TW201618675A - 一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法及包含該醱酵混合原料之水產飼料 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其包含：一前置步驟，係提供豆粉>蚯蚓粉之比例所成之混合原料；一預處理步驟，將一枯草桿菌菌液與該混合原料進行混合，獲得一預處理混合原料；及一醱酵步驟，係將該預處理混合原料於溫度為35~50℃之條件下培養，獲得一醱酵混合原料。本發明另揭示一種水產飼料，係包含以上述方法所製備之醱酵混合原料。
Description
本發明係關於一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法及包含該醱酵混合原料之水產飼料，特別係關於一種以枯草桿菌對豆粉及蚯蚓粉之混合原料進行醱酵之製備方法，以及包含該醱酵混合原料之白蝦用飼料。
白蝦(Litopenaeus vannamei)為台灣主要養殖經濟蝦類，由於其成長快速及對環境耐受力強的原因，而獲得養殖業者的青睞。
習用水產飼料的主要蛋白質來源主要為魚粉，然而，魚粉成本單價較高，且由於近年來海洋環境的汙染、全球氣候變遷及生態環境的破壞，使得全球魚粉原料短缺，造成水產養殖業的飼料成本居高不下，因此，許多習用水產飼料改以價格較低之大豆粉取代部分魚粉，藉以降低習用水產飼料的成本。
雖大豆具高蛋白、價格低廉和貨源穩定等特點，但大豆會因為其含有許多抗營養因子、適口性不佳、低消化率和不平衡的胺基酸組成，導致其利用率下降，故如何改善上述問題係提高其利用率之關鍵。
先前文獻已揭露醱酵工程可應用於水產飼料上，藉以改善動物對豆粉營養的吸收及利用率，進而提高魚粉取代量。
但醱酵豆粉雖可提高取代量，卻無法完全取代魚粉，原因可能係植物性蛋白質缺乏必需胺基酸-甲硫胺酸(Methionine)。即使以結晶型胺基酸補足水產動物必需胺基酸，效果亦不顯著而有疑慮。因此，找到一種甲硫胺酸含量高，且成本低之原料，輔以醱酵豆粉於水產飼料之使用，如混合兩種原料共同醱酵，提高最終醱酵混合原料之營養價值，應可提高醱酵混合原料的利用潛力。
再者，赤子愛勝蚓已證實可取代水產飼料中的部份魚粉，但其對魚粉的取代量無法太高，原因係赤子愛勝蚓粉所含的凝血素及其所散發出的惡臭味，會造成水產動物的成長表現下降(Tacon et al.,1983)。
綜上所述，有必要提供一種方法，以改善習用水產飼料之大豆粉中甲硫胺酸不足，及蚯蚓粉所含的凝血素及其味道所造成水產飼料轉換率低下的問題。
Tacon, A. G. J., Stafford, E. A. & Edwards, C. A. (1983). A preliminary investigation of the nutritive value of three terrestrial lumbricid worms for rainbow trout. Aquaculture, 35, 187-199.
中華民國公開第201412249號專利
中華民國公開第201412249號專利「一種醱酵豆粉之製備方法及包含該醱酵豆粉之水產飼料」，係以枯草桿菌B.subtilis E20菌株進行豆粉醱酵，研究於白蝦飼料中，顯示醱酵豆粉對魚粉取代量高於未醱酵豆粉，可取代飼料中61.67%的魚粉量，證明藉由醱酵工程使用B.subtilis E20處理豆粉，可以提高水產動物對豆粉之利用率。
但業界仍企盼，能更進一步提高魚粉取代量，提高水產動物對植物原料利用率及降低對魚粉的依賴。
有鑑於上述業界存在之問題，本發明之主要目的係提供一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，解決水產飼料轉換率低之問題。
本發明之次一目的係提供一種包含該醱酵混合原料之水產飼料，係以醱酵混合原料補充醱酵豆粉所不足之甲硫胺酸。
緣此，本發明所運用之技術內容包含有：一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其包含：一前置步驟，係提供豆粉>蚯蚓粉之比例所成之混合原料，該混合原料之含水量為20~50%；一預處理步驟，將一枯草桿菌菌液與該混合原料以重量比例為1：15~1：12之條件進行混合，獲得一預處理混合原料；及一醱酵步驟，係將該預處理混合原料於溫
度為35~50℃之條件下培養，獲得一醱酵混合原料。
其中，於該預處理步驟所使用之枯草桿菌，係寄存於中華民國食品工業發展研究所，其寄存編號為BCRC 910556。
其中，前述混合原料之含水量為30%。
其中，該預處理步驟之枯草桿菌菌液濃度為1×106~1×108cfu/ml。
其中，前述醱酵步驟中，該醱酵時間為12~72小時。
其中，再進行一終止步驟，係對該醱酵混合原料進行一滅菌程序，使該醱酵混合原料中菌體死亡。
其中，該終止步驟係以100℃以上之溫度進行滅菌。
一種水產飼料，其特徵係包含以如申請專利範圍第1項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法所獲得之醱酵混合原料。
其中，該醱酵混合原料佔該水產飼料總重之60~100%。
其中，包含有重量百分比為60~100%之醱酵混合原料、0~20%之魚粉、10~20%之澱粉、0.1~2%之食用油、1~3%之維生素及1~3%之微量元素。
其中，該油脂係選自由魚油及大豆油所組成之群組。
首先，藉由本發明之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，能夠有效提高醱酵豆粉中所含粗蛋白及游離胺基酸的含量，進而提高取代習用魚粉的比例，而達到降低飼料成本之功效。
其次，本發明之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，可提高甲硫胺酸含量，具有提高飼料轉換率之功效，甚至可提高至取代率100%。
再者，本發明之包含該醱酵混合原料之水產飼料，係以該醱酵豆粉及蚯蚓粉作為蛋白質來源，不僅能夠提高該飼料中的游離胺基酸含量，更能夠達到降低飼料成本之功效。
S1‧‧‧前置步驟
S2‧‧‧預處理步驟
S3‧‧‧醱酵步驟
S4‧‧‧終止步驟電連接器
【圖1】本發明之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法的步驟方塊圖(一)。
【圖2】本發明之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法的步驟方塊圖(二)。
【圖3】表示水份含量對醱酵期間混合原料中之Bacillus subtilis E20增殖之影響的折線圖。
【圖4】表示水份含量對醱酵期間混合原料中之蛋白質含量之影響的折線圖。
【圖5】表示水份含量對醱酵期間混合原料中之脂肪含量之影響的折線圖。
【圖6】表示對白蝦餵食不同實驗飼料(FSFEM60、FSFEM80、FSFEM100組飼料)後，以溶藻弧菌進行感染試驗，觀察7天後各組之死亡率的直條圖。
為使本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂，下文特舉本發明之較佳實施例，並配合所附圖式，詳細說明如圖1所示，本發明醱酵混合原料之製備方法，係包含一前置步驟S1、一預處理步驟S2及一醱酵步驟S3。
該前置步驟S1，係將含有植物性蛋白質之豆粉及提高其中之甲硫胺酸含量之蚯蚓粉進行混合。本發明較佳實施例之豆粉來源係指含有高植物性蛋白質之豆類植物種子，較佳係選擇其中含有水產生物生長所必須之精胺酸、離胺酸及白胺酸的大豆粉，但不以此為限。
較佳地，本發明係提供500公克之混合原料，添加混合原料重量之20~50%的水，藉由調整含水量，使該混合原料的醱酵效率提高。
此外，為確保該醱酵步驟S3的醱酵效果，將該含水量為20~50%之混合原料進行一滅菌程序，如蒸氣滅菌或高溫滅菌，以去除該混合原料中的雜菌。
該預處理步驟S2，將一枯草桿菌菌液與該混合原料以重量比例為1：15~1：12之條件進行混合，獲得一預處理混合原料。本實施例較佳係以寄存於中華民國食品工業發展研究所，寄存編號為BCRC 910556之枯草桿菌(Bacillus subtilis)與該混合原料混合後，以該枯草桿菌進行該醱酵步驟S3，該枯草桿菌菌液較佳係培養至濃度為1×106~1×108cfu/ml，此時該枯草桿菌菌液中的菌體生長及代謝能力較強，而能夠有助於該豆粉之醱
酵效果；較佳地，本發明係提供50毫升之1×107cfu/ml枯草桿菌菌液，並將該50毫升之枯草桿菌菌液添加至含水量為20~50%之500公克的混合原料中，如此，使每公克之預處理混合原料中含有至少1×106cfu/g的菌量，以有效醱酵該預處理混合原料，可提高混合原料中生物可利用的營養物質含量，並能夠有效降低混合原料中的抗營養物質。
本實施例所使用混合原料中之豆粉，主要係含有如非澱粉多醣、寡糖、皂苷、植酸等營養抑制因子，而造成水產動物對營養素消化率不佳，及必需胺基酸等營養不均衡問題；因此，本發明係藉由可產生多種胞外酵素(如lipase、amylase、protease、nattokinase或phytase)的枯草桿菌之醱酵，可將該等營養抑制因子轉換成微生物可利用的營養或者菌體蛋白後，即可去除該等營養抑制因子，並且以此作為水產飼料的營養成分，如此，即可達到提高豆粉的經濟價值，以及減少水產飼料成本之功效。
本實施例所使用混合原料中之蚯蚓粉，其蚯蚓品種為赤子愛勝蚓(Eisenia fetida)，以其作為完整性蛋白之甲硫胺酸來源，以改善豆粉缺乏甲硫胺酸之問題，並藉由可產生多種胞外酵素(如lipase、amylase、protease、nattokinase或phytase)的枯草桿菌之醱酵，可改善蚯蚓粉之適口性差及溶血素的問題。
該醱酵步驟S3，係將該預處理混合原料於溫度為35~50℃之條件下培養12~72小時，獲得一醱酵混合原料。更詳言之，本發明係以40℃進行培養，該枯草桿菌於40℃下之代謝活性較高，藉此可提高該枯草桿菌醱酵該預處理豆粉之效率，並且獲得含有較高且較均衡之必需胺基酸之醱酵混合原料，且該醱酵混合原料係有利於水產動物的營養吸收，具有提
高飼料轉換率以促進動物生長之功效。至此，所獲得之醱酵混合原料因其消化利用率提高，在製成飼料後，可提高飼料中之魚粉使用量，進而降低成本。
請參照圖2所示，本發明醱酵混合原料之製備方法較佳係於該醱酵步驟S3後，再進行一終止步驟S4，係對該醱酵混合原料進行一滅菌程序，使該醱酵混合原料中菌體死亡。更詳言之，本實施例之終止步驟S4可以選擇高溫進行滅菌但不以此為限，例如，將該醱酵混合原料置於121℃之溫度20分鐘以上，確保該醱酵混合原料中的菌體死亡。如此，可以確保該醱酵混合原料中的菌體死亡，並且有利於將該菌體中如游離胺基酸之營養成分釋放出來，以便於水產動物攝取該醱酵混合原料中的營養成分，具有效提高該醱酵混合原料之營養成分被動物利用的效率。
終止步驟S4結束後，再以60℃烘箱將醱酵混合原料烘乾至水分低於10%。
本發明醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法所獲得的醱酵混合原料，係能夠作為一水產飼料的蛋白質原料，提供水產動物足夠的游離胺基酸以供其生長，並且有效改善飼料效益，而達到降低該等水產生物的飼料成本的功效。本實施例較佳係將該醱酵步驟S3或該終止步驟S4之醱酵混合原料的含水量降至10%以下，再依照水產動物種類選擇適當營養成分與該醱酵混合原料混合，例如將該醱酵混合原料與如表1所示之纖維素、澱粉、食用油、維他命及微量元素等成分進行混合，其中各成分之調配比例可依照所養殖的動物種類不同而調整，因此，該飼料的成分亦不以上述成分為限。
為證實本發明醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法中，藉由調控該前置步驟S1中混合原料的含水量、該枯草桿菌本身及其醱酵條件，確實能夠增加醱酵混合原料中的生物可利用營養，且將該醱酵混合原料應用於水產飼料中，可有效提高水產動物的飼料轉換率，遂進行以下試驗。
〔(A)水分含量對FSFEM醱酵影響〕
本試驗例(A)中以脫脂豆粕>蚯蚓粉之比例關係將兩者混合，秤混合物500g至2L玻璃燒杯內，分別添加混合物重量之20、30、40及50%的蒸餾水於燒杯內，每組進行3重複，以藥匙攪拌均勻後，使用鋁箔紙將玻璃燒杯口完全覆蓋，以滅菌釜121℃，滅菌20分鐘後，冷卻至室溫。回溫後，將滅菌混合物移至無菌操作台進行接菌，接菌量為50ml之B.subtilis E20(生菌數107cfu/ml)，接菌後以無菌藥匙攪拌均勻，置於40℃恆溫培養箱醱酵，期間一天需攪拌2次。在醱酵後之0、12、24、48以及72小時，各取10g樣品以測定B.subtilis E20之生菌數、原料粗蛋白和粗脂質含量，以了解醱酵結果。採樣前先以無菌藥匙均勻攪拌醱酵物，再採樣。生菌數分析是以無菌生理食鹽水，將樣品進行10倍連續稀釋後，取100μl於NA培養基上，以無菌L型玻璃棒進行塗盤，並置於40℃培養箱24小時，以肉眼判斷B.subtilis E20外觀型態，並計數。粗蛋白及粗脂肪是根據Association of Official Agricultural Chemists(A.O.A.C.)之方法進行。
請參照圖3所示，其係表示水份含量對醱酵期間混合原料中之Bacillus subtilis E20增殖之影響的折線圖，醱酵後12小時，加水量40%
和50%FSFEM的B.subtilis E20的菌數急遽上升，之後則趨於穩定；而20%及30%FSFEM之B.subtilis E20菌數成長較緩慢，但醱酵時間達48小時後，與加水量40%和50%FSFEM沒有顯著性差異。
請參照圖4所示，其係表示水份含量對醱酵期間混合原料中之蛋白質含量之影響的折線圖，加水量30、40以及50%之組別經過24小時醱酵後，粗蛋白質含量從醱酵前的43.8%分別上升至49.6±0.2%、49.7±0.3%和49.8±0.4%，醱酵至48小時後，粗蛋白則高達約51.1±0.5%、50.7±0.4%和52.0±0.3%，而加水量20%之組別，其粗白質含量上升趨勢緩慢，並與其他組別有顯著性差異，直到醱酵時間長達72小時，蛋白質含量才會上升至51.1±0.5%，與其他組別沒有顯著性差異。
請參照圖5所示，其係表示水份含量對醱酵期間混合原料中之脂肪含量之影響的折線圖，不同加水量進行混合物醱酵，其粗脂質含量於醱酵期間皆無顯著性差異。
由此可知，本實施例較佳係以水分含量20%~50%，醱酵時間為12~72小時作為醱酵步驟S3之醱酵條件。
〔(B)習用魚粉、豆粉、蚯蚓粉及醱酵豆粉與醱酵混合原料之營養組成參數比較〕
本試驗例(B)係以含水量為30%之豆粉及蚯蚓粉之混合原料，醱酵48小時後，以滅菌釜121℃，進行滅菌20分鐘，再以60℃烘箱烘至水分低於10%，粉碎成醱酵混合原料並進行一般成分和水解胺基酸分析。
請參照表2所示，本試驗例之FM組係未經醱酵魚粉，SBM組係未經醱酵豆粉，EM組係未經醱酵豆粉蚯蚓粉，FSBM為醱酵豆粉，
FSFEM為醱酵混合原料。
由表2可知，魚粉(FM)之粗蛋白含量為67.8%，粗脂質含量為7.3%，水解胺基酸總量為所有原料最高，其必需胺基酸和非必需胺基酸含量分別為33.9%及34.22%，且甲硫胺酸含量更高達2.4%。而豆粉(SBM，粗蛋白質為39.5%)經B.subtilis E20醱酵後，粗蛋白質增加了16.1%，但脂質、灰分及水分則沒有明顯改變，水解胺基酸總量則增加了8.4%。蚯蚓粉(EM)為高蛋白質原料，但低於魚粉，其粗蛋白為60.7%，粗脂肪含量為4.9%，是與魚粉(FM)粗成分最接近的原料，其甲硫胺酸含量為1.02%，雖然不足魚粉(FM)2.4%，但是高於SBM的0.59%。另外，醱酵豆粉與蚯蚓粉所成之混合原料(FSFEM)之粗蛋白、粗脂質、灰分及水分分別為49.8%、2.5%、6.8%及4.6%，其中，FSFEM的甲硫胺酸含量為0.85%，以FSFEM取代全魚粉飼料中60%、80%及100%之魚粉量後，其甲硫胺酸含量可介於0.71~0.89%(表3)，可滿足白蝦對飼料之甲硫胺酸建議需求量0.66%。
由此可知，本發明之醱酵混合原料的甲硫胺酸含量確實具有滿足白蝦對甲硫胺酸等營養的需求。
〔(C)成長試驗〕
本試驗例(C)係餵食白蝦不同醱酵混合原料取代率飼料並進行成長試驗，其中FM組代表全魚粉飼料，FSFEM60組代表醱酵混合原料(FSFEM)取代FM組飼料中60%之魚粉，FSFEM80組代表醱酵混合原料(FSFEM)取代FM組飼料中80%之魚粉，FSFEM100組代表醱酵混合原料(FSFEM)取代FM組飼料中100%之魚粉。
其白蝦選購至屏東縣白蝦繁養殖場的後期幼蟲，並以海水
(鹽度35‰)蓄養於屏東科技大學水產養殖系的養殖場內，蓄養用水泥池(6×2×1.2m)水量10噸，初期以豐年蝦一天餵食3次，一星期後以商業蝦料一天餵飼蝦苗2次，一直養至約3公分後，先以淡水淡化至25‰，再用於成長試驗。
如表4所示，成長試驗期間各組之水質參數維持在安全範圍內(表4)。養成期間各處理組之水溫(26.3~26.9℃)、pH(8.1~8.4)、總氨-氮(0.01~0.03mg L-1)、亞硝酸-氮(0.06~0.21mg L-1)及溶氧(6.1~6.3mg L-1)並無顯著性差異。
成長實驗共進行84天，試驗用水泥池為兩噸池，內含1.2噸25‰海水，每組皆有打氣與加溫設備，維持溶氧6mg L-1以及控制水溫於26~27℃，並設有單獨過濾器，以移除水中固型物。總計630隻白蝦(初重為0.22g±0.01)被隨機分配到七個組別，每組30隻，共3重複。實驗期間，每天餵食白蝦體重之10%飼料，一天餵食2次，分別為早上8點和下午4點餵食，投餵後1小時會將殘餌立即移除，並置於60℃烘箱乾燥，並秤重紀錄，以了解實際攝食量。試驗期間，每天會監測溶氧、水溫以及pH，每兩周會測量蝦重、水中氨-氮及亞硝酸-氮濃度，直到實驗結束。實驗結束後，會進行蝦子採收與秤重，並使用以下公式換算其活存率(Survival rate)、增重率(Weight gain)、飼料效益(Feed efficiency)、特定成長率(Special growth ratio)以及日攝食量(Daily feed intake)。
Survival rate(%)=(實驗後採收蝦數/實驗前放養蝦數)×100%
Weight gain(%)=((平均末重-平均初重)/平均初重)×100%
Feed efficiency=總增重/總飼料投餵量
Special growth rate(%)=((平均末重-平均初重)/飼養天數)×100%
Daily feed intake(g/shrimp/day)=(總攝食量/蝦數)/飼養天數
南美白蝦攝食不同實驗飼料(FSFEM60、FSFEM80、FSFEM100組飼料)之平均體重，如表5所示。實驗第14天時，FSFEM組與FM組之間的蝦子，成長沒有顯著性差異，但實驗第28天後，攝食FSFEM100的蝦子與控制組、FSFEM60及FSFEM80相比，成長有顯著下降。實驗結束後，攝食控制組、FSFEM60及FSFEM80飼料的蝦子並沒有顯著性差異，蝦子平均末重分別為3.8±0.24g、4.21±0.23g及3.54±0.1g，顯著高於攝食FSFEM100的1.88±0.03g。
又，如表6所示，白蝦攝食FM組飼料與攝食各組不同取代率之混合原料84天後，其存活率皆無顯著性差異。在增重率、特定成長率及日攝食量部分，白蝦攝食FSFEM60組和FSFEM80組與FM組相比沒有顯著性差異，但當FSFEM完全取代魚粉後，則會顯著低於FM組、FSFEM60組及FSFEM80組。而飼料效益部分，以FSFEM取代魚粉之組別與FM組皆無顯著性差異。
〔(D)蝦肉成分分析〕
本試驗例(D)係餵食白蝦不同醱酵混合原料取代率飼料，生長後分析其蝦肉成分，其中FM組代表全魚粉飼料，FSFEM60組代表醱酵混合原料(FSFEM)取代FM組飼料中60%之魚粉，FSFEM80組代表醱酵混合原料(FSFEM)取代FM組飼料中80%之魚粉，FSFEM100組代表醱酵混合原料(FSFEM)取代FM組飼料中100%之魚粉。
於成長實驗結束後，停止餵食1天，以隨機採集各組白蝦進行犧牲，以測得蝦肉組成成分分析。首先將白蝦冰暈後，將多餘水分擦乾，並完整去除蝦頭和蝦殼，依上述一般成分分析之步驟，分析蝦肉之水分、粗蛋白、粗脂質及灰分。
如表7所示，白蝦攝食全魚粉FM組飼料與FSFEM60、FSFEM80、FSFEM100組飼料84天後，其蝦肉組成皆無顯著性差異。水分含量介在76.6~76.9%，粗蛋白質含量介在19.1~19.9%，粗脂質含量介在0.71~0.8%，灰分含量介在1.4~1.5%。
由此可知，白蝦之肌肉組成不會因飼料中醱酵混合原料(FSFEM)的增加而有影響，。本試驗之不同實驗飼料(FSFEM60、FSFEM80、FSFEM100組飼料)中，其甲硫胺酸含量皆可滿足白蝦之最低需求量，可解釋為本發明所有組別的蝦肉成分含量皆無顯著差異。
〔(E)攻擊試驗〕
成長試驗結束後，進行病原菌攻擊實驗，確認餵食不同實驗飼料(FSFEM60、FSFEM80、FSFEM100組飼料)對蝦體健康的影響，並額外有一組為施打滅菌生理實驗水作為對照組。
其中所使用病原菌為Vibrio alginolyticus(溶藻弧菌)，其係南美白對蝦之病原菌，實驗用菌株係由感染溶藻弧菌之白蝦分離而得，並以20%甘油保存於-70℃。使用前以含1.5%NaCl之tryptic soy broth(TSB)液態培養基，以28℃，轉速100rpm培養24小時後。利用離心機以8000×g，4℃條件下離心20分鐘，收集細菌，並以0.85%滅菌生理食鹽水將菌液稀釋至適當濃度作為感染試驗用。注射10μl，注射部位為血竇處，蝦子感染時，
每隻蝦以成106cfu/g shrimp的感染濃度，注射後放回原本的水族缸，以觀察其死亡情形，在計觀察7天。實驗額外注射一組0.85%滅菌生理食鹽水為對照組。
如圖6所示，以生理食鹽水作為對照組，白蝦注射生理食鹽水後，死亡率為0%；白蝦注射溶藻弧菌，感染7天後，攝食全魚粉FM組飼料與不同實驗飼料(FSFEM60、FSFEM80、FSFEM100組飼料)之蝦子死亡率介於86.7~93.3%，各組間皆無顯著性差異。
藉由微生物醱酵處理可改善豆粉對動物免疫上的負面影響，因此本試驗以溶藻弧菌感染攝食不同實驗飼料的白蝦後，其死亡率沒有顯著性差異。
綜上所述，證實本發明之一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，可以改善蚯蚓的營養價與適口性問題。
本發明之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，能夠有效提高醱酵豆粉中所含粗蛋白及游離胺基酸的含量，進而提高取代習用魚粉的比例，而達到降低飼料成本之功效。
本發明之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，可提高甲硫胺酸含量，具有提高飼料轉換率之功效。
本發明之包含該醱酵混合原料之水產飼料，係以該醱酵豆粉及蚯蚓粉作為蛋白質來源，不僅能夠提高該飼料中的游離胺基酸含量，更能夠達到降低飼料成本之功效。
雖本發明已使用上述較佳實施例揭示，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內，相對上述實
施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
本發明係提供一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法及包含該醱酵混合原料之水產飼料，在產業上能被製造及使用，可供產業上利用，故本發明具有產業利用性。
S1‧‧‧前置步驟
S2‧‧‧預處理步驟
S3‧‧‧醱酵步驟
S4‧‧‧終止步驟
Claims (11)
- 一種醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其包含：一前置步驟，係提供豆粉>蚯蚓粉之比例所成之混合原料，該混合原料之含水量為20~50%；一預處理步驟，將一枯草桿菌菌液與該混合原料以重量比例為1：15~1：12之條件進行混合，獲得一預處理混合原料；及一醱酵步驟，係將該預處理混合原料於溫度為35~50℃之條件下培養，獲得一醱酵混合原料。
- 如申請專利範圍第1項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其中，於該預處理步驟所使用之枯草桿菌，係寄存於中華民國食品工業發展研究所，其寄存編號為BCRC 910556。
- 如申請專利範圍第1項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其中，前述混合原料之含水量為30%。
- 如申請專利範圍第1或2項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其中，該預處理步驟之枯草桿菌菌液濃度為1×106~1×108cfu/ml。
- 如申請專利範圍第1或2項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其中，前述醱酵步驟中，該醱酵時間為12~72小時。
- 如申請專利範圍第1項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其中，再進行一終止步驟，係對該醱酵混合原料進行一滅菌程序，使該醱酵混合原料中菌體死亡。
- 如申請專利範圍第5項如申請專利範圍第1項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法，其中，該終止步驟係以100℃以上之溫度進行滅菌。
- 一種水產飼料，其特徵係包含以如申請專利範圍第1項之醱酵豆粉及蚯蚓粉所成混合原料之製備方法所獲得之醱酵混合原料。
- 如申請專利範圍第7項所述之水產飼料，其中，該醱酵混合原料佔該水產飼料總重之60~100%。
- 如申請專利範圍第7項所述之水產飼料，其中，包含有重量百分比為60~100%之醱酵混合原料、0~20%之魚粉、10~20%之澱粉、0.1~2%之食用油、1~3%之維生素及1~3%之微量元素。
- 如申請專利範圍第9項所述之水產飼料，其中，該油脂係選自由魚油及大豆油所組成之群組。
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