SU468953A1 - Способ получени трипаномицина - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПАНОМИЦИНА услови х штамм Streptomyces, причем под этим штаммом подразумевают штамм IMETJA 10081, подобный по описанию Streptomyces diastatocliromogencs (Ваксмап, 1961 г.),его мутанты или разиовидиости. Культивирование штамма производ т в подход шей питательной среде в течение 2-6 дпей при температуре от 25 до , в токе воздуха и при перемешивании, причем в питательную среду добавл ют соли т желых металлов. После отделени  мицели  антибиотик выдел ют с помощью экстракции раствор .ителем, как из культуральиого фильтрата, так и из мицелл. Перевод т его в водную фазу , непосредственно за этим повторно экстрагируют из водного неочиш.енного концентрата органическим растворителем, а затем осаждают продукт из неочишенного концентрата низкокип ш,ей фракцией углеводородов. Полученный антибиотик обозначаетс  как трипаномицин . Пример 1. В две бутылки с крутыми стенками емкостью 500 мл помеш,ают по 80 мл питательной среды дл  предварительного культивировани  следующего состава (%): Глюкоза1,5 Соева  мука1,5 Карбонат кальцп 0,1 Хлористый натрий0,5 Первичный фосфат кали 0,03 Водопроводна  водаДо 1 (л) Производ т фракционную стерилизацию 3 раза по 30 мин при температуре 100°С. После стерилизации рП составл ет 6,3. В каждую бутыль ввод т по 1/10 части суспензии спор, которую получают посредством смешепи  стерильного раствора поваренной соли с четырнаддатидневной культурой IMETJA 10081, культивированной в пробирке на питательной среде состава (%): Сахароза0,300 Декстрин1,500 Мочевина0,010 Дрожжевой экстракт0,100 Пептон0,500 Хлористый натрий0,050 Сульфат железа0,001 Первичный фосфат кали 0,050 Агар (промытый)2,000 Дистиллированна  водаОстальное Провод т стерилизацию 40 мип при . После стерилизации рН культуральной жидкости составл ет 6,5-7,0. Инкубацию провод т 48 час нри температуре 28°С и перемешивании . 8 мл приготовленпой указанным способом культуральной жидкости засевают в бутыли , в которых находитс  по 80 мл питательной среды следующего состава (%): Глюкоза3,0 Соева  мука2,0 Карбонат кальци 0,3 Хлористый натрий0,5 Водопроводна  водаОстальное Стерилизацию провод т 35 мин при 110°С. После стерилизации рП составл ет 6,3. Пнкубируют при температуре 28°С и перемешивапии со скоростью 180 об/мин. Паибольшее содержание трипапомицина наблюдают по истечении 96 час (150 мг/мл) ферметации . Определение активности производ т с помощью известного микробиологического снособа , при котором испытание осиовываетс  на диффузии агара и ири котором величина замедл ющего действи  на размножение температурных вирусов в бактери х  вл етс  мерой активности антибиотика. Пример 2. Опыт провод т аналогично примеру 1, но на производ щей питательной среде состава (%): Глюкоза3,000 Соева  мука3,000 Карбонат кальци 0,300 Хлористый натрий0,300 Хлорное железо0,025 Водопроводна  водаОстальное После стерилизации рН равно 6,5. Наивысшее содержание тринаномицина наблюдают по истечении 100 час-170 мг/мл. Пример 3. Опыт провод т аналогично примеру 2, но среда предварительного выращивани  и ферментационна  среда имеют другие составы. Среда предварительного выращивани  (%): Пептон0,60 Сухие дрожжи0,30 Нитрат кальци , гидрат0,05 Водопроводна  водаОстальное Стерилизацию провод т 20 мин при 120°С. После стерилизации рП среды равпо 7,2. Ферментационна  питательна  среда (%): Глюкоза3,000 Сухие дрожжи0,300 Хлористый натрий0,300 Вторичный фосфат кали 0,100 Карбонат кальци 0,150 Сульфат .магни 0,010 железа0,002 Сульфат цинка0,002 Сульфат меди0,001 Водопроводна  водаОстальное РН ферментационной среды равно 7,0. Стерилизацию провод т обычным обраом . Наивысшее содержание трипаномицина остигаетс  но истечении 120 час ферментаии - 160 .мг/мл. Предмет изобретени  1. Снособ нолучени  триианош-щина, отлиающийс  тем, что культуру Streptomyces iastatochrornogenes IMETJy 10081 выращиают в аэробных услови х на среде, содеращей источники углерода, азота и минеальные соли, лгицелий и фильтрат культу56

ралыюй жидкости экстрагируют органическимвыращивание осуществл ют в течение 2-6

растворителем и выдел ют целевой нродуктдней при температуре 25-37°С.

известными приемами.3. Способ по пн. 1 и 2, отличаюп(ийс  тем, 2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что 5 вин солей железа.

468953

что выращивание осуществл ют в присутст