TW517155B - Standard fluid for flow cytometer - Google Patents

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經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（1 ) 發明^持術镅Μ 本發明偽與為進行流動式細胞計量器之精度管理或校 準所使用之標準液有關者。更詳言之，本發明偽與為分析 尿中細胞所用之流動式細胞計量器用之標準液有關者。 以汴拎術 以往_為進行血液中之細胞或尿中之粒子之分類計數 ,使用流動式細胞計量器之方法，夙已知名。該方法，偽 以染色液對樣本試料中之細胞施予染色後，令其一個個於 流動槽中流過，並對經過染色之細胞照射激發光線，測定 發自細胞之螢光或散射光，藉以進行分類計數。 然而，於使用流動式細胞計量器進行分析之際，有必 要將該裝置加以校準，以便獲得正確之數據。為進行流動 式細胞計量器之精度管理或校準工作，一般均使用經固定 化之紅血球或細菌等細胞 < 膠乳頼粒、螢光顆粒等。例如 ,特開平6 - 1 02 1 5 2號公報掲示使用離子交換樹脂之流動式 顆粒奎像解析裝置用標準液。另外，特開平4 - 278 46 0號公 報亦記載有使用細胞、菌體、膠乳粒子、撤膠囊、澱粉粒 子、白明_粒子及花粉等作為標識顆粒。 然而，、細胞或菌體等生物來源之材料，採得檢體常有 偏體間差異，在提供穩定品質方面有其困難。另外，尚有 受到病原菌慼染之危險性，或需要冷鶊保存等處理方面之 繁瑣性。 膠乳粒子由於一般無法染色，故無法進行染色液之管 理。另外，結合螢光色素之螢光顆粒，雖可進行光學条統 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 。。r。， 3 38584 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

517155 A7 B7 五、發明説明（2 ) 之管理，然而無法進行染色条統之管理（不僅染色液本身 尚 ο I \)/ 31 ms 理理 管管 之之 條 色 染 等 理 管 度 溫 及 理 管 量 注 分 之 液 色 染 有 有 等 粒 顆 膠 明 白 粒 顆 粉 澱 囊 膠 徹 者 再 被胞細 泊 事細之 。像 此際 象理畫 。 實 對管粒 應與定度顆 反性測精將 色和 為或俗 染 親作作 ， 之之 與工報 同素 出準公 不色 示校號 胞中顯行52 細 液能進21 之 色以易10 象染，容6-對與 質較平 定粒物者開 測顆 用應特 為等準反述 作該 校之上 與於 。同， 出 由 故相外 示·.乃 之乎另 顯/為 同幾 時認 不胞 液有 準液 標準 之標 用之 所用 置置 裝裝 之之 子度 粒強 析光 分螢 像及 畫度 之強 子光 粒射 個散 各析 自分 並與 來非 。 下並者0 關 頴 間 之 決 解 擬 明 發 示危為 顯之液 能染準 、 感標 失具用 缺不器 之 、量 術應計 技反胞 往之細 以同式 述相動 上乎流 服幾之 克胞用 可細使 供之理 提象處 以對易 係定容 明測且 發為並 本作、 C 與性的 出險目 0 決 解 為 段 丰 之 取 摆 所 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 達 為 終 等 人 明 發 案 本 男 結 究 研 意 銳 經 的 百 述 上 鬣成 D tr 力 ο 液液與 色準出 染標示 用之顯 可粒能 有顆後 含之色 、 應染 料反過 材樣經 之同有 源象含 來對以 物定供 生測提 用與僳 使出明 需示發 毋顯本 發可 ， 開並即 功色亦 成染 於以 粒 其 之 在 度 ， 強 液 光 體 射 。等 散者液 及液尿 度準 、 強檫液 光用血 螢器偽 之量料 同計試 相胞本 略細樣 約式之 胞動象 細流對 之之定 象徽測 對特為 定其作 測為 為子 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 4 3 8 5 8 4 517155 A7 B7 五、發明説明（3 ) 中含有之成分，例如以血液之情形言，有紅血球、白血球 細感功晶 測 。作 ，程 皮 身腎之 為粒 與外同 上 全因成 作顆 得另胞 、或或構 。與之獲 。細 球染；肪胞出度可者之 血感物脂^ 示強足素象 白部生離 顯光著色對 、局 徹游 可射吸 之定 球有等或象後散能度測 血 含蟲品 對色及 用強為 紅亦生藥定染度選光作 有往寄療測過強偽螢與 則往及翳 之經光 ，之用 , 中蟲 、明 有螢 粒度使 言尿原分 發含之 穎程可 而在 、成本 ，同 之等雖 液 ，菌 學為液 相液同 ， 尿者真化即準略 準胞言 以再 、由分標約 標細而 , 。_有成之胞明之小 等等細含 等明細 發象大 板 柱之而 該發之 本對之 小圓來·全 。本象 於定粒 血及帶/不等 對用測穎 及胞染能體 定使為就 , 小 外大 關等 有同 小用 大使 之要 粒定 顆一 與必 了未 除 · 度此 強因 之 ， 光態 射狀 散面 而表 然之 , 粒 者顆 小映 大反 。 度尚者 , 夠添 後能未 劑即使 定亦即 穩 ， 〇 度化至 感變之 光生便 螢發方 加態此 添狀因 步色 · 一 染化 進之變 經子生 • 粒發 液中度 準存感 標保光 之止螢 明防止 發間防 本時間 長時 可長 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T Φ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 穩狀 之定 態穩 狀更 色以 染可 粒即 顆 ， 持劑 保該 可加 仍添 下果 溫如 室 ， 在而 , 然 劑 ， 定度 穩程 度月 感値 光 3 螢達 加定 機 有 性 溶 水 以 劑 定 穩 之光 存螢 保 態 8 達 可 下 溫 室 在 如 例 月 個 上 類 醇 使 以 而 想 m·- 理 較 媒 溶 圍 、 。範 醇佳之 乙最用 、 醇 使 醇乙適 甲用良 用使可 使以為 可而圍 ， ， 範 言 等之 而醇 ％ 體甘/W 具 一一5W 。及 J 適醇 5 合 二在 最 乙以 類 、則 醇醇度 甘丙濃 異 用 、 使 醇於 丙至 在 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 5 38 5 8 4 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（4 ) 6〜14w/v%之範圍較佳。另外，添加該等物質時，亦有抑 制雜菌繁殖之效果。 發明之奮旃形熊 使用於本發明標準液之顆粒，以球狀氣化矽驂較為理 想，尤其以液晶隔Μ用氣化矽為佳。另外，液體層析法用 填充劑之顆粒用於本發明之標準液亦佳，尤其交聯瓊脂醣 或多孔性氣化矽膠為佳。 例如以尿中出現之細胞為例，將對於各細胞而言最佳 之顆粒詳細說明如下。 紅血球 以使用粒徑3〜15μπι、最佳為5〜ΙΟμιη之高純度氣化矽 膠之球狀顆粒為良適。尤其，如液晶隔片般充作電子材料 使用者最適合。可使用例如宇部日東化成公司製之 Η I P R E S I C A S Ρ τ Μ (平均粒徑 5 , 1 μ πι)者。 白血球 以使用粒徑5〜2〇μιη、最佳為7〜15μπι,具有細孔徑5 〜ΙΟΟηπι,最佳7〜ΙΟηιη之全多孔氣化矽膠為最良適。可使 用例如 GL Science Co·, Ltd販售之 Zorbax BP-SILTM( ROCKLAND TECHNOLOGIES Ins.製造，粒徑 7〜8mbi、細孔徑 7〜8 η m )者。 上皮細胞 以使用粒徑15〜30〇μιη,較佳20〜20〇μπι,細孔徑5〜 40πιβ,較佳10〜lOOnm之多孔性氣化矽膠為宜。可使用例 如MACHEREY-NAGEL公司産製之NUCLE0PREPTM(平均粒徑30 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 6 38 58 4 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（5 ) μπ)者。其他，亦可使用纖維素膠（日本Chissoci公司産製 之CellulofineTM)、親水性乙烯基聚合物醪（TOSOH Co·, Ltd産製之 Toyopal HWTM)等。 圓柱 以使用粒徑25〜30〇μπι,較佳40〜20〇μιη之交聯瓊脂醣 膠為宜。可使用例如Pharmacia Biotec Co·, Ltd産製之 Sepharose CL-2BTM(粒徑 60〜200 μm )者。 細菌 以使用粒徑0,7〜5μ«ι,較佳1〜3μπι之全多孔性球狀氣 化矽膠為宜。可使用例如Pia TEC CO., Ltd産製之PU S e e d τ 11 (平均粒徑2 μ m )者。 能夠充作白血球、上皮細胞、圓柱及細菌使用之顆粒 為球狀顆粒，通常用來作為液體層析用之填充劑使用者即 可使用。另外，亦以未施予化學修飾者為佳。另外，該等 僅偽其中一例而已，祗要經過染色後之螢光強度及散射光 強度與作為測定對象之細胞幾乎相同者均可使用，其粒徑 及材料並無待別之限制。 上述之顆粒，偽例示用於測定尿中含有之細胞成分時 所使用者，測定血液時，試料中除了紅血球、白血球外， 尚含有血小板。適合血小板之顆粒，以使用粒徑1〜5μπ», 較佳2〜4μπι之全多孔性球狀氧化矽醪為佳。 本發明之流動式細胞計量器用標準液，可將粒子懸浮 在水性媒體中，較佳為pH 3〜7,更佳為pH 4〜5之緩衝液 中調製而成。再者，必要時亦可添加氛化鈉、氛化鉀等生 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 7 38 5 84 517155 A7 B7 五、發明説明（6 ) 理塩類、葡萄糖等單糖類、白蛋白、血紅蛋白、亞硝酸塩 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 類對成 製象甘為»,之1 式胞計測有東 液之 種定而 調對二素-2等& 動細胞料中如。準液 、 色 一 測製 外定、色藍基藍糸 流式細試尿例列標色 單作調 另測醇性 丙咐t 行動式液動用条明染 將充合 與為二子 U 二ΠΙΜ 2進流動尿自使 R 發與 I ED jHJ 可合混 偽作乙離to， 羰 液之流，全可置本液 雖配粒 ，於在陽 _,3噁+ 準明通器之者裝明準 , 可顆 液應解用 -,b3」 G 檫發流量製用定說標 液亦類 準對溶採，2^,2^6匕用本其計産定測形之 準，同 標可其以2,-2W Μ 器.將令胞司測球情通 檫成不 用用將料i-g、基台^〇 景，，細公料血之流 用而之 器使·染aau戊€計時合式子試紅液内 量製上 量則料光 二 B、 胞準混動電液網準槽 計調以 計液染螢一- _»明細校相流用血動標應 胞中類 胞色光 。^ 惡^丹 式或液於醫：自用反 細體種 細染螢用3,「L3若 ·動理色至亞00之定動 式媒二 式。種使化21·， Ϊ 流管染 6東· 製測流 動性將 動用多中碘2 素1之度與槽如=>産料在 流水， 流使或媒如ft-色 A明精液應例置司試對 。之在料 之合種溶例基_条DN發之準反用裝公液 。 等明浮試 明混一等用甲f 藍對本器標動使析子尿法 劑發懸本 發液之醇使， 咐針用量用流可分電以方 腐本粒·.樣 本色胞甲可3fof能使計器之者分用H用 防穎.之 染細、，3,「羰是 胞量器用成翳 使 、 之象。 之之醇宜化2f二或 細計量定形亞 之 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 8 3 8 58 4 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（7 ) 混合物（以下稱為標準試料）照射激發光，測定標準試料中 之有形成分所造成、前方散射光強度及螢光強度。藉由此 步驟，可進行標準試料中所含有形成分之分析。另外，進 行圓柱測定時，將標準試料之電阻訊號強度（體積數據）加 以測定，則可提高檢出靈敏度，两甚為方便。從而，於進 行尿液試料之測定時，以使用可測定電阻訊號與光學數據 之流動式、胞計量器為佳。適合使用本發明之檫準液之流 動式細胞計量器，可舉例如第〗圖所示之裝置。 首先，將閥門1及2打開規定時間，即可藉廢液室之 負壓，自吸引噴嘴3引進試料液使充滿閥門1及2。注射 筒4以一定流量將液體壓出，自試料用噴嘴6將試料液唧 出，同時將閥門8打開，將鞘套液送入流她槽5之室7。 由於執行該項步驟，如第1圖所示，試料即依循室7之内 徑被推擠成一條細流通過篩眼11。篩眼11之形狀，呈内徑 一邊為100〜30〇μιη之方柱形狀，其材質則以光學玻璃（包 含石英玻璃）所製成。如此經由鞘套細流之形成，即可使 粒子排列成一排，一個値自筛眼11之中心流過。流過篩眼 11之試料液與鞘套液則通過設置在室25之回收管14排出。 電極13偽設置在室25内部白金製者，充作正電極；而 電極12則僳設置在室7内部之不綉銷製者，充作負電極。 該電極12及13間之電阻，依鞘套液之電阻率（導電度）、篩 眼之孔尺寸（孔截面積）與孔長、試料液之電阻率，以及試 料液流通時之直徑尺寸決定之。 電極15係直流定電流源，可針對電極12及13間供應之 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 9 3 8 5 8 4 517155 A7 B7 _ 五、發明説明（8 ) 。令定電流在電極1 2及1 3間流通，卽可藉以産生由電極1 2 及〗3間之電阻及電流值決定之直流電壓。另外，當顆粒通 過篩眼1 1時，篩眼1 1兩端之電阻即變化，因此，僅在穎粒 子通過時電阻變大，可令産生在電極12及13間之電壓變化 。币i旦亦産生與通過篩眼1 1之粒子大小成正比之脈衝電壓 ，該電壓即與前述直流電壓相重叠，以致在電極12及13間 ,出現該等電壓。該等電壓由放大器16將其檢出，以電阻 訊號型式自2 9輸出。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 發振自激光器17之激發光線，由聚光透鏡18令其縮小 成橢圓狀，對流過篩眼11約略中心處之樣本流體26照射之 。在試料流通方向上激發光線之形狀呈與血球粒子之直徑 同樣寬度，例如ΙΟμπι左右；而在與試料流通方向及照射光 軸方向直交之方向上，則其寬度遠大於血球粒子徑，例如 150〜300mid左右。照射樣本流體26之激光光線，其中未接 觸到細胞（有形物）而直接透過流動槽6之透過光束，卽由 光束遮斷器19隔斷。照射到細胞（有形物）。而以狹窄角度 發出之前方散射光及前方螢光，則由聚光透鏡20加以集光 ，而通過遮光板30之針孔21。然後，透過分光鏡22,由濾 光器23進一步除去散光後，再由光電擴程管（Photo-BiHtiplier)(PTM)24將其檢出並變換成電氣訊號27輸出之 。散射光則在分光鏡2 2反射，由光電二極管31受光，再變 換成電訊28輸出之。 使用本發明之流動式細胞計量器用標準液，依循上述 之方法進行分析結果，顯示出與作為測定對象之細胞約略 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X：297公釐） 10 3 8 5 8 4 517155 A7 B7 五、發明説明（9 ) 同樣之反應舉動，可證明本發明之標準液可被用在流動式 細胞計量器之校準用途。 作用 將本發明之流動式細胞計量器用標準液與染色液相混 合，則色素即被粒子所吸箸，並依其吸箸量發出螢光。 本發明之流動式細胞計量器用標準液，偽使用可吸著 其量足以獲得與測定對象之細胞同一程度之螢光強度之色 素之粒子者。另外以粒子之大小而言，雖可使用與測定對 象之細胞同一程度之大小者，然散射光之強度除了與粒子 之大小外，尚反映粒子之表面狀態，因此未必一定要使用 一大小之粒子。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 例如，為使細胞染色而使用陽離子性色素，然而紅血 球之染色性較其他細胞為差。因此，充作代用紅血球之粒 子雖不能使用完全無法吸著色素者，然亦以不大會吸著者 為佳，通常使用可吸著其量足以發出與紅血球同等程度之 螢光強度之色素者。至於，粒子之大小，則使用近似實際 紅血球之大小（3〜1 Ο μ m)者。然而，即使其大小稍有不同， 祗要為散射光強度與紅血球約略同等者亦可。 一方，白血球及上皮細胞卻可以被強勁染色，因此充 作該等之代替物之粒子，則使用可吸著其量足以顯示與該 等細胞同程度之螢光強度之色素者。至於粒子之大小，則 亦與紅血球之情形同樣，雖可使用近似實際之大小（白血 球：3〜15μιο;上皮細胞·· 15〜15〇μπι)者，然祗要為散射 光強度分別與各細胞同等程度者，即其大小稍不同仍可使 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 3 8 58 4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 11 517155 A7 B7 _ 五、發明説明（10 ) 用。 另外，以圓柱而言，實際上又可分為含有與未含有封 入物者，而本發明之標準液則使用可充作其中任一種圓柱 之代替物之粒子。在粒子方面亦與其他細胞同樣，可使用 - 、錢 能吸著其量足以顯示出與實際含有封入物之圓柱同等程度 之螢光強度之色素者。在大小方面，則雖可使用具有近似 實際之大小（ΙΟΟμιη以上）者，然而只要散射光強度在約略 同等程度者均可使用。 以可充作細菌（大小：1〜3μιη)之代替物之粒子而言， 偽使用可吸箸其量足以産生與實際之細菌同等程度之螢光 強度之色素，而且散射光強度與細菌為同等程度之粒子。 玆依據以下之實施例更詳細說明本發明，然而本發明 之範圍並非限定於該等實施例者。 審施例 實施例1 :尿測定用標準液之測定 調製具有下述組成而可用於尿測定之標準液及染色液 〇 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 <標準液> 海布烈氣化矽卡SPTM 40個/μ 1

(平均粒徑5. Ιμ®,紅血球用，宇部日東化成公司製） Zorbax BP-SIL™ 4 0® / μ I (粒徑7〜8μ id,白血球用，購自吉艾爾賽茵斯公司） NUCLE0PREP 1 00 - 3 0 ™ 4 0 IS /μ i (平均粒徑3〇μη,上皮細胞用，MACHEREY-NAGEL製） 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 3 8 5 8 4 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 12 517155 A7 B7 五、發明説明（11 )

Sepharose CL - 2BτM 2個 /μΐ (粒徑 60 〜20〇μιη，圓柱用，Pharmacia Bioteck 公司 製）

批雅西持S-150TM 40個/μ I (平均粒徑2μΐΒ,細菌用，批雅特克公司製） 氛化鈉 1 0 g / 1 叠氮化納（sodiiiio azide) 1 g / 1 50roM檸檬酸緩衝液，pH 4,0,導電率13ms/Cm 首先，調製僅含有各自之粒子之高濃度懸浮液，在下 述之條件下進行粒子數之測定後，再將其稀釋並混合成如 上述之粒子濃度，調製上述之檫準液。 <染色液> 染色用試藥： -----—---— (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 碘化3 , 3 ’ -二己基-2 , 2 ’ -噁羰〇1咐藍 溴化乙錠 乙二醇 染色用稀釋液： HEPES 氫氧化鈉 0.144 w / w % 0.0 3 6 w/w % 9 9.8 20 w/w % 1.16 5 w / w % .0 3 6 w/V % 0.391 w / w % EDTA-3K 再加上精製水，使成為100%。 將標準液：染色用試藥：染色用稀釋液以40 0:40: 1160U1)之比率相混合，在反應溫度35t：、染色時間10秒 鐘之條件下，利用U F - 1 0 0 (東亞翳用電子公司製）測定之。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 13 3 9 5 9 4 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（12 ) 第2圖偽前方散射光強度與螢光強度之二次元散射圖 ,可將對應於紅血球、白血球及細薗之粒子加以分離並計 數之^ 第3圖偽螢光脈衝寬度與散射光脈衝寛度之二次元散 射圖，可將對應於上皮細胞之粒子與加以分離並計數之。 第4圖偽前方散射光強度與螢光強度之二次元散射圖 ，可將對應於紅血球與細菌之粒子加以分離並計數之。 其次，使用實際之尿試料，與上述同樣加上染色液後 進行測定。結果示於第5圖〜第7圖。第5圖偽對應於第 2圖之散射圖，在與第2圖約略同一之位置可觀察到紅血 球與細菌。另外，白血球集團可在圖面上比第2圖稍徹上 方部分觀察到，而在其下方，則可觀察到在細胞膜等處遒 受到損傷之白血球之疏落集團。該部分約略對應於第2圖 之白血球位置。 第6圖偽對應於第3圖之散射圖，在與第3圖約略相 同位置可觀察到上皮細胞。而在該尿試料中則並未觀察到 圓柱。 第7圖係對應於第4圖之散射圖，在與第4圖約略同 一位置可觀察到紅血球與細菌。 在各圖中，Fsc表示前方散射光強度、F1表示螢光強 度、Flw表示螢光脈衝寬度、Fscv表示散射光脈衝寬度、 RBC表示紅血球、WBC表示白血球、BACT表示細菌、EC表示 上皮細胞、而CAST則表示圓柱。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T Φ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 14 38 5 8 4 20 0 個 /μ 1 2 00 個 /μ 1 80 個 /μ 1 13 個 /μ 1 20 0 個 /μ I 30,5 g/ 1 5.0 g/ 1 9 . 5 w / w ^ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（15 ) 奮施例2 :尿測定用檫準液之測定 <標準液> 海布烈氧化矽卡SPTM Zorbax BP-S IL™ NUCLEOPREP 1 0 0 - 3 0™

Bio-Gel A-5m(Fine)TM (粒徑 38〜75μπι,圓柱用，Bio-Rad Laboratories 製）

批雅西待S-150TM 甲酸鈉 塩酸 乙醇（螢光感度穩定劑） NS-80DTM(異α唑条防腐劑，長瀨化成工業公司製） 0,01 w/ν % pH 4 . 0 ,導電率 25 ms/cro 首先與實施例1同樣調製僅含有各自粒子之高濃度懸 浮液，測定粒子數後，再將其稀釋並混合成如上述之濃度 ，調製如上述之標準液。 標準液之測定，亦在與實施例1同一條件下進行。 第8圖偽前方散射光強度與螢光強度之二次元散射圖 ,可將對應於紅血球、白血球及細菌之粒子，加以分離並 計數之。 第9圖僳螢光脈衝寬度與散射光脈衝寬度之二次元散 射圖，可將對應於上皮細胞之粒子與對應於玻璃圓柱之粒 子加以分離並計數之。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 15 38 5 84 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517155 A7 B7 五、發明説明（14 ) 第10圖亦僳前方散射光強度與螢光強度之二次元散射 圖，可將對應於红血球與細菌之粒子加以分離並計數之。 發明之放果 應用本發明時，可提供能顯示出與測定對象之細胞約 略相同之反應舉動，且不致有細胞感染等危險性，並且容 易操作、處理之流動式細胞計量用標準液。 另外，使用散射光強度及螢光強度不同之二種類以上 之粒子，即可正確進行感度調整。例如，可以利用感度大 之粒子進行大概之感度調整後，再利用感度小之粒子進行 微調整。 圖而簡望說明 第1圖表示流動式細胞計量器之略圖。 第2圖表示使用本發明之標準液所獲得之前方散射光 強度與螢光強度之二次元散射圖。可將對應於紅血球、白 血球及細菌之粒子加以分離並計數之。 第3圖表示使用本發明之檫準液所獲得之螢光脈衝寬 度與散射光脈衝寬度之二次元散射圖，可將對應於上皮細 胞與圓柱之粒子加以分離並計數之。 第4画表示使用本發明之標準液所獲得之前方散射光 強度與螢光強度之二次元散射圖，可將對應於紅血球與細 ϋ之粒子加以分離並計數之。 第5圖表示使用尿試料所獲得之前方散射光強度與榮 光強度之二次元散射圖，可觀察到紅血球、白血球及細菌 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、^Τ 517155 A7 B7 五、發明説明（15 ) 第6圖表示使用尿試料所獲得之螢光脈衝寬度與散射 光脈衝寬度之二次元散射圖，可觀察到上皮細胞。 光菌二 射細之 散及度 方球強 前血光 之紅螢 得到與 獲察度 所觀強 料可光 試 ，，5;^ 尿圖散 用射方 使散前 示 元 示 表次表 圖二 圖 7έ8 第度·.第 強' 光 螢 與 度 強 射 散 元 次 並 豳 分 以 加 子 粒 之 菌 細 及 球 血 白 球 血 紅 於 應 對 將 〇 可之 , 數 圖計 元之 次柱 二 圓 之璃 度玻 寬於 衝應 脈對 光與 射子 散粒 與之 度胞 寬細 衝皮 C 脈上之 光於數 螢應計 示對並 表將離 圖可分 9 ，以 第圖加 射子 散粒 圖 射 〇 散之 元數 次計 二 並 之離 度分 強以 光加 螢子 與粒 度 之 強菌 射 細 散及 方球 前血 示紅 表於 圖 _ 1 對 第將 可 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 Φ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 7 11 3 8 5 8 4

Claims (1)

1. 517155 H3 牛 9(1 ί·κ

   第85115162號專利申請案 申請專利範圍修正本 (90年9月26日） ^式細胞計量器用標準液，係以含有經過染色 後能顯示出與作爲測定對象之細胞在± 3%範圍內同等 之螢光強度及散射光強度之直徑在3至15/z in球狀氧化 矽粒子及/或液態層析法用之直徑在5至20# m之塡充劑 粒子爲其特徵者。 如申請專利範圍第1項之流動式細胞計量器用標準液， 其中之球狀氧化矽粒子係液晶隔片用氧化矽者。 如申請專利範圍第1項之流動式細胞計量器用標準液> 其中之液態層析法用之塡充劑粒子係交聯瓊脂醣或多 孔性氧化矽者。 如申請專利範圍第1項之流動式細胞計量器用標準液 係進一步含有螢光感度穩定劑者。 經濟部中央標準局員工福利委員會印製 張 紙 本

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