TW310273B - - Google Patents

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Λ 6 Bo 濟部中央浮爭局3工消货合作u.srt·;ί 五、發明説明（1 ) 本發明範噃： 本發明係有閻神經及血管移接用之胎膜管。 本發明背景： 基於數個原因，胎膜、羊膜及絨毛胰被吾人遘用為啟 始物質。胎膜最好是人類的，雖然動物胎膜亦可使用。（ 1)在本發明之一方面，吾人巳閛明人類羊膜及絨毛膜導管 在老鼠體内之低免 ' __ I、E 及 m 型醪 C~^(fibronectin)、'^amTninT，以點斑法及 ELISA法進行試驗時，亦獲得證實。⑻人類胎盤叮以相當 不受限制之量取得，且價格低廉。（3)羊膜及絨毛膜被用 於各種鲁療及外科用途，巳有近9〇年。（4)它們巳被狡實 能形成新众管。（5)它們亦可被置於人體之皮下凹處長達 7星期而無急性排斥之現象。胎膜具有複雜之生化構造及 獨特之物理性質。利用本文稍後所將述及之處理方法，可 對它們進行物理性質方面之改良，而形成半硬質、具彈性 之管子’且具有不同長度、直徑及厚度。羊膜及絨毛膜之 生化组成主要為I 、I[及瓜型璆原、海淨氣蛋台及 其他醏蛋台。已證實外級可經由與属於受v^^in)族之 釉突性雖蛋白交互作用而促進軸突之伸展。免疫化學研究 方法疋進仃使吾人得以改良對羊膦及絨毛膜之處理方法， 以維持法雜·這些管子之主要成分，如本文稍後所述。 雖然W人類之羊膜及絨毛膜校佳，但來自其他動物之 這些膜，例如牛m，則構成了本發明之另一方面〇 臨床上利用神經自艘移接作&重建神經間棟之方法 其膜.七有爸種抗原，主要為 (^*=問...|.«'而之;.1今？择.^1#褀寫本頁) • —裝u 訂·

310273 五、發明説明（2 ) 是可〆接受的。神經自艘移 舉例來說，需要一額外的外 感凳過敏可能也是—個間題 寸上之限制。雖然神經同種 之一些缺點，然而移接之排 在臨床上之用途，不論是否 在神經研究上，目前之 出一理想之神經等管以供臨 利用包括矽氣橡膠、pTFg 、 、及條咏移接等不同材料來 材料中，每一種皆有其缺點 之環境以供神經之再生。__ 取得、價格低、容易製造、 性、非軟性、可菌解、且其 供轴突再生。如本文稍後所 類羊膜製成之神經導管，具 特性。 許多研究人員目前正在 依需要而定，此膠原之來源 能剌激一免疫反應而可能抑 及絨毛膜神經導管之免疫試 不顯著，因此，可避免一些 。雖然，羊膜及絨毛膜導管 % 組之微兆，且經電子顯微鏡 接之缺點已經被證實有很多， 科手術，在給予體造成麻晬或 ’且在给予體移接上經常有尺 異®移接巳克服了自骰移接上 斥仍為一重要問题且限制了其 使用免疫抑制則。 重點及未來之方向集中在發展 床使用硕究人员已砑究 激正S|>fp〇lyglactin)、肌肉基月 作鸟神經導管。所述及之这些 ’沒有一種被證明可提供理想 理想之神經導管應該是可輕易 具各種尺寸、非免疫性、橄孔 生化組成可提供一理想環境W 述’吾人已發展出一種利用人 有所提出理想神經等管之許多 研究利用醪原作為神經導管。 可W是同種或異種的，因此， 制神經之再生。本發明中羊膜 驗結果顯示其免疫反應很小而 可能影響神蛵再生之抑制因子 顯帝出菌解性及構造上大體重 檢查結果，局部炎症細胞浸潤 -•^"閲-评而之浼^^^再填寫本頁) 丨装- 訂· 4_ 本紙張中:(CNS) T .1 吡丨3· (2UI X 37 公兌 m

經濟部中央標準局3工消费合作社印S 五、發明説明（3 ) 情形相當輕微，局限於管髮周 性神經恩傷之變化。此種後==且不會生成類似使 供神經再生所遭遇之一主要=發展為利㈣氧橡… 利用羊膜及絨毛膜導管進荇 學誶仿μ心u 再生之功能性及形態 估、。果，證明其優於神經自雜移接及錢管。 同時，在血管被阻斯時，例如發生mum 移除時，亦需要可連接其近 長坻端及遠端〈血管。在繞流手術 ’當病人沒有足夠之解脈τ取代被移除之血拴動腺時， :了違些原因所進行之腿部靜眼利除可以避免，在後續之 ，術中亦然。同m移接壁之㈣及其管腔閉 5加諸於給予教端之罹病率亦為限制其使用之重要問題。 通常使用之血管為取自病人腿部或手臂之靜咏移接。冠狀 動眼之靜腺繞流及周固血管間之繞流移接所致之给予做端 之罹病率及不可顿期之明顯現象皆已為人所熟^。曾經被 嘗試遇且常被使用之—些血管，包括經保存之牛靜胍移接 、達克綸輔助移接、特夫綸、及膦動睞移接。血拴之高發 生率及這些移接之感杂亦為一個問題。為了達成一理想之 血管移接，移接應為不易發生血拴、容易取得、具各種尺 寸及長度、可伸展及具彈性。 依據本發明之羊膦及絨毛膜醪原管及導管為非免疫性 ，可輕易製成各種不同長度及直徑之管子。本發明之羊膜 及絨毛膜管可適用於神經移接或作爲冠狀動咏繞流或盗管 繞流手術之繞流管。 (淆先間.：'片而>'··;έ'δρ^再增寫本頁) Γ裝. .11. f 表纸張/utia用中闪準（cns)甲.1 ^(7(^7 X 297 公》> «0273 «0273 經濟部中央標準局3工消费合作吐，印以 Λ 6 五、發明説明（4 ) 本發明综述： 本發明係閼於提供用來移接之神經及血管或導管以迷 接神經及血管之間咮。衍生自腆狀羊膜及絨毛膜胎盤之工 、I、BI型膠原之物理性質業經改良，因此所製成之管子 得以維持恃通及彈性，血液流經其内腔時其壁可承受間隙 恩力’其中膜之胎面或光亮面為其內面，在神經移接時可 促進軸突之生長。 在本發明之一部分中係提供一種移接，其羊膜及軾毛 膝係得自新鮮之胎盤，最釾是人類者，羊膜及絨毛膜係分 離自胎盤，而二者中復蓋於膜之胎面基月之細胞單層物質 被經由暴露於胰睐或胃蛋白絳等方式移除之，以磷睃緩衝 溶液或蒸餾水重復沖洗羊膜及絨毛膜直至乾淨，然後經由 暴露於加馬射線或利用戊醛進行化學性交逮使羊膜及絨毛 膜交連，如此可將組織滅菌，保護之使免受病毒性疾病之 傳染，強化之並且使得該物贫得以由X狀重新塑造爲管狀 。然後將羊膜及絨毛膜包裝成層狀，使得光亮之胎面直接 指向完成管之内層表面。包裝之數目依管子之長度及直徑 而定◊然後將管子乾燥置於瓶中，封存之，作標記，若有 需要並暴露於2.5 φ得之加馬射線中以再度滅菌，並進一 步交連導管醪原。若有需要，以如血纖維蛋白醪等遑當之 醪將各層醪合，以P方止分層，特別是在較大之導管，如用 於it管移接時。 然後可將管子或導管儲存於例如_ 2〇下，直至使用 木紙張用中同囚家作準（CNS) ψ .1岈炫（2U| X 29Γ公兌) ~-'"毛^'-?.背而之;1"芦·^再塡寫本頁} •裝‘ 訂. Λ 6 Β(3 理濟部中央墚準局3工消¢=合作.吐.印.k 五、發明説明（5 ) 對神經移接而言 可使用神經促進因子 萃出物、神經生長因 同樣地，本發明 接一受阻斷周圍神經 ，而可避免以往早期 本發明進一步之 斯周圓神經近枝及遠 ~層層源自人類胎盤 膠原、I 、I 、I哩 ，且其膠原被以放射 維持13管之暢通，圓 端間之姖離，其直徑 % 本發明一進一步 或絨毛m之層面係有 本發明另·—進·— 其壁可使間質液體流 移接時，並供給許旺 本發明另一進一 作岛在神經學範疇内 棋型。 本發明一進一步 含有相間生長因子之 本發明一進一步 ，在進行 ，例如基 子及其他 之目的之 近枝及遠 工業之缺 目的為， 枝或者是 且其細胞 ，所構成 線或化學 管之長度 至少等於 之目的為 效醪合以 步之目的 過w供給 氏細胞生 步之目的 神經再生 移植時在羊膜及鉞毛膜管内 片之顆粒、、膠原 有間之生長因子。 一為提供一種管狀移接以連 枝或者是血管之近端及遑端 之優點。 點，並且 提供一種 血管之近 性物貧巳 之圓柱形 方法交迷 大於近枝 遠抆或端 ，提供一 防止分層 為，提供 移接用之 長所需之 為，提供 藥物研究 血·管之近 具有黹述 移接w連 端及遠端 被實贫移 管壁，其 ，囬管之 及遠枝或 之結締組 種移接其 〇 —種囬柱 早期營養 令*養。 一種圓柱 内含物付 二. 而 '辛 >ί\ 再 % 本 接一受阻 ，包括由 除之滅菌 胎面朝内 層數足以 近端及遠 織。 羊膜及/ 形移接， ，在神經 形移接以 料之研究 之目的為，提供—極 蚀神經移技 , 羊膦及/或織毛膜管。 矢，巴4 之目的為，提供—種 砷轾移接ϋ

装 訂

沒濟部中央-準局^工消泞合作社印1111· 五、發明説明（f)) 含有基顿粒之羊膜及/或絨毛脒管。 本發明一進一步之目的為，提供一種移接，其可製成 相當長之長度不會糾結，而可保持其形狀，其間之通路維 持榜·通。 本發明其他及進一步之目的、特性及優點處處可見。 較佳具體形式詳述·· Λ.羊膽之取得及製備 在本發明之这一方面，羊膜係取自新鮮之人類胎盤。 這些胎盤係來自香院之工作人負並且在分婕後24小時内送 達。只有兩個胎盤係來自已被篩撿出AIDS及肝炎病毒，而 他們並不屬於如IV綦品滥用者這類之高危險族群。要注意 以避免皮膚接觸到血液及組織，並使工作區墩遑受这些物 贤污杂之機會減至最小。 羊膜層係以手指分離之方法自胎盤分離。具相同厚度 之敌大可能羊膜）彳，係由所有取得之羊膜中遇取出來的， 慠底清洗所選取之膜片，最好是用磷瞍緩衝生理食里水或^ 蒸餾水，以去除所有血液及碎片。然後再進一步清洗膜， 直至圣白色透明。 U暴露於胰海等方式將復蓋於膜胎面基片之單層細跑 移除。在室溫下將膜浸潤於1 : 1蒸餾水與胰錄之溶液中 2小時。所用之胰辑最好是取自濃度25 *無钙或媒之 procine胰臟。然後再以胲豳處理之，重復沖洗羊膦，最句 是用磷睃緩衝生理食盈水或蒸餾水，直至得到乾淨、白色 而無粉紅色胰海痕跡之膜。 本纸叫中闪Ηΐ丨？準（cns)甲.1叹洛（2U) x 297公兑）8 ('^"閃····'1'而之：;1~^*^4":鳥本玎> -·1 裝-- 訂' 五、發明説明（7 ) 將經冲洗之羊膜片裝於蓁餘水瓶中，使暴露於5⑽,〇〇〇 雷得之加馬射線。以輻射處料滕會使膠原交#，组織滅 菌，使動物免受病毒性疾病之傳染，再繼之以使該物贫得 W Μ㈣Μ為導管或管狀。然後將瓶子貯存於_8〇 C之冷<Mfi中，如有需要可以用戊塔等化學方法使羊膜月 交連。 B.導管之裂造 將羊膜自冷凍貯存險段移出，然後置於室溫下解凍3 至4小時。在操作顆微鏡下檢视羊膜片之缺失，並列斷膜 之知或光亮面。利用輥轧機仔細收集寬度足夠所需爭管長 度及直徑之羊膜片。旋轉羊膜片使光亮之始面成4完成管 之内表面。 雖然羊膜片可包筑成任何所需之形式，最好是利用— 適當直徑經高度磨*之τ、_展幅機將羊膜“層狀包裝 爲 榜通所 而定。 之羊膳 需之長 燥大约 預防分 則或醪 ，封存 了維持羊 需羊膜片 舉例來說 ，而直徂 度。然後 30分錄。 層，如有 將成層或 之，作標 膜囬管 之要數 ，直徑 2.5者 將展幅 乾燥使 需要可 成#之 邊己f若 之形狀以避 或層數，依 1.6 - 1.8 英 W 15綦較理 機上之管子 得管子得以 利用如血織 羊膜片膠合 有需要並暴 免糾結現象並 管或圈管之長 吋之導管需要 想。導管可以 置於 40 - 60 。〇 輕易自展幅機 維蛋白醪等逋 0然後將管子 露於 2,〇〇〇,〇〇〇 能維持_! 度及直召 大約10丨 是te何叫 供葙中乾 移除。 當之黏合 置於狀中 雷得之力〇 — ........

$修正 • Λ 6 ™一— ^ RG 五、發明説明（8 ) 馬射線中以再度滅菌’並進一步交建導管發原。然後將導 管储存於-20 t：下，直至使用。 例證1 在此例證中，以免疫化學法評估在製成導管之前、後 ,人類羊膜中基底膜之完整性及薄月含量。依據本發明， 人额羊料管低免疫性，且當羊膜中有各種抗主要爲 1型膠原、鐵、私連务句、及省，以點斑法及ELISA法進 π試驗時，亦獲得證實。羊膦被廣泛用於各種蜃療及外科 用途，巳有近9〇年，且已證實其能用來形成新血管。曾將 其置於人體之皮下凹處長達7星期而無急性排斥之現氣。 涇濟部中央-準局3工消"合作.吐，印-'4 -•^11?-."而之：1,:立炉-1(,再^穷本页) -裝. 胎膜具有複雜之生化構造及獨特之物理性質。在本發 明中利用本文所將述及之處理方法，可對它們進行物理性 質方面之改良，而形成半硬質、具彈性之導管，且具有不 同長度、直徑及厚度。羊膜之生化組成主要爲工、E及迅 嗤膠原、及其他醋蛋白。已證實冷 可經由與屬於受體赛合蛋白族之軸突性鞑蛋白交互作用而促 進釉突之伸展。本發明中處理羊膜之方法使__保持為 这些組成中之主要成分0利用加馬射線之本方法具有—此 優點。已證實在.20 Μ雷得下，所有細菌、真菌及遽過性病 毒（包括AIDS )皆會被破壞。最好是利用2.5 Μ雷得之則量 ，以確保終產物完全滅菌。此則量亦會増加羊膜醪原之交 連而強化之，因此，使早膜導管可製成半硬質型，保持〜 些彈性’使在移植後維挦其暢通。不過，如前所述以巳知 方法，例如暴露於戊醛，進行化學交逹相當有效且很理祁 本紙i认，，丨，(CNS) ψ ., Di,», (7Γο χ 207 ...................._______ 1

綞濟部中央標準局資工消??合作让印公 免疫試 不顯著，因 。雖然，羊 ，且經電子 ，輕微，局限 傷之變化。 矽氧橡醪管 羊膜導 據為許旺氏 出菌解性及 如前所 &多能促進 等專利所述 ，基片可用 羊膜管中任 例證2 在此例 與自體移接 態及功能上 將11隻 經再生作用 驗結 此， 膜導 顯橄 於導 此種 以供 細胞 重組 述， 膠原 神經 ，膠 來作 何保 果δ/ΐ示 可避免 音顯示 鏡檢査 後者之 神轾再 長·期和f 硬拥通 之特性 本發明 萃出物 再生之 原萃出 為冰來 存溶液 ，羊 一些 出菌 結果 周因 發展 生所 究結 過成 之羊 、神 物質 物係 乾燥 中0 膜神經導管之免疫反應很小而 可能影響神經再生之抑制因子 解性及構造上大體重組之微也 ，局部炎症細胞浸潤情形相當 地區，且不會生成使性神經恩 為最近在提供臨床用途上利用 遭遇之一主要問題。 -采指出，主要構造上變化之從 層之導管及醪原之重組，顯示 種羊膜導管之獨特性贫。 膜管可用來作為如基片、、纽If 經生長因子及其他有關因子等 之載體。如美國第5,002,071號 萃取自人類之胎膜。舉例來說 基質，在移植時極化或保存於 證中，將依據本發明透遇導管之神經再生作用 及在實驗動物棋裀中其他型態之神經管進行形 之比较。 貓分為5组以評估速過脛骨神經4 cm間隙之神 l·丨裝丨. -4

木紙张&浼这丨丨]中(CXS) ψ .H見|5_ (2l0 X Jr公兌）I I

A 6 RG 五、發明説明（10) 第1組（3隻動 第2組（3隻動 黍因子之基片。 第3組（3隻動 第4組（1隻動 第5組（1隻動 追蹤这些動物六 行形態及組織學之研 利用肌肉内注射 與N02 混合物之方式 切除一 4 cm之段並 在第1組（羊膜 確保一 4 era之間隙。 物）羊膜管。 物）羊膜管及莩取自阢肉作爲神絰奮 部 中 央 T* 準 工 ；H Tf it 吐 印 含有祌經 在第 一 4 cm 之 在第 然後以神 在第 作任何處 在第 段，將神 追蹤 中未發現 業神經外膜 2組（羊膜 片段，Μ充 3組（神經 經弓突之方 4組（棋擬 理〇 5組（未修 經枝與下面 這些動物六 功能上之改 物）神經 物）進行 物）未修 個月後， 究0 Demerol 及 將貓麻醉 以下述方 )中，將 兩針分別 之管子的 一基片） 滿基片之 自體移接 法再接合 手術）中 自體移接。 棋擬手術作爲控制組。 復。 觀察其結果，對神經W段進 笨巴比妥μ及吸入i化乙垸 。將脛骨神經暴露於其中， 法進行修復： 羊膜管缝合於遠枝及近枝以 位於兩邊相隔180 °，通遇只 全部厚度。 中--如前所述，切除神經中 羊膜管連接間隙。 )中，切除一 4cm之片段， Ο ，以探針檢査脛膏神經而未 復）中，切除經t神經中一 4 cm之片 之机肉缝合以確定未修復。 個月，除了模擬手術者外，實驗族群 良。 本紙張用中!家巧準（CXS)甲.1 (：') ,·_____'_____________^_____^_____-τ (^也^-:一货而之泫念戸屮再塡寫本頁) ——....._________________12 A 6 --------- Βΰ 五、發明説明（u ) 在六個月時，犧牲這些描並進行形態及組織學上之矸 (-先閲-分而之汶念芦屮再填寫本頁) 究。結果頸示，羊膜基月為神經再生上一種很強之 既〜锝用物 ，同時指出，將肌肉基片加入羊膜膠原管中，會促進神經 之再生 〇 在抽突直方困中，和棋擬手術組比較起來，羊膜基片 組之分佈情形顯示其釉突较大，且有相當比例之釉突（雜） 落在1.5至2.25撖米之範園内。在神經自體移接時，其直 方固與棋擬手術組相當，但是有較高比例之釉突（37%)落在 〇.5至0.75微米之範固内。在羊膜管組中，軸突直徂在〇1 至1楸米之間，而大多數之軸突（58%)落在〇·25至〇·5橄米 之範固内。軸突直徂直方阖顯示，基月有助於產生較大之 抽突，而應該是最接近正常者。 此例證之結論為，人類羊膜導管為神經移接之強取代 ‘11 物，而肌肉基片在加入羊膜醪原管時，被證實是一種很舒 的神經管養物質。充滿基片之羊膜導管優於神經自體移接 0人類羊膿醪原管為神經再生上很好的導管，吁用於放置 任何神經營養物質。 例證3 ί£;#部中央標準局e«工消费合作.-江印" 在此例證中，以人類織毛膜取代人類羊膜。將械也膜 自羊膜分離而後得以取得，並以與Α段所述相同之方式處 理之，形成和B段相同之導管，具有和例證】及2所述相 似之性質遑。於神經生長及血管。如絨毛膜係分離自羊 膜，則使用肤海及W蛋白瘫之步驟可省略。 A 6 B6 "濟部中央？：&準局3工消"合作.11.111^ 五、發明説明（12 ) 例證4 在此例證中，以源自牛羊膜及絨毛膜之]；、E及^锂 膠原及其混合物取代人類之膜，如前所述，製倚並形成導 管或管子’對神絰生長及血管而言，具有和前面所述人類 之膜相似且令人滿意之結果。 本發明之方法包括以一包括至少一層無細胞性或上皮 物質，包括I 、H型醪原或其混合物、洛帶 #途_受句及其他醆蛋白，經滅菌之交連膳之管子連接一受 阻斯周園神經近枝及遠枝或者是血管之近端及遠端，其胎 面朝内。將膜以放射線或化學方法滅菌及交連，其層數足 以維持其揚通。管子之長度至少等於近枝及遠枝或近端及 遠端間之距離，其直徑5 ·>、戈从 * 0 升且你主> ♦於，最好是略大於，近及遠 枝或端之結締组織。對神經移接而纟，如前所& ,管子可 包含如基月、_梅或膠原莩出物或其混合物等神經生 長因子。將管子缝合或者令 ^有固疋在部近神經枝或血管端之結 締組織。 移接物可貯存長時間，A邾 J為移接材料方便易得之來源。 移接物可製成住何所需之直徑 卫1及長度，移接< 層狀物可予 以膠合，以避兔在使用β寺造成分層。 同樣地，連接一受阻靳神經近 r缺迎权·及遠枝或者是金管之 近端及遠端間間隙之移接，肖技 ^ ^ ' 包括—圓柱其壁係由至少一層 源自胎盤衍生自I 、I 、jj型膠婷砹 1吁席或其混合物之經滅菌交 連膜所形成，相當適當而令人滿意。 (綺屯間-背而.，/:;1:-5,(!再填贫本頁) _裝， 訂 4. 14 Λ 6 Β(3 五、發明説明（13 ) 同樣.地.，本發明相當通合於達到目的及目標，具有前 述特性及優點以及其他其中所蘊含者。 因為目前之本發明较佳具體形式是爲了揭示目的而提 出，如所附申請專利範®所定義，在本發明精神之範嘈内 可作改變及修正。 (请先間-以背而之注&PF再填寫本頁> .裝. 訂. 涇濟部中央標準局胃工消费合作让印以 本纸張尺茂这用中丙囚家丨？芈（CNS)甲.1规丨3· (210 X 29：•公兌） 15

Claims (1)

1. ^10273 A8 B8 C8 D8 月

   經濟部中央梯準局貝工消费合作社印装 々、申請專利範圍 1. —種用於連接一受阻斷神經之近端與遠端間以及血 管之近端與遠端間之間隙之移接物，卑含： 一圓柱，其長度至少等於受阻斷'神經或血管之近端 與遠端間之距離，而直徑至少等於受阻斷神經或血管之近 端與遠端間之直徑， 所述圓柱具有一由至少一層經滅菌之交連膜所形成 之壁，所述膜包含由I型、II型、及其等之混合物所組成 集團中選出之膠原， 所述膠原係衍生自胎盤之羊膜、胎盤之絨毛膜及其 等之混合物所組成之集團〇 2. 如申請專利範園第1項之移接物，其中所述壁包含 至少二層呈片狀之所述膜，係予有效膠合以防止使用時各 層之分層現象0 3.如申請專利範圔第1項之移接物，其中移接物允許 間質液體流過其圓柱壁〇 4. 如申請專利範圍第1、2、或3項之移接物，其中 移接物爲一神經移接物且含有至少一種神經生長因子0 5. 如申請專利範圍第1、2、或3項之移接物，其中 移接物爲一神經移接物且含有基片、纖黏連蛋白、羊膜膠 原萃出物或其等之混合物〇 6. 如申請專利範園第1、2、或3項之移接物，其中 羊膜或絨毛膜係衍生自人類之胎盤0 7. 如申請專利範圍第4項之栘接物，其中羊膜或絨毛 .膜係衍生自人類之胎盤〇 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4現格（210X297公釐） (請先閱讀背而之注意事項再填寫本其)

   S1G273 ABCD 六、申請專利範圍 8.如申請專利範圍第5項之移接物，其中羊膜或絨毛 膜係衍生自人類之胎盤〇 (請先閲讀背而之注意事項-*· Λ *1T 經濟部中央標隼局属工消費合作社印裝 本紙张尺度適用中國國家榡準（CNS ) Λ4規格（2丨Ο X 297公釐）