PT86982B

PT86982B - Processo para a preparacao de nucleosidos

Info

Publication number: PT86982B
Application number: PT86982A
Authority: PT
Inventors: Janet Litster Rideout; George Andrew Freeman; Sammy Ray Shaver
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1987-03-16
Filing date: 1988-03-15
Publication date: 1992-06-30
Also published as: DE3872028D1; EP0287215A3; JPS63290894A; PL271196A1; NO881135L; AU601556B2; FI881216A; NO881135D0; MC1914A1; PT86982A; AU1318588A; HU199865B; DK140588A; HUT47591A; GR3005506T3; ES2039615T3; NZ223880A; AP73A; AP8800085A0; CA1321387C

Description

Memória Descritiva

A presente invenção refere-se aos derivados de nucleósidos que são úteis na terapêutica particularmente no tratamento ou na profilaxia de certas infecções víricas e mais particularmente de infecções humanas retrovíricas tal como o Sindroma da Imunodeficiência Adquirida (SIDA).

A SIDA é uma doença imunossupressora ou imunodestrutiva que predispõe os indivíduos a infecções oportunistas fatais. A SIDA, caracteristicamente, está associada com uma diminuição progressiva das células T, especialmente da subsárie de células indutoras auxiliares que possuem os marcadores de superfície οκτ\ vírus da Imunodeficiência Humana (HIV), tem sido reprodutivelmente isolado de doentes com SIDA ou com sinais e sintomas que frequentemente a precedem. 0

HIV é patogánico para a célula e parece infectar e destruir preferencialmente as células T que produzem OKT e presentemente está geralmente reconhecido que o HIV é o agente etiológico da SIDA.

Desde a descoberta do HIV como o agente etiológico da SIDA, tem sido feitas numerosas propostas de agentes quimioterapeuticos anti-HIV que podem ser eficazes no tratamento da SIDA. Assim, por exemplo, a P_atente Europeia e reivindicações N2 196185 descreve o composto 3‘-azido-3•-desoxitimidina (que possui a designação aprovada de zidovudina), os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis e a sua administração no tratamento de infecções humanas por retrovirus compreendendo a SIDA e situações clínicas associadas. T_em sido observado ser a zidovudina de excepcional benefício terapêutico no tratamento da SIDA e de situações associadas.

No tratamento da SIDA e de estados relacionados, é necessário geralmente administrar o agente quimioterapeutico anti-HIV numa base regular para assegurar a manutenção de níveis suficientemente elevados da droga antivírica no doente, por exemplo, a zidovudina pode necessitar de ser administrada até 6 vezes por dia.

Os autores verificaram presentemente que um certo derivado de nucleósido, designado 1-(3-azido-2,3-didesoxi-^D-eritropentafuranosil) -5-metil- 2 (1H) -pirimidinona, pode ser convertido in vivo em zidovurina quando administrado ao Homem ou aos animais. Pensa-se que a referida conversão é efectuada pela acção de enzimas tais como a xantina oxidase/ /desidrogenase ou aldeído oxidase presentes no organismo do individuo ao qual foi administrado o referido derivado.

O derivado acima referido pode assim ser utilizado para aumentar a eficácia terapêutica da zidovudina proporcionando níveis sanguíneos da droga apropriados após a administração do derivado referido.

De acordo com uma caracterlstica da presente invenção os autores proporcionam o composto com a. fórmula (I)

(I)

i.e. 1-(3-azido-2,3-didesoxi-p-D-eritro-pentafuranosil)-5-metil-2(lH)-pirimidinona e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis. 0 composto com a fórmula (I) e seus derivados são referidos a seguir como compostos de acordo com a invenção.

A designação um derivado farmacêuticamente aceitável refere-se a qualquer sal, éster ou sal de éster farmaceuticamente aceitável, ou qualquer outro composto que em administração ao beneficiário pode proporcionar (directa ou indirectamente) o composto inicial corti a fórmula (I).

Os ésteres preferidos do composto com < fórmula I compreendem ésteres de ácidos carboxílicos nos quais a parte não carbonilo associada ao éster á escolhida de entre um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada, alcoxi-alquilo (por ex; fenilo opcionalmente substituído por halogéneo, alquilo Cj-C₄ ou alcoxi ésteres de sulfonatos tais como alguil ou aralquilsulfonilo (por ex: metanosulfonilo); e ésteres de mono, di ou trifosfatos. Qualquer referência a algum dos compostos de éster atrás referidos também compreende a referência a um seu sal farmaceuticamente aceitável. Com respeito aos ésteres atrás déscritos, a meaos que seja de outro modo especificado, qual- 3 -

quer parte alquilo presente, tem vantagem em conter entre 1 a 18 átomos de carbono, particularmente se tiver entre 1 a 4 átomos de carbono. Qualquer parte arilo presente nesses esteres tem vantagem em compreender um grupo fenilo.

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis do composto com a fórmula (l) e de seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, compreendem sais de base, por exx derivados de bases adequados, tais comoo os sais de metais alcalinos (por exx de sódio), de metais alcalino-terrosos (por exx de magnésio), amónio e NX ₄ (em que X a o grupo alquilo 4) ^e sais de ácidos minerais, tal como o de cloreto.

D_e acordo ainda com características da presente invenção, os autores proporcionam:

a) um composto de acordo com a invenção para a utilização na terapia medica, sobretudo no Homem e particularmente para o tratamento ou profilaxia de infecções retro ví ricas; e

b) a utilização de um composto de acordo com a invenção na preparação de medicamentos para o tratamento ou profilaxia de infecções retrovíricas.

E_xemplos de infecções retovíricas que podem ser prevenidas ou tratadas de acordo com a invenção compreendem infecções retrovíricas humanas tais como infecções por vírus de I_munodeficiência H_umana (HIV), por HIV-2 e por vírus Linfotrópico de células T Humanas (HTLV) por exx infecções por HTLV-I ou por HTLV-IV. Os compostos de acordo com a invenção são úteis sobretudo, no tratamento ou profilaxia da SIDA e situações clínicas relacionadas tais como a situação complexa relacionada com a AID (ARC), a linfanopatia generalizada progressiva (PGL), situações neurológicas relacionadas com a SIDA e situações de anticorpos positivos anti-HIV e HIV positivos. Os compostos de acordo com a invenção

- 4 podem também ser utilizados na prevenção e no tratamento da psoríase.

Os compostos de acordo com a invenção, também referidos na presente invenção como ingredientes activos, podem ser administrados na terapêutica por qualquer via adequada compreendendo a via oral, rectal, nasal, tópica (incluindo transdérmica, bucal e sublingual), vaginal e parentérica (incluindo a via sub-cutânea, intramuscular, intravenosa e intradérmica). Deverá ser considerado que a via preferida variará com a situação e a idade do beneficiário e a natureza da infecção mas é geralmente preferida a administração oral ou a parentérica.

Em geral a dose sistémica adequada do composto 1-(3-azido-2,3-didesoxi-p-D-eritro-pentafuranosil)-5-metil~2(lH)-pirimidinona deverá estar compreendida entre 4,0 e 160 mg por kilograma de peso do beneficiário e por dia, preferivelmente compreendida entre 8 a 120 mg por kilograma de peso por dia e mais preferivelmente compreendida entre 20 a 80 mg por kilograma de peso por dia para produzir a zidovundina para tratar mamíferos, por exs um individuo humano que possua uma infecção por HIV. A dose desejada é preferivelmente distribuida em duas, três, guatro, cinco, seis ou mais sub-doses administradas em intervalos adequados através do dia. As sub-doses referidas podem ser administradas em formas de dosagem unitária; por exemplo, contendo 10 a 1500 mg, preferivelmente 20 a 1000 mg e mais preferivelxente contendo 50 a 700 mg do ingrediente activo por unidade de dosagem.

Entora seja possível administrar unicamente um composto de acordo com a invenção por via sistémica (internamente), é preferível apresentá-lo como uma composição farmacêutica. As composições de acordo com a presente inver ção compreendem um composto de acordo com a invenção juntamente com um ou mais veículos aceitáveis para esse fim e opcionalmente, outros agentes terapêuticos. Cada veículo deve ser

•'aceitável no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da composição e não prejudicar o doente. As composições compreendem as que são adequadas para administração oral, rectal, nasal, tópica (incluindo a transdérmica, bucal, e sublingual), vaginal ou parenterica (incluindo a subcutânea, intramuscular, intravenosa e intradérmica). Ag composições podem ser apresentadas convenientemente, na forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer método conhecido na ciência farmacêutica. Esses métodos compreendem a fase de se fazer a associação do composto de acordo com a invenção com o veículo que constitui um ou mais ingredientes adjuvantes. E_m geral, as composições são preparadas associando uniformemente o ingrediente activo com os veículos líquidos ou os veículos sólidos finamente divididos ou ambos e em seguida, se necessário, moldando o produto.

A_s composições da presente invenção adequados para administração oral podem ser apresentadas como unidades descontínuas tais como cápsulas, hóstias ou comprimidos contendo cada unidade uma quantidade previamente determinada do composto com a fórmula (I)s podem ser apresentados como um pó ou um granulado; como uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida de óleo em água ou de água em óleo. 0 ingrediente activo também pode ser apresentado como um bolo, electuário ou uma pasta. Os compostos de acordo com a invenção podem ser formulados de modo a proporcionar a libertação controlada ou lenta do composto.

Um comprimido pode ser obtido por compressão ou por moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes adjuvantes. Os comprimidos podem ser preparados numa máquina adequada por compressão do composto de acordo com a invenção na forma levemente livre tal como um pó ou grânulo, opcionalmente misturado com um aglutinante (por ex: povidona, gelatina, hidroxipropilmetilcelulose), um lubrificante, um diluente inerte, conservantes, desagregante (por ey: amido

- 6 glicolato de sódio, povidona reticulada, carboximetilcelulose sódica reticulada) um agente tensioactivo ou dispersor. Os comprimidos moldados podem ser obtidos n’«na máquina adequada moldando uma mistura do composto em pó humedecido com um diluente líquido inerte. Os comprimidos opcionalmente podem ser revestidos ou ter incisões.

A_s composições adequadas para administração tópica na boca compreendem as pastilhas contendo o ingrediente activo numa base aromatizada, geralmente sacarose e acácia ou goma adraganta; as pastilhas contendo o ingrediente activo numa base inerte tal como a gelatina e glicerina ou sacarose e acácia; e as loções para a boca contendo o ingredien te activo numa veículo líquido adequado.

As composições para administração rectal podem ser apresentadas como supositórios com uma adequada base compreendendo por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.

As composições adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, geles, pastas, espumas ou aerossóles contendo, adicionalmente ao composto de acordo com a invenção, veículos adequados e conhecidos.

A_s composições adequadas para administração parenterica compreendem soluções injectáveis estéreis, isotónicas, aquosas ou não aquosas que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a composição istónica com o sangue de um possível beneficiário; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem compreender agentes suspensores e agentes espessantes. As composições podem ser apresentadas em frascos hermeticamente fechados de dose unitária eu de doses múltiplas, por exemplo, ampolas e frascos-ampolas e podem ser fornecidas no estado seco por congelação (liofilizado) requerendo apenas a adição do veículo lí-

quido estéril, por exemplo água para injactáveis, imediatamer te antes da administração. As soluções e suspensões injectá veis extemporâneas podem ser preparadas de pós, grânulos e comprimidos estéreis do tipo anteriormente descrito.

As composições de dosagem unitária preferidas são as que contém uma dose diária ou uma unidade, uma sub-dose diária, como referido anteriormente ou uma sua fracção adequada do composto de acordo com a invenção.

Os compostos de acordo com a invenção podem também ser apresentados para utilização na forma de composições veterinárias que podem ser preparadas, por exemplo, por métodos usuais. Exemplos de composições veterinárias compreendem as que são adequadas para:

a) administração oral, por exemplo poções (por ex: soluções ou suspensões aquosas ou não aquosas); comprimidos ou bolos; pós, grânulos ou pílulas para misturar com as substâncias da ração; pastas para aplicação na língua;

b) administração parentérica por exemplo para injecção subcutânea, intramuscular ou intravenosa, por ex: como uma solução ou suspensão estéril; ou (quando adequado) para injecção intramamária em que a suspensão ou a solução é introduzida no úbere por via tetal:

c) aplicação tópica, por ex: como emplastro transdérmico aplicado na pele; ou

d) aplicação intravaginal, por ex: como um pressário. creme ou espuma.

Deverá ser considerado que as composições descritas anteriormente, também serão adequadas para a apresentação de combinações de acordo com a invenção, quer

em composições unitárias quer em composições separadas e podem ser preparadas de um modo semelhante.

Deverá ser entendido, que adicionalmente aos ingredientes particulares atrás mencionados, as composições da presente invenção podem compreender outros agentes habituais relacionados com o tipo de composição em questão, por exemplo, as composições adequadas para administração oral podem compreender ainda os agentes tais como, agentes edulcorantes, espessantes e aromatizantes.

Os compostos de acordo com a invenção podem ser utilizados na terapia médica em combinação com outros agentes terapêuticos, por exemplo, derivados de nucleósidos acíclicos tal como a 9-(2-hidroxietoximetil)-guanina, 2,3-didesoxinucleósideos tais como a 2’,5’-didesoxicitidina, 2’,

3’-didesoxiadenosina e 2',3’-didesoxi-inosina, interferões tal como a alfa-interferão, inibidores da glucuronoconjuga ção tal como o probenecide, imunomoduladores tal como o facto:? que estimula a colónia de granulócitos macrófavos e outros agentes, por exemplo, os descritos na Patente Europeia e reivindicações 217580. Os compostos que fazem parte desta terapia de combinação podem ser administrados simultaneamente, tanto em composições separadas como em composições combinadas, ou administrados a intervalos de tempo diferentes por ex: sequencialmente, de tal modo que seja obtido o efeito combinado.

Os composto com a fórmula (I) e os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, podem ser preparados de modo usual utilizando técnicas que são conhecidas, por ex: como descrito em Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry (1,321 (1968)), T. A. Krenitsky e outros (J. Med. Chem. (26, 981 (1983)); Nucleic Acid Chemistry, Improved and New Synthetic Processes, Methods and Techniques (Partes 1 e 2, Ed. L. D. Townsend, R. S. Tipson, (J. Wiley) 1978; J. R. Horwitz e outros (J. Org. Chem. 29, (Julho 1964)

2076-78); M. Imazawa e outros (J. Med. Chem., 45, 3274 (1980); e R. P.Glinski e outros (d. Ohem. Soc. Chem, Commun., 915 (1970)).

A presente invenção ainda compreende o processo para a preparação do composto com a fórmula (I) e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, compreendendo :

(A) a reacção de um composto com a fórmula (II) ou um seu derivado, por ex: um éster,

(li) em que

M representa um grupo precursor do grupo 5’-azido, com um agente adequado ou sob condiçães adequadas para converter o referido grupo precursor no grupo azido desejado;

(B) a reacção de um composto com a fórmula (III)

(III)

em que R representa um grupo precursor de um átomo de hidrogénio, com um agente adequado ou sob condições adequadas para converter o referido grupo precursor num átomo de hidrogénio; ou (O a reacção de um composto com a fórmula(IV)

(IV) ou um seu derivado funcional, com um composto adequado para introduzir o anel ribofuranosilo desejado na posição 1 do composto com a fórmula (IV);

e a realização, simultânea ou subsequentemente, de pelo menos uma das conversões seguintes:

i) quando for preparado um derivado do composto com a fórmula (I), a conversão do referido derivado no composto inicial com a fórmula (I); e ii) quando for preparado um composto com a fórmula (I), a conversão do referido composto num seu derivado farmaceuticaraente aceitável.

No processo de acordo com a invenção atrás descrito, deve ser considerado que a escolha dos compostos precursores nos processos de (A) a (0) deverá ser grandemente ditada pelos compostos particulares que se deseja preparar, sendo escolhidos os agentes e as condições atrás mencionadas de acordo com os agentes e as condições conhecidas na química de síntese de nucleósideos. São descritos a seguir, exemplos dos processos de conversão para fins de orientação e deverá ser entendido que podem ser modificados de modo usual dependendo do composto desejado. Em particular, por exemplo, quando é descrita uma conversão que poderá

resultar de outro modo numa reacção não desejada dos grupos instáveis, nesse caso, esses grupos podem ser protegidos de modo usual, com a remoção subsequente dos grupos de protecção depois de realizada a conversão.

Assim, por exemplo, com respeito ao processo (A) o grupo M no composto com a fórmula (II) pode representar, por exemplo, um radical halogéneo (por ex. cloro), hidroxi ou organosulfoniloxi (por ex. trifluorometilsulfoniloxi, metanosulfoniloxi ou p-toluenosulfoniloxi).

Para a preparação do composto com a fórmula (I), pode ser tratado um composto com a fórmula (II), em que o grupo M representa um grupo halogéneo (por ex: cloro) na configuração treo (na qual o grupo 5’-hidroxi é vantajosamente protegido, por ex: com um grupo tritilo), com azida de lítio ou de sódio. 0 composto de partida 3'treo-halogéneo (por ex. cloro) pode ser obtido, por exemplo, por reacção do composto correspondente 3'-eritro-hidroxi com, por exemplo, trifenilfosfina e tetracloreto de carbono ou alternativamente, por tratamento com haleto de organosulfonil (por ex. cloreto de trifluorometanosulfonilo) para I preparar o correspondente composto 3’-eritro-organosulfoniloxi que é em seguida halogenado, por ex. como atrás descrito. Alternativamente, pode ser tratado um composto com a fórmula (II) 3’-treo-hidroxi, por exemplo com trifinilfosfina, tetrabrometo de carbono e azida de lítio para preparar o correspondente composto 3’-eritro azido.

Com respeito ao processo (B), o grupo precursor R na fórmula (III) pode representar, por exemplo, um grupo 1,2,4-triazol-l-ilo que pode ser convertido no composto desejado com a fórmula (I) por exemplo, por tratamento com hidrato de hidrasina e óxido de prata.

Com respeito ao processo (C), este pode ser realizado por exemplo, por tratamento da pirimidina

com a fórmula (IV) adequada ou um seu sal ou seu derivado protegido, com um composto com a fórmula:

HOCHj

N₃ (na qual Y representa um grupo substituível, por ex. um grupo acetoxi ou benzoiloxi ou halogéneo, por ex. cloro, e o grupo 5’-hidroxilo é opcionalmente protegido, por ex. pelo grupo p-toluilo) e remoção subsequentemente, de qualquer grupo de protecção.

Quando é preparado o composto com a fórmula (I), este composto pode ser convertido num fosfato farmaceuticamente aceitável ou num outro éster, por reacção do composto com a fórmula (I) com respectivamente um agente de fosforilação, por ex. POCl^ ou um agente adequado de esterificação, por ex. um haleto ou anidrido de ácido. 0 composto com a fórmula (I), incluindo os seus ésteres, podem ser convertidos nos seus sais farmaceuticamente aceitáveis de modo usual, por ex. por tratamento com uma base adequada.

Quando é preparado um derivado do composto com a fórmula (I), por exemplo um éster, esse derivado pode ser convertido no composto inicial de modo habitual por ex. por hidrólise.

Os exemplos que se seguem são referidos oom fins de ilustração e não devem ser considerados como possuindo carácter limitativo da invenção. A designação Ingrediente activo utilizados nos exemplos refere-se ao composto com a fórmula (I), i.e. ao composto l-(3-azido-2,3-didesoxi- β -D-eritro-pentafuranosil)-5-metil-2(lH)-pirimidinona.

Exemplo 1 : Formulações de comprimidos

As formulações seguintes A, B e 0, são preparadas por granulação por via húmida dos ingredientes

com uma solução de povidona, seguida por adição de estearato de magnésio e da compressão.
Formulação A	mg/comprimido	mg/comprimido
(a) Ingrediente activo		250			250
(b) Lactose B.P.		210			26
(c) Povidona B.P.		15			9
(d) Amido glicolato de	sódio	20			12
(e) Estearato de magnésio	5			3
		500			300
Formulação B		mg/comprimido	mg/comprimido
(a) Ingrediente activo		250			250
(b) Lactose		150			—
(c) Avicel pH 101		60			26
(d) Povidona B.P.		15			9
(e) Amido glicolato de	sódio	20			12
(f) Estearato de magnésio	5			3
		500			500
Formulação C		mg/comprimido
Ingrediente activo			100
Lactose			200
Amido			50
Povidona			5
Estearato de magnésio			4
		- 14 -	559

As formulações seguintes, D e E, são preparadas por compressão directa da mistura dos ingredientes. A lactose utilizada na formulação E é do tipo de compressão directa (Dairy Crest - Zeparox).

Formulação D mg/comprimido

Ingrediente activo

250

Amido pregelatinizado NF15

150

400

Formulação E

Ingrediente activo

Lactose

Avicel mg/oomprimido

250

150

100

500

Exemplo 2 ; Formulações de cápsulas

Formulação A

A composição de uma cápsula é preparada por mistura dos ingredientes da Formulação D do Exemplo 1 atrás referida e enchimento de cápsulas de gelatina dura constituida por duas partes. A Formulação B (abaixo referida) é preparada de um modo semelhante.

Formulação B

Ingrediente activo

Lactose B.P.

mg/cápsula

250

145

Amido glicolato de sódio 25

Estearato de magnésio 2

420 f *

Formulação C mg/cápsula

250

350

Ingrediente activo Macrogol 4000 B.P.

600

As cápsulas são preparadas fundindo o Macrogol 4000 B.P. dispersando o ingrediente activo na quantidade fundida e enchendo as cápsulas de gelatina dura com o preparado assim obtido.

Formulação D

Ingrediente activo Lecitina óieo de Arachis mg/cápsula

250

100

450

As cápsulas são preparadas dispersando o ingrediente activo na lecitina e no óleo de Archis e enchendo, com o preparado assim obtido, cápsulas de gelatina mole.

Exemplo. 3 t Formulação de injectável

Formulação A

Ingrediente activo

Solução de ácido clorídrico 0,1M q.b.p. pH

Solução de hidróxido de sódio 0,1M q.b.p. pH Água estéril q.b.p.

0,200 g

4,0 a 7,0

4,0 a 7,0 ml ingrediente activo e dissolvido na maior parte da água (35-4O°C) e o pH é ajustado entre 4,o e 7,0 com ácido clorídrico ou hidróxido de sódio conforme o caso. A solução foi em seguida completada com a água até ao volume referido, foi filtrada através de um filtro microfore estéril

A

para um frasco de vidro de cor âmbar (tipo I) de 10 ml estéril e foi selada com materiais de fecho estéreis e sobre-se^alada.

Formulação B

Ingrediente activo 0,125 g

Solução tampão de fosfato de pH 7, apirogénica e estéril q.b.p. 25 ml

Exemplo 4 i Iniectável intramuscular

Peso (g)

Ingrediente activo 0, 20 Álcool benzílico 0,10 Glicofurol 75 1,45

Água para injectáveis q.b.p. 3.00 ml ingrediente activo é d issolvido em gliclofurol. 0 álcool benzílico é em seguida adicionado e dissolvido e e adicionado água até 3 ml. A mistura é depois filtrada através de um filtro microfore estéril e selada em frascos de vidro (tipo I) de cor âmbar de 3 ml estéreis.

Exemplo 5 t Xarope

Formula A	Peso (q)
Ingrediente activo	0,2500
Solução de sorbitol	1,5000
Glicerol	2,0000
Benzoato de sódio	0,0050
Aroma de pêssego 17,42,3169	0,0125 ml
Água purificada q.b.p.	5,0000 ml

ingrediente activo é dissolvido numa mistura de glicerol e da maior parte da água purificada. Em seguida é adicionada à solução, uma solução aquosa de benzoato

de sódio, seguida pela adição da solução de sorbitol e finalmente do aromatizante. 0 volume é completado com água purificada e é bem misturada.

Peso (q)

Ingrediente activo	0, 250
S₀lução de sorbitol	1,500
Glicerol	0,005
Celulose dispersível	0,005
Benzoato de sódio	0,010 ml
Aromatizante q.b.
Água purificada q.b.p.	5,000 ml

Misture a solução de sorbitol, glicerol e parte da água purificada. Dissolva o benzoato de sódio na água purificada e adicione a solução ao volume anterior. Adicione e disperse a celulose dispersível e o aromatizante. Adicione e disperse o ingrediente activo. Complete o volume com a água purificada.

Exemplo 6 t 3'-Azido-3‘-desoxitimidina (AZT)

a) 2, 3¹-Anidrotimidina

Foi dissolvida a timidina (85,4 g; 0,353 mol) em 500 ml de DMF anidra e adicionada a N-(2-cloro-l,1,2-trifluoroietiDdietilamina (100,3 g; 0,529 mol) (preparada de acordo com o método de D.E. Ayer, J. Med. Chem. 6,608, 1963). Esta solução foi aquecida a 70°C durante 30 minutos e em seguida foi deitada em 950 ml de etanol (ΕΊΌΗ) sob vigorosa agitação. 0 produto precipitou a partir desta solução e foi filtrado. Foi refrigerado ο ETOH sobrenadante e em seguida filtrado para se obter o composto em epígrafe.

P.F. » 23O°C.

*-Azi.do-3 '-desoxitimidina

Numa mistura de 250 ml de DMF e de 38 ml de água foram colocados em suspensão 2, 3‘-O-anidrotimidina (25 g; 0,115 mol)de NaN^ (29 g; 0,446 mol). A mistura reaccional foi sujeita a refluxo durante 5 horas e ao fim desse tempo foi deitada em 1 1 de água. A solução aquosa foi extraída com ETOAc (3x700 ml). Os extractos de ETOAc foram secos sobre Na₂SO₄, a mistura foi filtrada e foi removido in vacuo o ETOAc, para se obter um óleo viscoso. Este óleo foi agitado com 200 ml de água proporcionando o composto em epígrafe como um sólido, que foi recuperado por filtração.

P.F. = 116-118°C.

Eyemplo 7 : 5 '-Acetil-3 ^l-azido-3.^,-desoxitimidina to

Â solução de 3'-azido-3'-desoxitimidina (AZT) (20 g) em piridina (50 ml) foi adicionada, à temperatura ambiente, cloreto de acetilo (2,1 equivalentes). A mistura reaccional foi agitada durante duas horas e mantida entre 0 e 5°C durante 20 horas. Foi deitada, sob agitação em gelo e água, A fase aquosa foi decantada. 0 produto oleoso foi dissolvido em acetato de etilo e extraído com água (5 vezes), com ácido clorídrico 0,5 N e água (2 x) e foi seco sobre sulfade magnésio. A solução foi filtrada e evaporada in vacuo.

óleo residual foi dissolvido em clorofórmio, aplicado numa coluna de silica gel e cromatografado rapidamente utilizando metanol em clorofórmio 2%. A_s fracções com o produto foram evaporadas e o óleo foi mais uma vez cromatografado, utilizando acetato de etilo / hexano (6:4 v/v). As fracções com o produto foram evaporadas in vacuo para se obter o composto 5'-acetil-3'-azido-3'desoxitimidina como um sólido branco.

P.F. « 96-98°C

Calculado: C 46,60; H, 4,89; N, 22,65 Encontrados C 46,67; H, 4,94; N, 22,59

Exemplo 8 : l-(5-Q-Acetil-3-azi(jo~2,3-cidesoxi-&-D-eritro-pentafuranoail)-5-metil-4- (1, 2,4-triazol-l-il) -2- (lH-pirimidinona

Foi sujeito à reacção o composto 5'-acetil-3'-azido-3’-desoxitimidina, com 5 equivalentes de 1,2,4-triazole e dois equivalentes de diclorofosfato de 4-clorofenilo em piridina seca e à temperatura ambiente durante 10 dias. Pela cromatografia em sílica gel do produto bruto, utilizando EIOAc/hexano líl (v/v), seguida da reunião e evaporação das fracções adequadas, obteve-se um óleo.

A cristalização a partir de ETOAc proporcionou o composto em epígrafe como um sólido de 2,7 g (7,5 mMol; 60%);

P.F. 143-145°C

UV(nm) s a pH - 1 / max = 324, 245, 215 (£ » 9300, 10000, 20500), min - 282,233 ( £ = 2100, 8200); a pH = 13 /\ max « - 276 (£ » 6000),/ min « 242 (£ - 2000), ^NMR (DMS0-d6) 9.34, 8,40 (2s, 2H triazolilo), 8,23 (s, 1H,H6), 6,12 (t, 1H, Hl», J - 6, lfi Hz), 4,48-4,17 (m, 4H, M3*, H4·, H5‘) 2,35 (s, 3H, 5'-acetilo), 2,07 (s, 3H, 5CH3).

Análise de C₁₄H₁₆N_Q04

Calculado s C, 46,67; H, 4,48; N, 31,10 Encontrados C, 46, 58; H, 4,51; N, 31,02

Exemplo 9 t 1-(3-Azido-2, 3-didesoxi-B-D-eritro-pentafuranosil) -5-metil-2(1H)-pirimidinona

Foi dissolvido o composto 1-(5-0-Acetil-3-azido-2,3-didesoxi-p-D-eritro-pentafuranosil)-5-metil-4-(1,2,4-triazol-l-il)-2(1H)-pirimidinona (0,5 g, 1,4 mMol) em CH^CNÍIO ml) e teatada com hidrato de hidrazina 85% (0,105 g,

2,1 mMol) durante 30 minutos à temperatura ambiente por um processo análogo ao descrito por D. Cech e A. Holy, Coll. Czech. Chem. Comm. 42, 2246(1977). Os solventes foram evapora20

dos in vacuo e o resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando como solvente eluente CHCl^ / MeOH 9:1 (v/v)_t Da reunião e evaporação das fracções adequadas obteve-se um solido, que foi dissolvido em ΞΊΌΗ (5O ml) contendo Ag₂O (0,35 g, 1,5 mMol, 1,5 eq) e foi sujeito a refluxo durante 90 minutos. A filtração da suspensão quente através de uma camada de celite, seguida da remoção dos solventes in vacuo proporcionou um sólido que foi dissolvido em MeOH saturado em NH3 (50 ml) durante 3 horas. A evaporação dos solventes in vacuo proporcionou um óleo que foi cromatografado em sílica gel e eluindo com CHCI3 / MeOH 20:1 (v/v). As fracções adequadas foram reunidas e os solventes evaporados in vacuo para proporcionar um óleo que solidificou lentamente em repouso: P.F. « 62-63°C; UV (nm) = a pH = 1 / max =» 326, 212 ( / 7700, 13000), min =* 263 (<f » 200); a pH 13 max = 322, 213 (» 22700, 10800), / min = 246 ( f = 400); H* NMR: (DMSO-d6) 8,46 (d, 1H, H4, J =» 3,28 Hz), 8,28 (d, 1H, H6, H=3,23 Hz), 6.00 (t, 1H, Hl', J=5,08 Hz), 5,31 (t, 1H, 5‘OH, J=5,12 Hz), 4,4-4,3 (m, 1H, Hj·), 3,95-3,89 (m, 1H, »·), 3,8-3,6 (m, 2H, H5»), 2,5-2,3 (m, 2H, H2‘), 2,03 (s, 3H, 5-0¾).

Análise calculada para ^cio^í113^N5°3^/ 0,25 H₂0 » :

C, 46,96; H, 5,32; N, 27,38

Encontrado : C, 47,05; II, 5,40; N, 27,14.

Ey-emplo 10 :

1-(5-Acetil-3-azidQ-2,3-didesoxi-6-D-eritro-pentafuranosil)-5-metil-2-pirini3inona

Foi dissolvida l-(5-acetil-3-azido-2,3-didesoxi-p-D-eritro-pentafuranosil)-5~metil-4-(1, 2,4-triazol-l-iD-2-(lH)-pirimidinona (0,5 g, 1,4 mmol) em CHgCN (10 ml) e tratada com hidrato de hidrazina 85% (0,105 g, 2,1 mmol) durante 30 minutos à temperatura ambiente, por um processo análogo ao descrito por D. Cech e A. Holy Coll. Czech. Chem. Comm, 42, 2246, (1977). Os solventes foram evaporados in vacuo e o — 21 —

e o resíduo foi cromatografado em sílica gel utilizando como solvente eluente CHCl^ / MeOH 9:1 (v/v). A recolha e evaporação das fracções adequadas proporcionou um sólido que foi dissolvido em ΕΊΌΗ (50 ml) contendo Ag^O (0,35 g, 1,5 mmol, 1,5 eq) e sujeito a refluxo durante 90 minutos. A filtração da suspensão quente através de uma camada de celite, seguida da remoção dos solventes in vacuo proporcionou um sólido que foi cromatografado em sílica gel e eluído com CHC1₃ / MeOH 20:1 (v/v). A reunião e e vaporação das fracções adequadas proporcionou o composto em epígrafe como um óleo dourado: UV (nm) a pH 1/ max-327 ( f -6900), A min-254 ( £ -700); a pH 13 A ^maxf£. -17200), A max-247 ( £ -600); 1H RMN (DMS0-d6 á ) 8,46 (d, J»3.13Hz, ΙΗ, H4), 7,92 (d, J-3.90 HZ, 1H, H6(, 6,03 (dd, J-5.28HZ, 6,64Hz, 1H, Hl),

4, 46-4,03 (m, 4H, H3, H4, H5), 2,71-2,32 (m, 2H,H2) 2,05-2,04 (2s,6H,5-CH₃, acetilo)

Análise para ^<*j2^I^15^N5°4

Calculado j C, 49,14; H, 5,16; N, 23,88 Encontrado: C, 49,39; II, 5,22; N, 23,75 Exemplo 11

1-(3-Azido-2-desoxi-5-pivaloil-8-D-ribofuranosil)5-metil-2-pirimidinona

Foi dissolvida 1-(3-azido-2-desoxi-£-ribofuranosil)-5-metil-2-pirimidinona (0,4 g, 1,59 mmol) em piridina anidra (10 ml) a 0°C e sob atmosfera de azoto. Foi adicionado com agitação cloreto de pivaloilo (0, 588 ml, 4, 78 mmol) e deixado a reagir durante 72 horas. A mistura reaccional foi arrefecida com gelo e depois foi evaporada até à secura. 0 resíduo foi cromatografado em silica gel com CHCl^ / / MeOH 20:1 (v/v) e as fracções adequadas foram combinadas e evaporadas para se obter o composto em epígrafe

P.F. = 121-123°C; UV (nm) a pH 1/\ max-327 (£ -5900), / min22 Τ' fe

-269 (£ -820); a ρΗ 13 7 max-322 ( £ -17200), λ min - 251 (£ -350) : 1Η RMN (DMS0-d6) ^8.48(d, J-3.12HZ, 1H, H4), 7,88 (d, J-3.27HZ, 1H, H6)_, 6,02(t, J-6, 25Hz, 1H, Hl»), 4,48—4,39 (m, 1H, M3 ·), 4,31-4, 28(m, 2H,H5‘), 4, 20-4,14 (m, 1H, H4»), 2,62-2,50 (m, 1H,H2), 2,41-2, 27(m, 1H, H2*)·, 2,O4(s, 3H, 5-CH₃), 1,12 (s, 9H,-C(CH₃)₃).

Análise para ^ci5^H21^N5°4 °·1^Η2θ

Calculado : C, 53,42; H, 6,34; N, 20,77 Encontradoí C, 53,46; H, 6,36; N, 2o, 72

Exemplo 12 l-/~3-Azido-5-(3-clorobeazoil)-2-desoxi-e-D-ribofuranosil7-5-metil-2-pirimidinona

O composto em epígrafe foi preparado a partir do cloreto de 3~clorobenzoil de um modo análogo ao Exemplo 11 para se obter uma goma clara uv (nm) PH1 / max-327 ( -6200), min-264 (£ -1700), pH 13 / max-318 (£ -8500), Λ min-257( € -1600); RMN 1H (DMS0-d6), δ8.43 (d, J-1.27HZ, 1H, H4), 7, 93-7, 52 (m, 5H, H6,benzoilo), 6,06 (t, J-5, 28Hz. 1H, Hl ·), 4, 67-4. 51 (m, 3H,H3 ·, H5·), 4.30 (q. J-4, 25, 1H, H4 ¹), 2, 59-2, 39(m, 2H,H2'), 1.85(s, 3H, 5-CHj).

Análise para C-^H^NgO^l

C_alculado : C, 52,38; H, 4,14; N, 17,97 Encontrado: C, 52,52; H, 4,19; N, 17,82

Conversão de um composto com a fórmula (I) em Zidovudina

Em ensaios com ratazanas compreendendo a administração com água e pela via oral do composto com a fórmula (I) acima referida, foi recuperada a zidovudina na quantidade média de 51%.

Claims

REIVINDICAÇÕES

- 1® Processo para a preparação de 1-(3-azido-
2,3-didesoxi^-D-eritro-pentafuranosil)-5~:netil-2- (1H)-pirimidinona e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, caracterizado por:

(A) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) ou um seu derivado em que M representa um grupo precursor do grupo

3¹-azido, com um agente adequado ou sob condições adequadas para converter o referido grupo precursor no grupo azido desejado;

(B) fazer-se reagir um composto com a fórmula (III) na qual R represente um grupo precursor de um átomo de hidrogénio, com um agente adequado ou sob condições adequadas para converter o referido grupo precursor num átomo de hidrogénio;

ou (C) fazer-se reagir um composto com a fórmula (IV) ou um seu equivalente funcional com um composto adequado para introduzir o anel ribofuranosilo desejado na posição 1 do composto com a fórmula (IV);

e efectuar-se, subsequentemente ou simultaneamente, pelo menos uma das conversões seguintes:

i) quando se preparar um derivado da referida pirimidinona converter-se o derivado na pirimidinona referida; e ii) quando se preparar a referida pirimidinona, converter-se a pirimidinona num seu derivado farmaceuticamente aceitável.

25 «Mt *“*

Processo de acordo com a reivindicação 1 (B) caracterizado por se utilizar o composto com a fórmula (III) sob a forma de um derivado 5'-acetato.
- 3» Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 (B) e 2 caracterizado por se utilizar um composto com a fórmula (lll) em que o grupo precursor R representa um grupo 1, 2,4-triazol-l-ilo.

Processo de acordo com a reivindicação 3 caracterizado por se converter o referido grupo precursor num átomo de hidrogénio por tratamento com hidrato de hidrazina e óxido de prata.

A requerente declara que os primeiros pedidos desta patente foram apresentados no Reino Unido em 16 de Março de 1987 sob o na 8706176 e nos Estados Unidos da América em 28 de D_ezembro de 1987, sob o número de série 138,808.