RU2080114C1 - Препарат для лечения туберкулеза - Google Patents
Препарат для лечения туберкулеза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2080114C1 RU2080114C1 RU94023447/14A RU94023447A RU2080114C1 RU 2080114 C1 RU2080114 C1 RU 2080114C1 RU 94023447/14 A RU94023447/14 A RU 94023447/14A RU 94023447 A RU94023447 A RU 94023447A RU 2080114 C1 RU2080114 C1 RU 2080114C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- phenazide
- animals
- tuberculosis
- ginc
- drug
- Prior art date
Links
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 title claims description 20
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 33
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 31
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 abstract description 7
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 abstract description 7
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 abstract description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 abstract description 4
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 abstract description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 2
- YSAKFRWFAVUMQK-UHFFFAOYSA-N hydrazine;pyridine-4-carboxylic acid Chemical compound NN.OC(=O)C1=CC=NC=C1 YSAKFRWFAVUMQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 37
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 20
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 11
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 7
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 7
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 7
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 7
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 7
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- TWBYWOBDOCUKOW-UHFFFAOYSA-N isonicotinic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=NC=C1 TWBYWOBDOCUKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 5
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710202061 N-acetyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 208000013210 hematogenous Diseases 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 2
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 2
- -1 iron ion Chemical class 0.000 description 2
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 208000008128 pulmonary tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 4-aminosalicylic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006049 Bovine Tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- DYDCUQKUCUHJBH-UWTATZPHSA-N D-Cycloserine Chemical compound N[C@@H]1CONC1=O DYDCUQKUCUHJBH-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- DYDCUQKUCUHJBH-UHFFFAOYSA-N D-Cycloserine Natural products NC1CONC1=O DYDCUQKUCUHJBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013453 Disseminated tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 238000001159 Fisher's combined probability test Methods 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 201000006836 Miliary Tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- VRDIULHPQTYCLN-UHFFFAOYSA-N Prothionamide Chemical compound CCCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 VRDIULHPQTYCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 229960004909 aminosalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 229960003077 cycloserine Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 description 1
- 229960002001 ethionamide Drugs 0.000 description 1
- AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N ethionamide Chemical compound CCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003918 potentiometric titration Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- XTUSEBKMEQERQV-UHFFFAOYSA-N propan-2-ol;hydrate Chemical compound O.CC(C)O XTUSEBKMEQERQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000918 protionamide Drugs 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000002411 thermogravimetry Methods 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 description 1
- 230000001549 tubercolostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Предлагается для лечения туберкулеза препарат, представляющий собой комплекс гидразина изоникотиновой кислоты с двухвалентным железом форм-лы:
В экспериментах на животных установлено, что он менее токсичен и более активен, чем изониазид, обладает пролонгированным действием, не образует в организме токсичных метаболитов, главное оказывает выраженное бактериостатическое действие на штаммы микобактерий туберкулеза, устойчивых к действию изониазида и стрептомицина. 10 табл.
В экспериментах на животных установлено, что он менее токсичен и более активен, чем изониазид, обладает пролонгированным действием, не образует в организме токсичных метаболитов, главное оказывает выраженное бактериостатическое действие на штаммы микобактерий туберкулеза, устойчивых к действию изониазида и стрептомицина. 10 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, конкретно к лекарственным противотуберкулезным средствам.
В настоящее время для лечения туберкулеза используют 2 группы препаратов:
а) Препараты 1 ряда (основные антибактериальные производные изоникотиновой кислоты, п-аминосалициловой кислоты, антибиотики - стрептомицин, рифалепицин).
а) Препараты 1 ряда (основные антибактериальные производные изоникотиновой кислоты, п-аминосалициловой кислоты, антибиотики - стрептомицин, рифалепицин).
б) Препараты II ряда (резервные этионамид, протионамид, этамбутол, циклосерин, канамицин и др.).[Машковский М.Д. Лекарственные средства, М. Медицина, 1993, ч. II, с. 366 367]
Недостатком препаратов I ряда является то, что при применении этих высокоактивных лекарств довольно быстро развиваются устойчивые микобактерии туберкулеза, а препараты II ряда для самостоятельного применения мало эффективны.
Недостатком препаратов I ряда является то, что при применении этих высокоактивных лекарств довольно быстро развиваются устойчивые микобактерии туберкулеза, а препараты II ряда для самостоятельного применения мало эффективны.
Наиболее близким по технической сущности к изобретению является препарат изониазид гидразид изоникотиновой кислоты (ГИНК) [Машковский М.Д. Лекарственные средства, М. Медицина, 1993, с. 367 -369] Будучи самым эффективным препаратом для лечения туберкулеза, ГИНК обладает тем недостатком, что при его применении довольно быстро развиваются микобактерии туберкулеза, устойчивые к ГИНК, кроме того, при его применении в организме образуются некоторые достаточно токсичные метаболиты, что приводит к нежелательному побочному действию препарата.
Цель изобретения создание препарата, не уступающего ГИНК по противотуберкулезной активности, но оказывающего бактериостатическое действие на штаммы микобактерий туберкулеза, устойчивых к действию изониазида и стрептомицина и не образующих в организме токсичных метаболитов.
Цель достигается применением в качестве лекарственного противотуберкулезного препарата неописанного ранее комплекса ГИНК с двухвалентным железом структуры
условно названным нами "Феназидом".
условно названным нами "Феназидом".
Феназид получают прибавлением к 0,2 М раствору ГИНК в дистиллированной воде 0,2 М раствора сульфата железа в дистиллированной воде. Выпавший осадок оранжевого цвета отфильтровывают, промывают дистиллированной водой, высушивают в сушильном шкафу при 40 50oC до постоянного веса. Выход Феназида 76% от теоретического.
C6H11FeN3O7S
Вычислено, C 22,15; H 3,88; N 12,92; Fe 17,23.
Вычислено, C 22,15; H 3,88; N 12,92; Fe 17,23.
Найдено, C 23,04; H 4,13; N 13,08; Fe 16,62.
Найдено содержание воды в Феназиде (определение по методу Фишера) - 11,6% вычислено 11,07%
При излучении спектральных характеристик в воде и 0,2 M HCl были получены следующие данные (фиг. 1 4).
При излучении спектральных характеристик в воде и 0,2 M HCl были получены следующие данные (фиг. 1 4).
Данные спектрального анализа показывают, что в воде спектр Феназида имеет два максимума поглощения 200 нм и 262 нм, спектр ГИНК в тех же условиях - 212 и 262 нм. Спектры поглощения Феназида и ГИНК в 0,2 M HCl полностью совпадают максимумы поглощения 215 и 265 нм. Это указывает на два обстоятельства:
1. Комплекс ГИНК с сульфатом железа (II) представляет собой внутрикомплексное соединение следующей структуры:
2. Комплекс ГИНК с сульфатом железа (II) полностью диссоциирует в 0,2 M HCl на ГИНК и ион железа.
1. Комплекс ГИНК с сульфатом железа (II) представляет собой внутрикомплексное соединение следующей структуры:
2. Комплекс ГИНК с сульфатом железа (II) полностью диссоциирует в 0,2 M HCl на ГИНК и ион железа.
Результаты, полученные при изучении данных УФ-спектроскопии, свидетельствующие о том, что комплекс ГИНК с сульфатом железа является внутрикомплексным соединением указанной структуры, подтверждается данными ИК-спектроскопии (фиг.5). ИК-спектры были получены в вазелиновом масле.
Исследование Феназида в сравнении с ГИНК методом жидкостной хроматографии высокого давления (сорбент Нуклеосил C18, растворитель 32% метанол, pH 6,25) показывает, что Феназид является индивидуальным (100%) веществом - внутрикомплексным соединением ГИНК с сульфатом железа (II) (фиг.6, 7).
Хроматографические исследования были приведены на хроматографе "Миллипор Пат. N 52507" (США).
Масс-спектрометрическое исследование Феназида на приборе МИ-1201 Э (СССР) показало, что в образцах препарата, переданных на исследование, были обнаружены три масс-пика, идентифицированных как железо (М=56), ГИНК (М=137) и феназид (М=289). Масса 289 соответствует молекулярной массе Феназида без учета двух молекул воды (325 36=289).
Методом потенциометрического титрования определена константа устойчивости Феназида в водных растворах при физиологических значениях pH, равная 6,9522. Это позволяет сделать вывод, что Феназид будет всасываться в желудочно-кишечном тракте животных и человека без разложения и диссоциации на компоненты.
Определен коэффициент распределения Феназида "масло-вода", равный 1,48. Это позволяет сделать вывод, что Феназид должен хорошо проникать через липидную оболочку микобактерии туберкулеза.
При изучении кинетики окисления Феназида в водном растворе при комнатной температуре кислородом воздуха (с учетом данных термогравиметрического анализа) было показано, что окисление препарата идет по схеме:
образуя бактериостатическое соединение изоникотиновую кислоту и нетоксичные продукты (азот, протоны, ионы железа).
образуя бактериостатическое соединение изоникотиновую кислоту и нетоксичные продукты (азот, протоны, ионы железа).
Фармакологическое изучение Феназида
Экспериментальное изучение бактериостатической и химиотерапевтической активности Феназида проводили в экспериментах "in vitro" и "in vivo" на культурах микробактерий туберкулеза человеческого и бычьего типов, свежевыделенных от больных туберкулезом легких, устойчивых к известным противотуберкулезным препаратам ГИНК и стрептомицину, а также на моделях заболевания.
Экспериментальное изучение бактериостатической и химиотерапевтической активности Феназида проводили в экспериментах "in vitro" и "in vivo" на культурах микробактерий туберкулеза человеческого и бычьего типов, свежевыделенных от больных туберкулезом легких, устойчивых к известным противотуберкулезным препаратам ГИНК и стрептомицину, а также на моделях заболевания.
Изучение бактериостатической активности Феназида в эксперименте "in vitro"
Культуру микобактерий туберкулеза засевали по 0,2 мл по V оптическому (казеиново-солевую). Концентрация микобактерий составляла при этом 1•107 млн клеток в 1 мл питательной среды.
Культуру микобактерий туберкулеза засевали по 0,2 мл по V оптическому (казеиново-солевую). Концентрация микобактерий составляла при этом 1•107 млн клеток в 1 мл питательной среды.
Раствор Феназида в различных концентрациях (от 10 до 100 мкг/мл) вводили в культуры микобактерий и выдерживали в стерильных условиях в течение 10 дн при 37oC. По истечении указанного срока надосадочную жидкость удаляли, из осадка готовили фиксированные мазки, окрашивали их по Цилю-Нильсену и в 100 полях зрения считали количество образовавшихся "кос". Результаты исследования обрабатывали статически.
Установлено, что Феназид в концентрации 40 мкг/мл обладает бактерицидным, а в концентрации 10 и 20 мкг/мл бактериостатическим действием в отношении чувствительных к ГИНК лабораторных штаммов микобактерий туберкулеза. Особенно ценным представляется его антибактериальное действие в отношении штаммов, свежевыделенных от больных туберкулезом легких, устойчивых к воздействию высокоактивных туберкулостатиков ГИНК и антибиотика стрептомицина. В этом случае Феназид имеет такую же активность 40 мкг/мл, что и по отношению к чувствительным микобактериям туберкулеза, табл. 1-3.
Изучение химиотерапевтической активности Феназида при длительном лечении туберкулеза у белых мышей
Для проведения химиотерапевтического эксперимента были использованы беспородные белые мыши-самцы, массой 20-22 г. Животных заражали внутривенно (в хвостовую боковую вену) культурой микобактерий туберкулеза человеческого типа в дозе 0,025 мг в 0,5 мл.
Для проведения химиотерапевтического эксперимента были использованы беспородные белые мыши-самцы, массой 20-22 г. Животных заражали внутривенно (в хвостовую боковую вену) культурой микобактерий туберкулеза человеческого типа в дозе 0,025 мг в 0,5 мл.
Феназид вводили внутрь в дозах 5,0 мг/кг и 10,0 мг/кг, каждую дозу изучали на 10 животных; 10 мышей служили контролем.
В результате эксперимента установлено: контрольные животные пали в течение 1-го месяца после начала эксперимента. Причина гибели - генерализованный гематогенно-дессиминированный туберкулез.
В 1-ой экспериментальной группе, получавшей ежедневно 5 мг/кг Феназида, из 10 мышей в течение месяца али 2 особи, у остальных 8 животных индекс поражения туберкулезом составил от 0,5 до 2-х единиц, что соответствует присутствию единичных туберкулезных очагов (табл. 4).
Микробиологическое исследование органов животных через 1 месяц лечения Феназидом показало, что у 6 обследованных мышей в гомогенате внутренних органов не удалось выявить микобактерий туберкулеза как методом посева, так и методом бактериоскопии; у 2-х животных микобактерии туберкулеза были обнаружены в гомогенате селезенки и легких. При посеве материала рост микобактерий выявлен не бал.
Во 2-й экспериментальной группе белых мышей, которые получали Феназид внутрь в дозе 10 мг/кг ежедневно в течение месяца, все животные остались живы.
При вскрытии отмечались единичные туберкулезные очаги в селезенке, в легочной ткани были увеличены бронхиальные лимфатические узлы. В печени туберкулезных изменений выявлено не было. Микобиологическое обследование внутренних органов белых мышей, получавших Феназид в дозе 10 мг/кг, показало, что в гомогенатах внутренних органов животных микобактерий туберкулеза обнаружено не было (табл. 4).
Таким образом, индекс эффективности химиотерапии Феназидом в этом эксперименте составил:
Изучение химиотерапевтической активности Феназида при длительном лечении туберкулеза у морских свинок.
Изучение химиотерапевтической активности Феназида при длительном лечении туберкулеза у морских свинок.
Изучение химиотерапевтической активности Феназида в дозах 5 и 10 мг/кг
Для проведения этого эксперимента были использованы 30 морских свинок-самцов, массой 200-220 г. Животных заражали культурой микобактерий человеческого типа в дозе 0,025 мг в 0,5 мл, которую вводили подкожно в правую паховую область. 10 животных служили контролем. Экспериментальные группы: 1-я, 10 животных, которым вводили ежедневно внутрь 5,0 мг/кг Феназида, и 2-я, 10 животных, которым ежедневно вводили Феназид в дозе 10,0 мг/кг.
Для проведения этого эксперимента были использованы 30 морских свинок-самцов, массой 200-220 г. Животных заражали культурой микобактерий человеческого типа в дозе 0,025 мг в 0,5 мл, которую вводили подкожно в правую паховую область. 10 животных служили контролем. Экспериментальные группы: 1-я, 10 животных, которым вводили ежедневно внутрь 5,0 мг/кг Феназида, и 2-я, 10 животных, которым ежедневно вводили Феназид в дозе 10,0 мг/кг.
Контрольные животные пали в течение первого месяца с момента начала эксперимента.
В первой опытной группе (Феназид, 5 мг/кг) в течение эксперимента (3 месяца) пали 4 морские свинки из 10. В легких у погибших животных определялись крупные полупрозрачные очаги серого цвета, печень и селезенка также содержали очаги поражения. Диагноз: гематогенно-диссиминированный туберкулез внутренних органов. У 6 морских свинок индекс поражения туберкулезом составил от 1 до 1,5 единиц, что соответствует присутствию единичных очагов туберкулеза в селезенке. В легочной ткани были увеличены трахео-бронхиальные лимфатические узлы. В печени туберкулезных изменений обнаружено не было (табл. 5). Микробиологическое исследование внутренних органов животных через 3 месяца лечения Феназидом в дозе 5 мг/кг показало, что из 6 обследованных морских свинок у пяти животных микобактерии туберкулеза в гомогенате внутренних органов выявлены не были как методом посева, так и методом бактериоскопии. Только у одной морской свинки микобактерии туберкулеза были обнаружены в гомогенатах печени, легких и селезенки. Посев этого материала не позволил получить положительного результат, то есть рост микобактерий выявлен не был.
Таким образом, у 50% животных в 1-ой опытной группе наступила стерилизация очагов после парэнтерального введения микpобактерий туберкулеза на фоне химиотерапии Феназидом в дозе 5 мг/кг в течение трех месяцев.
2-я группа экспериментальных животных получала Финазид в дозе 10 мг/0кг. Все 10 животных в течение трехмесячного эксперимента оставались живы. По окончании опыта при вскрытии были отмечены единичные поражения туберкулезом в селезенке. В гомогенатах внутренних органов при микробиологическом обследовании микобактерий обнаружено не было.
Индекс эффективности химиотерапии в этом эксперименте на морских свинках составил:
Изучение химиотерапевтической активности Феназида в дозах 20 и 40 мг/кг.
Изучение химиотерапевтической активности Феназида в дозах 20 и 40 мг/кг.
Для проведения оценки химиотерапевтической активности Феназида в дозах 20,0 и 40,0 мг/кг были использованы также 30 морских свинок-самцов массой 200-220 г. Животных заражали культурой микобактерий туберкулеза человеческого типа в дозе 0,025 мг в 0,5 мл, которую вводили подкожно в правую пазовую область. 10 животных служили контролем. Экспериментальные группы: 1-я, 10 животных, которым ежедневно вводили Феназид внутрь в дозе 20 мг/кг; 2-я, 10 животных, которым ежедневно вводили Феназид внутрь в дозе 40 мг/кг. Продолжительность эксперимента три месяца.
Контрольные животные пали в сроки от двух недель до 1,5 месяцев с момента начала эксперимента.
В первой опытной группе к окончанию эксперимента все животные живы. Индекс поражения туберкулезом составил от 0 до 0,5. Внутренние органы были без патологических изменений. У шести животных в легких были обнаружены замещенные соединительной тканью очаги воспаления (табл. 6). Микробиологическое исследование внутренних органов экспериментальных животных через три месяца лечения Феназидом в дозе 20 мг/кг показало, что у всех животных этой группы микобактерии туберкулеза не были выявлены как методом посева, так и методом бактериоскопии.
При обследовании 2-й экспериментальной группы было показано, что индекс поражения туберкулезом составил от 0 до 0,5. Однако в этой группе животных только у двух особей были обнаружены в легких небольшие разрешенные очаги воспаления, замещенные соединительной тканью. Остальные внутренние органы были найдены без патологических изменений. Микробиологическое исследование гомогенатов внутренних органов методов посева и бактериоскопическое не выявило наличия микобактерий туберкулеза.
Таким образом, у всех животных этой группы после трехмесячного лечения Феназидом в дозе 40 мг/кг наступила полная стерилизация очагов после парэнтерального введения микобактерий туберкулеза.
Индекс эффективности химиотерапии в этом эксперименте составил:
Изучение метаболизма и фармакокинетики Феназида
1. Изучение метаболизма Феназида
ГИНК, являясь субстратом N-ацетилтрансферазы, при длительном применении может оказывать и не оказывать побочное действие на организм больного в зависимости от фенотипа ацетилирования. Это обстоятельство предполагает проведение комплекса мероприятий в клинике, направленного на обеспечение индивидуализации разовых и курсовых доз этого препарата для каждого больного. Реализация же побочных эффектов изониазида связана с хелатирующими свойствами его молекулы.
Изучение метаболизма и фармакокинетики Феназида
1. Изучение метаболизма Феназида
ГИНК, являясь субстратом N-ацетилтрансферазы, при длительном применении может оказывать и не оказывать побочное действие на организм больного в зависимости от фенотипа ацетилирования. Это обстоятельство предполагает проведение комплекса мероприятий в клинике, направленного на обеспечение индивидуализации разовых и курсовых доз этого препарата для каждого больного. Реализация же побочных эффектов изониазида связана с хелатирующими свойствами его молекулы.
Модификация молекулы ГИНК с помощью комплексообразования с железом (П) преследовала, в первую очередь, цель, достижение которой обеспечивало бы большую безопасность химиотерапии туберкулеза, поскольку блокированный железом (П), хелатный узел молекулы ГИНК теряет способность к взаимодействию с активными центрами металлсодержащих ферментов, а включение первичной аминогруппы гидразина в хелатный цикл комплекса, лишает ее свойств субстрата N-ацетилтрансферазы.
В этой связи мы провели изучение метаболизма Феназида с целью прямой проверки теоретических и экспериментальных результатов.
Белым крысам-самцам массой 200-220 г, вводили внутрь по 0,1 г Феназида и ГИНК. Животных помещали на сутки в обменные клетки "Кассель" (ФРГ). В течение эксперимента пищу животные не получали, воду получали по потребности.
Через 24 ч собирали суточную мочу и исследовали ее методом Defrancini, Zumboui, описанным Ж.Хирцем (1975). Для получения хроматограмм использовали бумагу марки "Ватман-плотный" и систему растворителей изопропанол вода в соотношении 85: 15. Вертикальное хроматографирование проводили в течение 5 ч. После окончания процесса хроматограммы сушили в течение 16 ч при комнатной температуре в темноте, затем проявляли парами йода при 25oС в течение 45 мин. Идентификацию хроматограмм вели по результатам, полученным авторами метода в аналогичных условиях (табл. 7).
Результаты, приведенные в табл.7, показывают, что при введении в организм животного Феназида (в отличие от ГИНК) в суточной моче отсутствуют изониазид и ацетилизониазид основные соединения, ответственные за развитие побочных эффектов при длительном лечении больных препаратами ГИНК. Следовательно, Феназид не является субстратом N-ацетилтрансферазы и при его назначении больным нет необходимости в индивидуализации дозирования препарата. Кроме того, полученные нами данные подтверждают, что основной путь метаболизма Феназида окисление.
Изучение фармакокинетики Феназида
Фармакокинетику Феназида изучали на белых беспородных крысах самцах средней массой 300 г. Препарат вводили однократно через зонд внутрижелудочно в форме водной суспензии, в дозе 30 мг/кг.
Фармакокинетику Феназида изучали на белых беспородных крысах самцах средней массой 300 г. Препарат вводили однократно через зонд внутрижелудочно в форме водной суспензии, в дозе 30 мг/кг.
Кровь для анализа отбирали после декапитации через 1,5; 3,0; 6,0; 9,0; 12,0; 18,0; 24,0 ч. На каждую временную точку фармакокинетической кривой в эксперимент было взято по 6 животных.
Определение содержания препарата в сыворотке крови экспериментальных животных проводили спектрофотометрически.
Расчет фармакокинетической кривой и параметров проводили по программе "фарм" на персональном компьютере НР-85 фирмы Хьюлит-Паккард (США).
Усредненные концентрации Феназида в сыворотке крови крыс приведены в табл.8.
Согласно полученным данным изменение концентрации Феназида в сыворотке крови крыс хорошо описывается экспоненциальным уравнением на одночастевой фармакокинетической модели со всасыванием (Соловьев В.Н. и др. 1980). Незначительная разница между экспериментальными и расчетными величинами концентраций Феназида свидетельствует в пользу правильности выбранной модели (табл. 9, фиг.8).
Фармакокинетические параметры Феназида приведены в табл.9.
Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что для Феназида характерно медленное всасывание из желудочно-кишечного тракта и еще более медленное выведение. Так, уровень максимальной концентрации Феназида в крови достигается через 9, 18 ч, при этом скорость всасывания составляет 2,6 мкг мл-1ч-1. В то же время период полувыведения препарата составляет 7,21 ч, а константа скорости элиминации 0,0961 ч-1. Кажущийся объем распределения Феназида составляет 1,09 л кг-1, общий клиренс 0,1047 л кг-1 ч-1.
Согласно данным, приведенным в табл.8, уравнения, описывающие кривую зависимости концентрации Феназида от времени, имеют вид:
C(t)=27,0•(1-е-0,09661•T),
если t<Tabc, то есть для восходящей ветви кривой
C(t)=17,2•e-0,0961 (t-9,18),
если t>Tabc, то есть для нисходящей ветви кривой
где
T=t-Tлаг.
C(t)=27,0•(1-е-0,09661•T),
если t<Tabc, то есть для восходящей ветви кривой
C(t)=17,2•e-0,0961 (t-9,18),
если t>Tabc, то есть для нисходящей ветви кривой
где
T=t-Tлаг.
Следует отметить, что для Феназида время достижения максимального уровня препарата в крови определяется соотношением между константами всасывания и элиминации и не зависит от вводимой дозы препарата. При этом, поскольку значения констант всасывания и элиминации отличаются незначительно, каждая из ветвей фармакокинетической кривой характеризует одновременно оба процесса (Соловьев В.Н. и др. 1980).
Таким образом, Феназид является препаратом пролонгированного действия в отличие от ГИНК, что имеет огромное значение для фтизиатрии. Однократное назначение Феназида обеспечивает наличие в крови бактериостатической концентрации препарата в течение 24 ч (ГИНК 4 ч).
Результаты изучения острой токсичности Феназида
Исследование острой токсичности Феназида проводили на нелинейных белых мышах-самцах массой 18 20 г и нелинейных белых крысах-самцах массой 18 20 г и нелинейных белых крысах-самцах, массой 200 220 г. Феназид вводили внутрижелудочно и внутрибрюшинно в форме водной суспензии. Каждому виду животных вводили по пять доз препарата. На каждую дозу было использовано по 10 животных каждого вида. Наблюдение за экспериментальными животными после введения препарата вели в течение 10 сут. У крыс гибели не наблюдали при очень высоких дозах Феназида (табл.10). У мышей гибель отдельных особей наблюдались только на следующие сутки после введения препарата. ЛД50 рассчитывали по методу Литчфилда-Уилкоксона.
Исследование острой токсичности Феназида проводили на нелинейных белых мышах-самцах массой 18 20 г и нелинейных белых крысах-самцах массой 18 20 г и нелинейных белых крысах-самцах, массой 200 220 г. Феназид вводили внутрижелудочно и внутрибрюшинно в форме водной суспензии. Каждому виду животных вводили по пять доз препарата. На каждую дозу было использовано по 10 животных каждого вида. Наблюдение за экспериментальными животными после введения препарата вели в течение 10 сут. У крыс гибели не наблюдали при очень высоких дозах Феназида (табл.10). У мышей гибель отдельных особей наблюдались только на следующие сутки после введения препарата. ЛД50 рассчитывали по методу Литчфилда-Уилкоксона.
Из опубликованных данных известно, что ЛД50 ГИНК для белых мышей при внутрибрюшинном введении составляет 211,2 мг/кг (Витолия M.A. 1957), причем гибель животных наступает в первый ч после введения ГИНК при характерной картине интоксикации.
Сравнивая данные табл.10 и литературы, можно заключить, что блокада хелатного узла молекулы ГИНК ионом железа (II) резко снижает токсические свойства препарата, более того, в силу различных путей метаболизма ГИНК и Феназида, изменяется молекулярный механизм интоксикации и гибели экспериментальных животных. Так, если при введении ГИНК гибель животных наступает через 5 10 мин 1 1,5 ч(в зависимости от способа введения препарата), то при нагрузке экспериментальных животных (мыши) Феназидом гибель наблюдается только на следующие сутки после введения препарата, а у крыс, вообще не удалось установить ЛД50 Феназида при внутрижелудочном введении препарата.
Таким образом, предложен в качестве препарата для лечения туберкулеза неописанный ранее комплекс ГИНК с двухвалентным железом под условным название Феназид, разработан метод получения, изучены физико-химические свойства и установлена структура Феназида.
Изучение бактериоскопической и химиотерапевтической активности Феназида в экспериментах "in vitrpo" и "in vivo" показано, что Феназид по химиотерапевтической активности превосходят ГИНК, оказывает выраженное бактериоскопическое действие на штаммы микробактерий туберкулеза, устойчивых к действию изониазида и стрептомицина.
Изучение метаболизма и фармакокинетики Феназид, в отличие от ГИНК, не образует в организме экспериментальных животных токсичных метаболитов. Однократное введение Феназида обеспечивает поддержание бактериостатической концентрации препарата в крови в течение 24 часов. Эффект пролонгации не зависит от дозы Феназида, при этом Феназид в острых опытах продемонстрировал гораздо меньшую токсичность нежели ГИНК. 10 табл.
Claims (1)
- Препарат для лечения туберкулеза, представляющий собой комплекс гидразида изоникотиновой кислоты с двухвалентным железом общей формулы
в
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94023447/14A RU2080114C1 (ru) | 1994-06-21 | 1994-06-21 | Препарат для лечения туберкулеза |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94023447/14A RU2080114C1 (ru) | 1994-06-21 | 1994-06-21 | Препарат для лечения туберкулеза |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94023447A RU94023447A (ru) | 1996-04-27 |
| RU2080114C1 true RU2080114C1 (ru) | 1997-05-27 |
Family
ID=20157502
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94023447/14A RU2080114C1 (ru) | 1994-06-21 | 1994-06-21 | Препарат для лечения туберкулеза |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2080114C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1145719A3 (en) * | 2000-03-10 | 2001-11-14 | Pfizer Products Inc. | Use a ferrous salt for inhibiting oxidative degradation of pharmaceutical formulations |
| RU2454226C1 (ru) * | 2010-11-17 | 2012-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "ФАРМХИМ" (ООО "ФАРМХИМ") | Способ получения полимерного конъюгата гидразона изоникотиновой кислоты |
-
1994
- 1994-06-21 RU RU94023447/14A patent/RU2080114C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Машковский М.Д. Лекарственные средства. Т. 2, с.315-317, 1985. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1145719A3 (en) * | 2000-03-10 | 2001-11-14 | Pfizer Products Inc. | Use a ferrous salt for inhibiting oxidative degradation of pharmaceutical formulations |
| RU2454226C1 (ru) * | 2010-11-17 | 2012-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "ФАРМХИМ" (ООО "ФАРМХИМ") | Способ получения полимерного конъюгата гидразона изоникотиновой кислоты |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU94023447A (ru) | 1996-04-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Brtko et al. | Kojic acid and its derivatives: history and present state of art | |
| Rai et al. | Synthesis, physicochemical properties, and evaluation of N-substituted-2-alkyl-3-hydroxy-4 (1 H)-pyridinones | |
| Nonaka et al. | Effect of a new synthetic ascorbic acid derivative as a free radical scavenger on the development of acute pancreatitis in mice. | |
| US20070207217A1 (en) | Method for treating a mammal by administration of a compound having the ability to release CO | |
| WO2007073225A1 (en) | Molybdenum carbonyl complexes for treating rheumatoid arthritis and other inflammatory diseases | |
| US11389459B2 (en) | Texaphyrin-Pt(IV) conjugates and compositions for use in overcoming platinum resistance | |
| Strauss | The nitroaromatic group in drug design. pharmacology and toxicology (for Nonpharmacologists) | |
| SA08290239B1 (ar) | مشتقات حمض ليبويك | |
| PL206902B1 (pl) | Fotosensybilizator i sposób jego wytwarzania | |
| Duffin et al. | Alkyl gallium (III) quinolinolates: A new class of highly selective anti-leishmanial agents | |
| IL28164A (en) | Substituted ammonium basic addition salts of ribonucleic acid and their preparation | |
| RU2080114C1 (ru) | Препарат для лечения туберкулеза | |
| KR100808630B1 (ko) | 클로린 화합물을 포함하는 경구투여용 항종양 조성물 | |
| Dwyer et al. | Preparation of the Optical Forms of Tris-Acetylacetone Cobalt III | |
| EP0145711A1 (en) | Copper complex for treating cancer | |
| Kondritzer et al. | Investigation of methyl Pyridinium‐2‐aldoxime salts | |
| Mies et al. | Synthesis, siderophore activity and iron (III) chelation chemistry of a novel mono-hydroxamate, bis-catecholate siderophore mimic: Nα,-Nε-Bis [2, 3-dihydroxybenzoyl]-l-lysyl-(γ-N-methyl-N-hydroxyamido)-l-glutamic acid | |
| JP3348849B2 (ja) | ３−ヒドロキシ−４−ピロンのガリウム錯体の医薬組成物 | |
| RU2316327C1 (ru) | Ксимедон в качестве индуктора активности микросомальных оксидаз печени человека | |
| DE69626548T2 (de) | Macrocyclische verbindungen die aus kohlensuboxi-gruppen besteht | |
| CN116496277B (zh) | 一种姜黄素2,6-二氨基嘌呤衍生化合物 | |
| FR2534589A1 (fr) | Procede pour la preparation d'une solution a usage pharmaceutique contenant un nouveau complexe mixte polynucleaire de fer iii comme ingredient actif | |
| CN116444522B (zh) | 一种姜黄素腺嘌呤衍生化合物 | |
| RU2190618C2 (ru) | Новое комплексное соединение оксованадия (iv) с гидразидом изоникотиновой кислоты, обладающее антидиабетическим действием и проявляющее антимикобактериальную активность | |
| RU2295330C2 (ru) | Фармацевтическая композиция для профилактики и дополнительной химиотерапии туберкулеза |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20060404 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |