RU2760335C1 - Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1 для повышения урожайности зерновых культур - Google Patents
Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1 для повышения урожайности зерновых культур Download PDFInfo
- Publication number
- RU2760335C1 RU2760335C1 RU2021110658A RU2021110658A RU2760335C1 RU 2760335 C1 RU2760335 C1 RU 2760335C1 RU 2021110658 A RU2021110658 A RU 2021110658A RU 2021110658 A RU2021110658 A RU 2021110658A RU 2760335 C1 RU2760335 C1 RU 2760335C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acinetobacter johnsonii
- bacterial strain
- seeds
- vkpm
- strain
- Prior art date
Links
- 241000122229 Acinetobacter johnsonii Species 0.000 title claims abstract description 19
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 18
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 5
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 9
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 9
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 9
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 9
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 description 7
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 5
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 4
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N D-ribopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 2
- 241000589774 Pseudomonas sp. Species 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000589152 Azotobacter chroococcum Species 0.000 description 1
- 241000193410 Bacillus atrophaeus Species 0.000 description 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 1
- 241000194103 Bacillus pumilus Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 108010020943 Nitrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241001148116 Paucimonas lemoignei Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241001645955 Pseudomonas chlororaphis subsp. aureofaciens Species 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000881765 Serratia ficaria Species 0.000 description 1
- 241000186986 Streptomyces anulatus Species 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000012225 czapek media Substances 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005530 etching Methods 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001863 plant nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии и сельскому хозяйству. Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1, обладающий азотфиксирующей, фитопротекторной и ростостимулирующей активностью, депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под регистрационным номером ВКПМ В-13867. Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii ВКПМ В-13867 может быть использован для оздоровления биоценоза почвы и повышения урожая зерновых культур. 5 пр.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии и сельскому хозяйству и касается получения штаммов бактерий, обладающих азотфиксирующей фитопротекторной и ростостимулирующей активностью. Штамм перспективен для получения бактериальных препаратов для улучшения питания растений, оздоровления биоценоза и повышения урожая зерновых культур.
Известно использование штамма бактерий Azotobacter chroococcum 3064 ВКПМ В-3721, проявляющего азотфиксирующую активность в составе препарата, для повышения урожайности, приживаемости растений при одновременном повышении качества стандартного посадочного материала, выхода его, а также повышения зимостойкости культур, в особенности плодовых (п. РФ № 2127509, МПК A01G 7/00, опубл. 23.03.1999).
Однако данный штамм предлагается к использованию только в составе биопрепаратов.
Pseudomonas aureofaciens ИБ 51 и Pseudomonas putida ИБ 17 (п. РФ № 2203945, МПК C12N 1/20, опубл. 2003; п. РФ № 2213774, МПК C12N 1/20, опубл. 2003), обладающие способностью оказывать антагонистическое действие на возбудителей заболеваний пшеницы твердой головней и корневыми гнилями.
Недостатком штаммов является их сравнительно невысокая антагонистическая активность и неспособность к фиксации атмосферного азота и синтезу ростостимулирующих веществ, т.е. отсутствие комплексности воздействия на фитопатогены и растения.
Известны штаммы микроорганизмов, непосредственно стимулирующие рост и способствующие повышению продуктивности растений, такие как Pseudomonas putida ВКПМ В-4308 (п. РФ № 2051586, МПК A01N 63/00, C12N 1/20, опубл. 10.01.1996), Pseudomonas lemoignei ВКМ В-6615 (п. РФ № 2121271, МПК A01N 63/00, C12N 1/20, опубл. 10.11.1998), Streptomyces chrysomallus Р-21 (п. РФ № 2226214, МПК C12N 1/20, A01N 63/00, опубл. 27.03.2004), Bacillus subtilis 8А (п. РФ № 2495119, МПК C12N 1/20, C12R 1/125, A01N 63/00, опубл. 10.10.2013), Serratia ficaria ВКПМ В-11403 (п. РФ № 2545398, МПК A01N 63/02, C12N 1/20, C12R 1/425, опубл. 27.03.2015), Bacillus pumilus А1.5 (п. РФ №2551968, опубл. 10.06.2015), Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 (п. РФ № 2570624, МПК C12N 1/20, A01N 63/02, C12R 1/07, опубл. 10.12.2015), Bacillus cereus 875 TS (п. РФ № 2624032, МПК C12N 1/20, A01N 63/02, C12R 1/085, опубл. 30.06.2017).
Однако ни для одного из перечисленных штаммов не указаны возможные механизмы прямой стимуляции роста растений, что не позволяет делать уверенные прогнозы относительно эффективности их применения в различных условиях и на различных культурах.
Штамм бактерий Pseudomonas sp. ИБ-4 (п. РФ № 2529958, МПК А01N 63/00, C12N 1/20, опубл. 10.10.2014) обладает высокой продуктивностью, нитрогеназной и ростостимулирующей активностями. Штамм бактерий Pseudomonas sp. депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов под регистрационным номером ВКМ В-2830D и может быть использован при получении биопрепарата для снижения заболеваемости растений, вызываемой фитопатогенными грибами, и повышения урожайности растений. Изобретение позволяет повысить урожай пшеницы.
Недостатком данного штамма является его низкая азотфиксирующая способность.
Таким образом, все известные штаммы, используемые в качестве фиксаторов азота воздуха или обладающие фитопротекторной и/или ростостимулирующей активностью, имеют ряд недостатков вследствие недостаточно высокой эффективности и трудоемкости способа получения биомассы, низким уровнем азотфиксирующей способности и стимуляции роста растений. Кроме того, большинство известных штаммов, для достижения указанных свойств, используются только в составе консорциумов, и не обладают самостоятельной фитпротекторной и ростостимулирующей активностью.
Технической проблемой, поставленной перед изобретением, является расширение ассортимента штаммов, обладающих азотфиксирующей, фитопротекторной и ростостимулирующей активностью.
Поставленная техническая проблема решается выявлением нового природного штамма Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867, который обладает значительной азотфиксирующей способностью, а также фитопротекторной и ростостимулирующей активностью.
Штамм Acinetobacter johnsonii A1 выделен в естественных условиях из почвы (Приморский край, Россия) путем прямого высева на агаризованную среду Эшби при 22-25°С и депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под номером ВКПМ В-13867.
Штамм Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 обладает азотфиксирующей способностью. Активность фиксации азота определяли ацетиленовым методом с помощью газового хроматографа и выражали в наномолях образовавшегося этилена за 1 час инкубации (нМ С2Н4/ч).
Штамм идентифицировали помощью анализа 16S РН. Была проанализирована последовательность длинной 598 пар оснований. Для амплификации участка 16S рРНК образцов использовали пару праймеров BAK11w 5’-AGTTTGATCMTGGCTCAG-3' и BAK2 5’-GGACTACHAGGGTATCTAAT-3’, которые оптимизированы для идентификации широкого спектра бактериальной ДНК (Zucol et al., 2006). Реакцию амплификации проводили с помощью термоциклера iCycler (Bio-Rad Laboratories, USA), программированном на следующие условия реакции: предварительная денатурация 96°С — 1 мин, 30 циклов, включавших 96°С — 10 сек, 55°С — 20 сек, 72°С — 30 сек и финальная элонгация 55°С — 20 сек, 72°С — 3 мин. Объем реакционной смеси составлял 25 мкл, содержащей по 0,3 мM праймеров BAK11w и BAK2, 0,2 мM каждого нуклеотида, 2,5 мкл 10X Encyclo буфера, 0,5 мкл 50X Encyclo полимеразы и 50 нг образца ДНК. Результат амплификации анализировали в 1 %-ном агарозном геле с добавлением бромида этидия. Полученный специфичный продукт размером 780 п.н. вырезали из геля, очищали и использовали в реакции секвенирования с помощью BigDye Terminator v3.1 согласно рекомендациям фирмы-производителя (Thermo Fisher Scientific, USA).
Культурально-морфологические и биохимические особенности штамма:
На агаризованной среде Эшби штамм образует округлые, гладкие, выпуклые, блестящие непрозрачные колонии белого цвета с ровными краями, центр не выражен. В мазке обнаруживаются палочки размером 0,5-1,0×1,0-3,0 мкм, грамотрицательные. В активной фазе роста клетки в виде палочек шириной 1,1-1,4 мкм, длиной 1,6-2,4 мкм. Стационарной фазе роста клетки укорачиваются, становясь почти сферическими. По грамму окрашиваются отрицательно, подвижны. Каталазаположительные. Оксидазоотрицатиельные. Строгие Аэробы. Утилизируют соли аммония и нитраты, используют глюкозу, Л-арабинозу, ксилозу, рибозу.
Для длительного хранения культуру бактерий высевали уколом на столбик полужидкого питательного агара (состав г/л: мясной экстракт – 3,0; пептон – 3,0; агар – 4,0) и через 3 дня заливали стерильным вазелиновым маслом слоем в 0,5-1 см. Полученные таким образом музейные культуры были помещены в холодильник при 4°С.
Размножение штамма проводили на скошенном столбике ГРМ-агара (состав гр/л: панкреатический гидролизат рыбной муки- 12,0; пептон ферментативный – 12,0; натрия хлорид – 6,0; агар микробиологический – 10,0) при 25-30°С.
Ферментацию штамма проводили путем посева в ГРМ-бульон (состав гр/л: панкреатический гидролизат рыбной муки- 8,0; пептон ферментативный – 8,0; натрия хлорид – 6,0) при 22-25°С в течение 6 дней при постоянном перемешивании до достижения численности бактерий не менее 1×107 м.кл./мл.
Пример 1. Фиксация молекулярного азота культурой бактерий Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867.
Активность фиксации азота определяли ацетиленовым методом с помощью газового хроматографа. Культуру бактерий Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 выращивали в ГРМ-бульоне (состав г/л: панкреатический гидролизат рыбной муки - 8,0; пептон ферментативный – 8,0; натрия хлорид – 6,0) при 22-25°С в течение 6 дней при постоянном перемешивании до достижения численности бактерий не менее 1×107 мкл/мл. Затем во флакон с культурой вносили 2% глюкозы, перемешивали, закрывали флакон ватно-марлевой пробкой и помещали в термостат на 24 часа при 28°С. После чего флаконы с культурой закрывали резиновыми пробками и внутрь каждого флакона вводили 1 мл ацетилена и вновь помещали в термостат при 28°С. Через 1 сутки инкубации из флакона отбирали газовую пробу и вводили ее в газовый хроматограф медицинским шприцем. Колонка газового хроматографа обеспечивает разделение газов метана, пропана, этилена, ацетилена. Азотфиксирующую активность выражали в наномолях образовавшегося этилена за 1 час инкубации (наномоль С2Н4/ч). Активность азотфиксации вычисляли по формуле: АФ = (0,0067 × S × V) / t, где 0,0067 — калибровочная коэффициента на этилен, S — площадь пика этилена (мВ·сек), V — объем воздуха в пенициллиновом флакончике, T — время инкубации с ацетиленом (ч).
В результате установлена азотфиксирующая способность культуры бактерий Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 на уровне 5,4 нМ С2Н4/ч
Ростостимулирующее и фитопротекторное действие изучали посредством выявления потенциального эффекта исследуемых бактерий при воздействии на прорастание семян злаковых растений.
Пример 2. Оценка воздействия штамма Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 на энергию прорастания семян злаковых культур
Готовили рабочий раствор: штамм Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 подращивали на жидкой питательной среде при 23-25°С в течении 5-7 суток до достижения концентрации 1*109 КОЕ/мл. Семена растений, в количестве 100 штук каждого сорта, замачивали в рабочем растворе, время экспозиции составляло 30 минут. Затем все семена раскладывали по 10 штук на поверхность фильтровальной бумаги, смоченной стерильной водой, в стерильных чашках Петри для прорастания. Семена проращивали при 23°С. На 3-и сутки определяли энергию прорастания. В результате воздействия препарата наблюдали увеличение энергии прорастания семян пшеницы в среднем на 20%, семян ячменя — в среднем на 22% по сравнению с необработанным контролем.
Пример 3. Оценка воздействия штамма Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 на лабораторную всхожесть семян злаковых культур.
Готовили рабочий раствор: штамм Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 подращивали на жидкой питательной среде при 23-25°С в течении 5-7 суток до достижения концентрации 1*109 КОЕ/мл. Семена растений, в количестве 100 штук каждого сорта, замачивали в рабочем растворе, время экспозиции составляло 30 минут. Затем все семена раскладывали по 10 штук на поверхность фильтровальной бумаги, смоченной стерильной водой, в стерильных чашках Петри для прорастания. Семена проращивали при 23°С. На 7-е сутки оценивали лабораторную всхожесть семян. В результате воздействия препарата наблюдали увеличение лабораторной всхожести семян ярового ячменя на 18%, яровой пшеницы – на 20%.
Пример 4. Оценка воздействия штамма Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 на длину побега и длину корней проростков семян злаковых культур.
Готовили рабочий раствор: штамм Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 подращивали на жидкой питательной среде при 23-25°С в течении 5-7 суток до достижения концентрации 1*109 КОЕ/мл. Семена растений, в количестве 100 штук каждого сорта, замачивали в рабочем растворе, время экспозиции составляло 30 минут. Затем все семена раскладывали по 10 штук на поверхность фильтровальной бумаги, смоченной стерильной водой, в стерильных чашках Петри для прорастания. Семена проращивали при 23°С. На 7-е оценивали длину побега и длину корней проростков. В результате воздействия препарата наблюдали увеличение длины надземной части ярового ячменя на 24 %, яровой пшеницы – на 8%; увеличение длины корня ярового ячменя на 34%, яровой пшеницы – на 70%.
Пример 5. Протравка семян ячменя и пшеницы перед посевом штаммом бактерий Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867.
Семена опрыскивали из пульверизатора культурой бактерий Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867 в концентрации 1х104 КОЕ/мл из расчета 100 мл на 1 кг семян. Обработанные таким образом семена ячменя и пшеницы раскладывали, соблюдая стерильность, на чашки Петри с плотной средой Чапека. На одну чашку выкладывали 10 семян. Всего в эксперимент брали 100 семян ячменя и 100 семян пшеницы. Контроль – необработанные семена. В результате эксперимента наблюдали 100% фунгицидную и бактерицидную активность бактерий Acinetobacter johnsonii A1 ВКПМ В-13867.
Claims (1)
- Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1, обладающий азотфиксирующей, фитопротекторной и ростостимулирующей активностью и депонированный во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под регистрационным номером ВКПМ В-13867.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110658A RU2760335C1 (ru) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1 для повышения урожайности зерновых культур |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110658A RU2760335C1 (ru) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1 для повышения урожайности зерновых культур |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2760335C1 true RU2760335C1 (ru) | 2021-11-24 |
Family
ID=78719314
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021110658A RU2760335C1 (ru) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1 для повышения урожайности зерновых культур |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2760335C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115011522A (zh) * | 2022-06-17 | 2022-09-06 | 贵州大学 | En-j1脱氮菌及其在含氮污水处理中的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5232850A (en) * | 1991-07-19 | 1993-08-03 | The Penn State Research Foundation | Predatory Pseudomonas strain as a control of bacterial and fungal plant pathogens |
| RU2130264C1 (ru) * | 1997-12-15 | 1999-05-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Плодородие" | Препарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней |
| RU2235771C2 (ru) * | 2002-05-13 | 2004-09-10 | Государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр прикладной микробиологии" | Штамм бактерий pseudomonas fluorescens p469 для получения преперата против болезней растений, вызываемых фитопатогенными грибами и бактериями |
| RU2529958C1 (ru) * | 2013-08-20 | 2014-10-10 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Штамм азотфиксирующих бактерий pseudomonas sp. для получения биопрепарата против заболеваний пшеницы, вызываемых фитопатогенными грибами, и повышения урожайности |
-
2021
- 2021-04-16 RU RU2021110658A patent/RU2760335C1/ru active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5232850A (en) * | 1991-07-19 | 1993-08-03 | The Penn State Research Foundation | Predatory Pseudomonas strain as a control of bacterial and fungal plant pathogens |
| RU2130264C1 (ru) * | 1997-12-15 | 1999-05-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Плодородие" | Препарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней |
| RU2235771C2 (ru) * | 2002-05-13 | 2004-09-10 | Государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр прикладной микробиологии" | Штамм бактерий pseudomonas fluorescens p469 для получения преперата против болезней растений, вызываемых фитопатогенными грибами и бактериями |
| RU2529958C1 (ru) * | 2013-08-20 | 2014-10-10 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Штамм азотфиксирующих бактерий pseudomonas sp. для получения биопрепарата против заболеваний пшеницы, вызываемых фитопатогенными грибами, и повышения урожайности |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115011522A (zh) * | 2022-06-17 | 2022-09-06 | 贵州大学 | En-j1脱氮菌及其在含氮污水处理中的应用 |
| CN115011522B (zh) * | 2022-06-17 | 2023-05-12 | 贵州大学 | En-j1脱氮菌及其在含氮污水处理中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103789234B (zh) | 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
| CN111040976B (zh) | 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
| CN115820461B (zh) | 一种高产吲哚乙酸菌株jb0319及其应用 | |
| RU2760335C1 (ru) | Штамм бактерий Acinetobacter johnsonii A1 для повышения урожайности зерновых культур | |
| CN117903964B (zh) | 一株耐盐芽孢杆菌147及其应用 | |
| RU2408722C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus mucilaginosus Bac 1208, ОБЛАДАЮЩИЙ ПОВЫШЕННЫМИ ФОСФОР И КАЛИЙ МОБИЛИЗУЮЩИМИ СВОЙСТВАМИ И УДОБРЕНИЕ НА ЕГО ОСНОВЕ | |
| CN107674850A (zh) | 一种杀根结线虫的莓实假单孢菌Sned811、代谢产物及应用 | |
| RU2694565C1 (ru) | Средство для стимуляции роста и повышения устойчивости к болезням растений гороха | |
| JPH06135811A (ja) | 植物病害防除剤 | |
| RU2751487C1 (ru) | Способ приготовления жидкой питательной среды и способ получения жидкого микробиологического препарата на основе смеси штаммов спорообразующих бактерий-антагонистов фитопатогенных грибов р. Fusarium | |
| RU2551968C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus pumilus А 1.5, В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ | |
| RU2757506C1 (ru) | Штамм бактерий Pseudarthrobacter equi S2 для повышения урожайности зерновых культур | |
| RU2757123C1 (ru) | Штамм бактерий Pantoea agglomerans Ф19 для повышения урожайности зерновых культур | |
| RU2675503C1 (ru) | Способ получения биологического препарата для стимуляции роста и защиты растений от заболеваний | |
| RU2820245C1 (ru) | Штамм microbacterium sp. et2, стимулирующий рост злаковых культур | |
| JP4768308B2 (ja) | 植物病害防除微生物及び植物病害防除方法 | |
| RU2760337C1 (ru) | Препарат для увеличения урожайности яровой пшеницы | |
| RU2760336C1 (ru) | Препарат для увеличения урожайности ярового ячменя | |
| RU2823059C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus pumilus bis88 в качестве универсального средства для улучшения питания, ускорения роста и увеличения продуктивности сельскохозяйственных зерновых, овощных и технических культур, а также их защиты от болезней и стрессовых факторов хлоридного засоления | |
| Azeez et al. | The species composition of epiphytic microorganisms and their influence on roots excretory activity of wheat and pea seedlings | |
| RU2752903C1 (ru) | Смесь бактериальных штаммов, обладающая целлюлозолитической и фунгицидной активностью | |
| RU2795906C1 (ru) | Консорциум психротолерантных бактериальных штаммов для биологической защиты и стимуляции роста сельскохозяйственных растений | |
| RU2732627C1 (ru) | Средство для повышения холодоустойчивости и продуктивности растений | |
| RU2426778C2 (ru) | Штамм клубеньковых бактерий bradyrhizobium japonicum 206 вкпм в-9505, вирулентный к районированным сортам сои | |
| RU2736424C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus amyloliquefaciens recb-95 для производства биопрепарата защиты сельскохозяйственных растений от стрессов, стимуляции их роста и повышения урожайности |