RU2609657C1 - Method for extracting mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue - Google Patents
Method for extracting mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue Download PDFInfo
- Publication number
- RU2609657C1 RU2609657C1 RU2015145404A RU2015145404A RU2609657C1 RU 2609657 C1 RU2609657 C1 RU 2609657C1 RU 2015145404 A RU2015145404 A RU 2015145404A RU 2015145404 A RU2015145404 A RU 2015145404A RU 2609657 C1 RU2609657 C1 RU 2609657C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- adipose tissue
- cells
- fragments
- stem cells
- mesenchymal stem
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0618—Cells of the nervous system
- C12N5/0621—Eye cells, e.g. cornea, iris pigmented cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0618—Cells of the nervous system
- C12N5/0623—Stem cells
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, тканевой инженерии и может быть использовано в трансплантологии, офтальмологии, пластической хирургии, косметологии для лечения широкого круга заболеваний и возрастных изменений и касается способа выделения стволовых клеток взрослого человека, а именно мезенхимных стволовых клеток орбитальной жировой ткани.The invention relates to the field of biotechnology, tissue engineering and can be used in transplantology, ophthalmology, plastic surgery, cosmetology for the treatment of a wide range of diseases and age-related changes, and relates to a method for isolating adult stem cells, namely mesenchymal stem cells of orbital adipose tissue.
Ближайшим аналогом является способ выделения мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани, описанный в статье B.S. Korn (Korn B.S., Kikkawa D.O., Hicok K.C. Identification and Characterization of Adult Stem Cells From Human Orbital Adipose Tissue / Ophthal Plast Reconstr Surg. 2009; 25 (1): 27-32), заключающийся в измельчении свежевыделенного фрагмента орбитальной жировой ткани ножницами, промывке физиологическим раствором, ферментативном расщеплении коллагеназой, аспирации плавающих на поверхности адипоцитов, фильтрации оставшихся клеток последовательно через фильтр с порами 100 мкм и 40 мкм и осаждении клеток путем центрифугирования в течение 5 мин со скоростью 400g. После ресуспендирования осажденные центрифугированием клетки помещают в культуральные флаконы с питательной средой (среда F12 с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки и антибиотиков), смену которой проводят каждые 3-4 дня.The closest analogue is the method for isolating mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue, described in B.S. Korn (Korn BS, Kikkawa DO, Hicok KC Identification and Characterization of Adult Stem Cells From Human Orbital Adipose Tissue / Ophthal Plast Reconstr Surg. 2009; 25 (1): 27-32), which consists in grinding a freshly isolated fragment of orbital adipose tissue with scissors, washing with saline, enzymatic cleavage with collagenase, aspiration of adipocytes floating on the surface, filtering the remaining cells sequentially through a filter with pores of 100 μm and 40 μm and sedimenting cells by centrifugation for 5 min at a speed of 400g. After resuspension, the cells precipitated by centrifugation are placed in culture bottles with culture medium (F12 medium supplemented with 10% fetal calf serum and antibiotics), which are changed every 3-4 days.
Недостатками приведенного способа являются:The disadvantages of this method are:
- трудоемкость выполнения вследствие большого количества этапов;- the complexity of the implementation due to the large number of stages;
- снижение количества выделенных мезенхимных стволовых клеток, по сравнению с потенциально возможным, вследствие того, что выделяются только клетки, освободившиеся из ткани в результате ферментативного расщепления; мезенхимные стволовые клетки, оставшиеся в мельчайших фрагментах жировой ткани, не используется для культивирования;- a decrease in the number of isolated mesenchymal stem cells, compared with the potential, due to the fact that only cells released from the tissue as a result of enzymatic cleavage are released; mesenchymal stem cells remaining in the smallest fragments of adipose tissue are not used for cultivation;
- нерациональность использования первичного материала с учетом особенностей орбитальной жировой ткани: ограниченный объем, доступный для резекции, и меньшее содержание стволовых клеток в единице объема, по сравнению с жировой тканью туловища.- the irrationality of the use of primary material, taking into account the characteristics of the orbital adipose tissue: limited volume available for resection, and a lower content of stem cells per unit volume, compared with adipose tissue of the body.
Таким образом, оптимизация способа выделения мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани актуальна в связи с необходимостью получения максимального количества стволовых клеток из минимального объема первичного материала.Thus, the optimization of the method for isolating mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue is relevant in connection with the need to obtain the maximum number of stem cells from the minimum amount of primary material.
Задачей изобретения является разработка более эффективного метода выделения мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани.The objective of the invention is to develop a more effective method for the isolation of mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue.
Технический результат изобретения, получаемый в результате решения этой задачи, состоит в увеличении числа первичных клеточных колоний и, следовательно, увеличении количества выделенных мезенхимных стволовых клеток, меньшей трудоемкости способа, более эффективном использовании исходного тканевого материала, получении чистой культуры за счет использования способности к адгезии мезенхимных стволовых клеток.The technical result of the invention, obtained by solving this problem, consists in increasing the number of primary cell colonies and, consequently, increasing the number of isolated mesenchymal stem cells, less laborious method, more efficient use of source tissue material, obtaining a pure culture by using the ability of adhesion of mesenchymal stem cells.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе выделения мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани, включающем ее измельчение на фрагменты, расщепление их раствором коллагеназы, осаждение клеток путем центрифугирования в течение 5 минут, перенос их в пластиковый культуральный флакон, согласно изобретению расщепление фрагментов орбитальной жировой ткани проводят раствором коллагеназы второго типа в сбалансированном растворе Хэнкса в соотношении 1 мг/мл на 0,1 г жировой ткани при температуре 37°С в шейкере в течение 60 минут, полученную суспензию центрифугируют со скоростью 1300 оборотов в минуту, после чего жировую фракцию, а также клетки, осажденные на дно, переносят в пластиковый культуральный флакон, который заполняют 5 мл питательной среды следующего состава: 45 мл среды DMEM/F12, 5 мл эмбриональной телячьей сыворотки, 2 ммоль L-глутамина, 100 мкл смеси антибиотиков, состоящей из 10000 МЕ/мл пенициллина, 10000 мкг/мл стрептомицина, 25 мкг/мл амфотерицина, и культивируют в CO2-инкубаторе при 37°С и 5% CO2 в атмосфере, на вторые сутки при замене питательной среды на свежую того же состава проводят удаление эритроцитов и других клеток стромально-сосудистой фракции, не прикрепившихся к поверхности флакона, а также плавающих на поверхности фрагментов жировой ткани.The specified technical result is achieved by the fact that in the method for isolating mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue, including its grinding into fragments, splitting them with a collagenase solution, sedimenting cells by centrifugation for 5 minutes, transferring them to a plastic culture bottle, according to the invention, splitting of orbital fragments adipose tissue is carried out with a solution of collagenase of the second type in a balanced Hanks solution in a ratio of 1 mg / ml per 0.1 g of adipose tissue at a temperature of 37 ° C in a shaker for 60 minutes, the resulting suspension is centrifuged at a speed of 1300 rpm, after which the fat fraction, as well as the cells deposited on the bottom, are transferred to a plastic culture bottle, which is filled with 5 ml of culture medium of the following composition: 45 ml of DMEM / F12 medium, 5 ml of fetal calf serum, 2 mmol of L-glutamine, 100 μl of a mixture of antibiotics consisting of 10,000 IU / ml penicillin, 10,000 μg / ml streptomycin, 25 μg / ml amphotericin, and cultured in a CO 2 incubator at 37 ° C and 5 % CO 2 in the atmosphere, on the second day when replacing the nutrient medium a fresh one of the same composition is used to remove red blood cells and other cells of the stromal-vascular fraction that are not attached to the surface of the vial, as well as fragments of adipose tissue floating on the surface.
Между совокупностью существенных признаков и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь.Between the totality of essential features and the achieved technical result, there is a causal relationship.
Помещение верхней жировой фракции, образовавшейся в результате центрифугирования, в пластиковый культуральный флакон с последующим заполнением его питательной средой и культивированием в течение суток создает условие для активной миграции дополнительных фракций мезенхимных стволовых клеток из мельчайших фрагментов жировой ткани, осевших на дно пластикового культурального флакона. Выход дополнительных фракций мезенхимных стволовых клеток из нерасщепленных фрагментов жировой ткани, наряду с освобождением мезенхимных стволовых клеток в результате ферментативного расщепления и центрифугирования, обусловливает увеличение общего количества первичных клеточных колоний и, следовательно, достижение технического результата.The placement of the upper fat fraction resulting from centrifugation in a plastic culture bottle, followed by filling it with a nutrient medium and culturing for 24 hours, creates a condition for the active migration of additional fractions of mesenchymal stem cells from tiny fragments of adipose tissue that have settled on the bottom of a plastic culture bottle. The output of additional fractions of mesenchymal stem cells from unsplit fragments of adipose tissue, along with the release of mesenchymal stem cells as a result of enzymatic cleavage and centrifugation, leads to an increase in the total number of primary cell colonies and, therefore, the achievement of a technical result.
Среди существенных признаков, характеризующих способ, отличительными являются:Among the essential features characterizing the method, the distinguishing ones are:
- ферментативное расщепление проводят раствором коллагеназы второго типа в сбалансированном растворе Хэнкса в соотношении 1 мг/мл на 0,1 г жировой ткани при температуре 37°С в шейкере в течение 60 минут;- enzymatic digestion is carried out with a solution of collagenase of the second type in a balanced Hanks solution in a ratio of 1 mg / ml per 0.1 g of adipose tissue at a temperature of 37 ° C in a shaker for 60 minutes;
- центрифугирование проводят в течение 5 минут со скоростью 1300 оборотов в минуту;- centrifugation is carried out for 5 minutes at a speed of 1300 rpm;
- после центрифугирования мельчайшие фрагменты жировой ткани, образующие жировую фракцию в верхней части пробирки, не удаляют, а переносят в пластиковый культуральный флакон, наряду с клетками, осажденными на дно пробирки;- after centrifugation, the smallest fragments of adipose tissue that form the fat fraction in the upper part of the tube are not removed, but transferred to a plastic culture bottle, along with the cells deposited on the bottom of the tube;
- чистую культуру мезенхимных стволовых клеток получают не путем фильтрования, а в результате смены среды на вторые сутки культивирования, т.к. мезенхимные стволовые клетки, в отличие от других клеток стромально-сосудистой фракции, обладают адгезией к поверхности пластикового культурального флакона.- a pure culture of mesenchymal stem cells is obtained not by filtration, but as a result of a change of medium on the second day of cultivation, because Mesenchymal stem cells, unlike other cells of the stromal-vascular fraction, have adhesion to the surface of a plastic culture vial.
Заявленный технический результат может быть получен только при использовании всей совокупности предложенного способа, при этом:The claimed technical result can be obtained only by using the totality of the proposed method, while:
- сокращается трудоемкость за счет сокращения количества этапов выделения;- reduces the complexity by reducing the number of stages of selection;
- более эффективно используется исходный тканевой материал, т.к. помещение мельчайших фрагментов жировой ткани в культуральный флакон дает возможность выделить фракцию клеток, не освободившихся из ткани при ферментативном расщеплении;- the raw fabric material is used more efficiently, as the placement of the smallest fragments of adipose tissue in a culture bottle makes it possible to isolate the fraction of cells that are not released from the tissue by enzymatic cleavage;
- чистота первичной культуры достигается за счет использования способности к адгезии мезенхимных стволовых клеток, а не за счет фильтрования;- the purity of the primary culture is achieved through the use of adhesion ability of mesenchymal stem cells, and not by filtration;
- для выделения дополнительного количества мезенхимных клеток используется верхняя жировая фракция, полученная при центрифугировании.- to isolate an additional number of mesenchymal cells, the upper fat fraction obtained by centrifugation is used.
Существенные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и не являющиеся очевидными для специалиста.The essential features characterizing the invention, showed in the claimed combination of new properties that are not explicitly derived from the prior art in this field and are not obvious to a specialist.
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Образец орбитальной жировой ткани, резецированный в ходе хирургического вмешательства, измельчают ножницами на фрагменты размером 1-2 мм. Полученную массу заливают раствором коллагеназы второго типа в сбалансированном растворе Хэнкса в соотношении 1 мг/мл на 0,1 г жировой ткани. Инкубируют при температуре 37°С в шейкере в течение 60 минут. После этого полученную суспензию переливают в пластиковую центрифужную пробирку, добавляют 5 мл питательной среды (на 45 мл DMEM/F12 добавить 5 мл эмбриональной телячьей сыворотки, 2 ммоль L-глутамина, 100 мкл смеси антибиотиков (пенициллин 10000 МЕ/мл, стрептомицин 10000 мкг/мл, амфотерицин 25 мкг/мл)) и центрифугируют со скоростью 1300 оборотов в минуту в течение пяти минут. После этого верхнюю жировую фракцию (мельчайшие нерасщепленные фрагменты жировой ткани, адипоциты и свободные липиды) собирают пипеткой и переносят в пластиковый культуральный флакон. Среднюю часть (раствор коллагеназы, питательная среда) из пробирки удаляют, а осадок (эритроциты, клетки стромально-сосудистой фракции) переносят в тот же культуральный флакон и добавляют 5 мл вышеописанной питательной среды. Культивирование проводят в стандартных условиях в CO2-инкубаторе при 37°С и 5% CO2 в атмосфере. Смену питательной среды проводят на вторые сутки культивирования. В процессе смены среды удаляются осевшие на дно пластикового культурального флакона эритроциты и другие, не прикрепившиеся клетки стромально-сосудистой фракции, а также плавающие на поверхности фрагменты жировой ткани. Это позволяет получить чистую культуру мезенхимных стволовых клеток, адгезивных к поверхности пластикового культурального флакона.A sample of orbital adipose tissue resected during surgery is crushed with scissors into fragments of 1-2 mm in size. The resulting mass is poured with a collagenase solution of the second type in a balanced Hanks solution in a ratio of 1 mg / ml per 0.1 g of adipose tissue. Incubated at a temperature of 37 ° C in a shaker for 60 minutes. After that, the resulting suspension is transferred to a plastic centrifuge tube, 5 ml of culture medium are added (add 45 ml of fetal calf serum, 2 mmol of L-glutamine, 100 μl of antibiotic mixture (penicillin 10,000 IU / ml, streptomycin 10,000 μg / ml, amphotericin 25 μg / ml)) and centrifuged at a speed of 1300 rpm for five minutes. After that, the upper fat fraction (the smallest unsplit fragments of adipose tissue, adipocytes and free lipids) is collected with a pipette and transferred to a plastic culture bottle. The middle part (collagenase solution, culture medium) is removed from the test tube, and the sediment (erythrocytes, cells of the stromal vascular fraction) is transferred to the same culture vial and 5 ml of the above culture medium is added. Cultivation is carried out under standard conditions in a CO 2 incubator at 37 ° C and 5% CO 2 in the atmosphere. The change of the nutrient medium is carried out on the second day of cultivation. In the process of changing the medium, erythrocytes and other non-adherent cells of the stromal-vascular fraction, as well as adipose tissue fragments floating on the surface, are removed to the bottom of the plastic culture bottle. This allows you to get a pure culture of mesenchymal stem cells, adhesive to the surface of a plastic culture bottle.
Данное изобретение может быть использовано в трансплантологии (для пересадки стволовых клеток орбитальной жировой ткани как свободных, так и размещенных на матриксе), офтальмологии (для изучения патогенеза и лечения глазных болезней), пластической хирургии (для липофилинга с обогащением стволовыми клетками), косметологии (для стимуляции репаративных процессов и коррекции возрастных изменений кожи).This invention can be used in transplantology (for stem cell transplantation of orbital adipose tissue, both free and placed on the matrix), ophthalmology (for studying the pathogenesis and treatment of eye diseases), plastic surgery (for lipofilling with stem cell enrichment), cosmetology (for stimulation of reparative processes and correction of age-related skin changes).
Изобретение поясняется фотографиями 1 и 2, на которых видна миграция мезенхимных стволовых клеток из мельчайших фрагментов орбитальной жировой ткани, резецированной у пациентов Т. и С. соответственно.The invention is illustrated by photographs 1 and 2, which show the migration of mesenchymal stem cells from the smallest fragments of orbital adipose tissue resected in patients T. and C., respectively.
Пример 1. Пациентка Т., 5 лет, фрагмент орбитальной жировой ткани объемом 0,3 мл резецирован в ходе операции по устранению птоза верхнего века правого глаза. Выделение мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани проводили согласно заявляемому способу. Миграция дополнительной фракции мезенхимных стволовых клеток из мельчайших фрагментов жировой ткани в первичной культуре демонстрируется на фотографии 1. Количество клеток, выделенных из данного фрагмента, на вторые сутки культивирования составило 1,9×102.Example 1. Patient T., 5 years old, a 0.3 ml fragment of orbital adipose tissue was resected during the operation to eliminate ptosis of the upper eyelid of the right eye. The selection of mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue was performed according to the claimed method. The migration of an additional fraction of mesenchymal stem cells from the smallest fragments of adipose tissue in primary culture is shown in photo 1. The number of cells isolated from this fragment on the second day of cultivation was 1.9 × 10 2 .
Пример 2. Пациентка С., 84 года, фрагмент орбитальной жировой ткани объемом 0,3 мл резецирован в ходе энуклеации правого глаза. Выделение мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани проводили согласно заявляемому способу. Миграция дополнительной фракции мезенхимных стволовых клеток из мельчайших фрагментов жировой ткани в первичной культуре демонстрируется на фотографии 2. Количество клеток, выделенных из данного фрагмента, на вторые сутки культивирования составило 1,7×102.Example 2. Patient S., 84 years old, a 0.3 ml fragment of orbital adipose tissue was resected during enucleation of the right eye. The selection of mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue was performed according to the claimed method. The migration of an additional fraction of mesenchymal stem cells from the smallest adipose tissue fragments in primary culture is shown in photo 2. The number of cells isolated from this fragment on the second day of cultivation was 1.7 × 10 2 .
Заявляемым способом проводилось выделение мезенхимных стволовых клеток из орбитальной жировой ткани, резецированной интраоперационно у 14 пациентов. Критерием отбора явилось отсутствие у пациентов сопутствующей атрофии орбитальной жировой ткани. Во всех случаях наблюдалась миграция дополнительных фракций мезенхимных стволовых клеток из мельчайших фрагментов жировой ткани, за счет чего увеличивалось число первичных клеточных колоний.The inventive method was the selection of mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue resected intraoperatively in 14 patients. The selection criterion was the absence of concomitant atrophy of orbital adipose tissue in patients. In all cases, migration of additional fractions of mesenchymal stem cells from the smallest fragments of adipose tissue was observed, due to which the number of primary cell colonies increased.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015145404A RU2609657C1 (en) | 2015-10-22 | 2015-10-22 | Method for extracting mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015145404A RU2609657C1 (en) | 2015-10-22 | 2015-10-22 | Method for extracting mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2609657C1 true RU2609657C1 (en) | 2017-02-02 |
Family
ID=58457595
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015145404A RU2609657C1 (en) | 2015-10-22 | 2015-10-22 | Method for extracting mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2609657C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107815414A (en) * | 2017-09-21 | 2018-03-20 | 浙江泰林生物技术股份有限公司 | A kind of CO2gas incubator movement system |
| RU2718907C1 (en) * | 2018-12-07 | 2020-04-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Biomaterial based on cell-free matrix produced by human mesenchymal stromal cells, method for preparing thereof and method of using thereof to stimulate regenerative processes |
| RU2806684C1 (en) * | 2023-03-27 | 2023-11-02 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный медицинский университет имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for obtaining stromal-vascular fraction of adipose tissue |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2252252C1 (en) * | 2004-04-09 | 2005-05-20 | Тепляшин Александр Сергеевич | Method for isolation of mesenchymal stem cells |
| US20120288480A1 (en) * | 2011-02-22 | 2012-11-15 | Taipei Medical University | Cell population comprising orbital fat-derived stem cells (ofscs) and their isolation and applications |
-
2015
- 2015-10-22 RU RU2015145404A patent/RU2609657C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2252252C1 (en) * | 2004-04-09 | 2005-05-20 | Тепляшин Александр Сергеевич | Method for isolation of mesenchymal stem cells |
| US20120288480A1 (en) * | 2011-02-22 | 2012-11-15 | Taipei Medical University | Cell population comprising orbital fat-derived stem cells (ofscs) and their isolation and applications |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| WESTER S.T. "Orbital Stem Cells", Curr Ophthalmol Rep. 2014; 2: 107-115. * |
| ZUK P.A. et all "Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells", Molecular Biology of the Cell. 2002; 13: 4279-4295, стр. 4280. SZU-YU Ch. et all "Isolation and Characterization of Mesenchymal Progenitor Cells From Human Orbital Adipose Tissue", Invest Ophthalmol Vis Sci. 2014; 55(8):4842-4852. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107815414A (en) * | 2017-09-21 | 2018-03-20 | 浙江泰林生物技术股份有限公司 | A kind of CO2gas incubator movement system |
| CN107815414B (en) * | 2017-09-21 | 2020-11-24 | 浙江泰林生物技术股份有限公司 | Carbon dioxide incubator transfer system |
| RU2718907C1 (en) * | 2018-12-07 | 2020-04-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Biomaterial based on cell-free matrix produced by human mesenchymal stromal cells, method for preparing thereof and method of using thereof to stimulate regenerative processes |
| RU2806684C1 (en) * | 2023-03-27 | 2023-11-02 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный медицинский университет имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for obtaining stromal-vascular fraction of adipose tissue |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100907248B1 (en) | Volume replacement method of body by transplantation of differentiated young fat cells and biodegradable polymer | |
| WO2020103192A1 (en) | Method for extracting exosome | |
| CN105238751B (en) | Isolated culture method of umbilical cord tissue mesenchymal stem cells | |
| JP3218433U (en) | Mechanical device for separating stromal vascular fraction | |
| Rezanejad et al. | In vitro differentiation of adipose-tissue-derived mesenchymal stem cells into neural retinal cells through expression of human PAX6 (5a) gene | |
| JP2010538681A (en) | Methods for extracting mesenchymal stem cells from human or animal embryos and their secretions | |
| CN102978156A (en) | Expansion in vitro purification culture method of mesenchymal stem cells and culture medium | |
| CN105543164A (en) | Primary isolated culture method for dairy cow mammary epithelial cells | |
| CN104694466A (en) | Preparation of mesenchymal stem cells (MSCs) derived exosomes and application of the same in acute lung injury | |
| CN102618497B (en) | Method for preparing retinal pigment epithelia by utilizing human marrow mesenchymal stem cells | |
| CN104480062A (en) | Separation and culture method for different cellular components of human mammary tissue | |
| CN106754664B (en) | Culture medium for inducing adipogenic differentiation of skeletal muscle myogenic stem cells, application of culture medium and adipogenic differentiation method | |
| KR101430708B1 (en) | Stem cells from human salivary glands, a process for the preparation thereof, a culture solution thereof, and a use thereof for the treatment of salivary gland damage | |
| RU2609657C1 (en) | Method for extracting mesenchymal stem cells from orbital adipose tissue | |
| CN113322231A (en) | Method for separating and culturing mesenchymal stem cells and preparation | |
| CN103484424B (en) | Single cell cloning method for obtaining goat mammary epithetical cells | |
| CN108486039B (en) | A method for inducing the differentiation of human adipose stem cells into Leydig cells by small molecules | |
| CN112029717A (en) | Serum-free in vitro domestication culture of human mesenchymal stem cells | |
| RU2409663C1 (en) | Method for producing dedifferentiated cells of adult retinal pigment eye epithelium | |
| CN111073858A (en) | A kind of YAP1 gene-modified mesenchymal stem cell and preparation method thereof | |
| JP5636174B2 (en) | Method for producing mesenchymal cells or chondrocytes and method for suppressing carcinogenicity | |
| CN110846273A (en) | Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell culture and trilineage differentiation induction method | |
| CN118453655B (en) | Application of mesenchymal stem cells in the treatment of idiopathic pulmonary fibrosis | |
| CN106867965B (en) | Efficient induction differentiation agent and induction differentiation culture medium for adipose-derived stem cells | |
| CN113583952A (en) | Culture solution for increasing yield of exosomes of stem cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20171023 |