc-butildimetilsilila, uma base ade- quada como usando imidazol, dimetilaminopiridina e similares, em um solvente como DMF, a temperaturas na faixa de 0 °C em temperatura ambiente, para produzir ((1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4,2,0]oc- tano-3,1'-ciclo-hexan]-7-ilmetóxi)(terc-butil)difenilsilano. O composto es- piro-hexano carbocíclico ((1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4.2.0]oc- tano-3,1'-ciclo-hexan]-7-ilmetóxi)(terc-butil)difenilsilano foi hidrolisado com p-toluenossulfonato de piridínio (PPTS) em um solvente como
MeOH, para produzir (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-(hi- droximetil)ciclobutanol. A proteção de N-trifenilmetil (tritil, Tr ou Trt) do composto hidroxi (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-(hidro- ximetil)ciclobutanol, empregando as condições conhecidas pelo ver- sado na técnica, fornece (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)- 2-((tritilóxi)metil)ciclobutanol. Por exemplo, a reação do composto álcool (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-(hidroximetil)ciclobuta- nol com cloreto de tritila (TrtCl), em uma base orgânica adequada, como piridina, dimetilaminopiridina (DMAP), 2,4,6-tri-t-butilpiridina, 2,4,6-coli- dina, trietilamina (TEA) e 1,8-diazabiciclo[5,4,0]-undec-7-eno (DBU), de preferência piridina, produz (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-2-((tritilóxi)metil)ciclobutanol. A proteção de benzila de (1R,2R,3R)- 3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-((tritilóxi)metil)ciclobutanol, empre- gando brometo de benzila (BnBr), uma base adequada como NaH, e similares, em um solvente adequado como THF, DMF, e similares, a temperaturas na faixa de 0 °C em temperatura ambiente, produz (((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)-2-((tritilóxi)metil)ciclobutil)metóxi)(terc-bu- til)difenilsilano. A desproteção de triti, empregando condições conheci- das pelo versado na técnica, por exemplo, condições ácidas brandas como TsOH em um solvente como MeOH, produz um composto de ál- cool da fórmula (VI), onde Ra é t-butildifenilsilila (TBDPS), Rb é H; Rc é H; e Rd é O-Bn.
[0130] Em um método alternativo, um composto de álcool da fór- mula (VI), onde Ra é t-butildifenilsilila (TBDPS), Rb é H; Rc é H; e Rd é O-Bn é preparado em três etapas a partir de um composto da fórmula (V), onde PG é benzoíla (Bz). Em uma primeira etapa, a reação de di- benzoato de ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobutano-1,2-di-il)bis(metileno) com 2,2,2-tricloroacetimidato de benzila, ciclo-hexano, 2,2,2-tricloroace- timidato de benzila, ácido trifluorometanossulfônico (TFMSA), em um solvente adequado como DCM, produziu dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-
(benzilóxi)ciclobutano-1,2-di-il)bis(metileno). A remoção do grupo prote- tor Bz empregando as condições anteriormente descritas fornece ((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. A proteção de ((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol como o éter si- lílico, empregando as condições anteriormente descritas, fornece um composto de álcool da fórmula (VI), onde Ra é t-butildifenilsilila (TBDPS), Rb é H; Rc é H; e Rd é O-Bn. Esquema 2
[0131] De acordo com o ESQUEMA 2, um composto de álcool da fórmula (VI) sofre uma eliminação de acordo com Grieco, para produzir um alqueno da fórmula (VII). Por exemplo, um álcool da fórmula (VI), em que Ra é um grupo protetor adequado como t-butildifenilsilila (TBDPS), benzila (Bn), 4,4-dimetoxitritila (DMTr) e similares; Rb é H; Rc é H ou CH2OBn; e Rd é O-Bn, ou OAcetil (OAc); é primeiro conver- tido no arilseleneto, seguido pela oxidação para selenóxido usando H2O2 ou m-CPBA, que então sofre eliminação syn para produzir um composto de olefina da fórmula (VII).
[0132] A desbenzilação de um composto de éter arilbenzílico de fórmula (VII) contendo um éter silílico ácido-lábil, em que Ra é TBDPS, Rb é H; empregando-se as condições conhecidas pelo versado na téc- nica, fornece um composto da fórmula (VIII) onde Re é OH. Por exem- plo, a desbenzilação foi obtida empregando-se BCl3, uma base como
Na2CO3 aquoso, e similares; em um solvente adequado, como DCM, THF, H2O ou uma mistura dos mesmos; produzindo um composto da fórmula (VIII), onde Ra é TBDPS, Rb é H e Re é OH.
[0133] A O-desacilação seletiva de um composto da fórmula (VII), em que Ra é Bn, Rb é H, Rc é CH2OBn; e Rd é OAc; é obtida empre- gando-se K2CO3, MeOH, para produzir um composto da fórmula (VIII), onde Re é OH.
[0134] Em uma eliminação de Grieco similar, um composto da fór- mula (X) é preparado a partir de um composto da fórmula (IX), onde Ra é um grupo protetor adequado como 4,4-dimetoxitritila (DMTr) ou ben- zila (Bn); Rb é H ou C=C; Rc é CH2OBn, ou CH2-O-monometoxitritila (MMtr); e o anel B é uma base ligada a nitrogênio adequadamente pro- tegida como (6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila ou N-(9H- purin-6-il)benzamida.
[0135] A destritilação suave de um composto de monometoxitritila (MMtr) e 4,4-dimetoxitritila (DMTr) da fórmula (X), em que Ra é 4,4- dimetoxitritila (DMTr); Rb é C=CH; Rc é CH2-O-MMtr; e o anel B é (6- cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila; é conseguida sob condi- ções conhecidas pelo versado na técnica. Por exemplo, o emprego de um ácido como ácido tricloroacético (TCA), e similares, em um solvente adequado como DCM, e similares, em temperatura ambiente, durante um período de 1 a 3 h, fornece um composto hidróxi de fórmula (XI), onde Ra é H; Rb é C=CH; Rc é CH2-OH; e o anel B é uma base como (6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila.
[0136] Os grupos protetores opcionais no composto protegido das fórmulas (XI) são, então, clivados seguindo metodologias de desprote- ção estabelecidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ª Ed., John Wiley & Sons, 1999.
Esquema 4
[0137] De acordo com o ESQUEMA 4, 3,3-dietoxiciclobutano-1,2- dicarboxilato de (1S,2R)-dimetila (preparado de acordo com os métodos descritos em US6.025.519) é reduzido empregando-se hidreto de lítio e alumínio (LAH), em um solvente adequado como THF, e similares, para fornecer o diol correspondente ((1S,2S)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di- il)dimetanol. O diol foi convertido no composto de éter bis-benzílico cor- respondente da Fórmula (XII), onde PG é Bn, sob as condições anteri- ormente descritas. A remoção do acetal forneceu o composto de ciclo- butanona da fórmula (XIII), onde PG é Bn. Esquema 5
[0138] De acordo com o ESQUEMA 5, ortoformiato de trietila reagiu com BF3.OEt2, em um solvente adequado como DCM, a temperaturas na faixa de -30°C a 0°C; (2S,3S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona (XIII) é reagida com a solução resultante a -78°C, e uma base como DIPEA, para fornecer (2S,3R,4R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobu- tanona. A redução de (2S,3R,4R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoxime- til)ciclobutanona com L-Selectride produz (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol. Esquema 6
[0139] De acordo com o ESQUEMA 6, (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((ben- zilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol é acilado sob condições conhe- cidas pelo versado na técnica. Por exemplo, a reação de (1R,2S,3R,4S)- 2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol com anidrido acé- tico, um catalisador como 4-DMAP ou piridina, ou uma mistura dos mes- mos, para fornecer acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)- 4-(dietoximetil)ciclobutila. A desproteção do dietil acetal sob condições conhecidas pelo versado na técnica fornece acetato de (1R,2S,3R,4S)- 2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-formilciclobutila, de preferência, desproteção com um ácido adequado como H2SO4, em um solvente como CN3CN. A redução do composto aldeído acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-Bis((ben- zilóxi)metil)-4-formilciclobutila com um agente redutor como NaBH4, em um solvente adequado como THF, e similares, fornece um composto da fórmula (VI), onde Ra é Bn, Rb é H, Rc é CH2OBn e Rd é OAc. Esquema 7
[0140] De acordo com o ESQUEMA 7, um composto da fórmula (VIII) reage sob condições de Mitsonobu com um anel heterocíclico ou heteroaromático monocíclico ou bicíclico de 6 a 10 membros da fórmula (XIV), para produzir um composto da fórmula (XI), em que Ra é TBDPS ou Bn, Rb é H e o anel B é um anel heterocíclico ou heteroaromático monocíclico ou bicíclico de 6 a 10 membros. Por exemplo, um composto da fórmula (XIV), como 3-benzoilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona, (6-cloro-
9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila, N,N-diboc-9H-purin-6-amina, N,N-di-Boc-2-fluoro-9H-purin-6-amina, 3-benzoil-5-metilpirimidina- 2,4(1H,3H)-diona, 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina, 4-cloro-5-fluoro- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina ou (6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc- butila; é reagido com um composto da fórmula (VIII) como (1R,3R)-3- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutanol, ou (1R,2S,3R)- 2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutanol; PPh3; um reagente como azodicarboxilato de dietila (DEAD), azodicarboxilato de di-isopro- pila (DIAD) e similares; em um solvente adequado, como THF, ACN e similares; a temperaturas entre 0°C e 55°C; durante um período de cerca de 24 a 36 h, para produzir um composto da fórmula (XI) (a reação de acoplamento prossegue com a inversão da estereoquímica no car- bono ligado ao grupo hidróxi do reagente alcoólico). Esquema 8
[0141] De acordo com o ESQUEMA 8, um composto da fórmula (XVI), onde Ra é Bn, ou TBDPS, Rb é H e Rc é H ou CH2-O-Bn, é pre- parado a partir de um composto da fórmula (XV) em duas etapas pela primeira reação com cloreto de 2,4,6-tri-isopropilbenzenossulfonila (TPSCl) na presença de dimetilaminopiridina (DMAP); trietilamina; em um solvente adequado, como acetonitrila e similares; seguido de amo- nólise com NH4OH. A desproteção do grupo TBDPS em um composto da fórmula (XVI), onde Ra é TBDPS, Rb é H e Rc é H ou CH2-O-Bn, é obtida com um ácido como HCl, em um solvente como THF. Os grupos protetores opcionais no composto protegido das fórmulas (XVI) são, então, clivados seguindo metodologias de desproteção estabelecidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ª Ed., John Wiley & Sons, 1999, para produzir um composto da fórmula (IA), onde Rb é H, Rc é H ou CH2OH, e o anel B é. . Esquema 9
[0142] De acordo com o ESQUEMA 9, um composto da fórmula (XI), onde Ra é TBDPS; Rb é H; Rc é CH2-OH; e o anel B é um heterociclo ou heteroarila ligado a nitrogênio, como N-(9H-purin-6-il)benzamida; é oxi- dado com um agente oxidante adequado, como um trióxido de cromo ou reagente de cromato, periodinano de Dess-Martin, ou por oxidação de Swern. Em uma modalidade preferencial, um composto da fórmula (XI) é tratado com periodinano de Dess-Martin, em um solvente adequado como diclorometano, e similares, a temperaturas na faixa de cerca de 0°C a cerca de 25°C, durante um período de aproximadamente 0,5 a 4 horas, para produzir um composto da fórmula (XVII). A adição de um re- agente de Grignard, como um haleto de alquila, alquenila ou alquinila de magnésio (por exemplo, MeMgBr, EtMgBr, vinilMgBr, alilMgBr e etinilM- gBr) ou um alquil, alquenil ou alquinil-lítui, como MeLi, a um composto de aldeído da fórmula (XVII), em um solvente orgânico adequado, como te- tra-hidrofurano (THF), éter dietílico e similares, produz um composto de álcool onde Rb é H e Ra é TBDPS. Os grupos protetores opcionais no composto álcool protegido são, então, clivados seguindo metodologias de desproteção estabelecidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ª Ed., John Wiley & Sons, 1999), para fornecer um composto da Fórmula (IB).
[0143] O tratamento de um composto aldeído da fórmula (XVII) com cloridrato de hidroxilamina e piridina produz um intermediário hidroxi- imina que é convertido na função ciano usando cloreto de metanossul- fonila e piridina, para produzir um composto ciano, onde Ra é Bz, Rb é H e o anel B é N-(9H-purin-6-il)benzamida. Os grupos protetores opcio- nais no composto ciano protegido são, então, clivados seguindo meto- dologias de desproteção estabelecidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ª Ed., John Wiley & Sons, 1999), para fornecer um composto da Fór- mula (IC).
[0144] A conversão do substituinte hidróxi em um grupo de saída como halogênio ou sulfonato permite o deslocamento usando reagen- tes nucleofílicos, como fluoreto de tetrabutilamônio. Por exemplo, o grupo hidróxi de um composto da fórmula (XII), onde Rc é CH2OH, é convertido em um grupo de saída (mesilato, tosilato e similares), em- pregando condições conhecidas pelo versado na técnica. Em uma mo- dalidade preferencial, um composto sulfonato (p-toluenossulfonato (- OTs)) da fórmula (XVIII) é preparado usando cloreto de para-toluenos- sulfonila, DMAP, TEA, em um solvente adequado como DCM, e simi- lares. A fluoração subsequente usando TBAF, em um solvente ade- quado como THF, e similares, a temperaturas na faixa de temperatura ambiente a cerca de 50 °C, durante um período de cerca de 16 h, pro- duz um composto de tosilato onde R a é MMtr e o anel B é N-(9l2-purin- 6-il)benzamida. Os grupos protetores opcionais no composto de flúor são, então, clivados seguindo metodologias de desproteção estabele-
cidas, como aquelas descritas em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Pro- tective Groups in Organic Synthesis," 3ª Ed., John Wiley & Sons, 1999), para fornecer um composto da Fórmula (ID). Esquema 10
[0145] A mistura de epóxido da fórmula (XIX), em que PG é Bn, é preparada de acordo com os métodos descritos em Tetrahedron (1994), 50 (46), 13145-54. De acordo com o ESQUEMA 10, a reação da mistura de epóxido (XIX) com uma base como NaH, e similares, em um solvente adequado como DMF, e similares, com o nucleófilo de nucleobase B (XIV) adequado, como adenina, a temperaturas na faixa de 80 a 100°C, durante um período de 48 a 52 h, fornece uma mistura de compostos da fórmula (XX). Uma mistura do composto da fórmula (XX) é oxidada, empregando as condições anteriormente descritas, para fornecer uma mistura do composto da fórmula (XXI). Esquema 11
[0146] De acordo com o ESQUEMA 11, uma mistura de compostos da fórmula (XXI) é reagida com fluorometilfenilsulfona, dietilclorofosfito e bis(trimetilsilil)amida de lítio, em um solvente adequado como THF, e similares, para fornecer os compostos da fórmula (XXIIa) e (XXIIb) como uma mistura de isômeros E e Z. Fica claro que, para o versado na téc- nica, o derivado de halometilideno representado pelo composto das fór- mulas (XXIIa) e (XXIIb) existe como dois isômeros geométricos que po- dem ser chamados de isômeros (Z) e (E).
[0147] A mistura de 2-arilsulfonil-halometilideno dos compostos de fórmula (XXIIa e XXIIb) é convertida nos correspondentes derivados de 2- tributil-estanho-halometilideno de fórmula (XXIIIa e XXIIIb). Por exemplo, a reação de uma mistura de compostos da fórmula (XXIIa e XXIIb) com hidreto de tributil-estanho (HSnBu3) na presença de 2,2'-azobisisobutironi- trila (AIBN) em um solvente adequado como benzeno. Os isômeros geo- métricos do derivado de 2-tributil-estanho-halometilideno da fórmula (XXIIIa e XXIIIb) podem, opcionalmente, ser isolados com o uso de proce- dimentos e técnicas que são bem conhecidos e entendidos na arte.
[0148] A porção tributil-estanho de uma mistura de compostos das fór- mulas (XXIIa e XXIIb) é removida e substituída por um átomo de hidrogê- nio para fornecer a mistura de compostos de 2-halometilideno correspon- dente das fórmulas (XXIIIa e XXIIIb). Isto é realizado por procedimentos que são bem conhecidos e entendidos na técnica, como a reação com ácido acético diluído, amônia em metanol ou metóxido de sódio. A mistura de compostos das fórmulas (XXIIIa e XXIIIb) sofre proteção e desproteção e é separada com o uso de técnicas de separação convencionais bem conhecidas pelo versado na técnica, e conforme anteriormente descrito, para fornecer compostos puros isolados das fórmulas (XXIVa) e (XXIVb). Esquema 12
[0149] De acordo com o ESQUEMA 12, um composto de cloropu- rina da fórmula (XXV), onde Rf é Cl; Rc é H; Rb é H; Ra é TBDPS; Y é N; e Z é NH(BOC); é convertido em um composto carbonila da fórmula (XXVI) por tratamento com o alcóxido de 3-hidroxipropionitrila. Por exemplo, a reação de 3-hidroxipropionitrila; em um solvente adequado, como THF, e similares; com uma base, como NaH, e similares; (9- ((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)-6-cloro- 9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila; a uma temperatura de cerca 0°C; produz (9-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobu- til)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. Em um mé- todo alternativo, a hidrólise de um composto de cloropurina da fórmula (XXV), onde Rf é Cl; Rc é CH2O(Bn); Rb é H; Ra é Bn; Y é N; e Z é NH(PG); é alcançada empregando-se uma solução aquosa de CF3COOH em temperatura ambiente.
[0150] A amonólise de um composto da fórmula (XXV), onde Rf é Cl; Rc é CH2O(MMtr); Rb é H; Ra é H; Y é CH ou CF; e Z é CH; é realizada pela reação com solução de amônia a 25% de força; em um solvente adequado, como dioxano, e similares; sob pressão elevada; em tempe- raturas elevadas, de preferência, de 90 a 120 °C; para fornecer um com- posto da fórmula (XXVII), onde Rf é NH2. Esquema 13
[0151] De acordo com o ESQUEMA 13, um composto de trifosfato de nucleosídeo da Fórmula (II) é preparado a partir de um composto de nucleosídeo da Fórmula (I) que emprega as condições conhecidas pelo versado na técnica. Por exemplo, a reação do nucleosídeo da Fórmula (I) com fosfato de trimetila, fosfato de trietila e similares; cloreto de fosfo- rila; e N-metilimidazol para fornecer o intermediário monofosfato de nu- cleosídeo correspondente. A reação subsequente do monofosfato de nu- cleosídeo com o sal de tetrabutilamônio de pirofosfato, em um solvente adequado como DMF, e similares, fornece o trifosfato da Fórmula (II). Esquema 14
[0152] De acordo com o ESQUEMA 14, os compostos pró-fármacos de ariloxifosforamidato nucleosídeo da Fórmula (III) são preparados pelo acoplamento dos compostos de nucleosídeo da Fórmula (I) com fosforo-
cloridato pela ativação do intermediário de imidazólio com NMI (N-metili- midazol) ou por desprotonação 5′ do nucleosídeo com isoPrMgCl, t-BuM- gCl e similares, e a subsequente substituição com o clorofosforamidato. Vale notar que essas diferentes abordagens sintéticas geralmente produ- zem a misturas aproximadas de 1:1 dos compostos da Fórmula (III) como diastereoisômeros no centro de fósforo (isômeros Sp e Rp).
[0153] Os compostos da Fórmula (I) podem ser convertidos em seus sais correspondentes usando os métodos conhecidos por um ver- sado na técnica. Por exemplo, uma amina da Fórmula (I) é tratada com ácido trifluoroacético, HCl ou ácido cítrico em um solvente como Et2O, CH2Cl2, THF, MeOH, clorofórmio ou isopropanol para produzir a forma de sal correspondente. Alternativamente, sais de ácido trifluoro acético ou de ácido fórmico são obtidos como um resultado de condições de purificação por HPLC em fase reversa. As formas cristalinas dos sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da fórmula (I) podem ser obtidas na forma cristalina por recristalização a partir de solventes pola- res (incluindo misturas de solventes polares e misturas aquosas de sol- ventes polares) ou a partir de solventes não-polares (incluindo misturas de solventes não-polares).
[0154] Os compostos preparados de acordo com os esquemas aqui descritos podem ser obtidos como formas únicas, como enantiômeros únicos, por síntese específica quanto à forma ou por resolução. Os com- postos preparados de acordo com os esquemas acima podem ser alter- nativamente obtidos como misturas de várias formas, como misturas ra- cêmicas (1:1) ou não racêmicas (não 1:1). Nos casos em que são obti- das misturas racêmicas e não racêmicas de enantiômeros, os enantiô- meros únicos podem ser isolados com o uso de métodos de separação convencionais conhecidos por um versado na técnica, como cromato- grafia quiral, recristalização, formação de sal diastereomérico, derivati- zação em adutos diasteroméricos, biotransformação ou transformação enzimática. Nos casos em que forem obtidas misturas regioisoméricas ou diastereoméricas, conforme aplicável, isômeros únicos podem ser separados com o uso de métodos convencionais como cromatografia ou cristalização.
[0155] Em algumas modalidades, a variação dos substituintes so- bre um composto aqui descrito, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode fazer com que o fósforo seja um centro quiral. Em algumas modalidades, o fósforo pode estar na configuração (R) Em algumas modalidades, o fósforo pode estar na configuração (S). Exemplos das duas configurações são: e
[0156] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser enriquecido na configuração (R) ou (S) em relação ao fósforo. Por exemplo, uma das configurações (R) e (S) em relação ao átomo de fósforo pode estar presente em uma quantidade > 50%, ≥ 75%, ≥ 90%, ≥ 95% ou ≥ 99% em comparação com a quantidade da outra configuração (R) ou (S) em relação ao átomo de fósforo.
[0157] Ao neutralizar a carga na porção de fosfonato da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, a penetração da membrana celular pode ser facilitada como resultado do aumento da lipofilicidade do composto. Uma vez absorvidos e captados dentro da célula, os grupos fixados ao fósforo podem ser facilmente removidos por esterases, proteases e/ou outras enzimas. Em algumas modalidades, os grupos fixados ao fósforo podem ser removidos por simples hidrólise. Dentro da célula, o fosfonato liberado dessa forma pode, então, ser me- tabolizado por enzimas celulares no monofosfonato ou no difosfonato ativo (por exemplo, um fosfono difosfato). Além disso, em algumas mo- dalidades, a variação dos substituintes em um composto aqui descrito, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, pode auxiliar a manter a eficácia do composto através da redução dos efeitos indesejáveis.
[0158] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode agir como um ter- minador de cadeia de um vírus e inibir a replicação do vírus, sendo que o vírus pode ser HBV, HDV e/ou HIV. Por exemplo, os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, po- dem ser incorporados em uma cadeia de DNA do vírus (como HBV, HDV e/ou HIV) e, em seguida, nenhum alongamento adicional é obser- vado.
[0159] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma maior estabili- dade metabólica e/ou plasmática. Em algumas modalidades, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser mais resistente à hidrólise e/ou mais resistente às transforma- ções enzimáticas. Por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter estabilidade metabólica aumentada, estabilidade plasmática aumentada e/ou pode ser mais resis- tente à hidrólise. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter propriedades aprimoradas. Uma lista não limitadora de exemplos de propriedades inclui, mas não se limita, ao aumento da meia vida biológica, aumento da biodis- ponibilidade, aumento da potência, uma resposta in vivo sustentada, au- mento dos intervalos de dosagem, diminuição das quantidades de dosa- gem, diminuição da citotoxicidade, redução das quantidades necessárias para tratamento de condições das doenças, redução da carga viral, redu- ção da carga viral plasmática, aumento da contagem de linfócitos T CD4+,
redução no tempo de soroconversão (ou seja, do tempo para o vírus se tornar indetectável no soro do paciente), aumento da resposta viral sus- tentada, uma redução da morbidade ou mortalidade nos resultados clíni- cos, diminuição ou prevenção de infecções oportunistas, aumento da ade- são do indivíduo e compatibilidade com outros medicamentos. Em algu- mas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ter uma meia vida biológica maior que 24 horas. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ter uma atividade antivi- ral mais potente (por exemplo, uma EC50 menor em um ensaio de replicon de HIV, HBV e/ou HDV) em comparação com o padrão atual de trata- mento. Composições farmacêuticas
[0160] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a uma composição farmacêutica, que pode incluir uma quantidade eficaz de um ou mais compostos aqui descritos (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) e um veículo farmaceuticamente aceitável, diluente, excipiente ou combina- ção dos mesmos.
[0161] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica pode incluir um único diastereômero de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo (por exemplo, um único diastereômero está presente na composição farmacêutica a uma concentração maior que 99% em comparação com a concentração to- tal dos outros diastereômeros). Em outras modalidades, a composição farmacêutica pode incluir uma mistura de diastereômeros de um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a composição farmacêutica pode incluir uma concentração de um diastereômero de > 50%, ≥ 60%, ≥ 70%, ≥ 80%, ≥ 90%, ≥ 95% ou ≥ 98%, em comparação com a concentração total de outros diastereômeros. Em algumas modalidades, a composição far- macêutica inclui uma mistura de 1:1 de dois diastereômeros de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0162] O termo "composição farmacêutica" refere-se a uma mis- tura de um ou mais dos compostos aqui revelados com outros compo- nentes químicos, como diluentes ou veículos. A composição farmacêu- tica facilita a administração do composto a um organismo. As compo- sições farmacêuticas também podem ser obtidas pela reação de com- postos com ácidos inorgânicos ou orgânicos como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, e ácido salicílico. As composições farmacêuticas serão geralmente adaptadas à via de administração específica pretendida. Uma compo- sição farmacêutica é adequada para aplicações humanas e/ou veteri- nárias.
[0163] O termo "fisiologicamente aceitável" define um veículo, dilu- ente ou excipiente que não impede a atividade biológica e as propriedades do composto.
[0164] Como usado aqui, um "veículo" refere-se a um composto que facilita a incorporação de um composto nas células ou nos tecidos. Por exemplo, mas não se limitando, o sulfóxido de dimetila (DMSO) é um veículo comumente utilizado que facilita a absorção de muitos com- postos orgânicos nas células ou tecidos de um indivíduo.
[0165] Como usado aqui, um "diluente" refere-se a um ingrediente em uma composição farmacêutica que não possui atividade farmaco- lógica, mas pode ser farmaceuticamente necessário ou desejável. Por exemplo, um diluente pode ser usado para aumentar o volume de um fármaco potente cuja massa é pequena demais para fabricação e/ou administração. Ele também pode ser um líquido para a dissolução de um fármaco a ser administrado por injeção, ingestão ou inalação. Uma forma de diluente comum na técnica é uma solução aquosa tamponada por exemplo, mas não se limitando à solução salina tamponada com fosfato que imita a composição do sangue humano.
[0166] Como usado aqui, um "excipiente" refere-se a uma substância inerte que é adicionada a uma composição farmacêutica para fornecer, sem limitação, volume, consistência, estabilidade, capacidade de ligação, lubrificação, capacidade de desintegração etc., à composição. Um "dilu- ente" é um tipo de excipiente.
[0167] As composições farmacêuticas aqui descritas podem ser administradas a um paciente humano per se, ou em composições far- macêuticas onde elas são misturadas com outros ingredientes ativos, tal como em terapia de combinação, ou veículos, diluentes, excipientes ou combinações dos mesmos. A formulação adequada é depende da via de administração escolhida. As técnicas para a formulação e admi- nistração dos compostos aqui descritos são conhecidas pelos versa- dos na técnica.
[0168] As composições farmacêuticas aqui reveladas podem ser fa- bricadas de uma forma conhecida, por exemplo, através de processos de mistura, dissolução, granulação, fabricação de drágeas, levigação, emulsificação, encapsulação, aprisionamento ou formação de compri- midos. Adicionalmente, os ingredientes ativos estão contidos em uma quantidade eficaz para se obter o propósito ao qual se destina. Muitos dos compostos usados nas combinações farmacêuticas aqui reveladas podem ser fornecidos como sais com contraíons farmaceuticamente compatíveis.
[0169] Várias técnicas para se administrar um composto existem na arte, incluindo, mas não se limitando a, aplicação oral, retal, tópica, aeros- sol, injeção e parenteral, incluindo injeções intramusculares, subcutâneas,
intravenosas, intramedulares, intratecais, intraventricular direta, intraperi- toneal, intranasal e intraocular.
[0170] Pode-se também administrar o composto a um local em vez de uma forma sistêmica, por exemplo, através de injeção do composto diretamente na área infectada, frequentemente em uma formulação de depósito ou de liberação sustentada. Além disso, pode-se administrar o composto em um sistema de liberação de fármacos direcionado, por exemplo, em um lipossomo revestido com um anticorpo tecido-especí- fico. Os lipossomas podem ser tomados como alvo e absorvidos sele- tivamente pelo órgão.
[0171] As composições podem, se desejado, ser apresentadas em uma embalagem ou dispositivo aplicador que pode conter uma ou mais formas de dose unitária contendo o ingrediente ativo. A embalagem pode, por exemplo, compreender folha metálica ou plástica, tal como uma em- balagem blister. A embalagem ou o dispositivo aplicador pode ser acom- panhada(o) de instruções para a administração. A embalagem ou o dispo- sitivo aplicador pode também ser acompanhada(o) de uma nota associada ao recipiente sob a forma prescrita por uma agência governamental que regula a fabricação, o uso ou a venda de fármacos, cuja nota reflete a aprovação pela agência da forma da droga para administração a seres humanos ou animais. Esta nota, por exemplo, pode ser o rótulo aprovado pelo FDA (U.S. Food and Drug Administration) para fármacos de prescri- ção, ou a bula aprovada. As composições que podem incluir um composto aqui descrito formulado em um veículo farmacêutico compatível podem também ser preparadas, colocadas em um recipiente adequado, e identi- ficadas para o tratamento de uma condição indicada. Métodos de uso
[0172] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um método de tratamento e/ou melhora de uma doença ou condição que pode incluir a administração a um indivíduo de uma quantidade eficaz de um ou mais compostos aqui descritos, como um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêu- tica que inclui um composto aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outras modalidades aqui descritas referem-se a um método de tratamento e/ou melhora de uma doença ou condição que pode incluir a administração a um indivíduo identificado como sofrendo da do- ença ou condição de uma quantidade eficaz de um ou mais compostos aqui descritos, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0173] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um mé- todo de tratamento de uma infecção causada por HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo de infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farma- cêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composi- ção farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV.
[0174] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descritos (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para tratamento de uma in- fecção causada por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica aqui des- crita. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma in- fecção por HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica aqui des- crita.
[0175] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de inibição da replicação de HBV e/ou HDV que pode incluir colo- car uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas re- ferem-se ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da
Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fa- bricação de um medicamento para inibição da replicação do HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos. Ainda outras modalida- des aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que in- clui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), para inibir a replicação de HBV e/ou HDV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou composi- ção farmacêutica aqui descritos.
[0176] Em algumas modalidades, a infecção por HBV pode ser uma infecção por HBV aguda. Em algumas modalidades, a infecção por HBV pode ser uma infecção por HBV crônica.
[0177] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um método de tratamento de cirrose hepática que é desenvolvido por causa de uma infecção por HBV e/ou HDV, que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de cirrose hepática e/ou colocar em contato uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em um indivíduo que sofre de cirrose hepática com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica, que inclui uma quantidade efi- caz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas re- ferem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de cirrose hepática com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição far- macêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas refe- rem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar cirrose hepática.
[0178] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um método de tratamento de câncer de fígado (como carcinoma hepatocelular) que é desenvolvido por causa de uma infecção por HBV e/ou HDV, que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de câncer de fígado e/ou colo- car em contato uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em um indiví- duo que sofre de câncer de fígado com uma quantidade eficaz de um com- posto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêu- tica, que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito. Ou- tras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer de fígado (como um carcinoma hepatocelular) com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farma- cêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas referem- se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar câncer de fígado (como carcinoma hepatocelular).
[0179] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um método de tratamento de insuficiência hepática que é desenvolvido por causa de uma infecção por HBV e/ou HDV, que pode incluir administrar a um indiví- duo que sofre de insuficiência hepática e/ou colocar em contato uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em um indivíduo que sofre de insuficiência hepática com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo), ou uma composição farmacêutica, que inclui uma quan- tidade eficaz de um composto aqui descrito. Outras modalidades aqui des- critas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de insufici- ência hepática com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar insuficiência hepática.
[0180] Vários indicadores para determinar a eficácia de um método para tratar uma infecção causada por HBV e/ou HDV também são conhe- cidos pelos versados na técnica. Exemplos de indicadores adequados incluem, mas não se limitam a, uma redução na carga viral indicada pela redução no DNA de HBV (ou carga), antígeno de superfície de HBV (HBsAg) e antígeno e de HBV (HBeAg), uma redução na carga viral plas- mática, uma redução na replicação viral, uma redução no tempo para so- roconversão (vírus indetectável no soro do paciente), um aumento na taxa de resposta viral sustentada à terapia, uma melhora na função he- pática e/ou uma redução da morbidade ou mortalidade nos resultados clínicos.
[0181] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir as titulações virais de HBV e/ou HDV a níveis indetectáveis, por exemplo, de cerca de 10 a cerca de 50 ou de cerca de 15 a cerca de 25 unidades internacionais/mL de soro, ou a menos de cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HBV e/ou de HDV em comparação com a carga viral de HBV e/ou de HDV antes do fornecimento do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em al- gumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HBV e/ou HDV para menos que cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para alcançar uma redução na carga viral de HBV e/ou HDV no soro do indivíduo até um nível indetectável e/ou uma redução de cerca de 1,5-log a cerca de 2,5-log, uma redução de cerca de 3-log a cerca de 4- log, ou uma redução maior que cerca de 5-log em comparação com a carga viral antes da administração do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a carga viral de HBV e/ou HDV pode ser medida antes do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ser fornecido, e nova- mente após a conclusão de pelo menos uma parte do regime de trata- mento com o composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo (por exemplo, 1 mês após o início ou a conclusão).
[0182] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução de ao menos 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100 vezes ou mais reduções na replicação do HBV e/ou do HDV em relação aos ní- veis de pré-tratamento em um indivíduo, conforme determinado após a conclusão, ou a conclusão de ao menos uma parte do regime de tratamento (por exemplo, 1 mês após o início ou a conclusão). Em al-
gumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação do HBV e/ou do HDV em relação aos níveis de pré-trata- mento na faixa de mais de 1 vez, de cerca de 2 a cerca de 5 vezes, de cerca de 10 a cerca de 20 vezes, de cerca de 15 a cerca de 40 vezes, ou de cerca de 50 a cerca de 100 vezes. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação de HBV e/ou de HDV na faixa de mais de 0,5 log, de 1 a 1,5 log, de 1,5 log a 2 log, de 2 log a 2,5 log, de 2,5 a 3 log, de 3 log a 3,5 log ou de 3,5 log a 4 log ou maior da redução da replicação de HBV e/ou HDV em compa- ração com a redução da replicação de HBV e/ou HDV alcançada pelo padrão de tratamento de HBV e/ou HDV administrado de acordo com o padrão de tratamento, ou pode alcançar a mesma redução que a terapia padrão de tratamento em um período de tempo menor, por exemplo, em um mês, dois meses ou três meses, em comparação com a redução alcançada após seis meses de terapia com padrão de trata- mento.
[0183] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um com- posto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para obter uma resposta viral sus- tentada, por exemplo, uma carga de DNA de HBV e/ou HDV não detectá- vel ou substancialmente não detectável (por exemplo, menor que cerca de 25 ou menor que cerca de 15 unidades internacionais por mililitro de soro) encontrada no soro do indivíduo durante um período de ao menos cerca de um mês, de pelo menos cerca de dois meses, de pelo menos cerca de três meses, de pelo menos cerca de quatro meses, de pelo menos cerca de cinco meses ou de pelo menos cerca de seis meses após o término da terapia.
[0184] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode reduzir a carga viral de HBV e/ou de HDV por ao menos cerca de 10%, ao menos cerca de 20%, ao menos cerca de 25%, ao menos cerca de 30%, ao menos cerca de 35%, ao menos cerca de 40%, ao menos cerca de 45%, ao menos cerca de 50%, ao menos cerca de 55%, ao menos cerca de 60%, ao menos cerca de 65%, ao menos cerca de 70%, ao menos cerca de 75% ou ao menos cerca de 80% ou mais, em comparação com a carga viral de um indivíduo tratado com o padrão de tratamento, em um indivíduo não tratado ou em um indivíduo tratado com placebo. São conhecidos métodos de detecção da carga viral de HBV e/ou HDV pelos versados na técnica, e incluem métodos baseados em imunologia, como por exemplo, ensaios imunossorventes ligados à enzima (ELISA), radioimunoensaios e similares, que detectam anticor- pos de HBV e/ou HDV e outros marcadores indicativos da carga viral de HBV e/ou HDV, e combinações dos mesmos.
[0185] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um mé- todo de inibição da atividade do HIV, que pode incluir colocar em contato uma célula infectada com o HIV com uma quantidade eficaz de um com- posto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um método de inibição da atividade do HIV, que pode incluir administrar a um indi- víduo infectado com o HIV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode inibir uma transcriptase reversa viral e, dessa forma, inibir a transcrição do RNA para DNA de HIV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode inibir uma HIV integrase. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode inibir a glicoproteína 120 (gp
120) do envelope viral.
[0186] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir administrar a um indivíduo identificado como sofrendo da infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um com- posto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas re- ferem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por HIV. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exem- plo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) para tratar uma infecção por HIV.
[0187] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma com- posição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um com- posto aqui descrito. Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) na fabri- cação de um medicamento para o tratamento de uma infecção por ou HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o ou HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas re- ferem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito para tratar uma infecção por HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quanti- dade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêu- tica.
[0188] Algumas modalidades aqui reveladas referem-se a um mé- todo de inibição da replicação do HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como por exemplo, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou de uma composição farmacêutica que inclui um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), na fabricação de um medicamento para inibir a replicação do HIV, que pode incluir colocar uma célula infectada com HIV em contato com uma quantidade eficaz do(s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se ao uso de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo), para inibir a replicação do HIV, sendo que o uso inclui colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz do (s) dito(s) composto(s) e/ou da composição farmacêutica.
[0189] Em algumas modalidades aqui descritas, quando a infecção é causada por HIV e/ou o vírus é o HIV, o indivíduo sofre de uma in- fecção oportunista (OI). As OIs se aproveitam dos indivíduos com o sistema imunológico enfraquecido. Em algumas modalidades aqui des- critas, um indivíduo que tem uma contagem de linfócitos T CD4+ menor que cerca de 200 células/mL tem um risco aumentado de desenvolver uma OI. Em algumas modalidades, as OIs ocorrem quando a conta- gem de linfócitos T CD4+ é menor que cerca de 500 células/mL. Em algumas modalidades, uma OI ocorre quando uma carga viral de HIV é maior que cerca de 100.000 cópias/mL. Em algumas modalidades, as cargas virais do HIV e/ou as contagens de linfócitos T CD4+ podem ser determinadas por metodologias convencionais de padrão de trata- mento, por exemplo, através de ensaios de detecção de HIV por imu- noensaio para a detecção de anticorpos de HIV e/ou antígeno p24 de HIV.
[0190] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um mé- todo de tratamento de uma OI relacionada a uma infecção por HIV se- lecionada dentre candidíase, bronquite, pneumonite, esofagite, câncer cervical invasivo, coccidioidomicose, criptococose, criptosporidiose in- testinal crônica, doença do citomegalovírus, encefalopatia, herpes sim- plex, histoplasmose, isosporiose intestinal crônica, sarcoma de Kaposi, linfoma, complexo mycobacterium avium, tuberculose, pneumonia por Pneumocystis carinii, leucoencefalopatia multifocal progressiva, septi- cemia de salmonela, toxoplasmose do cérebro e síndrome de desperdí- cio em um indivíduo que sofre de uma ou mais das condições supraci- tadas, que pode incluir fornecer ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto ou de uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um método para prevenir e/ou tratar uma ou mais OI em um indivíduo com uma infecção por HIV que pode incluir fornecer ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da Fórmula (I) ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo). Também é contemplado um mé- todo para reduzir ou eliminar uma ou mais Ois em um indivíduo que tem uma infecção por HCV fornecendo ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo). Em algumas modalidades, este método pode in- cluir retardar ou interromper a progressão de uma OI. Em outras moda- lidades, o curso da OI pode ser revertido, e a estase ou a melhora da função hepática é contemplada. Em algumas modalidades, um ou mais dentre candidíase, bronquite, pneumonite, esofagite, câncer cervical in- vasivo, coccidioidomicose, criptococose, criptosporidiose intestinal crô- nica, doença do citomegalovírus, encefalopatia, herpes simplex, histo- plasmose, isosporiose intestinal crônica, sarcoma de Kaposi, linfoma, complexo mycobacterium avium, tuberculose, pneumonia por Pneumo- cystis carinii, leucoencefalopatia multifocal progressiva, septicemia de salmonela, toxoplasmose do cérebro e síndrome de desperdício podem ser tratados mediante o contato de uma célula infectada com HIV com uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo).
[0191] Dois tipos de HIV foram caracterizados: HIV-1 e HIV-2. O HIV- 1 é mais virulento e mais infeccioso, e tem uma prevalência global, en- quanto o HIV-2 é menos virulento e é geograficamente limitado. Em algu- mas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto da Fór-
mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser efi- caz para tratar o HIV-1. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, pode ser eficaz para tratar o HIV-2. Em algumas modali- dades, um composto aqui descrito (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) pode ser eficaz para tratar os dois genótipos de HIV (HIV-1 e HIV-2).
[0192] Vários indicadores para determinar a eficácia de um método para tratar uma infecção por HIV são conhecidos pelos versados na téc- nica. Exemplos de indicadores adequados incluem, mas não se limitam, a uma redução na carga viral, uma redução na carga viral plasmática, um aumento da contagem de linfócitos T CD4+, uma redução na repli- cação viral, uma redução no tempo de seroconversão (vírus indetectá- vel no soro do paciente), um aumento da taxa de resposta viral susten- tada por terapia, uma redução da morbidade ou mortalidade nos resul- tados clínicos e/ou uma redução na taxa de infecções oportunistas. De modo similar, a terapia bem-sucedida com uma quantidade eficaz de um composto ou uma composição farmacêutica aqui descrita (por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) pode reduzir a incidência de infecções oportunis- tas em indivíduos infectados com HIV.
[0193] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir os títulos virais de HCV a níveis indetectáveis, por exemplo, até cerca de 10 a cerca de 50 ou até cerca de 15 a cerca de 25 unidades internacionais/mL de soro, ou até menos de cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para reduzir a carga viral de HIV em compara- ção com a carga viral de HIV antes de fornecer o composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas mo- dalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser uma quanti- dade que é eficaz para reduzir a carga viral de HIV para menos que cerca de 20 unidades internacionais/mL de soro. Em algumas modali- dades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para alcançar uma redução no título viral de HIV no soro do indivíduo na faixa de uma redução de cerca de 1,5-log a cerca de 2,5- log, uma redução de cerca de 3-log a cerca de 4-log, ou uma redução maior que cerca de 5-log em comparação com a carga viral antes do fornecimento do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo. Por exemplo, a carga viral do HIV pode ser medida antes do fornecimento do composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e novamente após a con- clusão do regime de tratamento com o composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo (por exemplo, 1 mês após a conclusão).
[0194] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para aumentar as contagens de linfócitos T CD4+ de menos que cerca de 200 células/mL até mais que cerca de 1.200 células/mL. Em algumas modalidades, uma quan- tidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para au- mentar as contagens de linfócitos T CD4+ de menos que cerca de 200 células/mL até mais que cerca de 500 células/mL.
[0195] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em ao menos 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100 vezes ou mais reduções na replicação do vírus da imunodeficiência humana em relação aos níveis de pré-tratamento em um indivíduo, conforme determinado após a conclusão do regime de tratamento (por exemplo, 1 mês após a con- clusão). Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação do vírus da imunodeficiência humana em rela- ção aos níveis de pré-tratamento na faixa de cerca de 2 a cerca de 5 vezes, de cerca de 10 a cerca de 20 vezes, de cerca de 15 a cerca de 40 vezes ou de cerca de 50 a cerca de 100 vezes. Em algumas moda- lidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode resultar em uma redução da replicação do vírus da imunodeficiência humana na faixa de 1 a 1,5 log, 1,5 log a 2 log, 2 log a 2,5 log, 2,5 a 3 log, 3 log a 3,5 log ou 3,5 log a 4 log a mais de redução da replicação do vírus da imunodeficiência humana em comparação com a redução da redução do vírus da imunodeficiência humana alcançada pela terapia do padrão de tratamento, como a tera- pia incluindo ritonavir em combinação com etravirina, ou pode alcançar a mesma redução que a terapia de padrão de tratamento em um perí- odo de tempo menor, por exemplo, em um mês, dois meses ou três meses, em comparação com a redução alcançada após seis meses de terapia de padrão de tratamento.
[0196] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é uma quantidade que é eficaz para obter uma resposta viral sustentada, por exemplo, RNA de HIV não detectável ou substancial- mente não detectável (por exemplo, menos de cerca de 25 ou menos de cerca de 15 unidades internacionais por mililitro de soro) encontrado no soro do indivíduo durante um período de ao menos cerca de um mês, de pelo menos cerca de dois meses, de pelo menos cerca de três me- ses, de pelo menos cerca de quatro meses, de pelo menos cerca de cinco meses ou de pelo menos cerca de seis meses após o término da terapia.
[0197] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um com- posto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode reduzir a carga viral de HIV por ao menos cerca de 10%, ao menos cerca de 20%, ao menos cerca de 25%, ao menos cerca de 30%, ao menos cerca de 35%, ao menos cerca de 40%, ao menos cerca de 45%, ao menos cerca de 50%, ao menos cerca de 55%, ao menos cerca de 60%, ao menos cerca de 65%, ao menos cerca de 70%, ao menos cerca de 75% ou ao menos cerca de 80% ou mais, em comparação com a carga viral em um indivíduo não tratado, ou um indivíduo tratado com placebo. Métodos de detecção da carga viral do HIV são conhecidos pelos versados na técnica e incluem métodos baseados em imunologia, como por exemplo, ensaios imunossorventes ligados à enzima (ELISA), ra- dioimunoensaios, e similares, que detectam anticorpos para HIV-1 e/ou HIV-2, antígeno p24 de HIV-1 e outros marcadores indicativos de carga viral do HIV, e combinações dos mesmos.
[0198] Os indivíduos que são clinicamente diagnosticados com in- fecção por HBV, HDV e/ou HIV incluem indivíduos "naive" (por exem- plo, indivíduos que não foram previamente tratados para HBV, HDV e/ou HIV, particularmente aqueles que não receberam previamente ART para HIV, incluindo terapia à base de ritonavir) e indivíduos que não tiveram sucesso no tratamento prévio de HBV, HDV e/ou HIV (in- divíduos com "tratamento falho"). Os indivíduos que falharam ao trata- mento incluem os "não responsivos" (para HIV, estes são indivíduos nos quais o título do HIV não foi significativamente ou suficientemente reduzido por um tratamento anterior para HIV (≤ 0,5 log de UI/mL)), como por exemplo, uma TÉCNICA anterior, incluindo ritonavir ou outra terapia; e "recidivantes" (para HIV, indivíduos que foram previamente tratados com HIV, por exemplo, que receberam uma TÉCNICA anterior cujo título de HIV diminuiu e, posteriormente, voltou a aumentar). Exemplos adicionais de indivíduos incluem indivíduos com uma infec- ção aguda por HBV e/ou HDV, indivíduos com infecção crônica por HBV e/ou HDV, e indivíduos que são assintomáticos.
[0199] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado a um indivíduo com tratamento falho que sofre de HBV, HDV e/ou HIV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo não responsivo que sofre de HBV, HDV e/ou HIV. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo recidivante sofrendo de HBV, HDV e/ou HIV. Em algumas modalidades, o indivíduo pode ser assinto- mático, por exemplo, o indivíduo pode ser infectado com HBV e/ou HDV, mas não apresenta quaisquer sintomas da infecção viral. Em algumas modalidades, o indivíduo pode estar imunocomprometido. Em algumas modalidades, o indivíduo está sofrendo com ao menos um dentre o HIV, HBV e/ou HDV.
[0200] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo sofrendo de HBV e/ou HDV cronicamente. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo que está sofrendo de HBV e/ou HDV cronicamente.
[0201] Após um período de tempo, os agentes infecciosos podem desenvolver resistência a um ou mais agentes terapêuticos. O termo
"resistência", como usado aqui, refere-se a uma cepa viral que apre- senta uma resposta atrasada, retardada e/ou nula a um agente(s) te- rapêutico(s). Em alguns casos, o vírus às vezes muta ou produz varia- ções que são resistentes ou parcialmente resistentes a certos fárma- cos. Por exemplo, após o tratamento com um agente antiviral, a carga viral de um indivíduo infectado com um vírus resistente pode ser redu- zida para um grau menor em comparação à quantidade na redução da carga viral apresentada por um indivíduo infectado com uma cepa não resistente. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo infectado com uma cepa de HBV e/ou HDV que é resis- tente a um ou mais agentes anti-HBV e/ou anti-HDV diferentes (por exemplo, um agente usado em um padrão de tratamento convencio- nal). Em algumas modalidades, o desenvolvimento de cepas de HBV e/ou HDV resistentes é retardado quando um indivíduo é tratado com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em comparação com o desenvolvimento de cepas de HBV e/ou HDV resistentes a outros fármacos para HBV e/ou HDV (como um agente usado em um padrão de tratamento convencional). Em algu- mas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo infec- tado com uma cepa de HIV que é resistente a um ou mais agentes anti- HIV diferentes (por exemplo, um agente usado em um padrão de tra- tamento convencional). Em algumas modalidades, o desenvolvimento de cepas de HIV resistentes é retardado quando um indivíduo é tratado com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, em comparação com o desenvolvimento de cepas de HIV resistentes a outros fármacos de HIV (como um agente usado em um padrão de tratamento convencional).
[0202] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrada a um indivíduo para o qual outros me- dicamentos anti-HBV, anti-HDV e/ou anti-HIV são contraindicados. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser fornecido a um indivíduo que é hipersensível a um agente antiviral.
[0203] Alguns indivíduos sendo tratados para HBV, HDV e/ou HIV experimentam um rebote da carga viral. O termo "rebote de carga viral", como usado aqui, refere-se a um aumento sustentado da carga viral (como ≥ 0,5 log UI/Ml para HIV) acima do nadir antes do final do trata- mento. Para o HIV, o nadir é uma diminuição de ≥0,5 log UI/mL a partir da linha de base. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser adminis- trado a um indivíduo que experimenta um rebote da carga viral, ou pode impedir tal rebote da carga viral quando usado para tratar o indivíduo.
[0204] O padrão de cuidado para tratar HBV, HDV e HIV tem sido associado a vários efeitos colaterais (também chamados de efeitos ad- versos). Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode diminuir o número e/ou a gravidade dos efeitos colaterais observados nos indivíduos sendo tra- tados com o padrão de tratamento para um vírus específico, como HBV, HDV e HIV. Exemplos de efeitos colaterais para um indivíduo sendo tra- tado com HBV e/ou HDV incluem, mas não se limitam a, dispepsia, neu- ropatia, tosse, perda de apetite, acidose lática, lipodistrofia, diarreia, fa- diga, insônia, erupção cutânea, febre, mal-estar, taquicardia, calafrios, enxaqueca, artralgias, mialgias, apatia, náusea, vômito, alterações cog- nitivas, astenia e sonolência. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode di- minuir o número e/ou a gravidade dos efeitos colaterais. Por exemplo, o número e/ou a gravidade dos efeitos colaterais observados em indivíduos com HIV sendo tratados com uma TÉCNICA de acordo com o padrão de tratamento. Exemplos de efeitos colaterais de um indivíduo sendo tratado com HIV incluem, mas não se limitam a, perda de apetite, lipodistrofia, diarreia, fadiga, níveis de colesterol e triglicerídeos elevados, erupção cu- tânea, insônia, febre, mal-estar, taquicardia, calafrios, enxaqueca, artral- gias, mialgias, apatia, náusea, vômito, alterações cognitivas, astenia, so- nolência, falta de iniciativa, irritabilidade, confusão, depressão, depres- são grave, ideação suicida, anemia, baixa contagem de leucócitos e adel- gaçamento dos cabelos. Em algumas modalidades, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser for- necido a um indivíduo que interrompeu uma terapia para HBV, HDV e/ou HIV devido a um ou mais efeitos adversos ou efeitos colaterais associa- dos a um ou mais agentes de HBV, HDV e/ou HIV (por exemplo, um agente usado em um padrão de tratamento convencional).
[0205] A Tabela 1 fornece algumas modalidades dos aprimoramen- tos percentuais obtidos com o uso de um composto da fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em comparação com o padrão de tratamento para HBV, HDV e/ou HIV. Os exemplos incluem o seguinte: em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, resulta em uma porcen- tagem de não responsivos que é 10% menor que a porcentagem de não responsivos que recebem o padrão de tratamento. Em algumas moda- lidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, resulta em uma série de efeitos colaterais que está na faixa de cerca de 10% a cerca de 30% menos em comparação com o número de efeitos colaterais experimentados por um indivíduo que recebe o padrão de tratamento; e em algumas modalidades, um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, resulta em uma gravidade de um efeito colateral (como um dos aqui descritos) que é 25% menor em comparação com a gravidade do mesmo efeito colateral experimentado por um indivíduo que recebe o padrão de tratamento. Os métodos para quantificar a gravidade de um efeito colateral são conhecidos pelos versados na técnica. Tabela 1 Porcentagem de não responde- Porcentagem de recupera- Número de efeitos cola- Gravidade dos efei- Porcentagem de recidivas Porcentagem de resistência dores ção da carga viral terais tos secundários 10% menor 10% menor 10% menor 10% menor 10% menor 10% menor 25% menor 25% menor 25% menor 25% menor 25% menor 25% menor 40% menor 40% menor 40% menor 40% menor 40% menor 40% menor 50% menor 50% menor 50% menor 50% menor 50% menor 50% menor 60% menor 60% menor 60% menor 60% menor 60% menor 60% menor 70% menor 70% menor 70% menor 70% menor 70% menor 70% menor 80% menor 80% menor 80% menor 80% menor 80% menor 80% menor 90% menor 90% menor 90% menor 90% menor 90% menor 90% menor cerca de 10% a cerca de 30% cerca de 10% a cerca de 30% cerca de 10% a cerca de 30% cerca de 10% a cerca de cerca de 10% a cerca de cerca de 10% a menor menor menor 30% menor 30% menor cerca de 30% menor cerca de 20% a cerca de 50% cerca de 20% a cerca de 50% cerca de 20% a cerca de 50% cerca de 20% a cerca de cerca de 20% a cerca de cerca de 20% a menor menor menor 50% menor 50% menor cerca de 50% menor cerca de 30% a cerca de 70% cerca de 30% a cerca de 70% cerca de 30% a cerca de 70% cerca de 30% a cerca de cerca de 30% a cerca de cerca de 30% a menor menor menor 70% menor 70% menor cerca de 70% menor cerca de 20% a cerca de 80% cerca de 20% a cerca de 80% cerca de 20% a cerca de 80% cerca de 20% a cerca de cerca de 20% a cerca de cerca de 20% a menor menor menor 80% menor 80% menor cerca de 80% menor
[0206] Conforme usado no presente documento, um "indivíduo" re- fere-se a um animal que é o objeto de tratamento, observação ou expe- rimento. "Animal" inclui vertebrados e invertebrados de sangue frio ou quente, como peixe, crustáceos, répteis e, em particular, mamíferos. "Ma- mífero" inclui, sem limitações, camundongos, ratos, coelhos, porquinhos da índia, cachorros, gatos, ovelha, cabras, vacas, cavalos, primatas, como macacos, chimpanzés e bugios e, em particular, seres humanos. Em algumas modalidades, o indivíduo é um ser humano.
[0207] Conforme usado aqui, os termos "tratar", "tratamento", "tera- pêutico" ou "terapia" não significam necessariamente cura total ou supres- são da doença ou condição. Qualquer alívio de sinais indesejados ou sin- tomas de uma doença ou afecção, a qualquer extensão pode ser conside- rada tratamento e/ou terapia. Ademais, o tratamento pode incluir ações que podem piorar a sensação geral do paciente de bem-estar ou aparên- cia.
[0208] Os termos "quantidade terapeuticamente eficaz" e "quanti- dade eficaz" são usados para indicar uma quantidade de um composto ativo, ou agente farmacêutico, que suscita a resposta biológica ou medi- cina indicada. Por exemplo, uma quantidade eficaz do composto pode ser a quantidade necessária para prevenir, aliviar ou melhorar os sinto- mas da doença ou prolongar a sobrevida do indivíduo sendo tratado. Esta resposta pode ocorrer em um tecido, sistema, animal ou ser humano, e inclui alívio dos sinais ou sintomas da doença sendo tratada. A determi- nação de uma quantidade eficaz é bem dentro da capacidade dos versa- dos na técnica, em vista da revelação fornecida no presente documento. A quantidade eficaz dos compostos revelados no presente documento exigida como uma dose irá depender da via de administração, do tipo de animal, incluindo ser humano, que é tratado, e das características físicas do animal específico em consideração. A dose pode ser adaptada para alcançar um efeito desejado, porém, irá depender de tais fatores como peso, dieta, medicamentos concomitantes e outros fatores que os versa- dos na técnica medicinal irão reconhecer.
[0209] Conforme será prontamente evidente ao versado na técnica, a dosagem in vivo útil a ser administrada e o modo particular de admi- nistração irão variar dependendo da idade, do peso, da severidade da doença e da espécie de mamífero tratada, dos compostos específicos empregados, e do usar específico para o qual estes compostos são em- pregados. A determinação dos níveis de dose eficaz, ou seja, os teores de dosagem necessários para se obter o resultado desejado, podem ser obtidos por um versado na técnica com o uso de métodos de rotina, por exemplo, testes clínicos em seres humanos e estudos in vitro.
[0210] A dosagem pode variar amplamente, dependendo dos efei- tos desejados e da indicação terapêutica. Alternativamente, as dosa- gens podem ser baseadas e calculadas na área superficial do paciente, conforme compreendido pelos versados na técnica. Embora a dosa- gem exata seja determinada com base no fármaco individual, na mai-
oria dos casos, algumas generalizações relacionadas à dosagem po- dem ser feitas. O regime de dosagem diário para um paciente adulto humano pode ser, por exemplo, uma dose oral de entre 0,01 mg e 3000 mg de cada ingrediente ativo, de preferência, entre 1 mg e 700 mg, por exemplo, 5 a 200 mg. A dosagem pode ser uma única dose ou uma série de duas ou mais dadas ao longo de um ou mais dias, conforme necessário pelo indivíduo. Em algumas modalidades, os compostos serão administrados por um período de terapia contínua, por exemplo, por uma semana ou mais, ou por meses ou anos. Em algumas moda- lidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado menos frequentemente em comparação com a frequência de administração de um agente com o padrão de tratamento. Em algumas modalidades, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado uma vez ao dia. Por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser admi- nistrado uma vez ao dia a um indivíduo que sofre de uma infecção por HIV. Em algumas modalidades, o tempo total do regime de tratamento com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, pode ser menor em comparação com o tempo total do regime de tratamento com o padrão de tratamento.
[0211] Em casos nos quais dosagens humanas para os compostos foram estabelecidas para ao menos algumas condições, as mesmas dosagens podem ser usadas, ou dosagens entre cerca de 0,1% e 500%, com mais preferência, entre cerca de 25% e 250% da dosagem estabelecida para seres humanos. Onde nenhuma dosagem é estabe- lecida para seres humanos, conforme será o caso para composições farmacêuticas recém-descobertas, uma dosagem humana adequada pode ser inferida dos valores de ED50 ou de ID50, ou de outros valores adequados derivados de estudos in vitro ou in vivo, conforme qualifi- cados por estudos de toxicidade e estudos de eficácia em animais.
[0212] Em casos de administração de um sal farmaceuticamente aceitável, as dosagens podem ser calculadas como a base livre. Con- forme será compreendido pelos versados na técnica, em certos casos, pode ser necessário administrar os compostos aqui revelados em quan- tidades que ultrapassam, ou mesmo ultrapassam muito, a faixa de dosa- gem preferida declarada acima, de modo a tratar eficazmente e agressi- vamente doenças ou infecções particularmente agressivas.
[0213] A quantidade e o intervalo das dosagens podem ser ajusta- dos individualmente para fornecer níveis plasmáticos da porção ativa que são suficientes para manter os efeitos de modulação, ou a concen- tração mínima eficaz (MEC). A concentração mínima eficaz irá variar para cada composto, mas pode ser estimada a partir de dados in vitro. As dosagens necessárias para se obter a concentração mínima eficaz dependerão das características individuais e da via de administração. Entretanto, ensaios de HPLC ou bioensaios podem ser usados para de- terminar as concentrações plasmáticas. Os intervalos de dosagem po- dem também ser determinados com o uso do valor da concentração mí- nima eficaz. As composições devem ser administradas com o uso de um regime que mantém os níveis plasmáticos acima da concentração mínima eficaz por 10 a 90% do tempo, de preferência entre 30 a 90% e, com a máxima preferência, entre 50 a 90%. Em casos de administração local ou absorção seletiva, a concentração local eficaz do fármaco pode não estar relacionada à concentração plasmática.
[0214] Deve ser observado que o médico responsável deve saber como e quando terminar, interromper, ou ajustar a administração devido à toxicidade ou a disfunções de órgãos. De modo contrário, o médico responsável também saberia ajustar o tratamento para níveis maiores se a resposta clínica não fosse adequada (excluindo toxicidade). A mag- nitude de uma dose administrada no manejo do distúrbio de interesse variará com a severidade da condição a ser tratada e com a via de ad- ministração. A severidade da condição pode, por exemplo, ser avaliada, em parte, por métodos de avaliação prognóstica padrão. Adicional- mente, a dose e talvez a frequência da dosagem, também irão variar de acordo com a idade, o peso corporal, e a resposta do paciente indivi- dual. Um programa comparável ao discutido acima pode ser usado na medicina veterinária.
[0215] Os compostos aqui revelados podem ser avaliados para a eficácia e toxicidade com o uso de métodos conhecidos. Por exemplo, a toxicologia de um composto específico, ou de um subconjunto de compostos que partilham certas porções químicas, pode ser estabele- cida pela determinação da toxicidade in vitro para uma linhagem de células, como uma linhagem de células de mamífero, e de preferência, humana. Os resultados destes estudos são frequentemente preditivos da toxicidade em animais, como mamíferos, ou, mais especificamente, seres humanos. Alternativamente, a toxicidade de compostos especí- ficos em um modelo animal, como camundongos, ratos, coelhos, ou macacos, pode ser determinada com o uso de métodos conhecidos. A eficácia de um composto específico pode ser estabelecida com o uso de vários métodos reconhecidos, como métodos in vitro, modelos ani- mais, ou testes clínicos em seres humanos. Quando se seleciona um modelo para determinar a eficácia, o versado na técnica pode ser gui- ado pelo estado da técnica para escolher um modelo, uma dose, uma via de administração e/ou um regime adequado. Terapias de combinação
[0216] Em algumas modalidades, os compostos aqui descritos, como um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei-
tável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um com- posto aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, podem ser usados em combinação com um ou mais agente(s) adicio- nal(is). Exemplos de agentes adicionais que podem ser usados em com- binação com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, podem ser agentes atualmente usados em um padrão conven- cional de tratamento para o tratamento de HIV, HBV e/ou HDV. Em al- gumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, pode ser usado com um, dois, três ou mais agentes adicionais aqui descritos.
[0217] Em algumas modalidades, quando a infecção é causada por HBV, HBV e/ou HIV, o agente terapêutico adicional pode ser um agente de terapia antirretroviral (ART) como um inibidor da transcriptase re- versa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da polimerase, um inibidor da protease (PI), um inibidor de fusão/entrada, um interferon, um inibidor de maturação viral, um modulador de montagem de capsí- deo, um agonista do FXR, um inibidor do TNF/ciclofilina, um agonista de TLR, uma vacina, um inibidor de siRNA ou de DNA circular covalen- temente fechado ASO (cccDNA), um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor da secreção de antígeno de superfície (sAg) (por exemplo, HBsAg), outro composto antiviral contra HBV, outro com- posto antiviral contra HDV e/ou outro composto antiviral contra HIV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0218] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com (um) agente(s) atualmente usado(s) em um padrão de terapia de tratamento convencional. Por exemplo, para o tratamento de HBV e/ou HDV, um composto revelado na presente invenção pode ser usado em combinação com uma terapia de interferon.
[0219] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farma- cêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ser substituído por um agente atual- mente usado em um padrão convencional de terapia de tratamento. Por exemplo, para o tratamento de HIV, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farma- cêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ser usado no lugar de um inibidor ART convencional.
[0220] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN). Em algumas modalidades, o ITRNN pode inibir uma transcriptase reversa do HBV e/ou do HDV. Exemplos de ITRNNs adequados incluem, mas não se limitam a, delavirdina (Rescriptor ®), efavirenz (Sustiva ®), etravi- rina (Intelence®), nevirapina (Viramune ®), rilpivirina (Edurant ®), doravi- rina e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anterior- mente mencionados, e/ou uma combinação dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de ITRNNs inclui os compostos numerados de 1001 a 1006 na Figura 1.
[0221] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN). Em al- gumas modalidades, o ITRN pode inibir uma transcriptase reversa de HBV e/ou HDV. Exemplos de ITRNs adequados incluem, mas não se limitam a, abacavir (Ziagen®), adefovir (Hepsera®), andoxovir, apricita- bina, censavudina, didanosina (Videx®), elvucitabina, emtricitabina (Emtriva®), entecavir (Baraclude®), lamivudina (Epivir®), racivir, estam- pidina, estavudina (Zerit®), tenofovir desoproxila (incluindo Viread®), te- nofovir alafenamida, zalcitabina (Hivid®), zidovudina (Retrovir®) e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente men- cionados, e/ou uma combinação dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de ITRNs inclui os compostos numerados de 2001 a 2017 na Figura 2.
[0222] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farma- cêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um ini- bidor de protease. Em algumas modalidades, o inibidor de protease pode inibir uma protease de HBV e/ou HDV, por exemplo, NS3/4A. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de protease inclui os seguintes: amprenavir (Agenerase®), asunaprevir (Sunvepra®), atazanavir (Reya- taz®), boceprevir (Victrelis®), darunavir (Prezista®) e fosamprenavir (Le- xiva®; Telzir®), grazoprevir, indinavir (Crixivan®), lopinavir (Kaletra®), nel- finavir (Viracept®), ritonavir (Norvir®), saquinavir (Fortovase®; Invirase®), simeprevir (Olysio®), telaprevir (Incivek®), danoprevir, tipranavir (Apti- vus®), ABT-450 (paritaprevir), BILN-2061 (ciluprevir), BI-201335 (faldapre- vir), GS-9256, vedroprevir (GS-9451), IDX-320, ACH-1625 (sovaprevir),
ACH-2684 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos ante- riormente mencionados e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não li- mitadora de exemplos de inibidores de protease inclui os compostos nu- merados de 3001 a 3010 na Figura 3A e 3011 a 3023 na Figura 3B.
[0223] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farma- cêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um ini- bidor de fusão/entrada de HIV. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada de HIV podem impedir que o HIV entre nos linfócitos T CD4+. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada, que tam- bém são conhecidos como antagonistas de CCR5, podem bloquear as proteínas nas células de linfócitos T CD4+ que são necessárias para a entrada celular do HIV. Exemplos de inibidores de fusão/entrada adequa- dos incluem, mas não se limitam a, enfuvirtida (Fuzeon®), maraviroc (Sel- zentry®), vicriviroc, cenicriviroc, fostemsavir, ibalizumabe, PRO 140 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencio- nados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exem- plos de inibidores de fusão/entrada de HIV inclui os compostos numerados de 4001 a 4007 na Figura 4A.
[0224] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farma- cêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um ini- bidor de fusão/entrada de HBV e/ou de HDV. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada podem impedir que o HBV e/ou HDV entrem nos hepatócitos. Em algumas modalidades, os inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV podem bloquear proteínas nos hepatócitos que são ne- cessárias para a entrada celular de HBV e/ou HDV. Em algumas modali- dades, os inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV podem se ligar aos polipeptídeos cotransportadores de taurocolato de sódio. Exemplos de inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV adequados incluem, mas não se limitam a, mircludex B, ciclosporina A, ezetimibe e SCYX1454139, HBIG, Ma18/7, KR127, 17.1.41/19,79,5, heparina, suramina, SALP, deri- vados de ácido taurocólico e sais farmaceuticamente aceitáveis de qual- quer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de fusão/entrada de HBV e/ou HDV inclui os compostos numerados de 4008 a 4019 na Figura 4B.
[0225] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de transferência da fita de integrase do HIV (INSTI). Em algu- mas modalidades, o INSTI pode bloquear a integrase do HIV. Exemplos de INSTIs incluem, mas não se limitam a, dolutegravir (Tivicay®), elvi- tegravir (Strivild®; Vitekta®), raltegravir (Isentress®), BI 224436, glo- boidnan A, cabotegravir, bictegravir, MK-2048 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou uma combinação dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de ini- bidores de INSTIs de HIV inclui os compostos numerados de 5001 a 5008 na Figura 5.
[0226] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com outros compostos antivirais. Exemplos de outros compostos antivirais incluem, mas não se limitam a, bevirimat, BIT225, calanolida A, hidroxi- carbamida, miltefosina, seliciclibe, cianovirina-N, grifitsina, scitovirina, BCX4430, favipiravir, GS-5734, mericitabina, MK-608 (7-deaza-2'-C-
metiladenosina), NITD008, moroxidina, ribavirina, taribavirina, triazavi- rina, ARB-1467, ARB-1740, ARC-520, ARC-521, ALN-HBV, TG1050, Tre recombinase, AT-61, AT-130, BCX4430, favipiravir, umifenovir, brin- cidofovir, FGI-104, LJ-001, FGI-106, e sais farmaceuticamente aceitá- veis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combina- ções dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de outros com- postos antivirais inclui os compostos numerados de 6001 a 6010 na Fi- gura 6A e 6011 a 6033 na Figura 6B. Exemplos adicionais de outros compostos antivirais incluem, mas não se limitam a, uma abzima, uma enzima, uma proteína ou um anticorpo. Exemplos adicionais de outros compostos antivirais incluem, mas não se limitam a, cerageninas, inclu- indo CSA-54, diarilpirimidinas, intensificadores sinérgicos, fatores de transcrição da proteína dedo de zinco, e sais farmaceuticamente acei- táveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combina- ções dos mesmos.
[0227] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor da maturação viral. Em algumas modalidades, o inibidor de ma- turação viral pode inibir a maturação de HBV e/ou HDV. Exemplos de inibidores de maturação viral incluem, mas não se limitam a, bevimirat, BMS-955176, MPC-9055 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qual- quer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mes- mos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de maturação viral; inclui os compostos numerados de 7001 a 7003 na Figura 7.
[0228] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um modulador de montagem de capsídeo. Em algumas modalidades, o mo- dulador de montagem de capsídeo pode estabilizar o capsídeo. Em al- gumas modalidades, o modulador de montagem de capsídeo pode pro- mover o excesso de montagem de capsídeo. Em algumas modalidades, o modulador de montagem de capsídeo pode induzir a formação capsí- dicos de peptídeos de capsídeo. Em algumas modalidades, o modula- dor de conjunto de capsídeo pode direcionar de maneira errada a mon- tagem de capsídeo (por exemplo, diminuindo a estabilidade do capsí- deo). Em algumas modalidades, o modulador de montagem de capsí- deo pode se ligar à proteína de núcleo de HBV e/ou HDV. Exemplos de moduladores de montagem de capsídeo incluem, mas não se limitam a, NVR-3-778, AB-423, GLS-4, Bayer 41-4109, HAP-1, AT-1 e sais farma- ceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente menciona- dos, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exem- plos de moduladores de montagem de capsídeo inclui os compostos numerados de 8001 a8006 na Figura 8.
[0229] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um agonista do FXR. Exemplos de agonistas do FXR incluem, mas não se limitam a(o): ácido quenodesoxicólico; ácido cólico; ácido obeticólico, ácido ursodesoxicólico; fexaramina; ; ;
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, e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente menci- onados, e/ou combinações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de agonistas do FXR adicionais inclui os compostos numera- dos de 9001 a 9006 na Figura 9.
[0230] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor do TNF/ciclofilina. Exemplos de inibidores de TNF/ciclofilina in- cluem, mas não se limitam, ao infliximabe (Remicade®), adalimumabe (Humira®), certolizumabe pegol (Cimzia®), golimumabe (Simponi®), eta- nercepte (Enbrel®), talidomida (Immunoprin®), lenalidomida (Revlimid®), pomalidomida (Pomalyst®, Imnovid®), ciclosporina A, NIM811, Alisporivir (DEB-025), SCY-635, DEB-064, CRV-431, e sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combi- nações dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de TNF/ciclofilina inclui os compostos numerados de 10001 a 10014 na Figura 10.
[0231] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um agonista do TLR. Exemplos de agonistas do TLR incluem, mas não se limitam a, GS-9620, ARB-1598, ANA-975, RG-7795 (ANA-773), MEDI-9197, PF-3512676, IMO-2055, isatoribina, tremelimumabe, SM360320, AZD-8848 e sais farmaceuticamente aceitáveis de qual- quer um dos anteriormente mencionados, e/ou combinações dos mes- mos. Uma lista não limitadora de exemplos de agonistas do TLR inclui os compostos numerados de 11001 a 11013 na Figura 11.
[0232] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de polimerase. Exemplos de inibidores de polimerase incluem, mas não se limitam a, telbivudina, beclabuvir, dasabuvir, deleobuvir, fi- libuvir, setrobuvir, sofosbuvir, radalbuvir, RG7128 (mericitabina), PSI- 7851, INX-189, PSI-352938, PSI-661, GS-6620, IDX-184, TMC649128, setrobuvir, lomibuvir, nesbuvir, GS-9190 (tegobuvir), VX-497 (merime- podib), ribavirina, aciclovir, atevirapina, famciclovir, valaciclovir, ganci- clovir, valganciclovir, cidofovir, JK-05 e sais farmaceuticamente aceitá- veis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combina- ções dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de inibidores de polimerase inclui os compostos numerados de 12001 a 12030 na Figura 12.
[0233] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com uma vacina. Exemplos de vacinas incluem, mas não se limitam, ao Heplislav®, ABX-203, INO-1800 e sais farmaceuticamente aceitá- veis de qualquer um dos anteriormente mencionados, e/ou combina- ções dos mesmos. Uma lista não limitadora de exemplos de vacinas inclui aqueles numerados de 13001 a 13003 na Figura 13.
[0234] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um interferon. Exemplos de interferons incluem, mas não se limi- tam, aos alfa-interferons, beta-interferons, delta-interferons, ômega-in- terferons, tau-interferons, x-interferons, interferons de consenso e asi- alo-interferons. Exemplos não limitadores específicos incluem interfe- ron alfa 1A, interferon alfa 1B, interferon alfa 2A, interferon alfa 2B, interferon alfa 2a peguilado (PEGASYS®, Roche), interferon alfa 2a recombinante (ROFERON®, Roche), interferon alfa 2b inalado (AERX®, Aradigm), interferon alfa 2b peguilado (ALBUFERON®, Hu- man Genome Sciences/Novartis, PEGINTRON®, Schering), interferon alfa 2b recombinante (INTRON A®, Schering), interferon alfa 2b pegui- lado (PEG-INTRON®, Schering, VIRAFERONPEG®, Schering), inter- feron beta-1a (REBIF®, Serono, Inc. e Pfizer), e interferon alfa de con- senso (INFERGEN®, Valeant Pharmaceutical).
[0235] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de cccDNA ASO ou siRNA. Em algumas modalidades, o inibidor de cccDNA ASO ou siRNA pode evitar a formação de cccDNA, eliminar o cccDNA existente, desestabilizar o cccDNA existente e/ou silenciar a transcrição de cccDNA.
[0236] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um agente de silenciamento de gene. Em algumas modalidades, o agente de silenciamento de gene diminui a transcrição de um ou mais genes- alvo. Em algumas modalidades, o agente de silenciamento de gene di- minui a tradução de um ou mais genes-alvo. Em algumas modalidades, o agente de silenciamento de gene pode ser um oligodesoxinucleotídeo, uma ribozima, siRNA, um morfolino ou uma combinação de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0237] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição far- macêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de HBx. HBx é um polipeptídeo codificado por hepadnavírus que contribui para a infecciosidade viral. Em algumas modalidades, o inibi- dor de HBx diminui a atividade de transativação do HBx. Em algumas modalidades, o inibidor de HBx bloqueia ou diminui a ligação de HBx a proteínas celulares de mamíferos. Em algumas modalidades, o inibidor de HBx diminui os blocos de HBx ou diminui o recrutamento de quina- ses.
[0238] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de secreção de HBsAg. Os antígenos de superfície HBV e HDV são as proteínas encontradas nas novas partículas de HBV e nas partículas subvirais. As partículas subvirais são não infec- ciosas e são secretadas em excesso significativo em relação ao vírus infeccioso, potencialmente esgotando o sistema imunológico de um in- divíduo. Em algumas modalidades, o inibidor da secreção de HBsAg pode reduzir a exaustão imunológica de um indivíduo devido ao antí- geno de superfície. Em algumas modalidades, o inibidor da secreção de HBsAg pode promover a resposta imunológica de um indivíduo ao HBV e/ou HDV.
[0239] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um inibidor de DNA circular covalentemente fechado (cccDNA). Em algumas modalidades, o inibidor de cccDNA pode se ligar direta- mente ao cccDNA, pode inibir a conversão de DNA circular relaxado (rcDNA) para cccDNA, pode reduzir ou silenciar a transcrição de cccDNA e/ou pode promover a eliminação do cccDNA existente.
[0240] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado em combinação com um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, descrito na publicação PCT n° WO 2017/156262, de- positada em 9 de março de 2017.
[0241] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com infecção por HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agen- tes adicionais, como aqueles aqui descritos. Outras modalidades aqui des- critas referem-se-se a um método de tratamento de uma infecção por HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre com a in- fecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combina- ção com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos.
Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se a um método de ini- bição da replicação de um HBV e/ou HDV que pode incluir colocar uma célula infectada com HBV e/ou HDV em contato com uma quantidade efi- caz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas referem- se a um método de inibição da replicação de um HBV e/ou HDV que pode incluir administrar a um indivíduo infectado com o HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Exemplos de agentes adicionais incluem aqueles aqui descritos, como um inibidor de polimerase, um inibi- dor de protease (PI), um inibidor de fusão/entrada, um interferon, um ago- nista do FXR, um agonista do TLR, um inibidor de maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um inibidor de TNF/ciclofilina, uma vacina, um siRNA ou inibidor de cccDNA ASO, um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor de secreção de HBsAg e outro com- posto antiviral, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0242] Algumas modalidades aqui descritas referem-se a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir colocar uma cé- lula infectada com a infecção por HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicio- nais, como aqueles aqui descritos. Outras modalidades aqui descritas re- ferem-se a um método de tratamento de uma infecção por HIV que pode incluir administrar a um indivíduo que sofre de infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se a um método para inibir a replicação de um HIV que pode incluir colocar uma célula infectada com o HIV em contato com uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Ainda outras modalidades aqui descritas referem-se a um método para inibir a replicação de um HIV que pode incluir a administração a um indivíduo infectado com o HIV de uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agentes adicionais, como aqueles aqui descritos. Exemplos de agentes adicionais incluem aqueles descritos na presente invenção, como os agentes de te- rapia antirretroviral (ART), como um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da protease (IP), um inibidor de fusão/entrada (também chamado de antagonista do receptor CCR5), um inibidor de transferência de fita da integrase (INSTI) e uma outra te- rapia antirretroviral para HIV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
[0243] Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado com um ou mais agentes adicionais juntos em uma única composição farma- cêutica. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado com um ou mais agentes adicionais como duas ou mais composições farma- cêuticas separadas. Por exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado em uma composição farmacêutica, e ao menos um dentre os agentes adicionais pode ser administrado em uma segunda composição farmacêutica. Se houver ao menos dois agentes adicionais, um ou mais dos agentes adici- onais podem estar em uma primeira composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e ao menos um dos outros agentes adicionais pode estar em uma segunda composição farmacêutica.
[0244] A(s) quantidade(s) de dosagem e o(s) esquema(s) de dosa- gem ao usar um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou uma composição farmacêutica que inclui um com- posto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agentes adicionais, está(estão) dentro do conhecimento dos versados na técnica. Por exemplo, quando se realiza um padrão conven- cional de terapia de tratamento com o uso de quantidades de dosagem e esquemas de dosagem reconhecidos na técnica, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma com- posição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado em adição a essa terapia, ou em lugar de um dos agentes de uma terapia de combi- nação, com o uso de quantidades e protocolos de dosagem eficazes como aqui descritos.
[0245] A ordem de administração de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um ou mais agentes adicionais pode variar. Em algumas modalidades, um composto da Fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser ad- ministrado antes de todos os agentes adicionais. Em outras modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado antes de ao menos um agente adicional. Ainda em outras modalidades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado concomi- tantemente com um ou mais agentes adicionais. Ainda em outras modali- dades, um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo, pode ser administrado após à administração de ao menos um agente adicional. Em algumas modalidades, um composto da Fórmula
(I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser adminis- trado após à administração de todos os agentes adicionais.
[0246] Em algumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em com- binação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (inclu- indo os sais e os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis dos mes- mos), pode resultar em um efeito aditivo. Em algumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fármacos de qualquer um dos anteriores), pode resultar em um efeito sinérgico. Em al- gumas modalidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anterio- res), pode resultar em um efeito fortemente sinérgico. Em algumas moda- lidades, a combinação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais e os pró-fár- macos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), não é antagonística.
[0247] Como usado aqui, o termo "antagonístico" significa que a ati- vidade da combinação dos compostos é menor em comparação com a soma das atividades dos compostos em combinação quando a atividade de cada composto é determinada individualmente (isto é, como um único composto). Conforme usado no presente documento, o termo "efeito sinergístico" significa que a atividade da combinação dos com- postos é maior do que a soma das atividades individuais dos compostos na combinação quando a atividade de cada composto é determinada individualmente. Conforme usado no presente documento, o termo "efeito aditivo" significa que a atividade da combinação de compostos é aproximadamente igual à soma das atividades individuais do composto na combinação quando a atividade de cada composto é determinada individualmente.
[0248] Uma vantagem potencial do uso de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) pode ser uma redução na(s) quantidade(s) necessária(s) de um ou mais com- postos das Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitá- veis de qualquer um dos anteriores) que são eficazes no tratamento de uma condição de doença aqui descrita (por exemplo, por HBV, HDV e/ou HIV), em comparação com a quantidade necessária para alcançar o mesmo resultado terapêutico quando um ou mais compostos das Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) são administrados sem um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Por exemplo, a quanti- dade de um composto nas Figuras 1 a 13 (incluindo de um sal farmaceu- ticamente aceitável de qualquer um dos anteriores) pode ser menor em comparação com a quantidade do composto nas Figuras 1 a 13 (incluindo um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores), ne- cessária para alcançar a mesma redução da carga viral quando adminis- trado como uma monoterapia. Outra vantagem potencial do uso de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Fi- guras 1 a 9 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos) é que o uso de dois ou mais compostos com diferentes mecanismos de ação pode criar uma barreira maior ao desenvolvimento de cepas virais resistentes em comparação com a barreira criada quando um composto é administrado como uma monoterapia.
[0249] As vantagens adicionais do uso de um composto da Fór- mula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) podem incluir pouca ou nenhuma resistência cruzada entre um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores) dos mesmos; diferentes rotas para a eliminação de um composto da Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (inclu- indo os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos); pouca ou ne- nhuma sobreposição de toxicidade entre um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceu- ticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores); pouco ou ne- nhum efeito significativo sobre o citocromo P450; pouca ou nenhuma interação farmacocinética entre um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agente(s) adicional(is) nas Figuras 1 a 13 (incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores); maior porcentagem de indi- víduos que alcançam uma resposta viral sustentada em comparação com quando um composto é administrado como monoterapia e/ou uma diminuição no tempo de tratamento para alcançar uma resposta viral sustentada em comparação com quando um composto é administrado como uma monoterapia. Exemplos
[0250] Os exemplos específicos a seguir são fornecidos para ilustrar adicionalmente as várias modalidades aqui descritas.
[0251] Para a obtenção dos compostos descritos nos exemplos abaixo, bem como dos dados analíticos correspondentes, foram seguidos os protocolos experimentais e analíticos apresentados a seguir, exceto onde indicado em contrário.
[0252] Exceto onde especificado em contrário, as misturas de reação foram agitadas magneticamente em temperatura ambiente (ta) sob uma atmosfera de nitrogênio. Quando as soluções foram "secas", as mesmas foram geralmente submetidas à secagem com um agente secante como Na2SO4 ou MgSO4. Nos casos em que as misturas, soluções e extratos foram "concentrados", os mesmos foram tipicamente concentrados em um evaporador giratório sob pressão reduzida.
[0253] Cromatografia em gel de sílica de fase normal (FCC) foi re- alizada em gel de sílica (SiO2) usando cartuchos pré-empacotados.
[0254] A cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa preparatória (RP HPLC) foi realizada em: uma HPLC Gilson 281/215 com uma coluna Xtimate Prep RP18 (5 µM, 25 x 150 mm) ou uma co- luna YMC-Actus Triart C18 (5 µM, 30 x 100 mm) e uma fase móvel de 1% de ACN em 0,225% de FA foi mantida por 1 min, em seguida, em um gradiente de ACN de 1 a 23% ao longo de 9 min, e em seguida, foi mantida a 95% de ACN por 2 min, com uma vazão de 25 mL/min.
[0255] Os espectros de massa (MS) foram obtidos em um equipa- mento de LCMS-TOF G1969A da Agilent. Fase móvel: FA (ácido fór- mico) a 0,1% em água (solvente A) e FA a 0,1% em ACN (solvente B); Gradiente de eluição: 0% a 30% (solvente B) durante 3 minutos e man- tendo a 30% durante 1 minuto a uma vazão de 1 mL/minuto; Coluna: Fonte de íons Xbridge Shield RP 18 5 um, 2,1*50 mm: Fonte de ESI; Modo iônico: Positivo Gás de nebulização: Nitrogênio; Vazão do gás de secagem (N2): 5 L/min; Pressão do nebulizador: 30 psig; Tempera- tura do gás: Tensão capilar a 325 °C: 3,5KV Tensão do fragmentador: 50 V.
[0256] Os espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) fo- ram obtidos nos espectrômetros Bruker 400 MHz ou Varian 400 MHz. Definições para multiplicidade são as seguintes: s = singleto, d = du- bleto, t= tripleto, q = quarteto, m = multipleto, br = largo. Será entendido que para compostos compreendendo um próton cambiável, o referido próton pode ou não ser visível em um espectro de RMN dependendo da escolha do solvente usado para executar o espectro de RMN e a con- centração do composto na solução.
[0257] Foram gerados nomes de produtos químicos com o uso de ChemDraw Ultra 12.0, ChemDraw Ultra 14.0 (CambridgeSoft Corp., Cambridge, MA, EUA) ou ACD/Name Version 10.01 (Advanced Che- mistry).
[0258] Os compostos designados como R* ou S* são compostos enantiopuros, em que a configuração absoluta não foi determinada. Intermediário 1: (1R,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenoci- clobutanol
[0259] Etapa A. 1,1-Dietoxieteno. A um frasco equipado com con- densador foram adicionados t-BuOK (115,0 g, 1,02 mol) e 2-bromo- 1,1-dietoxietano (200,0 g, 1,01 mol) em temperatura ambiente A rea- ção foi extremamente exotérmica e começou a ocorrer refluxo. Após o refluxo cessar, a reação foi agitada durante 1 h. O t-BuOH foi removido por destilação e a mistura resultante foi destilada sob pressão reduzida para produzir 1,1-dietoxieteno (82,0 g, 705,9 mmol, 69,9% de rendi- mento) como um líquido incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,27 (q, J = 7,1 Hz, 4H), 2,05 (s, 2H), 1,33 (t, J = 7,1 Hz, 6H).
[0260] Etapa B. 3,3-dietoxiciclobutano-1,2-dicarboxilato de (1R,2S)- dietila Uma mistura de tolueno (100 mL) e 1,1-dietoxieteno (6,50 g, 37,75 mmol) foi resfriada até -45 °C sob atmosfera de N2. Cloreto de dietilalumínio (1 M, 113,25 mL) foi adicionado lentamente usando uma seringa. A mistura de reação foi agitada durante 10 minutos, e em se- guida, N,N-di-isopropiletilamina (DIPEA) (1,95 g, 15,10 mmol) foi adici- onada. Após agitação a -45 °C durante 10 minutos, fumarato de dietila (8,77 g, 75,50 mmol) foi adicionado com uma seringa, e a mistura foi agitada a -45 °C durante 3 horas. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (200 mL) e ex- traída com hexano (200 mL × 2). A camada orgânica combinada foi la- vada com salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concen- trada sob pressão reduzida para produzir 3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di- carboxilato de (1R,2S)-dietila. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = (80:1) produziu o composto do título (3,41 g, 42,3% de rendimento) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,31 – 4,18 (m, 4H), 4,18 – 4,11 (m, 4H), 3,75 – 3,69 (m, 1H), 3,34 (m, J = 10,2, 8,5 Hz, 1H), 2,59 (m, 1H), 2,31 – 2,21 (m, 1H), 1,33 (m, 6H), 1,20 – 1,07 (m, 6H).
[0261] Etapa C: ((1R,2R)-3,3-Dietoxiciclobutano-1,2-di-il)dimeta- nol. À mistura resfriada (0 °C) de 3,3-dietoxiciclobutano-1,2-dicarboxi- lato de (1R,2S)-dietila (55,30 g, 191,79 mmol) e tetra-hidrofurano ani- dro (THF) (300 mL), adicionou-se LiAlH4 (21,84 g, 575,37 mmol) lenta- mente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente du- rante 4 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com H 2O (21 mL) lentamente a 0 °C, seguido por uma solução aquosa de NaOH (63 mL, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O composto do título, ((1R,2R)-3,3-dietoxiciclobu- tano-1,2-di-il)dimetanol (33,40 g, 163,52 mmol, 85,3% de rendimento) foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[0262] Etapa D. dibenzoato de ((1R,2R)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di- il)bis(metileno). A uma solução de ((1R,2R)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di- il)dimetanol (33,40 g, 163,52 mmol) em piridina (300 mL), adicionou-se clo-
reto de benzoíla (BzCl) (91,94 g, 654,08 mmol) lentamente através de se- ringa sob atmosfera de N2 a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e em seguida, diclorometano (DCM) (500 mL) foi adicionado. A solução resultante foi lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3, e em seguida, com salmoura, seca com sul- fato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purifi- cação (FCC, SiO2, PE: EA=20:1) produziu dibenzoato de ((1R,2R)-3,3-di- etoxiciclobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (59,70 g, 88,5% de rendimento) como um óleo incolor.
[0263] Etapa E. Dibenzoato de ((1R,2R)-3-oxociclobutano-1,2-di- il)bis(metileno). A uma solução de dibenzoato de ((1R,2R)-3,3-dietoxici- clobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (59,70 g, 144,98 mmol) em tetra-hidro- furano (THF) (350 mL) foi adicionado HCl (0,4 M, 362,45 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. NaHCO 3 (0,2 N) foi adicionado à mistura de reação até um pH = 7. A mistura resultante foi extraída com EA (30 mL x 2), lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão redu- zida. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA=10:1) produziu dibenzoato de ((1R,2R)-3-oxociclobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (26,10 g, 77,14 mmol, 53,2% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,07 – 7,98 (m, 4H), 7,62 – 7,55 (m, 2H), 7,44 (m, 4H), 4,68 – 4,53 (m, 4H), 3,75 – 3,63 (m, 1H), 3,34 – 3,22 (m, 1H), 3,15 – 3,05 (m, 1H), 3,05 – 2,91 (m, 1H).
[0264] Etapa F. Dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobutano- 1,2-di-il)bis(metileno). Uma solução de THF (300 mL) e dibenzoato de ((1R,2R)-3-oxociclobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (26,10 g, 77,14 mmol) foi agitada a -78 °C sob atmosfera de N2. LS-selectride (77,14 mmol) foi adicionado lentamente à mistura de reação usando uma seringa. A mis- tura de reação foi agitada a -78 °C durante 3 horas. O pH da mistura de reação foi ajustado para pH = 7,0 com HCl 0,1 N, e ela foi agitada du- rante 30 minutos. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (EA) (300 mL × 2), a camada orgânica combinada foi lavada com sal- moura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=30:1) produziu di- benzoato de((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobutano-1,2-di-il)bis(meti- leno)(21,10 g, 61,99 mmol, 80,4% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,06 (m, 4H), 7,63 – 7,56 (m, 2H), 7,46 (m, 4H), 4,87 (dd, J = 11,5, 8,9 Hz, 1H), 4,49 (m, 1H), 4,46 – 4,34 (m, 2H), 4,28 (dd, J = 11,6, 4,5 Hz, 1H), 4,14 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 2,28 – 2,11 (m, 2H).
[0265] Etapa G. ((1R,2R,3R)-3-Hidroxiciclobutano-1,2-di-il)dimeta- nol. A uma solução de dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobu- tano-1,2-di-il)bis(metileno)(21,10 g, 61,99 mmol) em metanol (MeOH) (100 mL) foi adicionado MeNH 2 a 30% (61,99 mmol, 200 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH=15:1) produziu ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (5,50 g, 41,62 mmol, 67,1% de rendimento) como um óleo amarelo. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,69 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 4,45 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,26 – 4,18 (m, 1H), 4,12 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3,66 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,37 – 3,29 (m, 2H), 2,17 – 2,09 (m, 1H), 2,09 – 1,98 (m, 1H), 1,93 (m, 1H), 1,80 (m, 1H).
[0266] Etapa H. (1R,6R,7R)-2,4-Dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano-3,1'- ciclo-hexan]-7-ilmetanol. A uma solução de ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobu- tano-1,2-di-il)dimetanol (4,80 g, 36,32 mmol) em ciclo-hexanona (142,58 g, 1,45 mol) adicionou-se ácido p-toluenossulfônico (TsOH) (8,29 g, 43,58 mmol) e MgSO4 (20 g, 192,31 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. À mistura de reação adicio- nou-0,5 mL de trietilamina (0,5 mL). A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH=30:1) pro- duziu (1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano-3,1'-ciclo-hexan]-7- ilmetanol (8,10 g, 38,16 mmol, 105,1% de rendimento) como um óleo.
[0267] Etapa I. ((1R,6R,7R)-2,4-Dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano- 3,1'-ciclo-hexan]-7-ilmetóxi)(terc-butil)difenilsilano. A uma solução de (1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4.2.0]octano-3,1'-ciclo-hexan]-7-il- metanol (9,90 g, 46,64 mmol) em DMF (250 mL) adicionou-se imidazol (9,53 g, 139,92 mmol) a 0 °C. terc-butildifenilclorossilano (TBDPSCl) (10,85 g, 93,28 mmol), e a mistura de reação foi agitada em tempera- tura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi vertida em água (500 mL) e extraída com EA (400 mL x 2). As camadas orgâ- nicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com sulfato de sódio anidro e concentradas por filtração sob pressão reduzida para produzir ((1R,6R,7R)-2,4-dioxaespiro[biciclo[4,2,0]octano-3,1'-ciclo- hexan]-7-ilmetóxi)(terc-butil)difenilsilano (20 g, 44,38 mmol, 95,2% de rendimento), que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purifi- cação adicional.
[0268] Etapa J. (1R,2R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)-2-(hi- droximetil)ciclobutanol. A uma solução de ((1R,6R,7R)-2,4-dioxaes- piro[biciclo[4,2,0]octano-3,1'-ciclo-hexan]-7-ilmetóxi)(terc-butil)difenilsi- lano (20 g, 44,60 mmol) em MeOH (200 mL) adicionou-se p-toluenos- sulfonato de piridínio (PPTS) (4,48 g, 17,84 mmol), e a mistura foi agi- tada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução saturada de NaHCO 3 (100 mL), extraída com EA (200 × 2), lavada com salmoura, seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH=10:1) produziu (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)-2-(hidroximetil)ciclobutanol (9,50 g, 25,6 mmol, 57,5% de rendimento) como um óleo incolor. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,68 (m, 4H), 7,51 – 7,36 (m, 6H), 4,57 (s, 1H), 3,99 – 3,85 (m, 2H), 3,71 – 3,56 (m, 3H), 2,55 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 2,39 – 2,31 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 1,08 (s, 9H).
[0269] Etapa K. (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-((triti- lóxi)metil)ciclobutanol. A uma solução de (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenil- silil)óxi)metil)-2-(hidroximetil)ciclobutanol (9,50 g, 25,64 mmol) em piridina (200 mL) adicionou-se cloreto de tritila (TrtCl) (10,71 g, 38,46 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=20:1) produziu (1R,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)-2-((tritilóxi)metil)ciclobutanol (12,50 g, 20,4 mmol, 79,6% de rendimento) como um óleo incolor. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,70 – 7,63 (m, 4H), 7,52 – 7,46 (m, 6H), 7,42 – 7,24 (m, 10H), 4,52 – 4,41 (m, 1H), 4,15 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,73 – 3,59 (m, 2H), 3,47 – 3,36 (m, 2H), 2,68 (dd, J = 12,1, 6,3 Hz, 2H), 2,49 – 2,37 (m, 1H), 2,26 – 2,14 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,06 (s, 9H). ESI-LCMS: m/z 635,4 [M+Na]+.
[0270] Etapa L. (((1R,2R,3R)-3-(Benzilóxi)-2-((tritilóxi)metil)ciclo- butil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano A uma solução de (1R,2R,3R)-3- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-((tritilóxi)metil)ciclobutanol (1,97 g, 3,21 mmol) em DMF (30 mL) foi adicionado NaH (115,56 mg, 4,81 mmol) a 0 °C sob atmosfera de N 2. A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min. Brometo de benzila (BnBr) (415,05 mg, 3,85 mmol) foi adicio- nado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. Água (100 mL) foi adicionada e a mistura de reação foi extraída com EA (100 mL x 2), lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=30:1) produziu (((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)-2-((triti- lóxi)metil)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (941,0 mg, 1,3 mmol,
41,7% de rendimento) como um óleo amarelo, ESI-LCMS: m/z 725,5 [M+Na]+.
[0271] Etapa M. ((1R,2R,4R)-2-(Benzilóxi)-4-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)ciclobutil)metanol A uma solução de (((1R,2R,3R)-3-(benzi- lóxi)-2-((tritilóxi)metil)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (941 mg, 1,34 mmol) em MeOH (20 mL) adicionou-se TsOH (127,45 mg, 670 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 30 minutos, e em seguida aquecida até em temperatura ambiente e agitada durante 3 ho- ras. À mistura de reação adicionou-se solução aquosa saturada de Na2CO3 (50 mL). A mistura de reação foi extraída com EA (50 mL × 2), as camadas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com sul- fato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 20:1) produziu ((1R,2R,4R)-2-(benzi- lóxi)-4-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobutil)metanol (320,0 mg, 694,6 µmol, 51,8% de rendimento) como um óleo incolor. ESI LC-MS: m/z 483,3 [M+Na]+.
[0272] Etapa N. (((1R,2S,3R)-3-(Benzilóxi)-2-(((2-nitrofenil)sela- nil)metil)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano. A uma solução de ((1R,2R,4R)-2-(benzilóxi)-4-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobu- til)metanol (320 mg, 694,63 µmol) em THF (7,50 mL) foi adicionado 1- nitro-2-selenocianatobenzeno (315,47 mg, 1,39 mmol), seguido por tri- butilfosfina (PBu3) (281,08 mg, 1,39 mmol). A mistura de reação foi agitada a 55 °C de um dia para o outro. A mistura de reação foi con- centrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA = 40:1) produziu (((1R,2S,3R)-3-(benzilóxi)-2-(((2-nitrofenil)selanil)me- til)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (460,0 mg, 713,5 µmol, 102,7% de rendimento) como um sólido marrom malcheiroso. ESI LC- MS: m/z 668,3 [M+Na]+.
[0273] Etapa O. (((1R,3R)-3-(Benzilóxi)-2-metilenociclobutil)me- tóxi)(terc-butil)difenilsilano. A uma solução de (((1R,2S,3R)-3-(benzilóxi)-
2-(((2-nitrofenil)selanil)metil)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (460 mg, 713,48 µmol) em piridina (15 mL) adicionou-se H2O2 (48,53 g, 1,43 mol, 1,62 mL). A mistura de reação foi agitada a 55°C de um dia para o outro. À mistura de reação adicionou-se H2O (40 mL). A mistura de reação foi extraída com EA (40 mL × 2) e as camadas orgânicas combinadas fo- ram lavadas com salmoura, secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=30:1) produziu (((1R,3R)-3-(benzilóxi)-2-metilenociclobutil)me- tóxi)(terc-butil)difenilsilano (250,0 mg, 564,8 µmol, 79,2% de rendimento) como um sólido amarelo malcheiroso. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,68 (m, 4H), 7,49 – 7,34 (m, 11H), 5,19 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 5,04 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,57 (d, J = 1,8 Hz, 2H), 3,70 (m, 2H), 3,09 (s, 1H), 2,16 – 2,10 (m, 2H), 1,06 (s, 9H). ESI-LCMS: m/z 443,3 [M+H]+.
[0274] Etapa P. (1R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)-2-meti- lenociclobutanol Uma solução de (((1R,3R)-3-(benzilóxi)-2-metilenoci- clobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (250 mg, 564,77 µmol) em DCM (20 mL) foi agitada a -75 °C. BCl3 (1 M, 847,16 µL) foi adicionado len- tamente. A mistura foi agitada a -76 °C durante 1 h. À mistura de rea- ção, adicionou-se solução aquosa saturada de Na 2CO3 (4 mL) e H2O (20 mL). A mistura de reação foi extraída com DCM (20 mL x 2), lavada com salmoura, seca e concentrada sob pressão reduzida. A purifica- ção (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 25:1) produziu (1R,3R)-3-(((terc-butildi- fenilsilil)óxi)metil)-2-metilenoclorobutanol (104,0 mg, 295,0 µmol, 52,2% de rendimento) como um óleo incolor. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,67 – 7,57 (m, 4H), 7,51 – 7,41 (m, 6H), 5,30 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,02 (t, J = 2,3 Hz, 1H), 4,87 (t, J = 2,1 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,74 – 3,59 (m, 2H), 2,96 – 2,83 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 1,87 (m, 1H), 1,26 – 1,16 (m, 1H), 1,01 (s, 9H). ESI-LCMS: m/z 376,3 [M+Na]+. Consulte também Slusarchyk et al., Tetrahedron Letters (1989), 30 (47), 6453-6456.
Intermediário 2: (1R,3R)-3-(((terc-butildimetilsilil)óxi)metil)-2-metilenoci- clobutanol
[0275] Etapa A. Dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-(Benzilóxi)ciclobu- tano-1,2-di-il)bis(metileno). A uma solução de dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-hidroxiciclobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (Intermediário 1, produto da Etapa F, 9,40 g, 27,62 mmol) em DCM (29,70 mL) e ciclo- hexano (60,30 mL) adicionou-se 2,2,2-tricloroacetimidato de benzila (6,97 g, 27,62 mmol), seguido por CF3SO3H (829,04 mg, 5,52 mmol. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de NaHCO3 (300 mL), extraída com EA (200 mL × 3), lavada com salmoura, seca com Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH=15:1) produziu dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)ciclobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (12,60 g, 29,27 mmol, 105,97% de rendimento) como um óleo amarelo. ESI LC- MS: m/z 431,2 [M+H]+.
[0276] Etapa B. ((1R,2R,3R)-3-(Benzilóxi)ciclobutano-1,2-di-il)di- metanol. Uma solução de dibenzoato de ((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)ci- clobutano-1,2-di-il)bis(metileno) (12,40 g, 28,80 mmol) e MeNH2 33% (28,8 mmol, 200 mL) foi agitada a 55 °C de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 10:1) produziu ((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)ci- clobutano-1,2-di-il)dimetanol (3,95 g 17,79 mmol, 61,72% de rendi- mento) como um óleo incolor. ESI-LCMS: m/z 223,1 [M+H]+.
[0277] Etapa C. ((1R,2R,4R)-2-(Benzilóxi)-4-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)ciclobutil)metanol. A uma solução de ((1R,2R,3R)-3-(benzi- lóxi)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (3,45 g, 15,52 mmol) em DCM (120 mL) adicionou-se imidazol (3,17 g, 46,56 mmol), seguido por TBDPSCl
(1,81 g, 15,52 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em tempe- ratura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi resfriada brus- camente com água (20 mL), extraída com DCM (20 mL × 2), lavada com salmoura, seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA=20:1) produziu ((1R,2R,4R)- 2-(benzilóxi)-4-((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobutil)metanol (2,40 g, 5,21 mmol, 33,6% de rendimento) como um óleo incolor. ESI-LCMS: m/z 483,3 [M+Na]+. 2,3 g do produto duplamente protegido, 1,1 g do material de partida recuperado e ((1R,2R,3R)-3-(benzilóxi)-2-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)ciclobutil)metanol (550 mg), como subproduto.
[0278] Etapa D. (((1R,2S,3R)-3-(Benzilóxi)-2-(((2-nitrofenil)selanil)me- til)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano. A uma solução de ((1R,2R,4R)- 2-(benzilóxi)-4-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobutil)metanol (2,70 g, 5,86 mmol) em THF (30 mL) adicionou-se PBu3 (3,56 g, 17,58 mmol, 4,40 mL) e 1-nitro-2-selenocianatobenzeno (3,99 g, 17,58 mmol) em tempera- tura ambiente. À mistura de reação adicionou-se PBu3 (3,56 g, 17,58 mmol, 4,40 mL) em temperatura ambiente sob N2, e a mistura de reação foi agitada a 55 °C de um dia para o outro. A mistura de reação foi concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 40:1 pro- duziu (((1R,2S,3R)-3-(benzilóxi)-2-(((2-nitrofenil)selanil)metil)ciclobutil)me- tóxi)(terc-butil)difenilsilano (4,50 g, 6,98 mmol, 119,1% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI-LCMS: m/z 668,3 [M+Na]+.
[0279] Etapa E. (((1R,3R)-3-(Benzilóxi)-2-metilenociclobutil)me- tóxi)(terc-butil)difenilsilano. A uma solução de (((1R,2S,3R)-3-(benzi- lóxi)-2-(((2-nitrofenil)selanil)metil)ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsi- lano (3,78 g, 5,86 mmol) em piridina (100 mL) adicionou-se H2O2 a 30% (13,29 g, 117,26 mmol, 13,29 mL). A mistura de reação foi agitada a 55 °C sob N2 durante 4 h. À mistura de reação foi adicionada água (500 mL). A solução de reação foi extraída com EA (500 mL x 2), as cama- das orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com
Na2SO4 anidro e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 30:1) produziu ((1R,3R)-3-(benzilóxi)-2-metileno- ciclobutil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (2,30 g, 5,20 mmol, 88,7% de rendimento) como um óleo incolor malcheiroso. ESI-LCMS: m/z 443,3 [M+H]+.
[0280] Etapa F. (1R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metile- nociclobutanol A uma solução de (((1R,3R)-3-(benzilóxi)-2-metilenociclo- hexil)metóxi)(terc-butil)difenilsilano (2,30 g, 5,20 mmol) em DCM (40 mL) adicionou-se BCl3 (1 M, 10,40 mL) a -78°C, sob atmosfera de N2. A mis- tura foi agitada a -78°C durante 30 minutos. A mistura de reação foi res- friada bruscamente com MeOH e trietilamina (TEA) (1:2,3 mL) e concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 25:1) produziu (1R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclo- butanol (1,01 g, 2,86 mmol, 55,1% de rendimento) como um óleo incolor. ESI LC-MS: m/z 376,3 [M+Na]+. Intermediário 3: (1R,2S,3S,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-5-oxabici- clo[2.1.0]pentano.
[0281] Etapa A. (1R,5S)-3-Oxabiciclo[3.2.0]hept-6-eno-2,4-diona. Furan-2,5-diona (32,0 g, 326,3 mmol), acetofenona (75,1 mmol, 8,76 mL) e acetato de etila (1,3 L) foram colocados em um recipiente Pyrex de 2,0 litros com uma tampa de polipropileno, através da qual foram encaixados uma estrutura de lâmpada de poço de imersão de parede tripla, um bor- bulhador de gás encaixado, um termômetro de baixa temperatura e um tubo de saída de gás. Com o fluxo do suprimento de etanol de resfria- mento à lâmpada e um fluxo contínuo de nitrogênio passando através da solução, todo o reator foi resfriado até -40 °C a -70 °C. O gás acetileno foi, então, passado para dentro da mistura a uma alta vazão e a irradiação foi iniciada. Os gases de exaustão foram cuidadosamente inseridos em um sistema de extração vigoroso. A reação foi monitorada evaporando- se porções de 1 mL para exame por RMN 1H. Após 72 horas, ainda restou 20% de SM sem haver nenhuma melhoria na razão de SM: produto, e por isso, a irradiação foi interrompida. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi lavado com éter de petróleo (PE):CHCl3 = 100:1 (500 mL) para produzir (1R,5S)-3-oxabiciclo[3.2.0]hept-6-eno-2,4-diona (38,5 g, 315,3 mmol, 97% de rendimento) como um sólido amarelo claro. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 5,09 (s, 2H), 4,08 (s, 2H). ESI-LCMS: m/z 407,1 [M+H]+.
[0282] Etapa B. Ácido (1R,4R)-4-(metoxicarbonil)ciclobut-2-eno- carboxílico. A uma suspensão de (1R,5S)-3-oxabiciclo[3,2,0]hept-6- eno-2,4-diona (47,9 g, 386,0 mmol) em MeOH (500 mL) adicionou-se NaOMe (2,5 M, 1,24 L) a 0 °C durante 1 hora. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 6 dias. A mistura foi adicio- nada a HCl 4 M (770 mL) a 0 °C, e em seguida, concentrada sob pres- são reduzida. O resíduo resultante foi diluído com EA (2 L), seco com sulfato de sódio anidro, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para produzir ácido (1R,4R)-4-(metoxicarbonil)ciclobut-2-enocarboxí- lico (57,0 g, 365,1 mmol, 95% de rendimento) como um óleo amarelo que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação.
[0283] Etapa C. (1S,2S)-Ciclobut-3-eno-1,2-di-ildimetanol. A uma sus- pensão de LiAlH4 (27,7 g, 730,1 mmol) em THF (1 L) foi adicionada uma solução de ácido (1R,4R)-4-(metoxicarbonil)ciclobut-2-enocarboxílico (28,5 g, 182,5 mmol) em THF (100 mL) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi bruscamente arrefecida com água (27,8 mL) seguido de solução aquosa de NaOH a 15% 83,4 mL). A mistura foi filtrada e a torta do filtro foi lavada com DCM (1 L x 4). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA=1:1) produziu (1S,2S)-ciclobut-3-eno-1,2- di-ildimetanol (13,3 g, 116,5 mmol, 64% de rendimento) como um óleo amarelo.
[0284] Etapa D. (3S,4S)-3,4-Bis((benzilóxi)metil)ciclobut-1-eno. A uma solução agitada de (1S,2S)-ciclobut-3-eno-1,2-di-ildimetanol (26,7 g, 233,9 mmol) em DMF (800 mL) adicionou-se NaH (28,1 g, 701,8 mmol, 60% de pureza) e BnBr (60,5 g, 561,4 mmol) sequencialmente a 0 °C. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A reação foi bruscamente arrefecida com H2O (500 mL) e extraída com H2O (500 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi extraída com EA (300 mL × 5, e os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos com sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. A purifica- ção (FCC, SiO2, PE: EA=30:1) produziu (3S,4S)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ci- clobut-1-eno (41,9 g, 142,3 mmol, 61% de rendimento) como um óleo ama- relo.
[0285] Etapa E. (1R,2S,3S,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-5-oxabici- clo[2.1.0]pentano. A uma solução de (3S,4S)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ci- clobut-1-eno (41,9 g, 142,3 mmol) em DCM (1,2 L) adicionou-se NaHCO3 (4,8 g, 56,9 mmol) e ácido meta-cloroperoxibenzoico (m-CPBA) (31,9 g, 185,0 mmol) a 0°C. A mistura resultante foi agitada em temperatura am- biente durante 16 horas. A mistura foi resfriada bruscamente com solução aquosa saturada de Na2SO3, e então, a mistura foi alcalinizada por solu- ção aquosa saturada de NaHCO3 até pH = 9, e extraída com DCM (1 L × 2). Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos em sul- fato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA= 20:1) produziu (1R,2S,3S,4S)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-5-oxabiciclo[2.1.0]pentano e seu isômero como uma mistura (20,8 g, 46,9 mmol, 33% de rendimento, 70% de pureza) como um óleo amarelado. ESI LC-MS: m/z 311 [M+H]+. Intermediário 4: (1R,2S,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ci- clobutanol.
[0286] Etapa A. Fumarato de (-)-dimentila. O composto do título foi preparado de acordo com o procedimento conforme descrito no docu- mento WO 2007/008564, na página 20. Publicação internacional Data: 18 de janeiro de 2007.
[0287] Etapa B. 3,3-dietoxiciclobutano-1,2-dicarboxilato de (1S,2R)- dimetila. A um frasco com 3 gargalos foi adicionado tolueno (500 mL), fumarato de (-)-dimetila (100 g, 0,25 mol), a mistura foi resfriada até -45°C sob atmosfera de N2, cloreto de dietilalumínio (1 M, 750 mL) foi adicio- nado lentamente através de uma seringa, e a mistura foi agitada durante 10 min. DIPEA (11,7 g, 90 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a -45 °C durante 10 min, fumarato de dietila (8,77 g, 75,50 mmol) foi adici- onado através de seringa, e a mistura foi mantida a -45 °C durante 3 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução aquosa saturada de bi- carbonato de sódio (200 mL) e extraída com hexano (200 mL × 2). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=100:1) produziu 3,3-dietoxiciclobutano-1,2-dicarboxilato de (1S,2R)-dimetila (3,41 g, 11,8 mmol, 42,3% de rendimento) como um óleo amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,31 – 4,18 (m, 4H), 4,18 – 4,11 (m, 4H), 3,75 – 3,69 (m, 1H), 3,34 (m, J = 10,2, 8,5 Hz, 1H), 2,59 (m, 1H), 2,31 – 2,21 (m, 1H), 1,33 (m, Hz, 6H), 1,20 – 1,07 (m, 6H).
[0288] Etapa C. ((1S,2S)-3,3-Dietoxiciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. A uma solução resfriada a 0 °C de 3,3-dietoxiciclobutano-1,2-dicarboxi- lato de (1S,2R)-dimetila (300,5 g, 0,55 mol) dissolvido em THF anidro (300 mL), adicionou-se LiAlH4 (118,5 g, 3,12 mol) lentamente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 4 h. A mistura foi brusca- mente arrefecida com H2O (100 mL) lentamente a 0 °C, seguido por solução aquosa de NaOH (15%) (300 mL). A mistura resultante foi fil- trada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=1:1) produziu ((1S,2S)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (102,1 g, 0,50 mol, 90,9% de rendimento) como um óleo incolor.
[0289] Etapa D. (((((1S,2S)-3,3-Dietoxiciclobutano-1,2-di-il)bis(meti- leno))bis(óxi))bis(metileno))dibenzeno. Uma solução resfriada, a 0 °C, de ((1S,2S)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (102,1 g, 0,50 mol) dis- solvido em DMF (300 mL) foi agitada sob uma atmosfera de N2. NaH (100 g, 2,5 mmol, 60% em óleo mineral) foi adicionado à mistura, e a mistura de reação foi agitada durante 30 minutos a 0 °C. BnBr (256,5 g, 1,5 mmol) foi adicionado lentamente através de seringa e a mistura de reação foi dei- xada aquecer até em temperatura ambiente, sob agitação durante 3 horas. A mistura de reação foi resfriada bruscamente com água gelada e concen- trada a vácuo. O produto bruto foi dissolvido em EA (500 mL) e a solução resultante foi lavada com água, e em seguida salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA=30:1) produziu (((((1S,2S)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2- di-il)bis(metileno))bis(óxi))bis(metileno))dibenzeno (170,1 g, 0,44 mmol, 88,5% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS m/z = 385,2 [M+H]+.
[0290] Etapa E. (2S,3S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona. A uma solução de (((((1S,2S)-3,3-dietoxiciclobutano-1,2-di-il)bis(meti- leno))bis(óxi))bis(metileno))dibenzeno (170,1 g, 0,44 mmol) em CH3CN (1,75 L) foi adicionado H2SO4 0,5 N (660 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas, em seguida diluída com EtOAc (5 L), lavada com água (2 X 1 L), solução saturada de bicar- bonato de sódio (1 L), água (2 X 1 L) e salmoura (1 L). A fase orgânica foi separada, submetida à secagem (Na2SO4), filtrada e concentrada a vácuo. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=30:1) produziu (2S,3S)-2,3- bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona (125,4 g, 0,41 mmol, 93,2% de rendi- mento) como um óleo incolor. LC-MS m/z = 311,2 [M+H]+.
[0291] Etapa F. (2S,3R,4R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ci- clobutanona. A uma solução de ortoformiato de trietila (143,0 g, 0,96 mol) em DCM (100 mL) a -30 °C foi adicionado BF3OEt2 (203,4 g, 1,44 mol) por gotejamento. Após 30 minutos, a mistura de reação foi aquecida até 0 °C durante 15 minutos e resfriada de volta para -78 °C. À mistura de reação foi adicionada uma solução de (2S,3S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)ciclobuta- nona (150 g, 0,48 mol) em DCM (200 mL) e DIPEA (245,1 g, 1,9 mol) por gotejamento. Após 1 h a -78 °C, a mistura de reação foi bruscamente ar- refecida com solução saturada de NaHCO3 e diluída com DCM. A solução bifásica foi separada e a fase aquosa foi extraída mais duas vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram, lavadas em contracor- rente com salmoura, secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=10:1) produziu (2S,3R,4R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanona (180,5 g, 0,44 mol, 45,8% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS m/z = 413,2 [M+H]+.
[0292] Etapa G. (1R,2S,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoxime- til)ciclobutanol. A uma solução de (2S,3R,4R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- (dietoximetil)ciclobutanona (80,1 g, 0,19 mol) em THF (100 mL) foi adicio- nada uma solução 1M de L-Selectride em THF (290 mL, 0,29 mol) a - 78 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente du- rante 30 minutos e resfriada de volta para 0 °C para ser bruscamente ar- refecida com solução saturada de NH4Cl (100 mL). A solução foi diluída com água e EtOAc, a solução bifásica foi separada e a fase orgânica foi lavada três vezes com água, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 5:1) produziu (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol (40,2 g, 97 mmol, 51,1% de rendimento) como um óleo incolor. LCMS m/z = 437,2 [M+H]+.
Intermediário 5: (1R,2S,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobu- tanol.
[0293] Etapa A. acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4- (dietoximetil)ciclobutila. A uma solução de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol (Intermediário 4, 10,0 g, 24,0 mmol) em piridina (100 mL) em temperatura ambiente adicionou-se anidrido acé- tico (Ac2O) (7,4 g, 72,5 mmol) e DMAP (0,6 g, 5,0 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto resultante foi dissolvido com DCM, lavado com H2O, em seguida, lavado com salmoura, seco com Na2SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=5:1) produziu acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- (dietoximetil)ciclobutila (9,5 g, 86,3% de rendimento) como um óleo incolor. ESI LC-MS m/z = 479,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,37- 7,24 (m, 12H), 5,29 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,51-4,35 (m, 5H), 3,57-3,34 (m, 3H), 2,65-2,52 (m, 2H), 2,32-2,21 (m, 1H), 1,98-1,94 (m, 4H), 1,07-0,96 (m, 7H).
[0294] Etapa B. Acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4- formilciclobutila. A uma solução de acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((ben- zilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutila (9,5 g, 20,8 mmol) em CH3CN (200 mL) em temperatura ambiente adicionou-se H2SO4 1 N (187,2 mmol, 187,2 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura de reação foi extraída com EtOAc e a camada orgânica foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio, H2O e salmoura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=5:1) produziu acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-formilciclobutila (7,6 g, 19,9 mmol, 95,5% de rendimento)
como um óleo incolor. ESI LC-MS m/z =383,1 [M+H]+.
[0295] Etapa C. Acetato de (1S,2S,3S,4R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4- (hidroximetil)ciclobutila. A uma solução de acetato de (1R,2S,3R,4S)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-formilciclobutila (7,6 g, 19,9 mmol) em THF (150 mL) em temperatura ambiente adicionou-se NaBH4 (1,1 g, 29,8 mmol). A mis- tura de reação foi agitada durante 0,5h. A mistura de reação foi brusca- mente arrefecida com água, e a mistura resultante foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O, salmoura, secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A pu- rificação (FCC, SiO2, PE:EA = 2:1) produziu acetato de (1S,2S,3S,4R)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-(hidroximetil)ciclobutila (4,9 g, 12,7 mmol, 64,1% de rendimento) como um óleo incolor. ESI LC-MS m/z =385,1 [M+H]+. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,39-7,23 (m, 10H), 5,24 (td, J = 6,8, 0,8 Hz, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,41 (d, J = 4,7, 2H), 4,30 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3,58-3,35 (m, 6H), 2,64-2,54 (m, 1H), 2,46-2,36 (m, 1H), 2,17-2,07 (m, 1H), 1,98 (s, 3H).
[0296] Etapa D. Acetato de (1R,2S,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4- metilenociclobutila. A uma solução de acetato de (1S,2S,3S,4R)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-(hidroximetil)ciclobutila (4,9 g, 12,7 mmol) em THF (100 mL) em temperatura ambiente foram adicionados fenilselenocianato (4,6 g, 25,4 mmol) e (tBu)3P (5,1 g, 25,4 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente. durante 2 horas, e em seguida H2O2 (100 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h e, então, agitada a 50 °C durante mais 2 h. A mistura de reação foi resfriada bruscamente com solução aquosa de Na2SO3 e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com H2O, salmoura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 3:1) produziu acetato de (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenoci- clobutila (2,9 g, 7,9 mmol, 62,1% de rendimento) como um óleo incolor. ESI LC-MS m/z = 367,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,42-
7,21 (m, 10H), 5,64-5,55 (m, 1H), 5,13 (t, J = 2,3 Hz, 1H), 5,09 (t, J = 2,3 Hz, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 3,67-3,42 (m, 4H), 2,89-2,78 (m, 1H), 2,76-2,64 (m, 1H), 1,98 (s, 3H).
[0297] Etapa E. (1R,2S,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclo- butanol. A uma solução de acetato de (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)me- til)-4-metilenociclobutila (2,9 g, 7,9 mmol) em MeOH (30 mL) em tempe- ratura ambiente adicionou-se K2CO3 (3,3 g, 23,7 mmol). A mistura foi agi- tada em temperatura ambiente durante 1 hora. O sólido resultante foi fil- trado da solução e o líquido foi concentrado sob pressão reduzida. A pu- rificação (FCC, SiO2, PE: EA=2:1) produziu (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-metilenociclobutanol (2,1 g, 6,5 mmol, 81,8% de rendimento) como um óleo incolor. ESI LC-MS m/z =325,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,41-7,22 (m, 10H), 5,22 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 5,03 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,93 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,75-4,65 (m, 1H), 4,55-4,40 (m, 4H), 3,66 (dd, J = 9,9, 6,1 Hz, 1H), 3,56-3,42 (m, 3H), 2,77 (t, J = 3,4 Hz, 1H), 2,49-2,41 (m, 1H). Intermediário 6: ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol.
[0298] Etapa A. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(Hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 8, produto da Etapa F, 225 mg, 615,8 µmol) em DCM (5 mL) foi adicionada piridina (3,08 mmol, 250 µL), seguido por 4-metoxitrifenilclorometano (MMTrCl) (190 mg, 615,8 µmol)
em temperatura ambiente A mistura resultante foi agitada em tempera- tura ambiente durante 18 horas. A mistura de reação foi diluída com DCM, lavada com ácido cítrico aquoso, salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 100:1 a 50:1) de N-(9-((1S,2R,3R)-3-(hidro- ximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida (145 mg, 227,4 µmol, 37% de rendimento) como um sólido branco, ESI-LCMS: m/z 638 [M+H]+.
[0299] Etapa B. ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. Uma solução de N- (9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4- metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (112 mg, 175,6 µmol) em CH3NH2/EtOH (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 15 min. A mistura de reação foi concentrada a vácuo. A purificação (HPLC Flash preparativa com as seguintes condições: Coluna de gel de sílica C18 (4 g); fase móvel, CH3CN/H2O = 0/1, aumentando para CH3CN/H2O (NH4HCO3 5 mM) = 1/0 dentro de 15 minutos, o produto eluído foi coletado em CH3CN/H2O = 45/55; detector, UV 254 nm) produziu ((1R,2R,3S)-3-(6- amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclo- butil)metanol (62 mg, 116,2 µmol, 66% de rendimento)como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,29 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,22- 7,29 (m, 12 H), 7,13 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 5,44 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 5,09 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,72(t, J = 5,6 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,62-3,71 (m, 2 H), 3,19-3,21 (m, 2 H), 2,96-3,04 (m, 1 H), 2,84-2,86 (m, 1 H). ESI-LCMS: m/z 534 [M+H]+. Intermediário 7: ((1S,2S,3R)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol.
[0300] Etapa A. N-(9-((1R,2S,3S)-3-(Hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 8, produto da etapa E e F, 301 mg, 823,8 µmol) em DCM (6 mL) foi adicionada piridina (4,12 mmol, 332 µL) seguido de MMTrCl (254 mg, 823,8 µmol) em temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 18 ho- ras. A mistura foi diluída com DCM, lavada com solução aquosa de ácido cítrico, salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 100:1 a 50:1) produziu N-(9-((1R,2S,3S)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)dife- nilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (112 mg, 175,6 µmol, 21% de rendimento) como um sólido branco, ESI LC-MS: m/z 638 [M+H]+ e N-(9-((1R,2S,3S)-2-(hidroximetil)-3-(((4-metoxifenil)di- fenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (75 mg, 117,6 µmol, 14% de rendimento) como um sólido branco, ESI LC-MS: m/z 638 [M+H]+.
[0301] Etapa B. ((1S,2S,3R)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. Uma solução de N- (9-((1R,2S,3S)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4- metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (102 mg, 159,9 µmol) em CH3NH2/EtOH (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 15 min. A purificação (HPLC Flash preparativa com as seguintes condições: coluna de gel de sílica C18 (4 g); fase móvel, CH3CN/H2O = 0/1 aumen- tando para CH3CN/H2O = 1/0 dentro de 15 minutos, o produto eluído foi coletado em CH3CN/H2O =1/1; detector, UV 254 nm) produziu ((1S,2S,3R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)me- til)-4-metilenociclobutil)metanol (62 mg, 116,2 µmol, 73% de rendi- mento)como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,29 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,22-7,29 (m, 12 H), 7,13 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 5,44 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 5,09 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,72(t, J = 5,6 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,62-3,71 (m, 2 H), 3,19-3,21 (m, 2 H), 2,96- 3,04 (m, 1 H), 2,84-2,86 (m, 1 H). ESI-LCMS: m/z 534 [M+H]+. Exemplo 1: 4-Amino-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclobu- til)pirimidin-2(1H)-ona. #60107#
[0302] Etapa A. 3-Benzoil-1-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-2-metilenociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de (1R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutanol (Interme- diário 2, 387 mg, 1,1 mmol) em THF (8 mL) adicionou-se 3-benzoilpirimi- dina-2,4(1H,3H)-diona (356 mg, 1,65 mmol), e PPh3 (425 mg, 1,65 mmol). DIAD (445 mg, 2,2 mmol) foi adicionado por gotejamento sob N2 em tem- peratura ambiente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambi- ente sob N2 de um dia para o outro. Adicionou-se água à mistura de rea- ção, e a mistura foi extraída com EA. A fase orgânica foi lavada com água, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purifica- ção (FCC, SiO2, PE: EA = 1:1) produziu 3-benzoil-1-((1S,3R)-3-(((terc-bu- tildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (650 mg). LC/MS: m/z 551,3 [M+H]+.
[0303] Etapa B. 1-((1S,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)-2-me- tilenociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona. 3-Benzoil-1-((1S,3R)-3- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)pirimidina- 2,4(1H,3H)-diona (650 g, 1,1 mmol) foi dissolvida em solução de amô-
nia e metanol 7 M (10 mL). A mistura foi agitada em temperatura am- biente durante 1,5 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 10:1) produziu 1-((1S,3R)-3- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)pirimidina- 2,4(1H,3H)-diona (363 mg, 73,8% de rendimento). LC/MS: m/z 447,2 [M+H]+.
[0304] Etapa C. 4-Amino-1-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-2-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona. A uma solução de 1- ((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)pirimidina- 2,4(1H,3H)-diona (361 mg, 0,81 mmol) em THF (4,5 mL) adicionou-se TBDPSCl (491 mg, 1,62 mmol), DMAP (198 mg, 1,62 mmol) e trietilamina (TEA) (164 mg, 1,62 mmol). A mistura de reação foi agitada em tempe- ratura ambiente sob N2 durante 3 horas. Solução aquosa de NH3 a 28% (5 mL) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi extraído com EA e água. A fase orgânica foi lavada com água, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purifi- cação (FCC, SiO2, PE:EA=1:1) produziu 4-amino-1-((1S,3R)-3-(((terc-bu- tildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (290 mg, 80,5% de rendimento). LC-MS: m/z = 446,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,62-7,65 (m, 4H), 7,54 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43-7,48 (m, 6H), 7,07 (d, J = 16,0 Hz, 2H), 5,63 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,52 (m, 1H), 5,08 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 4,79 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 3,81 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,98-3,01 (m, 1H), 2,35-2,42 (m, 1H), 1,93-2,00 (m, 1H), 1,02 (s, 9H).
[0305] Etapa D. 4-Amino-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenoci- clobutil)pirimidin-2(1H)-ona. A uma solução de 4-amino-1-((1S,3R)-3- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (290 mg, 0,65 mmol) em THF (4 mL) adicionou-se solução concentrada de HCl (4 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h. A camada aquosa foi lavada por DCM várias vezes e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (HPLC Flash preparativa com as seguintes condições: coluna de gel de sílica C18 (4 g); fase móvel, CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) = 0/1 aumentando para CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) = 1/0 dentro de 15 minutos, o produto eluído foi cole- tado em CH3CN/H2O = 23/77; Detector, UV 254 nm) produziu 4-amino- 1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (80 mg, 59,2% de rendimento). LCMS: m/z=208,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,59 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,04 (d, 2H), 5,71 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,50-5,54 (m, 1H), 5,04-5,05 (m, 1H), 4,72-4,73 (m, 1H), 4,66 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 2,83-2,87 (m, 1H), 2,33-2,41 (m, 1H), 1,87-1,94 (m, 1H); RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6/D2O) δ ppm 7,61 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,48 (t, J = 2,4 Hz, 1H), 5,05 (t, 1H), 4,73 (m, 1H), 2,84-2,88 (m, 1H), 2,35-2,42 (m, 1H), 1,88-1,95 (m, 1H). Exemplo 2: ((1R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-metilenociclobutil)me- tanol.
[0306] Etapa A. (9-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-meti- lenociclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma solu- ção de (1R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutanol (Intermediário 1, 380 mg, 858,45 µmol) em THF (5 mL) adicionou-se (6- cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (347,27 mg, 1,29 mmol) e PPh3 (337,74 mg, 1,29 mmol). A mistura de reação foi agitada a 0 °C sob atmosfera de N2. Azodicarboxilato de dietila (DEAD) (299 mg, 1,72 mmol) foi adicionado lentamente à mistura de reação. A mistura foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA= 1:1) produziu (9-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenoci- clobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (575 mg, 951,7 µmol, 110,9% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,30 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,66 (m, 4H), 7,53 – 7,43 (m, 6H), 5,52 (s, 1H), 5,14 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,18 (s, 1H), 2,70 – 2,56 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,03 (s, 9H),ESI-LCMS: m/z 604,3 [M+H]+.
[0307] Etapa B. (9-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-meti- lenociclobutil)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma mistura de 3-hidroxipropionitrila (792,5 mg, 11,2 mmol) em THF (25 mL) adicionou-se NaH (374,64 mg, 15,61 mmol, 624,40 µL) a 0 °C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min, e (9- ((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)-6-cloro- 9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (1,35 g, 2,23 mmol) dissolvido em THF (0,5 mL) foi adicionado por gotejamento a 0 °C. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas. H2O (50 mL) foi adicionada à mistura de reação, e foi extraída com EA (50 mL x 3). As camadas orgâ- nicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purifica- ção (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 150:1) produziu (9-((1S,3R)-3-(((terc-bu- tildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2- il)carbamato de terc-butila (850,0 mg, 1,45 mmol, 65,1% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,41 (s, 1H), 11,12 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,66 (m, 4H), 7,54 – 7,42 (m, 6H), 5,33 (s, 1H), 5,12 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,95 (m 1H), 3,88 (m, 1H), 3,17 (s, 1H), 2,65 – 2,55 (m, 1H), 2,37 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 1,51 (s, 9H), 1,03 (s, 9H). ESI-LCMS: m/z 586,3 [M+H]+.
[0308] Etapa C. (9-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclobutil)-6- oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9-((1S,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutil)-6- oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (325 mg, 554,83 µmol) em THF (5 mL) foi adicionado fluoreto de tetra-n-butilamônio
(TBAF) (1 M, 5,55 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 40:1) produziu (9- ((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclobutil)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-pu- rin-2-il)carbamato de terc-butila (150 mg, 388,6 µmol, 70,1% de rendi- mento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS: m/z 348,6 [M+H]+.
[0309] Etapa D. 2-Amino-9-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclo- butil)-1H-purin-6(9H)-ona. A uma solução de (9-((1S,3R)-3-(hidroximetil)- 2-metilenociclobutil)-6-oxo-6,9-di-hidro-1H-purin-2-il)carbamato de terc- butila (70 mg, 201,51 µmol) em THF (400 µL) foi adicionado HCl (6 M, 349,96 µL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A purificação por HPLC Flash preparativa foi feita com as seguintes condições: coluna de gel de sílica C18 (4 g); fase móvel, CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) = 0/1 aumentando para CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) = 1/0 dentro de 25 minutos, o produto eluído foi coletado em CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) = 21/79; Detector, UV 254 nm) produziu 2-amino-9-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenociclobutil)-1H-purin-6(9H)- ona (40 mg, 161,8 µmol, 80,3% de rendimento) como um pó branco. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,71 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 6,50 (d, J = 18,1 Hz, 2H), 5,25 (dd, J = 10,0, 7,5 Hz, 1H), 5,07 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,84 – 4,76 (m, 1H), 3,69 – 3,60 (m, 2H), 3,04 – 2,94 (m, 1H), 2,57 (m, 1H), 2,27 (m, 1H). ESI-LCMS: m/z 248,1 [M+H]+. Exemplo 3: ((1R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-metilenociclobutil)me- tanol.
[0310] Etapa A. ((1R,3S)-3-(6-(N,N-DiBoc)amino-9H-purin-9-il)-2- metilenociclobutil)metanol. A uma solução de (1R,3R)-3-(((terc-butildife- nilsilil)óxi)metil)-2-metilenociclobutanol (Intermediário 2, 750 mg, 2,13 mmol) em THF (8 mL) adicionou-se N,N-diboc-9H-purin-6-amina (714,32 mg, 3,20 mmol), seguido de PPh3 (1,12 g, 6,39 mmol). A mistura de reação foi agitada a 0 °C sob atmosfera de N 2. DEAD (741,88 mg, 4,26 mmol) foi adicionado lentamente à mistura de reação usando uma seringa. A mistura foi agitada a 55 °C de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA = 1:1) produziu ((1R,3S)-3-(6-(N,N-DiBoc)amino-9H-purin- 9-il)-2-metilenociclobutil)metanol (1,30 g, 1,94 mmol, 90,8% de rendi- mento) como um sólido amarelo. ESI-LCMS: m/z 670,4 [M+H]+.
[0311] Etapa B. ((1R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-metilenoci- clobutil)metanol. A uma solução de ((1R,3S)-3-(6-(N,N-DiBoc)amino- 9H-purin-9-il)-2-metilenociclobutil)metanol (1,30 g, 1,94 mmol) em THF (5 mL) adicionou-se HCl (12 M, 5 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A purificação por HPLC Flash preparativa foi feita com as seguintes condições: coluna de gel de sílica C18 (4 g); ftase móvel, CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) =0/1 aumentando para CH3CN/ H2O (HCOOH 5 mM)=1/0 dentro de 25 minutos, o produto eluído foi coletado em CH3CN/H2O (HCOOH 5 mM) = 23/77; Detector, UV 254 nm) e produziu ((1R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-metileno- ciclobutil)metanol (400 mg, 1,73 mmol, 89,2% de rendimento). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,30 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 5,66 – 5,58 (m, 1H), 5,21 (td, J = 2,6, 1,2 Hz, 1H), 4,93 (m, 1H), 3,92 – 3,78 (m, 2H), 3,24 – 3,13 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,49 (m, 1H). ESI-LCMS: m/z 232,1 [M+H]+. Exemplo 4: 4-Amino-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclo- butil)pirimidin-2(1H)-ona.
[0312] Etapa A. 3-Benzoil-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- metilenociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de
(1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutanol (1,7 g, 5,24 mmol), 3-benzoilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (1,70 g, 7,86 mmol) e trifenil- fosfina (2,06 g, 7,86 mmol) em tetra-hidrofurano (26 mL) adicionou-se azo- dicarboxilato de di-isopropila (1,59 g, 7,86 mmol, 1,54 mL) por gotejamento a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (HPLC Flash preparativa com as seguintes condições: coluna de gel de sílica C18 (20 g); fase móvel, CH3CN/H2O = 0/1 aumentando para CH3CN/H2O = 1/0 den- tro de 25 minutos, o produto eluído foi coletado em CH3CN/H2O = 35/65; detector, UV 254 nm) produziu 3-benzoil-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (2,5 g, 4,31 mmol, 82,2% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI- LCMS m/z = 523,4 [M+H]+.
[0313] Etapa B. 1-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metile- nociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona. Uma solução de 3-benzoil-1- ((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidina- 2,4(1H,3H)-diona (2,5 g, 4,78 mmol) em metilamina/etanol (5 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies 20 g, 20 mL/min, ACN: H2O = 30:70) produziu 1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobu- til)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (1,8 g, 4,09 mmol, 85,4% de rendi- mento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 419,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,32 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,36-7,26 (m, 10H), 5,52 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 5,38 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 5,10 (s,1H), 4,90 (s, 1H), 4,49 (d, J = 10,2 Hz, 4 H), 3,67 (d, J = 5,7 Hz, 2 H), 3,59-3,57 (m, 2 H), 2,89-2,87 (m,1H), 2,72- 2,65 (m, 1H).
[0314] Etapa C. 4-Amino-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona. A uma solução de 1-((1S,2R,3R)-
2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (1,7 g, 4,06 mmol), DMAP (1,09 g, 8,94 mmol), TEA (1,03 g, 10,16 mmol, 1,42 mL) em acetonitrila (20 mL) adicionou-se cloreto de 2,4,6-tri-isopropi- lbenzenossulfonila (2,71 g, 8,94 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agi- tada em temperatura ambiente durante 3 h. Hidróxido de amônio (7 mL) foi adicionado à mistura em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 16 horas. A mistura de reação foi vertida em água e extraída com EA. A camada orgânica foi lavada com salmoura e concentrada sob pres- são reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies 20 g, 20 mL/min, ACN:H2O = 30:70) produziu 4-amino-1-((1S,2R,3R)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (1,6 g, 3,83 mmol, 94,3% de rendimento) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 418,2 [M+H]+.
[0315] Etapa D. N-(1-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-meti- lenociclobutil)-2-oxo-1,2-di-hidropirimidin-4-il)benzamida. A uma solu- ção de 4-amino-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenoci- clobutil)pirimidin-2(1H)-ona (1,5 g, 3,59 mmol) em piridina (20 mL) adi- cionou-se cloreto de benzoíla (757,55 mg, 5,39 mmol, 626,07 µL) por gotejamento a 0 °C. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 6 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida por NH4OH e agitada durante 20 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 20 g, 20 mL/min, ACN:H2O = 40:60) produziu N-(1- ((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2- di-hidropirimidin-4-il)benzamida (1,8 g, 3,38 mmol, 94,1% de rendi- mento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 522,2 [M+H]+.
[0316] Etapa E. N-(1-((1S,2R,3R)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-metileno- ciclobutil)-2-oxo-1,2-di-hidropirimidin-4-il)benzamida. A uma solução de N-(1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-
oxo-1,2-di-hidropirimidin-4-il)benzamida (1,8 g, 3,45 mmol) em dicloro- metano (20 mL) adicionou-se tricloreto de boro (1 M, 34,51 mL) por gotejamento a -78 °C. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 1 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com metanol a - 78 °C. TEA foi adicionada para ajustar o pH até 6. O solvente foi remo- vido sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 20 g, 20 mL/min, ACN:H2O=25:75) produziu N-(1- ((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2-di-hi- dropirimidin-4-il)benzamida (1,0 g, 2,90 mmol, 84,0% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z =342,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,25 (s, 1H), 8,19 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 8,02-8,00 (m, 2H), 7,65-7,61 (m, 1H), 7,54-7,50 (m, 2H), 7,37 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,41-5,39 (m, 1H), 5,14 (t, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,87 (t, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,75 (s, 2 H), 3,65 (t, J = 5,2 Hz, 2 H), 3,57 (t, J = 4,8 Hz, 2 H), 3,11-3,04 (m, 1H), 2,77-2,72 (m, 1H).
[0317] Etapa F. 4-Amino-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metile- nociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona. Uma solução de N-(1-((1S,2R,3R)-2,3- bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2-di-hidropirimidin-4-il)ben- zamida (50 mg, 146,47 µmol) em metilamina/etanol (1,5 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: H2O = 10:90) produziu 4-amino-1- ((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (10 mg, 41,31 µmol, 28,2% de rendimento, 98% de pureza) como um só- lido branco. ESI-LCMS m/z = 238,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO- d6): δ 7,61(d, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,12(d, J = 21,8 Hz, 2H), 5,73 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 5,28-5,25 (m, 1 H), 5,08 (t, J = 2,5 Hz, 1 H), 4,77 (t, J = 2,5 Hz, 1 H), 4,70-4,67 (m, 2 H), 3,59 (t, J = 5,5 Hz, 2 H), 2,65-2,61 (m, 1H), 2,37- 2,33 (m, 1H). Exemplo 5: 1-((1S,2R,3R)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-5-
metilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0318] Etapa A. 3-Benzoil-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- metilenociclobutil)-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutanol (Interme- diário 5, 350 mg, 1,08 mmol) e 3-benzoil-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)- diona (496 mg, 2,16 mmol) em THF seco (5 mL) foi adicionado PPh3 (566 mg, 2,16 mmol) em temperatura ambiente. Em seguida, azodicar- boxilato de di-isopropila (DIAD) (436 mg, 2,16 mmol) foi adicionado por gotejamento a 0 °C sob N2. A suspensão resultante foi agitada a 55 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 40:60) e a purificação adicional (FCC, SiO2, PE:EA=3:1) produziram 3-benzoil-1-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)me- til)-4-metilenociclobutil)-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (240 mg, 447 µmol) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):δ ppm 7,98-7,92 (m, 2H), 7,68-7,62 (m, 1H), 7,52-7,42 (m, 3H), 7,42-7,24 (m, 10H), 5,55-5,50 (m, 1H),5,27-5,22 (m, 1H), 5,11-5,07 (m, 1H), 4,63-4,53 (m, 4H), 3,83-3,78 (m, 1H), 3,75-3,69 (m, 1H), 3,68-3,64 (m, 2H), 2,99- 2,85 (m, 2H), 1,71 (s, 3H). ESI-LCMS: m/z 537 [M+H] +.
[0319] Etapa B. 1-((1S,2R,3R)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-metilenociclo- butil)-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 3-benzoil-1- ((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-5-metilpirimi- dina-2,4(1H,3H)-diona (400 mg, 745 µmol) em DCM seco (10 mL) foi adi- cionado por gotejamento BCl3 (7,5 mmol, 7,5 mL) a -78 °C sob N2. A mis- tura foi agitada a -78 °C durante 1 h. A mistura foi bruscamente arrefecida pela adição de água gelada a -78 °C. A mistura foi extraída com DCM e lavada com água. A camada orgânica foi concentrada a vácuo. A purifi- cação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: H2O=10:90) produziu 1-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metile- nociclobutil)-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (100 mg, 390 µmol) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):δ ppm 7,41 (s,1H), 5,25-5,19 (m, 1H),5,09-5,05 (m, 1H), 4,82-4,80 (m, 1H), 3,62 (d, J = 5,8, 2H), 3,50 (d, J = 5,8, 2H), 2,66-2,60 (m, 1H), 2,48-2,41 (m, 1H), 1,75 (s, 3H). ESI-LCMS: m/z 253 [M+H]+. Exemplo 6: ((1R,2R,3S)-3-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-meti- lenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol
[0320] Etapa A. 7-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metilenoci- clobutil)-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina. A uma solução de (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutanol (Intermediá- rio 5, 1,0 g, 3,1 mmol) em THF (20 mL) em temperatura ambiente adicio- nou-se 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,0 g, 6,2 mmol) e PPh3 (1,6 g, 6,2 mmol), e em seguida, a 0 °C, foi adicionado DIAD (1,3 g, 6,2 mmol) sob N2. A mistura de reação foi aquecida a 55°C e agitada durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=4:1) produziu 7-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metileno- ciclobutil)-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,3 g, 2,8 mmol, 91,7% de rendimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =460,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ8,66 (s, 1H), 7,82 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,41-7,12 (m, 9H), 6,70 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,76-5,71 (m, 1H), 5,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 3,83- 3,72 (m, 2H), 3,64 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 3,11-3,02 (m, 1H), 3,01-2,91 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,2 Hz, 1H).
[0321] Etapa B. ((1R,2R,3S)-3-(4-Cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-
il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. A uma solução de 7- ((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-4-cloro-7H-pir- rolo[2,3-d]pirimidina (1,3 g, 2,8 mmol) em DCM (20 mL) a -70 °C foi adi- cionado BCl3 1 N (16,8 mL, 16,8 mmol) sob N2. A mistura foi agitada a - 70 °C durante 1 hora e, então, foi bruscamente arrefecida com MeOH. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, co- luna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 20:80) produziu ((1R,2R,3S)-3-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-metile- nociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (500 mg, 1,8 mmol, 63,3% de rendi- mento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =280,0 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,64 (s, 1H), 7,82 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,63 (dt, J = 7,8, 2,6 Hz, 1H), 5,07 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,82- 4,73 (m, 2H), 4,66 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 3,70 (td, J = 5,5, 1,5 Hz, 2H), 3,57 (t, J = 4,9 Hz, 2H), 2,94-2,71 (m, 2H).
[0322] Etapa C. ((1R,2R,3S)-3-(4-Cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7- il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4- metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (500 mg, 1,8 mmol) em DCM (20 mL) em temperatura ambiente adicionou-se piridina (0,3 mL) e MMTrCl (0,6 g, 2,0 mmol) sob N2. Em seguida, a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi bruscamente arre- fecida com MeOH e, então, concentrada sob pressão reduzida. A puri- ficação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 10:1) produziu ((1R,2R,3S)-3-(4- cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)me- til)-4-metilenociclobutil)metanol (240 mg, 0,4 mmol, 24,3% de rendi- mento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,1 [M+H]+. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,64 (s, 1H), 7,90 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,25- 7,12 (m, 10H), 7,10-7,01 (m, 2H), 6,85-6,74 (m, 3H), 5,79-5,72 (m, 1H), 5,09 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,78-4,69 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,70-3,58 (m, 2H), 3,25-3,13 (m, 2H), 2,96-2,77 (m, 2H).
[0323] Etapa D. ((1R,2R,3S)-3-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)meta- nol. A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimi- din-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)me- tanol (240 mg, 0,4 mmol) em dioxano (10 mL) foi adicionada solução aquosa de amônia (30 mL). Em seguida, a mistura foi aquecida até 100 °C e agitada durante 24 horas. A mistura foi resfriada e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com H 2O e salmoura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purifica- ção (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: H2O=45:55) produziu ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclo- butil)metanol (140 mg, 0,3 mmol, 60,5% de rendimento) como um só- lido branco. ESI LC-MS m/z =533,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO- d6): δ 8,07 (s, 1H), 7,30-7,15 (m, 11H), 7,15-7,08 (m, 2H), 7,00 (s, 2H), 6,84-6,78 (m, 2H), 6,63 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,67 (dt, J = 8,0, 2,7 Hz, 1H), 5,05 (t, J = 2,5 Hz, 1H), 4,74-4,62 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,69-3,56 (m, 2H), 3,14 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 2,86-2,65 (m, 2H).
[0324] Etapa E. ((1R,2R,3S)-3-(4-Amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 7-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (40 mg, 0,08 mmol) em DCM (1 mL) adicionou-se ácido tricloroacético (30 mg). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução aquosa de NaHCO3. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:H2O 40:60) produziu (1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-l)dimetanol (15 mg, 0,06 mmol, 76,7% de rendimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =261,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,05 (d, J
= 1,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 3,6, 1,1 Hz, 1H), 6,99 (s, 2H), 6,58 (dd, J = 3,6, 1,4 Hz, 1H), 5,47 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,05 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,77 (s, 2H), 4,67-4,63 (m, 1H), 3,75-3,62 (m, 2H), 3,61-3,49 (m, 2H), 2,81 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 2,67-2,57 (m, 1H). Exemplo 7: ((1R,2R,3S)-3-(4-Amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7- il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol, #60480#.
[0325] Etapa A. 7-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metilenoci- clobutil)-4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina A uma solução de (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutanol (Intermediário 5, 1,0 g, 3,1 mmol) em THF (20 mL) em temperatura ambiente, adicionou- se 4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,1 g, 6,2 mmol) e PPh3 (1,6 g, 6,2 mmol). A 0 °C, DIAD (1,3 g, 6,2 mmol) foi adicionado sob N2. A mis- tura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=4:1) produziu 7-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenoci- clobutil)-4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,3 g, 2,7 mmol, 88,2% de rendimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =478,1 [M+H]+.
[0326] Etapa B. ((1R,2R,3S)-3-(4-Cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. A uma solu- ção de 7-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-4- cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1,3 g, 2,7 mmol) em DCM (20 mL) a -70°C foi adicionado BCl 3 1 N (16,2 mL, 16,2 mmol) sob N2. A mistura de reação foi agitada a -70 °C durante 1 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com MeOH. A mistura de reação foi con- centrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, H2O:ACN = 5:1) produziu
((1R,2R,3S)-3-(4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-meti- lenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (400 mg, 1,3 mmol, 64,2% de ren- dimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 298,0 [M+H]+.
[0327] Etapa C. ((1R,2R,3S)-3-(4-Cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pi- rimidin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobu- til)metanol. A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(4-cloro-5-fluoro-7H-pir- rolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (400 mg, 1,3 mmol) em DCM (20 mL) em temperatura ambiente adicionou- se piridina (0,3 mL) e MMTrCl (440 mg, 1,4 mmol) sob N2. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com MeOH e concentrada sob pressão redu- zida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 3:1) produziu ((1R,2R,3S)-3-(4- cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (200 mg, 0,4 mmol, 26,1% de rendimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 570,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,67 (s, 1H), 7,95 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,29-7,12 (m, 10H), 7,10-7,02 (m, 2H), 6,87-6,76 (m, 2H), 5,78 (s, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,70 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,11-3,95 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,70-3,56 (m, 1H), 3,24-3,11 (m, 2H), 2,81 (s, 2H).
[0328] Etapa D. ((1R,2R,3S)-3-(4-Amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]piri- midin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)meta- nol. A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(4-cloro-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pi- rimidin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)me- tanol (200 mg, 0,4 mmol) em dioxano (10 mL) adicionou-se solução aquosa de amônia (30 mL). A mistura de reação foi aquecida até 100 °C e agitada durante 24 h. A mistura resultante foi extraída com EtOAc e a ca- mada orgânica foi lavada com H2O e salmoura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, H2O: ACN = 2:1) produziu
((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(((4-me- toxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (120 mg, 0,2 mmol, 62,2% de rendimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =551,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,09 (s, 1H), 7,30-7,16 (m, 11H), 7,16-7,09 (m, 2H), 7,01 (s, 2H), 6,89-6,76 (m, 2H), 5,71 (dd, J = 7,9, 2,3 Hz, 1H), 5,06 (t, J = 2,7 Hz, 1H), 4,74 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,67 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,69-3,53 (m, 2H), 3,14 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,83-2,66(m, 2H). RMN 19F (400 MHz, DMSO-d6): δ -167,525 (s).
[0329] Etapa E. ((1R,2R,3S)-3-(4-Amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pi- rimidin-7-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (40 mg, 0,07 mmol) em DCM (1 mL) adicionou-se ácido tricloroacético (30 mg). A mis- tura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mis- tura de reação foi bruscamente arrefecida com solução aquosa de NaHCO3. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, H2O:ACN=5:1) produziu ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-fluoro- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (16 mg, 0,06 mmol, 79,2% de rendimento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =279,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,06 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,97 (s, 2H), 5,52 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,04 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,68 (s, 1H), 3,76-3,61 (m, 2H), 19 3,55 (d, J = 5,0 Hz, 2H), 2,85-2,73 (m, 1H), 2,65-2,55 (m, 1H). RMN F (400 MHz, DMSO-d6): δ -167,764 (s). Exemplo 8: ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano- 1,2-di-il)dimetanol.
[0330] Etapa A. (1R,2R,3S,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3,4-
bis((benzilóxi)metil)ciclobutanol, A uma suspensão de adenina (36,1 g, 266,8 mmol) em DMF (1,0 L) adicionou-se NaH (10,7 g, 266,8 mmol, 60% com óleo mineral) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 100 °C durante 2 h. Uma solução de uma mistura de (1R,2S,3S,4S)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-5-oxabiciclo[2.1.0]pentano (Intermediário 3) e seus isômeros (20,7 g, 66,7 mmol) em DMF (200 mL) foram adicionados à mistura de reação a 80°C. A mistura de reação foi agitada a 110 °C durante 48 h. A mistura de reação foi resfriada até em temperatura am- biente, bruscamente arrefecida por solução aquosa saturada de NH4Cl, diluída com água (3 mL) e extraída com EA (1 L × 3). Os extratos orgâ- nicos combinados foram lavados com salmoura, secos em sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. A purifica- ção (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 20:1) produziu (1R,2R,3S,4R)-2-(6- amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanol e seu isômero como uma mistura (17,6 g, 39,5 mmol, 59% de rendimento) como um óleo incolor. ESI-LCMS: m/z 446 [M+H]+.
[0331] Etapa B. (2R,3S,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzi- lóxi)metil)ciclobutanona e (2S,3R,4S)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3,4- bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona. A uma solução de uma mistura de (1R,2R,3S,4R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobu- tanol e seus isômeros (17,6 g, 39,5 mmol) em DCM (300 mL) foi adicio- nado DMP (33,5 g, 79,0 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 50:1) produziu (2R,3S,4R)-2-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona (15,6 g, 28,1 mmol, 71% de rendimento, 80% de pureza) e seu isômero (2S,3R,4S)-2-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona) como uma mistura sólida amarela. ESI-LCMS: m/z 444 [M+H]+.
[0332] Etapa C. 9-((1R,2S,3S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metile- nociclobutil)-9H-purin-6-amina. A uma suspensão de PPh3CH3Br (50,3 g, 140,7 mmol) em THF (1,0 mL) adicionou-se t-BuOK (15,8 g, 140,7 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1,5 h, em seguida, uma solução de uma mistura de (2R,3S,4R)-2-(6-amino-9H- purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona e (2S,3R,4S)-2-(6- amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona (15,6 g, 35,2 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada à mistura. A mistura de reação foi agitada a 40 °C durante 1,5 h. A mistura de reação foi res- friada até em temperatura ambiente, bruscamente arrefecida por solu- ção aquosa saturada de NH4Cl e extraída com EA (1L × 2). Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos em sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1 a 30:1) produziu 3,5 g, em seguida, a purificação (MPLC, ACN:NH4HCO3 0,5% em água = 70:30) produziu 9-((1R,2S,3S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin- 6-amina e seu isômero como uma mistura (2,0 g, 4,5 mmol, 13% de rendimento) como um óleo amarelo. ESI-LCMS: m/z 442 [M+H]+
[0333] Etapa D. N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-meti- lenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de uma mistura de 9-((1R,2S,3S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-pu- rin-6-amina e seu isômero (2,0 g, 4,5 mmol) em piridina (40 mL) adici- onou-se BzCl (9,06 mmol, 1,05 mL) em temperatura ambiente. A mis- tura de reação foi agitada em temperatura ambiente A mistura de rea- ção foi bruscamente arrefecida com MeOH e concentrada sob pressão reduzida. O produto de reação bruto foi dissolvido em THF (40 mL) e MeOH (10 mL), e NH4OH 30% (10 mL) foi adicionado à mistura a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 1,5 h. A mistura foi aci- dificada usando ácido cítrico até pH = 5, e extraída com EA (100 mL × 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, EA:PE = 1:1) produziu 2,3 g (85%
de pureza em HPLC) como um óleo amarelo. A purificação (MPLC, ACN:HCOOH 5% em água = 95:5) produziu N-(9-((1R,2S,3S)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu isômero como uma mistura (2,05 g, 3,76 mmol, 83% de rendi- mento) como um óleo amarelado. ESI-LCMS: m/z 546 [M+H] +.
[0334] Etapas E e F. N-(9-((1S,2R,3R)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-metile- nociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de uma mistura de N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida e seu isômero (1,5 g, 2,8 mmol) em DCM (30 mL) adicionou- se BCl3 (1 M, 14,1 mL) a -75 °C sob N2. A mistura resultante foi agitada a -78 ~ -40 °C por 3,5 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com MeOH (30 mL) a 75 °C e, em seguida, ela foi aquecida até em temperatura ambiente. A mistura de reação foi alcalinizada com solução aquosa satu- rada de NaHCO3 até pH 6, e concentrada sob pressão reduzida. A purifi- cação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:NH4HCO3 0,5% em água = 50:50) produziu N-(9-((1R,2S,3S)-2,3- bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu isô- mero como uma mistura (703 mg) como um sólido branco. O produto da mistura de N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida e seu isômero (1,25 g) foi separado por cromatografia de fluido supercrítico (SFC) (OZ-H, 2 mL/min, (MeOH70ACN30)/CO2 = 35/65) para fornecer N-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenoci- clobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (509 mg, 1,39 mmol, tempo de retenção de 3,2 min) como um sólido branco, ESI-LCMS: m/z 366 [M+H]+.
[0335] Etapa G. ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-metileno- ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2,3- bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (35,0 mg, 95,8 µmol) em CH3NH2/EtOH (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h. A mistura de reação foi concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, NH4HCO3 0,05% em H2O: ACN = 20:80) produziu ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di- il)dimetanol (15,0 mg, 57,4 µmol, 59,9% de rendimento) como um só- lido branco. RMN 1H (400 MHz, D2O): δ 8,19 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 5,23 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 5,11-5,13 (m, 1 H), 4,88-4,90 (m, 1H), 3,73-3,82 (m, 2H), 3,71 (d, J = 6 Hz, 2 H), 2,85-2,90 (m, 1 H), 2,73-3,77 (m, 1 H). ESI-LCMS: m/z 262 [M+H]+. Exemplo 9: ((1S,2S,3R)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano- 1,2-di-il)dimetanol.
[0336] Etapas A e B: N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-metile- nociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu isômero. A uma solução de uma mistura de N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu isômero (Exemplo 8, produto da Etapa D, 1,5 g, 2,8 mmol) em DCM (30 mL) adicionou-se BCl3 (1 M, 14,1 mL) a -75 °C sob N2. A mistura resultante foi agitada a -78 ~ -40 °C por 3,5 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com MeOH (30 mL) a - 75°C e, em seguida, aquecida até em temperatura ambiente. A mistura de reação foi alcalinizada com solução aquosa saturada de NaHCO3 até pH 6, e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, ACN:NH4HCO3 0,5% em água = 50:50) produziu N-(9-((1R,2S,3S)-2,3- bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu isô- mero (703 mg) como um sólido branco. O produto da mistura (1,25 g) foi separado por SFC (OZ-H, 2 mL/min, MeOH(70)ACN(30))/CO2 = 35/65) para fornecer N-(9-((1R,2S,3S)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)- 9H-purin-6-il)benzamida (493 mg, 1,35 mmol, tempo de retenção 3,8 min) como um sólido branco, ESI-LCMS: m/z 366 [M+H]+.
[0337] Etapa C: ((1S,2S,3R)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-metileno- ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de N-(9-((1R,2S,3S)-2,3- bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (30 mg, 82,1 µmol) em CH3NH2/EtOH (3 mL) foi agitada em temperatura ambi- ente durante 1,5 h. A mistura de reação foi concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash 18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, HCOOH 0,5%/H2O:ACN=1:9) produziu ((1S,2S,3R)-3-(6- amino-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (10 mg, 38,3 µmol, 47% de rendimento) como um sólido branco. RMN H 1 (400 MHz, D2O): δ 8,19 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 5,23 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 5,11- 5,13 (m, 1 H), 4,88-4,90 (m, 1H), 3,73-3,82 (m, 2H), 3,71 (d, J = 6 Hz, 2 H), 2,85-2,90 (m, 1 H), 2,73-3,77 (m, 1 H). ESI-LCMS: m/z 262 [M+H]+. Exemplo 10: ((1R,2R,3S)-3-(2-Amino-6-hidróxi-9H-purin-9-il)-4-metile- nociclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0338] Etapa A. (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoxi- metil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma solu- ção de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol (Intermediário 4, 8,0 g, 19,3 mmol) em 10 mL) adicionou-se (6-cloro-9H- purin-2-il)carbamato de terc-butila (10,4 g, 38,6 mmol) e PPh3 (10,1 g, 38,6 mmol). A mistura de reação foi agitada a 0 °C sob atmosfera de N2, e DIAD (7,8 g, 38,6 mmol) foi adicionado lentamente. A mistura de reação foi agi- tada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=4:1) produziu (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dieto- ximetil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (9,5 g)
como um óleo amarelo. LC/MS: m/z 666,3 [M+H]+.
[0339] Etapa B. (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-formil- ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutil)- 6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (8,5 g, 12,7 mmol) em CH3CN (30 mL) adicionou-se H2SO4 0,5 N (20 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (15 mL), lavada com água (2 x 10 mL), solução satu- rada de bicarbonato de sódio (10 mL), H2O (2 X 10 mL) e salmoura (10 mL). A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para pro- duzir o produto (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-formilciclo- butil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. O produto bruto foi usado diretamente na reação seguinte sem purificação adicional. LC-MS m/z = 592,2 [M+H]+.
[0340] Etapa C. (9-((1R,2R,3S,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(hidro- ximetil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-formilciclobutil)- 6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila em MeOH foi adicionado NaBH4 (723,9 mg, 19,1 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min e bruscamente arrefecida com H2O. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida. EA (15 mL) foi adicionado, a fase orgânica foi lavada com água e salmoura, seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA=1:1) produziu (9-((1R,2R,3S,4S)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-(hidroximetil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carba- mato de terc-butila (4,5 g, 7,6 mmol, 38,7% de rendimento) como um óleo incolor. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 – 7,24 (m, 10H), 4,72 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 10,5 Hz, 4H), 4,30 (q, J = 5,9 Hz, 1H), 4,12 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 3,74 – 3,56 (m, 2H), 3,44 – 3,33 (m, 2H), 2,31 (ddd, J = 14,5, 8,2, 6,3 Hz, 1H), 2,16 (tt, J = 8,0, 6,0 Hz, 1H), 2,05 (tt, J = 8,7, 5,8
Hz, 1H); LCMS: m/z 594,2 [M+H]+.
[0341] Etapa D. (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(((2-ni- trofenil)selanil)metil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-bu- tila. A uma solução de (9-((1R,2R,3S,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(hidro- ximetil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (1,0 g, 1,7 mmol) em THF (20 mL) adicionou-se 1-nitro-2-selenocianatobenzeno (839,9 mg, 3,4 mmol), seguido por PBu3 (686,8 mg, 3,4 mmol). A mistura de reação foi agitada a 55 °C de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 2:1) produziu (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(((2-nitrofe- nil)selanil)metil)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (1,1 g, 1,4 mmol, 83,1% de rendimento) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,30 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,09 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 8,2, 1,3 Hz, 1H), 7,47 – 7,37 (m, 1H), 7,37 – 7,19 (m, 10H), 4,58 – 4,39 (m, 5H), 3,81 – 3,53 (m, 4H), 3,18 (p, J = 8,0 Hz, 1H), 3,03 – 2,89 (m, 1H), 2,18 (ddd, J = 15,0, 8,7, 6,2 Hz, 1H), 1,44 (s, 9H). LCMS m/z = 779,2 [M+H]+.
[0342] Etapa E. (9-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metileno- ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila. A uma solução de (9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(((2-nitrofenil)selanil)me- til)ciclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (1,1 g, 1,4 mmol) em THF (30 mL) adicionou-se H2O2 (5 mL). A mistura de reação foi agitada a 55 °C de um dia para o outro. Água (40 mL) foi adicionada à mistura de reação e a camada aquosa foi extraída com EA (40 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão redu- zida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 2:1) produziu (9-((1S,2R,3R)- 2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carba- mato de terc-butila (734,0 mg, 1,3 mmol, 92,9% de rendimento) como um sólido amarelo. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,35 (s, 1H), 8,58 (s,
1H), 7,47 – 7,14 (m, 10H), 5,45 (dt, J = 7,9, 2,6 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,87 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 3,91 – 3,74 (m, 2H), 3,66 (h, J = 5,4 Hz, 2H), 3,25 (td, J = 7,9, 3,9 Hz, 1H), 3,10 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 1,48 (s, 9H). LCMS m/z = 576,2 [M+H]+.
[0343] Etapa F. 2-Amino-9-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- metilenociclobutil)-9H-purin-6-ol, (9-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)- 4-metilenociclobutil)-6-cloro-9H-purin-2-il)carbamato de terc-butila (734,0 mg, 1,3 mmol) foi dissolvido em TFA (15 mL) e H2O (3 mL), após agitação em temperatura ambiente durante 15 min, a mistura foi aquecida até 50 °C e agitada até o monitoramento por LC-MS indicar que o material de partida foi consumido. NaHCO3 foi adicionado à mistura cuidadosamente em tem- peratura ambiente até pH = 8. A mistura de reação foi extraída com EA. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de NaHCO3, salmoura, secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e con- centradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 10:1) produziu 2-amino-9-((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metileno- ciclobutil)-9H-purin-6-ol (469,4 mg, 1,03 mmol, 79,0% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,60 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,47 – 7,05 (m, 10H), 6,46 (s, 2H), 5,17 (dt, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,77 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,82 – 3,67 (m, 2H), 3,62 (qd, J = 9,9, 4,9 Hz, 2H), 3,01 (tdd, J = 10,1, 6,8, 3,7 Hz, 2H). LC/MS: m/z 458,2 [M+H]+.
[0344] Etapa G. ((1R,2R,3S)-3-(2-Amino-6-hidróxi-9H-purin-9-il)-4- metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de 2-amino-9- ((1S,2R,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-ol (469,4 mg, 1,03 mmol) dissolvida em DCM (20 mL), foi agitada a -75 °C. BCl3 (1 M, 10,3 mL) foi adicionado lentamente à mistura de reação. A mis- tura de reação foi agitada a -75 °C durante 1 h. À mistura de reação, adi- cionou-se solução aquosa saturada de Na2CO3 (4 mL), H2O (20 mL) e foi extraída com DCM (20 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e concentradas sob pressão reduzida. A purifica- ção (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 30:70) produziu ((1R,2R,3S)-3-(2-amino-6-hidróxi-9H-purin-9- il)-4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (174,0 mg, 0,63 mmol, 61,2% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,56 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 6,43 (s, 2H), 5,21 – 4,94 (m, 2H), 4,85 – 4,61 (m, 3H), 3,67 (h, J = 5,3 Hz, 2H), 3,56 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 2,85 – 2,70 (m, 1H). LC-MS m/z = 278,1 [M+H]+. Exemplo 11: ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4-metile- nociclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0345] Etapa A. 9-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metileno- ciclobutil)-N,N-Di-Boc-2-fluoro-9H-purin-6-amina. A uma solução de (1R,2S,3R)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutanol (500 mg, 1,54 mmol) em THF (20,0 mL) adicionou-se N,N-Di-Boc-2-fluoro-9H-pu- rin-6-amina (1,09 g, 3,08 mmol) e PPh3 (810,4 mg, 3,08 mmol). A mis- tura de reação foi agitada a 0 °C sob atmosfera de N2, e DIAD (622,2 mg, 3,08 mmol) foi adicionado lentamente. A mistura de reação foi agi- tada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi concentrada a vácuo. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 4:1) produziu 9-((1S,2R,3R)- 2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-N,N-Di-Boc-2-fluoro-9H- purin-6-amina (1,1 g) como um sólido branco. LC-MS m/z = 660,8 [M+H]+.
[0346] Etapa B. 9-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-metile- nociclobutil)-2-fluoro-9H-purin-6-amina. 9-((1S,2R,3R)-2,3-Bis((benzi- lóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-N,N-Di-Boc-2-fluoro-9H-purin-6-amina (1,1 g bruto) foi dissolvida em TFA (15 mL) e H2O (3 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 4 h. NaHCO 3 foi adicionado à mistura cuidadosamente em temperatura ambiente até pH = 8. A mistura de reação foi extraída com EA. As camadas orgâni- cas combinadas foram lavadas com NaHCO 3 e salmoura, secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, PE:EA = 1:1) produziu 9-((1S,2R,3R)-2,3- bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-fluoro-9H-purin-6-amina (450 mg, 0,98 mmol, 63,6% de rendimento em duas etapas) como um sólido branco. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,21 (s, 1H), 7,84 (s, 2H), 7,40 – 7,20 (m, 10H), 5,31 (dt, J = 7,0, 2,7 Hz, 1H), 5,10 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,84 – 3,71 (m, 2H), 3,71 – 3,60 (m, 2H), 3,05 (tq, J = 5,5, 2,7 Hz, 2H). LCMS: m/z 460,3 [M+H]+.
[0347] Etapa C. ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4- metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de 9-((1S,2R,3R)- 2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-fluoro-9H-purin-6-amina (450 mg, 0,98 mmol) em DCM (200 mL) foi agitada a -75 °C. BCl3 (1 M, 10,3 mL) foi adicionado lentamente à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada a -75 °C durante 1 h. Adicionou-se à reação uma so- lução aquosa saturada de Na2CO3 (4 mL), H2O (20 mL), e em seguida, ela foi extraída com DCM (20 mL × 2), lavada com salmoura e concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 30:70) produziu ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano- 1,2-di-il)dimetanol (200 mg, 0,72 mmol, 73,5% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,20 (s, 1H), 7,81 (s, 2H), 5,20 (dt, J = 7,5, 2,6 Hz, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,93 – 4,68 (m, 3H), 3,70 (h, J = 5,2 Hz, 2H), 3,58 (h, J = 6,0 Hz, 2H), 2,84 (dddd, J = 13,9, 8,2, 6,9, 4,1 Hz, 1H). LCMS m/z = 280,1 [M+H]+.
Exemplo 12: ((1R,2S,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroximetil)-3-me- tilenociclobutil)etan-1-ol.
[0348] Etapa A. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)me- til)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenoci- clobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 8, produto da Etapa F, 720 mg, 1,97 mmol) em DMF seco (15 mL) foi adicionado imidazol (402,46 mg, 5,91 mmol) seguido por TBDPSCl (343,9 mg, 2,96 mmol). A mis- tura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com água (20 mL), extraída com EA (20 mL × 2), lavada com salmoura, seca com Na2SO4 anidro, fil- trada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 80:1) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida (250 mg, 414,1 µmol, 21,0% de rendimento) como um sólido branco. LCMS m/z = 604,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 11,19 (s, 1 H), 8,71 (s, 1 H), 8,52 (s, 1 H), 8,10 – 8,02 (m, 2 H), 7,72 – 7,63 (m, 5 H), 7,61 – 7,53 (m, 2 H), 7,53 – 7,44 (m, 6 H), 5,55 – 5,47 (m, 1 H), 5,10 (t, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,86 (t, J = 5,1 Hz, 1 H), 4,82 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 4,01 (dd, J = 7,3, 5,8 Hz, 2 H), 3,72 – 3,57 (m, 2 13 H), 3,07 (dt, J = 5,9, 2,7 Hz, 2 H), 1,04 (s, 9 H). RMN C (101 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 165,56, 151,35, 150,18, 148,20, 143,30, 135,09, 133,39, 132,96, 132,37, 129,87, 128,44, 128,42, 127,91, 125,52, 106,11, 64,78, 61,10, 53,76, 45,16, 42,24, 26,63, 18,80.
[0349] Etapa B. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)- 2-formil-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-(hidroximetil)-4-
metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (250 mg, 414,1 µmol) em DCM (10 mL) adicionou-se periodinano de Dess–Martin (DMP) (379,27 mg, 828,11 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em tempera- tura ambiente durante 1 h. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 70:1) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-for- mil-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (241 mg, 400,5 µmol, 96,7% de rendimento) como um óleo amarelo. LCMS m/z = 620,3 [M+H2O]+.
[0350] Etapa C. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)- 2-(1-hidroxietil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma so- lução de N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-2-formil-4- metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (240 mg, 398,8 µmol) em THF (10 mL) adicionou-se MeMgBr (1 M, 1,40 mL) usando uma seringa a 0 °C sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi agitada a 0 °C du- rante 1 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com solução aquosa sa- turada de NH4Cl (20 mL), extraída com EA (20 mL × 2), lavada com sal- moura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, MeCN 97% sem tampão) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc- butildifenilsilil)óxi)metil)-2-(1-hidroxietil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (210 mg, 339,9 µmol, 85,2% de rendimento) como um só- lido branco. LC-MS m/z = 618,3 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 11,18 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,71 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 8,11 – 7,98 (m, 2H), 7,73 – 7,62 (m, 5H), 7,56 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 7,52 – 7,42 (m, 6H), 5,62 – 5,49 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 4,91 – 4,75 (m, 2H), 3,98 (q, J = 5,6, 4,8 Hz, 2H), 3,84 (m, 1H), 3,33 (s, 2H), 3,04 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 2,92 – 2,82 (m, 1H), 1,04 (s, 9H), 0,94 (m, 3H).
[0351] Etapa D. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)me- til)-2-(1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)-9H-pu-
rin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butil- difenilsilil)óxi)metil)-2-(1-hidroxietil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (200 mg, 323,7 µmol) em DCM (10 mL) adicionou-se 2,4,6-colidina (78,46 mg, 647,45 µmol), MMTrCl (149,95 mg, 485,59 µmol), seguido por AgNO3 (54,99 mg, 323,72 µmol). A mistura de rea- ção foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A purificação (FCC, SiO2, PE: EA=1:1) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butildife- nilsilil)óxi)metil)-2-(1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida (200 mg, 224,7 µmol, 69,4% de rendi- mento) como um óleo amarelo. LC-MS m/z = 890,4 [M +H]+.
[0352] Etapa E. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(1-((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-3-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)- 2-(1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (200 mg, 224,68 µmol) em THF (10 mL) adicionou-se TBAF (58,75 mg, 224,7 µmol). A mistura de reação foi agitada a 35 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A purifi- cação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, MeCN 92% sem tampão) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2- (1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (120 mg, 184,1 µmol, 82,0% de rendimento) como um sólido branco. LC-MS m/z = 652,3 (M+H)+.
[0353] Etapa F. ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(1-((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)metanol. Uma solução de N- (9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4- metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (120 mg, 184,1 µmol) dissol- vida em 30% de solução de MeNH2/EtOH (10 mL), foi agitada em tempe- ratura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob pres- são reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technolo- gies, 4 g, 4 mL/min, MeCN 65% sem tampão) forneceu ((1R,2R,3S)-3-(6-
amino-9H-purin-9-il)-2-(1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenoci- clobutil)metanol (75 mg, 137,0 µmol, 74,4% de rendimento) como um só- lido branco. LC-MS m/z = 548,2 (M +H)+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,23 (d, J = 14,5 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 17,3 Hz, 1H), 7,43 – 7,39 (m, 1H), 7,34 – 7,11 (m, 12H), 6,85 – 6,74 (m, 2H), 5,39 (dd, J = 12,8, 8,5 Hz, 1H), 5,13 (dt, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 4,78 (dt, J = 5,6, 2,6 Hz, 1H), 4,70 (dt, J = 17,8, 5,3 Hz, 1H), 3,73 (d, J = 8,5 Hz, 3H), 3,67 – 3,46 (m, 3H), 3,25 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 2,92 – 2,78 (m, 1H), 2,64 (dd, J = 52,3, 5,7 Hz, 1H), 0,82 (dd, J = 39,2, 6,2 Hz, 3H).
[0354] Etapa G. 1-((1R,2S,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroxi- metil)-3-metilenociclobutil)etanol A uma solução de ((1R,2R,3S)-3-(6- amino-9H-purin-9-il)-2-(1-((4-metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenoci- clobutil)metanol (25 mg, 45,65 µmol) em DCM (5 mL) adicionou-se CCl3COOH (200 mg, 1,22 mmol). A mistura de reação foi aquecida em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, MeCN 20% sem tampão) produziu 1- ((1R,2S,4R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroximetil)-3-metilenociclobu- til)etanol (8,0 mg, 29,1 µmol, 63,7% de rendimento) como um sólido branco. LC-MS m/z = 276,1 (M +H)+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,22 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,26 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 5,42 – 5,27 (m, 1H), 5,09 (dt, J = 13,5, 2,6 Hz, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,73 (dt, J = 5,3, 2,6 Hz, 1H), 3,80 (dt, J = 9,4, 5,9 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 5,9, 4,3 Hz, 2H), 2,86 (dd, J = 5,5, 2,6 Hz, 1H), 2,71 (m,1H), 0,95 (dd, J = 6,3, 1,3 Hz, 3H). Exemplo 13: ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-4-meti- lenociclobutil)metanol.
[0355] Etapa A. N-(9-((1S,2R,3R)-2-(Hidroximetil)-3-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenoci- clobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 8, produto da etapa F, 225 mg, 615,8 µmol) em DCM (5 mL) foi adicionada piridina (3,08 mmol, 250 µL) seguido de MMTrCl (190 mg, 615,8 µmol) em temperatura am- biente. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente du- rante 18 horas. A mistura de reação foi diluída com DCM, lavada com solução aquosa de ácido cítrico, salmoura, seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada a vácuo. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH=50:1) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-2-(hidroximetil)-3-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (85 mg, 133,3 µmol, 22% de rendimento) como um sólido branco, ESI- LCMS: m/z 638 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,15(s, 1H), 8,63(s, 1H), 8,46(s, 1H), 8,03(d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,66-7,62(m, 1H), 7,58-7,53(m, 2H), 7,44-7,24(m, 12H), 6,93(d, J = 8,8 Hz, 1 H), 5,48(s, 1H), 4,95(s, 1H), 4,88-4,85(m, 1H), 4,75(s, 1H),3,75(s, 3H), 3,66- 3,62(m, 2H), 3,40-3,34(m, 2H), 3,04 (s, 2H).
[0356] Etapa B. 4-Metilbenzenossulfonato de ((1R,2S,4R)-2-(6- Benzamido-9H-purin-9-il)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-3-meti- lenociclobutil)metila. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2-(hidroxime- til)-3-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin- 6-il)benzamida (420 mg, 658,59 µmol), DMAP (8,05 mg, 65,86 µmol) e TEA (166,61 mg, 1,65 mmol, 229,64 µL) em diclorometano (8 mL) adi- cionou-se cloreto de paratoluenossulfonila (188,34 mg, 987,89 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com água, e a mistura foi extraída com EA. A camada orgânica foi concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: Água = 76: 24) produziu
((1R,2S,4R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-3-metilenociclobutil)metila 4-metilbenzenosulfonato (367 mg, 463,4 µmol, 70,4% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI-LCMS m/z = 792,3 [M+H]+
[0357] Etapa C. N-(9-((1S,2R,3R)-2-(Fluorometil)-3-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de ((1R,2S,4R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-3-metilenociclobutil)metila 4-metilbenzenosulfo- nato (367 mg, 463,44 µmol) em tetraidrofurano (8 mL) adicionou-se TBAF (484,68 mg, 1,85 mmol) em temperatura ambiente A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Techno- logies, 4 g, 4 mL/min, ACN: Água = 80:20) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-2- (fluorometil)-3-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)- 9H-purin-6-il)benzamida (120 mg, 187,6 µmol, 40,5% de rendimento) como um sólido amarelo. ESI-LCMS m/z = 640,2 [M+H]+.
[0358] Etapa D. N-(9-((1S,2R,3R)-2-(Fluorometil)-3-(hidroximetil)- 4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. Uma solução de N-(9- ((1S,2R,3R)-2-(fluorometil)-3-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4- metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (120 mg, 187,58 µmol) em ácido tricloroacético a 3%/DCM (8 mL) foi agitada em temperatura am- biente durante 10 min. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução saturada de bicarbonato de sódio e a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: Água = 30:70) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-2-(fluorometil)-3-(hidroximetil)-4-metileno- ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (65 mg, 175,2 µmol, 93,4% de ren- dimento, 99% de pureza) como um sólido amarelo. ESI-LCMS m/z =368,1 [M+H]+
[0359] Etapa E. ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorome- til)-4-metilenociclobutil)metanol. Uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2- (fluorometil)-3-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida (68 mg, 185,10 µmol) em metilamina/etanol (5 mL) foi agitada du- rante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 10: 90) produziu ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-2-(fluorometil)-4-metilenociclobutil)metanol (42 mg, 159,5 µmol, 86,2% de rendimento) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z =261,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,22(s, 1H), 8,13(s, 1H), 7,24(s, 2H), 5,39-5,37(m, 1H), 5,12(t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,81(s, 2H), 4,68 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,56(d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,73(d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,19- 3,09 (m, 1H), 2,89-2,87 (m, 1H). RMN 19 F (400 MHz, DMSO-d6): δ - 223,95 (s). Exemplo 14: (1R,2S,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroximetil)-3-meti- lenociclobutanocarbonitrila.
[0360] Etapa A. N-(9-((1S,2R,3R)-3-(Hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 8, produto da Etapa F, 240 mg, 656 µmol) em DCM seco (10 mL) adicionou-se piridina (259 mg, 3,3 mmol, 264 µL). Uma solução de MMTrCl (202 mg, 656,84 µmol) em DCM a 0 °C foi adicionada por gotejamento à mistura de reação. A mis- tura de reação foi agitada a 0 °C durante 1 h. A mistura foi bruscamente arrefecida com metanol. A mistura de reação foi concentrada sob pres- são reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technolo- gies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 40:60) produziu N-(9-((1S,2R,3R)-3-
(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobu- til)-9H-purin-6-il)benzamida (160 mg, 250 µmol). ESI LC-MS: m/z 638 [M+H]+.
[0361] Etapa B. Benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-pu- rin-9-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)me- tila. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (360 mg, 564 µmol) em piridina seca (8 mL) adicionou-se uma solução de cloreto de benzoíla (119 mg, 846 µmol) em DCM por gotejamento a 0 °C sob N2. A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C, em seguida, água fria foi adicionada para arrefecer bruscamente a reação. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purifica- ção (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 50:50) produziu benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benza- mido-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenoci- clobutil)metila (140 mg, 165 µmol) como um sólido branco. ESI-LCMS: m/z 742 [M+H]+.
[0362] Etapa C. Benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-pu- rin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila. A uma solução de benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metila (240 mg, 323 µmol) em DCM (10 mL) adicionou-se ácido tricloroacético (TCA) (0,3 g) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 1 h em temperatura ambiente. À mistura de reação adicionou-se solução satu- rada de NaHCO3. A mistura de reação foi concentrada a vácuo. A puri- ficação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 50:50) produziu benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido- 9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila (150 mg, 319 µmol) como um sólido branco. ESI-LCMS: m/z 470 [M+H]+.
[0363] Etapa D. Benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-pu- rin-9-il)-2-formil-4-metilenociclobutil)metila. A uma solução de benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metile- nociclobutil)metila (210 mg, 447 µmol) em DCM (5 mL) adicionou-se pe- riodinano de Dess-Martin (284 mg, 670 µmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 1 h em temperatura ambiente. A mistura de reação foi lavada com solução saturada de NaHCO3 e so- lução saturada de Na2SO3, e extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada a vácuo. O composto do título, benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-pu- rin-9-il)-2-formil-4-metilenociclobutil)metila (230 mg, 393 µmol, 80% de pureza) foi usado como um sólido mais branco diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. ESI-LCMS: m/z 468 [M+H]+, 486 [M+H+H2O]+.
[0364] Etapa E. Benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-Benzamido-9H-pu- rin-9-il)-2-((E)-(hidroxi-imino)metil)-4-metilenociclobutil)metila. A uma solução de benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2- formil-4-metilenociclobutil)metila (230 mg, 393 µmol) em piridina (5 mL) adicionou-se cloridrato de hidroxilamina (82 mg, 1,18 mmol) em tempe- ratura ambiente. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com água gelada e extraída com DCM (20 mL x 4). Os extratos orgânicos combinados foram secos com Na2SO4, filtrados e concentrados a vácuo para fornecer o produto bruto benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido- 9H-purin-9-il)-2-((E)-(hidroxi-imino)metil)-4-metilenociclobutil)metila (240 mg, 348 µmol, 70% de pureza) como um sólido branco, usado di- retamente na etapa seguinte. ESI-LCMS: m/z 483 [M+H]+.
[0365] Etapa F. benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-Benzamido-9H-purin- 9-il)-2-ciano-4-metilenociclobutil)metila. A uma solução de benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-((E)-(hidroxi-imino)metil)-4- metilenociclobutil)metila (240 mg, 348 µmol) em piridina seca (5 mL) foi adicionado, por gotejamento, uma solução de cloreto de metanossulfonila (200 mg, 1,74 mmol) em piridina a 0 °C sob N2. A mistura foi agitada durante 1 h a 0 °C. À mistura de reação adicionou-se HCl 4 N frio por gotejamento para arrefecer bruscamente a reação. A mistura de reação foi extraída com DCM (20 mL x 4) e lavada com solução saturada de NaHCO3 e salmoura. As camadas orgânicas combinadas foram concen- tradas sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:H2O = 40:60) produziu benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2-ciano-4-metilenociclo- butil)metila (100 mg, 215 µmol) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO): δ ppm 11,26 (br s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,1-8,1 (m, 4H), 7,75-7,62 (m, 2H), 7,62-7,53 (m, 4H), 6,23-6,17 (m, 1H), 5,40- 5,34 (m, 1H), 5,10-5,16 (m, 1H), 4,78-4,68 (m, 2H), 4,42-4,32 (m, 1H), 3,95-3,85 (m, 1H). ESI-LCMS: m/z 465 [M+H]+.
[0366] Etapa G. (1R,2S,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroxime- til)-3-metilenociclobutanocarbonitrila. Benzoato de ((1R,2R,3S)-3-(6-ben- zamido-9H-purin-9-il)-2-ciano-4-metilenociclobutil)metila (100 mg, 215,30 µmol) foi dissolvido em metilamina/metanol (5 mL) em temperatura ambi- ente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 4 h. A mistura de reação foi concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, co- luna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:H2O = 20:80) forneceu (1R,2S,4R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroximetil)-3-metileno- ciclobutanocarbonitrila (25 mg, 97,6 µmol) como um sólido mais branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO): δ ppm 8,22 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,36 (br s, 2H), 5,93-5,87 (m, 1H), 5,24-5,19 (m, 1H), 5,07 (t, J = 5,5, 1H), 4,97-4,93 (m, 1H), 3,95 (t, J = 8,16, 1H), 3,85-3,72 (m, 2H), 3,95-3,85 (m, 1H). ESI- LCMS: m/z 257 [M+H]+. Exemplo 15: ((1S,2S,3R,Z)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometi- leno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0367] Etapa A. 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(flu- oro(fenilsulfonil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu isômeros. A uma solução de fluorometil fenil sulfona (1,65 g, 9,47 mmol) e clorofos- fito de dietila (1,48 g, 9,47 mmol) em tetra-hidrofurano (55 mL) adicio- nou-se bis(trimetilsilil)amida de lítio (1,58 g, 9,47 mmol) por gotejamento usando uma seringa a -78 °C. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 50 min, em seguida, uma solução de (2S,3R,4S)-2-(6-amino- 9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona e (2R,3S,4R)-2-(6- amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanona (Exemplo 8, produto da etapa B, 2,8 g, 6,31 mmol) em tetra-hidrofurano (15 mL) foi adicionada à mistura por gotejamento usando uma seringa. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução saturada de cloreto de amônio a 0 °C. A mistura de reação foi extraída com EA e a camada orgânica foi lavada com salmoura e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1) produziu 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(fenilsulfo- nil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu isômeros como uma mis- tura (800 mg, 1,13 mmol, 18,0% de rendimento, 85% de pureza) como um sólido branco.
[0368] Etapa B. 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(flu- oro(tributilestanil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiô- mero; 9-((1S,2R,3R,E)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(tributilesta- nil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero. A uma so- lução de uma mistura de 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(flu- oro(fenilsulfonil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seus isômeros (2,0 g, 3,34 mmol) e azobisisobutironitrila (AIBN) (219,07 mg, 1,33 mmol) em tolueno (20 mL) adicionou-se hidreto de tri-n-butilestanho (2,90 g, 10,01 mmol, 2,69 mL) em temperatura ambiente sob N2. A mis- tura de reação foi submetida a refluxo durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1) produziu 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4- (fluoro(tributilestanil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enanti- ômero (0,88 g, 1,12 mmol, 33,5% de rendimento, 95% de pureza) e 9- ((1S,2R,3R,E)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(tributilestanil)meti- leno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero como uma mistura (0,91 g, 1,15 mmol, 34,6% de rendimento, 95% de pureza) como um óleo incolor. ESI-LCMS m/z = 750,2 [M+H]+.
[0369] 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(tributiles- tanil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,20(s, 1H), 8,15(s, 1H) 7,36-7,27 (m, 12H), 5,53-5,51(m,1H), 4,58-4,57 (m, 2H), 4,46(s,1H), 4,01-3,97 (m, 1H), 3,83- 3,80 (m, 1H), 3,61-3,60 (m, 2H), 4,01-3,97 (m, 1H), 3,18 (s,1H), 2,90- 2,87 (m, 1H), 1,25-1,21 (m, 6H), 1,13-1,08 (m, 6H), 0,77 (s,9 H), 0,61- 0,55 (m, 6H). RMN 19F (400 MHz, DMSO-d6): δ -107,29 (s).
[0370] 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(tributi- lestanil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,12(s, 1H), 8,11(s, 1H) 7,38-7,21 (m, 12H), 5,53-5,51(m,1H), 4,58-4,46 (m, 4H), 3,85-3,81 (m, 1H), 3,68-3,62 (m, 3H), 3,09-2,99 (m, 2H), 1,54-1,36 (m, 6H), 1,28-1,18 (m, 6H), 0,96-0,92 (m, 6H), 0,95-0,81 (m,9 H). RMN 19 F (400 MHz, DMSO-d6): δ -106,70 (s).
[0371] Etapa C. 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluorome- tileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero. A uma solução de uma mistura de 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(tributi- lestanil)metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero (910 mg, 1,22 mmol) em metanol (30 mL) adicionou-se metóxido de sódio (328,4 mg, 6,1 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi brusca- mente arrefecida por HCl (aq. 6 N) até pH = 7, e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: Água = 75: 25) 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)me- til)-4-(fluorometileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero como uma mistura (550 mg, 1,1 mmol, 88,6% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z =460,2 [M+H]+.
[0372] Etapa D. N-(9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(flu- orometileno)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero. A uma solução de 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluorome- tileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero (550 mg, 1,2 mmol) em piridina (8 mL) adicionou-se cloreto de benzoíla (252,4 mg, 1,8 mmol, 208,6 µL) por gotejamento a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 6 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida por NH 4OH, em seguida, a mistura foi concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: Água = 85: 15) produziu N-(9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluorometileno)ciclobu- til)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero como uma mistura (480 mg, 766,5 µmol, 64,0% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 564,2 [M+H]+
[0373] Etapa E. N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(Fluorometileno)-3,4-bis(hi- droximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluorometi- leno)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero (920 mg, 1,6 mmol) em diclorometano (30 mL) foi adicionado tricloreto de boro (1 M, 19,6 mL) por gotejamento a -78 °C. A mistura de reação foi agitada a - 78 °C durante 1 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com metanol a -78 °C e adicionou-se TEA até pH = 6. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna
Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:Água = 34: 66) produziu N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(fluorometileno)-3,4-bis(hidroximetil)ci- clobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero como uma mistura (480 mg, 1,2 mmol, 72,9% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 384,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,76 (s, 1H), 8,61(s, 1H), 8,10-7,54 (m, 5H), 7,03- 6,82(m,1H), 5,63-5,61(m, 1H),4,92-4,86(m, 2H), 3,78-3,73(m, 2H), 3,62- 3,59 (m, 2H), 2,99-2,90(m, 2H). O material foi adicionalmente separado por SFC (AS-H, 2 mL/min, CO2: MeOH = 85:15), para fornecer N-(9- ((1S,3R,4R,Z)-2-(fluorometileno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-pu- rin-6-il)benzamida (270 mg) e N-(9-((1R,3S,4S,Z)-2-(fluorometileno)- 3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (270 mg).
[0374] Etapa F. N-(9-((1R,3S,4S,Z)-2-(Fluorometileno)-3-(hidroxime- til)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida e seu isômero. A uma solução de N-(9-((1R,3S,4S,Z)-2-(fluorometi- leno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (270 mg, 704,3 µmol) e piridina (278,5 mg, 3,5 mmol, 283,7 µL) em diclorometano (20 mL) adicionou-se cloreto de 4-metoxitrifenilmetila (239,2 mg, 774,7 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi deixada aquecer até em temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com metanol. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: Água = 70: 30) e purificação adicional (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1) produziu N-(9-((1R,3S,4S,Z)-2-(fluorometileno)-3-(hidroxi- metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida (120 mg, 168,4 µmol, 23,9% de rendimento, 92% de pureza) e N-(9- ((1R,3S,4S,Z)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 115,90 µmol, 16,5% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco ESI LC-MS m/z = 656,3 [M+H]+.
[0375] Etapa G. ((1S,2R,4S,Z)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solu- ção de N-(9-((1R,3S,4S,Z)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 122,0 µmol) em metilamina/etanol (2 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1S,2R,4S,Z)-2-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobu- til)metanol (40 mg, 68,9 µmol, 56,5% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+.
[0376] Etapa H. ((1S,2S,3R,Z)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorome- tileno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de ((1S,2R,4S,Z)-2-(6- amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)ciclobutil)metanol (50 mg, 90,6 µmol) em ácido tricloroacético a 3%/DCM (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 15: 85) produziu ((1S,2S,3R,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometi- leno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (20 mg, 71,6 µmol, 79,0% de rendi- mento) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 280,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,23 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,24 (s, 2 H), 6,98 (t, J = 2,1 Hz, 0,5H), 6,77 (t, J = 2,1 Hz, 0,5H), 5,45-5,43 (m, 1H), 4,89 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 4,84 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,73-3,68 (m, 2H), 3,56 (t, J = 4,3 Hz, 2H), 2,88-2,87 (m, 2H). RMN 19F (400 MHz, DMSO-d6): δ -138,71 (s). Exemplo 16: ((1R,2R,3S,Z)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometi- leno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0377] Etapa A. N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(Fluorometileno)-3-(hidroxi- metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)ben- zamida e seu isômero. A uma solução de N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(fluoro- metileno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 15, Etapa E) (270 mg, 704,3 µmol) e piridina (278,5 mg, 3,5 mmol, 283,7 µL) em diclorometano (20 mL) adicionou-se cloreto de 4- metoxitrifenilmetila (239,2 mg, 774,7 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi deixada aquecer até em temperatura ambiente e foi agitada durante 3 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com metanol. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: Água = 70: 30) e purificação adicional (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1) produziu N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (120 mg, 168,4 µmol, 23,9% de rendimento, 92% de pureza) e N-(9- ((1S,3R,4R,Z)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-metoxifenil)dife- nilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 115,9 µmol, 16,5% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco ESI LC- MS m/z = 656,3 [M+H]+.
[0378] Etapa B. ((1R,2S,4R,Z)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solu- ção de N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 122,0 µmol) em metilamina/etanol (4 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1R,2S,4R,Z)-2-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobu- til)metanol (40 mg, 69,6 µmol, 57,1% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+.
[0379] Etapa C. ((1R,2R,3S,Z)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluoro- metileno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de ((1R,2S,4R,Z)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-me- toxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (71,9 mg, 130,4 µmol) em ácido tricloroacético a 3%/DCM (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 15: 85) produziu ((1R,2R,3S,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometileno)ciclobu- tano-1,2-di-il)dimetanol (10 mg, 35,5 µmol, 27,2% de rendimento, 99% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 280,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,23(s, 1H), 8,14(s, 1H), 7,24 (s, 2 H), 6,98(t, J = 2,1 Hz, 0,5H), 6,77(t, J = 2,1 Hz, 0,5H), 5,45-5,43(m, 1H), 4,89(t, J = 5,0 Hz, 1H), 4,84(t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,73-3,68(m, 2H), 3,56(t, J = 4,3 Hz, 2H), 2,88-2,87 (m, 2H). RMN 19 F (400 MHz, DMSO-d6): δ - 138,71 (s). Exemplo 17: ((1R,2R,3S,E)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometi- leno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0380] Etapa A. 9-((1S,2R,3R,E)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro- metileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero. A uma solução de 9-((1S,2R,3R,Z)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluoro(tributilestanil)meti- leno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enantiômero (880 mg, 1,18 mmol) em metanol (30 mL) adicionou-se metóxido de sódio (317,6 mg, 5,9 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida por solução aquosa de HCl 6N) até pH = 7, e a mistura de reação foi con- centrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18,
Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: Água = 75: 25) produziu 9- ((1S,2R,3R,E)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(fluorometileno)ciclobutil)-9H-pu- rin-6-amina e seu enantiômero como uma mistura (400 mg, 800,9 µmol, 68,1% de rendimento, 92% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 460,2 [M+H]+
[0381] Etapa B. N-(9-((1S,2R,3R,E)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4- (fluorometileno)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero. A uma solução de uma mistura de 9-((1S,2R,3R,E)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-(fluorometileno)ciclobutil)-9H-purin-6-amina e seu enanti- ômero (400 mg, 870,48 µmol) em piridina (8 mL) foi adicionado cloreto de benzoíla (183,5 mg, 1,31 mmol, 151,7 µL) por gotejamento a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 6 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com NH 4OH, em se- guida, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: Água = 85: 15) produziu N-(9-((1S,2R,3R,E)-2,3-bis((benzilóxi)metil)- 4-(fluorometileno)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiô- mero como uma mistura (470 mg, 792,2 µmol, 91,0% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 564,2 [M+H]+.
[0382] Etapa C. N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(Fluorometileno)-3,4-bis(hidro- ximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero. A uma solu- ção de uma mistura de N-(9-((1S,2R,3R,E)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(flu- orometileno)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida e seu enantiômero (880 mg, 1,6 mmol) em diclorometano (30 mL) adicionou-se tricloreto de boro (1 M, 1,87 mL) por gotejamento a -78 °C. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 1 h. A reação foi bruscamente arrefecida com metanol a -78 °C e adicionou-se TEA até pH = 6. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:Água = 34: 66) produziu N-(9-
((1S,3R,4R,E)-2-(fluorometileno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin- 6-il)benzamida e seu enantiômero como uma mistura (450 mg, 1,2 mmol, 72,2% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS: m/z = 384,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,75(s, 1H), 8,63(s, 1H), 8,06-7,54 (m, 5H), 6,99-6,78(m, 1H), 5,52-5,50(m, 1H), 4,91-4,83(m, 2H), 3,86-3,80(m, 2H), 3,68-3,57 (m, 2H), 3,08-2,97(m, 2H). O material foi adicionalmente separado por SFC (OD-H, 2 mL/min, CO2:DEA 0,1% em MeOH = 65:35), para fornecer N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(fluorometileno)-3,4- bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (242 mg) e N-(9- ((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometileno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin- 6-il)benzamida (242 mg).
[0383] Etapa D. N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(Fluorometileno)-3-(hidroxi- metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)ben- zamida e seu isômero. A uma solução de N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(fluoro- metileno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (242,0 mg, 631,2 µmol) e piridina (249,7 mg, 3,2 mmol, 254,3 µL) em dicloro- metano (10 mL) adicionou-se cloreto de 4-metoxitrifenilmetila (214,4 mg, 694,4 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em tem- peratura ambiente e agitada durante 3 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com metanol e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: Água = 70: 30) e (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1) produziu N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(fluorometileno)-3-(hi- droximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (130 mg, 188,3 µmol, 29,8% de rendimento, 95% de pu- reza) e N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 115,9 µmol, 18,4% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 656,3 [M+H]+.
[0384] Etapa E. ((1R,2S,4R,E)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solu- ção de N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (50 mg, 76,3 µmol) em metilamina/etanol (2 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1R,2S,4R,E)-2-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobu- til)metanol (30 mg, 51,7 µmol, 67,8% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+.
[0385] Etapa F. ((1R,2R,3S,E)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluoro- metileno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de ((1R,2S,4R,E)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (30 mg, 54,4 µmol) em ácido tricloroacético 3%/DCM foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 15: 85) produziu ((1R,2R,3S,E)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-4-(fluorometileno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (10 mg, 35,1 µmol, 64,5% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 280,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,28 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,27 (s, 2 H), 6,93 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 6,73 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 4,91 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,85 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,81-3,77 19 (m, 2H), 3,61-3,56 (m, 2H), 2,99-2,96 (m, 2H). RMN F (400 MHz, DMSO-d6): δ -138,27 (s). Exemplo 18: ((1S,2S,3R,E)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometi- leno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0386] Etapa A. N-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(Fluorometileno)-3-(hidroxime- til)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida e seu isômero. A uma solução de N-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometi- leno)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 17, Etapa E) (242,0 mg, 631,2 µmol) e piridina (249,7 mg, 3,2 mmol, 254,3 µL) em diclorometano (10 mL) adicionou-se cloreto de 4-metoxitrifenilmetila (214,4 mg, 694,4 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com metanol e concentrada sob pressão redu- zida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:Água = 70: 30) e purificação adicional (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 100:1) produziu N-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometileno)-3-(hidroxi- metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida (130 mg, 188,3 µmol, 29,8% de rendimento, 95% de pureza) e N-(9- ((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 115,9 µmol, 18,4% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS: m/z 656,3 [M+H]+.
[0387] Etapa B. ((1S,2R,4S,E)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solu- ção de N-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)-3-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (80 mg, 122,0 µmol) em metilamina/etanol (2 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1S,2R,4S,E)-2-(6-amino-9H-pu-
rin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobu- til)metanol (50 mg, 85,2 µmol, 69,8% de rendimento, 94% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+
[0388] Etapa C. ((1S,2S,3R,E)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-4-(fluoro- metileno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de ((1S,2R,4S,E)- 2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)ciclobutil)metanol (50 mg, 90,6 µmol) em ácido tricloroacético a 3%/DCM (2 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 15: 85) produziu ((1S,2S,3R,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(fluorometi- leno)ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol (10 mg, 35,1 µmol, 38,7% de rendi- mento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 280,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,38 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,26-7,19 (m, 10 H), 7,16-7,13 (m, 2H), 6,95 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 6,84-6,82 (m, 2H), 6,75 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 5,50-5,49 (m, 1H), 4,87 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3,78-3,75 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,22-3,20 (m, 2H), 3,14- 3,12 (m, 1H), 2,95 (s, 1H) RMN 19 F (400 MHz, DMSO-d6): δ -138,28 (s). Para os Exemplos 15 a 18, as configurações foram atribuídas arbitraria- mente. Exemplo 19: ((1S,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-4-metileno- ciclobutano-1,2-di-il)dimetanol.
[0389] Etapa A. 9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoxi- metil)ciclobutil)- N,N-Di-Boc-9H-purin-6-amina. A uma suspensão de (1R,2S,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutanol (Inter- mediário 4, 20 g, 48,2 mmol), N,N-diboc-9H-purin-6-amina (32,4 g, 96,5 mmol) e Pph3 (25,3 g, 96,5 mmol) em THF (300 mL) adicionou-se DIAD
(19,5 g, 96,5 mmol) a 0 °C sob N2. A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 18 h. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. A purificação (FCC, SiO2, EA:PE = 1:10 a 1:3) produziu 56 g. A purificação (MPLC, co- luna Flash C18, Agela Technologies, 800 g, 200 mL/min, ACN: H2O = 80: 20) produziu 9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ci- clobutil)-N,N-Di-Boc-9H-purin-6-amina (23,9 g, 32,3 mmol, 67% de rendi- mento, 99% de pureza) como um óleo amarelo. ESI-LCMS m/z = 732,3 [M+H]+
[0390] Etapa B. (1S,2S,3R,4R)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3,4- bis((benzilóxi)metil)ciclobutanocarbaldeído. A uma solução de 9- ((1S,2R,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(dietoximetil)ciclobutil)- N,N- Di-Boc-9H-purin-6-amina (23,9 g, 32,7 mmol) em DCM (150 mL) adicio- nou-se TFA (50 mL) em temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (500 mL) e lavada com água (250 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com solução saturada de NaHCO3 e salmoura, e concentrada a vácuo para produzir (1S,2S,3R,4R)-2-(6-amino-9H-purin- 9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanocarbaldeído (14,9 g, 32,6 mmol, 99,7% de rendimento) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 458,3 [M+H]+.
[0391] Etapa C. ((1S,2R,3R,4S)-2-(6-Amino-9H-purin-9-il)-3,4- bis((benzilóxi)metil)ciclobutil)metanol. A uma solução de (1S,2S,3R,4R)- 2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclobutanocarbaldeído (14,9 g, 32,6 mmol) em uma mistura de THF (50 mL) e MeOH (100 mL) adicionou-se NaBH4 (1,85 g, 48,9 mmol) em porções a 0 °C. Após agita- ção a 0 °C durante 0,5 hora, a mistura de reação foi bruscamente arrefe- cida com HCl 1N, diluída com água (300 mL) e extraída com DCM (300 mL × 2). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura e concentrados a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 330 g, 100 mL/min, ACN:H2O = 30: 70) produziu
((1S,2R,3R,4S)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclo- butil)metanol (11,3 g, 24,6 mmol, 76% de rendimento) como um óleo in- color.
[0392] Etapa D. 9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4-(((terc- butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-amina. A uma solução de ((1S,2R,3R,4S)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,4-bis((benzilóxi)metil)ciclo- butil)metanol (23 g, 50,1 mmol) em DCM (250 mL) adicionou-se terc-bu- tilclorodifenilsilano (41,27 g, 150,15 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi deixada aquecer até em temperatura ambiente e agitada durante 3 h. A reação foi bruscamente arrefecida com metanol, diluída com água e ex- traída com EA. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH =100: 1) produziu 9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzi- lóxi)metil)-4-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-amina (33 g, 42,55 mmol, 85,0% de rendimento, 90% de pureza) como um só- lido branco. ESI-LCMS m/z = 698,3 [M+H]+9
[0393] Etapa E. N-(9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-Bis((benzilóxi)metil)-4- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de 9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(((terc-butildife- nilsilil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-amina (33 g, 47,28 mmol) em piri- dina (250 mL) adicionou-se cloreto de benzoíla (7,98 g, 56,74 mmol) por gotejamento usando uma seringa a 0 °C. Após agitação em temperatura ambiente durante 2 horas, a mistura de reação foi bruscamente arrefe- cida com metanol, seguido pela adição de hidróxido de amônio (4 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min, e em se- guida, diluída com água e extraída com EA. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio e concentrada sob pressão re- duzida. A purificação (FCC, SiO2, DCM: MeOH = 200: 1) produziu N-(9- ((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me-
til)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (36 g, 41,29 mmol, 87,3% de rendi- mento, 92% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 802,4 [M+H]+
[0394] Etapa F. N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)me- til)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R,4S)-2,3-bis((benzilóxi)metil)-4-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (31 g, 38,65 mmol) em di- clorometano (200 mL) adicionou-se tricloreto de boro (1 M, 309,21 mL) por gotejamento a -78°C. A mistura de reação foi agitada a -78°C durante 1 hora. A reação foi bruscamente arrefecida com metanol a -78°C, e em se- guida, TEA foi adicionado à mistura de reação para ajustar o pH da mistura de reação até pH = 6. O solvente foi removido a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 330 g, 100 mL/min, ACN:H2O = 50: 50) produziu N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)-3,4-bis(hidroximetil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (20 g, 30,56 mmol, 79,1% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 622,2 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,12 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,05-8,03 (m, 2H), 7,66-7,62 (m, 1H), 7,58-7,53 (m, 6H), 7,43-7,32 (m, 6H), 4,81 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 4,70 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 4,64 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,84-3,73 (m, 2H), 3,62-3,54 (m, 4H), 2,90-2,86 (m, 1H), 2,78-2,74 (m, 1H), 2,11-2,07 (m, 1H), 0,90 (s, 9H).
[0395] Etapa G. N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-Butildifenilsi- lil)óxi)metil)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9- ((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3,4-bis(hidroxime- til)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (20 g, 32,16 mmol) e piridina (12,72 g, 160,82 mmol, 12,96 mL) em diclorometano (200 mL) adicio- nou-se cloreto de 4-metoxitrifenilmetila (9,93 g, 32,16 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com metanol e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 50 g, 50 mL/min, ACN:H2O = 86: 14) produziu N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida (4,5 g, 4,63 mmol, 14,4% de rendimento, 92% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 894,3 [M+H]+, RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,23 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,10-8,08 (m, 2H), 7,68-7,64 (m, 1H), 7,59-7,57 (m, 6H), 7,22-7,21 (m, 10H), 7,10-7,08 (m, 2H), 6,82-6,80 (m, 2H), 5,00 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,80-3,71 (m, 5H), 3,59-3,56 (m, 2H), 3,23-3,11 (m, 2H), 3,00-2,92 (m, 1H), 2,90-2,84 (m, 1H), 2,10-2,06 (m, 1H), 0,88 (s, 9H).
[0396] Etapa H. N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-Butildifenilsi- lil)óxi)metil)-3-formil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)- 9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)dife- nilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (7,0 g, 7,83 mmol) em diclorometano (100 mL) foi adicionado periodinano de Dess-Martin (4,98 g, 11,74 mmol) em porções a 0 °C. A mistura de reação foi dei- xada aquecer até em temperatura ambiente e foi agitada por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada bruscamente com solução saturada de bicarbonato de sódio e foi extraída com DCM. A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura, submetida à secagem com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 50 g, 50 mL/min, ACN = 100%) produziu N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-3-formil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (5,44 g, 4,70 mmol, 60,0% de rendimento, 77% de pu- reza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 892,3 [M+H]+.
[0397] Etapa I. N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)-3-
formil-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2S,3R,4R)-2-(((terc-bu- tildifenilsilil)óxi)metil)-3-formil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)ciclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida (5,44 g, 6,10 mmol) em dioxano (81 mL) adi- cionou-se formaldeído (12 M, 40,67 mL) e NaOH (2 M, 48,80 mL) em tem- peratura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 40 °C durante 16 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução saturada de cloreto de amônio e extraída com EA. As camadas orgânicas foram com- binadas e concentradas sob pressão reduzida. N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc- butildifenilsilil)óxi)metil)-3-formil-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida foi produzida como um só- lido branco (8,0 g bruto). ESI-LCMS m/z = 922,2 [M+H]+.
[0398] Etapa J. N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)- 3,3-bis(hidroxilmetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida. A N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)- 3-formil-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)- 9H-purin-6-il)benzamida resultante foi redissolvida em dioxano (81 mL). NaBH4 (1,85 g, 48,80 mmol) foi adicionado a 0 °C e agitado durante 30 min. A mistura de reação foi, então, diluída com solução saturada de clo- reto de amônio, e extraída com EA. A fase orgânica foi lavada com sal- moura e concentrada a vácuo. produzindo N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-butil- difenilsilil)óxi)metil)-3,3-bis(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (8,2 g bruto) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 924,2 [M+H]+, incluindo o subproduto formilado.
[0399] Etapa K. ((2S,3S,4R)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(((terc-bu- tildifenilsilil)óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutano- 1,1-di-il)dimetanol (incluindo o subproduto formilado). A N-(9- ((1S,2S,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3,3-bis(hidroximetil)-4- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida resultante, incluindo o subproduto formilado, foi dissolvida em
CH3NH2/C2H5OH e agitada durante 30 minutos para remover o grupo protetor Bz. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e foi purificada (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 50 g, 25 mL/min, ACN:H2O =54: 46). A fração coletada foi seca a vácuo para produzir ((2S,3S,4R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((terc-butildifenilsi- lil)óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)ciclobutano-1,1-di- il)dimetanol (3,1 g) como um sólido branco, ESI-LCMS m/z = 820,2[M+H]+, incluindo o subproduto formilado.
[0400] Etapa L. ((2S,3S,4R)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(((terc-butil- difenilsilil) óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutano-1,1- di-il)dimetanol. O ((2S,3S,4R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((terc-butildife- nilsilil)óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)ciclobutano-1,1-di- il)dimetanol (incluindo o subproduto formilado) resultante foi redissolvido em MeCN/água e a mistura foi agitada a 80 °C durante 1 h para remover a porção de formaldeído. Em seguida, o solvente foi removido sob pressão reduzida para produzir ((2S,3S,4R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((terc-bu- tildifenilsilil)óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)ciclobutano- 1,1-di-il)dimetanol (2,2 g, 2,31 mmol, 37,8% de rendimento, 86% de pu- reza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 820,4 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,43 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,50-7,27 (m, 11H), 7,20-7,05 (m, 12H), 6,99-6,97 (m, 2H), 6,77-6,75 (m, 2H), 5,01 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,49 (t, J = 3,8 Hz, 1H), 3,89-380 (m, 2H), 3,72 (S, 3H), 3,56-3,55 (m, 2H), 3,48-2,46 (m, 2H), 3,36-3,33 (m, 1H), 3,12- 3,08 (m, 1H), 3,06-2,96 (m, 2H), 0,75 (s, 9H).
[0401] Etapa M. N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-Butildifenilsilil)óxi)metil)- 3,3-bis(hidroxil metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida. A uma solução de ((2S,3S,4R)-3-(6-amino-9H-purin- 9-il)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil) ciclobutano-1,1-di-il)dimetanol (2,2 g, 2,68 mmol) em piridina (30 mL) adi-
cionou-se trimetilclorossilano (1,17 g, 10,73 mmol, 1,38 mL) por goteja- mento usando uma seringa a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora, A CCF mostrou que o material de partida foi consumido completamente e 9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-butildifenil- silil)óxi)metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-3,3-bis(((trimetilsi- lil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-amina se formou. Em seguida, cloreto de benzoíla (1,51 g, 10,73 mmol, 1,25 mL) foi adicionado por gotejamento usando uma seringa a 0 °C, e foi agitado em temperatura ambiente por mais 3 h. A CCF mostrou que o intermediário A foi consumido completa- mente. A reação foi bruscamente arrefecida com metanol, seguido por 0,5 mL de hidróxido de amônio. A mistura foi agitada em temperatura ambi- ente durante 30 min, A reação foi diluída com água e extraída com EA. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio e concentrada a vácuo, produzindo N-(9-((1S,2S,3S,4R)-2- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-3-(((trimetilsilil)óxi)metil)ciclobutil) -9H-purin-6-il)benzamida (1,8 g bruto) como um sólido amarelo. ESI-LCMS m/z = 996,4 [M+H]+
[0402] Etapa N. N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)- 3,3-bis(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil) difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida. N-(9-((1S,2S,3S,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-3-(((trimetilsi- lil)óxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (1,8 g) foi dissolvida em NaOH 1 N a 0 °C, e agitada durante 20 min para remover todo o grupo protetor TMS. A reação foi, então, bruscamente arrefecida por AcOH, dilu- ída com água e extraída com EA. A camada orgânica combinada foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, seca com sul- fato de sódio e concentrada, e o resíduo foi purificado (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 20 g, 20 mL/min, ACN: H2O = 65: 35) para pro- duzir N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3,3-bis(hidroxime-
til)-4-(((4-metoxifenil) difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida (1,37 g, 1,33 mmol, 49,7% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 924,2 [M+H]+
[0403] Etapa O. N-(9-((1S,2S,3R,4R)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)me- tóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxi- fenil) difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solu- ção de N-(9-((1S,2S,4R)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3,3-bis(hidroxi- metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benza- mida (1,37 g, 1,48 mmol) em piridina (15 mL) adicionou-se cloreto de 4,4'- dimetoxitritila (1 g, 2,96 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada por mais 3 horas. a reação foi brusca- mente arrefecida com metanol e concentrada sob pressão reduzida. A pu- rificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 20 g, 20 mL/min, ACN:H2O = 100: 0) produziu N-(9-((1S,2S,3R,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fe- nil)metóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-(hidroximetil)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (1,4 g, 1,03 mmol, 69,3% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 1226,3 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,23 (s, 1H) 8,64 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,01-8,08 (m, 2H), 7,67-7,64 (m, 1H), 7,58-7,55 (m, 2H), 7,44-7,04 (m, 33H), 6,96-6,73 (m, 9H), 5,14 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,89-3,87 (m, 2H), 3,71-3,50 (m, 12H), 3,49-3,45 (m, 1H), 3,26-3,07 (m, 6H), 0,69 (s, 9H).
[0404] Etapa P. N-(9-((1S,2S,3S,4R)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fe- nil)metóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-formil-4-(((4-meto- xifenil) difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2S,3R,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)me- tóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-(hidroximetil)-4-(((4-me- toxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (500 mg, 407,65 µmol) e EDCI (469,62 mg, 2,45 mmol) em DMSO (8 mL) adicionou-se TFA (46,48 mg, 407,65 µmol, 27,34 µL) e piridina (64,49 mg, 815,31 µmol, 65,68 µL). A mistura de reação foi agitada em tem- peratura ambiente durante 16 horas. A mistura foi bruscamente arrefe- cida com água e extraída com EA. A camada orgânica foi concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 100: 0) produziu N-(9-((1S,2S,3S,4R)-3- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)me- til)-3-formil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (492 mg, 373,7 µmol, 91,7% de rendimento, 93% de pu- reza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 1224,3 [M+H]+
[0405] Etapa Q. 9-((1S,2S,3R,4R)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)me- tóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-etinil-4-(((4-metoxifenil) difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-amina. A uma solução de N- (9-((1S,2S,3S,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-(((terc- butildifenilsilil)óxi)metil)-3-formil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) me- til)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (492 mg, 401,79 µmol) e carbo- nato de potássio (166,59 mg, 1,21 mmol) em metanol (8 mL) adicionou- se (1-diazo-2-oxopropil)fosfonato de dimetila (192,97 mg, 1 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com EA. A fase da camada orgânica foi concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 100: 0) produziu 9- ((1S,2S,3R,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-(((terc-butil- difenilsilil)óxi)metil)-3-etinil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclo- butil)-9H-purin-6-amina (380 mg, 306,3 µmol, 76,2% de rendimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 1.116.2 [M+H]+.
[0406] Etapa R. N-(9-((1S,2S,3R,4R)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)me- tóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-etinila-4-(((4-metoxifenil)dife- nil metóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de 9-
((1S,2S,3R,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-(((terc-butildife- nilsilil)óxi)metil)-3-etinil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)ciclobutil)- 9H-purin-6-amina (696 mg, 623,42 µmol) em piridina adicionou-se cloreto de benzoíla (175,26 mg, 1,25 mmol, 144,73 µL) por gotejamento usando uma seringa a 0°C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambi- ente durante 1 h. Hidróxido de amônio (3 mL) foi adicionado à mistura de reação, e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente du- rante mais 30 min. A reação foi diluída com água e extraída com EA. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, fil- trada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 100:0) pro- duziu N-(9-((1S,2S,3R,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2- (((terc-butildifenilsilil)óxi)metil)-3-etinil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)me- til)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (730 mg, 598,1 µmol, 95,9% de ren- dimento) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 1221,5 [M+H]+.
[0407] Etapa S. N-(9-((1R,2S,3S,4R)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)me- tóxi)metil)-3-etinil-2-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil) ci- clobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2S,3R,4R)- 3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-2-(((terc-butildifenilsilil)óxi) metil)- 3-etinil-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)ben- zamida (730 mg, 598,1 µmol) em tetraidrofurano (15 mL) adicionou-se TBAF (1 M, 2,39 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em tempera- tura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi bruscamente ar- refecida com água e extraída com EA. A fase orgânica foi lavada com sal- moura, seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada soba vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O 75: 25) produziu N-(9-((1R,2S,3S,4R)-3-((bis(4-metoxi- fenil)(fenil)metóxi)metil)-3-etinil-2-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (562 mg, 572,2 µmol, 95,7% de rendimento) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 982,4
[M+H]+.
[0408] Etapa T. N-(9-((1S,2R,3R,4S)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fe- nil)metóxi)metil)-3-etinil-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-(((2-ni- trofenil)selanil) metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1R,2S,3S,4R)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-eti- nil-2-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida (562 mg, 572,23 µmol) e 1-nitro-2-selenocianato- benzeno (285,87 mg, 1,26 mmol) em tetraidrofurano (10 mL) adicionou- se tributilfosfina (254,70 mg, 1,26 mmol) por gotejamento usando uma seringa a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambi- ente durante 1 h. A mistura foi diluída com água e extraída com EA. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e, em seguida, concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 95: 5) produziu N-(9-((1S,2R,3R,4S)-3-((bis(4-metoxife- nil)(fenil)metóxi)metil)-3-etinil-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4- (((2-nitrofenil)selanil)metil) ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (856 mg, 513,8 µmol, 89,8% de rendimento, 70% de pureza) como um sólido amarelo. ESI-LCMS m/z = 1167,3 [M+H]+.
[0409] Etapa U. N-(9-((1S,2R,3S)-3-((Bis(4-metoxifenil)(fenil)me- tóxi)metil)-3-etinil-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclo- butil)-9H-purin-6-il)benzamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3R,4S)- 3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-etinil-2-(((4-metoxifenil)dife- nilmetóxi) metil)-4-(((2-nitrofenil)selanil)metil)ciclobutil)-9H-purin-6- il)benzamida (856 mg, 513,81 µmol) em tetraidrofurano (10 mL) adicio- nou-se H2O2 (17,48 mg, 513,8 µmol, 1,3 mL). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 2 h. A mistura de reação foi bruscamente arre- fecida com solução saturada de sulfito de sódio e extraída com EA. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio,
filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, co- luna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 90: 10) produziu N-(9-((1S,2R,3S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)- 3-etinil-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H- purin-6-il)benzamida (390 mg, 384,3 µmol, 74,8% de rendimento, 95% de pureza) como um sólido amarelo. ESI-LCMS m/z = 964.3 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,23 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,07-8,05 (m, 2H), 7,66-7,63 (m, 1H), 7,57-7,54 (m, 2H), 7,40-7,38 (m, 2H),7,27-7,15 (m, 20H), 6,87-6,84 (m, 4H), 6,75-6,73 (m, 2H), 5,59- 5,56 (m, 1H), 5,16 (s, 1H), 4,9 2 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 3,74 (s, 6H), 3,68 (s, 3H), 3,57-3,53 (m, 2H), 3,44-3,41 (m, 2H), 3,31 (s, 1H), 3,25-3,19 (m, 1H).
[0410] Etapa V. N-(9-((1S,2R,3S)-3-Etinil-2,3-bis(hidroximetil)-4-meti- lenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida. Uma solução de N-(9- ((1S,2R,3S)-3-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metóxi)metil)-3-etinil-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (390 mg, 404,52 µmol) em TCA a 10% em diclorometano (10 mL) foi agi- tada em temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A puri- ficação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: H2O = 62: 38) produziu N-(9-((1S,2R,3S)-3-etinil-2,3-bis(hidroxime- til)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (140 mg, 359,5 µmol, 88,9% de rendimento) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 390,1 [M+H]+.
[0411] Etapa W. N-(9-((1S,2R,3S)-3-Etinil-3-(hidroximetil)-2-(((4- metoxifenil) difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)ben- zamida. A uma solução de N-(9-((1S,2R,3S)-3-etinil-2,3-bis(hidroxime- til)-4-metileno ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (140 mg, 359,52 µmol) e piridina (142,19 mg, 1,80 mmol, 144,81 µL) em diclorometano (8 mL) adicionou-se cloreto de 4-metoxitrifenilmetila (111,0 mg, 359,5 µmol) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida até em temperatura ambiente e agitada por mais 2 horas. A mistura de reação foi brusca- mente arrefecida com metanol, e a mistura de reação foi concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: H2O = 86: 14) produziu N-(9-((1S,2R,3S)-3-eti- nil-3-(hidroxilmetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenoci- clobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (230 mg, 312,8 µmol, 87,0% de ren- dimento, 90% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 662,2 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,27 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,09-8,08 (m, 2H), 7,67-7,64 (m, 1H), 7,59-7,55 (m, 2H), 7,24-7,16 (m, 11H), 7,07-7,05 (m, 2H), 6,82-6,80 (m, 2H), 5,58- 5,56 (m, 1H), 5,32-5,30 (m, 2H), 5,03 (s, 1H), 3,82-3,76 (m, 1H), 3,73- 3,68 (m, 4H), 3,45-3,33 (m, 3H), 3,16 (s, 1H).
[0412] Etapa X. ((1S,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. N-(9- ((1S,2R,3S)-3-etinil-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi) metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (230 mg, 347,57 µmol) foi dissolvida em metilamina/etanol (3 mL), e agitada em tempe- ratura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: H2O = 60: 40) produziu ((1S,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-2-(((4-metoxifenil)dife- nilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (120 mg, 206,6 µmol, 59,4% de rendimento, 96% de pureza) como um sólido branco. ESI- LCMS m/z = 558,2 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,31 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,35 (s, 2H), 7,22-7,16 (m, 10H), 7,08-7,06 (m, 2H), 6,82-6,79 (m, 2H), 5,45-5,43 (m, 1H), 5,29-5,25 (m, 2H), 4,95 (s, 1H), 3,80-3,76 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,69-3,65 (m, 1H), 3,42-3,35 (m, 1H),
3,34-3,27 (m, 2H), 3,15 (s, 1H).
[0413] Etapa Y. ((1S,2R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-4- metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol. Uma solução de ((1S,2R,3S)- 3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)me- til)-4-metilenociclobutil)metanol (30 mg, 53,8 µmol) em TCA a 10% em diclorometano (1 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida com uma solução saturada de bicarbonato de sódio e concentrada a vácuo. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: H2O = 19: 81) produziu ((1S,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil- 4-metilenociclobutano-1,2-di-il)dimetanol (10 mg, 34,4 µmol, 63,9% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 286,1 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,19 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,28 (s, 2H), 5,32-5,26 (m, 3H), 4,95 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,78 (t, J = 2,76 Hz, 2H), 3,70 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 3,27 (s, 1H), 3,22-3,16 (m, 1H). Exemplo 20: 2-(((((1R,3S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-2-metileno- ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila.
[0414] A uma solução de 4-amino-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2- metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (Exemplo 1, 100 mg, 0,48 mmol) em THF (2,5 mL) adicionou-se t-BuMgCl (1,93 mL, 1,0 M, 1,93 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente sob N 2 du- rante 1,0 h. 2-(((perfluorofenil)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila (263 mg, 0,58 mmol) em THF (1,0 mL) foi adicionada por gotejamento à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna
Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:tampão HCOOH 0,5% = 46:54) produziu 2-(((((1R,3S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)- il)-2-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila (20 mg, 9,3% de rendimento) como uma mistura de isô- meros no centro de fósforo (R p e Sp). LCMS: m/z = 447,2 [M+H]+. RMN 1 H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,91-8,02 (m, 1H), 7,35-7,39 (m, 2H), 7,18-7,26 (m, 3H), 6,03-6,10 (m, 1H), 5,57-5,60 (m, 1H), 5,23-5,29 (m, 1H), 5,05-5,07 (m, 1H), 4,94-5,01 (m, 1H), 4,32-4,34 (m, 1H), 3,88-3,92 (m, 1H), 2,57-2,65 (m, 1H), 2,13-2,25 (m, 1H), 1,30-1,35 (m, 1H), 1,22- 1,24 (m, 1H); RMN 31 P (162 MHz, CD3OD) δ ppm 4,05, 3,60, 3,55. Exemplo 21: 2-(((((1R,3S)-3-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)-2-metile- nociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de isopropila.
[0415] À solução de 2-amino-9-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metileno- ciclobutil)-1H-purin-6(9H)-ona (Exemplo 2, 80 mg, 323,56 µmol) em THF (2 mL) adicionou-se t-BuMgCl (1 M, 1,29 mL) dentro de 10 min em tem- peratura ambiente, a mistura foi agitada em temperatura ambiente du- rante 30 min e 2-(((S)-(perfluorofenóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de isopropila (146,67 mg, 323,56 µmol) dissolvido em THF (1 mL) foi adi- cionado lentamente dentro de 10 min. A mistura foi agitada em tempera- tura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi brusca- mente arrefecida com MeOH e concentrada sob pressão reduzida. A pu- rificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:tampão de HCOOH 0,5% = 42:58) produziu 2-((((1R,3S)-3-(2- amino-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)-2-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosfo- ril)amino)propanoato de isopropila (60 mg, 116,17 µmol, 35,90% de ren- dimento) como um pó branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (s,
1H), 7,36 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,23 – 7,11 (m, 3H), 5,35 (s, 1H), 5,09 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,89 – 4,77 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 3,83 – 3,73 (m, 1H), 3,23 (s, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,38 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 1,22 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,19 – 1,04 (m, 6H). ESI-LCMS: m/z 517,2 [M+H]+. Exemplo 22: (2S)-2-(((((1R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-metilenociclo- butil)metóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de isopropila.
[0416] A uma solução de ((1R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-meti- lenociclobutil)metanol (Exemplo 3, 50 mg, 216,22 µmol) em THF (1 mL) adicionou-se t-BuMgCl (1 M, 648,66 µL) dentro de 10 minutos em tem- peratura ambiente. A mistura foi agitada durante 30 minutos e 2-(((per- fluorofenóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila (117,62 mg, 259,46 µmol) dissolvido em THF (1 mL) foi adicionado len- tamente durante 10 minutos. A mistura foi agitada em temperatura am- biente de um dia para o outro. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:tampão HCOOH a 0,5% = 46:54) produziu (2S)-2-(((((1R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-metile- nociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propanoato de isopropila como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp) (50 mg, 99,9 µmol, 46,2% de rendimento) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,29 – 8,16 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,29 – 7,19 (m, 3H), 5,63 (m, 1H), 5,26 – 5,16 (m, 1H), 5,03 – 4,93 (m, 2H), 4,51 – 4,30 (m, 2H), 4,00 – 3,86 (m, 1H), 3,33 (s, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,50 (s, 1H), 1,40 – 1,32 (m, 3H), 1,25 – 1,19 (m, 6H). ESI-LCMS: m/z 501,3 [M+H]+. Exemplo 23: ((((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)- 4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0417] Etapa A. ((1S,3R,4S,E)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solução de N-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 18, Etapa A, 130 mg, 198,3 µmol) em metilamina/etanol (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclo butil)metanol (85 mg, 149,5 µmol, 75,4% de rendimento, 97% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO- d6): δ 8,38 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,26-7,19 (m, 10 H), 7,16- 7,13 (m,2H), 6,95 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 6,84-6,82 (m, 2H), 6,75 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 5,50-5,49 (m, 1H), 4,87 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3,78-3,75 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,22-3,20 (m, 2H), 3,14-3,12 (m, 1H), 2,95 (s, 1H) RMN 19F (400 MHz, DMSO-d6): δ -138,87 (s).
[0418] Etapa B: (Z)-N'-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(Fluorometileno)-3-(hidroxi- metil)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)-N,N-di- metilformimidamida A uma solução de ((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino-9H-pu- rin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobu- til)metanol (16 mg, 0,03 mmol) em MeOH (1,0 mL) em temperatura ambi- ente adicionou-se dimetilformamida dimetilacetal (0,1 mL, 89,4 mg, 0,75 mmol) sob Ar. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A concentração sob pressão reduzida produziu (Z)-N'-(9- ((1R,3S,4S,E)-2-(fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimidamida, que foi adicionalmente seca sob alto vácuo de um dia para o outro e usada bruta na etapa seguinte sem purificação adicional. MS [M+1] + = 607,15.
[0419] Etapa C: ((((1S,3R,4S,E)-3-(6-(((Z)-(dimetilamino)meti- leno)amino)-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenil- metóxi)metil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. (Z)-N'-(9-((1R,3S,4S,E)-2-(Fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimida- mida foi dissolvida em THF anidro (0,5 mL) e 1-metilimidazol (NMI) (30 mg, 29 µL, 0,36 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente. A mis- tura resultante no pequeno frasco (4 mL) foi agitada, e 2-((cloro(fe- nóxi)fosforil)amino)propanoato de (2S)-isopropila (68 mg, 0,22 mmol) foi, então, adicionada. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h e concentrada a 35 °C sob vácuo e, então, seca sob alto vácuo. O composto do título foi usado bruto na etapa seguinte sem purificação adicional. MS [M+1] + = 876,25.
[0420] Etapa D: ((((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. Ao ((((1S,3R,4S,E)-3-(6-(((Z)-(dimetilamino)metileno)amino)- 9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ci- clobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila adicionou-se solu- ção de TFA 0,377 M em MeOH-H2O (2,0 mL). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h e, então, concentrada sob pressão re- duzida. A purificação (FCC, SiO2, MeOH/DCM, 0 a 20%) e adicionalmente HPLC preparativa (CH3CN-H2O, 5 a 95%, incluindo 0,1% de ácido fórmico) produziu o composto do título. As frações corretas foram combinadas e secas por liofilização para produzir ((((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino-9H-purin- 9-il)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L- alaninato de isopropila como um sólido branco macio (6,4 mg) como uma mistura de isômeros no centro de fósforo (Rp e Sp). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 3,92, 3,55. MS [M+1] + = 549,1.
Exemplo 24: ((((1R,2R,3S)-2-(hidroximetil)-3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hi- dropirimidin-1(2H)-il)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alani- nato de isopropila.
[0421] Etapa A. 1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-5-metilpirimidina- 2,4(1H,3H)-diona. A uma solução de 1-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroxime- til)-4-metilenociclobutil)-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (Exemplo 5) (100 mg, 390 µmol) em DCM seco (2 mL) adicionou-se piridina (157 mg, 1,4 mmol, 113,0 µL) em temperatura ambiente, seguido por MMTrCl (122 mg, 1,98 mmol) a 0 °C sob N2. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi extraída com DCM e água. A camada orgânica foi concentrada a vácuo. A pu- rificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH=10:1 e MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: H2O = 20:80), produziu 1- ((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4- metilenociclobutil)-5-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (45 mg, 82 µmol) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):δ ppm 11,37 (s, 1H), 7,55-7,51 (m, 1H), 7,37-7,17 (m, 12H), 6,91-6,86 (m, 2H), 5,42-5,35 (m, 1H),5,09-5,04 (m, 1H), 4,87-4,83 (m, 1H), 4,67 (t, J = 5,3, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,59 (t, J = 5,2, 2H), 3,21-3,09 (m, 2H), 2,71-2,60 (m, 2H), 1,82 (s, 3H). ESI-LCMS: m/z 547 [M+H]+.
[0422] Etapa B. ((((1R,2R,3S)-2-(hidroximetil)-3-(5-metil-2,4-dioxo- 3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)- L-alaninato de isopropila. O composto do título como uma mistura de isô- meros no centro de fósforo (Rp e Sp) foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23, Etapas B e C, usando 1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-
metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-5-metilpirimidina- 2,4(1H,3H)-diona. RMN P31 (CD3OD) δ ppm 4,07, 3,72. MS [M+H]+ 522,1. Exemplo 25: ((((1R,2R,3S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)-2-(hi- droximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0423] Etapa A. N-(1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2-di-hidropirimi- din-4-il)benzamida. A uma solução de N-(1-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidro- ximetil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2-di-hidropirimidin-4-il)benza- mida (Exemplo 4, Etapa E,) (900 mg, 2,64 mmol) em piridina (15 mL) adicionou-se cloreto de 4-metoxitrifenilmetila (976,99 mg, 3,16 mmol) a 0°C, a mistura foi deixada aquecer até em temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A reação foi bruscamente arrefecida com me- tanol. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: H2O=70:30) produziu N-(1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)- 2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2- di-hidropirimidin-4-il)benzamida (630 mg, 944,4 µmol, 35,8% de rendi- mento, 92% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 614,2 [M+H]+
[0424] Etapa B. 4-Amino-1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona. Uma so- lução de N-(1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-2-oxo-1,2-di-hidropirimidin-4-il)benzamida (630 mg, 1,03 mmol) em metilamina/etanol (8 mL) foi agitada em tempe- ratura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Techno- logies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 50:50) produziu 4-amino-1- ((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-meti- lenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona (400 mg, 769,2 µmol, 74,9% de rendi- mento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 610,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,62 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,37- 7,16 (m, 12H), 7,14 (d, J = 16,4 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,9 Hz, 2 H), 5,77 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,51-5,49 (m, 1H), 5,04 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 4,73 (t, J = 2,4 Hz, 1H), 4,68 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,62-3,56 (m, 2H), 3,14-3,11 (m, 2H), 2,68-2,66 (m, 1H), 2,61-2,55 (m, 1H).
[0425] Etapa C. ((((1R,2R,3S)-3-(4-amino-2-oxopirimidin-1(2H)-il)- 2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. O composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foram preparados de maneira análoga ao Exemplo 23 usando 4-amino-1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-me- toxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)-ona. RMN P31 (CD3OD) δ ppm 3,95, 3,56. MS [M+1]+ 507,1. Exemplo 26: ((((1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2- (hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0426] O composto do título como uma mistura de isômeros no cen- tro de fósforo (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23 usando ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Exem- plo 6, Etapa D). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 3,93, 3,59. MS [M+1]+ 530,1. Exemplo 27: ((((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-
7-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alani- nato de isopropila.
[0427] O composto do título como uma mistura de isômeros no cen- tro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23 ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Exem- plo 7, Etapa D). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 3,99, 3,62. MS [M+1]+ 548,2. Exemplo 28: ((((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4- metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0428] O composto do título como uma mistura de isômeros no cen- tro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23 usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxifenil)di- fenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Intermediário 6). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 2,90, 2,54. MS [M+1]+ 531,1. Exemplo 29: ((((1R,2R,3S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2- (hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0429] Etapa A. (E)-N'-(9-((1S,2R,3R)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-metile- nociclobutil)-6-hidroxi-9H-purin-2-il)-N,N-dimetilformimidamida. ((1R,2R,3S)-3-(2-amino-6-hidroxi-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano- 1,2-di-il)dimetanol (Exemplo 10) (160 mg, 0,58 mmol) foi dissolvido em MeOH (10 mL), e em seguida, DMF-DMA (690,2 mg, 5,8 mmol) foi adicio- nado lentamente. Após a agitação em temperatura ambiente durante 4 ho- ras, a mistura foi evaporada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 40:60) produziu (E)-N'-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenoci- clobutil)-6-idroxi-9H-purin-2-il)-N,N-dimetilformimidamida (190,2 mg, 0,57 mmol, 98%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,27 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 5,18 (dd, J = 7,9, 2,7 Hz, 1H), 5,04 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,77 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 4,72 (s, 0H), 3,74 – 3,61 (m, 2H), 3,58 (td, J = 5,0, 2,8 Hz, 2H), 3,15 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 2,91 – 2,83 (m, 1H), 2,83 – 2,76 (m, 1H). LCMS m/z = 385,2 [M+H]+. LCMS m/z = 333,2 [M+H]+.
[0430] Etapa B. (E)-N'-(6-hidroxi-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-2-il)- N,N-dimetilformimidamida. A uma solução de (E)-N'-(9-((1S,2R,3R)-2,3- bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-6-hidroxi-9H-purin-2-il)-N,N-dimetil- formimidamida (190,2 mg, 0,57 mmol) em piridina (10 mL) adicionou-se MMTrCl (193,1 mg, 0,63 mmol). A mistura de reação foi agitada em tem- peratura ambiente durante 2 h. Em seguida, MeOH (1 mL) foi adicionada para arrefecer bruscamente a reação. A mistura de reação foi concen- trada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min) e a purificação adicional (FCC, SiO2,
DCM:MeOH = 10:1) produziu (E)-N'-(6-hidroxi-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroxi- metil)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-pu- rin-2-il)-N,N-dimetilformimidamida (110,2 mg, 0,18 mmol, 28,9%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,33 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,37 – 7,11 (m, 9H), 6,86 – 6,78 (m, 2H), 5,45 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3,73 (s, 2H), 3,62 (dp, J = 11,0, 5,6 Hz, 2H), 3,18 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 2,97 (s, 2H), 2,91 – 2,84 (m, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,76 (d, J = 15,3 Hz, 1H). LC-MS m/z = 605,3 [M+H]+.
[0431] Etapa C. 2-Amino-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-ol. (E)-N'-(6- hidroxi-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-2-il)-N,N-dimetilformimidamida (80 mg, 0,13 mmol) foi dissolvida em solução de amônia (5 mL, 7 N). Após agitação em temperatura ambiente durante 4 h, o excesso de rea- gente foi removido para obter o produto bruto. A purificação (MPLC, co- luna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:H2O = 45:55) produziu 2-amino-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)dife- nilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-ol (42 mg, 0,077 mmol, 58,8%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,59 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,41 – 7,16 (m, 9H), 7,19 – 7,09 (m, 2H), 6,94 – 6,80 (m, 2H), 6,42 (s, 2H), 5,16 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,83 – 4,73 (m, 1H), 4,68 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,62 (dh, J = 22,4, 5,7 Hz, 2H), 3,21 – 3,11 (m, 2H), 2,87 (p, J = 7,3 Hz, 1H), 2,77 (d, J = 5,9 Hz, 1H). LC/MS: m/z 550,2 [M+H]+.
[0432] Etapa D. ((((1R,2R,3S)-3-(2-amino-6-oxo-1,6-di-hidro-9H-pu- rin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alani- nato de isopropila. O composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exem-
plo 23, usando 2-amino-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-ol). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 4,15, 3,75. MS [M+1]+ 547,1. Exemplo 30: ((((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-2-(hidroxi- metil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopro- pila.
[0433] Etapa A. (E)-N'-(9-((1S,2R,3R)-2,3-Bis(hidroximetil)-4-meti- lenociclobutil)-2-fluoro-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimidamida. ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-4-metilenociclobutano- 1,2-di-il)dimetanol (Exemplo 11) (190 mg, 0,71 mmol) (Exemplo 11) (190 mg, 0,71 mmol) foi dissolvido em MeOH (10 mL), em seguida DMF-DMA (844,9 mg, 7,1 mmol) foi adicionado lentamente. Após agitação em tem- peratura ambiente durante 4 h, a mistura foi evaporada sob pressão re- duzida para obter o produto bruto. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN:H2O = 40:60) produziu (E)-N'-(9-((1S,2R,3R)-2,3-bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-2-flu- oro-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimidamida (210 mg, 0,63 mmol, 88,5%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,91 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 5,26 (dt, J = 7,7, 2,6 Hz, 1H), 5,09 – 5,04 (m, 1H), 4,79 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 4,75 – 4,70 (m, 2H), 3,59 (h, J = 6,0 Hz, 2H), 3,23 (s, 3H), 3,15 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 2,94 – 2,85 (m, 1H), 2,82 (dq, J = 8,3, 3,0 Hz, 1H). LCMS m/z = 335,1 [M+H]+
[0434] Etapa B. (E)-N'-(2-Fluoro-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)- N,N-dimetilformimidamida. A uma solução de (E)-N'-(9-((1S,2R,3R)-2,3-
bis(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)-2-fluoro-9H-purin-6-il)-N,N-dime- tilformimidamida (210 mg, 0,63 mmol) em DCM (10 mL) adicionou-se piridina (5 eq,) e MMTrCl (225,0 mg, 0,69 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. Em seguida, MeOH (1 mL) foi adicionada para arrefecer bruscamente a reação. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:H2O = 45:55) e a purificação (FCC, SiO2, DCM:MeOH = 10:1) produziu (E)-N'- (2-fluoro-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimidamida (110 mg, 0,18 mmol, 28,5%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,95 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,35 – 7,17 (m, 10H), 7,12 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 5,36 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,71 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,65 (dq, J = 10,7, 5,3 Hz, 2H), 3,26 (s, 3H), 3,21 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 3,18 (s, 2H), 2,95 (dd, J = 13,3, 7,1 Hz, 1H), 2,83 (d, J = 5,8 Hz, 1H). LCMS m/z = 607,2 [M+H]+.
[0435] Etapa C. ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. (E)- N'-(2-fluoro-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxifenil)difenilme- tóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-il)-N,N-dimetilformimida- mida (80 mg, 0,13 mmol) foi dissolvida em solução de amônia e meta- nol (5 mL, 7 N). Após agitação em temperatura ambiente durante 4 horas, a purificação (MPLC, coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN:H2O = 40:60) produziu ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2- fluoro-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metileno- ciclobutil)metanol (42 mg, 0,076 mmol, 58,5%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,27 (s, 1H), 7,85 (s, 2H), 7,33 – 7,16 (m, 11H), 7,11 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 5,29 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,82 (t, J = 2,6 Hz, 1H), 4,67 (t, J
= 5,3 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,64 (tt, J = 10,7, 5,2 Hz, 2H), 3,26 – 3,10 (m, 2H), 3,03 – 2,86 (m, 1H), 2,80 (d, J = 7,3 Hz, 1H). LCMS m/z = 552,2 [M+H]+.
[0436] Etapa D. ((((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-2- (hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. O composto do título, como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23, usando ((1R,2R,3S)-3-(6-Amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. RMN P31 (CD3OD) δ ppm 3,99, 3,62. MS [M+1]+ 549,1. Exemplo 31: ((((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(1-hidroxietil)-4- metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0437] O composto do título como uma mistura de isômeros no cen- tro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23 usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(1-((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)metanol (Exemplo 12, Etapa F). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 3,97, 3,65. MS [M+1]+ 545,4. Exemplo 32: ((((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-4-me- tilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0438] O composto do título como uma mistura de isômeros no cen- tro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23 usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)-4-meti- lenociclobutil)metanol (Exemplo 13). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 4,03, 3,62. MS [M+1]+ 533,1. Exemplo 33: ((((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-ciano-4-metileno- ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0439] O composto do título como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23 usando (1R,2S,4R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroximetil)-3-metileno- ciclobutanocarbonitrila (Exemplo 14). RMN P31 (CD3OD) δ ppm 4,03, 3,69. MS [M+1]+ 526,0. Exemplo 34: ((((1R,3S,4R,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)- 4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0440] Etapa A. ((1R,3S,4R,E)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solução de N-(9-((1S,3R,4R,E)-2-(fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exem- plo 17, Etapa D) (180 mg, 274,5 µmol) em metilamina/etanol (3 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash
C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1R,3S,4R,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (120 mg, 213,2 µmol, 77,7% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI-LCMS m/z = 552,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,38(s, 1H), 8,18(s, 1H), 7,33(s, 1H), 7,26-7,19 (m, 10 H), 7,16-7,13 (m,2H), 6,95 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 6,84-6,82 (m, 2H), 6,75 (t, J = 2,4 Hz, 0,5H), 5,50-5,49 (m, 1H), 4,87 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3,78-3,75 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,22-3,20 (m, 2H), 3,14-3,12 (m, 1H), 2,95 (s, 1H). RMN 19F (400 MHz, DMSO-d6): δ -138,15 (s).
[0441] Etapa B. ((((1R,3S,4R,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. O composto do título, como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23, usando ((1R,3S,4R,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. RMN P31(CD3OD) δ ppm 3,91, 3,67. MS [M+1]+ 549,1. Exemplo 35: ((((1R,3S,4R,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)- 4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0442] Etapa A. ((1R,3S,4R,Z)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solução de N-(9-((1S,3R,4R,Z)-2-(fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exemplo 16, Etapa A) (202 mg, 308,1 µmol) em metilamina/etanol (4 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC,
coluna Flash C18, Agela Technologies, 4 g, 4 mL/min, ACN: água = 50:50) produziu ((1R,3S,4R,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometi- leno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (80 mg, 145,0 µmol, 47,1% de rendimento, 97% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO- d6): δ 8,31(s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,28-7,21 (m, 12 H), 7,16-7,14 (m, 2 H), 7,01 (t, J = 2,5 Hz, 0,5H), 6,85-6,83 (m, 2H), 6,80 (t, J = 2,5 Hz, 0,5H), 5,59-5,57 (m, 1H), 4,86 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,67-3,66 (m, 2H), 3,19-3,17 (m, 2H), 3,01-2,97 (m, 1H), 2,89-2,87 (m, 1H). RMN 19F (400 MHz, DMSO-d6): δ -139,33 (s).
[0443] Etapa B. ((((1R,3S,4R,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. O composto do título, como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23, usando ((1R,3S,4R,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. RMN P31(CD3OD) δ ppm 4,00, 3,62; MS [M+1]+ 549,1. Exemplo 36: ((((1S,3R,4S,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)- 4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila.
[0444] Etapa A. ((1S,3R,4S,Z)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. Uma solução de N-(9-((1R,3S,4S,Z)-2-(fluorometileno)-3-(hidroximetil)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)-9H-purin-6-il)benzamida (Exem- plo 16, Etapa F) (196 mg, 298,9 µmol) em metilamina/etanol (4 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. A purificação (MPLC, coluna Flash
C18, Agela Technologies, 12 g, 12 mL/min, ACN: água = 50: 50) produziu ((1S,3R,4S,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (120 mg, 213,2 µmol, 71,3% de rendimento, 98% de pureza) como um sólido branco. ESI LC-MS m/z = 552,2 [M+H]+. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,31 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,28-7,21 (m, 12 H), 7,16-7,14 (m, 2 H), 7,01 (t, J = 2,5 Hz, 0,5H), 6,85- 6,83 (m, 2H), 6,80 (t, J = 2,5 Hz, 0,5H), 5,59-5,57 (m, 1H), 4,86 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,67-3,66 (m, 2H), 3,19-3,17 (m, 2H), 3,01-2,97 (m, 1H), 2,89-2,87 (m, 1H).
[0445] Etapa B. ((((1S,3R,4S,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluoro- metileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)-L-alaninato de isopropila. O composto do título, como uma mistura de isômeros no centro de fósforo, (Rp e Sp), foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23, usando ((1S,3R,4S,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol. RMN P31(CD3OD) δ ppm 4,02, 3,58; MS [M+1]+ 549,1. Exemplo 37: 2-(((((1S,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-2-(hi- droximetil)-4-metilenociclobutil)metóxi)(fenóxi)fosforil)amino)propano- ato de (2S)-isopropila.
[0446] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 23, usando ((1S,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol. (Exemplo 19, Etapa T) como o material de partida de nucleosídeo. RMN P31(CD3OD) δ ppm 3,57, 3,13; MS [M+1]+ 556. Exemplo 38: Síntese de 5'-trifosfatos de nucleosídeo.
[0447] Nucleosídeo seco (0,05 mmol) foi dissolvido em PO(OMe)3 seco (1 mL). N-metilimidazol (0,009 mL, 0,11 mmol) foi adicionado seguido de POCl3 (0,009 mL, 0,11 mmol). A mistura de reação foi agitada em tem- peratura ambiente durante 20 a 40 minutos. A reação foi monitorada por LCMS (pela aparência do nucleosídeo-5’-monofosfato correspondente). Após o término da reação, sal de tetrabutilamônio de pirofosfato (150 mg) foi adicionado, seguido por DMF (0,5 mL) para obter uma solução homo- gênea. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5h, e em seguida, diluída com água (10 mL). Purificação (coluna HiLoad 16/10 com Q Sepharose de alto desempenho: A separação foi feita em um gradiente linear de NaCl de 0 a 1N em tampão TRIS 50 mM (pH 7,5) (tam- pão B). O trifosfato foi eluído a 75 a 80% do tampão b. As frações corres- pondentes foram concentradas. A dessalinização foi obtida por HPLC de fase reversa na coluna Synergy 4 micron Hydro-RP (Phenominex). Um gradiente linear de acetonitrila de 0 a 30% em tampão de acetato de trieti- lamônio a 10 mM (pH 7,5) foi usado para a eluição. As frações correspon- dentes foram combinadas, concentradas e liofilizadas 3 vezes para remo- ver o excesso de tampão para produzir o 5’-trifosfato de nucleosídeo de- sejado. Exemplo 39: tetra-hidrogeno trifosfato de ((1R,3S)-3-(4-Amino-2- oxopirimidin-1(2H)-il)-2-metilenociclobutil)metila.
[0448] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, usando 4-amino-1-((1S,3R)-3-(hidroximetil)-2-metilenoci- clobutil)pirimidin-2(1H)-ona como o material de partida do nucleosídeo. Exemplo 40: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S)-3-(2-Amino-6-oxo- 1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2-metilenociclobutil)metila.
[0449] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, usando ((1R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin-9-il)-2-metilenoci- clobutil)metanol (Exemplo 2) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 41: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S)-3-(6-Amino-9H-purin- 9-il)-2-metilenociclobutil)metila.
[0450] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, usando ((1R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-metilenoci- clobutil)metanol (Exemplo 3) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 42: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-2-(fluorometil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0451] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometil)- 4-metilenociclobutil)metanol (Exemplo 13) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 43: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-2-ciano-4-metilenociclobutil)metila.
[0452] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 38, usando (1R,2S,4R)-2-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-(hidroxime- til)-3-metilenociclobutanocarbonitrila (Exemplo 14) como o material de par- tida de nucleosídeo. Ex. No. Estrutura MS (M-H) P(α) e P(γ) P(β) 39 446,2 -11,04 (d, 2P) -23,51(t) 40 486,4 -11,01 (d); -11,15 (d) -23,48 (t) 41 469,6 -10,77 (d); -11,01 (d) -23.16 (t)
42. 502,6 -11,00 (d); -11,12 (d) -23,41 (t) 43 495,3 -10,95 (d); -11,40 (d) -23,41 (t) Exemplo 44: 5'-trifosfatos de nucleosídeo
[0453] 1,2,4-Triazol (21 mg, 0,3 mmol) foi suspenso em CH3CN seco (0,7 mL). Trietilamina foi adicionada (0,046 mL, 0,33 mmol) e a mistura foi submetida a vórtice para obter uma solução límpida. Após a adição de POCl3 (0,01 mL, 0,1 mmol), a mistura foi submetida a vórtice e deixada durante 20 minutos, e então centrifugada. O sobrenadante foi adicionado para secar o nucleosídeo protegido com 2'-O-4,4'-dimetoxitritila (DMTr) (0,05 mmol) e a mistura foi mantida em temperatura ambiente durante 0,5 h. Sal de pirofosfato de tetrabutilamônio (150 mg) foi adicionado, se- guido por DMF (0,5 mL) para obter uma solução homogênea. A mistura de reação foi agitada durante 1,5 h em temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com água. O fosfato foi isolado por cromatografia IE em AKTA Explorer usando a coluna HiLoad 16/10 com Q Sepharose de alto desempenho. A separação foi feita em um gradiente linear de NaCl de 0 a 1N em tampão TRIS 50 mM (pH 7,5). As frações eluídas a 60 a 70% de NaCl foram combinadas, concentradas e dessalinizadas por HPLC de fase reversa em coluna Hydro-RP Synergy de 4 mícrons (Phe- nominex). O gradiente linear de acetonitrila de 0 a 90% em tampão de trietilamônio 50 mM foi usado para eluição durante 20 minutos, sob fluxo de 10 mL/min. As frações correspondentes foram concentradas e trata- das com HCOOH a 80% durante 15 minutos em RT. O solvente foi eva- porado e o resíduo foi suspenso em água. A suspensão foi centrifugada e o sobrenadante foi purificado por HPLC de fase reversa, conforme des- crito acima, com gradiente de acetonitrila de 0 a 30%. As frações corres- pondentes foram combinadas, concentradas e liofilizadas 3 vezes para remover o excesso de tampão. Exemplo 45: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-2- oxopirimidin-1(2H)-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0454] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando 4-amino-1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4- metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)pirimidin-2(1H)- ona (Exemplo 1, Etapa B) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 46: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-2-(hidroximetil)- 3-(5-metil-2,4-dioxo-3,4-di-hidropirimidin-1(2H)-il)-4-metilenociclobu- til)metila.
[0455] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando 1-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxife- nil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-5-metilpirimidina- 2,4(1H,3H)-diona (Exemplo 24, Etapa A) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 47: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0456] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimi- din-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)me- tanol (Exemplo 6, Etapa D) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 48: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-flu- oro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)me- tila.
[0457] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,2R,3S)-3-(4-amino-5-fluoro-7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-7-il)-2-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclo- butil)metanol (Exemplo 7, Etapa D) como o material de partida de nu- cleosídeo. Exemplo 49: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-
purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0458] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Intermediário 6) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 50: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,2S,3R)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0459] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1S,2S,3R)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(((4-meto- xifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Intermediário 7) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 51: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(2-amino-6-oxo- 1,6-di-hidro-9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0460] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando 2-amino-9-((1S,2R,3R)-3-(hidroximetil)-2-(((4-metoxi- fenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)-9H-purin-6-ol (Exemplo 29, Etapa C) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 52: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2-
fluoro-9H-purin-9-il)-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0461] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-2-fluoro-9H-purin-9-il)-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Exem- plo 30, Etapa C) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 53: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-2-((S)-1-hidroxietil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0462] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(1-((4- metoxifenil)difenilmetóxi)etil)-4-metilenociclobutil)metanol (Exemplo 12, Etapa F) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 54: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S,4R,E)-3-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metila.
[0463] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,3S,4R,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (Exemplo 34, Etapa A) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 55: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metila.
[0464] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, ((1S,3R,4S,E)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (Exemplo 23, Etapa A) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 56: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1R,3S,4R,Z)-3-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metila.
[0465] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1R,3S,4R,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (Exemplo 35, Etapa A) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 57: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,3R,4S,Z)-3-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2-(fluorometileno)-4-(hidroximetil)ciclobutil)metila.
[0466] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1S,3R,4S,Z)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-(fluorome- tileno)-4-(((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)ciclobutil)metanol (Exemplo 36, Etapa A) como o material de partida de nucleosídeo. Exemplo 58: Tetra-hidrogenotrifosfato de ((1S,2R,3S)-3-(6-amino-9H- purin-9-il)-1-etinil-2-(hidroximetil)-4-metilenociclobutil)metila.
[0467] O composto do título foi preparado de maneira análoga ao Exemplo 44, usando ((1S,2R,3S)-3-(6-amino-9H-purin-9-il)-1-etinil-2- (((4-metoxifenil)difenilmetóxi)metil)-4-metilenociclobutil)metanol (Exem- plo 19, Etapa X) como o material de partida de nucleosídeo.
Ex.
No.
Estrutura MS (M-H) P(α) e P(γ) P(β)
45 476,2 -6.43 (d); -11,01(d) -22,68 (t)
46 491,5 -6,38 (d); -11,05 (d) -22,67 (t)
47 499,2 -10,88 (br.s. 2P) -23,09 (br.s)
48 516,9 -6,51 (d); -11,01(d) -22,65 (d)
49 500,0 -10,82 (d); -11,01 (d) -23,39 (t)
50 500,1 -6,58 (d); -11,02 (d) -22,75 (t)
51 515,9 -10,94 (d); -11,13 (d) -23,42 (t)
52 518,5 -8,50 (br.s); -11,00 (d) -22,87 (t)
Ex. No. Estrutura MS (M-H) P(α) e P(γ) P(β) 53 514,3 -6,48 (d); -11,10 (d) -22,72 (t) 54 518,5 -6,46 (br.s, 2P) -22,44 (t) 55 518,4 -9,59 (br.s.); -11,05 (d) -23,13 (t) 56 518,6 -6,54 (d); -11,10 (d) -22,64 (t) 57 518,7 -11,02 (d); -11,25 (d) -23,44 (t) 58 524,8 -10,69 (d), -11,84 (d) -23,39 (t) Ensaios biológicos Exemplo A. Ensaio de ciclo único de HIV
[0468] 24 h antes da infecção, células humanas do linfoblasto T CEM (ATCC, Manassas, VA, EUA) foram plaqueadas em meio de ensaio (MEM suplementado com FBS 10%, penicilina a 1%/estreptomicina (to- dos da Mediatech, Manassas, VA, EUA) e DMSO 1% (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, EUA)) a uma densidade de 5 x 105 células/mL (5 x 104 célu- las/poço) em placas brancas de 96 poços. Os compostos diluídos em sé- rie foram adicionados às células e incubados de um dia para o outro a 37 °C, sob CO2 a 5%. No dia seguinte, as células foram infectadas com HIV NL4-3 pseudotipado com VSV-G, no qual partes do env e do nef eram genes substituídos por Renilla-luciferase, e as células infectadas foram incubadas durante 72 h a 37 °C, sob CO2 a 5%. O inóculo viral foi titulado para alcançar um sinal de Renilla-luciferase de aproximadamente
100 vezes em relação ao do plano de fundo. A atividade antiviral foi me- dida pela adição de 100 uL de reagente Renilla-Glo® (Promega, Madi- son, WI, EUA) às células infectadas. Após uma incubação durante 10 minutos em temperatura ambiente, a luminescência foi medida em um leitor de placa com multimarcadores Victor X3. (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA). A citotoxicidade das culturas paralelas não infectadas foi de- terminada pela adição de 100 µL de reagente CellTiter-Glo® (Promega, Madison, WI, EUA), e por incubação durante 10 minutos em temperatura ambiente. A luminescência foi medida em um leitor de placa com multi- marcadores Victor X3. Exemplo B. Inibição da transcriptase reversa do HIV
[0469] A transcriptase reversa do HIV-1 de comprimento total re- combinante (HIVrt) foi adquirida junto à Abcam, n.° de catálogo ab63979. A última região de 385 nucleotídeos do anti-genoma do HCV complementar à região 5’ não traduzida (c5' UTR) foi sintetizada usando o kit de T7 RNA polimerase Megascript da Ambion (n.° de catálogo AM1333). Um oligoDNA serviu como um iniciador de iniciação interno e foi adquirido junto à IDT. Exceto onde especificado em contrário, as amostras de reação consistiram em RNA c5’UTR 20 nM, primer de DNA 100 nM e HIVrt 1 nM, misturadas em um tampão contendo Tris pH 7,5 50 mM, KCl 100 mM, ditiotreitol 4 mM (DTT) e MgCl2 12,5 mM. As rea- ções foram iniciadas a 30 °C pela adição de trifosfato de adenosina (dATP) 0,1 µM, trifosfato de citosina (dCTP) 0,1 µM, trifosfato de gua- nosina (dGTP) 1 µM e trifosfato de 3H-timidina (3H-TTP) 0,32 µM, em um volume final de 50 µL. Após incubação de 40 minutos, a reação foi interrompida pela adição de 60 µL de ácido tricloroacético 20% (p/v) resfriado com ATP 500 µM para precipitar os ácidos nucleicos. Após a incubação a 4 °C durante 1 h, a amostra foi submetida à filtração em uma placa de 96 poços com múltiplas telas BV de 1,2 µm (Millipore). 40 µL de Microscint-20 (Perkin Elmer) foram adicionados ao poço e as con- tagens na amostra foram determinadas por um leitor de cintilação de microplacas Trilux Microbeta (Wallac).
[0470] Todos os dados foram analisados com o software GraphPad Prism. A concentração do composto na qual a taxa catalisada por en- zima foi reduzida em 50% (IC50) foi calculada ajustando-se os dados à equação Y = % Min + (% Max -% Min)/(1 + X/IC50), onde Y corresponde à porcentagem de atividade enzimática relativa, % Min é a atividade re- lativa residual na concentração do composto de saturação,% Max é a atividade enzimática máxima relativa e X corresponde à concentração do composto. O Ki foi calculado usando a equação de Cheng-Prusoff presumindo inibição competitiva em relação à incorporação natural de dNTP: Ki = IC50/(1 + [dNTP]/Km), onde [dNTP] é a concentração de dNTP natural e Km é a Km aparente para dNTP. O ensaio de polimerização de DNA dependente de RNA de HIVrt padrão (RdDp) foi usado para deter- minar os valores de IC50. Exemplo C. Inibição de polimerase de HBV
[0471] A polimerase de HBV de comprimento total recombinante (HBVpol) foi expressa em células SF9 e purificada de acordo com Lan- ford et al. (Nucleotide priming and reverse transcriptase activity of he- patitis B virus polymerase expressed in insect cells. (Lanford et al., J Virol. 1995; 69(7): 4431-4439). A última região de 385 nucleotídeos do anti-genoma do HCV complementar à região 5’ não traduzida (c5' UTR) foi sintetizada usando o kit de T7 RNA polimerase Megascript da Am- bion (n.° de catálogo AM1333). Um oligoDNA serviu como um iniciador de iniciação interno e foi adquirido junto à IDT. Exceto onde especifi- cado em contrário, as amostras de reação consistiram em RNA c5’UTR 50 nM, primer de DNA 500 nM e HIVrt 1 uL, misturadas em um tampão contendo Tris pH 7,5 50 mM, KCl 100 mM, ditiotreitol 4 mM (DTT), DMSO 10% e MgCl2 12,5 mM. As reações foram iniciadas a 30 °C pela adição de trifosfato de adenosina (dATP) 46 nM, trifosfato de citosina (dCTP) 17 nM, trifosfato de guanosina (dGTP) 57 µM e trifosfato de 3H- timidina (3H-TTP) 0,32 µM, em um volume final de 50 µL. Após incu- bação de 120 minutos, a reação foi interrompida pela adição de 60 µL de ácido tricloroacético 20% (p/v) resfriado com ATP 500 µM para pre- cipitar os ácidos nucleicos. Após a incubação a 4 °C durante 1 h, a amostra foi submetida à filtração em uma placa de 96 poços com múl- tiplas telas BV de 1,2 µm (Millipore). 40 µL de Microscint-20 (Perkin Elmer) foram adicionados ao poço e as contagens na amostra foram determinadas por um leitor de cintilação de microplacas Trilux Micro- beta (Wallac).
[0472] Todos os dados foram analisados com o software GraphPad Prism. A concentração do composto na qual a taxa catalisada por en- zima foi reduzida em 50% (IC50) foi calculada ajustando-se os dados à equação Y = % Min + (% Max -% Min)/(1 + X/IC50), onde Y corresponde à porcentagem de atividade enzimática relativa, % Min é a atividade re- lativa residual na concentração do composto de saturação,% Max é a atividade enzimática máxima relativa e X corresponde à concentração do composto. O Ki foi calculado usando a equação de Cheng-Prusoff presumindo inibição competitiva em relação à incorporação natural de dNTP: Ki = IC50/(1 + [dNTP]/Km), onde [dNTP] é a concentração de dNTP natural e Km é a Km aparente para dNTP. O ensaio de polimerização de DNA dependente de RNA de HBVpol padrão (RdDp) foi usado para de- terminar os valores de IC50. Exemplo D. Inibição de HBV em células Hepg2.117
[0473] As células HepG2.117 (com uso de passagem inferior a 25 passagens) foram cultivadas em meio DMEM/F12 50/50 (Corning, REF 10-092 CM) com SFB a 10% (Corning REF 35-011-CV), sulfato G418 250 ug/mL (Corning, REF 30-234-CI), 2 ug/mL de tetraciclina (TEKNOVA, n.° de cat. T3325) e 1X penicilina/estreptomicina (Corning,
30-002-CI), (Corning, 30-002-CI). Para cada ensaio, as células foram plaqueadas em meio de ensaio: DMEM/F12 50/50 (Corning, REF. 10- 092-CM), FBS aprovado pelo sistema Tet (Clontech, n.° de catálogo 631106) e penicilina/estreptomicina 1x (Corning, 30-002-CI). Determinação da atividade anti-HBV
[0474] A determinação de 50% da concentração inibidora (EC50) dos compostos em células HepG2.117 foi realizada pelo procedimento a se- guir. No primeiro dia, as células foram lavadas com PBS duas vezes após a tripsinização das células. Em seguida, as células foram lavadas uma vez com o meio de ensaio. As células foram semeadas de 30.000 a 35.000 células por 100 µL por poço em placas de 96 poços de fundo plano reves- tidas Biocoat collage. Os compostos de teste foram solubilizados em DMSO a 100% até 100x a concentração final do teste desejada. Cada composto foi, então, diluído seriadamente (1:3) em até 9 concentrações diferentes. Os compostos em DMSO a 100% foram reduzidos para DMSO a 10% por diluição 1:10 no meio de ensaio. Após a incubação das células em uma incubadora a 37°C e sob CO2 a 5% durante 4 horas, 10 uL de compostos de teste diluídos em meio de ensaio foram adicionados à placa de células. A concentração final de DMSO foi de 1%. As células foram incubadas a 37°C durante 96 horas.
[0475] A atividade antiviral foi medida usando um ensaio de reação em cadeia de polimerase quantitativo em tempo real (RT, qPCR) que mede diretamente os números de cópias de DNA viral de HBV do so- brenadante das células HepG2.117. Os primers do núcleo de HBV e as sondas usadas no primer direto do núcleo:qPCR foram 5’- CTGTGCCTTGGGTGGCTTT-3’ (SEQ. ID. NO. 1); o primer reverso do núcleo foi o 5’- AAGGAAAGAAGTCAGAAGGCAAAA-3’ (SEQ. ID. NO. 2); a sonda do núcleo foi 5’/FAM/AGCTCCAAA/ZEN/TCCTTTATAAGGGTCGATGTCCATG/31 ABKFQ/-3’ (SEQ. ID. NO. 3). As sondas direta do núcleo e reversa do núcleo foram usadas em uma concentração final de 1 µM e a sonda do núcleo foi usada em uma concentração final de 0,5 µM. O ensaio de RT qPCR foi ajustado com 10 µL de 2x Quanta Perfecta qPCR Tough- Mix ROX, 0,1 µL de mistura de primer/sonda 200X, 4,0 µL de sobrena- dante de célula HepG2.117 (ou padrão para poços de controle) e 5,9 µL de dH2O, para um volume de reagente total de 20 µL por poço. O padrão foi preparado diluindo-se o plasmídeo de DNA de HBV, Psi Check, em tampão TE 10 mM em uma razão de 1:5 em 6 concentra- ções: 1E6, 0,2E6, 0,04E6, 0,008E6, 0,0016E6 e 0,00032E6 de núme- ros de cópias de DNA viral. A RT qPCR (Applied Biosystems e "Quant Studio 6 Flex" da Life Technology) foi realizada durante 5 minutos a 95°C, em seguida, durante 15 minutos a 95 °C e por 20 minutos a 60°C para cada ciclo, 40 ciclos no total.
[0476] Os números de cópias do DNA viral do HBV são normaliza- dos para o nível observado na ausência de inibidor, que foi definido como 100%. A EC50 foi definida como a concentração do composto na qual os números de cópias de DNA viral do HBV das células HepG2.117 foram reduzidos por 50% em relação ao seu nível na au- sência do composto. Determinação da citotoxicidade nas células HepG2
[0477] A citotoxicidade celular (CC 50) contra as células HepG2 foi medida usando um ensaio de viabilidade celular luminescente para de- terminar o número de células viáveis na cultura com base na quantifi- cação do trifosfato de adenosina (ATP) presente após um período de incubação de 4 dias. No primeiro dia, as células HepG2 foram semea- das a 15.000/100 uL/poço com meio de ensaio contendo DEME (Cor- ning, REF 10-013-CV), SFB a 3% (Coning REF 35-011-CV), 1X de pe- nicilina/estreptomicina (Corning, 30-002-CI), e 1X de aminoácido não essencial em placas de fundo plano de 96 poços Biocoat college. As células foram incubadas em uma incubadora a 37 °C com CO2 a 5%
durante 4 horas, antes da dosagem do composto. Os procedimentos de diluição do composto e dosagem foram idênticos àqueles delinea- dos em relação à determinação da atividade anti-HBV. Após 96 horas de incubação, a viabilidade celular é normalizada para o nível obser- vado na ausência de inibidor, que foi definido como 100%. Nenhum efeito citotóxico sobre as células HepG2 foi definido como uma con- centração citotóxica de 50% (CC50) >100 µM.
[0478] Ademais, embora o supracitado tenha sido descrito em alguns detalhes por meio de ilustrações e exemplos para propósitos de clareza e entendimento, será entendido pelos versados na técnica que inúmeras e várias modificações podem ser realizadas sem se afastar do espírito da presente revelação. Portanto, deve ser claramente entendido que as for- mas reveladas no presente documento são apenas ilustrativas e não são destinadas a limitar o escopo da presente revelação, mas, em vez disso, a cobrir, também, todas as modificações e alternativas abrangidas pelo verdadeiro escopo e espírito da invenção.

Claims (107)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por ter a estrutura: (I) em que: B1 é uma base heterocíclica ligada em N opcionalmente subs- tituída ou uma base heterocíclica ligada em C opcionalmente substituída; R1 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, ha- logênio, ciano, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alque- nila C2-6 não substituída e uma alquinila C 2-6 não substituída, em que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C 1-6 é substituída com ao menos um halogênio; R2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halo- gênio, hidroxila, ciano e uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C1-4 é substituída com uma hidroxila ou ao menos um halogênio; R3 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, ha- logênio, ciano, uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, uma alque- nila C2-4 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-4 não substituída, em que quando a alquila C1-4 ou a alquenila C2-4 são substituídas, a alquila C1-4 e a alquenila C2-4 são independentemente substituídas com ao menos um halogênio; R4 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, uma acila opcionalmente substituída, um α-aminoácido ligado em O opcio-
nalmente substituído, , e ; R5 e R6 são, independentemente, hidrogênio ou halogênio; R7 e R8 são independentemente selecionados do grupo con-
sistindo em hidrogênio, , e
, ou estão ausentes; ou
R7 é e R8 está ausente ou é hi- drogênio; R9 está ausente, é hidrogênio, uma arila opcionalmente subs- tituída ou uma heteroarila opcionalmente substituída; e R10 é um α-aminoácido ligado em N opcionalmente subs- tituído ou um derivado de éster do α-aminoácido ligado em N opcional- mente substituído; R11 e R12 são independentemente um α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído ou um derivado de éster do α-aminoácido li- gado em N opcionalmente substituído; R13, R14, R16 e R17 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1- 24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substituída; R15 e R18 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C 1-24 opcionalmente substitu- ída, uma arila opcionalmente substituída, uma –O–alquila C1-24 opcio- nalmente substituída e uma –O–arila opcionalmente substituída; R19 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1-24 opcionalmente substituída e uma arila opcionalmente substi- tuída; R20, R21 e R22 estão, independentemente, ausentes ou são hidrogênio; R5 e R6 são, independentemente, hidrogênio ou halogênio; e m é 0 ou 1; e desde que quando R1 é hidrogênio; R2 é hidroxila; R5 e R6 são, cada um, hidrogênio; e B1 é adenina; então, R3 não é hidrogênio.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: e , ou um sal farma- ceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente menciona- dos.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- terizado por R3 ser halogênio.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o halogênio ser flúor.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- terizado por R3 ser ciano.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- terizado por R3 ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C 1-4 é substituída com ao menos um halogênio.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por R3 ser uma alquila C1-4 não substituída.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por R3 ser uma alquila C1-4 substituída com flúor.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por R3 ser uma alquila C1-4 substituída com cloro.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 8 ou 9, ca- racterizado por R3 ser –CH2F ou –CH2Cl.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- terizado por R3 ser uma alquenila C2-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquenila C2-4 é substituída, a alquenila C2-4 é substituída com ao menos um halogênio.
12. Composto, de acordo com a reivindicação 11, caracte- rizado por R3 ser uma alquenila C2-4 não substituída.
13. Composto, de acordo com a reivindicação 11, caracte- rizado por R3 ser uma alquenila C2-4 substituída com flúor.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 11, caracte- rizado por R3 ser uma alquenila C2-4 substituída com cloro.
15. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ca- racterizado por R3 ser hidrogênio.
16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 15, caracterizado por R2 ser halogênio.
17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 14, caracterizado por R2 ser hidroxila.
18. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 15, caracterizado por R2 ser ciano.
19. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 15, caracterizado por R 2 ser uma alquila C1-4 opcionalmente substituída, em que quando a alquila C1-4 é substituída, a alquila C 1-4 é substituída com uma hidroxila ou ao menos um halogênio.
20. Composto, de acordo com a reivindicação 19, caracte- rizado por R2 ser uma alquila C1-4 não substituída.
21. Composto, de acordo com a reivindicação 19, caracte- rizado por R2 ser uma alquila C1-4 substituída com flúor.
22. Composto, de acordo com a reivindicação 21, caracte- rizado por R2 ser –CH2F.
23. Composto, de acordo com a reivindicação 19, caracte- rizado por R2 ser uma alquila C1-4 substituída com cloro.
24. Composto, de acordo com a reivindicação 23, caracte- rizado por R2 ser –CH2Cl.
25. Composto, de acordo com a reivindicação 19, caracte- rizado por R2 ser uma alquila C1-4 substituída com hidroxila.
26. Composto, de acordo com a reivindicação 25, caracte- rizado por R2 ser –CH2OH.
27. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 14, caracterizado por R2 ser hidrogênio.
28. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 27, caracterizado por R1 ser hidrogênio.
29. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 27, caracterizado por R1 ser halogênio.
30. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 27, caracterizado por R1 ser ciano.
31. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 27, caracterizado por R1 ser uma alquila C1-6 opcionalmente subs- tituída, em que quando a alquila C1-6 é substituída, a alquila C1-6 é substi- tuída com ao menos um halogênio.
32. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 27, caracterizado por R1 ser uma alquenila C2-6 não substituída.
33. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 27, caracterizado por R1 ser uma alquinila C2-6 não substituída.
34. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 33, caracterizado por R5 e R6 serem, cada um, hidrogênio.
35. Composto, de qualquer uma das reivindicações 1 a 33, caracterizado por R5 e R6 serem, cada um, halogênio.
36. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 33, caracterizado por um dentre R5 e R6 ser hidrogênio, e o outro dentre R5 e R6 ser halogênio.
37. Composto, de acordo com a reivindicação 35 ou 36, ca- racterizado por o halogênio ser flúor.
38. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser hidrogênio.
39. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser uma acila opcionalmente substituída.
40. Composto, de acordo com a reivindicação 39, caracte- rizado por R4 ser uma acila não substituída.
41. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser um α-aminoácido ligado em O opci- onalmente substituído.
42. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser um α-aminoácido ligado em O não substituído.
43. Composto, de acordo com a reivindicação 42, caracteri- zado por R4 ser selecionado dentre alanina ligada em O não substituída, valina ligada em O não substituída, leucina ligada em O não substituída e glicina ligada em O não substituída.
44. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser .
45. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracteri- zado por R7 e R8 serem, cada um, hidrogênio ou estar ausente.
46. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracte- rizado por R7 ser ; e R8 estar ausente ou ser hidrogênio.
47. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracte- rizado por m ser 0; R8, R20 e R21 estarem, independentemente, ausen- tes ou serem hidrogênio.
48. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracteri- zado por m ser 1; R8, R20, R21 e R22 estarem, independentemente, au- sentes, ou serem hidrogênio.
49. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracte- rizado por um de R7 e R8 estar ausente, ser hidrogênio ou , e o outro dentre R7 e R8 ser .
50. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracteri- zado por R7 e R8 serem, cada um, .
51. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracte- rizado por um de R7 e R8 estar ausente, ser hidrogênio ou , e o outro dentre R7 e R8 ser .
52. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracteri- zado por R7 e R8 serem, cada um, .
53. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracte- rizado por um de R7 e R8 estar ausente, ser hidrogênio ou , e o outro dentre R7 e R8 ser .
54. Composto, de acordo com a reivindicação 44, caracteri- zado por R7 e R8 serem, cada um, .
55. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser .
56. Composto, de acordo com a reivindicação 55, caracte- rizado por R9 ser uma arila opcionalmente substituída.
57. Composto, de acordo com a reivindicação 55, caracte- rizado por a arila opcionalmente substituída ser uma fenila opcional- mente substituída ou qualquer naftila opcionalmente substituída.
58. Composto, de acordo com a reivindicação 57, caracteri- zado por a fenila opcionalmente substituída ser uma fenila não substitu- ída.
59. Composto, de acordo com a reivindicação 55, caracte- rizado por R9 ser uma heteroarila opcionalmente substituída.
60. Composto, de acordo com a reivindicação 59, caracte-
rizado por R9 ser uma heteroarila monocíclica opcionalmente substitu- ída.
61. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 55 a 60, caracterizado por R10 ser um α-aminoácido ligado em N op- cionalmente substituído.
62. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 55 a 60, caracterizado por R10 ser um derivado do éster de α-amino- ácido ligado em N opcionalmente substituído.
63. Composto, de acordo com a reivindicação 61 ou 62, carac- terizado por R10 ser uma alanina ligada em N, éster isopropílico de alanina ligada em N, éster ciclo-hexílico de alanina ligada em N e éster neopentí- lico de alanina ligada em N.
64. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 37, caracterizado por R4 ser .
65. Composto, de acordo com a reivindicação 64, caracte- rizado por R11 e R12 serem independentemente um derivado do éster de α-aminoácido ligado em N opcionalmente substituído.
66. Composto, de acordo com a reivindicação 64 ou 65, ca- racterizado por R11 e R12 serem independentemente selecionados do grupo que consiste em alanina ligada em N, éster isopropílico de ala- nina ligada em N, éster ciclo-hexílico de alanina ligada em N e éster neopentílico de alanina ligada em N.
67. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 66, caracterizado por B1 ser uma purina opcionalmente substitu- ída.
68. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 66, caracterizado por B1 ser uma pirimidina opcionalmente subs- tituída.
69. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 66, caracterizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em:
, , , e
; em que: RA2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, ha- logênio e NHRJ2, em que RJ2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C(=O)RK2 e –C(=O)ORL2; RB2 é halogênio ou NHRW2, em que RW2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 opcio- nalmente substituída, -C(=O)RM2 e –C(=O)ORN2; RC2 é hidrogênio ou NHRO2, em que RO2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C(=O)RP2 e –C(=O)ORQ2; RD2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, deutério, halogênio, uma alquila C 1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída e uma alquinila C 2-6 opcional- mente substituída; RE2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, hi- droxila, uma alquila C 1-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, -C(=O)RR2 e –C(=O)ORS2;
RF2 é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, ha- logênio, uma alquila C1-6 opcionalmente substituída, uma alquenila C2-6 opcionalmente substituída e uma alquinila C2-6 opcionalmente substitu- ída; Y1, Y2 e Y4 são, independentemente, N ou C, desde que ao menos um dentre Y1, Y2 e Y4 seja N; Y3 é N ou CRI2, em que RI2 é selecionado do grupo que con- siste em hidrogênio, halogênio, uma alquila C 1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída e uma alquinila C2-6 não substituída; Y5 e Y6 são, independentemente, N ou CH; cada --------- é independentemente uma ligação simples ou dupla, desde que as ligações simples e as ligações duplas estejam situadas no anel de modo que cada anel seja aromático; RG2 é uma alquila C1-6 opcionalmente substituída; RH2 é hidrogênio ou NHRT2, em que RT2 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C(=O)RU2 e – C(=O)ORV2; e RK2, RL2, RM2, RN2, RP2, RQ2 RR2, RS2, RU2 e RV2 são indepen- dentemente selecionados do grupo que consiste em uma alquila C 1-6 não substituída, uma alquenila C2-6 não substituída, uma alquinila C2-6 não substituída, uma cicloalquila C3-6 opcionalmente substituída, uma cicloalquenila C3-6 opcionalmente substituída, uma arila C6-10 opcional- mente substituída, uma heteroarila opcionalmente substituída, uma he- terociclila opcionalmente substituída, uma aril(alquila C1-6) opcional- mente substituída, uma heteroaril(alquila C1-6) opcionalmente substitu- ída e uma heterociclil(alquila C1-6) opcionalmente substituída.
70. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ca- racterizado por B1 ser uma base heterocíclica ligada em N opcional- mente substituída.
71. Composto, de acordo com a reivindicação 70, caracte- rizado por B1 ser uma purina opcionalmente substituída.
72. Composto, de acordo com a reivindicação 70, caracte- rizado por B1 ser uma pirimidina opcionalmente substituída.
73. Composto, de acordo com a reivindicação 69, caracte- rizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: ,, , , e .
74. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
75. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
76. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
77. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
78. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
79. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
80. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
81. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
82. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
83. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracteri- zado por B1A ser .
84. Composto, de acordo com a reivindicação 73, caracte- rizado por B1 ser .
85. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ca- racterizado por B1 ser uma base heterocíclica ligada em C opcional- mente substituída.
86. Composto, de acordo com a reivindicação 69, caracte- rizado por B1 ser .
87. Composto, de acordo com a reivindicação 86, caracte- rizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: e .
88. Composto, de acordo com a reivindicação 86, caracte- rizado por B1 ser selecionado do grupo que consiste em: e .
89. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: , , , , , ,
e , ou um sal farmaceutica- mente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
90. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser selecionado do grupo que consiste em: , , , , , , , ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
e , ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
91. Composição farmacêutica, caracterizada por compreen- der uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo, diluente, excipiente farmaceuticamente acei- tável ou uma combinação dos mesmos.
92. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindi- cação 91, caracterizado por se destinar ao preparo de um medica- mento para tratar uma infecção por HBV e/ou HDV.
93. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindi- cação 91, caracterizado por se destinar ao preparo de um medica- mento para reduzir a recorrência de uma infecção por HBV e/ou HDV.
94. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindi- cação 91, caracterizado por se destinar ao preparo de um medica- mento para inibir a replicação de um vírus da HBV e/ou HDV.
95. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 92 a 94, caracterizado por compreender adicionalmente o uso de um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em um inibidor da polimerase de HBV e/ou HDV, um agente imunomodulador, um interfe- ron, um interferon peguilado, um inibidor de fusão/entrada viral, um ini- bidor da maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um inibidor da transcriptase reversa, um inibidor da ciclofilina/TNF, um ago- nista FXR, um agonista de TLR, um inibidor de cccDNA ASO ou siRNA, um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor de se- creção de sAg e uma vacina contra HBV, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
96. Método para tratar ou melhorar uma infecção por HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender administrar a um indivíduo sofrendo de infecção por HBV e/ou HDV uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 91.
97. Método para melhorar ou tratar uma infecção causada por HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica, como definida na reivindicação 91.
98. Método para reduzir a recorrência de uma infecção cau- sada por HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender colocar uma cé- lula infectada com HBV e/ou HDV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 91.
99. Método para inibir a replicação de um vírus da HBV e/ou HDV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o HBV e/ou HDV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica como definida na reivindicação 91.
100. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 96 a 99, caracterizado por compreender adicionalmente o uso de um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em um inibidor da polimerase de HBV e/ou HDV, um agente imunomodulador, um in- terferon, um interferon peguilado, um inibidor de fusão/entrada viral, um inibidor da maturação viral, um modulador de montagem de capsídeo, um inibidor da transcriptase reversa, um inibidor da ciclofilina/TNF, um agonista FXR, um agonista de TLR, um inibidor de cccDNA ASO ou siRNA, um agente silenciador de gene, um inibidor de HBx, um inibidor de secreção de sAg e uma vacina contra HBV, ou um sal farmaceutica- mente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
101. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica, como definida na reivindica- ção 91, caracterizado por ser para a preparação de um medicamento para melhorar ou tratar uma infecção causada pelo HIV.
102. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou da composição farmacêutica como definida na reivindicação 91, caracterizado por se destinar ao preparo de um medicamento para ini- bir a replicação de um vírus HIV.
103. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 101 e 102, caracterizado por compreender adicionalmente o uso de um ou mais agentes de terapia antirretroviral (ART) selecionados do grupo que consiste em um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeo (ITRN), um inibidor da protease (IP), um inibidor de fu- são/entrada (também chamado de antagonista do receptor CCR5), um inibidor de transferência de fita da integrase (INSTI) e de uma outra te- rapia antirretroviral para HIV, ou de um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
104. Método para tratar ou melhorar uma infecção por HIV, caracterizado por compreender administrar a um indivíduo sofrendo de infecção por HIV uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou de um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 91.
105. Método para inibir a replicação de um vírus HIV, caracte- rizado por compreender colocar uma célula infectada com o vírus HIV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindi- cações 1 a 90, ou com um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou com uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 91.
106. Método para melhorar ou tratar uma infecção por HIV, caracterizado por compreender colocar uma célula infectada com o HIV em contato com um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 90, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica, como definida na reivindica- ção 91.
107. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 104 a 106, caracterizado por compreender adicionalmente um ou mais agentes de terapia antirretroviral (ART) selecionados do grupo que consiste em um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nu- cleosídeo (ITRNN), um inibidor da transcriptase reversa análogo de nu- cleosídeo (ITRN), um inibidor da protease (IP), um inibidor de fusão/en- trada (também chamado de antagonista do receptor CCR5), um inibidor de transferência de fita da integrase (INSTI) e uma outra terapia antirre- troviral para HIV, ou de um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriormente mencionados.
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