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WO2021152250A1 - Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d'un extrait de tamarindus indica l. et / ou d'une composition le comprenant - Google Patents

Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d'un extrait de tamarindus indica l. et / ou d'une composition le comprenant Download PDF

Info

Publication number
WO2021152250A1
WO2021152250A1 PCT/FR2021/050135 FR2021050135W WO2021152250A1 WO 2021152250 A1 WO2021152250 A1 WO 2021152250A1 FR 2021050135 W FR2021050135 W FR 2021050135W WO 2021152250 A1 WO2021152250 A1 WO 2021152250A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
healthy
extract
skin
mucous membranes
volume
Prior art date
Application number
PCT/FR2021/050135
Other languages
English (en)
Inventor
Vincent Bardey
Florence Henry
Camille MAS
Philippe Moser
Nicolas Pelletier
Original Assignee
Basf Beauty Care Solutions France Sas
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Beauty Care Solutions France Sas filed Critical Basf Beauty Care Solutions France Sas
Publication of WO2021152250A1 publication Critical patent/WO2021152250A1/fr

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Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists

Definitions

  • the present invention relates to the cosmetic, nutraceutical and / or pharmaceutical use, in particular dermatological, of an extract of leaves of Tamarindus indica L. and / or of a composition comprising it for maintaining and / or increasing the expression of molecules of the extracellular matrix of the skin and / or the mucous membranes, the extract not being obtained by using butylene glycol as extraction solvent.
  • the structure and properties of the skin change under the effect of complex biological, physical and biomechanical processes, leading to a loss of elasticity, firmness, density of the dermis, especially under the effect of the modification of the molecules of the matrix extracellular.
  • the extracellular matrix of the skin and mucous membranes is made up of the association of three types of molecules: fibers: collagen and elastin, glycoproteins: less abundant than fibers but have a more important role in cell adhesion, such as fibronectin and laminin, highly hydrated polysaccharides constituting a gel filling the matrix.
  • This matrix plays a major role in maintaining the structure and properties of the skin, in particular the elasticity, firmness and density of the dermis. Since these molecules are synthesized in particular by fibroblasts and keratinocytes, the renewal of the latter is essential for maintaining the biomechanical properties of the skin.
  • Elastin is a protein that makes up elastic fibers by associating with other molecules such as fibrillins and MAGPs (Microfibrillar Associated Glycoproteins).
  • Elastin is synthesized in the form of soluble tropoelastin which acquires its physicochemical properties (insolubility, elasticity) after its intra- and intermolecular crosslinking by a lysyl oxidase (LOX) and its deposition on the microfibrils.
  • the elastic fibers are responsible for the elastic property of the organs that contain them (vessels, pulmonary parenchyma, elastic cartilages, skin, etc.).
  • the name elastin is reserved for the protein forming the amorphous portion of elastic fibers and giving them their elasticity.
  • the aging of the skin and mucous membranes is associated with a modification of the fibrillar networks, in particular that of the elastic fibers which degrade and no longer reform correctly.
  • Collagen is a constituent protein of the extracellular matrix (ECM) present in large quantities in the tissues of vertebrates. This is a large family comprising 29 different types.
  • Type I collagen is found in particular in many human tissues such as tendons, ligaments, cornea and skin, located more precisely in the dermis.
  • Type I collagen is the major collagen in the skin.
  • Fibrillar collagen is formed from procollagen fibers, then assembled into a network, then stabilized by crosslinking. It is collagen that gives tissues their mechanical strength, and as a result, helps maintain their firmness.
  • the molecules of the extracellular matrix are therefore the subject of numerous studies and innovations in the field of cosmetics for the development and improvement of cosmetic active ingredients aimed at maintaining the biomechanical properties of the skin.
  • Tamarindus indicaL is a 12-15 m tree that can reach 30 m in height, nowadays distributed in a large number of warm regions of the globe. It is most likely originally from tropical Africa (especially Burkina Faso) from where it spread in the past in all the hot parts of the globe.
  • the main production areas of T. indica are in Asia (India, Bangladesh, Sri Lanka, Thailand, Vietnam and Indonesia) and America (Mexico, Caribbean, Costa Rica and Brazil)
  • Tamarindus indica is mainly used for its fruits, especially the pulp, which has a wide variety of domestic and industrial uses.
  • the seed is commercially available as a food additive to improve the viscosity and texture of processed foods.
  • the leaves, flowers and immature pods are also edible. The leaves and flowers are used in making curries, salads, stews and soups in many countries, especially in times of food shortage but also as a bite in tincture.
  • Tamarindus indica leaves are also used for various applications in traditional medicine, including in wound healing, treatment of inflammation, treatment of snakebites, diarrhea and liver pain.
  • patent application US2012189725 discloses the inhibitory effect of the elastase, TNF- ⁇ and MMPI activities of an extract of Tamarindus indica leaf obtained with butylene glycol as an extraction solvent.
  • Another extract of Tamarind pericarp exhibiting anti-elastase and anti-collagenase activities has been described in application US2008 / 286387. It is obtained by methanol extraction of the polyphenols contained in the pericarp of Tamarind.
  • the first subject of the present invention is the cosmetic and / or nutraceutical use of an extract of Tamarindus indica leaves to maintain and / or increase the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin and / or healthy mucous membranes, the extract not being obtained by using butylene glycol as extraction solvent.
  • a cosmetic care process characterized in that it comprises the topical application to at least one area of healthy skin and / or healthy mucosa of an extract of Tamarindus indica as defined above. , or of a cosmetic composition comprising it, to maintain and / or increase the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin, of healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, preferably firmness and / or elasticity.
  • a subject of the invention is also an extract of Tamarindus indica as defined above, or of a dermatological composition comprising it, for its use in the treatment and / or prevention of pathologies of the skin and / or of the mucous membranes involving loss of expression of molecules of the extracellular matrix of the skin and / or mucous membranes, and / or loss of expression of collagen fibers and / or elastic fibers of the skin and / or mucous membranes, and / or a loss of the biomechanical properties of the skin and / or of the mucous membranes, in particular a loss of firmness of the skin and / or of the mucous membranes, and / or a loss of the proliferation of fibroblasts of the skin and / or of the mucous membranes, and / or loss of keratinocyte differentiation of the skin and / or mucous membranes.
  • the term “cosmetic use and / or composition” is understood to mean a non-pharmaceutical use and / or composition, that is to say which is not intended for therapeutic use and is applied to a non-pharmaceutical use. so-called healthy part of the body, in particular in a so-called healthy area of the skin and / or mucous membranes.
  • the term "nutraceutical use and / or nutraceutical composition” means a use and / or a composition for non-pharmaceutical oral administration, that is to say which does not require therapeutic treatment.
  • the term “healthy skin”, “healthy mucosa” means an area of skin or mucosa to which the extract according to the invention is applied and said to be “non-pathological” by a. dermatologist, that is to say not presenting any infection, scar, disease or skin condition such as candidiasis, impetigo, psoriasis, eczema, acne or dermatitis, or wounds or injuries.
  • the term “mucosa (s)” denotes the ocular mucosa, the vaginal mucosa, the urogenital mucosa and / or the oral mucosa, in particular the buccal, labial and / or gingival mucosa, preferably the ocular mucosa and / or buccal, and more preferably, the labial and / or ocular mucosa.
  • the term “maintaining and / or increasing the expression of the molecules of the extracellular matrix” is understood to mean preventing a decrease and / or increasing the level of gene expression, that is to say mRNAs. (Messenger RNA), and / or protein synthesis of molecules of the extracellular matrix of healthy skin and / or healthy mucous membranes, treated with the extract according to the invention, relative to the level of gene expression and / or of protein synthesis detected in the absence of the extract according to the invention.
  • it involves maintaining and / or increasing the gene expression of molecules of the extracellular matrix.
  • the term “molecules of the extracellular matrix” means all the fibers and / or glycoproteins of the extracellular matrix of healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • they are collagen fibers and / or elastic fibers of the extracellular matrix of healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • the present invention more particularly aims to maintain and / or increase the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of the extracellular matrix of healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • the term “maintaining and / or increasing the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes” is understood to mean preventing a decrease and / or increasing the level of 'gene expression, that is to say the expression of mRNAs (messenger RNAs), and / or protein synthesis of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes treated with the extract according to the invention, relative to the gene expression and / or protein synthesis detected in the absence of the extract according to the invention.
  • it is about maintaining and / or increasing the protein synthesis of collagen fibers and / or elastic fibers.
  • the term “collagen” is understood to mean the type I, III, IV, V, VI, VII, XII, XIII, XIV, XVI, XVII, XXIV, XXIX type collagen proteins present in the skin. healthy and / or healthy mucous membranes.
  • the collagen fibers are chosen from type I, III, IV, V and / or XIV collagen fibers, preferably type I, IV and / or V collagen fibers, even more preferably type I, IV and / or V collagen fibers. type I collagen.
  • type I collagen protein is understood to mean the collagen protein present in the skin, the cornea, the tendons, the ligaments, the bones, more preferably in the skin.
  • the extract of Tamarindus indica leaves according to the invention is therefore used to maintain and / or increase the protein expression of type I collagen in healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • it is an increase relative to the level of gene and / or protein expression of collagen measured in dermal fibroblast cells cultured in vitro in the absence of the extract of Tamarindus indica according to the invention.
  • it is an increase in the level of protein expression of type I collagen of at least 50%, preferably of at least 200% and even more preferably of at least 400% relative to the level of protein expression measured in dermal fibroblast cells cultured in vitro in the absence of the extract according to the protocol as described for example in Example 4.
  • the measurement of the increase in protein expression is carried out by in vitro measurement, preferably after immunostaining, for example according to the method as presented in Example 4 and / or 5.
  • the term “immunostaining” is understood to mean the technique consisting in fixing an antibody specific for a given collagen protein, preferably the type I collagen protein, on said protein, with a view to being revealed by microscopic observation.
  • the revelation is done by confocal microscopy.
  • the measurement of the increase in protein expression is carried out by in vitro measurement, preferably after RT-qPCR, for example according to the method as presented in Example 6.
  • the extract according to the invention is used to maintain and / or increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, preferably firmness and / or elasticity and / or density of healthy skin and / or healthy mucous membranes, more preferably the firmness and / or elasticity of healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes means firmness and / or elasticity and / or density and / or resistance to compression and / or resistance to compression. stretch and / or flexibility and / or extensibility and / or the ability to resist deformation of healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • it is the firmness and / or elasticity and / or density of healthy skin and / or healthy mucous membranes, in particular of the healthy dermis, more preferably it is the firmness and / or elasticity of healthy skin and / or healthy mucous membranes, in particular of the healthy dermis.
  • biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes can be studied by measurement techniques known to those skilled in the art, in particular by traction, by torsion, suction, indentation, levatometry, ballistometry, by high-resolution ultrasound scanner or elastography, preferably by indentation, by high resolution ultrasound scanner.
  • the term “maintaining and / or increasing the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes” is understood to prevent a reduction and / or increase in the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes. , preferably the firmness and / or elasticity of healthy skin and / or healthy mucous membranes, in particular healthy dermis, treated with the extract according to the invention with respect to the biomechanical properties of healthy skin and / or mucous membranes healthy, measured in the absence of the extract according to the invention.
  • this is an increase of at least 5%, preferably 10%, in the biomechanical properties of the healthy skin and / or of the healthy mucous membranes treated with the extract of Tamarindus indica according to the invention compared to the biomechanical properties.
  • healthy skin and / or healthy mucous membranes measured in the absence of the extract of Tamarindus indica according to the invention.
  • maintaining and / or increasing the biomechanical properties of healthy skin makes it possible to limit and / or reduce the sagging of healthy skin of the face, in particular in the cheeks and / or the angular zone of the face ( commonly referred to as roundness of the face or V of the face).
  • the intrinsic factors can be tissue aging of the skin and / or mucous membranes, i.e. chrono-induced aging, which is found for example in so-called mature skin, i.e. skins of persons over 40 years of age.
  • This loss of firmness can also appear under the effect of extrinsic factors such as aggressive environmental agents such as UV radiation, pollution, smoke, tobacco, toxins, climatic and / or mechanical aggressions.
  • the increase in firmness can be measured according to conventional methods, in particular by in vivo measurement by the fringe projection method using a Cutometer®, a DensiScore®, a torquemeter or even a DynaSKIN associated with a DermaTOP.
  • the term “maintaining and / or increasing the elasticity of healthy skin and / or healthy mucous membranes” is understood to mean preventing the reduction and / or causing the increase at aesthetic purposes, the elasticity of healthy skin and / or healthy mucous membranes which have lost elasticity in particular under the effect of intrinsic factors such as tissue aging of the skin and / or mucous membranes, that is, i.e. chrono-induced aging, which is found for example in so-called mature skin i.e. the skin of people over 40 years old, cellular stress, non-pathological physiological variations such as change in diet, hormonal variations, especially during puberty, pregnancy, menopause and / or andropause.
  • This loss of elasticity can also appear under the effect of extrinsic factors such as aggressive environmental agents such as UV radiation, pollution, smoke, tobacco, toxins, climatic and / or mechanical aggressions. .
  • the increase in elasticity can be measured according to conventional methods, in particular by in vivo measurement using a Cutometer®, a torquemeter or even a DynaSKIN.
  • the extract of Tamarindus indica according to the invention can be used to maintain and / or increase the proliferation of fibroblasts in healthy skin and / or in healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the differentiation of keratinocytes in the skin. healthy and / or healthy mucous membranes.
  • fibroblasts and / or “keratinocytes” means “healthy” fibroblasts and / or “healthy” keratinocytes, that is to say not showing any pathology.
  • the term “increasing the proliferation of fibroblasts” is understood to mean an increase in the proliferation of fibroblasts of at least 5%, preferably of at least 10% and even more preferably of at least 20%, relative to the level of fibroblast proliferation measured in the absence of the extract of T. indica according to the invention.
  • the measurement of the proliferation of fibroblasts can be carried out by any standard method known to those skilled in the art. It can be carried out by assaying DNA, by incorporation of fluorescent nucleic bases, by incorporation of tritiated thymidine, by labeling of proteins specific to proliferating cells with Ki67, by counting cells with a flow cytometer and / or by measurement. density optical. Advantageously, it is carried out by in vitro measurement, by measurement of the optical density, for example according to the method as presented in Example 2.
  • the term “increasing the differentiation of keratinocytes” is understood to mean an increase in the differentiation of keratinocytes of at least 5%, preferably of at least 10% and even more preferably of at least 20%, relative to the level of differentiation of the keratinocytes measured in the absence of the extract of T. indica according to the invention.
  • the measurement of the differentiation of the keratinocytes can be carried out by any conventional methods known to those skilled in the art, in particular by assaying the involucrine and / or the filaggrin.
  • it is carried out by in vitro measurement, by measurement of the synthesis of involucrine, for example according to the method as presented in Example 3.
  • the extract of Tamarindus indica according to the invention is not obtained using butylene glycol as extraction solvent.
  • the extract of Tamarindus indica leaves according to the invention is useful for maintaining and / or increasing the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin, of healthy mucous membranes, and / or for maintaining and / or or increase the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, preferably firmness and / or elasticity and / or to maintain and / or increase the proliferation of fibroblasts in healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the differentiation of keratinocytes in healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • the extract of Tamarindus indica leaves according to the invention is useful for increasing the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin, of healthy mucous membranes, and / or for increasing the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, preferably firmness and / or elasticity and / or to increase the proliferation of fibroblasts from healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to increase the differentiation of keratinocytes from healthy skin and / or healthy mucous membranes, more preferably to increase firmness.
  • the extract according to the invention can be obtained by any method of extracting plants known to a person skilled in the art.
  • the extraction can be carried out in particular by maceration or by other processes such as leaching, decoction, extraction under reflux, percolation, flash-expansion, extraction assisted by enzymes, extrusion, extraction by means of ultrasound and / or microwave.
  • the extraction is carried out by maceration.
  • the leaves are preferably dried and / or crushed before extraction.
  • the extract according to the invention may in particular be obtained by extraction in a solvent or mixture of solvents, preferably a polar protic solvent with the exception of butylene glycol, and advantageously in water, an alcohol, a glycol, a polyol. , a water / alcohol, water / glycol or water / polyol mixture (such as water mixed with ethanol, glycerol and / or other glycols such as xylitol and / or propanediol, etc.) from 99/1 to 1/99 (w / w), advantageously in water as the sole solvent.
  • a solvent or mixture of solvents preferably a polar protic solvent with the exception of butylene glycol
  • water an alcohol, a glycol, a polyol.
  • a water / alcohol, water / glycol or water / polyol mixture such as water mixed with ethanol, glycerol and / or other glycols such as xylitol and / or propanedio
  • protic polar solvent is understood to mean a solvent having a dipole moment and at least one hydrogen capable of intervening in hydrogen bonds.
  • the extract is obtained by aqueous extraction.
  • extract obtained by aqueous extraction is understood to mean any extract obtained by extraction with an aqueous solution, with the exception of solutions comprising butylene glycol, containing more than 60% by weight, advantageously at least 70%. % by weight, in particular at least 80% by weight, more particularly at least 90% by weight, in particular at least 95% by weight, of water relative to the total weight of the aqueous solution, even more advantageously not containing no glycol and in particular not containing alcohol, preferably containing only water.
  • the extract according to the invention is not obtained by extraction with an ethyl acetate solvent.
  • the extraction could be carried out in the presence of a solvent of C 6 -Ci 6 dialkyl carbonate type.
  • a solvent of C 6 -Ci 6 dialkyl carbonate type preferably chosen from dioctyl carbonate and diethylhexyl carbonate with stirring for 2 hours at 80 ° C.
  • the extraction can be carried out in the presence of a nonionic surfactant, preferably chosen from lauryl glucoside marketed under the name Plantacare® 1200UP by BASF or else caprylyl / capryl glucoside (Plantacare® 810 UP), preferably caprylyl / capryl glucoside (Plantacare® 810 UP).
  • a nonionic surfactant preferably chosen from lauryl glucoside marketed under the name Plantacare® 1200UP by BASF or else caprylyl / capryl glucoside (Plantacare® 810 UP), preferably caprylyl / capryl glucoside (Plantacare® 810 UP).
  • the concentration by weight of the nonionic surfactant may be between 0.5% and 5%, advantageously between 0.5 and 1%, again advantageously it will be 1% by weight relative to the total weight of the extracted and solvent mixture.
  • the extraction can be carried out with a solvent comprising coconut water.
  • the extract can be obtained by extraction under supercritical conditions (CO2) in the presence of a co-solvent.
  • CO2 supercritical conditions
  • the co-solvent will be ethanol.
  • the extraction can be carried out by aqueous extraction under subcritical conditions.
  • subcritical conditions extraction is understood to mean extraction in the presence of water, under conditions of temperature above 100 ° C. and pressure below 22.1 MPa (221 bars), such that the water remains at the temperature. liquid state but has a lower viscosity and surface tension than water at room temperature, increasing its dielectric constant.
  • the extraction pressure will for example be between 10 MPa (100 bars) and 25 MPa (250 bars), preferably between 15 and 22.1 MPa (150 and 221 bars).
  • the extraction can be carried out from dry or fresh material, advantageously dry, in an amount of 0.1% to 20% by weight, advantageously from 1% to 10%, very advantageously from 5% to 10% , and even more advantageously 10%, by weight relative to the total weight of the material and of the extraction solvent.
  • the extraction can be carried out at a temperature ranging from 4 ° C to 300 ° C, including room temperature, that is to say a temperature of 20 ° C. In a preferred embodiment of the invention, the extraction will be carried out at a temperature of 60 ° C to 90 ° C, preferably from 70 ° C to 85 ° C, more preferably at a temperature of 80 ° C.
  • the extraction will be carried out at a temperature of 4 ° C to 25 ° C, again preferably from 4 ° C to 20 ° C, again advantageously at room temperature, that is to say - say at 20 ° C.
  • the extraction will be carried out in water under subcritical conditions, at a temperature ranging from 100 ° C to 300 ° C, advantageously from 120 ° C to 250 ° C, again advantageously between 140 ° C and 200 ° C.
  • the extraction can be carried out at a single given temperature or at successive increasing temperatures.
  • the extraction will be carried out at a single temperature of 160 ° C.
  • it will be conducted according to a gradient of three increasing temperatures between 100 ° C and 200 ° C, such as 120 ° C, 140 ° C then 160 ° C or 110 ° C, 130 ° C then 150 ° C , or alternatively 120 ° C, 145 ° C then 170 ° C.
  • the extraction can be carried out during a period ranging from 1 hour to 20 hours, preferably during a period ranging from 2 hours to 16 hours. Again preferably, said extraction is carried out during a period of 1 hour.
  • the extract of Tamarindus indica leaves can be obtained by extracting a quantity of dry or fresh material, advantageously dry, in an amount of 0.1% to 20% by weight, advantageously from 1% to 10%, very advantageously of 5% to 10%, and even more advantageously 10%, by weight relative to the total weight of the material and the extraction solvent by weight of dry leaf material relative to the total weight of the mixture consisting of the solvent and the sheets (p / p).
  • the extract is obtained by extracting an amount of 10% by weight of dry matter from the leaves, relative to the total weight of the mixture consisting of the solvent, preferably water, and the leaves (w / w).
  • the extracts obtained are then preferably centrifuged and / or filtered and / or distilled, preferably centrifuged, in order to recover the active soluble fraction (crude extract). Additional decolorization and / or deodorization and / or fractionation and / or purification steps can be carried out on the extract at any stage of the extraction and according to techniques known to those skilled in the art.
  • the extract according to the invention can then be concentrated by evaporation of the solvent, by use of membrane technologies or dried, for example by lyophilization, zeodration or by atomization.
  • the extract of Tamarindus indica leaves obtained according to the invention can be sterilized.
  • the extract is obtained by extraction in water as the sole solvent of an amount of 10% (w / w) of crushed leaves relative to the total weight of the solvent and of the material, with stirring and for a period of one hour at a temperature of 80 ° C. After cooling, the mixture is centrifuged and the extract is filtered. The extract is obtained in liquid form under the conditions described in Example la).
  • the extract prepared according to the preceding procedure is diluted with glycerin, so as to obtain a final glycerin concentration of 80% (v / v) by volume of glycerin by relative to the total volume of glycerin and extract.
  • the extract is obtained in liquid form under the conditions described in Example lb).
  • the extract is obtained by maceration in water as a single solvent of an amount of 10% (w / w) by weight of crushed leaves relative to the total weight of solvent and the material, with stirring and for a period of 16 hours at a temperature of 4 ° C.
  • the mixture is centrifuged and the extract is then filtered.
  • the extract is then diluted so as to obtain a final glycerin concentration of 80% (v / v) by volume of glycerin relative to the total volume of glycerin and of the extract.
  • the extract is obtained in liquid form under the conditions described in example 1c).
  • the extract is obtained by extraction with stirring and under reflux of an amount of 10% (w / w) by weight of crushed leaves relative to the total weight of the material and the solvent, in an ethanol: water mixture (70:30; v / v) at a temperature of 80 ° C for a period of one hour.
  • the suspension is filtered then the hydroalcoholic extract recovered.
  • the alcoholic phase is evaporated in vacuo and the residual aqueous phase obtained is centrifuged and filtered.
  • This aqueous phase is atomized in the presence of maltodextrin, in a final amount of maltodextrin of 80% (w / w) by weight relative to the total weight of the extract and of maltodextrin in solid form, under the conditions described in example ld ).
  • the extract is obtained by extraction in water as a single solvent of an amount of 20% (w / w) by weight of crushed leaves with respect to the weight of the solvent and the material, with stirring and for a period of one hour at a temperature of 80 ° C.
  • the crude extract was centrifuged, then filtered and then atomized in the presence of maltodextrin, in a final quantity of maltodextrin of 80% (w / w) by weight relative to the total weight of the final extract in solid form, under the conditions described. in the example).
  • the extract is obtained by aqueous extraction in subcritical conditions in the water as the sole solvent of total sheets.
  • the extraction was carried out at a flow rate of 5 ml / min and a solvent / Tamarindus indica leaf ratio of 25 ml / g at a temperature of 120 ° C, and a pressure sufficient for the water to be in its liquid state. , i.e. 16 bars.
  • the extract is then dried and ground to obtain a fine powder under the conditions described in example 1f).
  • the extract is obtained by aqueous extraction in subcritical conditions in the water as the sole solvent of total sheets.
  • the extraction was carried out at a flow rate of 5 ml / min and a solvent / Tamarindus indica leaf ratio of 25 ml / g at a temperature of 140 ° C and a pressure sufficient for the water to be in its liquid state, i.e. 18 bars.
  • the extract is then dried and ground to obtain a fine powder under the conditions described in Example 1g).
  • the extract of Tamarindus indica according to the invention can be used alone, in the form of active ingredient and / or in a cosmetic and / or nutraceutical, and / or pharmaceutical composition, in particular dermatological, preferably intended for topical application and / or oral route, more preferably for topical application.
  • the extract according to the invention is preferably soluble and / or diluted in a solvent, in particular polar, such as water, an alcohol, a polyol, a glycol such as pentylene glycol and / or hexylene glycol and / or caprylyl glycol, or one of their mixtures, preferably a hydroglycolic or hydroalcoholic mixture, more preferably comprising a glycol chosen from hexylene glycol, caprylyl glycol and their mixtures.
  • a solvent in particular polar, such as water, an alcohol, a polyol, a glycol such as pentylene glycol and / or hexylene glycol and / or caprylyl glycol, or one of their mixtures, preferably a hydroglycolic or hydroalcoholic mixture, more preferably comprising a glycol chosen from hexylene glycol, caprylyl glycol and their mixtures.
  • the active ingredient is not diluted in butylene glycol.
  • the extract according to the invention is soluble and / or solubilized in an aqueous solution comprising glycerol, advantageously in a solution comprising at least 80% (w / w) by weight of glycerol relative to the total weight of the aqueous solution .
  • the extract obtained is diluted and / or soluble in an aqueous solution comprising caprylyl glycol, in particular comprising between 0.01 and 5% (w / w) by weight of caprylyl glycol, preferably between 0.1 and 1% (w / w) by weight of caprylyl glycol, relative to the total weight of the aqueous solution.
  • the extract according to the invention can be incorporated into a cosmetic and / or nutraceutical composition comprising at least one cosmetically acceptable and / or nutraceutical acceptable excipient.
  • a cosmetic composition comprising at least one cosmetically acceptable excipient.
  • the term “cosmetically acceptable” excipient is understood to mean a topically acceptable compound and / or solvent, that is to say not inducing an allergic response on contact with the skin, including the human scalp, and / or mucous membranes, non-toxic, non-unstable, chemically.
  • the extract according to the invention is present in the cosmetic and / or dermatological composition in a content of between 1x10 4 % and 10% (v / v) by volume, preferably between 1x10 4 % and 5% (v / v) by volume, again advantageously between 1 ⁇ 10 3 % and 3% (v / v) by volume, more preferably between 0.1% and 1% (v / v) by volume, relative to to the total volume of the composition, said composition further comprising at least one cosmetically acceptable excipient.
  • the cosmetic and / or dermatological composition of the invention can be chosen from an aqueous or oily solution, an aqueous cream or gel or an oily gel, in particular a shower gel, a shampoo; a milk ; an emulsion, a microemulsion or a nanoemulsion, in particular oil-in-water or water-in-oil or multiple or silicone; a mask; a serum; a lotion; liquid soap; a dermatological bar; an ointment ; a foam; a patch; an anhydrous product, preferably liquid, pasty or solid, for example in the form of makeup powders, sticks or sticks, in particular in the form of lipstick.
  • It can also be a makeup product or a makeup removal product.
  • the extract or the composition of the invention is intended to be applied to all or part of the body and / or of the face and / or of the scalp, preferably the legs, thighs, arms, stomach, the Vietnameselleté, the neck, the armpits, the lips, more preferably all or part of the face, and preferentially the cheeks, the forehead, the chin, the lips, the contour of the eyes.
  • the extract and / or the composition comprising it is intended to be applied to an area of healthy skin exhibiting sagging and / or an area of sagging healthy skin and / or an area of healthy skin lacking in tone.
  • the cosmetic composition is advantageously intended for topical application to healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • the extract according to the invention is particularly suitable for the formulation of a so-called neutral and gentle composition for respecting the sebaceous gland, in particular the skin including the scalp and / or mucous membranes.
  • the extract according to the invention can be in all the dosage forms conventionally used for oral application, in particular in the form of a nutraceutical active ingredient and / or of a nutraceutical composition.
  • compositions according to the invention may contain any suitable solvent and / or any suitable vehicle and / or any suitable excipient, optionally in combination with other compounds of interest.
  • the excipient contains for example at least one compound chosen from the group comprising preservatives, emollients, emulsifiers, surfactants, moisturizers, thickeners, conditioners, mattifying agents, stabilizers. , antioxidants, texturing agents, shine agents, film-forming agents, solubilizers, pigments, dyes, perfumes and sun filters.
  • excipients are preferably chosen from the group consisting of amino acids and their derivatives, polyglycerols, esters, polymers and cellulose derivatives, lanolin derivatives, phospholipids, lactoferrins, lactoperoxidases, stabilizers based on sucrose, vitamins E and its derivatives, natural and synthetic waxes, vegetable oils, triglycerides, unsaponifiables, phytosterols, vegetable esters, silicones and its derivatives, protein hydrolysates, Jojoba oil and its derivatives, lipo / water-soluble esters, betaines, aminoxides, plant extracts, sucrose esters, titanium dioxides, glycines, and parabens, and more preferably from the group consisting of butylene glycol, steareth-2, steareth-21, glycol-15 stearyl ether, cetearyl alcohol, phenoxyethanol, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylpara
  • abrasives such as perfumes, pigments, dyes, essential oils, astringents, etc.
  • cosmetic compounds such as perfumes, pigments, dyes, essential oils, astringents, etc.
  • anti-acne agents for example: clove oil, menthol, camphor, eucalyptus oil, eugenol, menthyl lactate, witch hazel distillate
  • anti-acne agents for example: clove oil, menthol, camphor, eucalyptus oil, eugenol, menthyl lactate, witch hazel distillate
  • anti-acne agents for example: anti-flocculants, anti-foam agents
  • antimicrobial agents for example: iodopropyl butylcarbamate
  • antioxidants for example: iodopropyl butylcarbamate
  • binders biological additives, buffering agents, blowing agents, chelating agents, additives, biocidal agents, denatur
  • the cosmetic composition may also comprise other cosmetic and / or nutraceutical agents having the same properties and inducing a synergistic effect or not with the extract according to the invention, or cosmetic agents with complementary effects. They may for example be anti-wrinkle ingredients, agents stimulating the activity or proliferation of fibroblasts, agents stimulating molecules of the extracellular matrix.
  • They can also be anti-aging active ingredients and / or tightening agents for a synergistic effect with the extract of Tamarindus indica.
  • they are active ingredients increasing the gene and / or protein expression of collagen or active ingredients preventing the degradation of collagen such as retinol, vitamin C, an extract of Davilla rugosa marketed under the name of Collguard TM by BASF Beauty Care Solutions, an extract of Hibiscus abelmoschus seed marketed under the name Linefactor TM, a peptide marketed under the name Dermican TM by the applicant or the products marketed under the names of Matrixyl TM, Matrixyl 3000 TM and Regestril TM by the company Sederma or Neuroguard by the company Codif, or else Etemaline TM by the company Silab.
  • the tensioning agents which can be used in the invention can be chosen from synthetic polymers, such as polyurethane latexes or acrylic latexes, polymers of natural origin, in particular polyholosides in the form of starch or in the form of carrageenans, alginates, agars, gellans, cellulose polymers and pectins; proteins and hydrolysates of vegetable proteins; mixed silicates; wax microparticles; colloidal particles of inorganic filler chosen for example from silica, silica-alumina composites; as well as their mixtures.
  • synthetic polymers such as polyurethane latexes or acrylic latexes, polymers of natural origin, in particular polyholosides in the form of starch or in the form of carrageenans, alginates, agars, gellans, cellulose polymers and pectins
  • proteins and hydrolysates of vegetable proteins mixed silicates
  • wax microparticles colloidal particles of inorganic filler chosen for example from silic
  • the cosmetic and / or dermatological composition of the present invention also contains one or more tightening agents and / or one or more antimicrobial agents and / or one or more anti-free radical agents and / or one or more soothing agents and / or one or more agents. slimming agents and / or one or more active agents on the microcirculation.
  • antimicrobial agents associated with the extract of T. indica there may be mentioned 2,4,4'-trichloro-2'-hydroxy diphenyl ether (or triclosan), 3,4, 4'- trichlorobanilide, phenoxyethanol, phenoxypropanol, phenoxyisopropanol, hexamidine isethionate, metronidazole and its salts, miconazole and its salts, itraconazole, terconazole, econazole, ketoconazole, saperconazole, fluconazole, clotrimazole, butoconazole, oxiconazole, sulfaconazole, sulconazole, terbinafine, undecylenic acid and its salts, benzoyl peroxide, 3-hydroxy benzoic acid, 4-hydroxy benzoic acid, phytic acid, N-acetyl-L-cysteine, lipoic acid,
  • the anti-radical agents can be vitamin C and its derivatives including ascorbyl glucoside, phenols and polyphenols, in particular tannins, ellagic acid and tannic acid; epigallocatechin and natural extracts containing it, in particular green tea extracts; anthocyanins; phenol acids, stilbenes; active scavengers of mono- or polycyclic aromatic compounds, tannins such as ellagic acid and indole derivatives and / or active scavengers of heavy metals such as EDTA, anti-radical active agents such as vitamin E and its derivatives such as tocopheryl acetate; bioflavonoids; coenzyme Q10 or ubiquinone.
  • vitamin C and its derivatives including ascorbyl glucoside, phenols and polyphenols, in particular tannins, ellagic acid and tannic acid; epigallocatechin and natural extracts containing it, in particular green tea extracts; anthocyanins; phenol acids
  • composition of the invention use may be made of pentacyclic triterpenes, ursolic acid and its salts, oleanolic acid and its salts, betulinic acid and its salts, salts of salicylic acid. and in particular zinc salicylate, bisabolol, allantoin, unsaturated omega 3 oils, cortisone, hydrocortisone, indomethacin and beta methasone, anti-inflammatory active agents, and in particular those described in the application FR2847267, in particular the root extract of Pueraria lobata marketed under the name Inhipase TM by the applicant, extracts of Theobroma cacao.
  • the active ingredients acting on the microcirculation, vasoprotectors or vasodilators can be chosen from flavonoids, ruscogenins, nicotinates and essential oils.
  • the slimming active agents can in particular be chosen from agents which inhibit lipoprotein lipase such as those described in patent US2003086949 (Coletica) and in particular an extract of liana from Peru (Uncaria tomentosa); draining active agents, in particular hesperitin laurate (Flavagrum TM), or quercitin caprylate (Flavenger TM); phosphodiesterase enzyme inhibitors, adenylate cyclase activators, cAMP and / or active agents capable of trapping spermine and / or spermidine.
  • agents which inhibit lipoprotein lipase such as those described in patent US2003086949 (Coletica) and in particular an extract of liana from Peru (Uncaria tomentosa); draining active agents, in particular hesperitin laurate (Flavagrum TM), or quercitin caprylate (Flavenger TM); phosphodiesterase enzyme inhibitors, adenylate cyclase
  • Mention may be made of an extract of Coleus Forskohlii root, an extract of Cecropia obtusa, Uva lactuca, caffeine, forskolin, theophylline, theobromine and / or their derivatives, a hydrolyzed kappa carrageenan product called Slimexcess TM marketed by the applicant and / or their mixtures.
  • a subject of the present invention is also a cosmetic care process comprising the topical application to at least one area of healthy skin and / or healthy mucosa of an extract of Tamarindus indica leaves according to the invention, the extract not being obtained by using butylene glycol as an extraction solvent, or of a cosmetic composition comprising it, to maintain and / or increase the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin, healthy mucous membranes , and / or to maintain and / or increase the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, in particular firmness and / or elasticity, preferably firmness.
  • a preferred embodiment of the invention relates to a cosmetic care process characterized in that it comprises the topical application to at least one area of healthy skin and / or healthy mucosa of a Tamarindus indica leaf extract.
  • invention to increase the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin, healthy mucous membranes, and / or to increase the expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes , and / or to increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, preferably firmness and / or elasticity and / or to increase the proliferation of fibroblasts in healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to increase the differentiation of keratinocytes from healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • the extract of Tamarindus indica according to the invention preferably in the form of a cosmetic composition according to the invention, is used in regular topical application and preferably at least once a day, advantageously twice a day, for at least 10 days, preferably for 20 days, and more preferably for at least 28 days.
  • the topical application of an extract of Tamarindus indica according to the invention or of a cosmetic composition comprising it is carried out on all or part of the body and / or of the face and / or of the scalp, preferably the legs, thighs, arms, stomach, Vietnameselleté, neck, armpits, lips, more preferably all or part of the face, and preferably the cheeks, forehead, chin, lips, contour of eyes.
  • a cosmetic composition comprising the extract of Tamarindus indica according to the invention, the extract not being obtained by using butylene glycol as an extraction solvent, in an amount effective to maintain and / or increase the expression of molecules of the extracellular matrix of healthy skin, healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase l '' expression of collagen fibers and / or elastic fibers of healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or to maintain and / or increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, in particular firmness and / or elasticity, preferably firmness, namely in an extract content of between 1x10 4 % and 10% (v / v) by volume, preferably between 1x10 4 % and 5% (v / v) by volume, still advantageously between 1 ⁇ 10 3 % and 3% (v / v) by volume, more preferably between 0.1% and
  • topical route is understood to mean direct local application and / or vaporization of the extract or of the composition according to the invention on the surface of the zone of healthy skin and / or of healthy mucosa.
  • topically and / or orally acceptable is understood to mean an ingredient suitable for application respectively topically and / or orally, non-toxic, non-irritant for the skin including the scalp and not inducing no allergic response, and which is not chemically unstable.
  • the method according to the invention relates to a cosmetic treatment method for maintaining and / or increasing the proliferation of fibroblasts of healthy skin and / or healthy mucous membranes, and / or for maintaining and / or increasing the differentiation of the keratinocytes of healthy skin and / or healthy mucous membranes comprising the following steps:
  • a subject of the invention is also the extract of T. indica according to the invention, alone or in a dermatological composition comprising it, for its use, advantageously topically, in the treatment and / or prevention of pathologies of the disease.
  • skin and / or mucous membranes involving loss of expression of molecules of the extracellular matrix of the skin and / or mucous membranes, and / or loss of expression of collagen fibers and / or elastic fibers of the skin and / or mucous membranes, and / or a loss of the biomechanical properties of the skin and / or the mucous membranes, in particular a loss of the firmness of the skin and / or of the mucous membranes, and / or a loss of the proliferation of fibroblasts of the skin and / or mucous membranes, and / or loss of differentiation of keratinocytes from the skin and / or mucous membranes, the extract not being obtained using butylene glycol as extraction solvent.
  • the expression “treatment and / or prevention of pathologies of the skin and / or of the mucous membranes involving a loss of firmness of the skin and / or of the mucous membranes” is understood to mean a increase for therapeutic purposes in the firmness of the skin and / or of the mucous membranes which have lost firmness under the effect of pathologies of the skin and / or of the mucous membranes such as, for example, rosacea, telangiectasias.
  • the term “treatment and / or prevention of pathologies of the skin and / or of the mucous membranes involving a loss of elasticity of the skin and / or of the mucous membranes” is understood to mean a increase for therapeutic purposes in the elasticity of the skin and / or mucous membranes which have lost their elasticity under the effect of pathologies of the skin and / or mucous membranes such as for example solar elastosis and / or cutis pathology laxa.
  • the extract according to the invention can be found in the form of a pharmaceutical composition, preferably dermatological, comprising at least one pharmaceutically and / or dermatologically acceptable excipient.
  • said composition is applied topically and / or orally, preferably topically.
  • the pharmaceutical composition preferably dermatological, at a concentration of 1x10 4 % to 10% by weight, preferably between 1x10 4 % and 5% by weight, again advantageously between 1x10 3 % and 0.5% by weight relative to the total weight of the composition, said composition further comprising at least one pharmaceutically acceptable excipient.
  • Example 1 Preparations of different extracts of Tamarindus indica
  • Example la A quantity of 10% (w / w) by weight of dried and crushed Tamarindus indica leaves (origin Burkina Faso) relative to the total mixture of solvent and leaves was extracted in water as the sole solvent for one hour with stirring at a temperature of 80 ° C. The crude extract was centrifuged, filtered (0.45 ⁇ m). The extract is therefore obtained in liquid form.
  • Example 1b A quantity of 10% (w / w) by weight of dried and crushed Tamarindus indica leaves (origin Burkina Faso) relative to the total mixture of water and leaves was macerated in water as the sole solvent for 1 hour at a temperature of 80 ° C.
  • the crude extract was centrifuged, filtered (0.45 ⁇ m) then formulated with glycerin, for a final quantity of glycerin of 80% (v / v) by volume relative to the total volume of the extract and of the glycerin .
  • the extract is therefore obtained in liquid form.
  • Example le A quantity of 10% (w / w) weight of dried and crushed Tamarindus indica leaves (origin Burkina Faso) relative to the total water and leaves mixture was macerated in water as the sole solvent for 16 hour at a temperature of 4 ° C.
  • the crude extract was centrifuged, filtered (0.45 mih) then formulated with glycerin, for a final quantity of glycerin of 80% (v / v) by volume relative to the total volume of the extract and of the glycerin .
  • the extract is therefore obtained in liquid form.
  • Example 1d A quantity of 10% (w / w) by weight of dried and ground Tamarindus indica leaves (origin Burkina Faso) relative to the total mixture of water and leaves is extracted with stirring and under reflux in a solvent consisting of an ethanol: water mixture (70:30; v / v) at a temperature of 80 ° C for a period of one hour. The suspension was then filtered and then the hydroalcoholic extract recovered. The alcoholic phase was evaporated in vacuo and the resulting residual aqueous phase was centrifuged and filtered.
  • This aqueous phase was atomized in the presence of maltodextrin, in a final quantity of maltodextrin of 80% (w / w) by weight relative to the total weight of the extract and of maltodextrin.
  • the extract is therefore obtained in the form of a powder.
  • Example le A quantity of 20% (w / w) by weight of dried and ground Tamarindus indica leaves (origin Burkina Faso) relative to the total mixture of water and leaves a is extracted with stirring in water as the sole solvent for one hour at a temperature of 80 ° C.
  • the crude extract was centrifuged, decanted, filtered (0.45 ⁇ m) then atomized in the presence of maltodextrin, in a final amount of maltodextrin of 80% (w / w) by weight relative to the total weight of the final extract. .
  • the extract is therefore obtained in the form of a powder.
  • Example lf Whole leaves of Tamarindus indica (origin Burkina Faso) dried were extracted under subcritical conditions with water as the sole solvent in an extraction column with a flow rate of 5 ml / min and a solvent / leaves ratio. Tamarindus indica of 25 ml / g, at a temperature of 120 ° C, and a pressure of 16 bars. The recovered extract was dried and crushed. The extract is therefore obtained in the form of a powder.
  • Example 1g Whole leaves of Tamarindus indica (origin Burkina Faso) dried were extracted under subcritical conditions with water as the sole solvent in an extraction column with a flow rate of 5 ml / min and a solvent / leaves ratio. Tamarindus indica of 25 ml / g, at a temperature of 120 ° C, and a pressure of 8 bars. The recovered extract was dried and crushed. The extract is therefore obtained in the form of a powder.
  • Normal human fibroblasts that is to say non-pathological, obtained from abdominal biopsies of a healthy donor were inoculated in a 96-well plate in a defined medium (FGM) in the presence of the Tamarindus indica extract prepared according to example la) of the present invention, at a final concentration of 1% (w / w) by weight of the extract relative to the weight of the culture medium and of the extract.
  • FGM defined medium
  • the same culture medium without addition of extract according to the invention was used as a control (untreated control). After 4 days of culture at 37 ° C, the culture medium was removed and discarded.
  • a solution of 3- (4,5-dimethyl-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium (MTT) bromide is deposited on the cell mats for 3 hours.
  • the solution is then removed and replaced with dimethyl sulfoxide for 15 minutes.
  • the Optical densities of each condition are then measured using an EnVision multi-plate reader (Perkin Elmer).
  • Example 3 Demonstration of the effect of an extract of Tamarindus indica according to the invention on the synthesis of involucrine.
  • results were calculated relative to a range of involucrin, then they were expressed as a percentage relative to the control cell culture medium without product (untreated control).
  • the results are presented in the form of the mean ⁇ standard deviation from 2 tests (from 2 different keratinocyte donors) each carried out in triplicate.
  • the activity of the product was statistically evaluated according to the Sigmaplot TM software process.
  • the extract of Tamarindus indica according to the invention can therefore be used to maintain and / or increase the differentiation of keratinocytes from healthy skin and / or healthy mucous membranes.
  • Example 4 Increase in the expression of type I and V collagen by the fibroblasts in the presence of various extracts of T. indica according to the invention.
  • the assay of mature type I and V collagens was evaluated using time-resolved fluorescence intensity technology, DELF1A®, developed and patented by the applicant.
  • a phosphate buffered saline / bovine serum albumin saturation solution (Perkin Elmer, Courtaboeuf, France) was added to the matrix deposited before reaction with either the primary anti-collagen 1 antibody (fnterchim / Acris, Montluzzo, France, LH0284 / RI 038) or the primary anti-collagen V antibody (fnterchim / Acris, Montluzzo, France, LH4523 / RI 042).
  • the secondary antibody conjugated to Europium was added.
  • a revealing solution (Perkin Elmer) was added. Fluorescence intensity was read (/.cxc. 340nm / /.cm. 615nm) using an EnVision® multiple label plate reader (Perkin Elmer).
  • the extract of Tamarindus indica according to example la) induced an increase in the protein expression of type I and V collagen in human fibroblasts cultured in vitro.
  • the extract according to the invention can therefore be used to increase the firmness of the skin and / or of the mucous membranes.
  • Example 5 Increase in the expression of type IV collagen by keratinocytes in the presence of various extracts of T. indica according to the invention.
  • the keratinocytes were incubated for 48 hours at 37 ° C, with 5% CO2 with or without Tamarindus indica extract according to example la) at 0.1%.
  • the untreated control corresponds to the conditions without any product added to the culture medium and TGF b at 5 ng / mL was used as a positive reference.
  • the culture medium was removed and the keratinocytes underwent lysis with an ammonium hydroxide solution (Sigma, France). The wells were then saturated for 30 minutes with a solution of bovine serum albumin (BSA; Sigma France), then incubated for one hour with an anti-collagen IV monoclonal antibody diluted to 1/2500 followed by washing and incubation. an additional hour at room temperature with a secondary antibody diluted to 1/25000.
  • BSA bovine serum albumin
  • the cell culture medium was then removed and replaced with a revealing fluorescent solution. The fluorescence was finally recorded at 340exc / 615em nm.
  • the concentration of collagen IV was deduced from a standard curve of commercially available collagen solution IV. Readings were normalized to the amount of cellular DNA determined using a Picogreen kit.
  • Example 6 Demonstration of the effect of an extract of Tamarindus indica according to the invention on the gene expression of molecules of the extracellular matrix
  • fibroblasts Four different strains of primary human fibroblasts were obtained from surgical skin biopsies of female donors (between 52 and 64 years of age). The 4 or 5 passage fibroblasts were cultured in Eagle's minimum essential medium with fetal calf serum (FCS) and incubated at 37 ° C with 5% CO2.
  • FCS fetal calf serum
  • the cells were treated with the extract of Tamarindus indica according to example la) at a final concentration of 0.3% (w / w) by weight of the extract relative to the weight of the medium. of culture and the extract or at 1% (w / w) by weight of the extract relative to the weight of the culture medium and of extract, and were incubated for 24 or 48 hours at 37 ° C with 5% CO 2.
  • the control conditions correspond to the culture of fibroblasts without adding product to the basal culture medium.
  • the absence of treatment-induced cytotoxicity was verified using the trypan blue method.
  • RNAs from fibroblast cultures were extracted with the NucleoSpin miRNA kit (Machery-Nagel), according to the instructions in the manual. The quantification and the quality control of the total RNAs were carried out by measuring the optical densities at 260 and 280 nm.
  • a personalized PCR matrix dedicated to 88 strategic genes involved in the quality of the dermal extracellular matrix was created.
  • a panel of genes whose expression was modulated by treatments was selected.
  • specific qRT-PCR analyzes dedicated to the selected target genes were carried out on each of the 4 fibroblast cultures. Reverse transcriptions were carried out on 0.1 ⁇ g of RNA in 20 m ⁇ of final mixture using SuperScript IV V1LO Master Mix (fnvitrogen).
  • Quantitative PCRs of each gene were carried out on 2 m ⁇ of reverse transcription mixture diluted to 1/2 in 10 m ⁇ of final reaction mixture using the LC480 SYBR Green 1 Master system (Roche) and dedicated primers in an LC480 TM thermal cycler. (Rock). Analysis of domestic genes (ACTB: actin B; SDHA: succinate dehydrogenase) was performed in parallel with the target genes. Each qPCR analysis was performed on duplicate and the average Ct values of each analysis were used for the calculation of the modulation of gene expression by the AACt method.
  • Statistical analysis was performed using Mann & Whitney test against untreated condition.
  • the extract of Tamarindus indica according to example la) induced an increase in the gene expression of genes encoding collagen molecules and / or elastic fibers.
  • the extract according to the invention can therefore be used to increase the biomechanical properties of healthy skin and / or healthy mucous membranes, in particular the firmness and / or elasticity and / or density of healthy skin and / or mucous membranes. healthy.
  • Example 7 Example of a cosmetic ingredient comprising an extract of Tamarindus indica according to the invention
  • Example 8 Example of a cosmetic composition comprising an extract of Tamarindus indica according to the invention
  • Tamarindus indica extract obtained according to example 1a) 1.00
  • Example 9 Example of a dermatological composition
  • composition below is prepared according to methods known to those skilled in the art, in particular as regards the different phases to be mixed together.
  • the amounts indicated are in percentage by weight relative to the total weight of the composition.
  • the ingredient is prepared according to example la) above.
  • the ingredient according to the invention is sterilized and then dried before being incorporated into the composition in the form of an ointment.
  • Example 9b Cream containing the extract according to example la).
  • Phases A and B are heated to 75 ° then mixed with stirring. Once the mixture has returned to ambient temperature, phases C and D are added with stirring.

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation cosmétique, nutraceutique et / ou pharmaceutique, notamment dermatologique, d'un extrait de Tamarindus indica L. et / ou d'une composition le comprenant pour maintenir et / ou augmenter l'expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau et / ou des muqueuses, l'extrait n'étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d'extraction.

Description

Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d'un extrait de Tamarindus indica L. et / ou d’une composition le comprenant
DOMAINE TECHNIQUE
La présente invention concerne l’utilisation cosmétique, nutraceutique et / ou pharmaceutique, notamment dermatologique, d’un extrait de feuilles de Tamarindus indica L. et / ou d’une composition le comprenant pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau et / ou des muqueuses, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction.
ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUE
La structure et les propriétés de la peau changent sous l’effet de processus biologiques, physiques et biomécaniques complexes, entraînant une perte d’élasticité, de fermeté, de densité du derme, notamment sous l’effet de la modification des molécules de la matrice extracellulaire.
La matrice extracellulaire de la peau et des muqueuses est composée de l'association de trois types de molécules : des fibres : collagène et élastine, des glycoprotéines : moins abondantes que les fibres mais ont un rôle plus important dans l'adhérence cellulaire, comme la fibronectine et la laminine, des polysaccharides très hydratés constituant un gel de remplissage de la matrice. Cette matrice joue un rôle prépondérant dans le maintien de la structure et les propriétés de la peau, notamment l’élasticité, la fermeté, la densité du derme. Ces molécules étant notamment synthétisées par les fibroblastes et les kératinocytes, le renouvellement de ces derniers est primordial pour le maintien des propriétés biomécaniques de la peau.
L’élastine est une protéine composant les fibres élastiques en s’associant avec d’autres molécules comme les fibrillines et les MAGP (Microfïbrillar Associated Glycoproteins).
L'élastine est synthétisée sous la forme de tropoélastine soluble qui acquiert ses propriétés physico chimiques (insolubilité, élasticité) après sa réticulation intra- et intermoléculaire par une lysyl oxydase (LOX) et son dépôt sur les microfibrilles. Les fibres élastiques sont responsables de la propriété élastique des organes qui les contiennent (vaisseaux, parenchyme pulmonaire, cartilages élastiques, peau...). Le nom élastine est réservé à la protéine formant la portion amorphe des fibres élastiques et leur conférant leur élasticité.
Le vieillissement des peaux et des muqueuses est associé à une modification des réseaux fibrillaires, notamment celui des fibres élastiques qui se dégradent et ne se reforment plus correctement.
Dans la peau, les fibres élastiques fonctionnelles sont formées par les fibroblastes du derme, mais certains composants nécessaires à l'élaboration des fibres élastiques ont aussi été retrouvés dans les cellules de l'épiderme. Le taux de renouvellement des fibres élastiques est très faible dans la vie adulte, bien que le taux global d’élastine de la peau puisse augmenter. Chez le nouveau-né, les micro fibrilles ne sont pas toutes complètement couvertes d'élastine, et le deviennent vers la puberté. Dès 40 ans, on voit apparaître sur les fibres des inclusions, plus fréquentes chez les femmes, puis la fragmentation des fibres élastiques et leur disparition sous la jonction dermo-épidermique (JDE). Ce fractionnement et/ou cette disparition sous la JDE se traduisent par la perte d'élasticité de la peau et la formation de rides. La synthèse de fibres élastiques non fonctionnelles est observée lors du photo-vieillissement, mais cette augmentation s’accompagne de la perte accélérée des fibres élastiques sous la JDE.
Le collagène est une protéine constitutive de la matrice extra-cellulaire (MEC) présente en grande quantité dans les tissus des vertébrés. Il s’agit d’une large famille comprenant 29 types différents.
Parmi les différents types de collagène, on retrouve en particulier le collagène de type I dans de nombreux tissus humains tels que tendons, ligaments, cornée et peau, localisé plus précisément au niveau du derme. Le collagène de type I est le collagène majoritaire de la peau.
Le collagène fibrillaire est formé à partir des fibres de procollagène, ensuite assemblées en réseau, puis stabilisées par réticulation. C’est le collagène qui confère aux tissus leur résistance mécanique, et par voie de conséquence, participe au maintien de leur fermeté.
Au cours du vieillissement de la peau, le taux de collagène diminue globalement, ce qui entraîne une perte de fermeté. Ce phénomène est d’autant plus prononcé que la peau est entre autres soumise aux UV. On parle de vieillissement photobiologique.
Plusieurs mécanismes sont impliqués dans la diminution du taux de collagène au cours du vieillissement tissulaire : des enzymes appelées collagénases sont responsables de la dégradation des protéines de collagène. En parallèle, un mécanisme de glycation non enzymatique à l’origine de la formation de protéines glyquées appelées AGEs (Advanced Glycation End Products), dans la matrice extra-cellulaire, participe à une diminution de la fonctionnalité de ladite matrice, donc de la peau.
Les molécules de la matrice extracellulaire sont donc l’objet de nombreuses études et innovations dans le domaine de la cosmétique pour la mise au point et l’amélioration d’actifs cosmétiques visant à maintenir les propriétés biomécaniques de la peau.
Tamarindus indicaL. appelé communément tamarinier ou tamarin est un arbre de 12-15 m pouvant atteindre 30 m de hauteur, distribué de nos jours dans un grand nombre de régions chaudes du globe. Il est très vraisemblablement originaire de l’Afrique tropicale (notamment au Burkina Faso) d’où il s’est répandu anciennement dans toutes les parties chaudes du globe. Les principales zones de production du T. indica se trouvent en Asie (Inde, Bangladesh, Sri Lanka, Thaïlande, Vietnam et Indonésie) et Amérique (Mexique, Belize, Costa Rica et Brésil) Tamarindus indica est principalement utilisé pour ses fruits, en particulier la pulpe, qui présente une grande variété d'usages domestiques et industriels. La graine est commercialement disponible comme additif alimentaire pour améliorer la viscosité et la texture des aliments transformés. Les feuilles, les fleurs et les gousses immatures sont également comestibles. Les feuilles et les fleurs sont utilisées dans la confection de curry, des salades, des ragoûts et des soupes dans de nombreux pays, surtout en cas de pénurie alimentaire mais également comme mordant dans la teinture.
Les feuilles de Tamarindus indica sont également utilisées pour diverses applications en médecine traditionnelle, notamment pour dans la cicatrisation des plaies, le traitement des inflammations, le traitement des morsures de serpents, de la diarrhée et des douleurs hépatiques.
Diverses études menées sur les extraits de feuilles de T. indica ont mis en évidence les propriétés antioxydantes des extraits méthanolique de feuilles, les propriétés antiglycation des extraits éthanoliques d’un résidu obtenu après extraction par l’acétate d’éthyle de feuilles de Tamarindus indica, les activités anti bactériennes et antifongiques des extraits aqueux, acétoniques et éthanoliques d’écorces de tiges et de feuilles de Tamarindus indica d’origine nigérienne et des activités anti-inflammatoire et antinociceptive d'un extrait hydro-éthanolique (éthanol 95%-eau 5%) de feuilles de Tamarindus indica d’origine indienne. Le document KR20130032995 divulgue ainsi Tutilisation comme agent anti-inflammatoire d’un extrait de Tamarin.
Enfin, la demande de brevet US2012189725 divulgue l’effet inhibiteur des activités élastase, TNF- a et MMPI d’un extrait de feuille de Tamarindus indica obtenu avec du butylène glycol en tant que solvant d’extraction. Un autre extrait de péricarpe de Tamarin présentant des activités anti-élastases et anti collagénases a été décrit dans la demande US2008/286387. Il est obtenu par extraction au méthanol des polyphénols contenus dans le péricarpe du Tamarin.
RESUME DE L'INVENTION
Ainsi, à la connaissance de la demanderesse, aucun art antérieur ne divulgue ni ne suggère l’utilisation cosmétique, nutraceutique et / ou pharmaceutique, notamment dermatologique d’un extrait de feuilles de Tamarindus indica et / ou d’une composition le comprenant pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau, des muqueuses, et / ou pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau et / ou des muqueuse, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau et / ou des muqueuses, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction. La présente invention a pour premier objet l’utilisation cosmétique et / ou nutraceutique d’un extrait de feuilles de Tamarindus indica pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction.
Elle a également pour objet un procédé de soin cosmétique caractérisé en ce qu’il comprend l’application par voie topique sur au moins une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine d’un extrait de Tamarindus indica tel que défini ci-dessus, ou d’une composition cosmétique le comprenant, pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité.
L'invention a encore pour objet un extrait de Tamarindus indica tel que défini ci-dessus, ou d’une composition dermatologique le comprenant, pour son utilisation dans le traitement et / ou la prévention des pathologies de la peau et / ou des muqueuses impliquant une perte de l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte des propriétés biomécaniques de la peau et / ou des muqueuses, notamment une perte de la fermeté de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de la prolifération des fibroblastes de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de la différenciation des kératinocytes de la peau et / ou des muqueuses.
DESCRIPTION DETAILLEE
Au sens de la présente invention, on entend par « utilisation et / ou composition cosmétique », une utilisation et / ou composition non pharmaceutique, c'est-à-dire qui n’est pas destinée à un usage thérapeutique et est appliquée sur une partie du corps dite saine, en particulier sur une zone de la peau et / ou des muqueuses dite saine.
Au sens de la présente invention, on entend par « utilisation nutraceutique et / ou composition nutraceutique » une utilisation et / ou une composition à administration orale non pharmaceutique, c’est-à- dire qui ne nécessite pas de traitement thérapeutique.
Au sens de la présente invention on entend par « peau saine », « muqueuse saine » une zone de peau, de muqueuse sur laquelle est appliquée l’extrait selon l’invention et dite « non pathologique » par un dermatologue, c’est à dire ne présentant pas d’infection, de cicatrice, de maladie ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, ou de plaies ou de blessures.
Selon l’invention, on désigne par « muqueuse(s) », la muqueuse oculaire, la muqueuse vaginale, la muqueuse uro-génitale et / ou la muqueuse buccale, notamment buccale, labiale et / ou gingivale, préférentiellement, la muqueuse oculaire et / ou buccale, et encore préférentiellement, la muqueuse labiale et / ou oculaire.
Au sens de la présente invention, on entend par « maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire », empêcher une diminution et / ou augmenter le niveau d’expression génique, c’est-à-dire des ARNm (ARN messagers), et / ou de la synthèse protéique des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines, traitées par l’extrait selon l’invention, par rapport au niveau d’expression génique et / ou de synthèse protéique détecté en l’absence de l’extrait selon l’invention. Préférentiellement, il s’agit du maintien et / ou de l’augmentation de l’expression génique des molécules de la matrice extracellulaire.
Au sens de la présente invention, on entend par « molécules de la matrice extracellulaire » l’ensemble des fibres et / ou des glycoprotéines de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines. Préférentiellement, il s’agit des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Ainsi, la présente invention vise plus particulièrement à maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Au sens de la présente invention, on entends par « maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines» empêcher une diminution et / ou augmenter le niveau d’expression génique, c’est-à-dire l’expression des ARNm (ARN messagers), et / ou de la synthèse protéique des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines traitées par l’extrait selon l’invention, par rapport à l’expression génique et / ou de la synthèse protéique détectée en l’absence de l’extrait selon l’invention.
En particulier, il s’agit d’une augmentation du niveau d’expression génique et / ou de la synthèse protéique des fibres de collagène d’au moins 40 %, préférentiellement d’au moins 200 % et encore plus préférentiellement d’au moins 400 %, par rapport au niveau d’expression génique et / ou protéique des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques mesuré en l’absence de l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention. En particulier, il s’agit d’une augmentation du niveau d’expression génique et / ou de la synthèse protéique des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques d’au moins 20 %, préférentiellement d’au moins 40 % et encore plus préférentiellement d’au moins 50 %, par rapport au niveau d’expression génique et / ou protéique des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques mesuré en l’absence de l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention.
Préférentiellement, il s’agit du maintien et / ou de l’augmentation de la synthèse protéique des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques.
Au sens de la présente invention, on entend par « collagène », les protéines de collagène de type I, III, IV, V, VI, VII, XII, XIII, XIV, XVI, XVII, XXIV, XXIX, présentes dans la peau saine et / ou les muqueuses saines. Selon un mode avantageux, les fibres de collagène sont choisies parmi les fibres de collagène de type I, III, IV, V et / ou XIV, préférentiellement les fibres de collagène de type I, IV et / ou V, encore préférentiellement les fibres de collagène de type I.
Au sens de la présente invention, on entend par protéine de « collagène de type I », la protéine de collagène présente dans la peau, la cornée, les tendons, les ligaments, les os, encore préférentiellement dans la peau. Ainsi, dans un mode préférentiel de l’invention, l’extrait de feuilles de Tamarindus indica selon l’invention est donc utilisé pour maintenir et / ou augmenter l’expression protéique du collagène de type I au niveau de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Selon un mode avantageux, il s’agit de l’augmentation de l’expression géniques des fibres de collagène d’un ou plusieurs gènes choisis parmi LAMB1 (codant pour la protéine Laminin subunit b 1), LAMG1 (codant pour la protéine Laminin subunit g 1), NID-1 (codant pour la protéine Nidogen 1), COL7A1 (codant pour la protéine Collagen Type VII a 1 Chain), BGN (codant pour la protéine Biglycan), SP ARC (codant pour la protéine Secreted protein acidic & cystein rich), COL1A2 (codant pour la protéine Col I a 2 chain), COL3A1 (codant pour la protéine Col III a 1 chain), COL1A (codant pour la protéine Col I a 1 chain), COL1A2 (codant pour la protéine Col I a 2 chain), COL3A1 (codant pour la protéine Col III a 1 chain), COL4A1 (codant pour la protéine Collagen Type IV a 1 chain), COL4A2 (codant pour la protéine Collagen Type IV a 2 chain), COL5A1 (codant pour la protéine Col V a l chain), COL5A2 (codant pour la protéine Col V a 2 chain), COL14A1 (codant pour la protéine Col XIV a 1 chain), P4HA1 (codant pour la protéine Prolyl 4- Hydroxylase Subunite a l), P4HA2 (codant pour la protéine Prolyl 4-Hydroxylase Subunite a 2), P4HA3 (codant pour la protéine Prolyl 4-Hydroxylase Subunite a 3), P4HB (codant pour la protéine Prolyl 4- Hydroxylase Subunite b). Selon un mode avantageux, il s’agit d’une augmentation du niveau d’expression génique des fibres élastiques d’un ou plusieurs gènes choisis parmi Elastin, Fibulin 1, Fibrilin 1 et / ou Microfibril associated protein 2.
Selon un mode avantageux de l’invention, il s’agit d’une augmentation par rapport au niveau d’expression génique et / ou protéique du collagène mesuré dans des cellules de fibroblastes dermiques cultivées in vitro en l’absence de l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention.
Dans un mode préférentiel de l’invention, il s’agit d’une augmentation du niveau d’expression protéique du collagène de type I d’au moins 50 %, préférentiellement d’au moins 200 % et encore plus préférentiellement d’au moins 400 % par rapport au niveau d’expression protéique mesuré dans des cellules de fibroblastes dermiques cultivées in vitro en l’absence de l’extrait selon le protocole tel que décrit par exemple dans l’exemple 4.
Avantageusement, la mesure de l’augmentation de l’expression protéique est effectuée par mesure in vitro, préférentiellement après immunomarquage par exemple selon la méthode telle que présentée en exemple 4 et / ou 5.
Au sens de la présente invention, on entend par « immunomarquage », la technique consistant à fixer un anticorps spécifique d’une protéine donnée de collagène, préférentiellement la protéine de collagène de type I, sur ladite protéine, en vue d’une révélation par observation microscopique. Avantageusement, la révélation se fait par microscopie confocale.
Selon un autre mode avantageux, la mesure de l’augmentation de l’expression protéique est effectuée par mesure in vitro, préférentiellement après RT-qPCR par exemple selon la méthode telle que présentée en exemple 6.
Dans une forme d'exécution préférée, l'extrait selon l'invention est utilisé pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité et / ou la densité de la peau saine et / ou des muqueuses saines, encore préférentiellement la fermeté et/ou l’élasticité de la peau saine et/ou des muqueuses saines.
Au sens de la présente invention on entend par « propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines » la fermeté et / ou l’élasticité et / ou la densité et / ou la résistance à la compression et / ou la résistance à l’étirement et / ou la flexibilité et / ou l’extensibilité et / ou la capacité à résister à la déformation de la peau saine et / ou des muqueuses saines. Préférentiellement il s’agit de la fermeté et / ou l’élasticité et / ou la densité de la peau saine et / ou des muqueuses saines, en particulier du derme sain, encore préférentiellement il s’agit de de la fermeté et / ou l’élasticité de la peau saine et / ou des muqueuses saines, en particulier du derme sain.
Les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines peuvent être étudiées par les techniques de mesure connues par l’homme du métier notamment par traction, par torsion, succion, indentation, levatométrie, ballistométrie, par scanner ultrason à haute résolution ou élastographie, préférentiellement par indentation, par scanner ultrason à haute résolution.
Au sens de la présente invention, on entend par « maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines» empêcher une diminution et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité de la peau saine et / ou des muqueuses saines, en particulier du derme sain, traité par l’extrait selon l’invention par rapport aux propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines mesurées en l’absence de l’extrait selon l’invention.
Préférentiellement, il s’agit d’une augmentation d’au moins 5%, préférentiellement 10% des propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines traitées par l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention par rapport aux propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines mesurées en l’absence de l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention.
En particulier, le maintien et / ou l’augmentation des propriétés biomécaniques de la peau saine permet de limiter et / ou de réduire le relâchement de la peau saine du visage en particulier au niveau des joues et / ou de la zone angulaire du visage (communément appelé arrondie du visage ou V du visage).
Au sens de la présente invention, on entend d’un point de vue cosmétique par « maintenir et / ou augmenter la fermeté de la peau saine et / ou des muqueuses saines », empêcher la diminution et / ou augmenter à des fins esthétiques, la fermeté de la peau saine et / ou des muqueuses saines notamment celles qui ont perdu de la fermeté notamment sous l’effet de facteurs intrinsèques. Les facteurs intrinsèques peuvent être le vieillissement tissulaire de la peau et / ou des muqueuses, c'est-à-dire le vieillissement chrono-induit, que l’on retrouve par exemple chez les peaux dites matures c'est-à-dire les peaux de personnes de plus de 40 ans. Il peut s’agir du stress cellulaire, des variations physiologiques non pathologiques telles qu’un changement de régime alimentaire, des variations hormonales, en particulier durant la puberté, la grossesse, la ménopause et / ou l’andropause. Cette perte de fermeté peut également apparaître sous l’effet de facteurs extrinsèques tels que les agents agressifs de l’environnement comme par exemple les radiations UV, la pollution, les fumées, le tabac, les toxines, les agressions climatiques et / ou mécaniques. L’augmentation de la fermeté peut être mesurée selon les méthodes classiques notamment par mesure in vivo par la méthode de projections de frange à l’aide d’un Cutomètre®, d’un DensiScore ® , d’un torquemètre ou encore d’un DynaSKIN associé à un DermaTOP.
Au sens de la présente invention, on entend d’un point de vue cosmétique par « maintenir et / ou augmenter l’élasticité de la peau saine et / ou des muqueuses saines », empêcher la diminution et / ou entraîner l’augmentation à des fins esthétiques, de l’élasticité de la peau saine et / ou des muqueuses saines qui ont perdu de l’élasticité notamment sous l’effet de facteurs intrinsèques tels que le vieillissement tissulaire de la peau et / ou des muqueuses, c'est-à-dire le vieillissement chrono-induit, que l’on retrouve par exemple chez les peaux dites matures c'est-à-dire les peaux de personnes de plus de 40 ans, le stress cellulaire, les variations physiologiques non pathologiques telles que un changement de régime alimentaire, les variations hormonales, en particulier durant la puberté, la grossesse, la ménopause et / ou l’andropause. Cette perte d’élasticité peut également apparaître sous l’effet de facteurs extrinsèques tels que les agents agressifs de l’environnement comme par exemple les radiations UV, la pollution, les fumées, le tabac, les toxines, les agressions climatiques et / ou mécaniques.
L’augmentation de l’élasticité peut être mesurée selon les méthodes classiques notamment par mesure in vivo à l’aide d’un Cutomètre®, d’un torquemètre ou encore d’un DynaSKIN.
L’extrait de Tamarindus indica selon l’invention peut être utilisé pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Sauf indication contraire, on entend par « fibroblastes » et / ou « kératinocytes », les fibroblastes « sains » et / ou les kératinocytes « sains », c’est-à-dire ne présentant pas de pathologie.
Au sens de la présente invention, on entend par « augmenter la prolifération des fibroblastes », une augmentation de la prolifération des fibroblastes d’au moins 5 %, préférentiellement d’au moins 10 % et encore plus préférentiellement d’au moins 20 %, par rapport au niveau de prolifération des fibroblastes mesuré en l’absence de l’extrait de T. indica selon l’invention.
La mesure de la prolifération des fibroblastes peut être effectuée par toutes méthodes classiques connue de l’homme du métier. Elle peut être effectuée par dosage de l’ADN, par incorporation de bases nucléiques fluorescentes, par incorporation de thymidine tritiée, par marquage de protéines spécifiques des cellules en prolifération par du Ki67, par comptage des cellules au cytomètre de flux et/ou par mesure de la densité optique. Avantageusement, elle est effectuée par mesure in vitro, par mesure de la densité optique, par exemple selon la méthode telle que présentée en exemple 2.
Au sens de la présente invention, on entend par « augmenter la différenciation des kératinocytes », une augmentation de la différenciation des kératinocytes d’au moins 5 %, préférentiellement d’au moins 10 % et encore plus préférentiellement d’au moins 20 %, par rapport au niveau de différenciation des kératinocytes mesuré en l’absence de l’extrait de T. indica selon l’invention.
La mesure de la différenciation des kératinocytes peut être effectuée par toutes méthodes classiques connues de l’homme du métier, notamment par dosage de l’involucrine et/ou de la filaggrine. Avantageusement, elle est effectuée par mesure in vitro, par mesure de la synthèse d’involucrine, par exemple selon la méthode telle que présentée en exemple 3.
Au sens de la présente invention, l’extrait de Tamarindus indica selon invention n’est pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction.
Selon un mode préférentiel, l’extrait de feuilles de Tamarindus indica selon l’invention est utile pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité et/ou pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Encore préférentiellement, l’extrait de feuilles de Tamarindus indica selon l’invention est utile pour augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité et/ou pour augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, encore préférentiellement pour augmenter la fermeté. L’extrait selon l’invention pourra être obtenu par toute méthode d’extraction de végétaux connue par l’Homme du métier. L’extraction peut être réalisée notamment par macération ou par d'autres procédés comme la lixiviation, la décoction, l’extraction sous reflux, la percolation, flash-détente, l’extraction assistée par les enzymes, l’extrusion, l’extraction au moyen d'ultrasons et/ou de micro-ondes. Préférentiellement, l’extraction est réalisée par macération.
Les feuilles sont préférentiellement séchées et / ou broyées avant extraction.
L’extrait selon l’invention pourra notamment être obtenu par extraction dans un solvant ou mélange de solvants, de préférence un solvant polaire protique à l’exception du butylène glycol, et avantageusement dans l’eau, un alcool, un glycol, un polyol, un mélange eau/alcool, eau/glycol ou eau/polyol (tels que l’eau en mélange avec éthanol, glycérol et / ou autres glycols tel que xylitol et / ou propanediol, etc.) de 99/1 à 1/99 (p/p), avantageusement dans l’eau comme unique solvant.
Au sens de la présente invention, on entend par « solvant polaire protique » un solvant possédant un moment dipolaire et au moins un hydrogène susceptible d'intervenir dans des liaisons hydrogène.
Dans un mode de réalisation préférentielle, l’extrait est obtenu par extraction aqueuse. Au sens de la présente invention, on entend par « extrait obtenu par extraction aqueuse » tout extrait obtenu par extraction avec une solution aqueuse, à l’exception des solutions comprenant du butylène glycol, contenant plus de 60% en poids, avantageusement au moins 70% en poids, en particulier au moins 80% en poids, plus particulièrement au moins 90% en poids, de façon particulière au moins 95% en poids, d’eau par rapport au poids total de la solution aqueuse, encore plus avantageusement ne contenant pas de glycol et de façon particulière ne contenant pas d’alcool, préférentiellement ne contenant que de l’eau. De manière préférentielle, l’extrait selon l’invention n’est pas obtenu par une extraction avec un solvant acétate d’éthyle.
Dans un mode de réalisation alternatif, l’extraction pourra être effectuée en présence d’un solvant de type carbonate de dialkyle en C6-Ci6. On peut citer à titre d’exemple de ce mode de réalisation, l’obtention d’un extrait selon l’invention en ajoutant la partie de Tamarindus indica à extraire, préférentiellement de feuilles, au solvant d’extraction contenant le carbonate de dialkyle, préférentiellement choisis parmi le carbonate de dioctyle et le carbonate de diéthylhexyle sous agitation pendant 2 heures à 80°C.
Dans un autre mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction pourra être réalisée en présence d’un surfactant non ionique, préférentiellement choisi parmi du lauryl glucoside commercialisé sous le nom de Plantacare® 1200UP par BASF ou encore du caprylyl/capryl glucoside (Plantacare® 810 UP), préférentiellement du caprylyl/capryl glucoside (Plantacare® 810 UP). La concentration en poids du surfactant non ionique pourra être comprise entre 0,5% et 5%, avantageusement entre 0,5 et 1%, encore avantageusement elle sera de 1% en poids par rapport au poids total du mélange extrait et solvant.
Selon un autre mode de réalisation, l’extraction pourra être effectuée par un solvant comprenant de l’eau de coco. Selon ce mode de réalisation, l’extrait selon l’invention peut être obtenu en ajoutant la partie de Tamarindus indica à extraire, préférentiellement de feuilles (ratio feuilles/solvant = 1/10) sous agitation au solvant d’extraction (un mélange eau, eau de coco) dont le pH a été ajusté à 3 ou à 4, pendant 1 heure à 80°C en milieu fermé pour éviter l’évaporation du solvant. L’extrait est alors refroidi, centrifugé et filtré à 0,45 pm.
Dans un autre mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extrait pourra être obtenu par extraction en conditions supercritiques (CO2) en présence d’un co-solvant. Avantageusement, le co-solvant sera l’éthanol. Dans un autre mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction pourra être réalisée par extraction aqueuse en conditions subcritiques.
On entend par extraction en « conditions subcritiques » une extraction en présence d’eau, dans des conditions de température supérieure à 100°C et de pression inférieure à 22,1 MPa (221 bars), telle que l’eau reste à l’état liquide mais possède une viscosité et une tension de surface inférieure à celle de l’eau à température ambiante, augmentant sa constante diélectrique.
Ainsi, la pression d’extraction sera par exemple comprise entre 10 MPa (100 bars) et 25 MPa (250 bars), préférentiellement entre 15 et 22,1 MPa (150 et 221bars).
De manière générale, l’extraction pourra être conduite à partir de matière sèche ou fraîche, avantageusement sèche, en quantité de 0,1 % à 20 % en poids, avantageusement de 1 % à 10 %, très avantageusement de 5 % à 10 %, et encore plus avantageusement de 10 %, en poids par rapport au poids total de la matière et du solvant d’extraction.
L’extraction pourra être réalisée à une température allant de 4°C à 300°C, incluant la température ambiante, c’est-à-dire une température de 20°C. Dans un mode préférentiel de réalisation de l’invention, l’extraction sera réalisée à une température de 60°C à 90°C, préférentiellement de 70°C à 85 °C, encore préférentiellement à une température de 80°C.
Dans un mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction sera conduite à une température de 4°C à 25°C, encore préférentiellement de 4°C à 20°C, encore avantageusement à température ambiante, c’est-à- dire à 20°C.
Dans encore un autre mode alternatif de réalisation de l’invention, l’extraction sera réalisée dans l’eau en conditions subcritiques, à une température allant de 100°C à 300°C, avantageusement de 120°C à 250°C, encore avantageusement entre 140°C et 200°C. L’extraction peut être réalisée à une température donnée unique ou à des températures successives croissantes. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, l’extraction sera réalisée à une température unique de 160°C. Dans un mode alternatif, elle sera conduite selon un gradient de trois températures croissantes comprises entre 100°C et 200°C, tel que 120°C, 140°C puis 160°C ou 110°C, 130°C puis 150°C, ou encore 120°C, 145°C puis 170°C. L’extraction peut être réalisée durant une période allant de 1 heure à 20 heures, préférentiellement durant une période allant de 2 heures à 16 heures. Préférentiellement encore, ladite extraction est réalisée durant une période de 1 heure.
L’extrait de feuilles de Tamarindus indica peut être obtenu par extraction d’une quantité de matière sèche ou fraîche, avantageusement sèche, en quantité de 0,1 % à 20 % en poids, avantageusement de 1 % à 10 %, très avantageusement de 5 % à 10 %, et encore plus avantageusement de 10 %, en poids par rapport au poids total de la matière et du solvant d’extraction en poids de matière sèche de feuilles par rapport au poids total du mélange constitué du solvant et des feuilles (p/p). Préférentiellement, l’extrait est obtenu par extraction d’une quantité de 10 % en poids de matière sèche de feuilles, par rapport au poids total du mélange constitué du solvant, préférentiellement l’eau, et des feuilles (p/p).
Les extraits obtenus sont ensuite de préférence centrifugés et / ou fdtrés et / ou distillés, préférentiellement centrifugés, afin de récupérer la fraction soluble active (extrait brut). Des étapes supplémentaires de décoloration et / ou désodorisation et / ou fractionnement et/ou purification peuvent être effectuées sur l’extrait à n’importe quel stade de l’extraction et selon les techniques connues par l’Homme du métier. L’extrait selon l’invention peut être ensuite concentré par évaporation du solvant, par utilisation de technologies membranaires ou séché par exemple par lyophilisation, zéodratation ou par atomisation.
Dans un mode particulier de réalisation de l’invention notamment pour son utilisation en dermatologie, l’extrait de feuilles de Tamarindus indica, obtenu selon l’invention peut être stérilisé.
L’extrait selon l’invention est préférentiellement obtenu selon l’un des modes de réalisation décrit ci- dessous :
- Dans un premier mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par extraction dans l’eau comme unique solvant d’une quantité de 10% (p / p) de feuilles broyées par rapport au poids total du solvant et de la matière, sous agitation et durant une période d’une heure à une température de 80°C. Après refroidissement, le mélange est centrifugé et l’extrait est filtré. L’extrait est obtenu sous forme liquide dans les conditions décrites dans l’exemple la).
- Dans un deuxième mode de réalisation de l’invention, l’extrait préparé selon le mode opératoire précédent est dilué avec de la glycérine, de manière à obtenir une concentration finale en glycérine de 80% (v / v) en volume de glycérine par rapport au volume total de glycérine et de l’extrait. L’extrait est obtenu sous forme liquide dans les conditions décrites dans l’exemple lb).
- Dans un 3eme mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par macération dans l’eau comme unique solvant d’une quantité de 10% (p / p) en poids de feuilles broyées par rapport au poids total du solvant et de la matière, sous agitation et durant une période de 16 heures à une température de 4°C. Le mélange est centrifugé et l’extrait est ensuite filtré. L’extrait est ensuite dilué de manière à obtenir une concentration finale en glycérine de 80% (v / v) en volume de glycérine par rapport au volume total de glycérine et de l’extrait. L’extrait est obtenu sous forme liquide dans les conditions décrites dans l’exemple le).
- Dans un 4eme mode de réalisation, l’extrait est obtenu par extraction sous agitation et sous reflux d’une quantité de 10% (p / p) en poids de feuilles broyées par rapport au poids total de la matière et du solvant, dans un mélange éthanol : eau (70 : 30 ; v / v) à une température de 80°C durant une période d’une heure. La suspension est filtrée puis l’extrait hydroalcoolique récupéré. La phase alcoolique est évaporée sous vide et la phase aqueuse résiduelle obtenue est centrifugée et filtrée. Cette phase aqueuse est atomisée en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% (p / p) en poids par rapport au poids total de l’extrait et de maltodextrine sous forme solide, dans les conditions décrites dans l’exemple ld).
- Dans un 5eme mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par extraction dans l’eau comme unique solvant d’une quantité de 20% (p / p) en poids de feuilles broyées par rapport au poids du solvant et de la matière, sous agitation et durant une période d’une heure à une température de 80°C. L’extrait brut a été centrifugé, puis filtré puis atomisée en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% (p / p) en poids par rapport au poids total de l’extrait final sous forme solide, dans les conditions décrites dans l’exemple le).
- Dans un 6me mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par extraction aqueuse en conditions subcritiques dans l’eau comme unique solvant des feuilles totales. L’extraction a été effectuée à un débit de 5 ml / min et un rapport solvant / feuilles de Tamarindus indica de 25 ml / g à une température de 120°C, et une pression suffisante pour que l’eau soit dans son état liquide, soit 16 bars. L’extrait est ensuite séché et broyé pour obtenir une poudre fine dans les conditions décrites dans l’exemple lf).
- Dans un 7eme mode de réalisation de l’invention, l’extrait est obtenu par extraction aqueuse en conditions subcritiques dans l’eau comme unique solvant des feuilles totales.
L’extraction a été effectuée à un débit de 5 ml / min et un rapport solvant / feuilles de Tamarindus indica de 25 ml / g à une température de 140°C et une pression suffisante pour que l’eau soit dans son état liquide, soit 18 bars. L’extrait est ensuite séché et broyé pour obtenir une poudre fine dans les conditions décrites dans l’exemple lg).
Selon l’invention, l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention peut être utilisé seul, sous forme d’ingrédient actif et / ou dans une composition cosmétique et / ou nutraceutique, et / ou pharmaceutique, notamment dermatologique, préférentiellement destiné(e) à une application par voie topique et / ou par voie orale, encore préférentiellement à une application par voie topique.
Lorsqu’il est utilisé seul sous forme d’ingrédient actif, l’extrait selon l’invention est préférentiellement soluble et / ou dilué dans un solvant, notamment polaire, tel que l’eau, un alcool, un polyol, un glycol tel que le pentylène glycol et / ou l’hexylène glycol et / ou le caprylyl glycol, ou un de leurs mélanges, préférentiellement un mélange hydroglycolique ou hydroalcoolique, encore préférentiellement comprenant un glycol choisi parmi l’hexylène glycol, le caprylyl glycol et leurs mélanges.
Préférentiellement, l’ingrédient actif n’est pas dilué dans du butylène glycol.
Avantageusement, l’extrait selon l’invention est soluble et / ou solubilisé dans une solution aqueuse comprenant du glycérol, avantageusement dans une solution comprenant au moins 80% (p / p) en poids de glycérol par rapport au poids total de la solution aqueuse.
Alternativement, l'extrait obtenu est dilué et / ou soluble dans une solution aqueuse comprenant du caprylyl glycol, en particulier comprenant entre 0,01 et 5% (p / p) en poids de caprylyl glycol, préférentiellement entre 0,1 et 1% (p / p) en poids de caprylyl glycol, par rapport au poids total la solution aqueuse.
Dans un autre mode de réalisation, l’extrait selon l’invention peut être incorporé dans une composition cosmétique et / ou nutraceutique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable et / ou nutraceutiquement acceptable. Préférentiellement, il est incorporé dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
On entend au sens de la présente invention, par excipient « cosmétiquement acceptable » un composé et / ou solvant topiquement acceptable, c’est-à-dire n’induisant pas de réponse allergique au contact de la peau, incluant le cuir chevelu humain, et / ou les muqueuses, non toxique, non instable, chimiquement.
Dans un mode de réalisation préférentiel de l’invention, l’extrait selon l’invention est présent dans la composition cosmétique et / ou dermatologique en une teneur comprise entre lxl04% et 10% (v / v) en volume, préférentiellement entre lxl04% et 5% (v / v) en volume, encore avantageusement entre lxl03% et 3 % (v / v) en volume, encore préférentiellement entre 0, 1 % et 1 % (v / v) en volume, par rapport au volume total de la composition, ladite composition comprenant en outre au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
La composition cosmétique et / ou dermatologique de l’invention peut être choisie parmi une solution, aqueuse ou huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment un gel douche, un shampoing ; un lait ; une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée ; un masque ; un sérum ; une lotion ; un savon liquide ; un pain dermatologique ; une pommade ; une mousse ; un patch ; un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de poudres de maquillage, de bâtonnet ou de stick, notamment sous forme de rouge à lèvres.
Il peut également s’agir d’un produit de maquillage ou d’un produit de démaquillage.
De façon avantageuse, l'extrait ou la composition de l’invention est destiné à être appliquée sur tout ou partie du corps et / ou du visage et / ou du cuir chevelu, préférentiellement les jambes, les cuisses, les bras, le ventre, le décolleté, le cou, les aisselles, les lèvres, encore préférentiellement tout ou partie du visage, et préférentiellement les joues, le front, le menton, les lèvres, le contour des yeux.
De façon avantageuse, l’extrait et/ou la composition le comprenant est destiné à être appliqué sur une zone de peau saine présentant un relâchement et / ou une zone de peau saine affaissée et/ou une zone de peau saine manquant de tonicité.
Ainsi, avantageusement la composition cosmétique est destinée à une application par voie topique sur la peau saine et / ou les muqueuses saines.
De manière préférentielle, l’extrait selon l’invention est particulièrement adapté pour la formulation de composition dite neutre et douce pour le respect de la glande sébacée, notamment de la peau incluant le cuir chevelu et / ou des muqueuses.
De manière alternative, l’extrait selon l’invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques classiquement utilisées pour une application par voie orale, notamment sous forme d’ingrédient actif nutraceutique et / ou de composition nutraceutique.
Les compositions selon l’invention peuvent contenir tout solvant approprié et / ou tout véhicule approprié et / ou tout excipient approprié, éventuellement en combinaison avec d’autres composés d’intérêt.
De ce fait, pour ces compositions, l'excipient contient par exemple au moins un composé choisi parmi le groupe comprenant les conservateurs, les émollients, les émulsifiants, les tensioactifs, les hydratants, les épaississants, les conditionneurs, les agents matifiants, les stabilisants, les antioxydants, les agents de texture, les agents de brillance, les agents filmogènes, les solubilisants, les pigments, les colorants, les parfums et les filtres solaires. Ces excipients sont de préférence choisis parmi le groupe consistant en les acides aminés et leurs dérivés, les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de Lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrose, les vitamines E et ses dérivés, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytostérols, les esters végétaux, les silicones et ses dérivés, les hydrolysats de protéines, l’huile de Jojoba et ses dérivés, les esters lipo/hydrosolubles, les bétaïnes, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de Saccharose, les dioxydes de Titane, les glycines, et les parabens, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le butylène glycol, le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol-15 stéaryl éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparaben, l’éthylparaben, le propylparaben, le butylparaben, le butylène glycol, les tocophérols naturels, la glycérine, le dihydroxycétyl sodium phosphate, l’isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, la triisononanoïne, l’octyl cocoate, le polyacrylamide, l’isoparaffïne, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l’hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les triglycérides caprique/caprylique, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l’huile de pépin de raisin, l’huile de jojoba, le sulfate de magnésium, l’EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l’acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l’isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l’isostéarate de propylène glycol, le PEG 8, la cire d'abeille, les glycérides d’huile de cœur de palme hydrogénée, les glycérides d’huile de palme hydrogénée, l’huile de lanoline, l’huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l’huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée, et leurs mélanges.
De nombreux ingrédients cosmétiquement actifs sont connus par l'homme du métier pour améliorer la santé et / ou l'apparence physique de la peau (y compris le cuir chevelu) et / ou des muqueuses. L'homme du métier sait formuler les compositions cosmétiques, nutraceutiques ou dermatologiques pour obtenir les meilleurs effets. D'autre part, ces composés peuvent avoir un effet de synergie lorsqu'ils sont combinés les uns aux autres. Ces combinaisons sont également couvertes par la présente invention. Le CTFA Cosmetic Ingrédient Handbook, Second Edition (1992) décrit différents ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques utilisés couramment dans l'industrie cosmétique et pharmaceutique, qui sont en particulier adaptés à une utilisation topique. Des exemples de ces classes d'ingrédients comprennent, sans en être limités, les composés suivants: abrasifs, absorbants, composés à but esthétique tel que les parfums, les pigments, les colorants, les huiles essentielles, les astringents, etc. (par exemple: l’huile de clou de girofle, menthol, camphre, l’huile d’eucalyptus, eugénol, menthyl lactate, distillât d’hamamélis), les agents anti-acné, les agents anti-floculants, les agents antimousse, les agents antimicrobiens (par exemple: iodopropyl butylcarbamate), les antioxydants, les liants, les additifs biologiques, les agents tampons, les agents gonflants, les agents chélatants, les additifs, les agents biocides, les dénaturants, les épaississants, et les vitamines, et les dérivés ou équivalents de ceux-ci, les matériaux formant des films, les polymères, les agents opacifiants, les ajusteurs de pH, les agents réducteurs, les agents dépigmentants ou éclaircissants (par exemple : hydroquinone, acide kojique, acide ascorbique, magnésium ascorbyl phosphate, ascorbyl glucosamine), les agents de conditionnement (par exemple : les humectants).
La composition cosmétique pourra comprendre par ailleurs d’autres agents cosmétiques et / ou nutraceutiques possédant les mêmes propriétés et induisant un effet synergique ou non avec l’extrait selon l’invention, ou des agents cosmétiques à effets complémentaires. Il peut s’agir par exemple d’ingrédients anti-rides, agents stimulant l’activité ou la prolifération des fibroblastes, agents stimulant les molécules de la matrice extra-cellulaire.
Il peut s’agir par ailleurs d’ingrédients actifs anti-âge et / ou agents tenseurs pour un effet de synergie avec l’extrait de Tamarindus indica. Avantageusement, il s’agit d’ingrédients actifs augmentant l’expression génique et / ou protéique du collagène ou d’ingrédients actifs empêchant la dégradation du collagène tels que le rétinol, la vitamine C, un extrait de Davilla rugosa commercialisé sous le nom de Collguard™ par BASF Beauty Care Solutions, un extrait de graine d 'Hibiscus abelmoschus commercialisé sous le nom de Linefactor™, un peptide commercialisé sous le nom de Dermican™ par la demanderesse ou encore les produits commercialisés sous les noms de Matrixyl™, Matrixyl 3000™ et Regestril™ par la société Sederma ou Neuroguard par la société Codif, ou encore Etemaline™ par la société Silab.
Les agents tenseurs utilisables dans l’invention peuvent être choisis parmi les polymères synthétiques, tels que les latex de polyuréthanne ou les latex acryliques, les polymères d'origine naturelle, notamment les polyholosides sous forme d'amidon ou sous forme de carraghénanes, alginates, agars, gellanes, polymères cellulosiques et pectines; les protéines et hydrolysats de protéines végétales ; les silicates mixtes ; les microparticules de cire ; les particules colloïdales de charge inorganique choisies par exemple parmi la silice, les composites silice-alumine ; ainsi que leurs mélanges.
Il peut enfin s’agir d’ingrédients cosmétiques comme par exemple des agents antimicrobiens, agents anti- radicalaires, agents apaisants, calmants ou relaxants, agents agissant sur la microcirculation pour améliorer l’éclat du teint, en particulier du visage, agents cicatrisants ou agents amincissants. Avantageusement la composition cosmétique et / ou dermatologique de la présente invention contient également un ou plusieurs agents tenseurs et / ou un ou plusieurs agents antimicrobiens et / ou un ou plusieurs agents antiradicalaires et / ou un ou plusieurs agents apaisants et / ou un ou plusieurs agents amincissants et / ou un ou plusieurs agents actifs sur la microcirculation.
Parmi les agents antimicrobiens associés à l’extrait de T. indica dans un mode préférentiel la présente invention, on peut citer le 2,4,4'-trichloro-2'-hydroxy diphényl éther (ou triclosan), le 3,4,4'- trichlorobanilide, le phénoxy éthanol, le phénoxypropanol, le phénoxyisopropanol, l'hexamidine iséthionate, le métronidazole et ses sels, le miconazole et ses sels, l'itraconazole, le terconazole, l'éconazole, le kétoconazole, le saperconazole, le fluconazole, le clotrimazole, le butoconazole, l'oxiconazole, le sulfaconazole, le sulconazole, la terbinafine, l'acide undécylénique et ses sels, le peroxyde de benzoyle, l'acide 3-hydroxy benzoïque, l'acide 4-hydroxy benzoïque, l'acide phytique, l'acide N-acétyl-L-cystéine, l'acide lipoïque, l'acide azélaïque et ses sels, l'acide arachidonique, le résorcinol, l'octoxyglycérine, l'octanoylglycine, le caprylyl glycol, l'acide 10-hydroxy-2-décanoïque, le famesol, les phytosphingosines et leurs mélanges. Les agents anti-radicalaires peuvent être la vitamine C et ses dérivés dont le glucoside d'ascorbyle, les phénols et polyphénols, en particulier les tannins, l'acide ellagique et l'acide tannique; l'épigallocatéchine et les extraits naturels en contenant, en particulier les extraits de thé vert; les anthocyanes; les acides phénols, les stilbènes; des actifs piégeurs de composés aromatiques mono- ou polycycliques, les tannins tels que l'acide ellagique et les dérivés indoles et / ou des actifs piégeurs de métaux lourds tels que l'EDTA, des actifs anti-radicalaires tels que la vitamine E et ses dérivés tels que l'acétate de tocophéryle ; les bioflavonoïdes; la coenzyme Q10 ou ubiquinone.
Comme agents apaisants entrant dans la composition de l'invention, on peut utiliser les triterpènes pentacycliques, l'acide ursolique et ses sels, l'acide oléanolique et ses sels, l'acide bétulinique et ses sels, les sels de l'acide salicylique et en particulier le salicylate de zinc, le bisabolol, l'allantoïne, les huiles insaturées en oméga 3, la cortisone, l'hydrocortisone, l'indométhacine et la beta méthasone, les actifs anti- inflammatoires, et notamment ceux décrits dans la demande FR2847267, en particulier l’extrait de racine de Pueraria lobata commercialisé sous le nom Inhipase™ par la demanderesse, les extraits de Theobroma cacao.
Les ingrédients actifs agissant sur la microcirculation, vasoprotecteurs ou vasodilatateurs, peuvent être choisis parmi les flavonoïdes, les ruscogénines, les nicotinates, les huiles essentielles.
Les actifs amincissants peuvent être notamment choisis parmi les agents inhibiteurs de la lipoprotéine lipase tels que ceux décrits dans le brevet US2003086949 (Coletica) et en particulier un extrait de liane du Pérou ( Uncaria tomentosa ); les actifs drainants, notamment l’hesperitine laurate (Flavagrum™), ou quercitine caprylate (Flavenger™); les agents inhibiteurs de l’enzyme phosphodiestarase, les agents activateurs de l’adenylate cyclase, l’AMPc et / ou les actifs capable de piéger la spermine et / ou la spermidine. On peut citer un extrait de racine de Coleus Forskohlii, un extrait de Cecropia obtusa, d’Uva lactuca, la caféine, la forskoline, la théophylline, la théobromine et / ou leurs dérivés, un produit de kappa carraghénanes hydrolysé dénommé Slimexcess™ commercialisé par la demanderesse et / ou leurs mélanges.
La présente invention a également pour objet un procédé de soin cosmétique comprenant l’application par voie topique sur au moins une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine d’un extrait de feuilles de Tamarindus indica selon l’invention, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction, ou d’une composition cosmétique le comprenant, pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, notamment la fermeté et / ou l’élasticité, préférentiellement la fermeté. Un mode préférentiel de l’invention concerne un procédé de soin cosmétique caractérisé en ce qu’il comprend l’application par voie topique sur au moins une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine d’un extrait de feuille Tamarindus indica l’invention, pour augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité et/ou pour augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
De manière avantageuse, l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention, préférentiellement sous la forme d’une composition cosmétique selon l’invention, est utilisé en application topique régulière et préférentiellement au moins une fois par jour, avantageusement deux fois par jour, pendant au moins 10 jours, préférentiellement pendant 20 jours, et encore préférentiellement pendant au moins 28 jours.
De manière avantageuse, l’application par voie topique d’un extrait de Tamarindus indica selon l’invention ou d’une composition cosmétique le comprenant, est effectuée sur tout ou partie du corps et / ou du visage et / ou du cuir chevelu, préférentiellement les jambes, les cuisses, les bras, le ventre, le décolleté, le cou, les aisselles, les lèvres, encore préférentiellement tout ou partie du visage, et préférentiellement les joues, le front, le menton, les lèvres, le contour des yeux.
Le procédé de soin cosmétique selon l'invention pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, préférentiellement pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, notamment la fermeté et / ou l’élasticité, préférentiellement la fermeté comprend avantageusement les étapes suivantes :
- L’identification sur l’individu d’une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine, pour laquelle on souhaite maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, notamment la fermeté et / ou l’élasticité, préférentiellement la fermeté, et
- L’application topique sur cette zone de peau saine et / ou de muqueuse saine, d’une composition cosmétique comprenant l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction, en une quantité efficace pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, notamment la fermeté et / ou l’élasticité, préférentiellement la fermeté, à savoir en une teneur d’extrait comprise entre lxl04% et 10% (v / v) en volume, préférentiellement entre lxl04% et 5% (v / v) en volume, encore avantageusement entre lxl03% et 3 % (v / v) en volume, encore préférentiellement entre 0, 1 % et 1 % (v / v) en volume, par rapport au volume total de la composition.
Au sens de la présente invention, on entend par « voie topique », l’application locale directe et / ou la vaporisation de l’extrait ou de la composition selon l’invention sur la surface de la zone de peau saine et / ou de muqueuse saine.
Au sens de la présente invention, on entend par « topiquement et / ou oralement acceptable », un ingrédient adapté à une application respectivement par voie topique et / ou orale, non toxique, non irritant pour la peau y compris le cuir chevelu et n’induisant pas de réponse allergique, et qui n’est pas instable sur le plan chimique.
De manière avantageuse, le procédé selon l’invention porte sur une méthode de traitement cosmétique pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines comprenant les étapes suivantes :
- L’identification sur l’individu d’une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine, pour laquelle on souhaite maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et
- L’application topique sur cette zone de d’une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine, d’une composition cosmétique comprenant l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction, en une quantité efficace pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, à savoir en une teneur d’extrait comprise entre 1x10-4% et 10% (v / v) en volume, préférentiellement entre 1x10-4% et 5% (v / v) en volume, encore avantageusement entre 1x10-3% et 3% (v / v) en volume, encore préférentiellement entre 0,1% et 1% (v / v) en volume, par rapport au volume total de la composition.
L’invention a également pour objet, l’extrait de T. indica selon l’invention, seul ou dans une composition dermatologique le comprenant, pour son utilisation, avantageusement par voie topique, dans le traitement et / ou la prévention des pathologies de la peau et / ou des muqueuses impliquant une perte de l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte des propriétés biomécaniques de la peau et / ou des muqueuses, notamment une perte de la fermeté de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de la prolifération des fibroblastes de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de la différenciation des kératinocytes de la peau et / ou des muqueuses, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction.
Au sens de la présente invention, on entend d’un point de vue dermatologique par « traitement et / ou prévention des pathologies de la peau et / ou des muqueuses impliquant une perte de la fermeté de la peau et / ou des muqueuses », une augmentation à des fins thérapeutiques de la fermeté de la peau et / ou des muqueuses qui ont perdu de la fermeté sous l’effet de pathologies de la peau et / ou des muqueuses comme par exemple la couperose, les télangiectasies.
Au sens de la présente invention, on entend d’un point de vue dermatologique par « traitement et / ou prévention des pathologies de la peau et / ou des muqueuses impliquant une perte d’élasticité de la peau et / ou des muqueuses », une augmentation à des fins thérapeutiques de l’élasticité de la peau et / ou des muqueuses qui ont perdu de leur élasticité sous l’effet de pathologies de la peau et / ou des muqueuses comme par exemple l’élastose solaire et/ou la pathologie cutis laxa.
L’extrait selon l’invention peut trouver sous la forme d’une composition pharmaceutique, préférentiellement dermatologique, comprenant au moins un excipient pharmaceutiquement et / ou dermatologiquement, acceptable. Dans un mode de réalisation de l’invention, ladite composition est appliquée par voie topique et / ou orale, préférentiellement par voie topique.
Avantageusement, il est présent dans la composition pharmaceutique, préférentiellement dermatologique, à une concentration de lxl04% à 10% en poids, préférentiellement entre lxl04% et 5% en poids, encore avantageusement entre lxl03% et 0,5% en poids par rapport au poids total de la composition, ladite composition comprenant en outre au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.
L’invention sera mieux comprise à la lecture de la description des figures et des exemples qui suivent. Des exemples faisant référence à la description de l’invention sont présentés ci-après. Ces exemples sont donnés à titre d’illustration et ne sauraient limiter en aucun cas la portée de l’invention. Chacun des exemples a une portée générale.
Les exemples font partie intégrante de la présente invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la technique antérieure quelconque à partir de la description prise dans son ensemble, incluant les exemples, fait partie intégrante de l'invention.
D'autre part, dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire, la température est exprimée en degré Celsius sauf indication contraire, et la pression est la pression atmosphérique, sauf indication contraire.
Exemples
Exemple 1 : Préparations de différents extraits de Tamarindus indica
Exemple la) : Une quantité de 10% (p / p) en poids de feuilles de Tamarindus indica séchées et broyées (origine Burkina Faso) par rapport au mélange total de solvant et de feuilles a été mise à extraire dans l’eau comme unique solvant pendant une heure sous agitation à une température de 80°C. L’extrait brut a été centrifugé, fdtré (0,45pm). L’extrait est donc obtenu sous forme liquide.
Exemple 1b) : Une quantité de 10% (p / p) poids de feuilles de Tamarindus indica séchées et broyées (origine Burkina Faso) par rapport au mélange total eau et feuilles a été mise à macérer dans l’eau comme unique solvant pendant 1 heure à une température de 80°C. L’extrait brut a été centrifugé, fdtré (0,45pm) puis formulé avec de la glycérine, pour une quantité finale de glycérine de 80% (v / v) en volume par rapport au volume total de l’extrait et de la glycérine. L’extrait est donc obtenu sous forme liquide.
Exemple le) : Une quantité de 10% (p / p) poids de feuilles de Tamarindus indica séchées et broyées (origine Burkina Faso) par rapport au mélange total eau et feuilles a été mise à macérer dans l’eau comme unique solvant pendant 16 heure à une température de 4°C. L’extrait brut a été centrifugé, filtré (0,45mih) puis formulé avec de la glycérine, pour une quantité finale de glycérine de 80% (v / v) en volume par rapport au volume total de l’extrait et de la glycérine. L’extrait est donc obtenu sous forme liquide.
Exemple ld) : Une quantité de 10% (p / p) en poids de feuilles de Tamarindus indica séchées et broyées (origine Burkina Faso) par rapport au mélange total eau et feuilles est extraite sous agitation et sous reflux dans un solvant constitué d’un mélange éthanol : eau (70 :30 ; v/v), à une température de 80°C durant une période d’une heure. La suspension a ensuite été filtrée puis l’extrait hydroalcoolique récupéré. La phase alcoolique a été évaporée sous vide et la phase aqueuse résiduelle obtenue a été centrifugée et filtrée. Cette phase aqueuse a été atomisée en présence de maltodextrine, en quantité finale de maltodextrine de 80% (p / p) en poids par rapport au poids total de l’extrait et de maltodextrine. L’extrait est donc obtenu sous forme de poudre.
Exemple le) : Une quantité de 20% (p / p) en poids de feuilles de Tamarindus indica séchées et broyées (origine Burkina Faso) par rapport au mélange total eau et feuilles a est extraite sous agitation dans de l’eau comme unique solvant pendant une heure à une température de 80°C. L’extrait brut a été centrifugé, décanté, filtré (0,45 pm) puis atomisé en présence de maltodextrine, en une quantité finale de maltodextrine de 80% (p / p) en poids par rapport au poids total de l’extrait final. L’extrait est donc obtenu sous forme de poudre. Exemple lf) : Des feuilles entières de Tamarindus indica (origine Burkina Faso) séchées ont été extraites en conditions subcritiques avec l’eau comme unique solvant dans une colonne d’extraction avec un débit de 5 ml / min et un rapport solvant / feuilles de Tamarindus indica de 25 ml / g, à une température de 120°C, et une pression de 16 bars. L’extrait récupéré a été séché et broyé. L’extrait est donc obtenu sous forme de poudre.
Exemple 1g) : Des feuilles entières de Tamarindus indica (origine Burkina Faso) séchées ont été extraites en conditions subcritiques avec l’eau comme unique solvant dans une colonne d’extraction avec un débit de 5 ml / min et un rapport solvant / feuilles de Tamarindus indica de 25 ml / g, à une température de 120°C, et une pression del8 bars. L’extrait récupéré a été séché et broyé. L’extrait est donc obtenu sous forme de poudre.
Exemple 2 : Mise en évidence de l'effet d'un extrait de Tamarindus indica selon l'invention sur la prolifération des fibroblastes
Protocole :
Des fibroblastes humains normaux, c'est-à-dire non pathologiques, obtenus à partir de biopsies abdominales d'un donneur sain ont été ensemencés en plaque 96 puits dans un milieu défini (FGM) en présence de l’extrait Tamarindus indica préparé selon l'exemple la) de la présente invention, à une concentration finale de 1 % (p/p) en poids de l’extrait par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait. Le même milieu de culture sans ajout d'extrait selon l'invention a été utilisé comme contrôle (témoin non traité). Après 4 jours de culture à 37°C, le milieu de culture a été prélevé et éliminé. Une solution de bromure de 3-(4,5- diméthyl-2-thiazolyl)-2,5-diphényl-2H-tétrazolium (MTT) est déposée sur les tapis cellulaires pendant 3 heures. La solution est ensuite éliminée et remplacée par du diméthylsulfoxyde pendant 15 minutes. Les densités optiques de chaque condition sont ensuite mesurées en utilisant un lecteur multi plaques EnVision (Perkin Elmer).
Pour chaque condition, les résultats sont exprimés par la moyenne des pourcentages des viabilités cellulaires par rapport à la moyenne des viabilités mesurées dans les conditions contrôle (témoin non traité) (n=3).
Résultats : [Tableau 1]
Figure imgf000026_0001
Conclusion : L'extrait de Tamarindus indica selon l'exemple la) a induit une stimulation de la prolifération des fibroblastes humains.
Exemple 3 : Mise en évidence de l'effet d'un extrait de Tamarindus indica selon l'invention sur la synthèse d’involucrine.
Protocole :
Les kératinocytes humains normaux, c'est-à-dire non pathologiques, de donneurs adultes ont été ensemencés dans un milieu de croissance (milieu standard MCDB 153, Sigma- Aldrich France complété par du sérum de veau fœtal à 2%). Après 3-4 jours d'incubation à 37° C, C02 = 5%, le milieu de croissance a été échangé par du milieu standard MCDB 153 sans SVF (contrôle non traité), et avec une gamme de concentrations de l’extrait de Tamarindus indica selon l’exemple la). Comme référence positive, une gamme de concentrations de CaC12 (0,1 - 0,3 - 1 mM) a été testée sur des kératinocytes humains pour calibrer le test. Après 3 jours d'incubation à 37 ° C, C02 = 5%, la viabilité cellulaire a été quantifiée en utilisant le test MTT, et le niveau d'involucrine synthétisé a été mesuré par une méthode ELISA sur les homogénats cellulaires selon les recommandations du fabricant.
Les résultats ont été calculés par rapport à une gamme d'involucrine, puis ils ont été exprimés en pourcentage par rapport au milieu de culture cellulaire témoin sans produit (témoin non traité). Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± écart-type à partir de 2 tests (provenant de 2 donneurs de kératinocytes différents) chacun réalisé en triple. L'activité du produit a été évaluée statistiquement selon le processus logiciel Sigmaplot™. Résultats :
[Tableau 2]
Figure imgf000027_0001
L’extrait de Tamarindus indica selon l’exemple la) aux concentrations de 0,3 % (p/p) (p/p) en poids de l’extrait liquide par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait et 1 % (p/p) en poids de l’extrait liquide par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait augmente de manière significative de respectivement 37% et de 53 % la synthèse d’involucrine par les kératinocytes. L’extrait de Tamarindus indica selon l’invention peut donc être utilisé pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Exemple 4 : Augmentation de l’expression de collagène de type I et V par les fibroblastes en présence de différents extraits de T. indica selon l’invention.
Protocole : Des fibroblastes humains dits « normaux », c’est-à-dire ne présentant pas de pathologie, issus d’une donneuse saine de 42 ans ont été cultivés dans un milieu défini (FGM) durant une période de 48 heures en présence de l’extrait de Tamarindus indica selon l'exemple la) à une concentration finale de 0,3% (p/p) en poids de l’extrait par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait ou à 1 % (p/p) en poids de l’extrait par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait, puis le milieu cellulaire a été éliminé. Le même milieu de culture sans ajout d’extrait selon l’invention a été utilisé comme témoin (Contrôle). Le tapis cellulaire obtenu a été lysé avec une solution d’hydroxyde d’ammonium.
Le dosage des collagènes de type I et V matures a été évalué à l'aide d’une technologie d'intensité de fluorescence à résolution temporelle, DELF1A®, développée et brevetée par la demanderesse.
Une solution de saturation tampon phosphate salin / albumine sérique bovine (Perkin Elmer, Courtaboeuf, France) a été ajoutée sur la matrice déposée avant réaction avec soit l'anticorps primaire anti-collagène 1 (fnterchim / Acris, Montluçon, France, LH0284 / RI 038) soit le primaire anticorps anti -collagène V (fnterchim / Acris, Montluçon, France, LH4523 / RI 042). Après rinçage dans du tampon phosphate salin, l'anticorps secondaire conjugué à l'Europium (Perkin Elmer) a été ajouté. Enfin, une solution de révélation (Perkin Elmer) a été ajoutée. L'intensité de fluorescence a été lue (/.cxc. 340 nm / /.cm. 615 nm) en utilisant un lecteur de plaque à étiquettes multiples EnVision® (Perkin Elmer).
Les résultats de fluorescence ont été normalisés par rapport à la fluorescence obtenue avec le même milieu cellulaire en l’absence de l’extrait de T. indica (Contrôle) et ont été rapportés à la quantité d‘ADN obtenue dans chaque condition. Les résultats présentés correspondent à la moyenne de 6 essais (n=6). (ET : Ecart- type).
Résultats : [Tableau 3]
Figure imgf000028_0001
Conclusion : L'extrait de Tamarindus indica selon l’exemple la) a induit une augmentation de l'expression protéique du collagène de type I et V dans des fibroblastes humains cultivés in vitro. L'extrait selon l'invention peut donc être utilisé pour augmenter la fermeté de la peau et / ou des muqueuses.
Exemple 5 : Augmentation de l’expression du collagène de type IV par les kératinocytes en présence de différents extraits de T. indica selon l’invention.
Protocole : Des kératinocytes humains sains obtenus à partir d'une biopsie cutanée humaine d'une femme de 50 ans ont été ensemencés et cultivés jusqu'à confluence dans un milieu défini (KSFM, Life Technologies, France) à 37 ° C avec 5% de C02 sous 95% d'humidité relative.
Les kératinocytes ont été incubés 48 heures à 37 ° C, avec 5% de C02 avec ou sans extrait de Tamarindus indica selon l’exemple la) à 0,1%. Le témoin non traité correspond aux conditions sans aucun produit ajouté dans le milieu de culture et du TGF b à 5ng / mL a été utilisé comme référence positive.
Le milieu de culture a été éliminé et les kératinocytes ont subi une lyse avec une solution d'hydroxyde d'ammonium (Sigma, France). Les puits ont ensuite été saturés 30 minutes avec une solution d'albumine sérique bovine (BSA; Sigma France), puis incubés une heure avec un anticorps monoclonal anti-collagène IV dilué au 1/2500 suivi d'un lavage et d'une incubation supplémentaire d'une heure à température ambiante avec un anticorps secondaire dilué au 1/25000. Le milieu de culture cellulaire a ensuite été retiré et remplacé par une solution fluorescente révélatrice. La fluorescence a finalement été enregistrée à 340exc / 615em nm. La concentration de collagène IV a été déduite d'une courbe standard de solution de collagène IV disponible dans le commerce. Les lectures ont été normalisées à la quantité d'ADN cellulaire déterminée à l'aide d'un kit Picogreen.
Les résultats de la synthèse de collagène IV par les kératinocytes sont normalisés par rapport au témoin non traité et sont exprimés en pourcentage moyen (%) ± SD. L'analyse statistique a été effectuée en utilisant la méthode One way ANOVA Dunnet suivant la recommandation du logiciel Sigmaplot (Systat Software Inc, USA). Le seuil de signification a été fixé à 5% (p <0,05).
Résultats [Tableau 4]
Figure imgf000029_0001
Conclusion : L'extrait de Tamarindus indica selon l’exemple la) a induit une augmentation de l'expression protéique du collagène de type IV dans des kératinocytes humains cultivés in vitro. L'extrait selon l'invention peut donc être utilisé pour augmenter la fermeté de la peau et / ou des muqueuses.
Exemple 6 : Mise en évidence de l'effet d'un extrait de Tamarindus indica selon l'invention sur l’expression génique des molécules de la matrice extracellulaire
Protocole :
Quatre souches différentes de fibroblastes humains primaires ont été obtenues à partir de biopsies cutanées chirurgicales de femmes donneuses (entre 52 et 64 ans). Les fibroblastes ayant subi 4 ou 5 passages ont été cultivés dans du milieu minimum essentiel de Eagle avec du sérum de veau fœtal (SVF) et incubés à 37 ° C avec 5% de C02.
Après 24 heures de croissance, les cellules ont été traitées avec l’extrait de Tamarindus indica selon l'exemple la) à une concentration finale de 0,3% (p/p) en poids de l’extrait par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait ou à 1 % (p/p) en poids de l’extrait par rapport au poids du milieu de culture et de l’extrait, et ont été incubées pendant 24 ou 48 heures à 37 °C avec 5% de C02. Les conditions de contrôle correspondent à la culture de fibroblastes sans ajout de produit au milieu de culture basal. L'absence de cytotoxicité induite par le traitement a été vérifiée en utilisant la méthode du bleu trypan.
Les ARN totaux des cultures de fibroblastes ont été extraits avec le kit NucleoSpin miRNA (Machery- Nagel), selon les instructions du manuel. La quantification et le contrôle de la qualité des ARN totaux ont été effectués par mesure des densités optiques à 260 et 280 nm.
Une première analyse a été réalisée sur un mélange de la même quantité d'ARN total extrait de 3 cultures de fibroblastes traitées. Une matrice PCR personnalisée dédiée à 88 gènes stratégiques impliqués dans la qualité de la matrice extracellulaire dermique (Prime PCR Custom Plate 384 Wells-96 genes, Biorad) a été créée. Un panel de gènes dont l'expression a été modulée par les traitements l’extrait de Tamarindus indica selon l'exemple la) a été sélectionné. Pour valider les modulations génétiques identifiées, des analyses qRT- PCR spécifiques dédiées aux gènes cibles sélectionnés ont été réalisées sur chacune des 4 cultures de fibroblastes. Des transcriptions inverses ont été réalisées sur 0,1 pg d'ARN dans 20 mΐ de mélange final en utilisant le SuperScript IV V1LO Master Mix (fnvitrogen). Des PCR quantitatives de chaque gène ont été effectuées sur 2 mΐ de mélange de transcription inverse dilué à 1/2 dans 10 mΐ de mélange réactionnel final en utilisant le système LC480 SYBR Green 1 Master (Roche) et des amorces dédiées dans un thermocycleur LC480 ™ (Roche). L'analyse des gènes domestiques (ACTB: actine B; SDHA: succinate déshydrogénase) a été réalisée parallèlement aux gènes cibles. Chaque analyse de qPCR a été réalisée sur du double et moyennes des Ct de chaque analyse ont été utilisées pour le calcul de la modulation de l'expression des gènes par la méthode AACt.
Les résultats ont été exprimés en pourcentage +/- écart type, d'expression gène cible dans la condition traitée avec l'extrait de Tamarindus indica selon l'exemple la) par rapport à la condition non traitée (à 100%) pour chaque culture (n = 4). L'analyse statistique a été réalisée via le test de Mann & Whitney par rapport à un état non traité.
Résultats : [Tableau 5]
Figure imgf000030_0001
Figure imgf000031_0001
Conclusion : L'extrait de Tamarindus indica selon l'exemple la) a induit l’augmentation de l’expression génique des gènes codant pour les molécules de collagène et/ou des fibres élastiques. L'extrait selon l'invention peut donc être utilisé pour augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, notamment la fermeté et / ou l’élasticité et / ou la densité de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
Exemple 7 : Exemple d’ingrédient cosmétique comprenant un extrait de Tamarindus indica selon l'invention
[Tableau 6]
Figure imgf000031_0002
Exemple 8 : Exemple de composition cosmétique comprenant un extrait de Tamarindus indica selon l'invention
On procède selon les méthodes connues de l’homme du métier pour mélanger ensemble les différentes phases A, B, C, D ci-dessous pour préparer une composition selon la présente invention. Les proportions sont exprimées en % et les noms en majuscules correspondent aux noms INCI des ingrédients.
Phase A
GLYCERYL STEARATE AND PEG- 100 STEARATE 4,00
PENTAERYTHRITYL DISTEARATE 1,50
CETEARYL ISONONANOATE 3,00
PROPYLHEPTYL CAPRYLATE 5,00
COCO CAPRYLATE 2,00
DICAPRYLYL CARBONATE 3,00
DIMÉTHICONE 1,00
Phase B
Eau 64,43
Propylène glycol, phénoxyéthanol, chlorphénésine, méthylparabène 1 ,00
Glycérine 1,57
Gomme de xanthane 0,20
Butylène glycol 2,00
Hydroxyde de sodium, eau 0,15
Phase C
Carbomère 0,15
Eau 10
Phase D
Extrait de Tamarindus indica obtenu selon exemple la) 1,00
Exemple 9 : Exemple d’une composition dermatologique Exemple 9a) : Pommade contenant l’extrait selon l’invention.
La composition ci-après est préparée selon des méthodes connues de l’homme du métier, en particulier s’agissant des différentes phases à mélanger entre elles. Les quantités indiquées sont en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition. Ingrédient * 3,00
Excipient :
Polyéthylène basse densité 5,50 Paraffine liquide Qsp 100
* L’ingrédient est préparé selon l’exemple la) précédent. L’ingrédient selon l’invention est stérilisé puis séché avant d’être incorporé dans la composition sous forme de pommade.
Exemple 9b) Crème contenant l’extrait selon l’exemple la).
[Tableau 7]
Figure imgf000033_0001
Les phases A et B sont chauffées à 75° puis mélangés sous agitation. Une fois que le mélange est revenu à température ambiante, les phases C et D sont ajoutées sous agitation.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation cosmétique et/ou nutraceutique d’un extrait de feuilles de Tamarindus indica pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines, l’extrait n’étant pas obtenu en utilisant du butylène glycol en tant que solvant d’extraction.
2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle les molécules de la matrice extracellulaire la peau saine et / ou des muqueuses saines sont choisies parmi les fibres de collagène et / ou les fibres élastiques de la matrice extracellulaire de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène de type I, III, IV, V, VI, VII, XII, XIII, XIV, XVI, XVII, XXIV et / ou XXIX, préférentiellement de type I, III, IV, V et / ou XIV, préférentiellement les fibres de collagène de type I, IV et / ou V, encore préférentiellement les fibres de collagène de type I.
4. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle l’expression est l’expression génique, préférentiellement des gènes choisis parmi LAMBl, LAMG1, NID-1, COL7A1, BGN, SPARC, COPIAI, COL3A1, COPIA, COPIAI, COU Al, COIAA1, COP, A2, COP5A1, COP5A2, COP14A1, P4HA1, P4HA2, P4HA3, P4HB .
5. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité et / ou la densité de la peau saine et / ou des muqueuses saines, encore préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
6. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
7. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 67, dans laquelle l’extrait est obtenu par extraction dans un solvant polaire protique, préférentiellement obtenu par extraction aqueuse, encore préférentiellement obtenu dans l’eau comme unique solvant.
8. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, dans laquelle l’extrait est appliqué par voie topique sur la peau saine et/ou les muqueuses saines.
9. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, telle que l’extrait est présent dans la composition cosmétique à une teneur comprise entre lxl04% et 10% (v / v) en volume, préférentiellement entre lxl04% et 5% (v / v) en volume, encore avantageusement entre lxl03% et 3% (v / v) en volume, encore préférentiellement entre 0, 1 % et 1 % (v / v) en volume, par rapport au volume total de la composition, ladite composition comprenant en outre au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
10. Procédé de soin cosmétique caractérisé en ce qu’il comprend l’application par voie topique sur au moins une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine d’un extrait de Tamarindus indica selon l’une des revendication 1 ou 7, ou d’une composition cosmétique selon la revendication 9, pour maintenir et / ou augmenter l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau saine, des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter les propriétés biomécaniques de la peau saine et / ou des muqueuses saines, préférentiellement la fermeté et / ou l’élasticité.
11. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 10, caractérisé en ce qu’il comprend l’application par voie topique sur au moins une zone de peau saine et / ou de muqueuse saine d’un extrait de Tamarindus indica selon l’une des revendication 1 ou 7, ou d’une composition cosmétique selon la revendication 9, pour maintenir et / ou augmenter la prolifération des fibroblastes de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou pour maintenir et / ou augmenter la différenciation des kératinocytes de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
12. Procédé de soin cosmétique l’une quelconque des revendications 10 ou 11, dans laquelle l’application par voie topique d’un extrait de Tamarindus indica selon l’une des revendication 1 ou 7, ou d’une composition cosmétique selon la revendication 9, est effectuée sur tout ou partie du corps et / ou du visage et / ou du cuir chevelu, préférentiellement les jambes, les cuisses, les bras, le ventre, le décolleté, le cou, les aisselles, les lèvres, encore préférentiellement tout ou partie du visage, et préférentiellement les joues, le front, le menton, les lèvres, le contour des yeux.
13. Procédé de soin cosmétique selon l’une quelconque des revendications 10 à 12, dans lequel la composition cosmétique comprend l’extrait de Tamarindus indica selon l’invention à une concentration de Ixl04% à 10% (v / v) en volume, préférentiellement de lxlO4% à 5% (v / v) en volume, encore avantageusement de lxl03% et 3% (v / v) en volume, encore préférentiellement entre 0,1% et 1% (v / v) en volume, par rapport au volume total de la composition, ladite composition comprenant en outre au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
14. Extrait de Tamarindus indica obtenu selon l’une des revendication 1 ou 7, ou d’une composition dermatologique le comprenant, pour son utilisation dans le traitement et / ou la prévention des pathologies de la peau et / ou des muqueuses impliquant une perte de l’expression des molécules de la matrice extracellulaire de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de l’expression des fibres de collagène et / ou des fibres élastiques de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte des propriétés biomécaniques de la peau et / ou des muqueuses, notamment une perte de la fermeté de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de la prolifération des fibroblastes de la peau et / ou des muqueuses, et / ou une perte de la différenciation des kératinocytes de la peau et / ou des muqueuses.
15. Extrait de Tamarindus indica pour son utilisation selon la revendication 14, caractérisé en ce qu’il se trouve sous la forme d’une composition dermatologique comprenant au moins un excipient dermatologiquement acceptable.
16. Extrait de Tamarindus indica pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 14 à 15, caractérisé en ce qu’il est présent dans la composition pharmaceutique, préférentiellement dermatologique, à une concentration de lxl04% à 10% (v / v) en volume, préférentiellement de lxl04% à 5% (v / v) en volume, encore avantageusement de lxl03% et 0,5% (v / v) en volume, encore préférentiellement entre 0, 1 % et 1 % (v / v) en volume, par rapport au volume total de la composition, ladite composition comprenant en outre au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.
PCT/FR2021/050135 2020-01-30 2021-01-26 Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d'un extrait de tamarindus indica l. et / ou d'une composition le comprenant WO2021152250A1 (fr)

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