RU2163129C1 - Method of preparing animal-origin complex of biologically-active polypeptides exhibiting antioxidant and geroprotection activities, pharmacological agent, and method for utilization thereof - Google Patents
Method of preparing animal-origin complex of biologically-active polypeptides exhibiting antioxidant and geroprotection activities, pharmacological agent, and method for utilization thereof Download PDFInfo
- Publication number
- RU2163129C1 RU2163129C1 RU2000116823/14A RU2000116823A RU2163129C1 RU 2163129 C1 RU2163129 C1 RU 2163129C1 RU 2000116823/14 A RU2000116823/14 A RU 2000116823/14A RU 2000116823 A RU2000116823 A RU 2000116823A RU 2163129 C1 RU2163129 C1 RU 2163129C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- complex
- drug
- pharmacological agent
- supernatant
- acetone
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 23
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 20
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 title claims description 23
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 title claims description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 17
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 title description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 25
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 19
- 210000004560 pineal gland Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 12
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 19
- 230000002398 geroprotective effect Effects 0.000 claims description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000007172 age related pathology Effects 0.000 claims description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 61
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 58
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 abstract 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 5
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 4
- YJPIGAIKUZMOQA-UHFFFAOYSA-N Melatonin Natural products COC1=CC=C2N(C(C)=O)C=C(CCN)C2=C1 YJPIGAIKUZMOQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 229960003987 melatonin Drugs 0.000 description 4
- DRLFMBDRBRZALE-UHFFFAOYSA-N melatonin Chemical compound COC1=CC=C2NC=C(CCNC(C)=O)C2=C1 DRLFMBDRBRZALE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001599018 Melanogaster Species 0.000 description 3
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 3
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 3
- 230000002225 anti-radical effect Effects 0.000 description 3
- 230000006851 antioxidant defense Effects 0.000 description 3
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 2
- GRFNBEZIAWKNCO-UHFFFAOYSA-N 3-pyridinol Chemical compound OC1=CC=CN=C1 GRFNBEZIAWKNCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003830 Automatism Diseases 0.000 description 2
- 238000011735 C3H mouse Methods 0.000 description 2
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 description 2
- 108010087806 Carnosine Proteins 0.000 description 2
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 2
- 239000004258 Ethoxyquin Substances 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000017011 Glycated Hemoglobin A Human genes 0.000 description 2
- 108010014663 Glycated Hemoglobin A Proteins 0.000 description 2
- CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N N-beta-alanyl-L-histidine Natural products NCCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 2
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 2
- 208000007888 Sinus Tachycardia Diseases 0.000 description 2
- 206010042602 Supraventricular extrasystoles Diseases 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 description 2
- 235000021256 carbohydrate metabolism Nutrition 0.000 description 2
- CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N carnosine Chemical compound [NH3+]CCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC=N1 CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- 229940044199 carnosine Drugs 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 150000001993 dienes Chemical class 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 2
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 2
- 235000019285 ethoxyquin Nutrition 0.000 description 2
- DECIPOUIJURFOJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyquin Chemical compound N1C(C)(C)C=C(C)C2=CC(OCC)=CC=C21 DECIPOUIJURFOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940093500 ethoxyquin Drugs 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940125384 geroprotector Drugs 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- RBCOYOYDYNXAFA-UHFFFAOYSA-L (5-hydroxy-4,6-dimethylpyridin-3-yl)methyl phosphate Chemical class CC1=NC=C(COP([O-])([O-])=O)C(C)=C1O RBCOYOYDYNXAFA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- KZUIXWYHQJZUOK-UHFFFAOYSA-N 2-ethyl-6-methylpyridin-1-ium-3-ol;chloride Chemical compound Cl.CCC1=NC(C)=CC=C1O KZUIXWYHQJZUOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 1
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 1
- 206010018473 Glycosuria Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010020915 Hypervitaminosis Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- XZTYGFHCIAKPGJ-UHFFFAOYSA-N Meclofenoxate Chemical compound CN(C)CCOC(=O)COC1=CC=C(Cl)C=C1 XZTYGFHCIAKPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100010166 Mus musculus Dok3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010063493 Premature ageing Diseases 0.000 description 1
- 208000032038 Premature aging Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 208000009729 Ventricular Premature Complexes Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000001557 animal structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004375 bundle of his Anatomy 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008828 contractile function Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002745 epiphysis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 description 1
- 230000001456 gonadotroph Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 150000002432 hydroperoxides Chemical class 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101150000548 laf1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000010016 myocardial function Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 208000008510 paroxysmal tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002613 pineal body hormone Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000007348 radical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002683 reaction inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 206010047302 ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и касается выделения из органов животных комплекса биологически активных веществ, который может использоваться в клинической геронтологии (гериатрии) как фармакологическое средство, обладающее антиоксидантной и геропротекторной активностью. The invention relates to medicine, namely to pharmacology, and for the allocation from the organs of animals of a complex of biologically active substances, which can be used in clinical gerontology (geriatrics) as a pharmacological agent with antioxidant and geroprotective activity.
Известно, что одними из ведущих механизмов старения организма являются нарастание молекулярных повреждений, вызываемых свободными радикалами, и нарушение функции системы антиоксидантной защиты организма, а также нарушение физиологических функций эпифиза [1, 2, 3]. It is known that one of the leading mechanisms of aging of the body is an increase in molecular damage caused by free radicals, and a violation of the function of the antioxidant defense system of the body, as well as a violation of the physiological functions of the pineal gland [1, 2, 3].
Известны препараты, проявляющие геропротекторную и антиоксидантную активность. Добавление в пищу известного ингибитора радикальных процессов ионола (2,6-ди-трет.бутил-4-метилфенола) способствовало увеличению времени жизни мышей с ускоренным старением линии LAF1 [4]. Однако лекарственный препарат на основе 2,6-ди-трет.бутил-4-метилфенола (дибунол) выпускается в виде линимента и применяется у людей, в основном, при онкологических заболеваниях в урологической практике [5] . Введение в пищу антиоксиданта этоксихина (сантохин) увеличивало продолжительность жизни мышей линии C3H [6]. Увеличение продолжительности жизни лабораторных животных вызывает также малотоксичный водорастворимый антиоксидант - хлоргидрат 2-этил-6-метил-3-оксипиридина, структурного аналога витамина B6 [7, 8]. Незначительное увеличение продолжительности жизни в эксперименте давали 2-меркаптоэтаноламин, бутилгидрокситолуол, цистеин, 3-гидроксипиридин, центрофеноксин, молочная и глюконовая кислоты, глутатион [9, 10]. Однако эти химические соединения не являются лекарственными препаратами и не нашли применения в медицине в качестве геропротекторных средств. Увеличивали продолжительность жизни в эксперименте витамины A, C, E [11, 12, 13]. Однако перенасыщение организма этими витаминами может неблагоприятно влиять на функциональное состояние органов и систем, обуславливает быстрое развитие гипервитаминоза. Известен препарат β-катехин, в состав которого входят витамины и растительные вещества, обладающиe антиоксидантным действием [14]. Применение этого препарата мышам с ускоренным старением линии SAM-P8 увеличивало выживаемость животных. При этом механизмы геропротекторной активности этого комбинированного препарата недостаточно изучены, что ограничивает его внедрение в клиническую практику. После 7-месячного содержания мышей линии SAM, склонных к ускоренному старению, на диете с увеличенным содержанием карнозина (β-Ala-His) уменьшалась смертность животных [15]. Следует отметить, что карнозин не является лекарственным препаратом, его геропротекторные свойства изучены недостаточно. Незначительное увеличение средней продолжительности жизни мышей вызывало применение гормона эпифиза - мелатонина [16]. Эффекты мелатонина связывают с его антиоксидантными свойствами [17]. Однако применение мелатонина у Drosophila melanogaster линии ВЭС, селектированнoй на высокий уровень эмбриональной смертности, не оказывало геропротекторного эффекта, хотя и сопровождалось антиоксидантным эффектом. Мелатонин не является лекарственным препаратом, а выпускается в качестве биологически активной добавки к пище.Known drugs exhibiting geroprotective and antioxidant activity. The addition of a well-known inhibitor of radical processes of ionol (2,6-di-tert.butyl-4-methylphenol) to food contributed to an increase in the life time of mice with accelerated aging of the LAF 1 line [4]. However, a drug based on 2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol (dibunol) is produced as a liniment and is used in humans, mainly for oncological diseases in urological practice [5]. The introduction of the antioxidant ethoxyquin (Santokhin) into food increased the life span of C3H mice [6]. An increase in the lifespan of laboratory animals is also caused by a slightly toxic water-soluble antioxidant - 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine hydrochloride, a structural analogue of vitamin B 6 [7, 8]. A slight increase in life expectancy in the experiment was given by 2-mercaptoethanolamine, butylhydroxytoluene, cysteine, 3-hydroxypyridine, centrophenoxin, lactic and gluconic acids, glutathione [9, 10]. However, these chemical compounds are not drugs and have not been used in medicine as geroprotective agents. Vitamins A, C, E increased the life expectancy in the experiment [11, 12, 13]. However, a supersaturation of the body with these vitamins can adversely affect the functional state of organs and systems, causes the rapid development of hypervitaminosis. The known drug β-catechin, which includes vitamins and plant substances with antioxidant effects [14]. The use of this drug in mice with accelerated aging of the SAM-P8 line increased animal survival. Moreover, the mechanisms of geroprotective activity of this combined preparation are not well understood, which limits its introduction into clinical practice. After a 7-month maintenance of SAM mice prone to accelerated aging, animal mortality decreased on a diet with an increased content of carnosine (β-Ala-His) [15]. It should be noted that carnosine is not a drug; its geroprotective properties are not well understood. A slight increase in the average life span of mice was caused by the use of the pineal gland hormone melatonin [16]. The effects of melatonin are associated with its antioxidant properties [17]. However, the use of melatonin in Drosophila melanogaster of the WES line, selected for a high level of embryonic mortality, did not have a geroprotective effect, although it was accompanied by an antioxidant effect. Melatonin is not a drug, but is available as a biologically active food supplement.
В качестве геропротекторного средства используется лекарственный препарат, содержащий новокаин, - геровитал [18] - прототип фармакологического средства и способа профилактики и лечения возрастной патологии. Недостатком этого препарата являются возможное отрицательное действие на функции сердечно-сосудистой системы, аллергизирующее действие, иногда - ухудшение сна, появление чувства беспокойства, боли в мышцах и суставах. As a geroprotective agent, a drug containing novocaine is used - gerovital [18] - a prototype of a pharmacological agent and a method for the prevention and treatment of age-related pathology. The disadvantage of this drug is a possible negative effect on the functions of the cardiovascular system, an allergenic effect, sometimes sleep impairment, the appearance of anxiety, pain in muscles and joints.
Наиболее близким аналогом в отношении способа получения комплекса биологически активных полипептидов из эпифиза мозга животных и заявленного фармакологического средства является способ получения вещества, обладающего геропротекторным и антиаксидантным действием [19], однако при использовании указанного способа при экстракции из ткани эпифиза извлекается большое количество веществ неполипептидной природы, которые и определяют основное действие (противоопухолевое) известного препарата. The closest analogue in relation to the method for producing a complex of biologically active polypeptides from the pineal gland of the animal brain and the claimed pharmacological agent is a method for producing a substance with geroprotective and antioxidant effects [19], however, when using this method, a large number of non-peptide substances are extracted from the pineal gland tissue, which determine the main effect (antitumor) of a known drug.
Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, состоит в расширении видов биологической активности целевого продукта, полученного путем выделения из эпифиза животных комплекса полипептидных фракций, а также в создании фармакологического средства, содержащего целевой продукт, полученный заявляемым способом в качестве активного начала, обладающего антиоксидантным и геропротекторным действием. The problem to which the invention is directed, is to expand the types of biological activity of the target product obtained by isolating a complex of polypeptide fractions from the pineal gland of animals, as well as to create a pharmacological agent containing the target product obtained by the claimed method as an active principle with antioxidant and geroprotective effect.
Согласно заявляемому изобретению комплекс биологически активных полипептидов из эпифиза мозга животных получают путем измельчения эпифиза, экстракции 3%-ным раствором уксусной кислоты в присутствии хлористого цинка, обработки надосадочной жидкости ацетоном, промывания органическим растворителем, причем экстракцию проводят при температуре 7-15oC в течение 48 ч, pH 3,0-4,0, экстракт отделяют от балластных веществ сепарированием, обработку надосадочной жидкости ацетоном проводят в соотношении 1:5 при t = 5oC, отстаивают до образования сформировавшегося осадка, надосадочную жидкость сифонируют, полученный осадок промывают ацетоном в соотношении 1:(15-20), отстаивают до осветления надосадочной жидкости и сифонируют ее, осадок фильтруют и промывают ацетоном при комнатной температуре, высушивают и готовят водный раствор с содержанием пептидов 15-35 мг/мл, полученный раствор перемешивают, центрифугируют, затем высокомолекулярные водорастворимые фракции отделяют ультрафильтрацией через материалы с задерживающей способностью до 15000 Да, полученный целевой продукт лиофилизируют.According to the claimed invention, a complex of biologically active polypeptides from the pineal gland of the animal brain is obtained by grinding the pineal gland, extraction with a 3% solution of acetic acid in the presence of zinc chloride, treatment of the supernatant with acetone, washing with an organic solvent, and the extraction is carried out at a temperature of 7-15 o C for 48 h, pH 3.0-4.0, the extract is separated from the ballast substances by separation, the treatment of the supernatant with acetone is carried out in a ratio of 1: 5 at t = 5 o C, defend to form After sedimentation, the supernatant is siphoned, the precipitate obtained is washed with acetone in a ratio of 1: (15-20), sedimented until the supernatant is clarified and siphoned, the precipitate is filtered and washed with acetone at room temperature, dried and an aqueous solution containing peptides 15-35 mg / ml, the resulting solution is stirred, centrifuged, then high molecular weight water-soluble fractions are separated by ultrafiltration through materials with a retention capacity of up to 15,000 Da, the obtained target product is lyophilized.
Согласно заявляемому изобретению целевой продукт, полученный заявляемым способом, содержит комплекс полипептидов с молекулярной массой от 1000 до 12000 Да. According to the claimed invention, the target product obtained by the claimed method contains a complex of polypeptides with a molecular weight of from 1000 to 12000 Da.
Согласно заявляемому изобретению целевой продукт, полученный заявляемым способом, в ультрафиолетовом спектре имеет полосы с максимумом поглощения при 274 ± 3 нм, что характерно для веществ полипептидной природы. According to the claimed invention, the target product obtained by the claimed method in the ultraviolet spectrum has bands with a maximum absorption at 274 ± 3 nm, which is typical for substances of a polypeptide nature.
Согласно заявляемому изобретению фармакологическое средство содержит фармацевтически приемлемый компонент и активное начало, причем в качестве активного начала содержит эффективное количество целевого продукта, полученного заявляемым способом и представляющего собой комплекс выделенных из эпифиза животных биологически активных полипептидов с молекулярной массой от 1000 до 12000 Да. According to the claimed invention, the pharmacological agent contains a pharmaceutically acceptable component and an active principle, wherein the active principle contains an effective amount of the target product obtained by the claimed method and which is a complex of biologically active polypeptides isolated from the pineal gland of animals with a molecular weight of from 1000 to 12000 Da.
Согласно заявляемому изобретению фармакологическое средство обладает антиоксидантной и геропротекторной активностью. According to the claimed invention, the pharmacological agent has antioxidant and geroprotective activity.
Различные лекарственные формы фармакологического средства могут содержать в качестве фармацевтически приемлемых компонентов - вещества, указанные в Государственной Фармакопее. Various dosage forms of a pharmacological agent may contain, as pharmaceutically acceptable components, the substances indicated in the State Pharmacopoeia.
Согласно заявляемому изобретению способ профилактики и лечения возрастной патологии заключается во введении субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества фармакологического средства, включающего в себя в качестве активного начала целевой продукт, полученный заявляемым способом и представляющий собой комплекс выделенных из эпифиза животных биологически активных полипептидов с молекулярной массой от 1000 до 12000 Да, в дозах от 0,1 до 1,0 мг на 1 кг веса тела в течение 10-40 дней в зависимости от характера течения и тяжести заболевания. According to the claimed invention, a method for the prevention and treatment of age-related pathology consists in administering to a subject in need thereof a therapeutically effective amount of a pharmacological agent comprising, as an active principle, the target product obtained by the claimed method and which is a complex of biologically active polypeptides isolated from the pineal gland of animals with molecular weighing from 1000 to 12000 Yes, in doses of 0.1 to 1.0 mg per 1 kg of body weight for 10-40 days, depending on the nature of the course and severity and diseases.
Во время проведения сравнительных исследований in vivo на экспериментальных моделях были обнаружены новые терапевтические эффекты препарата, полученного заявляемым способом, такие как антиоксидантное и геропротекторное действие. During comparative in vivo studies on experimental models, new therapeutic effects of the preparation obtained by the claimed method, such as antioxidant and geroprotective effects, were discovered.
Изобретение иллюстрируется примером конкретного выполнения способа (пример 1); примерами испытания биологической активности продукта, полученного заявляемым способом (примеры 2, 3, 4); примерами результатов клинического изучения препарата, демонстрирующего его фармакологические свойства и подтверждающего возможность достижения лечебного эффекта (примеры 5, 6). The invention is illustrated by an example of a specific implementation of the method (example 1); test examples of the biological activity of the product obtained by the claimed method (examples 2, 3, 4); examples of the results of a clinical study of a drug that demonstrates its pharmacological properties and confirms the possibility of achieving a therapeutic effect (examples 5, 6).
Пример 1. Example 1
Эпифиз крупного рогатого скота измельчают и загружают в реактор, в котором предварительно приготовлен 3%-ный раствор уксусной кислоты (из расчета на 1 кг сырья - 10 л 3%-ного раствора уксусной кислоты) и охлажден до температуры 7-15oC. По окончании загрузки содержимое реактора тщательно перемешивают, затем добавляют 1%-ный раствор хлористого цинка в 3%-ном растворе уксусной кислоты (из расчета на 1 кг сырья - 10 г хлористого цинка), перемешивают до 45 мин. Экстракцию проводят при температуре 7-15oC в течение 48 ч, pH 3,0-4,0 при периодическом перемешивании.The epiphysis of cattle is crushed and loaded into a reactor in which a 3% solution of acetic acid is preliminarily prepared (based on 1 kg of raw material - 10 l of a 3% solution of acetic acid) and cooled to a temperature of 7-15 o C. at the end of loading, the contents of the reactor are thoroughly mixed, then a 1% solution of zinc chloride in a 3% solution of acetic acid is added (per 1 kg of raw material - 10 g of zinc chloride), stirred for 45 minutes. The extraction is carried out at a temperature of 7-15 o C for 48 h, pH 3.0-4.0 with periodic stirring.
Отделение экстракта от балластных веществ проводят на сепараторе. В экстракт добавляют ацетон из расчета 1:5, смесь охлаждают до 5oC и выдерживают до образования сформировавшегося осадка. Осуществляют сифонирование надосадочной жидкости. Затем доливают ацетон из расчета 15-20 л на 1 кг сырья. Отстаивают до осветления надосадочной жидкости. Осуществляют сифонирование надосадочной жидкости.The separation of the extract from the ballast substances is carried out on a separator. Acetone was added to the extract at a ratio of 1: 5, the mixture was cooled to 5 ° C and kept until a precipitate formed. Siphoning of the supernatant is carried out. Then add acetone at the rate of 15-20 l per 1 kg of raw material. Settle until clarification of the supernatant. Siphoning of the supernatant is carried out.
Проводят фильтрацию. Осадок порционно промывают ацетоном с температурой не более 25oC и высушивают.Filtering is carried out. The precipitate is washed in portions with acetone at a temperature of no more than 25 o C and dried.
Готовят раствор с содержанием пептидов 15-35 мг/мл. Высушенный осадок растворяют в воде. Воду для растворения охлаждают до 15oC и фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. Перемешивают в течение 30 мин, отделяют нерастворимую часть центрифугированием.A solution is prepared with a peptide content of 15-35 mg / ml. The dried precipitate is dissolved in water. The dissolution water is cooled to 15 ° C. and filtered through a filter with a pore diameter of 0.2 μm. It is stirred for 30 minutes, the insoluble part is separated by centrifugation.
Для отделения высокомолекулярной водорастворимой фракции проводят ультрафильтрацию через материалы с задерживающей способностью 15000 Да. После окончания ультрафильтрации целевой продукт лиофилизируют. To separate the high molecular weight water-soluble fraction, ultrafiltration is carried out through materials with a retention capacity of 15,000 Da. After ultrafiltration, the target product is lyophilized.
Для получения фармакологического средства целевой продукт растворяют, добавляют фармацевтически приемлемый компонент, например, изотонический 0,9%-ный раствор натрия хлорида, стерилизуют и лиофилизируют. To obtain a pharmacological agent, the target product is dissolved, a pharmaceutically acceptable component is added, for example, an isotonic 0.9% sodium chloride solution, sterilized and lyophilized.
Препарат представляет собой лиофилизированный порошок белого или белого с желтоватым оттенком цвета и содержит комплекс биологически активных полипептидов от 1000 до 12000 Да. Препарат умеренно растворим в растворе натрия хлорида изотоническом 0,9%-ном и воде. The preparation is a lyophilized powder of white or yellowish-white color and contains a complex of biologically active polypeptides from 1000 to 12000 Da. The drug is sparingly soluble in a solution of sodium chloride isotonic 0.9% and water.
Отсутствие в препарате высокомолекулярных белковых компонентов подтверждает то, что при добавлении к 1%-ному раствору препарата 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты раствор препарата остается прозрачным. The absence of high molecular weight protein components in the preparation confirms that when a 10% solution of trichloroacetic acid is added to a 1% solution of the preparation, the solution of the preparation remains clear.
Для определения в препарате пептидных связей к его раствору добавляют биуретовый реактив. Окрашивание раствора в фиолетовый цвет свидетельствует об имеющихся в препарате пептидных связях. To determine peptide bonds in a preparation, a biuret reagent is added to its solution. Staining the solution with violet color indicates the peptide bonds present in the preparation.
С целью определения в препарате полипептидов и их фракций использовали методы ультрафиолетовой спектрофотометрии, гель-хроматографии, высокоэффективную жидкостную хроматографию и электрофорез в полиакриламидном геле. In order to determine the polypeptides and their fractions in the preparation, the methods of ultraviolet spectrophotometry, gel chromatography, high performance liquid chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis were used.
Ультрафиолетовый спектр раствора препарата в вводе снимали в области длин волн от 250 до 350 нм с максимумом поглощения при 274±3 нм. The ultraviolet spectrum of the drug solution in the input was recorded in the wavelength region from 250 to 350 nm with a maximum absorption at 274 ± 3 nm.
Методом гель-хроматографии на сефадексе G-25 (колонка диаметром 12 мм, объемом 70 мм, уравновешенная 5%-ной уксусной кислотой), установлено, что в состав препарата входят вещества с молекулярной массой не более 12000 Да. Using gel chromatography on Sephadex G-25 (column with a diameter of 12 mm, volume 70 mm, balanced with 5% acetic acid), it was found that the composition of the drug includes substances with a molecular weight of not more than 12,000 Da.
С помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии в градиенте ацетонитрила (сорбент "Lichrosorb C 18", колонка 2х62 см) было установлено, что в состав препарата входят преимущественные полипептидные фракции (от 70 до 90%), а высокомолекулярные компоненты в препарате отсутствуют. Using reverse-phase high-performance liquid chromatography in an acetonitrile gradient (Lichrosorb C 18 sorbent, 2x62 cm column), it was found that the composition of the preparation contains predominant polypeptide fractions (from 70 to 90%), and there are no high molecular weight components in the preparation.
По данным электрофореза в 15%-ном полиакриламидном геле молекулярная масса полипептидов составляет от 1000 до 12000 Да. Аминокислотный состав препарата определяли на анализаторе "LKB-3201" (Швеция). В табл. 1 приведен аминокислотный состав целевого продукта. According to electrophoresis in a 15% polyacrylamide gel, the molecular weight of the polypeptides is from 1000 to 12000 Da. The amino acid composition of the preparation was determined on an LKB-3201 analyzer (Sweden). In the table. 1 shows the amino acid composition of the target product.
Фармакологическое средство (далее препарат) содержит в качестве активного начала эффективное количество целевого продукта, полученного указанным способом и представляющего собой комплекс биологически активных полипептидов с молекулярной массой от 1000 до 12000 Да и фармацевтически приемлемый компонент. A pharmacological agent (hereinafter referred to as a preparation) contains, as an active principle, an effective amount of a target product obtained by the indicated method and which is a complex of biologically active polypeptides with a molecular weight of from 1000 to 12000 Da and a pharmaceutically acceptable component.
При этом в качестве фармацевтически приемлемого компонента можно использовать, например, 0,9%-ный раствор NaCl или гликокол. In this case, for example, a 0.9% NaCl solution or glycol can be used as a pharmaceutically acceptable component.
Во время проведения сравнительных исследований in vivo на экспериментальных моделях были обнаружены новые терапевтические эффекты препарата, полученного заявляемым способом, такие как антиоксидантная и геропротекторная активность. During comparative in vivo studies on experimental models, new therapeutic effects of the preparation obtained by the claimed method, such as antioxidant and geroprotective activity, were discovered.
Изучение возможного токсического влияния на организм препарата, полученного заявляемым способом, проводилось в соответствии с "Требованиями к доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ", 1984 г. (изданы Управлением по внедрению новых лекарственных препаратов и медицинской техники МЗ СССР). The study of the possible toxic effects on the body of the drug obtained by the claimed method was carried out in accordance with the "Requirements for the preclinical study of the general toxic effects of new pharmacological substances", 1984 (published by the Office for the Introduction of New Medicines and Medical Equipment of the USSR Ministry of Health).
Цель изучения состояла в определении переносимых токсических доз препарата, оценке степени и характера патологических изменений в различных органах и системах организма и выявлении зависимости токсических эффектов от дозы и длительности применения препарата. The purpose of the study was to determine tolerable toxic doses of the drug, assess the degree and nature of pathological changes in various organs and systems of the body, and identify the dependence of toxic effects on the dose and duration of use of the drug.
Изучение "острой" токсичности препарата, полученного заявляемым способом, было проведено при однократном введении его животным по методу Кербера. Исследование выполнено на 96 мышах - самцах массой 20-22 г. Животные были разделены на 8 групп по 12 мышей в каждой. Препарат растворяли в стерильном 0,9%-ном растворе NaCl и вводили внутримышечно в дозах от 700 до 1500 мг/кг. Наблюдение за животными вели в течение 14 суток. ЛД50 рассчитывали с помощью графика зависимости гибели животных от вводимой дозы препарата.The study of the "acute" toxicity of the drug obtained by the claimed method was carried out with a single administration to animals by the method of Kerber. The study was performed on 96 mice - males weighing 20-22 g. Animals were divided into 8 groups of 12 mice each. The drug was dissolved in a sterile 0.9% NaCl solution and was administered intramuscularly in doses from 700 to 1500 mg / kg. Observation of the animals was carried out for 14 days. LD 50 was calculated using a graph of the dependence of the death of animals from the administered dose of the drug.
В результате проведенного исследования установлено, что ЛД50 для белых беспородных мышей при однократном введении препарата составляет 992±27.2 мг/кг. Необходимо отметить, что ЛД50 препарата для мышей превышает предполагаемую однократную терапевтическую дозу (0.01-0.1 мг/кг) в среднем в 10000 раз.As a result of the study, it was found that the LD 50 for white outbred mice with a single injection of the drug is 992 ± 27.2 mg / kg. It should be noted that the LD 50 of the drug for mice exceeds the expected single therapeutic dose (0.01-0.1 mg / kg) by an average of 10,000 times.
"Хроническую" токсичность препарата, полученного заявляемым способом, изучали при повторном и длительном введении его крысам и кроликам. Животным ежедневно вводили внутримышечно препарат в дозе 1,0 мг/кг в течение 6 месяцев. Оценивали общее состояние животного, состав и свойства периферической крови, функции сердечно-сосудистой системы, печени, поджелудочной железы, почек и надпочечников. Часть животных подвергали патоморфологическому исследованию с целью оценки состояния различных отделов головного и спинного мозга, сердца, аорты, легких, печени, почек, органов эндокринной и иммунной систем. "Chronic" toxicity of the drug obtained by the claimed method was studied with repeated and prolonged administration to rats and rabbits. Animals were daily injected intramuscularly with a dose of 1.0 mg / kg for 6 months. The general condition of the animal, the composition and properties of peripheral blood, and the functions of the cardiovascular system, liver, pancreas, kidneys, and adrenal glands were evaluated. Some animals were subjected to pathomorphological research to assess the state of various departments of the brain and spinal cord, heart, aorta, lungs, liver, kidneys, organs of the endocrine and immune systems.
При изучении "хронической" токсичности препарата, полученного заявляемым способом, в дозе, которая в 10-100 раз превышала предполагаемую терапевтическую дозу, было установлено, что общее состояние животных, двигательная активность, а также основные функции изученных органов и систем находились в пределах физиологической нормы. При патоморфологическом исследовании различных органов животных также не было обнаружено патологических изменений. Следовательно, препарат, полученный заявляемым способом, при длительном введении животным не обладает токсическими свойствами, препятствующими дальнейшему его применению в качестве лекарственного средства. When studying the "chronic" toxicity of the drug obtained by the claimed method, in a dose that was 10-100 times higher than the expected therapeutic dose, it was found that the general condition of the animals, physical activity, as well as the main functions of the studied organs and systems were within the physiological norm . A pathomorphological study of various animal organs also did not reveal pathological changes. Therefore, the drug obtained by the claimed method, with prolonged administration to animals does not have toxic properties that prevent its further use as a medicine.
Пример 2. Example 2
Для изучения антиоксидантной активности использовали экспериментальные модели, позволяющие оценить способность биологически активных веществ эпифиза проявлять указанную активность. Препарат вводили крысам весом 180-200 г в течение 5 суток подкожно в дозе 0,5 мг. После этого в сыворотке крови животных определяли показатели свободнорадикальных процессов (интенсивность перекисной хемилюминесценции, перекисного окисления липидов, содержание диеновых конъюгатов, шиффовых оснований и др.). Полученные результаты представлены в табл. 2. To study the antioxidant activity, experimental models were used to evaluate the ability of biologically active substances of the pineal gland to exhibit the indicated activity. The drug was administered to rats weighing 180-200 g for 5 days subcutaneously at a dose of 0.5 mg. After that, the parameters of free-radical processes (the intensity of peroxide chemiluminescence, lipid peroxidation, the content of diene conjugates, Schiff bases, etc.) were determined in the blood serum of animals. The results are presented in table. 2.
Показано, что препарат существенно (в 3-4 раза) подавляет интенсивность перекисной хемилюминесценции в сыворотке крови и перекисного окисления липидов, что выражалось, в частности, в значительном снижении (в 4,1 раза) содержания диеновых конъюгатов, тогда как содержание шиффовых оснований имело тенденцию к снижению. Эти результаты свидетельствуют об избирательном ингибирующем влиянии препарата на начальные этапы перекисного окисления липидов. Кроме того, после введения препарата наблюдали достоверное увеличение общей антиокислительной активности сыворотки крови. При этом активность супероксиддисмутазы в сыворотке крови увеличивалась на 19,7% (P < 0,05). В механизме антиоксидантного действия препарата основную роль играет его влияние на ферментативные системы антиоксидантной защиты. It was shown that the drug significantly (3-4 times) suppresses the intensity of serum peroxide chemiluminescence and lipid peroxidation, which was expressed, in particular, in a significant decrease (4.1 times) in the content of diene conjugates, while the content of Schiff bases had downward trend. These results indicate a selective inhibitory effect of the drug on the initial stages of lipid peroxidation. In addition, after drug administration, a significant increase in the total antioxidant activity of blood serum was observed. At the same time, the activity of superoxide dismutase in blood serum increased by 19.7% (P <0.05). In the mechanism of the antioxidant action of the drug, the main role is played by its effect on the enzymatic antioxidant defense systems.
Пример 3. Example 3
Для изучения антиоксидантной активности использовали экспериментальные модели, позволяющие оценить способность биологически активных веществ эпифиза проявлять указанную активность. To study the antioxidant activity, experimental models were used to evaluate the ability of biologically active substances of the pineal gland to exhibit the indicated activity.
Изучено влияние препарата на интенсивность процессов перекисного окисления липидов в тканах мух (D. Melanogaster). The effect of the drug on the intensity of lipid peroxidation in the tissues of flies (D. Melanogaster) was studied.
Препарат добавляли в среду питания личинок мух в концентрации 100 мкг/мл. Продукты перекисного окисления липидов у мух определяли в возрасте 11 суток. Результаты исследования приведены в табл. 3. The preparation was added to the feeding medium of larvae of flies at a concentration of 100 μg / ml. The products of lipid peroxidation in flies were determined at the age of 11 days. The results of the study are given in table. 3.
Применение препарата привело к достоверному уменьшению содержания конъюгированных гидроперекисей и кетодиенов в тканях D. Melanogaster. The use of the drug led to a significant decrease in the content of conjugated hydroperoxides and ketodienes in D. Melanogaster tissues.
Под влиянием препарата достоверно увеличивалась активность каталазы у самцов и самок мух и увеличивалась активность супероксиддисмутазы у самцов дрозофил. Полученные результаты свидетельствуют об отчетливом антиоксидантном действии препарата. Under the influence of the drug, the activity of catalase in male and female flies significantly increased and the activity of superoxide dismutase in male Drosophila increased. The results indicate a distinct antioxidant effect of the drug.
Пример 4. Example 4
Для изучения геропротекторной активности использовали экспериментальные модели, позволяющие оценить способность биологически активных веществ эпифиза проявлять указанную активность. To study geroprotective activity, experimental models were used to evaluate the ability of biologically active substances of the pineal gland to exhibit the indicated activity.
Известно, что антиоксиданты обладают широким спектром действия на различные физиологические системы организма, в частности, при введении в организм они влияют на процессы обмена веществ, энергетический обмен, иммунитет и обладают геропротекторными свойствами. В эксперименте на различных видах животных была изучена эффективность применения заявляемого препарата как геропротектора. Полученные результаты приведены в табл. 4. It is known that antioxidants have a wide spectrum of action on various physiological systems of the body, in particular, when introduced into the body, they affect the metabolism, energy metabolism, immunity and have geroprotective properties. In an experiment on various animal species, the effectiveness of the use of the claimed drug as a geroprotector was studied. The results are shown in table. 4.
Введение препарата крысам и мышам способствовало увеличению средней продолжительности жизни и замедляло скорость старения животных. Сходные результаты были получены при использовании препарата у D. Melanogaster. Следует отметить, что при изучении на крысах и дрозофилах было выявлено, что геропротекторный эффект препарата коррелировал с его высоким антиоксидантным потенциалом. The introduction of the drug to rats and mice contributed to an increase in average life expectancy and slowed the rate of aging of animals. Similar results were obtained when using the drug in D. Melanogaster. It should be noted that when studying on rats and Drosophila, it was revealed that the geroprotective effect of the drug correlated with its high antioxidant potential.
Выявленные в результате экспериментального доклинического исследования новые свойства препарата позволяют считать показанным его применение при ряде заболеваний, развивающихся с возрастом, таких как сердечно-сосудистые заболевания, гормональные и метаболические нарушения, диабет у пожилых, дистрофические заболевания костей и т.д. The new properties of the drug revealed as a result of an experimental preclinical study allow its use to be considered indicated for a number of diseases developing with age, such as cardiovascular diseases, hormonal and metabolic disorders, diabetes in the elderly, degenerative bone diseases, etc.
Приведенные ниже примеры клинического применения препарата подтверждают возможность его применения в клинической практике с достижением указанного терапевтического эффекта. The following examples of clinical use of the drug confirm the possibility of its use in clinical practice with the achievement of the indicated therapeutic effect.
Пример 5. Example 5
Изучена эффективность препарата у 57 женщин в возрасте от 40 до 55 лет, страдающих климактерической миокардиопатией и ишемической болезнью сердца. The effectiveness of the drug was studied in 57 women aged 40 to 55 years, suffering from climacteric myocardiopathy and coronary heart disease.
Препарат вводили пациентам внутримышечно ежедневно в дозе 10 мг (курсовая доза составила 100 мг). Эффективность препарата оценивали через 10-14 дней после окончания лечения. Применение препарата снижало проявление вегетососудистых нарушений у женщин. Гормональные исследования показали снижение уровня эстрадиола и повышение уровня гонадотропных гормонов в крови, что сопровождалось улучшением клинических данных. После лечения препаратом уровень эстрадиола у больных составил 64,75 ± 12,62 нм/мл, что было достоверно ниже, чем у больных, не получавших препарат. После введения препарата у больных улучшалась функция миокарда. До лечения наиболее характерными были нарушения в виде отрицательных, изоэлектрических или двухфазных зубцов "T" в грудных отведениях V1 - V3 электрокардиограммы. Нарушение автоматизма у больных в основном проявлялось в виде синусовой тахикардии. Кроме того, у ряда больных наблюдали нарушения возбудимости миокарда по типу суправентрикулярной экстрасистолии и пароксизмальной тахикардии. Кроме того, характерным признаком нарушений на электрокардиограмме при ишемической болезни сердца были горизонтальная депрессия сегмента ST в отведениях V3 - V6, инверсия зубца "T", блокада правой и левой ножек пучка Гиса, снижение вольтажа зубцов и удлинение систолического показателя.The drug was administered to patients intramuscularly daily at a dose of 10 mg (course dose was 100 mg). The effectiveness of the drug was evaluated 10-14 days after the end of treatment. The use of the drug reduced the manifestation of vegetovascular disorders in women. Hormonal studies showed a decrease in estradiol levels and an increase in the level of gonadotropic hormones in the blood, which was accompanied by an improvement in clinical data. After treatment with the drug, the estradiol level in patients was 64.75 ± 12.62 nm / ml, which was significantly lower than in patients who did not receive the drug. After drug administration, myocardial function improved in patients. Before treatment, the most characteristic were disturbances in the form of negative, isoelectric or biphasic "T" teeth in the chest leads V 1 - V 3 of the electrocardiogram. The violation of automatism in patients was mainly manifested in the form of sinus tachycardia. In addition, in a number of patients, myocardial excitability was observed according to the type of supraventricular extrasystole and paroxysmal tachycardia. In addition, a horizontal ST depression in leads V 3 - V 6 , inversion of the T wave, blockage of the right and left legs of the bundle of His, a decrease in the voltage of the teeth, and lengthening of the systolic index were a characteristic sign of disturbances in the electrocardiogram for coronary heart disease.
Применение препарата у больных способствовало нормализации показателей электрокардиограммы как в покое, так и при физических нагрузках. На фоне обратного развития клинических проявлений заболевания наблюдали положительную динамику кардиограммы - улучшение функции автоматизма, исчезновение синусовой тахикардии, улучшение периода реполяции в виде положительной динамики конечной части желудочкового комплекса, исчезновение суправентрикулярной и желудочковой экстрасистолии и пароксизмов желудочковой тахикардии. По данным велоэргометрии толерантность к физической нагрузке у больных после применения препарата повысилась как по мощности пороговой нагрузки и времени нагрузки, так и по объему выполняемой работы. Улучшение показателей гемодинамики у больных после лечения свидетельствовало об оптимизации сократительной функции миокарда и повышении экономичности работы сердца. The use of the drug in patients contributed to the normalization of electrocardiogram indices both at rest and during physical exertion. Against the background of the reverse development of the clinical manifestations of the disease, a positive dynamics of the cardiogram was observed - an improvement in the function of automatism, the disappearance of sinus tachycardia, an improvement in the repolation period in the form of positive dynamics in the final part of the ventricular complex, the disappearance of supraventricular and ventricular extrasystole and paroxysms of ventricular tachycardia. According to bicycle ergometry, exercise tolerance in patients after the use of the drug increased both in terms of the power of the threshold load and load time, and in the amount of work performed. The improvement in hemodynamic parameters in patients after treatment indicated the optimization of myocardial contractile function and increased efficiency of the heart.
При изучении антиокислительной и антирадикальной активности сыворотки больных до лечения было установлено, что с возрастом происходит снижение общей антиокислительной и антирадикальной активности крови. После лечения наблюдалось достоверное повышение показателей общей антиокислительной и антирадикальной активности сыворотки крови, уменьшение содержания продуктов перекисного окисления липидов, а также повышение активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы. Полученные результаты приведены в табл. 5. When studying the antioxidant and antiradical activity of the serum of patients before treatment, it was found that with age there is a decrease in the total antioxidant and antiradical activity of the blood. After treatment, there was a significant increase in the total antioxidant and antiradical activity of blood serum, a decrease in the content of lipid peroxidation products, and an increase in the activity of superoxide dismutase and glutathione peroxidase. The results are shown in table. 5.
Полученные результаты клинического изучения свидетельствуют об эффективности использования препарата для коррекции системы антиоксидантной защиты при преждевременном старении и возрастной патологии. The results of a clinical study indicate the effectiveness of using the drug to correct the antioxidant defense system in premature aging and age-related pathology.
Пример 6. Example 6
Изучено влияние препарата на состояние сердечно-сосудистой системы и процессы обмена у 33 больных (17 мужчин и 16 женщин) с инсулиннезависимым сахарным диабетом и длительностью заболевания 6,0 ± 1,5 года. Средний возраст пациентов составил 52,8 ± 1,8 года. По результатам обследование в соответствии с критериями ВОЗ у всех больных была установлена гипертоническая болезнь I - II стадии. С целью лечения препарат вводили пациентам внутримышечно, ежедневно по 10 мг в течение 10 дней. Результаты, полученные при изучении показателей углеводного обмена, приведены в табл. 6. The effect of the drug on the state of the cardiovascular system and metabolic processes was studied in 33 patients (17 men and 16 women) with non-insulin-dependent diabetes mellitus and a disease duration of 6.0 ± 1.5 years. The average age of the patients was 52.8 ± 1.8 years. According to the results of the examination, in accordance with the WHO criteria, hypertension of the I-II stage was established in all patients. For the purpose of treatment, the drug was administered to patients intramuscularly, 10 mg daily for 10 days. The results obtained in the study of carbohydrate metabolism are shown in table. 6.
После введения препарата было отмечено снижение тощаковой гликемии на 15% (на 2-й неделе), на 22% (на 4-й неделе) и на 29,4% к 12-й неделе наблюдения. After administration of the drug, a decrease in fasting glycemia was noted by 15% (at the 2nd week), by 22% (at the 4th week) and by 29.4% by the 12th week of observation.
Постпрендиальная гликемия снижалась на 18,2% через 2 недели, на 28% через 4 недели и на 41% к 12-й неделе наблюдения за пациентами. Postprandial glycemia decreased by 18.2% after 2 weeks, by 28% after 4 weeks and by 41% by the 12th week of patient monitoring.
Кроме того, у пациентов после лечения препаратом наблюдалось достоверное снижение уровня гликозилированного гемоглобина к 12-й неделе наблюдения. В то же время показатели гликемии, гликозурии и гликозилированного гемоглобина у пациентов контрольной группы (24 человека) достоверно не изменялись на протяжении всего периода наблюдения. In addition, in patients after treatment with the drug, a significant decrease in the level of glycosylated hemoglobin was observed by the 12th week of observation. At the same time, the indicators of glycemia, glycosuria and glycosylated hemoglobin in patients of the control group (24 people) did not significantly change during the entire observation period.
Таким образом, у больных с инсулиннезависимым сахарным диабетом применение препарата оказывало положительное влияние на углеводный обмен, нарушение которого происходит при старении организма. В этих условиях препарат проявлял выраженное геропротекторное действие. Thus, in patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus, the use of the drug had a positive effect on carbohydrate metabolism, a violation of which occurs with the aging of the body. Under these conditions, the drug showed a pronounced geroprotective effect.
Источники информации
1. Harman D. Aging and disease: extending functional life span // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1996. - Vol. 786. - P. 321-336.Sources of information
1. Harman D. Aging and disease: extending functional life span // Ann. NY Acad. Sci. - 1996. - Vol. 786. - P. 321-336.
2. Pierpaoli W. Neuroimmunomodulation of aging: a program in the pineal gland // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1998. - Vol. 840. - P. 491-497. 2. Pierpaoli W. Neuroimmunomodulation of aging: a program in the pineal gland // Ann. N.Y. Acad Sci. - 1998. - Vol. 840. - P. 491-497.
3. Yu B. P., Yang R. Critical evaluation of the free radical theory of aging: a proposal for the oxidative stress hypothesis // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1996. - Vol. 786. - P. 1-11. 3. Yu B. P., Yang R. Critical evaluation of the free radical theory of aging: a proposal for the oxidative stress hypothesis // Ann. N.Y. Acad Sci. - 1996. - Vol. 786. - P. 1-11.
4. Harman D. Free radical theory of aging: effect of free radical reaction inhibitors on the mortality rate of male LAF1 mice // J. Gerontol. - 1968. - Vol. 23. - P. 476. 4. Harman D. Free radical theory of aging: effect of free radical reaction inhibitors on the mortality rate of male LAF1 mice // J. Gerontol. - 1968. - Vol. 23. - P. 476.
5. Машковский М. Д. Лекарственные средства (Пособие для врачей). - М.: Медицина, 1993. - Ч. II, гл. 10. - с. 213-215. 5. Mashkovsky M. D. Medicines (Manual for doctors). - M .: Medicine, 1993. - Part II, Ch. 10. - p. 213-215.
6. Comfort A., Youhotsky-Gore J., Pathmanathan K. Effect of ethoxyquin on the longevity of C3H mice // Nature. - 1971. - Vol. 229. - P. 254-255. 6. Comfort A., Youhotsky-Gore J., Pathmanathan K. Effect of ethoxyquin on the longevity of C3H mice // Nature. - 1971. - Vol. 229. - P. 254-255.
7. Обухова Л.К. Химические геропротекторы, увеличение продолжительности жизни // Усп. химии. - 1975. - Т. 44. - с. 1914-1925. 7. Obukhova L.K. Chemical geroprotectors, increase in life expectancy // Usp. chemistry. - 1975. - T. 44. - p. 1914-1925.
8. Эмануэль Н. М. , Обухова Л.К., Смирнов Л.Д., Бунто Т.В. Замедление процесса старения у лабораторных мышей при воздействии хлоргидрата 2-этил-6-метил-3-оксипиридина // Изв. АН СССР. Сер. биол. - 1977. - N 1. - С. 32-37. 8. Emanuel N.M., Obukhova L.K., Smirnov L.D., Bunto T.V. Slowing down the aging process in laboratory mice when exposed to 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine hydrochloride // Izv. USSR Academy of Sciences. Ser. biol. - 1977. - N 1. - S. 32-37.
9. Обухова Л. К., Эмануэль Н.М. Молекулярные механизмы замедления старения антиоксидантами // Общие проблемы биологии / ВИНИТИ. - 1984. - Т.4. - С.44-80. 9. Obukhova L.K., Emanuel N.M. Molecular mechanisms of aging retardation by antioxidants // General problems of biology / VINITI. - 1984.- T.4. - S. 44-80.
10. Фролькис В.В., Мурадян Х.К. Экспериментальные пути продления жизни. - Л.: Наука, 1988. 10. Frolkis V.V., Muradyan Kh.K. Experimental ways to extend life. - L .: Science, 1988.
11. Baker G.T. Effect of various antioxidants on aging in Drosophila // Toxicol. Ind. Health. - 1993. - Vol. 9. - P. 163-186. 11. Baker G.T. Effect of various antioxidants on aging in Drosophila // Toxicol. Ind. Health - 1993. - Vol. 9. - P. 163-186.
12. Epstein J., Himmelhoch S., Gershon D. Studies on ageing in nematodes. III. Electron-microscopical studies on age-associated cellular damage // Mech. Age. Dev. - 1972. - P. 245-255. 12. Epstein J., Himmelhoch S., Gershon D. Studies on ageing in nematodes. III. Electron-microscopical studies on age-associated cellular damage // Mech. Age Dev. - 1972.- P. 245-255.
13. Massie H.R., Aiello V.R., Williams T.R. et al. Effect of vitamin A on longevity // Exp. Gerontol. - 1993. - Vol. 28. - P. 601-610. 13. Massie H.R., Aiello V.R., Williams T.R. et al. Effect of vitamin A on longevity // Exp. Gerontol. - 1993. - Vol. 28. - P. 601-610.
14. Kumari M. V., Yoneda Т., Hiramatsu M. Effect of "beta CATECHIN" on the life span of senescence accelerated mice (SAM-P8 strain) // Biochem. Mol. Biol. Int. - 1997. - Vol. 41, N 5. - P. 1005-1011. 14. Kumari M. V., Yoneda T., Hiramatsu M. Effect of "beta CATECHIN" on the life span of senescence accelerated mice (SAM-P8 strain) // Biochem. Mol. Biol. Int. - 1997. - Vol. 41, N 5. - P. 1005-1011.
15. Болдырев A.A. Карнозин. Биологическое значение и возможности применения в медицине. - M.: Изд-во МГУ, 1998. - 320 с. 15. Boldyrev A.A. Carnosine. Biological significance and applicability in medicine. - M .: Publishing House of Moscow State University, 1998 .-- 320 p.
16. Pierpaoli W., Regelson W. Pineal control of aging: effect of melatonin and pineal grafting in aging mice // Proc. Nat. Acad. Sci. USA - 1986. - Vol. 91.- P. 787-791. 16. Pierpaoli W., Regelson W. Pineal control of aging: effect of melatonin and pineal grafting in aging mice // Proc. Nat. Acad Sci. USA - 1986. - Vol. 91.- P. 787-791.
17. Reiter R., Tang L., Garcia J.J., Mucoz H.A. Pharmacological actions of melatonin in oxygen radical pathophysiology // Life Sci. - 1997. - Vol. 60, N 25. - P. 2255-2271. 17. Reiter R., Tang L., Garcia J.J., Mucoz H.A. Pharmacological actions of melatonin in oxygen radical pathophysiology // Life Sci. - 1997. - Vol. 60, N 25. - P. 2255-2271.
18. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - M.: Медицина, 1993. - Ч. I, гл. 3. - С. 375. 18. Mashkovsky M.D. Medicines - M .: Medicine, 1993. - Part I, ch. 3 .-- S. 375.
19. Анисимов В.Н., Арутюнян А.В, Хавинсон В.Х. / / Докл. АН - 1997. - Т. 352. - N 6. - С. 831-833.2 19. Anisimov V.N., Harutyunyan A.V., Khavinson V.Kh. // Dokl. AN - 1997. - T. 352. - N 6. - S. 831-833.2
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000116823/14A RU2163129C1 (en) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | Method of preparing animal-origin complex of biologically-active polypeptides exhibiting antioxidant and geroprotection activities, pharmacological agent, and method for utilization thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000116823/14A RU2163129C1 (en) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | Method of preparing animal-origin complex of biologically-active polypeptides exhibiting antioxidant and geroprotection activities, pharmacological agent, and method for utilization thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2163129C1 true RU2163129C1 (en) | 2001-02-20 |
Family
ID=20236906
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000116823/14A RU2163129C1 (en) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | Method of preparing animal-origin complex of biologically-active polypeptides exhibiting antioxidant and geroprotection activities, pharmacological agent, and method for utilization thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2163129C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA010720B1 (en) * | 2006-01-31 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гармония" | Method for preparing a medicament for supporting therapy exhibiting tissue-specific activity, and a medicament obtained thereof (embodiments) |
| EA010737B1 (en) * | 2006-06-22 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Medicament having heteroprotective activity and method for preparing thereof |
| RU2709524C1 (en) * | 2019-02-07 | 2019-12-18 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Wound healing agent |
| RU2732688C1 (en) * | 2020-02-06 | 2020-09-22 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of treating polycystic ovary syndrome with non-hormonal preparations |
-
2000
- 2000-06-29 RU RU2000116823/14A patent/RU2163129C1/en active IP Right Revival
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. АНИСИМОВ В.Н. и др. Роль пептидов эпифиза в регуляции гомеостаза. - Успехи современной биологии, 1993, т.113, вып.6, с.752-762. 2. МАШКОВСКИЙ М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1993, ч.1, гл.3, с.375. 3. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA010720B1 (en) * | 2006-01-31 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гармония" | Method for preparing a medicament for supporting therapy exhibiting tissue-specific activity, and a medicament obtained thereof (embodiments) |
| EA010737B1 (en) * | 2006-06-22 | 2008-10-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Medicament having heteroprotective activity and method for preparing thereof |
| RU2709524C1 (en) * | 2019-02-07 | 2019-12-18 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Wound healing agent |
| RU2732688C1 (en) * | 2020-02-06 | 2020-09-22 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Курский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of treating polycystic ovary syndrome with non-hormonal preparations |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0655460B1 (en) | Pharmacotherapeutical use of glutathione derivatives | |
| US20080020988A1 (en) | Brain cell- or nerve cell-protecting agents comprising medicinal ginseng | |
| KR100245482B1 (en) | Active oxygen scavenger | |
| JPH1087483A (en) | Use of l-carnitine or its derivative and antioxidation agent for prevention and treatment of disease caused by oxidizing stress on nervous system and cardiovascular system | |
| RU2163129C1 (en) | Method of preparing animal-origin complex of biologically-active polypeptides exhibiting antioxidant and geroprotection activities, pharmacological agent, and method for utilization thereof | |
| CN104519913A (en) | Composition for improving or promoting hair growth containing, as active ingredients, photosensitizer irradiated with light and peptide, and method using same | |
| EP0545972A1 (en) | Therapeutically active mixture of glutathion and anthocyan compounds. | |
| RU2356573C1 (en) | Anti-ishemic and antihypoxic agent | |
| YOSHIKAWA et al. | Antioxidant therapy in digestive diseases | |
| RU2762221C1 (en) | Complex agent with hepatoprotective activity for sheep | |
| WO2009053850A2 (en) | Herbal extracts for treatment of chronic wounds | |
| JP2008504231A (en) | Oxidized dibenzo-alpha-pyrone chromoprotein | |
| RU2405558C2 (en) | Medication for treatment of hypoxic and toxic mitochondrial dysfunctions and method of its obtaining | |
| EA010735B1 (en) | Medicament normalising reproductive male function and method for preparing thereof | |
| Alfarajat et al. | Reno-protective effect of Citrus sinensis by regulating antioxidant capability and gene expression in adenine-induced chronic kidney in rats | |
| Falih et al. | Medical Ozone Treatment Alleviate Blood Oxidative Stress And Pancreas Damage In an Alloxan-Induced Diabetes Model in Rats | |
| KR100502835B1 (en) | Compositions comprising extract of ganoderma lucidum, oleamide and its structural analogue as an effective component for preventing or treating dementia | |
| RU2303454C1 (en) | Preparation for normalizing female reproductive function and method for its obtaining | |
| Öztürk et al. | Effect of melatonin treatment on liver and thymus zinc levels in young and middle‐aged rats | |
| GB2124900A (en) | Product for stimulating the synthesis of melanotic pigment in the skin | |
| RU2228744C2 (en) | Antioxidant agent | |
| Seliem et al. | The physiological Effects of Royal Jelly Administration on Hypercholesterolemic Male Albino Rats | |
| Wu et al. | Acute hyperglycemia impedes spinal cord injury recovery via triggering excessive ferroptosis of endothelial cells | |
| KR20220122913A (en) | Composition for anti-inflammation including extract of beet as an effective ingredient | |
| Ilango et al. | Effect of Naga Parpam, a metallic drug of Siddha medicine, on lipid peroxidation, antioxidant enzymes and tissues of liver in Wistar rats |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HE4A | Notice of change of address of a patent owner | ||
| QZ41 | Official registration of changes to a registered agreement (patent) |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20010419 Effective date: 20120627 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190630 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20200302 |