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TWI496790B - 介白素-１３結合蛋白質 - Google Patents

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TWI496790B
TWI496790B TW096133634A TW96133634A TWI496790B TW I496790 B TWI496790 B TW I496790B TW 096133634 A TW096133634 A TW 096133634A TW 96133634 A TW96133634 A TW 96133634A TW I496790 B TWI496790 B TW I496790B
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狄克森 理查Ｗ
銀華
包克 強納森Ｐ
雅吉莉亞迪 瑪麗亞Ａ
庫夫 卡洛琳Ａ
庫瑪 珊卡
辛頓 保羅Ｒ
陳炎
梅林 泰瑞Ｌ
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艾伯維巴哈馬有限公司
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Description

介白素-13結合蛋白質
本發明係關於IL－13結合蛋白，且具體言之係關於其於預防及/或治療包括哮喘、過敏、COPD、纖維化及癌症之各種疾病之用途。
本申請案之內容服從Protein Design Labs,Inc.與Abbott Laboratories於2005年12月14日簽訂之共同研究協約，且係關於IL－13之重組工程化抗體。
人類IL－13為自活化T細胞選殖之17－kDa醣蛋白(Zurawski與de Vries 1994 Immunol Today 15 19－26)且由Th2譜系之活化T細胞產生，儘管Th0及Th1 CD4＋T細胞、CD8＋T細胞及若干諸如肥大細胞之非T細胞群體亦產生IL－13(Zurawski及de Vries 1994 Immunol Today 15 19－26)。IL－13之功能包括在人類B細胞中轉變成IgE(Punnonen,Aversa等人1993 Proc Natl Acad Sci U S A 90 3730－4)且抑制人類及小鼠發炎性細胞激素產生(de Waal Malefyt,Figdor等人。1993 J Immunol 151 6370－81；Doherty,Kastelein等人。1993 J Immunol 151 7151－60)之免疫球蛋白同型。IL－13與其細胞表面受體IL－13Rα1及IL－13Rα2結合。IL－13Rα1以低親和力(KD約10 nM)與IL－13相互作用，接著募集IL－4Ra以形成高親和力(KD約0.4 nM)信號傳輸雜二聚受體複合體(Aman,Tayebi等人。1996 J Biol Chem 271 29265－70；Hilton,Zhang等人。1996 Proc Natl Acad Sci U S A 93 497－501)。IL－4R/IL－13Rα1複合體表現於諸如B細胞、單核細胞/巨噬細胞、樹狀細胞、嗜伊紅性粒細胞、嗜鹼性細胞、成纖維細胞、內皮細胞、氣管上皮細胞及氣管平滑肌細胞之許多細胞類型上(Graber,Gretener等人。1998 Eur J Immunol 28 4286－98；Murata,Husain等人。1998 Int Immunol 10 1103－10；Akaiwa,Yu等人。2001 Cytokine 13 75－84)。IL－13Rα1/IL－4R受體複合體之連接使得包括信號轉導蛋白及轉錄活化因子(STAT6)及胰島素受體底物－2(IRS－2)途徑之各種信號轉導途徑活化(Wang,Michieli等人。1995 Blood 86 421－27；Takeda,Kamanaka等人。1996 J Immunol 157 3220－2)。僅IL－13Rα2鏈對IL－13具有高親和力(KD約0.25－0.4 nM)且充當反向調節IL－13結合之誘餌受體(Donaldson,Whitters等人。1998 J Immunol 161 2317－24)及誘導巨噬細胞及可能地其他細胞類型中TGF－b經由AP－1途徑合成及纖維化之信號傳輸受體(Fichtner－Feigl,Strober等人。2006 Nat Med 12 99－106)。
臨床前哮喘動物模型中進行之若干研究指示IL－13在哮喘中起重要作用。此等數據包括IL－13基因剔除小鼠之哮喘抗性以及各種小鼠模型中IL－13拮抗劑(可溶性IL－13受體、抗IL－13 mAbs等)之哮喘表型抑制作用(Sela 1999 Harefuah 137 317－9；Wills－Karp及Chiaramonte 2003 Curr Opin Pulm Med 9 21－7；Wills－Karp 2004 Immunol Rev 202 175－90)。多個研究已證明向小鼠以及天竺鼠之肺部藥理學投與重組IL－13誘導氣管黏液高度分泌、嗜伊紅血球增多及AHR(Grunig,Warnock等人。1998 Science 282 2261－3；Wills－Karp,Luyimbazi等人。1998 Science 282 2258－61；Kibe,Inoue等人。2003 Am J Respir Crit Care Med 167 50－6；Vargaftig及Singer 2003 Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 284 L260－9；Vargaftig及Singer 2003 Am J Respir Cell Mol Biol 28 410－9)。IL－13之此等效應在構成型或誘導型表達IL－13之轉基因小鼠系統中重新產生(Zhu,Homer等人。1999 J Clin Invest 103 779－88；Zhu,Lee等人。2001 Am J Respir Crit Care Med 164 S67－70；Lanone,Zheng等人。2002 J Clin Invest 110 463－74)。IL－13之慢性轉基因過度表現亦誘導上皮下纖維化及氣腫。缺乏IL－13(及IL－14)信號傳輸分子STAT6之小鼠未能發展過敏原誘導之AHR及黏液過度產生(Kuperman,Huang等人。2002 Nat Med 8 885－9)。使用可溶性IL－13受體融合蛋白質(sIL－13Rα2Fc)之研究已證明此細胞激素在實驗性過敏原卵白蛋白(OVA)誘導之氣管疾病中的關鍵作用(Grunig,Warnock等人。1998 Science 282 2261－3；Wills－Karp,Luyimbazi等人。1998 Science 282 2258－61；Taube,Duez等人。2002 J Immunol 169 6482－9)。亦在鼠類哮喘慢性模型中證明抗IL－13治療之功效。除顯示黏液高度分泌及AHR之特徵外，慢性哮喘之此模型證明更急性模型中缺乏之若干人類疾病之特點。此等包括位於上皮內空間之肺組織嗜伊紅血球增多以及如由膠原沈積增加所量測之平滑肌纖維化。以OVA在OVA敏化小鼠中每週1次重複氣溶膠激發，歷時總計4週誘導慢性哮喘模型。最終2週OVA激發中投與抗IL－13抗體(自第36天開始，在研究之第53天評估功效讀出值)顯著地抑制AHR，肺炎、杯狀細胞增生、黏液高度分泌及氣管纖維化(Yang,Li等人。2005 J Pharmacol Exp Ther)。此外，在靈長類哮喘模型中亦證明IL－13拮抗劑之治療劑效應抑制AHR[摘要，American Thoracic Society 2005]。
由於已在哮喘患者之肺偵測到升高含量之IL－13 mRNA及蛋白質，其與疾病之嚴重程度相互關聯，因此IL－13牽涉於人類哮喘之發病機制中(Huang,Xiao等人。1995 J Immunol 155 2688－94)。另外，已鑑別出導致升高之IL－13含量的人類IL－13遺傳多態性，且其與哮喘及異位性皮膚炎相關(Heinzmann,Mao等人。2000 Hum Mol Genet 9 549－59；Hoerauf,Kruse等人。2002 Microbes Infect 437－42；Vercelli 2002 Curr Opin Allergy Clin Immunol 2 389－93；Heinzmann,Jerkic等人。2003 J Allergy Clin Immunol 112 735－9；Chen,Ericksen等人。2004 J Allergy Clin Immunol 114 553－60；Vladich,Brazille等人。2005 J Clin Invest)，且在哮喘患者之肺中已偵測到升高之IL－13含量(Huang,Xiao等人。1995 J Immunol 155 2688－94；Arima,Umeshita－Suyama等人。2002 J Allergy Clin Immunol 109 980－7；Berry,Parker等人。2004 J Allergy Clin Immunol 114 1106－9)。由於具有導致較高血漿IL－13含量之IL－13基因多態性之個體對於異位性皮膚炎及哮喘具有增加風險性，因此已亦證明IL－13與哮喘之間的遺傳聯繫(Wills－Karp 2000 Respir Res 1 19－23)。
因人類IL－13在各種人類病症中之作用，因此治療策略已經設計以抑制或抵消IL－13活性。尤其已尋找結合與中和IL－13之抗體作為抑制IL－13活性之方式。然而，在此項技術中需要能夠結合IL－13之改良之抗體。較佳地，抗體結合人類IL－13。較佳地，抗體能夠中和人類IL－13。本發明提供一種新穎結合蛋白、CDR移植抗體、人源化抗體及其片段之家族，其能夠結合人類IL－13，以高親和力結合且結合且中和人類IL－13。
本發明係關於IL－13結合蛋白。本發明之結合蛋白質包括(但不限於)抗體、抗原結合部分及其他能夠結合人類IL－13之抗原結合蛋白。另外，本發明提供IL－13結合蛋白質之製造及使用方法。
本發明之一態樣係關於能夠結合IL－13之結合蛋白質。在一較佳實施例中，結合蛋白質結合人類IL－13。較佳地，該結合蛋白質能夠調節IL－13之生物學功能。該結合蛋白質更佳能夠中和IL－13。
在本發明之一態樣中，該結合蛋白質能夠結合IL－13且防止IL－13與IL－13α1受體結合。在本發明之另一態樣中，該結合蛋白質能夠結合IL－13且防止IL－13與IL－13α2受體結合。在一較佳實施例中，該結合蛋白質能夠結合IL－13且防止IL－13與IL－13α1受體及IL－13α2結合。
本發明之一實施例提供分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13且在細胞表面基受體結合檢定中抑制該IL－13與IL－13a2受體結合，其中IC50 選自由約1.5×10－8 至1×10－8 M、1×10－8 至1×10－9 M、10－9 至10－10 M及10－10 至10－11 M組成之群；或在ELISA基受體結合檢定中抑制其結合，其中IC50 選自由約1.8×10－8 至1×10－8 M、1×10－8 至1×10－9 M、10－9 至10－10 M及10－10 至10－11 M組成之群。較佳地，抗體結合人類IL－13且抑制該IL－13與IL－13a2受體在細胞表面基受體結合檢定中結合，其中IC50 為2.7×10－9 M且在ELISA基受體結合檢定中抑制其結合，其中IC50 為1.1×10－9 M。較佳地抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13且抑制該IL－13與IL－13a2受體在細胞表面基受體結合檢定或在ELISA基受體結合檢定中以約70－100%在100 nM之濃度下結合。抗體較佳為13C5.5。抗體更佳不為BAK502G9、mAb13.2或MJ2－7。
在另一態樣中，本發明提供分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13且在人類IL－13誘導之哮喘模型中以約50%、60%、70%、80%、90%或100%抑制AHR。在人類IL－13誘導之哮喘模型中該抗體較佳以大於86%抑制AHR。在另一實施例中，所分離之抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13且在人類IL－13誘導之哮喘模型中以約50%、60%、70%、80%、90%或100%抑制AHR，且以約40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%抑制黏液產生。抗體較佳為13C5.5。抗體更佳不為BAK502G9、mAb13.2或MJ2－7。
在一實施例中，如表面電漿共振所量測本發明之結合蛋白質對IL－13具有以下結合速率常數(kon )：至少約102 M－1 s－1 ；至少約103 M－1 s－1 ；至少約104 M－1 s－1 ；至少約105 M－1 s－1 ；或至少約106 M－1 s－1 。較佳地，如表面電漿共振所量測本發明之結合蛋白質對IL－13具有介於102 M－1 s－1 與103 M－1 s－1 之間；介於103 M－1 s－1 與104 M－1 s－1 之間；介於104 M－1 s－1 與105 M－1 s－1 之間；或介於105 M－1 s－1 與106 M－1 s－1 之間的結合速率常數(kon )。
在另一實施例中，如表面電漿共振所量測，本發明之結合蛋白質對IL－13具有至多約10－3 s－1 ；至多約10－4 s－1 ；至多約10－5 s－1 ；或至多約10－6 s－1 之分解速率常數(koff )。較佳地，如表面電漿共振所量測，本發明之結合蛋白質對IL－13具有10－3 s－1 至10－4 s－1 ；10－4 s－1 至10－5 s－1 ；或10－5 s－1 至10－6 s－1 之分解速率常數(koff )。
在另一實施例中，本發明之結合蛋白質對IL－13具有至多約10－7 M；至多約10－8 M；至多約10－9 M；至多約10－10 M；至多約10－11 M；至多約10－12 M；或至多10－13 M之解離常數(KD )。較佳地，本發明之結合蛋白質對IL－13具有10－7 M至10－8 M；10－8 M至0－9 M；10－9 M至10－10 M；10－10 至10－11 M；10－11 M至10－12 M；或10－12 M至10－13 M之解離常數(KD )。
較佳地抗體或其抗原結合片段以選自由以下組成之群的結合特性結合IL－13：a)介於約105 M－1 s－1 至106 M－1 s－1 或約106 M－1 s－1 至107 M－1 s－1 之結合速率常數(kon )；或b)如表面電漿共振所量測約10－4 s－1 至10－5 s－1 ；或約10－5 s－1 至10－6 s－1 之分解速率常數(koff )；或c)約1.5×10－10 至1×10－10 M或約10－10 至10－11 M之解離常數(KD )。較佳地，抗體或其抗原結合片段對IL－13具有選自由以下數值組成之群的結合速率常數(kon )：6.68×105 M－1 s－1 、7.86×105 M－1 s－1 、8.35×105 M－1 s－1 、8.69×105 M－1 s－1 、9.15×105 M－1 s－1 、1.26×106 M－1 s－1 、1.7×106 M－1 s－1 及2.51×106 M－1 s－1 。較佳地，如表面電漿共振所量測，該抗體或其抗原結合片段對IL－13具有選自由以下各值組成之群的分解速率常數(koff )：1.23×10－4 s－1 ；1.76×10－4 s－1 ；4.74×10－4 s－1 ；1.91×10－5 s－1 ；2.14×10－5 s－1 ；3.82×10－51 s－1 ；8.81×10－5 s－1 ；及9.65×10－5 s－1 。較佳地，抗體或其抗原結合片段對IL－13具有選自由以下數值組成之群之解離常數(KD )：1.05×10－10 M；7.10×10－10 M；1×10－11 M；2.20×10－11 M；2.72×10－11 M；4.17×10－11 M；5.68×10－11 M；7.01×10－11 M；7.10×10－11 M；及9.79×10－11 M。
本發明之一態樣係關於能夠結合IL－13上之特定抗原決定基之結合蛋白質。較佳地，該特定抗原決定基包含人類IL－13之C末端螺旋D區。更佳地，該特定抗原決定基包含胺基酸序列VRDTK IEVAQ FVKDL LL HLK KLFRE GR，對應於SEQ ID NO.1之胺基酸104－130。在另一態樣中，該抗體或抗原結合部分結合包含人類IL－13之C末端螺旋D區及N末端螺旋A區之抗原決定基。較佳地，該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13，使得具有該抗體或其抗原結合片段(與由SEQ ID No.1之地形區域Ser26－Thr27－Ala28－Leu29－Arg30－Glu31－Leu32－Ile33－Glu34－Glu35－Leu36－Val37－Asn38與Lys123－Lys124－Leu125－Phe126－Arg127－Glu－128－Gly129－Arg130界定之抗原決定基結合)之IL－13經抑制免於與IL－13受體結合。較佳地，該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13，使得具有該抗體或其抗原結合片段(與由SEQ ID No.1之地形區域Arg30－Glu31－Leu32－Ile33－Glu34－Glu35－Leu36－Val37－Asn38與Lys123－Lys124－Leu125－Phe126－Arg127界定之抗原決定基結合)之IL－13經抑制免於與IL－13受體結合。較佳地，該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13，使得具有該抗體或其抗原結合片段(與由SEQ ID No.1之地形區域Ser26－Thr27－Ala28－Leu29－Arg30－Glu31－Leu32－Ile33－Glu34－Glu35－Leu36－Val37－Asn38與Lys123－Lys124－Leu125－Phe126－Arg127－Glu128－Gly129－Arg130界定之抗原決定基結合)之IL－13經抑制免於與IL－13α2受體結合。更佳地，該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13，使得具有該抗體或其抗原結合片段(與由SEQ ID No.1之地形區域Ser26－Thr27－Ala28－Leu29－Arg30－Glu31－Leu32－Ile33－Glu34－Glu35－Leu36－Val37－Asn38與Lys123－Lys124－Leu125－Phe126－Arg127－Glu－128－Gly129－Arg130界定之抗原決定基結合)之IL－13經抑制免於與IL－13a2受體結合，其限制條件為該抗體不為BAK502G9或MJ2－7。該抗體最佳為13C5.5。
在一態樣中，所分離之抗體或其抗原結合片段結合IL－13且防止IL－13與IL－13a2受體結合，其結合特性選自由以下組成之群：與IL－13上包括螺旋A及D之抗原決定基結合；結合速率常數(kon )介於約105 M－1 s－1 至106 M－1 s－1 或約106 M－1 s－1 至107 M－1 s－1 之間；如表面電漿共振所量測分解速率常數(koff )為約10－4 s－1 至10－5 s－1 ；或約10－5 s－1 至10－6 s－1 ；且解離常數(KD )為約1.5×10－10 至1×10－10 M或約10－10 至10－11 M。在另一態樣中，所分離之抗體或其抗原結合片段結合變異體IL－13且防止變異體IL－13與IL－13a2受體結合，其結合特性選自由以下組成之群：與IL－13上包括螺旋A及D之抗原決定基結合；結合速率常數(kon )介於約105 M－1 s－1 至106 M－1 s－1 或約106 M－1 s－1 至107 M－1 s－1 之間；如表面電漿共振所量測分解速率常數(koff )為約10－4 s－1 至10－5 s－1 ；或約10－5 s－1 至10－6 s－1 ；且解離常數(KD )為約1.5×10－10 至1×10－10 M或約10－10 至10－11 M。
在一態樣中，本發明結合蛋白質能夠結合IL－13，該抗原結合域包含至少一CDR，該CDR包含選自由以下組成之群的胺基酸序列：CDR－H1. X1 －X2 －X3 －X4 －X5 －X6 －X7 (SEQ ID NO：64)其中：X1 為T、D、G或S；X2 為S；X3 為D；X4 為M、S、Y、L或H；X5 為G、W、Y、A、S或N；X6 為V、I或M；且X7 為D、H、S、Y、N或G；CDR－H2. X1 －X2 －X3 －X4 －X5 －X6 －X7 －X8 －X9 －X10 －X11 －X12 －X13 －X14 －X15 －X16 －X17 (SEQ ID NO：65)，其中：X1 為M、E、H、R、S、G或L；X2 為I或不存在；X3 為H、Y、A、D、S或W；X4 為P、S、W或G；X5 為S、G、E或D；X6 為D、G、S、E或N；X7 為S、Y或G；X8 為E、N、Y、V或R；X9 為T、I或K；X10 為R、Y、I、D或A；X11 為L、Y、D或F；X12 為N、P、S或D；X13 為Q、E、D、P或S；X14 為K、M、S、T、A或V；X15 為F、L、V或M；X16 為K、R或Q；且X17 為D、G或S；CDR－H3. X1 －X2 －X3 －X4 －X5 －X6 －X7 －X8 －X9 －X10 －X11 －X12 －X13 －X14 (SEQ ID NO：66)，其中：X1 為W、T、G、Y、D或I；X2 為R、A、S、G或V；X3 為T、F、Y或S；X4 為S、T或Y；X5 為Y、F或G；X6 為F或Y；X7 為S、Y、I或F；X8 為D、L、Y或P；X9 為Y；X10 為G；X11 為Y、A、P或E；X12 為F、M、S、L或I；X13 為D、V、N或K；且X14 為Y或F；CDR－L1. X1 －X2 －X3 －X4 －X5 －X6 －X7 －X8 －X9 －X10 －X11 －X12 －X13 －X14 －X15 －X16 －X17 (SEQ ID NO：67)其中：X1 為K或R；X2 為S或A；X3 為S或T；X4 為Q、K或I；X5 為N、S、T、G或E；X6 為L、T或S；X7 為L、Q或V；X8 為Y、N、H、D或T；X9 為S、I或T；X10 為S、D、N、H或Y；X11 為N或G；X12 為Q；X13 為K、F、N、E或S；X14 為N、T或S；X15 為Y或F；X16 為L、A或M；且X17 為A、D、E、H或N CDR－L2. X1 －X2 －X3 －X4 －X5 －X6 －X7 (SEQ ID NO：68)，其中：X1 為L、S、K、T、W或Y；X2 為V、T或A；X3 為S或N；X4 為N、K、T、M或R；X5 為R、K或L；X6 為F、D、E、H、P或A；且X7 為S、R或P；及CDR－L3. X1 －X2 －X3 －X4 －X5 －X6 －X7 －X8 －X9 (SEQ ID NO：69)，其中：X1 為F、W、Q或A；X2 為Q或L；X3 為H、G、Y、W或N；X4 為N、S、T、L或Y；X5 為Y、T、S、E或H；X6 為L、V、F、Y、N、G、P或D；X7 為P或H；X8 為L、F、Y、W或R；且X9 為T或V。
較佳地，該抗原結合域包含至少一包含選自由以下成之群的胺基酸序列之CDR：
在一較佳實施例中，結合蛋白質包含至少3個CDR，其係選自由以下組成之可變域CDR組：
結合蛋白質較佳包含至少兩個可變域CDR組。較佳至少兩個可變域CDR組係選自由以下組成之群：VH 25C8 CDR組& VL 25C8 CDR組；VH 9C11 CDR組& VL 9C11 CDR組；VH 21D9 CDR組& VL 21D9 CDR組；VH 22D10 CDR組& VL 22D10 CDR組；VH 5F1 CDR組& VL 5F1 CDR組；VH 5G1 CDR組& VL 5G1 CDR組；VH 3H7 CDR組& VL 3H7 CDR組；VH 14B2 CDR組& VL 14B2 CDR組；VH 13C5 CDR組& VL 13C5 CDR組；VH 29G5 CDR組& VL 29G5 CDR組；VH 33C3 CDR組& VL 33C3 CDR組；VH 4A8 CDR組& VL 4A8 CDR組；VH 1B6 CDR組& VL 1B6 CDR組；VH 3E5CDR組& VL 3E5 CDR組；VH 6C8 CDR組& VL 6C8 CDR組；VH 5D3 CDR組& VL 5D3 CDR組；及VH 8B6 CDR組& VL 8B6 CDR組。
在另一實施例中，上文揭示之結合蛋白質另外包含人類受體框架。人類受體框架較佳包含選自由以下組成之群的胺基酸序列：
在一較佳實施例中，結合蛋白質為能夠結合IL－13之CDR移植抗體或其抗原結合部分。CDR移植抗體或其抗原結合部分較佳包含一或多個上文揭示之CDR。CDR移植抗體或其抗原結合部分較佳包含人類受體框架。該人類受體框架更佳為上文揭示之人類受體框架之任一者。
在一較佳實施例中，結合蛋白質為能夠結合IL－13之人源化抗體或其抗原結合部分。人源化抗體或其抗原結合部分較佳包含一或多個上文所揭示併入人類受體框架之人類抗體可變域之CDR。人類抗體可變域較佳為一致人類可變域。人類受體框架更佳包含至少一關鍵殘基之框架區域胺基酸取代，其中該關鍵殘基係選自由以下各物組成之群：鄰近於CDR之殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基；能夠與人類IL－13相互作用之殘基；能夠與CDR相互作用之殘基；正則殘基；重鏈可變區域與輕鏈可變區域之間的接觸殘基；微調區中之殘基；及重疊於Chothia定義之可變重鏈CDR1與Kabat定義之第一重鏈框架之間的區域中之殘基。人類受體框架較佳包含至少一框架區域胺基酸取代，其中該框架之胺基酸序列與該人類受體框架之序列至少65%一致且包含至少70個與該人類受體框架一致之胺基酸殘基。關鍵殘基之框架區域胺基酸取代較佳係選自由2L、15L、22L、41L、42L、44L、49L、50L、51L、62L、71L、73L、10H、44H、46H、48H、67H、68H、70H、72H、74H、76H、83H、84H、86H、87H及97H組成之群。
在一較佳實施例中，結合蛋白質為能夠結合IL－13之人源化抗體或其抗原結合部分。人源化抗體或其抗原結合部分較佳包含一或多個上文揭示之CDR。人源化抗體或其抗原結合部分更佳包含三個或三個以上上文揭示之CDR。人源化抗體或其抗原結合部分最佳包含六個上文揭示之CDR。
在所主張發明之另一實施例中，人源化抗體或其抗原結合部分包含至少一可變域，其具有選自選自由以下組成之群的胺基酸序列：
人源化抗體或其抗原結合部分更佳包含兩個選自上文揭示之群的可變域。結合蛋白質更佳包含兩個可變域，其中該兩個可變域具有選自由以下組成之群的胺基酸序列：SEQ ID NO：70 & SEQ ID NO：71,SEQ ID NO：72 & SEQ ID NO：73,SEQ ID NO：74 & SEQ ID NO：75,SEQ ID NO：76 & SEQ ID NO：77,SEQ ID NO：78 & SEQ ID NO：79,SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：81,SEQ ID NO：82 & SEQ ID NO：83,SEQ ID NO：84 & SEQ ID NO：85 SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：92,SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：93及SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：94。
本發明之一實施例提供抗體構築體，其包含上文所揭示結合蛋白質之任一者及連接多肽或免疫球蛋白。在一較佳實施例中，抗體構築體係選自由免疫球蛋白分子、單株抗體、嵌合抗體、CDR移植抗體、人源化抗體、Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、二硫化物鍵聯之Fv、scFv、單域抗體、雙功能抗體、多特異性抗體、雙重特異抗體及雙特異性抗體組成之群。在一較佳實施例中，抗體構築體包含重鏈免疫球蛋白恆定域，其選自由人類IgM恆定域、人類IgG1恆定域、人類IgG2恆定域、人類IgG3恆定域、人類IgG4恆定域、人類IgE恆定域及人類IgA恆定域組成之群。抗體構築體更佳包含SEQ ID NO：2；SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：4；及SEQ ID NO：5。在另一實施例中，本發明提供一種抗體結合物，其包含上文揭示之抗體構築體及選自由以下各物組成之群之試劑：免疫黏附分子、造影劑、治療劑及細胞毒素劑。在一較佳實施例中，該造影劑選自由放射性標籤、酶、螢光標籤、發光標籤、生物發光標籤、磁性標籤及生物素組成之群。更佳，造影劑為選自由3 H、14 C、35 S、90 Y、99 Tc、111 In、125 I、131 I、177 Lu、166 Ho及153 Sm組成之群的放射性標籤。在一較佳實施例中，治療劑或細胞毒素劑係選自由抗代謝物、烷基化劑、抗生素、生長因子、細胞激素、抗血管生成劑、抗有絲分裂劑、蒽環黴素、毒素及細胞凋亡劑組成之群。
在另一實施例中，抗體構築體經糖基化。較佳，該糖基化為人類糖基化形式。
在另一實施例中，上文揭示之結合蛋白質、抗體構築體或抗體結合物以晶體形式存在。較佳該晶體為無載體之醫藥控釋晶體。在一較佳實施例中，結晶結合蛋白質、結晶抗體構築體或結晶抗體結合物具有比其可溶性對應物更大之活體內半衰期。在另一較佳實施例中，結晶結合蛋白質、結晶抗體構築體或結晶抗體結合物結晶後保留生物學活性。
本發明之一態樣係關於包含能夠結合IL－13之結合蛋白質的DVD結合蛋白質。該DVD結合蛋白質較佳能夠結合IL－13及第二標靶。第二標靶係選自由以下各物組成之群：CSF1(MCSF)、CSF2(GM－CSF)、CSF3(GCSF)、FGF2、IFNA1、IFNB1、IFNG、組織胺及組織胺受體、IL1A、IL1B、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12A、IL12B、IL14、IL15、IL16、IL17、IL18、IL19、KITLG、PDGFB、IL2RA、IL4R、IL5RA、IL8RA、IL8RB、IL12RB1、IL12RB2、IL13RA1、IL13RA2、IL18R1、TSLP、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL7、CCL8、CCL13、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL22、CCL24、CX3CL1、CXCL1、CXCL2、CXCL3、XCL1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CX3CR1、GPR2、XCR1、FOS、GATA3、JAK1、JAK3、STAT6、TBX21、TGFB1、TNFSF6、YY1、CYSLTR1、FCER1A、FCER2、LTB4R、TB4R2、LTBR及殼多糖酶。DVD蛋白質更佳能夠識別IL－13及IL－1β、IL－13及IL－9；IL－13及IL－4；IL－13及IL－15；IL－13及IL－25；IL－13及TARC；IL－13及MDC；IL－13及MIF；IL－13及TGF－β；IL－13及LHR促效劑；IL－13及CL25；IL－13及SPRR2a；IL－13及SPRR2b；或IL－13及ADAM8。DVD蛋白質最佳能夠結合IL－13及TNFα。
本發明之一態樣係關於分離之核酸，其編碼上文揭示之結合蛋白質、抗體構築體或抗體結合物中之任一者。另一實施例提供包含上文所揭示之分離之核酸的載體，其中該載體係選自由以下各物組成之群：pcDNA；pTT(Durocher等人，Nucleic Acids Research 2002，第30卷，第2號)；pTT3(具有其他若干選殖位點之pTT)；pEFBOS(Mizushima,S.及Nagata,S.,(1990)Nucleic acids Research第18卷，第17號)；pBV；pJV；及pBJ。
在另一態樣中，宿主細胞經上文所揭示之載體轉型。宿主細胞較佳為原核細胞。宿主細胞更佳為大腸桿菌(E.Coli)。在相關實施例中，宿主細胞為真核細胞。真核細胞較佳係選自由原生生物細胞、動物細胞、植物細胞及真菌細胞組成之群。宿主細胞更佳為哺乳動物細胞，其包括(但不限於)CHO及COS；或真菌細胞，諸如釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)；或昆蟲細胞，諸如Sf9。
本發明之另一態樣提供一種產生結合IL－13之結合蛋白質之方法，其包含在培養基中在足以產生結合IL－13之結合蛋白質的條件下培養上文揭示之宿主細胞中之任一者。另一實施例提供根據上文所揭示方法產生之結合蛋白質。
一實施例提供用於釋放結合蛋白質之組合物，其中該組合物包含一種調配物及至少一種聚合載劑，該調配物接著包含如上文揭示之結晶結合蛋白質、結晶抗體構築體或結晶抗體結合物及一種成份。聚合載劑較佳為選自由以下各物組成之群的一或多者之聚合物：聚(丙烯酸)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(胺基酸)、聚(酸酐)、聚(酯肽)、聚(酯)、聚(乳酸)、聚(乳－共－乙醇酸)或PLGA、聚(b－羥基丁酯)、聚(己內酯)、聚(二氧環己酮)；聚(乙二醇)、聚((羥丙基)甲基丙烯醯胺)、聚[(有機)磷氮烯]、聚(原酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯啶酮)、順丁烯二酸酐－烷基乙烯基醚共聚物、複合多元醇、白蛋白、海藻酸鹽、纖維素及纖維素衍生物、膠原、血纖蛋白、明膠、玻尿酸、寡醣、甘胺基聚糖、硫酸化多醣、其摻合物及共聚物。成份較佳係選自由白蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖醇、明膠、羥丙基－β－環糊精、甲氧基聚乙二醇及聚乙二醇組成之群。另一實施例提供一種用於治療哺乳動物之方法，其包含向該哺乳動物投與有效量之上文所揭示組合物之步驟。
本發明亦提供一種醫藥組合物，其包含如上文所揭示之結合蛋白質、抗體構築體或抗體結合物及醫藥學上可接受之載劑。在另一實施例中，該醫藥組合物包含至少一用於治療其中IL－13活性有害之病症的其他治療劑。較佳該其他藥劑係選自由以下各物組成之群：治療劑、造影劑、細胞毒素劑、血管生成抑制劑(包括(但不限於)抗VEGF抗體或VEGF－trap)；激酶抑制劑(包括(但不限於)KDR及TIE－2－抑制劑)；協同刺激分子阻斷劑(包括(但不限於)抗B7.1、抗B7.2、CTLA4－Ig、抗CD20)；黏著分子阻斷劑(包括(但不限於)抗－LFA－1 Abs、抗－E/L選擇蛋白Abs、小分子抑制劑)；抗細胞激素抗體或其功能片段(包括(但不限於)抗－IL－18、抗－TNF、抗－IL－6/細胞激素受體抗體)；甲胺蝶呤；環孢菌素；雷帕黴素(rapamycin)；FK506；可偵測標籤或報導體；TNF拮抗劑；防風濕藥劑；肌肉鬆弛劑、麻醉藥、非類固醇消炎藥物(NSAID)、止痛藥、麻醉劑、鎮靜劑、局部麻醉劑、神經肌肉阻斷劑、抗菌劑、牛皮癬治療劑、皮質類固醇、同化類固醇、紅血球生成素、免疫、免疫球蛋白、免疫抑制劑、生長激素、激素替換藥物、放射性藥物、抗抑鬱劑、抗精神病劑、刺激劑、哮喘藥劑、β促效劑、經吸入類固醇、腎上腺素或類似物、細胞激素及細胞激素拮抗劑。
在另一態樣中，本發明提供一種用於抑制人類IL－13活性之方法，其包含使人類IL－13與上文揭示之結合蛋白質接觸使得人類IL－13活性受抑制。在一相關態樣中，本發明提供一種用於抑制患有其中IL－13活性有害之病症的人類受檢者之人類IL－13活性之方法，其包含向該人類受檢者投與上文揭示之結合蛋白質，使得該人類受檢者之人類IL－13活性受抑且實現治療。
在另一態樣中，本發明提供一種治療(例如治癒、抑制、改善、延遲或防止發作或預防反覆或復發)或防止受檢者之IL－13相關病症之方法。該方法包括：向受檢者投與足以治療或預防IL－13相關病症之量的IL－13結合劑(尤其拮抗劑)，例如如本文中描述之抗IL－13抗體或其片段。可單獨或組合如本文中描述之其他治療形式將IL－13拮抗劑，例如抗IL－13抗體或其片段投與受檢者。
在一實施例中，受檢者為哺乳動物，例如患有一或多種IL－13相關病症之人類，該等病症包括例如呼吸病症(例如哮喘(例如過敏性及非過敏性哮喘)、慢性阻塞性肺病(COPD)及其他病狀，包括呼吸道發炎、嗜伊紅血球增多、纖維化及黏液過量產生；異位性病症(例如異位性皮膚炎及過敏性鼻炎)；皮膚、胃腸器官(例如發炎性腸病(IBD)，諸如潰瘍性結腸炎及/或克羅恩氏病(Crohn's disease))及肝臟(例如硬化、纖維化)之發炎性及/或自體免疫病狀；硬皮病；腫瘤或癌症，例如如本文中描述之霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)。因此，揭示內容包括IL－13結合劑(諸如抗IL－13抗體或其本文中描述之片段)用於本文中描述之治療的用途，及IL－13結合劑(諸如抗IL－13抗體或其本文中描述之片段)用於製備用於本文中描述之治療的藥劑之用途。IL－13相關病症之實例包括(但不限於)選自以下之一或多者的病症：呼吸病症，例如哮喘(例如過敏性及非過敏性哮喘(例如因(例如)呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之(例如)幼兒哮喘)、慢性阻塞性肺病(COPD)及其他病狀，包括呼吸道發炎、嗜伊紅血球增多、纖維化及黏液過量產生，例如囊性纖維化及肺纖維化；異位性病症，例如因IL－13敏感性增加所致之異位性病症(例如異位性皮膚炎、蕁痲疹、濕疹、過敏性鼻炎及過敏性腸胃炎)；皮膚(例如異位性皮膚炎)、胃腸器官(例如發炎性腸病(IBD)，諸如潰瘍性結腸炎及/或克羅恩氏病)、肝臟(例如硬化、肝細胞癌)之發炎性及/或自體免疫病狀及硬皮病；腫瘤或癌症(例如，軟組織或實體腫瘤)，諸如白血病、神經膠母細胞瘤及淋巴瘤，例如霍奇金淋巴瘤；病毒感染(例如自HTLV－1病毒感染)；其他器官纖維化，例如肝臟纖維化(例如，由B型肝炎及/或C型肝炎病毒所致之纖維化)；及如本文中描述之保護性1型免疫反應表現之抑制(例如在疫苗接種期間)。
在其他實施例中，本申請案提供治療(例如降低、改善)或預防一或多種與以下病症相關之症狀的方法：呼吸病症，例如哮喘(例如過敏性及非過敏性哮喘)；過敏症；慢性阻塞性肺病(COPD)；包括呼吸道發炎、嗜伊紅血球增多、纖維化及黏液過量產生之病狀，例如囊性纖維化及肺纖維化。例如，哮喘症狀包括(但不限於)喘息、氣促、支氣管收縮、氣管高反應性、降低之肺活量、纖維化、呼吸道發炎及黏液產生。該方法包含向受檢者投與足以治療(例如降低、改善)或預防一或多種症狀之量的IL－13拮抗劑，例如IL－13抗體或其片段。IL－13抗體可治療性或預防性或兩者性質地投與。可單獨或組合如本文中描述之其他治療形式將IL－13拮抗劑，例如抗IL－13抗體或其片段投與受檢者。受檢者較佳為哺乳動物，例如患有如本文中所述之IL－13相關病症之人類。
在另一態樣中，本申請案提供一種用於活體外偵測樣品(例如生物樣品，諸如血清、血漿、組織、活組織切片)中IL－13之存在的方法。本方法可用於診斷例如免疫細胞相關病症之病症。該方法包括：(i)使樣品或對照樣品與如本文中描述之抗IL－13抗體或其片段接觸；且(ii)偵測抗IL－13抗體或其片段與樣品或對照樣品之間複合體的形成，其中相對於對照樣品，樣品中複合體形成之統計上顯著變化指示樣品中IL－13存在。
在另一態樣中，本申請案提供一種用於活體內偵測IL－13存在之方法(例如在受檢者活體內造影中)。本方法可用於診斷例如IL－13相關病症之病症。該方法包括：(i)在容許抗體或片段與IL－13結合之條件下，向受檢者或對照受檢者投與如本文中描述之抗IL－13抗體或其片段；且(ii)偵測抗體或片段與IL－13之間複合體的形成，其中相對於對照受檢者，受檢者中複合體形成之統計上顯著變化指示IL－13存在。在另一態樣中，本發明之結合蛋白質適用於治療選自由以下各病狀組成之群的病症：關節炎、骨關節炎、幼年型慢性關節炎、膿毒性關節炎、萊姆(Lyme)關節炎、牛皮癬關節炎、反應性關節炎、脊椎關節病、全身性紅斑性狼瘡症、克羅恩氏病(Crohn's disease)、潰瘍性結腸炎、發炎性腸病、胰島素依賴型糖尿病、甲狀腺炎、哮喘、過敏性疾病、牛皮癬、皮炎硬皮病、移植物對抗宿主疾病、器官移植排斥反應、與器官移植相關之急性或慢性免疫疾病、肉狀瘤病、動脈粥樣硬化、彌漫性血管內凝血、川崎氏疾病(Kawasaki's disease)、格雷氏疾病(Grave's disease)、腎病症候群、慢性疲勞症候群、韋格納肉牙腫病(Wegener's granulomatosis)、過敏性紫癜(Henoch－Schoenlein purpurea)、腎微觀血管炎、慢性活動型肝炎、葡萄膜炎、膿毒性休克、中毒性休克症候群、膿毒症症候群、惡病質、傳染性疾病、寄生疾病、愛滋病、急性橫貫性脊髓炎、亨廷頓氏舞蹈病(Huntington's chorea)、帕金森氏病症(Parkinson's disease)、阿茲海默症(Alzheimer's disease)、中風、原發性膽汁性肝硬化、溶血性貧血、惡性疾病、心臟衰竭、心肌梗死、阿狄森氏病(Addison's disease)、零星多腺缺乏I型及多腺缺乏II型、施密特症候群(Schmidt's syndrome)、成人(急性)呼吸窘迫症候群、脫髮、斑形脫髮、血清陰性關節病、關節病、萊特爾氏病(Reiter's disease)、牛皮癬性關節病、潰瘍性大腸炎性關節病、腸病性滑膜炎、衣原體病、耶爾森氏菌(yersinia)及沙門氏菌(salmonella)相關關節病、脊椎關節病、動脈粥樣化的疾病/動脈硬化、特異反應性過敏、自體免疫大皰疾病、尋常天疱瘡、葉型天泡瘡、類天疱瘡、線性IgA疾病、自體免疫溶血性貧血症、庫姆(Coombs)陽性溶血性貧血症、後天性惡性貧血、幼年型惡性貧血、肌痛性腦炎/Royal Free疾病、慢性皮膚黏膜念珠菌病、巨細胞性動脈炎、原發性硬化型肝炎、隱性自體免疫肝炎、後天免疫缺陷疾病症候群、後天免疫缺陷相關疾病、B型肝炎、C型肝炎、常見變異免疫缺損(常見變異低丙種球蛋白血症)、擴張型心肌病、雌性不育症、卵巢衰竭、卵巢早衰、纖維化肺疾病、隱性纖維性肺泡炎、發炎後間質肺病、間質肺炎、結締組織病相關間質肺病、混合性結締組織病相關肺病、全身性硬化相關間質肺病、類風濕性關節炎相關間質肺病、全身性紅斑性狼瘡症相關肺病、皮肌炎/多發性肌炎相關肺病、修格蘭氏疾病(Sjgren's disease)相關肺病、強直性脊椎炎相關肺病、脈管炎擴散肺病、含鐵血黃素沈著症相關肺病、藥物誘導之間質肺病、纖維化、放射性纖維化、閉塞性細支氣管炎、慢性嗜酸細胞性肺炎、淋巴細胞滲透性肺病、感染後間質肺病、痛風性關節炎、自體免疫肝炎、1型自體免疫肝炎(傳統的自體免疫或狼瘡樣肝炎)、2型自體免疫肝炎(抗LKM抗體肝炎)、自體免疫介導之低血糖、具有黑棘皮病之B型抗胰島素症、甲狀旁腺機能減退、與器官移植相關之急性免疫疾病、與器官移植相關之慢性免疫疾病、骨性關節病、原發性硬化性膽管炎、1型牛皮癬、2型牛皮癬、特發性白血球減少、自體免疫性嗜中性白血球減少症、腎病NOS、絲球體腎炎、腎微觀血管炎、萊姆病(lyme disease)、盤狀紅斑狼瘡、特發性或NOS男性不育症、精液自體免疫性、多發性硬化症(所有亞型)、交感性眼炎、結締組織病後繼發之肺動脈高血壓、古德帕斯徹氏症候群(Goodpasture's syndrome)、肺多發性結節性動脈炎特徵、急性風濕熱、類風濕性脊椎炎、斯蒂爾氏病(Still's disease)、系統性硬化、修聯氏症候群(Sjrgren's syndrome)、高安氏疾病(Takayasu's disease)/動脈炎、自體免疫血小板減少症、特發性血小板減少症、自體免疫性甲狀腺病、甲狀腺機能充進、甲狀腺腫自體免疫甲狀腺機能減退(橋本氏症(Hashimoto's disease))、萎縮性自體免疫甲狀腺機能減退、原發性黏液水腫、晶狀體源性葡萄膜炎、原發性血管炎、白斑症急性肝病、慢性肝病、酒精性肝硬化、酒精誘導之肝臟損傷、膽汗鬱積(choleosatatis)、特質性肝病、藥物誘導之肝炎、非酒精性脂肪變性肝炎、過敏及哮喘、B組鏈球菌(GBS)感染、精神錯亂(例如抑鬱及精神分裂症)Th2型及Th1型介導之疾病、急性及慢性疼痛(各種疼痛)及癌症(諸如肺、乳房、胃、膀胱、結腸、胰腺、卵巢、前列腺及直腸癌)及造血惡性疾病(白血病及淋巴瘤)、無β脂蛋白血症(Abetalipoprotemia)、手足發紺、急性及慢性寄生或傳染性過程、急性白血病、急性淋巴母細胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性或慢性細菌感染、急性胰腺炎、急性腎功能衰竭、腺癌、空中異位搏動、AIDS癡呆綜合症、酒精誘導之肝炎、過敏性結膜炎、過敏性接觸性皮炎、過敏性鼻炎、同種異體移植排斥、α－1－抗胰蛋白酶缺乏、肌萎縮性側索硬化、貧血、心絞痛、前角細胞退化、抗cd3療法、抗磷脂症候群、抗受體超敏性反應、主動脈瘤及周圍動脈瘤、主動脈剝離、高動脈壓、動脈硬化、動靜脈瘺、共濟失調、心房顫動(持續性或突發性)、心房撲動、房室傳導阻滯、B細胞淋巴瘤、骨移植排斥反應、骨髓移植(BMT)排斥反應、房室束支傳導阻滯、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、灼傷、心律不整、心臟頓抑症候群、心臟腫瘤、心肌病、心肺旁路發炎反應、軟骨移植排斥反應、小腦皮質退化、小腦病症、混亂或多灶性房性心動過速、化學療法相關之病症、鉻髓細胞性白血症(CML)、慢性醇中毒、慢性發炎性病狀、慢性淋巴球性白血病(CLL)、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性水楊酸鹽中毒、結腸直腸癌、充血性心臟衰竭、結膜炎、接觸性皮炎、肺心病、冠狀動脈病、庫賈氏病(Creutzfeldt－Jakob disease)、培養物陰性膿毒症、囊性纖維化、細胞因子治療相關之病症、拳擊員癡呆、脫髓鞘疾病、登革熱出血熱、皮炎、皮膚病學病狀、糖尿病(diabetes)、糖尿病(diabetes mellitus)、糖尿病性動脈硬化性疾病、泛發性路易體疾病、擴張型充血型心肌病、基底神經節病症、中年唐氏綜合症(Down's Syndrome)、藉由藥物誘發之阻斷CNS多巴胺受體之藥物誘發運動病症、藥物過敏、濕疹、腦脊髓炎、心內膜炎、內分泌病、會厭炎、埃－巴二氏病毒(epstein－barr virus)感染、紅斑性肢痛病、錐體束外及小腦病症、家族性噬血細胞淋巴組織細胞增生症、胎兒胸腺植入排斥反應、弗裏德棘希氏共濟失調(Friedreich's ataxia)、功能性周邊動脈病症、真菌膿毒症、氣性壞疽、胃潰瘍、腎小球性腎炎、任何器官或組織之移植排斥反應、革蘭氏陰性膿毒症、革蘭氏陽性膿毒症、因細胞內生物而致之肉芽瘤、毛細胞白血病、霍－史氏疾病(Hallerrorden Spatz disease)、橋本氏甲狀腺炎(hashimoto's thyroiditis)、枯草熱、心臟移植排斥反應、血色素沈著症、血液透析、溶血尿毒癥症候群/溶栓劑血小板減少性紫癜、出血、肝炎(A)、希氏束心律不整(His bundle arrythmias)、HIV感染/HIV神經病、霍奇金病、多動性運動障礙、超敏性反應、超敏性肺炎、高血壓、運動功能減退性運動障礙、下視丘垂體腎上腺軸評估、特發性阿狄森氏病(Addison's disease)、特發性肺纖維化、抗體介導之細胞毒性、衰弱、嬰兒脊髓性肌萎縮、主動脈發炎、流行性感冒a、電離輻射暴露、虹膜睫狀體炎/葡萄膜炎/視神經炎、局部缺血－再灌注損傷、局部缺血性中風、青年類風濕性關節炎、幼年型脊髓性肌萎縮症、卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、腎臟移植排斥反應、軍團菌、利什曼病、麻瘋病、脊髓皮質系統病變、脂肪水腫、肝臟移植排斥反應、淋巴水腫、瘧疾、惡性淋巴瘤、惡性組織細胞病、惡性黑色素瘤、腦膜炎、腦膜炎球菌血症、代謝/特發性、偏頭痛、線粒體多系統功能異常、混合性結締組織病、單株丙種球蛋白病、多發性骨髓瘤、多發性系統退化(Mencel Dejerine－Thomas Shi－Drager及Machado－Joseph)、重症肌無力、胞內鳥分枝桿菌、結核分枝桿菌、骨髓增生異常症候群、心肌梗死、心肌局部缺血症、鼻咽癌、新生兒慢性肺病、腎炎、腎變病、神經退化性疾病、神經性I肌肉萎縮、嗜中性白血球低下發燒、非霍奇金淋巴瘤、腹主動脈及其旁支閉塞症、動脈閉塞症、okt3療法、睾丸炎/副睾丸炎、睾丸炎/輸精管切除術反向程序、臟器腫大、骨質疏鬆症、胰腺移植排斥反應、胰腺癌、腫瘤伴隨症候群/惡性血鈣過多、甲狀旁腺移植排斥反應、骨盆炎症性疾患、常年性鼻炎、心包疾病、周邊動脈粥樣硬化的疾病、周邊血管性病症、腹膜炎、惡性貧血、卡氏肺囊蟲肺炎、肺炎、POEMS症候群(多神經病、臟器腫大、內分泌病、單株丙種球蛋白病及皮膚變化症候群)、灌注後症候群、泵後症候群、MI心切開術後症候群、子癇前期、進行性核上麻痹、原發性肺動脈高壓、放射治療、雷諾氏(Raynaud)現象及疾病、雷諾氏疾病、雷富孫氏病(Refsum's disease)、常見窄QRS心動過速、腎血管高血壓、再灌注損傷、限制性心肌病、肉瘤、硬皮病、老年性舞蹈病、路易體型老年癡呆症、血清陰性關節病、休克、鐮刀形細胞貧血症、同種移植皮膚排斥反應、皮膚變化症候群、小腸移植排斥反應、實體腫瘤、特定心律不整、脊椎共濟失調、脊髓小腦退化、鏈狀球菌肌炎、小腦結構損害、亞急性硬化性全腦炎、暈厥、心血管系統梅毒、全身過敏反應、全身發炎性反應症候群、全身發作青年類風濕性關節炎、T細胞或FAB ALL、毛細血管擴張、血管閉塞性脈管炎、血小板減少、毒性、移植、外傷/出血、III型超敏性反應、IV型超敏性反應、不穩定絞痛、尿毒癥、尿膿毒病、蕁痲疹、心臟瓣膜病、靜脈曲張、血管炎、靜脈疾病、靜脈血栓形成、心室纖維性顫動、病毒及真菌感染、致命腦炎/無菌性腦膜炎、生命攸關之噬血細胞症候群、韋尼克－科爾薩科夫(Wernicke－Korsakoff syndrome)症候群、威爾森氏症(Wilson's disease)、任何器官或組織之異種移植排斥反應、急性冠狀症候群、急性特發性多發性神經炎、急性發炎性脫髓鞘多神經根神經病、急性局部缺血、成人斯蒂爾氏病、斑形脫髮、過敏性反應、抗磷脂抗體症候群、再生障礙性貧血、動脈硬化、異位性濕疹、異位性皮膚炎、自體免疫皮炎、與鏈球菌感染相關之自體免疫病症、自體免疫性腸病、自體免疫性耳聾、自體免疫性淋巴組織增生症候群(ALPS)、自體免疫性心肌炎、自體免疫性卵巢早衰、瞼炎、支氣管擴張、大皰性類天疱瘡、心血管疾病、惡性抗磷脂症候群、乳糜瀉、頸脊椎病、慢性局部缺血、瘢痕型類天疱瘡、具有多發性硬化症風險之臨床上獨立之症候群(CIS)、結膜炎、兒童期發作之精神錯亂、慢性阻塞性肺病(COPD)、淚囊炎、皮肌炎、糖尿病性視網膜病、糖尿病、腰椎間盤突出症(Disk herniation，Disk prolaps)、藥物誘發之免疫性溶血性貧血、心內膜炎、子宮內膜異位、內眼炎、鞏膜表層炎、多形性紅斑、主要多形性紅斑、妊娠期類天疱瘡、古立安－白瑞症候群(Guillain－BarrSyndrome，GBS)、枯草熱、休氏症候群、特發性帕金森氏病症、特發性間質性肺炎、IgE介導之過敏、免疫性溶血性貧血、包涵體肌炎、傳染性眼部發炎性疾病、發炎性髓鞘脫失病、發炎性心臟病、發炎性腎病、IPF/UIP、虹膜炎、角膜炎、角結膜乾燥症、庫斯毛爾氏症(Kussmaul disease)或庫斯毛爾氏－梅爾症(Kussmaul Meier Disease)、蘭德裏麻痺(Landry's Paralysis)、藍氏(Langerhan)細胞組織細胞增多病、網狀青斑、黃斑退化、微觀多血管炎、Morbus Bechterev、運動神經元病症、黏膜類天疱瘡、多發性器官衰竭、重症肌無力、脊髓發育不良症候群、心肌炎、神經根病症、神經病、非A非B型肝炎、視神經炎、骨質溶解、少關節型JRA、周邊動脈閉塞疾病(PAOD)、周邊血管疾病(PVD)、周邊動脈疾病(PAD)、靜脈炎、多發性結節性動脈炎(或結節性動脈周圍炎)、多軟骨炎、風濕性多肌痛、灰發症、多關節JRA、多內分泌腺缺乏症候群、多發性肌炎、風濕性多肌痛(PMR)、泵後症候群、原發性帕金森氏症候群、前列腺炎、純紅細胞再生障礙性貧血、原發性腎上腺機能不全、復發性視神經脊髓炎、再狹窄、風濕性心臟病、SAPHO(滑膜炎、粉刺、黃水瘡、骨肥厚及骨炎)、硬皮病、繼發性澱粉樣變性、休克肺、鞏膜炎、坐骨神經痛、繼發性腎上腺機能不全、聚矽氧相關結締組織病、史年登－威金森病、強直性脊椎炎(spondilitis ankylosans)、多形糜爛性紅斑(SJS)、全身發炎性反應症候群、顳動脈炎、弓形體性視網膜炎、中毒性表皮壞死溶解、橫貫性脊髓炎、TRAPS(腫瘤壞死因子受體、1型過敏反應、II型糖尿病、蕁痲疹、常見間質性肺炎(UIP)、血管炎、春季結膜炎、病毒性視網膜炎、柳一原田症候群(Vogt－Koyanagi－Harada syndrome)(VKH症候群)、濕性黃斑退化及愈傷。
在另一態樣中，本發明之結合蛋白質適用於治療選自由以下各病狀組成之群的病症：急性淋巴母細胞白血病、急性骨髓性白血病、腎上腺皮質癌、肛門癌、闌尾癌、小腦星形細胞瘤、大腦星形細胞瘤、基底細胞癌、膽管癌、肝外、膀胱癌、骨癌、骨肉瘤/惡性纖維組織細胞瘤腦幹神經膠質瘤、腦腫瘤、腦幹神經膠質瘤、大腦星形細胞瘤、室管膜瘤、成神經管細胞瘤、幕上原始神經外胚層瘤、視覺傳導路徑及下視丘神經膠質瘤、乳癌、支氣管腺瘤/類癌、類癌腫瘤、類癌腫瘤、未知根源之胃腸癌、中樞神經系統淋巴瘤、原發性小腦星形細胞瘤、子宮頸癌、慢性淋巴球性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性脊髓增生病症、結腸癌、結腸直腸癌、皮膚T細胞淋巴瘤、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、尤文(Ewing)腫瘤家族、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、肝外膽管癌、眼癌、眼內黑素瘤成視網膜細胞瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸道類癌腫瘤、胃腸基質腫瘤(GIST)、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、卵巢生殖細胞腫瘤、妊娠期滋養層瘤、神經膠質瘤、腦幹神經膠質瘤、大腦星形細胞瘤神經膠質瘤、兒童期視覺傳導路徑及下視丘神經膠質瘤、毛細胞白血病、頭部及頸部癌、肝細胞(肝臟)癌、霍奇金淋巴瘤、下嚥癌、眼內黑素瘤、小島細胞癌(內分泌胰腺)、卡波西(Kaposi)肉瘤、腎臟(腎臟細胞)癌、喉癌、急性淋巴母細胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴球性白血病、慢性骨髓性白血病、毛細胞白血病、唇及口腔癌、肝癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、AIDS相關淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、原發性中樞神經系統淋巴瘤、沃德斯姆巨球蛋白血症(Waldenstrm Macroglobulinemia)、骨惡性纖維組織細胞瘤/骨肉瘤、成神經管細胞瘤、黑素瘤、眼內(眼)黑素瘤、墨克(Merkel)細胞癌、惡性間皮瘤、具有隱蔽根源之轉移性鱗狀頸部癌、口腔癌、多發性內分泌瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞腫瘤、蕈樣肉芽腫病、脊髓發育不良症候群、脊髓發育不良/骨髓及外骨髓增生疾病、粒細胞性白血病、慢性粒細胞性白血病、多發性骨髓瘤、脊髓增生病症、鼻腔及鼻竇癌、鼻咽癌、成神經細胞瘤、口腔癌(Oral Cancer)、口腔癌(Oral Cavity Cancer)、唇及口咽癌、骨肉瘤/骨惡性纖維組織細胞瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖細胞腫瘤、卵巢低惡性潛能腫瘤、胰腺癌、小島細胞胰腺癌、鼻竇及鼻腔癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、咽癌、嗜鉻細胞瘤、成松果體細胞瘤及幕上原始神經外胚層瘤、垂體瘤、漿細胞腫瘤/多發性骨髓瘤、胸膜肺母細胞瘤、前列腺癌、直腸癌、腎臟細胞(腎臟)癌、腎盂癌及輸尿管癌、移行細胞癌、成視網膜細胞瘤、唾液腺癌、肉瘤、尤文腫瘤家族、卡波西肉瘤、軟組織肉瘤、子宮肉瘤、賽謝(Szary)症候群、皮膚癌(非黑素瘤)、皮膚癌(黑素瘤)、墨克細胞皮膚癌、小腸癌、鱗狀細胞癌、具有隱蔽根源之轉移性鱗狀頸部癌、胃癌、幕上原始神經外胚層瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、睾丸癌、咽喉癌、胸腺瘤、胸腺瘤及胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂及輸尿管之移行細胞癌、妊娠期滋養層瘤、輸尿管及腎盂癌、移行細胞癌、尿道癌、子宮癌、子宮內膜子宮肉瘤、陰道癌、視覺傳導路徑及下視丘神經膠質瘤、陰門癌、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、胚胎性癌肉瘤。
在另一態樣中，本發明提供一種治療患有其中人類IL－13有害之病症的患者之方法，其包含在投與如以上所討論之第二藥劑之前、同時或在其後投與上文所揭示之任一結合蛋白質的步驟。在一較佳實施例中，可與一或多種IL－13拮抗劑(例如抗IL－13抗體或其片段)共投與及/或共調配之其他治療劑包括(但不限於)以下之一或多者：經吸入類固醇；口服類固醇；β－促效劑，例如短效或長效β－促軟劑；白三烯或白三烯受體拮抗劑；諸如ADVAIR之組合藥物；IgE抑制劑，例如抗IgE抗體(例如XOLAIR)；磷酸二酯酶抑制劑(例如PDE4抑制劑)；黃嘌呤；抗膽鹼劑藥物；肥大細胞穩定劑，諸如色甘酸；IL－4抑制劑；IL－5抑制劑；嗜酸性粒細胞趨化因子/CCR3抑制劑；組織胺或其包括H1、H2、H3及H4之受體之拮抗劑；及前列腺素D或其受體(DP1及CRTH2)之拮抗劑。該等組合可用於治療哮喘及其他呼吸病症。可與一或多種抗IL－13抗體或其片段共同投藥及/或共調配之治療劑之其他實例尤其包括以下之一或多者：TNF拮抗劑(例如TNF受體之可溶性片段，TNF受體例如p55或p75人類TNF受體或其衍生物，例如75 kD TNFR－IgG(75 kD TNF受體－IgG融合蛋白質，ENBREL))；TNF酶拮抗劑，例如TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF－β拮抗劑；干擾素γ；潑氟尼東(perfenidone)；化學治療劑，例如甲胺蝶呤、來氟米特(leflunomide)或西羅莫司(sirolimus)(雷帕黴素(rapamycin))或其類似物，例如CCI－779；COX2及cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑、TPL－2、MK－2及NFkB抑制劑。另一第二藥劑係選自由以下各物組成之群：布替耐德(budenoside)；表皮生長因子；皮質類固醇；環孢菌素(cyclosporin)；柳氮磺胺吡啶；胺基水楊酸鹽；6－巰基嘌呤；硫唑嘌呤；甲硝唑；脂肪氧合酶抑制劑；馬沙拉嗪(mesalamine)；奧沙拉嗪(olsalazine)；巴柳氮；抗氧化劑；血栓形成抑制劑；IL－1受體拮抗劑；抗IL－1β單株抗體；抗1L－6單株抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶基－咪唑化合物；TNF、LT、IL－1、IL－2、IL－6、1L－7、IL－8、IL－15、IL－16、IL－18、EMAP－II、GM－CSF、FGF及PDGF之抗體或促效劑；CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配位體之抗體；甲胺蝶呤；環孢菌素；FK506；雷帕黴素(rapamycin)；黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)；來氟米特(leflunomide)；NSAID；布洛芬(ibuprofen)；皮質類固醇；潑尼龍(prednisolone)；磷酸二酯酶抑制劑；腺苷促效劑；抗血栓形成劑；補體抑制劑；腎上腺素能劑；IRAK；NIK；IKK；p38；MAP激酶抑制劑；IL－1β轉化酶抑制劑；TNFα轉化酶抑制劑；T－細胞信號傳輸受體；金屬蛋白酶抑制劑；柳氮磺胺吡啶；硫唑嘌呤；6－巰基嘌呤；血管緊張素轉化酶抑制劑；可溶性細胞激素受體；可溶性p55 TNF受體；可溶性p75 TNF受體；sIL－1RI；sIL－1RII；sIL－6R；消炎細胞激素；IL－4；IL－10；IL－11及TGFβ。
在一較佳實施例中，藉由至少一種選自以下之形式將上文揭示之醫藥組合物投與受檢者：非經腸、皮下、肌肉內、靜脈內、關節內、支氣管內、腹內、囊內、軟骨內、腔內、體腔內、小腦內、腦室內、大腸內、頸管內、胃內、肝內、心肌內、骨內、骨盆內、心囊內、腹膜內、胸膜內、前列腺內、肺內、直腸內、腎內、視網膜內、脊柱內、滑膜內、胸骨正中內、子宮內、膀胱內、丸劑、陰道、經直腸、頰內、舌下、鼻內及經皮。
本發明之一態樣提供本發明之至少一IL－13結合蛋白質之至少一IL－13抗個體基因型抗體。該抗個體基因型抗體包括含有包含免疫球蛋白分子之至少一部分或其可併入本發明之結合蛋白質之任何部分的分子之任何蛋白質或肽，該至少一部分諸如(但不限於)重鏈或輕鏈之至少一補體決定區(CDR)或其配體結合部分，重鏈或輕鏈可變域、重鏈或輕鏈恆定區、框架區域。
本發明係關於結合IL－13之人類IL－13結合蛋白質，尤其抗IL－13抗體或其抗原結合部分。本發明之各種態樣係關於抗體及抗體片段及其醫藥組合物以及用於製造該等抗體及片段之核酸、重組表現載體及宿主細胞。本發明亦包涵本發明抗體活體外或活體內偵測人類IL－13、抑制人類IL－13活性及調節基因表現之使用方法。
除非另外指出，否則本文中關聯本發明使用之科學及技術術語將具有熟習此項技術者通常所理解之含義。術語之含義及範疇應為清晰的，然而若任何潛在歧義，本文中提供之定義優先於任何詞典或外在定義。另外，除非上下文另作要求，否則單數術語將包括複數且複數術語將包括單數。在本申請案中，除非另作說明，否則"或"之使用意謂"及/或"。此外，術語"包括"("including")以及諸如"包括"("includes")及"包括"("included")之其他形式的使用無限制。除非上下文另作說明，否則諸如"元件"或"組件"之術語亦包涵包含一個單元之元件及組件與包含一個以上亞單元之元件及組件。
大體而言關聯本文中描述之細胞及組織培養物、分子生物學、免疫學、微生物學、遺傳學及蛋白質及核酸化學及雜交使用之命名法及其技術為彼等此項技術中熟知且通常使用。大體而言，除非另作指示，否則根據在此項技術中熟知且如本說明書引用且詳盡探討之各種一般及更特定參考文獻中所述之習知方法進行本發明之方法及技術。如此項技術中通常完成或如本文中所描述，根據製造商之說明書進行酶促反應及純化技術。關聯本文中描述之分析化學、合成有機化學及醫藥及藥物化學使用的命名法及其實驗方法及技術為彼等此項技術中熟知且通常使用。標準技術用於化學合成、化學分析、藥物製備、調配及輸送及患者之治療。
本發明可更易於理解，選擇術語定義如下。
如本文中所用術語"多肽"係指任何胺基酸之聚合鏈。術語"肽"及"蛋白質"與術語多肽可交換地使用且亦係指胺基酸之聚合鏈。術語"多肽"包涵原生或人造蛋白質、蛋白質片段及蛋白質序列之多肽類似物。多肽可為單體或聚合多肽。
術語"分離之蛋白質"或"分離之多肽"為由於其衍生起點或來源與伴隨其天然狀態之天然關聯組份不相關之蛋白質或多肽；其大體上不含來自相同物種之其他蛋白質；由不同物種之細胞表現；或在自然界中並不存在。因此，化學上合成或於不同於其天然起源之細胞的細胞系統中合成之多肽將自其天然關聯組份分離。亦可使用在此項技術中熟知之蛋白質純化技術藉由分離使得蛋白質大體上不含天然關聯組份。
如本文中所用術語"回收"係藉由分離，例如使用在此項技術中熟知之蛋白質純化技術使得諸如多肽之化學物種大體上不含天然關聯組份之過程。
如本文中所用術語"人類IL－13"及"人類IL－13野生類型"(本文中縮寫為h IL－13、h IL－13wt)包括主要由T輔助2細胞分泌之人類細胞激素。該術語包括13 kDa多肽之單體蛋白質。人類IL－13之結構進一步描述於例如(Moy,Diblasio等人。2001 J Mol Biol 310 219－30)中。術語人類IL－13意欲包括重組人類IL－13(rh IL－13)，其可藉由標準重組表現方法製備。表1展示人類IL－13、SEQ ID No.1之胺基酸序列，其在此項技術中已知。
如本文中所用術語"人類IL－13變異體"(本文中縮寫為h IL－13v)包括人類IL－13之變異體，其中胺基酸殘基130由精胺酸變化為麩醯胺酸(R130Q)。
如本文中所用"生物學活性"係指細胞激素之所有固有生物學特性。IL－13之生物學特性包括(但不限於)結合IL－13受體；(其他實例包括轉變成人類B細胞中之IgE的免疫球蛋白同型及抑制發炎性細胞激素產生)。
如本文中關於抗體、蛋白質或肽與第二化學物種交互作用所用術語"特異性結合"或"特異性地結合"意謂交互作用依賴於該等化學物種上特定結構(例如抗原決定簇或抗原決定基)之存在；例如大體而言抗體識別且與特異蛋白質結構而非蛋白質結合。若抗體對於抗原決定基"A"而言具有特異性，則含有標記之"A"及抗體之反應中含有抗原決定基A(或游離未標記A)之分子之存在將降低與抗體結合之經標記A的量。
如本文中所用術語"抗體"廣泛係指任何免疫球蛋白(Ig)分子，其包含4個多肽鏈，2個重鏈(H)及2個輕鏈(L)或其任何功能片段、突變體、變異體或衍生物，其保留Ig分子之基本抗原決定基結合特徵。該等突變體、變異體或衍生物抗體形式在此項技術中已知。其之非限制性實施例於下文中探討。
在全長抗體中，各重鏈由重鏈可變域(本文中縮寫為HCVR或VH)及重鏈恆定區組成。重鏈恆定區由3個域CH1、CH2及CH3組成。各輕鏈由輕鏈可變域(本文中縮寫為LCVR或VL)及輕鏈恆定區組成。輕鏈恆定區由1個域CL組成。VH及VL區域可進一步再分成高度可變之稱為互補決定區(CDR)、散布在更保守、稱為框架區域(FR)之區域中的區域。各VH及VL包括3個CDR及4個FR，按以下順序自胺基末端排列至羧基末端：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。免疫球蛋白分子可為任何類型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA及IgY)、類別(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)或亞類。
如本文中所用術語抗體之"抗原結合部分"(或簡言之"抗體部分")係指抗體之保留特異結合抗原(例如hIL－13)之能力的一或多個片段。已展示可由全長抗體之片段進行抗體之抗原結合功能。該等抗體實施例亦可為雙特異性、雙重特異性或多特異性形式；與兩個或兩個以上不同抗原特異性地結合。抗體之術語"抗原結合部分"中包涵之結合片段的實例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL及CH 1域組成的單價片段；(ii)F(ab')2 片段，包含2個在鉸鏈區由雙硫橋連接之Fab片段的二價片段；(iii)由VH及CH 1域組成的Fd片段；(iv)由抗體之單臂之VL及VH域組成的Fv片段；(v)dAb片段(Ward等人，(1989)Nature 341：544－546；Winter等人，PCT公開案WO 90/05144 A1，以引用的方式併入本文中)，其包含單一可變域；及(vi)分離之互補決定區(CDR)。此外，儘管Fv片段之2個域VL及VH經獨立基因編碼，其可使用重組方法經使得其能夠製成VL且VH區域配對以形成單價分子的單一蛋白質鏈(稱為單鏈Fv(scFv)；參見例如Bird等人。(1988)Science 242：423－426；及Huston等人。(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：5879－5883)之合成連接子連接。該等單鏈抗體亦意欲包涵在術語抗體之"抗原－結合部分"中。亦包涵單鏈抗體之其他形式，諸如雙功能抗體。雙功能抗體為二價、雙特異性抗體，其中VH及VL域表現於單一多肽鏈上，但使用過短而不允許在相同域之2個域之間配對的連接子，藉此迫使該等域與另一鏈之互補域配對且產生2個抗原結合位點(參見例如Holliger,P.等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444－6448；Poljak,R.J.，等人(1994)Structure 2：1121－1123)。該等抗體結合部分在此項技術中已知(kontermann及Dubel編，Antibody Engineering (2001)Springer－Verlag.New York.第790頁(ISBN 3－540－41354－5)。
如本文中所用術語"抗體構築體"係指包含一或多個與連接子多肽或免疫球蛋白恆定域連接之本發明之抗原結合部分的多肽。連接子多肽包含兩個或兩個以上由肽鍵連接之胺基酸殘基且其用以連接一或多個抗原結合部分。該等連接子多肽為在此項技術中所熟知(參見例如Holliger,P.等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444－6448；Poljak,R.J.，等人(1994)Structure 2：1121－1123)。免疫球蛋白恆定域係指重鏈或輕鏈恆定域。人類IgG重鏈及輕鏈恆定域胺基酸序列為在此項技術中所已知且表示於表2中。
另外，抗體或其抗原結合部分可為較大免疫附接分子之一部分，其藉由抗體或抗體部分與一或多種其他蛋白質或肽共價或非共價締合形成。該等免疫附接分子之實例包括使用鏈黴親和素核心區域以製造四聚scFv分子(Kipriyanov,S.M.，等人(1995)Human Antibodies and Hybridomas 6：93－101)及使用半胱胺酸殘基、標記肽及C末端聚組胺酸標記以製造二價及生物素化scFv分子(Kipriyanov,S.M.，等人(1994)Mol.Immunol.31：1047－1058)。可分別使用諸如木瓜蛋白酶或胃蛋白酶消化全抗體之習知技術，自全抗體製備諸如Fab及F(ab')2 片段之抗體部分。此外，可使用如本文中描述之標準重組DNA技術獲得抗體、抗體部分及免疫附接分子。
如本文中所用"分離之抗體"意欲指大體上不含其他具有不同抗原特異性之抗體的抗體(例如特異性結合hIL－13之分離之抗體大體上不含特異性結合除hIL－13以外的抗原之抗體)。然而特異性結合hIL－13之分離之抗體可對其他抗原(諸如其他物種之IL－13分子)具有交叉反應性。此外，分離之抗體可大體上不含其他細胞材料及/或化學物質。
如本文中所用術語"人類抗體"意欲包括具有源自人類種系免疫球蛋白序列之可變及恆定區之抗體。本發明之人類抗體可在(例如)CDR及尤其CDR3中包括不由人類種系免疫球蛋白序列(例如由隨機或位點特異性體外誘變或由活體內體細胞突變引入的突變)編碼之胺基酸殘基。然而，如本文中所用術語"人類抗體"不意欲包括源自諸如小鼠之另一哺乳動物物種之種系的CDR序列已移植於人類框架序列上的抗體。
如本文中所用術語"重組人類抗體"意欲包括所有藉由重組方法製備、表現、產生或分離之人類抗體，諸如使用轉染於宿主細胞中之重組表現載體表現之抗體(進一步描述於下文之第二部分C中)，自重組、組合人類抗體庫分離之抗體(Hoogenboom H.R.,(1997)TIB Tech.15：62－70；Azzazy H.,及Highsmith W.E.,(2002)Clin.Biochem.35：425－445；Gavilondo J.V.,及Larrick J.W.(2002)BioTechniques 29：128－145；Hoogenboom H.及Chames P.(2000)Immunology Today 21：371－378)、自對於人免疫球蛋白基因而言轉基因之動物(例如小鼠)分離之抗體(參見例如Taylor,L.D.等人(1992)Nucl.Acids Res.20：6287－6295；Kellermann S－A及Green L.L.(2002)Current Opinion in Biotechnology 13：593－597；Little M.等人(2000)Immunology Today 21：364－370)或藉由包括將人免疫球蛋白基因序列剪接至其他DNA序列之任何其他方法製備、表現、產生或分離之抗體。該等重組人類抗體具有源自人類種系免疫球蛋白序列之可變及恆定區。然而在某些實施例中該等重組人類抗體經受活體外誘變(或當使用對於人類Ig序列轉基因之動物時，活體內體細胞誘變)，且因此重組抗體之VH及VL區域之胺基酸序列為儘管源自且與人類種系VH及VL序列有關，但不可活體內天然地存在於人類抗體種系譜的序列。一實施例提供能夠結合人類IL－13之完全人類抗體，其可使用在此項技術中熟知之技術使用諸如(但不限於)人類Ig噬菌體庫(諸如彼等揭示於Jermutus等人，PCT公開案第WO 2005/007699 A2號中者)產生。
術語"嵌合抗體"係指包含來自一種物種之重鏈及輕鏈可變域序列及來自另一物種之恆定區序列的抗體，諸如具有與人類恆定區連接之鼠類重鏈及輕鏈可變域的抗體。
術語"CDR移植抗體"係指包含來自一種物種之重鏈及輕鏈可變域序列，但其中VH及/或VL之一或多個CDR區域之序列經另一物種之CDR序列替換的抗體，諸如具有鼠類重鏈及輕鏈可變域的抗體，可變域中一或多個鼠類CDR(例如CDR3)已經人類CDR序列替換。
術語"人源化抗體"係指包含來自非人類物種(例如小鼠)之重鏈及輕鏈可變域序列，但其中VH及/或VL序列之至少一部分已變更為更"類似於人類"，亦即與人類種系可變序列更相似的抗體。一種類型之人源化抗體為CDR移植抗體，其中人類CDR序列經引入非人類VH及VL序列中以替換對應的非人類CDR序列。在一實施例中，提供人源化抗人類IL－13抗體及抗原結合部分。藉由使用傳統融合瘤技術獲得鼠類抗hIL－13單株抗體，接著使用活體外遺傳工程人源化來產生該等抗體，諸如彼等揭示於Kasaian等人PCT公開案第WO 2005/123126 A2號中者。
本文中術語"Kabat編號""Kabat定義"及"Kabat標記"可交換地使用。該等在此項技術中識別之術語係指將比抗體或其抗原結合部分之重鏈及輕鏈可變域中的其他胺基酸殘基更可變(亦即高度可變)之胺基酸殘基編號之系統(Kabat等人(1971)Ann.NY Acad,Sci.190：382－391及Kabat,E.A.，等人(1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，美國衛生和人類服務部(U.S.Department of Health and Human Services),NIH出版號91－3242)。對於重鏈可變域，對於CDR1高變區在胺基酸位置31至35範圍內，對於CDR2在胺基酸位置50至65範圍內且對於CDR3在胺基酸位置95至102範圍內。對於輕鏈可變域，對於CDR1高變區在胺基酸位置24至34範圍內，對於CDR2在胺基酸位置50至56範圍內且對於CDR3在胺基酸位置89至97範圍內。
如本文中所用，術語"受體"及"受體抗體"係指提供或編碼至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%之一或多個框架區域的胺基酸序列之抗體或核酸序列。在某些實施例中，術語"受體"係指提供或編碼恆定區之抗體胺基酸或核酸序列。在另一實施例中，術語"受體"係指提供或編碼一或多個框架區域及恆定區之抗體胺基酸或核酸序列。在一特異性實施例中，術語"受體"係指提供或編碼至少80%、較佳至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%之一或多個框架區域的胺基酸序列之人類抗體胺基酸或核酸序列。根據此實施例，受體可含有至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5或至少10個在人類抗體之一或多個特殊位置不出現的胺基酸殘基。受體框架區域及/或受體恆定區可(例如)衍生自或由種系抗體基因、成熟抗體基因、功能抗體(例如在此項技術中熟知之抗體、發展中之抗體或市售抗體)獲得。
如本文中所用，術語"CDR"係指抗體可變序列內的互補決定區。在各重鏈及輕鏈可變區中存在3個CDR，對於各可變域其經命名為CDR1、CDR2及CDR3。如本文中所用術語"CDR組"係指單一可變域中存在之能夠結合抗原的3個CDR之組。此等CDR之確切邊界已根據不同系統不同定義。Kabat(Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest(國家衛生研究所(National Institutes of Health),Bethesda,Md.(1987)及(1991))描述之系統不僅提供可適用於抗體之任何可變域之明確殘基編號系統，而亦提供界定3個CDR之明確殘基邊界。此等CDR可稱為Kabat CDR。Chothia及合作者(Chothia & Lesk,J.Mol.Biol.196：901－917(1987)及Chothia等人，Nature 342：877－883(1989))發現Kabat CDR中之某些亞部分幾乎採用相同肽骨架構象，儘管其胺基酸序列之水準具有極大多樣性。此等亞部分經命名為L1、L2及L3或H1、H2及H3，其中"L"及"H"分別指示輕鏈及重鏈區域。此等區域可稱為Chothia CDR，其具有與Kabat CDR重疊之邊界。其他界定CDR、與Kabat CDR重疊之邊界已由Padlan(FASEB J.9：133－139(1995))及MacCallum(J Mol Biol 262(5)：732－45(1996))描述。其他CDR邊界定義可能不嚴格遵循上文系統中之一者，但仍然與Kabat CDR重疊，儘管根據預測或實驗結果：特定殘基或殘基之組或甚至全部CDR並未顯著地影響抗原結合，其可經縮短或延長。本文中使用之方法可利用根據任何該等系統定義之CDR，儘管較佳實施例使用Kabat或Chothia定義之CDR。
如本文中所用，術語"正則"殘基係指如Chothia等人(J.Mol.Biol.196：901－907(1987)；Chothia等人，J.Mol.Biol.227：799(1992)，兩者均以引用的方式併入本文中)所定義，定義特定正則CDR結構之CDR或框架中之殘基。根據Chothia等人，儘管胺基酸序列之水準之極大多樣性，許多抗體之CDR之關鍵部分具有幾乎相同肽骨架構象。各正則結構主要規定形成環之胺基酸殘基之鄰近片段的一組肽骨架扭轉角。
如本文中所用，術語"供體"及"供體抗體"係指提供一或多個CDR之抗體。在一較佳實施例中，供體抗體為來自物種之抗體，其不同於獲得或衍生框架區域之抗體。在人源化抗體之情況中，術語"供體抗體"係指提供一或多個CDR之非人類抗體。
如本文中所用，術語"框架"或"框架序列"係指可變域減去CDR之剩餘序列。由於可藉由不同系統測定CDR序列之確切定義，框架序列之含義服從相對地不同解譯。6個CDR(輕鏈之CDR－L1、CDR－L2及CDR－L3及重鏈之CDR－H1、CDR－H2及CDR－H3)亦將輕鏈及重鏈上之框架區域分為各鏈上四個亞區域(FR1、FR2、FR3及FR4)，其中CDR1位於FR1與FR2之間，CDR2位於FR2與FR3之間且CDR3位於FR3與FR4之間。如其他人所提及，將特定亞區域指定為FR1、FR2、FR3或FR4框架區域表示單一、天然產生之免疫球蛋白鏈之可變域內的組合FR。如本文中所用，FR表示四個亞區域中之一者，且FRs表示構成框架區域之四個亞區域中之2個或2個以上。
人類重鏈及輕鏈受體序列在此項技術中已知。在本發明之一實施例中，人類重鏈及輕鏈受體序列係選自表3及表4中描述之序列。
如本文中所用，術語"種系抗體基因"或"基因片段"係指由非淋巴樣細胞編碼之免疫球蛋白序列，該非淋巴樣細胞並未經歷導致遺傳重排及突變以表現特定免疫球蛋白之成熟過程。(參見例如Shapiro等人，Crit.Rev.Immunol.22(3)：183－200(2002)；Marchalonis等人，Adv Exp Med Biol.484：13－30(2001))。本發明之各種實施例提供之一優點源自以下認識：種系抗體基因在物種中比成熟抗體基因更可能保守個體之必要胺基酸序列結構特徵，因此當在彼物種中治療使用時不太可能自外來源識別出。
如本文中所用，術語"關鍵"殘基係指可變域內之對抗體、尤其人源化抗體之結合特異性及/或親和力具有更多影響之某些殘基。關鍵殘基包括(但不限於)以下之一或多者：鄰近於CDR、可能的糖基化位點(可為N或O糖基化位點)之殘基；稀有殘基；能夠與抗原相互作用之殘基；能夠與CDR相互作用之殘基；正則殘基；重鏈可變域與輕鏈可變域之間的接觸殘基；微調區中之殘基；及重疊於Chothia定義之可變重鏈CDR1與Kabat定義之第一重鏈框架之間的區域中之殘基。
如本文中所用，術語"人源化抗體"為抗體或其變異體、衍生物、類似物或片段，其與所關注之抗原免疫特異結合，且其包含大體上具有人類抗體之胺基酸序列的框架(FR)區域及大體上具有非人類抗體之胺基酸序列之互補決定區(CDR)。如本文中所用，在CDR之情況下術語"大體上"係指CDR具有與非人類抗體CDR之胺基酸序列至少80%、較佳至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致之胺基酸序列。人源化抗體包含至少1個且通常2個可變域(Fab、Fab'、F(ab')2、FabC、Fv)中之全部，其中所有或大體上所有CDR區域對應於非人免疫球蛋白(亦即供體抗體)之彼等CDR區域，且所有或大體上所有框架區域為人免疫球蛋白一致序列之框架區域。人源化抗體較佳亦至少包含免疫球蛋白恆定區(Fc)之一部分，通常人免疫球蛋白之一部分。在某些實施例中，人源化抗體含有輕鏈以及至少重鏈之可變域。抗體亦可包括重鏈之CH1、鉸鏈、CH2、CH3及CH4區域。在某些實施例中，人源化抗體僅含有人源化輕鏈。在某些實施例中，人源化抗體僅含有人源化重鏈。在特定實施例中，人源化抗體僅含有輕鏈及/或人源化重鏈之人源化可變域。
該人源化抗體可選自任何類別之免疫球蛋白，包括IgM、IgG、IgD、IgA及IgE，及任何同型，包括(而不限於)IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。該人源化抗體可包含一種以上類別或同型之序列且特定恆定域可經選擇以使用在此項技術中所熟知之技術優化所需效應子功能。
人源化抗體之框架且CDR區域不必精確對應於親本序列，例如供體抗體CDR或一致框架可經取代、插入及/或刪除至少一胺基酸殘基而誘變以便彼位點之CDR或框架殘基並不對應於供體抗體或一致框架。然而在一較佳實施例中，該等突變不會為大範圍突變。通常，至少80%、較佳至少85%、更佳至少90%且最佳至少95%之人源化抗體殘基將對應於親本FR及CDR序列之彼等殘基。如本文中所用，術語"一致框架"係指一致免疫球蛋白序列中之框架區域。如本文中所用，術語"一致免疫球蛋白序列"係指由相關免疫球蛋白序列之家族中最頻繁出現之胺基酸(或核苷酸)形成之序列(參見例如Winnaker,From Genes to Clones(Verlagsgesellschaft,Weinheim,Germany 1987))。在免疫球蛋白之家族中，一致序列之各位置由在該家族中最頻繁出現在彼位置之胺基酸佔據。若2個胺基酸以相同頻率出現，則任一者可包括於一致序列中。
如本文中所用，"微調"區係指如由Foote及Winter 1992,J.Mol.Biol.224：487－499，其以引用的方式併入本文中)所描述可調節CDR結構且微調以配合抗原之框架殘基之子組。微調區殘基形成位於CDR下之層且可影響CDR之結構及抗體之親和力。
術語"多價結合蛋白質"用於此說明書以表示包含2個或2個以上抗原結合位點之結合蛋白質。多價結合蛋白質較佳經工程化以具有3個或3個以上抗原結合位點，且大體而言不為天然存在之抗體。術語"多特異性結合蛋白質"係指能夠結合2個或2個以上相關或不相關標靶之結合蛋白質。如本文中所用雙可變域(DVD)結合蛋白質為包含2個或2個以上抗原結合位點之結合蛋白質且其為四價或多價結合蛋白質。該等DVD可具有單特異性，亦即能夠結合一個抗原或具有多特異性，亦即能夠結合2個或2個以上抗原。包含2個重鏈DVD多肽及2個輕鏈DVD多肽之DVD結合蛋白質稱為DVD Ig。DVD Ig之每一半包含重鏈DVD多肽及輕鏈DVD多肽及2個抗原結合位點。各結合位點包含重鏈可變域及輕鏈可變域，每個抗原結合位點具有6個與抗原結合有關之CDR。
如本文中所用，術語"中和"係指當結合蛋白質特異性結合細胞激素時，細胞激素生物學活性之中和。中和結合蛋白質較佳為中和抗體，其與hIL－13及/或hIL－13之結合使得hIL－13及/或hIL－13之生物學活性受到抑制。中和結合蛋白質較佳結合hIL－13及/或hIL－13且將IL－13及/或hIL－13之生物學活性降低至少約20%、40%、60%、80%、85%或以上。可藉由量測在此項技術中所熟知之hIL－13及/或hIL－13生物學活性之一或多種指示劑來評估hIL－13及/或hIL－13之生物學活性受中和結合蛋白質之抑制。例如，A－549細胞之人類IL－13誘導性TARC(CCL－17)產生之抑制(參見實例1.1.C)。
術語"活性"包括諸如抗體對抗原之結合特異性/親和力之活性，例如結合IL－13抗原及/或中和抗體效能之抗hIL－13抗體，例如與hIL－13之結合抑制hIL－13之生物學活性的抗hIL－13抗體，例如抑制TARC(CCL－17)由A－549細胞經人類IL－13誘導產生(參見實例1.1.C)。
術語"抗原決定基"包括任何能夠特異性地結合免疫球蛋白或T細胞受體之多肽決定簇。在某些實施例中，抗原決定基決定簇包括化學活性表面之分子群，諸如胺基酸、糖側鏈、磷醯基或磺醯基，且在某些實施例中可具有特異性三維結構特性及/或比電荷特性。抗原決定基為由抗體結合之抗原區域。在某些實施例中，當抗體較佳識別其於蛋白質及/或大分子之複雜混合物中的標靶抗原時，據稱其特異性地結合抗原。
如本文中所用術語"表面電漿共振"係指藉由例如使用BIAcore系統(Pharmacia Biosensor AB,Uppsala,Sweden and Piscataway,NJ)偵測生物傳感器基質中蛋白質濃度變化而允許實時分析生物特異性交互作用之光學現象。對於進一步描述，參見Jnsson,U.，等人(1993)Ann.Biol.Clin.51：19－26；Jnsson,U.，等人(1991)Biotechniques 11：620－627；Johnsson,B.，等人(1995)J.Mol.Recognit.8：125－131；及Johnnson,B.，等人(1991)Anal.Biochem.198：268－277。
如本文中所用術語"kon "意欲指如在此項技術中已知抗體與抗原締合以形成抗體/抗原複合體之結合速率常數。
如本文中所用術語"koff "意欲指如在此項技術中已知抗體自抗體/抗原複合體解離之分解速率常數。
如本文中所用術語"KD "意欲指如在此項技術中已知特定抗體－抗原交互作用之解離常數。
如本文中所用術語"標記之結合蛋白質"係指具有經併入提供結合蛋白質之鑑別之標籤的蛋白質。該標籤較佳為可偵測標記，例如併入放射性標記之胺基酸或附接至多肽之生物素基部分，其可藉由標記之抗生物素蛋白偵測(例如含有螢光標記或酵素活性之鏈黴親和素，其可藉由光學或比色法偵測)。多肽之標籤之實例包括(但不限於)以下：放射性同位素或放射性核素(例如3 H、14 C、35 S、90 Y、99 Tc、111 In、125 I、131 I、177 Lu、166 Ho或153 Sm)；螢光標籤(例如FITC、羅丹明(rhodamine)、鑭系元素磷光體)、酶促標籤(例如辣根過氧化物酶、螢光素酶、鹼性磷酸酶)；化學螢光標記；生物素基基團；由第二報導子識別之預定多肽抗原決定基(例如白胺酸拉鏈配對序列、第二抗體之結合位點、金屬結合域、抗原決定基標籤)；及磁性試劑，諸如釓螯合物。
術語"抗體結合物"係指結合蛋白質，諸如抗體，其在化學上與諸如治療或細胞毒素劑之第二化學部分連接。本文中使用術語"藥劑"以表示化合物、化合物之混合物、生物大分子或由生物材料製成之萃取物。治療或細胞毒素劑較佳包括(但不限於)百日咳毒素、紫杉酚、細胞分裂抑素B、短桿菌肽D、溴化乙錠、吐根鹼、絲裂黴素、依託泊苷(etoposide)、鬼臼噻吩甙(tenoposide)、長春新鹼(vincristine)、長春鹼、秋水仙鹼(colchicin)、阿黴素(doxorubicin)、道諾紅菌素(daunorubicin)、二羥基炭疽菌素二酮、米托蒽醌(mitoxantrone)、光神黴素(mithramycin)、放線菌素D、1－去氫睾酮、糖皮質激素、普魯卡因(procaine)、丁卡因(tetracaine)、利多卡因(lidocaine)、普萘洛爾(propranolol)及嘌呤黴素及其類似物或同系物。
如本文中所用術語"晶體"及"結晶"係指以晶體形式存在之抗體或其抗原結合部分。晶體為一種形式之固態物質，其不同於諸如非晶形固態或液晶態之其他形式。晶體包括規則、重複、三維原子、離子、分子陣列(例如蛋白質，諸如抗體)，或分子裝配(例如抗原/抗體複合體)。此等三維陣列根據該領域中充分理解之特定數學關係排列。晶體中重複之基本單位或建構塊稱作不對稱單元。排列中符合給定、充分定義之晶體學對稱性之不對稱單元的重複提供晶體之"晶胞"。晶胞藉由規則平移在所有三維空間中之重複提供晶體。參見Giege,R.及Ducruix,A.Barrett,Crystallization of Nucleic Acids and Proteins,a Practical Approach，第二版，第20 1－16頁，Oxford University Press,New York,New York,(1999)。
如本文所提及術語"多核苷酸"意謂2或2個以上核苷酸的聚合形式、或核糖核苷酸或脫氧核苷酸或任一類型之核苷酸之修飾形式。該術語包括單一及雙股形式之DNA，但較佳雙股DNA。
如本文中所用術語"分離之多核苷酸"將意謂(例如染色體組、cDNA或合成起源或其某些組合之)多核苷酸，由於其起源，該"分離之多核苷酸"：與自然界中所發現之"分離之多核苷酸"所具有的所有或部分多核苷酸不相關；與在自然界中無連接之多核苷酸操作連接；或在自然界中作為較大序列之一部分並不存在。
如本文中所用術語"載體"意欲指能夠運輸其連接之另一核酸之核酸分子。一種類型之載體為"質體"，其係指其他DNA片段可連接之環狀雙股DNA環。另一類型之載體為病毒載體，其中其他DNA片段可連接於病毒基因組中。某些載體能夠在其所引入之宿主細胞中(例如具有細菌複製起點之細菌載體及附加型哺乳動物載體)自主複製。在引入宿主細胞後其他載體(例如非附加型哺乳動物載體)可併入宿主細胞之基因組中且藉此連同宿主基因組一起複製。此外，某些載體能夠直接表現其操作連接之基因。該等載體在本文中稱為"重組表現載體"(或簡言之"表現載體")。一般而言，用於重組DNA技術之表現載體通常以質體形式。在本說明書中，"質體"及"載體"可交換地使用，由於質體為載體之最通常使用形式。然而，本發明意欲包括該等其他形式之表現載體，諸如病毒載體(例如複製缺陷型逆轉錄病毒、腺病毒及腺病毒相關病毒)，其提供等效功能。
術語"操作連接"係指所描述組件成允許其以預定方式起作用之關係的並置。與編碼序列"操作連接"之控制序列經連接使得在與控制序列相容之條件下實現編碼序列之表現。"操作連接"之序列包括與所關注之基因鄰接的表現控制序列與以反式或在一定距離作用以控制所關注之基因的表現控制序列。如本文中所用術語"表現控制序列"係指為實現其所連接的編碼序列之表現及處理所必需的多核苷酸序列。表現控制序列包括適當轉錄起始、終止、啟動子及增強子序列；有效RNA加工信號，諸如剪接及聚腺苷酸化信號；穩定細胞質mRNA之序列；增強轉譯效率(亦即Kozak一致序列)之序列；增強蛋白穩定性之序列；及若需要，增強蛋白質分泌之序列。該等控制序列之性質依賴於宿主生物而不同；在原核生物中該等控制序列大體而言包括啟動子、核糖體結合位點及轉錄終止序列；在真核生物中，大體而言該等控制序列包括啟動子及轉錄終止序列。術語"控制序列"意欲包括對於表現及處理而言必需存在之組件，且亦可包括其他存在具有有利性之組件，例如前導序列及融合搭配序列。可使用在此項技術中已知之包括表現盒、載體、重組宿主細胞之表現載體及宿主細胞及用於重組表現之方法及自單一開放閱讀框之重組聚合蛋白質及預蛋白質之蛋白水解過程(例如WO 2007/014162，其以引用的方式併入本文中)來表現且純化本發明之蛋白質構築體。
如本文中所定義之"轉型"係指外源性DNA進入宿主細胞之任何過程。轉型可在自然或人工條件下使用在此項技術中所熟知之各種方法進行。轉型可依賴於用於將外來核酸序列插入原核或真核宿主細胞中之任何已知方法。基於經轉型之宿主細胞選擇方法且其可包括(但不限於)病毒感染、電穿孔、脂質轉染及粒子轟擊。該等"經轉染"之細胞包括穩定轉染之細胞，其中所插入DNA能夠複製為自主複製質體或宿主染色體之一部分。其亦包括在有限時段瞬時表現所插入DNA或RNA的細胞。
如本文中所用術語"重組宿主細胞"(或簡言之"宿主細胞")意欲指外源性DNA已引入之細胞。應理解該等術語不僅意欲指特定受檢者細胞，而亦指該細胞之子代。由於某些修飾因突變或環境影響可能存在於後繼代中，因此該子代實際上不可能與母細胞相同，但仍包括於如本文中所用之術語"宿主細胞"範疇內。宿主細胞較佳包括選自任一生命領域之原核及真核細胞。真核細胞較佳包括原生生物、真菌、植物及動物細胞。宿主細胞最佳包括(但不限於)原核細胞株大腸桿菌(E.Coli)；哺乳動物細胞株CHO、HEK 293及COS；昆蟲細胞株Sf9；及真菌細胞釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。
標準技術可用於重組DNA、寡核苷酸合成及組織培養物及轉型(例如電穿孔、脂質轉染)。可根據製造商之說明書或如此項技術中通常完成或如本文中所描述，進行酶促反應及純化技術。大體而言上述技術及程序可根據在此項技術中熟知之習知方法且如各種一般及更特定參考文獻(其遍及本說明書引用及探討)中所述般進行。參見例如Sambrook等人。Molecular Cloning：A Laboratory Manual(第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y,(1989))，其出於任何目的以引用的方式併入本文中。
如在此項技術中已知且如本文中所用"轉基因生物"係指具有含有輸異基因之細胞的生物，其中該引入生物(或生物之始祖)中之輸異基因表現不天然表現於該生物中之多肽。"輸異基因"為DNA構築體，其經穩定地且操作地整合入發展轉基因生物之細胞的基因組中，引導所編碼基因產物在轉基因生物的一或多種細胞類型或組織中之表現。
術語"調節"("regulate")與"調節"("modulate")可交換地使用，且如本文中所用係指所關注之分子(例如hIL－13之生物學活性)之活性變化或變更。調節可增加或降低所關注分子之某一活性或功能的大小。分子之例示性活性及功能包括(但不限於)結合特性、酵素活性、細胞受體活化及信號轉導。
相對地，如本文中所用術語"調節劑"為能夠改變或變更所關注分子之活性或功能(例如hIL－13之生物學活性)之化合物。例如，與調節劑不存在條件下所觀察到之活性或功能大小相比，調節劑可導致分子之某一活性或功能之大小增加或降低。在某些實施例中，調節劑為抑制劑，其降低分子之至少一活性或功能之大小。例示性抑制劑包括(但不限於)蛋白質、肽、抗體、肽體、糖類或小有機分子。肽體描述於例如WO 01/83525中。
如本文中所用術語"促效劑"係指當與所關注之分子接觸時，與促效劑不存在情況下所觀察到之活性或功能大小相比，導致分子之某一活性或功能的大小增加之調節劑。所關注之特定促效劑可能包括(但不限於)IL－13多肽或多肽、核酸、糖類或與hIL－13結合之任何其他分子。
如本文中所用術語"拮抗劑"或"抑制劑"係指當與所關注之分子接觸時，與拮抗劑不存在情況下所觀察到之活性或功能大小相比，導致分子之某一活性或功能的大小降低之調節劑。所關注之特定拮抗劑包括彼等阻斷或調節hIL－13及/或hIL－13之生物或免疫活性者。hIL－13及/或hIL－13之拮抗劑及抑制劑可包括(但不限於)蛋白質、核酸、糖類或與hIL－13及/或hIL－13結合之任何其他分子。
術語"抑制與受體結合"係指結合蛋白質防止IL－13與其一或多個受體結合之能力。該與受體結合之抑制將使得IL－13與其受體結合所介導之生物學活性減少或消除。
如本文中所用，術語"有效量"係指足以降低或改善病症或其一或多種症狀之嚴重程度及/或持續時間，預防病症進行，使得病症消退，預防一或多種與病症相關的症狀反覆、發展、發作或進行，偵測病症或增強或改善另一治療劑(例如預防或治療劑)之預防或治療作用之治療劑的量。
如本文中所用術語"樣品"以其最廣泛意義使用。如本文中所用"生物樣品"包括(但不限於)任意量之自存活事物或先前存活事物的物質。該等存活事物包括(但不限於)人類、小鼠、大鼠、猴、狗、兔及其他動物。該等物質包括(但不限於)血液、血清、尿、滑液、細胞、器官、組織、骨髓、淋巴結及脾臟。
I.結合人類IL－13之抗體
本發明之一態樣提供分離之鼠類單株抗體或其抗原結合部分，其以高親和力、緩慢分解速率及高中和能力與IL－13結合。本發明之第二態樣提供結合IL－13之嵌合抗體。本發明之第三態樣提供結合IL－13之人源化抗體或其抗原結合部分。該抗體或其部分較佳為分離之抗體。本發明之抗體較佳中和人類抗IL－13及/或人類抗IL－13抗體。
A.抗IL－13抗體之製造方法
本發明之抗體可藉由在此項技術中已知之大量技術中的任一者製備。
1.使用融合瘤技術之抗IL－13單株抗體 可使用在此項技術中已知之廣泛各種技術製備單株抗體，該等技術包括使用融合瘤、重組體及噬菌體呈現技術或其組合。例如，可使用融合瘤技術產生單株抗體，該技術包括彼等在此項技術中已知且教示於例如於Harlow等人，Antibodies：A Laboratory Manual,(Cold Spring Harbor Laboratory Press，第二版1988)；Hammerling，等人，於Monoclonal Antibodies and T－Cell Hybridomas 563－681(Elsevier,N.Y.,1981)中(該參考文獻以引用的方式全部併入)中者。如本文中所用術語"單株抗體"不侷限於經由融合瘤技術產生之抗體。術語"單株抗體"係指源自包括任何真核、原核或噬菌體株之單一株抗體，且非其產生之方法的抗體。
用於使用融合瘤技術產生且篩選特異性抗體之方法為常規且在此項技術中熟知。在一實施例中，本發明提供產生單株抗體之方法以及藉由包含培養分泌本發明之抗體的融合瘤細胞之方法產生的抗體，其中融合瘤較佳藉由以下步驟產生：使自經本發明之抗原免疫的小鼠分離之脾細胞與骨髓瘤細胞融合，且隨後篩選由融合產生之融合瘤以篩選分泌能夠結合本發明之多肽的抗體之融合瘤株(參見實例1.2)。簡而言之，小鼠可經IL－13抗原免疫。在一較佳實施例中，將IL－13抗原與佐劑一起投與以刺激免疫反應。該等佐劑包括完整或弗氏不完全佐劑、RIBI(胞壁醯二肽)或ISCOM(免疫刺激複合體)。該等佐劑可藉由使多肽局部沈積而保護其免於快速分散，或其可含有刺激宿主分泌對於巨噬細胞及免疫系統之其他組份而言具有趨化性之因素的物質。較佳地，若多肽正投與，則免疫計劃將包括2或2次以上投與多肽，經數星期展開。
以IL－13抗原使動物免疫之後，可由動物獲得抗體及/或抗體產生細胞。藉由放血或處死動物由動物獲得含有抗IL－13抗體之血清。當自動物獲得時，可使用血清，可由血清獲得免疫球蛋白部分，或可自血清純化抗IL－13抗體。以此方式獲得之血清或免疫球蛋白為多株的，因此具有不同種類陣列之特性。
偵測免疫反應後，例如偵測小鼠血清中對抗原IL－13特異性之抗體，收集小鼠脾臟且分離脾細胞。隨後，藉由熟知技術使脾細胞與任何適當骨髓瘤細胞，例如由ATCC獲得之細胞株SP20之細胞融合。選擇融合瘤且藉由限制稀釋選殖。隨後藉由對於分泌能夠結合IL－13之抗體的細胞而言，在此項技術中已知之方法檢定融合瘤株。可藉由以陽性融合瘤株使小鼠免疫來產生大體而言含有高含量之抗體的腹水液體。
在另一實施例中，可自免疫動物製備抗體產生永生融合瘤。免疫後，處死動物且如在此項技術中所熟知般使脾臟B細胞與永生骨髓瘤細胞融合。參見例如前述Harlow且Lane。在一較佳實施例中，骨髓瘤細胞並不分泌免疫球蛋白多肽(非分泌細胞株)。融合及抗生素選擇後，使用IL－13或其部分或表現IL－13之細胞篩選融合瘤。在一較佳實施例中，使用酶聯免疫測定(ELISA)或放射免疫測定(RIA)，較佳ELISA進行初始篩選。ELISA篩選之實例提供於WO 00/37504中，其以引用的方式併入本文中。
如下文所進一步探討，選擇、選殖抗IL－13抗體產生融合瘤且進一步篩選其合意特性，包括穩固融合瘤生長、高抗體產生及合意抗體特性。融合瘤可於同基因型動物中、於缺乏免疫系統之例如裸鼠動物中活體內培養且擴增或於細胞培養物中活體外培養且擴增。選擇、選殖且擴增融合瘤之方法為熟習此項技術者所熟知。
在一較佳實施例中，融合瘤為如上所述之小鼠融合瘤。在另一較佳實施例中，於諸如大鼠、羊、豬、山羊、牛或馬之非人類、非小鼠物種中產生融合瘤。在另一實施例中，融合瘤為人類融合瘤，其中人類非分泌骨髓瘤與表現抗IL－13抗體之人類細胞融合。
可藉由已知技術產生識別特異性抗原決定基之抗體片段。例如，本發明之Fab及F(ab')2片段可使用諸如木瓜蛋白酶(以產生Fab片段)或胃蛋白酶(以產生F(ab')2片段)之酶藉由免疫球蛋白分子之蛋白水解裂解產生。F(ab')2片段含有可變域、輕鏈恆定區及重鏈之CHI域。
2.使用SLAM之抗IL－13單株抗體 在本發明之另一態樣中，如美國專利第5,627,052號、PCT公開案WO 92/02551及Babcock,J.S.等人。(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93：7843－7848中所述，自單一、分離之淋巴細胞使用在此項技術中稱作選擇之淋巴細胞抗體方法(SLAM)的程序產生重組抗體。在此方法中，使用抗原特異性溶血斑塊檢定篩選分泌所關注之抗體之單一細胞，例如源自第一部分所描述之任一免疫動物的淋巴細胞，其中使用諸如生物素之連接子將該抗原IL－13、IL－13之子單元或其片段與綿羊紅細胞偶合且其用以鑑別分泌對於IL－13具有特異性之抗體的單一細胞。鑑定所關注之抗體分泌細胞後，藉由反轉錄酶PCR自細胞救援重鏈及輕鏈可變域cDNA，且此等可變域可隨後表現於諸如COS或CHO細胞之哺乳動物宿主細胞的適當免疫球蛋白恆定區(例如人類恆定區)環境中。可隨後藉由(例如)淘洗轉染之細胞以分離表現IL－13之抗體的細胞，來進一步活體外分析且選擇源自活體內選擇之淋巴細胞、經放大之免疫球蛋白序列轉染之宿主細胞。放大之免疫球蛋白序列可進一步藉由諸如彼等描述於PCT公開案WO 97/29131且PCT公開案WO 00/56772中之(諸如)活體外親和力成熟方法活體外操作。
3.使用轉基因動物之抗IL－13單株抗體 在本發明之另一實施例中，藉由以IL－13抗原使包含某些或所有人免疫球蛋白基因座之非人類動物免疫產生抗體。在一較佳實施例中，該非人類動物為XENOMOUSE轉基因小鼠，包含較大人免疫球蛋白基因座片段且小鼠抗體產生不足之工程化小鼠品系。參見例如Green等人。Nature Genetics 7：13－21(1994)及美國專利5,916,771、5,939,598、5,985,615、5,998,209、6,075,181、6,091,001、6,114,598及6,130,364。亦參見1991年7月25日公開之WO 91/10741、1994年2月3日公開之WO 94/02602、1996年10月31日公開之WO 96/34096及WO 96/33735、1998年4月23日公開之WO 98/16654、1998年6月11日公開之WO 98/24893、1998年11月12日公開之WO 98/50433、1999年9月10日公開之WO 99/45031、1999年10月21日公開之WO 99/53049、2000年2月24日公開之WO 00/09560及2000年6月29日公開之WO 00/037504。XENOMOUSE轉基因小鼠產生類似成人之全部人類抗體人類譜且產生抗原特異性人類Mab。XENOMOUSE轉基因小鼠經由引入人類重鏈基因座及x輕鏈基因座之大分子量、種系構型YAC片段含有約80%之人類抗體譜。參見Mendez等人，Nature Genetics 15：146－156(1997)；Green及Jakobovits J.Exp.Med.188：483－495(1998)，據此將其揭示內容以引用的方式併入。
4.使用重組抗體庫之抗IL－13單株抗體 活體外方法亦可用於製造本發明之抗體，其中抗體庫經篩選以鑑別具有所需結合特異性之抗體。該篩選重組抗體庫之方法為在此項技術中所熟知且包括描述於以下各專利及參考文獻中之方法：例如Ladner等人美國專利第5,223,409號；Kang等人PCT公開案第WO 92/18619號；Dower等人PCT公開案第WO 91/17271號；Winter等人PCT公開案第WO 92/20791號；Markland等人PCT公開案第WO 92/15679號；Breitling等人PCT公開案第WO 93/01288號；McCafferty等人PCT公開案第WO 92/01047號；Garrard等人PCT公開案第WO 92/09690號；Fuchs等人(1991)Bio/Technology 9：1370－1372；Hay等人(1992)Hum Antibod Hybridomas 3：81－85；Huse等人(1989)Science 246：1275－1281；McCafferty等人，Nature(1990)348：552－554；Griffiths等人(1993)EMBO J 12：725－734；Hawkins等人(1992)J Mol Biol 226：889－896；Clackson等人(1991)Nature 352：624－628；Gram等人(1992)PNAS 89：3576－3580；Garrad等人(1991)Bio/Technology 9：1373－1377；Hoogenboom等人(1991)Nuc Acid Res 19：4133－4137；及Barbas等人(1991)PNAS 88：7978－7982；美國專利申請公開案20030186374及PCT公開案第WO 97/29131號，將各自之內容以引用的方式併入本文中。
重組抗體庫可來自經IL－13或IL－13或IL－13或IL－13之一部分免疫的受檢者。或者，重組抗體庫可來自未實驗過之受檢者，亦即並未經IL－13免疫者，諸如來自並未經人類IL－13免疫之人類受檢者之人類抗體庫。藉由以包含人類IL－13之肽篩選重組抗體庫以藉此選擇彼等識別IL－13之抗體來選擇本發明之抗體。進行該篩選及選擇之方法為在此項技術中所熟知，諸如描述於前段之參考文獻中。為選擇本發明之對hIL－13具有特定結合親和力之抗體，諸如彼等以特定koff 速率常數與人類IL－13解離者，此項技術中已知之表面電漿共振法可用於選擇具有所需koff 速率常數之抗體。為選擇本發明之對hIL－13具有特定中和活性之抗體，諸如彼等具有特定IC50 者，可使用在此項技術中已知之對於評估hIL－13活性抑制之標準方法。
在一態樣中，本發明係關於結合人類IL－13之分離之抗體或其抗原結合部分。抗體較佳中和抗體。在各種實施例中，抗體為重組抗體或單株抗體。
例如，本發明之抗體亦可使用在此項技術中已知之各種噬菌體呈現方法產生。在噬菌體呈現方法中，功能抗體域呈現在噬菌體顆粒之表面上，其攜帶編碼其之多核苷酸序列。詳言之，可利用該噬菌體以呈現自譜或組合抗體文庫(例如人類或鼠類)表現之抗原結合域。可使用抗原選擇或識別表現結合所關注之抗原之抗原結合域之噬菌體，例如使用標記抗原或結合或捕捉於固體表面或珠粒上之抗原。用於此等方法之噬菌體為典型絲狀噬菌體，其包括自具有Fab、Fv或二硫化物穩定之Fv抗體域的噬菌體表現之fd及M13結合域，該Fv抗體域重組融合至噬菌體基因III或基因VIII蛋白質。可用於製備本發明之抗體的噬菌體呈現方法之實例包括彼等揭示於以下專利及參考文獻者中：Brinkman等人，J.Immunol.Methods 182：41－50(1995)；Ames等人，J.Immunol.Methods 184：177－186(1995)；Kettleborough等人，Eur.J.Immunol.24：952－958(1994)；Persic等人，Gene 187 9－18(1997)；Burton等人，Advances in Immunology 57：191－280(1994)；PCT申請案第PCT/GB91/01134號；PCT公開案WO 90/02809；WO 91/10737；WO 92/01047；WO 92/18619；WO 93/11236；WO 95/15982；WO 95/20401；及美國專利第5,698,426、5,223,409、5,403,484、5,580,717、5,427,908、5,750,753、5,821,047、5,571,698、5,427,908、5,516,637、5,780,225、5,658,727、5,733,743、及5,969,108號；各自以引用的方式全部併入本文中。
如以上參考文獻中所述，噬菌體選擇後，噬菌體之抗體編碼區可經分離且用以產生包括人類抗體或任何其他所需抗原結合片段且表現於任何所需宿主中之全抗體，該宿主包括哺乳動物細胞、昆蟲細胞、植物細胞、酵母及細菌，例如如下文中所詳述。例如，亦可使用在此項技術中已知之方法採用重組產生Fab、Fab'及F(ab')2片段之技術，該等方法諸如彼等揭示於PCT公開案WO 92/22324；Mullinax等人，BioTechniques 12(6)：864－869(1992)；及Sawai等人，AJRI 34：26－34(1995)及Better等人，Science 240：1041－1043(1988)(該等參考文獻以引用的方式全部併入)中者。可用於產生單鏈Fv及抗體之技術之實例包括彼等描述於美國專利4,946,778及5,258,49；Huston等人，Methods in Enzymology 203：46－88(1991)；Shu等人，PNAS 90：7995－7999(1993)；及Skerraet等人，Science 240：1038－1040(1988)中者。
替代藉由噬菌體呈現篩選重組抗體庫，可應用在此項技術中已知用於篩選較大組合庫之其他方法論以鑑別本發明之雙重特異性抗體。一類型之替代表現系統為如Szostak及Roberts之PCT公開案第WO 98/31700號及Roberts,R.W.及Szostak,J.W.(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94：12297－12302中所述其中重組抗體庫表現為RNA－蛋白質融合者。在此系統中，mRNA與肽或蛋白質之間產生共價融合，其藉由活體外翻譯在3'端具有嘌呤黴素，一種肽基受體抗生素之合成mRNA編碼。因此，特異mRNA可基於所編碼肽或蛋白質(例如抗體或其部分)之特性自mRNA(例如組合庫)複雜混合物富集，諸如將抗體或其部分結合至雙重特異性抗原。可藉由如上所述之重組方法表現自篩選該等庫中重新獲得之編碼抗體或其部分之核酸序列(例如在哺乳動物宿主細胞中)，且此外如上所述其可藉由其他輪之mRNA肽融合篩選(其中突變已引入最初選擇之序列中)，或藉由其他用於重組抗體之活體外親和力成熟法之方經受進一步親和力成熟。
在另一方法中，本發明之抗體亦可使用在此項技術中已知之酵母呈現方法產生。在酵母呈現方法中，遺傳法用以將抗體域限定至酵母細胞壁，且將其呈現在酵母之表面上。尤其可利用該酵母呈現自譜或組合抗體文庫(例如人類或鼠類)表現之抗原結合域。可用於製備本發明之抗體的酵母呈現方法之實例包括彼等揭示於Wittrup等人美國專利第6,699,658號中者，將其以引用的方式併入本文中。
B.產生重組IL－13抗體
本發明之抗體可藉由在此項技術中已知之大量技術中的任一者產生。例如，自宿主細胞表現，其中編碼重鏈及輕鏈之表現載體經藉由標準技術轉染於宿主細胞中。各種形式之術語"轉染"意欲包涵廣泛各種通常用於引入外源性DNA於原核或真核宿主細胞中之技術，例如電穿孔、鈣磷酸鹽沈澱、DEAE－葡聚糖轉染等。儘管可能在原核或真核宿主細胞中表現本發明之抗體，但較佳在真核細胞中表現抗體，且最佳在哺乳動物宿主細胞中表現，由於該真核細胞(且尤其哺乳動物細胞)比原核細胞更可能組裝且分泌適當摺疊且具有免疫活性之抗體。
用於表現本發明之重組抗體之較佳哺乳動物宿主細胞包括中國倉鼠卵巢(CHO細胞)(包括dhfr－CHO細胞，描述於Urlaub且Chasin,(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77：4216－4220中者，(例如)如R.J.Kaufman及P.A.Sharp(1982)Mol.Biol.159：601－621中所述其與DHFR可選擇標記一起使用)、NSO骨髓瘤細胞、COS細胞及SP2細胞。當將編碼抗體基因之重組表現載體引入哺乳動物宿主細胞中時，藉由培養該宿主細胞歷時一段足以允許抗體在宿主細胞中表現，或更佳抗體於宿主細胞生長之培養基中分泌之時間產生抗體。抗體可使用標準蛋白質純化法自培養基中重新獲得。
宿主細胞亦可用以產生功能抗體片段，諸如Fab片段或scFv分子。應瞭解上述程序之變化在本發明之範疇內。例如，可能需以編碼本發明抗體之輕鏈及/或重鏈之功能片段的DNA轉染宿主細胞。DNA重組技術亦可用以移除編碼結合所關注之抗原所不必需之輕及重鏈的任一者或兩者之某些或全部DNA。本發明之抗體亦包涵自該等截斷DNA分子表現之分子。另外可藉由標準化學交聯方法交聯本發明之抗體與第二抗體產生二功能抗體，其中一個重鏈及一個輕鏈為本發明之抗體，及另一重鏈及輕鏈對除所關注之抗原以外的抗原具有特異性。
在用於重組表現本發明之抗體或其抗原結合部分之較佳系統中，藉由磷酸鈣介導之轉染將編碼抗體重鏈及抗體輕鏈之重組表現載體引入dhfr－CHO細胞中。在重組表現載體中，抗體重鏈及輕鏈基因各與CMV增強子/AdMLP啟動子調節元件操作連接以驅動高水準基因轉錄。重組表現載體亦具有DHFR基因，其使用甲胺蝶呤選擇/放大允許已經載體轉染之CHO細胞之選擇。培養所選擇轉型之宿主細胞以允許抗體重鏈及輕鏈之表現，且自培養基中重新獲得完整抗體。標準分子生物學技術用以製備重組表現載體，轉染宿主細胞，選擇轉型株，培養宿主細胞且自培養基回收抗體。另外本發明提供一種藉由在適當培養基中培養本發明之宿主細胞直至本發明之重組抗體合成，來合成本發明之重組抗體之方法。該方法可進一步包含自培養基分離重組抗體。
1.抗IL－13抗體 表5為本發明之較佳抗hIL－13抗體之VH且VL區域的胺基酸序列之列表。
上述分離之抗IL－13抗體CDR序列確立根據本發明分離且包含包括於下表6中所列之CDR序列之多肽的IL－13結合蛋白質之新穎家族。為產生且選擇本發明之關於hIL－13及或hIL－13具有較佳IL－13結合及/或中和活性的CDR，可使用在此項技術中已知用於產生本發明結合蛋白質且評估彼等結合蛋白質之IL－13及或IL－13結合及/或中和特徵的標準方法，包括(但不限於)彼等特定描述於本文中者。
2.抗IL－13嵌合抗體 嵌合抗體為其中抗體之不同部分源自於不同動物物種之分子，諸如具有源自鼠類單株抗體之可變域及人免疫球蛋白恆定區之抗體。在此項技術中已知用於產生嵌合抗體之方法且詳細地探討於實例2.1.中。參見例如，Morrison,Science 229：1202(1985)；Oi等人，BioTechniques 4：214(1986)；Gillies等人，(1989)J.Immunol.Methods 125：191－202；美國專利第5,807,715、4,816,567及4,816,397號，其以引用的方式全部併入本文中。另外，可使用藉由將自適當抗原特異性之小鼠抗體分子的基因與自適當生物學活性之人類抗體分子的基因剪接在一起，經發展用於產生"嵌合抗體"之技術(Morrison等人，1984,Proc.Natl.Acad.Sci.81：851－855；Neuberger等人，1984,Nature 312：604－608；Takeda等人，1985,Nature 314：452－454，其以引用的方式全部併入本文中)。
在一實施例中，藉由以人類IgG1恆定區替換第一部分所描述的鼠類單株抗人類IL－13抗體之重鏈恆定區來產生本發明之嵌合抗體。在一特定實施例中，本發明之嵌合抗體包含重鏈可變域(VH )，其包含SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：46之胺基酸序列；及輕鏈可變域(VL )，其包含SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：37、SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：43或SEQ ID NO：47之胺基酸序列。
3.抗IL－13人源化抗體 人源化抗體為來自結合所需抗原的非人類物種抗體之抗體分子，其具有來自非人類物種之一或多個互補決定區(CDR)及來自人免疫球蛋白分子之框架區域。揭示已知人類Ig序列例如www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez－/uery.fcgi；www.atcc.org/phage/hdb.html；www.sciquest.com/；www.abcam.com/；www.antibodyresource.com/onlinecomp.html；www.public.iastate.edu/.about.pedro/research_tools.html；www.mgen.uni－heidelberg.de/SD/IT/IT.html；www.whfreeman.com/immunology/CH－05/kuby05.htm；www.library.thinkquest.org/12429/Immune/Antibody.html；www.hhmi.org/grants/lectures/1996/vlab/；www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/m－ikeimages.html；www.antibodyresource.com/；mcb.harvard.edu/BioLinks/Immuno－logy.html.www.immunologylink.com/；pathbox.wustl.edu/.about.hcenter/index.－html；www.biotech.ufl.edu/.about.hcl/；www.pebio.com/pa/340913/340913.html－；www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody/；www.m.ehime－u.acjp/.about.yasuhito－/Elisa.html；www.biodesign.com/table.asp；www.icnet.uk/axp/facs/davies/lin－ks.html；www.biotech.ufl.edu/.about.fccl/protocol.html；www.isac－net.org/sites_geo.html；aximtl.imt.uni－marburg.de/.about.rek/AEP－Start.html；baserv.uci.kun.nl/.about.jraats/linksl.html；www.recab.uni－hd.de/immuno.bme.nwu.edu/；www.mrc－cpe.cam.ac.uk/imt－doc/pu－blic/lNTRO.html；www.ibt.unam.mx/vir/V_mice.html；imgt.cnusc.fr：8104/；www.biochem.ucl.ac.uk/.about.martin/abs/index.html；antibody.bath.ac.uk/；abgen.cvm.tamu.edu/lab/wwwabgen.html；www.unizh.ch/.about.honegger/AHOsem－inar/Slide01.html；www.cryst.bbk.ac.uk/.about.ubcg07s/；www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.htm；www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/h－umanisation/TAHHP.html；www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat_aim.html；www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html；www.cryst.bioc.cam.ac.uk/.abo－ut.fmolina/Web－pages/Pept/spottech.html；www.jerini.de/frroducts.htm；www.patents.ibm.com/ibm.html。Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest,U.S.Dept.Health(1983)，各自以引用的方式全部併入本文中。如在此項技術中已知，該等引入序列可用於降低免疫原性或降低、增強或改進結合、親和力(affinity)、結合速率、分解速率、親和力(avidity)、特異性、半衰期或任何其他適當特性。
人類框架區域中之框架殘基可經CDR施體抗體之對應殘基取代以改變、較佳改善抗原結合。藉由在此項技術中所熟知之方法，例如藉由將CDR與框架殘基之交互作用建立模型以鑑別對於抗原結合及序列比較而言重要的框架殘基，以鑑別特定位置之特殊框架殘基，來鑑定此等框架取代。(參見例如Queen等人，美國專利第5,585,089號；Riechmann等人，Nature 332：323(1988)，將其以引用的方式全部併入本文中)三維免疫球蛋白模型通常可獲得且為熟習此項技術者所熟知。可獲得說明且顯示所選候選免疫球蛋白序列之可能三維構造結構的電腦程式。該等顯示之檢視允許分析殘基對候選免疫球蛋白序列之功能的可能作用，亦即分析影響候選免疫球蛋白結合其抗原之能力的殘基。以此方式，FR殘基可自共有區選擇且組合且引入序列以便獲得所需抗體特徵，諸如對靶標抗原之增加之親和力。一般而言，CDR殘基直接且極大體上與影響抗原結合有關。可使用在此項技術中已知之各種技術將抗體人源化，諸如(但不限於)彼等描述於以下參考文獻及專利中者：Jones等人，Nature 321：522(1986)；Verhoeyen等人，Science 239：1534(1988)；Sims等人，J.Immunol.151：2296(1993)；Chothia及Lesk,J.Mol.Biol.196：901(1987)；Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89：4285(1992)；Presta等人，J.Immunol.151：2623(1993)；Padlan,Molecular Immunology 28(4/5)：489－498(1991)；Studnicka等人，Protein Engineering 7(6)：805－814(1994)；Roguska.等人，PNAS 91：969－973(1994)；PCT公開案WO 91/09967；PCT/：US 98/16280、US 96/18978、US 91/09630、US 91/05939、US 94/01234、GB 89/01334、GB 91/01134、GB 92/01755；WO 90/14443、WO 90/14424、WO 90/14430、EP 229246、EP 592,106；EP 519,596、EP 239,400、美國專利第5,565,332、5,723,323、5,976,862、5,824,514、5,817,483、5,814,476、5,763,192、5,723,323、5,766,886、5,714,352、6,204,023、6,180,370、5,693,762、5,530,101、5,585,089、5,225,539、4,816,567號，各自以引用的方式全部併入本文中，包括其所引用的參考文獻。
C.產生抗體及產生抗體之細胞株
本發明之抗IL－13抗體較佳顯示高降低或中和IL－13活性之能力，例如如在此項技術中已知之數種活體外及活體內檢定之任一者所評估(例如參見實例1.1.C)。例如，此等抗體以在至少約10－8 M、約10－9 M或約10－10 M範圍內的IC50 值中和TARC藉由A－549細胞經IL－13誘導之產生。
在較佳實施例中，分離之抗體或其抗原結合部分結合人類IL－13，其中如表面電漿共振所測定，該抗體或其抗原結合部分以約0.1 s－1 或以下之koff 速率常數與人類IL－13解離，或其以約1×10－6 M或以下之IC50 值抑制人類IL－13及/或人類IL－13活性。或者，如表面電漿共振所測定該抗體或其抗原結合部分可以約1×10－2 s－1 或以下之koff 速率常數與人類IL－13解離，或其可以約1×10－7 M或以下之IC50 值抑制人類IL－13及/或人類IL－13活性。或者，如表面電漿共振所測定抗體或其抗原結合部分可以約1×10－3 s－1 或以下之koff 速率常數與人類IL－13解離，或其可以約1×10－8 M或以下之IC50 值抑制人類IL－13及/或人類IL－13。或者，如表面電漿共振所測定抗體或其抗原結合部分可以約1×10－4 s－1 或以下之koff 速率常數與人類IL－13解離，或其可以約1×10－9 M或以下之IC50 值抑制IL－13及/或人類IL－13活性。或者，如表面電漿共振所測定抗體或其抗原結合部分可以約1×10－5 s－1 或以下之koff 速率常數與人類IL－13解離，或其可以約1×10－10 M或以下之IC50 值抑制IL－13及/或人類IL－13活性。或者，如表面電漿共振所測定抗體或其抗原結合部分可以約1×10－5 s－1 或以下之koff 速率常數與人類IL－13解離，或其可以約1×10－11 M或以下之IC50 值抑制IL－13及/或人類IL－13活性。
IL－13藉由與細胞表面上之IL－13受體(IL－13R)，包含IL－13Rα1鏈(IL－13Rα1)及IL－4R鏈(IL－4R)之異源二聚體結合行使其作用。IL－13首先以低親和力(KD ＝2－10 nM)與IL－13Rα1結合，且隨後招募IL－4R至複合體，產生高親和力受體(KD ＝0.03－0.4 nM)(Aman,M.J.，等人。1996 J.Biol.Chem.271,29265－29270；Miloux等人。1997 FEBS Lett.401,163－166；Andrews等人2002 J.Biol.Chem.277,46073－46078)。IL－13R之雜二聚合導致分別與IL－13Rα1及IL－4R構成型相關之Janus激酶TYK2及JAK1活化，接著導致信號轉導蛋白及轉錄6(STAT6)之活化因子活化(Izuhara,K.及Arima,K.2004 Drug News Perspect.17,91－98)。存在另一IL－13結合單元IL－13Rα2鏈(IL－13Rα2)，其以高親和力(0.25－1.2 nM)與IL－13結合(Caput，等人1996 J.Biol.Chem.271,16921－16926；Donaldson等人1998 J.Immunol.161,2317－2324)。已知無其他受體分子涉及於IL－13．TL－13R2複合體中。最初認為IL－13R2充當非信號傳輸"誘餌"受體。然而，後來發現其可與IL－13結合且經由AP－1途徑傳輸信號，使得在某些包括巨噬細胞之細胞類型中TNF－β產生，其接著導致肺部纖維化(Fichtner－Feigl,2006 Nat Med 12：99－106)。因此，IL－13Rα1/IL－4Ra與IL－13Rα2途徑造成哮喘及其他肺發炎病狀之總病理生理學。因此，阻斷IL－13與兩種受體結合之治療性抗IL－13抗體將比彼等僅阻斷一種受體者更有效。
已分離阻斷IL－13與IL－13Rα1與IL－13Rα2結合之單株抗體。細胞表面上ELISA基受體結合檢定與125－I－標記之IL－13結合檢定均證明鼠類形式與人源化形式(亦即13C5.5)之13C5均能夠有效阻斷IL－13與兩種受體之結合。與13C5相同譜系中之包括25C8及33C3之抗體亦能夠阻斷IL－13與兩種受體結合。13C5之抗原決定基作圖指示其結合位點包括人類IL－13之C末端螺旋D區(殘基VRDTK IEVAQ FVKDL LLHLK KLFRE GR，對應於SEQ ID NO 1之胺基酸104－130)。已提出c末端螺旋D區涉及於與IL－13受體之相互作用中(Zuegg等人2001 Immunol Cell Biol.79：332－9)。與13C5.5抗體之Fab部分複合之人類IL－13之晶體結構指示13C5.5結合人類－13之C末端螺旋D區以及N末端螺旋A區。較佳地，該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13，使得具有該抗體或其抗原結合片段(與由SEQ ID No.1之地形區域Ser26－Thr27－Ala28－Leu29－Arg30－Glu31－Leu32－Ile33－Glu34－Glu35－Leu36－Val37－Asn38與Lys123－Lys124－Leu125－Phe126－Arg127－Glu128－Gly129－Arg130界定之抗原決定基結合)之IL－13經抑制免於與IL－13結合。較佳地，該抗體或其抗原結合片段結合人類IL－13，使得具有該抗體或其抗原結合片段(與由SEQ ID No.1之地形區域Arg30－Glu31－Leu32－Ile33－Glu34－Glu35－Leu36－Va137－Asn38與Lys123－Lys124－Leu125－Phe126－Arg127界定之抗原決定基結合)之IL－13經抑制免於與IL－13α2受體結合。
在某些實施例中，抗體包含重鏈恆定區，諸如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恆定區。重鏈恆定區較佳為IgG1重鏈恆定區或IgG4重鏈恆定區。此外，抗體可包含輕鏈恆定區，輕鏈恆定區或λ輕鏈恆定區。抗體較佳包含輕鏈恆定區。或者，抗體部分可為例如Fab片段或單鏈Fv片段。
在此項技術中已知替換Fc部分之胺基酸殘基至改變抗體效應子功能(Winter，等人。US專利第5,648,260；5,624,821號)。抗體之Fc部分介導數種重要效應子功能，例如細胞激素誘導、ADCC、吞噬作用、補體依賴型細胞毒性(CDC)及抗體及抗原抗體複合物之半衰期/清除率。視治療目的而定，在某些情況下，此等效應子功能對於治療抗體而言為合意的，但在其他情況下其可為不必要的或甚至有害的。某些人類IgG同型，尤其IgG1及IgG3經由分別與FcγR及補體C1q結合介導ADCC及CDC。新生Fc受體(FcRn)為決定抗體之循環半衰期的關鍵組件。在另一實施例中，抗體之恆定區(例如抗體之Fc區域)中的至少一胺基酸殘基經替換，使得抗體之效應子功能改變。
一實施例提供標記之結合蛋白質，其中本發明之抗體或抗體部分經衍生或與另一官能分子(例如另一肽或蛋白質)連接。例如，本發明之標記之結合蛋白質可藉由官能性地連接本發明之抗體或抗體部分(藉由化學偶聯、遺傳融合、非共價締合或以別的方式)與一或多種其他分子實體而衍生，該等其他分子實體諸如另一抗體(例如雙特異性抗體或雙功能抗體)、可偵測試劑、細胞毒素劑、藥劑及/或可介導抗體或抗體部分與另一分子(諸如鏈黴親和素核心區域或聚組胺酸標籤)締合的蛋白質或肽。
本發明之抗體或抗體部分可衍生之適用可偵測試劑包括螢光化合物。例示性螢光可偵測試劑包括螢光素、異硫氰酸螢光素、羅丹明、5－二甲胺－1－萘磺醯基氯、藻紅蛋白及其類似物。抗體亦可經諸如鹼性磷酸酶、辣根過氧化物酶、葡萄糖氧化酶及其類似物之可偵測酶衍生。當抗體經可偵測酶衍生時，其藉由添加酶用以產生可偵測反應產物之其他試劑而進行偵測。例如當可偵測試劑辣根過氧化物酶存在時，添加過氧化氫及二胺基聯苯胺得到可偵測之呈色反應產物。抗體亦可經生物素衍生且經由間接量測抗生物素蛋白或鏈黴親和素結合而偵測。
本發明之另一實施例提供結晶結合蛋白質。較佳地，本發明係關於如本文揭示之全抗IL－13抗體及其片段之晶體及包含該等晶體之調配物及組合物。在一實施例中，結晶結合蛋白質比結合蛋白質之可溶性對應物具有更大活體內半衰期。在另一實施例中，結晶後結合蛋白質保留生物學活性。
可根據在此項技術中已知且如WO 02072636(以引用的方式併入本文中)中揭示之方法產生本發明之結晶結合蛋白質。
本發明之另一實施例提供糖基化結合蛋白質，其中抗體或其抗原結合部分包含一或多個糖殘基。初期活體內蛋白質產生可進行進一步處理，稱為轉譯後修飾。糖(糖基)殘基尤其可以酵素方式，一種稱為糖基化之方法添加。所得具有以共價連接之寡醣側鏈的蛋白質稱為糖基化蛋白質或醣蛋白。抗體為在Fc域以及可變域中具有一或多個糖殘基之醣蛋白。Fc域中之糖殘基對Fc域之效應子功能具有重要影響，對抗體之抗原結合或半衰期具有最低影響(R.Jefferis,Biotechnol.Prog.21(2005)，第11－16頁)。相反，可變域之糖基化對抗體之抗原結合活性可具有一定影響。可變域之糖基化可能因位阻而對抗體結合親和力可具有負作用(Co,M.S.等人Mol.Immunol.(1993)30：1361－1367)或使得對抗原之親和力增加(Wallick，S.C.，等人，Exp.Med.(1988)168：1099－1109；Wright,A.等人，EMBO J.(1991)10：2717－2723)。
本發明之一態樣係關於產生糖基化位點突變體，其中結合蛋白質之O或N連接之糖基化位點已突變。熟習此項技術者可使用標準熟知技術產生該等突變。保留生物學活性，但具有升高或降低之結合活性的糖基化位點突變體為本發明之另一目標。
在另一實施例中，本發明之抗體或抗原結合部分之糖基化經改進。例如，可製造非糖基化抗體(亦即抗體缺乏糖基化)。可改變糖基化以(例如)增加抗體對抗原之親和力。可藉由(例如)改變抗體序列中之一或多個糖基化位點實現該等糖類修飾。例如，可進行一或多個胺基酸取代，其使得一或多個可變域糖基化位點消除以藉此消除彼位點之糖基化。該非糖基化可增加抗體對抗原之親和力。該方法進一步詳細描述於PCT公開案WO 003016466 A2及美國專利第5,714,350及6,350,861號中，各者以引用的方式全部併入本文中。
另外或替代地，本發明之修飾之抗體可經製備具有改變之糖基化類型，諸如具有降低量之岩藻糖基殘基的次岩藻糖基化之抗體或具有增加之二等分GlcNAc結構的抗體。已證明該等改變之糖基化形式增加抗體之ADCC能力。可藉由(例如)於具有改變之糖基化機制的宿主細胞中表現抗體來實現該等糖類修飾。在此項技術中已描述具有改變之糖基化機制之細胞且其可用作表現本發明之重組抗體以藉此產生具有改變之糖基化的抗體之宿主細胞。參見例如Shields,R.L.等人。(2002)J.Biol.Chem.277：26733－26740；Umana等人(1999)Nat.Biotech.17：176－1以及歐洲專利第EP 1,176,195號；PCT公開案WO 03/035835；WO 99/5434280，各自以引用的方式全部併入本文中。
蛋白質糖基化視所關注之蛋白質之胺基酸序列以及表現蛋白質之宿主細胞而定。不同生物可產生不同糖基化酶(例如糖基轉移酶及醣苷酶)且具有不同可用底物(核苷酸糖)。因該等因素，蛋白質糖基化形式及糖基殘基之組合物可依賴於表現特定蛋白質之宿主系統而不同。適用於本發明之糖基殘基可包括(但不限於)葡萄糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖、n－乙醯葡萄胺糖及唾液酸。糖基化結合蛋白質較佳包含糖基殘基使得糖基化形式為人類。
熟習此項技術者已知不同蛋白質糖基化可產生不同蛋白質特性。例如，與表現於諸如CHO細胞株之哺乳動物細胞中之相同蛋白質相比，在諸如酵母之微生物宿主中產生且利用酵母內源性途徑糖基化之治療性蛋白質之功效可降低。該等醣蛋白在人類中亦可具有免疫原性且投與後展示降低之活體內半衰期。人類及其他動物之特異性受體可識別特異性糖基殘基且促進蛋白質自血流快速清除。其他不利效果可包括蛋白質摺疊、溶解性、蛋白酶易感性、運輸、輸送、區室化、分泌、由其他蛋白質或因子識別、抗原性或過敏性變化。因此，執業醫師可優選具有特定組成及糖基化形式之治療性蛋白質，例如糖基化組成及形式等同於或至少類似於人類細胞或預定受檢動物之物種特異細胞中產生者。
可藉由在遺傳上修飾宿主細胞以表現異源性糖基化酶來獲得不同於宿主細胞之蛋白質的表現糖基化蛋白質。使用在此項技術中已知之技術，執業醫師可產生顯示人類蛋白質糖基化之抗體或其抗原結合部分。例如，酵母株已經在遺傳上修飾以表現非天然發生糖基化酶，使得在此等酵母株中產生之糖基化蛋白質(醣蛋白)顯示與動物細胞、尤其人類細胞相同之蛋白質糖基化(美國專利申請案20040018590及20020137134及PCT公開案WO 2005100584 A2)。
除結合蛋白質外，本發明亦關於對本發明之該等結合蛋白質具有特異性之抗個體基因型(抗－Id)抗體。抗－ID抗體為識別通常與另一抗體之抗原結合區域相關的獨特決定子之抗體。可藉由以結合蛋白質或其含有CDR之區域使動物免疫來製備抗－ID。所免疫動物將識別及對免疫抗體之個體基因型決定子作出應答且產生抗－Id抗體。抗－Id抗體亦可用作"免疫原"以誘導另一動物之免疫反應，產生所謂的抗抗Id抗體。
另外，熟習此項技術者應瞭解可使用遺傳上工程化以表現各種糖基化酶之宿主細胞之庫表現所關注之蛋白質，使得庫之成員宿主細胞產生具有不同糖基化形式的所關注之蛋白質。執業醫師可隨後選擇且分離具有特定新穎糖基化形式的所關注之蛋白質。具有特定選擇之新穎糖基化形式的蛋白質較佳顯示改善或改變之生物特性。
D.抗IL－13抗體之用途
考慮到結合人類IL－13之能力，本發明之抗人類IL－13抗體或其部分可用於使用諸如酶聯免疫吸附檢定(ELISA)、放射免疫檢定(RIA)或組織免疫組織化學之習知免疫測定偵測人類IL－13(例如於諸如血清或血漿之生物樣品中)。本發明提供一種用於偵測生物樣品之人類IL－13之方法，其包含使生物樣品與本發明之抗體或抗體部分接觸，且偵測與人類IL－13結合之抗體(或抗體部分)或未結合抗體(或抗體部分)，以藉此偵測生物樣品中之人類IL－13。抗體經可偵測物質直接或間接標記以促進結合或未結合抗體之偵側。適當可偵測物質包括各種酶、輔基、螢光材料、發光材料及放射性物質。適當酶之實例包括辣根過氧化物酶、鹼性磷酸酶、β－半乳糖苷酶或乙醯膽鹼酯酶；適當輔基複合體之實例包括鏈黴親和素/生物素及抗生物素蛋白/生物素；適當螢光材料之實例包括傘形酮、螢光素、異硫氰酸螢光素、羅丹明、二氯三嗪基胺螢光素、丹磺醯氯或藻紅蛋白；發光材料之實例包括魯米諾(luminol)；且適當放射性物質之實例包括3 H、14 C、35 S、90 Y、99 Tc、111 In、125 I、131 I、177 Lu、166 Ho或153 Sm。
替代標記抗體，人類IL－13可藉由競爭免疫檢定，利用經可偵測物質記之rhIL－13標準及未標記抗人類IL－13抗體於生物液體中檢定。在此檢定中，將生物樣品、標記之rhIL－13標準與抗人類IL－13抗體組合，且測定與未標記抗體結合之標記之rhIL－13標準的量。生物樣品中人類IL－13的量與同抗IL－13抗體結合之標記之rhIL－13標準的量成反比。類似地，人類IL－13亦可藉由競爭免疫測定，利用經可偵測物質標記之rhIL－13標準及未標記抗人類IL－13抗體於生物液體中檢定。
本發明之抗體及抗體部分較佳能夠活體外與活體內中和人類IL－13活性。因此，本發明之該等抗體及抗體部分可用於抑制hIL－13活性，例如在含有hIL－13之細胞培養物中、在人類受檢者中或在其他具有本發明之抗體交叉反應的IL－13之哺乳動物受檢者中抑制hIL－13活性。在一實施例中，本發明提供一種用於抑制hIL－13活性之方法，其包含使hIL－13與本發明之抗體或抗體部分接觸，使得hIL－13活性受抑。例如，在含有或懷疑含有hlL－13之細胞培養物中，本發明之抗體抗體部分可添加至培養基以抑制培養物之hIL－13活性。
在另一實施例中，本發明提供一種用於降低受檢者之hIL－13活性之方法，有利地自患有其中IL－13活性有害的疾病或病症之受檢者降低hIL－13活性。本發明提供用於降低患有該疾病或病症的受檢者之IL－13活性之方法，該方法包含向受檢者投與本發明之抗體或抗體部分。使得該受檢者之IL－13活性降低。IL－13較佳為人類IL－13且該受檢者為人類受檢者。或者，受檢者可為表現本發明之抗體能夠結合的IL－13之哺乳動物。另外，受檢者可為IL－13已引入(例如藉由投與IL－13或藉由表現IL－13輸異基因)之哺乳動物。可出於治療目的向人類受檢者投與本發明之抗體。此外，可出於獸醫學目的或作為人類疾病之動物模型，向表現抗體能夠結合之IL－13之非人類哺乳動物投與本發明之抗體。關於後者，該等動物模型可適用於評估本發明抗體之治療功效(例如測試投與劑量及時程)。
如本文中所用，術語"IL－13活性有害之病症"意欲包括疾病及其他病症，其中患有該病症之受檢者中IL－13之存在已展示或懷疑造成該病症或造成病症惡化之因素的病理生理學。因此，其中IL－13活性有害之病症為其中預期IL－13活性降低減輕病症之症狀及/或進行的病症。該等病症可藉由(例如)增加患有該病症的受檢者之生物流體中IL－13之濃度(例如受檢者之血清、血漿、滑液等中IL－13之濃度增加)來證明，該濃度可使用(例如)如上所述之抗IL－13抗體偵測。可以本發明之抗體治療之病症的非限制性實例包括彼等探討於以下關於本發明抗體之醫藥組合物的部分之病症。
已暗示IL－13在導致與哮喘相關的病理反應中具有關鍵作用。然而，差示免疫學途徑之其他介體亦與哮喘發病機制有關，且除IL－13之外阻斷此等介體可提供其他治療益處。因此，本發明之結合蛋白質可併入DVD－Ig蛋白質中，其中DVD能夠結合標靶對，包括(但不限於)IL－13及前發炎性細胞激素，諸如腫瘤壞死因子－α(TNF－α)。TNF－α可放大哮喘之發炎性反應且可與疾病嚴重程度關聯(McDonnell，等人，Progress in Respiratory Research(2001),31(New Drugs for Asthma,Allergy and COPD),247－250)。此暗示阻斷IL－13與TNF－α可具有有利效應，尤其在嚴重氣管疾病中。在一較佳實施例中，本發明之DVD－Ig結合標靶IL－13及TNF－α且用於治療哮喘。
在另一實施例中，本發明之結合蛋白質可用於產生DVD－Ig分子，其結合IL－13及IL－1β、IL－13及IL－9；IL－13及IL－4；IL－13及IL－5；IL－13及IL－25；IL－13且TARC；IL－13及MDC；IL－13及MIF；IL－13及TGF－β；IL－13及LHR促效劑；IL－13及CL25；IL－13及SPRR2a；IL－13及SPRR2b；及IL－13及ADAM8。本發明亦提供能夠結合IL－13及一或多種與哮喘有關的標靶之DVD－Ig，該等標靶選自由以下各物組成之群：CSF1(MCSF)、CSF2(GM－CSF)、CSF3(GCSF)、FGF2、IFNA1、IFNB1、IFNG、組胺酸及組胺酸受體、IL1A、IL1B、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12A、IL12B、IL14、IL15、IL16、IL17、IL18、IL19、IL－20、IL－21、IL－22、IL－23、IL－24、IL－25、IL－26、IL－27、IL－28、IL－30、IL－31、IL－32、IL－33、KITLG、PDGFB、IL2RA、IL4R、IL5RA、IL8RA、IL8RB、IL12RB1、IL12RB2、IL13RA1、IL13RA2、IL18R1、TSLP、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL7、CCL8、CCL13、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL22、CCL24、CX3CL1、CXCL1、CXCL2、CXCL3、XCL1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CX3CR1、GPR2、XCR1、FOS、GATA3、JAK1、JAK3、STAT6、TBX21、TGFB1、TNFSF6、YY1、CYSLTR1、FCER1A、FCER2、LTB4R、TB4R2、LTBR及殼多糖酶。
D.醫藥組合物
本發明亦提供包含本發明之抗體或其抗原結合部分及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物。包含本發明之抗體的醫藥組合物適用於(但不限於)診斷、偵測或監控病症；預防、治療、控制或改善病症或其一或多種症狀及/或用於研究。在一特定實施例中，組合物包含一或多種本發明之抗體。在另一實施例中，該醫藥組合物包含一或多種本發明之抗體及一或多種除本發明抗體以外的預防或治療劑，以供治療其中IL－13活性有害之病症。較佳地，已知預防或治療劑適用於或已或當前正用於預防、治療、控制或改善病症或其一或多種症狀。根據此等實施例，該組合物可另外包括載劑、稀釋劑或賦形劑。
本發明之抗體及抗體部分可併入適用於投與受檢者之醫藥組合物中。醫藥組合物通常包含本發明之抗體或抗體部分及醫藥學上可接受之載劑。如本文中所用，"醫藥學上可接受之載劑"包括生理上相容之任一及所有溶劑、分散介質、塗料、抗菌及抗真菌劑，等滲及吸收延遲劑及其類似物。醫藥學上可接受之載劑之實例包括水、鹽水、磷酸鹽緩衝生理食鹽水、葡聚糖、甘油、乙醇及其類似物中之一或多者以及其組合。在多數情況下，其在組合物中較佳包括等滲劑，例如糖，諸如甘露糖醇、山梨糖醇之多元醇或氯化鈉。醫藥學上可接受之載劑可另外包含微量助劑物質，諸如潤濕劑或乳化劑、防腐劑或緩衝劑，其增強抗體或抗體部分之存放期或有效性。
已知各種輸送系統且其可用於投與一或多種本發明之抗體或一或多種本發明之抗體與適用於預防、控制、治療或改善病症或其一或多種症狀的預防劑或治療劑之組合，例如脂質體封裝、微粒、微膠囊、能夠表現抗體或抗體片段之重組細胞、受體介導之胞吞作用(參見例如Wu及Wu,J.Biol.Chem.262：4429－4432(1987))、核酸作為反轉錄病毒或其他載體之一部分之構建等。投與本發明之預防或治療劑之方法包括(但不限於)非經腸投與(例如皮內、肌肉內、腹膜內、靜脈內及皮下)、硬膜外投與、腫瘤內投與及黏膜投與(例如鼻內及口服路徑)。另外，可藉由使用(例如)吸入器或霧化器及與霧化劑之調配物，採用肺部投與。參見例如美國專利第6,019,968、5,985,320、5,985,309、5,934,272、5,874,064、5,855,913、5,290,540及4,880,078號；及PCT公開案第WO 92/19244、WO 97/32572、WO 97/44013、WO 98/31346及WO 99/66903號，各自以引用的方式全部併入本文中。在一實施例中，使用Alkermes AIR肺部藥物輸送技術(Alkermes,Inc.,Cambridge,Mass)投與本發明之抗體、組合療法或本發明之組合物。在一特定實施例中，肌內、靜脈內、腫瘤內、經口、鼻內、肺部或皮下投與本發明之預防或治療劑。預防或治療劑可藉由任何便利途徑投與，例如藉由注射或快速注射、藉由經上皮或黏膜皮膚外膜(例如口腔黏膜、經直腸及腸黏膜等)吸收，且其可與其他生物活性劑一起投與。投與可為全身性或局部投與。
在一特定實施例中，向需要治療之區域局部投與本發明之預防或治療劑可為合意的；此可藉由(例如且不限於)局部輸注、注射或藉助於植入而實現，該植入為包括薄膜及基質(諸如矽橡膠(sialastic)薄膜、聚合物、纖維基質(例如Tissuel)或膠原基質)之多孔或無孔材料。在一實施例中，將有效量之一或多種本發明之抗體局部投與患者之受影響區域以預防、治療、控制及/或改善病症或其症狀。在另一實施例中，將有效量之本發明之一或多種抗體組合有效量之除本發明抗體外的一或多種治療劑(例如一或多種預防或治療劑)局部投與患者之受影響區域以預防、治療、控制及/或改善病症或其一或多種症狀。
在另一實施例中，本發明之預防或治療劑可在控釋或持續釋放系統中輸送。在一實施例中，泵可用以實現控釋或持續釋放(參見前述Langer；Sefton,1987,CRC Crit.Ref Biomed.Eng.14：20；Buchwald等人，1980,Surgery 88：507；Saudek等人，1989,N.Engl.J.Med.321：574)。在另一實施例中，聚合材料可用於實現本發明之治療劑之控釋或持續釋放(參見例如Medical Applications of Controlled Release,Langer及Wise(編),CRC Pres.Boca Raton,Fla.(1974)；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design and Performance,Smolen及Ball(編),Wiley,New York(1984)；Ranger及Peppas,1983,J.,Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23：61；亦參見Levy等人，1985,Science 228：190；During等人，1989,Ann.Neurol.25：351；Howard等人，1989,J.Neurosurg.71：105)；美國專利第5,679,377號；美國專利第5,916,597號；美國專利第5,912,015號；美國專利第5,989,463號；美國專利第5,128,326號；PCT公開案第WO 99/15154號；及PCT公開案第WO 99/20253號。用於持續釋放調配物之聚合物之實例包括(但不限於)聚(甲基丙烯酸2－羥基乙酯)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯－共－乙酸乙烯酯)、聚(甲基丙烯酸)、聚乙交酯(PLG)、聚酐、聚(N－聚乙烯吡咯啶酮)、聚乙烯醇、聚丙烯醯胺、聚(乙二醇)、聚乳酸交酯(PLA)、聚(丙交酯－共－乙交酯)(PLGA)及聚原酸酯。在一較佳實施例中，用於持續釋放調配物之聚合物為惰性的、不含可濾除雜質、儲存穩定、無菌的與生物可降解。在另一實施例中，受控或持續釋放系統可接近預防或治療標靶放置，因此僅需全身劑量之一部分(參見例如前述Goodson，在Medical Applications of Controlled Release，第2卷，第115－138頁(1984)中)。
控釋系統論述於Langer之回顧中(1990,Science 249：1527－1533)。熟習此項技術者已知之任何技術可用於產生包含一或多種本發明之治療劑的持續釋放調配物。參見例如美國專利第4,526,938號；PCT公開案WO 91/05548；PCT公開案WO 96/20698；Ning等人，1996,"Intratumoral Radioimmunotheraphy of a Human Colon Cancer Xenograft Using a Sustained－Release Gel," Radiotherapy & Oncology 39：179－189；Song等人，1995,"Antibody Mediated Lung Targeting of Long－Circulating Emulsions," PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 50：372－397；Cleek等人，1997,"Biodegradable Polymeric Carriers for a bFGF Antibody for Cardiovascular Application," Pro.Int'l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24：853－854；及Lam等人，1997,"Microencapsulation of Recombinant Humanized Monoclonal Antibody for Local Delivery," Proc.Int'l.Symp.Control Rel.Bioact.Mater.24：759－760，各自以引用的方式全部併入本文中。
在一特定實施例中，若本發明之組合物為編碼預防或治療劑之核酸，則該核酸可活體內投與以促進其經編碼之預防或治療劑之表現，藉由將其構建為適當核酸表現載體之一部分且投與其以便其在細胞內，例如藉由使用逆轉錄病毒載體(參見美國專利第4,980,286號)或藉由直接注入或藉由使用微粒轟擊(例如基因槍；Biolistic,Dupont)或以脂質或細胞表面受體或轉染劑塗佈，或藉由關聯已知進入核之同源異形盒樣肽將其投與(參見例如,Joliot等人，1991,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：1864－1868)。或者，可將核酸引入細胞內且併入宿主細胞DNA中以藉由同源重組表現。
本發明之醫藥組合物經調配以與其預定投與路徑相容。給藥途徑之實例包括(但不限於)非經腸，例如靜脈內、皮內、皮下；口服；鼻內(例如吸入)；經皮(例如局部)；經黏膜及經直腸投與。在一特定實施例中，根據常規程序調配組合物以作為適合於靜脈內、皮下、肌肉內、口服、鼻內或局部投與人類之醫藥組合物。用於靜脈內投與之組合物通常為無菌等滲水性緩衝液中之溶液。若必要，該組合物亦可包括增溶劑及諸如利多卡因(lignocamne)之局部麻醉劑以緩解注射位點之痛感。
若局部投與本發明之組合物，則該組合物可調配成以下形式：軟膏、乳膏、經皮貼片、洗劑、凝膠、香波、噴霧劑、氣溶膠、溶液、乳液或熟習此項技術者所熟知之其他形式。參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms第19版，Mack Pub.Co.,Easton,Pa.(1995)。對於非噴霧型局部劑型，通常採用包含與局部應用相容的載劑或一或多種賦形劑且具有較佳大於水之動態黏度的黏性半固型或固型。適當調配物包括(但不限於)溶液、懸浮液、乳液、乳膏、軟膏、粉末、擦劑、油膏及其類似物，若需要其可經滅菌或與助劑(例如防腐劑、穩定劑、潤濕劑、緩衝液或鹽)混合以便影響諸如滲透壓之各種特性。其他適當局部劑型包括可噴霧氣溶膠製劑，其中較佳與固體或液體惰性載體組合之活性成份以與受壓揮發物(例如氣體推進劑，諸如氟利昂)之混合物形式包裝或包裝於塑料擠瓶中。若需要補濕劑或保濕劑亦可添加至醫藥組合物及劑型。該等其他成份之實例為在此項技術中所熟知。
若本發明之方法包含鼻內投與組合物，則該組合物可調配成氣溶膠形式、噴霧劑、霧狀物或以滴劑形式。根據本發明使用之預防或治療劑尤其可在使用適當推進劑(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適當氣體)之情況下，以來自加壓包或噴霧器之氣溶膠噴霧呈遞形式便利地輸送。在加壓氣霧劑之情況下，可藉由提供閥門來輸送經計量之量來確定劑量單位。用於吸入器或吹入器之膠囊及濾筒(由例如明膠組成)可經調配以含有該化合物與諸如乳糖或澱粉之適當粉末的粉末狀混合物。
若本發明之方法包含口服投藥，則組合物可經調配成錠劑、膠囊、扁囊劑、膠囊錠、溶液、懸浮液、及其類似物之經口形式。可由習知方法與醫藥學上可接受之諸如以下之賦形劑一起製備錠劑或膠囊：黏結劑(例如預先動物膠化玉米澱粉、聚乙烯吡咯啶酮或羥丙基甲基纖維素)；填充劑(例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石或矽石)；崩解劑(例如馬鈴薯澱粉或澱粉羥乙酸鈉)；或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉)。可由在此項技術中所熟知之方法塗覆該等錠劑。口服投與之液體製劑可採用(但不限於)溶液、糖漿或懸浮液之形式，或其可作為用於在使用之前與水或其他合適媒劑組合之乾燥產物存在。該等液體製劑可由習知方法使用醫藥學上可接受之諸如以下之添加劑來製備：懸浮劑(例如山梨糖醇糖漿、纖維素衍生物或氫化可食脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水媒劑(例如杏仁油、油性酯、乙醇或分級植物油)；及防腐劑(例如甲基或丙基－對－羥基苯甲酸酯或山梨酸)。該等製劑亦可視情況而定含有緩衝鹽、調味劑、著色劑及甜味劑。口服投與之製劑可經適當調配以便緩釋、控釋或持續釋放預防或治療劑。
本發明之方法可包含(例如)藉由使用吸入器或霧化器肺部投與與氣霧劑一起調配之組合物。參見例如美國專利第6,019,968、5,985,320、5,985,309、5,934,272、5,874,064、5,855,913、5,290,540及4,880,078號；及PCT公開案第WO 92/19244、WO 97/32572、WO 97/44013、WO 98/31346及WO 99/66903號，各自以引用的方式全部併入本文中。在一特定實施例中，使用Alkermes AIR肺部藥物輸送技術(Alkermes,Inc.,Cambridge,Mass)投與本發明之抗體、組合療法及/或本發明之組合物。
本發明之方法可包含投與經調配以便藉由注射(例如藉由快速注射或連續輸液)非經腸投與之組合物。用於注射之調配物可以單位劑型形式(例如以安瓶形式或以多劑量容器形式)與經添加之防腐劑一起提供。組合物可採用該等如於油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液或乳液的形式且可含有調配劑，諸如懸浮劑、穩定劑及/或分散劑。或者活性成份可呈在使用之前與合適之媒劑(例如無菌無熱原質水)組合的粉劑形式。
本發明之方法可另外包括投與經調配為儲槽式製劑之組合物。該等長效調配物可藉由植入(例如皮下或肌內)或藉由肌內注射投藥。因此(例如)可使用合適之聚合或疏水性材料(例如作為可接受之油劑中之乳液)或離子交換樹脂來調配組合物，或其可調配為微溶性衍生物(例如微溶性鹽)。
本發明之方法包涵投與調配為中性或鹽形式之組合物。醫藥學上可接受之鹽包括彼等與陰離子形成之鹽，諸如彼等源自鹽酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等之鹽，及彼等與陽離子形成之鹽，諸如彼等源自鈉、鉀、銨、鈣、氫氧化鐵、異丙胺、三乙基胺、2－乙基胺基乙醇、組胺酸、普魯卡因(procaine)等之鹽。
大體而言，獨立地或於單位劑型中混合在一起提供組合物之成份，該等劑型例如於諸如指示活性劑數量之安瓿或藥囊的密閉容器中之乾燥凍乾粉或無水濃縮物。若投與形式為輸注，則組合物可以含有無菌醫藥級水或鹽水之輸液瓶施配。若投與形式為注射，則可提供無菌注射水或鹽水之安瓿以便成份可在投與之前混合。
本發明亦尤其規定一或多種預防或治療劑，或本發明之醫藥組合物經封裝在諸如安訊瓶或藥囊之指示藥劑數量的密閉容器中。在一實施例中，一或多種預防或治療劑或本發明之醫藥組合物經提供為於密閉容器中之乾燥滅菌凍乾粉末或無水的濃縮物，且其可經重構(例如與水或鹽水)成適當濃度以便投與受檢者。一或多種預防或治療劑或本發明之醫藥組合物較佳以以下單位劑量經提供為於密閉容器中之乾燥無菌凍乾粉末：至少5 mg、更佳至少10 mg、至少15 mg、至少25 mg、至少35 mg、至少45 mg、至少50 mg、至少75 mg或至少100 mg。該等凍乾預防或治療劑或本發明之醫藥組合物應於其原始容器中儲存在2℃且8℃之間，且該等預防或治療劑或本發明之醫藥組合物應在重構後1週內、較佳5天內、72小時內、48小時內、24小時內、12小時內、6小時內、5小時內、3小時內或1小時內投與。在一替代實施例中，一或多種預防或治療劑或本發明之醫藥組合物以於指示藥劑之量及濃度的密閉容器中之液體形式提供。較佳地，所投與組合物之液體形式在密閉容器中以下列量提供：至少0.25 mg/ml、更佳至少0.5 mg/ml、至少1 mg/ml、至少2.5 mg/ml、至少5 mg/ml、至少8 mg/ml、至少10 mg/ml、至少15 mg/ml、至少25 mg/ml、至少50 mg/ml、至少75 mg/ml或至少100 mg/ml。液體形式應於其原始容器中儲存在2℃與8℃之間。
本發明之抗體及抗體部分可併入適用於非經腸投與之醫藥組合物中。抗體或抗體部分較佳將製備為含有0.1－250 mg/ml抗體之可注射溶液。該可注射溶液可包括於火石玻璃或琥珀色小瓶、安瓿或預填充注射器中的液體或凍乾劑型。緩衝液可為L－組胺酸(1－50 mM)、最佳5－10 mM，pH 5.0至7.0(最佳pH 6.0)。其他適當緩衝液包括(但不限於)丁二酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸鈉或磷酸鉀。氯化鈉可用於調節濃度為0－300 mM(對於液體劑型最佳150 mM)之溶液的毒性。對於凍乾劑型，可包括低溫保護劑，主要為0－10%蔗糖(最佳0.5－1.0%)。其他適當低溫保護劑包括海藻糖及乳糖。對於凍乾劑型可包括填充劑，主要為1－10%甘露糖醇(最佳2－4%)。穩定劑可用於液體與凍乾劑型，主要為1－50 mM L－甲硫胺酸(最佳5－10 mM)。其他適當填充劑包括甘胺酸、精胺酸，其可以0－0.05%聚山梨醇酯－80之形式而包括(最佳0.005－0.01%)。其他界面活性劑包括(但不限於)聚山梨醇酯20及BRIJ界面活性劑。經製備為用於非經腸投與之可注射溶液的包含本發明抗體及抗體部分之醫藥組合物可另外包含適用作佐劑之試劑，諸如彼等用以增加治療蛋白質(例如抗體)之吸收或分散的試劑。尤其適用之佐劑為玻尿酸酶，諸如Hylenex(重組人類玻尿酸酶)。在可注射溶液中添加玻尿酸酶可改善非經腸投與、尤其皮下投與後之人類生物可用性。其亦允許更大注射位點體積(亦即大於1 ml)，而疼痛及不適更少，且注射部位反應發生率最小(參見WO 2004078140、US 2006104968，其以引用的方式併入本文中)。
本發明之組合物可呈各種形式。此等包括(例如)液體、半固體及固體劑型，諸如液體溶液(例如可注射性及輸注溶液)、分散液或懸浮液、錠劑、丸劑、粉末、脂質體及栓劑。較佳形式取決於預定投與形式及治療應用。典型較佳組合物係呈可注射或可輸注溶液之形式，諸如與彼等用於以其他抗體被動免疫接種人類之組合物相似的組合物。投與之較佳形式為非經腸(例如靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內)。在一較佳實施例中，抗體藉由靜脈內輸注或注射投與。於另一較佳實施例中，抗體藉由肌肉內或皮下注射投與。
在製造及儲存條件下，治療組合物通常須為無菌且穩定的。組合物可調配成溶液、微乳液、分散液、脂質體或其他適於高藥物濃度之有序結構。視需要，可藉由將所需量之活性化合物(亦即抗體或抗體部分)與上文列舉之成份中的一者或其組合一起併入適當溶劑中，接著過濾滅菌來製備無菌可注射溶液。大體而言，藉由將活性化合物併入含有基礎分散介質及上文所列舉的所需其他成份之無菌媒劑中來製備分散液。在用於製備無菌可注射溶液之無菌凍乾粉末之情況下，較佳製備方法為真空乾燥及噴霧乾燥，該方法自先前經無菌濾過之溶液得到活性成份加上任何其他所需成份之粉末。可(例如)藉由使用諸如卵磷脂之塗料，在分散液情況下藉由維持所需粒徑及藉由使用界面活性劑來維持溶液之適當流動性。可藉由在組合物中包括延遲吸收之例如單硬脂酸鹽及明膠之試劑，來實現可注射性組合物之延長吸收。
可藉由在此項技術中已知之各種方法投與本發明之抗體及抗體部分，儘管對於許多治療應用，較佳投與途徑/形式為皮下注射、靜脈注射或輸注。如熟習此項技術者所瞭解，投與之途徑及/或形式將依賴於所需結果而變。在某些實施例中，活性化合物可與保護化合物防止快速釋放之載劑一起製備，諸如控釋調配物，包括植入物、經皮貼片及微囊封之傳輸系統。可使用生物可降解、生物相容性聚合物，諸如乙烯－乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯及聚乳酸。許多用於製備該等調配物之方法已申請專利或通常為熟習此項技術者所已知。參見例如Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems,J.R.Robinson編，Marcel Dekker,Inc.,New York,1978。
在某些實施例中，本發明之抗體或抗體部分可與(例如)惰性稀釋劑或可吸收可食用載劑一起經口投與。該化合物(若需要及其他成份)亦可封入硬質或軟殼膠囊中，壓縮成錠劑，或直接併入受檢者之膳食中。對於口服治療投藥，該化合物可與賦形劑一起併入且以可攝取錠劑、口含錠劑、片劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑及其類似物形式使用。為藉由非經腸以外之投與方式投與本發明之化合物，可能必需以預防其失活之材料塗佈該化合物或與該材料一起共投與該化合物。
補充型活性化合物亦可併入該組合物中。在某些實施例中，本發明之抗體或抗體部分與一或多種適用於治療其中IL－13活性有害的病症之其他治療劑一起共調配及/或共投與。例如，本發明之抗hIL－13抗體或抗體部分可與一或多種結合其他標靶之其他抗體(例如結合其他細胞激素或結合細胞表面分子之抗體)一起共調配及/或共投與。此外，本發明之一或多種抗體可組合2種或2種以上上述治療劑使用。該等組合療法可有利地利用低劑量之所投與治療劑，因此避免與各種單一療法相關的可能之中毒或併發症。
在某些實施例中，IL－13或其片段之抗體與在此項技術中已知之半衰期延長媒劑關聯。該等媒劑包括(但不限於)Fc域、聚乙二醇及葡聚糖。該等媒劑描述於(例如)美國申請案第09/428,082號及公開之PCT申請案第WO 99/25044號中，據此出於任何目的將其以引用的方式併入。
在一特定實施例中，投與包含編碼本發明之抗體或本發明之另一預防或治療劑的核苷酸序列之核酸序列以經由基因療法治療、預防、控制或改善病症或其一或多種症狀。基因療法係指藉由向受檢者投與表現或可表現核酸而進行之治療。在本發明之此實施例中，核酸產生其編碼抗體或介導預防或治療效應之本發明之預防或治療劑。
根據本發明可使用在此項技術中可獲得之用於基因療法之方法中的任一者。對於基因療法之方法的一般性綜述，參見Goldspiel等人，1993,Clinical Pharmacy 12：488－505；Wu及Wu,1991,Biotherapy 3：87－95；Tolstoshev,1993,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32：573－596；Mulligan,Science 260：926－932(1993)；及Morgan及Anderson,1993,Ann.Rev.Biochem.62：191－217；May,1993,TIBTECH 11(5)：155－215。DNA重組技術中通常已知之可使用之方法描述於Ausubel等人(編),Current Protocolsin Molecular Biology,John Wiley & Sons,NY(1993)；及Kriegler,Gene Transfer and Expression,A Laboratory Manual,Stockton Press,NY(1990)中。基因療法之各種方法的詳細描述揭示於US 20050042664 A1中，其以引用的方式併入本文中。
在另一態樣中，本申請案之特徵在於一種治療(例如治癒、抑制、改善、延遲或防止發作或預防反覆或復發)或防止受檢者之IL－13相關病症之方法。該方法包括：向受檢者投與足以治療或預防IL－13相關病症之量的IL－13結合劑(尤其拮抗劑)，例如如本文中描述之抗IL－13抗體或其片段。可單獨或組合如本文中描述之其他治療形式將IL－13拮抗劑，例如抗IL－13抗體或其片段投與受檢者。
在一實施例中，受檢者為哺乳動物，例如患有一或多種IL－13相關病症的人類，該等病症包括例如呼吸病症(例如哮喘(例如過敏性及非過敏性哮喘)、慢性阻塞性肺病(COPD)，及其他病狀，包括呼吸道發炎、嗜伊紅血球增多、纖維化及黏液過量產生)；異位性病症(例如異位性皮膚炎及過敏性鼻炎)；皮膚、胃腸器官之發炎性及/或自體免疫性病狀(例如發炎性腸病(IBD)，諸如潰瘍性結腸炎及/或克羅恩氏病)及肝臟之發炎性及/或自體免疫性病狀(例如硬化、纖維化)；硬皮病；腫瘤或癌症，例如如本文描述之霍奇金淋巴瘤。因此，揭示內容包括IL－13結合劑(諸如本文中描述之抗IL－13抗體或其片段)用於本文中描述之治療的用途，及IL－13結合劑(諸如本文中描述之抗IL－13抗體或其片段)用於製備用於本文中描述之治療的藥劑之用途。
IL－13相關病症之實例包括(但不限於)選自以下之一或多者的病症：呼吸病症，例如哮喘(例如過敏性及非過敏性哮喘(例如因(例如)呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之(例如)幼兒哮喘)、慢性阻塞性肺病(COPD)及其他病狀，包括呼吸道發炎、嗜伊紅血球增多、纖維化及黏液過量產生)，例如囊性纖維化及肺纖維化；異位性病症，例如因IL－13敏感性增加所致之異位性病症(例如異位性皮膚炎、蕁痲疹、濕疹、過敏性鼻炎及過敏性腸胃炎)；皮膚(例如異位性皮膚炎)、胃腸器官(例如發炎性腸病(IBD)，諸如潰瘍性結腸炎及/或克羅恩氏病)、肝臟(例如硬化肝細胞癌)之發炎性及/或自體免疫病狀及硬皮病；腫瘤或癌症(例如，軟組織或實體腫瘤)，諸如白血病、神經膠母細胞瘤及淋巴瘤，例如霍奇金淋巴瘤；病毒感染(例如自HTLV－1病毒感染)；其他器官纖維化，例如肝臟纖維化(例如，由B型肝炎及/或C型肝炎病毒所致之纖維化)；及如本文中描述之保護性1型免疫反應表現之抑制(例如在疫苗接種期間)。
在其他實施例中，本申請案提供治療(例如降低、改善)或預防一或多種與以下病症相關之症狀的方法：呼吸病症，例如哮喘(例如過敏性及非過敏性哮喘)；過敏症；慢性阻塞性肺病(COPD)；包括呼吸道發炎、嗜伊紅血球增多、纖維化及黏液過量產生之病狀，例如囊性纖維化及肺纖維化。例如，哮喘症狀包括(但不限於)喘息、氣促、支氣管收縮、氣管高反應性、降低之肺活量、纖維化、呼吸道發炎及黏液產生。該方法包含向受檢者投與足以治療(例如降低、改善)或預防一或多種症狀之量的IL－13拮抗劑，例如IL－13抗體或其片段。IL－13抗體可治療性或預防性或兩者性質地投與。可單獨或組合如本文中描述之其他治療形式將IL－13拮抗劑，例如抗IL－13抗體或其片段投與受檢者。受檢者較佳為哺乳動物，例如患有如本文中所述之IL－13相關病症之人類。
在另一態樣中，本申請案提供一種用於活體外偵測樣品(例如生物樣品，諸如血清、血漿、組織、活組織切片)中IL－13之存在的方法。本方法可用於診斷例如免疫細胞相關病症之病症。該方法包括：(i)使樣品或對照樣品與抗IL－13抗體或其如本文中描述之片段接觸；且(ii)偵測抗IL－13抗體或其片段與樣品或對照樣品之間複合體的形成，其中相對於對照樣品，樣品中複合體形成之統計上顯著變化指示樣品中IL－13存在。
在另一態樣中，此應用提供一種用於活體內偵測IL－13存在之方法(例如在受檢者活體內成像中)。本方法可用於診斷例如IL－13相關病症之病症。該方法包括：(i)在容許抗體或片段與IL－13結合之條件下，向受檢者或對照受檢者投與抗IL－13抗體或其如本文中描述之片段；且(ii)偵測抗體或片段與IL－13之間複合體的形成，其中相對於對照受檢者，受檢者中複合體形成之統計上顯著變化指示IL－13存在。
本發明之抗體或其抗原結合部分可單獨或組合使用以治療該等疾病。應理解本發明之抗體或其抗原結合部分可單獨或組合其他例如治療劑之藥劑使用，該其他藥劑經熟習此項技術者選擇用於其預定目的。例如，該其他藥劑可為此項技術公認之有效於治療本發明之抗體所治療的疾病或病狀之治療劑。該其他藥劑亦可為向治療組合物賦予有利特徵之藥劑，例如實現組合物之黏度之藥劑。
應進一步理解包括於本發明之組合為彼等適用於其預定目的之組合。下文闡述之藥劑用於說明目的且並非意欲限制。屬於本發明之組合可為本發明之抗體與選自下表之至少一其他藥劑。如該組合使得所形成組合物可進行其預定作用，則該組合亦可包括一種以上其他藥劑，例如兩種或三種其他藥劑。
如本文中所描述，組合療法可包括一或多種IL－13拮抗劑，例如抗IL－13抗體或其片段，其與一或多種其他治療劑共調配及/或共投與，該或該等其他治療劑例如一或多種細胞激素及生長因子抑制劑、免疫抑制劑、消炎劑(例如全身消炎劑)、抗纖維化劑、代謝抑制物、酶抑制劑及/或細胞毒素或細胞生長抑制劑。
可與一或多種IL－13拮抗劑(例如抗IL－13抗體或其片段)共投與及/或共調配之其他較佳治療劑之實例包括(但不限於)以下之一或多者：經吸入類固醇；β－促效劑，例如短效或長效β－促效劑；白三烯或白三烯受體拮抗劑；諸如ADVAIR之組合藥物；IgE抑制劑，例如抗IgE抗體(例如XOLAIR)；磷酸二酯酶抑制劑(例如PDE4抑制劑)；黃嘌呤；抗膽鹼劑藥物；肥大細胞穩定劑，諸如色甘酸；IL－4抑制劑；IL－5抑制劑；嗜酸性粒細胞趨化因子/CCR3抑制劑；組織胺或其包括H1、H2、H3及H4之受體之拮抗劑；及前列腺素D或其受體(DP1及CRTH2)之拮抗劑。該等組合可用於治療哮喘及其他呼吸病症。可與一或多種抗IL－13抗體或其片段共同投藥及/或共調配之治療劑之其他實例尤其包括以下之一或多者：TNF拮抗劑(例如TNF受體之可溶性片段，TNF受體例如p55或p75人類TNF受體或其衍生物，例如75 kD TNFR－IgG(75 kD TNF受體－IgG融合蛋白質，ENBREL))；TNF酶拮抗劑，例如TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF－β拮抗劑；干擾素γ；潑氟尼東；化學治療劑，例如甲胺蝶呤、來氟米特或西羅莫司(雷帕黴素)或其類似物，例如CCI－779；COX2及cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑、TPL－2、MK－2及NFkB抑制劑。
其他較佳組合為細胞激素抑制性消炎藥物(CSAID)；其他人類細胞激素或生長因子之抗體或拮抗劑，例如IL－1、IL－2、IL－3、IL－4、IL－5、IL－6、IL－7、IL－8、IL－15、IL－16、IL－18、IL－21、IL－31、干擾素、EMAP－II、GM－CSF、FGF、EGF、PDGF及內皮素－1以及此等細胞激素及生長因子之受體。本發明之抗體或其抗原結合部分可與細胞表面分子之諸如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD90、CTLA之抗體或其包括CD 154之配位體(gp39或CD40L)組合。
治療劑之較佳組合可在不同點干擾發炎性級聯；較佳實例包括TNF拮抗劑，如嵌合、人源化或人類TNF抗體，D2E7(PCT公開案第WO 97/29131號)，CA2(RemicadeTM)，CDP 571及可溶性p55或p75 TNF受體，其衍生物(p75TNFR1gG(Enbre1TM)或p55TNFR1gG(Lenercept)，以及TNF轉化酶(TACE)抑制劑；類似地IL－1抑制劑(介白素－1－轉化酶抑制劑、IL－1 RA等)出於相同因素可為有效的。其他較佳組合包括介白素4。另一較佳組合為哮喘反應之其他關鍵隊員參與因素，其可與IL－13功能平行，依賴於其作用或與其協同作用；尤其較佳為包括IL－9抗體之IL－9拮抗劑。已展示IL－13及IL－9具有重疊但不同功能，且兩者拮抗劑之組合可最有效。另一較佳組合為抗IL－5抗體。其他較佳組合包括趨化因子及趨化因子受體之拮抗劑，該等趨化因子包括MCP－1、MCP－4、嗜酸性粒細胞趨化因子、RANTES、MDC、CCL－12及CCL－17(TARC)，該等趨化因子受體包括CCR2、CCR3、CCR4及CXCR4。組合可包括哮喘介體之拮抗劑，該等哮喘介體包括酸哺乳動物殼多糖酶、CRHT2、胃促胰酶、S1P1、S1P2、Tyk2、ROCKII、Stat6、p38、NFkB、磷酸二酯酶4(PDE－4)、肥大細胞類胰蛋白酶、NO、腺嘌呤核苷、IKK2、GATA3、ICAM－1、VCAM－1及ICOS。
本發明之醫藥組合物可包括"治療有效量"或"預防有效量"之本發明抗體或抗體部分。"治療有效量"係指在劑量下且歷時必要時段有效於取得所需治療結果的量。可由熟習此項技術者測定治療有效量之抗體或抗體部分且其可根據諸如個體疾病病況、年齡、性別及體重之因素及抗體或抗體部分引起所需個體反應之能力而變。治療有效量亦為治療有利效應優於抗體或抗體部分之任何毒性或不利影響者。"預防有效量"係指在劑量下且歷時必要時段有效於取得所需預防結果的量。通常，由於預防劑量在疾病前或在疾病早期時用於患者，因此預防有效量將小於治療有效量。
給藥方案可經調整以提供最佳所需反應(例如治療或預防反應)。例如，可投與單次劑量，可隨時間投與若干分次劑量或該劑量可如治療情況之緊急狀態所指示適當降低或增加。為便於投藥及劑量一致性，以劑量單位形式調配非經腸組合物尤其有利。如本文中所用劑量單位形式係指適用作用於待治療的哺乳動物受檢者之單位劑量之物理上離散單位；各單位含有預定量之活性化合物，其與所需醫藥載劑相關聯經計算以產生所需治療作用。本發明之劑量單位形式的規格由以下指示且直接依賴於(a)活性化合物之獨特特徵及待實現之特定治療或預防作用；及(b)混配此用於治療敏感性個體之活性化合物的技術中固有的限制。
本發明之抗體或抗體部分之治療或預防有效量的例示性、非限制範圍為0.1－20 mg/kg，更佳1－10 mg/kg。應注意劑量值可隨待減輕之病狀類型及嚴重程度而變。應進一步理解對於任何特定受檢者，特定給藥方案應隨時間根據個體需要及投與或監督組合物投與之人的專業診斷而調節，且本文闡述之劑量範圍僅為例示性的且不欲限制所主張組合物之範疇或實踐。
對於熟習此項技術者易於顯而易見，在不悖離本發明範疇或本文中揭示之實施例的情況下，本文中描述之本發明方法的其他適當改進及改適為明顯的且可使用適當等效物進行。現已詳細描述本發明，參考以下實例其將更清楚的理解，僅出於說明目的包括該等實例且其不欲限制本發明。
實例 實例1：產生且分離抗人類IL－13單株抗體
實例1.1：鑑別抗人類IL－13抗體之檢定 除非另作說明，否則遍及實例1，以下檢定用以鑑別且表徵抗人類IL－13抗體。
實例1.1.A：ELISA 篩選結合人類IL－13之抗體的酶聯免疫吸附檢定進行如下。
在4攝氏度以50 μL/孔之於磷酸鹽緩衝生理食鹽水(PBS)中的5 μg/ml特異性山羊抗小鼠IgG Fc(Pierce #31170,Rockford,IL)將ELISA平板(Corning Costar,Acton,MA)塗佈隔夜。以含有0.05% Tween－20之PBS將平板洗滌一次。在室溫下藉由添加200 μL/孔之稀釋為PBS(BioRad #170－6404,Hercules,CA)中2%之阻斷溶液將平板阻斷1小時。阻斷後，以含有0.05% Tween－20之PBS將平板洗滌一次。
將50微升/孔之稀釋於含有0.1%牛血清白蛋白(BSA)(Sigma,St.Louis,MO)之PBS中的小鼠血清或融合瘤上清液添加至如上所述製備之ELISA平板且在室溫下培育1小時。以含有0.05% Tween－20之PBS將各孔洗滌3次。將稀釋為含有0.1% BSA之PBS中100 ng/ml的50微升生物素化重組純化之人類IL－13變異體(R110Q)添加至各孔且在室溫下培育1小時。以含有0.05% Tween－20之PBS將各平板洗滌3次。於含有0.1% BSA之PBS中按1：20000稀釋鏈黴親和素HRP(Pierce #21126,Rockland,IL)；添加50 μL/孔且在室溫下將平板培育1小時。以含有0.05% Tween－20之PBS將各平板洗滌3次。將50微升TMB溶液(Sigma # T0440,St.Louis,MO)添加至各孔且在室溫下培育10分鐘。藉由添加1 N硫酸停止反應。在450 nm波長下分光光度計讀取平板。
實例1.1.B：使用BIACORE技術親和力測定 BIACORE檢定(Biacore,Inc,Piscataway,NJ)以動態量測結合、分解速率常數來測定抗體之親和力。在25℃以Biacore3000測試儀(BiacoreAB,Uppsala,Sweden)使用流動HBS－EP(10 mM HEPES[pH 7.4]，150 mM NaCl，3 mM EDTA及0.005%界面活性劑P20)藉由表面電漿共振基量測來測定抗體與重組純化之人類IL－13或重組純化之人類IL－13變異體(R110Q)的結合。所有化學品由BiacoreAB(Uppsala,Sweden)或者自文中描述之不同來源獲得。使用標準胺偶合套組根據製造商之指導及程序，在25 μg/ml將稀釋於10 mM乙酸鈉(pH 4.5)中之約5000 RU山羊抗小鼠IgG(Fcγ)片段特異性多株抗體(Pierce Biotechnology Inc,Rockford,IL)直接貫穿CM5研究級生物傳感器晶片固定。以乙醇胺阻斷生物傳感器表面上未反應之部分。流動單元2及4之修飾之羧甲基葡聚糖表面用作反應表面。流動單元1及3中無山羊抗小鼠IgG之未修飾羧甲基葡聚糖用作參考表面。對於動力學分析，藉助於Biaevaluation 4.0.1軟體將源自1：1朗繆爾結合模型之速率方程同時擬合至8次注射之締合及解離階段(使用全擬合分析)。將純化之抗體稀釋於HEPES－緩衝鹽水中以便橫過山羊抗小鼠IgG特異性反應表面捕捉。在反應基質上以5 μl/min之流動速率注射捕捉為配位體之小鼠抗體(25 μg/ml)。在25 μl/min之連續流動速率下，測定締合及離解速率常數kon (單位M－1 s－1 )及koff (單位s－1 )。藉由在範圍為10－200 nM之10個不同抗原濃度下進行動力結合量測來獲得速率常數。隨後藉由下式由動力速率常數計算小鼠抗體與重組純化之人類IL－13或重組純化之人類IL－13之間的反應之平衡解離常數(單位M)：KD ＝koff /kon 。結合記錄為時間之函數且計算動力速率常數。在此檢定中，可量測到快至106 M－1 s－1 之結合速率常數及慢至10－6 s－1 之分解速率常數。
實例1.1.C：抗人類IL－13抗體之功能活性 為檢查本發明之抗人類IL－13抗體之功能活性，將抗體用於下列量測抗體抑制IL－13活性之能力的檢定中。
實例1.1.C 1 A－549生物檢定 抗人類IL－13抗體抑制A－549細胞經人類IL－13誘導產生TARC(CCL－17)之能力分析如下。在第一天將A－549細胞接種於96孔平板(2E5細胞/孔)RPMI生長培養基(具有10% FBS)中。在第二天，以含有400 ng/ml rhTNF之新鮮RPMI生長培養基(100 μl/孔)替換介質。其間，在37℃下以於微量滴定板(U型底，96孔，Costar)中之100 μL RPMI完全培養基中的10 ng/ml重組純化之人類IL－13或IL－13變異體將各種濃度之免疫小鼠血清、鼠類融合瘤上清液或純化之抗人類IL－13抗體預培育1小時。隨後向TNF處理之A－549細胞添加抗體加重組純化之人類IL－13混合物(100 μl/孔)，最終體積為200 μl/孔(最終IL－13及TNF濃度分別為5 ng/ml及200 ng/ml)且在37℃下培育18小時。培育後，自各孔抽取150 μL不含細胞的上清液且使用人類TARC ELISA(R& D Systems Cat # DDN00)量測所產生之人類TARC的含量。
A－549細胞亦對包括獼猴、小鼠、大鼠及羊之其他物種之IL－13作出應答，其ED50 值與人類IL－13相似。因此，其使用相同實驗方案用於交叉反應分析其他物種之IL－13之抗hIL－13 mAb。
實例1.2：產生抗人類IL－13單株抗體 抗人類IL－13小鼠單株抗體獲得如下：實例1.2.A：以人類IL－13抗原使小鼠免疫 在第1天將與完全弗氏佐劑或免疫檢定佐劑(Qiagen,Valencia,CA)混合之20微克重組純化之人類IL－13變異體(Peprotech)皮下注射於5隻6－8週齡Balb/C、5隻C57B/6小鼠及5隻AJ小鼠中。在第24、38及49天，將與弗氏不完全佐劑或免疫檢定佐劑混合之20微克重組純化之人類IL－13變異體皮下注射於同一小鼠中。在第84天或第112天或第144天，以1 μg重組純化之人類IL－13變異體靜脈內注射小鼠。
實例1.2.B：產生融合瘤 根據Kohler,G.及Milstein 1975,Nature,256：495中描述之確立方法，以5：1之比率將由實例1.2.A描述之免疫小鼠獲得的脾細胞與SP2/O－Ag－14細胞融合以產生融合瘤。將融合產物以每孔2.5×106 脾臟細胞之密度平皿接種於於96孔平板中含有重氮絲胺酸及次黃嘌呤之選擇介質中。融合後7至10天，觀察到肉眼可見融合瘤集落。藉由EL1SA測試來自含有融合瘤集落之各孔上清液中IL－13變異體之抗體的存在(如實例1.1.A中所述)。隨後測試顯示IL－13變異體特異活性之上清液的在TARC之A－549生物檢定中和IL－13變異體及IL－13野生類型之能力(如實例1.1.C中所述)。
實例1.2.C：鑑定及表徵抗人類IL－13單株抗體 按比例增加產生結合IL－13變異體之抗體、根據實例1.2.B及1.2.C產生且能夠特異性地結合IL－13變異體的融合瘤及尤其在A－549生物檢定中具有5 nM或小於5 nM之IC50 值者，且藉由有限稀釋選殖。
在含有10%低IgG胎牛血清(Hyclone #SH30151,Logan,UT)之介質中擴充融合瘤細胞。平均收集250 mL各融合瘤上清液(獲自單株群體)、濃縮且如Harlow,E.及Lane,D.1988 "Antibodies：A Laboratory Manual"中所述藉由蛋白質A親和層析純化。如實例1.1.C中所述使用A－549生物檢定測定純化之mAb抑制IL－13活性的能力。表7展示A－549生物檢定中17個單株抗體之IC50 值。
如實例1.1.B中所述使用表面電漿共振(Biacore)量測測定單株抗體對重組純化之人類IL－13變異體及野生類型的結合親和力。表8展示上文所述之18種單株抗體對人類IL－13的親和力。
實例1.2.C.1：鼠類單株抗人類IL－13抗體之物種特異性 為測定上文所述之17種單株抗體是否識別鼠類IL－13，藉由以5 μg/ml山羊抗小鼠IgG、Fc片段特異性抗體(Pierce #31170,Rockland,IL)塗佈ELISA平板來設定間接ELISA。製備範圍在含有0.1% BSA之PBS中0.1至100 ng/ml的各種濃度之鼠類抗人類IL－13 mAb；將50 μl各抗體稀釋添加至塗佈之ELISA平板且在室溫下培育1小時。以含有0.05% Tween－20之PBS將各孔洗滌3次。於含有0.1% BSA之PBS中將重組生物素化小鼠IL－13(R & D Systems)稀釋為0.1 μg/ml；添加50 μl/孔且在室溫下將平板培育1小時。以含有0.05% Tween－20之PBS將各孔洗滌3次。於含有0.1% BSA之PBS中按1：20000稀釋鏈黴親和素HRP(Pierce #21126,Rockland,IL)；添加50 mL/孔且在室溫下將平板培育1小時。以含有0.05% Tween－20之PBS將各平板洗滌3次。將50微升TMB溶液(Sigma # T0440,St.Louis,MO)添加至各孔且在室溫下培育10分鐘。藉由添加1 N硫酸停止反應。在450 nm波長下分光光度計讀取平板。間接ELISA之結果指示mAb 3H7能夠結合mIL－13。在後續生物檢定中展示3H7可以劑量依賴型方式抑制mIL－13刺激之TARC產生，IC50 值為2.4 nM。Biacore分析亦證明3H7與mIL－13陽性結合，KD 為12 nM。表8中之所有其他mAb並未展示與小鼠IL－13之任何陽性結合。
在A－548生物檢定中亦量測抗hIL－13 mAb抗非人類靈長類(獼猴)IL－13及羊IL－13之中和效能。為產生犬及羊IL－13，使用基於人類IL－13序列之退化引子藉由染色體組DNA模板之PCR獲得各蛋白質之cDNA。隨後將重組犬及羊IL－13蛋白質表現於瞬時轉染COS細胞中。在所有功能研究中，亦平行產生野生類型人類IL－13作為對照。A－549細胞以與人類IL－13類似之ED50 對犬且羊IL－13作出應答。多數mAb中和犬IL－13之活性，證明對犬IL－13之交叉反應性(表7)。然而，抗體皆未展示顯著羊IL－13中和。
實例1.2.C.2：鼠類單株抗人類IL－13抗體阻斷IL－13與IL－13受體(IL－13Rα1及IL－13Rα2)之結合 IL－13活性經由由IL－13Rα1與IL－4Rα鏈組成的受體複合體介導。細胞激素首先在細胞表面上與IL－13Rα1進行相對低親和力相互作用。IL－13/IL－13Rα1複合體隨後招募IL－4Rα以形成完整IL－13受體，其以高親和力與其配位體(IL－13)結合(Zurawski等人(1993)EMBO J.12：2663；Zurawski等人(1995)J.Biol.Chem.270：23869)。隨後IL－13與高親和力受體之結合經由包括轉錄(JAK－STAT)途徑之Janus激酶信號轉導蛋白及活化因子的IL－4Rα鏈發送下游信號，例如經由STAT6磷酸化，其可作為對IL－13之最初細胞反應之一者監控(前述Murata等人)。
存在另一IL－13結合受體IL－13Rα2鏈(IL－13Rα2)，其以高親和力(0.25－1.2 nM)與IL－13結合(Caput等人。1996 J.Biol.Chem.271,16921－16926；Donaldson等人。1998 J.Immunol.161,2317－2324)。已知無其他受體分子包括在IL－13/IL－13Rα2複合體中。最初認為IL－13Rα2充當非信號傳輸"誘餌"受體。然而，後來發現其可與IL－13結合且經由AP－1途徑傳輸信號，使得在包括巨噬細胞之某些細胞類型中TGF－β產生，其接著導致肺部纖維化(Fichtner－Feigl.2006 Nat Med 12：99－106)。因此，IL－13Rα1/IL－4R複合體與IL－13Rα2途徑造成哮喘及其他IL－13介導之疾病之總病理生理學。諸如抗原決定基作圖、受體結合檢定、尺寸排外層析法(SEC)及另一BIACORE分析之數種方法用以闡明本發明之抗IL－13抗體與人類IL－13之間的交互作用。
為測定上文所述之單株抗體是否能夠阻斷IL－13與IL－13受體(IL－13Rα1及IL－13Rα2)之結合，受體結合ELISA開展如下。在4℃下以於100 μl/孔塗佈緩衝液(碳酸鹽－碳酸氫鹽緩衝劑，Pierce)中之4 μg/ml重組IL－13Rα1/Fc或IL－13Rα2/Fc(R&D Systems)塗佈高結合96孔ELISA平板。16小時後，藉由在接收器中輕打平板內含物來移除塗佈溶液，且以Superblock阻斷緩衝液(240 μl/孔)(Pierce)洗滌且阻斷平板4次。添加抗IL13 mAb(自40 μg/ml 1：4連續稀釋，50 μl/孔)及生物素－IL－13(50 μl/孔，對於hIL－13Rα1/Fc最終濃度為5 nM且對於hIL－13Rα2/Fc 0.5 nM)且在室溫下(RT)培育2小時。以300 μl 0.1% PBST將平板洗滌5次，且隨後添加100 μl之按1：5000稀釋之小鼠抗－生物素MAb(Jackson Immunosciences)且在RT下培育45分鐘。以300 μl 0.1% PBST將平板再洗滌5次，接著添加TMB底物試劑(100 μl/孔，Pharmingen)；發展5 min，且藉由添加50 μl 2 M H2 SO4 (VWR)停止。在450 nm藉由分光光度測定法測定OD。
另外,亦藉由受體結合檢定使用IL－13Rα2轉染之COS細胞評估mAb之受體阻斷特性。如先前所述，以125 I(Amersham,Arlington Heights,IL)使用IODO－GEN試劑(Pierce,Rockford,IL)標記重組人類IL－13(Obiri NI等人，(1995)J Biol Chem.270：8797－8804)。據估計放射性標記之IL－13的比活性為158 μCi/μg蛋白質。如A－549生物檢定所評估，標記之IL－13顯示與未標記IL－13類似之生物活性。對於結合實驗，以人類IL－13Rα2藉由脂質胺2000(Invitrogen)瞬間轉染COS細胞且培育48小時。在4℃在1 μM未標記IL－13存在或不存在條件下，以1.0 nM125 I－IL－13將轉染之COS細胞(5×105個細胞於100 μL結合緩衝液中：含有0.2%人血清白蛋白及10 mmol HEPES之RPMI 1640)培育2小時。藉由離心經由鄰苯二甲酸酯油梯度將細胞結合之125 I－IL－13與未結合125 I－IL－13分離，且以γ粒子計數管(Wallac,Gaithersburg,MD)測定放射能。對於抗體置換檢定，如上所述在增加濃度(高達50 μg/ml)之抗IL－13抗體存在或不存在條件下，以125 I－IL－13(1.0 nM)培育轉染之COS細胞。2種形式之受體結合檢定均證明以下：首先13C5及9C11阻斷IL－13與IL－13Rα1結合；其次，13C5強烈阻斷IL－13與IL－13Rα2結合(在細胞表面RBA與RBELISA中IC50 值為約1－3 nM)，而9C11以低效能阻斷IL－13與IL－13Rα2結合(IC50 值>10 nM)；且再次，5G1與3E5未能阻斷IL－13與IL－13Rα1或IL－13Rα2結合。亦分析3種其他抗IL－13抗體BAK.502G9(CAT PCT WO 2005/007699)、mAb13.2(Wyeth PCT WO 2005/123126 A2)及MJ2－7(Wyeth PCT WO 2006/0073148 A1)在受體結合ELISA與細胞表面RBA中阻斷人類IL－13與人類IL－13Rα2結合之能力。抗體mAb 13.2並不阻斷IL－13與IL－13Rα1或IL－13Rα2結合。BAK502G9及MJ2－7能夠阻斷IL－13與IL－13Rα1結合；然而其在以高達50 μg/ml(330 nM)之抗體濃度阻斷IL－13與IL－13Rα2結合中顯示低效能。
亦在抗IL－13 mAb存在下藉由BIACORE分析IL－13與IL－13Rα1/α2之間的交互作用。以若干形式進行此分析。首先，在存在且缺少抗IL－13 mAb條件下IL－13Rα1/Fc與Biacore晶片結合，且IL－13溢出晶片。MAb 13C5及9C11尤其能夠阻斷IL－13與IL－13Rα1結合，而5G1及3E5未能抑制IL－13與IL－13Rα1結合，與受體結合檢定一致。其次，IL－4R與BIACORE晶片結合，且與IL－13Rα1預結合之IL－13複合體溢出晶片。在無抗IL－13 mAb存在下，證明形成三分子複合體。然而，向與IL－13Rα1預結合之IL－13之混合物添加抗IL－13抗體5G1預防IL－4R結合在晶片上。此指示即使5G1不能阻斷IL－13與IL－13Rα1結合，其可阻斷IL－13結合至IL－4R之結合，為其IL－13中和活性提供機械基礎。此等觀測結果藉由尺寸排外層析法(SEC)進一步確認，而觀察到5G1而非13C5之雜三聚複合體(mAb－IL－13－IL－13Rα1/Fc)。使用蛋白酶處理mAb－IL－13複合體進行後續抗原決定基作圖研究，接著質量規格分析指示以下：首先5G1與包括N末端11－aa肽(GPVPPSTALRE)、涵蓋已展示與IL－4R相互作用(Moy等人。2001 J Mol Biol.310：219及Horita等人，(2001)J Mol Biol.310：231)之螺旋A區域之一部分的IL－13殘基結合。其次，抗體9C11與介於螺旋C與螺旋D之間的區域(VSAGQFSSLHVR)相互作用；且再次，抗體13C5與包括涵蓋螺旋D(VRDTK IEVAQ FVKDL LLHLK KLFRE GR，對應於SEQ ID NO 1之胺基酸104－130)的區域之IL－13殘基相互作用。已展示螺旋D與IL－13受體相互作用(Moy等人。2001 J Mol Biol.310：219；Horita等人。2001 J Mol Biol.310：231；及Madhankumar等人2002 JBC 277：43194)。由於13C5比獼猴IL－13(KD ＝1800 pM)更強烈地結合人類IL－13變異體(KD ＝50 pM)，且在此可能的13C5抗原決定基區域中人類IL－13變異體與獼猴IL－13之間的唯一序列差異為位置120處人類IL－13之L，而犬IL－13之V，吾人產生V120L突變體犬IL－13且測試此突變對13C5是否將具有相對於野生類型犬IL－13增加之結合親和力。基於Biacore及生物檢定結果，13C5對V120L突變體犬IL－13之結合親和力以及中和效能等於對野生類型犬IL－13之結合親和力以及中和效能，指示C末端區域中位置120之此V/L差異並未促進對於人類IL－13變異體相對於犬IL－13之13C5親和力差異，且C末端區域外須存在其他促進13C5對人類及犬IL－13之差示結合親和力的殘基。此與藉由西方轉漬分析13C5並未識別變性人類IL－13之觀測結果一致，指示人類IL－13上13C5之結合抗原決定基係強烈構造的。
結合及抗原決定基作圖研究指示5G1並未抑制IL－13與IL－13Rα1相互作用，而破壞IL－13/IL－13Rα1與IL－4Rα之交互作用。認為此破壞干擾功能IL－13信號傳輸複合體之形成。此等觀測結果提供在諸如A－549細胞的IL－13Rα1/IL－4R介導之系統中中和此抗體活性之理論模型。相反，13C5阻斷IL－13與IL－13Rα1及IL－13Rα2結合。有趣地，即使9C11能夠阻斷IL－13與IL－13Rα1結合，其僅展示部分(或低效能)抑制IL－13與IL－13Rα2結合。儘管IL－13Rα1及Rα2採用類似三維摺疊及IL－13結合取向，其具有低序列一致性且因此負責IL－13結合之特異性殘基可變(Arima 2005 JBC 280：24915；及Madhankumar等人2002 JBC 277：43194)。因而，IL－13上的結合IL－13Rα1及IL－13Rα2之特異性殘基可不同，其可說明9C11之差示受體阻斷特性。
上文所述之受體結合檢定、抗原決定基作圖、Biacore及生物檢定共同指示中和抗IL－13抗體可經由以下機制抑制IL－13相關之活性：1)藉由在與受體結合IL－13Rα1及IL－13Rα2有關的區域中與IL－13相互作用抑制IL－13與IL－13Rα1及IL－13Rα2結合。該抗體之一實例為13C5。該等抗體將經由IL－13Rα1/IL－4R複合體及IL－13Rα2抑制IL－13信號傳輸。
2)並未抑制IL－13與IL－13Rα1或IL－13Rα2結合。然而，抗體抑制與IL－4受體之相互作用，因此抑制IL－13經由IL－13Rα1/IL－4R複合體傳輸信號。該抗體不可抑制IL－13Rα2傳輸信號。該等抗體之實例為5G1及mAbl 3.2(Wyeth PCT WO 2005/123126)。
3)抑制IL－13與IL－13Rα1結合，但低效地抑制IL－13與IL－13Rα2結合。此可由於下列理由而發生：a)抗原決定基：與IL－13Rα1結合有關但與IL－13Rα2結合無關，或與IL－13Rα2結合不強烈相關之區域。一實例為9C11；b)親和力：由於IL－13Rα2具有比IL－13Rα1對IL－13更高之親和力，因此在治療抗體之生理濃度下，低親和力抗體可能阻斷IL－13與IL－13Rα1結合，而不阻斷與IL－13Rα2結合。一實例為BAK502G9，如Biacore所評估其對重組野生類型人類IL－13顯示2.11 nM親和力(CAT PCT WO 2005/007699)。另一實例為MJ2－7，如Biacore所評估其對重組野生類型人類IL－13顯示1.4 nM親和力且對猴IL－13顯示更高親和力(43 pM)(Wyeth PCT WO 2006/0073148 A1)。因親和力差異，此mAb可有效地抑制猴IL－13與IL－13Rα2結合；然而其以更低效能抑制人類IL－13與相同受體結合。
mAb BAK502G9及MJ2－7具有類似抗原決定基(CAT PCT WO 2005/007699及Wyeth PCT WO 2006/0073148 A1)且如競爭ELISA所評估其競爭與IL－13結合。簡而言之，BAK502G9經固定在ELISA平板上，接著洗滌且阻斷。隨後在各種濃度之MJ2－7(0.2 ng/ml至20 μg/ml)存在下將生物素化人類IL－13(10 ng/ml)添加至平板，接著洗滌且使用HRP－結合之抗生物素抗體偵側。此研究證明MJ2－7劑量依賴型與BAK502G9競爭結合至人類IL－13。陰性對照IgG並未展示與BAK502G9競爭。
實例1.2.D：測定各鼠類抗人類IL－13 mAb之可變域的胺基酸序列 對於各胺基酸序列測定，藉由離心分離約10×106 融合瘤細胞且遵循製造商之指導經以Trizol處理分離總RNA(Gibco BRL/Invitrogen,Carlsbad,CA)。使用Superscript First－Strand Synthesis System(Invitrogen,Carlsbad,CA)按製造商之指導使總RNA經受第一股DNA合成。寡(dT)用以引發第一股合成以選擇聚(A)＋ RNA。隨後藉由PCR以經設計用於放大鼠類免疫球蛋白可變域之引子(Ig－引子組,Novagen,Madison,WI)放大第一股cDNA產物。在瓊脂糖凝膠上解析PCR產物、切除、純化且隨後以TOPO選殖套組次選殖於pCR2.1－TOPO載體(Invitrogen,Carlsbad,CA)中且經轉型於TOP 10化學上勝任大腸桿菌(Invitrogen,Carlsbad,CA)中。對轉型株進行集落PCR以鑑別含有插入物之株。使用QIAprep Miniprep套組(Qiagen,Valencia,CA)由含有插入物之株分離質體DNA。對質體中之插入物的2股進行定序，以使用M13前置及M13反置引子(Fermentas Life Sciences,Hanover MD)測定可變重鏈或可變輕鏈DNA序列。實例1.2.C中描述之17個單株抗體之可變重鏈及可變輕鏈序列描述在表5中。
實例2：重組抗人類IL－13抗體
實例2.1：構建且表現重組嵌合抗人類IL－13抗體 藉由在細菌中同源性重組，由編碼含有2個鉸鏈區胺基酸突變的人類IgG1恆定區之cDNA片段置換編碼鼠類抗人類IL－13單株抗體5G1、13C5、9C11、21D9及3H7之重鏈恆定區的DNA。此等突變為位置234(EU編號)之白胺酸至丙胺酸改變及位置235之白胺酸至丙胺酸改變(Lund等人，1991,J.Immunol.,147：2657)。由人類恆定區置換此等抗體之每一者的輕鏈恆定區。藉由共轉染連接在pBOS表現質體中之嵌合重鏈及輕鏈cDNA，將全長嵌合抗體瞬時表現於COS細胞中(Mizushima及Nagata,Nucleic Acids Research 1990，第18卷，第5322頁)。藉由蛋白質A瓊脂糖層析純化含有重組嵌合抗體之細胞上清液，且藉由添加酸緩衝液溶離結合之抗體。中和抗體且透析於PBS中。
隨後如實例1.1.C2及1.1.C3中所述測試純化之嵌合抗人類IL－13單株抗體之抑制A－549細胞經IL－13誘導產生TARC的能力。表12展示3種嵌合抗體之A－549生物檢定的IC50 值。
實例2.2：構建及表現人源化抗人類IL－13抗體實例2.2.1：選擇人類抗體框架 使用載體NT1軟體相對於44人免疫球蛋白種系可變重鏈或46種系可變輕鏈序列(獲自NCBI Ig Blast網站http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/retrieveig.html. )http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/retrieveig.html. )分別比對各鼠類可變重鏈及可變輕鏈基因序列(如表3中所述)。
人源化基於胺基酸序列同源性、CDR聚類分析、表現之人類抗體的使用頻率及關於人類抗體之晶體結構可得到的資訊。考慮到對抗體結合、VH－VL配對及其他因素之可能的影響，若鼠類及人類框架殘基不同，除數種例外，則使鼠類殘基突變為人類殘基。基於與鼠類抗體可變域之實際胺基酸序列具有高度同源性(亦即序列相似性)人類種系抗體序列或其亞組之分析設計其他人源化策略。
使用同源性建模以鑑別經預測對於抗體組合位點(CDR)之結構關鍵的鼠類抗體序列之獨特殘基。同源性建模為計算法，藉以產生蛋白質之近似三維座標。初始座標及其進一步細化之指導之源為第二蛋白質，參考蛋白質，其之三維座標已知且其之序列與第一蛋白質之序列有關。2種蛋白質之序列之間的關係用以在參考蛋白質與需座標之蛋白質(標靶蛋白質)之間產生對應。將參考及標靶蛋白質之初始序列與直接自參考蛋白質轉移至標靶蛋白質之2個蛋白質的相同部分之座標對準。自通用結構模板建構2個蛋白質之自(例如)殘基突變、插入或缺失之錯配部分的座標，且精製能量以確保與已轉染模型座標一致。此計算蛋白質結構可另外精製或直接用於建模研究中。自此說明應清楚模型結構之品質由參考與標靶蛋白質相關且序列對準構建之精度的論點之準確度決定。
對於鼠類序列5G1、13C5及9C11，BLAST研究與視覺檢查之組合用以鑑別適當參考結構。認為參考與標靶胺基酸序列之間25%的序列一致性為嘗試同源性建模練習所必需之最小值。手動構建序列對準且以程式Jackal產生模型座標(參見Petrey,D.,Xiang,Z.,Tang,C.L.,Xie,L.,Gimpelev,M.,Mitros,T.,Soto,C.S.,Goldsmith－Fischman,S.,Kernytsky,A.,Schlessinger,A.等人2003.Using multiple structure alignments,fast model building,and energetic analysis in fold recognition and homology modeling.Proteins 53(增刊6)：430－435)。
所選擇抗體之鼠類與人類框架區域之初始序列具有顯著一致性。不同之殘基位置為在人源化序列中包括鼠類殘基以保留所觀察到之鼠類抗體結合效能的候選者。手動構建人類與鼠類序列之間不同的框架殘基之列表。
給定框架殘基將影響抗體之結合特性之可能性依賴於其與CDR殘基之接近度。因此，使用模型結構，將鼠類與人類序列之間不同的殘基根據其距CDR中任何原子之距離排列。彼等屬於任何CDR原子之4.5之殘基經鑑別為最重要殘基，且推薦其為在人源化抗體中保留之鼠類殘基(亦即回復突變)之候選者。
對於5G1可變域之人源化，以下為本發明提供之通用方法。首先，藉助於計算機程式ABMOD及ENCAD(Levitt,M.,J.Mol.Biol.168：595－620(1983))構建5G1可變域之分子模型。接著，基於相對於人類V及J片段序列之同源性調查，選擇VH片段21/28(Dersimonian,H.，等人，J.Immunol.139：2496－2501(1987))及J片段JH4(Ravetch,J.V.,等人，Cell 27：583－591(1981))以提供Hu5Gl重鏈可變域之框架。對於5G1輕鏈可變域，使用VL片段HF－21/28(Chastagner,P.等人，Gene 101：305－306(1991))及J片段JK4(Hieter,P.A.等人，J.Biol.Chem.257：1516－1522(1982))。5G1 VH與受體人類21/28及JH4片段之間的框架胺基酸一致性為72%，而5G1 VL與受體人類HF21/28及JK4片段之間的一致性為83%。在其中計算機模型表明與CDR顯著接觸之框架位置，自小鼠V區域之胺基酸取代原始人類框架胺基酸。此在重鏈之殘基48、67、68、70、72、74及97進行。對於輕鏈，在殘基50進行替換。在對應人類V區域亞組中之個別位置僅很少出現之框架殘基經彼等位置之人類一致胺基酸替換。此在重鏈之殘基44及76，及輕鏈之殘基2、15、41、42、44及51進行。
對於13C5可變域之人源化，以下為本發明提供之通用方法。首先，藉助於計算機程式ABMOD及ENCAD(Levitt,M.,J.Mol.Biol.168：595－620(1983))構建13C5可變域之分子模型。接著，基於相對於人類V及J片段序列之同源性調查，選擇VH片段M60(Schroeder,Jr.,H.W.及Wang,J.Y.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：Cell 27：583-591(1981))以提供Hul3C5重鏈可變域之框架。對於Hul3C5輕鏈可變域，使用VL片段III-3R(Manheimer-Lory,A.等人，J.Exp.Med.174：1639-1652(1991))及J片段JK4(Hieter,P.A.等人，J.Biol.Chem.257：1516-1522(1982))。13C5 VH與受體人類M60及JH4片段之間的框架胺基酸之一致性為74%，而13C5 VL與受體人類III-3R及JK4片段之間的一致性為75%。
在其中計算機模型表明與CDR顯著接觸之框架位置，自小鼠V區域之胺基酸取代原始人類框架胺基酸。此在輕鏈之殘基22、49及71進行。在對應人類V區域亞組中之個別位置僅很少出現之框架殘基經彼等位置之人類一致胺基酸替換。此在重鏈之殘基10、46、83、84、86及87及輕鏈之殘基62及73進行。
人源化mAb之VL及VH胺基酸序列展示於表10中。
實例2.2.2：構建人源化抗體
使用寡核苷酸更始構建上文所述之電腦試驗構建之人源化抗體。對於各可變域cDNA，各60－80個核苷酸中之6個寡核苷酸經設計以由20個核苷酸在各寡核苷酸之5'及/或3'端彼此重疊。在退火反應中，組合所有6個寡聚物、使其沸騰且在dNTP存在下退火。隨後添加DNA聚合酶I大(Klenow)片段(New England Biolabs #M0210,Beverley,MA)以填充重疊寡核苷酸之間的約40 bp缺口。隨後進行PCR以使用2個含有與修飾之pBOS載體中多個選殖位點互補之外伸序列的最外引子放大整個可變區域基因(Mizushima,S.且Nagata,S.,(1990)Nucleic acids Research第18卷，第17號)。在瓊脂糖凝膠上分離源自各cDNA組裝之PCR產物，且切除並純化對應於所預測可變域cDNA尺寸之條帶。藉由在細菌中同源性重組將可變重鏈區域於框中插至編碼含有2個鉸鏈區胺基酸突變之人類IgG1恆定區之cDNA片段上。此等突變為位置234(EU編號)之白胺酸至丙胺酸改變及位置235之白胺酸至丙胺酸改變(Lund等人，1991,J.Immunol.,147：2657)。藉由同源性重組將可變輕鏈區域與人類恆定區一起插入框中。分離菌落且提取質體DNA；將cDNA插入物全部定序。將對應於各抗體之正確人源化重鏈及輕鏈共轉染於COS細胞中以瞬時產生全長人源化抗人類IL－13抗體。對於13C5，將含有13C5重鏈移植cDNA及13C5輕鏈移植cDNA之pBOS載體共轉染於COS細胞中。藉由蛋白質A瓊脂糖層析純化含有重組嵌合抗體之細胞上清液且藉由添加酸緩衝液溶離結合之抗體。中和抗體且透析於PBS中。若干人源化抗體描述在表10中。
如實例1.1.C中所述使用A－549生物檢定測定純化之人源化抗體抑制IL－13活性的能力。如實例1.1.B中所述，使用表面電漿共振(Biacore)量測來測定人源化抗體對重組人類IL－13之結合親和力。表11展示A－549生物檢定之IC50 值及表10中描述之前6種人源化抗體對人類IL－13wt及變異體的親和力。
使用在此項技術中已知之技術使人源化抗體13C5.5之CDR序列進一步突變，且產生3種其他人源化抗體。如實例1.1.C中所述使用A－549生物檢定測定此等其他人源化抗體抑制人類、獼猴及恆河猴IL－13活性之能力。如實例1.1.B中所述，使用表面電漿共振(Biacore)量測來測定其他人源化抗體對重組人類、獼猴及恆河猴IL－13之結合親和力。除結合及抑制人類IL－13外，此等3種其他抗體對獼猴及恆河猴IL－13展示增強之親和力。表12展示A－549生物檢定之IC50 值，且表13展示其他人源化抗體對人類、獼猴及恆河猴IL－13之親和力。
實例2.2.3：人源化抗IL－13抗體之表徵 已分離阻斷IL－13與IL－13Rα1及IL－13Rα2結合之單株抗體。細胞表面上ELISA基受體結合檢定與125－I－標記之IL－13結合檢定均證明鼠類形式與人源化形式(亦即13C5.5)之13C5均能夠有效阻斷IL－13與兩種受體之結合。與13C5相同譜系中之包括25C8及33C3之抗體亦能夠阻斷IL－13與兩種受體結合。
實例2.2.3.a：人源化抗IL－13抗體阻斷IL－13與IL－13受體之結合 為測定人源化抗體13C5.5阻斷IL－13與IL－13受體(IL－13Rα1及IL－13Rα2)結合之能力，使用ELISA基受體結合檢定。在4℃下，以於100 μl/孔塗佈緩衝液(碳酸鹽－碳酸氫鹽緩衝液，Pierce)中4 μg/ml之重組人類IL－13Rα1/Fc或IL－13Rα2/Fc(R&D Systems)塗佈高結合96孔ELISA平板。16小時後，藉由在接收器中輕打平板內含物來移除塗佈溶液，且以Superblock阻斷緩衝液(240 μl/孔)(Pierce)洗滌且阻斷平板4次。添加人源化抗IL－13 mAb 13c5.5及對照mAb(自40 μg/ml 1：4連續稀釋，50 μl/孔)及生物素－IL－13(50 μl/孔，對於hIL－13Rα1/Fc最終濃度為5 nM，且對於hIL－13Rα2/Fc最終濃度為0.5 nM)且在室溫下(RT)培育2小時。以300 μl 0.1% PBST將平板洗滌5次，且隨後添加100 μl按1：5000稀釋之小鼠抗生物素MAb(Jackson Immunosciences)且在RT下培育45 min。以300 μl 0.1% PBST將平板再洗滌5次，接著添加TMB底物試劑(100 μl/孔，Pharmingen)；發展5 min，且藉由添加50 μl 2 M H2 SO4 (VWR)停止。在450 nm藉由分光光度測定法測定OD。結果展示於表14中。
另外，亦使用IL－13Rα2轉染之COS細胞藉由細胞表面基受體結合檢定評估人源化mAb之受體阻斷特性。如先前所述，以125 I(Amersham,Arlington Heights,IL)使用IODO－GEN試劑(Pierce,Rockford,IL)標記重組人類IL－13(Obiri NI等人，(1995)J Biol Chem.270：8797－8804)。據估計放射性標記IL－13之比活性為158 μCi/μg蛋白質。如A－549生物檢定所評估，標記之IL－13顯示與未標記IL－13類似之生物活性。對於結合實驗，藉由脂質胺2000(Invitrogen)將COS細胞以人類IL－13Rα2瞬時轉染且培育48小時。在4℃下，在具有或無1 μM未標記IL－13之情況下，以1.0 nM125 I－IL－13將轉染之COS細胞(於100 μl結合緩衝液中5×105細胞：含有0.2%人血清白蛋白及10 mmol HEPES之RPM1 1640)培育2小時。藉由離心經由鄰苯二甲酸酯油梯度將細胞結合之125 I－IL－13與未結合125 I－IL－13分離，且以γ粒子計數管(Wallac,Gaithersburg,MD)測定放射能。對於抗體置換檢定，如上所述在增加濃度(高達50 μg/ml)之人類抗IL－13抗體13C5.5存在或不存在條件下，以125 I－IL－13(1.0 nM)培育轉染之COS細胞。結果展示於表14中。
表15展示人源化13C5.5抗體及其他抗IL－13抗體之結合親和力。
在細胞表面基及ELISA基受體結合檢定中，13C5.5在阻斷人類IL－13與人類IL－13Rα2結合中顯示高效力，IC50 值在1與3 nM之間。BAK502G9與MJ2－7亦能夠降低結合信號，其效能比13C5.5低的多(參見表14)，至少部分因其對人類wt IL－13(參見表15)之低親和力。MAb 13.2不能抑制IL－13與IL－13Rα2結合，與其抗原決定基一致。另外，在兩種檢定中，13C5.5在100 nM(或15 μg/ml)濃度下可實現100%抑制。在相同濃度下，BAK502G9及MJ2－7在細胞表面基受體結合檢定中僅分別顯示40%與70%抑制，且兩者在ELISA基受體結合檢定中僅顯示60%抑制。
對於人類血清半衰期在10與20天之間的治療性mAb，在每週或雙週IV或SC 3 mpk或以下之給藥方案情況下血清濃度通常在5－15 μg/ml之間。基於此計算，13C5.5為在單株抗體之習知給藥方案條件下，作為治療性mAb在100 nM(或15 μg/ml)之血清濃度下，當前唯一可能完全活體內(100%)阻斷人類IL－13與IL－13Rα2結合之抗IL－13 mAb。
實例2.2.3.b：抗IL－13抗體與IL－13上特異性抗原決定基之結合 使用抗原決定基切除技術，接著以質譜(MS)進行肽分析來將人類IL－13上抗IL－13 mAb 13C5、13C5.5、9C11及5G1結合之抗原決定基作圖。在抗原決定基切除中，首先使蛋白質與固定之mAb結合且隨後以蛋白水解酶消化。藉由使用MS及MS/MS鑑別含有抗原決定基之肽來測定蛋白質上之抗原決定基區域。將CNBr活化之瓊脂糖珠粒(Amersham Biosciences,10 mg/反應)懸浮於500 μL 0.1 M HCl中且平衡15 min。將珠粒轉染於緻密反應塔(USB Corporation)中且以0.1 M HCl接著以0.1 M NaHCO3 偶合緩衝液洗滌。將mAb(100 μg)添加至懸浮液中且在緩慢旋轉條件下在室溫下培育2 h。以約pH 8.0之0.1 M Tris－HCl緩衝液洗滌與mAb共價連接之珠粒。藉由以約pH 8.0之0.1 M Tris－HCl緩衝液培育2 h，實現CNBr瓊脂糖珠粒上之未反應基團之阻斷。藉由以2種不同pH之緩衝液順序洗滌移除未偶合mAb：1)0.1 M乙酸Na、0.5 M NaCl，約pH 4.0緩衝液；及2)0.1 M Tris－HCl、0.5 M NaCl，約pH 8.0緩衝液。使珠粒在PBS~0.14 M NaCl、2.7 mM KCl、4.3 mM Na2 HPO4 、1.5 mM KH2 PO4 ，pH 7.2中平衡且在IL－13存在或不存在條件下在室溫下培育2 h。以PBS約pH 7.2洗滌珠粒後，移出懸浮液之等分試樣以用於MALDI－TOF分析。
以不同蛋白酶(1：100－1：20酶：底物比率)將親和力結合蛋白質消化12 h。所用蛋白酶包括：胰蛋白酶、GluC、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶Y及胺基肽酶M。蛋白質水解後，以500 μL消化緩衝液洗滌珠粒。留下最終100 μL洗滌液作為對照。將約100 μL 2% TFA添加至珠粒且收集。首先在真空下將對照及酸洗滌液濃縮至約20 μL。隨後以C18 ziptip將肽脫鹽。藉由MALDI－ToF MS使用Voyager DE或Voyager DE－Pro系統分析樣品。在與Sciex Q－Star Pulsar i MS系統連接之Agilent 1100 Capillary HPLC系統上進行奈米－ESI－LC－MS/MS分析。
在研究13C5之抗原決定基中，2個用於連續步驟之蛋白酶得到最佳結果。以胰凝乳蛋白酶偵測到由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基100－130組成的主要肽，指示其可含有抗原決定基。亦偵測到SEQ ID NO：1之胺基酸殘基103－130及104－130之少量肽。胰凝乳蛋白酶消化後使用胺基肽酶M。所偵測到之主要肽為SEQ ID NO：1之胺基酸殘基104－130，暗示4 N末端胺基酸殘基(80－83)不為抗原決定基之一部分。以羧肽酶Y進一步消化使得親和力損失。消化及洗滌後未觀察到肽。使用奈米－ESI－LC－MS/MS確認所有肽序列。
13C5及13C5.5之抗原決定基作圖指示其結合位點包括人類IL－13之C末端螺旋D區(殘基VRDTK IEVAQ FVKDL LL HLK KLFRE GR，對應於SEQ ID NO：1之胺基酸104－130)。已提出C末端螺旋D區涉及於與IL－13受體之相互作用中(Zuegg等人2001 Immunol Cell Biol.79：332－9)。
實例2.3：與IL－13複合之抗IL－13的結晶 使13C5.5之Fab部分與人類IL－13複合且複合體之晶體產生如下。
實例2.3.1：13C5.5 Fab片段之製備及純化 為製備13C5.5 Fab片段，首先使用Ultrafree－15 Biomax 10 kDa分子量截斷(MWCO)離心過濾裝置(Millipore)將於0.15 M PBS緩衝液中之13C5.5 IgG濃縮至2 mg/ml。以1：1體積比緩衝液A(20 mM Na2 HPO4 、10 mM EDTA、20 mM半胱胺酸)預洗滌木瓜蛋白酶凝膠漿液(Pierce)且饋入2－3X。隨後將濃縮之抗體與50%木瓜蛋白酶凝膠漿液混合且在37℃下在劇烈振盪下培育24小時。離心(Beckman 6KR)抗體/漿液混合物且將上清液裝載於PBS預平衡之Superdex 75上。溶離主要峰且彙集蛋白質。藉由以100 mL PBS洗滌來製備25 mL蛋白質A瓊脂糖4快速流動親和柱(Amersham Pharmacia)。將所彙集抗體片段應用於親和柱(流動速率2 mL/min)上。在流出物中收集含有13C5.5 Fab片段之溶離份(藉由280 nm下之UV吸光度監控)。彙集含有濃度大於0.3 mg/ml之13C5.5 Fab片段(藉由280 nm下之UV吸光度測定)的溶離份且冷凍於－80℃下。以SDS－PAGE評估樣品純度。
實例2.3.2：IL－13/13c5.5 Fab複合體製備 將重組人類IL－13表現於哺乳動物表現系統中且隨後使用在此項技術中熟知之技術純化。以1：1莫耳比混合重組人類IL－13與13C5.5 Fab蛋白質且在4℃下培育1小時。以0.5 ml/min將複合體樣品負載於預平衡(20 mM Tris pH 7.5，150 mM NaCl)之Superdex 200管柱上。將複合體彙集且使用Ultrafree－15 Biomax 10 kDa分子量截止(MWCO)離心過濾裝置(Millipore)濃縮至24 mg/ml且冷凍於－80℃下。以SDS－PAGE評估樣品純度。
實例2.3.3：IL－13/13c5.5 Fab複合體之結晶 在冰上將冷凍IL－13/13C5.5複合體儲備液(約24 mg/ml)解凍。使複合體(1.0 μL)與1.0 μL儲集器溶液(1.75 M硫酸銨，100 mM MES，pH 6.5，10 mM CaCl2 )混合。在約18℃下將所得滴劑混合於儲液器之沈滴孔(CrysChem沈滴板)中。一週後出現菱形晶體。
實例2.3.4：IL－13/13C5.5 Fab複合體晶體之低溫保護及急驟冷卻 使用纖維環在母液＋20%甘油中收集IL－13/13C5.5 Fab複合體之晶體。隨後藉由投入液氮中將晶體急驟冷卻。
實例2.3.5：IL－13/13C5.5 Fab複合體之X射線繞射數據收集 在IMCA光束線下在Argonne,IL之高級光子源下收集IL－13/13C5.5 Fab晶體之X射線繞射數據。在數據收集期間以Oxford Cryosystems Cryostream冷卻器將晶體維持在100 K之溫度下。在1.0°之振盪範圍內總計收集到180個幀。以HKL2000程式套組(Otwinowski及Minor,1997)處理數據。測定晶體取向後，以DENZO整合數據且標定並以SCALEPACK合併，且置於絕對溫標上並以TRUNCATE(French及Wilson,1978)減約為結構因數幅度。以隨機方式將5%之獨特反射指定為"自由"設定，以用於計算自由R因子(Rfree)(Brnger，1992)；剩餘95%之反射構成"工作"設定，用於計算R因子(R)。X射線繞射數據概括於表16中。以下列出標定晶型之指數：(1)1L－13/13C5.5 Fab：空間群P2(1)2(1)2(1)、a＝163.578、b＝163.318、c＝228.627、α＝90.0°、β＝90.0°、γ＝90.0°。表17列出數據表之X射線繞射統計。
實例2.3.6：IL－13/13C5.5 Fab複合體晶體結構之分子替換方案及精製 使用程式PHASER(Read,2001)測定最大似然分子替換方案。在3.0解析度下在空間群P2(1)2(1)2(1)中解決總共六個13C5.5單體。搜索模型為先前報導之Fab晶體結構(Protein Data Bank entry 1BJ1；Muller等人1998)。基於分子替換方案產生座標。
以上文所述之分子替換方案座標起始在空間群P2(1)2(1)2(1)中細化IL－13/13C5.5 Fab複合體晶體結構。使用剛性軀體精製藉由CCP4程式套組(Murshudov等人，1997,Collaborative Computational Project,1994)中可獲得之程式REFMAC開始精製，其在2.6產生以下統計：R 40.00%(Rfree 39.00%)。觀察到更始IL－13電子密度。以公共IL－13 NMR結構1IJZ(Moy等人，2001)使用分子圖形程式O(Jones等人，1991)及2Fo－Fc及Fo－Fc電子密度圖檢查指導6個IL－13單體之手動構建。精製程式REFMAC(Murshudov等人，1997)用於限制精製之迭代輪，產生以下統計：R 25.8%(Rfree 30.5%)。結果展示於表18中。
實例2.3.6：IL－13/13C5.5 Fab複合體結構 觀察到人類IL－13與若干13C5.5 CDR廣泛接觸。抗體－抗原介面上所隱匿面積為1415.50 2 。接觸由使界面穩定之關鍵氫鍵與疏水性相互作用組成。包含多數界面接觸之2個最小序列片段處於IL－13螺旋A及D上(對於IL－13之結構，參見美國專利公開案第2003－0013851 A1號，其以引用的方式併入本文中)。此等接觸使得CDR之L1與L3，且H2與H3接合。基於上述，抗原決定基13C5.5結合範圍包含由SEQ ID NO.1之Ser26－Asn38、Lys123－Arg130界定的地形區域。抗原決定基13C5.5結合範圍更佳包含由SEQ ID NO 1之Arg30－Asn38、Lys123－Arg127界定的地形區域。
實例2.4：人源化IL－13抗體之活體內功效 抗hIL－13抗體之活體內功效評估如下。
實例2.4.1：人源化IL－13抗體在人類IL－13誘導之哮喘模型中的活體內功效 在小鼠人類IL－13誘導之哮喘模型中測試抗hlL－13抗體5G1、13C5及13C5.5之功效。以劑量為50 μl無菌PBS中1 μg、以微型噴霧器使用齧齒動物喉鏡以檢驗氣管打開輸送至氣管中的重組人類IL－13激發小鼠。在研究之第1及2天，給予總計2個劑量之IL－13，且最終激發24小時後，在支氣管－肺泡灌洗液體中量測氣管高反應性(AHR；Hoymann,H.G.；J Pharmacol Toxicol Methods.2007年1－2月；55(1)：16－26)以及黏液、酸性哺乳動物殼多糖酶(AMC酶；Donnelly LE,Barnes PJ.,1：Trends Pharmacol Sci.2004年10月；25(10)：509－11)及胸腺及活化調節趨化因子(TARC；Bisset LR,Schmid－Grendelmeier P.,Curr Opin Pulm Med.2005 Jan；11(1)：35－42)。在以IL－13第一次激發前一天，藉由腹膜內注射投與100、300及1000 μg之抗體劑量，且結果概括於表19中。與PBS處理之對照動物相比，並未阻斷IL－13與IL－13Rα1或IL－13Rα2結合之5G1抗體在此活體內模型中不能以與使用5G1處理之動物中偵側到之AHR、AMC酶及Muc5ac相當的水準中和IL－13生物活性。相反，阻斷與α1及α2受體結合之13C5抗體有效於降低所有參數。以IL－13處理使得氣管阻力自3.6 cm H2 O/ml/sec增加至5.7 cm H2 O/ml/sec。以13C5(1000 μg)治療將氣管阻力降低至4.3 cm H2 O/ml/sec。在以抗體治療情況下，如muc5ac含量所量測之黏液分泌過多自356.5單位降低至最大211 U，對應於40%降低。類似地AMC酶含量自202 U降低至68 U，對應於66%之降低，與TARC含量所觀察到之降低可比(n＝10,p<.05，所有劑量)。重組人源化抗體13C5.5在此模型中證明類似結果。以30 μg/ml乙醯甲膽鹼激發後，IL－13誘導氣管阻力自3.9增加至5.5 cm H2 O/ml/sec。抗體13C5.5在100、300及1000 μg劑量分別抑制氣管阻力至4.1、4.45及4.3 cm H2 O/ml/sec。在100、300及1000 μg抗體治療劑量下，如muc5ac含量所量測，黏液分泌過多自由IL－13處理誘導之247 U分別降低至154、30.2及11.1 U。此表示以此抗體黏液產生之38、88及96%抑制。IL－13處理誘導130 U AMC酶活性，其藉由抗體治療(100、300及1000 μg劑量)降低至113、98及55 U，表示14、24及68%抑制。此等數據證明阻斷IL－13與IL－Rα1及α2結合之13C5及重組人源化抗體13C5.5可中和IL－13誘導之肺中AHR、黏液及AMC酶產生反應，而並未阻斷IL－13與α1及α2受體結合之抗體無法有效阻斷所有此等生物反應。
＊ p<0.05，學生T－檢驗，＊＊ p<0.05，ANOVA，Bonferroni檢驗，＊＊＊ p<0.01，ANOVA，Bonferroni檢驗
在另一研究中，在小鼠人類IL－13誘導之哮喘模型中比較抗hIL－13抗體BAK502G9、MJ2－7及13C5.5之功效。以劑量為50 μl無菌PBS中1 μg、在輕度鎮靜下經鼻輸送之重組人類IL－13激發小鼠。在研究之第1及2天給予總共2劑量之IL－13，且在最終激發24小時後在支氣管肺泡灌洗液體中量測氣管高反應性以及黏液及AMC酶。在首次以以IL－13激發前一天藉由腹膜內注射投與1000 μg抗體劑量。研究之結果概括於表20中。阻斷IL－13與IL－13α1及α2受體結合之13C5.5抗體有效於顯著降低所有參數。以30 mg/ml乙醯甲膽鹼激發後，IL－13處理使得氣管阻力自4.2 cm H2 O/ml/sec增加至7.2 cm H2 O/ml/sec。13C5.5(1000 μg)治療使得氣管阻力降低至4.6 cm H2 O/ml/sec，降低86.8%。以抗體治療情況下，如由muc5ac含量所量測之黏液分泌過多自768.2單位降低至412.9 U，對應於58.8%之降低。類似地，AMC酶含量自316.5 U降低至147 U，對應於52%之降低(n＝10，p<.001)。抑制IL－13與IL－13Rα1結合但並不有效地抑制IL－13與IL－13Rα2結合之BAK502G9及MJ2－7抗體在此模型中證明可比的中和IL－13誘導之AHR的能力。抗體BAK502G9及MJ2－7僅分別將氣管阻力自7.2抑制至5.96 cm H2 O/ml/sec及5.93 cm H2 O/ml/sec，表示42%及41.5%之AHR降低。在1000 μg抗體劑量下，如由muc5ac含量所量測之黏液分泌過多自由IL－13處理所誘導之768.2 U降至627.8及380 U，分別對應於BAK502G9或MJ2－7抗體之23%及64%抑制。與13C5.5或MJ2－7抗體相比，BAK502G9抗體抑制AMC酶之有效性較低。IL－13處理誘導316.5 U AM酶活性，其由BAK502G9或MJ2－7抗體處理(1000 μg劑量)降低至279及169 U，分別表示8%及45%抑制。此等數據證明阻斷IL－13與IL－13Rα1及α2結合之重組人源化抗體13C5.5最有效於中和肺中IL－13誘導之AHR、黏液及AMC產生反應，而以低親和力阻斷IL－13與IL－13α2受體結合之抗體不太有效於阻斷此等造成哮喘發病機制之生物反應。
實例2.4.2：IL－13抗體在OVA－誘導之哮喘小鼠模型中的活體內功效 為測定受體阻斷特性(尤其關於IL－13Rα2)是否影響mAb在哮喘小鼠模型中之活體內功效，如受體結合ELISA使用mIL－13Rα1/Fc及mIL－13Rα2/Fc蛋白質(R & D Systems)(參見表21)所測定，產生一組顯示不同受體阻斷特性之大鼠抗小鼠IL－13抗體。由於抗h1L－13 mAb 3H7與小鼠IL－13交叉反應，其抗mIL－13特性亦包括在表21中。使用BIACORE檢定相對於重組小鼠IL－13(R & D Systems)量測抗體對小鼠IL－13之結合親和力，且藉由A－549生物檢定相對於重組小鼠IL－13測定抗體抗小鼠IL－13之效能(IC50 )。51D9及48D3之可變域序列展示於表22中。
對於鼠類哮喘模型之活體內功效研究，動物(雌性Balb/c小鼠)購自Taconic，在Abbott Bioresearch Center圈養，且在8－12週齡時使用。所有方案經IACUC批准。在第0及7天，腹膜內注射於2 mg礬(Pierce)中之8 μg OVA使小鼠經OVA敏化(Sigma，根據製造商之方案使用DetoxiGel(Pierce)將內毒素自卵白蛋白中移出且最終材料含有小於0.1 EU/mg之蛋白質)。在第14及16天，動物接受於50 ml無菌PBS中之0.3 mg OVA的鼻內激發。在第13天以於無菌PBS中之單一腹膜內注射形式投與抗體51D9及48D3(根據標準程序自融合瘤株51D9及48D3之上清液純化，其含有小於0.1 EU/mg之蛋白質且藉由PCR測試對於齧齒動物病原體為陰性)。在第13－17天以3 mg/kg之劑量經口每天投與一次地塞米松(Dexamethasone)(Sigma)。在第17天，第二次OVA激發24後分析所有終點。使用全血體積描記法評估氣管高反應性(AHR)。簡而言之，以腹膜內注射開他敏(ketamine)及甲苯噻嗪(xylazine)誘導麻醉之手術平面。將氣管套管手術插於第三與第四氣管環之間。藉由經頸靜脈內注射泮庫溴銨(pancuronium bromide)預防自發呼吸，且將動物置於全身體體積描記器(Buxco)中且以0.2 ml室內空氣在每分鐘150次呼吸下使用體積受控通風機(Harvard Apparatus)以機械方式通風。使用變換器量測肺部壓力及體積描記器內的氣流，且使用Biosystem Xa軟體將肺阻力計算為壓力/氣流。量測基線阻力以及以使用管內超音噴霧器輸送之乙醯甲膽鹼(3、10 & 30 mg/ml)激發後之阻力。完成肺功能測試後，以0.5 ml無菌PBS將肺灌洗4次。分析灌洗液體之TARC、AMC酶及細胞滲透。收集血清以量化研究結束時的抗體含量。
藉由ELISA(R & D)根據製造商之方案測定鼠類TARC含量。在支氣管肺泡灌洗(BAL)液體(在80 μM 4－甲基傘形基β－D－N,N'－二乙醯基殼二糖苷(chitobioside)存在下，以0.01% BSA、30 mM檸檬酸鈉、60 mM磷酸鈉pH 5.2稀釋1至10倍)中測定AMC酶活性。在室溫下將反應物培育15分鐘，且藉由添加100 μL 1 M甘胺酸/NaOH pH 10.6終止。藉由在460 nm之螢光發射，使用在385 nm之激發在Fluoroskan Ascent螢光計上測定產物形成。為評估杯狀細胞增生，以10%中性緩衝之福馬林在22 cm高度下使肺膨脹15分鐘以實現肺表面之區域一致。將切片嵌入石蠟中，切開且以高碘酸雪夫氏(schiff)(PAS)染色。使用ImagePro Plus軟體將沿左肺之主支氣管之PAS陽性細胞區域定量。藉由ELISA測定Muc5ac含量。以BAL液體塗佈96孔平板，乾燥隔夜，且隨後添加生物素化抗－Muc5ac抗體且以HRP結合之鏈黴親和素偵測，接著裂解比色底物TMB。
在標準型式之卵白蛋白誘導之小鼠哮喘中測試IL－13Rα1及α2對哮喘發病機制之相對貢獻。藉由在以卵白蛋白局部激發1天前以抗體處理動物來測試阻斷IL－13與α1及α2受體結合之抗體(51D9、54D1及3H7分別以340、24及2430 pM之效能)以及僅阻斷IL－13與α1受體結合之抗體(48D3，效能為50 pM)且結果提供於表23中。以乙醯甲膽鹼激發後，OVA激發誘導肺阻力增加，如BAL液體中增加之Muc5ac含量所量測之黏液分泌過多，以及藉由組織學評估增加之上皮細胞PAS陽性染色，肺經嗜伊紅性粒細胞&T細胞浸潤且產生哮喘關聯蛋白質AMC酶及TARC。
阻斷IL－13與IL－13 Rα1及α2結合之抗體均證明試劑之功效及活體內效能根據其活體外所量測之效能變化。在100、300及1000μg/小鼠之劑量下測試51D9。與非哮喘動物之3.6 cm H2 O/ml/sec相比，以30 mg/ml乙醯甲膽鹼激發後，OVA處理導致氣管阻力增加至6.2 cm H2 O/ml/sec。以51D9處理小鼠完全防止肺阻力增加，其值與非哮喘對照動物中所觀察到之對於劑量100、300及1000 μg分別為4.1、4.0及3.5 cm H2 O/ml/sec(n＝8－10/組，p<.05)之值可比。以51D9觀察到之抑制的量與以類固醇處理(3.3 cm H2 O/ml/sec)所取得的量可比。在以1000 μg 51D9處理之動物中，以51D9處理亦劑量依賴型地自404單位Muc5ac降至55 U抑制黏液分泌過多。藉由組織學評估PAS反應性上皮細胞亦觀察到抑制黏液分泌過多。以300及1000 μg劑量之51D9抗體，陽性細胞百分比區域自1.0%降低至0.6%及0.5%，分別表示47－65%(n＝8，p<.01)之降低。51D9處理亦抑制TARC及AMC酶。OVA激發誘導61 pg/ml之TARC，以1000 μg 51D9處理其降低至7.8 pg/ml(n＝10，p<.05)。OVA激發誘導96任意單位之AMC酶活性，以100、300及1000 μg之抗體其分別以51D9劑量依賴型地降低至52、45及21 U(n＝9－10，p<.01)。具有大出10倍之活體外效能(24 pM)之54D1在30 μg劑量以氣管阻力自6.58 cm H2 O/ml/sec降低至4.4 cm H2 O/ml/sec證明AHR之抑制，且以300 μg抗體處理觀察到氣管阻力降低至3.65 cm H2 O/ml/sec之值的最大抑制。對於黏液、AMC酶及TARC產生之抑制觀察到類似效能。具有2.5 nM之效能的第三抗體3H7證明AHR、黏液及AMC酶之抑制，但僅在1000 μg抗體處理之劑量下，此與活體外生物檢定中所描述之效能10倍變化一致。
以抗體48D3測試僅阻斷IL－13與IL－13Rα1結合之抗體功效。以30、100、300及1000 μg/小鼠處理動物。與4.1 cm H2 O/ml/sec相比，在非哮喘PBS處理之動物中OVA激發誘導氣管阻力升至5.69 cm H2 O/ml/sec。以30 μg 48D3處理對OVA誘導之肺阻力無效，而以100、300及1000 μg 48D3處理抑制OVA誘導之肺阻力變化至4.4 cm H2 O/ml/sec之最大量或至OVA對照含量之~80%(n＝10，p<.05)。與51D9所觀察到之效應相對比，如Muc5ac ELISA或PAS反應性上皮細胞所量測48D3並未抑制OVA誘導之黏液分泌過多。48D3在30 μg劑量處理觀察到黏液之略微但統計學顯著降低(30%)，而所有其他劑量等於OVA激發之動物。PAS陽性染色之組織學定量證明OVA激發之動物中0.6%對OVA激發且以1000 μg 48D3處理之動物中0.8%。在此等研究中，48D3在30、100、300及1000 μg劑量下將OVA誘導之AMC酶表現自OVA處理之動物中偵側到之196 U分別抑制至63、90、87及96 U。抗體含量之分析指示在抗體處理之小鼠的血清與BAL液體中可偵測到可比含量之48D3及51D9。儘管與51D9抗體相比48D3抗體之7倍更大效能及2種抗體之等效暴露，48D3抗體不能抑制AHR或AMC酶至與阻斷IL－13與IL－13Rα1及α2結合之抗體相同的程度，且不能減弱黏液產生。總而言之，此等數據暗示IL－13Rα2在調節OVA誘導之黏液過度分泌中起重要作用，且IL－13Rα2有助於活體內調節哮喘表型。
<110> 美商亞培公司<120> 介白素－13結合蛋白質<130> 8370 US P1 <140> 096133634 <141> 2007－09－07 <150> 60/843,249 <151> 2006－09－08 <160> 94 <170> PatentIn version 3.4 <210> 1 <211> 132 <212> PRT <213> 智人種<400> 1<210> 2 <211> 330 <212> PRT <213> 智人種<400> 2 <210> 3 <211> 330 <212> PRT <213> 智人種<400> 3 <210> 4 <211> 106 <212> PRT <213> 智人種<400> 4<210> 5 <211> 105 <212> PRT <213> 智人種<400> 5 <210> 6 <211> 30 <212> PRT <213> 智人種<400> 6<210> 7 <211> 14 <212> PRT <213> 智人種<400> 7<210> 8 <211> 32 <212> PRT <213> 智人種<400> 8<210> 9 <211> 11 <212> PRT <213> 智人種<400> 9<210> 10 <211> 14 <212> PRT <213> 智人種<400> 10<210> 11 <211> 32 <212> PRT <213> 智人種<400> 11<210> 12 <211> 11 <212> PRT <213> 智人種<400> 12<210> 13 <211> 30 <212> PRT <213> 智人種<400> 13<210> 14 <211> 15 <212> PRT <213> 智人種<400> 14<210> 15 <211> 32 <212> PRT <213> 智人種<400> 15<210> 16 <211> 30 <212> PRT <213> 智人種<400> 16 <210> 17 <211> 14 <212> PRT <213> 智人種<400> 17<210> 18 <211> 32 <212> PRT <213> 智人種<400> 18<210> 19 <211> 32 <212> PRT <213> 智人種<400> 19<210> 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MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> X＝L,A,M <220> <221> MISC_FEATURE <222> (17)..(17) <223> X＝A,D,E,H,N <400> 67<210> 68 <211> 7 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 一致IL－13 CDR <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> X＝L,S,K,T,W,Y <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> X＝V,T,A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> X＝S,N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> X＝N,K,T,R,M <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> X＝R,L,K <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> X＝F,D,E,H,A,P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> X＝S,P,R <400> 68<210> 69 <211> 9 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 一致IL－13 CDR <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> X＝F,W,Q,A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> X＝Q,L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> X＝H,G,Y,W,N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> X＝N,S,T,Y,L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> X＝Y,T,S,E,H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> X＝L,V,F,Y,N,G,D,P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> X＝P,H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> X＝L,F,Y,W,R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> X＝T,V <400> 69<210> 70 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈5G1.1可變區域<400> 70 <210> 71 <211> 113 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈5G1.1可變區域<400> 71<210> 72 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈5G1.2可變區域<400> 72 <210> 73 <211> 113 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈5G1.2可變區域<400> 73<210> 74 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈5G1.3可變區域<400> 74 <210> 75 <211> 112 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈5G1.3可變區域<400> 75<210> 76 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈13C5.1可變區域<400> 76 <210> 77 <211> 108 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈13C5.1可變區域<400> 77<210> 78 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈13C5.2可變區域<400> 78 <210> 79 <211> 108 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈13C5.2可變區域<400> 79<210> 80 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈13C5.5可變區域<400> 80<210> 81 <211> 107 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈13C5.5可變區域<400> 81<210> 82 <211> 116 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈9C11.1可變區域<400> 82<210> 83 <211> 113 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈9C11.1可變區域<400> 83 <210> 84 <211> 116 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈9C11.2可變區域<400> 84<210> 85 <211> 113 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈9C11.2可變區域<400> 85 <210> 86 <211> 123 <212> PRT <213> 黑鼠<400> 86<210> 87 <211> 111 <212> PRT <213> 黑鼠<400> 87 <210> 88 <211> 119 <212> PRT <213> 黑鼠<400> 88<210> 89 <211> 111 <212> PRT <213> 黑鼠<400> 89 <210> 90 <211> 123 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化重鏈5G1.5可變區域<400> 90<210> 91 <211> 112 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈5G1.5 <400> 91 <210> 92 <211> 107 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈13C5.5L2E可變區域<400> 92<210> 93 <211> 107 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈13C5.5L3F <400> 93 <210> 94 <211> 107 <212> PRT <213> 人工<220> <223> 人源化輕鏈13C5.5L2EL3F可變區域<400> 94

Claims (135)

  1. 一種包含抗原結合域之結合蛋白質，該結合蛋白質能夠結合IL-13，該抗原結合域包含六個CDR：CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3，其中CDR-H1係選自由下列所組成之群：X1 -X2 -X3 -X4-X5 -X6 -X7 (SEQ ID NO：64)，其中：X1 為T、D、G或S；X2 為S；X3 為D；X4 為M、S、Y、L或H；X5 為G、W、Y、A、S或N；X6 為V、I或M；且X7 為D、H、S、Y、N或G；SEQ ID NO：32之殘基31至35；SEQ ID NO：34之殘基31至35；SEQ ID NO：36之殘基31至35；SEQ ID NO：38之殘基31至35；SEQ ID NO：39之殘基31至35；SEQ ID NO：41之殘基31至35；SEQ ID NO：42之殘基31至35；SEQ ID NO：44之殘基31至35；SEQ ID NO：52之殘基31至35；SEQ ID NO：54之殘基31至35；SEQ ID NO：56之殘基31至35； SEQ ID NO：58之殘基31至35；SEQ ID NO：60之殘基31至35；及SEQ ID NO：62之殘基31至35；CDR-H2係選自由下列所組成之群：X1 -X2 -X3 -X4 -X5 -X6 -X7 -X8 -X9 -X10 -X11 -X12 -X13 -X14 -X15 -X16 -X17 (SEQ ID NO：65)，其中：X1 為M、E、H、R、S、G或L；X2 為I或不存在；X3 為H、Y、A、D、S或W；X4 為P、S、W或G；X5 為S、G、E或D；X6 為D、G、S、E或N；X7 為S、Y或G；X8 為E、N、Y、V或R；X9 為T、I或K；X10 為R、Y、I、D或A；X11 為L、Y、D或F；X12 為N、P、S或D；X13 為Q、E、D、P或S；X14 為K、M、S、T、A或V；X15 為F、L、V或M；X16 為K、R或Q；且X17 為D、G或S；SEQ ID NO：44之殘基50至65； SEQ ID NO：46之殘基52至67；SEQ ID NO：48之殘基52至67；SEQ ID NO：50之殘基52至67；SEQ ID NO：54之殘基50至65；SEQ ID NO：56之殘基50至65；SEQ ID NO：58之殘基50至65；SEQ ID NO：60之殘基50至65；及SEQ ID NO：62之殘基50至65；CDR-H3係選自由下列所組成之群：X1 -X2 -X3 -X4 -X5 -X6 -X7 -X8 -X9 -X10 -X11 -X12 -X13 -X14 (SEQ ID NO：66)，其中：X1 為W、T、G、Y、D或I；X2 為R、A、S、G或V；X3 為T、F、Y或S；X4 為S、T或Y；X5 為Y、F或G；X6 為F或Y；X7 為S、Y、I或F；X8 為D、L、Y或P；X9 為Y；X10 為G；X11 為Y、A、P或E；X12 為F、M、S、L或I；X13 為D、V、N或K；且 X14 為Y或F；SEQ ID NO：32之殘基99至105；SEQ ID NO：34之殘基99至105；SEQ ID NO：36之殘基99至109；SEQ ID NO：38之殘基99至109；SEQ ID NO：42之殘基99至100；SEQ ID NO：44之殘基98至106；SEQ ID NO：46之殘基100至112；SEQ ID NO：48之殘基100至112；SEQ ID NO：50之殘基100至112；SEQ ID NO：52之殘基99至107；SEQ ID NO：54之殘基98至107；SEQ ID NO：56之殘基98至107；SEQ ID NO：58之殘基98至107；SEQ ID NO：60之殘基98至107；及SEQ ID NO：62之殘基98至107；CDR-L1係選自由下列所組成之群：X1 -X2 -X3 -X4 -X5 -X6 -X7 -X8 -X9 -X10 -X11 -X12 -X13 -X14 -X15 -X16 -X17 (SEQ ID NO：67)，其中：X1 為K或R；X2 為S或A；X3 為S或T；X4 為Q、K或I；X5 為N、S、T、G或E； X6 為L、T或S；X7 為L、Q或V；X8 為Y、N、H、D或T；X9 為S、I或T；X10 為S、D、N、H或Y；X11 為N或G；X12 為Q；X13 為K、F、N、E或S；X14 為N、T或S；X15 為Y或F；X16 為L、A或M；且X17 為A、D、E、H或N；SEQ ID NO：33之殘基24至39；SEQ ID NO：35之殘基24至39；SEQ ID NO：37之殘基24至39；SEQ ID NO：40之殘基24至39；SEQ ID NO：43之殘基24至39；SEQ ID NO：47之殘基24至34；SEQ ID NO：49之殘基24至34；SEQ ID NO：51之殘基24至34；SEQ ID NO：53之殘基23至36；SEQ ID NO：55之殘基24至38；SEQ ID NO：57之殘基24至38；SEQ ID NO：59之殘基24至38； SEQ ID NO：61之殘基24至38；及SEQ ID NO：63之殘基24至38；CDR-L2係X1 -X2 -X3 -X4 -X5 -X6 -X7 (SEQ ID NO：68)，其中：X1 為L、S、K、T、W或Y；X2 為V、T或A；X3 為S或N；X4 為N、K、T、M或R；X5 為R、K或L；X6 為F、D、E、H、P或A；且X7 為S、R或P；及CDR-L3係選自由下列所組成之群：X1 -X2 -X3 -X4 -X5 -X6 -X7 -X8 -X9 (SEQ ID NO：69)，其中：X1 為F、W、Q或A；X2 為Q或L；X3 為H、G、Y、W或N；X4 為N、S、T、L或Y；X5 為Y、T、S、E或H；X6 為L、V、F、Y、N、G、P或D；X7 為P或H；X8 為L、F、Y、W或R；且X9 為T或V；及SEQ ID NO：40之殘基94至102。
  2. 如請求項1之結合蛋白質，其中該等CDR係選自由以下序列組成之群：
  3. 如請求項1之結合蛋白質，其中該等CDR選自由以下組成之群之可變域CDR組：
  4. 如請求項3之結合蛋白質，其包含至少2個可變域CDR組。
  5. 如請求項4之結合蛋白質，其中該至少2個可變域CDR組選自由以下組成之群：VH 25C8 CDR組& VL 25C8 CDR組；VH 9C11 CDR組& VL 9C11 CDR組；VH 21D9 CDR組& VL 21D9 CDR組；VH 22D10 CDR組& VL 22D10 CDR組； VH 5F1 CDR組& VL 5F1 CDR組；VH 5G1 CDR組& VL 5G1 CDR組；VH 3H7 CDR組& VL 3H7 CDR組；VH 14B2 CDR組& VL 14B2 CDR組；VH 13C5 CDR組& VL 13C5 CDR組；VH 29G5 CDR組& VL 29G5 CDR組；VH 33C3 CDR組& VL 33C3 CDR組；VH 4A8 CDR組& VL 4A8 CDR組；VH 1B6 CDR組& VL 1B6 CDR組；VH 3E5 CDR組& VL 3E5 CDR組；VH 6C8 CDR組& VL 6C8 CDR組；VH 5D3 CDR組& VL 5D3 CDR組；及VH 8B6 CDR組& VL 8B6 CDR組。
  6. 如請求項5之結合蛋白質，其進一步包含人類受體框架。
  7. 如請求項6之結合蛋白質，其中該人類受體框架包含選自由以下序列組成之群的胺基酸序列：
  8. 如請求項6之結合蛋白質，其中該人類受體框架包含至少一個框架區域胺基酸取代，其中該框架之胺基酸序列與該人類受體框架之序列至少65%一致且包含至少70個與該人類受體框架一致之胺基酸殘基。
  9. 如請求項7之結合蛋白質，其中該人類受體框架在關鍵殘基處包含至少一個框架區域胺基酸取代，該關鍵殘基選自由以下各殘基組成之群：鄰近於CDR之殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基；能夠與人類IL-13相互作用之殘基；能夠與CDR相互作用之殘基；正則殘基(canonical residue)；重鏈可變區域與輕鏈可變區域之間的接觸殘基；微調區(Vernier zone)中之殘基；及位於Chothia定義之可變重鏈CDR1與Kabat定義之第一重鏈框架之間的重疊區域中之殘基。
  10. 如請求項9之結合蛋白質，其中關鍵殘基係選自由2L、15L、22L、41L、42L、44L、49L、50L、51L、62L、71L、73L、10H、44H、46H、48H、67H、68H、70H、72H、74H、76H、83H、84H、86H、87H及97H組成之 群。
  11. 如請求項10之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為一致人類可變域(consensus human variable domain)。
  12. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質包含至少一個具有選自由以下序列組成之群的胺基酸序列之可變域：
  13. 如請求項12之結合蛋白質，其中該結合蛋白質包含2個可變域，其中該2個可變域具有選自由以下序列組成之群的胺基酸序列：SEQ ID NO：70 & SEQ ID NO：71；SEQ ID NO：72 & SEQ ID NO：73；SEQ ID NO：74 & SEQ ID NO：75；SEQ ID NO：76 & SEQ ID NO：77；SEQ ID NO：78 & SEQ ID NO：79；SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：81； SEQ ID NO：82 & SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：84 & SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：92；SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：93及SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：94。
  14. 如請求項10之結合蛋白質，其中該結合蛋白質包含至少一個具有選自由以下序列組成之群的胺基酸序列之可變域：
  15. 如請求項1或13之結合蛋白質，其中該結合蛋白質能夠調節IL-13之生物學功能。
  16. 如請求項1或13之結合蛋白質，其中該結合蛋白質能夠中和IL-13。
  17. 如請求項1或13之結合蛋白質，其中如表面電漿共振所 量測該結合蛋白質對該標靶具有選自以下數值組成之群的結合速率常數(kon )：至少約102 M-1 s-1 ；至少約103 M-1 s-1 ；至少約104 M-1 s-1 ；至少約105 M-1 s-1 ；及至少約106 M-1 s-1 。
  18. 如請求項1或13之結合蛋白質，其中如表面電漿共振所量測該結合蛋白質對該標靶具有選自以下數值組成之群的分解速率常數(koff )：至多約10-3 s-1 ；至多約10-4 s-1 ；至多約10-5 s-1 ；及至多約10-6 s-1 。
  19. 如請求項1或13之結合蛋白質，其中該結合蛋白質對該標靶具有選自以下數值組成之群的解離常數(KD )：至多約10-7 M；至多約10-8 M；至多約10-9 M；至多約10-10 M；至多約10-11 M；至多約10-12 M；及至多10-13 M。
  20. 一種抗體構築體，其包含如請求項1之結合蛋白質，該抗體構築體進一步包含連接子多肽或免疫球蛋白恆定域。
  21. 如請求項20之抗體構築體，其中該抗體構築體係選自由以下組成之群： 雙功能抗體；多特異性抗體。
  22. 如請求項20之抗體構築體，其中該抗體構築體包含選自由以下組成之群的重鏈免疫球蛋白恆定域：
  23. 如請求項20之抗體構築體，其中該抗體構築體包含具有選自由以下組成之群的胺基酸序列之免疫球蛋白恆定域：
  24. 一種抗體結合物，其包含如請求項21之抗體構築體，該抗體結合物另外包含選自由免疫黏附分子、造影劑、治療劑及細胞毒素劑組成之群的試劑。
  25. 如請求項24之抗體結合物，其中該試劑為選自由放射性標籤、酶、螢光標籤、發光標籤、生物發光標籤、磁性標籤及生物素組成之群的造影劑。
  26. 如請求項24之抗體結合物，其中該造影劑為選自由3 H、14 C、35 S、90 Y、99 Tc、111 In、125 I、131 I、177 Lu、166 Ho及153 Sm組成之群的放射性標籤。
  27. 如請求項24之抗體結合物，其中該試劑為選自由抗代謝物、烷基化劑、抗生素、生長因子、細胞激素、抗血管 生成劑、抗有絲分裂劑、蒽環黴素、毒素及細胞凋亡劑組成之群的治療劑或細胞毒素劑。
  28. 如請求項21之抗體構築體，其中該抗體構築體具有人類糖基化形式。
  29. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為結晶結合蛋白質。
  30. 如請求項20之抗體構築體，其中該抗體構築體為結晶抗體構築體。
  31. 如請求項30之抗體構築體，其中該結晶抗體構築體為不含載劑之醫藥控釋結晶抗體構築體。
  32. 如請求項31之抗體構築體，其中該抗體構築體比該抗體構築體之可溶性對應物具有更大活體內半衰期。
  33. 如請求項31之抗體構築體，其中該抗體構築體保留生物學活性。
  34. 一種分離之核酸，其編碼如請求項1之結合蛋白質胺基酸序列。
  35. 一種分離之核酸，其編碼如請求項20之抗體構築體胺基酸序列。
  36. 一種載體，其包含如請求項34之分離之核酸。
  37. 如請求項36之載體，其中該載體係選自由pcDNA、pTT、pTT3、pEFBOS、pBV、pJV及pBJ組成之群。
  38. 一種宿主細胞，其包含如請求項36之載體。
  39. 如請求項38之宿主細胞，其中該宿主細胞為原核細胞。
  40. 如請求項39之宿主細胞，其中該宿主細胞為大腸桿菌 (E.Coli)。
  41. 如請求項38之宿主細胞，其中該宿主細胞為真核細胞。
  42. 如請求項41之宿主細胞，其中該真核細胞係選自由原生生物細胞、動物細胞、植物細胞及真菌細胞組成之群。
  43. 如請求項41之宿主細胞，其中該真核細胞為選自由哺乳動物細胞、鳥禽細胞及昆蟲細胞組成之群的動物細胞。
  44. 如請求項41之宿主細胞，其中該宿主細胞為CHO細胞。
  45. 如請求項41之宿主細胞，其中該宿主細胞為COS細胞。
  46. 如請求項41之宿主細胞，其中該宿主細胞為酵母細胞。
  47. 如請求項46之宿主細胞，其中該酵母細胞為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae )。
  48. 如請求項41之宿主細胞，其中該宿主細胞為昆蟲Sf9細胞。
  49. 一種產生能夠結合IL-13之蛋白質的方法，其包含在培養基中在足以產生能夠結合IL-13之結合蛋白質的條件下，培養如請求項38之宿主細胞。
  50. 一種蛋白質，其根據如請求項49之方法產生。
  51. 一種組合物，其用於釋放抗體構築體，該組合物包含：(a)調配物，其中該調配物包含如請求項30之結晶抗體構築體及選自白蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖醇、明膠、羥丙基-β-環糊精、甲氧基聚乙二醇或聚乙二醇之成份；及(b)至少一種聚合載劑。
  52. 如請求項51之組合物，其中該聚合載劑為選自由以下各物組成之群的一或多者之聚合物：聚(丙烯酸)、聚(氰基 丙烯酸酯)、聚(胺基酸)、聚(酸酐)、聚(縮肽)、聚(酯)、聚(乳酸)、聚(乳酸-共-乙醇酸)或PLGA、聚(b-羥基丁酸酯)、聚(己內酯)、聚(二氧環己酮)；聚(乙二醇)、聚((羥丙基)甲基丙烯醯胺)、聚[(有機)磷氮烯]、聚(原酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯啶酮)、順丁烯二酸酐-烷基乙烯基醚共聚物、複合多元醇、白蛋白、海藻酸鹽、纖維素及纖維素衍生物、膠原、血纖蛋白、明膠、玻尿酸、寡醣、甘胺基聚糖、硫酸化多醣、其摻合物及共聚物。
  53. 如請求項51之組合物，其係用於治療哺乳動物。
  54. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1之結合蛋白質及醫藥學上可接受之載劑。
  55. 如請求項54之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之載劑係作用為適用於增加該結合蛋白質之吸收或分散之佐劑。
  56. 如請求項55之醫藥組合物，其中該佐劑為玻尿酸酶。
  57. 如請求項54之醫藥組合物，其進一步包含至少一種用於治療其中IL-13活性起有害作用之病症的其他治療劑。
  58. 如請求項54之醫藥組合物，其包含一其他藥劑，其中該其他藥劑係選自由以下各物組成之群：治療劑、造影劑、細胞毒素劑、血管生成抑制劑、激酶抑制劑、協同刺激分子阻斷劑、黏著分子阻斷劑、抗細胞激素抗體或其功能片段、甲胺蝶呤、環孢菌素、雷帕黴素(rapamycin)、FK506、可偵測標籤或報導體、TNF拮抗劑、抗風濕藥劑、肌肉鬆弛劑、麻醉藥、非類固醇消炎 藥物(NSAID)、止痛藥、麻醉劑、鎮靜劑、局部麻醉劑、神經肌肉阻斷劑、抗菌劑、牛皮癬治療劑、皮質類固醇、同化類固醇、紅血球生成素、免疫、免疫球蛋白、免疫抑制劑、生長激素、激素替代藥物、放射性藥物、抗抑鬱劑、抗精神病劑、刺激劑、哮喘藥劑、β促效劑、經吸入類固醇、口服類固醇、腎上腺素或類似物、細胞激素及細胞激素拮抗劑。
  59. 如請求項54之醫藥組合物，其係用於降低人類IL-13活性。
  60. 如請求項54之醫藥組合物，其係用於降低患有其中IL-13活性起有害作用之病症的人類個體之人類IL-13活性。
  61. 如請求項54之醫藥組合物，其係用於治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症。
  62. 如請求項61之醫藥組合物，其中該病症係選自由以下各疾病組成之群之IL-13相關病症：呼吸病症；哮喘；過敏性及非過敏性哮喘；因感染所致之哮喘；因呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之哮喘；慢性阻塞性肺病(COPD)；其他涉及氣管發炎之病狀；嗜伊紅血球增多；纖維化及黏液過量產生；囊性纖維化；肺纖維化；異位性病症；異位性皮膚炎；蕁痳疹；濕疹；過敏性鼻炎；及過敏性腸胃炎；皮膚之發炎性及/或自體免疫病狀；胃腸器官之發炎性及/或自體免疫病狀；發炎性腸病(IBD)；潰瘍性結腸炎；克羅恩氏病(Crohn's disease)；肝臟之發炎性及/或自體免疫病狀；肝硬化；肝臟纖維化；由B型肝炎及/ 或C型肝炎病毒所致之肝臟纖維化；硬皮病；腫瘤或癌症；肝細胞癌；神經膠母細胞瘤；淋巴瘤；霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)；病毒感染；HTLV-1感染(例如來自HTLV-1)；保護性1型免疫反應表現之抑制及在疫苗接種期間保護性1型免疫反應表現之抑制。
  63. 如請求項54之醫藥組合物，其係用於治療患有其中IL-13活性起有害作用之病症，其進一步包含第二藥劑，該第二藥劑係於投與結合蛋白質之前、同時或在其後投與，其中該第二藥劑係選自由以下各藥劑組成之群：經吸入類固醇；β-促效劑；短效或長效β-促效劑；白三烯或白三烯受體拮抗劑；ADVAIR；IgE抑制劑；抗IgE抗體；XOLAIR；磷酸二酯酶抑制劑；PDE4抑制劑；黃嘌呤；抗膽鹼能藥物；肥大細胞穩定劑；色甘酸；IL-4抑制劑；IL-5抑制劑；嗜酸性粒細胞趨化因子/CCR3抑制劑；組胺酸或其包括H1、H2、H3及H4之受體之拮抗劑；前列腺素D或其受體DP1及CRTH2之拮抗劑；TNF拮抗劑；TNF受體之可溶性片段；ENBREL；TNF酶拮抗劑；TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF-β拮抗劑；干擾素γ；潑氟尼東(perfenidone)；化學治療劑，甲胺蝶呤；來氟米特(leflunomide)；西羅莫司(sirolimus)(雷帕黴素(rapamycin))或其類似物CCI-779；COX2或cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑；TPL-2、MK-2及NFkB抑制劑；布替耐德(budenoside)；表皮生長因子；皮質類固醇；環孢菌素 (cyclosporin)；柳氮磺胺吡啶；胺基水楊酸鹽；6-巰基嘌呤；硫唑嘌呤；甲硝唑；脂肪氧合酶抑制劑；馬沙拉嗪(mesalamine)；奧沙拉嗪(olsalazine)；巴柳氮(balsalazide)；抗氧化劑；凝血噁烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗IL-1β抗體；抗IL-6抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶基-咪唑化合物；TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、1L-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、1L-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、EMAP-II、GM-CSF、FGF或PDGF之抗體或促效劑；CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配位體之抗體；FK506；雷帕黴素(rapamycin)；黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)；布洛芬(ibuprofen)；潑尼龍(prednisolone)；磷酸二酯酶抑制劑；腺苷促效劑；抗血栓形成劑；補體抑制劑；腎上腺素能劑；IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑；IL-1β轉化酶抑制劑；TNFα轉化酶抑制劑；T-細胞信號傳輸抑制劑；金屬蛋白酶抑制劑；6-巰基嘌呤；血管緊張素轉化酶抑制劑；可溶性細胞激素受體；可溶性p55 TNF受體；可溶性p75 TNF受體；sIL-1RI；sIL-1RII；sIL-6R；消炎細胞激素；IL-4；IL-10；IL-11及TGFβ。
  64. 如請求項61之醫藥組合物，其係藉由至少一種選自以下 之方式投與：非經腸、皮下、肌肉內、靜脈內、關節內、支氣管內、腹內、囊內、軟骨內、腔內、體腔內、小腦內、腦室內、大腸內、宮頸內、胃內、肝內、心肌內、骨內、骨盆內、心包內、腹膜內、胸膜內、前列腺內、肺內、直腸內、腎內、視網膜內、脊柱內、滑膜內、胸腔內、子宮內、膀胱內、丸劑、陰道、經直腸、頰內、舌下、鼻內及經皮。
  65. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，且其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL-13且在細胞表面基受體結合檢定中抑制該IL-13與IL-13a2受體結合，其中IC50 為10-8 M或更低。
  66. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體，或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL-13且在人類IL-13誘導之哮喘模型中抑制50%或更高之氣管高反應性(airway hyper responsiveness；AHR)。
  67. 如請求項66之結合蛋白質，其中該抗體在人類IL-13誘導之哮喘模型中抑制80%或更高之AHR。
  68. 如請求項67之結合蛋白質，其中該抗體為13C5.5。
  69. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL-13，且在人類IL-13誘導之哮喘模型中抑制50%或更高之氣管高反應性(AHR)且抑制40%或更高之黏液產生。
  70. 如請求項69之結合蛋白質，其中該抗體為13C5.5。
  71. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL-13且在細胞表面基受體結合檢定中或在ELISA基受體結合檢定中，在100nM之濃度下抑制約70-100%之該IL-13與IL-13a2受體之結合。
  72. 如請求項65之結合蛋白質，其中該抗體不為BAK502G9、mAbl3.2或MJ2-7。
  73. 如請求項65之結合蛋白質，其中該抗體為13C5.5。
  74. 如請求項71之結合蛋白質，其中該抗體為13C5.5。
  75. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段以選自由以下特性組成之群的結合特性結合IL-13：a)介於105 M-1 s-1 至107 M-1 s-1 之結合速率常數(kon )；b)如表面電漿共振所量測10-4 s-1 至10-6 s-1 之分解速率常數(koff )；及c)10-10 至10-11 M之解離常數(KD )。
  76. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段對IL-13具有選自由以下數值組成之群的結合速率常數(kon )：6.68×105 M-1 s-1 、7.86×105 M-1 s-1 、8.35×105 M-1 s-1 、8.69×105 M-1 s-1 、9.15×105 M-1 s-1 、1.26×106 M-1 s-1 、1.7×106 M-1 s-1 及2.51×106 M-1 s-1 。
  77. 如請求項75之結合蛋白質，其中如表面電漿共振所量測，該抗體或其抗原結合片段對IL-13具有選自由以下數 值組成之群的分解速率常數(koff )：1.23×10-4 s-1 ；1.76×10-4 s-1 ；4.74×10-4 s-1 ；1.91×10-5 s-1 ；2.14×10-5 s-1 ；3.82×10-51 s-1 ；8.81×10-5 s-1 ；及9.65×10-5 s-1 。
  78. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段對IL-13具有選自由以下數值組成之群的解離常數(KD )：1.05×10-10 M；7.10×10-10 M；1×10-11 M；2.20×10-11 M；2.72×10-11 M；4.17×10-11 M；5.68×10-11 M；7.01×10-11 M；7.10×10-11 M；及9.79×10-11 M。
  79. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段能夠調節IL-13之生物功能。
  80. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段能夠中和IL-13。
  81. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段係選自由免疫球蛋白分子、單株抗體、嵌合抗體、CDR移植抗體、人源化抗體、Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、二硫化物鍵聯之Fv、scFv、雙功能抗體、多特異性抗體、雙重特異抗體及雙特異性抗體組成之群。
  82. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段為人源化抗體。
  83. 如請求項75之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段為13C5.5抗體。
  84. 一種醫藥組合物，其包含如請求項75之抗體或其抗原結合片段及醫藥學上可接受之載劑。
  85. 如請求項84之醫藥組合物，其進一步包含至少一種用於 治療其中IL-13活性起有害作用之病症的其他治療劑。
  86. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL-13，使得IL-13經抑制免於與IL-13受體結合。
  87. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其與由SEQ ID No.1之局部區域Arg30-Glu31-Leu32-Ile33-Glu34-Glu35-Leu36-Va137-Asn38與Lys123-Lys124-Leu125-Phe126-Arg 127界定之抗原決定基結合。
  88. 如請求項87之結合蛋白質，其中該抗體或其抗原結合片段結合人類IL-13，使得具有該抗體或其抗原結合片段之IL-13經抑制免於與IL-13α2受體結合，該抗體或其抗原結合片段與由SEQ ID No.1之局部區域Ser26-Thr27-Ala28-Leu29-Arg30-Glu31-Leu32-Ile33-Glu34-Glu35-Leu36-Val37-Asn38與Lys123-Lys 124-Leu125-Phe126-Arg127-Glu128-Gly129-Arg130界定之抗原決定基結合。
  89. 如請求項87之結合蛋白質，其中該抗體為13C5.5。
  90. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段以選自由以下特性組成之群的結合特性結合IL-13，且防止IL-13與IL-13a2受體結合：a. 與IL-13上包括螺旋A及D之抗原決定基結合；b. 結合速率常數(kon )介於105 M-1 s-1 至107 M-1 s-1 之間； c. 如表面電漿共振所量測分解速率常數(koff )為10-4 s-1 至10-6 s-1 ；及d. 解離常數(KD )為10-10 至10-11 M。
  91. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段以選自由以下特性組成之群的結合特性結合變異體IL-13：a. 與IL-13上包括螺旋A及D之抗原決定基結合；b. 結合速率常數(kon )介於105 M-1 s-1 至107 M-1 s-1 之間；c. 如表面電漿共振所量測分解速率常數(koff )為10-4 s-1 至10-6 s-1 ；及d. 解離常數(KD )為10-10 至10-11 M。
  92. 如請求項1之結合蛋白質，其中該結合蛋白質為分離之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段以選自由以下特性組成之群的結合特性結合野生類型IL-13及變異體IL-13：a. 與IL-13上包括螺旋A及D之抗原決定基結合；b. 結合速率常數(kon )介於105 M-1 s-1 至107 M-1 s-1 之間；c. 如表面電漿共振所量測分解速率常數(koff )為10-4 s-1 至10-6 s-1 ；及d. 解離常數(KD )為10-10 至10-11 M。
  93. 一種如請求項51或52之組合物之用途，其係用於製備治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症之藥物。
  94. 一種如請求項54至61中任一項之醫藥組合物之用途，其係用於製備降低人類IL-13活性之藥物。
  95. 一種如請求項1至19及29中任一項之結合蛋白質之用途，其係用於製備降低人類IL-13活性之藥物。
  96. 一種如請求項1至19及29中任一項之結合蛋白質之用途，其係用於製備降低患有其中IL-13活性起有害作用之病症的人類個體之人類IL-13活性之藥物。
  97. 一種如請求項1至19及29中任一項之結合蛋白質之用途，其係用於製備治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症之藥物。
  98. 如請求項96之用途，其中該病症係選自由以下各疾病組成之群之IL-13相關病症：呼吸病症；哮喘；過敏性及非過敏性哮喘；因感染所致之哮喘；因呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之哮喘；慢性阻塞性肺病(COPD)；其他涉及氣管發炎之病狀；嗜伊紅血球增多；纖維化及黏液過量產生；囊性纖維化；肺纖維化；異位性病症；異位性皮膚炎；蕁痲疹；濕疹；過敏性鼻炎；及過敏性腸胃炎；皮膚之發炎性及/或自體免疫病狀；胃腸器官之發炎性及/或自體免疫病狀；發炎性腸病(IBD)；潰瘍性結腸炎；克羅恩氏病(Crohn's disease)；肝臟之發炎性及/或自體免疫病狀；肝硬化；肝臟纖維化；由B型肝炎及/或C型肝炎病毒所致之肝臟纖維化；硬皮病；腫瘤或癌症；肝細胞癌；神經膠母細胞瘤；淋巴瘤；霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)；病毒感染；HTLV-1感染(例如來自HTLV-1)；保護性1型免疫反應表現之抑制及在疫苗接種期間保護性1型免疫反應表現之抑制。
  99. 如請求項96之用途，其係藉由至少一種選自以下之方式投與：非經腸、皮下、肌肉內、靜脈內、關節內、支氣管內、腹內、囊內、軟骨內、腔內、體腔內、小腦內、腦室內、大腸內、宮頸內、胃內、肝內、心肌內、骨內、骨盆內、心包內、腹膜內、胸膜內、前列腺內、肺內、直腸內、腎內、視網膜內、脊柱內、滑膜內、胸腔內、子宮內、膀胱內、丸劑、陰道、經直腸、頰內、舌下、鼻內及經皮。
  100. 一種如請求項1至19及29中任一項之結合蛋白質之用途，其係用於製備治療患有其中IL-13起有害作用之病症之藥物，其中該藥物進一步包含第二藥劑，該第二藥劑係於投與結合蛋白質之前、同時或在其後投與，其中該第二藥劑係選自由以下各藥劑組成之群：經吸入類固醇；β-促效劑；短效或長效β-促效劑；白三烯或白三烯受體拮抗劑；ADVAIR；IgE抑制劑；抗IgE抗體；XOLAIR；磷酸二酯酶抑制劑；PDE4抑制劑；黃嘌呤；抗膽鹼能藥物；肥大細胞穩定劑；色甘酸；IL-4抑制劑；IL-5抑制劑；嗜酸性粒細胞趨化因子/CCR3抑制劑；組胺酸或其包括H1、H2、H3及H4之受體之拮抗劑；前列腺素D或其受體DP1及CRTH2之拮抗劑；TNF拮抗劑；TNF受體之可溶性片段；ENBREL；TNF酶拮抗劑；TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF-β拮抗劑；干擾素γ；潑氟尼東(perfenidone)；化學治療劑，甲胺蝶呤；來氟米特(leflunomide)；西羅莫司 (sirolimus)(雷帕黴素(rapamycin))或其類似物CCI-779；COX2或cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑；TPL-2、MK-2及NFkB抑制劑；布替耐德(budenoside)；表皮生長因子；皮質類固醇；環孢菌素(cyclosporin)；柳氮磺胺吡啶；胺基水楊酸鹽；6-巰基嘌呤；硫唑嘌呤；甲硝唑；脂肪氧合酶抑制劑；馬沙拉嗪(mesalamine)；奧沙拉嗪(olsalazine)；巴柳氮(balsalazide)；抗氧化劑；凝血噁烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗IL-1β抗體；抗IL-6抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶基-咪唑化合物；TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、1L-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、1L-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、EMAP-II、GM-CSF、FGF或PDGF之抗體或促效劑；CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配位體之抗體；FK506；雷帕黴素(rapamycin)；黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)；布洛芬(ibuprofen)；潑尼龍(prednisolone)；磷酸二酯酶抑制劑；腺苷促效劑；抗血栓形成劑；補體抑制劑；腎上腺素能劑；IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑；IL-1β轉化酶抑制劑；TNFα轉化酶抑制劑；T-細胞信號傳輸抑制劑；金屬蛋白酶抑制劑；6-巰基嘌呤；血管緊張素轉化酶抑制劑；可 溶性細胞激素受體；可溶性p55 TNF受體；可溶性p75 TNF受體；sIL-1RI；sIL-1RII；sIL-6R；消炎細胞激素；IL-4；IL-10；IL-11及TGFβ。
  101. 一種如請求項20至23、28及30至33中任一項之抗體構築體之用途，其係用於製備降低人類IL-13活性之藥物。
  102. 一種如請求項20至23、28及30至33中任一項之抗體構築體之用途，其係用於製備降低患有其中IL-13活性起有害作用之病症的人類個體之人類IL-13活性之藥物。
  103. 一種如請求項20至23、28及30至33中任一項之抗體構築體之用途，其係用於製備治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症之藥物。
  104. 如請求項102之用途，其中該病症係選自由以下各疾病組成之群之IL-13相關病症：呼吸病症；哮喘；過敏性及非過敏性哮喘；因感染所致之哮喘；因呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之哮喘；慢性阻塞性肺病(COPD)；其他涉及氣管發炎之病狀；嗜伊紅血球增多；纖維化及黏液過量產生；囊性纖維化；肺纖維化；異位性病症；異位性皮膚炎；蕁痲疹；濕疹；過敏性鼻炎；及過敏性腸胃炎；皮膚之發炎性及/或自體免疫病狀；胃腸器官之發炎性及/或自體免疫病狀；發炎性腸病(IBD)；潰瘍性結腸炎；克羅恩氏病(Crohn's disease)；肝臟之發炎性及/或自體免疫病狀；肝硬化；肝臟纖維化；由B型肝炎及/或C型肝炎病毒所致之肝臟纖維化；硬皮病；腫瘤或癌症；肝細胞癌；神經膠母細胞瘤；淋巴瘤；霍奇金淋巴 瘤(Hodgkin's lymphoma)；病毒感染；HTLV-1感染(例如來自HTLV-1)；保護性1型免疫反應表現之抑制及在疫苗接種期間保護性1型免疫反應表現之抑制。
  105. 如請求項102之用途，其係藉由至少一種選自以下之方式投與：非經腸、皮下、肌肉內、靜脈內、關節內、支氣管內、腹內、囊內、軟骨內、腔內、體腔內、小腦內、腦室內、大腸內、宮頸內、胃內、肝內、心肌內、骨內、骨盆內、心包內、腹膜內、胸膜內、前列腺內、肺內、直腸內、腎內、視網膜內、脊柱內、滑膜內、胸腔內、子宮內、膀胱內、丸劑、陰道、經直腸、頰內、舌下、鼻內及經皮。
  106. 一種如請求項20至23、28及30至33中任一項之抗體構築體之用途，其係用於製備治療患有其中IL-13起有害作用之病症之藥物，其中該藥物進一步包含第二藥劑，該第二藥劑係於投與結合蛋白質之前、同時或在其後投與，其中該第二藥劑係選自由以下各藥劑組成之群：經吸入類固醇；β-促效劑；短效或長效β-促效劑；白三烯或白三烯受體拮抗劑；ADVAIR；IgE抑制劑；抗IgE抗體；XOLAIR；磷酸二酯酶抑制劑；PDE4抑制劑；黃嘌呤；抗膽鹼能藥物；肥大細胞穩定劑；色甘酸；IL-4抑制劑；IL-5抑制劑；嗜酸性粒細胞趨化因子/CCR3抑制劑；組胺酸或其包括H1、H2、H3及H4之受體之拮抗劑；前列腺素D或其受體DP1及CRTH2之拮抗劑；TNF拮抗劑；TNF受體之可溶性片段；ENBREL；TNF酶拮抗 劑；TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF-β拮抗劑；干擾素γ；潑氟尼東(perfenidone)；化學治療劑，甲胺蝶呤；來氟米特(leflunomide)；西羅莫司(sirolimus)(雷帕黴素(rapamycin))或其類似物CCI-779；COX2或cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑；TPL-2、MK-2及NFkB抑制劑；布替耐德(budenoside)；表皮生長因子；皮質類固醇；環孢菌素(cyclosporin)；柳氮磺胺吡啶；胺基水楊酸鹽；6-巰基嘌呤；硫唑嘌呤；甲硝唑；脂肪氧合酶抑制劑；馬沙拉嗪(mesalamine)；奧沙拉嗪(olsalazine)；巴柳氮(balsalazide)；抗氧化劑；凝血噁烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗IL-1β抗體；抗IL-6抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶基-咪唑化合物；TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、1L-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、1L-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、EMAP-II、GM-CSF、FGF或PDGF之抗體或促效劑；CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配位體之抗體；FK506；雷帕黴素(rapamycin)；黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)；布洛芬(ibuprofen)；潑尼龍(prednisolone)；磷酸二酯酶抑制劑；腺苷促效劑；抗血栓形成劑；補體抑制劑；腎上腺素能劑；IRAK、NIK、 IKK、p38或MAP激酶抑制劑；IL-1β轉化酶抑制劑；TNFα轉化酶抑制劑；T-細胞信號傳輸抑制劑；金屬蛋白酶抑制劑；6-巰基嘌呤；血管緊張素轉化酶抑制劑；可溶性細胞激素受體；可溶性p55 TNF受體；可溶性p75 TNF受體；sIL-1RI；sIL-1RII；sIL-6R；消炎細胞激素；IL-4；IL-10；IL-11及TGFβ。
  107. 一種如請求項24至27中任一項之抗體結合物之用途，其係用於製備降低人類IL-13活性之藥物。
  108. 一種如請求項24至27中任一項之抗體結合物之用途，其係用於製備降低患有其中IL-13活性起有害作用之病症的人類個體之人類IL-13活性之藥物。
  109. 一種如請求項24至27中任一項之抗體結合物之用途，其係用於製備治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症之藥物。
  110. 如請求項108之用途，其中該病症係選自由以下各疾病組成之群之IL-13相關病症：呼吸病症；哮喘；過敏性及非過敏性哮喘；因感染所致之哮喘；因呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之哮喘；慢性阻塞性肺病(COPD)；其他涉及氣管發炎之病狀；嗜伊紅血球增多；纖維化及黏液過量產生；囊性纖維化；肺纖維化；異位性病症；異位性皮膚炎；蕁痳疹；濕疹；過敏性鼻炎；及過敏性腸胃炎；皮膚之發炎性及/或自體免疫病狀；胃腸器官之發炎性及/或自體免疫病狀；發炎性腸病(IBD)；潰瘍性結腸炎；克羅恩氏病(Crohn's disease)；肝臟之發炎性及/或 自體免疫病狀；肝硬化；肝臟纖維化；由B型肝炎及/或C型肝炎病毒所致之肝臟纖維化；硬皮病；腫瘤或癌症；肝細胞癌；神經膠母細胞瘤；淋巴瘤；霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)；病毒感染；HTLV-1感染(例如來自HTLV-1)；保護性1型免疫反應表現之抑制及在疫苗接種期間保護性1型免疫反應表現之抑制。
  111. 如請求項108之用途，其係藉由至少一種選自以下之方式投與：非經腸、皮下、肌肉內、靜脈內、關節內、支氣管內、腹內、囊內、軟骨內、腔內、體腔內、小腦內、腦室內、大腸內、宮頸內、胃內、肝內、心肌內、骨內、骨盆內、心包內、腹膜內、胸膜內、前列腺內、肺內、直腸內、腎內、視網膜內、脊柱內、滑膜內、胸腔內、子宮內、膀胱內、丸劑、陰道、經直腸、頰內、舌下、鼻內及經皮。
  112. 一種如請求項24至27中任一項之抗體結合物之用途，其係用於製備治療患有其中IL-13起有害作用之病症之藥物，其中該藥物進一步包含第二藥劑，該第二藥劑係於投與結合蛋白質之前、同時或在其後投與，其中該第二藥劑係選自由以下各藥劑組成之群：經吸入類固醇；β-促效劑；短效或長效β-促效劑；白三烯或白三烯受體拮抗劑；ADVAIR；IgE抑制劑；抗IgE抗體；XOLAIR；磷酸二酯酶抑制劑；PDE4抑制劑；黃嘌呤；抗膽鹼能藥物；肥大細胞穩定劑；色甘酸；IL-4抑制劑；IL-5抑制劑；嗜酸性粒細胞趨化因子/CCR3抑制劑；組胺酸或其 包括H1、H2、H3及H4之受體之拮抗劑；前列腺素D或其受體DP1及CRTH2之拮抗劑；TNF拮抗劑；TNF受體之可溶性片段；ENBREL；TNF酶拮抗劑；TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF-β拮抗劑；干擾素γ；潑氟尼東(perfenidone)；化學治療劑，甲胺蝶呤；來氟米特(leflunomide)；西羅莫司(sirolimus)(雷帕黴素(rapamycin))或其類似物CCI-779；COX2或cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑；TPL-2、MK-2及NFkB抑制劑；布替耐德(budenoside)；表皮生長因子；皮質類固醇；環孢菌素(cyclosporin)；柳氮磺胺吡啶；胺基水楊酸鹽；6-巰基嘌呤；硫唑嘌呤；甲硝唑；脂肪氧合酶抑制劑；馬沙拉嗪(mesalamine)；奧沙拉嗪(olsalazine)；巴柳氮(balsalazide)；抗氧化劑；凝血噁烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗IL-1β抗體；抗IL-6抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶基-咪唑化合物；TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、1L-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、1L-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、EMAP-II、GM-CSF、FGF或PDGF之抗體或促效劑；CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配位體之抗體；FK506；雷帕黴素(rapamycin)；黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)；布洛芬(ibuprofen)； 潑尼龍(prednisolone)；磷酸二酯酶抑制劑；腺苷促效劑；抗血栓形成劑；補體抑制劑；腎上腺素能劑；IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑；IL-1β轉化酶抑制劑；TNFα轉化酶抑制劑；T-細胞信號傳輸抑制劑；金屬蛋白酶抑制劑；6-巰基嘌呤；血管緊張素轉化酶抑制劑；可溶性細胞激素受體；可溶性p55 TNF受體；可溶性p75 TNF受體；sIL-1RI；sIL-1RII；sIL-6R；消炎細胞激素；IL-4；IL-10；IL-11及TGFβ。
  113. 一種結合蛋白質，其包含抗原結合域，其中該結合蛋白質結合IL-13及該抗原結合域包含2個可變域，其中該2個可變域具有選自由以下序列組成之群的胺基酸序列：SEQ ID NO：46 & SEQ ID NO：47；SEQ ID NO：76 & SEQ ID NO：77；SEQ ID NO：78 & SEQ ID NO：79；SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：81；SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：92；SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：93；及SEQ ID NO：80 & SEQ ID NO：94。
  114. 一種結合蛋白質，其包含抗原結合域，其中該結合蛋白質結合IL-13及該抗原結合域包含2個可變域，其中該2個可變域具有SEQ ID NO：80及SEQ ID NO：81之胺基酸序列。
  115. 一種醫藥組合物，其包含如請求項113之結合蛋白質及醫藥學上可接受之載劑。
  116. 一種醫藥組合物，其包含如請求項114之結合蛋白質及醫藥學上可接受之載劑。
  117. 一種分離之核酸，其編碼如請求項113之結合蛋白質胺基酸序列。
  118. 一種分離之核酸，其編碼如請求項114之結合蛋白質胺基酸序列。
  119. 一種載體，其包含如請求項117或118之分離之核酸。
  120. 如請求項119之載體，其中該載體係選自由pcDNA、pTT、pTT3、pEFBOS、pBV、pJV及pBJ組成之群。
  121. 一種分離之宿主細胞，其包含如請求項119或120之載體。
  122. 如請求項121之宿主細胞，其中該宿主細胞為原核細胞。
  123. 如請求項122之宿主細胞，其中該原核宿主細胞為大腸桿菌(E.Coli )。
  124. 如請求項121之宿主細胞，其中該宿主細胞為真核細胞。
  125. 如請求項124之宿主細胞，其中該真核細胞係選自由原生生物細胞、動物細胞、植物細胞及真菌細胞組成之群。
  126. 如請求項124之宿主細胞，其中該真核細胞為選自由哺乳動物細胞、鳥禽細胞及昆蟲細胞組成之群的動物細胞。
  127. 如請求項124之宿主細胞，其中該真核細胞為CHO細胞 或COS細胞。
  128. 如請求項124之宿主細胞，其中該真核細胞為酵母細胞。
  129. 如請求項128之宿主細胞，其中該酵母細胞為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae )。
  130. 如請求項124之宿主細胞，其中該真核細胞為昆蟲Sf9細胞。
  131. 一種產生能夠結合IL-13之蛋白質的方法，其包含在培養基中在足以產生能夠結合IL-13之結合蛋白質的條件下，培養如請求項121之宿主細胞。
  132. 一種IL-13結合蛋白質，其係由如請求項131之方法所製造。
  133. 一種如請求項113之結合蛋白質之用途，其係用於製備治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症之藥物。
  134. 一種如請求項114之結合蛋白質之用途，其係用於製備治療其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症之藥物。
  135. 如請求項133或134之用途，其中該病症係選自由以下各疾病組成之群之IL-13相關病症：呼吸病症；哮喘；過敏性及非過敏性哮喘；因感染所致之哮喘；因呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致之哮喘；慢性阻塞性肺病(COPD)；其他涉及氣管發炎之病狀；嗜伊紅血球增多；纖維化及黏液過量產生；囊性纖維化；肺纖維化；異位性病症；異位性皮膚炎；蕁痳疹；濕疹；過敏性鼻炎；及過敏性腸胃炎；皮膚之發炎性及/或自體免疫病狀；胃腸器官之 發炎性及/或自體免疫病狀；發炎性腸病(IBD)；潰瘍性結腸炎；克羅恩氏病(Crohn's disease)；肝臟之發炎性及/或自體免疫病狀；肝硬化；肝臟纖維化；由B型肝炎及/或C型肝炎病毒所致之肝臟纖維化；硬皮病；腫瘤或癌症；肝細胞癌；神經膠母細胞瘤；淋巴瘤；霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)；病毒感染；HTLV-1感染(例如來自HTLV-1)；保護性1型免疫反應表現之抑制及在疫苗接種期間保護性1型免疫反應表現之抑制。
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Families Citing this family (117)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6303321B1 (en) 1999-02-11 2001-10-16 North Shore-Long Island Jewish Research Institute Methods for diagnosing sepsis
US7304034B2 (en) 2001-05-15 2007-12-04 The Feinstein Institute For Medical Research Use of HMGB fragments as anti-inflammatory agents
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
HUE034760T2 (en) * 2003-05-12 2018-02-28 Helion Biotech Aps Masp-2-T binding antibodies
CN1878793A (zh) * 2003-09-11 2006-12-13 鉴定医疗有限公司 拮抗hmgb1的单克隆抗体
WO2005052001A2 (en) * 2003-11-21 2005-06-09 Zymogenetics, Inc. Anti-il-20 receptor antibodies and binding partners and methods of using in inflammation
MX2007005866A (es) 2004-11-17 2007-11-12 Amgen Inc Anticuerpos monoclonales totalmente humanos para il-13.
CN102846585A (zh) 2006-03-28 2013-01-02 杰佛林制药公司 低剂量的双氯芬酸和β-环糊精的制剂
KR20090010953A (ko) * 2006-03-28 2009-01-30 자블린 파머슈티칼스 인코포레이티드 저 복용량의 비-스테로이드성 항염증성 약물 및 베타-사이클로덱스트린 제형
TWI496790B (zh) * 2006-09-08 2015-08-21 艾伯維巴哈馬有限公司 介白素-１３結合蛋白質
KR20140001229A (ko) * 2007-03-30 2014-01-06 아보트 러보러터리즈 숙주 세포에서 재조합 단백질의 발현을 증강시키기 위한 재조합 발현 벡터 요소(ｒＥＶＥ)
CA2688146C (en) * 2007-05-21 2018-03-06 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Antibodies to il-6 and use thereof
US8252286B2 (en) 2007-05-21 2012-08-28 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
US8178101B2 (en) 2007-05-21 2012-05-15 Alderbio Holdings Inc. Use of anti-IL-6 antibodies having specific binding properties to treat cachexia
US8062864B2 (en) 2007-05-21 2011-11-22 Alderbio Holdings Llc Nucleic acids encoding antibodies to IL-6, and recombinant production of anti-IL-6 antibodies
US7906117B2 (en) * 2007-05-21 2011-03-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever
TW201531484A (zh) 2007-05-21 2015-08-16 Alder Biopharmaceuticals Inc 抗ＴＮＦ-α之抗體及其用途
US8404235B2 (en) 2007-05-21 2013-03-26 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US9701747B2 (en) 2007-05-21 2017-07-11 Alderbio Holdings Llc Method of improving patient survivability and quality of life by anti-IL-6 antibody administration
CA2700197C (en) 2007-11-08 2020-09-08 Neogenix Oncology, Inc. Recombinant monoclonal antibodies and corresponding antigens for colon and pancreatic cancers
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
NZ601913A (en) 2008-01-15 2014-02-28 Abbott Gmbh & Co Kg Powdered protein compositions and methods of making same
TWI532498B (zh) * 2008-03-17 2016-05-11 巴克斯特保健公司 供免疫球蛋白及玻尿酸酶之皮下投藥之用的組合及方法
BRPI0910482A2 (pt) * 2008-04-29 2019-09-24 Abbott Lab imunoglobinas de domínio variável duplo e usos das mesmas
TW201006485A (en) 2008-06-03 2010-02-16 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
SG191639A1 (en) 2008-06-03 2013-07-31 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
AU2009268585C1 (en) 2008-07-08 2014-10-02 Abbvie Inc. Prostaglandin E2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
JP2012506695A (ja) * 2008-08-20 2012-03-22 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 改変された抗ｉｌ−１３抗体、組成物、方法、及び使用
US9212223B2 (en) 2008-11-25 2015-12-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
US8337847B2 (en) 2008-11-25 2012-12-25 Alderbio Holdings Llc Methods of treating anemia using anti-IL-6 antibodies
US8323649B2 (en) 2008-11-25 2012-12-04 Alderbio Holdings Llc Antibodies to IL-6 and use thereof
US8992920B2 (en) 2008-11-25 2015-03-31 Alderbio Holdings Llc Anti-IL-6 antibodies for the treatment of arthritis
US8420089B2 (en) 2008-11-25 2013-04-16 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US9452227B2 (en) * 2008-11-25 2016-09-27 Alderbio Holdings Llc Methods of treating or diagnosing conditions associated with elevated IL-6 using anti-IL-6 antibodies or fragments
GB0904214D0 (en) 2009-03-11 2009-04-22 Ucb Pharma Sa Biological products
CA2760332A1 (en) * 2009-05-01 2010-11-04 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
PL2477603T3 (pl) 2009-09-17 2016-10-31 Trwały preparat złożony hialuronidazy i immunoglobuliny oraz sposoby jego stosowania
PE20121531A1 (es) * 2009-10-15 2012-12-22 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual
CN102711828B (zh) 2009-10-20 2015-06-17 Abbvie公司 使用蛋白a亲和色谱法分离和纯化抗-il-13抗体
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
US9775921B2 (en) 2009-11-24 2017-10-03 Alderbio Holdings Llc Subcutaneously administrable composition containing anti-IL-6 antibody
JP5934652B2 (ja) 2009-11-24 2016-06-15 アルダーバイオ ホールディングス エルエルシー Ｉｌ−６に対する抗体およびその使用
EP2582391B1 (en) 2010-06-18 2018-10-03 XBiotech, Inc Arthritis treatment
JP6023706B2 (ja) * 2010-07-09 2016-11-09 アデュロ・バイオテック・ホールディングス・ヨーロッパ・ベスローテン・フエンノートシャップＡｄｕｒｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ， Ｅｕｒｏｐｅ Ｂ．Ｖ． Ｃｄ２７に対するアゴニスト抗体
JP2013537415A (ja) 2010-08-03 2013-10-03 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリンおよびその使用
PH12013500337A1 (en) 2010-08-26 2017-08-23 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CA2818813C (en) 2010-11-23 2020-10-06 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-il-6 antibodies for the treatment of oral mucositis
CN103688171B (zh) 2010-12-16 2017-10-24 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 与th2抑制相关的诊断和治疗
CA2981662C (en) 2011-01-14 2019-02-05 The Regents Of The University Of California Therapeutic antibodies against ror-1 protein and methods for use of same
TWI719112B (zh) * 2011-03-16 2021-02-21 賽諾菲公司 雙重ｖ區類抗體蛋白質之用途
WO2012162592A1 (en) * 2011-05-25 2012-11-29 Intermune, Inc. Pirfenidone and anti-fibrotic therapy in selected patients
CN103857411A (zh) * 2011-07-13 2014-06-11 阿布维公司 使用抗il-13抗体治疗哮喘的方法和组合物
AR089529A1 (es) * 2011-12-30 2014-08-27 Abbvie Inc Proteinas de union especificas duales dirigidas contra il-13 y/o il-17
MX2015005593A (es) 2012-11-01 2016-02-05 Abbvie Inc Inmunoglobulinas de dominio variable dual anti-vegf/dll4 y usos de las mismas.
CN105324396A (zh) 2013-03-15 2016-02-10 艾伯维公司 针对IL-1β和/或IL-17的双重特异性结合蛋白
TW201446800A (zh) * 2013-03-15 2014-12-16 Abbvie Inc 針對ＴＮＦα之雙特異性結合蛋白
RU2013131870A (ru) * 2013-07-11 2015-01-20 Павлов Владимир Игоревич Способ обнаружения наличия, тяжести, риска и предрасположенности к рецидивам, а также лечения и реакции на лечение воспаления мочевыводящих путей и наборы для его описания
CN105682683A (zh) 2013-08-02 2016-06-15 阿杜罗生物科技控股有限公司 结合cd27激动剂以及免疫检查点抑制以用于免疫刺激
CA2920835A1 (en) 2013-08-20 2015-02-26 Anutra Medical, Inc. Syringe fill system and method
NZ717140A (en) * 2013-08-30 2022-05-27 Immunogen Inc Antibodies and assays for detection of folate receptor 1
BR112016008694A2 (pt) 2013-10-23 2017-10-03 Genentech Inc Métodos de previsão da reação de pacientes com asma, de previsão da capacidade de reação de pacientes com asma, de identificação de pacientes com asma, de tratamento de pacientes portadores de asma e de tratamento de asma, uso de um kit e kit
BR112016015140A2 (pt) * 2013-12-30 2018-01-23 Epimab Biotherapeutics Inc. imunoglobulina com fabs in-tandem e usos das mesmas
EP3092253B1 (en) 2014-01-10 2021-03-17 AnaptysBio, Inc. Antibodies directed against interleukin-33 (il-33)
ES2762806T3 (es) 2014-02-10 2020-05-25 Respivant Sciences Gmbh Tratamiento utilizando estabilizadores de mastocitos para trastornos sistémicos
AU2015213681B2 (en) 2014-02-10 2020-03-12 Respivant Sciences Gmbh Mast cell stabilizers for lung disease treatment
MX2016010729A (es) 2014-02-21 2016-10-26 Genentech Inc Anticuerpos biespecificos anti-il-13 / il-17 y sus usos.
SI3126383T1 (sl) 2014-04-03 2019-05-31 Igm Biosciences, Inc. Modificirana veriga J
WO2015164716A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 Brown University Methods for the diagnosis and treatment of pulmonary fibrosis in subjects with hermansky pudlak syndrome
USD763433S1 (en) 2014-06-06 2016-08-09 Anutra Medical, Inc. Delivery system cassette
USD774182S1 (en) 2014-06-06 2016-12-13 Anutra Medical, Inc. Anesthetic delivery device
USD750768S1 (en) 2014-06-06 2016-03-01 Anutra Medical, Inc. Fluid administration syringe
US9616114B1 (en) 2014-09-18 2017-04-11 David Gordon Bermudes Modified bacteria having improved pharmacokinetics and tumor colonization enhancing antitumor activity
CN104198694A (zh) * 2014-09-18 2014-12-10 复旦大学附属华山医院 一种诊断试剂盒和使用该诊断试剂盒鉴别结核病与肿瘤的方法
TWI700300B (zh) * 2014-09-26 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體
KR102660362B1 (ko) * 2014-11-17 2024-04-23 아디셋 바이오, 인크. 조작된 감마 델타 t 세포
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
ES2806500T3 (es) 2015-01-20 2021-02-17 Igm Biosciences Inc Moléculas de unión al receptor de la superfamilia de TNF (factor de necrosis tumoral) y usos de las mismas
KR20170127011A (ko) 2015-03-16 2017-11-20 제넨테크, 인크. Il-13을 검출 및 정량화하는 방법 및 th2-연관 질환의 진단 및 치료에서의 용도
ES2886114T3 (es) 2015-03-31 2021-12-16 Medimmune Ltd Una nueva forma de IL33, formas mutadas de IL33, anticuerpos, ensayos y métodos para usar los mismos
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
EP3331522A1 (en) 2015-08-07 2018-06-13 Patara Pharma LLC Methods for the treatment of mast cell related disorders with mast cell stabilizers
US10265296B2 (en) 2015-08-07 2019-04-23 Respivant Sciences Gmbh Methods for the treatment of systemic disorders treatable with mast cell stabilizers, including mast cell related disorders
CN116440279A (zh) 2015-09-17 2023-07-18 伊缪诺金公司 包含抗folr1免疫缀合物的治疗组合
US11639389B2 (en) 2015-09-30 2023-05-02 Igm Biosciences, Inc. Binding molecules with modified J-chain
AU2016329197B2 (en) 2015-09-30 2021-01-21 Igm Biosciences, Inc. Binding molecules with modified J-chain
CN114617962A (zh) * 2016-04-27 2022-06-14 艾伯维公司 使用抗-il-13抗体治疗il-13活性在其中有害的疾病的方法
CA3023993A1 (en) 2016-05-12 2017-11-16 Adicet Bio Inc. Methods for selective expansion of .gamma..delta. t-cell populations and compositions thereof
CN115404196A (zh) 2016-07-13 2022-11-29 哈佛学院院长等 抗原呈递细胞模拟支架及其制备和使用方法
CN110139646A (zh) 2016-08-31 2019-08-16 瑞思皮万特科学有限责任公司 用于治疗由特发性肺纤维化引起的慢性咳嗽的色甘酸组合物
JOP20190055A1 (ar) 2016-09-26 2019-03-24 Merck Sharp & Dohme أجسام مضادة ضد cd27
EP3522983A4 (en) 2016-10-07 2020-06-03 Respivant Sciences GmbH CROMOLYNE-BASED COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF PULMONARY FIBROSIS
US11129906B1 (en) 2016-12-07 2021-09-28 David Gordon Bermudes Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria
US11180535B1 (en) 2016-12-07 2021-11-23 David Gordon Bermudes Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria
US10093731B2 (en) 2017-02-24 2018-10-09 Kindred Biosciences, Inc. Anti-IL31 antibodies for veterinary use
EP3655961A4 (en) * 2017-07-17 2021-09-01 Massachusetts Institute of Technology HEALTHY AND SICK BARRIER TISSUE CELL ATLAS
US11053309B2 (en) 2017-08-04 2021-07-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating active eosinophilic esophagitis
KR20200098518A (ko) 2017-11-15 2020-08-20 아디셋 바이오, 인크. δ3 γδ T-세포 집단의 선택적 증식을 위한 방법 및 이의 조성물
BR112020016172A2 (pt) 2018-02-09 2020-12-15 Genentech, Inc. Métodos de tratamento, métodos para determinar, métodos para selecionar uma terapia, métodos para avaliar uma resposta e monitorar a resposta, kits para identificar um paciente, agentes selecionados, agentes para uso, uso de um agente selecionado e uso de um antagonista
JP7407742B2 (ja) * 2018-05-11 2024-01-04 ハルシオン セラピューティクス インコーポレイテッド Ｇａｓｐ－１顆粒を標的とする結合性タンパク質及びキメラ抗原受容体ｔ細胞並びにそれらの使用
WO2020092015A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 University Of Rochester Therapeutic mitigation of epithelial infection
WO2020102721A1 (en) * 2018-11-16 2020-05-22 Rapa Therapeutics, Llc Immune monitoring of neuro-inflammatory amyotrophic lateral sclerosis (als)
CN116479022A (zh) * 2018-12-12 2023-07-25 中南大学 一种重组car19-il24基因、慢病毒载体、car19-il24-t细胞及应用
GB201820554D0 (en) * 2018-12-17 2019-01-30 Univ Oxford Innovation Ltd BTLA antibodies
CA3129963A1 (en) 2019-03-06 2020-09-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Il-4/il-13 pathway inhibitors for enhanced efficacy in treating cancer
JP2022526738A (ja) 2019-03-21 2022-05-26 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド アレルギーを治療するためのｉｌ－４／ｉｌ－１３経路阻害剤と形質細胞除去の組み合わせ
JP2022530063A (ja) * 2019-04-24 2022-06-27 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗体製剤
KR20230031981A (ko) 2019-05-14 2023-03-07 프로벤션 바이오, 인코포레이티드 제1형 당뇨병을 예방하기 위한 방법 및 조성물
US20220220206A1 (en) * 2019-05-20 2022-07-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treating chronic liver disease
CN113527485B (zh) * 2020-04-17 2024-11-15 湖南麦济生物技术股份有限公司 抗人白细胞介素-4受体α抗体及其制备方法和应用
KR20230092863A (ko) 2020-06-11 2023-06-26 프로벤션 바이오, 인코포레이티드 제1형 당뇨병을 예방하기 위한 방법 및 조성물
CN111803508B (zh) * 2020-08-05 2024-01-19 江苏省中医院 雷公藤内酯醇在制备用于治疗car-t诱发的细胞因子释放综合征的药物上的用途
CN117903303A (zh) * 2020-08-20 2024-04-19 南京融捷康生物科技有限公司 Il-5的结合分子及其应用
CN112067827A (zh) * 2020-11-16 2020-12-11 天津德祥生物技术有限公司 抗体稀释液和包括该抗体稀释液的血型检测卡
KR20240008298A (ko) 2021-03-17 2024-01-18 리셉토스 엘엘씨 항 il-13 항체를 사용한 아토피성 피부염을 치료하는 방법
EP4388006A1 (en) * 2021-08-20 2024-06-26 Intervet International B.V. Homodimer fusion proteins for treating atopic dermatitis
CA3241374A1 (en) 2021-12-30 2023-07-06 Gregory GEBA Methods for attenuating atopic march by administering an il-4/il-13 antagonist
CN119074914A (zh) * 2023-06-05 2024-12-06 北京东方百泰生物科技股份有限公司 一种抗il-11单克隆抗体的药物制剂

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030175261A1 (en) * 1999-12-17 2003-09-18 Dirk Weickmann Pharmaceutical composition comrised of spider venoms, the production thereof , and its use for treating tumor diseases
US20040096452A1 (en) * 1996-05-01 2004-05-20 Denney Dan W. Vaccines for treatment of lymphoma and leukemia
US20050147610A1 (en) * 2003-11-12 2005-07-07 Tariq Ghayur IL-18 binding proteins
US20060063228A1 (en) * 2004-06-09 2006-03-23 Kasaian Marion T Antibodies against human interleukin-13 and uses therefor

Family Cites Families (146)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US938A (en) 1838-09-22 Improvement in paddle-wheels for propelling boats
US225A (en) 1837-06-03 Machine fob
US5258A (en) 1847-08-28 Cooking-stove
US4526A (en) 1846-05-16 Improvement in the mode o
US5780A (en) 1848-09-19 Improvement in preparing shoe-pegs
US498A (en) 1837-12-01 Improvement in mode of constructing saw-cylinders for cotton-gins
ATE37983T1 (de) 1982-04-22 1988-11-15 Ici Plc Mittel mit verzoegerter freigabe.
GB8308235D0 (en) * 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) * 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5128326A (en) 1984-12-06 1992-07-07 Biomatrix, Inc. Drug delivery systems based on hyaluronans derivatives thereof and their salts and methods of producing same
US6492107B1 (en) 1986-11-20 2002-12-10 Stuart Kauffman Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique
DE3590766C2 (zh) 1985-03-30 1991-01-10 Marc Genf/Geneve Ch Ballivet
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US5618920A (en) 1985-11-01 1997-04-08 Xoma Corporation Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
DE3600905A1 (de) 1986-01-15 1987-07-16 Ant Nachrichtentech Verfahren zum dekodieren von binaersignalen sowie viterbi-dekoder und anwendungen
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5225539A (en) * 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
DE3883899T3 (de) * 1987-03-18 1999-04-22 Sb2, Inc., Danville, Calif. Geänderte antikörper.
US5258498A (en) * 1987-05-21 1993-11-02 Creative Biomolecules, Inc. Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins
US4880078A (en) * 1987-06-29 1989-11-14 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Exhaust muffler
EP1026240A3 (en) 1988-09-02 2004-04-07 Dyax Corp. Generation and selection of recombinant varied binding proteins
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
EP0368684B2 (en) 1988-11-11 2004-09-29 Medical Research Council Cloning immunoglobulin variable domain sequences.
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
CA2016841C (en) 1989-05-16 1999-09-21 William D. Huse A method for producing polymers having a preselected activity
EP0478627A4 (en) 1989-05-16 1992-08-19 William D. Huse Co-expression of heteromeric receptors
CA2016842A1 (en) 1989-05-16 1990-11-16 Richard A. Lerner Method for tapping the immunological repertoire
WO1991005548A1 (en) 1989-10-10 1991-05-02 Pitman-Moore, Inc. Sustained release composition for macromolecular proteins
WO1991006287A1 (en) 1989-11-06 1991-05-16 Enzytech, Inc. Protein microspheres and methods of using them
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5780225A (en) 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
AU7247191A (en) 1990-01-11 1991-08-05 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
ATE356869T1 (de) 1990-01-12 2007-04-15 Amgen Fremont Inc Bildung von xenogenen antikörpern
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
AU665190B2 (en) 1990-07-10 1995-12-21 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
WO1992002551A1 (en) 1990-08-02 1992-02-20 B.R. Centre Limited Methods for the production of proteins with a desired function
EP0544809B1 (en) 1990-08-24 1998-12-16 Ixsys, Inc. Methods of synthesizing oligonucleotides with random codons
US5698426A (en) 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
ATE177782T1 (de) 1990-12-20 1999-04-15 Ixsys Inc Optimierung von bindenden proteinen
EP1279731B1 (en) 1991-03-01 2007-05-30 Dyax Corporation Process for the development of binding mini-proteins
EP0506574B1 (fr) * 1991-03-29 1995-11-29 Sanofi Protéine à activité de type cytokine, ADN recombinant codant pour cette protéine, cellules et microorganismes transformés
EP0580737B1 (en) 1991-04-10 2004-06-16 The Scripps Research Institute Heterodimeric receptor libraries using phagemids
ATE221379T1 (de) 1991-05-01 2002-08-15 Jackson H M Found Military Med Verfahren zur behandlung infektiöser respiratorischer erkrankungen
EP0519596B1 (en) 1991-05-17 2005-02-23 Merck & Co. Inc. A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains
WO1992022324A1 (en) 1991-06-14 1992-12-23 Xoma Corporation Microbially-produced antibody fragments and their conjugates
DE4122599C2 (de) 1991-07-08 1993-11-11 Deutsches Krebsforsch Phagemid zum Screenen von Antikörpern
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
CA2119930C (en) 1991-09-23 2002-10-01 Hendricus R. J. M. Hoogenboom Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
WO1993011236A1 (en) 1991-12-02 1993-06-10 Medical Research Council Production of anti-self antibodies from antibody segment repertoires and displayed on phage
ATE249840T1 (de) 1991-12-13 2003-10-15 Xoma Corp Verfahren und materialien zur herstellung von modifizierten variablen antikörperdomänen und ihre therapeutische verwendung
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
US5912015A (en) 1992-03-12 1999-06-15 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Modulated release from biocompatible polymers
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
JPH07509137A (ja) 1992-07-24 1995-10-12 セル　ジェネシス，インク． 異種抗体の生産
CN1085953A (zh) * 1992-08-21 1994-04-27 先灵公司 人白细胞介素13
AU5010793A (en) 1992-08-21 1994-03-15 Schering Corporation Human interleukin-13
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
US5934272A (en) 1993-01-29 1999-08-10 Aradigm Corporation Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug
AU6132994A (en) 1993-02-02 1994-08-29 Scripps Research Institute, The Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains
JPH09506262A (ja) 1993-12-08 1997-06-24 ジェンザイム・コーポレイション 特異的抗体の製造方法
ES2201097T3 (es) 1994-01-31 2004-03-16 Trustees Of Boston University Bibliotecas de anticuerpos policlonales.
US5516637A (en) 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
DE69630514D1 (de) 1995-01-05 2003-12-04 Univ Michigan Oberflächen-modifizierte nanopartikel und verfahren für ihre herstellung und verwendung
US6130364A (en) 1995-03-29 2000-10-10 Abgenix, Inc. Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination
US6091001A (en) 1995-03-29 2000-07-18 Abgenix, Inc. Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination
US6019968A (en) * 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
JPH11503914A (ja) 1995-04-21 1999-04-06 セル ジェネシス，インコーポレイテッド 大ゲノムｄｎａ欠失の生成
KR100654645B1 (ko) 1995-04-27 2007-04-04 아브게닉스, 인크. 면역화된 제노마우스 유래의 인간 항체
WO1996034096A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6127977A (en) 1996-11-08 2000-10-03 Cohen; Nathan Microstrip patch antenna with fractal structure
EP0850051A2 (en) 1995-08-31 1998-07-01 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Composition for sustained release of an agent
US6331431B1 (en) 1995-11-28 2001-12-18 Ixsys, Inc. Vacuum device and method for isolating periplasmic fraction from cells
JP2978435B2 (ja) 1996-01-24 1999-11-15 チッソ株式会社 アクリロキシプロピルシランの製造方法
CZ292465B6 (cs) 1996-02-09 2003-09-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Lidské protilátky k lidskému TNFalfa
US6664227B1 (en) * 1996-03-01 2003-12-16 Genetics Institute, Llc Treatment of fibrosis by antagonism of IL-13 and IL-13 receptor chains
US5985320A (en) 1996-03-04 1999-11-16 The Penn State Research Foundation Materials and methods for enhancing cellular internalization
US5714352A (en) 1996-03-20 1998-02-03 Xenotech Incorporated Directed switch-mediated DNA recombination
US5874064A (en) 1996-05-24 1999-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery
US5855913A (en) * 1997-01-16 1999-01-05 Massachusetts Instite Of Technology Particles incorporating surfactants for pulmonary drug delivery
US5985309A (en) 1996-05-24 1999-11-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of particles for inhalation
US6699658B1 (en) 1996-05-31 2004-03-02 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Yeast cell surface display of proteins and uses thereof
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
EP2314625B1 (en) 1996-12-03 2014-05-07 Amgen Fremont Inc. Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and Vkappa regions and antibodies produced therefrom
ES2236832T3 (es) 1997-01-16 2005-07-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparacion de particulas para inhalacion.
KR100566859B1 (ko) 1997-01-21 2006-04-03 제너럴 하스피톨 코포레이션 Ｒｎａ-단백질 융합물을 이용한 단백질의 선별
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
WO1999006834A2 (en) 1997-08-04 1999-02-11 Ixsys, Incorporated Methods for identifying ligand specific binding molecules
US5989463A (en) * 1997-09-24 1999-11-23 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Methods for fabricating polymer-based controlled release devices
SE512663C2 (sv) 1997-10-23 2000-04-17 Biogram Ab Inkapslingsförfarande för aktiv substans i en bionedbrytbar polymer
JP2002505097A (ja) 1998-03-03 2002-02-19 アブジェニックス インク． 治療薬としてのｃｄ１４７結合分子
US20020029391A1 (en) 1998-04-15 2002-03-07 Claude Geoffrey Davis Epitope-driven human antibody production and gene expression profiling
AU3657899A (en) 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
AU747231B2 (en) 1998-06-24 2002-05-09 Alkermes, Inc. Large porous particles emitted from an inhaler
CA2341029A1 (en) 1998-08-17 2000-02-24 Abgenix, Inc. Generation of modified molecules with increased serum half-lives
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
WO2000037504A2 (en) 1998-12-23 2000-06-29 Pfizer Inc. Human monoclonal antibodies to ctla-4
AU2750800A (en) * 1999-02-01 2000-08-18 Amgen Canada Inc. Materials and methods to inhibit hodgkin and reed sternberg cell growth
SI2168984T1 (sl) 1999-03-25 2012-12-31 Abbott Gmbh & Co. Kg Človeška protitelesa za vezavo IL-12 in postopki izdelave
EP1914244B1 (en) 1999-04-09 2013-05-29 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method of modulating the activity of functional immune molecules
WO2001083525A2 (en) 2000-05-03 2001-11-08 Amgen Inc. Modified peptides, comprising an fc domain, as therapeutic agents
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
ATE440959T1 (de) 2000-06-28 2009-09-15 Glycofi Inc Verfahren für die herstellung modifizierter glykoproteine
DE60135481D1 (de) 2000-10-20 2008-10-02 Genetics Inst Verwendung von il-13 inhibitoren zur behandlung von tumoren
AU2002256971B2 (en) 2000-12-28 2008-04-03 Altus Pharmaceuticals Inc. Crystals of whole antibodies and fragments thereof and methods for making and using them
EP1402451A4 (en) 2001-06-07 2005-01-05 Wyeth Corp SOLUTION STRUCTURE OF IL-13 AND USE THEREOF
WO2003016466A2 (en) 2001-08-17 2003-02-27 Eli Lilly And Company ANTI-Aβ ANTIBODIES
ES2276735T3 (es) 2001-09-14 2007-07-01 Affimed Therapeutics Ag Anticuerpos fv multimericos de cadena sencilla en tandem.
JP4578098B2 (ja) 2001-10-01 2010-11-10 ダイアックス、コープ 多重鎖真核ディスプレイベクターとその使用
PL368989A1 (en) * 2001-10-02 2005-04-04 Novo Nordisk A/S Human tissue factor antibodies
JP2005522986A (ja) * 2001-10-19 2005-08-04 ジェネンテック・インコーポレーテッド 炎症性腸疾患の診断と治療のための組成物と方法
US20030157108A1 (en) 2001-10-25 2003-08-21 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
AU2003223497A1 (en) * 2002-04-05 2003-10-27 Centocor, Inc. Asthma-related anti-il-13 immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses
AUPS194902A0 (en) 2002-04-24 2002-06-06 Atheromastat Pty Ltd Compositions and methods for diagnosis and treatment of cardiovascular disorders
DE60239566D1 (de) * 2002-06-14 2011-05-05 Brigham And Women S Hospital Boston Verfahren zur behandlung und prävention von kolitis, an der il-13 und nk-t zellen beteiligt sind
MXPA05004512A (es) * 2002-10-30 2005-07-26 Genentech Inc Inhibicion de la produccion de il-17.
SG177008A1 (en) 2003-03-05 2012-01-30 Halozyme Inc Soluble hyaluronidase glycoprotein (shasegp), process for preparing the same, uses and pharmaceutical compositions comprising thereof
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
AU2004242846A1 (en) 2003-05-31 2004-12-09 Micromet Ag Pharmaceutical compositions comprising bispecific anti-CD3, anti-CD19 antibody constructs for the treatment of B-cell related disorders
GB0407315D0 (en) 2003-07-15 2004-05-05 Cambridge Antibody Tech Human antibody molecules
EP1660534A2 (en) 2003-08-22 2006-05-31 MedImmune, Inc. Humanization of antibodies
KR20150064250A (ko) * 2003-12-23 2015-06-10 제넨테크, 인크. 신규 항-ｉｌ１３ 항체 및 그 용도
CA2557724A1 (en) * 2004-02-27 2005-10-06 Centocor, Inc. Methods and compositions for treating il-13 related pathologies
US7410781B2 (en) 2004-02-27 2008-08-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. IL-4/IL-13 specific polypeptides and therapeutic uses thereof
AU2005233387B2 (en) 2004-04-15 2011-05-26 Glycofi, Inc. Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes
FR2869909B1 (fr) 2004-05-04 2007-12-21 Univ Angers Peptide capable d'inhiber la polymerisation de la tubuline et son utilisation pour inhiber la proliferation cellulaire
US7501121B2 (en) * 2004-06-17 2009-03-10 Wyeth IL-13 binding agents
TWI307630B (en) * 2004-07-01 2009-03-21 Glaxo Group Ltd Immunoglobulins
PT1773885E (pt) * 2004-08-05 2010-07-21 Genentech Inc Antagonistas anti-cmet humanizados
TWI309240B (en) * 2004-09-17 2009-05-01 Hoffmann La Roche Anti-ox40l antibodies
MX2007005866A (es) * 2004-11-17 2007-11-12 Amgen Inc Anticuerpos monoclonales totalmente humanos para il-13.
JP2006189538A (ja) 2005-01-04 2006-07-20 Sharp Corp 照明光学系、投射型表示装置
JP4465469B2 (ja) * 2005-02-21 2010-05-19 国立大学法人佐賀大学 循環器病マーカーとしてのインターロイキン１３
WO2006124451A2 (en) * 2005-05-11 2006-11-23 Centocor, Inc. Anti-il-13 antibodies, compositions, methods and uses
TW200745332A (en) 2005-07-21 2007-12-16 Abbott Lab Multiple gene expression including sorf constructs and methods with polyproteins, pro-proteins, and proteolysis
EP2532679B1 (en) 2005-10-21 2017-04-12 Novartis AG Human antibodies against il13 and therapeutic uses
TWI496790B (zh) * 2006-09-08 2015-08-21 艾伯維巴哈馬有限公司 介白素-１３結合蛋白質
JP5470817B2 (ja) 2008-03-10 2014-04-16 日産自動車株式会社 電池用電極およびこれを用いた電池、並びにその製造方法
JP6136279B2 (ja) 2013-01-15 2017-05-31 株式会社ジェイテクト 転がり軸受装置
TWI503850B (zh) 2013-03-22 2015-10-11 Polytronics Technology Corp 過電流保護元件
TWI510996B (zh) 2013-10-03 2015-12-01 Acer Inc 控制觸控面板的方法以及使用該方法的可攜式電腦
US9816280B1 (en) 2016-11-02 2017-11-14 Matthew Reitnauer Portable floor

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040096452A1 (en) * 1996-05-01 2004-05-20 Denney Dan W. Vaccines for treatment of lymphoma and leukemia
US20030175261A1 (en) * 1999-12-17 2003-09-18 Dirk Weickmann Pharmaceutical composition comrised of spider venoms, the production thereof , and its use for treating tumor diseases
US20050147610A1 (en) * 2003-11-12 2005-07-07 Tariq Ghayur IL-18 binding proteins
US20060063228A1 (en) * 2004-06-09 2006-03-23 Kasaian Marion T Antibodies against human interleukin-13 and uses therefor

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EP3339445B1 (en) 2020-07-15
US20140099313A1 (en) 2014-04-10
KR20150056666A (ko) 2015-05-26
US20110165066A1 (en) 2011-07-07
SG174782A1 (en) 2011-10-28
RU2472807C2 (ru) 2013-01-20
MY188368A (en) 2021-12-06
CY1123752T1 (el) 2022-03-24

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