PT95607A

PT95607A - Processo para a preparacao de derivados axiais de hidroxi-acidos e de acidos mono - e dicarboxilicos soluveis em agua e em outros dissolventes com accao antitumoral e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT95607A
Application number: PT95607A
Authority: PT
Inventors: Joseph Ballard Bogardus; Murray Arthur Kaplan; Robert Kevin Perrone; Kenneth J Wilcox
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1989-10-17
Filing date: 1990-10-16
Publication date: 1991-09-13
Also published as: ZA908250B; FI905018A0; KR910007947A; AU6461890A; IE903719A1; EP0423707A3; EP0423707A2; AU635346B2; JPH03151396A; CA2027792A1

Description

BRISTOL-MYERS SQUIBB COMPANY

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DERIVADOS AXIAIS DE HIDROXI-ACIDOS E DE ÁCIDOS MONO- E DlCARBOXILICOS SOLOVEIS EM AGUA E EM OUTROS DISSOLVENTES COM ACÇÃO ANTITUMORAL E DE COMPOSIÇQES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM 1. Campo da invenção A presente invenção refere-se a derivados axiais de platina (IV) hidroxilados e carboxilados com actividade anti-tumoral. Alguns dos compostos da presente invenção possuem exceleii te solubilidade na água, o que os torna mais eficazes para as fo_r mas posolõgicas farmacêuticas do que os derivados de platina conhe eidos como quimicamente eficazes; outros compostos são lipossolú-veís, o que indica a sua utilização potencial nos lipossomas, para incorporação numa fase oleosa interna duma emulsão óleo/água para administração oral ou parenteral, para soluções oleosas injectá-veis directamente em tumores sólidos ou para utilização tópica,sob a forma de pomadas, geles, etc. Os compostos de acordo com a presente invençãr exibem melhores propriedades relativamente a outros compostos de platina conhecidos, tais como menor toxicidade renal e medular acompanhantes de grande actividade tumoral,

2. Descrição da técnica anterior

Estudou-se um grande número de complexos de plat^ na (II) e platina (IV) para a sua aplicação como agentesanti-tumo-rais.

Muitos destes derivados exibiram actividade sobre as células neoplãsicas in vitro e in vivo. Um composto de platina (II) ( cis-diclorodiamina-platina (II) está comercializado e disp£ nível para o tratamento de certos tumores humanos. Contudo, a mai£ ria destes derivados têm efeitos indesejáveis quando são administra dos in vivo ou não são muito solúveis nos líquidos aquosos.

As patentes de invenção publicadas, pedidos de p£ tente de invenção, e documentos em publicações técnicas relacionados com os derivados de platina (IV) são os seguintes:

Patente de invenção norte-americana ns 4466924 re fere-se a compostos de platina de fórmula geral

3 -3-

na qual X representa um átomo de hidrogénio, um radical sulfato, um radical carboxilato eventualmente substituído e Y representa um halogenóide ou um grupo hidroxilo, nitrato ou carboxilato. Contudo, apenas os derivados tetra-halogenados e di-halogeno-di-hidro-xi são referidos como espécies particulares destes compostos. A patente de invenção norte-americana ns 4250189 refere-se a compostos de platina de fórmula geral

Z

Z na qual Z ou está ausente ou representa um átomo de halogéneo, um pseudo-halogéneo ( por exemplo cianeto, cianato, tiocianato e azi-da) ou um grupo hidroxi; X e Y, iguais ou diferentes, representam, cada um, um grupo sulfato, fosfato, nitrato, carboxilato eventualmente substituído, uma molécula de água, um átomo de halogéneo ou um pseudo-halogéneo. Os derivados carboxilato axiais não estão des^ critos ou reivindicados. -4-

As patentes de invenção norte-americanas na 4581224 e nQ 4594238 referem-se ao processo para a utilização de compostos ditiocarbâmicos para reduzir os efeitos nocivos provocados pela ad^ ministração dos complexos de platina.Eritire outros compostos de pla_ tina geralmente citados na página 11 em cada uma das patentes ante_ riormente referidas consideram-se os compostos de fórmula geral

na qual os substituintes para os símbolos X^» Xgs ^3 e ^4 s^° 9e“ ralmente descritos,mas de preferência e representam átomos de halogéneo e os símbolos X~ e X representam grupos -OH ou mole O ™r cuias de água. Os compostos de platina são geral, e amplamente des_ critos e não estão descritos exemplos de compostos ou de derivai— dos sub-genéricos em que os substituintes equatoriais sejam átomos de halogéneo quando pelo menos um dos substituintes axiais for um derivado carboxilato.

A patente de invenção norte-americana n^ 4119654 refere compostos de platina de fórmula geral

OH na qual X e Y representam, cada um, um halogenóide e A e B represeii tam cada um, independentemente, um grupo amina alifática de cadeia ramificada de fórmula geral na qual n representa um número inteiro de 3a9 e todos os grupos representados por R, iguais ou diferentes, representam, cada um,um átomo de hidrogénio ou de-halogéneo ou um grupo alquilo, arilo, aj_ canilo, aralquilo, pseudo-halogéneo, hidroxi, carbonilo, formilo, nitro, amido, amino, ácido sulfónico, sal de ácido sulfónico, ácido carboxílico ou sal de ácido carboxílico. A patente de invenção norte-americana ns 4119653 refere compostos de platina de fórmula geral

OH

na qual X e Y representam cada um, um halogenóide e A e B represen tam, cada um, independentemente, uma amina (NH^) ou um grupo de amina alifática de cadeia linear de fórmula geral C -R_ «-NH. n 2n+1 2 na qual n representa um número inteiro de 3 a 9 e R tem os significados definidos na patente de invenção norte-americana n8 4119654, anteriormente citada. 0 pedido de patente de invenção britânica ns 2 006213A descreve compostos de platina de fórmula geral

Z

na qual, entre outros, Z representa um grupo hidroxi e X e Y repr£ sentam, cada um um grupo halogenóide e A e B representam, cada um um grupo amina alicíclica ou amina alicíclica C-substituída de fójr mula geral cicl0-Cn-R2n+rNH2 na qual n representa um número de 3 a 7 e R tem os significados de_ finidos na patente de invenção norte-americana ηθ 41 19654, anterio_r mente citada. 0 pedido de patente de invenção britânica η2 2148819A refere-se aos compostos de fórmula geral n (V)

P t (Y) n

X -8-

na qual e representam, cada um, um grupo alquilo C^-C^ ou, considerados conjuntamente, representam um grupo alquileno C^-Cg, X representa um átomo de halogéneo, um grupo de fórmula 0 0 0 II II 11 -0-C-C-CH3 ou -0-C-CH2-Cl ou representam conjuntamente um grupo de fórmual geral

em que R3 representa um grupo alquilo inferior ou um grupo de fór mula geral -0M, na qual M representa um catião monovalente; Y representa um átomo de halogéneo ou um grupo OH e n representa 0 ou 1. A patente de invenção norte-americana nQ 4658047 descreve isómeros de 1,2-diaminociclo-hexano-tetracloro-platina (IV) do tipo

Cl -9-

em que os compostos são cis-, trans (d,l), trans-1 ou trans-d. A patente de descreve compostos de fórmula invenção norte-americana n9 4431666 geral

R Y

X 3 na qual e R^ representam,cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo, arilo ou arálquilo com 1 a 20 átomos de carbono ou cicloalquilo com 3 a 7 átomos de carbono, podendo R,| e R2 conjuntamente representar um grupo cicloalquilo com 3 a 7 átomos de carbono, R^ e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo, arilo ou aral^ quilo com 1 a 20 átomos de carbono e X e Y representam, cada um,in_ dependentemente, um grupo aniónico.

Alguns derivados acilados de platina (IV) estão descritos na literatura. Por exemplo Zh. Neorq. Khim 27 (5) (1982) 1234-1238 descreve um complexo de platina de fórmula -10-

0 II

Int. J. Mass. Spectrom. Ion. Phys., 48, ( 1983) 177-180 descreve complexos de platina de fórmulas gerais

0 II

0' 11

°SCF2CF3 0 í OCCF, II 3 0

°ÍCF2CF2CF3 0 -11-

e Chemical Abstracts 101 (20) 182625s, refere-se a complexos de platina de fórmula

Sumário da Invenção

Descobriram-se compostos axiais hidroxilados ou carboxilados que apresentam as fórmulas gerais

n

em que na fórmula geral I A e B representam, cada um, independentemente, uma amina ou uma amina monodentada ou A e B representam, considerados conjuntamente, uma amina bidentada e A e B se coordenam ao átomo de platina atra vés do seu átomo de azoto; X e Y representam, cada um, independentemente, um átomo de halogéneo; e R e R" representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alcanoi i° c1-c2Q, aroílo, he-teroaroílo ou um grupo escolhido entre

0 NH 2 0

0 NH 2 0 tl

II

II -C-CH-CH2-C-0H, -C-CH-(CH2)2-C-0H, 0 OH OH 0

II

II -C-CH-CH-C-OH, ou um grupo de fórmula geral

0 OH OH 0

II

-C-CH-(CH2)u,-CH-C-0H -13-

na qual u representa um número inteiro de 1 a 5 com a cond_i_ ção de um dos símbolos R* e R" não representar um átomo de hidrogénio e ainda de os símbolos A, B,X e Y representarem substituintes estruturalmente equatoriais em relação ao grupo de fórmula geral OR -Pt-OR"; e em que na fórmula geral Ia, A e B representam, cada um independentemente, uma amina ou uma amina monodentada, ou A e B representam conjuntamente uma amina bidentada; n1 representa 1 ou 2, e quando n' representa 1, um dos símbolos x' e X" representa um átomo de halogéneo e o outro representa um grupo aciloxi C^-C^, Y e Y" ΓΘΡΓϋ sentam, cada um, independentemente, um grupo acilo C^-C^q, com a condição de A, B, X’ e X" representarem substituintes estruturalmente equatoriais e quando n' representa 2, X* e X" representarem, cada um, independentemente, um átomo de halogéneo; e pelo menos dois dos grupos representados por Y1 e Y" se ligam para formarem um dímero, mediante uma ponte constituída por um grupo derivado de .um ácido carboxílico, sendo o referido grupo em ponte escolhido entre 0 NH0 0

II i L II 0 NH 0 ii i 2 ii -C-CH-CH2-C-, -C-CH-(CH2)2-C-, 0 OH OH 0

II

II -C-CH-CH-C-, -14- ou por um grupo de fórmula geral 0 OH OH 0 i 1 " -C-CH-(CH2) ,-CH-C- na qual u‘ representa um número inteiro de 1 a 5 e os restantes grupos representados por Y1 e Y", representam cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, um grupo alcanoílo C^-C , aroílo ou heteroaroílo, com a condição de A, B, X·1 e X" representarem substituintes estruturalmente equatoriais relativamente ao grupo de fórmula geral 0Y‘-Pt-0Y".

As designações "equatorial" e "axial" utilizadas neste pedido de patente de invenção servem para designar as relações estéricas tridimensionais dos grupos substituintes ligados ao núcleo de platina (IV), uns em relação aos· outros, no mesmo complexo de platina. Assim, por exemplo, na fórmula geral I, (A,B)= =Pt=(X,Y) formam o plano equatorial "relativamente a um plano axial formado por OR1-Pt-OR" ".

Inesperadamente, descobriu-se que os compostos de acordo com apresente invenção são úteis para o tratamento de tu mores. Designadamente, os complexos de platina de acordo com a pr£ sente invenção têm grande actividade anti-tumoral e são, portanto, utilizáveis no tratamento de mamíferos e outros animais com doen- -15-

ças provocadas por tumores, para inibir o desenvolvimento de tum£ res nos mamíferos. Os compostos da presente invenção, portanto,são utilizáveis num método terapêutico para tratar um animal hospedeiro portador de um tumor maligno, que consiste em administrar uma dose eficaz para inibir o tumor, de um composto de acordo com a presente invenção ou de uma composição farmacêutica que o contenha.

De acordo com um outro aspecto, os compostos da presente invenção são utilizáveis para a preparação de composições farmacêuticas que contenham uma quantidade eficaz, inibidora do t£ mor, de um composto de acordo com a presente invenção em associação com um veículo ou dissolvente inertes, aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

As propriedades físicas dos compostos de acordo com a presente invenção são particularmente adequadas para o trata mento de tumores. Por exemplo, os derivados acilados com menor número de átomos de carbono são, de um modo geral, solúveis na água e alguns destes compostos são muito solúveis na água. Os compostos com excelente solubilidade na água são mais eficazes para inclusão em formas farmacêuticas, por exemplo soluções injectáveis end£ venosas ou composições para administração oral, do que os derivados de platina quimicamente activos conhecidos. . Surpreendentemente;os derivados acilados com maior número de átomos de carbono são, de um modo geral, solúveis em óleo "-ίγ. solúveis em óleo e/ou lipossolúveis, para inclusão em lipossomas ou para emulsão óleo/água ou para formas poso. e apresentam vantagem quando dado que são muito adequados a fase oleosa interna de uma lógicas parentéricas. res sólidos, sob ção tópica sob a

Também são úteis para injecção directa em tumo-a forma de soluções oleosas ou ainda para aplica forma de pomadas, geles, etc.

Descrição de Aspectos Preferidos

Os compostos de acordo com a presente invenção, tal como indicado anteriormente, são aplicáveis como agentes anti--tumorais. Contudo, certos sub-géneros ou espécies, desta invenção, têm maior preferência. Estes compostos e sub-géneros mais preferidos são em seguida indicados.

Os compostos preferidos, de acordo com a presente invenção, são os que apresentam a fórmula geral

-17-

na qual A e B representam, cada um, independentemente, um grupo amino ou amino alicíclico C^-C^ coordenado com átomo de platina através do seu átomo de azoto.

Também são compostos preferidos os compostos de fórmula geral I, na qual A e B, considerados conjuntamente, formam um grupo diamino alicíclico C3-C7· Ainda mais preferidos são os compostos substituídos de tal modo que A e B representam, considerados conjuntamente, um grupo 1,2-diamino-ciclo-hexano, especialmente cis-, trans (d,l)-, trans (1) ou trans (d)-1,2-diamino—ciclo--hexano. também são compostos preferidos os compostos de fórmula geral I na qual A e B representam, cada um, independentemente, uma amina ou um grupo amino alifático, de cadeia linear ou ramificada, com 1 a 6 átomos de carbono, coordenada com o átomo de platina através do seu átomo de azoto. São particularmente preferi_ dos entre os compostos assim substituídos os que apresentam a forma geral

OR" -ír na qual X e Y representam, cada um, independentemente um átomo de halogéneo e R* e R" representam, cada um,ijn dependentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo al-canoílo C.J-C Q, benz°íl0 ou nicotinoílo com a condição " de um dos símbolos R1 e R" não representar um átomo de hidrogénio ou ainda com a condição de A, B, X e Y repre sentarem, substituintes e estruturalmente equatoriais relativamente ao grupo de fórmula geral 0R'-Pt-0R". São ainda mais preferidos os compostos de fórmula geral II com as estruturas seguintes

0 0-C-H

0 II (Ha) (Hb)

0 - -C - H -19-

<CH3)

0 II o-c-ch3 <CH3)

(11 d) <CH3)

-20- 0 o-c-ch2-ch3

(Ilf) 0 II O-C-(CHj)g-CH3

ΠΙ9) 0 11 0-C-(CH3)2-CH3

(11 h) ο ιι

< 11 i) ο

<IIj> η./ . ^ São também preferidos os compostos de fórmula geral

na qual e R2 representam, cada um, independentemen, te, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^Cg, cicloalquilo C3-C7, arilo C6-C10, ou aril (C6-C1(J)-al- quilo C,-C- ou R. e R-, considerados conjuntamente com M 16 12 o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam um grupo cicloalquilo C3-C7; r‘ e R" representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alcanoílo benzoílo ou nicotinoílo, com a condição de um dos símbolos R* e R" não representar um átomo hidrogénio e ainda com a condição de A, B, X e Y representarem substituintes estruturalmente equatoriais relativamente ao grupo de fórmula geral OR*-Pt-OR".São particularmente preferidos, entre os compostos assim substituídos, aqueles em que X e Y representam, cada um, um átomo de cloro. Ainda mais preferidos são os com

postos deste tipo em que e R2 representam, cada um, um grupo CH3~CH2 ou em que R^ e R2 considerados conjun tamente com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam um grupo de fórmula geral

em que R representa um átomo de halogéneo ou um grupo alquilo C^-Cg e m representa um número inteiro de 0 a 10.

Ainda mais preferidos são os compostos de fórrnu la geral III na qual R representa um grupo alquilo e m re presenta um número inteiro de 0 a 10 e que apresentam a fórmula geral

(111 d) -24-

na qual X, Y, R e R" têm os significados definidos antes para a fórmula geral III.

Particularmente preferidos são os compostos em que X e Y representam, cada um, um átomo de cloro, R* representa um grupo -C(=0)-CH3, R" representa um átomo hidrogénio e m representa 0 ou em que X e Y representam, cada um, um átomo de cloro,R1 e R" representam, cada um, um grupo -C(C=0)-Ce m representa 0.

Ainda mais preferidos são os compostos de fórmjj la geral III que apresentam a fórmula geral

0R

0R" na qual X, Y, R e R" têm os significados definidos antes para a.fórmula geral III. São ainda preferidos os compostos representados “ pela fórmula geral

0R

0R" (IHf) -25-

na qual R^ e representam, cada um, um grupo alquilo C^-Cg ou Rg e R , considerados conjuntamente com o át£ mo de carbono ao qual estão ligados, representam um grupo cicloalquilo Cg-Cy; R1 e R" representam, cada um, independentemente, um áto mo de hidrogénio ou um grupo alcanoílo CrC20* benzoílo ou nicotinoílo com a condição de um dos símbolos R' e R" não representar um átomo de hidrogénio e ainda com a condição de A, B, X e Y representarem substituintes estruturalmente equatoriais em relação ao grupo de fórmula geral OR*-Pt-OR" São ainda preferidos os compostos de fórmula geral Ia na qual n‘ representa 1 e que apresentam a fórmula geral

OY

OY" (IV) na qual A e B representam, cada um, independentemente, um grupo amino ou um grupo alicíclico C^-Cy coordenado corm o átomo de platina através dos seus átomos de az£ to, e em que um dos símbolos X1 e X" representa um ât£ mo de cloro e o outro representa um grupo aciloxi C^C^; -26-

Y1 e Υ" representam, cada um, independentemente, um gru_ po acilo C^-C .

Entre os compostos assim substituídos são particularmente preferidos os compostos em que um dos símbolos x'e X" ne presenta um átomo de cloro e o outro representa um grupo 2-etil-he xanoílo. Ainda entre os compostos assim substituídos são também preferidos os compostos em que Y* e Y" representam, cada um,um gr£ po 2-eti1-hexanoílo. Ainda mais preferidos, entre estes compostos são aqueles em que o átomo de halogéneo é umátomo de cloro.

Também são compostos preferidos os compostos de fórmula geral I na qual n' representa 2, A e B representam, cada um, independentemente, um grupo amino, aminoalifático C.j-Cg, ou aminoalicíclico C^-C^ coordenado com os átomos, de platina através dos seus átomos de azoto, e em que X1 e X" representam cada um,um átomo de cloro. São ainda preferidos os compostos de fórmula geral I na qual X e Y representam, cada um, um átomo de cloro; R* re presenta um grupo formilo, acetilo, propinilo, butanoílo, pentanoí_ lo, hexanoílo, 2-eti1-hexanoílo, heptanoílo, octanoílo, nonanoílo, decanoílo ou 2,3-di-hidroxi-4-carboxi-1-butanoílo; R" representa um átomo de hidrogénio ou um grupo formilo, acetilo, propionilo,bu_ tanoílo, pentanoílo, hexanoílo, 2-eti1-hexanoílo, heptanoílo, octa noílo, nonanoílo, decanoílo ou 2,3-di-hidroxi-4-carboxi-1-butanoí- -27-

lo e A e B representam,cada um, um grupo isopropilamino ou A e B, considerados conjuntamente, representam um grupo 1,2-diaminopropa_ no, 1,1-bis(aminometilo)-ciclobutano, 1, 1-bis(aminometilo)-ciclo-pentano, 1,1-bis(aminometilo)-ciclo-hexano ou 1,2-diaminociclo-h^ xano com a condição de A, B, X, e Y representarem, grupos substi-tuintes estruturalmente equatoriais relativamente ao grupo de fór mula geral OR1-Pt-OR".

Os compostos de acordo com a presente invenção de fórmula geral I e Ia podem preparar-se por acilação dos compos_ tosd intermédios correspondentes que contêm grupos hidroxi ou gru pos hidroxi protegidos ( tais como os grupos hidroxi que foram acilados, colocados sob a forma de sal de um ião metálico (tal C£ mo um ião de sódio) e similares) seguida de separação e/ou purifi_ cação dos derivados acilados resultantes. Por exemplo, os compostos intermédios podem dissolver-se num ácido carboxílico apropria_ do e a solução conter, eventualmente, um dissolvente apropriado tanto para os compostos intermédios como para o ácido carboxílico; ou os compostos intermédios podem ser acilados com um derivado dum ácido carboxílico, tal como um halogeneto de acilo ou um anidrido, capazes de realizar a acilação dos grupos hidroxi desses compostos intermédios.

Podem ainda adicionar-se grupos substituintes de derivados de ácidos carboxílicos ou substituirem-se mediante aplicação de métodos convencionais, tais como os processos de transes-terificação. 0 esquema reaccional é o seguinte:

Esquema Reaccional I (Q1)4-Pt / OT1 \ OT1 ^0-C<=Q>-V' n'-C<=0>-V' (q‘)Λ-Pt -> 4 ^ X0-Z' Z'= H e -0-C<=0>-V' e que (Q1^ representa grupos múltiplos não reactivos ou protegidos também complexados com o núcleo de platina; T1 representa um átomo hidrogénio ou um grupo removível, isto é, um grupo acilo, um ião metálico etc.; e ν' -C(=0)-V‘ representa um resíduo de um ácido carboxílico em que N* representa um grupo removível apropriado, isto é, um grupo hidroxi, um grupo halogenado ou um derivado de um anidrido, etc.

Mais particularmente, os compostos de acordo com a presente invenção podem preparar-se seguindo o processo geral descrito em seguida, que consiste em dissolver cerca de 1 g do com posto intermédio [ equatorial J-dicloro-/' axial 7-di-hidroxi-diis£ propilamina- platina ( daqui em diante designado por "3D-Pt) ou ou: -29-

tro composto apropriado Γ equatorial 7-dicloro-/ axial 7-di-hidro xi-(amina, amina monodentada ou amina bidentada)-platina, em cerca de 10 a 50 ml de ácido e conservar na ausência da luz a uma temperatura compreendida entre cerca de 15° e 95° C, durante até cerca de 5 semanas, de preferência à temperatura de 25°C durante cerca de 1 a 3 semanas ou a uma temperatura compreendida entre ce_r ca de 50°C e 70°C durante cerca de 1 dia a cerca de 1 semana. A solução pode ser opcionalmente analisada duran_ te a reacção por cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) e/ou cromatografia em camada fina (TLC) por exemplo, ( num aparelho para cromatografia BOWMAC Bridgewater, N.J.). A uma temperatura de cerca de 25°C durante 1 a 3 semanas, formam-se os mono e diésteres com predominância do monoéster. Contudo, para períodos mais longos ou a temperaturas mais altas para períodos mais curtos parece predominar o diéster. Subsequentemente, o derivado de ácido ou acilo em excesso que reage pode ser removido sob vazio a uma temperatura compreendida entre cerca de 25° e 60°C num aparelho de destilação sob vazio, por exemplo num aparelho R0T0VAP0R (Brinkmann Instruments Company, que é uma divisão da Sybron Corp., Cantiague Road, Westbury, NY), de preferência a uma temperatura de banho compreendida entre 35° e 40° C. Em seguida, trata-se o resíduo para se coji centrar e/ou purificar os compostos resultantes.

Por exemplo, extraí-se o resíduo com cerca de 35 a 200 ml de um dissolvente apropriado durante cerca de 15 minutos -30-

a 2 horas, de preferência com 50 a 100 ml de éter etílico durante 30 a 60 minutos. Pode então recolher-se o monoéster cristalizado (Cr-1) por filtração, aproveitando o filtrado do dissolvente (F-1) que se põe de parte para novos processos de tratamento. Os cristais recolhidos anteriormente (Cr-1) podem depois tratar-se por lavagem com um dissolvente apropriado, por exemplo com 25 ml de éter etílico para se obterem cristais (Cr-2) e o filtrado do dissolvente (F-2) que se adiciona ao dissolvente anterior(F-1) para se obter uma mistura de filtrados (F-3).

Os cristais (Cr-2), obtidos pela anterior filtra, ção podem ser eventualmente purificados,por exemplo, lavando-se com 25 ml dum dissolvente apropriado, tal como um dissolvente cons_ tituído por uma mistura de alcanos inferiores e nafta, por exemplo, SKELLYSOLVE-B ( uma mistura de hexanos, heptanos, octanos e nafta dissolvente, comercializada pela Skelly Oil Company), seguida de secagem dos cristais sob vazio a uma temperatura compreendida entre cerca de 30° e 65°C, de preferência entre 40° e 50° c durante até cerca de 24 horas. Em seguida, pode obter-se o derivado monoé_s ter. A mistura de dissolventes (F-3) pode ser eventua_l mente tratada mediante concentração sob vazio, por exemplo, num R0T0VAP0R a uma temperatura de preferência compreendida entre 35° e 45° c. Os compostos obtidos podem ser eventualmente purificados posteriormente, por exemplo, por trituração com cerca de 50 ml de '"'Lr SKELLYSOLVE-B a uma temperatura de cerca de 25°C, durante cerca de 2 horas, sob agitação.

Os derivados diéster podem recolher-se por filtração e, em seguida, purificarem-se eventualmente por lavagem com mais 20 ml de um agente de lavagem,por'exemplo, SKELLYSOLVE-B, seguido de secagem dos cristais sob vazio, a uma temperatura compreendida entre cerca de 30° e 65°C, de preferência entre 40° e 50°C durante um período de até cerca de 24 horas. Em seguida, podem-se obter os di-derivados.

Além disso, pode facilmente demonstrar-se que os compostos de acordo com a presente invenção são utilizáveis com agentes para o tratamento de tumores. As propriedades físicas dos compostos de acordo com a presente invenção são particularmente adequadas ao tratamento dos tumores. Por exemplo, os derivados ac_i_ lados com menos átomos de carbono são, de um modo geral, solúveis na água e nos dissolventes, tais como nos álcoois inferiores, por exemplo, no etanol e similares, e os exemplos de compostos de 1 a 4 cujas estruturas se indicaram anteriormente são muito solúveis na água, nos dissolventes alcoólicos e similares. Os compostos que apresentam boa solubilidade na água são potencialmente mais eficazes quando sob formas posológicas farmacêuticas do que os derivados de-platina quimicamente activos já conhecidos, por exemplo,nas soluções endovenosas, soluções injectáveis e composições orais.

Além disso, são vantajosos os outros compostos solúveis em óleo e/ou 1 ipossolúveis, dado que são muito adequados à sua total utilização nos lipossomas, para incorporação na fase óleosa interna de uma emulsão de óleo/água para aplicação de doses orais ou parentéricas, para soluções oleosas para injecção dj_ recta na matéria sólida ou aplicação tópica sob a forma de pomadas, geles, etc. Os ésteres dipropionato, butirato e 2-etil-hexa-noato são particularmente preferidos para estas soluções oleosas.

Os compostos solúveis em óleo são úteis para: a) incorporação na fase lipídica dos lipossomas; b) incorporação na fase oleosa interna das emulsões de óleo/água para uso endovenoso, intramuscular, intraperitoneal e oral; c) injecções directas das soluções oleosas nos tumores sólidos; d) injecção de soluções oleosas por via intraperitoneal; e) para alcance dos tecidos gordos, lipomas, tra-nsporte através de membranas gordas; e f) para aplicação de soluções oleosas tópicas, tal e qual ou por incorporação como parte de um óleo ou de pomadas de fase lipídica, geles etc. -33-

As surpreendentes propriedades biológicas dos compostos de acordo com a presente invenção são facilmente avalija das nos ensaios de citotoxicidade in vitro e em tumores experimeii tais in vivo.

Citotoxicidade in vitro

Avaliou-se a actividade citotóxica de complexos de platina in vitro utilizando células de melanoma murino B16-F10 e células de carcinoma de cólon humano HCT-116. manteve-se a cultura de linha de células B16-F10 em Meio Essencial Mínimo de Eagle (MEM) com sais de Earle (Gibco, Grand Island, NY) enriquecido com 2 mmoles de L-glutamina, 2,06 mmoles de piruvato de sódio, insuH na (0,26 unidade/ml), penici1ina/estreptomicina ( 10 unidades/ml e 10 microgramas/ml respectivamente), aminoácidos não essenciais MEM (0,6¾ Gibco, Grand Island, NY) e 10¾ de soro de bovino fetal (Hyclone; Logan, UT). Desenvolveram-se as células HCT-116 em meio de McCoy 5A (Gibco modificado, Grand Island, NY) suplementado com 2 mmoles de L-glutamina, 0,12 mmoles de L-serina, 0,17 mmoles de asparagina, 1,5 mmoles de piruvato de sódio, aminoácidos essen_ ciais MEM (0,67 Gibco, Grand Island, NY), vitaminas MEM ( 0,6 % Gibco, Grand island, NY ), soro de vitela fetal ( 10% Hyclone;Lo gan, UT ) e penici1ina/estreptomicina (10 unidades/ml e 10 micro-gralas/ml, respectivamente). Incubaram-se ambas as linhas de célu_ las à temperatura de 37° c em ar equilibrado com dióxido de carb£ no a 5%, num incubador de grande humidade. -34-

Recolheram-se as células na fase de desenvolvimento logarítmico por tripsinização moderada e e adicionaram-se 4000 células em cada cavidade de uma placa de microtit.ulação de 96 cavidades ( Costar; Cambridge, MA ). Incubaram-se as placas à tem peratura de 37°C sob atmosfera de dióxido de carbono a 5%, durante uma noite para permitir a ligação das células à placa.Em segu_i da, trataram-se as células com um complexo de platina de acordo com a presente invenção, com cisplatina ou com iproplatina e, em seguida, incubaram-se durante 72 horas.

Após incubação, inverteram-se as placas e agita ram-se para retirar o meio, o fármaco e as células desligadas.Ad_i_ cionou-se formalina a 10¾ em solução de cloreto de sódio tampona-da com fosfato e fixaram-se as células durante 10 minutos.Retirou--se, então o fixador, secaram-se as placas ao ar e coraram-se com violeta de cristal a 0,0075¾ durante 15 minutos, lavaram-se 2 vezes e secaram-se ao ar. Solubi1izou-se o corante com 0,2 ml de uma mistura de ácido acético 0,2 M/álcool etílico (1;1) e determinaram-se as densidades ópticas num leitor de placas de microtitula-ção Dynatech MR600 (Dynatech; Chantilly, VA). Calcularam-se os vai lores de Clcn por análise de regressão linear dos dados de absor-ou çao. "C:

Actividade sobre Leucémia Murina L1210

Os complexos de platina de acordo com a presente invenção foram ensaiados para determinação da actividade anti-tumoral sobre leucémia murina L1210. Inocularam-se por via intraperitoneal ou 6 5 intracerebral murganhos CDF1 com pesos de 20 g com 10 ou 10 cé lulas ascíticas de leucémia L1210, respectivamente.

Iniciou-se a administração do fármaco no dia s£ guinte à implantação intraperitoneal do tumor ou 3 dias após a implantação intracerebral. Administraram-se os complexos com doses diversas por injecção intraperitoneal. Utilizaram-se grupos de 4 a 6 murganhos para cada dose e trataram-se com uma dose única de complexo, no dia do início do tratamento. Incluiu-se em cada exp£ riência um grupo de controlo constituído por 10 murganhos tratados com solução de cloreto de sódio. Em cada experiência os grupos de controlo positivo eram constituídos por grupos tratados com cispla_ tina ou com iproplatina.

Pesaram-se os murganhos antes do tratamento e n£ vamente no .59 ou 69dias e utilizou-se a variação média de peso como medida de toxicidade. Observaram-se os animais diariamente p_a ra verificação da mortalidade e deram-se as experiências por termi_ nadas após 30 dias. Determinou-se a actividade anti-tumoral com b£ se na relação T/C em percentagem, que é a relação entre o tempo mé dio de sobrevivência no grupo tratado com o fármaco e o tempo mé- -36-

dio de sobrevivência do grupo de controlo tratado com solução de cloreto de sódio, multiplicada por 100.

De um modo geral, os murganhos tratados com solução de cloreto de sódio apresentaram um tempo de sobrevivência médio de 7 dias. Considerou-se o complexo activo se a relação T/C obtida era maior ou igual a 125%.

Actividade sobre o sarcoma M5076

Os complexos de platina de acordo com a presente invenção foram também avaliados para a actividade anti-tumoral sobre o sarcoma M5076. Inocularam-se por via subcutânea com um fragmento de sarcoma M5076 grupos de 8 murganhos BDF1.

Decorridos 5 dias após a implantação, iniciou-se o tratamento com os complexos por via intraperitoneal ou endovenosa e continuou-se nos dias 9a, 135 e ‘índias com um total de 4 tratamentos. Avaliaram-se entre 4 a 6 doses de cada composto em e^ tudo.

Em cada experiência incluiram-se um grupo de cojn trolo tratado com solução de cloreto de sódio e grupos tratados com cisplatina. Observaram-se diariamente os murganhos para deter; minação dos sobreviventes e deram-se as experiências por concluídas 75 a 80 dias depois. -37-

Os murganhos tratados com solução de cloreto de sódio, que constituíam o controlo, apresentaram um tempo de sobre vivência médio compreendido entre 44,5 e 50 dias. Determinou-se a actividade anti-tumoral com base em: a) o tempo de sobrevivência médio dos murganhos tratados com o fármaco relativamente ao tempo de sobrevivência médio dos controlos ( T/C em percentagem ); e b) o tempo médio para os tumores alcançarem 1 g nos murganhos tra_ tados com o fármaco relativamente aos controlos (T-C). Considerou-se um complexo como activo se o valor T-C obtido era igual ou superior a 13 dias.

Actividade sobre Leucémia Murina P388

Ensaiaram-se os complexos de platina de acordo com a presente invenção, para determinação da actividade anti-tumoral sobre leucémia murina P388. Inocularam-se murganhos CDF1 com pesos de 20 g, por via endovenosa, com 10 células ascíticas de leucémia P388. A administração do fármaco sob a forma de comple xos de platina iniciou-se no dia seguinte à inoculação do tumor por via endovenosa. Administraram-se os complexos com várias doses por gavagem oral. Utilizaram-se grupos de 6 murganhos para cada do se e trataram-se com uma dose única do complexo, no dia do início do tratamento. Incluiu-se em cada experiência um grupo de controlo de 10 murganhos tratados com solução de cloreto de sódio. Inclui- -38-

ram-se para cada experiência, como controlos positivos, grupos tra tados com cisplatina.

Pesaram-se os murganhos antes do tratamento e no 52 ou no 62 dia e utilizou-se a variação média de peso como medida de toxicidade. Observaram-se os animais diariamente para determin^ ção da mortalidade e deram-se as experiências por terminadas após 30 dias. Determinou-se a actividade anti-tumoral com base na relação T/C em percentagem, a qual representa a relação entre o tempo médio de sobrevivência no grupo tratado com o fármaco e o tempo mé dio de sobrevivência do grupo tratado com solução de cloreto de só dio, multiplicado por 100.

De um modo geral, os murganhos tratados com soljj ção de cloreto de sódio apresentaram um tempo de sobrevivência médio de 7 dias. Considerou-se um complexo como activo se a relação T/C observada era superior ou igual a 125%.

Preparação da composição com o fármaco e método para a sua utilização

Para os estudos de toxicidade in vitro anterior_ mente descritos dissolveram-se ou suspenderam-se os compostos, d£ pendendo da sua solubilidade, em cloreto de sódio a 0,9% ou em et a. nol a 10% em cloreto de sódio a 0,9%. Preparam-se os compostos pa_ ra o tratamento in vivo mediante dissolução ou suspensão em água -39- /

V (quantidades mínimas de Tween 80), solução de cloreto de sódio a 0,9% ou etanol a 10% em cloreto de sódio a 0,9%. Utilizou-se aze_i_ te ou óleo de sementes de algodão para o estudo in vivo quando os compostos eram solúveis em óleo ( ver,poe exemplo, no Quadro 8,um composto solúvel em azeite, exemplo 9 ( derivado 2-eti1-hexanoato), a seguir ).

Os complexos de platina de acordo com a presente invenção possuem grande actividade anti-tumoral ( ver, por exemplo os Quadros 7 a 9, seguintes). Assim, os compostos de acordo com a presente invenção são utilizáveis na terapêutica de mamíferos ou de outros animais, com doenças provocadas por tumores, devido à sua capacidade para inibir o desenvolvimento de tumores nos mamífe ros.

Portanto, a presente invenção proporciona um método para o tratamento terapêutico de um animal hospedeiro portador de um tumor maligno, que consiste em administrar a esse hospedeiro uma quantidade eficaz inibidora de tumor de um composto de acordo com a presente invenção, tal como se referiu anteriormente ou de uma composição farmacêutica que o contenha.

Num outro aspecto, a presente invenção proporcio_ na composições farmacêuticas que contêm uma quantidade eficaz inibidora de tumor de um composto de acordo com a presente invenção, referido anteriormente, em associação com um veículo ou um dissol- -40-

vente inertes aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Estas composições podem preparar-se sob qualquer forma farmacêutica apro_ priada para o modo de administração anteriormente indicado.

As preparações de acordo com a presente invenção ou para administração farmacêutica, incluem soluções, suspensõ-es ou emulsões estéreis, aquosas ou não aquosas ( por exemplo óleo ou álcool). Podem também preparar-se sob a forma de composições sólidas que se podem dissolver num dissolvente apropriado, tal como água estéril, soro fisiológico, álcool, PEG-400, óleo etc., ou em outros meios estéreis apropriados para aplicação tópica, oral ou administração injectável, antes do uso da composição.

Será de considerar que as quantidades preferidas reais dos complexos de platina a utilizar variarão de acordo com o componente em causa, a composição, o modo de aplicação e o local, hospedeiro e doença a tratar. Muitos factores modificam a acção do fármaco e devem ser considerados pelos técnicos, como, por exemplo, a idade, a massa corporal, o sexo, o regime dietético, o tempo e a via de administração, a taxa de excreção, a doença do hospedeiro, a associação de fármacos, as reacções de sensibilidade e a gravidade da doença. Pode realizar-se a administração de forma contínua ou periódica, de acordo com a dose máxima tolerada. As taxas de aplicação óptimas para um dado conjunto de condições podem ser facilmente determinadas por um técnico, utilizando-se testes para de terminação de posologia convencionais, tendo em vista as directi-vas anteriormente apresentadas. -41-

Em seguida, proporcionam-se exemplos não limita tivos para a preparação dos compostos de acordo com a presente iji venção e exemplos que demonstram a sua utilização.

Exemplo 1

Dissolveram-se 500 mg do complexo [ equatorial J--dicloro-/' axial 7-di-hidroxi-di-isopropilamina-platina "3D-Pt",em 10 ml de ácido fórmico e conservou-se na ausência de luz durante uma semana à temperatura de 25°C. Em seguida, retirou-se o excesso de ácido num aparelho ROTOVAPOR, a uma temperatura compreendida er^ tre 35° e 40° C e depois dissolveu-se o resíduo proveniente do processo sob vazio em 10 ml de acetona e filtrou-se a mistura. Em seguida, extraiu-se o filtrado com 100 ml de éter etílico e recolheu-se por filtração os cristais (Cr-1) do derivado monoéster do ácido fórmico (formato). Separou-se o filtrado etéreo (F-1) para eventual tratamento e/ou purificação subsequente e lavaram-se os cristais (Cr-1) com 15 ml de éter etílico, após o que se adicionou o líquido de lavagem (F-2) à mistura F-1 para se obter uma mistura (F-3). Lavaram-se os cristais do monoéster (Cr-1) com 25 ml de SKELLYS0LVE-B e depois secou-se sob vazio dos cristais a uma temp£ ratura compreendida entre 40° C e 50° C durante 24 horas. Obtiveram-se cerca de 430 mg dos derivados monoéster do ácido fórmico p£ ros de 3D-Pt de fórmula geral

-42- 0 II O-C-H (ch3)2-ch-hjh2\ (ch3)2-ch-nh2

(Ha)

Exemplo 2

Dissolveram-se 100 mg de 3D-Pt em 4 ml de ácido fórmico e conservou-se na ausência de luz durante uma semana, fo_r mando-se um precipitado que se separou por filtração e se guardou.

Retirou-se o excesso de ácido fórmico por meio de um aparelho R0T0VAP0R, à temperatura de 50°C sob vazio e extra_ iu-se o resíduo com 15 ml de acetona e em seguida evaporou-se a acetona por meio de um aparelho R0T0VAP0R. Em seguida, ressuspen-deu-se o resíduo em 20 ml de éter etílico e recolheu-se por filtração um sólido cristalino. Secou-se o sólido cristalino à tempe_ ratura de 50°C sob vazio durante 24 horas para se obterem 70 mg de um composto de fórmula geral -43-/

Exemplo 3

Adicionaram-se 650 mg de 3D-Pt a 20 ml deácido acético glacial e agitou-se essa mistura durante 2 horas. Conservou-se a mistura durante 10 dias à temperatura de 25° C na ausência da luz e tratou-se de acordo com o método descrito no Exemplo 1. Este processo permitiu obter cerca de 550 mg de um composto de fórmula geral Q 0-C-CH. (ch3)2-ch-nh4(0H2) z-o»-m2'a^rrT7Â1Sr'''' (Ilc)

Exemplo 4

Adicionaram-se 650 mg de 3D-Pt a 20 ml de ácido acético glacial e agitou-se a mistura durante 2 horas, seguido de 3 dias à temperatura de 70°C, na ausência da luz. Após transforina ção substancialmente de acordo com os procedimentos descritos no Exemplo 2 anterior, a mistura deu cerca de 550 mg de um composto de fórmula geral 0 (ch3)2-ch-nh2 - —

(Ild) 0-C-CH3 •44-

Exemplos 5-10

Obtiveram-se os compostos dos Exemplos de 5 a 10 de fórmula geral (CH3)2-CHrp2

(II cujos substit.uintes se apresentam no Quadro 1, mediante a aplicação dos procedimentos descritos nos Exemplos de 1 a 4 e por reac-ção do correspondente derivado de ácido carboxílico com 3D-Pt. QUADRO 1 R"

Ex. No. -Cl -Cl

0 C-CH2-CH

-H -Cl -Cl C-CH2-CH3 -c-ch2-ch3 •Cl

Cl -C-(CH2)2-CH3 -45

QUADRO I (Continuação)

Ex.No. X Y R 1 R" 8 -Cl -Cl 0 -c-(ch2)2-ch3 0 -5-(ch2)2-ch3 9 -Cl -Cl 0 -C-CH-(CH2)3-CH3 1 CA -H 10 ZC1 1 0 1 1 0 -C-CH-(CH2)3-CH3 C2H5 0 -C-CH-(CH2)3-CH C2H5

Exemplos 11-23

Também para ilustrar a realização prática da presente invenção podem preparar-se os compostos dos Exemplos 11 a

OR" “V. e cujos substituintes se indicam no Quadro 2, seguindo substancia_l_ mente os procedimentos indicados anteriormente, fazendo reagir o derivado de ácido carboxílico apropriado com os complexos de platj^ na di-hidroxi axiais apropriados. c

QjÃC"õ“

Ex. No. X Y R' R"

0 fl 11 -Cl .-1 u 1 -C-H -H

0 0 11 II 12 -Cl -Cl -C-H -C-H

0 II 13 -Cl -Cl -C-CH3 -H 0 0 n II 14 -Cl -Cl -C-CH3 ·. -c-

0 15 -Cl -Cl -C-CH2-CH3 -H

O 0

0 H 17 -Cl -Cl -C-(CH2)2-CH3 -H 16 -Cl -Cl 1! -C-CH2-CH3 rt -C-ÇH2-CH3 -47- Ex. No. 18 -Cl -Cl QUADRO 2 (Continuação) R' R"

0 II

0 II -c-(ch2)2-ch3 · -c-(ch2)2-ch3

0 (I 19 -Cl -Cl -C-CH-(CH2)3-CH3 -h C2H5 0 ti 0 1! 20 -Cl -Cl -C-CH- (CH2 )3~CH3 -C-CH- (CH2 )3-CH3 C2H5 C2H5 21 -Cl -Cl

0 OH OH 0 II I I It •C-CH-CH-C-OH

-H 0 OH OH 0

II I I II 22 -Cl -Cl

-C-CH-CH-C-OH

0 OH OH 0 11 I I II •C-CH-CH-C-OH 0 OH OH 0

II I I II 23 -Cl

Cl -C-CH-CH-C-

Exemplos 24-33 também para ilustrar a realização prática da presente invenção podem preparar-se os compostos dos Exemplos 24 a 33 de fórmula geral

cujos substituintes se indicam no Quadro 3, seguindo substancialmente os procedimentos descritos anteriormente, fazendo reagir os derivados de ácido carboxílico apropriados com os complexos de pljj tina di-hidroxi axiais apropriados. QUADRO 3

Ex. N2 X' X" Rn IV R W Rz 24 -Cl -Cl 0 NE 0 Μ 1 2 II -C-CH-CH2-C- -H -H 25 -Cl -Cl 0 NH2 0 tl f tl -C-CH-CH2-C- 0 lt -C-OH -H 26 -Cl -Cl 0 NH2 0 II 1 11 -c-ch-ch2-c- 0 II -C-OH 0 II -C-OH -49-

QUADRO 3 (Continuação) :-NS X' X" R R q v R R„ w z 0 NH2 0 1! 1 <1 0 NH2 0 !t 1 11 27 -Cl -Cl -C-CH-CH2-C- -C-CH-CH2-C- 0 NH2 11 ! 0 11 28 -Cl -Cl -C-CH-(CH2)2- •c- -Η -H 0 NH2 !T f 0 11 0 NH2 11 1 0 11 29 -Cl -Cl -c-ch-(ch2)2- c- -C-CH-(CH2)2- •c- 0 OH OH 0 ff r i *! 30 -Cl -Cl -C-CH-CH-C- -Η -H 0 OH OH 0 0 OH OH 0 1! f 1 11 II 1 1 11 31 -Cl -Cl -C-CH-CH-C- -C-CH-CH-C- 0 OH OH 0 11 1 1 - 11 32 -Cl -Cl -C-CH-CH2-CH- -c- -Η -H 0 OH OH 0 0 OH · OH 0 n i i 1! ii i i 11 -Cl -Cl -C-CH-CH2-CH-C- -c-ch-ch2-ch-c- 33 -50-

Exemplos 34-46

Também para ilustrar a realização prática da presente invenção, podem preparar-se os compostos dos Exemplos 34 e 46 de fórmula geral 0R '

cujos substituintes se indicam no Quadro 4 seguinte, seguindo subs tancialmente os procedimentos descritos anteriormente, fazendo re£ gir os derivados de ácido carboxílico apropriados com os complexos de platina di-hidroxi axiais apropriados QUADRO 4'

Ex. No. X Y r' R" , 0

II

34 -Cl -Cl -C-H -H

0 It -C-H 0

35 -Cl -Cl -C-H -51- Ex. No.

X Y QUADRO 4 (Continuação) R' R" 36 -Cl -Cl O 11 C-CH,

-H 37 -Cl -Cl O II -C-CH, 0 II -C-CH. 38 -Cl -Cl 0 II -C-CH2-CH3

-H 39 -Cl -Cl •C-CH2-CH3 •C-CH2-CH3

0 II 40 -Cl -Cl -C-(CH2)2-CH3

-H

0 II

0 II 41 -Cl -Cl -C-(CH2)2-CH3 -C-(CH2)2-CH3 0 tt 42 -Cl -Cl •C-CH-(CH2)3-CH3 -h C2hs

-52Quadro 4 (continuação)

Ex. No. X Y R' R" 43 -Cl -Cl 0 1! - -C-CH-(CH2)3-CH3 f 0 11 -C-CH-(CH2)3-CH3 I C2HS C2H5 44 -Cl -Cl 0 OH OH 0 II 1 1 11 -C-CH-CH-C-OH -H 45 -Cl -Cl 0 OH OH 0 II 1 1 11 -C-CH-CH-C-OH 0 OH OH 0 ii i i ii -C-CH-CH-C-OH 46 -Cl -Cl 0 OH OH ff f f -C-CH-CH- 0 11 C-

Exemplo 47-59

Também para ilustrar a realização prática da presente invenção, podem preparar-se os compostos dos Exemplos 47 a 59 de fórmula geral

-53-

que são substituídos de acordo com a lista apresentada no Quadro 5 seguinte, seguindo substancialmente os procedimentos descritos an-teriormente, fazendo reagir os derivados de ácido carboxílico apro_ priados com os complexos de platina di-hidroxi axiais apropriados QUADRO 5

No. X Y R' R" 0 n 47 -Cl -Cl -C-H -H 0 0 11 II 48 -Cl -Cl -C-H -C-H 0 II 49 -Cl -Cl -C-CH3 -H 0 0 tf ir 50 -Cl -Cl -C-CH3 -C-CH3 0 tf 51 -Cl -Cl -C-CH2-CH3 -H 0 0 tf tf 52 -Cl r-l u 1 -C-CH2-CH3 -c-ch2- -54- Ex. No. 53 -Cl -Cl QUADRO 5 (Continuação) R' R" 0 I! -C-(CH2)2-CH3 -h

0 II 54 -Cl -Cl -C-(CH2)2-CH3 -C-(CH2)2-CH3

0 II 55 -Cl -Cl -C-CH-(CH2)3-CH3 -h C2H5

0 II

0 II 56 -Cl -Cl -C-CH-{CH2)3-CH3 -C-CH-{CH2)3-ch3 c2h5 C2H5

O OH OH O

II I I II 57 -Cl -Cl

-C-CH-CH-C-OH

-H

O OH OH O

II I I II

II I I II 58 -Cl -Cl

-C-CH-CH-C-OH

-C-CH-CH-C-OH 59 -Cl -Cl 0 OH OH O II I I II -C-CH-CH-C-

-55-

Exemplos 60-72

Também para ilustrar a realização prática da presente invenção, podem preparar-se os compostos dos Exemplos 60 a 72 de fórmula geral 0R*

0R" cujos substituintes se indicam a seguir no Quadro 6, seguindo sub£ tancialmente os procedimentos descritos anteriormente, fazendo re_a gir os derivados de ácido carboxílico apropriados com os complexos de platina di-hidroxi axiais apropriados QUADRO 6

Ex. No. X Y R R" 0

60 -Cl -Cl -C-H -H O 0 II >·

61 -Cl -Cl -C-H -C-H -56-

Quadro 6 (Continuação) 62 63 64 65 66 67

Ex. No. X Y R' R" -Cl -Cl 0 1! -C-CH3 -H -Cl -Cl 0 11 -C-CH3 0 Tf -C-CH3 -Cl -Cl 0 II -C-CH2-CH3 -H -Cl -Cl 0 II -C-CH2-CH3 0 11 -C-CH2-CH3 -Cl -Cl 0 11 -c-(ch2)2-ch3 -H -Cl -Cl 0 11 -c-(ch2)2-ch3 0 11 -C-(CH2)2-CH3 -Cl -Cl 0 II -C-CH-(CH2)3-CH3 -H C2H5 68

Quadro 6 (Continuação)

Ex. No. X Y R' R" 69 -Cl -Cl 0 ff -C-CH-(CH2)3-CH3 f 0 ff -C-CH-(CH2)3-CH3 f C2H5 C2H5 70 -Cl -Cl 0 ÒH OH 0 II t 1 II -C-CH-CH-C-OH -H 71 -Cl -Cl 0 OH OH 0 II 1 1 II -C-CH-CH-C-OH 0 OH OH 0 II 1 1 II -C-CH-CH-C-OH 72 -Cl -Cl 0 OH OH 0 11 1 1 ff -C-CH-CH-C-

Os compostos e os procedimentos descritos ante riormente são meramente ilustrativos da presente invenção que não é limitada aos compostos e aos procedimentos descritos.

Outros exemplos de procedimentos equivalentes e compostos serão evidentes para os especialistas na matéria, com base nos exemplos ilustrativos anteriores. Deste modo, esses procedimentos e composições equivalentes são abrangidos pelo âmbito da presente invenção e pelas correspondentes reivindicações. -5

Ensaios In Vitro e In Vivo

Ensaiaram-se compostos representativos da presente invenção de acordo com o ensaio de citotoxicidade in vitro e com experiências sobre tumores in vivo, de acordo com os procedimentos indicados anteriormente. Os resultados destas avaliações apresentam-se nos Quadros 7-10. QUADRO 7

CITOTOXICIDADE IN VITRO

COMPOSTO B16 C150 ( microgramas/ml ) - HCT116 Cisplastina 5,4-7,3 4,2-4,5 Iproplatina 66,8-243 20,2-31,2 Exemplo 1 5,6 11 Exemplo 3 5 3,2 Exemplo 4 5,5 6,2 Exemplo 5 5,3 1,6 Exemplo 6 15,2 12,8 Exemplo 8 NT 0,3 Exemplo 9 NT NT NT = Não testado a/Solúvel em óleo, portanto, não ensaiado in vitro. -59* / ’

Inibição de Leucémia Murina L210 0 quadro 8 contém um resumo das avaliações para alguns dos compostos exemplificativos relativamente à actividade anti-tumoral sobre a leucémia murina 1210. Apresenta-se para cada composto a percentagem máxima da relação T/C alcançada e a dose que produz esse efeito. QUADRO 8 INIBIÇÃO DA LEUCEMIA MURINA L1210 COMPOSTO MAXIM0% T/C DOSE3 A. Tumor implantado por via intraperitoneal Cisplatina 143-207 8-10 Iproplatina 143-171 40 Exemplo 1 136 40 Exemplo 3 164 32 Exemplo 4 143 60 Exemplo 5 143 16 Exemplo 6 129 40 Exemplo 8 143 16 Exemplo 9 100 120 B. Tumor implantado por via intracerebral Cisplatina 114 10 Iproplatina 157 40 Exemplo 3 129 60 Exemplo 4 114 60

aJ Dose era mg/kg administrada por via intraperitoneal 1 vez por dia a murganhos com um tumor implantado por via intraperitoneal ou no 3° dia a murganhos com implantação tumoral por via intra-cerebral.

Inibição do Sarcoma M5076

Os resultados do ensaio de alguns complexos de platina de acordo com a presente inveção estão resumidos no Quadro 9 que indica a percentagem máxima de T/C e o valor de T-C alcançado por cada complexo e a dose que produz esse efeito. QUADRO 9 INIBIÇÃO DO SARCOMA M5076 COMPOSTO TRATAMENTO VIA ΜΑΧΙΜΟ % T/C D0SEa ΜΑΧΙΜΟ T-C (DIAS) DOSE3 Cisplatina ip3 126 4.8 33 4,8 iva 114-126 3,6-4,8 25-27,3 4,8 Iproplatina ip 160+b 48 34,5 36 Exemplo 3 ip 140 24 38,5 + 24 Exemplo 4 ip 97 36 29,6 36 Exemplo 5 iv 124 16 16,3 24 a/ Dose em mg/Kg administrada nos 59, 9S 13S a 173 J i a § em que "ip" e "iv" representam a administração intraperit£ neal e intravenosa, respectivamente. -61-

b/ Sobreviventes a. longo prazo, com tumor. Inibição de Leucémia Murina P388

Os resultados do ensaio de alguns complexos de pl_a tina de acordo com a presente invenção estão resumidos no Quadro 10, o qual apresenta a percentagem máxima de T/C conseguida para cada complexo e a dose que produz esse efeito. QUADRO 10 INIBIÇÃO DE LEUCEMIA P388 COMPOSTO TRATAMENTO ΜΑΧΙΜΟ % T/C DOSE3 Ci splatina 173 12 Exemplo 1 127 120 Exemplo 3 144 96 Exemplo 5 167 120 a/ Dose em mgs/kg, administrada por via oral ( por gravagem ), 1 vez no Ί 3 di a.

Claims

-62- geral REIVINDICAÇÕES 1-- Processo para. a preparação de compostos de formula

QR

-63-

ΟΥ»

em que: A e 3 representam/ cada um/ independentamente, uma ami na ou uma amina monodentada ou A a 3 representam/ considerados conjuntamente, uma amina bidentada, apresentando-se, na fórmula geral I, os símbolos A e B ligados ao átomo de platina através dos seus átomos de azo to mediante uma ligação coordenada; X e Y representam, cada. um, independentemente, um átomo de halogéneo; R' e R" representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, um grupo alcanoílo > aroílo, hetero-aroílo, 0 NE- 0 0 NH_ 0 0 OH OE 0 II I 2 II li i 2 II II | í II -C-CE-CE2-C-OH, -C-CH-(CH2)2“C-OE, ou -c-ch-ch-c-oe ou um grupo de fórmula geral 0 OE OH 0 li i i i| -C-CH-(CH2)u,-CH-C-OE -64-

na qual u' representa.um número inteiro de 1 a 5, com a condição de um dos. símbolos R‘ e "R" não representar um átomo de hidrogénio e ainda de os símbolos A, B, X e Y representarem, astruturalmente, substituintes equatoriais relativamente a OR*-Pt-OR“; n' rapresenta o· numero inteiro 1 ou 2; πτπ dos símbolos X' e X" representa um átomo de haloge-neo e o outro representa um grupo aciloxi C-j_^Q e Y' e Y" representam, cada. um, independentemente, um grupo acilo quando, n.' representa o número inteiro 1, com a condição, de A, B, X' e X" representarem substituintes equatoriais sob o.ponto, de vista estrutural; ou Xr e X" representam, cada um, independentemente, um átomo de halogáneo e Yf e Y" representam 4 grupos disponíveis dos quais., pelo menos, 2 se ligam formando um dlmero, mediante, uma ponte constituída por um grupo derivado de um ácido dicarboxílico. escolhido entre grupos 0 NH, 0 0 NH., 0 0 OE OH 0 II 1 2 li 11 1 2 !í II 1 1 li -c-ch-ch2-c-, -C-CH-(CH2) 2-C- ou -C-CH-CH-C pos de fórmula geral 0 OE OE 0 II 1 1 li -c- -CH-CCH2)u,-CH-C na qual u' representa .um número inteiro de 1 a 5; e os restantes são, independentemsnta, átomos de hidrogénio -65-

ou grupos alcanoílo C^1Q, aroílo ou hetero-aroílo quando n' rapresenta o número inteiro 2, com a condição de A, B, X' e X" representarem, estruturalmente, substituintes equatoriais relativamente a OY1 - Pt - OY", caracterizado pelo facto de se acilar, na presença de um dissolvente apropriado e dissolvido em um ácido carboxílico apropriado, um composto intermédio correspondente comportando grupos hi-droxi eventualmente protegidos como, por exemplo, grupos hidro-xi praviamente acilados transformados em sais com um ião metálico, tal como um sal sõdico, ou outros similares, utilizando um derivado de um ácido carboxílico e de se" separar e/ou purificar, seguidamente, os derivados acilados. resultantes.
2.- Processo de acordo, com a reivindicação 1, para a pre paração de compostos de fórmula geral. I na.qual R' e R" represen tam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alcanoílo C^_2Q/ aro^° ou hetero-aroílo com a condição de um dos símbolos Rr a R”. não representar um átomo- de hidrogénio e A, B, X e Γ representarem, estruturalmente, substituintes equato riais relativamenta a OR1 - PT - OR", caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais, corraspondentamenta substituídos .
3.- Processo de acordo com a raivindicaçao 1, para a pre -66-

paração de compostos de fórmula, geral I na qual A e B representam, cada um, independentemente, um grupo escolhido entre grupos amina, amina aliciclica ou de cadeia ramificiada ou linear C^_g,· ou A e B representam, considerados conjuntamente, um grupo diamino aliciclíclo ^2-7' diamino-alquilo C3_7, ou bis (aminometil)-cicloalquilo C3_7,* e R' e R" representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alca-noílo C2.-20/ aro^° ou hetero-aroílo com a condição de um dos símbolos R1 e R" não representar um átomo de hidrogénio, carac-terizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corras-pondentemente. substituídos.
4,- Processo de acordo com a reivindicação. 2, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R' e R" representam, cada um, independentemente,· um átomo de hidrogénio ou um grupo alcanoílo com a condição de um dos símbolos R' e R" não representar um átomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5.- Processo de acordo com a reivindicação 3, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R' e R” representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alcanoílo C^_^q ca!I1 ^ condição de um dos símbolos R' a R" não representar um átomo de hidrogénio, caracterizado -67- -67-

pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual A e B representam, considerados conjuntamente, um grupo 1,2-diaminociclo--hexano, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos ini ciais correspondentementa substituídos.
7. - Processo de acordo com a reivindicação 6, caracteri zado pelo. facto de o 1,2-diaminociclo-hsxano se apresentar sob a configuração cis, transai), trans(l) ou trans(d).
8. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula., geral I na. qual A e B representam,. cada um, um grupo isopropilamina, caracterizado pelo facto de se utilizarem · compostos iniciais correspondentemente substituídos.
9. - Processo de acordo.com a reivindicação 8, para a preparação de compostos de fórmula gerai I na qual um -dos símbo los R' e R" representa um grupo fozmilo, acetilo, propionilo, butirilo ou 2-etil-haxanoílo e o outro representa um átomo de hidrogénio ou um grupo formilo, acetilo, propionilo, butirilo ou 2-etil-hexanoílo, caracterizado pelo facto de se utilizarem -68-

compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10. - Processo de acorco com a reivindicação 9, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual um dos símbolos R1 e R" representa um átomo de hidrogénio e o outro repre senta um grupo formilo, acetilo, propionilo, butirilo ou 2-etil--hexanoílo e X e Y representam, cada um, um átomo de cloro, ca-racterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais cor-respondentemente substituídos.
11. - Processo de acordo com a. reivindicação 9, para a preparação de. compostos de fórmula geral I na qual R’ e .R" representam ambos um grupo formilo, acetilo,.propionilo, butirilo ou 2-etil-hexanaílo; e X e Y representam, cada um, um átomo de cloro, caracterizado pelo facto de se. utilizarem.compostos iniciais correspondentemente substituídos.
12. - Processo de acorda com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula, geral 08' Λ

v# Λ -69- na qual R^ e representam, cada um, independentemente um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^_6, ciclo-alquilo arilo Cg_lQ ou aril (Cg_1Q)-alquilo C-^g ou R^ e R2 representam considerados conjuntamente com o átomo de carbono a que estão ligados, um grupo ciclo-alquilo ' caracterzza<i0 pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
13.- Processo de acordo com a reivindicação 12, para a preparação de compostos de formula geral I na qual R^ e representam, cada um, um grupo ou R^ e representam, considerados conjuntamente com o átomo de carbono a que estão ligados, um grupo ou ou um grupo de formula geral

na cual R representa, independentemente, um átomo de halogéneo ou um grupo alquilo C-, -g em representa zero ou um numero intei- -70-

ro da 1 a 10, caracterizado pelo facto da se utilizaram compos-;tos iniciais correspondentemente substituídos-
14.- Processo de acordo com a reivindicação 12, para a • preparação de compostos de fórmula geral I na qual e R2 repre sentam, considerados conjuntamente com o átomo de carbono- a que estão ligados, um grupo ciclo-hexilo, caracterizado pelo facto de se utilizaram compostos iniciais corraspondenteaente substituídos.
15. - Processo de acordo com a reivindicação 14, para a preparação de compostos de fórmula, geral I na qual um dos símbolos R' e R" representa um grupo acetilo e o outro representa um átomo de hidrogénio ou um grupo acetilo e X e Y representam, cada um, um átomo de cloro, caracterizado pelo- facto de se utiliza rem compostos· iniciais correspondentemente substituídos.
16. - Processo de acordo com. a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral 0R

-71- na qual R^ e representam, cada um, um grupo alquilo-C^_g ou R^ e R^ representam,· considerados conjuntamente com o átomo de carbono a que estio ligados, um grupo ciclo-alquilo C3_6, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
17.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de formula gerai. I na qual X e Y representam ambos um átomo, de· cloro e A e B representam, considerados conjuntamente, uma propanodiamina, caracterizado.pelo - facto de se utilizarem compostos iniciais. correspondentemente substituídos .
18. - Processo.de acordo com a reivindicação 1, para a preparação· de compostos de fórmula, geral Ia na qual -n* represen ta o numero, inteiro 1, caracterizado pelo facto:-de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
19. - Processo.de acordo com a reivindicação 18, para a preparação de compostos de· fórmula geral. Ia na qual um dos símbo los X' e X" representa um átomo de cloro e o outro um grupo 2-etil-hexanoiioxi e Y’ e Y" representam, cada- um, um grupo 2-etil-hexanoílo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos. -72-
20.- Processo para a preparação de composições farmaceu ticas utilizadas no tratamento de tumores malignos, caracteriza do pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz sob o ponto de vista farmacêutico de um composto de formula geral I ou Ia, como ingrediente activo, preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, com um veículo ou diluente inerte aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. O Â««nte Oficial da Propriedade Industria'