RU2722700C2 - Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-7817, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products - Google Patents
Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-7817, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products Download PDFInfo
- Publication number
- RU2722700C2 RU2722700C2 RU2018139352A RU2018139352A RU2722700C2 RU 2722700 C2 RU2722700 C2 RU 2722700C2 RU 2018139352 A RU2018139352 A RU 2018139352A RU 2018139352 A RU2018139352 A RU 2018139352A RU 2722700 C2 RU2722700 C2 RU 2722700C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- fermented milk
- bulgaricus
- starter
- lactobacillus delbrueckii
- Prior art date
Links
- 239000007858 starting material Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims description 3
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 title abstract description 15
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 title 1
- 241000186672 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus Species 0.000 claims abstract description 11
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 abstract description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 4
- 244000005706 microflora Species 0.000 abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 abstract 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 5
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 5
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- SYTBZMRGLBWNTM-SNVBAGLBSA-N (R)-flurbiprofen Chemical compound FC1=CC([C@H](C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 101100346198 Caenorhabditis elegans mpc-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- -1 aromatics Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 1
- 238000009343 monoculture Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 235000020122 reconstituted milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Штамм бактерий Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817, используемый в качестве закваски прямого внесения для приготовления кисломолочных продуктов.The bacterial strain Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817, used as a direct starter culture for the preparation of fermented milk products.
Изобретение относится к биотехнологии и молочной промышленности и представляет собой новый штамм Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817, обладающий высокой ростовой активностью и используемый в качестве закваски прямого внесения для приготовления кисломолочных продуктов.The invention relates to biotechnology and the dairy industry and is a new strain of Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817, which has high growth activity and is used as a direct starter culture for the preparation of fermented milk products.
Производство ферментированных продуктов питания основано на использовании стартовых культур. Например, для производства продуктов молочнокислого брожения применяют стартовые культуры молочнокислых бактерий. Разрабатываются новые стартовые культуры молочнокислых бактерий с промышленно важными свойствами, обладающие органолептическими, технологическими, питательными и/или медицинскими преимуществами. Примерами являются молочнокислые бактерии, которые продуцируют полисахариды, ароматические соединения, витамины и противомикробные вещества.The production of fermented foods is based on the use of starter crops. For example, for the production of lactic acid fermentation products, starter cultures of lactic acid bacteria are used. New starter cultures of lactic acid bacteria with industrially important properties are developed that have organoleptic, technological, nutritional and / or medical advantages. Examples are lactic acid bacteria that produce polysaccharides, aromatics, vitamins, and antimicrobials.
Качество и биологическая ценность кисломолочных продуктов напрямую зависят от применяемых стартовых культур. Культуры должны обеспечивать воспроизводилось технологического процесса, стабильное качество готовой продукции, кроме того, культуры должны быть устойчивы к бактериофагам, иметь высокую выживаемость при хранении, обеспечивать ферментируемый молочный продукт необходимыми свойствами, а также позволять проявлять больше гибкости на производстве (использовать разные штаммы с разными свойствами и возможность комбинировать их в зависимости от качества сырья).The quality and biological value of fermented milk products directly depend on the starting crops used. Cultures must ensure reproducible technological process, stable quality of the finished product, in addition, cultures must be resistant to bacteriophages, have high survival during storage, provide the fermented milk product with the necessary properties, and also allow more flexibility in production (use different strains with different properties and the ability to combine them depending on the quality of the raw materials).
Основными компаниями-правообладателями в исследуемой области являются Chr. Hansen (Дания), Bright Dairy & Food Co. (Китай), Meiji Holdings Co (Япония), DuPont Nutrition & Biosciences (Дания), Gervais Danone (Франция), NESTEC (Швейцария).The main copyright holders in the study area are Chr. Hansen (Denmark), Bright Dairy & Food Co. (China), Meiji Holdings Co (Japan), DuPont Nutrition & Biosciences (Denmark), Gervais Danone (France), NESTEC (Switzerland).
Данные компании в составе заквасок прямого внесения в большинстве случаев используют мутированные штаммы болгарской палочки с целью устранения эффекта «вторичного скисания» (патент US20020081712), а также увеличения срока годности и температуры хранения кисломолочного продукта до 20-25°С (патент WO 2017194650). В патенте RU 2446209 описан штамм Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus, который был подвергнут химическому мутагенезу.The data of the company as a part of direct starter cultures in most cases use mutated strains of bulgarian bacillus in order to eliminate the effect of “secondary souring” (patent US20020081712), as well as increase the shelf life and storage temperature of the fermented milk product to 20-25 ° C (patent WO 2017194650). RU 2446209 describes a strain of Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus that has undergone chemical mutagenesis.
Использование мутированных штаммов как компонентов заквасок прямого внесения имеет определенные недостатки. Неспецифический мутагенез ведет как к приобретению штаммом необходимого свойства, так и к появлению неспецифических мутаций, что приводит к нестабильности генома и быстрому вырождению данного штамма, что сильно ограничивает число генераций (пересевов) штамма, при которых он сохраняет свои технологические свойства.The use of mutated strains as components of direct starter cultures has certain disadvantages. Nonspecific mutagenesis leads both to the acquisition by the strain of the necessary property and to the appearance of nonspecific mutations, which leads to instability of the genome and the rapid degeneration of this strain, which greatly limits the number of generations (transfers) of the strain at which it retains its technological properties.
Настоящее изобретение относится к биологически чистой культуре штамма молочнокислых бактерий Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus Т-7817, которая по ряду полезных качеств может быть использована в качестве закваски прямого внесения.The present invention relates to a biologically pure culture of a strain of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817, which for a number of useful qualities can be used as a direct starter culture.
Задачей изобретения является получение нового штамма, не являющегося генетически модифицированной культурой, обеспечивающего стабильное получение кисломолочных продуктов питания, а также обладающего высокой эффективностью в процессе получения сухой лиофилизированной микробной массы для изготовления заквасок прямого внесения.The objective of the invention is to obtain a new strain, which is not a genetically modified culture, providing stable production of fermented milk products, as well as having high efficiency in the process of obtaining dry lyophilized microbial mass for the manufacture of direct starter cultures.
Задача изобретения решается посредством селекции нового штамма Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus Т-7817 (регистрационный номер ГКНМ №1264), отвечающего современным требованиям, предъявляемым к компонентам кисломолочных и лечебно-диетических продуктов питания, и обладающего высокой ферментативной активностью.The objective of the invention is solved by selection of a new strain of Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817 (registration number GKNM No. 1264), which meets modern requirements for components of fermented and therapeutic dietary foods, and has high enzymatic activity.
Технический результат заключается в том, что предлагаемый к использованию штамм обладает быстрым набором биомассы при культивировании и укороченной лаг-фазой при сквашивании молока по сравнению с аналогичными штаммами данного вида, а кисломолочные продукты на его основе обладают низкой кислотностью (80-100°Т), которая сохраняется на протяжении 14 суток хранения, а также плотным сгустком. При хранении кисломолочных продуктов с использованием данного штамма не образуется сыворотка.The technical result consists in the fact that the strain proposed for use has a fast set of biomass during cultivation and a shortened lag phase when fermenting milk in comparison with similar strains of this type, and dairy products based on it have low acidity (80-100 ° T), which persists for 14 days of storage, as well as a dense clot. When storing fermented milk products using this strain, no serum is formed.
Предлагаемый штамм Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817 новый, в научной и патентной литературе не описан.The proposed strain of Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817 is new, not described in the scientific and patent literature.
Штамм выделен из домашнего кисломолочного продукта. Штамм Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817 депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) Федерального бюджетного учреждения науки Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора под коллекционным номером №1264.The strain is isolated from a domestic fermented milk product. The strain Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T-7817 was deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) of the Federal budget institution of science of the Moscow research institute of epidemiology and microbiology named after G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor under collection number 1264.
1. Анатомо-морфологические свойства штамма.1. Anatomical and morphological properties of the strain.
Изучение колоний в полужидкой среде проводили на протяжении 12 пересевов суточных культур в среде «Бифидум сухой» производства ГНЦ ПМ п. Оболенск, далее (БС). В полужидкой БС питательной среде форма единичных колоний - шарик - шарик с хвостиком, диаметром до 3-х мм, рост наблюдали по всему объему среды, кроме зоны аэробиоза (до 0,5 см), а на поверхности плотной питательной среды (агаризованной среды БС) в анаэробных условиях вырастают полупрозрачные непигментированные шероховатые колонии (R-форма), мягкой консистенции. Грамположительные, неподвижные, неспорообразующие, прямые или слегка изогнутые крупные палочки с закругленными концами, иногда образующие короткие цепочки.The study of colonies in a semi-liquid medium was carried out over 12 passages of diurnal cultures in the Bifidum dry medium produced by the SSC PM in Obolensk, hereinafter (BS). In a semi-liquid BS nutrient medium, the form of single colonies - ball - ball with a tail, with a diameter of up to 3 mm, growth was observed throughout the entire volume of the medium, except for the aerobiosis zone (up to 0.5 cm), and on the surface of a dense nutrient medium (agarized BS medium ) under anaerobic conditions, translucent unpigmented rough colonies (R-form), soft consistency grow. Gram-positive, motionless, non-spore-forming, straight or slightly curved large sticks with rounded ends, sometimes forming short chains.
2. Технологические свойства штамма.2. Technological properties of the strain.
Для определения особенностей штамма проводили культивирование при максимальной температуре 50°С. (Оптимальная температура развития для штамма 40-45°С, максимальная 45-50°С).To determine the characteristics of the strain, cultivation was carried out at a maximum temperature of 50 ° C. (The optimum development temperature for the strain is 40-45 ° C, maximum 45-50 ° C).
Наблюдали выраженный рост по всей толще среды без зоны аэробиоза, в полужидкой БС среде при высоких температурах. Данная культура растет в толще полужидких питательных сред и очень слабо (легкий налет) на поверхности плотных сред в присутствии кислорода, т.е. штамм относится к анаэробам.A pronounced growth was observed throughout the entire thickness of the medium without an aerobiotic zone, in a semi-liquid BS medium at high temperatures. This culture grows in the thickness of semi-liquid nutrient media and is very weak (light coating) on the surface of dense media in the presence of oxygen, i.e. strain refers to anaerobes.
3. Протеолитическая активность культуры.3. Proteolytic activity of culture.
Для изучения протеолитических свойств изменение величины титруемой кислотности при росте в молоке проводили на стерильном 9% восстановленном сухом обезжиренном молоке, приготовленном на участке питательных сред ОИР ООО «Агробиопрод». (Молоко сухое обезжиренное, сорт стандарт, СТБ 1858-2009, республика Беларусь).To study the proteolytic properties, the titratable acidity during the growth in milk was changed using sterile 9% reconstituted skimmed milk powder prepared in the nutrient medium section of OIR Agrobioprod LLC. (Skimmed milk powder, grade standard, STB 1858-2009, Republic of Belarus).
Кислотность кисломолочных продуктов определяли в условных единицах-градусах Тернера (°Т) (ГОСТ 3624-67).The acidity of fermented milk products was determined in arbitrary units-degrees Turner (° T) (GOST 3624-67).
Ход определения: в колбу или стакан на 100-150 мл отмеряют пипеткой 10 г исследуемого продукта. В стакан вносят 20 мл дистиллированной воды, добавляют 3 капли 1% раствора фенолфталеина и титруют 0,1 Н раствором NaOH до достижения величиной рН значения 8,5±0,05 ед. и появления бледно-розового цвета, не исчезающего в течение 1 минуты. Количество щелочи, израсходованное на титрование, умножают на 10. Штамм к 16 часам сквашивает молоко с образованием равномерного сметанообразного сгустка приятного вкуса без синерезиса. В 1 мл сквашенного стерильного молока к 12 часам культивирования накапливается до 108 микробных клеток. Каталазу не образует. Данные накопления титруемой кислотности представлены в таблице 1.Definition: in a flask or glass, 100-150 ml measure with a pipette 10 g of the test product. 20 ml of distilled water are added to the glass, 3 drops of 1% phenolphthalein solution are added and titrated with 0.1 N NaOH solution until the pH reaches 8.5 ± 0.05 units. and the appearance of a pale pink color that does not disappear within 1 minute. The amount of alkali spent on titration is multiplied by 10. By 16 hours the strain ferments the milk with the formation of a uniform creamy clot with a pleasant taste without syneresis. In 1 ml of fermented sterile milk, up to 108 microbial cells accumulate by 12 hours of cultivation. Catalase does not form. The accumulation of titratable acidity are presented in table 1.
Как видно из данных, представленных в таблице, заявляемый штамм лактобацилл проявляет стабильные протеолитические свойства.As can be seen from the data presented in the table, the inventive strain of lactobacilli exhibits stable proteolytic properties.
5.Ферментативная активность культуры.5. Enzymatic activity of culture.
По результатам изучения ферментативных свойств штамма лактобацилл с применением двух тест-систем было обнаружено, что заявляемый штамм ферментирует глюкозу, маннозу, лактозу, сахарозу.According to the results of studying the enzymatic properties of the lactobacilli strain using two test systems, it was found that the inventive strain ferments glucose, mannose, lactose, and sucrose.
Оптимальная температура культивирования 42±1°С. В качестве сред для культивирования штамма использовали обезжиренное молоко, среду Блаурокка, ГМ-среду, МРС-2, МРС-4 и другие.The optimum cultivation temperature is 42 ± 1 ° C. Skim milk, Blaurock medium, GM medium, MPC-2, MPC-4 and others were used as media for culturing the strain.
Штамм хранится в виде лиофильно высушенной культуры в защитной сахарозо-желатиновой среде при температуре 4±2°С не менее 12 месяцев.The strain is stored as a freeze-dried culture in a protective sucrose-gelatin medium at a temperature of 4 ± 2 ° C for at least 12 months.
Генетическая идентификация штамма подтверждена с помощью анализа 16SpPHK.Genetic identification of the strain is confirmed by analysis of 16SpPHK.
В качестве прототипа использовали штамм Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus ВКПМ B-3141, депонированный во Всеросийской коллекекции промышленных микроорганизмов.As a prototype used a strain of Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus VKPM B-3141, deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms.
Регидратированные лиофилизаты каждого штамма в объеме 1,0% вносили в восстановленное сухое молоко. При этом наблюдаемый период лаг-фазы у заявляемого штамма был значительно короче (2,5 часа), чем у штамма-прототипа (5-5,5 часов), что является важным условием для промышленного производства кисломолочной продукции.The rehydrated lyophilisates of each strain in a volume of 1.0% were added to reconstituted milk powder. Moreover, the observed lag phase period of the claimed strain was significantly shorter (2.5 hours) than that of the prototype strain (5-5.5 hours), which is an important condition for the industrial production of dairy products.
Аналогичным образом изучали скорость накопления биомассы у заявляемого штамма и штамма-прототипа, которая также показала, что изменение оптической плотности жидкой культуры заявляемого штамма через 12 часов культивирования в питательной среде на основе СОМ достигало 14,3 ед., в то время как у штамма-аналога оно составляло 9 ед., т.е. было примерно на 50% выше.Similarly studied the biomass accumulation rate of the claimed strain and the prototype strain, which also showed that the change in the optical density of the liquid culture of the claimed strain after 12 hours of cultivation in a nutrient medium based on COM reached 14.3 units, while the strain analogue it amounted to 9 units, i.e. was about 50% higher.
Использование штамма иллюстрируется следующими примерами. Пример 1. Для приготовления производственной закваски прямого внесения на первом этапе получали посевной материал для засева в ферментер, для этого ресуспендировали флакон лиофилизированной культуры штамма, а полученную суспензию вносили в среду Блаурокка и инкубировали при температуре 37°С 18-24 часа. Полученную культуру использовали в качестве посевного материала для получения культуры 2-ой генерации. Среда культивирования - СОМ. Время инкубации: 12-18 ч.The use of the strain is illustrated by the following examples. Example 1. For the preparation of industrial direct starter culture, at the first stage, seed was obtained for inoculation into the fermenter, for this a vial of the lyophilized strain culture was resuspended, and the resulting suspension was introduced into Blaurock medium and incubated at 37 ° C for 18-24 hours. The resulting culture was used as seed for obtaining the culture of the 2nd generation. The cultivation medium is COM. Incubation time: 12-18 hours.
Для получения жидкой биомассы посевной материал 2-ой генерации вносили в биореактор в количестве 5% от объема среды культивирования. Среда культивирования - СОМ. Время инкубации до 5-6 ч.To obtain liquid biomass, seed of the second generation was introduced into the bioreactor in an amount of 5% of the volume of the cultivation medium. The cultivation medium is COM. Incubation time up to 5-6 hours.
Для получения сухой лиофилизированной микробной массы жидкую биомассу концентрировали методом центрифугирования, смешивали со средой высушивания на основе сахарозы и желатины и проводили лиофильное высушивание.To obtain a dry lyophilized microbial mass, the liquid biomass was concentrated by centrifugation, mixed with a drying medium based on sucrose and gelatin, and freeze drying was carried out.
Полученный лиофилизат может быть использован в качестве закваски, как в виде монокультуры, так и как компонент комплексной закваски для производства кисломолочной продукции.The obtained lyophilisate can be used as a starter culture, either as a monoculture or as a component of a complex starter culture for the production of fermented milk products.
Пример 2. Использование штамма в составе сухой комплексной закваски прямого внесения для приготовления йогурта. Для приготовления йогурта использовали нормализованное молоко жирностью 3,2%, подогретое до температуры 42°С. Вносили лиофилизат штамма Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T7817 в количестве 0,03% вместе с лиофилизатом штамма Streptococcus thermophillus Т-5367 (Штамм депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) Федерального бюджетного учреждения науки Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора под коллекционным номером №1266). Штамм Streptococcus thermophillus Т-5367 вносили в количестве 0,05%. После внесения молоко тщательно перемешивали и инкубировали до 6 часов при температуре 42°С до достижения значения рН кисломолочного продукта равного 4,7±0,1. После окончания инкубирования кисломолочный продукт охлаждали до температуры 2-8°С. Образующийся сгусток - белый, не тянущийся, без признаков синерезиса. Вкус - кисломолочный, йогуртный, слабокислый, инертный. Величина рН йогурта на 14 суток хранения составила 4,2 ед., титруемая кислотность - 87°Т, титр КОЕ 3,6 × 108 КОЕ/г.Срок годности получаемого продукта составляет не менее 14 дней.Example 2. The use of the strain in the composition of dry complex starter culture direct application for the preparation of yogurt. For the preparation of yogurt used normalized milk fat content of 3.2%, heated to a temperature of 42 ° C. The lyophilisate of the strain Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus T7817 was added in an amount of 0.03% together with the lyophilisate of the Streptococcus thermophillus strain T-5367 (The strain was deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) of the Federal budget institution of science of Moscow and Russian research and scientific research institute. G. N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor under collection number No. 1266). The strain Streptococcus thermophillus T-5367 was introduced in an amount of 0.05%. After application, the milk was thoroughly mixed and incubated for 6 hours at a temperature of 42 ° C until the pH of the fermented milk product is 4.7 ± 0.1. After incubation, the fermented milk product was cooled to a temperature of 2-8 ° C. The resulting clot is white, not stretching, without signs of syneresis. The taste is fermented, yogurt, slightly acidic, inert. The pH value of yogurt for 14 days of storage was 4.2 units, titratable acidity - 87 ° T, CFU titer of 3.6 × 10 8 CFU / g. The shelf life of the resulting product is at least 14 days.
Таким образом, свойства заявляемого штамма свидетельствуют о целесообразности его использования в составе поликомпонентной закваски прямого внесения.Thus, the properties of the claimed strain indicate the feasibility of its use in the composition of multicomponent starter culture direct application.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018139352A RU2722700C2 (en) | 2018-11-08 | 2018-11-08 | Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-7817, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018139352A RU2722700C2 (en) | 2018-11-08 | 2018-11-08 | Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-7817, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018139352A3 RU2018139352A3 (en) | 2020-05-13 |
| RU2018139352A RU2018139352A (en) | 2020-05-13 |
| RU2722700C2 true RU2722700C2 (en) | 2020-06-03 |
Family
ID=70734894
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018139352A RU2722700C2 (en) | 2018-11-08 | 2018-11-08 | Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-7817, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2722700C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2123045C1 (en) * | 1997-09-26 | 1998-12-10 | Башкирский институт патентоведения и сертификации | Consortium of microorganisms lactobacillus acidophilus, lactobacillus delbruockii subspecies bulgaricus, saccharomyces for kumiss production |
| RU2391393C1 (en) * | 2008-11-19 | 2010-06-10 | Галина Геннадиевна Алехина | Lactobacillus delbrueckii TS1-06 STRAIN USED FOR MAKING BACTERIAL PREPARATIONS AND PRODUCTION OF LIQUID SOUR MILK BROTH AS FOOD PRODUCT FOR MEDICAL AND PREVENTIVE PURPOSES |
| RU2446209C2 (en) * | 2006-06-23 | 2012-03-27 | Кр. Хансен А/С | METHOD FOR PRODUCTION OF Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus STRAIN WITH LOW LACTIC ACID POSTPRODUCTION DEGREE, TEXTURISING STRAINS PRODUCED (VERSIONS), DAIRY PRODUCT AND METHOD OF ITS PRODUCTION USING TEXTURISING STRAINS |
-
2018
- 2018-11-08 RU RU2018139352A patent/RU2722700C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2123045C1 (en) * | 1997-09-26 | 1998-12-10 | Башкирский институт патентоведения и сертификации | Consortium of microorganisms lactobacillus acidophilus, lactobacillus delbruockii subspecies bulgaricus, saccharomyces for kumiss production |
| RU2446209C2 (en) * | 2006-06-23 | 2012-03-27 | Кр. Хансен А/С | METHOD FOR PRODUCTION OF Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus STRAIN WITH LOW LACTIC ACID POSTPRODUCTION DEGREE, TEXTURISING STRAINS PRODUCED (VERSIONS), DAIRY PRODUCT AND METHOD OF ITS PRODUCTION USING TEXTURISING STRAINS |
| RU2391393C1 (en) * | 2008-11-19 | 2010-06-10 | Галина Геннадиевна Алехина | Lactobacillus delbrueckii TS1-06 STRAIN USED FOR MAKING BACTERIAL PREPARATIONS AND PRODUCTION OF LIQUID SOUR MILK BROTH AS FOOD PRODUCT FOR MEDICAL AND PREVENTIVE PURPOSES |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2018139352A3 (en) | 2020-05-13 |
| RU2018139352A (en) | 2020-05-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4772131B2 (en) | Method for producing fermented milk using novel lactic acid bacteria | |
| ES2674353T3 (en) | Method for preparing microbial liquid cultures that have high stability and fermentative activity | |
| JP4862053B2 (en) | New lactic acid bacteria | |
| CN104531587B (en) | One lactobacillus plantarum and its application in active fermentation breast | |
| EA029862B1 (en) | Texturizing lactic acid bacteria strains | |
| CN112442464B (en) | Bifidobacterium breve grx201 resistant to oxidation stress and application thereof | |
| EA024087B1 (en) | Process for preparing a fermented milk product by synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp. paracasei | |
| WO2019095274A1 (en) | Lactobacillus plantarum with high butanedione yield and use thereof | |
| RU2326938C2 (en) | Consortium of lactobacteria strains and method of receiving preparation on its basis, which is used as dietary supplement or ferment for production of sour milk products | |
| RU2441910C1 (en) | Streptococcus thermophilus strains used for fermented milk products preparation | |
| RU2722700C2 (en) | Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-7817, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2731738C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus k 1903, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2590716C1 (en) | Strain of bacteria streptococcus thermophilus strain used for preparation of cultured milk product | |
| RU2728171C2 (en) | Bacterial strain lactobacillus helveticus t-5068 used as direct starter for preparation of fermented milk products | |
| RU2722729C2 (en) | Bacterial strain lactobacillus delbrueckii subsp_ bulgaricus t-4809 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2737198C2 (en) | Strain of bacteria streptococcus thermophilus used as a component of a direct starter for preparation of fermented milk products | |
| RU2724529C2 (en) | Strain of bacteria streptococcus thermophilus t-3693 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| JP4794592B2 (en) | New lactic acid bacteria | |
| RU2109054C1 (en) | Consortium of bifidobacterium bifidum 791, b longum b379m, b breve 79-119, b infantis 73-15, b adolescentis g7513 for preparing lactic acid nonfermented foodstuffs and bacterial preparations | |
| RU2726113C2 (en) | Strain of bacteria streptococcus thermophiles t-5367 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2524117C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus acidophilus used to prepare fermented milk product | |
| RU2731731C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus acidophilus k 1901 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2731718C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus acidophilus k 1902, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| Bury et al. | Effect of yeast extract supplementation on beta-galactosidase activity of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus 11842 grown in whey | |
| JP4794593B2 (en) | Method for producing fermented milk using novel lactic acid bacteria |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HC9A | Changing information about inventors | ||
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |