[go: up one dir, main page]

RS63510B1 - Supstituisana pirazolo[1,5-a]piridin jedinjenja kao inhibitori ret kinaze - Google Patents

Supstituisana pirazolo[1,5-a]piridin jedinjenja kao inhibitori ret kinaze

Info

Publication number
RS63510B1
RS63510B1 RS20220783A RSP20220783A RS63510B1 RS 63510 B1 RS63510 B1 RS 63510B1 RS 20220783 A RS20220783 A RS 20220783A RS P20220783 A RSP20220783 A RS P20220783A RS 63510 B1 RS63510 B1 RS 63510B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
alkyl
ret
optionally substituted
ring
cancer
Prior art date
Application number
RS20220783A
Other languages
English (en)
Inventor
Steven W Andrews
Sean Aronow
James F Blake
Barbara J Brandhuber
James Collier
Adam Cook
Julia Haas
Yutong Jiang
Gabrielle R Kolakowski
Elizabeth A Mcfaddin
Megan L Mckenney
Oren T Mcknulty
Andrew T Metcalf
David A Moreno
Ginelle A Ramann
Tony P Tang
Li Ren
Shane M Walls
Original Assignee
Array Biopharma Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Array Biopharma Inc filed Critical Array Biopharma Inc
Publication of RS63510B1 publication Critical patent/RS63510B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4162—1,2-Diazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Opis
REFERENCE NA SRODNE PRIJAVE
OSNOVA PRONALASKA
[0001] Predmetni opis odnosi se na nova jedinjenja koja pokazuju inhibiciju kinaze rearanžirane tokom transfekcije (RET), farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja, postupke za pravljenje jedinjenja, i upotrebu jedinjenja u terapiji. Specifičnije, odnosi se na pirazolo[1,5-a]piridin jedinjenja korisna u tretmanu i prevenciji bolesti koje se mogu tretirati sa inhibitorom RET kinaze, uključujući RET-povezane bolesti i poremećaje.
[0002] RET transmembranski receptor koji pripada superfamiliji tirozin kinaza koji je neophodan za normalno razviće, sazrevanje i održavanje nekoliko tipova tkiva i ćelija (Mulligan, L. M., Nature Reviews Cancer, 2014, 14, 173-186). Ekstracelularni deo RET kinaze sadrži četiri kalcijum-zavisna kadherin-slična ponovka uključena u vezivanje liganda i jukstamembranski region bogat cisteinom neophodan za ispravno pakovanje RET ekstracelularnog domena, dok citoplazmatski deo receptora uključuje dva subdomena tirozin kinaze.
[0003] RET signalizacija je posredovana vezivanjem grupe solubilnih proteina neurotrofičkog faktora izvedenih iz familije liganada glijalne ćelijske linije (GDNF) (GFLs), koji takođe uključuju neurturin (NTRN), artemin (ARTN) i persefin (PSPN) (Arighi et al., Cytokine Growth Factor Rev., 2005, 16, 441-67). za razliku od drugih receptor tirozin kinaza, RET se ne vezuje direktno sa GFLs i zahteva dodatni ko-receptor: odnosno, jedan od četiri pripadnika familije GDNF receptora-α (GFRα), koji su vezani za površinu ćelije sa glikozilfosfatidilinozitol vezom. Članovi GFLs i GFRα familije formiraju binarne komplekse koje se zauzvrat vezuju sa RET i regrutuju ga u membranske subdomene bogate holesterolom, koji su poznati kao lipidni splavovi, gde se odigrava RET signalizacija.
[0004] Nakon vezivanja ligand-ko-receptor kompleksa, RET dimerizacija i autofosforilacija na intracelularnim tirozinskim ostacima regrutuje adapter i signalizacione proteine da stimulišu više nishodnih puteva. Adaptr protein koji se vezuje za ova vezujuća mesta dovodi do aktivacije Ras-MAPK i PI3K-Akt/mTOR signalnih puteva ili do regrutovanja CBL familije ubikvitin ligaza koje funkcionišu u RET nishodnoj regulaciji RET-posredovanih funkcija.
[0005] Aberantna RET ekspresija i/ili aktivnost je pokazana u različitim kancerima, gastrointestinalnim poremećajima i sindromu iritabilnog creva (IBS).
REZIME PRONALASKA
[0006] Sada je pronađeno da su supstituisana pirazolo[1,5-a]piridin jedinjenja inhibitori RET kinaze, i da su korisni za tretiranje proliferativnih bolesti i kancera.
[0007] Shodno tome, ovde je obezbeđeno jedinjenje Formule I:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, gde A, B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, prsten D, E, R<a>, R<b>, n i m su kao što je ovde definisano.
[0008] Ovde je takođe obezbeđena farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, u smeši sa farmaceutski prihvatljivim razblaživačem ili nosačem.
[0009] Ovde je takođe obezbeđeno jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, ili njegova farmaceutski prihvatljiva kompozicija kao što je ovde definisano za upotrebu u terapiji.
[0010] Ovde je takođe obezbeđeno jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat ili njegova farmaceutski prihvatljiva kompozicija kao što je ovde definisano za upotrebu u tretiranju kancera i/ili inhibiranju metastaza povezanih sa određenim kancerom.
[0011] Ovde je takođe obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat ili njegova farmaceutska kompozicija kao što su ovde definisani za upotrebu u lečenju sindroma iritabilnog creva (IBS) ili bola povezanog sa IBS.
[0012] Takođe je obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat ili njegova farmaceutska kompozicija kako su ovde definisani za upotrebu koja pruža podršku pacijentu sa kancerom, uključujući prevenciju ili minimiziranje gastrointestinalnih poremećaja i dijareje, povezane sa lečenjem, uključujući hemoterapeutski tretman.
[0013] Ovde je takođe obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat za upotrebu u inhibiciji aktivnosti RET kinaze.
[0014] Ovde je takođe obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat ili njegova farmaceutska kompozicija kao što su ovde definisani, za upotrebu u lečenju bolesti ili poremećaja povezanih sa RET.
[0015] Ovde je takođe obezbeđena farmaceutska kombinacija za upotrebu u tretiranju kancera (npr., RET-povezani kancer i RET-povezani kancer koji ima jedan ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor) kod pacijenta kome je to potrebno, koja sadrži (a) jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, (b) dodatno terapeutsko sredstvo, i (c) izborno najmanje jedan farmaceutski prihvatljivi nosač, gde jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat i dodatni terapeutik su formulisani kao zasebne kompozicije ili doze za istovremenu, zasebnu ili sekvencijalnu upotrebu u tretmanu kancera, gde količine jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata i dodatnog terapeutskog sredstva su zajedno efikasne u tretiranju kancera. Ovde je takođe obezbeđena farmaceutska kompozicija koja sadrži takvu kombinaciju. Ovde je takođe obezbeđena upotreba takve kombinacije za pripremu medikamenta za tretman kancera. Ovde je takođe obezbeđeno komercijalno pakovanje ili proizvod koji sadrži takvu kombinaciju kao kombinovani preparat za istovremenu, zasebnu ili sekvencijalnu upotrebu; i na postupak tretmana kancera kod pacijenta kome je to potrebno.
[0016] Ovde je takođe obezbeđena farmaceutska kombinacija za lečenje sindroma iritabilnog creva (IBS) kod pacijenta kome je to potrebno, koja obuhvata primenu (a) jedinjenja opšte formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, (b) dodatnog terapeutskog sredstva, i (c) izborno najmanje jednog farmaceutski prihvatljivog nosača, za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu upotrebu za lečenje IBS, pri čemu su količine jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata i dodatnog terapeutskog sredstva zajedno efikasne u lečenju IBS. Ovde je takođe obezbeđena farmaceutska kompozicija koja sadrži takvu kombinaciju. Ovde je takođe obezbeđena upotreba takve kombinacije za pripremu leka za lečenje IBS. Ovde je takođe obezbeđeno komercijalno pakovanje ili proizvod koji sadrži takvu kombinaciju kao kombinovani preparat za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu upotrebu.
[0017] Ovde je takođe obezbeđen postupak za dobijanje jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata.
[0018] Ovde je takođe obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat dobijeni postupkom pripreme jedinjenja kako je ovde definisan.
[0019] Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje kao što se podrazumeva od strane stručnjaka iz oblasti kojoj pronalazak pripada. Postupci i materijali su opisani ovde za upotrebu u predmetnom pronalasku; drugi, pogodni postupci i materijali poznati u tehnici se takođe mogu koristiti.
[0020] Druge karakteristike i prednosti pronalaska biće očigledne iz sledećeg detaljnog opisa i slika, i iz patentnih zahteva.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0021] 1. Jedinjenje formule I:
i njegove farmaceutski prihvatljive soli, gde:
X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su nezavisno CH, CCH3, CF ili N, pri čemu nula, jedan ili dva od X<1>, X<2>, X<3>i X<4>je N;
A je H, CN, Cl, metil, etil ili ciklopropil;
B je:
(a) vodonik,
(b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora,
(c) hidroksi C2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom,
(d) dihidroksi C3-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom,
(e) (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil- izborno supstituisan sa 1-3 fluora,
(f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil- i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-;
(g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu koji se nezavisno biraju između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata;
(h) (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-,
(i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-,
(j) hetCyc<a>,
(k) (R<1>R<2>N)C(=O)C1-C6 alkil- gde R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila, (l) (R<1>R<2>N)C(=O)-, gde R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila, ili
(m) hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-;
hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana između N i O i izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-;
Prsten D je
(i) zasićeni monociklični 4-7 člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot,
svaki R<a>je nezavisno C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil ili (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-;
R<b>je (a) hidroksi,
(c) hetCyc<b>CH2- pri čemu hetCyc<b>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana između N i O i gde hetCyc<b>je izborno supstituisan sa C1-C6 alkilom (izborno supstituisan sa 1-3 fluora),
(e) R<c>R<d>N- ili
(f) R<c>R<d>NCH2-;
R<c>je vodonik ili C1-C6 alkil; i
R<d>je vodonik ili C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora);
n je 0 ili 1;
m je 0 ili 1;
E je:
(d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je navedeni alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora,
(e) hetAr<2>C1-C6 alkil-,
(g) Ar<1>O-,
(h) hetAr<2>O-,
(l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde je R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili
(m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1;
Ar<1>je fenil izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, CN, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), C1C6 alkoksi (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1 -C6 alkoksi)C1-C6 alkil- (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), C3-C6 cikloalkil, hidroksiC1-C6 alkil, (C1-C6 alkil)SO2-, R<e>R<f>N- i (R<e>R<f>N)C1-C6 alkil- gde svaki R<e>i R<f>je nezavisno H ili C1-C6 alkil;
hetAr<2>je 5-6-člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, ili 9-10-člani biciklični heteroaril koji ima 1-2 atoma azota u prstenu, gde hetAr<2>je izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, CN, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), C1-C6 alkoksi (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1- C6 alkoksi)C1-C6 alkil-(izborno supstituisan sa 1-3 fluora) i hidroksiC1-C6 alkoksi.
[0022] Za složena hemijska imena koja se ovde koriste, grupa supstituenata se obično imenuje ispred grupe za koju se vezuje. Na primer, metoksietil sadrži etil kičmu sa metoksi supstituentom.
[0023] Termin "halogen" označava -F (ponekad se ovde pominje kao "fluoro" ili "fluoro"), -Cl, -Br i -I.
[0024] Termini "C1-C3 alkil", "C3-C6 alkil", "C1-C6 alkil" i "C2-C6 alkil" kako se ovde koriste odnose se na zasićene linearne ili razgranate monovalentne ugljovodonične radikale od jedan do tri, tri do šest, jedan do šest ili dva do šest atoma ugljenika, respektivno. Primeri uključuju metil, etil, 1-propil, izopropil, 1-butil, izobutil, sek-butil, terc-butil, 2-metil-2-propil, pentil, neopentil i heksil.
[0025] Izraz "C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C6 alkil radikal kao što je ovde definisano, pri čemu je jedan do tri atoma vodonika zamenjen sa jednim do tri atoma fluora, respektivno. Primeri uključuju fluorometil, difluorometil, trifluorometil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2- i trifluoroetil.
[0026] Termin "C1-C6 alkoksi" kako se ovde koristi odnosi se na zasićene monovalentne alkoksi radikale linearnog ili razgranatog lanca od jednog do šest atoma ugljenika, pri čemu se radikal nalazi na atomu kiseonika. Primeri uključuju metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, butoksi i terc-butoksi.
[0027] Termin "(C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na zasićene monovalentne radikale linearnog ili razgranatog lanca od jednog do šest atoma ugljenika, gde je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa C1-C6 alkoksi grupom kao definisano ovde. Primeri uključuju metoksimetil (CH3OCH2-) i metoksietil (CH3OCH2CH2-).
[0028] Termin "(C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkoksi" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C6 alkoksi radikal kao što je ovde definisano, pri čemu je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa C1-C6 alkoksi grupom kao što je ovde definisano. Primeri uključuju metoksimetoksi (CH3OCH2O-) i etoksimetoksi (CH3CH2O-CH2O-).
[0029] Termini "hidroksiC1-C6 alkil" i "hidroksiC2-C6 alkil", kako se ovde koriste, odnose se na zasićene monovalentne alkil radikale linearnog ili razgranatog lanca od jednog do šest ili dva do šest atoma ugljenika, respektivno, pri čemu je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa hidroksi grupom.
[0030] Termin "dihidroksiC3-C6 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C3-C6 alkil radikal kao što je ovde definisan, pri čemu su dva atoma vodonika zamenjena hidroksi grupom, pod uslovom da hidroksi grupe nisu na istom ugljeniku.
[0031] Termin "(R<1>R<2>N)C1-C6 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C6 alkil radikal kako je ovde definisan, pri čemu je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa R<1>R<2>N- grupom, gde R<1>i R<2>su kao što je ovde definisano.
[0032] Termin „hetAr<1>C1-C6 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C6 alkil radikal kako je ovde definisan, gde je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa hetAr<1>grupom, pri čemu hetAr<1>je kao što je ovde definisano.
[0033] Termin "C3-C6 cikloalkil" kako se ovde koristi odnosi se na ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil.
[0034] Termin "C3-C6 cikloalkilidenski prsten" kako se ovde koristi odnosi se na dvovalentni C3-C6 cikloalkanski prsten izveden iz zasićenog 3-6-članog ugljovodoničnog prstena uklanjanjem dva atoma vodonika sa istog atoma ugljenika, na primer, ciklopropiliden, ciklobutiliden, ciklopentiliden i cikloheksiliden. Može se ilustrativno predstaviti sledećom strukturom u kojoj n je 1, 2 ili 3:
[0035] Termin "(C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C3 alkil radikal kako je ovde definisan, pri čemu je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa C3-C6 cikloalkil prstenom. Primer je ciklobutilmetil.
[0036] Termin "(hetCyc<a>)C1-C3 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C3 alkil radikal kako je ovde definisan, pri čemu je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa hetCyc<a>grupom, pri čemu hetCyc<a>je kao što je ovde definisan.
[0037] Termin „Ar<1>C1-C6 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C6 alkil radikal kako je ovde definisan, gde je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa Ar<1>grupom, pri čemu Ar<1>je kao što je ovde definisan.
[0038] Termini „hetAr<2>C1-C6 alkil" kako se ovde koristi odnosi se na C1-C6 alkil radikal kako je ovde definisan, gde je jedan od atoma ugljenika supstituisan sa hetAr<2>grupom, pri čemu hetAr<2>je kao što je ovde definisan.
[0039] Termin "okso" kako se ovde koristi označava kiseonik koji je dvostruko vezan za atom ugljenika, tj. =O. Na primer, u jednom primeru izvođenja kada se govori o hetCyc<a>, 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno odabrana od N i O i supstituisana sa okso može biti, na primer, pirolidinil prsten supstituisan sa okso (npr., pirolidinonil prsten), koji može biti predstavljen strukturom:
[0040] Termin "spirociklični prsten" kako se ovde koristi odnosi se na grupu koja ima dva prstena spojena spirocikličnom vezom preko zajedničkog pojedinačnog atoma ugljenika, pri čemu je svaki prsten 4-7-člani prsten (uključujući zajednički atom ugljenika).
[0041] Termin "heterospirociklični" kako se ovde koristi odnosi se na grupu koja ima dva prstena spojena spirocikličnom vezom preko atoma ugljenika, pri čemu svaki prsten ima 4 do 6 atoma u prstenu (sa jednim atomom ugljenika u prstenu koji je zajednički za oba prstena), i gde je jedan atoma u prstenu je atom azota.
[0042] Termin "jedinjenje", kako se ovde koristi, podrazumeva sve stereoizomere, geometrijske izomere, tautomere i izotope prikazanih struktura. Jedinjenja koja su ovde identifikovana imenom ili strukturom kao jedan određeni tautomerni oblik imaju za cilj da uključuju druge tautomerne oblike osim ako nije drugačije naznačeno.
[0043] Termin "tautomer" kako se ovde koristi odnosi se na jedinjenja čije se strukture značajno razlikuju po rasporedu atoma, ali koja postoje u lakoj i brzoj ravnoteži, i treba razumeti da jedinjenja koja su ovde data mogu biti prikazana kao različiti tautomeri, i kada jedinjenja imaju tautomerne oblike, svi tautomerni oblici su namenjeni da budu u okviru pronalaska, a imenovanje jedinjenja ne isključuje nijedan tautomer.
[0044] Biće jasno da određena jedinjenja koja su ovde data mogu da sadrže jedan ili više centara asimetrije i da se stoga mogu pripremiti i izolovati u smeši izomera, racemskoj smeši ili u enantiomerno čistom obliku.
[0045] U određenim primerima izvođenja Formule I, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su nezavisno CH ili CF. U određenim primerima izvođenja, svaki od X<1>, X<2>, X<3>i X<4>je CH.
[0046] U određenim primerima izvođenja Formule I, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su nezavisno CH, CF ili N, pri čemu jedan od X<1>, X<2>, X<3>i X<4>je N, a ostatak su nezavisno CH ili CF. U određenim primerima izvođenja Formule I, X<1>je N i X<2>, X<3>i X<4>su nezavisno CH ili CF. U određenim primerima izvošenja, X<1>je N i X<2>, X<3>i X<4>su CH.
[0047] U određenim primerima izvođenja Formule I, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su nezavisno CH, CF ili N, pri čemu su dva od X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su N. U određenim primerima izvođenja Formule I, X<1>i X<3>su N i X<2>i X<4>su nezavisno CH ili CF. U jednom primeru izvođenja, X<1>i X<3>su N i X<2>i X<4>su CH.
[0048] U određenim primerima izvođenja Formule I, A je H.
[0049] U određenim primerima izvođenja Formule I, A je Cl.
[0050] U određenim primerima izvođenja Formule I, A je CN.
[0051] U određenim primerima izvođenja Formule I, A je metil.
[0052] U određenim primerima izvođenja Formule I, A je etil.
[0053] U određenim primerima izvođenja Formule I, A je ciklopropil.
[0054] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je vodonik.
[0055] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora. Primeri uključuju metil, etil, propil, izopropil, izobutil, sek-butil, 2-etilbutil, neopentil, difluorometil, 2,2-difluoroetil i 2,2,2-trifluoroetil. U određenim primerima izvođenja, B je metil ili etil.
[0056] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je hidroksiC2-C6 alkil pri čemu je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom. U određenim primerima izvođenja, alkil deo je nesupstituisan. Primeri uključuju strukture:
[0057] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je dihidroksiC3-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom. Primer uključuje 2,3-dihidroksipropil.
[0058] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkilizborno supstituisan sa 1-3 fluora. U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (C1-C6 alkoksi)C2-C6 alkil- izborno supstituisan sa 1-3 fluora. Primeri uključuju strukture:
[0059] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-, gde su R<1>i
1
R<2>nezavisno H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi)C (=O)-. Primeri za (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- obuhvataju strukture:
[0060] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde hetAr<1>je 5-6-člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu koji se nezavisno izabrani od N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata. U određenim primerima izvođenja, hetAr<1>je 5-6-člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno je supstituisan sa C1-C6 alkilom. Primeri hetAr<1>C1-C3 alkil- obuhvataju strukture:
[0061] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-, pri čemu je navedeni cikloalkil izborno supstituisan sa OH. Primer je ciklobutilmetil.
[0062] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, gde hetCyc<a>je kao što je definisano za Formulu I. U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, gde hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno je supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1- C6 alkil-, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-. Primeri uključuju strukture:
[0063] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je hetCyc<a>, gde hetCyc<2>je kao što je definisan za Formulu I. U određenim primerima izvođenja, hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno je supstituisan sa OH, C1-C6 alkilom (izborno supstituisan sa 1-3 fluora) ili hidroksiC1-C6 alkil-. Primeri uključuju strukture:
[0064] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (R<1>R<2>N)C(=O)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila. Primeri uključuju strukture:
[0065] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (R<1>R<2>N)C(=O)-, gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila. Primeri uključuju strukturu:
[0066] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-, gde je hetCyc<a>kao što je definisan za Formulu I. Primer uključuje strukturu:
[0067] U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora ili (c) hidroksiC2-C6 alkil- pri čemu je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkilidenskim prstenom. U određenim primerima izvođenja Formule I, B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora ili (c) hidroksiC2-C6 alkil-.
[0068] Pozivajući se sada na Prsten D formule I,
Prsten D je (zasićeni monociklični 4-7-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. Izraz "koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot" kada je prsten D zasićeni monociklični 4-7-člani heterociklični prsten znači da navedeni atom azota u prstenu je atom azota prikazan u prstenu D formule I. Primeri uključuju strukture:
[0069] pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, zvezdica označava tačku vezivanja Prstena D za E grupu, a R<a>, n, R<b>i m su kao što su definisani za formulu I. U jednom primeru izvođenja, n je 0. U jednom primeru izvođenja, n je 1. U jednom primeru izvođenja, m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, m je 0. U jednom primeru izvođenja, m je 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0 i m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0 ili 1, a m je 0.
[0070] U jednom primeru izvođenja Formule I, Prsten D je zasićeni monociklični 4-6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot izabran od struktura
1
[0071] pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, zvezdica označava tačku vezivanja Prstena D za E grupu, a R<a>, n, R<b>i m su kao što su definisani za formulu I. U jednom primeru izvođenja, n je nula. U jednom primeru izvođenja, n je jedan. U jednom primeru izvođenja, m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, m je 0. U jednom primeru izvođenja, m je 1.
[0072] U određenim primerima izvođenja Formule I, Prsten D je zasićeni monociklični 5-6 člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot koji ima strukturu:
[0073] pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, zvezdica označava tačku vezivanja Prstena D za E grupu, a R<a>, n, R<b>i m su kao što su definisani za formulu I. U jednom primeru izvođenja, svaki R<a>je nezavisno izabran od sledećih: C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil ili (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-. U jednom primeru izvođenja, n je 0. U jednom primeru izvođenja, n je 1. U jednom primeru izvođenja, m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, m je 0. U jednom primeru izvođenja, m je 1. U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni monociklični 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, prsten D je zasićeni monociklični 5-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot
[0074] U određenim primerima izvođenja Formule I, Prsten D je zasićeni monociklični 4-6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot izabran od sledećih struktura:
[0075] pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, zvezdica označava tačku vezivanja prstena D za E grupu, a R<a>, n, R<b>i m su kao što su definisani za formulu I. U jednom primeru izvođenja, svaki R<a>je nezavisno izabran od sledećih: C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora) ili (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-. U jednom primeru izvođenja, n je 0. U jednom primeru izvođenja, n je jedan. U jednom primeru izvođenja, m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, m je 0. U jednom primeru izvođenja, m je 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0 ili 1, a m je 0 ili 1. Primeri kada je prsten D izborno supstituisan zasićeni 4-7 člani heterociklični prsten uključuje strukture:
1
pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, a zvezdica označava tačku vezivanja za E grupu.
[0076] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni monociklični 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot koji može biti predstavljen strukturom:
gde su n i m nula, odnosno Prsten D može biti predstavljen strukturom:
pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, a zvezdica označava tačku vezivanja za E grupu.
[0077] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 4-7 člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, R<b>je (a) OH, (c) hetCyc<b>CH2-, gde hetCyc<b>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana između N i O, pri čemu hetCyc<b>je izborno supstituisan sa C1-C6 alkilom (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (e) R<c>R<d>N- ili (f) R<c>R<d>NCH2-; R<c>je vodonik ili C1-C6 alkil; i R<d>je vodonik ili C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora).
1
[0078] U jednom primeru izvođenja, prsten D je zasićeni monociklični 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot koji može biti predstavljen strukturom:
pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, a zvezdica označava tačku vezivanja za E grupu, a R<a>je C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil ili (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-. U jednom primeru izvođenja, R<a>je C1-C6 alkil.
[0079] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni monociklični 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot koji može biti predstavljen strukturama:
pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, a zvezdica označava tačku vezivanja za E grupu, a R<b>je (a) OH, (c) hetCyc<b>CH2- , (e) R<c>R<d>N- ili (f) R<c>R<d>NCH2-; R<c>je vodonik ili C1-C6 alkil; R<d>je vodonik ili C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora); i hetCyc<b>je kao što je definisan za Formulu I. U jednom primeru izvođenja, R<b>je (c) hetCic<b>CH2- , (e) R<c>R<d>N- ili (f) R<c>R<d>NCH2-; R<c>je vodonik ili C1-C6 alkil; R<d>je vodonik ili C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora); i hetCyc<b>je kao što je definisan za Formulu I.
[0080] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, R<b>je OH. U jednom primeru izvođenja, n je 0, 1 ili 2, a m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0, a m je 0 ili 1. Primeri uključuju strukture:
1
[0081] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, n je 0 ili 1, a m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0, a m je 0. U jednom primeru izvođenja, n je 0, a m je 1. U jednom primeru izvođenja, R<b>je (a) hidroksi, (e) R<c>R<d>N-primeri uključuju strukture:
1
[0082] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 4 ili 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, n je 0, 1 ili 2, a m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0, a m je 0. Primeri uključuju strukture:
[0083] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 4-6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 5-6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, n je 0 ili 1, a m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0, a m je 0. U jednom primeru izvođenja, n je 0, a m je 1. U jednom primeru izvođenja, R<a>je C1-C6 alkil. U
1
jednom primeru izvođenja, R<b>je R<c>R<d>N-. Primeri uključuju strukture:
2
[0084] . U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 5-6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, n je 0, 1 ili 2, a m je 0 ili 1. U jednom primeru izvođenja, n je 0 ili 1, a m je 0. U jednom primeru izvođenja, n je 1, a m je 0. U jednom primeru izvođenja, n je 0 i m je 1. U jednom primeru izvođenja, R<a>je C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora) ili hidroksiC1-C6 alkil. U jednom primeru izvođenja, R<b>je R<c>R<d>NCH2- gde je R<c>je H ili C1-C6 alkil i R<d>je C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora). U jednom primeru izvođenja, R<b>je hidroksil. Primeri uključuju strukture:
�
�
[0085] U jednom primeru izvođenja, Prsten D je zasićeni 6-člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot. U jednom primeru izvođenja, n je 0 ili 1, a m je 0. U jednom primeru izvođenja, R<a>je C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora) ili hidroksiC1-C6 alkil. U jednom primeru izvođenja, R<b>je hidroksi, hetCyc<b>CH2-, R<c>R<d>NCH2-, gde hetCyc<b>, R<c>i R<d>su kao što su definisani za Formulu I. U jednom primeru izvođenja, R<b>je hetCyc<b>CH2- gde hetCyc<b>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O, pri čemu hetCyc<b>je izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od C1-C6 alkila (izborno supstituisan sa 1-3 fluora). U jednom primeru izvođenja, R<b>je R<c>R<d>NCH2- gde je R<c>je H ili C1-C6 alkil i R<d>je C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora). Primeri uključuju strukture:
2
�
�
�
[0086] U jednom primeru izvođenja, Formula I uključuje jedinjenja formule I-D, u čemu: X<1>i X<3>su N i X<2>i X<4>su CH ili CF; i A, B, E, R<a>, R<b>, m i n su kao što su definisani za Formulu I.
[0087] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, A je CN.
[0088] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, B je (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-; i hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana između N i O i izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-.
[0089] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, A je CN; B je (c) hidroksiC2-C6 alkil - gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkilgde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-; i hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-.
[0090] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, E je (l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil.
[0091] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, A je CN; B je (c) hidroksiC2-C6 alkil - gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkilgde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-; hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-; i E je (l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde je R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil.
[0092] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, m je 1; i n je 0 ili 1.
[0093] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, m je 1; i n je 0.
[0094] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, m je 1; n je 0; i R<b>je hidroksi.
1
[0095] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, m je 0; i n je 0 ili 1.
[0096] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, m je 0; n je 0 ili 1; i R<a>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora.
[0097] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, A je CN; B je (c) hidroksiC2-C6 alkil - gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkilgde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-; hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana između N i O i izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-; E je (l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde je R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil; m je 0 ili 1; n je 0 ili 1; R<a>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; i R<b>je hidroksi. U jednom aspektu, m je 1, n je 0, a R<b>je hidroksi. U jednom primeru izvođenja, m je 0, n je 1, a R<b>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora.
[0098] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, Prsten D je
pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, zvezdica označava tačku vezivanja prstena D za E grupu.
[0099] U jednom primeru izvođenja Formule I-D, A je CN; B je (c) hidroksiC2-C6 alkil - gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkilgde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-; hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana između N i O i izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil
2
(izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-; E je (l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde je R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)str- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil; m je 0 ili 1; n je 0 ili 1; R<a>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; a Prsten D je
pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, zvezdica označava tačku vezivanja prstena D za E grupu. U jednom primeru izvođenja, m je 1, n je 0, a R<b>je hidroksi. U jednom primeru izvođenja, m je 0, n je 1, a R<b>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora.
[0100] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju jedinjenja Formule I-F
gde E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je navedeni alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora ili (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-; R<b>je (a) hidroksi, ili (e) R<c>R<d>N-; i X<1>, X<1>, X<3>, X<4>, B, Ar<1>, hetAr<2>, R<c>i R<d>su kao što su definisani za formulu I.
[0101] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, X<1>je N; i X<2>, X<3>i X<4>su CH. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0102] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, A je CN. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0103] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, ili hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkilidenskim prstenom. U jednom primeru izvođenja Formule I-F, B je C1-C6 alkil ili hidroksiC2-C6 alkil-. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0104] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, ili hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkilidenskim prstenom. U jednom primeru izvođenja, B je C1-C6 alkil ili hidroksiC2-C6 alkil-. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil -gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0105] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, ili hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom; i R<b>je (a) hidroksi. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0106] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, ili hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom; i R<b>je (e) R<c>R<d>N-gde su R<c>i R<d>kao što su definisano za formulu I. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil - gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0107] U jednom primeru izvođenja Formule I-F, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, ili hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom; i R<b>je (e) R<c>R<d>N-gde je R<c>i R<d>su kao što su definisani za formulu I. U jednom primeru izvođenja, E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil - gde je pomenuti alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, E je (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-.
[0108] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju jedinjenja Formule I-G
gde je E (l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde je R<g>je H ili C1-C6 alkil ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil; R<a>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; i Ar<1>, hetAr<2>, X<1>, X<1>, X<3>, X<4>, A i B su kao što su definisani za formulu I.
[0109] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, X<1>je N; i X<2>, X<3>i X<4>su CH.
[0110] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, A je CN.
[0111] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa
4
1-3 fluora, (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana od N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, gde je hetCyc<a>kao što je definisan za formulu I.
[0112] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, B je C1-C6 alkil.
[0113] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je hidroksiC2-C6 alkil- izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom. U jednom primeru izvođenja, B je hidroksiC2-C6 alkil-.
[0114] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; a B je (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-, (C1-C6 alkil)C(=O)- i (C1-C6 alkoksi) )C(=O)-.
[0115] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; a B je hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>je 5-6-eročlani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu koji se nezavisno biraju između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata.
[0116] U jednom primeru izvođenja Formule I-G, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; a B je (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, gde je hetCyc<a>je kao što je definisano za formulu I.
[0117] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju jedinjenja Formule I-H
gde E je (l) Ar<1>C(=O)NR<g>-, gde R<g>je H ili C1-C6 alkil ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil; R<b>je (a) hidroksi, (c) hetCyc<b>CH2-, (f) R<c>R<d>NCH2-; i Ar<1>, hetAr<2>, X<1>, X<1>, X<3>, X<4>, A, B, hetCyc<b>, R<c>i R<d>su kao što je definisano za formulu I.
[0118] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, X<1>je N; i X<2>, X<3>i X<4>su CH.
[0119] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, A je CN.
[0120] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, B je C1-C6 alkil.
[0121] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora. U jednom primeru izvođenja, B je C1-C6 alkil.
[0122] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; i R<b>je (a) hidroksi.
[0123] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; i R<b>je (c) hetCyc<b>CH2-.
[0124] U jednom primeru izvođenja Formule I-H, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; i R<b>je (f) R<c>R<d>NCH2-.
[0125] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju jedinjenja Formule I-K gde je E (l) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde je R<g>je H ili C1-C6 alkil ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde je p 0 ili 1 i R<g>je H ili C1-C6 alkil; Prsten D je
gde talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>; R<a>je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora; i X<1>, X<1>, X<3>, X<4>, B, Ar<1>i hetAr<2>su kao što su definisani za formulu I.
[0126] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; i X<2>, X<3>i X<4>su CH.
[0127] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, A je CN.
[0128] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; a A je CN.
[0129] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, B je (a) vodonik, (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde je R<1>i R<2>su nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil- i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-, (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu, nezavisno izabrana između N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata, ili (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, gde je hetCyc<a>kao što je definisan za formulu I.
[0130] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je (a) vodonik.
[0131] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora.
[0132] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom.
[0133] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; a B je (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil- i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-.
[0134] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde je hetAr<1>5-6-eročlani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu koji su nezavisno izabrani od N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata.
[0135] U jednom primeru izvođenja Formule I-K, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; A je CN; i B je (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, gde je hetCyc<a>je kao što je definisano za formulu I.
[0136] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju jedinjenja Formule I L gde E je (g) Ar<1>O- ili (h) hetAr<2>-O-; Prsten
ili
gde talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>; i X<1>, X<1>, X<3>, X<4>, B, Ar<1>i hetAr<2>su kao što su definisani za formulu I.
[0137] U jednom primeru izvođenja Formule I L, X<1>je N; i X<2>, X<3>i X<4>su CH.
[0138] U jednom primeru izvođenja Formule I L, A je CN.
[0139] U jednom primeru izvođenja Formule I L, X<1>je N; X<2>, X<3>i X<4>su CH; a A je CN.
[0140] U jednom primeru izvođenja Formule I L, B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil- ili (k) (R<1>R<2>N)C(=O)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila.
[0141] U jednom primeru izvođenja Formule I L, X<1>je N; X<2>, X<3>X<4>su CH; i A je CN; i B je (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora.
[0142] U jednom primeru izvođenja Formule I L, X<1>je N; X<2>, X<3>X<4>su CH; i A je CN; i B je (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom.
[0143] U jednom primeru izvođenja Formule I L, X<1>je N; X<2>, X<3>X<4>su CH; i A je CN; i B je (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil- ili (k) (R<1>R<2>N)C(=O)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila.
[0144] Jedinjenja Formule I uključuju njihove farmaceutski prihvatljive soli. Dodatno, jedinjenja Formule I takođe uključuju druge soli takvih jedinjenja koje neophodno nisu farmaceutski prihvatljive soli, i koje mogu biti korisne kao intermedijeri za pripremu i/ili prečišćavanje jedinjenja Formule I i/ili za razdvajanje enantiomera jedinjenja Formule I.
Primeri farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja Formule I uključuju monohidrohlorid, dihidrohlorid, soli trifluorosirćetne kiseline, i di-trifluorosirćetne kiseline. U primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju soli trifluorosirćetne kiseline i dihidrohloridne soli.
[0145] U primeru izvođenja, jedinjenja Formule I uključuju jedinjenja iz Primera 1-819 i stereoizomere i njihove farmaceutski prihvatljive soli. U primeru izvođenja, jedinjenja iz Primera 1-819 su u obliku slobodne baze. U primeru izvođenja, jedinjenja iz Primera 1-819 su dihidrohlorid ili soli trifluorosirćetne kiseline.
[0146] Termin "farmaceutski prihvatljiv" označava da jedinjenje, ili njegova so ili kompozicija je kompatibilna hemijski i/ili toksikološki sa drugim sastojcima koji čine formulaciju i/ili pacijentom koji se njima tretira.
[0147] Jedinjenja koja su obezbeđena ovde mogu takođe sadržati neprirodan odnos atomskog izotopa na jednom ili više atoma koji čine takva jedinjenja. Odnosno, atom, naročito kada je pomenut u odnosu na jedinjenje prema Formuli I, sadrži sve izotope i izotopske smeše tog atoma, ili koji se javlja prirodno ili je sintetički napravljen, bilo sa prirodnom abundancom ili u izotopski obogaćenom obliku. Na primer, kada se spominje vodonik, podrazumeva se da se odnosi na<1>H,<2>H,<3>H ili njihove smeše; kada se pominje ugljenik, podrazumeva se da se odnosi na<11>C,<12>C,<13>C,<14>C ili njihove smeše; kada se pominje azot, podrazumeva se da se odnosi na<13>N,<14>N,<15>N ili njihove smeše; kada se pominje kiseonik, podrazumeva se da se odnosi na<14>O,<15>O,<16>O,<17>O,<18>O ili njihove smeše; i kada se pominje fluor, podrazumeva se da se odnosi na<18>F,<19>F ili njihove smeše. Jedinjenja obezbeđena ovde stoga takođe sadrže jedinjenja sa jednim ili više izotopa od jednog ili više atoma, i njihovih smeša, uključujući radioaktivna jedinjenja, gde je jedan ili više neradioaktivnih atoma zamenjeno sa jednim od njegovih radioaktivnih obogaćenih izotopa. Radioobeležena jedinjenja su korisna kao terapeutska sredstva, npr., terapeutska sredstva za kancer, reagensi za istraživanje, npr., reagensi za analize, i dijagnostička sredstva, npr., sredstva za in vivo vizuelizaciju. Sve izotopske varijacije jedinjenja obezbeđenih ovde, bez obzira da li su radioaktivni ili nisu, su određene tako da budu obuhvaćene unutar obima predmetnog pronalaska.
[0148] Za ilustrativne svrhe, Šeme 1-6 prikazuju opšte postupke za pripremu ovde obezbeđenih jedinjenja kao i ključnih intermedijera. Za detaljniji opis pojedinačnih reakcionih koraka, videti odeljak Primera u nastavku. Stručnjaci će shvatiti da se mogu koristiti drugi sintetički putevi za sintezu jedinjenja prema pronalasku. Iako su specifični početni materijali i reagensi prikazani u Šemama i razmatrani u nastavku, drugi početni materijali i reagensi se mogu lako zameniti da bi se obezbedili različiti derivati i/ili reakcioni uslovi. Dodatno, mnoga od jedinjenja pripremljenih postupcima opisanim u nastavku mogu se dodatno modifikovati u svetlu ovog opisa korišćenjem konvencionalne hemije dobro poznate stručnjacima.
[0149] Šema 1 prikazuje opštu šemu za sintezu jedinjenja X gde A je CN, i B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, n, m i E su kao što je definisano za Formulu I.
[0150] Jedinjenje 2 je dobijeno tretiranjem 3-bromo-5-metoksipiridina (jedinjenje 1), koji je komercijalno dostupan, sa O-(mezitilsulfonil)hidroksilaminom. O-mezitilsulfonilhidroksilamin se može pripremiti kao što je opisano u Mendiola, J., et al., Org.
Process Res. Dev.2009, 13(2), 263-267. Jedinjenje 2 može reagovati sa etil propiolatom da bi se obezbedila smeša jedinjenja 3A i 3B, koja su tipično dobijena u odnosu od približno 2:1 do 9:1, respektivno. Smeša jedinjenja 3A i 3B može se tretirati sa 48% HBr na povišenim temperaturama, nakon čega sledi prečišćavanje rekristalizacijom ili hromatografijom, da bi se izolovalo jedinjenje 4A kao sporedni izomer i jedinjenje 4B kao glavni izomer. Nakon izolacije, jedinjenje 4A se može tretirati sa POCl3da bi se obezbedilo jedinjenje 5. Formil grupa se može pretvoriti u oksim grupu korišćenjem NH2OH da bi se obezbedilo jedinjenje 6.
Oksim grupa se može pretvoriti u nitril grupu korišćenjem anhidrida sirćetne kiseline da bi se obezbedilo jedinjenje 7. Metoksi grupa jedinjenja 7 može se pretvoriti u hidroksi grupu tretiranjem jedinjenja 7 sa aluminijum trihloridom da bi se obezbedilo jedinjenje 8.
[0151] Kada je grupa B vodonik, jedinjenje 12 može se pripremiti spajanjem jedinjenja 8 sa odgovarajućim jedinjenjem estra bora 10 (gde su prsten D, E, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>kao što su definisani za formulu I; Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<z>i R<i>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima za koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta odabranih od (C1-C3 alkil)) da bi se dobilo jedinjenje 11a koristeći odgovarajuće uslove reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovane paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijumski katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama), pri čemu ako je prsten D jedinjenja 10 zamenjen sa R<b>supstituentom koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja. Amino zaštitna grupa ako je prisutna na supstituentu prstena D jedinjenja 11a može biti uklonjena pod standardnim uslovima (na primer, Boc grupa može biti uklonjena tretiranjem jedinjenja 11a u kiselim uslovima, npr. HCl) da bi se dobilo jedinjenje 12 gde je B vodonik. Alternativno, E grupa može biti funkcionalizovana (tj. reagovana ili tretirana odgovarajućim reagensom) pod standardnim uslovima opisanim u nastavku da bi se dobilo jedinjenje 12 gde je B vodonik, a E kao što je definisano za formulu I osim što E nije vodonik.
[0152] Alternativno, kada je grupa B kao što je definisano za formulu I osim vodonika, jedinjenje 11a može da reaguje sa C1-C6 alkil-OH, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-OH izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hetAr<1>C1-C3 alkil-OH, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-OH, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-OH, hetCyc<a>OH ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-OH, gde je hetAr<1>i hetCyc<a>su kao što je definisano za Formulu I, pod uslovima Mitsunobu reakcije (PPh3i diizopropil azodikarboksilat) da bi se dobilo jedinjenje 11. Compound 12 može se zatim pripremiti iz jedinjenja 11 kao što je gore opisano.
4
[0153] Alternativno, kada je grupa B kao što je definisano za formulu I osim vodonika, jedinjenje 9 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 8 sa C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hidroksiC2-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, dihidroksiC3-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-X izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-X, hetAr<1>C1-C3 alkil-X, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-X, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-X, hetCyc<a>-X, ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-X, gde su R<1>, R<2>, hetAr<1>, i hetCyc<a>kao što su definisani za formulu I i X je odlazeći atom ili grupa (halogenid ili triflat), pri čemu je svaki od navedenih reagensaa izborno supstituisan sa zaštitnom grupom (npr. tbutildimetilsilil grupom ako B grupa ima jednu ili dve dodatne hidroksi grupe), u prisustvu baze (na primer, kalijum karbonata). Na primer, kada je B jednako C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, jedinjenje se može dobiti reakcijom jedinjenja 8 sa C1-C6 alkil-X, gde X je Br ili Cl, ili triflat. Jedinjenje se 11 može zatim pripremiti spajanjem jedinjenja 9 sa odgovarajućim jedinjenjem estra bora 10 koristeći odgovarajuće uslove reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovane paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijumski katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama), pri čemu ako je prsten D jedinjenja 10 je zamenjen sa R<b>supstituentom koji je R<c>R<d>N- pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>je vodonik, atom azota R<b>mogu biti zaštićeni odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja. Jedinjenje 12 može se zatim pripremiti iz jedinjenja 11 kao što je gore opisano.
[0154] Šema 2 prikazuje još jednu opštu šemu za sintezu jedinjenja 17 gde A je CN, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, n, m i E su kao što su definisani za formulu I.
[0155] Jedinjenje 9 (pripremljeno, npr., kako je opisano u Šemi 1) u kome je B kao što je definisano za formulu I, može biti u kombinaciji sa jedinjenjem 13 (gde su X<1>, X<2>, X<3>i X<4>kao što su definisani za formulu I; L<2>je odlazeća grupa kao što je triflat ili halid); Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<z>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima na koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabranih od (C1-C3 alkil)), koristeći odgovarajuće uslove reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovane paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijum katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama) da bi se dobilo jedinjenje 14. Jedinjenje 16 može se pripremiti spajanjem jedinjenja 14 sa složenim 15 pod odgovarajućim SNAr uslovima (na primer, izborno u prisustvu K2CO3i na povišenoj temperaturi), pri čemu ako je prsten D jedinjenja 15 je zamenjen sa R<b>supstituentom koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja. Amino zaštitna grupa, ako je prisutna, može se zatim ukloniti pod standardnim uslovima (na primer, Boc grupa može biti uklonjena tretiranjem jedinjenja 1 u kiselim uslovima, npr. HCl) da bi se dobilo jedinjenje 17 gde E je H.
[0156] Alternativno, E grupa može biti funkcionalizovana (tj. reagovati ili tretirati odgovarajućim reagensom) pod standardnim uslovima opisanim u nastavku da bi se dobilo jedinjenje 17 gde je E kao što je definisano za formulu I osim što E nije H.
[0157] Šema 3 prikazuje opštu šemu za sintezu jedinjenja 21 gde A je H, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, n, m i E su kao što su definisani za formulu I.
[0158] Jedinjenje 18 može se pripremiti spajanjem jedinjenja 4A (pripremljeno npr., kako je opisano u Šemi 1) sa odgovarajućim jedinjenjem estra bora 10 (gde su prsten D, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>kao što su definisani za formulu I; Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<z>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima za koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta odabranih od (C1-C3 alkil)) korišćenjem odgovarajućih uslova reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovanog paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijum katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama), pri čemu ako je prsten D jedinjenja 10 zamenjen sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja. Jedinjenje 19 može se pripremiti tretiranjem jedinjenja 18 sa aluminijum trihloridom.
[0159] Kada je B kao što je definisano za formulu I osim vodonika, jedinjenje 20 može se
4
pripremiti reagovanjem jedinjenja 19 sa C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hidroksiC2-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, dihidroksiC3-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-X izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-X, hetAr<1>C1-C3 alkil-X, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-X, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-X, hetCyc<a>-X ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-X, gde su R<1>, R<2>, hetAr<1>, i hetCyc<a>kao što su definisani za Formulu I i X je odlazeći atom ili grupa (halid ili triflat), pri čemu je svaki od navedenih reagenasa izborno supstituisan sa zaštitnom grupom (npr. t-butildimetilsilil grupa ako B ima jednu ili dve dodatne hidroksi grupe) . Na primer, kada je B jednako C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, jedinjenje se može dobiti reakcijom jedinjenja 19 sa C1-C6 alkil-X, gde X je Br ili Cl, ili triflat. Jedinjenje 21 može se zatim pripremiti iz jedinjenja 20.
Ako prsten D sadrži supstituent koji ima amino zaštitnu grupu, amino zaštitna grupa može biti uklonjena pod standardnim uslovima (na primer, Boc grupa se može ukloniti tretiranjem jedinjenja 20 u kiselim uslovima, npr. HCl) da bi se dobilo jedinjenje 21 gde E je H.
[0160] Alternativno, E grupa jedinjenja 20 može biti funkcionalizovana (tj. reagovati ili tretirati odgovarajućim reagensom) pod standardnim uslovima opisanim u nastavku da bi se dobilo jedinjenje 21 gde je E kao što je definisano za formulu I osim što E nije H.
[0161] Alternativno, kada je grupa B vodonik, jedinjenje 21 može se pripremiti od jedinjenja 19 prema ovde opisanim koracima uklanjanja zaštite i izborne funkcionalizacije.
[0162] Šema 4 prikazuje alternativnu opštu šemu za sintezu jedinjenja 21 gde A je H, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, n, m i E su kao što su definisani za formulu I.
[0163] Jedinjenje 22 može se pripremiti tretiranjem jedinjenja 4A (pripremljen npr., kako je opisano u Šemi 1) sa aluminijum trihloridom.
[0164] Kada je grupa B vodonik, jedinjenje 19 može se pripremiti spajanjem jedinjenja 22 sa odgovarajućim jedinjenjem estra bora 10 (gde Prsten D, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su kao što su definisani za formulu I; Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<z>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa
4
atomima za koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabranih od (C1-C3 alkil)) korišćenjem odgovarajućih uslova reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovanih paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijum katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama), pri čemu ako je prsten D jedinjenja 10 zamenjen sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N- pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>je vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja. Jedinjenje 21 može se pripremiti od jedinjenja 19 prema postupku opisanom za šemu 3.
[0165] Alternativno, kada je grupa B kao što je definisano za formulu I osim vodonika, jedinjenje 23 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 22 sa C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hidroksiC2-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, dihidroksiC3-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkilidenski prsten, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-X izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-X, hetAr<1>C1-C3 alkil-X, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-X, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-X, hetCyc<a>-X ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-X, gde je R<1>, R<2>, hetAr<1>, i hetCyc<a>su kao što je definisano za Formulu I i X je odlazeći atom ili grupa (halogenid ili triflat), pri čemu je svaki od navedenih reagensa izborno supstituisan sa zaštitnom grupom (npr. t-butildimetilsilil grupa ako B ima jednu ili dve dodatne hidroksi grupe) . Na primer, kada je B C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, jedinjenje se može dobiti reakcijom jedinjenja 22 sa C1-C6 alkil-X, gde X je Br ili Cl, ili triflat. Jedinjenje 20 može se dobiti kuplovanjem jedinjenja 23 sa jedinjenjem 10 kao što je opisano u šemi 3. Jedinjenje 21 može se pripremiti od jedinjenja 20 prema postupku opisanom za šemu 3.
[0166] Alternativno, kada je grupa B kao što je definisana za formulu I osim vodonika, jedinjenje 20 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 19 sa (C1-C6 alkil)OH, odgovarajuće supstituisanim (C1-C3 alkil)OH, odgovarajuće supstituisanim (C1-C6 alkil)OH, ili hetCyc<a>OH (tj. gde je hetCyc<a>4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno je supstituisan sa OH, C1-C6 alkilom (izborno supstituisan sa 1-3 fluora) ili hidroksiC1-C6 alkilom) pod Mitsunobu reakcionim uslovima (PPh3i diizopropil azodikarboksilat). Jedinjenje 21 može se pripremiti od jedinjenja 20 prema postupku opisanom za šemu 3.
4
[0167] Šema 5 prikazuje alternativnu opštu šemu za sintezu jedinjenja 21 gde A je H, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, n, m i E su kao što su definisani za formulu I.
[0168] Jedinjenje 22 može se pripremiti tretiranjem jedinjenja 4A (pripremljen na primer, kao što je opisano u Šemi 1) sa aluminijum trihloridom.
[0169] Kada je grupa B kao što je definisana za formulu I osim vodonika, jedinjenje 23 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 22 sa C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hidroksiC2-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, dihidroksiC3-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkilidenski prstenom, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-X, hetAr<1>C1-C3 alkil-X, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-X, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-X, hetCyc<a>-X ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-X, gde je R<1>, R<2>, hetAr<1>, i hetCyc<a>su kao što su definisani za Formulu I i X je odlazeći atom ili grupa (halogenid ili triflat), pri čemu je svaki od navedenih reagensa izborno supstituisan sa zaštitnom grupom (npr. t-butildimetilsilil grupa ako B ima jednu ili dve dodatne hidroksi grupe). Na primer, kada je B jednako C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, jedinjenje se može dobiti reakcijom jedinjenja 22 sa C1-C6 alkil-X, gde X je Br ili Cl, ili triflat.
[0170] Jedinjenje 24 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 23 sa složenim 13 (gde su X<1>, X<2>, X<3>i X<4>kao što su definisani za formulu I; L<2>je triflat ili halogenid); Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<z>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima za koje su povezani formiraju 5-6-
4
člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabranih od (C1-C3 alkil)) korišćenjem odgovarajućih uslova reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovanih paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijum katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama).
[0171] Kada je grupa B vodonik, jedinjenje 24 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 22 direktno sa jedinjenjem 13 kao što je gore opisano.
[0172] Jedinjenje 20 može se pripremiti spajanjem jedinjenja 24 sa složenim 15 gde su Prsten D i E kao što su definisani za formulu I pod odgovarajućim SNAr uslovima (na primer, izborno u prisustvu K2CO3i na povišenoj temperaturi). Ako je prsten D jedinjenja 15 sadrži supstituent koji ima primarni ili sekundarni atom azota u prstenu, atom azota je zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja, a zatim amino zaštitna grupa može biti uklonjena posle spajanja kao što je gore opisano.
[0173] Jedinjenje 21 može se pripremiti od jedinjenja 20 prema postupku opisanom za šemu 3.
[0174] Šema 6 prikazuje opštu šemu za sintezu jedinjenja 31 gde A je Cl, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>,
4
Prsten D, R<a>, R<b>, n, m i E su kao što su definisani za formulu I.
[0175] Jedinjenje 25 se može dobiti tretiranjem jedinjenja 4A (pripremljenog npr. kao što je opisano u Šemi 1) sa aluminijum trihloridom.
[0176] Jedinjenje 26 može se pripremiti tretiranjem jedinjenja 25 sa aluminijum trihloridom.
[0177] Kada je grupa B kao što je definisano za formulu I osim vodonika, jedinjenje 27 može se pripremiti reagovanjem jedinjenja 26 sa C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hidroksiC2-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, dihidroksiC3-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-X izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-X, hetAr<1>C1-C3 alkil-X, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-X, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-X, hetCyc<a>-X ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-X, gde su R<1>, R<2>, hetAr<1>, i hetCyc<a>kao što su definisani za Formulu I i X je odlazeći atom ili grupa (halid ili triflat), pri čemu je svaki od navedenih reagenasa izborno supstituisan sa zaštitnom grupom (npr. t-butildimetilsilil grupa ako B ima jednu ili dve dodatne hidroksi grupe). Na primer, kada je B jednako C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, jedinjenje se može dobiti reakcijom jedinjenja 26 sa C1-C6 alkil-X, gde X je Br ili Cl, ili triflat.
[0178] Jedinjenja 28 (kada je grupa B metil), 29 (kada je grupa B vodonik) i 30 (kada je grupa B različita od vodonika) mogu se pripremiti kuplovanjem jedinjenja 25, 26 i 27, respektivno, sa odgovarajućim jedinjenjem estra bora 10 (gde su prsten D, E, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>kao što su definisani za formulu I; Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<z>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima za koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta odabranih od (C1-C3 alkil)) korišćenjem odgovarajućih uslova reakcije unakrsnog kuplovanja katalizovanog paladijumom, npr. Suzuki uslovi reakcije kuplovanja (na primer, paladijum katalizator i izborno ligand u prisustvu neorganske baze, na primer, Pd(PPh3)4i Na2CO3u dioksanu na povišenim temperaturama), pri čemu ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituentom koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja. Amino zaštitna grupa ako je prisutna na supstituentu prstena D jedinjenja 29 ili 30 može biti uklonjena pod standardnim uslovima (na primer, Boc grupa može biti uklonjena tretiranjem jedinjenja 1 u kiselim uslovima, npr. HCl) da bi se dobilo jedinjenje 31 gde E je H.
[0179] Alternativno, E grupa može biti funkcionalizovana (tj. reagovati ili tretirati odgovarajućim reagensom) pod standardnim uslovima opisanim u nastavku da bi se dobilo jedinjenje 31 gde je E kao što je definisano za formulu I osim što E nije H.
[0180] E grupa jedinjenja 11, 11a, 16, 19, 20, 29 i 30 opisana u Šemama 1-6 može se
4
funkcionalizovati (tj. reagovati ili tretirati odgovarajućim reagensom) da bi se uvela E grupa, gde je E bilo koja od E grupa definisanih za formulu I sa izuzetkom vodonika, koristeći standardnu hemiju dobro poznatu stručnjacima. Kako se ovde koristi, termin "funkcionalizovan" se odnosi na korak postupak u E grupi jedinjenja opšte formule I koji reaguje ili se tretira odgovarajućim reagensom da bi se dobilo jedinjenje formule I gde je E kao što je definisano za formulu I osim što E nije vodonik.
[0181] Na primer, derivat amida (npr., gde je E Ar<1>C(=O)NR<g>-, hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p-, p je 0 ili 1, ili R<4>R<5>NC(=O)NR<g>-, može se dobiti reakcijom jedinjenja 11 gde E je -NH2sa kiselim hloridom koristeći konvencionalne uslove formiranja amidne veze, na primer u prisustvu baze (npr. DIEA) u odgovarajućem rastvaraču (DCM) da bi se dobilo funkcionalizovano jedinjenje 12. Alternativno, jedinjenje 11 gde E je -NH2može reagovati sa karboksilnom kiselinom koristeći konvencionalne uslove za formiranje amidne veze, na primer tretiranjem karboksilne kiseline sa agensom za aktiviranje (npr. HATU) nakon čega sledi dodavanje jedinjenja 11 u prisustvu baze ((npr. DIEA) u odgovarajućem rastvaraču (DMA) da bi se dobilo funkcionalizovano jedinjenje 12. Ista hemija se može koristiti sa jedinjenjima 11a, 16, 19, 20, 29 i 30 za pripremu funkcionalizovanih jedinjenja 12, 17, 21 i 31.
[0182] Kao još jedan primer, derivat uree, (npr., gde E je R<4>R<5>NHC(=O)NR<g>-) mogu se pripremiti reagujući jedinjenje 11 gde E je -NH2sa jedinjenjem koje ima formulu R<4>R<5>N=C(=O) gde je R<4>i R<5>su kao što su definisani za formulu I u prisustvu odgovarajuće baze (npr. DIEA) da bi se dobilo funkcionalizovano jedinjenje 12. Ista hemija se može koristiti sa jedinjenjima 11a, 16, 19, 20, 29 i 30 za pripremu funkcionalizovanih jedinjenja 12, 17, 21 i 31.
[0183] Kao drugi primer, alkoksi, ariloksi ili heteroariloksi derivat (npr., gde E je (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkoksi, Ar<1>O- ili hetAr<2>O-), mogu se dobiti reakcijom jedinjenja 11 gde je E hidroksi sa jedinjenjem formule (C1-C6 alkoksi) C1-C6 alkil-X, Ar<1>-X ili hetAr<2>-X, gde X je halogen, u prisustvu neorganske baze (npr., natrijum hidrida ili kalijum hidrida) u odgovarajućem rastvaraču (npr. DMA). Ista hemija se može koristiti sa jedinjenjima 11a, 16, 19, 20, 29 i 30 za pripremu funkcionalizovanih jedinjenja 12, 17, 21 i 31.
[0184] Shodno tome, ovde je dalje obezbeđen postupak za dobijanje jedinjenja formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so kao što je ovde definisana, a koja sadrži:
[0185] (b) za jedinjenje formule I gde su A, B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I sa izuzetkom da E nije vodonik, funkcionalizujući odgovarajuće jedinjenje formule
pri čemu Prsten D, B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, R<a>, R<b>, m i n su kao što su definisani za formulu I i E<1>je -NH2ili OH; ili
(c) za jedinjenje formule I gde A je CN i B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I, reakcjom odgovarajuće jedinjenje formule 14
pri čemu Prsten D, B, X<1>, X<2>, X<3>, i X<4>su kao što su definisani za formulu I i L<2>je halogen ili triflat, sa jedinjenjem formule 15
pri čemu Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I i gde ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N- pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom pre kuplovanja, u prisustvu baze, izborno praćen uklanjanjem amino zaštitne grupe ako je prisutna; ili
(e) za jedinjenje formule I gde A je H, B je H i X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D i E su kao što su definisani za formulu I, tretiranje odgovarajućeg jedinjenja formule 18
gde A je H, B je H i X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I pri čemu ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>je vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen amino zaštitnom grupom,
1
sa aluminijum trihloridom da bi se dobilo jedinjenje 19
izborno praćeno uklanjanjem amino zaštitne grupe ako je prisutna; ili
(f) za jedinjenje formule I gde A je H, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I,
(i) tretiranje odgovarajućeg jedinjenja formule 18
gde A je H, a X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I, pri čemu ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituentom koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen odgovarajućom amino zaštitnom grupom, sa aluminijum trihloridom da bi se dobilo jedinjenje 19
(ii) jedinjenje koje reaguje 19 sa C1-C6 alkil-X izborno supstituisanim sa 1-3 fluora, hidroksiC2-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, dihidroksiC3-C6 alkil-X gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-X izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil-X, hetAr<1>C1-C3 alkil-X, (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-X, (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-X, hetCyc<a>-X ili hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-X, gde su R<1>, R<2>, hetAr<1>, i hetCyc<a>kao što su definisani za Formulu I i X je odlazeći atom ili grupa, izborno praćeno uklanjanjem amino zaštitne grupe ako je prisutna; ili
(g) za jedinjenje formule I gde A je H ili Cl, B je H i X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E
2
su kao što su definisani za formulu I, kuplovanje jedinjenja formule
gde A je H ili Cl sa boronatnim estrom koji ima formulu 10
gde Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<x>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima na koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabranih od (C1-C3 alkil), i prsten D, E, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, R<a>, R<b>, m i n su kao što su definisani za formulu I, pri čemu ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>je vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen amino zaštitnom grupom pre pomenutog kuplovanja, u prisustvu paladijumskog katalizatora i izborno liganda i u prisustvu baze, izborno praćeno uklanjanjem amino zaštitne grupe ako je prisutna; ili
(h) za jedinjenje formule I gde A je H ili Cl, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I, kuplovanje jedinjenja formule
gde A je H ili Cl, sa odgovarajućim boronatnim estarskim jedinjenjem formule 10
gde Z je -B(OR<x>)(OR<y>) i R<x>i R<y>su H ili (1-6C)alkil, ili R<x>i R<y>zajedno sa atomima na koje su povezani formiraju 5-6-člani prsten izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabranih između (C1-C3 alkil), i prsten D, E, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, R<a>, R<b>, m i n su kao što su definisani za formulu I, pri čemu ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>su vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen amino zaštitnom grupom pre pomenutog kuplovanja, u prisustvu paladijumskog katalizatora i izborno liganda i u prisustvu baze, i izborno praćen uklanjanjem amino zaštitne grupe ako je prisutna; ili
(i) za jedinjenje formule I gde A je H, a B, X<1>, X<2>, X<3>, X<4>, Prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I, kuplovanje jedinjenja formule 24
gde su B, X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, kao što su definisani za Formulu I i L<2>je odlazeća grupa ili atom, sa odgovarajućim jedinjenjem formule 15
gde prsten D, R<a>, R<b>, m, n i E su kao što su definisani za formulu I, gde ako je prsten D supstituisan sa R<b>supstituent koji je R<c>R<d>N-, pri čemu jedan ili oba R<c>i R<d>je vodonik, atom azota u R<b>može biti zaštićen amino zaštitnom grupom, izborno praćen uklanjanjem amino zaštitne grupe ako je prisutna; i
uklanjanje bilo koje dodatne zaštitne grupe ako su prisutne i izborno formiranje njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0186] Termin "amino zaštitna grupa" kao što je ovde korišćeno odnosi se na derivat grupa koje se obično koriste da blokiraju ili zaštite amino grupu dok se izvode reakcije na drugim funkcionalnim grupama na jedinjenju. Primeri pogodnih zaštitnih grupa za upotrebu u bilo kojim od postupaka opisanih ovde uključuju karbamate, amide, alkil i aril grupe, imine, kao i mnoge N-heteroatom derivate koji se mogu ukloniti da bi se regenerisala željena grupa amina. Primeri amino zaštitnih grupa su acetil, trifluoroacetil, t-butiloksikarbonil ("Boc"), benziloksikarbonil ("CBz") i 9-fluorenilmetilenoksikarbonil ("Fmoc"). Dodatni primeri ovih grupa, i drugih zaštitnih grupa, mogu se naći u T. W. Greene, et al., Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis. New York: Wiley Interscience, 2006.
[0187] Hidroksi grupe se mogu zaštiti sa bilo kojom pogodnom hidroksi zaštitnom grupom, na primer kao što je opisano u T. W. Greene, et al., Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis. New York: Wiley Interscience, 2006. Primeri uključuju benzil, tritil i silil etre.
[0188] Atomi azota u jedinjenjima opisanim u bilo kom od prethodnih postupaka mogu se zaštiti sa bilo kojom pogodnom zaštitnom grupom za azot, na primer kao što je opisano u Greene & Wuts, eds., "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2nd ed. New York; John Wiley & Sons, Inc., 1991. Primeri zaštitnih grupa za azot uključuju acil i t-butoksikarbonil (BOC), fenoksikarbonil, i [2-(trimetilsilil)etoksi]metil (SEM).
4
[0189] Sposobnost test jedinjenja da deluju kao RET inhibitori može se pokazati analizom opisanom u Primeru A. IC50vrednosti su prikazane u Tabeli 5.
[0190] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde pokazuju potentnu i selektivnu RET inhibiciju. Na primer, jedinjenja obezbeđena ovde pokazuju nanomolarnu potenciju protiv divljeg tipa RET i selektuju RET mutante, uključujući KIF5B-RET fuziju i V804M gatekeeper mutaciju, sa minimumom aktivnosti protiv srodnih kinaza.
[0191] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, selektivno ciljano deluju na RET kinazu. Na primer, jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, mogu selektivno ciljano delovati na RET kinazu u odnosu na drugu kinazu ili ciljno mesto koje nije kinaza.
[0192] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, pokazuje najmanje 30-struku selektivnost za RET kinazu u odnosu na drugu kinazu. Na primer, jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, pokazuje najmanje 40-struku selektivnost; najmanje 50-struku selektivnost; najmanje 60-struku selektivnost; najmanje 70-struku selektivnost; najmanje 80-struku selektivnost; najmanje 90-struku selektivnost; najmanje 100-struku selektivnost; najmanje 200-struku selektivnost; najmanje 300-struku selektivnost; najmanje 400-struku selektivnost; najmanje 500-struku selektivnost; najmanje 600-struku selektivnost; najmanje 700-struku selektivnost; najmanje 800-struku selektivnost; najmanje 900-struku selektivnost; ili najmanje 1000-struku selektivnost za RET kinazu u odnosu na drugi kinazu. U nekim primerima izvođenja, selektivnost za RET kinazu u odnosu na drugu kinazu je merena u ćelijskoj analizi (npr., ćelijska analiza kao što je obezbeđena ovde).
[0193] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde mogu pokazati selektivnost za RET kinazu u odnosu na KDR kinazu (npr., VEGFR2). U nekim primerima izvođenja, selektivnost za RET kinazu u odnosu na KDR kinazu je uočena bez gubitka potencije gatekeeper mutanta. U nekim primerima izvođenja, selektivnost u odnosu na KDR kinazu je najmanje 10-struka (npr., najmanje 40-struka selektivnost; najmanje 50-struka selektivnost; najmanje 60-struka selektivnost; najmanje 70-struka selektivnost; najmanje 80-struka selektivnost; najmanje 90-struka selektivnost; najmanje 100-struka selektivnost; najmanje 150-struka selektivnost; najmanje 200-struka selektivnost; najmanje 250-struka selektivnost; najmanje 300-struka selektivnost; najmanje 350-struka selektivnost; ili najmanje 400-struka selektivnost) u poređenju sa inhibicijom KIF5B-RET (tj. jedinjenja su bila potentnija protiv KIF5B-RET od KDR). U nekim primerima izvođenja, selektivnost za RET kinazu u odnosu na KDR kinazu je oko 30-struka. U nekim primerima izvođenja, selektivnost za RET kinazu u odnosu na KDR kinazu je najmanje 100-struka. U nekim primerima izvođenja, selektivnost za RET kinazu u odnosu na KDR kinazu je najmanje 150-struka. U nekim primerima izvođenja, selektivnost za RET kinazu u odnosu na KDR kinazu je najmanje 400-struka. Bez vezivanja za bilo koju teoriju, smatra se da je potentna inhibicija KDR kinaze zajednička osobina među multikinaznim inhibitorima (MKIs) koji ciljano deluju na RET i može biti izvor doznoograničavajućih toksičnosti uočenih sa takvim jedinjenjima.
[0194] U nekim primerima izvođenja, inhibicija V804M bila je slična onoj uočenoj za divlji tip RET. Na primer, inhibicija V804M bila je unutar oko 2-struke (npr., oko 5-struke, oko 7-struke, oko 10-struke) inhibicije divljeg tipa RET (tj. jedinjenja su slično potentna protiv divljeg tipa RET i V804M). U nekim primerima izvođenja, selektivnost za divlji tip ili V804M RET kinaze u odnosu na drugu kinazu je merena u enzimskoj analizi (npr., enzimska analiza kao što je ovde obezbeđena). U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde pokazuju selektivnu citotoksičnost na RET-mutant ćelije.
[0195] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde pokazuju penetraciju u mozak i/ili centralni nervni sistem (CNS). Takva jedinjenja su sposobna da prođu krvnomoždanu barijeru i inhibiraju RET kinazu u mozgu i/ili druge CNS strukture. U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde su sposobna da prođu krvno-moždanu barijeru na terapeutski efikasan način. Na primer, tretman pacijenta sa kancerom (npr., RET-povezanim kancerom mozga ili CNS) može uključivati primenu (npr., oralnu primenu) jedinjenja na pacijenta. U nekim takvim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde su korisna za tretiranje primarnog tumora mozga ili metastaziranog tumora mozga.
[0196] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, pokazuju jedan ili više od visoke GI apsorpcije, niskog klirensa, i niskog potencijala ua interakcije lek-lek.
[0197] Jedinjenja Formule I su korisna za tretiranje bolesti i poremećaja koji se mogu tretirati inhibitorom RET kinaze, RET-povezanih bolesti i poremećaja, npr., proliferativnih poremećaja, kancera, uključujući hematološke kancere i solidne tumore i gastrointestinalne poremećaje i IBS.
[0198] Kao što je ovde korišćeno, termini "tretirati" ili "tretman" odnosi se na terapeutske ili palijativne mere. Korisni ili željeni klinički rezultati uključuju, ublažavanje, delimično ili u celini, simptoma povezanih sa bolešću ili poremećajem ili stanjem, umanjivanje stepena bolesti, stabilizaciju (tj., ne pogoršavanje) stanja bolesti, odlaganje ili usporavanje napredovanja bolesti, poboljšanje ili palijaciju stanja bolesti (npr., jednog ili više simptoma bolesti), i remisiju (bilo da je delimična ili potpuna), bilo da su detektabilni ili nedetektabilni.
"Tretman" može takođe označavati produžavanje preživljavanja u poređenju očekivanim preživljavanjem bez primanja tretmana.
[0199] Kao što je ovde korišćeno, termini "subjekat," "individua," ili "pacijent," koji su naizmenično korišćeni, odnose se na bilo koju životinju, uključujući miševe, pacove, druge glodare, zečeve, pse, mačke, svinje, krave, ovce, konje, primate, i ljude. U nekim primerima izvođenja, pacijent je čovek. U nekim primerima izvođenja, subjekat je iskusio i/ili pokazao najmanje jedan simptom bolesti ili poremećaja koji treba tretirati i/ili sprečiti. U nekim primerima izvođenja, subjekt je identifikovan ili dijagnostifikovan da ima kancer sa disregulacijom RET gena, RET proteina, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo kojeg od istog (RET-povezanog kancera) (npr., kao što je određeno korišćenjem analize ili kompleta odobrenog od strane regulatorne agencije, npr., odobren od strane FDA). U nekim primerima izvođenja, subjekt ima tumor koji je pozitivan u odnosu na disregulaciju RET gena, RET proteina, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo kojeg od istog (npr., kao što je određeno korišćenjem analize ili kompleta odobrenog od strane regulatorne agencije). Subjekt može biti subjekt sa tumorom (tumorima) koji je pozitivan na disregulaciju RET gena, RET proteina, ili nivoa bilo kojeg od istog (npr., kao što je određeno korišćenjem analize ili kompleta odobrenog od strane regulatorne agencije, npr., odobren od strane FDA). Subjekt može biti subjekt čiji tumori imaju disregulaciju RET gena, RET proteina, ili nivoa bilo kojeg od istog (npr., kao što je određeno korišćenjem analize ili kompleta odobrenog od strane regulatorne agencije, npr., odobren od strane FDA). U nekim primerima izvođenja, sumnja se da subjekat ima RET-povezani kancer. U nekim primerima izvođenja, subjekt ima kliničku dosije koji ukazuje da subjekt ima tumor koji disregulaciju RET gena, RET proteina, ili nivoa bilo kojeg od istog (i izborno klinički dosije koji ukazuje da subjekata treba tretirati sa bilo kojom od kompozicija koje su ovde obezbeđene). U nekim primerima izvođenja, pacijent je pedijatrijski pacijent.
[0200] Termin "pedijatrijski pacijent" kao što je ovde korišćeno odnosi se na pacijenta ispod 21 godine starosti u vreme dijagnoze ili tretmana. Termin "pedijatrijski" može se dodatno podeliti u različite subpopulacije koje uključuju: novorođenčad (od rođenja do prvog meseca života); odojčad (1 mesec do dve godine starosti); decu (dve godine starosti do 12 godina starosti); i adolescente (12 godina starosti do 21 godine starosti (do, ali ne uključujući, dvadeset drugi rođendan)). Berhman RE, Kliegman R, Arvin AM, Nelson WE. Nelson Textbook of Pediatrics, 15th Ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1996; Rudolph AM, et al. Rudolph’s Pediatrics, 21st Ed. New York: McGraw-Hill, 2002; i Avery MD, First LR. Pediatric Medicine, 2nd Ed. Baltimore: Williams & Wilkins; 1994. U nekim primerima izvođenja, pedijatrijski pacijent je od rođenja do prvih 28 dana života, od 29 dana starosti do manje od dve godine starosti, od dve godine starosti do manje od 12 godina starosti, ili 12 godina starosti do 21 godina starosti (do, ali ne uključujući, dvadeset drugi rođendan). U nekim primerima izvođenja, pedijatrijski pacijent je od rođenja do prvih 28 dana života, od 29 dana starosti do manje od 1 godine starosti, od jednog meseca starosti do manje od četiri meseca starosti, od tri meseca starosti do manje od sedam meseci starosti, od šest meseci starosti do manje od 1 godine starosti, od 1 godine starosti do manje od 2 godine starosti, od 2 godina starosti do manje od 3 godine starosti, od 2 godine starosti do manje od sedam godina starosti, od 3 godine starosti do manje od 5 godina starosti, od 5 godina starosti do manje od 10 godina starosti, od 6 godina starosti do manje od 13 godina starosti, od 10 godina starosti do manje od 15 godina starosti, ili od 15 godina starosti do manje od 22 godina starosti.
[0201] U određenim primerima izvođenja, jedinjenja Formule I su korisna za prevenciju bolesti i poremećaja kako su ovde definisani (na primer, autoimune bolesti, inflamatorne bolesti i kancer). Termin "prevencija" kako se ovde koristi označava prevenciju početka, ponovnog pojavljivanja ili širenja, u celini ili delimično, bolesti ili stanja kao što je ovde opisano, ili njihovog simptoma.
[0202] Termin "bolest ili poremećaj povezan sa RET" kako se ovde koristi odnosi se na bolesti ili poremećaje povezane sa ili imaju disregulaciju RET gena, RET kinaze (koja se ovde takođe naziva protein RET kinaze), ili ekspresiju ili aktivnost ili nivo bilo kog (npr., jedan ili više) istih (npr., bilo koji od tipova disregulacije gena RET, RET kinaze, domena RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kojeg od istih opisanih ovde). Primeri bolesti ili poremećaja povezanih sa RET uključuju, na primer, kancer i gastrointestinalne poremećaje i sindrom iritabilnog creva (IBS).
[0203] Termin "RET-povezani kancer" kao što je ovde korišćeno odnosi se na kancere povezane sa ili koji imaju disregulaciju RET gena, RET kinaze (ovde takođe nazvana RET kinaza protein), ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog. Primeri RET-povezanog kancera su opisani ovde.
[0204] Izraz "disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo čega od istog" odnosi se na genetičku mutaciju (npr., translokaciju RET gena koja rezultuje u ekspresiji fuzionog proteina, deleciju RET gena koja rezultuje u ekspresiji RET proteina koji uključuje deleciju najmanje jedne aminokiseline u poređenju sa divljim tipom RET proteina, mutaciju u RET genu koja rezultuje u ekspresiji RET proteina sa jednom ili više tačkastih mutacija, ili alternativno splajsovanoj verziji RET iRNK koja rezultuje u RET proteinu koji ima deleciju najmanje jedne aminokiseline u RET proteinu u poređenju sa divljim tipom RET proteina) ili amplifikaciju RET gena koja rezultuje u prekomernoj ekspresiji RET proteina ili autokrinoj aktivnosti koja je rezultat prekomerne ekspresije RET gena u ćeliji koja rezultuje u patogenom povećanju aktivnosti kinaznog domena RET proteina (npr., konstitutivno aktivni kinazni domen RET proteina) u ćeliji. Kao sledeći primer, disregulacija RET gena, RET proteina, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, može biti mutacija u RET genu koji kodira RET protein koji je konstitutivno aktivan ili ima povećanu aktivnost u poređenju sa proteinom kodiranim od strane RET gena koji ne uključuje mutaciju. Na primer, disregulacija RET gena, RET proteina, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, može biti rezultat translokacije gena ili hromozoma koja rezultuje u ekspresiji fuzionog proteina koji sadrži prvi deo RET koji uključuje funkcionalni kinazni domen, i drugi deo partner proteina (tj., koji nije RET). U nekim primerima, disregulacija RET gena, RET proteina, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog može biti rezultat translokacije gena jednog RET gena sa drugim ne-RET genom. Primeri fuzionih proteina su opisani u Tabeli 1. Primeri tačkastih mutacija/ insercija/delecija RET kinaza proteina su opisani u Tabeli 2. Dodatni primeri mutacija RET kinaznog proteina (npr., tačkaste mutacije) su mutacije koje daju rezistenciju na RET inhibitor. Primeri mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor su opisani u Tabelama 3 i 4.
[0205] Termin "divlji tip" ili "divlji-tip" opisuje nukelinsku kiselinu (npr., RET gen ili RET iRNK) ili protein (npr., RET protein) koji se nalazi u subjektu koji nema RET-povezanu bolest, npr., RET-povezani kancer (i izborno takođe nema povećani rizik od razvoja RET-povezane bolesti i/ili nije suspektan u odnosu na RET-povezanu bolest), ili se nalazi u ćeliji ili tkivu subjekta koji nema RET-povezanu bolest, npr., RET-povezani kancer (i izborno takođe nema povećani rizik od razvoja RET povezane bolesti i/ili nije suspektan u odnosu na RET-povezanu bolest).
[0206] Termin "regulatorna agencija" odnosi se na državnu agenciju za odobravanje medicinske upotrebe farmaceutskih sredstava u državi. Na primer, neograničavajući primer regulatorne agencije je U.S. Food i Drug Administration (FDA).
[0207] Ovde je dat postupak lečenja kancera (npr. kancera povezanog sa RET) kod pacijenta kome je takav tretman potreban, postupak koji obuhvata primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata ili njegove farmaceutske kompozicije. Na primer, ovde su dati postupci za lečenje kancera povezanog sa RET kod pacijenta kome je takav tretman potreban, pri čemu postupak sadrži a) detekciju disregulacije RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istih u uzorku od pacijenta; i b) primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kojeg od istih uključuje jedan ili više fuzionih proteina. Primeri fuzionih proteina RET gena su opisani u tabeli 1. U nekim primerima izvođenja, fuzioni protein je KIF5B-RET. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istih uključuje jednu ili više mutacija/insercija proteina RET kinaze. Primeri tačkastih mutacija/insercija/delecija proteina RET kinaze su opisani u Tabeli 2. U nekim primerima izvođenja, tačkaste mutacije/insercije/delecije proteina RET kinaze su izabrani iz grupe koja se sastoji od M918T, M918V, C634W, V804L i V804M.
[0208] U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, kancer (npr., RET-povezani kancer) je hematološki kancer. U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, kancer (npr., RET-povezani kancer) je solidni tumor. U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, kancer (npr., RET-povezani kancer) je kancer pluća (npr., sitnoćelijski karcinom pluća ili nesitnoćelijski karcinom pluća), papilarni tiroidni kancer, medularni tiroidni kancer, diferencirani tiroidni kancer, rekurentni tiroidni kancer, refraktorni diferencirani tiroidni kancer, adenokarcinom pluća, karcinom ćelija bronhiola pluća, multipla endokrina neoplazija tipa 2A ili 2B (MEN2A ili MEN2B, respektivno), feohromocitom, paratiroidna hiperplazija, kancer dojke, kolorektalni kancer (npr., metastazirani kolorektalni kancer), karcinom papilarnih ćelija bubrega, ganglioneuromatoza gastroenterične sluzokože, inflamatorni mofibroblastni tumor, ili kancer grlića materice. U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, kancer (npr., RET povezani kancer) je izabran iz grupe od: akutne limfoblastne leukemije (ALL), akutne mijeloidne leukemije (AML), kancera kod adolescenata, adrenokortikalnog karcinoma, analnog kancera, kancera slepog creva, astrocitoma, atipičnog teratoidnog/rabdoidnog tumora, karcinoma bazalnih ćelija, kancera žučnog kanala, kancera bešike, kancera kosti, glioma moždanog stabla, tumora mozga, kancera dojke, bronhijalnog tumora, Burkitt.ovog limfoma, karcionoidnog tumora, nepoznatog primarnog karcinoma, srčanih tumora, cervikalnog kancera, kancera u detinjstvu, hordoma, hronične limfocitne leukemije (CLL), hronične mijelogene leukemije (CML), hroničnih mijeloproliferativnih neoplazmi, kancera debelog creva, kolorektalnog kancera, kraniofaringioma, kožnog T-ćelijskog limfoma, kancera žučnog kanala, dukatlnog karcinoma in situ, embrionalnih tumora, endometrijalnog kancera, ependimoma, kancera jednjaka, estezioneuroblastoma, Ewing-ovog sarkoma, ekstrakranijalnog tumora germinativne linije, ekstragonadalnog tumora germinativne linije, ekstrahepatičkog kancera žučnog kanala, kancera oka, kancera jajovoda, fibroznog histiocitoma kosti, kancera žučne kese, kancera želudca, gastrointestinalnog karcionoidnog tumora, gastrointestinalnih stromalnih tumora (GIST), tumora klicine ćelije, gestacione trofoblastne bolesti, glioma, tumora vlasastih ćelija, leukemije vlasastih ćelija, kancera glave i vrata, kancera srca, hepatocelularnog kancera, histiocitoze, Hodgkin-ovog limfoma, hipofaringealnog kancera, intraokularnog melanoma, tumora ćelija ostrvaca, pankreasnih neuroendokrinih tumora, Kaposi sarkoma, kancera bubrega, histiocitoze Langerhans-ovih ćelija, kancera larinksa, leukemije, kancera usne i oralne duplje, kancera jetre, kancer pluća, limfoma, makroglobulinemije, malignog fibroznog histiocitoma kosti, osteokarcinoma, melanoma, karcinoma Merkel ćelija, mezotelioma, metastaznog skvamoznog kancera vrata, karcinoma srednje linije, kancera usta, sindroma multiple endokrine neoplazije, multiplog mijeloma, mycosis fungoides, mijelodisplastičnih sindroma, mijelodisplastičnih/mijeloproliferativnih neoplazmi, mijelogene leukemije, mijeloidne leukemije, multiplog mijeloma, mijeloproliferativnih neoplazmi, kancera nosne šupljine i paranazalnog sinusa, nazofaringealnog kancera, neuroblastoma, ne-Hodgkin-ovog limfoma, nesitnoćelijskog kancera pluća, oralnog kancera, kancera oralne duplje, kancera usne, orofaringealnog kancera, osteosarkoma, kancera jajnika, kancera pankreasa, papilomatoze, paraganglioma, kancera paranazalnog sinusa i nosne šupljine, paratiroidnog kancera, kancera penisa, faringealnog kancera, feohromocitoma, kancera hipofize, neoplazme plazma ćelije, pleuropulmonalnog blastoma, kancera u trudnoći i kancera dojke, primarnog limfoma centralnog nervnog sistema, primarnog peritonealnog kancera, kancera prostate, rektalnog kancera, kancera bubrežnih ćelija, retinoblastoma, rabdomiosarkoma, kancera pljuvačne žlezde, sarkoma, Sezary sindroma, kancera kože, sitnoćelijskog kancera pluća, kancera tankog creva, sarkoma mekog tkiva, karcinoma skvamoznih ćelija, skvamoznog kancera vrata, kancera želudca, T-ćelijskog limfoma, kancera testisa, kancera grla, timoma i timusnog karcinoma, tiroidnog kancera, kancera prelaznih ćelija renalnog pelvisa i uretera, nepoznatog primarnog karcinoma, uretralnog kancera, kancera materice, sarkoma materice, kancera vagine, kancera vulve, i Wilms-ovog tumora.
[0209] U nekim primerima izvođenja, hematološki kancer (npr., hematološki kanceri koji su RET-povezani kanceri) je izabran iz grupe koja se sastoji od leukemija, limfoma, (ne-Hodgkin-ovog limfoma), Hodgkin-ove bolesti (takođe nazvane Hodgkin-ov limfom), i mijeloma, na primer, akutne limfocitne leukemije (ALL), akutne mijeloidne leukemije (AML), akutne promijelocitne leukemije (APL), hronične limfocitne leukemije (CLL), hronične mijeloidne leukemije (CML), hronične mijelomonocitne leukemije (CMML), hronične neutrofilne leukemije (CNL), akutne nediferencirane leukemije (AUL),
1
anaplastičnog krupnoćelijskog limfoma (ALCL), prolimfocitne leukemije (PML), juvenilne mijelomonocitne leukemije (JMML), adultne T-ćelijske ALL, AML sa trilinjskom displazijom (AML/TMDS), leukemije mešovite linije (MLL), mijelodisplastičnih sindroma (MDSs), mijeloproliferativnih poremećaja (MPD), i multiplog mijeloma (MM). Dodatni primeri hematoloških kancera uključuju mijeloproliferativne poremećaje (MPD), polycythemia vera (PV), esencijalnu trombocitopeniju (ET) i idiopatsku primarnu mijelofibrozu (IMF/IPF/PMF). U primeru izvođenja, hematološki kancer (npr., hematološki kancer koji je RET-povezani kancer) je AML ili CMML.
[0210] U nekim primerima izvođenja, kancer (npr., RET-povezani kancer) je solidni tumor. Primeri solidnih tumora (npr., solidni tumori koji su RET-povezani kanceri) uključuju, na primer, tiroidni kancer (npr., papilarni tiroidni karcinom, medularni tiroidni karcinom), kancer pluća (npr., adenokarcinom pluća, sitnoćelijski karcinom pluća), pankreasni kancer, pankreasni duktalni karcinom, kancer dojke, kancer debelog creva, kolorektalni kancer, kancer prostate, karcinom bubrežnih ćelija, tumore glave i vrata, neuroblastom, i melanom. Videti, na primer, Nature Reviews Cancer, 2014, 14, 173-186.
[0211] U nekim primerima izvođenja, kancer je izabran iz grupe koja se sastoji od kancera pluća, papilarnog tiroidnog kancera, medularnog tiroidnog kancera, diferenciranog tiroidnog kancera, rekurentnog tiroidnog kancera, refraktornog diferenciranog tiroidnog kancera, multiple endokrine neoplazije tipa 2A ili 2B (MEN2A ili MEN2B, respektivno), feohromocitoma, paratioroidne hiperplazije, kancera dojke, kolorektalnog kancera, karcinoma papilarnih bubrežnih ćelija, ganglioneuromatoze gastroenterične sluzokože, i kancera grlića materice.
[0212] U nekim primerima izvođenja, pacijent je čovek.
[0213] Jedinjenja Formule I i njegove farmaceutski prihvatljive soli su takođe korisni za tretiranje RET-povezanog kancera.
[0214] Disregulacija RET kinaze, RET gena, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog (npr., jednog ili više) od istog može doprineti tumorigenezi. Na primer, disregulacija RET kinaze, RET gena, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istog može biti translokacija, prekomerna ekspresija, aktivacija, amplifikacija, ili mutacija RET kinaze, RET gena, ili RET kinaznog domena. Translokacija može uključiti translokacije koje uključuju RET kinazni domen, mutacije mogu uključiti mutacije koje uključuju mesto vezivanja RET liganda, i amplifikacija može biti RET gena. Druge disregulacije mogu uključiti RET iRNK splajs varijante i RET autokrinu/parakrinu signalizaciju, koja takođe može doprineti tumorigenezi.
2
[0215] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje prekomernu ekspresiju divljeg tipa RET kinaze (npr., dovodeći do autokrine aktivacije). U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje prekomernu ekspresiju, aktivaciju, amplifikaciju, ili mutaciju u hromozomskom segmentu koji sadrži RET gen ili njegov deo, uključujući, na primer, deo kinaznog domena, ili deo koji je sposoban da pokaže kinaznu aktivnost.
[0216] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje jednu ili više hromozomskih translokacija ili inverzija koje rezultuju u fuziji RET gena. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, rezultat je genetičkih translokacija u kojima eksprimirani protein je fuzioni protein koji sadrži ostatke ne-RET partner proteina, i uključuje minimum funkcionalnog RET kinaznog domena.
[0217] Primeri RET fuzionih proteina su prikazani u Tabeli 1.
Tabela 1. Primeri RET fuzionih partnera i kancera
4
[0218] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje jednu ili više delecija (npr., deleciju aminokiseline na položaju 4), insercije, ili tačkastu mutaciju(e) u RET kinazi. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje deleciju jednog ili više ostataka RET kinaze, što rezultuje u konstitutivnoj aktivnosti RET kinaznog domena.
[0219] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje najmanje jednu tačkastu mutaciju u RET genu koja rezultuje u proizvodnji RET kinaze koja ima jednu ili više aminokiselinskih supstitucija, insercija, ili delecija u poređenju sa divljim tipom RET kinaze (videti, na primer, tačkaste mutacije navedene u Tabeli 2).
Tabela 2. Aktivirajuće tačkaste mutacije/insercije/delecije RET Kinaza Proteina
1
2
[0220] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje najmanje jednu tačkastu mutaciju u RET genu koja rezultuje u proizvodnji RET kinaze koja ima jednu ili više aminokiselinskih supstitucija, insercija, ili delecija u poređenju sa divljim tipom RET kinaze (videti, na primer, tačkaste mutacije navedene u Tabeli 2a).
Aktivirajuće tačkaste mutacije/insercije/delecije RET Kinaza Proteina
[0221]
4
[0222] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje splajs varijaciju u RET iRNK koja rezultuje u eksprimiranom proteinu koji je alternativno splajsovana varijanta RET koji ima najmanje jedan deletirani ostatak (u poređenju sa divljim tipom RET kinaze) što rezultuje u konstitutivnoj aktivnosti RET kinaznog domena.
[0223] "Inhibitor RET kinaze" kao što je ovde definisano uključuje bilo koje jedinjenje koje pokazuje aktivnost inhibicije RET. U nekim primerima izvođenja, inhibitor RET kinaze je selektivan u odnosu na RET kinazu. Primeri Inhibitori RET kinaze mogu pokazivati inhibitornu aktivnost (IC50) protiv RET kinaze od manje od oko 1000 nM, manje od oko 500 nM, manje od oko 200 nM, manje od oko 100 nM, manje od oko 50 nM, manje od oko 25 nM, manje od oko 10 nM, ili manje od oko 1 nM kao što je mereno u analizi kao što je ovde opisano. U nekim primerima izvođenja, inhibitor RET kinaze može pokazivati inhibitornu aktivnost (IC50) protiv RET kinaze od manje od oko 25 nM, manje od oko 10 nM, manje od oko 5 nM, ili manje od oko 1 nM kao što je mereno analizom kao što je ovde obezbeđeno.
[0224] Kao što je ovde korišćeno, "prvi inhibitor RET kinaze" ili "prvi RET inhibitor" je inhibitor RET kinaze kao što je ovde definisano, ali koji ne uključuje jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat kao što je ovde definisano. Kao što je ovde korišćeno, "drugi inhibitor RET kinaze" ili "drugi RET inhibitor" je inhibitor RET kinaze kao što je ovde definisano, ali koji ne uključuje jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat kao što je ovde definisano. Kada su prisutni i prvi i drugi RET inhibitor u postupku je ovde obezbeđen, prvi i drugi inhibitor RET kinaze su različiti.
[0225] U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, uključuje najmanje jednu tačkastu mutaciju u RET genu koja rezultuje u proizvodnji RET kinaze koja ima jednu ili više aminokiselinskih supstitucija ili insercija ili delecija u RET genu koja rezultuje u proizvodnji RET kinaze koja ima jednu ili više umetnutih ili uklonjenih aminokiselina, u poređenju sa divljim tipom RET kinaze. U nekim slučajevima, rezultujuća RET kinaza je rezistentnija na inhibiciju aktivnosti njene fosfotransferaze sa jednim ili više prvih inhibitora RET kinaze (kinaza), u poređenju sa divljim tipom RET kinaze ili RET kinazom koja ne uključuje istu mutaciju. Takve mutacije, izborno, ne povećavaju osetljivost ćelija kancera ili tumora koje imaju RET kinaza na tretman sa jedinjenjem Formule I ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli ili solvatom (npr., u poređenju sa ćelijom kancera ili tumora koja ne uključuje određenu mutaciju koja daje rezistenciju na RET inhibitor). U takvim primerima izvođenja, mutacija koja daje rezistenciju na RET inhibitor može rezultovati u RET kinazi koja ima jedno ili više od povećane Vmax, smanjene Kmza ATP, i povećane KDza prvi inhibitor RET kinaze, kada je u prisustvu prvog inhibitora RET kinaze, u poređenju sa divljim tipom RET kinaze ili RET kinazom koja nema istu mutaciju u prisustvu istog prvog inhibitora RET kinaze.
[0226] U drugim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo čega od istog, uključuje najmanje jednu tačkastu mutaciju u RET genu koja rezultuje u proizvodnji RET kinaze koja ima jednu ili više aminokiselinskih supstitucija u poređenju sa divljim tipom RET kinaze, i koja ima povećanu rezistenciju na jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, u poređenju sa divljim tipom RET kinaze ili RET kinazom koja ne uključuje istu mutaciju. U takvim primerima izvođenja, mutacija koja daje rezistenciju na RET inhibitor može rezultovati u RET kinazi koja ima jedno ili više od povećane Vmax, smanjene Km, i smanjene KDjedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata, u poređenju sa divljim tipom RET kinaze ili RET kinazom koja nema istu mutaciju u prisustvu istog jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata.
[0227] Primeri mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor mogu, npr., uključivati tačkaste mutacije, insercije, ili delecije u i blizu mesta vezivanja ATP u tercijernoj strukturi RET kinaze, uključujući gatekeeper ostatku, ostacima P-petlje, ostacima u ili blizu DFG motiva, i čeone aminokiselinske ostatke rastvarača koji se vezuje za rascep u ATP. Dodatni primeri ovih tipova mutacija uključuju promene u ostacima koji mogu uticati na enzimsku aktivnost i/ili vezivanje leka uključujući ostatke u aktivacionoj petlji, ostatke blizu ili one koji su u interakciji sa aktivacionom petljom, ostatke koji doprinose aktivnim ili neaktivnim konformacijama enzima, promene koje uključuju mutacije, delecije, i insercije u petlji koja prethodi C-heliksu i u C-heliksu. Specifični ostaci ili regioni ostataka koji se mogu promeniti (i koji su mutacije koje daju rezistenciju na RET inhibitor) uključuju one navedene u Tabeli 3 na osnovu sekvence humanog divljeg tipa RET proteina (npr., SEQ ID NO: 1). Dodatni primeri položaja mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor su prikazane u Tabeli 4. Promene ovih ostataka mogu uključivati pojedinačne ili višestruke promene aminokiselina, insercije unutar ili koje flankiraju sekvence, i delecije unutar ili koje flankiraju sekvence.
[0228] Primer sekvence zrelog humanog RET proteina (SEQ ID NO: 1)
[0229] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule I i farmaceutski prihvatljive soli su korisni za tretman pacijenata koji razvijaju kancer sa mutacijama koje daju rezistenciju na RET inhibitor (npr., koje rezultuju u povećanoj rezistenciji na prvi RET inhibitor, npr., supstitucija na aminokiselinskom položaju 804, npr., V804M, V804L, ili V804E, i/ili jedna ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor navedene u Tabelama 3 i 4) sa ili doziranjem u kombinaciji ili kao prateća terapija postojećim tretmanima sa lekovima (npr., drugi inhibitori RET kinaze; npr., prvi i/ili drugi inhibitori RET kinaze). Primeri prvog i drugog inhibitora RET kinaze su opisani ovde. U nekim primerima izvođenja, prvi ili drugi inhibitor RET kinaze može se izabrati iz grupe koja se sastoji od kabozantinib, vandetanib, alektinib, sorafenib, lenvatinib, ponatinib, dovitinib, sunitinib, foretinib, BLU667, i BLU6864.
[0230] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja Formule I ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su korisni za tretiranje kancera za koji je identifikovano da ima jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET (koja rezultuje u povećanoj rezistenciji na prvi ili drugi RET inhibitor, npr., supstitucija na aminokiselinskom položaju 804, npr., V804M, V804L, ili V804E). Primeri mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor su navedeni u Tabelama 3 i 4.
Tabela 3. Mutacije koje daju rezistenciju na RET inhibitor
1
Tabela 4. Dodatni primeri aminokiselinskih položaja mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor
2
[0231] Onkogena uloga RET je prvi put opisana kod papilarnog tiroidnog karcinoma (PTC) (Grieco et al., Cell, 1990, 60, 557-63), koji nastaje od folikularnih tiroidnih ćelija i najčešći je oblik tiroidnog maligniteta. Približno 20-30% PTC nosi somatske hromozomske rearanžmane (translokacije ili inverzije) koje vezuju promotor i 5’ delove konstitutivno eksprimiranih, nesrodnih gena sa domenom RET tirozin kinaze (Greco et al., Q. J. Nucl. Med. Mol. Imaging, 2009, 53, 440-54), tako upravljajući njegovom ektopijskom ekspresijom u tiroidnim ćelijama. Do danas, različiti fuzioni partneri su identifikovani, pri čemu svi obezbeđuju domen interakcije protein/protein koji indukuje ligand nezavisnu RET dimerizaciju i konstitutivnu kinaznu aktivnost (videti, npr., Tabelu 1). Uloga RET-PTC rearanžmana u patogenezi PTC je potvrđena kod transgeni miševa (Santoro et al., Oncogene, 1996, 12, 1821-6). Nedavno, identifikovana je 10.6 Mb pericentrična inverzija na hromozomu 10, gde je mapiran RET gen, kod oko 2% pacijenata sa adenokarcinomom pluća, stvarajući različite varijante himernog gena KIF5B-RET (Ju et al., Genome Res., 2012, 22, 436-45; Kohno et al., 2012, Nature Med., 18, 375-7; Takeuchi et al., Nature Med., 2012, 18, 378-81; Lipson et al., 2012, Nature Med., 18, 382-4). Fuzioni transkripti su visoko eksprimirani i svi rezultujući himerni proteini sadrže N-terminalni deo uvijenog regiona od KIF5B, koji posreduje u homodimerizaciji, i ceo domen RET kinaze. Nijedan od RET pozitivnih pacijenata ne nosi druge poznate onkogene alteracije (kao što je EGFR ili K-Ras mutaciju, ALK translokaciju), što govori u prilog mogućnosti da KIF5B-RET fuzija može biti vodeća mutacija adenokarcinoma pluća. Onkogeni potencijal KIF5B-RET je potvrđen transfekcijom fuzionog gena u kultivisane ćelijske linije: slično onome što je uočeno sa RET-PTC fuzionim proteinima, KIF5B-RET je konstitutivno fosforilisan i indukuje NIH-3T3 transformaciju i IL-3 nezavisan rast BA-F3 ćelija. Međutim, identifikovani su drugi RET fuzioni proteini kod pacijenata sa adenokarcinom pluća, CCDC6-RET fuzioni protein, za koga je nađeno da igra ključnu ulogu u proliferaciji LC-2/ad ćelijske linije humanog adenokarcinoma pluća (Journal of Thoracic Oncology, 2012, 7(12):1872-1876). Pokazano je da su RET inhibitori korisni u tretiranju kancera pluća koji uključuju RET rearanžmane (Drilon, A.E. et al. J Clin Oncol 33, 2015 (suppl; abstr 8007)). RET fuzioni proteini su takođe identifikovani kod pacijenata koji imaju kolorektalni kancer (Song Eun-Kee, et al. International Journal of Kancer, 2015, 136: 1967-1975).
[0232] Osim rearanžmana RET sekvence, tačkaste mutacije sa dobijanjem funkcije RET proto-onkogena su takođe vodeći onkogeni događaji, kao št5o je pokazano kod medularnog tiroidnog karcinoma (MTC), koji nastaje od parafolikularnih ćelija koje proizvode kalcitonin (de Groot, et al., Endocrine Rev., 2006, 27, 535-60; Wells i Santoro, Clin. Cancer Res., 2009, 15, 7119-7122). Oko 25% od MTC je povezano sa multiplom endokrinom neoplazijom tipa 2 (MEN2), grupom nasleđenih sindroma kancera koji pogađaju neuroendokrine organe izazvanom aktivirajućim tačkastim mutacijama klicine linije RET. Kod MEN2 podtipova (MEN2A, MEN2B i familijalne MTC/FMTC) mutacije RET gena imaju jaku fenotip-genotip korelaciju koja definiše različite MTC agresivnosti i kliničke manifestacije bolesti. Kod MEN2A sindroma mutacije uključuju jedan od šest cisteinskih ostataka (uglavnom C634) lociranih u ekstracelularnom regionu bogatom cisteinom, dovodeći do ligand-nezavisne homodimerizacije i konstitutivne RET aktivacije. Pacijenti razvijaju MTC u ranoj dobi (početak sa 5-25 godina) i mogu takođe razviti feohromocitom (50%) i hiperparatiroidizam. MEN2B je uglavnom izazvana sa M918T mutacijom, koja je locirana u kinaznom domenu.
4
Ova mutacija konstitutivno aktivira RET u njegovom monomernom stanju i menja prepoznavanje supstrata od strane kinaze. MEN2B sindrom se karakteriše ranom pojavom (< 1 godine) i veoma agresivnim oblikom MTC, feohromocitoma (50% pacijenata) i ganglioneuromima. Kod FMTC jedina manifestacija bolesti je MTC, koja se obično javlja u adultnom dobu. Detektovano je mnogo različith mutacija, koji obuhvataju ceo RET gen. Preostalih 75% od MTC slučajeva su sporadični i oko 50% njih nosi RET somatske mutacije: najčešća mutacija je M918T koja je, kao kod MEN2B, povezana sa najagresivnijim fenotipom. Somatske tačkaste mutacije RET su takođe opisane kod kolorektalnog kancera (Wood et al., Science, 2007, 318, 1108-13) i sitnoćelijskog karcinoma pluća (Jpn. J. Cancer Res., 1995, 86, 1127-30).
[0233] Pronađeno je da su RET signalizujuće komponente eksprimirane u primarnim tumorima dojke i da funkcionalno interaguju sa putem estrogen receptor-cc kod ćelijskih linija tumora dojke (Boulay et al., Cancer Res. 2008, 68, 3743-51; Plaza-Menacho et al., Oncogene, 2010, 29, 4648-57), dok RET ekspresija i aktivacija sa ligandima GDNF familije može imati važnu ulogu u perineuralnoj invaziji sa različitim tipovima ćelija kancera (Ito et al., Surgery, 2005, 138, 788-94; Gil et al., J. Natl. Kancer Inst., 2010, 102, 107-18; Iwahashi et al., Kancer, 2002, 94, 167-74).
[0234] RET je takođe eksprimiran u 30-70% invazivnog kancera dojke, sa ekspresijom koja je relativno učestalija kod estrogen receptor-pozitivnih tumora (Plaza-Menacho, I., et al., Oncogene, 2010, 29, 4648-4657; Esseghir, S., et al., Cancer Res., 2007, 67, 11732-11741; Morandi, A., et al., Cancer Res., 2013, 73, 3783-3795; Gattelli, A., EMBO Mol. Med., 2013, 5, 1335-1350).
[0235] Identifikacija RET rearanžmana je objavljena kod subseta (ksenografti izvedeni iz pacijenta) PDX ustanovljenih kod kolorektalnog kancera. Iako ostaje da se definiše učestalost takvih događaja kod pacijenata sa kolorektalnim kancerom, ovi podaci sugerišu ulogu RET kao ciljane strukture u ovoj indikaciji (Gozgit et al., AACR Annual Meeting 2014). Studije su pokazale da je RET promotor često metilovan kod kolorektalnih kancera, i heterozigotne missens mutacije, za koje je predviđeno da smanjuju RET ekspresiju, su identifikovane u 5-10% slučajeva, što sugeriše da RET može iamti neke osobine tumor supresora u sporadičnim kancerima debelog creva (Luo, Y., et al., Oncogene, 2013, 32, 2037-2047; Sjoblom, T., et al., Science, 2006, 268-274; Kancer Genome Atlas Network, Nature, 2012, 487, 330-337).
[0236] Sada je pokazano da povećani broj tipova tumora eksprimira značajne nivoe divljeg tipa RET kinaze koji bi mogli imati implikacije u odnosu na napredovanje i širenje tumora. RET je eksprimiran u 50-65% karcinoma pankreasnog kanala, i ekspresija je češća kod metastazirajućim i tumorima višeg stepena (Ito, Y, et al., Surgery, 2005, 138, 788-794; Zeng, Q., et al., J. Int. Med. Res.2008, 36, 656-664).
[0237] U neoplazmama hematopoetskih linija, RET je eksprimiran u akutnoj mijeloidnoj leukemiji (AML) sa monocitnom diferencijacijom, kao i u CMML (Gattei, V. et al., Blood, 1997, 89, 2925-2937; Gattei, V., et al., Ann. Hematol, 1998, 77, 207-210; Camos, M., Cancer Res. 2006, 66, 6947-6954). Nedavne studije su identifikovale retke hromozomske rearanžmane koji uključuju RET kod pacijenata sa hroničnom mijelomonocitnom leukemijom (CMML). CMML je često asocirana sa rearanžmanima nekoliko tirozin kinaza, što rezultuje u eskpresiji himernih citosolnih onkoproteina što dovodi do aktivacije RAS puta (Kohlmann, A., et al., J. Clin. Oncol. 2010, 28, 2858-2865). U slučaju RET, fuzije gena koje povezuju RET sa BCR (BCR-RET) ili sa onkogenim partnerom receptora 1 faktora rasta fibroblasta (FGFR1OPRET) su transformisane u ranim hematopoetskim progenitorskim ćelijama i mogle su da promene sazrevanje ovih ćelija prema monocitnim putevima, verovatno do inicijacije RET-posredovane RAS signalizacije (Ballerini, P., et al., Leukemia, 2012, 26, 2384-2389).
[0238] Takođe je pokazano da se RET ekspresija dešava u nekoliko drugih tipova tumora, uključujući kancer prostate, sitnoćelijski karcinom pluća, melanom, karcinom bubrežnih ćelija, i tumore glave i vrata (Narita, N., et al., Oncogene, 2009, 28, 3058-3068; Mulligan, L. M., et al., Genes Chromosomes Kancer, 1998, 21, 326-332; Flavin, R., et al., Urol. Oncol., 2012, 30, 900-905; Dawson, D. M., J Natl Kancer Inst, 1998, 90, 519-523).
[0239] Kod neuroblastoma, RET ekspresija i aktivacija sa GFLs ima uloge u diferencijaciji ćelija tumora, potencijalno u kolaboraciji sa drugim receptorima neurotrofnog faktora da bi se nishodno regulisao N-Myc, čija je ekspresija marker loše prognoze (Hofstra, R. M., W., et al., Hum. Genet. 1996, 97, 362-364; Petersen, S. i Bogenmann, E., Oncogene, 2004, 23, 213-225; Brodeur, G. M., Nature Ref. Kancer, 2003, 3, 203-216).
[0240] Poznati su multiciljani inhibitori koji unakrsno reaguju sa RET (Borrello, M.G., et al., Expert Opin. Ther. Targets, 2013, 17(4), 403-419; Međunarodne patentne prijave br. WO 2014/141187, WO 2014/184069, i WO 2015/079251).
[0241] Takođe je obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat ili njegova farmaceutska kompozicija za upotrebu u lečenju kancera povezanog sa RET kod pacijenta koji je identifikovan ili dijagnostikovan da ima kancer povezan sa RET kroz korak izvođenja testa (npr. in vitro test) na uzorku dobijenom od pacijenta da bi se utvrdilo da li pacijent ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo čega od istih, gde je prisustvo disregulacije RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kojeg od istih, identifikuje da pacijent ima kancer povezan sa RET. Takođe je obezbeđena upotreba jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata za proizvodnju leka za lečenje kancera povezanog sa RET kod pacijenta koji je identifikovan ili dijagnostikovan da ima kancer povezan sa RET kroz korak izvođenja test na uzorku dobijenom od pacijenta da bi se utvrdilo da li pacijent ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo čega od istih gde je prisustvo disregulacije RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kojeg od istih, identifikuje da pacijent ima kancer povezan sa RET. Neki primeri izvođenja bilo koje od ovde opisanih upotreba dalje uključuju snimanje u kliničkom dosijeu pacijenta (npr., kompjuterski čitljiv medijum) da je utvrđeno da pacijent ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istih, kroz izvođenje testa, trebalo bi da se primeni jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat ili njegova farmaceutska kompozicija. U nekim primerima izvođenja, test koristi sekvenciranje sledeće generacije, pirosekvenciju, imunohistohemiju ili FISH analizu. U nekim primerima izvođenja, test je test koji je odobrila regulatorna agencija, npr. komplet koji je odobrila FDA. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istih uključuje jednu ili više mutacija otpornosti na inhibitor RET.
[0242] Takođe je obezbeđeno jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, za upotrebu u tretmanu kancera kod pacijenta kod koga postoji potreba za tim ili pacijenta kod koga je postavljena dijagnoza da ima RET-povezani kancer. Takođe je obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat za upotrebu u tretmanu kancera kod pacijenta koji je identifikovan ili kod koga je postavljena dijagnoza da ima RET-povezani kancer. U nekim primerima izvođenja, kancer je RET-povezani kancer, na primer, RET-povezani kancer koji ima jednim ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor. U nekim primerima izvođenja, pacijent je identifikovan ili dijagnostikovan da ima RET-povezani kancer upotrebom testa ili analize odobrene od strane regulatorne agencije, npr., FDA-odobreni test ili analiza za identifikaciju disregulacije RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, kod pacijenta ili uzorka biopsije pacijenta. Kao što je ovde obezbeđeno, RET-povezani kancer uključuje one opisane ovde i poznate u tehnici.
[0243] U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, pacijent je identifikovan ili dijagnostikovan da ima kancer sa disregulacijom RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog. U nekim primerima izvođenja bilo koji od postupaka ili upotreba opisanih ovde, pacijent ima tumor koji je pozitivan u odnosu na disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog.
U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, pacijent može biti pacijent sa tumorom (tumorima) koji je pozitivan u odnosu na disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog. U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, pacijent može biti pacijent čiji tumori imaju disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog. U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, sumnja se da pacijent ima RET-povezani kancer (npr., kancer koji ima jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor). U nekim primerima izvođenja, ovde su obezbeđeni postupci za tretman RET-povezanog kancera kod pacijenta kod koga postoji potreba za takvim tretmanom, pri čemu postupak sadrži a) detekciju disregulacije RET gena, RET kinaze ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istih u uzorku od pacijenta i b) primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog uključuje jedan ili više fuzionih proteina. Primeri fuzionih proteina RET gena opisani su u Tabeli 1. U nekim primerima izvođenja, fuzioni protein je KIF5B-RET. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog uključuje jednu ili više tačkastih mutacija/insercija/delecija RET kinaza proteina. Primeri tačkastih mutacija/insercija/delecija RET kinaza proteina su opisani u Tabeli 2. U nekim primerima izvođenja, tačkaste mutacije/insercije/delecije RET kinaza proteina su izabrane iz grupe koja se sastoji od M918T, M918V, C634W, V804L, i V804M. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog uključuje jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor. Primeri mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor su opisani u Tabelama 3 i 4. U nekim primerima izvođenja, mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor je V804M. U nekim primerima izvođenja, kancer sa disregulacijom RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog je određen upotrebom testa ili analize odobrene od strane regulatorne agencije, npr., FDA-odobreni test ili analiza. U nekim primerima izvođenja, tumor koji je pozitivan u odnosu na disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog je tumor pozitivan na jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor. U nekim primerima izvođenja, tumor sa disregulacijom RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog je određen upotrebom testa ili analize odobrene od strane regulatorne agencije, npr., FDA-odobreni test ili analiza.
[0244] U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, pacijent ima klinički dosije koji ukazuje da pacijent ima tumor koji ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog (npr., tumor koji ima jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor). U nekim primerima izvođenja, klinički dosije ukazuje da pacijenta treba tretirati sa jednim ili više jedinjenja Formule I ili njegovim farmaceutski prihvatljivim solima ili kompozicijama obezbeđenim ovde. U nekim primerima izvođenja, kancer sa disregulacijom RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog je određen upotrebom testa ili analize odobrene od strane regulatorne agencije, npr., FDA-odobreni test ili komplet. U nekim primerima izvođenja, tumor koji je pozitivan na disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresiju ili aktivnost ili nivo bilo kojeg od istih je tumor pozitivan na jednu ili više mutacija otpornosti na inhibitor RET. U nekim primerima izvođenja, tumor sa disregulacijom RET gena, RET kinaze, ili ekspresijom ili aktivnošću ili nivoom bilo čega od istih se određuje korišćenjem testa ili kompšleta odobrenog od strane regulatorne agencije, npr., odobrenog od strane FDA.
[0245] Takođe je obezbeđeno jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju kancera povezanog sa RET kod pacijenta koji ima klinički dosije koji ukazuje da pacijent ima disregulaciju RET gena, RET kinaze ili ekspresiju ili aktivnost ili nivo bilo čega od istog. Neki primeri izvođenja ovih upotreba mogu dalje da uključuju: korak izvođenja na uzorku dobijenom od pacijenta da bi se utvrdilo da li pacijent ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresiju ili aktivnost ili nivo bilo čega od istog, i beleženje informacija u pacijentov klinički dosije (npr. računarski čitljiv medijum) da je pacijent identifikovan da ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresiju ili aktivnost ili nivo bilo čega od istog. U nekim primerima izvođenja, test je in vitro test. Na primer, test koji koristi sekvenciranje sledeće generacije, imunohistohemiju ili FISH analizu. U nekim primerima izvođenja, test je komplet koji je odobrila regulatorna agencija, npr., odobren od strane FDA. U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti ili nivoa bilo kog od istih uključuje jednu ili više mutacija otpornosti na inhibitor RET.
[0246] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde poakzuju penetraciju u mozak i/ili centralni nervni sistem (CNS). Takva jedinjenja su sposobna da prođu krvno moždanu vbarijeru i inhibiraju RET kinazu u mozgu i/ili drugim CNS strukturama. U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde su sposobna da prođu krvno mooždanu barijeru u terapeutski efikasnoj količini. Na primer, tretman pacijenta sa kancerom (npr., RET-povezani kancer, RET-povezani kancer mozga ili CNS) može uključivati primenu (npr., oralnu primenu) jedinjenja na pacijenta. U nekim takvim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde su korisna za tretiranje primarnog moždanog tumora ili metastaziranog tumora mozga. Na primer, jedinjenja se mogu koristiti u tretmanu jednog ili više od glioma, glioblastoma (takođe poznatoih kao glioblastoma multiforme), astrocitoma, oligodendroglioma, ependimoma, i mešovith glioma, meningioma, meduloblastoma, ganglioglioma, švanoma (neurilemoma), i kraniofaringioma (videti, na primer, tumore navedene u Louis, D.N. et al. Acta Neuropathol 131(6), 803-820 (June 2016)). U nekim primerima izvođenja, tumor mozga je primarni tumor mozga. U nekim primerima izvođenja, pacijent je prethodno tretiran sa drugim antikancer sredstvom, npr., drugim RET inhibitorom (npr., jedinjenje koje nije jedinjenje Opšte Formule I) ili multi-kinaznim inhibitorom. U nekim primerima izvođenja, tumor mozga je metastazirani tumor mozga. U nekim primerima izvođenja, pacijent je prethodno tretiran sa drugim antikancer sredstvom, npr., drugim RET inhibitorom (npr., jedinjenje koje nije jedinjenje Opšte Formule I) ili multi-kinazni inhibitor.
[0247] U nekim primerima izvođenja bilo koje od upotreba opisanih ovde, analiza kortišćena za određivanje da li pacijent ima disregulaciju RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog, korišćenjem uzorka od pacijenta može uključivati, na primer, sekvenciranje sledeće generacije, imunohistohemiju, fluorescentnu mikroskopiju, break apart FISH analizu, Southern bloting, Westran bloting, FACS analizu, Northern bloting, i PCR-zasnovanu amplifikaciju (npr., RT-PCR i kvantitativna real-time RT-PCR). Kao što je dovbro poznato u tehnici, analize se tipično izvode, npr., sa najmanje jednom obeleženom probbom nukleinske kiseline probe ili najmanje jednim obeleženim antitelom ili njegovim antigen-vezujućim fragmentom. Analize mogu uključivati druge postupke detekcije poznate u tehnici za detekciju disregulacije RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog (videti, npr., ovde citirane reference). U nekim primerima izvođenja, disregulacija RET gena, RET kinaze, ili ekspresije ili aktivnosti, ili nivoa bilo čega od istog dysregulation uključuje jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor. U nekim primerima izvođenja, uzorak je biološki uzorak ili uzorak biopsije (npr., uzorak biopsije ukalupljen u parafinu) od pacijenta. U nekim primerima izvođenja, pacijent je pacijent za koga se sumnja da ima RET-povezani kancer, pacijent koji ima jedan ili više simptoma RET-povezanog kancera, i/ili pacijent koji ima povećani rizik za razvoj RET-povezanog kancera)
[0248] U oblasti medicinske onkologije normalna je praksa korišćenja kombinacije različitih oblika tretmana za tretiranje svakog pacijenta sa kancerom. U medicinskoj onkologiji druga komponenta (komponente) takvog zajedničkog tretmana ili terapije dodatno kompozicijama obezbeđenim ovde može biti, na primer, hirurška operacija, radioterapija, i hemoterapeutska sredstva, inhibitori kinaze, inhibitori prenosa signala i/ili monoklonska antitela. Jedinjenja Formule I stoga mogu takođe biti korisna kao ađuvansi u tretmanu kancera, odnosno, mogu se koristiti u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapija ili terapijskih sredstava, na primer hemoteraputskim sredstvom koje deluje istim ili različitim mehanizmom dejstva.
[0249] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje Formule I (ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat) je primenjena u kombinaciji sa terapeutski efikasnom količinom od najmanje jednog dodatnog terapeutskog sredstva izabranog od jedne ili više ddoatnih terapija ili terapeutskih (npr., hemoteraputskih) sredstava.
[0250] Primeri dodatnih terapeutski sredstava uključuju: druga RET-ciljajuće terapeutska sredstva (tj. prvi ili drugi inhibitor RET kinaze), terapeutska sredsatva koja ciljno deluju na receptor tirozin kinaze, inhibitore puteva prenosa signala, inhibitore kontrolnih tački, modulatore puteva apoptoze (npr. obataklaks); citotoksične hemoterapeutike, terapije koje ciljno deluju na angiogenezu, sredstva koja ciljno deluju na imuni sistem, uključujući imunoterapiju, i radioterapiju.
[0251] U nekim primerima izvođenja, drugi RET-targetirani terapeutik je multikinazni inhibitor koji pokazuje inhibitornu aktivnost u odnosu na RET. U nekim primerima izvođenja, drugi RET-targetirani terapeutik je selektivan za RET kinazu. Primeri inhibitora RET kinaze mogu pokazivati inhibitoprnu aktivnost (IC50) protiv RET kinaze od manje od oko 1000 nM, manje od oko 500 nM, manje od oko 200 nM, manje od oko 100 nM, manje od oko 50 nM, manje od oko 25 nM, manje od oko 10 nM, ili manje od oko 1 nM kao što je mereno u analizi kao što je ovde opisano. U nekim primerima izvođenja, inhibitori RET kinaze mogu pokazati inhibitornuu aktivnost (IC50) protiv RET kinaze od manje od oko 25 nM, manje od oko 10 nM, manje od oko 5 nM, ili manje od oko 1 nM kao što je mereno u analizi kao što je obezbeđeno ovde.
[0252] Primeri RET-targeted targetiranih terapeutskih sredstava uključuju alektinib, apatinib, kabozantinib (XL-184), dovitinib, lenvatinib, motesanib, nintedanib, ponatinib, regorafenib, sitravatinib (MGCD516), sunitinib, sorafenib, vatalanib, vandetanib, AUY-922 (5-(2,4-Dihidroksi-5-izopropil-fenil)-N-etil-4-[4-(morfolinometil)fenil]izoksazol-3- karboksamid), BLU6864, BLU-667, DCC-2157, GSK3179106, NVP-AST487 (1-[4-[(4-etilpiperazin-1-il)metil]-3-(trifluorometil) fenil]-3-[4-[6-(metilamino)pirimidin-4-il]oksifenil]urea), PZ-1, RPI-1 (1,3-dihidro-5,6-dimetoksi 3-[(4-hidroksifenil)metilen]-H-indol-2-on), RXDX-105 (1-(3-((6,7-dimetoksihinazolin-4-il)oksi)fenil)- 3-(5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)urea), SPP86 (1-Izopropil-3-(feniletinil)-1H-pirazolo[3,4- d]pirimidin-4-
1
amin), i TG101209 (N-(1,1-dimetiletil)-3-[[5-metil-2-[[4-(4-metil-1-piperazinil)fenil]amino]-4- pirimidinil]amino]-benzensulfonamid).
[0253] Dodatni primeri drugih inhibitora RET kinaze uključuju one opisane u SAD patentima br. 9,150,517 i 9,149,464, i Međunarodnoj objavi br. WO 2014075035. Na primer, u nekim primerima izvođenja drugi RET inhibitor je jedinjenje Formule I:
gde R<1>je C6-C24alkil ili polietilen glikol; ili oblik njegove farmaceutski prihvatljive soli. U nekim primerima izvođenja, drugi RET inhibitor je dodecil estar 4-{5-[bis-(hloroetil)-amino]-1-metil-1H-benzimidazol-2-il}buterne kiseline.
[0254] Dodatni primeri drugih inhibitora RET kinaze uključuju one opisane u Međunarodnoj objavi br. WO 2016127074. Na primer, U nekim primerima izvođenja, drugi RET inhibitor je jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde:
gde Prstenovi A i B su svaki nezavisno izabrani od aril, heteroaril, cikloalkil i heterociklil; svaki L1 i L2 je nezavisno izabran od veze, -(C1-C6alkilen)-, -(C2-C6alkenilen)-, -(C2-C6alkinilen)-, -(C1-C6haloalkilen)-, -(C1-C6heteroalkilen)-, -C(O)-, -O-, -S-, -S(O), -S(O)2-, -N(R<1>)-, -O-(C1-C6alkilen)-, -(C1-C6alkilen)-O-, -N(R<1>)-C(O)-,-C(O)N(R<1>)-, -(C1-C6alkilen)-N(R<1>)-, -N(R<1>)-(C1-C6alkilen)-, -N(R<1>)-C(O)-(C1-C6alkilen)-, -(C1-C6alkilen)-N(R<1>)-C(O)-, -C(O)-N(R<1>)-(C1-C6alkilen)-, -(C1-C6alkilen)-C(O)-N(R<1>)-, -N(R<1>)-S(O)2-, -S(O)2-N(R<1>)-, -N(R<1>)-S(O)2-(C1-C6alkilen)-, i -S(O)2-N(R<1>)-(C1-C6alkilen)-; gde svaki alkilen, alkenilen, alkinilen, haloalkilen, i heteroalkilen je nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci R’;
2
svaki R<A>i R<B>je nezavisno izabran od C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, halo, C1-C6haloalkil, C1-C6hidroksialkil, C1-C6heteroalkil, i -N(R<1>)(R<1>); gde svaki alkil, alkoksi, haloalkil, hidroksialkil, i hidroksialkil je nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci R<a>;
svaki R<C>i RD je nezavisno izabran od C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C1-C6alkoksi, halo, C1-C6heteroalkil, C1-C6haloalkil, C1-C6haloalkoksi, C1-C6hidroksialkil, cikloalkil, aril, heteroaril, ariloksi, aralkil, heterociklil, heterociklilalkil, nitro, cijano, -C(O)R<1>, -OC(O)R<1>, -C(O)OR<1>, -(C1-C6alkilen)-C(O)R<1>, -SR<1>,-S(O)2R<1>, -S(O)2-N(R<1>)(R<1>), -(C1-C6alkilen)-S(O)2R<1>, -(C1-C6alkilen)-S(O)2-N(R<1>)(R<1>), -N(R<1>)(R<1>) -C(O)-N(R<1>)(R<1>)-N(R<1>)-C(O)R<1>, -N(R<1>)-C(O)OR<1>, -(C1-C6alkilen)-N(R<1>)-C(O)R<1>, -N(R<1>)S(O)2R<1>, i -P(O)(R<1>)(R<1>); gde svaki od alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, heteroalkil, haloalkil, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, aril, heteroaril, ariloksi, aralkil, heterociklil, i heterociklilalkil je nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci R<a>; ili 2 R<C>ili 2 RD zajedno sa atomom (atomima) ugljenika za koji su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil prsten nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci Ra; svaki R<1>je nezavisno izabran od vodonik, hidroksil, halo, tiol, C1-C6alkil, C1-C6tioalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkil, C1-C6hidroksialkil, C1-C6heteroalkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, heteroarilalkil, heterociklil, i heterociklilalkil, gde svaki od alkil, tioalkil, alkoksi, haloalkil, hidroksialkil, heteroalkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, heteroarilalkil, heterociklil, i heterociklilalkil je nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci R<b>, ili 2 R<1>zajedno sa atomom (atomima) ugljenika za koji su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil prsten nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci R<b>; svaki R<a>i R<b>je nezavisno C1-C6alkil, halo, hidroksil, C1-C6haloalkil, C1-C6heteroalkil, C1-C6hidroksialkil, C1-C6alkoksi, cikloalkil, heterociklil, ili cijano, gde svaki od alkil, haloalkil, heteroalkil, hidroksialkil, alkoksi, cikloalkil i heterociklil je nezavisno supstituisan sa 0-5 instanci R’; svaki R’ je C1-C6alkil, C1-C6heteroalkil, halo, hidroksil, C1-C6haloalkil, C1-C6hidroksialkil, cikloalkil ili cijano; ili 2 R’, zajedno sa atomom (atomima) ugljenika za koji su vezani formiraju cikloalkil ili heterociklil prsten; m je 0, 1, 2, ili 3; n je 0, 1, ili 2; i p i q su svaki nezavisno 0, 1, 2, 3, ili 4. Na primer, RET inhibitor može biti izabran iz grupe koja se sastoji od:
�
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0255] U nekim primerima izvođenja, RET inhibitor je izabran iz grupe koja se sastoji od: ABT-348 (N-[4-[4-Amino-7-[1-(2- hidroksietil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-c]piridin-3-il]fenil]-N’-(3-fluorofenil)urea); AD-57, koje ima strukturu:
AD-80 (1-(4-(4-amino-1-izopropil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)fenil)-3-(2-fluoro-5-(trifluorometil)fenil)urea); ALW-II-41-27 (N-(5-((4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)karbamoil)-2-metilfenil)-5-(tiofen- 2-il)nikotinamid); Amuvatinib (MP470) (N-(benzo[d][1,3]dioksol-5-ilmetil)-4-(benzofuro[3,2-d]pirimidin-4-il)piperazin-1-karbotioamid); BPR1J373 (derivat 5-feniltiazol-2-ilamin-pirimidin); CLM3; doramapimod (BIRB-796) (1-(3-(terc-butil)-1-(p-tolil)-1H-pirazol-5-il)-3-(4-(2-morfolinoetoksi)naftalen-1-il)urea); DS- 5010; famitinib (5-[2-(dietilamino)etil]-2-[(Z)-(5-fluoro-2-okso-1H-indol-3-iliden)metil]-3-metil-6,7-dihidro-1H pirolo[ 3,2-c]piridin-4-on); fedratinib (SAR 302503, TG101348) (N-(terc-butil)-3-((5-metil-2-((4-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)fenil)amino)pirimidin-4-il)amino)benzensulfonamid); GSK3179106; GSK3352589; HG-6-63-01 ((E)- 3-(2-(4-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)vinil)-N-(4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-4-metilbenzamid); NVP-BBT594 (5-((6-acetamidopirimidin-4-il)oksi)-N-(4-((4-metilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil) fenil)indolin-1-karboksamid); PP2 (4-amino-5-(4-hlorofenil)-7-(dimetiletil)pirazolo[3,4-d]pirimidin); PP242 (2-(4-amino-1-izopropil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)-1H-indol-5-ol); hizartinib (AC220) (1-(5-(tercbutil) izoksazol-3-il)-3-(4-(7-(2-morfolinoetoksi)benzo[d]imidazo[2,1-b]tiazol-2-il)fenil)urea); semaksanib (SU5416, VEGFR2 Kinaza Inhibitor III) ((Z)-3-((3,5-dimetil-1H-pirol-2-il)metilen)indolin-2-on); SU4984 (3-[4-(1-formilpiperazin- 4-il)benzilidenil]-2-indolinon); Withaferin A ((4β,5β,6β,22R)-4,27-Dihidroksi-5,6:22,26-diepoksiergosta-2,24-dien-1,26-dion); XL-999 ((Z)-5-((1-etilpiperidin-4-il)amino)-3-((3-fluorofenil)(5-metil-1H-imidazol-2-il)metilen)indolin-2-on); XMD15-44 (N-(4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-4-metil-3-(piridin- 3-iletinil)benzamid); Y078-DM1 (antitelo lek konjugat sastavljen od RET antitela (Y078) vezanog za derivat citotoksičnog sredstva majtanzina); i Y078-DM1 (antitelo lek konjugat sastavljen od RET antitela (Y078) vezanog za derivat citotoksičnog sredstva majtanzina).
[0256] Dodatni primeri RET inhibitora uključuju: N-(2-fluoro-5-trifluorometilfenil)-N’-{4’-[(2"-benzamido)piridin- 4"-ilamino]fenil}urea; 1-izopropil-3-(feniletinil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amin; 3-((6,7-dimetoksihinazolin- 4-il)amino)-4-fluoro-2-metilfenol; N-(5-(terc-butil)izoksazol-3-il)-2-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-il)fenil)acetamid; N-(5-(tercbutil)izoksazol-3-il)-2-(3-(imidazo[1,2-b]piridazin-6-iloksi)fenil)acetamid; 2-amino-6-{[2-(4-hlorofenil)- 2-oksoetil]sulfanil}-4-(3-tienil)piridin-3,5-dikarbonitril; i 3-arilureidobenzilidenindolin-2-oni.
[0257] Sledeća terapeutska sredstva uključuju RET inhibitore opisane, na primer, u SAD patentnu br. 7,504,509; 8,012,966; 8,299,057; 8,399,442; 8,067,434; 8,629,135; 8,895,744; 8,937,071; 9,006,256; i 9,035,063; SAD objavama br. 2015/0272958; 2015/0238477; 2014/0121239; 20160176865; 2011/0053934; 2011/0301157; 2010/0324065; 2009/0227556; 2009/0130229; 2009/0099167; 2005/0209195; Međunarodnim objavama br. WO 2017/043550; WO 2017/026718; WO 2016/037578; WO 2016/038519; WO 2016/038552; WO 2014/184069; WO 2014/072220; WO 2012/053606; WO 2009/017838; WO 2008/031551; WO 2007/136103; WO 2007/087245; WO 2007/057399; WO 2005/051366; WO 2005/062795; i WO 2005/044835; i J. Med.Chem. 2012, 55 (10), 4872-4876.
[0258] Primeri terapeutskih sredstava koji ciljano deluju na receptor tiroznin kinaze (npr., Trk), uključuje afatinib, kabozantinib, cetuksimab, krizotinib, dabrafenib, entrektinib, erlotinib, gefitinib, imatinib, lapatinib, lestaurtinib, nilotinib, pazopanib, panitumumab, pertuzumab, sunitinib, trastuzumab, 1-((3S,4R)-4-(3-fluorofenil)-1-(2-metoksietil)pirolidin-3-il)-3-(4- metil-3-(2-metilpirimidin-5-il)-1-fenil-1H-pirazol-5-il)urea, AG 879, AR-772, AR-786, AR-256, AR-618, AZ-23, AZ623, DS-6051, Gö 6976, GNF-5837, GTx-186, GW 441756, LOKSO-101, MGCD516, PLX7486, RXDX<10>1, TPX-0005, i TSR-011. Dodatna sredstva koja ciljno deluju na Trk uključuju one opisane u SAD patentima br. 8,450,322; 8,513,263; 8,933,084; 8,791,123; 8,946,226; 8,450,322; 8,299,057; i 8,912,194; SAD objava br. 2016/0137654; 2015/0166564; 2015/0051222; 2015/0283132; i 2015/0306086; Međunarodna objava br. WO 2010/033941; WO 2010/048314; WO 2016/077841; WO 2011/146336; WO 2011/006074; WO 2010/033941; WO 2012/158413; WO 2014078454; WO 2014078417; WO 2014078408; WO 2014078378; WO 2014078372; WO 2014078331; WO 2014078328; WO 2014078325; WO 2014078323; WO 2014078322; WO 2015175788; WO 2009/013126; WO 2013/174876; WO 2015/124697; WO 2010/058006; WO 2015/017533; WO 2015/112806; WO 2013/183578; i WO 2013/074518.
[0259] Dodatni primeri Trk inhibitora mogu se naći u SAD patent br. 8,637,516, Međunarodna objava br. WO 2012/034091, SAD patent br. 9,102,671, Međunarodna objava
1
br. WO 2012/116217, SAD objava br. 2010/0297115, Međunarodna objava br. WO 2009/053442, SAD patent br. 8,642,035, Međunarodna objava br. WO 2009092049, SAD patent br. 8,691,221, Međunarodna objava br. WO2006131952. Primeri Trk inhibitora uključuju GNF-4256, opiasn u Cancer Chemother. Pharmacol. 75(1):131-141, 2015; i GNF-5837 (N-[3-[[2,3-dihidro-2-okso-3-(1H-pirol-2-ilmetilen)-1H-indol-6-il]amino]-4-metilfenil]-N’-[2-fluoro-5-(trifluorometil)fenil]-urea), opisan u ACS Med. Chem. Lett. 3(2):140-145, 2012.
[0260] Dodatni primeri Trk inhibitora uključuju one opisane u SAD objavi br.2010/0152219, SAD patent br. 8,114,989, i Međunarodna objava br. WO 2006/123113. Primeri Trk inhibitora uključuju AZ623, opisan u Cancer 117(6):1321-1391, 2011; AZD6918, opisan u Cancer Biol. Ther. 16(3):477-483,2015; AZ64, opisan u Cancer Chemother. Pharmacol.
70:477-486, 2012; AZ-23 ((S)-5-Hloro-N2-(1-(5-fluoropiridin-2-il)etil)-N4-(5-izopropoksi-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamin), opisan u Mol. Cancer Ther. 8:1818-1827, 2009; i AZD7451.
[0261] Trk inhibitor može uključivati one opisane u SAD patenti br. 7,615,383; 7,384,632; 6,153,189; 6,027,927; 6,025,166; 5,910,574; 5,877,016; i 5,844,092.
[0262] Dodatni primeri Trk inhibitora uključuju CEP-751, opisan u Int. J. Cancer 72:672-679, 1997; CT327, opisan u Acta Derm. Venereol. 95:542-548, 2015; jedinjenja opisana u Međunarodna objava br. WO 2012/034095; jedinjenja opisana u SAD patent br. 8,673,347 i Međunarodna objava br. WO 2007/022999; jedinjenja opisana u SAD patent br. 8,338,417; jedinjenja opisana u Međunarodna objava br. WO 2016/027754; jedinjenja opisana u SAD patent br. 9,242,977; jedinjenja opisana u SAD objava br. 2016/0000783; sunitinib (N-(2-dietilaminoetil)-5-[(Z)-(5-fluoro-2-okso-1H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1Hpirol- 3-karboksamid), kao što je opisano u PLoS One 9:e95628, 2014; jedinjenja opisana u Međunarodna objava br. WO 2011/133637; jedinjenja opisana u SAD patent br. 8,637,256; jedinjenja opisana u Expert. Opin. Ther. Pat. 24(7):731-744, 2014; jedinjenja opisana u Expert Opin. Ther. Pat. 19(3):305-319, 2009; (R)-2-fenilpirolidin supstituisani imidazopiridazini, npr., GNF-8625, (R)-1-(6-(6-(2-(3-fluorofenil)pirolidin-1-il)imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)-[2,4’-bipiridin]-2’-il)piperidin-4-ol kao što je opisan u ACS Med. Chem. Lett. 6(5):562-567, 2015; GTx-186 i drugi, kao što je opisan u PLoS One 8(12):e83380, 2013; K252a((9S-(9α,10β,12α))-2,3,9,10,11,12-heksahidro-10-hidroksi- 10-(metoksikarbonil)-9-metil-9,12-epoksi-1H-diindolo[1,2,3-fg:3’,2’,1’-kl]pirolo[3,4-i][1,6]benzodiazocin-1-on), kao što je opisan u Mol. Cell Biochem.339(1-2):201-213, 2010; 4-aminopirazolilpirimidini, npr., AZ-23 (((S)-5-hloro- N2-(1-(5-fluoropiridin-2-il)etil)-N4-(5-izopropoksi-1H-pirazol-3-
1 1
il)pirimidin-2,4-diamin)), kao što je opisan u J. Med. Chem. 51(15):4672-4684, 2008; PHA-739358 (danusertib), kao što je opisan u Mol. Cancer Ther. 6:3158, 2007; Gö 6976 (5,6,7,13-tetrahidro-13-metil-5-okso-12H-indolo[2,3-a]pirolo[3,4-c]karbazol-12-propannitril), kao što je opisan u J. Neurochem. 72:919-924, 1999; GW441756 ((3Z)-3-[(1-metilindol-3-il)metiliden]-1H-pirolo[3,2-b]piridin-2-on), kao što je opisan u IJAE 115:117, 2010; milciklib (PHA-848125AC), opisan u J. Carcinog. 12:22, 2013; AG-879 ((2E)- 3-[3,5-Bis(1,1-dimetiletil)-4-hidroksifenil]-2-cijano-2-propenetioamid); altiratinib (N-(4-((2-(ciklopropankarboksamido) piridin-4-il)oksi)-2,5-difluorofenil)-N-(4-fluorofenil)ciklopropan-1,1-dikarboksamid); kabozantinib (N-(4-((6,7-Dimetoksihinolin-4-il)oksi)fenil)-N’-(4-fluorofenil)ciklopropan-1,1-dikarboksamid); lestaurtinib ((5S,6S,8R)-6-Hidroksi-6-(hidroksimetil)-5-metil-7,8,14,15-tetrahidro-5H-16-oksa-4b,8a,14-triaza-5,8-metanodibenzo[ b,h]ciklookta[jkl]ciklopenta[e]-as-indacen-l3(6H)-on); dovatinib (4-amino-5-fluoro-3-[6-(4-metilpiperazin-1-il)-1H-benzimidazol-2-il]hinolin-2(1H)-on mono 2-hidroksipropanoat hidrat); sitravatinib (N-(3-fluoro-4-((2-(5-(((2- metoksietil)amino)metil)piridin-2-il)tieno[3,2-b]piridin-7-il)oksi)fenil)-N-(4-fluorofenil)ciklopropan-1,1-dikarboksamid); ONO-5390556; regorafenib (4-[4-({[4-Hloro-3-(trifluorometil)fenil]karbamoil}amino)-3-fluorofenoksi]- N-metilpiridin-2-karboksamid hidrat); i VSR-902A.
[0263] Sposobnost Trk inhibitora da deluje kao što je TrkA, TrkB, i/ili Trk C inhibitor može se testirati korišćenjem analiza opisanih u Primerima A i B u SAD patent br.8,513,263.
[0264] U nekim primerima izvođenja, inhibitori puta prenosa signala uključuju inhibitore Ras-Raf-MEK-ERK puta (npr., binimetinib, selumetinib, enkorafinib, sorafenib, trametinib, i vemurafenib), inhibitore PI3K-Akt-mTOR-S6K puta (npr. everolimus, rapamicin, perifosin, temsirolimus), i druge inhibitore kinaze, such kao što je baricitinib, brigatinib, kapmatinib, danusertib, ibrutinib, milciklib, kvercetin, regorafenib, ruksolitinib, semaksanib, AP32788, BLU285, BLU554, INCB39110, INCB40093, INCB50465, INCB52793, INCB54828, MGCD265, NMS-088, NMS-1286937, PF 477736 ((R)-amino-N-[5,6-dihidro-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-okso-1Hpirolo[4,3,2-ef][2,3]benzodiazepin-8-il]-cikloheksanacetamid), PLX3397, PLX7486, PLX8394, PLX9486, PRN1008, PRN1371, RXDX103, RXDX106, RXDX108, i TG101209 (N-terc-butil-3-(5-metil-2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)pirimidin-4-ilamino)benzensulfonamid).
[0265] Primeri inhibitora kontrolnih tački uključuju ipilimumab, tremelimumab, nivolumab, pidilizumab, MPDL3208A, MEDI4736, MSB0010718C, BMS-936559, BMS-956559, BMS-935559 (MDX-1105), AMP-224, i pembrolizumab.
1 2
[0266] U nekim primerima izvođenja, citotoksični hemoterapeutici su izabrani od arsen trioksid, bleomicin, kabazitaksel, kapecitabin, karboplatin, cisplatin, ciklofosfamid, citarabin, dakarbazin, daunorubicin, docetaksel, doksorubicin, etoposid, fluorouracil, gemcitabin, irinotekan, lomustin, metotreksat, mitomicin C, oksaliplatin, pakslitaksel, pemetreksed, temozolomid, i vinkristin.
[0267] Primeri terapija koje ciljano deluju na angiogenezu uključuju aflibercept i bevacizumab.
[0268] Termin "imunoterapija" se odnosi na sredstvo koje modulira imuni sistem. U nekim primerima izvođenja, imunoterapija može povećati ekspresiju i/ili aktivnost regulatora imunog sistema. U nekim primerima izvođenja, imunoterapija može smanjiti ekspresiju i/ili aktivnost regulatora imunog sistema. U nekim primerima izvođenja, imunoterapija može regrutovati i/ili poboljšati aktivnost imune ćelije.
[0269] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je ćelijska imunoterapija (npr., adoptivna T-ćelijska terapija, terapija dendritskim ćelijama, terapijama ćelijama prirodnim ubicama). U nekim primerima izvođenja, ćelijska imunoterapija je sipuleucel-T (APC8015; Provenge™; Plosker (2011) Drugs 71(1): 101-108). U nekim primerima izvođenja, ćelijska imunoterapija uključuje ćelije koje eksprimiraju himerni antigen receptor (CAR). U nekim primerima izvođenja, ćelijska imunoterapija je CAR-T ćelijska terapija. U nekim primerima izvođenja, CAR-T ćelijska terapija je tisagenlecleucel (Kymriah™).
[0270] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je terapija antitelom (npr., monoklonsko antitelo, konjugovano antitelo). U nekim primerima izvođenja, terapija antitelom je bevacizumab (Mvasti™, Avastin®), trastuzumab (Herceptin®), avelumab (Bavencio®), rituksimab (MabThera™, Rituxan®), edrecolomab (Panorex), daratumuab (Darzalex®), olaratumab (Lartruvo™), ofatumumab (Arzera®), alemtuzumab (Campath®), cetuksimab (Erbitux®), oregovomab, pembrolizumab (Keytruda®), dinutiksimab (Unituxin®), obinutuzumab (Gazyva®), tremelimumab (CP-675,206), ramucirumab (Cyramza®), ublituksimab (TG-1101), panitumumab (Vectibix®), elotuzumab (Empliciti™), avelumab (Bavencio®), necitumumab (Portrazza™), cirmtuzumab (UC-961), ibritumomab (Zevalin®), isatuksimab (SAR<65>0984), nimotuzumab, fresolimumab (GC1008), lirilumab (INN), mogamulizumab (Poteligeo®), ficlatuzumab (AV-299), denosumab (Xgeva®), ganitumab, urelumab, pidilizumab ili amatuksimab.
[0271] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je konjugat antitelo-lek. U nekim primerima izvođenja, konjugat antitelo-lek je gemtuzumab ozogamicin (Mylotarg™),
1
inotuzumab ozogamicin (Besponsa®), brentuksimab vedotin (Adcetris®), ado-trastuzumab emtansin (TDM-1; Kadcyla®), mirvetuksimab soravtansin (IMGN853) ili anetumab ravtansin [0272] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija uključuje blinatumomab (AMG103; Blincyto®) ili midostaurin (Rydapt).
[0273] U nekim primerima izvođenja, imuno terapija uključuje toksin. U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je denileukin diftitoks (Ontak®).
[0274] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je terapija citokinima. U nekim primerima izvođenja, terapija citokinima je interleukin 2 (IL-2) terapija, interferon alfa (IFNα) terapija, terapija faktiorom stimulacije kolonije granulocita (G-CSF), interleukin 12 (IL-12) terapija, interleukin 15 (IL-15) terapija, interleukin 7 (IL-7) terapija ili eritropetin-alfa (EPO) terapija. U nekim primerima izvođenja, IL-2 terapija je aldesleukin (Proleukin®). U nekim primerima izvođenja, IFNα terapija je IntronA® (Roferon-A®). U nekim primerima izvođenja, G-CSF terapija je filgrastim (Neupogen®).
[0275] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je inhibitor imune kontrolne tačke. U nekim primerima izvođenja, imunoterapija uključuje jedan ili više inhibitora imunih kontrolnih tačaka. U nekim primerima izvođenja, inhibitor imunih kontrolnih tačaka je CTLA-4 inhibitor, PD-1 inhibitor ili PD-L1 inhibitor. U nekim primerima izvođenja, CTLA-4 inhibitor je ipilimumab (Yervoy®) ili tremelimumab (CP-675,206). U nekim primerima izvođenja, PD-1 inhibitor je pembrolizumab (Keytruda®) ili nivolumab (Opdivo®). U nekim primerima izvođenja, PD-L1 inhibitor je atezolizumab (Tecentriq®), avelumab (Bavencio®) ili durvalumab (Imfinzi™).
[0276] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je imunoterapija zasnovana na iRNK. U nekim primerima izvođenja, imunoterapija zasnovana na iRNK je CV9104 (videti, npr., Rausch et al. (2014) Human Vaccin Immunother 10(11): 3146-52; i Kubler et al. (2015) J. Immunother Kancer 3:26).
[0277] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je bacillus Calmette-Guerin (BCG) terapija.
[0278] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je an terapija onkolitičkim virusom. U nekim primerima izvođenja, terapija onkolitičkim virusom je talimogen alherparepvec (T-VEC; Imlygic®).
[0279] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je vakcina za kancer. U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer vaccine je vakcina za humani papillomavirus (HPV). U nekim primerima izvođenja, HPV vakcina je Gardasil®, Gardasil9® ili Cervarix®. U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer je hepatitis B virus (HBV) vakcina. U nekim
1 4
primerima izvođenja, HBV vakcina je Engerix-B®, Recombivax HB® ili GI-13020 (Tarmogen®). U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer je Twinrix® ili Pediarix®. U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer je BiovaxID®, Oncophage®, GVAX, ADXS11-001, ALVAC-CEA, PROSTVAC®, Rindopepimut®, CimaVax-EGF, lapuleucel-T (APC8024; Neuvenge™), GRNVAC1, GRNVAC2, GRN- 1201, hepkortespenlisimut-L (Hepko-V5), DCVAX®, SCIB1, BMT CTN 1401, PrCa VBIR, PANVAC, ProstAtak®, DPXSurvivac, ili viagenpumatucel-L (HS-110).
[0280] U nekim primerima izvođenja, imunoterapija je peptidna vakcina. U nekim primerima izvođenja, peptidna vakcina je nelipepimut-S (E75) (NeuVax™), IMA901, ili SurVaxM (SVN53-67). U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer je imunogena personalna neoantigen vakcina (videti, npr., Ott et al. (2017) Nature 547: 217-221; Sahin et al. (2017) Nature 547: 222-226). U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer je RGSH4K, ili NEO-PV-01. U nekim primerima izvođenja, vakcina za kancer je vakcina zasnovana na DNK. U nekim primerima izvođenja, vakcina zasnovana na DNK je mamaglobin-A DNK vakcina (videti, npr., Kim et al. (2016) OncoImmunology 5(2): e1069940).
[0281] U nekim primerima izvođenja, imuno targetirana sredstva su izabrana od aldesleukin, interferon alfa-2b, ipilimumab, lambrolizumab, nivolumab, prednizon, i sipuleucel-T.
[0282] Primeri radioterapije uključuju radiojodid terapiju, zračenje spoljašnjim zrakom, i terapiju radijumom 223.
[0283] Dodatni inhibitori kinaze uključuju one opisane u, na primer, SAD patent br.
7,514,446; 7,863,289; 8,026,247; 8,501,756; 8,552,002; 8,815,901; 8,912,204; 9,260,437; 9,273,051; SAD objava br. US 2015/0018336; Međunarodna objava br. WO 2007/002325; WO 2007/002433; WO 2008/080001; WO 2008/079906; WO 2008/079903; WO 2008/079909; WO 2008/080015; WO 2009/007748; WO 2009/012283; WO 2009/143018; WO 2009/143024; WO 2009/014637; 2009/152083; WO 2010/111527; WO 2012/109075; WO 2014/194127; WO 2015/112806; WO 2007/110344; WO 2009/071480; WO 2009/118411; WO 2010/031816; WO 2010/145998; WO 2011/092120; WO 2012/101032; WO 2012/139930; WO 2012/143248; WO 2012/152763; WO 2013/014039; WO 2013/102059; WO 2013/050448; WO 2013/050446; WO 2014/019908; WO 2014/072220; WO 2014/184069.
[0284] Dodatni primeri inhibitora kinaze uključuju one opisane u, na primer, WO 2016/081450; WO 2016/022569; WO 2016/011141; WO 2016/011144; WO 2016/011147; WO 2015/191667; WO 2012/101029; WO 2012/113774; WO 2015/191666; WO 2015/161277; WO 2015/161274; WO 2015/108992; WO 2015/061572; WO 2015/058129;
1
WO 2015/057873; WO 2015/017528; WO/2015/017533; WO 2014/160521; i WO 2014/011900.
[0285] Ovde je takođe obezbeđena (i) farmaceutska kombinacija za tretiranje kancera kod pacijenta kome je to potrebno, koja sadrži (a) jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, (b) najmanje jedno dodatno terapeutsko sredstvo (npr., bilo koje od primera dodatnih terapeutskih sredstava opisanih ovde ili poznatih u tehnici), i (c) izborno najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač za istovremenu, zasebnu ili sekvencijalnu upotrebu u tretmanu kancera, gde su količine jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata i dodatnog terapeutskog sredstva zajedno efikasne u tretiranju kancera; (ii) farmaceutsku kompoziciju koja sadrži takvu kombinaciju; (iii) upotrebu takve kombinacije za Pripremu medikamenta za tretman kancera; i (iv) komercijalno pakovanje ili proizvod koji sadrži takvu kombinaciju kao što je kombinovani preparat za istovremenu, zasebnu ili sekvencijalnu upotrebu; i postupak za tretman kancera kod pacijenta kod koga postoji potreba za tim. U primeru izvođenja pacijent je čovek. U nekim primerima izvođenja, kancer je RET-povezani kancer. Na primer, RET-povezani kancer koji ima jednu ili više mutacija koje daju rezistenciju na RET inhibitor.
[0286] Termin "farmaceutska kombinacija", kao što je ovde korišćeno, odnosi se na farmaceutsku terapiju koja je rezultat mešanja ili kombinovanja više od jednog aktivnog sastojka i uključuje i fiksne i ne-fiksne kombinacije aktivnih sastojaka. Termin "fiksna kombinacija" znači da jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat i najmanje jedno dodatno terapeutsko sredstvo (npr., hemoterapeutsko sredstvo), su oba primenjena na pacijenta istovremeno u obliku jedne kompozicije ili doze. Termin "ne-fiksna kombinacija" znači da jedinjenje Formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat i najmanje jedno dodatno terapeutsko sredstvo (npr., hemoterapeutsko sredstvo) su formulisani kao zasebne kompozicije ili doze tako da mogu biti primenjeni na pacijenta kome je to potrebno simultano, istovremeno ili sekvencijalno sa promenljivim vremenskim intervalima, gde takva primena obezbeđuje efikasne nivoe dva ili više jedinjenja u telu pacijenta. Ovo takođe važi za koktel terapije, npr. primenu tri ili više aktivnih sastojaka
[0287] Iako genetska osnova tumorigeneze može varirati između različitih tipova kancera, ćelijski i molekularni mehanizmi potrebni za metastaze izgledaju slični za sve tipove solidnih tumora. Tokom metastatske kaskade, ćelije kancera gube reakcije inhibicije rasta, prolaze kroz promene u adhezivnosti i proizvode enzime koji mogu razgraditi komponente ekstracelularnog matriksa. Ovo dovodi do odvajanja tumorskih ćelija od prvobitnog tumora, infiltracije u cirkulaciju kroz novoformiranu vaskulaturu, migracije i ekstravazacije tumorskih
1
ćelija na povoljnim udaljenim mestima gde mogu da formiraju kolonije. Određeni broj gena je identifikovan kao stimulatori ili supresori metastaza. Na primer, prekomerna ekspresija neurotrofnog faktora koji potiče od glijalnih ćelija (GDNF) i njegove RET receptorske tirozin kinaze su u korelaciji sa proliferacijom kancera i metastazama. Vidi, npr. Zeng, Q. et al. J. Int. Med. Res. (2008) 36(4): 656-64.
[0288] Termin "metastaza" je termin poznat u tehnici i označava formiranje dodatnog tumora (npr., solidnog tumora) na mestu koje je udaljeno od primarnog tumora kod subjekta ili pacijenta, gde dodatni tumor uključuje iste ili slične ćelije kancera kao primarni tumor.
[0289] Izraz "efikasna količina" označava količinu jedinjenja koja, kada je primenjena na pacijenta kome je potreban takva tretman, je dovoljna da (i) tretira RET kinaza-povezanu bolest ili poremećaj, (ii) ublaži, poboljša, ili eliminiše jedan ili više simptoma određene bolesti, stanja, ili poremećaja, ili (iii) odloži početak jednog ili više simptoma određene bolesti, stanja, ili poremećaja opisanih ovde. Količina jedinjenja Formule I koja će odgovarati takvoj količini variraće u zavisnosti od određenog jedinjenja, stanja bolesti i njene težine, osobina (npr., težina) pacijenta kome je potreban tretman, ali se ipak može rutinski odrediti od strane stručnjaka.
[0290] Kada su primenjeni kao farmaceutici, jedinjenja Formule I se mogu primeniti u obliku farmaceutskih kompozicija. Ove kompozicije se mogu pripremiti na način koji je dobro poznat u farmaceutskoj tehnici, i mogu se pripremiti različtiim putevima, u zavisnosti od toga da li se želi lokalni ili sistemski tretman i u zavisnosti od površine koju treba tretirati. Primena može biti topikalna (uključujući transdermalnu, epidermalu, oftalmičku i na sluzokožu uključujući intranazalno, vaginalno i rektalno dostavljanje), plućna (npr., inhalacijom ili insuflacijom prašaka ili aerosola, uključujući nebulizerom; intratrahealna ili intranazalna), oralna ili parenteralna. Oralna primena može uključivati dozni oblik formulisan za prime nu jednom dnevno i dva puta dnevno (BID). Parenteralna primena uključuje intravensku, intraarterijalnu, potkožnu, intraperitonealnu, intramuskularnu ili injekciju ili infuziju; ili intrakranijalnu, npr., intratekalnu ili intraventrikularnu primenu. Parenteralna primena može biti u obliku jedne bolus doze, ili može biti, na primer, kontinuiranom perfuuzionom pumpom. Farmaceutske kompozicije i formulacije za topikalnu primenu mogu uključivati transdermalne flastere, masti, losione, kreme, gelove, kapi, supozitorije, sprejeve, tečnosti i praškove. Mogu biti neophodni konvencionalni farmaceutski nosači, vodene, praškaste ili masne baze i sredstva za zgušnjavanje.
[0291] Ovde su takođe obezbeđene farmaceutske kompozicije koje sadrže, kao aktivni sastojak, jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, u kombinaciji
1
sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (ekscipijenata). U nekim primerima izvođenja, kompozicija je pogodna za topikalnu primenu. Pri pravljenju kompozicija obezbeđenih ovde, aktivni sastojak se tipično meša sa ekscipijentom, razblažuje sa ekscipijentom ili se zatvara unutar takvog nosača u obliku, na primer, kapsule, kesice, papira, ili drugog spremnika. Kada ekscipijent služi razblaživač, on može biti čvrst, polu čvrst, ili tečni materijal, koji se ponaša kao vehikulum, nosač ili medijum za aktivni sastojak. Stoga, kompozicije mogu biti u obliku tableta, pilula, praškova, lozengi, kesica, kašeta, eliksira, suspenzija, emulzija, rastvora, sirupa, aerosola (kao čvrsti ili u tečnom medijumu), masti koje sadrže, na primer, do 10% po težini aktivnog jedinjenja, kapsule od mekog i tvrdog želatina, supozitorija, sterilnih injektabilnih rastvora, i sterilnih spakovanih praškova. U primeru izvođenja, kompozicija je formulisana za oralnu primenu. U primeru izvođenja, kompozicija je formulisana kao što je tableta ili kapsula.
[0292] Kompozicije koje sadrže jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat mogu se formulisati u jediničnom doznom obliku, pri čemu svaka doza sadrži od oko 5 do oko 1,000 mg (1 g), češće oko 100 mg do oko 500 mg, aktivnog sastojka. Termin "jedinični dozni oblik" odnosi se na fizički odvojene jedinice pogodne kao jedinične doze za humane subjekte i druge pacijente, pri čemu svaka jedinica sadrži prethodno određenu količinu aktivnog sastojka (tj., jedinjenje Formule I kao što je obezbeđeno ovde) izračunatu da proizvede željeni terapeutski efekat, zajedno sa pogodnim farmaceutskim ekscipijentom.
[0293] U nekim primerima izvođenja, kompozicije obezbeđene ovde sadrže od oko 5 mg do oko 50 mg aktivnog sastojka. Stručnjaci će shvatiti da ovo obuhvata jedinjenja ili kompozicije koje sadrže oko 5 mg do oko 10 mg, oko 10 mg do oko 15 mg, oko 15 mg do oko 20 mg, oko 20 mg do oko 25 mg, oko 25 mg do oko 30 mg, oko 30 mg do oko 35 mg, oko 35 mg do oko 40 mg, oko 40 mg do oko 45 mg, ili oko 45 mg do oko 50 mg aktivnog sastojka.
[0294] U nekim primerima izvođenja, kompozicije obezbeđene ovde sadrže od oko 50 mg do oko 500 mg aktivnog sastojka. Stručnjaci će shvatiti da ovo obuhvata jedinjenja ili kompozicije koje sadrže 50 mg do oko 100 mg, oko 100 mg do oko 150 mg, oko 150 mg do oko 200 mg, oko 200 mg do oko 250 mg, oko 250 mg do oko 300 mg, oko 350 mg do oko 400 mg, ili oko 450 mg do oko 500 mg aktivnog sastojka.
[0295] U nekim primerima izvođenja, kompozicije obezbeđene ovde sadrže od oko 500 mg do oko 1,000 mg aktivnog sastojka. Stručnjaci će shvatiti da ovo obuhvata jedinjenja ili kompozicije koje sadrže oko 500 mg do oko 550 mg, oko 550 mg do oko 600 mg, oko 600 mg do oko 650 mg, oko 650 mg do oko 700 mg, oko 700 mg do oko 750 mg, oko 750 mg do
1
oko 800 mg, oko 800 mg do oko 850 mg, oko 850 mg do oko 900 mg, oko 900 mg do oko 950 mg, ili oko 950 mg do oko 1,000 mg aktivnog sastojka.
[0296] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja obezbeđena ovde se mogu primeniti u količini u opsegu od oko 1 mg/kg do oko 100 mg/kg. U nekim primerima izvođenja, jedinjenje obezbeđeno ovde može se primeniti u količini od oko 1 mg/kg do oko 20 mg/kg, oko 5 mg/kg do oko 50 mg/kg, oko 10 mg/kg do oko 40 mg/kg, oko 15 mg/kg do oko 45 mg/kg, oko 20 mg/kg do oko 60 mg/kg, ili oko 40 mg/kg do oko 70 mg/kg. Na primer, oko 5 mg/kg, oko 10 mg/kg, oko 15 mg/kg, oko 20 mg/kg, oko 25 mg/kg, oko 30 mg/kg, oko 35 mg/kg, oko 40 mg/kg, oko 45 mg/kg, oko 50 mg/kg, oko 55 mg/kg, oko 60 mg/kg, oko 65 mg/kg, oko 70 mg/kg, oko 75 mg/kg, oko 80 mg/kg, oko 85 mg/kg, oko 90 mg/kg, oko 95 mg/kg, ili oko 100 mg/kg. U nekim primerima izvođenja, takva primena može biti primena jednom ili dva puta dnevno (BID).
[0297] Aktivno jedinjenje može biti efikasno u širokom doznom opsegu i generalno se primenjuje u farmaceutski efikasnoj količini. Podrazumeva se, međutim, da količina jedinjenja koja se stvarno primenjuje obično biti određena od strane lekara, prem arelevantnim okolnostima, uključujući stanje koje se tretira, izabrani put primene, stvarno primenjeno jedinjenje, starost, težinu, i odgovor pojedinačnog pacijenta i težinu simptoma pacijenta.
[0298] Obezbeđena ovde su farmaceutski kompleti korisni, na primer, u tretmanu RET-povezanih bolesti ili poremećaja, kancer ili sindrom iritabilnog creva (IBS), koji uključuje jedan ili više spremnika koji sadrže farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja obezbeđenog ovde. Takvi kompleti mogu dodatno uključivati, ukoliko je poželjno, jedan ili više različitih komponenti konvencionalnog farmaceutskog kompleta, na primer, spremnici sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, dodatni spremnici, kao što što će biti jasno stručnjacima. Uputstva, ili kao umetci ili kao nalepnice, koji označavaju količine komponenti koje treba primeniti, uputstva za primenu, i/ili uputstva za mešanje komponenti, mogu takođe biti uključeni u komplet.
[0299] Stručnjak će shvatiti da, i in vivo i in vitro studije korišćenjem pogodonih, poznatih i generalno prihvaćenih ćelijskih i/ili životinjskih modela su prediktivni u odnosu na sposobnost test jedinjenja da tretira ili spreči dati poremećaj.
[0300] Stručnjak će dodatno prepoznati da humane kliničke studije uključujući prve testove na ljudima u odnosu na opseg doze i efikasnost, kod zdravih pacijenata i/ili onih koji pate od datog poremećaja, mogu se izvesti prema postupcima dobro poznatim u kliničkoj i medicinskoj tehnici.
1
Primeri
[0301] Sledeći Primeri ilustruju pronalazak.
Biološki Primeri
Primer A
RET enzimska analiza
[0302] Izvršen je skrining jedinjenja Formule I u odnosu na njihovu sposobnost da inhibiraju divlji tip i V804M mutant RET kinaze korišćenjem CisBio’s HTRF® KinEASE™-TK tehnologije analize. Ukratko, N-terminalno GST tagovani rekombinantni humani RET citoplazmatski domen (ak 658-kraj) od Eurofins (0.25 nM RET; Catalog No.14-570M) ili N-terminalni GST tagovani rekombinantni humani V804M mutant RET citoplazmatski domen (ak 658-kraj) od Millipore (0.25 nM enzim; Catalog No. 14-760) je inkubiran sa 250 nM TK-biotin supstrata (CisBio, Part of Catalog No. 62TK0PEC) i 1 mM ATP zajedno sa test jedinjenjem u puferu koji se sastoji od 25 mM HEPES pH 7.4, 10 mM MgCl2, 0.01% Triton X-100, i 2% DMSO u zapremini od 8 µL. Jedinjenja su tipično pripremljena u trostrukim serijskim razblaženjima u DMSO i dodati su analizi da bi se dobila odgovarajuća finalna koncentracija. Nakon 30-minuta inkubacije na 22 °C, reakcija je ugašena dodavanjem 8 mL rastvora za gašenje koji sadrži 31.25 nM Sa-XL665 i IX TK-ab-Cryptate u HTRF detekcionom puferu (sve od CisBio, Part of Cat. No.62TK0PEC). Nakon 1 časa inkubacije na 22°C, stepen reakcije je određen korišćenjem PerkinElmer EnVision multimod čitača ploča preko HTRF detekcije dvostruke zalasne dužine, i procenat kontrole (POC) je izračunat korišćenjem raciometrijskog emisionog faktora. 100 POC je određen bez test jedinjenja i 0 POC je određen korišćenjem prethodno ugašenih kontrolnih reakcija. POC vrednosti su fitovane na 4 parametersku logističku krivu, i IC50je definisan kao koncentracija inhibitora na kojoj je POC jednak 50 za fitovanu krivu. IC50vrednosti za jedinjenja testirana u ovoj analizi su obezbeđene u Tabeli 5.
Primer B
RET ćelijska analiza
11
[0303] Ćelijska potencija jedinjenja za inhibiciju RET kinaze je određena u HEK-293 ćelijama koje eksprimiraju Kif5b- RET fuzioni protein. Ukratko, HEK-293 ćelije koje eksprimiraju Kif5b-RET fuzioni protein su postavljene na ploče obložene poli-D-lizinom od 96 bunarčića sa 50K ćelija/bunarčiću dan pre analize. Ćelije su inkubirane 1 čas sa test jedinjenje u DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) sa finalnom DMSO koncentracijom od 0.5%. Jedinjenja su tipično pripremljena u trostrukom serijskom razblaženju u DMSO i dodata u analizu da bi se dobila odgovarajuća finalna koncentracija. Nakon 1 časa medijum je uklonjen, ćelije su fiksirane sa 3.8% formaldehidom 20 min, isprane sa PBS, i permeabilizovane 10 min sa 100% metanolom. Ploče su zatim isprane sa PBS-0.05% Tween20, i blokirane sa LI-COR blokirajućim rastvorom (LI-COR catalog # 927-40000) 1 čas. Ploče su isprane sa PBS-0.05% Tween20, zatim inkubirane sa anti-fosfo-RET(Tyr1062) (Santa Cruz catalog #sc-20252-R) antitelom i anti-GAPDH (Millipore catalog # MAB374) antitelom 2 časa. Ploče su isprane sa PBS-0.05%Tween20, i inkubirane sa antizečijim 680 (Molecular Probes catalog No. A21109) i anti-mišjim 800 (LI-COR catalog No.
926-32210) sekundarnim antitelima 1 čas. Sva antitela su razblažena u LI-COR Block koji sadrži 0.05% Tween. Ploče su isprane sa PBS-0.05% Tween20, 100 µL PBS je dodato u svaki bunarčić, i ploče su očitane na LI-COR Aerius fluorescentnom čitaču ploča. Fosfo-RET signal je normalizovan prema GAPDH signalu. 100 POC (procenat kontrole) je određen bez test jedinjenja i 0 POC je određen korišćenjem 1 mM kontrole inhibitora. POC vrednosti su fitovane na 4 parametarsku logističku krivu. IC50vrednost je tačka gde kriva preseca 50 POC. IC50vrednosti za testirana jedinjenja u ovoj analizu obezbeđena su u Tabeli 5.
Primer C
RET G810R mutant analiza
[0304] Potencija jedinjenja za inhibiranje G810R mutant RET kinaze određena je korišćenjem CisBio’s HTRF Kinease-TK tehnologije analize. Analiza je sadržala G810R mutant RET proizveden od strane Aray Biopharma, Inc. (1 nM entim - pl982 Lot. No. 160713. Kinaza je inkubirana sa 250 nM biotin TK-substrata (CisBio, Part of Catalog # 62TK0PEC) i 1 mM ATP zajedno sa test jedinjenjem u puferu koji sadrži 25 mM HEPES, pH 7.4, 10 mM MgCl2, 0.01% Triton X-100, i 2% DMSO u zapremini od 8 µL. Jedinjenja su tipično pripremljena kao trostruka serijska razblaženja u DMSO i dodata u analizu da bi se dobila odgovarajuća finalna koncentracija. Nakon 60-min inkubacije na 22 °C, reakcija je ugašena dodavanjem 8 µL rastvora za gašenje koji je sadržao 31.25 nM Sa-XL665 i 1x TK-Ab-Cryptate u HTRF detekcionom puferu (sve od CisBio, Deo iz cat # 62TK0PEC). Nakon 1-č inkubacije na 22 °C, stepen reakcije je određen korišćenjem PerkinElmer EnVision multimod ćitača ploča preko HTRF detekcije dvostrukih talasnih dužina, i procenat kontrole (POC) je izračunat korišćenjem raciometrijskog emisionog faktora. Stotinu POC je određeno bez test jedinjenja, i 0 POC je određeno korišćenjem prethodno ugašenih kontrolnih reakcija. 4-parametarska logistička kriva je fitovana na POC vrednosti kao funkcija koncentracije jedinjenja, i IC50vrednost je bila tačka gde je najbolje fitovan kriva sekla 50 POC.
Tabela 5. IC50 jedinjenja testiranih u testu Primera A, B i C
11
11
11
11
11
11
12
12
12
12
12
12
12
1
11
Sintetički primeri
Sinteza sintetičkih intermedijera
[0305]
Intermedijer P1
4-Bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
Deo A: Priprema O-(mezitilsulfonil)hidroksilamina
[0306] Korak 1: Priprema terc-butil (mezitilsulfonil)oksikarbamata. U 0°C rastvor 2,4,6-trimetilbenzen-1-sulfonil hlorida (10.0 g, 45.72 mmol) i terc-butil hidroksikarbamata (6.088 g, 45.72 mmol) u MTBE (100 mL) ukapavanjem je dodavan TEA (14.46 mL, 48.01 mmol) uz mešanje. Dobijena suspenzija je mešana na 0°C dodatnih 30 min i zatim zagrevana do temperature sredine. Reakcija je zatim razblažena vodom (100 mL), podešena do pH 4 sa 1N HCl(vodeni rastvor). Organski sloj je sušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova početno kao žućkasto ulje, koje je posle sušenja pod visokim vakuumom postaje bela čvrsta supstanca (12.89 g, 89% prinos).<1>H NMR (CDCl3) δ 7.66 (br s, 1H), 6.98 (s, 2H), 2.67 (s, 6H), 2.32 (s, 3H), 1.31 (s, 9H).
[0307] Korak 2: Priprema O-(mezitilsulfonil)hidroksilamina. U TFA (117 mL, 1521 mmol) na 0°C lagano je dodavan terc-butil (mezitilsulfonil)oksikarbamat (39.0 g, 124 mmol) tokom 25 min. Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 1.5 č i zatim je ugašena uzastopnim
1 2
dodavanjem izmrvljenog leda i vode. Dobijena gusta suspenzija je snažno mešana na temperaturi sredine u trajanju od 5 min. Bez dozvoljavanja da se filter kolač osuši, čvrste supstance su sakupljene pažljivom vakuumskom filtracijom praćenom kasnijim ispiranjem vodom (4 L) sve dok filtrat nije dostigao pH 6 (Pažnja: postoji rizik od eksplozije sa suvim jedinjenjem na temperaturi sredine). Vlažan filter kolač je apsorbovan u DCM (150 mL) i dobijeni dvofazni rastvor je razdvojen. DCM sloj je sušen preko MgSO4u trajanju od 30 min i zatim filtriran i ispran sa DCM (420 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao 0.22 M rastvor u DCM
Deo B: Priprema 4-Bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0308] Korak 1: Priprema 1-amino-3-bromo-5-metoksipiridin-1-ium 2,4,6-trimetilbenzensulfonata. U rastvor O-(mezitilsulfonil)hidroksilamina (Deo A, 26.6 g, 117 mmol) u DCM (570 mL) ohlađen do 0 °C dodat je 3-bromo- 5-metoksipiridin (22.1 g, 117 mmol) u delovima. Reakciona smeša je mešana 1 č na 0 °C zatim tretirana sa dodatnim 3-bromo-5-metoksipiridinom (250 mg, 1.39 mmol) i mešana dodatnih 2 č na 0 °C. Reakciona smeša je razblažena sa Et2O (600 mL), mešano na 0 °C 10 min i zatim vakuum filtrirana, isprana sa Et2O (3 x 250 mL). Nakon smanjenja zapremine od oko 1/3, filtrat je dao dodatni talog koji je skupljen filtracijom. Oba filter kolača su osušena in vacuo da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova (39.3 g, 83% prinos).<1>H NMR (CDCl3) δ 9.25 (br s, 1H), 8.99 (m, 1H), 8.74 (m, 1H), 7.46 (m, 1H), 6.83 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.65 (s, 6H), 2.22 (s, 3H).
[0309] Korak 2: Priprema Etil 6-bromo-4-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karboksilat i Etil 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karboksilata. U magnetno mešanu belu suspenziju 1-amino-3-bromo-5-metoksipiridin- 1-ijum 2,4,6-trimetilbenzensulfonata (33.24 g, 82.42 mmol) u DMF (82 mL) na ambijentalnoj temperaturi dodat je TEA (22.98 mL, 164.8 mmol), praćeno sa dodavanjem u kapima etil propiolata (16.71 mL, 164.8 mmol). Nakon snažnog mešanja 2 d, reakcija je polako ugašena dodavanjem u delovima uz snažno mešanje ledene vode(820 mL). Smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi 10 min i zatim vakuum filtrirana. Sakupljene čvrste supstance su isprane sa vodom i osušene na vazduhu, dajući jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta supstanca u izomernom odnosu od oko 4:1 (sa<1>H NMR) sa 6-Br izomerom kao glavnim izomerom (21 g). Vlažna čvrsta izomerna smeša (oko 75% tež/tež) je direktno korišćena u Koraku 3 bez dodatnog prečišćavanja. MS (apci) m/z = 298.9, 300.9 (M+H). Regioizomerni odnos je određen sa MeO hemijskim pomeranjem u<1>H NMR (CDCl3) δ 3.98 (6-Br izomer) nasuprot 3.83 (4-Br izomer).
[0310] Korak 3: Priprema 6-bromo-4-metoksipirazolo[1,5-a]piridin (P1) i 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina. Izomerna smeša etil 6-bromo-4-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-
1
3-karboksilata i etil 4-bromo- 4-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karboksilata iz Koraka 2 (15 g, 50.1 mmol) dodata je 48% HBr (114 mL) uz mešanje, zatim zagrevana na 80 °C 90 min praćena sa mešanjem na ambijentalnoj temperaturi preko noći. Rezultujuća suspenzija je vakuum filtrirana i isprana sa vodom. Vodeni filtrat i filter kolač su tretirani nezavisno. Filter kolač je prenet u MTBE i vakuum filtriran da bi se uklonile nerastvorljive nečistoće. MTBE filtrat je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo da bi se dobio 6-bromo-4-metoksipirazolo[ 1,5-a]piridin kao bež čvrsta supstanca (oko 98:26-/4- Br; 5.08 g). MS (apci) m/z = 226.9, 228.9 (M+H).<1>H NMR (CDCl3) δ 8.26 (m, 1H), 7.82 (d, 1H), 6.61 (m, 1H), 6.43 (m, 1H), 3.94 (s, 3H). Nezavisno filtrat originalne vodene reakcione smeše je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je prenet u DCM (50 mL) i zatim filtriran da bi se uklonile nerastvorljive nečistoće. Koncentrovanje DCM filtrata pod vakuumom praćeno sa hromatografijom na silika gelu (0 to 50% EtOAc/heksani) dala je drugu seriju 6-bromo-4-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijer P1) kao belu čvrstu supstancu (gornja R<f>tačka, 2.06 g), kao i sporedni izomer jedinjenja iz naslova 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijer P2) takođe kao belu čvrstu supstancu (niža R<f>tačka, 1.32 g). MS (apci) m/z = 226.9, 228.9 (M+H).<1>H NMR (CDCl3) δ 8.02 (m, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.55 (m, 1H), 3.80 (s, 3H).
[0311] Korak 4: Priprema 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbaldehid: Rastvor 4-bromo-6-metoksipirazolo[ 1,5-a]piridina (5.0 g, 22 mmol) u DMF (220 mL) je ohlađen do 0 °C i zatim polako tretiran sa POCl3(6.2 mL, 66 mmol). Reakcija je zagrejana do ambijentalne temperature i mešana preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C, ugašena sa vodom (220 mL), i bazifikovana sa 6 M NaOH(vod.) do pH 9-10. Reakciona smeša je mešana 1 č i zatim vakuum filtrirana. Čvrste supstance su isprane sekvencijalno sa vodom i MTBE. Sakupljene čvrste supstance su suspendovane u DCM (500 mL) i mešane u ultrazvučnom kupatilu 30 min i zatim vakuum filtrirane. Filtrat je zadržan, dok je filter kolač prenet u vodu (300 mL) i ekstrahovan sa DCM. Organski ekstrakti, zajedno sa zadržanim DCM filtratom, kombinovani su i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, zatim filtrirani i koncentrovani in vacuo da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova (4.84 g, 86% prinos). MS (apci), m/z = 256.9 (M+H).
[0312] Korak 5: Priprema 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbaldehid oksima. U suspenziju 4- bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbaldehida (4.84 g, 19.0 mmol) u EtOH (253 mL) na ambijentalnoj temperaturi dodata je voda (127 mL) i hidroksilamin hidrohlorid (1.98 g, 28.5 mmol). Nakon mešanja na 50 °C preko noći, reakciona smeša je
1 4
ohlađena do ambijentalne temperature i koncentrovana in vacuo. Ostatak je suspendovan u vodi (150 mL) i zatim polako ugašen sa zasićenim NaHCO3(vod.) (30 mL). Nakon mešanja 1 čas na ambijentalnoj temperaturi suspenzija je vakuum filtrirana i filter kolač je sekvencijalno ispran sa H2O (500 mL) i MTBE (100 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao 2:1 E/Z smeša (5.13 g, kvantitativni prinos), koji je korišćen u sledećem Koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (apci) m/z = 271.9 (M+H).
[0313] Korak 6: Priprema 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. E/Z smeša 4-bromo-6- metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbaldehid oksima (4.95 g, 18.33 mmol) u anhidridu sirćetne kiseline (172.9 mL, 1833 mmol) je mešana na 140 °C 25 č, i zatim ohlađena do ambijentalne temperature. Rezultujuća suspenzija je dodatno ohlađena u ledenom kupatilu 15 min i zatim vakuum filtrirana i isprana sekvencijalno sa vodom i MTBE da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova (3.74 g, 81% prinos).<1>H NMR (d<6>-DMSO) δ 8.70 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 3.83 (s, 3H).
[0314] Korak 7: Priprema 4-Bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila: Gusta suspenzija 4-bromo-6-metoksipirazolo[ 1,5-a]piridin-3-karbonitrila (50.0 g, 198.4 mmol) u DCE (500 mL) tretirana je sa AlCl3(79.34 g, 595.1 mmol). Pod N2(g) atmosferom, rezultujuća smeša je mešana 19 č na 76 °C, pre hlađenja do sobne temperature. Korišćenjem THF (1750 mL) kao rastvarača za ispiranje, reakciona smeša je sipana u mehanički mešanu suspenziju natrijum sulfat dekahidrata (10 ekv, 639 g) u THF (1000 mL). Nakon mešanja preko noći na ambijentalnoj temperaturi, rezultujuća suspenzija je filtrirana, i čvrste supstance su isprane sa dodatnim THF (2 x 250 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo, i rezultujuće čvrste supstance su osušene pod visokim vakuumom 3 dana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46.18 g, 98% prinos) u dovoljnoj čistoći za narednu upotrebu.<1>H NMR (d<6>-DMSO) δ 10.48 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 7.64 (3, 1H).
Intermedijer P5
4-Bromo-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0315] Rastvor 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1;
4.0 g, 16.80 mmol) u DMA (100 mL) tretiran je sa K2CO3(s) (7.0 g, 51 mmol) i jodoetanom
1
(2.0 mL, 25 mmol) i zatim mešan 3 č na 60 °C. Reakciona smeša je ohlađena do ambijentalne temperature i zatim ugašena sa 1:1 NH4OH/voda. Rezultujuća suspenzija je filtrirana, i čvrste supstance su izolovane da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova (4.35 g, 97% prinos) u dovoljnoj čistoći za naknadnu upotrebu.
Intermedijer P6
6-Etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0316] U boci pod pritiskom, rastvor 4-bromo-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P5; 500 mg, 1.88 mmol) u dioksanu (9.40 mL) tretiran je sekvencijalno sa 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan- 2-il)piridinom (629 mg, 2.82 mmol), Pd(PPh3)4(217 mg, 0.188 mmol) i 2 MNa2CO3(vod.) (4.70 mL, 9.40). Rezultujuća smeša je ovlažena sa Ar(g) i zatim Sud je zapečaćena. Smeša je mešana 8 č na 90°C, i zatim preko noći na ambijentalnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa vodom i fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (25-100% EtOAc u heksanima kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo čisto jedinjenje iz naslova (500 mg, 94% prinos). MS (apci) m/z = 283.1 (M+H).
Intermedijer P25
4-bromo-6-(2-((terc-butildimetilsilil)oksi)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0317] Smeša (2-bromoetoksi)(terc-butil)dimetilsilana (451 µL, 2,10 mmol), 4-bromo-6-
1
hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1; 500 mg, 2,10 mmol) i K2CO3(s)(871 mg, 6,30 mmol) u DMF (10,5 mL) je mešana 1 dan na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Dobijeni organski ekstrakti su direktno prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc/heksani kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (420 mg, 49% prinos).
Intermedijer P26
6-(2-((terc-butildimetilsilil)oksi)etoksi)-4-('6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0318] U posudi pod pritiskom, rastvor 4-bromo-6-(2-((tercbutildimetilsilil)oksi)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P25;
420 mg, 1,06 mmol) u dioksanu (10,6 mL) je tretiran uzastopno sa 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridinom (355 mg, 1,59 mmol), Pd(PPh3)4(61.2 mg, 0,530 mmol) i 2 M Na2CO3(aq)(2.65 mL, 5,30). Dobijena smeša je prskana sa Ar(g)i posuda je zapečaćena. Smeša je mešana 8 h na 90°C, a zatim preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom (10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-15% MeOH u DCM kao eluent za gradijent) da bi se dobilo nečisto jedinjenje iz naslova. Nečisti materijal je ponovo podvrgnut hromatografiji na silicijum dioksidu (0-50% EtOAc u heksanima kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (351 mg, 80% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6-) δ: 8,81 (d, 1H, J=2,0 Hz), 8,61 (s, 1H), 8,48 (d, 1H, J=2,7 Hz), 8,25 (td, 1H, J=7,8, 2,7 Hz), 7,47 (d, 1H, J=1,9 Hz), 7,38 (dd, IH, J=7,8, 2,3 Hz), 4,21 (t, 2H, J=4,3 Hz), 3,97 (t, 2H, J=4,7 Hz), 0,86 (s, 9H), 0,08 (s, 6H).
Intermedijer P41
1
4-bromo-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1.5-a]piridin-3-karbonitril
[0319] U posudi pod pritiskom, smeša 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1; 10.0 g, 42,0 mmol) i K2CO3(s)(17.4 g, 126 mmol) u DMF (50 mL) je tretirana 2,2-dimetiloksiranom (36,9 mL, 420 mmol). Nakon zatvaranja posude, reakciona smeša je mešana 12 h na 60 °C, zatim 12 h na 85°C. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Smeša sobne temperature je sipana u vodu (400 mL), zatim mešana 1 sat na sobnoj temperaturi. Dobijena suspenzija je filtrirana pod vakuumom i filterski kolač je ispran vodom. Čvrste materije su sakupljene i osušene u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (11 g, 84% prinos).
Intermedijer P42
4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0320] Smeša 4-bromo-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P41; 10.0 g, 32,2 mmol), 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (10,8 g, 48,4 mmol) i Pd(PPh3)4(1.12 g, 0,967 mmol) u dioksanu (200 mL) je tretirana sa 2 M Na2CO3(aq)(64.5 mL, 129 mmol). Dobijena smeša je prskana sa Ar(g), zatim mešana 12 h na 85°C u atmosferi N2(g). Posle hlađenja do sobne temperature, dobijena smeša je sipana u hladnu vodu (1,5 L). pH smeše je podešen na oko pH 6 dodatkom 10% limunske kiseline. Posle mešanja tokom 1 sata na sobnoj temperaturi, dobijena suspenzija je filtrirana pod vakuumom. Čvrste materije su sakupljene i osušene u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (10 g, 95% prinos).
Intermedijer P46
1
4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0321] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)karbamata. Rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 100 mg, 0,306 mmol) u DMA (2,04 mL) je tretiran uzastopno terc-butil (4-metilpiperidin-4-il)karbamatom (98,5 mg, 0,460 mmol) i DIEA (107 µL, 0,613 mmol). Dobijena smeša je prskana sa Ar(g), zatim mešano preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i isprana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (22,4 mg, 50% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 521,3 (M+H).
[0322] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (160 mg, 0,307 mmol) u DCM (1,54 mL) je tretiran sa TFA (1 mL, 13,8 mmol). Posle mešanja tokom 30 min na sobnoj temperaturi, smeša je tretirana sa dodatnim TFA (1 mL) i mešana još 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je prečišćen silika hromatografijom (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (110 mg, 85% prinos). MS (apci) m/z = 421,2 (M+H).
Intermedijer P48
1
4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
[0323] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)karbamata. Rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 2.535 g, 7,768 mmol) u DMSO (6,1 mL) je tretiran uzastopno terc-butil (4-metilpiperidin-4-il)karbamatom (1,998 mg, 9,322 mmol) i DIEA (4,06 mL, 23,3 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u 80 mL vode i razblažena sa 80 mL heptana i mešana 1 sat. Suspenzija je filtrirana i čvrste materije su isprane sa 25 mL vode, a zatim sa 25 mL heptana. Izolovane čvrste materije su sušene pod vakuumom 18 sati da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,04 g, 99,9% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 521,3 (M+H)
[0324] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridina -3-karbonitril dihidrohlorida. Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4 -metilpiperidin-4-il)karbamata (4,04 g, 7,76 mmol) u DCM (20 mL) je ohlađen na 0°C. Reakcija je tretirana sa TFA (5,98 mL) i ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Posle mešanja od 30 min na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u MeOH (20 mL) i ohlađen na 0°C, a zatim tretiran hlorovodoničnom kiselinom, 5 do 6N rastvorom u 2-propanolu (15,5 mL, 77,5 mmol) i mešan 15 minuta na 0°C. Reakcija je razblažena sa 20 mL MTBE, filtrirana, a čvrste materije su isprane sa 20 mL 1:1 MTBE:MeOH. Izolovane čvrste materije su osušene pod vakuumom da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (3,37 g, 88% prinos). MS (apci) m/z = 421,2 (M+H).
Intermedijer P49
14
(R)-4-(6-(3-amino-3-metilpirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0325] Korak 1: Priprema terc-butil (R)-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin- 2-il)-3-metilpirolidin-3-il)karbamata. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 750 mg, 2,30 mmol) i terc-butil estra HCl (R)-(3-metilpirolidin-3-il)-karbaminske kiseline (644 mg, 3,22 mmol) u DMSO (4,6 mL) je dodat DIEA (1,2 mL, 6,89) mmol). Reakciona smeša je mešana 12 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena u hladnoj vodi i mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i čvrste materije su isprane vodom. Izolovane čvrste materije su sušene pod vakuumom 48 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,05 g, 90% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 507,3 (M+H)
[0326] Korak 2: (R)-4-(6-(3-amino-3-metilpirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat). Rastvor (R)-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilpirolidin-3-il)karbamata (1,05 g, 2,07 mmol) u 3 mL DCM je tretiran sa TFA (3 mL, 39 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen sa DCM (4 mL) i toluenom (1 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 15 min. Smeša je koncentrovana u vakuumu i sušena pod vakuumom 2 dana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova sa kvantitativnim prinosom. MS (apci) m/z = 407,3 (M+H).
Intermedijer P50
(S)-4-(6-(3-amino-3-metilpirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin- 3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0327] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin- 2-il)-3-metilpirolidin-3-il)karbamata. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 700 mg, 2,15 mmol) i terc-butil estra HCl (S)-(3-metilpirolidin-3-il)-karbaminske kiseline (601 mg, 3,0 mmol) u DMSO (4,3 mL) je dodat DIEA (1,1 mL, 6,44 mmol). Reakciona smeša je mešana 12 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena u hladnoj vodi i mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i čvrste materije su isprane vodom. Izolovane čvrste materije su sušene pod vakuumom 48 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (950 mg, 87% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 507,3 (M+H)
[0328] Korak 2: Priprema (S)-4-(6-(3-amino-3-metilpirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata). Rastvor tercbutil (S)-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilpirolidin-3-il)karbamata (950 mg, 1.88 mmol) u 3 mL DCM je tretiran sa TFA (3 mL, 39 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen sa DCM (4 mL) i toluenom (1 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 15 min. Smeša je koncentrovana u vakuumu i sušena pod vakuumom 2 dana dajući jedinjenje iz naslova sa kvantitativnim prinosom. MS (apci) m/z = 407,2 (M+H).
Intermedijer 51
4-(6-(3-aminopirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0329] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) pirolidin-3-il)karbamata. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 850 mg, 2.60 mmol) i 3-(terc-butoksikarbonilamino)pirolidina (679 mg, 3.65 mmol) u DMSO (5.2 mL) je dodat DIEA (1.36 mL, 7.81 mmol). Reakciona smeša je mešana 12 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena u hladnoj vodi i mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i čvrste materije su isprane vodom. Izolovane čvrste materije su sušene pod vakuumom 48 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,26 g, 98% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 493,3 (M+H)
[0330] Korak 2: Priprema 4-(6-(3-aminopirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila bis(2,2,2-trifluoroacetata). Rastvor tercbutil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidina-3-il)karbamata (950 mg, 1.88 mmol) u 3 mL DCM je tretiran sa TFA (3 mL, 39 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovan u vakuumu. Ostatak je razblažen sa DCM (4 mL) i toluenom (1 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 15 min. Smeša je koncentrovana u vakuumu i sušena pod vakuumom 2 dana dajući naslovljeno jedinjenje sa kvantitativnim prinosom. MS (apci) m/z = 393,2 (M+H).
Intermedijer 52
6-etoksi-4-(6-(4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0331] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.500 g, 1,77 mmol) u DMSO (3,5 mL) je dodat TEA (0,741 mL, 5,31 mmol) i piperidin-4-ol (269 mg, 2,66 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 5 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u ledenu vodu. Dobijene čvrste supstance su izolovane vakuum filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (501 mg, 1,38 mmol, prinos 77,8 %). MS (apci) m/z = 364,2 (M+H).
Intermedijer P53
14
4-(6-(4-benzil-4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0332] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 30 mg, 0,106 mmol) u DMA (0,5 mL) je dodat TEA (0,044 mL, 0,319 mmol) i 4-benzilpiperidin-4-ol (40,7 mg, 0,213 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NH4Cl(aq)zatim vodom. Kombinovani vodeni rastvori su dalje ekstrahovani sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (30-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (39 mg, 0,0860 mmol, prinos 80,9 %). MS (apci) m/z = 454,2 (M+H).
Intermedijer P55
4-(6-(4-benzil-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0333] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 100.5 mg, 0,3560 mmol) u DMSO (3 ml) je dodat (4-benzilpiperidin-4-il)metanol hidrohlorid (151,5 mg, 0,6267 mmol) i cezijum karbonat (812,0 mg, 2,492 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i zasićenim NH4Cl(aq). Kombinovani vodeni slojevi su ekstrahovani sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2TSO4(s)i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (118,2 mg, 0,2528 mmol, 71,00 % prinos). MS (apci) m/z = 468,2 (M+H).
Intermedijer P56
4-(6-(4-amino-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0334] Korak 1: Priprema metil 4-((terc-butoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidina-4-karboksilata. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 303.4 mg, 1.075 mmol) u DMSO (21.50 mL) dodat je metil estar 4-N-Boc-amino-piperidin-4-karboksilne kiseline (416.5 mg, 1.612 mmol) i kalijum karbonat (297.1 mg, 2.150 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110°C tokom 72 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (76,7 mg, 13,7% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 521,2 (M+H).
[0335] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)karbamata. U rastvor litijum borohidrida (0,0120 mL, 0,365 mmol) u THF (0,912 mL) dodat je metil 4-((terc-butoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-karboksilat (47,5 mg, 0,0912 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog MgSO4(s)i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao sirovi proizvod (65,9 mg), koji je korišćen u sledećem koraku
14
bez daljih prečišćavanja. MS (apci) m/z = 493,2 (M+H).
[0336] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-amino-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)karbamata (65.9 mg, 0.134 mmol) u DCM (1 mL) je tretiran sa TFA (0.2 mL, 2.68 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je stavljen u DCM i ispran sa zasićenim Na2CO3. Vodena frakcija je ekstrahovana sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s)i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (35,6 mg, 68% prinos). MS (apci) m/z = 393,2 (M+H).
Intermedijer P57
terc-butil (R)-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-3-il)karbamat
[0337] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.147 g, 0,521 mmol) u DMSO (1 mL) je dodat terc-butil (R)-piperidin-3-ilkarbamat (209 mg, 1,04 mmol) i kalijum karbonat (216 mg, 1,56 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110°C tokom 72 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahovan u dodatnom DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (100 mg, 0,216 mmol, 41,5% prinos). MS (apci) m/z = 463,2 (M+H).
Intermedijer P58
14
4-(6-((3S,4S)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0338] Korak 1: Priprema (3S,4S)-terc-butil 3-azido-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata. Rastvor terc-butil 6-oksa-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (15,42 g, 83,25 mmol), (R)-N,N'-Bis(3,5-Di-terc-butilsaliciliden)-1,2-cikloheksandiaminohrom (III) hlorida (0,5904 g, 0,8325 mmol), kalijum karbonata (13,81 g, 99,90 mmol) i azidotrimetilsilana (12,79 ml, 91,58 mmol) je poprskan azotom temperatura i mepan na sobnoj temperaturi 24h. Reakciona smeša je tretirana sa silika gelom (30 g) i vodom (2 mL) i mešana na sobnoj temperaturi dodatnih 72 h. Rastvor je filtriran kroz jastučić od Celite<®>i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-50% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18,5 g, 81,05 mmol, 97,36 % prinos) dovoljne čistoće za korak 2.
[0339] Korak 2: Priprema (3S,4S)-4-azidopirolidin-3-ol dihidrohlorida. Rastvor terc-butil (3S,4S)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (0,500 g, 2,19 mmol) u DCM (2,19 mL) tretiran je sa 6M HCl u IPA (4,5 mL, 27 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h, za koje vreme je reakciona smeša koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,440 g, 2,19 mmol) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 129,1 (M+H).
[0340] Korak 3: Priprema 4-(6-((3S,4S)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1.5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.300 g, 1,06 mmol) u DMSO (2 mL) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (3,70 mL, 21,3 mmol) i (3S,4S)-4-azidopirolidin-3-ol dihidrohlorid (0,427 g, 2,13 mmol) Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq)i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko
14
anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,220 g, 0,564 mmol, 53,0 % prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 391,15 (M+H).
Intermedijer 59
4-(6-((3R,4R)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0341] Korak 1: Priprema (3R,4R)-terc-butil 3-azido-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata. Rastvor terc-butil 6-oksa-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (15,42 g, 83,25 mmol), (1S,2S)-(-)-[1,2-Cikloheksandiamo-N, N'-bis(3,5-di-t-butilsaliciliden)]hrom (III) hlorida (1,181 g, 1,665 mmol) i azidotrimetilsilana (12,79 ml, 91,58 mmol) je prskan azotom i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Ovome je dodat kalijum karbonat (13,81 g, 99,90 mmol) u MeOH (100 mL), i reakciona smeša je mešana dodatnih 5 h na sobnoj temperaturi. Rastvor je filtriran kroz jastučić od Celite<®>i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je stavljen u EtOAc i vodu. Vodena frakcija je ekstrahovana sa EtOAc, a kombinovani organski ekstrakti su isprani uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Sušene su preko anhidrovanog MgSO4(s)i koncentrovane u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20% EtOAc u heksanu kao eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18,5 g, 81,05 mmol, 97,36 % prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 2.
[0342] Korak 2: Priprema (3R,4R)-4-azidopirolidin-3-ol dihidrohlorida. Rastvor terc-butil (3R,4R)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (0,500 g, 2,19 mmol) u DCM (2,19 mL) tretiran je sa 6M HCl u IPA (4,5 mL, 27 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h, za koje vreme je reakciona smeša koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,440 g, 2,19 mmol) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 129,1 (M+H).
[0343] Korak 3: Priprema 4-(6-((3R,4R)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-
14
etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.300 g, 1,06 mmol) u DMSO (2 mL) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (3,70 mL, 21,3 mmol) i (3R,4R)-4-azidopirolidin-3-ol dihidrohlorid (0,427 g, 2,13 mmol) Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq)i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,205 g, 0,525 mmol, 49,4% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 391,2 (M+H).
Intermedijer P60
terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamat
[0344] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.215 g, 0,762 mmol) u DMSO (1,5 mL) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,663 ml, 3,81 mmol) i terc-butil ((3R,4S)-4-hidroksipirolidin-3-il) karbamat (0,231 g, 1,14 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq)i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,347 g, 0,747 mmol, 98,1 % prinos). MS (apci) m/z = 465,3 (M+H).
Intermedijer P61
14
terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamat
[0345] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.215 g, 0,762 mmol) u DMSO (1,5 mL) dodat je N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,663 ml, 3,81 mmol) i terc-butil ((3S,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il) karbamat (0,231 g, 1,14 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq)i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,284 g, 0,611 mmol, 80,3% prinos). MS (apci) m/z = 465,2 (M+H).
Intermedijer P62
terc-butil ((3R,5S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-5-(trifluorometil)piperidin-3-il)karbamat
[0346] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.060 g, 0,21 mmol) u DMSO (0,4 mL) dodat je kalijum karbonat (0,15 g,
1
1,1 mmol) i terc-butil ((3R,5S)-5-(trifluorometil)piperidin-3-il)karbamat (0,171 g, 0,638). mmol). Reakciona smeša je mešana na 110°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq)i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0538 g47,7 % prinosa) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 531,2 ( M+H).
Intermedijer P64
4-(6-(4-aminopiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0347] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) piperidin-4-il)karbamata. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 205 mg, 0,628 mmol) i terc-butil piperidin-4-ilkarbamata (252 mg, 1,26 mmol) u DMA (2,09 mL) je dodat DIEA (549 uL, 3,14 mmol). Reakcija je mešana 2 h na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 319 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 507,20 (M+H)
[0348] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-aminopiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidina-4-il)karbamata (319 mg, 0,63 mmol) u DCM (3,15 mL) je dodat TFA (3,14 mL, 40,9 mmol). Reakcija je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u DCM i prečišćen korišćenjem silika hromatografije (1-9% MeOH u DCM sa
1 1
0,1-0,9% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (37 mg, 53% prinos) MS (apci) m/z = 407,2 (M+H).
Intermdijer P66
4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0349] U posudi pod pritiskom, rastvor 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1; 15.4 g, 64,7 mmol) u dioksanu (320 mL) je tretiran uzastopno 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridinom (15,2 g, 67,9 mmol), Pd(PPh3)4(3.74 g, 3,23 mmol) i 2 M Na2CO3(aq)(97 mL, 194 mmol). Dobijena smeša je prskana sa Ar(g)a zatim je posuda zapečaćena. Smeša je mešana 16 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa MTBE i ekstrahovana sa 1 M NaOH. Kombinovani vodeni slojevi su ekstrahovani sa MTBE. Kombinovani vodeni slojevi su zakišeljeni do pH 4 sa 4 M HCl. Suspenzija je filtrirana i isprana vodom da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (14,8 g, 72% prinos). MS (apci) m/z = 253,1 (M-H)<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 (s, 1H), 8,48-8,47 (d, 1H), 8,41-8,40 (d, 1H), 8,26-8,21 (m, 1H), 7,38-7,36 (m, 1H), 7,31-7,30 (d , 1H).
Intermedijer P67
4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
[0350] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-
1 2
il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer nivo P66; 3.0 g, 9,44 mmol) i terc-butil 4-metilpiperidin-4-ilkarbamata (2,83 mg, 13,2 mmol) u DMSO (12 mL) je dodat DIEA (4,93 mL, 28,3 mmol). Reakcija je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena u vodi i zakišeljena do pH 5 korišćenjem 10% rastvora limunske kiseline i mešana 15 min na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i talog je ispran vodom. Izolovane čvrste materije su rastvorene u 4:1 DCM:IPA i osušene preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Ostatak je prečišćen korišćenjem silika hromatografije (5-75% EtOAc u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 4,23 g) dovoljno čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 449,3 (M+H)
[0351] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida U rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (pretpostavlja se 4,23 g 9,44 mmol) u MeOH (30 mL) dodata je HCl (5-6 N rastvor u 2-propanolu, 28,3 mL, 142 mmol). Reakcija je mešana 2,5 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa MTBE (30 mL) i mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Suspenzija je filtrirana i isprana sa MTBE (50 mL) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2,18 g, 55% prinos u dva koraka) MS (apci) m/z = 349,2 (M+H).
Intermedijer P68
N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0352] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer nivo P67; 503 mg, 1,19 mmol), 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline (552 mg, 3,58 mmol) i HATU (1,36 g, 3,58 mmol) u DMSO (5 mL) je dodat DIEA (1,7 mL, 9,55 mmol). Reakcija je mešana 16 h na sobnoj temperaturi.
1
Reakciona smeša je razblažena sa THF (4 mL) i tretirana sa NaOH (5,97 mL, 11,9 mmol) i mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran vodom. pH je podešen na pH 5 sa AcOH i zatim ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen korišćenjem silika hromatografije (50-100% heksana u EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (534 mg, 92% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 485,2 (M+H).
Intermedijer P69
metil 4-((terc-butoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-karboksilat
[0353] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.700 g, 2,480 mmol) u DMSO (4,96 mL) dodat je DIEA (1,296 mL, 7,439 mmol) i metil 4-((terc-butoksikarbonil)amino)piperidin-4-karboksilat (0,8968 g, 3,472 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana u EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,003 g, 1,927 mmol, 77,69 % prinos). MS (apci) m/z = 521,3 (M+H).
Intermedijer P70
1 4
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0354] Korak 1: Priprema metil 4-amino-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-karboksilata. Rastvor metil 4-((terc-butoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-karboksilata (Intermedijer P69, 0.8 g, 1,5 mmol) u DCM je tretiran sa TFA. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h, zatim koncentrovana u vakuumu. U smešu je dodata HCl u iPrOH (6N) da se istaloži proizvod. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a zatim koncentrovana, dajući jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,65 g, 1,5 mmol) dovoljno čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 421,25 (M+H).
[0355] Korak 2: Priprema metil 1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)piperidin-4-karboksilata. U rastvor metil 4-amino-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-karboksilata (0,65 g, 1,5 mmol) u DCM (31 mL) je dodata 5-fluoro-2-metilbenzojeva kiselina (0,36 g, 2,3 mmol) i HATU (0,88 g, 2,3 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, za koje vreme je dodata katalitička količina DMAP. Reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 1 h, zatim ohlađena na sobnu temperaturu i prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu, zatim 1-10% MeOH u CHCl3kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,8 g, 1,4 mmol, 93% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 557,2 (M+H).
[0356] Korak 3: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. U rastvor metil 1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)piperidin-4-karboksilata (750 mg, 1.35 mmol) u THF (26.949 mL) na 0°C je dodat litijum borohidrid (117 mg, 5.39 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 1 h. Reakciona smeša je
1
razblažena sa EtOAc i isprana sa 10% vodenim rastvorom limunske kiseline. Organski ekstrakt je osušen i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu, zatim 1-10% MeOH u EtOAc kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (700 mg, 1,32 mmol, 98,3% prinos) dovoljne čistoće za korak 4. MS (apci) m/z = 529,1 (M+H).
[0357] Korak 4: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida (100 mg, 0,189 mmol) u DCM (0,946 mL) na 0°C je dodat 3-okso-115-benzo[d][1,2]jodaoksol-1,1,1 (3H)-triiltriacetat (201 mg, 0,473 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana na toj temperaturi 1 h, a za to vreme dodat je dodatni 3-okso-115-benzo[d][1,2]jodaoksol-1,1,1(3H)-triil triacetat (201 mg, 0,473 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi dodatnih 15 minuta, zatim ugašena sa EtOAc i zasićenim NaHCO3(aq)Organski ekstrakt je ispran sa Na2S2O3(aq), osušen i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu, zatim 1-10% MeOH u EtOAc kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (358 mg, 55,3% prinos). MS (apci) m/z = 527,15 (M+H).
Intermedijer P71
terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)karbamat
[0358]
[0359] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)karbamata. U rastvor metil 4-((tercbutoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-karboksilata (Intermedijer P69, 1.00 g, 1,92 mmol) u THF (12,8 mL) na 0°C dodat je litijum borohidrid (0,167 g, 7,68 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da dostigne
1
sobnu temperaturu i mešana na ovoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je ugašena vodom, a zaostale čvrste materije su uklonjene filtracijom. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc, a kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,832 g, 1,69 mmol, 87,9 % prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 493,3 (M+H).
[0360] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)karbamata. U rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)karbamata (0,832 g, 1,69 mmol) u THF (16,9 mL) je dodat 3-okso-115-benzo[d][1,2]jodaoksol-1,1,1(3H)-triil triacetat (0,832 g, 1,69 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h, a zatim ugašena vodom. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc, a kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu, i ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,594 g, 1,21 mmol, 71,7 % prinos). MS (apci) m/z = 491,2 (M+H).
Intermedijer P72
4-(6-(4-amino-4-((dimetilamino)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0361] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil) piperidin-4-il)karbamata. U smešu terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)karbamata (0,594 g, 1,21 mmol) u DCM (0,077 mL) je dodat dimetilamin hidrohlorid (0,197 g, 2,42 mmol) i DIEA (0,443 mL, 2,54 mmol). Ova smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 min, zatim je polako dodat natrijum triacetoksiborohidrid (0,385 g, 1,82 mmol). Reakciona smeša je mešana na
1
sobnoj temperaturi 24 h, a zatim ugašena vodom. Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc, a kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,181 g, 0,348 mmol, 28,8 % prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/ z = 520,3 (M+H).
[0362] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-amino-4-((dimetilamino)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Smeša terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil)piperidin-4-il)karbamata (0,181 g, 0,348 mmol) u DCM (0,02 mL) je tretirana sa TFA (0,0268 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, resuspendovana u DCM, i isprana uzastopno zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,145 g, 0,346 mmol, 99,2 % prinos). MS (apci) m/z = 420,3 (M+H).
Intermedijer P73
4-(6-(4-amino-4-(morfolinometil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0363] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(morfolinometil)piperidin-4-il)karbamata. U rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P71, 400 mg, 0,815 mmol) u DCM (4,077 mL) dodat je morfolin (0,07703 mL, 0,815 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (346 mg, 1,63 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 72 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta).
1
Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane sukcesivno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 458 mg, 0,815 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 562,4 (M+H).
[0364] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-amino-4-(morr)holinometil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(morfolinometil)piperidin-4-il)karbamata (458 mg, 0,815 mmol) u DCM (0,815 mL) je tretiran sa TFA (0,0628 mL, 0,815 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je ugašena sa 4:1 DCM/IPA i vodom. Smeša je isprana i uzastopno isprana sa zasićenim NaHCO33(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (135 mg, 0,292 mmol, 35,9 % prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 462,3 (M+H).
Intermedijer P74
4-(6-(4-amino-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0365] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-) il)metil)piperidin-4-il)karbamata (Primer 379, 0.149 g, 0,253 mmol) u DCM (0,0163 mL) je tretiran sa HCl u IPA (0,00769 mL, 0,253 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi, a zatim ugašena sa DCM i zasićenim Na2CO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog MgSO4(s), filtriran, zatim koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,124 g, 0,253 mmol). MS (apci) m/z =
1
489,3 (M+H).
Intermedijer P75
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0366] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P67; 256 mg, 0,608 mmol), 3-hlorpikolinske kiseline (287 mg, 1,82 mmol) i HATU (294 mg, 1,82 mmol) u DMSO (3 mL) je dodat DIEA (0,74 mL, 4,25 mmol). Reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (10 mL) i isprana sa vodom (10 mL) i 4:1 AcOH:vodom (10 mL), a zatim ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani sa 4:1 AcOH:vodom i zatim fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je razblažen sa THF (4 mL) i 2M NaOH (6 mL). Rastvor je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u DCM (2 mL) i prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je resuspendovana u DCM i propuštena kroz Pl-HCO3smole za eluiranje proizvoda na slobodnoj bazi. Organski eluenti su koncentrovani u vakuumu i rekristalisani korišćenjem DCM/heksana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (226 mg, 76% prinos). MS (apci) m/z = 488,2 (M+H).
Intermedijer P77
1
4-(6-(4-benzil-4-formilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0367] Korak 1: Priprema 4-(6-(4-benzil-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 100.5 mg, 0,3560 mmol) u DMSO (3 mL) je dodat (4-benzilpiperidin-4-il)metanol hidrohlorid (151,5 mg, 0,6267 mmol) i cezijum karbonat (812,0 mg, 2,492 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 24 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana uzastopno vodom i zasićenim NH4Cl(aq). Vodene frakcije su ekstrahovane sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)zatim prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (118,2 mg, 0,2528 mmol, 71,00 % prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 2. MS (apci) m/z = 468. (M+H).
[0368] Korak 2: Priprema 4-(6-(4-benzil-4-formilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor 4-(6-(4-benzil-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (51,3 mg, 0,110 mmol) u DCM (1,5 mL) je tretiran sa 3-okso-115-benzo[d][1,2]jodaoksol-1,1,1(3H)-triil triacetatom (93,1 mg, 0,219 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1,5 h. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO33(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46,7 mg, 0,100 mmol, 91,4 % prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 466,3 (M+H).
Intermedijer P78
6-hidroksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
1 1
[0369] Korak 1: Priprema 2-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina. U rastvor pinakol estra 2-hloropiridin-5-borne kiseline (1,18 g, 4,93 mmol) u DMSO (5,0 mL) dodat je DIEA (4,29 mL, 24,6 mmol) i 2-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorid (1,55 g, 6,16 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 72 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su sukcesivno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq)zatim osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,19 g, 3,12 mmol, 63,3 % prinos) dovoljno čistoće za korak 2.
[0370] Korak 2: Priprema 6-hidroksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, 800.5 mg, 3,363 mmol) u 4:1 dioksan:vodi (30 mL) je tretirano sa 2-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridinom (1410,406 mg, 3,699 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijumom (0) (388,6035 mg, 0,3363 mmol) i vodenim rastvorom kalijum karbonata (1394 mg 8,10). Reakciona smeša je prskana argonom i mešana na 90°C 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i podešena na pH 7 sa 4N HCl. Smeša je ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% acetona u heksanu kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (475,3 mg, 1,152 mmol, 34,3% prinos). MS (apci) m/z = 413,2 (M+H).
Intermedijer P79
4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0371] Korak 1: Priprema 4-bromo-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, 1000 mg, 4,201 mmol) u DMA (21,005 L) tretiran je kalijum karbonatom (1742 mg, 12,60 mmol) i 4-(2-hloretil)morfolinom (1,132 mL, 8,402 mmol). Reakciona smeša je mešana
1 2
na 50°C tokom 72 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NaCl(aq). Dobijeni talog je izolovan filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1475 mg, 4.200 mmol, 99% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 351 (M<+>).
[0372] Korak 2: Priprema 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor 4-bromo-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (0,83 g, 1,394 mmol) u 1,4-dioksanu (1000 mL) tretiran je sa 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridinom (373,2181 mg, 1,673 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijumom (0) (32,22577 mg, 0,0279 mmol) i vodenim rastvorom kalijum karbonata (2.092 mL, 4.183 mmol). Reakciona smeša je prskana argonom i mešana na 90°C 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa MTBE i isprana sa 1N NaOH. Vodene frakcije su ekstrahovane sa MTBE, a zatim podešene na pH 4 sa 4N HCl. Zasićeni NaCl(aq)je dodat i vodena smeša je ekstrahovana sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,341 g, 0,928 mmol, 66,6 % prinos). MS (apci) m/z = 368,1 (M+H).
Intermedijer P80
(R)-4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksipropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0373] U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P66, 0.2027 g, 0,78935 mmol) u THF (3,16 mL) dodat je u kapima vodeni rastvor natrijum hidroksida (2M, 0,40257 mL, 0,80514 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, za koje vreme je dodat (R)-2-metiloksiran (0,33181 mL, 4,7361 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, pH je podešen na 5 dodavanjem 10% vodenog rastvora limunske kiseline. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc, zatim su kombinovani organski ekstrakti isprani sukcesivno vodom i zasićenim NaCl(aq)zatim osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanima kao
1
eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,084 g, 0,26897 mmol, 34,074 % prinos. MS (apci) m/z = 313,1 (M+H) (M+H)1 (M+H).
Intermedijer P81
terc-butil (1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamat
[0374] Korak 1: Priprema 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina. U rastvor 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (5,122 g, 22,56 mmol) u 1,4-dioksanu (45,12 mL) dodat je 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (6,038 g, 27,07 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (1,043 g, 0,9023 mmol) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2M, 23,69, mL, 47,37 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je izlivena u vodu i mešana 4 h. Dobijeni precipitat je izolovan vakuumskom filtracijom, a zatim uzet u MTBE i mešan dodatnih 30 min. Talog je izolovan vakuum filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,616 g, 18,98 mmol, 84,13 % prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 2. MS (apci) m/z = 244,1 (M+H).
[0375] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (2,25 g, 9,25 mmol) u DMSO (18,5 mL) dodat je terc-butil (4-metilpiperidin-4-il)karbamat (2,97 g, 13,9 mmol) i DIEA (4,83 mL, 27,8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3,8 g, 8,68 mmol, 93,9% prinos). MS (apci) m/z = 438,3 (M+H).
Intermedijer P82
1 4
1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin
[0376] Rastvor terc-butil (1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P81, 0,500 g, 1,14 mmol) u DCM (5 mL) je tretirano sa TFA (5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,38 g, 1,13 mmol, 98,5 % prinos). MS (apci) m/z = 338,2 (M+H).
Intermedijer P83
1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin
[0377] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-vl)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. U rastvor terc-butil (1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P81, 0.800 g, 1,83 mmol) u DCM (12,2 mL) je dodat NCS (0,293 g, 2,19 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo
1
jedinjenje iz naslova (0,765 g, 1,62 mmol, 88,6 % prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
[0378] Korak 2: Priprema 1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amina. Rastvor terc-butil (1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata ( 0,765 g, 1,62 mmol) u DCM (12 mL) je tretiran sa TFA (12 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,548 g, 1,47 mmol, 90,9 % prinos). MS (apci) m/z = 372,2 (M+H).
Intermedijer P84
4-bromo-3-hloropirazolo[1,5-a]piridin-6-ol
[0379] Korak 1: Priprema 4-bromo-3-hloro-6-metoksipirazolorI .5-a l<pi>ridina. U rastvor 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (15 g, 66,06 mmol) u DCM (100 mL) je dodat NCS (8,821 g, 66,06 mmol). Reakciona smeša je ultrazvučno obrađena 5 min, a zatim mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je razblažena sa Et2O, u kome je mešana 10 min, a zatim ultrazvučno obrađena 2 min. Čvrsti precipitat je izolovan vakuumskom filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18,69 g, 71,47 mmol, 108,2% prinos) dovoljno čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 263,1 (M+H).
[0380] Korak 2: Priprema 4-bromo-3-hloropirazolo[1,5-a]piridin-6-ola. Rastvor 4-bromo-3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (7,59 g, 29,0 mmol) u DCE (290 mL) je ispražnjen sa N2i tretiran sa aluminijum trihloridom (11,6 g, 87,1 mmol) tokom 5 min. Reakciona smeša je mešana na 76°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena sa DMA, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je potopljen u vodu i hlađen na ledu 30 min. Dobijeni precipitat je izolovan vakuumskom filtracijom, a zatim uzet u DMA. Rastvor je filtriran kroz čep od silicijum dioksida da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao rastvor u DMA (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 7,00 g, 28,3 mmol).
Intermedijer P85
1
1-((3-hloro-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)-2-metilpropan-2-ol
[0381]
[0382] Korak 1: Priprema 1-((4-bromo-3-hloropirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)-2-metilpropan--ola. U rastvor 4-bromo-3-hloropirazolo[1,5-a]piridin-6-ola (Intermedijer nivo P84, 4,2 g, 17,0 mmol) u DMA (300 mL) dodat je kalijum karbonat (23,5 g, 170 mmol) i 2,2-dimetiloksiran (14,9 mL, 169,8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85°C tokom 2 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena sa 1:1 zasićenim NH4Cl(aq)/vodom. Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,62 g, 5,74 mmol, 33,8% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 321,0 (M+H).
[0383] Korak 2: Priprema 1-((3-hloro-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)-2-metilpropan-2-ola. U rastvor 1-((4-bromo-3-hloropirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)-2-metilpropan-2-ola (1,44 g, 4,51 mmol) u 1,4- dioksanu je dodat 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (1,51 g, 6,76 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0,260 g, 0,225 mmol) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2M, 50 mL, 100 mmol). Reakciona smeša je prskana sa N2i mešana na 90°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom. Rastvor je ekstrahovan sa MTBE, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,37 g, 1,10 mmol, 24,5 % prinos). MS (apci) m/z = 336,1 (M+H).
Intermedijer P86
1
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorokolinamid
[0384] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P67, 0,253 g, 0,600 mmol) u DCM (3 mL) dodata je 3-hloro-5-fluorokolinska kiselina (0,232 g, 1,32 mmol), HATU (0,502 g, 1,32 mmol) i DIEA (0,524 mL, 3,00 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodenim rastvorom limunske kiseline (podešen na pH 5). Vodena smeša je ekstrahovana sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq),zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je stavljen u THF i 2M NaOH i mešan na sobnoj temperaturi 5 min. Smeša je razblažena sa DCM, isprana vodenim rastvorom limunske kiseline (podešena na pH 5) i ekstrahovana sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane sukcesivno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,325 g, 0,578 mmol, 96,3 % prinos). MS (apci) m/z = 506,2 (M+H).
Intermedijer P87
1
N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamid
[0385] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P67, 255,4 mg, 0,606 mmol) u DCM (6 mL) dodata je benzojeva kiselina (185,072 mg, 1,51545 mmol), HATU (576,228 mg, 1,515 mmol) i DIEA (1,056 mL, 6,06 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je stavljen u THF i tretiran sa 2M KOH(aq). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim je podešena na pH 4 dodavanjem 2M HCl. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom, a zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su isprane zasićenim NaHCO33(aq)i ekstrahovane sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (172,5 mg, 0,381 mmol, 62,9% prinos). MS (apci) m/z = 453,2 (M+H).
Intermedijer P88
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-
1
metilpiperidin-4-il)benzamid
[0386] Korak 1: Priprema terc-butil 4-(2-((4-(6-(4-benzamido-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]) piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (Intermedijer P87, 157,2 mg, 0,3474 mmol) u DMA (3,5 mL) je dodat terc-butil 4-(2-hloretil)tetrahidro-1(2H)-pirazinkarboksilat (172,8 mg, 0,6948 mmol) i cezijum karbonat (565,9 mg, 1,737 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 231 mg, 0,3474 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 665,4 (M+H).
[0387] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2- il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida. Rastvor terc-butil 4-(2-((4-(6-(4-benzamido-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata u DCM (1,75 mL) je tretiran sa TFA (1,75 mL, 22,9 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi (+ 0,1% TFA) kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su isprane zasićenim NaHCO33(aq)i ekstrahovan sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (111,8 mg, 0,1980 mmol, 56,99% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 565,3 (M+H).
Intermedijer P89
1
4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0388] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Primer 469, 100 mg, 0,210 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa TFA (2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Sirova reakciona smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (5-50% [MeOH 2% NH4OH] u DCM kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 mg, 0,0531 mmol, 25,3% prinos). MS (apci) m/z = 377,2 (M+H).
Intermedijer P90
N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0389] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P67, 1,38 g, 3,2754 mmol) u DCM (6,5507 mL) dodata je 2-pikolinska kiselina (1,0081 g, 8,1884 mmol), HATU (3,1135 g, 8,1884 mmol) i DIEA (5,7207 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je stavljen u THF i 2M vodeni KOH i mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Smeša je podešena na pH 4 dodavanjem 1M HCl i ekstrahovana sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq)zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi (+ 0,1% TFA) kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane sukcesivno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (737 mg, 1,6251 mmol, 49,616% prinos). MS (apci) m/z = 454,2 (M+H).
1 1
Intermedijer P91
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0390] Korak 1: Priprema terc-butil 4-(2-((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P90, 120 mg, 0,265 mmol) u DMA (2,646 mL) je dodat tercbutil 4-(2-hloretil)tetrahidro-1(2H)-pirazinkarboksilat (65,8 mg, 0,265 mmol) i cezijum karbonat (431 mg, 1,32 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 48 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (176 mg, 0,264 mmol, 99,9 % prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 666,4 (M+H).
[0391] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) )-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida. Rastvor terc-butil 4-(2-((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata (176 mg, 0,264 mmol) u DCM (2,643 mL) je tretiran sa TFA (0,2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq), vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 150 mg, 0,264 mmol). MS (apci) m/z = 566,4 (M+H).
[00575] Intermedijer P93
1 2
4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0392] U cevi pod pritiskom, smeša 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, korak 6; 1,1854 g, 4,7026 mmol), 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (1,2587 g, 5,6432 mmol), Pd(PPh3)4(0.1087 g, 0,094 mmol) i 2 M Na2CO3(aq)(15 mL, 30 mmol) u dioksanu (15 mL) prskan je N2(g). Posuda je zapečaćena, a prskana smeša je mešana 4 dana na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran vodom, a zatim prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-25% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (734,6 mg, 58% prinos). MS (apci), m/z = 269,1 (M+H).
[00578] Intermedijer P94
4-(6-((3S,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
[0393] Rastvor terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (Primer 514, 274,5 mg, 0,5909 mmol) u dioksanu (3 mL) je tretiran sa 37% HCl (97 uL, 1,18 mmol), zatim mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (258 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 365,2 (M+H).
Intermedijer P95
1
4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
[0394] Mešanje, na sobnoj temperaturi, rastvora terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)karbamata (Primer 469, 807 mg, 1,69 mmol) u MeOH (3387 µL) je tretirano ukapavanjem 12 M HCl(aq)(1.41 mL, 16,9 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena gusta suspenzija je razblažena sa MeOH (oko 1 mL) i filtrirana pod vakuumom. Čvrste materije su isprane sa MeOH (3 × 1 mL) i MTBE (3 × 10 mL), a zatim osušene u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (690 mg, 91% prinos). MS (apci) m/z = 377,2 (M+H).
Intermedijer P96
terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(pirolidin-1-ilmetil)piperidin-4- il)karbamat
[0395] terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)karbamat (Intermedijer P71, 100 mg, 0,2038 mmol) je dodat u rastvor pirolidina (681 uL, 0,82 mmol) i TEA (142 uL, 1,0 mmol) u DCM (1,0 mL), i smeša je mešana 1 h na temperaturi okoline. Nakon toga, dodat je NaBH(AcO)3(86.4 mg, 0,41 mmol) i dobijena smeša je mešana 2,5 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN:voda sa 0,1% TFA). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, razblažene sa 4:1 DCM:iPrOH, zatim
1 4
uzastopno ekstrahovane sa zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (40 mg, 36% prinos). MS (apci) m/z = 546,3 (M+H).
Intermedijer P97
4-(6-(4-amino-4-(pirolidin-1-ilmetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0396] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(pirolidin-1-ilmetil)piperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P96; 40 mg, 0,073 mmol) u DCE (4,7 uL) i TFA (5,6 uE, 0,073 mmol) je mešan 90 minuta na temperaturi okoline. Dobijena smeša je razblažena sa 4:1 DCM:iPrOH, zatim uzastopno ekstrahovana sa zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (30 mg, 92% prinos). MS (apci) m/z = 446,3 (M+H).
Intermedijer P98
4-(6-(4-amino-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
1
[0397] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-4-il)karbamata (Primer 379, 171.2 mg, 0,2908 mmol) u dioksanu (5,0 mL) je tretiran sa 12 M HCl(aq)(23.88 µL, 0,2908 mmol). Dobijena smeša je mešana 45 min na sobnoj temperaturi pre koncentrovanja smeše u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (205,5 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 489,3 (M+H).
Intermedijer P106
4-(6-(4-amino-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0398] Rastvor 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer R41; 287.5 mg, 0,6856 mmol) u DMF (2 mL) tretiran je sa 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom (Intermedijer P6, 176 mg, 0,624 mmol), K2CO3(s)(431 mg, 3.12 mmol) je mešan preko noći na 70°C. Smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 × 20 mL). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-15% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (73 mg, 26% prinos). MS (apci) m/z = 454 (M+H).
Intermedijer P110
6-etoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
1
[0399] U posudi pod pritiskom, rastvor 4-bromo-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P5, 1.37 g, 5,15 mmol) u dioksanu (52 mL) tretiran je bis(pinakolato)diborom (3,92 g, 15,4 mmol), PdCl2(dppf)•CH2Cl2(0.420 g, 0,515 mmol) i KOAc (1,52 g, 15,4 mmol), zatim prskan sa Ar(g). Posuda je zatvorena, i smeša je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana uzastopno sa vodom (2x) i fiziološkim rastvorom (1x). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 5-75% heksana-EtOAc kao gradijentnog eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (1.31 g, 81% prinos). MS (apci) m/z = 314,2 (M+H).
Intermedijer P115
3-cijano-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il dimetilkarbamat
[0400] Rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P66, 145.9 mg, 0,5739 mmol) i DIEA (200,5 uL, 1,148 mmol) u DCM (2,0 mL) je tretiran dimetilkarbamin hloridom (92,57 mg, 0,8609 mmol), zatim mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je isprana vodom. Organski ekstrakti su odvojeni i prečišćeni direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 20-80% heksana/EtOAc kao gradijentnog eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (158,4 mg, 85% prinos). MS (apci) m/z = 326,1 (M+H).
Intermedijer P116
6-(2-(1H-imidazol-1-il)etoksi)-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
1
[0401] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P66, 100.3 mg, 0,3945 mmol), 1-(2-hloretil)-1H-imidazol hidrohlorida (197,7 mg, 1,184 mmol) i Cs2CO3(s)(1.285 g, 3,945 mmol) u DMA (2,0 mL) je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i isprana uzastopno sa DCM (4x) i 4:1 DCM:iPrOH. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), i filtrirani. Filtrat je prečišćen direktno hromatografijom na silika gelu (koristeći 0-25% DCM/MeOH sa 1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (158,4 mg, 85% prinos). MS (apci) m/z = 349,10 (M+H).
Intermedijer P117
4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-((1-metil-1H-imidazol-4-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0402] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P66, 103.6 mg, 0,4075 mmol), 4-(hlorometil)-1-metil-1 H-imidazol hidrohlorida (199,7 mg, 1,196 mmol) i Cs2CO3(s)(1.328 g, 4,075 mmol) u DMA (2,0 mL) je mešana 1 dan na 60°C, zatim još 1 dan na 110°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je zakišeljena sa 2 M HCl(aq)i prečišćena direktno C18 hromatografijom reverzne faze (koristeći 0-70% vode/ACN sa 0,1% TFA kao eluent za gradijent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, delimično koncentrovane u vakuumu da bi se uklonio ACN, zatim podeljene između zasićenog NaHCO3(aq)i 4:1 DCM:iProOH. Dvofazna smeša je ekstrahovana sa dodatnim 4:1 DCM:iPrOH (3x). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26,0 mg, 18% prinos). MS (apci) m/z = 349,10 (M+H).
Intermedijer P122
1
6-(2-morfolinoetoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0403] U posudi pod pritiskom, smeša 4-bromo-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P79, korak 1, 426mg, 1,21 mmol), bis(pinakolato)dibora (3,08 g, 12,1 mmol), PdCl2(dppf)•CH2Cl2(89mg, 0,121 mmol) i KOAc (595 mg, 6,06 mmol) u dioksanu (10 mL) je ispražnjen sa N2(g), za 1 min. Posuda je zatvorena, i smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM (15 mL) i filtrirana kroz Celite<®>. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 0-100% heksana/acetona kao gradijentnog eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (185 mg, 38% prinos). MS (apci) m/z = 317 (M+H).
Intermedijer P123
terc-butil (1-(6-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-3-il)-4-metilpiperidin-4-il) karbamat
[0404] U cevi pod pritiskom, suspenzija 6-(2-morfolinoetoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridina-3-karbonitrila (Intermedijer P122; 24 mg, 0,061 mmol) u 3:1 dioksanu:vodi (0,4 mL) tretirana je sa Cs2CO3(s)(60 mg, 0,18 mmol) i terc-butil (1-(6-bromopiridin-3-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamatom (intermedijer R45; 25 mg, 0,068 mmol), zatim prskana sa N2(g)5 min. Dobijena smeša je tretirana sa X-phos (150,9 mg, 0,3165 mmol) i Pd2(dba)3(144.9 mg, 0,1582 mmol), zatim prskana sa N2(g). Nakon zatvaranja
1
posude, reakciona smeša je mešana 20 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, dobijena suspenzija je razblažena vodom (25 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 × 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 0-90% acetona/heksana kao gradijentnog eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (5,4 mg, 16% prinos). MS (apci) m/z = 562,3 (M+H).
Intermedijer P124
4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
[0405] Rastvor terc-butil (1-(6-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-3-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P123; 5.0 mg, 0,0089 mmol) u DCM (500 uL) je tretiran sa 5-6 N HCl u iPrOH (534 uL, 2,67 mmol) i mešan 30 min na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu, azeotropski obrađena sa Et2O, a zatim osušena pod visokim vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,8 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 462,3 (M+H).
Intermedijer P125
4-bromo-6-(2-hloroetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0406] Smeša 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, 574 mg, 2,41 mmol) u DMF (2,41 mL) tretirana je uzastopno sa anhidrovanim K2CO3(s)(1.67 g, 12,1 mmol) i 1-hloro-2-jodoetanom (221 µL, 2,41 mmol), zatim mešana 48 h na sobnoj
1
temperaturi. Zatim je uveden dodatni 1-hloro-2-jodoetan (221 µL, 2,41 mmol) i smeša je mešana dodatnih 60 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je podeljena između DCM i vode. Dobijena emulzija je filtrirana, a dvofazni filtrat je odvojen. Posle povratne ekstrakcije vodenih ekstrakata sa 4:1 DCM:iPrOH (3x), svi organski ekstrakti su kombinovani, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 0-100% EtOAc/heksana kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (331 mg, 46% prinos).<1>H NMR (CDCl3) 88,19 (s, IH), 8,11 (d, IH), 7,47 (d, IH), 4,24 (t, 2H), 3,84 (t, 2H).
[00620] Intermedijer P126
6-(2-(azetidin-1-il)etoksi)-4-bromopirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0407] Rastvor 4-bromo-6-(2-hloroetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P125; 77 mg, 0,256 mmol) u DMF (256 uL) tretiran je uzastopno sa DIEA (447 µl, 2,56 mmol) i azetidinom (43,9 mg, 0,769 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je razblažena vodom, a rezultujuća suspenzija je filtrirana. Čvrste materije su sakupljene i osušene pod visokim vakuumom da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (42 mg, 51% prinos). MS (apci) m/z = 321 (M+H).
[00623] Intermedijer P127
(3 -cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)borna kiselina
[0408] U posudi pod pritiskom, smeša 4-bromo-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P79, korak 1, 200 mg, 0,3360 mmol), bis(pinakolato)dibora (1,446 g, 5,694 mmol), PdCl2(dppf)•CH2Cl2(46.4 mg, 0,0570 mmol) i KOAc (167,7 mg, 1,709 mmol) u dioksanu (3,36 mL) je prskana sa Ar(g), tokom 10 min. Posuda je zatvorena, i smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša
1 1
je razblažena sa DCM, i filtrirana kroz GF/F papir. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je prečišćen silika hromatografijom (koristeći 0-20% MeOH u DCM sa 2% NH4OH kao gradijentni eluent). Prečišćeni ostatak je rastvoren u DCM (2 mL) i triturisan sa Et2O (5 mL). Dobijena suspenzija je filtrirana, a čvrste materije su izolovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 56% prinos). MS (apci) m/z = 317,1 (M+H).
Intermedijer P128
terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il) karbamat
[0409] U cevi pod pritiskom, smeša (3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)borne kiseline (Intermedijer P127; 215 mg, 0,680 mmol), terc-butil (1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer R46; 37.6 mg, 0,0991 mmol), X-phos (64,8 mg, 0,136 mmol) i Pd2(dba)3(31.1 mg, 0,0340 mmol) u dioksanu (3,40 mL) je tretirana sa 2 M K3PO4(aq)(1.02 mL, 2,04 mmol). Smeša je prskana sa Ar(g)10 min, a zatim je posuda zatvorena. Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i ekstrahovana uzastopno sa vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-100% EtOAc/heksane, a zatim 0-10% MeOH u DCM sa 0,1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (102 mg, 27% prinos). MS (apci) m/z = 563,3 (M+H).
Intermedijer 129
1 2
4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2, 2-trifluoroacetat)
[0410] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)karbamata (Intermedijer P128; 102 mg, 0,181 mmol) u DCM (1 mL) i TFA (1,4 mL, 18,1 mmol) je mešan 2,5 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen sa DCM, zatim triturisan sa Et2O, i koncentrovan u vakuumu (ponoviti trituraciju 3x). Čvrsti ostatak je osušen pod visokim vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (125 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 463,3 (M+H).
Intermedijer P130
terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il) karbamat
[0411] Korak 1: Priprema (2-(4-((terc-butokskarbonil)amino)-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-5-il)borne kiseline. U posudi pod pritiskom, smeša terc-butil (4-metilpiperidin-4-il)karbamata (0,23 g, 1,1 mmol), 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3, 2-dioksaborolan-2-il)pirimidina (0,2 g, 0,89 mmol) i K2CO3(s)(0.62 g, 4,5 mmol) je kombinovana u dioksanu (8,9 mL) i posuda je zatvorena. Reakciona smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je direktno korišćena za sledeći korak pod pretpostavkom kvantitativnog prinosa. MS (apci) m/z = 337,2 (M+H).
[0412] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidina -4-il)karbamata. U zatvorenoj posudi, rastvor (2-(4-((terc-butoksikarbonil)amino)-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-5-il)borne kiseline (300 mg, 0,892 mmol) i K2CO3(s)(617 mg, 4,46 mmol) u dioksanu (8,92 mL) je tretiran vodom (0,892 mL), 4-bromo-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom (Intermedijer P79, korak 1, 313 mg, 0,892 mmol) i Pd(PPh3)4(103 mg, 0,0892 mmol), zatim prskan sa Ar(g). Nakon zatvaranja posude, reakciona smeša je mešana 16 h na 80°C. Posle
1
hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana fiziološkim rastvorom (3x). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-20% MeOH u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (243 mg, 36% prinos). MS (apci) m/z = 563,4 (M+H).
Intermedijer P131
4-(2-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-5-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0413] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P130; 91 mg, 0,147 mmol u DCM (2 mL) i TFA (2 mL, 26 mmol) je mešan preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim tretiran sa dodatnim TFA (2 mL). Reakciona smeša je mešana 4 h na 40°C i 60 h na sobnoj temperaturi pre koncentrovanja u vakuumu. Ostatak je sušen pod visokim vakuumom 3 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (101,52 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 463,3 (M+H).
Intermedijer P132
terc-butil 4-(2-((4-bromo-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilat
[0414] Smeša 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, 200 mg, 0,840 mmol) u DMA (4,20 mL) je tretiran sekvencijalno sa K2CO3(s)(348 mg, 12,1 mmol) i terc-butil 4-(2-bromoetil)piperazin-1-karboksilatom (493 mg, 1,68 mmol), zatim
1 4
mešana 3 h na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena fiziološkim rastvorom. Dobijena suspenzija je filtrirana, a čvrste materije su isprane vodom (5x). Čvrste materije su sakupljene, rastvorene u DCM i koncentrovane u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (239 mg, 63% prinos). MS (apci) m/z = 452,0 (M+H).
[0415] Jedinjenja u tabeli bbb su pripremljena korišćenjem sličnog postupka onome koji se koristi za sintezu terc-butil 4-(2-((4-bromo-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazina-1-karboksilata (Intermedijer P132) zamenom terc-butil 4-(2-bromoetil)piperazin-1-karboksilata sa (1,0 - 2,0 ekvivalenta) odgovarajućeg alkil halogenida (ili soli alkil halogenida). Reakcije su sprovedene između 50-60°C, i praćene za završetak pomoću LCMS, i trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Tamo gde je navedeno (*) potreban je dodatni korak obrade, koji uključuje vodenu obradu filtrata (ili reakcione smeše) korišćenjem DCM, vode i fiziološkog rastvora, nakon čega sledi hromatografsko prečišćavanje organskih materija iz ekstrakcije korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta.
Tabela bbb
1
Intermedijer Struktura Hemijsko ime Analitički
Intermedijer P140
1
terc-butil (R)-2-(((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin) -6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat
[0416] U posudi pod pritiskom, smeša terc-butil (R)-2-(((4-bromo-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P136; 367 mg, 0,839 mmol), bis(pinakolato)dibora (2,131 g, 8,39 mmol), PdCl2(dppf)•CH2Cl2(68.4 mg, 0,0839 mmol) i KOAc (412 mg, 4,20 mmol) u dioksanu (8,393 mL) je naprskan Ar(g), za 10 min. Posuda je zatvorena, i smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, i filtrirana kroz GF/F papir. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je triturisan pentanom. Pentanska suspenzija je filtrirana, a čvrste materije su izolovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (304 mg, 75% prinos).<1>HNMR (CDCl3) δ 8,19 (s, 1H), 7,70 (s, IH), 7,25 (s, 1H), 3,80-4,12 (m, 6H), 3,52-3,75 (m, 3H), 1,57 (s, 9H), 1,49 ( s, 12H).
[0417] Jedinjenja u tabeli ccc su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao i za sintezu terc-butil (R)-2-((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P140) sa zamenom terc-butil (R)-2-(((4-bromo-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P136) sa odgovarajućim 4-bromo-6-alkoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom iz Tabele bbb (ili sintetički intermedijer naveden u njemu). Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Obrada je obavljena ili sa DCM ili EtOAc, i gde je navedeno (*) bilo je potrebno ili druga trituracija iz pentana ili hromatografsko prečišćavanje korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (umesto trituracije).
Tabela ccc
1
Intermedijer Struktura Hemijsko ime Analitički
1
terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1) ,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat
1
[0418] U cevi pod pritiskom, smeša terc-butil (R)-2-((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazola [1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P140; 96 mg, 0,198 mmol), 2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Intermedijer R48; 37,6 mg, 0,0991 mmol), 2 M K3PO4(aq)(149 µL, 0,297 mmol), X-phos (9,45 mg, 0,0198 mmol) i Pd2(dba)3(4.54 mg, 0,00495 mmol) u dioksanu (1,0 mL) je prskana sa Ar(g)10 min, a zatim je posuda zatvorena. Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM, i ekstrahovana uzastopno sa vodom (3x) i fiziološkim rastvorom (1x). Organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu, i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-100% EtOAc/heksane kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (40,3 mg, 58% prinos). MS (apci) m/z = 701,2 (M+H).
[0419] Jedinjenja u tabeli ddd su pripremljeni korišćenjem sličnog postupka onom koji se koristi za sintezu terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il))pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P148) sa zamenom terc-butil (R)-2-(((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P140) sa odgovarajućim boronatnim estrom iz Tabele ccc (ili sintetički intermedijer naveden u njemu). Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Naslovna jedinjenja su izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg eluenta.
Tabela ddd
1
Intermedijer Struktura Hemijsko ime MS
Intermedijer P152
N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2 -hloro-6-metilbenzamid bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0420] Rastvor terc-butil (2-((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)karbamata (Intermedijer P151; 134 mg, 0,208 mmol) u DCM (1 mL) i TFA (0,5 mL, 6,53 mmol) je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (161 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 545,2 (M+H).
Intermedijer P153
1 1
terc-butil 3-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi )metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilat
[0421] U cevi pod pritiskom, smeša terc-butil 3-(((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (Intermedijer P144; 155 mg, 0,328 mmol), 1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer R47; 149 mg, 0,328 mmol), tretirana je sa 2 M K3PO4(q)(492 µL, 0,984 mmol), X-phos (31,3 mg, 0,0656 mmol) i Pd2(dba)3(15.0 mg, 0,0164 mmol) u dioksanu (1,64 mL) je prskano Ar(g)3 min, a zatim je posuda zapečaćena. Reakciona smeša je mešana 4 h na 80°C. Nakon hlađenja na temperaturu okoline, reakciona smeša je prečišćena direktno, prvo hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-30% MeOH u DCM kao gradijent eluenta), zatim C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentni eluent) da bi se dobila TFA so jedinjenja iz naslova. TFA so je razblažena sa DCM, zatim ekstrahovana sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (27 mg, 15% prinos). MS (apci) m/z = 473,2 (M+H).
Intermedijer P154
terc-butil 3-(((4-(5-(4-(2-hloro-5-fluorobenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilat
1 2
[0422] Rastvor 2-hloro-5-fluorobenzoeve kiseline (5,9 mg, 0,034 mmol), terc-butil 3-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il) )-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (Intermedijer P153; 6 mg, 0,011 mmol), DIEA (20 uL, 0,11 mmol) i HATU (8,5 mg, 0,022 mmol) u DCM (112 uL) su mešani preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (3 mg, 39% prinos). MS (apci) m/z = 693,2 (M+H).
Intermedijer P157
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorobenzamid bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0423] Rastvor terc-butil 3-(((4-(5-(4-(2-hloro-5-fluorobenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (Intermedijer P154; 19 mg, 0,027 mmol) u DCM (2 mL) i TFA (2 mL, 13 mmol) mešan je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16 mg, 73% prinos). MS (apci) m/z = 593,2 (M+H).
Intermedijer P158
terc-butil ((3r,4r)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-
1
hidroksipiperidin-3-il)karbamat
[0424] Smeša 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.204 g, 0,723 mmol), terc-butil ((3r,4r)-4-hidroksipiperidin-3-il)karbamata (0,313 g, 1,45 mmol) i DIEA (0,378 ml, 2,17 mmol) u DMSO (1,81 mL) je zagrevana na 90°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je podeljena između EtOAc i vode. Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakti su kombinovani, isprani fiziološkim rastvorom, osušeni sa Na2SO4i koncentrovani da bi se dobio naslovni proizvod (0,33 g, 0,69 mmol, 95 % prinos). MS (apci) m/z = 479,2 (M+H).
Intermedijer P159
4-(6-((3R,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0425] Korak 1: Priprema terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata. Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P93, 0,206 g, 0,768 mmol), tercbutil ((3R,4S)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (0,216 g, 0,998 mmol) i DIEA (0,669 mL, 3,84 mmol) u 92 DMSO (1). zagreva se na 90°C preko noći. Reakciona smeša je obrađena sa EtOAc i vodom. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni sa Na2SO4, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-10% MeOH u DCM) da bi se dobio naslovni proizvod (0,223 g, 62,5% prinos). MS (apci) m/z = 465,2 (M+H).
[0426] Korak 2: Priprema 4-(6-((3R,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamat (0,223 g,
1 4
0,480 mmol) je stavljen u DCM i TFA (1 mL svaki) i mešan 1 h. Smeša je koncentrovana, stavljena u DCM i mešana sa MP-karbonatom 20 min. Smeša je filtrirana i koncentrovana da bi se dobio naslovni proizvod (0,055 g, 31,4 % prinos). MS (apci) m/z = 365,1 (M+H).
Intermedijer P160
terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamat
[0427] Rastvor 3-hloro-6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridina (Primer 425, korak 2; 93,1 mg, 0,319 mmol) i terc-butil ((3S,4S)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (104 mg, 0,479 mmol) u DMSO (2 mL) tretiran je sa DIEA (0,279 mL, 1,60 mmol) i mešan na 115°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i filtrirana, dajući naslovljeno jedinjenje (112 mg, 72 % prinos). MS (apci) m/z = 488,2 (M+H).
Intermedijer P161
(3S,4S)-4-amino-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-3-ol dihidrohlorid
[0428] Rastvor terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P160, 110 mg, 0,225 mmol) u 1,4-
1
dioksanu (2 mL, 0,225 mmol) je tretiran sa HCl (0,0370 mL, 0,451 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Uklanjanje rastvarača pod vakuumom je dalo jedinjenje iz naslova kao čvrstu supstancu uz pretpostavku kvantitativnog prinosa. MS (apci) m/z = 388,2 (M+H).
Intermedijer P162
terc-butil ((3S,4S)-4-amino-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-3- il)karbamat
[0429] Korak 1: Priprema terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipiperidin-3-il)karbamata. Smeša 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0,270 g, 0,957 mmol), terc-butil ((3S,4R)-4-hidroksipiperidin-3-il)karbamata (0,414 g, 1,91 mmol) i Hunigove baze (0,500 ml, 2,87 mmol) u DMSO (2,39 mL) je zagrevana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je obrađena sa EtOAc i vodom. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,291 g, 63,6 % prinos). MS (apci) m/z = 479,2 (M+H).
[0430] Korak 2: Priprema (3S,4R)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il metansulfonata. Smeša terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipiperidin-3-il)karbamata (0,291 g, 0,608 mmol), metansulfonil hlorida (0,0471 ml, 0,608 mmol) i Hunigove baze (0,159 ml, 0,912 mmol) u DCM (6,08 mL) su mešani preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je obrađena sa DCM i vodom. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,293 g, 86,6 % prinos). MS (apci) m/z = 557,2 (M+H).
[0431] Korak 3: Priprema terc-butil ((3S,4S)-4-azido-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il )piperidin-3-il)karbamata. (3S,4R)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il metansulfonat (0,293 g, 0,526 mmol) i NaN3(0.0513 g, 0,790 mmol) u DMF (2,11 mL) su zagrevani na
1
90°C preko noći. Smeša je obrađena sa DCM i vodom. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušena sa Na2SO4, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-10% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,177 g, 66,8% prinos). MS (apci) m/z = 504,2 (M+H).
[0432] Korak 4: Priprema terc-butil ((3S,4S)-4-amino-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-3-il)karbamata. terc-butil ((3S,4S)-4-azido-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-3-il)karbamat (0,177 g, 0,351 mmol) i Pd/C (0,00748 g, 0,0703 mmol) u MeOH (3,51 mL) su mešani pod H2balonu preko noći. Ovo je filtrirano i koncentrovano da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,152 g, 90,6 % prinos). MS (apci) m/z = 478,2 (M+H).
Intermedijer P163
4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0433] Korak 1: Priprema 4-(5-bromopirimidin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu (3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)borne kiseline (Intermedijer P127, 86 mg, 0,27 mmol) i 5-bromo-2-jodopirimidina (78 mg, 0,27 mmol) u dioksanu (2 mL) i vodi (0,8 mL) dodat je X-Phos (26 mg, 0,054 mmol), Pd2(dba)3(12mg, 0,014 mmol) i 2M K3PO4(0.4 mL, 0,8 mmol). Reakcija je zagrevana na 60°C tokom 3 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je podeljena između DCM i vode (15 mL svaki), nakon čega je usledila ekstrakcija vodenog rastvora sa DCM (2 × 15 mL). Organski ekstrakti su kombinovani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0 do 100% acetona u heksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (48 mg, 41%). MS (apci) m/z = 429,1, 431,1 (M+H).
[0434] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(2-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-5-il)-4-metilpiperidina -4-il)karbamata. Smeša 4-(5-bromopirimidin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (48 mg, 0,11 mmol), terc-butil (4-metilpiperidin) -4-il)karbamata (36 mg, 0,17 mmol), Cs2CO3(73 mg, 0,22 mmol), XPHOS
1
(11 mg, 0,022 mmol) i Pd2dba3(10 mg, 0,011 mmol) u dioksanu (1 mL) je zagrevana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (25 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 × 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su filtrirani kroz Celite<®>jastučić i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-100% aceton u heksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (22 mg, 35%). MS (apci) m/z = 563,3 (M+H).
[0435] Korak 3: Priprema 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Smeša terc-butil (1-(2-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-5-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (22 mg, 0.04 mmol) u 1:1 DCM:TFA je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je uzet u minimalnoj količini MeOH i propušten je kroz P1-HCO3čep od smole. Uklanjanje rastvarača pod sniženim pritiskom dalo je jedinjenje iz naslova sa kvantitativnim prinosom. MS (apci) m/z = 463,2 (M+H).
Intermedijer P164
(S)-4-bromo-6-(2-hidroksipropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0436] Smeša 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1; 500 mg, 2,10 mmol) u DMF (4 mL) tretirana je uzastopno sa K2CO3(s)(1451 mg, 10,5 mmol) i (S)-2-metiloksiranom (1830 mg, 31,5 mmol). Reakciona smeša je mešana 3 dana na 50°C u zatvorenoj posudi. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 × 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (50 mL). Dobijena emulzija je filtrirana kroz grubu staklenu fritu, a dvofazni filtrat je odvojen. Organski ekstrakti su ponovo isprani fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 0-90% EtOAc/heksana kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (357 mg, 57% prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,21 (s, 1H), 8,14 (d, 1H), 7,49 (d, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,96 (dd, 1H), 3,86 (dd, 1H), 1,33 (d, 3H).
1
Intermedijer P165
(S)-4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksipropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0437] U cevi pod pritiskom, rastvor (S)-4-bromo-6-(2-hidroksipropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P164; 357 mg, 1,21 mmol) u dioksanu (6 mL) tretiran je sa 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridinom (323 mg, 1,45 mmol ), i 2 M Na2CO3(aq)(1808 µL, 3,62 mmol), prskan je sa N2(g)za 5 min. Dobijena smeša je tretirana sa Pd(PPh3)4(34.8 mg, 0,0301 mmol), zatim ponovo prskana sa N2(g)5 min, pre zatvaranja posude. Reakciona smeša je mešana 22 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom (25 mL) i mešana 1 h. Dobijena suspenzija je filtrirana pod vakuumom i čvrste materije su sakupljene da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (191 mg, 51% prinos). MS (apci) m/z = 313,1 (M+H).
Intermedijer P166
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0438] U posudi pod pritiskom, smeša 4-bromo-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P41; 2.0 g, 6,4 mmol), bis(pinakolato)dibora (2,5 g, 9,7 mmol), PdCl2(dppf)•CH2Cl2(0.53 g, 0,64 mmol) i KOAc (1,9 g, 19 mmol) u dioksanu (15 mL) je naprskana sa Ar(g)za 10 min. Posuda je zatvorena i smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL). Dobijena suspenzija je filtrirana, a filter kolač je ispran sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (25%
1
EtOAc u heksanima kao eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,2 g, 91% prinos).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,19 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 3,80 (s, 2H), 1,41 (s, 12H), 1,35 ( s, 6H).
Intermedijer P167
3 -hloro-6-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin
[0439] Smeša 4-bromo-3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (Intermedijer P84, korak 1; 152 mg, 0,581 mmol), PdCl2(dppf)•CH2Cl2(23.7 mg, 0,029 mmol), KOAc (285 mg, 2,91 mmol) i bis(pinakolato)dibora (443 mg, 1,74 mmol) u dioksanu (5,8 mL) prskana je sa Ar(g). Reakcioni sud je zapečaćen, i smeša je mešana 2 h 15 min na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite<®>. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (102 mg, 57%). MS (apci) m/z = 309,1 (M+H).
Intermedijer P168
6-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0440] Smeša 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, korak 6; 150 mg, 0,6 mmol), PdCl2(dppf) (17 mg, 0,02 mmol), KOAc (165 mg, 1,7 mmol) i 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (267 mg, 1,05 mmol) u dioksanu (4 mL) je poprskana argonom, a zatim zagrevana na 90°C tokom 3 h. Posle hlađenja do sobne
2
temperature, reakcija je filtrirana kroz Celite<®>i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-10% MeOH/DCM) da bi se dobio naslovni proizvod (126 mg, 70%).
Intermedijer P169
4-bromo-6-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-3-metilbutoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0441] U rastvor 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1;
194 mg, 0,815 mmol) u DMA (4,0 mL, 0,815 mmol) je dodat K2CO3(338 mg, 2,44 mmol), zatim ((4-bromo-2-metilbutan-2-il)oksi)(terc-butil)dimetilsilan (459 mg, 1,63 mmol). Reakcija je zatvorena i zagrevana na 60°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena fiziološkim rastvorom i filtrirana, isprana vodom. Dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u minimalnoj količini DCM, praćeno dodavanjem Et2O da izazove padavine. Posle mešanja tokom 2 h, suspenzija je filtrirana da bi se dobio naslovni proizvod (250 mg, 70%). 'H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8,19 (s, 1H), 8,09 (br d, 1H), 7,42 (br d, 1H), 4,13 (t, 2H), 1,97 (t, 2H), 1,31 (s, 6H), 0,86 (s , 9H), 0,10 (s, 6H).
Intermedijer P170
4-bromo-6-(2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0442] U smešu 4-bromo-6-(2-hloroetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P125; 50 mg, 0,17 mmol) u DMF (0,33 mL) dodati su DIEA (291 µl, 1,7 mmol), a zatim 3,3-difluoroazetidin (46 mg, 0,50 mmol). Reakcija je mešana na 60°C tokom 4 dana, nakon čega je dodat još 3,3-difluoroazetidin (46 mg, 0,50 mmol) i zagrevanje je nastavljeno još 16 h da bi se postigao završetak. Reakcija je razblažena vodom i filtrirana da bi se dobio naslovni
2 1
proizvod, koji je direktno upotrebljen bez daljeg prečišćavanja (31 mg, 37%). MS (apci) m/z = 357, 359 (M+H).
Intermedijer P171
4-bromo-6-(2-okso-2-(pirolidin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0443] U rastvor 4-bromo-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1;
100 mg, 0,420 mmol) u DMA (2 mL) je dodat K2CO3(87.1 mg, 0,63 mmol), zatim 2-hloro-1-(pirolidin-1-il)etan-1-on (74,4 mg, 0,504 mmol). Reakcija je zagrevana na 50°C preko noći, zatim sipana u vodu (10 mL) i mešana 1 h pre nego što je filtrirana i isprana vodom (5 mL), dajući naslovni proizvod kao bež čvrstu supstancu (127 mg, 86%) .<1>H NMR (CDCl3) δ 8,20 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,54 (t, 2H), 3,47 (t, 2H), 2,04 (m, 2H) , 1,90 (m, 2H).
Intermedijer P172
4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0444] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolor[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. Smeša 6-etoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P110; 500 mg, 1,60 mmol), terc-butil (1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer R46;
521.8 mg, 1,60 mmol), K3PO4(2 M aq, 2,4 mL, 4,79 mmol), dicikloheksil(2',4',6'-triizopropil-
2 2
[1,1'-bifenil]-2-il)fosfana (152,2 mg, 0,32 mmol) i Pd2(dba)3(73.10 mg, 0,080 mmol) u 1,4-dioksanu (8,0 mL) je degazirana argonom tokom 3 min, zatim zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći. Posle obrade u vodi, sirovi materijal je prečišćen korišćenjem hromatografije na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima) da bi se dobio naslovni proizvod (338,5 mg, 44%). MS (apci) m/z = 478,2 (M+H).
[0445] Korak 2: Priprema 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata). U rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (338,5 mg, 0,71 mmol) u DCM (2 mL) dodata je 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (2 mL). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 h, reakcija je razblažena sa Et2O (20 mL) i filtrirana da bi se dobio naslovni proizvod (342 mg, 80%). MS (apci) m/z = 378,1 (M+H).
Intermedijer P173
4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorid
[0446] Naslovni proizvod je pripremljen prema proceduri opisanoj u Intermedijeru P172, zamenom 6-etoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila sa 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom (Intermedijer P166) u koraku 1. MS (apci) m/z = 422,3 (M+H).
Intermedijer P174
2
4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0447] Korak 1: Priprema terc-butil (4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il) karbamata. U posudi pod pritiskom su kombinovani terc-butil (1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamat (Intermedijer R46; 26 mg, 0,080 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (202 mg, 0,80 mmol), PdCl2(dppf)-DCM (6,5 mg, 0,0080 mmol), KOAc (39 mg, 0,40 mmol) i dioksan (796 µl). Reakciona smeša je prskana argonom 10 min pre nego što je zatvorena i zagrevana na 90°C preko noći. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakcija je podeljena između DCM i vode, ekstrahovanjem vodenog rastvora sa DCM (3x) posle odvajanja faza. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, a zatim osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je direktno korišćen u sledećem koraku pod pretpostavkom kvantitativnog prinosa.
[0448] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. Smeša 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P1, Korak 6; 300 mg, 1,19 mmol), terc-butil (4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il)karbamata (1158 mg, 1,19 mmol), Pd(Ph3P)4(138 mg, 0,119 mmol) i Na2CO3(2 M aq, 3,6 mL, 7,14 mmol) u dioksanu (6,0 mL) je prskana argonom tokom 10 minuta, a zatim zagrevana na 80°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA (5×10 mL). Kombinovane organske ekstrakcije su propuštene kroz fritu separatora faza, a filtrat je koncentrovan, a zatim prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% MeOH u DCM) da bi se dobio naslovni proizvod kao čvrsta supstanca (173 mg, 31%). MS (apci) m/z = 464,2 (M+H).
[0449] Korak 3: Priprema 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila bis(2,2,2-trifluoroacetata). U rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (173 mg, 0.336 mmol) u DCM (2 mL) je dodat TFA (2 mL). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 30 min, reakcija je razblažena sa Et2O (20 mL) i filtrirana da bi se dobio naslovni proizvod (163 mg, 78%). MS (apci) m/z = 364,2 (M+H).
Intermedijer P175
2 4
1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin
[0450] Smeša 3-hloro-6-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridina (P167 55 mg, 0,18 mmol), 1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amina (R47, 40 mg, 0,18 mmol), dicikloheksil(2',4',6'-triizopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)fosfana (17 mg, 0,036 mmol)) i Pd2(dba)3(8.2 mg, 0,0089 mmol) u 1,4-dioksanu (891 µL) i K3PO4(2 M ak, 267 µL) je poprskana argonom pre zatvaranja i zagrevana na 80°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa DCM, isprana vodom i fiziološkim rastvorom, zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen korišćenjem silika hromatografije (0-20% MeOH u DCM sa 0,2% NH4OH) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29 mg, 44%). LCMS m/z = 373,1 (M+H).
Intermedijer P176
terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat
[0451] Naslovljeno jedinjenje (36 mg, 16%) je pripremljeno sličnim postupkom kao što je opisano u Intermedijeru P175, zamenom 3-hloro-6-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridina sa terc-butilom (R)-2-(((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilatom (Intermedijer P140). LCMS m/z = 549,3 (M+H).
Intermedijer P177
2
terc-butil (S)-2-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6 -il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat
[0452] Naslovljeno jedinjenje (36 mg, 16%) je pripremljeno sličnim postupkom kao što je opisano u Intermedijeru P175, zamenom 3-hloro-6-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridina sa terc-butil (S) -2-(((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilatom (Intermedijer P146). LCMS m/z = 549,3 (M+H).
Intermedijer R13
(2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridin
[0453] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. Rastvor 6-metoksipiridin-3-ola (100 mg, 0,799 mmol) i terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (161 mg, 0,799 mmol) u THF je tretiran sa PPh3(231 mg, 0879 mmol), zatim prskan sa Ar(g)5 min. Uz mešanje na sobnoj temperaturi, smeša je polako tretirana sa DIAD (186 µL, 0,959 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana 9 h na sobnoj temperaturi, zatim preko noći na 70°C pre uvođenja dodatnog DIAD (186 µL, 0,959 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na 70°C i zatim ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Posle koncentrovanja reakcione smeše u vakuumu, ostatak je suspendovan u DCM i ispran zasićenim Na2CO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (246 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 309,15 (M+H).
2
[0454] Korak 2: Priprema 2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (246 mg, 0,80 mmol) u DCM (4,0 mL) je tretiran sa TFA (4,0 mL, 0,80 mmol), zatim mešan 5 min na sobnoj temperaturi pre uvođenja dodatne TFA (1 mL). Posle mešanja tokom 45 min na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (127,5 mg, 77% prinos). MS (apci) m/z = 209,1 (M+H).
Intermedijer R14
terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilat
[0455] Rastvor N-terc-butoksikarbonil-(R)-(-)-3-pirolidinola (2,0 g, 10,7 mmol) u DCM (28 mL) je tretiran sa TEA (2,9 mL, 21,4 mmol). Rastvor je hlađen na 0°C tokom 30 minuta. Zatim je dodat metansulfonil hlorid (868 µL, 11,2 mmol). Reakcija je mešana na 0°C 30 minuta. Reakcija je razblažena sa DCM i isprana sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,83 g, 100% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 55,24 (s, 1H), 3,55-3,38 (m, 3H), 3,31-3,27 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,18-2,08 (m, 2H ), 1,40 (s, 9H).
Intermedijer R25
ciklobutil karbonohloridat
[0456] Naslovljeno jedinjenje (93,3 mg, 0,693 mmol, kvantitativni prinos se pretpostavlja) je pripremljeno i obrađeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za (S)-tetrahidrofuran-3-il karbonohloridat (Intermedijer R54), zamenom (S)-tetrahidrofuran-3-ola (100 mg, 1.13 mmol) sa ciklobutanolom (54.3 µl, 0.693 mmol).
2
Intermedijer R26
1-metoksiciklopropan-1-karboksilna kiselina
[0457] Korak 1: Priprema metil 1-metoksiciklopropan-1-karboksilata. Rastvor 1-hidroksi-1-ciklopropankarboksilne kiseline (1,02 g, 9,99 mmol) u DMF (33 mL) tretiran je uzastopno jodometanom (1,56 mL, 25,0 mmol) i NaH (60 tež.% u mineralnom ulju; 1,00 g). 25,0 mmol), zatim mešan 16 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena vodom, a zatim ekstrahovana sa Et2O (2x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani uzastopno vodom (3x) i fiziološkim rastvorom (1x), a zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova dovoljno čistoće da se prenese u korak 2 (1,30 g, kvantitativni prinos).
[0458] Korak 2: Priprema 1-metoksiciklopropan-1-karboksilne kiseline. Rastvor sirovog metil 1-metoksiciklopropan-1-karboksilata (Korak 1; 1.30, 9.99 mmol, pretpostavljeno) u 1:1 THF:MeOH (60 mL) je tretiran sa 2.0 M KOH(aq)(14,99 mL, 29,97 mmol), zatim mešan 60 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena sa Et2O, i ekstrahovana sa 1,0 M NaOH(aq)(2x). Kombinovani vodeni ekstrakti su zakišeljeni do pH ~2 dodatkom 4,0 M HCl(aq), zatim ekstrahovani sa DCM (2x). Kombinovani DCM ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (240 mg, 99% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 812,56 (s, IH), 3,29 (s, 3H), 1,14-1,04 (m, 4H).
Intermedijer R29
N,N-dimetil-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetat)
2
[0459] Korak 1: Priprema terc-butil 4-(dimetilamino)-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-karboksilata. Rastvor terc-butil 4-amino-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-karboksilata (50,2 mg, 0,172 mmol) u DCM (1,15 mL) je tretiran formaldehidom (37 tež.% u vodi sa 5 -15% MeOH stabilizator; 64,7 µl, 0,861 mmol) i NaBH(AcO)3(365 mg, 1.72 mmol), i mešan 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i dvofazna smeša je ekstrahovana sa DCM (3x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom. Nakon povratne ekstrakcije svih vodenih ekstrakata još jednom sa DCM, svi DCM ekstrakti su kombinovani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (50-100% EtOAc/heksani, a zatim 0-10% MeOH u EtOAc) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (55 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 320,2 (M+H).
[0460] Korak 2: Priprema N,N-dimetil-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetata). Smeša terc-butil 4-(dimetilamino)-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-karboksilata (55 mg, 0,172 mmol) u DCM (2 mL) je tretirana sa TFA (1 mL, 6,51 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi pre koncentrovanja smeše u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (77,0 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 220,1 (M+H).
Intermedijer R41
4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0461] Smeša 1 terc-butil 4-amino-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-karboksilata (200 mg, 0,686 mmol) u DCM (0,25 mL) je tretirana sa TFA (0,25 mL, 3,27 mmol). Dobijena smeša je mešana 1,75 h na sobnoj temperaturi pre koncentrovanja smeše u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (287 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 192,2 (M+H)
Intermedijer R44
2
terc-butil (4-metil-1-(piridin-3-il)piperidin-4-il)karbamat
[0462] U epruveti pod pritiskom, suspenzija 3-bromopiridina (304,9 µL, 3,165 mmol), tercbutil (4-metilpiperidin-4-il)karbamata (678,2 mg, 3,165 mmol) i Cs2CO3(s)(2.062 g, 6,329 mmol) u dioksanu (15 mL) je prskana sa N2(g)tokom 5 minuta, zatim tretirana sa X-phos (150,9 mg, 0,3165 mmol) i Pd2(dba)3(144.9 mg, 0,1582 mmol). Dobijena smeša je prskana sa N2(g). Nakon zatvaranja posude, reakciona smeša je mešana 60 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, dobijena suspenzija je razblažena vodom (25 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-50% aceton/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (639,9 mg, 81% prinos). MS (apci) m/z = 292,2 (M+H).
Intermedijer R45
terc-butil (1-(6-bromopiridin-3-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamat
[0463] Rastvor terc-butil (4-metil-1-(piridin-3-il)piperidin-4-il)karbamata (Intermedijer R44; 50 mg, 0,172 mmol) u DCM (0,5 mL) je ohlađen na 0°C, zatim tretiran sa NBS (30,5 mg, 0,172 mmol). Dobijena smeša je mešana 1 h na 0°C, a zatim razblažena vodom. Dvofazna smeša je ekstrahovana sa DCM (2 × 1 mL). Kombinovani organski ekstrakti su delimično koncentrovani, a zatim prečišćeni direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (0-90% aceton/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (50,2 mg, 79% prinos). MS (apci) m/z = 372,2 (M+H).
21
Intermedijer R46
terc-butil (1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamat
[0464] U zatvorenoj posudi, smeša terc-butil (4-metilpiperidin-4-il)karbamata (1,44 g, 6,71 mmol), 2,5-dihloropirazina (1,00 g, 6,71 mmol) i K2CO3(s)(4.64 g, 33,6 mmol) u dioksanu (67,1 mL) je mešana 60 h na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, dobijena suspenzija je razblažena sa EtOAc, filtrirana kroz Celite<®>, zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (657 mg, 30% prinos). MS (apci) m/z = 327,1 (M+H).
Intermedijer R47
1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetat)
[0465] Smeša terc-butil (1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer R46; 500 mg, 1,53 mmol) u DCM (0,5 mL) je tretirana sa TFA (0,25 mL, 3,27 mmol). Dobijena smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi pre koncentrovanja smeše u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (696 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 227,1 (M+H).
Intermedijer R48
2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[0466] Rastvor 1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer R47; 596 mg, 1,31 mmol) u DCM (26 mL) tretiran je uzastopno sa 2-hloro-6-metilbenzojevom kiselinom (1,345 g, 7,89 mmol), HATU (1,999 g, 5,26 mmol) i DIEA (4,6 mL 26). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, pre koncentrovanja smeše u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-60% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (360 mg, 72% prinos). MS (apci) m/z = 379 (M+H).
Intermedijer R49
2-hloro-6-metil-N-(4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il)benzamid
[0467] U posudi pod pritiskom, smeša 2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Intermedijer R48; 730 mg, 1,92 mmol), bis(pinakolato)dibora (4,888 g, 19,2 mmol), KOAc (944 mg, 9,62 mmol) i PdCl2(dppf)•CH2Cl2(157 mg, 0,192 mmol), u dioksanu (19,25 mL) je prskana sa Ar(g). Posuda je zatvorena, i smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM, i filtrirana kroz GF/F filter. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je razmućen pentanom (50 mL). Dobijena suspenzija je ultrazvučno obrađena 4 min, a zatim filtrirana. Čvrste materije su sakupljene da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (980 mg, 54% prinos). MS (apci) m/z = 389,1 (M+H).
Intermedijer R50
terc-butil (4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirimidin-2-il)piperidin-4-il)karbamat
[0468] U posudi pod pritiskom, smeša terc-butil (4-metilpiperidin-4-il)karbamata (0,23 g, 1,1 mmol), 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3, 2-dioksaborolan-2-il)pirimidina (0,2 g, 0,89 mmol) i K2CO3(s)(944 mg, 9,62 mmol) je kombinovana u dioksanu (8,9 mL). Posuda je zatvorena i reakciona smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja na temperaturu okoline, reakciona smeša je sačuvana kao suspenzija (tj. bez dalje obrade, prečišćavanja ili izolovanja) koja sadrži naslovno jedinjenje (pretpostavljeno 370 mg, kvantitativni prinos. MS (apci) m/z = 419,3 (M+H ).
Intermedijer R53
terc-butil ((3S,4S)-1-(5-hloropirazin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamat
[0469] Rastvor 2,5-dihloropirazina (217 mg, 1,46 mmol), terc-butil ((3S,4S)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (300 mg, 1,387 mmol) i K2CO3(575 mg, 2,25 mmol) u DMSO (2,3 mL) je mešan na 90°C tokom 12 h, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je razblažena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 × 15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (15 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-15% MeOH/DCM), a zatim hromatografijom reverzne faze (0 do 98% MeCN/voda). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane, koncentrovane da bi se
21
uklonila većina ACN, razblažene sa zas. NaHCO3(15 mL) i ekstrahovane sa DCM (3 × 15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (15 mL) i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (180,7 mg, 40% prinos). MS (apci) m/z = 329,2 (M+H).
Intermedijer R54
(S)-tetrahidrofuran-3-il karbonohloridat
[0470] Rastvor trifozgena (111 mg, 0,375 mmol) u DCM (284 µL) je mešan na 0°C, uz uzastopno dodavanje (S)-tetrahidrofuran-3-ola (100 mg, 1,13 mmol) i rastvora piridina (91,8 µL, 1,13 mmol) u DCM (0,15 mL). Dobijena smeša je mešana 1,5 h na 0°C, zatim još 0,5 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je filtrirana da bi se uklonile čvrste materije piridinijuma. Filtrat koji sadrži jedinjenje iz naslova u DCM je sakupljen i korišćen kao što jeste u narednim koracima pod pretpostavkom kvantitativnog prinosa.
Intermedijer R55
4-(2-fluorobenzil)piperidin-4-ol hidrohlorid
[0471] Korak 1: Priprema terc-butil 4-(2-fluorobenzil)-4-hidroksipiperidin-1-karboksilata. U rastvor (2-fluorobenzil)magnezijum hlorida (0,5 M u Et2O, 2,4 mL, 1,227 mmol) ohlađenog na -78°C dodat je terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilat (203,7 mg, 1,022 mmol) u porcijama. Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Posle uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je stavljen u DCM i ispran vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je koncentrovan i sirovi materijal je tretiran hromatografijom na silicijum dioksidu (0-70% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (143,9 mg, 45,5%). MS (apci) m/z = 210,2 (M+H-Boc).
[0472] Korak 2: Priprema 4-(2-fluorobenzil)piperidin-4-ol hidrohlorida. Rastvor terc-butil 4-(2-fluorobenzil)-4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (143,9 mg, 0,4651 mmol) u 1,4-dioksanu (0,5 mL) je tretiran konc. HCl (0,038 mL, 0,46 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Uklanjanje rastvarača pod sniženim pritiskom dalo je naslovni proizvod kao bezbojno ulje (114 mg, 99 % prinos). MS (apci) m/z = 210,1 (M+H).
Intermedijer R56
4-(2-metoksibenzil)piperidin-4-ol hidrohlorid
[0473] Korak 1: Priprema terc-butil 4-hidroksi-4-(2-metoksibenzil)piperidin-1-karboksilata. U rastvor (2-metoksibenzil)magnezijum hlorida (0,25 M u 2-metiltetrahidrofuranu, 4,8 mL, 1,2 mmol) ohlađenom na -78°C dodat je terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilat (207,0 mg, 1,04 mmol) u porcijama. Reakcija je mešana na -78°C tokom 2 h pre nego što je ugašena sa zas. NH4Cl (aq.). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x). Organski ekstrakti su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-70% EtOAc u heksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (64,1 mg, 19 %). MS (apci) m/z = 222,2 (M+H-Boc).
[0474] Korak 2: Priprema 4-(2-metoksibenzil)piperidin-4-ol hidrohlorida. Naslovni proizvod (51 mg, 99%) je pripremljen prema postupku opisanom za dobijanje Intermedijera R55, Korak 2. MS (apci) m/z = 222,2 (M+H).
Intermedijer R57
21
4-(4-fluorobenzil)piperidin-4-ol hidrohlorid
[0475] Korak 1: Priprema terc-butvl 4-(4-fluorobenzil)-4-hidroksipiperidin-1-karboksilata. Rastvoru (4-fluorobenzil)magnezijum hlorida (0,5 M u 2-metiltetrahidrofuranu, 7,5 mL, 3,75 mmol) ohlađenom na 0°C dodat je terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilat (496,4 mg, u porcijama 2,49 mmol). Smeša je mešana na 0°C 30 min pre nego što je ugašena sa zas. NH4Cl (aq). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x). Organski ekstrakti su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-70% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (950,5 mg, 73%). MS (apci) m/z = 210,2 (M+H-Boc).
[0476] Korak 2: Priprema 4-(2-metoksibenzil)piperidin-4-ol hidrohlorida. Naslovni proizvod (51 mg, 99%) je pripremljen prema postupku opisanom za dobijanje intermedijera R55, korak 2. MS (apci) m/z = 210,1 (M+H).
Intermedijer R58
4-((6-metilpiridin-2-il)metil)piperidin-4-ol
[0477] Korak 1: Priprema terc-butil 4-hidroksi-4-((6-metilpiridin-2-il)metil)piperidin-1-karboksilata. U balon koji je osušen pod vakuumom uz zagrevanje dodat je 2,6-dimetilpiridin (0,06 mL, 0,5 mmol) i suvi THF (1,1 mL) pod argonom. Posle hlađenja na -78°C, uveden je n-BuLi (2,5 M u THF, 0,17 mL, 0,43 mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do 0°C, zatim je ponovo ohlađena na -78°C i dodat je 1-benzilpiperidin-4-on (66 mg, 0,33 mmol). Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana 3 h pre nego što je podeljena između DCM i vode. Posle odvajanja faza i ekstrakcije vodenog sa DCM (2 x), organski ekstrakti su kombinovani, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-20% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (73 mg, 71%). MS (apci) m/z = 307,2 (M+H).
[0478] Korak 2: Priprema 4-((6-metilpiridin-2-il)metil)piperidin-4-ola. Mešavina terc-butil 4-
21
hidroksi-4-((6-metilpiridin-2-il)metil)piperidin-1-karboksilata (73 mg, 0,24 mmol) u DCM (3 mL) i TFA (2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre nego što je koncentrovana. Ostatak je uzet u minimalnu količinu MeOH i propušten kroz P1-HCO3čep od smole. Uklanjanje rastvarača pod sniženim pritiskom dalo je jedinjenje iz naslova sa kvantitativnim prinosom. MS (apci) m/z = 207,1 (M+H).
Intermedijer R59
4-(3-metoksibenzil)piperidin-4-ol hidrohlorid
[0479] Korak 1: Priprema terc-butil 4-hidroksi-4-(3-metoksibenzil)piperidin-1-karboksilata. U rastvor (3-metoksibenzil)magnezijum hlorida (0,25 M u 2-metiltetrahidrofuranu, 15 mL, 3,75 mmol) ohlađenom na 0°C dodat je terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilat (678 mg, 3,40 mmol) u porcijama. Reakciona smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana preko noći pre nego što je ugašena sa zas. NH4Cl (aq.). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x). Organski ekstrakti su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-70% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (1,09 g). MS (apci) m/z = 222,2 (M+H-Boc).
[0480] Korak 2: Priprema 4-(3-metoksibenzil)piperidin-4-ol hidrohlorida. Naslovni proizvod je pripremljen prema postupku opisanom za dobijanje intermedijera R55, korak 2. MS (apci) m/z = 222,1 (M+H).
[0481] RE23649-093
4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ol
[0482] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((3-hloropiridin-2-il)metil)-4-hidroksipiperidin-1-
21
karboksilata. Rastvor 3-hloro-2-metilpiridina (64,2 mg, 0,50 mmol) u THF (1 mL) je ispražnjen sa N2i ohlađen na -78 °C pre nego što je n-butillitijum (2,5 M THF, 0,16 mL, 0,41 mmol) dodat u kapima. Posle mešanja na -78 °C tokom 45 min, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 2 h pre nego što se ponovo ohladi na -78°C. U kapima je dodat rastvor terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilata (74,2 mg, 0,37 mmol) u THF (1,5 mL). Posle mešanja tokom 2 sata na -78°C, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 2 dana. Reakcija je zatim podeljena između EtOAc i zas. NH4Cl (aq). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x). Organski ekstrakti su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (103,5 mg, 85%). MS (apci) m/z = 227,1 (M+H-Boc).
[0483] Korak 2: Priprema 4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ola. Rastvor terc-butil 4-((3-hloropiridin-2-il)metil)-4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (103,5 mg, 0,32 mmol) u DCM (1,5 mL) je tretiran sa TFA (1,5 mL) i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Posle uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je tretiran sa NaHCO3(zas.) i ekstrahovan sa 4:1 DCM/IPA (4x). Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz fritu za razdvajanje faza i koncentrovani da bi se dobio naslovni proizvod kao bezbojno ulje (71,1 mg, 99%). MS (apci) m/z = 227,1 (M+H).
Intermedijer R61
4-((5-fluoropiridin-3-il)metil)piperidin-4-ol
[0484] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-fluoropiridin-3-il)metil)-4-hidroksipiperidin-1-karboksilata. Rastvor 3-fluoro-5-metilpiridina (279 mg, 2,51 mmol) u THF (1,5 mL) je ispražnjen sa N2i ohlađen na -78°C pre nego što je u kapima dodat butillitijum (2,5 M THF, 0,79 mL, 1,99 mmol). Posle 5 min mešanja, u kapima je dodat rastvor terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilata (359,7 mg, 1,805 mmol) u THF (1,5 mL) i mešanje je nastavljeno još 5 min. Reakcija je zatim ugašena sa zas. NH4Cl (aq) i filtrirana. Posle odvajanja faza, organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan.
21
Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu) da bi se dobio naslovni proizvod kao bezbojno ulje (104,9 mg, 18,7%). MS (apci) m/z = 211,1 (M+H-Boc).
[0485] Korak 2: Priprema 4-((5-fluoropiridin-3-il)metil)piperidin-4-ola. Naslovni proizvod je pripremljen prema postupku opisanom za dobijanje intermedijera R60, Korak 2. MS (apci) m/z = 211,2 (M+H).
[0486] Jedinjenja u tabeli R1 su pripremljeni korišćenjem sličnih postupaka kao što su opisani za pripremu Intermedijera R56 (postupak A), Intermedijera R57 (postupak B), Intermedijera R60 (metod C), Intermedijera R55 (postupak D) ili Intermedijera R58 (postupak E), koristeći odgovarajuće uslove reagensa i hromatografije za korak 1.
Tabela R1
21
1-(5-hloropirazin-2-il)-4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ol
[0487] Rastvor 4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ola (R60, 222,0 mg, 0,98 mmol) i 2,5-dihloropirazina (145,9 mg, 0,98 mmol) u DMSO (2 mL) je tretiran sa DIEA (0,86 mL, 4,90 mmol) i mešan na 100°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa H2O i ekstrahovan sa 4:1 DCM/IPA (3x). Organski ekstrakti su kombinovani i koncentrovani. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-80% EtOAc u heksanima) da bi se dobio naslovni proizvod kao bezbojno ulje (206,7 mg, 62% prinos). MS (apci) m/z = 339,1 (M+H).
Intermedijer R70
22
1-(5-hloropirazin-2-il)-4-((3-fluoropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ol
[0488] Naslovni proizvod (460 mg, 59%) je pripremljen prema postupku opisanom za dobijanje intermdijera R69, zamenom 4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ola sa 4-((3-fluoropiridin-2-il)metil)piperidin-4-olom (Intermedijer R68). MS (apci) m/z = 323,1 (M+H).
Intermedijer R71
1-(5-hloropirazin-2-il)-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol
[0489] Naslovni proizvod (550 mg, 96%) je pripremljen prema postupku opisanom za dobijanje intermedijera R69, zamenom 4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ola sa 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol dihidrohloridom. MS (apci) m/z = 305,1 (M+H).
Intermedijer R72
4-benzil-1-(5-hloropirazin-2-il)piperidin-4-amin
[0490] Korak 1: Priprema 4-benzilpiperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetata). Smeša tercbutil 4-amino-4-benzilpiperidin-1-karboksilata (210 mg, 0,723 mmol) u DCM (2 mL) i TFA (1 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom ~3 h pre nego što je koncentrovana da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje pod pretpostavkom kvantitativnog prinosa. MS (apci) m/z = 191,2 (M+H).
[0491] Korak 2: Priprema 4-benzil-1-(5-hloropirazin-2-il)piperidin-4-amina. U rastvor 2,5-dihloropirazina (0,1316 mL, 0,7243 mmol) u DMSO (10 mL) dodat je K.2CO3(300.3 mg, 2,173 mmol), a zatim 4-benzilpiperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetat) (303 mg, 0,72 mmol). Reakcija je zatvorena i zagrevana na 75°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc (10 mL) i vodom (20 mL). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x). Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani i direktno korišćeni u sledećem koraku. MS (apci) m/z = 303,1 (M+H).
Sintetički primeri
Primer 9
[0492]
6-etoksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0493] Suspenzija 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6; 30 mg, 0,11 mmol), 2-(piperidin-4-iloksi)piridina (28,4 mg, 0,159 mmol) i TEA (44 µL, 0,319 mmol) u DMA (500 uL) je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i ugašena vodom. Dobijena dvofazna smeša je ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (40-100% EtOAc/heksani kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23,6 mg, 50% prinos). MS (apci) m/z = 441,2 (M+H).
Primer 10
[0494]
6-etoksi-4-(6-(4-(pirimidin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0495] Naslovljeno jedinjenje (18,6 mg, 40% prinos) je pripremljeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za Primer 9, zamenom 2-(piperidin-4-iloksi)piridina sa 2-(piperidin-4-iloksi)pirimidinom. MS (apci) m/z = 442,3 (M+H).
Primer 27
[0496]
4-(6-(4-benzil-4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0497] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 29.3 mg, 0,0898 mmol), 4-benzilpiperidin-4-ola (25,8 mg, 0,135 mmol) i TEA (37,5 µL, 0,269 mmol) u DMA (599 µL) je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i isprana sa DCM. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% voda:ACN sa 0,1% TFA kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq). Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (22,4 mg, 50% prinos). MS (apci) m/z = 498,2 (M+H).
22
Primer 29
[0498]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamid
[0499] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3 -karbonitrila (Intermedijer P46; 36 mg, 0,0856 mmol), benzojeve kiseline (20,9 mg, 0,171 mmol) i HATU (35,8 mg, 0,0942 mmol) u DCM (856 µL) je tretirana sa DIEA (74,8 µL, 0,428 mmol) i zatim mešana 2 h na temperaturi sredine. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA, a zatim filtriran kroz špric filter. Filtrat je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33,2 mg, 74% prinos). MS (apci) m/z = 525,25 (M+H).
[0500] Jedinjenja u Tabeli N su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 29, zamenom benzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela N
Primer 35
[0501]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0502] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 29.7 mg, 0,0910 mmol), 2-(piperidin-4-iloksi)piridina (24,3 mg, 0,137 mmol) i TEA (38,1 µL, 0,273 mmol) u DMA (607 µL) su mešani preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i isprana sa DCM. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq). Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (12,1 mg, 27% prinos). MS (apci) m/z = 485,2 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8,34 (d, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,15 (m, 2H), 7,71 (dd, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,15 (d, 1H), 6,86 (m, 1H ), 6,81 (d, 1H), 6,74 (d, 1H), 5,35 (m, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,86 (s, 2H), 3,55 (m, 2H), 2,15
22
(m, 2H), 1,88 (m, 2H), 1,40 (s, 6H).
[0503] Jedinjenja u tabeli P su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 35, zamenom 2-(piperidin-4-iloksi)piridina odgovarajućim piperidinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim.
Tabela P
22
Primer 42
[0504]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0505] Rastvor 2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridina (Intermedijer R13; 66.1 mg, 0,317 mmol) u DMA (794 µL) je tretiran 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom (Intermedijer P42; 51.8 mg, 0,159 mmol) i TEA (43,4 uL, 0,317 mmol). Dobijena smeša je prskana sa Ar(g)zatim mešana preko noći na 110°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM i isprana sa zasićenim NaHCO3(aq). Vodeni ekstrakti su ponovo ekstrahovani sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, a zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (41 mg, 50% prinos). MS (apci) m/z = 515,2 (M+H).
22
Primer 43
[0506]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-fenoksiazetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0507] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 42.7 mg, 0,131 mmol), 3-fenoksiazetidina (23,4 mg, 0,157 mmol) i TEA (54,7 µL, 0,393 mmol) u DMA (872 µL) je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i isprana sa DCM. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (14,1 mg, 24% prinos). MS (apci) m/z = 456,2 (M+H).
Primer 44
[0508]
6-etoksi-4-(6-(4-hidroksi-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0509] 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (Intermedijer P6,
22
0.030 g, 0,11 mmol), trietilamin (0,044 mL, 0,32 mmol) i 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol (0,041 g, 0,21 mmol) su kombinovani u DMA (0,5 mL) i mešani na 90°C tokom 5 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (5 mL), zas. NH4Cl (vod., 5 mL) i vodom (20 mL). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani, koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (30-100% EtOAc/heksani) da bi se dobio naslovni proizvod kao čvrst (0,022 g, 46% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,5 (dq, 1H), 8,3 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,65 (qd, 2H), 7,15 (qd, 1H), 7,1 (d, 1H) , 7,05 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 6,05 (br s, 1H), 4,1 (q, 2H), 3,45 (m, 2H), 2,9 (s, 2H), 1,6 (m, 4H) , 1,5 (t, 3H). LCMS (apci) m/z = 455,2 (M+H).
Primer 45
[0510]
4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[ 1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0511] Korak 1: Priprema terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata. 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (Intermedijer P6, 0.22 g, 0,76 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,66 mL, 3,81 mmol) i terc-butil ((3S,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamat (0,23 g, 1,14 mmol) su kombinovani u DMSO (1,5 mL) i mešani na 100°C tokom 60 h. Reakciona smeša je razblažena zas. NH4Cl i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani, koncentrovani u vakuumu i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc/heksani) da bi se dobio proizvod kao čvrsta supstanca (0,28 g, 80% prinos).
[0512] Korak 2: Priprema 4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Smeša tercbutil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (0,030 g, 0,07 mmol), 5-fluoro-6-metoksipiridin-3-ola (0,037
22
g, 0,26 mmol) i trifenilfosfina (0,068 g, 0,26 mmol) je kombinovana u 1:1 DCM/THF (0,7 mL). Reakcioni sud je ispražnjen argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,035 mL, 0,26 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i H2O, filtrirana kroz papir za razdvajanje faza i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani, koncentrovani u vakuumu i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc/heksan). Frakcije koje sadrže Boc-zaštićeno naslovno jedinjenje su koncentrovane, a ostatak je razblažen sa 6 mL 1:1 DCM/5N HCl u izopropil alkoholu. Ova smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa 2M NaOH i prečišćeni hromatografijom reverzne faze (0-80% ACN/vodom [0,1% mravlja kiselina]) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,2 mg, 7,0 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,4 (d, 1H), 8,3 (s, 1H), 8,25 (dd, 1H), 7,75 (dd, 1H), 7,7 (d, 1H), 7,3 (dd, 1H), 7,2 (d, 1H ), 6,7 (dd, 1H), 4,1 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,9 (m, 2H), 3,7 (dd, 1H), 3,6 (dd, 1H), 3,3 (s, 2H) , 1,45 (t, 3H). LCMS (apci) m/z = 490,1 (M+H).
Primer 46
[0513]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3- karbonitril
[0514] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (0,040 g, 0,12 mmol) (Intermedijer P42), 2-(azetidin-3-iloksi)piridin dihidrohlorida (0,055 g, 0,24 mmol) i trietilamina (0,10 mL, 0,74 mmol) u DMA (0,82 mL) je zagrevana u zatvorenoj bočici na 90°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je podeljena između DCM i vode (po 10 mL). Posle odvajanja faza, vodeni rastvor je ekstrahovan sa DCM (2 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA) da bi se dobio naslovni proizvod kao TFA so, koja je zatim konvertovana u slobodnu bazu razdvajanjem u DCM i Na2CO3
2
(zas. aq). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani da bi se dobio naslovni proizvod (4,7 mg, 8,4 % prinos).<1>H NMR (CDCl3) δ 8,31 (dd, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,14 (m, 2H), 7,68 (dd, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,91 (m, 1H) , 6,80 (m, 1H), 6,44 (dd, IH), 5,57 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 4,15 (m, 2H), 3,86 (s, 2H), 1,39 (s, 6H). LCMS (apci) m/z = 457,2 (M+H).
Primer 47
[0515]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0516] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (0,031 g, 0,095 mmol) (Intermedijer P42), 3-metoksi-6-(piperidin-4-iloksi)piridazin dihidrohlorida (0,090 g, 0,32 mmol), trietilamina (0,10 mL, 0,76 mmol) u DMA (0,32 mL) je zagrevana u zatvorenoj bočici do 95°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM (10 mL) i uzastopno isprana sa zas. NaHCO3(15 mL), vodom (2 x 15 mL) i fiziološkim rastvorom (15 mL), zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,01% TFA) i kombinovane frakcije proizvoda su koncentrovane i konvertovane u slobodnu bazu sa zas. NaHCO3(15 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 × 15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (15 mL), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (22,5 mg, 46 % prinos).<1>H NMR (CDCl3) δ 8,32 (dd, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,92 (m, 2H), 6,80 (m, 1H) , 5,42 (m, 1H), 4,10 (m, 2H), 4,04 (s, 3H), 3,84 (s, 2H), 3,46 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 1,88 (m, 2H), 1,39 (s, 6H). LCMS (apci) m/z = 516,2 (M+H).
Primer 52
2 1
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2-(trifluorometil)benzamid
[0518] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (50 mg, 0,13 mmol) i 2-(trifluorometil)benzojeve kiseline (25 mg, 0,13 mmol) u DMSO (1 mL) tretirana je sa DIEA (83 µL, 0,48 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su zatim sušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (1-10% MeOH u DCM sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (37 mg, 53% prinos) MS (apci) m/z=593,3 (M+H).
[0519] Jedinjenja u Tabeli K su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 52, zamena 2-(trifluorometil)benzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela Q
2 2
Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
Primer 56
[0520]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2-fluoro-6-metilbenzamid
2
[0521] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (90 mg, 0,24 mmol) i 2-fluoro-6-metilbenzojeve kiseline (37 mg, 0,24 mmol) u DMSO (1 mL) tretirana je sa DIEA (93 µL, 0,54 mmol), a zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (1-10% MeOH u DCM sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (35 mg, 53% prinos) MS (apci) m/z = 557,3 (M+H).
[0522] Jedinjenja u Tabeli R su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu iz Primera 56, zamenom 2-fluoro-6-metilbenzojeve kiseline sa odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela R
Primer 59
2 4
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)pirimidin-4-karboksamid
[0524] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 43 mg, 0,10 mmol), HATU (77,8 mg, 0,21 mmol) i pirimidin-4-karboksilne kiseline (12,7 mg, 0,10 mmol) u DMSO (600 µL) tretirana je sa DIEA (80 µL, 0,46 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su zatim sušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (1-10% MeOH u DCM sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (35 mg, 53% prinos). MS (apci) m/z = 527,3 (M+H).
Primer 60
[0525]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-3,4-difluorobenzamid
[0526] Jedinjenje je pripremljeno korišćenjem metode slične onoj opisanoj za sintezu Primer 59, zamenom pirimidin-4-karboksilne kiseline sa pirazin-2-karboksilnom kiselinom. MS (apci) m/z = 527,2 (M+H).
2
Primer 61
[0527]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0528] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 35 mg, 0,08 mmol), HATU (34,8 mg, 0,09 mmol) i pikolinske kiseline (22,6 mg, 0,18 mmol) u DCM (832 µL) tretirana je sa DIEA (47 µL, 0,35 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (43,7 mg, 49,3% prinos). MS (apci) m/z = 526,20 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,54 (m, 1H), 8,33 (d, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,18 (dt, 1H), 8,16 (s, br, 1H), 8,14 (d, 1H), 7,85 (td, 1H).7,70 (dd, 1H), 7,43 (m, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,80 (d, 1H), 4,08 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,37 (m, 2H), 2,42 (m, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,59 (s, 3H), 1,39 (s, 6H)
Primer 62
[0529]
2
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0530] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 15.8 mg, 0,038 mmol), HATU (15,7 mg, 0,041 mmol) i 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline (11,6 mg, 0,075 mmol) u DCM (1,07 mL) tretirana je sa DIEA (33 µL, 0,19 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11,2 mg, 53,6% prinos). MS (apci) m/z = 557,3 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 8 8,34 (d, IH), 8,20 (s, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,71 (dd, IH), 7,17 (dd, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,06 (dd, 1H), 7,00 (td, 1H), 6,81 (d, 1H), 5,50 (s, br, 1H), 4,01 (m, 2H), 3,86 (s, 2H) , 3,41 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,30 (m, 2H), 1,84 (m, 2H), 1,61 (s, 3H), 1,39 (s, 6H)
[0531] Jedinjenja u Tabeli S su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 62, zamenom 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela S
2
2 Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
2
24 Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
Primer 78
[0532]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0533] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (50 mg, 0,13 mmol) i 3-hloropikolinske kiseline (37 mg, 0,24 mmol) u DMSO (1,2 mL, 0,1 M) tretirana je sa DIEA (100 µL, 0,59 mmol) i zatim mešana 1 h na temperaturi okoline. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodom koja sadrži 2% TFA.
Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (45 mg, 68% prinos). MS (apci) m/z = 560,2 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 88,43 (dd, IH), 8,32 (d, IH), 8,18 (s, IH), 8,12 (d, IH), 7,88 (s, br, 1H), 7,81 (dd, 1H). 7,68 (dd, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,11 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,36 (m, 2H), 2,38 (m, 2H), 1,79 (m, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,38 (s, 6H).
Primer 79
[0534]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-3-(trifluorometil)pikolinamid
[0535] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (50 mg, 0,13 mmol) i 3-(trifluorometil)pikolinske kiseline (45,4 mg, 0,24 mmol) u DMSO (1,19 mL, 0,1 M) tretirani su sa DIEA (104 µL, 0,60 mmol) a zatim mešani 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46,5 mg, 66% prinos). MS (apci) m/z = 594,3 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 88,8,71 (d, IH), 8,34 (d, IH), 8,19 (s, IH), 8,16 (d, IH), 8,14 (d, IH), 7,70 (dd, IH).7,56 (dd, 1H), 7,52 (s, br, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,80 (d, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,36 (m, 2H) , 2,40 (m, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,39 (s, 6H).
Primer 80
[0536]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2,6-difluorobenzamid
[0537] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (50 mg, 0,13 mmol) i 2,6-difluorobenzojeve kiseline (37,6 mg, 0,24 mmol) u DMSO (1,19 mL, 0,1 M) tretirana je sa DIEA (104 µL, 0,60 mmol), zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46,5 mg, 66% prinos). MS (apci) m/z = 561,2 (M+H).
Primer 81
[0538]
24
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-2,5-difluorobenzamid
[0539] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 67 mg, 0,16 mmol), HATU (67 mg, 0,18 mmol) i 2,5-difluorobenzojeve kiseline (50 mg, 0,32 mmol) u DMSO (1,6 mL, 0,1 M) tretirana je sa DIEA (0,14 mL, 0,80 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57 mg, 64% prinos). MS (apci) m/z = 561,2 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 88,34 (d, IH), 8,20 (s, IH), 8,14 (d, IH), 7,76 (m, IH).7,70 (dd, 1H), 7,14 (m, 3H), 6,80 (d, 1H), 6,62 (d, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,86 (s, 2H), 3,34 (m, 2H), 2,31 (m, 2H), 1,81 (m, 2H), 1,59 (s, 3H), 1,39 (s, 6H).
[0540] Jedinjenja u Tabeli T su pripremljena korišćenjem postupka sličnog onome opisanom za sintezu Primera 81, zamenom 2,5-difluorobenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela T
Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
24
Primer 87
[0541]
5-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)-2-metilnikotinamid
[0542] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 53 mg, 0,107 mmol), HATU (44,9 mg, 0,118 mmol) i 5-hloro-2-metil-3-piridinkarboksilne kiseline (36,9 mg, 0,107 mmol) u DMSO (1,28 mL, 0,1 M) tretirani su sa DIEA (0,09 mL, 0,54 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodu koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26,1 mg, 42% prinos). MS (apci) m/z = 574,2 (M+H).
Primer 88
[0543]
24
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-3,6-dimetilpikolinamid
[0544] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 63 mg, 0,128 mmol), HATU (67 mg, 0,18 mmol) i 3,6-dimetilpikolinske kiseline (38,6 mg, 0,26 mmol) u DMSO (1,28 mL, 0,1 M) tretirani su sa DIEA (0,11 mL, 0,64 mmol) zatim mešani 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57 mg, 64% prinos). MS (apci) m/z = 554,3 (M+H).
[0545] Jedinjenja u Tabeli U su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 88, zamenom 3,6-dimetilpikolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela U
24
24
24 Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
Primer 105
[0546]
[0547] 2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorobenzamid Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 56 mg, 0,11 mmol), HATU (47,5 mg, 0,125 mmol) i 2-hloro-5-fluorobenzojeve kiseline (39,6 mg, 0,23 mmol) u DMSO (1,13 mL, 0,1 M) tretirana je sa DIEA (0,06 mL, 0,125 mmol) i zatim mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (34,3 mg, 52% prinos). MS (apci) m/z = 577,2 (M+H).
[0548] Jedinjenja u Tabeli V su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 105, zamenom 2-hloro-5-fluorobenzojeve kiseline odgovarajućom
2
karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela V
Primer 108
[0549]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-3,5-difluoro-2-metoksibenzamid
[0550] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-
2 1
metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 52 mg, 0,105 mmol), HATU (44,1 mg, 0,116 mmol), 3,5-difluoro-2-metoksibenzojeva kiselina (19,8 mg, 0,105 mmol) u DMSO (1,05 mL, 0,1 M) tretirana je sa DIEA (0,09 mL, 0,527 mmol) i zatim mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (41,6 mg, 66,8% prinos). MS (apci) m/z = 591,3 (M+H).
Primer 109
[0551]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-3-(hidroksimetil)benzamid
[0552] Pripremljen korišćenjem postupka sličnog onome opisanom za sintezu Primera 108, zamenom 3,5-difluoro-2-metoksibenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcije je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Naslovljeno jedinjenje je čisto izolovano nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovano u slobodnu bazu). MS (apci) m/z = 555,3 (M+H).
Primer 111 reference
[0553]
2 2
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2-ciklopropilacetamid
[0554] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 21 mg, 0,05 mmol), HATU (23 mg, 0,06 mmol), ciklopropilosirćetne kiseline (5 mg, 0,05 mmol) u DCM (100 µL) je tretirana sa DIEA (35 µL, 0,2 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (50-100% EtOAc u heksanu, zatim 0-20% MeOH u EtOAc kao eluent sa gradijentom) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (17 mg, 67,5% prinos) MS (apci) m/z= 503,30 (M+H).
[0555] Jedinjenja u Tabeli V su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 111, zamena ciklopropilsirćetne kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela V
2
Primer 119
[0556]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-4-metilpikolinamid 2,2,2-trifluoroacetat
[0557] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 20 mg, 0,048 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol), 4-metilpikolinske kiseline (6,52 mg, 0,048 mmol) u DCM (238 µL) je tretirana sa DIEA (33 µL, 0,19 mmol) i zatim mešana 1 h na temperaturi sredine. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonile čvrste materije, a zatim je filtrat koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so (14,2 mg, 55,3% prinos). MS (apci) m/z = 540,3 (M+H).
2 4
Primer 122
[0558]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-6-metilnikotinamid
[0559] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 20 mg, 0,048 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol), 6-metilnikotinske kiseline (6,52 mg, 0,048 mmol) u DCM (238 µL) je tretirana sa DIEA (33 µL, 0,19 mmol) i zatim mešana 4 h na temperaturi sredine. Reakcija je prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (1-10% MeOH u CHCl3sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg, 39% prinos) MS (apci) m/z = 540,3 (M+H).
[0560] Jedinjenja u Tabeli Z su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 122, zamenom 6-metilnikotinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu)
2
Tabela Z
Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
Primer 129
[0561]
2
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-3-metoksi-2-metilbenzamid
[0562] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol), 3-metoksi-2-metilbenzojeve kiseline (24 mg, 0,14 mmol) u DMSO (793 µL) je tretirana sa DIEA (25 µL, 0,14 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 37% prinos). MS (apci) m/z = 569,3 (M+H).
[0563] Jedinjenja u Tabeli AA su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 129, zamenom 3-metoksi-2-metilbenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
2
Tabela AA
Pr. Struktura Hemijsko ime MS
Primer 132
[0564]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-3,5-difluorokolinamid
[0565] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 50 mg, 0,10 mmol), HATU (59 mg, 0,16 mmol), 3,5-difluorokolinske kiseline (25 mg, 0,16 mmol) u DMSO (793 µL) je tretirana sa DIEA (73 µL, 0,42 mmol) i zatim mešana 18 h na temperaturi sredine. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze
2
(5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29,7 mg, 44,5% prinos). MS (apci) m/z = 562,2 (M+H).
[0566] Jedinjenja u Tabeli BB su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 132, zamenom 3,5-difluorokolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela BB
2
2 Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
Primer 143 reference
[0567]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4 -il)-3-metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamid
[0568] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 50 mg, 0,10 mmol), HATU (90 mg, 0,238 mmol), 6-hidroksi-3-metilpikolinske kiseline (36 mg, 0,238 mmol) u DMSO (793 µL) je tretirana sa DIEA (93 µL, 0,535 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg, 15,1% prinos). MS (apci) m/z = 556,3 (M+H).
[0569] Jedinjenja u Tabeli CC su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 143, zamenom 6-hidroksi-3-metilpikolinske kiseline odgovarajućom
2 1
karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela CC
Primer 147
[0570]
2 2
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilizonikotinamid
[0571] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3 -karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P48; 50 mg, 0,10 mmol), HATU (90 mg, 0,238 mmol), 5-fluoro-2-metilizonikotinske kiseline (18 mg, 0,12 mmol) u DMSO (793 µL) je tretirana sa DIEA (93 µL, 0,535 mmol) i zatim mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (1-10% MeOH u DCM kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (41,9 mg, 63,2% prinos) MS (apci) m/z = 558,3 (M+H).
Primer 148
[0572]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-1,5-dimetil-1H-pirazol-4-karboksamid
[0573] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol), 1,5-dimetil-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline (25 mg, 0,18 mmol) u DCM (2,4 mL) je tretirana sa DIEA (104 µL, 0,59 mmol) i zatim mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim
2
NaHCO3. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (1-10% MeOH u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (41,9 mg, 63,2% prinos) MS (apci) m/z = 543,20 (M+H).
[0574] Jedinjenja u Tabeli DD su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 148, zamenom 1,5-dimetil-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela DD
Primer 151
[0575]
2 4
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2-metiloksazol-4-karboksamid
[0576] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P46; 50 mg, 0,12 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol), 2-metiloksazol-4-karboksilne kiseline (18 mg, 0,14 mmol) u DCM (2,4 mL) je tretirana sa DIEA (104 µL, 0,59 mmol) i zatim mešana 20 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (5 mL) i isprana sa 0,1 M NaOH. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je triturisan sa MTBE da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg, 23,8% prinos) MS (apci) m/z = 543,20 (M+H).
[0577] Jedinjenja u Tabeli EE su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 151, zamenom 2-metiloksazol-4-karboksilne kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon iste osnovne obrade i prečišćavanja trituracijom.
Tabela EE
2
Primer 155
[0578]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(piridin-3-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0579] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (intermedijer P42; 30,7 mg, 0,0941 mmol), 3-(azetidin-3-iloksi)piridina (28,3 mg, 0,188 mmol) i TEA (78,7 µL, 0,564 mmol) u DMA (627 µL) su mešani preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i isprana sa DCM. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz
2
naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (17 mg, 39,6% prinos). MS (apci) m/z = 457,2 (M+H).
[0580] Jedinjenja u Tabeli FF su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 155, zamenom 3-(azetidin-3-iloksi)piridina odgovarajućim azetidin nukleofilom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela FF
2
Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
Primer 163
[0581]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(4-(trifluorometil)fenoksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0582] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 36.4 mg, 0,112 mmol), 3-(4-(trifluorometil)fenoksi)azetidin hidrohlorida (70,7 mg, 0,279 mmol) i TEA (93,3 µL, 0,669 mmol) u DMA (372 µL) su mešani preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je
2
razblažena vodom i isprana sa DCM. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (15 mg, 25,7% prinos). MS (apci) m/z = 524,1 (M+H).
Primer 164
[0583]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((3-metilpiridin-2-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0584] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol), 2-(azetidin-3-iloksi)-3-metilpiridin dihidrohlorida (76,3 mg, 0,322 mmol) i TEA (117 µL, 0,858 mmol) u DMA (358 µL) je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq). Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9,4 mg, 18,6% prinos). MS (apci) m/z = 471,10 (M+H).
[0585] Jedinjenja u Tabeli GG su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 164, zamenom 2-(azetidin-3-iloksi)-3-metilpiridin dihidrohlorida odgovarajućim azetidin nukleofilom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje
2
reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela GG
Primer 169
[0586]
2
4-(6-(3-(4-fluorofenoksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0587] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 36.5 mg, 0,112 mmol), 3-(4-fluorofenoksi)azetidin hidrohlorida (68,3 mg, 0,336 mmol) i TEA (91,8 µL, 0,671 mmol) u DMA (358 µL) su mešani preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23,5 mg, 44,4% prinos). MS (apci) m/z = 474,20 (M+H).
Primer 170
[0588]
4-(6-(3-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0589] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol), 2-(azetidin-3-iloksi)-5-fluoropiridin
2 1
dihidrohlorida (51,7 mg, 0,215 mmol) i TEA (65,1 µL, 0,644 mmol) u DMA (358 µL) su mešani preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8,3 mg, 16,3% prinos). MS (apci) m/z = 475,20 (M+H).
Primer 171
[0590]
4-(6-(3-((5-hloropiridin-2-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0591] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol), 2-(azetidin-3-iloksi)-5-hloropiridin dihidrohlorida (94,7 mg, 0,368 mmol) i TEA (117 µL, 0,858 mmol) u DMA (358 µL) je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (19,1 mg, 36,3% prinos). MS (apci) m/z = 491,10 (M+H).
2 2
Primer 172
[0592]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(o-toliloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0593] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol), 3-(2-metilfenoksi)azetidina (52,2 mg, 0,322 mmol) i TEA (44 µL, 0,322 mmol) u DMA (358 µL) su mešani preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (40-90% EtOAc u heksanima kao gradijentni eluent). Ostale su nečistoće i frakcije koje sadrže proizvod su koncentrisane u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21,6 mg, 42,9% prinos). MS (apci) m/z = 470,20 (M+H).
Primer 173 reference
[0594]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-izopropoksiazetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-
2
a]piridin-3-karbonitril
[0595] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol), 3-(1-metiletoksi)-azetidin hidrohlorida (48,8 mg, 0,322 mmol) i TEA (73 µL, 0,536 mmol) u DMA (358 µL) su mešani preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN: vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,8 mg, 37,2% prinos). MS (apci) m/z = 422,20 (M+H).
[0596] Jedinjenja u Tabeli HH su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu 173, zamenom 3-(1-metiletoksi)-azetidin hidrohlorida odgovarajućim azetidin nukleofilom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela HH
2 4
Primer 176
[0597]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-metil-3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a] piridin-3-karbonitril
[0598] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 76.1mg, 0,233 mmol), 2-((3-metilazetidin-3-il)oksi)piridina (95 mg, 0,579 mmol) i TEA (159 µL, 1,17 mmol) u DMA (777 µL) su mešani preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33 mg, 30,1% prinos). MS (apci) m/z = 471,20 (M+H).
Primer 177
2
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0600] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 75.8 mg, 0,232 mmol), 5-(azetidin-3-iloksi)-2-metoksipiridina (93 mg, 0,516 mmol) i TEA (118 µL, 1,16 mmol) u DMA (774 µL) su mešani preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (65,6 mg, 58% prinos). MS (apci) m/z = 487,15 (M+H).
Primer 178
[0601]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((5-metoksipirazin-2-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0602] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 32.2 mg, 0,0987 mmol), 2-(azetidin-3-iloksi)-5-
2
metoksipirazina (41,7 mg, 0,230 mmol) i TEA (67,5 µL, 0,493 mmol) u DMA (329 µL) su mešani preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN: vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14,8 mg, 30,8% prinos). MS (apci) m/z = 488,20 (M+H).
Primer 179
[0603]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0604] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 32.2 mg, 0,0987 mmol), 3-(azetidin-3-iloksi)-6-metoksipiridazina (51 mg, 0,281 mmol) i TEA (67,5 µL, 0,493 mmol) u DMA (329 µL) su mešani preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN: vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28,6 mg, 59,5% prinos). MS (apci) m/z = 488,20 (M+H).
2
Primer 180
[0605]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0606] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 30.0 mg, 0,0919 mmol), 5-(azetidin-3-iloksi)-2-metoksipirimidina (56 mg, 0,309 mmol) i TEA (101 µL, 0,735 mmol) u DMA (306 µL) su mešani preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14,9 mg, 33,2% prinos). MS (apci) m/z = 488,20 (M+H).
Primer 181
[0607]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(3-(trifluorometil)fenoksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3 -karbonitril
2
[0608] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 31.9 mg, 0,0978 mmol), 3-[3-(trifluorometil)fenoksi]azetidin hidrohlorida (74,4 mg, 0,293 mmol) i TEA (93,6 µL, 0,684 mmol) u DMA (326 µL) su mešani preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36,6 mg, 71,5% prinos). MS (apci) m/z = 524,10 (M+H).
[0609] Jedinjenja u Tabeli II su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 181, zamenom 3-[3-(trifluorometil)fenoksi]azetidin hidrohlorida odgovarajućim azetidin nukleofilom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja.
Tabela II
2
Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS
2
Primer 192
[0610]
4-(6-(3-((6-(difluorometoksi)piridin-3-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1, 5-a]piridin-3-karbonitril
[0611] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 30.7 mg, 0,0941 mmol), 5-(azetidin-3-iloksi)-2-(difluorometoksi)piridina (55 mg, 0,254 mmol) i TEA (64,3 µL, 0,470 mmol) u DMA (314 µL) je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (39,9 mg, 81,2% prinos). MS (apci) m/z = 523,20 (M+H).
Primer 193
2 1
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((4-metilpiridin-2-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0613] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25.5 mg, 0,0781 mmol), 2-(azetidin-3-iloksi)-4-metilpiridina (50 mg, 0,304 mmol) i TEA (74,8 µL, 0,547 mmol) u DMA (391 µL) je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (19,3 mg, 52,5% prinos). MS (apci) m/z = 471,3 (M+H).
Primer 194
[0614]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((4-metoksipiridin-2-il)oksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0615] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-
2 2
karbonitrila (Intermedijer P42; 28 mg, 0,0858 mmol), 2-(azetidin-3-iloksi)-4-metoksipiridina (15,5 mg, 0,858 mmol) i TEA (82,1 µL, 0,601 mmol) u DMA (286 µL) je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,9 mg, 40,5% prinos). MS (apci) m/z = 487,20 (M+H).
Primer 197
[0616]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilazetidin-3-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0617] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -3-metilazetidin-3-il)karbamata. Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 753 mg, 2,307 mmol), terc-butil (3-metilazetidin-3-il)karbamat hidrohlorida (770,9 mg, 3,461 mmol) i DIEA (1,809 mL, 10,38 mmol) u DMSO (4,615 mL) je mešana na 90°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-10% MeOH u DCM kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,089 g, 95,81% prinos) dovoljne
2
čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 493,3 ( M+H).
[0618] Korak 2: Priprema 4-(6-(3-amino-3-metilazetidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridina-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil (1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilazetidin-3-il)karbamata (1.089 g, 2.211 mmol) u DCM (5.527 mL) je tretiran sa TFA (10 mL, 130 mmol). Posle mešanja tokom 1 h na sobnoj temperaturi smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se čisto dobije jedinjenje iz naslova (800 mg, 92,2% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 393,2 (M+H).
[0619] Korak 3: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilazetidin-3-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. Smeša 4-(6-(3-amino-3-metilazetidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (54 mg, 0,138 mmol), HATU (57,5 mg, 0,151 mmol), 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline (42,4 mg, 0,275 mmol) u DMSO (1,38 mL) tretirana je sa DIEA (120 µL 0,688 µL) i zatim mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen silika hromatografijom (0,5-10% MeOH u DCM sa 0,05-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (48,2 mg, 66,3% prinos) MS (apci) m/z=529,2 (M+H)
Primer 201
[0620]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0621] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-
2 4
karbonitrila (Intermedijer nivo P42; 394 mg, 1,208 mmol, (S)-2-(pirolidin-3-iloksi)-piridin dihidrohlorida (1,146 g, 4,833 mmol) i TEA (1,639 mL, 12,08 mmol) u DMA (12 mL) je mešana 16 na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (400 mg, 70% prinos). MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) 5 8,65-8,64 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,31-8,30 (dd, 1H), 8,22-8,20 (m, 1H), 7,76-7,69 (m, 2H), 8,31-8,30 (dd, 1H), 7,26-7,25 (d, 1H), 7,01-6,98 (m, 1H), 6,85-6,83 (m, 1H), 6,61-6,59 (d, 1H), 5,69-5,67 (m, 1H), 4,69 (s , 1H), 3,86-3,81 (m, 3H), 3,70-3,65 (m, 2H), 3,60-3,53 (m, 1H), 2,42-2,22 (m, 2H), 1,22 (s, 6H)
Primer 202
[0622]
(R)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0623] Rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25 mg, 0,077 mmol) u DMA (100 µL) je tretiran sa TEA (27 µL, 0,192 mmol) i (R)-2-(pirolidin-3-iloksi)piridin hidrohloridom (15,4 mg, 0,077 mmol) i mešan preko noći na 110°C. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 × 10 mL) korišćenjem frite separatora faza. Organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (0-60% ACN u vodi kao gradijent eluenta) da bi se čisto
2
dobilo jedinjenje iz naslova (16 mg, 44% prinos). MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).
Primer 203
[0624]
(S)-4-(6-(3-(4-fluorofenoksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0625] Rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 31,6 mg, 0,097 mmol) u DMA (1 mL) tretiran je (S)-3-(4-fluorofenoksi)pirolidin hidrohloridom (22,1 mg, 0,102 mmol), a zatim TEA (65,7 µL, 0,484 mmol) i mešan preko noći na 90°C. Dodatni (S)-3-(4-fluorofenoksi)pirolidin hidrohlorid (8,8 mg, 0,48 mmol) je dodat u reakciju i reakcija je nastavljena da se meša dodatnih 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-50% acetona u DCM kao gradijent eluenta). Ostala je nečistoća tako da su frakcije koje sadrže proizvod bile koncentrisane u vakuumu. Ostatak je ponovo prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9,8 mg, 20,8% prinos). MS (apci) m/z = 488,2 (M+H).
Primer 204
[0626]
2
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(pirazin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0627] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-(pirazin-2-iloksi)pirolidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil (S)-3-(fenilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (264,5 mg, 1,413 mmol) u DMF (7,1 mL) dodat je 2-hloropirazin (192,2 mg, 1,695 mmol) i zatim natrijum hidrid (60% tež./tež., 113 mg, 2.825 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana 16 sati na 80°C Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-60% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostaviti teoretski prinos, 374,9 mg, 1,413 mmol) dovoljne čistoće za korak 2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 8,31 (s, 1H), 8,22 (s, 2H), 5,49 (s, 1H), 3,64-3,57 (m, 1H), 3,48-3,31 (m, 3H), 2,23-2,04 (m, 2H), 1,40-1,39 (d, 9H).
[0628] Korak 2: Priprema (S)-2-(pirolidin-3-iloksi)pirazina. Rastvor terc-butil (S)-3-(pirazin-2-iloksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 374,9 mg, 1,413 mmol) u 3 mL DCM je tretiran sa TFA (3 mL, 39 mmol). Reakciona smeša je mešana 0,5 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (72,1 mg, 31% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,27 (s, 1H), 8,21 (s, 2H), 5,46-5,42 (m, IH), 3,25-3,21 (m, 1H), 3,09-2,95 (m, 3H), 2,17-2,08 (m, 1H), 1,96-1,89 (m, 1H).
[0629] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-(pirazin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 30,8 mg, 0,094 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (64 µL, 0,472 mmol), a zatim (S)-2-(pirolidin-3-iloksi)pirazin (71,7 mg, 0,434 mmol). Reakciona smeša je
2
mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je prečišćena direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao eluentom za gradijent). Ostala je nečistoća i frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu. Ostatak je ponovo prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% acetona u DCM-u kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36.2 mg, 81% prinos). MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
Primer 205
[0630]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0631] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijer R14; 208.7 mg, 0,787 mmol) u DMF (8 mL) dodat je 5-hidroksi-2-metoksilpiridin (118,1 mg, 0,944 mmol), a zatim kalijum karbonat (217,4 mg, 1,573 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana 16 sati na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-75% acetona u DCM kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostaviti teoretski prinos, 231 mg, 0,787 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 295,1 (M+H).
[0632] Korak 2: Priprema (S)-2-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil (S)-3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 231 mg, 0,787 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL, 26). mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova
2
(54,6 mg, 36% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 195,1 (M+H).
[0633] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 60,8 mg, 0,186 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (126 µL, 0,932 mmol), a zatim (S)-2-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)piridin (54,3 mg, 0,279 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (39,5 mg, 42% prinos). MS (apci) m/z = 501,2 (M+H).
Primer 206
[0634]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0635] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijer R14;
200.8 mg, 0,757 mmol) u DMF (8 mL) dodat je 5-fluoro-2-hidroksipiridin (102,7 mg, 0,908 mmol), zatim kalijum karbonat (209,2 mg, 1,514 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana 60 sati na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-75% acetona u DCM kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavimo teoretski prinos, 213,5 mg, 0,757 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 183,1 (M-Boc).
2
[0636] Korak 2: Priprema (S)-5-fluoro-2-(pirolidin-3-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil (S)-3-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 213,5 mg, 0,75 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol) ). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (57,2 mg, 41% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 183,1 (M+H).
[0637] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 30,3 mg, 0,093 mmol) i (S)-5-fluoro-2-(pirolidin-3-iloksi)piridina (55,8 mg, 0,31 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (63 µL, 0,464 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29,6 mg, 65% prinos). MS (apci) m/z = 489,2 (M+H).
Primer 207
[0638]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0639] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. Smeši (S)-1-Boc-3-hidroksipirolidina (112,5 mg, 0,601 mmol) i 2-hloro-6-metoksipiridina (86 µL, 0,721 mmol) u DMF (6 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež.,
2
48,1 mg, 1,20 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana 16 sati na 80°C. Dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 48.1 mg, 1.20 mmol) i reakciona smeša je mešana dodatnih 16 sati na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao sirovi proizvod koji je direktno korišćen u sledećem koraku, pod pretpostavkom kvantitativnog prinosa. MS (apci) m/z = 195,1 (M-Boc).
[0640] Korak 2: Priprema (S)-2-metoksi-6-(pirolidin-3-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil (S)-3-((6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 176,8 mg, 0,601 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (81,6 mg, 70% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 195,1 (M+H).
[0641] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 57,2 mg, 0,175 mmol) i (S)-2-metoksi-6-(pirolidin-3-iloksi)piridina (71,5 mg, 0,368 mmol) u DMA (3 mL) je dodat TEA (64 µL, 0,472 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56,6 mg, 65% prinos). MS (apci) m/z = 501,2 (M+H).
Primer 208
[0642]
2 1
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metilpiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0643] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((6-metilpiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. Smeši (S)-1-Boc-3-hidroksipirolidina (112,5 mg, 0,601 mmol) i 2-hloro-6-metilpiridina (74 µL, 0,669 mmol) u DMF (6 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 44,6 mg, 1,11 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana 16 sati na 80°C. Dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 44,6 mg, 1,11 mmol) i reakciona smeša je mešana dodatnih 16 sati na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavimo teoretski prinos, 155 mg, 0,557 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 279,1 (M+H).
[0644] Korak 2: Priprema (S)-2-metil-6-(pirolidin-3-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil (S)-3-((6-metilpiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 155 mg, 0,557 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (81,6 mg, 70 % prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 179,1 (M+H).
[0645] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metilpiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 53,3 mg, 0,163 mmol) i (S)-2-metil-6-(pirolidin-3-iloksi)piridina (69,9 mg, 0,392 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (111 uL, 0,817 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu 1-30% MeOH u EtOAc sa 0,1-2%
2 2
NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (60,8 mg, 76,8% prinos) MS (apci) m/z=485,2 (M+H)
Primer 209
[0646]
(S)-4-(6-(3-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0647] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U smešu terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijer R14;
301.5 mg, 1.136 mmol) i 5-fluoropiridin-3-ola (154.2 mg, 1.364 mmol) u DMF (11 mL) je dodat kalijum karbonat (314.1 mg, 2.273 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana 16 sati na 80°C Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostaviti teoretski prinos, 320,7 mg, 1,136 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 183,1 (M-Boc).
[0648] Korak 2: Priprema (S)-3-fluoro-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina. U rastvor terc-butil (S)-3-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 320,7 mg, 1,136 mmol) u 2,5 mL DCM je tretiran TFA (2,5 mL, 32,7 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju naslovljeno jedinjenje (57,2 mg, 41% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 183,1 (M+H).
[0649] Korak 3: Priprema (S)-4-(6-(3-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2 -metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila
2
(Intermedijer P42; 32,7 mg, 0,10 mmol) i (S)-3-fluoro-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina (48,4 mg, 0,266 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (68 µL, 0,501 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu 1-30% MeOH u EtOAc sa 0,1-2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (23 mg, 47% prinos) MS (apci) m/z=489,2 (M+H)
Primer 210
[0650]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((5-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0651] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((5-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U smešu terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijer R14; 301.6 mg, 1.137 mmol) i 5-metoksipiridin-3-ola (170.7 mg, 1.364 mmol) u DMF (11 mL) je dodat kalijum karbonat (314 mg, 2.273 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana 16 sati na 80°C Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavimo teoretski prinos, 334,7 mg, 1,137 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 239,1 (M- t-Bu fragment).
[0652] Korak 2: Priprema (S)-3-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil (S)-3-((5-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 334,7 mg, 1,137 mmol) u 2,5 mL DCM tretiran je TFA (2,5 mL, 32,7 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko
2 4
anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (59,4 mg, 26,9% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 195,1 (M+H).
[0653] Korak 3: Priprema ((S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((5-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin- 3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 30 mg, 0,092 mmol) i (S)-3-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina (59,4 mg, 0,306 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (62 µL, 0,46 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu 1-30% MeOH u EtOAc sa 0,1-2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (32,6 mg, 71 % prinos) MS (apci) m/z=501,2 (M+H)
Primer 211
[0654]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0655] Korak 1: Dobijanje terc-butil (S)-3-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U smešu terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksipirolidin-1-karboksilata (Intermedijer R14; 374.0 mg, 1.410 mmol) i 2-metoksipirimidin-5-ola (213.3 mg, 1.692 mmol) u DMF (14 mL) je dodat kalijum karbonat (390 mg, 2.819 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana 60 sati na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavimo teoretski prinos,
2
416,4 mg, 1,410 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 196,1 (M-Boc).
[0656] Korak 2: Priprema i (S)-2-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)pirimidina. Rastvor terc-butil (S)-3-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 416,4 mg, 1,410 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (61,7 mg, 20% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 196,1 (M+H).
[0657] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3 -il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 31.7 mg, 0,097 mmol) i (S)-2-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)pirimidina (60,7 mg, 0,311 mmol) u DMA (2 mL) je dodat TEA (79 µL, 0,58 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 80°C. Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 16 sati. Reakcija je zagrevana na 100°C tokom 60 sati. Reakcija je zagrevana na 150°C tokom 2 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakcija je zagrevana na 150°C tokom 8 sati u mikrotalasnom reaktoru. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,6 mg, 34% prinos). MS (apci) m/z = 502,3 (M+H).
Primer 212
[0658]
(S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-
2
il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0659] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U smešu (S)-1-Boc-3-hidroksipirolidina (83,9 mg, 0,448 mmol) 3-hloro-6-metoksipiridazina (77,7 mg, 0,538 mmol) u DMF (4,5 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 35,8 mg, 0,896 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana 60 sati na 80°C. Dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 35,8 mg, 0,896 mmol) i reakciona smeša je mešana dodatnih 16 sati na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostaviti teoretski prinos, 132 mg, 0,448 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 295,1 (M+H).
[0660] Korak 2: Priprema (S)-3-metoksi-6-(pirolidin-3-iloksi)piridazina. Rastvor terc-butil (S)-3-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 132 mg, 0,448 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (17,6 mg, 20,1% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3.
[0661] Korak 3: Priprema (S)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(3-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 22,4 mg, 0,069 mmol) i (S)-3-metoksi-6-(pirolidin-3-iloksi)piridazina (17,4 mg, 0,892 mmol) u DMA (3 mL) je dodat TEA (46 µL, 0,343 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 80°C. Reakciona smeša je mešana 60 h na 100°C. Reakciona smeša je zatim mešana 2 h na 150°C u mikrotalasnom reaktoru. Reakcija je zagrevana dodatnih 8 h na 150°C u mikrotalasnom reaktoru. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(i), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo
2
jedinjenje iz naslova (6,3 mg, 18,3% prinos). MS (apci) m/z = 502,2 (M+H).
Primer 213
[0662]
(S)-4-(6-(3-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2- metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0663] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-3-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. U smešu terc-butil (R)-3-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (Intermedijer R14; 602.2 mg, 2,27 mmol) i 3-hloro-5-hidroksi-2-metoksipiridina (301,8 mg, 1,891 mmol) u DMF (22 mL) je dodat kalijum karbonat (522,8 mg, 3,783 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana 60 sati na 80°C Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-95% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavimo teoretski prinos, 621,7 mg, 1,891 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 229,1 (M-Boc).
[0664] Korak 2: Priprema (S)-3-hloro-2-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina. U rastvor tercbutil (S)-3-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 621,7 mg, 1,891 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA ( 2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (140,6 mg, 32,5% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 229,10 (M+H).
[0665] Korak 3: Priprema (S)-4-(6-(3-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2 -hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila
2
(Intermedijer P42; 26.4 mg, 0,081 mmol) i (S)-3-hloro-2-metoksi-5-(pirolidin-3-iloksi)piridina (64,7 mg, 0,283 mmol) u DMA (1 mL) je dodat TEA (66 µL, 0,49 mmol) ). Reakciona smeša je mešana 16 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27,2 mg, 63% prinos). MS (apci) m/z = 535,2 (M+H).
Primer 214
[0666]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-((trans)-3-metil-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0667] Korak 1: Priprema terc-butil (trans)-3-metil-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-karboksilata. U smešu terc-butil (trans)-3-hidroksi-4-metilpirolidin-1-karboksilata (303,8 mg, 1,509 mmol) i 2-fluoropiridina (259 µL, 3,019 mmol) u DMA (7,5 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 120,7 mg, 3,019 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-50% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostaviti teoretski prinos, 420 mg, 1,509 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 279,1 (M+H).
[0668] Korak 2: Priprema 2-(((trans)-4-metilpirolidin-3-il)oksi)piridina. Rastvor terc-butil (trans)-3-hidroksi-4-metilpirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 420 mg, 1,509 mmol) u 3
2
mL DCM je tretiran sa TFA (3 mL, 39,2 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (178,6 mg, 66% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 179,1 (M+H).
[0669] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-((trans)-3-metil-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol) i 2-(((trans)-4-metilpirolidin-3-il)oksi)piridina (76,5 mg, 0,428 mmol) u DMA (1,1 mL) je dodat TEA (145 µL, 1,07 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq) i ekstrahovan sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (38,2 mg, 73,5% prinos). MS (apci) m/z = 485,2 (M+H).
Primer 215
[0670]
(S)-4-(6-(3-((5-fluoro-6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2- metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0671] Korak 1: Priprema 3,6-difluoro-2-metoksipiridina. U rastvor 2,3,6-trifluoropiridina (1,00 mL, 11,27 mmol) u MeOH (11 mL) dodat je natrijum metoksid (30% rastvor u MeOH, 2,5 mL), 13,5 mmol). Reakcioni rastvor je mešan 2 h na 70°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (257 mg, 16% prinos) dovoljne čistoće za korak 2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 57,90-7,84 (m, IH), 6,75-6,72 (m, IH), 3,92 (s, 3H).
[0672] Korak 2: Priprema terc-butil (S)-3-((5-fluoro-6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata. Rastvor (S)-1-Boc-3-hidroksipirolidina (255 mg, 1,362 mmol) u 13,6 mL DMF je tretiran sa 3,6-difluoro-2-metoksipiridinom (256,9 mg, 1,77 mmol), a zatim natrijum hidridom (60 % tež./tež., 163,4 mg, 4,086 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-40% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavimo teoretski prinos, 425 mg, 1.362 mmol) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 213,1 (M-Boc).
[0673] Korak 3: Priprema (S)-3-fluoro-2-metoksi-6-(pirolidin-3-iloksi)piridina. Rastvor tercbutil (S)-3-((5-fluoro-6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 425 mg, 1,362 mmol) u 3 mL DCM tretiran je TFA (3 mL, 39 mmol). Reakciona smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je razblažen sa 4:1 DCM: IPA i ispran sa zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da daju jedinjenje iz naslova (222,2 mg, 77% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 4. MS (apci) m/z = 213,1 (M+H).
[0674] Korak 4: Priprema (S)-4-(6-(3-((5-fluoro-6-metoksipiridin-2-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35.2 mg, 0,108 mmol) u DMA (1,1 mL) je dodat (S)-3-fluoro-2-metoksi-6-(pirolidin-3-iloksi)piridin (91,6 mg, 0,431 mmol), a zatim TEA (145 µL, 1,07 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana sa zasićenim NaHCO3(aq) i
1
ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (44,8 mg, 80,1% prinos). MS (apci) m/z = 519,2 (M+H).
Primer 224
[0675]
(R)-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilpirolidin-3-il)benzamid.
[0676] Smeša (R)-4-(6-(3-amino-3-metilpirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata)(Intermedijer P49; 40 mg, 0,098 mmol), HATU (75 mg, 0,20 mmol) i benzojeve kiseline (24 mg, 0,20 mmol) u ACN (600 µL) tretirana je sa DIEA (86 µL, 0,49 mmol) i zatim mešana 12 h na temperatura okoline. Reakciona smeša je razblažena sa 60:40 ACN:vodom koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg, 46% prinos). MS (apci) m/z = 511,3 (M+H).
[0677] Jedinjenja u Tabeli JJ su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 224, zamenom benzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
2
Tabela JJ
Primer 231
[0678]
(S)-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-metilpirolidin-3-il)benzamid
[0679] Smeša (S)-4-(6-(3-amino-3-metilpirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P50; 30 mg, 0,047 mmol), HATU (56 mg, 0,15 mmol) i benzojeve kiseline (18 mg, 0,15 mmol) u ACN (600 µL) tretirani su sa DIEA (64 µL, 0,37 mmol) i zatim mešani 12 h na temperatura okoline. Reakciona smeša je razblažena sa 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12 mg, 51% prinos). MS (apci) m/z = 511,3 (M+H).
[0680] Jedinjenja u Tabeli KK su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 231, zamenom benzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela KK
4
Primer 242
[0681]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il) benzamid
[0682] Smeša 4-(6-(3-aminopirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis( 2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P51; 40 mg, 0,064 mmol), HATU (78 mg, 0,20 mmol) i benzojeve kiseline (25 mg, 0,20 mmol) u ACN (600 µL) tretirana je sa DIEA (89 µL, 0,51 mmol) i zatim mešana 12 h na temperatura okoline. Reakciona smeša je razblažena sa 60:40 ACN:vodom koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg, 47% prinos). MS (apci) m/z = 497,2 (M+H).
[0683] Jedinjenja u Tabeli LL su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 242, zamenom benzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela LL
Primer 247
[0684]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-(pirimidin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0685] U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 40 mg, 0,123 mmol) u DMA (1,2 mL) je dodat 2-(piperidin-4-iloksi)pirimidin (242 mg, 0,135 mmol), a zatim TEA (33,5 µL, 0,245 mmol). Reakciona smeša je prskana argonom i mešana preko noći na 90°C. Zatim dodatno 2-(piperidin-4-iloksi)pirimidin (242 mg, 0,135 mmol) i TEA (33,5 µL, 0,245 mmol) i reakcija je mešana 8 h na 110°C, a zatim je reakciona temperatura spuštena na 90°C gde je mešano 60 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa DCM. Organski ekstrakti su isprani vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (40-99% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20,8 mg, 35% prinos). MS (apci) m/z = 486,2 (M+H).
Primer 248
[0686]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-(pirazin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3- karbonitril
[0687] U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25 mg, 0,077 mmol) u DMA (38 mL) je dodat 2-(piperidin-4-iloksi)pirazin (13,7 mg, 0,077 mmol), a zatim TEA (21 µL, 0,153 mmol). Reakciona smeša je prskana argonom i mešana 60 h na 90°C. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM, a organski ekstrakti su isprani zasićenim NaHCO3(aq)i zatim vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u 1 mL DCM i prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (40-99% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12,3 mg, 33,1% prinos). MS (apci) m/z = 486,2 (M+H).
Primer 249
[0688]
4-(6-(4-((5-hloropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0689] U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 51.1 mg, 0,157 mmol) u DMA (78 mL) dodat je 5-hloro-2-(piperidin-4-iloksi)piridin (40 mg, 0,188 mmol), a zatim TEA (43 uL, 0,313 mmol). Reakciona smeša je mešana 48 h na 90°C. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM, a organski ekstrakti su isprani zasićenim NaHCO3(aq)a zatim vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Reakcija je prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (40-75% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,1 mg, 20% prinos). MS (apci) m/z = 519,2 (M+H).
Primer 250
[0690]
4-(6-(4-((5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0691] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil-4-hidroksi-1-piperidinkarboksilata (135 mg, 0,67 mmol) u DMF (2,2 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 113 mg, 2,825 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim je dodat 5-hloro-2,3-difluoropiridin (100 mg, 0,67 mmol). Reakciona smeša je mešana 60 h na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq)i zatim vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije jedinjenje iz naslova (pretpostavi teoretski prinos, 222 mg, 0,671 mmol) dovoljno čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 213,1 (M-Boc).
[0692] Korak 2: Priprema 5-hloro-3-fluoro-2-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 222 mg, 0,671 mmol) u 3,4 mL DCM tretiran je TFA (3,4 mL, 43,6 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM (1 mL). Rastvor je prečišćen silika hromatografijom 1-10% MeOH u DCM sa 0,1-1% NH4OH kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56 mg, 36% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 231,1 (M+H).
[0693] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-
1
il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25 mg, 0,77 mmol) i 5-hloro-3-fluoro-2-(piperidin-4-iloksi)piridina (35 mg, 0,153 mmol) u DMA (0,4 mL) je dodat TEA (52 uL, 0,383 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq)i zatim vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (25-99% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8,2 mg, 20% prinos). MS (apci) m/z = 357,1 (M+H).
Primer 251
[0694]
4-(6-(4-((5-hloropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0695] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-hloropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. Rastvor 5-hloro-3-piridinola (1,018 g, 0,786 mmol) i terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (1,582 mg, 0,786 mmol) u THF tretiran je PPh3(227 mg, 0,864 mmol), zatim prskano sa Ar(g)za 5 min. Uz mešanje na sobnoj temperaturi, smeša je polako tretirana sa DIAD (186 µL, 0,959 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana 5 h na 70°C i zatim ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Reakcija je razblažena sa DCM i isprana zasićenim Na2CO3(aq), voda i rasol. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (246 mg, pretpostavljeni kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 213,1 (M-Boc).
[0696] Korak 2: Priprema 3-hloro-5-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorida. Rastvor tercbutil 4-((5-hloropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (264 mg, 0,844 mmol) u 4,2 mL DCM je tretiran sa TFA (4,2 mL, 54,5 mmol). Reakciona smeša je mešana 16 h na sobnoj
11
temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u MeOH i tretiran sa zatim tretiran sa 4 N HCl u dioksanima (5 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljih prečišćavanja. MS (apci) m/z = 213,1 (M+H).
[0697] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-hloropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazola [1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 40 mg, 0,123 mmol) i 3-hloro-5-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorida (35 mg, 0,123 mmol) u DMA (0,6 mL) je dodat TEA (84 uL, 0,613 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 105°C. Reakcija je održavana na 90°C tokom 60 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Zatim su organski ekstrakti isprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8,1 mg, 13% prinos). MS (apci) m/z = 519,20 (M+H).
Primer 252
[0698]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((5-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0699] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (158 mg, 0,787 mmol) u DMF (2 mL)
12
dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 38 mg, 0,944 mmol). Reakcija je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 2-fluoro-5-metoksipiridin (100 mg, 0,787 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 60°C. Reakcija je zagrevana na 70°C tokom dodatne noći. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i dodata je dodatna količina terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (316 mg, 1,574 mmol) i natrijum hidrida (60% tež./tež., 76 mg, 1,888 mmol) i reakcija je mešana tokom 60 h na 70°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (243 mg, pretpostavljeni kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 253,1 (M-Bu<t>).
[0700] Korak 2: Priprema 5-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorida. Rastvor tercbutil 4-((5-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 243 mg, 0,786 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u MeOH i tretiran sa zatim tretiran sa 4 N HCl u dioksanima (4 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so (221 mg, 100% prinos), koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljih prečišćavanja.
[0701] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((5-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25 mg, 0,077 mmol) i 5-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorida (43 mg, 0,153 mmol) u DMA (0,4 mL) je dodat TEA (52 µL, 0,383 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,3 mg, 11% prinos). MS (apci) m/z = 515,30 (M+H).<1>H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8,34 (m, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,81 (d, 1 H), 7,69-7,72 (m, 1 H), 7,20-7,24 (m, 1 H), 7,14 (m, 1 H), 6,81 (d, 1 H),
1
6,68 (m, 1 H), 5,20-5,26 (m, 1 H), 4,03-4,08 (m, 2 H) , 3,86 (s, 2 H), 3,82 (s, 3 H), 3,50-3,56 (m, 2 H), 2,09-2,14 (m, 2 H), 2,04 (s, 1 H), 1,82-1,89 (m, 2 H), 1,40 (s, 6 H).
Primer 253
[0702]
4-(6-(4-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0703] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (175 mg, 0,869 mmol) u DMF (2,9 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 41,7 mg, 1,043 mmol). Reakcija je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Dodat je 2,5-difluoropiridin (100 mg, 0,869 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 60°C. Reakcija je zagrevana na 70°C tokom dodatne noći. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i dodata je dodatna količina terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (316 mg, 1,574 mmol) i natrijum hidrida (60% tež./tež., 76 mg, 1,888 mmol) i reakcija je mešana tokom 4 h na 70°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (257,5 mg, pretpostavljeni kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 197,10 (M-Boc).
[0704] Korak 2: Priprema 5-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorida. Rastvor tercbutil 4-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 257,5 mg, 0,869 mmol) u 2 mL DCM tretiran je sa 4 N HCl u dioksanima (4 mL) . Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 15 min i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so (202 mg, 100% prinos) dovoljne čistoće za korak 3 MS (apci) m/z = 197,10 (M+H).
[0705] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-
14
il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol) i 5-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorida (87 mg, 0,322 mmol) u DMA (0,4 mL) je dodat TEA (117 µL, 0,858 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7,7 mg, 14% prinos). MS (apci) m/z = 503,20 (M+H).
Primer 254
[0706]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1, 5-a]piridin-3-karbonitril
[0707] U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 35 mg, 0,107 mmol) i 2-(piperidin-4-iloksi)-5-(trifluorometil)piridin dihidrohlorida (79 mg, 0,322 mmol) u DMA (0,4 mL) je dodat TEA (117 µL, 0,858 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su
1
isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14,6 mg, 25% prinos). MS (apci) m/z = 553,20 (M+H).
Primer 255
[0708]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-metil-4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a] piridin-3-karbonitril
[0709] Korak 1: Priprema terc-butil 4-metil-4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (266 mg, 1,24 mmol) u DMF (2,6 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 91 mg, 2,27 mmol). Reakcija je mešana 5 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 2-fluoropiridin (100 mg, 1,03 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 70°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa DCM i isprana sa zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-50% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 301 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 293,3 ( M+H).
[0710] Korak 2: Priprema 2-((4-metilpiperidin-4-il)oksi)piridin dihidrohlorida. Rastvor tercbutil 4-metil-4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 301 mg, 1,03 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u MeOH i tretiran sa zatim tretiran sa 4 N HCl u dioksanima (4 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 5 min. Reakcija je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so (221 mg, 100% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 3.<1>H NMR (400 MHz, d<6>-DMSO) 5 8,12 (d, 1H), 7,69 (dd, 1H), 6,97 (dd, 1H), 6,84 (d, 1H), 3,26 (m, 4H), 2,74 (m, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,64 (s, 3H).
1
[0711] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-metil-4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25 mg, 0,077 mmol) i 2-((4-metilpiperidin-4-il)oksi)piridin dihidrohlorida (44 mg, 0,17 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (84 µL, 0,61 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5,6 mg, 15% prinos). (400 MHz, CDC13) 88,32 (d, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,12 (m, 2H), 7,69 (dd, 1H), 7,54 (m, 1H). 7,13 (d, 1H), 6,83 (m, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,72 (d, 1H), 4,08 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,36 (m, 2H), 2,57 (m, 2H), 1,79 (m, 2H), 1,70 (s, 3H), 1,39 (s, 6H).
Primer 256
[0712]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((5-metoksipirazin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0713] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-metoksipirazin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (278 mg, 1.38 mmol) u DMF (1.7 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež.61 mg, 1.52 mmol). Reakcija je mešana 5 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 2-hloro-5-metoksipirazin (100 mg, 0,692 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 95°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa
1
DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-40% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 214 mg) u dovoljnoj čistoći za korak 2. MS (apci) m/z = 210,1 ( M-Boc).
[0714] Korak 2: Priprema 2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)pirazin dihidrohlorida. Rastvor terc-butil 4-((5-metoksipirazin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 214 mg, 0,692 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u MeOH i tretiran sa 4 N HCl u dioksanima (4 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 5 min. Reakcija je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so (61,3 mg, 21,7% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 210,1 (M+H).
[0715] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((5-metoksipirazin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 32 mg, 0,098 mmol) i 2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)pirazin dihidrohlorida (61 mg, 0,216 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (107 µL, 0,784 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,7 mg, 33% prinos). MS (apci) m/z = 516,25 (M+H).
Primer 257
[0716]
1
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0717] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilata (222 mg, 0,793 mmol) i 2-metoksipirimidin-5-ola (100 mg, 0,793 mmol) u DMF (2 mL) je dodat kalijum karbonat (219 mg, 1.59 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 245 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 254,1 (M-t-bu).
[0718] Korak 2: Priprema 2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)pirimidin dihidrohlorida. Rastvor terc-butil 4-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 245 mg, 0,793 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 45 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je tretiran sa 4 N HCl u dioksanima (4 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 5 min. Reakcija je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so (166 mg, 74,2% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 210,2 (M+H).
[0719] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((2-metoksipirimidin-5-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 31 mg, 0,096 mmol) 2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)pirimidin dihidrohlorida (81 mg, 0,287 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (105 µL, 0,765 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so
1
je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9,6 mg, 20% prinos).
Primer 258
[0720]
4-(6-(4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1 ,5-a]piridin-3-karbonitril
[0721] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilata (197 mg, 0,706 mmol) i 5-fluoro-6-metoksipiridin-3-ola (101 mg, 0,706 mmol) u DMF (1,8) mL) je dodat kalijum karbonat (195 mg, 1.41 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana 60 h na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 230 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 227,1 (M-Boc).
[0722] Korak 2: Priprema 3-fluoro-2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 230 mg, 0,706 mmol) u 2 mL DCM tretiran je sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 45 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (86 mg, 54% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 227,10 (M+H).
[0723] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila
2
(Intermedijer P42; 33 mg, 0,102 mmol) i 3-fluoro-2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridina (86 mg, 0,380 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (97 µL, 0,712 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36 mg, 67% prinos). MS (apci) m/z = 533,20 (M+H).
Primer 259
[0724]
4-(6-(4-((6-(difluorometoksi)piridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1, 5-a]piridin-3-karbonitril
[0725] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((6-(difluorometoksi)piridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilata (133 mg, 0,475 mmol) i 6-(difluorometoksi)piridin-3-ola (76,5 mg, 0,475 mmol) u DMF (1,2 mL) je dodat kalijum karbonat (197 mg, 1.42 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 164 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 245,10 (M-Boc).
[0726] Korak 2: Priprema 2-(difluorometoksi)-5-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-
21
butil 4-((6-(difluorometoksi)piridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 164 mg, 0,706 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 45 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (61 mg, 53% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 245,10 (M+H).
[0727] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((6-(difluorometoksi)piridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 31 mg, 0,095 mmol) i 2-(difluorometoksi)-5-(piperidin-4-iloksi)piridina (61 mg, 0,25 mmol) u DMA (0,32 mL) je dodat TEA (65 µL, 0,477 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21 mg, 41% prinos). MS (apci) m/z = 551,20 (M+H).
Primer 264
[0728]
4-(6-(4-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1 ,5-a]piridin-3-karbonitril
[0729] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilata (186 mg,
22
0,664 mmol) i 5-hloro-6-metoksipiridin-3-ola (106 mg, 0,664 mmol) u DMF (1,7) mL) je dodat kalijum karbonat (275 mg, 1.99 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 228 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 243,10 (M-Boc).
[0730] Korak 2: Priprema 3-hloro-2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 228 mg, 0,664 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (65 mg, 40% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 243,10 (M+H).
[0731] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-hloro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 26 mg, 0,079 mmol) i 3-hloro-2-metoksi-5-(piperidin-4-iloksi)piridina (82 mg, 0,338 mmol) u DMA (0,26 mL) je dodat TEA (76 µL, 0,553 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 60:40 ACN:vodom koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12 mg, 28% prinos). MS (apci) m/z = 549,15 (M+H).
Primer 265
[0732]
2
4-(6-(4-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0733] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-((metilsulfonil)oksi)piperidin-1-karboksilata (257 mg, 0,920 mmol) dodat je 3-fluoro-5-hidroksipiridin (104 mg, 0,920 mmol) u DMF (2,3 mL) kalijum karbonata (381 mg, 2.76 mmol), a zatim je reakciona smeša mešana preko noći na 105°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 273 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 297,2 (M+H).
[0734] Korak 2: Priprema 3-fluoro-5-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 273 mg, 0,920 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (89 mg, 49% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 197,10 (M+H).
[0735] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-fluoropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazola [1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42;
25.5 mg, 0,078 mmol) i 3-fluoro-5-(piperidin-4-iloksi)piridina (15,3 mg, 0,781 mmol) u DMA (0,26 mL) je dodat TEA (75 µL, 0,547 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 60:40 ACN:vodom koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko
24
anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12 mg, 31% prinos). MS (apci) m/z = 503,25 (M+H).
Primer 266
[0736]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((4-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0737] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((4-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (146 mg, 0,725 mmol) u DMF (2,4 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 37,7 mg, 0,943 mmol). Reakcija je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 2-hloro-4-metoksipiridin (104 mg, 0,725 mmol) i reakcija je mešana 92 h na 95°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 224 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 309,1 (M+H).
[0738] Korak 2: Priprema 4-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((4-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 224 mg, 0,725 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM i rastvor je prečišćen silika hromatografijom (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (54 mg, 36% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 209,1 (M+H).
[0739] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((4-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila
2
(Intermedijer P42; 25 mg, 0,077 mmol) i 4-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridina (16 mg, 0,077 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (73 µL, 0,54 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,7 mg, 33% prinos). MS (apci) m/z = 515,20 (M+H).
Primer 267
[0740]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-(piridazin-3-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3- karbonitril
[0741] Korak 1: Priprema terc-butil 4-(piridazin-3-iloksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (140 mg, 0,696 mmol) u DMF (2,3 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 56 mg, 1,39 mmol). Reakcija je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 3-hloropiridazin (159 mg, 1.39 mmol) i reakcija je mešana 3 h na 95°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 194 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 280,2 (M+H).
[0742] Korak 2: Priprema 3-(piperidin-4-iloksi)piridazina. Rastvor terc-butil 4-(piridazin-3-
2
iloksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 194 mg, 0,696 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM i rastvor je prečišćen silika hromatografijom (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (111 mg, 89% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za sledeći korak. MS (apci) m/z = 180,1 (M+H).
[0743] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-(piridazin-3-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 28 mg, 0,086 mmol) i 3-(piperidin-4-iloksi)piridazina (46 mg, 0,257 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (82 µL, 0,601 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23,5 mg, 56% prinos). MS (apci) m/z = 486,20 (M+H).
Primer 268
[0744]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((6-metoksi-5-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1 ,5-a]piridin-3-karbonitril
[0745] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((6-metoksi-5-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-
2
karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (761 mg, 3,78 mmol) u DMF (7,9 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 164 mg, 4,10 mmol). Reakcija je mešana 5 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 6-hloro-3-metoksi-4-metilpiridazin (500 mg, 3.15 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 95°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 1,019 g) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 324,1 (M+H).
[0746] Korak 2: Priprema 3-metoksi-4-metil-6-(piperidin-4-iloksi)piridazina. Rastvor tercbutil 4-((6-metoksi-5-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 1,019 g, 3,15 mmol) u 2 mL DCM tretiran je TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM i rastvor je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (70 mg, 10% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 224,15 (M+H).
[0747] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((6-metoksi-5-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 51 mg, 0,156 mmol) i 3-metoksi-4-metil-6-(piperidin-4-iloksi)piridazina (70 mg, 0,314 mmol) u DMA (0,8 mL) je dodat TEA (150 µL, 1,09 mmol). Reakciona smeša je mešana 40 h na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26,5 mg, 32% prinos). MS (apci) m/z = 530,30 (M+H).
Primer 269
2
4-(6-(4-((5-etilpiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0749] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((5-etilpiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (1,42 g, 7,06 mmol) u DMF (11,8 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 311 mg, 7,77 mmol). Reakcija je mešana 15 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 2-hloro-5-etilpiridin (1,00 g, 3,15 mmol) i reakcija je mešana 48 h na 90°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i dodato je dodatno tercbutil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilat (1,42 g, 7,06 mmol) i natrijum hidrid (60% tež./tež., 311 mg, 7,77 mmol). Reakcija je mešana 60 h na 90°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i dodato je dodatno terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilat (1,42 g, 7,06 mmol) i natrijum hidrid (60% tež./tež., 311 mg, 7,77 mmol). Reakcija je mešana 4 h na 90°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena vodom i zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski delovi su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM i rastvor je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-50% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 2,163 g) u dovoljnoj čistoći za korak 2. MS ( apci) m/z = 307,2 (M+H).
[0750] Korak 2: Priprema 5-etil-2-(piperidin-4-iloksi)piridina. Rastvor terc-butil 4-((5-etilpiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 2,163 g, 7,06 mmol) u 5 mL DCM je tretiran sa TFA (10 mL, 130 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM i rastvor je prečišćen hromatografijom na silika gelu (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (835 mg, 57% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 207,20 (M+H).
[0751] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((5-etilpiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-
2
hidroksi-2-metilpropoksi)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25 mg, 0,077 mmol) i 5-etil-2-(piperidin-4-iloksi)piridina (55 mg, 0,27 mmol) u DMA (0,8 mL) je dodat TEA (73 µL, 0,54 mmol). Reakciona smeša je mešana 40 h na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:voda koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6,7 mg, 17% prinos). MS (apci) m/z = 513,30 (M+H).
Primer 270
[0752]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0753] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (313 mg, 1,56 mmol) u DMF (1,94 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 68,4 mg, 1,71 mmol). Reakcija je mešana 5 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 3-hloro-6-metilpiridazin (100 mg, 0,778 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 95°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski delovi su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 228 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 294,20 (M+H).
[0754] Korak 2: 3-metil-6-(piperidin-4-iloksi)piridazin. Rastvor terc-butil 4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 228 mg, 0,778 mmol) u 2 mL DCM je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u DCM i rastvor je prečišćen silika hromatografijom (1-9% MeOH u DCM sa 0,1-0,9% NH4OH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (104 mg, 69% prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 194,1 (M+H).
[0755] Korak 3: Priprema 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 32mg, 0,098 mmol) i 3-metil-6-(piperidin-4-iloksi)piridazina (57 mg, 0,29 mmol) u DMA (0,3 mL) je dodat TEA (67 µL, 0,49 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 51% prinos). MS (apci) m/z = 500,20 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,35 (d, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,72 (dd, IH), 7,24 (d, IH).7,15 (d, 1H), 6,87 (d, 1H), 6,82 (d, 1H), 5,56 (m, 1H), 4,10 (m, 2H), 3,86 (s, 2H), 3,51 (m, 2H), 2,61 (s, 3H), 2,23 (m, 2H), 1,91 (m, 2H), 1,39 (s, 6H).
Primer 271
[0756]
1
4-(6-(4-(4-hlorofenoksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0757] U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 25.5 mg, 0,078 mmol) i 4-(4-hlorofenoksi)piperidin hidrohlorida (38,8 mg, 0,156 mmol) u DMA (0,5 mL) je dodat TEA (33 µL, 0,234 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim Na2CO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28 mg, 70% prinos). MS (apci) m/z = 518,1 (M+H).
Primer 272
[0758]
4-(6-(4-(4-cijanofenoksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0759] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisano za sintezu iz Primera 271, zamenom 4-(4-hlorofenoksi)piperidin hidrohlorida sa 4-(piperidin-4-iloksi)benzonitrilom. MS (apci) m/z = 509,2 (M+H).
Primer 273
[0760]
2
4-(6-(4-(3-fluorofenoksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0761] U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 28 mg, 0,085 mmol) i 4-(3-fluorofenoksi)piperidin hidrohlorida (39 mg, 0,170 mmol) u DMA (0,6 mL) je dodat TEA (47 µL, 0,34 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim Na2CO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25,5 mg, 60% prinos). MS (apci) m/z = 502,2 (M+H).
Primer 274
[0762]
4-(6-(4-(2-fluorofenoksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0763] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem metode slične onoj opisanoj za sintezu Primera 273, zamenom 4-(3-fluorofenoksi)piperidin hidrohlorida sa 4-(2-fluorofenoksi)piperidinom. MS (apci) m/z = 502,2 (M+H).
Primer 275
[0764]
4-(6-(4-(2-cijanofenoksi)piperidin-l-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0765] U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 27 mg, 0,083 mmol) i 2-(piperidin-4-iloksi)benzonitrila (34 mg, 0,166 mmol) u DMA (0,42 mL) je dodat TEA (70 µL, 0,498 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim Na2CO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23 mg, 55% prinos). MS (apci) m/z = 509,2 (M+H).
Primer 277
[0766]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-(1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)piperidin-1-
4
il)piridin-3-il)pirazolo[ 1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0767] Smeša 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 50 mg, 0,15 mmol) i 1-metil-2-(piperidin-4-il)-1H-benzo[d]imidazol dihidrohlorida (66 mg, 0,23 mmol) i DIEA (133 µL, 0,77 mmol) je kombinovana u DMSO (306 µL). Reakciona smeša je mešana 72 h na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je prečišćena direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-45% ACN u vodi kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (38 mg, 47% prinos). MS (apci) m/z = 522,2 (M+H).
Primer 278
[0768]
4-(6-(4-(1H-benzo[d]imidazol-2-il)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5- a]piridin-3-karbonitril
[0769] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem metode slične onoj opisanoj za sintezu Primer 277, zamenom 1-metil-2-(piperidin-4-il)-1H-benzo[d]imidazol dihidrohlorida sa 2-(piperidin-4-il)-1H-benzo[d]imidazolom. MS (apci) m/z = 508,2 (M+H).
Primer 289
[0770]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il) benzamid
[0771] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P64; 20 mg, 0,049 mmol), HATU (21 mg, 0,054 mmol) i benzojeve kiseline (9 mg, 0,24 mmol) u DCM (0,5 mL) je tretirana sa DIEA (43 µL, 0,054 mmol) i zatim mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (43,7 mg, 49,3% prinos). MS (apci) m/z = 511,20 (M+H).
[0772] Jedinjenja u Tabeli OO su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 289, zamenom benzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela OO
Pr. Struktura Hemijsko ime MS
Primer 294
[0773]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il) -4-fluorobenzamid
[0774] Smeša 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P64; 20 mg, 0,049 mmol), HATU (21 mg, 0,054 mmol) i 4-fluorobenzojeve kiseline (69 mg, 0,049 mmol) u DCM (0,5 mL) tretirana je sa DIEA (43 µL, 0,049 mmol) i zatim mešana 2,5 h na temperaturi okoline. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je suspendovan u 60:40 ACN:vodi koja sadrži 2% TFA. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16 mg, 60% prinos). MS (apci) m/z = 529,20 (M+H).
Primer 301
[0775]
N-(1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2 -metilbenzamid
[0776] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida (P68, 30 mg, 0,619 mmol) u DMF (0,6 mL) dodat je kalijum karbonat (26 mg, 0,186 mmol), a zatim jodometan (6 µL, 0,09 mmol) i mešan je 1 h na 60°C. Reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom i osušena preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirana i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u DCM (2 mL) i prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu 10-90% EtOAc u heksanima da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9 mg, 29% prinos) MS (apci) m/z=499,2 (M+H).
Primer 302
[0777]
N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0778] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata. U smešu N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5 -fluoro-2-metilbenzamida (Intermedijer P68; 47 mg, 0,097 mmol) i terc-butil 3-(bromometil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (39 mg, 0,146 mmol) je dodat cezijum karbonat (126 mg, 0,388 mmol) u DMA (1 mL) i mešana je preko noći na 60°C. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i osušena preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije na silicijum dioksidu 25-50% EtOAc u heksanima da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (62 mg, 95% prinos) MS (apci) m/z=672,3 (M+H).
[0779] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2- il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. Rastvor tercbutil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (62 mg, 0,09 mmol) u DCM (4 mL) je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, razblažene sa 4:1 DCM:iPrOH i isprane uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. (42 mg, 80% prinos) MS (apci) m/z = 572,3 (M+H).
Primer 303
[0780]
N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4il)piridin-2-il )-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0781] Smeša N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida (Primer 302; 30 mg, 0,053 mmol), formaldehida (20 µL, 0,26 mmol) i NaBH(AcO)3(56 mg, 0,26 mmol) rastvorena je u u DMA (2 mL). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao eluentom za gradijent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, razblažene sa 4:1 DCM:iPrOH i isprane uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27 mg, 87% prinos) MS (apci) m/z = 586,3 (M+H).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,32-8,30 (m, 1H), 8,19-8,15 (m, 2H), 7,71-7,66 (m, 1H), 7,17-7,13 (m, 2H), 7,06-7,02 (m, 1H), 7,00-6 (m, 1H), 6,80-6,77 (m, 1H), 5,50 (br s, 1H), 4,36-4,29 (m, 2H), 4,05-3,92 (m, 2H), 3,75-3,57 (m, 2H), 3,43-3,32 (m, 2H), 3,26-3,13 (m, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,33-2,21 (m, 2H), 1,90-1,75 (m, 2H), 1,58 (s, 3H).
Primer 304
[0782]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(dimetilamino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0783] U smešu N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5 -fluoro-2-metilbenzamida (Intermedijer P68; 39 mg, 0,08 mmol) i 2-bromo-N,N-dimetiletan-1-amin hidrobromida (37 mg, 0,16 mmol) je dodat cezijum karbonat (105 mg, 0,32 mmol) u DMA (1 mL) i mešana je preko noći na 60°C. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i osušena preko
4
anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu 2-4% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu. Ostatak je ponovo prečišćen i prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, razblažene sa 4:1 DCM:iPrOH i isprane uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8 mg, 18% prinos) MS (apci) m/z = 556,3 (M+H).
[0784] Jedinjenja u Tabeli KK su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 304, zamenom 2-bromo-N,N-dimetiletan-1-amin hidrobromida sa odgovarajućim alkil halogenidom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela KK
Primer 307
41
N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0786] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)pirazol[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-metilazetidin-1-karboksilata. U smešu N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5 -fluoro-2-metilbenzamid (Intermedijer P68; 42 mg, 0,087 mmol) i tercbutil 3-(bromometil)-3-metilazetidin-1-karboksilata (34 mg, 0,13 mmol) je dodat cezijum karbonat (113 mg, 0,347 mmol) u DMA (1 mL) i mešana je preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom, a organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije na silicijum dioksidu 50-100% EtOAc u heksanima da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21 mg, 36% prinos) MS (apci) m/z=668,4 (M+H).
[0787] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. Rastvor terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-metilazetidin-1-karboksilata (21 mg, 0,03 mmol) u DCM (4 mL) je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, razblažene sa 4:1 DCM:iPrOH i isprane uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. (13 mg, 73% prinos) MS (apci) m/z = 568,3 (M+H).
Primer 308
42
N-(1-(5-(3-cijano-6-((1,3-dimetilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)- 4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0789] Smeša N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida (Primer 307; 12 mg, 0,021 mmol), formaldehida (8 µL, 0,106 mmol) i NaBH(AcO)3(22mg, 0,106 mmol) rastvorena je u DCM (4 mL). Dobijena reakciona smeša je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, razblažene sa 4:1 DCM:iPrOH i isprane uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg, 81% prinos) MS (apci) m/z = 582,3 (M+H).
Primer 309
[0790]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
4
[0791] Korak 1: Priprema terc-butil 4-(2-((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il))pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata. U smešu N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida (Intermedijer P68; 55 mg, 0,114 mmol), terc-butil 4-(2-hloretil)tetrahidro-1(2H)-pirazin karboksilata (57 mg, 0,227 mmol) je dodat cezijum karbonat (148 mg, 0,454 mmol) u DMA (1 mL) i je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom, a organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije na silicijum dioksidu (50-100% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (49 mg, 62% prinos) MS (apci) m/z=697,4 (M+H).
[0792] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2- il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. Rastvor terc-butil 4-(2-((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il) pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata (49 mg, 0,070 mmol) u DCM (4 mL) je tretiran sa TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu. Ostatak je ponovo prečišćen korišćenjem hromatografije na silicijum dioksidu (4% MeOH u DCM sa 1% TEA kao eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. (33 mg, 79% prinos) MS (apci) m/z = 597,3 (M+H).
Primer 310
[0793]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)- 4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0794] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida (Primer 309; 27 mg, 0,045
44
mmol) u DCM (0,25 mL) i MeOH (0,25 mL) dodat je formaldehid (17 µL, 0,226 mmol) i NaBH(AcO)3(48 mg, 0,226 mmol). Dobijena reakciona smeša je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je direktno prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je triturisan sa DCM/heksanom i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12,5 mg, 45% prinos) MS (apci) m/z = 611,4 (M+H).
Primer 311
[0795]
(S)-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin -4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0796] Korak 1: Priprema terc-butil (S)-2-(((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3)-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata. U N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro- 2-metilbenzamid (Intermedijer P68; 30 mg, 0,062 mmol) je dodat cezijum karbonat (22 mg, 0,068 mmol) u DMA (1,2 mL). Dobijena smeša je prskana sa Ar(g)i mešana 10 min. (S)-terc-butil 2-(bromometil)morfolin-4-karboksilat (26 mg, 0,093 mmol) je dodat u reakcionu smešu. Dobijena smeša je prskana sa Ar(g)i mešano preko noći na 60°C. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom, a organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na.2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (42 mg, 99% prinos) MS (apci) m/z = 684,3 (M+H).
[0797] Korak 2: Priprema (S)-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamida. Rastvor terc-butil
4
(S)-2-(((3-cijano-4-(6-(4-(5-fluoro-2-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il))pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (42 mg, 0,061 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa TFA (0,31 mL). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u DCM (2 mL). Rastvor je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0,5-10% MeOH u DCM sa 0,05-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6 mg, 16% prinos) MS (apci) m/z=584,3 (M+H).
Primer 312
[0798]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0799] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamida (Intermedijer nivo P75; 34 mg, 0,070 mmol) u DMF (0,7 mL) je dodat kalijum karbonat (29 mg, 0,209 mmol), a zatim je u reakcionu smešu dodat jodometan (7 µL, 0,105 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa DCM i prečišćena direktno korišćenjem hromatografije na silika gelu (0,5-10% MeOH u DCM sa 0,1-2% NH4OH kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu. Ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran vodom i fiziološkim rastvorom, a zatim osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16 mg, 45% prinos) MS (apci) m/z = 502,2 (M+H).
Primer 313
[0800]
4
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-N- metilpikolinamid
[0801] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamida (Primer 312; 10 mg, 0,020 mmol) u ACN (0,3 mL) dodat je jodometan (4 µL, 0,06 mmol), a zatim natrijum hidrid (1,4 mg, 0,06 mmol) i zatim je reakciona smeša mešana 1 sat na temperaturi okoline. Reakcija je mešana 1 sat na 85°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je direktno prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6,5 mg, 63% prinos). MS (apci) m/z = 516,2 (M+H).
Primer 314
[0802]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((1-metil-1H-imidazol-4-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin- 2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0803] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamida (Intermedijer P75; 25 mg, 0,051 mmol) u DMF (0,5 mL) dodat je kalijum karbonat (22 mg, 0,159 mmol), zatim 4-(hlorometil)-1-metil-1H-imidazol (13 mg, 0,102 mmol). Dobijena smeša je mešana 2 h na 60°C. Posle hlađenja do sobne
4
temperature, reakcija je razblažena sa 60:40 ACN:vodom. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM (10 mL) i MeOH (1 mL) i eluirana kroz Pl-HCO3smolu. Organski eluent je koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg, 45% prinos). MS (apci) m/z = 582,2 (M+H).
Primer 315
[0804]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(dimetilamino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin -4-il)pikolinamid
[0805] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamid (Intermedijer P75; 25 mg, 0,051 mmol) u DMA (0,5 mL) je dodat cezijum karbonat (52 mg, 0,159 mmol), zatim 2-dimetilaminoetil hlorid hidrohlorid (15 mg, 0,102 mmol). Dobijena smeša je mešana 1 h na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, dodat je kalijum karbonat. Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa DCM i prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (0,5-10% MeOH u DCM sa 0,1-2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg, 47% prinos). MS (apci) m/z = 559,2 (M+H).
Primer 316
[0806]
4
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin- 2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0807] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((4-(6-(4-(3-hloropikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata. U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamida (Intermedijer P75; 37 mg, 0,076 mmol) u DMF (0,76 mL) je dodat cezijum karbonat (27 mg, 0,083 mmol), zatim terc-butil 3-(bromometil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilat (41 mg, 0,15 mmol). Dobijena smeša je mešana 3 h na 60°C. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom, a organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na.2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (Pretpostavljeni kvantitativni prinos, 51 mg) MS (apci) m/z=675,3 (M+H).
[0808] Korak 2: Priprema 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida. Rastvor terc-butil 3-(((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (62 mg, 0,092 mmol) u DCM (0,46 mL) je tretiran sa TFA (0,46 mL, 6 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u DCM (3 mL). Rastvor je propušten kroz dva Pl-HCO3smole i eluiran sa dodatnim DCM. Eluent je koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (30 mg, 57% prinos) MS (apci) m/z = 575,2 (M+H).
[0809] Korak 3: Priprema 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida. U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (35 mg, 0,061 mmol) u DMA (0,61 mL) je dodat formaldehid (8 µL, 0,304 mmol) i NaBH(AcO)3(116 mg, 0,547 mmol) Dobijena reakciona smeša je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je direktno prečišćena C18 hromatografijom reverzne faze (5-75% ACN u vodi sa 0,1% TFA
4
kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je razblažena sa DCM i propuštena kroz Pl-HCO3smole i eluirana sa dodatnim DCM. Eluent je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvoren u DCM i tretiran sa zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7 mg, 19% prinos) MS (apci) m/z=589,3 (M+H).
Primer 317
[0810]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamid
[0811] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamida (Intermedijer P75; 36 mg, 0,074 mmol) u DMA (0,74 mL) je dodat cezijum karbonat (26 mg, 0,081 mmol), a zatim je u reakcionu smešu dodat 4-(2-hloretil)morfolin (44 mg, 0,295 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa 60:40 ACN:voda. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA i zatim ispran fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9 mg, 20% prinos) MS (apci) m/z = 601,3 (M+H).
Primer 318
[0812]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0813] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P75; 36 mg, 0,074 mmol) u DMF (0,74 mL) dodat je kalijum karbonat (31 mg, 0,221 mmol), a zatim jodoetan (17 mg, 0,111 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa 60:40 ACN:voda. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA i zatim isprana fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (19 mg, 50% prinos) MS (apci) m/z = 516,2 (M+H).
Primer 319
[0814]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0815] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamida (Intermedijer P75; 31 mg, 0,063 mmol) u DMA (0,63 mL) dodat je kalijum karbonat (10 mg, 0,69 mmol), a zatim 1-(2-hloroetil)-pirolidin (25 mg, 0,189 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne
1
temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Vodeni sloj je dalje ekstrahovan korišćenjem 4:1 DCM:IPA. Organski ekstrakti su odvojeno isprani fiziološkim rastvorom, zatim spojeni i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je resuspendovan sa 60:40 ACN:voda. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA i zatim ispran fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16 mg, 42% prinos) MS (apci) m/z = 585,3 (M+H).
Primer 320
[0816]
terc-butil (2-((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6) -il)oksi)etil)karbamat
[0817] U smešu 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P75; 150 mg, 0,307 mmol) i kalijum karbonata (47 mg, 0,34 mmol) u DMA (3,07 mL) je dodat 2-(bokamino)etil bromid (138 mg, 0,615 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, dodat je dodatni 2-(boc-amino)etil bromid (69 mg, 0,307 mmol) i reakcija je mešana 1 h na temperaturi okoline. Zatim je dodato još kalijum karbonata (42 mg, 0,31 mmol) i reakcija je mešana dve noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim kombinovani i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova dovoljno čistoće za sledeći korak. 10 mg naslovnog jedinjenja je ponovo prečišćeno korišćenjem C18 hromatografije reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao
2
gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA i zatim ispran fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. (169 mg, 87% prinos) MS (apci) m/z = 631,3 (M+H).
Primer 321
[0818]
N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-3 -hloropikolinamid
[0819] Rastvor terc-butil (2-((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)karbamata (Primer 320, 158 mg, 0,250 mmol) u DCM (2,5 mL) je tretiran sa TFA (2,5 mL, 32 mmol). Reakciona smeša je mešana 10 min na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je tretiran zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovan sa 4:1 DCM:IPA i zatim ispran fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 mg, 98% prinos) MS (apci) m/z=531,2 (M+H)
Primer 322
[0820]
N-(1-(5-(6-(2-acetamidoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-3 -hloropikolinamid
[0821] U rastvor N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-3-hlorpikolinamida (Primer 321; 27 mg, 0,51 mmol) u DCM (0,5 mL) je dodat anhidrid sirćetne kiseline (5 µL, 0,51 mmol), a zatim TEA (14 uL, 0,102 mmol). Reakcioni rastvor je mešan 1 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je resuspendovan sa 60:40 ACN:voda. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-75% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA i zatim ispran fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 mg, 67% prinos) MS (apci) m/z = 573,2 (M+H).
Primer 323
[0822]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-((2,2-difluoroetil)amino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2 -il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0823] U rastvor N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-3-hlorpikolinamida (Primer 321, 27 mg, 0,051 mmol) u DMA (0,5 mL) dodat je kalijum karbonat (35 mg, 0,254 mmol). Suspenzija je prskana argonom i mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Zatim 2,2-difluoroetil trifluorometansulfonat (11 mg, 0,51 mmol). Dobijena smeša je prskana argonom i mešana 60 h na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa 60:40 ACN:voda. Rastvor je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA i zatim ispran fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski
4
ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4 mg, 13% prinos) MS (apci) m/z = 595,2 (M+H).
Primer 324
[0824]
6-etoksi-4-(6-(4-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0825] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (10,0 g, 49,7 mmol) u DMF (82,8 mL) dodat je natrijum hidrid (2,19 g, 54,7 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, nakon čega je dodat 3-hloro-6-metoksipiridazin (7,18 g, 49,7 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (5-50% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 15,4 g, 49,8 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 310,1 (M+H).
[0826] Korak 2: Priprema 3-metoksi-6-(piperidin-4-iloksi)piridazina. U rastvor terc-butil 4-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 15,4 g, 49,8 mol) u DCM (16 mL) dodata je TFA (19,2 mL, 250,9 mmol) . Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 min, nakon čega je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u 20 mL DCM i prečišćen silika hromatografijom (1-9% MeOH u DCM sa 1% NH4OH kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6,0 g, 28,7 mmol, 57,6 % prinos u dva koraka) u dovoljnoj čistoći za Korak 3. MS (apci) m/z = 210,1 (M+H).
[0827] Korak 3: Priprema 6-etoksi-4-(6-(4-((6-metoksipiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridina-3-karbonitrila. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 0.012 g, 0,0425 mmol) u DMSO (0,1 mL) dodat je 3-metoksi-6-(piperidin-4-iloksi)piridazin (0,0133 g, 0,0638 mmol) i DIEA (37 uL, 0,213 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NH4Cl(aq). Kombinovani vodeni rastvori su dalje ekstrahovani sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6 mg, 0,0127 mmol, 30% prinos). MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
Primer 325
[0828]
4-(6-(4-benzil-4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0829] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 30 mg, 0,106 mmol) u DMA (0,5 mL) je dodat TEA (0,044 mL, 0,319 mmol) i 4-benzilpiperidin-4-ol (40,7 mg, 0,213 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NH4Cl(aq)zatim vodom. Kombinovani vodeni rastvori su dalje ekstrahovani sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (30-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (39 mg, 0,0860 mmol, prinos 80,9 %). MS (apci) m/z = 454,2 (M+H).
[0830] Jedinjenja u Tabeli RR su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 325, zamenom 4-benzilpiperidin-4-ola odgovarajućim piperidin nukleofilom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela RR
Primer 331
[0831]
6-etoksi-4-(6-(4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0832] U rastvor 6-etoksi-4-(6-(4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P52, 30 mg, 0,0825 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,7 mL) je dodat 6-metilpiridazin-3-ol (18,2 mg, 0,165 mmol) i trifenilfosfan (43,3 mg, 0,165 mmol). Reakciona posuda je ispražnjena argonom, nakon čega je dodat diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0235 ml, 0,165 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Vodena frakcija je ekstrahovana sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrisano u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (50-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg, 0,0329 mmol, prinos 39,9 %). MS (apci) m/z = 456,2 (M+H).
Primer 332
[0833]
4-(6-(4-((6-hloropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0834] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem metode sličnog onom opisanom za sintezu Primer 331, zamenom 6-metilpiridazin-3-ola sa 6-hloropiridin-3-olom. MS (apci) m/z = 475,2 (M+H).
Primer 333
[0835]
6-etoksi-4-(6-(4-((6-(2-hidroksietoksi)piridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin- 3-karbonitril
[0836] U rastvor etan-1,2-diola (9,8 mg, 0,16 mmol) u DMF (0,2 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 2,3 mg, 0,095 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 5 min, kada je dodat 4-(6-(4-((6-hloropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (Primer 332 15 mg, 0,032 mmol) u dodatnih 0,3 mL DMF. Reakciona smeša je mešana na 110°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (10-90% ACN u vodi sa 0,1% mravlje kiseline kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,2 mg, 0,0044 mmol, 14% prinos).
MS (apci) m/z = 501,25 (M+H).
Primer 336
[0837]
4-(6-(4-benzil-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0838] U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (100,5 mg, 0,3560 mmol) u DMSO (3 ml) je dodat (4- benzilpiperidin-4-il)metanol hidrohlorid (151,5 mg, 0,6267 mmol) i cezijum karbonat (812,0 mg, 2,492 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i zasićenim NH4Cl(aq). Kombinovani vodeni slojevi su ekstrahovani sa DCM, zatim su kombinovani organski ekstrakti osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (118,2 mg, 0,2528 mmol, 71,00 % prinos). MS (apci) m/z = 468,2 (M+H).
Primer 337
[0839]
4-(6-(4-benzil-4-(metoksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0840] U rastvor 4-(6-(4-benzil-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P559,0 mg, 0,019 mmol) u DMF (0,4 mL) je dodat natrijum hidrid (60% tež./tež., 2,8 mg, 0,070 mmol). Ova smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, za koje vreme je dodat metil jodid (0,021 ml, 0,34 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 72 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,0 mg, 0,0083 mmol, 43% prinos). MS (apci) m/z = 482,25 (M+H).
Primer 339
[0841]
6-etoksi-4-(6-(4-(hidroksimetil)-4-(4-metoksibenzil)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0842] Korak 1: Priprema terc-butil 4-formil-4-(4-metoksibenzil)piperidin-1-karboksilata. U zatvorenu bocu sa 3 grla koja je prskana N2je dodat terc-butil 4-formilpiperidin-1-karboksilat (201,8 mg, 0,9462 mmol) u THF (2 mL). Smeša je ohlađena na -78°C i mešana na ovoj temperaturi 10 min, a za to vreme je u kapima dodat litijum bis(trimetilsilil)amid (3 mL, 3 mmol). Reakciona smeša je mešana na -78°C 40 min, a zatim zagrejana do sobne temperature. Posle 16 h, dodat je 1-(bromometil)-4-metoksibenzen (0,3 mL, 2,058 mmol) i reakciona smeša je mešana dodatnih 24 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana u EtOAc, a organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu da se dobije jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 315 mg, 0,946 mmol) dovoljno čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 234,2 (M+H-Boc).
[0843] Korak 2: Priprema 4-(4-metoksibenzil)piperidin-4-karbaldehida.U rastvor terc-butil 4-formil-4-(4-metoksibenzil)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 315 mg, 0,946 mmol) u DCM (2 mL) je dodat TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen u DCM i 10% NH4OH u MeOH i mešano 15 min. Smeša je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 220,8 mg, 0,9462 mmol) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 234,2 (M+H).
[0844] Korak 3: Priprema 6-etoksi-4-(6-(4-formil-4-(4-metoksibenzil)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 40,3 mg, 0,143 mmol) u DMSO (0,5 mL) je dodat 4-(4-metoksibenzil)piperidin-4-karbaldehid (66,6 mg, 0,286 mmol) i cezijum karbonat (465 mg, 1,43 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 70,8 mg, 0,143 mmol) dovoljne čistoće za korak 4. MS (apci) m/z = 496,2 (M+H).
[0845] Korak 4: Priprema 6-etoksi-4-(6-(4-(hidroksimetil)-4-(4-metoksibenzil)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin- 3-karbonitrila. MeOH (0,5 mL) je dodat u 6-etoksi-4-(6-(4-formil-4-(4-metoksibenzil)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (pretpostavljeno 70,8 mg, 0,143 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 10 min, za koje vreme je dodat natrijum borohidrid (103,5 mg, 2,736 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1,5 h, a zatim ugašena vodom i 2M HCl. pH smeše je podešen na 12 sa 2M NaOH, i smeša je ekstrahovana sa 4:1 DCM/IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (0-70% ACN u vodi sa 0,1% TFA). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su bazirane na slobodnoj bazi sa zasićenim NaHCO3(aq)da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,1 mg, 0,00221 mmol, 1,57 % prinos u četiri koraka). MS (apci) m/z = 498,3 (M+H).
Primer 340
[0846]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(hidroksimetil)piperidin-4-il)-5- fluoro-2-metilbenzamid
1
[0847] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P56, 30 mg, 0,0764 mmol) u DCM (0,005 mL) dodata je 5-fluoro-2-metilbenzojeva kiselina (11,8 mg, 0,0764 mmol), DIEA (13,4 µl, 0,0764 mmol) i HATU (29,07 mg, 6 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h, a zatim prečišćena pomoću C18 prep HPLC eluiranjem sa gradijentom 5-95% acetonitril/voda 0,1% TFA, zatim hromografijom na silicijum dioksidu eluiranjem sa (0-100% EtOAc u heksanu, zatim 0-10% MeOH u EtOAc kao gradijent eluenta) nakon čega sledi trituracija sa 1:3 DCM/MTBE da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23,8 mg, 0,045 mmol, 59% prinos). MS (apci) m/z = 529,2 (M+H).
[0848] Jedinjenja u Tabeli SS su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 340, zamenom 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela SS
2
Primer 350
[0849]
4-(6-((3S,4R)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0850] Korak 1: Priprema 4-(6-((3S,4R)-3-azido-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-((3S,4S)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3- karbonitrila (Intermedijer P580,050 g, 0,128 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,7 mL) je dodat piridin-2-ol (0,0244 g, 0,256 mmol) i trifenilfosfan (0,0672 g, 0,256 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom, dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0350 mL, 0,256 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašen je vodom i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,014 g, 0,0299 mmol, 23,4 % prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 2. MS (apci) m/z = 468,1 (M+H).
[0851] Korak 2: Priprema 4-(6-((3S,4R)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5 -a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-((3S,4R)-3-azido-4-(piridin-2iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5 -a]piridin-3-karbonitrila (0,013 g, 0,028 mmol) u 1:1 MeOH/EtOAc (2 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (0,33 mg, 0,0028 mmol). Reakciona smeša je prskana sa H2i mešano na sobnoj temperaturi 24 h. Čvrste materije su uklonjene filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7 mg, 56 % prinos). MS (apci) m/z = 442,2 (M+H).
Primer 354
[0852]
4-(6-((3R,4S)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0853] Korak 1: Priprema 4-(6-((3R,4S)-3-azido-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-((3R,4R)-3-azido-4-hidroksipirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P590,050 g, 0,128 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,7 mL) je dodat piridin-2-ol (0,0244 g, 0,256 mmol) i trifenilfosfan (0,0672 g, 0,256 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom, dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0350 mL, 0,256 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašena je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,025 g, 0,0535 mmol, 41,8% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 2. MS (apci) m/z = 468,1 (M+H).
[0854] Korak 2: Priprema 4-(6-((3R,4S)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5 -a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-((3R,4S)-3-azido-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5- a]piridin-3-karbonitrila (0,022 g,
4
0,0471 mmol) u 1:1 MeOH/EtOAc (2 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (0,56 mg, 0,0047 mmol). Reakciona smeša je prskana sa H2i mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Čvrste materije su uklonjene vakuum filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (13 mg, 0,0297 mmol, 63,1 % prinos). MS (apci) m/z = 442,2 (M+H).
Primer 358
[0855]
4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0856] Korak 1: Priprema terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- (piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidina-3-il)karbamata (Intermedijer P600,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,75 mL) je dodat piridin-2-ol (0,0123 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfan (0,0339 g, 0,129 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašen je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrisano u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,035 g, 0,0646 mmol) u dovoljnoj čistoći za korak 2.
[0857] Korak 2: Priprema 4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5 -a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata (0,035 g, 0,0646 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu. 2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0073 g, 0,0165 mmol, 25,6% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 442,2 (M+H).
Primer 359
[0858]
4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[0859] Korak 1: Priprema terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- (piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (Intermedijer P600,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,75 mL) je dodat 5-metoksipiridin-2-ol (0,0162 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfan (0,0339 g, 0,129 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašena je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,037 g, 0,0646 mmol) dovoljne čistoće za korak 2.
[0860] Korak 2: Priprema 4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-3il)karbamata (0,037 g, 0,0646) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu. 2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0065 g, 0,0138 mmol, 21,3% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
Primer 360
[0861]
4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[0862] Korak 1: Priprema terc-butil ((3R,4R)-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo [1,5-a] piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (Intermedijer P600,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,7 mL) dodat je 6-hloropiridazin-3-ol (0,0169 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfan (0,0339 g, 0,129 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašen je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,031 g, 0,0646 mmol) dovoljne čistoće za korak 2.
[0863] Korak 2: Priprema 4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6- etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3R,4R)-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il)karbamata (0,031 g, 0,0646) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu. 2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,013 g, 0,0273 mmol, 42,2% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 477,1 (M+H).
Primer 361
[0864]
4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0865] Korak 1: Priprema terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- ((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidina -3-il)karbamata (Intermedijer P600,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,7 mL) je dodat 5-fluoro-6-metoksipiridin-3-ol (0,0185 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfan (0,03129 g, mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašen je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,038 g, 0,0646 mmol) u dovoljnoj čistoći za korak 2.
[0866] Korak 2: Priprema 4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((5-fluoro-6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor tercbutil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((5-fluoro-6metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-3-il)karbamata (0,038 g, 0,0646) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu.2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0014 g, 0,00286 mmol, 4,43% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 490,2 (M+H).
Primer 362
[0867]
4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0868] Korak 1: Priprema terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- (piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (Intermedijer P610,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,75 mL) je dodat piridin-2-ol (0,0123 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfan (0,0339 g, 0,129 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašen je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrisano u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,035 g, 0,0646 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 542,3 (M+H).
[0869] Korak 2: Priprema 4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata (0,035 g, 0,0646 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu. 2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0101 g, 0,0229 mmol, 35,4% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 442,2 (M+H).
Primer 363
[0870]
4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[0871] Korak 1: Priprema terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- (piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (Intermedijer P610,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,75 mL) je dodat 5-metoksipiridin-2-ol (0,0162 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfan (0,0339 g, 0,129 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Ugašena je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,037 g, 0,0646 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 572,3 (M+H).
[0872] Korak 2: Priprema 4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3S,4S)-1-(5(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(piridin-2-iloksi)pirolidin-3-il)karbamata (0,037 g, 0,0646) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu. 2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0112 g, 0,0238 mmol, 36,8% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
Primer 364
[0873]
4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[0874] Korak 1: Priprema terc-butil ((3S,4S)-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo [1,5-a] piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il)karbamata. U rastvor terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (Intermedijer P610,030 g, 0,0646 mmol) u 1:1 DCM/THF (0,7 mL) dodat je 6-hloropiridazin-3-ol (0,0169 g, 0,129 mmol) i trifenilfosfin (0,0339 g, 0,129 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i dodat je diizopropil (E)-diazen-1,2-dikarboksilat (0,0176 mL, 0,129 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Ugašena je vodom i ekstrahovan u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 0,031 g, 0,0646 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 577,2 (M+H).
[0875] Korak 2: Priprema 4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((6-hloropiridazin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6- etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3S,4S)-4-((6-
1
hloropiridazin-3-il)oksi)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il)karbamata (0,031 g, 0,0646) u DCM (2 mL) je tretiran sa 6M HCl u IPA (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je potopljen u vodu. 2M NaOH je dodat i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz frit separatora faza, a zatim prečišćeni silika hromatografijom (0-40% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0096 g, 0,0201 mmol, 31,2% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 477,2 (M+H).
Primer 372 reference
[0876]
N-(4-benzil-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il)acetamid
[0877] Korak 1: Priprema N-(4-benzilpiperidin-4-il)acetamida. Rastvor 4-benzilpiperidin-4-ola (0,100 g, 0,523 mmol) u ACN (0,5 mL) je ohlađen na 0°C i zatim tretiran dodatkom sumporne kiseline u kapima (98%, 0,418 mL, 7,84 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana na istoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i tretirana laganim dodavanjem 2M NaOH do bazne. Rastvor je ekstrahovan sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz fritu za odvajanje faza, a zatim koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,102 g, 0,439 mmol, 84% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 233,2 (M+H).
[0878] Korak 2: Priprema N-(4-benzil-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il)acetamida. U rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P60,060 g, 0,213 mmol) u DMSO (1 mL) dodat je DIEA (0,184 mL, 1,06 mmol) i N-(4-benzilpiperidin-4-il)acetamid (0,0988 g, 0,425 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature,
2
reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq). i ekstrahovana u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,072 g, 0,146 mmol, 68,5 % prinos). MS (apci) m/z = 495,2 (M+H).
Primer 373
[0879]
4-(6-(4-amino-4-benzilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0880] U rastvor N-(4-benzil-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il)acetamida (Primer 3720,020 g, 0,040 mmol) u 1:1 THF/DCM (0,7 mL) je dodat titanijum(IV) propan-2-olat (0,048 mL, 0,16 mmol) i difenilsilan (0,030 g, 0,16 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h, a zatim ugašena vodom. Smeša je ekstrahovana sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s)i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i isprane sa 2M NaOH i ekstrahovane u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su propušteni kroz fritu za odvajanje faza, a zatim koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0030 g, 0,0066 mmol, 16 % prinos). MS (apci) m/z = 453,3 (M+H).
Primer 379
[0881]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(morfolinometil)piperidin-4-il)-5- fluoro-2-metilbenzamid
[0882] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)-5 -fluoro-2-metilbenzamida (Intermedijer P70, 0,0196 g, 0,03722 mmol) u DCE (0,1861 mL) je dodat morfolin (0,009661 mL, 0,1117 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (0,01183 g, 0,05583 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Sirova reakciona smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima, zatim 0-10% MeOH u CHCl3kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0172 g, 0,02878 mmol, 77% prinos). MS (apci) m/z = 598,3 (M+H).
[0883] Jedinjenja u Tabeli TT su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 379, zamenom morfolina odgovarajućim aminom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Primer 383
[0884]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil)piperidin-4-il) -5-fluoro-2-metilbenzamid
4
[0885] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-((dimetilamino)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P727 mg, 0,017 mmol) u DMF (0,334 mL) dodata je 5-fluoro-2-metilbenzojeva kiselina (5,1 mg, 0,033 mmol), HATU (13 mg, 0,033 mmol) i DIEA (0,015 mL, 0,083 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Sirova reakciona smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu, zatim 1-10% MeOH u EtOAc sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5 mg, 0,0090 mmol, 54% prinos). MS (apci) m/z = 556,2 (M+H).
Primer 384
[0886]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil)piperidin-4 -il)pikolinamid
[0887] U smešu 4-(6-(4-amino-4-((dimetilamino)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P72, 0,050 g, 0,119 mmol) u DMSO (0,795 mL) dodata je 3-hlorokolinska kiselina (0,0282 g, 0,179 mmol), a zatim Hunigova baza (0,0934 mL, 0,536 mmol) i HATU (09060 g, 0,238 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom. Organski ekstrakt je ispran zasićenim NaCl(aq), osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovane u DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaCl(aq), osušene preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovane u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0108 g, 0,0193 mmol, 16,2% prinos). MS (apci) m/z = 559,3 (M+H).
Primer 389
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil) piperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[0889] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P74. 20 mg, 0,0356 mmol) u DMF (0,356 mL) je dodata 5-fluoro-2-metilbenzojeva kiselina (6,86 mg, 0,0445 mmol), DIEA (0,0311 mL, 0,178 mmol) i HATU (16,9 mg, 45 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 min. Sirova reakciona smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu, zatim 1-10% MeOH u EtOAc sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7 mg, 0,0112 mmol, 31,5% prinos). MS (apci) m/z = 625,4 (M+H).
[0890] Jedinjenja u Tabeli UU su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 389, zamenom 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Table UU
Primer 391
[0891]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil) piperidin-4-il)-2,5-difluorobenzamid
[0892] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P74, 0,0238 g, 0,0606 mmol) u DMSO (0,606 mL) je dodat DIEA (0,0530 ml, 0,303 mmol), 2,6-difluorobenzojeva kiselina (0,0192 g, 0,121 mmol), HATU (0,0461 g, 0,121 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Sirova reakciona smeša je direktno prečišćena silika hromatografijom (1-10% MeOH u DCM sa 0,1-1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29 mg, 0,023 mmol, 49,5% prinos). MS (apci) m/z = 629,4 (M+H).
Primer 398
[0893]
4-(6-(4-benzil-4-(morfolinometil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0894] U rastvor 4-(6-(4-benzil-4-formilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P77, 10,4 mg, 0,0223 mmol) u DCE (0,75 mL) dodat je morfolin (9,1 mg, 0,104 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim je tretirana natrijum triacetoksiborohidridom (34,0 mg, 0,160 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 96 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s)i prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao gradijent eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,6 mg, 0,00295 mmol, 13,2 % prinos). MS (apci) m/z = 537,3 (M+H).
Primer 399
[0895]
6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0896] Rastvor trifenilfosfana (31,7966 mg, 0,121 mmol) u 1:1 DCM:THF (0,6 mL) je ohlađen na 0°C i tretiran sa diizopropil azodikarboksilatom (0,023 mL, 0,121 mmol) i mešan na 15°C. Reakciona smeša je tretirana 6-hidroksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom (Intermedijer P78, 25.0 mg, 0,0606 mmol) u 1:1 DCM:THF (0,6 mL) i 1-(N-hidroksietil)-4-metil piperazinom (13,1 mg, 0,0909 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je na ovoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM:IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (31,5 mg, 0,0526 mmol, 86,8% prinos). MS (apci) m/z = 539,2 (M+H).
[0897] Jedinjenja u Tabeli VV su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 399, zamenom 1-(N-hidroksietil)-4-metil piperazina odgovarajućim alkoholom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela VV
Primer 405
[0898]
6-(2-(2-oksopirolidin-1-il)etoksi)-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0899] U rastvor 6-hidroksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P78, 0,010 g, 0,0242 mmol) u DMF (0,8 mL) je dodat 1-(2-hloretil)pirolidin-2-on (7,16 mg, 0,0485 mmol), kalijum karbonat (6,7 mg, 0,0485 mmol) i natrijum bromid (3,24 mg, 0,0315 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 72 h. Posle hlađenja do sobne temperature, sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom reverzne faze C-18 (0-70% ACN u vodi kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8 mg, 0,0153 mmol, 63% prinos). MS (apci) m/z = 524,2 (M+H).
[0900] Jedinjenja u Tabeli VV su pripremljena korišćenjem metode slične onoj opisanoj za sintezu Primera 405, zamenom 1-(2-hloretil)pirolidin-2-ona odgovarajućim alkil halogenidom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela VV
1
Primer 409
[0901]
(R)-6-(2-hidroksipropoksi)-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0902] U rastvor 6-hidroksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P781,023 mL, 0,0512 mmol) u DMF (1,0 mL) je dodat vodeni rastvor natrijum hidroksida (1M, 0,0563 mL, 0,0563 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 min, za koje vreme je dodat R-(+)-propilen oksid (35,8 µL, 0,512 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a zatim isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8,5 mg, 0,0181 mmol, 35,3% prinos). MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).
Primer 410
[0903]
2
(S)-6-(2-hidroksipropoksi)-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0904] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem metode sličnog onom opisanom za sintezu Primera 409, zamenom R-(+)-propilen oksida sa S-(-)-propilen oksidom. MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).
Primer 411
[0905]
4-(6-(4-hidroksi-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3- karbonitril
[0906] U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P7919,7 mg, 0,05362 mmol) u DMSO (1 mL) je dodat 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol hidrohlorid (39,3 mg, 0,1718 mmol) i cezijum karbonat (157,2 mg, 0,4826 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana uzastopno vodom i zasićenim NH4Cl(aq). Vodena frakcija je ekstrahovana sa DCM, a kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s). Smeša je prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% MeOH u DCM kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,9 mg, 0,02505 mmol, 46,72 % prinos). MS (apci) m/z = 540,2 (M+H).
[0907] Jedinjenja u Tabeli XX su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 411, zamenom 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol hidrohlorida odgovarajućim aminom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela XX
Primer 414
[0908]
6-(2-metoksietoksi)-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[0909] Korak 1: Priprema 6-hidroksi-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-
4
hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P660,250 g, 0,9834 mmol) u DMA (2,458 mL) je dodat 2-(azetidin-3-iloksi)piridin (0,452 g, 3,010 mmol) i TEA (0,9413 mL, 6,884 mmol). Reakciona smeša je mešana na 95°C tokom 72 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq)zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-9% MeOH u DCM kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,1557 g, 0,4050 mmol, 41,19% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 385,1 (M+H).
[0910] Korak 2: Priprema 6-(2-metoksietoksi)-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1.5-a]piridin-3-karbonitrila. U rastvor 6-hidroksi-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (0,030 g, 0,07804 mmol) u DMF (0,3902 mL) dodat je kalijum karbonat (0,02157 g, 0,1561 mmol) i 2-bromoetil metil etar (0,01467 mL, 0,1561 mmol). Reakciona smeša je mešana na 95°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq), zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su isprane zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovane sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq), zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0108 g, 0,02441 mmol, 31,27% prinos). MS (apci) m/z = 443,2 (M+H).
Primer 415
[0911]
(R)-6-(2-hidroksipropoksi)-4-(6-(4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5- a]piridin-3-karbonitril
[0912] U rastvor (R)-4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksipropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P80, 0,020 g, 0,0640 mmol) u DMA (0,640 mL) dodat je 3-metil-6-(piperidin-4-iloksi)piridazin (0,039 g, 0,202 mmol) i TEA (0,0613 ml, 0,448 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 48 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq), zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su isprane zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovane sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su uzastopno isprani vodom i zasićenim NaCl(aq)zatim osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11 mg, 0,022 mmol, 34 % prinos). MS (apci) m/z = 486,2 (M+H).
Primer 416
[0913]
(R)-6-(2-hidroksipropoksi)-4-(6-(3-(piridin-2-iloksi)azetidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3 -karbonitril
[0914] Jedinjenje je pripremljeno korišćenjem metode slične onoj opisanoj za sintezu Primera 415, zamenom 3-metil-6-(piperidin-4-iloksi)piridazina sa 2-(azetidin-3-iloksi)piridinom. MS (apci) m/z = 443,1 (M+H).
Primer 417
[0915]
3-hloro-6-metoksi-4-(6-(4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin
[0916] Korak 1: Priprema 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina. U smešu 4-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (10,0 g, 44,04 mmol) u 1,4-dioksanu (88,08 mL) dodat je 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (11,79 g, 52,85 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (1,018 g, 0,8808 mmol) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2M, 46,24 mL, 92,49 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je izlivena u vodu i mešana 4 h. Dobijeni precipitat je izolovan vakuum filtracijom, a zatim uzet u MTBE i mešan dodatnih 30 min. Precipitat je izolovan vakuum filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,616 g, 18,98 mmol, 43,09% prinosa) u dovoljnom prinosu za korak 2. MS (apci) m/z = 244,0 (M+H).
[0917] Korak 2: Priprema 3-hloro-4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina. Rastvor 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (1,00 g, 4,11 mmol) u DCM (27,4 mL) tretiran je sa NCS (0,549 g, 4,11 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Smeša je sipana u 2M NaOH i ekstrahovana sa 10% IPA u DCM u PS friti. Organski ekstrakt je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je razmućen sa Et2O. Čvrsta supstanca je izolovana na staklenoj friti da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,98 g, 3,53 mmol, 85,8% prinos) u dovoljnoj čistoći za korak 3. MS (apci) m/z = 278,0 (M+H).
[0918] Korak 3: Priprema 3-hloro-6-metoksi-4-(6-(4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridina. U rastvor 3-hloro-4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (30 mg, 0,11 mmol) u DMSO (0,2 mL) dodat je 3-metil- 6-(piperidin-4-iloksi)piridazin (31 mg, 0,16 mmol) i cezijum karbonat (176 mg, 0,54 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je sipana u 2M NaOH i ekstrahovana sa 10% IPA u DCM u PS friti. Organski ekstrakt je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0100% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg, 0,031 mmol, 29% prinos). MS (apci) m/z = 451,2 (M+H).
Primer 418
[0919]
3-hloro-N-(1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0920] U smešu 1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amina (0,057 g, 0,169 mmol) u DMSO (1,13 mL) je dodata 3-hlorokolinska kiselina (0,0399 g, 0,253 mmol), DIEA (0,132 mL, 0,760 mmol) i HATU (0,128 g, 0,338 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa DCM i isprane sukcesivno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0501 g, 0,105 mmol, 62,2% prinos). MS (apci) m/z = 477,2 (M+H).
[0921] Jedinjenja u Tabeli YY su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 418, zamenom 3-hlorokolinsku kiselinu odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela YY
Primer 421
[0922]
3-hloro-N-(1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0923] U smešu 1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amina (0,057 g, 0,153 mmol) u DMSO (1,02 mL) dodata je 3-hloropkolinska kiselina (0,0362 g, 0,230 mmol), DIEA (0,120 mL, 0,690 mmol) i HATU (0,117 g, 0,307 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-99% EtOAc u heksanu kao eluent sa gradijentom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0415 g, 0,0811 mmol, 52,9% prinos). MS (apci) m/z = 511,2 (M<+>).
[0924] Jedinjenja u Tabeli ZZ su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 421, zamenom 3-hloropikolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela ZZ
Primer 424
[0925]
3-hloro-N-(1-(5-(3-ciklopropil-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0926] Korak 1: Priprema terc-butil (1-(5-(3-bromo-6-metoksipirazolo[1.5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. U rastvor terc-butil (1-(5-(6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer P81, 0.806 g, 1,84 mmol) u DCM (12,3 mL) je dodat NBS (0,328 g, 1,84 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,839 g, 1,62 mmol, 88% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 518,1 (M+H+l).
[0927] Korak 2: Priprema terc-butil (1-(5-(3-ciklopropil-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata. U smešu terc-butil (1-(5-(3-bromo-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata (0,250 g, 0,484 mmol) u dvofaznoj smeši toluena (2,42 mL) i vode (0,4 mL) dodata je ciklopropilborna kiselina (0,0832 g, 0,968 mmol), kalijum fosfat (0,308 g, 1,45 mmol), paladijum (II) acetat (0,0109 g, 0,0484 mmol) i triciklopentilfosfin (0,0272 g, 0,0968 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (10-90% EtOAc u heksanu kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,061 g, 0,128 mmol, 26% prinos) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 478,3 (M+H).
[0928] Korak 3: Priprema 1-(5-(3-ciklopropil-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amina
[0929] Rastvor terc-butil (1-(5-(3-ciklopropil-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)karbamata ( 0,060 g, 0,13 mmol) u DCM (12 mL) je tretiran sa TFA (12 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,047 g, 0,12 mmol, 99% prinos) dovoljne čistoće za korak 4. MS (apci) m/z = 378,2 (M+H).
[0930] Korak 4: Priprema 3-hloro-N-(1-(5-(3-ciklopropil-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida. U smešu 1-(5-(3-ciklopropil-6-
1
metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amina (0,047 g, 0,125 mmol ) u DMSO (0,830 mL) je dodata 3-hloropkolinska kiselina (0,0294 g, 0,187 mmol), DIEA (0,0976 mL, 0,560 mmol) i HATU (0,0947 g, 0,249 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa DCM i isprane sukcesivno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0441 g, 0,0853 mmol, 68,5% prinos). MS (apci) m/z = 517,2 (M<+>).
Primer 425
[0931]
(3S,4S)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((6-metoksipiridin-3-il) oksi)pirolidin-3-amin
[0932] Korak 1: Priprema 4-bromo-3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridina. U rastvor 4-bromo-3-hloropirazolo[1,5-a]piridin-6-ola (Intermedijer P842,5 g, 10,1 mmol) u DMA (150 mL) dodat je kalijum karbonat (14,0 g, 101 mmol) i jodoetan (2,45 mL, 30,3 mmol). Reakciona smeša je mešana na 65°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,00 g, 7,26 mmol, 72% prinos) dovoljno čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 277,0 (M+H).
[0933] Korak 2: Priprema 3-hloro-6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolor[1.5-a]piridina. U rastvor 4-bromo-3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridina (1,0 g, 3,6 mmol) u 1,4-dioksanu (18
2
mL) dodat je 2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (1,1 g, 4,7 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (0,21 g, 0,18 mmol) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2M, 9.1 mL, 18 mmol). Reakciona smeša je prskana sa N2i mešana na 90°C tokom 4 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i obrađena ultrazvukom 5 min. Dobijeni precipitat je izolovan vakuum filtracijom i ispran na filteru sa Et2O da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,4 g, 1,4 mmol, 38% prinos) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 292,1 (M+H).
[0934] Korak 3: Priprema terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata. U rastvor 3-hloro-6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridina (0,100 g, 0,343 mmol) u DMSO (1 mL) je dodat DIEA (0,296). mL, 1,71 mmol) i terc-butil ((3S,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamat (0,139 g, 0,686 mmol). Reakciona smeša je mešana na 95°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ohlađena na 0°C. Dobijeni precipitat je izolovan vakuum filtracijom, a zatim rastvoren u 1:1 MTBE/pentan. Suspenzija je obrađena ultrazvukom 20 minuta, a čvrsta supstanca je izolovana vakuumskom filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,148 g, 0,312 mmol, 91,1% prinos) dovoljne čistoće za korak 4. MS (apci) m/z = 474,15 (M H).
[0935] Korak 4: Priprema (3S,4S)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((6-metoksipiridin-3-il)oksi)pirolidin-3-amina. U rastvor terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipirolidin-3-il)karbamata (0,040 g, 0,0844 mmol) u 1:1 THF/DCM (0,8 mL) je dodat 6-metoksipiridin-3-ol (0,0211 g, 0,169 mmol) i trifenilfosfan (0,0416 g, mmol). Reakciona smeša je prskana argonom i mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl(aq). i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni korišćenjem PS frite, koncentrovani u vakuumu, i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su koncentrovane u vakuumu, a ostatak je stavljen u 6M HCl u IPA i mešan 2 h. Smeša je koncentrovana u vakuumu, potopljen u vodu i 2M NaOH, zatim ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni korišćenjem PS frite, koncentrovani u vakuumu, i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-35% [9:1 MeOH/NH4OH] u EtOAc kao gradijentni eluent da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,004 g, 0,00832 mmol, 9,85% prinos). MS (apci) m/z = 481,2 (M+H).
Primer 426
4-((1-(5-(3-hloro-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4-il) oksi)benzonitril
[0937] U rastvor 1-((3-hloro-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)-2-metilpropan-2-ola (Intermedijer P850,026 g, 0,077 mmol) u DMA (0,5 mL) je dodat TEA (0,024 g, 0,23 mmol) i 4-(piperidin-4-iloksi)benzonitril (0,023 g, 0,12 mmol). Reakciona smeša je mešana na 105°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ugašena vodom i ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), koncentrovani u vakuumu, i prečišćeni hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,012 g, 0,023 mmol, 30% prinos). MS (apci) m/z = 518,2 (M+H).
[0938] Jedinjenja u Tabeli AAA su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 426, zamenom 4-(piperidin-4-iloksi)benzonitrila sa odgovarajućim amin reagensom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
4
Tabela AAA
Primer 432
[0939]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(3-(pirolidin-1-il)propoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorokolinamid
[0940] U rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-5-fluorokolinamida (Intermedijer P86, 0,035 g, 0,0692 mmol) u DMA (0,692 mL) dodat je kalijum karbonat (0,0478 g, 0,346 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom, zatim je dodat 1-(3-hloropropil)-pirolidin (0,0204 g, 0,138 mmol) i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 5 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je direktno prečišćena preparativnom HPLC (5-75% ACN u vodi [+ 2% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane sukcesivno sa zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,0186 g, 0,0301 mmol, 43,6% prinos). MS (apci) m/z = 617,3 (M+H).
[0941] Jedinjenja u tabeli BBB su pripremljena korišćenjem postupka sličnog onome opisanom za sintezu Primera 432, zamenom 1-(3-hloropropil)-pirolidina odgovarajućim alkil halogenidom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela BBB
Primer 437
[0942]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamid
[0943] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (Intermedijer P8730,3 mg, 0,0670 mmol) u DMA (0,7 mL) je dodat 4-(2-hloretil)morfolin hidrohlorid (24,9 mg, 0,134 mmol) i cezijum karbonat (109 mg, 0,335 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq), osušena preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (22,3 mg, 0,0394 mmol, 58,9% prinos). MS (apci) m/z = 566,3 (M+H).
[0944] Jedinjenja u Tabeli CCC su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primera 437, zamenom 4-(2-hloretil)morfolin hidrohlorida odgovarajućim alkil halogenidom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela CCC
Primer 441
[0945]
N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il )-4-metilpiperidin-4-il)benzamid
[0946] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((4-(6-(4-benzamido-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin- 6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (Intermedijer P87, 44,8 mg, 0,0990 mmol) u DMA (1 mL) je dodat terc-butil 3-(bromometil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilat (53,1 mg, 0,198 mmol) i cezijum karbonat (161 mg, 0,495 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno sa vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 63 mg, 0,099 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 640,25 (M+H).
[0947] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida. Rastvor terc-butil 3-(((4-(6-(4-benzamido-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)3-fluoroazetidin-1-karboksilata u DCM (0,5 mL) je tretiran sa TFA (0,5 mL, 6,5 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim koncentrovana u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29,5 mg, 0,055 mmol, 55,2% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 540,3 (M+H).
[0948] Korak 3: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il) piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il))-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (29,5 mg, 0,055 mmol) u 1:1 DCM:MeOH (1,1 mL) dodat je formaldehid (21 µL, 0,273 mmol), a zatim NaBH(AcO)3(58 mg, 0,273 mmol). Dobijena reakciona smeša je ostavljena da se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24 mg, 78% prinos). MS (apci) m/z = 554,3 (M+H).
Primer 442
[0949]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)- 4-metilpiperidin-4-il)benzamid
[0950] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il )-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (Intermedijer P8832,7 mg, 0,0579 mmol) u 1:1 DCM/MeOH (1 mL) dodat je formaldehid (0,0218 mL, 0,290 mmol) i natrijum
4
triacetoksiborohidrid (61,4 mg, 0,290 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21,4 mg, 0,0370 mmol, 63,9% prinos). MS (apci) m/z = 579,4 (M+H).
Primer 443
[0951]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(4-etilpiperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamid
[0952] Jedinjenje je pripremljeno korišćenjem postupka sličnog onome opisanom za sintezu Primera 442, zamenom formaldehida acetaldehidom. MS (apci) m/z = 593,4 (M+H).
Primer 444
[0953]
N-(1-(5-(6-(2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4 -metilpiperidin-4-il)benzamid
[0954] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-
4 1
il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (Intermedijer P88, 46,4 mg, 0,0822 mmol) u DCM (1 mL) je dodat TEA (0,0557 mL, 0,411 mmol), zatim acetil hlorid (0,164 mL, 0,164 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (1-30% [MeOH 2% NH4OH] u DCM kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24,7 mg, 0,0407 mmol, 49,5% prinos). MS (apci) m/z = 607,4 (M+H).
Primer 445
[0955]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(dimetilamino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)benzamid
[0956] Korak 1: Priprema terc-butil (2-((4-(6-(4-benzamido-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)karbamata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida (Intermedijer P8764,2 mg, 0,142 mmol) u DMA (1,5 mL) je dodat 2-(Boc-amino)etil bromid (63,6 mg, 0,284 mmol) i cezijum karbonat (231 mg, 0,709 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq), osušena preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 84,6 mg, 0,142 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 596,3 (M+H).
[0957] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1.5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida. Rastvor terc-butil (2-((4-(6-(4-benzamido-4-
4 2
metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)karbamata (84,6 mg, 0,142 mmol) u DCM (0,75 mL) je tretiran sa TFA (0,75 mL, 9,8 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (17,9 mg, 0,0361 mmol, 25,5% prinos u dva koraka). MS (apci) m/z = 496,2 (M+H).
[0958] Korak 3: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il) piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)benzamida. U rastvor N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)benzamida (18 mg, 0,036 mmol) u 1:1 DCM:MeOH (0,5 mL) dodat je formaldehid (27 µL, 0,36 mmol), a zatim NaBH(AcO)3(77 mg, 0,36 mmol) Dobijena reakciona smeša je ostavljena da se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)i ekstrahovana sa 4:1 DCM:IPA. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9 mg, 49% prinos). MS (apci) m/z = 524,3 (M+H).
Primer 447
[0959]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0960] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P8925,6 mg, 0,0680 mmol) u DCM (0,136 mL) dodata je 2-pikolinska kiselina (10,9 mg, 0,0884 mmol), HATU (31,0 mg, 0,0816 mmol) i DIEA
4
(0,0474 mL, 0.2). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 72 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je isprana vodom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (50-100% EtOAc u heksanu, zatim 0-10% MeOH u EtOAc kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23 mg, 0,0473 mmol, 70% prinos). MS (apci) m/z = 482,2 (M+H).
Primer 448
[0961]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)nikotinamid
[0962] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem postupka sličnog onome koji je opisan za sintezu Primera 447, zamenom 2-pikolinske kiseline nikotinskom kiselinom. MS (apci) m/z = 482,2 (M+H).
Primer 453
[0963]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0964] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-
4 4
metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P9040 mg, 0,0882 mmol) u DMA (0,882 mL) je dodat 4-(2-hloretil)morfolin hidrohlorid (32,8 mg, 0,176 mmol) i cezijum karbonat (144 mg, 0,441 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran, koncentrovan u vakuumu, i prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15,0 mg, 0,0265 mmol, 30,0% prinos). MS (apci) m/z = 567,3 (M+H).
[0965] Jedinjenja u Tabeli EEE su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za sintezu Primer 453, zamenom 4-(2-hloretil)morfolin hidrohlorida odgovarajućim alkil halogenidom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Tabela EEE
4
Pr. Struktura Hemijsko ime MS
Primer 459
[0966]
4
N-(1-(5-(6-(azetidin-3-ilmetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il) pikolinamid
[0967] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5- a]piridin-6-il)oksi)metil)azetidin-1-karboksilata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P90, 40 mg, 0,088 mmol) u DMA (0,882 mL) je dodat terc-butil estar 3-bromometil-azetidin-1-karboksilne kiseline (22 mg, 0,088 mmol) i cezijum karbonat (144 mg, 0,44 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran, koncentrovan u vakuumu, i prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15,0 mg, 0,0265 mmol, 30,0% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 623,3 (M+H).
[0968] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(6-(azetidin-3-ilmetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidina-4-il)pikolinamida. Rastvor terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)azetidin-1-karboksilata (55 mg, 0,088 mmol) u 1:1 (tež./tež.) smeši DCM:TFA (883 µL) je mešan na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46 mg, 0,088 mmol, 100% prinos). MS (apci) m/z = 523,3 (M+H).
Primer 460
4
N-(1-(5-(3-cijano-6-((1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0970] U rastvor N-(1-(5-(6-(azetidin-3-ilmetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Primer 459, 46 mg, 0,088 mmol) u DCM (1,760 mL) dodat je formaldehid (0,066 mL, 0,88 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (93 mg, 0,44 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim koncentrovana u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9,4 mg, 0,017 mmol, 20% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 537,3 (M+H).
Primer 461
[0971]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(dimetilamino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamid
[0972] Korak 1: Priprema terc-butil (2-((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-
4
il)piridin-3-il)pirazolo[1,5- a]piridin-6-il)oksi)etil)karbamata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P90, 40 mg, 0,088 mmol) u DMA (0,882 mL) je dodat 2-(Boc-amino)etil bromid (20 mg, 0,088 mmol) i cezijum karbonat (144 mg, 0,44 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 3 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran, koncentrovan u vakuumu, i prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni teoretski prinos, 53 mg, 0,088 mmol) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 597,3 (M+H).
[0973] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il) pikolinamida. Rastvor terc-butil (2-((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)karbamata (53 mg, 0,089 mmol) u 1:1 (tež./tež.) smeši DCM:TFA (0,89 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (34 mg, 0,068 mmol, 77% prinos u dva koraka) dovoljne čistoće za korak 3. MS (apci) m/z = 497,2 (M+H).
[0974] Korak 3: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(dimetilamino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4 -metilpiperidin-4-il)pikolinamida. U rastvor N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (34 mg, 0,0685 mmol) u DCM (1,369 mL) je dodat formaldehid (0,051 mL, 0,685 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (72,6 mg, 0,342 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim koncentrovana u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeni film je triturisan sa DCM/heksanom i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10,5 mg, 0,0198 mmol, 29% prinos). MS (apci) m/z = 525,3 (M+H).
4
Primer 462
[0975]
N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0976] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5- a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata. U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P90, 40 mg, 0,088 mmol) u DMA (0,882 mL) je dodat 1-boc-3-bromometil-azetidin (24 mg, 0,088 mmol) i cezijum karbonat (144 mg, 0,44 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno vodom i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran, koncentrovan u vakuumu, i prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (54 mg, 0,084 mmol, 96% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 641,3 (M+H).
[0977] Korak 2: Priprema N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2- il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida. Rastvor terc-butil 3-(((3-cijano-4-(6-(4-metil-4-(pikolinamido)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (54 mg, 0,084 mmol) u 1:1 (tež./tež.) smeši DCM:TFA (0,84 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 1 h . Reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak
41
je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5,0 mg, 11% prinos). MS (apci) m/z = 541,2 (M+H).
Primer 463
[0978]
N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il )-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0979] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il))-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Primer 46235 mg, 0,065 mmol) u DCM (1,295 mL) je dodat formaldehid (0,048 mL, 0,65 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (69 mg, 0,32 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (19 mg, 0,034 mmol, 53% prinos). MS (apci) m/z = 555,3 (M+H).
Primer 464
[0980]
N-(1-(5-(6-(2-(4-acetilpiperazin-1-il)etoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4 -metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0981] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P91, 35 mg, 0,0619 mmol) u DCM (0,619 mL) je dodat TEA (0,00862 mL, 0,0619 mmol) i acetil hlorid (0,124 mL, 0,124 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa 4:1 DCM/IPA i isprana uzastopno vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27,7 mg, 0,0456 mmol, 73,7% prinos). MS (apci) m/z = 608,3 (M+H).
Primer 465
[0982]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)- 4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0983] U rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P91, 40 mg, 0,0707 mmol) u DCM (1,414 mL) dodat je formaldehid (0,0526 mL, 0,707 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (74,9 mg, 0,354 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 0,1% TFA] kao gradijent eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq)i zasićenim NaCl(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-10% MeOH u DCM kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15,4 mg, 37,6% prinos). MS (apci) m/z = 580,3 (M+H).
Primer 466 reference
[0984]
1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-N-izopropil-4-metilpiperidin-4-karboksamid
[0985] U rastvor 1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-karboksilne kiseline (Intermedijer P92, 38.2 mg, 0,0942 mmol) u DCM (0,942 mL) dodat je HATU (43,0 mg, 0,113 mmol), DIEA (0,033 mL, 0,188 mmol) i propan-2-amin (0,009 mL, 0,104 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a dobijeni sirovi ostatak je direktno prečišćen C-18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi [+ 2% TFA] kao gradijentni eluent). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su razblažene sa 4:1 DCM/IPA i isprane zasićenim NaHCO3(aq). Organski ekstrakt je osušen preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (32,4 mg, 0,0726 mmol, 77% prinos). MS (apci) m/z = 447,2 (M+H).
[0986] Jedinjenja u Tabeli FFF su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je
41
opisan za sintezu Primera 466, zamenom propan-2-amina odgovarajućim partnerom za kuplovanje amina. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Jedinjenja iz naslova su čisto izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta (i ako je potrebno konvertovana u slobodnu bazu).
Primer 485
[0987]
N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2 -metilbenzamid
[0988] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P67; 503 mg, 1,19 mmol), 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline (552 mg, 3,58 mmol) i HATU (1,36 g, 3,58 mmol) u DMSO (5 mL) je dodat DIEA (1,7 mL, 9,55 mmol). Reakcija je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa THF (4 mL) i tretirana sa NaOH (5,97 mL, 11,9 mmol) i mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran vodom. pH je podešen na pH 5 sa AcOH i zatim ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen korišćenjem silika hromatografije (50-100% heksana u EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (534 mg, 92% prinos) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 485,2 (M+H).
Primer 487
[0989]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[0990] U rastvor 4-(6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P67; 256 mg, 0,608 mmol), 3-hlorpikolinske kiseline (287 mg, 1,82 mmol) i HATU (294 mg, 1,82 mmol) u DMSO (3 mL) je dodat DIEA (0,74 mL, 4,25 mmol). Reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (10 mL) i isprana vodom (10 mL) i 4:1 AcOH:vodom (10 mL), a zatim ekstrahovana sa EtOAc. Organski ekstrakti su isprani sa 4:1 AcOH:vodom i zatim fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je razblažen sa THF (4 mL) i 2M NaOH (6 mL). Rastvor je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je resuspendovan u DCM (2 mL) i prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je resuspendovana u DCM i propuštena kroz Pl-HCO3smole za eluiranje proizvoda na slobodnoj bazi. Organski eluenti su koncentrovani u vakuumu i rekristalisani korišćenjem DCM/heksana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (226 mg, 76% prinos). MS (apci) m/z = 488,2 (M+H).
Primer 488
41
4-(6-(4-((3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitril
[0992] Korak 1: Priprema terc-butil 4-((3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata. U rastvor terc-butil 4-hidroksi-4-metilpiperidin-1-karboksilata (175 mg, 0,869 mmol) u DMF (2,2 mL) dodat je natrijum hidrid (60% tež./tež., 41,7 mg, 1,04 mmol). Reakcija je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Dodat je 2,3-difluoropiridin (100 mg, 0,869 mmol) i reakcija je mešana preko noći na 60°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa DCM i isprana zasićenim NaHCO3(aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 258 mg) dovoljne čistoće za korak 2. MS (apci) m/z = 197,2 (M-Boc).
[0993] Korak 2: Priprema 3-fluoro-2-(piperidin-4-iloksi)piridin hidrohlorida. Rastvor tercbutil 4-((3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-karboksilata (pretpostavljeno 258 mg, 0,869 mmol) u 4,3 mL DCM je tretiran sa TFA (4,3 mL, 55,8 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je resuspendovan u MeOH i tretiran sa 4 N HCl u dioksanima (4 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 15 min. Reakcija je koncentrovana u vakuumu da se dobije jedinjenje iz naslova kao dihidrohloridna so, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljih prečišćavanja.. MS (apci) m/z = 197,1 (M+H).
[0994] Korak 3: Priprema 4-(6-(4-((3-fluoropiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazola [1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U smešu 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42; 40 mg, 0,123 mmol) i 3-fluoro-2-(piperidin-4-iloksi)piridin dihidrohlorid (66 mg, 0,245 mmol) u DMA (0,817 mL) je dodat TEA (103 µL, 0,735 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 95°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom
41
reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je tretirana zasićenim Na2CO3(aq)i ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, zatim osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (17 mg, 28% prinos). MS (apci) m/z = 503,2 (M+H).
Primer 498
[0995]
3-hloro-6-metoksi-4-(6-(4-(piridin-2-iloksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin
[0996] U posudi pod pritiskom, smeša 3-hloro-4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridina (Primer 417, korak 2; 30 mg, 0,11 mmol), 2-(piperidin-4-iloksi)piridina (29 mg, 0,16 mmol) i Cs2CO3(s)(176 mg, 0,54 mmol) u DMSO (200 uL) je mešana preko noći na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u 2N NaOH(aq)(2 mL) i ekstrahovana sa 10% iPrOH u DCM (2 × 3 mL) u PS Frit. Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-100% EtOAc/heksane kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (22 mg, 47% prinos). MS (apci) m/z = 436,1 (M+H).
Primer 512 reference
[0997]
terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-
41
hidroksipiperidin-4-il )karbamat
[0998] Rastvor 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 177.8 mg, 0,6299 mmol) i terc-butil ((3R,4R)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (199 mg, 0,9201 mmol) u DMSO (1,5 mL) tretirani su sa DIEA (55,01 µL, 3,149 µL), i mešan 2 dana na 90°C. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena vodom, a rezultujuća suspenzija je filtrirana. Čvrste materije su isprane vodom (3x), zatim osušene u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (255,2 mg, 81% prinos). MS (apci) m/z = 479,2 (M+H).
[0999] Jedinjenja u tabeli III su pripremljeni korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za pripremu, izolovanje i prečišćavanje terc-butil ((3R,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (Primer 512), zamenom terc-butil ((3R,4R)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata odgovarajućim komercijalnim piperidinom. Reakcije su sprovedene na 90-95°C i praćene do kraja pomoću LCMS. I trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim.
Tabela III
41
Pr. Struktura Hemijsko ime MS
Primer 520 reference
[1000]
N-((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il) -3-metilbutanamid
[1001] Korak 1: Priprema 4-(6-((3R,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida. Rastvor terc-butil ((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (Primer 514; 293.5 mg, 0,6133 mmol) u dioksanu (2,0 mL) je tretiran sa 12 M HCl(aq)(100.7 µL, 1,227 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (276 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 379,2 (M+H).
[1002] Korak 2: Priprema N-((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidina-4-il)-3-metilbutanamida. Rastvor 4-(6-((3R,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (112 mg, 0,2481 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa DIEA (433,4 µL, 2,481 mmol), a zatim mešan 5 min na 0°C. Hladni rastvor je tretiran u kapima sa izovaleril hloridom
41
(60,51 µL, 0,4963 mmol). Kupatilo za hlađenje je uklonjeno, a dobijena smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 20-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (115,7 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 463,2 (M+H).
Primer 521 reference
[1003]
N-((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il) -3-metilbutanamid
[1004] Korak 1: Priprema 4-(6-((3S,4R)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida. Rastvor terc-butil ((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamat (Primer 515; 341.5 mg, 0,7136 mmol) u dioksanu (2,0 mL) je tretiran sa 12 M HCl(aq)(117.2 µL, 1,427 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (322 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 379,2 (M+H).
[1005] Korak 2: Priprema N-((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidina -4-il)-3-metilbutanamida. Rastvor 4-(6-((3S,4R)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (160,4 mg, 0,3554 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa DIEA (620,7 µL, 3,554 mmol), a zatim mešan 5 minuta na 0°C. Hladni rastvor je tretiran u kapima sa izovaleril hloridom (86.65 µL, 0.7108 mmol). Kupatilo za hlađenje je uklonjeno, a dobijena smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 30-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (63,4 mg, 39% prinos). MS (apci) m/z = 463,2 (M+H).
42
Primer 522 reference
[1006]
N-((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il) -1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksamid
[1007] Korak 1: Priprema 4-(6-((3S,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3- karbonitril dihidrohlorida. Rastvor terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (Primer 513; 845.1 mg, 1,766 mmol) u dioksanu (3,0 mL) je tretiran sa 12 M HCl(aq)(290.0 µL, 3,532 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (797 mg, 100% prinos). MS (apci) m/z = 379,3 (M+H).
[1008] Korak 2: Priprema N-((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)-1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksamida. Rastvor 4-(6-((3S,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (61,6 mg, 0,136 mmol) i 1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksilne kiseline (45,9 mg, 0,273 mmol) u DCM (1 mL) tretirani su uzastopno sa DIEA (119 µL, 0,682 mmol) i HATU (104 mg, 0,273 mmol), zatim mešano 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 20-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (45,5 mg, 63% prinos). MS (apci) m/z = 529,25 (M+H).
[1009] Jedinjenja u tabeli JJJ su pripremljeni korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan u koraku 2 u sintezi N-((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il) )piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)-1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksamida (Primer 522), zamenom 1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksilne kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Naslovna jedinjenja su izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta. Gde je navedena (<∗>) vodena obrada, koja se sastoji od razblaženja reakcione smeše sa DCM i ispiranja vodom prethodila je hromatografskom prečišćavanju.
Tabela JJJ
Primer 528
[1010]
3-hloro-N-((3R,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4 -il)pikolinamid
[1011] Rastvor 4-(6-((3R,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Primer 520, Korak 1; 164 mg, 0,3634 mmol) u DCM (2 mL) tretiran je uzastopno sa DIEA (634,6 µL, 3,634 mmol), 3-hloropikolinskom kiselinom (229,0 mg, 1,453 mmol) i HATU (276,3 mg67 mmol). Dobijena smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi i isprana vodom. Organski ekstrakti su prečišćeni direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 30-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (241,1 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 518,1 (M+H).
Primer 529
[1012]
3-hloro-N-((3S,4R)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4 -il)pikolinamid
[1013] Rastvor 4-(6-((3S,4R)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Primer 521, Korak 1; 161,6 mg, 0,3580 mmol) u DCM (2 mL) tretiran je uzastopno sa DIEA (625,3 µL, 3,580 mmol), 3-hlorpikolinskom kiselinom (225,6 mg, 1,432 mmol) i HATU (272,3 mg, 0,7161 mmol). Dobijena smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi i isprana vodom. Organski ekstrakti su prečišćeni direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 30-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (241,1 mg, kvantitativni prinos). MS (apci) m/z = 518,1 (M+H).
Primer 561 reference
[1014]
4-(6-(4-amino-4-((2-morfolinoetoksi)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2 ,2,2-trifluoroacetat)
[1015] Suspenzija 4-(6-(4-amino-4-(hidroksimetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P56, 40 mg, 0,10 mmol) u DMF (2 mL) je tretirana uzastopno sa NaH (60 tež.% u mineralnom ulju; 41 mg, 1,0 mmol) i 4-(2-
42
hloretil)morfolinom (76 mg, 0,51 mmol). Posle mešanja tokom 4 h na 50°C, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i ugašena vodom (2 mL). Ugašena smeša je koncentrovana do suva u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40 mg, 55% prinos). MS (apci) m/z = 506,3 (M+H).
Primer 570
[1016]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil)piperidin-4-il) -3-fluorokolinamid
[1017] Rastvor 4-(6-(4-amino-4-((dimetilamino)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P72, 50 mg, 0,119 mmol) u DMSO (795 µL) tretiran je uzastopno sa 3-fluorokolinskom kiselinom (0,0252 g, 0,179 mmol), DIEA (93,4 µL, 0,536 mmol) i HATU (90,6 mg, 0). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim podeljena između EtOAc i vode. Organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% vode: ACN sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je rastvorena u DCM, i ekstrahovana sekvencijalno sa zasićenim NaHCO3(aq)i fiziološkim rastvorom. Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40,1 mg, 62% prinos). MS (apci) m/z = 543,3 (M+H).
Primer 571
[1018]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil)piperidin-4-il) -3-(trifluorometil)pikolinamid
[1019] Naslovljeno jedinjenje (24 mg, 34% prinos) je pripremljeno, obrađeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisano za N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin) -4-il)piridin-2-il)-4-((dimetilamino)metil)piperidin-4-il)-3-fluorokolinamid (Primer 570), zamenom 3-fluorokolinske kiseline sa 3-(trifluorometil)pikolinskom kiselinom. MS (apci) m/z = 593,3 (M+H).
Primer 595 reference
[1020]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil) piperidin-4-il)izobutiramid
[1021] Rastvor 4-(6-(4-amino-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a] piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P98; 9.5 mg, 0,0169 mmol), izobuterne kiseline (1,86 mg, 0,0211 mmol) i DIEA (14,8 µL, 0,0846 mmol) u DMF (169 µL) tretirani su sa HATU (8,04 mg, 0,0211 mmol). Dobijena smeša je mešana 5 minuta na sobnoj temperaturi, a zatim prečišćena hromatografijom na silika gelu (koristeći 0-10% [MeOH sa 1% NH4OH] u EtOAc kao gradijentni eluent). Prečišćeni ostatak je triturisan sa MTBE, a zatim koncentrovan u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (9 mg, 95% prinos). MS (apci) m/z = 559,3 (M+H).
42
Primer 596
[1022]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil) piperidin-4-il)-2-(trifluorometil)benzamid
[1023] Naslovljeno jedinjenje se može pripremiti na sličan način kao što je opisano za N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-4-il)izobutiramid (Primer 595), zamenom izobuterne kiseline sa 2-(trifluorometil)benzojevom kiselinom.
Primer 597
[1024]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il) )metil)piperidin-4-il)-5-fluorokolinamid
[1025] Rastvor 4-(6-(4-amino-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a] piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P74, 23.5 mg, 0,0481 mmol) u DMSO (481 uL) tretiran je sa DIEA (42,0 µL, 0,240 mmol), 3-hloro-5-fluorokolinskom kiselinom (16,9 mg, 0,0962 mmol) i HATU (36,6 mg, 2 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim prečišćena direktno silika hromatografijom
42
(koristeći 0-10% [MeOH sa 1% NH4OH] u DCM kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (20,6 mg, 66% prinos). MS (apci) m/z = 646,3 (M+H).
Primer 598
[1026]
5-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il) )metil)piperidin-4-il)-2-metilnikotinamid
[1027] Jedinjenje iz naslova (17,2 mg, 56% prinos) je pripremljeno, obrađeno i prečišćeno korišćenjem slične procedure kao što je opisano za 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-4-il)-5-fluorokolinamid (Primer 597), zamenom 3-hloro-5-fluorokolinske kiseline (2 ekvivalenta) sa 5-hloro-2-metil-3-piridinkarboksilnom kiselinom (1 ekvivalent). MS (apci) m/z = 642,4 (M+H).
Primer 599
[1028]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((4-etilpiperazin-1-il) )metil)piperidin-4-il)pikolinamid
[1029] Rastvor 4-(6-(4-amino-4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-
42
etoksipirazolo[1,5-a] piridin-3 -karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P98; 31.9 mg, 0,0568 mmol) u DMF (169 uL) tretiran je sa DIEA (9,2 µL, 0,0568 mmol), 3-hloropikolinskom kiselinom (26,9 mg, 0,170 mmol) i HATU (43,2 mg, 0,114 mmol). Dobijena smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi, a zatim prečišćena direktno hromatografijom na silika gelu (koristeći 10-25% [MeOH sa 1% NH4OH] u DCM kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (23,4 mg, 66% prinos). MS (apci) m/z = 628,3 (M+H).
Primer 615 reference
[1030]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-((3-hidroksi-3-metilazetidin-1) il)metil)piperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[1031] Rastvor N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-formilpiperidin-4-il)-5- fluoro-2-metilbenzamida (Intermedijer P70, 44.3 mg, 0,0841 mmol), 3-hidroksi-3-metilazetidin hidrohlorida (31,2 mg, 0,252 mmol) i DIEA (44,1 µL, 0,252 mmol) u DCM (421 µL) su mešani 30 min na temperaturi okoline. Dobijena smeša je tretirana sa NaBH(AcO)3(26.7 mg, 0,126 mmol), i mešano preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je direktno prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-10% [9:1 DCM:MeOH sa 1% NH4OH] u DCM kao gradijentni eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (42,2 mg, 84% prinos). MS (apci) m/z = 598,3 (M+H).
Primer 616
[1032]
42
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-(((2,2-difluoroetil)(metil) amino)metil)piperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid
[1033] Naslovljeno jedinjenje (17,5 mg, 35% prinos) je pripremljeno, obrađeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisano za N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin)-4-il)piridin-2-il)-4-((3-hidroksi-3-metilazetidin-1-il)metil)piperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid (Primer 615), zamenom 3-hidroksi-3-metilazetidin hidrohlorida sa 2,2-difluoro-N-metiletanamin hidrohloridom. MS (apci) m/z = 606,3 (M+H).
Primer 625
[1034]
4-(6-(4-(dimetilamino)-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[1035] Rastvor N,N-dimetil-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-amin bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer R29; 71 mg, 0,16 mmol), 6-etoksi-4-(6-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P6, 30 mg, 0,11 mmol) i K2CO3(s)(73 mg, 0,53 mmol) u DMSO (1063 µL) je mešan 1 h na 100°C. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, smeša je filtrirana, a filtrat je prečišćen direktno C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% ACN/vode sa 0,1% TFA kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao TFA so. TFA so je suspendovana u MeOH (5 mL), eluirana kroz baznu smolu (Stratospheres Pl-HCO3) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg, 29% prinos). MS (apci) m/z =
42
482,3 (M+H).
Primer 674
[1036]
terc-butil (S)-2-(((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a) ]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat
[1037] Rastvor 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid (Intermedijer P75, 100 mg, 0,205 mmol) i Cs2CO3(s)(134 mg, 0,410 mmol) u DMF (1366 µL) tretiran je terc-butil (S)-2-(bromometil)morfolin-4-karboksilatom (57,4 mg 0,205 mmol) je mešan preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (4 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani uzastopno sa vodom (3 × 10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL). Organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je dva puta prečišćen hromatografijom na silika gelu (prvo korišćenjem 0-100% [10% MeOH sa 1% NH4OH u DCM]/DCM, i ponovo korišćenjem stepenastog gradijenta od 0-100% EtOAc/heksana praćenog 0-10% EtOAc/MeOH kao gradijentom eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 mg, 84% prinos). MS (apci) m/z = 687,2 (M+H).
Primer 675
[1038]
4
terc-butil (R)-2-(((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a) ]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat
[1039] Naslovljeno jedinjenje (110 mg, 78% prinos) je pripremljeno, obrađeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za terc-butil (S)-2-((4-(6-(4-(3-hloropkolinamido))-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat (Primer 674), zamenom terc-butil (S)-2-(bromometil)morfolin-4-karboksilata sa terc-butil (R)-2-(bromometil)morfolin-4-karboksilatom. MS (apci) m/z = 687,2 (M+H).
Primer 676
[1040]
(R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1041] Rastvor terc-butil (R)-2-((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Primer 675; 110 mg, 0,160 mmol) u DCM (10,2 µL) i TFA (12,2 µL, 0,160 mmol) mešani su 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je rastvoren u MeOH (3 mL). Deo metanolnog rastvora (2 mL) je koncentrovan u vakuumu da bi se dobila TFA so naslovnog jedinjenja, (R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin- 4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid bis(2,2,2-trifluoroacetat) (63 mg, 48% prinos; MS (apci) m/z = 587,2 (M+ H)). Preostali deo metanolnog rastvora (1 mL) je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% ACN u vodi sa 0,2% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže željeno jedinjenje su kombinovane, zatim uzastopno, koncentrovane u vakuumu, rastvorene u MeOH (5 mL) i eluirane kroz baznu smolu (Stratospheres MP-HCO3) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (9,3 mg, 10% prinos). MS (apci) m/z = 587,2 (M+H).
4 1
Primer 677
[1042]
(S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1043] Naslovljeno jedinjenje (8,2 mg, 7% prinos), zajedno sa TFA soli naslovnog jedinjenja (S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi))pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid bis(2,2,2-trifluoroacetatom) (78 mg, 51% prinos) pripremljeni, odvojeni i prečišćeni korišćenjem sličnog postupka kao što je opisano za (R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid (Primer 676), zamenom terc-butil (R)-2-((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Primer 675; sa terc-butil (S)-2-((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilatom (Primer 674). MS (apci) m/z = 587,2 (M+H).
Primer 678
[1044]
(S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((4-metilmorfolin-2-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin -2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1045] Rastvor (S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-
4 2
4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Primer 677, TFA so; 78 mg, 0,0957 mmol) u DCM (957 µL) tretiran je formaldehidom (35 tež.% u vodi sa 5-15% MeOH stabilizatorom; 38 µL, 0,478) i NaBH(AcO)3(203 mg, 0,957 mmol), i mešan 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je prečišćena direktno C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% ACN u vodi sa 0,2% TFA kao eluentom za gradijent). Frakcije koje sadrže željeno jedinjenje su kombinovane, zatim uzastopno, koncentrovane u vakuumu, rastvorene u MeOH (5 mL) i eluirane kroz baznu smolu (Stratospheres MP-HCO3) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (31 mg, 54% prinos). MS (apci) m/z = 601,2 (M+H).
Primer 679
[1046]
(R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((4-metilmorfolin-2-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin -2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1047] Naslovljeno jedinjenje (21 mg, 45% prinos) je pripremljeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisano za (S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((4-metilmorfolin-2-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid (Primer 678), zamenom (S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Primer 677) sa (R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid bis(2,2,2-trifluoroacetatom) (Primer 676). MS (apci) m/z = 601,2 (M+H).
Primer 680
[1048]
4
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1049] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata. Smeša 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-hidroksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida (Intermedijer P75, 200 mg, 0,410 mmol), terc-butil 3-(bromometil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (220 mg, 0,820 mmol) i Cs2CO3(s)(160 mg, 0,492 mmol) u DMA (4099 uL) je mešana preko noći na 60°C. Nakon toga, uveden je dodatni Cs2CO3(s)(160 mg, 0,492 mmol) i reakciona smeša je ponovo mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je podeljena između 4:1 DCM:IPA i vode kroz PS Frit ispiranje sa 4:1 DCM:IPA (3x). Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu, i prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći stepenasti gradijent od 0-100% EtOAc/heksana kao gradijent eluenta) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kontaminirano sa DMA (277 mg, kvantitativni prinos pretpostavljen). MS (apci) m/z = 675,3 (M+H).
[1050] Korak 2: Priprema 3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il) piridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida.
[1051] Rastvor terc-butil 3-(((4-(6-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)piridin-3-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a] piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (277 mg, 0,410 mmol) u DMA (~0,5 mL; rastvor koji se prenosi kroz kolonu) tretiran je sa TFA (1106 µL, 14,4 mmol) i mešan 60 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i fiziološkim rastvorom, zatim neutralizovana do pH 7 sa 2 N NaOH(aq). Dobijena dvofazna smeša je propuštena kroz PS Frit, a organski slojevi su koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen silika hromatografijom (koristeći 0-15% MeOH u EtOAc sa 0,2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (79 mg, 34% prinos, u 2 koraka). MS (apci) m/z = 575,2 (M+H).
Primer 681
4 4
2-hloro-N-(1-(6-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-3-il)-4-metilpiperidin-4- il)-6-metilbenzamid
[1053] Rastvor 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)piridin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P124; 4.8 mg, 0,010 mmol) u DCM (0,2 mL) je tretiran uzastopno 2-hloro-6-metilbenzojevom kiselinom (3,5 mg, 0,021 mmol), DIEA (27 µL, 0,16 mmol), HATU (7,9 mg, 0,021 mmol). Dobijena smeša je mešana 17 h na sobnoj temperaturi, pre nego što je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% ACN u vodi sa 0,2% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobila TFA so jedinjenja iz naslova. TFA so je rastvorena u MeOH (1 mL) i eluirana kroz baznu smolu (Stratospheres SPE MP-HCO3) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (3,5 mg, 55% prinos). MS (apci) m/z = 614,2 (M+H).
Primer 682
[1054]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-6-metilbenzamid
[1055] Rastvor 4-(2-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-5-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila bis( 2,2,2-trifluoroacetata)
4
(Intermedijer P131; 22.7 mg, 0,0329 mmol) u DCM (579 uL) je tretiran 2-hloro-6-metilbenzojevom kiselinom (25,1 mg, 0,147 mmol), DIEA (15 µL, 0,087 mmol) i HATU (13 mg, 0,035 mmol). Dobijena smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi, koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima, a zatim 0-10% MeOH u DCM). Uporne nečistoće zahtevale su drugu hromatografiju na silicijum dioksidu (0-10% MeOH u DCM sa 0-0,1% NH4OH) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2,8 mg, 9% prinos). MS (apci) m/z = 615,2 (M+H).
Primer 683
[1056]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)- 5-fluoro-2-metilbenzamid
[1057] Naslovljeno jedinjenje (12,34 mg, 42% prinos) je pripremljeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisano za N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid (Primer 682), zamenom 2-hloro-6-metilbenzojeve kiseline sa 5-fluoro-2-metilbenzojevom kiselinom. MS (apci) m/z = 599,3 (M+H).
Primer 684
[1058]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-5-fluorobenzamid
4
[1059] Naslovljeno jedinjenje (14 mg, 46% prinos) je pripremljeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a) ]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluoro-2-metilbenzamid (Primer 682), osim što je 2-hloro-6-metilbenzojeva kiselina zamenjena sa 2-hloro-5-fluorobenzojevom kiselinom i reakcija je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi pre obrade i prečišćavanja je bilo potrebno samo jedno silicijumsko hromatografsko odvajanje (koristeći 0-100% EtOAc u Hek zatim 0-10% MeOH u EtOAc kao eluent za gradijent). MS (apci) m/z = 619,2 (M+H).
Primer 685
[1060]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1061] U zatvorenoj posudi, rastvor 4-bromo-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P41, 18 mg, 0,058 mmol) u dioksanu (0,5 mL) je tretiran uzastopno vodom (0,15 mL), Cs2CO3(s)(57 mg, 0,17 mmol) i 2-hloro-6-metil-N-(4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il)benzamidom (Intermedijer P125; 38 mg, 0,058 mmol). Dobijena smeša je prskana sa N2(g)tokom 5 minuta zatim tretirana sa X-phos (11 mg, 0,023 mmol) i Pd2(dba)3(5.3 mg, 0,0058 mmol). Nakon prskanja sa N2(g)tokom 5 min, posuda je zapečaćena, a rezultujuća smeša je mešana 17 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, dobijena suspenzija je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta) da bi se dobila TFA so jedinjenja iz naslova. TFA so je rastvorena u MeOH (1 mL) i eluirana kroz baznu smolu (Stratospheres SPE MP-HCO3) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (3,6 mg, 11% prinos). MS (apci) m/z = 574,2 (M+H); 596,2
4
(M+Na).
Primer 686
[1062]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(dimetilamino)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin -4-il)-6-metilbenzamid
[1063] Rastvor N-(1-(5-(6-(2-aminoetoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il )-2-hloro-6-metilbenzamid bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P152;
80 mg, 0,103 mmol) u DCM (66 µL) tretiran je formaldehidom (37% aq, 19,3 µL, 0,517 mmol) i NaBH(AcO)3(110 mg, 0,517 mmol), zatim mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je podeljena između 4:1 DCM:iPrOH i zasićenog NaHCO3(aq)i eluiran kroz PS Frit. Organski filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (12,6 mg, 21% prinos). MS (apci) m/z = 573,3 (M+H).
Primer 687
[1064]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((1-metil-1H-imidazol-4-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin- 2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1065] U epruveti pod pritiskom, smeša 6-((1-metil-1H-imidazol-4-il)metoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2- il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P145;
54 mg, 0,142 mmol), 2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-
4
metilbenzamida (Intermedijer R48; 54.0 mg, 0,142 mmol), 2 M K3PO4(aq)(214 µL, 0,427 mmol), X-phos (13,6 mg, 0,0285 mmol) i Pd2(dba)3(6.52 mg, 0,00712 mmol) u dioksanu (1,0 mL) je prskana sa Ar(g)10 min, a zatim je posuda zatvorena. Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM, i ekstrahovana uzastopno sa vodom (3x) i fiziološkim rastvorom (1x). Organski ekstrakti su prečišćeni direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc/heksani), a zatim C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (12,5 mg, 14,7). % prinosa). MS (apci) m/z = 596,2 (M+H).
Primer 688
[1066]
(R)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1067] Rastvor terc-butil (R)-2-((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P148; 40.3 mg, 0,0575 mmol) u DCM (1 mL) i TFA (500 µL, 6,53 mmol) mešani su 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim koncentrovana i prečišćena silika hromatografijom (koristeći 0-100% [10% MeOH u DCM SA 1% NH4OH]/ DCM kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (21,3 mg, 10% prinos). MS (apci) m/z = 601,2 (M+H).
Primer 689
[1068]
4
(R)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((4-etilmorfolin-2-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin -2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1069] Rastvor (R)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2 -il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Primer 688; 12 mg, 0,02 mmol) u DCM (100 µL) tretiran je acetaldehidom (1 µL, 0,02 mmol) i NaBH(AcO)3(4 mg, 0,02 mmol), i mešan 20 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% vode-ACN sa 0,1% TFA kao gradijent eluenta) da bi se dobila TFA so naslovnog jedinjenja. TFA so je podeljena između 4:1 DCM:iPrOH i zasićenog NaHCO3(aq). Organski ekstrakti su odvojeni, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2,25 mg, 18% prinos). MS (apci) m/z = 629,2 (M+H).
Primer 690
[1070]
(S)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1071] Naslovljeno jedinjenje (26,2 mg, kvantitativni prinos) je pripremljeno i prečišćeno korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan za (R)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid (Primer 688), zamenom terc-butil (R)-2-((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (Intermedijer P148; 0.0575 mmol) sa terc-butil (S)-2-(((4-(5-(4-(2-hloro-6-
44
metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilatom (Intermedijer P150; 0.164 mmol) i korišćenjem 1 mL TFA. MS (apci) m/z = 601,2 (M+H).
Primer 691
[1072]
(S)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((4-etilmorfolin-2-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin -2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1073] Rastvor (S)-2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2 -il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Primer 690; 19.5 mg, 0,0324 mmol) u DCM (200 µL) tretiran je acetaldehidom (1,88 µL, 0,0649 mmol) i NaBH(AcO)3(13.8 mg, 0,0649 mmol), i mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je podeljena između 4:1 DCM:iPrOH i zasićenog NaHCO3(aq)i eluirana kroz PS Frit. Kombinovani organski filtrati su koncentrovani u vakuumu da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (9,4 mg, 46% prinos). MS (apci) m/z = 629,3 (M+H).
Primer 692
[1074]
N-(1-(5-(6-(2-(azetidin-1-il)etoksi)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin -4-il)-2-hloro-6-metilbenzamid
[1075] U epruveti pod pritiskom, smeša 6-(2-(azetidin-1-il)etoksi)-4-bromopirazolo[1,5a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P126; 26.4 mg, 0,0822 mmol), 2-hloro-6-metil-N-(4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il)benzamida (Intermedijer R49; 53 mg, 0,0822 mmol), Pd(PPh3)4(2.85 mg, 0,00247 mmol) i 2 M Na2CO3(aq)(247 µL, 0,493 mmol) u dioksanu (2 mL) je prskana sa Ar(g). Posuda je zatvorena i smeša je mešana 2 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa 4:1 DCM:iPrOH (5 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-10% MeOH u DCM kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (17 mg, 35% prinos). MS (apci), m/z = 585,3 (M+H).
Primer 693
[1076]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1077] U epruveti pod pritiskom, smeša 6-(2-(pirolidin-1-il)etoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P143; 68 mg, 0,178 mmol), 2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Intermedijer R48; 67.5 mg, 0,178 mmol), 2 M K3PO4(aq)(267 µL, 0,534 mmol), X-phos (17,0 mg, 0,0356 mmol) i Pd2(dba)3(8.14 mg, 0,00889 mmol) u dioksanu (889 µL) je prskana sa Ar(g)3 min, a zatim je posuda zapečaćena. Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa DCM (4x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (1x), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-20% MeOH u DCM kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2,04 mg, 2% prinos). MS (apci), m/z = 599,2 (M+H).
Primer 694
[1078]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)-6-metilbenzamid
[1079] Rastvor 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P129; 20 mg, 0,0290 mmol), HATU (13,2 mg, 0,0348 mmol) i 2-hloro-6-metilbenzojeve kiseline (5,43 mg, 0,0319 mmol) u DCM (579 µL) tretirani su sa DIEA (15,2 µL, 0,0319 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, pre uvođenja dodatnih HATU (3,4 mg, 0,015 mmol) i DIEA (5 uL, 0,029 mmol). Dobijena smeša je mešana 60 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je prečišćena direktno hromatografijom na silika gelu (koristeći 0-10% MeOH u EtOAc sa 0,2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2,87 mg, 16% prinos). MS (apci) m/z = 615,4 (M+H).
Primer 695
[1080]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4- il)pikolinamid
[1081] Rastvor 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P129; 20 mg, 0,0290 mmol), HATU (13 mg, 0,035 mmol) i 3-hloropikolinskr kiseline (5,0
44
mg, 0,032 mmol) u DCM (579 µL) tretirani su sa DIEA (15 µL, 0,087 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, prečišćena je direktno hromatografijom na silika gelu (koristeći 0-10% MeOH u EtOAc sa 0,2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (4 mg, 22% prinos). MS (apci) m/z = 602,3 (M+H).
Primer 696
[1082]
N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)- 5-fluoro-2-metilbenzamid
[1083] Rastvor 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P129; 20 mg, 0,0290 mmol), HATU (13 mg, 0,035 mmol) i 5-fluoro-2-metilbenzojeve kiseline (4,9 mg, 0,032 mmol) u DCM (579 µL) tretirani su sa DIEA (15 µL, 0,087 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, prečišćena je direktno hromatografijom na silika gelu (koristeći 0-10% MeOH u EtOAc sa 0,2% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (4 mg, 22% prinos). MS (apci) m/z = 599,3 (M+H).
Primer 697
[1084]
terc-butil 4-(2-((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5 -a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilat
[1085] U epruveti pod pritiskom, smeša terc-butil 4-(2-((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata (Intermedijer P141; 50 mg, 0,10 mmol), 2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Intermedijer R48; 38 mg, 0,10 mmol), 2 M K3PO4(aq)(151 µL, 0,30 mmol), X-phos (9,6 mg, 0,02 mmol) i Pd2(dba)3(4.6 mg, 0,0050 mmol) u dioksanu (503 µL) prskana je sa Ar(g)3 min, a zatim je posuda zapečaćena. Reakciona smeša je mešana 4 h na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa DCM (4x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (1x), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen dva puta hromatografijom na silicijum dioksidu (korišćenjem 0-100% EtOAc u heksanima, zatim sa 0-20% MeOH u DCM kao eluentom za gradijent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2,04 mg, 2% prinos). MS (apci), m/z = 714,3 (M+H).
Primer 698
[1086]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1087] Rastvor terc-butil 4-(2-((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)etil)piperazin-1-karboksilata (Primer 697; 26 mg, 0.036 mmol) u DCM (1 mL) i TFA (1 mL, 13 mmol) mešani su 45 min na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je tretirana zasićenim NaHCO3(aq)(20 mL), ekstrahovana sa 4:1 DCM:iPrOH (3x) i eluirana kroz PS Frit. Organske materije su koncentrisane u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (koristeći 0-100% DCM u heksanima, zatim 0-10% MeOH u DCM sa 0,1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (7 mg, 31% prinos). MS (apci) m/z = 614,2 (M+H).
44
Primer 699
[1088]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(4-etilpiperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2- il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1089] Rastvor 2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-(piperazin-1-il)etoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin- 2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Primer 698; 6 mg, 0,01 mmol) u DCM (488 µL) tretiran je acetaldehidom (2,74 µL, 0,0488 mmol) i NaBH(AcO)3(20.7 mg, 0.10 mmol), zatim mešan 2 dana na temperaturi okoline. Dobijena smeša je prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-20% MeOH u DCM sa 0,1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (1,33 mg, 20% prinos). MS (apci) m/z = 642,3 (M+H).
Primer 700
[1090]
terc-butil 3-(((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a ]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilat
[1091] U epruveti pod pritiskom, smeša terc-butil 3-(((3-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (Intermedijer P144; 125 mg, 0,264 mmol), 2-hloro-N-(1-(5-hloropirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Intermedijer R48; 50 mg, 0,132 mmol), 2 M
44
K3PO4(aq)(198 µL, 0,395 mmol), X-phos (12,6 mg, 0,0264 mmol) i Pd2(dba)3(6.04 mg, 0,00659 mmol) u dioksanu (659 µL) je prskana sa Ar(g)10 min, a zatim je posuda zatvorena. Reakciona smeša je mešana preko noći na 80°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa DCM, i ekstrahovana vodom (3x) i fiziološkim rastvorom (1x). Organski ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-100% EtOAc u heksanima kao gradijent eluenta) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (28,2 mg, 31% prinos). MS (apci), m/z = 689,3 (M+H).
Primer 701
[1092]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1093] Rastvor terc-butil 3-(((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (Primer 700; 27 mg, 0,039 mmol) u DCM (1 mL) i TFA (0,2 mL, 2,6 mmol) su mešani preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen silika hromatografijom (koristeći 0-100% DCM/10% MeOH/1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (19 mg, 82% prinos). MS (apci) m/z = 589,2 (M+H).
Primer 702
[1094]
44
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((1-etil-3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin- 2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1095] Rastvor 2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamida (Primer 701; 16 mg, 0,0270 mmol) u DCM (0,15 mL) tretiran je acetaldehidom (7,6 µL, 0,136 mmol) i sa NaBH(AcO)3(29 mg, 0,136 mmol), zatim mešan 15 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen C18 hromatografijom reverzne faze (5-95% acetonitrila u vodi sa 0,1% TFA) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg, 60% prinos). MS (apci) m/z = 617,2 (M+H).
Primer 703
[1096]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorobenzamid
[1097] Rastvor terc-butil 3-(((4-(5-(4-(2-hloro-5-fluorobenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (Intermedijer P154; 3 mg, 0,0043 mmol) u DCM (0,25 mL) i TFA (0,05 mL, 0,65 mmol) su mešani preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, tretirana sa zasićenim NaHCO3(aq)i dvofazna smeša je ekstrahovana sa DCM (3x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,79 mg, 70% prinos). MS (apci) m/z = 593,2 (M+H).
Primer 704
[1098]
44
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((1-etil-3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin- 2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorobenzamid
[1099] Rastvor 2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-5-fluorobenzamida (Primer 703; 16 mg, 0,0270 mmol) u DCM (1,72 mL) tretiran je acetaldehidom (7,57 µL, 0,135 mmol) i NaBH(AcO)3(57.2 mg, 0,270 mmol), zatim mešan 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je prečišćena direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-20% MeOH u DCM sa 0,1% NH4OH kao gradijentni eluent) da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (2 mg, 12% prinos). MS (apci) m/z = 521,2 (M+H).
Primer 705
[1100]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoropirolidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)-6-metilbenzamid
[1101] Rastvor terc-butil 3-(((4-(5-(4-(2-hloro-6-metilbenzamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoropirolidin-1-karboksilata (Intermedijer P149; 15 mg, 0,019 mmol) u DCM (1 mL) i TFA (1 mL, 13 mmol) mešani su preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen direktno hromatografijom na silicijum dioksidu (koristeći 0-100% DCM u heksanima, zatim 0-10% MeOH u DCM sa 0,1% NH4OH kao gradijentni eluent da bi se čisto dobilo jedinjenje iz naslova (7 mg, 60% prinos). MS (apci) m/z = 603,2 (M+H).
44
Primer 706
[1102]
6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(6-(4-hidroksi-4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-1-il)piridin-3-il)pirazolo[1,5-a] piridin-3-karbonitril
[1103] U suspenziju 4-(6-fluoropiridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P42, 90 mg, 0,276 mmol) u DMSO (2 mL) je dodat DIEA (193 µL, 1,10 mmol), a zatim je dodat 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol hidrohlorid (69 mg, 0,303 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90 °C tokom 60 h, zatim prečišćena direktno C18 hromatografijom reverzne faze (korišćenjem 5-95% acetonitrila u vodi sa 0,1% TFA kao gradijentom eluenta). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane, delimično koncentrovane u vakuumu da bi se uklonio ACN, zatim podeljene između zasićenog NaHCO3(aq) i DCM. Dvofazna smeša je ekstrahovana sa dodatnim DCM (2x). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog MgSO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je obrađen ultrazvukom u Et2O (2 mL) i zatim koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (48 mg, 35% prinos). MS (apci) m/z = 499,2 (M+H).
Primer 707
[1104]
3-hloro-N-((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4 -il)pikolinamid
4
[1105] Korak 1: Priprema terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata. U smešu 6-etoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P110, 296 mg, 0,782 mmol) i terc-butil ((3S,4S)-1-(5-hloropirazin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (Intermedijer R53, 181 mg, 0,55 mmol) u dioksanu (2,7 mL) dodat je XPhos (52 mg, 0,11 mmol), Pd2(dba)3(25 mg, 0,028 mmol) i K3PO4(2 M aq., 0,82 mL). Reakcija je prskana argonom jedan minut pre zagrevanja na 85°C i mešanja preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 × 15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (15 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-15% MeOH/DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (147 mg, 56% prinos). MS (apci) m/z = 480,2 (M+H).
[1106] Korak 2: Priprema 4-(5-((3S,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. Rastvor terc-butil ((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)karbamata (147 mg, 0.31 mmol) u DCM (3 mL) i TFA (2 mL) je mešan 30 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvor je koncentrovan u vakuumu, zatim razblažen sa zasićenim NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa DCM (3 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (58 mg, 50% prinos). MS (apci) m/z = 380,2 (M+H).
[1107] Korak 3: Priprema 3-hloro-N-((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)pikolinamida. U rastvor 4-(5-((3S,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (21,2 mg, 0,056 mmol) u DMSO (0,6 mL) dodata je 3-hloropikolinska kiselina (8,8 mg, 0,056 mmol) i DIEA (0,1 mL, 0,56 mmol), a zatim je dodat HATU (23,4 mg, 0,061). Posle mešanja tokom 80 minuta na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je razblažena sa zasićenim NaHCO3(5 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 × 5 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (5 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4(s), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29 mg, 99% prinos). MS (apci) m/z = 519,1 (M+H).
[1108] Jedinjenja u Tabeli ZZZ pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 707, korak 3, zamenom 3-hlorokolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
4 1
Tabela ZZZ
Primer 713
[1109]
42
4-(6-((3r,4r)-3-amino-4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[1110] Smeša terc-butil ((3r,4r)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-4-hidroksipiperidin- 3-il)karbamata (Intermedijer P158, 0.025 g, 0,052 mmol), 3-hloro-6-metilpiridazina (0,010 g, 0,078 mmol) i NaH (0,0042 g, 0,10 mmol) u DMF (0,26 mL) je zagrevana na 90°C preko noći. Smeša je zatim koncentrovana i prečišćena preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi sa 1% TFA). Smeša je zatim obrađena sa DCM i zas. NaHCO3. Organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni sa Na2SO4i koncentrovan da bi se dobio naslovni proizvod (6,4 mg, 26 % prinos). MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).
Primer 714
[1111]
4-(6-((3R,4R)-3-amino-4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[1112] 4-(6-((3r,4r)-3-amino-4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5- a]piridin-3-karbonitril (Primer 713, 65 mg, 0,138 mmol) je tretiran SFC hiralnom hromatografijom (5-70% MeOH:IPA:DEA 80:20:0,1) da bi se dobila dva proizvoda. Željeni proizvod je izolovan iz frakcija koje sadrže pik 1 i proizvoljno je dodeljen kao (R,R) izomer (6,6 mg). MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).
4
Primer 715
[1113]
4-(6-((3S,4S)-3-amino-4-((6-metilpiridazin-3-il)oksi)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo [1,5- a]piridin-3-karbonitril
[1114] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno i prečišćeno hiralnom hromatografijom prema postupku opisanom u Primeru 714. Željeni proizvod je izolovan iz frakcija koje sadrže pik 2 i proizvoljno je dodeljen kao (S,S) izomer (9,1 mg). MS (apci) m/z = 471,2 (M+H).
Primer 717
[1115]
2-hloro-N-((3R4S)-1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il )-5-fluorobenzamid
[1116] Smeša 4-(6-((3R,4S)-4-amino-3-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (Intermedijer P159, 0.025 g, 0,0686 mmol), 2-hloro-5-fluorobenzojeve kiseline (0,0180 g, 0,103 mmol), HATU (0,0522 g, 0,137 mmol) i Hunigove baze (0,0358 ml, 0,206 mmol) u DMSO (0,686 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je obrađena sa DCM i vodom. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen sa Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% ACN u vodi sa 1% TFA). Kombinovane frakcije koje sadrže proizvod su obrađene sa DCM i zas. NaHCO3. Kombinovani organski ekstrakti su
4 4
isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani da bi se dobio naslovni proizvod (0,0198 g, 55,4 % prinos). MS (apci) m/z = 521,1 (M+H).
Primer 718
[1117]
2-hloro-N-((3R4S)-1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il )-6-fluorobenzamid
[1118] Naslovni proizvod je pripremljen prema postupku opisanom u Primeru 717, zamenom 2-hloro-5-fluorobenzojeve kiseline sa 2-hloro-6-fluorobenzojevom kiselinom. MS (apci) m/z = 521,1 (M+H).
Primer 721 reference
[1119]
N-((3S,4S)-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il) -3-metilbutanamid
[1120] Rastvor (3S,4S)-4-amino-1-(5-(3-hloro-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-3-ol dihidrohlorida (Intermedijer P161; 50 mg, 0,109 mmol) u DCM (1 mL, 0,109 mmol) tretiran je sa DIEA (0,190 mL, 1,09 mmol) i 3-metilbutanoil hloridom (19,6 mg, 0,163 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, zatim prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (20-100% EtOAc u heksanu) da bi se dobio naslovni
4
proizvod u obliku bele čvrste supstance (14,6 mg, 28% prinos). MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
[1121] Jedinjenja u tabeli X1 su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan u koraku 2 u sintezi N-((3S,4S)-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il))piridin-2-il)-3-hidroksipiperidin-4-il)-1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksamida (Primer 522), zamenom 1-(trifluorometil)ciklobutan-1-karboksilne kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Naslovna jedinjenja su izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta.
Tabela X1
4
Primer 729
[1122]
N-((3S,4S)-3-amino-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidin-4- il)-3-hlorpikolinamid
[1123] Smeša terc-butil ((3S,4S)-4-amino-1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)piperidina-3-il)karbamata (Intermedijer P162; 0.026 g, 0,0544 mmol), 3-hlorokolinske kiseline (0,00944 g, 0,0599 mmol), HATU (0,0414 g, 0,109 mmol) i Hunigove baze (0,0123 ml, 0,0708 mmol) u DMSO (0,544 mmol) mešana je na sobnoj temperaturipreko noći. Smeša je obrađena sa DCM i vodom. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen sa Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Koncentrovani materijal je mešan u DCM (1 mL) i TFA (1 mL) tokom 1 h, zatim koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC (5-95% acetonitrila u vodi sa 1% TFA). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i podeljene između DCM i zasićenog NaHCO3Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobio naslovni proizvod (0,008 g, 28,4 % prinos). MS (apci) m/z = 517,2 (M+H).
4
[1124] Jedinjenja u tabeli X2 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 729, zamenom 3-hlorokolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom. Završetak reakcija je praćen pomoću LCMS, a trajanje reakcije je prilagođeno u skladu sa tim. Naslovna jedinjenja su izolovana nakon hromatografskog prečišćavanja korišćenjem odgovarajućeg gradijentnog eluenta.
Tabela X2
Primer 733 reference
[1125]
N-(1-(2-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-5-il)-4-metilpiperidin-4-il)- 3-metilbutanamid
4
[1126] U rastvor 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirimidin-2-il)-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (P163, 4 mg, 0,00865 mmol) u DCM (0,3 mL) dodata je 3-metilbutanska kiselina (0,001 mL, 0,013 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0,009 mL, 0,052 mmol) i HATU (4,3 mg, 0,0112 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, reakcija je podeljena između DCM i zasićenog NaHCO3. Posle odvajanja faza, vodeni rastvor je ekstrahovan sa DCM (3 × 10 mL). Organski ekstrakti su kombinovani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% acetonitrila u vodi sa 1% TFA) da bi se dobio naslovni proizvod (1,7 mg, 36%). MS (apci) m/z = 547,3 (M+H).
Primer 734
[1127]
2-hloro-N-(1-(2-(3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirimidin-5-il)-4-metilpiperidin-4- il)-6-metilbenzamid
[1128] Naslovljeno jedinjenje je pripremljeno korišćenjem metode sličnog onom opisanom u Primeru 733, zamenom 3-metilbutanske kiseline sa 2-hloro-6-metilbenzojevom kiselinom. MS (apci) m/z = 615,2 (M+H).
[1129] Jedinjenja u Tabeli X3 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 88, zamenom 3,6-dimetilpikolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
4
Tabela X3
Primer 739
[1130]
4
6-etoksi-4-(5-(4-((5-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)pirimidin-2-il)pirazolo [1,5-a]piridin-3-karbonitril
[1131] Korak 1: Priprema 4-(5-bromopirimidin-2-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila. U (3-cijano-6-(2-morfolinoetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)bornu kiselinu (Intermedijer P110, 190 mg, 0,61 mmol) i 5-bromo-2-jodopirimidin (225 mg, 0,789 mmol) u dioksanu (2 mL) dodat je XPhos (58 mg, 0,121 mmol), Pd2(dba)3(3.3 mg, 0,03 mmol) i K3PO4(2 M aq, 0,9 mL, 1,8 mmol). Reakciona smeša je poprskana argonom i zagrevana na 85 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je podeljena u 1:1 DCM:vodi (30 mL). Posle odvajanja faza, vodeni rastvor je ekstrahovan sa DCM (2 × 15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-60% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (30 mg, 14%).
[1132] Korak 2: Priprema 6-etoksi-4-(5-(4-((5-metoksipiridin-2-il)oksi)piperidin-1-il)pirimidin-2-il)pirazolo[1,5-a]piridina-3-karbonitrila. Smeša 4-(5-bromopirimidin-2-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila (30 mg, 0,087 mmol), 5-metoksi-2-(piperidin-4-iloksi)piridina (37 mg, 0,18 mmol), Cs2CO3(57 mg, 0,17 mmol), XPhos (4 mg, 0,0087 mmol) i Pd2(dba)3(4 mg, 0,0044 mmol) u dioksanu (0,44 mL) je poprskana argonom i mešana na 90°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je podeljena u 1:1 DCM:voda (20 mL). Posle odvajanja faza, vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 × 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom TLC (10% MeOH u DCM) da bi se dobio naslovni proizvod (1,4 mg, 3%). MS (apci) m/z = 472,2 (M+H).
[1133] Jedinjenja u Tabeli X4 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 706, zamenom 4-(piridin-2-ilmetil)piperidin-4-ol hidrohlorida odgovarajućim piperidinskim intermedijerom.
4 1
Tabela X4
Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS Intermedijer
4 2
4 Pr. Struktura Hemijsko ime LCMS Intermedijer
4 4
[1134] Jedinjenja u Tabela X5 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 325, zamenom 4-benzilpiperidin-4-ola sa odgovarajućim piperidinskim intermedijerom.
Tabela X5
[1135] Jedinjenja u Tabeli X6 pripremljena su po postupku opisanom u Primeru 415, reakcijom bilo Intermedijera P80 (Postupak A) ili Intermedijera P165 (Postupak B) sa odgovarajućim piperidinskim intermedijerom.
4
Tabela X6
Pr. Struktura Hemijsko ime MS m/z Intermedijer
4
Primer 763
[1136]
4-(5-(4-((3-hloropiridin-2-il)metil)-4-hidroksipiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1, 5-a]piridin-3-karbonitril
[1137] Posuda pod pritiskom je napunjena sa 6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a ]piridin-3-karbonitrilom (P166 76.0 mg, 0,213 mmol), 1-(5-hloropirazin-2-il)-4-((3-hloropiridin-2-il)metil)piperidin-4-olom (R69, 65.6 mg, 0,193 mmol) i K3PO4(123 mg, 0,580 mmol), zatim 1,4-dioksanom (1,5 mL) i vodom (0,2 mL). Reakciona smeša je prskana sa N210 min pre uvođenja Pd2(dba)3(8.85 mg, 0,00967 mmol) i XPhos (18,4 mg, 0,0387 mmol). Reakcija je poprskana sa N2još 3 minuta pre nego što je zapečaćena i zagrevana na 100°C tokom 3 dana da bi se dostigla konverzija od ~79% (LCMS). Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa 60/40 ACN:H2O sa 2% TFA i filtriran kroz Pall Acrodisc da bi se uklonile čvrste materije. Filtrat je koncentrovan i prečišćen preparativnom HPLC (40-60% ACN/H2O sa 0,1% TFA). Kombinovane frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane, a ostatak je stavljen u MeOH i filtriran kroz MP-HCO3smolu. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio naslovni proizvod u obliku žutog praha (2,0 mg, 1,9%). MS (apci) m/z = 534,2 (M+H).
4
Primer 764
[1138]
3-hloro-N-(1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1139] U smešu 3-hlorokolinske kiseline (23 mg, 0,14 mmol) i HATU (37 mg, 0,097 mmol) u DCM (2,4 mL) je dodat DIEA (84 µL, 0,48 mmol). Posle 30 minuta mešanja na sobnoj temperaturi, 1-(5-(3-hloro-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-amin (Intermedijer P175, 29 mg, 0,078 mmol) je dodat u jednoj porciji. Reakcija je mešana 3 h na sobnoj temperaturi, a zatim podeljena u zas. NH4Cl i DCM. Posle odvajanja faza, organski sloj je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu) da bi se dobio naslovni proizvod (20 mg, 50%). MS (apci) m/z = 512,2 (M+H).
Primer 765
[1140]
4-(6-(4-(fluoro(fenil)metil)-4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin -3-karbonitril
[1141] U rastvor 1-hlorometil-4-fluoro-1,4-diazoniabiciklo[2.2.2]oktan bis(tetrafluoroborata) (115 mg, 0,325 mmol) i V2O3(2.87 mg, 0,0192 mmol) u CH3CN (2 mL) je dodat 4-(6-(4-benzil-4-hidroksipiperidin-1-il)piridin-3-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (Primer 27, 95.3 mg, 0,192 mmol). Reakciona smeša je zamrznuta na -
4
78°C i očišćena od vazduha. Smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Nakon razblaživanja reakcije sa H2O, smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 x). Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani i prečišćeni preparativnom HPLC (20-80% ACN u H2O sa 0,1% TFA). Kombinovane frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane, rastvorene u minimalnoj količini MeOH i propuštene kroz PL-HCO3 smolu. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio naslovni proizvod kao bledo žuta čvrsta supstanca (4,2 mg, 4%). MS (apci) m/z = 516,2 (M+H).
Primer 766
[1142]
4-(5-(4-((3-fluoropiridin-2-il)metil)-4-hidroksipiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril
[1143] U 6-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (Intermedijer P168, 126 mg, 0,211 mmol) i 1-(5-hloropirazin-2-il)-4-((3-fluoropiridin-2-il)metil)piperidin-4-ol (Intermedijer R70, 68 mg, 0,211 mmol) u dioksanu (1,5 mL) dodat je XPhos (20 mg, 0,04 mmol), Pd2(dba)3(10 mg, 0,011 mmol) i K3PO4(2 M aq, 0,3 mL, 0,3 mmol). Smeša je prskana sa Ar i zagrevana na 90 °C tokom 17 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je podeljena u 1:1 DCM/vodi (30 mL). Posle odvajanja faza, organski sloj je ispran vodom i rastvorom soli i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC (5 do 95% acetonitrila u vodi sa 1% TFA) da bi se dobio naslovni proizvod (3,4 mg, 2,8%). MS (apci) m/z = 460,2 (M+H).
[1144] Jedinjenja u Tabeli X7 pripremljena su po postupku opisanom u Primeru 766, spajanjem odgovarajućih boronatnih i halogenih intermedijera.
4
Tabela X7
Primer 771
[1145]
N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-2,3,6 -trifluorobenzamid
[1146] U smešu 2,3,6-trifluorobenzojeve kiseline (22 mg, 0,12 mmol) i HATU (31 mg, 0,083 mmol) u DCM (2,1 mL) je dodat DIEA (72 µl, 0,41 mmol) i mešana je 30 min na sobnoj temperaturi, nakon čega sledi dodavanje 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-
4
etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2, 2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P172; 25 mg, 0,041 mmol) u jednoj porciji. Posle mešanja još 2 h, reakcija je razblažena sa zas. NH4Cl (2 mL) i propuštena kroz fritu separatora faza. Organski filtrat je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (17 mg, 77%). MS (apci) m/z = 536,1 (M+H).
[1147] Jedinjenja u Tabeli X8 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 771, zamenom 2,3,6-trifluorobenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
Tabela X8
4 1
Primer 779
[1148]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)-6- metilbenzamid
[1149] U epruvetu pod pritiskom od 15 mL sipan je 4-bromo-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril (Intermedijer P5; 15 mg, 0,056 mmol) i dioksan (0,5 mL) da se formira
4 2
suspenzija, nakon čega sledi dodavanje vode (0,15 mL), Cs2CO3(55 mg, 0,17 mmol) i 2-hloro-6-metil-N-(4-metil-1-(5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il)benzamida (Intermedijer R49; 37 mg, 0,056 mmol). Smeša je prskana sa N2tokom 5 minuta pre XPHOS (11 mg, 0,023 mmol) i Pd2dba3(5.2 mg, 0,0056 mmol), nakon čega je usledilo dodatnih 5 minuta prskanja sa N2pre nego što je reakcija zatvorena i zagrevana na 80°C tokom 17 h. Kada se ohladi na sobnu temperaturu, reakcija je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 × 10 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prvo prečišćen preparativnom HPLC (5-95% MeCN/H2O sa 0,2% TFA), što je praćeno hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% aceton/heksan) da bi se dobio naslovni proizvod (2,1 mg, 7%). MS (apci) m/z = 530,2 (M+H).
[1150] Jedinjenja u Tabeli X9 pripremljena su po postupku opisanom u Primeru 779, zamenom 4-bromo-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrila odgovarajućim bromidnim intermedijerom.
Tabela X9
Pr
#
78
78
4
Pr
#
78
78
*Napomena: TBS zaštitna grupa je uklonjena tokom preparativnog HPLC prečišćavanja (5-95% ACN u vodi sa 0,1% TFA).
Primer 784
[1151]
2-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4- metilpiperidin-4-il)-5-fluorobenzamid
[1152] U suspenziju 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)pirazolo[1,5-a]piridin- 3-karbonitril dihidrohlorida (Intermedijer P173; 10 mg, 0,020 mmol) u DCM (0,2 mL) dodata je 2-hloro-5-fluorobenzojeva kiselina (4,2 mg, 0,024 mmol), DIEA (14 µl, 0,081 mmol) i HATU (12 mg, 0,030 mmol). Reakcija je mešana
4 4
na sobnoj temperaturi tokom 2 dana, zatim razblažena sa H2O (10 mL), ekstrahovan sa DCM (3 x 10 mL), i kombinovane organske faze su koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC (5-95% MeCN/H2O sa 0,1% TFA). Kombinovane frakcije koje sadrže proizvod su razblažene sa zas. NaHCO3(10 mL) i ekstrahovane sa DCM (3 x 10 mL). Kombinovane organske faze su isprane fiziološkim rastvorom (15 mL), osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane da bi se dobio naslovni proizvod (1,2 mg, 10%). MS (apci) m/z = 578,2 (M+H).
[1153] Jedinjenja u Tabeli X10 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisan u Primeru 784, zamenom 2-hloro-5-fluorobenzojeve kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
Tabela X10
4
Primer 790
[1154]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-((3-fluoroazetidin-3-il)metoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1155] Korak 1: Priprema terc-butil 3-(((4-(5-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata. Smeša 3-hlorokolinske kiseline (24 mg, 0,15 mmol) i HATU (38 mg, 0,10 mmol) u DCM (2,5 mL) je tretirana sa DIEA (88 µL, 0,50 mmol), zatim mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi pre dodavanja terc-butil 3-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazm-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridm-6-il)oksi) metil)-3-fluoroazetidme-1-karboksilata (Intermedijer P153; 27 mg, 0,050 mmol) u jednoj porciji. Posle mešanja preko noći, reakcija je razblažena sa zas. NH4Cl (aq) (2 mL) i propuštena kroz fritu separatora faza. Filtrat je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanu) da bi se dobilo jedinjenje
4
iz naslova (34 mg, kvantitativni prinos). LCMS m/z = 676.2 (M+H).
[1156] Korak 2: Priprema (R)-N-(4-benzil-1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)piperidin-4-il)-2,3-dihidroksipropanamida. Rastvor terc-butil 3-(((4-(5-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)-3-fluoroazetidin-1-karboksilata (34 mg, 0,050 mmol) u DCM (2 mL) je tretiran sa TFA (2 mL). Reakcija je mešana 20 minuta na sobnoj temperaturi pre nego što je koncentrovana u vakuumu i prečišćena hromatografijom na silicijum dioksidu (0-10% MeOH u DCM sa 0,1% NH4OH) da bi se dobio proizvod iz naslova (12 mg, 41%). MS (apci) m/z = 576,2 (M+H).
Primer 791
[1157]
3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1158] Smeši 3-hlorokolinske kiseline (15 mg, 0,096 mmol) i HATU (24 mg, 0,064 mmol) u DCM (1,6 mL) je dodat DIEA (56 µl, 0,32 mmol), zatim mešan 30 minuta pre dodavanja 4-( 5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata) (Intermedijer P174; 20 mg, 0,032 mmol) u jednoj porciji. Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, zatim razblažena sa zas. NH4Cl (aq) (2 mL) i propuštena kroz fritu separatora faza. Organski filtrat je prečišćen hromatografijom na silicijum dioksidu (0-100% EtOAc u heksanima) da bi se dobio naslovni proizvod kao čvrsta supstanca (14 mg, 87%). MS (apci) m/z = 503,2 (M+H).
[1159] Jedinjenja u Tabeli X11 pripremljena su sličnim postupkom kao što je opisano u Primeru 791, zamenom 3-hlorokolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
4
Tabela X11
Primer 797
[1160]
4
(R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1161] Korak 1: Priprema terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilat.
Naslovljeno jedinjenje (30 mg, 67%) je pripremljeno prema proceduri opisanoj u Primeru 791, zamenom 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata) sa terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilatom (Intermedijer P176). LCMS m/z = 688,2 (M+H).
[1162] Korak 2: Priprema (R)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)pikolinamida. U rastvor terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-(3-hlorpikolinamido)-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata (30,2 mg, 0,044 mmol) u DCM (2 mL) je dodat TFA (1 mL), zatim mešan 2 h na sobnoj temperaturi i zatim koncentrovan i ponovo rastvoren u 4:1 DCM/IPA. Smeša je isprana sa zas. NaHCO3, osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana da bi se dobio naslovni proizvod (21,5 mg, 83% prinos). MS (apci) m/z = 588,3 (M+H).
[1163] Jedinjenja u Tabeli X12 su pripremljena korišćenjem sličnog postupka kao što je opisan u Primeru 797, zamenom 3-hlorokolinske kiseline odgovarajućom karboksilnom kiselinom u koraku 1.
4
Tabela X12
Primer 800
[1164]
(S)-3-hloro-N-(1-(5-(3-cijano-6-(morfolin-2-ilmetoksi)pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)pirazin-2-il) -4-metilpiperidin-4-il)pikolinamid
[1165] Naslovljeno jedinjenje (50 mg, 74%) je pripremljeno prema postupku opisanom u Primeru 797, zamenom terc-butil (R)-2-(((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilata sa terc-butil (S)-2-((4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-3-cijanopirazolo[1,5-a]piridin-6-il)oksi)metil)morfolin-4-karboksilatom (Intermedijer 177). LCMS m/z = 688,2 (M+H).
4
Primer 803
[1166]
(S)-3-hloro-N-((1-(5-(3-cijano-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-4-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il) metil)pikolinamid
[1167] Jedinjenje iz naslova (32,6 mg, 71%) je pripremljeno prema postupku opisanom u Primeru 791, zamenom 4-(5-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)pirazin-2-il)-6-metoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitril bis(2,2,2-trifluoroacetata) sa (S)-4-(6-(3-(aminometil)pirolidin-1-il)piridin-3-il)-6-etoksipirazolo[1,5-a]piridin-3-karbonitrilom (Primer 801). LCMS m/z = 502,2 (M+H).
[1168] Jedinjenja u Tabeli X13 pripremljena su po postupku opisanom u Primeru 803, kuplovanjem odgovarajućeg intermedijera amina sa odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
Tabela X13
4 1
42
4
44
4
4
�
�
�
�

Claims (16)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule I:
    i njegove farmaceutski prihvatljive soli, naznačeno time što: X<1>, X<2>, X<3>i X<4>su nezavisno CH, CCH3, CF ili N, pri čemu nula, jedan ili dva od X<1>, X<2>, X<3>i X<4>je N; A je H, CN, Cl, metil, etil ili ciklopropil; B je: (a) vodonik, (b) C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (c) hidroksiC2-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (d) dihidroksiC3-C6 alkil- gde je alkil deo izborno supstituisan sa C3-C6 cikloalkiliden prstenom, (e) (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil- izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (f) (R<1>R<2>N)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil- i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-; (g) hetAr<1>C1-C3 alkil-, gde hetAr<1>je 5-6 člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu koji su nezavisno izabrani od N, O i S i izborno je supstituisan sa jednim ili više nezavisno odabranih C1-C6 alkil supstituenata; (h) (C3-C6 cikloalkil)C1-C3 alkil-, (i) (hetCyc<a>)C1-C3 alkil-, (j) hetCyc<a>, (k) (R<1>R<2>N)C(=O)C1-C6 alkil- gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila, (l) (R<1>R<2>N)C(=O)-, gde su R<1>i R<2>nezavisno izabrani od H i C1-C6 alkila, ili (m) hetCyc<a>C(=O)C1-C6 alkil-; hetCyc<a>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil, halogen, (C1-C6 alkil)C(=O)-, C1-C6 alkoksi, okso i (C1-C6 alkoksi)C(=O)-; Prsten D je (i) zasićeni monociklični 4-7 člani heterociklični prsten koji ima jedan heteroatom u prstenu koji je azot, svaki R<a>je nezavisno C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), hidroksiC1-C6 alkil ili (C1-C6 alkoksi)C1-C6 alkil-; R<b>je (a) hidroksi, (c) hetCyc<b>CH2- pri čemu hetCyc<b>je 4-6-člani heterociklični prsten koji ima 1-2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O i gde hetCyc<b>je izborno supstituisan sa C1-C6 alkilom (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (e) R<c>R<d>N- ili (f) R<c>R<d>NCH2-; R<c>je vodonik ili C1-C6 alkil; i R<d>je vodonik ili C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora); n je 0 ili 1; m je 0 ili 1; E je: (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je navedeni alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-, (g) Ar<1>O-, (h) hetAr<2>O-, (l) Ar<1>C(=O)NR<g>-, gde R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p-, gde p je 0 ili 1; Ar<1>je fenil izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, CN, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), C1-C6 alkoksi (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1 -C6 alkoksi)C1-C6 alkil- (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), C3-C6 cikloalkil, hidroksiC1-C6 alkil, (C1-C6 alkil)SO2-, R<e>R<f>N- i (R<e>R<f>N)C1-C6 alkil-, gde svaki R<e>i R<f>su nezavisno H ili C1-C6 alkil; hetAr<2>je 5-6-člani heteroaril prsten koji ima 1-3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, ili 9-10-člani biciklični heteroaril koji ima 1-2 atoma azota u prstenu, gde hetAr<2>je izborno supstituisan sa jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, CN, C1-C6 alkil (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), C1-C6 alkoksi (izborno supstituisan sa 1-3 fluora), (C1- C6 alkoksi)C1-C6 alkil-((izborno supstituisan sa 1-3 fluora) i hidroksiC1-C6 alkoksi.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što svaki R<a>je nezavisno izabrana C1-C6 alkil grupa.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, gde je D
    pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, a zvezdica označava tačku vezivanja Prstena D za E grupu.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je D
    pri čemu talasasta linija označava tačku vezivanja prstena D za prsten koji sadrži X<1>, X<2>, X<3>i X<4>, a zvezdica označava tačku vezivanja za E grupu.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, gde E je (d) Ar<1>C1-C6 alkil- gde je navedeni alkil deo izborno supstituisan sa 1-3 fluora, (e) hetAr<2>C1-C6 alkil-, (g) Ar<1>O-, (h) hetAr<2>O-, (1) Ar<1>C(=O)NR<g>- gde R<g>je H ili C1-C6 alkil, ili (m) hetAr<2>C(=O)NR<g>(CH2)p- gde p je 0 ili 1.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, naznačeno time što B je C1-C6 alkil izborno supstituisan sa 1-3 fluora.
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-6, naznačeno time što X<1>je N i X<2>, X<3>i X<4>su CH.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, naznačeno time što A je CN.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je 4
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija, koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-10 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u mešavini sa farmaceutski prihvatljivim razblaživačem ili nosačem.
  12. 12. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-10, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju kancera.
  13. 13. Jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema patentnom zahtevu 12, naznačeno time što kancer je kancer povezan sa RET.
  14. 14. Jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, naznačeno time što kancer povezan sa RET je kancer koji ima disregulaciju u RET genu, proteinu RET kinaze, ili ekspresiji ili aktivnosti ili nivou bilo kojeg od istih uzrokovanih jednom ili više tačkastih mutacija u RET genu.
  15. 15. Jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema patentnom zahtevu 13 ili 14, naznačeno time što je kancer povezan sa RET izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: kancer pluća, papilarni kancer štitne žlezde, medularni kancer štitne žlezde, diferencirani kancer štitne žlezde, rekurentni kancer štitne žlezde, refraktorni diferencirani karcinom štitne žlezde, multipla endokrina neoplazija tip 2A ili 2B (MEN2A ili MEN2B, respektivno), feohromocitom, hiperplazija paratireoidne žlezde, kancer dojke, kolorektalni kancer, papilarni karcinom bubrežnih ćelija, ganglioneuromatozis gastroenterične mukoze i kancer grlića materice.
  16. 16. Jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 12-15, naznačeno time što je lek formulisan za oralnu primenu. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 4
RS20220783A 2016-10-10 2017-10-10 Supstituisana pirazolo[1,5-a]piridin jedinjenja kao inhibitori ret kinaze RS63510B1 (sr)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662406275P 2016-10-10 2016-10-10
US201762447849P 2017-01-18 2017-01-18
US201762491180P 2017-04-27 2017-04-27
US201762531690P 2017-07-12 2017-07-12
US201762566030P 2017-09-29 2017-09-29
EP17787844.4A EP3523302B1 (en) 2016-10-10 2017-10-10 Substituted pyrazolo[1,5-a]pyridine compounds as ret kinase inhibitors
PCT/US2017/055993 WO2018071454A1 (en) 2016-10-10 2017-10-10 Substituted pyrazolo[1,5-a]pyridine compounds as ret kinase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS63510B1 true RS63510B1 (sr) 2022-09-30

Family

ID=60153576

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220783A RS63510B1 (sr) 2016-10-10 2017-10-10 Supstituisana pirazolo[1,5-a]piridin jedinjenja kao inhibitori ret kinaze

Country Status (35)

Country Link
US (5) US10144734B2 (sr)
EP (2) EP3523302B1 (sr)
JP (1) JP7075399B2 (sr)
KR (1) KR102287752B1 (sr)
CN (1) CN110177786B (sr)
AU (1) AU2017342027B2 (sr)
BR (1) BR112019007143A2 (sr)
CA (1) CA3039912A1 (sr)
CL (1) CL2019000942A1 (sr)
CO (1) CO2019004649A2 (sr)
CR (1) CR20190224A (sr)
CY (1) CY1125606T1 (sr)
DK (1) DK3523302T3 (sr)
DO (1) DOP2019000091A (sr)
EC (1) ECSP19033052A (sr)
ES (1) ES2926136T3 (sr)
HR (1) HRP20221154T1 (sr)
HU (1) HUE060089T2 (sr)
IL (1) IL265918B (sr)
JO (1) JOP20190077A1 (sr)
LT (1) LT3523302T (sr)
MD (1) MD3523302T2 (sr)
MX (1) MX388140B (sr)
PE (1) PE20191613A1 (sr)
PH (1) PH12019500776A1 (sr)
PL (1) PL3523302T3 (sr)
PT (1) PT3523302T (sr)
RS (1) RS63510B1 (sr)
SA (1) SA519401544B1 (sr)
SG (1) SG11201903187WA (sr)
SI (1) SI3523302T1 (sr)
TN (1) TN2019000107A1 (sr)
TW (1) TWI752098B (sr)
UA (1) UA125032C2 (sr)
WO (1) WO2018071454A1 (sr)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6816100B2 (ja) 2015-07-16 2021-01-20 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ＲＥＴキナーゼ阻害物質としての置換ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン化合物
WO2017079140A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of ret
JOP20190077A1 (ar) 2016-10-10 2019-04-09 Array Biopharma Inc مركبات بيرازولو [1، 5-a]بيريدين بها استبدال كمثبطات كيناز ret
TWI704148B (zh) 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
CN109963834B (zh) * 2016-11-18 2023-04-14 综合研究实验室瑞典股份公司 可用作皮质儿茶酚胺能神经传递调节剂的新型氮杂环丁烷衍生物
CN110267960B (zh) 2017-01-18 2022-04-26 阿雷生物药品公司 作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡嗪化合物
TWI791053B (zh) * 2017-10-10 2023-02-01 美商亞雷生物製藥股份有限公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之結晶形式及其醫藥組合物
CA3087578C (en) 2018-01-18 2023-08-08 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidine compounds as ret kinase inhibitors
WO2019143977A1 (en) 2018-01-18 2019-07-25 Array Biopharma Inc. Substituted pyrrolo[2,3-d]pyrimidines compounds as ret kinase inhibitors
EP3740486A1 (en) 2018-01-18 2020-11-25 Array Biopharma, Inc. Substituted pyrazolyl[4,3-c]pyridinecompounds as ret kinase inhibitors
JP7422084B2 (ja) 2018-04-03 2024-01-25 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｒｅｔ変化を有する癌の処置において使用するためのｒｅｔ阻害剤
EP3849986B1 (en) 2018-09-10 2022-06-08 Array Biopharma, Inc. Fused heterocyclic compounds as ret kinase inhibitors
WO2020063751A1 (en) * 2018-09-27 2020-04-02 Fochon Pharmaceuticals, Ltd. Substituted imidazo [1, 2-a] pyridine and [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine compounds as ret kinase inhibitors
KR102558308B1 (ko) 2018-09-27 2023-07-24 주식회사 엘지화학 3-아자바이사이클로[3,1,1]헵탄 유도체 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
EP3845531A4 (en) * 2018-09-30 2021-11-24 Applied Pharmaceutical Science, Inc. SUBSTITUTED PYRAZOLE-CONDENSED RING DERIVATIVES, METHOD FOR THEIR PRODUCTION AND USE THEREOF
WO2020094084A1 (zh) * 2018-11-07 2020-05-14 南京明德新药研发有限公司 作为ret抑制剂的三并环衍生物
EP3886854A4 (en) 2018-11-30 2022-07-06 Nuvation Bio Inc. Pyrrole and pyrazole compounds and methods of use thereof
CN111285873B (zh) * 2018-12-07 2024-10-15 广东东阳光药业股份有限公司 Ret抑制剂、其药物组合物及其用途
EP3891148A4 (en) * 2018-12-07 2022-09-07 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. RET INHIBITORS, PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND USES THEREOF
EP3942045A1 (en) 2019-03-21 2022-01-26 Onxeo A dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
CN111808077B (zh) 2019-04-12 2023-05-02 浙江海正药业股份有限公司 哌嗪酰胺衍生物，其制备方法及其在医药上的用途
TW202108582A (zh) * 2019-05-14 2021-03-01 大陸商上海翰森生物醫藥科技有限公司 含二並環類衍生物抑制劑、其製備方法和應用
EP3980425A1 (en) * 2019-06-10 2022-04-13 JS InnoPharm (Shanghai) Ltd. Heterocyclic compounds as kinase inhibitors, compositions comprising the heterocyclic compound, and methods of use thereof
WO2021043209A1 (zh) * 2019-09-04 2021-03-11 广东东阳光药业有限公司 一种ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN112574235B (zh) * 2019-09-29 2024-01-16 广东东阳光药业股份有限公司 一种ret抑制剂、其药物组合物及其用途
WO2021057970A1 (zh) * 2019-09-29 2021-04-01 广东东阳光药业有限公司 一种ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN112778337B (zh) * 2019-11-08 2023-09-26 杭州邦顺制药有限公司 作为ret激酶抑制剂的3、6二氮杂双环[3.1.1]庚烷衍生物
JP2023500906A (ja) 2019-11-08 2023-01-11 インサーム（インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシェ メディカル） キナーゼ阻害剤に対する獲得抵抗性を有するがんの処置方法
CN113045569B (zh) * 2019-12-27 2022-04-19 浙江同源康医药股份有限公司 用作ret激酶抑制剂的化合物及其应用
CN113121524B (zh) 2019-12-31 2023-04-25 南京创济生物医药有限公司 杂环亚砜亚胺化合物及其中间体、制备方法和应用
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
CN111233899B (zh) * 2020-03-27 2020-12-29 苏州信诺维医药科技有限公司 一种ret抑制剂
CN111410662B (zh) * 2020-03-27 2020-12-29 苏州信诺维医药科技有限公司 一种酪氨酸激酶抑制剂
CN111269229B (zh) * 2020-03-27 2021-02-12 苏州信诺维医药科技有限公司 一种治疗癌症的化合物
CN111285887B (zh) * 2020-03-27 2020-11-17 苏州信诺维医药科技有限公司 一种螺环化合物
CN113527291B (zh) * 2020-04-13 2025-07-22 广东东阳光药业股份有限公司 Ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN113527290B (zh) * 2020-04-13 2025-07-22 广东东阳光药业股份有限公司 一种ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN113527292B (zh) * 2020-04-13 2025-07-22 广东东阳光药业股份有限公司 一种ret抑制剂、其药物组合物及其用途
WO2021213476A1 (zh) * 2020-04-22 2021-10-28 深圳晶泰科技有限公司 一种吡唑并[1,5-a]吡啶类衍生物及其制备方法，组合物以及用途
CN113620944B (zh) * 2020-05-07 2024-10-15 广东东阳光药业股份有限公司 新型的ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN113683611B (zh) * 2020-05-18 2025-02-11 广东东阳光药业股份有限公司 新的ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN113683610B (zh) * 2020-05-18 2025-02-25 广东东阳光药业股份有限公司 一种ret抑制剂、其药物组合物及其用途
CN113698390B (zh) * 2020-05-20 2022-09-27 浙江同源康医药股份有限公司 用作ret激酶抑制剂的化合物及其应用
WO2021243192A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Blueprint Medicines Corporation Solid forms of pralsetinib
CA3188313A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 C4 Therapeutics, Inc. Compounds for targeted degradation of ret
CN114478586A (zh) * 2020-11-13 2022-05-13 上海翰森生物医药科技有限公司 一种含二并环类衍生物抑制剂盐或晶型及其制备方法和应用
US20230406865A1 (en) * 2020-11-13 2023-12-21 Shanghai Hansoh Biomedical Co., Ltd. Crystal form of free base of inhibitor containing bicyclic ring derivative and preparation method and application of crystal form
WO2023239422A2 (en) 2021-10-22 2023-12-14 University Of Houston System Methods and compositions for treating chronic inflammatory injury, metaplasia, dysplasia and cancers of epithelial tissues
WO2024006841A2 (en) * 2022-06-29 2024-01-04 Knowledge Pharmaceuticals Inc. Compositions for weight loss and cancer treatment
AU2023319517A1 (en) * 2022-08-01 2025-03-20 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co., Ltd. Intermediate of bicyclic inhibitor and preparation method therefor
EP4565585A1 (en) * 2022-08-03 2025-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for modulating ret protein

Family Cites Families (264)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4783443A (en) 1986-03-03 1988-11-08 The University Of Chicago Amino acyl cephalosporin derivatives
US5844092A (en) 1994-03-18 1998-12-01 Genentech, Inc. Human TRK receptors and neurotrophic factor inhibitors
US5877016A (en) 1994-03-18 1999-03-02 Genentech, Inc. Human trk receptors and neurotrophic factor inhibitors
US6677135B1 (en) 1996-05-08 2004-01-13 Biogen, Inc. Ret ligand (RetL) for stimulating neutral and renal growth
EP1757617A1 (en) 1996-05-08 2007-02-28 Biogen Idec MA Inc. Ret Ligand (RetL) for stimulating neural and renal growth
US6682921B1 (en) 1996-08-21 2004-01-27 New York University Crystals of the tyrosine kinase domain of non-insulin receptor tyrosine kinases
US6531152B1 (en) 1998-09-30 2003-03-11 Dexcel Pharma Technologies Ltd. Immediate release gastrointestinal drug delivery system
WO2001016169A2 (en) 1999-09-01 2001-03-08 Biogen, Inc. RET LIGAND 5 (Retl5) FROM HUMAN AND MOUSE
FI20000403A0 (fi) 2000-02-22 2000-02-22 Hannu Sariola GDNF perhesukuisten yhdisteiden käyttö kivessyövän hoitoon tarkoitettujen tuotteiden valmistamiseksi
AU2001271422B2 (en) 2000-06-22 2005-12-22 Genentech, Inc. Agonist anti-trk-C monoclonal antibodies
AU2002334355A1 (en) 2001-09-06 2003-03-18 Prochon Biotech Ltd. Protein tyrosine kinase inhibitors
PE20030762A1 (es) 2001-12-18 2003-09-05 Schering Corp Compuestos heterociclicos como antagonistas nk1
US7466344B2 (en) 2002-06-07 2008-12-16 Scimeasure Analytical Systems, Inc. High-speed low noise CCD controller
ITMI20021620A1 (it) 2002-07-23 2004-01-23 Novuspharma Spa Composto ad ativita' antitumorale
AU2003232960A1 (en) 2002-07-24 2004-02-09 University Of Cincinnati 4-4(methylpiperazin-1-ylmethyl)-n-(4-methyl-3-(pyridin-3-yl)pyrimidin-2-ylamino)phenyl)-benzamide for treating mutated-ret kinase associated diseases
DE602004021472D1 (en) 2003-02-20 2009-07-23 Smithkline Beecham Corp Pyrimiidinverbindungen
US20090143399A1 (en) 2003-10-14 2009-06-04 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Protein Kinase Inhibitors
US7169918B2 (en) 2003-10-27 2007-01-30 Genelabs Technologies, Inc. Methods for preparing 7-(2′-substituted-β-D-ribofuranosyl)-4-(NR2R3)-5-(substituted ethyn-1-yl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine derivatives
MY141220A (en) 2003-11-17 2010-03-31 Astrazeneca Ab Pyrazole derivatives as inhibitors of receptor tyrosine kinases
AU2004295061B2 (en) 2003-11-21 2008-11-20 Novartis Ag 1H-imidazoquinoline derivatives as protein kinase inhibitors
PE20051046A1 (es) 2003-11-28 2006-01-11 Novartis Ag Derivados de diaril-urea en el tratamiento de enfermedades dependientes de la quinasa de proteina
PT1696920E (pt) 2003-12-19 2015-01-14 Plexxikon Inc Compostos e métodos para o desenvolvimento de moduladores de ret
GB0330042D0 (en) 2003-12-24 2004-01-28 Pharmacia Italia Spa Pyrrolo [2,3-b] pyridine derivatives active as kinase inhibitors process for their preparation and pharmaceutical compositions them
GB0330043D0 (en) 2003-12-24 2004-01-28 Pharmacia Italia Spa Pyrrolo [2,3-b] pyridine derivatives active as kinase inhibitors process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
WO2005068424A1 (en) 2004-01-20 2005-07-28 Cell Therapeutics Europe S.R.L. Indolinone derivatives as receptor tyrosine kinase ihibitors
US20050222171A1 (en) 2004-01-22 2005-10-06 Guido Bold Organic compounds
AR049769A1 (es) 2004-01-22 2006-09-06 Novartis Ag Derivados de pirazolo(1,5-a)pirimidin 7-il-amina para utilizarse en el tratamiento de enfermedades dependientes de la quinasa de proteina
WO2005099363A2 (en) 2004-03-26 2005-10-27 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods of diagnosing, preventing and treating cancer metastasis
GB0512324D0 (en) 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
EP1797054A2 (en) 2004-08-02 2007-06-20 OSI Pharmaceuticals, Inc. Aryl-amino substituted pyrrolopyrimidine multi-kinase inhibiting compounds
PE20060664A1 (es) 2004-09-15 2006-08-04 Novartis Ag Amidas biciclicas como inhibidores de cinasa
WO2006050076A1 (en) 2004-10-29 2006-05-11 Janssen Pharmaceutica, N.V. Pyrimidinyl substituted fused-pyrrolyl compounds useful in treating kinase disorders
SG194363A1 (en) 2004-12-17 2013-11-29 Univ Pennsylvania Stilbene derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
DE102005003687A1 (de) 2005-01-26 2006-07-27 Sphingo Tec Gmbh Immunoassay zur Bestimmung der Freisetzung von Neurotensin in die Zirkulation
GB0501999D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
CN101257948A (zh) 2005-02-18 2008-09-03 阿特努奥恩公司 嘧啶并二氮䓬衍生物及吲哚并蝶啶化合物
GB0507575D0 (en) 2005-04-14 2005-05-18 Novartis Ag Organic compounds
CA2604787A1 (en) 2005-04-15 2006-10-26 Cylene Pharmaceuticals, Inc. Quinobenzoxazine analogs and methods of using thereof
WO2006123113A2 (en) 2005-05-16 2006-11-23 Astrazeneca Ab Pyrazolylaminopyrimidine derivatives useful as tyrosine kinase inhibitors
WO2006128042A2 (en) 2005-05-26 2006-11-30 The Johns Hopkins University Methods of identifying mutations in nucleic acid
JP2008542382A (ja) 2005-05-31 2008-11-27 ザ ファール ファミリー トラスト （デイティド ９ ジュライ １９９６） 癌および他の疾患の処置用プロテインキナーゼ阻害剤としての置換ビアリール複素環誘導体
US7541367B2 (en) 2005-05-31 2009-06-02 Janssen Pharmaceutica, N.V. 3-benzoimidazolyl-pyrazolopyridines useful in treating kinase disorders
ITRM20050290A1 (it) 2005-06-07 2006-12-08 Lay Line Genomics Spa Uso di molecole in grado di inibire il legame tra ngf e il suo recettore trka come analgesici ad effetto prolungato.
WO2007002325A1 (en) 2005-06-22 2007-01-04 Plexxikon, Inc. Pyrrolo[2,3-b] pyridine derivatives as protein kinase inhibitors
GB0515026D0 (en) 2005-07-21 2005-08-31 Novartis Ag Organic compounds
ES2444003T5 (es) 2005-08-25 2017-07-05 Creabilis Therapeutics S.P.A. Conjugados poliméricos de K-252A y sus derivados
CA2628474A1 (en) 2005-11-03 2007-05-10 Sgx Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidinyl-thiophene kinase modulators
EP1785420A1 (en) 2005-11-14 2007-05-16 4Sc Ag Thiazole analogues and uses thereof
US20070149523A1 (en) 2005-11-14 2007-06-28 Jan Ehlert Thiazole Analogues and Uses Thereof
WO2007057399A2 (en) 2005-11-15 2007-05-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment of cancer with indole derivatives
WO2007057397A1 (en) 2005-11-15 2007-05-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment of cancer
GB0524436D0 (en) 2005-11-30 2006-01-11 Novartis Ag Organic compounds
KR20080074161A (ko) 2005-12-08 2008-08-12 노파르티스 아게 ＥＰＨＢ 및 ＶＥＧＦＲ２ 키나아제 억제제로서의피라졸로[１,５-ａ]피리딘-３-카르복실산
WO2007077435A1 (en) 2005-12-30 2007-07-12 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
WO2007087245A2 (en) 2006-01-24 2007-08-02 Merck & Co., Inc. Ret tyrosine kinase inhibition
PL1973910T3 (pl) 2006-01-27 2013-11-29 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pirolo[3,2-c]pirydyn-4-onowo-2-indolinonowe inhibitory kinazy białkowej
KR20090052301A (ko) 2006-03-16 2009-05-25 노파르티스 아게 특히 흑색종의 치료를 위한 헤테로고리형 유기 화합물
US7820657B2 (en) 2006-03-17 2010-10-26 Ambit Biosciences Corporation Imidazolothiazole compounds for the treatment of disease
EA015126B1 (ru) 2006-03-27 2011-06-30 НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.р.л. Пиридил- и пиримидинилзамещённые производные пиррола, тиофена и фурана в качестве ингибиторов киназ
EP2018167A4 (en) 2006-05-15 2010-07-14 Irm Llc COMPOSITIONS AND METHODS AS INHIBITORS OF FGF RECEPTOR KINASES
AU2007252506C1 (en) 2006-05-18 2012-07-19 Eisai R & D Management Co., Ltd. Antitumor agent for thyroid cancer
US8063225B2 (en) 2006-08-14 2011-11-22 Chembridge Corporation Tricyclic compound derivatives useful in the treatment of neoplastic diseases, inflammatory disorders and immunomodulatory disorders
WO2008031551A2 (en) 2006-09-12 2008-03-20 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Non-neuroendocrine cancer therapy
CA2662902C (en) 2006-09-15 2015-11-24 Xcovery, Inc. Kinase inhibitor compounds
US20120225057A1 (en) 2006-10-11 2012-09-06 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods and compositions for the treatment of myeloproliferative diseases and other proliferative diseases
EP1918291A1 (en) 2006-10-30 2008-05-07 Novartis AG 3-Aminocarbonyl-substituted fused pyrazolo-derivatives as protein kinase modulators
WO2008058341A1 (en) 2006-11-15 2008-05-22 Cytopia Research Pty Ltd Inhibitors of kinase activity
PE20081483A1 (es) * 2006-12-15 2008-12-07 Bayer Schering Pharma Ag 3-h-pirazolopiridinas y sales de estas, composiciones farmaceuticas que las comprenden, metodos para prepararlas y sus usos
WO2008079909A1 (en) 2006-12-21 2008-07-03 Plexxikon, Inc. Pyrrolo [2,3-b] pyridines as kinase modulators
PE20081581A1 (es) 2006-12-21 2008-11-12 Plexxikon Inc COMPUESTOS PIRROLO[2,3-b]PIRIDINAS COMO MODULADORES DE QUINASA
US7872018B2 (en) 2006-12-21 2011-01-18 Plexxikon, Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
US20080199426A1 (en) 2007-01-11 2008-08-21 Sukhatme Vikas P Methods and compositions for the treatment and diagnosis of vascular inflammatory disorders or endothelial cell disorders
EP2114403A2 (en) 2007-01-19 2009-11-11 Bayer Healthcare, LLC Treatment of cancers having resistance to chemotherapeutic agents
US20080234267A1 (en) 2007-03-20 2008-09-25 Karen Elizabeth Lackey Compounds and Methods of Treatment
US20110189167A1 (en) * 2007-04-20 2011-08-04 Flynn Daniel L Methods and Compositions for the Treatment of Myeloproliferative Diseases and other Proliferative Diseases
CA2686382C (en) 2007-05-04 2013-09-17 Irm Llc Phenylaminopyrimidine derivatives and compositions thereof as c-kit and pdgfr kinase inhibitors
WO2008138184A1 (fr) 2007-05-14 2008-11-20 Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co.Ltd. Dérivés de pyrrolo-azacycles, leur procédé de fabrication et leur utilisation en tant qu'inhibiteurs de protéine kinases
WO2009003136A1 (en) 2007-06-26 2008-12-31 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyrimidine-2, 4 -diamines for treating cell proliferative disorders
WO2009007748A2 (en) 2007-07-09 2009-01-15 Astrazeneca Ab Trisubstituted pyrimidine derivatives for the treatment of proliferative diseases
WO2009012262A1 (en) 2007-07-16 2009-01-22 The Regents Of The University Of California Protein kinase modulating compounds and methods for making and using them
SG183036A1 (en) 2007-07-17 2012-08-30 Plexxikon Inc Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
RU2474580C2 (ru) 2007-07-19 2013-02-10 Шеринг Корпорейшн Гетероциклические амидные соединения как ингибиторы протеинкиназ
BRPI0814628B1 (pt) 2007-07-20 2022-04-05 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Derivados ativos de indazol substituídos como inibidores da quinase
WO2009017838A2 (en) 2007-08-01 2009-02-05 Exelixis, Inc. Combinations of jak-2 inhibitors and other agents
EP2185698B1 (en) 2007-08-07 2015-04-22 Purdue Research Foundation Kinase inhibitors and uses thereof
EP2025678A1 (en) 2007-08-17 2009-02-18 Oncalis AG Pyrazolo[3,4-d]pyrimidine compounds and their use as modulators of protein kinase
WO2009042646A1 (en) 2007-09-24 2009-04-02 Curis, Inc. Anti-proliferative agents
US20100297115A1 (en) 2007-10-23 2010-11-25 Novartis Ag Use of trkb antibodies for the treatment of respiratory disorders
JP5400791B2 (ja) 2007-12-04 2014-01-29 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ 置換ジヒドロプテリジン−６−オン誘導体、その製造方法及びキナーゼ阻害剤としてのその使用
CN101459004B (zh) 2007-12-14 2011-02-09 深圳富泰宏精密工业有限公司 电子装置的按键面板结构及制造该按键面板结构的方法
AU2009205937B2 (en) 2008-01-17 2013-02-07 Novartis Ag Improved anti-TrkB antibodies
US20090227556A1 (en) 2008-01-31 2009-09-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Receptor tyrosine kinase inhibitors comprising pyridine and pyrimidine derivatives
TW200938542A (en) 2008-02-01 2009-09-16 Irm Llc Compounds and compositions as kinase inhibitors
WO2009103076A1 (en) 2008-02-15 2009-08-20 Oxigene, Inc. Methods and compositions for enhancing the efficacy of rtk inhibitors
EP2966076A1 (en) 2008-03-19 2016-01-13 ChemBridge Corporation Novel tyrosine kinase inhibitors
US8822500B2 (en) 2008-03-19 2014-09-02 Chembridge Corporation Tyrosine kinase inhibitors
US8207165B2 (en) 2008-03-28 2012-06-26 Nerviano Medical Sciences S.R.L. 3,4-dihydro-2H-pyrazino[1,2-A]indol-1-one derivatives active as kinase inhibitors, process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
US8158636B2 (en) 2008-05-19 2012-04-17 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
PE20091846A1 (es) 2008-05-19 2009-12-16 Plexxikon Inc DERIVADOS DE PIRROLO[2,3-d]-PIRIMIDINA COMO MODULADORES DE CINASAS
GEP20125502B (en) 2008-05-23 2012-04-25 Novartis Ag Derivatives of quinolines and quinoxalines as protein tyrosine kinase inhibitors
CA2727389A1 (en) 2008-06-10 2009-12-17 Prabha N. Ibrahim 5h-pyrrolo [2,3-b] pyrazine derivatives for kinase modulation, and indications therefor
US20110212053A1 (en) 2008-06-19 2011-09-01 Dapeng Qian Phosphatidylinositol 3 kinase inhibitors
CA2730190A1 (en) 2008-07-14 2010-01-21 Queen's University At Kingston Pharmaceutical compositions comprising ret inhibitors and methods for the treatment of cancer
JO3041B1 (ar) 2008-07-25 2016-09-05 Galapagos Nv مركبات جديدة مفيدة لمعالجة الأمراض التنكسية والالتهابية
WO2010012733A1 (en) 2008-07-29 2010-02-04 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Use of a cdk inhibitor for the treatment of glioma
EP2352361B1 (en) 2008-09-01 2014-09-24 Sharp Kabushiki Kaisha Organic electroluminescence panel, organic electroluminescence display, organic electroluminescence illumination and method for manufacturing such panel, display and illumination
WO2010028254A2 (en) 2008-09-05 2010-03-11 Auspek Pharmaceuticals, Inc. Substituted quinazoline inhibitors of growth factor receptor tyrosine kinases
EP2161271A1 (en) 2008-09-08 2010-03-10 Università Degli Studi Di Milano - Bicocca Alpha-carboline inhibitors of NMP-ALK, RET, and Bcr-Abl
US8394802B2 (en) 2008-09-19 2013-03-12 Nerviano Medical Sciences S.R.L. 3,4-dihydro-2H-pyrrolo[1,2-a]pyrazin-1-one derivatives for the modulation of the activity of protein kinases
RS53350B (sr) 2008-09-22 2014-10-31 Array Biopharma, Inc. Supstituisana jedinjenja imidazo[1,2-b]piridazina kao inhibitori trk kinaze
EP2331530B8 (en) 2008-09-26 2013-12-25 National Health Research Institutes Fused multicyclic compounds as protein kinase inhibitors
PT2725028T (pt) 2008-10-22 2016-08-31 Array Biopharma Inc Compostos de pirazolo[1,5-]pirimidina substituídos como intermediários na síntese de inibidores de cinase trk
WO2010054058A1 (en) 2008-11-06 2010-05-14 Ambit Bioscience Corporation Imidazolothiazole compounds as modulators of protein kinase
JP2012509859A (ja) 2008-11-24 2012-04-26 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ 中皮腫の治療のためのｃｄｋ阻害物質
KR101061599B1 (ko) 2008-12-05 2011-09-02 한국과학기술연구원 비정상 세포 성장 질환의 치료를 위한 단백질 키나아제 저해제인 신규 인다졸 유도체, 이의 약학적으로 허용가능한염 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
JO3265B1 (ar) 2008-12-09 2018-09-16 Novartis Ag مثبطات بيريديلوكسى اندولات vegf-r2 واستخدامها لعلاج المرض
KR101841003B1 (ko) 2009-03-18 2018-03-22 리스버로직스 코퍼레이션 신규한 소염제
WO2010111527A1 (en) 2009-03-26 2010-09-30 Plexxikon, Inc. Pyrazolo [ 3, 4 -b] pyridines as kinase inhibitors and their medical use
TWI410418B (zh) 2009-04-29 2013-10-01 Ind Tech Res Inst 氮雜薁化合物、藥學組合物與抑制一細胞中蛋白質激酶之活性的方法
TWI484961B (zh) 2009-05-08 2015-05-21 Astellas Pharma Inc Diamine heterocyclic methyl ester compounds
CN102480966B (zh) 2009-06-12 2015-09-16 达娜-法勃肿瘤研究所公司 融合的杂环化合物及其用途
WO2010145998A1 (en) 2009-06-15 2010-12-23 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Substituted pyrimidinylpyrrolopyridinone derivatives, process for their preparation and their use as kinase inhibitors
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
IN2012DN01961A (sr) 2009-08-17 2015-08-21 Intellikine Llc
KR101256018B1 (ko) 2009-08-20 2013-04-18 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 1,3,6-치환된 인돌 화합물
FR2951172B1 (fr) 2009-10-13 2014-09-26 Pf Medicament Derives pyrazolopyridines en tant qu'agent anticancereux
KR101147550B1 (ko) 2009-10-22 2012-05-17 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해활성을 가지는 2,7-치환된 티에노［3,2-ｄ］피리미딘 화합물
KR101116756B1 (ko) 2009-10-27 2012-03-13 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 신규의 1,6-치환된 인돌 화합물
EP2493313B1 (en) 2009-10-29 2017-12-13 Genosco Kinase inhibitors
NZ599041A (en) 2009-11-13 2014-05-30 Genosco Kinase inhibitors
KR101094446B1 (ko) 2009-11-19 2011-12-15 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해활성을 가지는 2,4,7-치환된 티에노［3,2-ｄ］피리미딘 화합물
EP2937345B1 (en) 2009-12-29 2018-03-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Type ii raf kinase inhibitors
KR101483215B1 (ko) 2010-01-29 2015-01-16 한미약품 주식회사 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 비시클릭 헤테로아릴 유도체
US8772279B2 (en) 2010-01-29 2014-07-08 Nerviano Medical Sciences S.R.L. 6,7-dihydroimidazo[1,5-a]pyrazin-8(5H)-one derivatives as protein kinase modulators
ES2636262T3 (es) 2010-01-29 2017-10-05 Hanmi Science Co., Ltd. Derivados de tieno[3,2-d]pirimidina que tienen actividad inhibidora en las proteínas cinasas
DK2536414T3 (en) 2010-02-18 2016-10-03 Inserm (Institut Nat De La Santé Et De La Rech Médicale) METHOD FOR PREVENTING cancer metastasis
TWI510487B (zh) 2010-04-21 2015-12-01 Plexxikon Inc 用於激酶調節的化合物和方法及其適應症
WO2011146336A1 (en) 2010-05-20 2011-11-24 Array Biopharma Inc. Macrocyclic compounds as trk kinase inhibitors
UY33597A (es) 2010-09-09 2012-04-30 Irm Llc Compuestos y composiciones como inhibidores de la trk
WO2012034095A1 (en) 2010-09-09 2012-03-15 Irm Llc Compounds and compositions as trk inhibitors
WO2012047017A2 (ko) 2010-10-05 2012-04-12 크리스탈지노믹스(주) 2,3-디히드로-이소인돌-1-온 유도체 및 이를 포함하는 조성물
JP2014005206A (ja) 2010-10-22 2014-01-16 Astellas Pharma Inc アリールアミノヘテロ環カルボキサミド化合物
EP2668188B1 (en) 2011-01-26 2016-05-18 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Tricyclic derivatives, process for their preparation and their use as kinase inhibitors
WO2012101032A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Tricyclic pyrrolo derivatives, process for their preparation and their use as kinase inhibitors
CN102093421B (zh) 2011-01-28 2014-07-02 北京康辰药业有限公司 一种含磷取代基的喹啉类化合物及其制备方法、以及含有该化合物的药物组合物及其应用
CN103517710B (zh) 2011-02-07 2017-05-31 普莱希科公司 用于激酶调节的化合物
RU2606497C2 (ru) 2011-02-24 2017-01-10 НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.р.л. Тиазолилфенилбензолсульфонамидопроизводные в качестве ингибиторов киназ
WO2012116217A1 (en) 2011-02-25 2012-08-30 Irm Llc Compounds and compositions as trk inhibitors
US8791112B2 (en) 2011-03-30 2014-07-29 Arrien Pharmaceuticals Llc Substituted 5-(pyrazin-2-yl)-1H-pyrazolo [3, 4-B] pyridine and pyrazolo [3, 4-B] pyridine derivatives as protein kinase inhibitors
HUE046988T2 (hu) 2011-04-01 2020-04-28 Univ Utah Res Found Szubsztituált N-fenilpirimidin-2-amin analógok mint AXL kináz inhibitorok
US9284298B2 (en) 2011-04-11 2016-03-15 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Pyrazolyl-pyrimidine derivatives as kinase inhibitors
WO2012143248A1 (en) 2011-04-19 2012-10-26 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Substituted pyrimidinyl-pyrroles active as kinase inhibitors
AR086042A1 (es) 2011-04-28 2013-11-13 Galapagos Nv Compuesto util para el tratamiento de enfermedades degenerativas e inflamatorias y composicion farmaceutica
JP6396210B2 (ja) 2011-05-12 2018-09-26 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ キナーゼ阻害剤として活性な置換インダゾール誘導体
CN103649076B (zh) 2011-05-13 2015-09-09 阵列生物制药公司 作为trka激酶抑制剂的吡咯烷基脲和吡咯烷基硫脲化合物
RU2477723C2 (ru) 2011-06-16 2013-03-20 Общество С Ограниченной Ответственностью "Фьюжн Фарма" Ингибиторы протеинкиназ (варианты), их применение для лечения онкологических заболеваний и фармацевтическая композиция на их основе
CN102827073A (zh) * 2011-06-17 2012-12-19 安吉奥斯医药品有限公司 治疗活性组合物和它们的使用方法
WO2013016720A2 (en) 2011-07-28 2013-01-31 Gerinda Therapeutics, Inc. Novel substituted biarylheterocycle derivatives as protein kinase inhibitors for the treatment of cancer and other diseases
US8912200B2 (en) 2011-07-28 2014-12-16 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Alkynyl substituted pyrimidinyl-pyrroles active as kinases inhibitors
IN2014DN01605A (sr) 2011-08-04 2015-05-15 Nat Cancer Ct
SG2014012728A (en) 2011-08-23 2014-06-27 Foundation Medicine Inc Novel kif5b-ret fusion molecules and uses thereof
EP2751112B1 (en) 2011-09-02 2019-10-09 The Regents of The University of California Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidines and uses thereof
WO2013036232A2 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods and compositions for the treatment of myeloproliferative diseases and other proliferative diseases
CN102408411B (zh) 2011-09-19 2014-10-22 北京康辰药业股份有限公司 一种含喹啉基的羟肟酸类化合物及其制备方法、以及含有该化合物的药物组合物及其应用
WO2013042137A1 (en) 2011-09-19 2013-03-28 Aurigene Discovery Technologies Limited Bicyclic heterocycles as irak4 inhibitors
ES2639064T3 (es) 2011-10-07 2017-10-25 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Derivados de 3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-1(2h)-ona sustituidos como inhibidores de cinasa
ES2660265T3 (es) 2011-10-07 2018-03-21 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Derivados de 3,4-dihidropirrolo[1,2-a]pirazin-1(2h)-ona 4-alquil-sustituidos como inhibidores de cinasa
WO2013074518A1 (en) 2011-11-14 2013-05-23 Tesaro, Inc. Modulating certain tyrosine kinases
TW201335372A (zh) 2011-11-30 2013-09-01 Nat Cancer Ct 誘導惡性幹細胞
BR122019019582B1 (pt) 2011-12-30 2021-07-13 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Compostos derivados de tieno[3,2-d]pirimidina, composição farmacêutica contendo os ditos compostos e uso dos mesmos para a prevenção ou tratamento de uma doença causada por ativação anormal de uma proteína quinase
US8377946B1 (en) 2011-12-30 2013-02-19 Pharmacyclics, Inc. Pyrazolo[3,4-d]pyrimidine and pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds as kinase inhibitors
JP2015109806A (ja) 2012-03-22 2015-06-18 アステラス製薬株式会社 新規ｒｅｔ融合体の検出法
WO2013161919A1 (ja) 2012-04-26 2013-10-31 小野薬品工業株式会社 Ｔｒｋ阻害化合物
AU2013259267A1 (en) 2012-05-10 2014-11-06 Synta Pharmaceuticals Corp. Treating cancer with Hsp90 inhibitory compounds
WO2013174876A1 (en) 2012-05-23 2013-11-28 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Process for the preparation of n-[5-(3,5-difluoro-benzyl)-1h-indazol-3-yl]-4-(4-methyl-piperazin-1-yl)-2-(tetrahydro-pyran-4-ylamino)-benzamide
TWI585088B (zh) 2012-06-04 2017-06-01 第一三共股份有限公司 作爲激酶抑制劑之咪唑并［１，２－ｂ］嗒衍生物
PL2872491T3 (pl) 2012-07-11 2021-12-13 Blueprint Medicines Corporation Inhibitory receptora czynnika wzrostu fibroblastów
EP2872690B1 (en) 2012-07-13 2020-04-08 Otis Elevator Company Belt including fibers
CN104619841A (zh) 2012-07-26 2015-05-13 日本国立癌症研究中心 Cep55基因与ret基因的融合基因
EP2880025B1 (en) 2012-08-02 2018-12-05 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Substituted pyrroles active as kinases inhibitors
CN104703600A (zh) 2012-09-07 2015-06-10 埃克塞里艾克西斯公司 用于治疗肺腺癌的met、vegfr和ret的抑制剂
RU2648818C2 (ru) 2012-09-25 2018-03-28 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Ингибитор ret
CN108047219A (zh) 2012-11-07 2018-05-18 内尔维阿诺医学科学有限公司 取代的嘧啶基和吡啶基吡咯并吡啶酮类、其制备方法及其作为激酶抑制剂的用途
EP2917183A1 (en) 2012-11-12 2015-09-16 Ignyta, Inc. Bendamustine derivatives and methods of using same
US9790178B2 (en) 2012-11-13 2017-10-17 Array Biopharma Inc. Pyrrolidinyl urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as TrkA kinase inhibitors
US9981959B2 (en) 2012-11-13 2018-05-29 Array Biopharma Inc. Thiazolyl and oxazolyl urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as TrkA kinase inhibitors
JP6345684B2 (ja) 2012-11-13 2018-06-20 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド 疼痛の治療に有用な二環式尿素、チオ尿素、グアニジン、およびシアノグアニジン化合物
WO2014078408A1 (en) 2012-11-13 2014-05-22 Array Biopharma Inc. Bicyclic heteroaryl urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trka kinase inhibitors
NZ708028A (en) 2012-11-13 2018-12-21 Array Biopharma Inc N-pyrrolidinyl, n’-pyrazolyl- urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trka kinase inhibitors
US9546156B2 (en) 2012-11-13 2017-01-17 Array Biopharma Inc. N-bicyclic aryl,N'-pyrazolyl urea, thiourea, guanidine cyanoguanidine compounds as TrkA kinase inhibitors
US9809578B2 (en) 2012-11-13 2017-11-07 Array Biopharma Inc. Pyrazolyl urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trkA kinase inhibitors
WO2014078331A1 (en) 2012-11-13 2014-05-22 Array Biopharma Inc. N-(arylalkyl)-n'-pyrazolyl-urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trka kinase inhibitors
WO2014078378A1 (en) 2012-11-13 2014-05-22 Array Biopharma Inc. Pyrrolidinyl urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trka kinase inhibitors
WO2014078325A1 (en) 2012-11-13 2014-05-22 Array Biopharma Inc. N-(monocyclic aryl),n'-pyrazolyl-urea, thiourea, guanidine and cyanoguanidine compounds as trka kinase inhibitors
US20150290233A1 (en) 2012-11-29 2015-10-15 Yeda Research And Development Co.Ltd. At The Weizmann Institute Of Science Methods of preventing tumor metastasis, treating and prognosing cancer and identifying agents which are putative metastasis inhibitors
WO2014086284A1 (zh) 2012-12-04 2014-06-12 上海医药集团股份有限公司 一类氘代3-氰基喹啉类化合物、其药用组合物、制备方法及其用途
FR3000494B1 (fr) 2012-12-28 2015-08-21 Oribase Pharma Nouveaux derives d'azaindoles en tant qu'inhibiteurs de proteines kinases
AU2013371146C1 (en) 2012-12-28 2019-01-17 Crystalgenomics, Inc. 2,3-dihydro-isoindole-1-on derivative as BTK kinase suppressant, and pharmaceutical composition including same
FR3000492B1 (fr) 2012-12-28 2015-09-11 Oribase Pharma Nouveaux derives azaindole en tant qu'inhibiteurs multikinases
FR3000493A1 (fr) 2012-12-28 2014-07-04 Oribase Pharma Nouveaux inhibiteurs de proteines kinases
BR112015019921A2 (pt) 2013-02-19 2017-07-18 Ono Pharmaceutical Co composto inibidor de trk
US20160151461A1 (en) 2013-03-14 2016-06-02 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Cardio-Metabolic and Vascular Effects of GLP-1 Metabolites
EP2970231A1 (en) 2013-03-15 2016-01-20 Blueprint Medicines Corporation Piperazine derivatives and their use as kit modulators
AR095308A1 (es) 2013-03-15 2015-10-07 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Compuesto de 2-piridona, composición farmacéutica que lo comprende y su uso para preparar un medicamento
UA115264C2 (uk) 2013-03-15 2017-10-10 Глаксосмітклайн Інтеллектьюел Проперті Девелопмент Лімітед Піридинові похідні як інгібітори реаранжованої у процесі трансфекції (ret) кінази
US9682083B2 (en) 2013-05-14 2017-06-20 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Pyrrolo[2,3-D]pyrimidine derivatives, process for their preparation and their use as kinase inhibitors
KR20160013028A (ko) 2013-05-30 2016-02-03 플렉시콘, 인코퍼레이티드 키나제 조정을 위한 화합물 및 그에 대한 적응증
EP3027655B1 (en) 2013-07-30 2019-08-21 Blueprint Medicines Corporation Ntrk2 fusions
US10875930B2 (en) 2013-07-30 2020-12-29 Blueprint Medicines Corporation PIK3C2G fusions
WO2015025866A1 (ja) 2013-08-20 2015-02-26 独立行政法人国立がん研究センター 肺がんで見出された新規融合遺伝子
KR20160055170A (ko) 2013-08-30 2016-05-17 암비트 바이오사이언시즈 코포레이션 바이아릴 아세트아미드 화합물 및 이의 사용 방법
AU2013402175B2 (en) 2013-09-30 2017-09-07 Handok Inc. Novel triazolopyrazine derivative and use thereof
US9334263B2 (en) 2013-10-17 2016-05-10 Blueprint Medicines Corporation Compositions useful for treating disorders related to kit
RU2706235C2 (ru) 2013-10-17 2019-11-15 Блюпринт Медсинс Корпорейшн Композиции, пригодные для лечения расстройств, связанных с kit
RU2704112C2 (ru) 2013-10-25 2019-10-24 Блюпринт Медсинс Корпорейшн Ингибиторы рецептора фактора роста фибробластов
GB201321146D0 (en) 2013-11-29 2014-01-15 Cancer Rec Tech Ltd Quinazoline compounds
US9801880B2 (en) 2013-12-02 2017-10-31 Bergenbio As Use of kinase inhibitors
US9695165B2 (en) 2014-01-15 2017-07-04 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
MX2016009588A (es) 2014-01-24 2017-05-15 Tp Therapeutics Inc Macrociclos de diarilo como moduladores de la proteina quinasa.
EA032757B1 (ru) 2014-02-14 2019-07-31 Экселиксис, Инк. Кристаллические твердые формы n-{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-n'-(4-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамида, способы получения и способы применения
US10231965B2 (en) 2014-02-20 2019-03-19 Ignyta, Inc. Molecules for administration to ROS1 mutant cancer cells
WO2015161277A1 (en) 2014-04-18 2015-10-22 Blueprint Medicines Corporation Met fusions
WO2015161274A1 (en) 2014-04-18 2015-10-22 Blueprint Medicines Corporation Pik3ca fusions
SG11201609550PA (en) 2014-05-15 2016-12-29 Array Biopharma Inc 1-((3s,4r)-4-(3-fluorophenyl)-1-(2-methoxyethyl)pyrrolidin-3-yl)-3-(4-methyl-3-(2-methylpyrimidin-5-yl)-1-phenyl-1h-pyrazol-5-yl)urea as a trka kinase inhibitor
EP3155131B1 (en) 2014-06-10 2020-02-12 Blueprint Medicines Corporation Raf1 fusions
WO2015191667A1 (en) 2014-06-10 2015-12-17 Blueprint Medicines Corporation Pkn1 fusions
EP3169804B3 (en) 2014-07-17 2019-09-18 Blueprint Medicines Corporation Fgr fusions
JP6665154B2 (ja) 2014-07-17 2020-03-13 ノース・アンド・サウス・ブラザー・ファーマシー・インベストメント・カンパニー・リミテッド 置換尿素誘導体及びその薬学的使用
US10370724B2 (en) 2014-07-17 2019-08-06 Blueprint Medicines Corporation PRKC fusions
US10370723B2 (en) 2014-07-17 2019-08-06 Blueprint Medicines Corporation TERT fusions
US9688680B2 (en) 2014-08-04 2017-06-27 Blueprint Medicines Corporation Compositions useful for treating disorders related to kit
HUE045237T2 (hu) 2014-08-18 2019-12-30 Ono Pharmaceutical Co TRK-inhibitáló vegyület savaddíciós sója
JP2017527574A (ja) 2014-09-08 2017-09-21 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッドＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ ２−（４−（４−エトキシ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−イル）−２−フルオロフェニル）−ｎ−（５−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）イソオキサゾール−３−イル）アセトアミドの結晶形
CA2960768A1 (en) 2014-09-10 2016-03-17 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Pyridone derivatives as rearranged during transfection (ret) kinase inhibitors
PE20170677A1 (es) 2014-09-10 2017-05-13 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Nuevos compuestos como inhibidores de reorganizado durante la transfeccion (ret)
TWI538914B (zh) 2014-10-03 2016-06-21 國立交通大學 蛋白質激酶之選擇性抑制劑、其醫藥組成物及其用途
EA039885B1 (ru) 2014-11-14 2022-03-23 НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.р.л. Производные 6-амино-7-бицикло-7-деазапурина в качестве ингибиторов протеинкиназы
ES2941630T3 (es) 2014-11-16 2023-05-24 Array Biopharma Inc Forma cristalina de sulfato de hidrógeno de (S)-N-(5-((R)-2-(2,5-difluorofenil)-pirrolidin-1-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)-3-hidroxipirrolidin-1-carboxamida
EP3221700B1 (en) 2014-11-18 2022-06-22 Blueprint Medicines Corporation Prkacb fusions
US10336707B2 (en) 2014-12-16 2019-07-02 Eudendron S.R.L. Heterocyclic derivatives modulating activity of certain protein kinases
WO2016127074A1 (en) 2015-02-06 2016-08-11 Blueprint Medicines Corporation 2-(pyridin-3-yl)-pyrimidine derivatives as ret inhibitors
KR101675984B1 (ko) 2015-02-23 2016-11-14 한양대학교 에리카산학협력단 티에노디아제핀 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물
WO2016141169A1 (en) 2015-03-03 2016-09-09 Caris Mpi, Inc. Molecular profiling for cancer
WO2016168992A1 (en) 2015-04-21 2016-10-27 Ruijin Hospital Affiliated To Shanghai Jiao Tong University School Of Medicine Preparation and use of novel protein kinase inhibitors
GB201512365D0 (en) 2015-07-15 2015-08-19 King S College London Novel therapy
JP6816100B2 (ja) 2015-07-16 2021-01-20 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ＲＥＴキナーゼ阻害物質としての置換ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン化合物
EP3120851A1 (en) 2015-07-21 2017-01-25 Pangaea Biotech S.L. 4-amino-6-(2,6-dichlorophenyl)-8-methyl-2-(phenylamino)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8h)-one for treatment of solid cancers
KR101766194B1 (ko) 2015-08-07 2017-08-10 한국과학기술연구원 RET 키나아제 저해제인 신규 3-(이속사졸-3-일)-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 화합물
WO2017027883A1 (en) 2015-08-13 2017-02-16 San Diego State University Research Foundation Atropisomerism for increased kinase inhibitor selectivity
MA41559A (fr) 2015-09-08 2017-12-26 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Composé de pyrimidine condensé ou un sel de celui-ci
WO2017049462A1 (zh) 2015-09-22 2017-03-30 合肥中科普瑞昇生物医药科技有限公司 一类新型的flt3激酶抑制剂及其用途
CN105255927B (zh) 2015-09-30 2018-07-27 温州医科大学附属第一医院 一种kiaa1217-ret融合基因
WO2017079140A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of ret
EP3387145A1 (en) 2015-12-08 2018-10-17 Boehringer Ingelheim International GmbH Method using a ret fusion gene as a biomarker to select non-small cell lung cancer (nsclc) and thyroid cancer patients for a cancer treatment
WO2017122815A1 (ja) 2016-01-15 2017-07-20 公益財団法人がん研究会 新規融合体及びその検出法
TWI620748B (zh) 2016-02-05 2018-04-11 National Health Research Institutes 氨基噻唑化合物及其用途
CN108697714B (zh) 2016-02-23 2022-04-26 大鹏药品工业株式会社 稠合嘧啶化合物或其盐
WO2017145050A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Pyridylpyridone derivative useful as a ret kinase inhibitor in the treatment of ibs and cancer
AR107912A1 (es) 2016-03-17 2018-06-28 Blueprint Medicines Corp Inhibidores de ret
US10045991B2 (en) 2016-04-04 2018-08-14 Loxo Oncology, Inc. Methods of treating pediatric cancers
EP3960180A1 (en) 2016-04-15 2022-03-02 Cancer Research Technology Limited Heterocyclic compounds as ret kinase inhibitors
ES2925698T3 (es) 2016-04-15 2022-10-19 Cancer Research Tech Ltd Compuestos heterocíclicos como inhibidores de la quinasa RET
TWI704148B (zh) 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
JOP20190077A1 (ar) 2016-10-10 2019-04-09 Array Biopharma Inc مركبات بيرازولو [1، 5-a]بيريدين بها استبدال كمثبطات كيناز ret

Also Published As

Publication number Publication date
CO2019004649A2 (es) 2019-05-21
US10172845B2 (en) 2019-01-08
KR102287752B1 (ko) 2021-08-11
DK3523302T3 (da) 2022-08-01
IL265918B (en) 2021-01-31
US20180134703A1 (en) 2018-05-17
US20180148445A1 (en) 2018-05-31
SA519401544B1 (ar) 2022-07-19
US20220313676A1 (en) 2022-10-06
CN110177786A (zh) 2019-08-27
ECSP19033052A (es) 2019-07-31
MX2019004204A (es) 2019-08-21
US20200383966A9 (en) 2020-12-10
HUE060089T2 (hu) 2023-01-28
WO2018071454A1 (en) 2018-04-19
EP3523302B1 (en) 2022-07-20
US20200030311A1 (en) 2020-01-30
PE20191613A1 (es) 2019-11-05
HRP20221154T1 (hr) 2022-12-09
DOP2019000091A (es) 2019-06-30
SG11201903187WA (en) 2019-05-30
CL2019000942A1 (es) 2019-11-15
PT3523302T (pt) 2022-09-23
MX388140B (es) 2025-03-19
CY1125606T1 (el) 2024-09-20
US10144734B2 (en) 2018-12-04
EP3523302A1 (en) 2019-08-14
US10881652B2 (en) 2021-01-05
CN110177786B (zh) 2021-12-14
KR20190077389A (ko) 2019-07-03
BR112019007143A2 (pt) 2019-07-02
ES2926136T3 (es) 2022-10-24
TWI752098B (zh) 2022-01-11
PL3523302T3 (pl) 2022-10-24
CA3039912A1 (en) 2018-04-19
PH12019500776A1 (en) 2019-07-01
JP7075399B2 (ja) 2022-05-25
TN2019000107A1 (en) 2020-10-05
UA125032C2 (uk) 2021-12-29
JOP20190077A1 (ar) 2019-04-09
IL265918A (en) 2019-06-30
AU2017342027A1 (en) 2019-05-23
SI3523302T1 (sl) 2022-09-30
TW201827428A (zh) 2018-08-01
US10441581B2 (en) 2019-10-15
US20180133207A1 (en) 2018-05-17
US11648243B2 (en) 2023-05-16
MD3523302T2 (ro) 2022-12-31
AU2017342027B2 (en) 2021-04-01
CR20190224A (es) 2019-09-30
EP4144735A1 (en) 2023-03-08
LT3523302T (lt) 2022-09-12
JP2019533670A (ja) 2019-11-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11648243B2 (en) Substituted pyrazolo[1,5-A]pyridine compounds as RET kinase inhibitors
JP7761732B2 (ja) Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての置換ピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン化合物
JP2022515198A (ja) ＦＧＦＲチロシンキナーゼの阻害剤としての置換ピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン化合物
CA3049136A1 (en) Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrazine compounds as ret kinase inhibitors
HK40004737B (en) Substituted pyrazolo[1,5-a]pyridine compounds as ret kinase inhibitors
HK40004737A (en) Substituted pyrazolo[1,5-a]pyridine compounds as ret kinase inhibitors
EA037208B1 (ru) ЗАМЕЩЕННЫЕ ПИРАЗОЛО[1,5-а]ПИРИДИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ RET КИНАЗЫ