SU1690544A3 - Способ получени иммобилизованных нуклеофильных соединений - Google Patents
Способ получени иммобилизованных нуклеофильных соединений Download PDFInfo
- Publication number
- SU1690544A3 SU1690544A3 SU833636515A SU3636515A SU1690544A3 SU 1690544 A3 SU1690544 A3 SU 1690544A3 SU 833636515 A SU833636515 A SU 833636515A SU 3636515 A SU3636515 A SU 3636515A SU 1690544 A3 SU1690544 A3 SU 1690544A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- hours
- gel
- nucleophilic
- molar
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract 10
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 title claims abstract 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 9
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 7
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 7
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 3
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 3
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011837 N,N-methylenebisacrylamide Substances 0.000 claims description 2
- 229920006322 acrylamide copolymer Polymers 0.000 claims description 2
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims 3
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 claims 3
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 claims 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims 1
- 229940105657 catalase Drugs 0.000 claims 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 43
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- -1 amino, sulfhydryl Chemical group 0.000 abstract description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 abstract 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 abstract 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 7
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 7
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 7
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 5
- ASHGTUMKRVIOLH-UHFFFAOYSA-L potassium;sodium;hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[K+].OP([O-])([O-])=O ASHGTUMKRVIOLH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000004280 Sodium formate Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- SDCJMBBHNJPYGW-UHFFFAOYSA-L disodium;hydrogen carbonate;chloride Chemical compound [Na+].[Na+].Cl.[O-]C([O-])=O SDCJMBBHNJPYGW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M sodium formate Chemical compound [Na+].[O-]C=O HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019254 sodium formate Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/28—Condensation with aldehydes or ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/30—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups
- C08F8/32—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups by reaction with amines
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
- C12N11/087—Acrylic polymers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к способу иммобилизации биологически активных соединений , содержащих нуклеофильные группы - у-аминомасл ной кислоты, глюкозы, альбумина бычьей, сыворотки, глюкозооксидазы и каталазы. Изобретение позвол ет повысить стабильность полученных продуктов за счет Изобретение относитс к способу иммобилизации биологически активных соединений , содержащих нуклеофильные группы, таких как у-аминомасл на кислота, глюкоза , альбумин бычьей сыворотки, глюкозоокси- даза и каталаза. Цель изобретени - повышение стабильности целевых продуктов. Пример1.30г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и N.N -мети- лен-бис-акриламида) суспендируют в 1200 мл 0,1 М фосфатного калиевого буфера (рН 8), того, что активизируют сополимер акриламида с N.N-метиленбисакриламидом путем добавлени к суспензии сополимера в фосфатном буфере с рН 8 раствора п-бензохи- нона в водном диоксане при концентрации n-бензохинона в реакционной смеси 50 ммоль/л и реакционную смесь выдерживают при 50°С в течение 24 ч. Полученный гель промывают и подвергают взаимодействию с нуклеофильным соединением - у-ами- номасл ной кислотой, глюкозой, альбумином бычьей сыворотки, глюкозооксидазой или каталазой. Взаимодействие провод т путем добавлени к гелю активированного сополимера раствора нуклеофильного соединени в буферной смеси с рН 3-9 и концентрацией у-аминомасл ной кислоты и глюкозы 0,01 моль/л, а остальных соединений - 20 мг/мл. Смесь выдерживают при 4°С в течение 24 ч при конечной концентрации у-аминомасл ной кислоты и глюкозы 2,5 ммоль/л, а остальных нуклеофильных соединений - 5 мг/мл, 1 табл. после чего к полученной суспензии добавл ют 0,25 моль n-бензохинона в 20%-ном растворе диоксана (300 мл) и выдерживают ее в течение 24 ч при 50°С. Концентраци п-бен- зохинона в смеси равна 50 ммоль/л. Набухший гель отдел ют и последовательно промывают 3 л 20%-ного раствора диоксана и 10 л дистиллированной воды. Отмытый гель лиофилизируют. В результате получают 24,3 г активированного носител . П р и м е р 2. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акиламида и N.N -метиО о о ел fc со
Description
лен-бис-акриламида) суспендируют в 4,0 мл 0,1 М буфера (рН 8), после чего к полученной суспензии добавл ют раствор 0,25 моль п- бензохинона в 20%-ном растворе диоксана (1,0 мл) (концентраци п-бензохинона 50 ммоль/л) и выдерживают ее в течение 24 ч при 50°С. Набухший гель отдел ют и последовательно промывают 70 мл 20%-ного раствора диоксана в 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровывают на вакуумном фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл 0,01-мол рного раствора } -ами- номасл ной кислоты. Дл растворени у аминомасл ной кислбты используют 0,1-мол рный раствор калийнатрийфосфат- ного буфера (рН 7,5). Суспензию выдерживают в течение 24 ч при 4°С, гель отдел ют, а несв занную у-аминомасл ную кислоту удал ют путем промывкиО,1-мол рным рас- твором натрийацетатного буфера (рН 5,0), содержащего 1,0 моль хлористого натри и 0,1-мол рным раствором бикарбоната натри (рН 8,5). Количество св занной аминомасл ной кислоты составл ет 4,0 мкмоль, что соответствует 20% от всего ее количества в реакционной смеси.
Пример 3. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и N,N -мети- лен-бис-акриламида) суспендируют в 4,0 мл 0,1-мол рного фосфатного буфера (рН 8,0). После добавки к суспензии раствора 0,25 моль п-бензохинона в 20%-ном растворе диоксана (1,0 мл) ее оставл ют сто ть в течение 24 ч при 50°С. Затем набухший гель отдел ют и последовательно промывают 70 мл 20%-ного раствора диоксана и 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровывают на вакуумном фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл раствора альбумина бычьей сыворотки (20 мг/мл). Дл растворени альбу- мина бычьей сыворотки используют 0,1-мол рный натрийформиатный буферный раствор (рН 3,0). Суспензию выдержи- вают в течение 24 ч при 4°С, после чего гель отдел ют и удал ют несв занный альбумин сыворотки путем последовательной промывки 0,1-мол рным раствором натрийацетатного буфера (рН 5,0), содержащего 1,0 моль хлористого натри и 0,1-мол рным раствором бикарбоната натри (рН 8,5). Количество св занного альбумина бычьей сыворотки составл ют 10 мг. Выход 25% в расчете на добавл емый к реакционной смеси альбумин сыворотки.
Пример 4. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и М,М -мети- лен-бис-акриламида) суспендируют в 4,0 мл
0,1-мол рного фосфатного буфера (рН 8,0), после чего добавл ют к полученной суспензии раствор 0,25 моль n-бенэохинона в 20%- ном растворе диоксана (1,0 мл) и составл ют ее состо ть в течение 24 ч при 50°С. Затем набухший гель отдел ют и последовательно промывают 70 мл 20%-ного раствора диоксана и 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровывают на вакуумном фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл раствора альбумина бычьей сыворотки (20 мг/мл). Дл растворени альбумина бычьей сыворотки используют 0,1-мол рный калийнатрийфосфатный буфер (рН 6,0). Суспензию выдерживают в течение 24 ч при 4°С, после чего гель отдел ют, а несв занный альбумин сыворотки удал ют путем последовательной промывки 0,1-мол рным натрийацетатным буфером (рН 5,0), содержащим 1,0 моль хлористого натри , и 0,1- мол рным раствором бикарбоната натри (рН 8,5). Количество св занного альбумина сыворотки составл ет 4,5 мг, что соответствует 11,25% от всего его количества в реакционной смеси.
Пример 5. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и N.N -мети- лен-бис-акриламида) суспендируют в 4,0 мл 0,1-мол рного фосфатного буфера (рН 8,0), после чего к полученной суспензии добавл ют раствор 0,25 моль п-бензохинона в 20%- ном растворе диоксана (1,0 мл) и выдерживают ее в течение 24 ч при 50°С. Набухший гель отдел ют и последовательно промывают 70 мл 20%-ного раствора диоксана и 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровывают на вакуумном фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл раствора альбумина бычьей сыворотки (20 мг/мл). Дл растворени альбумина бычьей сыворотки используют 0,1-мол рный буферный раствор карбоната и бикарбоната натри (рН 9,0). Суспеьзию выдер живают в течение 24 ч при 4°С, после чего гель отдел ют и удал ют несв занный альбумин сыворотки путем последовательной промывки его 0,1-мол рным натрийацетатным буфером, содержащим 1,0 моль хлористого натри (рН 5,0), и 0,1-мол рным раствором бикарбоната натри . Количество св занного альбумина бычьей сыворотки составл ет 5,0 мг, что соответствует 12,5% от общего его количества в реакционной смеси.
Пример 6. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и N.N -мети- лен-бис-акриламида) суспендируют в 4,0 мл 0,1-мол рного фосфатного буфера (рН 8,0), после чего к полученной суспензии добавл ют раствор 0,25 моль п-бензохинона в 20%ном растворе диоксана (1 мл) и выдерживают ее в течение 24 ч при 50°С. Набухший гель отдел ют и промывают последовательно 70 мл 20%-ного раствора диоксана и 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровывают на вакуумной фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл раствора глюкозооксидазы (20 мг/мл). Дл растворени глюкозооксидазы используют 0,1-мол рный калийнат- рийфосфатный буфер (рН 7,5). Суспензию выдерживают в течение 24 ч при 4°С, гель отдел ют, а несв занный блок удал ют путем последовательной промывки 0,1-мол р- ным натрийацетатным буфером, содер- жащим 1,0 моль хлористого натри (рН 5,0), и 0,1-мол рным раствором бикарбоната натри (рН 8,5).
Количество св занного с гелем белка составл ет 4,5 мг. Активность полученного продукта равна 7,2 ед./г ксерогел . Одна единица активности соответствует тому количеству фермента, которое обеспечивает каталитическое окисление 1,0 мкмоль глюкозы в минуту при рН 7,0 и температуре 25°С. Удельна активность св занного фермента составл ет 8% от удельной активности растворенного фермента.
Пример 7. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и Ы,М -метилен-бис-акриламида ) суспендируют в 4,0 мл 0,1-мол рного фосфатного буфера (рН 8,0), после чего к полученной суспензии добавл ют раствор 0,25 моль n-бензохинона в 20%- ном растворе диоксана (1,0 мл) и выдерживают ее в течение 24 ч при 50°С. Набухший гель отдел ют и промывают по- следовательно 70 мл 20%-ного раствора диоксана и 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровыва- ют на вакуумном фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл раствора каталазы (20 мг/мл). Дл растворени каталазы используют 0,1- мол рный раствор калийнатрийфосфатного буфера (рН 7,5). Суспензию выдерживают в течение 24 ч при 4°С, гель отдел ют и удал ют несв занный белок путем последовательной промывки 0,1-мол рным натрийацетатным буфером, содержащим 1,0 моль хлористого натри (рН 5,0) и 0,1-мол р- ным раствором бикарбоната натри (рН 8.5).
Количество св занного белка составл ет 5,3 мг, активность полученного продукта равна 2100 ед./г ксерогел . Одна единица активности соответствует тому количеству фермента, которое катализирует разложение 1 мкмоль перекиси водорода в минуту при 25°С. Удельна активность св занного
фермента составл ет 2% от удельной актин ности раствора фермента.
П р и м е р 8. 0,1 г ксерогел акрилекс Р-100 (сополимер акриламида и N.N1 -мети- лен-бис-акриламида) суспендируют в 4,0 мл 0,1-мол рного фосфатного буфера (рН 8.0) после чего к полученной суспензии добавл ют раствор 0,25 моль n-бензохинона в 20%- ном растворе диоксана (1.0 мл) и выдерживают суспензию в течение 24 ч при 50°С Набухший гель отдел ют и промывают последовательно 70 мл 20%-ного раствора диоксана и 70 мл дистиллированной воды.
Активированный гель отфильтровывают на вакуумном фильтре и добавл ют к нему 2,0 мл 0,01-мол рного раствора глюкозы в 0,1-мол рном растворе калийнатрийфосфатного буфера (рН 7.5). Суспензию выдерживают в течение 24 ч при 4°С, после чего гель отдел ют и удал ют несв занную глюкозу путем последовательной промывки содержащим 1 моль хлористого натри 0,1-мол рным натрийацетатным буфером (рН 5,0) и 0,1-мол рным раствором бикарб- роната натри (рН 8,5). Количество св занной глюкозы составл ет б мкмоль, что соответствует 30% от всего ее количества в реакционной смеси.
Все данные по примерам 1-8 сведены в таблицу.
П р и м е р 9 (демонстрирует стабильность полученных продуктов), Колонку размером 1,5x10 см заполн ют 0,5 г иммобилизованного препарата фермента, полученного согласно примеру 6, активность которого составл ла 23 ед.
Через колонку пропускают в услови х промышленного процесса при 25°С и со скоростью 12 мл/ч 0,25-мол рный водный раствор глюкозы. Количество продукта в вытекающем потоке оставалось неизменным в течение 51 дн (1224 ч). Это доказывает, что фиксированный препарат фермента сохран ет свою активность.
Применение перепарата инвертазы, полученного известным способом, дл процесса гидролиза показало, что активность препарата падает в течение 100 ч работы.
Claims (1)
- Формула изобретени Способ получени иммобилизованных нуклеофильных соединений, включающий активацию сополимера акриламида с N,N- метиленбис-акриламидом и его взаимодействие с нуклеофильным соединением с последующей промывкой целевого продукта дл удалени низкомолекул рных примесей , отличающийс тем, что, с целью повышени стабильности целевых продуктов , активацию провод т путем добавленик суспензии сополимера в фосфатном буфере с рН 8 раствора n-бензохинона в водном диоксане, при концентрации п-бензохино- на в реакционной смеси 50 ммоль/л, и выдержки реакционной смеси при 50°С в течение 24 ч с последующей промывкой полученного гел , в качесвте нуклеофильных соединений используют у-аминомасл ную кислоту, глюкозу, альбумин бычьей сыворотки , глюкозооксидазу или каталазу и взаимодействие осуществл ют путем добавлени к гелю активированного сополимера раствора нуклеофильного соединени в буферной смеси с рН 3-9 и концентрацией у-аминомасл ной кислоты и глюкозы0,01 моль/л, а остальных нуклеофильных соединений - 20 мг/мл и выдержки смеси при 4°С в течение 24 ч при конечной концентрации у-аминомасл ной кислоты и глюкозы 2,5 ммоль/л, а остальных соединений 5 мг/мл.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU822719A HU186566B (en) | 1982-08-24 | 1982-08-24 | Process for immobilisation of combinations consisting nucleofil group |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1690544A3 true SU1690544A3 (ru) | 1991-11-07 |
Family
ID=10960804
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU833636515A SU1690544A3 (ru) | 1982-08-24 | 1983-08-23 | Способ получени иммобилизованных нуклеофильных соединений |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4670390A (ru) |
| JP (1) | JPS5998045A (ru) |
| DE (1) | DE3330573A1 (ru) |
| FR (1) | FR2532319B1 (ru) |
| HU (1) | HU186566B (ru) |
| SE (1) | SE463921B (ru) |
| SU (1) | SU1690544A3 (ru) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3688489T2 (de) * | 1985-08-29 | 1993-09-16 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | Einen feldeffekttransistor benutzender fuehler und dessen herstellungsverfahren. |
| AT395252B (de) * | 1989-04-04 | 1992-11-10 | Pittner Fritz | Verfahren zum immobilisieren von proteinen, peptiden, coenzymen an einem traeger |
| AT395253B (de) * | 1989-05-10 | 1992-11-10 | Pittner Fritz | Verfahren zum immobilisieren von proteinen, peptiden, coenzymen, liganden an einem traeger |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1392181A (en) * | 1971-04-16 | 1975-04-30 | Rech Et Dapplications Soc Gen | Fixation of nitrogenous materials |
| CS167530B1 (en) * | 1972-03-29 | 1976-04-29 | Jiri Coupek | Method of insoluble biologically active compounds preparation |
| CS167593B1 (ru) * | 1973-02-05 | 1976-04-29 | ||
| JPS5722922B2 (ru) * | 1974-01-17 | 1982-05-15 | ||
| FR2334107A1 (fr) * | 1975-12-05 | 1977-07-01 | Pasteur Institut | Procede de couplage de substances biologiques par des liaisons covalentes |
| GB1560938A (en) * | 1976-09-10 | 1980-02-13 | Chaplin M | Polymer gels |
| US4208309A (en) * | 1977-05-20 | 1980-06-17 | Rohm Gmbh | Pearl polymer containing hollow pearls |
| FR2398762A1 (fr) * | 1977-07-28 | 1979-02-23 | Marpha Etudes Expl Marques | Gels aqueux actives de copolymeres a base de n-(tris(hydroxy-methyl)methyl)acrylamide ou de n-(tris(hydroxymethyl)methyl)methacrylamide leur preparation et leur emploi dans les techniques d'immobilisation des substances naturelles |
| DD144559A1 (de) * | 1979-06-28 | 1980-10-22 | Jens Fischer | Regenerierung von organischen enzymtraegermaterialien fuer die wiederverwendung als traeger |
| US4282343A (en) * | 1980-02-07 | 1981-08-04 | Chevron Research Company | Poly-(alpha-alkoxy)acrylamide and poly-(alpha-alkoxy)acrylamide complexes |
-
1982
- 1982-08-24 HU HU822719A patent/HU186566B/hu not_active IP Right Cessation
-
1983
- 1983-08-23 SU SU833636515A patent/SU1690544A3/ru active
- 1983-08-23 JP JP58152572A patent/JPS5998045A/ja active Pending
- 1983-08-23 SE SE8304572A patent/SE463921B/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-08-24 DE DE3330573A patent/DE3330573A1/de not_active Withdrawn
- 1983-08-24 FR FR8313673A patent/FR2532319B1/fr not_active Expired
- 1983-08-24 US US06/526,035 patent/US4670390A/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР №530886, кл. С 12 N 11/08, 1975. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE8304572L (sv) | 1984-02-25 |
| HU186566B (en) | 1985-08-28 |
| JPS5998045A (ja) | 1984-06-06 |
| DE3330573A1 (de) | 1984-03-01 |
| FR2532319B1 (fr) | 1988-06-24 |
| US4670390A (en) | 1987-06-02 |
| FR2532319A1 (fr) | 1984-03-02 |
| SE8304572D0 (sv) | 1983-08-23 |
| SE463921B (sv) | 1991-02-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1093991A (en) | Enzyme immobilization with pullulan gel | |
| JPS5840474B2 (ja) | 酵素反応により有機物質を少くとも１種類の他の有機物質に変換する酵素利用法 | |
| JPS62257386A (ja) | ニトリル水和活性の保持方法 | |
| SU1690544A3 (ru) | Способ получени иммобилизованных нуклеофильных соединений | |
| CA1215336A (en) | Immobilization of catalytically active microorganisms in agar gel fibers | |
| JPS6214274B2 (ru) | ||
| JPH0556957B2 (ru) | ||
| US20240262858A1 (en) | Scalable production of polyribonucleotides of controlled size | |
| JPH11152330A (ja) | ポリリジン、及びポリリジンの製造方法、及びポリリジン組成物、及びエンドトキシンを除去する医薬品の生産方法 | |
| KR950014967B1 (ko) | 모라노린 유도체의 제법 | |
| Adachi et al. | Conversion of quinate to 3-dehydroshikimate by Ca-alginate-immobilized membrane of Gluconobacter oxydans IFO 3244 and subsequent asymmetric reduction of 3-dehydroshikimate to shikimate by immobilized cytoplasmic NADP-shikimate dehydrogenase | |
| EP0092829A2 (en) | Process for semi-synthesis of human insulin and alkaline protease for use therein | |
| DK143165B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af 6-aminopenicillansyre ved enzymatisk omsaetning af penicillin med en penicillinamidaseproducerende mikroorganisme | |
| GB1597436A (en) | Enzyme-immobilization carriers and preparation thereof | |
| JPH0884593A (ja) | Ｌ−セリンの製造方法 | |
| KR940010307B1 (ko) | 고농도 프락토올리고당의 제조법 | |
| SU735594A1 (ru) | Способ получени иммобилизованной эндонуклеазы | |
| JPH05244968A (ja) | α−ヒドロキシイソブチルアミドの製造法 | |
| JPS6167489A (ja) | 枯草菌の固定化細胞、固定化方法及び７‐β‐アシルアミドセフアロスポラン酸からの３‐アセトキシ基の脱離に対する生成物の使用 | |
| JP3126578B2 (ja) | 修飾酵素の精製方法 | |
| CA2002010A1 (en) | Immobilized enzyme and a method for application thereof | |
| SU1326616A1 (ru) | Способ получени иммобилизованной рибозофосфатизомеразы | |
| JPH0695945B2 (ja) | アセチルＣｏＡの製造法 | |
| JPS62163698A (ja) | γ−Ｌ−グルタミル−Ｌ−α−アミノ−ｎ−ブチリルグリシンの製造方法 | |
| JPH08501218A (ja) | 固定化グリコラートオキシダーゼ及びカタラーゼの存在下における，グリコール酸の酸化によるグリオキシル酸の製造 |