[go: up one dir, main page]

TW202412858A - 免疫接合物及方法 - Google Patents

免疫接合物及方法 Download PDF

Info

Publication number
TW202412858A
TW202412858A TW112127994A TW112127994A TW202412858A TW 202412858 A TW202412858 A TW 202412858A TW 112127994 A TW112127994 A TW 112127994A TW 112127994 A TW112127994 A TW 112127994A TW 202412858 A TW202412858 A TW 202412858A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
substituted
unsubstituted
immunoconjugate
conjugate
alkyl
Prior art date
Application number
TW112127994A
Other languages
English (en)
Inventor
曉軍 韓
書維 杜拉 瑪朱卡 歐爾
琴華 黃
凱文 杜安 班納
金柏莉 費雪
Original Assignee
美商薩諾管理公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商薩諾管理公司 filed Critical 美商薩諾管理公司
Publication of TW202412858A publication Critical patent/TW202412858A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68037—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a camptothecin [CPT] or derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6867—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from a cell of a blood cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

式(I)之免疫接合物包括用於將抗體靶向配體(Ab)鍵聯至藥物(D)之鍵聯基。此類免疫接合物之實施例可用於將藥物遞送至所選擇之細胞或組織，例如用於治療癌症。 Ab-[S-L 1- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D] n(I)

Description

免疫接合物及方法
本申請案係關於包括用於將抗體靶向配體鍵聯至細胞殺滅部份（諸如藥物）之鍵聯基之接合物，製作此類接合物之方法，以及使用此類接合物將細胞殺滅部份遞送至所選擇的細胞或組織的方法，例如用於治療或抑制癌症。
說明
已開發用於醫療用途之多種抗體藥物接合物(antibody-drug conjugate, ADC)。參見例如Nejadmoghaddam, M. et al., “Antibody-Drug Conjugates: Possibilities and Challenges”, Avicenna J Med Biotech 11(1), 3-23 (2019)。ADC中之抗體用作將藥物遞送至所選擇的細胞或組織，諸如癌細胞或腫瘤之靶向劑。在美國，美國食品及藥物管理局(FDA)已批准若干ADC配方，包括英妥珠單抗奧佐米星(inotuzumab ozogamicin)（商品名BESPONSA）、吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin)（商品名MYLOTARG）、布妥昔單抗維多汀(brentuximab vedotin)（商品名ADCETRIS）、及阿多-曲妥珠單抗恩他新(ado-trastuzumab emtansine)（商品名KADCYLA）。
美國專利第10,155,821號揭示抗腫瘤化合物經由連接子與抗HER2抗體接合之ADC。亦參見美國專利公開案第2020/0385486號及第2019/0077880號。曲妥珠單抗德魯替康係ADC之實例，其中抗HER2抗體（曲妥珠單抗）經由可裂解之馬來醯亞胺四肽連接子附接至抗腫瘤化合物（德魯替康）。FDA已批准稱為fam-曲妥珠單抗德魯替康-nxki（商品名ENHERTU）之配方，用於治療患有不可切除或轉移性HER2陽性乳癌的成年患者，該等患者在轉移性背景下已經接受了二或更多次基於抗HER2的治療方案。圖1繪示據信連接子將抗體(mAb)連接至藥物部份之方式。
FDA的批准代表治療性ADC之持續發展的里程碑。然而，仍然需要改進的ADC，以幫助解決長期以來感受到的對治療癌症及/或向所選擇的細胞或組織遞送治療酬載的額外選項的需求。
一些實施例提供一種式(I)之免疫接合物，其包含抗體或其抗原結合片段(Ab)、藥物部份(D)、及將Ab連接至D之連接子。在一實施例中，式(I)之免疫接合物包含式(II)之藥物部份。
一實施例提供具有式(I)之免疫接合物， Ab-[S-L 1- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D] n(I) 其中： Ab可係抗體或其抗原結合片段； L 1可係 ； L 2可不存在、係 、或 ； Z 1及Z 2各自獨立地可係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基； L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–或–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–； n 1可獨立地係0至12之整數； L 4可係四肽殘基； L 5可不存在或係–[NH(CH 2)n 2]n 3–； n 2可係0至6之整數； n 3可係0至2之整數； L 6可不存在或係 ； L 7可不存在、係 、 、或 ； D可係藥物部份；及 n可係1至10之整數。
在一實施例中，式(I)中之D可係式(II)之藥物部份，其具有以下結構： (II) 其中： R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環； R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成經取代或未經取代4、5、或6員雜環基、或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者可係經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2、或經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2； X 2可係–OR 9、-SR 9、或-NHR 9； R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0； 各Y獨立地可係H或鹵素； 各m獨立地可係1或2； 各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6； 各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6； R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7； R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3； R 9可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其限制條件是R 7及R 9中僅一者係L 4、L 5、L 6、或L 7；及 各X 3獨立地可係–H、–OH、–SH、或–NH 2。
一實施例提供一種式(IV)之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，該化合物具有以下結構： (IV) 其中： R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、及經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環； R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基； R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0； 各Y獨立地可係H或鹵素； 各m獨立地可係1或2； 各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6；及 各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6； R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8；及 R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
一實施例提供一種醫藥組成物，其包含本文所述之免疫接合物、本文所述之藥物化合物、或其醫藥上之活性鹽、及醫藥上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑、或其組合。
一實施例提供一種用於治療癌症或腫瘤之方法，其包含對患有癌症或腫瘤之對象投予有效量之本文所述之免疫接合物、本文所述之藥物化合物或其醫藥上活性之鹽、或本文所述之醫藥組成物。
一實施例提供一種有效量之本文所述之免疫接合物、本文所述之藥物化合物或其醫藥上活性之鹽、或本文所述之醫藥組成物在製造用於治療癌症或腫瘤之藥劑中的用途。
一些實施例提供式(III)之接合物，其包含官能基M1、藥物部份(D)及將Mi連接至D之連接子。在一實施例中，式(III)之接合物包含式(II)之藥物部份。
一實施例提供一種具有式(III)之接合物， Mi- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D (III) 其中： Mi可係 ； L 2可不存在、係 、或 ； Z 1及Z 2各自獨立地可係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基； L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–或–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–； n 1可獨立地係0至12之整數； L 4可係四肽殘基； L 5可不存在或係–[NH(CH 2)n 2]n 3–； n 2可係0至6之整數； n 3可係0至2之整數； L 6可不存在或係 ； L 7可不存在、係 、 、或 ；及 D可係藥物部份。
一實施例提供一種生產免疫接合物之製程，其包含：使有效量的硫醇官能化抗體或其抗原結合片段與本文中所述之接合物在有效形成如本文中所述之免疫接合物的反應條件下反應。
一實施例提供一種如本文中所述之免疫接合物、醫藥組成物、治療方法，用途、或製造方法，其中Ab係抗體或其抗原結合片段，其包含： a)重鏈，其包含： VHCDR 1，其包含與SEQ ID NO:1之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含與SEQ ID NO:2之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含與SEQ ID NO:3之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含與SEQ ID NO:8之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含與AAS之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含與SEQ ID NO:10之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
一實施例提供一種如本文中所述之免疫接合物、醫藥組成物、治療方法，用途、或製造方法，其中Ab係抗體或其抗原結合片段，其包含： a)重鏈，其包含： VHCDR 1，其包含與SEQ ID NO:15之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含與SEQ ID NO:16之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含與SEQ ID NO:17之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含與SEQ ID NO:22之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含與DAY之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含與SEQ ID NO:24之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
一實施例提供一種如本文中所述之免疫接合物、醫藥組成物、治療方法，用途、或製造方法，其中Ab係抗體或其抗原結合片段，其包含： a)重鏈，其包含： VHCDR 1，其包含與SEQ ID NO:29之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含與SEQ ID NO:30之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含與SEQ ID NO:31之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含與SEQ ID NO:36之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含與DAS之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含與SEQ ID NO:38之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
以下更詳細地描述這些及其他實施例。
以引用方式併入任何優先權申請案中
在隨本申請案提交的申請書資料表中任何及所有聲明主張國際或國內優先權的申請案，特此根據37 CFR 1.57及法則4.18及20.6以引用方式明示併入本文中，包括2022年7月26日申請之美國臨時專利申請案第63/369464號。 序列陳述
本申請案含有序列表，其已以電子方式提交且其全文特此以引用方式併入本文中。序列表創建於2023年7月21日，名稱係ZENO144.xml且大小係大約56 kb。 定義
除非另外定義，否則本文中所使用之所有技術及科學用語具有與所屬技術領域中具有通常知識者所共同理解的相同含義。除非另有說明，本文所引用之所有專利、申請案、公開申請案、及其他出版物之全文均以引用之方式併入本文中。若在本文中之用語具有複數個定義，除非另有說明，否則以此節之定義為主。
如本文中所使用，「接合物(conjugate)」係包含藉由化學鍵連接在一起的二或更多種物質（諸如抗體、連接子部份及/或藥物部份）之化合物。接合物的實例包括抗體藥物接合物（其可以可選地包括連接子部份）、藥物連接子接合物及抗體連接子接合物。「免疫接合物(immunoconjugate)」係包含免疫物質，諸如抗體之接合物。
如本文中所使用，「抗體(antibody)」(Ab)係由免疫系統所製成之蛋白質，或其合成變體，其結合至細胞或組織上之特定位點。「抗原結合片段(antigen-binding fragment)」(Fab)係結合至特定抗原之抗體的一部分。單株抗體係一種類型之合成抗體。在癌症治療中，單株抗體可直接殺滅癌細胞，其可阻斷腫瘤血管之發展，或其可幫助免疫系統殺滅癌細胞。
每當基團經描述為「可選地經取代(optionally substituted)」時，該基團可未經取代或經一或多個指示取代基取代。同樣，當基團經描述為「未經取代或經取代(unsubstituted or substituted)」時，若經取代，則（多個）取代基可選自一或多個指示的取代基。如果沒有指示取代基，則代表所指示之「可選地經取代(optionally substituted)」或「經取代(substituted)」基團可經一或多個個別地且獨立地選自下列之基團所取代：烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、環烷基(烷基)、雜芳基(烷基)、雜環基(烷基)、羥基、烷氧基、醯基、氰基、鹵素、硫羰基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-胺硫甲醯基、N-胺硫甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、S-磺醯胺基、N-磺醯胺基、C-羧基、O-羧基、硝基、次磺醯基(sulfenyl)、亞磺醯基、磺醯基、鹵烷基、鹵烷氧基、胺基、經單取代胺基、經二取代胺基、經單取代胺(烷基)、及經二取代胺(烷基)。
如本文中所使用，「C a至C b」中之「a」及「b」係整數，其係指基團中之碳原子數目。所指示的基團可包括性(inclusive)的含有「a」至「b」個碳原子。因此，「C 1至C 4烷基」係指所有具有1至4個碳之烷基，亦即CH 3-、CH 3CH 2-、CH 3CH 2CH 2-、(CH 3) 2CH-、CH 3CH 2CH 2CH 2-、CH 3CH 2CH(CH 3)-、及(CH 3) 3C-。如果未指定「a」及「b」，則假定此等定義中描述之最寬範圍。
如果將兩個「R」基團描述為「一起(taken together)」，則該等R基團及其等所附接之原子可形成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、或雜環。例如但不限於，若苯環上之鄰位R 1及R 2取代基表示為–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2「合在一起」形成環，其意謂–O-(CR 5R 6) m–O–在R 1及R 2位置共價鍵合至苯環形成雜環。
如本文中所使用，用語「烷基(alkyl)」係指完全飽和之脂族烴基。烷基部份可係支鏈或直鏈。支鏈烷基之實例包括但不限於異丙基、二級丁基、三級丁基、及類似者。直鏈烷基之實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基、及類似者。烷基可具有1至30個碳原子（每當在本文中出現諸如「1至30」之數值範圍時，係指給定範圍中之各個整數；例如，「1至30個碳原子」意指烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等、至多且包括30個碳原子所組成，雖然本定義亦涵蓋未指定數值範圍之用語「烷基」的出現）。烷基亦可係具有1至12個碳原子之中等大小烷基。烷基亦可係具有1至6個碳原子之低級烷基。烷基可係經取代或未經取代的。除非上下文另外指示，否則烷基一般係單價的。例如，所屬技術領域中具有通常知識者認識到C 1-C 6烷基在以下式中係二價的：–(C 1-C 6烷基)-X 2。
如本文中所使用，用語「伸烷基(alkylene)」係指二價完全飽和之直鏈脂族烴基。伸烷基之實例包括但不限於亞甲基、伸乙基、伸丙基、伸丁基、伸戊基、伸己基、伸庚基、及伸辛基。伸烷基可由 代表，後面接著碳原子數目，然後再接著「*」。例如， 代表伸乙基。伸烷基具有1至30個碳原子（每當在本文中出現時，數值範圍諸如「1至30」係指給定範圍中之每個整數；例如，「1至30個碳原子」意指伸烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、等、直至並且包括30個碳原子所組成，雖然本定義亦涵蓋未指定數值範圍之用語「烷基」之出現）。伸烷基亦可係具有1至12個碳原子之中等大小烷基。伸烷基亦可係具有1至4個碳原子之低級烷基。伸烷基可係經取代的或未經取代的。例如，低級伸烷基可藉由置換該低級伸烷基之一或多個氫及/或藉由用C 3-6單環環烷基（例如， ）取代同一個碳上的兩個氫來取代。
本文中所使用之用語「烯基(alkenyl)」係指含有（多個）碳雙鍵之二至二十個碳原子的單價直鏈或支鏈基，包括但不限於1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、及類似者。烯基可係未經取代或經取代的。
本文中所使用之用語「炔基(alkynyl)」係指含有（多個）碳參鍵之二至二十個碳原子的單價直鏈或支鏈基，包括但不限於1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、及類似者。炔基可係未經取代或經取代的。
如本文中所使用之用語「鹵素原子(halogen atom)」或「鹵素(halogen)」意指元素周期表第7欄之任一種放射穩定原子，諸如氟、氯、溴、及碘。
如本文中所使用，「鹵烷基(haloalky)」係指其中一或多個氫原子係經鹵素置換的烷基（例如，單鹵烷基、二鹵烷基、三鹵烷基、及多鹵烷基）。此類基團包括但不限於氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟甲基、2-氟異丁基、及五氟乙基。鹵烷基可係經取代或未經取代的。
如本文中所使用，「鹵烯基(haloalkenyl)」係指其中一或多個氫原子係經鹵素置換的烯基（例如，單鹵烯基、二鹵烯基、三鹵烯基、及多鹵烯基）。
如本文中所使用，「鹵炔基(haloalkynyl)」係指其中一或多個氫原子係經鹵素置換的炔基（例如，單鹵炔基、二鹵炔基、三鹵炔基、及多鹵炔基）。
如本文中所使用，「鹵烷氧基(haloalkoxy)」係指其中一或多個氫原子係經鹵素置換的烷氧基（例如，單鹵烷氧基、二鹵烷氧基、及三鹵烷氧基）。此類基團包括但不限於氯甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、1-氯-2-氟甲氧基、及2-氟異丁氧基。鹵烷氧基可係經取代或未經取代的。
如本文中所使用，「雜環基(heterocyclyl)」或「雜脂環基(heteroalicyclyl)」係指三、四、五、六、七、八、九、十到至多18員單環、雙環、及三環環系統，其中碳原子與1至5個雜原子一起構成該環系統。雜環可以可選地含有一或多個以這種方式定位之不飽和鍵，然而，完全離域的π電子系統不會發生在所有環中。（多個）雜原子係除碳以外的元素，包括但不限於氧、硫、及氮。雜環可進一步含有一或多個羰基或硫羰基官能性，以使定義包括側氧基系統及硫基系統，諸如內醯胺、內酯、環狀醯亞胺、環狀硫醯亞胺、及環狀胺甲酸酯。當由二或更多個環構成時，環可以稠合、橋接、或螺合方式連接在一起。如本文中所使用，用語「稠合(fused)」係指共用兩個原子及一個鍵之兩個環。如本文中所使用，用語「架橋雜環基(bridged heterocyclyl)」或「架橋雜脂環基(bridged heteroalicyclyl)」係指其中雜環基或雜脂環基含有連接非相鄰原子之一或多個原子的鍵聯之化合物。如本文中所使用，用語「螺(spiro)」係指兩個環共用一個原子且該兩個環非藉由橋接連接。雜環基及雜脂環基可以在（多個）環中含有3至30個原子、在（多個）環中含有3至20個原子、在（多個）環中含有3至10個原子、在（多個）環中含有3至8個原子、在（多個）環中含有3至6個原子。例如，五個碳原子及一個雜原子；四個碳原子及兩個雜原子；三個碳原子及三個雜原子；四個碳原子及一個雜原子；三個碳原子及兩個雜原子；兩個碳原子及三個雜原子；一個碳原子及四個雜原子；三個碳原子及一個雜原子；或兩個碳原子及一個雜原子。此外，雜脂環中之任何氮可為四級銨化的。雜環基或雜脂環基團可係未經取代的或經取代的。此類「雜環基(heterocyclyl)」或「雜脂環基(heteroalicyclyl)」之實例包括但不限於1,3-戴奧辛、1,3-二㗁烷(dioxane)、1,4-二㗁烷、1,2-二氧雜環戊烷、1,3-二氧雜環戊烷、1,4-二氧雜環戊烷、1,3-氧硫雜環己烷(1,3-oxathiane)、1,4-氧硫雜環己二烯(1,4-oxathiin)、1,3-氧硫雜環戊烷(1,3-oxathiolane)、1,3-二硫雜環戊烯(1,3-dithiole)、1,3-二硫雜環戊烷(1,3-dithiolane)、1,4-氧硫雜環己烷、四氫-1,4-噻𠯤(tetrahydro-1,4-thiazine)、2H-1,2-㗁𠯤(2H-1,2-oxazine)、順丁烯二醯亞胺、琥珀醯亞胺、巴比妥酸、硫巴比妥酸、二氧哌𠯤(dioxopiperazine)、乙內醯脲、二氫尿嘧啶、三㗁烷、六氫-1,3,5-三𠯤、咪唑啉、咪唑啶、異㗁唑啉、異㗁唑啶、㗁唑啉、㗁唑啶、㗁唑啶酮、噻唑啉、噻唑啶、 啉(morpholine)、氧 (oxirane)、哌啶N-氧化物、哌啶、哌𠯤、吡咯啶、氮 (azepane)、吡咯啶酮、吡咯啶二酮、4-哌啶酮、吡唑啉、吡唑啶、2-側氧基吡咯啶、四氫哌喃、4H-哌喃、四氫噻喃、硫 啉、硫 啉亞碸、硫 啉碸、及其苯并稠合類似物（例如苯并咪唑啶酮、四氫喹啉、及/或3,4-亞甲基二氧基苯基）。螺雜環基之實例包括2-氮雜螺[3.3]庚烷、2-氧雜螺[3.3]庚烷、2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷、2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷、2-氧雜螺[3.4]辛烷、及2-氮雜螺[3.4]辛烷。
當未指定取代基的數目（例如，鹵烷基、鹵烯基、鹵炔基）時，則可能有一或多個取代基存在。例如，「鹵烷基(haloalkyl)」可包括一或多個相同或不同的鹵素。作為另一個實例，「C 1-C 3烷氧基苯基(C 1-C 3alkoxyphenyl)」可包括一或多個相同或不同的含有一、二、或三個原子之烷氧基。
如本文中所使用，基(radical)指示具有單個不成對電子之物種，使得含有該基之物種可共價鍵結至另一物種。因此，在此上下文中，基不一定是自由基。相反地，基表示較大分子之特定部分。用語「基(radical)」可與用語「基團(group)」互換使用。
用語「醫藥上可接受之鹽(pharmaceutically acceptable salt)」係指不會對其所投予至之生物體造成顯著刺激且不會使化合物之生物活性及性質無效化的化合物之鹽。在一些實施例中，鹽係化合物之酸加成鹽。醫藥鹽可藉由使化合物與無機酸反應而獲得，無機酸諸如氫鹵酸（例如，氫氯酸或氫溴酸）、硫酸、硝酸、及磷酸（諸如2,3-二羥丙基磷酸二氫鹽）。醫藥鹽亦可藉由使化合物與有機酸反應而獲得，有機酸諸如脂族或芳族羧酸或磺酸，例如甲酸、乙酸、琥珀酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、菸鹼酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、三氟乙酸、苯甲酸、水楊酸、2-側氧戊二酸或萘磺酸。醫藥鹽亦可藉由使化合物與鹼反應以形成鹽而獲得，鹽諸如銨鹽、鹼金屬鹽（諸如鈉鹽、鉀鹽、或鋰鹽）、鹼土金屬鹽（諸如鈣鹽或鎂鹽）、碳酸鹽、碳酸氫鹽、有機鹼（諸如二環己基胺、N-甲基-D-還原葡糖胺、參(羥甲基)甲基胺、C 1-C 7烷基胺、環己基胺、三乙醇胺、乙二胺）之鹽、及與胺基酸（諸如精胺酸及離胺酸）之鹽。針對式(I)之化合物，所屬技術領域中具有通常知識者理解，當鹽係藉由基於氮之基團（例如，NH 2）的質子化而形成時，基於氮之基團可與正電荷締合（例如，NH 2可變成NH 3 +），且該正電荷可由帶負電荷之相對離子（諸如Cl -）平衡。
應理解的是，在本文所述之具有一或多個掌性中心之任何化合物中，若未明確指示絕對立體化學，則各中心可獨立地具有R-構形、或S-構形、或其混合物。因此，本文中所提供之化合物可係鏡像異構地純的、鏡像異構地富集的外消旋混合物、非鏡像異構地純的、非鏡像異構地富集的或立體異構的混合物。如本文中所使用，每當立體化學在化合物中係「隨機指派的」時，其係指組態上可係( R)或( S)之立體中心，並且化合物可係所描繪者之相對鏡像異構物。此外，應當理解，在具有一或多個雙鍵產生幾何異構物（可定義為E或Z）之任何本文中所述化合物中，各雙鍵可獨立地係E或Z或其混合。同樣地，應理解，在任何所述化合物中，亦意欲將所有互變異構形式包括在內。
應理解，在本文中揭示之化合物具有未填滿價數時，則價數應以氫或其同位素填滿，例如氫-1（氕）及氫-2（氘）。本文中所述之化合物亦可包括出現於中間或最終化合物內之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子數但不同質量數的那些原子。例如，氫之同位素包括氚及氘。
應理解，本文所述之化合物可經同位素標示。以諸如氘之同位素取代可得到由較高代謝穩定性帶來的某些治療優點，例如體內半衰期增長或劑量需求降低。在化合物結構中表示之各化學元素可包括該元素之任何同位素。例如，在化合物結構中，氫原子可明確揭示或理解成存在於化合物中。在化合物之可能存在氫原子的任何位置處，氫原子可係氫之任何同位素，包括但不限於氫-1（氕）、氫-2（氘）、及氫-3（氘）。因此，在本文中參照之化合物涵蓋所有潛在同位素形式，除非上下文清楚另行表明。
應理解的是，本文所述之方法及組合包括結晶形式（亦稱為多形體，其包括化合物之相同元素組成之不同晶體堆積排列）、非晶相、鹽、溶劑合物、及水合物。在一些實施例中，本文所述之化合物以與醫藥上可接受之溶劑（諸如水、乙醇、或類似者）之溶劑合形式存在。在其他實施例中，本文所述之化合物以非溶劑合形式存在。溶劑合物含有化學計量或非化學計量之量的溶劑，且可與醫藥上可接受之溶劑（諸如水、乙醇、或類似者）在結晶程序期間形成。當溶劑係水時即形成水合物，當溶劑係醇時即形成醇合物。此外，本文中所提供之化合物可以非溶劑合形式以及溶劑合形式存在。一般而言，針對本文中所提供之化合物及方法的目的，將溶劑合形式視為等同於非溶劑合形式。
當提供數值之範圍時，應理解範圍之上限及下限以及在上限及下限之間的各介入數值皆涵蓋於實施例之中。
除非另外明確說明，否則本申請案中所使用之用語、及片語、及其變化（尤其在隨附申請專利範圍中）應理解為開放式的而非限制性的。作為前述之實例，用語「包括(including)」應解讀為意指「包括但不限於(including, without limitation/including but not limited to)」或類似者；如本文中所使用，用語「包含(comprising)」與「包括(including)、含有(containing)、或「其特徵為(characterized by)」同義，且係包括性(inclusive)或開放式且不排除額外、未列舉之元件或方法步驟；用語「具有(having)」應解讀為「至少具有(having at least)」；用語「包括(include)」應解讀為「包括但不限於(includes but is not limited to)」；用語「實例(example)」係用於提供討論項目之例示性例子而非其詳盡或限制性列表；且用語如「較佳地(preferably)」、「較佳的(preferred)」、或「所欲(desired/desirable)」、及類似意義文字的使用不應理解為暗示某些特徵對於結構或功能而言係關鍵、必要、或甚至重要的，而是僅意欲強調可在一特定實施例中利用或不利用的替代或額外特徵。此外，用語「包含(comprising)」應與片語「至少具有(having at least)」或「至少包括(including at least)」同義地解讀。當在化合物、組成物、或裝置之背景下使用時，用語「包含」意指化合物、組成物、或裝置至少包括所列舉之特徵或組分，但亦可包括額外之特徵或組分。
關於在本文中使用實質上任何複數及/或單數用語，所屬技術領域中具有通常知識者可視適合上下文及/或應用之情況，從複數轉換成單數及/或從單數轉換成複數。各種單數/複數排列組合可在本文中明確闡述以求清晰。不定冠詞「一（a或an）」並不排除複數。在互不相同的附屬項中列舉某些措施的單純事實，並不表示這些措施之組合無法有益地使用。申請專利範圍中之任何元件符號不應解讀為範圍限制。 化合物
本文中所揭示之各種實施例係關於一種式(IV)之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其具有以下結構： (IV) 其中： R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環； R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基； R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0； 各Y獨立地可係H或鹵素； 各m獨立地可係1或2； 各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6；及 各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6； R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8；及 R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
本文中所揭示之各種實施例係關於一種式(IV*)之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其具有以下結構： (IV*) 其中： R 1及R 2各自獨立地可選自由下列所組成之群組：氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、及經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環； R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基； R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0； 各Y獨立地可係H或鹵素； 各m獨立地可係1或2； 各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6；及 各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6； R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8；及 R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係氫。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係鹵素。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2各自可係氟基。在另一實施例中，R 1各自可係氟基且R 2可係氫。在又另一實施例中，R 1各自可係氫且R 2可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係氯基。在一個實施例中，R 1及R 2中之一者可係氟且R 1及R 2中之其他者可係氯基。在一個實施例中，R 1可係氯基且R 2可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係–CN。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係–OR 5，其中R 5可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲氧基。在一個實施例中，R 1及R 2可係經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代–O-(CH 2)–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成1,3-二氧雜環戊烷。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之至少一者可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之至少一者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係C 1-C 3烷基。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係C 1-C 3烷基且其他者可係鹵素。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲基且其他者可係氟基。在一實施例中，R 1可係甲基且R 2其他可係氟基。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之至少一者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係二氟甲基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲氧基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。在一實施例中，R 1及R 2可係經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環，其中–O-(CR 5R 6) m–O–之末端在式(IV)或式(IV*)之R 1及R 2位置處共價結合至苯環而形成雜環。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係鹵素。在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係氟基。在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1可係氟基且R 2可係氫。在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1可係氫且R 2可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆係氫。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係氫。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之一者可係鹵素且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係鹵素且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係鹵素且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係鹵素。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係鹵素。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。
在一實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可係經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。在各種實施例中，R 1及R 2各自獨立地可選自氫、氟、甲氧基、甲基、二氟甲基、及–O-(CH 2)–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。
在各種實施例中，式(IV)中之R 3可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 3可係氫。在一實施例中，R 3可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 3可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 3可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 3可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。例如，在一實施例中，R 3可係–CH=CH 2。在另一實施例中，R 3可係–CH 2CH=CH 2。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。例如，在一實施例中，R 3可係–C≡CH。在一實施例中，R 3可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在各種實施例中，式(IV)中之R 4可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 4可係氫。在一實施例中，R 4可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 4可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 4可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 4可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。例如，在一實施例中，R 4可係–CH=CH 2。在另一實施例中，R 4可係–CH 2CH=CH 2。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。例如，在一實施例中，R 4可係–C≡CH。在一實施例中，R 4可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在各種實施例中，式(IV*)中之R 3可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 3可係氫。在一實施例中，R 3可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 3可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 3可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 3可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 3可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在各種實施例中，式(IV*)中之R 4可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 4可係氫。在一實施例中，R 4可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 4可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 4可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 4可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 4可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在一些實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在其他實施例中，R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–NR 5R 6。在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係CH 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係–CH 3。例如，在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係不可是–CH 3之經取代或未經取代C 1-C 6烷基，諸如–CH 2OH或–CH 2CH 2OH。在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係–CH 3，且R 3及R 4中之其他者可係–NR 5R 6。
在一些實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及/或R 4可係如本文中所述之–NR 5R 6。例如，在一實施例中，R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基（諸如–CH 3、–CH 2CH 2OH、或 ）。在式(IV)或式(IV*)中之R 3及/或R 4可係本文中所述之–NR 5R 6的其他實施例中，R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。例如，在一些實施例中，–NR 5R 6可係 或 。在其他實施例中，–NR 5R 6可係 或 。
在一些實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及/或R 4可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，諸如–CH 2OCH 3。例如，在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係–CH 2OH或–CH 2CH 2OH，且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OCH 3。
在一些實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基。例如，在一些實施例中，R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起可選自 、 、 、及 ，其中*表示R 3及R 4可附接之碳原子。在其他實施例中，R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起可選自 、 、 、 、 、 、 、 、及 ；其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2–CH=CH 2。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–C≡CH。在一個實施例中，R 3及R 4可皆係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，R 3及R 4可皆係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 2OH或–(CH 2) 2OH且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OCH 3。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–N(CH 3)CH 2CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–N(C=OCH 3)CH 2CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8，其中R 8係描述於本文中他處。在一實施例中，R 7可係H。在一實施例中，R 7可係–COR 8。在一實施例中，R 7可係–CO 2R 8。在一實施例中，R 7可係–(CO)-NHR 8。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中變數p、q、t、及Y係描述於本文中他處。在一實施例中，R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 8可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之m可係1或2。在一實施例中，m可係1。在另一實施例中，m可係2。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0。在一實施例中，n 4及n 5可皆係1。在一實施例中，n 4可係0且n 5可係1。在一實施例中，n 4可係0且n 5可係2。在一實施例中，n 4可係1且n 5可係0。在一實施例中，n 4可係2且n 5可係0。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之各Y獨立地可係H或鹵素。在一實施例中，各Y可係氫。在一實施例中，–CY 2可係–CH 2。在一實施例中，–CY 3可係–CH 3。在一實施例中，–CY 3可係–CHF 2。在一實施例中，–CY 3可係–CH 2F。在一實施例中，–CY 3可係–CF 3。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6。在一實施例中，p可係1。在一實施例中，p係2。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6。在一實施例中，q可係1。在一實施例中，q可係2。
在各種實施例中，式(IV)或式(IV*)中之各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6。在一實施例中，t可係1。在一實施例中，p可係t。
在各種實施例中，R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、及未經取代C 1-C 6烷基、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環；R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或經未經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；R 5及R 6各自獨立地可係未經取代C 1-C 6烷基、或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基；n 4可係2；n 5可係0；各Y可係H；各m可係1；p可係1；q可係2；t可係1；且R 7可係H。在各種實施例中，R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、及未經取代C 1-C 6烷基；R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或經未經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；R 5及R 6各自獨立地可係未經取代C 1-C 6烷基、或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基；n 4可係2；n 5可係0；各Y可係H；各m可係1；p可係1；q可係2；t可係1；且R 7可係H。
在各種實施例中，式(IV)及/或式(IV*)之化合物、或替代地本揭露提供一種可由選自下列之結構、或其醫藥上可接受之鹽所代表之化合物： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(IV)及/或式(IV*)之化合物可由選自下列之結構、或其醫藥上可接受之鹽所代表： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(IV)及/或式(IV*)之化合物可由選自下列之結構、或其醫藥上可接受之鹽所代表： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(IV)及/或式(IV*)之化合物可由選自下列之結構、或其醫藥上可接受之鹽所代表： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。 接合物（毒素-連接子或連接子-酬載）
本文所揭示之各種實施例係關於式(III)之接合物，其具有以下結構： Mi- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D (III) 在各種實施例中，式(III)中之Mi可係 ，D可係藥物部份且–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–可係將Mi連接至D之連接子。
在各種實施例中，式(III)中之L 2可不存在、係 、或 ，其中Z 1及Z 2各自獨立地可係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基。在一實施例中，式(III)中之L 2可不存在。在一實施例中，式(III)中之L 2可係 。在一實施例中，式(III)中之L 2可係 。
在各種實施例中，式(III)中之Z 1及Z 2各自獨立地可係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係氫。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係鹵素。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係NO 2。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係–O–(C 1-C 6烷基)。例如，在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係甲氧基。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係甲基。
在各種實施例中，式(III)中之L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–或–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–，其中各n 1可獨立地係0至12之整數。在一實施例中，L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–。例如，在一實施例中，L 3可係–C(=O)–。在一實施例中，L 3可係–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–。例如，在一實施例中，L 3可係–CH 2C(=O)–。在實施例中，n 1可係1至12之整數，諸如1至6或1至3。
在各種實施例中，L 4式(III)中之可係四肽殘基。例如，在一實施例中，L 4可係選自SEQ ID NO: 43 GGFG (gly-gly-phe-gly)、SEQ ID NO: 44 EGGF (glu-gly-gly-phe)、SEQ ID NO: 45 SGGF (ser-gly-gly-phe)、及SEQ ID NO: 46 KGGF (lys-gly-gly-phe)之四肽殘基。
在各種實施例中，式(III)中之L 5可不存在或係–[NH(CH 2)n 2]n 3–，其中n 2可係0至6之整數且n 3可係0至2之整數。在一實施例中，L 5可不存在。在一實施例中，L 5可係–[NH(CH 2)n 2]n 3–。例如，在一實施例中，L 5可係–NH–。在另一實施例中，L 5可係–NHCH 2–。
在各種實施例中，式(III)中之L 6可不存在或 。在一實施例中，L 6可不存在。在另一實施例中，L 6可係 。
在各種實施例中，式(III)中之L 7可不存在、 、 、或 。在一實施例中，L 7可不存在。在一實施例中，L 7可係 。在一實施例中，L 7可係 。在一實施例中，L 7可係 。在一實施例中，L 7可係 。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係如本文中所述之藥物部份（例如，下文在標題「藥物部份」下或上文在標題「化合物」下）。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(II)之化合物。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(II*)之化合物。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(IV)之化合物。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(IV*)之化合物。在一實施例中，D可係細胞毒性抗癌藥物部份。
在各種實施例中，式(III)之接合物可由選自下列之結構所代表： , 、 、 、 、 、 , 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(III)之接合物可由選自下列之結構所代表： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(III)之接合物可由選自下列之結構所代表： 、 、 、 、 、 、 、 、及 。 藥物部份
在各種實施例中，式(I)之免疫接合物中或式(III)之接合物中的D可係藥物部份。藥物部份可係如本文中所述（例如如上文在標題「化合物」下所描述）之式(IV)或式(IV*)之任何化合物，其具有適當的修飾而使得連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–連接至D。例如，在各種實施例中，藥物部份D可係式(II)之化合物，其具有以下結構： (II) 其中： R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環； R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成經取代或未經取代4、5、或6員雜環基、或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者可係經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2、或經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2； X 2係–OR 9、–SR 9、或–NHR 9； R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0； 各Y獨立地可係H或鹵素； 各m獨立地可係1或2； 各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6； 各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6； R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7； R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3； R 9可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其限制條件是R 7及R 9中僅一者係L 4、L 5、L 6、或L 7；及 各X 3獨立地可係–H、–OH、–SH、或–NH 2。
在替代實施例中，式(I)之免疫接合物或式(III)之接合物中的藥物部份D可係式(II*)之化合物，其具有以下結構： (II*) 其中： R 1及R 2各自獨立地可選自由下列所組成之群組：氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、及經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起形成環； R 3及R 4各自獨立地可選自由下列所組成之群組：氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成經取代或未經取代4、5、或6員雜環基、或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者可係經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2、或經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2； X 2可係–OR 9、-SR 9、或-NHR 9； R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0； 各Y獨立地可係H或鹵素； 各m獨立地可係1或2； 各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6； 各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6； R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7； R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3； R 9可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其限制條件是R 7及R 9中僅一者可係L 4、L 5、L 6、或L 7；及 各X 3獨立地可係–H、–OH、–SH、或–NH 2。
所屬技術領域中具有通常知識者將認知的是，式(II)之化合物可經由R 3或R 4（當定義為包括X 2時而為R 9）或如下文中所述經由R 7連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係氫。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係鹵素。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2各自可係氟基。在另一實施例中，R 1各自可係氟基且R 2可係氫。在又另一實施例中，R 1各自可係氫且R 2可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係氯基。在一個實施例中，R 1及R 2中之一者可係氟且R 1及R 2中之其他者可係氯基。在一個實施例中，R 1可係氯基且R 2可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係–CN。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係–OR 5，其中R 5可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲氧基。在一個實施例中，R 1及R 2可係經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代–O-(CH 2)–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成1,3-二氧雜環戊烷。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之至少一者可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之至少一者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係C 1-C 3烷基。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係C 1-C 3烷基且其他者可係鹵素。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲基且其他者可係氟基。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之至少一者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係二氟甲基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。例如，在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係甲氧基。在一實施例中，R 1及R 2中之至少一者可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。在一實施例中，R 1及R 2獨立地可係經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環，其中–O-(CR 5R 6) m–O–之末端在式(II)或式(II*)中之R 1及R 2位置處共價結合至苯環而形成雜環。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係鹵素。在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係氟基。在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1可係氟基且R 2可係氫。在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1可係氫且R 2可係氟基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係氫且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆係氫。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係氫。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之一者可係鹵素且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係鹵素且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係鹵素且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係鹵素。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係鹵素。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基且R 1及R 2中之其他者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基。
在一實施例中，式(II)或式(II*)中之R 1及R 2中之一者可係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆獨立地係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可皆非係經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)。在一實施例中，R 1及R 2可係經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。在各種實施例中，R 1及R 2各自獨立地可選自氫、氟、甲氧基、甲基、二氟甲基、及–O-(CH 2)–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環。
在各種實施例中，式(II)中之R 3可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 3可係氫。在一實施例中，R 3可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 3可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 3可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 3可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。例如，在一實施例中，R 3可係–CH=CH 2。在另一實施例中，R 3可係–CH 2CH=CH 2。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。例如，在一實施例中，R 3可係–C≡CH。在一實施例中，R 3係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在各種實施例中，式(II)中之R 4可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 4可係氫。在一實施例中，R 4可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 4可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 4可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 4可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。例如，在一實施例中，R 4可係–CH=CH 2。在另一實施例中，R 4係–CH 2CH=CH 2。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。例如，在一實施例中，R 4可係–C≡CH。在一實施例中，R 4可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在各種實施例中，式(II*)中之R 3可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 3可係氫。在一實施例中，R 3可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 3可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 3可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 3可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 3可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 3可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在各種實施例中，式(II*)中之R 4可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係氫。在一實施例中，R 4可係氫。在一實施例中，R 4可係–OR 5，諸如–OCH 3。在一實施例中，R 4可係–NR 5R 6，其中R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。在一實施例中，R 4可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，R 4可係甲基、–CH 2OH、或–CH 2CH 2OH。作為另一實例，在一實施例中，R 4可係–(CH 2) 3OH或–CH 2O(CH 2) 2OH。在一實施例中，R 4可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其中各Y獨立地可係H或鹵素。
在一些實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。在其他實施例中，R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–NR 5R 6。在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係–CH 3，其限制條件是R 3及R 4不可皆係–CH 3 。例如，在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係不可是–CH 3之經取代或未經取代C 1-C 6烷基，諸如–CH 2OH或–CH 2CH 2OH。在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係CH 3，且R 3及R 4中之其他者可係–NR 5R 6。
在一些實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及/或R 4可係如本文中所述之–NR 5R 6。例如，在一實施例中，R 5及R 6各自獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基（諸如–CH 3、–CH 2CH 2OH、或 ）。在本文中所述之–NR 5R 6的其他實施例中，R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。例如，在一些實施例中，–NR 5R 6可係 或 。在其他實施例中，–NR 5R 6可係 或 。
在一些實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及/或R 4可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，諸如–CH 2OCH 3。例如，在一些實施例中，R 3及R 4中之一者可係–CH 2OH或–CH 2CH 2OH，且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OCH 3。
在一些實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或可經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基。例如，在一些實施例中，R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起可選自 、 、 、及 ，其中*表示R 3及R 4可附接之碳原子。在其他實施例中，R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起可選自 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 ；其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(IV)或式(IV*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(II)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，式(II)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–(CH 2) 3OH。在一個實施例中，R 3及R 4可皆係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–OCH 3且R 3及R 4中之其他者係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–C 2H 5且R 3及R 4中之其他者係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)中之R 3及R 4中之一者可係–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(IV)中之R 3及R 4中之一者可係–C≡CH且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2O(CH 2) 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，R 3及R 4可皆係–CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係–CH 2OH或–(CH 2) 2OH且R 3及R 4中之其他者可係–CH 2OCH 3。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–N(CH 3)CH 2CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係–N(C=OCH 3)CH 2CH 2OH。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。在一個實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可係氫或–CH 3且R 3及R 4中之其他者可係 。
在其他實施例中，式(II)或式(II*)中之R 3及R 4中之一者可選自經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2、及經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2。在各種實施例中，X 2可係–OR 9、-SR 9、或-NHR 9，其中R 9可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其限制條件是R 7及R 9中僅一者可係L 4、L 5、L 6、或L 7。在此類實施例中，當R 3或R 4分別包括X 2且R 9可係L 4、L 5、L 6、或L 7時，式(II)之化合物可經由R 3或R 4連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–。在一實施例中，R 3或R 4可係經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2。在一實施例中，R 3或R 4可係經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2。在一實施例中，R 3或R 4可係經取代或未經取代-(C 1-C 6烯基)-X 2。在一實施例中，R 3或R 4可係經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2。在一實施例中，R 3或R 4可係經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2。在一實施例中，R 3或R 4可係經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2。在R 3或R 4包括X 2之各個此類實施例中，提供R 9係L 4、L 5、L 6、或L 7之選項，因而提供藉此將式(II)之化合物經由R 3或R 4連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–之選項。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其中各R 8獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3。在一實施例中，R 7可係H。在一實施例中，R 7可係–COR 8。在一實施例中，R 7可係–CO 2R 8。在一實施例中，R 7可係–(CO)-NHR 8。所屬技術領域中具有通常知識者將認知的是，當R 7可係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8時，將式(II)或式(II*)中之化合物連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–可經由R 3或R 4（因而R 9），如本文中他處所述。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之各R 8獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3，其中X 3可係–H、–OH、–SH、或–NH 2。在一實施例中，各R 8獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3。在一實施例中，各R 8獨立地可係經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3。在一實施例中，各R 8獨立地可係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之X 2可係–OR 9、–SR 9、或–NHR 9，其中R 9可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7。在一實施例中，X 2可係–OR 9。在一實施例中，X 2可係–SR 9。在一實施例中，X 2可係–NHR 9。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之R 9可係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其中R 8可係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3。在一實施例中，R 9可係H。在一實施例中，R 9可係–COR 8。在一實施例中，R 9可係–CO 2R 8。在一實施例中，R 9可係–(CO)-NHR 8。所屬技術領域中具有通常知識者將認知的是，當R 9係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8時，將式(II)之化合物連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7可經由R 7，如本文中他處所述。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之R 9可係L 4、L 5、L 6、或L 7。在一實施例中，R 9可係L 4。在一實施例中，R 9可係L 5。在一實施例中，R 9可係L 6。在一實施例中，R 9可係L 7。所屬技術領域中具有通常知識者將認知的是，當R 9可係L 4、L 5、L 6、或L 7時，將式(II)或式(II*)之化合物連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–可經由R 3或R 4，如本文中他處所述。在一實施例中，R 7及R 9中僅一者可係L 4、L 5、L 6、或L 7，在此情況下共價鍵可將藥物D連接至連接子–L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7–並藉此連接至Mi。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之各X 3獨立地可係–H、–OH、–SH、或–NH 2。在一實施例中，X 3可係–H。在一實施例中，X 3可係–OH。在一實施例中，X 3可係–SH。在一實施例中，X 3可係–NH 2。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之m可係1或2。在一實施例中，m可係1。在另一實施例中，m可係2。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之n 4及n 5各自獨立地可係0、1、或2，其限制條件是n 4及n 5不可皆係0。在一實施例中，n 4及n 5可皆係1。在一實施例中，n 4可係0且n 5可係1。在一實施例中，n 4可係0且n 5可係2。在一實施例中，n 4可係1且n 5可係0。在一實施例中，n 4可係2且n 5可係0。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之各Y獨立地可係H或鹵素。在一實施例中，各Y可係氫。在一實施例中，–CY 2可係–CH 2。在一實施例中，–CY 3可係–CH 3。在一實施例中，–CY 3可係–CHF 2。在一實施例中，–CY 3可係–CH 2F。在一實施例中，–CY 3可係–CF 3。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之各p獨立地可係1、2、3、4、5、或6。在一實施例中，p可係1。在一實施例中，p可係2。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之各q獨立地可係0、1、2、3、4、5、或6。在一實施例中，q可係1。在一實施例中，q可係2。
在各種實施例中，式(II)或式(II*)中之各t獨立地可係1、2、3、4、5、或6。在一實施例中，t可係1。在一實施例中，p可係t。
在各種實施例中，R 1及R 2各自獨立地可選自氫、鹵素、及未經取代C 1-C 6烷基、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起可形成環；R 3及R 4各自獨立地可選自氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或經未經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者可係未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2；X 2可係–OR 9；R 5及R 6各自獨立地可係未經取代C 1-C 6烷基、或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基；n 4可係2；n 5可係0；各Y可係H；各m可係1；p可係1；q可係2；t可係1；R 7可係H；且R 9可係H，其限制條件是R 7及R 9中僅一者係L 4、L 5、L 6、或L 7。在各種實施例中，R 1及R 2各自獨立地可選自由下列所組成之群組：氫、鹵素、及未經取代C 1-C 6烷基；R 3及R 4各自獨立地可選自由下列所組成之群組：氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4可與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基或經未經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者可係未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2；X 2可係–OR 9；R 5及R 6各自獨立地可係未經取代C 1-C 6烷基、或R 5及R 6可與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基；n 4可係2；n 5可係0；各Y可係H；各m可係1；p可係1；q可係2；t可係1；R 7可係H；且R 9可係H，其限制條件是R 7及R 9中僅一者係L 4、L 5、L 6、或L 7。在一些實施例（包括此段者）中，L 2可不存在；L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–；n 1可獨立地係0至5之整數；L 4可係四肽殘基；L 5可係–[NH(CH 2)n 2]n 3–；n 2可係1；n 3可係1；L 6可不存在；L 7可不存在；且n可係1。在其他實施例（包括此段者）中，L 2可係 ；Z 1及Z 2各自可係氫；L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–；n 1係0至5之整數；L 4可係四肽殘基；L 5可係–[NH(CH 2)n 2]n 3–；n 2可係1；n 3可係1；L 6可不存在；L 7可不存在；且n可係1。在又其他實施例（包括此段者）中，L 2可係 ；Z 1及Z 2各自可係氫；L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–；n 1可係0至5之整數；L 4可係四肽殘基；L 5可係–[NH(CH 2)n 2]n 3–；n 2可係1；n 3可係1；L 6可不存在；L 7可不存在；且n可係1。
在一些實施例中，藥物部份之部分可連接至L 4、L 5、L 6、或L 7，如本文中所述。作為一實例，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分可係R 3或R 4，如本文中所述。在一些實施例中，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分可係–CH 2–O–或–CH 2CH 2–O–。在其他實施例中，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分可係具有–O–取代之單環胺，其中–O–可直接或經由伸烷基連接至環胺。具有直接連接至環胺之羥基的單環胺之實例包括 、 、及 ，其中「 」表示與藥物部份之其餘部分的連接，而「+」表示與L 4、L 5、L 6、或L 7之連接。具有經由伸烷基連接至環胺之羥基的單環胺之實例係 ，其中「 」表示與藥物部份之其餘部分的連接，而「+」表示與L 4、L 5、L 6、或L 7之連接。在又其他實施例中，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分可係經二取代胺，諸如 或 ，其中「 」表示與藥物部份之其餘部分的連接，而「+」表示與L 4、L 5、L 6、或L 7之連接。在又其他實施例中，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分可係單環胺，其中來自單環胺之碳係以螺合方式連接至藥物部份之其餘部分，例如，連接至藥物部份之環。螺合連接至藥物部份之其餘部分的例示性單環胺係 、 、 、及 ，其中*表示單環胺附接至藥物部份之其餘部分的碳原子，而「+」表示與L 4、L 5、L 6、或L 7之連接。在一些實施例中，以螺合方式連接至藥物部份之其餘部分的單環胺可經包括末端氧 、 、 、 、 、 、 、 、及 之部份取代，其中*表示單環胺附接至藥物部份之其餘部分的碳原子而「+」表示與L 4、L 5、L 6、或L 7之連接。在一些實施例中，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分不可包括直鏈醯胺。例如，藥物部份連接至L 4、L 5、L 6、或L 7之部分不可包括–NH–C(=O)–。 免疫接合物（抗體-藥物接合物）
本文所揭示之各種實施例係關於式(I)之免疫接合物，其具有以下結構： Ab-[S-L 1- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D] n(I)
在各種實施例中，式(III)中之L 1可係 。
在各種實施例中，式(III)中之L 2可不存在、係 、或 ，其中Z 1及Z 2各自獨立地可係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基。在一實施例中，式(III)中之L 2可不存在。在一實施例中，式(III)中之L 2可係 。在一實施例中，式(III)中之L 2可係 。
在各種實施例中，式(III)中之Z 1及Z 2各自獨立地可係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係氫。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係鹵素。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係NO 2。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係–O–(C 1-C 6烷基)。例如，在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係甲氧基。在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係C 1-C 6烷基。例如，在一實施例中，Z 1及Z 2中之至少一者可係甲基。
在各種實施例中，式(III)中之L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–或–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–，其中各n 1可獨立地係0至12之整數。在一實施例中，L 3可係–(CH 2)n 1-C(=O)–。例如，在一實施例中，L 3可係–C(=O)–。在一實施例中，L 3可係–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–。例如，在一實施例中，L 3可係–CH 2C(=O)–。在實施例中，n 1可係1至12之整數，諸如1至6或1至3。
在各種實施例中，L 4式(III)中之可係四肽殘基。例如，在一實施例中，L 4可係選自SEQ ID NO: 43 GGFG (gly-gly-phe-gly)、SEQ ID NO: 44 EGGF (glu-gly-gly-phe)、SEQ ID NO: 45 SGGF (ser-gly-gly-phe)、及SEQ ID NO: 46 KGGF (lys-gly-gly-phe)之四肽殘基。
在各種實施例中，式(III)中之L 5可不存在或係–[NH(CH 2)n 2]n 3–，其中n 2可係0至6之整數且n 3可係0至2之整數。在一實施例中，L 5可不存在。在一實施例中，L 5可係–[NH(CH 2)n 2]n 3–。例如，在一實施例中，L 5可係–NH–。在另一實施例中，L 5可係–NHCH 2–。
在各種實施例中，式(III)中之L 6可不存在或 。在一實施例中，L 6可不存在。在另一實施例中，L 6可係 。
在各種實施例中，式(III)中之L 7可不存在、 、 、或 。在一實施例中，L 7可不存在。在一實施例中，L 7可係 。在一實施例中，L 7可係 。在一實施例中，L 7可係 。在一實施例中，L 7可係 。
在各種實施例中，式(I)之免疫接合物中的D可係如本文（例如，上文在標題「藥物部份」下或上文在標題「化合物」下）中所述之藥物部份。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(II)之化合物。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(II*)之化合物。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(IV)之化合物。在各種實施例中，式(III)之接合物中的D可係式(IV*)之化合物。在一實施例中，D可係細胞毒性抗癌藥物部份。在一實施例中，藥物部份可係依喜替康(exatecan)。
在各種實施例中，式(I)中之Ab可係抗體或其抗原結合片段。在一實施例中，Ab可特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)、Her2、TROP2、或Her3。在一實施例中，Ab可結合至癌症細胞表面。在一實施例中，Ab可係抗HER2抗體或其抗原結合片段。
在各種實施例中，式(I)之免疫接合物可選自： 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(I)之免疫接合物可選自： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在各種實施例中，式(I)之免疫接合物可選自： 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含： VHCDR 1，其包含(i)與SEQ ID NO:1之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(ii) SEQ ID NO:1之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含(iii)與SEQ ID NO:2之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(iv) SEQ ID NO:2之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含(v)與SEQ ID NO:3之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(vi) SEQ ID NO:3之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含(vii)與SEQ ID NO:8之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(viii) SEQ ID NO:8之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含(ix)與AAS之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(x) AAS之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含(xi)與SEQ ID NO:10之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(xii) SEQ ID NO:10之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含：(a)與SEQ ID NO: 5、7、12、或14中任一者之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(b) SEQ ID NO: 5、7、12、或14之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含：(a)與SEQ ID NO: 5、7、12、或14中任一者之胺基酸序列具有至少98%序列同一性之胺基酸序列或(b) SEQ ID NO: 5、7、12、或14之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含(a) SEQ ID NO: 5、7、12、或14或(b) SEQ ID NO: 5、7、12、或14中任一者之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含： VHCDR 1，其包含(i)與SEQ ID NO:15之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(ii) SEQ ID NO:15之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含(iii)與SEQ ID NO:16之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(iv) SEQ ID NO:16之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含(v)與SEQ ID NO:17之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(vi) SEQ ID NO:17之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含(vii)與SEQ ID NO:22之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(viii) SEQ ID NO:22之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含(ix)與DAY之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(x) DAY之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含(xi)與SEQ ID NO:24之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(xii) SEQ ID NO:24之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含：(a)與SEQ ID NO: 19、21、26、或28中任一者之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(b) SEQ ID NO: 19、21、26、或28之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含：(a)與SEQ ID NO: 19、21、26、或28中任一者之胺基酸序列具有至少98%序列同一性之胺基酸序列或(b) SEQ ID NO: 19、21、26、或28之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含(a) SEQ ID NO: 19、21、26、或28或(b) SEQ ID NO: 19、21、26、或28中任一者之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含： VHCDR 1，其包含(i)與SEQ ID NO:29之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(ii) SEQ ID NO:29之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含(iii)與SEQ ID NO:30之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(iv) SEQ ID NO:30之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含(v)與SEQ ID NO:31之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(vi) SEQ ID NO:31之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含(vii)與SEQ ID NO:36之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(viii) SEQ ID NO:36之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含(ix)與DAS之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(x) DAS之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含(xi)與SEQ ID NO:38之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(xii) SEQ ID NO:38之胺基酸序列 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含：(a)與SEQ ID NO: 33、35、40、或42中任一者之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列或(b) SEQ ID NO: 33、35、40、或42之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含：(a)與SEQ ID NO: 33、35、40、或42中任一者之胺基酸序列具有至少98%序列同一性之胺基酸序列或(b) SEQ ID NO: 33、35、40、或42之胺基酸序列。
在一個實施例中，任何前述式(I)之免疫接合物中的Ab可係抗體或其抗體結合片段，其包含(a) SEQ ID NO: 33、35、40、或42或(b) SEQ ID NO: 33、35、40、或42中任一者之胺基酸序列。
「Fv」係含有完整抗原辨識及結合位點之最小抗體片段。此區域由一個重鏈及一個輕鏈可變域之二聚體所組成，這兩個域呈緊密之非共價締合。在此組態中，各可變域之三個CDR會交互作用而在VH-VL二聚體之表面上界定出抗原結合位點。這六個CDR共同賦予了對抗體之抗原結合特異性。甚至單一個可變域（僅包含三個特異於抗原之CDR的半個Fv）便可具有辨識及結合抗原之能力，雖然在一些情況下其親和力低於整個結合位點。同樣地，在提及用語CDR之用途時，如本文中所使用，在一些替代方案中，CDR中任一或多者可與序列表中所陳述之CDR序列有一個胺基酸的差異，例如一個保守性胺基酸取代的差異。 醫藥組成物
本文中所述之一些實施例係關於一種醫藥組成物，其可包括有效量的一或多種本文中所述之化合物（例如式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物、或其醫藥上可接受之鹽）及醫藥上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑、或其組合。
用語「醫藥組成物(pharmaceutical composition)」係指本文所揭示之一或多種化合物及/或鹽與其他化學組分（諸如稀釋劑或載劑）之混合物。醫藥組成物促進化合物向生物體之投予。醫藥組成物亦可藉由使化合物與無機酸或有機酸（諸如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、及水楊酸）反應來獲得。醫藥組成物通常將針對特定意圖投予途徑設計。
用語「生理上可接受之(physiologically acceptable)」定義載劑、稀釋劑、或賦形劑，其不會消除化合物之生物活性及性質，亦不會對預期遞送組成物之動物引起明顯損傷或損害。
如本文中所使用，「載劑(carrier)」係指促進化合物併入細胞或組織中之化合物。例如（但不限於），二甲基亞碸(DMSO)係經常利用的載劑，其促進許多有機化合物被攝入對象的細胞或組織中。
如本文中所使用，「稀釋劑(diluent)」係指醫藥組成物中缺乏明顯藥理學活性但可能為醫藥上必需或所欲之成分。例如，稀釋劑可用於增加質量過小而無法用於製造及/或投予之有效藥物的體積。其亦可係用於溶解將藉由注射、攝取、或吸入投予之藥物的液體。所屬技術領域中常見形式的稀釋劑為緩衝水溶液，諸如但不限於模擬人類血液之pH及等滲性之磷酸鹽緩衝鹽水。
如本文中所使用，「賦形劑(excipient)」係指基本上惰性的物質，其經添加至醫藥組成物中以向該組成物提供（但不限於）體積、稠度、穩定性、結合能力、潤滑、崩解能力等。例如，諸如抗氧化劑及金屬螯合劑之穩定劑係賦形劑。在一實施例中，醫藥組成物包含抗氧化劑及/或金屬螯合劑。「稀釋劑(diluent)」係一種類型的賦形劑。
在本文中描述之醫藥組成物本身可向人類患者投予，或可以其中彼等與其他活性成分（如在組合療法中）、或載劑、稀釋劑、賦形劑或其組合混合之醫藥組成物向人類患者投予。適當配方取決於選擇的投予途徑。用於本文所述之化合物的配方及投予之技術係所屬技術領域中具有通常知識者已知的。
在本文中揭示之醫藥組成物可以本身已知之方式製造，例如藉由習知之混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、研調、乳化、囊封、包封、或製錠程序。此外，所含有的活性成分之量可有效達成其意圖目的。在本文中揭示之醫藥組合中使用的許多化合物可提供為含有醫藥上相容的相對離子之鹽。
所屬技術領域存在多種投予化合物、鹽、及/或組成物之技術，包括但不限於口服、直腸、肺、外用、氣溶膠、注射、輸注、及腸胃外遞送，包括肌內、皮下、靜脈內、髓內注射、鞘內、直接心室內、腹膜內、鼻內、及眼內注射。在一些實施例中，式(I)之化合物或其醫藥上可接受之鹽可口服投予。
亦可以局部而非全身方式投予化合物、鹽、及/或組成物，例如經由將通常呈貯劑或持續釋放配方之化合物直接注射或植入至感染區域中。另外，可以標靶藥物遞送系統（例如以針對特異性細胞或組織類型之靶向配體包被之脂質體）投予化合物。脂質體將靶向細胞或組織且由標靶細胞或組織選擇性吸收。
所欲時，組成物可呈現於可含有一或多個（含有活性成分之）單位劑型之包裝或分配裝置中。包裝可例如包含金屬或塑膠箔，例如泡殼包裝。包裝或分配器裝置可隨附投予說明。包裝或分配器亦可隨附與該容器相關聯之通知來規範藥品的製造、使用、或銷售，通知之形式係由政府機構規定，該通知反映該機構核准該藥物形式用於人類或獸醫投予。舉例來說，該通知可係美國食品與藥品管理局批准用於處方藥的標籤或產品仿單。亦可製備可包括在相容醫藥載劑中配製的本文描述之化合物及/或鹽的組成物、置於適當容器中並標示用來治療所指示之病況。 治療用途及方法
本文中所述之一些實施例係關於一種用於治療本文中所述之癌症或腫瘤之方法，其可包括向患有癌症或腫瘤之對象投予有效量的本文所述之化合物（例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽）、或包括本文所述化合物（例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽）之醫藥組成物。本文中所述之其他實施例係關於一種有效量的本文所述之化合物（例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽）或包括本文中所述之化合物（例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽）之醫藥組成物在製造用於治療本文中所述之癌症或腫瘤之藥劑的用途。本文中所述之又一些實施例係關於一種有效量的本文中所述之化合物（例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽）或包括本文中所述化合物（例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽）之醫藥組成物，其用於治療本文中所述之癌症或腫瘤。
癌症及腫瘤之實例包括但不限於：肺癌、尿路上皮癌、結腸直腸癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、乳癌、膀胱癌、胃癌、胃腸間質瘤、子宮頸癌、食道癌、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、子宮癌、唾液腺癌、腎癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、或肉瘤。
如本文中所使用，「對象(subject)」係指作為治療、觀察、或實驗之目標的動物。「動物(animal)」包括冷血及溫血脊椎動物及無脊椎動物，例如魚、甲殼類動物、爬蟲類及特別是哺乳動物。「哺乳動物(mammal)」包括但不限於小鼠、大鼠、兔、天竺鼠、犬、貓、綿羊、山羊、牛、馬、靈長類動物，諸如猴、黑猩猩、及猿，且特別是人類。在一些實施例中，對象可以是人。在一些實施例中，對象可以是兒童及/或嬰兒，例如患有發燒的兒童或嬰兒。在其他實施例中，對象可係成人。
如本文中所使用，用語「治療(treat, treating, treatment, therapeutic)」及「療法(therapy)」不必然意指完全治癒或消除疾病或病況。可將疾病或病況之任何非所欲的徵象或症狀有任何程度的任何減輕視為治療及/或療法。另外，治療可包括可使對象對福祉或外觀的整體感覺惡化之行動。
用語「治療有效量(therapeutically effective amount)」及「有效量(effective amount)」用於指示引發指示生物或藥物反應之活性化合物或醫藥製劑的量。例如，治療有效量的化合物、鹽、或組成物可係預防、減輕、或改善疾病或病況之症狀、或延長所治療對象之存活所需的量。此反應可以在組織、系統、動物、或人類中發生，且包括減輕所治療疾病或病況之徵象或症狀。鑒於本文所提供之揭露，有效量之判定完全在所屬技術領域中具有通常知識者之能力範圍內。作為劑量所需之本文中所揭示之化合物的治療有效量將取決於投予途徑、所治療的動物類型（包括人類）、及所考慮的特定動物之身體特徵。可調整劑量以達到所預的效果，但是取決於諸如體重、飲食、併用藥物、及所屬醫學領域中具有通常知識者將認識到的其他因素之因素。
例如，化合物之有效量係導致下列者的量：(a)由癌症引起之一或多種症狀減少、減輕、或消失，(b)腫瘤大小減小，(c)腫瘤消除，及/或(d)腫瘤之長期疾病穩定（生長停滯）。在肺癌（諸如非小細胞肺癌）的治療中，治療有效量係減輕或消除咳嗽、呼吸急促、及/或疼痛的量。
用於治療所需的式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽的量將不僅隨著所選特定化合物或鹽而變化，且亦隨著投予途徑、所治療的疾病或病況之性質及/或症狀、及患者的年齡及身體狀況而變化，而最終將由主治醫師或臨床醫師來決定。在投予醫藥上可接受之鹽的情況下，劑量可以游離鹼計算。所屬技術領域中具有通常知識者將理解，在某些情况下，可能需要以超過或甚至遠超過本文所述劑量範圍之量投予本文中所揭示之化合物，以有效及積極地治療特別是侵襲性疾病或病況。
然而，通常，合適之劑量將常常在約0.05 mg/kg至約10 mg/kg之範圍內。例如，合適之劑量可在約0.10 mg/kg至約7.5 mg/kg體重/天，諸如約0.15 mg/kg至約5.0 mg/kg/接受者體重/天、約0.2 mg/kg至約4.0 mg/kg/接受者體重/天、或介於其間之任何量的範圍內。化合物可以單位劑型投予；例如，每單位劑型含有1至500 mg、10至100 mg、5至50 mg、或介於其間之任何量的活性成分。
所欲劑量可便利地以單一劑量呈現，或呈以適當間隔投予之分開劑量，例如，以每天二、三、四、或更多個亞劑量。亞劑量本身可進一步劃分成例如多次不連續的寬鬆間隔開投予。
如所屬技術領域中具有通常知識者將顯而易知的，欲投予之有用體內劑量及特定投予模式將視年齡、體重、病痛嚴重性及所治療哺乳動物物種、所採用之特定化合物及所採用之這些化合物的特定用途而變化。有效劑量水平（即達到所欲效果所需之劑量水平）的判定可由所屬技術領域中具有通常知識者使用常規方法來達成，例如人體臨床試驗、體內研究、及體外研究。例如，式(I)之免疫接合物化合物、式(IV)或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽之有用劑量可藉由比較其體外活性及在動物模型中體內活性來判定。這種比較可藉由與已建立之藥物（諸如順鉑及/或吉西他濱）比較來進行。
劑量及時間間隔可經個別地調節，以提供足以維持調節效應之活性部份之血漿水平或最小有效濃度(MEC)。各化合物之MEC將有所不同，但可自體內及/或體外數據估計。達成MEC所需之劑量將取決於個體特徵及投予途徑。然而，可使用HPLC檢定或生物檢定來判定血漿濃度。劑量時間間隔亦可使用MEC值來判定。組成物應使用維持血漿水平高於MEC達10至90%的時間、較佳地在30至90%之間的時間且最佳地在50至90%之間的時間的方案投予。在局部投予或選擇性吸收之情況下，藥物之局部有效濃度可能與血漿濃度無關。
應注意，主治醫師會瞭解如何及何時因毒性或器官功能異常而終止、中斷或調整投予。相反地，主治醫師亦會知道若臨床反應不充足（排除毒性），則將治療調整至較高水平。管理所關注病症時投予劑量之量值將隨所治療疾病或病況之嚴重性及投予途徑而異。疾病或病況之嚴重程度可例如部分地依據標準預後評估方法來評估。另外，劑量及可能的給藥頻率亦將根據個別患者之年齡、體重及反應而異。與以上討論之計畫類似的計畫可用於獸醫學。
可使用已知方法評估本文中所揭示之化合物、鹽、及組成物之療效及毒性。例如，特定化合物或共用某些化學部份之化合物亞組之毒物學可藉由判定對細胞系（例如哺乳動物且較佳人類細胞系）之體外毒性來建立。此類研究之結果通常可預測在動物（例如哺乳動物）或更具體而言在人類中之毒性。替代地，可使用已知方法判定動物模型（諸如小鼠、大鼠、兔、狗、或猴）中特定化合物之毒性。特定化合物之療效可使用數種公認方法（例如體外方法、動物模型或人體臨床試驗）來建立。當選擇模型來判定療效時，熟習此項技術者可由目前最佳技術的引導以選擇適當模型、劑量、投予途徑及/或方案。 合成
式(II)、式(II*)、式(IV)、或式(IV*)之藥物化合物或其醫藥上可接受之鹽可由具有通常知識者使用已知技術以各種方式製備，如本文提供之詳細技術所指引。例如，在一實施例中，根據 圖 2 至圖 4中所繪示之通用方案製備式(II)、或式(II*)、式(IV)、或式(IV*)之藥物化合物。
式(III)之接合物可由具有通常知識者使用已知技術以各種方式製備，如本文提供之詳細技術作為引導。用於製造式(III)之接合物的通用方案係提供於 圖 7B中，其中變數L 2、L 3、L 4、L 5、L 6、及L 7係如本文中針對式(III)所定義；R 1、R 2、R 3、R 4、R 7、n 4、及n 5係如本文中針對式(II)、式(II*)、式(IV)、或式(IV*)所定義；且A 1、A 2、A 3、A 4、及R x係定義於 圖 7B本身內。
式(I)之免疫接合物可由具有通常知識者使用已知技術以各種方式製備，如本文提供之詳細技術作為引導。例如，在一實施例中，根據 圖 7A中所繪示之通用方案製備式(I)之免疫接合物。簡言之，抗體係針對還原（以形成半胱胺酸殘基Cys-SH）藉由將Tris緩衝劑（mM EDTA，在pH 8.5下）接著TCEP加入來製備。在將DMA加入並與經還原抗體溶液溫和混合以在接合期間達到最終10% v/v後，將含有毒素-連接子（亦即，式(III)之化合物）之DMA儲備溶液加入並溫和混合。讓生物接合在20℃下繼續進行大約16至20 h過夜。製備式(I)之免疫接合物的程序係更詳細描述於實例30中。在一實施例中，一種生產本文所述之免疫接合物之製程包含使有效量之硫醇官能化抗體或抗原結合片段與本文所述之接合物在有效形成免疫接合物之反應條件下反應。在一實施例中，製程包含：(i)將抗體或其抗原結合片段還原以形成硫醇官能化抗體或其抗原結合片段；及(ii)將該接合物添加至該硫醇官能化抗體或其抗原結合片段。在一個實施例中，該製程之步驟(i)包含於(2-羧乙基)膦(TCEP)存在下及乙二胺四乙酸(EDTA)及在約pH 8.5下將該抗體或其抗原結合片段還原。在一個實施例中，該製程之步驟(ii)包含於二甲基乙醯胺(DMA)存在下在約20℃下將該接合物添加至該硫醇官能化抗體或其抗原結合片段以培養至少16小時。 實例
額外實施例在下列實例中進一步詳細揭示，其並非以任何方式意圖限制申請專利範圍之範圍。 實例1 (1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10H,13H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 1-16)及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10H,13H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 1-17)（ 圖 8） 1-溴-3-氟-2-甲基-5-硝基-苯( 1-2)：
向2-氟-1-甲基-4-硝基-苯( 1-1) (1.00 kg, 6.45 mol)於H 2SO 4(1.25 L)及庚烷(5.00 L)中之攪拌溶液中在65℃下在6 h期間內分批添加1-溴吡咯啶-2,5-二酮(2.29 kg, 12.9 mol)。在65℃下攪拌1 h後，將其用3.1 kg的冰淬熄，用乙酸乙酯(2 × 650 mL)萃取，用10% Na 2SO 3(3 × 650 mL)、飽和NaHCO 3(2 × 650 mL)洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。在室溫下靜置16 h後，便形成黃色固體；將其乾燥，用冷庚烷(1.20 L)洗滌並在真空中乾燥而供給1-溴-3-氟-2-甲基-5-硝基-苯( 1-2)（238 g, 16%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 8.25 (t, J= 1.7 Hz, 1 H), 7.87 (dd, J= 8.8, 2.2 Hz, 1 H), 2.43 (d, J= 2.4 Hz, 3 H)。 3-溴-5-氟-4-甲基-苯胺( 1-3)：
向1-溴-3-氟-2-甲基-5-硝基-苯( 1-2) (100 g, 427 mmol)於乙酸乙酯(1.50 L)中之攪拌溶液中在氬氣氛下添加Pt/C (10 wt%, 10.0 g)，用H 2吹掃三次，並在H 2(15 psi)中在60℃下攪拌4 h。在將H 2氣氛用氬交換後，將其通過矽藻土墊過濾，將濾餅用乙酸乙酯(500 mL)洗滌，將合併之濾液濃縮並在真空中乾燥而供給3-溴-5-氟-4-甲基-苯胺( 1-3)（94.7 g，純度71%，77%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 6.79 (s, 1 H), 6.50 (dd, J= 11.7, 2.1 Hz, 1 H), 2.10 (d, J= 2.1 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ ppm -112.13。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +, 205.8。 N-(3-溴-5-氟-4-甲基-苯基)乙醯胺( 1-4)：
向3-溴-5-氟-4-甲基-苯胺( 1-3) (300 g, 1.47 mol)於乙酸乙酯(4.5 L)中之溶液中在15℃下添加三乙胺(420, 3.01 mol)及乙酸酐(179 mL, 1.91 mol)。在15℃下攪拌12 h後，將其用飽和NH 4Cl (2.5 L)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 850 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之15%乙酸乙酯而洗提供給 N-(3-溴-5-氟-4-甲基-苯基)乙醯胺( 1-4)（200 g，55%產率）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm 7.59 (t, J= 1.5 Hz, 1 H), 7.41 (dd, J= 11.6, 2.0 Hz, 1 H), 2.26 (d, J= 2.2 Hz, 3 H), 2.11 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ ppm -112.95。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +247.8。 ( E)-4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基-苯基)丁-3-烯酸( 1-5)：
向 N-(3-溴-5-氟-4-甲基-苯基)乙醯胺( 1-4) (200 g, 813 mmol)於四氫呋喃(1.00 L)及水(200 mL)中之攪拌溶液中在N 2下添加二異丙基乙胺(566 mL, 3.25 mol)、參鄰甲苯基磷烷(49.5 g, 163 mmol)、丁-3-烯酸(168 g, 1.95 mol)、及Pd(OAc) 2(18.2 g, 81.3 mmol)。在75℃下攪拌16 h後，將其用水(350 mL)稀釋，將pH用3 N HCl調整至2，並通過矽藻土墊過濾。將混合物用乙酸乙酯(650 mL)及水(650 mL)萃取；在分離後，將水層用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之70%乙酸乙酯洗提而給出( E)-4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基-苯基)丁-3-烯酸( 1-5)（100 g，49%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 12.32 (br s, 1 H), 10.02 (s, 1 H), 7.48 (ddd, J= 12.0, 8.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.08 - 6.98 (m, 1 H), 6.94 - 6.83 (m, 1 H), 6.75 - 6.50 (m, 1 H), 6.13 (td, J= 15.7, 7.2 Hz, 1 H), 5.69 (d, J= 15.5 Hz, 1 H), 3.59 (ddd, J= 6.5, 4.1, 2.5 Hz, 1 H), 3.56 - 3.46 (m, 1 H), 3.31 - 3.21 (m, 1 H), 2.16 - 2.06 (m, 3 H), 2.05 - 1.99 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ ppm -115.38。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +252.0。 4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基-苯基)丁酸( 1-6)：
向( E)-4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基-苯基)丁-3-烯酸( 1-5) (100 g, 398 mmol)於甲醇(1.5 L)中之攪拌溶液中在氬氣氛下添加Pd/C (30.0 g, 39.8 mmol, 10 wt%, 0.10 eq.)，用H 2吹掃三次，並在H 2(15 psi)下在35℃下攪拌12 h。在將H 2氣氛用氬交換後，將其通過矽藻土墊過濾，將濾餅用甲醇(2 L)洗滌，將合併之濾液濃縮並在真空中乾燥而供給4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基-苯基)丁酸( 1-6)（82.5 g，82%產率），將其用於下一個步驟中而未經進一步純化。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 9.98 (s, 1 H), 7.42 (dd, J= 12.2, 1.7 Hz, 1 H), 7.04 (s, 1 H), 2.59 - 2.53 (m, 2 H), 2.27 (t, J= 7.2 Hz, 2 H), 2.09 (d, J= 1.8 Hz, 3 H), 2.01 (s, 3 H), 1.73 – 1.67 (m, 2 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ ppm -115.64。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +254.0。 N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-7)：
向4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基-苯基)丁酸( 1-6) (110 g, 434 mmol)於三氟乙酸(330 mL)中之攪拌溶液中在0℃下添加三氟乙酸酐(121 mL, 869 mmol)。在15℃下攪拌15 h後，將其在0℃下倒入50%乙腈水溶液(2 L)中並在0℃下攪拌0.5 h。將所得黃色懸浮液在0℃下用25% NaOH調整至pH 7，將所得固體過濾，用水(350 mL)、甲基三級丁酯(700 mL)洗滌，乾燥，用甲基三級丁酯(200 mL)研製，過濾並乾燥而供給N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-7)（89.9 g，88%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 12.18 (s, 1 H), 8.28 (d, J= 13.2 Hz, 1 H), 2.89 (t, J= 6.1 Hz, 2 H), 2.68 - 2.60 (m, 2 H), 2.18 - 2.08 (m, 6 H), 1.99 (quin, J= 6.4 Hz, 2 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ ppm -103.89。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +236.0。 N-(7-((二甲基胺基)亞甲基)-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-8)：
在將 N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺 (1-7) (100 mg, 0.426 mmol)於1,1-二甲氧基- N, N-二甲基甲胺(1 mL)中之攪拌溶液在110℃下加熱5 h後，將其冷卻至15℃，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之70%乙酸乙酯洗提而供給 N-(7-((二甲基胺基)亞甲基)-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺 (1-8)（96 mg，77%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 12.88 (br s, 1 H), 8.35 (d, J= 13.0 Hz, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 3.17 (s, 6 H), 2.75 - 2.84 (m, 4 H), 2.20 (s, 3 H), 2.16 (d, J= 1.8 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -106.40。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +264.1。備註：在LCMS條件下將 1-8轉化成 1-9。 N-(3-氟-7-(羥基亞甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-9)：
向 N-(7-((二甲基胺基)亞甲基)-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)乙醯胺( 1-8) (49.0 mg, 0.168 mmol)於二氯甲烷(1 mL)中之攪拌溶液中在15℃下添加1 N HCl (1 mL)。在15℃下攪拌15 h後，將其用二氯甲烷(3 × 2 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並在真空中乾燥而供給 N-(3-氟-7-(羥基亞甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-9)（30.0 mg，67%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 13.99 (d, J= 11.1 Hz, 1 H), 11.85 (s, 1 H), 8.40 (d, J= 12.8 Hz, 1 H), 7.45 (d, J= 11.1 Hz, 1 H), 2.81 - 2.87 (m, 2 H), 2.48 (t, J= 6.8 Hz, 2 H), 2.24 (s, 3 H), 2.18 (d, J= 1.8 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -101.81。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +264.1。 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-10)：
向 N-(3-氟-7-(羥基亞甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-9) (10.0 g, 38.0 mmol)於二氯乙烷(100 mL)及乙酸(1 mL)中之攪拌溶液中在20℃下分批添加三乙醯氧基硼氫化鈉(9.66 g, 45.5 mmol)。在30℃下攪拌12 h後，將其用水(100 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 150 mL)萃取，將合併之有機層用水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之33%至66%乙酸乙酯洗提而供給 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-10)（7.25 g，72%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 12.13 (br s, 1 H), 8.44 (d, J= 12.9 Hz, 1 H), 3.81 - 3.98 (m, 2 H), 3.07 - 3.09 (m, 1 H), 2.67 - 2.90 (m, 3 H), 2.24 (s, 3 H), 2.10 - 2.18 (m, 4 H), 1.83 - 1.97 (m, 1 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -101.14。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +266.1。 N-(7-((烯丙氧基)甲基)-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-11)：
向 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-10) (11.8 g, 44.7 mmol)及3-碘丙-1-烯(20.3 mL, 222 mmol)於乙腈(236 mL)中之攪拌溶液中在25℃下添加Ag 2O (30.9 g, 133 mmol)。在25℃下12 h攪拌後，將其過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之7%乙酸乙酯洗提而供給 N-(7-((烯丙氧基)甲基)-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-11)（3.80 g，28%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 12.22 (s, 1 H), 8.43 (d, J= 12.9 Hz, 1 H), 5.83 - 6.02 (m, 1 H), 5.07 - 5.40 (m, 2 H), 4.05 (d, J= 5.6 Hz, 2 H), 3.88 (dd, J= 9.5, 4.5 Hz, 1 H), 3.70 (dd, J= 9.5, 7.1 Hz, 1 H), 3.02 - 3.05 (m, 1 H), 2.72 - 2.87 (m, 2 H), 2.34 - 2.36 (m, 1 H), 2.22 (s, 3 H), 2.15 (d, J= 1.6 Hz, 3 H), 1.89 - 2.04 (m, 1 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -101.93。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +306.2。 2-((烯丙氧基)甲基)-8-胺基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 1-12)：
向 N-(7-((烯丙氧基)甲基)-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-11) (3.80 g, 12.5 mmol)於甲醇(152 mL)中之攪拌溶液中在20℃下添加2 N HCl (152 mL)。在60℃下攪拌2 h後，將其冷卻至0℃，將pH用飽和NaHCO 3調整至7，用乙酸乙酯(3 × 300 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之2%乙酸乙酯洗提而供給2-((烯丙氧基)甲基)-8-胺基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 1-12)（2.60 g，79%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 6.49 (br s, 2 H), 6.19 (d, J= 11.6 Hz, 1 H), 5.94 (m, 1 H), 5.30 (dq, J= 17.2, 1.6 Hz, 1 H), 5.20 (dq, J= 10.4, 1.3 Hz, 1 H), 3.98 - 4.10 (m, 2 H), 3.92 (dd, J= 9.5, 4.4 Hz, 1 H), 3.67 (dd, J= 9.5, 7.8 Hz, 1 H), 2.98 (dt, J= 17.3, 4.6 Hz, 1 H), 2.65 - 2.80 (m, 2 H), 2.27 - 2.37 (m, 1 H), 2.06 (d, J= 1.6 Hz, 3 H), 1.92 -1.86 (m, 1 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -106.56。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +264.2。 (9S)-1-((烯丙氧基)甲基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-14)：
將2-((烯丙氧基)甲基)-8-胺基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 1-12) (100 mg, 0.380 mmol)、( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (100 mg, 0.380 mmol)及2,4,6-三氧化2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜己烷(2,4,6-tripropyl-1,3,5,2,4,6-trioxatriphosphinane 2,4,6-trioxide)（1.13 mL，1.90 mmol，50% wt於乙酸乙酯中）之攪拌混合物在60℃下加熱10 h。如上所述設置十九個額外反應，並在冷卻至室溫時將所有二十個反應混合物合併以進行後處理(work-up)及純化。將合併之反應混合物用水(200 mL)稀釋，用乙酸乙酯(4 × 200 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之5%至80%乙酸乙酯洗提而供給(9 S)-1-((烯丙氧基)甲基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-14)（310 mg，5.4%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.71 (br d, J= 10.6 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 5.63 - 6.04 (m, 2 H), 4.99 - 5.57 (m, 5 H), 3.94 (br d, J= 5.4 Hz, 2 H), 3.66 - 3.79 (m, 2 H), 3.47 - 3.64 (m, 2 H), 3.14 (br d, J= 3.1 Hz, 1 H), 2.91 - 3.07 (m, 1 H), 2.28 - 2.54 (m, 4 H), 2.03 - 2.14 (m, 1 H), 1.83 - 1.97 (m, 2 H), 1.00 - 1.09 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -110.59。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +491.0。 (9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-15)：
向(9 S)-1-((烯丙氧基)甲基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-14) (360 mg, 0.734 mmol)於四氫呋喃(18 mL)中之攪拌溶液中在25℃下添加氯化鋅(II) (130 mg, 0.954 mmol)，在25℃下攪拌0.25 h，接著將肆(三苯膦)鈀(212 mg, 0.183 mmol)加入，攪拌0.25 h，接著將四丁基錫烷(3.88 mL, 14.7 mmol)加入。在50℃下攪拌1.5 h後，將其冷卻至20℃，用水(30 mL)淬熄，用乙酸乙酯(4 × 30 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並在真空中乾燥而供給(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-15)（110 mg，33%產率）。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +451.1。 (1R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-16) 及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-17)：
使(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-15) (110 mg, 0.244 mmol)經歷SFC（儀器：Waters SFC80製備型SFC；管柱：Phenomenex-Cellulose-2 (250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為EtOH；梯度：B%=55%等度洗提模式；流率：80 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：40℃；系統反壓：100巴）而供給(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-16)（15.0 mg，4.5%產率）（化合物 1-16可能是所描繪者之相對立體異構物）及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 1-17)（10.1 mg，3.1%產率）（化合物 1-17可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環處之立體化學係任意指派的。
1-16： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (br d, J= 11.1 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.53 (s, 1 H), 5.27 - 5.52 (m, 4 H), 5.02 (br t, J= 5.4 Hz, 1 H), 3.67 (t, J= 6.1 Hz, 2 H), 3.46 (br d, J= 0.9 Hz, 1 H), 2.92 - 3.19 (m, 2 H), 2.33 - 2.43 (m, 4 H), 1.75 - 2.02 (m, 3 H), 0.87 (br t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.87。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +451.1。
1-17： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (d, J= 11.1 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 5.27 - 5.50 (m, 4 H), 5.02 (t, J= 5.7 Hz, 1 H), 3.66 (t, J= 6.4 Hz, 2 H), 3.46 (br d, J= 3.5 Hz, 1 H), 2.94 - 3.18 (m, 2 H), 2.37 (s, 4 H), 1.78 - 1.99 (m, 3 H), 0.87 (t, J= 7.3 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.86。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 25H 24FN 2O 5 +計算為：451.1，測得為：451.1。 實例2 ( S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,1-雙(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 2-20)（ 圖 9） N-(3-氟-7,7-雙(羥甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 2-18)：
向 N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺 (1-7) (5.00 g, 21.3 mmol)於乙腈(80 mL)中之攪拌溶液中添加碳酸鈉(451 mg, 4.25 mmol)及甲醛水溶液(10.4 g, 128 mmol)。在40℃下攪拌15 h後，將其用水(30 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 30 mL)萃取，將合併之有機層用水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之5%至70%乙酸乙酯洗提而給出固體，將其用三級丁基甲醚(10 mL)在20℃下研製30 min而供給 N-(3-氟-7,7-雙(羥甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 2-18)（3.00 g，47%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 11.98 – 12.25 (m, 1 H), 8.29 (dd, J= 13.2, 3.6 Hz, 1 H), 4.70 (t, J= 5.2 Hz, 1 H), 4.54 (br d, J= 7.6 Hz, 1 H), 3.65 - 3.81 (m, 2 H), 3.40 - 3.56 (m, 2 H), 2.93 (br t, J= 5.6 Hz, 2 H), 2.05 - 2.19 (m, 8 H)。 19F NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.42。LCMS (ESI+) m/z：296.1。 8-胺基-6-氟-2,2-雙(羥甲基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 2-19)：
向 N-(3-氟-7,7-雙(羥甲基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)乙醯胺( 2-18) (1.00 g, 3.39 mmol)於甲醇(40 mL)中之攪拌溶液中添加2N HCl (40 mL)。在60℃下攪拌2 h後，將其冷卻至0℃，用冰水(10 mL)淬熄，將pH用飽和碳酸氫鈉調整至7，用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之5%至33%乙酸乙酯洗提而供給8-胺基-6-氟-2,2-雙(羥甲基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 2-19)（0.50 g，58%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 6.21 (d, J= 11.6 Hz, 1 H), 3.97 (d, J= 11.2 Hz, 2 H), 3.74 (d, J= 11.2 Hz, 2 H), 2.86 (t, J= 6.4 Hz, 2 H), 2.06 (d, J= 1.6 Hz, 3 H), 1.89 (t, J= 6.4 Hz, 2 H)。 19F NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm -105.09。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +254.1。 (S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,1-雙(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 2-20)：
向8-胺基-6-氟-2,2-雙(羥甲基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 2-19) (100 mg, 0.394 mmol)及( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4-f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (208 mg, 0.790 mmol)於甲苯(2 mL)中之攪拌混合物中添加四氟硼酸1-丁基-3-甲基-1 H-咪唑-3-鎓(2 mL)。（如上所述設置一個額外反應並在冷卻至室溫時將兩個反應混合物合併。）在130℃下攪拌16 h後，將其用水(5 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 5 mL)萃取，將合併之有機層以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮，將殘餘物藉由prep-TLC純化（SiO 2，乙酸乙酯/甲醇= 10/1）而給出固體，將其用水(0.5 mL)在20℃下研製10 min，過濾並在真空中乾燥而供給( S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,1-雙(羥甲基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3', 4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 2-20)（7.0 mg，3.6%產率）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm 7.55 - 7.78 (m, 2 H), 5.53 - 5.69 (m, 3 H), 5.40 (d, J= 16.0 Hz, 1 H), 4.15 (d, J= 11.6 Hz, 2 H), 3.86 (d, J= 11.6 Hz, 2 H), 3.19 (t, J= 6.4 Hz, 2 H), 2.43 (s, 3 H), 2.30 (t, J= 6.8 Hz, 2 H), 1.97 (dd, J= 7.2, 5.2 Hz, 2 H), 1.01 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm -113.70。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +481.1。 實例3 (1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-27)及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-28)（ 圖 10） 4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基苯基)-2-甲基丁-3-烯酸( 3-21)：
向 N-(3-溴-5-氟-4-甲基-苯基)乙醯胺 (1-4) (10.0 g, 40.6 mmol)及2-甲基丁-3-烯酸(13.0 g, 130 mmol)於四氫呋喃(40 mL)及水(10 mL)中之攪拌混合物中添加 N-乙基- N, N-二異丙胺(38.2 mL, 219 mmol)、參鄰甲苯基磷烷(2.47 g, 8.13 mmol)、及二乙醯氧基鈀(912 mg, 4.06 mmol)。在75℃下攪拌5 h後，將其冷卻至0℃，用水(50 mL)淬熄，將pH用3 N HCl調整至3，將混合物通過矽藻土墊過濾並將濾餅用乙酸乙酯洗滌。將合併之濾液用乙酸乙酯(3 × 150 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之50%乙酸乙酯洗提而供給4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基苯基)-2-甲基丁-3-烯酸( 3-21)（6.00 g，56%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.38 (s, 1 H), 10.02 (d, J= 4.0 Hz, 1 H), 7.46 - 7.52 (m, 1 H), 6.99 - 7.38 (m, 1 H), 6.65 - 6.69 (m, 1 H), 6.17 (dd, J= 15.6, 8.0 Hz, 1 H), 3.49 (d, J= 7.2 Hz, 1 H), 2.11 (dd, J= 13.2, 1.6 Hz, 3 H), 2.02 (d, J= 4.8 Hz, 3 H), 1.24 - 1.88 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -115.68。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +266.1。 4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基苯基)-2-甲基丁酸( 3-22)：
向4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基苯基)-2-甲基丁-3-烯酸( 3-21) (5.00 g, 18.8 mmol)於甲醇(20 mL)中之除氣攪拌混合物中添加Pd/C (10 wt%) (2.40 g)，用H 2吹掃三次，並在H 2(15 psi)下在25℃下攪拌10 h。在將H 2氣氛用氬置換後，將其通過矽藻土墊過濾並將濾餅用甲醇(300 mL)洗滌，將合併之濾液濃縮並在真空中乾燥而供給4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基苯基)-2-甲基丁酸( 3-22)（4.4 g，87%產率），將其直接用於下一個步驟中。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 10.0 (s, 1 H), 7.42 (dd, J= 12.4, 1.6 Hz, 1 H), 7.04 (s, 1 H), 2.52 - 2.58 (m, 2 H), 2.24 (t, J= 6.8 Hz, 2 H), 2.08 (d, J= 1.6 Hz, 3 H), 2.01 (s, 3 H), 1.40 - 1.65 (m, 4 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -125.77。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +268.1。 N-(7-氟-3,8-二甲基-4-側氧基四氫萘-5-基)乙醯胺( 3-23)：
向4-(5-乙醯胺基-3-氟-2-甲基苯基)-2-甲基丁酸( 3-22) (5.00 g, 18.7 mmol)於三氟乙酸(10 mL)中之混合物中在0℃下添加三氟乙酸酐(5.20 mL, 37.4 mmol)。在0℃下攪拌2 h後，將反應混合物用冰水(100 mL)淬熄，將pH用25% aq. NaOH在0℃下調整至7，用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮，並將殘餘物藉由矽膠快速管柱層析法純化且用石油醚中之8%乙酸乙酯洗提而給出 N-(7-氟-3,8-二甲基-4-側氧基四氫萘-5-基)乙醯胺( 3-23)（3.50 g，75%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.13 (s, 1 H), 8.28 (d, J= 13.2 Hz, 1 H), 2.93 - 3.04 (m, 1 H), 2.81 - 2.92 (m, 1 H), 2.63 - 2.75 (m, 1 H), 2.07 - 2.18 (m, 7 H), 1.74 (qd, J= 12.0, 4.8 Hz, 1 H), 1.15 (d, J= 6.4 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.64。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +250.1。 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 3-24)：
向 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 3-23) (2.00 g, 8.04 mmol)於乙腈(32 mL)中之攪拌溶液中添加碳酸鈉(106 mg, 0.802 mmol)及甲醛水溶液(723 mg, 24.1 mmol)。在60℃下攪拌16 h後，將反應混合物用水(20 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 20 mL)萃取，將合併之有機層用水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠純化且用石油醚中之30%乙酸乙酯洗提而供給 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 3-24)（1.40 g，59%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.17 (s, 1 H), 8.26 - 8.34 (m, 1 H), 4.81 (t, J= 5.6 Hz, 1 H), 3.69 (dd, J= 10.4, 5.6 Hz, 1 H), 2.78 - 3.01 (m, 2 H), 2.06 - 2.32 (m, 8 H), 1.73 - 1.90 (m, 1 H), 1.07 (s, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +280.1。 8-胺基-6-氟-2-(羥甲基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H) -酮( 3-25)：
向 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)乙醯胺( 3-24) (1.40 g, 5.00 mmol)於甲醇(56 mL)中之攪拌溶液中在15℃下添加HCl/甲醇(56 mL, 2 M)。在60℃下攪拌1 h，將反應混合物用冰水(10 mL)淬熄，將pH用飽和碳酸氫鈉在0℃下調整至7，用乙酸乙酯(6 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之15%乙酸乙酯洗提而供給8-胺基-6-氟-2-(羥甲基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H) -酮( 3-25)（1.00 g，80%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.43 (br s, 2 H), 6.34 (d, J= 12.6 Hz, 1 H), 4.65 (t, J= 5.6 Hz, 1 H), 3.65 (dd, J= 10.4, 5.6 Hz, 1 H), 3.25 (dd, J= 10.4, 5.6 Hz, 1 H), 2.64 - 2.87 (m, 2 H), 2.06 - 2.08 (m, 1 H), 1.98 (d, J= 1.2 Hz, 3 H), 1.62 - 1.76 (m, 1 H), 1.01 (s, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +238.1。 (9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-26)：
向8-胺基-6-氟-2-(羥甲基)-2,5-二甲基-3,4-二氫-萘-1(2 H)-酮( 3-25) (200 mg, 0.842 mmol)及( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (332 mg, 1.26 mmol)於甲苯(10 mL)中之攪拌澄清溶液中在130℃下添加4-甲基苯磺酸(58.1 mg, 0.337 mmol)。如上所述設置四個額外反應，並在冷卻至室溫時將所有五個反應混合物合併以進行後處理及純化。在130℃下攪拌12 h，將反應混合物濃縮並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用乙酸乙酯洗提而供給(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-26)（157 mg，6.8%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.31 (d, J= 2.0 Hz, 1 H), 6.46 - 6.56 (m, 1 H), 5.35 - 5.58 (m, 4 H), 5.04 (br d, J= 6.8 Hz, 1 H), 3.69 - 3.89 (m, 1 H), 3.60 (br d, J= 8.8 Hz, 1 H), 2.96 - 3.16 (m, 2 H), 2.26 - 2.41 (m, 3 H), 2.17- 2.19 (m, 1 H), 1.87 - 1.92 (m, 3 H), 1.32 - 1.48 (m, 3 H), 0.87 (td, J= 7.2, 2.0 Hz, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +465.1。 (1R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-27)及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-28)：
將(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-26) (157 mg, 0.323 mmol)溶解於甲醇中並藉由SFC分離（儀器：Waters SFC150AP製備型SFC。管柱：REGIS(s,s) WHELK-O1 (250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為EtOH；梯度：B%=50%等度洗提模式；流率：70 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：攝氏35度；系統反壓：120巴）而供給(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-27) (18.0 mg, 12%產率）（化合物 3-27可能是所描繪者之相對立體異構物）及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(羥甲基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 3-28)（15.0 mg，10%產率）（化合物 3-28可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環處之立體化學係任意指派的。
3-27： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.76 (d, J= 11.2 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 5.34 - 5.63 (m, 4 H), 5.03 (t, J= 5.2 Hz, 1 H), 3.79 (dd, J= 11.3, 5.6 Hz, 1 H), 3.56 - 3.68 (m, 1 H), 3.10 (br d, J= 5.6 Hz, 2 H), 2.38 (s, 3 H), 2.18 - 2.30 (m, 1 H), 1.75 - 1.94 (m, 3 H), 1.42 (s, 3 H), 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.58。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +465.1。
3-28： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.76 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 6.53 (s, 1 H), 5.29 - 5.63 (m, 4 H), 5.06 (t, J= 5.2 Hz, 1 H), 3.81 (br dd, J= 11.2, 5.2 Hz, 1 H), 3.61 (br dd, J= 11.2, 5.2 Hz, 1 H), 3.03 - 3.18 (m, 2 H), 2.38 (s, 3 H), 2.25 (m, 1 H), 1.78 - 1.94 (m, 3 H), 1.40 (s, 3 H), 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.57。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +465.1。 實例4 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( R)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 4-38) 及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( S)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 4-39)（ 圖 11） 1-(8-乙醯胺基-6-氟-2,5-二甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)肼-1,2-二羧酸二-三級丁酯( 4-29)：
向 N-(7-氟-3,8-二甲基-4-側氧基四氫萘-5-基)乙醯胺( 3-23) (35.1 g, 140 mmol)於甲苯(700 mL)中之攪拌混合物中在0℃下在氮下逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鈉(309 mL, 1 M)，冷卻至-40℃，接著將偶氮-1,2-二羧酸二-三級丁酯(42.1 g, 183 mmol)於甲苯(350 mL)中之溶液加入。在25℃下攪拌4 h後，將反應混合物冷卻至0℃，用水(1 L)稀釋，用乙酸乙酯(3 × 500 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之20%乙酸乙酯洗提而供給1-(8-乙醯胺基-6-氟-2,5-二甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)肼-1,2-二羧酸二-三級丁酯( 4-29)（41.0 g，60%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 11.61 - 11.84 (m, 1 H), 8.26 (d, J= 12.8 Hz, 1 H), 7.96 - 8.15 (m, 1 H), 2.96 - 3.16 (m, 2 H), 2.68 - 2.84 (m, 1 H), 2.12 (s, 4 H), 2.08 (s, 3 H), 1.35 - 1.46 (m, 21 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -105.29。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 24H 35FN 3O 6 +計算為：480.2，測得為：502 [MS+Na]。 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-(2-(丙-2-亞基)肼基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 4-31)：
在25℃下向1-(8-乙醯胺基-6-氟-2,5-二甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)肼-1,2-二羧酸二-三級丁酯( 4-29) (41.0 g, 85.5 mmol)於二氯甲烷(820 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(410 mL)，在25℃下攪拌1 h，接著將丙酮(480 mL)加入。在25℃下攪拌0.5 h後，將其濃縮而供給 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-(2-(丙-2-亞基)肼基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 4-31)（18.1 g，66%產率，經過2個步驟）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 11.90 (s, 1 H), 8.31 (d, J= 12.8 Hz, 1 H), 3.05 - 3.14 (m, 1 H), 2.90 - 3.02 (m, 1 H), 2.11 - 2.19 (m, 7 H), 2.05 - 2.08 (m, 2 H), 1.98 (d, J= 2.0 Hz, 6 H), 1.34 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -75.04。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 17H 23FN 3O 2 +計算為：320.1，測得為：320.1。 N-(7-胺基-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 4-32)：
向 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-(2-(丙-2-亞基)肼基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 4-31) (15.1 g, 47.3 mmol)於乙酸(302 mL)中之混合物中分批添加鋅粉(40.8 g, 624 mmol)。在20℃下攪拌2 h後，將反應混合物過濾並將濾液濃縮且在真空中乾燥而供給 N-(7-胺基-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 4-32)（23.8 g，粗製），將其直接用於下一個步驟中而未經進一步純化。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 11.56 (s, 1 H), 8.26 - 8.30 (m, 1 H), 3.01 - 3.09 (m, 2 H), 2.12 - 2.19 (m, 10 H), 1.43 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -73.57。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 14H 18FN 2O 2 +計算為：265.1，測得為：265.1。 N,N'-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺( 4-33)：
向 N-(7-胺基-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 4-32) (23.8 g, 73.3 mmol)於二氯甲烷(414 mL)中之攪拌混合物中添加乙酸酐(8.28 mL, 88.0 mmol)及三乙胺(30.6 mL, 220 mmol)。在25℃下攪拌12 h後，將反應混合物用水(500 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 200 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用石油醚中之70%乙酸乙酯洗提而供給 N, N'-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺( 4-33)（7.5 g，51%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 11.81 (s, 1 H), 8.20 - 8.37 (m, 2 H), 2.94 - 3.03 (m, 1 H), 2.77 - 2.88 (m, 1 H), 2.65 (m, 1 H), 2.06 - 2.18 (m, 6 H), 1.85 (m, 1 H), 1.79 (s, 3 H), 1.32 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -105.03。 N-(8-胺基-6-氟-2,5-二甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺( 4-34)：
向 N, N'-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1,7-二基)二乙醯胺( 4-33) (7.50 g, 24.4 mmol)於甲醇(105 mL)中之攪拌混合物中添加HCl/MeOH (105 mL, 4 M)。在25℃下攪拌2 h後，將反應混合物濃縮，用二氯甲烷(300 mL)稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液(2 × 200 mL)萃取，用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並在真空中乾燥而供給 N-(8-胺基-6-氟-2,5-二甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺( 4-34)（5.50 g，89%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.91 (s, 1 H), 7.39 (s, 2 H), 6.36 (d, J= 12.4 Hz, 1 H), 2.78 - 2.89 (m, 1 H), 2.67 - 2.75 (m, 2 H), 1.97 (d, J= 1.20 Hz, 3 H), 1.83 - 1.88 (m, 1 H), 1.80 (s, 3 H), 1.27 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -108.38。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 14H 18FN 2O 2 +計算為：265.1，測得為：265.1。 N-((9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)乙醯胺( 4-35)：
向 N-(8-胺基-6-氟-2,5-二甲基-1-側氧基-1,2,3,4-四氫萘-2-基)乙醯胺(500 mg, 1.89 mmol) ( 4-34)及( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (547 mg, 2.08 mmol)於甲苯(25 mL)中之攪拌混合物中在120℃下在氬下添加4-甲基苯磺酸吡啶(71.3 mg, 0.283 mmol)及鄰甲酚(1.44 mL, 13.8 mmol)。在130℃下用迪安-斯塔克(Dean-Stark)阱攪拌13 h以移除所形成之水，將其濃縮，並將殘餘物藉由矽膠管柱層析法純化且用二氯甲烷中之7%甲醇洗提而供給 N-((9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)乙醯胺( 4-35)（362 mg，39%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.78 (d, J= 11.2 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.53 (d, J= 10.0 Hz, 1 H), 5.25 - 5.54 (m, 4 H), 4.81 - 4.90 (m, 1 H), 3.24 - 3.29 (m, 1 H), 2.86 - 3.11 (m, 3 H), 2.39 (s, 3 H), 1.95 (d, J= 3.6 Hz, 3 H), 1.84 - 1.89 (m, 2 H), 1.50 (d, J= 4.8 Hz, 3 H), 0.87 (d, J= 5.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.94。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 27FN 3O 5 +計算為：492.1，測得為：492.2。 (1S,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 4-36)及(1 R,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 4-37)：
將 N-((9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10, 12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)乙醯胺( 4-35) (600 mg, 1.22 mmol)於二㗁烷(6 mL)及濃鹽酸(6 mL, 12 M)之攪拌混合物在100℃下於密封管中在氬下加熱24 h。將反應混合物濃縮並藉由prep-HPLC純化而供給(1 S,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H, 9 H)-二酮鹽酸鹽( 4-36)（61.0 mg，10%產率）（化合物 4-36可能是所描繪者之相對立體異構物）、及(1 R,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 4-37)（85.0 mg，14%產率）（化合物 4-37可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環處之立體化學係任意指派的。
4-36： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 8.97 (s, 3 H), 7.89 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 5.73 - 5.81 (m, 1 H), 5.56 - 5.65 (m, 1 H), 5.41 - 5.49 (m, 2 H), 3.22 (d, J= 4.4 Hz, 2 H), 2.34 - 2.44 (m, 5 H), 1.82 - 1.94 (m, 5 H), 0.88 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.24。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 25H 25FN 3O 4 +計算為：450.1，測得為：450.1
4-37： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 8.98 (s, 3 H), 7.89 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 5.71 - 5.79 (m, 1 H), 5.57 - 5.64 (m, 1 H), 5.46 (s, 2 H), 3.18 - 3.26 (m, 2 H), 2.36 - 2.44 (m, 5 H), 1.81 - 1.94 (m, 5 H), 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.22。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 25H 25FN 3O 4 +計算為：450.1，測得為：450.1 (1S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( R)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 4-38)及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( S)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13 (1 H,9 H)-二酮( 4-39)：
向(1 S,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 4-36) (50.0 mg, 0.102 mmol)於乙腈(10 mL)中之攪拌混合物中添加二異丙基乙胺(0.286 mL, 1.65 mmol)，在20℃下攪拌0.5 h，接著將1,4-二溴丁-2-醇(0.0954 mL, 0.823 mmol)及碘化鈉(123 mg, 0.823 mmol)加入。在125℃下在微波下攪拌24 h後，將反應混合物濃縮並將殘餘物藉由矽膠層析法純化且用乙酸乙酯中之0%至10%甲醇洗提，接著進行掌性SFC（儀器：Waters SFC 80製備型SFC；管柱：DAICEL CHIRALPAK IG (250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為IPA；梯度：B%=60%等度洗提模式；流率：80 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：攝氏40度；系統反壓：100巴）而供給(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( R)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 4-38)（1.80 mg，3.3%產率）（化合物 4-38可能是所描繪者之相對立體異構物）及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( S)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 4-39)（1.70 mg，3.1%產率）（化合物 4-39可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環及吡咯啶環處之立體化學係任意指派的。
4-38： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 5.34 - 5.50 (m, 3 H), 5.23 (d, J= 20.0 Hz, 1 H), 4.74 (d, J= 3.6 Hz, 1 H), 4.22 (br s, 1 H), 3.38 (br s, 1 H), 2.88 - 2.98 (m, 1 H), 2.66 - 2.82 (m, 3 H), 2.48 (br s, 1 H), 2.39 (s, 3 H), 2.07 - 2.17 (m, 2 H), 1.92 - 2.02 (m, 1 H), 1.78 - 1.92 (m, 2 H), 1.58 - 1.68 (m, 1 H), 1.48 (s, 3 H), 0.88 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.14。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 29H 31FN 3O 5 +計算為：520.2，測得為：520.3。
4-39： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 5.56 - 5.65 (m, 1 H), 5.34 - 5.45 (m, 3 H), 4.73 (d, J= 3.2 Hz, 1 H), 4.24 (br s, 1 H), 3.38 (br s, 1 H), 2.85 - 3.01 (m, 3 H), 2.43 - 2.49 (m, 1 H), 2.31 - 2.41 (m, 4 H), 2.07 - 2.22 (m, 2 H), 1.92 - 1.98 (m, 1 H), 1.77 - 1.92 (m, 2 H), 1.62 – 1.67 (m, 1 H), 1.49 (s, 3 H), 0.88 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.15。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 29H 31FN 3O 5 +計算為：520.2，測得為：520.2。 實例5 (1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( R)-3-羥基吡咯啶- 1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 5-40) 及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(( S)-3-羥基吡咯啶-1-基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 5-41)（ 圖 12）
5-40及 5-41之製造方式類似於 4-38及 4-39者並使用 4-37代替 4-36。化合物 5-40及 5-41可能是所描繪者之相對立體異構物。備註：F環及吡咯啶環處之立體化學係任意指派的。
5-40 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.71 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.28 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 5.54 - 5.64 (m, 1 H), 5.32 - 5.44 (m, 3 H), 4.74 (d, J= 3.2 Hz, 1 H), 4.24 (br s, 1 H), 3.37 (br s, 1 H), 2.83 - 2.99 (m, 3 H), 2.41 - 2.49 (m, 1 H), 2.31 - 2.40 (m, 4 H), 2.07 - 2.20 (m, 2 H), 1.93 - 2.03 (m, 1 H), 1.82 - 1.87 (m, 2 H), 1.61 - 1.70 (m, 1 H), 1.48 (s, 3 H), 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.15。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 29H 31FN 3O 5 +計算為：520.2，測得為：520.2。
5-41 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.71 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 5.38 - 5.47 (m, 3 H), 5.22 (d, J= 20.0 Hz, 1 H), 4.75 (d, J= 3.6 Hz, 1 H), 4.19 - 4.27 (m, 1 H), 3.37 (br s, 1 H), 2.86 - 2.98 (m, 1 H), 2.64 - 2.83 (m, 3 H), 2.50 - 2.52 (m, 1 H), 2.38 (s, 3 H), 2.05 - 2.22 (m, 2 H), 1.92 - 2.02 (m, 1 H), 1.79 - 1.92 (m, 2 H), 1.57 - 1.70 (m, 1 H), 1.47 (s, 3 H), 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.13。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 29H 31FN 3O 5 +計算為：520.2，測得為：520.2。 實例6 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙基) (甲基)胺基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 6-44)（ 圖 13） (1S,9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13 (1 H,9 H)-二酮( 6-42)：
向(1 S,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 4-36) (200 mg, 0.411 mmol)於二氯乙烷(8 mL)中之懸浮液中添加三乙胺(57.2 mL, 0.411 mmol)，在15℃下攪拌0.5 h，接著將2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙醛(156 mL, 0.823 mmol)加入。在15℃下攪拌15 h後，將三乙醯氧基硼氫化鈉(95.9 mg, 0.457 mmol)加入，並在15℃下攪拌另外3 h。然後，將反應混合物用水(20 mL)淬熄，用二氯乙烷(3 × 20 mL)萃取，將合併之有機層以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠層析法純化且用石油醚中之35%乙酸乙酯洗提而供給(1 S, 9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮 (6-42)（60.0 mg，21%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.69 (d, J= 10.5 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 5.77 (d, J= 16.3 Hz, 1 H), 5.42 - 5.66 (m, 2 H), 5.31 (d, J= 16.3 Hz, 1 H), 3.65 - 3.93 (m, 3 H), 3.26 - 3.38 (m, 1 H), 2.95 - 3.11 (m, 1 H), 2.89 (m, 1 H), 2.30 - 2.50 (m, 5 H), 2.03 - 2.14 (m, 1 H), 1.77 - 2.00 (m, 3 H), 1.49 (s, 3 H), 1.05 (t, J= 7.3 Hz, 3 H), 0.89 (s, 9 H), 0.08 (s, 3 H), 0.10 (s, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -111.20。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 33H 43FN 3O 5Si +計算為：608.3，測得為：608.2。 (1S,9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)(甲基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10, 13(1 H,9 H)-二酮( 6-43)：
向(1 S, 9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 6-42) (50.0 mg, 0.0822 mmol)於甲醇(2.0 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸(0.00941 mL, 0.164 mmol)及聚甲醛(12.3 mg, 0.409 mmol)，在25℃下攪拌1 h，接著將氰硼氫化鈉(5.16 mg, 0.0822 mmol)加入。在40℃下攪拌15 h後，將另一批聚甲醛(12.3 mg, 0.409 mmol)加入，在40℃下攪拌1 h，接著將氰硼氫化鈉(20.6 mg, 0.329 mmol)加入。在40℃下攪拌另外15 h後，將反應混合物用水(1.0 mL)淬熄，冷卻至0℃，將pH用NaHCO 3水溶液調整至8，用萃取乙酸乙酯(3 × 5 mL)，將合併之有機層用鹽水洗滌，以乾燥Na 2SO 4，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠層析法純化且用二氯甲烷之10%乙酸乙酯洗提而供給(1 S,9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)(甲基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 6-43)（19.0 mg，37%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.70 (d, J= 10.5 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 5.77 (d, J= 16.3 Hz, 1 H), 5.50 - 5.62 (m, 1 H), 5.36 - 5.47 (m, 1 H), 5.31 (d, J= 16.3 Hz, 1 H), 3.77 - 3.91 (m, 2 H), 3.70 (s, 1 H), 3.36 (br d, J= 15.9 Hz, 1 H), 2.82 - 3.07 (m, 2 H), 2.48 - 2.62 (m, 1 H), 2.39 - 2.46 (m, 3 H), 2.30 (br s, 4 H), 2.05 - 2.17 (m, 1 H), 1.79 - 2.01 (m, 2 H), 1.53 (s, 3 H), 1.06 (t, J= 7.3 Hz, 3 H), 0.87 (s, 9 H), 0.06 (s, 3H), 0.10 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -111.00。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 34H 45FN 3O 5Si +計算為：622.3，測得為：622.2。 (1S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙基)(甲基)胺基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 6-44)：
向(1 S,9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)(甲基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 6-43) (19.0 mg, 0.0305 mmol)於二㗁烷(0.45 mL)中之攪拌溶液中添加HCl/二㗁烷(0.45 mL, 4 M)。在15℃下攪拌1 h後，將反應混合物過濾，將濾餅用三級丁基甲醚(3 × 1 mL)洗滌，將所得固體溶解於水(0.5 mL)中，並凍乾而給出(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙基)(甲基)胺基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H) -二酮鹽酸鹽( 6-44)（10.2 mg，61%產率）（化合物 6-44可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環處之立體化學係任意指派的。 1H NMR (400 MHz, D 2O) δ ppm 7.03 - 7.37 (m, 2 H), 5.30 - 5.57 (m, 4 H), 3.67 - 3.94 (m, 2 H), 3.44 - 3.64 (m, 1 H), 3.12 - 3.35 (m, 3 H), 2.87 - 2.98 (m, 1 H), 2.42 - 2.79 (m, 4 H), 2.12 - 2.33 (m, 6 H), 1.89 (q, J= 7.3 Hz, 2 H), 0.88 (t, J= 7.4 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, D 2O) δ ppm -108.73。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 31FN 3O 5 +計算為：508.2，測得為：508.1。 實例7 (1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1- ((2-羥基乙基)(甲基)胺基)-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮鹽酸鹽( 7-45)（圖 14）
7-45之製造方式類似於 6-44者並使用 4-37代替 4-36。化合物 7-45可能是所描繪者之相對立體異構物。備註：F環處之立體化學係任意指派的。
7-45： 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm 7.51 - 7.93 (m, 2 H), 5.33 - 5.73 (m, 4 H), 3.79 – 3.83 (m, 2 H), 3.40 – 3.44 (m, 1 H), 3.38 - 3.50 (m, 2 H), 2.79 - 3.19 (m, 2 H), 2.28 - 2.55 (m, 6 H), 2.06 - 2.27 (m, 2 H), 1.91 - 2.03 (m, 2 H), 1.41 - 1.72 (m, 2 H), 1.01 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm -113.03。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 31FN 3O 5 +計算為：508.2，測得為：508.2。 實例8 N-((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)- N-(2-羥基乙基)乙醯胺( 8-47)（圖 15）之合成 N-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)- N-((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)乙醯胺( 8-46)：
向(1 S, 9 S)-1-((2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)胺基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 6-42) (60.0 mg, 0.0987 mmol)於吡啶(0.6 mL)中之攪拌溶液中添加乙酸酐(100 mg, 0.987 mmol)。在15℃下攪拌12 h後，將反應混合物直接藉由矽膠層析法純化且用二氯甲烷中之30%乙酸乙酯洗提而供給 N-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)- N-((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)乙醯胺( 8-46)（26.0 mg，31%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 6.98 (s, 1 H), 5.40 - 5.59 (m, 4 H), 3.70 (q, J= 5.2 Hz, 2 H), 3.29 (br s, 1 H), 2.95 - 3.09 (m, 1 H), 2.74 - 2.85 (m, 1 H), 2.38 (s, 4 H), 2.20 (s, 3 H), 2.10 - 2.17 (m, 3 H), 1.95 (br d, J= 1.6 Hz, 1 H), 1.41 (s, 3 H), 0.90 (br t, J= 7.2 Hz, 3 H), 0.81 (s, 9 H), 0.02 (s, 6 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.09。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 35H 45FN 3O 6Si +計算為：650.3，測得為：650.2。 N-((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)- N-(2-羥基乙基)乙醯胺( 8-47)：
向 N-(2-((三級丁基二甲基矽基)氧基)乙基)- N-((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)乙醯胺 (8-46) (28.0 mg, 0.0431 mmol)於二㗁烷(1.12 mL)中之攪拌溶液中添加HCl/二㗁烷(215 mL, 2 M)。在15℃下攪拌1 h後，將反應混合物濃縮並將殘餘物用三級丁基甲醚(5 mL)在20℃下研製5 min，過濾並將所得固體進一步藉由prep-TLC純化（乙酸乙酯，R f= 0.5）而供給 N-((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)- N-(2-羥基乙基)乙醯胺( 8-47)（10.0 mg，45%產率）（化合物 8-47可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環處之立體化學係任意指派的。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.70 (d, J= 10.8 Hz, 1 H), 7.08 (s, 1 H), 5.33 - 5.63 (m, 4 H), 3.52 (td, J= 5.6, 2.0 Hz, 2 H), 3.29 (br d, J= 17.2 Hz, 1 H), 2.99 (br t, J= 13.6 Hz, 1 H), 2.70 - 2.79 (m, 1 H), 2.36 (s, 3 H), 2.25 - 2.33 (m, 1 H), 2.14 - 2.18 (m, 4 H), 2.04 - 2.12 (m, 2 H), 1.92 - 2.00 (m, 1 H), 1.37 (s, 3 H), 0.89 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.54。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 29H 31FN 3O 6 +計算為：536.2，測得為：536.2。 實例9 N-((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-1,2,3,9,10,12,13,15-八氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)- N-(2-羥基乙基)乙醯胺鹽酸鹽( 9-48)（圖 16）
9-48之製造方式類似於 8-47者並使用 4-37代替 4-36。化合物 9-48可能是所描繪者之相對立體異構物。備註：F環處之立體化學係任意指派的。
9-48： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 9.50 - 9.72 (m, 1 H), 8.81 - 9.03 (m, 1 H), 7.84 - 7.91 (m, 1 H), 7.06 (s, 1 H), 5.77 - 5.88 (m, 1 H), 5.45 - 5.60 (m, 3 H), 5.13 - 5.40 (m, 1 H), 3.64 (br d, J= 4.0 Hz, 2 H), 3.20 (br d, J= 5.2 Hz, 2 H), 3.08 (br s, 2 H), 2.62 - 2.66 (m, 1 H), 2.41 (s, 3 H), 2.26 - 2.31 (m, 1 H), 2.22 (s, 3 H), 2.14 (dt, J= 10.4, 7.2 Hz, 2 H), 1.96 (br s, 3 H), 0.90 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.19。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 29H 31FN 3O 6 +計算為：536.2，測得為：536.2。 實例10 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基吖呾-1-基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮2,2,2-三氟乙酸酯( 10-49)（圖 17）
向(1 S,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮甲磺酸酯(100 mg, 0.188 mmol)及二異丙基乙胺(131 mL, 0.752 mmol)於 N, N-二甲基乙醯胺(2 mL)中之攪拌混合物中添加2-(氯甲基)氧 (29.5 mL, 0.376 mmol)在25℃下。在120℃下攪拌10 h後，將反應混合物濃縮並將殘餘物藉由矽膠層析法純化且用二氯甲烷中之10%甲醇洗提，進一步藉由pre-HPLC純化（酸性條件，在TFA緩衝劑中）而供給(1S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基吖呾-1-基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮2,2,2-三氟乙酸酯( 10-49)（9.25 mg，8.1%產率）（化合物 10-49可能是所描繪者之相對立體異構物）。備註：F環處之立體化學係任意指派的。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm 7.78 (d, J= 10.5 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 5.53 - 5.65 (m, 2 H), 5.36 - 5.49 (m, 2 H), 5.15 (br s, 1 H), 4.58 (br s, 2 H), 4.06 - 4.46 (m, 3 H), 3.36 (br s, 1 H), 2.96 - 3.09 (m, 1 H), 2.73 (br d, J= 15.6 Hz, 1 H), 2.46 (s, 3 H), 2.28 - 2.40 (m, 1 H), 1.88 - 2.03 (m, 2 H), 1.01 (t, J= 7.4 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ ppm -77.05 (3 F), -111.31(1 F)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 27FN 3O 5 +計算為：492.1，測得為：492.1。 實例11 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-(羥甲基)吖呾-1-基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮2,2,2-三氟乙酸酯( 11-52)（圖 18） 2-((苄氧基)甲基)丙-1,3-二基雙(三氟甲磺酸酯) ( 11-50)：
向2-((苄氧基)甲基)丙-1,3-二ol (200 mg, 1.02 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之攪拌混合物中在0℃下添加二異丙基乙胺(0.390 mL, 2.24 mmol)及三氟甲磺酸酐(0.369 mL, 2.24 mmol)。在15℃下攪拌20 h後，將反應混合物用水(5 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 10 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮並將殘餘物藉由矽膠層析法純化且用石油醚中之2%乙酸乙酯洗提而供給2-((苄氧基)甲基)丙-1,3-二基雙(三氟甲磺酸酯) ( 11-50)（437 mg，93%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.29 - 7.42 (m, 5 H), 4.58 - 4.70 (m, 4 H), 4.54 (s, 2 H), 3.59 (d, J= 5.50 Hz, 2 H), 2.64 (m, 1 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -74.30。 (1S,9 S)-1-(3-((苄氧基)甲基)吖呾-1-基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 11-51)：
向(1 S,9 S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮甲磺酸酯 （依喜替康）(50.0 mg, 0.094 mmol)於乙腈(10 mL)中之攪拌混合物中在15℃下添加二異丙基乙胺(81.9 mL, 0.470 mmol)，在15℃下攪拌0.5 h，接著將2-((苄氧基)甲基)丙-1,3-二基雙(三氟甲磺酸酯) ( 11-50) (86.6 mg, 0.188 mmol)於乙腈(2.5 mL)中之溶液加入。在60℃下攪拌15 h後，將反應混合物冷卻至15℃，濃縮，並將殘餘物藉由矽膠層析法純化且用二氯甲烷中之7%甲醇洗提而供給(1 S,9 S)-1-(3-((苄氧基)甲基)吖呾-1-基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 11-51)（32.0 mg，57%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.55 - 7.70 (m, 2 H), 7.29 - 7.39 (m, 5 H), 5.76 (d, J= 16.4 Hz, 1 H), 5.60 (dd, J= 6.0, 1.6 Hz, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 5.28 - 5.34 (m, 1 H), 4.51 (s, 2 H), 3.91 - 4.01 (m, 2 H), 3.78 (br s, 1 H), 3.55 (br d, J= 6.4 Hz, 2 H), 3.03 - 3.31 (m, 4 H), 2.75 (m, 1 H), 2.40 (s, 3 H), 1.87 - 1.98 (m, 4 H), 1.05 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -110.71。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 35H 35FN 3O 5 +計算為：596.2，測得為：596.3。 (1S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-(羥甲基)吖呾-1-基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮2,2,2-三氟乙酸酯( 11-52)：
向(1 S,9 S)-1-(3-((苄氧基)甲基)吖呾-1-基)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮( 11-51) (32.0 mg, 0.0537 mmol)於二氯甲烷(4 mL)中之攪拌混合物中在0℃下添加甲磺酸(0.8 mL)。在15℃下攪拌1 h後，將反應混合物濃縮，將殘餘物溶解於二甲基亞碸(3 mL)中，並藉由prep-HPLC純化（酸性條件，在TFA緩衝劑中）而供給(1 S, 9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-(羥甲基)吖呾-1-基)-4-甲基-2,3,12,15-四氫苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13(1 H,9 H)-二酮甲磺酸酯2,2,2-三氟乙酸酯( 11-52)（12.5 mg，37%產率）。 1H NMR (400 MHz, D 2O) δ ppm 7.26 - 7.36 (m, 2 H), 5.40 - 5.52 (m, 2 H), 5.27 - 5.38 (m, 2 H), 5.20 (br s, 1 H), 4.69 - 4.72 (m, 2 H), 4.33 - 4.41 (m, 1 H), 4.15 (br t, J= 8.8 Hz, 1 H), 3.61 - 3.72 (m, 2 H), 3.31 (br dd, J= 18.4, 6.0 Hz, 1 H), 3.02 (m, 1 H), 2.75 - 2.97 (m, 2 H), 2.40 - 2.54 (m, 1 H), 2.28 (s, 3 H), 1.90 (q, J= 7.2 Hz, 2 H), 0.88 (t, J= 7.2 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, D 2O) δ ppm -75.60, -108.10。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 29FN 3O 5 +計算為：506.2，測得為：506.1。 實例12 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 12-58) 及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 12-59)（圖 19）
N-(7-烯丙基-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-53)：向 N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 1-7) (7.50 g, 31.9 mmol, 1.0 eq.)於PhMe (150 mL)中之溶液中在-70℃下添加雙(三甲基矽基)醯胺)鉀(1.0 M, 63.8 mL, 2.0 eq.)，在-70℃下攪拌1 h，接著將3-碘丙-1-烯(5.36 g, 31.9 mmol, 2.91 mL, 1.0 eq.)於PhMe (75 mL)中之溶液中加入。在-70℃下攪拌1 h後，將其用H 2O (100 mL)在-70℃下淬熄並緩慢溫熱至25℃。以相同規模設置另一個反應並以與上述者相同之方式進行後處理。將合併之混合物用乙酸乙酯(3 × 200 mL)萃取，用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至94/6）而供給 N-(7-烯丙基-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-53)（9.7 g，55%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 12.09 (br s, 1 H) 8.29 (d, J= 13.13 Hz, 1 H) 5.69 - 5.97 (m, 1 H) 4.98 - 5.21 (m, 2 H) 2.93 - 3.07 (m, 1 H) 2.77 - 2.90 (m, 1 H) 2.64 - 2.74 (m, 1 H) 2.54 - 2.63 (m, 1 H) 2.05 - 2.26 (m, 8 H) 1.65 - 1.78 (m, 1 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.42。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 16H 19FNO 2 +計算為：276.1，測得為：276.1。
N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-7-(2-側氧基乙基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-54)：在將 N-(7-烯丙基-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-53) (1.50 g, 5.45 mmol, 1.0 eq.)於二氯甲烷(30 mL)及甲醇(15 mL)中之溶液冷卻至-70℃，將臭氧（產生速率：30 g/h）在-70℃下鼓泡至混合物中持續10 min而產生淡藍色溶液。然後，將O 2在-70℃下鼓泡至反應混合物中持續15 min以移除多餘臭氧，將Me 2S (846 mg, 13.6 mmol, 1.00 mL, 2.5 eq.)加入並將混合物溫熱至0℃並在0℃下攪拌1 h。將其用H 2O (50 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 50.0 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮而給出 N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-7-(2-側氧基乙基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-54)呈粗產物(1.60 g)，並將其直接使用而未經進一步純化。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 15H 16FNO 3 +計算為：278.1，測得為：278.1。
N-(3-氟-7-(2-羥基乙基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-55)：向粗製 N-(3-氟-4-甲基-8-側氧基-7-(2-側氧基乙基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-54)（1.60 g，粗製）於THF (36 mL)及H 2O (18 mL)中之溶液中在25℃下添加NaBH 4(65.5 mg, 1.73 mmol)。在0℃下攪拌0.5 h後，將其用H 2O (50 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至7/3）而給出 N-(3-氟-7-(2-羥基乙基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-55)（600 mg，39%產率，經過2個步驟）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.09 (s, 1 H) 8.29 (d, J= 13.26 Hz, 1 H) 4.50 (t, J= 5.19 Hz, 1 H) 3.47 - 3.58 (m, 2 H) 2.93 - 3.04 (m, 1 H) 2.78 - 2.90 (m, 1 H) 2.62 - 2.75 (m, 1 H) 2.10 - 2.22 (m, 7 H) 1.98 - 2.06 (m, 1 H) 1.68 - 1.83 (m, 1 H) 1.42 - 1.59 (m, 1 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.70。LCMS (ESI+) m/z：[MH-H 2O] +針對C 15H 16FNO +計算為：262.1，測得為：262.1。
8-胺基-6-氟-2-(2-羥基乙基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 12-56)：向N-(3-氟-7-(2-羥基乙基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-55) (600 mg, 2.15 mmol, 1.0 eq.)於甲醇(24.0 mL)中之溶液中添加HCl (2 M, 24.0 mL, 22 eq.)。在60℃下攪拌3 h後，將反應混合物藉由NaHCO 3飽和水溶液在0℃下調整至pH 7，用乙酸乙酯(3 × 30.0 mL)萃取，將合併之有機層以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至4/1）而給出8-胺基-6-氟-2-(2-羥基乙基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 12-56)（360 mg，70%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.40 (br s, 2 H) 6.35 (d, J= 12.63 Hz, 1 H) 4.46 (t, J= 5.25 Hz, 1 H) 3.44 - 3.56 (m, 2 H) 2.85 (dt, J= 17.32, 4.85 Hz, 1 H) 2.60 - 2.74 (m, 1 H) 2.44 - 2.50 (m, 1 H) 1.89 - 2.15 (m, 5 H) 1.59 - 1.74 (m, 1 H) 1.36 - 1.51 (m, 1 H) 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -108.49。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 13H 17FNO 2 +計算為：238.1，測得為：238.1。
(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 12-57)：將8-胺基-6-氟-2-(2-羥基乙基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 12-56) (180 mg, 0.759 mmol, 1.0 eq.), ( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (220 mg, 0.834 mmol, 1.1 eq.)及4-甲基苯磺酸(52.3 mg, 0.303 mmol, 0.4 eq.)於PhMe (10 mL)中之混合物除氣並用氬吹掃3次，並在120℃下在氬氣氛下攪拌16 h。以相同規模設置另一個反應。將兩個合併之反應混合物用H 2O (10 mL)在25℃下淬熄，用乙酸乙酯(3 × 10.0 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至0/1）而給出(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10H,13H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2 -b]喹啉-10,13-二酮( 12-57)（200 mg，28%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.71 (br d, J= 10.79 Hz, 1 H) 7.29 (d, J= 1.13 Hz, 1 H) 6.50 (d, J= 1.63 Hz, 1 H) 5.43 (s, 2 H) 5.27 (s, 2 H) 4.73 (t, J= 4.89 Hz, 1 H) 3.58 - 3.67 (m, 1 H) 3.53 (br d, J= 3.64 Hz, 2 H) 2.95 - 3.15 (m, 2 H) 2.35 (s, 3 H) 2.28 (br d, J= 13.18 Hz, 1 H) 1.81 - 1.98 (m, 3 H) 1.71 (br d, J= 4.52 Hz, 2 H) 0.88 (br t, J= 7.28 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.93。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 26H 26FN 2O 5 +計算為：465.1，測得為：465.3。SFC（滯留時間= 1.656 min，1.970 min）。
(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 12-58)及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 12-59)：將(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 12-57) (200 mg, 0.430 mmol, 1.0 eq.)藉由SFC分離（儀器：Waters SFC150AP製備型SFC；管柱：DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為乙醇；梯度：B%=50%等度洗提模式；流率：70 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：攝氏35度；系統反壓：120巴）而供給(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 12-58)（化合物 12-58可能是所示者之相對鏡像異構物）（60 mg，30%產率）及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 12-59)（化合物 12-59可能是所示者之相對鏡像異構物）（55 mg，28%產率）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。
12-58： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.73 (d, J= 11.13 Hz, 1 H) 7.30 (s, 1 H) 6.51 (s, 1 H) 5.43 (s, 2 H) 5.29 (s, 2 H) 4.74 (t, J= 5.07 Hz, 1 H) 3.58 - 3.67 (m, 1 H) 3.49 - 3.57 (m, 2 H) 2.98 - 3.17 (m, 2 H) 2.37 (s, 3 H) 2.29 (br d, J= 13.38 Hz, 1 H) 1.80 - 1.99 (m, 3 H) 1.66 - 1.79 (m, 2 H) 0.87 (t, J= 7.32 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.91。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 26H 26FN 2O 5 +計算為：465.1，測得為：465.3。SFC（滯留時間= 1.659 min）
12-59： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.73 (d, J= 11.01 Hz, 1 H) 7.30 (s, 1 H) 6.50 (s, 1 H) 5.43 (s, 2 H) 5.29 (s, 2 H) 4.74 (t, J= 5.13 Hz, 1 H) 3.58 - 3.66 (m, 1 H) 3.53 (dt, J= 10.60, 5.27 Hz, 2 H) 2.98 - 3.17 (m, 2 H) 2.37 (s, 3 H) 2.25 - 2.33 (m, 1 H) 1.80 - 2.00 (m, 3 H) 1.66 - 1.78 (m, 2 H) 0.88 (t, J= 7.32 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.91。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 26H 26FN 2O 5 +計算為：465.1，測得為：465.3。SFC（滯留時間= 1.976 min）。 實例13 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 13-63) 及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-64)（圖 20）
N-(3-氟-7-(3-羥基丙基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 13-60)：向N-(7-烯丙基-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-53) (700 mg, 2.54 mmol, 1.0 eq.)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中在室溫下添加氯銥(1Z,5Z)-環辛-1,5-二烯(85.3 mg, 0.127 mmol, 0.05 eq.)、1,2-雙-(二苯基膦基)乙烷(101 mg, 0.254 mmol, 0.1 eq.)，攪拌10 min，接著將4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二㗁硼 (389 mg, 3.05 mmol, 0.442 mL, 1.2 eq.)加入。在攪拌25 min後，將其冷卻至0℃，隨後將2 M NaOH (12 mL)及30%H 2O 2水溶液(27.5 g, 242 mmol, 23 mL, 30%, 95 eq.)在劇烈攪拌下加入。然後，將其在0℃下攪拌1.5 h，用飽和Na 2S 2O 3水溶液(50 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至7/3）而供給N-(3-氟-7-(3-羥基丙基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 13-60)（340 mg，45%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.12 (s, 1 H) 8.29 (d, J= 13.13 Hz, 1 H) 4.41 (t, J= 5.19 Hz, 1 H) 3.42 (q, J= 6.09 Hz, 2 H) 2.94 - 3.04 (m, 1 H) 2.79 - 2.91 (m, 1 H) 2.53 - 2.64 (m, 1 H) 2.06 - 2.22 (m, 7 H) 1.69 - 1.91 (m, 2 H) 1.36 - 1.60 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.66。LCMS (ESI+) m/z：[MH-H 2O] +針對C 16H 19FNO +計算為：276.1，測得為：276.1。
8-胺基-6-氟-2-(3-羥基丙基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 13-61)：向N-(3-氟-7-(3-羥基丙基)-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 13-60) (340 mg, 1.16 mmol, 1.0 eq.)於甲醇(15 mL)中之溶液中添加HCl (2 M, 13 mL, 23 eq.)。在60℃下攪拌3 h後，將反應混合物藉由NaHCO 3飽和水溶液在0℃下調整至pH =7，用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至7/3）而給出8-胺基-6-氟-2-(3-羥基丙基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 13-61)（200 mg，68%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.42 (brs, 2 H) 6.35 (d, J= 12.64 Hz, 1 H) 4.39 (t, J= 5.19 Hz, 1 H) 3.37 - 3.43 (m, 2 H) 2.85 (dt, J= 17.52, 5.13 Hz, 1 H) 2.62 - 2.76 (m, 1 H) 2.31 - 2.44 (m, 1 H) 2.01 - 2.14 (m, 1 H) 1.97 (d, J= 1.19 Hz, 3 H) 1.62 - 1.85 (m, 2 H) 1.30 - 1.58 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -108.52。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 14H 19FNO 2 +計算為：252.1，測得為：252.1。
(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 13-62)：將8-胺基-6-氟-2-(3-羥基丙基)-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 13-61) (200 mg, 0.795 mmol, 1.0 eq.)、( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (230 mg, 0.872 mmol, 1.1 eq.)、及甲苯-4-磺酸(54.7 mg, 0.316 mmol, 0.4 eq.)於PhMe (3.5 mL)中之混合物除氣並用氬吹掃3次，並在120℃下在氬氣氛下攪拌16 h。將其冷卻至25℃，用H 2O (10 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至0/1）而給出(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-62)（200 mg，52%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (d, J= 11.13 Hz, 1 H) 7.30 (d, J= 1.22 Hz, 1 H) 6.52 (d, J= 2.08 Hz, 1 H) 5.44 (s, 2 H) 5.31 - 5.40 (m, 1 H) 5.25 (br d, J= 3.42 Hz, 1 H) 4.39 - 4.47 (m, 1 H) 3.40-3.51 (m, 2 H) 3.35 - 3.39 (m, 1 H) 3.10 (br d, J= 3.30 Hz, 2 H) 2.38 (s, 3 H) 2.30 (br d, J= 13.20 Hz, 1 H) 1.81 - 1.99 (m, 3 H) 1.51 - 1.73 (m, 4 H) 0.88 (t, J= 7.34 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.87。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 28FN 2O 5 +計算為：479.2，測得為：479.4。SFC（滯留時間= 0.842 min，1.830 min）。
(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12-15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-63)及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-64)：將(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-62) (200 mg, 0.42 mmol)藉由掌性SFC分離（儀器：Waters SFC150AP製備型SFC；管柱：DAICEL CHIRALPAK IG(250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為乙醇(0.1%NH 3H 2O)；梯度：B%=37%等度洗提模式；流率：70 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：攝氏35度；系統反壓：120巴）而供給(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-63)（化合物 13-63可能是所示者之相對鏡像異構物）（36.8 mg，18%產率）及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 13-64)（化合物 13-64可能是所示者之相對鏡像異構物）（76.2 mg，38%產率）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。
13-63： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 7.74 (d, J= 11.13 Hz, 1 H) 7.30 (s, 1 H) 6.51 (s, 1 H) 5.43 (s, 2 H) 5.32 - 5.39 (m, 1 H) 5.18 - 5.26 (m, 1 H) 4.42 (t, J= 5.13 Hz, 1 H) 3.43 - 3.49 (m, 2 H) 3.35 (br s, 1 H) 2.97 - 3.17 (m, 2 H) 2.37 (s, 3 H) 2.29 (br d, J= 12.63 Hz, 1 H) 1.79 - 2.00 (m, 3 H) 1.51 - 1.77 (m, 4 H) 0.87 (t, J= 7.25 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.87。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 28FN 2O 5 +計算為：479.2，測得為：479.5。掌性SFC (RT = 0.837 min)
13-64： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.73 (d, J= 11.04 Hz, 1 H) 7.30 (s, 1 H) 6.52 (s, 1 H) 5.43 (s, 2 H) 5.31 - 5.40 (m, 1 H) 5.18 - 5.28 (m, 1 H) 4.43 (t, J= 5.14 Hz, 1 H) 3.42 - 3.51 (m, 2 H) 3.33 - 3.39 (m, 1 H) 2.98 - 3.16 (m, 2 H) 2.37 (s, 3 H) 2.24 - 2.34 (m, 1 H) 1.80 - 1.99 (m, 3 H) 1.51 - 1.77 (m, 4 H) 0.87 (t, J= 7.34 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.87。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 28FN 2O 5 +計算為：479.2，測得為：479.5。掌性SFC (RT = 1.803 min）。 實例14 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 14-70)及 (1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 14-71)（圖 21）
N-(7-烯丙基-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺(14-65)：向 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺 (3-23) (12.0 g, 48.1 mmol, 1.0 eq.)於PhMe (240 mL)中之溶液中在-70℃下逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鉀(1.0 M, 96.2 mL, 96.2 mmol, 2.0 eq.)，在-70℃攪拌下1 h，接著將3-碘丙-1-烯(8.09 g, 48.1 mmol, 4.39 mL, 1.0 eq.)加入。在-70℃下攪拌1 h後，將其用H 2O (200 mL)在25℃下淬熄，用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至96/4）而給出 N-(7-烯丙基-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-65)（10.3 g，74%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.12 (s, 1 H), 8.31 (d, J= 13.26 Hz, 1 H), 5.69 - 5.85 (m, 1 H), 5.04 - 5.15 (m, 2 H), 2.80 - 3.00 (m, 2 H), 2.30 - 2.40 (m, 1 H), 2.10 - 2.25 (m, 7 H), 1.92 - 2.02 (m, 1 H), 1.77 - 1.91 (m, 1 H), 1.11 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.43。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 17H 21FNO 2 +計算為：290.1，測得為：290.1。
N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-(2-側氧基乙基)-5,6,7,8-四氫萘-1yl)乙醯胺( 14-66)：在將 N-(7-烯丙基-3-氟-4.7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-65) (1.50 g, 5.18 mmol, 1.0 eq.)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液冷卻至-70℃，將臭氧（產生速率：30 g/h）鼓泡至混合物中持續10 min而產生淡藍色溶液。然後，將O 2在-70℃下鼓泡至反應混合物中持續15 min以移除多餘臭氧，接著將Me 2S (805 mg, 12.9 mmol, 0.951 mL, 2.5 eq.)加入。在將其溫熱至25℃並在25℃下攪拌0.5 h後，將其用H 2O (15 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 40 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮而給出 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-(2-側氧基乙基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-66)（1.40 g，粗製）。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 16H 19FNO 3 +計算為：292.1，測得為：292.1。
N-(3-氟-7-(2-羥基乙基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-67)：向 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-(2-側氧基乙基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-66)（1.40 g，粗製）於THF (28 mL)及水(14 mL)中之溶液中添加NaBH 4(36.3 mg, 0.961 mmol, 0.5 eq.)。在0℃下攪拌0.5 h後，將其用H 2O (7 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至7/3）而給出 N-(3-氟-7-(2-羥基乙基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-67)（330 mg，21%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 11.99 (s, 1 H), 8.30 (d, J= 13.13 Hz, 1 H), 4.39 (t, J= 5.07 Hz, 1 H), 3.35 - 3.53 (m, 2 H), 2.80 - 3.00 (m, 2 H), 2.10 - 2.17 (m, 6 H), 1.97 - 2.08 (m, 1 H), 1.81 - 1.91 (m, 1 H), 1.70 - 1.80 (m, 1 H), 1.60 - 1.69 (m, 1 H), 1.13 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -105.12。LCMS (ESI+) m/z：[MH-H 2O] +針對C 16H 19FNO +計算為：276.1，測得為：276.1。
8-胺基-6-氟-2-(2-羥基乙基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 14-68)：向 N-(3-氟-7-(2-羥基乙基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-67) (330 mg, 1.13 mmol, 1.0 eq.)於MeOH (13.2 mL)中之溶液中添加HCl (2 M, 13.2 mL, 23.4 eq.)。在60℃下攪拌3 h後，將其冷卻至25℃，用飽和NaHCO 3淬熄以將pH調整至7，用乙酸乙酯(3 × 30.0 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至7/3）而給出8-胺基-6-氟-2-(2-羥基乙基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 14-68)（270 mg，95%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.40 (br s, 2 H), 6.36 (d, J= 12.63 Hz, 1 H), 4.34 (t, J= 5.19 Hz, 1 H), 3.37 - 3.51 (m, 2 H), 2.64 - 2.89 (m, 2 H), 1.89 - 2.02 (m, 4 H), 1.66 - 1.84 (m, 2 H), 1.52 - 1.65 (m, 1 H), 1.08 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -108.69。LCMS (ESI+) m/z：[MH-H 2O] +針對C 14H 17FNO +計算為：234.1，測得為：234.1。
(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 14-69)：將8-胺基-6-氟-2-(2-羥基乙基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 14-68) (270 mg, 1.07 mmol, 1.0 eq.), ( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1H-哌喃并[3,4-f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (311 mg, 1.18 mmol, 1.1 eq.)及4-甲基苯磺酸(74.0 mg, 0.429 mmol, 0.4 eq.),於PhMe (13.5 mL)中之混合物除氣並用氬吹掃3次，並在120℃下在氬氣氛下攪拌16 h。然後，將反應混合物用H 2O (10 mL)稀釋，用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（乙酸乙酯/甲醇= 100/1至98/2）而給出呈淡紅色固體之(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10H,13H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉酮-10,13-二酮(KP-6363-5)（180 mg，35%產率）。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 7.74 (d, J= 10.67 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 6.51 (d, J= 2.01 Hz, 1 H), 5.32 - 5.54 (m, 4 H), 4.45 - 4.51 (m, 1 H), 3.39 - 3.62 (m, 2 H), 2.98 - 3.23 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.08 - 2.24 (m, 1 H), 1.80 - 1.98 (m, 5 H), 1.53 (d, J= 4.14 Hz, 3 H), 0.83 - 0.92 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ ppm -112.52。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 28FN 2O 5 +計算為：479.2，測得為：479.3。
(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 14-70)及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 14-71)：將(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 14-69) (180 mg, 0.37 mmol)藉由SFC分離（儀器：Waters SFC150AP製備型SFC；管柱：REGIS(s,s) WHELK-O1 (250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為乙醇；梯度：B%=50%等度洗提模式；流率：70 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：攝氏35度；系統反壓：120巴）而給出(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 14-70)（化合物 14-70可能是所示者之相對鏡像異構物）（40.3 mg，22.4%產率）及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(2-羥基乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 14-71)（化合物 14-71可能是所示者之相對鏡像異構物）（60.5 mg，33.6%產率）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。
14-70： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (d, J= 10.76 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 5.31 - 5.54 (m, 4 H), 4.48 (t, J= 5.07 Hz, 1 H), 3.40 - 3.59 (m, 2 H), 3.00 - 3.21 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.08 - 2.22 (m, 1 H), 1.77 - 2.02 (m, 5 H), 1.54 (s, 3 H), 0.88 (t, J= 7.32 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.53。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 28FN 2O 5 +計算為：479.2，測得為：479.4。SFC（滯留時間= 0.801 min）。
14-71： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (d, J= 10.76 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 6.53 (s, 1 H), 5.32 - 5.54 (m, 4 H), 4.49 (t, J= 5.00 Hz, 1 H), 3.39 - 3.62 (m, 2 H), 2.97 - 3.21 (m, 2 H), 2.38 (s, 3 H), 2.15 (dt, J= 12.73, 6.21 Hz, 1 H), 1.79 - 2.01 (m, 5 H), 1.53 (s, 3 H), 0.87 (t, J= 7.32 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.51。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 28FN 2O 5 +計算為：479.2，測得為：479.3。SFC（滯留時間= 1.223 min）。 實例15 (1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-75) 及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 15-76)（圖 22）
N-(3-氟-7-(3-羥基丙基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 15-72)：向 N-(7-烯丙基-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 14-65) (800 mg, 2.76 mmol, 1.0 eq.)於二氯甲烷(40 mL)中之溶液中在室溫下添加氯(1,5-環辛二烯)銥(I)二聚物(92.9 mg, 0.138 mmol, 0.05 eq.)、1,2-雙(二苯基膦基)乙烷(110 mg, 0.276 mmol, 0.1 eq.)，攪拌10 min，接著將4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二㗁硼 (424 mg, 3.32 mmol, 0.481 mL, 1.2 eq.)加入。在室溫下攪拌25 min後，將其冷卻至0℃，並將NaOH (2M, 8 mL)及H 2O 2(8 mL, 30wt%)依序加入並攪拌1.5 h。將反應混合物用飽和Na 2S 2O 3(16 mL)在0℃下淬熄，用乙酸乙酯(3 × 20 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以乾燥無水Na 2SO 4，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至65/35）而給出 N-(3-氟-7-(3-羥基丙基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 15-72)（520 mg，61%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.16 (s, 1 H), 8.32 (d, J= 13.20 Hz, 1 H), 4.38 (t, J= 5.26 Hz, 1 H), 3.33 - 3.38 (m, 2 H), 2.81 - 2.97 (m, 2 H), 2.16 (s, 3 H), 2.12 (d, J= 1.59 Hz, 3 H), 1.94 - 2.03 (m, 1 H), 1.83 - 1.92 (m, 1 H), 1.32 - 1.62 (m, 4 H), 1.11 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -104.67。LCMS (ESI+) m/z：[MH-H 2O] +針對C 17H 21FNO +計算為：290.1，測得為：290.1。
8-胺基-6-氟-2-(3-羥基丙基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 15-73)：向 N-(3-氟-7-(3-羥基丙基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)乙醯胺( 15-72) (520 mg, 1.69 mmol, 1.0 eq.)於MeOH (26 mL)中之溶液中添加HCl (2 M, 26 mL, 24 eq.)。在60℃下攪拌3 h後，將其冷卻至25℃，用飽和NaHCO 3淬熄以將pH調整至7，用乙酸乙酯(3 × 30 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/1至65/35）而給出8-胺基-6-氟-2-(3-羥基丙基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 15-73)（310 mg，69%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ ppm 7.41 (br d, J= 1.75 Hz, 2 H), 6.35 (d, J= 12.63 Hz, 1 H), 4.36 (t, J= 5.19 Hz, 1 H), 3.35 (br s, 1 H), 3.31 (br s, 1 H), 2.64 - 2.84 (m, 2 H), 1.95 - 2.05 (m, 3 H), 1.86 - 1.94 (m, 1 H), 1.72 - 1.82 (m, 1 H), 1.28 - 1.55 (m, 4 H), 1.07 (s, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ ppm -108.72。LCMS (ESI+) m/z：[MH-H 2O] +針對C 15H 19NFO +計算為：248.1，測得為：248.1。
(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-74)：將8-胺基-6-氟-2-(3-羥基丙基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 15-73) (310 mg, 1.17 mmol, 1.0 eq.), ( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (338 mg, 1.28 mmol, 1.1 eq.)及對甲苯磺酸(80.6 mg, 0.468 mmol, 0.4 eq.)於PhMe (15 mL)中之混合物除氣並用氬吹掃3次，並在120℃下在氬氣氛下攪拌16 h。將其冷卻至25℃，用水(8 mL)稀釋，用乙酸乙酯(3 × 10 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 100/0至15/85）而給出(9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-74)（220 mg，38%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (br d, J= 10.63 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.51 (d, J= 2.13 Hz, 1 H), 5.32 - 5.57 (m, 4 H), 4.40 (q, J= 4.79 Hz, 1 H), 3.34 - 3.45 (m, 2 H), 3.08 (br s, 2 H), 2.38 (s, 3 H), 2.06 - 2.20 (m, 1 H), 1.75 - 2.02 (m, 4 H), 1.27 - 1.73 (m, 6 H), 0.87 (t, J= 7.21 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.45。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 30N 2O 5F +計算為：493.2，測得為：493.4。
(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-75)及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-76)：將(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-74) (220 mg, 0.447 mmol)藉由SFC分離（儀器：Waters SFC80Q製備型SFC；管柱：REGIS(s,s) WHELK-O1 (250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為乙醇；梯度：B% = 54%等度洗提模式；流率：75 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：40℃；系統反壓：100巴）而給出(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-75)（化合物 15-75可能是所示者之相對鏡像異構物）（65.2 mg，30%產率）及(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-(3-羥基丙基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃
并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 15-76)（化合物 15-76可能是所示者之相對鏡像異構物）（90.5 mg，41%產率）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。
15-75： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (br d, J= 10.76 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 5.29 - 5.59 (m, 4 H), 4.40 (t, J= 5.14 Hz, 1 H), 3.32 -3.40 (m, 2 H), 3.08 (br s, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.06 - 2.19 (m, 1 H), 1.72 - 1.95 (m, 4 H), 1.58 - 1.69 (m, 1 H), 1.50 (s, 3 H), 1.34 - 1.48 (m, 2 H), 0.87 (br t, J= 7.21 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.45。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 30FN 2O 5 +計算為：493.2，測得為：493.5。SFC（滯留時間= 0.761 min）。
15-76： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.75 (d, J= 10.76 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 5.34 - 5.52 (m, 4 H), 4.42 (t, J= 5.14 Hz, 1 H), 3.32 -3.40 (m, 2 H), 3.08 (br s, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.07 - 2.21 (m, 1 H), 1.76 - 1.96 (m, 4 H), 1.57 - 1.70 (m, 1 H), 1.49 (s, 3 H), 1.32 - 1.45 (m, 2 H), 0.87 (br t, J= 7.21 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -112.44。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 30FN 2O 5 +計算為：493.2，測得為：493.4。SFC（滯留時間= 1.165 min）。 實例16 (1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-82)及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-83)（圖 23）
N-(7-((烯丙氧基)甲基)-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-77)：向 N-(3-氟-7-(羥甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 3-24) (5.00 g, 17.9 mmol, 1.0 eq.)於CH 2Cl 2(100 mL)中之溶液中添加Ag 2O (41.4 g, 179 mmol, 10 eq.)及3-碘丙-1-烯(60.1 g, 358 mmol, 20 eq.)。在50℃下在氬氣氛下攪拌60 h後，將其冷卻至室溫，通過矽藻土墊過濾，將濾餅用CH 2Cl 2洗滌，並將合併之濾液用鹽水洗滌，以無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法且用石油醚中之20%乙酸乙酯洗提而給出 N-(7-((烯丙氧基)甲基)-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-77)（3.5 g，61%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.09 (br d, J= 3.4 Hz, 1 H), 8.30 (d, J= 13.2 Hz, 1 H), 5.73 - 5.96 (m, 1 H), 5.02 - 5.29 (m, 2 H), 3.90 - 3.99 (m, 2 H), 3.62 - 3.82 (m, 1 H), 3.34 (s, 1 H), 2.82 - 3.03 (m, 2 H), 2.00 - 2.30 (m, 7 H), 1.81 - 1.94 (m, 1 H), 1.04 - 1.17 (m, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 18H 23FNO 3 +計算為：320.1，測得為：320.3。
N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-((2-側氧基乙氧基)甲基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-78)：將 N-(7-((烯丙氧基)甲基)-3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-77) (3.50 g, 10.9 mmol, 1.0 eq.)於CH 2Cl 2(68 mL)及MeOH (34 mL)中之溶液在-78℃下攪拌，接著將臭氧鼓泡至混合物中持續15 min而產生淡藍色混合物，並將Me 2S (1.69 g, 27.3 mmol, 1.95 mL, 2.5 eq.)在-78℃下加入。讓其溫熱至25℃，在25℃下攪拌1 h，用水(100 mL)淬熄，用二氯甲烷(3 × 200 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮而給出 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-((2-側氧基乙氧基)甲基)-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-78)（1.50 g，粗製），將其直接用於下一個步驟中而未經進一步純化。
N-(3-氟-7-((2-羥基乙氧基)甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-79)：向 N-(3-氟-4,7-二甲基-8-側氧基-7-((2-側氧基乙氧基)甲基)-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)乙醯胺( 16-78) (1.50 g, 3.73 mmol, 1.0 eq.)於THF (30 mL)及H 2O (15 mL)中之溶液中在0℃下分批添加NaBH 4(45.0 mg, 1.19 mmol, 0.32 eq.)。在0℃下攪拌30 min後，將其用H 2O (50 mL)淬熄，用乙酸乙酯(3 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法且用石油醚中之40%乙酸乙酯洗提而給出 N-(3-氟-7-((2-羥基乙氧基)甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)乙醯胺( 16-79)（800 mg，23%產率，經過兩個步驟）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 12.09 (br d, J= 8.75 Hz, 1 H), 8.30 (br d, J= 13.13 Hz, 1 H), 4.60 (br d, J= 2.38 Hz, 1 H), 3.66 - 3.80 (m, 1 H), 3.33 - 3.52 (m, 4 H), 3.14 - 3.24 (m, 1 H), 2.79 - 3.03 (m, 2 H), 2.06 - 2.25 (m, 7 H), 1.86 (dt, J= 8.04, 5.36 Hz, 1 H), 1.11 (br d, J= 9.63 Hz, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 17H 23FNO 4 +計算為：324.1，測得為：324.3。
8-胺基-6-氟-2-((2-羥基乙氧基)甲基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H) -酮( 16-80)：向 N-(3-氟-7-((2-羥基乙氧基)甲基)-4,7-二甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 16-79) (800 mg, 2.47 mmol, 1.0 eq.)於MeOH (32 mL)中之溶液中在20℃下添加2 N鹽酸溶液(32 mL)。在60℃下在氬保護下攪拌1 h後，將其冷卻至0℃，將pH用飽和水溶液NaHCO 3調整至8，用乙酸乙酯(2 × 100 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法且用石油醚中之35%乙酸乙酯洗提而給出8-胺基-6-氟-2-((2-羥基乙氧基)甲基)-2,5-二甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 16-80)（350 mg，50%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.45 (brs, 2 H), 6.35 (d, J= 12.59 Hz, 1 H), 4.50 (t, J= 5.38 Hz, 1 H), 3.70 (d, J= 9.05 Hz, 1 H), 3.36 - 3.47 (m, 4 H), 3.25 (d, J= 9.05 Hz, 1 H), 2.69 - 2.88 (m, 2 H), 2.10 - 2.16 (dt, J= 8.99, 4.55 Hz, 1 H), 1.99 (s, 3 H), 1.75 (dt, J= 13.60, 5.55 Hz, 1 H), 1.04 (s, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 15H 21FNO 3 +計算為：282.1，測得為：282.2。
(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-81)：將8-胺基-6-氟-2-((2-羥基乙氧基)甲基)-2,5-二甲基-3,4-二氫-萘-1(2 H)-酮( 16-80) (30.0 mg, 0.106 mmol, 1.0 eq.)及( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4- f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮( 1-13) (83.8 mg, 0.319 mmol, 3.0 eq.)於PhMe (1.5 mL)中之混合物在120℃下攪拌直到所有固體溶解，接著將4-甲基苯磺酸(11.0 mg, 0.064 mmol, 0.6 eq.)在120℃下在氬保護下整批加入。如上所述多設置十個反應，並在120℃下攪拌12 h後將所有十一個反應混合物合併。將合併之混合物濃縮並使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法且用乙酸乙酯洗提而給出(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]quino-line-10,13-二酮( 16-81)（85 mg，14%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.76 (d, J= 11.0 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.28 - 5.46 (m, 4 H), 3.35 - 3.44 (m, 6 H), 3.08 -3.19 (m, 1 H), 2.19-2.29 (m, 5 H), 2.18 (t, J= 6.2 Hz, 2 H), 1.22 (s, 3 H), 0.79 - 0.90 (m, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 30FN 2O 6 +計算為：509.2，測得為：509.2。
(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-82)及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-83)：將(9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-81) (60.0 mg, 0.117 mmol)溶解於MeOH中並藉由掌性SFC分離（儀器：Waters SFC80製備型SFC；管柱：DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm*30 mm,10um)；流動相：A為CO 2且B為乙醇；梯度：B%=50%等度洗提模式；流率：80 g/min；波長：220 nm；管柱溫度：40℃；系統反壓：100巴）而供給(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-82)（化合物 16-82可能是所示者之相對鏡像異構物）（5.0 mg，8.3%產率）、及(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 16-83)（化合物 16-83可能是所示者之相對鏡像異構物）（9.0 mg，15%產率）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。
16-82： 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.67 (br d, J= 10.4 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 5.75 (br d, J= 16.3 Hz, 1 H), 5.47 (br s, 2 H), 5.30 (br d, J= 15.8 Hz, 1 H), 3.50 - 4.02 (m, 7 H), 3.12 (br t, J= 6.0 Hz, 2 H), 2.41 (br s, 4 H), 1.85 - 2.08 (m, 4 H), 1.53 (s, 3 H), 1.05 (br t, J= 7.1 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -111.40。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 30FN 2O 6 +計算為：509.2，測得為：509.5。SFC (RT = 1.842 min)。
16-83： 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.67 (br d, J= 10.5 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 5.75 (br d, J= 16.4 Hz, 1 H), 5.47 (br s, 2 H), 5.32 (s, 1 H), 3.47 - 4.06 (m, 7 H), 3.12 (br t, J= 5.9 Hz, 2 H), 2.30 - 2.50 (m, 4 H), 1.82 - 2.04 (m, 4 H), 1.53 (s, 3 H), 0.98 - 1.13 (m, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ ppm -111.40。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 28H 30FN 2O 6 +計算為：509.2，測得為：509.5。SFC (RT = 2.103 min)。 實例17 (1 S,9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-86)及(1 R,9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮 ( 17-87)（圖 24）
2-烯丙基-8-胺基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 17-84)：向 N-(7-烯丙基-3-氟-4-甲基-8-側氧基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)乙醯胺( 12-53) (1.0 g, 3.63 mmol, 1.0 eq.)於MeOH (30 mL)中之溶液中添加硫酸(2.0 mL)，並在60℃下在氬氣氛下攪拌18 h。如上所述多設置五個反應並在冷卻至室溫後將所有六個反應混合物合併。將其用水(150 mL)淬熄，將pH用飽和NaHCO 3水溶液在0℃下調整至7，用EtOAc (3 × 300 mL)萃取，將合併之有機層用鹽水洗滌，以無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。使殘餘物經歷矽膠快速管柱層析法，且用石油醚中之10%乙酸乙酯洗提而給出2-烯丙基-8-胺基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 17-84)（3.2 g，63%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.42 (br s, 2 H), 6.35 (d, J= 12.7 Hz, 1 H), 5.59 - 5.99 (m, 1 H), 4.93 - 5.23 (m, 2 H), 2.87 (dt, J= 17.3, 4.5 Hz, 1 H), 2.52 - 2.74 (m, 2 H), 2.48 (br s, 1 H), 1.93 - 2.21 (m, 5 H), 1.54 - 1.70 (m, 1 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 14H 17FNO +計算為：234.1，測得為：234.4。
(9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-85)：向2-烯丙基-8-胺基-6-氟-5-甲基-3,4-二氫萘-1(2 H)-酮( 17-84) (200 mg, 0.857 mmol, 1.0 eq.)及( S)-4-乙基-4-羥基-7,8-二氫-1 H-哌喃并[3,4-f]吲 -3,6,10(4 H)-三酮 (10) (451 mg, 1.71 mmol, 2.0 eq.)於PhMe (10 mL)中之懸浮液中在140℃下添加4-甲基苯磺酸(59.1 mg, 0.342 mmol, 0.4 eq.)，並用迪安-斯塔克阱攪拌16 h以移除反應期間所形成之水。如上所述多設置兩個反應。將三個反應混合物合併，濃縮，並使殘餘物經歷矽膠快速層析法，且用石油醚中之50%乙酸乙酯洗提而供給(9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-85)（300 mg，25%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (br d, J= 10.9 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 5.88 - 6.12 (m, 1 H), 5.27 - 5.51 (m, 4 H), 5.02 - 5.25 (m, 2 H), 3.45 (br d, J= 3.3 Hz, 1 H), 3.08 (br s, 2 H), 2.34 - 2.47 (m, 4 H), 2.18 - 2.33 (m, 2 H), 1.83-1.95 (m, 3 H), 0.87 (br t, J= 7.0 Hz, 3 H)。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 26FN 2O 4 +計算為：461.1，測得為：461.4。
(1 S,9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-86)及(1 R,9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-87)：將(9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]
哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-85) (150 mg, 0.326 mmol)藉由SFC分離（儀器：Waters SFC80製備型SFC系統管柱：REGIS(S,S)WHELK-O1(250 mm*25 mm,10um)，動相：A為CO 2且B為甲醇，梯度：B%=60.00%等度洗提模式，流率：75.00 g/min，監測波長：220&254 nm，管柱溫度：40℃，系統反壓：100巴）而供給(1 S,9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-86)（化合物 17-86可能是所示者之相對鏡像異構物）（25.2 mg，17%產率）及(1 R,9 S)-1-烯丙基-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-10,13-二酮( 17-87)（化合物 17-87可能是所示者之相對鏡像異構物）（11.9 mg，8%產率）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。
17-86： 1H NMR (400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.76 (d, J= 11.1 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 5.91 - 6.05 (m, 1 H), 5.24 - 5.47 (m, 4 H), 5.09 - 5.20 (m, 2 H), 3.40 - 3.50 (m, 1 H), 3.03 - 3.15 (m, 2 H), 2.36 - 2.47 (m, 4 H), 2.21 - 2.31 (m, 2 H), 1.79 - 1.99 (m, 3 H), 0.88 (t, J= 7.3 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.77。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 26FN 2O 4 +計算為：461.1，測得為：461.3。SFC（滯留時間= 1.020 min）。
17-87： 1H NMR(400 MHz, DMSO-D 6) δ ppm 7.74 (d, J= 11.0 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 5.87 - 6.06 (m, 1 H), 5.24 - 5.51 (m, 4 H), 5.03 - 5.21 (m, 2 H), 3.40 - 3.52 (m, 1 H), 3.01 - 3.16 (m, 2 H), 2.36 - 2.48 (m, 4 H), 2.20 - 2.34 (m, 2 H), 1.79 - 2.02 (m, 3 H), 0.87 (t, J= 7.3 Hz, 3 H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO-D 6) δ ppm -111.78。LCMS (ESI+) m/z：[MH] +針對C 27H 26FN 2O 4 +計算為：461.1，測得為：461.2。SFC（滯留時間= 2.047 min）。 實例18 ( S)-2-(2-(2-(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)苯基)丙醯胺基)乙醯胺基)乙醯胺基)-N-(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)-3-苯基丙醯胺( 18-94)（圖 25） (3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)苯基)丙醯基)甘胺醯基甘胺醯基- L-苯丙胺酸( 18-90)：
將( S)-2-(2-(2-胺基乙醯胺基)乙醯胺基)-3-苯基丙酸( 18-89)及 N-乙基- N, N-二異丙胺之混合物逐滴添加至2,5-二側氧基吡咯啶-1-基3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)苯基)丙酸酯( 18-88)於乙腈中之混合物中。將反應混合物在25℃下攪拌5 h，過濾並將濾液藉由prep-HPLC純化而給出(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)苯基)丙醯基)甘胺醯基甘胺醯基- L-苯丙胺酸( 18-90)。 (9 H-茀-9-基)甲基(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸酯( 18-92)：
向(1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 16-82)及二氯甲烷之混合物中在25℃下在1.5 h期間內分成三批添加三氟甲磺酸鈧(III)、及[[2-(9 H-茀-9-基甲氧基羰基胺基)乙醯基]胺基]甲基乙酸酯( 18-91)。將反應混合物在30℃下攪拌36 h，用水淬熄並用二氯甲烷萃取。將合併之有機相用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮、並將殘餘物藉由矽膠快速管柱層析法純化且用乙酸乙酯中之10%-100%的二氯甲烷洗提而給出(9 H-茀-9-基)甲基(9 H-茀-9-基)甲基(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸酯( 18-92)。 2-胺基-N-((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)乙醯胺( 18-93)：
向(9 H-茀-9-基)甲基(9 H-茀-9-基)甲基(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸酯( 18-92)於 N, N-二甲基甲醯胺中之混合物中添加哌啶。將反應混合物在0℃下攪拌1 h，過濾並將濾液藉由prep-HPLC純化而給出2-胺基-N-((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)乙醯胺( 18-93)。 ( S)-2-(2-(2-(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)苯基)丙醯胺基)乙醯胺基)乙醯胺基)-N-(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)-3-苯基丙醯胺( 18-94)：
將(2 S)-2-[[2-[[2-[3-[4-(2,5-二側氧基吡咯-1-基)苯基]丙醯基胺基]乙醯基]胺基]乙醯基]胺基]-3-苯基-丙酸( 18-90)、2-胺基-N-((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)乙醯胺( 18-93)、4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三𠯤 -2-基)-4-甲基 啉-4-鎓四氟硼酸及4-甲基 啉於 N, N-二甲基甲醯胺中之混合物在25℃下攪拌1 h，過濾並將濾液藉由prep-HPLC純化而給出( S)-2-(2-(2-(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)苯基)丙醯胺基)乙醯胺基)乙醯胺基)-N-(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)-3-苯基丙醯胺( 18-94)（化合物 18-94可能是所描繪者之相對鏡像異構物）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。 實例19 ( S)-2-(2-(2-(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)苯基)丙醯胺基)乙醯胺基)乙醯胺基)-N-(2-(((2-(((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)-3-苯基丙醯胺( 19-97)（圖 26） (9 H-茀-9-基)甲基(2-(((2-(((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸酯( 19-95)：
向(1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1-((2-羥基乙氧基)甲基)-1,4-二甲基-1,2,3,9,12,15-六氫-10 H,13 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮( 16-83)二氯甲烷中之混合物中在25℃下分成三批在1.5 h期間內添加三氟甲磺酸鈧(III)、及[[2-(9 H-茀-9-基甲氧基羰基胺基)乙醯基]胺基]甲基乙酸酯( 18-91)。將反應混合物在30℃下攪拌36 h，用水淬熄並用二氯甲烷萃取。將合併之有機相係用鹽水洗滌，以Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮、並將殘餘物藉由矽膠快速管柱層析法純化且用乙酸乙酯中之10%-100%二氯甲烷洗提而給出(9 H-茀-9-基)甲基(9 H-茀-9-基)甲基(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸酯( 19-95)。 2-胺基-N-((2-(((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)乙醯胺( 19-96)：
向(9 H-茀-9-基)甲基(9 H-茀-9-基)甲基(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)胺甲酸酯( 19-95)於 N, N-二甲基甲醯胺中之混合物中添加哌啶。將反應混合物在0℃下攪拌1 h，過濾並將濾液藉由prep-HPLC純化而給出2-胺基-N-((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)乙醯胺( 19-96)。 ( S)-2-(2-(2-(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)苯基)丙醯胺基)乙醯胺基)乙醯胺基)-N-(2-(((2-(((1 R,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)-3-苯基丙醯胺( 19-97)：
將(2 S)-2-[[2-[[2-[3-[4-(2,5-二側氧基吡咯-1-基)苯基]丙醯基胺基]乙醯基]胺基]乙醯基]胺基]-3-苯基-丙酸( 18-90)（參見實例18）、2-胺基-N-((2-(((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2- b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)乙醯胺( 19-96)、四氟硼酸4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三𠯤 -2-基)-4-甲基 啉-4-鎓、及4-甲基 啉於 N, N-二甲基甲醯胺中之混合物在25℃下攪拌1 h，過濾並將濾液藉由prep-HPLC純化而給出( S)-2-(2-(2-(3-(4-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)苯基)丙醯胺基)乙醯胺基)乙醯胺基)-N-(2-(((2-(((1 S,9 S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-1,4-二甲基-10,13-二側氧基-2,3,9,10,13,15-六氫-1 H,12 H-苯并[ de]哌喃并[3',4':6,7]吲 并[1,2-b]喹啉-1-基)甲氧基)乙氧基)甲基)胺基)-2-側氧基乙基)-3-苯基丙醯胺( 19-97)。（化合物 19-97可能是所描繪者之相對鏡像異構物）。備註：F環碳處之立體化學係任意指派的。 實例20 酬載（Jeko-1及MDA-MB-468）之CTG檢定
CTG檢定係基於存在的ATP，代謝活性細胞指標之定量判定培養物中之活細胞數目之方法。細胞檢定需要加入單一試劑，Cell Titer Glo，其中使細胞裂解且產生發光訊號。發光訊號與存在之ATP之量成比例。ATP之量與培養物存在之細胞數目成正比。針對此檢定，確保Jeko-1或MDA-MB-468之細胞處於對數期。將細胞轉移至96孔中並用化合物以三倍連續稀釋自1 mM起始至0.0000508 mM（10點稀釋）處理72 h。細胞存活力係用CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability檢定(Promega)依照製造商之指示分析。藉由用媒劑對照的發光進行標準化來判定每種化合物濃度的活細胞百分比，並藉由在GraphPad Prism軟體中的非線性擬合繪製成存活力百分比對劑量反應曲線。化合物IC 50被計算為殺滅50%的細胞的化合物濃度。代表性檢定結果係歸納於表1及表2中。 實例21 人肝細胞清除(HHEP CL)
將人肝細胞（來自10名混合性別的人供體，最終濃度0.5 × 10 6個細胞/mL）在Williams’ E介質中的懸浮液與測試化合物（0.90%的乙腈及0.10%的DMSO，最終濃度係1 mm）及陽性對照（7-乙氧基香豆素、7-羥基香豆素、0.90%的乙腈及0.10%的DMSO，最終濃度係3 mm）一起培養90 min，在37℃下在5% CO 2及95%濕度的培養箱中以約600 rpm的速度持續搖動。培養總體積係200 µl。在T0、15、30、60及90 min時取出樣本(25 mL)，中間將其添加至冰冷的終止溶液（帶有200 ng/mL甲苯磺丁脲及拉貝洛爾(labetalol)作為內部標準品之乙腈）(125 µl)中，並以500 rpm漩渦震盪10 min，在4℃下以3220 × g離心20 min。將分析板密封並在4℃下儲存，直到進行LCMS分析。在預培養時，肝細胞的存活力被確定係84.5%。代表性檢定結果係歸納於表1及表2中。 實例22 人肝微粒體清除(HLM CL)
藉由將5 µL化合物及對照儲備溶液（10 mm於二甲基亞碸，DMSO中）添加至495 µL的乙腈(ACN)（中間溶液濃度：100 µM，99% CAN及1% DMSO）中來製備工作溶液在100 mm磷酸鉀緩衝液中製備適當濃度的微粒體工作溶液。將含有化合物及微粒體混合物的反應板在37℃預培養10 min後，加入98 mL的2 mm NADPH及2 mm MgCl 2溶液以開始反應。培養基之最終濃度如下：微粒體–0.5 mg蛋白質/mL，測試化合物/對照化合物–1 mM，NADPH–1 mM，MgCl 2–1 mM，乙腈0.99%，DMSO 0.01%。培養係在37℃下執行60 min。在T0、T5、T15、T30、T45及T60時取出樣本，中間將其添加至冰冷的終止溶液（帶有200 ng/mL的甲苯磺丁脲及拉貝洛爾作為內部標準品之乙腈）(125 µl)中，搖動10 min，在4℃下以4000 rpm離心20 min。分析板係藉由LCMS來分析。代表性檢定結果係歸納於表1及表2中。
人肝微粒體清除檢定藉由細胞色素P450系統（第I期酶）評估代謝。該等酶藉由將氧原子結合到烴中來氧化受質，從而導致羥基的引入，或受質的N-O-及S-脫烷基化，並形成更容易被清除之更具極性的產物。人肝細胞清除檢定更廣泛地測量測試化合物的整體細胞代謝（第I期及第II期酶通路）。第II期酶催化異生素代謝物及帶電物種，諸如麩胱甘肽、硫酸鹽、甘胺酸或葡萄糖醛酸的結合反應，以形成極性甚至更強的化合物以更容易清除。
由於其潛在的較低的全身血漿暴露，具有較高固有清除的酬載可以提供更好的治療指數。(Maderna, A.; Doroski, M; Subramanyam, C.; Porte, A.; Leverett, C. A.; Vetelino, B. C.; Chen, Z.; Risley, H.; Parris, K.; Pandit, J.; Varghese, A. H.; Shanker, S.; Song, C.; Sukuru, S. C. K.; Farley, K. A.; Wagenaar, M. M.; Shapiro, M. J.; Musto, S.; Lam, M-H.; Loganzo, F.; O’Donnell, C. J. “Discovery of cytotoxic dolastatin 10 analogues with N‑terminal modifications” Journal Medicinal Chemistry, 2014, 57, 10527 – 10543)。在表1中，具有較高固有清除的酬載可能具有改善的安全性概況，因為對健康細胞具有潛在毒性的酬載被迅速從血漿中去除，降低了其與健康細胞相互作用的機會。 實例23 PAMPA（平行人工膜滲透性檢定）
PAMPA係判定來自供體區室的物質經由脂質輸注之人工膜進入受體區室的滲透性的方法。參見 Ottaviani, G.; Martel, S.; Carrupt, P-A. "Parallel Artificial Membrane Permeability Assay: A New Membrane for the Fast Prediction of Passive Human Skin Permeability", Journal of Medicinal Chemistry, 2006, 49 (13), 3948–3954)。將多孔微量滴定板用於供體，並將膜/受體區室置於頂部上；整個總成通常稱為「夾心」。在測試開始時，將藥物加入供體區室，且受體區室不含藥物。在可能包括攪拌的培養期間後，將夾心分離，並測量每個區室中的藥物量。質量平衡允許計算殘留在膜中之藥物。
PAMPA係由Pion Inc在pH 5.0及pH 7.4的PRISMA緩衝液（含有0.05% DMSO）中使用GIT-0脂質及5 mM供體溶液來進行。更高的PAMPA資料與更佳的旁觀者殺滅相關。(Ogitani Y.; Hagihara K.; Oitate, M.; Naito, H.; Agatsuma T. “Bystander killing effect of DS-8201a, a novel anti-human epidermal growth factor receptor 2 antibody-drug conjugate, in tumors with human epidermal growth factor receptor 2 heterogeneity” Cancer Science, 2016, 107 (7), 1039 – 1046)。
代表性檢定結果係歸納於表1及表2中。更高的滲透性是重要的，因為其意味著更大的「旁觀者殺滅」的可能性。亦即，一旦酬載中和了腫瘤細胞，滲透性更強的酬載更有可能逃離中和的腫瘤細胞，然後嵌入鄰近的腫瘤細胞中。一旦到達彼處，其可以中和腫瘤細胞，逃逸，嵌入另一鄰近的腫瘤細胞，並重複該程序。 表1代表性PAMPA檢定、HHEP CL、HLM CL、CTG檢定與化合物1-16、1-17、2-20、3-27、3-28、5-40、5-41、6-44、及7-45之Jeko-1及MDA-MB-468細胞結果。
化合物 PAMPA Pe (10 -6cm/s) pH 5.0/7.4 HHEP Cl (T 1/2) HLM Cl (T 1/2) JeKo-1 IC 50(nM) MDA-MB-468 IC 50(nM)
Dxd 24/4.0 17.8 (217) 8.6 (＞145) 1.42 11.6
依喜替康 37.2/5.7 59.3 (65.0) 11.7 (106) 0.59 6.2
1-16 40.4/8.5 33.0 (117) 44.0 (28) 0.79 7.2
1-17 74.7/7.8 17.9 (215) 53.2 (23.5) 1.0 7.7
2-20 -/- 24.0 (161) 46.0 (27) 40.8 351
3-27 62.2/8.5 62.4 (62) 128 (9.7) 2.1 18.6
3-28 64.0/8.4 62.9 (61) 53.8 (23) 1.3 9.9
5-40 52.2/6.0 102 (38) 238 (5.2) 10.0 69.1
5-41 53.5/6.6 49.8 (77) 92.5 (13.5) 11.6 92.2
6-44 54.9/8.3 48.3 (80) 51.7 (24) 24.1 198
7-45 56.6/7.5 92.2 (42) 137 (9) 33.5 258
表2.代表性PAMPA檢定、HHEP CL、HLM CL、CTG檢定與化合物12-58、12-59、13-63、13-64、14-70、14-71、15-75、15-76、16-82、16-83、17-86、及17-87對JeKo-1之Jeko-1細胞結果。
化合物 PAMPA Pe (10 -6cm/s) pH 5.0/7.4 HHEP Cl (T 1/2) HLM Cl (T 1/2) JeKo-1 IC 50(nM)
Dxd 10.6/4.7 ＞217 52.2 0.52
12-58 2.9/3.8 68.1 20.1 0.24
12-59 46.9/33.4 64.3 20.1 0.32
13-63 34.7/32.9 141.4 27.1 0.44
13-64 14.6/10.6 79.4 22.0 0.28
14-70 44.2/28.5 53.6 18.4 0.79
14-71 25.0/17.3 47.0 10.8 0.18
15-75 16.5/11.5 76.5 22.4 0.88
15-76 45.5/33.2 40.8 5.2 0.27
16-82 54.8/25.5 45.0 5.6 0.64
16-83 47.7/25.1 113.4 25.7 1.1
17-86 NA 46 13 0.93
17-87 NA 31 5.4 0.58
Dxd：德魯替康；HHEP Cl：人類肝細胞固有清除率，mL/min/Kg；HHEP t 1/2，min. HLM：人類肝微粒體清除率，mL/min/Kg。-/-：低滲透性。NA：不可得。 實例24 抗ROR-1特異性單株抗體之開發
藉由採用使用以下三種策略的抗體開發活動，開發新穎及多樣化的抗ROR-1特異性單株抗體，以結合至ROR-1細胞外域(ECD)之多個區域：(1)使用全長ROR-1 ECD將世代1之小鼠免疫化；(2)使用ROR-1 IgG樣域將世代2及3之小鼠免疫化；且(3)使用ROR-1之人類IgG樣序列將世代4之小鼠免疫化在免疫小鼠後，使用習知方法產生單株抗體。簡言之，將來自融合瘤及噬菌體展示活動的獨特可變重鏈及輕鏈對選殖至載體中，該等載體被設計成在CMV啟動子的控制下在HEK293細胞中以IgG形式表現全長抗體。將抗體表現載體與聚乙烯亞胺複合且轉染至HEK293培養物中。在293細胞培養基中在37℃下搖動5天之後，抗體被捕捉在基於瓊脂糖的蛋白A樹脂上。數次嚴格洗滌後，將抗體在甘胺酸溶液(pH 3)中洗提，用Hepes (pH 9)中和，且將緩衝液交換成PBS。
使用該等方法開發了數種單株抗體，並且對產生的抗體進行額外的篩選以評估抗體的特異性特征。為完全評估新穎抗體之特徵，進行了若干次檢定。首先，以生物化學方式以及ROR-1陽性細胞系確認了抗體與ROR-1表位的結合。藉由篩選與人ROR-2蛋白、齧齒動物ROR-1蛋白的結合，以及在基於細胞的檢定中，以生物化學方式評估結合的特異性。進一步的篩選參數包括分析抗體內化、針對已知抗ROR-1抗體（UC961及4a5）的表位分級、與人ROR-1 Ig樣域的結合、熱移位、以及用親和力-捕捉自我交互作用奈米粒子光譜法(AC-SINS)評估自我交互作用。 實例25 評估抗ROR-1特異性單株抗體之飽和濃度及人類ROR-1結合親和力的檢定
開發一種細胞結合飽和檢定以評估實例22中所開發之抗ROR-1抗體與細胞系上內源表現之細胞外ROR-1蛋白的結合程度。更具體而言，在細胞結合檢定中分析了實例22中所開發之抗ROR-1單株抗體，例如ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890。簡言之，將兩個ROR-1陽性細胞系，JeKo-1及MDA-MB-468，在滴定系列濃度的各抗體構築體中培養。然後洗滌細胞並進行二級抗體染色及流動式細胞測量術偵測。藉由細胞儀軟體分析判定平均螢光(MFI)。將ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890之結合與單株抗ROR-1抗體UC-961之細胞結合飽和數據進行比較。（ 參見圖 27A 至圖 27B）。如 圖 27A 至圖 27B中所示，抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890之細胞結合飽和度與UC-961之細胞結合飽和度相當，然而與UC-961相比，需要更高濃度的ATX-P-875才能達到飽和。在達到結合飽和度所需的濃度方面，ATX-P-890及ATX-P-885分別與UC-961一樣好或得到改善。與UC-961相當的飽和度表明，抗ROR-1抗體ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890與臨床批准的抗體UC-961一樣，對人ROR-1標靶具有相似的親和力。 實例26 評估抗ROR-1特異性單株抗體之容量的檢定 將人類ROR-1陽性腫瘤細胞上之ROR-1內化(Internalize)
在結合檢定中判定飽和濃度(74nM)後，評估本文開發的抗ROR-1抗體（ATX-P-875、P-885、P-890）內化人ROR-1陽性細胞（JeKo-1及MDA-MB-468）上ROR-1受體的能力。簡言之，將ROR-1陽性細胞系在超飽和條件下與抗體一起培養，以便結合所有可用的ROR-1受體。洗去多餘的抗體，且將細胞在37℃下培養指定的時間，歷經四小時的製程。在每一時間點結束時，藉由將細胞等分試樣置放於冰上來停止內化。使用經標記之二級抗體及流動式細胞測量術偵測表面上剩餘之抗體。基於時間零點計算內化百分比，且時間零點假設100%的可用受體位於細胞表面上。 圖 28A 至圖 28B中之結果表明，所有抗體在4小時期間內均會將JeKo-1及MDA-MB-468細胞上之ROR-1受體內化達至少75%之還原。出乎意料的是，在MDA-MB-468中，兩種抗ROR-1抗體（ATX-P-875及ATX-P-890）的內化相對於臨床使用的UC-961抗ROR-1抗體得到改善，從而提供了ATX-P-875及ATX-P-890抗體具有改善的內化來自實性瘤表面的ROR-1受體的能力的證據。 實例27 抗ROR-1特異性單株抗體之表位結合研究
亦使用細胞分級來判定單株抗體ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890是否與習知已知的抗ROR-1結合單株抗體UC-961及4A5（對照）結合至相同的表位。在細胞分級實驗之步驟1中，將ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890單株抗體分別與不同量的ROR-1表現細胞(MDA-MB-468)一起培養。在步驟2中，將識別新穎抗體的螢光標記的二級抗體與樣本一起培養。最後在步驟3中，將用ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890包被的ROR-1表現細胞與飽和劑量的標記的UC-961 (Dy650-UC 961)或4A5抗體(PE 4A5)一起培養，并藉由流動式細胞測量術進行分析。然後將UC-961及4A5染色訊號與新穎抗體染色訊號進行比較，以判定ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890抗體是否與已知的ROR-1結合抗體UC961及4A5結合相同的表位。 圖 29A顯示了ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890抗體與UC-961及4A5抗體結合相同的表位時預期的染色概況。 圖 29B顯示了ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890抗體在ROR-1上結合不同於UC-961或4A5抗體的表位時的預期概況。簡言之，若結合相同的表位，增加的新穎抗體濃度將阻斷預先標記的競爭抗體的結合，從而降低較高濃度下競爭抗體的訊號。在抗體結合不同表位的情況下，每種抗體，新穎的及競爭的，將隨著劑量的增加而增加染色，因為無與受體結合的競爭。在MDA-MB-468細胞中獲得的細胞分級資料表明，ATX-P-885明顯與UC-961結合相同的表位，且ATX-P-875及ATX-P-890兩者明顯與4A5結合相同的表位。（參見 圖 29C 至圖 29H 及圖 30）。本文開發的抗體結合不同ROR-1表位的能力提供了以多種方式調節標靶的機會。 實例28 抗ROR-1特異性單株抗體之生化分級研究
與對照抗ROR-1抗體UC-961及4A5相比，還針對抗ROR1抗體（ATX-P-875、P-885、P-890）評估了藉由SPR進行的生化分級。在該等實驗中，將10ug/ml純化的Hu/Cy/Rh ROR1-His殖株蛋白與HC30M晶片共價耦合。將10 µg/mL的每種抗體的個別稀釋液注射至晶片上，並且藉由Carterra SPR評估結合。出乎意料的是，資料證明在ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890之間存在3個不同的結合表位，其中ATX-885係唯一給予UC-961抗體部分阻斷的抗體（參見 圖 31）。細胞分級僅評估了抗ROR1抗體（ATX-P-875、P-885、P-890）阻斷UC-961或4A5（兩種臨床使用之ROR-1抗體）的能力。生化SPR評價亦測試了抗體相互阻斷的能力，且發現ATX-P-875能夠阻斷4A5以及ATX-P-885的結合，但仍然不能阻斷UC-961。 實例29 抗體表徵
ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890之抗體表徵（相較於UC-961）係歸納於 圖 31及表3至表6中。藉由AC-SINS進行抗體可開發性之初步評定，以評估自我交互作用的可能性（ 圖 28）。對照抗體利妥昔單抗顯示了預期的低移位，而對照抗體英夫利昔單抗則顯示了預期的高移位。本文中所開發之抗ROR-1抗體，ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890與對照抗體一致，未顯示出顯著的自我交互作用，因而不太可能造成顯著的可開發性風險。此外，在額外的實驗中，將單株抗體ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890的結合特性與UC961的結合特性進行了比較。表3及表4提供了與已知ROR-1結合抗體UC-961比較的抗體表徵數據，包括與純化蛋白及藉由SPR測量之生化結合（表3至表4）、與ROR-1陽性細胞系JeKo-1及MDA-MB-468之細胞結合(EC50)（表5）、及細胞內化（%內化）（表6）之表列結果。特別值得注意的是，據信ATX-P-885 (KD: 1.09E-08)之親和力相較於UC-961及其他抗ROR-1抗體（ATX-P-875及ATX-P-890）有所降低可提供意料之外的治療效益。預期藉由不太緊密地結合至ROR-1表位，ATX-P-885抗體可以進一步刺透至腫瘤中，到達更遠處的表現ROR-1標靶的細胞。 表3.人/食蟹獼猴(Cyno)/恆河獼猴(Rhesus) ROR-1結合
Hu/Cy/Rh ROR1 - His
名稱 k a (M-1 s-1) k d (s-1) K D (M) Rmax (RU) Res SD % Rmax
ATX-P-453 (UC961) 1.26E+06 5.91E-03 4.69E-09 529.0 25.6 4.85%
ATX-P-875 4.93E+05 3.16E-03 6.45E-09 593.6 22.3 3.76%
ATX-P-885 2.70E+05 2.95E-03 1.09E-08 341.6 10.2 2.99%
ATX-P-890 3.92E+05 3.14E-03 8.40E-09 504.2 15.0 2.97%
表4.小鼠ROR-1結合
小鼠 ROR1 – His
名稱 k a (M-1 s-1) k d (s-1) K D (M) Rmax (RU) Res SD % Rmax
ATX-P-453 (UC961) N/A N/A N/A N/A N/A N/A
ATX-P-875 N/A N/A N/A N/A N/A N/A
ATX-P-885 2.92E+04 1.32E-03 4.53E-08 73.5 8.9 12.14%
ATX-P-890 N/A N/A N/A N/A N/A N/A
表5. JeKo-1及MDA-MB-468細胞結合概述
細胞結合概述
名稱 JeKo-1 （平均 EC50 ） MDA-MB-468 （平均 EC50 ）
ATX-P-453 (UC961) 0.073 0.176
ATX-P-875 0.145 0.708
ATX-P-885 1.075 2.508
ATX-P-890 0.174 1.016
表6. JeKo-1及MDA-MB-468細胞內化概述
細胞內化概述
名稱 JeKo-1 (%) MDA-MB-468(%)
ATX-P-453 (UC961) 75 80
ATX-P-875 75 89
ATX-P-885 75 89
ATX-P-890 70 80
實例30 抗體-藥物接合物之製備
免疫接合物之合成係如本實例中所述來達成。抗體係如實例24中所述製備並將其懸浮於PBS pH 7.2中，蛋白質濃度範圍在10至20 mg/ml之間。對於還原及結合計算，所有抗體的分子量皆係150000Da。
藉由將5% v/v的500 mM Tris、25 mM EDTA，pH 8.5加入，接著將TCEP（6當量，10 mM TCEP儲備溶液於水中）加入來準備各個抗體，並將混合物維持在20℃持續2h以進行還原。此還原步驟會在抗體上形成半胱胺酸殘基Cys-SH而有利於與毒素連接子（亦即，如本文中所述之式(III)之化合物）進行生物接合。
在加入DMA並與以上經還原蛋白質溶液溫和混合以在接合期間達到最終10% v/v後，將毒素連接子儲備溶液（12當量，50 mM於DMA中）加入並溫和混合。讓生物接合在20℃下繼續進行大約16至20 h過夜；其會在2 h內完成，讓其加長時間進行以將順丁烯二醯亞胺環打開。
使用重力進料NAP 25（小規模）或流式HiPrep G25（大規模）將粗製接合物進行緩衝劑交換至PBS pH 7.4，其中管柱係根據製造商(Cytivia)之指示來準備及操作。為了去除殘留的毒素，製備100 mg/ml活性碳(Sigma/C9157)於PBS pH 7.4中之漿液並加入以達到1 mg碳對1 mg起始抗體質量。將其溫和混合2h，足以將碳維持懸浮。然後，將碳藉由以4000 g離心來去除。從PBS pH7.4中之10% w/v儲備溶液中加入聚山梨醇酯20 (PS20)，以在產物中達到最終0.02% PS20 w/v。最終將抗體-藥物接合物(ADC)在A級層流下通過合適尺寸的0.2 µm PES過濾器（Chromatography Direct / FIL-S-PES-022-13-100-S）過濾。最終產物之分析如下：單體及[ADC] mg/ml係藉由SEC HPLC，平均DAR係藉由PLRP，殘餘毒素係藉由RP-HPLC，且內毒素係藉由Endosafe動力學顯色。
分析程序係在HPLC儀器Agilent 1100或1260上進行。 實例31 抗體-藥物接合物之CTG檢定
新穎ROR-1抗體藥物接合物(ADC)係藉由CTG檢定以與用於篩檢酬載之實例20及表1與表2中所述者類似的方式來評估。絕不會限制本揭露之抗體-藥物接合物之範疇且僅作為範例之用，將總共3種獨特抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890接合至式(III)之新穎連接子/酬載或化合物，包括但不限於化合物 18-94、 19-97，以及段落 [0121]至 [0123]（該等段落之各者均以「在各種實施例中，式(III)之接合物可由選自. . .之結構所代表」）中所述的任何式(III)之例示性化合物。簡言之，將ROR陽性(JeKo-1 / MDA-MB-468)或ROR陰性(Ramos)細胞轉移至96孔中並用測試ADC以三倍稀釋自1 mM起始至0.0000508 mM（10點稀釋）處理72 h。細胞存活力係用CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability檢定(Promega)依照製造商之指示來分析。在各ADC濃度下之活細胞百分比係藉由對媒劑對照組之發光進行標準化來判定，並藉由GraphPad Prism軟體中之非線性擬合將其繪製成存活力百分比對劑量反應曲線。各測試ADC之IC 50係計算為殺滅50%的細胞之化合物濃度並對UC-961進行基準化。基於對Jeko-1或MDA-MB-468細胞之CTG檢定，本文中所述之ADC（包括藉由將抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890接合至化合物 18-94、 19-97 、及任何式(III)之例示性化合物所製備者）具有低於500 nM（例如，低於300 nM、低於100 nM、低於50 nM、或低於30 nM）之IC 50值。
此外，雖然前述已藉由說明和示例之方式稍微詳細地描述以達清晰及理解之目的，所屬技術領域中具有通常知識者將理解可進行各式各樣的改良而不背離本揭露之精神。因此，應清楚理解在本文中揭示之形式僅用以說明，且並非意欲限制本揭露之範疇，而是亦涵蓋伴隨本揭露之真實範疇及精神而來的所有修改及替代方案。 序列表 SEQ ID NO: 1 ATX-P-875 VH CDR1 (Kabat) GFTFSNAW SEQ ID NO: 2 ATX-P-875 VH CDR2 (Kabat) IKSKTDGGTT SEQ ID NO: 3 ATX-P-875 VH CDR3 (Kabat) TTGPDDLDY SEQ ID NO: 4 ATX-P-875 VH nt GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTGGCCGTATTAAAAGCAAAACTGATGGTGGGACAACAGACTACGCTGCACCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCAAAAAACACGCTCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTACCACAGGCCCTGACGATCTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCCGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 5 ATX-P-875 VH AA EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNAWMSWVRQAPGKGLEWVGRIKSKTDGGTTDYAAPVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTEDTAVYYCTTGPDDLDYWGQGTPVTVSS SEQ ID NO: 6 ATX-P-875 HC IgG1-Fc nt GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTGGCCGTATTAAAAGCAAAACTGATGGTGGGACAACAGACTACGCTGCACCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCAAAAAACACGCTCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTACCACAGGCCCTGACGATCTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCCGGTCACCGTCTCCTCAGCTAGCACTAAAGGGCCTTCTGTATTTCCCTTGGCCCCGTCCAGCAAATCGACCTCGGGAGGGACAGCCGCCCTGGGTTGCCTTGTGAAAGATTATTTCCCTGAGCCAGTTACCGTAAGTTGGAACAGTGGGGCGCTGACAAGTGGTGTGCACACGTTTCCTGCCGTCCTGCAATCATCGGGCTTGTATAGCCTCAGCTCTGTGGTCACTGTCCCAAGTTCATCGCTGGGCACTCAGACGTATATTTGCAATGTGAACCACAAACCTTCAAATACAAAAGTGGATAAACGCGTAGAACCGAAATCGTGTGATAAAACTCACACATGCCCGCCATGCCCGGCACCTGAACTGCTTGGTGGTCCCAGCGTGTTCCTGTTCCCGCCGAAGCCTAAAGATACTCTAATGATCAGCCGTACGCCAGAGGTGACATGTGTCGTGGTTGACGTGTCCCACGAAGATCCCGAAGTTAAGTTCAATTGGTATGTTGATGGTGTAGAGGTACACAATGCTAAGACTAAACCTCGCGAGGAGCAGTACAATTCGACCTATCGTGTCGTGAGCGTTCTGACCGTCCTTCACCAAGATTGGCTTAACGGCAAAGAATATAAGTGCAAGGTAAGCAATAAAGCACTTCCGGCCCCAATCGAGAAAACCATTTCCAAGGCCAAAGGTCAACCAAGAGAACCCCAGGTGTATACTCTTCCGCCTTCTCGTGAGGAAATGACTAAAAATCAAGTATCCCTTACGTGTCTGGTTAAAGGTTTTTATCCTAGCGATATTGCTGTTGAATGGGAATCGAACGGTCAGCCGGAGAATAATTATAAAACAACGCCACCCGTCCTGGATAGCGACGGCTCATTTTTTCTGTATAGCAAACTGACTGTAGATAAATCACGGTGGCAGCAGGGCAATGTATTCAGTTGCTCCGTTATGCATGAAGCGTTACATAATCACTACACGCAGAAATCTCTTAGTCTTTCACCCGGT SEQ ID NO: 7 ATX-P-875 HC IgG1-Fc AA EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNAWMSWVRQAPGKGLEWVGRIKSKTDGGTTDYAAPVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTEDTAVYYCTTGPDDLDYWGQGTPVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 8 ATX-P-875 VL CDR1 (Kabat) QSISSY ATX-P-875 VL CDR2 (Kabat) AAS SEQ ID NO: 10 ATX-P-875 VL CDR3 (Kabat) QQYDNLPIT SEQ ID NO: 11 ATX-P-875 VL nt GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGTATGATAATCTCCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA SEQ ID NO: 12 ATX-P-875 VL AA DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYDNLPITFGQGTRLEIK SEQ ID NO: 13 ATX-P-875 κ LC nt GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGTATGATAATCTCCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGTACGGTAGCTGCCCCTTCAGTTTTTATCTTTCCGCCGTCTGACGAGCAGTTAAAATCCGGGACCGCTTCTGTAGTTTGCCTGCTGAATAATTTTTATCCGCGTGAGGCTAAAGTACAATGGAAAGTCGACAATGCTTTGCAGTCGGGAAATTCACAGGAAAGTGTTACGGAGCAGGATTCTAAAGATTCCACATATTCACTCAGCTCCACCCTTACACTGAGCAAAGCCGACTATGAAAAACATAAAGTTTACGCATGTGAGGTGACGCACCAAGGATTATCCAGTCCGGTCACAAAATCGTTTAACCGCGGTGAGTGT SEQ ID NO: 14 ATX-P-875 κ LC AA DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYDNLPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 15 ATX-P-885 VH CDR1 (Kabat) GGSFSGYY SEQ ID NO: 16 ATX-P-885 VH CDR2 (Kabat) INHSGST SEQ ID NO: 17 ATX-P-885 VH CDR3 (Kabat) AREGVYEDY SEQ ID NO: 18 ATX-P-885 VH nt CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTATATTACTGTGCGAGAGAGGGTGTCTACGAGGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 19 ATX-P-885 VH AA QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAREGVYEDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 20 ATX-P-885 HC IgG1-Fc nt CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTATATTACTGTGCGAGAGAGGGTGTCTACGAGGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGCTAGCACTAAAGGGCCTTCTGTATTTCCCTTGGCCCCGTCCAGCAAATCGACCTCGGGAGGGACAGCCGCCCTGGGTTGCCTTGTGAAAGATTATTTCCCTGAGCCAGTTACCGTAAGTTGGAACAGTGGGGCGCTGACAAGTGGTGTGCACACGTTTCCTGCCGTCCTGCAATCATCGGGCTTGTATAGCCTCAGCTCTGTGGTCACTGTCCCAAGTTCATCGCTGGGCACTCAGACGTATATTTGCAATGTGAACCACAAACCTTCAAATACAAAAGTGGATAAACGCGTAGAACCGAAATCGTGTGATAAAACTCACACATGCCCGCCATGCCCGGCACCTGAACTGCTTGGTGGTCCCAGCGTGTTCCTGTTCCCGCCGAAGCCTAAAGATACTCTAATGATCAGCCGTACGCCAGAGGTGACATGTGTCGTGGTTGACGTGTCCCACGAAGATCCCGAAGTTAAGTTCAATTGGTATGTTGATGGTGTAGAGGTACACAATGCTAAGACTAAACCTCGCGAGGAGCAGTACAATTCGACCTATCGTGTCGTGAGCGTTCTGACCGTCCTTCACCAAGATTGGCTTAACGGCAAAGAATATAAGTGCAAGGTAAGCAATAAAGCACTTCCGGCCCCAATCGAGAAAACCATTTCCAAGGCCAAAGGTCAACCAAGAGAACCCCAGGTGTATACTCTTCCGCCTTCTCGTGAGGAAATGACTAAAAATCAAGTATCCCTTACGTGTCTGGTTAAAGGTTTTTATCCTAGCGATATTGCTGTTGAATGGGAATCGAACGGTCAGCCGGAGAATAATTATAAAACAACGCCACCCGTCCTGGATAGCGACGGCTCATTTTTTCT SEQ ID NO: 21 ATX-P-885 HC IgG1-Fc AA QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAREGVYEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 22 ATX-P-885 VL CDR1 (Kabat) QSVSNY ATX-P-885 VL CDR2 (Kabat) DAY SEQ ID NO: 24 ATX-P-885 VL CDR3 (Kabat) QQRSNWPLT SEQ ID NO: 25 ATX-P-885 VL nt GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAACTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCCTACAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA SEQ ID NO: 26 ATX-P-885 VL AA EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDAYNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTRLEIK SEQ ID NO: 27 ATX-P-885 κ LC nt GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAACTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCCTACAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGTACGGTAGCTGCCCCTTCAGTTTTTATCTTTCCGCCGTCTGACGAGCAGTTAAAATCCGGGACCGCTTCTGTAGTTTGCCTGCTGAATAATTTTTATCCGCGTGAGGCTAAAGTACAATGGAAAGTCGACAATGCTTTGCAGTCGGGAAATTCACAGGAAAGTGTTACGGAGCAGGATTCTAAAGATTCCACATATTCACTCAGCTCCACCCTTACACTGAGCAAAGCCGACTATGAAAAACATAAAGTTTACGCATGTGAGGTGACGCACCAAGGATTATCCAGTCCGGTCACAAAATCGTTTAACCGCGGTGAGTGT SEQ ID NO: 28 ATX-P-885 κ LC AA EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDAYNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 29 ATX-P-890 VH CDR1 (Kabat) GYTFTGYY SEQ ID NO: 30 ATX-P-890 VH CDR2 (Kabat) INPNSGGT SEQ ID NO: 31 ATX-P-890 VH CDR3 (Kabat) VRDQVQLERFDS SEQ ID NO: 32 ATX-P-890 VH nt CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCGGCTACTATATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAGTGGTGGCACAAACTATGCACAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGGCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGTGAGAGATCAGGTACAACTGGAACGGTTCGACTCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 33 ATX-P-890 VH AA QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCVRDQVQLERFDSWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 34 ATX-P-890 HC IgG1-Fc nt CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCGGCTACTATATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAGTGGTGGCACAAACTATGCACAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGGCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGTGAGAGATCAGGTACAACTGGAACGGTTCGACTCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGCTAGCACTAAAGGGCCTTCTGTATTTCCCTTGGCCCCGTCCAGCAAATCGACCTCGGGAGGGACAGCCGCCCTGGGTTGCCTTGTGAAAGATTATTTCCCTGAGCCAGTTACCGTAAGTTGGAACAGTGGGGCGCTGACAAGTGGTGTGCACACGTTTCCTGCCGTCCTGCAATCATCGGGCTTGTATAGCCTCAGCTCTGTGGTCACTGTCCCAAGTTCATCGCTGGGCACTCAGACGTATATTTGCAATGTGAACCACAAACCTTCAAATACAAAAGTGGATAAACGCGTAGAACCGAAATCGTGTGATAAAACTCACACATGCCCGCCATGCCCGGCACCTGAACTGCTTGGTGGTCCCAGCGTGTTCCTGTTCCCGCCGAAGCCTAAAGATACTCTAATGATCAGCCGTACGCCAGAGGTGACATGTGTCGTGGTTGACGTGTCCCACGAAGATCCCGAAGTTAAGTTCAATTGGTATGTTGATGGTGTAGAGGTACACAATGCTAAGACTAAACCTCGCGAGGAGCAGTACAATTCGACCTATCGTGTCGTGAGCGTTCTGACCGTCCTTCACCAAGATTGGCTTAACGGCAAAGAATATAAGTGCAAGGTAAGCAATAAAGCACTTCCGGCCCCAATCGAGAAAACCATTTCCAAGGCCAAAGGTCAACCAAGAGAACCCCAGGTGTATACTCTTCCGCCTTCTCGTGAGGAAATGACTAAAAATCAAGTATCCCTTACGTGTCTGGTTAAAGGTTTTTATCCTAGCGATATTGCTGTTGAATGGGAATCGAACGGTCAGCCGGAGAATAATTATAAAACAACGCCACCCGTCCTGGATAGCGACGGCTCATTTTTTCTGTATAGCAAACTGACTGTAGATAAATCACGGTGGCAGCAGGGCAATGTATTCAGTTGCTCCGTTATGCATGAAGCGTTACATAATCACTACACGCAGAAATCTCTTAGTCTTTCACCCGGT SEQ ID NO: 35 ATX-P-890 HC IgG1-Fc AA QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCVRDQVQLERFDSWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 36 ATX-P-890 VL CDR1 (Kabat) QDISNY ATX-P-890 VL CDR2 (Kabat) DAS SEQ ID NO: 38 ATX-P-890 VL CDR3 (Kabat) QQYDNLPPT SEQ ID NO: 39 ATX-P-890 VL nt GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTAGCAACTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTACGATGCATCCAATTTGGAAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGAAGTGGATCTGGGACAGATTTTACTTTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATATTGCAACATATTACTGTCAACAGTATGATAATCTCCCTCCCACTTTCGGCCCTGGGACCAAGGTGGAAATCAAA SEQ ID NO: 40 ATX-P-890 VL AA DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYDNLPPTFGPGTKVEIK SEQ ID NO: 41 ATX-P-890 κ LC nt GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCGAGTCAGGACATTAGCAACTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTACGATGCATCCAATTTGGAAACAGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGAAGTGGATCTGGGACAGATTTTACTTTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATATTGCAACATATTACTGTCAACAGTATGATAATCTCCCTCCCACTTTCGGCCCTGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTAGCTGCCCCTTCAGTTTTTATCTTTCCGCCGTCTGACGAGCAGTTAAAATCCGGGACCGCTTCTGTAGTTTGCCTGCTGAATAATTTTTATCCGCGTGAGGCTAAAGTACAATGGAAAGTCGACAATGCTTTGCAGTCGGGAAATTCACAGGAAAGTGTTACGGAGCAGGATTCTAAAGATTCCACATATTCACTCAGCTCCACCCTTACACTGAGCAAAGCCGACTATGAAAAACATAAAGTTTACGCATGTGAGGTGACGCACCAAGGATTATCCAGTCCGGTCACAAAATCGTTTAACCGCGGTGAGTGT SEQ ID NO: 42 ATX-P-890 κ LC AA DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYDNLPPTFGPGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
〔 圖 1 〕繪示了曲妥珠單抗德魯替康抗體藥物接合物。 〔 圖 2 〕繪示了用於製造式(II)、式(II*)、式(IV)、或式(IV*)（其中n 4= 2及n 5= 0）之化合物的反應方案。 〔 圖 3 〕繪示了用於製造式(IV-12)之化合物的反應方案。 〔 圖 4 〕繪示了用於製造式(IV-17)之化合物的反應方案。 〔 圖 5 〕繪示了用於製造式(V-6)之化合物的反應方案。 〔 圖 6 〕繪示了用於製造式(IIIC-6)之接合物的反應方案。 〔 圖 7A 〕繪示了用於製造式(I)之免疫接合物的反應方案。 〔 圖 7B 〕繪示了用於製造式(III)（其中式(III)中之D（藥物部份）係式(II)之化合物）之例示性接合物的反應方案。 〔 圖 8 〕繪示了用於製造化合物 1-16及 1-17的反應方案（參見實例1）。 〔 圖 9 〕繪示了用於化合物 2-20的反應方案（參見實例2）。 〔 圖 10 〕繪示了用於製造化合物 3-27及 3-28的反應方案（參見實例3）。 〔 圖 11 〕繪示了用於製造化合物 4-38及 4-39的反應方案（參見實例4）。 〔 圖 12 〕繪示了用於製造化合物 5-40及 5-41的反應方案（參見實例5）。 〔 圖 13 〕繪示了用於製造化合物 6-44的反應方案（參見實例6）。 〔 圖 14 〕繪示了化合物 7-45之結構（參見實例7）。 〔 圖 15 〕繪示了用於製造化合物 8-47的反應方案（參見實例8） 〔 圖 16 〕繪示了化合物 9-48之結構（參見實例9）。 〔 圖 17 〕繪示了用於製造化合物 10-49的反應方案（參見實例10）。 〔 圖 18 〕繪示了用於製造化合物 11-52的反應方案（參見實例11）。 〔 圖 19 〕繪示了用於製造化合物 12-58及 12-59的反應方案（參見實例12）。 〔 圖 20 〕繪示了用於製造化合物 13-63及 13-64的反應方案（參見實例13）。 〔 圖 21 〕繪示了用於製造化合物 14-70及 14-71的反應方案（參見實例14）。 〔 圖 22 〕繪示了用於製造化合物 15-75及 15-76的反應方案（參見實例15）。 〔 圖 23 〕繪示了用於製造化合物 16-82及 16-83的反應方案（參見實例16）。 〔 圖 24 〕繪示了用於製造化合物 17-86及 17-87的反應方案（參見實例17）。 〔 圖 25 〕繪示了用於製造化合物 18-94的反應方案（參見實例18）。 〔 圖 26 〕繪示了用於製造化合物 19-97的反應方案（參見實例19）。 〔 圖 27A 〕至 〔 圖 27B 〕繪示了藉由本文中所述之方法所產生的抗ROR-1抗體之細胞結合飽和度數據測量。將ROR-1陽性細胞系JeKo-1在滴定系列中與抗ROR-1抗體ATX-P-875（ 圖 27A）、ATX-P-885（ 圖 27B）、及ATX-P-890（ 圖 27A）一起培養，並與陽性對照抗體UC-961進行比較。洗滌細胞，用二級抗體染色，藉由流動式細胞測量術偵測細胞結合飽和度，並被以平均螢光強度(MFI)記述。 〔 圖 28A 〕至 〔 圖 28B 〕繪示了抗ROR-1抗體ATX-875、ATX-P -885、ATX-P -890之ROR-1受體內化數據。將ROR-1陽性細胞系JeKo-1（ 圖 28A）及MDA-MB-468（ 圖 28B）與抗ROR-1抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890以及陽性對照抗體UC961在超飽和條件下一起培養，以便結合所有可用的ROR-1受體。將細胞洗滌且在37℃下在4個不同的時間點（30 min、1小時、2小時及4小時）培養，然後藉由將細胞置於冰中停止內化。受體內化藉由流動式細胞測量術判定，且被以相對於零小時的受體內化百分比記述。 〔 圖 29A 〕至 〔 圖 29H 〕繪示了抗ROR-1抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890之細胞分級資料。進行細胞分級檢定以評估ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890是否與對照抗體UC-961及4A5結合ROR-1受體上的相同表位。 圖 29A描繪了結合相同表位之抗體的染色概況。 圖 29B描繪了結合不同表位之抗體的染色概況。將ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890分別與不同量的ROR-1 + MDA-MB-468一起培養。接下來，用二級抗體螢光標記抗ROR-1抗體。最後，將用抗ROR-1抗體包覆的MDA-MB-468細胞與飽和劑量的螢光標記UC-961（ 圖 29C 至圖 29E）或4A5（ 圖 29F 至圖 29H）一起培養，而且藉由流動式細胞測量術進行分析，並將ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890抗體訊號與UC-961或4A5訊號進行比較。 〔 圖 30 〕繪示了抗ROR-1抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890之AC-SINS資料。藉由執行AC-SINS檢定並評價自我交互作用之可能性來評估抗體可開發性。使用利妥昔單抗及英夫利昔單抗作為對照來分別證明低移位及高移位。ATX-P-875、ATX-P-885及ATX-P-890的檢定結果在藉由對照抗體所判定之範圍內。 〔 圖 31 〕繪示了藉由針對抗ROR1抗體ATX-P-875、ATX-P-885、ATX-P-890與對照抗ROR-1抗體UC961（ATX-P-453）及4a5相比之SPR得到的生化分級資料。 〔 圖 32 〕繪示了抗ROR-1抗體ATX-P-875、ATX-P-885、及ATX-P-890之核苷酸及胺基酸序列。
TW202412858A_112127994_SEQL.xml

Claims (175)

  1. 一種免疫接合物，其具有式(I)， Ab-[S-L 1- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D] n(I) 其中： Ab係抗體或其抗原結合片段； L 1係 ； L 2不存在、係 或 ； Z 1及Z 2各自獨立地係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基； L 3係–(CH 2)n 1-C(=O)–或–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–； n 1獨立地係0至12之整數； L 4係四肽殘基； L 5不存在或係–[NH(CH 2)n 2]n 3–； n 2係0至6之整數； n 3係0至2之整數； L 6不存在、或係 ； L 7不存在、係 、 、或 ； D係藥物部份；及 n係1至10之整數。
  2. 如請求項1之免疫接合物，其中L 2不存在。
  3. 如請求項1之免疫接合物，其中L 2係 。
  4. 如請求項1之免疫接合物，其中L 2係 。
  5. 如請求項1至4中任一項之免疫接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係氫。
  6. 如請求項1至4中任一項之免疫接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係鹵素。
  7. 如請求項1至4中任一項之免疫接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係NO 2。
  8. 如請求項1至4中任一項之免疫接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係–O–(C 1-C 6烷基)。
  9. 如請求項1至4中任一項之免疫接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係C 1-C 6烷基。
  10. 如請求項1至9中任一項之免疫接合物，其中L 3係–(CH 2)n 1-C(=O)–。
  11. 如請求項1至9中任一項之免疫接合物，其中L 3係–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–。
  12. 如請求項1至11中任一項之免疫接合物，其中L 4係gly-gly-phe-gly (GGFG)。
  13. 如請求項1至12中任一項之免疫接合物，其中L 5不存在。
  14. 如請求項1至12中任一項之免疫接合物，其中L 5係–[NH(CH 2)n 2]n 3–。
  15. 如請求項1至14中任一項之免疫接合物，其中L 6不存在。
  16. 如請求項1至14中任一項之免疫接合物，其中L 6係 。
  17. 如請求項1至16中任一項之免疫接合物，其中L 7不存在。
  18. 如請求項1至16中任一項之免疫接合物，其中L 7係 。
  19. 如請求項1至16中任一項之免疫接合物，其中L 7係 。
  20. 如請求項1至16中任一項之免疫接合物，其中L 7係 。
  21. 如請求項1至20中任一項之免疫接合物，其中D係式(II)之藥物部份，其具有以下結構： (II) 其中： R 1及R 2各自獨立地係選自由以下所組成之群組：氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起形成環； R 3及R 4各自獨立地係選自由下列所組成之群組：氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成經取代或未經取代4、5、或6員雜環基、或經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2、或經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2； X 2係–OR 9、-SR 9、或-NHR 9； R 5及R 6各自獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地係0、1或2，其限制條件係n 4及n 5不皆係0； 各Y獨立地係H或鹵素； 各m獨立地係1或2； 各p獨立地係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地係0、1、2、3、4、5、或6； 各t獨立地係1、2、3、4、5、或6； R 7係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7； R 8係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3； R 9係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其限制條件是R 7及R 9中僅一者係L 4、L 5、L 6、或L 7；及 各X 3獨立地係–H、–OH、–SH、或–NH 2。
  22. 如請求項21之免疫接合物，其中R 1係C 1-C 3烷基且R 2係鹵素。
  23. 如請求項21或22之免疫接合物，其中R 1係甲基且R 2係F。
  24. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係氫。
  25. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係–CH 3。
  26. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。
  27. 如請求項26之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH=CH 2。
  28. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。
  29. 如請求項28之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係–C≡CH。
  30. 如請求項26之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH 2–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者係氫。
  31. 如請求項24至29中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之其他者係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
  32. 如請求項31之免疫接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–CH 2OH。
  33. 如請求項31之免疫接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–(CH 2) 2OH。
  34. 如請求項31之免疫接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–(CH 2) 3OH。
  35. 如請求項31之免疫接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–CH 2O(CH 2) 2OH。
  36. 如請求項24或25之免疫接合物，其中R 3及R 4中之其他者係–NR 5R 6。
  37. 如請求項36之免疫接合物，其中R 5及R 6與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。
  38. 如請求項37之免疫接合物，其中該–NR 5R 6係選自由 及 所組成之群組。
  39. 如請求項37之免疫接合物，其中該–NR 5R 6係選自由 及 所組成之群組。
  40. 如請求項36之免疫接合物，其中R 5及R 6各自獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
  41. 如請求項40之免疫接合物，其中R 5及R 6中之一者係–CH 2CH 2OH。
  42. 如請求項41之免疫接合物，其中R 5及R 6中之其他者係選自由–CH 3及 所組成之群組。
  43. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之至少一者係–CH 2OH。
  44. 如請求項43之免疫接合物，其中R 3及R 4皆係–CH 2OH。
  45. 如請求項43之免疫接合物，其中R 3及R 4中之其他者係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  46. 如請求項45之免疫接合物，其中該–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3係–CH 2OCH 3。
  47. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH 2CH 2OH。
  48. 如請求項47之免疫接合物，其中R 3及R 4中之其他者係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  49. 如請求項48之免疫接合物，其中該–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3係–CH 2OCH 3。
  50. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基。
  51. 如請求項50之免疫接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起係選自由 、 、 、及 所組成之群組；且其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
  52. 如請求項21至23中任一項之免疫接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基。
  53. 如請求項52之免疫接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、及 ；且其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
  54. 如請求項21至53中任一項之免疫接合物，其中R 7係H。
  55. 如請求項1至54中任一項之免疫接合物，其中Ab特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)、Her2、TROP2、或Her3。
  56. 如請求項1至55中任一項之免疫接合物，其中Ab結合至癌症細胞表面。
  57. 如請求項1之免疫接合物，其中式(I)之免疫接合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、及 。
  58. 如請求項1之免疫接合物，其中式(I)之免疫接合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、及 。
  59. 如請求項1之免疫接合物，其中式(I)之免疫接合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、及 。
  60. 如請求項1之免疫接合物，其中式(I)之免疫接合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、及 。
  61. 如請求項1之免疫接合物，其中式(I)之免疫接合物係選自由下列所組成之群組： 、 、及 。
  62. 一種式(IV)之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，該化合物具有以下結構： (IV) 其中： R 1及R 2各自獨立地係選自由以下所組成之群組：氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起形成環； R 3及R 4各自獨立地係選自由下列所組成之群組：氫、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基、或經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基； R 5及R 6各自獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基；或R 5及R 6與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地係0、1或2，其限制條件係n 4及n 5不皆係0； 各Y獨立地係H或鹵素； 各m獨立地係1或2； 各p獨立地係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地係0、1、2、3、4、5、或6；及 各t獨立地係1、2、3、4、5、或6； R 7係H、–COR 8、–CO 2R 8、或–(CO)-NHR 8；及 R 8係經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  63. 如請求項62之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 1係C 1-C 3烷基且R 2係鹵素。
  64. 如請求項62或63之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 1係甲基且R 2係F。
  65. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係氫。
  66. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係–CH 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係–CH 3。
  67. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。
  68. 如請求項67之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係–CH=CH 2。
  69. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。
  70. 如請求項69之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係–C≡CH。
  71. 如請求項67之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係–CH 2–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者係氫。
  72. 如請求項65至70中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之其他者係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
  73. 如請求項72之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該經取代C 1-C 6烷基係–CH 2OH。
  74. 如請求項72之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–(CH 2) 2OH。
  75. 如請求項72之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–(CH 2) 3OH。
  76. 如請求項72之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–CH 2O(CH 2) 2OH。
  77. 如請求項65或66之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之其他者係–NR 5R 6。
  78. 如請求項77之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 5及R 6與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。
  79. 如請求項78之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該–NR 5R 6係選自由 及 所組成之群組。
  80. 如請求項78之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該–NR 5R 6係選自由 及 所組成之群組。
  81. 如請求項77之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 5及R 6各自獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
  82. 如請求項81之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 5及R 6中之一者係–CH 2CH 2OH。
  83. 如請求項82之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 5及R 6中之其他者係選自由–CH 3及 所組成之群組。
  84. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之至少一者係–CH 2OH。
  85. 如請求項84之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4皆係–CH 2OH。
  86. 如請求項84之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之其他者係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  87. 如請求項86之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3係–CH 2OCH 3。
  88. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之一者係–CH 2CH 2OH。
  89. 如請求項88之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4中之其他者係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  90. 如請求項89之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3係–CH 2OCH 3。
  91. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基。
  92. 如請求項91之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起係選自由 、 、 、及 所組成之群組，且其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
  93. 如請求項62至64中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基。
  94. 如請求項93之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、及 ；且其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
  95. 如請求項62至94中任一項之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中R 7係H。
  96. 如請求項62之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該式(IV)之化合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
  97. 如請求項62之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該式(IV)之化合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
  98. 如請求項62之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該式(IV)之化合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
  99. 如請求項62之化合物、或其醫藥上可接受之鹽，其中該式(IV)之化合物係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、及 。
  100. 一種醫藥組成物，其包含如請求項1至61中任一項之免疫接合物、如請求項62至99中任一項之化合物、或其醫藥上之活性鹽、及醫藥上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑、或其組合。
  101. 一種用於治療癌症或腫瘤之方法，其包含向患有該癌症或該腫瘤之對象投予有效量的如請求項1至61中任一項之免疫接合物、如請求項62至99中任一項之化合物、或其醫藥上之活性鹽、或如請求項100之醫藥組成物。
  102. 如請求項101之方法，其中該癌症或該腫瘤選自肺癌、尿路上皮癌、結腸直腸癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、乳癌、膀胱癌、胃癌、胃腸間質瘤、子宮頸癌、食道癌、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、子宮癌、唾液腺癌、腎癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、或肉瘤。
  103. 一種有效量的如請求項1至61中任一項之免疫接合物、如請求項62至99中任一項之化合物、或其醫藥上之活性鹽、或如請求項100之醫藥組成物在製造用於治療癌症或腫瘤之藥劑中的用途。
  104. 如請求項103之用途，其中該癌症或該腫瘤係選自肺癌、尿路上皮癌、結腸直腸癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、乳癌、膀胱癌、胃癌、胃腸間質瘤、子宮頸癌、食道癌、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、子宮癌、唾液腺癌、腎癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、或肉瘤。
  105. 一種接合物，其具有式(III)， Mi- L 2- L 3- L 4- L 5- L 6- L 7-D (III) 其中： Mi係 ； L 2不存在、係 或 ； Z 1及Z 2各自獨立地係氫、鹵素、NO 2、–O–(C 1-C 6烷基)、或C 1-C 6烷基； L 3係–(CH 2)n 1-C(=O)–或–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–； n 1獨立地係0至12之整數； L 4係四肽殘基； L 5不存在或係–[NH(CH 2)n 2]n 3–； n 2係0至6之整數； n 3係0至2之整數； L 6不存在、或係 ； L 7不存在、係 、 、或 ；及 D係藥物部份。
  106. 如請求項105之接合物，其中L 2不存在。
  107. 如請求項105之接合物，其中L 2係 。
  108. 如請求項105之接合物，其中L 2係 。
  109. 如請求項105至108中任一項之接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係氫。
  110. 如請求項105至108中任一項之接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係鹵素。
  111. 如請求項105至108中任一項之接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係NO 2。
  112. 如請求項105至108中任一項之接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係–O–(C 1-C 6烷基)。
  113. 如請求項105至108中任一項之接合物，其中Z 1及Z 2中之至少一者係C 1-C 6烷基。
  114. 如請求項105至113中任一項之接合物，其中L 3係–(CH 2)n 1-C(=O)–。
  115. 如請求項105至113中任一項之接合物，其中L 3係–(CH 2CH 2O)n 1-(CH 2)n 1C(=O)–。
  116. 如請求項105至115中任一項之接合物，其中L 4係gly-gly-phe-gly (GGFG)。
  117. 如請求項105至116中任一項之接合物，其中L 5不存在。
  118. 如請求項105至116中任一項之接合物，其中L 5係–[NH(CH 2)n 2]n 3–。
  119. 如請求項105至118中任一項之接合物，其中L 6不存在。
  120. 如請求項105至118中任一項之接合物，其中L 6係 。
  121. 如請求項105至120中任一項之接合物，其中L 7不存在。
  122. 如請求項105至120中任一項之接合物，其中L 7係 。
  123. 如請求項105至120中任一項之接合物，其中L 7係 。
  124. 如請求項105至120中任一項之接合物，其中L 7係 。
  125. 如請求項105至124中任一項之接合物，其中D係式(II)之藥物部份，其具有以下結構： (II) 其中： R 1及R 2各自獨立地係選自由以下所組成之群組：氫、鹵素、–CN、–OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6烷基)、經取代或未經取代–O–(C 1-C 6鹵烷基)、及–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3、或經取代或未經取代–O-(CR 5R 6) m–O–，使得R 1及R 2合在一起形成環； R 3及R 4各自獨立地係選自由下列所組成之群組：氫, –OR 5、–NR 5R 6、經取代或未經取代C 1-C 6烷基、經取代或未經取代C 2-C 6烯基、經取代或未經取代C 2-C 6炔基、經取代或未經取代4或5員雜環基、及[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係氫；或R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基、或經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4、5、或6員雜環基；或R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代–(C 1-C 6烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烷基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵烯基)-X 2、經取代或未經取代–(C 1-C 6炔基)-X 2、或經取代或未經取代–(C 1-C 6鹵炔基)-X 2； X 2係–OR 9、-SR 9、或-NHR 9； R 5及R 6各自獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基或R 5及R 6與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基； n 4及n 5各自獨立地係0、1或2，其限制條件係n 4及n 5不皆係0； 各Y獨立地係H或鹵素； 各m獨立地係1或2； 各p獨立地係1、2、3、4、5、或6； 各q獨立地係0、1、2、3、4、5、或6； 各t獨立地係1、2、3、4、5、或6； R 7係H、-COR 8、-CO 2R 8、-(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7； R 8係經取代或未經取代C 1-C 6烷基-X 3、經取代或未經取代C 1-C 6鹵烷基-X 3、或–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 2-X 3； R 9係H、–COR 8、–CO 2R 8、–(CO)-NHR 8、L 4、L 5、L 6、或L 7，其限制條件是R 7及R 9中僅一者係L 4、L 5、L 6、或L 7；及 各X 3獨立地係–H、–OH、–SH、或–NH 2。
  126. 如請求項125之接合物，其中R 1係C 1-C 3烷基且R 2係鹵素。
  127. 如請求項125或126之接合物，其中R 1係甲基且R 2係F。
  128. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之一者係氫。
  129. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH 3，其限制條件是R 3及R 4不皆係–CH 3。
  130. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代C 2-C 6烯基。
  131. 如請求項130之接合物，其中R 3及R 4中之一者係其中R 3及R 4中之一者係–CH=CH 2。
  132. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之一者係經取代或未經取代C 2-C 6炔基。
  133. 如請求項132之接合物，其中R 3及R 4中之一者係–C≡CH。
  134. 如請求項130之接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH 2–CH=CH 2且R 3及R 4中之其他者係氫。
  135. 如請求項128至133中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之其他者係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
  136. 如請求項135之接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–CH 2OH。
  137. 如請求項135之接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–(CH 2) 2OH。
  138. 如請求項135之接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–(CH 2) 3OH。
  139. 如請求項135之接合物，其中該經取代或未經取代C 1-C 6烷基係–CH 2O(CH 2) 2OH。
  140. 如請求項128或129之接合物，其中R 3及R 4中之其他者係–NR 5R 6。
  141. 如請求項140之接合物，其中R 5及R 6與其等所附接之氮原子一起形成經取代或未經取代4或5員雜環基。
  142. 如請求項141之接合物，其中該–NR 5R 6係選自由 及 所組成之群組。
  143. 如請求項141之接合物，其中該–NR 5R 6係選自由 及 所組成之群組。
  144. 如請求項140之接合物，其中R 5及R 6各自獨立地係經取代或未經取代C 1-C 6烷基。
  145. 如請求項144之接合物，其中R 5及R 6中之一者係–CH 2CH 2OH。
  146. 如請求項145之接合物，其中R 5及R 6中之其他者係選自由–CH 3及 所組成之群組。
  147. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之至少一者係–CH 2OH。
  148. 如請求項147之接合物，其中R 3及R 4皆係–CH 2OH。
  149. 如請求項147之接合物，其中R 3及R 4中之其他者係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  150. 如請求項149之接合物，其中該–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3係–CH 2OCH 3。
  151. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4中之一者係–CH 2CH 2OH。
  152. 如請求項151之接合物，其中R 3及R 4中之其他者係–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3。
  153. 如請求項152之接合物，其中該–[(CY 2) pO(CY 2) q] tCY 3係–CH 2OCH 3。
  154. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成未經取代4、5、或6員雜環基。
  155. 如請求項154之接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起係選自由 、 、 、及 所組成之群組；且其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
  156. 如請求項125至127中任一項之接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起形成經可選地經取代C 1-C 3烷基取代之4或5員雜環基。
  157. 如請求項156之接合物，其中R 3及R 4與其等所附接之碳原子一起係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、 、及 ；且其中*表示R 3及R 4所附接之碳原子。
  158. 如請求項125至157中任一項之接合物，其中R 7係H。
  159. 如請求項105之接合物，其中該接合物具有式(III)，其係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、及 。
  160. 如請求項105之接合物，其中該接合物具有式(III)，其係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、及 。
  161. 如請求項105之接合物，其中該接合物具有式(III)，其係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、 、 、及 。
  162. 如請求項105之接合物，其中該接合物具有式(III)，其係選自由下列所組成之群組： 、 、 、 、 、及 。
  163. 如請求項105之接合物，其中該接合物具有式(III)，其係選自由下列所組成之群組： 、 、及 。
  164. 一種生產免疫接合物之製程，其包含：使有效量的硫醇官能化抗體或其抗原結合片段與如請求項105至163中任一項之接合物在有效形成如請求項1至61中任一項之免疫接合物的反應條件下反應。
  165. 如請求項164之製程，其中該製程包含：(i)將抗體或其抗原結合片段還原以形成硫醇官能化抗體或其抗原結合片段；及(ii)將該接合物添加至該硫醇官能化抗體或其抗原結合片段。
  166. 如請求項165之製程，其中步驟(i)包含於(2-羧乙基)膦(TCEP)及乙二胺四乙酸(EDTA)存在下在約pH 8.5下將該抗體或其抗原結合片段還原。
  167. 如請求項165或166之製程，其中步驟(ii)包含於二甲基乙醯胺(DMA)存在下在約20℃下將該接合物添加至該硫醇官能化抗體或其抗原結合片段以培養至少16小時。
  168. 如請求項1至61中任一項之免疫接合物、如請求項100之醫藥組成物、如請求項101或102之方法、如請求項103或104之用途、或如請求項164至167中任一項之製程，其中Ab係抗體或其抗原結合片段，其包含： a)重鏈，其包含： VHCDR 1，其包含與SEQ ID NO:1之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含與SEQ ID NO:2之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含與SEQ ID NO:3之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含與SEQ ID NO:8之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含與AAS之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含與SEQ ID NO:10之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
  169. 如請求項168之免疫接合物、醫藥組成物、方法、用途、或製程，其中該抗體或其抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 5、7、12、或14中任一者之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列。
  170. 如請求項1至61中任一項之免疫接合物、如請求項100之醫藥組成物、如請求項101或102之方法、如請求項103或104之用途、或如請求項164至167中任一項之製程，其中Ab係抗體或其抗原結合片段，其包含： a)重鏈，其包含： VHCDR 1，其包含與SEQ ID NO:15之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含與SEQ ID NO:16之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含與SEQ ID NO:17之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含與SEQ ID NO:22之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含與DAY之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含與SEQ ID NO:24之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
  171. 如請求項170之免疫接合物、醫藥組成物、方法、用途、或製程，其中該抗體或其抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 19、21、26、或28中任一者之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列。
  172. 如請求項1至61中任一項之免疫接合物、如請求項100之醫藥組成物、如請求項101或102之方法、如請求項103或104之用途、或如請求項164至167中任一項之製程，其中Ab係抗體或其抗原結合片段，其包含： a)重鏈，其包含： VHCDR 1，其包含與SEQ ID NO:29之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VHCDR 2，其包含與SEQ ID NO:30之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VHCDR 3，其包含與SEQ ID NO:31之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 b)輕鏈，其包含： VLCDR 1，其包含與SEQ ID NO:36之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； VLCDR 2，其包含與DAS之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列；及 VLCDR 3，其包含與SEQ ID NO:38之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列； 其中該抗體或其抗原結合片段特異性地結合至人類受體酪胺酸激酶樣孤兒受體1 (ROR1)之細胞外域。
  173. 如請求項172之免疫接合物、醫藥組成物、方法、用途、或製程，其中該抗體或其抗原結合片段包含與SEQ ID NO: 33、35、40、或42中任一者之胺基酸序列具有至少95%序列同一性之胺基酸序列。
  174. 如請求項1至61或168至172中任一項之免疫接合物，其中來自Ab（該抗體或其抗原結合片段）以外之一或多個氫係由氘置換。
  175. 如請求項62至99中任一項之化合物或如請求項105至163中任一項之接合物，其中一或多個氫係由氘置換。
TW112127994A 2022-07-26 2023-07-26 免疫接合物及方法 TW202412858A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202263369464P 2022-07-26 2022-07-26
US63/369,464 2022-07-26

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202412858A true TW202412858A (zh) 2024-04-01

Family

ID=89707280

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112127994A TW202412858A (zh) 2022-07-26 2023-07-26 免疫接合物及方法

Country Status (2)

Country Link
TW (1) TW202412858A (zh)
WO (1) WO2024026323A1 (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11806405B1 (en) 2021-07-19 2023-11-07 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
WO2024158996A2 (en) * 2023-01-25 2024-08-02 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
CN118878548A (zh) * 2023-04-30 2024-11-01 泰诚思(上海)生物医药有限公司 喜树碱衍生物、其制备方法及用途、抗体药物偶联物及其应用
WO2025005240A1 (ja) * 2023-06-30 2025-01-02 第一三共株式会社 活性炭材料を使用する精製工程を含む抗体－薬物コンジュゲートの製造方法
WO2025021152A1 (zh) * 2023-07-26 2025-01-30 上海医药集团股份有限公司 喜树碱类小分子及其抗体药物偶联物、制备方法和应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220025861A (ko) * 2019-06-28 2022-03-03 상하이 후단-장지앙 바이오-파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 항체 약물 복합체, 이의 중간체, 제조 방법 및 용도
CN112138171B (zh) * 2019-06-28 2024-09-24 泰州复旦张江药业有限公司 抗体偶联药物、其中间体、制备方法及应用
CA3188508A1 (en) * 2020-08-13 2022-02-17 Xiquan Zhang Antibody drug conjugate
IL301793A (en) * 2020-09-30 2023-05-01 Duality Biologics Suzhou Co Ltd Anti-tumor compound and preparation method and use thereof
CN113943310A (zh) * 2020-10-12 2022-01-18 四川百利药业有限责任公司 一种氘代的喜树碱衍生物及其抗体药物偶联物
MX2023008716A (es) * 2021-02-05 2023-08-02 Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd Compuesto de camptotecina, metodo de preparacion del mismo y aplicacion del mismo.
CN113816969B (zh) * 2021-04-30 2024-01-16 联宁（苏州）生物制药有限公司 依喜替康类化合物、其抗体药物偶联物及其应用
CA3236930A1 (en) * 2021-11-03 2022-04-21 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Specific conjugation of an antibody

Also Published As

Publication number Publication date
WO2024026323A1 (en) 2024-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TW202412858A (zh) 免疫接合物及方法
JP6392764B2 (ja) ピロロベンゾジアゼピン−抗体結合体
ES2640449T3 (es) Conjugados de anticuerpos anti-her2-Pirrolobenzodiazepinas
US20230123041A1 (en) Immunoconjugates and methods
AU2022291454B2 (en) Macrocyclic compound and uses thereof
JP2015534580A (ja) ピロロベンゾジアゼピン−抗体結合体
JP2015534578A (ja) ピロロベンゾジアゼピン−抗体結合体
JP2018502844A (ja) Ｋｓｐ阻害剤の脱グリコシル化抗ｔｗｅａｋｒ抗体との抗体薬物複合体（ａｄｃ類）
ES2974243T3 (es) Compuestos macrocíclicos y usos de los mismos
US12186403B2 (en) Immunoconjugates and methods
AU2019248589A1 (en) Conjugate of cytotoxic drug and prodrug form of said conjugate
TW202313125A (zh) 一種抗腫瘤化合物及其應用
WO2024158996A2 (en) Immunoconjugates and methods
WO2023147329A1 (en) Antibody-conjugated chemical inducers of degradation and methods thereof
US20230020952A1 (en) Macrocycles comprising a 4-amido-2,4-pentadienoate moiety for the treatment of hypoxic cancers
JP2025506357A (ja) 加水分解性マレイミドリンカーを有する抗体コンジュゲート化化学的分解誘導剤及びその方法
JP2025508328A (ja) 抗体にコンジュゲートした化学的分解誘導物質とその方法