SK15662001A3

SK15662001A3 - Nové zlúčeniny

Info

Publication number: SK15662001A3
Application number: SK1566-2001A
Authority: SK
Inventors: Marcel Linschoten; Magnus Polla
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1999-05-03
Filing date: 2000-05-03
Publication date: 2002-09-10
Also published as: PL356140A1; HK1042493A1; MXPA01011043A; US7423012B2; WO2000066550A8; JP2002543179A; ZA200108966B; US7354895B1; NO20015374L; HUP0202379A3; CZ20013931A3; EP1180099A1; KR20020010631A; AU4447100A; NO20015374D0; CA2371215A1; WO2000066550A1; CN1358187A; ZA200108967B; AR028826A1

Description

Predložený vynález sa týka nových zlúčenín a ich farmaceutický prijateľných solí, ktoré inhibujú základné karboxypeptidázy, špecifickejšie karboxypeptidázy U, a teda sa môžu použiť pri prevencii a liečení ochorení, pri ktorých je užitočná inhibícia karboxypeptidázy U. Predložený vynález sa ďalej týka zlúčenín na použitie pri liečení; spôsobov prípravy takýchto nových zlúčenín; farmaceutických kompozícií, ktoré ako účinnú zložku obsahujú najmenej jednu zlúčeninu podľa vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ; a použitia účinných zlúčenín pri výrobe liečiv na ďalej uvedené medicínske použitie.

Doterajší stav techniky

Fibrinolýza je výsledkom sérií enzymatických reakcií, ktoré majú za následok degradáciu fibrínu vplyvom plazmínu. Aktivácia plazminogénu je ústredným procesom pri fibrinolýze. Štiepenie plazminogénu za vzniku plazmínu je sprevádzané plazminogénnymi aktivátormi, tkanivovo-typovým plazminogénnym aktivátorom (t-PA) alebo urokinázovo-typovým plazminogénnym aktivátorom (uPA). Počiatočná plazmínová degradácia fibrínu generuje karboxy-terminálne lyzínové zvyšky, ktoré sú vysoko afinitnými väzbovými miestami pre plazminogén. Pretože plazminogén viazaný ku fibrínu sa oveľa ľahšie aktivuje na plazmín než voľný plazminogén, tento mechanizmus poskytuje pozitívnu reguláciu spätnej väzby fibrinolýzy.

Jedným z endogénnych inhibítorov pre fibrinolýzu je karboxypeptidáza U (CPU). CPU je tiež známe ako karboxypeptidáza B plazmy, aktívny trombínom aktivovateľný inhibítor fibrinolýzy (TAFIa), karboxypeptidázy R a indukovateľnej aktivity karboxypeptidázy. CPU sa tvorí počas koagulácie a fibrinolýzy zo svojho prekurzora proCPU účinkom proteolytických enzýmov, napríklad trombínu, komplexu trombínu-trombomodulínu alebo plazmínu. CPU štiepi základné aminokyseliny na karboxy-terminálnych fragmentoch fibrínu. Strata karboxyterminálnych lyzínov a tým väzbových miest lyzínu pre plazminogén slúži potom na inhibíciu fibrinolýzy.

-2Inhibovaním straty lyzínových väzbových miest pre plazminogén a teda zvýšenie rozsahu tvorby plazmínu, účinných inhibítorov karboxypeptidázy U by sa dalo očakávať uľahčenié fibrinolýzy.

Kyselina 2-merkaptometyl-3-guanidinoetyltiopropánová sa uvádza ako inhibítor karboxypeptidázy N. Pred nedávnom bola táto zlúčenina opísaná, že inhibuje CPU, Hendriks, D. a kol., Biochimica et Biophysica Acta, 1034 (1990) 86 92.

Kyselina guanidinoetylmerkaptojantárová sa uvádza ako inhibítor karboxypeptidázy N. Pred nedávnom bola táto zlúčenina opísaná, že inhibuje CPU, Eaton, D. L., a kol., The Journal of Biological Chemistry. 266 (1991) 21833 21838.

Podstata vynálezu

Prekvapujúco sa zistilo, že zlúčeniny vzorca I sú predovšetkým účinné ako inhibítory karboxypeptidázy U a tým využiteľné ako liečivá na liečenie alebo profýlaxiu stavov, pri ktorých je užitočná inhibícia karboxypeptidázy U.

Predložený vynález sa teda týka zlúčenín všeobecného vzorca I ? i.

^XX^RS

Ŕ* (I) alebo ich farmaceutický prijateľnej soli alebo solvátu alebo solvátu takejto soli, kde

R¹ predstavuje

CrC6-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

-3cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden heteroatóm zvolený z S alebo O, a substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

alebo arylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina,

R² predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylovú skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu, aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxyskupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén, heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R³ predstavuje COOR⁵, SO(OR⁵), SO3R⁵, P=0(OR⁵)2, B(OR⁵)₂, P=OR⁵(OR⁵) alebo tetrazol, alebo akýkoľvek izostér karboxylovej kyseliny, p⁵ o ⁰ JL OH

R⁴ predstavuje skupinu _p_ alebo skupinu -'ΐΐ' n 11 alebo skupinu

R⁵ predstavuje atóm vodíka, CrCe-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

-4R⁶ predstavuje Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu, alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

R⁷ znamená atóm vodíka, C-i-Cô-alkylovú skupinu;

X predstavuje O, S, SO, SO₂₎ C(Z)₂, N(Z), NR⁷SO₂, SO₂NR⁷, NR⁷CO alebo CONR⁷,

Y predstavuje O, N(Z), S, C(Z)₂, alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu, pod podmienkou, že ak X znamená O, S, SO, SO₂, N(Z), NR⁷SO2, SO2NR⁷ or NR⁷CO, potom Y predstavuje C(Z)2 alebo jednoduchú väzbu.

Výhodnými zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

R¹ predstavuje

C_rC6-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

-5alebo arylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina,

R³ predstavuje COOR⁵;

R⁴ predstavuje skupinu

alebo skupinu

alebo skupinu _Rs

R⁵ predstavuje atóm vodíka, CrCe-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu, alebo prípadne N-substituovanú H2NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H2N-C(Z)- skupinu,

R⁷ znamená atóm vodíka, CrCô-alkylovú skupinu;

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje O, N(Z), S, C(Z)₂, alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu.

-6Výhodnejšími zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát, alebo solvát takejto soli, v ktorých

R¹ predstavuje cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, CrCa-alkylovú skupinu, aminoskupinu, halogén alebo hydroxylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵,

R predstavuje skupinu _Á_

II ^H o

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci-C₆-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje CrC6-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu, alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje O alebo C(Z)₂;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C₆-alkylovú skupinu.

-7Ďalšími predovšetkým výhodnými zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R³ predstavuje COOR⁵, o

R⁴ predstavuje skupinu ^x^n'^0H

R⁷

R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo CrCe-alkylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, CpCe-alkylovú skupinu.

Ešte ďalšími predovšetkým výhodnými zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

-8R¹ predstavuje cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, Ci-C3-alkylovú skupinu, aminoskupinu, halogén alebo hydroxylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵, predstavuje skupinu

R⁵ predstavuje atóm vodíka, CrCe-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu.

Rovnako ďalšími predovšetkým výhodnými zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

-9heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, fluór alebo C-i-alkylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵, .R o

R⁴ predstavuje skupinu -p-r* n ⁿO

R⁵ predstavuje atóm vodíka, C^Ce-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje Ci-C₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu, alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje O alebo C(Z)₂;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C₆-alkylovú skupinu.

Ďalšími rovnako výhodnými zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, fluór alebo C-i-alkylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵,

-100

R⁴ predstavuje skupinu i

R

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo CrC6-alkylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo CrC₆-alkylovú skupinu.

R¹ predstavuje cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, arnidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, fluór alebo C_ralkylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵,

R⁵ predstavuje atóm vodíka, CrC6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

-11 Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C₆-alkylovú skupinu.

Najvýhodnejšími zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

R¹ predstavuje pyridyl alebo piperidinyl,

R² predstavuje atóm vodíka,

R³ predstavuje COOR⁵, ! 5

R⁴ predstavuje skupinu — p-r*

Ó

R⁵ predstavuje atóm vodíka,

R⁶ predstavuje Ci-C₆-alkylovú skupinu alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

X predstavuje CHZ;

Y predstavuje CHZ;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C6-alkylovú skupinu.

Ďalšími najvýhodnejšími zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

R¹ predstavuje pyridyl alebo piperidinyl,

R² predstavuje atóm vodíka,

R³ predstavuje COOR⁵,

-120

Λ ... JL^OH

R predstavuje skupinu N

R⁷

R⁵ predstavuje atóm vodíka,

R⁷ predstavuje atóm vodíka,

X predstavuje CHZ;

Y predstavuje CHZ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo C-i-C6-alkylovú skupinu.

Ešte ďalšími najvýhodnejšími zlúčeninami podľa predloženého vynálezu sú také zlúčeniny vzorca I, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, v ktorých

R¹ predstavuje pyridyl alebo piperidinyl,

R² predstavuje atóm vodíka,

R³ predstavuje COOR⁵, predstavuje skupinu

R

R⁵ predstavuje atóm vodíka,

X predstavuje CHZ;

Y predstavuje CHZ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C6-alkylovú skupinu.

V celom opise a v priložených patentových nárokoch sa budú používať nasledujúce definície:

- 13Termín zásaditá skupina označuje zásaditú skupinu, kde konjugovaná kyselina uvedenej zásaditej skupiny má hodnotu pKa od približne -5 do asi 25, výhodne od 1 do 15.

Termín izostér karboxylovej kyseliny označuje kyslú skupinu, ktorá má hodnotu pKa od približne -5 do asi 25, výhodne od 1 do 15.

Termín CrCs-alkylová skupina označuje lineárnu alebo rozvetvenú, nasýtenú alebo nenasýtenú, substituovanú alebo nesubstítuovanú alkylovú skupinu, ktorá obsahuje 1 až 6 atómov uhlíka v reťazci, pričom alkylová skupina môže byť prípadne prerušená jedným alebo viacerými heteroatómami, ktoré sú zvolené z O, N alebo S. Príklady uvedenej alkylovej skupiny zahrňujú, ale nie sú obmedzené na, metyl, etyl, etenyl, etinyl, n-propyl, /zo-propyl, propenyl, /zopropenyl, propinyl, n-butyl, /zo-butyl, sek-butyl, terc-butyl, butenyl, /zo-butenyl, butinyl, a pentyl a hexyl s lineárnym a rozvetveným reťazcom.

Termín Ci-C3-alkylová skupina označuje lineárnu alebo rozvetvenú, nasýtenú alebo nenasýtenú, substituovanú alebo nesubstítuovanú alkylovú skupinu, ktorá obsahuje 1 až 3 atómy uhlíka v reťazci, pričom alkylová skupina môže byť prípadne prerušená jedným alebo viacerými heteroatómami, ktoré sú zvolené z O, N alebo S. Príklady uvedenej alkylovej skupiny zahrňujú, ale nie sú obmedzené na, metyl, etyl, etenyl, etinyl, n-propyl, /zo-propyl, propenyl, /zopropenyl, propinyl.

Termín Ci-alkylová skupina označuje substituovanú alebo nesubstítuovanú alkylovú skupinu, ktorá obsahuje 1 atóm uhlíka. Príklad uvedenej alkylovej skupiny zahrňuje, ale nie je obmedzený na, metyl,

Termín CrC₆-alkoxylová skupina označuje alkyl-O-skupinu, pričom CrC6alkyl je definovaný vyššie.

Termín Ci-C₃-alkoxylová skupina označuje alkyl-O-skupinu, pričom C1-C3alkyl je definovaný vyššie.

Termín heterocyklylová skupina označuje substituovaný alebo nesubstituovaný, 4- až 10-členný monocyklický alebo multicyklický kruhový systém,

-14v ktorom jeden alebo viac z atómov kruhu alebo kruhov predstavuje iný prvok ako uhlík, napríklad dusík, kyslík alebo síra, predovšetkým 4-, 5- alebo 6-členné aromatické alebo alifatické heterocyklické skupiny, a zahrňuje, ale nie je obmedzený na, azetidínovú, furánovú, tiofénovú, pyrolovú, pyrolínovú, pyrolidínovú, dioxolánovú, oxatiolánovú, oxazolánovú, oxazolovú, tiazolovú, imidazolovú, imidazolínovú, imidazolidínovú, pyrazolovú, pyrazolínovú, pyrazolidínovú, izoxazolovú, izotiazolovú, oxadiazolovú, furazanovú, triazolovú, tiadiazolovú, pyránovú, pyridínovú, piperidínovú, dioxánovú, morfolínovú, ditiánovú, oxatiánovú, tiomorfolínovú, pyridazínovú, pyrimidínovú, pyrazínovú, piperazínovú, triazínovú, tiadiazínovú, ditiazínovú, azaindolovú, azaindolínovú, indolovú, indolínovú, naftyridínovú skupinu, a treba rozumieť, že zahrňuje všetky izoméry vyššie uvedených skupín. Termín '’azetidinyľ' je napríklad potrebné rozumieť tak, že zahrňuje 2- a 3-izoméry a termíny pyridyl a piperidinyl je napríklad potrebné rozumieť tak, že zahrňuje 2-, 3- a 4-izoméry.

Termín cykloalkylová skupina označuje nasýtený alebo nenasýtený, substituovaný alebo nesubstituovaný, nearomatický kruh obsahujúci 3, 4, 5, 6 alebo 7 atómov uhlíka, a zahrňuje, ale nie je obmedzený na, cyklopropylovú, cyklobutylovú, cyklopentylovú, cyklohexylovú, cykloheptylovú, cyklobutenylovú, cyklopentenylovú, cyklohexenylovú, cykloheptenylovú, cyklopentadienylovú, cyklohexadienylovú a cykloheptadienyiovú skupinu.

Termín halogén zahrňuje skupiny fluóru, chlóru, brómu a jódu.

Termín arylová skupina označuje substituovaný alebo nesubstituovaný C₆Ci₄-aromatický uhľovodík a zahrňuje, ale nie je obmedzený na, fenyl, naftyl, indenyl, antracenyl, fenantrenyl a fluorenyl.

Termín aryloxylová skupina označuje aryl-O-skupinu, pričom aryl je definovaný vyššie.

Termín acylová skupina označuje alkyl-CO-skupinu, pričom alkyl je definovaný vyššie.

Termín aroylová skupina označuje aryl-CO-skupinu, pričom aryl je definovaný vyššie.

-15Termín alkyltioskupina označuje alkyl-S-skupinu, pričom alkyl je definovaný vyššie.

Termín aryltioskupina označuje aryl-S-skupinu, pričom aryl je definovaný vyššie.

Termín aroylaminoskupina označuje aroyl-N(Z)-skupinu, pričom aroyl a Z sú definované vyššie.

Termín acylaminoskupina označuje acyl-N(Z)-skupinu, pričom acyl a Z sú definované vyššie.

Termín karbamoylová skupina označuje H2N-CO-skupinu.

Termín alkylkarbamoylová skupina označuje Z₂N-CO-skupinu, pričom Zje definované vyššie.

Termín substituovaný označuje C^alkylovú skupinu, Ci-C3-alkylovú skupinu, Ci-C₆-alkylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu“, heterocyklylovú skupinu, arylovú skupinu, H₂N-C(Z)-CONH-C(Z)-skupinu alebo H₂N-C(Z)skupinu, definované vyššie, ktoré sú substituované jednou alebo viacerými skupinami, ako je acylová skupina, acylaminoskupina, alkylová skupina, alkylkarbamoylová skupina, alkyltioskupina, alkoxyskupina, aroylová skupina, aroylaminoskupina, aryloxyskupina, aryltioskupina, amidinoskupina, aminoskupina, arylová skupina, karbamoylová skupina, karboxylová skupina, kyanoskupina, cykloalkylová skupina, formylová skupina, guanidínová skupina, halogén, heterocyklylová skupina, hydroxylová skupina, oxoskupina, nitroskupina, tiolová skupina, tioskupina, skupina Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo skupina Z₂N-CO-NZ-.

Do rozsahu predloženého vynálezu sú taktiež zahrnuté čisté enantioméry, racemické zmesi a nerovnorodé zmesi dvoch enantiomérov. Je tiež potrebné si uvedomiť, že všetky možné diastereoizomérne formy spadajú do rozsahu predloženého vynálezu. Do rozsahu predloženého vynálezu sú zahrnuté tiež deriváty zlúčenín vzorca I, ktoré majú biologickú funkciu zlúčenín vzorca I, ako sú prekurzory.

- 16V závislosti od podmienok prípravy sa zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu získať v neutrálnej forme alebo vo forme soli, alebo vo forme solvátu, napríklad hydrátu a všetky spadajú do rozsahu predloženého vynálezu.

Príprava

Predložený vynález sa tiež týka spôsobu A až C na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I.

Spôsob A

Spôsob A na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, kde R¹, R⁵, R⁶ a Z majú vyššie definované významy a R² znamená atóm vodíka, R³ predstavuje COOR⁵,

O ¹ e '

R znamená skupinu ^—P^- R O

X predstavuje C(Z)2, Y znamená C(Z)₂ a zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Zlúčeniny všeobecného vzorca II,

R¹-X-OH (II) kde R¹ a Z majú významy definované vo vzorci I a X predstavuje C(Z)₂, ktoré sú buď komerčne dostupné alebo sa môžu získať s použitím známych metód, sa môžu konvertovať na zlúčeniny všeobecného vzorca III,

R¹-X-L (III) kde L znamená vhodnú odstupujúcu skupinu, ako chlór, bróm, jód, triflátovú alebo tozylovú skupinu, pri štandardných podmienkach s použitím vhodného reakčného činidla, ako je PPh₃/CBr₄, TosCI/pyridín alebo (CF₃SO₂)₂O/TEA.

b) Zlúčeniny všeobecného vzorca III sa potom môžu nechať reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca IV,

- 17W

OH OH (IV) ktoré sú buď komerčne dostupné alebo sa môžu získať s použitím známych metód, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je K2CO3 alebo NaH, pri štandardných podmienkach, pričom sa získajú zlúčeniny všeobecného vzorca V,

(V)

c) Zlúčeniny všeobecného vzorca V sa môžu potom konvertovať na zlúčeniny všeobecného vzorca VI,

reakciou s formaldehydom v prítomnosti vhodnej zásady, ako je Et2NH, pri štandardných podmienkach.

Avšak, ak Y znamená CH(Z), potom sa zlúčeniny všeobecného vzorca VI môžu pripraviť reakciou zlúčenín všeobecného vzorca VII, (MeO)₂OP

OH (VII)

-18s alkylačným činidlom všeobecného vzorca III,

R¹-X-L (III) pričom R¹ má význam definovaný vo vzorci I a L znamená vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je chlór, bróm, jód, triflátová alebo tozylová skupina, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca VIII,

(VIII)

Zlúčeniny všeobecného vzorca VIII sa potom môžu nechať reagovať s vhodným aldehydom CHO(Z), kde Zrná význam definovaný vo vzorci I, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je KOtBu, LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca VI.

d) Zlúčeniny všeobecného vzorca VI sa ďalej nechajú reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca IX

R⁶PO₂H₂ (IX) kde R⁶ má význam definovaný vo vzorci I, v prítomnosti vhodného reakčného činidla, ako je BSA alebo HMDS, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, pričom R¹, R⁵, R⁶ a Z majú vyššie definované významy, R² znamená vodík a R³ predstavuje COOR⁵, y

R⁴ znamená skupinu ' _i ^— n~^RO

X predstavuje C(Z)₂ a Y znamená C(Z)₂.

-19Spôsob B

Spôsob B na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, kde R¹, R², R⁵, R⁶ a Z majú vyššie definované významy, R³ znamená COOR⁵. X predstavuje C(Z)2, Y znamená O a

R⁴ predstavuje skupinu n ^RO zahrňuje nasledujúce kroky:

a) Reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca X,

R¹ - XCO - R² (X) kde R¹, R² a Z majú významy definované vo vzorci I a X znamená C(Z)2, v prítomnosti vhodných reakčných činidiel, ako je TMSCN/Znl₂ alebo KCN/HOAc, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XI,

-i

R i

N (XI) kde R¹ a R² majú významy definované vo vzorci I a X znamená C(Z)₂.

b) Zlúčeniny všeobecného vzorca XI sa potom môžu nechať reagovať s vhodnými reakčnými činidlami, ako je HCI alebo HCI/MeOH, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca XII;

(XII)

-20kde R¹ a R² majú významy definované vo vzorci I a X znamená C(Z)₂.

c) Zlúčeniny všeobecného vzorca XII sa potom nechajú reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca XIII

R⁶PO₃H₂ (XIII) kde R⁶ má význam definovaný vo všeobecnom vzorci I, ktoré sú buď komerčne dostupné, dobre známe z literatúry alebo sa dajú pripraviť s použitím známych postupov, v prítomnosti vhodných kopulačných reakčných činidiel, ako je DCC/DMAP, PyBop/DIPEA alebo SOCI₂, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹, R², R⁵, R⁶ a Z majú vyššie definované významy, R³ predstavuje COOR⁵, zR o

R⁴ predstavuje skupinu -P- r® o

X znamená C(Z)₂ a Y predstavuje O.

Spôsob C

Spôsob C na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ a R²majú vyššie definované významy a X a Y predstavujú C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu a R³ a R⁴ znamenajú COOR⁵, zahrňujú nasledujúce kroky:

a) reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca XIV

kde R² a R⁵ majú významy definované vo vzorci I a Y znamená C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu, ktoré sú buď komerčne dostupné alebo sú dobre známe

-21 z literatúry alebo sa dajú pripraviť s použitím známych postupov, so zlúčeninou všeobecného vzorca III,

R¹-X-L (III) kde R¹ má význam definovaný vo vzorci I, X znamená C(Z)₂ a L predstavuje vhodnú odstupujúcu skupinu, ako je Cl, Br, I alebo tozyl, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je LDA or NaH pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca XV,

b) hydrolýzu zlúčeniny všeobecného vzorca XV, napríklad reakciou s vodným NaOH alebo vodným TFA pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ a R² majú vyššie definované významy a X a Y znamenajú C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu a R³ a R⁴ predstavujú COOH.

Spôsob D

Spôsob D na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹, R², R⁵, R⁷, X, Y a Z majú vyššie definované významy, R³ znamená COOR⁵ a

R⁴ predstavuje skupinu

O

A,-°H

N

Ŕ⁷ zahrňuje nasledujúce kroky

a) Zlúčeniny všeobecného vzorca XV,

R

I

X R OOC (XV)

OR

-22sa môžu nechať reagovať so zlúčeninami všeobecného vzorca XVI,

HR⁷NOH (XVI) kde R⁷ má význam definovaný vo vzorci I, v prítomnosti vhodných reakčných činidiel, ako je DCC/DMAP, pri štandardných podmienkach, za vzniku zlúčenín všeobecného vzorca I. v ktorom R¹, R². R⁵, R⁷, X, Y a Z majú vyššie uvedené významy, R³ znamená COOR⁵ a o

R⁴ predstavuje skupinu „oh

Ŕ⁷

Odborníci skúsení v odbore si budú vedomí toho, že vo vyššie opísaných spôsoboch sa môže potrebné chrániť funkčné skupiny medziproduktov pomocou vhodných chrániacich skupín.

Funkčné skupiny, ktoré je vhodné chrániť zahrňujú hydroxyskupinu, aminoskupinu, merkaptoskupinu a karboxylovú kyselinu. Vhodné chrániace skupiny pre hydroxyskupinu zahrňujú trialkylsilyl alebo diarylalkylsilyl (napríklad tercbutyldimetylsilyl, ŕerc-butyldifenylsilyl alebo trimetylsilyl), tetrahydropyranyl a benzyl. Vhodné chrániace skupiny pre aminoskupinu, amidinoskupinu a guanidinoskupinu zahrňujú ŕerc-butyloxykarbonyl a benzyloxy-karbonyl. Vhodné chrániace skupiny pre merkaptoskupinu zahrňujú CO-C^e-alkyl, p-metoxybenzyl ad trityl. Vhodné chrániace skupiny pre karboxylovú kyselinu zahrňujú C^g-alkyl a benzylestery.

Chrániace skupiny sa môžu odstrániť v súlade s metódami, ktoré sú pre odborníkov v odbore známe a sú opísané v ďalšom.

Určité chránené deriváty zlúčenín vzorca I, ktoré sa môžu pripraviť pred konečným odstránením chrániacich skupín za vzniku zlúčenín vzorca I, sú nové.

-23Použitie chrániacich skupín je opísané v „Protective Groups in Organic Synthesis“, 2^nd Edítion, T. W. Greene & P. G. M. Wutz, Wiley-lnterscience (1991). Chrániacou skupinou môže byť tiež polymérna živica, ako je Wangova živica alebo 2-chlórtritylchloridová živica.

Odborníci skúsení v odbore si tiež budú vedomí toho, že hoci takéto chránené deriváty zlúčenín vzorca I samotné nemusia vykazovať farmakologickú aktivitu, môžu sa podávať parenterálne alebo orálne a následne sa metabolizovať v tele za vzniku zlúčenín podľa predloženého vynálezu, ktoré sú farmakologicky účinné. Takéto deriváty sa preto môžu opísať ako prekurzory. Všetky prekurzory zlúčenín vzorca I sú zahrnuté do rozsahu tohto vynálezu.

Je tiež potrebné si uvedomiť, že všetky polymorfné formy, amorfné formy, anhydráty, hydráty, solváty zlúčenín podľa predloženého vynálezu spadajú do rozsahu tohto vynálezu.

Farmaceutické prípravky

Predložený vynález sa v ďalšom týka farmaceutických kompozícií obsahujúcich najmenej jednu zlúčeninu podľa predloženého vynálezu, alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, ako účinnú zložku.

Na klinické použitie sa zlúčeniny podľa vynálezu formulujú do farmaceutického prípravku na orálny, intravenózny, subkutánny, tracheálny, bronchiálny, intranazálny, pulmonálny, transdermálny, bukálny, rektálny, parenterálny alebo niektorý ďalší spôsob podávania. Farmaceutický prípravok obsahuje zlúčeninu podľa vynálezu v kombinácii s jednou alebo viacerými farmaceutický prijateľnými zložkami. Nosič môže byť vo forme pevnej látky polopevnej látky alebo kvapalného riedidla alebo ako kapsula. Tieto farmaceutické prípravky predstavujú ďalší predmet vynálezu. Zvyčajné množstvo účinných zlúčenín je v rozsahu 0,1 % až 95 % hmotnostných z prípravku.

Pri príprave farmaceutických prípravkov obsahujúcich zlúčeninu podľa predloženého vynálezu sa zvolená zlúčenina môže zmiešať s pevnými práškovými zložkami, ako je laktóza, sacharóza, sorbitol, manitol, škrob, amylopektín, deriváty celulózy, želatína alebo ďalšia vhodná zložka, ako aj s dezintegračnými činidlami a

-24mastivami, ako je stearát horečnatý, stearát vápenatý, stearylfumarát sodný a polyetylénglykolové vosky. Zmes sa potom môže spracovať na granule alebo sa lisovať na tablety.

Mäkké želatínové kapsule sa môžu pripraviť ako kapsule obsahujúce zmes účinnej zlúčeniny alebo zlúčenín podľa predloženého vynálezu, rastlinný olej, tuk alebo ďalšie vhodné vehikulum pre mäkké želatínové kapsule. Tvrdé želatínové kapsule môžu obsahovať granule účinnej zlúčeniny. Tvrdé želatínové kapsule môžu tiež obsahovať účinnú zlúčeninu v kombinácii s pevnými práškovými zložkami, ako je laktóza, sacharóza, sorbitol, manitol, zemiakový škrob, kukuričný škrob, amylopektín, deriváty celulózy alebo želatína.

Dávkové jednotky na rektálne podávanie sa môžu pripraviť (i) vo forme čípkov, ktoré obsahujú účinnú zložku zmiešanú s neutrálnou tukovou bázou; (ii) vo forme želatínovej rektálnej kapsule, ktorá obsahuje účinnú zložku v zmesi s rastlinným olejom, parafínovým olejom alebo ďalším vhodným vehikulom pre želatínové rektálne kapsule; (iii) vo forme hotových mikro-črevných nálevov alebo (iv) vo forme suchých prípravkov pre mikro-črevné nálevy, ktoré sa rekonštituujú vo vhodnom rozpúšťadle bezprostredne pred podávaním.

Kvapalné prípravky sa môžu pripraviť vo forme sirupov alebo suspenzií, napríklad roztokov alebo suspenzií obsahujúcich účinnú zložku a zvyšok pozostávajúci napríklad z cukru alebo cukorných alkoholov a zmesi etanolu, vody, glycerolu, propylénglykolu a polyetylénglykolu. Ak je to potrebné, takéto kvapalné prípravky môžu obsahovať farbiace činidlá, aromatické činidlá, konzervačné látky, sacharín a karboxymetylcelulózu alebo ďalšie zahusťovacie činidlá. Kvapalné prípravky sa môžu tiež pripraviť vo forme suchého prášku, ktorý sa pred použitím rekonštituuje s vhodným rozpúšťadlom.

Roztoky na parenterálne podávanie sa môžu pripraviť ako roztok zlúčeniny podľa vynálezu vo farmaceutický prijateľnom rozpúšťadle. Tieto roztoky môžu tiež obsahovať stabilizačné zložky, konzervačné látky a/alebo pufrovacie zložky. Roztoky na parenterálne podávanie sa môžu tiež pripraviť ako suché prípravky, ktoré sa pred použitím rekonštituujú s vhodným rozpúšťadlom.

-25Typicky denná dávka účinnej látky varíruje v širokom rozsahu a bude závisieť od rozličných faktorov, ako sú napríklad individuálne požiadavky každého pacienta, spôsob podávania a ochorenie. Vo všeobecnosti, orálne a parenterálne dávky sa budú pohybovať v rozsahu od 0,1 do 1000 mg účinnej látky na deň.

Medicínske a farmaceutické použitie

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú inhibítormi karboxypeptidázy U, buď samotné, alebo v prípade prekurzorov, po podaní. Očakáva sa teda, že zlúčeniny podľa predloženého vynálezu budú využiteľné pri takých stavoch, pri ktorých sa je užitočná inhibícia karboxypeptidázy U, ako je liečenie alebo profylaxia trombózy a nadmerná zrážanlivosť v krvi a tkanivách cicavcov, vrátane človeka.

Je známe, že nadmerná zrážanlivosť môže viesť k trombo-embolickým ochoreniam. Stavy spojené s nadmernou zrážanlivosťou a trombo-embolickými ochoreniami, ktoré možno uviesť, zahrňujú rezistenciu na proteín C a zdedenú alebo získanú nedostatočnosť antitrombínu III, proteínu C, proteínu S a heparínového kofaktora II. Ďalšie stavy, o ktorých je známe, že sú spojené s nadmernou zrážanlivosťou a trombo-embolickým ochorením, zahrňujú cirkulačný a septický šok, cirkuláciu anti-fosfolipidových protilátok, homocysteinémiu, heparínom vyvolanú trombocytopéniu a poruchy fibrinolýzy. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú teda určené na terapeutické a/alebo profylaktické liečenie týchto stavov. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú ďalej určené na liečenie stavov, pri ktorých jestvuje nežiaduci nadbytok proCPU/CPU.

Konkrétne chorobné stavy, ktoré je možné uviesť zahrňujú terapeutické a/alebo profylaktické liečenie venóznej trombózy a pulmonálnej embólie, arteriálnej trombózy (napríklad pri infarkte myokardu, nestabilnej angíne, mŕtvici na báze trombózy a periferálnej arteriálnej trombóze) a systémovej embólii zvyčajne z predsiene počas arteriálnej fibrilácie alebo z ľavej komory po transmurálnom infarkte myokardu.

Okrem toho sa očakáva, že zlúčeniny podľa vynálezu budú využiteľné pri profylaxii reoklúzie a restenózy (t.j. trombóze) po trombolýze, perkutánnej transluminálnej angioplastii (PTA) a koronárnych bypassových operáciách; pri prevencii

-26retrombózy po mikrochirurgickom zákroku a všeobecne vaskulárnom chirurgickom zákroku.

Ďalšie indikácie zahrňujú terapeutickú a/alebo profylaktické liečenie roztrúsenej intravaskulárnej koagulácii spôsobenej baktériou, viacnásobnou traumou, intoxikáciou alebo akýmkoľvek iným mechanizmom, fibrinolytické liečenie, ak je krv v kontakte s cudzími povrchmi v tele, ako sú vaskulárne štepy, vaskulárne stenty, vaskulárne katétre, mechanické a biologické protetické chlopne alebo akékoľvek iné lekárske zariadenie a na fibrinolytické liečenie, ak krv je v kontakte s lekárskym zariadením mimo tela, ako počas kardiovaskulárneho chirurgického zákroku s použitím prístroja srdce-pľúca alebo pri hemodialýze.

Zlúčeniny podfa predloženého vynálezu sa môžu tiež kombinovať a/alebo podávať spoločne s akýmkoľvek antitrombotickým činidlom s odlišným mechanizmom účinku, ako sú činidlá proti zrážaniu krvných doštičiek acetylsalicylová kyselina, ticlopidin, clopidogrel, tromboxánový receptor a/alebo inhibítory syntetázy, antagonisty receptora fibrinogénu, prostacyklínové mimetické Činidlá a inhibítory fosfodiesterázy a antagonisty ADP-receptora (P₂T) a inhibítory trombínu.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu ďalej kombinovať a/alebo podávať spoločne s trombolytickými činidlami, ako je tkanivový plazminogénny aktivátor (prirodzený, rekombinantný alebo modifikovaný), streptokináza, urokínáza, prourokináza, anizoylovaný plazminogén-streptokinázový aktivátorový komplex (APSAC), živočíšne plazminogénne aktivátory slinnej žľazy a podobne, pri liečení trombotických ochorení, predovšetkým infarktu myokardu a mŕtvice.

Experimenty in vitro

Inhibičný účinok zlúčenín podľa predloženého vynálezu sa stanovil s použitím skúšky, ktorá je opísaná v: Dirk Hendriks, Šimon. Scharpé and Mare van Sande, Clinical Chemistry, 3Ί, 1936 - 1939 (1985); a Wei Wang, Dirk F. Hendriks, Šimon S. Scharpé, The Journal of Biological Chemistry, 269. 15937 - 15944 (1994).

Príklady uskutočnenia vynálezu

-27Všeobecné experimentálne postupy

Hmotnostné spektrá sa zaznamenali na trojnásobnom kvadrupólovom hmotnostnom spektrometre Finnigan MAT TSQ 700, vybavenom s elektrosprayovým rozhraním (FAB-MS) a hmotnostnom spekrometre VG Platform II vybavenom s elektrosprayovým rozhraním (LC-MS). Merania ¹H NMR a ¹³C NMR sa uskutočnili na spektrometroch Varian UNITY plus 400, 500 a 600, pracujúcich pri ¹H frekvenciách 400. 500 a 600 MHz. Chemické posuny sú uvedené v ppm s rozpúšťadlom ako vnútorným štandardom. Organické extrakty sa vysušili s použitím MgSO₄ alebo Na₂SO₄ ako sušiacim činidlom. Chromatografické separácie sa uskutočnili s použitím Merck Silica gel 60 (0,063 - 0,200 mm). HPLC separácie sa uskutočnili na kolóne HIGHCROM KR100-10C8.

Príklad 1

5-Amino-2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxyfosfinoyloxyjpentánová kyselina (a) 5-ŕerc-Butoxykarbonylamino-2-hydroxypentánová kyselina

Di-terc-butyldikarbonát (30,8 g, 0,141 mol) sa po častiach počas 5 minút pridal k roztoku 5-amino-2-hydroxy-pentánovej kyseliny (17,0 g; 0,128 mol) v 0,5 M NaOH (240 ml) a dioxáne (240 ml) pri teplote 5 °C. Zmes sa miešala počas 2,5 hodín pri laboratórnej teplote. V priebehu tohto času sa pridal 0,5 M NaOH, na udržanie hodnoty pH 9 až 10. Dioxán sa odstránil pri zníženom tlaku a vodná fáza sa premyla s dietyléterom. Vodná fáza sa okyslila na hodnotu pH 2 až 3 s KHSO₄ a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 300 ml). Spojené organické fázy sa premyli s vodou a soľankou, vysušili sa a zahustili pri zníženom tlaku, čím sa získala surová 5-ŕerc-butoxykarbonyl-amino-2-hydroxy-pentánová kyselina (22,0 g, 73,7 %).

(b) Metylester 5-terc-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-pentánovej kyseliny

Roztok metyljodidu (11,5 ml, 0,189 mol) v DMF (50 ml) sa po kvapkách v priebehu 15 minút pridal k zmesi 5-terc-butoxykarbonylamino-2-hydroxypentánovej kyseliny (22,0 g, 94,4 mmol) a NaHCO3 (11,8 g, 141 mmol) v DMF (150

-28ml). Po miešaní cez noc sa pridala voda a zmes sa extrahovala s etylacetátom. Spojené organické fázy sa premyli s vodou a soľankou, vysušili sa a zahustili pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil s použitím chromatografie (heptán/etylacetát, 1:1), pričom sa získal metylester 5-terc-butoxykarbonylamino2-hydroxy-pentánovej kyseliny (9,9 g, 42,5 %).

(c) Metylester 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metyl-propyl)-metoxy-fosfinoyloxy]5-ŕerc-butoxykarbonylamino-pentánovej kyseliny

Roztok PyBOP (2,1 g, 4,0 mmol) v DMF (3 ml) sa pridal k zmesi monometylesteru (1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)fosfónovej kyseliny (1,0 g, 3,32 mmol) a metylesteru 5-terc-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-pentánovej kyseliny (865 mg, 3,5 mmol) v DMF (4 ml) pod argónom. Po kvapkách sa pridal DIPEA (2,28 ml, 13,3 mmol) a zmes sa miešala cez noc. Pridal sa etylacetát a zmes sa premyla s 10 % KHSO₄, nasýteným NaHCO₃ a soľankou a vysušila sa. Zahustením pri zníženom tlaku a následnou chromatografiou (heptán/EtOAc, 1 : 1 -> 1 : 6) sa získal metylester 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-metoxyfosfinoyloxy]-5-ŕerc-butoxykarbonylamino-pentánovej kyseliny (1,21 g, 69 %).

(d) 2-[(1-Benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyloxy]-5-fercbutoxy-karbonylamino-pentánová kyselina

M LiOH (5 ml) sa pridal k roztoku metylesteru 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2metylpropyl)-metoxy-fosfinoyloxy]-5-terc-butoxykarbonylamino-pentánovej kyseliny (187 mg, 0,35 mmol) v acetonitrile (5 ml). Zmes sa miešala pri teplote 50 °C cez noc a zahustila sa pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil s použitím chromatografie (/-PrOH/konc. vodný NH3/H2O, 4:2:1), pričom sa získala 2-[(1benzyloxykarbonyl-amino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyloxy]-5-ŕerc-butoxykarbonylamino-pentánová kyselina (180 mg, 100 %).

(e) 5-.Amino-2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyloxy]pentánová kyselina

TFA (3 ml) sa pridal k roztoku 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)hydroxy-fosfinoyloxy]-5-ŕerc-butoxykarbonylamino-pentánovej kyseliny

-29(150 mg, 0,3 mmol) v zmesi metylénchlorid/acetonitril (1 : 1,15 ml). Roztok sa miešal počas 120 minút a zahustil sa pri zníženom tlaku, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme TFA soli (174 mg, 100 %).

¹H NMR (500 MHz. CD₃OD): δ 1,02 (t, 6H), 1,66-2,0 (m, 4H), 2,23 (m, 1H), 2,93 (m, 2H), 3,91 (m, 1H), 4,85 (bs, 1H), 5,12 (m, 2H), 7,28 - 7,42 (m, 5H).

MS (+) 403,3 (M+1).

Príklad 2

2-[(1-Benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyloxy]-5-guanidinopentánová kyselina (a) 2-[(1-Benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyloxy]-5guanidino-pentánová kyselina

Roztok hydrogensíranu 5-metylizotiomočoviny (25 mg, 90 pmol) v 1 M NaOH (0,18 ml) sa pridal k roztoku 5-amino-2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyloxy]-pentánovej kyseliny (36 mg, 90 pmol) a 1 M NaOH (0,18 ml) v zmesi voda/MeOH (1:1, 0,4 ml). Reakčná zmes sa miešala pri teplote 50 °C počas 6 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil pomocou HPLC (0 až 50 % acetonitrilu, 0,1 % TFA vo vode), pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme TFA soli (19 mg, 38 %).

¹H NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 1,02 (t, 6H), 1,60 - 1,98 (m, 4H), 2,23 (m, 1 H), 3,20 (m, 2H), 3,91 (m, 1 H), 4,82 (bs, 1 H), 5,11 (m, 2H), 7,26 - 7,42 (m, 5H).

MS (+) 445 (M+1 ).

Príklad 3

5-Amino-2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]hydroxy-fosfinoyloxy} pentánová kyselina (a) Metylester 2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]-hydroxy-fosfinoyloxy}-5-terc-butoxykarbonylamino-pentánovej kyseliny

-30Tionylchlorid (49 μΙ, 0,67 mmol) sa po kvapkách pridal k roztoku [1-(2benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metyl-propyl]-fosfónovej kyseliny (208 mg, 0,48 mmol) v DMF (5 ml) pri teplote -20 °C pod argónom. Zmes sa miešala počas 35 minút pri teplote -5 °C. Pridal sa roztok metylesteru 5-tercbutoxykarbonylamino-2-hydroxy-pentánovej kyseliny (166 mg, 0,67 mmol) v DMF (1 ml) a zmes sa miešala počas 90 minút pri laboratórnej teplote. Pridal sa etylacetát a zmes sa premyla s 1 M HCI , vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil s použitím chromatografie (CHCl3/MeOH/H2O, 10:1:0—>10:5:1), čím sa získal metylester 2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino3-fenyl-propionyl-amino)-2-metylpropyl]-hydroxy-fosfinoyloxy}-5-ŕercbutoxykarbonylamino-pentánovej kyseliny (2,11 mg, 66 %).

(b) 2-{ [1 -(2-Benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionyl-amino)-2-metylpropyl]hydroxy-fosfinoyloxy}-5-terc-butoxykarbonylamino-pentánová kyselina

M LiOH (3,5 ml) sa pridal k roztoku metylesteru 2-{[1-(2benzyloxykarbonyl-amino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]-hydroxyfosfinoyloxy}-5-ŕerc-butoxy-karbonylamino-pentánovej kyseliny (211 mg, 0,32 mmol) v acetonitrile (3,5 ml) a zmes sa miešala počas 3 hodín. Pridal sa etylacetát a zmes sa premyla s 1 M HCI, vysušila sa a zahustila, pričom sa získala surová 2{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionyl-amino)-2-metylpropyl]hydroxyfosfinoyloxy}-5-terc-butoxykarbonylamino-pentánová kyselina (208 mg, 100 %).

(c) 5-Amino-2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]-hydroxy-fosfinoyloxy}-pentánová kyselina

TFA (5 ml) sa pridal k roztoku 2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenylpropionylamino)-2-metylpropyl]-hydroxyfosfinoyloxy}-5-terc-butoxykarbonylaminopentánovej kyseliny (208 mg, 0,32 mmol) v acetonitrile (5 ml) a zmes sa miešala počas 90 minút. Reakčná zmes sa zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získala surová zlúčenina uvedená v názve, vo forme TFA soli (212 mg, 100 %). 20 mg surovej zlúčeniny sa prečistilo s použitím chromatografie (i-PrOH/konc. vodný

-31 ΝΗ₃/Η₂Ο, 4:2:1), pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme TFA soli (19 mg, 94%).

¹H NMR (500 MHz. CD₃OD): δ 0,85 - 0,95 (m. 6H), 1,70 - 2,0 (m, 4H). 2,05 - 2,13 (m, 1H). 2„85 - 3,05 (m, 2H), 3,05 - 3,12 (m, 1H), 4,10 (bs. 1H); 4,55 (m,.1H), 4,90 (m, 1H), 5,09 (s. 2H), 7,20 - 7,35 (m, 10H).

Príklad 4

2-{[1-(2-Benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]-hydroxyfosfmoyloxy}-5-guanidino-pentánová kyselina (a) Metylester 5-amino-2-hydroxypentánovej kyseliny

TFA (2 ml) sa pridal k roztoku metylesteru 5-terc-butoxykarbonylamino-2hydroxypentánovej kyseliny v metylénchloride (10 ml) a zmes sa miešala počas 3 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku, pričom sa získal surový metylester 5-amino-2-hydroxypentánovej kyseliny (1 g).

(b) Metylester 5-(guanidino-ro,o'-bis(terc-butoxykarbonyl)-2-hydroxypentánovej kyseliny

K roztoku metylesteru 5-amino-2-hydroxypentánovej kyseliny (0,5 g, 2,0 mmol) v acetonitrile (5 ml) sa pridal terc-butylester terc-butoxykarbonylimino-pyrazol-1-ylmetyl)-karbámovej kyseliny (0,77 g, 2,5 mmol) a následne sa pridal DIPEA (0,86 ml, 5 mmol). Po miešaní počas 60 minút sa pridal etylacetát. Zmes sa premyla s 1 M HCI, nasýteným NaHCO₃ a soľankou, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil s použitím chromatografie (heptán/etylacetát, 1:0 -> 1:3), čím sa získal metylester 5-(guanidino-ro,o'bis(terc-butoxykarbonyl)-2-hydroxypentánovej kyseliny (0,27 g, 35 %).

(c) Metylester 2-{ [1 -(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]hydroxy-fosfinoyloxy}-5-[guanidino-co,a>'-bis(terc-butoxykarbonyl)]pentánovej kyseliny ,

Tionylchlorid (70 μΙ, 0,97 mmol) sa po kvapkách pridal k roztoku [1-{2benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metyl-propyl]-fosfónovej

-32kyseliny (301 mg, 0,69 mmol) v DMF (5 ml) pri teplote -20 °C po argónom. Zmes sa miešala počas 20 minút pri teplote -5 °C. Pridal sa roztok metylesteru 5(guanidino-cc>,a>'-bis(terc-butoxykarbonyl)-2-hydroxypentánovej kyseliny (270 mg, 0,69 mmol) v DMF (1 ml) a zmes sa miešala počas 180 minút pri laboratórnej teplote. Pridal sa etylacetát a zmes sa premyla s 1 M HCI, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil s použitím chromatografie (toluén/etylacetát, 1:1 > 0:1), pričom sa získal metylester 2-{[1-(2benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metyl-propyl]hydroxyfosfinoyloxy}-5-[guanidino-cc>,co'-bis(ŕerc-butoxykarbonyl)]-pentánovej kyseliny (0,27 g, 48 %).

(d) 2-{[1-(2-Benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]hydroxy-fosfinoyloxy}-5-[guanidino-a>,co'-bis(ŕerc-butoxykarbonyl)]pentánová kyselina

Roztok LiOH (42 mg, 1,0 mmol) vo vode (1,0 ml) sa pridal k roztoku metylesteru 2-{[1-(2-benzyloxy.karbonylamino-3-fenyl-propionyl-amino)-2metylpropyl]hydroxy-fosfinoyloxy}-5-[guanidino-a>,co'-bis(te/'c-butoxykarbonyl)]pentánovej kyseliny (160 mg, 0,2 mmol) v acetonitrile (1,0 ml) a zmes sa miešala počas 15 minút. Pridal sa etylacetát a zmes sa premyla s 1 M HCI a soľankou, vysušila sa a zahustila, čím sa získala surová 2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3fenyl-propionylamino)-2-metyl-propyl]hydroxy-fosfinoyloxy}-5-[guanidino-cú,<±)'bis(ferc-butoxykarbonyl)]-pentánová kyselina (160 mg, 100 %).

(e) 2-{[1-(2-Benzyloxykarbonylamino-3-fenyl-propionylamino)-2-metylpropyl]hydroxy-fosfinoyloxy} -5-guanidino-pentánová kyselina

TFA (2 ml) sa pridalo k roztoku 2-{[1-(2-benzyloxykarbonylamino-3-fenylpropionylamino)-2-metylpropyl]hydroxyfosfinoyloxy}-5-[guanidino-K>,K>'-bis(tercbutoxy-karbonyl)]-pentánovej kyseliny (160 mg, 0,2 mmol) v acetonitrile (5 ml) a zmes sa miešala počas 60 minút a potom sa zahustila pri zníženom tlaku. Surový produkt prečistil s použitím chromatografie (/-PrOH/konc. vodný NH3/H2O, 4:2:1), čím sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme TFA soli (30 mg, 21 %).

-33*Η NMR (500 MHz. CD₃OD): δ 0,80 - 0,98 (m. 6H). 1,53 - 1,95 (m, 4H), 2,01 -2,30 (m, 1H), 2,90 (m, 1H). 3,10-3,30 (m, 3H), 3,94-4,10 (m, 1H). 4,41 4,55 (m, 1H), 4,68 (m, 1H), 5,03 (m. 2H), 7,18 - 7,37 (m, 5H).

MS (+) 592 (M+1).

Príklad 5

2-Hydroxykarbamoyl-4-piperidin-4-yl-butánová kyselina (a) Piperidin-4-yl-octová kyselina

Hydrochlorid pyridin-4-yl-octovej kyseliny (20,0 g, 115 mmol) sa pridal ku zmesi voda/25 % amoniak (125 ml: 10 ml). Zmes sa odplynila a premyla sa s dusíkom a potom sa pridalo ródium na aktivovanom oxide hlinitom (0,45 g): Zmes sa znova odplynila sa potom sa miešala v atmosfére vodíka pri tlaku 50 bar počas 16 hodín. Prefiltrovaním reakčnej zmesi cez filtračný papier sa získala prevažná časť katalyzátora, ktorý sa recykloval po premytí s metanolom. Filtrát sa potom prefiltroval cez Celit a zahustil sa, pričom sa získala biela pevná látka (19,7 g, výťažok 96 %).

(b) terc-Butylester 4-karboxymetyl-piperidine-1-karboxylovej kyseliny

K roztoku piperidin-4-yl-octovej kyseliny (19,7 g, 148 mmol) v zmesi THFvoda (417 ml, 1 : 1) sa pridal di-ŕerc-butyldikarbonát (32,3 g, 148 mmol) a hydrogenuhličitan sodný (125 g, 148 mmol) a reakčná zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas 16 hodín. THF sa potom odstránil pri zníženom tlaku a vodná fáza sa extrahovala s dichlórmetánom a organická vrstva sa odhodila. Vodná vrstva sa potom okyslila na hodnotu pH 1 až 2 s 1 M roztokom HCI a extrahovala sa s etylacetátom. Organická fáza sa premyla so soľankou, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získal terc-butylester 4-karboxymetylpiperidine-1-karboxylovej kyseliny (16,7 g, 46 %).

(c) terc-Butylester 4-(2-hydroxyetyl)piperidín-1 -karboxylovej kyseliny

K roztoku terc-butylesteru 4-karboxymetyl-piperidine-1-karboxylovej kyseliny (16,7 g, 69,0 mmol) v THF (100 ml) sa v priebehu 10 minút pri teplote 0 °C pridal

-34diborán (151 ml, 1,0 M roztok v THF). Rýchle sa vyvíjal plynný vodík a po ukončení vyvíjania plynu sa reakčná zmes miešala pri laboratórnej teplote počas jednej hodiny. Reakčná zmes sa potom znova ochladila na teplotu 0 °C a k reakčnej zmesi sa po kvapkách pridával 1 M vodný HCI za ďalšieho vývoja vodíka. V pridávaní HCI sa pokračovalo až pokým vyvíjanie vodíka takmer neustalo. Zmes sa potom miešala počas 10 minút a zalkalizovala sa (hodnota pH 13 až 14) pridaním 1 M roztoku NaOH. Vodný roztok sa extrahoval s etylacetátom, organická fáza sa premyla so soľahkou, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získal tercbutylester 4-(2-hydroxyetyl)piperidín-1 -karboxylovej kyseliny (15,2 g, 97 %).

(d) ŕerc-Butylester 4-(2-oxo-etyl)-piperidín-1 -karboxylovej kyseliny

Perjodistan (36,1 g, 85,2 mmol) sa pridal k terc-butylesteru 4-(2hydroxyetyl)piperidín-1-karboxylovej kyseliny (15,0 g. 65,5 mmol) v CH2CI2 (230 ml) a zmes sa miešala počas 90 minút. Pridal sa dietyléter (560 ml) a zrazeniny sa odstránili extrakciou s 10 % Na₂S₂O3/nasýtený NaHCO3 (1:1, 350 ml). Organická vrstva sa premyla s 0,5 M roztokom NaOH a sofankou. Organická fáza sa vysušila a zahustila sa pri zníženom tlaku, čím sa získal terc-butylester 4-(2-oxo-etyl)piperidín-1-karboxylovej kyseliny (8,50 g, 57 %).

(e) ŕerc-Butylester 4-[2-(2,2-dimetyl-4,6-dioxo-[1.3]dioxan-5-yl)-etyl]-piperid ín-1 karboxylovej kyseliny

K roztoku kyseliny meldrumovej (meldrums acid) (1,68 g, 11,66 mmol) a terc-butylesteru 4-(2-oxo-etyl)-piperidín-1-karboxylovej kyseliny (2,21 g, 9,72 mmol) v dichlórmetáne (40 ml) sa pridala kyselina octová (0,055 ml, 0,972 mmol) a piperidín (0,096 ml, 0,972 mmol). Zmes sa zahrievala pod refluxom počas 3 hodín a potom sa nechala dosiahnuť laboratórnu teplotu. Po zriedení s tercbutylmetyléterom sa zmes premyla s NaHCO₃ (nasýtený) a soľankou. Organická fáza sa vysušila, prefiltrovala a zahustila. Zvyšok sa rozpustil v zmesi EtOH (40 ml) a kyseliny octovej (20 ml). Roztok sa ochladil na teplotu/0 °C a po častiach sa pridal NaBH₄ (0,554 g, 14,6 mmol), potom sa roztok nechal miešať počas 30 minút pri laboratórnej teplote a následne sa okyslil na hodnotu pH 3 s 1 M HCI. Roztok sa niekoľkokrát extrahoval s dichlórmetánom. Spojené organické fázy sa vysušili, prefiltrovali, zahustili a prefiltrovali cez stĺpik silikagélu (dichlórmetán). Rozpúšťadlo

-35sa odparilo, čím sa získal ŕerc-butylester 4-(2-(2,2-dimetyl-4,6-dioxo-[1.3]dioxan-5yl)-etyl]-piperidín-1-karboxylovej kyseliny, vo forme bezfarebného oleja (2,30 g,. 65 %), ktorý státím stuhol.

(f) 2-Hydroxykarbamoyl-4-piperidin-4-yl-butánová kyselina

Plynovochromatografická automatická vzorkovacia liekovka (2 ml) vybavená priehradkovým uzáverom a malou miešacou tyčinkou sa naplnila s tercbutylesterom 4-(2-(2,2-dimetyl-4,6-dioxo-[1.3]dioxan-5-yl)-etyl]-piperidín-1karboxylovej kyseliny (17,8 mg, 0,05 mmol) a prepláchla sa s dusíkom. Pomocou striekačky sa pridal N,O-bis(trimetylsilyl)hydroxylamín (0,2 ml) a výsledný roztok sa miešal pri laboratórnej teplote cez noc. Zmes sa zahustila vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v zmesi dichlórmetán/MeOH (4 : 1) a naniesol sa na malý stĺpik ionomeničovej živice (200 mg, isolute™, aminoživica), premyla sa so zmesou dichlórmetán/MeOH (4 1) a potom sa eluovala so zmesou dichlórmetán/MeOH/AcOH (3:1 : 1). Eluát sa zahustil, zvyšok sa rozpustil v zmesi dichlórmetán/TFA (1 : 1, 2 ml) a miešal sa počas jednej hodiny pri laboratórnej teplote. Odparením rozpúšťadla sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme TFA soli (16 mg, 93 %), ako bezfarebný olej.

’H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ 1,21 - 1,40 (m, 4H), 1,53 - 1,62 (m, 1H), 1,80 -1,99 (m, 4H), 2,90 - 2,98 (m, 2H), 3,06 (t. 1H), 3,32 - 3,39 (m, 2H).

M (+) 231 (M+1).

Príklad 6

N-hydroxy-2-piperidin-3-ylmetyl-malonamová kyselina (a) ŕerc-Butylester 3-hydroxymetyl-píperidín-1-karboxylovej kyseliny

3-Hydroxymetyl-piperidín (20,0 g, 0,17 mmol) v acetonitrile sa nechal reagovať s di-ŕerc-butyldikarbonátom (37,9 g, 0,17 mol) a DMAP (2,13 g, 1g74 mmol). Reakčná zmes sa miešala pri teplote prostredia počas 5 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil pomocou bleskovej chromatografie (hexán/EtOAc, 70:30), pričom sa získal ŕerc-butylester 3hydroxymetyl-píperidín-1-karboxylovej kyseliny (16,0 g, 44 %).

-36(b) terc-Butylester 3-formyl-piperidín-1 -karboxylovej kyseliny

Perjodistan (18,2 g, 42,9 mmol) sa pridal k terc-butylesteru 3-hydroxymetylpíperidín-1 -karboxylovej kyseliny (7,10 g, 33,0 mmol) v CH2CI2 (230 ml) a zmes sa miešala počas 90 minút. Pridal sa dietyléter (230 ml) a zrazeniny sa odstránili extrakciou so zmesou 10 % Na₂S₂O3/nasýtený NaHCO₃ (1:1, 230 ml). Organická vrstva sa premyla s 0,3 M roztokom NaOH a soľankou. Organická fáza sa vysušila a zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získal terc-butylester 3-formyl-piperidín-1karboxylovej kyseliny (6,50 g, 93 %).

(c) N-Hydroxy-2-piperidin-3-ylmetyl-malonamová kyselina

Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila z terc-butylesteru 3-formylpiperid í n-1-karboxylovej kyseliny postupom, opísaným v príklade 5. Výťažok: (50 %).

¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ 1,18 -1,30 (m, 1H), 1,61 - 1,99 (m, 6H). 2,64 (t, 1H). 2,86 (t, 1H), 3,20 - 3,38 (m, 3H).

M (+) 217 (M+1).

Príklad 7

2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-N-hydroxy-malonamová kyselina

Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila z terc-butylesteru (5-formyl-pyridin2-yl)-karbámovej kyseliny postupom, opísaným v príklade 5. Výťažok: (23 %).

¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ 2,99 - 3,10 (m, 2H), 3,36 -4 ,01 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,82 (d, 1H).

M (+) 226 (M+1 ).

Príklad 8

2-(2-Amino-pyridin-4-ylmetyl)-N-hydroxy-malonamová kyselina (a) terc-Butylester (4-formyl-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny

-37terc-Butylester (4-hydroxymetyl-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny (1,91 g, 8,51 mmol) sa rozpustil v suchom DMSO (10 ml) a reakčná banka sa ponorila do vodného kúpeľa s teplotou 15 °C. Pridal sa trietylamín (1,72 g, 17,0 mmol) a potom sa pridal komplex oxidu sírového a pyridínu (2,41 g, 15,1 mmol). reakčná zmes sa miešala počas dvoch hodín a vyliala sa na rozdrvený ľad a produkt sa extrahoval s CHCI₃. Organický extrakt sa premyl s vodou, vysušil a zahustil pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil s použitím bleskovej chromatografie (hexán/EtOAc, 80 : 20), čím sa získal terc-butylester (4-formyl-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny (1,.57 g, 83%).

(b) 2-(2-Amino-pyridin-4-ylmetyl)-N-hydroxy-malonamová kyselina

Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila z terc-butylester (4-formyl-pyridin-2yl)-karbámovej kyseliny, spôsobom opísaným v príklade 5. Výťažok: (48 %).

¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ 3,10 (dd, 1H ), 3,19 (dd, 1H). 3,47 (dd, 1H),

6,77 (d, 1 H). 7,82 (s, 1H), 7,71 (d, 1H).

M (+) 226 (M+1 ).

Príklad 9

2-(2-(1 -terc-Butoxykarbonyl-piperidin-4-yl)-etyl]-malónovej kyseliny

K roztoku ŕerc-butylesteru 4-[2-(2,2-dimetyl-4,6-dioxo-[1,3]dioxan-5-yl)-etyl]piperidín-1-karboxylovej kyseliny (17,8 mg, 0,05 mmol) v kyseline octovej (1 ml) sa pridala 6 M HCI (2 ml). Roztok sa miešal pri laboratórnej teplote cez noc a potom sa zahustil, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme hydrochloridovej soli (15 mg, 100 %).

¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ 1,30 - 1,40 (m, 4H), 1,57-1,64 (m, 1H), 1,83 - 1,90 (m, 1 H), 1,90 - 1,98 (m, 1 H), 3,31 - 3,39 (m, 2H).

M (+)216 (M+1).

Príklad 10

2-[2-(1-terc-Butoxykarbonyl-piperidin-3-yl)-metyl]-malónová kyselina

-38Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila z ŕerc-butylesteru 3-(2,2-dimetyΙΑ, 6-dioxo-[1,3]dioxan-5ylmetyl)-piperidín-1 -karboxylovej kyseliny, postupom, ktorý je opísaný v príklade 9. Výťažok: (100 %).

¹H NMR (600 MHz. CD₃OD) δ 1,20 - 1,30 (m, 1H); 1,63-1,76 (m, 1H), 1,78 - 1,97 (m, 5H), 2,65 (t, 1H), 2,83 - 2,92 (m, 1 H), 3,29 -3,38 (m, 2H), 3,42 - 3,48 (m, 1H).

M (+) 202 (M+1).

Príklad 11

2-(2-[1-terc-Butoxykarbonyl-piperidin-4-yl)-metyl]-malónová kyselina (a) Mono-ŕerc-butylester piperidín-1,4-dikarboxylovej kyseliny

Piperidín-4-karboxylová kyselina (24,5 g, 0,19 mmol) v zmesi THF/voda (1:1, 417 ml) sa nechala reagovať s di-ŕerc-butyldikarbonátom (41,49 g, 0,19 mol) a hydrogenuhličitanom sodným (16,0 g, 0,19 mol). Reakčná zmes sa miešala pri teplote prostredia počas 16 hodín . THF sa potom odstránil pri zníženom tlaku a vodná fáza sa premyla s dichlórmetánom. Vodná vrstva sa potom okyslila na hodnotu pH 1 až 2 s 1 M roztokom HCl a extrahovala sa s etylacetátom. Organická fáza sa premyla so soľankou a vysušila sa, čím sa získal mono-ŕerc-butylester piperidín-1,4-dikarboxylovej kyseliny (35,9 g, 83 %).

(b) ŕerc-Butylester 4-hydroxymetyl-piperidine-1-karboxylovej kyseliny

K roztoku mono-ŕerc-butylesteru piperidín-1,4-dikarboxylovej kyseliny (19,3 g, .84,0 mmol) v THF (100 ml) sa pridal diborán (185 ml. 1,0 M roztok v THF) v priebehu 10 minút pri teplote 0 °C. Rýchlo sa vyvíjal vodík a po ukončení vývoja plynu sa reakčná zmes miešala pri laboratórnej teplote počas jednej hodiny. Reakčná zmes sa znova ochladila na teplotu 0 °C a po kvapkách sa k reakčnej zmesi pridal vodný 1 M HCl za ďalšieho vývoja vodíka. V pridávaní HCl sa pokračovalo až pokým vyvíjanie vodíka takmer celkom neustalo. Zmes sa potom miešala počas 10 minút a zalkalizovala sa (hodnota pH 13 až 14) pridaním 1 M roztoku NaOH. Vodný roztok sa extrahoval s etylacetátom, organická fáza sa

-39premyla so soľankou, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku, pričom sa získal terc-butylester 4-hydroxymetyl-piperidine-1-karboxylovej kyseliny (18,12 g, 100 %).

(c) terc-Butylester4-formyl-piperidín-1-karboxylovej kyseliny

Perjodistan (26,9 g, 63,5 mmol) sa pridal k terc-butylesteru 4-hydroxymetylpiperidín-1-karboxylovej kyseliny (10,5 g, 48g8 mmol) v CH2CI2 (200 ml) a zmes sa miešala počas 90 minút. Pridal sa dietyléter (560 ml) a zrazeniny sa odstránili extrakciou so zmesou 10 % Na₂S₂O₃/nasýtený NaHCO₃ (1:1, 300 ml). Organická vrstva sa premyla s 0,5 M roztokom NaOH a soľankou. Organická fáza sa vysušila a zahustila pri zníženom tlaku. Prečistením s použitím bleskovej chromatografie (hexán/EtOAc, 8 : 2) sa získal terc-butylester 4-formyl-piperidín-1-karboxylovej kyseliny (8,5 g, 81 %).

(d) 2-[2-(1-terc-Butoxykarbonyl-piperidin-4-yl)-metyl]-malónová kyselina

Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila z terc-butylesteru 4-formylpiperidín-1 -karboxylovej kyseliny postupom, ktorý je opísaný v príklade 5 a 9. Výťažok: (100 %).

¹H NMR (600 MHz. CD₃OD) δ 1,38 - 1,48 (m, 2H), 1,61 - 1,75 (m, 1H), 1,82

- 1,90 (m, 2H), 1,92 - 2,02 (m, 2H), 2,90 - 3,01 (m, 2H), 3,35 - 3,42 (m. 2H), 3,42

- 3,48 (m, 1 H).

M (+) 202 (M+1 ).

Príklad 12

2-(6-terc-Butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-malónová kyselina

Zlúčenina uvedená názve sa pripravila z terc-butylesteru [5-(2,2-dimetyl-4,6dioxo-[1,3]dioxan-5-ylmetyl)-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny postupom, ktorý je opísaný v príklade 9. Výťažok: (100 %).

¹H NMR (600 MHz. CD3OD) δ 3,08 (d, 2H), 3,66 (t, 1H). 6,98 (d, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,92 (d, 1H).

M (+)211 (M+1).

-40Príklad 13

2-(2-terc-Butoxykarbonylamino-pyridin-4-ylmetyl)-malónová kyselina

Zlúčenina uvedená v názve sa pripravila z terc-butylesteru [4-(2,2-dimetyl4_l6-dioxo-[1,3]dioxan-5-ylmetyl)-pyridin-2-yl]-karbámovej kyseliny postupom, ktorý je opísaný v príklade 9. Výťažok: (100 %).

¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ 3,10 (d, 2H), 3,79 (t, 1H), 6,84 (d, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,77 (d, 1H).

M (+)211 (M+1).

Príklad 14

2-(2-Amino-pyridin-4-ylmetyl)-jantárová kyselina (a) 4-Benzylester 1-terc-butylester 2-(2-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-4ylmetylén)-jantárovej kyseliny

Butyllítium (1,6 M v hexáne, 14,8 ml, 23,7 mmol) sa po kvapkách pridalo k roztoku 4-benzylesteru 1-terc-butylesteru 2-(dietoxy-fosforyl)-jantárovej kyseliny (9,50 g, 23,7 mmol) v THF (75 ml) pri teplote 0 °C pod dusíkom. Po miešaní pri teplote 0 °C počas jednej hodiny sa roztok preniesol do roztoku terc-butylesteru (4formyl-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny (3,70 g, 16,6 mmol) v THF (75 ml). Výsledná reakčná zmes sa miešala pri teplote 0 °C počas jednej hodiny a potom sa nechala zahriať na teplotu 25 °C a zmes sa miešala cez noc. Pridala sa voda (400 ml) a produkt sa extrahoval s CH2CI2 (3 x 30 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili a zahustili. Blesková chromatografia (hexán/EtOAc, 4:1) poskytla 4benzylester 1 -terc-butylester 2-(2-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-4-ylmetylén)jantárovej kyseliny (4,30 g, 55 %).

(b) 1 -terc-Butylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmetyl)jantárovej kyseliny

4-benzylester 1 -terc-butylester 2-(2-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-4-ylmetylén)-jantárovej kyseliny (2,81 g, 7,60 mmol) a Pd/C (10 %. 400 mg) sa suspendovali v EtOH a hydrogenovali pri tlaku 41 atm. a teplote 28 °C počas 3 dní.

-41 Katalyzátor sa odstránil z reakčnej zmesi odfiltrovaním. Katalyzátor sa premyl s EtOH (96 %). K filtrátu sa pridal 1 M K2CO3 (30 ml) a následne sa pridala voda (50 ml). Po dvoch dňoch sa reakčná zmes odparila na približne 80 ml, potom sa pridala soľanka (10 ml) a reakčná zmes sa extrahovala s éterom. Vodná fáza sa okyslila na hodnotu pH 3 a extrahovala sa s chloroformom. Pridal sa metanol (25 ml) a reakčná zmes sa vysušila (Na₂SO4 + CaSO₄) a prefiltrovala sa, pričom sa získal 1 -terc-butylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmetyl)jantárovej kyseliny (1,90 g, 83 %).

(c) 2-(2-Amino-pyridin-4-ylmetyl)-jantárová kyselina

K roztoku 1-terc-butylesteru 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmetyl)jantárovej kyseliny (164 mg, 0,43 mmol) v metylénchloride (1,5 ml) sa pridal TFA (1,5 ml). Reakčná zmes sa miešala počas 2,5 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku. Zvyšok sa lyofilizoval, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme TFA soli (126 mg, 87 %).

¹H NMR (500 MHz, D₂O): δ 2,58 -2,80 (m, 2H), 2,88 - 3,07 (m, 2H), 3,13 3,26 (m, 1H), 6,79 - 6,84 (dd, 1 H), 6,84 - 6,88 (s, 1H), 7,69 - 7,75 (d, 1 H).

MS (+) 225 (M+1).

Príklad 15 ŕrans-2-(4-Amino-cyklohexylmetyl)-jantárová kyselina (a) 4-[N-(terc-Butoxykarbonyl)amino]-cyklohexánkarboxylová kyselina

K roztoku c/s-4-aminocyklohexánkarboxylovej kyseliny (9,90 g, 69,0 mmol) vo vode (120 ml) a dioxáne (120 ml) sa pridal KOH (3,73 g, 56 mmol) a následne sa pridal di-terc-butyldikarbonát (15,3 g, 70,0 mmol). Reakčná zmes sa miešala pri laboratórnej teplote cez noc. Pridala sa voda a produkt sa extrahoval s CHCI₃. Spojené organické extrakty sa premyli s vodu, vysušili sa a zahustili pri zníženom tlaku, pričom sa získala 4-[N-(terc-butoxykarbonyl)amino]-cyklohexánkarboxylová kyselina (14,1 g, 84 %).

(b) terc-Butylester [4-(metoxy-metylkarbamoyl)-cyklohexyl]-karbámovej kyseliny

-42Roztok 4-[N-(terc-butoxykarbonyl)amino]-cyklohexánkarboxylová kyseliny (11,95 g, 49,0 mmol), O,N-dimetylhydroxylamínu (4,88 g, 50,0 mmol), DCC (9,60 g, 50 mmol) a trietylamínu (5,06 g, 50,0 mmol) v DMF (150 ml) sa miešal pri laboratórnej teplote cez noc. Pridala sa voda (500 ml) a zmes sa extrahovala s CHCI₃. Organická fáza sa premyla s vodou, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku. Prečistením pomocou bleskovej chromatografie (hexán/EtOAc 1 :1) sa získal terc-butylester [4-(metoxy-metylkarbamoyl)-cyklohexyl]-karbámovej kyseliny (8,50 g, 61 %).

(c) terc-Butylester (4-formyl-cyklohexyl)-karbámovej kyseliny terc-Butylester [4-(metoxy-metylkarbamoyl)-cyklohexyl]-karbámovej kyseliny (7,50 g, 26,2 mmol) v suchom éteri (150 ml) sa redukoval s nadbytkom LÍAIH4. Reakčná zmes sa rýchle zriedila opatrným pridaním vody a extrahovala sa s CHCI3. Zmes sa vysušila a zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získal tercbutylester (4-formyl-cyklohexyl)-karbámovej kyseliny (6,30 g, 93 %).

(d) terc-Butylester ŕrans-[4-(benzylimino-metyl)-cyklohexyl]-karbámovej kyseliny

Zmes terc-butylesteru (4-formyl-cyklohexyl)-karbámovej kyseliny (3,80 g, 16,7 mmol), benzylamínu (1,82 g, 16,7 mmol), kyseliny octovej (0,01 g, 16,7 mmol) a bezvodého síranu horečnatého (4,01 g, 33,3 mmol) v metylénchloride (20 ml) sa miešala počas 5 dní. Zmes sa prefiltrovala cez Celit a zahustila sa pri zníženom tlaku, čím sa získal terc-butylester ŕrans-[4-(benzylimino-metyl)cyklohexyl]karbámovej kyseliny (5,10 g, 97 %) vo forme trans ; cis zmesi v pomere 97 ; 3.

(e) terc-Butylester ŕrans-(4-formyl-cyklohexyl)-karbámovej kyseliny

Roztok terc-butylester ŕrans-[4-(benzylimino-metyl)cyklohexyl]-karbámovej kyseliny (2,50 g, 8,00 mmol) a kyselina štävelovej (0,80 g} v zmesi voda /THF (50 ml, 1 : 1) sa miešal počas 10 hodín pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zahustila pri zníženom tlaku a ku zvyšku sa pridal metylénchlorid (50 ml). Organická fáza sa vysušila a zahustila pri zníženom tlaku, čím sa získal tercbutylester ŕrans-(4-formyl-cyklohexyl)-karbámovej kyseliny (1,3 g, 80 %).

-43(f) 4-Benzylester 1-terc-butylester ŕrans-2-(4-terc-butoxykarbonylamino-cyklohexylmetylén)-jantárovej kyseliny

Butyllítium (1,6 M v hexáne, 5,0 m!, 8,00 mmol) sa po kvapkách pridalo k roztoku 4-benzylesteru 1-terc-butylesteru 2-(dietoxy-fosforyl)-jantárovej kyseliny (3,21 g, 8,00 mmol) v THF (25 ml) pri teplote 0 °C pod dusíkom. Po miešaní pri teplote 0 °C počas jednej hodiny sa roztok preniesol do roztoku terc-butylester teans-(4-formyl-cyklohexyl)-karbámovej kyseliny (1,30 g, 5,72 mmol) v THF (10 ml). Výsledná zmes sa miešala pri teplote 0 °C počas jednej hodiny a pri laboratórnej teplote cez noc. Pridala sa voda a produkt sa extrahoval s CH2CI2. Organická fáza sa vysušila a zahustila pri zníženom tlaku. Blesková chromatografia (hexán/EtOAc, 80:20) poskytla 4-benzylester 1-terc-butylester trans-2-(4-tercbutoxykarbonylamino-cyklohexyl-metylén)-jantárovej kyseliny (1,10 g).

(g) 1 -terc-Butylester ŕrans-2-(4-terc-butoxykarbonylamino-cyklohexylmetyl)jantárovej kyseliny

Roztok 4-benzylesteru 1-terc-butylesteru trans-2-(4-tercbutoxykarbonylamino-cyklohexylmetylén)-jantárovej kyseliny (243 mg, 0,51 mmol) a paládia (5 % na aktívnom uhlí) v etanole (15 ml) sa hydrogenoval pri tlaku 4 bar počas 3 hodín. Katalyzátor sa odstránil z reakčnej zmesi odfiltrovaním. Katalyzátor sa premyl s etanolom a roztok sa zahustil pri zníženom tlaku, pričom sa získal surový 1 -terc-butylester ŕrans-2-(4-terc-butoxykarbonylamino-cyklohexylmetyl)jantárovej kyseliny (217 mg, >100 %).

(h) frans-2-(4-Amino-cyklohexylmetyl)-jantárová kyselina

K roztoku 1 -terc-butylesteru teans-2-(4-terc-butoxykarbonylamino-cyklohexylmetyl)-jantárovej kyseliny (200 mg, 0,52 mmol) v metylénchloride (1,32 g, 15,6 mmol) sa pridal trietylsilán (150 mg, 1,30 mmol) a následne sa pridal TFA (770 mg, 6,75 mmol). Reakčná zmes sa miešala počas 2,5 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku. Prečistením pomocou HPLC (0 až 80 % acetonitŕilu, 0,1 % TFA vo vode) sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme TFA soli (60 mg, 34 %).

-44¹H NMR (500 MHz, D₂O): δ 0,99 -1,11 (m, 2H), 1,30 -1,46 (m, 4H), 1,54 -1 ,62 (m, 1H). 1,79 - 1,86 (m, 1H), 1,89 -1,96 (m, 1H), 1,99 - 2,06 (m, 2H), 2,58 2,71 (m, 2H), 2,85 - 2,95 (m, 1H), 3,08 - 3,17 (m, 1H).

MS (+) 230 (M+1).

Príklad 16

2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-N-benzyl-N-hydroxy-jantárová kyselina (a) terc-Butylester N-benzyl-N-benzyloxy-2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-3yl-metyl)-jantárovej kyseliny

K roztoku 1-ŕerc-butylesteru 2-(2-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-4ylmetyl)-jantárovej kyseliny (0,67 g, 1,76 mmol) v CH₂CI₂ (25 ml) sa pridal Nbenzyl-N-benzyloxyamín (0,42 g, 1,94 mmol), DCC (0,40 g, 1,94 mmol) a DMAP (0,02 g, 0,17 mmol) a reakčná zmes sa miešala cez noc. Pridala sa voda a zmes sa extrahovala s CH₂CI₂. Organická fáza sa vysušila a prefiltrovala a zvyšok sa prečistil pomocou bleskovej chromatografie (hexán/EtOAc, 4:1), pričom sa získal ŕerc-butylester N-benzyl-N-benzyloxy-2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-jantárovej kyseliny (0,51 g, 50 %).

(b) 2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-N-benzyl-N-benzyloxy-jantárová kyselina

K roztoku ŕerc-butylesteru N-benzyl-N-benzyloxy-2-(6-ŕercbutoxykarbonylamino-pyridin-3-yl-metyl)-jantárovej kyseliny (1,0 g, 1,7 mmol) v metylénchloride (10 ml) sa pridal TFA (4 ml) pri teplote 0 °C. Reakčná zmes sa miešala počas 4 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku, pričom sa získala surová 2-(6-amino-pyridin-3-ylmetyl)-N-benzyl-N-benzyloxy-jantárová kyselina, vo forme TFA soli (0,9 g, 100 %).

(c) 2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-N-benzyl-N-hydroxy-jantárová kyselina

Roztok 2-(6-amino-pyridin-3-ylmetyl)-N-benzyl-N-benzyloxy-jantárovej kyseliny (0,9 g, 1,7 mmol) a paládia (0,5g, 5 % na aktívnom uhlí) v metanole (100 ml) sa hydrogenoval pri tlaku 1 bar počas 2 hodín. Reakčná zmes sa prefiltrovala a zahustila pri zníženom tlaku. Zvyšok sa prečistil pomocou bleskovej chromatografie

-45(CHCIVMeOH/hkO, 10 : 5 : 1), čím sa získala zlúčenina uvedená v názve (123 mg, 22 %).

¹H NMR (600 MHz, CD₃OD): δ 2,50 - 3,03 (m, 5H), 4,72 (q, 2H), 6,65 (d, 1H), 7,18- 7,31 (m, 6H), 7,53 (d, 1H), 7,65 (s, 1H).

MS (+) 330 (M+1 ).

Príklad 17

2-(6-aminopyridin-3-ylmetyl)-[3-hydroxy-(3-fenylpropyl)-fosfinoyl]propiónová kyselina (a) Etylester 2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-3-[hydroxy-(3-fenylpropyl)-fosfinoyl]-propiónovej kyseliny

Roztok (3-fenylpropyl)-fosfínovej kyseliny (0,579 g, 3,143 mmol) a etylesteru kyseliny 2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-akrylovej (0,327 g, 1,067 mmol) v MeCN (7,5 ml) sa odplynil s použitím techniky zmrazovaniarozmrazovania. Pridal sa BSA (2,55 g, 12,57 mmol) s zmes sa miešala počas troch dní a zahustila sa pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozpustil v chloroforme, premyl sa s NaHCO₃ a soľankou, vysušil sa a zahustil pri zníženom tlaku. Blesková chromatografia (CH₂CI₂/MeOH, 8 : 2) poskytla etylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmetyl)-3-[hydroxy-(3-fenylpropyl)-fosfinoyl]-propiónovej kyseliny (0,240 g, 16%).

(b) 2-(6-ŕerc-Butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-3-[hydroxy-(3-fenylpropyl)fosfinoyl]-propiónová kyselina

K roztoku etylester 2-(6-ferc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-3[hydroxy-(3-fenylpropyl)-fosfinoyl]-propiónovej kyseliny (0,240 g, 0,489 mmol) v MeCN (3 ml) sa pridal roztok LiOH (0,059 g, 2,45 mmol) v H₂O (3 ml). Reakčná zmes sa potom miešala pri teplote 20 °C počas 1,5 hodín. Pridal sa etylacetát a zmes sa premyla s 1 M HCI a soľankou a prefiltrovala sa, pričom sa získala kyselina 2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-3-[hydroxy-(3fenylpropyl)-fosfinoyl]-propiónová (0,174 g, 77 %) vo forme bielych kryštálov.

-46(c) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmetyl)-3-[hydroxy-(3-fenylpropyl)-fosfinoyl]-propiónová kyselina

K zmesi 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-3-[hydroxy-(3fenylpropyl)-fosfinoyl]-propiónovej kyseliny (0,170 g, 0,367 mmol) v etylacetáte (3 ml) sa pri teplote 4 °C pomaly pridal etylacetát (4 ml, nasýtený s HCl (plynný)). Reakčná zmes sa potom miešala počas 22 hodín Zahustením pri zníženom tlaku sa získala zlúčenina uvedená v názve (0,124 g, 93 %), vo forme hydrochloridovej soli.

¹H NMR (300 MHz; CD₃SOCD₃): δ 1,52 - 1,72 (m, 4H), 1,58 - 1,96 (m, 2H), 2,47 - 2,49 <t,1 H), 2,57 - 2,62 (m, 2H), 2,77 - 2,82 (m, 2H). 6,94 - 6,97 (d, 1H), 7,15 - 7,29 (m, 4H), 7,75 - 7,80 (m, 2H), 8,05 (s. 1H).

MS (+) 363 (M+1).

Príklad 18

2- (6-Amino-5-metyl-pyridin-3-ylmetyl)-3-[(1-benzyloxykarbonylamino-2metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyl]-propiónová kyselina (a) Etylester 2-[(1 -benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoylmetyl]3- (6-Ď/s(terc-butoxykarbonyl)amino-5-metyl-pyridin-3-yl)-propiónovej kyseliny

Roztok etylesteru 2-(6-b/s(ferc-butoxykarbonyl)amino-5-metyl-pyridin-3ylmetyl)-akrylovej kyseliny (0,6 g, 1,43 mmol) a (1-benzyloxykarbonylamino-2metyl-propyl)-fosfínovej kyseliny (0,678 g, 2,5 mmol) v suchom acetonitrile (10 ml) sa odplynil s použitím techniky zmrazovania-rozmrazovania. Pod argónom sa pridal ó/s-trimetylsilylacetamid (5 ml., 20,3 mmol). Výsledná zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas 84 hodín a potom sa zahustila pri zníženom tlaku. Zvyšná zmes sa rozpustila v chloroforme a premyla sa s nasýteným vodným NaHCO₃. Vodná fáza sa extrahovala s chloroformom a EtOAc. Spojené organické extrakty sa vysušili a zahustili pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil pomocou bleskovej chromatografie (EtOAc/EtOH, 100: 20 -> 100 : 20), pričom sa získal etylester 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-47hydroxyfosfinoylmetyl]-3-(6-Ď/s(ŕerc-butoxy-karbonyl)amino-5-metyl-pyridin-3-yl)propiónovej kyseliny (650 mg, 65,9 %).

(b) 2-[(1-Benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoylmetyl]-3-(6-tercbutoxykarbonylamino-5-metyl-pyridin-3-yl)-proniónová kyselina

M LiOH (2 ml) sa po kvapkách pridal k roztoku etylesteru 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxyfosfinoylmetyl]-3-(6-b/s(terc-butoxykarbonyl)-amino-5-metyl-pyridin-3-yl)-propiónovej kyseliny (100 mg, 0,145 mmol) v acetonitrile (2 ml). Reakčná zmes sa miešala cez noc a zahustila sa pri zníženom tlaku. Zmes sa prečistila pomocou stĺpcovej chromatografie (izopropanol/koncentrovaný vodný NH₃/voda. 4:2:1), pričom sa získal znečistený produkt. Znečistený produkt sa miešal s MeOH, prefiltroval sa a zahustil pri zníženom tlaku. Surový produkt sa miešal s EtOH, prefiltroval sa a zahustil pri zníženom tlaku. Surový produkt sa miešal so zmesou etylacetát/etanol, prefiltroval sa a zahustil pri zníženom tlaku, pričom sa získala kyselina 2-[(1benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)-hydroxy-fosfinoylmetyl]-3-(6-tercbutoxykarbonylamino-5-metylpyridin-3-yl)-propiónová (52 mg, 63,8 %).

(c) 2-(6-Amino-5-metyl-pyridin-3-ylmetyl)-3-[(1-benzyloxykarbonylamino-2metylpropyl)-hydroxy-fosfinoyl]-propiónová kyselina

Roztok kyseliny 2-[(1-benzyloxykarbonylamino-2-metylpropyl)hydroxyfosfinoyl-metyl]-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-metylpyridin-3-yl)propiónovej (52 mg, 0,09 mmol) a etylacetátu (6 ml, nasýtený s HCI (plynný)) sa miešal počas 20 minút. Zmes sa zahustila pri zníženom tlaku, premyla sa s acetonitrilom a rozpustila sa v etanole a petrolétere. Roztok sa zahustil pri zníženom tlaku, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve (41 mg, 91,3 %) vo forme hydrochloridovej soli.

¹H NMR (600 MHz, D₂O): δ 0,99 - 1,05 (m,6H), 1,75 - 1,85 (m, 1H). 2,10 2,28 (m, 5H) 2,68 - 3,15 (m, 3H), 3,75 - 3,81 (m, 1H), 5,04 - 5,19 (m, 2H), 7,20 7,37 (m, 5H), 7,51 - 7,71 (m, 2H).

MS (+) 501 (M+1).

-48Príklad 19

2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-3-metyl-jantárová kyselina (a) Dietylester 2-etoxykarbonyl-3-metyl-jantárovej kyseliny

Roztok dietylmalonátu (2,44 g, 15 mmol) a fluoridu cézneho (2,32 g, 15 mmol) v DMF (20 ml) sa miešal počas jednej hodiny pri laboratórnej teplote pod argónom. Pridal sa roztok etylesteru 2-metansulfonyloxy-propiónovej kyseliny (1,0 g, 5 mmol) v DMF (5 ml) a reakčná zmes sa miešala pri teplote 45 °C cez noc. Zmes sa vyliala do H₂O a extrahovala sa s etylacetátom. Organické vrstvy sa premyli s vodou, vysušili sa a zahustili pri zníženom tlaku. Surový produkt sa prečistil pomocou vákuovej destilácie. Produkt sa prečisti s použitím stĺpcovej chromatografie (petroléter/etylacetát, 4:1), čím sa získal dietylester 2etoxykarbonyl-3-metyl-jantárovej kyseliny (0,5.g, 37,7 %).

(b) Dietylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-2-etoxykarbonyl-3metyljanátovej kyseliny

Roztok dietylesteru 2-etoxykarbonyl-3-metyl-jantárovej kyseliny (300 mg, 1,15 mmol) a NaH (30 mg, 1,25 mmol) v DMF (1 ml) sa miešal pri laboratórnej teplote počas jednej hodiny pod argónom. Pridal sa roztok ŕerc-butylesteru (5brómmetyl-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny (330 mg, 1,15 mmol) v DMF (1 ml) a reakčná zmes sa miešala počas 24 hodín. Reakčná zmes sa vyliala do H₂O a extrahovala sa s etylacetátom. Organická vrstva sa premyla s vodou, vysušila sa a zahustila pri zníženom tlaku. Produkt sa prečistil pomocou stĺpcovej chromatografie (petroléter/etylacetát, 4 1), čím sa získal dietylester 2-(G-tercbutoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-2-etoxykarbonyl-3-metyljanátovej kyseliny (220 mg, 40,9 %).

(c) 2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-3-metyl-jantárová kyselina

Roztok dietylesteru 2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-2etoxy-karbonyl-3-metyljanátovej kyseliny (94 mg, 0,20 mmol) v koncentrovanej vodnej HCI (4 ml) sa miešal pod refluxom cez noc. Zmes sa zahustila pri zníženom

-49tlaku a vysušila sa vymrazením, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme HCI soli (50 mg, 90,3 %).

¹H NMR (400 MHz; D₂O): δ 1,22 - 1,35 (m, 3H), 2,77 - 3,08 (m, 4H), 6,99 7,05 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,84 -7,91 (m, 1H).

MS (+) 239 (M+1).

Príklad 20

2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-3-fenetyl-jantárová kyselina (a) Dietylester 2-etoxykarbonyl-3-fenetyl-jantárovej kyseliny

Roztok dietylmalonátu (240,2 mg, 1,5 mmol) a NaH (43,2 mg, 1,8 mmol) v THF (3 ml) sa miešal počas jednej hodiny pri laboratórnej teplote pod argónom. Pridal sa etylester 2-(4-nitrobenzénsulfonyloxy)-4-fenyl-butánovej kyseliny (590 mg, 1,5 mmol) a DMPU (192,2 mg, 1,5 mmol) a zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas troch dní. Reakčná zmes sa vyliala do H₂O a extrahovala sa s etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou a zahustila sa pri zníženom tlaku. Produkt s prečistil pomocou stĺpcovej chromatografie (petroléter/etylacetát. 4 : 1), čím sa získal dietylester 2-etoxy-karbonyl-3-fenetyl-jantárovej kyseliny (274 mg, 52,1 %).

(b) Dietylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-2-etoxykarbonyl-3fenetyljantárovej kyseliny

Roztok dietylesteru 2-etoxykarbonyl-3-fenetyl-jantárovej kyseliny (9,3 mg, 0,027 mmol) a NaH (1,39 mg, 0,032 mmol) v DMF (0,5 ml) sa miešal počas 15 minút pri laboratórnej teplote. Pridal sa terc-butylester (5-brómmetyl-pyridin-2-yl)karbámovej kyseliny (8,76 mg, 0,031 mmol) a zmes sa miešala pri laboratórnej teplote cez noc. Reakčná zmes sa vyliala do H2O a extrahovala sa s etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou a zahustila sa pri zníženom tlaku. Produkt sa prečistil pomocou stĺpcovej chromatografie (heptán/etylacetát, 2:1), čím sa získal dietylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-2-etoxykarbonyl-3fenetyljantárovej kyseliny (3,8 mg, 25,7 %).

-50(c) 2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-3-fenetyl-jantárová kyselina

Roztok dietylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmetyl)-2etoxy-karbonyl-3-fenetyljantárovej kyseliny (94 mg, 0,169 mmol) v koncentrovanej HCI (7 ml) sa miešal pod refluxom počas 24 hodín. Zmes sa zahustila pri zníženom tlaku a vysušila sa vymrazením, pričom sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme HCI soli (55 mg, 99,2 %).

¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 1,63 - 1,98 (m, 2H), 2,42 - 2,85 (m, 4H), 3,00 3,60 (m, 2H), 6,85 - 6,98 (m, 1H), 7,10 - 7,29 (m, 5H), 7,76 - 8,05 (m, 2H).

MS (+) 329 (M+1)

Príklad 21

2- (6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-3-butyl-jantárová kyselina (a) Dietylester 2-butyl-3-etoxykarbonyl-jantárovej kyseliny

Roztok dietylmalonátu (3,589 g, 0,022 mol) a fluoridu cézneho (3,406 g, 0,024 mol) v DMF (50 ml) sa miešal počas jednej hodiny pri laboratórnej teplote pod argónom. Pridal sa etylester 2-brómhexánovej kyseliny (5 g, 0,022 mol) a zmes sa miešala pri teplote 100 °C a potom pri teplote 65 °C cez noc. Reakčná zmes sa vyliala do H₂O a extrahovala sa s etylacetátom. Organická vrstva sa premyla s vodou a zahustila sa pri zníženom tlaku. Produkt sa prečistil pomocou stĺpcovej chromatografie (heptán/etylacetát, 1 : 2), čím sa získal dietylester 2-butyl3- etoxykarbonyl-jantárovej kyseliny (5,0 g, 73,8 %).

(b) Dietylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pridin-3-ylmetyl)-3-butyl-2etoxykarbonyl-jantárovej kyseliny

Roztok dietylesteru 2-butyl-3-etoxykarbonyl-jantárovej kyseliny (1 g, 3 mmol) a NaH (119 mg, 5 mmol) v DMF (20 ml) sa miešal počas 60 minút pri teplote 0 °C pod argónom. Pridal sa terc-butylester (5-brómmetyl-pyridin-2-yl)-karbámovej kyseliny (1,425 g, 5 mmol) a zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas jedného týždňa. Pridal sa etanol (1 ml) a reakčná zmes sa vyliala do H₂O a extrahovala sa s etylacetátom. Organická vrstva sa premyla vodou a zahustila sa

-51 pri zníženom tlaku. Produkt sa prečistil pomocou stĺpcovej chromatografie (heptán/etylacetát, 4:1 až 1:1), pričom sa získal dietylester 2-(Q-tercbutoxykarbonylamino-pridin-3-ylmetyl)-3-butyl-2-etoxykarbonyl-jantárovej kyseliny (1,2 g, 71,3%).

(c) 2-(6-Amino-pyridin-3-ylmetyl)-3-butyl-jantárová kyselina

Roztok dietylesteru 2-(6-ŕerc-butoxykarbonylamino-pridin-3-ylmetyl)-3-butyl2-etoxykarbonyl-jantárovej kyseliny (50 mg, 0,098 mmol) v koncentrovanej HCI (4 ml) sa miešal pod refluxom počas 24 hodín. Zmes sa zahustila pri zníženom tlaku a vysušila sa vymrazením, čím sa získala zlúčenina uvedená v názve, vo forme HCI soli (28 mg, 89,9 %).

¹H NMR (400 MHz, D²O): δ 0,83 - 0,91 (m, 3H), 1,18 - 1,40 (m, 4H), 1,50 1,82 (m, 2H), 2,67 - 2,75 (m, 12H), 2,78 - 2,85 (m, 2H), 2,89 - 3,03 (m, 1H), 6,97 - 7,09 (m, 1 H), 7,63 - 7,67 (m, 1H), 7,80 - 7,85 (m, 1H).

MS (+) 281 (M+1).

Skratky

Ac = acetát

AIBN = α,α'-azoizobutyronitril

Bn = benzyl

BSA = N,O-bis(trimetylsilyl)acetamid

Bu = butyl

Bz = benzoyl

DCC = dicyklohexylkarbodiimid

DIAD = diizopropylazodikarboxylát

DIPEA = diizopropyletylamín

DMAP = N,N-dimetylaminopyridín

DME = 1,2-dimetoxyetán

DMF = dimetylformamid

-52DMSO = dimetylsulfoxid

EDC = 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid

Et = etyl

EtOAc = etylacetát

EtOH = etanol

HMDS = hexametyldisilazan

HOAc = kyselina octová

HOBt= 1-hydroxybenzotriazol

HPLC = vysokoúčinná kvapalinová chromatografia

KHMDS = bis(trimetylsilyl)amid draselný

LDA = diizopropylamid lítny

Me = metyl

MeOH = metanol

PMB = 4-metoxybenzyl

Ph = fenyl

Pr = propyl

PyBOP = (benzotriazol-l-yloxy)tripyrolidinofosfónium hexafluórfosfát

TEA = trietylamín

TFA = trilfluóroctová kyselina

THF = tetrahydrofurán

TMSCN = trimetylsilylkyanid

Tos = toluén-4-sulfonyl

Claims

1. Zlúčenina všeobecného vzorca I ? i ^XX^R.

Ŕ* (I) alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát alebo solvát takejto soli, kde R¹ predstavuje

Ci-C₆-alkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidino-skupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, acylovú skupinu, acylaminoskupinu, alkylovú skupinu, alkylkarbamoylová skupinu, alkyltioskupinu, alkoxyskupinu, aroylovú skupinu, aroylaminoskupinu, aryloxyskupinu, aryltioskupinu, amidinoskupinu, amínoskupinu, arylovú skupinu, karbamoylovú skupinu,

-54karboxylovú skupinu, kyanoskupinu, cykloalkylovú skupinu, formylovú skupinu, guanidinoskupinu, halogén, heterocyklylovú skupinu, hydroxylovú skupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, tiolovú skupinu, skupinu Z

2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- alebo Z₂N-CO-NZ-,

R³ predstavuje COOR⁵, SO(OR⁵), SO

3R⁵, P=O(OR⁵)2l B(OR⁵)₂, P=OR⁵(OR⁵) alebo tetrazol, alebo akýkoľvek izostér karboxylovej kyseliny, predstavuje skupinu __

Λ O

Q S P-R

II ^{1 1} o

alebo skupinu .OH alebo skupinu o

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁶ predstavuje Ci-C6-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu, heterocyklylovú skupinu, alebo prípadne N-substituovanú H₂NC(Z)-CONH-C(Z)- skupinu alebo H₂N-C(Z)- skupinu,

R⁷ znamená atóm vodíka, CrCô-alkylovú skupinu;

X predstavuje O, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR⁷SO₂, SO₂NR⁷, NR⁷CO alebo CONR⁷,

Y predstavuje O, N(Z), S, C(Z)₂, alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka, CrC₆-alkylovú skupinu, arylovú skupinu, cykloalkylovú skupinu alebo heterocyklylovú skupinu, pod podmienkou, že ak X znamená O, S, SO, SO₂, N(Z), NR⁷SO2, SO2NR⁷ or NR⁷CO, potom Y predstavuje C(Z)2 alebo jednoduchú väzbu.

-552. Zlúčenina podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát, alebo solvát takejto soli, kde

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R³ predstavuje COOR⁵,

R predstavuje skupinu __i_ _oe

II ™ o

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Ci-C6-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje O alebo C(Z)₂;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C6-alkylovú skupinu.

-563. Zlúčenina podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát, alebo solvát takejto soli, kde

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R³ predstavuje COOR⁵, o

R⁴ predstavuje skupinu /An'^0H

Ŕ⁷

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Cb-Ce-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

R⁷ predstavuje atóm vodíka alebo CrC₆-alkylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo CrC6-alkylovú skupinu.

4. Zlúčenina podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo solvát, alebo solvát takejto soli, kde

-57R¹ predstavuje cykloalkylovú skupinu, substituovanú jednou alebo viacerými zásaditými skupinami, ako je aminoskupina, amidinoskupina a/alebo guanidinoskupina;

heterocyklylovú skupinu, obsahujúcu najmenej jeden atóm dusíka;

R² predstavuje atóm vodíka, Ci-C₃-alkylovú skupinu, aminoskupinu, halogén alebo hydroxylovú skupinu,

R³ predstavuje COOR⁵, . O r

R predstavuje skupinu II pr

R⁵ predstavuje atóm vodíka, Cí-Ce-alkylovú skupinu alebo arylovú skupinu,

X predstavuje C(Z)₂;

Y predstavuje C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu;

Z predstavuje nezávisle atóm vodíka alebo Ci-C6-alkylovú skupinu.

5. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde R¹, R⁵, R⁶a Z majú významy definované v nároku 1, R² predstavuje atóm vodíka a R³znamená COOR⁵, s

_4 , , x^R

R znamena skupinu o — P-R^ŕH

O

-58X znamená C(Z)₂ , Y predstavuje C(Z)2, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje krok reakcie zlúčeniny vzorca VI (VI) v ktorom R¹ a Z majú významy definované v nároku 1, X znamená C(Z)₂ a Y predstavuje C(Z)₂, so zlúčeninou vzorca IX,

R⁶PO₂H₂ (IX) kde R⁶ má význam definovaný v nároku 1, v prítomnosti vhodného reakčného činidla, ako je BSA alebo HMDS, pri štandardných podmienkach.

6. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde R¹, R², R⁵, R⁶ a Z majú významy definované v nároku 1, R³ znamená COOR⁵, X znamená C(Z)₂, Y predstavuje O,

R⁴ znamená skupinu vyznačujúci sa tým, že zahrňuje krok reakcie zlúčeniny vzorca XII i

R i

R

COOH (XII)

-59v ktorom R¹ a R² majú významy definované v nároku 1 a X znamená C(Z)2, so zlúčeninou vzorca XIII,

R⁶PO₃H₂ (XIII) kde R⁶ má význam definovaný v nároku 1, v prítomnosti vhodného kopulačného reakčného činidla, ako je DCC/DMAP, PyBop/DIPEA alebo SOCI₂, pri štandardných podmienkach.

7. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde R¹ a R²majú významy definované v nároku 1, a X a Y znamenajú C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu a R³ a R⁴ znamenajú COOR⁵, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje krok reakcie zlúčeniny vzorca XIV v ktorom R² a R⁵ majú významy definované v nároku 1 a Y znamená C(Z)₂ alebo jednoduchú väzbu, so zlúčeninou všeobecného vzorca III,

R¹-X-L (III) kde R¹ má význam definovaný v nároku 1, X znamená C(Z)₂ a L predstavuje odstupujúcu skupinu, ako je Cl, Br, I alebo tozyl, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je LDA alebo NaH, pri štandardných podmienkach.

8. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde R¹, R², R⁵, R⁷, X, Y a Z majú významy definované v nároku 1, R³ znamená COOR⁵ a

R⁴ znamená skupinu o

„OH

-60vyznačujúci sa tým, že zahrňuje krok reakcie zlúčeniny vzorca XV

R

I (XV) so zlúčeninou vzorca XVI

HR⁷NOH (XVI) kde R⁷ má význam definovaný v nároku 1, v prítomnosti vhodného reakčného činidla, ako je DCC/DMAP, pri štandardných podmienkach.

9. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, ako účinnú zložku v kombinácii s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

10. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na liečenie.

11. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na výrobu lieku na inhibíciu karboxypeptidázy U.

12. Spôsob liečenia alebo profylaxie stavov spojených s inhibíciou karboxypeptidázy U, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie cicavcovi, vrátane človeka, ktorý potrebuje takéto liečenie, účinného množstva zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 4.

13. Farmaceutický prípravok na použitie pri liečení alebo profylaxii stavov spojených s inhibíciou karboxypeptidázy U, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 4, v kombinácii s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

14. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje

-61 (i) zlúčeninu vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ alebo solvát, alebo solvát takejto soli, a (ii) jedno alebo viac antitrombotických činidiel s odlišným mechanizmom účinku, ako je činidlo proti zrážaniu krvných doštičiek, inhibítor tromboxánového receptora, inhibítor syntetázy, antagonista receptora fibrinogénu, prostacyklínové mimetické činidlo, inhibítor fosfodiesterázy alebo antagonista ADP-receptora (P₂T), v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

15. Kit súčastí, vyznačujúci sa tým, že obsahuje (i) farmaceutický prípravok obsahujúci zlúčeninu vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ alebo solvát, alebo solvát takejto soli v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom; a (ii) farmaceutický prípravok obsahujúci jedno alebo viac antitrombotických činidiel s odlišným mechanizmom účinku, ako je činidlo proti zrážaniu krvných doštičiek, inhibítor tromboxánového receptora, inhibítor syntetázy, antagonista receptora fibrinogénu, prostacyklínové mimetické činidlo, inhibítor fosfodiesterázy alebo antagonista ADP-receptora (P₂T), v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom;

pričom ako zlúčenina (i) tak aj činidlo (ii) sa poskytujú vo forme, ktorá je vhodná na podávanie spolu s druhou zložkou.

16. Spôsob liečenia pacienta trpiaceho alebo náchylného na stav, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia karboxypeptidázy U a odlišný antitrombotický mechanizmus, vyznačujúci sa tým, že tento spôsob zahrňuje podávanie pacientovi terapeuticky účinného celkového množstva (i) zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli alebo solvátu, alebo solvátu takejto soli v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom; spolu s

-62(ii) jedným alebo viacerými antitrombotickými činidlami s odlišným mechanizmom účinku, ako je činidlo proti zrážaniu krvných doštičiek, inhibítor tromboxánového receptora, inhibítor syntetázy, antagonista receptora fibrinogénu, prostacyklínové mimetické činidlo, inhibítor fosfodiesterázy alebo antagonista ADP-receptora (P2T), v zmesi s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou, riedidlom alebo nosičom.

17. Spôsob liečenia pacienta trpiaceho alebo náchylného na stav, pri ktorom je vhodná alebo sa vyžaduje inhibícia karboxypeptidázy U a odlišný antitrombotický mechanizmus, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie pacientovi prípravku definovaného v nároku 15.