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BE722993A - - Google Patents

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BE722993A
BE722993A BE722993DA BE722993A BE 722993 A BE722993 A BE 722993A BE 722993D A BE722993D A BE 722993DA BE 722993 A BE722993 A BE 722993A
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sep
atcc
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candida
cbs
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Publication date
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/26—Processes using, or culture media containing, hydrocarbons
    • C12N1/28—Processes using, or culture media containing, hydrocarbons aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

  

   <Desc/Clms Page number 1> 
 



   La présente invention concerne, de façon générale, un procédé de fermentation par biosynthèse ainsi que les produits obtenus. Plus particulièrement, l'invention concerne l'application d'hydrocarbures oxygénés, en   particulier   d'hydrocarbures oxygénés solubles dans l'eau,   cornue   source principale de carbone servant au procédé, Suivant une application particulière de l'invention, des fractions hydrocarbonées comme des liquides et des gaz dérives du pétrole, sont oxygénées ou partiellement oxygénées puis mises en contact avec un micro-organisme sous des conditions de fermentation pour donner des rendements élevés   en , '   protéine. Ce   procédé   peut être conduit en continu ou par charges. 



   L'actuelle pénurie en protéine, en particulier en protéins pour animaux dq faible prix, pour la consommation des animaux et des êtres humains est bien connue. Pour essayer de   palier   cette pénurie en protéine, on a récemment mis au point plusieurs procédés de biosynthèse dans lesquels on obtient biologiquement de la protéine par développement de microorganismes sur différents substrats contenant du carbone. Une telle technique implique le développement de différents microorganismes   comme   les levures (ou saccharomyces) et les bactéries sur des substrats d'hydrate de carbone. Cependant cette technique dépend de la disponibilité de grandes quantités d'hydrates de carbone relativement coûteux dont le prix s'ajoutede façon notable au prix de revient du procédé et du produit. 



   Une autre technique récente, peut-être plus prometteuse, de synthèse biologique d'aliments   protéiniques,   consiste à cultiver les microorganismes sur des substrats dérivés du pétrole, Ce type de synthèse par fermentation pour   l'obten-   tion de protéine est ordinairement conduit dans un système aqueux de biosynthèse contenant une charge hydrocarbonée, un agent d'inoculation du microorganisme dont on recherche le développement, un milieu aqueux de croissance, de l'oxygène, de l'azote et d'autres agents nutritifs   indispensables.   Cette technique permet l'application de charges hydrocarbonées que l'on trouve facilement en quantités et qui sont moins coûteuses que les hydrates de carbone. On 'sait aussi appliquer différents catalyseurs biologiques dans les procédés de fermentation.

   Le procédé de biosynthèse de la présente 

 <Desc/Clms Page number 2> 

 
 EMI2.1 
 invention est applicable cl la biosynthcso de tous les microorganisnes qui sont capables de se développer sur des subs- 
 EMI2.2 
 trats hydrocarbons oxygénés, en particulier les substrats 
 EMI2.3 
 oxygénés dérives de fractions hydrocarbonoes du pétrole, 
 EMI2.4 
 Alors que la présente invention'est applicable de fa- 
 EMI2.5 
 çon générale à tous uicroorganisiaes, il existe un certain nombre de ucroorganises qui conviennent particulièrement bien pour l'assimila'cion d'hydrocarbures oxygènes.

   Ces microorganisnes aux Tableaux'! at II ci-après et ils . sont identifias par des rôi±renoes telles que A.T.C.C. qui sont les références d'échantillons dt''.;70N.F3û , l'American Type Culture Collection, 212 1,1 8t=eet, Northwest, Washington 7, D,C., les refurences CBS relatives aux lots conserves par le Centraalbureûu voor Sc11ielculture, Baarn, Holland, ou les refdrencea du Quartermaster Culture Collection qui concernent des échantillons conservés à Natick, Maosachu- 
 EMI2.6 
 setts, Le Tableau II donne un certain nombre d'espèces do 
 EMI2.7 
 levure qui conviennent particulièrement bien pour l'assinilation d'hydro a.-bures oxygénés.

   Ces espèces de levure sont 
 EMI2.8 
 également indiquées par leurs références. 

 <Desc/Clms Page number 3> 

 
 EMI3.1 
 fil'.¯iZ<.':tT I - 3±-CTERT±S 
 EMI3.2 
 :t3ivïs.o:! clt>i;s<a 0r=ire Famïlle Ce3re Fsëce ' Rcîérence }lrotophyt2.-Schj zar.:ycci;ü::>-rBCUtlo::orw.da1cs-1'seudoTIopat:r::ceae - -Tscudosocan lijAzi=1--'1'9cc 15522 
 EMI3.3 
 
<tb> pseudo-
<tb> 
 
 EMI3.4 
 r.:ïa11ci .---i',TCC 15523 -orvïlla ATCC 15524 'li><'3Ctt'r'1:1C---iilGi'OCUCG4SE3"- liïCT'OCOt:Ctt:.--CC'3'7??1.C:;1? ATCC 149::j7 3arcina sp -¯QNB1518 Natick -Brevibacteriaceac#BreviLe.eteri'aa-inscctijW3.lïti -..iTCC 15528 hùa1ii-----ATCC 15527 chroaobac-teraeeae-.ilcaligcnes ###- sp--###ATCC 15525 -Corynebac-teriaceae-j-Cell-unonas#- galba###ATCC 15526 -Corynebacterito-sp-###ATCO 15529 I1muro:

  ,e"ta- 15530 !bo1tL --ATCC 15530 --Arthrobacter# sirJp1cx -ATCC. 6946 ----- s5 .-.---1-iCC 1914 0 Actino1'1yccta1es 1<Iycobacteriacac --- P.ycol:JD.ctcr:i.1l.r.l--rh0dochrousATCC 13808 LAc-tinomycetaccae -2vocardïa ' 5P 4. sp 

 <Desc/Clms Page number 4> 

 
 EMI4.1 
 TABLEAU II - Tìn1R1±S 
 EMI4.2 
 J)1vi Gion Cl(,sse Ordre J1'r,:'ille SOUG-j"'Q;1i11 e Ger.l'e ES11èce '3'uallohytc :.:co ;cc:t,:,-,doT,See¯¯ E!c10,,YCC-1 Sacchl'or:y---- Endo!.1ycopsertc -.EndonycoJ)::;is taies tczceae cetoidcae So..cc1ml'omyoct<:acl SacdCtro:::yc8S Hanncnula ' )Pîchia Pichia 110bary01:;YC:CS -FadonÜ'!,1c ---- :n,:dr;l)l1j::. 



  1]entjtO5 î>OOîùeéie --- ue ttoX j;ar<1 Li p o iay c e t O 1 à c a ########## i , 1 1 ; ,'1:J ' c: ; -}i'uudi iI!Jl)Crfocti-Cryptococ-Crypto-;-Cryi1tococcoiacae ######## Cryptococcuc cales coccaceae v'U2'L7OZJ:p7:i 1't?'i."W !'O^:j'CCS hil.occbicra -Kiocckera - i'2'l;Or;J1?3ï T . 



  -TrichosporoidGae ##########- 'richoDp0rou -Rhodotoruloidee-##########M.odotcru la . 

 <Desc/Clms Page number 5> 

 
 EMI5.1 
 I':ß'?f:t: II - LEVURES (suite) 
 EMI5.2 
 Genre. Espèce Culture 
 EMI5.3 
 (1) Erdomycopsis capsulais ATCC y/2471 fibuliger ATCO // 2G80 1,xitnr,essis ATCC / lOG2$ 1.;ali bisporll (2) Sccharoyces cerevisiae (A) CES rouxii 1lCC Tf 2624 . exigus ATCC '/ 1.J599 marxianus ATCC /f 1OG06 logos TCC W 10603 willianus ATCC 1/ 10598 uvarur-i ATCC 1/ 1061 fragilis ATCO 1/ l0022 1aotis . ATCC f 10689 rosei ATCC #'10664 chevalieri ATCC 1110604 feraentati ATCC ff 2551 e.cidifaciens (13) ATCC 8766 fruc-tuum ATCC z13053 
 EMI5.4 
 alezans 
 EMI5.5 
 (3) Hansenula anomala (D) OBIS saturnus ATO 1/ 2579 suaveolens ATCO f/ 981-7 SC'tlnCFE;L3. californien ATCC 11 10680 subpellicu10sa ATCC J/ 14462 nruïcii ' PtRRZ Y-12 8ilVïCola OBIS minuta CBS. 



  (.) Tiohia menbranaefaoienp ATCO / lOG.9 Ùl.rinosn ATCC f/ 2252 Po1Yl:10rpha ATCC il 15132 fernentans ATCC # 10651 (5) Debaryomyees hansenii ATCO /f 2357 k1oeo1ceri ATCC ff 1.0620 subjlobosus CBS i vini' 'C3S n.ootianae ATCC 1/9364 

 <Desc/Clms Page number 6> 

 
 EMI6.1 
 JA:2T1UU II suite te) (6) Nndsonia fulvescaris ATCC / 10645 6lbnGata ATCC 1110644 (7) Nematospora coryli ATCC // 10647. 



  (8) Liponyces stakcyi ATCC // 12659 ' (9) Cryptoeoccus neoxnr:ans ATCC' # 11239 laurcntil ATOC Il 9981 albious ATCC / J.0666 lutoolus ACC ;1 106'l. 



  (10) Torulopsis bo1mii ATOO // 10670 nolischiana dattila ATCC il 1069l ' ' sphaerica ATCC // 13193 candida A1'CC Il '2560 " ianata ATCC 71'l2790 *' " stellata ATCC / 10673 sako ATCC 7/14478 
 EMI6.2 
 globosa CBS versatilis CBS 
 EMI6.3 
 anonala CES 
 EMI6.4 
 inconspicua CBS 
 EMI6.5 
 (11) Brettanonyces bruxellensis ATCC 10560 lambicus ATCC f/ 10563 anonalus 1TCC il l0559 clc.ussenii ATCC fi lOS62 (12) Candida nycoderoa .

   ATCC 7/10641 1" pu1cb,errima (il') ATCC ±/ 9Ùù9 krusei ATCC fi 2159 
 EMI6.6 
 neucnteyioa ATCC / 10569 tropicalis ATCC ±/ 1>69 pseudotropicalis ATCC / 251.0. guilliermondii (H) , 'ATCC 11 9390 huixicola AT.CC, 1/ 1443à rugosa 1,TCC //10571 zeyianoides ATCC f/ 1067 pellioulosa ATCC 2149 utilis ATCC // 922E lipolytica (E) ,, 1,5 cC 11 e662 parapsilosis ATCC # 7333 stellatoidea ATCC ' moo6 

 <Desc/Clms Page number 7> 

 
 EMI7.1 
 T,3L'? .U Il ( suite ) 
 EMI7.2 
 robusta 
 EMI7.3 
 scotti ATCC 11 105'12 curvata ,lvTCC y 1U5G7 c1nusscnii CBS solani ATCC # 1t1r4"rO ffiolibiosi CBS (13) Illoeokera apiculata ATCC 11 10634 africana ATCC // 10<32 corticis ATCC 10635 ja,v,.nica ATCO / 1066 lafarii ATCC # 10638 rlae;

  na iETcc # 10640 (14) Trigonopsis variabilis (0) CBS / 100 (15) Triohosporon pullulans ATCC 10677 
 EMI7.4 
 cutaneum ATCC Il 14255 infestans CBS 
 EMI7.5 
 sericeum ATOC 10678 oapita-bum ATCO #1066J forinentane ATCC / 106?5 behrondii TOC / 11..65 (16) Rhodotorulla glutinis (G) ATCC z2527 rubra 1'>TCC 11 9'49 . riucilaginosa 'TCC // 25G3 auran-tiaca ATCC // 1065? ninuta ATCC 10658 Le Hicrocoocus cerificans (14987)} qui a t isolc3 ot identifié par le Dr, lt, E. Kallid et' ses collaborateurs, JOURIJAL 09 BnCTERIQT,OG1', Vol. 78, ? 3, pages 441-446 (Sep zembre 1959) est partiouliërenent avantageux.

   On 1''identifie 
 EMI7.6 
 - également de la façon suivante : Les cellules sont petites, sphériques, tendant à'deve- 
 EMI7.7 
 nir elliptiques -dans des vieilles cultures et dans des r.tilieux ex teneur dievee en azote, 
 EMI7.8 
 Les cellules provenant de milieux définis ont, en 
 EMI7.9 
 noyenne, un diamètre de 0,5 à 1,0.micron et celles provenant de milieux complexes, présentent un diauctre moyen de ,1,Q ?, microns. Les cellules se présentent seules ou en groupes. 1>n ne constate pas de granules m0tachrOJa tiques incapables de :.otveet;t et de granules pseudanophiles. 

 <Desc/Clms Page number 8> 

 



  La réaction de Gram est négative. 



  Les colonies sur un milieu d'agir défini sont petites 
 EMI8.1 
 (1mm), olles sont convexes ut circulaires et on un pourtour bien défini. Les colonies sur un milieu nutritif d'agar soi.t plus grosses (2 5:1:1':), elles ont un'relief mucoïdes et gÓnéralement de forme arrondie. 



  Dans un'û [.:8:;,0 CSI)bce, on peut avoir plusieurs souches différentes cor:P:C'Ç3(.a.r. t des variantes et des agents mutants naturels et induits. 



   La morphologie et les caractéristiques de croissance ' 
 EMI8.2 
 des autres organismes enumcrns ci-dessus sont données dans le brevet des Btats-Unis d'Amérique 11  3.308.035. 



   Les milieux de croissance comprennent un milieu aqueux d'un sel   minéral   et un excès   d'oxygène.-L'oxygène   est fourni au milieu de culture ou au bouillon de culture sous toute 
 EMI8.3 
 forme capable d'être assimilée facilement par le Microorga- nisme inoculant, Des composes   oxygènes   peuvent   également   
 EMI8.4 
 être appliqu6s pour' fournir l'oxygène aussi lonctenps qui ils ne nuisent pas au développement de la cellule du microorganiame et à la conversion de la charge hydrocarbonée oxydée fournie aux cellules du nicroorganisme.

   L'oxygène peut 8tre fourni sous la forme d'un gaz oxygéné   confie   l'air à la pres-   sion   atmosphérique ou à une pression élevée ou de   l'air   enrichi en oxygène dans lequel la concentration en oxygène peut atteindre jusqu'à   70-90   %. En   général,   on admet entre environ 0,1 et environ 10,   de   préférence entre environ 0,8 
 EMI8.5 
 et environ 2, volunes par nxinurc d'air dans le recteur par volume de liquide dans l'appareil de 4."err-.c--.,itation. 



  L'azote est esseatiol pour le d6vclol)peron'v biologique . La. source d'azote peut consister en tout osi,ipos6 orgienique ou rainerai contenant de l'azote et capable de libérer <iC l'azote sous une fore convenant pour l'utilisation Kûtabolique par le r::ioroorgJ.l1is,:c en d(1vGloPP::L,er"t. Les cor.po- 5é'J organiques azotes appropries sont par les prot6inec, les protuines hydrolyses par un acide, les protéine:3 résultant de digestion avec un 0nYG, ;r , v::1.r10 acide, un extrait de levure, l'aonarar1nG et 1 "ar?,1.; . copoas minéraux azo-cës comprennent l J o.::11nolÜnc, l'hydroxyde d' L1J'J",Onium, l'acide nitrique ou les sels C011:::0 10 phosphate d'ammonium, le citrate d'ammonium, le.sulfa*te d'ammonium, le 

 <Desc/Clms Page number 9> 

 
 EMI9.1 
 nitrate d' a::a on iu.; et le pyrophosphate acide d'annoniun.

   Un procédé très   corrode   et satisfaisant pour fournir de l'azote au procédé consiste à. utiliser de l'hydroxyde d'ammonium, 
 EMI9.2 
 du phosphate à'azr.oniL1=.i ou un phosphate acide dl a;rJf.10nÍUIl, que l'on peut ajouter sous force de sel ou que l'on peut obtenir in situ dans le   milieu de   fermentation aqueux en 
 EMI9.3 
 faisant barboter du yr-z a;nnoniac oL1 do 11 ar.:

  nonia.c gazeux dans le bouillon ou en injectant de l'hydroxyde d'annoniun aqueux dans le bouillon auquel on a préalable-rlent ajouta de l'acide phosphorique, ce qui permet ainsi de forcer du phosphate acide 'De cette naniere, la garnie de pH désire comprise entre environ 3,0 et 8,5 est maintenue et la quantité nécessaire d'azote fournie, Si le   nioroorga-   
 EMI9.4 
 r,iJixc consiste en une levure, le pH profère est compris entre 3 0 et 7,5, par exenpie entre 4,0 et 5,0, Si le nicro- organisme consiste en une bactérie, le pH   désire   est compris entre 5,0 et 8,5, par exemple environ 7,0, L'hydroxyde d'am- 
 EMI9.5 
 wO1iu."'l peut titre fourni au milieu de biosynthèse en quanti- tés comprises entre environ 0,08 et environ 0,20, de   prêtée   
 EMI9.6 
 rence entre environ 0,1 et environ 0,15 grar.U,

  10 d'azote par gramme de cellules séchées   produites.   Ces quantités représentent entre environ 0,01 et environ   1,0   en poids, de préférence entre environ 0,1 et environ   0,15   en poids d'azote par rapport au milieu total de biosynthèse,   Er   plus de l'oxygène et de l'azote, il est nécessaire de fournir au milieu les quantités requises d'agents miné 
 EMI9.7 
 raux choisis de nanibre 4 assurer un développement approprié du nicroorganisme et à assurer 1'assimilation naxillun, de l'hydrocarbure oxydé par les cellules du uioroorganisne, Le pot'assiun, le sodium, le fer, le uanganese, le calcimap le manganèse, le phosphore et autres agents nutritifs entrent dans la composition du milieu aqueux de croissance. 



  Ces substances   nécessaires   peuvent être fournies par toute 
 EMI9.8 
 technique connue et cte préférence au rooyen de leurs sels solubles dans l'eau. 



  Le potassiur.l peut être fourni sous forme .de chloiure.p de phosphate, de sulfate, de citrate, d'acétate et de nitrRtù dc le fer et le phosphore peuvent être fournis sous la forue de leurs sulfates.et phosphates corme le sulfate et le phosphate de fer, Ordinairenent la plus 

 <Desc/Clms Page number 10> 

 grande partie du phosphore est fournie sous forme de phos- 
 EMI10.1 
 phates d'ammonium, Lorsque l'on applique du pnosphato d'annoniun ou du phosphate acide dlaL1oniun, ils servent comne source combin6c d'asoie et de phosphore pour la croissance de la cellule du microor3aisme. 



   Une composition satisfaisante pour les milieux de fertentation, ch particulier pour les bactéries figurent dans le tableau suivant : 
 EMI10.2 
 concenté;tion (grandes par litre) 
 EMI10.3 
 Constituant '-k)oiivnnt tre Ordinairenent ±,iJp)1¯guè due 
 EMI10.4 
 
<tb> 
<tb> aptliquée <SEP> appliquée <SEP> préférence
<tb> Hydrocarbures
<tb> oxygènes <SEP> 4-120 <SEP> 5-80 <SEP> 10-50
<tb> 
 
 EMI10.5 
 K2lfpo4 0,5-15 1-10 2-8 ""42" 4 Hz5 bzz3 bzz? , Na2so4 0,1-1,0 0,2-0,9 U,3-O,f3 peso 4% 7 H20 OtOO2-0,5 Ù,ÙÙS-Ô,Ù4 , 0,01-0,03 gSO,.7 1120  ,l '7 0, 2-0, 0,3-Oe5 InSO4',7 H20 O,C(??...O,t)5 0,005-0,04.

   OtOI-0,03 NaCl 0,002-0,05 0,005-0,04- 0, 07.-C, ()3 
 EMI10.6 
 
<tb> 
<tb> Eau <SEP> Le <SEP> reste <SEP> pour <SEP> atteindre <SEP> 100%
<tb> 
 
Les autres agents nutritifs minéraux facultatifs que l'on peut trouver, en traces, comprennent :
Concentration (Milligrammes par litre) 
 EMI10.7 
 Constituant R,ouvanii &,t.±1i ordinairemint }.])p1iauée de appliquée a-ouliqudo prdf4rcficG Zfl±5Q,p . I20 0-0,4 0-0,3. 0-0,2 Ra2Mo04 .

   H20 00, 06 0-0, 05 o- (> , 04 coel 2 0-1,2 z 1, O-l', 2 Ï:I303 0-0,08 0-0,07 0-0,06 ouso 4 5 II20 0-0,3 0-1,25 0-0,2 
 EMI10.8 
 
<tb> 
<tb> CaCl2 <SEP> , <SEP> 6 <SEP> H2O <SEP> 0-0,14 <SEP> 0-0,13 <SEP> 0-0,12
<tb> NiCl2 <SEP> 6 <SEP> H2O <SEP> 0-0,01 <SEP> 0-0,008 <SEP> 0-0,006
<tb> 
 
Bien entendu, les agents nutritifs-essentiels et facultatifs peuvent Être fournis sous la   iorne   d'autres sels ou 
 EMI10.9 
 acides que ceux 6n6r0s ci-dessus.

   On prépare de la façon suivante un milieu très satis- 'faisant : 

 <Desc/Clms Page number 11> 

 
 EMI11.1 
 Milieu Pl 
 EMI11.2 
 6rannp3./l,it?'B .".. de vil.10 ( l,tlir ) Hl'4 10 KIiJ'0 1 , P. 2 "', 04 0,5 Aux cn:los :9 oi-doaous on ajoute 100..lirQ d'une solution .saline r: préparde do la façon suivante ; 
 EMI11.3 
 Solution A Grar:,es/litra d'eau distillé î,lgso, r .7H 2 0 40 PeSO"107H 2 0 IZr û ni' e .I I 0 
 EMI11.4 
 
<tb> 
<tb> !.,,,ICI <SEP> 2
<tb> 
 
 EMI11.5 
 Le milieu Pl ci-dessus présente un pH de 7,Go Une variante du milieu ci-deosuti est celui dans lequel le phosphate est fourni sous la forcie d'acide phosphorique. 



  Dos milieux très satisfaisants pour les levures sont les Milieux I, II et ID dao compositions suivantes Jl1ilieu I 
 EMI11.6 
 COI'11JOBÓ Gramme si /litre (il.eau 
 EMI11.7 
 
<tb> 
<tb> de <SEP> ville,
<tb> 
 
 EMI11.8 
 Ha2I#O 4 . 12 1120 2,5 K1f2P04 315 - Py,0 ? H20 leo '.;e,C1 0,5 ' r; tirro3 5 ,   1 ht z 6,5 
 EMI11.9 
 .. 



  Le Milieu II est le m8ne que le Milieu I sauf que l'on ajoute, comte facteur de croissance, 0,001 % d'extrait de levure, lic. triiliéu III est le Même que le Milieu 1 sauf que l'on ajoute ron do "Biotine" comme facteur de croissance, Les facteurs de croissance sont ajoutus au nilieu de base ae nnnHro à l1.ugr:wntor le 'eaux de développement des diverses 
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 levures. 
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  Les ràcroorja iiszés, lorsqu'on les cultive d'abord sur des hydrocarbures ox;; ti4n;s cor.ne source prirnaire de carbone 
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 se développent quelquefois avec difficulté et il est souvent 
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 nécessaire d'utiliser un inoculum d'un Taicroordanisme 

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 qui a été préalablement adapte à la croissance sur le subs- 
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 trat que l'on entend utiliser.

   De. plus les r,',ic2 oorznisr..es, en particulier les levures, bien que cultivas en présence d'un milieu fiin4ral aqueux contenant les cH6r:lOnto nutritifs approprida, peuvent se développer avec difficulté en rai- son du fait que la culture ne contient pas les facteurs de croissance qui existent dans les substrats d'hydrate de carbone à moins d'ajouter ces facteurs de croissance. 
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 Le dvoloP?ffi.ect des levures utilisées est favorise .par l'addition au   nilieu   de   culture   do très faibles quan-   tités   d'extrait   de   levure (ur. produit riche en   nutrilites   
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 essentielles, c'ost-à-dire, des facteurs de croissance obtenus par l'hydrolyse d'une levure, ) ou bien, plus généralement, des nitrilites essentiels.

   Ces aerniol's ,co!.1I;rennent la biotine, l'acide   pantothnique,   l'acide   nicotinique,   la   thiai.iine,   l'inositol et la pyridoxine, La quantité de l'ex- 
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 trait de levure ajouta est de pr6fJrencG de l'ordre de 25 parties par :1illion en se référant au nilieu de fomentation aqueux. Cette quantité peut être supérieure ou infé-   rieure   suivant les conditions choisies pour la   croissance.   



  Il peut   également   être nécessaire, dans le cas de   @   mi- 
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 croorgnniace, d'avoir dans le milieu de culture, une petite quantité d'un aent anti-nousae. 



  La température du nilieu du biosynth, peut varier entre environ 2t) C et : C suivant le microo' ganisrne particulier à développer, riais les tl:!1pé;raturcs y3"t:fC:rt:es, lorsque l'on a recours a des bactéries, sont copr3es entre enviror, 25 C et environ cl.5"0 par 6xeple, er,i.. tm 35 C. Le psi est de préférence conpris entre 5,5 'et 8,5. par exemple con- viron 7,0. 



     Lorsque   l'or, utilise une levure, la   température   est 
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 comprise entre environ 20 C et 47 C suivant le nicroorganisne particulier à ù/velopper nais les températures pr6f6rJos sont comprises t¯:;tre environ 20'C et .p C, par exemple 3G C. 



  ]e pll eit compris entre 3,0 et 7,5, de pr6i".Jreflce entre /1,G G 5,0, par exenole environ 4,5. 



  Dans If: T.yy4 de fomentation décrit et é " ' ßeF.:¯t des   hydrocarbures,   un des principaux facteurs et   difficulté   est 
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 celui de 1'insolubilité des hyarooarbures et, par conséquent, de fortes énergies de mélange ou des Gr.mlsi.'iants chimiques 

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 , d fdf 1d - ou les jeux, sont; nécessaires pour 1;aintenir la phase hydrocaroonde bien dispersée. Ceci est essentiel si l'on dé-- nire obtenir des taux de   fomentation   ou des rendements en cellules   élèves.   De dans le procédé, une quantité con- 
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 sidérable de chaleur se dégage, laquelle doit être éliiiin6e de préférence par de l'eau de refroidissement dispqnible 4' des degrés très   inefficaces.   
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  Ces nombreux inconvénients que l'on rencontre lorsqu'on utilise des hydrocarburcs à chaîne droite sont élimines et le   procède   est rendu beaucoup' plus souple en appliquant, 
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 COf:l.".e charge, une substance l yàrooarbon6e partiellement oxydée qui peut co..;r.rez:are un alcool'comme lf c;thano7. ou un mélange d'alcools, d'aldéhydes, de vtanes, d'esters, d'ëTners et d'acides.

   Ce.3 conposcs Oxy,;4nds sont plus facile... ment attaques par les différents que les hydrocarbures non oxydes.   Corme mentionné   ci-dessus, un avantage du procédé selon l'invention réside dans le fait qu'étant donne que la conversion des hydrocarbures en com- 
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 poses oxydés se produit avec degagenent de chaleur et étant donné que ces oonposds oxydes constituent des intermédiaires dnns la procède de fermentation, la chaleur de reaction dûgngoo dans la pru-conversion est eliminue à une température ulevee avantageuse avant le procède de fermentation. Ceci peut conduire u ui, net r.cloLiscement 4rs avantageux d'environ 10 à 30 ;as de la chaleur d8Rn6e ainsi qu'au besoin en air pour le procède de fermentation en se basant sur une charge d'hydrocarbure en c6.

   Les autres avantages résultant 
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 cie l'application de substrats oxygénés résident dans la ré-   duction   des énergies de mélange nécessaires par suite de la solubilité améliorée des substrats et des besoins réduits en air,
La source de carbone, de préférence la seule source de carbone pour le procédé de fermentation, comprend un   hydro-   carbure oxygéné autre que les hydrates   de   carbone, les   su-   cres,   les     anidons   et la cellulose, Les hydrocarbures oxy-   gns   doivent être fournis en quantité supérieure à,. environ 50 % de la quantité nécessaire de carbone, de   préférence   su- 
 EMI13.7 
 périeure à environ 80 %, cle préférence de tout le carbone nécessaire.

   Los hydrocarbures  oxygènes   peuvent comprendre des alcools, des cétones, des'aldéhydes, des esters et des 

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 acides, de   préférence   des composés contenant d'environ 1 à
50 atomes de carbone dans la molécule qui sont obtenus par oxydation d'une fraction de pétrole. Les hydrocarbures oxy-   gènes     profères   sont ceux obtenus à partir d'une fraction de pétrole contenant d'environ 2 environ 20 atones de carbone ' dans la molécule. Un composé avantageux est choisi parmi les alcools   contenant   d'environ 2 à environ   10   atones de carbone dans la   Molécule,   en particulier l'alcool éthylique. 



   La présente invention sera vieux comprise en se réfé- rant à la figure 1 du dessin   annexa ,     illustrant   un mode de   réalisation     :le   celle-ci. En se référant à cette figure, la charge d'hydrocarbure telle qu'un naphta léger ou une fraction en   Ci?     à   C18 est introduite dans la zone d'oxyda- tion   10   au Moyen de la conduite 1.

   Dans ce code de   réalisa-   tion décrit, la zone d'oxydation travaille à une températu- re élevée   et 4   un faible taux de conversion par passe.   L'oxy-   dation peut ôtre catalytique ou non eatalytique et   haut   être conduite, si on le désire, en présence d'acide borique li- bre ou de composés d'oxyde   de   bore qui favorisent la forma- tion   d'alcools dans   la zone   d' oxydation .   Dans ce dernier cas, .un stade d'hydrolyse et d'élimination de   l'acide   bori- que   précède   le stade d'extraction de   l'alcool,,  stade qui ' , sera examiné   ci-après.   On introduit de l'air par la condui- te 2.

     La température   est comprise entre environ   1200   et
205 C, par exemple à environ 163 C. La pression dans la zone
10 est comprise entre   1,'05 et   17,5kg/cm2 au   manomètre,   par   exemple,     à   environ 9 kg/cm2 au manomètre. 



   Les produits de la réaction de l'oxydation sont souti- rés de la zone   10   par la conduite 3'et introduits dans une zone d'extraction 20. Les produits de réaction contiennent d'environ 10 à   15   % de produits   oxydes   que   l'on   extrait au moyen   d'une   grande quantité d'eau qui est introduite dans la zone   20   par la conduite   4.   La quantité d'eau utilisée est comprise entre 1 et 90 volumes d'eau, par exemple,   3 à   15 vo-   lumes     d'eau,   tel qu'environ 9 volumes d'eau par volume de produit partiellement oxydé introduit par la conduite 3,

   Le solvant d'extraction introduit par la conduite   4   peut être de l'eau pure mais de   préférence     c' est   une solution nutri-   tive   qui est décrite ci-dessus. On peut ajouter suffisamment   de   base, par exemple d'ammoniac, par la conduite 5, de 

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 pr.'6ronoo avant l'extraction, de naniere à neutraliser oomplètement les acides présents dans la solution. 



     Etant   donne que les composés oxygénés sont beaucoup plus solubles dans l'eau que les hydrocarbures à chaîne 
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 droite, l'extraction a l'eau l.rt:i.ne 'de façon sélective tous les produits de 1   oxydation du ndiange réactionnel, Les hydrocarbures non convertis sont 4lir.iins de la zone 20 par la conduite 6 et sont de préférence   recycles   dans la   zo-   
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 ne d'oxygénation 10 par la conduire 7. L'cx1irai't est retire de la zone 20 par la conduite   8   et il est introduit dans la zone de fermentation 30.

   On peut ajouter par   la   conduite 15 de l'eau et des sels de   pour   obtenir les condi- 
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 tions <1.5IJirlcs pour la fermentation, 
Sous certaines conditions il peut être avantageux d'introduire l'extrait dans   la   zone 40 par la conduite 9 et de   rectifier   de l'extrait par de   l'air   que   l'on   introduit par la conduite   11   et que l'on évacue par la conduite 13. Cet air peut ensuite être utilisa pour l'oxydation dans la zone 10. Les produits' épures sont soutires de la zone   40   par la conduite 12 et introduits dana la zone de fermentation 30 
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 par la conduite 8.

   Le produit proteinique est soutire do la zone 30 par la conduite   14,     La   récolte des cellules   du   produit provenant du bouillon de fomentation peut se faire par tout Moyen   appropria   par exemple en deux stades.

   Les   cellu-   les peuvent d'abord être   séparées   du liquide surnageant par 
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 oontrifuu;ation (par exemple dans une boule ferride), au moyen de cyclones travaillant avec des liquides (hydroclones), par wvaporntion, (par exenpie en pellicules, en chute libre ou par étalement de nappes), par filtration, (par exemple, sur I;:

  icrol7ora, 1).ar dialyse, par osmose inverse),' par f100u.... par décantation, (par exemple en ajoutant des agents floculants, des coagulantsou des agents favorisant la filtration ou en changeant le pH ou la température) ou par tout 
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 autre procède de séparation ou la combinaison de ces proc6dés, Les cellules   concentrées   séparées peuvent ensuite être séchées par séchage par pulvérisation, séchage au tambour, séchage   par   séchage sous vide,. séchage sur 
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 - r,n.... '1.8, séchage :

  i 1 ' tuv ou autre noyen de s60hage ou par   la   combinaison de ces   procèdes.   Quelles que soient les opérations ci-dessus pour la séparation et le   séchage   des cellules 

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 produites, il est à noter que cette façon d'opérer est ex- 
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 trômenent econonique en ce sens qu'il n'est'pas besoin de mode de séparation spécial complexe et   d'ajout   de lavage   surfactif   pour séparer les substrats qui n'ont pas   réagi   et .

   les sous-produits (bien   qu'or,   puisse y faire appel dans   le.   sons le plus   général   de l'invention) pour   obtenir   un pre- duit final présentant une   teneur   en protéines  extrêmement     élevée,   et ne   contenant   pas   d'impuretés   nuisibles pour   1'bonne   ou les anihaux. 
 EMI16.2 
 



  La pr6oxydatiQJ1 des hydrocarbures ackis dans le procé.. clti de fomentation donne un f.'úll.ln:0 d'alcools, d'aldéhydes, de c6toncs, d' Óthors et d'acide et esters correspondants. Ceci réduit la perte en charge dans la   fermentation   à l'air 
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 et diuinue 05galenont la durée de fomentation. Pour un noubre d'atonies de carbone donne, les conposes oxygènes présen- tent une tension de vapeur bien inférieure à celle de l'hydrocarbure correspondant.

   De plus, sen raison de leur grande solubilité dans   l'eau,   les composés oxygénés n'exercent qu'une faible fraction de leur tension de vapeur totale lorsqu'ils sont présents sous la forme d'une solution aqueuse dilusée 
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 alors que les hydrocarbures exercent esse(;t1ellCI';or."C toute ) leur tension de vapeur même à basse concentration étant don-      
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 nô leur solubilité extrt;iei 1ent faible dans l'eau. Il en 1'é- suite que l'air de fermantution passant à travers le bouillon de i'err;enta tion capio beaucoup Moins d'hydrocarbure oxy* , gêne que a'hydrocarbure ordinaire si les cieux sont présents . en quantités équivalentes dans le bouillor. de   fermentation.   
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  Ceci non seulement conduit à une nette r6<x.iction des pertes qui sont voisines de zéro si l'air effluent est lave à l'eau ou au noyen d'une solution aqueuse nais au.si éi,inine essenti.lc:m4t.; l risques d'incendie et d'explosion qui'existent toujours lorsque l'on notante de l' l1i]" et des hydrocar- bures dans ceraircesproportions. 



   Ainsi, la présente invention réduit le bilan de calo- 
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 ries dans l'appareil de fermentation l fenvi.iaoti 10 à 3! -, Ainsi, le concept général de la prcserce invention réside 4Zns l'application de coaposos ox3<gér  tupis que dos gaz naturels oxygénés et des fractions pétrolières d'hydrocarbures oxygènes bouillant jusqu'à   environ   480 C et en particulier des fractions contenant d'environ 1 à 30 atones 

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 de carbone, Ces COOC0S sont choisis parmi les alcools, , 
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 les esters, les aldéhydes, les cétones et les acides, Les 
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 composés oxygénés pr4férés Douprennent les alcools, en partiaulier l'alcaol éthylique.

   D'autres composes oxygénés avantageux cor.prennent 1''alcool isopropylique, la i-.1,-thyl dthyl cétone, l'acide acétique, les glycols, l'alcool butylique, l'acétone, l'octanol, l'acide d6canoîque, l'ester dibutylique de l'acide sebacique et l'adipate de dir!1éthylè. 



  Los alcools appropries ecr.p:.annent le n6thGnol, l'ëthanol, le n-propanol, l'isopropanol, les alcools primaires de 4 à 30 ato::es de, cax%bJi;e, à chaîne droite ou ramifie, le 2dthyl hexanci, l'alcool isooctylique, le glycol, la Blyc6rine, le cyclohexanol, les alcools secondaires de 4 à 30 ato- 
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 nes de carbone de paraffines normales ou dlisoparaffines, 
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 les nonocthoxylates d'alcools secondaires et l'alcool crotyliqia (alcool non satura à 4 atomes de carbone). Les céto.. nés et aldéhydes appropriées comprennent l'acétone, la MO .

   (n6thylJthyl cétone), la MIBO (mc:thylisobutyl cétone), y 1' 3so- 
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 borone, la cyclohcxanone, la cyclopentanone, l'aldéhyde 
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 stearylique, l'aldéhyde laurylique, l'acétaldéhyde et le crotonaldéhyde (aldéhyde non saturé à 4 atomes de carbone), 
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 Les acides appropriés comprennent les acides acétique, pro, 
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 pioniqut, caproique, caprique, laurique, oléique, stéarique, linoléique, praohidique, toluique, oxalique, aébaa3.quea 'téréphtalique, phtalique, malonique, hexahydromellitique et 
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 crotonique (acide non satura à 4 atomes de carbone).

   Les 
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 esters appropriés comprennent l'acétate de i.i6thy1q, 1'acétate d'uthyle, le butyrate d'éthyle, le stéarate d'éthy.e, le diaoe-cate de glycol, le va1rate dlisopropyle, le phtalate de le trioléate de glycuryle et l'acoltate d'alcool secondaire en 12 0 ; et les éthers appropriés comprennent les éthoxyates, l'uther diéthylique, le tétrahydrofurane et l'cthor diisopropylique, Les gaz du pétiole comme le 1.1éthane, l'dthane, le propane et le butane peuvent être oxyd s aà l'air en alcools, otones, aldéhydes, éthers et acides par des procédés clas- 
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 oiques tels que des techniques d'oxydation avec pluie'de 
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 solides, ou dans'un rÓaoteur garni d'un lit de solides.

   Comne iientionrj('11, le substrats oxydas dérivent de pr6fJranoe de fractions hydrocarbonées contenant d'environ 1 à 30 atones 

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 de carbone, en particulier celles contenant t1 ' environ .r.à.... 



  5 atones de carbone, Il va de soit que d'autres techniques et d'autres   procèdes   peuvent être appliquas pour l'obtention d'une substance oxygénée contenant de 1 à 30 atones de carbone. 



   Il entre également dans le concept de la présente invention que'd'appliquer une fraction   oxygénée   brute telle qu'une fraction brute répondant à la composition suivante : 
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 r':,1?4ge A - QQn}lQ¯sjJJ>::,gér6s- 
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 Alcool adthylique 56,6 
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<tb> 
<tb> Acétone <SEP> 29,0
<tb> alcool <SEP> éthylique <SEP> 8,1
<tb> 
 
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 Acét3.te d'6t±'-Iyle 2,7 ;,ovtate de nJthyle 2,0 Dimdthyl Propane 0 e e Alcool t-bu-ylique 0, 3 lldtbyl6tllyle3torie 0,3 NéthylisopropénylcÓtone 0,3 
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<tb> 
<tb> H2O <SEP> 0,3
<tb> 
 
D'autres caractéristiques et les avantages de l'invention ressortiront plus   claireent   des exemples qui vont sui-   vre,   
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 -. EJVIP,.1 .. 



   On procède à un certain nombre d'opérations de fernen tation aérobie en continu en utilisant un milieu P1 et en utilisant de l'alcool éthylique comme seule source de car- 
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 bone. La torlp6rature est de 350C et le pH est fixe a 7oO par l'application d'hydroxyde d'ammonium. La puissance nécessaire est inférieure à 1 CV pour 100 litres de bouillon 
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 de culture en raison de la solubilité 'de 'l'éthR1i9l dans le milieu de fermentation. De nene le besoin en oxygène est inférieur à 2 gramuès par grapine de cellule résultant de l' application d'hydrocarbures oxygénés, Les rendements obtenus sont d'environ 0,6 grazcie de celle par gramne d'6thanol.'Ies résultats figurent au tableau suivant : 

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 TABLRAU TIr 
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 Ortpra- Durdo de su- Taux de 0/.

   Et0À dani nondcr.ent ;.> de lion jour en h. nouent ,T:. /1. /h. 1 a cb - o G 1 Iule s :''. Et OH 2,0 8,3 2,8 0,60 2 1,5 10,5 2 , 6 , 0,59 3 IP5 10,3 2,6 0',55 Ainsi,'un   procède   en continu est conduit avec une fai- 
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 ble g=inuie ào puissance énergique. 



  En appliquant une fraction hydrocarbonde en  16' on obtient les menés résultats de développer.'.oKt avec cotte fa1- blo puissance uniquement en ajoutant des quantités   inpor-   
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 tzntea d'oxygène, par exenple, trois fois la quantité d'oxygène qui est n6cessaire avec l'uthanol. (Voir Exemple 4). 



  Cotte diMinution d'utilisation d 1 oXY#ne dans 10 car d'un hydrocarbure linéaire est due à l'augmentation de la   résis-   tance au transfert de la nasse amenée par la   présence     d'une'   
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 phase )iydrocarbon-o additionnelle. 



  - rWP9Th'. 2 - 
On procède à des fermentations aérobies en continu de la façon décrite   à   l'Exemple 1 en utilisant un milieu P1 et 
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 dgalenent environ 2 % soit d'ethanol soit d'un ndange de paraffine dans les différentes opérations. Les résultats de ces opérations figurent au tableau suivant ;

   
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 T:'.3hlU IV 
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 Conposition des oellules sch6cs 
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<tb> 
<tb> e <SEP> . <SEP> en <SEP> poids
<tb> Source <SEP> de <SEP> carbone <SEP> '' <SEP> Protéine <SEP> totale <SEP> Total <SEP> des <SEP> Cendro
<tb> 
 
 EMI19.10 
 'Otxh, 5) "' fli>s nras Ethanol 76,6 ',., 0 .'!-,15 Ethanol 78,7 ' 6,0 4,20 
 EMI19.11 
 
<tb> 
<tb> Ethanol <SEP> 77,0 <SEP> 5,4 <SEP> 5,33
<tb> Etnanol <SEP> 78,8 <SEP> 3,8 <SEP> 3,96
<tb> 
 
 EMI19.12 
 Ethanol 78, 3, 4-,15 Ethanol 80, 3,1 J?T?ii:1<>1 65, 5, Paraffine 66,5 12,1 z., 98 
 EMI19.13 
 
<tb> 
<tb> Paraffine <SEP> 65,6 <SEP> 15,0 <SEP> 4,10
<tb> 
 
 EMI19.14 
 Paraffine Ól,8 17,4 zur 70 
 EMI19.15 
 
<tb> 
<tb> Paraffine <SEP> *' <SEP> 68,0 <SEP> 19,9 <SEP> 4,14
<tb> 
 

 <Desc/Clms Page number 20> 

 
 EMI20.1 
 T:a.i;tLr TV (suite) 
 EMI20.2 
 . l;îa:Z.a:a de paraffines 1# chnfne droite. i5 on ;eid;

  1 
 EMI20.3 
 
<tb> 
<tb> c13 <SEP> 1,6
<tb> c14 <SEP> 4,8
<tb> 
 
 EMI20.4 
 C1 .3 2 ,3 ' ,. 
 EMI20.5 
 
<tb> 
<tb> c16 <SEP> 29,8
<tb> Ci? <SEP> ; <SEP> 22,6
<tb> C18 <SEP> 8,1
<tb> C19 <SEP> $0,8/100,0
<tb> 
 
 EMI20.6 
 Moins de Q >0;1 zij garomatiques. 



   De ce qui précède, il ressort que lorsque l'on utilise   l'éthanol,   on obtient des rendements bien ours en protéine. 



  De même, les quantités de corps gras sont notablement réduites. 



    -   EXEMPLE 3 -
On procède à des   fomentations   aérobies en continu pour pouvoir les.comparer aux résultats obtenus en utilisant la 
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 charge paraffinique décrite à l'Exemple z2 et l'8thanol. L68 comparaisons sont faites avec une puissance relativement faible de   0,9   CV/100 litres et. avec   une   puissance   relativement   élevée de . 
 EMI20.8 
 



  2)7 OV pour 100 litres. Environ 2 % en poids d ct:.¯wr. , u d'un mélange   paraffinique   sont utilisés dans un milieu P1. 



   Les résultats de ces opérations figurent au tableau ci-après. 

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 EMI21.1 
 



  .T rT # 
 EMI21.2 
 Com,oF-r,,i-soy. cntrp. les i'c>:..}-:er.tationa avec de llhn0! et avec dé3 naraffines ÙV/10Ô Substrat Tally- de ddve- ¯¯¯SELECTIVITE¯¯¯ 02 Conc, litres lopperent 9#céiilg' ;, cell I,, o dans 3/1.-ï:. substrat dans le l'air ....- ....-;- f.1u1mtrat 76 o, ±toit 6,1 ' 0 p-70 1,34 4110 
 EMI21.3 
 
<tb> 
<tb> la,5 <SEP> 0,59 <SEP> 1,13 <SEP> 57,0
<tb> 0,9 <SEP> Paraffines <SEP> 8,5 <SEP> 0,71 <SEP> 0,83 <SEP> 70,8
<tb> 10,7 <SEP> 0,54 <SEP> 0,64 <SEP> 78,0
<tb> 
 
 EMI21.4 
 2,7 EtOH 10,6 0,59 1,13 48,0 9,4 0,58 1,ll 42,3 2, 7 Paraffines 11,2 gaz?. 1,10 E3;

   9,3 0,71 z33 53,0 Anàl,14rse des cellules s4ah4es CV/100 Substrat flua 02 0 % N % Cendre Total de Amino H20 litres utilisé % corps acides % % ... ,r J 1 .na. o, ztox 48,0 47, 11,2 2,4 8,7 60 4,5 
 EMI21.5 
 
<tb> 
<tb> 32,7 <SEP> 44,9 <SEP> 12,5 <SEP> 4,7 <SEP> 3,2 <SEP> 55 <SEP> 7,2
<tb> 0,9 <SEP> Paraffines <SEP> 35,9 <SEP> 50,3 <SEP> 11,0 <SEP> 2,9 <SEP> . <SEP> 16,0 <SEP> 48 <SEP> 10,3
<tb> 
 
 EMI21.6 
 36,8 55,4 8,1 24:8 20,6 34 4,6 7 EtOH 49,0 47,0 11,9 3,2 t,7 52 3,2 57,0 44,7 12,4 '790 4,7 ' 52 rye5 2,7 Paraffines 45,7 46,2 9,4 3,6 8,6 49 4,4 
 EMI21.7 
 
<tb> 
<tb> 51,0. <SEP> 50,4 <SEP> 10,7 <SEP> 5,9 <SEP> 22,1 <SEP> 47 <SEP> 10,1
<tb> 
 De ce qui   précède,  il ressort que l'on obtient des ré- 
 EMI21.8 
 sultats avantageux inattendus lorsque ilori a recours à. l'al- cool éthylique.

   Le nombre de grammes de cellules obtenu par   gramme   de carbone dans le substrat augmente dans le cas 
 EMI21.9 
 0, 9CI/1QU litres de 0,83 c"I 1,34. On obtient d'autres avanta- ges significatifs en ce qui concerne la concentration en oxygène dans   l'air, le   total de matières grasses résultant et les   aino   acides obtenus.

   Ces avantages sont très   signi-   ficatifs pour une puissance relativement faible, par exemple pour une puissance comprise antre environ   0,27   et 2CV, en particulier entre environ 0,9 et 1 CV pour 100 litres,
Ces résultats montrent le même avantage dans la quali- 
 EMI21.10 
 té du produit prée6doi-iiient illustré pour les substrats 

 <Desc/Clms Page number 22> 

 
 EMI22.1 
 oxygénés, e' est-à-cire une plus faible teneur en matières crasses et dos concentrations sup6riGurc en amino acides et en azote total. De plus, ces résultats montrent les perfec- 
 EMI22.2 
 tionnenents obtenus dans le procède de fermentation lorsque l'on a recours à c,es substrats oxygènes.

   Hn consir:ratct :1a faible énergie de mélange la plus avantageuse (0,9Q'I/100   litres),   il faut des concentrations plus faibles en oxygène' 
 EMI22.3 
 pour le Mone taux de croissance lorsque l'on applique do l'ethanol plutôt que la n-paraffine, L'avantage clos substrats oXYJ0nÓs pour une faible puissance est particulièrewcnt illustré par l'exeuple suivant : - }XEHPL.'S 4 .,. 



  On procède à des opérations de fermentations aérobies en continu en utilisant un nilieu Pl et de l'ethanol a 35 0, . avec Miorooocous cerificans, L'augnentation du pourcentage d'utilisation d'oxygène cOI'ipa.rativoT:lOnt à. un substrat de n-"paraffine ressort du graphique de la figure 2 sur lequel on a porté en abscisses les CV pour 100 litres de bouillon et en ordonnées le pourcentage d'augmentation d'utilisation d'oxygène avec l'éthanol par rapport aux n-paraffines. 



   En raison de :La solubilité de   l'6thanol   dans le milieu de   fomentation,   il y a une phase de   moine   dans l'appareil 
 EMI22.4 
 de feraentation avec l'éthanol comme substrat qu'avec le substrat n-,pa,rafinique Par conséquent lorsque l'ethanol est la seule source qejcar-bone, la résistance au transfert de la nasse est réduite et   l'utilisation.de   l'oxygène est augmentée pour une puissance maintenue constante, En fait, une 
 EMI22.5 
 augmentation de ilutilisation de l'oxygène de 210 cli 'est obtenue avec une puissance de 0,8CV/100 litres par l'application d'éthanol à la plape des n-paraffinen (COm!10 le r.ol1tro la figure   2).   Ces résultats montrent que pour obtenir un taux de croissance équivalent pour la même puissance aveo 
 EMI22.6 
 des n-paraffines,

   les forces pour le transfert de la liasse en milieu oxygène doivent être augmentées par l'enrichisse- 
 EMI22.7 
 ment du courant gazeux admis au rr;ôyen d'oxygène. ,1 partir de ces données, il faut admettre environ trois fois la gantitd d'oxygène en continu à l'appareil de forc8r.tatioh pour obtenir un rendement égal en cellules lorsque l'on a recours à des n-paraffines, Suivant une variante, on peut obter.ir des taux de croissance équivalents sans enrichir le 

 <Desc/Clms Page number 23> 

 
 EMI23.1 
 courant do gaz admis on augmentent considcrablenent la 'puis- sance.

   Ainsi, pour un rendement constant en cellule et pour une   concentration   constante   d'oxygène,   l'application d'étha- 
 EMI23.2 
 nol, en raison do sa solubilité dans le milieu do err..er.tf. tion favorise fortement le transfert "des Nasses et permet de   conduire .la   fermentation avec des puissances considérablement réduites.   Etant   donne que cet   avantage   dérive de la 
 EMI23.3 
 solubilité de l'athanol, il est évident que l'application d'autres substrats solubles conduiront aux mêmes   avantages.   
 EMI23.4 
 



  .. gX3N11J:" 5 On oxyde de l'elcosanc (0 20) on utilisant une solution do pornanganato c1o potassium contenant une faible quantité d'hydroxyde de aodiun. On admet de l'air dans la solution contenant l'eicosane pendant environ il heures. La tef,1pÓ:rn... ture do la solution est de   120 C.   On neutralise le mélange   rdaotionnel   au noyen d'hydroxyde de sodium puis on le   flet   
 EMI23.5 
 en contact avec de l'eau. Il se forte une phase aqueuse coin- tenant les acides et on sépare cette phase. On ajoute de 
 EMI23.6 
 l'hoxane a la phase résiduelle que l'on extrait à nouveau à l'eau.   L'hoxane   est   élimine   et on isole uno phase hydrocarbonée oxygénée de 12, à 18   atones de   carbone.

   On fait croître 
 EMI23.7 
 }riorocQccuS cerificans (14987) à 30 C avec un taux d'agita- tion de 300 tours par minute en utilisant   1 ;;,; des   composé   oxygènes   en C12   à   C18 par rapport au carbone,dans un Milieu 
 EMI23.8 
 Pl* Le poids de cellules obtenu est de 3, j.5 graines par litre. C'est le rendement naxiaal en cellules que l'on puisse obtenir par rapport à la quantité estimée de carbone   présen   te.

   Les amino acides essentiels   .'réduits   par ce substrat 
 EMI23.9 
 figurent au tableau suivant coapara.tivenent a ceux obtenus avec une fraction hydrocarbonée en C16 comme substrat, 

 <Desc/Clms Page number 24> 

 
 EMI24.1 
 1' \ :IZt!\ u VI 
 EMI24.2 
 Il est à noter que la teneur '3n thio ainino acide (Cystine et Hethionine) augmente de 21 '% par rapport à celle obtenue lorsqu'on utilise un hydrocarbure en  16 et que cotte 
 EMI24.3 
 augmentation est générale en ce qui concerne les anino acides essentiels. 
 EMI24.4 
 



  - EXEMPLR 6 On fait développer Miorocoocus oerifioans (l't-9'37) 3000 à 300 tours par ninuto en utilisant 2. d'un ii=Eli:sje de couposes oxygénés (Mélange A) décrit prdoedenent 'dans un milieu Pl* On obtient un poids' de cellules de 2,66 grairies par litre. Ceci est le renaencnt r.laxl:,.u;-, que l'on peut obtenir en supposant que 50 po des cellule:; microbiennes est constitua par Ju carbone et que la i.ioi.ILC ùu carbone ne transforme en anhydride carbonique. Le c1<.>rcloppe. or.t du miorococcus cerificans sur le mélange des c'jnpo&us o=;yjjosnols compar-itivezent au cas d'un substrat d'un-,- fraction hydrecarbonée en Glr contre une aug.'.entation due la te  neur en thio -nino acide, . savoir 14 flâ út U:12 teneur en protdine de 16 yj.

   Ceci figure au tableau suivant : @%;,IJ VII 
 EMI24.5 
 ''}ra"e3 ' ??.'1'1:0 rt c i ti r,r Total (1 '!',rLS,.. içç airnnncs CÎG nrntsin<..téi;.:é(i"1.;±,26) Substrat 'i'1 1.0 ?.1."'' n0 L,vsinG acides 016 1,66 ,57 bzz Mdiange A (Coaposés 2,12 5,01 7212 
 EMI24.6 
 Microooccun c0rificGs i n o --a. o -,! 0 16 ,,1\"'. &- ..11.....) L.....

   L ,""..;; 'gà \... ;.....\.,..{.& .... """"'4J;J. essentiels --- en C12 iE.ï 
 EMI24.7 
 
<tb> 
<tb> 
<tb> 
 
 EMI24.8 
 Isolcuoinc 3,2 3,7 15 Leucine (:, .. .5,0 5,5 10 Lysine 4,ex flr , 7 2 Phenylalanino 2, 2,8 12 
 EMI24.9 
 
<tb> 
<tb> Tyrosine <SEP> 2,3 <SEP> 2,4
<tb> 
 
 EMI24.10 
 Cystine 0,5 0,7 4C ethionine z.

   le(, 14 Threonina 3,7 4,1 11 Valine 3,7 4,4 19 

 <Desc/Clms Page number 25> 

 
Détermination selon Kjeldahl
Comme cela ressort des Exemples 5 et 6, Micrococcus cerificans est susceptible d'utiliser un mélange de compo- ses   oxygénés,   De même lorsque le microorganisme est   recette   conformément à   l'invention,   il présente une teneur en pro- téine   élevée,   une   répartition     élevée   en amine acide essen- tiel et un caractère nutritif très intéressant. 



   EXEMPLE 7-
On procède à un certain nombre de   fomentations   adro- bien en utilisant le milieu P1 à une   température   d'environ
30 C de la façon   indiquée   ci-dessus avec différents hydro- carbures exygénés. Le microorganisme   utilis6   est Micrococcus cerificans (14987). 



   La teneur en protéine, l'indice d'amino acide essentiel et la répartition des   anino   acides du microorganisme déve-   lopp6s   sur différents hydrocarbures oxygénés purs, sont dé-   terminés   en utilisant les procédés analytiques habituels et les calculs usuels. 



   La teneur en protéine   (exprinée   en pourcentage) est calculée à partir du pourcentage en poids d'azote des cellu-   les   (déterminé par la méthode de Kjeldahl) en multipliant par un facteur de   6,25.   



   L'indice   d'aino   acide essentiel des cellules récoltées . est déterminé en utilisant le procédé classique en prenant l'oeuf   conne   base de   comparaison.   L'oeuf est   considéré   comme une parfaite protéine présentant un indice d'amino acide essentiel (I.A.A.)de 100. 



   Pour déterminer la courbe de répartition des amino acide des cellules récoltées on utilise l'analyse   chronatographique   pour   déterminer   tous les constituants indiqués   à   l'exception du tryptophane que l'on détermine par analyse mierobiologique
La teneur on protéine, les indices d'amino acide essen-   tiel.     et la.répartition   des amino acides pour les cellules récoltées sont donnés au tableau suivant :

   

 <Desc/Clms Page number 26> 

   TABLEAU VIII   
 EMI26.1 
 MICROCOCCUS CERIFICAHS DEVELOPPE S l7I'3'L ii;';TS COi,POSES OXYG:;mES Anino acides GraIJ!1es Anino Acide Dour 100 <-rar:.-.es de Trottine àilanîne 6,5 6,7 6,1 7,4 5,5 6,2 5,9 5,2 Arginine 4,2 4,2 ruz,3 5,1 3,3 4,1. bzz,9 4,ï Acide Aspartique 7,9 7,6 6,3 7,0 6,2 6,1 G,4 5,3 Acide cyst6ique 0,1 - 0, 2 0,2 p 0,2 0,1 0,1 0,2 Cystite 0,3 0,4 0,4 0,3 0,0 0,3 0,5 0 Acide -Glutaziique 8, 8 8, 4 9, 10,8 G, 5 8,9 8, 2 5, 9 
 EMI26.2 
 
<tb> Glycine <SEP> 3,5 <SEP> 3,5 <SEP> 3,3 <SEP> 3,6 <SEP> 3,2 <SEP> 3,4 <SEP> 3,3 <SEP> 2,9
<tb> Histidine <SEP> 2,3 <SEP> 3,1 <SEP> 2,3 <SEP> 2,4 <SEP> 3,3 <SEP> 2,1 <SEP> 1,6 <SEP> 2,7
<tb> 
 
 EMI26.3 
 Isal-eucine 4,6 3,7 2,7 3,4 3,3 2,1 3,0 2,5 
 EMI26.4 
 
<tb> Leucine <SEP> 6,1 <SEP> 5,2. <SEP> 5,3 <SEP> 5,6 <SEP> 4,3 <SEP> 4,6 <SEP> 5,4 <SEP> 3,7
<tb> lysine <SEP> .

   <SEP> 4,9 <SEP> 5,4 <SEP> 4,1 <SEP> 3,9 <SEP> 4,8 <SEP> 3,8 <SEP> 4,3 <SEP> 4,6
<tb> 
 
 EMI26.5 
 hethionine 1,4 lu 1,6 1,4 0 1,3 1,6 0,8 Sulfoxyde de méthionine 0,4 0,1 0,2 0,2 0,3 0,1 0,3 0,3 
 EMI26.6 
 
<tb> Phénylalanine <SEP> 3,2 <SEP> 2,9 <SEP> 2,6 <SEP> 2,6 <SEP> 2, <SEP> 6 <SEP> 2,4 <SEP> 2,5 <SEP> 2,3
<tb> Proline <SEP> 3,4 <SEP> 2,6 <SEP> 3,2 <SEP> 3,3 <SEP> 2,7 <SEP> 2,5' <SEP> 2,4 <SEP> 2,8
<tb> Serine <SEP> 3,1 <SEP> 3,1 <SEP> 2,8 <SEP> 2,7 <SEP> 2,6 <SEP> 2,3 <SEP> 2,6 <SEP> 2,6
<tb> 
 
 EMI26.7 
 Thronine 3,7 3,5 2,9 3,9 3,1 3i5 2-,8 3,2 
 EMI26.8 
 
<tb> Tyrosine <SEP> 2,7 <SEP> 2,4 <SEP> 2,1 <SEP> 2,0 <SEP> 1,8 <SEP> 2,0 <SEP> 2,1 <SEP> 1,8
<tb> Valine <SEP> 6,6 <SEP> 3,4 <SEP> 3,5 <SEP> 4,3 <SEP> 3,7 <SEP> 3,1 <SEP> 4,0 <SEP> 3,0
<tb> 
 
 EMI26.9 
 Tryptophane 1,-. T. 1,12 O,û? 0,72 O,G? 0,78 i'%.T. 1'. T. 



  P.10T5I1F?, TOTALE (Ux6,25) 78,75 44 63 74,13 69,75 55,00 6-'.,50 67,60 55,63 
 EMI26.10 
 
<tb> 1,i,.ai. <SEP> 68,4 <SEP> 57,9 <SEP> 51,3 <SEP> 55,2 <SEP> 50,3 <SEP> 47,0 <SEP> 53,5 <SEP> 45,1
<tb> Conditions <SEP> de <SEP> fomentation <SEP> : <SEP> . <SEP> élcool <SEP> A1 <SEP> @
<tb> 
 
 EMI26.11 
 Substrat 1 ;. par rapport au - Alcool Acide Alcool Alcool Alcool Alcool Alcool 1-thyl carbone : éthyli- 016i- c6tTli-.1Gthy- sec-bu- isopra- Î3aÉe làtàne Cell. b.rs. que que Que lique typique pylique lique cJtonc Cell.j/1 24 lirs. "3,69 ,- 5,76 ' 5,58 Cell./1 48 hrs. 6,96 5'? 4,62 r , r?î0 lsrl 1,01 1,25 
 EMI26.12 
 
<tb> N.T.- <SEP> Non <SEP> teste.
<tb> 
 

 <Desc/Clms Page number 27> 

 
 EMI27.1 
 



  Corme cela ressort dos résultats ci-deoqus, lorsqu'on recolle Mioroooocus oei,ificans oon:toi?n6hent à l'invention -il présente la   combinaison   intéressante d'une teneur élevée 
 EMI27.2 
 'on protéine supérieure à 50 , d'un indice élève en p,,.ino acide essentiel supérieur à 45 ev ot une courbe de' rcpnrtition d'anino acides nutritifs, indiquant de plus la posni- bilité   d'application   de   l'invention   pour récolter une pro- 
 EMI27.3 
 tdino utilisable par biosynthèse d'une manière éxtr81.ienent 6conoriiquo, Ainsi la présente invention est particulière- 'mont intéressante pour la préparation d'appoints ali:enta3.- res convenant pour l'horde et les animaux et présentant un taux élevé en protéine   d'une   haute valeur nutritive. 
 EMI27.4 
 - ¯T;:

  CEILt'Ir ±3 - 
On procède à d'autres fermentations aérobies en   uti-   lisant le   milieu   P1 et neuf bactéries différentes. La tem- 
 EMI27.5 
 .p,rature est de 30 0 ot le pH de départ de 7,8. Le substrat eut do l'alcool éthylique, La teneur en azote, la teneur en protéine (pourcentage de protéine) le 1.,i,,1. (inàÉoù d'acide amino essentiel) et la répartition des amino aoides sont de" terrîin6s oonne indiqua à 1!rxemPle 7.

   Les résultats figurent au tableau suivant : 

 <Desc/Clms Page number 28> 

 
 EMI28.1 
 111=J11 ilT 
 EMI28.2 
 DIVERS :'MICBtO:?G¯ii:IS".FS 1)E\#T)O??ES SUR ALCOOL ETHYLI0UE .t..-1Í1l0 acides Grf.r:L":1CS ;I1ina ..aide -pour 100 arr:,es de protéine canine 5,9 r3,8 6,1 6,2 5,9 6,5 6,2 9,0 7,4 59fl 4,8 5,2 5,3 4,9 5,2 4,7 4',0 5,1 ÁC1GC hsprtquc 6,5 6,2 6,6 ?,C) 6,4 6,7 6,5 5,5 ?,0 Acaae Cytcrique 0,2 0,1 0,1 0,1 0,1 0,2 0,1 0,l 0,1 Cystine Ci, 3 0,4 t7,r C?,5 0e5 0, 0,4 0 2 03 Acide Glutaijique 7,6 9,3 8,8 8,0 8,2 8,6 8,6 1 r,, 9 10 8 Glycine 3,5 3,5 3,7 3,7 3,3 3,8 3,4 3,7 38 Histidine 2,8 3,3 3,2 3,1 1,6 3,1 2,5 3,C) 2, Isoleucine 3,1 2,7 3,1 3,1 3,0 3,1 3,1 1,3 3, Leucino 5,5 5,3 5, 5,8 5 4 5,7 5,4 3,4 56 Lysine il , 5 ,4 4,? 49 3 4,8 ,3 6,9 3 9 N6thioninc 1, 6 1,8 1,6 1,4 2, 6 1,7 1,6 'C,9 1 4 Sulfoxyùe de rluthionine 0,3 0,3 0,4 0, 6 0, 3 0,3 0,! 0,1 U,

   2 rhonylalahine 2,6 2,4 2,8 2,6 2.5 2,7 2,7 1,5 2,Et Praline 2,4 2,5 2,6 2,4 2,4 2,5 z3 2,5 3, 3 Serine 2,8 2,7 2,8 2,8. 2,6 3,0 .2,2 2,1 2.,7 Threo!1îne 2,9 3,0 3,1 3,2 2,8 3,1 3,9 ' 2,6 3,9 
 EMI28.3 
 
<tb> Tyrosine <SEP> 2,2 <SEP> 2,1 <SEP> 2,4 <SEP> 2,2 <SEP> 2,1 <SEP> 2,3 <SEP> 2,1 <SEP> 1,2 <SEP> 2,0
<tb> 
 
 EMI28.4 
 V-"#'- 3,? 39? l1 3,9 3,7 4,1 4,0 3,2 4,3 ?. '.I:K l'01':.L,:LiXú,;:-,) 67,63 68,63 68,69 68,31 67,56 68,75 67,9 ':y9 6S,8 1. J....

   Jo... 5/, 1 52,? 57,5 56,3 52,9 5?,1 56,3 #i,. 55,2 l'Iic.>'oo!'f.[ n5 S;:ie ;SCC =1/ 15528 15522 15523 15 2 l5-.'25 15526 15527 Q:151 l90 CoP:'i 1,1 ur<1 de f(-:r'. ient:ltiol1 ce 1 tJ11 -----------------¯.¯.¯------- 1,6 ----------------------------ce] 1 Cil 24 Hrs. 4,04 3,6 3,9,1 4,38 3,9B '3W2 3,7 1,08 Hz Ce].1 Cil 48 ErG. 6,7 7,1 8,r' 8,5 7,87 6,0 6,fus5 2,22 3,2 *, Quartern:wt'.:1' Culture Collection, !;2',3¯CJ:, 1gss.. 

 <Desc/Clms Page number 29> 

 



   Do   oc"qui   précède il ressort que différentes bactéries se développent facilenent sur un hydrocarbure   oxygène   pur. 



  Chacun des neuf microorganismes contient une teneur élevée en protéine   supérieure   à 65 %, un indice d'anino acide essentiel élevé supérieur à 15 % et une' répartition d'amino acides nutritifs très intéressante. 



    -   EXEMPLE 9 -
On procède à un certain   nocbre     .de     fomentations aérobies   en utilisant les milieux I, II et III et de   l'éthanol   à 30 C avec les levures suivantes. Le pH est maintenu entre 3 et 6,5, de préférence entre 4 et 5. 



   A. Saccharomyces cerevisiae - CBS
B, Saccharomyces   acidifaciens   - ATCC 8766
C,   Trigonopsis   variabilis -ATCC 10679
D, Hansenula anomala   - CBS  
E. Candida lipolytica - ATCC 8662
F. Candida   puloherrina   ATCC   9889  
G, Rhodotorula glutinis - ATCC 2527
H. Candida guilliermondii - ATCC 9390 ta teneur en azote, la teneur en protéine,   l'indice   d'amino acide essentiel et les répartitions en   anino   acides sont déterminés   conne   indiqué à l'Exemple 7. 



   Les   r6sultats   figurent aux tableaux   suivants :   

 <Desc/Clms Page number 30> 

   TABLEAU X   
 EMI30.1 
 
<tb> DIVERSES <SEP> LEVURES <SEP> DEVELOPPEES <SEP> SUR <SEP> ALCOOL <SEP> ETHYLIQUE
<tb> 
 
 EMI30.2 
 Anino Acides Grandes f mino iici de Dour 100 Grandes de Protéine Alanine 6,6 5,4 717 6,7 8,2 5,2 5,8 9,4 6,8 5,5 5,3 .6--ginine 5,7 5,2 5,0 4,1 5,0 5,1 10,2 3,5* 5,1 3,8 3,8 Acide Aspartique 7,1 7,1 8,6 7,8 9,9 8,0 6,6 8,2 7,3 7,4 6,5 Acide Cysterique 0,3 0, 2 0, 2 0, 2 0,9 0,3 0,3 0, 2 0,4 0,3 0,4. 



  Cyst1.ne 0,8 0,8 1, 2 0,7 0 0, 6 0,5 0 0,7 0,7 0 
 EMI30.3 
 
<tb> Acide <SEP> Glutamique <SEP> Il,5 <SEP> 10,5 <SEP> 13,3 <SEP> 12,3 <SEP> Il,6 <SEP> 8,7 <SEP> 8,8 <SEP> 11, <SEP> 2 <SEP> 10,5 <SEP> 8,4 <SEP> 8,0
<tb> Glycine <SEP> 3,1 <SEP> 3,0 <SEP> 3,9 <SEP> 3,6 <SEP> 4,3 <SEP> 3,2 <SEP> 3,1 <SEP> 8,7 <SEP> 3,3 <SEP> 3,4 <SEP> 3,0
<tb> 
 
 EMI30.4 
 Histidine 2,9 2,'7 3,2 3,2 3,2 3,2 2,9 2,0 2,7 2,8 2,5 
 EMI30.5 
 
<tb> Isolcucine <SEP> 3,1 <SEP> 2,9 <SEP> 3,2 <SEP> 3,2 <SEP> 4,8 <SEP> 3,3 <SEP> 3,1 <SEP> 4,7 <SEP> 3,1 <SEP> 3,4 <SEP> 3,4
<tb> Leucine <SEP> 5,1 <SEP> 5,0 <SEP> 6,0 <SEP> 5,5 <SEP> 6,7 <SEP> 5,7 <SEP> 5,0 <SEP> 3,9 <SEP> 5,1 <SEP> 5,7 <SEP> 5,4
<tb> lysine <SEP> 5,9 <SEP> 5,7 <SEP> 6,6 <SEP> '6,6 <SEP> 6,9 <SEP> 7,2 <SEP> 6,0 <SEP> 7,4 <SEP> 5,7 <SEP> 6,0 <SEP> 5,4
<tb> Méthionine <SEP> 1,0 <SEP> 1,1 <SEP> 1,5 <SEP> 1;

  4 <SEP> 1,2 <SEP> 1,2 <SEP> 1,0 <SEP> 1,0 <SEP> 0,8 <SEP> 1,1 <SEP> 1,1
<tb> Sulfoxyde <SEP> de <SEP> méthionine <SEP> 0,3 <SEP> 0,2 <SEP> 0 <SEP> 0,5 <SEP> 0,5 <SEP> 0,5 <SEP> 0,6 <SEP> 0,3 <SEP> 0,3 <SEP> 0,2 <SEP> 0,3
<tb> Phénylalanine <SEP> 2,9 <SEP> 3,2 <SEP> 3,2 <SEP> 3,1 <SEP> 3,8 <SEP> 3,3 <SEP> 2,8 <SEP> 2,3 <SEP> 3,0 <SEP> 3,1 <SEP> 3,0
<tb> Proline <SEP> 2,9 <SEP> 2,8 <SEP> 3,5 <SEP> 2,9 <SEP> 3,5 <SEP> -2,9 <SEP> 3,7 <SEP> 3,3 <SEP> 2,7 <SEP> 2,9 <SEP> 2,6
<tb> Serine <SEP> 4,1 <SEP> 3,9 <SEP> 4,6 <SEP> 4,4 <SEP> 4,9 <SEP> 4,4 <SEP> 3,9 <SEP> 4,2 <SEP> 4,5 <SEP> 4,1 <SEP> 3,3
<tb> Threonine <SEP> 4,3 <SEP> 3,8 <SEP> 4,5 <SEP> 4,3 <SEP> 5,1 <SEP> 4,5 <SEP> 6,0 <SEP> 4,4 <SEP> 4,3 <SEP> 4,1 <SEP> 3,5
<tb> Tyrosine <SEP> 2,7 <SEP> 2,9 <SEP> 2,9 <SEP> 2,8 <SEP> 3,0 <SEP> 2,7 <SEP> 2,4 <SEP> 1,3 <SEP> 2,6 <SEP> 2,8 <SEP> 2,6
<tb> Valine <SEP> 3,8 <SEP> 3,5 <SEP> 6,

  0 <SEP> 5,0 <SEP> 5,3 <SEP> 4,2 <SEP> 3,6 <SEP> 5,7 <SEP> 3,9 <SEP> 4,3 <SEP> 3,8
<tb> 
 
 EMI30.6 
 PROTEINE TOT..LE(Nx6,25) 33,3 39,- 36,4 40,7 42,9 43,4 38,4 36,9 32,5 4,8 59,3 
 EMI30.7 
 
<tb> I.A.A. <SEP> 60,8 <SEP> 59,0 <SEP> 70,8 <SEP> 67,0 <SEP> 76,9 <SEP> 67,4 <SEP> 63,0 <SEP> 63,6 <SEP> 60,2 <SEP> 63,8 <SEP> 59,0
<tb> Conditions <SEP> de <SEP> fermentation
<tb> 
<tb> 
 
 EMI30.8 
 Levure #Saccharonyces cerevisiae-- ------------S4ec2iro¯:yces Zy-osaccharo--iyces acidifaciens--Milieu-, II II III 1 i II II III III ETOH CI:!3 ------------1,6 --------------------------------1,6----------Cell 1 6,3 4,9 6,8 7,2 6,9 2,1 4,5 6,2 7,7 8,3 6,0 Durée de fermentation :

  r , ) 72 72 '72 72 96 96 96 72 72 72 72 

 <Desc/Clms Page number 31> 

   TABLEAU XI   
 EMI31.1 
 
<tb> DIVERSES <SEP> LEVURES <SEP> DEVELOPPEES <SEP> SUR <SEP> ALCOOL <SEP> ETHYLIQUE <SEP> - <SEP> 
<tb> 
 
 EMI31.2 
 ¯a:ino ci ae Gramnes Anino Acide pour 100 grarmes de ?rút6ine Llaninc 5,9 5,3 7,1 6,2 4,6' 5,0 5,3 4,9 6,5 5,6 5,6 5,7 Arginine 5,1 4,8 4,0 4,5 4,2 4,3 4,6 5,1 4,6 4;4 5,0 5,0 Acide Aspartique 7,8 7,3 6,5 6,3 6,8 7,0 7,6 8,6 7,9 ?, 2 8, 3 8, 8 Acide Cy::;

  t(rique 0,1 0,î 0,2 0,2 0,1 0,1 0,3 0,1 0,2 0,1 0,1 0,1 Cystine 0,6 0,5 0, 6 0,7 0,4 0, 6 0, 8 cl, ? 0,8 0, ? 0,9 0, 8 
 EMI31.3 
 
<tb> Acide <SEP> Glutamique <SEP> 9,2 <SEP> 7,6 <SEP> 9,9 <SEP> 9,8 <SEP> 7,1 <SEP> 7,0 <SEP> 8,4- <SEP> la,9 <SEP> 11,8 <SEP> Il,1 <SEP> 12,1 <SEP> 12,9
<tb> Glycine <SEP> 3,4 <SEP> 3,2 <SEP> 3,2 <SEP> 2,9 <SEP> 2,9 <SEP> 3,3 <SEP> 3,1 <SEP> 3,2 <SEP> 3,2 <SEP> 3,1 <SEP> 3,4 <SEP> 3,6
<tb> Histidine <SEP> 3,7 <SEP> 3,4 <SEP> 2,7 <SEP> 2,3 <SEP> 2,7 <SEP> 2,3 <SEP> 2,4 <SEP> 3,0 <SEP> 2,8 <SEP> 2,7 <SEP> 3,1 <SEP> 2,9
<tb> Isoleucine <SEP> 4,0 <SEP> 3,6 <SEP> 3,3 <SEP> 2,7 <SEP> 3,3 <SEP> 3,7 <SEP> 3,3 <SEP> 3,3 <SEP> 3,5 <SEP> 3,5 <SEP> 3,7 <SEP> 3,7
<tb> leucine <SEP> 5,6 <SEP> 5,9 <SEP> 5,4 <SEP> 4,6 <SEP> 5,5 <SEP> 5,8 <SEP> 5,4 <SEP> 5,9 <SEP> 5,2 <SEP> 5,1 <SEP> 5,8 <SEP> 5,6
<tb> Lysine <SEP> 6,0 <SEP> 6,2 <SEP> 5,3 <SEP> 4,7 <SEP> 5,1 <SEP> 4,

  7 <SEP> . <SEP> 5,1 <SEP> 6,7 <SEP> 6,2 <SEP> 5,8 <SEP> 6,3 <SEP> 6,2
<tb> Méthionine <SEP> 3,3 <SEP> 1,3 <SEP> 1, <SEP> 0 <SEP> 0,9 <SEP> 1,1 <SEP> 1,3 <SEP> 1,9 <SEP> 1,3 <SEP> 1,2 <SEP> 1,1 <SEP> 1,0 <SEP> 1,1
<tb> 
 
 EMI31.4 
 Sule5xyde de Hethionine 0,4 0,3 0,5 0,4 0,2 0,3 0,2 0,2 0,3 0,3 0,6 0,3 
 EMI31.5 
 
<tb> Phenylalanine <SEP> 2,9 <SEP> 3,2 <SEP> 3,1 <SEP> 2,5 <SEP> 3,5 <SEP> 3,2 <SEP> 3,0 <SEP> 3,3 <SEP> 3,0 <SEP> 2,9 <SEP> 3,3 <SEP> 3,3
<tb> Proline <SEP> 2,7 <SEP> 3,0 <SEP> 2,7 <SEP> 3,2 <SEP> 2,9 <SEP> 2,9 <SEP> 3,1 <SEP> 3,4 <SEP> 4,3 <SEP> 3,0 <SEP> 3,6 <SEP> 3,3
<tb> Serine <SEP> 3,3 <SEP> 3,5 <SEP> 3,6 <SEP> 3,5 <SEP> 3,6 <SEP> 3,5 <SEP> 3,5 <SEP> 4,1 <SEP> 4,0 <SEP> 4,0 <SEP> 4,3 <SEP> 4,0
<tb> 
 
 EMI31.6 
 Threouine ,0 3,9 3,7 3,6 3,7 4,0 3,7 4,2 4,5 h,2 4', 7 4,3 
 EMI31.7 
 
<tb> Tyrosine <SEP> 2,6 <SEP> 2,8 <SEP> 2,8 <SEP> 2,2 <SEP> 2,7 <SEP> 2,7 <SEP> 2,

  6 <SEP> 2,9 <SEP> 2,7 <SEP> 2,6 <SEP> 3, <SEP> 0 <SEP> 3, <SEP> 0 <SEP> 
<tb> 
 
 EMI31.8 
 Valine 4,2 Hz 3,9 3,4 3,8 4,1 3,6 4 0 4,0 3,6 4,2 4,0 PRO"'ElI;R .TOT.¯IR(ï;x6,25j58,1 62,7 41,1 40,9 fez?,3 57,0 62,9 45,9 33,8 35,5 32,3 33,5 
 EMI31.9 
 
<tb> I.A.A. <SEP> 67,8 <SEP> 64,0 <SEP> 60,0 <SEP> 52,1 <SEP> 59, <SEP> 2 <SEP> 61,4 <SEP> 60,2 <SEP> 65,6 <SEP> 63,6 <SEP> 60, <SEP> 2 <SEP> 67,6 <SEP> 65,2
<tb> 
 
 EMI31.10 
 Conditions Ce fermentation D Levure ----- Trig onopsis variabilis--=-- ###Han s enula an onala ----1---Nilieu l 1, II II III III I I II II III III Et0X C",3 --------------1, Ô--------------'T Cell. /1 a,0 5,2 7,4 7,6 7,1 5,7 7,2 7,2 8,0 7,7 8,0 7,3 
 EMI31.11 
 
<tb> Durée <SEP> de <SEP> fomentation <SEP> (Mrs.) <SEP> ----------72----------------'-- <SEP> 72 <SEP> 72 <SEP> 72 <SEP> 72 <SEP> .

   <SEP> 96 <SEP> 96
<tb> 
<tb> 
 

 <Desc/Clms Page number 32> 

 
 EMI32.1 
 TILBIL '1A'U XII 
 EMI32.2 
 :.T.11210 aCl.d2 DITERSES LEVURES DEVELOPPEES , .. SUR ALCOOL ETHYLIQUE .t',rîino 'acide Cramaes Acide pour 100 pannes de Protéine Àlcnine 5,0 4,9 6,4 5,8 5sfl 4,6 5,1 5,06 4,9 Argl!llne 4,0 12,1 4,7 5,7 4,7 4,6 5 0 . 4 4 6,2 ,cidc partique 7,0 7,5 67 7,3 6,9 5,9 76 T'2 7,3 Acide Cystcr-.que 0 0,3 0,3 0,5 0 4 0, 0,3 0,2 0,3 Cysti.fe 0 0,7 0,6 0,6 0,5 0 -& 5 -e-3 C.

   G Acide Glutauique 6,7 7,9 9,5 9, 0 7, 2 7,1 7 6 z G, 9 Glycine 2,6 3,2 3,2 -3,1 3,0 2,8 2,7 3,02 2,9 Histidine - 3,1 3,1 3,1 2, 6 3,5 4, 2 3, 3 4 0 0 Isoleucine 2,7 3,4 3,4 3,1 3,0 2,6 3,1 3,5 2'8 Leucine 5,7 5,3 5,3 4,7 5 1 2,6 5,1 6,g 5,2 Lyoine 6,2 6,4 -5,6 5,5 6,1 6,1 6,2 6,8 7,0 Méthionine 1,1 0,9 1, 2 0, 9 D, 8 0,7 ili. l, 0 0, 9 Sulfoxyde dellethionine 0 0, 5 0,6 0,8 0,5 0, 1. 0,7 -0,6 0,7 Phenylalc.n3.ne 3,3 3,C 3,2 2,7 2,8 2,5 3,0 3,4 2,6 Proline 3,1 3,0 3,9 2,6 2,9 2,4 2,6 2,6 2,0 Serine 4,4 4,0 3,7 4,8 1,8 4,1 4 5 5,3 4,3 Threonine 4, 2 po 3,8 5,6 4,5 3,9 4,4 5, 2 5, 0 Tyrosine 2,9 2,9 2,7 2,3 2,5 2,1 2,3 2,4 2,1 r>1;;;

   ;T Tex f';T bzz1 4 0- 4,0 3,7 3,8 3,5 4,3 4,5 3,9 }'T'f''"'Fr:E CT x5,25) 33,5 32,3 42,9 36,3 37,7 36,7 59,'i 32,0 39 8 1.., ".. 60,8 63,2 61,8 61,2 60,4 50,0 62,4 70,0 fez2,6 Co!:,'i tiens de fomentation 
 EMI32.3 
 
<tb> E <SEP> F
<tb> 
 
 EMI32.4 
 Levure ¯-¯¯--¯Candida lipolytics######## ##Candica pu.lcherrl:1él Iülicu' 3 II II III III II III jjl EtO!1 es' ------------1,6--------------------------------1, 6---------C11. vil- 7,0 4,1 6,9 6,6 7,2 6,8 5,9 5,1. 5,6 de fernentatjon (Iirs. 72 72 72 72 43 48 96 72 72 

 <Desc/Clms Page number 33> 

 
 EMI33.1 
 Tjs iZT:,;1 x I i 1 
 EMI33.2 
 DIVERSES LEVURES sTj7q 1.J,COOI, ETHY1,IQUE Aciee ;.I1iOO Gr!!.::'I1CS Anino Acide rour 100 arr,.:"es¯r?e J'roté} ne Alanine 5,6 5,3 5,6 5,2 5,8 4,9 8,1 12.5 7,7 G,4 rç:

  ll1ne -,4 4,4 4,5 4 1 4,1 3,3 3,7 3,6 4,l'r lili dCloe Asp3rtlque 6,5 6,5 7,9 7,1 6,8 5, 9 8,6 8"1 7 6 6 Acide ys erlque 0 0 0,1 0,2 0,3 0,2 0,2 0,5 0,3 0,9 Cys-uinc 2,3 0,4 0,6 04 0'5 0'5 0 3 0 0'" 0 C,,Ts'Zne 2,3 0,/1. 0, 0,.l 0,5 0,5 0,3 0,11 0,7 0,6 lCldc Glutar:nquc 7,7 ?, 5 7, 8 6 7 8, 8 ces, 8 8, lÙ, 2 8, 8 8, 7 Glycine 3,0 3,0 3,3 3,1 3 4 2 7 8,9 8,9 3 2,9 Histidine 2,8 3,1 2,7 2,7 2,4 2,1 2,0 2,1 2 8 3,1 Isoleucine }-,5 3,7 - 4,1 3,9 3,2 2,6 4,9 4,3 3,13 3,1 Leucine 5,5 5,3 6,2 5,8 5,2 4,3 1,3 1,1 5,3 4,6 Lysine 5,3 5,2 6,2 5,9 5,3 496 7,9 7,0 5,8 5,8 Méthionine 1,6 1,1 1, 5 1,4 1,1 0,8 1,1 0,9 1,0 0, 8 Sulfoxyde de Méthionine 0,2 0,4 0,3 0,4 0,1 z1, 2 0,2 '0,3 0,5 0, ° Pheriyl.,l4¯ine 3,1 2,9 5, 2 3, 4 2,9 2,5 2,3 2,0 2,8 2,6 Praline' 2,3 2,8 2,8 3,1 3,0 2,9 3;;

   3,1 2,5 2,6 Serine 2,8 1,9 3eF3 3,8 4,0 3,5 5,C 4,7 3,9 4,2 Threúnine 3,2 3,4 4,2 3,9 4,1 3,3 5,1 4,5 4,2 4,3 Tyrosine 2,4 2,3 2,9 2,6 2,5 2,2 l,,'y 1,1 2,4 2,3 
 EMI33.3 
 
<tb> Valine <SEP> 3,8 <SEP> 4,2 <SEP> 4,6 <SEP> 4,2 <SEP> 3,9 <SEP> 3,1 <SEP> 5,8 <SEP> 5,4 <SEP> 4,0 <SEP> 3,5
<tb> 
 
 EMI33.4 
 PROTEII# TOTALE ruz7-6,25) 69,3 71,2 55,4 57,8 46,6 41,4 41,4 35,6 42,0 33,1 I.A.A.. 62,2 58,1 72,2 64,6 58,648,9 61,2 55,3 60,6 58,1 Conditions de fermentation 62,2 58,1 72,2 64,6 5i,, 48,9 61,2 55,3 60,6 .58,1 
 EMI33.5 
 
<tb> H
<tb> 
 
 EMI33.6 
 Levure -R.'J.odotoru1a glitinis -###Cc.n'BTa guillicrnondii# lylilien 3 1 II III III 1 1 II 11 il-IL III EtOH c,l --------l,6----------------------------1,6-------------Cell. ;

  /1 3,7. 3,2 ',? '5,4 5,2 5,9 6,8 ?, J 4,8 5,0 Durée de fercnation F#s.) 72 48 72 72 96 96 48 48 48 48 

 <Desc/Clms Page number 34> 

 
De ce qui précède il ressort que   (1)   bien que les   levu-   res soient capables d'un bon développement sur un hydrocarbure oxygéné dans un simple milieu de sels minéraux, l'addition d'un facteur de croissance (par exemple un extrait de levure) augmente sensiblement le taux de   croissance.comme   le montrent les Tableaux X, XI, XII et XIII et   que (2)  des résultats ci-dessus chacune des ,levures récoltées conformément à l'invention présente une   combi-   naison intéressante d'une teneur élevée en protéine,

   d'une teneur élevée en amino acide essentiel et d'une répartition intéressante du point de vue nutritif en amino acide indiquant au surplus que l'application d'une croissance de levure sur un substrat hydrocarboné oxygéné donne une protéine intéressante par biosynthèse d'une façon extrêmement économique. Ainsi, la présente invention convient particulièrement bien pour la préparation d'appoints alimentaires pour l'homme ou les animaux présentant une valeur protéinique et nutritive extrêmement intéressante. 



   Il va de soi que la présente invention n'a été décrite qu'à titre purement explicatif et nullement limitatif et que toute modification utile .pourra y être apportée sans, sortir de son cadre. 

**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.



   <Desc / Clms Page number 1>
 



   The present invention relates, in general, to a fermentation process by biosynthesis as well as the products obtained. More particularly, the invention relates to the application of oxygenated hydrocarbons, in particular water-soluble oxygenated hydrocarbons, the main source of carbon used in the process, According to a particular application of the invention, hydrocarbon fractions such as liquids and gases derived from petroleum, are oxygenated or partially oxygenated and then contacted with a microorganism under fermentation conditions to give high yields of protein. This process can be carried out continuously or in batches.



   The current shortage of protein, especially low cost animal protein, for consumption by animals and humans is well known. To try to overcome this protein shortage, several biosynthetic processes have recently been developed in which protein is obtained biologically by the development of microorganisms on different substrates containing carbon. Such a technique involves the development of different microorganisms such as yeasts (or saccharomyces) and bacteria on carbohydrate substrates. However, this technique depends on the availability of large quantities of relatively expensive carbohydrates, the price of which adds significantly to the cost of the process and of the product.



   Another recent, perhaps more promising, technique for the biological synthesis of protein foods is to cultivate the microorganisms on petroleum-derived substrates. This type of synthesis by fermentation for the production of protein is usually carried out in a aqueous biosynthesis system containing a hydrocarbon feed, an agent for inoculating the microorganism whose development is sought, an aqueous growth medium, oxygen, nitrogen and other essential nutrients. This technique allows the application of hydrocarbon feedstocks which are easily found in quantities and which are less expensive than carbohydrates. It is also known to apply various biological catalysts in fermentation processes.

   The process of biosynthesis of this

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 EMI2.1
 The invention is applicable to the biosynthesis of all microorganisms which are capable of growing on sub-
 EMI2.2
 oxygenated hydrocarbon trates, in particular substrates
 EMI2.3
 oxygenates derived from hydrocarbon fractions of petroleum,
 EMI2.4
 While the present invention is largely applicable
 EMI2.5
 Generally speaking, to all microorganisms, there are a number of microorganisms which are particularly suitable for the uptake of oxygenated hydrocarbons.

   These microorganisms on the Tables'! at II below and they. are identified by rôi ± renoes such as A.T.C.C. which are the sample references dt ''.; 70N.F3û, the American Type Culture Collection, 212 1.1 8t = eet, Northwest, Washington 7, D, C., the CBS refurences relating to the lots preserved by the Centraalbureûu voor Sc11ielculture, Baarn, Holland, or references from the Quartermaster Culture Collection which relate to samples kept at Natick, Maosachu-
 EMI2.6
 setts, Table II gives a number of species of
 EMI2.7
 yeast which are particularly suitable for the assinilation of oxygenated hydro a.-bures.

   These yeast species are
 EMI2.8
 also indicated by their references.

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 EMI3.1
 fil'.¯iZ <. ': tT I - 3 ± -CTERT ± S
 EMI3.2
 : t3ivïs.o :! clt> i; s <a 0r=ire Famïlle Ce3re Fsëce 'Rcîérence }lrotophyt2.-Schj zar.:ycci;ü::> -rBCUtlo :: orw.da1cs-1'seudoTIopat: r :: ceae - -Tscudosocan lijAzi = 1 - '1'9cc 15522
 EMI3.3
 
<tb> pseudo-
<tb>
 
 EMI3.4
 r.:ïa11ci .--- i ', TCC 15523 -orvïlla ATCC 15524' li> <'3Ctt'r'1: 1C --- iilGi'OCUCG4SE3 "- liïCT'OCOt: Ctt: .-- CC'3' 7 ?? 1.C:; 1? ATCC 149 :: j7 3arcina sp -¯QNB1518 Natick -Brevibacteriaceac # BreviLe.eteri'aa-inscctijW3.lïti - .. iTCC 15528 hùa1ii ----- ATCC 15527 chroaobac-teraeeae- .ilcaligcnes ### - sp - ### ATCC 15525 -Corynebac-teriaceae-j-Cell-unonas # - galba ### ATCC 15526 -Corynebacterito-sp - ### ATCO 15529 I1muro:

  , e "ta- 15530! bo1tL --ATCC 15530 --Arthrobacter # sirJp1cx -ATCC. 6946 ----- s5.-.--- 1-iCC 1914 0 Actino1'1yccta1es 1 <Iycobacteriacac --- P.ycol : JD.ctcr: i.1l.rl - rh0dochrousATCC 13808 LAc-tinomycetaccae -2vocardïa '5P 4. sp

 <Desc / Clms Page number 4>

 
 EMI4.1
 TABLE II - Tìn1R1 ± S
 EMI4.2
 J) 1vi Gion Cl (, sse Order J1'r,: 'ille SOUG-j "' Q; 1i11 e Ger.l'e ES11èce '3'uallohytc:.: Co; cc: t,:, -, doT, Seē¯ E! C10,, YCC-1 Sacchl'or: y ---- Endo! .1ycopsertc -.EndonycoJ) ::; is pillowcases tczceae cetoidcae So..cc1ml'omyoct <: acl SacdCtro ::: yc8S Hanncnula ') Pîchia Pichia 110bary01:; YC: CS -FadonÜ'!, 1c ----: n,: dr; l) l1j ::.



  1] entjtO5 î> OOîùeéie --- ue ttoX j; ar <1 Li p o iay c e t O 1 à c a ########## i, 1 1; , '1: J' c:; -} i'uudi iI! Jl) Crfocti-Cryptococ-Crypto -; - Cryi1tococcoiacae ######## Cryptococcuc cales coccaceae v'U2'L7OZJ: p7: i 1't? 'i. "W!' O ^: i CCS hil.occbicra -Kiocckera - i'2'l; Or; J1? 3ï T.



  -TrichosporoidGae ########## - 'richoDp0rou -Rhodotoruloidee - ########## M.odotcru la.

 <Desc / Clms Page number 5>

 
 EMI5.1
 I ': ß'? F: t: II - YEASTS (continued)
 EMI5.2
 Kind. Species Culture
 EMI5.3
 (1) Erdomycopsis capsulais ATCC y / 2471 fibuliger ATCO // 2G80 1, xitnr, essis ATCC / lOG2 $ 1.; ali bisporll (2) Sccharoyces cerevisiae (A) CES rouxii 1lCC Tf 2624. exigus ATCC '/ 1.J599 marxianus ATCC / f 1OG06 logos TCC W 10603 willianus ATCC 1/10598 uvarur-i ATCC 1/1061 fragilis ATCO 1 / l0022 1aotis. ATCC f 10689 rosei ATCC # '10664 chevalieri ATCC 1110604 faireentati ATCC ff 2551 e.cidifaciens (13) ATCC 8766 fruc-tuum ATCC z13053
 EMI5.4
 chestnut
 EMI5.5
 (3) Hansenula anomala (D) OBIS saturnus ATO 1/2579 suaveolens ATCO f / 981-7 SC'tlnCFE; L3. Californian ATCC 11 10680 subpellicu10sa ATCC J / 14462 nruïcii 'PtRRZ Y-12 8ilVïCola OBIS minuta CBS.



  (.) Tiohia menbranaefaoienp ATCO / lOG.9 Ùl.rinosn ATCC f / 2252 Po1Yl: 10rpha ATCC il 15132 fernentans ATCC # 10651 (5) Debaryomyees hansenii ATCO / f 2357 k1oeo1ceri ATCC ff 1.0620 subjlobos'e C3 ves CBS i n ATCC 1/9364

 <Desc / Clms Page number 6>

 
 EMI6.1
 JA: 2T1UU II continued te) (6) Nndsonia fulvescaris ATCC / 10645 6lbnGata ATCC 1110644 (7) Nematospora coryli ATCC // 10647.



  (8) Liponyces stakcyi ATCC // 12659 '(9) Cryptoeoccus neoxnr: ans ATCC' # 11239 laurcntil ATOC Il 9981 albious ATCC / J.0666 lutoolus ACC; 1,106'l.



  (10) Torulopsis bo1mii ATOO // 10670 nolischiana dattila ATCC il 1069l '' sphaerica ATCC // 13193 candida A1'CC Il '2560 "ianata ATCC 71'l2790 *'" stellata ATCC / 10673 sako ATCC 7/14478
 EMI6.2
 globosa CBS versatilis CBS
 EMI6.3
 anonala CES
 EMI6.4
 inconspicua CBS
 EMI6.5
 (11) Brettanonyces bruxellensis ATCC 10560 lambicus ATCC f / 10563 anonalus 1TCC il l0559 clc.ussenii ATCC fi lOS62 (12) Candida nycoderoa.

   ATCC 7/10641 1 "pu1cb, errima (il ') ATCC ± / 9Ùù9 krusei ATCC fi 2159
 EMI6.6
 neucnteyioa ATCC / 10569 tropicalis ATCC ± / 1> 69 pseudotropicalis ATCC / 251.0. guilliermondii (H), 'ATCC 11 9390 huixicola AT.CC, 1 / 1443à rugosa 1, TCC // 10571 zeyianoides ATCC f / 1067 pellioulosa ATCC 2149 utilis ATCC // 922E lipolytica (E) ,, 1.5 cC 11 e662 parapsilosis ATCC # 7333 stellatoidea ATCC 'moo6

 <Desc / Clms Page number 7>

 
 EMI7.1
 T, 3L '? .U He (continued)
 EMI7.2
 robusta
 EMI7.3
 scotti ATCC 11 105'12 curvata, lvTCC y 1U5G7 c1nusscnii CBS solani ATCC # 1t1r4 "rO ffiolibiosi CBS (13) Illoeokera apiculata ATCC 11 10634 africana ATCC // 10 <32 corticis ATCC 10635 ja, v, .nica ATCO / 1066 lafarii ATCC / 1066 lafarii # 10638 rlae;

  na iETcc # 10640 (14) Trigonopsis variabilis (0) CBS / 100 (15) Triohosporon pullulans ATCC 10677
 EMI7.4
 cutaneum ATCC Il 14255 infestans CBS
 EMI7.5
 sericeum ATOC 10678 oapita-bum ATCO # 1066J forinentane ATCC / 106? 5 behrondii TOC / 11..65 (16) Rhodotorulla glutinis (G) ATCC z2527 rubra 1 '> TCC 11 9'49. riucilaginosa 'TCC // 25G3 auran-tiaca ATCC // 1065? ninuta ATCC 10658 Hicrocoocus cerificans (14987)} which has been isolated and identified by Dr, lt, E. Kallid and his collaborators, JOURIJAL 09 BnCTERIQT, OG1 ', Vol. 78,? 3, pages 441-446 (September 1959) is particularly advantageous.

   We identify him
 EMI7.6
 - also in the following way: The cells are small, spherical, tending to 'deve-
 EMI7.7
 nir elliptical - in old crops and in mediums with high nitrogen content,
 EMI7.8
 Cells from defined media have, in
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 nuclei, 0.5 to 1.0 micron in diameter and those from complex media, have an average diameter of .1, Q 2, microns. Cells occur singly or in groups. 1> n does not observe metachrOJa tic granules incapable of: .otveet; t and pseudanophilic granules.

 <Desc / Clms Page number 8>

 



  Gram's reaction is negative.



  Colonies on a defined acting medium are small
 EMI8.1
 (1mm), olles are convex and circular and have a well-defined circumference. Colonies on nutrient agar medium are larger (2 5: 1: 1 ':), have a mucoid relief and are usually rounded in shape.



  In a 'û [.: 8:;, 0 CSI) bce, one can have several different strains cor: P: C'Ç3 (.a.r. T variants and natural and induced mutants.



   Morphology and growth characteristics'
 EMI8.2
 other organisms listed above are given in US Pat. No. 3,308,035.



   Growth media include an aqueous medium of an inorganic salt and excess oxygen. - Oxygen is supplied to the culture medium or to the culture broth under any
 EMI8.3
 form capable of being easily assimilated by the inoculating microorganism, Oxygen compounds can also
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 be applied to provide oxygen as well as non-harmful to the development of the microorganism cell and the conversion of the oxidized hydrocarbon charge supplied to the microorganism cells.

   Oxygen can be supplied in the form of an oxygenated gas to impart air at atmospheric pressure or elevated pressure or oxygen enriched air in which the oxygen concentration can reach up to 70%. 90%. In general, between about 0.1 and about 10, preferably between about 0.8
 EMI8.5
 and about 2, volunes per nxinurc of air in the rector per volume of liquid in the apparatus of 4. "err-.c -., itation.



  Nitrogen is esseatiol for biological peronvol. The nitrogen source can be any organic, organic or rainerai containing nitrogen and capable of releasing nitrogen under a forest suitable for kutabolic use by the r :: ioroorgJ.l1is,: c in d (1vGloPP :: L, er "t. Appropriate nitrogenous organic pol.po- 5e'J are by the proteins, the proteins hydrolyzed by an acid, the proteins: 3 resulting from digestion with a 0nYG,; r, v :: 1.r10 acid, yeast extract, aonarar1nG and 1 "ar?, 1 .;. Azo-ces mineral co-oas include J o.::11nolÜnc, L1J'J" hydroxide, Onium , nitric acid or salts C011 ::: 0 10 ammonium phosphate, ammonium citrate, ammonium sulphate,

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 a :: a on iu nitrate .; and annoniun acid pyrophosphate.

   A very corroding and satisfactory method of supplying nitrogen to the process is. use ammonium hydroxide,
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 a'azr.oniL1 = .i phosphate or an acidic phosphate dl a; rJf.10nÍUIl, which can be added under the force of salt or which can be obtained in situ in the aqueous fermentation medium by
 EMI9.3
 splashing yr-z a; nnoniac oL1 do 11 ar .:

  nonia.c gas in the broth or by injecting aqueous annoniun hydroxide in the broth to which we have previously added phosphoric acid, which thus allows to force acid phosphate 'From this naniere, the garnished of desired pH of between about 3.0 and 8.5 is maintained and the necessary amount of nitrogen supplied, If the nioroorga-
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 r, iJixc consists of a yeast, the profuse pH is between 30 and 7.5, eg between 4.0 and 5.0, If the microorganism consists of a bacterium, the desired pH is between 5, 0 and 8.5, for example about 7.0, Am- hydroxide
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 wO1iu. "The titer supplied to the biosynthesis medium in amounts between about 0.08 and about 0.20, as given
 EMI9.6
 between about 0.1 and about 0.15 grar.U,

  10 nitrogen per gram of dried cells produced. These amounts represent between about 0.01 and about 1.0 by weight, preferably between about 0.1 and about 0.15 by weight of nitrogen relative to the total biosynthetic medium, Er plus oxygen and nitrogen, it is necessary to supply the medium with the required quantities of agent mined
 EMI9.7
 raux selected from nanibre 4 ensure an appropriate development of the microorganism and ensure the assimilation of naxillun, of the oxidized hydrocarbon by the cells of the uioroorganisne, the pot'assiun, the sodium, the iron, the uanganese, the calcimap the manganese, the phosphorus and other nutrients are used in the composition of the aqueous growth medium.



  These necessary substances can be supplied by any
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 known technique and cte preference to the rooyen of their water-soluble salts.



  Potassium can be supplied as phosphate, sulfate, citrate, acetate and nitrous chloride, where iron and phosphorus can be supplied as their sulfates and phosphates as sulfate and iron phosphate, usually the most

 <Desc / Clms Page number 10>

 much of the phosphorus is supplied as phosphorus
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 Ammonium phates, When either annoniun pnosphato or ammonium acid phosphate is applied, they serve as a combined source of starch and phosphorus for the growth of the microorism cell.



   A satisfactory composition for fertility media, particularly for bacteria, is shown in the following table:
 EMI10.2
 concentration (large per liter)
 EMI10.3
 Constituent '-k) oiivnnt be Ordinairenent ±, iJp) 1¯guè due
 EMI10.4
 
<tb>
<tb> applied <SEP> applied <SEP> preference
<tb> Hydrocarbons
<tb> oxygen <SEP> 4-120 <SEP> 5-80 <SEP> 10-50
<tb>
 
 EMI10.5
 K2lfpo4 0.5-15 1-10 2-8 "" 42 "4 Hz5 bzz3 bzz?, Na2so4 0.1-1.0 0.2-0.9 U, 3-O, f3 peso 4% 7 H20 OtOO2 -0.5 Ù, ÙÙS-Ô, Ù4, 0.01-0.03 gSO, .7 1120, l '7 0, 2-0, 0.3-Oe5 InSO4', 7 H20 O, C (?? ... O, t) 5 0.005-0.04.

   OtOI-0.03 NaCl 0.002-0.05 0.005-0.04-0, 07.-C, () 3
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<tb>
<tb> Water <SEP> The <SEP> remains <SEP> for <SEP> to reach <SEP> 100%
<tb>
 
Other optional mineral nutrients that can be found in traces include:
Concentration (Milligrams per liter)
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 Constituent R, Ouvanii &, t. ± 1i ordinairemint}.]) P1iaurée of applied a-ouliqudo prdf4rcficG Zfl ± 5Q, p. I20 0-0.4 0-0.3. 0-0.2 Ra2Mo04.

   H20 00, 06 0-0, 05 o- (>, 04 coel 2 0-1.2 z 1, O-l ', 2 Ï: I303 0-0.08 0-0.07 0-0.06 ouso 4 5 II20 0-0.3 0-1.25 0-0.2
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<tb>
<tb> CaCl2 <SEP>, <SEP> 6 <SEP> H2O <SEP> 0-0.14 <SEP> 0-0.13 <SEP> 0-0.12
<tb> NiCl2 <SEP> 6 <SEP> H2O <SEP> 0-0.01 <SEP> 0-0.008 <SEP> 0-0.006
<tb>
 
Of course, nutrient-essential and optional agents can be provided under the form of other salts or
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 acids than those 6n6r0s above.

   A very satisfactory medium is prepared as follows:

 <Desc / Clms Page number 11>

 
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 Middle Pl
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 6rannp3./l,it?'B. ".. de vil.10 (l, tlir) Hl'4 10 KIiJ'0 1, P. 2" ', 04 0.5 Aux cn: los: 9 oi-doaous 100..lirQ of a saline solution is added: prepared as follows;
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 Solution A Grar:, es / liter of distilled water I, Igso, r .7H 2 0 40 PeSO "107H 2 0 IZr û ni 'e .I I 0
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<tb>
<tb>!. ,,, HERE <SEP> 2
<tb>
 
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 The above P1 medium has a pH of 7.0 A variant of the above medium is that in which the phosphate is supplied under the force of phosphoric acid.



  Dos media very satisfactory for yeasts are Media I, II and ID dao following compositions Jl1ilieu I
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 COI'11JOBÓ Gram si / liter (il.water
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<tb>
<tb> from <SEP> city,
<tb>
 
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 Ha2I # O 4. 12 1120 2,5 K1f2P04 315 - Py, 0? H20 leo '.; E, C1 0.5' r; tirro3 5.1 ht z 6.5
 EMI11.9
 ..



  Medium II is the same as Medium I except that one adds, count growth factor, 0.001% yeast extract, lic. triiliary III is the same as Medium 1 except that one adds ron of "Biotin" as a growth factor, The growth factors are added to the basic nilieu ae nnnHro at l1.ugr: wntor the 'waters of development of the various
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 yeasts.
 EMI11.11
 



  The croorja iiszés, when they are first cultivated on oxyhydrocarbons; ti4n; s horn primary source of carbon
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 sometimes develop with difficulty and it is often
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 necessary to use an inoculum of Taicroordanism

 <Desc / Clms Page number 12>

 which has been previously adapted for growth on the
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 trat that we intend to use.

   In addition the r, ', ic2 oorznisr..es, especially yeasts, although cultivated in the presence of an aqueous final medium containing the appropriate nutrient cH6r: lOnto nutrients, can grow with difficulty due to the fact that the culture does not contain the growth factors that exist in the carbohydrate substrates unless these growth factors are added.
 EMI12.2
 The dvoloP? Ffi.ect of the yeasts used is promoted by the addition to the culture medium of very small quantities of yeast extract (ur. Product rich in nutrilites
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 essential, that is to say, growth factors obtained by the hydrolysis of a yeast,) or, more generally, essential nitrilites.

   These aerniol's, co! .1I; return biotin, pantothnic acid, nicotinic acid, thiai.iine, inositol and pyridoxine, The amount of ex-
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 The added yeast trait is preferably on the order of 25 parts per: 1illion when referring to the aqueous formative medium. This amount may be greater or less depending on the conditions chosen for the growth.



  It may also be necessary, in the case of @ mid-
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 croorgnniace, to have in the culture medium, a small amount of an anti-nouse aent.



  The temperature of the biosynth medium can vary between approximately 2t) C and: C depending on the particular microorganism to be developed, but the tl:! 1pé; erasures y3 "t: fC: rt: es, when one uses a bacteria, are copr3es between enviror, 25 C and about cl.5 "0 by 6xeple, er, i .. tm 35 C. The psi is preferably between 5.5 'and 8.5. for example about 7.0.



     When gold, uses yeast, the temperature is
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 between approximately 20 ° C. and 47 ° C. depending on the particular microorganism to be developed but the preferred temperatures are between:; being approximately 20 ° C. and .p C., for example 3G C.



  ] eit between 3.0 and 7.5, preferably between / 1, G G 5.0, eg about 4.5.



  In If: T.yy4 of fomentation described and é "'ßeF.: ¯t of hydrocarbons, one of the main factors and difficulty is
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 that of the insolubility of hyarooarbons and, consequently, of high mixing energies or chemical agents

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 , d fdf 1d - where the games, are; necessary to maintain the well dispersed hydrocarbon phase. This is essential if one is to define obtaining fomentation rates or pupil cell yields. In the process, a quantity con-
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 Considerable heat is given off, which should preferably be removed by available cooling water at 4 'very inefficient degrees.
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  These numerous drawbacks which are encountered when using straight chain hydrocarbons are eliminated and the process is made much more flexible by applying,
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 COf: 1. ". E charge, a partially oxidized carbonaceous substance which can co ..; r.rez: are an alcohol such as c; thano7. Or a mixture of alcohols, aldehydes, vtans, d esters, etners and acids.

   This. 3 Oxy conposcs,; 4 knots are more easily ... attacked by different than non-oxidized hydrocarbons. As mentioned above, an advantage of the process according to the invention lies in the fact that, given that the conversion of hydrocarbons into
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 Oxidized poses occur with the release of heat and since these oxides are intermediates in the fermentation process, the heat of reaction caused in the pru-conversion is removed at a favorable elevated temperature prior to the fermentation process. This can result in an advantageous net r.cloLiscement of about 10 to 30% of heat d8Rn6e as well as the air requirement for the fermentation process based on a load of C6 hydrocarbon.

   The other benefits resulting from
 EMI13.6
 cie the application of oxygenated substrates reside in the reduction of the mixing energies required as a result of the improved solubility of the substrates and the reduced air requirements,
The carbon source, preferably the only carbon source for the fermentation process, comprises an oxygenated hydrocarbon other than carbohydrates, sugars, anidons and cellulose. Oxygenated hydrocarbons should be provided in quantity greater than ,. about 50% of the required amount of carbon, preferably superfluous
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 less than about 80%, preferably all carbon needed.

   The oxygenated hydrocarbons may include alcohols, ketones, aldehydes, esters and

 <Desc / Clms Page number 14>

 acids, preferably compounds containing from about 1 to
50 carbon atoms in the molecule which are obtained by oxidation of a petroleum fraction. Profer oxygenic hydrocarbons are those obtained from a petroleum fraction containing from about 2 to about 20 carbon atoms in the molecule. An advantageous compound is selected from alcohols containing from about 2 to about 10 carbon atoms in the molecule, in particular ethyl alcohol.



   The present invention will be understood old with reference to FIG. 1 of the accompanying drawing, illustrating one embodiment: the same. Referring to this figure, the hydrocarbon feed such as light naphtha or a Ci? at C18 is introduced into the oxidation zone 10 by means of pipe 1.

   In this described embodiment code, the oxidation zone operates at a high temperature and a low conversion rate per pass. The oxidation can be catalytic or non-catalytic and can be carried out, if desired, in the presence of free boric acid or boron oxide compounds which promote the formation of alcohols in the zone. oxidation. In the latter case, a stage of hydrolysis and removal of boric acid precedes the stage of alcohol extraction, which stage will be discussed below. Air is introduced through line 2.

     The temperature is between about 1200 and
205 C, for example at about 163 C. The pressure in the zone
10 is between 1.05 and 17.5 kg / cm2 on the gauge, for example, to about 9 kg / cm2 on the gauge.



   The oxidation reaction products are withdrawn from zone 10 through line 3 ′ and introduced into extraction zone 20. The reaction products contain about 10 to 15% of the oxide products which are produced by the reaction products. it is extracted by means of a large quantity of water which is introduced into zone 20 via line 4. The quantity of water used is between 1 and 90 volumes of water, for example, 3 to 15 volumes of water, such as approximately 9 volumes of water per volume of partially oxidized product introduced through line 3,

   The extraction solvent introduced through line 4 may be pure water but preferably it is a nutrient solution which is described above. Sufficient base, for example ammonia, can be added through line 5,

 <Desc / Clms Page number 15>

 
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 pr.'6ronoo before extraction, so as to completely neutralize the acids present in the solution.



     Since oxygenates are much more soluble in water than chain hydrocarbons
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 on the right, the extraction with water l.rt: i.ne 'selectively all the products of the oxidation of the reaction ndiange. Unconverted hydrocarbons are removed from zone 20 through line 6 and are preferably removed from zone 20 through line 6. recycled in the zo-
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 oxygenation 10 through line 7. The exchanger is withdrawn from zone 20 through line 8 and is introduced into fermentation zone 30.

   Water and salts can be added through line 15 to obtain the conditions.
 EMI15.4
 tions <1.5IJirlcs for fermentation,
Under certain conditions, it may be advantageous to introduce the extract into zone 40 via line 9 and to rectify the extract with air which is introduced via line 11 and which is discharged via the line. line 13. This air can then be used for oxidation in zone 10. The purified products are withdrawn from zone 40 through line 12 and introduced into fermentation zone 30.
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 by pipe 8.

   The protein product is withdrawn from zone 30 through line 14. Harvesting of the cells of the product from the promoter broth can be done by any suitable means, for example in two stages.

   The cells can first be separated from the supernatant liquid by
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 oontrifu; ation (for example in a ferride ball), by means of cyclones working with liquids (hydroclones), by wvaporntion, (for exenpie in films, in free fall or by spreading of slicks), by filtration, (for example, on I ;:

  icrol7ora, 1) .ar dialysis, by reverse osmosis), 'by f100u .... by decantation, (for example by adding flocculants, coagulants or agents which promote filtration or by changing the pH or temperature) or by all
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 Another separation process or a combination of these processes. The separated concentrate cells can then be dried by spray drying, tumble drying, vacuum drying ,. drying on
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 - r, n .... '1.8, drying:

  By tuv or other drying kernel or by a combination of these methods. Whatever the above operations for separating and drying cells

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 produced, it should be noted that this way of operating is ex-
 EMI16.1
 They are economical in that there is no need for complex special separation mode and addition of surfactant washing to separate unreacted and unreacted substrates.

   the by-products (although gold, can make use of them in the most general sounds of the invention) to obtain a final product having an extremely high protein content, and containing no impurities harmful for 1'bonne or the anihaux.
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  The predoxidation of the hydrocarbons acquired in the fomentation process gives an amount of alcohols, aldehydes, cetonates, ethors and the corresponding acid and esters. This reduces the pressure drop in air fermentation
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 and decreases the duration of fomentation. For a given number of carbon atonies, the oxygen combinations present a vapor pressure much lower than that of the corresponding hydrocarbon.

   In addition, due to their high solubility in water, oxygenates exert only a small fraction of their total vapor pressure when present in the form of a diluted aqueous solution.
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 whereas hydrocarbons exert esse (; t1ellCI '; or. "C all) their vapor pressure, even at low concentration, being given
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 and their very low solubility in water. As a result, the closing air passing through the irrigation broth contains much less oxyhydrocarbon, hindering than regular hydrocarbon if the heavens are present. in equivalent quantities in the bouillor. fermentation.
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  This not only leads to a clear r6 <x.iction of losses which are close to zero if the effluent air is washed with water or with the drowning of an aqueous solution but at the same time, essentially inine. .; l risks of fire and explosion which always exist when one notices l1i] "and hydrocarbons in certain proportions.



   Thus, the present invention reduces the calorie balance.
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 ries in the fermentation apparatus l fenvi.iaoti 10 to 3! - Thus, the general concept of the prcserce invention lies 4Zns the application of coaposos ox3 <gér tupis that dos oxygenated natural gas and petroleum fractions of oxygenated hydrocarbons boiling up to about 480 C and in particular fractions containing oxygen. about 1 to 30 sluggish

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 of carbon, These COOC0S are chosen from alcohols,,
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 esters, aldehydes, ketones and acids,
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 preferred oxygenates Include alcohols, especially ethyl alcohol.

   Other advantageous oxygen compounds include isopropyl alcohol, i-.1, -thyl dthyl ketone, acetic acid, glycols, butyl alcohol, acetone, octanol, acid. decanoic, the dibutyl ester of sebacic acid and diethyl adipate.



  The appropriate alcohols ecr.p: .annent n6thGnol, ethanol, n-propanol, isopropanol, primary alcohols from 4 to 30 ato :: es, cax% bJi; e, straight chain or branched, 2dthyl hexanci, isooctyl alcohol, glycol, glycerin, cyclohexanol, secondary alcohols from 4 to 30 ato-
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 carbon nes of normal paraffins or isoparaffins,
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 nonocthoxylates of secondary alcohols and crotyliqia alcohol (unsaturated alcohol with 4 carbon atoms). Suitable keto and aldehydes include acetone, OM.

   (n6thylJthyl ketone), MIBO (mc: thylisobutyl ketone), y 1 '3so-
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 borone, cyclohcxanone, cyclopentanone, aldehyde
 EMI17.7
 stearyl, lauryl aldehyde, acetaldehyde and crotonaldehyde (unsaturated aldehyde with 4 carbon atoms),
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 Suitable acids include acetic, pro,
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 pioniqut, caproic, capric, lauric, oleic, stearic, linoleic, praohidic, toluic, oxalic, aébaa3.quea 'terephthalic, phthalic, malonic, hexahydromellitic and
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 crotonic (unsaturated acid with 4 carbon atoms).

   The
 EMI17.11
 Suitable esters include ethyl acetate, ethyl acetate, ethyl butyrate, ethyl stearate, glycol dioecate, isopropyl ester, glycuryl trioleate phthalate. and 120 secondary alcohol acoltate; and suitable ethers include ethoxyates, diethyl uher, tetrahydrofuran, and diisopropyl octhor. Petiole gases such as ethane, ethane, propane and butane can be oxidized in air to alcohols, otones, aldehydes, ethers and acids by conventional processes
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 oiques such as oxidation techniques with rain
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 solids, or in a rotor lined with a bed of solids.

   Comne iientionrj ('11, the oxidized substrates are preferably derived from hydrocarbon fractions containing from about 1 to 30 atons

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 carbon, in particular those containing t1 'approximately .r. to ....



  5 carbon atoms. It goes without saying that other techniques and other processes can be applied to obtain an oxygenated substance containing from 1 to 30 carbon atoms.



   It also comes within the concept of the present invention that to apply a crude oxygenated fraction such as a crude fraction corresponding to the following composition:
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 r ':, 1? 4ge A - QQn} lQ¯sjJJ> ::, managed-
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 Adthyl alcohol 56.6
 EMI18.4
 
<tb>
<tb> Acetone <SEP> 29.0
<tb> alcohol <SEP> ethyl <SEP> 8,1
<tb>
 
 EMI18.5
 Et ± '-Iyl 2.7 acet3, nJthyl ovtate 2.0 Dimdthyl propane 0 e e T-buyl alcohol 0, 3 lldtbyl6tllyle3torie 0.3 NethylisopropénylcÓtone 0.3
 EMI18.6
 
<tb>
<tb> H2O <SEP> 0.3
<tb>
 
Other characteristics and the advantages of the invention will emerge more clearly from the examples which follow,
 EMI18.7
 -. EJVIP, .1 ..



   A number of continuous aerobic fermentation operations are carried out using P1 medium and using ethyl alcohol as the sole source of carbon.
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 bone. The torlp6rature is 350C and the pH is fixed at 7oO by the application of ammonium hydroxide. The power required is less than 1 HP for 100 liters of broth
 EMI18.9
 of culture due to the solubility of ethR119l in the fermentation medium. De nene the oxygen requirement is less than 2 grams per cell seed resulting from the application of oxygenated hydrocarbons. The yields obtained are about 0.6 grams of that per gram of ethanol. The results are shown in the table. next :

 <Desc / Clms Page number 19>

 
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 TABLRAU DRAWER
 EMI19.2
 Ortpra- Durdo de su- Rate of 0 /.

   Et0À dani nondcr.ent;.> From lion day to h. knot, T :. / 1. / h. 1 a cb - o G 1 Iule s: ''. Et OH 2.0 8.3 2.8 0.60 2 1.5 10.5 2, 6, 0.59 3 IP5 10.3 2.6 0 ', 55 Thus,' a continuous process is carried out with a do-
 EMI19.3
 ble g = inui ato energetic power.



  By applying a hydrocarbon fraction in 16 'we obtain the results of developing. OKt with sideboard fa1- blo power only by adding inpor-
 EMI19.4
 tzntea oxygen, for example, three times the amount of oxygen that is needed with ethanol. (See Example 4).



  The decrease in the use of 1 oXY # ne in 10 because of a linear hydrocarbon is due to the increase in the resistance to transfer of the trap caused by the presence of a '
 EMI19.5
 additional ihydrocarbon-o phase.



  - rWP9Th '. 2 -
Continuous aerobic fermentation is carried out as described in Example 1 using a P1 medium and
 EMI19.6
 equal about 2% either of ethanol or of a mixture of paraffin in the various operations. The results of these operations are shown in the following table;

   
 EMI19.7
 T: '. 3hlU IV
 EMI19.8
 Layout of schematic cells
 EMI19.9
 
<tb>
<tb> e <SEP>. <SEP> in <SEP> weight
<tb> Carbon <SEP> source <SEP> <SEP> '' <SEP> Total <SEP> protein <SEP> Total <SEP> of <SEP> Cendro
<tb>
 
 EMI19.10
 'Otxh, 5) "' fli> s nras Ethanol 76.6 ',., 0.'! -, 15 Ethanol 78.7 '6.0 4.20
 EMI19.11
 
<tb>
<tb> Ethanol <SEP> 77.0 <SEP> 5.4 <SEP> 5.33
<tb> Etnanol <SEP> 78.8 <SEP> 3.8 <SEP> 3.96
<tb>
 
 EMI19.12
 Ethanol 78, 3, 4-, 15 Ethanol 80, 3.1 J? T? Ii: 1 <> 1 65, 5, Paraffin 66.5 12.1 z., 98
 EMI19.13
 
<tb>
<tb> Paraffin <SEP> 65.6 <SEP> 15.0 <SEP> 4.10
<tb>
 
 EMI19.14
 Paraffin Ól, 8 17,4 zur 70
 EMI19.15
 
<tb>
<tb> Paraffin <SEP> * '<SEP> 68.0 <SEP> 19.9 <SEP> 4.14
<tb>
 

 <Desc / Clms Page number 20>

 
 EMI20.1
 T: a.i; tLr TV (continued)
 EMI20.2
 . l; îa: Z.a: a of paraffins 1 # right chnfne. i5 on; eid;

  1
 EMI20.3
 
<tb>
<tb> c13 <SEP> 1.6
<tb> c14 <SEP> 4.8
<tb>
 
 EMI20.4
 C1 .3 2, 3 ',.
 EMI20.5
 
<tb>
<tb> c16 <SEP> 29.8
<tb> Ci? <SEP>; <SEP> 22.6
<tb> C18 <SEP> 8.1
<tb> C19 <SEP> $ 0.8 / 100.0
<tb>
 
 EMI20.6
 Less than Q> 0; 1 garomatic zij.



   From the foregoing, it emerges that when ethanol is used, good protein yields are obtained.



  Likewise, the amounts of fatty substances are notably reduced.



    - EXAMPLE 3 -
Aerobic training is carried out continuously so that it can be compared with the results obtained using the
 EMI20.7
 paraffinic filler described in Example z2 and 8thanol. L68 comparisons are made with a relatively low power of 0.9 hp / 100 liters and. with a relatively high power of.
 EMI20.8
 



  2) 7 OV per 100 liters. About 2% by weight d ct: .¯wr. , u of a paraffinic mixture are used in a P1 medium.



   The results of these operations are shown in the table below.

 <Desc / Clms Page number 21>

 
 EMI21.1
 



  .T rT #
 EMI21.2
 Com, oF-r ,, i-soy. cntrp. the i'c>: ..} -: er.tationa with llhn0! and with d3 naraffins ÙV / 10Ô Tally- Substrate of ddve- ¯¯¯SELECTIVITY¯¯¯ 02 Conc, liters lopperent 9 # ceiilg ';, cell I ,, o in 3 / 1.-ï :. substrate in the air ....- ....-; - f.1u1mtrat 76 o, ± roof 6.1 '0 p-70 1.34 4110
 EMI21.3
 
<tb>
<tb> la, 5 <SEP> 0.59 <SEP> 1.13 <SEP> 57.0
<tb> 0.9 <SEP> Paraffins <SEP> 8.5 <SEP> 0.71 <SEP> 0.83 <SEP> 70.8
<tb> 10.7 <SEP> 0.54 <SEP> 0.64 <SEP> 78.0
<tb>
 
 EMI21.4
 2.7 EtOH 10.6 0.59 1.13 48.0 9.4 0.58 1.11 42.3 2, 7 Paraffins 11.2 gas ?. 1.10 E3;

   9.3 0.71 z33 53.0 Anàl, 14rse des cells s4ah4es CV / 100 Substrate flua 02 0% N% Ash Total Amino H20 liters used% acid bodies%% ..., r J 1 .na. o, ztox 48.0 47, 11.2 2.4 8.7 60 4.5
 EMI21.5
 
<tb>
<tb> 32.7 <SEP> 44.9 <SEP> 12.5 <SEP> 4.7 <SEP> 3.2 <SEP> 55 <SEP> 7.2
<tb> 0.9 <SEP> Paraffins <SEP> 35.9 <SEP> 50.3 <SEP> 11.0 <SEP> 2.9 <SEP>. <SEP> 16.0 <SEP> 48 <SEP> 10.3
<tb>
 
 EMI21.6
 36.8 55.4 8.1 24: 8 20.6 34 4.6 7 EtOH 49.0 47.0 11.9 3.2 t, 7 52 3.2 57.0 44.7 12.4 ' 790 4.7 '52 rye5 2.7 Paraffins 45.7 46.2 9.4 3.6 8.6 49 4.4
 EMI21.7
 
<tb>
<tb> 51.0. <SEP> 50.4 <SEP> 10.7 <SEP> 5.9 <SEP> 22.1 <SEP> 47 <SEP> 10.1
<tb>
 From what precedes, it emerges that one obtains
 EMI21.8
 Unexpected beneficial results when ilori resorts to. ethyl alcohol.

   The number of grams of cells obtained per gram of carbon in the substrate increases in the case
 EMI21.9
 0.9Cl / 1QU liters of 0.83 c "I 1.34. Other significant advantages are obtained with regard to the oxygen concentration in the air, the resulting total fat and the amino acids obtained. .

   These advantages are very significant for a relatively low power, for example for a power between approximately 0.27 and 2 HP, in particular between approximately 0.9 and 1 HP per 100 liters,
These results show the same advantage in the quali-
 EMI21.10
 Tee of the pre-installed product shown for substrates

 <Desc / Clms Page number 22>

 
 EMI22.1
 Oxygenated, it has a lower dross content and higher concentrations of amino acids and total nitrogen. In addition, these results show the perfec-
 EMI22.2
 tionnenents obtained in the fermentation process when these oxygenate substrates are used.

   Hn consir: ratct: the most advantageous low energy of the mixture (0.9Q'I / 100 liters), lower oxygen concentrations are required.
 EMI22.3
 For the low growth rate when applying ethanol rather than n-paraffin, the advantage of closed oXYJ0nÓs substrates for low potency is particularly illustrated by the following example: -} XEHPL.'S 4., .



  Continuous aerobic fermentation operations are carried out using a medium P1 and ethanol at 35%. with Miorooocous cerificans, The increase in the percentage of oxygen use cOI'ipa.rativoT: lOnt à. a substrate of n- "paraffin emerges from the graph of FIG. 2 on which the CVs for 100 liters of broth have been plotted on the abscissa and on the ordinate the percentage increase in oxygen use with ethanol relative to the n -paraffins.



   Due to: The solubility of ethanol in the training medium, there is a monk phase in the apparatus.
 EMI22.4
 Therefore, when ethanol is the only carbon source, the resistance to the transfer of the trap is reduced and the use of the substrate is reduced with the ethanol as a substrate than with the n-, pa, rafinic substrate. oxygen is increased for a power kept constant, In fact, a
 EMI22.5
 increase in oxygen utilization of 210 cli 'is obtained with a power of 0.8CV / 100 liters by the application of ethanol to the plape of n-paraffinen (COm! 10 le r.ol1tro figure 2). These results show that to obtain an equivalent growth rate for the same power with
 EMI22.6
 n-paraffins,

   the forces for the transfer of the bundle in an oxygen medium must be increased by the enrichment
 EMI22.7
 ment of the gas stream admitted to the oxygen rr; ôyen. From these data, it is necessary to admit approximately three times the quantity of continuous oxygen to the forc8r.tatioh apparatus in order to obtain an equal yield of cells when one uses n-paraffins. , one can obtain equivalent growth rates without enriching the

 <Desc / Clms Page number 23>

 
 EMI23.1
 The gas flow admitted considerably increases the power.

   Thus, for a constant yield in the cell and for a constant concentration of oxygen, the application of etha-
 EMI23.2
 nol, because of its solubility in the medium of err..er.tf. tion strongly favors the transfer of the traps and makes it possible to carry out the fermentation with considerably reduced power. Since this advantage derives from the
 EMI23.3
 solubility of athanol, it is evident that the application of other soluble substrates will lead to the same advantages.
 EMI23.4
 



  .. gX3N11J: "5 Elcosanc (0 20) is oxidized using a solution of pornanganato c1o potassium containing a small amount of aodiun hydroxide. Air is admitted into the solution containing eicosane for about 1 hour. hours The temperature of the solution is 120 C. The reaction mixture is neutralized with sodium hydroxide and then filtered.
 EMI23.5
 in contact with water. An aqueous phase is strong which traps the acids and this phase is separated. We add
 EMI23.6
 the hoxane has the residual phase which is extracted again with water. The hoxane is removed and an oxygenated hydrocarbon phase of 12 to 18 carbon atoms is isolated.

   We grow
 EMI23.7
 } riorocQccuS cerificans (14987) at 30 C with a stirring rate of 300 revolutions per minute using 1 ;;,; oxygen compounds C12 to C18 relative to carbon, in a medium
 EMI23.8
 Pl * The weight of cells obtained is 3, 5 seeds per liter. It is the naxiaal yield of cells that can be obtained in relation to the estimated quantity of carbon present.

   The essential amino acids. 'Reduced by this substrate
 EMI23.9
 appear in the following table coapara.tiven to those obtained with a C16 hydrocarbon fraction as substrate,

 <Desc / Clms Page number 24>

 
 EMI24.1
 1 '\: IZt! \ U VI
 EMI24.2
 It should be noted that the content of '3n thio ainino acid (Cystine and Hethionine) increases by 21'% compared to that obtained when using a hydrocarbon in 16 and that cotte
 EMI24.3
 there is a general increase in essential anino acids.
 EMI24.4
 



  - EXEMPLR 6 Miorocoocus oerifioans (l't-9'37) 3000 to 300 revolutions are developed by ninuto using 2. of a ii = Eli: sje of oxygenated couposes (Mixture A) described prdoedenent 'in a medium Pl * A cell weight of 2.66 grams per liter is obtained. This is the renaencnt r.laxl:,. U; -, which can be obtained by assuming that 50 gp of cells :; microbial is formed by carbon and which the iioi.ILC of carbon does not convert into carbon dioxide. The c1 <.> Is successful. or.t of miorococcus cerificans on the mixture of c'jnpo & us o =; yjjosnols compar-itivates in the case of a substrate of a -, - hydrecarbonated fraction in Glr against an increase due to the te neur in thio - nino acid,. namely 14 flâ út U: 12 protein content of 16 yj.

   This is shown in the following table: @% ;, IJ VII
 EMI24.5
 ''} ra "e3 '??.' 1'1: 0 rt ci ti r, r Total (1 '!', rLS, .. içç airnnncs CÎG nrntsin <.. téi;.: é (i" 1. ; ±, 26) Substrate 'i'1 1.0? .1. "' 'N0 L, vsinG acids 016 1.66, 57 bzz Mdiange A (Coaposed 2.12 5.01 7212
 EMI24.6
 Microooccun c0rificGs i n o --a. o - ,! 0 16 ,, 1 \ "'. & - ..11 .....) L .....

   L, "" .. ;; 'gà \ ...; ..... \., .. {. & .... "" ""' 4J; J. essential --- in C12 iE.ï
 EMI24.7
 
<tb>
<tb>
<tb>
 
 EMI24.8
 Isolcuoinc 3.2 3.7 15 Leucine (:, ... 5.0 5.5 10 Lysine 4, ex flr, 7 2 Phenylalanino 2, 2.8 12
 EMI24.9
 
<tb>
<tb> Tyrosine <SEP> 2,3 <SEP> 2,4
<tb>
 
 EMI24.10
 Cystine 0.5 0.7 4C ethionine z.

   the (, 14 Threonina 3.7 4.1 11 Valine 3.7 4.4 19

 <Desc / Clms Page number 25>

 
Determination according to Kjeldahl
As emerges from Examples 5 and 6, Micrococcus cerificans is capable of using a mixture of oxygenates. Similarly, when the microorganism is recipe according to the invention, it has a high protein content, a high distribution. as an essential acidic amine and a very interesting nutritive character.



   EXAMPLE 7-
A number of adro- bien formulations are carried out using medium P1 at a temperature of about
30 ° C as indicated above with different oxygenated hydrocarbons. The microorganism used is Micrococcus cerificans (14987).



   The protein content, the essential amino acid number and the anino acid distribution of the microorganism developed on various pure oxygenated hydrocarbons are determined using the usual analytical methods and usual calculations.



   The protein content (expressed as a percentage) is calculated from the percentage by weight of nitrogen in the cells (determined by the Kjeldahl method) by multiplying by a factor of 6.25.



   The essential aino acid index of the harvested cells. is determined using the conventional method taking the egg as a basis for comparison. Eggs are considered a perfect protein with an essential amino acid index (I.A.A.) of 100.



   To determine the amino acid distribution curve of the cells harvested, chronatographic analysis is used to determine all the constituents indicated with the exception of tryptophan which is determined by microbiological analysis.
The protein content, the essential amino acid numbers. and the distribution of amino acids for the harvested cells are given in the following table:

   

 <Desc / Clms Page number 26>

   TABLE VIII
 EMI26.1
 MICROCOCCUS CERIFICAHS DEVELOPED S l7I'3'L ii; '; TS COi, POSES OXYG:; mES Anino acids GraIJ! 1es Anino Acid Dour 100 <-rar: .-. Es de Trottine àilanîne 6,5 6,7 6,1 7.4 5.5 6.2 5.9 5.2 Arginine 4.2 4.2 ruz, 3 5.1 3.3 4.1. bzz, 9 4, ï Aspartic acid 7.9 7.6 6.3 7.0 6.2 6.1 G, 4 5.3 Cyst6ic acid 0.1 - 0, 2 0.2 p 0.2 0, 1 0.1 0.2 Cystitis 0.3 0.4 0.4 0.3 0.0 0.3 0.5 0 -Glutaziic acid 8, 8 8, 4 9, 10.8 G, 5 8.9 8, 2 5, 9
 EMI26.2
 
<tb> Glycine <SEP> 3.5 <SEP> 3.5 <SEP> 3.3 <SEP> 3.6 <SEP> 3.2 <SEP> 3.4 <SEP> 3.3 <SEP> 2 , 9
<tb> Histidine <SEP> 2.3 <SEP> 3.1 <SEP> 2.3 <SEP> 2.4 <SEP> 3.3 <SEP> 2.1 <SEP> 1.6 <SEP> 2 , 7
<tb>
 
 EMI26.3
 Isal-eucine 4.6 3.7 2.7 3.4 3.3 2.1 3.0 2.5
 EMI26.4
 
<tb> Leucine <SEP> 6.1 <SEP> 5.2. <SEP> 5.3 <SEP> 5.6 <SEP> 4.3 <SEP> 4.6 <SEP> 5.4 <SEP> 3.7
<tb> lysine <SEP>.

   <SEP> 4.9 <SEP> 5.4 <SEP> 4.1 <SEP> 3.9 <SEP> 4.8 <SEP> 3.8 <SEP> 4.3 <SEP> 4.6
<tb>
 
 EMI26.5
 hethionine 1.4 lu 1.6 1.4 0 1.3 1.6 0.8 Methionine sulphoxide 0.4 0.1 0.2 0.2 0.3 0.1 0.3 0.3
 EMI26.6
 
<tb> Phenylalanine <SEP> 3.2 <SEP> 2.9 <SEP> 2.6 <SEP> 2.6 <SEP> 2, <SEP> 6 <SEP> 2.4 <SEP> 2.5 < MS> 2.3
<tb> Proline <SEP> 3.4 <SEP> 2.6 <SEP> 3.2 <SEP> 3.3 <SEP> 2.7 <SEP> 2.5 '<SEP> 2.4 <SEP> 2.8
<tb> Serine <SEP> 3.1 <SEP> 3.1 <SEP> 2.8 <SEP> 2.7 <SEP> 2.6 <SEP> 2.3 <SEP> 2.6 <SEP> 2 , 6
<tb>
 
 EMI26.7
 Thronine 3.7 3.5 2.9 3.9 3.1 3i5 2-, 8 3.2
 EMI26.8
 
<tb> Tyrosine <SEP> 2.7 <SEP> 2.4 <SEP> 2.1 <SEP> 2.0 <SEP> 1.8 <SEP> 2.0 <SEP> 2.1 <SEP> 1 , 8
<tb> Valine <SEP> 6.6 <SEP> 3.4 <SEP> 3.5 <SEP> 4.3 <SEP> 3.7 <SEP> 3.1 <SEP> 4.0 <SEP> 3 , 0
<tb>
 
 EMI26.9
 Tryptophan 1, -. T. 1.12 O, û? 0.72 O, G? 0.78%. T. 1 '. T.



  P.10T5I1F ?, TOTAL (Ux6.25) 78.75 44 63 74.13 69.75 55.00 6 - '., 50 67.60 55.63
 EMI26.10
 
<tb> 1, i, .ai. <SEP> 68.4 <SEP> 57.9 <SEP> 51.3 <SEP> 55.2 <SEP> 50.3 <SEP> 47.0 <SEP> 53.5 <SEP> 45.1
<tb> Conditions <SEP> of <SEP> fomentation <SEP>: <SEP>. <SEP> elcool <SEP> A1 <SEP> @
<tb>
 
 EMI26.11
 Substrate 1;. with respect to - Alcohol Acid Alcohol Alcohol Alcohol Alcohol 1-thyl carbon: ethyli- 016i- c6tTli-.1Gthy- sec-bu- isopra- Î3aÉe ltàne Cell. b.rs. que que que lique typical pylique lique cJtonc Cell.j / 1 24 lirs. "3.69, - 5.76 '5.58 Cell./1 48 hrs. 6.96 5'? 4.62 r, r? Lsrl 1.01 1.25
 EMI26.12
 
<tb> N.T.- <SEP> No <SEP> test.
<tb>
 

 <Desc / Clms Page number 27>

 
 EMI27.1
 



  As it emerges from the results below, when gluing Mioroooocus oei, ificans oon: you? N6hent to the invention - it presents the interesting combination of a high content
 EMI27.2
 A protein greater than 50, with a high index in p, essential acid greater than 45 ev ot a curve of the distribution of nutritive anino acids, further indicating the possibility of application of the invention. to harvest a pro-
 EMI27.3
 tdino which can be used by biosynthesis in an extr81.ienent 6conoriiquo manner, Thus the present invention is particularly interesting for the preparation of supplements ali: enta3.- res suitable for the horde and animals and exhibiting a high level of protein of high nutritional value.
 EMI27.4
 - ¯T ;:

  CEILt'Ir ± 3 -
Further aerobic fermentations are carried out using medium P1 and nine different bacteria. The tem-
 EMI27.5
 .p, rature is 30 0 ot the starting pH 7.8. The substrate had ethyl alcohol, the nitrogen content, the protein content (percentage of protein) on 1., i ,, 1. (where of essential amino acid) and the distribution of amino acids are shown in Figure 7.

   The results are shown in the following table:

 <Desc / Clms Page number 28>

 
 EMI28.1
 111 = J11 ilT
 EMI28.2
 MISCELLANEOUS: 'MICBtO:? G¯ii: IS ".FS 1) E \ #T) O ?? ES ON ETHYLIC ALCOHOL .t ..- 1Í1l0 acids Grf.r: L": 1CS; I1ina ..help -for 100 arr:, es of canine protein 5.9 r3.8 6.1 6.2 5.9 6.5 6.2 9.0 7.4 59fl 4.8 5.2 5.3 4.9 5, 2 4.7 4 ', 0 5.1 ÁC1GC hsprtquc 6.5 6.2 6.6?, C) 6.4 6.7 6.5 5.5?, 0 Acaae Cysticus 0.2 0.1 0 , 1 0.1 0.1 0.2 0.1 0, l 0.1 Cystine Ci, 3 0.4 t7, r C?, 5 0e5 0, 0.4 0 2 03 Glutaijic acid 7.6 9, 3 8.8 8.0 8.2 8.6 8.6 1 r ,, 9 10 8 Glycine 3.5 3.5 3.7 3.7 3.3 3.8 3.4 3.7 38 Histidine 2.8 3.3 3.2 3.1 1.6 3.1 2.5 3, C) 2, Isoleucine 3.1 2.7 3.1 3.1 3.0 3.1 3.1 1 , 3 3, Leucino 5.5 5.3 5, 5.8 5 4 5.7 5.4 3.4 56 Lysine il, 5, 4 4 ,? 49 3 4.8, 3 6.9 3 9 N6thioninc 1, 6 1.8 1.6 1.4 2, 6 1.7 1.6 'C, 9 1 4 Luthionine sulfoxy 0.3 0.3 0 , 4 0, 6 0, 3 0.3 0 ,! 0.1 U,

   2 rhonylalahine 2.6 2.4 2.8 2.6 2.5 2.7 2.7 1.5 2, And Praline 2.4 2.5 2.6 2.4 2.4 2.5 z3 2.5 3, 3 Serine 2.8 2.7 2.8 2.8. 2.6 3.0 .2.2 2.1 2.,7 Threo! 1in 2.9 3.0 3.1 3.2 2.8 3.1 3.9 '2.6 3.9
 EMI28.3
 
<tb> Tyrosine <SEP> 2.2 <SEP> 2.1 <SEP> 2.4 <SEP> 2.2 <SEP> 2.1 <SEP> 2.3 <SEP> 2.1 <SEP> 1 , 2 <SEP> 2.0
<tb>
 
 EMI28.4
 V - "# '- 3 ,? 39? L1 3.9 3.7 4.1 4.0 3.2 4.3?.' .I: K l'01 ':. L,: LiXú,;: -,) 67.63 68.63 68.69 68.31 67.56 68.75 67.9 ': y9 6S, 8 1. J ....

   Jo ... 5 /, 1 52 ,? 57.5 56.3 52.9 5 ?, 1 56.3 #i ,. 55.2 Iic.> 'Oo!' F. [N5 S;: ie; SCC = 1/15528 15522 15523 15 2 l5 -. '25 15526 15527 Q: 151 l90 CoP:' i 1.1 ur < 1 of f (-: r '. Ient: ltiol1 ce 1 tJ11 ----------------- ¯.¯.¯ ------- 1,6 --- ------------------------- ce] 1 Cil 24 Hrs. 4.04 3.6 3.9.1 4.38 3.9B ' 3W2 3.7 1.08 Hz Ce] .1 Cil 48 ErG. 6.7 7.1 8, r '8.5 7.87 6.0 6, fus5 2.22 3.2 *, Quartern: wt' .: 1 'Culture Collection,!; 2', 3¯CJ :, 1gss ..

 <Desc / Clms Page number 29>

 



   Do oc "above it emerges that different bacteria develop easily on a pure oxygen hydrocarbon.



  Each of the nine microorganisms contains a high protein content of greater than 65%, a high essential anino acid number of greater than 15% and a very attractive nutrient amino acid distribution.



    - EXAMPLE 9 -
A certain amount of aerobic fomentations is carried out using media I, II and III and ethanol at 30 ° C. with the following yeasts. The pH is maintained between 3 and 6.5, preferably between 4 and 5.



   A. Saccharomyces cerevisiae - CBS
B, Saccharomyces acidifaciens - ATCC 8766
C, Trigonopsis variabilis -ATCC 10679
D, Hansenula anomala - CBS
E. Candida lipolytica - ATCC 8662
F. Candida puloherrina ATCC 9889
G, Rhodotorula glutinis - ATCC 2527
H. Candida guilliermondii - ATCC 9390 The nitrogen content, protein content, essential amino acid number and anino acid distributions are determined as shown in Example 7.



   The results are shown in the following tables:

 <Desc / Clms Page number 30>

   PAINTINGS
 EMI30.1
 
<tb> VARIOUS <SEP> YEASTS <SEP> DEVELOPED <SEP> ON <SEP> ALCOHOL <SEP> ETHYLIC
<tb>
 
 EMI30.2
 Anino Acides Grandes f mino iici de Dour 100 Grandes de Protein Alanine 6,6 5,4 717 6,7 8,2 5,2 5,8 9,4 6,8 5,5 5,3 .6 - ginin 5 , 7 5.2 5.0 4.1 5.0 5.1 10.2 3.5 * 5.1 3.8 3.8 Aspartic Acid 7.1 7.1 8.6 7.8 9.9 8.0 6.6 8.2 7.3 7.4 6.5 Cysteric Acid 0.3 0, 2 0, 2 0, 2 0.9 0.3 0.3 0, 2 0.4 0.3 0.4.



  Cyst1.ne 0.8 0.8 1, 2 0.7 0 0, 6 0.5 0 0.7 0.7 0
 EMI30.3
 
<tb> Glutamic acid <SEP> <SEP> Il, 5 <SEP> 10.5 <SEP> 13.3 <SEP> 12.3 <SEP> Il, 6 <SEP> 8.7 <SEP> 8.8 <SEP> 11, <SEP> 2 <SEP> 10.5 <SEP> 8.4 <SEP> 8.0
<tb> Glycine <SEP> 3.1 <SEP> 3.0 <SEP> 3.9 <SEP> 3.6 <SEP> 4.3 <SEP> 3.2 <SEP> 3.1 <SEP> 8 , 7 <SEP> 3.3 <SEP> 3.4 <SEP> 3.0
<tb>
 
 EMI30.4
 Histidine 2.9 2. '7 3.2 3.2 3.2 3.2 2.9 2.0 2.7 2.8 2.5
 EMI30.5
 
<tb> Isolcucine <SEP> 3.1 <SEP> 2.9 <SEP> 3.2 <SEP> 3.2 <SEP> 4.8 <SEP> 3.3 <SEP> 3.1 <SEP> 4 , 7 <SEP> 3.1 <SEP> 3.4 <SEP> 3.4
<tb> Leucine <SEP> 5.1 <SEP> 5.0 <SEP> 6.0 <SEP> 5.5 <SEP> 6.7 <SEP> 5.7 <SEP> 5.0 <SEP> 3 , 9 <SEP> 5.1 <SEP> 5.7 <SEP> 5.4
<tb> lysine <SEP> 5.9 <SEP> 5.7 <SEP> 6.6 <SEP> '6.6 <SEP> 6.9 <SEP> 7.2 <SEP> 6.0 <SEP> 7.4 <SEP> 5.7 <SEP> 6.0 <SEP> 5.4
<tb> Methionine <SEP> 1.0 <SEP> 1.1 <SEP> 1.5 <SEP> 1;

  4 <SEP> 1.2 <SEP> 1.2 <SEP> 1.0 <SEP> 1.0 <SEP> 0.8 <SEP> 1.1 <SEP> 1.1
<tb> Sulfoxide <SEP> of <SEP> methionine <SEP> 0.3 <SEP> 0.2 <SEP> 0 <SEP> 0.5 <SEP> 0.5 <SEP> 0.5 <SEP> 0 , 6 <SEP> 0.3 <SEP> 0.3 <SEP> 0.2 <SEP> 0.3
<tb> Phenylalanine <SEP> 2.9 <SEP> 3.2 <SEP> 3.2 <SEP> 3.1 <SEP> 3.8 <SEP> 3.3 <SEP> 2.8 <SEP> 2 , 3 <SEP> 3.0 <SEP> 3.1 <SEP> 3.0
<tb> Proline <SEP> 2.9 <SEP> 2.8 <SEP> 3.5 <SEP> 2.9 <SEP> 3.5 <SEP> -2.9 <SEP> 3.7 <SEP> 3.3 <SEP> 2.7 <SEP> 2.9 <SEP> 2.6
<tb> Serine <SEP> 4.1 <SEP> 3.9 <SEP> 4.6 <SEP> 4.4 <SEP> 4.9 <SEP> 4.4 <SEP> 3.9 <SEP> 4 , 2 <SEP> 4.5 <SEP> 4.1 <SEP> 3.3
<tb> Threonine <SEP> 4.3 <SEP> 3.8 <SEP> 4.5 <SEP> 4.3 <SEP> 5.1 <SEP> 4.5 <SEP> 6.0 <SEP> 4 , 4 <SEP> 4.3 <SEP> 4.1 <SEP> 3.5
<tb> Tyrosine <SEP> 2.7 <SEP> 2.9 <SEP> 2.9 <SEP> 2.8 <SEP> 3.0 <SEP> 2.7 <SEP> 2.4 <SEP> 1 , 3 <SEP> 2.6 <SEP> 2.8 <SEP> 2.6
<tb> Valine <SEP> 3.8 <SEP> 3.5 <SEP> 6,

  0 <SEP> 5.0 <SEP> 5.3 <SEP> 4.2 <SEP> 3.6 <SEP> 5.7 <SEP> 3.9 <SEP> 4.3 <SEP> 3.8
<tb>
 
 EMI30.6
 TOT PROTEIN..LE (Nx6.25) 33.3 39, - 36.4 40.7 42.9 43.4 38.4 36.9 32.5 4.8 59.3
 EMI30.7
 
<tb> I.A.A. <SEP> 60.8 <SEP> 59.0 <SEP> 70.8 <SEP> 67.0 <SEP> 76.9 <SEP> 67.4 <SEP> 63.0 <SEP> 63.6 <SEP > 60.2 <SEP> 63.8 <SEP> 59.0
<tb> <SEP> conditions of <SEP> fermentation
<tb>
<tb>
 
 EMI30.8
 Yeast #Saccharonyces cerevisiae-- ------------ S4ec2irō: yces Zy-osaccharo - iyces acidifaciens - Medium-, II II III 1 i II II III III ETOH CI:! 3 - ---------- 1.6 -------------------------------- 1.6-- -------- Cell 1 6.3 4.9 6.8 7.2 6.9 2.1 4.5 6.2 7.7 8.3 6.0 Fermentation time:

  r,) 72 72 '72 72 96 96 96 72 72 72 72

 <Desc / Clms Page number 31>

   TABLE XI
 EMI31.1
 
<tb> VARIOUS <SEP> YEASTS <SEP> DEVELOPED <SEP> ON <SEP> ALCOHOL <SEP> ETHYLIC <SEP> - <SEP>
<tb>
 
 EMI31.2
 ¯a: ino ci ae Grams Anino Acid per 100 grams of? Rút6in Llaninc 5.9 5.3 7.1 6.2 4.6 '5.0 5.3 4.9 6.5 5.6 5.6 5.7 Arginine 5.1 4.8 4.0 4.5 4.2 4.3 4.6 5.1 4.6 4; 4 5.0 5.0 Aspartic Acid 7.8 7.3 6, 5 6.3 6.8 7.0 7.6 8.6 7.9?, 2 8, 3 8, 8 Acid Cy ::;

  t (risk 0.1 0, î 0.2 0.2 0.1 0.1 0.3 0.1 0.2 0.1 0.1 0.1 Cystine 0.6 0.5 0, 6 0 , 7 0.4 0, 6 0, 8 cl,? 0.8 0,? 0.9 0, 8
 EMI31.3
 
<tb> Glutamic acid <SEP> <SEP> 9.2 <SEP> 7.6 <SEP> 9.9 <SEP> 9.8 <SEP> 7.1 <SEP> 7.0 <SEP> 8.4 - <SEP> la, 9 <SEP> 11.8 <SEP> Il, 1 <SEP> 12.1 <SEP> 12.9
<tb> Glycine <SEP> 3.4 <SEP> 3.2 <SEP> 3.2 <SEP> 2.9 <SEP> 2.9 <SEP> 3.3 <SEP> 3.1 <SEP> 3 , 2 <SEP> 3.2 <SEP> 3.1 <SEP> 3.4 <SEP> 3.6
<tb> Histidine <SEP> 3.7 <SEP> 3.4 <SEP> 2.7 <SEP> 2.3 <SEP> 2.7 <SEP> 2.3 <SEP> 2.4 <SEP> 3 , 0 <SEP> 2.8 <SEP> 2.7 <SEP> 3.1 <SEP> 2.9
<tb> Isoleucine <SEP> 4.0 <SEP> 3.6 <SEP> 3.3 <SEP> 2.7 <SEP> 3.3 <SEP> 3.7 <SEP> 3.3 <SEP> 3 , 3 <SEP> 3.5 <SEP> 3.5 <SEP> 3.7 <SEP> 3.7
<tb> leucine <SEP> 5.6 <SEP> 5.9 <SEP> 5.4 <SEP> 4.6 <SEP> 5.5 <SEP> 5.8 <SEP> 5.4 <SEP> 5 , 9 <SEP> 5.2 <SEP> 5.1 <SEP> 5.8 <SEP> 5.6
<tb> Lysine <SEP> 6.0 <SEP> 6.2 <SEP> 5.3 <SEP> 4.7 <SEP> 5.1 <SEP> 4,

  7 <SEP>. <SEP> 5.1 <SEP> 6.7 <SEP> 6.2 <SEP> 5.8 <SEP> 6.3 <SEP> 6.2
<tb> Methionine <SEP> 3.3 <SEP> 1.3 <SEP> 1, <SEP> 0 <SEP> 0.9 <SEP> 1.1 <SEP> 1.3 <SEP> 1.9 < SEP> 1.3 <SEP> 1.2 <SEP> 1.1 <SEP> 1.0 <SEP> 1.1
<tb>
 
 EMI31.4
 Hethionine Sule5xide 0.4 0.3 0.5 0.4 0.2 0.3 0.2 0.2 0.3 0.3 0.6 0.3
 EMI31.5
 
<tb> Phenylalanine <SEP> 2.9 <SEP> 3.2 <SEP> 3.1 <SEP> 2.5 <SEP> 3.5 <SEP> 3.2 <SEP> 3.0 <SEP> 3 , 3 <SEP> 3.0 <SEP> 2.9 <SEP> 3.3 <SEP> 3.3
<tb> Proline <SEP> 2.7 <SEP> 3.0 <SEP> 2.7 <SEP> 3.2 <SEP> 2.9 <SEP> 2.9 <SEP> 3.1 <SEP> 3 , 4 <SEP> 4.3 <SEP> 3.0 <SEP> 3.6 <SEP> 3.3
<tb> Serine <SEP> 3.3 <SEP> 3.5 <SEP> 3.6 <SEP> 3.5 <SEP> 3.6 <SEP> 3.5 <SEP> 3.5 <SEP> 4 , 1 <SEP> 4.0 <SEP> 4.0 <SEP> 4.3 <SEP> 4.0
<tb>
 
 EMI31.6
 Threouine, 0 3.9 3.7 3.6 3.7 4.0 3.7 4.2 4.5 h, 2 4 ', 7 4.3
 EMI31.7
 
<tb> Tyrosine <SEP> 2.6 <SEP> 2.8 <SEP> 2.8 <SEP> 2.2 <SEP> 2.7 <SEP> 2.7 <SEP> 2,

  6 <SEP> 2.9 <SEP> 2.7 <SEP> 2.6 <SEP> 3, <SEP> 0 <SEP> 3, <SEP> 0 <SEP>
<tb>
 
 EMI31.8
 Valine 4.2 Hz 3.9 3.4 3.8 4.1 3.6 4 0 4.0 3.6 4.2 4.0 PRO "'ElI; R .TOT.¯IR (ï; x6, 25j58.1 62.7 41.1 40.9 fez?, 3 57.0 62.9 45.9 33.8 35.5 32.3 33.5
 EMI31.9
 
<tb> I.A.A. <SEP> 67.8 <SEP> 64.0 <SEP> 60.0 <SEP> 52.1 <SEP> 59, <SEP> 2 <SEP> 61.4 <SEP> 60.2 <SEP> 65, 6 <SEP> 63.6 <SEP> 60, <SEP> 2 <SEP> 67.6 <SEP> 65.2
<tb>
 
 EMI31.10
 Conditions This fermentation D Yeast ----- Trig onopsis variabilis - = - ### Han s enula an onala ---- 1 --- Nilieu l 1, II II III III II II II III III Et0X C " , 3 -------------- 1, Ô -------------- 'T Cell. / 1 a, 0 5.2 7.4 7, 6 7.1 5.7 7.2 7.2 8.0 7.7 8.0 7.3
 EMI31.11
 
<tb> Duration <SEP> of <SEP> fomentation <SEP> (Mrs.) <SEP> ---------- 72 ---------------- ' - <SEP> 72 <SEP> 72 <SEP> 72 <SEP> 72 <SEP>.

   <SEP> 96 <SEP> 96
<tb>
<tb>
 

 <Desc / Clms Page number 32>

 
 EMI32.1
 TILBIL '1A'U XII
 EMI32.2
 : .T.11210 aCl.d2 DITERATED YEASTS DEVELOPED, .. ON ETHYL ALCOHOL .t ', rino' acid Cramaes Acid for 100 breakdowns of Alcnin Protein 5.0 4.9 6.4 5.8 5sfl 4.6 5, 1 5.06 4.9 Argl! Llne 4.0 12.1 4.7 5.7 4.7 4.6 5 0. 4 4 6.2, cidc parique 7.0 7.5 67 7.3 6.9 5.9 76 T'2 7.3 Acid Cystcr-.que 0 0.3 0.3 0.5 0 4 0, 0.3 0.2 0.3 Cysti.fe 0 0.7 0.6 0.6 0.5 0 - & 5 -e-3 C.

   G Glutauic Acid 6.7 7.9 9.5 9, 0 7, 2 7.1 7 6 z G, 9 Glycine 2.6 3.2 3.2 -3.1 3.0 2.8 2.7 3.02 2.9 Histidine - 3.1 3.1 3.1 2, 6 3.5 4, 2 3, 3 4 0 0 Isoleucine 2.7 3.4 3.4 3.1 3.0 2, 6 3.1 3.5 2'8 Leucine 5.7 5.3 5.3 4.7 5 1 2.6 5.1 6, g 5.2 Lyoine 6.2 6.4 -5.6 5, 5 6.1 6.1 6.2 6.8 7.0 Methionine 1.1 0.9 1, 2 0, 9 D, 8 0.7 ili. l, 0 0, 9 Dellethionine sulfoxide 0 0, 5 0.6 0.8 0.5 0, 1. 0.7 -0.6 0.7 Phenylalc.n3.ne 3.3 3, C 3.2 2 , 7 2.8 2.5 3.0 3.4 2.6 Proline 3.1 3.0 3.9 2.6 2.9 2.4 2.6 2.6 2.0 Serine 4.4 4 , 0 3.7 4.8 1.8 4.1 4 5 5.3 4.3 Threonine 4.2 in 3.8 5.6 4.5 3.9 4.4 5, 2 5, 0 Tyrosine 2 , 9 2.9 2.7 2.3 2.5 2.1 2.3 2.4 2.1 r> 1 ;;;

   ; T Tex f '; T bzz1 4 0- 4.0 3.7 3.8 3.5 4.3 4.5 3.9}' T'f '' "'Fr: E CT x5.25) 33 , 5 32.3 42.9 36.3 37.7 36.7 59, 'i 32.0 39 8 1 .., ".. 60.8 63.2 61.8 61.2 60.4 50, 0 62,4 70,0 fez2,6 Co!:, 'I want of fomentation
 EMI32.3
 
<tb> E <SEP> F
<tb>
 
 EMI32.4
 Yeast ¯-¯¯ - ¯Candida lipolytics ######## ## Candica pu.lcherrl: 1él Iülicu '3 II II III III II III jjl EtO! 1 es' --------- --- 1.6 -------------------------------- 1, 6 --------- C11. vil- 7.0 4.1 6.9 6.6 7.2 6.8 5.9 5.1. 5.6 of fernentatjon (Iirs. 72 72 72 72 43 48 96 72 72

 <Desc / Clms Page number 33>

 
 EMI33.1
 Tjs iZT:,; 1 x I i 1
 EMI33.2
 VARIOUS YEASTS sTj7q 1.J, COOI, ETHY1, IQUE Aciee; .I1iOO Gr !!. :: 'I1CS Anino Acid rour 100 arr,.: "Es¯r? E J'rote} ne Alanine 5,6 5,3 5.6 5.2 5.8 4.9 8.1 12.5 7.7 G, 4 rç:

  ll1ne -, 4 4.4 4.5 4 1 4.1 3.3 3.7 3.6 4, l'r lili dCloe Asp3rtlque 6.5 6.5 7.9 7.1 6.8 5, 9 8.6 8 "1 7 6 6 Acid ys erlque 0 0 0.1 0.2 0.3 0.2 0.2 0.5 0.3 0.9 Cys-uinc 2.3 0.4 0.6 04 0'5 0'5 0 3 0 0 '"0 C ,, Ts'Zne 2,3 0, / 1. 0, 0, .l 0.5 0.5 0.3 0.11 0.7 0.6 lCldc Glutar: nquc 7.7?, 5 7, 8 6 7 8, 8 ces, 8 8, lÙ, 2 8, 8 8, 7 Glycine 3.0 3.0 3.3 3.1 3 4 2 7 8.9 8.9 3 2.9 Histidine 2.8 3.1 2.7 2.7 2.4 2 , 1 2.0 2.1 2 8 3.1 Isoleucine} -, 5 3.7 - 4.1 3.9 3.2 2.6 4.9 4.3 3.13 3.1 Leucine 5.5 5.3 6.2 5.8 5.2 4.3 1.3 1.1 5.3 4.6 Lysine 5.3 5.2 6.2 5.9 5.3 496 7.9 7.0 5.8 5.8 Methionine 1.6 1.1 1.5 1.4 1.1 0.8 1.1 0.9 1.0 0.8 Methionine sulfoxide 0.2 0.4 0.3 0 , 4 0.1 z1, 2 0.2 '0.3 0.5 0, ° Pheriyl., L4¯ine 3.1 2.9 5, 2 3, 4 2.9 2.5 2.3 2, 0 2.8 2.6 Praline '2.3 2.8 2.8 3.1 3.0 2.9 3 ;;

   3.1 2.5 2.6 Serine 2.8 1.9 3eF3 3.8 4.0 3.5 5, C 4.7 3.9 4.2 Threúnine 3.2 3.4 4.2 3, 9 4.1 3.3 5.1 4.5 4.2 4.3 Tyrosine 2.4 2.3 2.9 2.6 2.5 2.2 l ,, 'y 1.1 2.4 2 , 3
 EMI33.3
 
<tb> Valine <SEP> 3.8 <SEP> 4.2 <SEP> 4.6 <SEP> 4.2 <SEP> 3.9 <SEP> 3.1 <SEP> 5.8 <SEP> 5 , 4 <SEP> 4.0 <SEP> 3.5
<tb>
 
 EMI33.4
 PROTEII # TOTALE ruz7-6,25) 69.3 71.2 55.4 57.8 46.6 41.4 41.4 35.6 42.0 33.1 IAA. 62.2 58.1 72.2 64.6 58.648.9 61.2 55.3 60.6 58.1 Fermentation conditions 62.2 58.1 72.2 64.6 5i ,, 48.9 61.2 55.3 60.6 .58 , 1
 EMI33.5
 
<tb> H
<tb>
 
 EMI33.6
 Yeast -R.'J.odotoru1a glitinis - ### Cc.n'BTa guillicrnondii # lylilien 3 1 II III III 1 1 II 11 il-IL III EtOH c, l -------- l, 6- --------------------------- 1,6 ------------- Cell. ;

  / 1 3.7. 3.2 ',? '5.4 5.2 5.9 6.8?, J 4.8 5.0 Fercnation period F # s.) 72 48 72 72 96 96 48 48 48 48

 <Desc / Clms Page number 34>

 
From the above it emerges that (1) although the yeasts are capable of a good development on an oxygenated hydrocarbon in a simple medium of inorganic salts, the addition of a growth factor (for example an extract of yeast) significantly increases the growth rate as shown in Tables X, XI, XII and XIII and that (2) of the above results each of the yeasts harvested according to the invention exhibits an interesting combination of a high protein content,

   with a high content of essential amino acid and an interesting distribution from the nutritional point of view of amino acid indicating moreover that the application of a yeast growth on an oxygenated hydrocarbon substrate gives an interesting protein by biosynthesis of a extremely economical way. Thus, the present invention is particularly suitable for the preparation of food supplements for humans or animals having an extremely interesting protein and nutritional value.



   It goes without saying that the present invention has been described for purely explanatory and in no way limiting and that any useful modification can be made to it without departing from its scope.

** ATTENTION ** end of DESC field can contain start of CLMS **.

Claims (1)

Revendications 1.- Procédé perfectionné de fermentation aérobie convenant pour la production d'un produit à teneur élevée en protéine, . caractérisé en ce qu'il, comprend l'application, comme source primaire de carbone, d'un hydrocarbure oxygéné fourni par une fraction de pétrole présentant d'environ 1 à 30 atomes de carbone dans la molécule, la conduite de la fermentation sous des conditions aérobies en Utilisant un milieu aqueux de croissance d'un sel minéral, le Maintien', de la température entre environ 20 et 47 C et du pH entre environ 3,0 et 8, Claims 1. An improved process of aerobic fermentation suitable for the production of a product with a high protein content. characterized in that it comprises applying, as a primary carbon source, an oxygenated hydrocarbon supplied by a petroleum fraction having from about 1 to 30 carbon atoms in the molecule, carrying out the fermentation under aerobic conditions Using an aqueous growth medium of a mineral salt, Maintain ', the temperature between about 20 and 47 C and the pH between about 3.0 and 8, 5 et l'application d'un microorganisme choisi dans les groupes suivants EMI34.1 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> cerevisiaa <SEP> CBS <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 8766 <tb> Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> # <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> CBS <tb> Candida <SEP> lipolytica <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 8662 <tb> <Desc/Clms Page number 35> EMI35.1 <tb> <tb> ,Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> Rhodotorula <SEP> glutinis <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 2527 <tb> Candida <SEP> guilliermondii <SEP> ATCC <SEP> 93,90 <tb> EMI35.2 Brevibacterium insectiphilium ÀTGG fi 15528 Yseudomonas ligustri . 5 and the application of a microorganism selected from the following groups EMI34.1 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> cerevisiaa <SEP> CBS <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 8766 <tb> Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> # <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> CBS <tb> Candida <SEP> lipolytica <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 8662 <tb> <Desc / Clms Page number 35> EMI35.1 <tb> <tb>, Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> Rhodotorula <SEP> glutinis <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 2527 <tb> Candida <SEP> guilliermondii <SEP> ATCC <SEP> 93.90 <tb> EMI35.2 Brevibacterium insectiphilium ÀTGG fi 15528 Yseudomonas ligustri. ATCC , 155?2 Pseudomonas pseudomallei ATCC Il 15523 EMI35.3 <tb> <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <tb> EMI35.4 Cellumonas galba ATGQ j4 15520 Brevibactarimn healii ATCC Íi' 15527 Micrococcus cerititans ATCC .J.987 Sarcina sp Q",tB1518 flatick EMI35.5 <tb> <tb> Arthrobacter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 19140 <tb> puis la récolte du produit à haute teneur en protéine, 2.- Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le microorganisme est une levure choisie dans le groupe suivant EMI35.6 le pH étant maintenu entre 3,0 et 7< la température entre 200 et 40 C. ATCC, 155? 2 Pseudomonas pseudomallei ATCC II 15523 EMI35.3 <tb> <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <tb> EMI35.4 Cellumonas galba ATGQ j4 15520 Brevibactarimn healii ATCC Íi '15527 Micrococcus cerititans ATCC .J.987 Sarcina sp Q ", tB1518 flatick EMI35.5 <tb> <tb> Arthrobacter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 19140 <tb> then harvesting the product with a high protein content, 2.- A method according to claim 1, characterized in that the microorganism is a yeast selected from the following group EMI35.6 the pH being maintained between 3.0 and 7 <the temperature between 200 and 40 C. EMI35.7 Saccharomyces cerievisiae CBS EMI35.8 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 8766 <SEP> <tb> 'Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> # <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> CBC <tb> Candida <SEP> lipolytioa <SEP> ATCC <SEP> 8662 <tb> Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ' <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> EMI35.9 khodot6rula glutins AT ce # 2527 EMI35.10 <tb> <tb> Candida <SEP> guilliermondii <SEP> ATCC <SEP> ' <SEP> 9390 <tb> 3. - Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce EMI35.11 que le micrborzanisme est une bactérie choisie parmi les suivantes le pH étant maintenu entre 5,C et 8,5 et la température entre 25 et 45 C. EMI35.7 Saccharomyces cerievisiae CBS EMI35.8 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 8766 <SEP> <tb> 'Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> # <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> CBC <tb> Candida <SEP> lipolytioa <SEP> ATCC <SEP> 8662 <tb> Candida <SEP> pulcherrima <SEP> '<SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> EMI35.9 khodot6rula glutins AT ce # 2527 EMI35.10 <tb> <tb> Candida <SEP> guilliermondii <SEP> ATCC <SEP> '<SEP> 9390 <tb> 3. - Method according to claim 1, characterized in that EMI35.11 that micrborzanism is a bacterium chosen from among the following, the pH being maintained between 5, C and 8.5 and the temperature between 25 and 45 C. EMI35.12 Brevibacterium insectiphilium ATCC 15528- EMI35.13 <tb> <tb> Pscudomonas <SEP> ligustri <SEP> ATCC <SEP> 15522 <tb> <Desc/Clms Page number 36> EMI36.1 <tb> <tb> <tb> Pseudomonas <SEP> pseudomallei <SEP> ATCC <SEP> 15523 <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <tb> Cellumonas <SEP> p;alba <SEP> ATCC <SEP> 15526 <tb> Brevibacterium <SEP> healii <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 15527 <tb> Micrococcus <SEP> cerificans <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 14987 <tb> Sarcina <SEP> sp <SEP> QMB1518 <SEP> Natick <tb> Arthrobacter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 19140 <tb> 4.- Procède suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'hydrocarbure oxygéné est un alcool, un aldéhyde, un ester, un éther, une cétone ou un acide. EMI35.12 Brevibacterium insectiphilium ATCC 15528- EMI35.13 <tb> <tb> Pscudomonas <SEP> ligustri <SEP> ATCC <SEP> 15522 <tb> <Desc / Clms Page number 36> EMI36.1 <tb> <tb> <tb> Pseudomonas <SEP> pseudomallei <SEP> ATCC <SEP> 15523 <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <tb> Cellumonas <SEP> p; alba <SEP> ATCC <SEP> 15526 <tb> Brevibacterium <SEP> healii <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 15527 <tb> Micrococcus <SEP> cerificans <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 14987 <tb> Sarcina <SEP> sp <SEP> QMB1518 <SEP> Natick <tb> Arthrobacter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> # <SEP> 19140 <tb> 4. A method according to claim 1, characterized in that the oxygenated hydrocarbon is an alcohol, an aldehyde, an ester, an ether, a ketone or an acid. 5.- Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'hydrocarbure oxygéné est un mélange d'alcools, d'aldéhydes, de cétones et d'esters contenant d'environ 1 à environ 18 atomes de carbone dans la molécule. 5. A method according to claim 1, characterized in that the oxygenated hydrocarbon is a mixture of alcohols, aldehydes, ketones and esters containing from about 1 to about 18 carbon atoms in the molecule. 6.- Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'hydrocarbure oxygéné comprend un alcool contenant de 1 à 18 atomes de carbone dans la molécule.. 6. A method according to claim 1, characterized in that the oxygenated hydrocarbon comprises an alcohol containing from 1 to 18 carbon atoms in the molecule. 7.- Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce que l'alcool est essentiellement de l'alcool éthylique. 7. A method according to claim 6, characterized in that the alcohol is essentially ethyl alcohol. 8.- Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce que l'alcool est : l'alcool méthylique, '.,-'alcool secbutylique, l'alcool isopropylique, l'alcool n-butylique ou l'alcool-cétylique. 8. A method according to claim 6, characterized in that the alcohol is: methyl alcohol, '., -' secbutyl alcohol, isopropyl alcohol, n-butyl alcohol or cetyl alcohol. 9.- procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce que l'hydrocarbure oxygéné consiste essentiellement en méthyl éthyl. cétone. 9. A process according to claim 4, characterized in that the oxygenated hydrocarbon consists essentially of methyl ethyl. ketone. 10.- Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que la levure est développée en présence d'un milieu nutritif contenant un extrait de levure. 10. A method according to claim 2, characterized in that the yeast is developed in the presence of a nutrient medium containing a yeast extract. 11.- Procédé suivant la revendication 3, caractérisé en ce que le microorganisme est Micrococcus cerificans (14987). 11. A method according to claim 3, characterized in that the microorganism is Micrococcus cerificans (14987). 12.- Procédé suivant, la revendication 3, caractérisé en ce <Desc/Clms Page number 37> que le micro organisme est Micrococcus (14987) et l'hydrocarbure oxygéné est l'alcool éthylioue. 12.- A method according to claim 3, characterized in that <Desc / Clms Page number 37> that the microorganism is Micrococcus (14987) and the oxygenated hydrocarbon is ethyl alcohol. 13.- Procédé de fermentation aérobie continu convenant pour la production d'un produit à teneur élevée en protéine, caractérisé en ce qu'on fournit en'continu, comme source primaire de carbone, un hydrocarbure oxygéné provenant d'une fraction de pétrole présentant d'environ 1 à environ 30 atomes de carbone dans la molécule et on admet en continu un milieu de culture ne limitant pas la fermentaton qui est liquide et aqueuse et comprenant un sel minéral et un excès d'un gaz oxygéné, dans un réacteur sous agitation énergique contenant ledit hydrocarbure oxygéné, un milieu aqueux et un mictoorganisme préalablement inoculé dans ce réacteur, la température de celui-ci étant maintenue entre 20 .et 47 C, et le pH entre 3,0 et 8,0, le .microorganisme étant choisi parmi les suivants: 13. Continuous aerobic fermentation process suitable for the production of a product with a high protein content, characterized in that there is continuously supplied, as the primary carbon source, an oxygenated hydrocarbon originating from a petroleum fraction having from about 1 to about 30 carbon atoms in the molecule and a culture medium which does not limit fermentation which is liquid and aqueous and comprising an inorganic salt and an excess of an oxygenated gas, is continuously admitted into a reactor under vigorous stirring containing said oxygenated hydrocarbon, an aqueous medium and a mictoorganism previously inoculated into this reactor, the temperature of the latter being maintained between 20. and 47 C, and the pH between 3.0 and 8.0, the .microorganism being chosen from the following: EMI37.1 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> cerevisiae <SEP> CBS <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> 8766 <tb> Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> ' <SEP> CBS <tb> Candida <SEP> lipolytica <SEP> ATCC <SEP> 8662 <tb> Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> Rhodotorula <SEP> glutinis <SEP> ' <SEP> AYCC <SEP> 2527 <tb> Candida <SEP> guilliermondii <SEP> ATCC <SEP> 9390 <tb> Brevibacterium <SEP> insectiphilium <SEP> ATCC <SEP> 15528 <tb> Pseudomonas <SEP> ligustri <SEP> ATCC <SEP> 15522 <tb> Pseudomonas <SEP> pseudomallei <SEP> ATCC <SEP> 15523 <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <SEP> . <SEP> <tb> EMI37.1 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> cerevisiae <SEP> CBS <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> 8766 <tb> Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> '<SEP> CBS <tb> Candida <SEP> lipolytica <SEP> ATCC <SEP> 8662 <tb> Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> Rhodotorula <SEP> glutinis <SEP> '<SEP> AYCC <SEP> 2527 <tb> Candida <SEP> guilliermondii <SEP> ATCC <SEP> 9390 <tb> Brevibacterium <SEP> insectiphilium <SEP> ATCC <SEP> 15528 <tb> Pseudomonas <SEP> ligustri <SEP> ATCC <SEP> 15522 <tb> Pseudomonas <SEP> pseudomallei <SEP> ATCC <SEP> 15523 <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <SEP>. <SEP> <tb> .Cellumonas <SEP> galba <SEP> ATCC <SEP> 15526 <tb> Brevibacterium <SEP> healii <SEP> ATCC <SEP> 15527 <tb> Micrococcus <SEP> cerificans <SEP> ATCC <SEP> 14987 <tb> Sarcina <SEP> sp <SEP> QMB1518 <SEP> Natick <tb> Arthroba <SEP> cter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 19140 <tb> <Desc/Clms Page number 38> puis on récolte ensuite le produit à haute teneur en protéine. .Cellumonas <SEP> galba <SEP> ATCC <SEP> 15526 <tb> Brevibacterium <SEP> healii <SEP> ATCC <SEP> 15527 <tb> Micrococcus <SEP> cerificans <SEP> ATCC <SEP> 14987 <tb> Sarcina <SEP> sp <SEP> QMB1518 <SEP> Natick <tb> Arthroba <SEP> cter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 19140 <tb> <Desc / Clms Page number 38> then the high protein product is then harvested. 14.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisa en ce que la durée de séjour du liquide est comprise entre 1,5 et 4 fois la durée minimum de génération pour le microorganisme particulier. 14.- The method of claim 13, characterized in that the residence time of the liquid is between 1.5 and 4 times the minimum generation time for the particular microorganism. 15.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que le gaz oxygéné admis dans le réacteur est admis à raison d'environ 0,5 à 4 volumes d'air par volume du liquide contenu dans le réacteur par minute par pourcentage en poids de cellules sèches dans le réacteur par durée de séjour du liquide en heures, 16.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce qu'on admet en continu un mélange de. 0,1 à 10% en poids d'hydro- carbures oxygénés. 15.- A method according to claim 13, characterized in that the oxygenated gas admitted into the reactor is admitted at a rate of about 0.5 to 4 volumes of air per volume of the liquid contained in the reactor per minute per percentage by weight dry cells in the reactor per residence time of the liquid in hours, 16. A method according to claim 13, characterized in that continuously admits a mixture of. 0.1 to 10% by weight of oxygenated hydrocarbons. 17.- Procédé suivant la revendication 16, caractérisé en ce que le microorganisme est Mcrococcus (14987) et l'hydrocarbure oxygéné est l'alcool éthylique. 17. A method according to claim 16, characterized in that the microorganism is Mcrococcus (14987) and the oxygenated hydrocarbon is ethyl alcohol. 18.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que le microorganisme est une levure choisie dans le groupe sui- vant le pH étant maintenu entre 3,0 et 7,5, la température entre 20 et 40 C. EMI38.1 <tb> <tb> 18.- The method of claim 13, characterized in that the microorganism is a yeast selected from the following group, the pH being maintained between 3.0 and 7.5, the temperature between 20 and 40 C. EMI38.1 <tb> <tb> Saccharomyces <SEP> cerevisiae <SEP> CBS <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> 8766 <tb> Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> CBS <tb> Candida <SEP> lipolyti <SEP> ca <SEP> ATCC <SEP> 8662 <tb> Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> Rhodotorula <SEP> glutinis <SEP> ATCC <SEP> 2527 <tb> Candida <SEP> guilliermondi <SEP> ATCC <SEP> 9390 <tb> 19.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que le microorganisme est une bactérie choisie parmi les suivantes le pH étant maintenu entre 5,0 et 8,5 et la température entre 25 et 45 C. Saccharomyces <SEP> cerevisiae <SEP> CBS <tb> Saccharomyces <SEP> acidifaciens <SEP> ATCC <SEP> 8766 <tb> Trigonopsis <SEP> variabilis <SEP> CBS <SEP> 1040 <tb> Hansenula <SEP> anomala <SEP> CBS <tb> Candida <SEP> lipolyti <SEP> ca <SEP> ATCC <SEP> 8662 <tb> Candida <SEP> pulcherrima <SEP> ATCC <SEP> 9889 <tb> Rhodotorula <SEP> glutinis <SEP> ATCC <SEP> 2527 <tb> Candida <SEP> guilliermondi <SEP> ATCC <SEP> 9390 <tb> 19. A method according to claim 13, characterized in that the microorganism is a bacterium chosen from the following, the pH being maintained between 5.0 and 8.5 and the temperature between 25 and 45 C. Brevibacterium insectiphilium ATCC 15528 <Desc/Clms Page number 39> EMI39.1 <tb> <tb> Pseudomonas <SEP> liguatri <SEP> ATCC <SEP> 15522 <tb> Peudomonas <SEP> pseudomallei <SEP> , <SEP> ATCC <SEP> 15523 <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <tb> Cellumonas <SEP> galba <SEP> ATCC <SEP> 15526 <SEP> <tb> Brevibacterium <SEP> healii <SEP> ' <SEP> ATCC <SEP> 15527 <tb> Micrococcus <SEP> cerificans <SEP> , <SEP> ATCC <SEP> 14987 <tb> Sarcina <SEP> sp <SEP> QMB1518 <SEP> Natick <tb> Arthrobacter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> F <SEP> 19140 <tb> 20.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que l'alcool est essntiellement de l'alcool éthylique. Brevibacterium insectiphilium ATCC 15528 <Desc / Clms Page number 39> EMI39.1 <tb> <tb> Pseudomonas <SEP> liguatri <SEP> ATCC <SEP> 15522 <tb> Peudomonas <SEP> pseudomallei <SEP>, <SEP> ATCC <SEP> 15523 <tb> Pseudomonas <SEP> orvilla <SEP> ATCC <SEP> 15524 <tb> Alcaligens <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> 15525 <tb> Cellumonas <SEP> galba <SEP> ATCC <SEP> 15526 <SEP> <tb> Brevibacterium <SEP> healii <SEP> '<SEP> ATCC <SEP> 15527 <tb> Micrococcus <SEP> cerificans <SEP>, <SEP> ATCC <SEP> 14987 <tb> Sarcina <SEP> sp <SEP> QMB1518 <SEP> Natick <tb> Arthrobacter <SEP> sp <SEP> ATCC <SEP> F <SEP> 19140 <tb> 20.- A method according to claim 13, characterized in that the alcohol is essentially ethyl alcohol. 21.- Procédé suivant la revendication 18, caractérisé en ce que la levure est développée en présence d'un milieu nutritif contenant un extrait de.levure, 22. - Procédé suivant la revendication 19, caractérisé en ce, que la durée de séjour dans le réacteur est de 1,5'à 4 heures. 21.- The method of claim 18, characterized in that the yeast is developed in the presence of a nutrient medium containing an extract of yeast, 22. - Process according to claim 19, characterized in that the residence time in the reactor is 1.5 'to 4 hours. 23.- Procédé suivant la revendication 13, caractérisé en ce que le mélange admis contient 0,5 % à 5% de l'hydrocarbure oxy- géné et l'air enrichi en oxygène contient jusqu'à 90% en oxygène, 24.- Procédé perfectionné de fermentation aérobie convenant pour la production d'un produit teneur élevée en protéine, carac- térisé en ce qu'on utilise comme source primaire de carbone, un hydrocarbure oxygéné provenant d'une fraction de pétrole présentant de 1 à 30 atomes de carbone dans la moléculei on poursuit la fer- mentation sous des conditions.aérobies en utilisant un milieu aqueux renfermant un sel minéral et l'on maintient la température entre 20 et 47 C, et le pH entre 3,0 et 8,5, on utilise un micro- organisme et on récolte alors un produit protéinique à teneur élevée en protéine. 23.- Process according to claim 13, characterized in that the admitted mixture contains 0.5% to 5% of the oxygenated hydrocarbon and the oxygen-enriched air contains up to 90% of oxygen, 24.- An improved process of aerobic fermentation suitable for the production of a product with a high protein content, characterized in that as the primary source of carbon, an oxygenated hydrocarbon from a petroleum fraction having from 1 to 30 carbon atoms in the molecule, fermentation is continued under aerobic conditions using an aqueous medium containing an inorganic salt and the temperature is maintained between 20 and 47 C, and the pH between 3.0 and 8, 5, a microorganism is used and a protein product with a high protein content is then harvested. <Desc/Clms Page number 40> <Desc / Clms Page number 40> 25,.- Produit de fermentation alimentaire, caractérisa en ce qu'il contient plus d'environ 75% en poids de protéine totale (N x 6,25) et une teneur en graisse inférieure à environ 6% en poids, 26,- Produit de fermentation alimentaire,suivant la revendication 25, ou tel que défini dans la revendication 24, caractérisé en ce que sa teneur en protéine totale est supérieure à' environ 85% en poids. bactérienne 27.- Produit de fermentation/alimentaire, caractérisé en ce qu'il possède une teneur en protéine totale supérieure à environ 76% en poids (N x 6,25) et une teneur en graisse totale inférieure à environ 6% en poids. 25, .- Food fermentation product, characterized in that it contains more than about 75% by weight of total protein (N x 6.25) and a fat content of less than about 6% by weight, 26, - A food fermentation product as claimed in claim 25 or as defined in claim 24 characterized in that its total protein content is greater than about 85% by weight. bacterial 27.- Fermentation / food product, characterized in that it has a total protein content greater than about 76% by weight (N x 6.25) and a total fat content of less than about 6% by weight. 28.- Produit obtenu pour le procédé suivant l'une ou l'autre des revendications 1 à 24. 28.- Product obtained for the process according to any one of claims 1 to 24.
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