SU1029829A3 - Способ получени производных 1,8-нафтиридина или их фармацевтически пригодных солей - Google Patents

Abstract

Способ получени  1 8-нафтирндинового производного, описываемого общей формулой . X ° ,COOR .ьоДЛ Vs .в которой X - атом фтора или хлора R - атом водорода или низша  алкильна  группа, или их фармацевтически пригодных coAefi, отличающийс  тем, 1что соединение общей формулы II О Кг-/1Лг1 Г г /тт Н в котором хин имеют указанные значени  ; Кл- атом водорода или защитна  группа, подвергают взаимодействию с этилирующим реагентом, который выбирают из О галоидгаах соединений этила, диэтилсульфата ,этил-п-толуолсульфоната или го триэтилфосфаТа, в инертном растворисо теле при температуре от 25 до 150 С 00 с последующим удалением защитной группы в случае, когда R - защитна  ю группа, с пос едук цим выделением левого продукта в свободном виде или в виде солей.

Description

осутдествл етс  сольволизом (в т.ч. гидролизом полученного соединени ).

Характерными примерами защитных групп, которые могут быть удалены сольволизом,  вл ютс  ацильные группы , такие как формил, ацетил, Фрифторацетил , бензилоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, п-метоксибензилоксикарбонил , винилоксикарбонил, этоксикарбонил, р-п-С-толуолсульфонил ), 6-нитрофенилсульфенильна , триметилсилйльна , тритильна , тетрагидропирсхнильна  или дифенилфосфинильна  группы.

Реакци  сольволиза осуществл етс  как в присутствии, так и в отсутствне катализатора - кислоты или основани  г- В растворителе. При1у1ерами кислот  вл ютс  неорганические кис- лоты, такие как хлористоводородна , бромистоводородна , серна  или фосфорна  кислоты, или органические, такие как уксусна , трифторуксусна  муравьина  или толу;схлсульфонова  кислоты. Примерами оснований  вл ютс  гидроокиси щелочных металлов,таки как гидроокись натри  или бари , карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат натри  или кали , и ацетат Натри . Растворителем  вл етсй обычно вода, но в зависимости от свойств полученного соединени  раствс ител ми могут служить этанол, диоксан,диметиловый эфир этиленгликол , бензойна , -уксусна  кислоты или их смеси с Водой.

Температура реакции обычно 0-150°С преимущественно 30-100 с.

Если защитна  группа в пЪлучениом соединении может быть удалена восстановительным путем, то сн тие зашита  может осуществл тьс  гидрогено лиэом. К характерным примерам защитных групп, снимаемых гидрогенолизом , относ тс  арилсульфонильмые группы, такие как п-толуолсульфонил, фенил- или бензилоксизамещенные метильные , такие как бензил, тритил, бензилоксиметил арилметоксикарбонильные группы, такие как бенэилоксикарбонил или п-метоксибензилоксикарбонил , галогенэтоксикарбонильные группы, такие как ,,t -трихлорэтоксикарбонйл или 3 -йодэтоксикарбонил .

При удалении защитной группы полученного соединени  гидрогеноли-, зом услови  реакции должны быть изменены в зависимости от свойств защитной группы. Обычно реакцию щювод т следукицим образом.

Гидрогенолиз осуществл ют воздействием тока водорода на полученное соединение в инертном растворител е в присутствии таких катализаторов, как платина, палладий, никель Ренэ  или им подобных, или обработкой полученного соединени  металличесКИМ натрием в жидком аммиаке. Реакцию можно проводить также взаимодействием полученного соединени  с металлом , таким как цинк, в уксусной кислоте или в спирте, например в метаноле.

Каталитический гидрогенолиз происходит при комнатной температуре. При желании можно проводить его при повышенных температурах {до ). Подход щими растворител ми дл  этой реакции  вл ютс  этиленгликоль, диоксан , диметилформамид, этанол и уксусна  кислота. В частном случае, если защитна  группа - бензил, тритил , бензилоксикарбонил или п-толуолсульфонильна  группа, она может быть отщеплена металлическим натрием в жидком аммиаке обычно при температурах от -50 до .

Соединени , полученные приведенны способом, могут быть вьаделены и очищены обычными методами,.Соединени  (I) могут быть получены в свободном виде или в виде если в зависимости от выбора исходных материалов и условий реакции и могут быть переведены в фармацевтически применимые соли путем обработки их кислотой или основанием. В качестве кислот могут выступать различные органические и неорганические кислоты, примерами которых могут быть сол на , уксусна , молочна ,  нтарна , лактинова , щавелева  и метансульфонова  кислоты.

Производные 1,8-нафтиридина обла дают высокой антибактериальной активностью , ПОЭТОМУ их можно примен ть в качестве препаратов дл  лечени  или предупреждени  бактериальных инфекций теплокровных животных, и человека.

Дозировки соединени  (1) или его солей при назначении человеку определ ют с учетом возраста, веса тела и состо ни  пациента, способа применени  и частоты введени  препарата и др. Обычна  доза дл  взрослого составл ет 0,1-7 г в день, предпочтительно 0,2-5 г в день.

Соединени  согласно изобретению могут примен тьс  как лекарства, например в форме фармацевтических кo 4позиций , содержащих их в смеси с органическими или неорганическими твердыми или жидки11«и применимыми в фармгщевтике вспомогательными веществгииш , пригодными дл  применени  внут или дл  местного применени .

Фармацевтически применимыми вспомогательными веществами  вл ютс  вацества, которые не реагируют с соединени ми по изобретению. Примерами могут быть вода, желатин, лактова, крахмал, целлюлоза (преимущественно микрокристаллическа  целлюлоза),карбоксимётилцеллкшоз а, метнлцеллюлоз а, сорбит, стеарат .махани , тальк, расти тельйые масла, бензиловый спирт,смо лы, пропиленгликоль, полиалкиленгликоил , метилоксалилмочевина и дру г-ие известные в фармацевтике вещества . Фармацевтические композиции м гут представл ть собой порошки, гра нулы, таблетки, мази, свечи, кремы, капсулы и т.д. Они могут быть стери лизованы и/или содержать вспомогательные средства, такие как консерванты , стабилизирующие или увлажн ю щие вещества. Они могут, кроме того содержать другие терапевтически ценные вещества в зависимости от назначени  препарата. Стандартна  методика 1 представл ет собой способ получени  исходного соединени . Примеры 1-9 иллюстрируют способы приготовлени  соединений (I) и их солей. В стандартной, методике C2j приве ден способ получени  одного нового соединени , которое не относитс  к изобретению. Примеры A-G демонстрируют фармакологическую активность соединени ( I) и их солей в сравнении с контрольными соединени ми, выход щими за рамки изобретени . Соединени , полученные в примера и стандартных методиках, были охара теризованы элементным а нализом, ИК-спектроскопией, ЯМР-спектроскопиейf масс-спектрометрией и хроматографией тонких слоев. Стандастна  методика 1 . Получение исходного соединени  формулы е„к,осо- 5 JL 2,6-Дихлор-З-нитропиридин ввод т в реакции с N-этоксикарбонилпипираз ном дл  того, чтобы получить 6-хлор -2- (4-этокс.икарбонил-1-пиперазинил ) -3-нитропиридин. Получаемый продукт без очистки нагревают с этанольным аммиаком в откачанной колбе при 120 125°С дл  того, чтобы получить б-ам но-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-2-3-нитропиридин (температура плавлени  132-134°С), который обрабатывают ангидридом уксусной кислоты в уксусной кислоте, чтобы получить при этом 6-ацетиламино-2-(4-этоксикарбонил-1 пиперазинил ,) -3-нитропиридин (температура плавлени  168-169 С). Это соединение подв гают каталитическому гидрированию в присутствии 5% паллади  углерода в уксусной кислоте, чтобы получить 3-амино-6-ацетиламино-2-(4-этоксцкарбонил-1-пиперазинйл )-пиридин. Полученное 3-амино-производное без дальнейшей очистки раствор ют в смеси этанола и 42% тетрафторборной кислоты и к этому раствору добавл ют раствор изрс1милнитрита в этаноле при температуре ниже .0°С при перемешивании . Двадцать минут спуст  к раствору добавл ют эфир. Полученный в результате осадок собирают путем фильтровани  и промывают смесью этанола и §фира, а затем хлороформом дл  того, чтобы получить б-ацетиламино-2- (4-этоксйкарбонил-1-пиперазинил) -3-пиридиндиазонийтетрафторборат, температура плавлени  117-117, (разл.). Суспензию соли диазони  в толуоле подвергают постепенному нагреву и выдерживают при температуре 120°С {температура бани) в течение 30 мин при перемешивании. После испарени  растворител  при пониженном давлении осадок высушивают над безвод- ным карбонатом кали . После испарени  растворител  кристаллический оса док рекристаллизуют из этилацетата дл  того, чтобы получить б-ацетиламино-2- (4-эТоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-фтор-пиридин (температура плавлени  132-133°С1. 3-Фторпроизводное подверггиот гидролизу смесью 15% сол ной кислоты и метанола (1:2) , чтобы получить 6-амино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-3-фторпирИдин . Это соединение обрабатывают диэтилэтоксиметиленмалонатом при 130-140 0 дл  того, чтобы получить Н 2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )3-фтор-б-пиридинил с1минометиленмалонат (температура плавлени  144145°С ), и продукт подвергают циклизации путем нагревани  до дл  того, чтобы получить этил-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-б-фтор-1 ,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-3-карбоксилат (температура плавлени  279-281°С), %: С 55,09; Н 5,39; Рассчитано, N 14,2B;F 4,84. . Найдено, %: С 55,09; Н 5,65; Ы 14,27; F 4,85. ИК-спектры (КВг): 1700,1620 см Пример 1. Получение соединени  (l) и его кислых дополнительных солей. Этил-7-( 4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1 , 8- нафтиридин- 3- карбоксилат суспензируют в диметилформамиде (10 мл),после чего к суспензии добавл ют карбонат кали  (0,53 г). После этого смейь выдерживают при в течение 10 мин при перемешивании и добавл ют этилиодид (1,2 г) к полученному раствору.. Смесь перемешивают в течение 2 ч при 60-70С. Реакционную смесь концентрируют до получени  Сухого вещества при пониженном давлении ., после чего к осадку добавл ю воду. После экстрагировани  хлорофо ма этот экстракт высушивают над без водным карбонатом кали . После удал ни  хлороформа отгонкой полученный остаток рекристаллизуют из смеси ди хлсфметана и н-гексана дл  того, чт Сйл получить 0,89 г этил-1-этил-6-фтор-1 ,4- дигидро-4-оксо-7-( 4-этокси карбонил-1-пипераэи ил)-1,8-нафтири дин-З-карб ксилат (температура плав лени  ITl-lTS C). Рассчитано, %: С 57,13; Н 5,99; И 13,33; F 4,52. CioHipN OyF Найдено, %: С 57,02; Н 6,07; N 13,34; F 4,24. ИК-спектры (КВг): 1680, 1610 см Смесь этилового эфира {0,8 г), 10% гидрата, окиси натри  Гбмл) и этанола (2 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлалсдени  рй раствора довод т до значени  7,0-7,5 с помощью 10% уксусной кислоты. Ооадок собирают путем фильтрации, промывают этаноло и рекрнсталлизуют из смеси диметилформам  а и этанола дл  того, чтобы получить 0,57 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-{1-пиперазинил )-1 ,8-нафтиридин-3-карбоновой кислот ( температура плавлени  220-224 с). Рассчитано, %: С 56,24; Н 5,35; N 17,48;F 5,93. 45« K403F Найдено, %: С 56,05; Н 5,27; N 17,63; F 5,93. ИК-спектры (КВг): 1710, 1635 см Полученную Таким образом карбоно вую кислоту (0,2 г) раствор ют в 5%-ном растворе срл нс кислоты, по ле чего раствор коицен- ируют до по лучени  cyxotxs вещесхва при понижен ном давлении. Осадок рекристаллизуют из водаа, получа  при этом хлорг драт карбоновой кислоты (0,21 г), температура плавлени  выше . Рассчитано, %: G 50,50; Н 5,09; К 15,70; Ct 9,94; F 5,33. Cljj H.g % СЬ CtF Найдено, : С 50,34; Н 4,84; Л 15,81; Ct 9,97; F 5,16. ИК-спектры (КВг): 1725, 1635.см С другой стороны, свободную карбоновую кислоту (0,2 г) раствор ют в 7%-ном растворе метансульфокислоты при нагревании. После охлс1ждени  осадок рекристаллизуют из.разбавленного метанола дл  того, чтобы получить соль метансу ьфокислоты карбоновой кислоты (0,22 г), температура плавлени  свыше . , Рассчитано, %J С 46,14; Н 5,08; Н 13,46; S 7,70; F 4,56. af6H2 %OjSF. . Найдено, %: С 46,23; Н 5,17; И 13,17; 3.7,74; F 4,50. . ИК-спектры (КВг): 1720, 1625 . Свободную карбоновую кислот у (1,0 г) нагревают, дл  того, чтЪбы растворить ее в этаноле, затем к раствору добавл ют уксусную кислоту (1,0 мл). После того, как смесь охлад т , полученные кристаллы собирают и рекристаллизуют из этанола дл  того, чтобы получить соль уксусной кислоты карбоновой кислоты (0,93 г), температура плавлени  228-229 С. Рассчитано, %: С 53,68; Н 5,57; N 14,73; F 4,99, Н21 fU Найдено, %: С 53,30; Н 5,73; N14,60; F 4,76. ИК-спектры (КВг): 1705; 1625 см. Пример 2. Получение соединени  (II)(хлоргидрата). Соединени  получают из этил-6-хлор-7- (4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-1,4-дигидро-4-оксо-1 ,8-нафтиридин- 3 карбоксилата по методике, описанной в примере 1. : Получают 6-хлор-1-этил-1,.ГИДР6-4-оксо-7- (1-пиперазинил)-I,8-нафти- ридин-3-карбоновой кислоты-хлоргидрат (температура плавлени  свыше ). Рассчитано; %: С 48,27; Н 4,86- N 15,01;cf 19,00. С 5-Н 0%ОзС а Найдено, %: С 48,16; Н 5,13; N 14,84; С. 19.22. ИК-спектрыкв г) : 1710, 1600 см . Пример 3. Получение этиловог эфира соединени  (I). Этил-б-фтор-1,4-диг11дро-4-оксо-7-С4-трифторацетил-1-пиперазинил )-1 ,8-нафтиридин-З-карбоксилат обрабатывают этилиодидом и карбонитом кали  в диметилформамиде по той же методике, котора  описана в примере 1, дл  того, чтобы образовать ЭТИЛ-1-ЭТНЛ-6-ФТОР-1,4-дигидро-4оксо-7- ( 4-трифторацетил-1-пиперазинил ) -1,8-нафтиридин- 3-карбокоилат (температура плавлени  199-200 С). Рассчитано;- %; С 51,35; Н 4,54; N12,61 F 17,10. G,9l o%04F . Найдено, %: С 51,32; Н 4,56; Я 12,55; F 17,18. ИК-спектры (КВг): 1680, 1620 см. Этот продукт подвергают гидролизу путем обработки его водным растВОРОМ карбоната кали  в смеси хлороформа и метаНола дл  того, чтобы получить ЭТИЛ-1-ЭТИЛ-6-ФТОР-1,4-дигидpo-4-oкco-7- ( 1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин- З-карбоксилат (температура плавлени  150-151с). Рассчитано, %: С 58,61; Н 6,08; И 16,08; F 5,45. - Найдено, %: С 58,52; Н 6,36; Н 15,94; F 5,44. . HK-crfeKXpH (КВг): 1710, 1680, 1610« см Пример 4, По методике примера 3 получают пропиловый эфир сое динени  (I) и пропил-1-этил-б-фтор 1 , 4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (1-пиперазини 1,8-нафтиридин-З-карбоксилат (температура плавлени  133-135°С), Рассчитано, %: С 59,66; Н 6,40; N 15,46; F 5,24. 18 4 °3 Найдено, %: С 59,54; Н 6,50; N 15,43; F 5,54, ИК-спектры (КВг): 1720, 1670, 1620 CMl Получают также бутиловый эфир со динени  (l) н-бутил-1-этил-б-фтор-1 ,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил )-1,8-нафтиридинин-3 карбоксилат (температура плавлени  119-120 С). Рассчитано, %: С 60,62; Н 6,69; Н 14,88; F 5,05. . Найдено, %: С 60,56; Н 6,41; N 14,98; F 5,07. ИК-спектры (КВг): 1720, 1670, 1610 см Пример 5, Получение соединени  (I). Смесь б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин 3-карбоновой кислоты (2,92 г) и к боната кали  (3,01 г) в диметилформ амиде (100 мл) нагревают при в течение 30 мин. К этой смеси доба л ют этилиодид (3,4 г). Полученную смесь нагревают до 90°С в течение 3 ч с перемешиванием и затем конце рируют до получени  сухого веществ при пониженном давлении. К осадку добавл ют водный 10%-нь5й раствор гидрата окиси натри  (30 мл). Смес вновь нагревают до в течение 15 мин, охлаждают до 5-10°С и затем довод т значение рН смеси до 7,58 ,0 с помощью 10% уксусной кислоты Осадок собирают путем фильтровани  и рекристаллизуют из смеси диметил формамида и этанола дл  того, чтобы получить 2,18 г 1-ЭТИЛ-6-ФТОР-1,4-дигидро-4-оксо-7- (1-пипераэинил)-1 ,8-нафтиридин-З-карбоновой кисло ( температура плавлени  220-224с) . Рассчитано, %: С 56,24; Н 5,35; Ы 17,49; F 5,93. 5 Найдено, %: С 56,03; Н 5,39; и 17,28; F 5,96. ИК-спектры (КВг) 1710, 1635 см „Пример 6, Получение соеди нени  (I) . Суспензию этил-7-(4-этоксикарбо нил-1-пиперазинил)6 фтор-1,4-дигидро-4-OKCO-l ,8 нафтиридин-3-карбоксилата (16,8 г) и гидрата окиси кали  (2,42 г) в смеси воды (50 мл и метилэтилкетона (50 мл) нагреваю до 40-50с в течение 30 мин с пере мешиванием. К этой нагретой суспензии добавл ют прикапыванием диэтилсульфат (13,2 г) в течение промежутка времени, составл ющего 30 мин. После этого смесь нагревают до 2545 С в течение 30 мин при перемешивании , а затем добавл ют раствор бикарбоната кали  (11,9 г) в воде (17 мл). Нагрев при той же самой температуре продолжают с перемешиванием еще в течение одного часа.Метилэтилкетон отгон ют при пониженном давлении и к осадку добавл ют воду (17 мл). После охлаждени  собирают полученное в результате твердое вещество , проливают водой и рекристаллизуют , из смеси н-гексана и дихлорметана ,- получа  при этом 18,0 г ЭТИЛ-1-ЭТИЛ-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-6-фтор-1,4-дигидро-4-ОКСО-1 ,8-нафтиридин-З-карбоксилата . Этот продукт гидролизуют посредством обработки его гидратом окиси натри  точно таким же образом, как описано в примере 1, получа  при этом 12,3 г 1-ЭТИЛ-6-ФТОР-1,4-дигидро-4-оксо- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты (температура плавлени  220-224С/ . Рассчитано, %: С 56,24; Н 5,35; N 17,49; F 5,93. 4% Найдено, %: С 56,15; Н 5,29; N 17,68; F 5,93.. ИК-спектры (КВг): 1710, 1635 см . Пример 7. Получение соединени  (I). Смесь этил-7-(4-эТоксикарбонил-1-пиперазинил )-6-фтop-l,4-диrидpo-4-oкco-l ,8-нафтиридин-З-карбоксилата (1,96 г), этил-д-толуолсульфоната (2,42 г) и бикарбоната кали  (1,38 г) в 100 мл диметилформамида нагревают до 110-120°С в течение 2 ч при перемешивании . Смесь концентрируют при пониженном давлении, затем полученное твердое вещество собирают, промывайт водой и рекристаллизуют из. смеси н-гексана и дихлорэтана, получа  при этом 1,5 г этил- 1-этил-7-( 4-этоксикарбонил-1-пиперазинил )-6-фтор-1,4-дигидро-4-oKCO-l ,8-нафтиридин-З-карбоксилата . Этот продукт обрабатывают гидратом окиси натри  таким же образом, как это осуществл лось в примере 1, получа  при этом 1,01 г 1-ЭТИЛ-6-ФТОР-1,4-дигидро-4-оксо-7 (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты(температура плавлени  220-224с). Рассчитано, %: С 56,24; Н 5,35; N17,49; F 5,93. С Н К4 Оз F Найдено, %: С 56,06; Н 5,37 Н 17,63; F 5,98. ИК-спектры (КВг); 1710, 1635 см. Пример 8. Получение хлоргидрата соединени  (I).

Смесь этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил )-6-фтор-1,4-диги ро-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоксйлата (1,8 г), бикарбоната кали  (1,0 г) и триэтил фосфата (4,5 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 30 мин, затем разбавл ют водой до получени  осадков, осадок собирают, нагревают с обратным холодильником в водном 20%-ном -растворе сол ной кислоты (10 мл) в течение 3,5 ч и затем добавл ют 10 мл воды и 20 мл этанола к полученной таким образом реакционной смеси. Полученное в результате твердое вещество собирают и раствор ют в 30 мл гор чей воды, после чего полученный раствор обрабатывшот 0,5 г древесного угл  и отфильтровывают . К фильтрату добавл ют 13 мл концентрированной сол ной кислоты, полученную смесь охлаждают на лед но бане, получа  при этом 1,48 г хлоргидрата 1-ЭТИЛ-6-ФТОР-1,4-дигидро-4-оксо-7- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты {температура плавлени  свыше ).

Рассчитано, %: С 50,50; Н 5,09} N 15,70; CI 9,94; F 5,33.

C 5H 9N403CIF

Найдено, %: С 50,30; Н 5,13; Н 15,82; СТ 9,97; F 5,18.

ИК-спектры (КВг): 1725, 1635 см .

Пример 9. Получение хлоргидрата соединени  (I).

Смесь этил-7-(ацетил-1-пиперазинил )-б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-иафтиридин-3-карбоксилата (1,81 г) и триэтилфосфата (4,5 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 30 мин, затем разбавл ют водой дл  получени  осадков. Осадок собирают , нагревают с обратным холодильн ком в водном 20%-ном растворе сол но кислоты (10 мл) в течение 3,5 ч и затем добавл ют в реакционную смесь 10 и 20 мл эт-анола. Полученное в результате твердое вещество собирают и раствор ют в 30 МП гор чей волвл, чего полученный раствор обраба тывают 0,5 г древесного угл  и отфильтровывают , к фильтрату добавл ют 13 МП концентрированной сол ной кислоты и полученную смесь охлаждают в лед ной бане,получа  при этом 1,02 г хлоргидрата 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-с ксо-7- ( 1-пиперазинил )-1 ,8-нафтиридин-З-карбоновой кисло-пз (температура плавлени  свыше ).

Рассчитано, %: С 50,50; Н 5,09; N 15,70; СТ 9,94; F 5,33.

Найдено, % С 50,48; Н 5,10; Н 17,64; CI 9,85; F 5,28.

ИК-спектры СкВг): 1725,1635 .

Стандартна  метЪдика C2J дает методику получени  соединени , не вход щего в изобретение, приготовление которого еще не было опубликовано , с тем, чтобы оценить фармакологическую активность новых 1,8-нафтиридиновых соединений.

Стандартна  методика t2.

Получение контрольного соединени  формулы

СООН

К раствору/ содержащему 37%-ный формалин (12 мл) и муравьиную кислот ,( 18 мл), добавл ют 6,0 г 1-этил-6- т -фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил )-1 8-нафтиридин-3-карбоновую кислоту, после чего смесь нагревают до 120-125 С в течение 4 ч при перемешивании- . Затем смесь концентрируют до получени  сухого вещества при пониженном давлении, рН полученного остатка довод т до 8 путем добавлени  7%-ного водного раствора бикарбоната натри  и экстрагируют хлороформом . Экстракт высушивают и отгон ют растворитель. Кристаллический остаток -рекристаллизую т из сгаеси дихлс метана и этанола дл  того, чтобы получить 5,0 г 1-этил-5-фтор-1,4-дигидро-7- (4-метил-1-пиперазинил J-4-ОКСО-1 ,8-нафтиридин-З-карбоновую кислоты (температура плавлени  22823РС ).

Рассчитано, %: С 57,47; Н 5,73; N-16,76; F 5,68.

С бН 940зР

Найдено, %: С 57,53; Н 5,74; N 16,76; F 5,64.

ИК-спектры (КВг): 1710, 1630 см .

Фармакологическа  активность соединений (I) и их солей показана в примерах A-G в сравнении с известны1«1 антибактериальными агентами.

Соединени  включают:

Соединение 1.

-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбонова  кислота

соон

43тт- СгН5

. Соединение 1 .

1-ЭТИЛ-Б-ФТОР-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридинметансульфонат Соединение 2. Гидрохлорид 6-ХЛОР-1-ЭТИЛ-1,4-ДИгидро 4-оксо-7- (1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты i U-3v ЛК Соединение А.10 1-ЭТИЛ-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил )-1 ,8-нафтиридин-З-карбонова  кислота, называема  также 6-незамещенным 1,8-нафтиридином FlT. Q ,с II rtnnij хпч/ TV-Lie-JL-M-J I Соединение В 1-Этил-б-фтср-1,4-дигидро-7 {4-метил-1-пиперазинил )-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбонова  кислота, получено по стандартной методика Г2 -25 Соединение D. 1-Этил-б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (1-пиперазинил)-хинолин-3-карбонова  кислота Г4 , , Соединение Е. 1-Этил-1,4-диГидро-7-метил-4-оксо-1 ,8-нафтиридин-3-карЗонова  кислота, налидинова  кислота Nalidixic acid 5. Соединение 8-ЭТИЛ-5,8-ДИГИДРО-5-ОКСО-2-{1-пиперазинил )-пиридо- 2, ЗД-пуримидин-б-карбонова  кислота, пипемидова  кис- . - - -- -- - --f пота Pipemidic acid L6J. Соединение G. Натриева  соль е -{5-индинилокси )-бензилпенициллина КариндациллиН Carindacillin .7J-,

г 1

Соединение С. б-Хлор-1-этил-1,4-дигидpo 4-oкco-7-{ 1-пиперазиниЛ)-хинолин-3-карбонова  кислота ГЗ .Соединение Н.

D-oL-АминобеНзилпенициллин, ампициллин ampicillin (BJ.

Соединение j.

7-о-о -Аминофенилаиетамидо, деэацетоксидефаллоспаринова  кислота, сефалесин Cephalexin 5

П.р Я м е р А. Минимальные ингибируювдие концентраций (мг/мм) in vitro приведены в табл. 1 (антибактериальна  активность против 19 штаммов бактерий). .

Таблице 1 Бахтерви 1 ам-пвложи«елЫ1ые StBphyloooccae 0,76 0,78 3,13 aureus 209Р Staphylococcua 0,78 0,78 6,25 aureus 50774 Streptococcus 12,5 12,5 25 f&ecelis P-2473 Streptpcocous 12,5 12,5 12,5 pyogenes 65A Corynebacteriuffl 1,56 1,56 6,25 pyogenes C-21 Грам-отрица ельные Esoherichla coji 0,2 0,2 0,78 STHJ JC-2 Escherichie coli 0,1 0,i 0,39 P-5101 Escheriohia colt 0,2 0,2 0,39 P-140a S aljBonella 0,1 0,1 0,39 typhitourium S-9 T IIEIZITI 3IZI lIIfl актерии 25 1,560,780,39 100 22,S0,390,OSi,56 50 1,561,560,78 50 250,780,11,56 100 12,56,253,13 200 200SO1,56200 50 6,256,25 - 2000,20,0250,78 50 1,561,560,78 200 253,131,561,56 актерии: 6,25 0,390,390,1 12,5 1,566,2S6,2512,5 3,13 0,20,20,05 3,13 1,566,256,2512,5 6,25 0,390,20,1 - 1,5650200200 6,24 0,,20,20,05 3,13 1,560,780,396,25 Соеда ени  151029829 16 Продолжение табл. i

Shigelle . flexneri fc P-330 0,39 0,39 1.56 Klebeiclls рйеишоniae 130,2 0,2 1,56 Boterobacter cloaca P-2540 0,2 0,2 0,78 Pseudononfts aeruglnosa Tsucbijina0,39 0,39 0,25 PeeudomoQas aeruginosa 12 0,78 0,78 6,25 Serratia aeroeecees 1ГО 37360,39 0,39 l.,56 Proteus Dorgaaii Kone0,2 0,i 1,56 Proteue oirabflis p.23810,39 0,39 3,13

Пр мвчанне. Данные покйзывшат мйв иаЯьМу   гнг фукавгю кокцеатрашоо (НИК), попученкук «о методике 2.

Из результатов, приведенных в - Экспериментальные услови , табл. 1, следует, что соединени №гши: мыши самцы (ddY) весом око

1, 1 и 2, особенно соединени  1 ило 20 г.

1, демонстрируют очень высокую анти- Инфекци : Staphylococeus aureus

бактериальную активность против грам-35I 50774 - внутривенна  инфекци  с

положительных и грам-отрицательных бак-дойой 5-10 LE, около 9x10 клеток

тер й,включа  pseudomonas aerug inosa,а(мышв), бактериальной суспензии в

соединение А(6-незамещенный 1,8-наф-физиологическом растворе,Escheri сЫ а

тиридан) уступает по антибактериаль-coli р-5101 - внутрибрк ыинна  инфекци 

ной активности против грам-положитель- пс дозой 5-10 LDgjj, около 9x10 клеток

ных и грам-отрицательных бактерий, по(мышь)-, бактериальной суспензии в

сравнению с соединени ми по изобрё-триптосоевом бульоне; Pseudomonas

тению.aeruginosa 12 - внутрибркшинна  инЙ р и м е р B{in--vivo, терапевти-фекци  с дозой 50-100 Ы, около

ческа  эффективность). Соединени  1,. клеток (лишь), бактериальной

1и 2 и этиловый эфир соединени  (l} суспензии в триптосоевом бульоне

а также соединени  от А до С каж-с 4% муцина.

дый растворили в деиопизированнойЛечение: препарат вводитс  дважводе или суспензировали в 2%-номды - через 5 мин и 6 ч после зарайодном растворе CMC.. Каждый из раст-жеии .

воров ввели орально щшaм, предвари- 50 Наблюдение: Staphylococeus aureus

тельно зараженным тест-микробами при 50774 - 14 дней; Escherichia coii

описанных услови х.. Средн   эффектив-р-5101 - 7 дней; Pseudomonas aerugiна  доза (Efljo) представлена в табл.2.поза №12-7 дней.

Таблица2 12,50,70 0,2 0,2 - 1,56 6,25 6,25 JOO . . 12,5 0,39 0,78 0,2 12,5 6,25 290-. 100 6,25 6,250,39 0,2 0,1 6,25 1,56 3,13 200 :200 s 25 1,56 3,13 0,39 200 12,S 6,25 200 200 25 3,13 3,13 0,7Я 200 25 50 200 200 . « 12,5 1,56 0,78 0,2 6,25 3,13 3,13 25 200 6,250,78 0,39 0,1 6,2S 3J13 0,78 100 200 25 1,56 0,39 0,2 - 3,13 0,78 3,13 12,5

у

Значение рассчитываетс  в соответствии с методом Беррнс-Каербер Arch. Ехр. Path. Pharm.

Рассчитано дл  свободной карбоновой кислоты. Из результатов табл. 2 следует: 1. Соединени  1 и 1 демонстрирую активную терапевтическую эффективность при общей инфекции грам-положи тельными и грам-отрицательными бактери ми .. 2.Соединени  1 и 1 демонстрируют лучшую терапевтическую эффективность при общей инфекции грам-поло- жительными бактери ми, особенно Ps«udomonas aeruginosa, Чем соединени  А и С, Е и F, которые представл ют собой промышленные синтетические антибактериальные вещества и соединени  С и F, которые представл ют собой промышленные антибиотики 3.Соединени  1 и 1 Обладают большей терапевтической эффективностью , чем соединение D против грам положительных бактерий in vivo. Соединени  1 и I намного лучше, чем соединение D по терапевтической эффективности in vivo против грам-отр цательных бактерий, включа  Pseudoтопаз aeruginosa, 4.Этиловый эфир соединени  (l) удобен в качестве промежуточного пр дукта дл  синтеза соединений 1 и 1 . Он также демонстрирует высокую анти бактериальную активность in vivo пр тив грам-положительных и грам-отриц тельных бактерий. Пример С (in vivo терапевтическа эффективность).

Продолжение табл. 2 Терапевтическа  эффективность соединений 1 и D была испытана на мышах против восход щей инфекции почек, вызываемой Pseudomonas aeruginosa 12 по следующей методике. У мышей самок (ddY) весом 22-30 г под внутривенным пентабарбиталовым наркозом (50 мг/кг) небольшим надлобковым надрезом вскрывали мочевой пузырь и вводили О,1 мл разбавленной в отношении 1:10000 культуры Pseudomonas aeruginosa № 12, выращенной за 20 ч, с помощью 0,25 мл шприца и 0,25 мм иглы. Мышей ограничивали в Питье от 1 дн  до и на 1 день после инфицировани  в течение трех дней после инфицировани  они двс1жды в день обрабатывались препаратами.Дл  вы влени  бактерий на п тый день после заражени  почки извлекали, готовили поперечные срезы, помещали в раствор агар Кинг ди инкубировали при 31 в течение ночи. При этом в поч ках не было обнаружено никаких бак- терий из восход щей инфекции почек. Значени  ЕБ рассчитывались с помощью усредненных анализов, in vivo эффективность соединений при восхог д щей инфекции почек Pseudomonas ; aeruginosa № 12 на г-ьлиах. В табл, 3 представлены полученные результаты. Таблица Соединени  | Способ введени  ЕВ,мг Из результатов, приведенных в табл. 3, следует, что терапевтическ эффективность соединени  1 против восход щей инфекции почек, вызванно Pseudomonas aeruginosa, намного луч ше, чем у соединени  D. П р и м е р D (остра  toK-сичност Раствор, содержащий каждое из соеди нений от 1, f и 2 и соединени  от В до J в различных концентраци х, п рорально вводили юлшам-самцам (ddY) в группы от 4 до 8 в каждую в дозе в 0,1 мл на. каждые 10 г веса мыши. Koличectвo погибших мышей рассчитывалось через 7 дней и в соответстви с методом Береус-Каербера рассчитывалось значение средней летальной д эы (LDj-jp, Полученные результаты представле ны в табл. 4. Таблица 4 LD, МГ/КГ Соединени 

Значени  рассчитанные дл  карбоновой кислоты

Из результатов табл. 4 можно сделать следующие выводы:

1.Соединени  1, 1 и 2 имеют очень низкую токсичность.

2.Соединение В, полученное введением метильной группы в положение 4 1-пиперазинильной группы соединени  (1), демонстрирует одинаковую

Уровень препарата в

Соединени  плазме, мг/мл,через врем  после введени , . ч

0,5| 1 Г 2 Г зУ 6 8 ю

50

1 0,6 2,4 5,5 5,9 4,2 3,7 2,

Из результатов табл.5 можно сделать следующие выводы:

1. Соединение (1) хорошо абсорбируетс  организмом при пероральном введении, и уровень препарата в плазме сохран етс  на высоком уровне в течение довольно долгого времени. В частности, соединение (i) демонстрирует более высокий уровень в плазме , чем значени  МИК (см. табл.1) против большинства бактерий во врем  от 1 до 10 ч после введени . Так или более высокую антибактериальную активность, чем соединени  по изобретению , как показано в табл. 1 и 2, однако имеет очень высокую тосичность . Пример Е (подостра  токсичность ) . Соединение 1 перорально вводили шести мышам-самкам (ICL-ICR), имеющим средний вес 20ч г, в количестве 2 г/кг за один раз в один из 14 дней. В течение испытательного периода производилось взвешивание каждой из мышей . На 15-й день было проведено гематологическое исследование. После гематологического исследовани  мыши были умерщвлены и было проведено взвешивание каждого из органов а также гистопатологическое наблюдение. Отсюда были получены следукщие результаты. Не наблюдалась ненормальность в группе ьшшей, которой «вводили соединение (I), на основе веса тела и органов, гематологического исследовани  и гистопатологического наблюдени  по сравнению с контрольной группой мышей. Это демонстрирует высокую безопасность соединени  (I). Пример F (уровень в плазме). Кобелю Вигл, вес щему 12 кг, перорально ввели капсулу, содержащую соединение (I) в дозе 25 мг/кг веса с 200 мл молока соответственно.Образцы крови брали из вены собаки через 0,5,1,2,3,6,8 и 10 ч после введени  и центрифугированием каждого образца отдел ли плазму. Уровень препарата в крови определ ли тонкослойной пластинчатой хроматографией с использованием Escherichia coli Кр. в качестве индикатору. Полученные при этом результаты показаны в табл. 5. Таблица. 5 напр1|мер, уровень соединени  () в плазме {5,9 мг/мл) в 8 раз превы шает значени  МИК против Pseudomon aeruginosa № 12 и Staphylococcus №507704 и в 60 раз превышает знач ние МИК против :-scherichia coll Р-5101. 2. Соединение (I) демонстрирует довольно высокий уровень в плазме и таким образом высока  антибактер альна  активность препарата наблюд етс  при низких дозах при лечении общей инфекции, вызываемой различными бактери ми. П р -и м е р с- (выделение с мочой ) . Мочевыделени  собаки, использованные в примере F, собирали в теч ние 24 ч и соединение (l) в моче определ ли тем же методом, как в примере F. Полученные результаты приведены в табл. 6. Таблица Соединени  Концентраци , Выдел мг/мл ние, Из результатов табл. б следует что: 1.Выделение соединени  (l) С чой довольно хорошее и составл ет около 40% от количества препарата введенного перорально за 24 ч. 2.Уровень препарата (I) бОб мг/мл в моче превышает в 5 6QOO раз значени  МИК (0,1-12,5 м различных бактерий, как показано в табл. 1. 3.Соответственно, соединение демонстрирует более высокую эффек ность при низких дозах при лечении инфекции мочевых путей, вызываемой различными бактери ми. Как следует из чгабл. 1-6, соединени  по изобретению особенно соединени  1 и 1 , демонстрируют высо5сую терапевтическую эффективность при сильных заражени х грам-положи ельными и грам-отрицательными бак:гери ми и после перорального введени  сохран ют высокий уровень в плазме и моче на прот жении значительно длительного времени. Более того, они низкотоксичны. Соответственно эти соединени  эффективны при низких дозах при лечении инфекций мочевых путей и общейгинфекции, вызываемых различными бактери ми. Известные соединени  А и с уступают в антибактериальной активности in vitro И in vivo против грам-положительных и грам-отрицательных бактерий , как показано в табл. 1 и 2. Соединение с уступает соединени м 1 и 1 в терапевтической эффективности против восход щей инфекции почек, вызываемой Pseudomonas aeruginosa , Налидинова  (Nalidixicacid) кислота (соединение Е) и Пипёмицинова  (pipernidle) кислота (соединение F), которые представл ют собой промышленно доступные синтетические антибактериальные препараты, и кариндациллин (Carindacillin, соединение G), i 1пициллин (Ampicillin, соединение Н) и Сефалексин (Cephalexin, соединение Y), которые представл ют собой пpo ftИIшeннo доступные антибиотики , уступают соединени м 1 и 1 в терапевтическом эффекте (см.табл.2) in vivo против грам-положительных бактерий и, в частности, Pseudomonas aeruginoea. .

Claims (1)

1. Способ получения 1_Ч8-нафтиридинового производного, описываемого общей формулой ~Т ,в которой X - атом фтора или хлора;

   R - атом водорода или низшая алкильная группа, или их фармацевтически пригодных ‘сопей, отличающийся тем, (что соединение общей формулы τι

   0 X 0 * ' н В котором X И R имеют указанные зна· чения;

   IL- атом водорода или защитная группа, подвергают взаимодействию с этилирующим реагентом, который выбирают из галоид№1Х соединений этила, диэтил'сульфата,этил-п-толуолсульфоната или триэтилфосфата, в инертном растворителе при температуре от 25 до 150°С с последующим удалением защитной группы в случае, когда йд. - защитная группа, с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде солей.