TWI282335B

TWI282335B - A61k 31/437 200601 a i vhtw a61p 31/04 200601 a i vhtw

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Publication number: TWI282335B
Application number: TWGYRASEINA
Authority: TW
Original assignee: 13 2003 00 00 0
Priority date: 2002-06-13
Filing date: 2003-06-13
Publication date: 2007-06-11
Also published as: JP2005533061A; US20100105701A1; IL165715A; DE60309701D1; MXPA04012628A; ES2277088T3; EP1511482B1; CA2489128C; AU2003245442A1; US20110104207A1; IL165715A0; US7727992B2; TW200404785A; JP4489586B2; KR20050009748A; RU2005100516A; CA2489128A1; ATE345132T1; US8426426B2; AU2003245442B2

Description

1282335 玖、發明說明：【發明所屬之技術領域】本申請案專利範圍優先於2〇〇2年6月13日列檔之美國臨時專利申請案60/388,665及2002年11月26日列檔之美國臨時專利申請案60/429,077,該等申請案内容一併併入本專利說明書參考。本發明係屬醫樂化學領域，其係關於可抑制細菌旋轉酶及 /或Topo IV之化合物或其醫藥組合物，該化合物可作為細菌旋轉酶及/或Τορο IV活性之抑制劑，本發明亦關於治療哺乳動物細菌感染之方法，及降低生物樣品中細菌數量之方法。【先前技術】細菌對抗生素之抗性已久為所知，此如今已為全球一個嚴重的健康問題。因為抗藥性，因此難以用抗生素治療某些細菌感染或甚至無法治療，此問題已隨著近來某些菌株（諸如，肺炎鏈球菌（SP)、肺結核桿菌及腸球菌）中所產生的多重抗藥性而益發嚴重。萬古黴素抗藥性腸球菌的出現特別令人感到擔心，因為萬古黴素是從前治療此感染唯一有效的抗生素，且被認為是許多感染的“最後憑藉，，的藥物。雖然許多其他抗藥性細菌不會產生威脅生命的疾病，諸如腸球菌，但令人擔心的是謗發抗藥性基因可能會傳播到更為致命生物體中，諸如金黃葡萄球菌，此細菌對甲氧苯 (methicillin)的抗藥性已相當的普遍，（迪克樂（以^等人，抗感染研究藥物之最新觀念，1999，丨，1 ;立威（Lay) “抗生素抗藥性之挑戰”，科學美國雜誌，三月，1998)。， 85918.doc 1282335 其他令人關切的事情是抗生素抗藥性的傳播有多快，例如，I960年代SP均對盤林西靈敏感，在1987年時，美國SP 菌株中只有0.02%為抗藥性，然而，到了 1995年則有報告指出，SP對盤林西靈的抗藥性約為百分之七，在美國某些部分則高達30%(路易士（Lewis)，FDA消費雜誌（1995年9月）；高許曼（Gershman)在醫藥報告雜諕之報告，1997)。明確言之，醫院是抗藥性生物體形成及傳播的中心。發生在醫院的感染稱之為院内感染，業已為日益嚴重的問題。每年有兩百萬的美國人在醫院感染，這些感染中有一半以上的人至少對一種抗生素有抗藥性。疾病管制中心在 1992年報告指出，超過13,000位醫院病患死於對所治療用的抗生素有抗藥性之細菌感染（路易士，“抗生素抗藥性感染的升高”，FDA消費者雜誌，9月，1995)。鑒於有需要克服抗藥性細菌及克服現行可用藥劑失效率的增加，開發新穎的抗生素再度引起大家的注意。其中一種發展新穎抗生素的引人關注之策略是抑制DNA旋轉酶，該酵素是DNA複製作用時所需要的細菌酵素，因此，該酵素是細菌細胞生長及分裂所需的。旋轉酶活性也與DNA轉錄作用、修復及重組作用有關。旋轉酶是一種拓樸異構酶，這是一群可以催化DNA拓樸異構物間相互轉換的酵素（參考，可伯格（Kornberg)及貝克 (Baker)，DNA複製.第二版，第12章，1992，W. Η·福利曼 (Freeman)及可（Co);得立卡（Drlica)，分子微生物學，1992, 6, 425 ;得立卡及蔡（Zhao)，微生物及分子生物總論，1997, 85918.doc 1282335 61，377)。旋轉酶本身控制DNA超螺旋，並纾解因母股DNA 在複製過程中鬆開時所造成的拓樸結構壓力。旋轉酶亦可將鬆解封閉之環狀雙股DNA催化轉換成負性超螺旋形式，此可更有利重組作用。超螺旋反應的機制涉及旋轉酶圍繞在DNA區域、切開該區域之雙股DNA、將另個區域的DNA 通過該切開處，並再將切開的DNA股接合起來等步驟，此一切割機制是第Π型拓樸異構酶的特性。ATP鍵結至旋轉酶會驅動超螺旋反應，而後ATP在反應期間會水解，此ATP 鍵結及其後的水解作用會改變旋轉酶活性必要的DNA-鍵結旋轉酶結構。咸已發現D N A超螺旋（或鬆解）的程度是根據 ATP/ADP的比例而定，缺乏ATP時，旋轉酶只能夠紆緩超螺旋 DNA。細菌DNA旋轉酶是一種400千道爾頓蛋白質四體，其是由兩個A(GyrA)及兩個B (GyrB)次單位體所組成的。鍵結及切割DNA與GyrA有關，反之GyrB蛋白質則與ATP鍵結及水解有關。GyrB係由具有ATP酶活性之胺基端區域及可與GyrA 及DNA交相反應的羧基端區域所構成的，相反的，真核生物第Π型拓樸異構酶是同雙體，其可鬆解負性及正性的超螺旋，但是不能引發產生負性超螺旋。理想的狀況是，此酵素對以抑制細菌DNA旋轉酶為基礎之抗生素具有選擇性，且對真核生物第II型樸異構酶相當不活性。廣泛使用的p奎諾酮（quinolone)抗生素可抑制細菌DNA旋轉酶，喳諾酮的實例包括早期的化合物（諸如萘啶酸及歐索林酸）及後期更具有效力的氟喹諾酮（諸如諾氟沙星 85918.doc 1282335 (norfloxacin)、環丙沙星（ciprofloxacin)及曲伐沙星(trovafloxacin)) 。這些化合物會鍵結至GyrA並穩定所切開的複合物，因此可以抑制整個旋轉酶的功能，而導致細胞死亡。然而，抗藥性已被認為是這類化合物的一個問題（WHO報告，“喳諾酮在食品動物上的用途及對人類健康上可能的影響”， 1998)。4：諾酮與其它類的抗生素一樣，接觸到早期化合物的細菌常常很快地發展產生出對同類更有效化合物之交錯抗性。很少有已知的抑制劑可以鍵結至GyrB，實例包括香豆素 (coumarins)、諾伯黴素（novobiocin)及古莫黴素 A1 (coumermycin A1)、環硫立啶（cyclothialidine)、西諾咬（cinodine)及克勒西啶（clerocidin)。香豆素已証明與GyrB的鍵結非常緊密，例如，諾伯黴素會與蛋白質形成氫鍵網及數個疏水接觸面，雖然諾伯黴素及ATP會鍵結在ATP鍵結位置，然而這兩個化合物鍵結甚少重疊，重疊的部分是諾伯黴素的糖單位及ATP 腺誓（麥克斯威爾（Maxwell),微生物學趨勢，1997, 5，102)。以抗香豆素的細菌而言，最常發生的點突變是可鍵結到香豆素環上羰基之表面精胺酸殘基（大腸桿菌GyrB中的 Argl 3 6)，雖然經此突變作用的酵素顯示具有較低的超螺旋及ATP酶活性，香豆素藥物對其抑制作用亦有較低的敏感度（麥克斯威爾，分子微生物學，1993,9,681)。雖然香豆素是有效的旋轉酶超螺旋抑制劑，但卻不常作為抗生素之用，因為其在細菌中具有低穿透性、對真核細胞具有毒性，且低水溶解度等特性，所以這些化合物並不 85918.doc -9- 1282335 適用（麥克斯威爾，微生物學趨勢，1997, 5, 102)。咸欲開發一種可以克服這些缺點之有效GyrB抑制劑，此種抑制劑為引人注意的抗生素候選物，但不會具有困擾其他抗生素之抗藥性問題。複製叉沿著環狀DNA移動時會在複製複合物的前面及已經複製好的區域的後面產生拓樸結構的改變（強普克斯 (Champoux)，J· J·，生物化學年刊，2001，70，369-413)。雖然 DNA旋轉酶會導入負性超螺旋，以彌補複製叉前面的拓樸結構壓力，但是某些過度的扭轉會擴展到前已複製好的 DNA區域，而造成前環連體構造。如果沒有去除，在複製作用終了時，所存在的前環連體構造會產生内部的連結（環連化）子分子。Topo IV即是負責將環連化之子質體分開，及去除複製期間所形成的前環連體構造，最後將子分子分配到子細胞中。Topo IV是由兩個ParC及兩個parE次單位體所構成的C2E2四體（其中C及E單體與旋轉酶的A及B單體相似），其需要ATP水解作用（在E次單位體的N-端）以重整酵素，使其再次進入催化週期。Topo IV在細菌中高度保守，而且是細菌複製作用所必須的（得立卡及蔡，微生物學分子生物學總論，1997, 61，377)。雖然對於以Topo IV ParE為標的之抑制劑甚少引起注意，但是較新穎喳諾酮對ParC區域的作用已廣泛地研究中（何普（Hooper)，D· C·，臨床感染疾病，2000, 31 (補充 2) : S24-28)。咸已註明莫西沙星（moxifloxacin)及加替沙星 (gatifloxacin)對旋轉酶及Topo IV具有更平衡的活性，因而 85918.doc -10- 1282335 可擴展到革蘭氏陽性菌範圍，且主要標的突變作用會產生較低程度的抗藥性。在這些例子中，因感受性受到抗菌劑另一個標的之敏感度限制，因此，有效抑制多重基本標的之藥劑會產生較廣範圍的效力、增進抗菌的效力，增進抗單一標的突變菌株的效力及/或降低自然抗藥性的速率。因為細菌對抗生素的抗藥性已成為一個重要的公共健康問題’因此，必須持續發展出更新及更有效的抗生素，更明確言之，有必要發展前未用以治療細菌感染的新穎化合物’此化合物特別可用以治療抗藥性細菌的形成及傳播已日益增加之醫院中所發生的院内感染。【發明内容】咸已發現本發明化合物及其醫藥上可接受之組合物為有效的旋轉酶及/或TopoIV2抑制劑。這些化合物為通式ι: R1

R2

HN >〇

Q

I 或其醫樂上可接受之鹽類，其中X、Q、W、Rl、r2&r3定義如下。這些化合物及其醫藥上可接受之組合物可用以治療或舒缓細菌感染的嚴重性，明確言之，本發明化合物可用以治療尿通感染、肺炎、前列腺炎、皮膚及軟組織感染、腹部内感染或發燒性中性白血球缺少症病患之感染。 85918.doc -11- 1282335 【實施方式】本發明係關於式I化合物： R1

HN >=〇 Q R2 R3 或其醫藥上可接受之鹽類，其中： Q為-CH2_、_ΝΗ·或 _0; W選自於氮或C-R4 ; X選自於CH或CF ; R1為具有1·3個獨立選自於氧、氮或硫雜原子之5_6員芳基環，其中： R1經0-3個獨立選自於R、氧基、c〇2R，、〇R,、n(r，)2、 SR’、NO〗、# 素、CN、C(0)N(R，)2、NR，C(0)R，、S02R， ' S〇2N(R’)2或nr，so2r，之基團取代；每個R’獨立選自於氫、cle4脂肪族，或具有〇-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、未飽和環或芳基環，其中： R1為經0_3個獨立選自於鹵素、氧基、r〇、n(R0)2、〇R〇、co2rg、nrgc(0)r°、c(0)n(rg)2、so2r°、so2n(r〇)2 或nrgso2rg之基團取代；每個RG為獨立選自於氫或Cw脂肪族； R2為選自於氫或Cw脂肪族基團； 85918.doc -12- 1282335 R3為選自於 C(0)NHR、C(0)N(R)2、CH(O)、C(0)R、C02R 、C(0)C(0)N(R2)R、S02R、S02N(R)2、S02NHR、 C(R，)=NOR、C(R’)=NOH、C(R，)=NR、C(R，)=N-N(R2)R 、NO或 N02 ; 每個R為獨立選自於丁-人1'或(：1-6脂肪族基團，其中：該Cu脂肪族基團經0-3個獨立選自於R’、氧基、C02R’ 、OR，、N(Rf)2、SR，、N02、鹵素、CN、C(0)N(R，)2 、NR’C(0)R，、S02R，、S02N(R，)2或 NR，S02R，之基團取代； T為（CH2)y，其中y為0、1或2 ;

Ar選自於： (a) 3-8員飽和環、未飽和環或芳基環； (b) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之3-7員雜環 ;或 (c) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜芳基環，其中：

Ar經0-3個獨立選自於Rf、氧基、C02R’、OR’、N(R’)2 、SR’、NO]、_ 素、CN、C(0)N(R；)2、NR，C(0)R，、S02R’、S02N(R’)2或NR’S02R’之基團取代；及 R4為選自於氫、氟或OCH3。除非另有所指，本專利說明書係採用下列定義。本專利說明書“視情況經取代”一詞與“經取代或未經取代”一詞可交互使用。除非另有所指，視情況經取代基團在基團之每個可取代的位置有一取代基，且每一取代彼此無 85918.doc -13- 1282335 關。本專利說明書月旨肪族”或“脂肪族基圏，，係指直鏈或具支鍵Cl.C8錢鏈’其為完全飽和或含有-或多個未飽和單位或為全飽和或含有—或多個未飽和單位，但非芳香族之單環C3-C8碳氫化合物或雙環C8_Ci2碳氫化合物（本專利說明書將其稱為“碳環”或“我基，’），其具有—個與其他分子連接的單點，其中雙環上的個別環為3U如，適當的脂肪族包括（但不侷限於）直鏈或具支鏈縣、烯基、块基及其混合m如（縣基）職、（料基）縣基）烯基。 “燒基”、“燒氧基，’、“經基燒基，，、“燒氧基燒基，，及“燒氧基幾基，’可單獨使用，或為包括_至十二個碳原子之直鍵及具支鏈較大部分中的一部分。“埽基”及“炔基，，可單獨使用 ’或為包括-至十二個碳原子之直鏈及具支鏈較大部分中的一部分。雜原子係才曰氮、氧或硫，及包括任何氮及硫之氧化形式，及任㈣性氮的四級化形式m”包括雜環上的可經取代I ’舉例而言，具有G_3個選自t、硫或氮雜原子《飽和環或部分未飽和環上，氮可以是N (如3，4·二氯抓峨略基）、NH (如响略症基）或顺+(如N_取代㈣唉基卜、本專利說明書所用“未飽和，，係指具有—或多個未飽和單位之部分，及包括芳基環。 — 万基可單獨使用，或為如“芳烷基，，、“芳烷氧基，，戋 “芳基氧燒基”中較大部分之一部分，其係指具有總量為5至 85918.doc -14- 1282335 14環員之單環、雙環及三严為芳香性，φ 衣*、統，其中系統中至少一個環與“芳基環，，可六衣。有3至7個裱貝。“芳基” 尸人互使用，“芳其，系統。土斫扣下又足義之雜芳基環本專利說明書中所用“雜“六者S S U4 ^基或“雜環性，，係指具有5至14個環員之非芳时成 ^ - 早裱、雙環或三環系統，其個環員。 /、肀系、，无中的母個裱含有3至7 :::可單獨使用’或為如“雜芳烷基，’、“雜芳基烷氧大邵分之一部分，其係指具有總量為5至14環員之早壤、、雙環及三環隸，其中系財至少—個環為芳香性 :系統中至卜個環含有—或多個雜原子，且其中系統中每個環含有3至7個環員。“雜芳基，，與“雜芳基環，，或“雜芳香性”可交互使用。取代基或變數的組合是允許的，只要此組合能產生穩定或化學性適當的化合物即可。所謂穩定化合物或化學性適當化合物是指在沒有溼度或其他化學反應性條件下，當保持在40 C或更低溫度下，而未產生實質上變化至少一週者。熟識技藝者咸欲明白本發明某些化合物存在著互變異構物形式，所有此種的化合物之互變異構物形式均屬本發明範田壽。除非另有所指’本專利說明書所示的結構亦指包括所有結構式的立體化學形式，換言之，每個非對稱中心的R&s 結構形。因此，本發明化合物單一立體化學異構物及鏡像 85918.doc -15- 1282335 異構物及非鏡像異構物混合物均屬本發明範4。除非另有所指’本專利說明書所示之結構式亦指包括只是含有一或多個放射性原子之不同化合物’例如，除了以氛或氮取代氫’或以強化碳取代碳原子外，餘者均如本發明結構之化合物，這些化合物均屬本發明範缚。此種化合物例如可作為分析工具或作為生物分析的探針之用。根據-個具體實例，本發明係關於其中⑽.之式地合物。根據另一個具體實例’本發明係關於其中从_〇_之式此合物。根據另一個具體實例，本發明係關於其中卩為<^_之式工化合物。式I中較佳的R1基團選自於視情況經取代苯基或具有個氮之5-6員雜芳基環。式j中更佳的…基團選自於視情況經取代吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶—‘基、嘧啶基、嘧啶基、嘧啶-5-基、咪唑-1-基、咪唑_2_基、咪唑_4_基或咪唑_5_ 基。式I中最佳的R1基團選自於視情況經取代吡啶基、哺淀-4-基、喊矣-5-基或咪吐-1-基。根據另一個具體實例R1為吡啶酮環，更佳者，R1為4_p比淀酉同。式I中R1上當有取代基時，較佳選自於鹵素、氧基、R、 C02R，、OR，、N(R，)2、SR，、C(0)N(R，)2、NR，C(0)R-、S〇2R，、S02N(R，)2或NR’S02R，。當R1以T_Ar取代時，較佳的取代基包括其中Ar為視情況經選自於具有1-3個獨立選自於氮 85918.doc -16- 1282335 、氧或硫雜原子之5-6員雜環，或具有〇-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員芳基環取代者。式I中Ri上當有取代基，更佳選自於氧基、氟、氯、N(CH3)2、NHCH2CH3、NH-環丙基、NH2、NHC(0)CH3、C(0)NH環丙基、甲基、乙基、第三-丁基、異丁基、環丙基、異丙基、CH2苯基、ch2 吨匕淀 _2_基、CH2^s 淀-3-基、CH2峨淀·4·基、OH、〇CH3、 OCH2CH3、OCH2苯基、OCIV比淀_3·基、CH2六氫P比啶基、 CH2環丙基或 CH2CH2OCH3。當式I的R1上兩個取代基處於鄰近位置時，可一起組合形成與R1融合之視情況經取代環，因此所形成的較佳環為具有0-2個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、部分未飽和環或芳基環。與Ri融合之更佳環選自於具有兩個氡之5-員飽和環，或具有兩個氧之6-員飽和環。與…融合之環上較佳的取代基為鹵素，更佳者為氟。式I中較佳R2基團選自於甲基、乙基、異丙基或環丙基。式I中更佳R2基團為甲基、環丙基或乙基。更佳者，式工之 R為乙基。式I中較佳R3基團選自於c(〇)NHR、c(〇)R、c(r)=n〇r、 C(R)=NOH 或 CQ2R，其中：每個R為獨立選自於視情況經取代Cm脂肪基團或，其中： Τ為（CH2)y，其中y為〇、i或2 ;及

Ar為選自於5-6員飽和環、未飽和環或芳基環、具有卜2 個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜環，或具 85918.doc -17· 1282335 有1-2個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5_6員雜芳基環之視情況經取代環。式I中更佳R3基團選自於C(0)NHR、C(〇)R、C⑻ C(R)=NOH或 C02R，其中：每個R為獨立選自於視情況經取代Cw脂肪基團或T_Ar，其中：該Cm脂肪基團經〇-2個獨立選自於鹵素、〇R，或n(r，)2 之基團取代； T為（CH2)y，其中y為0、1或2 ;

Ar為選自於吡咯啶基、呋喃基、嘧唑基、四氫咬喃基、嘧啶基、吡畊基、吡啶基、六氫吡啶基、咪唑基、嗒井基、異噚唑基、吡唑基、四氫吡喃基或環戊晞，其中：

Ar經0-2個獨立選自於R’、氧基、〇R，或n(R，)2之基團取代；式 I 中更佳 R3 選自於 C02CH3、C(R)=NOR、C(R)=NOH 或 C(0)NHR，其中每個R獨立選自於下列基團：環丙基、 CH2CH2(1-甲基吡咯啶-2-基）、CH2(1-乙基吡咯啶-2·基）、 CH2CH2吡咯啶-1-基、CH2呋喃-2-基、嘧唑-2-基、（：112四氫吱喃_2·基、喊淀_2_基、基、CH2^^-2-基、p比淀-3-基、吡啶-4-基、CH(CH3)CH2OCH3、CH2CF3、CH2CH3、 CH2CH2N(CH2CH3)2、CH2CH2N(CH3)2、CH2CH2OCH3、 CH2CeCH、CH2環丙基、1_乙基六氫吡啶-3-基、 CH(CH2CH3)CH2OCH3、CH(CH3)CH2OCH3、二氫-呋喃-2-酮 85918.doc -18- 1282335 -3-基、1-甲基-1，5-二氫-咪唑_4_酮_2•基、嗒畊_4_基、咪唑 -2-基、3H-吡哫·4_酮-2_基、嘧啶基、環戊烯_4_基、卜甲基咪唑-2-基、四氫吡喃基、Ch2(3_甲基_異嘮唑冬基）或 CH2(1，3-二甲基·峨吐·5-基）。根據另一個具體貫例，R3較佳為C(R户n〇r或c(r)=n〇h。根據另一個具體實例，R3較佳為c(〇)R。較佳者，式I之R4為氫或氟。更佳者，式〗之&4為氫。本發明化合物係為PCT/US 〇1/48855中所揭示之化合物群。然而，中請者業已發現具有上述定義之r3部分可提供令人驚訝及意想不到增加酵素及抗微生物的效價。根據一個較佳的具體實例，本發明細關於式Π4Π,之化合物：

II ΙΓ 或其醫藥上可接受之鹽類’其中Rw定義如前所述，而環A經0_2個獨立選自於N(R，)2、〇R，、料处，之基團取代。式II及Π，中較佳R2及R3基團為前述式J中所述=。根據另-練佳具體實例，本發明係關於如化合物·· 〆 85918.doc 19- 1282335

III ΙΙΓ 或其醫藥上可接受之鹽類，其中R2及3 一 /、丁汉及R疋義如前所述，而環B視情況經〇_2個獨立選自於尺或备

、汉或虱基心基團取代，其中R 較佳為氫或視情況經N(RG)2取代之Ci_3脂肪族。式m及m，中較佳r2及r3基團為前述式^斤述者。根據另-個具體實例，本發明係關於式叫化合物：

Μ III-a 或其醫藥上可接受之鹽類，其中r、r3定義如前所述，而所示W酮環經〇_2個獨立選自W素、氧基、R、c〇2R，、OR’、N(R’)2、SR，、C(0)N(R，)2、NR,C(0)R,、s〇2R,、s〇2N(R)2 或NR’S02R’之基團取代。式III-a中較佳R2及R3基團為前述式I中所述者。式III-a中吡啶酮環較佳的取代基為前述式1中]^上較佳之 85918.doc -20- 1282335 取代基。根據-個具體實例，本發明係關於其中q為權之式m_a 化合物。根據另一個具體實例，本發明係關於其中Q為-0-之式 Ill-a化合物。根據另一個具體實例’本發明係關於其中Q為-CH2-之式Ϊ 化合物。根據另-個具體實例，本發明係關於式则化合物：

Μ III_b 或其醫藥上可接受之鹽類，其中R、R2&R3定義如前所述。式ΙΙΙ-b中較佳R2基團為前述式I中所述之R2基團者。式ΙΙΙ-b中較佳R基團為前述式I中所述之r3基團者。式m-b中吡啶酮環上較佳R取代基選自於T_Ar，其中為選自於具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫之雜原子之5_6 員雜環、或具有0-3個獨立選自於氮、氧或硫之雜原子之5_6 員芳基環之視情況經取代環。較佳的ΑΓ為苯基或峨淀基，式ΙΙΙ-b中吡啶酮環上更佳R取代基選自於甲基、乙基、第三 -丁基、異丁基、環丙基、異丙基、CIi2苯基、CH2吡啶_3_ 85918.doc -21 - 1282335 基、ch2六氫吡啶基、ch2環丙基或CH2CH2OCH3。根據一個具體實例，本發明係關於其中Q為_NH_之式III-b 化合物。根據另一個具體實例，本發明係關於其中q為-〇-之式 III-b化合物。根據另一個具體實例，本發明係關於其中Q為-CH2-之式I 化合物。根據另一個具體實例’本發明係關於式IV化合物：

R2

IV 或其醫藥上可接受之鹽類，其中R2&R3定義如前所述，而所示咪唑環視情況在第4位置經c(〇)N(R，)2、氧基取代，及/ 或在第2位置經R取代。式IV中較佳R2及R3基團為前述式ί中所述者。根據一個具體實例，本發明係關於其中Q為之式ιγ 化合物。根據另一個具體實例，本發明係關於其中卩為_〇_之式IV 化合物。 _ 、根據另一個具體實例，本發明係關於其中 Η。之式工化合物。 ” 85918.doc -22- 1282335 根據一個具體實例，本發明係關於一種式I、II、III、III-a 、：[ΙΙ-b或IV之化合物，或其任何次群，其中X為CH。根據另一個具體實例，本發明係關於一種式I、II、III、 ΙΙΙ-a、ΙΙΙ-b或IV之化合物，或其任何次群，其中X為CF。根據另一個具體實例，本發明係關於一種式I、II、III、 ΙΙΙ-a、ΙΙΙ-b或IV之化合物，或其任何次群，其中W為氮。根據另一個具體實例，本發明係關於一種式I、II、III、 ΙΙΙ-a、ΙΙΙ-b或IV之化合物，或其任何次群，其中W為C-R4。根據另一個具體實例，本發明係關於一種式I、II、III、 ΙΙΙ-a、ΙΙΙ-b或IV之化合物，或其任何次群，其中\¥為CH。式I化合物之示範性結構示於下列表1中。 85918.doc -23- 1282335

MO 1-11 -NH 1-12

Γ'13 1-14

1-15

1-18 85918.doc -25- 1282335

1-19 1-20

1-21

1-22

1-23

1-24

1-25 1-26 1-27

85918.doc -26- 1282335

1-28 1-29 1-30

1-31 1-32 1-33

1-34 1-35 1-36

85918.doc -27- 1282335

!-37 1-38 1-39

1-43 1-44 可以技藝中類似化合物所熟知的方法製備本發明化合物，其如下面流程I至IX所示。用以製備化合物之詳細條件示於實例中。 85918.doc -28- 1282335 流程i ⑻

2

〇 ^νΛνχν Η Η 3 上述流程I所示是製備可用以製備本發明化合物之Ν，_烷基-Ν-三聚氰酸化物（3)之一般性方法。步騾（a)中，於鹼存在下’氰胺（2)與異氰酸乙醋反應，經酸化作用後，可得化合物3。雖然所示者為n，-乙基三聚氰酸化物，但是熟識技藝者明白各種不同的異氰酸烷酯可適用於流程反應條件’而形成各式不同的N，-烷基-N-三聚氰酸化物。步騾（a)中，於各式的鹼存在下，氰胺（2)可與異氰酸烷酯反應，而形成三聚氰酸化物（3)。用以形成3的適當鹼包括氫化物鹼（諸如NaH及KH)、金屬烷氧化物（諸如第三-丁氧化鋼及第三-丁氧化鉀）及金屬氫氧化物（諸如，氫氧化鈉、氫氧化钾、氫氧化铯及氫氧化鋰）。步騾（a)中，金屬-氫化物、金屬-统氧化物及金屬-氫氧化物鹼可用以形成三聚氰酸化物（3)之金屬鹽類，其具有式3a 結構： /-人，CN 丄 Η μ ，其中Μ為鈉、Li、Κ、Rb或Cs。較佳地，]ν[為納0 步驟（a)是在各式的〉谷劑中進行，包括THF、醇類、亞甲基氯、DME、EtOAc、iPrOAc、氯苯、甲基第三丁基醚、甲苯、庚烷及環己虎。較佳地，步騾（a)中所用的溶劑為無 85918.doc -29- 1282335

水溶劑，更佳者，步騾（a)中所用的溶劑為無水thf 流程II

藥劑及條件：（a) i三氟醋酸酐、ϋ硝酸鉀；（b) hc卜MeOH ，（c) NaHC〇3、肆三苯基膦_Pd(〇);⑷ h2、Pd/C ; (e) H2S〇4。上述流程II所示是製備本發明苯并咪唑化合物之一般性方法。溴-苯胺（4)與三氟醋酸酐反應，後與硝酸鉀反應，形成硝基化合物（5)，繼而以酸處理進行去保護作用，形成胺化合物（6)。後在鉑存在下，3_硝基溴苯胺（6)偶合至芳基石朋酸（7) ’形成雙▲芳基化合物（8)。化合物8的硝基經還原後形成二胺化合物9，其與N-烷基-N·三聚氰酸化物反應後，形成本發明苯并咪唑化合物（10)。上述流程II中所示的反應可適用本發明各式R1及R3基團。 85918.doc -30- 1282335

流程III

13

R

藥劑及條件：（a) Pd(dppf)Cl2/KOAc、DMSO、80°C ; (b) Cu(OAc)2/吡啶、DMF ; (c) i H2、Pd/C、ii 3、H2S04。上述流程III所述是製備在其第4位置經C(0)N(R’)2取代之式IV化合物之一般性方法，所用方法實質上與奇亞莫莉 (Kiyomori)，A·及莫古斯（Marcoux)，J._F·;布瓦德（Buchwald)， S.L·，四面體通訊雜誌，40冊，1999, 2657-2660中所揭示之方法相似。80°C下，在Pd(dppf)/醋酸鉀之DMSO溶液存在下，化合物6與二硼酸酯反應，產生中間產物11，在醋酸銅存在下，化合物11與4-C(0)N(R’)2-咪唑反應，可形成 4-C(0)N(R’）2-咪唑-1-基化合物12，化合物12之硝基經還原形成二胺化合物，接著如流程II中步驟（e)所揭示方法，二 85918.doc -31 - 1282335 胺化合物與Ν’-乙基-N-三聚氰酸化物（3)反應，形成苯并咪唑化合物13。

\ 上述流程IV是製備式I化合物的另一種方法。如流程III 中所揭示者，在Pd(dppf)/醋酸鉀存在下，化合物6與雙二氧硼練（1^0丨1^(：〇1&(1丨1)〇1'〇11)反應後，產生中間產物11，而後在肆三苯基膦鈀、氯化鋰及碳酸鈉存在下，化合物11與R1-三氟化物反應，形成化合物14，繼而利用實質上與流程I至III 所列相似之方法，以化合物14製備本發明化合物。

流程V

藥劑及條件：（a) R-鎂鹵化物、THF、0°C至室溫；（b) Ac20 、80°C ; (c) HN〇3 ; (d) 6N HC1水溶液；（e)三氟醋酸酐，而後KN〇3 ; (f) Na2C03、Me0H/H20 (9 ·· 1)、65〇C ; (g) R1-硼 85918.doc -32- 1282335 酸、Pd(PPh3)4、lN NaHC03水溶液、DME、90°C ; (h) SnCl2.2H20 、EtOH、迴流；及（i) Na2S204、Et0H/H20 (3 ·· 1)、90°C。

上述流程V為製備其中R3為C(0)R之式I化合物之一般性方法。化合物15與R-鎂鹵化物反應，形成酮16，化合物16 先後與醋酸酐及硝酸反應後，可製備硝基化合物17。另一種方式是，化合物16與三氟醋酸酐及硝酸鉀反應以製備化合物17。硝基化合物17再與硼酸反應，如前所述，可形成化合物18，將化合物18的硝基以SnCl2(步騾h)或NaS204 (步驟i)還原形成二胺化合物19。利用實質上與上述流程I至IV 相似的方法，以二胺化合物19製備其中R3為C(0)R之式I化合物。流程VI

上述流程VI為製備其中R3為C(R)=NOR之式I化合物之一般性方法。酮化合物19與醋酸鉀及HC1 · NH-OR反應，形成肟化合物20。利用實質上與上述流程I-IV相似的方法，以化合物20製備其中R3為C(R)=N0R之式I化合物。 85918.doc -33- 1282335

流程VII

24 25 上述流程VII為製備其中W為CF及R3為C02R之式I化合物之一般性方法。利用實質上與金姆（Kim)，K. S.等人，醫藥化學雜誌1993, 36, 2335中所揭示之方法，以市售起始物質來製備化合物24，化合物24與溶於醋酸中的溴反應可製備化合物25。以實質上與上述流程I至IV相似的方法，以化合物25製備其中R3為C02R之本發明化合物。

流程VIII

9 26 上述流程VIII為製備其中Q為-0-之本發明化合物之一般性方法。根據前述流程II所製備之化合物9與2-甲基-2-硫代假脲及R2_氯甲酸反應，形成化合物26。此方法揭示於L. I. 克路斯（Kruse)等人，醫藥化學雜誌1989, 32,409-417中。 85918.doc -34- 1282335

流程IX

32 33 藥劑及條件：（a)HN03/H2S04; (b)NH4〇H/二噚烷/加熱；（c) 二噚烷 /加熱；（d) Na2C03/DMF/加熱（e) H2/pd_c/Et〇H ;⑴ 上述方法。上列流程IX為製備其中R1At i #、丄# κ為米唑-1-基《本發明化合物之 -般性方法。步驟（a)中，— 一鼠酮與硝酸反應，產生硝基化 85918.doc -35- 1282335 合物28，而後化合物28與氫氧化銨反應，形成胺基-硝基化合物29，繼而將化合物29偶合至咪吐30上，形成化合物31 。利用上述製備Q為·CH2·、_ΝΗ或-〇-之化合物之方法，以化合物31製備本發明各種的化合物。熟識技藝者咸欲了解可根據流程][至Ιχ之一般性方法及下列所示合成實例製備各種本發明化合物。根據另一個具體實例，本發明係關於製備式Α化合物：

R* A 或其鹽類之方法，其包括將式B化合物： RXwRy u γΛ η2ν νη2 Β 或其鹽類，與式C化合物：

Η Η c 或其鹽類反應之步驟，其中該反應係在包含至少一種質子性落劑之非-鹼性基質中進行，其中： X為氧或硫； R 及R 為獨選自於R5、〇r5、n(r5)2、c(〇)n(r5)2、c〇2R5 85918.doc -36- 1282335 ，或

Rx及Ry—起組合成具有0-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-8員飽和環、部分未飽和環或芳基環，及其中：

Rx及Ry所形成的環可視情況經1-3個獨立選自於氧基、鹵素、Ri、R3、R5、OR5、n(R5)2、0C(0)R5、 NR5C(0)R5或R6之基團取代； r1為具有1-3個獨立選自於氧、氮或硫雜原子之5-6員芳基環 ’其中· R1經0·3個獨立選自於R、氧基、C02R·、OR’、N(R’)2、 SR’、N02、鹵素、CN、C(0)N(R’)2、NR’C(0)R’、 S02R’、S02N(R’)2或NR’S02R’之基團取代；每個Rf為獨立選自於氫、Cw脂肪族或具有0-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、未飽和環或芳基環，其中： R’經0-3個獨立選·自於齒素、氧基、RG、N(RG)2、OR0、 co2r°、nrqc(o)r°、c(o)n(r0)2、so2rq、so2n(r〇)2 或NR^SC^R0之基團取代； R3選自於C(0)NHR、C(0)N(R)2、COR、C02R、COCOR、S02R 、S02N(R)2、S02NHR、C(R)=NOH、C(R)=NOR、C(R)=NR 或 C(R)=N-NHR ; 每個R為獨立選自於丁-八1^或(：1-6脂肪族基團，其中·· 該Cu脂肪族基團經0-3個獨立選自於R’、氧基、C02Rf 、OR，、N(R，）2、SR，、N02、鹵素、CN、C(0)N(R，）2 85918.doc -37- 1282335 、NR’C(0)R，、S02R，、30办(11’)2或]^1^〇211，之基團取代； T為（CH2)y，其中y為ο、1或2 ;

Ar選自於： (a) 3-8員飽和環、未飽和環或芳基環； (b) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之3_7員雜環 :或 (c) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之員雜芳基環；其中

Ar經〇_3個獨立選自於R，、氧基、c〇2R，、〇R，、N(R，)2 、SR’、N02、鹵素、CN、C(0)N(R，)2、NR，C(0)R，、SC^R1、S02N(Rリ2或NR·S02R’之基團取代；每個R5為獨立選自於氫、Cl-6脂肪族或具有〇_3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、部分未飽和環或芳基環，其中： R5視情況經1_3個獨立選自於自素、氧基、R〇、n(R0)2 、OR0、C02R〇、NR0C(〇)R0、C(O)N(R0)2、S〇2R〇、s〇2N(r0)2或nr〇s〇2R〇之基團取代；每個RG為獨立選自於氫、Ci6脂肪族或具有1-2個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5_6員雜芳基環或雜環；及本 R選自於R、Cw脂肪族或具有〇-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、部分未飽和環或芳基環，其中： R選自於氫或Cw脂肪族基團；及 85918.doc -38- I282335 R視情況經1-3個獨立選自於自素、氧基、rG、n(r0)2 、OR。、C02R。、NR〇C(0)R。、C(〇)n(r〇)2、s〇2R。、s〇2N(r0)2或NR0S〇2R0之基團取代。根據一個較佳具體實例，RX及Ry 一起形成具有〇_2個獨立選自於氮、氧、硫雜原子之6-7員飽和環、部分未飽和環或芳基環，其中該環可視情況經取代。更佳者，RX&Ry 一起形成具有0-2個獨立選自於氮、氧、硫雜原子之視情況經取代6員芳基環，更佳者，r及Ry 一起形成經一個^及一個r3 基團取代之苯并環。當Rx及Ry—起形成具有0-2個獨立選自於氮、氧、硫雜原子之視情況經取代6-7員飽和環時，式b中所示的兩個胺基較佳為順式結構。根據另一個較佳的具體實例，R*為R2，更佳者，R*為乙基。本專利說明書中所用"非-鹼性基質” 一詞係指任何溶劑或至少兩個溶劑、共同溶劑及酸混合物，其所產生的pIi低於或等於約7。-適合此方法之溶劑包括（但不侷限於）水、苯、甲苯、二氯甲烷、二氯乙烷、二甲基甲醯胺、二噚烷、二甲基砜、乙二醇二甲醚、momoglyme、乙腈、四氫呋喃、甲醇及乙醇。本專利說明書中所用”質子性溶劑”係如，，高等有機化學，，，傑瑞馬許（Jerry March)，第三版，約翰威利及孫斯，紐約中所指帶質子之溶劑，較佳的質子性溶劑選自於水、乙醇或甲醇。在另一個具體實例中，有機酸（諸如醋酸）可同時作為 85918.doc •39- 1282335 反應的質子性溶劑及酸成分。根據另一個較佳的具體實例，方法係在pH約2至約7下進行，更佳者，pH約3至約4。加至反應混合物中以達到非鹼性基質的適當酸包括礦物酸°可使用的有機酸實例⑽不偈礦物酸，諸如硫酸、氫氯酸及硝酸。較佳的酸料酸或聽酸。更佳的酸為硫酸0 該方法係在20-155°C下進行加熱’而更佳者在80_10(rc。較佳地，方法在40-l〇〇°C下本發明係關於一種製備根據另一個較佳的具體實例中式Γ化合物：

I· ’其包括將式B’化合物：或其醫藥上可接受鹽類之方法 R1

或其鹽類’與化合物C，：

R2 85918.doc -40. Ϊ282335 或其鹽類反應之步驟’其中該反應係在至少包括一種質子 η合劑〈非驗性基質中進行，其中Rl、r2&r3的定義如前所述。根據另一個具體實例，本發明係關於式C”化合物：人〆 Αι H c，，其中： R2選自於氫、乙基、異丙基、環丙基或丙基；及 Μ選自於鈉、鉀、鋰、絶或铷。較佳Μ為鈉或鉀，更佳者“為鈉。較佳R2為乙基。根據酵素分析法所測，本發明化合物是旋轉酶及/或τ〇ρ〇 IV之有效抑制劑，抗微生物感受性分析法中亦已證明這些化合物具有抗微生物活性。可根據技藝中所熟知的方法於試管内、活體内或在細胞株中分析作為旋轉酶及/或T0p0IV 抑制劑用之本發明化合物的活性。酵素分析法及抗微生物感受性分析法所用的詳細條件述於下列所示實例中。根據另-個具體實例’本發明提供—種包括本發明化合物或其醫藥上可接受鹽類及醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑之組合物。本發明組合物中化合物的含量是可偵測到抑制生物樣品中或病患中旋轉酶、T0p0IV的效果之含量或可測量到減少細菌數量的效果之含量。本發明組合物較佳係調配成需要此種組合物病患投用者，尤佳者，本發明組合 85918.doc -41 · 1282335 物係調配成以口服方式投與病患者。本專利說明書所用“生物樣品”係指包括（但不侷限於）細胞培養或其萃取物；取自哺乳動物之切片物質或其萃取物；及血液、唾液、尿液、糞便、精液、淚液或其他身體的體液或其萃取物。抑制生物樣品中旋轉酶/或T〇p〇 IV之活性有利於各種技藝者所熟識之目的，此目的的實例包括（但不侷限於）輸血、器官移植、生物樣品保存及生物分析等。本專利說明書中所用“病患”係指動物，較佳為哺乳動物 ’更佳者為人類。 ......，尸n .小扣-1、W攸啜興其部配化合物（醫藥活性之非毒性載劑、佐劑或媒劑。本發胡組合物可用之醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑包括（但不信限於）離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋自，諸如人類血清白蛋白、緩衝物質，諸如磷酸、甘胺酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和蔬菜脂肪酸之部份甘油酯混合物、水、鹽或電解質，諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氳二鉀：磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、羽狀矽膠、三矽酸鎂、聚乙烯基吡咯烷酮、以纖維素為基礎之物質、聚丙二醇、幾基甲二纖維素鋼、聚丙婦酸1、聚伸乙基聚氧伸丙基^ 二物、聚丙二醇及羊毛脂。禾备本專利說明書中所用“谓測到抑制，，係指在包括本合物及旋轉酶及/或T〇p〇 IV之樣品中之活性與不厶本發、、、且組合物而包括旋轉酶及/或Top〇 Iv之等量樣:中^活广明間 85918.doc -42- I282335 所測得旋轉酶及/或T〇p〇…的變化。本專利說明書中所用“測量到減少細菌數量，，係指含有該組合物樣品中之細菌數目及只含有細菌樣品中細菌數目間所測的數量變化。 “醫藥上可接受鹽類，，係指本發明化合物之非毒性鹽類， §其投與焚體時，可直接或間接供應本發明化合物或具有抑制活性之代謝物或其殘餘物。本專利說明書中所用，，抑制活性之代謝物或其殘餘物，，係指該代謝物或其殘餘物亦為旋轉酶及/或Τορο IV之抑制劑。本發明化合物醫藥上可接受鹽類包括衍生自醫藥上可接受無機酸及有機酸及鹼之鹽類。適當之酸鹽類實例兔括醋酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、天門冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、重硫酸鹽、丁酸鹽、擰檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦基磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡萄庚酸鹽、硫酸十二酯鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、葡萄糖甲酸鹽、甘油磷酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫氯酸鹽、氫讒酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲烷磺酸鹽、2_莕伸基磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過硫版鹽、3 -冬基丙酸鹽、鱗酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫代氰酸鹽、甲苯磺酸鹽及十一酸鹽。其他酸（諸如草酸）本身雖然不是醫藥上可接受者，但可用於製備本發明化合物及其醫藥上可接受酸加成鹽時中間產物之鹽類。 85918.doc -43 - 1282335 自適當㈣生之鹽類包括驗金屬鹽類（例如岐朴驗土金屬（例如鈒则、銨及N+(Ci戌基）4鹽類。本發明亦包括本發明所揭示化合物之任何驗性含氮基團四級化者，利用此種四級化作用可製備水溶性或油溶性或分散性產物。本發明組合物可經口投藥、以吸入噴霧、局部性、直腸性、經鼻腔、經舌下、經陰道等非經腸投藥，或以植入性储存裔万式投藥。本專利說明書所用“非經腸，，包括皮下、靜脈内、肌肉内、關節内、關節液内、胸骨内、椎管内、肝臟内、病灶内及顱内注射法或灌注技術。較佳地，组人物係以經口、腹膜内或靜脈内方式投藥。本發明組合物：無菌注射形式可為水溶液或油性懸浮液，可根據技s藝中所熟知的技術利用適當的分散劑或濕潤劑及懸浮劑調配這些懸浮液，無菌注射藥劑亦可為溶於無毒性非經腸-可接受稀釋劑或溶劑中之無菌注射溶液或懸浮液，諸如溶於^-丁烷二醇之溶液/可採用的可接受媒劑及溶劑為水、林格氏溶液及等張氯化鈉溶液。除此之外，無菌固定性油脂慣用為溶劑或懸浮基質。為此目的，可採用之任何無刺激性固定油脂包括合成性早-或二_甘油酯。脂肪酸，諸如油酸及其甘油酯衍生物可用於注射用製劑中，其是天然醫藥上可接受油脂，諸如橄欖油或蓖麻油，特別是經聚氧乙基化者。這些油脂溶液或懸浮液體亦可包括長鏈醇之稀釋劑或分散劑，諸如於調配醫藥上可接受劑量形式（包括乳化劑及懸浮液）所慣用之叛基甲基纖維素或類似的分散劑。為便調配目的，亦可使用其 85918.doc -44- 1282335 系用的表面活性劑’諸如吐溫、史班斯（邱㈣)及 -他礼化劑’或於製備醫藥上可接受固態、液態或其他劑量形式時所慣用之生物可祕促進劑。本發明醫藥上可接受之組合物亦可以任何經口可接受劑量形式(包括’但不侷限於，膠囊、鍵片、液態懸浮液或溶及）以口服方式投藥。以口服用之鍵片例子 =括乳糖及玉米殿粉，典型地亦可加入潤滑劑:諸如：月，H以口服用之膠囊例子而言，可用的稀釋劑包括乳唐及乾燥玉米殿粉。當以口服投用液態懸浮液時，活性成分係與乳化劑及懸浮劑組合，假若有需要’亦可加入某些甜味劑、芳香劑或呈色劑。另一種方式是，本發明醫藥上可接受組合物可以坐劑形 =直腸投藥。將藥劑與適當的無刺激性賦形劑混合後製備這些坐劑，因賦形劑在 n±Hf Λ 釗在至/見下為固悲，但在直腸内溫度時則為液態，因此在直腸内會融解而釋放形劑物質包括可可油、蜂蠟及聚丙二醇。 Λ 1 ★本發明醫藥上可接受之組合物亦可局部投藥，特別是當欲治療標的包括以局部投藥可輕易達到的區域絲官，$ 2邵、皮膚或後段腸道的疾病。可針對這些各各區域或态g輕易製備出適當的局部調配物。 =坐_配，（參考上述）或適當的灌腸劑調配物針對 <又运局„卩_可達到效果。局部經皮貼片亦可使用。 =邵投藥而言’醫藥上可接受組合物可調配於含有縣㈣或溶解於一或多種載劑之活性成分之適當油膏“ 85918.doc -45- 1282335 以局邵投用本發明化合物之載劑包括（但不侷限於）礦物油、液怨石虫藏脂、白石％脂、丙一每、聚氧乙婦、聚氧丙晞化合物、乳化樣及水。另一種方式是，醫藥上可接受組合物可調配於含有懸浮於或溶解於〜或多種載劑之活性成分之適當乳液或乳脂中’適當的載劑包括（但不侷限於）礦物油、單硬脂酸山梨糖酯、聚山梨酸6〇、鯨蠟酯蠟、十六硬脂酸酯、2-辛基十二醇、苄醇及水。以眼邵用藥而言，醫藥上可接受組合物可以等張、經pH 调整播菌鹽水調配成微粒化懸浮液，或較佳以等張、經pH 调整被菌鹽水（不論疋否含有保存劑（諸如benZyiaik〇nium chloride))調配成溶液。另一種方式是，以眼部用藥，而言，醫藥上可接受組合物可調配於藥膏中，諸如石蟻脂。本發明醫藥上可接受組合物亦可以鼻腔氣溶膠或吸入方式投藥。根據醫藥調配物所熟知的技術製備此種組合物，此種組合物是應用芊醇或其他適當的保存劑、增進生物可用性之吸收促劑劑、氟碳化物及/或其他慣用溶解劑或分散劑製備成溶於鹽水之溶液。更佳者，本發明醫藥上可接受組合物係調配成經口投藥者。於單一治療療程中，用以治療及預防因肺炎鏈球菌 (Streptococcus pneumoniae)、化膿性鏈球菌（Streptococcus pyogenes)、糞腸球菌（Enterococcus faecalis)、腸球菌 (Enterococcus faecium)、克雷柏斯肺炎球菌（Klebsiella pneumoniae)、腸產氣桿菌屬（Enterobacter sps·)、變形菌屬 85918.doc -46- 1282335 (Proteus sps·)、綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa)、大腸桿菌（E. coli)、靈桿菌（Serratia marcesens)、金黃葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、陰性凝集反應的葡萄球菌（Coag. Neg· Staph)、嗜血性流感桿菌（Haemophilus influenzae)、炭疽桿菌（Bacillus anthracis)、肺炎黴漿菌（Mycoplasma pneumoniae)、黏膜炎莫拉菌（Moraxella catarralis)、肺炎披衣菌（Chlamydia pneumphila)、退伍軍人肺炎菌（Legionella pneumoniae)、肺結核桿菌（Mycobacterium tuberculosis)、幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori)、白色葡萄球菌 (Staphylococcus epidermidis)或肺結核桿菌（Mycobacterium tuberculosis)所引起的感染時所用的活性成分化合物的劑量介於約0.01及約100毫克/公斤體重每日，較佳者介於0.5 及約75毫克/公斤體重每日及最佳者介於約1及50毫克/公斤體重每日。典型地，每天可投用約1至5次的本發明醫藥組合物，或另一種方式是以連續灌注投藥。或另一種方式是，本發明組合物可以搏動調配物投藥，此種投藥方式可作為慢性或急性治療。與載劑物質組合而產生單一劑量形式之活性成分含量端視欲治療的宿主及投藥模式而定。典型地藥劑包含約5%至約95%的活性化合物（重量/重量），較佳地，此種藥劑含有約20%至約80%的活性化合物。當本發明組合物包括式I化合物與一或多種額外治療藥劑或預防藥劑的組合時，於單一治療療程中，化合物及額外的藥劑兩者的劑量應介於正常投藥劑量的約10%至約 85918.doc -47- 1282335 80%之間。在改善病患病症上，假若有需要，可投用維持劑量之本發明化合物、組合物或組合，繼而，以症狀為函數，減少投藥的劑量或頻率（或同時減少兩者）至可維持改善病症的程度，當症狀纾解至所要的程度，即可終止治療。然而，當有任何復發或疾病症狀時，病患需要長期的間歇性治療。热識技藝者咸欲了解可能需要比上述所列較低或較低的劑量。任何特定病患所需之專一性劑量及治療療程端視各種的因素而定，包括所用專一性化合物的活性、病患的年秦組重、一般健康狀感、性別、飲食狀況、投藥時間、排泄速率、藥物組合、疾病的嚴重性及時程，及病嗯對疾病的配合度及治療醫師的判斷等。根據欲治療或預防特定病症或疾病，本發明組合物中亦可包含正常下係用以治療或預防疾病之額外治療藥劑。如本專利說明書所用，正常下係用以治療或預防特定疾病或病症之額外治療藥劑被認為是”適合欲治療的疾病或病症，，。此種藥劑包括（但不侷限於）抗生素、抗發炎藥劑、基質金屬蛋白抑制劑、脂氧化酶抑制劑、細胞激素拮抗劑、免疫抑制劑、抗癌藥劑、抗病毒藥劑、細胞激素、生長因子、免疫調節劑、前列腺素、抗血管過度增生化合物，或增加細菌對抗生素感受性的藥劑。適合與本發明化合物及其組合物投藥之抗生素實例包括喳諾酮類、β-内醯胺類、聚環類、糖肽類及脂肽類。能增進細菌生物體對抗生素感受性之藥劑是已知的，例 85918.doc -48- 1282335 如，美國專利申請案5,523,288號、美國專利申請案5,783,561 號及6，140,306號中揭示利用殺細菌/通透性_促進蛋白質 (BPI) ’以增加格蘭氏_陽性及格蘭氏_陰性細菌抗生素感受性之方法。增加細菌生物體外膜通透性之藥劑業已揭示於瓦瑞（vaara)，M.微生物學總論（1992) 395_4u頁中，而促進格蘭氏陰性細菌的敏感性業已揭示於蘇貝利（Tsubery)，H.，等人醫藥化學雜誌（2000) 3085-3092頁中。根，另-個具體㈣’本發明提供—種治療或舒緩病患中細菌感染嚴重性之方法’其包括投與該病患根據本發明組合物之步驟。 >根據另一個具體實例，本發明提供一種抑制病患s中旋轉酶之方法，其包括投與該病患根據本發明之組合物。根據另一個具體的實例，本發明提供一種抑制病患中 T〇P〇 IV之方法，其包括投與該病患根據本發明之組合物。，據另"個具體實例，本發明提供-種減少病患中細菌數量〈方法’其包括投與該病患根據本發明之組合物。根據另—個具體實例，本發明提供-種抑制生物樣品中旋轉酶之方法。根據另-個具时例，本發明提供—種抑制生物樣品中 Τορο IV之方法。根據另-個具體實例’本發明提供—種減少生物樣品中細菌數量之方法。 - 根據另一個具體實例，本發明提供一種減少生物樣品中細菌數量的方法’但另外包括將該生物樣品與能增加細菌 85918.doc -49- 1282335 生物體對抗生素感受性之藥劑接觸反應之步騾。本發明醫藥組合物和方法通常可用以控制活體内細菌感染，以本發明組合物和方法控制的細菌生物體之實例包括 (但不侷限於）下列的生物體：肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、糞腸球菌、腸球菌、克雷柏斯肺炎球菌、腸產氣桿菌屬、變形菌屬、綠膿桿菌、大腸桿菌、靈桿菌、金黃葡萄球菌、陰性凝集反應的葡萄球菌、嗜血性流感桿菌、炭疽桿菌、肺炎黴漿菌、黏膜炎莫拉菌、肺炎披衣菌、退伍軍人肺炎菌、肺結核桿菌、幽門螺旋桿菌、白色葡萄球菌或肺結核桿菌。根據另一個具體實例，本發明組合物及方法可控,制下列細菌生物體：肺炎鏈球菌'化膿性鏈球菌、糞腸球菌、腸球菌、金黃葡萄球菌、陰性凝集反應的葡萄球菌、嗜血性泥感桿菌、炭疽桿菌、肺炎黴漿菌、黏膜炎莫拉菌、肺炎披衣菌、退伍軍人肺炎菌、肺結核桿菌、幽門螺旋桿菌、白色葡萄球菌或肺結核桿菌。因此本發明組合物及方法可用以控制、治療或降低院内或非阬内感术之惡化、嚴重性或效應。院内感染用途實例包括（但不侷限於）尿道感染、呼吸道感染，諸如肺炎、手術知口感术中心導管感染及菌血症。非-院内感染用途實例包括（但不侷限於）尿道感染、支氣管炎、鼻竇炎、肺炎、前列腺火、皮膚及軟組織感染、腹腔内感染疾及發燒性中性白血球缺少症病患之治療。本專利說明書中所用，，醫藥上有效含量”係指可治療或舒 85918.doc -50- 1282335 緩病患中細菌感染之有效含量。"預防有效含量”係指可預防或實質上舒緩病患中細菌感染之有效含量。本發明化合物可以慣用的方法應用，以控制活體内細菌感染的程度及治療疾病或降低細菌媒介的惡化或嚴重性。热識技藝者自可用的方法及技術中選擇此種治療方法，劑量含量及所需條件。例如’本發明化合物可與醫藥上可接受之佐劑組合，以醫藥上可接受之方法及有效舒緩該感染或疾病嚴重性之劑 f ’施予罹患細菌感染或疾病之病患。另一種選擇是，本發明化合物可用於治療或保護個體以對柷長期細菌感染或疾病之組合物或方法中。此種^且合物中所採用的化合物可單獨使用，或以慣用的醫藥組合物中酵素抑制劑調和的方法與本發明其他化合物組合。例如，本發明化合物可與慣用於疫苗中之醫藥上可接受佐劑組合，並施予預防有效含量，以保護個體一段長時間對抗細菌感染或疾病。式I化合物_亦可與其他抗生素共同投用，以增加治療或預防各式細菌感染的效果。當本發明化合物與其他藥劑以組合療法共同投用時，病患可依序投用或同時投用之，另一種選擇是，根據本發明醫藥或預防組合物中包括式J化合物及另一種治療或預防藥劑之組合。上述額外治療藥劑係為多重劑量療法之一部分，可與含有抑制劑之組合物分開投用，另一種選擇是，這些藥劑可為單一劑量形式的一部分，也輩一 έ人 1刀/、早組分物中的抑制劑混合 85918.doc -51 - 1282335 使用。這些實例目的為讓更完全了解本發明，詳述下列實例係只為說明之用，非用以限制本發明範疇本專利說明書中所用"Rt"係指利用下列hplc方法（另有所指）取得專-性化合物時之滞留時間，以分鐘表示. 管柱：Z〇rbaXSB苯基，5微米，4.6毫米x 250毫米梯度：水：乙腈（9:1)至U:9)，l0分鐘流速·· 1.0毫升/分鐘波長·· 214奈米 ini

Br

5-溴_3_硝基-2N-三氟乙醯基胺基苯甲酸甲酯：將甲基_2_ 胺基-5-溴苯呼酸（5·0克，21.73毫莫耳）以5分鐘時間加至三氟醋酸酐（60毫升）中，並冷卻至〇-5°c。再額外攪拌15分鐘後，加入硝酸鉀（2·637克，26.08毫莫耳），隔夜攪拌所產生的灰褐色泥狀物。減壓濃縮所得之反應混合物，可得黃褐色固態物’以破酸氫鋼（飽和水溶液）分配，並以乙酸乙醋萃取（3χ)，用鹽水清洗合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾及減壓濃縮後，可產生6.39克黃褐色固態之標題化合物。hPlC Rt=3.62分鐘。MS (Μ-1 370.9)。 85918.doc -52- 1282335 實例2

2-胺基-5-、/臭-3-硝基苯甲酸甲酿：將鹽酸（2〇毫升，6n)加至溶於甲醇（40毫升）之5·溴-3-硝基-2N_三氟乙醯基胺基苯甲酸甲酯（2.1克’ 5.66¾莫耳）之泥狀物中，在75·8〇°〇下加熱所得之混合物12小時，冷卻後可得黃色之懸浮液，過滤懸浮液，並以水清洗，50°C下，減壓乾燥所得之固態物，可產生1 · 1克淡育色固態物之標題化合物。1H NMR (CDCIJ (5 3.93 (s，3H)，8·32 (d，1H)，8·51 (d，1H)。實例3

2-胺基-3-硝基-5-(3’-吡啶基）苯甲酸甲酯：將碳酸氫制（1M ’ 2.18毫升，2·18毫莫耳）、3-峨淀基侧酸（〇·2〇1克，1.636 毫莫耳）及肆三苯基膦鈀（0)(0.125克，0·11毫莫耳）加至溶於伸乙基丙二醇二甲基醚（8毫升）之2_胺基-5-溴-3-硝基苯甲酸甲酯（0.3克，1.09毫莫耳）之混充氮氣混合物中，所得之混合物加熱迴流12小時，冷卻，以碳酸氫鈉（水溶液，飽和）稀釋，並以乙酸乙酯萃取（3X)。以鹽水清洗合併有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾及減壓：濃縮，可得深黃色固態物。粗製 85918.doc -53- 1282335 產物經閃火層析法（矽膠，30至100%己烷/乙酸乙酯）純化後，可產生0.069克黃色固態物之標題化合物。Ηριχ R产176 分鐘，MS (M+H=274) 〇實例4

2,3-二胺基:-5-(3f-峨咬基）苯甲酸甲酿：在溶於乙醇（i〇毫升）之碳（0.035克）上10% pd泥狀物中加入_2·胺基-3-硝基 -5-(3’-吡啶基）苯甲酸甲酯（0.167克，0.61毫莫耳）之匕醇（15 毫升）泥狀物，在40 PSI下將部分懸浮液進行氫化作用6小時，過濾去除催化劑，減壓:濃縮濾液，可產生〇· 11克淡黃色固態之標題化合物。1H NMR (CDC13) 5 3.54 (bs，1H)，3.91 (s，3H) 5.76 (bs，1H)，7.08-7.81 (m，7H)，8·54 (m，1H)，8·79 (m，1H)。實例5

2-(3 -乙基-脲基）-6-吡啶-3-基-3H_苯并咪吨_4_羧酸甲酯 (1-1):在溶於水（1毫升）之2,3_二胺基-5-(3，-吡啶基）苯甲酸 85918.doc -54- 1282335 甲酯（0.109克，0.448毫莫耳）懸浮液中加入硫酸（in，1·2毫升）及Ν’-乙基-Ν-三聚氰酸化物（1Μ，0·9毫升，〇·94毫莫耳）溶液，用1Ν硫酸將pH值調整至3-4，將所得之反應混合物加熱迴流12小時，冷卻反應混合物，過濾所得懸浮液，以水清洗。以閃火層析法（矽膠，100 %亞甲基氯至1〇〇% (5/10/85體積比之NH4OH/MeOH/CH2Cl2)純化所收集的固態物，可得灰褐色固態物，於甲醇及二乙鍵中進行再結晶作用，可得0.009克之灰白色固態物標題化合物。HPLC Rt=1.5 分鐘，MS (M+H=340)，iH-NMR (DMSO) 5 1·13 (t，3H)，3.24 (m，2Η)，3·97 (s，3Η)，7·48 (m，2Η)，7.91 (s，1Η)，8·03 (s，1Η)， 8.14 (m，1H)，8.56 (d，1H)，8.92 (s，1H)，9.92 (bs，1H)，11.51 (bs，1H)。實例6

N▼乙基_N-三:聚氰酸化物，鈉鹽：皮法A:在20°C氫氧化鈉溶液（1·5 Μ水溶液，50毫升，75.02 晕莫耳）中加入氰胺（8.5克，202.25毫莫耳），而後以一滴滴方式於10分鐘時間加入異氰酸乙酯毫升，50.56毫莫耳），攪拌30分鐘後，額外加入氫氧化鈉（3Μ，25毫升，75.02毫莫耳）及異氰酸乙酯（4毫升，50.56毫莫耳），而後將所得之溶液靜置至少30分鐘，直接使用無需純化。灰法Β-:室溫下製備第三-丁氧化鈉（124.1克）之THF (500 85918.doc -55- 1282335 笔升，無水）溶液，而後以冰浴冷卻。在另一個反應容器中，將落於THF (300毫升，無水）之氰胺溶液（51·76克）與異氰酸乙酯（97·5毫升）合併，並以冰浴冷卻之。在所得合併之氰胺/異氰酸乙酯溶液中加入第三_丁氧化鈉/THF溶液，加入的速度足以使溶液内部溫度低於3〇t。過濾收集所產生的白色固態物’而後將所收集的固態物與THF (500毫升）合併，將所得之泥狀物於冰浴上攪拌15分鐘，過濾收集白色固態物，真空乾燥，可得151.5克之標題化合物（91%產率）。 Rt (分鐘）=3.0分鐘。實例7

2-胺基-6_氟_5-(1-甲基-2-氧基_1，2_二氫比淀_4基）-3-硝基冬甲 fei "酉旨·將 bispinacoladaboron (1.3 克，5.1 毫莫耳）、一氯[ι，ι’·雙（二苯基膦）二（環戊二晞亞鐵）]她（η)二氯甲燒加成物（0_125克，0.17毫莫耳）及醋酸鉀（1.0克，10·2毫莫耳）加至溶於二呤烷（25毫升）之2-胺基-5-溴-6-氟-3-硝基-苯甲酸甲酯（1.0克，3.4毫莫耳）溶液中，反應混合物加熱迴流18 小時，冷卻至室溫，以乙酸乙酯（5〇毫升）稀釋，經硅土⑧過濾、’所得之固態物以己燒‘（40毫升）磨碎三次，可生成〇 515 克之2-胺基-6-氟-3-硝基_5_(4,4,5,5-四甲基-[1，3,2]二$硼燒 85918.doc -56- 1282335 -2 -基）_麥甲故甲酉旨。在2 -胺基-6-氣-3-硝基- 5- (4，4,5,5 -四甲基-[1，3,2]二哼硼烷-2-基）-苯甲酸甲酯之伸乙基丙二醇二甲醚（10毫升）之混合物中加入三氟-甲燒續酸1-甲基_2-氧基-1，2-二氫比淀-4-基酯（〇·39克，1.5毫莫耳）、氯化4里（〇.25克，6.0毫莫耳）、碳酸鈉（2 Μ 1.1毫升，2.2毫莫耳）及肆三苯基膦|β(0·18克，0.15毫莫耳）。所得之混合物加熱至9〇χ；，並攪:拌18小時’冷卻後’真空濃縮，殘餘物經層析法純化（石夕膠，0.5%甲醇/二氯甲烷至2%甲醇/二氯甲烷），可得標題化合物（0.275克：，25%)。4 NMR (500 MHz，CDC13)&3.58 (s， 3H)，4·03 (s，3H)，6·30 (d，1H)，7.32 (d，1H)，8.45 (br s，2H)， 8.53 (d，1H) 0 實例8

(2-胺基-5-溴-苯基）-環己基-甲酮：以一滴滴方式將溪化環己基鎂（家於THF，1N，37.8毫升，37.8毫莫耳，3.5當量）加至冷卻至0°C之2-胺基-5-溴·苄腈（2·13克，10.80毫莫耳）之無水THF(20毫升）懸浮液中，所得黃色反應混合物回溫至室溫，並擴:摔2 0小時’用飽和氯化按飽和水溶液（3 〇毫升）慢慢終止反應，以水（30毫升）及EtOAc (50毫升）稀釋。劇烈攪拌雙相混合物，直至所有形成的固態物均溶解。分離相，以EtOAc (25毫升）萃取水層，用鹽水清洗合併有機層，乾燥（MgSCU)，過濾並真空濃縮濾液。粗製產物經閃火層析法 85918.doc -57- 1282335 純化（SiO2，己烷至19:l己烷：EtOAc)，可產生2.43克（80o/o) 黃色固態物之標題化合物：4 NMR (CDC13，500 MHz)占 7·84 (d，1H)，7.35 (dd，1H)，6. 72(d，1H)，3·18 (m，1H)，1·86 (m，4H)，1.74 (m，1H)，1·39·1·53 (m，4H)，1·25 (m，1H) ; MS (ES+) m/z (M++1) 282.07。實例9

(2-胺基-5 -溴-3-硝基-苯基）-環己基-甲酮··將（2-脖基- 5_ 溴-苯基）-環己基-甲酮（2.40克，8.50毫莫耳）之醋酸酐（4〇毫升）懸浮液在80°C下加熱1小時，將反應混合物濃縮至乾，而後溶解於發煙硝酸（18毫升）中，所得黃色溶液在室溫下攪拌2小時’所得之淡橘色溶液倒至冰中，並形成黃色的沉殿物。攪拌反應混合物，直至所有的冰融解，過遽所產生之淡黃色固態物。將此固態物溶解於EtOH (10毫升）及6 N氫氯酸（20毫升）水溶液中，在80°C下攪拌溶液3小時，冷卻至室㈤，以水（2 0毫升）稀釋，以竣故鈉（1克）驗化，以己燒（$ 〇毫升）稀釋所得之反應混合物，攪拌雙相混合物，直至所有的固態物溶解。分離相，以己烷（2 X 25毫升）萃取之，以水清洗合併的有機萃取物，乾燥（MgSCU)，過濾並真空濃縮滤液 ’可產生黃色固態物之標題化合物（1·丨7克，43%產率）：4 NMR (CDC13，500 MHz) 5 8.50 (s，1H)，8.12 (s，1Η)，3·2〇 (m， 85918.doc -58- 1282335 1Η)，1·86 (m，4H)，1.74 (m，1H)，1.51 (m，2H)，1·39 (m，2H)， 1.27 (m，1H)。實例10

(2-胺基-3_硝基-5-吡啶-3-基-苯基）_環己基-甲酮：依序將吡啶-3-硼酸U3-丙烷二醇環酯（388毫克，2.38毫莫耳）、（肆三苯基膦）鈀（0)(212毫克，0.18毫莫耳）及1 N NaHC03 (3.7 毫升，3.7毫莫耳）加至（2-胺基-5-溴-3-硝基-苯基）-瓖己基-甲酮（600毫克，1.83毫莫耳）之DME (25毫升）溶液中，在90 °C下攪拌所得混合物90分鐘，而後冷卻至室溫，用EtOAc (100毫升）稀釋反應混合物，用水（50毫升）、鹽水（50毫升）清洗，乾燥（MgS04)，過濾並真空濃縮濾液，所得殘餘物經閃火層析法（Si〇2，己烷至3 : 1己烷：EtOAc)純化，可產生 527毫克（89%)淡橘色固態物之標題化合物：4 NMR (CDC13, 500 MHz)(5 8.92 (d，1H)，8·69 (d，1H)，8.66 (d，1H)， 8.31 (d，1H)，8.20 (d，1H)，7·71 (dd，1H)，3.36 (m，1H)，！ 88 (m，3H)，1.77 (m，1H)，1.40-1.61 (m，3H)，1.24-1.32 (m，2H)，〇·89 (m，1H) o 85918.doc -59- 1282335 實例11

I—NH 1-14 1-(7-環己烷羰基-5-吡啶-3-基_1H-苯并咪唑-2-基）-3-乙基 -脲（1-14):將:溶於EtOH (4毫升）之生（42毫克，0·13毫莫耳）及氯化錫（II)二水合物（87毫克，0.39毫莫耳）之懸浮液加熱迴流4小時。將混合物冷卻至室溫，以飽和NaHC03(i〇毫升）水溶液鹼化之，並以EtOAc (15毫升）稀釋之。加入硅土（10 克），攪拌所得之懸浮液（30分鐘），經硅土過濾，真空濃縮濾液。用水（5毫升）稀釋所得之殘餘物，加入1 Ν Ν’-乙基-N-三聚氰酸化物水溶液。一滴滴加入足夠量的硫酸溶液使酸鹼值為ρΗ3。在100°C下加熱所得之混合物16小時，用飽和 NaHC03水溶"液鹼化並以EtOAc稀釋。分離相，乾燥（MgS04) 有機層，過濾並真空濃縮濾液。殘餘物經準備性HPLC純化後，可得8毫克雙-TFA鹽之標題化合物，其可轉換為淡黃色固態物之Z雙-HC1 鹽：HPLC: Rt=4.52分鐘；4 NMR (CD3OD， 500 MHz) 5 9.40 (s，1H)，9.08 (d，1H)，8.95 (d，1H)，8.48 (s5 1H)，8.27 (m，2H)，3·72 (m，1H)，3.36 (q，2H)，1·99 (m，2H)， 1.86 (m，2H)，1.83 (m，1H)，1.57 (m，4H)，1.32 (m，1H)，1.23 (t，3H) ; MS (ES+) m/z (M++1) 392.2。 85918.doc -60- 1282335 f例12

2-胺基-5-溴-3-硝基-苯甲酸甲酯：將溶於2毫升醋酸中之

甲酸甲酯溶液中，室溫下攪拌混合物3〇分鐘，並倒入至1〇〇克的冰中，抽氣過濾收集沉澱的黃色固態物並乾燥，可得 2.50克（82%)黃色固態物之標題化合物。ihnmr(cdci〇占 3.95 (s，3H)，8·35 (br s，2H)，8.6 (d，1H)。 —實例13

2-胺基·3-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-[1，3,2]二嘮硼烷·2_基]-苯甲版甲酯·將bispinacoladaboron (0.554 克，2.18毫莫耳）、二氯[1，Γ-雙（二苯基膦）二（環戊二婦亞鐵）]鈀（π)二氯甲烷加成物（0.133克’ 〇·ΐ8毫莫耳）及醋酸钾（〇·535克，5.45毫莫耳）加至溶於二巧垸（5毫升）之2-胺基-5-溴-3-硝基-苯甲酸甲酉旨（0.5克’ 1.82毫莫耳）溶液中，反應混合物加熱迴流3小時 ’冷卻’純化暗色固態物後（si〇2，CH2C12至50%乙酸乙酯 85918.doc -61 - 1282335 之0¾¾溶液），可得橘色固態標題化合物（〇·347克，57%) 。4 NMR (500MHz，CDC13) 1·32 (S，6H)，3.91 (s，3H)，8.3 (bs，1Η)，8.59 (s，1Η)，8.8 (s，1Η)，8.99 (bs，1Η)。實例14

2-胺基-5-(5-甲基-3-氧基-4-吡啶-2-基甲基·環己-1:，5-二烯基）-3-硝基-苯甲酸甲酯：將N-(甲基-2-外b淀基）-6-甲基-4-三氟甲基磺醯基氧-2-吡啶酮（0.136克，0.41毫莫耳）、雙（三苯膦）鈀（II)氯（0.029克，〇.〇4毫莫耳）及碳酸鈉（2M，0.62毫升，1.24亳莫耳）加至溶於伸乙基丙二醇二曱醚（5毫升）之2-胺基-3-硝基-5-(4,4,5,5·四甲基-[1，3,2]二嘮硼烷-2·基）-苯甲酸甲酯（0.163克，〇·51毫莫耳）溶液中，所得混合物加熱迴流3 小時’冷卻-，純化所得暗色固態物後（Si〇2，50%乙酸乙酯/ 亞甲基氯至溶於50%乙酸乙酯之3%甲醇/亞甲基氯），可得橘色固態標題化合物（0.176克，89%)。4 NMR (500 MHz， CDC13)(J 2.41 (s，3H)，3.39 (s，3H)，5.5 (s，2H)，6.28 (s，1H)， 6.68 (s，1H)，7·3·7·1 (m，2H)，7·62 (t，1H)，8·49 (s，1H)，8·61 (s，1H) 〇 85918.doc -62- 1282335 實例15

2,3-二胺基-5-(5-甲基-3-氧基-4-吡啶-2-基f基-環己-1，5-二烯基）-苯甲酸甲酯：在溶於乙酸乙酯（20毫扑）之碳（0·045 克）上10%虹泥狀物中加入2-胺基-5-(5-甲基-3-氧基-4-吡啶-2-基甲基_瓖己-1，5-二烯基）-3-硝基-苯甲酸甲酯（〇·176克，0.44毫莫耳），在30 psi下氫化所得之混合物24小晴，過濾反應物，真空濃縮並分離粗製產物純化（Si02，溶於亞甲基氯之2至10%甲醇溶液）後，可得標題化合物。NMR (500 MHz，CDC13) 2.5 (s，3H)，3·99 (s，3H)，5.3 (s, 2H), 5·38 (bs，2H)，6.39 (s，1H)，6.25 (s，1H)，7.93-7.21 (m，4H)，8.61 (s，1H)，8.93 (s，1H)。實例16

1-32 2-(3-乙基-脲基）-6-(5-甲基氧基_4-吡啶_2_基甲基_環己 85918.doc -63- 1282335 -1，5-二晞基）-1Η-苯并咪唑-4-羧酸甲醋（1-32):在溶於2〇%二甲基楓（5¾升）之2，3-一胺基- 5·(5 -甲基-3-氧基-4-外1：咬_2-義甲基-環己-1，5-二晞基）-苯甲酸甲酯（0·084克，〇·23毫莫耳）混合物中加入硫酸（0.5毫升）及Ν，-乙基三聚氰酸（1Μ NaOH溶液，0·58毫升，〇·58毫莫耳）溶液，用額外硫酸將阳值調整至〜3，將所得之反應混合物加熱迴流3小時，冷卻反應混合物，以飽和碳酸鈉水溶液鹼化混合物，並以水稀釋之。過濾所得懸浮液，另以水清洗。將固態物溶解於四氣呋喃中，經硫'酸鈉乾燥，過濾，濃縮至乾。以乙酸乙g旨萃取母液水層，經鹽水清洗，經硫酸鈉乾燥，過滤，真空乾燥。從母液分離之游離驗重新溶解於乙酸乙醋及甲ί醇中，以過量的無水HC1酸化之，濃縮至乾，可得二氫氯酸鹽之標題化合物（黃褐色固態物，0.036克）。4 NMR (500 MHz DMSO)(5 1·12 (t，3H)，2·41 (s，3H)，3.22 (m, 2H)，3·97 (s， 3H)，5.38 (s，2H)，6.6 (s，1H)，6·68 (s，1H)，7·8-7·25 (m，2H)， 7.48 (bs，1H)，7·79 (t，lH)，7·94 (s，1H)，8.03 (s，1H)，8.49 (s， 1H)，9.93 (bs; 1H)，11.53 (bs，1H)。HPLC : Rt=3.7分鐘[l〇至 90% 12 分鐘梯度，於 1毫升 / 分鐘 0.1% TFA (YMC 3x：15〇>J。 MS : M+H=46卜 M_H=459。MS/HPLC Rt=2.24分鐘。實例17

4-¾基-6-甲基- l-ρ比咬-2-基甲基- lH-p比淀-2 -鋼：在溶於5〇 85918.doc -64- 1282335 毫升水之12·6克（0· 1莫耳）4-羥基-6-甲基-2-哌啤懸浮液中加入2-(胺基甲基）吡啶（1〇·3毫升，oj莫耳），混合物加熱迴流 2.5小時，從冷卻的混合物中過濾所得淡黃色化合物，濃縮濾液，用二氯甲烷磨碎所得之膠狀物，可提供化⑺以cr〇p 標題化合物（19.85 克，92%)。^NMRCDMSO-dS，ppm): 10·5 (s，1Η)，8.5 (d，1Η)，7.7-7.8 (t，lH)，7.2 (t，lH)，7·1 (d，1Η)， 5.8 (s，1H)，5.5 (s，1H)，5·2 (s，2H)，2.2 (s，3H)。FIA : m/z-215.1 ES-/217.1 ES+。一實例18

三氟-甲燒績酸6-甲基-2-氧基-1-吡啶-2基甲基-1，2-二氫-峨咬-4-基酯：將N-苯基三氟甲基磺亞醯胺（18.2克，0.05莫耳）及三乙胺（7.7毫升，0.055莫耳）依序加至溶於二甲基甲醯胺（70毫升）之N-(甲基-2-吡啶基）-4-羧基-6-甲基-2-吡啶酮 (10.0克，0.046莫耳）之懸浮液中，將反應混合物倒入至400 毫升水中，乾燥及濃縮之前，以乙酸乙酯（4 X 1〇〇毫升）萃取之’以2 N NaOH (2 X 200毫升）、水（4 X 200毫升）及飽和鹽水（1 X 150毫升）清洗合併萃取液，經2英吋矽膠塞過滤，以己烷為沖堤液（丟棄），而後以50%乙酸乙酯/己燒混合物沖堤，濃縮濾液，可得白色固態物標題化合物（12.8克，80%) 。4 NMR (CDC13, ppm) : 8.5 (d，1H)，7.7 (t，1H)，7.3 (d，1H)， 85918.doc -65- 1282335 7.2 (m，1H)，6.4 (s，1Η)，6·1 (s，1Η)，5·4 (s，2H)，2 5 (s，3H) 0 FIA : m/z-349.0 ES+。實例19

1-40 l-[4-(環丙基-甲氧基亞胺基_甲基比淀_3_基苯并咪峻-2-基]-3-乙基-月尿（1_40):將醋酸抑（84毫克，〇g|48毫莫耳，8當量）、甲氧胺氫氯酸鹽（70.8毫克，〇·848毫莫耳，8當量）、分子篩（4人’粉末）依序加至溶於無水Et〇jj (3毫升）之 1-(4-環丙燒黢基-6-峨淀-3-基-1H-苯并咪唆-2-基）-3-乙基-脲（37.2克，0.106毫莫耳）之溶液中，5〇°C下攪拌所得之懸浮液3 6小時’而後將反應混合物冷卻至室溫，以EtO Ac及水稀釋。分離相以EtOAc (1χ)萃取水層，乾燥（MgS04)合併有機萃取物，過濾並真空濃縮濾液。以準備HPLC純化殘餘物，轉換成雙-HC1鹽類，可提供褐色固態物之標題化合物（11.0 毫克）：HPLC (10至 90% CH3CN，8分鐘）：tR=4.05分鐘；4 NMR (CD30D，500 ΜΗζ) ά 9.30 (s，1H)，8.99 (d，1H)，8.90 (d， 1H)，8·22 (dd，1H)，8·18 (s，1H)，8·04 (s，1H)，4.14 (s，3H)， 3.36 (q，2H)，2·04 (m，1H)，1.23 (t，3H)，1.15 (m，2H)，0.92 (m，2H) ; MS (ES+) m/z (M++1) 379.2 0 85918.doc -66- 1282335 實例20

(7-丙醯基-:5-吡啶_3-基-1H-苯并咪唑_2_基）·胺基甲酸乙;二: 酯（1-44):於40分鐘時間，在5°C下，將6N NaOH水溶液加：至溶於水（2毫升）之2-甲基-2-硫代假脲（109毫克，0!39毫莫 - 耳）及氯甲酸乙酯（75微升，0.78毫莫耳）之混合物中，直至 _ pH穩定至8，而後用冰AcOH將pH調整至5，繼而將溶於水（5 毫升）之1-(2,3-二胺基-5-吡啶-3-基-苯基）-丙烷-1-酮（0.30毫莫耳）懸浮液加至反應混合物中，在90°C下加熱反應混合物 18小時，冷卻至室溫，以水（10毫升）及EtOAc (20毫升）稀釋泰之，分離相τ以EtOAc (3x)萃取水層，以鹽水清洗合併有機 . 萃取物，乾燥（MgS04)，過濾並真空濃縮濾液。粗製殘餘物重新溶解於DMSO中，經準備HPLC及閃火管柱層析法純化 (Si02 ; CH2C12 : MeOH，1 ·· 0至 19 ·· 1)，繼而將殘餘物轉換成雙-HC1鹽，可得灰白色固態物標題化合物（5.0毫克）： HPLC (10 至 90% CH3CN，8 分鐘）：Rt=3.90 分鐘；4 NMR (CD3OD，500 MHz) 5 9.39 (d，1H)，9.07 (d，1H)，8.93 (d，1H)， 8·48 (d，1H)，8·28 (d，1H)，8.25 (dd，1H)，4.46 (q，2H)，3.35 85918.doc -67- 1282335 (q，2H)，1.43 (t，3H)，1.29 (t，3H) ; MS (ES+) m/z (M++1) 339.1。實例21 下列表2所示的化合物是根據技藝中所熟知一般流程I至 IX，及實質上與上述實例1·20中所示之相似方法製備的。這些化合物的特徵性數據摘要於表2中，包括咕NMR(在 500MHz處）及質譜（MS)數據。化合物編號係對應表1中所示之編號。表2挑選出之式I化合物之特徵牲數據

No. I- M-1 M+1 ^-NMR 4 365.18 367.16 - 11 390.2 392.2 (CD3OD) 9.40 (s, 1H), 9.08 (d, 1H), 8.95 (d, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.27 (m, 2H), 3.72 (m, 1H), 3.36 (q, 2H), 1.99 (m, 2H), 1.86 (m, 2H), 1.83 (m, 1H), 1.57 (m, 4H), 1.32 (m, 1H), 1.23 (t, 3H) 17 413 415 (CD3OD) I.18(t, 3H), 3.3 (m, 2H), 4.73(s, 2H), 7.27-7.42(m, 3H),8.0 (s, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 9.12 (s, 1H). 18 322 324.1 (dmso-d6): 11.77 (1H, s); 9.86 (1H, s); 9.02 (lH,d)； 8.59 (1H, d); 8.22 (1H, dd); 8.07 (1H, d); 8.03 (1H, s); 7.51 (2H, m); 3.26 (2H, dq); 2.77 (3H，s); 1.12 (3H，t). 19 338.14 1.8 (CD3OD): 9.38 (s, 1H), 9.06 (d, 1H), 8.94 (d, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.26 (m, 2H), 3.49 (q, 2H), 3.38 (q, 2H), 1.29 (t, 3H), 1.24 (t, 3H). 20 352 2.06 (CD3OD) 1.06(t,3H), 2.22(t,3H), 3.2(m,2H),3.36(m,2H), 7.57(m,lH), 7.92(s,lH), 8.03(s,lH) 8.19(d,lH),8.53(cUH), 8.89(s，lH). 21 366.1 2.26 (CD3OD)9.35 (s, 1H), 9.03 (d, 1H), 8.92 (d, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.21-8.26 (m, 2H), 3.81-3.84 (m, 1H), 3.37 (q, 2H), 1.89-1.94 (m, 1H), 1.59-1.63 (m, 1H), 1.30 (d, 3H), 1.24 (t, 3H), 0.98 (t, 3H) -68- 85918.doc 1282335

No. I- M-l M+l ^-NMR 22 352 1.9 (CD3〇D)d 1.23 (t，3H)，1.31(d,2H)，3.48 (q，2H)，3.96 (m，lH)，8.34 (m，2H)，8.49 (sJH)，8.92 (d，lH)，9.04 (d，lH)，9.47 (s，lH). 23 337 339.2 (CD3CN) 12.55 (br s, 1H), 12.50 (br s, 1H), 9.30 (s, 1H), 9.25 (s, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 6.86 (m, 1H), 3.32 (m, 2H), 3.25 (q, 2H), 1.25 (t,3H), 1.18 (t,3H) 25 - 350.1 (CD3OD)9.43 (br s, 1H), 9.09 (br s, 1H), 8.94 (br s, 1H), 8.68 (br s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.24 (br s, 1H), 3.36 (q, 2H), 3.22 (m, 1H), 1.30 (br s, 2H), 1.23 (m, 5H) 26 388.12 390.2 (dmso-d6) 1.1 (t, 3H), 3.25 (m, 2H), 4.1 (s, 3H), 7.3 (s, 1H), 7.5 (m, 1H), 7.7 (s, 1H), 7.75 (m, 1H), 8.1 (s, 1H), 8.3 (m, 1H), 8.7 (mm, 1H), 8.9 (m, 1H), 9.05 (s, 1H), 10.1 (br s, 1H) 27 455.97 458.04 (CD3OD) 8.9(m,2H),8.6(m,2H), 8.1(m,2H), 6.6(s,lH), 6.8-6.9(d,lH)5.85(s,2H), 5.7-5.8 (3H-NH+), 3.6(q,2H), 3.35(s,3H),3-2(q,2H),1.2(t,3H), l.l(t,3H) 28 376 '378 (CD3OD) d 1.2(m,3H), 1.75(m,3H0, 2.12-1.93(m,3H), 3.39(q,2H), 4.12(m,lH), 8.12(t,lH),8.18(s,lH), 8.49(s,lH), 8.87(d,lH), 8.9(d，lH)，9.26(s，lH). 29 404.15 2.81 (dmso d6) 1.1 (t, 3H), 1.45 (t, 3H), 3.3 (m, 2H), 4.5 (q, 2H), 73 (s, 1H), 7.55 (br s, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.8 (s, 1H), 8.1 (s, 1H), 8.4 (m, 1H), 8.7 (m, 1H), 8.9 (br s, 1H), 9.05 (s, 1H), 10.2 (br s, 1H) 30 390.22 2.13 (dmso-d6) 1.1 (t, 3H), 3.2 (m, 2H)；3.8 (s, 3H), 7.6 (m, 1H), 7.8 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.2 (s, 1H), 8.3 (s, 1H), 8.45 (m, 1H), 8.7 (m, 1H), 8.8 (s, 1H), 9.1 (s, 1H), 10.3 (br s, 1H) 31 415.22 1.84 (dmso-d6) 1.1 (t, 3H), 3.2 (m, 2H), 3.3 (t, 2H), 3.9 (U 2H), 7.4 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.7 (m, 1H), 7.8 (m, 1H), 8.0 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.2 (m, 1H), 8.4 (m, 1H), 8.7 (m, 2H), 9.1 (s, 1H), 10.1 (br s, 1H) 33 366 368 (DMSO-d6) d l.l(t3H), 1.5(d,6H), 3.25(m,2H05.25(m,lH), 7.38(bs,lH), 7.5(m,lH), 7.88(s,lH), 8.0(s,lH), 8.1(d,lH), 8.56(d,lH), 8.91(s,lH), 10.12(bs,lH), 11.51(bs,lH)> 34 352 354 (DMSO-d6) d l.ll(t,3H), 1.42(t,3H), 3.2i(m,2H), 4.41(m,2H), 7.5(m?lH),7.89(s,lH), 8.03(s,lH), 8.12(d,lH), 8.93(s,lH), 10.09(bs，lH)，1.55(bs，lH). 35 386.2 388.2 (DMSO-d6/CD3OD) 1.21(t,3H) 3.30(q,2H) 3.59(s,3H) 4.05(s,3H) 6.50(d,lH)6.65(s,lH) 7.73(d,lH) 7.88(d,lH) 36 385.2 387.3 (CD3OD), 1.22(t,3H) 3.01(s,3H) 3.32(q,2H) 3.71(s,3H) 6.80(d,lH)6.96(sJH) 7.85(d,lH), 7.95(d,2H) 37 380 382 - 38 - 367.2 (CD3OD) 8.80-8.87 (br s, 1H), 8.45-8.55 (br m, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.10 (m, lh minor isomer), 7.71 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.52-7.55 (m, 1H), 7.36 (s, 1H minor isomer), 4.15 (s, 3H), 3.89 (s, 3H minor isomer), 3.34 (q, 2H), 41 391.i 393.2 (DMSO-d6) 10.8 (br s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.77 (d, 1H), 8.58 (br s, 1H)，7.90 (m, 2H)，7.75 (br s，1H)，7.55 (br s, 1H)，4.27 (q，2H), 3.23 (m, 2H), 2.20 (m, 1H), 1.32 (t, 3H), 1.14 (t, 3H), 0.94 (br d, 2H), 0.65 (br s，2H)

85918.doc -69- 1282335

No. I- M-l M+l ^-NMR 42 - 391 (CD3OD) 1.23(t,3H), 2.28-1.67(m,8H), 3.45(q,2H), 3.75 (m,lH,major), 4.ll(m,lH,minor),8.30-7.82(m,3H), 8.65(m,2H), 9.10(s, 1 H,maj or), 9.18(s,IH,minor). 43 - 392 (CD3OD) 1.22(t，3H)，2.20-1.65(m，8H)，3.35(q，2H), 3.72(m,lH,minor), 4.11(m,lH,major), 8.32-7.88(m,3H), 8.78(m,2H), 9.18(s,lH,miilor), 9.20(s,lH,major). 44 422.2 424.1 (dmso-d6): 9.81 (s, 1H); 9.26 (s, 1H); 8.84 (dd,;lH); 8.29 (d, 1H)~ 8.14 (d, 1H); 8.12 (d, 1H); 7.47 (d, 1H); 7.28 (d, ;1H); 6.12 (s, lh); 3.34 (s, 6H); 3.33 (dq, 2H); 2.82 (m, 1H); 1.14;(t, 3H); 0.67 (m, 2H); 0.62 (m, 2H). ’ 會例22 #棘酶ATPase分析利用丙酮酸激酶/乳酸去氫酶產生ADP時偶合NADH氧化作用來測定DNA旋轉酶的ATP水解活性’此方法業已於前揭示（特姆瑞（Tamuira)及吉樂特（Gellert)，1990，生物化學雜誌，265, 21342) 〇 ATPase 分析是在 30°C 下含有 1〇〇 PM TRIS pH 7·6、1 ·5 μΜ MgCl2 150 μΜΚΧΙ之緩衝溶液中進行。偶合系統含有(最終濃度）2.5 μΜ磷酸烯醇丙酮酸、2〇〇 μΜ於醯胺腺嗓吟雙核苷 (NADH)、1 μΜ DTT、30微克/毫升丙酮酸激酶及10 υ g,毫升乳酸去氫酶加入40奈莫耳酵素（金黃葡萄球菌之374 kDa Gyr A2B2次單位體）及最終濃度為4%抑制劑之DMS0溶液，並讓反應混合物在30°C下培養10分鐘’而後加入最終濃度0.9 μΜ ATP開始反應，測定1〇分鐘期間340奈米處NADH 消逝的速率。從速率與濃度的圖形中來求出Ki數值，並以兩個重複的數值平均值表示。咸已發現上述表1所列化合物為旋轉酶之抑制劑。 ΨΜ23 -70- 85918.doc 1282335 ———— ί Ιορο IV ATPase分析方法:

Top〇4酵素將ATP轉換成ADP時會偶合NADH轉換成 NAD+，並測定340奈米處吸收值的變化。在緩衝液中Topo4 與抑制劑（最終DMSO為4%)於30°C下培養10分鐘，加入ATP 開始反應，並在30°C下於分子裝置測光微量盤讀取器中持續監控20分鐘。從強力键結抑制劑抑制劑之莫利森公式所套入速度與[抑制劑]的圖形來求出抑制常數Ki。金黃葡萄球菌Topo4緩衝溶液： 100 mM Tris 7.5、2 mM MgCl2、200 mM Κ ·麩胺酸、2.5 mM磷酸稀醇丙酮酸、〇·2 mM NADH、1 mM DTT、4·25微克/毫升直線化DNA、50微克/毫升BSA、30微克/毫升}丙酮酸酶及10微克/毫升乳酸去氫酶（LDH)。大腸桿菌Topo4緩衝溶液： 100 mM Tris 7.5、6 mM MgCl2、20 mM κα、2.5 mM 磷酸晞醇丙酮酸、0.2 mM NADH、10 mM DTT、5.25微克/毫升直線化DNA、50微克/毫升BSA、30微克/毫升丙酮酸酶及10 微克/毫升乳1去氫酶（LDH)。咸已發現上述表1所列化合物為Topo IV之抑制劑。實例24 液態基質中感受性試驗利用液態基質中感受性試驗測定本發明化合物之抗微生物活性。此分析方法係於規範此實務的最新版NCCLS指引 “針對嗜氧性生長細菌所作之稀釋抗微生物感受性試驗之 Μ7-Α5方法；經核准標準-第五版（2000)”下進行的。其他的 85918.doc -71 - 1282335 出版物（諸如“試驗室醫藥學的抗生素，，(V·羅利恩（Lodan)，出版商威廉斯（Williams)及威金斯（Wilkins), 1996)可提供實驗室抗生素試驗時必要的實務技巧。從新鮮培養的畫線純化培養盤中取出數個分離的細菌菌落（3至7個），轉種至適當添加的營養豐富液態培養基（諸如 MHB)中，其中添加適合更多挑剔微生物生長之物質。隔夜生長至高密度，其後進行1〇〇〇倍或2〇〇〇倍稀釋，而產生接種密度介於每毫升為5x 105及5 X 106菌落形成單位（CFU)之間。另外一後方式是，將新鮮挑取的菌落培養在37它下約4 至8小時’直至培養液的濁度等於或超過〇 · $麥克法蘭標準 (McFarland standard)(每毫升大約為ι·5 X 1〇8細胞），;並將其稀釋成每毫升具有上述的菌落形成單位數。更方便的方法是，以市售機械設備（BBL PROMPT系統）製備接種量，其係以一個底部處具有網目作出陰影的凹槽之棒狀物直接選取 5個菌落’而後將細菌懸浮於適當體積的食鹽水中，稀釋此細胞懸浮液以製備適當接種細胞密度。試驗所用的液態培養基係内添加50毫克/升之Ca2+及25毫克/升Mg2+之MHB。一如NCCLS標準M7-A5中所述，準備控制組抗生素之序列標準稀釋液，並保存，稀釋範圍典型地為每毫升128微克至每毫升0.015微克（2倍連續稀釋），溶解將試驗化合物，於試驗的同一天進行稀釋保持新鮮；稀釋濃度範圍與上述者相同或相似。將試驗組合物及控制組分裝至多槽孔培養盤中，並加入細菌，使每個槽孔中最終細菌接種量約5 X ι〇4菌落形成單位，而最終的體積為1〇〇微升。將培養盤置於35它下 85918.doc •72- 1282335 隔夜培養（16至20小時）’肉眼觀察渾濁度或以多槽孔培養盤讀取器定量。終點最低抑制濃度（MIC)是指該藥劑使試驗微生物無法生長之最低濃度者。此測定值亦與前述兩文獻所述之適當表格中者比較，以確認抗細菌活性範圍是位於此標準分析方法中可接受的範圍内。表3所示為本發明挑選化合物對抗金黃葡萄球菌試驗所得MIC分析結果。化合物編號相對於表1中化合物之編號。活性程度標記ΠΑΠ者的化合物之MIC低於或等於0.5微克/毫升；活性程度標記f’B"者的化合物之MIC介於0.5及1..0微克/ 毫升；活性程度標記"C"者的化合物之MIC大於1.0微克/毫升0

差3.姚撰式I化合^ 丨勿對抗金黃葡萄珑茴的MIC數值化合物編號活性化合物編號活性 1-1 A 1-3 A 1-5 A 1-6 B_ 1-7 C 1-11 A __ 1-13 ^ C I_14 C 1-15 C I_16 C 1-17 B 1-18 A 1-19 A 1-20 A — 1-21 A 1-22 A 1-23 A 1-24 A — 1-25 A 1-26 A 1-28 A 1-29 A 85918.doc -73- 1282335 化合物編號活性化合物編號活性 1-30 C 1-31 A 1-32 A 1-33 A 1-34 A 1-35 A 1-36 C 1-37 B 1-38 A 1-39 A 1-40 A 1-41 A 1-42 A 1-43 A 1-44 ' C 一麵表4所示為本發明挑選化合物對抗肺炎鏈球菌試驗所得 MIC分析結果。化合物編號相對於表1中化合物之編號。活性程度標記"A”者的化合物之MIC低於或等於0.5微克/毫升 ;活性程度標記”Βπ者的化合物之MIC介於0.5及1.0微克/毫升；活性程度標記"C”者的化合物之MIC大於1.0微克/毫升。

表4.挑選式I化合^ 汾對抗肺炎鏈球菌的MIC數值化合物編_號活性化合物編號活性 1-1 A 1-4 C 1-5 A 1-11 A 1-17 A Ι·18 A 1-19 A 1-20 A 1-21 A 1-22 A 1-23 A 1-24 A 1-25 A 1-26 A 85918.doc -74- 1282335 化合物編號活性化合物編號活性 1-28 A 1-29 A 1-30 A 1-31 A 1-32 A 1-33 A 1-34 A 1-35 A 1-36 A 1-37 A 1-38 A 1-39 A 1-40 A 1-41 A 1-42 A 1-43 A 1-44 A b 雖然我們已揭示一些本發明具體實例，但顯而易見的是，我們基本的說明經改變後，仍可提供其他利用本發明產物及流程之具體實例。 85918.doc 75-

Claims

鞭)正本號專利申請案甲h專利範圍替換本(95年1〇月）拾、申請專利範圍： • 一種式I化合物：

或其醫藥上可接受之鹽類，其中： Q為-CH2-、-NH_或; W選自於氮或C-R4 ; x選自於CH或CF ; R為具有1-3個獨JL選自於氧、氮或硫雜原子之5_6員芳基環，其中： R經0-3個獨亙選自於r、氧基、c〇2r，、〇R，、n(r，）2 、SR，、N02、鹵素、CN、c(〇)n(r，)2、NR，c(〇)R，、S02R’、802]^(11’）2或魏’8〇211，之基團取代；每個R’獨立選自於氫、Cv·4脂肪族，或具有〇-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、未飽和環或芳基環，其中： R1為經0-3個獨立選自於鹵素、氧基、Ro、N(R〇)2、 OR0 ' C02R° ' NR°C(〇)r° , c(0)N(R°)2 ' SO2R0 、S02N(R〇)2或NR〇S02R〇之基團取代； 85918-951011.doc 1282335 每個RG為獨立選自於氫或Cm脂肪族； R2為選自於氫或Cw脂肪族基團； R3為選自於 C(0)NHR、C(0)N(R)2、CH(O)、C(0)R、C02R 、C(0)C(0)N(R2)R、S02R、S02N(R)2、S02NHR、 C(R，)=NOR、C(R，)=NOH、C(Rf)=NR、C(R丨)=N-N(R2)R 、NO或 N02 ; 每個R為獨立選自於T-Ar或Cw脂肪族基團，其中：該Cu脂肪族基團經0-3個獨立選自於R’、氧基、 C02R，、OR，、N(R’)2、SR，、N02、鹵素、CN、 C(0)N(R，)2、NR’C(0)R，、S02R’、S02N(R’)2 或 NR’S02R’之基團取代； T為(CH2)y，其中y為0、1或2 ; Ar選自於： (a) 3-8員飽和環、未飽和環或芳基環； (b) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之3-7員雜環；或 (c) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜芳基環，其中： Ar經0-3個獨立選自於R’、氧基、C02R’、OR’ 、N(R’)2、SR’、N02、鹵素、CN、C(0)N(R，)2 、NR，C(0)R，、S02R，、S02N(Rf)2或 NR，S02R，之基團取代；及 R4為選自於氫、氟或〇CH3。 2.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中： 85918-951011.doc 1282335 Rl為視情沉具有1-2個氮原子之經取代5-6員雜芳基環。 3·根據申請專利範圍第2項之化合物，其中·· R1經0-2個選自於鹵素、氧基、R、CO2W、OR1、N(Rf)2 、SR，、C(0)N(R，)2、NR/CCCOR，、S02R’、S02N(R，)2或 nr’so2r’之基團取代。 4·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中： R3為選自於 C(0)NHR、C(0)R、C(R，)=NOR、C(R，)=NOH 或C02R，其中；每個R為獨立選自於視情況經取代Cle4脂肪族基團或T-Ar，其中： T為（CH2)y，其中y為〇、1或2 ;及 Ar選自於5-6員飽和環、未飽和環或具有u個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜環，或具有i_2 個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5_6員雜芳基環。 5·根據申請專利範圍第4項之化合物，其中每個R為獨立選自Cm脂肪族基團或T_Ar，其中：孩C〗_4脂肪族基團經0·2個獨立選自於自素、〇r,或 N(Rf)2之基團取代；丁為（CH2)y，其中y為0、1或2，及 Ar選自於吡咯啶基、呋喃基”塞唑基、四氫呋喃基、嘧啶基、吡呼基、吡啶基、六氫吡啶基、咪唑基、塔井基、異啊基”比吐基、四氫峨喃基，或環戊埽，其中： 85918-951011.doc 1282335 Ar經0-2個獨士、 6. 乂選自於11，、氧基、OR，或N(R，）2 《基固取代。根據申請專利範圍第4 或Π，：，、之化合物，其中該化合物為式II

或其醫藥上可接受之鹽類，其中： %八經〇-2個獨立選自於州尺，)2、〇化，、&或^，之基團取代。根據申請專利範圍第4項之化合物，其中該化合為為式 III或 ΙΙΓ :

或其醫藥上可接受之鹽類，其中： 85918-951011.doc ^82335 經0-2個獨立選自於氧基或r之基團取代。 Iv .申請專利範固第4项之化合物，其中該化合為為式 0

R3 HN Q Μ IV 或其醫藥上可接受之鹽類，其中：所示咪唑環視情況在第4位置經C(0)N(R，)2取代，視情況在第2位置經R取代，或視情況在第4位置經C(0)n(R，)2 取代且在第2位置經R取代。 9·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物為式 ΙΠ-a ：

R2 HN Q III-a 85918-951011.doc 1282335 或其醫藥上可接受之鹽類，其中·· 所示吡啶酮環經0-2個獨立選自於南素、氧基、r、c〇… OR N(R )2、SR、C(0)N(R’)2、nr，C(0)R，、s〇2r, 、so2n(r’）2或nr，so2r，之基團取代。 2 10·根據申請專利範圍第9項之化合物，其中該化合物為式 III-b ： ^ R

HN 〇>=° R2 Ill-b 或其醫藥上可接受之鹽類。 11·根據申請專利範圍第10項之化合物，其中卩為_NH_。 12·根據申請專利範圍第6項之化合物，其中R2為乙基。 13 ·根據申請專利範圍第7項之化合物，其中R2為乙基。 14·根據申請專利範圍第8項之化合物，其中R2為乙基。 1 5 ·根據申請專利範圍第1 〇項之化合物，其中r2為乙基。 1 6. —種化合物，其係選自於由 85918-951011.doc -6 - 1282335

85918-951011.doc 1282335

MO 1-11 M2

M3 1-14 I -15

1-16 1-17 1-18

85918-951011.doc 1282335

1-20 1-21 1-19

1-22

1-23 1-24

85918-951011.doc -9- 1282335

1-32

1-31 1-33

1-34 135 1-36

85918-951011.doc -10- 1282335

1-31 1-32 1-33

1-34 1-35 1-36 85918-951011.doc -11 - 1282335

1-37 1-38 1-39

1-40 1-41 1-42

1-43 and 1-44. 所組之群。 1 7 · —種抑制生物樣品中旋轉酶活性之方法，其包括將該生 -12- 85918-951011.doc !282335 18. 19. 20 21 22 ^ 與根據申請專利範圍第1項之化合物或包括根據申Μ專利範園第1項之化合物的組合物接觸之步驟。種抑制生物樣品中Τορο IV活性之方法，其包括將該生物樣品與根據申請專利範圍第1項之化合物或包括根據申μ專利範圍第1項之化合物的組合物接觸之步驟。抑制生物樣品中旋轉酶及Τορο IV活性之方法，其包括將琢生物樣品與根據申請專利範圍第1項之化合物或匕括根據申睛專利範圍第1項之化合物的組合物接觸之步驟。，一種減少病患體中細菌數量之醫藥組合物，其包括有效含量之根據申請專利範圍第丨項化合物，及醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑。 .一種用以治療、預防或舒緩病患體中細菌感染嚴重之醫藥組合物，其包括有效含量之根據申請專利範圍第1項化合物’及醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑。 •根據申凊專利範圍第21項之醫藥組合物，其中所欲治療的細鹵感染之特徵係存在下列一或多種之細菌：肺炎鏈球菌（Streptococcus pneumoniae)、化膿性鏈球菌 (Streptococcus pyogenes)、糞腸球菌（Enterococcus faecalis)、腸球菌（Enterococcus faecium)、克雷柏斯肺炎球菌（Klebsiella pneumoniae)、腸產氣桿菌屬（Enterobacter sps·)、變形菌屬（Proteus sps·)、·，綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa)、大腸桿菌（Ε· coli)、靈桿菌（Serratia marcesens)、金黃葡萄球菌（Staphylococcus aureus)、陰性 85918-951011.doc -13 - 1282335 凝集反應的葡萄球菌（Coag· Neg· Staph)、嗜血性流感桿菌（Haemophilus influenzae)、炭疽桿菌（Bacillus anthracis) 、肺炎黴漿菌（Mycoplasma pneumoniae)、黏膜炎莫拉菌 (Moraxella catarralis)、肺炎披衣菌（Chlamydia pneumoniae) 、退伍軍人肺炎菌（Legionella pneumophila)、肺結核桿菌 (Mycobacterium tuberculosis)、幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori)、白色葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis)或肺結核桿菌（Mycobacterium tuberculosis)。 23. 根據申請專利範圍第22項之醫藥組合物，其中所欲治療細菌感染的特徵係存有下列一或多種細菌：肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、糞腸球菌、腸球菌、金黃葡萄球菌、陰性凝集反應的葡萄球菌、嗜血性流感桿菌、炭疽桿菌、肺炎黴漿菌、黏膜炎莫拉菌、肺炎披衣菌、退伍軍人肺炎菌、肺結核桿菌、幽門螺旋桿菌、白色葡萄球菌或肺結核桿菌。 24. 根據申請專利範圍第22項之醫藥組合物，其中欲治療的細菌感染係選自下列一或多種感染症：尿道感染、呼吸道感染、手術傷口感染、中心導管感染、菌血症、支氣管炎、鼻竇炎、肺炎、前列腺炎、皮膚及軟組織感染、腹腔内感染疾及發燒性中性白血球缺少症病患之細菌感染。 25. 根據申請專利範圍第21項之醫藥組合物，其另外包括治療藥劑，其係選自於抗生素、抗發炎藥劑、基質金屬蛋白抑制劑、脂氧化酶抑制劑、細胞激素拮抗劑、免疫抑 85918-951011.doc -14· !282335 26. 27. 制劑、抗癌藥劑、抗病毒藥劑、細胞激素、生長因子、免疫調節劑、前列腺素、抗血管過度增生化合物。根據申請專利範圍第21項之醫藥組合物，其另外包括可增加細菌生物體對抗生素之感受性之藥劑。一種製備式A化合物：

或其鹽類之方法，其包括將式B化合物：

或其鹽類，與式C化合物：

反應’其中該反應係在至少一種質子性溶劑之非_鹼性基質中進行，其中： X為氧或硫； R 及1^為獨立選自於R5、OR5、n(r5)2、c(o)n(r5)2、co2r5 85918-951011.doc -15- 1282335 ，或 R及Ry—起組合成具有0-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-8員飽和環、部分未飽和環或芳基環，及其中： Rx及Ry所形成的環可視情況經丨_3個獨立選自於氧基、鹵素、Ri、R3、r5、〇r5、n(r5)2 、oc(o)r5、nr5c(o)r5或 R6之基團取代； R1為具有1-3個獨立選自於氧、氮或硫雜原子之5_6員芳基環，其中：經0-3個獨立選自於R、氧基、c〇2R，、OR，、n(R，)2 、SR’、N02、鹵素、CN、C(0)N(Rf)2、NR，C(0)R，、S02R’、S02N(R’)2或NR’S02R’之基團取代；每個R’為獨立選自於氫、CN4脂肪族或具有0-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、未飽和環或芳基環，其中： R經0-3個獨立選自於鹵素、氧基、r0、n(R〇)2、OR0 、CO2R0、NR0C(O)R0、C(O)N(R0)2、SO2R0、 so2n(rg)2或nrgso2rg之基團取代； R3選自於 C(0)NHR、C(0)N(R)2、COR、C02R、COCOR 、S02R、S02N(R)2、S02NHR、C(R)=NOH、C(R)=NOR 、（:(R)=NR或 C(R)=N-NHR; 每個R為獨立選自於T-Ar或Ci-6脂肪族基團，其中：該Cu脂肪族基團經0-3個獨立選自於R’、氧基、 CQ2R，、OR,、N(R，)2、SR，、N02、鹵素、CN、 85918-951011.doc -16- 1282335 c(o)n(r’)2、nr’c(o)r’、S02R’、s〇2N(R’)2 或 NR*S02R/之基團取代； T為（CH2)y ’其中y為〇、l或2; Ar選自於： (a) 3-8員飽和環、未飽和環或芳基環； (b) 具有1_3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之員雜環；或 (c) 具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜芳基環；其中 Ar經0-3個獨立選自於R，、氧基、c〇2r，、0R，、N(R’)2、SR’、NO〗、鹵素、CN、C(0)N(R，)2 、NR丨C(0)R，、S02R-、S02N(R，)2或 NR，S02R，之基團取代；每個R5獨立選自於氫、Cl-0脂肪族基團，或具有〇_3個獨互選自氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、部分未飽和環或芳基環，其中： r5视情況經1-3個獨立選自於画素、氧基、r〇、n(r〇)2 、〇R〇、C02R。、NR0C(〇)R0、C(O)N(R0)2、S〇2r〇、so2n(r0)2或nr0so2r〇之基團取代；每個R為獨立選自於氫、c1-0脂肪族或具有丨_2個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜芳基環或雜環；及 R選自於R2、Cl·6脂肪族或具有0-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、部分未飽和環或芳基環，其中： 85918-951011.doc 17- !282335 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. R*視情況經1-3個獨立選自於_素、氧基、Rg、N(R〇)2 、OR0、CO2R0、NR0C(O)R0、C(O)N(R0)2、SO2R0 、so2n(rg)2或nrgso2rg之基團取代；及 R2選自於氫或Cw脂肪族基團。根據申請專利範圍第27項之方法，其中： Rx及Ry—起組合成具有〇_2個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之視情況經取代6-7員飽和環、部分未飽和環或芳基環；及 R* 為 R2。根據申請專利範圍第27項之方法，其中：组合成經—個Rl基團及_齡3基團取代之为并環。根據申請專利範圍第27項之方法至約7下進行。根據申請專利範圍第30項之方法至約4下進行。其中反應係在pH約2 其中反應係在pH約3 根據申請專利範圍第27項之方法，其中該質子性溶劑選自於水、甲醇或乙醇。根據申請專利範圍第32項之方法，其中該質子性溶劑為根據申請專利範圍第32項之方法，應混合物中。其中將礦物酸加至反

根據申凊專利範圍第34項之方法，酸或氫氯酸。其中礦物酸選自於硫 85918-951011 .doc -18 - 1282335 3 6.根據申凊專利範園第27項之方法，其中反應係在4〇_ 1 〇〇。〇下進行。 37. —種製備式Γ化合物： R1

或其醫藥上可接受鹽類之方法，其包括其包括將式B 合物： R1

B· 或其鹽類，與式C，化合物：

R2 Η Η c· -鹼性基芳反應’其中該反應係在至少一質中進行，其中： Rl為具有1-3個獨立選自於氧種負子性溶劑之非、氮或硫雜原予之5_6員 85918-951011.doc -19- 1282335 基環，其中： R1經0-3個獨立選自於R、氧基、c〇2r，、OR，、n(R，)2 、SR’、N02、鹵素、CN、c(〇)n(r，)2、NR-c(〇)R，、S02R；、802>1(11’）2或>^80211’之基團取代；每個R’為獨立選自於氫、CN4脂肪族或具有0-3個獨立選自元氮、氧或硫雜原子之5-6員飽和環、未飽和環或芳基環，其中： R’經0-3個獨立選自於鹵素、氧基、R〇、n(R0)2、OR0 、C02R〇、NR0C(O)R0、C(0)N(R〇)2、SO2R0、 SC^NCR0)】或NR0SO2R0之基團取代；每個RG獨立選自於氫、Cw脂肪族、苯基獲具有1-2個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5-6員雜芳基環或雜環； R2選自於氫或Ci-3脂肪族基團； R3 選自於 C(0)NHR、C(0)N(R)2、COR、C02R、COCOR 、S02R、S02N(R)2、S02NHR、C(R)=NOH、C(R)=NOR 、C(R)=NR或 C(R)=N-NHR ; 每個R為獨立選自於T-AraCw脂肪族基團，其中：該Cu脂肪族基團經0-3個獨立選自於R，、氧基、 C02R,、OR,、N(R’)2、SR,、N02、鹵素、CN、 C(0)N(R’)2、NR，C(0)R，、S02R，、so2n(r’)2 或 NE/S02R·之基團取代； T為（CH2)y，其中y為ο、1或2 ; Ar選自於： (a) 3-8員飽和環、未飽和環或芳基環； 85918-951011.doc -20- 1282335 (b)具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之3_7員雜環；或 (0具有1-3個獨立選自於氮、氧或硫雜原子之5_6員雜芳基環；其中 Ar經0-3個獨立選自於R，、氧基、c〇2r，、0R，、N(R’)2、SR’、N〇2、鹵素、CN、C(0)N(R，)2 、NR’C(0)R’、S02R’、S02N(R，）2或 nr，s〇2R，之基團取代。 38. —種式C”化合物：

/R2 N H 其中： R2選自於氫、乙基、異丙基、環丙基或丙基；及 Μ選自於納、却、麵、絶或麵。 39·根據申請專利範圍第38項之化合物，其中μ為鈉或抑。 40·根據申請專利範圍第38項之化合物，其中R2為乙基。 41· 一種抑制旋轉酶活性之醫藥組合物，其包括有效含量之根據申請專利範圍第1項化合物，及醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑。 42. —種抑制Τορο IV活性之醫藥組合物，其包括有效含量之根據申請專利範圍第1項化合物，及醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑。 85918-951011.doc -21 - 1282335 43. —種抑制旋轉酶及Τορο IV活性之醫藥組合物，其包括有效含量之根據申請專利範圍第1項化合物，及醫藥上可接受載劑、佐劑或媒劑。 85918-951011.doc 22-