TW200930370A - Hedgehog pathway antagonists and therapeutic applications thereof - Google Patents

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200930370 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於有機化合物 、其醫藥組成物及其用於哺乳動 物體之治療上及/或預防上之用途 ，特別係關於調節刺壻因 子傳訊路徑之雜環化合物。 1 【先前技術】 45 kDa人類shh前驅物蛋白質之自體蛋白質分解所產生 ❹20 kDa之N端片段係負責正常刺蝎因子傳訊；及產生涉及 自體處理活性25 kDa之C端片段，其中該N端片段係經結 合至膽固醇（Lee et al. Science 266 1528-1537 (1994) 及 Bumcrot et al. Mol. Cell Biol. 15 2294-2303 (1995))。 功能正常的刺壻因子（Hedgehog’Hh)傳訊係經由調控細胞 为化與增生而表現出胚胎形態，首次報告於黑腹果蠅 © (Dros〇Philia melanogaster) (Nusslein-Vollhard et al. Roux. Arch. Dev· Biol. 193:267-282 (1984))。分泌 Hh 多肽之細胞反應係藉兩種嵌入膜蛋白Patched (ptc)及

Smoothened (Smo)媒介。Hh結合至十二穿膜蛋白ptc，因而 逆轉由Ptc媒介之七穿膜蛋白質smo之抑制作用。然後此種 Smo活化作用觸發一系列胞内事件，轉錄因子Cubitus interruptus (Ci)之安定化及以依賴型基因的表現達到高 峰。此等事件於哺乳動物發育期間及腫瘤發生期間經由多種 097148178 3 200930370

蛋白質同系物重演，該等蛋白包括三種不同的Hh家族成員 [音蜎因子（Sonic ’ Shh)、印度刺蜎因子（Indian，Ihh)、 及沙漠刺蜎因子（Desert，Dhh)]、兩種Ptc蛋白（Ptchl及 卩1：(±2)及三種類（^轉錄因子（〇11卜〇112、及0113)。但3111〇 有單一種脊椎動物同系物經由於果蠅、小鼠及斑馬魚之基因 分析暗示涉及全部各形式之Hh傳訊（Chen et al. PNAS 99(22): 14071-14076 (2002))。

Smo引發一信號串級，造成Gli轉錄因子之活化及其隨後 細胞核移位，結果導致標無基因之轉錄的控制。經由一負回 饋迴路’ Gli影響抑制Hh路徑之Ptc及Hipl (刺蝎因子交 互作用蛋白1 (Hipl))之轉錄作用。Hh路徑活化的喪失控制 可能引起某個範圍之癌症的增加，包括腦部癌症，諸如神經 管胚細胞瘤（Romer and Curran, Cancer Res 65(12) 4975-4978 (2005))及神經膠母細胞瘤（Bar et al. Stem Cells 25(10):2524-33 (2007));攝護腺癌（Sanchez et al. PNAS 101 (34) 1256卜 12566 (2004));胰臟癌（Thayer et al·

Nature 423 851-856 (2003));非小細胞肺癌（Yuan et al.

Oncogene 26 1046-1055 (2007));小細胞肺癌（Watkins et al. Nature 422 313-317 (2003));乳癌（Kubo et al. Cancer

Res 64 6071-6074 (2004));多種消化道腫瘤（Berman etal.

Nature 425 846-851 (2003));及（Lees et al.

Gastroenterology 129(5) 1696-1710 (2006));基底細胞 097148178 4 200930370 癌（Williams et al. PNAS 100(8) 4616-4621 (2003));惡 性黑色素瘤（Pons and Quintani 1 la Cl in Trans Oncol. 8(7) 466-474 (2006));鱗狀細胞癌（Xuan et al. Mod Pathol. 19(8) 1139-47 (2006)) ;B-細胞惡性病諸如多發性肌瘤及 淋巴瘤（Dierks et al. Nat. Med· 13(8) 944-951 (2007); Peacock et al. PNAS 104(10) 4048-4053 (2007));間葉 癌諸如軟骨肉瘤（Tiet et al. Am. J. Pathol. 168(1) φ 321-330 (2006))，腎臟透明細胞肉瘤（Cutcliffe et al. Clin Cancer Res. 11(22):7986-94 (2005))及橫紋肌肉瘤 (Tostar et al. J. Pathol. 208(1) 17-25 (2006));慢性 骨髓性白血病（Sengupta et al. Leukemia 21(5) 949-955 (2007));子宮内膜癌（Feng etal. Clin. Cancer Res. 13(5) 1389-1398 (2007));肝細胞癌.（Huang et al.

Carcinogenesis 27(7) 1334-1340 (2006));卵巢瘤（Chen et O al. Cancer Sci. 98(1) 68-76 (2007))。 也已經發現Hh傳訊調節ABC轉運子蛋白多重藥物抗性蛋 - 白-1 (MDIU、ABCB1、P-糖蛋白）及（BCRP、ABCG2)之表現， : 以及藉小型干擾性RNA靶定擊倒MDR1及BCRP的表現部分逆 轉Hh-誘導之化學抗性。此說明了 Hh路徑可為克服MDR之 標乾且提高化學治療反應（Sims-Mourtada et al Oncogene 26(38) 5674-5679 (2007))。音蜎因子傳訊路徑之阻斷發現 可增強EGFR抑制劑用於騰癌細胞（Hu et al. Aete 097148178 5 200930370

Pharmacol Sin. 28(8) 1224-30 (2007))及攝護腺癌細胞 (Mimeault et al. Int. J Cancer 118(4) 1022-31 (2006)) 之抗增生效果。 刺蜎因子路徑也與化學放射性治療後之腫瘤再度生長有 關’以及作為改善輻射線反應的可能標的（Sims_M〇urtada et al. Clin. Cancer Res. 12(21) 6565-6572 (2006))； 及環巴胺（cyclopamine)為一種刺蜎因子路徑拮抗劑，其可 增加太平洋紫杉醇及放射線於H h表現性胰臟癌細胞之胞毒 性效果（Shafaee et al. Cancer Chemother. Pharmacol. 58(6) 765-70 (2006))。 也曾報告刺蜎因子傳訊路徑之抑制可用於與發炎、上皮細 胞增生、組織纖維變性或免疫病症相關聯之一定範圍的疾病 的治療（Lamb et al. EP1183040)。曾經報告音蜎因子傳訊 的抑制用於大鼠原位小腸移植研究模型可減少慢性排斥且 延長同種異體移植片的存活。雖然急性移植物排斥可藉免疫 抑制劑控制’慢性排斥係以捐贈者器官血管之動脈硬化為特 徵，慢性排斥為長期同種異體移植存活的主要障礙。於大鼠 原位小腸移植研究模型中，於抗Shh抗體處理後，移植的存 活比較免疫球蛋白G對照組顯著延長（116日相較於77 5 曰）。抗Shh抗體接受者之腸繫膜中膠原蛋白的沈積及血管 梗阻顯著減少（Chen et al. Transplantation 83(10) 1351-1357 (2007) ; Lamb et al. EP1183040B1)。 097148178 6 200930370 也曾報告sFRP-l為Hh傳訊之下游標把基因，於肋路徑 活化後，所分泌的皺縮相關蛋白-1 (sFRP-Ι)之表現升高， 對分子鏈路提供對Wnt傳訊之抑制效應（Heetal. J. Biol. Chem. 281(47)35598,35602 (2006))。如此透過 sFRP-1 拮 : 抗Hh路徑，Wnt傳訊之調節作用提供一種治療某個範圍之 : 疾病諸如骨質疏鬆症（Ai et al. Mol. Cell. Bi〇l. 25(12) 4946-4955 (2005))及其它（Luo et al. Laboratory ❹ Investigation，87, 97-103(2007))之治療方法。 曾經研究多種Hh路徑之抑制劑，包括天然產物環巴胺係 經由結合至Smo之七螺旋區發揮作用。此外，近年來曾經報 告多種Smo受體之合成小分子拮抗劑：有關综論部分請參考 Kiselyov Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry 6 445-449 (2006)。

Lubisch等人揭示一系列2-苯基-苯并p米唾類用作為parp ❹抑制劑’可有效用於治療多種疾病包括癌症（w〇2〇〇〇〇2fnQ9、 以及用於化妝品領域（W02001082877)。番遴中τ珥的特徵$於 - 苯并咪唑環之第4-位置存在有胺基曱醯基部分。 - Arienti 等人(W02003032984)及 Ameriks 等人 (102004093873 及 US2004214857)描彔一丰列 2-苯基-笨并 咪唑衍生物用作為檢查點激鉼2抑制劑可用於癌症之治 療，進一步特徵在於苯并咪唑環之第卜位置經常性以羧酸 基、胺基甲醯基或胺基磺醯基取代。 097148178 7 200930370

Ohemeng 等人（W09911627 及 US5942532)描示一系列用作 為抗菌劑之5-羧基醯亞胺醯胺-2-苯基-苯并咪唑類化合 物。

Mjalli等人（W02003075921)說明一系列2-苯基-苯并咪 唑衍生物之醫藥上之應用。

Alekshun 等人（W02004041209 及 W02006073009)福示一系 列具有抗生素活性之2 -苯基-苯并味嗤醇衍生物。

Khaled等人Y藥學院公趙f開羅*學;)，40(1)，7-13， (2002))說明2-苯基-苯并咪唑類衍生物之合成及降血壓活 性’而若干其它DNA結合性質係說明於Kobuta等人（核酸研 究補遺，2 (第29屆核酸化學研討會），193-194 (2002)及 核酸研討會系列，35 (第23屆核酸化學研討會，1996)， 151-152 (1996))。

Guicherit 等人(W0200605Q506) ， Beachy 等人 (W02003088970)及 Rubin 等人（W02003011219)揭示可用作 為刺蜎因子路徑拮抗劑用於多種癌症形式之治療之2 -苯基 -苯并咪唑之芳基-及烷基-醯胺/脲衍生物。 【發明内容】 本發明提供式I化合物 097148178 8 200930370

其中’當價數及穩定性許可時 Ri為H; 4見需要可經以一 ❹ ❹ 或環狀〇^4)以、^個㈣子喊之線性分支 線性分支$ u 77 3 烧氧基或--或二- 骒性刀支或環狀（Cl_C6)烷基胺基. r等於0、1、2或3; 當r大於i時，Ri，各自分一 環狀.叫氣基；視需要Μ原子；線性、分支或 基、院基胺基或二錄胺基取代Μ性或分支（Gl—W烧氧 烷基； '之線性、分支或環狀（CrC4) 匕可為Η、ci、F或Br ; X可為N或cu ; 1及j可為1、2、或3，

時i及j不可為p 和不可超過5’及當X為N R3可為Η ;视费β ㈣夕㈣％ 胺基甲酿基或―個或多個氟原子 取代之線性、分支 又次磙狀…广匕）烷基、噚烷基、烷基羰基、 二4基、％基縣、純基絲、烧基胺 烯基、烯基羰基、逆 τ烯土羰基、婦氧基羰基、婦基胺基羰基、 097148178 9 200930370 亞烷基、烷氧基亞胺基、羥基、烷氧基、烯氧基；Ar ; Ar-胺基羰基；經以一個或兩個Ar取代且視需要可經以一個或 多個氟原子取代之線性或分支（C^C4)烷基、烷基胺基、吖烷 基、哼烷基、烷基羰基、烷氧基羰基或烷基胺基羰基；

Q為兩個氮原子間或一個氮原子與一個氧原子間未形成 直接鍵結且可為羰基；胺基羰基；羰基胺基；亞胺；s〇2; u 視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性或分支（c,—C 6) 烷基，其中一個亞曱基可經以〇、NRx、羰基或S〇2置換，或 其中兩個接續之亞曱基可經以羰基胺基、胺基羰基、磺醯基 胺基、胺基磺醯基置換；

Ar為視需要可經以分別選自於函原子、羥基、毓基、胺 基、氰基、硝基、胺基甲醯基、胺基磺醯基、三鹵甲基、三 鹵甲氧基、線性、分支或環狀（Cl_C4)炫基、羥基烷基、一一❹ 或二—烷基胺基、烷氧基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基羰 基胺基、π号烷基、吖烷基中之一個或多個基團取代之5至 : 10員芳香環或雜芳香環’且此等取代基中之二者可形成帶 : 有與Ar稠合接點之5至8員環；

Rx可為Η或線性、分支或環狀（Ci_C4)烷基、二鹵烷基或 三齒烧基； q可為0或1 ; 097148178 10 200930370 k可為1、2、3或4; 卜m、n、p、p’及3可分別為丨”或^ t可為0、1或2 ; l+m、n+P或p’ +s+t之和不可超過5; T及Τ’各自分別表示氫；線性、分支或環狀㈣)烧基、 伐基、你基、烯基、°丫㈣、娜基、其鏈視需要可經 以函原子、胺基、氰純基、酮基、線性、分支或環狀（C广C3) 烧基幾基、錄基縣、燒基躲絲、絲絲幾基、胺 基甲醯基、胍基、躲、销基躲、軌絲基、稀 基胺基幾基取代； Z 可為 〇、S、S〇2、S0、或 NRy，；

Ry及Ry’分別表示Η;視需要可經以一個或多個氟原子 取代之線性、分支或環狀（G-C6)烷基、烷基羰基、烷氧基羰 基或烷基胺基羰基； ⑩ y及y’分別為ο、1、2或3; Y!及Y2分別表示卣原子；羥基；胺基；氰基；硝基；輞 基，視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性或分支 • (Cl—Ce)烷基、二齒烷基、°丫烷基、噚烷基、烷基羰基、呤烷 基羰基、烷氧基羰基、烷基胺基羰基、烷基羰基胺基、烯基、 崎烯基、吖烯基、烯基羰基、哼烯基羰基、烯氧基羰基、烯 基胺基羰基、烷基胺基、毓基烷基、烷氧基、烷硫基；其中 兩個Y2基可具有螺接合或稠合接合而形成5至8員環； 097148178 11 200930370 以及排除2-[4-(4-曱基-哌讲-1-基）-苯基]-1H-苯并咪 唑；2-[4-(4-吼啶-2-基-哌畊-1-基）-苯基]-1H-苯并咪唑。 一組較佳化合物為式la化合物

該等式la化合物之一個特定具體例為其中 X為N ; R3為視需要可經以胺基曱醯基或一個或多個氟原子取代 之線性分支或環狀（Ci-Ce)燒基、》等烧基、烧基幾基、烧基石黃 醯基、哼烷基羰基、烧氧基羰基、烧基胺基羰基、崎烯基、 烯基羰基、崎烯基羰基、烯氧基羰基或烯基胺基羰基；Ar ; Ar-胺基幾基；經以一個或兩個Ar取代且視需要可經以一個 或多個氟原子取代之線性或分支（C1-C4)烧基、烧基胺基、β丫 烷基、哼烷基、烷基羰基、烷氧基羰基或烷基胺基幾基；

Q為兩個氮原子間或一個氮原子與一個氧原子間未形成 直接鍵結，且可為叛基；胺基幾基；幾基胺基；亞胺；S〇2 ; 視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性或分支（匕-Ce) 097148178 12 200930370 烷基，其中一個亞 &丄 ？基可經以0、NRx、羰基或S〇2置換，或 其中兩個接續之巧田* 飞 ^ 基可經以羰基胺基、胺基羰基、磺醯基 胺基、胺基磺醯基置換。 於式la之第二初 〜1固特定具體例中，X為CH。於本發明之一 個較佳態樣中，n % 〇及R3係選自 (Y^y ；Ϊ^

a) ❹ b) ❹ 另一個較隹具 該組化合物係、 體例係落至式la下方 用於q為1及r3為 ，後文稱作為Gi， /

(ipNRy

於Gl中’其φ n 、τ Μ為羰基；視需要經以一個或多個氣 取代之線性、分*斗也。， 氣尽于 * 支或環狀（Ci-C6)烷基、（Ci-Cs)烷基羰基或 幾基（Cl⑺燒基之該等化合物組成之較佳具體例。 &物之代表性組群之藥理活性使用後文說明 項》式&内檢&分析驗證。根據又—個態樣，因此本發明 於-種治療癌症或骨質疏鬆症之方法，包含對有需要之個體 097148178 13 200930370 較佳為人體投予有效量 ^ ^ 量之式I化合物。可使用此種方法治療 之癌症類別非限制性她 ^ i括非小細胞肺癌；小細胞肺癌；乳 癌，印巢瘤，消化谨、庙· 腦癌諸如神經管胚細胞瘤及神經膠 母、田胞瘤，攝濩腺癌；騰 賊臟癌，基底細胞癌；惡性黑色素瘤； 鱗狀細胞癌；多發性时、由.， 瘤，淋巴瘤；間葉癌諸如軟骨肉瘤、 腎臟之透明細胞肉瘤及择 留及軼紋肌肉瘤；慢性骨髓性白血病；子 宮内膜癌；肝細胞癌。 大致上幻化合物可藉該等化合物結合至Smo受體而由 刺螺因子雜之抑制細獲益之任何雜、病症或功能異 常’且非限制性包括骨質疏鬆症及選自於下列之癌症：非小 細胞肺癌；小細胞肺癌；乳癌；㈣瘤；消化道瘤；腦癌諸 如神經管胚細胞瘤及神經膠母細胞瘤；攝護腺癌；騰臟癌； 基底細胞癌；惡性黑色素瘤；鱗狀細胞癌；多發性肌瘤；淋 巴瘤；間葉癌諸如軟骨_、腎臟之透明細胞肉瘤及橫紋肌 肉瘤；慢性骨聽性白血病；子宮内膜癌；肝細胞癌。 用於治療之化合物劑量例如可依據投藥途徑、疾病之本質 及嚴重程度而改變。大致上，於人體可接受之藥理功效可以 由0. 01至200毫克/千克之每日劑量獲得。 於又另一個態樣中’本發明係關於一種醫藥組成物含有一 種或多種式I化合物結合醫藥上可接受之載劑及賦形劑。醫 藥組成物可呈固體、半固體或液體製劑劑型，較佳係呈溶液 劑、懸浮液劑、散劑、粒劑、錠劑、膠囊劑、糖漿劑、栓劑、 097148178 14 200930370 喷霧齊j或控制遞送系統等劑型。組成物可藉多種途徑投予， 包括經口、穿皮、皮下、靜脈、肌肉、直腸及鼻内投予，且 ，較佳調配為單位劑型。口服單位劑型含有約1毫克至約1000 毫克本發明化合物。 : 料呈自由鹼形叙料化合物，本發日純包括其酸加成 *鹽，較佳為與f藥上可接受之酸卿成之鹽。本發明也包括 分開的式I異構物及非對映異構物或魏合物（例如外消旋 ❹混合物）。醫藥組成物之製縣理及方法例如魏明於㈣

Publishing C_any，Easton ⑽出版之 Remingt〇n，s Pharmaceutical Science。 式I化合物、其光學異構物或非對映異構物可根據眾所周 知之程序純化及分離，該等程序非限制性包括使用對掌性其 質之層析術及分段結晶。 i 【實施方式】 ❹ 化合物合成及實驗程序 本發明化合物可使用多種合錢徑製備，包括 • 合物，藉如下方法Λ-Ζ所述之合成途徑製備。。、市售化 097148178 15

200930370 方法A

市售

步驟b

方法B

步驟b

097148178 16 200930370 方法c ❹

097148178 17

200930370 方法D、E

ο o ❹

097148178 18 200930370

方法F

097148178 19 200930370 方法i、j、κ

097148178 20 200930370方法L、Μ

方法Μ 步驟1 步驟e

097148178 21

200930370方法N

η- 1,2

方法Ν

η 1, 2

097148178 22 200930370

方法0、0A 市售

市售 步驟d

Cl

步驟f b〇q 8r

097148178 23 200930370 方法p 方法p Ο boo

市售 步驟c

097148178 24

200930370方法Q

i boc 市售

市售 boc η

HjH HjN

步驟b

n« 1t2

097148178 25 200930370 方法R、S、Τ

097148178 26 200930370 方法 U、V、W、Ab

$0舞 η* 1, 2 097148178 27 200930370

方法X

n = 1t2,3 097148178 28 200930370 材料及方法 全部反應物及溶劑皆係由市面上獲得。空氣及水分敏感性 液體溶液係透過注射器轉移。藉薄層層析術（TLC)及/或液相 層析術-質譜術（LC-MS)追蹤反應過程。 ： 全部核磁共振光譜係使用裝配有PFG ATB寬頻帶探頭之 ’ Varian Mercury Plus 400 MHz 光譜儀紀錄0 10 分鐘方法係使用 WatersXTERRAMSC183. 5 微米 2. 1x50 〇 耄米管柱，使用裝配有Waters Micromass ZQ (ES離子化） 及Waters PDA 2996之Waters 2795分離模組操作。 製備性 HPLC 係使用 Supelco Discovery HS C18 5. 0 微来 10x21. 2毫米管柱’使用具有二進制梯度模組waters 2525 幫浦且耗接至 Waters Micromass ZQ (ES)或 Waters 2487 DAD 之Waters 2767系統操作。 梯度係使用0.1%甲酸/水及〇1%甲酸/乙腈以梯度5/95 © 至95/5於所指示之操作時間操作。 、、’屯化係使用一氧化石夕凝膠卡匣Isolde fiash si執行， ' 具有純度高於95%。 • 全部TLC分析係於二氧化矽凝膠（Merck 60 F254)上執 行斑點係藉於254奈米之紫外光觀看及锰酸鉀或水和茚三 酮染色而顯示。 被波個人化學、Emrys優化器、微波反應器、吸收設定 於正常前置攪拌時間1〇秒。 097148178 29 200930370 實施例.上基卜4_^^笨基μ «#-1_基}_乙基）-二甲基-脸 2-轧-5zlir(2二甲基胺基二井_卜基卜笨甲酸乙酯 方法A-步驟a- 5-溴-2-氣笨曱酸乙酯（〇. 8〇克，3· 〇4亳 莫耳），外消旋-2,2’ -貳（二笨基膦基）_M，_聯萘 : (BIMP)(0. 19克’ 0. 30毫莫耳），參（二亞节基丙酮）二把 f (Pd2(dba)3)(0.28 克 ’ 0. 30 毫莫耳）及碳酸絶（Cs2C〇3)(139 克’ 4. 26毫莫耳）置於許朗克試管内及藉重複氮氣/減壓週❹ 期掃除30分鐘。然後加入無水曱苯（6毫升）及1(2二甲基 胺基乙基）哌讲（0.55毫升，3.65毫莫耳）。反應混合物於室 溫擾拌10分鐘’於85 C加熱隔夜及然後冷卻至室溫。溶液 以乙酸乙酯⑽毫升）_，不溶崎料經過濾去除及濾'液 以飽和食鹽水（15毫升）洗膝。有機相以硫酸納脫水，過濾 及於減壓下濃縮獲得殘餘物’殘餘物藉急速管柱層析術純化 (洗提劑梯度：EtOAc，EtOAc:MeOH/l:l, EtOAc:MeOH:NH3 〇 於MeOH (2 M)/l :1:0. 2)獲得〇. 3〇克標題化合物（3〇%)。 'H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 1.2g (3H, t), 2J2 (6H s) 2.32-,.42 (4H, m), 2.47-2.51 (4H, «), 3.Π.3.Η (4^.), 4.27 (2H,,), 7.06-7.09 (1H, m), 7.18-7.19 (1¾ m), 7.3〇.7.32 (iH, m) 2-氧-5-[4-(2二甲基jg棊-6基）-哌畊_!_基1一裟甲酸 方法A-步驟b- 2-氣-5-[4-(2二曱基胺基_乙基）_哌讲 -1-基]-苯甲酸乙酯（0.46克，1.36毫莫耳）於乙醇（6毫升） 097148178 30 200930370 及NaOH 10%(2毫升）之溶液回流加熱隔夜，然後反應混人物 冷卻至室溫及於減壓下藉蒸發濃縮有機溶劑。經由逐滴添加 1 N鹽酸中和所得溶液，然後於減壓下蒸發去除水。所得殘 餘物溶解於乙醇（10毫升），過濾去除不溶性材料及濟液於 室溫於減壓下濃縮，未經額外純化獲得〇·24克標題化合物 1 (58%)。 'H.NMR (400 MHz, DMSO): δ 2.27 (6Η, s), 2.46-2.55 (8Η m) Ο 3.04-3.06 (4¾ m), 7.76-7.79 (1Η, m), 6.92-6.93 (1¾ m), 7.07-7.09 (iH, m). N二(2-胺棊-苯基}^2-氧甲基胺篡-λ芊、一斤一寸 -1-基1-竿酿胺 方法A-步驟c-於2-氯-5-[4-(2二曱基胺基一乙基）_π底啡 -1-基]-笨曱酸（0. 40克，1· 29毫莫耳）於無水dmf (5毫升） 之溶液内添加1-(3-二甲基胺基丙基）-3-乙基曱二醢亞胺 鹽酸鹽（EDC)(0.25克，1.29毫莫耳），接著添加卜經基笨 ❹ 并三嗤水合物（l-HOBt)(0. 11克，0_ 77毫莫耳）及二甲基— 0比咬-4-基-胺（DMAP) (〇. 08克，0. 64毫莫耳）。於室溫授掉 3小時後’力σ入1，2-伸苯基二胺（0. 21克’ 1. 93毫莫耳）， ， 所得混合物於室溫攪拌隔夜。溶液於減壓下蒸發，然後以二 氯曱烷（20毫升）稀釋及以飽和碳酸鈉溶液（2Χ5毫升）洗 滌。有機層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓下蒸發。所得固體 藉急速管柱層析術純化（洗提劑：二氣曱烷：MeOH:NH3於 MeOH (2 Μ)/9:0· 5:0. 5)獲得 0. 18 克（35%)標題化合物。 097148178 31 200930370 lH-NMR (400 MHz, DMSO): 5 2.13 (6H, m)t 2.35-2,41 (4H, m), 2.48- 2.53 (4H, m), 3,14-3.18 (4H, m), 4.91 (2H, br s), 6.54-6.59 (1¾ m), 6.73-6.75 (1H, ra), 6.92-7,00 (2H, m), 7.11-7,12 (1H, m), 7.23-7.25 (1H, m), 7JI8-7.33 (1¾ m), 9.62 (1H，br s). (2-{4-[3-l 1H-笨并味峻-2-基丨-4-氣-笨基）-旅讲-1-基}-乙基）-二甲基-胺 方法A-步称d- N-(2-胺基-苯基）-2-氯-5-[4-(2二曱基 胺基-乙基）-哌讲-1-基]-苄醯胺（0.35克，0.87毫莫耳） 於乙酸（15毫升）之溶液於85°C加熱7小時，然後於減壓下 去除溶劑，殘餘物以乙醚濕磨，未經進一步純化獲得0.25 克（75%)標題化合物呈固體。 ^-NMR (400 MHz, DMSO): δ 2.12 (6Η, s), 2.33-2.42 (4Η, m), 2.49- 2.57 (4H, m), 3,16*3.19 (4H, m), 7.07 (1¾ dd), 7.18-7.23 (2H, m), 7.33 (1H, d), 7.38-7.41 7.52 (1H, d), X65-7.67 12.60 (1H, s). m/z 384 (M+H>+，停留時間=0,68, 實施例2 : 4-「3-(lH-笨并咪唑-2-基）-笨基1-哌讲-1-羧酸 第三丁酯 4-(3-叛基-笨基）-口底〇丼-1-幾酸第三丁醋 方法B-步驟b- 4-(3-乙氧基羰基-苯基）-哌讲-1-羧酸第 三丁酯（5. 00克，14. 95毫莫耳）於乙醇（50毫升）及NaOH 10% (20毫升）之溶液回流3小時，然後反應混合物冷卻至室溫 及於減壓下蒸發去除有機溶劑。經由逐滴添加1 N鹽酸中和 所得溶液及水溶液以乙酸乙酯（3x50毫升）萃取。組合有機 層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓下濃縮，未經進一步純化獲 097148178 32 200930370 得3. 90克標題化合物（85%)。 ^-NMR (400 MHZi DMSO): δ 1.40 (9Η, s), 3.15-3.18 (4Η, m) 3.47-3.49 (4H, m), 7.27-7.29 (1H, m), 7.32-7.37 (1¾ m)( 7.42-7.44 <1H, 7.54(lH,brs). ， ’ 4-「3-(2-胺基-笨基胺基曱酿基）-苯基~|-n底g井-i_雜酸第二 • 丁酯 方法B-步称c-4-(3-幾基-苯基）-π辰β井-i_幾酸第三丁醋 (5.80 克，18.05 毫莫耳）及 1,1-裁基二咪坐（cdi) (3.07 克，18. 95毫莫耳）於乙腈（120毫升）之溶液於室溫授拌3 小時，然後加入1，2-伸苯基二胺（2. 25克，20.85毫莫耳）。 所得懸浮液回流3小時，然後冷卻至室溫及於減壓下去除溶 劑。所得殘餘物以二氯甲烷（200毫升）稀釋，以水（3χ4〇毫 升）洗滌及有機層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓下蒸發。粗 產物由乙酸乙酯再結晶獲得2. 99克（40%)標題化合物。 'H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 1.40 (9Η, m), 3.15-3.17 (4H, m) ® 3.45-3,47 _，m)，4.85 (2H，br s>，6.56-6,60 (1H，坩>，6.75-6.77 (1H，m> 6.93-6.97 (1¾ in), 7.11-7.14 (2H, m% 7,30-7.34 (1H, m), 7,38-7.40 (1H, m), 7.51 (lH}brs), 9,60 (iH.brs), 」 . 4—「3一(1H—口米p坐_2_基）基 l-〇K一 1一# 酸第 ^ τ 西宫 方法B-步锁d_ 4-[3-(2-胺基-苯基胺基甲酿基）_苯基]一 旅讲-1-叛酸第三丁g旨（1.20克，3. 03毫莫耳）於乙酸（12毫 升）之溶液於55°C加熱隔夜，然後於減壓下去除溶劑。所得 固體以乙驗濕磨，未經進一步純化獲得標題化合物呈白色固 097148178 33 200930370 體（0. 90 克，79%)。 ^-NMR (400 MHz, DMSO)： δ 1.41 (9Η, m)» 3.19-3.21 (4¾ m), 3.4S-3.50 (4H, m), 7,05-7.08 (1H, m), 7,17-7.18 (2H, m), 7J5-7.40 (1H, m), 7.5 i-7_73 (4H, m), 12.80 (1H, br s). m/z 379 (M+H)+;停留時間=2.58. 會施例3 : 2-(3-旅°并-1-基-苯基）-1Η-笨并味峻二g|酸籩 2-（3~~派。井-1~~基-笨基）_1H-笨并p米嗤二鹽酸鹽 方法B-步驟e-於4-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-苯基]-哌 畊-1-羧酸第三丁酯（1.80克，4. 76毫莫耳）於甲醇（2毫升） 之溶液内，加入2 Μ鹽酸於乙喊（8毫升）及所得混合物於室 溫攪拌6小時。 然後於減壓下去除溶劑，所得鹽以乙醚濕磨獲得1. 66克 (100°/。）標題化合物呈二鹽酸鹽。 'H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 3*34-3.37 (4Η, m), 3.54-3,57 (4H, m), 7.34-7.37 (1H, ra), 7.52-7.5S (4¾ m), 7.74-7.77 (3H, m), m/x 279 (M+H)+; 停留時間 * 0.26. 實施例4 : {4-[3-(lH-苯并咪唑-2-某）-茉基i-哌p并-i-某}-Π-甲基-旅咬-4-基）-甲飼 {4-「3-(111-笨并_°坐-2-基）-茉基1-〇底1»年-1-某}_(1-甲基-〇底咬-4-基）-f嗣 方法B-步驟f-於1-曱基哌啶-4-羧酸鹽酸鹽（〇. 13克， 0.72毫莫耳）及N，N-二異丙基乙基胺（dipea)(〇.16毫升’ 0. 72毫莫耳）於乙腈（8毫升）之溶液内添加cdi (〇. 12克， 0.72毫莫耳）及所得懸浮液於室溫攪拌5小時。然後加入 097148178 34 200930370 2-(3-哌讲-1-基-苯基）-1Η-苯并咪唑二鹽酸鹽（0.20克， 0. 57毫莫耳）及所得溶液於65°C加熱隔夜。然後溶液冷卻至 室溫及移除溶劑。粗產物再溶解於二氯曱烷（15毫升）及以 攪拌添加飽和碳酸氫鈉溶液（6毫升）。然後所得沈澱經過 : 濾，以水（3毫升）及乙醚（5毫升）洗滌及於減壓下乾燥獲得 1 0. 20克（87%)標題化合物。 'H-NMR (400MHz, CD3OD): δ 1.80-1.84 (4Η, m), 2,19-2.26 (2Ht m), 2.35 (3H, s), 2,79-2.83 (IH, m), 2.99-3.02 (2H, m), 3.28-3.33 (4H, m), ® 3.78-3,79 (4H} in), 7a 10-7.15 (1H, in), 7.24-7.27 (2H, ni), 7.40-7.44 (1H, m), 735-7 59 (3H, m), 7.73-7J4 (1H, m). m/z 404 (M+H)+;停留時間=u〇. 實施例5: 2-{3-「4-(1-甲基-痕唆-4-基甲基）-痕p并-1-基 茉基卜1H-茉共咪唑甲酸鹽 2-{3-[4-(1-甲基底咬-4-基甲基）-〇底讲-1-基1-茉某卜n 笨并咪嗤 方法B-步驟g-於{4-[3-(lH-苯并咪唑-2-基）-苯基]―哌 ❹ °井_1-基}-(1-曱基-哌啶-4-基）-曱酮（〇.12克，〇.35毫莫耳） 於無水THF (4毫升）之溶液内，加入硼烷-甲基硫化物錯合 物於THF((CH3)2S.BH3) (0. 07毫升，〇· 74毫莫耳）及所得懸 浮液於60°C加熱隔夜。然後反應冷卻至室溫，於減壓下去 除溶劑，及於100°C加熱5小時前添加丨N鹽酸（3毫升）至 殘餘物。然後反應冷卻至室溫，以丨Na〇H中和及以二氯 甲烧（3x10毫升）萃取。組合有機層以硫酸納脫水，過遽及 於減壓下濃縮獲得殘餘物，殘餘物藉製備性HpLC純化，獲 097148178 35 200930370 得0. 08克（69%)標題化合物。 'H-NMR (400MHz, CD30D): δ 1.55-1.61 (2Η, m), 2.01-2.06 (3H, m), 2.63-2,81 (5H, m), 2.94-3.00 (2H, m), 3.09-3(4H, m), 3.43-3.48 (6H, m) 7.08-7.11 (1H, iri), 7.26-7.28 (2H} m), 7.38-7.42 (1Η» m), 7.57-7,63 (3H m) 7.70-7.71 (1H, m), 8.36 (3H, s). m/z 390 (M-l-H)+;停留時間=〇 21 實施例6 : 4-「3-(l-甲基-1H-苯并咪唑-2-臬V苹華卜啤今 -1-羧酸第三丁酯 4-「3-(1~~曱基-1!1-笨并味嗤-2-基）-苯基1-11版0井一1-雜酴竿 三丁酯 方法C-步称a. - 4-[3-(1Η-苯并味嗤-2-基）-苯基]_娘0井 -1-羧酸第三丁酯（0.83克’ 2.20毫莫耳）（如方法b獲得） 與NaH 60%油（0. 11克，4. 39毫莫耳）於THF (10毫升）之混 合物於室溫攪拌1小時。加入曱基碘（〇. 27毫升，4· 39毫莫 耳）及所得溶液擾拌隔夜。加水（15毫升）至反應溶液，然後 懸浮液以1 N鹽酸中和及以乙酸乙酯（3x40毫升）萃取。組 合有機層經脫水（硫酸納）、過滤及於減壓下濃縮。殘餘物以 乙醚濕磨及所得固體經過濾’獲得0.76克（88%)標題化合 物。 JH-NMR (400 〇Μ80>! S L40 (9H, m), 3J8-3.20 (4¾ m), 3.45-3.4S (4H, m), 3.85 (3H, br s), 7.14-7.15 (1H, m), 7.22-7,29 (3H, m), 7.33 (1¾ br s), 7.39-7.42 (1H, ml 7.60-7.62 (1¾ m), 7.65-7.67 (1H, m). m/2 393 (M+H>丫停留時間 =2.56. 實施例7 · 1-甲基-2-(3-派0井-1-基-装基）-iH-苯并蛛峻二 鹽酸鹽 097148178 36 200930370 1-甲基-2-(3-派讲-1-基-笨某）-111-茉并咪p坐二發舱輔 方法C-步称b-於4-[3-(1-曱基-1H-苯并咪唾-2-基）-苯 基]-哌畊-1-羧酸第三丁酯（1.30克，3. 32毫莫耳）於曱醇（4 毫升）之溶液内，加入2 Μ鹽酸於乙醚（9毫升）及所得混合 : 物於室溫攪拌6小時。 ’ 然後於減壓下去除溶劑，所得鹽以乙醚濕磨獲得丨.21克 (100%)標題化合物呈二鹽酸鹽。 ❹ lfieNMR (40〇MHz，CD3OI>): δ 3.42«3.44 (m, 4H>, 3,60463 4J3 (s, 3H), 7.41-7.4S (m, 2H)S 7.53-7.55 (m, 1H), 7.65-7.73 (m, 3H), 7,85·7_88 (m，1H), 7.97-7.99 (叫 1H)』々 293 (M+HA 停留時間= (U〇4’ 實施例.8 :環丙基-{4-「3-(卜甲某_ih-苯并咪唑-2-其茉 基1-旅°井-1-某}-甲酿| 環丙棊-{4-[3-(1·：曱基-1H-茉共P来唑-2-基）-茉某1-嘁〇弈 -1-基丨-甲酮 ❹ 方法c—步驟於環丙烷羧酸（〇. 〇6克，0. 68毫莫耳）於乙 腈（8毫升）之溶液内加入CDI <;〇. n克，〇. 68毫莫耳）及所 • 得懸浮液於室溫攪拌5小時。加入卜甲基_2_(3_派畊—1 一基 - -苯基）-1Η-苯并咪唑二鹽酸鹽2〇克，〇. 55毫莫耳）及所 得溶液於65°C加熱隔夜。然後反應冷卻至室溫，於減壓下 去除溶劑°粗產物再溶解於二氯甲烷（15毫升）及以飽和碳 酸氮納溶液（2x3亳升）洗滌。有機層以硫酸鈉脫水，過濾及 於減壓下》農縮。殘餘物藉急速層析術純化（洗提劑：環己烷： 097148178 37 200930370 乙酸乙酯’梯度由100%環己烷至100%乙酸乙酯）獲得〇. 17 克（85%)標題化合物。 ^-NMR (4〇〇 CD30D); δ 0.82-0.84 (2Η, m), 0.89-0.91 (2H, m), 1,99-2.00 (1H，m), 3.24-3*28 (2H, m), 3.29-3.35 (2H，m)，3.67-3.78 (2H， 3.85 (3H, br s), 3.89-3.95 (2H, m)> 7.16-7.22 (1H, m), 7.2S-7J5 (3¾ 7 44 ： (1H，t)f 7.51-7.53 ⑽，m), 7.66-7.68 (1H,叫衍々 361 (M+H)+;停留時間 =1.75. *' 實-遞例9: m-「4-環丙基甲基·畈啩-l-基1-苯基·bU蓋 -lij-苯并兔^甲酸鹽 ❹ 基甲某_哌0井-1—某]一茉基一甲基二 口米°坐 方法C-步称d-於環丙基-{4~[3-(1-曱基-1H-苯并咪°生 -2-基）-苯基]__α底啡_ι_基卜甲酮（〇. Η克，ο."毫莫耳）於

無水THF (3. 50毫升）之溶液内加入（Ch3)2S.冊3於THF (〇· U 毫升’ 1. 18毫莫耳）及所得懸浮液於65χ：Μ熱隔夜。然後反 應溶液冷卻至室溫，於減壓下去除溶劑，添加丨N鹽酸（3 ❹ 毫升）至殘餘物隨後於100°C加熱6小時。反應冷卻至室溫， 然後藉逐滴添加15% NaOH調整為鹼性及以乙酸乙酯（3x10 * 毫升萃取。組合有機層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓下濃縮 獲得殘餘物，殘餘物藉製備性HPLC純化，獲得0. 05克（32%) 標題化合物。 h'NMR(4〇〇MH2 CCbOD): 5 0.42-0.46 (2Η, m), 0.74-0.78 (2H, m), 097148178 38 200930370 l叫‘π (iH，叫3抓纖（2H，m)，3 47 (4H，br s) 3 (3H, s), 7,21-7.38 (5H, m), X47-7.55 (2H, n*X 7.68-7.70 (lH, m)，8.33 (2H, s). m/z 347 (M+H)+；停留時間=〇.65. ’ 實施例10 : 3二基_丨肜笔並^_2基）芏某卜 哌讲-1-羰基}-味啉-4-#酸第三丁酷 :苯并咪唑-哌畊―丨一辦 ' 基丨-咮琳-4-羧酸第三丁酯 方法D、E-步爾a-於咮琳_3, 4_二竣酸+第三丁醋（〇. 16 〇克，0.71毫莫耳）於乙腈«毫升）之溶液内加入CDI (〇. 16 克，0. 71毫莫耳）及所得懸浮液於室溫攪拌隔夜。加入卜 甲基-2-(3-料+基一苯基）_1H_苯并味唾二鹽酸鹽（〇2〇 克’0. 55毫莫耳）（如方法c所述獲得）及DIpEA (〇. 19毫升， 1. 10毫莫耳）及所得溶液於65。(：加熱隔夜。然後溶液冷卻至 室溫，去除溶劑，粗產物以二氣甲烷（15毫升）溶解及以飽 和碳酸氫鈉溶液（2x3毫升）洗滌。有機層以硫酸鈉脫水，過 β 遽及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析術純化（洗提劑：梯 度由環己烷至環己烷：乙酸乙酯2:1)獲得〇. u克（4〇%)標 : 題化合物。 'H-NMR (400 MHz, CD3QD); δ L44 (9Η, br s), 3.30-3.89 (16H, br m), 4.02-4.18 (2H, m), 7.20-7.26 (2H, m), 7.30-7.37 (3H, m), 7.47 (1H, t), 7.55-7.57 (1H, m)，7.67·7‘68 (1H} m), 506 (M+H)+;停留時間=2.24.

實施例11 :丨4-「3-(l-甲某-1H-笨并咪唑-2-篡装基LA 讲-l-基}-味嚇-基-甲酮鹽酸鹽 097148178 39 200930370 U-[3_-(l-T基-1H-苯并_咪嗤-2-基)二哌啫一卜其^叶 啉-3-基-甲酮 方法D-步驟b- 3-{4-[3-(1-甲基-1Η-苯并咪唑-2-基）_ 苯基]-痕讲-1-戴基}-咮琳-4-幾酸第三丁酯（〇. π克，〇 % 毫莫耳）於2 Μ鹽酸於乙醚（3毫升）之溶液於室溫擾拌隔夜。 沈澱經過濾，以乙醚洗滌及固體溶解於水（15毫升）及以 二氯甲烷（2x3毫升）洗滌。然後有機層以硫酸鈉脫水，過濾 及於減壓下濃縮，獲得0· 09克（79%)標題化合物。 JH-NMR (400 MHz, CD30D): δ 2.81 (2H> d), 3 12-3.25 (7Η, m) 3.54-3.65 (4H, m), 3.72 (3R br s), 3.77-3.89 (2H, m), 7.04-7.10 (2H, m)! 7J6-7.24 (3H, m), 7.32 (1H, t), 7.38-7.40 (1H, d), 7.56*7.58 (1H, d). ^ 4〇6 (M十H)+;停留時間 =0.52. 實施性.12 : {4-「3-(l-甲基-1H-苯并唑唓-2-某）一笨其~|一命 〇并-1_基}-(4-V基-g束淋-3-基）-甲銅 {4-[3-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-某V苇基μ哌呼-】一 基卜（4-甲某-呔啉-3-某甲酮 方法D-步称c-於{4_[3-(1-曱基-1Η-苯并味。坐-2-基）一 苯基]-派畊-l-基}-咪琳-3-基-曱酮（〇. 〇8克，〇. 20毫莫耳） 及三乙醯氧基硼氩化鈉（NaB(0Ac)3H) (〇. 17克，0.79毫莫 耳）於二氯曱院（2毫升）之懸浮液内’加入曱酸 37% (0.64 毫升，7. 90毫莫耳）。反應混合物於室溫攪拌隔夜，以飽和 碳酸鈉溶液（3毫升）淬熄然後以二氣甲烷（4x2毫升）萃取。 組合有機層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓下濃縮，獲得黃色 097148178 40 200930370 油（0. 08 克，97%)。 ^-NMR (MHz, CD30D): δ 2.24 (3Η, s), 2.33-2.39 (1H, m), 2.78-2,82 (1H, mX 3.25-3,28 (2H, ra), 3.30-3.32 (2H, m)s 3.34-3J? (1H, m), 3.47-3.52 (1¾ m), 3.62-3.68 (1H, ra), 3.76-3.85 (4Ht m), 3.87 (3H, s), 3.94-3.96 ¢2¾ m), 7.18-7,24 (2H, m), 7.28-7.36 (3H, m), 7.44-7.4S (1H, m), 7.53-7.55 : (IH, m), 7.66-7.69 (1¾ m). rnz 420 (M+H)+;停留時間=L12. ^ 實施例13 : 1-甲某-2-{3-「4-(4-甲基-味啉-3-基甲基）-哌 蟒-1-基1-笨基卜1H-策#咪唑甲酸鹽 卜甲基-2-{3-U-M-甲基-咮啉-3-基甲基）-哌4-1-基1-苯 ❹ 基卜1H-笨并哚吔 方法D-步驟d-於{4-[3-(1-曱基-1H-苯并咪唑-2-基）-苯 基]-哌讲-1-基}-(4-甲基-咮啉-3-基）-曱酮（0. 06克，0. 16 毫莫耳）於無水THF (2毫升）之溶液内，於室溫之氮氣氣體 下加入氫化鋰鋁（LiAlH4)(0. 02克，0. 47毫莫耳）。反應回 流加熱2小時及又加入LiA1H4 (0. 01克，0. 24毫莫耳）。 _ 30分鐘後溶液冷卻至室溫，以10% NaOH (3毫升）淬熄及然 . 後以二氯甲烷（3x3毫升）萃取。組合有機層以硫酸鈉脫水， 過濾及於減壓下濃縮。然後粗產物藉製備性HPLC純化獲得 气 0. 03克（41%)標題化合物。 ^-NMR (MHz, CD30D); δ 2.49-2.54 (1Η, m), 2.66-2.77 (4¾ m)5 2.88-2.94 (IH, m), 2.96 (3¾ s), 3.09-3.16 (1H, s), 3.57-3.63 (LH, m% 3.29-3.43 (6H, m), 3.78-3.S6 (IH, m), 3,88 (3HS S), 3.92-3.97 (1H, m), 4.01-4.05 (IH, m), 7.16-7.18 {2H, m), 7.31-7.39 <3H, m)* 7.38-7,46 (IH, m), 7,55-7.58 (1H，m)，7.67-7.70 (1¾ m), 8.28 (2H, s). /w/z 406 (M+Hf;停留時 間=0,92· 097148178 41 200930370 管施例14 : 3-{4-[3-(l-甲基-1H-茉#哞喊一9-某）-笨基1-旅"并-1-基甲基咮琳—4-羧酸第三丁酯甲雄癱 3-丨4-「3-(1-曱基-1H-苯并咪唑-2~某v等其]_哌0并-卜基甲 基卜呔啉-4-羧酸第三丁酯 方法E-步驟e-於3-{4-[3-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基）-苯基]-哌讲-卜羰基}-咪啉-4-羧酸第三丁酯（〇. 21 克，0. 42毫莫耳）於無水THF (3毫升）之溶液内，於室溫之 氮氣氣體下加入氫化鋰鋁（LiAlH4)(0.〇5克，1.27毫莫耳）。 反應回流加熱2小時。然後溶液冷卻至室溫，以Η% NaOH 淬熄，然後以二氣甲烷（3x10毫升）萃取。組合有機層以硫 酸鈉脫水，過濾及於減壓下濃縮。然後粗產物藉製備性HpLC 純化獲得0. 09克（43%)標題化合物。 _MR (40_ C_>: δ L48 佩 $) 3 〇2 3.39-3.46 (6H, m), 3.55^3.59 (1¾ m), 3.76-3.90 (6H, m)> 4.ί5^ 35 α„ , 7.20-7 24 (2H, m)，7.64-7,41 (3H，m)，7.45-7.49 tn、τ (，叫， v ^ 7.58-7.60 (IH in) 7,69-7.71 (1H, m). m/z 492 (MW；停留時間您 j 45 1 * h 實施例151_1-.甲基2-LM4-卜基）_ 茉某ΜΗ-苯并咪唑

并13米嗤 方法Ε-步称f-於3-{4-[3-(1-曱基_1Η一笨并咪嗤-2_ 基）-苯基]-哌讲-1-基曱基卜咪琳-4-羧酸第三丁 g旨（〇 〇7 克，0.15毫莫耳）於二氣甲烷（1毫升）之溶液内加入\ m鹽 097148178 42 200930370 酸於乙醚（3毫升）及所得溶液於室溫擾拌7小時。 所得沈澱經過濾出，以乙醚洗滌然後藉製備性HPLC純 化。洗提分以碳酸鉀鹼化以防最終曱醯化及然後於減壓下去 除溶劑。然後粗產物以二氣甲烷（15毫升）回收及有機層以 ’ 水（3x4毫升）洗務，以硫酸納脫水，過濾及於減壓下濃縮， '· 獲得0. 02克（37%)標題化合物。 ^-NMR (400MHz, DMSO): δ 2.11-2.24 (2Η, m), 2-48-2.58 (3Η, m)， φ 2 71-2,76 (2H, m), 2.83-2J9 (1H, m), 2.98-3,06 (1H, m), 3.19-3.24 (4H, m), 3.28-3.38 (2H, m), 3,62-3.71 (2H, (3H, s), 7.08-7.12 (1H, m), 7j7-7.30 (4H, m)，7.33·7,40 (1H, m), 7.58-7,67 (2H，m). w/z 392 (M+H)+; 停留時間 =0,77, 實礁例16 : 笨#崠崦-2-基）-苯基1-哌蟒i 基}-2-網基-乙基）-胺基甲酸笫三丁酷 (2-{4-[3-(1Η-苯并咪嗤：1^基）_笨基^哌啡-丨―基卜2-% -乙基）-胺基甲醴箆三丁 ^ ❹ 方法F_步驟a—於N_(第三-丁氧羰基）-甘胺酸（〇. 13克， 0. 74毫莫耳）於乙腈（8毫升）之溶液内加入CDi (〇. 12克， 0.68毫莫耳）及所得懸浮液於室溫攪拌隔夜。然後加入 2-(3-哌啡-1-基-苯基）-1H—苯并咪唑二鹽酸鹽（〇 2〇克， 0. 57毫莫耳）（如方法B所述獲得）&DIpEA (〇. 2〇毫升，丨.i4 毫莫耳）及所得溶液於65ΐ搜摔隔夜。然後反應冷卻至室 溫’移除溶劑，粗產物以二氯甲烧（15毫升）回收及以餘和 碳酸氫鈉溶液（2x3毫升）洗；^。有機層以硫酸納&水，過據 097148178 43 200930370 及於減壓下濃縮。殘餘物藉急迷#術純化（洗提劑：環己 烧：乙酸乙醋/2:1)獲得(M4克⑽)標題化合物。 'H-NMR (400 MHz, CD30D): δ 14#ς ^ ^ (¾ S), 3.29-3.36 (4Η, m), 3.69-3.71 (2Η» m), 3.67-3.80 (2H, m), 4>〇(i 7.24-7.27 (2H, m), 7.42 (1H, t), 7.56-7.62 (3H H* s)* 713-716 (1H’ m)， (M傅；停留時間=2瓜 ，叫7助4(m,啦祕 實施例Π: 2-H-[3-.ClH-·^^^基）一装某卜祕+ 基}-乙基胺 心(_4-[3-(料并_^^^4^井—卜某卜乙美脸 方法F-步称b:於（2-{4-[3〜（1H—苯并㈣_2_基）苯 基]ϋ-卜基卜2-喊-乙基）〜胺基f酸第三12 克，0.28¾莫耳）於無水THF(3.5〇毫升）之溶液内加入 (CH3)2S.BH3於 THF (0. 06 毫升， •69亳莫耳），所得懸浮液 於65〇C加熱隔夜。然後反應冷郜至室溫，於減壓下去除溶 劑及添加1 N鹽酸（3毫升）至殘餘物隨後於1〇〇它加熱6 時。反應冷卻至室溫，然後藉逐滴添加15%氫氧化鈉調整為 鹼性，所得白色固體經過濾及以水及乙醚洗滌，獲得〇.〇6 克（73%)樣題化合物。 lH-NMR (400 MHz* CD30D): δ 2.60.2.70 (6Hl m), 2.98-3.01 (2Η> m) 3.30-3 J4 (6H, m), 7,10 (lHt d\ 7.24-7.26 (2H, m), 7.39 (1H, t), 7.52 (iH dy 7.53-7.60 (2H, m), 7.73 (1H, br s). m/z 322 (M+H)+；停留時間 β 0 22 ’ ’ m 097148178 44 200930370 8-「3_〇H-苯并口米口坐_2-基）_4_氣-笨基1_1, 4_二口等_8_口丫-虫累 「4.51癸烷 始於1,4-二哼-8-吖螺[4. 5]癸烷鹽酸鹽，使用如方法A 所使用之相同程序。 : 獲得1. 25克標題化合物（77%，最末步驟）。 ^-NMR (400MHz, DMSO): δ 1.70 (4Η, br s)s 3.31-3.34 (4H, m), 3,90 (4H4 br s), 7.09-7.12 (1H, m% 7,19-7.21 (2H, m), 7.37-7.40 (2H,m), 7,60 (2H，brs>， 〇 l-「3-( 1H-笨并咪唑-2-基）-4-氣-笨基1-哌啶-4-酮 方法G、H_步驟a-於8-[3_(1 H-苯弁p米β坐_2_基）_4 -氯-苯基]-1,4-二崎-8-吖-螺[4. 5]癸烷（2. 00克，5. 42毫莫耳） 於水（50毫升）之懸浮液内逐滴加入硫酸（2. 50毫升），所得 溶液於室溫攪拌72小時。以碳酸鈉中和溶液，所得油當靜 置於水中時固化。沈澱物經過濾及乾燥獲得1.60克（90%) ^ 標題化合物。 •H-NMR (400MHz, DMSO): δ 2.43 (4Η, t), 3.68 (4Η, t), 7.22-7,25 (1HS m), 7.33-7.36 (2H, m), 7.46-7.50 (2H, m), 7.69-7.7Ϊ (2H, m). 實施例18 : 1-[3~·(1Η-苯并喃嗤-2-基）~~4-氣-笨基]-旅唆 : -4-醇 1-「3_(1H-笨并口米口坐-2-基）_4-氯-笨基1-口辰口定-4-醇 方法G-步驟b-於1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-4-氯-苯 基]-哌啶-4-酮（0.05克，0.17毫莫耳）於甲醇（50毫升）之 懸浮液内加入硼氳化鈉（NaBIW (0· 01克，0. 17毫莫耳）， 097148178 45 200930370 所得混合物於室溫攪拌1小時及然後以數滴水淬熄。於減壓 下去除溶劑，粗產物溶解於乙酸乙酯（5毫升）及過濾，然後 有機相於減壓下蒸發獲得〇.〇2克（36%)標題化合物。 lH-NMR (400MHz, DMSO): δ L43-1.45 (2Ht m), 1.78-1.80 (2H, m), 2.89-2.94 (2H, m), 3,56-3.64 (3H, m), 4,68 (1H, d), 7,06-7.08 (1H, m), 7.18-7.21 (2H, m), 7.33-7.40 (2H, m), 7.52 (1¾ d), 7.66 (1H, d), 12.59 (1H, s). m/z 328 (M+H)+;停留時間=1.55 實施例,.„19 : 2-[5-(4-吖咩-1-基-哌啶-1-基）-2-氩一笔 基1-1H-茉并咪唑 2-[5-(4-吖呼-」二基-哌啶-1-基氣-笨基1—1H_^#唑气 方法H-步驟c-於l-[3-(lH-笨并咪唑-2-基）-4-氣-笨 基]-哌啶-4-酮（0. 10克，0. 31毫莫耳）於二氯甲烷（2毫升） 之懸浮液内加入吖4(0.05毫升，0.46毫莫耳）。於室溫攪 拌30分鐘後加入1滴乙酸，1小時後又加入1份吖畔（〇. 〇5 毫升，0. 46毫莫耳）’接著加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (NaB(0Ac)3H) (〇. 1〇克，0.46毫莫耳）。反應混合物於室溫 撲拌隔伐·，然後於減壓下去除溶劑，粗產物溶解於二氯甲院 (10毫升）。於該溶液内加入PS-異氰酸酯樹脂（PS-NC0) (Argonaut，載荷量0.93毫莫耳/克），然後混合物於室溫振 搖隔夜及過濾。於減壓下移除溶劑獲得固體殘餘物，以乙酸 乙酯及乙醚洗滌然後乾燥獲得期望產物（〇. 〇7克，58%)。 097148178 46 200930370 ^H-NMR (400 MHz, DMSO): δ U5.t50 (9H, m), 1.74 (2H, d), 2.61-2.74 (6H, m)s 3.31 (2H, s), 3.78 (2H, d)s 7.06-7,08 (1¾ m) 720-7 22 (2HS m), 7.33.7.38 (2H, m), 7.52 (IH, 7.66 〇Η, d), 12.60 (lH,s). 409 (M+H)、停留時間 =1.32. 實_趣_例 20 : 1-(4-{4-[3-(1 二二l甲基一ih_笑葬_地_9_年、_ 苯基]-旅讲-1-叛基}-「1, 4]二〇Yp半一其）_乙輞 '· 2-(3-溴-茉基）-1Η-茉并咪唑 方法I、J、K-步驟a-鄰-伸苯基二胺（81 8克，756 6 ❹毫莫耳）及草酸（3.4〇克，37.8毫莫耳）完全溶解於先前於 80C溫熱之乙醇/水1:1 (2升）。然後逐滴添加3_溴苄醛 (44. 1毫升，378. 3毫莫耳）至該溶液。反應混合物於7〇。〇 撥拌隔仪至開放大氣埠口一日。固體經過滤出及以甲醇（15〇 毫升）濕磨獲得產物呈淺黃色固體（27 5〇克）。由母液回收 3. 8克產物。總產率31. 30克（30%)。 ^^NMR (400 MHZ DMSO): δ 7.24 (2Η, m), 7.54 (2Η, m) 7 7〇 ❹（m，2H)，U (1H，的，8.37 (1H，t)，Ι3·2 (1H s) ^ _h) ’ 間 *= 8·60. 2-(3->臭-笨基）-1-二氟曱基H-笨舁球吨 方法I、J、K-步驟b-於高壓鍋内放置2-(3-溴-苯基）_1Η一 本并米10坐（14. 10克’51· 6毫莫耳），50%氫氧化鈉水溶液（8. 3 毫升’ 154.8毫莫耳）’ TEBAC(0. 58克’ 2.5毫莫耳）及thf (120毫升）。混合物於室溫擾拌2小時’然後通入氯二氣甲 烧至起始物料之轉化完成（2巴’約3小時）。混合物以dcm 097148178 47 200930370 (00毫升）稀釋有機相經傾析及以硫酸納脫水。於減壓下 蒸發去除溶劑獲得深紅色油’油於二氧化石夕versaflash(1 克產物/30克—氧切）上藉急速層析術純化（洗提劑：環己 烧：乙酸乙醋梯度由環己烧95:乙酸乙酯5至環己烧7:乙 酸乙酯3)獲得14. 30克標題化合物（86%)。 'H-NMR (400 Mlfe DMS〇): δ 7.45(2H, m), 7.59〇^ ? ?5(1^ ^ 加讽邮7,9戰咕8卿以.心323(_>+;停留時間=臟 ^(4-(4—基-111-苯^^1^-2-某 V装某 1-痕口并 二1-羰基卜「1. 41二吖唓-1-篡）-λ獅 方法J-步驟c-於2-(3-溴-笨基）-ΐ-二氟曱基-m—苯并 咪°坐（0.10克，0.31毫莫耳），碳酸铯（o h克，0.43毫莫 耳），外消旋-2,2，貳（二苯基膦基卜丨，！，-聯萘（BINAp) (0.007克，0.01毫莫耳）及參—（二亞苄基丙酮）_二鈀（〇) (0.004克）置於7毫升密封瓶内，藉重複氮氣/真空週期掃 除10分鐘。加入無水曱苯（0.6毫升）及N-乙醯基高哌畊 (0· 05毫升’ 〇. 37毫莫耳）及反應混合物於85°c以攪拌加熱 24小時。 反應冷卻至室溫及經SCX卡匣（2克）過濾（洗提劑：DCM/ 曱醇1:1)。有機層於減壓下濃縮及藉製備性HPLC純化獲得 58毫克標題化合物（48%)。 *H-NMR (400 MHz, CD3〇D)r δ 1.95-2.08 (5Η, m), 3.48-3.55 (2Η, m), 3.65-3.77 (4H, m), 3,80-3*84 (2H, m), 6,93-6.95 (1HS m), 7.04-7J1 (2H, m), 7,41-7.67(41^111)^73-7.82(21^11^111/238^^+11)+:停留時間 3.30· 097148178 48 200930370 實施例氟甲某^-(3-旅4-1-基-茉基）-1Η-茉#哺 唑鹽酸鹽 4-[3-(1：：_51^王盖-{}-苯并咪唑-2-基）-苯基1-哌<4-1-羧醢 第三-丁酯 • 方法K_步驟d-於2-(3-溴-苯基）-1-二氟甲基-1H-苯并 、 °米峻（1. 00克，3. 10毫莫耳）’哌畊-1-羧酸第三丁酯（〇 75 克’ 4· 02毫莫耳）及碳酸鉋（5. 〇4克’ 15. 48毫莫耳）置於無 ❹ 水250毫升圓底瓶内及藉重複氮氣/真空週期掃除3〇分鐘， 加入無水曱苯（50毫升）。同時將乙酸鈀（139毫克，0. 62毫 莫耳）’及外消旋-2,2’貳（二苯基膦基）-1，1’-聯萘（81心？) (0.58克，0.30毫莫耳）置於無水100毫升圓底瓶内及藉重 複氮氣/真空週期掃除30分鐘。 加入無水曱苯（50毫升），此懸浮液攪拌1〇分鐘隨後添加 至第一圓底瓶。反應混合物於氮氣下回流隔夜及冷卻至室 ❹ 溫。混合物經過濾及不溶性物質以乙酸乙酯（3x20毫升）洗 滌。有機溶液於減壓下濃縮及粗產物藉急速層析術純化（洗 •提劑：環己炫：乙酸乙酯梯度由10⑽環己烧至環己烧5.乙 酸乙酯1)獲得1. 10克標題化合物（83%)。 ^-NMR (400 MHz, DMSO): δ ΙΛϊ (9Η, s), 3.19-3.22 (4Η, m), 3.46-3.48 (4Η, m), 7.08-7.10 (1H, m), 7.20-7.23 (2H, m), 7.37-T46 (3H, m), 7.71-7.80 (3¾ m). m/z 429 停留時間：=4,53. 097148178 49 200930370

_1 二氟曱基~2-(3-哌畊-1-基-苹基）一' 方法K-步驟e-於4-[3_(1-二氟曱基 本并咪嗅-2- 基）-苯基]-哌讲-1-羧酸第三-丁酯（1. 10克， 4 57毫莫耳） 於DCM (2毫升）之溶液内加入2 M鹽酸於 、 ^ ^噼（11毫升）， 所得懸浮液於室溫攪拌隔夜。沈澱經過濾及 ^ Λ 所得鹽以乙喊 (3x20毫升）濕磨獲得1. 〇2克（1〇〇%)標題化合 *τ37 轉酸鹽。 ^-NMR (400 MHz, DMSO): δ 3.21 (4Η, bs), 3 47 孤 7,11-7.20 (1H, m), 7.25-7.30 (2H, m), 7,41-7.5! (3H, M), 7 f ^ ^ 9.35(2H,bS).m/Z329(M+H)+;停留時間=】77 *°2 (3R m>* .實座例 22: 基）芏 基]-旅0丼-1-基}-2-甲甚-丙-i~脑

基}-2-甲基-丙-1-綱 方法K-步驟f- CDI (〇.〇5克，0.32毫莫耳）添加至異丁 酸（〇. 029克，0. 32毫莫耳）於乙腈（2. 50毫升）之溶液。所 得溶液於室溫擾拌5小時。 加入1-二氟曱基-2-(3-哌畊-1-基-苯基）_1H_苯并咪唑 (〇.1〇克，0.27亳莫耳）及n，N-二異丙基乙基胺（DIPEA) (0.05亳升，0.27毫莫耳）及反應於65°C加熱隔夜。反應冷 卻至室溫，去除溶劑及加入DCM(3毫升）。有機溶液以水（2 x2毫升）洗滌及以飽和碳酸鈉溶液（2X2毫升）洗滌。有機層 於減壓下濃縮及粗產物藉急速層析術純化（洗提劑：環己 097148178 50 200930370 烷：乙酸乙酯梯度由100%環己烷至環己烷3 :乙酸乙自旨^ 獲得0. 067克標題化合物（61%)。 '，七峰1 J；) 3.21·3,29 (4H, m)，3.64-3.75 (4H，7*04-7.07 (2H, m)，7.ΐ〇.7·41 (5H 7β70-7,73 (iH，〇!)，7*77-7.名 1 (1H，m)* m/z 399 (M+H),;停留時間广 3 你

某1-哌4-1-羰基卜哌啶-1-羧酸第三丁酯 氟甲基-1Η-苯并咪唑-2- lH-NMR (400 MHz, CDCI3): δ 1.09 (6HS d), 2.77 (m 實施例23 : 4-4-(4-「3-Π-二

鞴某丨-呱啶-1-羧酸第三丁酯 方法K-步琢g-於CDI (0· 053克，0. 32毫莫耳）添加至 哌啶-1，4-二羧酸一-第三丁酯（0.074克，0.32毫莫耳）於乙 腈（2. 50毫升）之溶液。所得溶液於室溫攪拌5小時。 加入1-二氟甲基_2-(3-旅〇井-1-基-苯基）-iH-苯并味唾 (0.10克，0.27毫莫耳）及Ν,Ν-二異丙基乙基胺（dipea) (0. 05毫升’ 〇. 27毫莫耳）及反應於65°C加熱隔夜。反應冷 卻至室溫，去除溶劑及加入DCM (3毫升）。有機溶液以水（2 x2毫升）洗蘇及以飽和碳酸納溶液（2x2毫升）洗滌。有機層 於減壓下濃縮及粗產物藉急速層析術純化（洗提劑：環己 烷：乙酸乙酯梯度由仙⑽環己烷至環己烷3 :乙酸乙酯1) 獲得0. 067克標題化合物（70%)。 097148178 51 200930370 Ή-NMR (400 MHz, CDC13): δ 1.39 (9H, s), 1.60-1.74 (4H, m), 2.57-2.77 (3H, m)t 3.21-3.26 (4H, m), 3.64-3.74 (4H, ra), 4.10 (2HS m), 7.04-7.07 (2H, m\ 7,11-7,41 (5H, m), 7.71-7.73 (1H, m), 7.78-7.82 (IH, m). m/z 540 (M+H)+;停留時間=4.25. 實施例24 :彳4-「3-(1-二氟甲基-1H-笨并咮唑-2-基）-笨 基~|一旅n并-1-基丨-旅唆-4-基-甲嗣 {4-「3-(1-二氟甲基-1H-笨并咪唑-2-基）-笨基]-哌畊-1-基}-派咬-4-基-甲嗣 方法K-步驟h_於4-{4-[3-(1-二氟曱基_1H-苯弁喃°坐 -2-基）-苯基]_α辰α井_1_幾基}_π底咬_1_幾酸第三丁醋（0.075 克，0. 14毫莫耳）於DCM (0. 5毫升）之溶液内，加入2 Μ鹽 酸於乙醚（2. 5毫升），所得懸浮液於室溫攪拌6小時。沈澱 物經過濾及以乙醚（3x20毫升）濕磨。固體藉製備性HPLC純 化。HPLC洗提分以碳酸鉀中和及濃縮。加入DCM (5毫升） 及水（5毫升），有機相經分離及濃縮獲得44毫克標題化合 物（72%)。 ^-NMR (400 MHz, CDC13): δ 1,82-2.15 (4Η, m), 2.72-2.86 (1H, m), 3.09-3.34 (6H, m), 3.48-3.64 (2H, m), 3.63-3.83 (4H, m), 7.09-7.15 (2H,mX 7.29-7.30 (2H, m), 7.37-7.47 (3H，ra), 7,75-7.78 (1H, m)，7·81·7,85 (1H，m). m/z 440 (M+H)+;停留時間尸 2,03, 實施例25 : l^~「3-（l~·二氟甲基~^lH-苯并味唆-2-基）-笨基~|-哌啶-4-羧酸乙酯 Μ3-Π-二氟曱基-1H-笨并咪唑-2-基）-笨基1-哌啶-4-羧 酸乙酯 097148178 52 200930370 产 ^於 以曰同稃序’> 方法I-步驟i-遵照方法K步驟d所述相 着康率。 哌啶_4-羧酸乙酯而替代哌啶-1-羧酸第彡丁 0曰 ^ m) 1 、，77彳87(20， ^-NMR (400 MHz, CD3OD)： δ 1.26 (3ft ^ 1 2 (2ft flj)» 4.12-4J7 (2H, q)? 7.09-7.11 (1H, m), 7.24-7.26 (1¾ 7.41-7.81 (6H, m), m/z 400 (M+H)+;停留時間；=4.25· 實施例26 : U-「3-(l-二氟甲某-ΙΐΤ- 2.01-2,05 (2H, m), 2.50-2.57 (1H, m), 2.88-2.94 (2¾ «»)* ^ ^ ^ m), -基旅咬-4-基}-(4-甲基-旅p并-1-某）-見姐

1-「3-Π-二氟曱基-1H-茉#唑崦 097148178 53 1 方法I-步驟1-氫氧化鈉粉末（〇. 24克，3· 4 5 6 7毫莫耳）添 加至1-[3-(1-二氟甲基-1H-苯并咪唑-2-基）—苯基]-娘咬 -4-羧酸乙酯（1. 20克，3. 01毫莫耳）於乙醇：水3:1之溶液’ 反應於80°C加熱隔夜。反應冷卻至室溫，於減壓下藉蒸發 濃縮有機溶劑。所得溶液藉逐滴添加6 N鹽酸中和。淡褐色 ❹ 沈澱物沈澱出，經過濾出及乾燥獲得〇.80克標題化合物 (72%)。 2 H-NMR (400 MHz, CD3〇D); δ 1.83-1,93 (2Η, m), 2.06-2.11 (2Η, m), 3 方法I-步驟m-HATU (0. 11克，〇. 30毫莫耳）及二異丙基 4 2.52-2.59 (IH, ffl), 3.14-3.17 (2H, m), 3.71-3.76 (2H, m), 7.33-7J5 (ΪΗ, m)} 5 7‘40-7‘42(2H，m)，7‘44-7.78(6H，m>，m/Z372(M+H)+;停留時間=3.25. 6 {l-「3-(1-二氟甲基-1H-茉#咪唑-2-基）-笨基1-派唆-4- 7 基丨-(4-甲基-0底°井-1~~基）-甲嗣 200930370 乙基胺（DIPEA) (0.09毫升，0.54毫莫耳）添加至^^(卜 二氟曱基-1H-苯并咪唑-2-基）-苯基]-哌啶〜4-羧酸（〇1〇 克’ 0. 27毫莫耳）於二氯曱烷於室溫之懸浮液。反應於％ C擾掉隔夜。反應冷卻至至溫及以飽和碳酸鈉溶液（2χ4毫 升）及以水（1x3毫升）洗滌。有機層於減壓下濃縮及粗產物 藉急速層析術純化（洗提劑：環己烷：乙酸乙酿梯度由環己 燒1.乙酸乙酯1至1 〇〇%乙酸乙醋及最終使用乙酸乙醋：2. 〇 N歲於曱醇5. 1)獲得0.025克標題化合物（2〇%)。 ^ 'H-NMR (400 MHz, C0.OD): δ 1.79-L88 (4¾ m)> 231 (3H s) 2.39-2.48 (4H, m), 2.80-2.92 (3H, m), 3.60-3.68 (4H, m), 3.85^3 88 (2H m) 7.08-7.10 (IH, m), 7.20-7.25 (1H, m), 7.28-7.29 (1H, m), 7.4〇.7.8I (6¾ ml m/z 454 (M+H)+;停留時間=2,00. 宜雖例27 :丄4-[4-氟-3-(1-甲基-1H-苯并，吒_2_基）一笨 基]-旅0弁-1-基1-n比洛唆-1-基-甲醜 K2-胺基-表基）一5_溴-2-氟-辛酿脸 方法L·、步驟a- 5-溴-2-氟-苯曱酸（4. 96克，22. 6毫 ❹ 莫耳），笨-1,2-二胺（4. 90克，45.3毫莫耳），1-(3一二曱基 胺基丙基）-3-乙基甲二醯亞胺鹽酸鹽（Edc) (5.?!克，27.2 毫莫耳），1-羥基苯并三唑水合物（1—H0Bt) (3 67克，27.2 毫莫耳）及二曱基-吡啶一4-基一胺（DMAp) (〇 〇3克，〇. 2毫莫 耳）置於100毫升圓底瓶。加入無水_⑽毫升）及反應於 室溫獅隔夜。於減麗下去除溶劑，然後粗產物以廳（15 毫升）及0.4 Μ碳酸納溶液（15毫升）稀釋。形成白色沈殿經 097148178 54 200930370 過濾出及再度以DCM (10毫升）洗滌及乾燥，獲得4. 96克標 題化合物。收集溶液，有機相由水相分離及於減壓下濃縮： 形成額外沈澱，經過濾出，以DCM (3毫升）洗滌獲得額外 〇. 68克期望化合物^總產率81%。 •H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 4.84-5.14 (2Η, m), 6.54-6.59 (1Η, m), 6.73-6.76 (1HT m), 6.93-6.97 (1H, m), 7.21-7.24 (IH, m)5 X31-7.35 (IH, m), 7.72-7.76 (1H，m), 9.62-9.64 (1¾ m). m/z 308/310 (M+H)+;停留時間=1.87. 2-(5-溴-2-氟-茉篡V〗H-苯并咪唑 方法L、Μ-步驟b- Ν-(2-胺基-苯基）-5-溴-2-氟-苄醯胺 (5.64克，18. 3毫莫耳）於乙酸（20毫升）之懸浮液於60°C加 熱。30分鐘後，懸浮液變成溶液，任其放置隔夜。於減壓 下去除溶劑，殘餘物以DCM (10毫升）濕磨及過濾出。沈澱 以DCM (3x10毫升）洗滌及乾燥獲得4. 76克標題化合物 (89%)。 ^-NMR (400 MHz, DMSO): δ 7,24-7.27 (2Η, m), 7.43-7.48 (1¾ m)t 7,63-7.66 (2H, m), 7.72-7.76 ¢1¾ m), 8.33-S.35 (1¾ m). m/z 290/292 (M+H广;停留時間；=丨ϋ 2-(5-溴-2-氟-笨某VI-甲基-1Η-苯#咪唑 方法L-步驟c-氫化鈉60%於礦油之懸浮液（0. 61克，25. 5 毫莫耳）添加至2-(5-溴-2-氟-苯基）-1Η-苯并咪唑（3. 70 克，12. 76毫莫耳）於無水THF (100毫升）之溶液，反應於 室溫攪拌30分鐘，隨後加入甲基碘（1. 19毫升，19. 1毫莫 耳）。讓反應攪拌2小時，然後以水（20毫升）淬熄。溶液經 097148178 55 200930370 濃縮然後加入乙酸乙酯（30毫升）。有機溶液經分離，以食 鹽水（10毫升）洗滌，以硫酸鈉脫水及於減壓下濃縮，獲得 3. 80克（97%)期望化合物。 'H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 3.76 (3Η, s), 7.31-7.42 (3H, m), 7.59-7.61 (IH, m), 7.70-7.72 (1¾ m), 7.78-7.82 (1H, m), 7.85-7.S7 Qh, m) m/z 304/306 (M+H)"；停留時間 »ss 1,80, {4-[4-氟-3-(1-甲基-1H-苯并p米嗤-2-基V苯其] 基}-p比洛咬-1-基-甲嗣 方法L-步驟d-遵照方法J步驟c所述相同程序但始於 2-(5-溴-2-氟-苯基）-1-甲基-111-笨并_〇坐及派。井_1_基_0比 咯啶-1-基-曱酮。反應混合物粗產物藉製備性HpLC純化獲 得0. 06克標題化合物（44%)。 丨腦MR _ MHa C_D): S成_1別袖，叫3 2〇 3力（4H，蚪 3.40-3.42 (4H, m% 3,44*3.47 (4H, m), 3.77-3.78 (3Hf m), 7.20-7 22 (IH, m), 7,24-7.26 (2H, m), 7.31-7.40 (2H, m), 7.57-7.59 (1H, m), 7.69.7.71 (1H, m). m/z 408 (M+H)+;停留時間=2.32. 實施例28 : 4-『4-氟-3-(1-甲某-1H-!并味也_2_基）_笨 基1-呱蟒-1-羧酸第三-丁黾 4-[4-|1-3-(1-甲基-111-苯开口米咏-2-其）-笨某1_娘11并一1_觀 酸第三-丁酯 方法L-步称e- 2-(5->臭-2-說-苯基）_ι一曱基_ih_苯并味 〇坐（2. 10克，6.9毫莫耳）’0底啡-1-竣酸第三—丁醋（1.16克， 8. 3毫莫耳）’碳酸鉋（3. 14克’9. 6毫莫耳），外消旋_2, 2，- 097148178 56 200930370 貳（二苯基膦基）-1，Γ -聯萘（BINAP)CO, 17克，0.28毫莫荨） 及參-(二亞苄基丙酮）二鈀（〇)(〇· 〇6克，0. 〇7毫莫耳）置於 徐朗克試管内及藉重複氮氣/真空週期掃除1〇分鐘^加入無 水甲苯（13毫升）及反應於85°C攪拌24小時。反應冷卻至室 •溫，以乙酸乙酯（20毫升）稀釋及以水（1〇亳升）洗滌。有機 v 層以硫酸鈉脫水及於減壓下濃縮。反應混合物粗產物藉急速 層析術純化（洗提劑：環己烷：乙酸乙酯梯度由1〇〇%環己烷 ❹至環己烷2:乙酸乙酯1)獲得1. 14克起始物料及〇. 7〇克標 題化合物（54%)。 s), 3.14-3.1? (4¾ m), J，7.56-7.58 (1 a m)， 1.90. *H-NMR (400 MHz, CD3〇D): δ 1.47 (9H, 3.57-3.59 (4H, m), 7.20-7.26 (3H, m), 7,30-7.39 (2H, 7-6S-7.71 (1H，m)· m/z 411 (M+H)、停留時間 《 玉 宜施例29 : 2-二曱基胺基-l-{4-[4-氣(i_甲基一in一装并 味唾-2-养>)-笨基1-痕”并-1-基}-乙酮 ❹ 氤-5-°底°井基-茉基）-1-甲基茉共味嗤 方法L-步驟f-於4_[4-氟-3-(1-甲基一；[H-苯并咪唾一2一 基）-苯基]-派讲-1-叛酸第三-丁醋（〇.如克，1.71毫莫耳） 於DCM (2.0宅升）之溶液内加入2.0 Μ鹽酸於乙謎（1〇毫 升）’所得懸浮液於室溫攪拌隔夜。沈澱經過濾出及以乙醚 (3x15毫升）濕磨獲得標題化合物（定量產率）。 •H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 3.22-3.25 (4Η, m), 3.44-3.47 (4Η, m), 3 94 (3Η, s), 7.43-7.53 (3H, m), 7.60-7.67 (2H, m)> 7.g7-7.89 (1H, m), 8.01-8.03 (1H, m), 9.42 (2H, m). m/z 311 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 097148178 57 200930370 2-二甲基胺基-l-{4-[4-氣笨并味嗤-2-基）-笨基1-旅。并-1~~基}-乙嗣 方法L-步騨g-方法L-步驟h所使用之相同程序。 'H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 2.30 (6Η, S)} 3 18.3 25 (6H m) 3.74-3.78 (7H, m), 7.21-7.28 (3H, m), 7.31-7.40 (2H, m)j 7.57.7 59 (1H> m) 7.69-7.71 (1H, m). m/z 396 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 ’ 實施例 30 : (S)-2-{4-[4-氟-3·~(1~~ 甲義二jjj-笨并味峻_?__ 基）-苯基]-旅4-1-擬基丨-g比洛咬-1-叛睃―差三丁 _旨 (S)-2-{4二[4-氟-3-Π-甲篡-1H-笨并咪唑~~2-基）-装某1-哌 ❹ 啡-1-羰基}-吡略啶羧酸篦三丁酯 方法L-步驟h_ CDI (〇.〇5克，0.31毫莫耳）添加至 N-Boc-L-脯胺酸（〇. 〇7克，〇. 31毫莫耳）於乙腈（2. 5〇毫升） 之溶液。所得溶液於室溫搜拌6小時。 2-(2-氟-5-哌讲-丨-基-苯基戶卜甲基_1H-苯并咪唑（〇. 1() 克，0. 26毫莫耳）及n，N-二異丙基乙基胺（dipea) (〇. 〇9毫 升，0. 52毫莫耳）添加至其中及反應於阳^加熱隔夜。反應❹ 冷卻至室溫，於減壓下去除溶劑，加入DCM(3毫升八有機 溶液以水（2x2毫升）洗滌及以飽和碳酸鈉溶液（2χ2毫升）洗 滌。有機層於減壓下濃縮及粗產物藉急速層析術純化（洗提 劑：環己烧：乙酸乙醋梯度由環己烷2 :乙酸乙酿1至100% 乙酸乙酯）獲得〇· 067克標題化合物（51%)。 097148178 58 200930370 ^-NMR (400 MHz, CD3〇D): δ 1.40-L45 (9H, m), 1.S2-1.97 (3H m); (4H, m), 3.42-3.57 (2H, m), 3.69-3.85 (7¾ 2.23-2.36 (1H, m)s 3.15-3.29 4.72-4.77 (1H, ra), 7.22-7.29 (3H, in), 7.31-7.40 (2H, m), 7.57-7 59 (ifj 7.69-7.71 (1H, m). m/z508 (M+H)+;停留時間=2.63, ’ 會施例31 : {4-[4-氟-3-(1-曱基-1H-苯并啤峻一其、一y 基1-旅〇井-1-基}-(8)-〇比略咬-2-基-甲_轉醉输 {4-「4-氟二3-(1-甲基-1H-苯并咪唑-g-基）-苯其卜呼1 q 基丨-(S)~~p比洛咬-2~基-甲酮 ❹ 方法L-步称i-於（S)-2-{4-[4-氟-3-(1-甲基苯并 σ米唾-2-基）-苯基]-派讲-l-幾_基}-°比洛唆_1_叛酸第r 丁西t (0. 05克’ 0. 10毫莫耳）於DCM (0. 5毫升）之溶液内加入2 M 鹽酸於乙醚（2. 0毫升）’所得懸浮液於室溫攪拌隔夜。反應 於減壓下濃縮及然後加水（4. 0毫升）’混合物再度濃縮獲得 0. 04克標題化合物呈鹽酸鹽（86%)。 'H-NMR (400 MH2； CD3〇D): δ 1.85-2.04 (4Η> m), 2.42-2.51 (IHm) 〇 3.60-3.81 (4H, m), 3.98-3.99 (3H, m), 3.23-3.36 (5H, m), 4.60-4.69 (1H, m)! 7.32-7.44 (3H, m), 7.62-7,68 (2H, m),7.77-7.80 (1H, m), 7.89-7.93 (1H, m)' m/z 408 (M+H)+;;停留時間=分裂峰。 實施例32:卜苯并味唑-2-基“-申-节早卜直 °并-1-基}-2-二甲基胺某-λ脑 2_(5_溴-2-氟.：：苯基）-苯林咪唑-1-羧酸第三_丁雖 方法Μ-步驟1- NaH 60%於礦油分散液（0.70克，π. 34 毫莫耳）於氣下於室溫添加至2-(5-漠-2-IL-苯基）-lH-苯 并咪唑（3.87克’ 13. 3毫莫耳）於無水THF (140毫升）之溶 097148178 59 200930370 液。10分鐘後，加入二碳酸二-第三-丁酯（ο. 30克，13. 3 毫莫耳）於無水THF (50毫升）之溶液及任其反應30小時。 加水（40毫升）及反應於減壓下濃縮。添加乙酸乙酯（30亳升） 及有機層經分離。水層以乙酸乙酯（2x10毫升）洗滌。有機 層經收集’以硫酸鈉脫水及於減壓下濃縮。反應混合物粗產

物藉急速層析術純化（洗提劑：環己烷：乙酸乙酯梯度由 100%環己燒至環己烧10 :乙酸乙酯1)獲得4. 7克標題化合 物（90%)。 ^-NMR (400 MHz, CD,OD): δ 1.44 (9Η, s), 7.23-7.27 (1Η, m), 7.41-7.50 C2H, m), 7.73-7.77 (2H, m), 7.84-7.86 (1H, m)j 8.10-8.12 (lHt m). m/z 392 (M+H)+；停留時間：=2.88. 第幾基-哌呼-丄-基）-2_氣_茉某μ皇并 口米嗤-1-幾酸第三-丁酷 方法Μ步称m 2-(5-漠-2-氟-苯基）-苯并σ米π坐-1—缓酸第 三-丁酯（2. 52克，6.5毫莫耳），哌啡—羧酸第三_丁酯

(1. 56克，8· 40毫莫耳）及碳酸錄（ίο. 5〇克，32. 2〇毫莫耳） 置於無水500毫升圓底瓶内於氮氣下及加入無水甲 毫朴同時’乙酸_,29克，L3〇毫莫耳）及蠢ρ(ι·2〇 克’ 1· 93毫莫耳）置於無水25〇毫升圓底瓶内於氣氣下及加 =無水曱苯⑽毫升）。1G分鐘後，含則Αρ及乙酸把之懸 浮液添加至_毫升圓輪内。反應混合物於85Ϊ於氮下 加熱隔夜及冷卻至室溫。混合祕過濾，不雜材料以乙酸 097148178 60 200930370 乙酯（3x20毫升）洗滌。有機溶液於減壓下濃縮，粗產物藉 急速層析術純化（洗提劑：環己烷：乙酸乙酯梯度由100%環 己烷至環己烷4:乙酸乙酯1)獲得2. 48克標題化合物（76%)。 •H-NMR (400 MHz, DMSO)： δ 1.36 (9Η, s), 3.0S-3.10 (4Η, m), 3.43-3,46 (4H, m), 7.12-7.18 (1H, m), 7.20-7.25 (2H, m\ 7.38-7.47 (2H, m), 7,76-7.78 7.97-7.99 497(M+H)+;停留時間=2.93. 2-(2-氟-5-旅《#-1-基-笨基）-1 H-装并p来p坐 方法Μ-步驟η-於2-[5-(4-第三-丁氧基羰基-哌畊-1-基）-2-氟-苯基]-苯并咪唑-1-羧酸第三-丁酯（0.45克， 0. 91亳莫耳）於DCM (1.0毫升）之溶液内加入2 Μ鹽酸於乙 趟（8.0毫升）及所得懸浮液於室溫攪拌隔夜。又加入2 μ鹽 酸於乙醚（5.0毫升）及讓反應攪拌24小時。沈澱物經過遽 出及以乙醚（3x15毫升）濕磨’獲得0.21克標題化合物 (55%)。 ^-NMR (400 MHz, DMSO): δ 3.26 (4Η, bs), 3.49-3.51 (4Η m) 7.36>7.40 ( JH, m), 7.45-7.53 (3H, m), 7.80-7.84 (2¾ m)> 7.91-7.93 (lHj m) 9.28 (2H, bs). m/z 297 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 ’ ’

二曱基胺基-乙嗣 方法M-步驟〇- CDI (0. 052克，〇. 32毫莫耳）添加至N，卜 二甲基甘胺酸（0.033克，0.32毫莫耳）於乙腈（2·5〇毫升） 之溶液。所得溶液於室溫攪拌5小時。然後加入2_(2_氟_5_ 哌讲-1-基-苯基）-1Η-苯并咪唑（〇. 1〇克，〇 27毫莫耳）及 097148178 61 200930370 N，N-二異丙基乙基胺（DIPEA) (0. 11毫升，〇. 6毫莫耳）及反 應於65°C加熱隔夜。反應冷卻至室溫及於減壓下去除溶 劑。DCM (2毫升）添加至粗產物，有機溶液以水（2X4毫升） 洗滌及以飽和碳酸鈉溶液（2x4毫升）洗滌及濃縮。反應混合 物粗產物藉急速層析術純化（洗提劑：MeOH : AcOEt梯度由 100% AcOEt 至 MeOH 0. 6 : AcOEt 4)獲得 〇· 049 克標題化合 物（43%)。 'H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 2.33 (6Η, s), 3.22-3.29 (4¾ m), 3.29 (2H, s), 3.77-3.79 (4H, m), 7.16-7.24 (2H, m), 7,26-7.31 (2H, m), 7.59-7.70 (2H, bp)，7,75-7.77 (1H, ra). m/z 382 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 苯# 咪唑-2-基）-4 -金-苹 11-硌 0井-l-基}-旅啶-4-基-甲嗣 彡」4 [3-( 1H-笨并p来g坐-2-基）-4-氟-笨基1 -娘p并-1 -幾基}一 0底咬-1~幾酸第二-丁瞄 方法M-步驟p-CDI (0.047克，0.29毫莫耳）添加至哌啶 -1’4-二羧酸一_第三—丁酯（0.07克，〇·29毫莫耳）於乙腈 (2. 50毫升）之溶液。所得溶液於室溫攪拌5小時。然後加 入2-(2~氟-5-派β井-1-基-苯基）-ΐΗ-苯并味η坐（〇. 克， 0.27毫莫耳）及DIPEA (〇. 05毫升，〇26毫莫耳）及反應於 65°C加熱隔夜。反應冷卻至室溫及於減壓下去除溶劑。DCM (2毫升）添加至粗產物’有機溶液以水（2X4毫升）洗滌及以 飽和碳酸鈉溶液（2x4毫升）洗滌及濃縮。反應混合物粗產物 097148178 62 200930370 藉急速層析術純化（洗提劑：環己烷：乙酸乙酯梯度由100°/〇 環己烷至100%乙酸乙酯）獲得0. 08克標題化合物（60%)。 !H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 1.45 (9Η, s), 1.55-1.66 (2H, m), 1.72-1.76 (2H, m), 2.82-3.00 (3H, m), 3.21-3.31 (4H, m), 3.77-3.83 (4H, m), 4.07-4.17 (2H, m), 7.17-7.24 (2H, m), 7.26-7.31 (2H, m), 7.55-.7.72 (2H, m), 7.75-7.78 (lH，m). ' 4-{4-「3-(lH-笨并咪唑-2-基）-4-氟-笨基卜哌畊-1-基卜哌 啶-4-基-甲酮 ❹ 方法M-步驟q-於4-{4-[3-( 1H-苯并味π坐-2-基）_4-氟-苯基]_旅讲_1_幾基}-旅°定-1-缓酸第三-丁醋（0.08克’ 0. 16毫莫耳）於DCM (1毫升）之溶液内加入2 Μ鹽酸於乙醚 (3. 0毫升）及所得懸浮液於室溫攪拌3曰。反應於減壓下濃 縮，加水（8毫升）及溶液於減壓下濃縮。固體藉製備性HPLC 純化。HPLC洗提分以碳酸鉀中和及濃縮。加入DCM (5毫升） 及水（5毫升），有機相經分離及濃縮獲得44毫克標題化合 ❹物（72%)。 ^-NMR (400 MHz, €D3OD): δ 1.70-L80 (4Η, m), 2.73-2.80 (2Η, m), 2.91-2.98 (1H, m), 3.13-3.17 (2H, m), 3.20-3.28 (4H, m), 7.15-7.32 (2H, m), 7.26-7.31 (2H, m), 7.62-7.65 (2H, m), 7.75-7.77 (1H, m). m/z 408 (M+H)+; _ 停留時間=分裂峰。 實施例34 : 2-乙氧基-N-{l-C3-(l-甲基-1H-笨并咪唑-2-基）-笨基1-旅咬-4-基}-乙酿胺 2-(3-溴笨基）-1Η-笨并咪唑 方法N-步驟a-鄰-伸苯基二胺（81.8克，756.6毫莫耳） 097148178 63 200930370 及草酸（3.4克’ 37.8毫莫耳）完全溶解於先前溫熱於㈣ 之乙醇-水/1:1 (2升）。然後逐滴添加3_漠节搭（44. 1〇毫 升’ 378· 30毫莫耳）至溶液。反應混合物於於大氣下授 拌隔夜。當日後固體經過濾出及以甲醇（15Q毫升）濕磨，獲 得產物呈淡黃色固體（27.50克）。由母液回收3 8克。總產 率 31. 30 克（30%)。 也NMR (彻随z DMSO): s 7.24 (2H，叫，7 54 (2H，m)，7 7〇 (取 2H), 8.19 即，叫，8,37 (1H，t)，13,2 (1H，s)此 273 (M+H)+ 停留時 間=8.60· 2-(3-溴-笨基Μ-甲基-1Η-茉舁哚 方法Ν-步驟b- 2-(3-溴苯基）-1Η-笨并咪唾（7 8克，28. 6 毫莫耳）完全溶解於無水THF (300毫升），然後分成數份添 加NaH 60% m/m (1. 49克’ 37. 2毫莫耳）至該澄清黃色溶液。 淺褐色懸浮液於室溫攪拌1小時’然後逐滴加入曱基雄（2. 5 毫升’ 40. 0毫莫耳）。反應混合物於室溫攪拌隔夜。反應以 水（300毫升）淬熄及以乙酸乙酯（2x450毫升）萃取。有機萃 取物以硫酸納脫水，過濾及蒸發’獲得標題化合物呈褐黃色 固體（7.4 克，70%)。 lH-NMR (400 MHz DMSO)：8 3.90 (3Η, s), 7>3〇 (2Hj m)> ? 55 (m 〇 7.64 (1H, d), 7.70 (1H, d), 7.77 (1H, m), 7.88 (1H, m)> g.05 (1H, m). »i/2=287[M+H]+，停留時間=7.70 {1-[3-(1.-里基-1H-苯并咪唑-2-棊）苯基1—唤啶_4_基卜胺 基甲酸第三-丁酯 097148178 64 200930370 方法N步称e於氬氣氣體下經乾燥的四頸圓底瓶内，放 置BINAP (5. 85克，q a赛苗甘、 、 9. 4 毫莫耳）及 Pd(0Ac)2 (1. 41 克，6. 3 毫莫耳）。混合物於氬氣回流下攪拌1{)分鐘然後加入· 、毫升無水曱苯。同時於另—個於氬氣氣體下乾燥之四頸圓底 瓶内，放置先前溶解於30〇«升無水甲苯之2-(3-演-苯 基）+甲基-1H-苯并_嗤（9· 〇克，31. 3毫莫耳），4_n_b〇c_ 胺基料（8. 18克’ 4G· 7毫莫耳）及碳祕⑽· 99克，156. 5 ©毫莫耳）。混合物攪拌約1Q分鐘然後第_燒瓶内容物加入第 二燒瓶内。反應於回流溫度攪拌隔夜。冷卻至室溫後，懸浮 液於有石夕薄土襯塾之古屈氏_上過滤。澄清溶液於減壓下 蒸發’殘餘物藉MTBE濕磨獲得7.1克（55%)純產物呈灰白色 固體。 ^-NMROJMSO)； U9(s, 9H); 1.49(^ 2H); L82(m, 2H); 2.83(roi 2H); 3.44(bs, 1H), 3.75(m} 2H); 3.87(s, 3H); 6.86(d, JH); 7.11-7.67(m, 8H). m/z=407[M+Hn 停留時間 4 02 ❹ 曱基-1H-苯并咪唑-2-基）-茉基1-哌啶-4-基}胺鹽 酸鹽 方法N-步驟d-於{1-[3-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基）-苯基]-哌啶-4-基卜胺基甲酸第三-丁酯（2. 00克，4. 93毫莫 耳）於二氯甲烷（2毫升）及曱醇（1毫升）之混合物内，加入2 Μ鹽酸於乙醚（25毫升）及所得混合物於室溫攪拌隔夜。 過濾出固體，於減壓下乾燥及再度溶解於水（50毫升）及 以二氯甲烷（3x10毫升）洗滌。於減壓下去除水獲得1.48克 097148178 65 200930370 (89%)標題化合物呈鹽酸鹽。 •H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 1.67-1.77 (2H) m), 2Λ1.2 〇4 (2^ ^ 2.95- 3,00 (2Η，m)，3· 19·3,26 (1Η，m), 3,89195 畑，m), 4〇5 (3H s> 7.36.7.44 (2Η, m), 7.55-7.68 (4H, m)> 7.86-7.89 (1H, ^ g 〇? {1^ m)； 8.41 (3H, bs). «n/z*=307 [M+Hf;停留時間=0. π 2-乙氧基-N-{l-「3-(l-甲基-1H_笨并口电逢-2—某）一赛其~|_口於 啶-4-基卜乙醯胺 方法N-步驟e-於乙氧基乙酸（0. 05毫升，〇· 49毫莫耳） 於乙猜（3毫升）之溶液内加入CDI作為備用溶液（〇.8Q克， 0.49毫莫耳）及所得懸浮液於室溫攪拌3小時。加入 1-[3-(1-曱基-1H-苯并咪也-2-基）-苯基]-旅咬_4-基胺鹽 酸鹽（0. 13克，0.41毫莫耳）及DIPEA (〇.〇7毫升，0.41毫 莫耳）’所得溶液於70°C加熱隔夜。然後反應冷卻至室溫， 於減壓下去除溶劑。粗產物再溶解於二氯甲烧（4毫升）及以 飽和碳酸鈉溶液（2毫升）及水（2毫升）洗滌。有機層以硫酸 鈉脫水，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析術純化（洗 提劑：二氯曱烷：甲醇，梯度由100%二氯曱烷至95%二氣曱 烷：5%曱醇）獲得〇. 70克標題化合物（44%)。 ^-NMR (400 MHz, CDCls): δ L17 (3HS t), L51-1.61 (2H, m), 1.96- 2.00 (2H, in), 2.89-2.95 (2H* m), 3.50 (2H, q), 3.67-3.71 (2H, m), 3.81 (3H, s), 3.86 (2H, s), 3.91-4,01 (1H, m), δ.44-6.46 (1H, m), 6.99-7.01 (1H, m)s 7,05-7,07 (1¾ m)t 7.23-7.35 (5H, m), 7.77-7.80 (1H, m). ιη72=393 [M+Hf;停留時間 =1.67 實施例35 : 4-氣-1’ 甲基-1H-笨并味峻-2-基）-笨 097148178 66 200930370 基]-[1，4’ ]聯娘唆 2-(3-溴苯基）-1-甲基-1H-1并#嗤

方法0、0a-步驟a- 2-(3〜溴苯基）-iH-苯并咪唑（如方法 N步驟a所述）（7. 8克，28· 6毫莫耳）完全溶解於無水THF (300毫升）’然後分成數份添加NaH 60% m/m (1. 49克，37. 2 '毫莫耳）至澄清黃色溶液。淺褐色懸浮液於室溫攪拌丨小 時’然後逐滴加入曱基峨（2· 5毫升，40. 0毫莫耳）^反應混 ❹合物於室溫攪拌隔夜。反應以水（300毫升）淬熄，及以乙酸 乙酯（2x450毫升）萃取。有機萃取物以硫酸鎂脫水，過濾及 蒸發，獲得7. 4克標題化合物呈褐黃色固體（7〇%)。 !H-NMR (400 MHz DMSO):6 3.90 (3H, $), 7,30 (2H, m), 7.55 (1H, t), 7.64 (1H, d), 7.70 (1H, d), 7.77 (1H, m), 7.88 (1H* mX 8,05 (lHt m). m/z 287 (M+H)+;停留時間这7.70. 8~~[3-(l -曱基-1H-笨开口米嗤-2-基）-苯基 1~1，4-二p罢-8-口丫- ©螺「4, 51癸烷 方法0、0a-步驟b-於裝配有磁力攪拌器且於氬氣氣體下 乾燥之四頸圓底瓶内，放置BINAP (3.7克，5.9毫莫耳， 0.3當量）及Pd(0Ac)2 (0.9克，3. 9毫莫耳，0.2當量）且置 於氬氣回流下15分鐘。同時，於襞配有磁力攪拌器、回流 冷凝器且於氬氣氣體下乾燥之四頸圓底瓶内，2-(3-演苯 基）-1-曱基-1H-苯并咪唑（5. 6克，19. 5毫莫耳，1當量）溶 解於無水曱苯（300毫升）’然後1，4-二*等-8-。丫螺[4. 5]癸烧 097148178 67 200930370 (3. 3毫升，25. 4毫莫耳，1. 3當量），碳酸铯（31. 8克，97. 5 毫莫耳，5當量）及催化劑懸浮液添加至該溶液。反應混合 物於回流溫度授掉隔仪，精LC-MS檢查轉換率。讓懸浮液冷 卻至室溫然後於帶有矽藻土襯墊之古屈氏坩堝上過滤。蒸發 去除溶劑獲得16. 0克紅褐色油，油於二氧化石夕versafiash (1克產物/30克二氧化石夕）上藉由Cy:MTBE=85:15至 Cy:MTBE= 15:85洗提，以自動急速層析術純化，獲得2. 3克 純質產物呈黃色油（34%)。 lH-NMR (400 MHz DMSO):S 1.70-1.73 (4H, m), 3.34-3.37 (4H, m), 3.84 (3H, s), 3.90 (4H, m), 7.11-7,39 (6H, m), 7.57-7.58 /1¾ m)t 7.64-7.65 (IH, ml m/z 350 (M+H)+;停留時間 *6.73. 甲基-1H-笨并「d]味嗤-2-基）装基~|n欣哈-4_酮 方法0、0a-步称c- 8-[3-(l-曱基-lH-苯并p米tr坐-2-基）- 苯基]-l，4-二哼-8-吖-螺[4,5]癸烷（2·30克，6.60毫莫耳） 溶解於120毫升THF。溶液以氣化鈉-冰浴於〇。〇冷卻，然後 加入6 Μ鹽酸（18毫升，108毫莫耳）。藉HPLC/MS監視反應 之進行’於室溫攪拌至轉化完成。溶液於減壓下濃縮，然後 以氫氧化納2 Μ (80毫升）中和及最終以乙酸乙酯（3x150毫 升）萃取。有機萃取物共同匯集’以硫酸鎂脫水，過濾及蒸 發獲得2克澄清產物呈淺黃色固體（92%)。 !Η-ΝΜΕ (400 MHz DMSO):5 2*46(4H, t), 3.70(4¾ t), 3.88(3H, s), 7*20-76 (8HS m)· m/z 306 (M+H)、停留時間丨=5·9(Κ L(5-溴-2-氣裳某V1H_笨并咪唑 097148178 68 200930370 方法0、0a-步称d 於裝配有磁力攪拌器之一頸圓底瓶内放置5-溴~2-氯苯 甲酸（70.0克，297.3毫莫耳），鄰-伸苯基二胺（64.3克， 594. 6毫莫耳）及甲磺酸（140毫升）及加熱至17(TC俾便溶解 " 固體。系統於此溫度攪拌5小時然後任其達到室溫。藍色固 ' 體以氫氧化鈉35% (200毫升）處理，獲得紫色懸浮液（pH 5)，經過濾及以氫氧化鈉〇. 5 Μ (2升）及水（2升）洗務。產 ❹ 物於減壓下乾燥（60°C) ’獲得61. 6克純質紫色固體（67%)。 m/z 307/309 (M+H)+;停留時間=8. 73。 2-（5 -漠-2 -氯未基H-苯共味〇坐-1-魏酸第二_丁醋 方法0、Oa-步驟e-於裝配有磁力攪拌器之三頸圓底瓶 内，2-(5-廣-2-氯苯基苯并咪嗤（30. 7克，99. 8毫莫 耳）懸浮於THF (1升）。然後加入50%氫氧化鈉（72 〇克，598 毫莫耳）。懸浮液於室溫於攪拌下放置i小時。（b〇c)2〇(37 {) ❹克，169. 7毫莫耳）溶解於THF (200毫升）及添加至反應混 σ物反應攪拌隔夜。於減壓下蒸發去除溶劑。所得殘餘物 以水（5〇〇毫升）稀釋，過渡及於減壓下乾燥（60。〇獲得39.8 克褐色固體（98%)。 m/z 407/409 (Μ+Η)+;停留時間= ι〇. 14。 螺[41 勞Μ)—茉某卜芏并 咪唑-1-羧酸第三-丁 方法0 Oa步称f於裝配有磁力授拌器且於氮氣氣體下 097148178 69 200930370 乾燥之四·底瓶内，放置BINAp(13 8克， 及Pd(0Ac)2 (3 3杳，u 7荟苗甘、 ·毫莫耳） (3.3克，14.7毫莫耳)且於氩氣下回流15分 里。°、於裝配有磁城拌器、回流冷凝Μ於氬氣氣體下 乾餘之四頸圓底瓶内，2_(5令2_氯苯基Μη_苯并味唾—卜 叛酸第旨⑽·Q克，73 6毫莫耳）溶解於無水甲苯（】 升）’然後1，4-二十8-丫-螺[4, 5]癸烧（12. 3毫升，95.7 毫莫耳）’碳酸鎚（119. 9克’ 368. 0毫莫耳）及催化劑懸浮液 添加至該溶液。反應混合物於80°C攪拌30小時，藉LC-MS ❹ 檢查轉換率。讓懸浮液冷卻至室溫然後於帶有矽藻土襯墊之 古屈氏坩堝上過濾。蒸發去除溶劑獲得64. 5克褐色油，其 未經進一步純化即用於次一步驟。 m/z 471/473 (M+H)+;停留時間=9.70。

IdLUjJb苯并「dl咪唑-2-基V4-氯笨基1哌啶-4-酮 方法0、〇a-步驟g-於裝配有磁力攪拌器之四頸圓底瓶 内 ’ 2一[2-氯-5-(1，4-二嘮-8_吖-螺[4,5]癸-8-基）-苯基]- 〇 苯并咪唑-1-羧酸第三-丁酯（59. 5克，93. 9毫莫耳，丨當量） 溶解於THF (250毫升），然後加入4 Μ鹽酸（1.2升，4695 亳莫耳）。系統於室溫攪拌隔夜。褐色懸浮液經過濾，以冷 水（500毫升）洗滌固體，此固體為得自前一步驟之催化劑。 母液於減壓下濃縮來沈澱其它固體，固體經過濾出。酸性水 相（1.7升）以冰-氯化鈉浴冷卻至〇。〇及然後以4 Μ氫氧化鈉 (1. 8升）調整為鹼性。固體經過濾，以水（600毫升）洗滌及 097148178 70 200930370 於減壓下乾燥（60。〇獲得純質22.8克產物呈淺灰色固體 (75%)。 'H-NMR (400 MHz DMSO):6 2.45 (4H, t\ 3.70(4¾ t), 7.17-7.64 (7H, m>，12.85( 1H，bs). m/z 426M28 停留時間6.97. , ϋ-Γ -f3-(l-甲基-1H-笨并咪唑-2-某V笑篡1-「1，4’ 1 聯g底咬

V 方法0-步驟h-三乙醯氧基硼氫化鈉（0.10克，0.49毫莫 耳）添加至1-[3-(1Η-苯并[d]咪唑-2-基）-4-氣苯基]哌啶 〇 -4-酮（0. 1克，〇· 33毫莫耳）及4-氟哌啶鹽酸鹽（〇. 07克， 〇· 49毫莫耳）於二氯乙烷（2. 50毫升）之混合物。反應於室溫 放置18小時。反應以DCM (4毫升）稀釋，及以碳酸鈉飽和 溶液（4毫升）洗滌。有機層經濃縮及粗產物經SCX卡匣（2 克）過濾（洗提劑：首先為10毫升DCM:MeOH 1:1然後為1〇 毫升2. 0 N氨於曱醇溶液）。氨溶液經濃縮及粗產物藉急速 ^ 層析術純化（洗提劑：乙酸乙酯2. 0 N氨於甲醇溶液，梯度 由100%乙酸乙酯至乙酸乙酯10 : 2. 0 N氨於甲醇溶液1)獲 > 得0. 06克標題化合物（48%)。 JH-NMR (400 MHz, CD3OD): δ 1.67-1.73 (2Η, m), L86-2.06 (6Η, m), 2,61-2,71 (3HS m), 2.77-2,89 (4H, m), 3.89-3.93 (5H, ra), 4.61-4.77 (1H, m), 7.17-7.19 (2H, m), 7,28-7.37, (3H, m), 7.41-7.45 (1H, m), 7.54-7.56 (1HS m), 7.66-7.68 (IH，n〇. m/2 393 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 實施例36 : Γ 甲基-1H-笨并咪唑-2-基）-裟 基Ml.4’ 1聯哌啶 097148178 71 200930370 聯痕 方法0a-步驟i- 1-[3-(1-曱基-1Η 一苯并[d]咪唑_2_基） 笨基]n底啶-4-酮（0.06克，〇·2毫莫耳）及哌咬（〇.〇34克， 0 4毫莫耳）與二乙基胺（27微升，〇. 2毫莫耳）及分子篩（〇. 5 克）於甲醇（5毫升）加熱至4(TC 16小時。加入氰基硼氫化鈉 (0.025克，0.4毫莫耳）及氣化鋅（〇 Q27克，〇·2毫莫耳）， 反應又加熱16小時’反雜合物經蒸發，殘餘物分溶於】n 氫氧化鈉（2毫升）及二氯曱烷（4毫升）。古換 有機層經分離，蒎 發及藉製備性HPLC純化。 … •H-NMR (400 MHz, CD3〇D): δ 1.56 (1Η, bs) 2-20-2.23 (2H, m)9 2.89-2,94 (2H, m), 3.04 (2H, bs)t 3 ^1'84'1*98 (7Η» (2H，bS)，3‘94 (3H，S>，4.024.05 (2H，m>，7,23-72^3 43 (1H,m)，3 56 (3^111),7.47-7.51(111,111),7.64-7.66(1^01),7.71.7^3 ^ ^ 7*37'7·45 m/z 375 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 ’叫· 實施例 37 : 2-「3-(3-氣 _4-”東吸 ^ 基]-卜甲某-1H-笨并咪唑 二丞）主 氧基i.匕氧- 方法卜步驟a-氯三甲基魏（1.52毫升，12 〇5毫莫曰耳） 及無水三乙基胺（3. 42毫升，24.6毫箪:cv* 芜旲耳）添加至4-酮基哌 啶-1-羧酸第三-丁酯（2. 0克’10. 〇4臺莖甘、 宅旲耳）於無水DMF (20 毫升）之經擾拌之溶液内。反應於墙扯 復件16小時，然後 至室溫及以正己飢20毫升）_ι機溶液以冷碳酸 097148178 72 200930370 氫鈉飽和溶液（60毫升）洗滌，以硫酸鈉脫水及於減壓下濃 縮，獲得2. 56克標題化合物（94%)。 ^-NMR <400 MHz, DMSO): δ 0,00 (9Η, s), 1.23 (9Η, s), 1,83-1.87 (2H, m), 3.24-3,27 (2H, m), 3.60-3.61 (2H, m), 4.63 (1H, bs). m/z 272 (M+H)4;停留時間=2.78, 3-氟-4-酮基-哌啶-1-羧酸第三-丁酯 方法 P-步驟 b- Selectfluor (5.52 克，15. 59 毫莫耳） 於室溫於氮氣下添加至4-三曱基矽烷氧基-3, 6-二氫-2H-吡啶-1-羧酸第三-丁酯（3. 84克，14. 17毫莫耳）於無水乙腈 (150毫升）之經攪拌之溶液。75分鐘後反應以乙酸乙酯（500 毫升）稀釋及以氯化鈉稀溶液（300毫升）然後以鹽水（300毫 升）洗滌。有機層以硫酸鈉脫水及於減壓下濃縮。反應混合 物粗產物經中性礬土藉急速層析術純化（洗提劑：環己烷： Ac0Et:Me0H梯度由環己烷：AcOEt 1:1至環己烷：AcOEt 1:2 至100%八(；(^1:及最終八(；(^1;:1^01195:5)獲得2.12克標題 化合物。 3-氟-4-咮琳-4-農-哌啶-1-羧酸第三-丁酷 方法卜步驟c-咪啉（0.71毫升’ 8.11毫莫耳）於氬氣下 添加至3-氟-4-酮基-哌啶-1-羧酸第三-丁酯〇. 6〇克，7. 37 毫莫耳）於二氯乙烷（2毫升）之經攪拌之溶液。1〇分鐘後， 分成數份添加三乙醯氧基硼氫化鈉（2. 35克，11. 13毫莫耳） 及反應放置3小時。添加碳酸鈉飽和溶液（2〇毫升）至反應。 097148178 73 200930370 有機相經分離及水性溶液以DCM (3x10毫升）萃取。有機層 經收集，以硫酸鈉脫水及於減壓下濃縮。反應混合物粗產物 藉急速層析術純化（洗提劑：環己烷：乙酸乙酯：2· 0 N氨於 曱醇溶液梯度由環己烷：乙酸乙酯2:1至100%乙酸乙酯及 最終乙酸乙酯：2. 0 N氨於曱醇溶液10:1)獲得1.28克標題 化合物（57%)。 W-NMR (400 MHz CD30D): δ 1‘45 (册，s)，1.74-1.80 (2H，in), 2.35- 2.51 (1Η, m), 2.65-2.68 (4H, m), 2.71-3.04 (2H, m), 3.65-3,72 (4H, m), 4.18-4.21 (ΪΗ, m>，4 3?·4,38 (1H, m)，4.91-5,03 (1H, m). m/z 289 (M+H)、 停留時間=分裂峰。 4-(3-氟-派p定-4-基）-味琳 方法P-步驟d- 2. 0 N鹽酸於乙醚（15毫升）添加至3-氟 -4-咮啉-4-基-哌啶-1-羧酸第三-丁酯（1. 28克，4. 44毫莫 耳）於DCM (2毫升）之溶液，所得懸浮液於室溫攪拌4曰。 沈殿經過遽及以乙醚（2x5毫升）濕磨。加入碳酸鈉飽和溶液 (10毫升）及所得溶液於減壓下濃縮。加入乙醇（15毫升）及 過濾出沈澱。 滤液於減壓下濃縮獲得〇. 71克標題化合物（85%)。 'H-NMR (400 MHz CD30D): δ 1.84-1.94 (2Η, m), 2.47-2.60 (1H, m), Z66-2.68 (4H, m)t 2.78-2.86 (1¾ m), 2.88^3.02 (1H, m), 3.23-3.28 (1H, m), 3.36- 3.44 (IH, m), 3.68-3.71 (4H, m), 5.01-5.14 (IH, m). m/z 189 (M+H)+; 停留時間 咮啉-4-基-哌咭-1-基）_苯某]-1-甲某-1H- 笨并喃g坐 097148178 74 200930370 方法P-步驟e- 4-(3-氟-哌啶-4-基）-咮啉（0.085克， 0.45毫莫耳），2-(3-溴-苯基）-1-曱基-1H-苯并咪唑（述於 方法N步驟a、b)(0. 10克’ 0· 35毫莫耳），及碳酸铯（1〇. 50 克’ 32· 2毫莫耳）置於氬氣氣體下之無水密封7毫升小瓶内 . 及加入無水甲苯（〇· 4毫升）。同時，乙酸鈀（〇. 〇16克，〇. 〇7 '毫莫耳）及BINAP (0.065克，0.1〇毫莫耳）於氮下置於另一 個無水密封7毫升小瓶内及以無水甲苯（〇. 8毫升）稀釋。約 〇 20分鐘後，所得懸浮液添加至含起始物料之小瓶。 反應混合物於85°C加熱24小時然後冷卻至室溫及通過 SCX過濾（洗提劑：首先為10毫升j)CM:MeOH 1:1然後為10 毫升2. 0 N氨於甲醇溶液）。氨溶液於減壓下濃縮及粗產物 藉急速層析術純化（洗提劑：MeOH: AcOEt梯度由1 〇〇% AcOEt 至MeOH:AcOEt 1:4)獲得0. 08克標題化合物（58%)。 ^-NMR (400 MHz CD30D): 5 1.91- L95 (1Η, m)? 2.01-2.11 (1H, m), ❹ 2.41-2.54 (1H，m)，2.67-2,75 (4H，m), 2.84-3.04 (2¾ 叫，3湖-3,76 (4H，蛛 3.88 (3H, s), 3.92-3.98 (IH, m), 4*09-4.16 (1H, m), 5.06-5,19 (1H, m). m/z 395 (M+H)+;停留時間 e0.27 實施例38: {4-「3-ΠΗ-茉#咪唑-2-基）-4-氣-苯基Ml, 4] 二ρ丫畔-1-基丨-1-甲基-旅咬-3-某-甲明 4-(4-氯-3-乙氣基辎某-茉某）-Π, 41二吖唓-1-羧酸第三-丁酯 方法Q-步驟a- [1,4]二吖咩-1-羧酸第三-丁酯（11.5 克’ 0. 057毫莫耳），5-溴-2-氯苯甲酸乙酯（12. 5克，0. 047 097148178 75 200930370 毫莫耳），Pd(0Ac)2 (0.21克，1毫莫耳），外消旋〜2 2，_ 貳（二苯基膦基）-1，1’ -聯萘（BIMP) (0.88克，1.4毫莫耳） 及碳酸鉋（21. 5克，66毫莫耳）懸浮於甲苯（200毫升）。反 應回流16小時然後冷卻至20°C。反應混合物倒人水C200 毫升）中及以乙酸乙酯（3x150毫升）萃取。組合萃取物以食 鹽水洗滌，以硫酸鎂脫水及於減壓下濃縮獲得褐色油，油藉 急速層析術純化（洗提劑：正己烷：乙酸乙酯梯度由正己烧： 乙酸乙酯4:1至正己烷：乙酸乙酯1:1)獲得17. 2克標題化 合物（96%)。 ^-NMR (400 MHz CDC13): δ 1.37-L48 (12Η, m), 1.96-2,02 (2Η m) 3.22-3 J，（2H，m)，3.50-3.64 (6H, m)，4.39 PH，q), 7J0-7.11 (1H, m}，7,23-7.26 (1H，m>. 383 (M+H)+;停留時間 7 7〇 2-(2-氣-5-[l, 41 二吖咩-1-基-茉基）-ih-茉#唑4 方法Q-步驟b-於氮下冷卻至〇°c之三曱基鋁（2·〇μ於甲 苯溶液）（90毫升，180毫莫耳）於曱苯（3〇〇毫升）之溶液内 分成數份加入苯-1，2-二胺（6. 5克，60毫莫耳）。溶液於〇 C攪拌30分鐘然後於15-20°C攪拌至曱烧之逸出停止。 4-(4-氯-3-乙氧基幾基-苯基）-[1，4]二σ丫畔-1-艘酸第二一 丁醋（15.2克’ 40毫莫耳）一次加入所得溶液内。反應加熱 至回流24小時然後冷卻至0 C。小心加水（70毫升）接著加 入曱醇（700毫升）。過濾出沈澱的固體及濾液於減壓下濃 縮。沈殿以熱DCM:MeOH 1:1 (400毫升）接著以乙酸乙醋（2〇〇 097148178 76 200930370 毫升）洗滌。溶液於減壓下濃縮。兩份萃取物經組合及藉急 速層析術純化（洗提劑：AcOEt:MeOH:NH3梯度由100% AcOEt 至 AcOEt:MeOH:NH3 73:25:2)獲得 9. 3 克 2-(2-氯-5-[l，4] 二吖啐-1-基-笨基）-1Η-苯并咪唑與N-(2-胺基-笨基）-2-'氯二吖啐-1-基-节醯胺之混合物。 、 m/z 345 (M+H)+ ;停留時間=3. 07 ; m/z 327 (M+H)+ ;停 留時間=4. 1。 〇 2-(2-氯-5-[1，4]二吖咩-1-某-芏某）-ih-茉并咪唑 方法Q-步驟c- 2-(2-氯-5-[1，4]二吖坪-1-基-苯基）-lH-苯并咪嗤與N-(2-胺基-笨基）-2-氯二吖畔-1-基-苄醯胺之 3:1混合物（10. 1克）溶解於乙酸（120毫升），及於55°C加熱 16小時。反應冷卻至20°C及於減壓下濃縮。所得褐色油以 乙醚濕磨及乾燥。乙酸鹽溶解於10% MeOH/DCM (100毫升） 及碳酸氫鈉0· 1 Μ水溶液（200毫升）。形成沈澱，攪拌2小 G 時然後經過濾及於60°C乾燥獲得7. 92克標題化合物。（二 步驟共61%)。 (400 MHz DMSO): 8 2J1-2.17 (2¾ οι), 3·07·3.08 (2H，坩)， 3.26 (2Η, bs), 3.60-3,63 (2H? m), 3.82-3.84 (2H, m), 7.12-7.15, (1H, m), 7.40-7.41 (1H, m% 7.54-7.56 (IH, m), 7.60-7.64 (2H, m), 7.88-7.92 (2¾ m)t 9,40 (2H, bs). mJz 327 (M+H)+;停留時間 3-{4-[3-(lH-笨并 口米 0坐-2-基）-4-氣-笨基 1一「1，4i 二 0丫吃 -1-羰某丨-哌啶-1-羧酸第三-丁啤 方法Q-步驟d- 2-(2-氣-5-[1，4]二吖咩-1-基-苯基）-ih- 097148178 77 200930370 苯并咪唑（0.25克，0.76毫莫耳），HOBt (0.12克，0.86 毫莫耳），NMM (0. 5毫升，3· 9毫莫耳），哌啶-1，3-二羧酸 卜第三-丁酯（0. 17克，0. 76毫莫耳），及EDC (0. 22克，1. 16 毫莫耳）溶解於DCM (8. 0毫升）及於20°C攪拌16小時。加 水（6. 0毫升）。有機層經分離，於減壓下濃縮，粗產物藉急 速層析術純化（洗提劑：100%乙酸乙酯）獲得〇. 25克標題化 合物（100%)。 ifMSiMR (400 MHz DMSO): δ 1.28-1.51 (11H, ra)，1.56-1.89 (3H，m)， 2.01 (IH, m,), 2.60-2.71 (3H, m), 3,41-3.76 (7H, m), 3.91-4.03 (3H, m), 4卯-6,95 (1H，m)，7·2〇-7,3〇 (3¾ m)，7.34-7.37 (〇i m>，7初（2H·，bs). m/z 536 (M+H)+;停留時間：=1.85, {4-「3-(lH-笨并咪唑-2-基）-4-氮-笨基1-「1,41二吖啐-1-基}-哌啶-3-基-甲酮 方法Q_步驟e- 3-{4-[3-(1Η-苯并π米β坐-2-基）-4-氣-苯 基]-[1，4]二吖咩-1-羰基}-哌啶-1-羧酸第三-丁酯（0. 21 克，0.39毫莫耳）溶解於異丙醇（4毫升）及加入乙醯氯（0· 17 毫升，2.4毫莫耳）。反應於40°C加熱16小時，然後冷卻至 室溫及於減壓下濃縮及於60°C乾燥，獲得0. 19克標題化合 物呈二鹽酸鹽（94%)。 •H-NMR (400 MHz CD30D): δ 1.56-2.07 (6Η, m), 3.04-3.25 (5H, m), 3.42-3.54 (!H, m), 3.59-3.87 (6H, m), 3.91-4,08 (1¾ m), 7.14-7.20 (1¾ m), 7.25-7.31 (IH, m), 7.50-7.56 (IH, m), 7.66-7.71 (2H, m), 7.87-7.92 (2H, m). m/z 438 (M+H)+;停留時間=分裂峰。 {4-f3-(lH-笨并咪唑-2-基）-4-氣-笨基1-「1，41二吖啐-1- 097148178 78 200930370 基}-1-甲基~~p底咬-3-基-甲酮 方法Q-步驟f- {4-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-4-氯-苯 基]-[1，4]二吖咩-1-基}-哌啶_3_基-曱酮（0.18克，0.34 毫莫耳）懸浮於DCM (8毫升加入三乙基胺（〇. 5毫升，3. 5 % 毫莫耳）獲得溶液，接著加入乙酸（〇.5毫升）及曱醛（37%水 '性溶液）（0· 1毫升）。加入三乙醯氧基硼氫化鈉（〇. 14克， 〇· 63毫莫耳）及反應於室溫攪拌24小時然後於4(TC攪拌4 ❹ 日。反應混合物濃縮至4毫升然後再度加入曱醛（〇. 1毫 升），三乙基胺（0. 5毫升，3. 5毫莫耳），乙酸（0. 5毫升）， 及三乙醯氧基硼氫化鈉（0. 14克，0.63毫莫耳），反應於微 波爐中於100°C加熱20分鐘。以氫氧化鈉2.0 N溶液（4毫 升）淬熄反應及攪拌15分鐘。有機層經分離及於減壓下濃 縮。殘餘物藉急速層析術純化（洗提劑：正己烷：AcOEt :

MeOH : NH3梯度由正己烷：AcOEt 1:1 至 AcOEt : MeOH : NH3

〇 80:18:2)獲得0· 07克標題化合物，其進一步藉製備性HPLC 純化獲得0. 02克標題化合物（13%)。 lH-NMR (400 MHz CD30D): δ 1,37-L94 (4Η, m), 1.98-2.10 (2H, m), 2,56-2.62 (3H, m), 2.68-2.80 (2H, 2.98-3.06 (2H, m), 3.44-4.04 (9H, m), 6.90-6.98 (1H, ra), 7.14-7.21 (1¾ ra), 7.28-7.40 (3H, m), 7.63-7,67 (2H, m). m/z 452 (M+H>+;停留時間=分裂峰。 實施例3Q : 4-「3-(1Η-装并咪唑-2-基）-4-氣-茉基1-「1，4] 二吖啐-1-羧酸笨醢胺 4-「3-(111-苯#味°坐-2-基）-4-氯-笨基]-1~1，41二°丫畔-1-幾· 097148178 79 200930370 酸笨醯胺 方法R-於2-(2-氯-5-[l，4]二吖咩-1-基-苯基）-1Η-苯 并咪嗤（方法卩，步驟&、1)、〇)(0.10克’0.30毫莫耳）於二 氯曱烷（4毫升）之溶液内加入異氰酸苯酯（〇.〇3毫升，0.30 毫莫耳），所得懸浮液於室溫攪拌16小時。沈澱物經過濾 出，然後藉急速層析術純化（洗提劑：乙酸乙酯：己炫·，1:4) 獲得〇. 06克標題化合物（45%)。 •H-NMR (400 MHz, DMSO): δ 1.89-1.95 (2Η, m), 3.39-3.42 (2Η, m), 3.56-3.59 (2H, m), 3.64 (4H, bs), 6.88-6.93 (2H, 7.16-7.24 (5H, m), 7 33-7.35 (1H, ra), 7.38-7.41 (2H, m), 7.52-7.54 (1H, m), 7.67-7.69 (1H, m), 12.56 (1]¾ 【M+H]4;停留時間；=5,87 實施例40 : 4-「3-ΠΗ-笨#咪唑-2-基）-4-氮-笨基Ml. 41 二吖咩-1-羧醴〔2-二甲基胺某-乙某V醯脸 izIlzUH-笨并咪唑-2-基）-4-氣-茉某Ml, 41二吖唓-1-羧 酸（2-二甲某脸臬-乙基）-醯胺 方法S-於N, N-二曱基-乙-1，2-二胺（〇· 85克，0. 96毫莫 耳）及二乙基胺（0.50毫升’3. 84毫莫耳）於二α号β山之溶液内 逐滴加入氯甲酸異丙酯（〇. 1〇毫升，〇 96毫莫耳），於室溫 攪拌1小時後，加入2-(2-氣-5-[1，4]二吖咩-1-基-苯 基）-1Η~苯并咪唑（方法q，步驟a、b、c)(〇. 21克，〇. 64 毫莫耳）。所得混合物於微波爐於15(rc加熱丨小時。然後 於減壓下去除溶劑，粗產物分溶於二氣甲烷（8毫升）及水（2 毫升）’有機層經分離及储至二氧切管柱上進行純化（洗 097148178 80 200930370 提劑：Et0Ac:Me0H:NH3 ’ 梯度由 80:18:2 至 70:28:2)獲得 279毫克標題化合物，定量產率。 H-NMR (400 MHz, C£)3〇D)z δ 1.97·2.00 {2Η, πι) 2 8S (6Η s) 2.92-2.95 (IH, m)t 3.12-3.15 (IH, m), 3.41-3,46 (4H, m), 3.65-3,74 (6H, m), 6.97-7.00 (IH, mX 7.21-7.22 (1¾ m), 7.38-7.41 (3H, m), 7.69-7.72 (2H, m). m/z=441 [M+H]+;停留時間：=4.12 、 實施例41 : 1-{4-[3-(1Η-苯并咪唑-2-某V4-金.-笨 基W1, 41二〇丫〇半-1-基}-2-二甲基胺基-乙酿[ ❹ Μ4-「3-(1Η-茉并咪唑-2-基）-4-氪-笨某卜「1 ^二。丫唓 -1-基卜2-二甲基胺基-乙酮 方法T-步驟a-二曱基甘胺酸（0. 78克，〇. 76毫莫耳）， N，N-二異丙基乙基胺（0.20毫升，1. 14毫莫耳）及鄰-苯并三 嗤-N，N，N’，N’ -四甲基-脲鐵-六氟-鱗酸鹽（HBTU) (0.32 克’0.84毫莫耳）於二氣曱烧（20毫升）之溶液於室溫授样 15分鐘，然後加入2-(2-氣-5-[1，4]二σ丫啤-1-基-苯 〇 基）-1Η-苯并咪唑（方法Q，步驟a、b、c) (0. 25克，0. 76 毫莫耳）。於室溫攪拌16小時後，去除溶劑，粗產物藉急速 層析術純化（洗提劑：梯度乙酸乙酯：己烷/50:50至乙酸乙 酯：己烷：NH3/80:18:2)獲得0.16克標題化合物（50%)。 !H-NMR (400 MHz, CDsOD): δ 1,93-2.04 (2¾ m), 2.15 (3Η, s), 2.21 m, s), 3.07-3.21 (2H, m), 3.45-3.51 (1H, m), 3.54-3.57 (IH, m), 3.63-3J0 (3H, 3.76-3.S4 (3H, m), 6.90^.95 (1H, m), 7.20-7.31 (3H, m), 7.33-7J7 (IH, raX 7.64 (2H, bs). m/z=412 [M+H]4;停留時間 s = 4,24 壹施例42 : (2-丨4-「3-(lH-笨并咪唑-2-某）-4-氳-笨 097148178 81 200930370 某卜「1.41二吖啐-1-基丨-乙基甲基-胺基 (2-丨4-「3-(111-笨并味 °坐-2-基）~~4-氯-茉基 -1-某卜乙基二甲基-胺基 方法Τ-步驟b-於1-{4-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）—4〜<氣一 苯基]-[1，4]二吖啐-1-基}-2-二曱基胺基-乙酮（〇·ΐ3克， 0. 31毫莫耳）於四氫梯喃（4毫升）之溶液内，加入1 μ qaiu4 (0.31毫升，0.31毫莫耳）及所得混合物於室溫搜拌72小 時，然後以水（20毫升）及2 N氫氧化鈉（20毫升）淬熄。然 後反應混合物傾倒通過短柱塞（硫酸納），於減壓下去除溶劑 及粗產物藉製備性HPLC純化獲得0. 03克（25%)標題化合物。 'H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ L98-2.04 (2Η, m), 2.29 (6H s) 2.53-2.56 (2H, m), 2.66-2.70 (4H, m), 2.85-2.88 (2H, m), 3.55-3.58 (2η'm)' 3.61-3.63 (2H, m), 6.86-6.89 (1H, m), 7,16-7.17 (1¾ m), 7.26-7.30 (2H, m) 7.32-7.35 (1H, m), 7.63 (2H, bs). ’ ’ m/2-39g [M+H]+;停留時間： = 4.53. 實施例 43 : N，N-二甲基-2-{4_[3-(l-甲某一 1H-笑并一？二 基）-苯基]-Γΐ. 41二半-l-基}-乙越脖 4-[3-_(_1一-曱基-1H-笨并咪°坐-2-基）-笼某4~[二0丫坪— 羧酸第三-丁酷 方法U、V、W、Ab-步驟a於氬氣氣體下乾燥之四頸圓底 瓶内放置BINAP (5.85克，9.4毫莫耳）及Pd(〇Ac)2 (141 克，6. 3毫莫耳）。混合物於氬氣回流下攪拌1〇分鐘，然後 加入300毫升無水甲苯。同時於氬氣氣體下乾燥的另一個四 097148178 82 200930370 頸圓底瓶内加入2-(3-溴笨基）_卜甲基_1H-苯并咪唑（述於 方法0、0a步驟a)預先溶解於300毫升無水甲苯（9 〇克， 31. 3毫莫耳），1-B0C-高哌啡（8. 〇毫升，4〇. 7毫莫耳）及碳 酸鉋（50. 99克’ 156. 5毫莫耳）。混合物攪拌約1〇分鐘然後 第一燒瓶之内容物加入第二燒瓶内。反應於回流溫度攪拌隔 '夜。冷卻至室溫後，懸浮液於帶有矽藻土襯墊之古屈氏坩堝 上過濾。澄清溶液於減壓下蒸發及殘餘物（25.〇克）於二氧 ❹化矽versaflash(l克產物/3〇克二氧化矽）藉由

Cy:Et0Ac=9:1至Cy:EtOAc=l: 9洗提而以自動急速層析術純 化獲得純質產物呈褐色泡沫體（5. 2克，41%)。 DMSO), 1.26(4 9H); ,.84(^ 2H); 3.25(m, 2H); 3.61(ra, 4H); 3.86(, 3H); 1H) 7.00(, lH); 7,0(S) 1H); ? 27{m> 3H); ? ^ _ 7.67(4 _參407_奶停留時間=㈣流 二ρϊ4-1-棊苯 甲某#咪唑二鹽酸 m ❹ 生 方法ϋ、V、W、Ab-步驟b-於4-[3-(1-曱基-1H_苯并咪 唑-2-基）-苯基]-[L4]二吖咩—卜羧酸第三_丁酯（2·2〇 克5. 61亳莫耳）於曱醇（3耄升）之混合物内加入2 μ鹽酸 於乙醚（10毫升），所得混合物於室溫攪拌6小時。然後於 減壓下去除溶劑，所得鹽以乙醚濕磨，於減壓下過濾及於減 壓下乾燥獲得1. 6〇克（93%)標題化合物呈氣化物鹽。 097148178 83 200930370 *H-NMR (400 MHz, DMSO); δ 2.13-2.19 (2¾ m), 3.07-3.08 (2H, m), 3.24 (2H，bs乂 3.61-X64 (2H，m), 3*84-3.87 (2H, m), 4.06 (3H，s), T 14-7.22 (2H, m), 7.33 (1H, bs), 7.49-7.53 (1H, ra), 7.62-7.68 (2H, m), 7.86-7.90 (1H, m)，8-04-8.08 (1H，m)，9,54 (2¾ bs). m/2^307[M+H】+;停留時間=分裂 ιΐφ1 〇 Ν，Ν-二甲某-2-{4-「3-Π-曱基-1Η-笨舁咪唑-2-基）-笨 基]-[1，41二吖啐-l-基}-乙醯胺 方法U-步驟c- 2-(3-[1，4]二吖咩-1-基苯基）-1-曱基 -1H-苯并咪唑（0.30克，0. 79毫莫耳），2-氯-N，N-二甲基- 乙醢胺（0. 14克，1. 18毫莫耳）及三乙基胺（0.44毫升，3. 20 毫莫耳）於二吟4(8毫升）之混合物於80°C加熱16小時。然 後反應冷卻至室溫，沈澱物經過濾出及有機相於減壓不蒸 發。殘餘物藉急速層析術純化（洗提劑：由EtOAc 100%至 Et0Ac:Me0H:NH3 89:10:1)獲得 0. 11 克（34%)標題化合物。 'H-NMR (400 MHz, CDjOD): δ 1.93-2.04 (2Η, m), 2,15 (3Η, s), 2 21 (3H, s), 3,07.3.2! (2H> m), 3.45-3.51 (ΪΗ, m), 3.54-3.57 ¢1¾ m), 3.63.3.70 (3H, m), 3.76-3.84 (3H, m), 6.90-6,95 (1H, m), 7.20-7.31 (3H, m), 7.33.7 37 (1H, to), ?.64 (2H, bs). m/z=392 [M+Hf;停留時間=* 4.87 min. 實施例4/1 一_44 : 2-[3-(4-甲續酿基-[1, 4]二 〇丫”半一1 -等、_ y 基Izl-甲某-1H-芏葬唑唑

笨并咪4 方法V-步驟d-於2-(3-[1，4]二吖啐-1-基苯基）<_甲基 -1H-笨并咪唑（0.18克，0.46毫莫耳）及三乙基胺（〇.32毫 097148178 84 200930370 升’ 2. 30毫莫耳）於二氯甲烷（4毫升）之溶液内加入甲磺醯 氣（0. 04毫升’ 0. 55毫莫耳）。於室溫攪拌16小時後加水（1 毫升）’有機層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓下蒸發。所得 粗產物藉急速層析術純化（洗提劑：乙酸乙酯）獲得〇. 1〇克 (5 4%)標題化合物。 ’H-NMR (400 MHz，DMSO>: δ 1.87-1.91 (2H，m), 2.SI (3H，s)， 3.19- 3.22 (2¾ m), 3.42-3.45 (2H, m)} 3,63-3.66 (2H, m), 3.69-3,71 (2H, m% 3.S4 (3H, s), 6,91-6.94 (1H, m), 7,00-7.02 (1H, m), 7.09-7.10 (1H, m), 7.20- 7.29 (2H, m), 7.32-7.36 (1H, m), 7.57-7.59 (1H, m), 7.65-7.66 (1H, m). ιη/Ζ=385 [Μ+ΗΓ;停留時間=5.49ηώι 免施例45 : {4-13-(1-甲某-1Η-笨并哚唑-2-基）-笨 基]一[1，4~|二〇丫_-1-基}-(4-甲基—旅0并-1_某）一甲嗣 11二[3-(1-甲基-1H-笨并咪唑-2-茉某]一 [1.41二吖啐 -1-基卜（4-曱基-哌蟒-1-某）一甲醎 方法W-步驟e-於三光氣（0.41克，〇 13毫莫耳）於二氣 〇 甲烷（2毫升）之溶液内加入2-(3-[1，4]二吖咩-1-基苯 基M-甲基-1H-苯并咪唑二鹽酸鹽（〇. μ克，〇 37毫莫耳） 及DIPEA (0. 11亳升，〇· 66毫莫耳）於二氯曱烷（2毫升）。 於室溫攪拌15分鐘後加入Ν-曱基-哌畊（〇.〇4毫升，0.44 毫莫耳）及DIPEA (〇· 04毫升，〇· 22毫莫耳）於二氯曱烷（1. 5 毫升）之溶液。所得懸浮液於室溫攪拌1〇分鐘。混合物傾倒 至飽和碳酸氫鈉溶液（25毫升）與二氯甲烷（25毫升）之混合 物上，有機層以硫酸納脫水，過濾及於減壓下濃縮，獲得殘 097148178 85 200930370 餘物’殘餘物藉製備性HPLC純化獲得20毫克（13%)標題化 合物。 | H-NMR (4〇〇 MHz> CD3OD): 6 2.02-2.13 (2Η, m), 2.89 (3H, s), 3.02-3.58 (l〇Hs m)j 3.67.3 72 (4Hf m), 3.84-3.86 (2¾ m), 4.10 (3H, s), •7.08-7.20 (3HS m), 7.51-7.55 (1H, m), 7.63-7.69 (2H, m), 7,82-7.93 (2H, m). m/z^433[M+H；T;停留時間： = 4.75 mia. " -{4-「3-n-甲基-1H-笨并咪唑-2-基）-苯 ^ ~~LL41一°丫 啤-1-基}-2-略咬-1-基-乙嗣 ^^1^11^_^-111-苯并咪唑-2-基）-苯某1-「1.41二吖_ ❹ 辰咬-1-基-Λ西6| 方法Ab-步驟f-哌啶―丨—基一乙酸（〇. 12克，〇 86毫莫耳） 及M-羰基二咪唑（0·14克，〇 86毫莫耳）於乙腈（3毫升） 之溶液於室溫攪拌4小時，然後加入4]二吖啐 基笨基）-1-曱基-1H_苯并咪唑二鹽酸鹽（〇 26克，〇 86毫莫 =)及二乙基胺（0 24毫升，171毫莫耳）於乙腈（2毫升）之 洛液所彳彳懸浮液於7『c加熱隔夜，然後冷卻至室溫及於❹ 減壓下去除溶劑^所得殘餘物以二氣伐⑽毫升）稀釋， 、夂（2x3毫升）洗滌及有機層以硫酸鈉脫水，過濾及於減壓 :蒸發。殘餘物藉急速層析術純化（洗提劑：二氯曱烧：甲 醇梯度由100%二氣曱貌至95%二氯甲烧：5%甲醇）獲得〇· 12 克（32%)標題化合物。 097148178 86 200930370 lH-NMR (400 MHz^ DMSO): δ 1.21-1.46 (7H, m), 1.83-1.97 (2H, ra), 2.21-2.31 (4H, m), X95-3.02 (2H, m)» 3.27-3.30 (2H, m), 3.48-3.70 (5H, m), 3.84-3.85 (3H, m), 6.88-7.01 (2H, m), 7.06-7.11 (1H, m), 7.20-7.35 (3H, m), 7.57-7.61 (1H, m>, 7.63-7.66 (1H, m). ιη/ζ=432停留時間= 4,64 min. 實施例47 : {l-「3-(l-甲基-1H-笨并蛛峻-2-基苯某l-旅 、 咬-3-基}-(4-甲基-痕〇井-1-基甲飼 1-[3-(1-曱某-1Η-笨并咪唑-2-基）-装某1-嘁嘧-3-羧酸乙 ❹ 皇 方法X-步驟a-哌啶甲酸乙酯（〇. 55克，3. 48毫莫耳）， 2-(3->臭苯基）-1-甲基-1H-苯并咪唾（述於方法〇、〇a步驟 a) (0. 50 克 ’ 1. 74 毫莫耳），Pd(〇Ac)2 (0. 008 克，〇. 〇35 毫莫耳），外消旋-2,2’ -貳（二苯基膦基）_ι,Γ -聯萘 (BINAP) (〇· 78 克，0. 052 毫莫耳）及碳酸鉋（〇. 78 克，2. 08 毫莫耳）懸浮於甲苯（20毫升）及以氮氣除氣。反應於微波爐 ❹於150°C加熱30分鐘。反應傾倒入水（2〇〇毫升）中及以乙酸 乙醋（100毫升）萃取。有機層經收集及於減壓下濃縮。反應 混合物粗產物藉急速層析術純化（洗提劑：正己烷：乙酸乙 酯梯度由100%正己烷至正己烷：乙酸乙酯7:3)獲得〇.4克 標題化合物（63%)。 lH.NMR (400 MHZ CDCU): δ 1.28 (3Η, s), i.66-1.77 (2H, m), ί 8M.89 (1H, m), 2.04-2.07 (1H, m), 2.66^2.73 (1¾ m), 2.89-2,96 (1H, m), 310-3.16 (1H, m), 3J8-3.62 (1H, m), 3.80-3.84 (1H, m), 3.88 (3H, s), 097148178 87 200930370 4.15-4.21 (2H, m), 7.09-7.12 (2Ht m), 7.3N7.42 (5H, m), 7.83-7,86 (1H m) 1-「3-(1-甲基-111-笨并口米。坐-2-基)-菜基~|-略。定'3'_醉 方法X-步称b- l-[3-(l-曱基-1H-苯并p米〇坐-2-基）-苯 基]-哌啶-3-羧酸乙酯（2.0克，5. 51毫莫耳）溶解於甲醇： 水5:2 (35毫升）。加入氫氧化納（0. 44克，Π毫莫耳）及反 應於40°C加熱3小時。反應混合物於減壓下濃縮，攝取於 水中（30毫升）及以乙酸乙S旨（30宅升）洗條。水層以滚鹽酸 酸化至pH 5. 5。白色固體經過濾出，以水（2〇毫升）及以正 己烷（20毫升）濕磨獲得1. 60克標題化合物（87%)。 •H-NMR (400 MHz CD3OD)：S 1.684.77 (2H, m), 1.83-1.88 (1H, m), 2.01-2.06 (IH, m), 2,64-2.71 (1H, m), 2.92-2,99 〇H, m), 3.12-3.17 (1H m)' 3,57-3.60 (IH, m), 3.77-3.S1 (1H, m), 3.90 (3¾ s), 7.18-7.21 (2H, m), 7,29-7,38 (3R m), 7.42-7.46 (IH, m), 7.56-7.58 (IH, m), 7.67-7.69 (IH, m). m/z 336 (Μ+ΗΓ;停留時間：=3.65. * {l-[3-(l-甲基-1H了苯并咪唑-2-基）-i基μ哌峻_q-基}-(4-甲基-哌°井-1-某）-甲酮 方法X-步驟c- 1-[3-(1-甲基-1Η-苯并咪唑_2-基）一苯 基]-派啶-3-羧酸（0· 10克’0.30毫莫耳）添加至二異丙基乙 基胺（DIPEA)(89 微升，〇. 36 毫莫耳），HBTU (0· 12 克，〇 33 毫莫耳），及N-曱基-哌畊（〇. 〇4克，〇. 36毫莫耳）於二氯曱 烷（4毫升）之經攪拌之溶液内。反應於35它攪拌隔夜及於減 壓下濃縮。反應混合物粗產物經NH2管柱藉急速層析術純化 (洗提劑.正己院.乙酸乙酿梯度由100%正己燒至100%乙酸 097148178 88 200930370 乙醋）獲得〇. 055克標題化合物（44%)。 «H-NMR (400 MHz CD3OD): δ 1.59-1.69 (1Η, m), 1.74.!.86 (2H, m)i 1.93- 1.96 (1H, m)9 2.35 (3H, s), 2.40*2,61 (4H, m)} 2.79-2 gg fjjj m) 2.94- 3.06 (2H, m), 3.60-3‘66 (4HS m)，3.80_3·85 (2H, m>, 3 的、’3H)’ 7.16-7.19 (2H, m), 7.28-7.36 (3H, m), 7.42-7.46 (1H, m), 7.54.7.57 (1H m) 7.66-7.68 (1H, m). m/z 418 (M+H)+;停留時間 5=5 4.75 實魏例:丄ί-[3-(1Η-苯并_途唑-2-基苯基哌啶 -4-基}-(4-甲基-痕〇体-1-基）-甲嗣 2- [ 乙氧基羰基-哌啶-1-基）-茇毛丄―笨并妹嗤 -1-隸酸第三-丁西肖 方法Y、Z-步驟a_異哌啶曱酸乙酯（1.54克，9 8毫莫 耳）2 (5 ’臭-2-氯苯基）-lH-苯并咪唾-i_幾酸第三_丁酯 (述於方法〇、〇a，步驟d、e)(2· Q克，4. 9毫莫耳），_Ac)2 (0.22克，0.98毫莫耳），外消旋_22,气（：苯基麟 基~聯萘（ΒΙΝΑΡ) (0.90克，147毫莫耳）及碳酸鉋 ❹（克24. 5毫莫耳）懸浮於甲苯（40毫升）及以氮氣除氣》 至起始物料完全耗盡。反應混合物經過滤出，以水 _ (200毫升）洗梅。有機層以乙酸乙酯（1〇〇毫升）萃取及於減 :壓下展縮有機層經收集及於減壓下濃縮。反應混合物粗產 物藉急速層析術純化(洗提劑: 正己炫·：乙酸乙S旨梯度由 1〇〇%正己燒至正己烷：乙酸乙酯1:1)獲得1. 6克標題化合 物（67%) 〇 097148178 89 200930370 iH-NMR (400 MHz CDClj): S 1.28 (3¾ t>,!，4〇 (9H, $> 丨 83l 94 (2H，m)，2.01-2*09 (2R m), 2.42-2.49 (1H, n〇, 2.82-2.88 (2H，m) 3 63-3 幼 (2H, m)t 4.16 (2H, q)t 7.00 (1H, bs), 7.11 (1H, bs), 7.29-7.33 (IH m) 7.37-7.45 (2H，in)、7 80-7,82 (1H，m), S. 11-8.13 (1¾ m)· m/2 484 (m:h)+: 停留時間=8.69. ， l-[3-( 1H-苯并味嗤-2-基）-4-氮-笨基酸a酷 方法Y、Z-步驟b_ 2-[2-氯-5-(4-乙氧基羰基—哌啶 基）-苯基]-苯并咪唑-1-羧酸第三-丁酯（1. 98克，4. 1毫莫 耳）溶解於異丙醇（50毫升）。逐滴加入乙醯氣（2. 1克，28 7 毫莫耳）及反應混合物於4〇°c加熱至不再殘留起始物料。反 應於減壓下濃縮獲得2.0克標題化合物（100%)。 丨H.NMR (400 廳職〇): s i.18 (3H，t)，1.60-1.70 (2H’ m)， 1.S9-1.93 (巩 m>，2,53-2.63 (1H，m)，2,92-2.98 (2H，π»), 3.79-3*82 (2H, m), 4,07 (2H, q), 7.29-7.32 〇H, m)y 7.53-7,64 (4H, m), 7.86-7.91 (2H m) m/z 384(Μ+ΗΓ;停留時間=6 59 ’ ；· 姻氟-茉基卜哌啶 方法Y、Z一步称c〜1~[3-(1Η-苯并味峻-2-基）-4-氯-笨 基]-痕咬-4-幾酸乙酉旨（2〇克，5. 2毫莫耳）溶解於甲醇：水 3,2 (5〇毫升）及加入氫氧化鈉（0.41克，10.3毫莫耳）。反 應於40C擾拌至起始物料完全耗盡。反應混合物於減壓下 濃縮，攝取於水中（3〇毫升）及以乙酸乙醋⑽毫升）洗務。 水層以/辰鹽酸中和，白色固體經過滤出，以水（2〇毫升）及 以乙趟（20毫升）洗務獲得1. 2克標題化合物（82%)。 097148178 200930370 *H-NMR (400 MHz DMSO): δ 1.59-1,69 (2H, m), L88-1.92 (2H, m), 2.36-2.43 (ΪΗ, m), 2.81-2.87 (2H, m), 3.69-3.72 (2H, m\ 7.07-7 10 (1¾ m), 7.19-7.23 (2H, m), 7.37-7.40 (2H, ra), 7.61 (2H, bs). mJz 356 (M+H)+; 停留時間=3.66. {1~「3-(111-笨并味峻-2-基）-4-氣-笨基~|-。底p定~~4~基丨-（4_ 、 甲基-哌畊-1-基）-甲酮 方法Y-步驟d-如方法X-步驟c所述合成但始於 1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-4-氯-苯基]-哌啶-4-羧酸（0. 1 ❹ 克，0.28毫莫耳）及1-曱基-哌畊（37微升，0.34毫莫耳）。 獲得30毫克（24%)。 ^-NMR (400 MHz CDjOD): δ 1.78-1.90 <4Η, m), 2.32 (3Η, s)t 2.41-2.50 (4Η, m), 2.82-2.89 (3H, m), 3.61-3.66 (4H, m), 3.82-3.8$ (2H, m)t 7.09-7.12 (1H, m), 7.26-7.30 (2H, m), 7.39-7.41 (2H, m), 7.62-7.64 (2H, m). m/z438 (M+H)+;停留時間：=4.74. 實施例49 :丨1-「3-(1Η-笨并咪唑-2-基）-4-氩-苯基]-哌啶 -4-基丨-旅p井-1-基-甲嗣Μ酸|| ❹ 4-{1-「3-门恥装#咪唑-2-基）-4-氮-装基1-哌咬二4-羰基}- 哌啡-1-羧醢篦三-丁酯 方法Ζ-步驟e-如方法X-步驟c所述合成但始於 1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-4-氯-苯基]-哌啶-4-羧酸（0. 1 克，0. 28毫莫耳）及哌畊-1-羧酸第三-丁酯（〇. 克，0 34 毫莫耳）。（72%) 097148178 91 200930370 lH-NMR (400 MHz CD3OD): δ 1·47 (9H, s)，1.9CM.91 (4¾ m)， 2,84-2,90 (3H, m), 3.41-3.63 (8H, m), 3.83-3.88 (2H, m), 7.10-7.13 (1H, m), 7.26-7,31 (2H, m), 7.39-7.41 (2H, m), 7.63 (2H, bs). m/z 524 (M+H)+; 停留時間=6.32. 茉并咪唑-2-基）-4-氣-毛 -1-基-甲酮 方法Z-步称f- 4-U-[3-(lH-苯并咪唑_2_基）_4—氣_苯 基]-哌啶-4-羰基}-哌4-1-羧酸第三_丁酯（〇. 〇5克，〇. u 毫莫耳）懸浮於異丙醇（4毫朴逐滴加人乙醯氯（55微升， 0.77毫莫耳）及反舰合物加熱至做至不㈣留起始物 料。反應於減壓下濃縮獲得〇. 〇5克標題化合物⑽％)。 m/z 424 (M+H)+;停留時間^斗.1〇。 表1顯示所合成之化合物之選擇，該等化合物係根據表中 第三攔指示且以前文實施例卜49之合成詳細討論之方法製 備0 097148178 92 200930370

實施例 結構式 方法 M+H 停留 時間 50 A 403 1. 30 51 A 417 1. 38 52 A 479 2. 28 53 A 403 1. 44 54 〇r〇^b A 417 1. 58 (待續） 097148178 93 200930370 55 C^N Cl A 479 2. 59 56 A 419 2. 66 57 H Cl A 389 2. 61 58 A 447 1. 56 59 —〇 A 384 2. 12 60 ai^-c^ A 447 1. 38 61 h a —o A 419 2.44 (待續） 097148178 94 200930370 ❹ 62 η a ο / A 419 2. 62 63 A 390 1.44 64 A 419 3. 03 65 〇^Χ)=λ A 389 2. 93 66 0Χ^ A 381 1. 07 67 cua0^ A 402 3. 52 68 A 385 1. 17 (待續） 097148178 95 200930370 69 A 417 1. 47 70 A 402 3. 13 71 A 418 1. 02 72 A 350 溶劑鋒 73 γ^ν^〇υΊ γγ^ B 364 0. 79 分裂峰 74 B 476 2. 36 75 B 351 1. 04 分裂峰 (待續） 097148178 96 200930370 ❹ 76 人0 十 Β 492 2.33 77 Β 365 1. 79 78 厂:κ>^ 〇 十 〇>^ Η Β 490 2. 53 79 ν〇 Ο > Η Β 490 2. 58 80 0 Β 347 1. 83 81 γΟ % Β 321 1. 53 82 >"...<〇 /—Ν '~~Ν Ο ρ Η Β 490 2. 60 (待續） 097148178 97 200930370 83 Ο H H B 490 2.60 84 'nh2〇 B 390 1. 55 85 0 B 349 1. 82 86 ΊΟ B 351 1. 62 87 O B 407 1.45 分裂峰 88 九c^b B 335 1. 00 分裂峰 89 α<Χ>Χ 《 y ^ B 492 1. 95 (待續） 097148178 98 200930370

90 B 418 1. 28 分裂峰 91 ^ 0 B 406 0. 83 分裂峰 92 W Htr^o 0r B 406 0. 88 分裂峰 93 ςΤΤ〇 B 404 1. 10 分裂峰 94 B 351 2. 04 95 厂 KT^O CXX^ H B 307 0. 54 分裂峰 96 L^>1^ ΚΤ^Ό B 333 0. 89 分裂峰 (待續） 097148178 99 200930370 97 〇 C 379 1.71 98 1 0 C * 378 0. 64 分裂峰 99 C 335 1.47 100 ο卜 Ν·~f 0 (Χβ ^ \ C 504 2. 55 101 α>^ \ C 504 2. 50 102 χν^0% ο C 418 0. 95 分裂峰 103 α 、 C 418 0. 70 分裂峰 (待續） 097148178 100 200930370 ❹ 104 0 c 363 1. 83 105 c 450 2. 10 106 0 c 450 2. 10 107 y-'O O 卜 cx>^ \ \ c 504 2. 57 108 。卜Q 〇 H ai>^ ^ \ c 504 2. 57 109 ^cr0% 'NHa〇 c 404 1. 50 110 c 365 1. 50 (待續） 097148178 101 200930370 111 -Ο Ό c 321 溶劑鋒 112 0 c 421 1. 39 分裂峰 113 Λ^ 0 c 421 1. 39 分裂峰 114 户。 c 506 2. 17 115 ^rOr\^ \ H3^0 c 351 0. 44 分裂峰 116 c 349 0. 84 分裂峰 117 err。 c 404 0. 93 分裂峰 (待續） 097148178 102 200930370

118 c 418 1. 02 分裂峰 119 Q^Y〇 七 c 432 1. 17 分裂峰 120 0 c 420 0. 58 分裂峰 121 νγΌ 丫七 0 c 365 1. 99 122 nxA^ a c 404 溶劑鋒 123 «u 〇 cx>^ c 490 1. 49 124 rfJ^l 00^ ^ \ c 490 1. 59 (待續） 097148178 103 200930370 125 Ηθγθ 0 D 390 1.12 分裂峰 126 D 390 1. 07 分裂峰 127 D 390 1. 10 分裂峰 128 a<x, ^ ί/ΝΗ ό" D 390 1. 12 分裂峰 129 9^0^¾ 0 D 390 0. 80 分裂峰 130 D 350 0. 37 分裂峰 131 π〇γΟ 0 D 404 0. 87 分裂峰 (待續） 097148178 104 200930370

132 ο D 404 0. 79 分裂峰 133 0 D 392 0. 87 分裂峰 134 9cvn^ 0 D 376 1. 00 135 D 404 1. 00 分裂峰 136 D 336 0. 64 分裂峰 137 E 390 溶劑鋒 138 9^0^5¾ E 376 0. 49 分裂峰 (待續） 097148178 105 200930370 139 Ε 390 溶劑鋒 140 η〇χΑ^ Ε 390 溶劑鋒 141 G 294 1. 29 分裂峰 142 Η 409 1. 29 分裂峰 143 Η 363 0. 72 分裂峰 144 rjO^b Η 397 0. 94 分裂峰 145 Η 397 0. 92 分裂峰 (待續） 097148178 106 200930370 ❹ 146 Β 418 1.30 147 Β 418 4. 49 148 A Β 420 4. 2 149 CTY0^; Ab 446 4. 94 150 〇〇YC^v "ό Ab 434 4. 34 151 (Λ〇0 D 506 2. 18 152 Α〇° 十 D 506 2. 17 (待續） 097148178 107 200930370 153 ^ 七。ra D 406 4.04 154 K Ww° « D 406 4. 04 155 Vv° "Ο 1 0 D 420 4. 14 156 yy^ D 420 4. 19 157 〇N_^\_c, crY^yl, T 424 4. 2 158 γ=Λ H3 D 390 4. 13 159 α^νΛν 00^ \ N 450 2 (待續） 097148178 108 200930370

160 0¾ \ N 490 2. 18 161 广 N 506 2. 2 162 OhV〇 α>^ \ N 418 1. 08 163 〇cV 〇cl·^ \ N 361 1. 72 164 〇chV°^ \ N 379 1. 77 165 ΟΎΫ ay<J \ N 490 2, 18 166 N 506 2. 2 (待續） 097148178 109 200930370 167 OhV〇 \ N 418 1. 12 168 Oh*V〇 \ N 418 0. 98 169 0 K 454 2. 02 170 入0 K 542 3. 98 171 0 K 397 3. 57 172 0 K 401 3. 18 173 /〇 rA^； K 486 3. 85 (待續） 097148178 110 200930370 Ο 174 K 526 4 175 K 540 4. 32 176 N^0> K 415 3. 42 177 〇 rAt 0 K 457 2. 88 178 ^ ^Λ；Γ 〇Λ° V 〇 K 440 2. 98 179 户。 K 542 3.47 180 K 454 2. 08 (待續） 097148178 111 200930370 181 κ 468 2. 12 182 、 Ν 361 1. 73 183 〇hV°^ \ Ν 379 1. 75 184 (Χ^ \ Ν 450 2 185 Orf'V〇 0 \ Ν 420 0. 98 186 Κ 414 1. 97 187 Ν 432 4. 42 (待續） 097148178 112 200930370 188 N 504 2. 17 189 〇ν〇^% 0 K 442 1. 97 190 o J 425 3. 37 191 J 397 1. 98 192 0"〇^ΓΛ- 5^F J 454 1. 57 193 J 357 1. 9 194 00¾ - J 357 1. 92 (待續） 097148178 113 200930370 195 F Y j 400 1.55 196 0 K 568 4. 52 197 K 426 2. 12 198 0 K 468 2. 2 199 OyCT^Y^ o J 426 3. 75 200 0 J 400 3.45 201 〇V J 426 1.45 (待續） 097148178 114 200930370 ❹ 202 αι^ ^ 〇 。丫、 J 399 3. 72 203 J 440 2. 08 204 Ο3....^ Q 438 1.32 205 Q 438 1. 27 206 C 399 0. 73 207 Q 418 4. 17 208 D 478 2. 48 (待續） 097148178 115 200930370 209 L 468 2.47 210 C 432 1. 03 211 C 418 0. 95 212 1 0 K 442 2. 03 213 γΝ—J L 353 0.87 214 L 422 1. 1 215 〇v〇^4) 0 L 421 2.4 (待續） 097148178 116 200930370 ❹ 216 L 381 2. 17 217 (X>p L 522 2. 9 218 入0 L 524 2. 62 219 入0 十 L 524 2.62 220 ra 0 L 368 0. 95 221 0 L 422 1.2 222 r> « 0 L 424 1. 13 (待續） 097148178 117 200930370 223 0 L 424 1. 13 224 ,^=( / V H3 L 424 1. 13 225 a L 379 1. 12 226 yyO 化 D 406 1.2 227 0 L 382 2 228 L 382 0. 62 229 L 436 1. 27 (待續） 097148178 118 200930370 230 0 L 436 1. 27 231 Μ 422 1. 22 232 XV3气 0 Μ 422 1. 18 233 0 Μ 422 1. 13 234 Μ 454 2. 38 235 Μ 436 1. 33 236 Μ 394 1. 17 (待續） 097148178 119 200930370 237 0 Μ 394 1.2 238 0 L 408 1. 22 239 O-ChL I 439 3. 85 240 0 I 441 3.22 241 A 0 I 468 2. 02 242 Ο I 470 2. 1 243 α-ο^: 办?- I 443 3.4 (待續） 097148178 120 200930370 ❹ 244 0 379 0.62 245 0 379 0. 65 246 0 375 0. 85 247 0 389 1. 07 248 C(〇^b 0 395 1.22 249 0 399 1.13 250 Ya°^b B 355 4. 78 (待續） 097148178 121 200930370 251 〇丫^ τ 389 5. 36 252 。丫 ο化 C 335 4. 73 253 °υ〇 ^Ό-01 τ 389 5. 36 254 τ 369 4. 92 255 O^b τ 349 4. 87 256 γγ*° "Ό Β 398 4. 39 257 γγ^ Ό C 378 4. 07 (待續） 097148178 122 200930370 258 户。 Q 560 5. 51 259 D 506 5. 02 260 0<Κη 0 十 Q 560 5. 51 261 iv〇^： Q 540 5. 15 262 Q 520 5. 21 263 Q 438 4. 19 264 0 Q 418 4. 25 (待續） 097148178 123 200930370 265 Q 438 4.2 266 Q 418 4. 25 267 cAb T 392 4. 25 268 > 〇 B .426 4. 66 269 广。。 D 524 6. 68 270 C^oyO !办。 cAo 0 Q 558 7. 43 271 〇υ〇^^} 〇人ο 0 十 D 504 6. 72 (待續） 097148178 124 200930370 ❿ 272 入0 十 Q 558 7.43 273 十 A Q 538 6. 97 274 rXc；, T 460 5. 22 275 Q 518 7. 03 276 r> rV^V>=\ ra 0 D 424 4. 04 277 Up 丫^ Q 458 4. 65 278 r^NH GYG 免 0 D 404 1. 00 (待續） 097148178 125 200930370 279 (^^ΝΗ 扣 0 Q 458 4. 65 280 r 〇°^b - V_/..“ί〇 Q 438 4. 24 281 Q 418 4. 3 282 C 406 4. 31 283 。人0〇 D 524 6. 68 284 ρ rNXXf>i Χί° ^ D 504 6. 73 285 ΓΥα Τ 460 5. 22 (待續） 097148178 126 200930370 ❹ 286 Q 538 7. 02 287 Q 518 7. 04 288 a//% 0 D 424 4.06 289 D 404 4. 15 290 Q 438 4. 27 291 ^Ογ。 & ora Q 418 4. 3 292 T 440 4. 35 (待續） 097148178 127 200930370 293 °>.....-〇 Ο >=° α>^ \ \ D 504 2.57 294 00¾ -ί>.....<Γ ^ Q 438 1. 32 295 Β 424 4. 34 296 。卜ο 0卜 ο:^ ' \ D 504 2. 57 297 0¾¾ « Q 438 1. 27 298 Τ 458 5. 05 299 0叫 ος>^ a D 524 6. 17 097148178 128 200930370 ❹ 300 crr^ Ό C 404 4. 18 301 JO：>-0 α Q 558 6. 79 302 κχ^ Ο 十 \ C 504 6. 18 303 α Q 558 6. 79 304 4~〇 0^6=^ υ:」七 Q 538 6. 22 305 0 D 424 3. 92 306 0 Q 458 4.44 (待續） 097148178 129 200930370 307 0 D 404 0. 79 308 0 Q 458 4.44 309 r爲l Τ 458 5. 05 310 Q 438 4. 03 311 ο C 418 4. 18 312 -々 Τ 452 4. 19 313 〇^4- ος>^ α D 496 5. 94 (待續） 097148178 130 200930370 314 Ο + α Q 530 6. 53 315 0.0 ΧΜ丄 0 + \ C 476 5. 92 316 〇w:+ Xc!>-0 α Q 530 6. 53 317 Q 510 5. 95 318 +<。 0 Q 430 4.45 319 H^〇^b 0 D 376 3. 97 320 0 Q 430 4.45 (待續） 097148178 131 200930370 321 0 Q 410 4.07 322 H Q 390 4. 03 323 D 496 5. 73 324 >。。 Q 530 6. 29 325 αγ〇Λ^ y。 D 476 5. 67 326 αγ〇 %。。 Q 530 6. 29 327 Q 510 5. 9 (待續） 097148178 132 200930370 328 Q 490 5. 96 329 0 D 396 3.97 330 〇"^ό=\ B 410 4.41 331 D 376 3. 97 332 0 Q 430 4. 59 333 Ap0^ 0 Q 410 4. 16 334 ^CK »Lj Q 390 4. 17 (待續） 097148178 133 200930370 335 T 460 4.82 336 V 371 5. 34 337 crr° 心 R 432 5. 99 338 mO-° R 466 6. 56 339 aV0^^ R 412 5. 82 340 crV0_Hv A R 426 5. 92 341 〇v〇 O W 419 4. 36 (待續） 097148178 134 200930370

342 cry^^H A T 424 4.2 343 0 c 391 4. 03 344 u 398 4. 81 345 u 432 5. 33 346 u 378 4. 7 347 〇 r^C u 432 5. 33 348 vP免 ~~N \ u 412 4.89 (待續） 097148178 135 200930370 349 υ 384 4. 79 350 υ 418 5. 26 351 υ 364 4. 64 352 υ 418 5. 26 353 νΡ"% —ΝΗ υ 398 5. 08 354 ν〇°^ —ΝΗ υ 378 5. 07 355 υ 424 5. 11 (待續） 097148178 136 200930370 Ο 356 ο r JO；, u 458 5.57 357 u 404 4. 96 358 u 458 5. 57 359 cA°^：h Nb u 438 5. 22 360 u 418 5. 21 361 c 375 6. 51 362 HOxrY」心1 T 460 4.80 (待續） 097148178 137 200930370 363 A 384 4. 12 364 T 410 4. 30 365 T 460 4. 80 366 T 424 4. 63 367 C 393 6. 77 368 C 391 4. 03 369 ςν^% ^ 0 B 410 4. 07 (待續） 097148178 138 200930370 ❹ 370 9γ^ 0 Q 444 4. 54 371 ό" D 390 4. 13 372 0 Q 444 4. 54 373 Si Q 424 4. 24 374 、O Oh Q 404 4. 24 375 ra 0 D 410 4. 01 376 9y^ 0 Q 444 4. 61 (待續） 097148178 139 200930370 377 0 D 390 1. 02 378 ^ rj^r\=, « 0 Q 444 4. 61 379 - Η u Q 424 4. 19 380 ay^ Q 404 4. 25 381 >Ί 〇^〇=\ -0 Q 460 4.45 382 rv U " D 406 3. 96 383 0 Q 460 4. 45 (待續） 097148178 140 200930370 ❹ 384 .- Q 440 4. 07 385 Η0 Q 420 4. 06 386 D 510 5. 88 387 NH0"' Q 544 6. 45 388 D 490 5. 85 389 nhO^' Q 544 6.45 390 。丫 W % Q 524 6. 04 (待續） 097148178 141 200930370 391 Q 504 6.04 392 D 510 5.86 393 1 丫」 nhO- Q 544 6.46 394 ^vO^b D 490 5. 84 395 nhO-' Q 544 6.46 396 Q 524 6. 03 397 Svc^b Q 504 6. 04 (待續） 097148178 142 200930370 ❹ 398 心。 D 526 4. 95 399 〇 Y 409 5. 50 400 Y 438 4.89 401 Y 450 4. 49 402 A 381 4. 65 403 o^b N^/ / 0A 424 4. 38 404 0A 412 4.49 (待續） 097148178 143 200930370 405 0Α 398 4. 38 406 0Α 418 4. 69 407 Υ 440 4.49 408 Υ 381 5. 14 409 0 、~1 Υ 395 5. 72 410 ο Ν~( Υ 410 4. 40 411 -Cyr0^ Υ 424 4. 13 (待續） 097148178 144 200930370 ❹ 412 Y 412 4. 10 413 0A 361 4. 29 414 ο Y 423 6. 05 415 、…气 Y 398 3. 96 416 / 0A 404 4. 25 417 0A 392 4. 35 418 0A 378 4. 12 (待續） 097148178 145 200930370 419 OA 398 4. 54 420 0 x~’ Y 418 4. 53 421 -〇Yaaib 0 Y 452 4.43 422 0 X 389 5. 26 423 0 X 403 5. 85 424 Ο X 418 4. 52 425 N 432 4. 42 (待續） 097148178 146 200930370

426 N 432 4.44 427 -Cycr% 0 X 432 4.26 428 1 0 X 420 4. 27 429 1 0 X 406 4. 08 430 0 X 426 4.65 431 1 0 Y 440 4. 50 432 X 389 5.48 (待續） 097148178 147 200930370 433 X 403 6. 09 434 X 432 4. 83 435 X 420 4. 89 436 X 406 4. 75 437 X 426 4. 91 438 0 ~ X 361 5. 33 439 0 ~f X 375 5. 84 (待續） 097148178 148 200930370 ❹ 440 o N~f X 390 4.50 441 0 、~f X 404 4. 27 442 X 392 4. 16 443 X 378 3. 96 444 0 x~f X 397 4. 67 445 avC^b 0 Y 446 5. 13 446 P^-O-" ChT Λ- Y 409 5. 67 (待續） 097148178 149 200930370 447 Y 423 6. 26 448 0 s 483 4. 54 449 z 439 4. 09 生物活性

Smo之選殖及穩定的重組smo表現細胞系之生成 人類Smo編碼序列使用標準條件藉聚合酶連鎖反應（pcr) 擴增。樣板為得自〇rigene公司之pcMV6-XL5-Smo (型錄號 碼TC122724)。引子對設計如下： 正向引子（5’ GATCGGTACCGGGCTTTTGCTGAGTT 3，）具有 ΚρηΙ限剪位置； 反向引子（5， GATCGCGGCCGCCTACTTATCGTCGTCATCCTT GTAATCGAAGTCCGAGTCTGC 3，）具有一 Notl 限剪位置、一停 止密碼子、及一 FLAG-編碼序列於5’端。 所得擴增子長2424 bp且含有完整smo編碼序列、一

標籤及兩個限剪位置，於每端各有一個。擴增之以Κρηΐ及 No11限剪酶雙重剪切，且選出pe_5/FRT f體（ι_廿。卿) 用於選殖。Smo-FLAG編碼序列之接合及選殖入pcMA5/FRT 097148178 150 200930370 質體，產生一種質體定名為PcDNA5/FRT_Smo-FLAG長7432 bp °

FlpIN技術（Invitrogen)用於使用FlpIN293細胞系 (Invitrogen，RT50-07)形成穩定表現Smo-FLAG細胞系。此 細胞系乃衍生自以pFRT/lacZeo質體穩定轉染HEK293細胞 所產生具zeocin-抗藥性之FlpIN293宿主細胞系。FlpIN293 細胞適合形成含有嵌入式Flp重組標靶（FRT)位置 © (Invitrogen)之穩定哺乳動物細胞系。 以pcDNA5/FRT_Sm〇-FLAG質體轉染（或於偽轉染細胞之情 況下’以空白質體轉染）係與攜帶Flp重組酶之p〇G44質體 之轉染共同進行’該Flp重組酶催化宿主細胞之FRT位置分 別與pcMA5/FRT一Smo-FLAG表現載體或pcDNA5/FRT空白載 體間之同系重組。Smo-FLAG表現細胞及偽轉染細胞具有濕 黴素（hygromycin) B抗藥性且對/3-gal染色呈陰性。也藉 ❹ 西方墨點分析檢查Smo抗原及FLAG抗原之表現.。生成的二 細胞糸訂名為293FlpIN/純株E-3指示偽轉染細胞系及 293FlpIN/純株3-5指示Smo-FLAG轉染的細胞系。 細胞培養條件 細胞維持於含10%胎牛血清之DMEM (皆係得自 Invitrogen) ’添加 〇. 25 毫克/毫升濕黴素 β (Invitrogen)。細胞維持於37乞於95%空氣-⑽二氧化碳充 份濕化環境，於解凍後使用高達22-25週期。 097148178 151 200930370 結合檢定分析發展 化合物與Smo受體之交互作用係藉置換結合檢定分析試 驗’使用Smo受體之螢光配體（Bodipy-Cyclopamine， Toronto Research Chemical Inc，型錄號碼#6674800)作為 欲置換之加標記的配體。 為了測定螢光配體之Kd (達到50%最大結合之配體濃度） 及Bmax (可與生物製劑中之受體特別結合之配體之最大 量），經由從總結合（TB)中扣除非特異性結合（NSB)求出特異 性結合（SB) 。TB係經由添加遞增濃度之 Bod i py-Cyc 1 opami ne至細胞測定，NSB係經由添加遞增濃度 之Bodipy-Cyclopamine與飽和濃度之經過明確說明之拮抗 劑（本例中選用Ν-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-4-氯苯 基]-3, 5-二甲氧基-苄醯胺（Rubin et al. W02003011219) 10 μΜ)之混合物至細胞測定。對各種濃度之

Bodipy-Cyclopamine，由 ΤΒ 中扣除 NSB 值求出 SB。由 SB 曲線，計算Bmax及Kd。此種情況下，發現穩定的偽轉染的 細胞系純株E-3具有Kd為115 nM，而發現穩定的Smo-FLAG 轉染的細胞系純株3-5具有Kd為44. 3 nM°Ki為可抑制 加標記配體之特異性結合（SB)之未加標記配體之濃度，且對 加標記配體之有效使用濃度經校正。Ki係遵照 Cheng-Prusoff 方程 式計算 ，

Ki = ICs〇/[l + [bodipy-cyclopamine]/Kd)] ° 097148178 152 200930370 以結合檢定分析試驗化合物 以Burker腔室計數293FlpIN/純株E-3及293FlpIN/純株 3-5細胞，100000細胞/100微升MEM 1% FBS轉染兩片96 孔孔板（U字形底，Sigma Aldrich，型錄號碼 #M8185-100ΕΑ)。293FΙρΙΝ/純株E-3細胞用作為内部對照來 '檢驗Smo過度表現293FlpIN/純株3-5細胞螢光（FLU)隨時 間之變化。 ❹ 對照組及化合物係於DMEM 1%FBS製備，添加1〇〇微升至 細胞。全部對照及化合物皆與終濃度5 nM Bodipy-Cyclopamine 共同培養。 化合物溶解於DMS0 (備料10 mM)，首先於1〇 μΜ試驗（單 一濃度檢定分析）；各化合物至少重複兩次（於兩片不同孔 板）。當Bodipy-Cyclopamine被置換高於30%臨界值時，化 合物再度以濃度-反應檢定分析試驗，試驗產出量為每片孔 ❹板8種化合物’濃度範圍為：1〇〇、1〇、卜〇. 5、〇.卜〇. 〇1、 0. 05、0. 001 及 〇. oow μΜ。 至於陰性對照組使用293FlpIN/純株3_5細胞，其中添加 DMS0稀釋1 : 1〇〇〇用於單一濃度檢定分析及稀釋1 : 1〇〇用 於濃度_反應檢定分析。 至於元全置換B〇dipy-CyCi〇pamine結合之陽性對照組， 使用濃度為10 μΜ之n-[3-(1H_苯并咪唑-2-基）-4-氯苯 基]-3, 5-—甲氧基-苄酿胺（尺此化et al. W02003011219)。 097148178 153 200930370 兩片孔板於室溫於振搖平台上避光培養4小時。培養後孔 板於1600 rpm離心5分鐘，以含2% FBS之PBS洗兩次。最 後細胞再懸浮於170微升洗條緩衝液，以FACScal ibur HTS 系統（Becton Dickinson)獲得螢光信號。 於各片孔板讀取之始，使用未經處理的且未加標記的 293FlpIN/純株E-3細胞設定儀器獲取參數。使用的HTS獲 取程式為 BD Plate Manager (BD Bioscience)及資料分析 係使用 BD CellQuest Pro 軟體（BD Bioscience)進行。 經由重疊陽性對照組與陰性對照組之FL1-H直方圖以及 設定一個標諸、於兩條曲線間之交叉點進行定量。唯有螢光大 於所設定之標誌之該等事件才加以量化。然後數值根據陰性 對照組（0% Bodipy-Cyclopamine置換）及陽性對照組（100% Bodipy-Cyclopamine 置換）規度化。 實施例1-449化合物當於前述條件下試驗時，全部皆顯示 83 pM至31 μΜ間之Ki值。 使用鹼性磷酸酶檢定分析試驗化合物 於小鼠中葉細胞系 C3H10T1/2 (Katsuura et al.，1999;

Kinto et al., 1997; Murone et al., 1999; Nakamura et al.，1997，Wu et al. 2004) Shh於試管内已經驗證可誘 導鹼性磷酸酶（AP)，AP為成骨細胞分化之標誌。因此為了 分析小分子與刺蜎因子-Gli傳訊之干擾，於本小鼠細胞系 中實施基於AP活化之功能檢定分析。AttoPhos套件組（型 097148178 154 200930370 錄號碼S1000，Promega)之酶基質用於檢測溶液中之ΑΡβ簡 言之’應用下列程序。 經聚離胺酸塗覆之透明平底96孔孔板（Corning，型錄號 碼3667)每孔填充1〇, 〇〇〇細胞於1〇〇微升細胞培養溶液。 細胞培養基包含DMEM (型錄號碼21969-035)含l%Glutamax (型錄號碼35050-038)，1%青黴素（peniciUin)/鏈黴素 (Streptomycin)(型錄號碼 1514〇-122)及 1% Hepes ❹（1563〇-〇56)。全部試劑皆係得自Invitr〇gen。孔板於37 C與5%二氧化碳培養隔夜。然後移出培養基，1〇〇微升含化 合物或參考拮抗劑Ν-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基）-4-氯苯 基]一3,5—二甲氧基一苄醯胺（Rubin et al. W02003011219) 之新鮮培養基添加至各孔。全部化合物及參考溶液含有濃度 為 2 μΜ 之促效劑 purmorphamine ⑻―et al. __ 邙⑽·

Biol. 2，29-30 (2005))。化合物於 loo pm 至 5〇 ㈣範圍 ❹重複三次以種濃度試驗。各樣本之DMS0終濃度於培養基 中調整至1%。於5%二氧化碳存在下細胞於3rc與化合物溶 液共同培養72小時。由孔板取出細胞培養基，4〇微升1:5 稀釋之溶解溶液（型錄號碼E194A，Pr〇mega)添加至各孔。 然後孔板於振搖器上於暗處培養2〇分鐘。最後，4〇微升重 新調製的AtfPhos酶基質溶液添加至各孔，接著又於振搖 器上培養15分鐘時間。AttoPh〇s酶基質係根據供應商的指 示重新調製，但酶基質溶液經常性儲存於—別它。Safire 2 097148178 155 200930370 . 孔板讀取器（Tecan)用於使用430奈米激光波長及560奈米 發光波長測定樣本之螢光強度變化。 實施例1-449化合物當於前述條件試驗時，皆顯示26 pM 至42 μΜ範圍間之IC5。值。 097148178 156

Claims (1)

1. 200930370 七、申請專利範圍： 1. 一種式I化合物 1¾

   〇 及其醫藥上可接受之鹽，其中，當價數及穩定性許可時 匕為Η;視需要可經以一個或多個鹵原子取代之線性、分 支或環狀（G-C4)烷基、分支或線性（G-C4)烷氧基或一-或二 -線性、分支或環狀（G-C6)烷基胺基； r等於0、1、2或3 ; 當r大於1時，R!’各自分別表示鹵原子；線性、分支或 環狀（Ct-CO烷氧基；視需要可經以線性或分支（G-C4)烷氧 ® 基、烷基胺基或二烷基胺基取代之線性、分支或環狀（G-C4) 院基； R2可為 Η、Cl、F 或 Br ; X可為N或CH ; i及j可為1、2、或3，i + j之和不可超過5，及當X為N 時i及j不可為1 ; R3可為Η ;視需要可經以胺基甲醯基或一個或多個氟原子 取代之線性、分支或環狀（G-Ce)烷基、噚烷基、烷基羰基、 097148178 157 200930370 烷基磺醯基、崎烷基羰基、烷氧基羰基、烷基胺基羰基、哼 烯基、稀基羰基、哼浠基羰基、烯氧基羰基、埽基胺基羰基、 亞烷基、烷氧基亞胺基、羥基、烷氧基、烯氧基；; Ar_ 胺基羰基；經以一個或兩個Ar取代且視需要可經以一個或 多個氟原子取代之線性或分支（G-C4)烷基、烷基胺基、η丫烧 基、崎烷基、烷基羰基、烷氧基羰基或烷基胺基羰基；

   Q為兩個氮原子間或一個氮原子與一個氧原子間未形成 直接鍵結且可為羰基；胺基羰基；羰基胺基；亞胺；s〇2; 視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性或分支…广匕） 烧基，其中一個亞甲基可經以〇、NRx、羰基或S〇2置換，或 其中兩個接續之亞甲基可經以羰基胺基、胺基羰基、磺醯基 胺基、胺基磺醯基置換； Ar為視需要可經以分別選自於鹵原子、羥基、毓基、胺 〇 基、氰基、硝基、胺基甲醯基、胺基磺醯基、三_甲基、三 鹵甲氧基、線性、分支或環狀（Ci_C4)烷基、羥基烷基、一— 或二-烷基胺基、烷氧基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基羰 基胺基、β亏烷基、吖烷基中之一個或多個基團取代之5至 10員芳香環或雜芳香環，且此等取代基中之二者可形成帶 有與Ar稠合接點之5至§員環； Rx可為Η或線性、分支或環狀（Ci_C4)烷基、二鹵烷基或 097148178 158 200930370 三鹵烧基； q可為0或1 ; k可為1、2、3或4; 1、m、η、p、p’及s可分別為丨、2或3 ; t可為0、1或2 ; l+m、n+p或p’ +s+t之和不可超過5;

   T及Τ’各自分黯示氫；線性、分支或環狀（…炫基 °丫燒基、辦基、縣”丫烯基、㈣基、其鏈視需要可經 以鹵原子、胺基、氰基、羥基、酮基、線性、分支 烧基獄基、錄基躲、絲祕絲、絲絲幾基、胺 基甲醯基、胍基、烯基絲、烯基縣、稀氧基幾基、稀 基胺基羰基取代； Ζ 可為◦、S、S〇2、S0、或 NRy，; Ry及Ry分別表不Η ;視需要可經以一個或多個氟原子 ©取代之線性、分支或環狀（Cl_C6)院基、烧基幾基、烧氧基幾 基或烧基胺基幾基； y及y’分別為0、1、2或3 ; Y!及Y2分別表示齒原子；羥基；胺基；氰基；硝基，·酮 基；視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性或分支 (G-C6)烷基、二鹵烷基、吖烷基、哼烷基、烷基羰基、哼烷 基羰基、烷氧基羰基、烷基胺基羰基、烷基羰基胺基、烯基、 °亏烯基、吖烯基、烯基羰基、哼烯基羰基、烯氧基羰基、烯 097148178 159 200930370 基胺基錄、燒基胺基、巯基縣、烧氧基、烧硫基；其中 兩個丫2基可以螺接合或稍合接合而形成5至8員環； 以及排除2—[4'(4、曱基H卜基）-苯基]-1H-苯并咪 唾2 [4 (4 t匕唆、2〜基_口辰畊_卜基）_苯基]_1Η_笨并味唾。 2.如申請專利範圍第1項之化合物，其具有式la

   其中 ’ Ri、、p D v 、， I、R3、X、Yi、Γ、i、j 及 y 係如申請 專利範圍第1項之說明。 3.如申請專利範圍第2項之化合物，其中， X為N ; 、可為Η，視而要可經以胺基甲酿基或一個或多個氟原子 取代之線n *支或環狀（Gi_Ge)烧基“槐基、烧基幾基、 烷基磺醯基、哼烷基羰基、烷氧基羰基、烷基胺基羰基、喝 稀基、烯基幾基、哼烯基羰基、烯氧基羰基或烯基胺基羰基； Ar ; Ar-胺基羰基；經以一個或兩個Ar取代且視需要可經以 一個或多個氟原子取代之線性或分支（Cl_C4)烷基、烷基胺 基、°丫烧基、噌烷基、烷基羰基、烷氧基羰基或烷基胺基羰 基； 097148178 160 200930370

   Q為兩個氮原子間或一個氮原子與一個氧原子間未形成 直接鍵結且可為羰基；胺基羰基；羰基胺基；亞胺；S〇2 ; 視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性或分支（C! - C 6 ) _ 烷基，其中一個亞曱基可經以0、NRx、羰基或S〇2置換，或 其中兩個接續之亞曱基可經以羰基胺基、胺基羰基、磺醯基 © 胺基、胺基磺醯基置換。 4. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中，X為CH。 5. 如申請專利範圍第3或4項之化合物，其中， R3為 ,r -(Ok—η

   q為1。 6. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中，q為1，及Q 為羰基；視需要可經以一個或多個氟原子取代之線性、分支 或環狀（Cl-C6)院基、（C1-C5)院基幾基或幾基（Cl-C5)炫》基。 7. 如申請專利範圍第4項之化合物，其中，q為零，及R3 係選自於 097148178 161 200930370

   8· 一種f #組成物，其含有申請專利額第1至7項作 -項之化合物及藥學上可接受之侧或賦形劑。 9. 種利用申请專利範圍第1至γ項中任一項之化合物製 備治療或預防骨質疏鬆症或癌症藥物之用途。 10. 如申請專利範圍第9項之用途，其係用於治療選自於 非小細胞肺癌；小細胞肺癌；乳癌；卵巢瘤；消化道瘤；腦 癌；攝護腺癌；胰臟癌；基底細胞癌；惡性黑色素瘤；鱗狀 細胞癌；多發性肌瘤；淋巴瘤；間葉癌；慢性骨髓性白灰病； 子宮内膜癌；肝細胞癌中之癌症。 097148178 162 200930370 四、指定代表圖·· (一) 本案指定代表圖為：無 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 益 ◎ 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： «2 0V)

   097148178