RU2752316C1 - Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной - Google Patents
Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной Download PDFInfo
- Publication number
- RU2752316C1 RU2752316C1 RU2020133908A RU2020133908A RU2752316C1 RU 2752316 C1 RU2752316 C1 RU 2752316C1 RU 2020133908 A RU2020133908 A RU 2020133908A RU 2020133908 A RU2020133908 A RU 2020133908A RU 2752316 C1 RU2752316 C1 RU 2752316C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rutin
- flavonoids
- leaves
- raw materials
- mass
- Prior art date
Links
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 title claims abstract description 42
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 title claims abstract description 42
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 title claims abstract description 42
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 241001104043 Syringa Species 0.000 title abstract description 7
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 68
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 68
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 68
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 68
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 claims abstract description 68
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 claims abstract description 68
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 41
- 244000297179 Syringa vulgaris Species 0.000 claims abstract description 35
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 34
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 24
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 claims abstract description 6
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 claims abstract 20
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 7
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 abstract 2
- IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N rutin Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N 0.000 description 47
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 20
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 6
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 5
- 0 CCC(*)C(CC(C)[N+](*)[O-])C(C)=O Chemical compound CCC(*)C(CC(C)[N+](*)[O-])C(C)=O 0.000 description 4
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 241000218982 Populus nigra Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 description 1
- 125000001474 phenylpropanoid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- QJVXKWHHAMZTBY-KSXIZUIISA-N syringin Natural products COc1cc(C=CCO)cc(OC)c1O[C@H]2O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]2O QJVXKWHHAMZTBY-KSXIZUIISA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной (Syringa vulgaris L.). Описан способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной путем получения водно-спиртового извлечения из растительного сырья экстракцией 1 г точной навески измельченного до размера частиц 1 мм растительного сырья 70%-ным этиловым спиртом с последующей пробоподготовкой и определением оптической плотности методом дифференциальной спектрофотометрии с использованием стандартного образца рутина, а при его отсутствии - с использованием теоретического удельного показателя поглощения, при этом экстракцию измельченных листьев сирени обыкновенной проводят в течение 45 мин при соотношении сырье: экстрагент 1:50; количественное определение суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной проводят при длине волны 412 нм в пересчете на рутин и содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье рассчитывают по формуле
где х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %; D - оптическая плотность испытуемого раствора; Do - оптическая плотность раствора Государственного стандартного образца рутина; m - масса сырья, г; mo - масса Государственного стандартного образца рутина, г; W - потеря в массе при высушивании, %, в случае отсутствия стандартного образца рутина целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 240:
где х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %; D - оптическая плотность испытуемого раствора; m - масса сырья, г; mo - масса Государственного стандартного образца рутина, г; 240 - удельный показатель поглощения
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной (Syringa vulgaris L.).
Действующая система контроля качества лекарственных препаратов требует постоянного усовершенствования подходов к стандартизации биологически активных соединений (БАС) с использованием современных методов анализа и актуальных данных об их физико-химических, спектральных и фармакологических свойствах, позволяющих объективно и селективно определять содержание целевых веществ [4].
Сирень обыкновенная (Syringa vulgaris L.) является одним из видов растений, не включенных в Государственную Фармакопею Российской Федерации XIV издания, но в качестве лекарственного растительного сырья (ЛРС), как источник государственного стандартного образца (ГСО) - сирингина зарегистрирована кора (ВФС 42-2106-92) [1,2]. Препараты на основе коры сирени обладают широким спектром фармакологической активности: иммуномодулирующим, адаптогенным, анксиолитическим и антидепессивным действием [3].
Особый интерес, наряду с фармакопейным сырьем - корой, представляют листья данного растения. Листья сирени обыкновенной (Syringa vulgaris L.) являются перспективным источником БАС, обладающих диуретическим и противовоспалительным действием. Однако, проблема стандартизации данного вида сырья остается нерешенной.
Прототипом для разработки данной методики является способ количественного определения флавоноидов в листьях тополя черного. Он основан на методе дифференциальной спектрофотометрии с использованием стандартного образца рутина. Недостатком данной методики является невозожность ее применения к сырью листьев сирени обыкновенной [8].
Таким образом, целью изобретения является разработка способа количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной, обладающего высокой специфичностью, точностью и воспроизводимостью.
Техническим результатом является создание способа количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной в пересчете на рутин.
Технический результат достигается тем, что предварительно получают водно-спиртовое извлечение из растительного сырья путем экстракции 1 г точной навески измельченного до размера частиц 1 мм растительного сырья 70% этиловым спиртом, в пересчете на вещество флавоноидной природы, методом дифференциальной спектрофотометрии в отношении «сырье-экстрагент» - 1:50, при степени измельчения сырья 1 мм. Определение флавоноидов проводят при длине волны 412 нм в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье рассчитывают по формуле:
где:
х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %;
D - оптическая плотность испытуемого раствора;
Do - оптическая плотность раствора Государственного стандартного образца рутина;
m - масса сырья, г;
mo - масса Государственного стандартного образца рутина, г;
W - потеря в массе при высушивании, %;
в случае отсутствия стандартного образца рутина для расчета целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 240:
где:
х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %;
D - оптическая плотность испытуемого раствора;
m - масса сырья, г;
240 - удельный показатель поглощения 
Государственного стандартного образца рутина при длине волны 412 нм;
W - потеря в массе при высушивании, %.
При изучении спектральных характеристик было выявлено, что именно рутин определяет характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из листьев сирени обыкновенной. Определено, что в УФ-спектре водно-спиртового извлечения сирени обыкновенной наблюдается батохромный сдвиг длинноволновой полосы флавоноидов (Фигура 1), как и в случае рутина (Фигура 2), где кривая 1 на фигуре 1 и фигуре 2 демонстрирует исходный раствор водно-спиртового извлечения из листьев сирени обыкновенной или исходный раствор рутина соответственно, а кривая 2 - раствор водно-спиртового извлечения из листьев сирени обыкновенной в присутствии алюминия хлорида или раствор рутина в присутствии алюминия хлорида соответственно.
Изучение УФ-спектров фигуры 2 (где кривая 1 - раствор рутина, а кривая 2 - раствор рутина с добавлением алюминия хлорида) показало, что раствор ГСО рутина в присутствии алюминия хлорида имеет максимум поглощения при длине волны 412 нм. В УФ-спектре водно-спиртового извлечения из листьев сирени обыкновенной в дифференциальном варианте на фигуре 3 так же обнаруживается при длине волны 412 нм максимум поглощения, который соответствует максимуму поглощения спиртового раствора рутина.
Данный факт позволяет проводить спектрофотометрическое определение суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной при аналитической длине волны 412 нм.
Также нами было изучено влияние экстрагента на процесс экстракции. В таблице 1 представлена зависимость выхода флавоноидов листьев сирени обыкновенной от концентрации экстрагента. В результате эксперимента в качестве оптимального экстрагента нами был выбран 70% этиловый спирт, так как выход действующих веществ из сырья при его использовании максимален.
Далее нами был изучен вопрос относительно продолжительности экстракции на кипящей водяной бане, в таблице 2 представлена зависимость выхода флавоноидов листьев сирени обыкновенной от времени экстракции на кипящей водяной бане, при этом было выбрано время экстракции 45 минут, при котором наблюдался максимальный выход веществ.
В таблице 3 представлена зависимость выхода флавоноидов листьев сирени обыкновенной от соотношения «сырье-экстрагент». Из таблицы 3 видно, что максимальный выход действующих веществ наблюдается при соотношении «сырье-экстрагент» 1:50, по этой причине данное соотношение было выбрано нами в качестве оптимального.
Финальной стадией стало изучение влияния степени измельчения сырья на выход фенилпропаноидов из цветков сирени обыкновенной. Из таблицы 4 следует, что максимальный выход веществ наблюдался при экстракции частиц, проходящих сквозь сито диаметром 1 мм.
Учитывая, что увеличение числа операций на стадии пробоподготовки ведет к возрастанию ошибки, выбор сделан в пользу одностадийного процесса экстракции с подтверждением требуемой точности количественного определения.
Таким образом, было определено, что оптимальными параметрами экстракции являются: однократное извлечение 70% этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 45 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:50, степень измельчения частиц 1 мм.
Принимая по внимание тот факт, что специфическим для листьев сирени обыкновенной является рутин, а максимумы поглощения раствора рутина и водно-спиртового извлечения листьев сирени обыкновенной находятся в области 412 нм, целесообразным является определение содержания суммы флавоноидов в пересчете на рутин при длине волны 412 нм.
Способ реализуется следующим образом.
Аналитическую пробу воздушно-сухого сырья сирени обыкновенной измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г точной навески измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 45 минут. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через фильтр с красной полосой (извлечения из травы).
Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки 96% этиловым спиртом (испытуемый раствор).
Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки 96% этиловым спиртом (раствор сравнения).
Для расчета содержания суммы флавоноидов готовят раствор стандартного образца рутина, добавляют к нему 3% спиртовой раствор алюминия хлорида, измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса при аналитической длине волны 412 нм и определенное значение оптической плотности используют в формуле расчета.
Приготовление раствора стандартного образца рутина
Около 0,025 г (точная навеска) рутина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 30 мл 70% этилового спирта при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры доводят объем раствора 70% этиловым спиртом до метки (раствор А рутина). После чего 1 мл раствора А рутина помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (испытуемый раствор Б рутина). Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96%.
Измерение оптической плотности проводят при длине волны 412 нм через 40 минут после приготовления всех растворов.
Содержание суммы флавоноидов (х, %) в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:
где:
D - оптическая плотность испытуемого раствора;
Do - оптическая плотность раствора Государственного стандартного образца рутина;
m - масса сырья, г;
mo - масса Государственного стандартного образца рутина, г;
W - потеря в массе при высушивании в процентах.
В случае отсутствия стандартного образца рутина для расчета целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 240:
где:
D - оптическая плотность испытуемого раствора;
m - масса сырья, г;
240 - удельный показатель поглощения Государственного стандартного образца рутина при 412 нм;
W - потеря в массе при высушивании в процентах.
Предлагаемый способ поясняется следующими примерами.
Пример 1.
Аналитическую пробу сырья сирени обыкновенной (заготовлено в Ботаническом саду Самарского университета, 2016 г.) измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. 0,9907 г измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 45 минут. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (красная полоса).
Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (испытуемый раствор).
Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (раствор сравнения).
Для расчета содержания суммы флавоноидов готовят раствор стандартного образца рутина, добавляют к нему 3% спиртовой раствор хлорида алюминия, измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса при длине волны 412 нм и определенное значение оптической плотности используют в формуле расчета.
Приготовление раствора стандартного образца рутина
0,025 г рутина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 30 мл 70% этилового спирта при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры доводят объем раствора 70% этиловым спиртом до метки (раствор А рутина). После чего 1 мл раствора А рутина помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида, затем доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96%. Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96%.
Измерение оптической плотности проводят при длине волны 412 нм через 40 минут после приготовления всех растворов.
Содержание суммы флавоноидов (х, %) в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:
где:
0,6653 - оптическая плотность испытуемого раствора;
0,4202 - оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;
0,9907 - масса сырья, г;
0,0202 - масса стандартного образца рутина, г;
10 - потеря в массе при высушивании в процентах.
Х=3,59%.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин равно 3,59%.
Пример 2.
При необходимости определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной, в случае отсутствия стандартного образца рутина, необходимо провести все действия из примера 1 до приготовления раствора стандартного образца рутина.
После измерения оптической плотности извлечения из листьев сирени обыкновенной при длине волны 412 нм, содержание суммы флавоноидов (х, %) в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле, используя теоретическое значение удельного показателя поглощения рутина, равное 240:
где:
0,6653 - оптическая плотность испытуемого раствора;
0,9907 - масса сырья, г;
240 - удельный показатель поглощения стандартного образца рутина при 412 нм;
10 - потеря в массе при высушивании в процентах.
Х=3,89%.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин равно 3,89%, что сопоставимо со значением, полученном в примере 1.
Все результаты были статистически обработаны. Ошибка единичного количественного определения составила ±6,12%.
Таким образом, предлагаемый способ количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин в листьях сирени обыкновенной с использованием дифференциальной спектрофотометрии разработан впервые для данного вида сырья и обладает следующими достоинствами:
1. Разработанный метод является более специфичным и селективным, а также позволяет проводить экстракцию сырья однократно 70% этиловым спиртом, позволяющим исчерпывающе извлекать целевые вещества (флавоноиды).
2. Пересчет суммы флавоноидов идет на специфическое для листьев сирени обыкновенной флавоноидное вещество - рутин, определяющее характер кривой поглощения в УФ-спектре испытуемого раствора (длина волны 412 нм)
3. Ошибка единичного определения предлагаемого способа составляет ±6,12%, что свидетельствует об объективности разработанного способа.
Этот способ можно применять в центрах контроля качества лекарственных средств, на фармацевтических предприятиях и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного анализа листьев сирени обыкновенной (Syringa vulgaris L.)
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. ВФС 42-2106-92 «Кора сирени обыкновенной».
2. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. М., 2018 г. Режим доступа: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php. (дата обращения: 27.11.2019)
3. Климова И.Ю. Аналитические и технические исследования по разработке новых препаратов на основе коры сирени обыкновенной. / И.Ю. Климова - Самара, 2005. - 159 с
4. Куркин В.А. К вопросу о стандартизации лекарственного сырья содержащего флавоноиды и фенилпропаноиды / В.А. Куркин, О.В. Маевская, В.Б. Браславский и др. // Применение хроматографии в пищевой, микробиологической и медицинской промышленности: Материалы Всесоюзной конференции. Геленджик, 1990. - С. 85-86.
5. Куркин В.А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармац. вузов - Изд. 4-е, перераб. и доп. / В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт», ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, 2019. - 1278 с.
6. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Кривенчук П.Е. Флавоноиды и маннит из листьев Syringa vulgaris II Химия природных соединений - 1980. - 3. - С. 418-419.
7. Патент РФ №2701726 от 1.10.2019 «Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя черного».
Claims (16)
- Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной путем получения водно-спиртового извлечения из растительного сырья экстракцией 1 г точной навески измельченного до размера частиц 1 мм растительного сырья 70%-ным этиловым спиртом с последующей пробоподготовкой и определением оптической плотности методом дифференциальной спектрофотометрии с использованием стандартного образца рутина, а при его отсутствии - с использованием теоретического удельного показателя поглощения, отличающийся тем, что экстракцию измельченных листьев сирени обыкновенной проводят в течение 45 мин, при соотношении сырье:экстрагент 1:50; количественное определение суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной проводят при длине волны 412 нм в пересчете на рутин и содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье рассчитывают по формуле:
-
- где х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %;
- D - оптическая плотность испытуемого раствора;
- Do - оптическая плотность раствора Государственного стандартного образца рутина;
- m - масса сырья, г;
- mo - масса Государственного стандартного образца рутина, г;
- W - потеря в массе при высушивании, %,
- в случае отсутствия стандартного образца рутина целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 240:
-
- где х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %;
- D - оптическая плотность испытуемого раствора;
- m - масса сырья, г;
- mo - масса Государственного стандартного образца рутина, г;
- 240 - удельный показатель поглощенияГосударственного стандартного образца рутина при 412 нм;
- W - потеря в массе при высушивании, %.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020133908A RU2752316C1 (ru) | 2020-10-14 | 2020-10-14 | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020133908A RU2752316C1 (ru) | 2020-10-14 | 2020-10-14 | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2752316C1 true RU2752316C1 (ru) | 2021-07-26 |
Family
ID=76989465
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020133908A RU2752316C1 (ru) | 2020-10-14 | 2020-10-14 | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2752316C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2792011C2 (ru) * | 2021-09-07 | 2023-03-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы антраценпроизводных в свежих листьях алоэ древовидного |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2669162C1 (ru) * | 2017-12-26 | 2018-10-08 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного |
| RU2701726C1 (ru) * | 2018-12-03 | 2019-10-01 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя черного |
-
2020
- 2020-10-14 RU RU2020133908A patent/RU2752316C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2669162C1 (ru) * | 2017-12-26 | 2018-10-08 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного |
| RU2701726C1 (ru) * | 2018-12-03 | 2019-10-01 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя черного |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Л.А. ЛЮБАКОВСКАЯ и др. Фенольные соединения сирени in vivo и в культуре in vitro //ВЕСТНИК ВГМУ, 2010, Том 9, N1, стр.1-8. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2792011C2 (ru) * | 2021-09-07 | 2023-03-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы антраценпроизводных в свежих листьях алоэ древовидного |
| RU2811264C1 (ru) * | 2023-10-11 | 2024-01-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве лабазника вязолистного |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2696770C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве монарды дудчатой | |
| RU2701726C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя черного | |
| RU2669162C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного | |
| CN107860733A (zh) | 壮药九层楼总黄酮含量测定方法 | |
| CN112763618B (zh) | 一种仙鹤草配方颗粒特征图谱鉴别方法 | |
| RU2747483C1 (ru) | Способ количественного определения суммы фенилпропаноидов в цветках сирени обыкновенной | |
| RU2554780C1 (ru) | Способ количественного определения флавоноидов в желчегонном сборе № 3 | |
| CN110824068A (zh) | 一种鸢都感冒颗粒指纹图谱的建立方法及应用 | |
| RU2752316C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях сирени обыкновенной | |
| RU2806047C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве солодки голой | |
| RU2751189C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях дуба черешчатого | |
| RU2786440C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве чернушки посевной | |
| RU2747417C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в коре ореха черного | |
| RU2747482C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях ореха грецкого | |
| WO1999020291A9 (en) | Pharmaceutical grade ginkgo biloba | |
| RU2772821C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в цветках бархатцев отклоненных | |
| RU2782618C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в почках дуба черешчатого | |
| RU2763264C1 (ru) | Способ количественного определения суммы фенилпропаноидов в моринги масличной листьях | |
| RU2798673C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях вахты трехлистной | |
| RU2806035C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве тысячелистника обыкновенного | |
| RU2807831C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях цефалярии гигантской | |
| RU2266544C2 (ru) | Унифицированный способ количественного определения флавоноидов в траве и экстракционных препаратах очанки | |
| RU2814635C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в листьях тополя белого | |
| RU2763263C1 (ru) | Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах | |
| RU2829551C1 (ru) | Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве аврана лекарственного |