TW201302799A - 新穎結合劑－藥物接合物（ＡＤＣｓ）及其用途（一） - Google Patents
新穎結合劑－藥物接合物（ＡＤＣｓ）及其用途（一） Download PDFInfo
- Publication number
- TW201302799A TW201302799A TW101114207A TW101114207A TW201302799A TW 201302799 A TW201302799 A TW 201302799A TW 101114207 A TW101114207 A TW 101114207A TW 101114207 A TW101114207 A TW 101114207A TW 201302799 A TW201302799 A TW 201302799A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- group
- hydrogen
- methyl
- indicates
- attachment
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 88
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 83
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 235
- 102000003735 Mesothelin Human genes 0.000 claims abstract description 45
- 108090000015 Mesothelin Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 736
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 736
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 460
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 396
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 337
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 241
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 228
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 195
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 186
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 173
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 172
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 169
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 152
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 135
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 123
- -1 4-hydroxy-3-nitrobenzyl Chemical group 0.000 claims description 117
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 117
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 103
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 claims description 99
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 95
- JJLKTTCRRLHVGL-UHFFFAOYSA-L [acetyloxy(dibutyl)stannyl] acetate Chemical group CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCCC[Sn+2]CCCC JJLKTTCRRLHVGL-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 93
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 91
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 claims description 91
- 125000000980 1H-indol-3-ylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[*])C2=C1[H] 0.000 claims description 80
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 76
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 71
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 71
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 71
- 125000003143 4-hydroxybenzyl group Chemical group [H]C([*])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 69
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 67
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 66
- 125000004343 1-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 60
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 claims description 57
- 125000004066 1-hydroxyethyl group Chemical group [H]OC([H])([*])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 56
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 54
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 54
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 53
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 53
- 125000003341 7 membered heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 52
- VOPWNXZWBYDODV-UHFFFAOYSA-N Chlorodifluoromethane Chemical compound FC(F)Cl VOPWNXZWBYDODV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- 125000000814 indol-3-yl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C([*])C2=C1[H] 0.000 claims description 49
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 claims description 47
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 46
- 125000006681 (C2-C10) alkylene group Chemical group 0.000 claims description 45
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 claims description 45
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 44
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 36
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 36
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 35
- 125000002373 5 membered heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 31
- 125000004070 6 membered heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 31
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 31
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 31
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 31
- PIGFYZPCRLYGLF-UHFFFAOYSA-N Aluminum nitride Chemical compound [Al]#N PIGFYZPCRLYGLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 125000004674 methylcarbonyl group Chemical group CC(=O)* 0.000 claims description 30
- CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N trichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)(Cl)Cl CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 claims description 28
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 28
- 125000006832 (C1-C10) alkylene group Chemical group 0.000 claims description 27
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 27
- 125000001960 7 membered carbocyclic group Chemical group 0.000 claims description 25
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 125000005913 (C3-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 23
- 125000000719 pyrrolidinyl group Chemical group 0.000 claims description 21
- RWRIWBAIICGTTQ-UHFFFAOYSA-N difluoromethane Chemical compound FCF RWRIWBAIICGTTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 20
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 17
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 15
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 13
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 12
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 12
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical group C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 125000003287 1H-imidazol-4-ylmethyl group Chemical group [H]N1C([H])=NC(C([H])([H])[*])=C1[H] 0.000 claims description 10
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 claims description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 9
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 9
- 125000004214 1-pyrrolidinyl group Chemical group [H]C1([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 8
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N benzene Substances C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N cysteic acid Chemical group OC(=O)C(N)CS(O)(=O)=O XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 5
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- VZXTWGWHSMCWGA-UHFFFAOYSA-N 1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical compound NC1=NC=NC(N)=N1 VZXTWGWHSMCWGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 4
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 4
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 3
- 150000004060 quinone imines Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000004008 6 membered carbocyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 2
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 claims description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 2
- 108700012439 CA9 Proteins 0.000 claims 4
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 claims 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 4
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims 4
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 claims 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 claims 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical compound O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- AEELXMHQIJJMKP-QWWZWVQMSA-N (2r,3r)-3-sulfanylbutane-1,2,4-triol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](S)CO AEELXMHQIJJMKP-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims 1
- UNXHWFMMPAWVPI-QWWZWVQMSA-N D-threitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 claims 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims 1
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 claims 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract description 4
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 abstract 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 36
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 25
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 17
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 14
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 11
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 9
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 9
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 9
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 8
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 6
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 6
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 6
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 6
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical class 0.000 description 6
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 5
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical class OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 4
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PBVAJRFEEOIAGW-UHFFFAOYSA-N 3-[bis(2-carboxyethyl)phosphanyl]propanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PBVAJRFEEOIAGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical class CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 3
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 3
- 239000007767 bonding agent Substances 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical class OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 229940082789 erbitux Drugs 0.000 description 3
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 2
- PAMIQIKDUOTOBW-UHFFFAOYSA-N 1-methylpiperidine Chemical compound CN1CCCCC1 PAMIQIKDUOTOBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DSXWYWXHYXKFTN-UHFFFAOYSA-N 2,4-diamino-2-(2-aminoethyl)butanoic acid Chemical compound NCCC(N)(C(O)=O)CCN DSXWYWXHYXKFTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- MHZGKXUYDGKKIU-UHFFFAOYSA-N Decylamine Chemical group CCCCCCCCCCN MHZGKXUYDGKKIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical class OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IDIDJDIHTAOVLG-VKHMYHEASA-N S-methylcysteine Chemical compound CSC[C@H](N)C(O)=O IDIDJDIHTAOVLG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical class OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940120638 avastin Drugs 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 2
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Chemical class CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 2
- 238000010931 ester hydrolysis Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical class CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 2
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 2
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 231100000057 systemic toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 125000003718 tetrahydrofuranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Chemical class OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 2
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 2
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 2
- AHPOMNDPBANYIB-YFKPBYRVSA-N (2S)-2-[(3-amino-3-oxopropyl)amino]pentanedioic acid Chemical compound NC(=O)CCN[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O AHPOMNDPBANYIB-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- BWBHIIJKOYBHON-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-(2-carboxyethylamino)pentanedioic acid Chemical compound OC(=O)CCN[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O BWBHIIJKOYBHON-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 125000006272 (C3-C7) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006569 (C5-C6) heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical group C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical class OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004678 1-methylpropylcarbonyl group Chemical group CC(CC)C(=O)* 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- HPBXBPRTXDLJLS-UHFFFAOYSA-N 2,3-diamino-2-(aminomethyl)propanoic acid Chemical compound NCC(N)(CN)C(O)=O HPBXBPRTXDLJLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJVNVLORPOBATD-UHFFFAOYSA-N 2,3-diamino-2-methylpropanoic acid Chemical compound NCC(N)(C)C(O)=O BJVNVLORPOBATD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XIGGORITFVMMTL-UHFFFAOYSA-N 2-(tert-butylamino)-3,3-dimethylbutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)NC(C(O)=O)C(C)(C)C XIGGORITFVMMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 101100025412 Arabidopsis thaliana XI-A gene Proteins 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Chemical class 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical class OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSUQNHDIZCZZIL-UHFFFAOYSA-N C1(=CC=CC=C1)C(N)C(=O)O.C1=CC=CC=C1 Chemical compound C1(=CC=CC=C1)C(N)C(=O)O.C1=CC=CC=C1 LSUQNHDIZCZZIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- GSNUFIFRDBKVIE-UHFFFAOYSA-N DMF Natural products CC1=CC=C(C)O1 GSNUFIFRDBKVIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical class OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017891 HER2 positive breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101500025419 Homo sapiens Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000415 L-cysteinyl group Chemical group O=C([*])[C@@](N([H])[H])([H])C([H])([H])S[H] 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical class O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical compound CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Chemical class OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- IDIDJDIHTAOVLG-UHFFFAOYSA-N S-methyl-L-cysteine Natural products CSCC(N)C(O)=O IDIDJDIHTAOVLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Chemical class [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000534944 Thia Species 0.000 description 1
- 231100000777 Toxicophore Toxicity 0.000 description 1
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001416177 Vicugna pacos Species 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005073 adamantyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)* 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Chemical class OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000732 arylene group Chemical group 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- FFBHFFJDDLITSX-UHFFFAOYSA-N benzyl N-[2-hydroxy-4-(3-oxomorpholin-4-yl)phenyl]carbamate Chemical compound OC1=C(NC(=O)OCC2=CC=CC=C2)C=CC(=C1)N1CCOCC1=O FFBHFFJDDLITSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000006251 butylcarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 229960002887 deanol Drugs 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical class CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009513 drug distribution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000029578 entry into host Effects 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000004672 ethylcarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000005549 heteroarylene group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940116978 human epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006328 iso-butylcarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C(*)=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical class OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Chemical class 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N methamphetamine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- WRVLBJXFSHALRZ-FUVGGWJZSA-N methyl (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoate Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 WRVLBJXFSHALRZ-FUVGGWJZSA-N 0.000 description 1
- LLAZQXZGAVBLRX-UHFFFAOYSA-N methyl 2,5-dioxopyrrole-1-carboxylate Chemical compound COC(=O)N1C(=O)C=CC1=O LLAZQXZGAVBLRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000004092 methylthiomethyl group Chemical group [H]C([H])([H])SC([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006252 n-propylcarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,2-disulfonic acid Chemical class C1=CC=CC2=C(S(O)(=O)=O)C(S(=O)(=O)O)=CC=C21 YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N nepidermin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 125000003566 oxetanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 102000036213 phospholipid binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091011000 phospholipid binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 125000003386 piperidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 230000007026 protein scission Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical class O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical group 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005888 tetrahydroindolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004632 tetrahydrothiopyranyl group Chemical group S1C(CCCC1)* 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
Abstract
本申請書係關於針對標靶間皮素(target mesothelin)之N,N-二烷基奧瑞他汀(N,N-dialkylauristatin)的結合劑-藥物接合物(ADC)、這些ADC之活性代謝物、製備這些ADC之方法、這些ADC於治療及/或預防疾病之用途，以及這些ADC於製造醫藥品供治療及/或預防疾病，特別是過度增生及/或血管新生疾病，例如癌症疾病之用途。此等治療可以單一治療或另與其他的醫藥品或另外的治療方法組合來施行。
Description
本申請書係關於針對標靶間皮素(target mesothelin)之N,N-二烷基奧利他汀(dialkylauristatin)的結合劑-藥物接合物(ADC)、這些ADC之活性代謝物、製備這些ADC之方法、這些ADC於治療及/或預防疾病之用途，以及這些ADC於製造醫藥品供治療及/或預防疾病，特別是過度增生及/或血管新生疾病，例如癌症疾病之用途。此等治療可以單一治療或另與其他的醫藥品或另外的治療方法組合來施行。
癌症疾病為不受控制的細胞在各種組織中生長之結果。在許多情況下這些新細胞穿過現存的組織(侵入性生長)，或其轉移至遠端器官。癌症疾病發生於廣泛的各種器官中，且疾病通常係以組織特異性的方式推進。因此「癌症疾病」名稱為一通稱，係描述一大群不同器官、組織和細胞類型之該定義疾病。
早期的腫瘤能以手術和放射線治療方法來移除。轉移的腫瘤一般僅可藉由化療劑給予減緩性治療。該情況下之目的係欲達到改善生活品質和延長剩餘生命期之最適組合。
目前以非經腸給藥之大部分的化療劑在腫瘤組織或腫瘤細胞通常不是靶向性，但取而代之的，因為其全
身性給藥係非特定性分佈在身體中，因此包括不希望暴露於該藥物之部位，例如健康的細胞、組織和器官。此可導致不欲的副作用及甚至嚴重的泛毒性效應，其然後常常限制該藥物的治療上有效劑量範圍或必須完全停止醫療。
這些化療劑在腫瘤細胞或緊鄰組織之改良和選擇性可利用性，及一方面有關增進效用，和另一方面將有毒副作用降至最低，因此已為多年來開發新化療劑的焦點。至今已做了許多嘗試來開發將藥物導入目標細胞之有效方法。例如，對相鄰細胞，最適化地連接藥物和細胞內目標及最小化細胞間的藥物分佈，仍然持續為困難的問題。
單株抗體，例如係適合用於腫瘤組織和腫瘤細胞之靶向定址。以此等藥物如曲妥珠單抗(trastuzumab)(Herceptin)、利妥昔單抗(rituximab)(Rituxan)、西妥昔單抗(cetuximab)(Erbitux)和貝伐單抗(bevacizumab)(Avastin)之活性為基礎，其因已核准用於個別、特定的腫瘤疾病治療，此等抗體對臨床癌症疾病治療之重要性在近幾年來已大大提升[參見，例如G.P.Adams和L.M.Weiner,Nat.Biotechnol.23,1147-1157(2005)]。因此，在所謂的免疫接合物之利益上亦顯著增加，例如前述的ADC，其中係將一針對腫瘤相關抗原之內化抗體經由一連接單位(連接子)與細胞毒性劑共價接合。在ADC導入腫瘤細胞後及隨後將接
合物裂解，將細胞毒性劑本身或由細胞毒性所形成的另外具細胞毒性活性之代謝物，於細胞內釋放，其中其能直接或選擇性產生其效用。相較於習用的癌症化療法，在此方法中，能大大地盡量限制對正常細胞的傷害[參見，例如J.M.Lambert,Curr.Opin.Pharmacol. 5,543-549(2005)；A.M.Wu和P.D.Senter,Nat.Biotechnol. 23,1137-1146(2005)；P.D.Senter,Curr.Opin.Chem.Biol. 13,235-244(2009)；L.Ducry和B.Stump,Bioconjugate Chem. 21,5-13(2010)]。
取代抗體，亦可用來自小分子藥物球之結合物作為選擇性與特定位置(標鈀)結合之結合物，例如受體，例如[參見，例如E.Ruoslahti等人，Science 279,377-380(1998)；D.Karkan等人，PLoS ONE 3(6),e2469(June 25,2008)]。又已知細胞毒性藥物和定址配體其在配體和藥物間具有一定義的裂解點供釋放藥物。此類之「預定的斷裂點」，例如可存在於胜肽鏈內，其可選擇性於特定位置被作用位置上的特定酵素裂解[參見，例如R.A.Firestone和L.A.Telan,US Patent Application US 2002/0147138]。
單株抗體之活性係於各種類型的癌症中驗證。因此，HERCEPTIN®和Erbitux®分別可成功地用於治療HER2-陽性的乳癌和EGFR-陽性的大腸直腸癌。
細胞毒性化合物與抗體偶合擴展另外改善癌症治療之可能性，因為這些接合物使腫瘤專一性的帶毒體堆
積及同時降低全身性毒性。有關活性和耐受性，以布妥昔單抗維多汀(brentuximab vedotin)於何杰金氏淋巴瘤之臨床研究，及以曲妥珠單抗於乳癌之臨床研究，已產生支持新抗體和抗其他腫瘤抗原之新ADC開發之高度有希望的結果
間皮素(mesothelin)前藥多肽為一種醣磷脂醯肌醇(GPI)固定糖基化細胞表面蛋白，其經蛋白裂解成30 kDa N-端分泌多肽(巨核細胞促進因子，MPF)及主要以GPI固定(mesothelin)存在細胞膜上之40 kDa C-端多肽(Chang,K.和I.Pastan,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,(1996)93(1)：136)。
由於此表面表現和過渡表現在許多類型的腫瘤，更特言之，卵巢癌、前列腺癌和間皮瘤中，及又由於在正常組織中高度限制的表現，間皮素為一適合的單株抗體治療之抗原(Argani,P.等人，Clin.Cancer Res.(2001)7(12)：3862；Hassan,R.，等人，Clin.Cancer Res.(2004)10(12 Pt 1)：3937)。間皮素確切的功能至今仍未知；間皮素基因缺陷小鼠未展現任何即時解剖、血液學上或生殖限制特質(Bera,T.K.和I.Pastan,Mol.Cell.Biol.(2000)20(8)：2902)。然而，間皮素為一高度變異蛋白，將其進行後轉譯修飾，例如蛋白酵素分解和糖基化(Hassan,R.，等人，Clin.Cancer Res.(2004)10(12 Pt 1)：3937)。因此治療抗體應能辨識與個別間皮素修飾作用無關的不變的表位。抗體可根據其所欲的性質來選擇，
例如不變的親和力或內化，例如以使用單株抗體一方面保證這些性質用於相關的所有抗體，及另一方面亦可長期一致地製造。
奧瑞他汀E(Auristatin E)(AE)和單甲基奧瑞他汀E(MMAE)為多拉司他汀(dolastatin)之合成的類似物，多拉司他汀為一特異性的直鏈偽胜肽，其起初係由海洋來源分離出，且在某些情況下對於腫瘤細胞具有非常強力的細胞毒性活性[其論述請參見，例如G.R.Pettit,Prog.Chem.Org.Nat.Prod. 70,1-79(1997)；G.R.Pettit等人，Anti-Cancer Drug Design 10,529-544(1995)；G.R.Pettit等人，Anti-Cancer Drug Design 13,243-277(1998)]。
然而MMAE具有相當高的全身毒性之缺點。對於改善腫瘤選擇性，MMAE更特別是與酵素性可裂解纈胺酸-瓜胺酸連接子共同用於ADC設置來供更多的標靶腫瘤治療[WO 2005/081711-A2；S.O.Doronina等人，Bioconjugate Chem. 17,114-124(2006)]。在蛋白質裂解後，MMAE較佳地係從對應的ADC於細胞內釋出。
然而當使用結合劑-藥物接合物(ADC)形式時，
MMAE與不具有酵素性可裂解的預定斷裂點之結合劑和藥物間的連接單位(連接子)並不相容[S.O.Doronina 等人，Bioconjugate Chem. 17,114-124(2006)]。
單甲基奧瑞他汀F(MMAF)為具有C-端苯丙胺酸單元之奧瑞他汀衍生物，相較於MMAE，其僅具中度的抗增生活性。此項事實非常可能係由於游離的羧酸基團，其極性和電荷對於此化合物進入細胞之能力有不利的影響。就此，MMAF之甲酯(MMAF-OMe)已描述為具有進入細胞能力之中性-電荷前藥衍生物，相較於MMAF，其對於各種增加許多數量級之癌細胞株具有活體外細胞毒性[S.O.Doronina等人，Bioconjugate Chem. 17,114-124(2006)]。可假設此效用係因MMAF本身所致，在前藥攝入細胞後，其藉由胞內酯水解快速地釋出。
然而，以簡單酯衍生為主的藥物化合物，由於與所希望的作用位置無關的非專一性酯水解，例如藉由存在於血漿中的酯酶，一般易有化學不穩定的風險；此非專一性的水解可能大大地限制此等化合物於治療上的有效性。
單甲基奧瑞他汀F(MMAF)及其各種酯衍生物和醯胺衍生物已揭示於WO 2005/081711-A2中。其他具有C-端經醯胺取代苯丙胺酸單元之奧瑞他汀類似物係描述於WO 01/18032-A2中。WO 02/088172-A2和WO 2007/008603-A1申請了MMAF類似物，其係關於苯丙胺酸之側鏈修飾作用，而WO 2007/008848-A2係申請其中苯丙胺酸之羧基基團經修飾之化合物。經由C-端連接之奧瑞他汀接合物最近已描述於WO 2009/117531-A1中[亦參見S.O.Doronina等人，Bioconjugate Chem.19,1960-1963(2008)]。
再者，奧瑞他汀衍生物例如MMAE和MMAF亦為許多腫瘤細胞所表現之轉運蛋白的基質，且其可能導致發展出對這些藥物之抗藥性。
本發明所提出的問題為提供新的結合劑-藥物接合物(ADC)，經由新的N,N-二烷基奧瑞他汀與創新的、適合的連接子和接合劑組合，其展現非常引人注目的活性性質，例如就其特定的腫瘤效應及/或降低胞內形成代謝物作為轉運蛋白相關基質之潛在性，且其因此適合用於治療及/或預防過度增生及/或血管新生疾病，例如癌症疾病。
本發明係提供通式(Ia)之結合劑-藥物接合物
其中n 為從1至50之數字，AK 為結合劑，§-G-L1-B-L2-§§基團為連接子，其中§係標示與AK基團之連接位置，及§§係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或
R1和R2與其相鍵結的碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫或甲基，R4 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或
R3和R4與其相鍵結的碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結的氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團中經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明化合物為式(Ia)和(I)之化合物以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物，與下式相同之化合物並涵蓋式(Ia)和(I)及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物，以及與下文操作實例相同之化合物並涵蓋式(Ia)和(I)及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物，與下文相同並涵蓋式(Ia)和(I)之化合物尚未為其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
依照其結構，本發明化合物可以不同的立體異構物形式存在，亦即組態異構物或其他，若適合，為構象異構物(鏡像異構物及/或非對映異構物，包括該等阻轉異
構物之案例)。本發明因此涵蓋鏡像異構物和非對映異構物及其各別的混合物。立體異構上同質的組成份可從此等鏡像異構物及/或非對映異構物中以已知的方法加以分離；就此目的，其最好係於非對掌或對掌相上使用層析法，更特言之，HPLC層析。
當本發明化合物可發生互變異構物形式時，本發明係涵蓋所有的互變異構型。
本發明亦涵蓋本發明化合物之所有適合的同位素變體。請了解，本發明化合物之同位素變體在本處係指一化合物，其中至少一個本發明化合物中的原子與另一個相同原子數但原子量與自然界正常或主要發生的原子量不同的原子交換。可併入本發明化合物之同位素之實例為該等氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘之同位素，例如2H(氘)、3H(氚)、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I和131I。本發明化合物特別的同位素變體，例如，更特言之，該等其中併入一或多個放射性同位素者，可能有利於，例如作用機制或藥物在身體內的分佈之研究；由於製備和偵測較容易，以3H或14C同位素標定之化合物特別適合這些目的。再者，併入同位素，例如氘，可造成某些治療上的利益，因化合物較大的代謝穩定性，例如延長在身體內的半衰期或降低所需的有效劑量；本發明化合物之此等修飾作用因此，若適當，亦構成本發明之較佳實施例。本發明化合物之同位素變
體可以熟習本項技術者已知的方法來製備，例如依照稍後於下文中所述之方法及操作實例中的生產製程，使用個別試劑及/或起始化合物之對應的同位素修飾作用。
本發明內文中較佳的鹽類為本發明化合物之生理上可接受鹽類。亦涵蓋雖然本身不適合醫藥應用，然而可用於，例如分離、純化本發明化合物之鹽類。
本發明化合物之生理上可接受鹽類涵蓋無機酸、羧酸和磺酸之酸加成鹽，實例有鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、延胡索酸、馬來酸及苯甲酸之鹽類。
本發明化合物之生理上可接受鹽類亦涵蓋習用鹼之鹽類，例如及較佳地鹼金屬鹽類(例如鈉和鉀鹽)、鹼土金屬鹽類(例如鈣和鎂鹽)或衍生自氨或有機胺具有1至16個C原子之銨鹽，例如及較佳地乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙基胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環己胺、二甲基胺基乙醇、7普卡因、二苯甲基胺、N-甲基哌啶、N-甲基嗎福啉、精胺酸、離胺酸及1,2-乙二胺。
本發明內文中之溶劑化物為該等經由與溶劑分子配位，形成固體或液體狀態複合物之本發明化合物形式。水合物為一種特定的溶劑化物形式，其中係與水進行配位。在本發明內文中較佳的溶劑化物為水合物。
再者，本發明亦涵蓋本發明化合物之前藥。本處術語「前藥」係指本身為生物上活化或非活化，但於其停留在體內期間轉變為本發明化合物(例如，藉由代謝或水解)之化合物。
在本發明內文中，除非另有說明，否則取代基係具有下列意義：在本發明內文中，(C1-C4)-烷基為具有1至4個碳原子之直鏈或支鏈烷基。可提及作為實例及較佳地為下列：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、1-甲基丙基和第三丁基。
在本發明內文中(C1-C4)-烷基羰基為具有1至4個碳原子之直鏈或支鏈烷基其係經由羰基連接。可提及作為實例及較佳地為下列：甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、異丙基羰基、正丁基羰基、異丁基羰基、1-甲基丙基羰基和第三丁基羰基。
在本發明內文中，亞烷基為具有所指之特定碳原子數之直鏈α,ω-二價烷基。可提及作為實例及較佳地為下列：伸甲基、乙-1,2-二基(1,2-伸乙基)、丙-1,3-二基(1,3-伸丙基)、丁-1,4-二基(1,4-伸丁基)、戊-1,5-二基(1,5-伸戊基)、己-1,6-二基(1,6-伸己基)、庚-1,7-二基(1,7-伸庚基)、辛-1,8-二基(1,8-伸辛基)、壬-1,9-二基(1,9-伸壬基)、癸-1,10-二基(1,10-伸癸基)。
在本發明內文中(C3-C7)-環烷基和3-至7-員碳環分別為具有3至7個碳原子之單環、飽和環烷基基團。可
提及作為實例及較佳地為下列：環丙基、環丁基、環戊基、環己基和環庚基。
在R19定義中之α-胺基的側基不僅涵蓋天然生成的α-胺基酸側基，亦包括這些α-胺基的類似物和異構物之側基。本處α-胺基酸可為L和D組態或另可以L型和D型之混合物存在。可給予的側基之實例有下列：甲基(丙胺酸)、丙-2-基(纈胺酸)、丙-1-基(正纈胺酸)、2-甲基丙-1-基(白胺酸)、1-甲基丙-1-基(異白胺酸)、丁-1-基(正白胺酸)、第三丁基(2-第三丁基甘胺酸)、苯基(2-苯基甘胺酸)、苯甲基(苯丙胺酸)、對羥基苯甲基(酪胺酸)、吲哚-3-基甲基(色胺酸)、咪唑-4-基甲基(組胺酸)、羥甲基(絲胺酸)、2-羥乙基(高絲胺酸)、1-羥乙基(蘇胺酸)、巰基甲基(半胱胺酸)、甲基硫基甲基(S-甲基半胱胺酸)、2-巰基乙基(高半胱胺酸)、2-甲基硫基乙基(甲硫胺酸)、胺甲醯基甲基(天門冬醯胺酸)、2-胺甲醯基乙基(麩醯胺酸)、羧甲基(天門冬胺酸)、2-羧乙基(麩胺酸)、4-胺基丁-1-基(離胺酸)、4-胺基-3-羥基丁-1-基(羥基離胺酸)、3-胺基丙-1-基(鳥胺酸)、2-胺基乙基(2,4-二胺基丁酸)、胺基甲基(2,3-二胺基丙酸)、3-胍基丙-1-基(精胺酸)、3-脲基丙-1-基(瓜胺酸)。在R19定義中，較佳的α-胺基酸側基為甲基(丙胺酸)、丙-2-基(纈胺酸)、2-甲基丙-1-基(白胺酸)、苯甲基(苯丙胺酸)、咪唑-4-基甲基(組胺酸)、羥甲基(絲胺酸)、1-羥乙基(蘇胺酸)、4-胺基丁-1-基(離胺酸)、3-胺基丙-1-基(鳥胺酸)、2-胺基乙基(2,4-二胺基
丁酸)、胺甲基(2,3-二胺基丙酸)、3-胍基丙-1-基(精胺酸)。各案例中L組態為較佳。
在本發明內文中4-至7-員雜環為具有總計4至7個環原子之單環、飽和雜環，其係含有一或二個來自N、O、S、SO及/或SO2系列的雜原子並經由一環碳原子或視需要環氮原子相連接。較佳的係給予具有一或二個來自N、O及/或S系列的環雜原子之5-至7-員雜環，更佳地具有一或二個來自N及/或O系列的環雜原子之5-至6-員雜環。可提及作為實例為下列：四氫氮唉基、氧雜環丁烷基、吡咯啶基、吡唑啶基、四氫呋喃基、噻基、哌啶基、哌基、四氫哌喃基、四氫噻哌喃基、嗎福啉基、噻嗎福啉基、六氫氮呯基和六氫-1,4-二氮呯。較佳地係給予吡咯啶基、四氫呋喃基、哌啶基、哌基、四氫哌喃基和嗎福啉基。
可分別以A、B、B1、D、G、L1、L2、L4、L6、R1、R2、R3、R4和R5表示之基團的化學式中，在各案中#6、*、**、#3、#1、#2、##1、##2、##3、##4、##5、##6、##7、##8、***、****、#4、#5、#6、#7、#8或#9符號所在的直線端點並非碳原子或CH2基團，而是為與所分派的原子相鍵結之部分，於此位與A、B、B1、D、G、L1、L2、L4、L6、R1、R2、R3、R4或R5相鍵結。
在本發明內文中，所有出現多次的基團具有其各自獨立的定義。若本發明化合物上的基團係經取代，除非另有說明，否則該等基團可經一或多次取代。經一或多
個相同或不同的取代基取代為較佳。特佳的係經一個取代基取代。
在本發明內文中，所用的術語除非另有說明，否則具有下列定義：術語「連接子」在最廣泛的概念下係理解為包括一共價鍵或一系列連接接合劑和藥物之原子的化學單元。術語「連接子」請了解在本發明概念下較佳地為共價連接接合劑和藥物之一系列原子。再者，連接子可例如以二價化學單元表示，例如亞烷基、亞芳基、亞雜芳基、亞雜環基、二羰酸酯、二羰酸醯胺。
術語「結合劑」在最廣泛的概念下係理解為與存在特定目標細胞族群中之標靶分子相結合，以結合劑-藥物接合物提出之分子。術語「接合劑」應以最廣泛的解釋來理解，並涵蓋，例如卵磷酯、能與特定糖鏈結和的蛋白或磷脂質結合蛋白。此等結合劑包括，例如高分子量蛋白(結合蛋白)、多肽或胜肽(結合胜肽)、非胜肽(例如適體(aptamer)論述文獻(US5,270,163)Keefe AD.，等人之回顧文獻，Nat.Rev.Drug Discov.2010；9：537-550)，或維生素)及所有其他細胞結合分子或物質。結合蛋白為，例如抗體和抗體片段或抗體模擬物，例如親和體(affibody)、adnectin、抗運載蛋白(anticalin)、DARPin、高親和多聚體(avimer)、奈米抗體(nanobodies)(論述文獻Gebauer M.等人，Curr.Opinion in Chem.Biol.2009；13：245-255；Nuttall S.D.等人，Curr.
Opinion in Pharmacology 2008；8：608-617)。結合胜肽有，例如配體-受體對之配體，例如配體-受體對VEGF/KDR之VEGF，例如配體-受體對運鐵蛋白/運鐵蛋白受體之運鐵蛋白，或細胞激素/細胞激素受體，例如配體-受體對TNFα/TNFα受體之配體TNFα。
依照本發明，較佳的結合劑(更特言之人類，單株抗體)為與間皮素結合之抗體或抗原結和抗體片段。在抗-間皮素抗體之案例中，換言之每個抗體分子之帶毒體(toxophore)分子數目較佳地係在從1至10個，更佳地2至8個之範圍內。
「標靶分子」在最廣泛的概念下係理解為存在目標細胞族群中並可為蛋白(例如生長因子之受體)之分子或非胜肽分子(例如糖或磷脂質)。較佳地其為一受體或抗原。
術語「胞外」標靶分子係描述與細胞相連及位於細胞外之標靶分子或位於細胞外之標靶分子部分，亦即結合劑可與完整細胞於胞外的標靶分子結合。胞外標靶分子可固定在細胞膜中或可為細胞膜之部分。熟習技術者已了解辨識胞外標靶分子之方法。對於蛋白，此可經由測定跨膜區和此蛋白在膜中之定向來進行。此資料一般係記錄在蛋白資料庫中(例如SwissProt)。
術語「癌標靶分子」係描述，相較於相同組織類型之非癌細胞，其係多重存在一或多種癌細胞類型上之標靶分子。相較於相同組織類型之非癌細胞，癌症標靶分
子較佳地係選擇性存在一或種癌細胞類型上，其中「選擇性」，相較於相同組織類型之非癌細胞，係描述至少二倍堆積在癌細胞上(選擇型癌標靶分子)。使用癌標靶分子得以用本發明接合物進行選擇性癌細胞治療。
結合劑可經由一鍵與連接子連接。從文獻已知各種有機分子與抗體共價結合(接合)之可能性。結合劑之連接可藉由結合劑之雜原子來進行。可用於連接之本發明結合劑之雜原子有硫(在一實施例中係經由結合劑的巰基基團)、氧(依照本發明係藉由結合劑的羧基或羥基基團)和氮(在一實施例中係經由結合劑的一級或二級胺基團或醯胺基團)。依照本發明較佳的為帶毒體與抗體經由抗體的半胱胺酸殘基之硫原子，及/或經由一或多個抗體的離胺酸殘基之NH基團接合。這些雜原子可存在天然的結合劑中或可藉由化學或分子生物之方法來導入。依照本發明，結合劑與帶毒體之連接對於結合劑與標靶分子之結合活性僅有極少的影響。在一較佳的實施例中，此連接對於結合劑與標靶分子之結合活性並無影響。
依照本發明，術語「抗體」係以最廣泛的概念理解並涵蓋免疫球蛋白分子，實例有完整或經修飾單株抗體、多株抗體或多專一性抗體(例如雙專一性抗體)。免疫球蛋白較佳地係包括具有四條多肽鏈，二條重鏈(H鏈)和二條輕鏈(L鏈)之分子，其典型地係以雙硫橋連接。各重鏈包括一重鏈可變區(縮寫VH)和一重鏈恆定
區。重鏈恆定區可涵蓋，例如CH1、CH2和CH3三個區。各輕鏈包括一可變區(縮寫VL)和一恆定區。輕鏈之恆定區包括一個區(縮寫CL)。VH和VL區可進一步細分為具有超變異性之區域，亦稱為互補決定區(縮寫CDR)及具有低序列變異性之區域(「架構區」，縮寫為FR)。各VH和VL區典型地係由三個CDR和至高四個FR所組成。例如，以下列胺基端至羧基端之順序：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。抗體可由任何適合用作抗體之物種來製得，例如兔、羊駝、駱駝、小鼠或大鼠。在一實施例中該抗體為人類或鼠科來源。抗體，例如可為人類、人源化或嵌合的。
術語「單株」抗體係指從一群實質上均質性抗體得來之抗體，亦即該群族的個別抗體為相同，但是少數可能發生天然的突變。單株抗體以高專一性辨識單一抗原結合位。術語「單株抗體」並非指特殊的製造方法。
術語「全(intact)」抗體係指不僅包括一抗原結合區亦包括輕鏈和重鏈恆定區之抗體。恆定區可為天然生成的區域或其中多數胺基酸位置經改變之其變體。
術語「經修飾全」抗體係指經由其胺基端或羧基端，藉由共價鍵(例如胜肽連接鏈)與另外非源自抗體的多肽或蛋白融合之全抗體。再者，抗體可藉由於定義位置導入反應性半胱胺酸加以修飾，以便於促使與帶毒體結合(參見Junutula等人Nat Biotechnol.2008 Aug；26(8)：925-32)。
術語「人類」抗體為可得自人類之抗體或為合成的人類抗體。「合成的」人類抗體為其部分或整體可從合成的序列經電腦模擬，以人類抗體序列分析為基準所得來之抗體。人類抗體可，例如從人類來源之抗體序列庫分離出的核酸所編碼。此等抗體之一實例可參見Söderlind等人，Nature Biotech.2000,18：853-856。
術語「人源化」或「嵌合」抗體係描述由非人類和人類序列組份所組成的抗體。在這些抗體中，部分的人類免疫球蛋白序列(受體)被非人類免疫球蛋白之序列組份(供體)所取代。在許多案例中，供體為鼠科免疫球蛋白。就人源化抗體，受體CDR之胺基酸係被供體之胺基酸取代。在某些案例中，架構之胺基酸亦被對應的供體胺基酸取代。在某些案例中，人源化抗體含有並非存在受體或供體之胺基酸且其係於抗體最適化期間插入。就嵌和抗體之情況，供體免疫球蛋白之可變區係與人類抗體之恆定區融合。
如本處所用，術語互補決定區(CDR)係指抗體可變區中與抗原結合所必須的胺基酸。每個可變區典型地具有三個CDR區，經鑑定為CDR1、CDR2和CDR3。各CDR區可包括根據Kabat定義之胺基酸及/或根據Chotia所定義之超變異環的胺基酸。Kabat之定義係涵蓋，例如輕鏈可變區之大約24-34(CDR1)、50-56(CDR2)和89-97(CDR3)胺基位置及重鏈可變區之31-35(CDR1)、50-65(CDR2)和95-102(CDR3)之區域(Kabat
等人，Sequences的Proteins的Immulological Interest,5th Ed.Public Health Service,National Institutes的Health,Bethesda,MD.(1991))。Chotia之定義係涵蓋，例如輕鏈可變區之大約26-32(CDR1)、50-56(CDR2)和91-96(CDR3)胺基位置及重鏈可變區之26-32(CDR1)、53-55(CDR2)和96-101(CDR3)之區域(Chothia和Lesk；J Mol Biol 196：901-917(1987))。在某些案例中，CDR可包括來自Kabat和Chotia所定義的一CDR區之胺基酸。
依照重鏈恆定區之胺基酸序列，抗體可分成不同的種類。有五種主要的全抗體：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中許多可再分成另外的亞種(同型物)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。對應不同種類之重鏈恆定區經鑑定為[alpha/α]、[delta/δ]、[epsilon/ε]、[gamma/γ]和[mu/μ]。抗體三元結構和亞單位結構已為所知。
術語抗體/免疫球蛋白之「功能性片段」或「抗原結合抗體片段」係定義為抗體/免疫球蛋白之片段(例如IgG之可變區)，其進一步涵蓋抗體/免疫球蛋白之抗原結合區。抗體之「抗原結合區」典型地係涵蓋一或多個抗體之超變異區列如CDR、CDR2及/或CDR3區。然而，抗體之「架構」或「骨架」區亦可參與有關抗體與抗原之結合。架構區形成CDR之骨架。抗原結合區較佳地係涵蓋至少4至103輕鏈可變區之胺基酸和5至
109個鏈可變區之胺基酸，更佳地，3至107輕鏈可變區之胺基酸和4至111個重鏈可變區之胺基酸，特佳地係給予完整的輕鏈和重鏈可變區，亦即VL之1-109和VH之1至113胺基酸(編號係根據WO97/08320)。
本發明之「功能性片段」或「抗原結合片段」係涵蓋(非決定性)Fab、Fab’、F(ab’)2和Fv片段、雙抗體、單區抗體(DAb)、直鏈抗體、抗體的個別鏈(單鏈Fv，縮寫為ScFv)；和多專一性抗體，例如雙和三專一性抗體，例如由抗體片段C.A.K Borrebaeck,editor(1995)Antibody Engineering(Breakthroughs in Molecular Biology),Oxford University Press；R.Kontermann & S.Duebel,editors(2001)Antibody Engineering(Springer Laboratory Manual),Springer Verlag)所形成。「多專一性」或「多功能性」抗體以外的抗體為該等具有相同結合位之抗體。多專一性抗體可對不同的抗原表位具專一性，或可對一個以上的抗原之表位具專一性(參見，例如WO 93/17715；WO 92/08802；WO 91/00360；WO 92/05793；Tutt，等人，1991,J.Immunol.147：60 69；美國專利第4,474,893；第4,7 14,68 1號；第4,925,648號；第5,573,920號；第5,601,8 19；或Kostelny等人，1992,J.Immunol.148：1547 1553)。F(ab’)2或Fab分子可建構成使發生在Ch1和CL區間的分子內雙硫鍵相互作用之數目降低或另外完全防止。
「功能性片段」或「抗原結合抗體片段」可與非源自抗體之另外的多肽或蛋白經由其胺基端或羧基端，藉由共價鍵(例如胜肽連接鏈)融合。再者，抗體和抗原結合片段可藉由於定義位置導入反應性半胱胺酸加以修飾，以便於促使與帶毒體結合(參見Junutula等人Nat Biotechnol.2008 Aug；26(8)：925-32)。
多株抗體可以本項技術之一般技術者已知的方法來製備。單株抗體可以本項技術之一般技術者已知的方法來製備(Köhler及Milstein,Nature,256,495-497,1975)。人類和人源化單株抗體可以本項技術之一般技術者已知的方法來製備(Olsson等人，Meth Enzymol.92,3-16或Cabilly等人US 4,816,567或Boss等人US 4,816,397)。
本項技術之一般技術者已知各種用於製備人類抗體和其片段之方法，例如藉由基因轉殖小鼠(N Lonberg 和D Huszar,Int Rev Immunol.1995；13(1)：65-93)或噬菌體表現技術(Clackson等人，Nature.1991 Aug 15；352(6336)：624-8)。本發明之抗體可得自藉由匯集大量健康自願者之大量抗體的胺基酸序列所組成之重組的抗體庫。抗體亦可藉由已知的重組DNA技術來製造。抗體之核酸序列可以慣用的定序來取得或可得自公共的資料庫。
「分離的」抗體或結合劑係經純化以移除其他的細胞組成份。可能干擾診斷或治療效用之沾染的細胞組成
份有，例如酵素、荷爾蒙或其他細胞之胜肽和非胜肽性組成份。較佳的抗體或結合劑，相對於抗體或結合劑為已純化至95%以上程度者(例如以Lowry法，UV-Vis光譜或以SDS毛細管電泳測定)。再者，抗體係經純化至可能測定至少15個胺基端或內部胺基酸序列之胺基酸程度，或經純化至均質性，該均質性係以SDS-PAGE於還原或非還原條件所測(偵測可藉由馬考斯藍染色(Coomassie Blau staining)或較佳地以銀著色)。然而，抗體一般係以一或多個純化步驟來製備。
術語「專一性結合」係指與預定的抗原/標靶分子結合之抗體或結合劑。抗體或結合劑之專一性結合典型地係具有至少10-7 M之親和力(為Kd值；亦即，較佳地具有小於10-7M之Kd值)，其中該抗體或結合劑對於預定的抗原/標靶分子具有至少比對非專一性抗原/標靶分子(例如牛血清白蛋白或酪蛋白)高二倍的親和力，其中非專一性抗原/標靶分子並非預定的抗原/標靶分子或密切相關之抗原/標靶分子。
專一性抗癌細胞抗原之抗體較佳地可由本項技術之一般技術者藉由其熟悉的方法(例如重組表現)或可由市面取得的(例如來自得過默克公司(Merck KGaA))方法來製備。用於癌症治療之已知的市售抗體之實例有Erbitux®(西妥昔單抗，Merck KGaA)、Avastin®(貝伐單抗，Roche)和Herceptin®(曲妥珠單抗，Genentech)。曲妥珠單抗為IgG1κ型之重組的人源化單株抗體，其在細胞
分析中(Kd=5 nM)係以高親和力與人類表皮生長因子之胞外區結合。該抗體係於CHO細胞中以重組來產生。
式(I)化合物代表式(Ia)化合物之亞群。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為從1至50之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為結合劑，(較佳地抗-間皮素抗體)其係經由結合劑之硫原子與G基團鍵結，AK2 為結合劑，(較佳地抗-間皮素抗體)其係經由結合劑之氮原子與G基團鍵結，當K=AK1時，G為下式之基團，
其中#1 係標示與結合劑之硫原子連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或
當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基、下式之基團
其中m 為從2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L6 為一鍵或下式之基團
其中
##7 係標示與羰基基團之連接位置，##8 係標示與L1B之連接位置，R33 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁基氧基羰基或苄氧基羰基，R34 為氫或甲基，R29 為氫或(C1-C4)-烷基，R30 為氫或(C1-C4)-烷基，或R29和R30與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R31 為氫或(C1-C4)-烷基，R32 為氫或(C1-C4)-烷基，或R31和R32與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，L1B 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，及其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O或NH，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為一鍵或下式之基團，
其中
*** 係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，R28 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁基氧基羰基或苄氧基羰基，Q1 為4-至7-員雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R14 為氫或(C1-C4)-烷基，R15 為氫或(C1-C4)-烷基，或R14和R15與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R16 為氫或(C1-C4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，
R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，R27 為氫或(C1-C4)-烷基，R36 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，R37 為氫或甲基，或R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳
原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯基甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，
#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀，視需要經取代之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫或甲基，R4 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯基甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中
#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基取代或
式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至50之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為結合劑，其係經由結合劑之硫原子與G基團鍵結，AK2 為結合劑，其係經由結合劑之氮原子與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之硫原子的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基、下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，,##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，B1 為下式之基團，
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L6 為一鍵或下式之基團
其中##7 係標示與羰基基團之連接位置，##8 係標示與L1B之連接位置，R33 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，R34 為氫或甲基，R29 為氫或(C1-C4)-烷基，R30 為氫或(C1-C4)-烷基，或R29和R30與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R31 為氫或(C1-C4)-烷基，R32 為氫或(C1-C4)-烷基，或R31和R32與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，L1B 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，及其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一
(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O或NH，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，
R25 為氫或甲基，R28 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，Q1 為4-至7-員雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R14 為氫或(C1-C4)-烷基，R15 為氫或(C1-C4)-烷基，或R14和R15與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R16 為氫或(C1-C4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，
R27 為氫或(C1-C4)-烷基，R36 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，R37 為氫或甲基，或R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中
#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基R3 為氫或甲基，R4 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，
或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可於苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至50之數字，
AK 為AK1或AK2其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑的半胱胺酸殘基之連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基、下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵，L6 為一鍵或下式之基團
其中##7 係標示與羰基基團之連接位置，##8 係標示與L1B之連接位置，R33 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R34 為氫或甲基，R29 氫，R30 氫，R31 氫或甲基，R32 氫或甲基，L1B 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，及
其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，
R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為一4-至7-員雜環，R14 為氫，R15 為氫，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R18 為氫，R19 為氫、甲基、丙-2-基、2-甲基丙-1-基或1-甲基丙-1-基，R20 為氫或甲基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫或甲基，R27 為氫，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為氫或甲基，或
R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其在苯基基團上可經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至20之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基、下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中
##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵，L6 為一鍵或下式之基團
其中##7 係標示與羰基基團之連接位置，##8 係標示與L1B之連接位置，R33 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R34 為氫或甲基，R29 為氫，R30 為氫，R31 為氫或甲基，R32 為氫或甲基，L1B 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，及其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為4-至7-員雜環，
R14 為氫，R15 為氫，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R18 為氫，R19 為氫、甲基、丙-2-基、2-甲基丙-1-基或1-甲基丙-1-基，R20 為氫或甲基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫或甲基，R27 為氫，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為氫或甲基，或R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，
#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可於苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，
R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中
#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基、下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中
*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為哌啶-1,4-二基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，
R37 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團，
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基之基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9或-CH2-O-R11之基團其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，R11 為苄基，其可在苯基上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團，
其中#9 係標示與-CHCH2苯基之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基、下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2基團之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，
****係標示與L1之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為哌啶-1,4-二基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，
R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，R11 為苄基，其可在苯基上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHCH2苯基之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為如上所示之通式(Ia)的結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK2，其中AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，G 為羰基，L1 為一鍵，
B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團其中
R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫，R9 為氫或苄基，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK2，其中AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，G 為羰基，L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，
##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫，R9 為氫或苄基，R35 為甲基，
以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為如上所示之通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1，其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，L1 為一鍵、直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，
其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，L2 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需
要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫，R9 為氫或苄基，
R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1，其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，L1 為一鍵、直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，
##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，L2 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，
#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，
R8 為氫，R9 為氫或苄基，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
另外本發明亦提供式(XXXa)之化合物
其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基、下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L6 為一鍵，R29 為氫或(C1-C4)-烷基，R30 為氫或(C1-C4)-烷基，或R29和R30與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R31 為氫或(C1-C4)-烷基，R32 為氫或(C1-C4)-烷基，或R31和R32與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，L1B 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，其其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O或NH，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為一鍵，Q1 為4-至7-員雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R14 為氫或(C1-C4)-烷基，R15 為氫或(C1-C4)-烷基，或R14和R15與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R16 為氫或(C1-C4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，
R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，R27 為氫或(C1-C4)-烷基，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單環或雙環、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫或甲基，R4 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，
其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，R35 為甲基或羥基，
以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中又另外較佳的為式(XXXa)之化合物，其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基、下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵，L6 為一鍵，R29 為氫，R30 為氫，R31 為氫或甲基，
R32 為氫或甲基，L1B 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，及其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵，R14 為氫，R15 為氫，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R23 為甲基，R24 為氫或甲基，
L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，
#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHCH2苯基之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中又另外特佳的為式(XXXa)之化合物，其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵或直鏈(C2-C6)-亞烷基，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為一鍵，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫，R8 為氫，R9 為氫，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
較佳的本發明之主題為上文所示之式(XXXa)化合物，其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結
之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵或直鏈(C2-C6)-亞烷基，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為一鍵，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基，4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或
R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團，
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫，R8 為氫，R9 為氫，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明另外係提供式(XXXI)化合物
其中L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基、下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L6 為一鍵，R29 為氫或(C1-C4)-烷基，R30 為氫或(C1-C4)-烷基，或R29和R30與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R31 為氫或(C1-C4)-烷基，R32 為氫或(C1-C4)-烷基，或R31和R32與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，L1B 為直鏈(C2-C10)-亞烷基，
及其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2基團之連接位置，P 為O或NH，Q1 為4-至7-員雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，R20 為氫或(C1-C4)-烷基，
或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R27 為氫或(C1-C4)-烷基，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫，羥基或苄氧基，R3 為氫或甲基，R4 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，
其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，
R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中亦較佳的為式(XXXI)之化合物，其中L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，R18 為氫，R19 為甲基、丙-2-基、2-甲基丙-1-基或1-甲基丙-1-基，
R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R27 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,4關係的二個碳原子，同時包括任何位於其間的碳原子可經橋聯，形成一苯基環，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，
R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，
R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHCH2苯基之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中亦特佳的為式(XXXI)之化合物，其中L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫，R8 為氫，R9 為氫，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明較佳的主題為如上所示之式(XXXI)化合物，其中
L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫，R8 為氫，R9 為氫，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
特佳的為由下列基團選出之下列式(XXXa)和(XXXI)化合物：N-[6-(3-{[(2R)-2-胺基-2-羧乙基]巰基}-2,5-二側氧吡咯啶-1-基)己基]-N-甲基-L-纈胺醯基，-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺，N-[6-(3-{[(2R)-2-胺基-2-羧乙基]巰基}-2,5-二側氧吡咯啶-1-基)己基]-N-甲基-L-纈胺醯基，-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺，
N-(6-{[(5S)-5-胺基-5-羧基戊基]胺基}-6-側氧己基)-N-甲基-L-纈胺醯基，-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽，N-(6-{[(5S)-5-胺基-5-羧基戊基]胺基}-6-側氧己基)-N-甲基-L-纈胺醯基，-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明另外係提供通式(I)之結合劑-藥物接合物
其中n 為1至50之數字，AK 為結合劑，§-G-L1-B-L2-§§基團為連接子，
其中§係標示與AK基團之連接位置，及§§係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，
R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或為下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
較佳的本發明主題為通式(I)之結合劑-藥物接合
物，其中n 為1至50之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為結合劑，其係經由結合劑之硫原子與G基團鍵結，AK2 為結合劑，其係經由結合劑之氮原子與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之硫原子的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基或為下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，
其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或為下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O或NH，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為一鍵或為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，Q1 為4-至7-員雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R14 為氫或(C1-C4)-烷基，R15 為氫或(C1-C4)-烷基，或R14和R15與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R16 為氫或(C1-C4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R23 為(C1-C4)-烷基，
R24 為氫或(C1-C4)-烷基，R27 為氫或(C1-C4)-烷基，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，D具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
較佳的本發明主題為通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至50之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為抗體或抗原結合抗體片段且係經由硫原子與G基團鍵結，
AK2 為抗體或抗原結合抗體片段且係經由氮原子與G基團鍵結，G、L1、B、L2和D具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
較佳的本發明主題為通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至20之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與T1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1至2個甲基取代基取代B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，
****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，Q1 為4-至6-員碳環或哌啶-1,4-二基，R14 為氫，R15 為氫，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R18 為氫，R19 為氫、甲基、丙-2-基、2-甲基丙-1-基或1-甲基丙-1-基，R20 為氫或甲基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與鄰氮原子之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1至2個甲基取代基取代，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，
其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中
R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
特佳的本發明主題為通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1至2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，
****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，Q1 為哌啶-1,4-二基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或
R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)苯基之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明另外亦提供式(XXX)之化合物
其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基或為下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1基團之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O或NH，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基Q1 為3-至7-員碳環或4-至7-員氮雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員氮雜環，
R14 為氫或(C1-C4)-烷基，R15 為氫或(C1-C4)-烷基，或R14和R15與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R16 為氫或(C1-C4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，R27 為氫或(C1-C4)-烷基，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或為下式之基團
其中
p 為為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，
T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之
基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫或羥基，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中另外特佳的亦為式(XXX)之化合物，其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基或下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1至2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵，R14 為氫，R15 為氫，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R23 為甲基，R24 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為1-羥乙基、苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結之碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫，R4 為苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結之碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其可在苯基基團上經甲氧基羰基或羧基取代，
R5 為氫或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)苯基之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基或式-S(O)2OH之基團取代，R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的亦為式(Ia)之化合物，其中n=1-20，更佳地n=1-10及非常佳地n=2-8。
在本發明內文中特佳的亦為式(Ia)之化合物，其中AK為AK1其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與l1基團之連接位置，及
n、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中AK 為AK2其中AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，G 為羰基，及n、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦給予式(Ia)之化合物，其中AK 為AK1其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，及n、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦給予式(Ia)之化合物，其中AK 為AK2其中AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，G 為羰基，及n、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦給予式(Ia)之化合物，其中AK 為AK2其中AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、
MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，G 為羰基，L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，n、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦給予式(Ia)之化合物，其中AK 為AK1其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團相連結，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，L1 為一鍵、直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C3-C5)-亞烷基可經1至2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與之L1連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，L2 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，及n、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中
L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，及n、AK、Cys、G、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中L1 為直鏈(C1-C10)-亞烷基或下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L1之連接位置，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，R28 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，Q1 為4-至7-員雜環，R16 為氫或(C1-CC4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或
R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，R36 為氫、(C1-C4)-烷基羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，R37 為氫或甲基，或R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個各自獨立由甲基、羥基和苄基組成之群中選出之取代基取代，及n、AK、G、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中L1 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或
R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為氫或甲基，或R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，及n、AK、G、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1至2個甲基取代基取代，
B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，
Q1 為哌啶-1,4-二基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中L1 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，
B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R2w為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，R23 為甲基，R24 為氫，
R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為氫或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，L1 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，及n、AK1、Cys、D、R16和R17具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)和(XXXa)之化合物，其中B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L1之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，
L4 為一鍵，n、AK、Cys、G、L1、L2、D、R16、R17和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中L1 為一鍵、直鏈(C3-C5)-亞烷基或為下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為一鍵，R16 為氫，R17 為氫，
L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，n、AK、Cys、G、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，n、AK、Cys、G、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中
L1 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為一鍵，R16 為氫，R17 為氫，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，
##4 係標示與氮原子之連接位置，n、AK、Cys、G、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中n 為2至8之數字，較佳地2至5，AK 為AK1或AK2其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中
m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為一鍵，R16 為氫，R17 為氫，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，及D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中n 為2至8之數字，較佳地2至5，AK 為AK1或AK2，其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，
##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中n 為2至8之數字，較佳地2至5，AK 為AK1，其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，L1 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，
其中(C3-C5)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代，B 為下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為一鍵，R16 為氫，R17 為氫，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中L1 為一鍵、直鏈(C3-C5)-亞烷基、下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，L1A 為直鏈(C3-C6)-亞烷基，B1 為下式之基團
其中##5 係標示與L1A基團之連接位置，##6 係標示與L1B基團之連接位置，L5 為一鍵或乙-1,2-二基，L6 為一鍵或下式之基團
其中##7 係標示與羰基基團之連接位置，##8 係標示與L1B之連接位置，R33 為氫、(C1-C4)-烷基羰基或第三丁氧基羰基，R34 為氫或甲基，
R29 為氫或甲基，R30 為氫或甲基，R31 為氫或甲基，R32 為氫或甲基，L1B 為直鏈(C3-C6)-亞烷基，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，R28 為氫，(C1-C4)-烷基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為4-至7-員雜環，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，R36 為氫，(C1-C4)-烷基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為氫或甲基，或R36和R37與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶環，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)之化合物，其中
L1 為直鏈(C3-C5)-亞烷基或為下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，B 為下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫，甲基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為哌啶-1,4-二基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，R23 為甲基，R24 為氫，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧羰基，R37 為或甲基，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結的碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，R3 為氫或甲基，R4 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R3和R4與其相鍵結的碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#7 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#8 係標示與T1基團之連接位置，T1 為式-C(=O)-OR7、-C(=O)-NR8R9、-C(=O)-NH-NH-R10或-CH2-O-R11之基團，
其中R7 為氫、甲基、乙基、正丙基、第三丁基、苄基或金剛烷基甲基，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基、乙基、正丙基或苄基，或R8和R9與其相鍵結之氮原子共同形成一4-至7-員雜環，R10 為苄醯基，R11 為苄基，其在苯基基團上可經甲氧基羰基或羧基取代，R5 為氫、甲基或下式之基團
其中#9 係標示與-CHC(R26)-T2之連接位置，R12 為苯基，其可經甲氧基羰基、羧基取代或式-S(O)2OH之基團取代R13 為苯基，其可經甲氧基羰基或羧基取代，R26 為氫，T2 為苯基、苄基、1H-吲哚-3-基或1H-吲哚-3-基甲基，
及n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，其中存有N-O基之A環，為下式之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，
其中R7 為氫，R8 為氫，R9 為氫，n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，其中存有N-O基之A環，為下式之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，
R3 為氫，R4 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-NR8R9之基團，其中R8 為氫，R9 為氫，n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，其中存有N-O基之A環，為下式之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-NR8R9之基團，其中R8 為氫，R9 為氫，n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R3 為氫，R4 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-OR7或-C(=O)-NR8R9之基團，其中R7 為氫，R8 為氫，
R9 為氫，n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R3 為氫，R4 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-NR8R9之基團，其中R8 為氫，R9 為氫，n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫或甲基，R2 為異丙基、異丁基、第二丁基、第三丁基、苯基、苄基、1-羥乙基、4-羥苄基、4-羥基-3-硝基苄基、4-羥基-3-胺基苄基、1-苯乙基、二苯甲基、1H-咪唑-4-基甲基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結的碳原子共同形成一下式之(1S，2R)-2-苯基環丙烷-1，1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，及n、AK、Cys、G、L1、B、L2和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、4-羥苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結的碳原子共同形成下式之(1S,2R)-2-
苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，及n、AK、Cys、G、L1、B、L2和具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中R35 為羥基，及n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，
以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(Ia)、(XXXa)和(XXXI)之化合物，其中R35 為甲基，及n、AK、Cys、G、L1、B、L2、D和R35具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的亦為式(XXXa)之化合物，其中Cys 為經由側基之硫原子經由琥珀醯亞胺之碳原子鍵結之L-半胱胺酸殘基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(I)和(XXX)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基、1-苯乙基或1H-吲哚-3-基甲基，
或R1和R2與其相鍵結的碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之單-或雙環狀、視需要經取代雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R6 為氫、羥基或苄氧基，n、AK、Cys、G、L1、L2和B具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的亦為式(I)和(XXX)之化合物，其中D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為苄基或1H-吲哚-3-基甲基，或R1和R2與其相鍵結的碳原子共同形成一下式之(1S,2R)-2-苯基環丙烷-1,1-二基基團
其中#4 係標示與相鄰的氮原子之連接位置，#5 係標示與羰基基團之連接位置，其中存有N-O基之A環，為下式之雜環
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，
n、AK、Cys、G、L1、L2和B具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為式(I)之化合物，其中n=1-20，更佳地n=1-10和非常佳地n=2-8。
在本發明內文中較佳的亦為式(I)和(XXX)之化合物，其中B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵，n、AK、Cys、G、L1、L2、D、R16和R17具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的亦為式(I)和(XXX)之化合物，其中B 為一鍵或下式之基團
其中
*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3和L4 為一鍵，n、AK、Cys、G、L1、L2、D、R16和R17具有如上所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中AK 為AK1，其中AK1 為結合劑，其係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，G 為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基或下式之基團
其中m 為2至6之數字，
##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或(C2-C4)-亞烷基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，
****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，Q1 為4-至7-員雜環，R14 為氫或(C1-C4)-烷基，R15 為氫或(C1-C4)-烷基，或R14和R15與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，R16 為氫或(C1-C4)-烷基，R17 為氫或(C1-C4)-烷基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一5-或6-員雜環，L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中較佳的亦為通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中AK 為AK2，其中AK2 為結合劑，其係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，G 為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C1-C10)-亞烷基或下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，P 為O或NH，Q2 為3-至7-員碳環或4-至7-員雜環，R18 為氫或(C1-C4)-烷基，R19 為氫或或天然α-胺基酸或其類似物或異構物之側基，R20 為氫或(C1-C4)-烷基，或R19和R20與其相鍵結之原子共同形成一吡咯啶基環，R21 為氫或(C1-C4)-烷基，R22 為氫或(C1-C4)-烷基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一3-至7-員碳環，R23 為(C1-C4)-烷基，R24 為氫或(C1-C4)-烷基，
L2 為直鏈(C2-C10)-亞烷基或為下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，其中(C2-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的亦為通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為2至8之數字，AK 為AK1或AK2，其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之人類或人源化抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之人類或人源化抗體或抗原結合抗體片段，
當AK=AK1時G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中m 為數字2或3，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C2-C6)-亞烷基可經1或2個甲基取代基取代B 為一鍵或下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵或乙-1,2-二基，L4 為一鍵或下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，Q1 為哌啶-1,4-二基，R16 為氫或甲基，R17 為氫或甲基，或R16和R17與其相鍵結之原子共同形成一哌基環，
R21 為氫或甲基，R22 為氫或甲基，或R21和R22與其相鍵結之原子共同形成一環丙基環，R23 為甲基，R24 為氫，L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
其中p 為2至6之數字，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，其中存有N-O基之A環，為
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-NR8R9之基團，R8 為氫或甲基，R9 為氫、甲基或乙基，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為2至8之數字，較佳地2至5，AK 為AK1或AK2，其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之人類或人源化抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之人類或人源化抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為一鍵，B 為一鍵R17 為氫，L2 為戊-1,5-二基、己-1,6-二基或為下式之基團
其中p 為數字2或3，##3 係標示與B基團之連接位置，##4 係標示與氮原子之連接位置，D 為下式之基團
其中
#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，其中存有N-O基之A環，為
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-NR8R9之基團，R8 為氫，R9 為氫，R35 為甲基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
本發明之較佳的主題為通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為2至8之數字，較佳地2至5，AK 為AK1或AK2，其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之人類或人源化抗體或抗原結合抗體片段，
AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之人類或人源化抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
其中#1 係標示與結合劑之半胱胺酸殘基的連接位置，#2 係標示與L1基團之連接位置，或當AK=AK2時，為羰基，L1 為直鏈(C2-C6)-亞烷基，B 為下式之基團
其中*係標示與L1之連接位置，**係標示與L2之連接位置，L3 為一鍵，L4 為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L1之連接位置，R25 為甲基，R28 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R16 為氫，R17 為氫，R36 為氫、甲基羰基或第三丁氧基羰基，R37 為甲基，L2 為直鏈(C2-C4)-亞烷基，D 為下式之基團
其中#3 係標示與氮原子之連接位置，R1 為氫，R2 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，其中存有N-O基之A環，為
其中#6 係標示與羰基基團之連接位置，R3 為氫，R4 為4-羥苄基或1H-吲哚-3-基甲基，T1 為式-C(=O)-NR8R9之基團，R8 為氫，R9 為氫，R35 為甲基或羥基，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
在本發明內文中特佳的亦為由下列化合物選出之結合劑-藥物接合物：
於各別的基團組合或較佳的組合中個別所指之基團定義亦可任意以其他組合，所指之獨立的各別基團組合來取代。
特佳的為二或多種上述較佳範圍之組合。
本發明另外亦提供製備式(Ia)之本發明化合物的方法，其特徵在於將溶於PBS緩衝液之結合劑溶液
[A]與適合的還原劑，例如二硫蘇糖醇或叁(2-羧乙基)膦鹽酸鹽混合，隨後與式(IIa)化合物反應，
其中D、L1、B、L2和R35各自具有如上所示之定義，得到式(I-A)之化合物
其中n、AK2、D、L1、B、L2和R35各自具有如上所示之定義，或[B]與式(IIIa)之化合物反應
(IIIa)，其中D、L1、B、L2和R35各自具有如上所示之定義，得到式(Ia-B)之化合物
其中n、AK2、D、L1、B、L2和R35各自具有如上所示之定義。
本發明另外亦提供製備式(I)之本發明化合物的方法，其特徵在於將溶於PBS緩衝液之結合劑溶液
[A]與適合的還原劑，例如二硫蘇糖醇或叁(2-羧乙基)膦鹽酸鹽混合，隨後與式(II)化合物反應，
其中D、L1、B和'L2各自具有如上所示之定義，得到式(I-A)之化合物
其中n、AK1、D、L1、B和L2各自具有如上所示之定義，或[B]與式(III)化合物反應
其中D、L1、B和L2各自具有如上所示之定義，得到式(I-B)之化合物
其中n、AK2、D、L1、B和L2各自具有如上所示之定義。
抗體的部分還原以及隨後將(部分)還原的抗體與式(II)或(IIa)化合物接合係依照熟習技術者已知之方法來進行，例如，參見，如Ducry等人，Bioconj.Chem.2010,21,5和references herein,Klussman等人，Bioconj.Chem.2004,15(4),765-773。此抗體緩和的還原較佳地係以加入2-6當量的TCEP至抗體中，該TCEP係存在適合緩衝液中，較佳地磷酸緩衝液，並於介於15和40℃的溫度，較佳地室溫下攪拌30-180分鐘來進行。接著，將溶於DMSO、乙腈或DMF之式(II)或(IIa)化合物溶液加至溶於PBS緩衝液之(部分)還原抗體溶液中，及隨後於0℃至+40℃的溫度下，更特言之+10℃至+30℃，反應30分鐘至6小時的期間，更特言之1至2小時，進行接合。
首先以習用的胜肽化學法製備式(III)或(IIa)化合物或相當的活化羧基組份。然後將其置於惰性溶劑例如DMSO或DMF中處理，並加入抗體，抗體較佳地係存在中性pH之磷酸緩衝液中。將溶液於介於15至40℃之溫度，較佳地RT下，攪拌1-16小時。
流程1
[a)：1. AK(抗體)，TCEP，PBS緩衝液，RT；2.加入溶於DMSO之馬來醯亞胺衍生物、RT]。
式(II)化合物，其中L1和B為一鍵，可藉由將式(IV)化合物
其中D具有如上所示之定義，於惰性溶劑中以式(V)化合物進行還原性胺化作用
其中L2A具有如上L2之定義，但在烷基鏈長度上少一個碳原子，PG1 為胺基-保護基團，例如(9H-茀-9-基甲氧基)羰基、第三丁氧基羰基或苄氧基羰基，得到式(VI)化合物
其中D、L2和PG1具有如上所示之定義，藉由熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG1保護基團，並將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼之存在下與2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯反應，得到式(II-A)之化合物
其中D和L2各自具有如上所示之定義。
式(II)化合物，其中B為式(B1)之基團
其中*、**、R14和R15各自具有如上所示之定義，可藉由熟習技術者已知的方法從式(VI)化合物移除PG1保護基團，並將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼之存在下與式(VII)化合物反應，來製備
其中L1各自具有上示之定義，得到式(II-B)之化合物
其中D、L1和L2各自具有如上所示之定義。
式(II)化合物，其中B為式(B2)之基團
其中*、**、L3、R16和R17各自具有如上所示之定義，可藉由將式(IV)化合物於惰性溶劑中以式(VIII)化合物進行還原性胺化作用，
其中L2A具有如上L2之定義，但在烷基鏈長度上少一個碳原子，得到式(IX)化合物
其中D和L2具有如上所示之定義，並將此化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和鹼之存在下與式(X)化合物反應，
其中L1和L3各自具有如上所示之定義，得到式(II-C)化合物
其中D、L1、L2和L3各自具有如上所示之定義。
式(II)化合物，其中B為式(B3)之基團
其中*、**、L3、R16和R17各自具有如上所示之定義及L4A為下式之基團
其中***係標示與羰基基團之連接位置，****係標示與L2之連接位置，R25 為氫或甲基，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼和適合的偶合劑之存在下與式(XI-A)或(XI-B)化合物反應來製備，
其中R25和PG1各自具有如上所示之定義，及PG2 為適合的羧基-保護基團，更特言之，苄基，得到式(XII-A)或(XII-B)化合物
或
其中D、PG1、PG2和L2具有如上所示之定義，隨後以熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG2保護基團，並將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與式(X)化合物反應，及最後以熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG1保護基團，得到式(II-D-A)或(II-D-B)之化合物
或
其中D、L1、L2和L3具有如上所示之定義。
式(II)化合物，其中B為(B4)之基團
其中* **各自具有如上所示之定義，及Q1A 為N-連接的4-至7-員雜環，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼和適合的偶合劑之存在下與式(XXI)化合物反應來製備，
其中PG1和Q1A各自具有如上所示之定義，得到式(XXII)化合物
其中PG1、Q1A、D和L2具有如上所示之定義，藉由熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG1保護基團及隨後將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與式(XXIII)化合物反應，
其中L1具有如上所示之定義，得到式(II-D)之化合物
其中Q1A、D、L1和L2具有如上所示之定義。
式(III)化合物，其中L1和B為一鍵，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存
在下與N-羥基琥珀醯亞胺反應來製備，得到式(III-A)之化合物
其中D和L2各自具有如上所示之定義。
式(III)化合物，其中L1為一鍵且B為式(B5A)之基團
其中*、**和P各自具有如上所示之定義，及Q2A 為3-至7-員碳環，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與式(XIII)化合物反應來製備，
其中P、Q2A和PG2各自具有如上所示之定義，得到式(XIV)之化合物
(XIV)，其中D、P、Q2A、L2和PG2各自具有如上所示之定義，藉由熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG2保護基團，及隨後將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼之存在下與N-羥基琥珀醯亞胺，得到式(III-B)之化合物
其中D、P、Q2A和L2各自具有如上所示之定義。
式(III)化合物，其中L1為一鍵且B為式(B6)之基團
其中*、**、R18、R19和R20各自具有如上所示之定義，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與式(XV)化合物反應來製備，
其中R18、R19、R20和PG2各自具有如上所示之定義，得到式(XVI)之化合物
其中D、R18、R19、R20、L2和PG2各自具有如上所示之定義，藉由熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG2保護基團，及隨後將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與N-羥基琥珀醯亞胺反應，得到式(III-C)化合物
其中D、R18、R19、R20和L2各自具有如上所示之定義。
式(III)化合物，其中L1為一鍵且B為式(B7)之基團
其中*、**、R21和R22各自具有如上所示之定義，可藉由熟習技術者已知的方法從式(VI)化合物移除PG1保護基團並將所產生的去保護化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼之存在下與式(XVII)化合物反應來製備，
其中R21和R22各自具有如上所示之定義，得到式(III-D)之化合物
其中D、R21、R22和L2各自具有如上所示之定義。
式(III)化合物，其中B為式(B8)之基團
其中*、**、R23和R24各自具有如上所示之定義，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與式(XVIII)反應來製備
其中R23、R24和PG1各自具有如上所示之定義，得到式(XIX)之化合物
其中D、R23、R24、L2和PG1各自具有如上所示之定義，藉由熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG1保護基團，及隨後將去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的偶合劑和適合的鹼之存在下與式(XX)化合物反應
其中L1A 為直鏈(C1-C10)-亞烷基或下式之基團
其中m 為2至6之數字，##1 係標示與G基團之連接位置，##2 係標示與B基團之連接位置，其中(C1-C10)-亞烷基可經1至4個甲基取代基取代，及其中亞烷基鏈相互為1,2、1,3或1,4關係的二個碳原子，同時包括任何在其間的碳原子可經橋聯，形成一(C3-C6)-環烷基環或苯基環，得到式(III-E)之化合物
其中D、R23、R24、L1A和L2各自具有如上所示之定義。
式(III)化合物，其中B為式(B5B)之基團
其中*和**各自具有如上所示之定義，及Q2B 為N-連接的4-至7-員雜環，可藉由將式(IX)化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼和適合的偶合劑之存在下與式(XXIV)化合物反應來製備，
其中PG1和Q2B各自具有如上所示之定義，得到式(XXV)之化合物
其中PG1、Q2B、D和L2具有如上所示之定義，藉由熟習技術者已知的方法從該化合物移除PG1保護基團，及隨後並去保護的化合物於惰性溶劑中，於適合的鹼之存在下以式(XX)化合物轉變為式(III-F)化合物
其中Q2B、D、L1A和L2各自具有如上所示之定義。
(IV)+(V)→(VI)和(IV)+(VIII)→(IX)反應係在習用於還原性胺化作用及於反應條件下為惰性的溶劑中，視需要在酸及/或脫水劑作為催化劑之存在下來進行。等溶劑包括，例如醇類如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或第三丁醇，醚類如四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷或二(2-甲氧基乙基)醚，或其他溶劑例如二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、N,N-二甲基甲醯胺或水。亦可使用這些溶劑之混合物。較佳地係使用1,4-二烷/水混合物作為溶劑，添加乙酸或稀鹽酸作為催化劑。
適用於此反應之還原劑，特言之，硼氫化物複合物，例如硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉、三乙醯氧基硼氫化
鈉、四正丁基硼氫化銨或硼烷-吡啶複合物。較佳的係使用氰基硼氫化鈉或硼烷-吡啶複合物。
(IV)+(V)→(VI)和(IV)+(VIII)→(IX)反應一般係在0℃至+120℃之溫度範圍內，較佳地於+50℃至+100℃下進行。反應可於大氣壓、升高或降低的壓力(例如0.5至5 bar)下進行；通常係於大氣壓下操作。
上述偶合反應(IX)+(X)→(II-C)、(XII-A)或(XII-B)+(X)→(II-D-A)或(II-D-B)、(IX)+(XIII)→(XIV)、(IX)+(XV)→(XVI)和(XXII)+(XXIII)→(II-D)(分別由胺組份和羧酸組份形成醯胺)係以標準的胜肽化學法來進行[參見，例如M.Bodanszky,Principles of peptide Synthesis,Springer-Verlag,Berlin,1993；M.Bodanszky and A.Bodanszky,The Practice的peptide Synthesis,Springer-Verlag,Berlin,1984；H.-D.Jakubke和H.Jeschkeit,aminosäuren,peptide,Proteine,Verlag Chemie,Weinheim,1982]。
用於這些偶和反應之惰性溶劑的實例有醚類，例如乙醚、異丙醚、第三丁基甲基醚、四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷或二(2-甲氧基乙基)醚，烴類例如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷、庚烷、環己烷或石油餾份，鹵化烴類例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、1,2-二氯乙烷、三氯乙烷或氯苯，或偶極性-非質子溶劑例如丙酮、甲基乙基酮、乙腈、乙酸乙酯、吡啶、二甲基亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基
乙醯胺(DMA)、N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)。亦可使用這些溶劑之混合物。較佳地係使用N,N-二甲基甲醯胺。
用於這些偶合反應之適合的活化/縮合劑包括碳二亞胺例如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二異丙基-、N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)或N-(3-二甲基胺基異丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、光氣(phosgene)衍生物例如N,N'-羰基二咪唑(CDI)或氯甲酸異丁酯、1,2-唑鎓化合物例如2-乙基-5-苯基-1,2-唑鎓3-硫酸鹽或2-第三丁基-5-甲基異唑鎓過氯酸鹽、醯基胺基化合物例如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氯喹啉，磷化合物例如正丙基磷酸酐、氰基磷酸二乙酯、雙(2-側氧-3-唑啶基)磷醯氯、苯并三唑-1-基氧基三(二甲基胺基)六氟磷酸鏻或苯并三唑-1-基氧基三(吡咯啶并)六氟磷酸鏻(PyBOP)或化合物例如O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基四氟硼酸(TBTU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HBTU)、2-(2-側氧-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基四氟硼酸(TPTU)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)或O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基四氟硼酸(TCTU)，視需要與另外的佐劑例如1-羥基苯并三唑(HOBt)或N-羥基琥珀醯亞胺(HOSu)組合，以及和鹼、鹼金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或鉀，或四級胺鹼
例如三乙胺、N-甲基嗎福啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶或4-N,N-二甲基胺基吡啶組合。
在本發明內文中，用於此等偶合反應之活化/縮合劑較佳地係使用N-(3-二甲基胺基異丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)與1-羥基苯并三唑(HOBt)和N,N-二異丙基乙基胺之組合，或O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)同樣與N,N-二異丙基乙基胺組合。
偶合反應(IX)+(X)→(II-C)、(XII-A)或(XII-B)+(X)→(II-D-A)或(II-D-B)、(IX)+(XIII)→(XIV)、(IX)+(XV)→(XVI)和(XXII)+(XXIII)→(II-D)一般係於-20℃至+60℃的溫度範圍內進行，較佳地0℃至+40℃。此等反應可於大氣壓、升高或降低的壓力下進行(例如0.5至5 bar)；其通常係於大氣壓下操作。
酯化作用(IX)+(XVIII)→(XII)和(IX)+(XI-A)或(XI-B)→(XII-A)或(XII-B)、(IX)+(XXIV)→(XXV)以及(IX)+(XXI)→(XXII)同樣地係於上述醯胺偶合反應中進行。這些反應較佳地係於二氯甲烷中，使用N-(3-二甲基胺基異丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)和4-二甲基胺基吡啶，於+50℃至100℃的溫度，在大氣壓下進行。
視需要存在於化合物中之功能性基團-例如，特別是胺基、羥基和羧基基團-若有用或需要時，於上述處理步驟期間可以暫時性保護形式存在。在這些情況下，
此等保護基團可依照胜肽化學已知的習用方法來導入和移除[參見，例如T.W.Greene and P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,Wiley,New York,1999；M.Bodanszky and A.Bodanszky,The Practice的Peptide Synthesis,Springer-Verlag,Berlin,1984]。當有二或多個保護基團存在時，其可視需要同時於一單一容器反應中再次釋放，或另外以分開的反應再次釋出。
較佳的係使用第三丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(Z)或(9H-茀-9-基甲氧基)羰基(Fmoc)作為PG1胺基-保護基團；就羥基或羧基功能基，較佳的係使用第三丁基或苄基作為PG2保護基團。移除第三丁基或第三丁氧基羰基基團典型地係以強酸，例如鹽酸、氫溴酸或三氟乙酸，於惰性溶劑例如乙醚、1,4-二烷、二氯甲烷或乙酸中處理來進行；此反應視需要亦可於無添加惰性溶劑下進行。在以苄基或苄氧基羰基作為保護基團的情況下，此基團較佳的係以氫解作用，於適合的鈀催化劑例如活性碳上鈀之存在下移除。(9H-茀-9-基甲氧基)羰基基團一般係使用二級胺鹼例如二乙胺或哌啶來移除。
(VI)→(II-A)反應係於其在反應條件下為惰性之溶劑中進行，例如醚類如四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷或二(2-甲氧基乙基)醚，醇類如甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或第三丁醇，或偶極性-非質子溶劑例如丙酮、甲基乙基酮、乙腈、乙酸乙酯、吡啶、二甲基亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙
醯胺(DMA)、N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)或水。亦可使用這些溶劑之混合物。較佳地係使用1,4-二烷和水之混合物。
用於(VI)→(II-A)反應之適合的鹼有，例如鹼金屬碳酸鹽例如碳酸鉀、碳酸鈉或碳酸鋰，鹼金屬碳酸氫鹽例如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，或鹼金屬烷醇類例如甲醇鈉、乙醇鈉或第三丁醇鉀。較佳地係使用碳酸氫鈉。
(VI)→(II-A)反應係於0℃至+50℃的溫度範圍內進行，較佳地+10℃至+30℃。此等反應可於大氣壓、升高或降低的壓力下進行(例如0.5至5 bar)；其通常係於大氣壓下操作。
(VI)+(VII)→(II-B)反應係在其於反應條件下為惰性之溶劑中進行，例如醚類如四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷或二(2-甲氧基乙基)醚，醇類如甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或第三丁醇，或偶極性-非質子溶劑例如丙酮、甲基乙基酮、乙腈、乙酸乙酯、吡啶、二甲基亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)或水。亦可使用這些溶劑之混合物。較佳地係使用DMF。
用於(VI)+(VII)→(II-B)之適合的鹼有，例如四級胺鹼例如三乙胺、N-甲基嗎福啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶或4-N,N-二甲基胺基吡啶。較佳地係
使用N,N-二異丙基乙基胺。
(VI)+(VII)→(II-B)反應係於0℃至+50℃的溫度範圍內進行，較佳地+10℃至+30℃。此反應可於大氣壓、升高或降低的壓力下進行(例如0.5至5 bar)；其通常係於大氣壓下操作。
(IX)→(III-A)、(XIV)→(III-B)和(XVI)→(III-C)，以及(VI)+(XVII)→(III-D)、(XIX)+(XX)→(III-E)和(XXV)+(XX)→(III-F)反應係在其於反應條件下為惰性之溶劑中進行。適合的溶劑之實例有醚類，例如乙醚、異丙醚、第三丁基甲基醚、四氫呋喃醚、1,4-二烷醚、1,2-二甲氧基乙烷或二(2-甲氧基乙基)醚，烴類例如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷、庚烷、環己烷或石油餾份，鹵化烴類例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、1,2-二氯乙烷、三氯乙烷或氯苯，或偶極性-非質子溶劑例如丙酮、甲基乙基酮、乙腈、乙酸乙酯、吡啶、二甲基亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)。亦可使用這些溶劑之混合物。較佳地係使用N,N-二甲基甲醯胺。
用於這些反應之適合的鹼有，例如四級胺例如三乙胺、N-甲基嗎福啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶或4-N,N-二甲基胺基吡啶。較佳地係使用N,N-二異丙基乙基胺，視需要添加4-N,N-二甲基胺基吡啶。
(IX)→(III-A)、(XIV)→(III-B)和(XVI)→(III-C)，以
及(VI)+(XVII)→(III-D)和(XIX)+(XX)→(III-E)反應係於0℃至+50℃的溫度範圍內進行，較佳地+10℃至+30℃。此等反應可於大氣壓、升高或降低的壓力下進行(例如0.5至5 bar)；其通常係於大氣壓下操作。
式(II)、(III)、(I-A)和(I-B)化合物分別為式(IIa)、(IIIa)、(Ia-A)和(Ia-B)化合物之亞分量，其中R35為甲基。式(IIa)和(IIIa)化合物之製備係類似如上述式(II)和(III)化合物之製備來進行。
上述方法係藉由實例以下列合成流程(流程3至13、18)來說明：
[a)：1.水/二烷、1N HCl、100℃；2. H2、Pd/C、甲醇、RT；b)：NaHCO3、H2O、二烷、RT]。
式(IV)化合物可由市售的胺基酸構件(building block)或該等文獻中已知(參見，例如Pettit等人，Synthesis 1996,719；Shioiri等人，Tetrahedron Lett.1991,32,931；Shioiri等人，Tetrahedron 1993,49,1913；Koga等人，Tetrahedron Lett.1991,32,2395；Vidal等人，Tetrahedron 2004,60,9715；Poncet等人，Tetrahedron 1994,50,5345.Pettit等人，J.Org.Chem.1994,59,1796)以類似文獻中已知的方法，依照胜肽化學之習用方法和本發明實驗部分所述來製備。下列之合成流程(流程14至16)係藉由實例說明製備。
式(XI)、(XIII)、(XV)、(XVII)和(XXI)之化合物包括，若適當其對掌或非對映異構物形式，可從文獻中得
知，或可藉由熟習技術者顯見的路徑，以類似文獻中所公開的方法來製備。在實驗章節、製備起始化合物和中間物有關的章節中亦給予許多製備起始物之廣泛的教導以及文獻資料。
式(V)、(VII)、(VIII)、(X)、(XVIII)、(XX)和(XXIII)包括，若適當其對掌或非對映異構物形式，為市售或描述於文獻中，或其可藉由熟習技術者顯見的路徑，以類似文獻中所公開的方法來製備。在實驗章節、製備起始化合物和中間物有關的章節中亦給予許多製備起始物之廣泛的教導以及文獻資料。
另外，製備程序之個別的步驟可以不同的順序來進行。此項係藉由實例以下列合成流程來說明(流程17、19和20)。
另外ADC可依照下列方法藉由實例來製備：
[a)：二異丙基乙基胺、DMF、RT]。
在另外較佳的實施例中，標靶分子為選擇性癌標靶分子。
在一特佳的實施例中，該標靶分子為一蛋白。
在一實施例中，該標靶分子為胞外標靶分子。在一較佳的實施例中，該胞外標靶分子為一蛋白。
癌標靶分子已為熟習技術者所了解。其實例係列於下。
癌標靶分子之實例係如下：
(1)EGF受體(NCBI參考序列NP_005219.2)序列(1210個胺基酸)：>gi|29725609|ref|NP_005219.2|表皮生長因子受體異構型一前驅物[智人]
MRPSGTAGAALLALLAALCPASRALEEKKVCQGTSNKLTQLGTFEDHFLSLQRMFNNCEVVLGNLEITYVQRNYDLSFLKTIQEVAGYVLIALNTVERIPLENLQIIRGNMYYENSYALAVLSNYDANKTGLKELPMRNLQEILHGAVRFSNNPALCNVESIQWRDIVSSDFLSNMSMDFQNHLGSCQKCDPSCPNGSCWGAGEENCQKLTKIICAQQCSGRCRGKSPSDCCHNQCAAGCTGPRESDCLVCRKFRDEATCKDTCPPLMLYNPTTYQMDVNPEGKYSFGATCVKKCPRNYVVTDHGSCVRACGADSYEMEEDGVRKCKKCEGPCRKVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPV AFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAYVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVSCRNVSRGRECVDKCNLLEGEPREFVENSECIQCHPECLPQAMNITCTGRGPDNCIQCAHYIDGPHCVKTCPAGVMGENNTLVWKYADAGHVCHLCHPNCTYGCTGPGLEGCPTNGPKIPSIATGMVGALLLLLVVALGIGLFMRRRHIVRKRTLRRLLQERELVEPLTPSGEAPNQALLRILKETEFKKIKVLGSGAFGTVYKGLWIPEGEKVKIPVAIKELREATSPKANKEILDEAYVMASVDNPHVCRLLGICLTSTVQLITQLMPFGCLLDYVREHKDNIGSQYLLNWCVQIAKGMNYLEDRRLVHRDLAARNVLVKTPQHVKITDFGLAKLLGAEEKEYHAEGGKVPIKWMALESILHRIYTHQSDVWSYGVTVWELMTFGSKPYDGIPASEISSILEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDADSRPKFRELIIEFSKMARDPQRYLVIQGDERMHLPSPTDSNFYRALMDEEDMDDVVDADEYLIPQQGFFSSPSTSRTPLLSSLSATSNNSTVACIDRNGLQSCPIKEDSFLQRYSSDPTGALTEDSIDDTFLPVPEYINQSVPKRPAGSVQNPVYHNQPLNPAPSRDPHYQDPHSTAVGNPEYLNTVQPTCVNSTFDSPAHWAQKGSHQISLDNPDYQQDFFPKEAKPNGIFKGSTAENAEYLRVAPQSSEFIGA
胞外區係以底線標示。
(2)間皮物(SwissProt參照號Q13421-3)序列(622個胺基酸)：
>sp|Q13421-3|MSLN_HUMAN間皮素之第2異構型OS=智人GN=MSLN
MALPTARPLLGSCGTPALGSLLFLLFSLGWVQPSRTLAGETGQEAAPLDGVLANPPNISSLSPRQLLGFPCAEVSGLSTERVRELAVALAQKNVKLSTEQLRCLAHRLSEPPEDLDALPLDLLLFLNPDAFSGPQACTRFFSRITKANVDLLPRGAPERQRLLPAALACWGVRGSLLSEADVRALGGLACDLPGRFVAESAEVLLPRLVSCPGPLDQDQQEAARAALQGGGPPYGPPSTWSVSTMDALRGLLPVLGQPIIRSIPQGIVAAWRQRSSRDPSWRQPERTILRPRFRREVEKTACPSGKKAREIDESLIFYKKWELEACVDAALLATQMDRVNAIPFTYEQLDVLKHKLDELYPQGYPESVIQHLGYLFLKMSPEDIRKWNVTSLETLKALLEVNKGHEMSPQVATLIDRFVKGRGQLDKDTLDTLTAFYPGYLCSLSPEELSSVPPSSIWAVRPQDLDTCDPRQLDVLYPKARLAFQNMNGSEYFVKIQSFLGGAPTEDLKALSQQNVSMDLATFMKLRTDAVLPLTVAEVQKLLGPHVEGLKAEERHRPVRDWILRQRQDDLDTLGLGLQGGIPNGYLVLDLSMQEALSGTPCLLGPGPVLTVLALLLASTLA
間皮素係由胺基酸296-598所編碼。胺基酸37-286碼為「巨核細胞促進因子」。間皮素係被GPI錨固定在細胞膜中並侷限在胞外。
(3)碳酸酐酶IX(SwissProt參照號Q16790)序列(459個胺基酸)：>sp|Q16790|CAH9_HUMAN碳酸酐酶9 OS=智人GN=CA9 PE=1 SV=2
MAPLCPSPWLPLLIPAPAPGLTVQLLLSLLLLVPVHPQRLPRMQEDSPLGGGSSGEDDPLGEEDLPSEEDSPREEDPPGEEDLPGEEDLPGEEDLPEVKPKSEEEGSLKLEDLPTVEAPGDPQEPQNNAHRDKEGDDQSHWRYGGDPPWPRVSPACAGRFQSPVDIRPQLAAFCPALRPLELLGFQLPPLPELRLRNNGHSVQLTLPPGLEMALGPGREYRALQLHLHWGAAGRPGSEHTVEGHRFPAEIHVVHLSTAFARVDEALGRPGGLAVLAAFLEEGPEENSAYEQLLSRLEEIAEEGSETQVPGLDISALLPSDFSRYFQYEGSLTTPPCAQGVIWTVFNQTVMLSAKQLHTLSDTLWGPGDSRLQLNFRATQPLNGRVIEASFPAGVDSSPRAAEPVQLNSCLAAGDILALVFGLLFAVTSVAFLVQMRRQHRRGTKGGVSYRPAEVAETGA
胞外區係以底線標示。
(4)C4.4a(NCBI參考序列NP_055215.2；Synonym LYPD3)序列(346個胺基酸)：>gi|93004088|ref|NP_055215.2|含ly6/PLAUR區域蛋白3前驅物[智人]
MDPARKAGAQAMIWTAGWLLLLLLRGGAQALECYSCVQKADDGCSPNKMKTVKCAPGVDVCTEAVGAVETIHGQFSLAVRGCGSGLPGKNDRGLDLHGLLAFIQLQQCAQDRCNAKLNLTSRALDPAGNESAYPPNGVECYSCVGLSREACQGTSPPVVSCYNASDHVYKGCFDGNVTLTAANVTVSLPVRGCVQDEFCTRDGVTGPGFTLSGSCCQGSRCNSDLRNKTYFSPRIPPLVRLPPPEPTTVASTTSVTTSTSAPVRPTSTTKPMPAPTSQTPRQGVEHE ASRDEEPRLTGGAAGHQDRSNSGQYPAKGGPQQPHNKGCVAPTAGLAALLLAVAAGVLL
成熟的胞外區係以底線標示。(SEQ ID NO：1).
(5)CD52(NCBI參考序列NP_001794.2)>gi|68342030|ref|NP_001794.2|CAMPATH-1抗原前驅物[智人]
MKRFLFLLLTISLLVMVQIQTGLSGQNDTSQTSSPSASSNISGGIFLFFVANAIIHLFCFS
(6)Her2(NCBI參考序列NP_004439.2)>gi|54792096|ref|NP_004439.2|受體酪胺酸-蛋白質激酶erbB-2異構型[智人]
MELAALCRWGLLLALLPPGAASTQVCTGTDMKLRLPASPETHLDMLRHLYQGCQVVQGNLELTYLPTNASLSFLQDIQEVQGYVLIAHNQVRQVPLQRLRIVRGTQLFEDNYALAVLDNGDPLNNTTPVTGASPGGLRELQLRSLTEILKGGVLIQRNPQLCYQDTILWKDIFHKNNQLALTLIDTNRSRACHPCSPMCKGSRCWGESSEDCQSLTRTVCAGGCARCKGPLPTDCCHEQCAAGCTGPKHSDCLACLHFNHSGICELHCPALVTYNTDTFESMPNPEGRYTFGASCVTACPYNYLSTDVGSCTLVCPLHNQEVTAEDGTQRCEKCSKPCARVCYGLGMEHLREVRAVTSANIQEFAGCKKIFGSLAFLPESFDGDPASNTAPLQPEQLQVFETLEEITGYLYISAWPDSLPDLSVFQNLQVIRGRILHNGAYSLTLQGLGISWLGLRSLRELGSGLALIHHNTHLCFVHTVPWDQLFRNPHQALLHTANRPEDECVGEGLACHQLCARGHCWGPGPTQCVNCSQFLRGQECVEECRVLQGLPREYVNARHCLPCHPECQPQNGSVTCFG
PEADQCVACAHYKDPPFCVARCPSGVKPDLSYMPIWKFPDEEGACQPCPINCTHSCVDLDDKGCPAEQRASPLTSIISAVVGILLVVVLGVVFGILIKRRQQKIRKYTMRRLLQETELVEPLTPSGAMPNQAQMRILKETELRKVKVLGSGAFGTVYKGIWIPDGENVKIPVAIKVLRENTSPKANKEILDEAYVMAGVGSPYVSRLLGICLTSTVQLVTQLMPYGCLLDHVRENRGRLGSQDLLNWCMQIAKGMSYLEDVRLVHRDLAARNVLVKSPNHVKITDFGLARLLDIDETEYHADGGKVPIKWMALESILRRRFTHQSDVWSYGVTVWELMTFGAKPYDGIPAREIPDLLEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDSECRPRFRELVSEFSRMARDPQRFVVIQNEDLGPASPLDSTFYRSLLEDDDMGDLVDAEEYLVPQQGFFCPDPAPGAGGMVHHRHRSSSTRSGGGDLTLGLEPSEEEAPRSPLAPSEGAGSDVFDGDLGMGAAKGLQSLPTHDPSPLQRYSEDPTVPLPSETDGYVAPLTCSPQPEYVNQPDVRPQPPSPREGPLPAARPAGATLERPKTLSPGKNGVVKDVFAFGGAVENPEYLTPQGGAAPQPHPPPAFSPAFDNLYYWDQDPPERGAPPSTFKGTPTAENPEYLGLDVPV
(7)CD20(NCBI參考序列NP_068769.2)>gi|23110987|ref|NP_068769.2|B-淋巴細胞抗原CD20[智人]
MTTPRNSVNGTFPAEPMKGPIAMQSGPKPLFRRMSSLVGPTQSFFMRESKTLGAVQIMNGLFHIALGGLLMIPAGIYAPICVTVWYPLWGGIMYIISGSLLAATEKNSRKCLVKGKMIMNSLSLFAAISGMILSIMDILNIKISHFLKMESLNFIRAHTPYINIYNCEPANPSEKNSPSTQYCYSIQSLFLGILSVMLIFAFFQELVIAGIVE
NEWKRTCSRPKSNIVLLSAEEKKEQTIEIKEEVVGLTETSSQPKNEEDIEIIPIQEEEEEETETNFPEPPQDQESSPIENDSSP
(8)淋巴細胞活化抗原CD30(SwissProt ID P28908)>gi|68348711|ref|NP_001234.2|腫瘤凋亡因子受體超家族成員8異構型1前驅物[智人]
MRVLLAALGLLFLGALRAFPQDRPFEDTCHGNPSHYYDKAVRRCCYRCPMGLFPTQQCPQRPTDCRKQCEPDYYLDEADRCTACVTCSRDDLVEKTPCAWNSSRVCECRPGMFCSTSAVNSCARCFFHSVCPAGMIVKFPGTAQKNTVCEPASPGVSPACASPENCKEPSSGTIPQAKPTPVSPATSSASTMPVRGGTRLAQEAASKLTRAPDSPSSVGRPSSDPGLSPTQPCPEGSGDCRKQCEPDYYLDEAGRCTACVSCSRDDLVEKTPCAWNSSRTCECRPGMICATSATNSRARCVPYPICAAETVTKPQDMAEKDTTFEAPPLGTQPDCNPTPENGEAPASTSPTQSLLVDSQASKTLPIPTSAPVALSSTGKPVLDAGPVLFWVILVLVVVVGSSAFLLCHRRACRKRIRQKLHLCYPVQTSQPKLELVDSRPRRSSTQLRSGASVTEPVAEERGLMSQPLMETCHSVGAAYLESLPLQDASPAGGPSSPRDLPEPRVSTEHTNNKIEKIYIMKADTVIVGTVKAELPEGRGLAGPAEPELEEELEADHTPHYPEQETEPPLGSCSDVMLSVEEEGKEDPLPTAASGK
(9)淋巴細胞黏附分子CD22(SwissProt ID P20273)>gi|157168355|ref|NP_001762.2|B-細胞受體CD22異構型1前驅物[智人]
MHLLGPWLLLLVLEYLAFSDSSKWVFEHPETLYAWEGACVWIPCTYRALDGDLESFILFHNPEYNKNTSKFDGTRLYESTKDGKVPSEQKRVQFLGDKNKNCTLSIHPVHLNDSGQLGLRMESKTEKWMERIHLNVSERPFPPHIQLPPEIQESQEVTLTCLLNFSCYGYPIQLQWLLEGVPMRQAAVTSTSLTIKSVFTRSELKFSPQWSHHGKIVTCQLQDADGKFLSNDTVQLNVKHTPKLEIKVTPSDAIVREGDSVTMTCEVSSSNPEYTTVSWLKDGTSLKKQNTFTLNLREVTKDQSGKYCCQVSNDVGPGRSEEVFLQVQYAPEPSTVQILHSPAVEGSQVEFLCMSLANPLPTNYTWYHNGKEMQGRTEEKVHIPKILPWHAGTYSCVAENILGTGQRGPGAELDVQYPPKKVTTVIQNPMPIREGDTVTLSCNYNSSNPSVTRYEWKPHGAWEEPSLGVLKIQNVGWDNTTIACAACNSWCSWASPVALNVQYAPRDVRVRKIKPLSEIHSGNSVSLQCDFSSSHPKEVQFFWEKNGRLLGKESQLNFDSISPEDAGSYSCWVNNSIGQTASKAWTLEVLYAPRRLRVSMSPGDQVMEGKSATLTCESDANPPVSHYTWFDWNNQSLPYHSQKLRLEPVKVQHSGAYWCQGTNSVGKGRSPLSTLTVYYSPETIGRRVAVGLGSCLAILILAICGLKLQRRWKRTQSQQGLQENSSGQSFFVRNKKVRRAPLSEGPHSLGCYNPMMEDGISYTTLRFPEMNIPRTGDAESSEMQRPPPDCDDTVTYSALHKRQVGDYENVIPDFPEDEGIHYSELIQFGVGERPQAQENVDYVILKH
(10)骨髓細胞表面抗原CD33(SwissProt ID P20138)>gi|130979981|ref|NP_001763.3|骨髓細胞表面抗原CD33異構型1前驅物[智人]
MPLLLLLPLLWAGALAMDPNFWLQVQESVTVQEGLCVLVPCTFFHPIPYYDKNSPVHGYWFREGAIISRDSPVATNKLDQEVQEETQGRFRLLGDPSRNNCSLSIVDARRRDNGSYFFRMERGSTKYSYKSPQLSVHVTDLTHRPKILIPGTLEPGHSKNLTCSVSWACEQGTPPIFSWLSAAPTSLGPRTTHSSVLIITPRPQDHGTNLTCQVKFAGAGVTTERTIQLNVTYVPQNPTTGIFPGDGSGKQETRAGVVHGAIGGAGVTALLALCLCLIFFIVKTHRRKAARTAVGRNDTHPTTGSASPKHQKKSKLHGPTETSSCSGAAPTVEMDEELHYASLNFHGMNPSKDTSTEYSEVRTQ
(11)跨膜糖蛋白NMB(SwissProt ID Q14956)>gi|52694752|ref|NP_001005340.1|跨膜糖蛋白NMB異構型前驅物[智人]
MECLYYFLGFLLLAARLPLDAAKRFHDVLGNERPSAYMREHNQLNGWSSDENDWNEKLYPVWKRGDMRWKNSWKGGRVQAVLTSDSPALVGSNITFAVNLIFPRCQKEDANGNIVYEKNCRNEAGLSADPYVYNWTAWSEDSDGENGTGQSHHNVFPDGKPFPHHPGWRRWNFIYVFHTLGQYFQKLGRCSVRVSVNTANVTLGPQLMEVTVYRRHGRAYVPIAQVKDVYVVTDQIPVFVTMFQKNDRNSSDETFLKDLPIMFDVLIHDPSHFLNYSTINYKWSFGDNTGLFVSTNHTVNHTYVLNGTFSLNLTVKAAAPGPCPPPPPPPRPSKPTPSLATTLKSYDSNTPGPAGDNPLELSRIPDENCQINRYGHFQATITIVEGILEVNIIQMTDVLMPVPWPESSLIDFVVTCQGSIPTEVCTIISDPTCEITQNTVCSPVDVDEMCLLTVRRTFNGSGTYCVNLTLGDDTSLALTSTLISVPDRDPASPLRMA
NSALISVGCLAIFVTVISLLVYKKHKEYNPIENSPGNVVRSKGLSVFLNRAKAVFFPGNQEKDPLLKNQEFKGVS
(12)黏附分子CD56(SwissProt ID P13591)>gi|94420689|ref|NP_000606.3|中性細胞黏附分子1異構型1[智人]
MLQTKDLIWTLFFLGTAVSLQVDIVPSQGEISVGESKFFLCQVAGDAKDKDISWFSPNGEKLTPNQQRISVVWNDDSSSTLTIYNANIDDAGIYKCVVTGEDGSESEATVNVKIFQKLMFKNAPTPQEFREGEDAVIVCDVVSSLPPTIIWKHKGRDVILKKDVRFIVLSNNYLQIRGIKKTDEGTYRCEGRILARGEINFKDIQVIVNVPPTIQARQNIVNATANLGQSVTLVCDAEGFPEPTMSWTKDGEQIEQEEDDEKYIFSDDSSQLTIKKVDKNDEAEYICIAENKAGEQDATIHLKVFAKPKITYVENQTAMELEEQVTLTCEASGDPIPSITWRTSTRNISSEEKTLDGHMVVRSHARVSSLTLKSIQYTDAGEYICTASNTIGQDSQSMYLEVQYAPKLQGPVAVYTWEGNQVNITCEVFAYPSATISWFRDGQLLPSSNYSNIKIYNTPSASYLEVTPDSENDFGNYNCTAVNRIGQESLEFILVQADTPSSPSIDQVEPYSSTAQVQFDEPEATGGVPILKYKAEWRAVGEEVWHSKWYDAKEASMEGIVTIVGLKPETTYAVRLAALNGKGLGEISAASEFKTQPVQGEPSAPKLEGQMGEDGNSIKVNLIKQDDGGSPIRHYLVRYRALSSEWKPEIRLPSGSDHVMLKSLDWNAEYEVYVVAENQQGKSKAAHFVFRTSAQPTAIPANGSPTSGLSTGAIVGILIVIFVLLLVVVDITCYFLNKCGLFMCIAVNLCGKAGPGAKGKDMEEGKAAFSKDESKEPIVEVRTEEERTPNHDGGKH
TEPNETTPLTEPEKGPVEAKPECQETETKPAPAEVKTVPNDATQTKENESKA
(13)表面分子CD70(SwissProt ID P32970)>gi|4507605|ref|NP_001243.1|CD70抗原[智人]
MPEEGSGCSVRRRPYGCVLRAALVPLVAGLVICLVVCIQRFAQAQQQLPLESLGWDVAELQLNHTGPQQDPRLYWQGGPALGRSFLHGPELDKGQLRIHRDGIYMVHIQVTLAICSSTTASRHHPTTLAVGICSPASRSISLLRLSFHQGCTIASQRLTPLARGDTLCTNLTGTLLPSRNTDETFFGVQWVRP
(14)表面分子CD74(SwissProt ID P04233)>gi|10835071|ref|NP_004346.1|HLA第II類組織相容性抗原γ鏈異構型b[智人]
MHRRRSRSCREDQKPVMDDQRDLISNNEQLPMLGRRPGAPESKCSRGALYTGFSILVTLLLAGQATTAYFLYQQQGRLDKLTVTSQNLQLENLRMKLPKPPKPVSKMRMATPLLMQALPMGALPQGPMQNATKYGNMTEDHVMHLLQNADPLKVYPPLKGSFPENLRHLKNTMETIDWKVFESWMHHWLLFEMSRHSLEQKPTDAPPKESLELEDPSSGLGVTKQDLGPVPM
(15)B-淋巴細胞抗原CD19(SwissProt ID P15391)>gi|296010921|ref|NP_001171569.1|B-淋巴細胞抗原CD19異構型1前驅物[智人]
MPPPRLLFFLLFLTPMEVRPEEPLVVKVEEGDNAVLQCLKGTSDGPTQQLTWSRESPLKPFLKLSLGLPGLGIHMRPLAIWLFIFNVSQQMGGFYLCQPGPPSEKAWQPGWTVNVEGSGELFRWN
VSDLGGLGCGLKNRSSEGPSSPSGKLMSPKLYVWAKDRPEIWEGEPPCLPPRDSLNQSLSQDLTMAPGSTLWLSCGVPPDSVSRGPLSWTHVHPKGPKSLLSLELKDDRPARDMWVMETGLLLPRATAQDAGKYYCHRGNLTMSFHLEITARPVLWHWLLRTGGWKVSAVTLAYLIFCLCSLVGILHLQRALVLRRKRKRMTDPTRRFFKVTPPPGSGPQNQYGNVLSLPTPTSGLGRAQRWAAGLGGTAPSYGNPSSDVQADGALGSRSPPGVGPEEEEGEGYEEPDSEEDSEFYENDSNLGQDQLSQDGSGYENPEDEPLGPEDEDSFSNAESYENEDEELTQPVARTMDFLSPHGSAWDPSREATSLAGSQSYEDMRGILYAAPQLRSIRGQPGPNHEEDADSYENMDNPDGPDPAWGGGGRMGTWSTR
(16)表面蛋白黏蛋白-1(mucin-1)(SwissProt ID P15941)>gi|65301117|ref|NP_002447.4|黏蛋白-1異構型1前驅物[智人]
MTPGTQSPFFLLLLLTVLTVVTGSGHASSTPGGEKETSATQRSSVPSSTEKNALSTGVSFFFLSFHISNLQFNSSLEDPSTDYYQELQRDISEMFLQIYKQGGFLGLSNIKFRPGSVVVQLTLAFREGTINVHDVETQFNQYKTEAASRYNLTISDVSVSDVPFPFSAQSGAGVPGWGIALLVLVCVLVALAIVYLIALAVCQCRRKNYGQLDIFPARDTYHPMSEYPTYHTHGRYVPPSSTDRSPYEKVSAGNGGSSLSYTNPAVAATSANL
(17)表面蛋白CD138(SwissProt ID P18827)>gi|29568086|ref|NP_002988.3|syndecan-1前驅物[智人]
MRRAALWLWLCALALSLQPALPQIVATNLPPEDQDGSGDDSDNFSGSGAGALQDITLSQQTPSTWKDTQLLTAIPTSPEPTGLE
ATAASTSTLPAGEGPKEGEAVVLPEVEPGLTAREQEATPRPRETTQLPTTHQASTTTATTAQEPATSHPHRDMQPGHHETSTPAGPSQADLHTPHTEDGGPSATERAAEDGASSQLPAAEGSGEQDFTFETSGENTAVVAVEPDRRNQSPVDQGATGASQGLLDRKEVLGGVIAGGLVGLIFAVCLVGFMLYRMKKKDEGSYSLEEPKQANGGAYQKPTKQEEFYA
(18)整合素αV(Genbank登錄號：NP_002201.1)>gi|4504763|ref|NP_002201.1|整合素α-V異構型1前驅物[智人]
MAFPPRRRLRLGPRGLPLLLSGLLLPLCRAFNLDVDSPAEYSGPEGSYFGFAVDFFVPSASSRMFLLVGAPKANTTQPGIVEGGQVLKCDWSSTRRCQPIEFDATGNRDYAKDDPLEFKSHQWFGASVRSKQDKILACAPLYHWRTEMKQEREPVGTCFLQDGTKTVEYAPCRSQDIDADGQGFCQGGFSIDFTKADRVLLGGPGSFYWQGQLISDQVAEIVSKYDPNVYSIKYNNQLATRTAQAIFDDSYLGYSVAVGDFNGDGIDDFVSGVPRAARTLGMVYIYDGKNMSSLYNFTGEQMAAYFGFSVAATDINGDDYADVFIGAPLFMDRGSDGKLQEVGQVSVSLQRASGDFQTTKLNGFEVFARFGSAIAPLGDLDQDGFNDIAIAAPYGGEDKKGIVYIFNGRSTGLNAVPSQILEGQWAARSMPPSFGYSMKGATDIDKNGYPDLIVGAFGVDRAILYRARPVITVNAGLEVYPSILNQDNKTCSLPGTALKVSCFNVRFCLKADGKGVLPRKLNFQVELLLDKLKQKGAIRRALFLYSRSPSHSKNMTISRGGLMQCEELIAYLRDESEFRDKLTPITIFMEYRLDYRTAADTTGLQPILNQFTPANISRQAHILLDCGEDNVCKPKLEVSVDSDQKKIYIGDDNPLTLIVKAQNQ
GEGAYEAELIVSIPLQADFIGVVRNNEALARLSCAFKTENQTRQVVCDLGNPMKAGTQLLAGLRFSVHQQSEMDTSVKFDLQIQSSNLFDKVSPVVSHKVDLAVLAAVEIRGVSSPDHIFLPIPNWEHKENPETEEDVGPVVQHIYELRNNGPSSFSKAMLHLQWPYKYNNNTLLYILHYDIDGPMNCTSDMEINPLRIKISSLQTTEKNDTVAGQGERDHLITKRDLALSEGDIHTLGCGVAQCLKIVCQVGRLDRGKSAILYVKSLLWTETFMNKENQNHSYSLKSSASFNVIEFPYKNLPIEDITNSTLVTTNVTWGIQPAPMPVPVWVIILAVLAGLLLLAVLVFVMYRMGFFKRVRPPQEEQEREQLQPHENGEGNSET
(19)畸胎瘤衍生生長因子1蛋白TDGF1(Genbank登錄號：NP_003203.1)>gi|4507425|ref|NP_003203.1|畸胎瘤衍生生長因子1異構型1前驅物[智人]
MDCRKMARFSYSVIWIMAISKVFELGLVAGLGHQEFARPSRGYLAFRDDSIWPQEEPAIRPRSSQRVPPMGIQHSKELNRTCCLNGGTCMLGSFCACPPSFYGRNCEHDVRKENCGSVPHDTWLPKKCSLCKCWHGQLRCFPQAFLPGCDGLVMDEHLVASRTPELPPSARTTTFMLVGICLSIQSYY
(20)前列腺專一性膜抗原PSMA(Swiss Prot ID：Q04609)>gi|4758398|ref|NP_004467.1|麩醯胺酸羧基肽酶2異構型1[智人]
MWNLLHETDSAVATARRPRWLCAGALVLAGGFFLLGFLFGWFIKSSNEATNITPKHNMKAFLDELKAENIKKFLYNFTQIPH
LAGTEQNFQLAKQIQSQWKEFGLDSVELAHYDVLLSYPNKTHPNYISIINEDGNEIFNTSLFEPPPPGYENVSDIVPPFSAFSPQGMPEGDLVYVNYARTEDFFKLERDMKINCSGKIVIARYGKVFRGNKVKNAQLAGAKGVILYSDPADYFAPGVKSYPDGWNLPGGGVQRGNILNLNGAGDPLTPGYPANEYAYRRGIAEAVGLPSIPVHPIGYYDAQKLLEKMGGSAPPDSSWRGSLKVPYNVGPGFTGNFSTQKVKMHIHSTNEVTRIYNVIGTLRGAVEPDRYVILGGHRDSWVFGGIDPQSGAAVVHEIVRSFGTLKKEGWRPRRTILFASWDAEEFGLLGSTEWAEENSRLLQERGVAYINADSSIEGNYTLRVDCTPLMYSLVHNLTKELKSPDEGFEGKSLYESWTKKSPSPEFSGMPRISKLGSGNDFEVFFQRLGIASGRARYTKNWETNKFSGYPLYHSVYETYELVEKFYDPMFKYHLTVAQVRGGMVFELANSIVLPFDCRDYAVVLRKYADKIYSISMKHPQEMKTYSVSFDSLFSAVKNFTEIASKFSERLQDFDKSNPIVLRMMNDQLMFLERAFIDPLGLPDRPFYRHVIYAPSSHNKYAGESFPGIYDALFDIESKVDPSKAWGEVKRQIYVAAFTVQAAAETLSEVA
(21)酪胺酸蛋白質激酶EPHA2(Swiss Prot ID：P29317)>gi|32967311|ref|NP_004422.2|A型ephrin受體2前驅物[智人]
MELQAARACFALLWGCALAAAAAAQGKEVVLLDFAAAGGELGWLTHPYGKGWDLMQNIMNDMPIYMYSVCNVMSGDQDNWLRTNWVYRGEAERIFIELKFTVRDCNSFPGGASSCKETFNLYYAESDLDYGTNFQKRLFTKIDTIAPDEITVSSDFEARHVKLNVEERSVGPLTRKGFYLAFQDIGACVALLSVRVYYKKCPEL
LQGLAHFPETIAGSDAPSLATVAGTCVDHAVVPPGGEEPRMHCAVDGEWLVPIGQCLCQAGYEKVEDACQACSPGFFKFEASESPCLECPEHTLPSPEGATSCECEEGFFRAPQDPASMPCTRPPSAPHYLTAVGMGAKVELRWTPPQDSGGREDIVYSVTCEQCWPESGECGPCEASVRYSEPPHGLTRTSVTVSDLEPHMNYTFTVEARNGVSGLVTSRSFRTASVSINQTEPPKVRLEGRSTTSLSVSWSIPPPQQSRVWKYEVTYRKKGDSNSYNVRRTEGFSVTLDDLAPDTTYLVQVQALTQEGQGAGSKVHEFQTLSPEGSGNLAVIGGVAVGVVLLLVLAGVGFFIHRRRKNQRARQSPEDVYFSKSEQLKPLKTYVDPHTYEDPNQAVLKFTTEIHPSCVTRQKVIGAGEFGEVYKGMLKTSSGKKEVPVAIKTLKAGYTEKQRVDFLGEAGIMGQFSHHNIIRLEGVISKYKPMMIITEYMENGALDKFLREKDGEFSVLQLVGMLRGIAAGMKYLANMNYVHRDLAARNILVNSNLVCKVSDFGLSRVLEDDPEATYTTSGGKIPIRWTAPEAISYRKFTSASDVWSFGIVMWEVMTYGERPYWELSNHEVMKAINDGFRLPTPMDCPSAIYQLMMQCWQQERARRPKFADIVSILDKLIRAPDSLKTLADFDPRVSIRLPSTSGSEGVPFRTVSEWLESIKMQQYTEHFMAAGYTAIEKVVQMTNDDIKRIGVRLPGHQKRIAYSLLGLKDQVNTVGIPI
(22)表面蛋白SLC44A4(Genbank Accession No：NP_001171515)>gi|295849282|ref|NP_001171515.1|類膽鹼轉運子蛋白4異構型2[智人]
MGGKQRDEDDEAYGKPVKYDPSFRGPIKNRSCTDVICCVLFLLFILGYIVVGIVAWLYGDPRQVLYPRNSTGAYCGMGENKDKPYLLYFNIFSCILSSNIISVAENGLQCPTPQTVITSLQQELCPSFLLPSAPALGRCFPWTNVTPPALPGITNDTTIQQGISGLIDSLNARDISVKIFEDFAQSWYWILVALGVALVLSLLFILLLRLVAGPLVLVLILGVLGVLAYGIYYCWEEYRVLRDKGASISQLGFTTNLSAYQSVQETWLAALIVLAVLEAILLLMLIFLRQRIRIAIALLKEASKAVGQMMSTMFYPLVTFVLLLICIAYWAMTALYLATSGQPQYVLWASNISSPGCEKVPINTSCNPTAHLVNSSCPGLMCVFQGYSSKGLIQRSVFNLQIYGVLGLFWTLNWVLALGQCVLAGAFASFYWAFHKPQDIPTFPLISAFIRTLRYHTGSLAFGALILTLVQIARVILEYIDHKLRGVQNPVARCIMCCFKCCLWCLEKFIKFLNRNAYIMIAIYGKNFCVSAKNAFMLLMRNIVRVVVLDKVTDLLLFFGKLLVVGGVGVLSFFFFSGRIPGLGKDFKSPHLNYYWLPIMTSILGAYVIASGFFSVFGMCVDTLFLCFLEDLERNNGSLDRPYYMSKSLLKILGKKNEAPPDNKKRKK
(23)表面蛋白BMPR1B(SwissProt：O00238)
(24)轉運蛋白SLC7A5(SwissProt：Q01650)
(25)上皮前列腺抗原STEAP1(SwissProt：Q9UHE8)
(26)卵巢癌抗原MUC16(SwissProt：Q8WXI7)
(27)轉運蛋白SLC34A2(SwissProt：O95436)
(28)表面蛋白SEMA5b(SwissProt：Q9P283)
(29)表面蛋白LYPD1(SwissProt：Q8N2G4)
(30)內皮受體B型EDNRB(SwissProt：P24530)
(31)環指蛋白RNF43(SwissProt：Q68DV7)
(32)前列腺癌連結蛋白STEAP2(SwissProt：Q8NFT2)
(33)陽離子通道TRPM4(SwissProt：Q8TD43)
(34)補體受體CD21(SwissProt：P20023)
(35)B-細胞抗原受體複合物連結蛋白CD79b(SwissProt：P40259)
(36)細胞黏附抗原CEACAM6(SwissProt：P40199)
(37)雙肽酶DPEP1(SwissProt：P16444)
(38)介白素受體IL20Ralpha(SwissProt：Q9UHF4)
(39)蛋白多糖BCAN(SwissProt：Q96GW7)
(40)ephrin受體EPHB2(SwissProt：P29323)
(41)前列腺幹細胞連結蛋白PSCA(Genbank登錄號：NP_005663.2)
(42)表面蛋白LHFPL3(SwissProt：Q86UP9)
(43)受體蛋白TNFRSF13C(SwissProt：Q96RJ3)
(44)B-細胞抗原受體複合物連結蛋白CD79a(SwissProt：P11912)
(45)受體蛋白CXCR5(SwissProt：P32302)
(46)離子通道P2X5(SwissProt：Q93086)
(47)淋巴細胞抗原CD180(SwissProt：Q99467)
(48)受體蛋白FCRL1(SwissProt：Q96LA6)
(49)受體蛋白FCRL5(SwissProt：Q96RD9)
(50)MHC第II類分子Ia抗原HLA-DOB(Genbank登錄號：NP_002111.1)
(51)T-細胞蛋白VTCN1(SwissProt：Q7Z7D3)。在一本發明較佳的主題中，癌標靶分子係由癌標靶分子(1)-(51)組成之群中選出。
在另外本發明較佳的主題中，結合劑係與由癌標靶分子(1)-(51)組成之群中選出之胞外癌標靶分子結合。
在另外本發明特佳的主題中，結合劑係專一性與由癌標靶分子(1)-(51)組成之群中選出之胞外癌標靶分子結合。
在一本發明特佳的主題中，癌標靶分子係由下列組成之群中選出：EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a(NP_055215.2)和羧酸酐酶IX(CA IX；NP_001207.2)。
在另外本發明特佳的主題中，結合劑係與由下列組成之群中選出之胞外癌標靶分子結合：EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a(NP_055215.2)和羧酸酐酶IX(CA IX；Q16790)。
在另外本發明特佳的主題中，結合劑係專一性與由下列組成之群中選出之胞外癌標靶分子結合：EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a(NP_055215.2)和羧酸酐酶IX(CA IX；Q16790)。
在一較佳的實施例中，結合劑在與其目標細胞上的胞外標靶分子結合後，因結合而被內化。此效應為結合劑-藥物接合物，其可為免疫接合物或ADC，被目標細
胞吸收。
在一實施例中，此接合劑為結合蛋白。在一較佳的實施例中，此結合劑為抗體、抗原結合抗體片段、多專一性抗體或抗體模擬物。
較佳的抗體模擬物有親和體(affibody)、Adnectin、抗運載蛋白(anticalin)、DARPin、高親和多聚體(avimer)和奈米抗體(nanobodies)。較佳的多專一性抗體為雙專一性和三專一性抗體。
在一較佳的實施例中，該結合劑為抗體、抗原結合抗體片段，更佳地分離的抗體或分離的抗原結合抗體片段。
較佳的抗原結合抗體片段有Fab、Fab’、F(ab’)2和Fv片段、雙抗體、DAb、直鏈抗體和scFv。特佳地為Fab、雙抗體和scFv。
在一特佳的實施例中，該結合劑為抗體。特佳地為單株抗體或其抗原結合抗體片段。另外特佳的為人類、人源化或嵌合抗體或其抗原結合抗體片段。
與癌標靶分子結合之抗體或抗原結合抗體片段可由本項技術之一般技術者使用已知的方法，例如化學合成或重組表現來製備。癌標靶分子之結合劑可從市面取得或可由本項技術之一般技術者，使用已知的方法，例如化學合成或重組表現來製備。另外製備抗體或抗原結合抗體片段之方法係描述於WO 2007/070538(參見第22頁“Antibodies”)。熟習本項技術者已知如何匯集例如
噬菌體表現庫(例如Morphosys HuCAL Gold)之方法及用於尋找抗體或抗原結合抗體片段(參見WO 2007/070538，第24頁ff和第70頁之實例，第72頁之實例2)。使用B細胞之DNA庫製備抗體之另外的方法係描述於，例如26頁(WO 2007/070538)。人源化抗體之方法係描述於WO2007070538之第30-32頁和詳細描述於Queen等人，Pros.Natl.Acad.Sci.USA 86：10029-10033,1989或於WO 90/0786中。再者，用於一般蛋白和特定抗體的重組表現方法已為熟習本項技術者所知(參見，例如Berger和Kimrnel(Guide to Molecular Cloning Techniques,Methods in Enzymology,Vol.152,Academic Press,Inc.)；Sambrook等人，(Molecular Cloning：A Laboratory Manual,(Second Edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press；Cold Spring Harbor,N.Y.；1989)Vol.1-3)；Current Protocols in Molecular Biolony,(F.M.Ausabel等人[Eds.]，Current Protocols,Green Publishing Associates,Inc./John Wiley & Sons,Inc.)；Harlow等人，(Monoclonal Antibodies：A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press(19881,Paul[Ed.])；Fundamental Immunology,(Lippincott Williams & Wilkins(1998))；及Harlow，等人，(Using Antibodies：A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press(1998))。熟習本項技術者知道用於表現蛋白/抗體所須之對應的載體、啟動子
和訊息胜肽。一般性的方法亦描述於WO 2007/070538的第41-45頁。製備抗體之方法係描述於，例如WO 2007/070538之第74頁ff的實例6中。可在抗體與其抗原結合後，測量抗體內化之方法已為熟習本項技術者所了解並描述於例如WO 2007/070538之第80頁。熟習本項技術者能使用已用於製備碳酸酐酶IX(Mn)抗體之WO 2007/070538中所述的方法，來製備具有不同標靶分子專一性之抗體。
與癌標靶分子EGFR結合之抗體的實例有西妥昔單抗(INN編號7906)、帕尼單抗(panitumumab)(INN編號8499)和尼妥珠單抗(nimotuzumab)(INN編號8545)。西妥昔單抗(藥物銀行登錄號DB00002)為於SP2/0小鼠骨髓瘤細胞中產生的嵌合抗-EGFR1抗體並由ImClone Systems公司/Merck KgaA/Bristol-Myers Squibb公司所販售。西妥昔單抗適於治療帶有野生型K-Ras基因之轉移性、EGFR表現的大腸直腸癌。其具有10-10M之親和力。
DILLTQSPVILSVSPGERVSFSCRASQSIGTNIHWYQQRTNGSPRLLIKYASESISGIPSRFSGSGSGTDFTLSINSVESEDIADYYCQQNNNWPTTFGAGTKLELKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTA
SVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTNYGVHWVRQSPGKGLEWLGVIWSGGNTDYNTPFTSRLSINKDNSKSQVFFKMNSLQSNDTAIYYCARALTYYDYEFAYWGQGTLVTVSAASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
帕尼單抗(INN編號8499)(藥物銀行登錄號DB01269)為專一性與人類EGF受體1結合之重組的單株人類IgG2抗體，並由Abgenix/Amgen公司所販售。帕尼單抗係源自基因轉殖小鼠(XenoMouse)之免疫接種。這些小鼠能製造人類免疫球蛋白(輕鏈和重鏈)。選擇產生抗EGFR抗體之專一性B-細胞選殖株，並將此選殖株以CHO細胞(中國倉鼠子宮細胞)無限增殖。將這些細胞用於製造100%人類抗體。帕尼抗體適用於治
療對氟嘧啶(fluoropyrimidine)、奧沙利鉑(oxaliplatin)和伊立替康(irinotecan)之化學治療具抗藥性的EGFR-表現、轉移性大腸直腸癌。其具有10-11M之親和力。
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYFCQHFDHLPLAFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSVSSGDYYWTWIRQSPGKGLEWIGHIYYSGNTNYNPSLKSRLTISIDTSKTQFSLKLSSVTAADTAIYYCVRDRVTGAFDIWGQGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
尼妥珠單抗(INN編號8545)(EP 00586002,
EP 00712863)為與人類EGF受體結合之人源化單株IgG1抗體並由YM BioScienecs公司(加拿大密西沙加)所販售。其係於非分泌性NSO細胞(哺乳動物細胞)中所產生。尼妥珠單抗係核准用於治療頭頸腫瘤、高度惡性星形細胞瘤和多型性神經膠母細胞瘤(EU和US未核准)和胰臟癌(罕用藥物，EMA)。其具有10-8M之親和力。
EGFR抗體之另外的實例係如下：
˙扎魯木單抗(Zalutumumab)/2F8/HuMax-EGFr，來自Genmab A/S(WO 02/100348、WO 2004/056847，INN編號8605)
˙萘昔木單抗(Necitumumab)/11F8、ImClone/IMC-11F8、來自ImClone Systems公司[Eli Lilly & Co](WO 2005/090407(EP 01735348-A1、US 2007/0264253-A1、US 7,598,350、WO 2005/090407-A1)，INN編號9083)
˙馬妥珠單抗(Matuzumab)/抗-EGFR MAb、Merck KGaA/抗-EGFR MAb、Takeda/EMD 72000/EMD-6200/EMD-72000和EMD-55900/MAb 425/單株抗體425，來自Merck KGaA/Takeda(WO 92/15683，INN編號8103(Matuzumab))
˙RG-7160/GA-201/GA201/R-7160/R7160/RG7160/RO-4858696/RO-5083945/RO4858696/RO5083945，來自Glycart Biotechnology AG(Roche Holding AG)(WO 2010/112413-A1、WO 2010/115554)
˙GT-MAB 5.2-GEX/CetuGEX，來自Glycotope GmbH(WO 2008/028686-A2(EP 01900750-A1、EP 01911766-A1、EP 02073842-A2、US 2010/0028947-A1)
˙ISU-101，來自Isu Abxis Inc(ISU Chemical Co Ltd)/Scancell(WO 2008/004834-A1)
˙ABT-806/mAb-806/ch-806/抗-EGFR單株抗體806，來自Ludwig Institute for Cancer Research/Abbott/Life Science Pharmaceuticals(WO 02/092771、WO 2005/081854和WO 2009/023265)
˙SYM-004(含有二種嵌合IgG1抗體(992和1024))，來自Symphogen A/S(WO 2010/022736-A2)
˙MR1-1/MR1-1KDEL，來自IVAX Corp(Teva Pharmaceutical Industries Ltd)(Duke University)，(Patent：WO2001/062931-A2)
˙抗缺失突變體抗體、EGFRvIII，來自Amgen/Abgenix(WO 2005/010151,US 7,628,986)
˙SC-100，來自Scancell Ltd(WO 01/088138-A1)
˙MDX-447/EMD 82633/BAB-447/H 447/MAb、EGFR、Medarex/Merck KgaA，來自Bristol-Myers Squibb(US)/Merck KGaA(DE)/Takeda(JP)，(WO 91/05871,WO 92/15683)
˙Anti-EGFR-Mab，來自Xencor(WO 2005/056606)
˙DXL-1218/抗-EGFR單株抗體(癌)，InNexus，來自InNexus Biotechnology Inc.,Pharmaprojects PH048638。
在一較佳的實施例中，抗-EGFR抗體係由下列組成之群中選出：西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗、扎魯木單抗、萘昔木單抗、馬妥珠單抗、RG-716、GT-MAB 5.2-GEX、ISU-101、ABT-806、SYM-004、MR1-1、SC-100、MDX-447和DXL-1218。
在一特佳的實施例中，抗-EGFR抗體係由下列組成之群中選出：西妥昔單抗、扎魯木單抗、萘昔木單抗和馬妥珠單抗。
熟習技術者，從上述抗體之CDR區，藉由序列變化，了解可用於製備另外的抗體之方法，這些另外的抗體對標靶分子具有類似或更佳的親和力及/或專一性。
在一另外的實施例中，該抗-EGFR抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包含任一下列抗體之三個輕鏈CDR區和三個重鏈CDR區的抗體或抗原結合抗體片段：西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗、扎魯木單抗、萘昔木單抗、馬妥珠單抗、RG-716、GT-MAB 5.2-GEX、ISU-101、ABT-806、SYM-004、MR1-1、SC-100、MDX-447和DXL-1218。
在另一實施例中，抗-EGFR抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：
包含任一下列抗體之三個輕鏈CDR區和三個重鏈CDR區的抗體或抗原結合抗體片段：西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗、扎魯木單抗、萘昔木單抗、馬妥珠單抗。
與癌標靶分子碳酸酐酶IX結合之抗體的實例係描述於WO 2007/070538-A2中(例如，申請專利範圍第1-16項)。
在一較佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體或抗原結合抗體片段係由下列抗-碳酸酐酶IX抗體或抗原結合抗體片段組成之群中選出：3ee9(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(a))、3ef2(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(b))、1e4(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(c))、3a4(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(d))、3ab4(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(e))、3ah10(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(f))、3bb2(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(g))、1aa1(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(h))、5a6(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(i))和5aa3(WO 2007/070538-A2之申請專利範圍第4項(j))。
在一較佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：
包括3ee9抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括3ef2抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括1e4抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括3a4抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括3ab4抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括3ah10抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括3bb2抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，包括1aa1抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)，
包括5a6抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)及包括5aa3抗體之三個輕鏈CDR區序列和三個重鏈CDR區序列的抗-碳酸酐酶IX抗體或其抗原結合抗體片段(來自WO 2007/070538-A2)。本處所指之CDR區序列係揭示於WO 2007/070538-A2第128-130頁的圖2a-2c中。
在一較佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包括3ee9抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，係如WO 2007/070538-A2第137頁圖4b中所示，包括3ef2抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第138頁圖4c和第137頁圖4b中所示，包括1e4抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第136頁的圖4a中所示，包括3a4抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第136頁的圖4a中所示，包括3ab4抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第
136頁的圖4a中所示，包括3ah10抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第136頁的圖4a中所示，包括3bb2抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第137頁的圖4b中所示，包括1aa1抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第136頁的圖4a中所示，包括5a6抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第137頁的圖4b中所示，及包括5aa3抗體之可變輕鏈和可變重鏈之胺基酸序列的抗體或抗原結合抗體片段，如WO 2007/070538-A2第137頁的圖4b中所示。
在一特佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體為來自WO 2007/070538-A2之3ee9抗體片段。
在一特佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體或抗原結合抗體片段係包括3ee9抗體之可變重鏈CDR區的胺基酸序列(VH3-CDR1：GFTFSSYGMS；VH3-CDR2：GISSLGSTTYYADSVKG；VH3-CDR3：TGSPGTFMHGDH，參見WO 2007/070538-A2第128頁的圖2a)和3ee9抗體之可變輕鏈CDR區的胺基酸序
列(VLk1-CDR1：RASQDINNYLS；VLk1-CDR2：YGASNLQS；VLk1-CDR3：QQYYGRPT，參見WO 2007/070538-A2第129頁的圖2b)。在一特佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體或抗原結合抗體片段係包括3ee9抗體之可變重鏈的胺基酸序列(VH3：ELVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMSWVRQAPGKGLEWVSGISSLGSTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTGSPGTFMHGDHWGQGTLVTVSS，參見WO 2007/070538-A2第137頁的圖4b)和3ee9抗體之可變輕鏈的胺基酸序列(VLk1：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRaSQDINNYLSWYQQKPGKAPKLLIYGASNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQYYGRPTTFGQGTKVEIKRT，參見WO 2007/070538-A2第137頁的圖4b)。
在一較佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體3ee9為一IgG抗體。
在一特佳的實施例中，抗-碳酸酐酶IX抗體3ee9為一IgG1抗體(3ee9-IgG1)，其中重鏈之胺基酸序列係包括下列序列：QVELVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMSWVRQAPGKGLEWVSGISSLGSTTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTGSPGTFMHGDHWGQGTLVTVSSA
STKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK及輕鏈之胺基酸序列係包括下列序列：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDINNYLSWYQQKPGKAPKLLIYGASNLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQYYGRPTTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
本發明另一方面係提供抗-碳酸酐酶IX抗體3ee9-IgG1。
C4.4a抗體和抗原結合抗體片段之實例係描述於下。抗體之序列係如表1所示，其中各列分別產生第1欄所列的抗體之個別可變輕鏈和可變重鏈的CDR胺基酸序列。亦指出各例中，第1欄所示的抗體之可變輕鏈和可變重鏈的CDR胺基酸序列和核酸序列。
在一實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段係與C4.4a之S1區S1(SEQ ID NO：1之胺基酸位置1-85)結合。
在一實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段係與人類C4.4a(SEQ ID NO：1)及小鼠C4.4a(SEQ ID NO：2)交叉反應。
在一實施例中，抗-C4.4a抗體或其抗原結合抗體片段，在與表現C4.4a之細胞結合後，被細胞所內化。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段係與M31-B01抗體及/或M20-D02-S-A抗體競爭和C4.4a結合。M31-B01和M20-D02-S-A抗體係競爭與C4.4a之結合。B01-1至B01-12抗體係藉由親和力成熟從M31-B01所製備，並與M31-B01競爭和C4.4a之結合。D02-1至D02-13抗體係係藉由親和力成熟從M20-D02-S-A所製備，並與M20-D02-S-A競爭和C4.4a之結合。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括至少一、二或三個表1或表2中所給的CDR胺基酸序列。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括至少一、二或三個表1或表2中所給的抗體之CDR胺基酸序列。
在一另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗
體片段包括至少一、二或三個表1或表2中所給的抗體之可變重鏈的CDR胺基酸序列。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括與表1或表2中可變輕鏈之CDR胺基酸序列和可變重鏈之CDR胺基酸序列具有至少50%、60%、70%、80%、90%或95%一致性。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括：符合CDR序列SEQ ID NO：297(CDR H1)、SEQ ID NO：298(CDR H2)和SEQ ID NO：299(CDR H3)之重鏈CDR序列，及符合CDR序列SEQ ID NO：300(CDR L1)、SEQ ID NO：22(CDR L2)和SEQ ID NO：301(CDR L3)之輕鏈CDR序列，或符合CDR序列SEQ ID NO：302(CDR H1)、SEQ ID NO：303(CDR H2)和SEQ ID NO：304(CDR H3)之重鏈CDR序列，及符合CDR序列SEQ ID NO：305(CDR L1)、SEQ ID NO：306(CDR L2)和SEQ ID NO：307(CDR L3)之輕鏈CDR序列。
在一另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括與表1或表2中所給的抗體之可變輕鏈和可變重鏈具有至少50%、60%、70%、80%、90%或95%一致性。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括表1或表2中所給的抗體之三個可變輕鏈CDR
胺基酸序列和三個可變重鏈CDR胺基酸序列。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括表1或表2中所給的抗體之一可變輕鏈及/或一可變重鏈。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體或抗原結合抗體片段包括表1或表2中所給的抗體之可變輕鏈和可變重鏈。
在一較佳的實施例中，C4.4a抗體和抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包括以SEQ ID NO：75-77序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：78-80序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(B01-10)，包括以SEQ ID NO：5、9和13序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：17、21和25序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(M31-B01)，包括以SEQ ID NO：6、10和14序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：18、22和26序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(M20-D02-S-A)，包括以SEQ ID NO：7、11和15序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：19、23和27序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(M60-G03)，包括以SEQ ID NO：8、12和16序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：20、24和28序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(36-H02)，
包括以SEQ ID NO：45-47序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：48-50序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(B01-3)，包括以SEQ ID NO：55-57序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：58-60序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(B01-5)，包括以SEQ ID NO：65-67序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：68-70序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(B01-7)，包括以SEQ ID NO：85-87序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：88-90序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(B01-12)，包括以SEQ ID NO：95-97序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：98-100序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(D02-4)，包括以SEQ ID NO：105-107序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：108-110序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(D02-6)，包括以SEQ ID NO：115-117序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：118-120序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(D02-7)，包括以SEQ ID NO：125-127序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：128-130序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(D02-11)，
包括以SEQ ID NO：135-137序列表示之可變重鏈CDR序列，和包括以SEQ ID NO：138-140序列表示之可變輕鏈CDR序列的抗體(D02-13)，在一較佳的實施例中，抗-C4.4a抗體和抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包括以SEQ ID NO：81序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：82序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(B01-7)，包括以SEQ ID NO：33序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：29序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(M31-B01)，包括以SEQ ID NO：34序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：30序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(M20-D02 S-A)，包括以SEQ ID NO：35序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：31序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(M60-G03)，包括以SEQ ID NO：36序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：32序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(M36-H02)，包括以SEQ ID NO：51序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：52序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(B01-3)，包括以SEQ ID NO：61序列表示之可變重鏈的胺基酸
序列，和包括以SEQ ID NO：62序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(B01-5)，包括以SEQ ID NO：71序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：72序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(B01-7)，包括以SEQ ID NO：91序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：92序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(B01-12)，包括以SEQ ID NO：101序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：102序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(D02-4)，包括以SEQ ID NO：111序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：112序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(D02-6)，包括以SEQ ID NO：121序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：122序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(D02-7)，包括以SEQ ID NO：131序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：132序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(D02-11)，包括以SEQ ID NO：141序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：142序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列之抗體(D02-13)。
在另外的實施例中，抗-C4.4a抗體係包括表2所給
的抗體之輕鏈和重鏈。
在一較佳的實施例中，抗-C4.4a抗體係包括表2所給的抗體之輕鏈和重鏈。
在一特佳的實施例中，C4.4a抗體係由下列組成之群中選出：包括以SEQ ID NO：346序列表示之輕鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：347序列表示之重鏈的胺基酸序列之抗體(M31-B01)，包括以SEQ ID NO：352序列表示之輕鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：353序列表示之重鏈的胺基酸序列之抗體(B01-3)，包括以SEQ ID NO：364序列表示之輕鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：365序列表示之重鏈的胺基酸序列之抗體(B01-10)，及包括以SEQ ID NO：382序列表示之輕鏈的胺基酸序列，和包括以SEQ ID NO：383序列表示之重鏈的胺基酸序列之抗體(D02-6)。
本發明另一方面係提供抗-C4.4a抗體IgG，其包括表2所給的抗體之輕鏈和重鏈的胺基酸序列。
與癌標靶分子Her2結合之一抗體的實例為曲妥珠單抗(Genentech)。曲妥珠單抗為(除了其他疾病外)用於治療乳癌之人源化抗體。與癌標靶分子CD20結合之一抗體的實例為利妥昔單抗(Genentech)。利妥昔單抗(CAS編號：174722-31-7)為用於治療非何杰金氏淋巴瘤之嵌合抗體。與癌標靶分子CD52結合之一抗體的實例為阿來組單抗(alemtuzumab)(Genzyme)。阿來組單抗(CAS編號：216503-57-0)為用於治療慢性淋巴性白血病之人源化抗體。
依照本發明特佳的結合劑為抗-間皮素抗體，更特佳地人類或人源化抗-間皮素抗體。抗體較佳地係具有至少10-7 M之親和力(為Kd值；換言之，較佳地具有小於10-7 M之Kd值)，較佳地至少10-8 M，更佳地在
10-9 M至10-11 M範圍內。Kd值可例如以表面電漿共振光譜來測定。
本發明抗體-藥物接合物同樣具有這些範圍內之親和力。此親和力較佳地實質上不會受藥物接合之影響(一般，親和力下降少於一量級，換言之，例如最多從10-8 M變為10-7 M)。
依照本發明所用的抗體較佳地係以高選擇性為著稱。當本發明抗體展現對標靶蛋白之親和力時，其比對無關的其他抗源，例如人類血清白蛋白，存有較佳至少2倍，較佳地5倍或更佳地10倍之高選擇性(親和力，例如可藉由表面電將共振光譜來測定)。
再者，所用的本發明抗體較佳地係具交叉反應性。為了能促進和提高闡明臨床前研究，例如毒性學或活性研究(例如於異種移植小鼠中)，若本發明所用的抗體不僅與人類標靶蛋白結合亦與用於研究中之物種的標靶蛋白結合為有利的。在一實施例中，本發明所用的抗體，除了人類標靶蛋白外，係與至少一另外物種之標靶蛋白交叉反應。就毒性學和活性研究，其較佳的係使用囓齒類家族、狗和非人類靈長類之物種。較佳的齧齒類物種為小鼠和大鼠。較佳的非人類靈長類物種為恆河猴、黑猩猩和長尾獼猴。
在一實施例中，本發明所用的抗體，除了人類標靶蛋白外，係與至少一種由下列組成之群中選出的另外物種之標靶蛋白交叉反應：小鼠、大鼠和長尾獼猴(Macaca
fascicularis)。特佳的本發明所用的抗體除了人類標靶蛋白外，係至少與小鼠的標靶蛋白交叉反應。較佳的係給予交叉反應性之抗體，其對於另外非人類物種之標靶蛋白的親和力與對人類標靶蛋白的親和力之差異不大50倍，更特佳地不大於10倍。
本發明所用的抗體另外較佳地係以與間皮素不變的結合著稱。不變結合，例如係由於用於與間皮素之表位結合的本發明抗體，其不能被另外的胞外蛋白遮蔽之事實而受注目。此另外的胞外蛋白為，例如蛋白卵巢癌抗原125(CA125)。較佳所用的抗體因其與間皮素結合，不會被CA125阻斷而受注目。
抗間皮素抗體系描述於，例如WO 2009/068204中。這些抗體可用於本發明。
本發明另一方面係提供新的抗間皮素抗體(MF-Ta)，其胺基酸序列包括以SEQ ID NO：398(HCDR1)、SEQ ID NO：399(HCDR2)和SEQ ID NO：400(HCDR3)序列表示之可變重鏈的CDR序列，及以SEQ ID NO：401(LCDR1)、SEQ ID NO：402(LCDR2)和SEQ ID NO：403(LCDR3)序列表示之可變輕鏈的CDR序列。
在一較佳的實施例中，抗間皮素抗體MF-Ta或抗原結合抗體片段之胺基酸序列包括以SEQ ID NO：404序列表示之可變重鏈的序列，及以SEQ ID NO：405序列表示之可變輕鏈的序列。在一較佳的實施例中，抗間
皮素抗體MF-Ta或抗原結合抗體片段之胺基酸序列包括由SEQ ID NO：406之核酸序列所編碼之可變重鏈的序列，及由SEQ ID NO：407核酸序列所編碼之可變輕鏈的序列。
在一特佳的實施例中，抗間皮素抗體MF-Ta之胺基酸序列係包括以SEQ ID NO：408序列表示之重鏈序列，及以SEQ ID NO：409序列表示之輕鏈的序列。
在一特佳的實施例中，抗間皮素抗體MF-Ta之胺基酸序列係包括由SEQ ID NO：410核酸序列所編碼的重鏈序列，及由SEQ ID NO：411核酸序列所編碼的輕鏈序列。
與癌標靶分子間皮素結合的抗體之實例已為熟習技術者所知並描述於例如WO 2009/068204中，且可用於本發明之結合劑-藥物接合物。
在一結合劑-藥物接合物之實施例中，結合劑為抗間皮素抗體或抗原結合抗體片段，其中該抗體係與間皮素結合並具有不變的結合。
在一結合劑-藥物接合物之實施例中，抗間皮素抗體或抗原結合抗體片段係包括WOv2009/068204-A1(表7；第61-63頁)中所描述的抗體之三個輕鏈CDR區的胺基酸序列，及三個重鏈CDR區的胺基酸序列。
在一較佳的實施例中，抗間皮素抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包括MF-Ta抗體之三個輕鏈CDR區的胺基酸序列，及
三個重鏈CDR區的胺基酸序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-J抗體(WO2009068204-A1；表7；第61頁)之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MOR06640抗體(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-226抗體(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，及包括MOR06626抗體(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段。
在一特佳的實施例中，抗間皮素抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包括MF-Ta抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-J抗體(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MOR06640抗體(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，
包括MF-226抗體(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MOR06626(WO2009/068204-A1；表7；第61頁)抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段。
與癌標靶分子Her2結合之一抗體的實例為曲妥珠單抗(Genentech)。曲妥珠單抗為用於治療(尤其是)乳癌之人源化抗體。與癌標靶分子CD20結合之一抗體的實例為利妥昔單抗(Genentech)。利妥昔單抗(CAS編號：174722-31-7)為用於治療非何杰金氏淋巴瘤之嵌合抗體。與癌標靶分子CD52結合之一抗體的實例為阿來組單抗(alemtuzumab)(Genzyme)。阿來組單抗(CAS編號：216503-57-0)為用於治療慢性淋巴性白血病之人源化抗體。
除了曲妥珠單抗(INN 7637，CAS No：RN：180288-69-1)和帕妥珠單抗(pertuzumab)(Cas No：380610-27-5)，其他與HER2結合之抗體的實例係如揭示於WO 2009/123894-A2、WO 200/8140603-A2或WO 2011/044368-A2中之抗體。抗-HER2接合物之實例為曲妥珠單抗-艾得辛(trastuzumab-emtansine)(INN No.9295)。
與癌標靶分子CD30結合並可用於治療癌症，例如
何杰金氏淋巴癌之抗體的實例有布妥昔單抗(brentuximab)、伊妥木單抗(iratumumab)和揭示於WO 2008/092117、WO 2008/036688或WO 2006/089232中之抗體。抗-CD30接合物之實例為布妥昔單抗-維多汀(brentuximab vedotine)(INN No.9144)。
與癌標靶分子CD22結合並可用於治療癌症，淋巴癌之抗體的實例有英妥珠單抗(inotuzumab)或伊帕珠單抗(epratuzumab)。抗-CD22接合物之實例為英妥珠單抗-奥唑米星(inotuzumab ozagamycin)(INN No.8574)，或抗-CD22-MMAE和抗-CD22-MC-MMAE(CAS RN：139504-50-0和474645-27-7)。
與癌標靶分子CD33結合並可用於治療癌症，例如淋巴癌之抗體的實例有吉妥單抗(gemtuzumab)或林妥珠單抗(lintuzumab)(INN 7580)。抗-CD33接合物之實例為吉妥單抗-奧唑米星。
與癌標靶分子NMB結合並可用於治療癌症，例如黑色素瘤或乳癌之抗體的實例為格巴單抗(glembatumumab)(INN 9199)。抗-NMB接合物之實例為格巴單抗-維多汀(glembatumumab vedotine)(CAS RN：474645-27-7)。
與癌標靶分子CD56結合並可用於治療癌症，例如多發性骨髓瘤、小細胞肺癌MCC或卵巢癌之抗體的實例為羅佛單抗(lorvotuzumab)。抗-CD56接合物之實例為羅佛單抗-美登素(lorvotuzumab mertansine)(CAS
RN：139504-50-0)。
與癌標靶分子CD70結合並可用於治療癌症，例如非何杰金氏淋巴癌或腎細胞癌之抗體的實例係揭示於WO 2007/038637-A2或WO 2008/070593-A2中。抗-CD70接合物之實例為SGN-75(CD70 MMAF)。
與癌標靶分子CD74結合並可用於治療癌症，例如多發髓瘤之抗體的實例為米拉珠單抗(milatuzumab)。抗-CD74接合物之實例為米拉珠單抗-多柔比星(milatuzumab-doxorubicin)(CAS RN：23214-92-8)。
與癌標靶分子CD19結合並可用於治療癌症，例如非何杰金氏淋巴癌之抗體的實例係揭示於WO 2008/031056-A2中。另外的抗體或抗-CD19接合物(SAR3419)之實例係揭示於WO 2008/047242-A2。
與癌標靶分子黏蛋白-1(mucin-1)結合並可用於治療癌症，例如非何杰金氏淋巴癌之抗體的實例有克利伐單抗(clivatuzumab)或揭示於WO 2003/106495-A2、WO 2008/028686-A2中之抗體。抗-黏蛋白接合物之實例係揭示於WO 2005/009369-A2。
可用於治療癌症，例如多發髓瘤之與癌標靶分子CD138的抗體實例及其接合物係揭示於WO 2009/080829-A1、WO 2009/080830-A1中。
與癌標靶分子整合素αV結合並可用於治療癌症，例如骨髓瘤、肉瘤或惡性腫瘤之抗體的實例有英妥木單抗(intetumumab)(Cas RN：725735-28-4)、阿昔單抗
(abciximab)(Cas-RN：143653-53-6)、伊瑞西珠單抗(etaracizumab)(Cas-RN：892553-42-3)或揭示於US 7,465,449、EP 19859-A1、WO 2002/012501-A1或WO 2006/062779-A2中之抗體。抗-接合物之實例為英妥木單抗-DM4和揭示於WO 2007/024536-A2中之其他ADC。
與癌標靶分子TDGF1結合並可用於治療癌症之抗體的實例係揭示於WO 02/077033-A1、US 7,318,924、WO 2003/083041-A2和WO 2002/088170-A2中。抗-TDGF1接合物之實例係揭示於WO 2002/088170-A2中。
與癌標靶分子PSMA結合並可用於治療癌症，例如前列腺癌之抗體的實例係揭示於WO 97/35616-A1、WO 99/47554-A1和WO 01/009192-A1中。抗-PSMA接合物之實例係揭示於WO 2009/026274-A1中。
與癌標靶分子EPHA2結合，可用於製備接合物及可用於治療癌症之抗體的實例係揭示於WO 2004/091375-A2中。
與癌標靶分子SLC44A4結合，可用於製備接合物並可用於治療癌症，例如胰臟癌或前列腺癌之抗體的實例係揭示於WO 2009/033094-A2和US 2009/0175796-A1中。
與癌標靶分子HLA-DOB結合之抗體的實例為lym-1抗體(Cas-RN：301344-99-0)，其可用於治療癌症，
例如非何杰金氏淋巴癌。抗-HLA-DOB接合物之實例係揭示於，例如WO 2005/081711-A2中。
與癌標靶分子VTCN1結合，可用於製備接合物及並可用於治療癌症，例如卵巢癌之抗體的實例係揭示於WO 2006/074418-A2中。
本發明之化合物具有珍貴的藥理特性並可用於預防和治療人類及動物之疾病。
如基於本發明實驗部分(C-1.至C-7e.)所提出的分析所示，式(Ia)之本發明結合劑-藥物接合物(ADC)對於腫瘤細胞具有高度和專一性細胞毒殺活性。對式(Ia)之本發明結合物-藥物(ADC)接合物此高度和專一性細胞毒殺活性部分，係經由適當的新N,N-二烷基奧瑞他汀衍生物和結合劑與不僅具有酵素性、水解性或還原性可裂解預定斷裂點，供釋放帶毒體，以及無此斷裂點之連接子的組合來達成。更特言之，經由使用不具酵素性、水解性或還原性可裂解預定斷裂點，供釋放帶毒體之穩定的連接子，及在將ADC吸入腫瘤細胞後和抗體之完全的細胞內、酵素性裂解後，仍保留完整或部分完整，該活性係非常特異地侷限於腫瘤細胞。ACD和穩定的連接子間之相容性係預先假定，其中胞內所形成的代謝物可形成足夠效力，能到達其標靶並能於該處以足夠的效力對標靶產生抗增生活性，而無需事先再次以轉運蛋白施行腫瘤細胞。胞內所形成的代謝物，在吸入本發明式(Ia)化合物之後，展現還原成為轉運蛋白基質之可能
性，藉此抑制其再分配進入全身循環，及因而觸發帶毒體本身的潛在副作用。再者，創新的N-烷基連附維持單甲基-奧瑞他汀胜肽之胺基端的鹼性性質。特別是在經由離胺酸側鏈連接的本發明式(Ia)之結合劑-藥物接合物之情況下(ADC)，整體的抗體電荷仍為恆定，與所承載的帶毒體-連接子數目無關。
ADC與穩定的連接子化學和所指的標靶之相容性，結合代表相當低度的轉運蛋白基質之代謝物，加大了治療窗口。
更特言之，本發明式(Ia)之結合劑-藥物接合物對於表現間皮素之腫瘤細胞具有高度和專一性細胞毒殺活性。同時，對於非表現間皮素之活性明顯地為較弱。
基於此特徵性質，一般而言，因此本發明化合物特定程度上係適合用於治療人類和哺乳動物之過度增生性疾病。此化合物在一方面能抑制、阻斷、降低或減低細胞增生及細胞分裂，在另一方面能增加細胞凋亡。
可使用本發明化合物治療之過度增生疾病包括，特別是癌症和腫瘤疾病之群。在本發明內文中。這些應理解為係指，特別是下列疾病(但不限於此)：乳腺癌和乳腺腫瘤(乳管和小葉形式，亦為原位)、呼吸道腫瘤(小細胞和非小細胞癌、支氣管癌)、腦腫瘤(例如腦幹和下視丘之腫瘤、星細胞瘤、髓母細胞瘤、室管膜瘤和神經上皮細胞瘤及松果體腫瘤)、消化器官之腫瘤(食道、胃、膽、小腸、大腸、直腸)、肝腫瘤(包括肝細胞癌、膽管
細胞癌和混合肝細胞及膽管細胞癌)、頭頸區之腫瘤(喉頭、下咽、鼻咽、口咽、嘴唇和口腔)、皮膚腫瘤(鱗狀上皮癌、卡波西氏肉瘤、惡性黑素瘤、梅克爾細胞皮膚癌和非黑色素皮膚癌)、軟組織之腫瘤(包括軟組織癌、骨肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、淋巴肉瘤和橫紋肌肉瘤)、眼睛之腫瘤(包括眼內黑色素瘤和視網膜母細胞瘤)、內分泌和外分泌腺之腫瘤(例如甲狀腺和副甲狀腺、胰臟和唾腺之腫瘤)、泌尿道之腫瘤(膀胱、陰莖、腎、腎盂和輸尿管之腫瘤)和生殖器官之腫瘤(女性的子宮內膜、子宮頸、卵巢、陰道、外陰和子宮之腫瘤，及男性前列腺和睪丸之腫瘤)。這些亦包括實體形式之增生性血液疾病和循環血液細胞，例如淋巴瘤、白血病和骨髓增生性疾病，例如急性骨髓性、急性淋巴母細胞性、慢性淋巴細胞性、慢性粒細胞性和髮細胞白血病，以及AIDS-相關的淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、皮膚T-細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤和中樞神經系統之淋巴瘤。
較佳地可應用本發明化合物治療之過度增生性疾病為CA9-過度表現之腫瘤、乳腺癌和乳腺腫瘤(乳管和小葉形式，亦為原位)、呼吸道腫瘤(小細胞和非小細胞癌、支氣管癌)，包括較佳地非小細胞肺癌；腦腫瘤(例如腦幹和下視丘之腫瘤、星細胞瘤、髓母細胞瘤、室管膜瘤及/或神經上皮細胞瘤及松果體腫瘤)、消化器官之
腫瘤(食道、胃、膽、小腸、大腸、直腸)，包括更佳地胃腫瘤和小腸腫瘤；肝腫瘤(包括肝細胞癌、膽管細胞癌和混合的肝細胞及膽管係胞癌)、頭頸區之腫瘤(例如，喉頭、下咽、鼻咽、口咽、嘴唇、口腔、舌和食道)、泌尿道之腫瘤(膀胱、陰莖、腎、腎盂和輸尿管之腫瘤)，包括更佳地腎和膀胱之腫瘤；及/或生殖器官之腫瘤(女性的子宮內膜、子宮頸、卵巢、陰道、外陰和子宮之腫瘤，及/或男性前列腺和睪丸之腫瘤)，包括更佳地子宮頸和子宮之腫瘤。
較佳地可應用本發明化合物治療之過度增生性疾病為EGFR-過度表現之腫瘤、呼吸道腫瘤(小細胞和非小細胞癌、支氣管癌)，包括較佳地非小細胞肺癌；消化器官之腫瘤(食道、胃、膽、小腸、大腸、直腸)，包括特別是小腸腫瘤；內分泌和外分泌腺之腫瘤(例如甲狀腺和副甲狀腺、胰臟和唾腺之腫瘤)，包括較佳地胰臟；頭頸區之腫瘤(例如，喉頭、下咽、鼻咽、口咽、嘴唇、口腔、舌和食道)；及/或膠質瘤。
較佳地可應用本發明化合物治療之過度增生性疾病為間皮素-過度表現之腫瘤、生殖器官之腫瘤(女性的子宮內膜、子宮頸、卵巢、陰道、外陰和子宮之腫瘤，及/或男性前列腺和睪丸之腫瘤)，包括較佳地卵巢癌；內分泌和外分泌腺之腫瘤(例如甲狀腺和副甲狀腺、胰
臟和唾腺之腫瘤)，包括較佳地胰臟；呼吸道腫瘤(小細胞和非小細胞癌、支氣管癌)，包括較佳地非小細胞肺癌；及/或間皮瘤。
較佳地可應用本發明化合物治療之過度增生性疾病為C4.4a過度表現之腫瘤、鱗狀上皮瘤(例如子宮頸、外陰、陰道之腫瘤、肛管之腫瘤、子宮內膜、輸卵管、陰莖、食道之腫瘤、乳房、膀胱之腫瘤、膽管之腫瘤、子宮內膜、子宮和卵巢)；乳腺癌和乳腺腫瘤(乳管和小葉形式，亦為原位)、呼吸道腫瘤(小細胞和非小細胞癌、支氣管癌)，包括較佳地非小細胞肺癌、肺鱗狀上皮癌和肺腺癌；頭頸區之腫瘤(例如，喉頭、下咽、鼻咽、口咽、嘴唇、口腔、舌和食道、頭頸區之鱗狀上皮癌)；泌尿道之腫瘤(膀胱、陰莖、腎、腎盂和輸尿管之腫瘤、膀胱之鱗狀上皮癌)，包括更佳地腎和膀胱之腫瘤；皮膚腫瘤(鱗狀上皮癌、卡波西氏肉瘤、惡性黑素瘤、梅克爾細胞皮膚癌和非黑色素皮膚癌)，包括更佳地黑色素瘤；內分泌和外分泌腺之腫瘤(例如甲狀腺和副甲狀腺、胰臟和唾腺之腫瘤)，包括較佳地胰臟；消化器官之腫瘤(食道、胃、膽、小腸、大腸、直腸)，包括特別是大腸直腸癌；及/或生殖器官之腫瘤(女性的子宮內膜、子宮頸、卵巢、陰道、外陰和子宮之腫瘤，及/或男性前列腺和睪丸之腫瘤)，包括更佳地子宮頸癌。
這些人類中完整記述之疾病亦可以類似病因發生
於其他哺乳動物並可以本發明之化合物來治療。
在本發明內文中，術語「治療(treatment或treat)」係涵蓋抑制、延緩、改善、衰減、限制、壓抑、壓制或治癒病症、病痛、疾病、損傷或健康破壞、此等症狀及/或此等症狀之癥候之發生、過程或進程。術語「治療(therapy)」本處應理解係與「治療(treatment)」相同。
術語「預防(prevention)」、「預防(prophylaxis)」、「防止(preclusion)」在本發明內文中使用上係為同義，並係指避免或降低得到、經驗、經歷或具有病症、病痛、疾病、損傷或健康破壞、此等症狀及/或此等症狀之癥候的發生、過程或進程之風險。
病症、病痛、疾病、損傷或健康破壞之治療或預防可為部分或完全的。
本發明因此進一步係提供本發明化合物於治療及/或預防疾病，特別是上述疾病之用途。
本發明另外係提供本發明化合物於製備醫藥品供治療及/或預防疾病，特別是上述疾病之用途。
本發明另外係提供本發明化合物於治療及/或預防疾病，特別是上述疾病之方法中之用途。
本發明另外係提供使用一有效量之至少一種本發明化合物，供治療及/或預防疾病，特別是上述疾病之方法，。
本發明之抗-間皮素結合劑-藥物接合物較佳地係用於治療病患之癌症，其中所欲治療的病患之癌細胞係具
有間皮素表現。更佳地該治療係投予其癌細胞中間皮素表現高於健康細胞之病患。
一種鑑定對治療癌症之抗-間皮素結合劑-藥物接合物具有利反應之病患之方法，係包括測定病患的癌細胞間皮素之表現。在一實施例中，間皮素表現係以間皮素基因表現分析來測定。熟習技術者了解用於基因表現分析之方法，例如RNA偵測、定量或定性聚合酶連鎖反應或原位螢光雜交(FISH)。在另外較佳的實施例中，間皮素表現係藉由免疫組織化學以抗-間皮素抗體來測定。免疫組織化學較佳地係於經甲醛-固定的組織上進行。用於免疫組織化學之抗體係與用於接合物中為相同之抗體。用於免疫組織化學之抗體為第二抗體-較佳地專一性辨識間皮素標靶蛋白。
本發明化合物可以其本身來使用，或若需要與一或多種其他的藥理活性物質組合，只要此組合不會導致不欲的及不可接受的副作用。本發明因此另外係提供包括至少一種本發明化合物和一或多種另外的藥物之醫藥品，特別是供治療及/或預防上述疾病。
例如，本發明化合物可與已知的抗過度增生、細胞生長抑制或細胞毒性物質組合，用於治療癌症。可提及的適合用於組合之藥物例如下列：阿地白介素(aldesleukin)、阿侖磷酸(alendronic acid)、阿法干擾素(alfaferone)、阿利維甲酸(litretinoin)、安樂普利諾(allopurinol)、安樂匹(aloprim)、安洛西(aloxi)、
六甲蜜胺(altretamine)、胺基格魯米特(glutethimide)、胺磷汀(amifostine)、胺柔比星(amrubicin)、安吖啶(amsacrine、阿那曲唑(anastrozole)、安澤美(anzmet)、安然愛斯普(aranesp)、阿加來必(arglabin)、三氧化砷(arsenic trioxide)、諾曼癌素(aromasin)、5-氮胞啶(5-氮雜cytidine)、硫唑嘌呤(azathioprine)、BCG或tice-BCG、烏苯美司(bestatin)、倍他米松乙酸鹽(betamethasone acetate)、倍氯米松磷酸鈉(betamethasone sodium phosphate)、貝沙羅汀(bexarotene)、博來黴素硫酸鹽(bleomycin sulphate)、溴尿苷(broxuridine)、硼替佐米(bortezomib)、白消安(busulfan)、降鈣素(calcitonin)、卡帕什(campath)、卡培他濱(capecitabine)、卡鉑(carboplatin)、可蘇多(casodex)、西非松(cefesone)、西莫白介素(celmoleukin)、柔紅黴素(cerubidin)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、順鉑(cisplatin)、克拉屈濱(cladribin)、唑來膦酸(clodronic acid)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、阿糖胞苷(cytarabine)、達卡巴嗪(dacarbazine)、放線菌素(dactinomycin)、柔紅黴素脂質體(daunoxome)、立克樂(decadron)、立克樂磷酸鹽(decadron phosphate)、戊酸雌二醇(delestrogen)、地尼白介素融合二毒素(denileukin diftitox)、甲潑尼龍(depomedrol)、地洛瑞林(deslorelin)、右雷佐生(dexrazoxane)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、泰復肯(diflucan)、多西它賽(docetaxel)、去氧氟尿苷
(doxifluridine)、多柔比星(doxorubicin)、屈大麻酚(dronabinol)、DW-166HC、艾裡咖(eligard)、埃立特(elitek)、艾倫斯(ellence)、阿瑞吡坦(emend)、表柔比星(epirubicin)、阿法依泊汀(epoetin-alfa)、益比奧(epogen)、依鉑(eptaplatin)、左旋咪唑(ergamisol)、estrace、雌二醇(estradiol)、雌莫司汀磷酸鈉(estramustine sodium phosphate)、炔雌醇(ethinylestradiol)、氨磷汀(ethyol)、etidronic acid、etopophos、依託泊苷(etoposide)、法倔唑(fadrozole)、farstone、非格司亭(filgrastim)、非那雄胺(finasteride)、來格司亭(fligrastim)、氟尿苷(floxuridine)、氟康唑(fluconazole)、氟達拉濱(fludarabin)、5-氟去氧尿苷單磷酸鹽(5-fluorodeoxyuridine monophosphate)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)(5-FU)、富美特龍(fluoxymesterone)、氟他胺(flutamide)、福美坦(formestane)、福斯替濱(fosteabine)、福莫司汀(fotemustine)、氟維司群(fulvestrant)、gammagard、吉西他濱(gemcitabine)、吉妥單抗(gemtuzumab)、gleevec、格立得(gliadel)、戈舍瑞林(goserelin)、格拉司瓊鹽酸鹽(granisetron鹽酸鹽)、組胺瑞林(histrelin)、氫考酮(hycamtin)、氫化可的松(hydrocortone)、赤-羥基壬基腺嘌呤、羥基尿素、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)、伊達比星(idarubicin)、異環磷醯胺(ifosfamide)、干擾素-α、幹擾素-α-2、幹擾素-α-2α、幹擾素-α-2β、幹擾素-α-n1、幹擾素-α-n3、幹
擾素-β、幹擾素-γ-1α、介白素-2、(intron A、艾瑞莎(iressa)、愛萊諾迪肯(irinotecan)、康你適(kytril)、香菇多醣硫酸鹽(lentinan sulphate)、曲來唑(letrozole)、亞葉酸(leucovorin)、亮丙瑞林(leuprolide)、亮丙瑞林乙酸鹽(leuprolide acetate)、左旋咪唑(levamisole)、左亞葉酸鈣鹽(levofolic acid calcium salt)、左甲狀腺素(levothroid)、levoxyl、洛莫司汀(lomustine)、氯尼達明(lonidamine)、marinol、氮芥(mechlorethamine)、甲鈷胺(mecobalamin)、美加米星乙酸鹽(medroxyprogesterone acetate)、甲地孕酮乙酸鹽(megestrol acetate)、美法侖(melphalan)、menest、6-巰基嘌呤、美司鈉(mesna)、甲胺喋呤(methotrexate)、metvix、米替福新(miltefosine)、四環素(minocycline)、絲裂黴素C(mitomycin C)、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、modrenal、myocet、奈達鉑(nedaplatin)、neulasta、neumega、neupogen、尼魯米特(nilutamide)、諾瓦得士(nolvadex)、NSC-631570、OCT-43、奧曲肽(octreotide)、奧丹亞龍鹽酸鹽(ondansetron鹽酸鹽)、orapred、益樂鉑(oxaliplatin)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、pediapred、培門冬酶(pegaspargase)、pegasys、噴司他汀(pentostatin)、必醫你舒(picibanil)、毛果芸香鹼鹽酸鹽(pilocarpine鹽酸鹽)、吡柔比星(pirarubicin)、普卡黴素(plicamycin)、卟吩姆鈉(porfimer sodium)、潑尼莫司汀(prednimustine)、潑尼松龍(prednisolone)、潑尼松
(prednisone)、倍美力(premarin)、丙卡巴肼(procarbazine)、procrit、雷替曲塞(raltitrexed)、立比扶(rebif、錸-186依替膦酸鹽、利妥昔單抗、roferon-A、羅莫肽(romurtide)、舒樂津(salagen)、善得定(sandostatin)、沙格司亭(sargramostim)、司莫司汀(semustine)、西佐喃(sizofiran)、索布佐生(sobuzoxane)、舒汝美卓佑(solu-medrol)、鏈佐星(streptozocin)、氯化鍶-89、(synthroid)、他莫昔芬(tamoxifen)、坦洛新(tamsulosin)、他索納明(tasonermin)、睾內酯(tastolactone)、剋癌易(taxoter)、替西白介素(teceleukin)、替莫唑胺(temozolomide)、替尼泊苷(teniposide)、睪酮丙酸鹽(testosterone propionate)、testred、硫鳥嘌呤(thioguanine)、塞替派(thiotepa)、促甲狀腺素(thyrotropin)、替魯膦酸(tiludronic acid)、托泊替康(topotecan)、托瑞米芬(toremifen)、托西莫單抗(tositumomab)、曲司珠單抗(tastuzumab)、曲奧舒凡(teosulfan)、維甲酸(tretinoin)、trexall、三甲基三聚氰胺、三甲曲沙(trimetrexate)、曲普瑞林乙酸鹽(triptorelin acetate)、曲普瑞林羥萘酸鹽(triptorelin pamoate)、UFT、尿苷(uridine)、戊柔比星(valrubicin)、維司力農(vesnarinone)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春地辛(vindesine)、長春瑞濱(vinorelbine)、virulizin、卓弗蘭(zinecard)、淨司他丁斯酯(zinostatin-stimalamer)、卓弗蘭(zofran)；ABI-007、
阿考比芬(acolbifen)、actimmune、(affinitak、胺蝶呤(aminopterin)、阿佐昔芬(arzoxifen)、阿索立尼(asoprisnil)、阿他美坦(atamestane)、阿曲森坦(atrasentan)、安維汀(avastin)、BAY 43-9006、索拉非尼(sorafenib)、CCI-779、CDC-501、塞來昔布(celebrex)、西妥昔單抗(cetuximab)、克雷斯托(crisnatol)、環丙氯地孕酮乙酸鹽(cyproterone acetate)、地西他濱(decitabine)、DN-101、多柔比星-MTC、dSLIM、度他雄胺(dutasteride)、艾特哢林(edotecarin)、依氟鳥氨酸(eflornithine)、依沙替康(exatecan)、維甲醯酚胺(fenretinide)、組織胺二鹽酸鹽、組胺瑞林水凝膠植入物(histrelin hydrogel implant)、鈥-166 DOTMP、伊班膦酸(ibandronic acid)、幹擾素-γ、intron-PEG、易莎平(ixabepilone)、鑰孔蟲戚血藍蛋白(keyhole limpet hemocyanine)、L-651582、蘭瑞肽(lanreotide)、拉索昔芬(lasofoxifen)、libra、洛那法尼(lonafarnib)、米普昔芬(miproxifen)、米諾膦酸(minodronate)、MS-209、微質體MTP-PE、MX-6、諾拉曲特(nafarelin)、奈莫柔比(nemorubicin)、諾司達(neovastat)、諾拉曲特(nolatrexed)、奧利默森(oblimersen)、onko-TCS、osidem、太平洋紫杉醇聚麩胺酸鹽(paclitaxel polyglutamate)、帕米德諾內二鈉(pamidronate disodium)、PN-401、QS-21、誇西泮(quazepam)、R-1549、雷洛昔芬(raloxifen)、豹蛙酶(ranpirnas)、13-順式-retic
acid、沙鉑(satraplatin)、西奧骨化醇(seocalcitol)、T-138067、特羅凱(tarceva)、二十二碳六烯酸紫杉醇(taxoprexin)、胸腺肽(thymosin)-α-1、噻唑羧胺核苷(tiazofurin)、替吡法尼(tipifarnib)、替拉紮明(tirapazamine)、TLK-286、托瑞米芬(toremifen)、反MID-107R、伐司撲達(valspodar)、伐普肽(vapreotide)、瓦他拉尼(vatalanib)、維替泊芬(verteporfin)、長春氟寧(vinflunin)、Z-100、唑來磷酸(zoledronic acid)及這些之組合。
在一較佳的實施例中，本發明化合物可與抗過度增生劑組合，例如-此列表並非為決定性的，如下所示：胺基格魯米特、L-天門冬醯胺酶、硫唑嘌呤(azathioprine)、5-氮胞啶(5-氮雜cytidine)、博來黴素(bleomycin)、白消安(busulfan)、卡鉑(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、順鉑(cisplatin)、左旋門冬醯胺酶(colaspase)、環磷醯胺、、阿糖胞苷(cytarabine)、達卡巴嗪(dacarbazine)、放線菌素(dactinomycin)、柔紅黴素(daunorubicin)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、2',2'-二氟去氧胞苷、多西它賽(docetaxel)、多柔比星(doxorubicin)(阿黴素(adriamycin))、表柔比星(epirubicin)、伊波希隆(epothilone)和其衍生物、赤-羥基壬基腺嘌呤、炔雌醇(ethinyl-estradiol)、依託泊苷(etoposide)、、氟達拉濱磷酸鹽(fludarabin phosphate)、5-氟去氧尿苷、5-氟去氧尿苷單
磷酸鹽、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、富美特龍(fluoxymesterone)、氟他胺(flutamide)、六甲基三聚氰胺、羥基尿素、羥孕酮己酸酯、伊達比星(idarubicin)、異環磷醯胺(ifosfamide)、干擾素、愛萊諾迪肯(irinotecan)、亞葉酸(leucovorin)、洛莫司汀(lomustine)、氮芥(mechlorethamine)、美加米星乙酸鹽(medroxyprogesterone acetate)、甲地孕酮乙酸鹽(megestrol acetate)、美法侖(melphalan)、6-巰基嘌呤、、美司鈉(mesna)、甲胺喋呤(methotrexate)、絲裂黴素C、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、噴司他汀(pentostatin)、N-磷醯乙醯L-天門冬胺酸鹽(PALA)、普卡黴素(plicamycin)、潑尼松龍(prednisolone)、潑尼松(prednisone)、丙卡巴肼(procarbazine)、雷洛昔芬(raloxifen)、司莫司汀(semustine)、鏈佐星(streptozocin)、他莫昔芬(tamoxifen)、替尼泊苷(teniposide)、睪酮丙酸鹽(testosterone propionate)、硫鳥嘌呤(thioguanine)、塞替派(thiotepa)、托泊替康(topotecan)、三甲基三聚氰胺、尿苷(uridine)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春地辛(vindesine)和長春瑞濱(vinorelbine)。
本發明化合物亦可以非常有前景的方式與生物治療劑例如抗體(例如安維汀(avastin)、美羅華(rituxan)、爾必得舒(erbitux)、賀賽汀(herceptin))。本發明化合物亦可以針對血管新生作用之治療組合達到正向效用，例
如以安維汀(avastin)、阿西替尼(axitinib)、西地尼布(recentin)、瑞戈非尼(regorafenib)、索拉菲尼(sorafenib)或舒尼替尼(sunitinib)。與蛋白酶體和mTOR之抑制劑以及與抗荷爾蒙和類固醇代謝酵素抑制劑組合，同樣的特別適合，因為其較有利的副作用性質。
一般而言，可以本發明化合物與其他具有細胞抑制或細胞毒性作用之藥劑的組合實行下列目標：˙相較於以個別的藥物治療，對減緩腫瘤生長、降低其大小或甚至完全消除具改良活性；˙比單一治療，使用較低劑量化療劑之可能性；˙相較於個別給藥，具極少副作用之更耐受治療的可能性；˙可能治療更廣泛的腫瘤疾病；˙對治療達到較高的反應率；˙相較於目前標準治療，病患存活時間更長。
本發明化合物再者亦可與放射性治療及/或外科手術組合使用。
本發明另外亦提供包括至少一種本發明化合物與習用上一或多種惰性、無毒、醫藥上可接受賦形劑之醫藥品，及其用於上述目地之用途。
本發明化合物可全身性及/或局部作用。其可以適合此目的之方式來給藥，例如非經腸，可能藉由吸入或為植入物或支架。
本發明化合物可以適合這些給藥路徑之給藥形式
來投予。
非經腸給藥可以吸收步驟之分流(例如靜脈內、動脈內、心內、脊椎內或腰內)或包括吸收(例如肌肉內、皮下、皮內、經皮或腹膜內)來進行。適合非經腸投予之給藥形式包括溶液、懸浮液、乳液或凍乾物形式之注射和輸液調配物。非經腸給藥為較佳，特別是靜脈給藥。
一般，已證明有利的在非經腸給藥之情況下，係給予從約0.001至1 mg/kg體重，較佳地從0.01至0.5 mg/kg體重之量，以便達到效果。
然而可能須偏離上述之量，且特別是依體重、給藥路徑、個體對活性化合物之取向、調配物的性質和給藥的時間點或間隔而定。因此，在某些情況下以低於上數最小量即足夠，而在其他的情況下則必須超過所述之上限量。在給予相當大量的情況下，適當的係將這些量分成數個個別的劑量分散於一天中。
下列實例係說明本發明。本發明不限於此等實例。
除非另有說明，否則下列試驗和實例中的百分比計算為重量百分比；分量為重量份。在各案例中，液體/液體溶液之溶劑比例、稀釋比例和濃度數據係指體積。
A431NS 人類細胞株
儀器：Waters Acquity SQD UPLC System；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 mm x 1 mm；溶離劑A：1 l水+0.25 ml 99%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.25 ml 99%濃甲酸；梯度：0.0 min 90% A→1.2 min 5% A→2.0 min 5% A；流速：0.40 ml/min；烘箱：50℃；UV偵測：210-400 nm。
儀器：Micromass QuattroPremier配有Waters UPLC Acquity；管柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ 50 mm x 1 mm；溶離劑A：1 l水+0.5 ml 50%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.5 ml 50%濃甲酸；梯度：0.0 min 90% A→0.1 min 90% A→1.5 min 10% A→2.2 min 10% A；流
速：0.33 ml/min；烘箱：50℃；UV偵測：210 nm.
儀器：Micromass Quattro Micro MS配有HPLC Agilent Series 1100；管柱：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm；溶離劑A：1 l水+0.5 ml 50%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.5 ml 50%濃甲酸；梯度：0.0 min 100% A→3.0 min 10% A→4.0 min 10% A→4.01 min 100% A(流速2.5 ml/min)→5.00 min 100% A；烘箱：50℃；流速：2 ml/min；UV偵測：210 nm.
MS儀器：Micromass ZQ；HPLC儀器：HP 1100 Series；UV DAD；管柱：Phenomenex Gemini 3μ 30 mm x 3.00 mm；溶離劑A：1 l水+0.5 ml 50%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.5 ml 50%濃甲酸；梯度：0.0 min 90% A→2.5 min 30% A→3.0 min 5% A→4.5 min 5% A；流速：0.0 min 1 ml/min→2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min；烘箱：50℃；UV偵測：210 nm。
儀器：HP 1090 Series II；管柱：Merck Chromolith SpeedROD RP-18e，50 mm x 4.6 mm；預備管柱：Merck Chromolith Guard Cartridge套組RP-18e，5 mm x 4.6 mm；注射量：5 μl；溶離劑A：70% HClO4之水溶液(4 ml/公升)，溶離劑B：乙腈；梯度：0.00 min 20% B→0.50 min 20% B→3.00 min 90% B→3.50 min 90% B
→3.51 min 20% B→4.00 min 20% B；流速：5 ml/min；管柱溫度：40℃。
儀器：Waters 2695配有DAD 996；管柱：Merck Chromolith SpeedROD RP-18e，50 mm x 4.6 mm；Ord.No.：1.51450.0001，預備管柱：Merck Chromolith Guard Cartridge套組RP-18e，5 mm x 4.6 mm；訂購編號：1.51470.0001，溶離劑A：70% HClO4之水溶液(4 ml/公升)，溶離劑B：乙腈；梯度：0.00 min 5% B→0.50 min 5% B→3.00 min 95% B→4.00 min 95% B；流速：5 ml/min。
MS儀器：Waters ZQ；HPLC儀器：Agilent 1100 Series；UV DAD；管柱：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm；溶離劑A：1 l水+0.5 ml 50%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.5 ml 50%濃甲酸；梯度：0.0 min 100% A→3.0 min 10% A→4.0 min 10% A→4.1 min 100% A(流速2.5 ml/min)；烘箱：55℃；流速：2 ml/min；UV偵測：210 nm。
MS儀器：Waters ZQ；HPLC儀器：Agilent 1100 Series；UV DAD；管柱：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm；溶離劑A：1 l水+0.5 ml 50%濃甲酸，溶
離劑B：1 l乙腈+0.5 ml 50%濃甲酸；梯度：0.0 min 100% A→2.0 min 60% A→2.3 min 40% A→3.0 min 20% A→4.0 min 10% A→4.2 min 100% A(流速2.5 ml/min)；烘箱：55℃；流速：2 ml/min；UV偵測：210 nm。
儀器：Waters Acquity SQD UPLC System；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 mm x 1 mm；溶離劑A：1 l水+0.25 ml 99%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.25 ml 99%濃甲酸；梯度：0.0 min 95% A→6.0 min 5% A→7.5 min 5% A；烘箱：50℃；流速：0.35 ml/min；UV偵測：210-400 nm。
儀器：Agilent 1200 Series；管柱：Agilent Eclipse XDB-C18 5μ 4.6 mm x 150 mm；預備管柱：Phenomenex KrudKatcher可拋棄式預備-管柱；注射量：5 μl；溶離劑A：1 l水+0.01%三氟乙酸；溶離劑B：1 l乙腈+0.01%三氟乙酸；梯度：0.00 min 10% B→1.00 min 10% B→1.50 min 90% B→5.5 min 10% B；流速：2 ml/min；管柱溫度：30℃。
對於所有的反應物或試劑，其製備並未明確地描述於下文中，係由市售一般可取得的來源所獲得。對於其他的反應物或試劑，其製備同樣地並未描述於下文中，且並非市售或由非一般性可取得的來源所獲得者，係給
予其中描述其製備之公開的文獻作為參考。
儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 30 x 2 mm；溶離劑A：1 l水+0.25 ml 99%濃甲酸，溶離劑B：1 l乙腈+0.25 ml 99%濃甲酸；梯度：0.0 min 90% A→1.2 min 5% A→2.0 min 5% A烘箱：50℃；流速：0.60 ml/min；UV偵測：208-400 nm。
儀器：Agilent 1200 Series配有管柱、烘箱和DAD；管柱：Merck Chromolith SpeedROD RP-18e，50 mm x 4.6 mm；Ord.No.：1.51450.0001；預備管柱：Merck Chromolith Guard Cartridge套組RP-18e，5 mm x 4.6 mm；Ord.No.：1.51470.0001；溶離劑A：70% HClO4之水溶液(4 ml/公升)，溶離劑B：乙腈；梯度：0.00 min 5% B→0.50 min 5% B→3.00 min 95% B→4.00 min 95% B；流速：5 ml/min；管柱溫度：30℃。
MS儀器：Waters(Micromass)Quattro Micro；儀器HPLC：Agilent 1100 Series；管柱：YMC-Triart C18 3 μ 50 x 3 mm；溶離劑A：1 l水+0.01 mol碳酸銨，溶離劑B：1 l乙腈；梯度：0.0 min 100% A→2.75 min 5% A→4.5 min 5% A；烘箱：40℃；流速：1.25 ml/min；UV偵測：210 nm。
標題化合物可根據文獻方法以各種方式來製備；參見，例如Pettit等人，Synthesis 1996,719；Shioiri等人，Tetrahedron Lett.1991,32,931；Shioiri等人，Tetrahedron 1993,49,1913；Koga等人，Tetrahedron Lett.1991,32,2395；Vidal等人，Tetrahedron 2004,60,9715；Poncet等人，Tetrahedron 1994,50,5345。其可為游離酸或為帶有二環己胺之1：1鹽。
標題化合物可根據文獻方法以各種方式來製備；參見，例如Pettit等人，J.Org.Chem.1994,59,1796；
Koga等人，Tetrahedron Lett.1991,32,2395；Shioiri等人，Tetrahedron Lett.1991,32,931；Shioiri等人，Tetrahedron 1993,49,1913.
標題化合物係類似起始化合物2a所製備，但是氫化反應係於無添加1N鹽酸下進行。
標題化合物係以文獻方法所製備(A.Ritter等人，J.Org.Chem.1994,59,4602)。
產率：750 mg(75%之理論值)
LC-MS(方法3)：Rt=1.67 min；MS(ESIpos)：m/z=281(M+H)+.
標題化合物係以文獻方法所製備(參見，例如H.King,J.Chem.Soc.1942,432)；其亦可從市面上購得。
標題化合物係以文獻方法所製備(參見，例如H.King,J.Chem.Soc.1942,432).
標題化合物可藉由文獻方法製備成Boc-保護形式(參見，例如C.Johnson等人，Tetrahedron Lett.1998,39,2059)；去保護係以習用的方式藉由以三氟乙酸處理及隨後中和來進行。
產率：149 mg(89%之理論值)
標題化合物係由市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙烷羧酸以文獻方法(A.Ritter等人，J.Org.Chem.1994,59,4602)處理所製備(C.Cativiela等人，Chirality 1999,11,583)。
產率：339 mg(59%之理論值)
LC-MS(方法1)：Rt=0.82 min；MS(ESIpos)：m/z=293(M+H)+.
將10.65 g(41.058 mmol)的(3R,4S,5S)-3-甲氧基-5-甲基-4-(甲基胺基)庚酸第三丁酯(起始化合物2b)至於
250 ml的二氯甲烷中處理並將溶液冷卻至-10℃。然後，攪拌下加入10.317 g(41.058 mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-L-纈胺酸、16.866 g(61.586 mmol)的2-溴-1-乙基四氟硼酸吡錠(BEP)和28.6 ml的N,N-二異丙基乙基胺，並隨後將混合物於RT攪拌20 h。然後將反應混合物以二氯甲烷稀釋並以飽和的氯化鈉溶液震盪二次，以硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。將殘餘物以快速層析於矽膠上以4：1石油醚/乙酸乙酯作為溶離劑純化。將對應的溶離份濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥至隔夜。得到10.22 g(51%之理論值)之標題化合物為淡黃色油狀物。
HPLC(方法5)：Rt=2.3 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.59 min；MS(ESIpos)：m/z=493(M+H)+.
HPLC(方法5)：Rt=1.59 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.74 min；MS(ESIpos)：m/z=359(M+H)+.
將4.64 g(13.13 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺酸溶於20 ml的DMF並連續與4.28 g(11.94 mmol)的(3R,4S,5S)-3-甲氧基-5-甲基-4-[甲基(L-纈胺醯基)胺基]庚酸第三丁酯(中間物2)、2.75 g(14.33 mmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和2.2 g(14.33 mmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物混合。將混合物於RT攪拌至隔夜。然後將反應混合物倒入半飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯之混合物中。將有機層移出，連續以飽和的碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾和濃縮。將殘餘物直接用
於下個步驟，無進一步純化。
產率：9.1 g(定量，60%純度)
HPLC(方法5)：Rt=2.7 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.99 min；MS(ESIpos)：m/z=694(M+H)+.
將9.1 g的粗產物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-第三丁氧基-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物3)置於56.6 ml的二氯甲烷中處理，加入56.6 ml的三氟乙酸，並將混合物於RT攪拌2 h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮及將剩餘的殘餘物以快速層析，使用二氯甲烷、3：1二氯甲烷/乙酸乙酯和15：5：0.5二氯甲烷/乙酸乙酯/甲醇作為溶離劑純化。將對應的溶離份純化和濃縮後，得到5.8 g(86%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.3 min；MS(ESIpos)：m/z=638(M+H)+.
將500 mg(1.9 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-L-苯基丙胺酸溶於10 ml的DMF及連續與466 mg(3.8 mmol)的1,2-烷鹽酸鹽(起始化合物5)、433 mg(2.3 mmol)的1-(3-di甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、382 mg(2.8 mmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物和731 mg(5.7 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌至隔夜。然後將反應混合物倒入半飽和的氯化銨水溶液和乙酸乙酯之混合物中。將有機層移出，連續以飽和的碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。得到620 mg(98%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.62 min；MS(ESIpos)：m/z=235
(M-C4H8-CO2+H)+.
將620 mg(1.85 mmol)的(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基胺甲酸第三丁酯(中間物5)置於5 ml的二氯甲烷中處理，加入10 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。將反應混合物於減壓下濃縮並將剩剩餘的殘餘物從水/乙腈中冷凍乾燥。於此方式，得到779 mg(91%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=0.45 min；LC-MS(方法3)：Rt=1.09 min；MS(ESIpos)：m/z=235(M+H)+.
將360 mg(1.25 mmol)的(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸(起始化合物1)置於10 ml的DMF中處理，並連續以579.2 mg(1.25 mmol)的(2S)-2-胺基-1-(1,2-烷-2-基)-3-苯基丙-1-酮三氟乙酸鹽(中間物6)、714.5 mg(1.88 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和655 μl的N,N-二異丙基乙基胺處理。將混合物於RT攪拌16 h。然後將反應混合物濃縮，並將殘餘物置於乙酸乙酯中處理及先以5%檸檬酸水溶震盪萃取，然後以5%的碳酸氫鈉溶液和隨後以飽和的氯化鈉溶液萃取。將有機層濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上以16：4二氯甲烷/甲醇作為溶離劑純化。將對應的溶離份組合並於減壓下移除溶劑。將殘餘物真空乾燥後，得到503.5 mg(74%之理論值)Boc-保護的中間物(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-羧基第三丁酯。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.12 min；MS(ESIpos)：m/z=504
(M+H)+.
將503 mg(1 mmol)的此中間物置於20 ml的二氯甲烷中處理，加入10 ml的三氟乙酸，並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並以二氯甲烷稀釋。將剩餘的殘餘物以正丙烷從乙酸乙酯沉澱，並將溶劑傾析出。將得到的殘餘物溶於水並以乙酸乙酯震盪萃取，及隨後將水層凍乾。以此法得到462 mg(89%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=1.53 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.57 min；MS(ESIpos)：m/z=404(M+H)+.
將51 mg(0.08 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)溶於10 ml的DMF，並加入0.5 ml的哌啶。於RT攪拌10 min後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物與乙醚攪
拌。將不可溶的組成份濾出並重複以乙醚清洗。然後將過濾殘餘物置於5 ml的二烷/水中處理，並將溶液以1N氫氧化鈉溶液調整至pH 11。於超音波下處理，分成數次加入總計349 mg(1.6 mmol)的二碳酸二-第三丁酯，在此期間將溶液的pH保持在11。反應結束後，蒸發二烷並以檸檬酸將水溶液調整至pH 2-3。將混合物各以50 ml的乙酸乙酯萃取二次。將有機層組合，以硫酸鎂乾燥，並於減壓下濃縮。將殘餘物置於乙醚中處理，並以丙烷沉澱標題化合物。以傾析移除溶劑。將殘餘物以戊烷再消化數次及最後於高真空下乾燥。由此得到40 mg(97%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.32 min；MS(ESIpos)：m/z=516(M+H)+.
標題化合物係類似中間物5、6和7之合成，於三階段藉由將市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙烷羧酸與1,2-烷鹽酸鹽(起始化合物5)偶合，隨後以三氟乙酸去保護並與起始化合物1偶合所製備。將最終產物以製備式HPLC純化。
HPLC(方法5)：Rt=2.12 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.25 min；MS(ESIpos)：m/z=516(M+H)+.
將315 mg(0.494 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)溶於12 ml的DMF並與104 mg(0.543 mmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和83 mg(0.543 mmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物混合，及將混合物於RT
攪拌90 min。隨後，加入112 μl的N,N-二異丙基乙基胺和先前從起始化合物1藉由三氟乙酸移除保護基團所製備的149 mg(0.494 mmol)(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙酸三氟乙酸鹽。將混合物於RT攪拌2 h及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化二次。得到140 mg(35%之理論值)的標題化合物為無色泡沫形式。
HPLC(方法5)：Rt=2.40 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.38 min；MS(ESIpos)：m/z=807(M+H)+.
首先，藉由於乙酸乙酯中處理及以5%硫酸溶液震盪萃取，將N-[(苄氧基)羰基]-N-甲基-L-蘇胺酸從其237 mg(0.887 mmol)的二環己基胺鹽中釋放出。將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物置於16 ml的DMF中處理並連續與365 mg(1 mmol)的(3R,4S,5S)-3-甲氧基-5-甲基-4-[甲基(L-纈胺醯基)胺基]庚酸第三丁酯(中間物2)、185 mg(0.967 mmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-
乙基碳二亞胺鹽酸鹽和148 mg(0.967 mmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物混合。將混合物於RT攪拌2 h。然後將反應混合物倒入半飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯之混合物。將有機層移出，連續以飽和的碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到283 mg(53%之理論值)的第三丁酯中間物N-[(苄氧基)羰基]-N-甲基-L-蘇胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-第三丁氧基-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
HPLC(方法5)：Rt=2.17 min。
將283 mg(0.466 mmol)的此中間物置於5 ml的二氯甲烷中處理，加入5 ml的無水三氟乙酸並將混合物於RT攪拌2 h。隨後，將反應混合物於高真空下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。有此得到156 mg(61%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.50 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.09 min；MS(ESIpos)：m/z=552(M+H)+.
於第1步驟，藉由將600 mg(1.28 mmol)對應的二環己基銨鹽溶於100 ml的乙酸乙酯及先以50 ml的0.5%硫酸而然後以飽和的氯化鈉溶液萃取震盪，將起始化合物從此鹽中釋放出。然後將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮及與苯丙胺酸苄基酯以類似中間物7之合成立即反應，然後去保護。
產率：650 mg(94%於2階段中)
HPLC(方法6)：Rt=1.76 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.68 min；MS(ESIpos)：m/z=425(M+H)+.
HPLC(方法6)：Rt=2.3 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.36 min；MS(ESIpos)：m/z=539(M+H)+.
將230 mg(0.42 mmol)的此中間物置於5 ml的二氯甲烷中處理，加入5 ml的三氟乙酸，並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物進一步於減壓下乾燥及然後以乙腈/水冷凍乾燥。以此法得到230 mg(quant.)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=1.6 min。
將143 mg(0.223 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)置於15 ml的DMF中處理，並連續與141 mg(0.22 mmol)的(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-N-[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯胺三氟乙酸鹽(中間物7)、102 mg(0.27 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲四甲基六氟磷酸(HATU)和128 μl(0.74 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌3 h。然後將混合物倒入半飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯之混合物中。將有機層移
出，連續以飽和的碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。由此得到275 mg(quant.)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
HPLC(方法5)：Rt=2.73 min；LC-MS(方法4)：Rt=3.19 min；MS(ESIpos)：m/z=1023(M+H)+.
將46 mg(0.045 mmol)的此中間物溶於4 ml的DMF。加入1 ml的哌啶後，將反應混合物於RT攪拌1 h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮及將殘餘物以製備式HPLC純化(溶離劑：乙腈+0.01% TFA/水+0.01% TFA)。得到22 mg(54%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.68 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.03 min；MS(ESIpos)：m/z=801(M+H)+
1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)：δ=8.8(m,2H),8.7(m,1H),8.42和8.15(2d,1H),7.3-7.1(m,5H),5.12和4.95(2m,1H),4.70和4.62(2m,1H),4.62和4.50(2t,1H),4.1-3.9(m,3H),3.85(m,1H),3.75-3.6(m,2H),3.23,
3.18,3.17,3.14,3.02和2.96(6s,9H),3.1-2.9和2.75(2m,2H),2.46(m,3H),2.4-2.1(m,2H),2.05(br.m,2H),1.85-1.55(br.m,6H),1.5-1.2(br.m,3H),1.1-0.8(m,18H),0.75(t,3H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下]。
將126 mg(0.198 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)置於10 ml的DMF中處理並連續與105 mg(0.198 mmol)的(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-N-[(2S,3S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯胺三氟乙酸鹽(中間物17)、41.6 mg(0.217 mmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、33 mg(0.217
mmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物和79 μl(0.454 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌至隔夜。然後將反應混合物倒入半飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯之混合物中。將有機層移出，連續以飽和的碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。由此得到220 mg(quant.)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S,3S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
HPLC(方法5)：Rt=2.77 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.5 min；MS(ESIpos)：m/z=1037(M+H)+.
將220 mg(0.212 mmol)的此中間物溶於5 ml的DMF。加入1 ml的哌啶後，將反應混合物於RT攪拌1h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。(溶離劑：乙腈+0.01% TFA/水+0.01% TFA)。得到91 mg(46%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.71 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.9 min；MS(ESIpos)：m/z=815(M+H)+
1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)：δ=8.87和8.80(2d,2H),
8.75(m,1H),8.40和7.98(2d,1H),7.3-7.1(m,5H),5.45和5.2(2t,1H),4.78和4.62(2m,1H),4.73和4.58(2t,1H),4.2-4.0(m,3H),3.7-3.6(m,1H),3.35,3.20,3.18,3.14,3.12和3.00(6s,9H),3.1和2.95(2m,2H),2.46(m,3H),2.4-2.0(m,4H),1.9-1.6(m,4H),1.6-1.2(m,5H),1.1-0.75(m,21H),0.80(t,3H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下].
將617 mg(1.2 mmol)的(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(中間物24)置於44 ml的二氯甲烷中處理，加入4.4 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合
物於減壓下濃縮並將剩餘的殘餘物從二烷/水冷凍乾燥。得到702 mg(quant.)去保護的化合物(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-N-[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯胺三氟乙酸鹽為粗產物，將其用於下個階段無進一步純化。
將470 mg(0.74 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)置於57 ml的DMF中處理並連續與390 mg(約0.74 mmol)的上述(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-N-[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯胺三氟乙酸鹽、336 mg(0.88 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和423 μl(2.4 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌2 h。然後將反應混合物倒入半飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯之混合物。將有機層移出，連續以飽和的碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到453 mg(59%之理論值)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
HPLC(方法5)：Rt=2.58 min；LC-MS(方法1)：Rt=3.10 min；MS(ESIpos)：m/z=1035(M+H)+.
將453 mg(0.438 mmol)的此中間物溶於24 ml的DMF。加入2.4 ml的哌啶後，將反應混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化(溶離劑：乙腈/0.1% TFA之水中溶液)。得到260 mg(64%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.64 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESIpos)：m/z=813(M+H)+
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ=8.8(m,2H),8.65(m,2H),7.3-7.1(m,5H),4.8-4.05(m,2H),4.0和3.82(2m,2H),3.8-3.5(m,8H),3.32,3.29,3.20,3.19,3.12和3.00(6s,9H),2.65(t,1H),2.5-2.45(m,3H),2.4-1.3(m,15H),1.15-0.85(m,18H),0.8和0.75(2d,3H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下].
將1000 mg(3.77 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-L-苯基丙胺酸溶於10 ml的DMF並與457 mg(3.77 mmol)的N-甲基苄基胺、2150 mg(5.65 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和657 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌30 min及然後於減壓下濃縮。將殘餘物置於二氯甲烷中處理並以水震盪萃取三次。將有機層以硫酸鎂乾燥及濃縮。將殘餘物以快速層析於矽膠上以3：1石油醚/乙酸乙酯作為溶離劑純化。將產物溶離份濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥。由此得到1110 mg(75%之理論值)Boc-保護的中間物N-苄基-N α-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-苯基丙胺醯胺。
HPLC(方法6)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.14 min；MS(ESIpos)：m/z=369(M+H)+.
將1108 mg(3,007 mmol)的此中間物置於30 ml的二氯甲烷中處理，加入10 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮，將剩餘的殘餘物與二氯甲烷攪拌並蒸發溶劑。將殘餘物與戊烷再攪拌二次，每次再將溶劑傾析出，最後將標題化合物於高真空下乾燥。由此得到1075 mg(93%之理論值)的標題化合物為一樹脂。
HPLC(方法6)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.6 min；MS(ESIpos)：m/z=269
(M+H)+.
首先，藉由於乙酸乙酯中處理及以5%硫酸水溶液震盪萃取，將(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸(起始化合物1)從其141 mg(0.491 mmol)的二環己基胺鹽中釋放出。將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。將殘餘物置於10 ml的DMF中處理並加入187.6 mg(0.49 mmol)的N-苄基-N-甲基-L-苯基丙胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物9)、190.3 mg(1.47 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和256 μl的N,N-二異丙基乙基胺。將混合物於RT攪拌1 h。然後將反應混合物濃縮，將殘餘物置於乙酸乙酯中處理並隨後連續以半飽和氯化銨溶液、飽和碳酸氫鈉溶液和水震盪萃取。將有機層以硫酸鎂乾燥及濃縮。將殘餘物以快速層析於矽膠上以30：1乙腈/水作為溶離劑純化。將產物溶離份濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥。由此得到168 mg(64%之理論值)Boc-保護的中間物(2S)-2-[(1R,2R)-3-({(2S)-1-[苄基
(甲基)胺基]-1-側氧-3-苯基丙-2-基}胺基)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯。
HPLC(方法6)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.22 min；MS(ESIpos)：m/z=538(M+H)+.
將168 mg(0.312 mmol)的此中間物置於15 ml的二氯甲烷中處理，加入3 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物與二氯甲烷攪拌，然後與乙醚攪拌，每次再將溶劑蒸餾出。於高真空下乾燥後，得到170 mg(99%之理論值)的標題化合物為一樹脂。
HPLC(方法6)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.73 min；MS(ESIpos)：m/z=438(M+H)+.
標題化合物係類似中間物18之合成，處理由二環己基胺鹽中釋放出之(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸(起始化合物1)和
L-苯丙胺酸甲酯鹽酸鹽所製備。
HPLC(方法5)：Rt=0.6 min；LC-MS(方法3)：Rt=1.17 min；MS(ESIpos)：m/z=349(M+H)+.
標題化合物係類似中間物18之合成，由二環己基胺鹽中釋放出之(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸(起始化合物1)和L-色胺酸苄基酯開始所製備。
HPLC(方法6)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.8 min；MS(ESIpos)：m/z=464(M+H)+.
標題化合物係類似中間物18之合成，由二環己基胺鹽中釋放出之(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸(起始化合物1)和(1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙烷羧酸苄基酯開始所製備。(1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙烷羧酸苄基酯係預先以標準方法，藉由將市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙羧酸以苄基醇酯化及隨後以三氟乙酸分離Boc所製備。
HPLC(方法5)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法2)：Rt=0.93 min；MS(ESIpos)：m/z=437(M+H)+.
將100 mg(473 μmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸溶於71 μl的DMF及然後與139 mg
(947 μmol)的1-甲基肼羧酸第三丁酯、182 mg(947 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和145 mg(947 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物混合。將混合物於RT攪拌至隔夜及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷/水冷凍乾燥後，得到129 mg(80%之理論值)保護的中間物為無色泡沫。
隨後，將129 mg(380 μmol)以2 ml三氟乙酸溶於8 ml的二氯甲烷之溶液去保護。將混合物於RT攪拌1 h後，將反應混合物於減壓下濃縮。將殘餘物以乙腈/水冷凍乾燥，留下125 mg(83%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=0.38 min；MS(ESIpos)：m/z=240(M+H)+
首先，將35 mg(164 μmol)的2-(甲基胺基)乙基胺甲酸第三丁酯鹽酸鹽三氟乙酸鹽、30 mg(164 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丁酸、75 mg(197 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和57 μl的N,N-二異丙基乙基胺與5 ml的DMF
混合並於RT攪拌至隔夜。隨後，於減壓下移除溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮並從二烷/水冷凍乾燥，得到35 mg(63%之理論值)保護的中間物。
HPLC(方法12)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.71 min；MS(ESIpos)：m/z=340(M+H)+.
隨後，將保護的中間物之總量以1 ml三氟乙酸溶於5 ml二氯甲烷之溶液去保護，得到28 mg(77%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法3)：Rt=0.75 min；MS(ESIpos)：m/z=240(M+H)+.
首先，將35 mg(164 μmol)的(2-胺基乙基)甲基胺甲酸第三丁酯鹽酸鹽三氟乙酸鹽、30 mg(164 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丁酸、75 mg(197 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和57 μl的N,N-二異丙基乙基胺於5 ml的DMF中混合，並於RT攪拌。隨後，於減壓下移除溶劑並將
剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮並從二烷/水冷凍乾燥，得到51 mg(91%之理論值)保護的中間物。
HPLC(方法12)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.77 min；MS(ESIpos)：m/z=340(M+H)+.
隨後，將保護的中間物之總量以1 ml三氟乙酸溶於5 ml二氯甲烷之溶液去保護，得到45 mg(69%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.19 min；MS(ESIpos)：m/z=240(M+H)+.
首先，藉由於乙酸乙酯中處理及以100 ml的5%硫酸水溶液震盪萃取，將(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸從其1.82 g(388 mmol)的二環己基胺鹽中釋放出。將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。將殘餘物置於10 ml的二烷和10 ml的水中處理，並加入1517 mg(4.66 mmol)的碳酸銫，並
將混合物以超音波浴處理5 min，及於減壓下濃縮和以DMF再蒸餾一次。然後將殘餘物至於15 ml的二氯甲烷中處理，並加入1990 mg(11.64 mmol)的苄基溴。將混合物以超音波浴處理15 min，及然後於減壓下濃縮。將殘餘物置於乙酸乙酯和水間分溶，並將有機層移出，及以飽和的氯化鈉溶液震盪萃取然後濃縮。然後將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到1170 mg(80%之理論值)Boc-保護的中間物。
隨後，將這些保護的1170 mg以5 ml三氟乙酸溶於15 ml二氯甲烷之溶液去保護。於RT攪拌15 min後，將反應混合物於減壓下濃縮。將殘餘物從二烷冷凍乾燥。於高真空下乾燥後，剩餘1333 mg(84%之理論值)的標題化合物為黃色油狀物。
HPLC(方法6)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.59 min；MS(ESIpos)：m/z=278(M+H)+.
將1200 mg(2.33 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物5)與910.8 mg(2.33 mmol)的(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙酸苄基酯三氟乙酸鹽(中間物14)、1327 mg(3.49 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和2027 μl的N,N-二異丙基乙基胺於50 ml的DMF中混合，並將混合物於RT攪拌5 min。之後，於減壓下移除溶劑。將剩餘的殘餘物置於乙酸乙酯中處理並連續以5%檸檬酸水溶液和飽和的碳酸氫鈉溶液震盪萃取。將有機層移出及濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合並濃縮，及將殘餘物於高真空下乾燥。由此得到1000 mg(55%之理論值)的苄基酯中間物N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-(苄氧基)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為一樹脂。
LC-MS(方法1)：Rt=1.56 min；MS(ESIpos)：m/z=775(M+H)+.
將所得到總量的此中間物置於25 ml的甲醇和二氯
甲烷(20：1)混合物中處理，以氫化作用於標準的氫氣壓下以10%活性碳上鈀作為催化劑移除苄基酯基團。於RT攪拌30 min後，將催化劑濾出並將濾液於減壓下濃縮。由此得到803 mg(91%之理論值)的標題化合物為白色固體。
HPLC(方法6)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.24 min；MS(ESIpos)：m/z=685(M+H)+.
標題化合物係藉由將市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙烷羧酸以正丙基胺在O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc所製備(產率：85%之理論值於二階段)。
HPLC(方法6)：Rt=1.2 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.52 min；MS(ESIpos)：m/z=219(M+H)+.
標題化合物係以標準方法，藉由將市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙烷羧酸以乙醇酯化，及隨後以三氟乙酸分離Boc所製備。
LC-MS(方法1)：Rt=0.50 min；MS(ESIpos)：m/z=206(M+H)+.
於1.39 g(8.95 mmol)N-甲氧基羰基馬來酸之44 ml的飽和碳酸氫鈉溶液中，於0℃加入1.5 g(8.95 mmol)的4-胺基-2,2-二甲基丁酸，並將混合物攪拌40 min。隨後，移除冷卻浴並將反應混合物另再攪拌1 h。在以冰冷卻下，然後將反應混合物藉由加入硫酸調整至pH 3，並以乙酸乙酯萃取。將組合的有機層以硫酸鎂乾燥及濃縮。得到1.17 g(79%純度，49%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.64 min；m/z=212(M+H)+.
於50 mg(237 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2,2-二甲基丁酸之2 ml的THF溶液中，於0℃先加入26 μl(237 μmol)的4-甲基嗎福啉及然後加入31 μl(237 μmol)的氯甲酸異丁酯。移除冷卻浴及於RT另再攪拌1 h後，加入31.3 mg(237 μmol)的第三丁氧基羰基肼。將反應混合物攪拌至隔夜及然後濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。得到50.8 mg(66%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.71 min；m/z=324(M-H)-.
將50 mg(154 mmol)的2-[4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2,2-二甲基丁醯基]肼羧酸第三丁酯溶
於2 ml的二氯甲烷並加入0.4 ml的三氟乙酸。將反應混合物於RT攪拌30 min及然後濃縮。得到55.2 mg(93%純度，99%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.36 min；m/z=226(M+H)+.
於500 mg(1.89 mmol)的N-Boc-L-苯丙胺酸之25 ml的二氯甲烷溶液中，於RT加入1192 mg(6.2 mmol)的EDC、578 μl(4.1 mmol)的三乙胺、345 mg(2.8 mmol)的DMAP和345 mg(2.1 mmol)的1-金剛烷基甲醇。將反應混合物攪拌至隔夜，然後以50 ml的二氯甲烷稀釋，並連續以10%檸檬酸水溶液和飽和的氯化鈉溶液清洗。將有機層以硫酸鎂乾燥，然後濃縮，並將殘餘物以製備式HPLC純化。得到769 mg(90%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法2)：Rt=1.84 min；m/z=414(M+H)+.
將769 mg(1.86 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-L-苯丙胺酸金剛烷-1-基甲基酯(中間物13)溶於25 ml的4 N鹽酸之二烷溶液中並於RT攪拌1 h。隨後，將反應混合物濃縮並將殘餘物於減壓下乾燥。得到619 mg(95%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.82 min；m/z=314(M+H)+.
於20 mg(29 μmol)N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-
基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之1 ml的DMF溶液中，於RT加入15.3 μl(88 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺、6.7 mg(44 μmol)的HOBt和6.7 mg(35 μmol)的EDC，並將混合物攪拌30 min。隨後，加入10.1 mg(32 μmol)的L-苯丙胺酸金剛烷-1-基酯鹽酸鹽。攪拌至隔夜後，將反應混合物以製備式HPLC直接分離其組份。得到27.5 mg(93%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.70 min；m/z=980(M+H)+.
將27.5 mg(28 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(金剛烷-1-
基甲氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於1.8 ml的二氯甲烷並加入和361 μl的TFA。將反應混合物變30 min及然後濃縮。將殘餘物置於水中處理并冷凍乾燥。得到22.7 mg(81%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.14 min；m/z=880(M+H)+.
於氬氣壓下，將500 mg(1.99 mmol)的N-Boc-L-苯丙胺醇溶於5 ml的DMF並冷卻至0℃。隨後，加入159 mg(3.98 mmol)60%的氫化鈉之石蠟油懸浮液。攪拌反應混合物直到氣體蒸發結束及然後加入260 μl(2.19 mmol)的苄基溴。移除冷卻浴並將反應混合物於RT攪拌2 h。之後，將反應混合物濃縮，將殘餘物置於冰水中處理並以二氯甲烷萃取混合物。將有機層以飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥及濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。得到226 mg(33%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.28 min；m/z=342(M+H)+.
將220 mg(644 μmol)的(2S)-1-(苄氧基)-3-苯基丙-2-基胺甲酸第三丁酯溶於11 ml的4 N鹽酸之二烷溶液，並於RT攪拌1 h。然後將反應混合物濃縮及將殘餘物於減壓下乾燥。得到138 mg(77%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.65 min；m/z=242(M+H)+.
於20 mg(29 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之1 ml的DMF溶液中，於RT加入15.3 μl(88 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺、6.7 mg(44 μmol)的HOBt和6.7 mg(35 μmol)的EDC，並將混合物攪拌30 min。隨後，加入7.8 mg(32 μmol)的(2S)-1-(苄氧基)-3-苯基丙-2-胺鹽酸鹽。攪拌至隔夜後，將反應混合物經由製備式HPLC直接分離其組份。得到26 mg(98%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.51 min；m/z=909(M+H)+.
將26 mg(29 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基
-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於1.8 ml的二氯甲烷並加入370 μl的TFA。將反應混合物於RT攪拌及然後濃縮。將殘餘物置於水中處理並冷凍乾燥。得到26.4 mg(quant.)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；m/z=809(M+H)+.
將50 mg(70 μmol)的中間物26和11 mg(70 μmol)的(1S,2R)-2-胺基-1-苯基丙-1-醇之10 ml的DMF溶液與42 mg(0.11 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和25 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合，並將反應混合物於RT攪拌5 min。接著濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離
份組合，濃縮及於高真空乾燥後，得到49 mg(81%)保護的中間物。隨後，藉由已知條件以三氟乙酸於二氯甲烷中去保護。濃縮接著將標題化合物以製備式HPLC純化，並得到26 mg(52%)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.65 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.77 min；MS(ESIpos)：m/z=718(M+H)+.
將150 mg(541 μmol)的3-{2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸第三丁酯溶於3 ml的二氯甲烷，加入1.5 ml的三氟乙酸並將反應混合物於RT攪拌1 h，然後濃縮。
181 mg(100%之理論值)的標題化合物。
MS(EI)：m/z 222(M+H)+
將186 mg(555 μmol)的3-{2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸三氟乙酸鹽溶於2.6 ml的飽和的碳酸氫鈉溶液並於0℃與86 mg(555 μmol)的N-甲氧基羰基馬來醯亞胺。將反應混合物於0℃攪拌40 min及於RT攪拌1 h，然後再次冷卻至0℃，以硫酸調整至pH 3並以3x 25 ml的乙酸乙酯萃取。將組合的有機層以硫酸鎂乾燥並濃縮。126 mg(75%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.53 min；m/z=302(M+H)+.
將125 mg(417 μmol)的3-(2-{2-[2-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸於0℃
溶於2.1 ml的THF並與46 μl(417 mmol)的4-甲基嗎福啉和54.5 μl(417 μmol)的氯甲酸異丁酯混合物。移除冰浴並將反應混合物於RT攪拌30 min。隨後，於0℃加入55 mg(417 μmol)的第三丁氧基羰基肼。將反應混合物升溫至RT至隔夜，濃縮並以製備式HPLC純化。60 mg(33%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.66 min；m/z=416(M+H)+.
60 mg(145 μmol)的基15-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-4-側氧-7,10,13-三氧-2,3-二氮十五烷-1-酸第三丁酯溶於1 ml的二氯甲烷並加入0.2 ml的三氟乙酸。將反應混合物於RT攪拌30 min及然後濃縮。
62 mg(100%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.35 min；m/z=316(M+H)+.
標題化合物係以標準方法，藉由將市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙烷羧酸以苄基醇酯化及隨後以三氟乙酸分離Boc所製備。
LC-MS(方法1)：Rt=0.72 min；MS(ESIpos)：m/z=268(M+H)+.
將383 mg(0.743 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物8)與485 mg(0.743 mmol)的N-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡
咯啶-2-基]丙醯基}-L-苯丙胺酸苄基酯三氟乙酸鹽(中間物12)、424 mg(1.114 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和388 μl的N,N-二異丙基乙基胺於15 ml的DMF中混合，並將混合物於RT攪拌10 min。隨後，於減壓下移除溶劑。將剩餘的殘餘物置於乙酸乙酯中處理並連續以5%檸檬酸水溶液和飽和的碳酸氫鈉溶液震盪萃取。將有機層移出並濃縮，及將殘餘物以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合，濃縮及將殘餘物於高真空乾燥後。得到335 mg(48%之理論值)的苄基酯中間物為泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=1.49 min；MS(ESIpos)：m/z=922(M+H)+.
將100 mg(0.11 mmol)的此中間物置於15 ml的甲醇中處理及以氫化作用於標準的氫氣壓下以10%活性碳上鈀作為催化劑移除苄基酯基團。於RT攪拌1 h後，將催化劑濾出並將濾液於減壓下濃縮。從二烷冷凍乾燥後，得到85 mg(94%之理論值)的標題化合物為一固體。
HPLC(方法12)：Rt=2.4 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.24 min；MS(ESIpos)：m/z=832(M+H)+.
將202 mg(0.5 mmol)的2,5-二側氧吡咯啶-1-基N-(第三丁氧基羰基)-L-色胺酸酯和45 mg(0.42 mmol)的苄基胺溶於10 ml的DMF並加入110 μl(630 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺。將反應混合物於RT攪拌3 h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上(溶離劑：20：0.5：0.05二氯甲烷/甲醇/17%氨水)純化。將對應的溶離份組合及濃縮。將產生的殘餘物以乙醚處理及然後於高真空乾燥。隨後，將此殘餘物置於10 ml的二氯甲烷中處理並加入3 ml的無水三氟乙酸。於RT攪拌45分鐘後，將混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。於高真空乾燥後，得到117 mg(57%之理論值於二階段中)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.66 min；MS(ESIpos)：m/z=294(M+H)+.
將50 mg(180 μmol)的市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙羧酸溶於5 ml的DMF並加入94 μl(541 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺、31 mg(270 μmol)的N-羥基琥珀醯亞胺和41.5 mg(216 μmol)的EDC，及然後將混合物於RT攪拌至隔夜。然後將反應混合物濃縮，將殘餘物置於二烷中處理，加入71 mg(901 μmol)的碳酸氫銨及然後將反應混合物置於RT下3天。將反應混合物以1：1的乙酸乙酯和水之混合物稀釋。將有機層移出，以硫酸鎂乾燥並濃縮。隨後將產生的殘餘物置於3 ml的二氯甲烷中處理，並加入3 ml的無水三氟乙酸。於RT攪拌1 h接著濃縮。將殘餘物與戊烷攪拌，以抽氣過濾並從二烷冷凍乾燥。由此法得到32 mg(62%之理論值於二階段中)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=0.38 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.20 min；MS(ESIpos)：m/z=177(M+H)+.
標題化合物係以類似中間物13之合成，由起始化合物1和L-色胺醯胺鹽酸鹽所製備。
HPLC(方法5)：Rt=1.4 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.92 min；MS(ESIpos)：m/z=473(M+H)+.
將813 mg(3.1 mmol)的三苯基膦溶於25 ml的THF並於氬氣下冷卻至-70℃。逐滴加入627 mg(3.1 mmol)的疊氮二羧酸二異丙酯後，將混合物攪拌5 min。隨後，逐滴加入溶於5 ml的THF之500 mg(3.1 mmol)的2-胺基乙基胺甲酸第三丁酯，並將反應混合物於-70℃另再攪拌5 min。然後加入溶於1 ml的THF之136.6 mg(1.55
mmol)的2,2-二甲基-1-丙醇和301 mg(3.1 mmol)的馬來醯亞胺，將反應混合物於-70℃另再攪拌10 min及然後讓混合物升至RT。於RT另再攪拌16 h後，於減壓下移除溶劑並將殘餘物以製備式HPLC純化。得到463 mg(62%)保護的中間物。
於標準條件下移除Boc保護基後，得到652 mg的1-(2-胺基乙基)-1H-吡咯-2,5-二酮為三氟乙酸鹽。
將112.9 mg(543 μmol)的氯甲酸硝基苯基酯溶於30 ml的THF及，加入100 mg(271.6 μmol)的1-(2-胺基乙基)-1H-吡咯-2,5-二酮三氟乙酸鹽後，將混合物於RT攪拌30 min。將混合物過濾並將濾液濃縮至乾，及然後以乙醚形成漿狀。抽氣過濾和乾燥後，得到60 mg(95%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=0.65 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.74 min；MS(ESIpos)：m/z=306(M+H)+.
起初將200 mg(0.75 mmol)的N-(第三丁氧基羰
基)-L-苯基丙胺酸於0℃裝入5.5 ml的二氯甲烷中，並加入128 mg(0.79 mmol)的1,1'-羰基二咪唑。30 min後，加入103 mg(0.75 mmol)的苄醯肼。於0℃另再45 min後，最後加入500 mg(1.5 mmol)的四溴化碳和395 mg(1.5 mmol)的三苯基膦。將反應混合物先於0℃攪拌2 h及然後於RT攪拌至隔夜。隨後將混合物於旋轉蒸發器上濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥。將由此得到的粗產物以製備式HPLC純化。得到217 mg(78%之理論值)Boc-保護的中間物(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基胺甲酸第三丁酯。
LC-MS(方法12)：Rt=1.15 min；MS(ESIpos)：m/z=366(M+H)+
將217 mg(0.59 mmol)的此中間物置於3 ml的二氯甲烷中處理，加入0.6 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物為反應混合物進一步於減壓下乾燥及然後從二烷冷凍乾燥。於此法，得到214 mg(90%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法11)：Rt=0.62 min；MS(ESIpos)：m/z=266(M+H)+
起初將200 mg(0.75 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-D-苯基丙胺酸於0℃裝入5.5 ml的二氯甲烷中，並加入128.3 mg(0.79 mmol)的1,1'-羰基二咪唑。30 min後，加入103 mg(0.75 mmol)的苄醯肼。於0℃另再45 min後，最後加入500 mg(1.5 mmol)的四溴化碳和395 mg(1.5 mmol)的三苯基膦。將反應混合物先於0℃攪拌2 h及然後於RT攪拌至隔夜。隨後將混合物於旋轉蒸發器上濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥。將由此得到的粗產物以製備式HPLC純化。得到219 mg(80%之理論值)Boc-保護的中間物(1R)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基胺甲酸第三丁酯。
LC-MS(方法2)：Rt=1.36 min；MS(ESIpos)：m/z=366(M+H)+
將219 mg(0.6 mmol)的此中間物置於3 ml的二氯甲烷中處理，加入0.6 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物為反應混合物進一步於減壓下乾燥及然後從二烷冷凍乾燥。以此法，得到196 mg(86%之理論值)的標題化合物為一固體。
HPLC(方法10)：Rt=2.41 min
起初將200 mg(1.13 mmol)的(4S)-4-苄基-1,3-唑啶-2-酮裝入3 ml的第三丁醇中並加入280 mg(2.26 mmol)的苄基硫醇。隨後將混合物加熱回流2天。之後，將反應混合物於旋轉蒸發器上濃縮並將生成的(2S)-1-(苄基巰基)-3-苯基丙-2-胺中間物直接進一步轉化，無後續處理。
HPLC(方法10)：Rt=2.63 min
LC-MS(方法1)：Rt=0.67 min；MS(ESIpos)：m/z=258(M+H)+
將上方所得到的粗中間物溶於2 ml的30%過氧化氫溶液和5 ml的甲酸中並將混合物於RT攪拌12 h。及然後將反應混合物加到飽和的硫酸鈉溶液並以乙酸乙酯萃取三次。將有機層以硫酸鎂乾燥並於減壓下濃縮。將得到的粗產物以製備式HPLC純化。由此得到343 mg(61%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法10)：Rt=2.40 min；LC-MS(方法12)：Rt=0.65 min；MS(ESIpos)：m/z=290(M+H)+
將552.7 mg(9.85 mmol)的氫氧化鉀溶於甲醇，吸附於1.1 g的中性氧化鋁上及然後於高真空下乾燥。於6.2 ml的正丁醇中所製備的240 mg(0.82 mmol)(2S)-1-(苄基磺醯基)-3-苯基丙-2-胺和1.56 g氧化鋁上的氫氧化鉀之溶液中，於5-10℃逐滴加入307 μl(3.3 mmol)的二溴二氟甲烷。將反應混合物於RT攪拌2 h，然後通過矽藻土並將殘餘物以二氯甲烷完全地清洗。將濾液濃縮並將所產生的殘餘物於減壓下乾燥。將由此得到的粗產物以製備式HPLC純化。得到98 mg(35%之理論值)的標題化合物帶有4：1之E/Z非對映異構物比例。
HPLC(方法10)：Rt=2.46 min；LC-MS(方法12)：Rt=0.75 min；MS(ESIpos)：m/z=224(M+H)+
將上方所得到的E/Z非對映異構物溶於2 ml的乙醇和0.2 ml的N,N-二異丙基乙基胺，並以HPLC於對掌相分離[管柱：DaicCl Chiralpak AD-H,5 μm 250 mm x 20 mm，溶離劑：己烷/(乙醇+0.2%二乙胺)50：50 v/v；UV偵測：220 nm；溫度：30℃]。將適當的溶離份於旋轉蒸發器上濃縮並將殘餘物於減壓下乾燥。得到
45 mg的標題化合物。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ[ppm]=2.62-2.83(m,2 H)3.52-3.71(m,1 H)6.18-6.30(m,1 H)6.34-6.46(m,1 H)6.98-7.57(m,10 H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下].
將20 mg(29 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於1 ml的DMF，加入13.3 mg(35 μmol)的HATU和15.3 μl(88 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺，並將混合物於RT攪拌30 min。隨後，
加入12.2 mg(32 μmol)的(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙胺三氟乙酸鹽。將反應混合物於RT攪拌至隔夜及然後以製備式HPLC分離。由此得到22 mg(81%之理論值)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
LC-MS(方法12)：Rt=1.45 min；MS(ESIpos)：m/z=933(M+H)+
隨後以三氟乙酸將BOC保護基分離，然後得到22.4 mg(98%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法11)：Rt=0.85 min；MS(ESIpos)：m/z=833(M+H)+
N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1R)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺係以類似中間物55之合成，藉由將20 mg(29 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺與12.2 mg(32 μmol)的(1R)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙胺三氟乙酸鹽反應所製備。
產率：17 mg(64%之理論值)
HPLC(方法10)：Rt=3.74 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.45 min；MS(ESIpos)：m/z=933(M+H)+
隨後以三氟乙酸將BOC保護基分離，然後得到17.1 mg(99%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法10)：Rt=2.55 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.85 min；MS(ESIpos)：m/z=833(M+H)+
N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基磺醯基)-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺係以類似中間物55之合成，藉由將20 mg(29 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基
-L-纈胺醯胺與9.3 mg(20 μmol)的(2S)-1-(苄基磺醯基)-3-苯基丙-2-胺反應所製備。
產率：19.2 mg(68%之理論值)
HPLC(方法10)：Rt=3.5 min；LC-MS(方法12)：Rt=1.41 min；MS(ESIpos)：m/z=957(M+H)+
隨後以三氟乙酸將BOC保護基分離，然後得到19.3 mg(99%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法10)：Rt=2.52 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESIpos)：m/z=857(M+H)+
N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3E)-1,4-二苯基丁-3-烯-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺係以類似中間物55之合成，藉由將20 mg(29 μmol)N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺與7.1 mg(32 μmol)的(2S,3E)-1,4-二苯基丁-3-烯-2-胺反應所製備。
產率：15.1 mg(58%之理論值)
HPLC(方法10)：Rt=4.2 min；LC-MS(方法12)：Rt=1.51 min；MS(ESIpos)：m/z=891(M+H)+
隨後以三氟乙酸將BOC保護基分離，然後得到15.7 mg(99%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法10)：Rt=2.62 min；LC-MS(方法12)：Rt=0.97 min；MS(ESIpos)：m/z=791(M+H)+
將50 mg(0.054 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物16)溶於8 ml的二烷/水中並加入70 ml(0.108 mmol)15%的4-側氧丁酸之水溶液。隨後將反應混合物於100℃攪拌1 h。冷卻至RT後，加入3.7 mg(0.059 mmol)的氰基硼氫化鈉並將混合物加入約300 μl的0.1 N鹽酸調整至pH 3。然後將反應混合物於100℃另再攪拌2 h。冷卻後，另加入70 ml(0.108 mmol)15% 4-側氧丁酸溶液並將反應混合物再次於100℃攪拌1 h。然後另再加入3.7 mg(0.059 mmol)的氰基硼氫化鈉，及隨後使用約300 μl的0.1 N鹽酸將pH調整回3。然後將反應混合物於100℃另再攪拌2 h。在轉化仍未完全之情況下，重複此步驟第三次。最後將反應混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。於此法得到32 mg(65%之理論值)的標題
化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法5)：Rt=1.64 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.76 min；MS(ESIpos)：m/z=899(M+H)+
1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)：δ=8.95和8.8(2m,1H),8.88和8.65(2s,1H),7.4-7.1(m,5H),5.0,4.78,4.65和4.55(4m,2H),4.1-3.7(m,5H),3.32,3.29,3.20,3.12,3.1和3.0(6s,9H),2.75(m,2H),2.63(t,1H),2.4-2.2(m,4H),2.1-1.2(m,12H),1.2-0.8(m,16H),0.75(m,3H)[更多的訊號隱藏於H2O和DMSO波峰下]。
標題化合物係以類似中間物61之合成，藉由50 mg
的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物14)與4-側氧丁酸反應所製備。
產率：34 mg(70%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.64 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.77 min；MS(ESIpos)：m/z=887(M+H)+.
標題化合物係以類似中間物61之合成，藉由15 mg的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物16)與4-甲醯苯甲酸之反應所製備。
產率：7.5 mg(48%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.75 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESIpos)：m/z=947(M+H)+.
將10 mg(0.011 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物16)溶於2 ml的二烷/水中，並加入2.8 mg(0.022 mmol)的6-側氧己酸。隨後將反應混合物於100℃攪拌1 h。冷卻至RT後，加入0.75 mg(0.012 mmol)的氰基硼氫化鈉並將混合物加入0.1 N鹽酸調整至pH 3。然後將反應混合物於100℃另再攪拌一小時。冷卻後，另加入2.8 mg(0.022 mmol)的6-側氧己酸並將反應混合物再次於100℃攪拌1 h。另再加入0.75 mg(0.012 mmol)的氰基硼氫化鈉，及隨後使用約0.1 N鹽酸將pH調整回至3。然後將反應混合物於100℃另再攪拌1 h。然後重複此步驟第三次。最後將反應混合物濃縮並將粗產物以製備式HPLC純化。由此得到6.4 mg(64%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法5)：Rt=1.68 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.86 min；MS(ESIpos)：m/z=927(M+H)+.
標題化合物係以68 mg的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物14)與2-側氧乙基胺甲酸第三丁酯之反應所製備，及隨後以三氟乙酸將BOC保護基分離。
產率：49 mg(62%之理論值於二階段中)
HPLC(方法5)：Rt=1.58 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.05 min；MS(ESIpos)：m/z=844(M+H)+
1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)：δ=8.25(m,1H),8.45和8.15(2d,1H),7.65-7.55(m,3H),7.23-7.1(m,5H),5.12和4.95(2m,1H),4.72和4.62(2m,1H),4.6和4.52(2t,1H),4.2-3.8(m,4H),3.7(d,1H),3.23,3.20,3.19,3.18,3.03和2.98(6s,9H),3.0-2.7(m,6H),2.4-1.2(m,
15H),1.05,1.0,0.88和0.82(4d,6H),0.92(m,6H),0.73(m,6H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下]。
標題化合物係以類似中間物66之合成，藉由25 mg(0.027 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物16)與3-側氧丙基胺甲酸苄基酯之反應所製備，及隨後以氫解作用將Z保護基分離(以10%活性碳上鈀作為催化劑，以乙醇作為溶劑)。
產率：11 mg(41%之理論值於二階段)
HPLC(方法5)：Rt=1.53 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.72 min；MS(ESIpos)：m/z=870(M+H)+.
將26 mg(26 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(金剛烷-1-基甲氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽和33.9 μl的15%琥珀半醛酸水溶液(53 μmol)溶於957 μl的1：1-二烷/水混合物並加熱至100℃歷時1 h。短暫的冷卻後，加入1.81 mg(29 μmol)的氰基硼氫化鈉。將反應混合物加入0.1 N鹽酸調整至pH 3並將混合物另再加熱至100℃歷時2 h。再次加入相同量的琥珀半醛酸溶液、
氰基硼氫化鈉和鹽酸，將混合物再次加熱至100℃歷時2 h。然後將反應混合物以製備式HPLC直接分離其組份。由此得到18.5 mg(73%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.17 min；m/z=967(M+H)+.
將24 mg(26 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽和33.7 μl的15%琥珀半醛酸水溶液(52 μmol)溶於953 μl的1：1-二烷/水混合物並加熱至100℃歷時1 h。短暫的冷卻後，加入1.81 mg(29 μmol)的氰基硼氫化鈉。將反應混合物加入0.1 N鹽酸調整至pH 3並將混合物另再加熱至100℃歷時2 h。再次
加入相同量的琥珀半醛酸溶液、氰基硼氫化鈉和鹽酸，將混合物再次加熱至100℃歷時2 h。然後將反應混合物以製備式HPLC直接分離其組份。由此得到15.2 mg(65%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；m/z=895(M+H)+
將53 mg(84 μmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基hexan-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)和45 mg(84 μmol)的N-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯基}-L-苯丙胺酸苄基酯三氟乙酸鹽(中間物12)置於2 ml的DMF中處理，加入19 μl的N,N-二異丙基乙基胺、14 mg(92 μmol)的HOBt和17.6 mg(92 μmol)的EDC及然後將混合物於RT攪拌至隔夜。隨後，
將反應混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到59 mg(68%之理論值)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
LC-MS(方法1)：Rt=1.55 min；m/z=1044(M+H)+.
將57 mg(0.055 mmol)的此中間物以1.2 ml的哌啶溶於5 ml的DMF之溶液處理以分離Fmoc保護基。濃縮及以製備式HPLC純化後，得到39 mg(76%之理論值)的游離胺中間物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；m/z=822(M+H)+.
將37 mg(0.045 mmol)的此中間物溶於5 ml的二烷/水，及類似中間物66中化合物的製備，與15%的4-側氧丁酸水溶液，於氰基硼氫化鈉的存在下反應。得到16 mg(39%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法6)：Rt=2.1 min；
LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；MS(ESIpos)：m/z=908(M+H)+.
首先，以類似中間物14中所述的合成，處理中間物4和26，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
將30 mg(0.032 mmol)的此化合物溶於6 ml的二烷/水中，並加入41 μl(0.063 mmol)15%的4-側氧丁酸水溶液。將反應混合物隨後於100℃攪拌1 h。冷卻至RT後，加入2.2 mg(0.035 mmol)的氰基硼氫化鈉並將混合物加入約300 μl的0.1 N鹽酸調整至pH 3。然後將
反應混合物於100℃另再攪拌2 h。冷卻後，另再加入41 μl(0.063 mmol)的15% 4-側氧丁酸溶液，並將反應混合物於100℃再攪拌1 h。然後另再加入2.2 mg(0.035 mmol)的氰基硼氫化鈉及隨後使用約300 μl的0.1 N鹽酸將pH調整回3。將反應混合物於100℃另再攪拌2 h。在轉化仍未完全之情況下，重複此步驟第三次。最後將反應混合物濃縮並將粗產物以製備式HPLC純化。由此得到24 mg(82%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.15 min；MS(ESIpos)：m/z=922(M+H)+.
首先，以類似中間物14中所述的合成，處理中間物4和39，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基
-3-{[(2S)-1-甲氧基-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。然後使用7 mg(0.009 mmol)的此化合物，以類似中間物61中之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到2 mg(22%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法6)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.06 min；MS(ESIpos)：m/z=832(M+H)+.
將212 mg(411 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物8)和237 mg(411
μmol)的苄基-N-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯基}-L-色胺酸酯三氟乙酸鹽(中間物20)置於30 ml的DMF中處理，並加入188 mg(493 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和215 μl N,N-二異丙基乙基胺。將反應混合物於RT攪拌20 h，然後於減壓下濃縮，並將殘餘物以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合並濃縮，及將殘餘物於高真空下乾燥。由此得到315 mg(80%之理論值)Boc-保護的中間物N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為無色泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=1.45 min；m/z=961(M+H)+.
將50 mg(52 μmol)的此中間物以1 ml的三氟乙酸溶於9 ml的二氯甲烷之溶液中處理，以分離Boc保護基。濃縮及以製備式HPLC純化後，得到29 mg(57%之理論值)的游離胺中間物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
LC-MS(方法1)：Rt=0.99 min；m/z=861(M+H)+.
將29 mg(0.03 mmol)的此中間物溶於6 ml的二
烷/水並加入39 μl(0.059 mmol)的15% 4-側氧丁酸水溶液。將反應混合物隨後於100℃攪拌1 h。冷卻至RT後，加入2 mg(0.033 mmol)的氰基硼氫化鈉並將混合物加入約300 μl的0.1 N鹽酸調整至pH 3。然後將反應混合物於100℃另再攪拌2 h。冷卻後，另再加入39 μl(0.059 mmol)的15% 4-側氧丁酸溶液，並將反應混合物於100℃再攪拌1 h。然後另再加入2 mg(0.033 mmol)的氰基硼氫化鈉及隨後使用約300 μl的0.1 N鹽酸將pH調整回3。然後將混合物於100℃另再攪拌2 h。之後，將反應混合物倒入1：1半飽和氯化銨水溶液及乙酸乙酯之混合物中。將有機層移出，以飽和的氯化鈉溶液清洗，以硫酸鎂乾燥及濃縮。將殘餘物以水/乙腈冷凍乾燥。由此得到27 mg(94%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法5)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.04 min；MS(ESIpos)：m/z=947(M+H)+.
首先，以類似中間物14中所述的合成，處理中間物4和38，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-({(2S)-1-[苄基(甲基)胺基]-1-側氧-3-苯基丙-2-基}胺基)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。然後使用25 mg(0.026 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到13 mg(54%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法12)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.01 min；MS(ESIpos)：m/z=921(M+H)+.
將50 mg(73 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和28 mg(73 μmol)的(1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙烷羧酸苄基酯三氟乙酸鹽(中間物45)置於5 ml的DMF中處理，並加入42 mg(110 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和38 μl的N,N-二異丙基乙基胺。將反應混合物於RT攪拌5 h，然後於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合並濃縮。從二烷/水冷凍乾燥後，得到35 mg(51%之理論值)Boc-保護的中間物N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-({(1S,2R)-1-[(苄氧基)羰基]-2-苯基環丙基}胺基)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為無色泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=1.52 min；m/z=934(M+H)+.
將35 mg的此中間物以1 ml的三氟乙酸溶於5 ml的二氯甲烷之溶液分離Boc保護基。濃縮和從二烷/水冷凍乾燥後，得到34 mg(97%之理論值)的游離胺中間物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-({(1S,2R)-1-[(苄氧基)羰基]-2-苯基環丙基}胺基)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
LC-MS(方法1)：Rt=0.91 min；m/z=834(M+H)+.
然後使用11 mg(0.011 mmol)的此中間物，以類似中間物66之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到2.5 mg(24%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法12)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.1 min；MS(ESIpos)：m/z=920(M+H)+.
首先，以類似中間物14中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和(1S,2R)-1-胺基-2-苯基-正丙基環丙甲醯胺三氟乙酸鹽(中間物27)於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和的存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S,2R)-2-苯基-1-(丙基胺甲醯基)環丙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用14 mg(0.016 mmol)的此化合物，以類似中間物61中之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到11.3 mg(83%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.27 min；MS(ESIpos)：m/z=871
(M+H)+.
首先，藉由中間物46(N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺)與中間物48((1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙烷羧酸乙酯三氟乙酸鹽)在O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後分離Boc，製備起始化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-(乙氧基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-
甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽。然後使用70 mg(0.079 mmol)的此起始物，類似中間物61，藉由與4-側氧丁酸反應，得到46 mg(68%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.28 min；MS(ESIpos)：m/z=858(M+H)+
首先，以類似中間物75中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和L-苯基丙胺醯胺鹽酸鹽於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸
之存在下偶合，隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用47 mg(0.049 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到39 mg(96%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.44 min；MS(ESIpos)：m/z=817(M+H)+
1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)：δ=8.95和8.8(2m,1H),8.25和8.0(2d,1H),7.45,7.35和7.0(3s,broad,2H),7.3-7.1(m,5H),4.8-4.4(2m,3H),3.95(m,1H),3.82(m,1H),3.72(d,1H),3.22,3.18,3.15,3.05和3.00(5s,9H),2.85-2.7(m,4H),2.45-1.6(m,12H),1.5-1.2(m,3H),1.1-0.7(m,21H)[更多的訊號隱藏於溶劑波峰下].
此化合物係類似中間物66於2階段，由20 mg(16 μmol)來自中間物14之化合物和6-側氧己基胺甲酸苄基酯開始，並以甲醇作為溶劑進行氫化所製備。
產率：7.6 mg(55%之理論值於2階段中)
HPLC(方法6)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.7 min；MS(ESIpos)：m/z=901(M+H)+.
將36 mg(43 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基
-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-苯乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物46)和4.6 mg(43 μmol)的苄基胺置於5 ml的DMF中處理，加入7.5 μl(88 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺、10 mg(65 μmol)的HOBt和10 mg(52 μmol)的EDC，及然後將混合物於RT攪拌至隔夜。隨後，將反應混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。得到29 mg(73%之理論值)Boc-保護的中間物N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
LC-MS(方法1)：Rt=1.43 min；m/z=921(M+H)+.
將29 mg的此中間物以1 ml的三氟乙酸溶於6 ml的二氯甲烷之溶液以分離Boc保護基。濃縮及從二烷/水冷凍乾燥後，得到30 mg(quant.)的游離胺中間物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
LC-MS(方法1)：Rt=0.95 min；m/z=821(M+H)+.
然後使用17 mg(0.018 mmol)的此中間物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到13 mg(80%之理論值)的標題化合物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.97 min；MS(ESIpos)：m/z=907(M+H)+.
首先，以類似中間物74中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和N-苄基-L-色胺醯胺三氟乙酸
鹽(中間物47)在O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。使用10 mg(0.01 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到2.5 mg(26%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.13 min；MS(ESIpos)：m/z=946(M+H)+.
首先，以類似中間物74中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和(1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙甲醯胺三氟乙酸鹽(中間物48)於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-胺甲醯基-2-苯基環丙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。使用14 mg(0.0163 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到8 mg(57%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.64 min；MS(ESIpos)：m/z=829(M+H)+.
首先，以類似中間物69中所述的合成，藉由N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)和N α-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯基}-L-色胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物49)在O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，並隨後以哌啶分離Fmoc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用78 mg(0.088 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到68 mg(90%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.49 min；MS(ESIpos)：m/z=856
(M+H)+.
此化合物係類似中間物82中之化合物，由20 mg(26 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽開始，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應所製備。
產率：5 mg(25%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.72 min；MS(ESIpos)：m/z=884(M+H)+.
首先，以類似中間物79中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-苯乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物46)和嗎福啉，於EDC和HOBT之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(嗎福啉-4-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為
三氟乙酸鹽。然後使用30 mg(0.033 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到22 mg(76%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.58 min；MS(ESIpos)：m/z=887(M+H)+.
首先，以類似中間物79中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-苯乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-
基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物46)和N-苄基-L-蘇胺醯胺三氟乙酸鹽，於HATU之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3R)-1-(苄基胺基)-3-羥基-1-側氧丁-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用21 mg(0.024 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到20 mg(97%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.54 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.49 min；MS(ESIpos)：m/z=861(M+H)+.
首先，以類似中間物74中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和第三丁基-L-苯丙胺酸酯鹽酸鹽，於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，得到第三丁基酯(與三氟乙酸於二氯甲烷中攪拌40分鐘)，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-第三丁氧基-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用22 mg(0.02 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到16 mg(94%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.05 min；MS(ESIpos)：m/z=874
(M+H)+.
此化合物，係以類似中間物86中所述之合成，由230 mg(336 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和第三丁基-L-色胺酸酯鹽酸鹽開始於3階段所製備。
產率：95 mg(31%之理論值於3階段中)
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.05 min；MS(ESIpos)：m/z=913(M+H)+.
首先，以類似中間物69中所述的合成，藉由N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)和N α-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯基}-L-色胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物49)於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以哌啶分離Fmoc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用30 mg(0.03 mmol)的此化合物，以類似中間物61之化合物的製備，藉由與6-側氧己基胺甲酸苄基酯(其係事
先將6-羥己基胺甲酸苄基酯氧化所得來)於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到17 mg(45%之理論值)的Z-保護化合物。隨後，在甲醇中於10%鈀/活性碳上氫解，得到標題化合物。
產率：14 mg(95%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.73 min；MS(ESIpos)：m/z=869(M+H)+.
首先，以類似中間物86中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基
-L-纈胺醯胺(中間物26)和第三丁基-L-色胺酸酯鹽酸鹽，於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，得到第三丁基酯(與1：10三氟乙酸/二氯甲烷攪拌30 min)，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-第三丁氧基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用71 mg(0.075 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與6-側氧己基胺甲酸苄基酯(其係事先將6-羥基己基胺甲酸苄基酯氧化所得來)於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到35 mg(44%之理論值)的Z-保護化合物。隨後，在甲醇中於10%鈀/活性碳上氫解，得到標題化合物。
產率：30 mg(98%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.77 min；MS(ESIpos)：m/z=926(M+H)+.
首先，以類似中間物74中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S}2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和2-(1H-吲哚-3-基)乙胺，於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用100 mg(0.119 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到50 mg(49%之理論值)的標題化合物。將標題化合物於本處以快速層析於矽膠上以二氯甲烷/甲醇/17%氨水作為溶離劑純化，在此期
間，混合比例從最初的15/2/02換成15/4/0.5。
HPLC(方法6)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=813(M+H)+.
首先，以類似中間物74中所述的合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和苯乙基胺，於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-{(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-[(2S)-2-{(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-[(2-苯乙
基)胺基]丙基}吡咯啶-1-基]-5-甲基-1-側氧庚-4-基}-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。然後使用57 mg(0.071 mmol)的此化合物，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到44 mg(80%之理論值)的標題化合物。標題化合物亦可以快速層析於矽膠上以二氯甲烷/甲醇/17%氨水作為溶離劑(15/2/02->15/4/0.5)純化。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.64 min；MS(ESIpos)：m/z=774(M+H)+.
使用100 mg(0.139 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-羥基-1-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯
啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物40)，以類似中間物61之製備，藉由與4-側氧丁酸於氰基硼氫化鈉的存在下反應，得到94 mg(84%之理論值)的標題化合物。將標題化合物以製備式HPLC純化。
HPLC(方法5)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.46 min；MS(ESIpos)：m/z=804(M+H)+.
將22.4 mg(24 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽溶於1.4 ml的二
烷/水，及以類似中間物61之製備，與15%的4-側氧丁酸水溶液於氰基硼氫化鈉的存在下反應。從二烷冷凍乾燥後，得到8.2 mg(38%之理論值)的標題化合物為白色固體之形式。
HPLC(方法10)：Rt=2.54 min
LC-MS(方法12)：Rt=0.94 min；MS(ESIpos)：m/z=919(M+H)+
將17.1 mg(18 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1R)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-
基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽溶於1.1 ml的二烷/水，及類似中間物61之製備，與15%的4-側氧丁酸水溶液於氰基硼氫化鈉的存在下反應。從二烷冷凍乾燥後，得到14.8 mg(89%之理論值)的標題化合物為白色固體之形式。
HPLC(方法10)：Rt=2.54 min；LC-MS(方法12)：Rt=0.92 min；MS(ESIpos)：m/z=919(M+H)+
將19.3 mg(20 μmol)N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基磺醯基)-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]
吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽溶於1.2 ml的二烷/水，及類似中間物61之製備，與15%的4-側氧丁酸水溶液於氰基硼氫化鈉的存在下反應。從二烷冷凍乾燥後，得到8.6 mg(45%之理論值)的標題化合物為白色固體之形式。
LC-MS(方法11)：Rt=0.85 min；MS(ESIpos)：m/z=943(M+H)+
將15.5 mg(10 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3E)-1,4-二苯
基丁-3-烯-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽溶於1.0 ml的二烷/水中，及類似中間物61之製備，與15%的4-側氧丁酸水溶液於氰基硼氫化鈉的存在下反應。從二烷冷凍乾燥後，得到10.3 mg(68%之理論值)的標題化合物為白色固體之形式。
HPLC(方法10)：Rt=2.59 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.94 min；MS(ESIpos)：m/z=877(M+H)+
標題化合物係以類似中間物66之合成，藉由200 mg(0.108 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物16)與6-側氧己基胺甲酸苄基酯之反應，及隨後將Z保護基氫解分離(以5%活性碳上鈀作為催化劑，以甲醇作為溶劑)所製備。
產率：69 mg(65%之理論值於二階段)
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.76 min；MS(ESIpos)：m/z=912(M+H)+.
此化合物，係以類似中間物80中所述之合成所製備。以製備式HPLC進行純化。
產率：40 mg(29%之理論值於三階段)
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.92 min；MS(ESIpos)：m/z=974(M+H)+.
將324 mg(0.81 mmol)的2,5-二側氧吡咯啶-1-基N-(第三丁氧基羰基)-L-色胺酸酯溶於20 ml的DMF，並
加入200 mg(1.62 mmol)的1,2-烷鹽酸鹽(起始化合物5)和850 μl的N,N-二異丙基乙基胺。將反應混合物於50℃攪拌至隔夜及然後於減壓下濃縮。將殘餘物置於二氯甲烷中處理並以水萃取。將有機層以硫酸鎂乾燥並濃縮。將殘餘物以快速層析於矽膠上以4：1二氯甲烷/乙酸乙酯作為溶離劑純化。將產物溶離份濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥。由此得到147.5 mg(48%之理論值)Boc-保護的中間物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.03 min；MS(ESIpos)：m/z=374(M+H)+.
使用166 mg(444.5 μmol)的此中間物，於標準條件下以3 ml三氟乙酸溶於20 ml二氯甲烷之溶液將Boc保護基分離，以HPLC純化後，得到155 mg(86%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.43 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.56 min；MS(ESIpos)：m/z=274(M+H)+.
將177 mg(260 μmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和100 mg(260 μmol)的(2S)-2-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)丙-1-酮三氟乙酸鹽(中間物99)置於15 ml的DMF中處理，並加入118 mg(310 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和140 μl的N,N-二異丙基乙基胺。將反應混合物於RT攪拌30 min，然後於減壓下濃縮，並將殘餘物以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合並濃縮。從二烷冷凍乾燥後，得到170 mg(68%之理論值)Boc-保護的中間物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.36 min；m/z=940(M+H)+.
將170 mg的此中間物以3 ml三氟乙酸溶於30 ml二氯甲烷之溶液處理以分離Boc保護基。然後反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化，得到155 mg(86%之理論值)去保護的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧
基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺中間物。
HPLC(方法12)：Rt=1.85 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESIpos)：m/z=840(M+H)+.
然後使用50 mg(0.052 mmol)的此中間物，以類似中間物97之製備，與6-側氧己基胺甲酸苄基酯於氰基硼氫化鈉的存在下，及隨後將Z保護基氫解分離(以5%活性碳上鈀作為催化劑，以甲醇作為溶劑)，製備標題化合物。
產率：21 mg(37%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.02 min；MS(ESIpos)：m/z=1073(M+H)+.
將26.7 mg(24.87 μmol)的中間物100溶於10 ml的甲醇並於鈀/活性碳(5%)上，於標準的氫氣壓下氫化30 min。將催化劑濾出並於減壓下蒸發溶劑。將殘餘物於高真空下乾燥後，得到22.5 mg(96%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；
LC-MS(方法1)：Rt=0.76 min；MS(ESIpos)：m/z=939(M+H)+.
此化合物，係以類似中間物157中所述的合成，從N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(嗎福啉-4-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
產率：8 mg(71%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=1094(M+H)+.
此化合物，係以類似中間物157中所述的合成，從N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3R)-1-(苄基胺基)-3-羥基-1-側氧丁-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
產率：3 mg(22%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.78 min；MS(ESIpos)：m/z=1069(M+H)+.
首先，從反式-4-胺基環己羧酸藉由導入Boc保護基及隨後以習用的胜肽化學法分離Boc保護基，製備反式-4-胺基環己羧酸苄基酯三氟乙酸鹽。
然後將15 mg(18 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於5 ml的二甲基甲醯胺及隨後與13 mg(35 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、9 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與15 mg(44 μmol)的反式-4-胺基環己羧酸苄基酯三氟乙酸鹽混合。將混合物於RT攪拌至1 h及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合並於減壓下蒸發溶劑。將殘餘物於高真空下乾燥後，得到14.7 mg(78%之理論值)保護的中間物為無色泡沫之形式。
HPLC(方法6)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.95 min；MS(ESIpos)：m/z=1072(M+H)+.
由此保護的中間物先將苄基酯以氫解法移除並得到一定產率之游離羧基組份。將14 mg(14 μmol；1 equiv.)的去保護化合物置於5 ml的DMF中處理並與3.3 mg(29 μmol；2.1 equiv.)的N-羥基琥珀醯亞胺在4.1 mg
(21 μmol；1.5 equiv.)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、7.5 μl(44 μmol；3.1 equiv.)的N,N-二異丙基乙基胺和0.9 mg(7 μmol；0.5 equiv.)的4-二甲基胺基吡啶之存在下混合，及將混合物於RT攪拌至隔夜。然後另加入10當量的N-羥基琥珀醯亞胺、5當量的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、5當量的N,N-二異丙基乙基胺和0.5當量的4-二甲基胺基吡啶，並將反應混合物以超音波浴處理5 h。隨後，蒸發溶劑，將殘餘物以製備式HPLC純化並將對應的溶離份組合並濃縮，將殘餘物從二烷冷凍乾燥後，得到9.7 mg(62%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.77 min；MS(ESIpos)：m/z=1078(M+H)+.
製備此化合物，係以類似中間物157中所述的合成，從4-{[(2S)-1-{[(2S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-第三丁氧基-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基](甲基)胺基}-3-甲基丁-2-基]胺基}-3-甲基-1-側氧丁-2-基](甲基)胺基}丁酸和市售的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼開始所製備。得到42%產率之酯中間物。在第二步驟，將6 mg(6 μmol)的此中間物以三氟乙酸裂解第三丁基酯。以HPLC純化後，得到3.4 mg(48%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.66 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.04 min；MS(ESIpos)：m/z=1025(M+H)+.
將14 mg(16 μmol)的N-(6-胺基己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物88)置於750 μl的二烷中處理並與1.5 ml的飽和的碳酸氫鈉溶液及然後與3.2 mg(21 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯混合。將反應混合物於RT攪拌1 h及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到5.5 mg(36%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.84 min；MS(ESIpos)：m/z=949(M+H)+.
將38 mg(47 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於37 ml的DMF，及然後與71 mg(187 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和33 μl的N,N-二異丙基乙基胺及與37 mg(140 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌1 h。接著於高真空下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到12.2 mg(26%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESIpos)：m/z=1020
(M+H)+.
此化合物，係類似中間物107中所製備。
產率：2.5 mg(30%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.9 min；MS(ESIpos)：m/z=981(M+H)+.
此化合物，係類似中間物107，從中間物92所製備。
產率：35 mg(65%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.76 min；MS(ESIpos)：m/z=1011(M+H)+.
此化合物，係類似中間物147，從中間物83中之
化合物所製備。
產率：2.4 mg(24%之理論值)
HPLC(方法6)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=981(M+H)+.
此化合物，係類似中間物140，從中間物82和中間物22所製備。
產率：6.5 mg(51%之理論值)
HPLC(方法6)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=4.71 min；MS(ESIpos)：m/z=1077
(M+H)+.
此化合物，係類似中間物157，從中間物81中之化合物所製備。
產率：5.7 mg(57%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=1036(M+H)+.
將95 mg(104 μmol)的4-{[(2S)-1-{[(2S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-第三丁氧基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基](甲基)胺基}-3-甲基丁-2-基]胺基}-3-甲基-1-側氧丁-2-基](甲基)胺基}丁酸溶於DMF，及然後與79.5 mg(209 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、73 μl的N,N-二異丙基乙基胺及與68 mg(261 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌2 h。接著於高真空下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到104 mg(89%之理論值)第三丁基酯之標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.93 min；MS(ESIpos)：m/z=1121(M+H)+.
將中間物置於33.4 ml的二氯甲烷中處理，加入17
ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌1 h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。
由此得到61 mg(62%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESIpos)：m/z=1064(M+H)+.
將5 mg(5 μmol)的N-(6-胺基己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲
基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺置於885 μl的DMF中處理，並與5.3 mg(8 μmol)的4-硝基苯基2-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙基胺甲酸酯和2.8 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌2 h及然後濃縮至乾。將殘餘物以製備式HPLC純化。
產率：0.58 mg(11%之理論值)的無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.83 min；MS(ESIpos)：m/z=1035(M+H)+.
製備此化合物，係以類似中間物147中之化合物，從8 mg(9 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺來進行。濃縮後，將活化酯以製備式HPLC純化，於減壓下移除溶劑後，立即與抗體反應。
產率：3 mg(27%之理論值)(水解-敏感性)
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=996(M+H)+.
製備此化合物，係以類似中間物147中之化合物，從5 mg(6 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺來進行。濃縮後，將活化酯以製備式HPLC純化，於減壓下移除溶劑後，立即與抗體反應。
產率：3.2 mg(43%之理論值)(水解-靈敏性)
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.92 min；MS(ESIpos)：m/z=984(M+H)+.
此化合物，係類似中間物157，從中間物86中之化合物所製備。
產率：7 mg(42%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESIpos)：m/z=1081(M+H)+.
目標化合物，係類似中間物157，從7 mg(7.8 μmol)的中間物68之化合物所製備。產率：6.3 mg(53%之理論值)
LC-MS(方法1)：Rt=1.00 min；MS(ESIpos)：m/z=1102(M+H)+.
將7.4 mg(8.1 mmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和6.3 mg(24.2 mmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼鹽酸鹽偶合並類似中間物157進行處理。得到1.6 mg(13%之
理論值)的標題化合物為一固體。
LC-MS(方法11)：Rt=0.89 min；MS(ESIpos)：m/z=1126(M+H)+
將12.8 mg(13.9 mmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1R)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和10.9 mg(41.8 mmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼鹽酸鹽偶合並類似中間物157進行處理。得到10.8 mg(59%之理論值)的標題化合物為一固體。
LC-MS(方法11)：Rt=0.90 min；MS(ESIpos)：m/z=1126(M+H)+
將7.4 mg(7.9 mmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基磺醯基)-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和6.2 mg(23.5 mmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼鹽酸鹽偶合並類似中間物157進行處理。得到6.9 mg(74%之理論值)的標題化合物為一固體。
LC-MS(方法11)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=1150(M+H)+
將8 mg(9.1 mmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3E)-1,4-二苯基丁-3-烯-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和7.2 mg(27.4 mmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼鹽酸鹽偶合並類似中間物157進行處理。得到8.2 mg(82%之理論值)的標題化合物為白色固體。
LC-MS(方法11)：Rt=0.95 min；MS(ESIpos)：m/z=
1083(M+H)+
將30 mg(30 μmol)的中間物89置於2 ml的1,4-二烷中處理並與4 ml的飽和的碳酸氫鈉溶液混合，及然後與7.5 mg(50 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯混合。將反應混合物於RT攪拌1 h及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到24 mg(74%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；MS(ESIpos)：m/z=1006(M+H)+.
將22 mg(20 μmol)的中間物123與4 ml的三氟乙酸於8 ml的二氯甲烷中在RT下反應1 h，之後將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到11 mg(54%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.85 min；MS(ESIpos)：m/z=950(M+H)+.
將22.5 mg(20 μmol)的中間物101置於2 ml的1：1二烷/水中處理，及然後與5.6 mg(40 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯和與0.25 ml的飽和的碳酸氫鈉溶液混合。將反應混合物於RT攪拌30 min。然後另加入0.25 ml的飽和碳酸氫鈉溶液並將反應混合物於RT再攪拌15 min及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到12.8 mg(50%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.95 min；MS(ESIpos)：m/z=1019(M+H)+.
將64 mg(70 μmol)的N-(6-胺基己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物97)置於3 ml的1：1二烷/水中處理，然後以4 ml的飽和的碳酸氫鈉溶液調整至pH 9，及隨後與16.3 mg(110 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯混合。將反應混合物於RT攪拌1 h及然後於減壓下濃縮。然後另加入8 mg(55 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯，並將反應混合物再次調整至pH 9及於RT再攪拌1小時。接著濃縮和以製備式HPLC將剩餘的殘餘物純化。首先得到31 mg尚未環化的中間物。將27 mg的此中間物再次置於2 ml的1：1二烷/水中處理，及然後與250 μl的飽和的碳酸氫鈉溶液混合。於RT攪拌2 h後，將反應混合物濃縮及將殘餘物以製備式HPLC純
化。冷凍乾燥後，得到20 mg(29%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.96 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESIpos)：m/z=992(M+H)+.
將17 mg(18 μmol)的N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物98)溶於2.8 ml的二氯甲烷並與20 mg(174 mmol)的1-羥基吡咯啶
-2,5-二酮混合，及然後與10 mg(52 μmol)的1-(3二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.21 mg(0.17 μmol)的DMAP混合。於RT攪拌4 h後，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到8.2 mg(43%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.98 min；MS(ESIpos)：m/z=1071(M+H)+.
將5 mg(5.6 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯
基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於845 μl的DMF及然後與3.2 mg(17 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、2.6 mg(17 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、1.96 μl的N,N-二異丙基乙基胺及與5.9 mg(22.5 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌至隔夜及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到2.2 mg(36%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.88 min；MS(ESIpos)：m/z=1094(M+H)+.
將4 mg(4.3 μmol)的N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於646 μl的DMF及然後與2.5 mg(13 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、2.0 mg(13 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、2.25 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與4.5 mg(17 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌3 h及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到1.9 mg(39%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.9 min；MS(ESIpos)：m/z=1134(M+H)+.
將10.5 mg(11.7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於3.7 ml的二氯甲烷，及然後與6.7 mg(35 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、0.7 mg(5.8 μmol)的4-二甲基胺基吡啶和與8.2 mg(47 μmol)的市售(2R)-2-羥基丙基胺甲酸第三丁酯混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到7.5 mg(61%之理論值)Boc-保護的中間物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.03 min；MS(ESIpos)：m/z=1056(M+H)+.
隨後，將Boc保護基以三氟乙酸分離。然後將4.9 mg(0.005 mmol)去保護的粗產物於無純化下置於1.8 ml的二氯甲烷中處理並與3.7 mg(0.011 mmol)的1,1'-[(1,5-二側氧戊-1,5-二基)雙(氧基)]二吡咯啶-2,5-二酮、2.4 μl(0.014 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺和0.6 mg
(5 μmol)的4-二甲基胺基吡啶。將混合物於RT攪拌2 h，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到0.77 mg(15%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.93 min；MS(ESIpos)：m/z=1167(M+H)+.
將10 mg(11 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於2 ml的二氯甲烷
及然後與4.3 mg(22 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、0.88 mg(6 μmol)的4-二甲基胺基吡啶和與5.2 mg(22 μmol)的市售4-羥基哌啶-1-羧酸苄基酯混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到5 mg(40%之理論值)Z-保護的中間物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.04 min；MS(ESIpos)：m/z=1116(M+H)+.
隨後，將Z保護基以氫解法於乙醇中於鈀/活性碳上分離。然後將4.6 mg(0.005 mmol)去保護的粗產物，無進一步純化下，置於1.8 ml的二氯甲烷中處理並與3.8 mg(0.012 mmol)的1,1'-[(1,5-二側氧戊-1,5-二基)雙(氧基)]二吡咯啶-2,5-二酮、0.8 μl(0.005 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺和0.6 mg(5 μmol)的4-二甲基胺基吡啶混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到0.96 mg(16%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESIpos)：m/z=1193(M+H)+.
將15 mg(16.7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於2500 μl的DMF及然後與9.6 mg(50 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、7.6 mg(50 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、5.8 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與17.4 mg(67 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到11.2 mg(52%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；
LC-MS(方法2)：Rt=1.09 min；MS(ESIpos)：m/z=1106(M+H)+.
將5.8 mg(6.3 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於943 μl的DMF及然後與3.6 mg(19 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、2.9 mg(19 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、2.2 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與6.6 mg(25 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-
吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到4.5 mg(64%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.03 min；MS(ESIpos)：m/z=1129(M+H)+.
首先，製備2-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙基胺甲酸4-硝基苯基酯係於標準條件下，由市售的1-(2-胺基乙基)-1H-吡咯-2,5-二酮三氟乙酸鹽和氯碳酸4-硝基苯基酯來進行。
將5 mg(6 μmol)的N-(3-胺基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於1000 μl的DMF及然後與2 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與2.2 mg(9 μmol)的2-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙基胺甲酸4-硝基苯基酯混合。將混合物於RT攪拌1 h，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到1.6 mg(23%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.09 min；MS(ESIpos)：m/z=1036(M+H)+.
將10 mg(11 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於4000 μl的DMF及然後與6.3 mg(33 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、4.5 mg(33 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、5.7 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與11.5 mg(44 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到2.6 mg(14%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；MS(ESIpos)：m/z=1115(M+H)+.
首先，製備1-[4-側氧-4-(哌-1-基)丁基]-1H-吡咯-2,5-二酮三氟乙酸鹽係於標準條件下，由哌-1-羧酸第三丁酯和4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丁酸於二階段來進行。
將5 mg(5.6 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於1000 μl的DMF及然後與2.1 mg(11 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、1.7 mg(11 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、2 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與3.5 mg(5.6 μmol)的1-[4-側氧-4-(哌-1-基)丁基]-1H-吡咯-2,5-二酮三氟乙酸鹽混合。將混合物於RT攪拌至隔
夜。然後加入2.1 mg(5.6 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸並將反應混合物於RT另攪拌3 h。隨後，於減壓下移除溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份，以水冷凍乾燥後，得到0.6 mg(10%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.9 min；MS(ESIpos)：m/z=1132(M+H)+.
首先，製備6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N'-甲基己烷肼三氟乙酸鹽係於標準條件下，由市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸和1-甲基肼
羧酸第三丁酯於2階段來進行。
將6.9 mg(8 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於2540 μl的DMF及然後與3.6 mg(9 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、3 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與4.1 mg(12 μmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N'-甲基己烷肼三氟乙酸鹽混合。將混合物於RT攪拌至隔夜。隨後，於減壓下蒸發溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到3.9 mg(45%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.93 min；MS(ESIpos)：m/z=1108(M+H)+.
從2-(甲基胺基)乙基胺甲酸第三丁基甲基酯和4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丁酸開始，於二階段，先製備4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-甲基-N-[2-(甲基胺基)乙基]丁醯胺三氟乙酸鹽。
將6.6 mg(7.3 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於2000 μl的DMF及然後與5.6 mg(14.7 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、2.6 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與4.1 mg(9 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-甲基-N-[2-(甲基胺基)乙基]丁醯胺三氟乙酸鹽混合。於RT攪拌3 h後，再次加入相同量的HATU和N,N-二異丙基乙基胺，及然後將反應混合物於RT攪拌至隔夜。隨後，於減壓下蒸發溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到4 mg(44%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=2.0 min；
LC-MS(方法1)：Rt=0.91 min；MS(ESIpos)：m/z=1134(M+H)+.
將13 mg(14.7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於10 ml的二氯甲烷及然後與8.4 mg(44 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、5.4 mg(44 μmol)的4-二甲基胺基吡啶和與9 mg(29.3 μmol)的市售N-(第三丁氧基羰基)-L-蘇胺酸苄基酯混合。將混合物於RT攪拌5 h。
隨後，將反應混合物以水震盪萃取二次並將有機層以硫酸鎂乾燥及於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷/水冷凍乾燥後，得到14 mg(81%之理論值)保護的中間物為無色泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=2.3 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.13 min；MS(ESIpos)：m/z=1178(M+H)+.
隨後，將Z保護基以氫解法於甲醇中於10%鈀/活性碳上分離。然後將9.5 mg(0.0087 mmol)去保護的粗產物，無進一步純化下，置於5 ml的DMF中處理並與5 mg(26.2 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、4 mg(26.2 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、54.6 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與9.1 mg(34.9 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌1 h，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷冷凍乾燥後，得到9.5 mg(84%之理論值)Boc-保護的中間物。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESIpos)：m/z=1295(M+H)+.
隨後，將9.5 mg(7.3 μmol)以0.5 ml的三氟乙酸於2 ml的二氯甲烷中將Boc-保護的中間物去保護，從二烷冷凍乾燥後，得到9 mg(82%之理論值)的標題化合
物為無色泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.84 min；MS(ESIpos)：m/z=1195(M+H)+.
將4.1 mg(12 μmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N'-甲基己烷肼三氟乙酸鹽(中間物22)與6.9 mg(8 μmol)來自中間物61之化合物共同溶解於2.5 ml的DMF中，及然後與3.5 mg(9 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和3 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷冷凍乾燥後，得到2.6 mg(30%之理論
值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.90和0.91 min；MS(ESIpos)：m/z=1120(M+H)+.
將44 mg(49 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於2 ml的二氯甲烷及然後與18.8 mg(98 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、3.8 mg(24 μmol)的4-二甲基胺基吡啶和與23 mg(98 μmol)的市售4-羥基哌啶-1-羧酸苄
基酯混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到22 mg(40%之理論值)Z-保護的中間物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.04 min；MS(ESIpos)：m/z=1116(M+H)+.
隨後，將Z保護基以氫解法於乙醇中於鈀/活性碳上分離。
然後將19 mg(19 μmol)去保護的粗產物，無進一步純化下，置於4 ml的DMF中處理並與7 mg(39 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丁酸、11 mg(29 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和5 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌1 h，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷冷凍乾燥後，得到7.5 mg(34%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESIpos)：m/z=1147(M+H)+.
將9 mg(9.5 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物72)溶於1000 μl的DMF及然後與10 mg(38 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼、7.2 mg(19 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-t四甲基六氟磷酸和8 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合，並將反應混合物於RT攪拌1 h。隨後，於減壓下蒸發溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮並冷凍乾燥，得到6.4 mg(58%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；
LC-MS(方法1)：Rt=0.99 min；MS(ESIpos)：m/z=1154(M+H)+.
將6 mg(6.7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物61)與3 mg(8.7 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2,2-二甲基丁烷肼三氟乙酸鹽，類似中間物142反應，得到2 mg(27%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；
LC-MS(方法3)：Rt=1.92 min；MS(ESIpos)：m/z=1106(M+H)+.
於5 mg(5.6 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之1 ml的DMF溶液中加入7.65 mg(22.5 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2,2-二甲基丁烷肼三氟乙酸鹽、3.2 mg(16.9 μmol)的EDC、1.96 μl(11.3 μmol)的二異丙基乙基胺和2.6 mg(16.9 μmol)的HOBT。將反應混合物於RT攪拌3 h。隨後，另加入0.95 mg(2.8 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2,2-二甲基丁烷肼三氟乙酸
鹽。攪拌至隔夜後，將反應混合物濃縮及以製備式HPLC純化。得到3.5 mg(85%純度，48%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法3)：Rt=1.86 min；m/z=1094(M+H)+.
將12 mg(14 μmol)的N-(3-胺基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物66)置於750 μl的二烷中處理並與1.5 ml的飽和的碳酸氫鈉溶液及然後與3.2 mg(21 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡
咯-1-羧酸甲酯混合。將反應混合物於RT攪拌1 h，及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到4.2 mg(32%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESIpos)：m/z=950(M+H)+.
將9 mg(9.8 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-({(2S)-1-[苄基(甲基)胺基]-1-側氧-3-苯基丙-2-基}胺基)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-
側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物73)，類似中間物133與10 mg(39 μmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼反應，得到1.8 mg(15%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法9)：Rt=5.11 min；MS(ESIpos)：m/z=1128(M+H)+.
將16 mg(17 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S,3S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物70)溶於2 ml的二氯甲烷並與2.6 mg(23 mmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮及
然後與4 mg(21 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽混合。於RT攪拌2 h後，再次加入相同量的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮和1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽。然後於RT攪拌至隔夜，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到10 mg(56%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；
將6 mg(7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側
氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物61)與2.8 mg(8 μmol)的N-(2-胺基乙基)-4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-甲基丁醯胺三氟乙酸鹽、10.1 mg(27 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和5 μl的N,N-二異丙基乙基胺於2 ml的DMF中混合，並於RT攪拌至隔夜。然後另再加入5 mg(23.5 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和3 μl的N,N-二異丙基乙基胺。於RT攪拌5 h後，於減壓下移除溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮，從二烷冷凍乾燥後，得到1.3 mg(15%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.21 min；MS(ESIpos)：m/z=1120(M+H)+.
將6 mg(7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物61)與3.1 mg(9 μmol)的4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-N-[2-(甲基胺基)乙基]丁醯胺三氟乙酸鹽、10.1 mg(27 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸和5 μl的N,N-二異丙基乙基胺於2 ml的DMF中混合，並將混合物於RT攪拌4 h。然後於減壓下移除溶劑並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮，從二烷冷凍乾燥後，得到1 mg(13.4%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.89 min；MS(ESIpos)：m/z=1121(M+H)+.
將7.9 mg(9 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S,2R)-2-苯基-1-(丙基胺甲醯基)環丙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於3 ml的DMF及然後與10.4 mg(54 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、8.3 mg(54 μmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物、9 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與9.5 mg(36 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到4.3 mg(22%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.93 min；MS(ESIpos)：m/z=1078(M+H)+.
製備此化合物係類似中間物150，由中間物81之化合物來進行。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESIpos)：m/z=1036(M+H)+.
將10 mg(12 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-(乙氧基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於3 ml的DMF及然後與8.9 mg(23 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、10 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與12 mg(47 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將混合物於RT攪拌1 h。接著於高真空下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到5.8 mg(37%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.99 min；MS(ESIpos)：m/z=1066(M+H)+.
於5 mg(5.6 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之1 ml的DMF溶液中加入9.7 mg(22.5 μmol)的3-(2-{2-[2-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙烷肼三氟乙酸鹽、3.2 mg(16.9 μmol)的EDC、1.96 μl(11.3 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺和2.6 mg(16.9 μmol)的HOBT。將反應混合物於RT攪拌3 h。隨後，另再加入1.2 mg(2.8 μmol)的3-(2-{2-[2-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙烷肼三氟乙酸鹽。將反應混合物於RT攪拌至隔夜及然後以製備式HPLC純化。3.6 mg(51%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.90 min；m/z=1185(M+H)+.
將15 mg(17 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S)-1-(1,2-烷-2-基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於10 ml的二氯甲烷及然後與12.8 mg(67 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、10 mg(83 μmol)的4-二甲基胺基吡啶和與10.3 mg(33 μmol)的市售N-(第三丁氧基羰基)-L-蘇胺酸苄基酯混合。將混合物加熱回流4 h。然後再次加入相同量的偶合劑和4-二甲基胺基吡啶，並將反應混合物加熱回流至隔夜。隨後，將反應混合物以二氯甲烷稀釋並以水震盪萃取一次，將有機層移除並於高真空下濃縮。
將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到7.7 mg(37%之理論值)保護的中間物為無色泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=2.5 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.13 min；MS(ESIpos)：m/z=1190(M+H)+.
隨後，以氫化作用，於標準的氫氣壓下，於甲醇中於10%鈀/活性碳上移除苄基酯保護基，如中間物151中所述，將由此得到的酸與6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。在最後步驟，以三氟乙酸分離Boc保護基。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到0.22 mg(2.5%之理論值於3階段)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.81 min；MS(ESIpos)：m/z=1207(M+H)+.
此化合物係以類似中間物152中所述之合成，由N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.82 min；MS(ESI+)：m/z=1024(M+H)+.
此化合物係以類似中間物131最後階段中所述之合成，由N-(3-胺基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和1,1'-[環丙烷-1,1-二基雙(羰基氧基)]二吡咯啶-2,5-二酮(事先從對應的羧酸製得)所製備。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.92 min；MS(ESI+)：m/z=1080(M+H)+.
將15 mg(18 μmol)的(N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於3.8 ml的DMF及然後與27 mg(70 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、12 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與14 mg(53 μmol)的市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼混合。將反應混合物於RT攪拌1 h。接著於高真空下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到6.2 mg(33%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESI+)：m/z=1063(M+H)+.
1H-NMR(500 MHz,DMSO-d6，特徵訊號)：δ=10.8(d,1H),9.8-9.7(m,2H),9.6和9.4(2m,1H),8.9,8.88,8.78和8.75(4d,1H),8.08和7.85(2d,1H),7.6-6.9(m,9H),4.7-4.4(m,3H),3.4(t,2H),3.23,3.2,3.18,3.0，和2.99
(5s,9H),2.8(m,3H),2.1(t,2H),1.06和1.01(2d,3H),0.95-0.8(m,15H),0.8-0.75(dd,3H).
將13 mg(14.7 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於4 ml的二甲基甲醯胺及然後與9.4 mg(25 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、6 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與7 mg(31 μmol)的市售D-白胺酸第三丁酯鹽酸鹽混合。將混合物於RT攪拌5 h及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷/
水冷凍乾燥後，得到6.5 mg(49%之理論值)保護的中間物於減壓下濃縮
HPLC(方法5)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.21 min；MS(ESI+)：m/z=1076(M+H)+.
先使用三氟乙酸於二氯甲烷中由此保護的中間物分離Boc保護基，得到6.2 mg(99%之理論值)去保護的化合物。將5.2 mg(5 μmol)的此中間物置於1.5 ml的二氯甲烷中處理並與0.8 mg(7 μmol)的N-羥基琥珀醯亞胺於1.2 mg(6 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.16 mg(1 μmol)的4-二甲基胺基吡啶之存在下反應。於RT攪拌2 h後，將反應混合物濃縮並以製備式HPLC純化。得到1.3 mg的標題化合物，將其中某些水解程反應物。
此化合物係以類似中間物157中所述之合成，由N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
產率：6 mg(53%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESI+)：m/z=1114(M+H)+.
此化合物係以類似中間物157中所述之合成，由20 mg(21 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄基胺基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
產率：13 mg(52%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.92 min；MS(ESI+)：m/z=1153(M+H)+.
此化合物係以類似中間物157中所述之合成，由N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
產率：0.8 mg(16%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.78 min；MS(ESI+)：m/z=1092(M+H)+.
將18 mg(20 μmol)的N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(1S,2R)-1-(1,2-烷-2-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物64)溶於3.2 ml的二氯甲烷及然後與22 mg(190 mmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮混合，及然後與11 mg(60 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.24 mg(0.17 μmol)的DMAP混合。於RT攪拌2 h後，另加入22 mg(190 mmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮、11 mg(60 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.24 mg(0.17 μmol)的DMAP並將反應混合物於RT另攪拌1小時。接著於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到8.2 mg(41%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.9 min；MS(ESI+)：m/z=1024
(M+H)+.
首先，從265 mg(0.82 mmol)的(1S,2R)-1-(羥基胺甲醯基)-2-苯基環丙基胺甲酸第三丁酯(起始化合物7)開始，藉由與1,2-雙(溴甲基)苯，以類似文獻方法(參見H.King,J.Chem.Soc.1942,432)反應，製備Boc-保護的(1S,2R)-1-(1,4-二氫-3H-2,3-苯并-3-基羰基)-2-苯基環丙基胺甲酸第三丁酯中間物。
產率：108 mg(34%之理論值)
LC-MS(方法2)：Rt=1.3 min；MS(ESI+)：m/z=395(M+H)+.
將108 mg(0.27 mmol)的此中間物置於3.7 ml的二氯甲烷中處理，加入1.8 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌15 min。接著於減壓下濃縮及將剩餘的殘餘物從二烷冷凍乾燥。得到定量產率的112 mg的標題化
合物為無色泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=0.7 min；MS(ESI+)：m/z=295(M+H)+.
將166 mg(0.196 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物10)置於40 ml的DMF中處理及連續與80 mg(0.196 mmol)的[(1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙基](1,4-二氫-3H-2,3-苯并-3-基)甲酮三氟乙酸鹽(中間物163)、112 mg(0.294 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六
氟磷酸(HATU)和682 μl(3.9 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物隨後於RT攪拌至隔夜。然後將反應混合物於減壓下濃縮，將殘餘物置於乙酸乙酯中處理並以飽和的氯化鈉水溶液清洗溶液。將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。最後將殘餘物以製備式HPLC純化。以此法，得到19 mg(9%之理論值)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-(1,4-二氫-3H-2,3-苯并-3-基羰基)-2-苯基環丙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
HPLC(方法5)：Rt=1.68 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.51 min；MS(ESI+)：m/z=1083(M+H)+.
將19 mg(0.015 mmol)的此中間物溶於4 ml的DMF。加入817 μl的哌啶後，將反應混合物於RT攪拌5 min。接著於減壓下濃縮，並將殘餘物以乙醚處理及然後以製備式HPLC純化(溶離劑：乙腈+0.1% TFA/0.1% aq.TFA)。將對應的溶離份組合，於減壓下移除溶劑及然後將殘餘物從二烷/水冷凍乾燥。得到12 mg(92%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESI+)：m/z=861(M+H)+.
使用20 mg(0.021 mmol)的中間物164，以類似中間物97之製備，以6-側氧己基胺甲酸苄基酯，於氰基硼氫化鈉之存在下，隨後以氫解分離Z保護基(以5%活性碳上鈀作為催化劑，以甲醇作為溶劑)，製備標題化合物。
產率：4.5 mg(23%之理論值於2階段)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.9 min；MS(ESI+)：m/z=960(M+H)+.
將4.4 mg(4.5 μmol)的中間物165置於1 ml的1：1二烷/水中處理及然後與1 mg(6.8 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯和與50 μl的飽和碳酸氫鈉水溶液混合。將反應混合物於RT攪拌30 min。然後另加入50 μl的飽和碳酸氫鈉水溶液並將反應混合物於RT另攪拌15 min，及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後，得到1 mg(21%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.08 min；MS(ESI+)：m/z=1040
(M+H)+.
標題化合物係由6 g(21.55 mmol)的市售3-{2-[2-(2-羥基乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸於標準條件下，先以苄基氯和碳酸銫酯化，及隨後以三氧化硫-吡啶複合物氧化所製備。
產率：611 mg(10%之理論值於2階段)
LC-MS(方法2)：Rt=1.69 min；MS(ESI+)：m/z=311(M+H)+.
首先，以類似中間物69中所述的合成，藉由N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)和N α-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯基}-L-色胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物49)，於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以哌啶分離Fmoc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
將25 mg(0.028 mmol)的此化合物和17.5 mg(0.06 mmol)的中間物167於2 ml的甲醇混合，及與12.6 mg(0.14 mmol)的硼烷-吡啶複合物和2.5 ml的乙酸混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜。然後再次加入相同量的硼烷-吡啶複合物和乙酸並將反應混合物於RT另攪拌24 h。接著於減壓下濃縮，並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮及以1：1二烷/水冷凍乾燥後，得到26.5 mg(88%之理論值)Z-保護的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.04 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESI+)：m/z=1064(M+H)+.
將25 mg(0.024 mmol)的此中間物置於10 ml的甲醇中處理並於10%活性碳上鈀在標準氫氣壓下，於RT氫化45 min。然後將催化劑濾出並於減壓下移除溶劑。從二烷冷凍乾燥後，得到19.7 mg(85%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.83 min；MS(ESI+)：m/z=974(M+H)+.
將10 mg(10 μmol)的中間物168溶於3 ml的DMF並與3.5 mg(30 mmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮混合，及然後與2.4 mg(10 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和5 μl的N,N-二異丙基乙基胺混
合。於RT攪拌20 h後，加入8 mg(0.02 mmol)的HATU並將反應混合物再次於RT攪拌至隔夜，及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從二烷冷凍乾燥後，得到8.6 mg(64%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.81 min；MS(ESI+)：m/z=1071(M+H)+.
此化合物係類似中間物101於2階段，從26 mg(0.028 mmol)的中間物15開始所製備。
產率：16.7 mg(63%之理論值於2階段)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.81 min；MS(ESI+)：m/z=914
(M+H)+.
將6.7 mg(7.3 μmol)由中間物170所形成的化合物和3 mg(14.7 μmol)的市售4-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丁酸置於2 ml的DMF中處理並與5.6 mg(14.7 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和2 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌30 min。將反應混合物濃縮及將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份組合，及然後將殘餘物從二烷冷凍乾燥。由此得到4.5 mg(56%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.12 min；MS(ESI+)：m/z=1079
(M+H)+.
標題化合物係由市售的2-{2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙醇於標準條件下，首先導入Z保護基及然後以三氧化硫-吡啶複合物氧化所製備。
HPLC(方法12)：Rt=1.4 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.65 min；MS(ESI+)：m/z=326(M+H)+.
標題化合物係類似中間物172，從市售2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙醇於標準條件下，首先導入Z保護基及然後以三氧化硫-吡啶複合物氧化所製備。
HPLC(方法12)：Rt=1.3 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.68 min；MS(ESI+)：m/z=282
(M+H)+.
將47 mg(0.05 mmol)的中間物16以類似中間物167之製備，與2-{2-[2-(2-側氧乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基胺甲酸苄基酯，在硼烷-吡啶複合物進行還原性胺化。隨後，以氫解法以5%活性碳上鈀作為催化劑及以甲醇作為溶劑移除Z保護基，製備38 mg(66%之理論值於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.8 min；MS(ESI+)：m/z=988(M+H)+.
此製備係類似中間物166，由34 mg(0.03 mmol)的中間物174開始來進行。
產率：8.3 mg(23%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESI+)：m/z=1068(M+H)+.
此製備係類似中間物174和175，由中間物16與中間物173之還原性胺化作用開始，隨後去保護及形成馬來醯亞胺來進行。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.8 min；MS(ESI+)：m/z=981(M+H)+.
此製備係類似中間物174和175，由中間物16與中間物172之還原性胺化作用開始，隨後去保護及形成馬來醯亞胺來進行。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1025(M+H)+.
此製備係類似中間物162，由6 mg的中間物82開始來進行。
LC-MS(方法1)：Rt=0.82 min；MS(ESI+)：m/z=953(M+H)+.
將13.6 mg(0.06 mmol)的乙酸鈀(II)、469 mg(1.46 mmol)的4-碘苯磺酸鉀、300 mg(1.21 mmol)的(S)-第三丁基1-苯基丁-3-烯-2-基胺甲酸酯、16.5 mg(0.12 mmol)的苯基尿素和167.6 mg(1.21 mmol)的碳酸鉀於7.5 ml的DMF中之混合物以微波加熱至160℃歷時15 min。隨後將粗產物直接以製備式HPLC純化。得到312 mg的31%Boc-保護化合物和69%游離胺之混合物。
隨後將混合物置於30 ml的二氯甲烷中處理，與1 ml的三氟乙酸混和並於RT攪拌20 h。於減壓下濃縮後，將殘餘物與乙醚攪拌，並將形成的沉澱抽氣過濾出並以乙醚清洗。由此得到200 mg(62%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法11)：Rt=0.44 min；MS(ESI+)：m/z=304(M+H)+.
將100 mg(0.25 mmol)的4-[(1E,3S)-3-胺基-4-苯基丁-1-烯-1-基]苯磺酸三氟乙酸鹽懸浮於10 ml的乙酸和數滴的DMF及水中，與70 mg(0.07 mmol)的碳上鈀(10%)混合，及於2.2巴(bar)的氫氣壓氫化24 h。將溶液過濾並以製備式HPLC純化濾液。29 mg(76%純度，21%之理論值)的產物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.46 min；MS(ESI+)：m/z=306(M+H)+.
於90 mg(0.13 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側
氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之4 ml的DMF溶液中加入60 mg(0.16 mmol)的HATU和69 μl的(0.39 mmol)Hünig鹼。將反應混合物於RT攪拌30 h及然後與60 mg(0.15 mmol)60.3 mg(0.13 mmol)的4-[(1E,3S)-3-胺基-4-苯基丁-1-烯-1-基]苯磺酸三氟乙酸鹽混合。攪拌至隔夜後，將反應混合物以製備式HPLC純化。由此得到127 mg的標題化合物和已去保護胺之44：56混合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.21 min；MS(ESI+)：m/z=971(M+H)+；Rt=0.84 min；MS(ESI+)：m/z=871(M+H)+去保護的化合物。
將90 mg的中間物180溶於4.6 ml的二氯甲烷並加
入0.92 ml的三氟乙酸。將反應混合物於RT攪拌及然後濃縮。將得到的粗產物以製備式HPLC純化。
得到91 mg(98%之理論值)的目標化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESI+)：m/z=871(M+H)+
將16.7 μl(0.03 mmol)的15%琥珀醛水溶液先裝入943 μl的甲醇中並與17 mg(0.02 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(2S,3E)-1-苯基-4-(4-磺苯基)丁-3-烯-2-基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物181)及
1.1 μl(0.02 mmol)的乙酸混合。將反應混合物於RT攪拌5 min，及然後加入2.9 μl(0.02 mmol)的硼烷-吡啶複合物。1 h後，另加入各2當量的琥珀醛、乙酸和硼烷-吡啶複合物，並將混合物於RT攪拌20 h。然後將反應混合物以製備式HPLC純化。由此得到20 mg(83%純度，80%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=957(M+H)+
將8 mg(7.5 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(2S,3E)-1-苯基-4-(4-磺苯基)丁-3-烯-2-基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺、2.8 mg(8.2 μmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼三氟乙酸鹽、3.4 mg(9 μmol)的HATU和3.9 μl的Hünig鹼於0.77 ml的DMF中於RT攪拌20 h。隨後，將反應混合物以製備式HPLC純化。
得到3 mg(31%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.90 min；MS(ESI+)：m/z=1164(M+H)+
於8 mg(7.5 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(2S,3E)-1-苯基-4-(4-磺苯基)丁-3-烯-2-基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之2 ml的DMF的溶液中加入8.6 mg(74.8 μmol)的N-羥基琥珀醯亞胺、8.5 mg(22.4 μmol)的EDCI和0.1 mg(0.75 μmol)的DMAP。將反應混合物於RT攪拌20 h。隨後，加入1.3 μl(7.5 μmol)的Hünig鹼並將混合物於RT攪拌1 h。然後將反應混合物以製備式HPLC純化。得到2.6 mg(72%純度，21%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.89 min；MS(ESI+)：m/z=1054(M+H)+
於43 mg(0.06 mmol)的N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之1.9 ml的DMF溶液中加入29 mg(0.07 mmol)的HATU和33 μl(0.19 mmol)的Hünig鹼。將反應混合物於RT攪拌30 min及然後與29 mg(0.07 mmol)的4-[(3R)-3-胺基-4-苯基丁基]苯磺酸三氟乙酸鹽混合。於RT攪拌至隔夜後，將反應混合物以製備式HPLC純化。由此得到58 mg的標題化合物和已去保護胺之45：55混合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.09 min；MS(ESI+)：m/z=973(M+H)+；Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=873(M+H)+去保護的化合物。
將58 mg的中間物186溶於4.1 ml的二氯甲烷，加入0.41 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。於減壓下濃縮後，將粗產物以製備式HPLC純化。
得到50 mg(90%純度，85%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=873(M+H)+
將171 μl(0.26 mmol)的15%琥珀醛水溶液先裝入2.5 ml的甲醇中並與50 mg(0.05 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(2R)-1-苯基-4-(4-磺苯基)丁-2-基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽和11.6 μl(0.2 mmol)的乙酸混合。將反應混合物於RT攪拌5 min及然後加入30 μl(0.24 mmol)的硼烷-吡啶複合物。攪拌24小時後，另加入一當量的硼烷-吡啶複合物並將混合物另再攪拌2 h。然後將反應混合物以製備式HPLC純化。
得到40 mg(90%純度，66%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.91 min；MS(ESI+)：m/z=959(M+H)+
將10 mg(9.3 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(2R)-1-苯基-4-(4-磺苯基)丁-2-基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺、3.5 mg(10.3 μmol)的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼三氟乙酸鹽、4.3 mg(11.2 μmol)的HATU和4.9 μl(28 μmol)的Hünig鹼於1 ml的DMF中於RT攪拌20 h。隨後，將反應混合物以製備式HPLC純化。4.2 mg(92%純度，33%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.91 min；MS(ESI+)：m/z=1166(M+H)+
於10 mg(9.3 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(2R)-1-苯基-4-(4-磺苯基)丁-2-基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之2.5 ml的DMF溶液中加入10.7 mg(93 μmol)的N-羥基琥珀醯亞胺、10.6 mg(28 μmol)的EDCI和0.12 mg(0.9 μmol)的DMAP。將反應混合物於RT攪拌20及然後以製備式HPLC純化。
得到3.8 mg(72%純度，25%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.90 min；MS(ESI+)：m/z=1055(M+H)+
標題化合物類似中間物7之合成於2階段，由起始化合物1和(2S)-2-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)丙-1-同三氟乙酸鹽(中間物99)所製備。
產率於2階段：62 mg(67%之理論值)
HPLC(方法6)：Rt=1.65 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.7 min；MS(ESI+)：m/z=443(M+H)+.
將1015 mg(1.59 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)置於50 ml的DMF中處理，與654 mg(2.39 mmol)的2-溴-1-乙基四氟硼酸吡錠(BEP)和2.8 ml的N,N-二異丙基乙基胺混合，並於RT攪拌。然後加入1083 mg(1.75 mmol)的(2R,3R)-N-[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯胺三氟乙酸鹽(中間物191)及然後將混合物於RT以超音波浴處理30 min。然後將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物置於300 ml的乙酸乙酯中處理。將有機層連續以5%檸檬酸水溶液和5%碳酸氫鈉水溶液震盪清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。將由此得到的粗產物(1684 mg)，無進一步純化下，置於20 ml的乙腈中處理，加入2 ml的哌啶及然後將反應混合物於RT攪拌10 min。然後將混合物於減壓下濃縮並將殘餘物與乙醚混合。以蒸發再次將溶劑濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上純化(溶離劑：15：1：0.1→15：2：0.2二氯甲烷/甲醇/17%氨水溶液)。將對應的溶離份組合，於
減壓下移除溶劑並將殘餘物從乙腈/水冷凍乾燥後。由此得到895 mg(67%於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.84 min；MS(ESI+)：m/z=840(M+H)+.
1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)：δ=10.8(d,1H),8.3和8.05(2d,1H),8.0(d,1H),7.5(m,1H),7.3(m,1H),7.15和7.08(2s,1H)7.05-6.9(m,2H),5.12和4.95(2m,1H),4.65(m,1H),4.55(m,1H),4.1-3.8(m,4H),3.75(d,1H),3.23,3.18,3.17,3.12,2.95和2.88(6s,9H),3.1-3.0和2.85(2m,2H),2.65(d,1H),2.4-2.2(m,3H),2.15(m,3H),1.95(br.m,2H),1.85-0.8(br.m,11H),1.08和1.04(2d,3H),0.9-0.75(m,15H),0.75-0.65(dd,3H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下].
將50 mg(0.052 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物192)和204 μl 15%的4-側氧丁酸水溶液於2 ml的甲醇中混合，並與23.4 mg(0.252 mmol)的硼烷-吡啶複合物和6 μl的乙酸混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜。接著於減壓下濃縮，並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮後，得到38 mg(78%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法9)：Rt=4.7 min；MS(ESI+)：m/z=926(M+H)+.
此化合物係類似中間物157中所述之合成，從10 mg(11 μmol)的N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺和市售6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼所製備。
產率：4.4 mg(35%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.90 min；MS(ESI+)：m/z=1133(M+H)+.
此化合物係類似中間物166，從9 mg(0.010 mmol)的中間物170開始所製備。
產率：1.1 mg(10%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.99 min；MS(ESI+)：m/z=994(M+H)+.
將41 mg(0.37 mmol)的2,5-二側氧吡咯啶-1-基N-(第三丁氧基羰基)-L-苯丙胺酸酯置於10 ml的DMF中處理並與149 mg(0.41 mmol)的2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯(起始化合物6)和72 μl(0.41 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌1 h。於減壓下移除溶劑並將殘餘物置於乙酸乙酯中處理，以
5%檸檬酸水溶液及然後以5%碳酸氫鈉水溶液震盪萃取。將有機層濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上以10：1甲苯/乙醇作為溶離劑純化。將對應的溶離份組和並於減壓下移除溶劑。將殘餘物於高真空下乾燥後，得到69 mg(47%之理論值)Boc-保護的中間物(2S)-1-(2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯-3-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基胺甲酸第三丁酯為非對映異構物混合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.1 min；MS(ESI+)：m/z=359(M+H)+.
將64 mg(0.18 mmol)的此中間物置於10 ml的二氯甲烷中處理，加入1 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌30 min。接著於減壓下濃縮並將剩餘的殘餘物從水/二烷冷凍乾燥。由此法得到66 mg(quant.)的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=1.45 min；LC-MS(方法3)：Rt=1.12 min；MS(ESI+)：m/z=259(M+H)+.
首先，藉由於乙酸乙酯中處理及以5%硫酸氫鉀水溶液震盪萃取，將(2R,3R)-3-[(2S)-1-(第三丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]-3-甲氧基-2-甲基丙酸(起始化合物1)從其83 mg(0.18 mmol)的二環己基胺鹽中釋放出。將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物置於10 ml的DMF中處理，並連續與66 mg(0.18 mmol)的(2S)-2-胺基-1-(2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯-3-基)-3-苯基丙-1-酮三氟乙酸鹽(中間物196)、101 mg(0.266 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和93 μl(0.53 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌30 min。然後將反應混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到52 mg(56%之理論值)Boc-保護的中間物(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯-3-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯。
HPLC(方法6)：Rt=2.13 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.13 min；MS(ESI+)：m/z=528(M+H)+.
將52 mg(0.1 mmol)的此中間物置於10 ml的二氯甲烷中處理，加入1 ml的三氟乙酸並將混合物於RT攪拌20 min。接著於減壓下濃縮並將剩餘的殘餘物與20 ml的乙醚攪拌。10 min後，將混合物過濾並將濾液於高真空下乾燥。於此法得到39 mg(72%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法6)：Rt=1.62 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.68 min；MS(ESI+)：m/z=428(M+H)+.
將44.5 mg(0.071 mmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)置於
10 ml的DMF中處理並連續與38.6 mg(0.071 mmol)的(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-N-[(2S)-1-(2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯-3-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯胺三氟乙酸鹽(中間物197)、32.5 mg(0.086 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和41 μl(0.235 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌1 h。然後將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物置於乙酸乙酯中處理。將有機層連續以5%檸檬酸水溶液和5%碳酸氫鈉水溶液清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。由此得到73 mg(98%之理論值)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯-3-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
HPLC(方法6)：Rt=2.78 min；LC-MS(方法3)：Rt=2.96 min；MS(ESI+)：m/z=1047(M+H)+.
將73 mg(0.071 mmol)的此中間物溶於5 ml的DMF。加入0.5 ml的哌啶後，將反應混合物於RT攪拌10 min，接著於減壓下濃縮，並將殘餘物重複以乙醚處理。將乙醚傾析出後，將殘餘物以製備式HPLC純化(溶離劑：乙腈/0.1% aq.TFA)。得到16 mg(26%之理論值)
的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法6)：Rt=1.94 min；LC-MS(方法3)：Rt=1.71 min；MS(ESI+)：m/z=825(M+H)+
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ=8.9-8.6(m,3H),8.4,8.3,8.1和8.0(4d,1H),7.3-7.1(m,5H),6.7-6.5(m,2H),5.2-4.8(m,3H),4.75-4.55(m,3H),4.05-3.95(m,1H),3.7-3.4(m,4H),3.22,3.17,3.15,3.05,3.02和2.95(6s,9H),3.0和2.7(2 br.m,2H),2.46(m,3H),2.4-1.2(br.m,13H),1.1-0.85(m,18H),0.75(m,3H)[更多的訊號隱藏於H2O波峰下].
標題化合物係類似中間物193和194，從23 mg(24 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S)-1-(2-氧-3-氮雜雙環[2.2.2]辛-5-烯-3-基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物198)開始所製備。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法2)：Rt=2.1 min；MS(ESI+)：m/z=1118(M+H)+.
此製備係類似中間物174和175，以中間物192與中間物172之烷化作用開始，隨後去保護及形成馬來醯
亞胺來進行。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1025(M+H)+.
將22 mg(0.023 mmol)的N-(6-胺基己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物101)溶於9.5 ml的THF並於0℃與4.2 μl的三乙胺混合。逐滴加入溴乙醯氯之THF溶液並將反應混合物於0℃攪拌30 min。將反應混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到6.9 mg(26%之理論值)的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.9 min；MS(ESI+)：m/z=1059和1061(M+H)+.
此製備首先係類似中間物168，由中間物192與中間物167之還原烷化作用開始，及隨後氫解性裂解N-(2-{2-[2-(2-羧基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之苄基酯來進行。
將13 mg(10 μmol)的此中間物溶於5 ml的DMF並
與2.1 mg(20 mmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮、6.5 μl的N,N-二異丙基乙基胺和7.1 mg(0.02 mmol)的HATU混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜及然後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。以乙腈/水冷凍乾燥後，得到9.2 mg(62%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法2)：Rt=2.1 min；MS(ESI+)：m/z=1141(M+H)+.
此化合物係以標準的胜肽化學法，藉由6-[(第三丁氧基羰基)胺基]己酸與苄基肼羧酸酯在EDCI和HOBT之存在下偶合，及隨後氫解性裂解苄氧基羰基保護基所製備。
LC-MS(方法11)：Rt=0.59 min；MS(ESI+)：m/z=246(M+H)+.
將146 mg(50 μmol)的(N-(3-羧基丙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-胺基-3-(1H-吲哚-3-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺溶於5 ml的DMF及然後與30.6 mg(80 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸、19 μl的N,N-二異丙基乙基胺和與22.4 mg(60 μmol)的6-肼基-6-側氧己基胺甲酸第三丁酯混合。將反應混合物於RT攪拌1.5 h。接著於高真空下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到43 mg(68%之理論值)保護的中間物，然後將其置於10 ml的二氯甲烷中處理並以1 ml的三氟乙酸去保護。將反應混合物濃縮並將殘餘物與二氯甲烷攪拌，再次於減壓下移除溶劑。由此得到45 mg(68%之理論值於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.66 min；MS(ESI+)：m/z=983
(M+H)+.
此化合物係類似中間物114，從中間物50和204開始所製備。
產率：4 mg(78%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.73 min；MS(ESI+)：m/z=1149(M+H)+.
將8 mg(10 μmol)的中間物101溶於2 ml的DMF並與8.6 mg(20 μmol)的1,1'-{二對胺苯磺醯基雙[(1-側氧丙-3,1-二基)氧基]}二吡咯啶-2,5-二酮和3.7 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌2 h及然後於減壓下蒸發溶劑並將殘餘物以製備式HPLC純化。得到7.2 mg(68%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.94 min；MS(ESI+)：m/z=615[½(M+2H+]
將210 mg(0.76 mmol)市售的(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-2-苯基環丙羧酸以三氟乙酸去保護，得到
定量產率之標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.23 min；MS(ESI+)：m/z=178(M+H)+.
標題化合物係由1 g(2.95 mmol)的市售9H-茀-9-基甲基6-羥基己基胺甲酸酯於標準條件下，以三氧化硫-吡啶複合物氧化所製備。得到840 mg(85%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.1 min；MS(ESI+)：m/z=338(M+H)+.
首先，以類似中間物75中所述之合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和(1S,2R)-1-胺基-2-苯基環丙烷羧酸三氟乙酸鹽(中間物207)於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備胺化合物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-羧基-2-苯基環丙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
然後於22 mg(0.026 mmol)的此化合物之10 ml的甲醇溶液中加入17 mg(0.05 mmol)的9H-茀-9-基甲基6-側氧己基胺甲酸酯(中間物208)和2.3 mg的乙酸以及11.4 mg(0.12 mmol)的硼烷-吡啶複合物。將反應混合物於RT攪拌至隔夜。然後再次加入相同量之硼烷-吡啶複合物和乙酸以及8 mg的茀-9-基甲基6-側氧己基胺甲酸
酯，並將反應混合物於RT另再攪拌24 h小時。接著於減壓下濃縮，並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮後，立即將此產物用於下個階段。
將33 mg仍帶有雜質之中間物置於5 ml的DMF中處理，並加入1 ml的哌啶。於RT攪拌15 min後，將反應混合物濃縮並將生成的殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到11 mg(55%之理論值於2階段)的胺基羧酸中間物。
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.7 min；MS(ESI+)：m/z=843(M+H)+.
將6 mg(7.12 μmol)的此中間物置於1 ml的二烷中處理及然後與6.6 mg(42.7 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯和與5 μl的飽和碳酸氫鈉水溶液混合。將反應混合物於RT攪拌1 h。然後加入另3份各50 μl的飽和碳酸氫鈉水溶液並將反應混合物於RT另再攪拌30 min。然後將反應混合物以三氟乙酸酸化至pH 2，及隨後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。以乙腈/水冷凍乾燥後，得到4 mg(60%之理論值)的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.88 min；MS(ESI+)：m/z=923(M+H)+.
首先，以文獻方法製備6-側氧己酸(J.Org.Chem.58,1993,2196-2200)。
將80 mg(0.08 mmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物192)和65.4 mg(0.5 mmol)的6-側氧己酸於9 ml的甲醇中混合，並與10 μl的乙酸和37.4 mg(0.4 mmol)的硼烷-吡啶複合物混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜。接著於減壓下濃縮並將殘餘物置於1：1乙腈/水中處理，及以三氟
乙酸調整至pH 2。將反應混合物再次濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮後，得到70 mg(86%之理論值)的N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=955(M+H)+.
1H NMR(500 MHz,DMSO-d6，特徵訊號)：δ=12.0(br.M,1H),10.8(s,1H),9.4(m,1H),8.9和8.8(2d,1H),8.3和8.02(2d,1H),7.5(m,1H),7.3(m,1H),7.15和7.1(2s,1H)7.05-6.9(m,2H),5.12和4.95(2m,1H),4.7-4.5(m,2H),4.1-3.8(m,4H),3.75(d,1H),3.25,3.2,3.18,3.13,2.98和2.88(6s,9H),2.8(m,3H),1.08和1.04(2d,3H),0.95-0.8(m,15H),0.8-0.65(dd,3H).
將22 mg(23 μmol)的此中間物溶於1.8 ml的二氯甲烷並與13.2 mg(70 μmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、26.5 mg(230 μmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮和0.28 mg(2 μmol)的二甲基胺基吡啶混合，並和將反應混合物於RT攪拌2 h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC
純化。從乙腈/水冷凍乾燥後，得到21.3 mg(88%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.94 min；MS(ESI+)：m/z=1052(M+H)+.
類似中間物210，將15 mg(20 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S,3S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺三氟乙酸鹽(中間物15)以6-側氧己酸進行還原性烷化。
產率：9.2 mg(61%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=929(M+H)+.
將9 mg(10 μmol)的此中間物溶於3 ml的DMF並與5.6 mg(48 μmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮、5 μl的N,N-二異丙基乙基胺和5.5 mg(0.015 mmol)的HATU混合，及將反應混合物於超音波浴中處理6 h。在此期間，每小時加入5.5 mg的HATU。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮，及將殘餘物置於乙腈/水中處理並以三氟乙酸調整至pH。再次於減壓下濃縮後，將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從乙腈/水冷凍乾燥後，得到5.8 mg(57%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.95 min；MS(ESI+)：m/z=1027(M+H)+.
此製備首先係類似中間物168，由中間物15與中間物167之還原烷化作用開始，及隨後氫解性裂解N-(2-{2-[2-(2-羧基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-{[(2S,3S)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧-3-苯基丁-2-基]胺基}-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺之苄基酯來進行。
將8.4 mg(8 μmol)的此中間物溶於3 ml的DMF並與9.5 mg(80 μmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮、10 μl的N,N-二異丙基乙基胺和9.4 mg(25 μmol)的HATU混合，並將反應混合物於RT攪拌至隔夜及然後於減壓下濃縮。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物置於乙腈/水中處理並以三氟乙酸調整至pH 2。在次於減壓下濃縮後，將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從乙腈/水冷凍乾燥後，得到4 mg(32%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.96 min；MS(ESI+)：m/z=1117
(M+H)+.
此化合物係類似中間物104，從N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(其合成係描述於中間物210中)開始所製備。得到9.3 mg的標題化合物(37%之理論值於3階段)。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.9 min；MS(ESI+)：m/z=1177(M+H)+.
此化合物係類似中間物210，藉由將中間物92轉變為活性酯所製備。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.82 min；MS(ESI+)：m/z=901(M+H)+.
首先，使用中間物40，類似中間物183，以硼烷-吡啶複合物來製備N-(5-羧基戊基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-羥基-1-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。從該化合物，類似中間物210，產生活性酯。得到34 mg(36%之理論值於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESI+)：m/z=930(M+H)+.
首先，類似中間物183之製備，將中間物192與4-甲醯基苯甲酸與硼烷-吡啶複合物反應，得到N-(4-羧基苄基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。然後使用此化合物，類似中間物210，產生11 mg(68%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.13 min；MS(ESI+)：m/z=1072(M+H)+.
將53 mg(84 μmol)的N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(2R,3S,4S)-1-羧基-2-甲氧基-4-甲基己-3-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物4)和45 mg(84 μmol)的N-{(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-3-[(2S)-吡咯啶-2-基]丙醯基}-L-苯丙胺酸苄基酯三氟乙酸鹽(中間物12)置於2 ml的DMF中處理，並加入19 μl的N,N-二異丙基乙基胺、14 mg(92 μmol)的HOBt和17.6 mg(92 μmol)的EDC，及然後將混合物於RT攪拌至隔夜。隨後，將反應混合物濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到59 mg(68%之理論值)Fmoc-保護的中間物N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺。
LC-MS(方法1)：Rt=1.55 min；m/z=1044(M+H)+.
將57 mg(0.055 mmol)的此中間物以1.2 ml哌啶於5 ml的DMF中處理，以分離Fmoc保護基。濃縮及以製備式HPLC純化後，得到39 mg(76%之理論值)的游
離胺中間物N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-1-(苄氧基)-1-側氧-3-苯基丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺為三氟乙酸鹽。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；m/z=822(M+H)+.
將60 mg(0.06 mmol)的此中間物，類似中間物210，與6-側氧己酸於硼烷-吡啶複合物之存在下反應。得到45 mg(75%之理論值)的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESI+)：m/z=9936(M+H)+.
此化合物係藉由將42 mg(0.05 mmol)的中間物217
轉變為活性酯所製備。
產率：26 mg(54%)
HPLC(方法5)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；MS(ESI+)：m/z=1034(M+H)+.
將20 mg(0.02 mol)來自中間物218之化合物置於2.4 ml的甲醇中處理並於5%活性碳上鈀於標準氫氣壓下，在RT氫化30 min。然後將催化劑濾出並於減壓下移除溶劑。將殘餘物從1：1乙腈/水冷凍乾燥。由此得到14 mg(92%之理論值)的標題化合物為無色泡沫。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=944
(M+H)+.
將於10 ml的二氯甲烷中之0.5 g(1.01 mmol)的中間物與1 ml的三氟乙酸混合。以超音波浴處理30 min後，將混合物濃縮並先與DCM再蒸發，及然後與乙醚再蒸發，並於高真空下乾燥。將油狀殘餘物用於下個階段，無進一步純化。
將500 mg的此中間物溶於20 ml的DMF並與466 mg(3.8 mmol)的中間物191、382 mg(1.01 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和440 μl(2.5 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌1 h於RT攪拌至隔夜濃縮。將殘餘物置於二氯甲烷中處理並先以5%檸檬酸水溶液震盪萃取及然後以飽和的碳酸氫鈉水溶液震盪萃取。將有機層濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上以95：5二氯甲烷/甲醇作為溶離劑純化。將對應的溶離份組合並
於減壓下移除溶劑。將殘餘物於高真空下乾燥後，得到562 mg(65%之理論值於二階段)Z-保護的中間物。
將562 mg(0.57 mmol)的此中間物置於50 ml的甲醇中處理並以155 mg的10%活性碳上鈀於標準的氫氣壓下於RT氫化20 min。然後將催化劑濾出並於減壓下移除溶劑。將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份組合，於減壓下蒸發溶劑並將殘餘物從二烷冷凍乾燥。由此得到361 mg(87%之理論值)的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法5)：雙波峰於Rt=1.75和1.86 min；LC-MS(方法1)：雙波峰於Rt=0.84 min和0.91 min具相同質量；MS(ESI+)：m/z=944(M+H)+.
將100 mg(0.76 mmol)的市售N-甲基-L-纈胺酸和285 mg(1.14 mmol)的市售(2S)-1-側氧-3-苯基丙-2-基胺甲酸第三丁酯於22 ml的甲醇中混合，並與340 mg(3.66 mmol)的硼烷-吡啶複合物和70 μl的乙酸混合。將反應
混合物於RT攪拌至隔夜。接著於減壓下濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上以二氯甲烷/甲醇/17%氨水溶液作為溶離劑純化。將對應的溶離份濃縮並從1：1二烷/水冷凍乾燥後，得到259 mg(93%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.76 min；MS(ESI+)：m/z=365(M+H)+.
將40 mg(0.11 mmol)的N-{(2S)-2-[(第三丁氧基羰基)胺基]-3-苯基丙基}-N-甲基-L-纈胺酸(中間物221)溶於5 ml的DMF並與80 mg(0.11 mmol)的N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧
基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物220)、50 mg(0.13 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和57 μl(2.5 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌1 h及然後濃縮。將殘餘物置於乙酸乙酯和中處理，並先以5%檸檬酸水溶液及然後以水清洗。將有機層濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份組合及於減壓下移除溶劑。從二烷冷凍乾燥後，得到60 mg(50%之理論值)保護的中間物。
HPLC(方法12)：Rt=2.2 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.17 min；MS(ESI+)：m/z=1073(M+H)+.
將60 mg(0.05 mmol)的此中間物置於10 ml的二氯甲烷中處理，加入2 ml的三氟乙酸並將反應混合物於RT攪拌1.5 h。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份組合，於減壓下移除溶劑並將殘餘物從二烷冷凍乾燥。於此得到25 mg(42%之理論值)的標題化合物為泡沫。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.95 min；MS(ESI+)：m/z=974(M+H)+.
此製備係類似中間物134，從5 mg(4.6 μmol)的中間物222開始來進行。得到3.4 mg(65%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.99 min；MS(ESI+)：m/z=1140(M+H)+.
此製備係類似中間物223之合成來進行。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.92 min；MS(ESI+)：m/z=1064(M+H)+.
將100 mg(0.76 mmol)的市售N-甲基-L-纈胺酸和182 mg(1.14 mmol)的市售2-側氧乙基胺甲酸第三丁酯於20 ml的甲醇中混合，並與340 mg(3.66 mmol)的硼烷-吡啶複合物和65 μl的乙酸混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜。接著於減壓下濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上以二氯甲烷/甲醇/17%氨水溶液作為溶離
劑純化。將對應的溶離份濃縮及以1：1二烷/水冷凍乾燥後，得到190 mg、39%純度(35%之理論值)的中間物，將其轉化，無進一步純化。
將50 mg(0.07 mmol)的此中間物溶於10 ml的DMF並與52 mg(0.07 mmol)的N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物220)、32 mg(0.09 mmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和37 μl(0.2 mmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將混合物於RT攪拌至隔夜及然後濃縮。將殘餘物置於乙酸乙酯中處理並以5%檸檬酸水溶液及然後以水震盪萃取。將有機層濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份組合及於減壓下移除溶劑。從二烷冷凍乾燥後，得到53 mg(76%之理論值)保護的中間物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.02 min；MS(ESI+)：m/z=984(M+H)+.
將53 mg(0.05 mmol)的此中間物置於10 ml的二氯甲烷中處理，加入2 ml的三氟乙酸並將反應混合物於RT攪拌30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份
組合，於減壓下移除溶劑並將殘餘物從二烷/水冷凍乾燥。由此得到21 mg(40%之理論值)的標題化合物，純度65%。
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=884(M+H)+.
此製備係類似中間物134之合成，由中間物225開始來進行。11.6 mg(59%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.90 min；MS(ESI+)：m/z=1050(M+H)+.
此化合物係類似中間物218，藉由轉化為活性酯所製備。
產率：18 mg(51%之理論值)
HPLC(方法5)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.98 min；MS(ESI+)：m/z=1073(M+H)+.
標題化合物係藉由將中間物154合成中所得到的Boc-保護中間物，與市售的6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己烷肼偶合所製備。
HPLC(方法12)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.97 min；MS(ESI+)：m/z=1308(M+H)+.
標題化合物係從7.5 mg(2.5 μmol)的中間物154，藉由以2.3 μl的乙酸酐於1 ml的DMF中，在0.4 μl的N,N-二異丙基乙基胺之存在下乙醯化所製備
產率：1.4 mg(40%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1250(M+H)+.
此化合物係類似中間物228，從中間物193開始所製備。得到16 mg(30%之理論值於3階段)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=2.0 min；
LC-MS(方法1)：Rt=1.02 min；MS(ESI+)：m/z=1335(M+H)+.
此化合物係由8 mg(6 μmol)的中間物230，先以三氟乙酸去保護，及隨後以乙酸酐於DMF中，在N,N-二異丙基乙基胺之存在下乙醯化所製備。得到2 mg(37%之理論值於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.88 min；MS(ESI+)：m/z=1277(M+H)+.
將200 mg(0.57 mmol)的市售4-甲基苯磺酸-苄基β-丙胺酸酯和229 mg(1.14 mmol)的氯碳酸4-硝基苯基酯置於15 ml的四氫呋喃中處理，然後將反應混合物加熱回流30 min。隨後，將反應混合物於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮並將殘餘物於高真空下乾燥後，得到86 mg(44%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.07 min；MS(ESI+)：m/z=345(M+H)+.
將13 mg(10 μmol)的中間物225和6.7 mg(20 μmol)的中間物232溶於3 ml的DMF及然後加入7 μl的N,N-二異丙基乙基胺。將混合物於RT攪拌至隔夜及然後於高真空下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。將對應的溶離份濃縮及將殘餘物於高真空下乾燥後，得到5.4 mg(38%之理論值)保護的中間物。
HPLC(方法5)：Rt=2.1 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.6in；MS(ESI+)：m/z=1089(M+H)+.
將5.4 mg(5 μmol)的此中間物溶於5 ml的甲醇及加入2 mg的10%活性碳上鈀後，於標準的氫氣壓下於RT氫化20 min。然後將催化劑濾出並於減壓下移除溶劑。將殘餘物於高真空下乾燥後，得到5 mg(quant.)的酸中間物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.84 min；MS(ESI+)：m/z=999(M+H)+.
將5 mg(10 μmol)的此中間物溶於1 ml的DMF並與5.8 mg(50 mmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮及然後與2.6 μl的N,N-二異丙基乙基胺和3.8 mg(10 μmol)的HATU混合。於RT攪拌20 h後，將反應混合物於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。從1：1二烷/水冷凍乾燥後，得到1.1 mg(20%之理論值)的
標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=1096(M+H)+.
將25 mg(30 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物55)和45 mg(180 μmol)的6-側氧己基胺甲酸苄基酯置於3 ml的甲醇中處理並以乙酸酸化。隨後於室溫加入15 μl(144 μmol；9.4M)的硼烷-吡啶複合物。隨後將混合物於RT攪拌24 h，並於8 h後再次加入乙酸和15 μl(144 μmol；9.4M)
的硼烷-吡啶複合物。隨後將反應混合物以TFA調整至pH 2並以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合並濃縮，及將殘餘物於高真空下乾燥。由此得到15 mg(46%之理論值)的標題化合物為泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=1.03 min；m/z=1066(M+H)+.
將15 mg(14 μmol)的N-(6-{[(苄氧基)羰基]胺基}己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物234)置於3 ml的甲醇中處理並加入1.8 mg的碳上鈀(5%)。將反應混合物隨後於標準的氫氣壓下於RT氫化2 h。然後將催化劑濾出並於減壓下移除
溶劑。將殘餘物以1：1乙腈/水冷凍乾燥。得到11 mg(86%之理論值)的標題化合物為泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=0.81 min；m/z=932(M+H)+.
將11 mg(12 μmol)的N-(6-胺基己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物235)置於500 μl的1：1二烷/水中處理並與253 μl的1M碳酸氫鈉水溶液及然後與2.8 mg(18 μmol)的2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-羧酸甲酯混合。將反應混合物於RT攪拌30 min及然後以三氟乙酸酸化。將反應混合物以製備式HPLC純化。冷凍乾燥後得到0.8 mg(7%之理論值)的標
題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；m/z=1012(M+H)+.
將25 mg(30 μmol)的N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧-3-{[(1S)-2-苯基-1-(5-苯基-1,3,4-二唑-2-基)乙基]胺基}丙基]吡咯啶-1-基}-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物55)和23 mg(180 μmol)的6-側氧己酸置於3 ml的甲醇中處理並以乙酸酸化。隨後於室溫加入15 μl(144 μmol；9.4M)的硼烷-吡啶複合物。將反應混合物隨後於RT攪拌20 h，及於8 h後再次加入乙酸和15 μl(144 μmol；9.4M)的硼烷-吡啶複合物。將反應混合物隨後以三氟乙酸調整至pH 2並以製備式HPLC純化。將產物溶離份組合及濃縮，並將
殘餘物冷凍乾燥。由此得到21 mg(74%之理論值)的標題化合物為泡沫。
LC-MS(方法1)：Rt=0.91 min；m/z=947(M+H)+.
將21 mg(22 μmol)的中間物237溶於1 ml的DMF並與38 mg(333 μmol)的1-羥基吡咯啶-2,5-二酮及然後與2.4 mg(10 μmol)的O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸(HATU)和19 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。於RT攪拌2 h後，將反應混合物以製備式HPLC純化。從二烷冷凍乾燥後，得到22 mg(96%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.95 min；m/z=1044(M+H)+.
首先，藉由於乙酸乙酯中處理及以5%硫酸水溶液震盪萃取，將N-[(苄氧基)羰基]-N-甲基-L-蘇胺酸從其237 mg(0.887 mmol)的二環己基胺鹽中釋放出。將有機層以硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。將14.7 mg(0.055 mmol)的N-[(苄氧基)羰基]-N-甲基-L-蘇胺酸置於3 ml的DMF中處理並連續與40 mg(0.055 mmol)的中間物220、12.7 mg(0.066 mmol)的1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和10 mg(0.066 mmol)的1-羥基-1H-苯并三唑水合物混合。將混合物隨後於RT攪拌2 h。於減壓下移除溶劑並將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到29 mg(54%之理論值)的Z-保護中間物。
LC-MS(方法1)：Rt=1.15 min；MS(ESI+)：m/z=976(M+H)+.
將29 mg(0.003 mmol)的此中間物溶於5 ml的甲醇並於5 mg的5%鈀/活性碳上於RT和標準的氫氣壓下氫化1 h。隨後將催化劑濾出並蒸發溶劑。將剩餘的殘餘物以製備式HPLC純化。得到17 mg(54%之理論值)的標題化合物。
LC-MS(方法1)：Rt=0.77 min；MS(ESI+)：m/z=842(M+H)+.
此化合物係類似中間物210，從15.6 mg(0.016 mmol)的中間物239所製備。得到10.8 mg(67%之理論值於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；
LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESI+)：m/z=1053(M+H)+.
首先，類似中間物5，製備三氟乙酸-(2S)-2-胺基-3-(4-羥基苯基)-1-(1,2-烷-2-基)丙-1-酮(1：1)。然後使用此試劑，以類似中間物75中所述之合成，藉由與 N -(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)，在O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，製備標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESI+)：m/z=817
(M+H)+.
將50 mg(0.05 mmol)的中間物241，類似中間物210，與6-側氧己酸於硼烷-吡啶複合物之存在下反應。隨後，將22.5 mg(0.02 mmol)所生成的酸轉變為活化酯。得到13.5 mg(36%之理論值於2階段)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1028(M+H)+.
此製備係類似中間物78，藉由中間物241與6-側氧己基胺甲酸苄基酯和硼烷-吡啶複合物之還原性烷化作用，及隨後以甲醇作為溶劑之氫化作用來進行。
產率：17.5 mg(34%之理論值於2階段)
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.63 min；MS(ESI+)：m/z=916(M+H)+.
此製備係類似中間物166，從中間物243開始來進行。
產率：1.3 mg(12%之理論值)
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.89 min；MS(ESI+)：m/z=996(M+H)+.
首先，將中間物193，如中間物154所述，與N-(第三丁氧基羰基)-L-蘇胺酸苄基酯反應，及然後以氫解作用移除苄基酯。然後將由此得到的30 mg(0.027 mmol)N-[4-({(1S,2R)-1-[(第三丁氧基羰基)胺基]-1-羧基丙-2-基}氧基)-4-側氧丁基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺與4-甲基苯磺酸-苄基β-丙胺酸酯於HATU之存在下偶合，並以氫解作用移除苄基酯(產率：24 mg(71%之理論值於2階段))。最後，將10 mg(0.008 mmol)所生成的酸轉變為活化酯。以HPLC純化後，得到2.7 mg(23%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=1.01 min；MS(ESI+)：m/z=1295(M+H)+
將1.6 g(3.982 mmol)的2,5-二側氧吡咯啶-1-基N-(第三丁氧基羰基)-L-色胺酸酯溶於15 ml的DMF並與500 mg(3.982 mmol)的1,2-唑啶-4-醇和100 μl的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜。然後另再加入100 μl的N,N-二異丙基乙基胺，並將混合物先以超音波浴處理5 h，然後於RT攪拌至隔夜，及隨後於減壓下濃縮。將剩餘的殘餘物置於乙酸乙酯中處理並先以5%檸檬酸水溶液萃取二次，然後以飽和的碳酸氫鈉水溶液，最後以水萃取。將有機層濃縮並將殘餘物以快速層析於矽膠上以95：5二氯甲烷/甲醇作為溶離劑分離成非對映異構物。將二種非對映異構物之對應的溶離份組合並於減壓下移除溶劑。將殘餘物於高真空下乾燥後，得到272 mg(18%之理論值)的非對映異構物1(Rf=0.18(95：5二氯甲烷/甲醇)和236 mg(16%之理論值)的非對映異構物2(Rf=0.13(95：5二氯甲烷/甲醇)，以及333 mg(22%之理論值)Boc-保護的中間物之混合溶離份。
於標準條件下，使用5 ml的三氟乙酸於20 ml的二氯甲烷中，從272 mg(725 μmol)此中間物的非對映異構物1分離Boc保護基，從二烷/水冷凍乾燥後，得到290 mg(quant.)的標題化合物，75%純度並用於下個階段，無進一步純化。
HPLC(方法12)：Rt=1.1 min；LC-MS(方法13)：Rt=1.80 min；MS(ESI+)：m/z=276(M+H)+
於標準條件下使用5 ml的三氟乙酸於20 ml的二氯甲烷中從236 mg(630 μmol)之246a中所述的中間物之非對映異構物2，分離Boc保護基，及濃縮，與乙醚攪拌和將殘餘物於高真空下乾燥後，得到214 mg(76%)的標題化合物。
LC-MS(方法13)：Rt=1.84 min；MS(ESI+)：m/z=276
(M+H)+
如中間物74所述先進行中間物26和246a之偶合，隨後分離Boc保護基，以合成此化合物。隨後，以6-側氧己酸於硼烷-吡啶複合物之存在下烷化，及隨後如中間物210所述，將酸轉變為活性酯。以製備式HPLC純化標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1053(M+H)+
如中間物74所述先進行中間物26和246b之偶合，隨後分離Boc保護基，以合成此化合物。隨後，以6-側氧己酸於硼烷-吡啶複合物之存在下烷化，及隨後如中間物210所述，將酸轉變為活性酯。以製備式HPLC純化標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1053(M+H)+
首先，類似中間物86中所述之合成，藉由N-(第三丁氧基羰基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-2-羧基-1-甲氧基丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺(中間物26)和L-酪胺酸第三丁酯，於O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸之存在下偶合，及隨後以三氟乙酸分離Boc保護基，得到第三丁酯(以三氟乙酸於二氯甲烷中攪拌40 min)，製備胺化合物N-[(2R,3R)-3-甲氧基-3-{(2S)-1-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-5-甲基-4-(甲基{(2S)-3-甲基-2-[(N-甲基-L-纈胺醯基)胺基]丁基}胺基)庚醯基]吡咯啶-2-基}-2-甲基丙醯基]-L-酪胺酸第三丁酯為三氟乙酸鹽。然後使用38 mg(0.04 mmol)的此化合物，類似中間物210之製備，藉由與6-側氧己酸於硼烷-吡啶複合物之存在下反應，得到31 mg(99%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.88 min；MS(ESI+)：m/z=918
(M+H)+.
將上述的中間物與，例如抗-間皮素抗體MF-Ta連接，其中該連接係依照下列所說明之方法，經由抗體蛋白之半胱胺酸或離胺酸側鏈，替代地來進行。抗-間皮素抗體MF-Ta係以類似WO 2009/068204-A1中所述之方法來製備。抗體MF-Ta係表現在真核細胞CHO細胞(穩定細胞株)並經由A蛋白和凝膠過濾純化，之後於D-PBS緩衝液中接合。
將3當量三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)溶於PBS緩衝液之溶液，加到濃度範圍介於1 mg/ml和15 mg/ml之對應的抗體於PBS緩衝液之溶液中，並將混合物於RT攪拌1小時。隨後，依照所欲的載量，加入介於2至10當量供偶合用的馬來醯亞胺前驅物化合物或鹵化物前驅物化合物(中間物102、103、105-109、111-114、117-126、128、129、132-146、148-155、157、159-161、166、171、175-177、184、189、194-195、199-201、205、209、223-224、226、228-231、236和244)之DMSO溶液。本處DMSO的量不應超過總體積的10%。將此批件於RT攪拌60-120分鐘，及然後施予經PBS平衡之PD 10管柱(Sephadex® G-25,GE Healthcare)，並以PBS緩衝液溶離。視需要，另外以超離心進行濃縮程序。若需要，就更有效移除低分子量組成物，則以PBS緩衝
液再稀釋後，重複以超過濾濃縮。
一般而言，除非另有指出，否則係使用5 mg的對應抗體之PBS緩衝液進行還原和隨後的偶合。經由PD10管柱純化後，由此得到，各例對應ADC溶於3.5 ml PBS緩衝液之溶液。然後測定這些溶液之所指的特定蛋白濃度。另外，依照B-4所述之方法測定抗體的載量(藥物/mAb比率)。
此方法係用於製備實例1、2、5-19、21-28、30、31、33-37、39-46、48、51-57、59、60、71、73-76、78-80、82-84、86-87、96、98-103、108和112中所代表的免疫接合物。
於所示的結構式中，AK1之定義係如下AK1=MF-Ta(部分降低)-S§1其中§1 係指與琥珀醯亞胺基連接，MF-Ta(部分還原)為部分還原的MF-Ta抗體(重鏈SEQ ID NO：408和輕鏈SEQ ID NO：409)及S係代表部分還原抗體之半胱胺酸殘基的硫原子。
依照所欲的載量，將介於2和5當量的偶合前驅化合物(中間物104、110、115、116、127、130、131、147、156、158、162、169、178、185、190、202、206、210-216、218、219、227、233、238、240、242、245、247a和
247b)之DMSO溶液，加到濃度範圍介於1 mg/ml和15 mg/ml之對應的抗體於PBS緩衝液之溶液中。於RT攪拌30分鐘後，再次加入相同量的前驅化合物之DMSO溶液。另外，可一次加入4-10當量的偶合前驅化合物。於RT另再攪拌30分鐘後，將此批施予經PBS平衡之PD 10管柱(Sephadex® G-25,GE Healthcare)，並以PBS緩衝液溶離。視需要，另外以超離心進行濃縮程序。若需要，就更有效移除低分子量組成物物，以PBS緩衝液再稀釋後，重複以超過濾濃縮。
一般而言，除非另有指出，否則係使用5 mg的對應抗體之PBS緩衝液進行偶合。經由PD10管柱純化後，由此得到各例對應ADC溶於3.5 ml PBS緩衝液之溶液。然後測定這些溶液之所指的特定蛋白濃度並依照B-4所述之方法測定抗體的載量(藥物/mAb比率)。
此方法係用於製備實例3、4、20、29、32、38、47、49、50、58、61、72、77、81、85、88-95、97、104、109-111和113-115中所代表的免疫接合物。
於所示的結構式中，AK2之定義係如下AK2=MF-Ta-NH§2其中§2 係代表與羰基基團連接，MF-Ta為非還原MF-Ta抗體(重鏈SEQ ID NO：408和輕鏈SEQ ID NO：409)及
NH係代表抗體之離胺酸殘基的側鏈胺基基團。
將10 μmol的上述馬來醯亞胺前驅化合物置於3 ml的DMF中處理並與2.1 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。
於所示的結構式中，Cys之定義係如下
其中§3 係指與連接子-帶毒體單元連接。
將10 μmol的上述活性酯前驅化合物置於5 ml的DMF中處理並在30 μmol的N,N-二異丙基乙基胺之存在下，與α-胺基-保護的L-離胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓係濃縮及隨後以製備式HPLC純化。然後以已知的方法移除保護基。
反應發生後，於特定案例中係將反應混合物，例如以超過濾濃縮，及然後脫鹽和以層析純化，例如使用Sephadex® G-25。例如以磷酸-緩衝食鹽水(PBS)來進行溶離。隨後將該溶液進行無菌過濾並冷凍。另一種選擇係將接合物冷凍乾燥。
操作實例中所述的接合物之結果溶液的帶毒體載量，於PBS緩衝液中，係如下測量：離胺酸連接的ADC之帶毒體載量係以質譜測定個別接合物種類之分子量來測量。在此案例中，開始係以PNGaseF將抗體接合物去糖基化，並將樣本酸化，接著HPLC分離，以質譜使用ESI-MicroTofQ(Bruker Daltonik)分析。所有的光譜係經由TIC(總離子層析圖)的訊號加入，且各種接合物之分子量係以MaxEnt解摺積(MaxEnt Deconvolution)為基準來計算。將不同種類的訊號整合後，然後計算DAR(藥物/抗體比率)。
就蛋白鑑定，除了分子量測定外，係在去糖基化及/或變性後進行胰蛋白酶消化，且此消化，係在變性、還原和衍生化後，以所偵測的胰蛋白酶胜肽為基礎，確認蛋白的特性。
半胱胺酸-連接的接合物之帶毒體載量係經由還原和變性的ADC之逆相層析來測定。將ADC溶液(1 mg/mL,50 μL)與鈲鹽酸鹽(GuHCl)(28.6 mg)及與DL-二硫蘇糖醇(DTT)(500 mM,3 μL)溶液混合。將混合物於55℃培養1小時並以HPLC分析。
HPLC分析係於Agilent 1260 HPLC系統上以220 nm偵測來進行。所用的管柱為Polymer Laboratories PLRP-S聚合逆相管柱(型號PL 1912-3802)(2.1×150 mm,8 μm粒徑，1000 Å)以1 mL/min之流速，使用下列梯
度：0 min,25% B；3 min，25% B；28 min，50% B。溶離劑A係由0.05%三氟乙酸(TFA)之水溶液組成，溶離劑B由0.05%三氟乙酸之乙腈溶液組成。
將偵測到的波峰與接合物抗體之輕鏈(L0)和重鏈(H0)相比較，以滯留時間來分配。於接合物樣本中單獨偵測到的波峰分派至輕鏈，含一帶毒體(L1)，而重鏈含一、二和三個帶毒體(H1、H2、H3)。
抗體含帶毒體之平均載量係如下計算：首先，從波峰面積計算輕鏈載量-以積分來測定-屬於輕鏈之L0和L1波峰，為L0和L1之帶毒體數加權積分結果之總和，除以L0和L1之奇異加權積分結果之總和。以同樣的方法，從波鋒面積計算重鏈載量-以積分來測定-屬於重鏈之H0、H1、H2和H3波峰，為H0、H1、H2和H3之帶毒體數加權積分結果之總和，除以H0、H1、H2和H3之奇異加權積分結果之總和。DAR係以輕鏈載量和重鏈載量來表示，為輕鏈載量和重鏈載量之二倍總和。2倍數係考量抗體乃由二條輕鏈和二條重鏈所組成之事實。在特定個別的案例中，由於特定波峰之共析(co-elution)，可能無法精確地測出帶毒體載量。
結合劑與標鈀分子之結合能力係於結合發生後進行試驗。熟習技術者知道各種用於進行此試驗之方法，例如接合物之親和力可以ELISA技術或表面電漿共振分析(BIAcoreTM測量)來試驗。接合物濃度可由熟習技
術者使用一般的方法，例如對於抗體接合物，係藉由蛋白測定(亦參見Doronina等人；Nature Biotechnol.2003；21：778-784和Polson等人，Blood 2007；1102：616-623)來測量。
蛋白濃度：0.96 mg/ml
藥物/mAb比率：3.1
蛋白濃度：0.44 mg/ml
藥物/mAb比率：4.6
蛋白濃度：1.09 mg/ml
藥物/mAb比率：2.1
蛋白濃度：0.87 mg/ml
藥物/mAb比率：3.8
蛋白濃度：0.45 mg/ml
藥物/mAb比率：6.5
蛋白濃度：0.15 mg/ml
藥物/mAb比率：3.1
蛋白濃度：0.94 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
蛋白濃度：0.45 mg/ml
藥物/mAb比率：0.9
蛋白濃度：0.51 mg/ml
藥物/mAb比率：6.6
蛋白濃度：0.47 mg/ml
藥物/mAb比率：4.2
蛋白濃度：0.45 mg/ml
藥物/mAb比率：5.9
蛋白濃度：0.47 mg/ml
藥物/mAb比率：3.3
蛋白濃度：0.53 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
蛋白濃度：0.92 mg/ml
藥物/mAb比率：3.5
蛋白濃度：0.09 mg/ml
藥物/mAb比率：nd
蛋白濃度：0.62 mg/ml
藥物/mAb比率：1.8
蛋白濃度：0.55 mg/ml
藥物/mAb比率：3.8
蛋白濃度：0.54 mg/ml
藥物/mAb比率：4.4
蛋白濃度：0.56 mg/ml
藥物/mAb比率：4.0
蛋白濃度：1.1 mg/ml
藥物/mAb比率：0.3
蛋白濃度：0.61 mg/ml
藥物/mAb比率：0.9
蛋白濃度：0.57 mg/ml
藥物/mAb比率：1.2
本處係使用100 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：11.2 mg/ml
藥物/mAb比率：3.4
蛋白濃度：1.56
藥物/mAb比率：2.8
蛋白濃度：0.60 mg/ml
藥物/mAb比率：2.4
蛋白濃度：0.58 mg/ml
Drug/mAb-Ratio：2.6
蛋白濃度：0.39 mg/ml
藥物/mAb-比率：0.8
本處係使用70 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：13.2 mg/ml
藥物/mAb比率：4.6
蛋白濃度：0.98 mg/ml
藥物/mAb比率：1.1
蛋白濃度：0.55 mg/ml
藥物/mAb比率：無法測出
本處係使用40 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：10.6 mg/ml
藥物/mAb比率：4.1
蛋白濃度：0.96 mg/ml
藥物/mAb比率：0.4
本處係使用70 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：12.7 mg/ml
藥物/mAb比率：3.6
蛋白濃度：1.1 mg/ml
藥物/mAb比率：2.7
蛋白濃度：1.24 mg/ml
藥物/mAb比率：2.6
蛋白濃度：0.99 mg/ml
藥物/mAb比率：2.3
蛋白濃度：1.22 mg/ml
藥物/mAb比率：3.3
蛋白濃度：1.34 mg/ml
藥物/mAb比率：1.2
蛋白濃度：1.28 mg/ml
藥物/mAb比率：3.2
本處係使用70 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：10.9 mg/ml
藥物/mAb比率：5.1
本處係使用100 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：10.3 mg/ml
藥物/mAb比率：4.3
蛋白濃度：1.08 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
蛋白濃度：1.24 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
蛋白濃度：1.28 mg/ml
藥物/mAb比率：3.8
蛋白濃度：1.07 mg/ml
藥物/mAb比率：3.0
蛋白濃度：1.35 mg/ml
藥物/mAb比率：4.0
本處係使用100 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：12.2 mg/ml
藥物/mAb比率：5.6
蛋白濃度：1.32 mg/ml
藥物/mAb比率：3.2
蛋白濃度：1.01 mg/ml
藥物/mAb比率：0.9
蛋白濃度：1.03 mg/ml
藥物/mAb比率：0.3
蛋白濃度：0.62 mg/ml
藥物/mAb比率：3.1
此ADC係以vivaspin離心濃縮、再稀釋及濃縮並再次再稀釋。
蛋白濃度：1.26 mg/ml
藥物/mAb比率：無法測出
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將該批件以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.21 mg/ml
藥物/mAb比率：無法確實測出
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將該批件以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.8 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
蛋白濃度：1.44 mg/ml
藥物/mAb比率：4.1
蛋白濃度：0.92 mg/ml
藥物/mAb比率：3.5
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將該批件以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.77 mg/ml
藥物/mAb比率：>1.5(無法確實測出)
蛋白濃度：1.3 mg/ml
藥物/mAb比率：2.0
本處係使用150 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：11.2 mg/ml
藥物/mAb比率：3.7
本處係使用100 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：11.4 mg/ml
藥物/mAb比率：3.9
本處係使用60 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，及在Sephadex純化後將反應混合物以超離心濃縮。
蛋白濃度：10.5 mg/ml
藥物/mAb比率：4.4
將10 mg(10 μmol)的中間物157置於5.2 ml的DMF中處理並與2.28 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到5.8 mg(48%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.45 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.74 min；MS(ESI+)：m/z=1184(M+H)+.
將10 mg(10 μmol)的中間物113置於5.2 ml的DMF中處理並與2.28 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到6 mg(54%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.77 min；MS(ESI+)：m/z=1185(M+H)+.
將9 mg(8.3 μmol)的中間物132置於4 ml的DMF中處理並與3 mg(24.4 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到6.8 mg(68%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.78 min；MS(ESI+)：m/z=1227(M+H)+.
將10 mg(10 μmol)的中間物106置於5.8 ml的DMF中處理並與2.5 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到5.2 mg(46%之理論值的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法11)：Rt=0.71 min；MS(ESI+)：m/z=1070(M+H)+.
將10 mg(10 μmol)的中間物124置於4 ml的DMF中處理並與2.5 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後
以製備式HPLC純化。由此得到7.2 mg(64%之理論值的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.8 min；MS(ESI+)：m/z=1071(M+H)+.
將10 mg(10 μmol)的中間物125置於4 ml的DMF中處理並與2.4 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到7.7 mg(69%之理論值的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法2)：Rt=1.91 min；MS(ESI+)：m/z=1140(M+H)+.
將10 mg(10 μmol)的中間物160置於3 ml的DMF中處理並與2.1 mg(20 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到8.1 mg(73%之理論值的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.86 min；MS(ESI+)：m/z=1274(M+H)+.
將3.5 mg(3 μmol)的中間物159置於1 ml的DMF中處理並與0.76 mg(6 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到2.6 mg(65%之理論值的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.75 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.85 min；MS(ESI+)：m/z=1235(M+H)+.
將3.6 mg(3 μmol)的中間物129置於1 ml的DMF中處理並與0.77 mg(6 μmol)的L-半胱胺酸混合。將反應混合物於RT攪拌2小時，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到1.55 mg(39%之理論值的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.6 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.87 min；MS(ESI+)：m/z=1255(M+H)+.
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.9 mg/ml
藥物/mAb比率：1
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.86 mg/ml
藥物/mAb比率：2.9
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.05 mg/ml
藥物/mAb比率：4.4
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.13 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.41 mg/ml
藥物/mAb比率：3.9
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.38 mg/ml
藥物/mAb比率：4.3
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.32 mg/ml
藥物/mAb比率：1
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.14 mg/ml
藥物/mAb比率：5.3
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.25 mg/ml
藥物/mAb比率：4.8
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.12 mg/ml
藥物/mAb比率：1.7
本處係使用150 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物在Sephadex純化後，以超離心濃縮，以PBS再稀釋並再次濃縮。
蛋白濃度：12.2 mg/ml
藥物/mAb比率：4.1
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.86 mg/ml
藥物/mAb比率：3.4
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.43 mg/ml
藥物/mAb比率：3.7
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.8 mg/ml
藥物/mAb比率：0.7
本處係使用50 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物在Sephadex純化後，以超離心濃縮，以PBS再稀釋並再次濃縮。
蛋白濃度：9.5 mg/ml
藥物/mAb比率：2.9
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.52 mg/ml
藥物/mAb比率：3.2
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.25 mg/ml
藥物/mAb比率：4.6
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.47 mg/ml
藥物/mAb比率：1.6
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.99 mg/ml
藥物/mAb比率：5.5
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.02 mg/ml
藥物/mAb比率：4.0
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.63 mg/ml
藥物/mAb比率：3.8
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.27 mg/ml
藥物/mAb比率：3.0
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.58 mg/ml
藥物/mAb-比率：0.6
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.31 mg/ml
藥物/mAb比率：6.6
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.75 mg/ml
藥物/mAb比率：1.8
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.44 mg/ml
藥物/mAb比率：2.5
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.96 mg/ml
藥物/mAb比率：5.6
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.58 mg/ml
藥物/mAb比率：4.2
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.48 mg/ml
藥物/mAb比率：4.6
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.5 mg/ml
藥物/mAb比率：3.1
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.3 mg/ml
藥物/mAb比率：4.3
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.62 mg/ml
藥物/mAb比率：2.2
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.37 mg/ml
藥物/mAb比率：2.8
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.43 mg/ml
藥物/mAb比率：4.0
將15.5 mg(15 μmol)的中間物210置於5 ml的DMF中處理並與4.4 mg(18 μmol)的N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸以及7.7 μL(44 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於減壓下濃縮。隨後將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到14 mg(81%之理論值)標題化合物之保護的中間物，隨後將其置於1 ml的二氯甲烷中處理，並以1 ml的三氟乙酸去保護。將反應混合物濃縮，及將殘餘物以乙腈/水1：1冷凍乾燥後，得到15 mg(97%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.8 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.79 min；MS(ESI+)：m/z=1083(M+H)+.
將40 mg(40 μmol)的中間物227置於5 ml的DMF中處理並與11.5 mg(40 μmol)的N2-[(苄氧基)羰基]-L-離胺酸以及13 μL(80 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜，然後於減壓下濃縮及隨後以製備式HPLC純化。由此得到32.5 mg(70%之理論值)標題化合物之保護的中間物。
將此32.5 mg的中間物溶於10 ml的甲醇及加入2 mg的10%活性碳上鈀後，於標準氫氣壓下於RT氫化30分鐘。以過濾移除催化劑並於減壓下移除溶劑。將殘餘物從二烷/水1：1冷凍乾燥後，得到26 mg(99%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.76 min；MS(ESI+)：m/z=1014
(M+H)+.
將3.5 mg(3 μmol)的中間物202置於2 ml的DMF中處理並與0.8 mg(3 μmol)的N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸以及1.6 μL(10 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜，及然後於減壓下濃縮。將殘餘物置於乙腈/水：1：1中處理，以三氟乙酸使pH達到2及然後以製備式HPLC純化。由此得到1 mg(25%之理論值)標題化合物之保護的中間物，隨後將其置於500 μl的二氯甲烷中處理並以500 μl的三氟乙酸去保護。將反應混合物濃縮，將殘餘物從乙腈/水1：1冷凍乾燥後，得到1 mg(89%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.9 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.82 min；MS(ESI+)：m/z=1173(M+H)+.
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將該批件於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：0.81 mg/ml
藥物/mAb比率：2.5
本處係使用5 mg的MF-Ta進行偶合，並將該批件於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.06 mg/ml
藥物/mAb比率：1.8
本處係使用5 mg的MF-Ta進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及以PBS再稀釋。
蛋白濃度：1.36 mg/ml
藥物/mAb比率：7.2
本處係使用5 mg的MF-Ta進行偶合，並將反應混合物於Sephadex純化後，以超離心濃縮及以PBS再稀釋。
蛋白濃度：1.57 mg/ml
藥物/mAb比率：2.9
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將該批件於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.44 mg/ml
藥物/mAb比率：2.5
本處係使用5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將該批件於Sephadex純化後，以超離心濃縮及再稀釋。
蛋白濃度：1.74 mg/ml
藥物/mAb比率：3.6
本處係使用中間物247a和5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將該批件於Sephadex純化後，以超離心濃縮及以PBS再稀釋。
蛋白濃度：1.57 mg/ml
藥物/mAb比率：4.2
本處係使用中間物247b和5 mg的MF-Ta之PBS溶液進行偶合，並將該批件於Sephadex純化後，以超離心濃縮及以PBS再稀釋。
蛋白濃度：1.42 mg/ml
藥物/mAb比率：4.0
將8.6 mg(8 μmol)的中間物240置於5 ml的DMF中處理並與4.0 mg(16 μmol)的N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸以及2 μL(16 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌4小時，然後再次與相同量之N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸和N,N-二異丙基乙基胺混合，並於RT攪拌至隔夜。隨後將此批件於減壓下濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。由此得到7 mg(72%之理論值)標題化合物之保護的中間物，將其置於1 ml的二氯甲烷中處理並以0.5 ml的三氟乙酸去保護。將此批件濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。於高真空下乾燥，得到3.3 mg(47%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法5)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.8 min；MS(ESI+)：m/z=1084(M+H)+.
將8 mg(8 μmol)的中間物242置於3 ml的DMF中處理並與2.9 mg(12 μmol)的N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸以及2.7 μL(16 μmol)的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜，然後再次與相同量之N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸和N,N-二異丙基乙基胺混合並於RT再攪拌4小時。隨後將此批件於減壓下濃縮。將殘餘物以製備式HPLC純化。以乙腈/水冷凍乾燥後，得到6.5 mg(72%之理論值)標題化合物之保護的中間物，將其置於5 ml的二氯甲烷中處理並以
0.75 ml的三氟乙酸去保護。將此批件濃縮並將殘餘物從二烷/水冷凍乾燥後，得到5 mg(76%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.7 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.69 min；MS(ESI+)：m/z=1059(M+H)+.
將38 mg(41 μmol)的中間物248先轉變為N-羥基琥珀醯亞胺酯。將得到的72 mg粗產物置於5 ml的DMF中處理並與24 mg(100 μmol)的N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸和23 μL的N,N-二異丙基乙基胺混合。將反應混合物於RT攪拌至隔夜，及然後再次與16 mg的N2-(第三丁氧基羰基)-L-離胺酸和12 μL的N,N-二異丙基乙基胺混合，及隨後於超音波浴中另再處理2小時。
然後將此批件於減壓下濃縮並將殘餘物以製備式HPLC純化。以乙腈/水冷凍乾燥，得到20 mg(50%之理論值)標題化合物之保護的中間物。
將15 mg(12 μmol)的此中間物隨後置於3 ml的二氯甲烷中處理並與1 ml的三氟乙酸混合。於RT攪拌40分鐘後，另再加入1.5 ml的三氟乙酸並將此批件於超音波浴中另再處理1小時。之後將此批件濃縮，將殘餘物從二烷/水冷凍乾燥，得到13 mg(90%之理論值)的標題化合物。
HPLC(方法12)：Rt=1.5 min；LC-MS(方法1)：Rt=0.68 min；MS(ESI+)：m/z=990(M+H)+.
本發明化合物之生物效用可以下述之分析來驗證：
本發明接合物的細胞毒殺活性係以活體外細胞增生試驗來試驗。就此目的，將內生性或重組表現結合劑之標靶分子的哺乳動物細胞以本發明接合物培養。培養數小時至數天後，以細胞計數為基準與未添加接合物之對照組相比較，測定細胞增生。就進一步的對照，其可單獨加入未接合的帶毒體，或使用非表現結合劑之標靶分子的細胞。細胞數係以熟習本項技術者已知的方法來測定，例如以計數或經由使用得以由ATP測量計算細
胞之分析套組(例如ATPliteTM,Perkin-Elmer)。以此法，確定本發明接合物之IC50。將攜帶結合劑標靶分子的細胞所測量的接合物IC50與未攜帶的細胞相比較，可測定接合物之選擇性。
將一確定量之人類大腸癌細胞株HT29wt之細胞(2500細胞/孔，野生型)種入96-孔MTP之完全培養基(10% FCS-RPMI)中並於37℃/5%二氧化碳下培養至隔夜。與此平行的，將穩定表現間皮素之轉染的HT29細胞植入96-孔MTP之完全培養基中並培養至隔夜(2500細胞/孔，37℃/5%二氧化碳)。
18小時後，將移種培養基換成含10% FCS之新鮮培養基。以添加本發明化合物開始處理。在本處將轉染的細胞與HT29wt細胞同樣地處理。
對於研究的物質，係於10-5M-10-14M(1：10連續稀釋)之濃度範圍內測定劑量-效用曲線。
選擇48 h-96 h之培養時間。
使用MTT分析(ATCC,Manassas,Virginia,USA，型號30-1010K)偵測增生。在選擇的培養時間結束時，將HT29wt細胞以MTT培養4 h，接著加入清潔劑將細胞解離至隔夜。
以570 nm偵測所形成的染劑。
未以試驗物質處理但另做同樣處理之細胞的增生
係定義為100%值。從此試驗所得到的數據為三重複測定值，且進行至少二個獨立實驗。
表3係列出此分析之代表性操作實例的IC50值1)：
1)所提出的活性數據係關於本發明實驗部分所述的操作實例，以所示的藥物/mAb比率。對不同的藥物/mAB比率此等值可能偏離。
癌細胞為變性細胞，其由於細胞分裂增加，常導致腫瘤形成。微管形成紡錘體之紡錘絲並且為細胞週期之必要組成。微管規則性的建構和破壞使子代細胞中染色體得以精確的分裂，及構成持續的動態流程。中斷此動態流程導致不正確的細胞分裂及最後細胞死亡。然而，癌細胞之細胞分裂增加亦使其對紡錘絲毒素(構成化療之固定組成份)特別敏感。紡錘絲毒素，例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)或伊波希隆(epothilone)導致微管之聚合
率劇烈增加，而長春鹼或其他單甲基奧瑞他汀E(MMAE)則導致微管的聚合率劇烈降低。在這二種情況下，此必要的細胞週期動態性被嚴重地打斷。本發明內文中所研究的化合物係使微管的聚合率下降。
使用Cytoskeleton公司(Denver,Colorado,USA；訂購編號：BK011)之「螢光微管聚合化分析套組」評估微管蛋白聚合化。以此分析，將GTP加到未聚合的微管蛋白使聚合化自發性發生。此分析係以螢光團4',6-二甲脒基-2-苯基吲哚(DAPI)與微管蛋白之結合為基礎。游離和結合的DAPI可基於不同的發射光譜來區分。因為相較於未聚合的微管蛋白，DAPI對於聚合的微管蛋白具有相當高的親和力，所以微管蛋白聚合可經由結合的DAPI螢光團之增加的螢光來追蹤。
對於施行此分析，係將本發明化合物之DMSO溶液從起初的濃度10 mM以水稀釋至1 μM。除了緩衝液對照組外，亦另外進行具增加聚合效應之太平洋紫杉醇(paclitaxel)，及具抑制聚合化效應之長春鹼(vinblastin)作為分析對照組。測量係使用帶有一半基底區之96-孔盤來進行。微管蛋白聚合之動力學係以螢光計(Fluorimeter)於37℃監測1小時。激發光波長為355 nm，而發射光係於460 nm監測。在前10分鐘內線性增加之區域，計算每分鐘螢光的變化(△F/min)，其代表微管之聚合率。試驗物質之效力係以其個別的聚合下降率為基準來定量。
微管蛋白聚合率下降之發生係隨所加的試驗物質濃度而定。而添加100 μM MMAF造成聚合作用完全停止，添加1 μM MMAF則使聚合率降低40-45%，其中最佳係顯示不同物質之活性比較。實例64之化合物以1 μM抑制聚合率至41%之程度。實例62-70和105-107之化合物具有與MMAF相當之微管蛋白聚合化抑制作用。
MMAF於1 μM濃度之抑制值係設定為100%。
表6係給與代表性操作實例之微管蛋白聚合抑制作用之數據。
MMAF帶毒體及操作實例係以其濃度之函數抑制微管蛋白聚合。100 μM MMAF，微管蛋白聚合完全被抑制。操作實例105於1 μM時，抑制微管蛋白聚合率為1 μM MMAF測量值之45%。
物質的細胞通透性可藉由活體外試驗以通量分析使用Caco-2細胞來評估[M.D.Troutman和D.R.Thakker,Pharm.Res.20(8),1210-1224(2003)]。就此目的，將細胞置於24-孔過濾盤上培養15-16天。就滲透作用之測定，係將操作實例於HEPES緩衝液中以頂端(A)或基部(B)施用於細胞，並培養2小時。0小時及2小時後，將樣本從順槽和反槽取出。將樣本以HPLC(Agilent 1200,Böblingen,Germany)使用逆相管柱分離。HPLC系統係經由Turbo離子噴霧界面與Triple Quadropol質譜儀API 4000(Applied Biosystems Applera,Darmstadt,Germany)結合。通透性係以Papp值為基準加以評估，該
值係使用Schwab等人[D.Schwab等人，J.Med.Chem.46,1716-1725(2003)]所發表的公式來計算。
對於胞內釋放帶毒體非常重要的為從B到A之通透性[Papp(B-A)]：通透性越低，則操作實例在胞內釋放後停留在細胞的時間越長，而因此可與生化標靶(在本案例為：微管蛋白)作用的時間亦越長。
下表4係說明本分析之代表性操作實例的通透性數據：
操作實例具有低的B至A之通透性[Papp(B-A)，而因此具有長時間留在CaCo-2細胞中。比較起來，單甲
基奧瑞他汀E(MMAE)和單甲基奧瑞他汀F(MMAF)在此試驗中具有73 nm/s之Papp(B-A)值，且因此具有明顯較短時間停留在Caco-2細胞中。
許多腫瘤細胞對藥物表現轉運蛋白，且此項通常伴隨對細胞抑制劑產生抗藥性。非此等轉運蛋白之物質，例如P-糖蛋白(P-gp)或BCRP，因此可能具有改良的活性性質。
P-gp(ABCB1)物質之基質性質係藉由通量分析使用表現P-gp之LLC-PK1細胞(L-MDR1細胞)來測定[A.H.Schinkel等人，J.Clin.Invest.96,1698-1705(1995)]。就此目的，係將LLC-PK1細胞或L-MDR1細胞於96-孔過濾盤上培養3-4天。就滲透性之測量，係將個別的試驗物質單獨或在抑制劑(例如伊維菌素(Ivermectin)或維拉帕米(Verapamil))之存在下於HEPES緩衝液中以頂端(A)或基部(B)施用於細胞並培養2小時。0小時及2小時後，將樣本從順槽和反槽取出。將樣本以HPLC使用逆相管柱分離。HPLC系統係經由Turbo離子噴霧界面與Triple Quadropol質譜儀API 3000(Applied Biosystems Applera,Darmstadt,Germany)結合。通透性係以Papp值為基準加以評估，該值係使用Schwab等人[D.Schwab等人，J.Med.Chem.46,1716-1725(2003)]所發表的公式來計算。
對於胞內釋放帶毒體非常重要的為從B到A之通
透性[Papp(B-A)]：通透性越低，則操作實例在胞內釋放後停留在細胞的時間越長，而因此可與生化標靶(在本案例為：微管蛋白)作用的時間亦越長。
下表5係說明本分析(其係於L-MDR1細胞中進行)之代表性操作實例的通透性數據：
操作實例具有低的B至A之通透性[Papp(B-A)，而因此具有長時間留在L-MDR1細胞中。
靜脈內給予16 mg/kg的實例5後，測量實例5以及可能的代謝物，例如實例64之血漿濃度和腫瘤濃度。於帶有間皮素-轉染的腫瘤之動物中，實例64化合
物之曲線下面積(AUC)在血漿中為約0.50 mg*h/l；在腫瘤中，實例64化合物之暴露約高400倍(AUC=203 mg*h/L)。在帶有非轉染腫瘤之動物中，實例64在血漿中之暴露量係與帶有轉染腫瘤之動物血漿中的暴露量相同。相反的，非轉染動物之腫瘤中AUC比轉染的動物約低8倍。此係顯示在抗原的存在下腫瘤中之明顯的標靶效應。
血漿和腫瘤中實例64化合物之測量係於以甲醇沉澱蛋白後，以高壓液相層析(HPLC)結合串聯質譜儀(MS)來進行。
就100 μL血漿之處理，係將其與400 μL的甲醇和10 μL的內標(ISTD,50 ng/mL之甲醇溶液)混合，並震盪10秒。以16 000 g離心5分鐘後，將250 μL的上清液轉置於自動取樣瓶中，將其加入250 μL的乙酸銨緩衝液(AAC,10 mM,pH 6.8)並再次震盪。
就腫瘤之處理，係將其與4倍量的甲醇混合。於組織研磨機Tissuelyser II(Quiagen)中，將樣本以每分鐘30次撞擊粉碎6分鐘，及然後以16 000 g離心5分鐘。將50 μL的上清液轉置於自動取樣瓶中並加入50 μL的乙酸銨緩衝液(10 mM,pH 6.8)及5 μL的ISTD。再次震盪後，腫瘤樣本完成可供測量。
二種基質樣本之測量，最後，係於HPLC-結合大氣
壓游離/串聯質譜儀，以Turbo離子噴霧界面(TISP)在SCIEX之API4000儀器上進行。所測量的m/z躍遷(transition)係如下：實例64(計量計) 614.652 → 570.9
實例64(計量計1) 614.652 → 555.0
實例64(計量計2) 614.652 → 500.4
內標(ISTD) 726.665 → 694.5 HPLC/LC-MSMS(TISP)分析係於配有Gemini管柱(5 μm C18 110 A,50×3 mm,Phenomenex)之HP1100幫浦(Agilent)上進行。於下列梯度條件下：流速0.4 mL/min；梯度：0.0 min-1.0 min 10%乙腈/90% AAC，1.0 min-3.0 min 10%乙腈/90% AAC→50%乙腈/50% AAC，3.0 min-5.5 min 50%乙腈/50% AAC，5.5 min-5.6 min 50%乙腈/50% AAC→10%乙腈/90% AAC，5.6 min-6.0 min 10%乙腈/90% AAC。
對於校正，係將血漿樣本與0.5-2000 μg/L之濃度混合。偵測極限(LOQ)為2 μg/L。直線範圍係從2至1000 μg/L。
就腫瘤樣本之校正，係將未處理的腫瘤上清液與0.5-200 μg/L之濃度混合。偵測極限為5 μg/L。直線範圍係從5至200 μg/L。
有效試驗之質性對照組含有5和50 μg/L，附加500 μg/L於血漿中。發現這些樣本的濃度與所欲的值(數據未附)偏離至高20%。
本發明接合物之活性係於活體內，以例如異種移植模型來試驗。熟習技術者已知先前技術中用於試驗本發明化合物活性之方法(參見，例如WO 2005/081711；Polson等人，Cancer Res.2009 Mar 15；69(6)：2358-64)。就此目的，例如將囓齒類(例如小鼠)植入表現結合劑標靶分子之腫瘤細胞株。隨後將植入的動物投予本發明接合物或對照組抗體或等張鹽溶液。給藥可單一或更頻繁進行。數天的培育時間後，測定腫瘤大小，將接合物治療的動物與對照組作比較。接合物治療的動物顯示較小的腫瘤。
將表現間皮素之人類腫瘤細胞皮下注射至免疫抑制小鼠，例如裸小鼠或SCID小鼠的側腹。從細胞培養中分離1百萬-1千萬個細胞，離心及以100 μl的培養基或1：1培養基/基質膠(Matrigel)再懸浮。將細胞懸浮液注射至小鼠的皮膚下。
於數天內，使腫瘤生長。在腫瘤大於20 mm2之後開始治療。為了評估對已建立的腫瘤之效用，治療亦可僅在腫瘤大小為50-100 mm2使才開始。
ADC之治療係經由靜脈路徑進入小鼠尾靜脈來進行。將ADC溶於PBS並以5 ml/kg之量給藥。
治療流程係以抗體的藥物動力學來管控。治療係每隔三天進行三次，作為標準。然而，治療亦可持續進行，
或於以後的某時間點接著第二輪的三天治療。
每個治療組使用8隻動物作為基準。若於腫瘤生長或預期的治療後有特別大的波動，則此數量可較高。如同接受活性物質之組別，一組作為對照組之組別，係依照相同的流程僅以緩衝劑治療。
在實驗期間，定期地使用二維(長/寬)游標尺測量腫瘤面積。
實驗終了時，移出腫瘤並稱重。治療組(T)與對照組(C)之腫瘤平均重量的比率係以T/C表示。
將1百萬的HT29細胞(以間皮素穩定轉染)皮下接種至NMRI裸小鼠的側腹。在第6天腫瘤平均大小為30 mm2時，開始以靜脈內治療(第6、10、14天)。治療後，監看腫瘤的生長至第26天。基於動物保護法之因素，對照組動物由於腫瘤大，必須在第26天適當地予以安樂死。
ADC引起腫瘤生長明顯的抑制。在第26天，實驗終了並將所有動物的腫瘤稱重。由此，計算T/C，為治療組相對於對照組之腫瘤重。
將3百萬的Ovcar3細胞皮下接種至NMRI裸小鼠的側腹。
在第49天腫瘤平均大小為40 mm2時，開始以靜脈內5 mg/kg之劑量治療(第38、42、46天和第70、74天)。治療後，監看腫瘤的生長至第78天。實驗終了時，移出腫瘤並稱重。
ADC引起腫瘤生長明顯的抑制。在第78天，實驗終了並將所有動物的腫瘤稱重。由此，計算T/C，為治療組相對於對照組之腫瘤重。
將5百萬的NCI-H322細胞皮下接種至NMRI裸小
鼠的側腹。在第21天腫瘤平均大小為50 mm2時，開始以靜脈內治療(第21、25、29天)。治療後，監看腫瘤的生長至第42天。基於動物保護法之因素，對照組動物由於腫瘤大，必須在第42天適當地予以安樂死。
ADC引起腫瘤生長明顯的抑制。在第42天，實驗終了並將所有動物的腫瘤稱重。由此，計算T/C，為治療組相對於對照組之腫瘤重。
將5百萬的NCI-H322細胞皮下接種至NMRI裸小鼠的側腹。在第22天腫瘤大小約45 mm2時，以靜脈內進行一次ACD或媒劑之治療。治療後，監看腫瘤的生長。基於動物保護法之因素，對照組動物由於腫瘤大，在第50天必須適當地予以安樂死。
ADC引起腫瘤生長明顯的抑制。在第50天，使用腫瘤面積(長x寬)來測定T/C。
本發明化合物可如下轉變為醫藥製備物：
將本發明化合物以低於飽和溶解度之濃度溶於生理上可耐受的溶劑中(例如等張的食鹽水溶液、D-PBS或帶有甘油和氯化鈉溶於檸檬酸緩衝液中添加山梨醇酯80之調配物)。將溶液進行無菌過濾並分散於無菌和無病原之注射容器中。
本發明化合物可轉變為所述的給藥形式。其可以已知的方法，藉由「混合」或「溶解」於惰性、無毒的醫藥上適合的賦形劑(例如緩衝劑物質、安定劑、增溶劑、防腐劑)中來進行。例如可存有下列物質：胺基酸(甘胺酸、組胺酸、甲硫胺酸、精胺酸、離胺酸、白胺酸、異白胺酸、蘇胺酸、麩胺酸、苯丙胺酸及其他)、糖及相關化合物(葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖、蔗糖、甘
露糖、乳糖、山梨醇)、甘油、鈉鹽、鉀、銨鹽和鈣鹽(例如氯化鈉、氯化鉀或磷酸氫二鈉及許多其他)、乙酸鹽/乙酸緩衝系統、磷酸緩衝系統、檸檬酸和檸檬酸緩衝系統、胺丁三醇(trometamol)(TRIS和TRIS鹽)、聚山梨醇酯(例如Polysorbate 80和Polysorbate 20)、泊洛沙姆(Poloxamer)(例如泊洛沙姆188和泊洛沙姆171)、聚乙二醇(Macrogol)(PEG，例如3350)、Triton X-100、EDTA鹽、麩胱甘肽、白蛋白(例如人類)、苄基醇、酚、氯甲酚、間甲酚、苯札氯銨(benzalkonium chloride)及許多其他。
另外，本發明化合物可轉變為穩定的凍乾物(可在上述賦形劑之幫助下)，及在給藥前，以適合的溶劑(例如注射等級的水、等張食鹽水溶液)重建並給藥。
<110> 拜耳製藥股份有限公司拜耳智慧財產有限公司
<120> 新穎結合劑-藥物接合物(ADCs)及其用途(一)
<130> BHC 09 1 029
<160> 411
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 278
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
<210> 2
<211> 293
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 2
<210> 3
<211> 346
<212> PRT
<213> 智人
<400> 3
<210> 4
<211> 363
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 4
<210> 5
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 5
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 6
<210> 7
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 7
<210> 8
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 8
<210> 9
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 9
<210> 10
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 10
<210> 11
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 11
<210> 12
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 12
<210> 13
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 13
<210> 14
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 14
<210> 15
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 15
<210> 16
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 16
<210> 17
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 17
<210> 18
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 18
<210> 19
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 19
<210> 20
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 20
<210> 21
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 21
<210> 22
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 22
<210> 23
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 23
<210> 24
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 24
<210> 25
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 25
<210> 26
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 26
<210> 27
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 27
<210> 28
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 28
<210> 29
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 29
<210> 30
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 30
<210> 31
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 31
<210> 32
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 32
<210> 33
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 33
<210> 34
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 34
<210> 35
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 35
<210> 36
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 36
<210> 37
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 37
<210> 38
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 38
<210> 39
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 39
<210> 40
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 40
<210> 41
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 41
<210> 42
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 42
<210> 43
<211> 360
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 43
<210> 44
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 44
<210> 45
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 45
<210> 46
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 46
<210> 47
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 47
<210> 48
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 48
<210> 49
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 49
<210> 50
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 50
<210> 51
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 51
<210> 52
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 52
<210> 53
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 53
<210> 54
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 54
<210> 55
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 55
<210> 56
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 56
<210> 57
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 57
<210> 58
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 58
<210> 59
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 59
<210> 60
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 60
<210> 61
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 61
<210> 62
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 62
<210> 63
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 63
<210> 64
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 64
<210> 65
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 65
<210> 66
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 66
<210> 67
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 67
<210> 68
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 68
<210> 69
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 69
<210> 70
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 70
<210> 71
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 71
<210> 72
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 72
<210> 73
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 73
<210> 74
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 74
<210> 75
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 75
<210> 76
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 76
<210> 77
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 77
<210> 78
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 78
<210> 79
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 79
<210> 80
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 80
<210> 81
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 81
<210> 82
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 82
<210> 83
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 83
<210> 84
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 84
<210> 85
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 85
<210> 86
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 86
<210> 87
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 87
<210> 88
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 88
<210> 89
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 89
<210> 90
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 90
<210> 91
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 91
<210> 92
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 92
<210> 93
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 93
<210> 94
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 94
<210> 95
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 95
<210> 96
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 96
<210> 97
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 97
<210> 98
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 98
<210> 99
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 99
<210> 100
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 100
<210> 101
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 101
<210> 102
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 102
<210> 103
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 103
<210> 104
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 104
<210> 105
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 105
<210> 106
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 106
<210> 107
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 107
<210> 108
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 108
<210> 109
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 109
<210> 110
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 110
<210> 111
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 111
<210> 112
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 112
<210> 113
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 113
<210> 114
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 114
<210> 115
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 115
<210> 116
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 116
<210> 117
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 117
<210> 118
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 118
<210> 119
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 119
<210> 120
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 120
<210> 121
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 121
<210> 122
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 122
<210> 123
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 123
<210> 124
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 124
<210> 125
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 125
<210> 126
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 126
<210> 127
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 127
<210> 128
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 128
<210> 129
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 129
<210> 130
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 130
<210> 131
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 131
<210> 132
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 132
<210> 133
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 133
<210> 134
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 134
<210> 135
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 135
<210> 136
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 136
<210> 137
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 137
<210> 138
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 138
<210> 139
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 139
<210> 140
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 140
<210> 141
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 141
<210> 142
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 142
<210> 143
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 143
<210> 144
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 144
<210> 145
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 145
<210> 146
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 146
<210> 147
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 147
<210> 148
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 148
<210> 149
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 149
<210> 150
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 150
<210> 151
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 151
<210> 152
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 152
<210> 153
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 153
<210> 154
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 154
<210> 155
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 155
<210> 156
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 156
<210> 157
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 157
<210> 158
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 158
<210> 159
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 159
<210> 160
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 160
<210> 161
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 161
<210> 162
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 162
<210> 163
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 163
<210> 164
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 164
<210> 165
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 165
<210> 166
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 166
<210> 167
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 167
<210> 168
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 168
<210> 169
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 169
<210> 170
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 170
<210> 171
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 171
<210> 172
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 172
<210> 173
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 173
<210> 174
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 174
<210> 175
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 175
<210> 176
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 176
<210> 177
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 177
<210> 178
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 178
<210> 179
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 179
<210> 180
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 180
<210> 181
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 181
<210> 182
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 182
<210> 183
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 183
<210> 184
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 184
<210> 185
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 185
<210> 186
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 186
<210> 187
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 187
<210> 188
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 188
<210> 189
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 189
<210> 190
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 190
<210> 191
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 191
<210> 192
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 192
<210> 193
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 193
<210> 194
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 194
<210> 195
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 195
<210> 196
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 196
<210> 197
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 197
<210> 198
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 198
<210> 199
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 199
<210> 200
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 200
<210> 201
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 201
<210> 202
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 202
<210> 203
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 203
<210> 204
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 204
<210> 205
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 205
<210> 206
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 206
<210> 207
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 207
<210> 208
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 208
<210> 209
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 209
<210> 210
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 210
<210> 211
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 211
<210> 212
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 212
<210> 213
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 213
<210> 214
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 214
<210> 215
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 215
<210> 216
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 216
<210> 217
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 217
<210> 218
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 218
<210> 219
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 219
<210> 220
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 220
<210> 221
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 221
<210> 222
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 222
<210> 223
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 223
<210> 224
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 224
<210> 225
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 225
<210> 226
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 226
<210> 227
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 227
<210> 228
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 228
<210> 229
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 229
<210> 230
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 230
<210> 231
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 231
<210> 232
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 232
<210> 233
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 233
<210> 234
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 234
<210> 235
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 235
<210> 236
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 236
<210> 237
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 237
<210> 238
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 238
<210> 239
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 239
<210> 240
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 240
<210> 241
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 241
<210> 242
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 242
<210> 243
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 243
<210> 244
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 244
<210> 245
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 245
<210> 246
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 246
<210> 247
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 247
<210> 248
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 248
<210> 249
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 249
<210> 250
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 250
<210> 251
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 251
<210> 252
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 252
<210> 253
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 253
<210> 254
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 254
<210> 255
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 255
<210> 256
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 256
<210> 257
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 257
<210> 258
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 258
<210> 259
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 259
<210> 260
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 260
<210> 261
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 261
<210> 262
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 262
<210> 263
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 263
<210> 264
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 264
<210> 265
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 265
<210> 266
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 266
<210> 267
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 267
<210> 268
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 268
<210> 269
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 269
<210> 270
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 270
<210> 271
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 271
<210> 272
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 272
<210> 273
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 273
<210> 274
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 274
<210> 275
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 275
<210> 276
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 276
<210> 277
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 277
<210> 278
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 278
<210> 279
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 279
<210> 280
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 280
<210> 281
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 281
<210> 282
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 282
<210> 283
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 283
<210> 284
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 284
<210> 285
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 285
<210> 286
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 286
<210> 287
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 287
<210> 288
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 288
<210> 289
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 289
<210> 290
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 290
<210> 291
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 291
<210> 292
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 292
<210> 293
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 293
<210> 294
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 294
<210> 295
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 295
<210> 296
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 296
<210> 297
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> M20 D02 S-A衍生的CDR H1之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (3)..(3)
<223> X=D或S
<400> 297
<210> 298
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> M20 D02 S-A衍生的CDRH2之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (4)..(4)
<223> X=V或I
<220>
<221> 變體
<222> (9)..(9)
<223> X=A或G
<220>
<221> 變體
<222> (10)..(10)
<223> X=R或S
<400> 298
<210> 299
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> M20 D02 S-A衍生的CDRH3之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (9)..(9)
<223> X=S,K，或R
<220>
<221> 變體
<222> (10)..(10)
<223> X=A,S或R
<220>
<221> 變體
<222> (14)..(14)
<223> X=D,K,E或R
<220>
<221> 變體
<222> (15)..(15)
<223> X=S或Y
<400> 299
<210> 300
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生自M20 D02 S-A CDRL1之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (7)..(7)
<223> X=V或I
<400> 300
<210> 301
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生自M20 D02 S-A衍生的CDR L3之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (3)..(3)
<223> X=A,Q或R
<220>
<221> 變體
<222> (5)..(5)
<223> X=D或G
<220>
<221> 變體
<222> (7)..(7)
<223> X=R或S
<220>
<221> 變體
<222> (9)..(9)
<223> X=N,W或S
<220>
<221> 變體
<222> (12)..(12)
<223> X=V,A或G
<400> 301
<210> 302
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生自M31 B01 CDR H1之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (3)..(3)
<223> X=N或S
<220>
<221> 變體
<222> (4)..(4)
<223> X=A或Y
<400> 302
<210> 303
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生自M31 B01 CDR H2之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (10)..(10)
<223> X=T或S
<220>
<221> 變體
<222> (11)..(11)
<223> X=I或T
<400> 303
<210> 304
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生自M31 B01 CDR H3之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (10)..(10)
<223> X=Y,K,G,W或N
<400> 304
<210> 305
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生的M31 B01 CDR L1之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (1)..(1)
<223> X=T或S
<400> 305
<210> 306
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生自M31 B01 CDR L2之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (4)..(4)
<223> X=K或Q
<400> 306
<210> 307
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 衍生的M31 B01 CDR L3之一致序列
<220>
<221> 變體
<222> (4)..(4)
<223> X=W,E,F或Y
<220>
<221> 變體
<222> (7)..(7)
<223> X=R,S或M
<220>
<221> 變體
<222> (9)..(9)
<223> X=N,K或S
<220>
<221> 變體
<222> (10)..(10)
<223> X=G或R
<220>
<221> 變體
<222> (11)..(11)
<223> X=P或A
<400> 307
<210> 308
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 308
<210> 309
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 309
<210> 310
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 310
<210> 311
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 311
<210> 312
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 312
<210> 313
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 313
<210> 314
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 314
<210> 315
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 315
<210> 316
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 316
<210> 317
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 317
<210> 318
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 318
<210> 319
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 319
<210> 320
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 320
<210> 321
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 321
<210> 322
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 322
<210> 323
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 323
<210> 324
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 324
<210> 325
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 325
<210> 326
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 326
<210> 327
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 327
<210> 328
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 328
<210> 329
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a
<400> 329
<210> 330
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 330
<210> 331
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 331
<210> 332
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 332
<210> 333
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 333
<210> 334
<211> 363
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 334
<210> 335
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 335
<210> 336
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 336
<210> 337
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 337
<210> 338
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 338
<210> 339
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 339
<210> 340
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 340
<210> 341
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 341
<210> 342
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 342
<210> 343
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 343
<210> 344
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 344
<210> 345
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> C4.4a結合劑
<400> 345
<210> 346
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 346
<210> 347
<211> 447
<212> PRT
<213> 智人
<400> 347
<210> 348
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 348
<210> 349
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 349
<210> 350
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 350
<210> 351
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 351
<210> 352
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 352
<210> 353
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 353
<210> 354
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 354
<210> 355
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 355
<210> 356
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 356
<210> 357
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 357
<210> 358
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 358
<210> 359
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 359
<210> 360
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 360
<210> 361
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 361
<210> 362
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 362
<210> 363
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 363
<210> 364
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 364
<210> 365
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 365
<210> 366
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 366
<210> 367
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 367
<210> 368
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 368
<210> 369
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 369
<210> 370
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 370
<210> 371
<211> 452
<212> PRT
<213> 智人
<400> 371
<210> 372
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 372
<210> 373
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 373
<210> 374
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 374
<210> 375
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 375
<210> 376
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 376
<210> 377
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 377
<210> 378
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 378
<210> 379
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 379
<210> 380
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 380
<210> 381
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 381
<210> 382
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 382
<210> 383
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 383
<210> 384
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 384
<210> 385
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 385
<210> 386
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 386
<210> 387
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 387
<210> 388
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 388
<210> 389
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 389
<210> 390
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 390
<210> 391
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 391
<210> 392
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 392
<210> 393
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 393
<210> 394
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 394
<210> 395
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 395
<210> 396
<211> 216
<212> PRT
<213> 智人
<400> 396
<210> 397
<211> 451
<212> PRT
<213> 智人
<400> 397
<210> 398
<211> 10
<212> PRT
<213> 智人
<400> 398
<210> 399
<211> 20
<212> PRT
<213> 智人
<400> 399
<210> 400
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<400> 400
<210> 401
<211> 14
<212> PRT
<213> 智人
<400> 401
<210> 402
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<400> 402
<210> 403
<211> 10
<212> PRT
<213> 智人
<400> 403
<210> 404
<211> 120
<212> PRT
<213> 智人
<400> 404
<210> 405
<211> 113
<212> PRT
<213> 智人
<400> 405
<210> 406
<211> 360
<212> DNA
<213> 智人
<400> 406
<210> 407
<211> 339
<212> DNA
<213> 智人
<400> 407
<210> 408
<211> 450
<212> PRT
<213> 智人
<400> 408
<210> 409
<211> 217
<212> PRT
<213> 智人
<400> 409
<210> 410
<211> 1353
<212> DNA
<213> 智人
<400> 410
<210> 411
<211> 654
<212> DNA
<213> 智人
<400> 411
Claims (55)
- 一種通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，
- 如申請專利範圍第1項之通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至50之數字，AK 為AK1或AK2 其中AK1 為結合劑，其係經由結合劑之硫原子與G基團相連接，AK2 為結合劑，其係經由結合劑之氮原子與G基團相連接，當AK=AK1時，G為下式之基團
- 如申請專利範圍第1或2項之通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至20之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
- 如申請專利範圍第1至3項任一項中之通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或 MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，AK2 為一抗體，其包括六個B01-3、B01-10、M31-B01或D02-6抗體之CDR序列、B01-3、B01-10、M31-B01或D02-6抗體之可變輕鏈和可變重鏈或B01-3、B01-10、M31-B01或D02-6抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
- 如申請專利範圍第1至4項任一項中之通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK2其中AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之 離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，G 為羰基，L1 為一鍵，B 為一鍵，L2 為直鏈(C3-C6)-亞烷基或為下式之基團
- 如申請專利範圍第1至4項任一項中之通式(Ia)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1，其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，G 為下式之基團
- 一種式(XXXa)之化合物，
- 如申請專利範圍第7項之式(XXXa)之化合物，其中 Cys 為半胱胺酸殘基，其係經由側基之硫原子經由琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基、下式之基團
- 如申請專利範圍第7或8項之式(XXXa)化合物，其中Cys 為半胱胺酸殘基，其係經由側基之硫原子經由琥 珀醯亞胺之碳原子相鍵結，L1 為一鍵或直鏈(C2-C6)-亞烷基，B 為一鍵或下式之基團
- 一種式(XXXI)之化合物，
- 如申請專利範圍第10項之式(XXXI)化合物，其中L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或下式之基團
- 如申請專利範圍第10或11項之式(XXXI)化合物，其中L1 為一鍵，B 為一鍵， L2 為直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
- 一種式(XXXa)和(XXXI)之化合物，係由下列之群中選出：N-[6-(3-{[(2R)-2-胺基-2-羧乙基]巰基}-2,5-二側氧吡咯啶-1-基)己基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺，N-[6-(3-{[(2R)-2-胺基-2-羧乙基]巰基}-2,5-二側氧吡咯啶-1-基)己基]-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺，N-(6-{[(5S)-5-胺基-5-羧基戊基]胺基}-6-側氧己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(2S)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-(1,2-烷-2-基)-1-側氧丙-2-基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯 胺三氟乙酸鹽，N-(6-{[(5S)-5-胺基-5-羧基戊基]胺基}-6-側氧己基)-N-甲基-L-纈胺醯基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]胺基}-1-甲氧基-2-甲基-3-側氧丙基]吡咯啶-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-側氧庚-4-基]-N-甲基-L-纈胺醯胺，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
- 一種通式(I)之結合劑-藥物接合物
- 如申請專利範圍第14項之通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至50之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為結合劑，其係經由結合劑之硫原子與G基團相連接，AK2 為結合劑，其係經由結合劑之氮原子與G基團相連接，當AK=AK1時，G為下式之基團
- 如申請專利範圍第14或15項之通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至50之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為一抗體或抗原結合抗體片段且係經由硫原子與G基團相鍵結，AK2 為一抗體或抗原結合抗體片段且係經由氮原子與G基團相鍵結，G、L1、B、L2和D具有如申請專利範圍第14或15項中所示之定義，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
- 如申請專利範圍第14至16項任一項中之通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至20之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為與間皮素結合及經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段， AK2 為與間皮素結合及經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結之抗體或抗原結合抗體片段，當AK=AK1時，G為下式之基團
- 如申請專利範圍第14至17項任一項中之通式(I)之結合劑-藥物接合物，其中n 為1至10之數字，AK 為AK1或AK2其中AK1 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之半胱胺酸殘基的硫原子與G基團鍵結，AK2 為一抗體，其包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈，且係經由結合劑之離胺酸殘基的NH側基與G基團鍵結，當AK=AK1時，G為下式之基團
- 一種製備如申請專利範圍第14至18項任一項中之本發明通式(I)化合物之方法，其特徵為將含結合劑之緩衝液溶液[A]與適合的還原劑，例如二硫蘇糖醇或叁(2-羧乙基)膦鹽酸鹽混合，隨後與式(II)化合物反應
- 如申請專利範圍第19或54項之方法所製備之化合物，其中AK1和AK2為包括六個MF-Ta抗體之CDR序列、MF-Ta抗體之可變輕鏈和可變重鏈或MF-Ta抗體之輕鏈和重鏈之抗體，以及其鹽類、溶劑化物和鹽類之溶劑化物。
- 一種式(XXX)之化合物，
- 如申請專利範圍第21項之式(XXX)化合物，其中Cys 為經由側基之硫原子與琥珀醯亞胺之碳原子相鍵結之半胱胺酸殘基，L1 為一鍵、直鏈(C2-C6)-亞烷基或為下式之基團
- 如申請專利範圍第1至6項或第14至18項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑係與癌標靶分子結合。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑係與胞外標靶分子結合。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至24項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑係與胞外癌標靶分子結合。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至25項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該標靶分子、胞外標靶分子、癌標靶分子或胞外癌標靶分子為蛋白。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至26項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑在與胞外標靶分子結合後被表現標靶分子之細胞所內化。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至27項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑為結合蛋白。
- 如申請專利範圍第1、2、14、15、20項或第23至28項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑為一抗體或其抗原結合抗體片段或抗體模擬物。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至29、10項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體為一單株抗體。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至30項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體為人類、人源化或嵌合抗體。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至31項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體為全抗體或經修飾的全抗體。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至32項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體為IgG類之抗體。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至33項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑係與由下列組成之群中選出的胞外癌標靶分子結合：EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a (NP_055215.2)和碳酸酐酶IX(CA IX；NP_001207.2)。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至34項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑係專一性與由下列組成之群中選出的胞外癌標靶分子結合：EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a(NP_055215.2)和碳酸酐酶IX(CA IX；NP_001207.2)。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至35項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體係與C4.4a結合。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至36項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體係與間皮素結合並具有不變的結合。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至37項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗體專一性與間皮素結合。
- 如申請專利範圍第1至6項、第14至18項或第23至38項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該接合劑為抗-間皮素抗體或抗原結合抗體片段，其係包括WO 2009/068204-A1(表7；第61-63頁)中所描述的抗體之三 個輕鏈CDR區的胺基酸序列，及三個重鏈CDR區的胺基酸序列。
- 如申請專利範圍第1至3項、第14至17項或第23至39項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗間皮素抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出：包括MF-Ta抗體之三個輕鏈CDR區的胺基酸序列，及三個重鏈CDR區的胺基酸序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-J抗體之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MOR06640抗體之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-226抗體之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，及包括MOR06626抗體之三個輕鏈CDR區序列，及三個重鏈CDR區序列之抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段。
- 如申請專利範圍第1至3項、第14至17項或第23至40項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗間皮素抗體或抗原結合抗體片段係由下列組成之群中選出： 包括MF-Ta抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-J抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MOR06640抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，包括MF-226抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段，及包括MOR06626抗體之可變輕鏈序列及可變重鏈序列的抗間皮素抗體或其抗原結合抗體片段。
- 一種與間皮素結合之抗體或抗原結合抗體片段，其中該抗體序列係包括以SEQ ID NO：404序列表示之可變重鏈的胺基酸序列，及以SEQ ID NO：405序列表示之可變輕鏈的胺基酸序列。
- 一種與間皮素結合之抗體或抗原結合抗體片段，其中該抗體序列係包括由SEQ ID NO：406之核酸序列所編碼之可變重鏈的胺基酸序列，及由SEQ ID NO：407核酸序列所編碼之可變輕鏈的胺基酸序列。
- 一種與間皮素結合之抗體，其中該抗體序列係包括以SEQ ID NO：408序列表示之重鏈的胺基酸序列，及以SEQ ID NO：409序列表示之輕鏈的胺基酸序列。
- 如申請專利範圍第42至44項之抗體或抗原結合抗體片段，其係專一性與間皮素結合。
- 如申請專利範圍第1至3項、第14至17項或第23至38項任一項中之結合劑-藥物接合物，其中該抗間皮素抗體係包括以SEQ ID NO：408序列表示之重鏈的胺基酸序列，及以SEQ ID NO：409序列表示之輕鏈的胺基酸序列。
- 如申請專利範圍第1至18項、第21至41項或第46項任一項中之結合劑-藥物接合物或化合物，係用於治療及/或預防疾病。
- 如申請專利範圍第1至18項、第21至41項或第46項任一項中之結合劑-藥物接合物或化合物，係用於治療及/或預防過度增生及/或血管新生疾病之方法中。
- 如申請專利範圍第1至18項、第21至41項或第46項任一項中之結合劑-藥物接合物或化合物，係用於製造醫藥品供治療及/或預防過度增生及/或血管新生疾病。
- 一種醫藥品，其係包括如申請專利範圍第1至18項、第21至41項或第46至48項任一項中之結合劑-藥物接合 物或化合物與一惰性、無毒之醫藥上可接受賦形劑組合。
- 一種醫藥品，其係包括如申請專利範圍第1至18項、第21至41項或第46至48項任一項中之結合劑-藥物接合物或化合物與一或多種抗增生、細胞抑制或細胞毒性物質組合。
- 如申請專利範圍第50或51項之醫藥品，係用於治療及/或預防過度增生及/或血管新生疾病。
- 一種治療及/或預防人類和動物之過度增生及/或血管新生疾病之方法，係使用一有效量之至少一種如申請專利範圍第1至18項或第21至41項任一項中之結合劑-藥物接合物或化合物，或如申請專利範圍第50或51項之醫藥品。
- 一種製備如申請專利範圍第1至6項任一項中之通式(Ia)本發明化合物之方法，其特徵為將結合劑於緩衝液中之溶液[A]與適合的還原劑，例如二硫蘇糖醇或叁(2-羧乙基)膦鹽酸鹽混合，及隨後與式(IIa)化合物反應，
- 一種結合劑-藥物接合物，係由下列化合物中選出：
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11016346 | 2011-04-21 | ||
| EP11016347 | 2011-04-21 | ||
| EP11016855 | 2011-06-01 | ||
| EP11019362 | 2011-12-14 | ||
| EP11019361 | 2011-12-14 | ||
| EP11019360 | 2011-12-14 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW201302799A true TW201302799A (zh) | 2013-01-16 |
Family
ID=48142126
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW101114207A TW201302799A (zh) | 2011-04-21 | 2012-04-20 | 新穎結合劑－藥物接合物（ＡＤＣｓ）及其用途（一） |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TW201302799A (zh) |
-
2012
- 2012-04-20 TW TW101114207A patent/TW201302799A/zh unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI582112B (zh) | 新穎結合劑－藥物接合物（ＡＤＣｓ）及其用途（二） | |
| US20150023989A1 (en) | New antibody drug conjugates (adcs) and the use thereof | |
| TW201302799A (zh) | 新穎結合劑－藥物接合物（ＡＤＣｓ）及其用途（一） | |
| TW201339175A (zh) | 新黏合劑－藥物接合體（ａｄｃ）及其用途 | |
| NZ615839B2 (en) | Novel binder-drug conjugates (adcs) and their use | |
| NZ625745B2 (en) | FGFR antibody drug conjugates (ADCs) and the use thereof |