PT86024B - Processo para a preparacao de polipeptidos de nor-estatina e nor-cicloestatina - Google Patents

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE POLIPÉPTIDOS DE NOR-ESTATINA

E NOR-CICLOESTATINA

Estes compostos apresentam as fórmulas

(II) em que Z é R|-(Y)_m~(A) em que, por exemplo é morfolino, Y é C=0, A é NH e m e p sao 1; e, por exemplo, Q é hidrogénio, X é ciclo-hexilo, W é CHOH, R₂ é n-propilo, Z¹ é CH₂0H, L é CH₂, é imidazol-4-ilmetilo e δθ é alcoxi (c_x-c₄).

processo de preparaçao consiste por exemplo, em se formar uma ligaçao amida, C(O)N, por acoplamento com desidrataçao, em que os grupos funcionais não envolvidos na reacção podem ser bloqueados.

Este pedido de patente é uma continuação em parte do pedido de patente pendente com o No. de série 68,982, depositado em 1 julho de 1987, que é uma continuação do pedido de patente pendente com o No. de série 925,449, depositada em 31 de Outubro de 1986.

Este invento refere-se a novos polipeptidos contendo nor-estatina e nor-cicloestatina, úteis como agentes anti-hipertensivos.

A renina de enzima proteolitica, que tem um peso molecular de cerca de 40.000, é produzida e segregada no sangue pelo rim. Ê sabido que é activa in vivo na clivagem do angiotensinogeno de glicoproteina de plasma natural, no caso de angiotensinogeno humano na ligaçao entre os resíduos dos amino ácidos de leucina (10^a) e de valina (11^a) na extremidade N-terminal do angiotensinogeno:

Asp-Arg-Val-Tir-Ile-His-Pro-Fen-His-Leu-Val-Ile-His-Ser-Glu1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 decapeptido N-terminal de circulação (angiotensina I) formado pela acçao de clivagem anterior de renina é subsequentemente partido pelo corpo num octapeptido conhecido como angiotensina II. A angiotensina II é conhecida ser uma substância pressora potente, i.e. uma substancia que é capaz de induzir um aumento significativo da pressão sanguínea e pensa-se que actua provocando a contracçao dos vasos sanguíneos e a libertação da hormona de retenção de sódio da glândula supra-renal. Deste modo, o sistema renina-angiotensinogeno foi relacionado como um factor provocador de certas formas de hipertensão e

do colapso cardiaco.

Uma maneira de aliviar os efeitos adversos do funcionamento do sistema renina-angiotensina é a administraçao duma substância capaz de inibir a acçao de clivagem de angiotensina da renina. Sao conhecidas uma série de tais substâncias, incluindo anti-corpos antirrenina, pepestatina e compostos fosfolípidos naturais. 0 pedido de patente Europeia No. 45.665 (publicado em 2 de fevereiro de 1982) divulga uma série de derivados de polipeptido de inibição da renina com a fórmula

X-Y-Pro-Fen-His-A-B-Z-W em que X pode ser hidrogénio ou um grupo de protecção de amino, Y pode estar ausente, B é um residuo de amino ácido lipofílico, Z é um residuo de amino ácido aromático, W pode ser hidroxilo e A pode ser, inter alia,

R¹ R² 0

I I

-NH-CH-CH-CH₂-CH—cI

OH

2 sendo cada um de R e R uma cadeia lateral lipofilica ou aromática. De acordo com as definições indicadas neste pedido de patente publicado, nao está contemplado nem que A ou Z possam ser estatina, nem que B possa ser lisina.

pedido de patente Europeia No. 77.028 A (publicado em 20 de Abril de 1983) divulga uma serie de compostos de polipeptido de inibição de renina com um residuo de derivado de estatina nao-terminal ou de estatina. Incluídos dentro destes estão compostos com uma sequência fenilalanina-histidina-estatina.

Pedido de Patente Europeia 132.304A também divulga a utilização de polipéptido contendo estatina sob a forma de agentes anti-hipertensivos inibidores de renina e o Pedido de Patente Europeia 114.993A divulga polipeptidos contendo cicloestatina, úteis como agentes anti-hipertensivos.

Os novos péptidos do presente invento têm as fórmulas

(II)

bem como um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Z é Rj-(Y)_m~(A)p. em que é alquilo (C|-C^), amino, alcoxi alquilamino (C^-C^), alcoxi (C^-Cg) alquilenoamino (Cg-C^), carboxialquilo hidroxialquilenoamino (Cg-C^), alcoxi (C^-Cg) COCHgN(CHg), aminoalquilo (C^-Cg), morfolino, piperidilo, hidroxipiperidino, 4-oxopiperidino, piperazino, 4-oxopiperidinoetileno cetal, 4-alquilpiperazino (C^-Cg), tiomorfolino, 1-oxido de tiomorfolino, 1,1-dioxido de tiomorfolino, N-alcoxicarbonilpiperidilo (C^-C^), 4-alcoxicarbonilpiperazino (Cj-C^) 3-°xomorfolino, 3,5-dioxomorfolino, hidroxipiridilo piridilo, (s)-pirrolid-2-ilo, N-t-butoxicarbonil-(s)-pirrolid-2-ilo, 2-(0^-Cg)-alcoxicarbonil-(s)-pirrolid-2-ilo ou 4- (C^-C^)-alcancãlpiperazino; Y é C=0, P(OCHg)=O ou SO2; A é NH, N Hg ou 0; m e sao cada um inteiros de 0 a 1; M é fenilo, naftilo, benzilo, tienilo, metoxifenilo, hidroxifenilo, clorofenilo ou cicloalquilo (C^-C?); Q é metilo ou hidrogénio; R2 é alquilo (C^-Cg), alquiltio (C^-Cg^lquilo (C^-Cg), alcoxi (C^-Cg) alquilo (C^-Cg), benziloxialquilo (C^-Cg), benzilo, hidroxialquilo (C^-Cg), carboxialquilo (C^-Cg), guanidoalquilo (C^-Cg), alquilo (Ci~Cg) sulfiniloalquilo (C^-Cg), alquilo (C|-Cg)sulfoniloalquilo (C^-Cg), 4-benziloxicarbonilaminobutilo, 4-aminobutilo, imidazol-4-ilmetilo, N-_t-butoxicarbonilimidazol-4-ilmetilo ou carbamilalquilo (C^-Cg); X é ciclohexilo, i_-propilo ou fenilo; W é CHI II OCO alquilo(C^-Cg)piperidino, CHUIOH, alquilo (C^-Cg)dialquilo(C^-Cg)amino, C=0, CHIlINg, CH**Ng, CH—«NHg, CHIHNHg, C(CHg)HlOH, C(CHg)—*0H, CHIIIOCO alquilo (Cj-Cg) ou CH 111 OCO alquileno (C^Cg) COgH; Z¹ é CHgOH ou R-S-T em que R é C=0, S é 0, NH, N(CHg), CHg ou uma ligaçao química ligando R e T; T é alquilo (C^-Cg), hidroxialquilo (C^-C^), CONH - alquilo (Cj-C^), hidrogénio, trifluoroetilo, cicloalquilo (C^-C?), cicloalquilmetilo(C^-Cy), fenilo, benzilo, aminoalquilo (C2-C5), 0-alquilo(C^-C2)hidroxilamino, morfolino, 4-alquil(C^-C2)piperazino ou omega- dialquilo (CJ-C2)-aminoalquilo L é CH ou N; é imidazol-4-ilmetilo ou alquilo (C2-C5); e R^ é alcoxi (C^-C^) ou alquilamino (Cj-C^) com a condição de que quando m é 0, j) é 0; quando A é 0, Y é 0=0; quando T é CONH-alquilo (C^-C^), S é NH, N(CH₃) ou CH2; e quando T é alquilamino (^2^5) » 0-alquil (GJ-C2) hidroxilamino, morfolino ou 4-alquilo (Ci-^Jpiperazino, S é CH2 ou uma ligaçao quimica ligando R e T.

Um grupo preferido de compostos sao aqueles de fórmula I, em que Y é 0=0, A é NH, Q e hidrogénio, X é ciclohexilo, W é CHIIIOH, R é 0=0, T é benzilo ou alquiloCC^-C^) e m e sao cada um 1. Especial mente preferidos dentro deste grupo sao os compostos em que Rj é morfolino, M é fenilo, S é 0 e R2 é n-propilo e T é i-propilo, em que R2 é CH₃SCH2- e T é i-propilo, em que R2 é 11-butilo e T é metilo, em que R2 ó HOCH2 e T é i-propilo, em que R2 é CH₃O(CH2)2^- e T é i-propilo, em que R2 é CH₃SCH2“ e T é benzilo, em que R2 é metilo e T é i-propilo, em que R2 é n_-butilo e T é i-propilo, em que R2 é CH₃OCH2~ e T é .i-propilo e em que R2 é CH₃CH20CH2- e T é i-propilo. Também especialmente preferidos dentro deste grupo estão os compostos em que M é fenilo, S é 0, T é i-propilo, R2 é CH₃SCH2- e R^ é pirrolidilo, 4-piridilo, piperazino ou 4-hidroxipiperidino. Também especialmente preferidos dentro deste grupo estão aqueles compostos em que R^ é morfolino. M é fenilo, S é uma ligaçao quimica ligando R e T e R2 é 11-butilo e T e CH2CH(CH₃)2· Também especialmente preferidos dentro deste grupo estão os compostos em que R^ é morfolino, S é 0 e em que M é 2-tienilo, R2 é CH₃SCH2 e T é i.-propilo, em que M é 4-hidroxifenilo, R2 é CH₃SCH2- e T é Í-propilo e em que M é 4-metoxifenilo, R2 é 11-butilo e T é metilo. Também especialmente preferido neste grupo

é o composto em que Rj é morfolino, M e fenilo, R₂ e n-butilo, S é NH e T é metilo.

Um grupo preferido de compostos são aqueles de formula I em que M é fenilo, S é uma ligação química ligando R e T, T é alquilo(C^-C₃) e R é C=0.

presente invento também inclui um método para o tratamento dum mamífero com hipertensão, o qual compreende a administraçao ao referido mamífero duma quantidade eficaz antihipertensiva dos compostos do presente invento e duma composição farmacêutica constituída pelos compostos do presente invento e um veiculo.

Como foi previamente indicado, o presente invento compreende sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos biologicamente activos. Estes sais sao aqueles que sao nao-tóxicos às dosagens de administraçao. Uma vez que os compostos do invento podem conter grupos básicos, sais de adiçao de ácido sao possiveis. Os sais de adiçao de ácido farmaceuticamente aceitáveis incluem p.e. os sais cloridrato, bromidrato, hidroiodeto, sulfato, bissulfato, fosfato, fosfato ácido, acetato, lactato, maleato, mesilato, fumarato, citrato ácido, tartarato, bitartarato, succinato, gluconato e sacarato.

No interesse de abreviar, impregou-se sempre que possivei o nome abreviado dos amino ácidos e reagentes individuais normalmente aceite. Por exemplo o amino ácido fenilalamina é abreviado por Fen, homoserina por Hse, histidina por His, lisina por Lis e norleucina por Nle. 0 grupo _t-butoxicarbonilo de protecçao de amino é abreviado por Boc, benziloxicarbonilo por CBZ e N-t.-butoxicarbonilo no imodazole de histidina por imBoc. Outras abreviaturas sao: CPBA-ãcido cloroperbenzoico, DCC-diciclohexilcarbodiimida, DEC-dimetilaminopropil etil carbodiimida-HCL, DMF dimetilformamida, HCL-cloreto de hidrogénio, HBT hidroxibenzotriazole, mesil-CH₃S02-, tala-2-tienilalanina, Nfala-l-naftilalanina, S-Mecis-cisteina de S-EtCis-cisteina de S-etilo, MgSO^-sulfato de magnésio, NaOH hidroxido de sodio, C^C^-cloreto de metileno, ^K2^°3~^carbonato de potássio, NaHC0₃_bicarbonato de sódio, O-MeTir-tirosina de 0-metilo, O-MeHse-O-metilhomoserina, etc.

A nostatina e norciclostatina modificadas, contendo menos um átomo de carbono na estru tura, têm as formulas

OH

OH

Estas estruturas sao abreviadas por nor-Sta e nor-C-Sta, respectivamente.

Todos os amino ácidos naturais contidos nas estruturas dos compostos presentemente reivindicados têm configuração L, a configuração natural, a menos que indicado doutra maneira.

Também considerados como parte do presente invento sao os compostos de fórmulas I e II, em que nor-Sta e nor-C-Sta são substituídos por nor-Statona e nor-C-Statona.

composto deste invento apresentam actividade anti-hipertensiva in vivo nos mamíferos, incluindo seres humanos. Pelo menos uma parte substancial desta actividade resulta da sua capacidade em inibir a clivagem da angiotensina pela renina. Embora nao queiramos ser limitados pela seguinte teoria de mecanismo, é provável que o mecanismo da actividade de inibição da renina dos compostos do invento esteja relacionado com a ligaçao selectiva (se comparada com a angiotensina) ã renina. Os compostos do invento apresentam actividade de inibição enzimática que está dirigida para a renina. Devido aos seus baixos pesos moleculares, eles apresentam caracteristicas de solubilidade favoráveis em meio aquoso, tornando assim a administraçao oral possível, e podem ser preparados com um custo comercialmente realista. Os compostos do presente invento sao também úteis contra o colapso cardíaco congestivo.

Os compostos do invento podem ser preparados por métodos conhecidos dos técnicos da especialidade. A sub-unidade básica da síntese quimica

-11preferida é a acilaçao do grupo alfa-amino desprotegido dum residuo de amino ácido com um amino acido possuindo uma função carboxilica activada (para fins de acilaçao) e um grupo protector adequado ligado ao seu próprio alfa-azoto para formar uma ligação péptido entre os dois residuos de amino ácido, seguida por remoção do referido grupo protector. Esta sub-unidade de ligaçao-desbloqueamento é efectuada repetidamente para construir o polipeptido, partindo das extremidades C-terminal, como descrito anteriormente. Os amino ácidos utilizados para sintetizar os compostos do presente invento sao comercialmente adquiridos (sob a forma de ácidos livres, sais ou ésteres, etc.) sob a forma alfa-amino protegido e alfa-amino desprotegido.

A actividade dos compostos do presente invento como inibidores da actividade de clivagem de angiotensinogeno da renina pode ser determinada através do estudo da sua capacidade em inibir a actividade de clivagem de angiotensinogeno da renina in vitr.

Os compostos do presente invento podem ser administrados como agentes anti-hipertensivos pela via de administraçao oral ou parentérica, sendo a primeira preferida por rasoes de conveniência e conforto do doente. Geralmente, estes compostos anti-hipertensivos sao normalmente administrados por via oral, com uma dosagem variando entre cerca de 0,1 mg e cerca de 20 mg por kg de peso corporal por dia, e por via parentérica, com uma dosagem variando entre cerca de 0,1 mg e cerca de 5 mg por kg de peso corporal por dia; far-se~ -âo necessariamente alterações dependendo do estado do individuo a tratar e do composto particular a administrar. Normalmente, o tratamento é iniciado com uma dosagem dia-12-

ria baixa e está só é aumentada pelo medico se for necessário. Nota-se que estes compostos podem ser administrados em combinação com veículos farmaceuticamente aceitáveis por ambas as vias anteriormente indicadas, e que tal administraçao pode ser efectuada por meio de dosagens individuais ou múltiplas.

Os novos compostos do invento podem ser administrados oralmente segundo uma grande variedade de formas de dosagem diferentes, i.e., elas podem ser formuladas com vários veículos inertes farmaceuticamente aceitáveis na forma de comprimidos, cápsulas, rebuçados, trociscos, caramelos duros, pós, sprays,suspençoes aquosas, elixires, xaropes, etc. Tais veículos incluem diluentes sólidos ou agentes de enchimento, meios aquosos esterilizados e vários solventes orgânicos nao-tóxicos, etc. Alem disso, tais formulações farmacêuticas orais podem ser adicionados adequadamente e/ou aromatizadas por meio de vários agentes do tipo normalmente empregue para estes fins. Geralmente, os compostos dete invento estão presentes nestas formas de dosagem oral com níveis de concentração variando entre cerca de 0,5% e cerca de 90% em peso da composição total, em quantidades que sao suficientes para proporcionarem as dosagens unitárias desejadas.

Para administraçao oral, podem-se empregar comprimidos contendo vários excipientes tais como citrato de sódio, carbonato de cálcio e fosfato de cácio, conjuntamente com vários desintegrantes tais como amido, preferivelmente amido de batata ou de tapioca, ácido algínico e determinados silicatos complexos, e com agentes de ligaçao tais como polivinilpirrolidona, sucrose, gelatina e acacia. Adicionalmente, agents lubrifican

-13tes tais como estearato de magnésio, sulfato de lourilo de sódio e talco, que sao composiçoes dum mesmo tipo, podem também ser empregues como agentes de enchimento em cápsulas de gelatina macias e duras; estão incluídos lactose ou açúcar de leite, bem como glicois de polictileno de alto peso molecular. Quando suspensões aquosas e/ou elixires sao desejados para administraçao oral, o ingrediente activo essencial aí pode ser combinado com vários agentes adocicantes ou aromatizantes, substâncias corantes ou tintas e, se desejado, emulsionadores e/ou suspensão como água, etanol, propileno aglicol, glicerina e varias suas combinações.

Os compostos do presente invento sao também úteis no diagnostico da hipertensão e colapso cardíaco congestivo.

Os seguintes exemplos ilustram o invento, mas nao foram feitos para o limitarem.

Condíçoes Gerais Experimentais

A cromatografia líquida de alto rendimento (CLAR) foi efectuada sob as seguintes condições: detecção a 214 nm, coluna de Dupont Zorbax C-8 de 4,6 x 250 mm, a 1,5 ml/min. Os sistemas de CCF sao, quando abreviados, da forma que se segue: Sistema A = acetato de etilo-hexano, respectivamente, à relaçao indicada, sobre silica; Sistema B = éter-hexano, respectivamente, à relaçao indicada, sobre silica; Sistema C =? 18/2/1 HCClg-EtOH-HOAc sobre silica; Sistema D = 9:2:1, clorofórmio-etanol-ácido acético.

EXEMPLO 1

BocFenHisnor-C-StaNHCHg (I, Z=_t-butoxicarbonilamino;

M=fenilo; Q=H; I^^inidazol-A-ilmetilo; W=CH|H0H;

Z¹=CONHCH₃; e X=ciclo-hexilo)

A. N-Metil-(S)-3-t.-Boc-amino-4-ciclo-hexil-(R)-

-2-h i d roxíbutiramída

Ácido (S)-3-t-Boc-amino-4-ciclohexil-(R)-2-hidroxibutérico (100 mg), E.U.A. 4.599.198, foi dissolvido em 0,9 ml de tetraidrofurano com 55 jil de trietilamina e a mistura foi tratada a -30°C com cloroformato de isubutilo (45 jil). Ao fim de 1,5 horas, a mistura foi arrefecida até -60°C e adicionaram-se 1,5 ml duma solução 1,6 M de metilamina em tetraidrofurano, e a mistura foi levada até 25°C. Borbulhou-se axcesso de metilamina na mistura de recçao, a qual foi então diluída com 25 ml de èter, foi extraída duas vezes com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, foi seca e concentrada. Cromatografia em acetato de etilo-hexanos, 2:1 sobre sílica produziu 45 mg (42%) da substância do título sob a forma dum sólido incolor, Rf 0,16 em acetato de etilo-hexanos, 2:1, sílica e RP-CLAR, 40/60 MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1, 3,32 min.

B. N-Metil-(S)-3-amino-4-ciclo-hexil-(R)-2-hidro- xibutiramida produto do Exemplo IA (45 mg)

foi dissolvido em 2 ml de cloreto de hidrogénio 4N-dioxano e foi agitado a 25°C durante 1,5 horas. A mistura foi concentrada e co-evaporada várias vezes com éter produzindo 50 mg da substância do titulo sob a forma dum sólido incolor, tempo de retenção de CLAR 3,05 min., 40/60 MeCN-fosfato O,1M pH 7,0.

C. BocFenHis( imBoOnor-C-StaNHCHg

Uma solução do produto do Exemplo 1B (49 mg) em 0,5 ml de diclorometano foi tratada a 0°C com 30 pl de trietilamina, 112 mg de BocFenHis(imBoc), E.U.A. 4.599.198, 48 mg de hidroxibenzotriazole e 46 mg de diciclohexilcarbodiimida respectivamente, e a mistura foi agitada a 0°C durante 6 h e depois foi deixada aquecer até 25°C durante a noite. A mistura foi filtrada, o precipitado foi lavado com diclorometano e os filtrados combinados foram concentrados e dissolvidos em acei tato de etilo. Após agitaçao durante alguns minutos, a | suspensão de acetato de etilo foi filtrada e o filtrado | foi lavado com uma solução de hidroxido de sódio 1 .N (duas vezes), foi seco sobre sulfato de magnésio e foi concentrado. Cromatografia sobre sílica eluindo-se com etanol-diclorometano aumentou gradualmente de polaridade da forma que se segue (1%, 2%, 4%, 6% e 10% de etanol) produziu 57 mg da substância do titulo sob a forma dum sólido amorfo incolor.

I ι

D. BocFenHisnor-C-StaNHCHg produto do Exemplo 1C foi dis-16solvido em 1,2 ml de 80/20 (V;V) de ácido acético-água e foi agitado a 25°C durante 12 horas. A mistura foi concentrada, co-evaporada três vezes com éter e duas vezes com diclorometano, produzindo 47 mg dum produto sob a forma dum pó castanho claro.

CLAR, em 50/50 de MeCN-fosfato O,1M pH 2,1, 3,61 min; 1H RMN, DMSO, 300 MHZ, parcial, delta ppm: 1,32 (s, 9H, Boc), 2,60 (d, 3H, NCH^), 3,90,

4,66 e 7,9 (m, 1H ea), 4,18 (m, 2H), 7,12, 7,7, 8,28 (d, 1H ea), 7,32 (s, 1H), 7,2-7,4 (m, aromático).

EXEMPLO 2

BocFenHisnor-C-StaNHCONHCI^CI^CHg (I, Z=t.-butoxicarbonilamino; R2=imidazol-4-ilmetilo; M=fenilo; Q=H; W=CH||| 0H; Z-=CONHCONHCH₂CH₂CH₃ e X=ciclohexilo)

A. N-t.-Boc-O-t.-butildimetilsilil-nor-C-

-StaNHCONHCH₂CH₂GH₃

Uma solução de 415 mg de (S)-3-t_-Boc-amino - (R )-2-t-butildimetilsililoxi-4-ciclohexilbutiramida (E.U.A. 4.599.198) e de 94 jil de isocianato de propilo em 2 ml de tolueno foi aquecida durante 90 horas a 100°C, foi arrefecida e cromatografada sobre silica em 15% de acetato de etilo-hexano, produzindo-se 260 mg da substância do titulo sob a forma duma espuma oleosa incolor, Rf de CCF de 0,49, l:2-sistema A.

174

Β. Cloridrato de Nor-C-StaNHCONHCH₂CH₂CH₃ produto do Exemplo 2C (255 mg) foi dissolvido a 25°C em 3 ml duma solução de ácido hidrofluórico a 48% aquoso a 5% acabado de preparar em acetonitrilo, e foi agitado durante 2 horas. Adicionou-se bicarbonato de sódio em excesso à mistura de reacçao. Juntamente com 20 ml de água e a mistura foi extraída com acetato de etilo, que foi então levado com água, foi seco (sulfato de magnésio) e foi concentrado para produzir 198 mg dum óleo. Este foi dissolvido, a 0°C em 4 ml de cloreto de hidrogénio 4N-dioxano, foi agitado a 25°C durante 1 hora e depois foi concentrado para produzir 130 mg dum sólido ceroso incolor. RMN indicou que a clivagem do grupo sililo ficou incompleta. CCF mostrou dois produtos de Rf 0,42 e 0,07 (sistema C) que se presumiram ser o éter de aminossililo e o aminoálcool, respectivamente. Este produto foi utilizado sem purificação na etapa seguinte.

C. BocFenHis(imBoc)nor-C-StaNHCONHCH₂CH₂CH₃

De acordo com o processo para preparação e purificação do produto do Exemplo 1C, 119 mg do produto do Exemplo 2B produziram 97 mg da substância do título sob a forma dum sólido amorfo incolor, Rf de CCF de 0,55, sistema C. A substância 0-sililada correspondente indesejada (derivada do contaminante 0-sililo no Exemplo 2B) foi separada durante a etapa de cromatografia (uma substância menos polar, Rf 0,60, sistema C).

BocFenHisnor-C-StaNHCONHCH₂CH₂CH₃ produto do Exemplo 2C (91 mg) foi dissolvido em 1,5 ml 80/20 de ácido acétco-água e foi agitado a 25°C durante 6 h. A mistura foi concentrada, co-evaporada três vezes com éter e seca durante a noite para produzir 80 mg de produto sob a forma dum solido incolor, Rf 0,10 no sistema C com um tempo de retenção de CLAR de 2,35 min. em 70/30 MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1.

RMN, DMSO, 250 MHz, delta parcial, ppm: 0,86 (t, 3H),1,32 (s, 9H, Boc), 1,47 (q, 2H), 3,14 (q, 2H), 4,06 e 4,48 (m, 1H ea), 4,17 (m, 2H), 6,83 (s, 1H), 7,10, 7,63, 8,02 (d, 1H ea), 7,15-7,35 (m, aromático), 7,56 (s, 1H), 8,28 (m, 1H).

EXEMPLO 3

Éster metilico de indole-2-carbonilHisnor-C-Sta (II, R^= =imidazol-4-ilmetilo; R^=OCH₃; e L=CH)

A. Éster de tetraidropiran-l-ilo de 4-ciclohexil-2-pentin-l-ilo

Um frasco de fundo redondo de três tubuladuras de 5 1, seco no forno, equipado com a19

gitador mecânico, termómetro, funil de gotejamento e entrada de azoto foi carregado com 192 g de éter de tetraidropiranilo de propargilo e 750 ml de tetraidrofurano seco (etiqueta dourada Aldrich). A solução agitada foi mantida a 0°C por meio dum banho de Gelo Seco-acetona, ao mesmo tempo que se adicionaram 604 ml de n-butillítio 2,5 M durante 45 minutos. À solução escura resultante adicionou-se uma solução de brometo de ciclohexilmetilo em hexametilfosforamida (destilada de hidrato de cálcio a pressão reduzida) durante um período de 20 min. a 5-10°C, e a agitaçao continuou durante 4 h a 25°C. A mistura foi deitada numa mistura agitada de 2 1 de água gelada e 2 1 de hexano. A camada orgânica foi lavada com 2 x 500 ml de solução de cloreto de lítio l,0M, foi seca sobre sulfato de sódio, foi concentrada e destilada utilizando-se uma coluna Vigreux de 8 120,32 cm para produzir 102 g de éter de tetraidropiramilo de propargilo recolhido, p.e. 60-90°C a 3 mm, seguidos por 151 g do produto do titulo, p.e. 125-130°C a 0,5 mm, Rf de CCF em 1:4 de sistema B.

B. 4-ciclo-hexil-2-butin-l-ole

Um frasco de três tubuladuras de 2 1 equipado com um agitado mecânico, entrada de azoto, e termómetro foi carregado com 140 g do produto do Exemplo 3A e 700 ml de metanol. A misyura agitada foi arrefecida até 2-3°C e adicionaram 560 mg de ácido p-toluenossulfónico, após o que o banho de arrefecimento foi substituído por um banho de água suficientemente quente para elevar a temperatura de reacçao até 30°C. Ao fim de 4,5 h, adicionaram-se 5 ml de hidróxido de sódio 1N_

I e a maioria do metanol foi removida a pressão reduzida no evaporador rotativo. 0 resíduo foi dissolvido em 700 ml de hexano e a solução foi lavada com solução de hidróxido de sódio 1N (3 x 100 ml), foi seca sobre carbonato de potássio, foi filtrada, concentrada e destilada a partir de carbonato de potássio utilizando-se uma coluna de Vigreux de 8” para produzirem 76 g de produto, p.e. 90°C a lmm sob a forma dum liquido amarelo claro, contaminado com 1% de metanol e 1% de hexametilfosforamida, como indicado por 1H RMN. Este produto foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. Rf de CCF 0,5, 1:1 de sistema B.

Anal. Calcd para C, 78,90; H, 10,59.

Encontrado: C, 78,31; H, 10,72.

C. Z-4-ciclo-hexil-2-buten-l-ole

Uma garrafa de Parr de 500 ml foi carregada com 35,2 g do produto do Exemplo 3B, 250 ml de tolueno, e 250 mg Lindlar Catalyst Poison’’ (FluKa) A solução foi purgada com azoto e adicionaram-se 14,08 g de catalizador de Lindlar (Aldrich). A mistura foi agitada sob uma pressão de hidrogénio de 241,32 KPa (35 psi) durante 45 minutos, durante cujo tempo a temperatura de reacçao aumentou espontaneamente até cerca de 45°C. A suspensão arrefecida foi filtrada através de Celite e foi combinada com outra mistura de reacçao preparada duma maneira idêntica a partir de mais 35,2 g do mesmo material de partida. A mistura combinada foi concentrada por dstilaçao á pressão atmosférica a partir de carbonato de cálcio através duma coluna de Vigeux de 12

^r~\ (30,48 cm), depois no evaporador rotativo a pressão do aspirador e a 25°C, seguida por aquecimento a 80°C a 0,3 mm no mesmo frasco equipado com uma coluna de Vigreux, até se ter obtido um refluxo suave. 0 liquido remanescente, um óleo amarelo claro, pesava 77,4 g, e foi contaminado com 1% de metanol e 1% de hexametilfosforamida, conforme indicado por RMN. Este produto mostrou uma mancha individual por CCF, Rf 0,4, 1:1, sistema B, e por RMN nao mostrou nenhum trans isómero detectável.

D. 2(S), 3(R)-Epoxi-4-cíclo-hexil-l-butanol

Um frasco de três tubuladuras de IL equipado com termómetro, agitador mecânico, entrada de azoto e banho de arrefecimento foi carregado com 15 g de crivos moleculares de 400 mesh 4 anstrom, 400 ml de [ diclorometano e 7,23 ml de L-tartarato de (+)-diisopropilo j (Aldrich). A mistura agitada foi arrefecida até -5°C e adicionaram-se 6,75 ml de tetraisopropóxido de titânio, seguidos por 227 ml de hidroperóxido de t_-butilo 3,0M em tolueno (Aldrich), nao tendo nenhum deles produzido exotermia apreciável. Â mistura agitada a -20°C adicionou-se uma solução de 70 g do produto do Exemplo 3C em 30 ml de diclorometano durante 10 min., de modo que a temperatura nao se elevasse a cima de cerca de -20°C. A mistura foi agitada 6h a -10°C, e depois foi colocada (sem agitaçao) num frigorifico (-10°C) durante 60h. A mistura foi agitada novamente num banho de gelo e adicionaram-se 120 ml de água, seguidos por 30 ml de solução de hidróxido de sódio 61$ e a mistura foi saturada com cloreto de sódio.

Adicionou-se metanol (50 ml) e a mistura foi filtrada, tratada com 100 ml de tampao fosfato ph 7 0,lM e, depois

-22de agitaçao vigorosa, foi deixada em repouso até se dar separaçao parcial. A camada inferior (orgânica) foi separada e as camadas superiores (aquosa) e intremédia (emul^ sao) foram extraídas com diclorometano (3 x 200 ml). A emulsão remanescente (camada intermédia) foi filtrada através de Celite, causando a sua separaçao completa na camada orgânica e na camada aquosa. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com tampao fosfato ph 7 (3 x 100 ml), bicarbonato aquoso e salmoura, foram secas (sulfato de magnésio), foram filtradas e concentradas para produzirem 85 g dum óleo viscoso que foi destilado utilizandose uma coluna Vigreux de 8” para produzir 12 g, pe. 60-122°C a 0,5 mm, e depois 51 g da substancia do titulo, pe. 122-130°C a 0,45 mm, Rf de GCF 0,20 em 2:1, sistema B.

Anal. Calcd para 6|θΗ^θ2: C, 70,55; H, 10,66.

Encontrado: C, 69,89; H, 10,50.

E. Ácido 2(S)-3(R)-epoxi-4-ciclo-hexil-l-butanóico

Três gramas do produto do Exemplo 3D foram dissolvidos em acetonitrilo (30 ml), e Adicionaram-se sequencialmente 45 ml de água, 30 ml de tetracloreto de carbono, 690 mg de trihidrato de tricloreto de ruténio, e 10,0 g de ácido periódico. A temperatura subiu gradualmente, mas foi mantida a 30-35°C por meio de arrefecimento suave. Ao fim de l,5h, adicionaram-se 75 ml de salmoura e 400 ml de clorofórmio. A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraida três vezes com clorofórmio (400 ml). As camadas orgânicas combinadas

foram lavadas com 50 ml de ácido clorídrico 2t£ saturado com cloreto de sódio, foram secas (sulfato de magnésio), foram filtradas através de Celite e foram concentradas para produzirem 2,55 g da substância do titulo sob a forma dum sólido purpúreo, Rf de CCF o,40, sistema C, que foi imediatamente utilizado sem purificação na etapa seguinte.

F. Ãcido 3(S)-Azido-2(R)-hidroxi-4-ciclo-hexibutirico produto do Exemplo 3E (2,65 g) foi dissolvido em 10 ml de etanol absoluto e foi adicionado a 25°C a uma solução em agitaçao de 2,11 g de azida de litio e 6,43 ml de tetraisopropóxido de titânio em 180 ml de etanol absoluto. A mistura foi agitada a 25°C durante 20 horas, depois a 35°C durante 5h e a 25°C durante 14 horas, após o que foi concentrada, dissolvida em 250 ml de éter e 75 ml de ácido sulfúrico a 1%, agitada durante 30 min. e separada. A camada orgânica resultante foi lavada com ácido sulfurico a 5% (3 x 20 ml), tampao fosfato ph Ί (duas vezes), seca (sulfato de magnésio) e concentrada para produzir 2,82 g da substância do titulo sob a forma dum óleo cor-de-bronze claro que solidificou em repouso. 0 material mostrou Rf de CCF de 0,35 (sistema C) e IV(CHC1₃) 2100 cm

I

G. Ester metilico de ácido 3(S)-Azido-2(R)-hidroxi-4-ciclo-hexilbutirico

Preparou-se diazometano por tratamento de 4,5 g de N’-nitrose-N-metil-N-nitroguanidina em 75 ml de eter com 31 ml de solução de hidróxido de sódio 6N a 0°C, seguido por decantação e secagem da camada orgânica muito rapidamente sobre 5 g de hidróxido de potássio. Esta solução foi introduzida num funil de gotejamento e adicionada gota a gota a uma solução agitada de 2,82 g do produto do Exemplo 3F em 50 ml de eter a 0°C. Ao fim de 40 min. adicionaram-se 20 ml de ácido acético e a mistura foi extraída com bicarbonato de sodio saturado (3 x 20 ml) e solução de hidroxido de sódio (2 x 20 ml), foi seca (sulfato de sódio), foi filtrada e cromatográfada sobre silica eluindo-se com 1:8 acetato de etilo-hexano. Obtiveram-se 2,43 g da substancia do titulo por concentração das fracções apropriadas e esta mostrou um Rf de CCF de 0,58, 1:1 sistema A, IV (CHCl^) 2100 cm /alfa7²⁰ + 10,1, (c = 1,19, CHCl^.

H. Cloridrato de éster metilico de ácido 3(S)~ -amino-2(R)-hidroxi-4-ciclo-hexilbutirico produto do Exemplo 3G (2,23 g) foi agitado com 100 mg:de Pd a 10%/C em 15 ml de etanol e sob 344,74 KPa (50 psi) de hidrogénio durante 40 min. a 25°C. A mistura foi filtrada através de Celite, foi concentrada, co-evaporada com tolueno (2 x 10 ml), foi dissolvida em 4 ml de cloreto de hidrogénio 3,4M-dioxano foi concentrada e co-evaporada várias vezes com eter para produzir após secagem 1,49 g duma espuma amarelo clara

oleosa, Rf de CCF de 0,15 (a placa manchada foi exposta a vapor de amónia antes de revelaçao no sistema C).

I. Ester metilico de indole-2-carbonilHis

Cinco gramas e meio de cloridrato de ester metilico de histidina foram suspensos em 500 ml de diclorometano e foram tratados a 0°C com 6,92 ml de trietilamina, e a seguir, sequencialmente, com 4,2 g de ácido indole-2-carboxilico, 5,56 g de hidroxibenzotriazole e 5,35 g de diciclohexilcarbodiimida. A mistura foi agitada num banho de gelo que foi deixado aquecer até 25°C durante a noite. A mistura foi filtrada, o precipitado foi lavado com diclorometano, o filtrado foi concentrado, o resíduo foi dissolvido em 200 ml de clorofórmio e foi extraído com 4 x 30 ml de solução de hidrói xido de sódio IN e salmoura, foi seco (sulfato de sódio) e concentrado para produzir 7,2 g duma espuma amarela.

Esta espuma foi dissolvida numa mistura de 5 ml de clorofórmio, 20 ml de água e 25 ml de ácido clorídrico IN, a camada aquosa foi lavada com 5 ml de clorofórmio e depois o ph foi ajustado para ph6 com solução de hidroxido de sódio. A mistura foi concentrada e seca para produzir 4,3 g dum sólido castanho claro, mostrando um tempo de retenção de 3,46 min. por CLAR em 35/65 de MeCN-fosfato 0,lM ph2,l (85% de absorçao total), sendo o dos contaminantes de menor importância de 2,36 e 1,66 min. Rf de CCF no sistema C foi 0,07. Este produto foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

J. N-alfa-(Indole-2-carbonil)-N(im)-t-butoxicarbonil-L-histidina

Quatro gramas e três décimos do produto do Exemplo 31 foram dissolvidos em 60 ml de metanol e 20 ml de água, foram arrefecidos até 0°C e tratados com 7,6 g de carbonato de potássio anidro. Após lha 0°C e 2 h a 25°C, a mistura foi arrefecida, levada até ph3 com ácido clorídrico 6N, concentrada, arrefecida até 0°C, levada para pH 10,5 com solução de hidróxido de sódio 6.N, tratada com 150 ml de dioxano e foram-lhe adicio20 nados 4,2 ml de bicarbonato de di-t-butilo ((Boc) ) a 0°C. A mistura foi então agitada a 25°C e o pfí foi mantido entre 9 e 10,5 por adiçao de solução de hidróxido de sódio. Após 75 min., adicionaram-se mais 2 ml de (Boc) e, ao fim de mais 15 minutos, amistura foi concentrada para remover a maioria do dioxano, adicionaram-se 100 ml de água e a solução resultante foi lavada três vezes com eter (25 ml ea.). A camada aquosa foi arrefecida num banho de gelo, adicionaram-se 500 ml de acetato de etilo e o pH da camada aquosa foi levado para 1,3 com ácido clorídrico 6N. A camada orgânica foi separada, a aquosa foi extraída com acetato de etilo, as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas (sulfato de sódio), filtradas e concentradas para produzirem após secagem 3,1 g da substância do titulo sob a forma dum pó amarelo seco, CLAR em 50/50 MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1 4,57 min. (93% da integração UV total) e / alfa7p + 10,5 (C = 0,88, CHC1₃).

K. Ester indole-2-carbonilHis(imBoc)nor-C-Stametílico

De acordo com o processo para a preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, combinaram-se 500 mg do produto do Exemplo 3H em 25 ml de diclorometano, com 911 mg do produto do Exemplo 3J e obtiveram-se 550 mg da substancia do titulo, Rf de CCF, sistema C. Estava também presente um componente de menor importância, Rf 0,55.

L. Ester metílico de Indole-2-carbonilHisnor-C-

-Sta produto do Exemplo 3K (455 mg) foi agitado em 10 ml de ácido acético-água, 5:1 durante 16 h a 25°C, foi concentrado, co-evaporado com éter várias vezes e seco para produzir 431 mg dum pó amarelo claro; CLAR em 40/60 de acetonitrilo-fosfato 0,lM pH 2,1 mostra 5,53 min. (39%) e 6,43 (58%).

RMN, DMSO, delta parcial, ppm:

2,94 (m), 3,53 (s, 3H, 0CH₃), 4,02, 4,18, 4,64 (m), 6,80 (s, 1H), 6,9-7,6 (aromático m), 7,0 (t) 7,4 (d) 7,6 (d).

EXEMPLO 4

Éster metilico de BocFenHis(imBoc)nor-C-Sta (I, Z=t.-butoxicarbonilamino; R2=N-_t-butoxicarbonilimidazol-4-ilmetilo; W=CHHl OH; Q=H; M=fenilo; Z¹=CO₂CH₃; e X= ciclo-hexilo)

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 2,0 g do produto do Exemplo 3H produziram 1,8 g da substância do título sob a forma duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,37 no sistema C; CLAR em 70/30 de MeCN-fosfato O,1M pH 2,1 eluiu aos 5,42 min. Obtiveram-se também 125 mg duma substância menos polar, Rf de 0,43, identificado espectralmente como o derivado O-BocFeHis(imBoc) do produto atrás identificado. Obteve-se também uma mistura (500 mg) do produto deste exemplo e deste composto.

RMN, CDC1₃, 300 MHz', delta, par ciai: 1,33 e 1,55 (s, 9H ea, Boc), 2,72 e 2,94 (m, 1H ea), 3,1 (m, 2H), 3,70 (s, 3H OCH₃), 4,04, 4,52 e 4,95 (m, 1H ea), 4,28 (m, 2H), 6,68 e 8,08 (d, 1H ea), 7,05-7,30 (m, aromático), 7,88 (s, 1H).

EXEMPLO 5

Éster metilico de BocFenHisnor-C-Sta(I, Z=j:-butoxicarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=imidazol-4-ilmetilo;

Z¹=CO₂CH₃; W=CHfliOH e X=ciclohexilo produto do Exemplo 4 (800 mg) foi agitado durante 14 h em 10 ml de 4:1 de ácido acético-água a 25°C, foi concentrado e co-evaporado várias vezes com éter, produzindo 580 mg duma espuma amarela clara, Rf de CCF de 0,30 no sistema D, CLAR em 50/50 de acetonitrilo-fosfato O,1M pH 2,1, 6,32, min.

RMN, 300 MHz, CDCl^, parcial, delta, ppm: 1,42 (s, 9H, Boc), 2,9-3,1 (m), 3,78 (s, OCH^) 4,20 e 4,62 (1H cada), 4,38 (m, 2H), 6,89 (s, 1H), 7,1-7,4 (m, aromático), 7,78 (m, 2-3H).

EXEMPLO 6

Éster metilico de BocFenHisnor-C-Statona (Z=(CH₃)^COCONH; M=fenilo; Q=H; X=ciclohexilo; R₂=iniidazol-4-il metilo;

e Z¹=C0₂CH₃)

Uma solução agitada de 157 mg de dicromato de piridínio em 10 ml de diclorometano foi tratada a 25°C com 107 pl de anidrido acético, seguidos de 250 mg do produto do Exemplo 5, numa única porção. Após 1,5 h, a mistura foi diluída com 150 ml de diclorometano e esta solução foi lavada com 2 x 10 ml de acido clorídrico IN, bicarbonato aquoso e salmoura, foi seca (sulfato de sódio) e concentrada para produzir 260 mg dum síido castanho, Rf de CCF de 0,2 (principal) e 0,27 (secundário, cerca de 5%), no sistema D. Por meio destas CCF’s, nao se pôde detectar nenhum dos produtos mais populares do Exemplo 5. A impureza menos polar pôde ser removida por cromatografia sobre sílica em etanol a 5%-acetato de etilo, mas a recolha foi pobre: 50 mg de material em bruto produziram 7 mg do produto que mostrou ser puro por CCF.

RMN, 300 MHz, CDClg, parcial, delta, ppm: 1,24 (s, Boc), 3,82 (s, OOCHg), 7,0-7,5 (m, aromático).

EXEMPLO 7 i Éster metilico de morfolinocarbonilFenHisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=imidazol-4-imetilo; W=CH(|( OH; Z=C02CH2? e X=ciclohexilo)

A. Éster benzílico do ácido (S)-2-isocianato-3-fenilpropiónico

De acordo com o processo de lombardino, et. al. (J. Med. Chem. 1964, 97 ) , 18,0 g de cloridrato de éster benzílico de L-fenilalamina em 150 ml de tolueno foram agitados ao refluxo sob uma atmosfera de fosgénio durante 1,5 h, arrefecidos e concentrados para produzirem um sólido que foi recristalizado a partir de 120 ml de hexano para produzir 16,1 g de agulhas incolores.

Anal. Calcd para ^ci7^Hi5^N°3^: 72,59; H, 5,37; N, 4,98.

Encontrado: C, 72,32; H, 5,35; N, 4,92. PF 68-72°C. /alfa7p³ -80,4° (c=l,02, CHCip. IV (CHCip 2250, 1750 cm^-1.

B. Éster benzilico de morfolinocarbonllFen produto do Exemplo 7A foi dissolvido em 5 ml de diclorometano, foi tratado a 25°C com 930 ul de morfolina e, após 30 min. a mistura foi concentrada num sólido ceroso que foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etilo, 4:1, quente, produzindo 1,92 g da substância do título, pf 87-89°C. EM (ionizaçao química, isobutano) 369 (MH , pico de base).

C. MorfolinocarbonllFen produto do Exemplo 7B (1,85 g) foi dissolvido em 30 ml de metanol absoluto e 5 ml de acido acético e foi agitado com 0,5 g de Pd a 10%/C durante 1 h sob uma atmosfera de hidrogénio de 365,42 KPa (53 psi). A suspensão foi filtrada, concentrada, co-evaporada três vezes com tolueno adicionado e seca para produzir 1,43 g duma espuma incolor.

D. Éster metilico de BocHis(imBoc)nor-C-Sta

De acordo com o processo para a preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, com excepção para o facto de se ter utilizado DiBocHis em vez de BocFen-His(imBoc), 200 mg do Exemplo 3H produziram 345 mg duma mistura de aproximadamente 1,5:1 da substância do titulo. Rf de 0,38, e do derivado correspondente 0-BocHis (imBoc), Rf de 0,50, respectivamente

(CCF sobre sílica em acetato de etilo). Esta mistura foi utilizada sem separaçao no Exemplo 3E. Esta mistura poderia ser separada por CLAR preparativa sobre uma coluna Zorbax C-8 25 cm x 9,8 mm. eluindo-se com 85/15 de acetonitrilo-água a 6,3 ml/min., detecção a 254 nm. A substância do titulo foi eluida aos 4,76 min. e o derivado 0-acilado aos 6,48 min. Obtiveram-se assim as amostras puras de cada um.

E. Éster mrtílico de BocHisnor-C-Sta

A mistura obtida no Exemplo 7D (895 mg) foi dissolvida em 20 ml de metanol a 25°C e foi tratada com 30 mg de carbonato de potássio anidro. Após 1 h, a mistura foi concentrada a seco para produzir 604 mg duma espuma amarela que foi utilizada sem purificação na reacçao seguinte. CLAR em 50/50 de acetonitrilo-fosfato 0,lM pH 2,1 mostrou picos de 3,15 min. e 1,98 min. na relaçao de 2,8:1. 0 pico de 1,98 min. foi presumido ser de BocHisOMe, confirmado por RMN da mistura e por conversão subsequente num derivado conhecido, a seguir.

F. Cloridrato de éster metilico de Hísnor-C-Sta produto do Exemplo 7E (595 mg) foi dissolvido em cloreto de hidrogénio 3,4í[-dioxano a 25°C e foi agitado durante 30 min. A mistura foi concentrada e o resíduo foi seco no vácuo produzindo 555 mg dum sólido amarelo, CLAR em 5/95 de acetonitrilo-fosfato 0,lM pH 2,1 de 1,54 min. RMN indicou que a substân-33cia do titulo estava presente, contaminada por dicloridrato de éster metílico de histidina.

G. Éster metilico de morfolinocarbonilFenHisnor-

- C - S t a

Seguindo-se o processo do Exemplo 1C, com excepção para o facto de se ter utilizado o produto do Exemplo 7C em vez de BocFenHis(imBoc) e 2,2 equiv. de trietilamina em vez de 1,1 equiv,, 550 mg do produto do Exemplo 7F produziram 365 mg dum sólido amorfo amarelo claro, que foi dissolvido em 3 ml de metanol, tratado com 4 mg de carbonato de potássio anidro a 25°C durante 2 horas e concentrado, produzindo 355 mg duma espuma amarela clara. Esta foi dissolvida em 4 ml de diclorometano e agitada vigorosamente duranta 5 min. com 20 ml de acido clorídrico IN. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com 2 x 2 ml de diclorometano. A camada aquosa foi tratada com quantidade suficiente de solução de hidróxido de sódio 2N para que o pH subisse até 10,5 e depois foi extraida com 4 x 100 ml de diclorometano. 0s últimos extratos de diclorometano foram secos (sulfato de sódio) e concentrados para produzirem 225 mg da substância do titulo sob a forma duma espuma quase branca, Rf de CCF de 0,1 no sistema D, CLAR de 2,95 min. em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1 (93% de integração UV total), com uma imporeza secundária aos 1,94 min. (5% de integração UV).

RMN, 300 MHz, CDC1₃, parcial, delta, ppm: 0,7-1,4 (m, 6-8H), 1,5-1,8 (m, 4-6H), 3,4-2,8 (m, ca, 8H), 3,6 (m,4H), 3,73 (s, 3H, 0CH₃), 4,08 e 4,54

(m, ΙΗ), 4,30 (m,2H), 5,2 (m, 1H), 6,82 e 7,57 (s, 1H ea), 6,97 e 8,12 (d, 1H ea), 7,1-7,35 (m, ca. 6H, aromático).

EXEMPLO 8

Ester metilo de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z= morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n-butilo; W= CHI/IOH; e X=ciclohexilo)

A. fister benzílico de Norleucina

De acordo com o processo geral delineado em J. Med. Chem. 1986, Vol. 30, p. 3575, 15,0 g de norleucina (Nle) foram misturados com 200 ml de álcool benzílico e arrefecidos até 0°C. Adicionou-se cloreto de tionilo (25 ml) gota a gota durante 15 min, e a mistura foi lentamente aquecida até 90°C com desenvolvimento intenso de SO2 a cerca de 50°C. Ao fim de 2 h a 90°C, a mistura foi arrefecida até 0°C e adicionaram-se mais 25 ml de cloreto de tionilo. A mistura foi então aquecida novamente a 90°C durante 2 h, foi arrefecida, diluída com 1,6 1 de éter e armazenada durante a noite a 0°C. Os cristais que se formaram foram filtrados, lavados com éter e secos para produzirem 23,1 g dum sólido húmido que foi recristalizado a partir de 1:10 de etanol-éter, utilizando-se 23 ml de etanol. 0 síido filtrado e seco pesava 17,1 g, Rf de CCF de 0,25 no Sistema C (a placa manchada foi exposta a vapor de amónia e

B. Éster benzílico de morfolinocarbonilFenNle

Seguindo-se o processo de preparação e purificação do produto do Exemplo 1C, 2,12 g do produto do Exemplo 8A e 2,63 g do produto do Exemplo 7C produziram 3,30 g da substância do título sob a forma duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,5 em acetato de etilo sobre sílica, tempo de retenção de CLAR de 3,27 min. 97% de absorçao total ao fim de 25 min. em 70/30 de MeCN-fosfato 0,1 pH 2,1.

C. MorfolinocarbonilFenNle produto do Exemplo 8B (3,3 g) foi agitado em 35 ml de metanol e 7 ml de acido acético com 1,0 g de Pd a 10%/C durante 45 min. , foi filtrado através de Celite, foi concentrado, foi co-evaporado varias vezes com tolueno e éter e foi seco para produzir 2,9 g dum sólido incolor, Rf de CCf de 0,2 no Sistema C.

D. Éster metilico de morfolinocarbonilFenNlenor-

- C - S t a

Seguindo-se o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 300 mg do produto do Exemplo 3H e 700 mg do produto do Exemplo

8C produziram 350 mg do, produto desejado sob a forma dum sólido amarelo claro, Rf de CCF de 0,33 em acetato de etilo sobre sílica, tempo de retenção de CLAR de 6,02 min., em 75/25 de MeCN-fosfato O,1M pH 2,1.

RMN (CDC1₃), 300 MHz, parcial, delta: 0,86 (t, 3H, J=6-7Hz, sobrepoe um 1-2H m centrado em 0,9), 1,04-1,36 (m, ca. 8H), 1,46 (dd, 2H), 1,46-1,90 (m, ca. 10H), 3,0 (centro de dd, 1H), 3,05-3,38 (m, I ca. 5H), 3,58 (m, ca. 4H), 3,74 (s, 3H, OCH₃), 4,12 (d, 1H, J=l-2Hz), 4,20 (q, 1H), 4,32-4,50 (m, 2H), 4,92 (d, 1H, J=ca. 8Hz), 6,48 (d, 1H, J=9Hz), 6,54 (d, 1H, J=10Hz), 7,12-7,35 (m, 5H, aromático).

EXEMPLO 9

Éster ij-propilico de morfolinocarbonilFenNlenor-Sta (I, Z=morfolínocarbonilamino; M=finilo; Q=H; R₂=n_-butilo;

W=CHUiOH; Z¹=CO₂CH(CH₃)₂; e X=isopropilo

A. N-_t-Butoxicarbonil-(S)-3-Amino-(R, S)-2-hidro- xi-5-metilcapronitrilo

Boc-Leucinal (119 g) (preparado por redução de Dibal-H do éster metilico de acordo com o processo de Rich et al., J. Med. Chem., 1978, 43, 3624), foi dissolvido em 500 ml de dimetoxietano e foi tratado a 5°C com 63,8 g de bissulfito de sódio em 500

ml de água, de modo que a temperatura nao excedeu 10°C. A agitação continuou 5 h a 0°C e a mistura foi agitada a 25°C durante 48 h. A mistura foi concentrada para 350 ml, adicionou-se 1 L de acetato de etilo, seguido por 39,5 g de KCN em 100 ml de água. Após 72 h de agitaçao a 25°C, as camadas foram separadas, a camada aquosa foi extraída 2 vezes com acetato de etilo, as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas para produzir as substâncias do título sob a forma dum óleo amarelo claro, 134 g,Rf de CCF de 0,22 no Sistema A, 1:3.

B. N-t_-Butoxicarbonil-(S)-3-amino-(R)-2-_t-butildimetilsiloxi-5-metilcapronitrilo produto do Exemplo 9A (117 g) foi dissolvido em 800 ml de dimetilformamida e foi arrefecido num banho de gelo. Adicionaram-se imidazole (82,2 g) e 102 g de t-butildimetilclorossilano sequencialmente e a mistura foi agitada 3 h a 25°C. A mistura foi concentrada, adicionaram-se 500 ml de hexano e 500 ml de éter e a camada orgânica foi lavada com uma solução saturada de brometo de lítio (3 x 50 ml), ácido clorídrico IN e salmoura, foi seca e concentrada para produzir 166 g dum óleo viscoso amarelo. Estes dois isómeros podem ser separados por cromatografia de coluna, carregando-se 17 g da mistura sobre 1,8 kg de sílica, comprimidos e eluidos em éter-hexano, 1:25 (10 L), depois em 10 L, 1:22,5, seguidos por 10 L de 1:20 de éter-hexano. Por repetição deste processo, obtiveram-se 47,2 g do isómero menos polar sob a forma dum sólido ceroso incolor, conjuntamente com 30,6 g do isómero mais polar, N-t_-Bu toxicarbonil-(S)-3-amino-(S )-2-t.-butildimetilsililoxi-5-metilcapronitrilo e com 42 g da mistura.

C. N-t.-Butoxicarbonil-(S)-3-amino-(R)-2-t-butildimetilsililoxi-5-metilhexanamida produto do Exemplo 9B (30 g) foi dissolvido em 650 ml de etanol abs. e foi tratado a 0°C com 144 ml de solução de hidróxido de sódio IN, seguidos por 290 ml de peróxido de hidrogénio aquoso a 30%, de modo que a temperatura nao ultrassasse os 5°C. Após 3,5 h a 0°C, a mistura foi aquecida a 30°C durante 0,5 h, foi arrefecida até 0°C e tratada com 116 ml de H2O2 a 30%. Após 10 minutos, CCF indicou desaparecimento do material de partida e adicionaram-se gota a gota 200 ml de sulfato de sódio aq. a 20% a menos de 5°C. A mistura foi reduzida por um volume de 450 ml in vacuo e foi extraída com acetato de etilo (4 x 250 ml) que foi lavado com salmoura, seco e concentrado para produzir 36 g dum óleo que foi cromatografado sobre 800 g de sílica com 1:1 de éter-hexano. Algumas das fracções impuras foram recromatografadas no mesmo sistema e, deste modo, obteve-se um total de 17,0 g de produto incolor, Rf de 0,2 em 1:1 de éter-hexano.

D. Cloridrato de (S)-3-amino-(R)-2-hidroxi-5-met i1h e xanamida produto do Exemplo 9C (16,9 g) foi dissolvido em 50 ml de dioxano e foi tratado com 100 ml de cloreto de hidrogénio 3,4N-dioxano a 25°C. Após

2,5 h, a mistura foi concentrada, co-evaporada com éter e seca para produzir 8,7 g da substância do título sob a forma dum sólido incolor; tempo de ret. de CLAR de

2,35 min. em 5/95 de MeCN-fosfato 0,1 pH 2,1.

E. Cloridrato de ácido (S)-3-amino-(R)-2-hidro- xi-5-metil-hexanoico produto do Exemplo 9D (8,7 g) foi dissolvido em 150 ml de ácido clorídrico 6N e foi aquecido a 60°C durante 2 h, foi concentrado e seco para produzir 10,6 g dum sólido amarelo claro, tempo de ret. de CLAR de 5,0 min. em 5/95 de MeCN-fosfato O,1M pH 2,1.

F.

Cloridrato de (S)-3-amino-(R)-2-hidroxi-5-metil-hexanoato de i-propilo produto do Exemplo 9E (1,25 g) foi dissolvido em 2-propanol que foi saturado com cio reto de hidrogénio e deixado em repouso durante 18 h a 25°C. A mistura foi concentrada, o resíduo foi co-evaporado com tolueno e éter e foi seco para produzir 1,36 g do produto desejado sob a forma duma espuma amarela oleo sa, Rf de CCF de 0,33 no Sistema D (placa manchada expos ta a vapor de NH^ antes da revelaçao).

G. Éster morfolinocarbonilFenNlenor-Sta-i-propllico

Empregando-se o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 300 mg do produto do Exemplo 9F e 782 mg do produto do Exemplo 8C produziram 209 mg de produto sob a forma duma espuma incolor; Rf de CCF de 0,4 em acetato de etilo, tempo de reteçao de CLAR de 5,86 min. em 75/25 de MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1.

1H RMN (CDC1₃), 300 MHz, parcial: delta, 0,82 (t, 3H, J=6 Hz), 0,89 (centro de dd, 6H), 1,21 (centro de dd, 6H), 1,3-1,6 (m, ca. 5H), 1,6-2,0 (m, 2-3H), 2,88-3,34 (multipletos, ca. 7H), 3,55 (m, 4-5H), 4,05, 4,20, 4,36 e 4,46 (m, 1H ea), 4,98 (m, 2H), 6,47 e 6,56 (m, 1H ea), 7,05-7,31 (m, 5H6.

EXEMPLO 10

Éster metilico morfolinocarbonilFenLisnor-C-Sta (I, Z= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H, R2=4-aminobutilo; X=ciclohexilo; W=CHl|l 0H; e Z‘*’=C02CH₃) e éster metilico de morfolinocarbonilFenLis(E-CBZ)nor-C-Sta (I, Z= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; X=ciclohexilo; W=CH11 ί 0H; e Z¹=CO₂CH₃)

R₂=0CH2OCONH(CH₂)₄-;

k, Ester metílico de BocLis(e-CBZ)nor-C-Sta

Seguindo-se o processo geral de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 300 mg do produto do Exemplo 3H e 679 mg de Boc Lis(E-CBZ) (Chemalog Co.) produziram-se 430 mg do produto sob a forma duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,57 em acetato de etilo, 4,83 min. de CLAR em 70/30 de MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1.

B. Cloridrato de éster metílico de Lis(E-CBZ)nor-

- C - S t a produto do Exemplo 10A (400 mg) foi dissolvido em 5 ml de cloreto de hidrogénio 3,4N-dioxano a 25°C, foi agitado durante 1,5 h, foi concentrado, co-evaporado várias vezes com éter e foi seco produzindo-se 366 mg do produto sob a forma duma espuma amarela clara.

C. Ester metílico de morfolinocarbonilFenLis(E-CBZ)nor-C-Sta

Seguindo-se o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 360 mg do produto do Exemplo 10B e 311 mg do produto do Exemplo 7C produziram 180 mg de produto sob a forma duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,64 no Sistema D, CLAR de 2,86 min. em 70/30 de MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1.

1Η RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta: 0,72-2,0 (m, ca, 25H), 2,94 (centro de dd,

1H), 3,0-3,32 (m, ca. 6H), 3,50 (centro de m, ca. 4H),

3,68 (s, 3H, OCH₃), 5,02 (m, 2H), CH₂0, 6,68 (d, 1H ea),

7,08-7,48 (m, ca. 11H).

D. Cloridrato de éster metílico de morfolinocar- bonilFenLi snor-C-Sta produto do Exemplo 10C (50 mg) foi dissolvido em 10 ml de metanol e 2 ml de ácido acético e foi agitado com 20 mg de Pd/C a 10% durante 45 min. a 25°C sob 344,74 KPa (50 psi) de pressão de hidrogénio. A mistura foi filtrada, concentrada e co-evaporada primeiramente com 3 ml de cloreto de hidrogénio 3,4N e depois com éter (3 x) e foi seca produzindo-se 36 mg de produto sob a forma de placas amarelas pálidas, CLAR de 4,08 min. em 40/60 de MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1, Rf de CCF de 0,12 no Sistema D.

1H RMN, 250 MHz, DMS0-d6, parcial, delta: 0,67-1,8 (m, ca. 25H), 2,67-3,07 (m, ca. 4H), 3,07-3,56 (m), 3,56 (s, 3H, 0CH₃), 4,07 (d aparente, 1H J=3 Hz), 4,13-4,40 (m, ca. 3H), 6,72 (d, 1H, J=8Hz), 7,10-7,4 (m, ca. 5H), 7,62 (d, 1H, J=9Hz), 8,08 (d, 1H, J=8,5 Hz).

EXEMPLO 11

Cloridrato de 5-aminopentilamida de morfolinocarbonilFeNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo;

Q = H; R₂ = butilo, W = CHlHOH; Z¹ = CONH(CH₂)₅NH₂; e

X - ciclo-hexilo)

A. 3-(S)-Azido-2-(R)-hidΓoxi-4-ciclo-hexilo-N^Í^Σ^Lêll£iÃ22£ί£âLb2I!Âlâ®iJl°2£âEil}â®ida_—_

Empregando-se o processo geral para a síntese e purificação do produto do Exemplo 1C, 800 mg de 5-(benziloxicarbonilamino)-l-aminopentano e 477 mg do produto do Exemplo 3F produziram 490 mg da subs tância do titulo sob a forma de um xarope amarelo claro Rf de CCF de 0,5 em acetato de etilo, IV(CHClg) 2100 cm

B. 3-(S)-Amino-2-(R)-hidroxi-4-ciclo-hexil-N-(5-benziloxicarbonilaminopentil)amida produto do Exemplo 11A (410 mg) foi dissolvido em 5 ml de metanol e foi tratado a 0°C com 525 mg de cloreto estanhoso anidro em 5 ml de metanol durante 1 min, A mistura foi agitada a 25°C durante 18h, foi concentrada, tratada com 3 ml de água e 3 ml de solução de hidróxido de sódio 1N_ e foi extraída com 200 ml de eter. A camada aquosa foi saturada com cloreto de sódio e foi extraída com eter. As camadas etereas foram secas, filtradas e concentradas para produzirem

200 mg duma espuma oleosa. As camadas aquosas foram ainda basificadas com 5 ml duma solução de hidróxido de sódio 1_N e foram tratadas com cloreto de sódio (5 g) e foram extraídas com 3 x 100 ml de acetato de etilo e 3 x 100 ml de diclorometano e as camadas orgânicas combinadas foram secas, filtradas e concantradas para produzirem mais 210 mg duma espuma amarela clara. Os sólidos combinados (410 mg) foram cromatografados sobre 25 g de sílica eluindo-se com 250 ml de cada um de 1%, 2%, 4%, 6%, 8% e 12% de etanol-diclorometano para produzir 172 mg de produto puro sob a forma de uma espuma incolor, CLAR 3,39 min., em 50/50 de MeCN-fosfato 0,lM pH2,l.

C. MorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta-(5-CBZamino- pentil)amida

Utilizando-se o processo geral para preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, excepto que se omitiu a trietilamina, 165 mg do produto do Exemplo 11B e 246 mg do produto do Exemplo 8C produziram 212 mg de produto sob a forma duma espuma amarela clara, Rf de CCF de 0,14 em acetato de etilo, 0,80 no Sistema D. CLAR (4,8 min.) indicou aproximadamente 30% (absorvência UV) duma impureza nao identificada, 5,03 min., em 60/40 de MeCN-fosfato 0,lM pH2,l.

D. Cloridrato de morfolinocarbonilFenNlenor-C-

-Sta-(5-aminopentil)amida produto do Exemplo 11C (186 mg) i

foi dissolvido em 20 ml de metanol e 4 ml de acido acético e foi agitado com 60 mg de 10% de Pd/C durante 2 horas a 25°C, filtrado através de Celite, concentrado, co-evaporado com tolueno e seco produzindo 167 mg dum sólido amarelo claro que foi co-evaporado duas vezes com cloreto de hidrogénio 3,4N-dioxano e eter e seco para produzir 150 mg de produto sob a forma dum sólido amarelo claro, CLAR 3,72 min., em 40/60 de acetonitrilo-fosfato 0,lM pH 2,1.

1H RMN (DMS0-d6 + 10% de H₂0), 300 MHz, parcial, delta: 0,82 (m, ca. 5H), 0,96-1,8 (m, ca. 25H), 2,7, 3,0, 3,2 e 3,44 (centros de 2-3H multipletos), 3,76 (d aparente, 1H), 4,0-4,2 (m, 2H), 4,2-4,35 (m, 1-2H), 4,35-4,9 (br, 3-4H), 6,7 (m, 1H), 7,06-7,4 (m, 5-6H), 7,63 (m, 1H), 7,92 (br, ca. 2H), 8,05 (d, 1H, J=9Hz).

EXEMPLO 12

Ester metilico de 1-formilpiperazinocarbonilFenlenor-C-Sta (I, Z = 4-formilpiperazinocarbonilamino; M = fenilo;

Q = H; R₂ = n-butilo; X = ciclo-hexilo; W = CH 0H; e z¹ = co₂ch₃)

A. Éster benzilico de 1-formilpiperazinocarbonilFen produto do Exemplo 7A (3,0 g)

foi dissolvido em 17 ml de diclorometano e foi tratado a 25°C com 1,7 ml de N-formilpiperzina, o que produziu uma exotermia ate 40°C, Após 0,5 h a 25°C, a mistura foi concentrada e cromatografada sobre 100 g de sílica, eluindo-se com 2 L de acetato de etilo, seguide por 10% de etanol-acetato de etilo para produzir 3,1 g de produto, Rf de 0,1 em acetato de etilo, CLAR 4,56 min. em 50/50 de MeCN-fosfato 0,lM pH 2,1.

B. 1-FormilpiperazinocarbonilFen produto do Exemplo 12A (3,0 g) foi dissolvido em 50 ml de metanol e 5 ml de ácido acético e foi agitado com 1,0 g de 10% de Pd/C sob 344,74 KPa (50 psi) de hidrogénio durante 1 hora a 25 C, foi filtrado através de Celite, foi concentrado, co-evaporado com tolueno (3x) e seco para produzir 2,31 g da substância do título sob a forma duma espuma incolor, Rf de 0,17 no Sistema D.

C. Éster benzílico de l-formilpiperazinocarbonil-

FenNle

Utilizando-se o processo geral de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 750 mg do produto do Exemplo 3H e 1,02 g do produto do Exemplo 8A produziram 1,06 g da substância do título sob a forma dum sólido incolor, Rf deCCF de 0,65 no Sistema D, CLAR 2,48 min. em 70/30 de MeCN-fosfato pH 2,1

D. 1-FormilpiperazinocarbonilFenNle priduto do Exemplo 12C (1,04 g) foi dissolvido em 30 ml de metanol com 3 ml de acido acético, foi agitado com 300 mg de 10% de Pd/C durante 1 hora a 25°C sob 344,74 KPa (50 psi) de hidrogénio, foi filtrado, concentrado, co-evaporado com tolueno (3X) e éter e foi seco para produzir 870 mg da substância do título sob a forma duma espuma quase branca, Rf de CCF de 0,5 no Sistema D.

E. Éster metílico de 1-FormilpiperazinocarbonilFenNlenor-C-Sta

Empregando-se o processo geral de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 200 mg do produto do Exemplo 3H e 465 mg do produto do Exemplo 12D produziram 194 mg de produto sob a forma duma espuma amarela clara, Rf de CCF de 0,53 no Sistema D, CLAR 4,50 min. em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

RMN (CDC1₃), 300 MHz, parcial, delta: 0,82 (t, 3H, J=6Hz, sobreposição de 0,9 multipleto), 1,0-1,35 (m, ca. 5H), 1,44 (centro de dd, 2H), 1,44-1,9 (m, ca. 9H), 2,98 e 3,10 (cada centro de dd, 1H ea), 3,10-3,57 (m, ca. 8H), 3,57-3,72 (m, com 3,72 s /OCH₃_7, total ca. 5H), 4,13 (d, 1H, J=3Hz), 4,21 (q, 1H), 4,39 (q, 1H), 4,49 (q, 1H), 5,18, 6,49 e 6,63 (d, 1H ea, J=6Hz), 7,08-7,36 (m, 5-6H), 8,0 (s, 1H, N-CHO).

-48Éster metílico de (0-4-piperidinobutiril) de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino;

M=fenilo; Q=H; R2⁼H^-b^utilo; X=ciclo-hexilo; W=CHII|OCO (CHRÍspiperidino; Z^CC^CH^)

A. Cloridrato de cloreto de 4-piperidinobutirilo

Cloridrato de ácido 4-piperidinobutírico (750 mg ) e 4 ml de cloreto de tionilo foram combinados e agitados ao refluxo durante 45 min., concentrados, triturados com éter e secos para produzirem 700 mg dum sólido castanho claro o qual, quando foi dissolvido em metanol seco, produziu Rf de 0,1 no Sistema D, completamente diferente do ácido de partida e provaveli mente do éster metílico. 0 sólido foi utilizado sem purificação posterior.

B. Éster metílico de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta-(0-4-piperidinobutirilo) produto do Exemplo 8D (50 mg) foi seco por adiçao e remoção in vacuo de benzeno, foi dissolvido em 1 ml de diclorometano e tratado sequencialmente a 25°C com 30 pl de trictilamina e 25 mg do produto do Exemplo 13A. Após 1,5 h, adicionaram-se mais 15 pl trictilamina e mais 22 mg de cloreto ácido e após mais 2,4 h adicionaram-se 19 pl de trictilamina e 21 mg de

cloreto ácido. Após mais 1 hora, adicionaram-se 7 pl de trietilamina e 10 mg de cloreto ácido e 0,5 h mais tarde a mistura foi diluida com diclorometano, lavada com bicarbonato aquoso, seca e concentrada para produzir 75 mg dum óleo castanho escuro que foi imediatamente cromatografado sobre 3 g de sílica com 3% de etanol-cloreto de metileno, eluindo-se então com 100 ml deste solvente e 100 ml de cada um de 5%, 7%, 9% e 13% de etanol-diclorometano. A substância do titulo foi eluida e foi obtida sob a forma dum sólido castanho claro, 25 mg, Rf de CCF de 0,23 no Sistema D, CLAR 5,09 min. em 60/40 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN (CDC1₃), 300 MHz, parcial, delta: 0,82 (t, 3H, sobreposição de 1-2H m), 1,04-2,0 (m), 2,26-2,58 (m), 3,06 (m, 2H), 3,1-3,34 (m, 4-6H), 3,57 (m, ca. 4H), 3,70 (s, 3H, OCH₃), 4,18 (q, 1H), 4,46 (q, 1H), 4,53 (m, 1-2H), 4,94 (m, 1H), 7,1-7,3 (m, 5-7H).

EXEMPLO 14

Amida de N-metilo de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n.-butilo; X=ciclo-hexilo; W=CH(|(0H; Z¹=C0NHCH₃)

A. Éster metilico de ácido 3(S)-azido-2(R)-_t-butildimetilsililoxi-4-ciclo-hexilbutírico produto do Exemplo 3G (0,60 g)

foi dissolvido em 5 ml de dimetilformamida e foi tratado a 0°C sequencialmente com 422 mg de imidazole e 523 mg de t-butildimetilclorosilano. Após 18 horas a 25°C, a mistura foi tratada com 211 mg de imidazole e 255 mg de t-butildimetilclorosilano e foi agitada a 25°C durante 1 hora. A mistura foi concentrada, o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo, foi extraído com solução de cloreto de lítio, ácido clorídrico IN e salmoura, foi seco, filtrado, concentrado (produzido 900 mg de óleo claro) e cromatografado sobre 25 g de silica com 1 L de 1:75 de éter-hexano para produzir 800 mg de produto puro, Rf de CCF de 0,55 em 1:2 de éter-hexano.

B. Amida de N-metilo do ácido 3(S)-azido-2(R)-j;-butildimetilsililoxi-4-ciclo-hexilbutí rico produto do Exemplo 14A (725 mg) foi dissolvido em metanol e foi arrefecido até 0°C. Esta solução foi saturada com metilamina anidra e o frasco tapado foi agitado a 40°C durante 5 h. A sõluçaa foi concentrada, o resíduo foi co-evaporado com éter e foi seco produzindo-se 642 mg dum sólido incolor. Rf de CCF de 0,18 em 1:2 de éter-hexano.

C. Amida de N-metilo de ácido 3(S)-amino-2(R)-

-t-butildimetilsililoxi-4-ciclo-hexilbutirico produto do Exemplo 14B (640 mg) foi dissolvido em 30 ml de metanol e 3 ml de ácido

I

e foi agitado com 200 mg de 10% de Pd/C sob 344 KPa (50 psi) de hidrogénio durante lha 25°C. A mistura foi filtrada através de Celite o filtrado foi concentrado e o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo. Esta solução foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso, foi seca, filtrada e concentrada para produzir 550 mg dum óleo incolor que foi utilizado na etapa seguinte sem purificação .

D. Amida de N-metilo de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta(éter de 0-t_-butildimetilsililo)

Utilizando-se o processo geral de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, excepto que se omitiu a trietilamina, o produto em bruto do Exemplo 14C (250 mg ) e 358 mg do produto do Exemplo 8C produziram 206 mg da substância do título sob a forma dum sólido amarelo claro, Rf de CCF de 0,18 em acetato de etilo, Rf 0,7 no Sistema D, CLAR de 8,2 min. em 70/30 de MeCN-fosfato pH 2,1.

E. Éster metilico de morfolinocarbonilFenNlenor-

-C-Sta produto do Exemplo 14D (200 mg) foi tratado com 3 ml de cloreto de hidrogénio 3íl-dioxano a 25°C durante 30 min., foi concentrado, co-evaporado com éter (3X) e seco para produzir 155 mg dum sólido amarelo pálido, Rf de CCF de 0,48 no Sistema D, CLAR

de 4,57 min, em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, 300 MHz, DMS0-d6, parcial, delta: 0,82 (t, 3H, J=6Hz, sobreposição de m 1-2H), 1,0-1,32 (m, ca. 10H), 1,4-1,9 (m), 2,54 (d, 3H, J=6Hz, NCH₃), 2,78 e 2,96 (centros de dd, 1H ea), 3,06-3,28 (m, ca. 4H), 3,42 (centro de m, ca. 4H), 3,76 (d’aparente 1H, J=ca. 1Hz), 4,11 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 6,62, 7,58 e 7,96 (d, 1H ea), 7,06-7,3 (m, 5H).

EXEMPLO 15

Amida de N-n-butilo de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n.-butilo;

X=ciclo-hexilo; W=CH111 0H; Z¹=CONH(CH₂)₃CH₃)

A. Amida de N-n-butilo de ácido 3(S)-azido-2(R)-

-t-butildimetilsililoxi~4-ciclo-hexilbutírico produto do Exemplo 14A (800 mg) foi dissolvido em 2 ml de metanol e 1 ml de butilamina e foi agitado ao refluxo durante 18 horas. Adicionou-se butilamina (1 ml) e o refluxo continuou durante 2 h. A mistura foi concentrada e cromatografada sobre 25 g de sílica eluindo-se com 1:5 de éter-hexano, produzindo 500 mg dum sólido ceroso incolor, Rf de CCF de 0,1 em 1:5 de éter-hexano, conjuntamente com 240 mg de material de partida recolhido.

53Β.

Amida de N-n-butilo de ácido 3(S)-Amino-2(R)-t-butildimetilsililoxi-4-ciclo-hexilbutírico produto do Exemplo 15A (450 mg) foi dissolvido em 30 ml de metanol com 3 ml de ácido acético e foi agitado com 220 mg de Pd/C durante 5 horas. A mistura foi filtrada através de Celite, o filtrado foi concentrado, o resíduo foi co-evaporado com tolueno que se adicionou, foi dissolvido em acetato de etilo, foi lavado com três porçoes de bicarbonato aquoso, foi seco sobre sulfato de magnésio e concentrado para produzir 360 mg dum óleo incolor que foi utilizado sem purificação na etapa seguinte.

C. Amida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta ( ter de O-t-butildimetilsililo

Empregando-se o processo geral de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, excepto que se omitiu trietilamina, 355 mg do produto do Exemplo 15B e 300 mg do produto do Exemplo 8C produziram 313 mg de produto sob a forma dum sólido incolor, Rf de 0,8 no Sistema D, CLAR de 7,5 min. em 85/15 de acetonitrilo-agua.

D. Amida de N-n-butilo de morfolinocarbonilFen-

Ν1 e η o r-C-Sta produto do Exemplo 15C (305 mg) foi dissolvido a 25°C em 3 ml de cloreto de hidrogénio 3,4N-dioxano. Após 45 min., a mistura foi concentrada, o resíduo foi co-evaporado três vezes com éter e foi seco produzindo 239 mg sob a forma dum sólido beje, Rf de CCF de 0,6 no Sistema D, CLAR de 10,2 min. em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, DMS0-d6, 300 MHz, parcial, delta: 0,9 tripletos, 6H total, sobreposição 1-2H m), 1,0-1,85 (m, ca. 20H), 2,76 (centro de dd, 1H), 2,9-3,5 (m), 3,74 (d aparente, 1H, J=ca, 1Hz), 4,14 (m, 2H), 4,27 (m, 1H), 6,60 (d, 1H), 7,05-7,3 (m, 5H), 7,58 (t, 1H), 7,98 (d, 1H).

EXEMPLO 16

Éster morfolinocarbonilFenNva-nor-C-Sta-i~propilo (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=ii-propilo;

X=ciclo-hexilo; W=CH?IIOH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Cloridrato de éster metílico de L-norvalina

Borbulhou-se cloreto de hidrogénio anidro numa suspensão de 2,0 g de L-norvalina (che

-55mical Dynamícs) em 50 ml de metanol te 15 min. A solução resultante foi anidro a 0°C duranagitada à temperatura ambiente durante 18 horas.

concentrada in vacuo num sólido

A mistura de reacçao foi branco que foi recristalizado a partir de etanol/éter para produzir 2,3 g do éster metílico desejado.

B. Éster metílico de N-(morfolinocarbonil)-L-fe- n i1a1anina-L-norvalina

A uma solução de 0,50 g de N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina e 0,26 g de éster metílico de L-norvalina em 10 ml de cloreto de metileno anidro adicionaram-se 0,22 ml de trietilamina, 0,33 g de 1-hidroxibenzotriazole e 0,38 g de carbodiimida de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilo. A reacçao foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas, após o que foi diluída com 50 ml de acetato de etilo e foi lavada com uma solução de ácido clorídrico 0,lN (2x25 ml) e com uma solução de hidróxido de sódio 0,lN (2x25 ml). A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, foi filtrada e concentrada in vacuo para produzir 0,62 g de dipeptido em bruto.

C. N-(Morfolinocarbonil)-L-fenilalanina-L-norva- li na

A uma solução de 0,62 g de éster metílico de N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina-L-norvalina em 40 ml de metanol e 20 ml de água adiciona-56-

ram-se 1,2 g de carbonato de potássio. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 60 horas, após o que foi concentrada in vacuo numa solução aquosa e lavada com éter (3x50 ml). A fase aquosa foi acidificada com 10 ml de solução de ácido clorídrico 4N e foi extraída (3x25 ml) com cloreto de metileno. Os extractos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio, filtrados e concentrados para produzirem 0,46 g de óleo em bruto.

D. Éster de morfolinocarbonilFenNva-nor-C-Sta-i_-propilo

A uma solução de 0,13 g de N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina-L-norvalina e 0,10 g de éster 2-propílico de ácido 2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-ciclohexilbutanóico (Exemplo 17A) em 5 ml de cloreto de metileno anidro adicionaram-se 0,055 ml de trietilamina, 0,060 g de 1-hidroxibenzotriazole e 0,075 g de carbodiimida de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilo.

A solução foi agitada ã temperatura ambiente durante 16 horas, após o que foi diluída com 40 ml de acetato de etilo e foi lavada com 2x25 ml de solução de ácido clorídrico 0,lN e 2x25 ml de solução de hidróxido de sódio 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, foi filtrada e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi cromatografado sobre gel (29:1, CE^C^ÍEtOH) para produzir 0,17 g de péptido puro, (77%). RMN (300 MHz, CDC13): 0,86 (m, 3H), 1,27 (d, J=8 Hz, 6H), 4,09 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,51 (m, 1H), 7,25 (m, 5H).

-57EXEMPLO 17

Éster morfolinocarbonilFen-S-metil-Cisnor-C-Sta-i-propilico (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂= =CH₃SCH₂-; ciclo-hexilo; W=CHHIOH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. Ácido 2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-ciclo-hexilbutanoico, éster 2-propanólico, cloridrato

Borbulhou-se cloreto de hidrogénio anidro, durante 20 min., numa solução gelada de 1,0 g de ácido N-jt-butiloxicarbonil-2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-ciclohexilbutanóico em 50 ml de 2-propanol. A solução foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi agitada durante 16 horas. A solução foi concentrada in vacuo e foi seca sob alto vácuo para produzir 0,93 g de éster de cloridrato de amina desejado.

B. Éster metílico de S-metil-L-cisteína, cloridrato

Uma suspensão gelada de 2,5 g de S-metil-L-cisteína (Chemical Dynamics) em 25 ml de metanol anidro foi saturada com cloreto de hidrogénio anidro, durante cujo o tempo todo o material se dissolveu. A solução foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi agitada durante 20 horas. A solução foi concentrada in vacuo para se obter um sólido amarelo, que foi recristalizado a partir de éter/etanol para produzir

Vn*·»*** 5 θ

3,0 g (87%) do cloridrato de éster-amina metílico.

C. Éster metílico de N-(morfolinocarbonil)-L-fen i1a1amina-S-metil-L-cisteína

A uma solução de 0,96 g de N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina 3 e 0,55 g de éster metílico de S-metil-L-cisteína em 50 ml de cloreto de metileno anidro à temperatura ambiente adicionaram-se 0,50 ml de trietilamina, 0,51 g de 1-hidroxibenzotriazole e 0,70 g de cloridrato de carbodiimida de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilo. Depois de se agitar durante 4 horas, a solução foi diluida com 100 ml de acetato de etilo e foi lavada com 2x35 ml de solução de ácido clorídrico 0,lN e 2x35 ml de solução de hidróxido de sódio Ο,ΙΝ. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, foi filtrada e concentrada in vacuo para produzir 1,15 g do dipeptido sólido desejado.

D. N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina-S-metil-L-cisteina

A uma solução gelada de 1,15 g de éster metílico de N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina-S-metil-L-cisteína em 30 ml de água e 60 ml de metanol adicionaram-se 3,5 g de carbonato de potássio. A mistura resultante foi agitada a 0^o durante 15 min. e à temperatura ambiente durante 4 horas. A solução foi concentrada in vacuo numa solução aquosa, a qual foi acidi ficada com ácido clorídrico conc. e extraída com 3x50 ml de cloreto de metileno. Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio, foram filtrados e concentrados in vacuo para produzirem 1,0 g (89%) do ácido em bruto.

E. Éster morfolinocarbonilFen-S-metil-Cisnor-C~

-Sta-i-propílico

A uma solução de 0,43 g de N-(morfolinocarbonil)-L-fenilalanina-S-metil-L-cisteína 5 e 0,34 g de éster 2-propanólico de ácido 2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-ciclohexilbutanóico em 20 ml de cloreto de metileno anidro adicionaram-se 0,17 mg de trietilamina, 0,18 g de hidroxibenzotriazole e 0,23 de carbodiimida de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilo. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas, após o que foi diluída com 50 ml de acetato de etilo e lavada com 25 ml de solução de ácido clorídrico 0,lN e 25 ml de solução de hidróxido de sódio 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, foi filtrada e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi cromatografado sobre sílica gel (29:1, CB^C^^tOH) para produzir 0,42 g de péptido puro 6. (62%). RMN (300 MHz, CDCl^): 1,30 (2xd, 6H), 2,13 (s, 3H), 4,49 (m, 3Η), 5,07 (m, 1H), 7,25 (m, 5H).

-60Êster metílico de benzimidazole-2-carbonilNlenor-C-Sta

(II, L=N; Rç.=n-butilo; e R^OCH^)

A. Éster benzílico de Norleucina de benzimidazo-

1e-2-carbonilo

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 1C, 80 mg de ácido benzimidazole-2-carboxilico e 110 mg de cloridrato de éster benzílico de norleucina (produto de Exemplo 8a) produziram, após cromatografia sobre sílica gel, eluindo-se com acetato de etilo-hexanos, 110 g dum sólido que foi recristalizado a partir de 1:7 de éter-hexanos, produzindo 85 mg dum sólido incolor.

B. Norleucina de benzimidazole-2-carbonilo produto do Exemplo 18A (82 mg) foi dissolvido em 15 ml de metanol e 2 ml de ácido acético e foi agitado com 50 mg de 10% de Pd/C sob 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio a 25°C durante 1 hora, foi filtrado atrvés de Celite, concentrado co-evaporado com 3 ml de tolueno que se adicionou (5X), e foi seco produzindo-se 48 mg dum sólido amarelado, Rf de CCF de 0,35 no Sistema C.

C. Éster metilico de ácido 3(S)-amino-2(R)-t-butildimetilsililoxi-4-ciclo-hexilbutírico

Utilizando-se o processo de preparação do produto do Exemplo 14B, 750 mg do produto do Exemplo 18B produziram 500 mg da substância do título sob a forma dum óleo amarelo.

D. Éster TBDMS metilico de benzimidazole-2-carbonilNlenor - C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 1C, 65 mg do produto do Exemplo 18C e 45 mg do produto do Exemplo 18B produziram 110 mg de produto em bruto que foi purificado sobre sílica, eluindo-se com éter-hexano, produzindo 65 mg duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,52 no Sistema A, 1:1.

E. Éster metilico de benzimidazole-2-carbonilNlenor-C-Sta produto do Exemplo 8D (60 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano. Após 45 min. a 25°C, a mistura foi concentrada, o resíduo foi co-evaporado com éter, foi dissolvido em acetato de etilo, foi lavado com hidróxido de sódio, foi seco, concentrado e cromarografado sobre sílica em acetato de etilo-hexano (1:1) produzindo 27 mg dum sólido amarelo que foi purificado por CLAR preparativa (coluna C-8 de 1 cm), eluini

-62do-se com 7/3 de acetonitrilo-água. Obtiveram-se assim dez (10) mg da substância pura, Rf de CCF de 0,55 sobre sílica em acetato de etilo, CLAR de 3,17 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, CDCL₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,83 (t, 3H), 3,80 (s, 3H), 4,10, 4,15, 4,29, 4,57 e 4,49 (m, 1H ea), 7,25 (m, 2H), 7,33 (m, 2-3H), 7,50, 7,77 e 8,10 (d, 1H ea).

EXEMPLO 19

Sal de sódio de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n-butilo;

X-ciclo-hexilo; W=CHIt|0H; e Z^C^H) produto do Exemplo 8 (25 mg) foi dissolvido em 0,5 ml de dioxano e foi tratado a 25°C com 42 jul de solução de hidróxido de sódio IN. Após 3 horas, a mistura foi concentrada para produzir a substância do título sob a forma dum sólido amarelo claro (17 mg), CLAR de 3,06 minutos em 60/40 de acetonitrilo-tampao pH 2,1 fosfato.

1H RMN, DMSO, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,87 (t, 3H), 4,97, 5,07 e 5,34 (m, 1H ea), 6,66, 7,98 e 8,10 (d, 1H ea), 7,1-7,35 (m, aromático).

EXEMPLO 20

3-(S)-MorfolinocarbonilFenNorleucilamino)-2-(R)-hidroxi-4-fenilbutiramida (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n-butilo; X=fenilo; W=CH111 OH; e Ζ^ΟΟΙΠ^)

De acordo com o processo de preparação e purificação do produto do Exemplo 1C, 148 mg de cloridrato de 3(S)-amino-2(R)-hidroxi-4-fenilbutiramida (Exemplo ID da Patente Norte Americana 4.668.769) e 251 mg do produto do Exemplo 8C produziram 170 mg dum pó incolor, Rf de CCF de 0,3 no Sistema C.

1H RMN, DMSO, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,82 (t, 3H), 2,60 (dd, 1H), 2,80 (dd de sobreposição, 1H), 2,95 (dd, 1H), 3,42 (m, 4H), 3,68 (d, 1H), 4,17 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 6,61, 7,52 e 7,91 (d, 1H ea), 7,05-7,35 (m, aromático).

EXEMPLO 21

Amida de morfolinocarbonilFenNlenor-C~Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=ii-butilo; X=ciclo-hexilo; W=CHI/IOH; e Z¹=CONH₂)

A. Éster TBDMS de amida de Boc nor-C-Sta produto do Exemplo 1C, Patente Norte Americana 4.668.769, (9,17 g) foi dissolvido em 200 ml de metanol e foi agitado com 1 g de 10% de RhC durante 70 horas a 25°C e 206,84 KPa (30 psi) de hidrogénio, foi filtrado através de Celite e foi concentrado produzindo-se 8,25 g duma espuma amarela pálida que foi cromatografada sobre 400 g de sílica em acetato de etilo-hexano (3 1 de 1:3, e depois 2 1 de 100:0), produzindo-se 7,2 g do produto sob a forma dum sólido cristalino incolor.

B. Cloridrato de amida nor-C-Sta produto do Exemplo 21A (6,1

g) foi dissolvido em 15 ml de HC1 4N-dioxano, foi agitado durante 3 horas a 25°C, foi concentrado e co-evaporado com éter adicionado, produzindo 3,00 g dum pó incolor que foi suspenso numa quantidade mínima de éter, filtrado e seco para produzir 2,70 g dum sólido incolor, p.f. 236-238°C.

C. MorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta-amida

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto de 1C, 150 mg do produto do Exemplo 21B e 248 mg do produto do Exemplo 8C produziram 169 mg da substância do título sob a forma

dum pó incolor, Rf de CCF de 0,30 no Sistema C.

1H RMN, DMSO, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,85 (t, 3H), 3,44 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 4,15 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 5,64, e 8,02 (d, 1H), 7,10-7,35 (m, aromático).

EXEMPLO 22

Éster metílico de benzimidazole (II, L=N; R^imidazol-4-ilmetilo; R^OCH^)

A. Éster de TBDMS de éster metílico de diBocHisnor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 1C, 750 mg do produto do Exemplo 18C e 1,05 g de Boc-His(im Boc) produziram 1,6 g de produto em bruto que foi cromatografado sobre sílica, eluindo-se com acetato de etilo-hexano para produzir 932 mg da substância do título, Rf de CCF de 0,31 em 1:1 do Sistema A.

B. Dicloridrato de éster metílico de Hisnor-C-Sta produto do Exemplo 22A (400 mg) foi dissolvido em 2 ml de diclorometano, foi arrefe

-66cido até 0°C e foi tratado com 3 ml de ácido trifluoroacético. Após 30 min a 0°C e 80 minutos a 30°C, a mistura foi concentrada e co-evaporada com três porçoes adicionadas de HC1 4N-dioxano e depois com éter adicionado, e foi seca, produzindo-se 210 mg dum sólido amarelo pá-

lido .

C. Éster metílico de benzimidazole-2-carbonilHisnor-C-St a

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 205 mg do produto do Exemplo 22B e 93 mg do ácido benzimidazole-2-carboxilo produziram 27 mg dum sólido amarelo pálido que foi novamente cromatografado sobre 1 g de sílica em 6% de etanol-diclorometano, produzindo 12 mg de produto, Rf de CCF de 0,44 no Sistema D, CLAR de 6,01 minutos em 60/40 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 3,75 (s, 3H), 4,20 (br, 1H), 3,16 (m), 6,96 (s, 1H).

-674-MetilpiperazinocarbonilFenNlenor-C-Sta-N-metilamida (I, Z= 4-metilpiperazinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

R2=n-butilo; X=ciclo-hexilo; W=CH/|IOH; e Z^CONHCH^)

EXEMPLO 23

A. Éster benzílico de 4-metilpiperazinocarbonilFen

O produto do Exemplo 7A (15,0

g) foi dissolvido em 100 ml de diclorometano e foi tratado a 3°C com N-metilpiperazina. Após 10 minutos (a temperatura subiu até 20°C), a mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado sobre sílica gel (eluindo-se com 5%-11% de etanol em diclorometano) produzindo 18,1 g dum óleo amarelo pálido.

B. Cloridrato de 4-metilpiperazinocarbonilFen produto do Exemplo 23A (18 g) foi dissolvido em 150 ml de ácido acético e foi agitado com 3 g de 10% de Pd/C sob 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 45 minutos a 25°C, filtrado através de Celite e concentrado, o resíduo foi co-evaporado com tolueno adicionado (2X) e foi seco produzindo-se 16,8 g duma espuma higroscópica incolor. Esta foi co-evaporada três vezes com 30 ml de HC1 4N-dioxano e foi seca produzindo 15,9 g de cristais incolores.

C. Éster benzílico de 4-metilpiperazinocarbonilF e η N1 e

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, excepto que se utilizou 2,5 equiv. de trietilamina, 2,00 g de éster benzilico de norleucina (8A) e 2,54 g do produto do Exemplo 23B produziram 2,34 g duma espuma branca incolor, Rf de CCF de 0,12 no Sistema C.

D. 4-MetilpiperazinocarbonilFenNle produto do Exemplo 23C (2,32 g) foi dissolvido em 20 ml de 10:1 de metanol-ácido acético e foi agitado com 500 mg de 10% de Pd/C sob 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 1,5 horas a 25°C, foi filtrado através de Celite, foi co-evaporado três vezes com tolueno e éter adicionados e foi seco para se produzir 2,15 g dum sólido incolor.

E. Éster TBDMS de 4-metilpiperazinocarbonilFenNlenor-C-Sta-N-metilamida

De acordo com o processo de preparação e purificação do produto do Exemplo 1C, 350 mg do produto do Exemplo 23D e 201 mg do produto do Exemplo 14C produziram 235 mg dum sólido incolor, CLAR de 4,92 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

F. 4-metilpiperazinocarbonilFenNlenor-C-Sta-N-

-metilamida produto do Exemplo 23E (230 mg) foi dissolvido em 5 ml de HC1 4N-dioxano a 25°C. Após 30 minutos, a mistura foi concentrada a pressão reduzida, o resíduo foi co-evaporado várias vezes com éter adicionado, foi seco, triturado com éter e foi seco produzindo-se 175 mg dum sólido amarelo, CLAR de 3,92 minutos em 40/60 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1, Rf de CCF de 0,08 no Sistema D (a placa manchada foi exposta a vapor de ΝΗ^ antes da eluiçao).

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,90 (t, 3H), 2,59 (d, 3H), 3,82 (m, 1H), 7,00, 7,62 e 8,08 (d, 1H ea).

EXEMPLO 24

Cetona de etilo de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n-butilo;

X=ciclo-hexilo; W=CHIII0H; e Z¹=C0CH₂CH₃)

A. 5(S)-Bocamino-4(R)-benziloxi-6-ciclohexil-3- (R, S)-hexanol produto do Exemplo 5A da Patente Norte Americana 4.668.769 (700 mg) foi dissolvido

em 5 ml de éter e foi tratado a 0°C com 1,45 ml de brometo de etilmagnésio 2,8M em eter. Apos 20 minutos, adicionaram-se mais 650 jil de brometo de etilmagnésio 2,8M e, ao fim de 30 minutos, a solução foi tratada com 1 ml de cloreto de amónio aquoso saturado. A mistura foi diluída com éter, foi extraída com ácido clorídrico IN, bicarbonato e salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio e comcentrada, produzindo 530 mg dum óleo viscoso, Rf de CCF de 0,4 e 0,25 (1:3 do Sistema A).

B. 5(S)-Bocamino-4(R)-benziloxi-6-ciclo-hexil-

-3-hexanona produto do Exemplo 24A (525 mg) foi dissolvido em 5 ml de éter e foi tratado a 25°C com 1,0 ml de solução de ácido crómico (Org. Syn. V, p. 310). Ao fim de 1 hora, adicionou-se éter e a solução foi lavada com solução de hidróxido de sódio IN e salmoura e foi seca sobre sulfato de sodio e concentrada e o resíduo foi purificado sobre sílica, eluindo-se com 1:7 de éter-hexanos, produzindo 250 mg dum óleo incolor, Rf de CCF de 0,6 em 1:3 do Sistema A.

C. Cloridrato de 5(S)-amino-4(R)-benziloxi~6-ciclohexanona produto do Exemplo 24B (245 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano, foi agitado durante 45 minutos a 25°C e concentrado, o resíduo foi co-evaporado com éter adicionado e seco, produzindo „71

190 mg duma espuma amarela pálida, Rf de CCF de 0,58 no

Sistema C (a substância manchada foi exposta a vapor de

ΝΗ^ antes da eluição da placa).

D. Éster benzílico de etil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta

De acordo com o processo de preparação e purificação do produto do Exemplo 1C, 95 mg do produto do Exemplo 24D e 142 mg do produto do Exemplo 8C produziram 133 mg da substância do titulo sob a forma duma espuma incolor.

E. Etil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-

-Sta produto do Exemplo 24D (120 mg) foi dissolvido em 3 ml de 2:1 de metanol-ácido acético e foi agitado com 75 mg de 10% de Pd/C sob 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 20 horas a 25°C, a mistura foi filtrada através de Celite, o filtrado foi concentrado, co-evaporado 5x com tolueno adicionado e 5x com éter adicionado e foi seco para produzir 100 mg dum sólido beje claro, CLAR de 2,96 minutos em 70/30 de acetonitrilo-tampao pH 2,1, Rf de CCF de 0,3 (acetato de etilo, sílica).

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,88 e 1,09 (t, 3H ea), 2,47 e 2,78 (dq, 1H ea), 3,10 (m, 2H), 3,17 e 3,64 (m, 4H ea), 4,13, 4,16

e 4,98 (m, 1H ea), 4,52 (m, 2H), 5,48 (d, 1H ea), 7,1-7,35 (m, aromático).

EXEMPLO 25

MorfolinocarbonilFenHisnor-C-Sta-N-metilamida (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=imidazol-4-ilmetilo; X=ciclohexilo; W=CHII»OH; e Z¹=CONHCH₃

A. Éster benzílico diBocHis

DiBoc-L-Histidina (0,317 moles) foi dissolvida em 800 ml de DMF seca e adicionaram-se 43,9 g de carbonato de potássio anidro. A mistura foi agitada num banho de gelo e adicionaram-se 37,8 ml de brometo de benzilo. A mistura foi agitada a 0°C e deixada aquecer até 25°C durante a noite, foi filtrada através de Celite (lavagem com éter), o filtrado foi concentrado, o resíduo foi dissolvido em 700 ml de acetato de etilo e esta solução foi lavada com 2x200 ml de cloreto de lítio 1M e 2x200 ml de cloreto de lítio 4M, 2x100 ml de NaOH IN, água e salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada para produzir um sólido oleoso. Este sólido foi agitado vigorosamente sob 500 ml de hexano, após o que se formou uma massa cristalina que foi pulverizada num almofariz e lavada com 2x100 ml de hexano a 25°C sobre o filtro. Após secagem o sólido pesava 120,5 g, p.f. 99-99,5°C, Rf de CCF de 0,35 em 1:1 do Sis-

tema A, / a7° 25-6,4 (C=l,09, CHCl^.

B. Dicloridrato de éster benzílico de histidina produto do Exemplo 25A (92 mg) foi dissolvido em 400 ml de HC1 4N-dioxano frio e a suspensão resultante foi agitada durante 24 horas a 25°C. A maioria do liquido foi decantada e o resíduo foi concentrado, seco, lavado 3x com éter e seco, para produzir a substância do título sob a forma dum sólido incolor com uma produção substancial. / a7^ 25 subiu até +6,4 (C=2,865, MeOH) durante 24 horas (descrito, Org. Proc. Int’l., 1970, 255, /~a7 =6,54 sob estas condiçoes). 0 processo ilustrado por estes exemplos é superior àquele referido.

C. Éster benzílico de morfolinocarbonilFenHis

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 1C, 1,37 g do produto do Exemplo 7C e 1,21 g do produto do Exemplo 25B produziram 1,8 g dum espuma amarela (em bruto). Este material foi triturado com éter e seco produzindo 1,68 g duma espuma amarela clara (CLAR de 2,92 minutos em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1) que foi utilizada sem purificação adicional.

D. Éster benzílico de morfolinocarbonilFenHis(im

-Boc) produto do Exemplo 25C (1,68 g) foi dissolvido em 30 ml de dioxano e 15 ml de água e o pH foi ajustado para 11 com hidrogénio de sódio aquo so IN. Adicionou-se di-_t-butildicarbonato (850 jil) e o pH foi mantido entre 9 e 11 por meio da adiçao de hidróxido de sódio. Após 45 minutos, adicionaram-se 450 μΐ de di-.t-butildicarbonato (pH mantido á volta de 10,5) e ao fim dum total de 1,5 horas, o pH, foi ajustado para 5 com HC1 IN e a solução foi parcialmente concentrada e depois extraída com 4x100 ml de acetato de etilo. Estes extratos foram lavados com hidróxido de sódio aquo so e bicarbonato, foram secos sobre sulfato de sódio e concentrados, produzindo-se 1,85 g duma espuma oleosa que foi purificada sobre sílica eluindo-se com um gradiente de etanol em diclorometano (2 e 8% de Et 0H), produzindo-se 1,05 g duma espuma amarela pálida, CLAR de 3,10 minutos em 70/30 de acetonitrilo-tampao, Rf de 0,13 (acetato de etilo, sílica).

E. MorfolinocarbonilFenHis produto do Exemplo 25D (500 mg) foi dissolvido em 25 ml de metanol e 2 ml de acido acético e foi agitado com 250 mg de 10% de Pd/C sob 344,74 (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 45 minutos a 25°C, a mistura foi filtrada através de Celite, o filtra do foi concentrado, co-evaporado com tolueno adicionado (3x) e éter (4x) e seco, produzindo 423 mg dum sólido incolor, Rf de CCF de 0,3 no Sistema C.

F. Éster de TBDMS de morfolinocarbonilFenHis(imBoc)nor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do Exemplo 1C, 140 mg do produto do Exemplo 14C e 285 mg do produto do Exemplo 25E produziram 223 mg duma espuma incolor, CLAR de 9,95 minutos em 70/30 de acetonitrilo-tampao pH 2,1.

G. Éster de TBDMS de morfolinocarbonilFenHisnor-

- C - Sta-N-metilamida produto do Exemplo 25F (218 mg) foi dissolvido em 3 ml de metanol a 25°C e foi tratado com 10 mg de carbonato de potássio anidro. Após 1 hora, a mistura foi concentrada produzindo 193 mg dum sólido incolor, Rf de CCF de 0,06 no Sistema G.

H. Cloridrato de morfolinocarbonilFenHisnor-C-

-Sta-N-metilamida produto do Exemplo 25G (185 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano, foi agitado durante 1 hora a 25°C, foi concentrado e co-evaporado com éter adicionado produzindo 150 mg dum sólido incolor, CLAR de 1,83 minutos em 1:1 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1, Rf de CCF de 0,25 no Sistema D (a substância manchada foi exposta a vapor de NH^ antes da eluiçao da placa).

761Η RMN, DMSO, 250 MHz, parcial, delta ppm: 2,58 (d, 3H), 3,90, 4,12, 4,27 e 4,58 (m, 1H ea), 6,87, 7,60, 7,82 e 8,33 (d, 1H ea), 7,13-7,34 (m, aromático), 7,44 e 9,02 (s, 1H ea).

EXEMPLO 26

MorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta-dimetilamida(I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H, R2=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CH|||0H; e Z¹=CONH(CH₃)₂).

A. Bocnor-C-Sta-dimetilamida

De acordo com o processo de preparação do produto do Exemplo 1C, 350 mg de Bocnor-C-Sta(Exemplo 1G, E.U.A. 4.668.769) e 170 mg de cloridrato de dimetilamina produziram 405 mg de produto em bruto que foi purificado sobre sílica (1:2 de acetato de etilo-hexanos) produzindo 310 mg duma espuma incolor.

B· Cloridrato de nor-C-Sta-dimetilamida produto do Exemplo 26A (305 mg) foi dissolvido em 4 ml de HCl-dioxano, foi agitado durante 18 horas, concentrado, co-evaporado com éter e seco produzindo 250 mg dum sólido amarelo claro, Rf de

CCF de 0,1 no Sistema C.

C. MorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta-dimetilamida

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 1C, 245 mg do produto do Exemplo 26B e 472 mg do produto do Exemplo 8C produziram 325 mg duma espuma incolor, CLAR de 5,36 minutos em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,86 (t, 3H), 2,91 e 3,03 (s, 3H ea), 3,07 (m, 2H), 3,45 e 3,59 (m, 4H ea), 4,15 (m, 2H), 4,31, 4,36 e 4,52 (m, 1H ea), 5,00, 6,13 e 6,49 (d, 1H ea), 7,08-7,26 (m, aromático).

EXEMPLO 27

Éster metílico de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Statona (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H, R2=n-butilo;

X=ciclohexilo; W=C=O; Z^=C02CH₃ produto do Exemplo 8D foi dissolvido em 0,4 ml de diclorometano e foi tratado com 48 pl de anidrido acético e 141 mg de dicromato de piridinio.

Após 45 minutos, a mistura foi colocada num congelador a -20°C, onde esteve durante 18 horas. Adicionou-se acetato de etilo e a solução foi lavada com HC1 IN, bicarbonato de sódio aquoso, hidróxido de sódio IN e salmoura, foi seca sobre sulfato de sódio e concentrada para produzir 85 mg de sódio incolor que foi cromatográfado sobre sílica eluindo-se com etanol-diclorometano, produzindo 44 mg da substância do título, Rf de CCF de 0,28 (acetato de etilo sobre sílica).

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,87 (t, 3H), 3,62 (m, 4H), 4,34, 4,51 e 5,09 (m, 1H ea), 4,94, 6,57 e 6,77 (d, 1H ea), 7,15-7,35 (m, aromatico).

EXEMPLO 28

Rtil cetona de 0-MeTirNlenor-C-Sta de morfolinocarbonil (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=j)-metoxifenilo; Q=H; R2=n-butilo; X=ciclo-hexilo; W=CH||| 0H; Z^=C0CH2CH₃

A. Êter benzílico de etil cetona de O-MeTirNlenor-C-Sta de morfolinocarbonilo

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 150 mg de morfolinocarbonil 0-MeTir Nle e 97 mg do produto do Exemplo 24D produziram 140 mg de espuma incolor, Rf

de CCF de 0,38 (acetato de etilo, sílica).

B. Etil cetona de O-MeTirNlenor-C-Sta de morfo-

1i ηo carbonilo produto do Exemplo 28A (128 mg) foi dissolvido em 3 ml de metanol e 1 ml de ácido acético e foi agitado com 130 mg de 10% de Pd/C sob 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 18 horas a 25°C. A mistura foi filtrada através de Celite, foi concentrada e o residuo foi co-evaporado com tolueno adicionado (5x) e éter (5x) produzindo após secagem 115 mg dum sólido amarelo pálido, Rf de CCF de 0,25 (acetato de etilo-sílica), CLAR de 3,64 minutos em 70/30 de acetonitrilo-f osf ato pH 2,1.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,90 e 1,11 (t, 3H ea), 2,47 e 2,79 (dq, 1H ea), 3,04 (m, 2H), 3,29 e 3,64 (m, 4H ea), 3,80 (s, 3H), 4,13, 4,16, 4,25 e 4,35 (m, 1H ea), 4,95, 6,28 e 6,43 (d, 1H ea), 6,84 e 7,12 (d, 2H ea).

EXEMPLO 29

Éster metílico de morfolinocarbonilFenNle 2 (R,S)-metil-nor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=C(CH₃)111 OH e C(CH₃)-^^0H; z =co₂ch₃)

A. 3(S)-Boc amino-4-ciclo-hexil-2-oxo-l-metiltio-

-1-i1sulfóxido de metilo

Sulfóxido de metiltiometilo de metilo (8,2 ml) em 78 ml de THF seco foi arrefecido num banho de gelo e foi tratado gota a gota durante 20 minutos com 49 ml de 1,6 butillitio em hexano. Após 45 minutos, a solução foi levada até -25°C e foi tratada gota a gota com uma solução de éster metilico de Boc-hexaidro-L-fenilalanina em 20 ml de THF. Após 30 minutos a -25°C, a solução foi concentrada a pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em 200 ml de éter. Esta solução foi lavada com água (4x30 ml) e salmoura e foi seca sobre sulfato de magnésio. Adicionou-se às camadas aquosas mais salmoura e esta mistura foi extraída com acetato de etilo que foi seca sobre sulfato de magnésio. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas produzindo um óleo cor-de-laranja que foi cromatografado sobre sílica (acetato de etilo-hexanos) produzindo 6,8 g duma espuma ambar clara, Rf de CCF de 0,28 em 3:1 do Sistema A.

B. Éster metilico de Boc-nor-C-Sta produto do Exemplo 29A, 4,25 g, foi dissolvido em 25 ml de metanol a 0°C e foi tratado com 2,86 g de iodo. Após agitaçao durante 1 hora a 30°C, a mistura foi deitada numa mistura agitada de gelo, 300 ml de tiossulfato de sódio aquoso a 10% e 100 ml de acetato de etilo. A camada orgânica foi separada e a camada aquoso foi lavada com acetato de etilo (4x50 ml). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de magnésio, concentradas e cromatografadas sobre sílica (acetato de etilo-hexano), produzindo 980 mg dum sólido amarelo, Rf de CCF de 0,32 (1:2 do Sistema C). Também se obtiveram 1,66 g dum óleo, Rf de CCF de 0,45 no sistema, identificado como 3(S)-t-Bocamino-4-ciclohexil-2-oxo-l,1-dismetiltio-l-metoxibutano.

C. 3-Bocamino-4-ciclohexil-2-(R,S)-meti1-2-hidrο- χ ibutirato de metilo

Uma solução de 459 mg do produto de Rf de 0,32 do Exemplo 29B em 2 ml de éter a 0°C foi tratada com 1,92 ml de brometo de metilmagnésio (1,9M em éter de n-butilo). Após 10 minutos a 0°C, adicionou-se 1 ml de cloreto de amónio aquoso saturado. A mistura foi extraída com éter que foi lavado com HCl IN, bicarbonato de sódio aquoso e salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada, concentrada e o resíduo foi cromatugrafado sobre sílica (éter-hexanos) produzindo 375 mg dum sólido incolor.

D. Cloridrato de 3-amino-4-ciclohexil-2(R,S)-metil-2-hidroxibutirato de metilo produto do Exemplo 29C foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano e foi agitado a 25°C. Após 30 minutos, a mistura foi concentrada e co-evaporada com éter produzindo 275 mg duma espuma amarela.

E. Éster metílico de morfolinocarbonilFenNle 2(R _t S)-metil-nor-C-Sta

De acordo com o processo de preparação e purificação do produto do Exemplo IC, 255 mg do produto do Exemplo 29E e 375 mg do produto do Exemplo 8C produziram 321 mg dum sólido incolor, Rf de CCF de 0,68 no Sistema C, CLAR de 5,24 minutos (68%) e 5,51 minutos, 32% em 60/40 de acetonitrilo-água. Os dois componentes foram separados por CLAR semipreparativa (9,8x x250 mm de Zorbax C-8, 6,3 ml/min., 60/40 de acetonitrilo-água, detecção de 254nM) em injecçoes de ca. de 20 mg, produzindo 172 mg da substância e 97 mg da substância mais retida sob a forma de sólidos incolores (CLAR, no sistema analítico anterior, de 5,20 e 5,53 minutos, respectivamente, cada uma homogénia ( 98%)).

A substância menos retida por CLAR, 1H RMN, CDClg, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,82 (t, 3H), 1,34 (s, 3H), 3,04 e 3,13 (dd, 1H ea), 3,13-3,34 (m), 3,59 (m, 4-5H), 3,78 (s, 3H), 4,32 (m, 2H), 4,51 (m, 1H), 5,05 (m, 1H6, 6,36 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,14-7,35 (m, aromático).

A substância mais retida por CLAR

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, (s, 3H), 3,04 (dd, 1H),

4,47 e 4,88 (m, 1H ea), parcial, delta ppm: (t, 3H), 1,39

3,60 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,92,

4,20-4,32 (m, 2H), 7,12-7,35 (m, aromático).

EXEMPLO 30

Etilcetona de morfolinocarbonilFenN-alfa-MeNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=CH₃; R2=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=CHII|OH; Z^COCHoCHg)

A. N-Boc-N-metil-L-norleucina

N-metil-L-Norleucina (1,0 g) (J. Chem, Soc. 1968, p. 930) foi dissolvida em 11 ml de DMF a 0°C e foi tratada com 2,1 ml de trietilamina, seguidos por 1,74 ml de dicarbonato de di-t-butilo. A mistura foi agitada a 0°C durante 4 horas e depois foi deixada aquecer até 20°C durante a noite. A mistura foi concentrada e dissolvida numa mistura de bicarbonato de sódio aquoso saturado e acetato de etilo. A camada aquosa foi separada, lavada com acetato de etilo e acidificado com HC1 na presença de acetato de etilo. Esta camada orgânica foi separada e combinada com mais extractos de acetato de etilo da camada aquosa, foi seca sobre sulfato de magnésio e foi concentrada produzindo 1,17 g de um óleo amarelo.

B, Éster benzílico de N.Boc-N-metil-L-norleucina produto do Exemplo 30A (750 mg) foi dissolvido em 7,5 ml de DMF seca a 0°C e foi tratado com 423 mg de carbonato de potássio anidro e 364 pl de brometo de benzilo. A mistura foi agitada num frasco arrefecido num banho de gelo que foi deixado aquecer até 20°C durante a noite. A mistura foi diluída com éter e foi filtrada através de Celite. 0 filtrado foi concentrado e o residuo foi dissolvido em acetato de etilo que foi lavado com cloreto de litio aquoso a 10% (3X), hidróxido de sódio IN e salmoura, foi seco sobre sulfato de magnésio e foi concentrado produzindo 942 mg de um óleo amarelo.

C. Cloridrato de éster benzílico de N-metil-L-Norleucina produto do Exemplo 30B (915 mg) foi dissolvido em 3,5 ml de HC1 4N-dioxano e agitado a 25°G durante 45 minutos. A mistura foi concentrada e obtiveram-se por isso 727 mg dum pó quase branco, Rf de CCF de 0,55 no Sistema C.

D. Éster benilico de morfolinocarbonilFenN-MeNle

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 370 mg do produto do Exemplo 30D e 378 mg do produto do Exemplo

7C produziram 476 mg dum óleo opaco, Rf de CCF de 0,69 no Sistema C.

E. MorfolinocarbonilFen N-MeNle produto do Exemplo 30E (468 mg) foi dissolvido em 10 ml de etanol e 1 ml de ácido acético e foi agitado com 100 mg de 10% de Pd/C a 25°C e 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 1 hora, foi filtrado através de Celite, concentrado e co-evaporado com tolueno adicionado e depois com éter e foi seco produzindo 365 mg dum pó quase branco, Rf de CCF de 0,6 no Sistema

C.

F. fiter benzilico de etil cetona de morfolinocarbonilFenN-MeNle nor-C-Sta

De acordo com o processo de preparação do produto do Exemplo 1C, 78 mg do produto do Exemplo 24D e 93 mg do produto do Exemplo 30E produziram 148 mg duma espuma quase branca que foi utilizada sem mais purificação.

G. Etil cetona de morfolinocarbonilFenN-MeNlenor-

-C-Sta produto do Exemplo 30F (142 mg)

foi dissolvido em 10 ml de metanol e 1 ml de ácido acético e foi agitado com 150 mg de 10% de Pd/C a 25°C e a 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 20 horas, foi filtrado, concentrado, co-evaporado com tolueno e depois com éter e seco, produzindo-se 120 mg duma espuma quase branca. Este material foi cromatografado sobre sílica (gradiente etanol-diclorometano), produzindo 93 mg de sólido incolor, Rf de CCF de 0,48 no Sistema C, CLAR de 5,29 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, DMSO, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,80 e 0,85 (t, 3H ea), 2,91 (s, NCH^), 4,5 e 4,63 (m, 1H ea), 4,59 (m, 2H), 4,94, 5,39, 5,58, 6,62 e 8,00 (d, presumivelmente resonâncias de NH de rotâmetros diferentes), 7,15-7,38 (m, aromático)

EXEMPLO 31

Metil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z= =mor.folinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n-butilo; X= =ciclohexilo; W=CHIHOH; Z¹x=C0CH₃)______________________________

A. 4(S)-Bocamino-3(R)-benziloxi-5-ciclohexilo-2-

-pentanona

3(S)-t-Butoxicarbonilamino-2(R)benziloxi-4-ciclohexilbutiraldeido (315 mg) foi dissolvido em 4 ml de éter a 0°C e foi tratado com 530 pl de brometo de metilmagnésio 1,9M em éter n-butilico. Após 20

minutos adicionaram-se mais 530 μΐ de reagente de Grinard e 10 minutos mais tarde a reacçao foi temperada com cloreto de amónio aquoso saturado e foi extraída com éter. As camadas etéreas foram lavadas com HC1 IN, bicarbonato de sódio aquoso e salmoura, foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas para produzir 580 mg dum óleo amarelo. Este material foi dissolvido em 5 ml de éter e foi tratado com 1 ml de solução de ácido crómico (Org. Syn. Coli. Vol. 5, p 310). Após 30 minutos, a mistura foi diluida com éter e lavada com hidróxido de sódio IN (4x5 ml), foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada para produzir 250 mg dum óleo amarelo claro que foi purificado sobre sílica gel (éter-hexanos) produzindo 125 mg de óleo incolor, Rf de CCF de 0,24 (1:4 do Sistema B).

B. Cloridrato de 4(S)-amino-3(R)-benziloxi~5-ciclohexil-2-pentanona produto do Exemplo 31A (120 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano e foi agitado a 25°C durante 1,2 horas. A mistura foi concentrada e o resíduo foi co-evaporado 3x com éter adicionado e foi seco produzindo 100 mg duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,22 (Sistema C, a placa manchada foi exposta a amónia antes de eluição).

C. Éster benzílico de metilcetona de morfolinoc a r b o n ilFenNlenor-C-Sta

De acordo com o processo de pre paraçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 95 mg do produto do Exemplo 31B e 150 mg do produto do Exemplo 8C produziram 180 mg duma espuma amarela pálida, Rf de CCF de 0,30 (acetato de etilo, silica).

D. Metil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-

-C-Sta produto do Exemplo 31C (180 mg) foi dissolvido em 3 ml de metanol e 1 ml de ácido acético e foi agitado com 10% de Pd/C (180 mg) a 25°C e 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio durante 24 horas. A mistura foi filtrada, concentrada, co-evaporada com tolueno adicionado e seca produzindo 160 mg duma espuma incolor que foi cromatografada sobre sílica (gradiente de etano-diclorometano) produzindo 55 mg dum sólido incolor, CLAR de 3,37 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fos fato pH 2,1.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,86 (t, 3H), 2,17 (s, 3H), 3,09 (dd, 1H ea), 3,24 e 3,59 (m, 4H ea), 3,89, 4,08, 4,15, 4,47 e 4,55 (m, 1H ea), 4,92, 6,11 e 6,48 (d, 1H ea), 7,13-7,35 (m, aromático).

-89EXEMPLO 32

N-metilamida de morfolinocarbonilFen O-ETSernor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; ^2^2^5^^2^

X=ciclohexilo; W=CHlllOH; Z¹=C0NHCH₃)

A. Êter de TBDMS de N-metilamida de morfolinocarboni1Fen O-ETSernor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 70 mg do produto do Exemplo 14C e 75 mg de morfolinocarbonilFen 0-ETSer produziram 50 mg de um sólido incolor.

B. N-metilamida de morfolinocarbonilFen 0-ETSernor-C-Sta produto do Exemplo 32A (48 mg) foi dissolvido em 2 ml de HC1 4N-dioxano e foi agitado durante 1 hora a 25°C, A mistura foi concentrada e o resíduo foi co-evaporado com éter e foi seco produzindo 40 mg dum sólido incolor, CLAR de 3,46 minutos em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1, Rf de CCF de 0,28 no Sistema C.

1H RMN, DMS0-D6, 300 MHz, parcial, delta ppm: 1,12 (t, 3H), 2,57 (d, 3H), 2,81 e 3,03 (dd, 1H ea), 3,20 (m, 4H), 3,45 (m), 3,78 e 4,13 (m, 1H ea), 4,35 (m, 2H), 5,74, 6,68, 7,54 e 8,08 (d, 1H ea),

7,12-7,35 (m, aromático).

EXEMPLO 33 i-Propil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; ~2L^—ϋ°S

X=ciclohexilo; W=CHIII OH; e Z¹=COCH(CH₃)₂)

A. 5(S)-Bocamino-4(R)-benziloxi-6-ciclohexil-2-

-metil-3-hexanona

3(S)-t-Butoxicarbonilamino-2(R)-benziloxi-4-ciclohexilbutiraldeído (400 mg) foi dissolvido em 3 ml de éter a 0°C e foi tratado com 1,17 ml de brometo de isopropilmagnésio (2,0 M em dietiléter). Após 20 minutos, adicionaram-se 0,6 ml do reagente de Grinard, seguidos 5 minutos mais tarde por Γ ml de bicarbonato de sódio aquoso saturado e salmoura, secou-se sobre sulfato de magnésio e concentrou-se produzindo-se 350 mg dum óleo claro. Este material foi dissolvido em 2 ml de éter e foi tratado com 2 ml de solução de ácido crómico (Org. Syn. Coll. Vol. V, p. 310) e após 30 minutos a mistura foi extraída com éter que foi lavado com hidróxido de sódio aquoso e salmoura, foi seco e concentrado para produzir 250 mg dum óleo amarelo que foi purificado sobre sílica (éter-hexanos), produzindo 125 mg dum óleo amarelo claro, Rf de CCF de 0,33 (1:4 do Sistema A).

B, Cloridrato de 5(s)-amino-4(R)-benziloxi-6-

-ciclohexil-2-metil-3-hexanona produto do Exemplo 33A (120 mg) foi dissolvido em 2 ml de HC1 4N-dioxano e foi agitado durante 1,2 horas a 25°C, concentrado e o resíduo foi co-evaporado com éter, produzindo 95 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,4 no Sistema C (a placa manchada foi exposta a amónia antes de eluição).

C. Éter benzílico de isopropil cetona de morfolinocarbonilFen Nlenor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 95 mg do produto do Exemplo 33B e 136 g do produto do Exemplo 8C produziram 160 mg duma espuma incolor, CLAR de 3,56 minutos em 85/15 de acetonitrilo-água.

D. i-Propil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-

-C-Sta produto do Exemplo 33C (155 mg) foi dissolvido em 3 ml de metanol e 3 ml de ácido acético e foi agitado com 155 mg de 10% de Pd/C durante 18 horas a 25°C, filtrado através de Celite, concentrado, o resíduo foi co-evaporado com tolueno e éter e foi seco produzindo 100 mg dum sólido amarelo pálido, Rf de CCF de 0,40 (acetato de etilo-sílica).

-921Η RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: o,87 (t, 3H), 1,08 e 1,12 (d, 3H ea), 3,09 (m, 2H), 3,62 (m, 4H), 4,15 (m, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,99,

6,38 e 6,51 (d, 1H ea), 7,15-7,37 (m, aromático).

EXEMPLO 34 i-Butil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CH111 OH; e Z¹=COCH₂CH(CH₃)₂)

A. 6(S)-Bocamino-5(R)-benziloxi-7-ciclohexil-2-metil-4-hexanona

3(S)-t-Butoxicarbonilamino-2(R)-benziloxi-4-ciclohexilbutiraldeído (1,00 g) foi dissolvido em 10 ml de éter a 0°C e foi tratado com 1,6 ml de cloreto de isobutilmagnésio etéreo 2,0 M. Após 30 minutos, adicionaram-se mais 3 ml de reagente de Grignard e a solução foi aquecida até 25°C. Após mais uma hora, a mistura foi temperada com solução aquosa de cloreto de amónio e extraída com éter. 0 eter foi lavado com salmoura, foi seco sobre sulfato de sódio e concentrado produzindo 1,02 g dum óleo claro. Este material foi dissolvido em 20 ml de éter e foi tratado com 5 ml de solução de ácido crómico (Org. Syn., V, p. 310). Depois de se agitar a 0° durante 1 hora e a 25°C durante 30 minutos, a mistura foi diluida com éter e lavada com hidróxido

-93de sódio IN e salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio, foi concentrada e o produto em bruto foi purificado sobre sílica (éter-hexano) produzindo 440 mg de um óleo incolor, Rf de CCF de 0,33 em 1:3 de Sistema B.

B. Cloridrato de 6(S)-amino-5(R)-benziloxi-7-ciclohexil-2-metil-4-hexanona produto do Exemplo 34A (430 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano e foi agitado durante 1,2 horas a 25°C, foi concentrado, co-evaporado duas vezes com éter e seco produzindo 325 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,29 no Sistema C(placa manchada exposta a amónia antes de eluição).

C. Éster benzílico de i-butil cetona de morfolinocarboni1FenNlenor-C-Sta

De acordo com o processo de preparação e purificação do produto do Exemplo 1C, 150 mg do produto do Exemplo 34B e 207 mg do produto do Exemplo 8C produziram 280 mg duma espuma incolor.

D. i-Butil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-

-C-Sta produto do Exemplo 34C (300

mg) foi dissolvido em 10 ml de 1:1 de metanol-ácido acético e foi agitado com 300 mg de 10% de Pd/C durante 18 horas a 25°C e 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio. A mistura foi filtrada através de Celite, os filtrados foram concentrados e co-evaporados com tolueno adicionado sobre sílica (gradiente de etanol-diclorometano), produzindo 180 mg de sólido incolor, CLAR de 4,40 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1, Rf de CCF de 0,31 (etilacetato-sílica).

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,84 (t, 3H), 0,90 e 0,92 (d, 3H ea), 2,10 (septeto, 1H), 2,38 e 2,53 (dd, 1H ea), 3,04 (m, 2H), 3,26 e 3,58 (m, 4H ea), 4,06 (s, 1H), 4,22, 4,52 e 4,60 (m, 1H ea), 5,26, 6,57 e 7,00 (d, 1H ea), 7,1-7,3 (m, aromático).

EXEMPLO 35

Metoxiamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z«= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n-butilo; X= =cicloexilo; W=CHÍ|| 0H; e Z¹=C0NH0CH₃)

A. Metoxiamida de Boc nor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 1C, 54 mg de cloridrato de metoxiamina e 98 mg de Boc nor-C-Sta (produto do Exemplo 1G, E.U.A. 4.668.769) produziram 102 mg de produto em bruto que foi purificado sobre silica (acetato de etilo-hexanos) produzindo 40 mg da substância do titulo.

B. Cloridrato de metoxiamida de nor-C-Sta produto do Exemplo 35A (38 mg) foi agitado em 2 ml de HC1 4N-dioxano a 25°C durante 1,2 horas e foi concentrado num sólido incolor que foi lavado três vezes com éter produzindo 25 mg de solido.

C. éster de N-hidroxissuccinimida de morfolinocarbonilFenNle produto do Exemplo 8A (1,05 g) foi dissolvido em 5 ml de dimetoxietano e foi tratado a 0°C com 350 mg de N-hidroxissuccinimida e 573 mg de diciclohexilcarbodiimida e agitado durante a noite num banho de gelo que foi deixado aquecer até 18°C. A mistura foi filtrada, o sólido filtrado foi lavado com dimetoxietano, os filtrados foram concentrados e o residuo foi suspenso em acetato de etilo. A suspensão de acetato de etilo foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado e salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada para produzir 960 mg de uma espuma incolor.

D. Metoxiamida de morfolínocarbonllFenNlenor-C-Sta produto do Exemplo 35B (23 mg) foi dissolvido em 0,3 ml de dimetoxietano e foi tratado sequencialmente a 25°C com 12 jil de trietilamina e 42 mg do produto do Exemplo 35C. Adicionaram-se mais dimetoxietano (200 pl) e 200 pl de diclorometano e a mistura foi agitada durante 22 horas, dissolvida em 30 ml de acetato de etilo, agitada com 2 χ 1 ml de HC1 IN e 2 x 2 ml de bicarbonato de sódio aquoso saturado, foi seca sobre sulfato de magnésio, concentrada e cromatográfada sobre sili ca (gradiente de etanol-diclorometano), produzindo 45 mg dum sólido incolor, Rf de CCF de 0,5 no Sistema C, CLAR de 2,84 minutos em 60/40 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1,

1H RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,89 (t, 3H), 3,02 (dd, 1H), 3,14 (m), 3,62 (m, 4H), 3,77 (s, 3H), 4,35, 4,60 e 5,01 (m, 1H ea), 7,13-7,38 (m, aromático), 9,57 (s, 1H).

EXEMPLO 36

MorfolinocarbonilFenNlenor-C-Statol (I,Z=morfoiinocarboni1amino; M=fenilo; Q=H; R2=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=CH(H0H; e Z¹=CH₂0H)

A. 3(S)-amino-2(R)-benziloxi-4-ciclohexil-l-butanol

3(S)-t-Butoxicarbonilamino-2(R) -benziloxi-4-ciclohexil-l-butanol (108 mg) (E.U.A. 4.668.769) Exemplo 1J, foi dissolvido em 0,5 ml de éter e arrefecido até 0°C. Nesta solução, introduziu-se um excesso de HC1 anidro e a solução foi agitada a 25°C durante 2 horas e foi concentrada produzindo 88 mg dum sólido incolor, Rf de CCF de 0,28 no Sistema A.

B. 3(S)-(morfolinocarbonilFenNleamino)-2(R)-benz i1o x i-4-ciclohexil-l-butanol produto do Exemplo 36A (85 mg) foi dissolvido em 500 ul de dimetoxietano e tratado sequencialmente a 0°C com 38 ul de trietilamina e 132 mg do produto do Exemplo 35C. Após 18 horas, a mistura foi concentrada e cromatográfada sobre silica (acetato de etilo-hexanos), produzindo 139 mg de um solido incolor, Rf de CCF de 0,25 (acetato de etilo-silica).

C. MorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta produto do Exemplo 36B (80 mg) e 90 mg de 10% de Pd/C foram misturadas com 5 ml de metanol e 5 ml de ácido acético e foram agitadas a 330,95 KPa(48 p.s.i.) de hidrogénio e 25°C durante 21 horas. A mistura foi concentrada e o residuo foi cromatografado sobre silica (gradiente de etanol-diclorometano),produ-

zindo 64 mg de sólido incolor, Rf de CCF de 0,5 no Sistema C CLAR de 4,95 minutos em 50/50 de acetonitrilo-água.

1H RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial delta ppm: 0,92 (t, 3H), 2,94 (dd, 1H), 3,09-3,72 (m de sobreposição), 4,12-4,37 (m, ca. 3H), 4,79, 6,28 e 6,93 (d, 1Η ea), 7,20-7,48 (m, aromático).

EXEMPLO 37 i-Butil cetona de morfolinocarbonilFen S-MeCisnar-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂;

X=ciclohexilo; W=CH 0H; e Z¹=COCH₂CH(CH₃)₂)

A. . Éter benzilico de i.-butil cetona de morf olinocar. boni 1Fen S-MeCisnor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 120 mg do produto do Exemplo 34B e 129 mg de Mor-Fe-SMeCis produziram 114 mg de um pó incolor, Rf de CCF de 0,58 no Sistema C.

B. i-Butil cetona de morfolinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta produto do Exemplo 37A (95 mg)

foi dissolvido em 1,0 ml de ácido fórmico e adicionaramse-lhe 100 mg de paladio preto (ALFA Co.). Após agitaçao durante a noite, a mistura foi filtrada através de Celite, foi concentrada e o residuo foi coevaporado com tolueno e seco, produzindo 97 mg de um óleo cor-de-bronze que foi purificado sobre sílica (gradiente de etanol-diclorometano), produzindo 23,5 g de pó incolor, Rf de CCF de 0,65 no Sistema C, 3,65 minutos por CLAR em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1,

1H RMN, CDClg, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,90 e 0,92 (d, 3H ea), 2,10 (s, 3H), 2,14 (septeto, 1H), 2,38, 2,56, 2,65, 2,92, 3,00 e 3,14 (dd, 1H ea), 3,14-3,37 (m), 3,60 (m, 4H), 3,97, 4,05 e 4,65 (m, 1H ea), 4,41-4,56 (m, 2H), 6,76 e 6,86 (d, 1H ea), 7,14-7,36 (m, aromático).

EXEMPLO 38 | Éster i-propílico de BocFen S-MeCisnor-C-Sta (I ,Z=_t-(CHg)g_

COCONH; M=fenilo; Q=H; Rg-CHgSCHgj X=ciclohexilo; W=CH 0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. BocFen S-meCis

S-metilcisteina (6,26 g) foi dissolvida em 65 ml de bicarbonato de sódio aquoso saturado a 25°C e adicionaram-se 35 ml de THF. Esta solução foi

-100-

tratada com uma porção de 12,0 g de éster de hidroxissuccinimida de N-t-boc-L-fenilalanina. Após 30 minutos, a solução foi transferida para um funil de separaçao e foi lavada duas vezes com acetato de etilo. Adicionou-se uma porção de acetato de etilo e o pH foi ajustado para 1,1 com HC1 6N. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (4x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com HC1 IN e salmoura, foram secas sobre sulfato de magnésio e concentradas produzindo 12,0 g duma espuma incolor.

B· Éster i-propilico de BocFen S-MeCisnor-C-Sta

Éster isopropilico de Nor-C-Sta (1,0 g) foi dissolvido em 20 ml de diclorometano e foi tratado sequencialmente com 1,57 g (1,0 equiv.) do produto do Exemplo 38A, 945 mg (1,5 equiv.) de hidrato de hidroxibenzotriazole e 788 mg (1,0 equiv.) de cloridrato de 1(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (DEC). A mistura de reacçao foi agitada num banho de gelo que foi deixado atingir 18°C durante a noite. A mistura foi concentrada, o residuo foi dissolvido em acetato de etilo e a solução resultante foi lavada duas vezes com HC1 IN, duas vezes com NaOH IN e uma vez com salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada para produzir um sólido incolor que foi purificado sobre silica (acetato de etilo-hexanos), produzindo 1,85 g da substância do titulo sob a forma dum pó incolor, Rf de CCF de 0,60 no Sistema C.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,94 (m), 1,29 e 1,30 (d, 3H ea), 13,9 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,64, 2,98, 3,03 e 3,15 (dd, 1H ea), 4,09

-101(d, 1H), 4,30-4,50 (m, 3H), 4,90 (m, 1H), 5,07 (septeto,

1H), 6,66 (m,lH), 6,86 (d, 1H), 7,16-7,36 (m, aromático).

EXEMPLO 39

Éster i.-propilico de Fen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=NH₂; M=fenilo; Q=H; R,=CH₃SCH,; X=ciclohexilo; W=CHIIIOH; e ζΜοΟΟ,ΟΗί <^CH ₃)₂>

produto do Exemplo 38B (500 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano e agitado a 25°C durante 40 minutos. A mistura foi concentrada e o resíduo foi co-evaporado com éter produzindo 460 mg de um pó quase branco, Rf de CCF de 0,25 no Sistema C (a substância foi tratada com trietilamina em diclorometano e foi então aplicada à placa de CCF), CLAR de 4,05 minutos em 50/50 de acetonitrilo-tampao pH 2,1.

1H RMN, DMSO, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,20 (d de sobreposição, 6H), 2,11 (s, 3H), 2,55 (2,82, 2,93 e 3,18 (dd, 1H ea), 4,01, 4,23 e 4,57 (m, 1H ea), 7,30 (s, aromático), 5,38, 7,96 e 8,89 (d, 1H ea), 8,18 (br, 3H).

-102-

EXEMPLO 40

Éster jl-propilico de 4-picolinoilFen S-MeCisnor-C-Sta (I,

Z=4-picolinoilamino; hexilo; W=CHI11 OH; e

M=fenilo; Q=H; R₂= CH₃SCH₂-;

z¹=co₂ch(ch₃)₂)

X=cicloDe acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizaram 1,05 equiv. de trietilamina (54 ^11) para neutralizar o cloridrato de amina de partida, 200 mg do produto do Exemplo 39 e 45 mg de ácido piridina-4-carboxi. lico (picolinico) produziram 157 mg dum pó quase incolor Rf de CCF de 0,52 no Sistema C, CLAR de 7,10 minutos em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, DMOS, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,18 e 1,20 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 2,60,

2,80 e 3,14 (dd, 1H ea), 4,00, 4,22, 4,49 e 4,78 (m, 1H ea), 4,87 (septeto, 1H), 5,35, 7,18, 8,42 e 8,90 (d, 1H ea), 7,26 (t, 2H), 7,37 (d, 2H), 7,67 (d, 2H), 8,70 (d, 2H).

EXEMPLO 41

Éster i-propilico de 4-t^-BocpiperazinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=4-t.-Bocpiperazinocarbonilamino; M=fenilo;

Q=H; R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHIII0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

-103

A. Éster metílico de 4-t-Bocpiperazinocarbonil-

F e n S-MeCis

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 38B, 245 mg de éster metílico de S-metil-cisteína e 500 mg de Boc-piperazinocarbonil-L-fenilalanina produziram 547 mg duma espuma incolor que foi utilizada sem purificação adicional.

B. 4-t-BocpiperazinocarbonilFen S-MeCis produto do Exemplo 41A (467 mg) foi dissolvido em 1 ml de dioxano e 0,5 ml de água a 0°C e foi tratado com 33 mg de hidróxido de lítio. Após 2,5 horas, a mistura foi concentrada, o resíduo foi dissolvido em água e a solução resultante foi extraída com éter. Adicionou-se acetato de etilo à camada aquosa que foi levada para pH 1 com HC1 IN e extraída com acetato de etilo (4x), os extratos foram lavados com água e secos sobre sulfato de magnésio produzindo 417 mg dum sólido incolor.

C. Éster i-propílico de 4-t-Bocpiperazinocarbonil-

Fen S-MeCisnor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 36B, 100 mg de éster isopropílico de nor-C-Sta e 203 mg do produto do Exemplo 41B produziram 182 mg de sólido incolor, Rf

de CCF de 0,49 (acetato de etilo/sílica).

1H RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,26 e 1,27 (d, 3H ea), 1,45 (s, 9H), 2,10 (s, 3H), 2,73 (dd, 1H), 3,00 (m, 2H), 3,27 e 3,36 (m, 9H total), 3,77 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,81 (d, 1H), 5,07 (septeto, 1H), 6,84 e 6,93 (d, 1H ea), 7,18-7,39 (m, aromático).

EXEMPLO 42

Éster i_-propílico de piperazinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=piperazinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂ = =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH| li0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂) produto do Exemplo 41 (33 mg) foi dissolvido em 2 ml de HC1 4N-dioxano e foi agitado a 25°C durante 50 minutos, concentrado e o resíduo foi co-evaporado com éter produzindo 31 mg de um pó quase branco, Rf de CCF de 0,2 no Sistema C (a placa manchada foi exposta a amónia antes de eluição), CLAR de 2,98 minutos em 50/50 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, DMSO, 250 MHz, parcicial, delta ppm: 1,18 e 1,20 (d, 3H ea), 2,10 (s, 3H), 4,00 e 4,21 (m, 1H ea), 4,40 (m, 2H), 4,85 (septeto, 1H), 5,33, 6,90, 7,63 e 8,22 (d, 1H ea), 7,13-7,33 (m, aromático) .

EXEMPLO 43

Éster i-propilico de morfolinocarbonilhexaidroFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=ciclohexilo; 0=H; R₂=CH„SCH₂; X=ciclohexilo; W=CH IIIOH; e Z¹=C0₂CH( ^Cii3>2’

A. Morfolinocarbonilhexaidro-L-fenilalanina produto do Exemplo 7C (4,0 g) foi dissolvido em 55 ml de 10:1 de metanol-ácido acético e foi agitado com 1,0 g de 10% de Rh/C sob 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio a 25°C durante 3,5 horas. A mistura foi filtrada através de Celite, foi concentrada e co-evaporada com éter, produzindo 4,15 g duma espuma incolor que foi purificada sobre sílica (compromido e colocado em acetato de etilo, eluído no mesmo, seguido por um gradi ente de etanol-diclorometano), produzindo 704 mg de uma espuma incolor, Rf de CCF de 0,4.

B. Éster de hidroxissuccinimida de morfolinocarbonilhexaidroF en produto do Exemplo 43A (700 mg) foi dissolvido em 5 ml de dimetoxietano e foi tratado sequencialmente a 0°C com 283 mg de N-hidroxissuccinimida e 507 mg de diciclohexilcarbodiimida. A mistura de reacçao foi deixada aquecer até 18°C durante a noite, foi filtrada, concentrada, o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo que foi lavado duas vezes com bicarbonato de sódio aquoso saturado e salmoura, seco sobre sul fato de magnésio e concentrado produzindo 704 mg de uma espuma incolor.

C. MorfolinocarbonilhexaidroFen S-MeCis

S-metilcisteina (442 mg) foi dissolvida em 4,6 ml de carbonato de sódio aquoso saturado e adicionaram-se 2,5 ml de THF seguidos por 890 mg do produto do Exemplo 43B. Após agitaçao durante 20 minutos a 25°C, a mistura foi diluída com água, foi lavada duas vezes com acetato de etilo e levada para pH 1,1 com HC1 IN na presença de adetato de etilo. A camada orgânica foi separada, a camada aquosa foi extraída com quatro porçoes de acetato de etilo, as camadas orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com HC1 IN, e salmoura, secas sobre sulfato de magnésio e concentradas produzindo 796 mg duma espuma incolor.

D. Éster i-propílico de morfolinocarbonilhexaidroFen S-MeCisnor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, 94 mg de éster isopropílico de nor-C-Sta e 170 mg do produto do Exemplo 43C produziram 178 mg de um pÓ incolor, Rf de CCF 0,83 no Sistema C, CLAR de 4,16 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1Η RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,93 (m, 4H), 1,26 e 1,27 (d, 3H ea), 2,13 (s, 3H), 2,76 e 3,11 (dd, 1H ea), 3,39 (m, 4H), 3,70 (m, 4H), 4,08 (br, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,41 (m, 2H), 4,82, 6,83 e 6,93 (d, 1H ea), 5,04 (septeto, 1H).

EXEMPLO 44

Éster .i-propílico de BocProFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z= =Bocpirrolidil-2-carbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=CH₃SCH2-;

X=ciclohexilo; W=CHIH0H; e Z^=C02CH(CH₃)2)

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizaram 1,2 equiv, 71 jil de trietilamina para neutralizar o cloridrato de amina, 233 mg do produto do Exemplo 39 e 101 mg de Boc-L-prolina produziram 237 mg de um pó incolor, Rf de CCF de 0,66 no Sistema C.

1H RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,27 e 1,29 (d, 3H ea), 1,48 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,67 e 3,04 (dd, 1H ea), 4,44 (m, 1H), 4,62 (m, 2H), 5,07 (septeto, 1H), 6,42 e 6,60 (d, 1H), 7,1-7,4 (m, aromático).

Cloridrato de éster jL-propílico de ProFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=(s)-pirrolidilcarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; X=CH111 OH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

EXEMPLO 45 produto do Exemplo 44 (124 mg) foi dissolvido em 3 ml de HC1 4N-dioxano e agitado a 25°C durante 40 minutos. A mistura foi evaporada produzindo 114 mg de um pó amarelo pálido, Rf de CCF de 0,39 no Sistema C (a placa manchada foi exposta a amónia antes de eluição).

1H RMN, DMSO, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,27 e 1,29 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 2,56 (dd, 1H), 4,00, 4,08, 4,22, 4,47 e 4,64 (m, 1H ea), 4,85 (septeto, 1H), 5,37, 7,73, 8,41 e 8,78 (d, 1H ea), 7,13-7,33 (m, aromático).

) i

EXEMPLO 46 I

Éster i-propílico de 0-succinoilo morfolinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo;

Q=H; R₂=CH₃SCH₂; X=ciclohexilo; W=CHI11 0C0(CH₂)₂C0₂H; e z¹=co₂ch(ch₃)₂) produto do Exemplo 17E (101

-109-

mg) foi dissolvido em 0,8 ml de diclorometano e foi tratado com 16 mg de anidrido succinico e 13 jil de piridina. Após agitaçao durante 18,5 horas a 25°C, adicionaram-se 20 mg de dimetilaminopiridina. Quatro horas mais tarde adicionaram-se 40 mg de anidrido succinico. Após agitaçao durante mais 20 minutos, a mistura foi diluída com acetato de etilo e lavada três vezes com HC1 IN e salmoura, foi seca sobre sulfato de magnésio, concentrada e cromatografada sobre sílica eluindo-se primeiro com acetato de etilo e depois com 4% de etanol em diclorometano, produzindo 59 mg de um pó incolor, Rf de CCF de 0,1 (acetato de etilo, sílica, CLAR de 2,84 minutos em 70/30 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, CDCl^, 300 MHz, parcial, delta ppm: 0,94 (m), 1,24 e 1,27 (d, 3H ea), 2,10 (br, 3H), 2,64-3,54 (m), 3,6 (m, 4H), 4,23, 4,53 e 4,67 (m, 1H ea), 4,96 (br, 1H), 4,98 (septeto, 1H), 5,14 (br, 1H), 6,65 (d, 1H), 7,16-7,39 (m, aromático).

EXEMPLO 47

Éster ί-propílico de morfolinocarbonllFen N-MeNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q^CH^; R2= =n-butilo; X=ciclohexilo; W=CH||I 0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, 76 mg de éster isopropílico de nor-C-Sta e 126 mg do produto do Exemplo 30E produziram 117 mg de uma espuma incolor,

Λ . -110I

Rf de CCF de 0,68 no Sistema C. 0 produto desejado desta mistura foi isolado por CLAR preparativa sobre uma coluna Zorbax C-8 de 9,8 x 250 mm, 6,3 ml/min. de 75/25 de acetonitrilo-água, tempo de ret. de 5,61 minutos, separado do componente inactivo indesejado aos 6,42 minutos. Obteve-se assim uma espuma incolor (60 mg), CLAR de 4,98 minutos 75/25 de acetonitrilo-água.

em al, (s, (m,

1H RMN, CDC1₃, delta ppm: 0,83 (t, 3H), 1,23 e 1,26 (d, 3H), 2,95 e 3,09 (dd, 1H ea), 3,22-3,45 4H), 4,02 e 4,05 (d, 1H total), 4,95 (m, e 7,75 (d, 1H ea), 7,14-7,38 (m, aromático).

250 MHz, parci3H ea), 2,70 (m, 4H), 3,65

2H), 5,15

EXEMPLO 48

Éster ji-propílico de piperidinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=piperidinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂= =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH|HOH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂).

A. Éster benzílico de piperidinocarbonilFen produto do Exemplo 7A (1,74

g) foi dissolvido em 13 ml de diclorometano e foi tratado com 0,61 ml de piperidina a 0°C. Após 15 minutos, adicionou-se 0,1 ml de piperidina e a solução foi evaporada e o residuo foi cromatografado sobre silica eluindo-se com acetato de etilo-hexanos produzindo 1,61 g de um óleo incolor, Rf de CCF de 0,36 em 1:1 do Sistema A.

B. PiperidinocarbonilFen produto do Exemplo 48A (1,6

g) foi dissolvido em 50 ml de 10:1 de metanol-ácido acético e foi agitado com 0,6 g de 10% de Pd/C a 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio e 25°C durante 30 minutos. A mistura foi filtrada através de Celite, o filtrado foi evaporado e o resíduo foi doevaporado primeiro com tolueno adicionado e depois com éter para produzir 1,17 g duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,50 no Sistema C.

C. Éster i-propílico de Boc S-MeCisnor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, 900 mg de éster isopropílico de nor-C-Sta e 871 mg de Boc-S-metil -L-cisteína produziram 1,04 g de um pó incolor, Rf de CCF de 0,42 no Sistema A, 1:1.

D. Cloridrado de i-propiléster de S-MeCisnor-C-

-Sta produto do Exemplo 48C (1,03

g) foi dissolvido em 6 ml de HC1 4N-dioxano, foi agitado durante 45 minutos a 25°C e foi concentrado produzin do 998 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,48 no Sistema C.

E. Éster i-propílico de piperidinocarbonilFen

S-MeCisn or-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizou trietilamina para neutralizar o cloridrato de amina, 130 mg do produto do Exemplo 48D e 90 mg do produto do Exemplo 48B produziram 117 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,44 (acetato de etilo-sílica).

1H RMN CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,27 e 1,29 (d, 3Η ea), 2,08 (s, 3Η), 2,75, 2,92, 3,13 e 3,31 (dd, 1Η ea), 3,20 (m), 4,11 (s, 2Η), 4,33-4,58 (m), 4,72 e 6,90 (d, 1Η ea), 5,09 (septeto, 1H), 7,19-7,4 (m, aromático).

EXEMPLO 49

2-Hidroxi-i.-butil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂ = =n-butilo; X=ciclohexilo; W=CHÍll 0Η; e Z¹=C0CH₂C(0H)(CH₃)₂)

113Α. 6(S)-Bocamino-5(R)-benziloxi-7-ciclohexil-2-metil-2-hidroxi-4-hexa nona

3(S)-t-butoxicarbonilamino-2(R)-benziloxi-4-ciclohexilbutiraldeído (475 mg) foi adicionado a -78°C a uma solução de 2,5 equiv. de acetato de etilo de lítio (a partir de 5 ml de THF, 392 /11 de diisopropilamina e 1,75 ml de n-butillítio 1,6 M em hexano a 0°C seguidos por 272 /11 de acetato de etilo a -78°C), foi agitado durante 10 minutos a -78°C e durante 10 minutos a 0°C e temperado com cloreto de amónio aquoso. Os produtos foram isolados por extracçao de éter produzindo 548 mg de substâncias isoméricas (Rf de CCF de 0,35 e 0,28 em 1:1 do Sistema B). Este material, conjuntamente com 217 mg das mesmas substâncias preparadas idêntica mas separadamente, foi dissolvido em 8 ml de THF e tratado com 5,9 ml de metillítio etéreo 1,3M a 0°C, agitado durante 5 minutos e temperado com uma solução de cloreto de amónio aquoso. Obteve-se um óleo amarelo (702 mg) por extracçao em éter. Rf de CCF de 0,2 em 1:1 do Sistema B. Este material foi dissolvido em 25 ml de acetona, foi tratado com 2 ml de solução de ácido crómico (Org. Syn. Coli. Vol.

) V, p. 310) e foi concentrado, dissolvido em água e extraído repetidamente com acetato de etilo que foi seco sobre sulfato de magnésio, concentrado e purificado sobre sílica produzindo 172 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,34 em 1:1 do Sistema. B.

-114-

B. Cloridrato de 6(S)-amino-5(R)-benziloxi-7-ciclohexíl-2-metil-2-hidroxi-4-hexanona produto do Exemplo 49A (124 mg) foi dissolvido em 0,5 ml de ácido trifluoroacético a 0°C, foi agitado durante 20 minutos, foi concentrado e o resíduo foi co-evaporado com tolueno, eter e éter contendo 1,1 equiv. de HC1 (em dioxano) produzindo, após secagem, 106 mg de um óleo amarelo.

C. Éter benzílico de 2-hidroxi-i-butil cetona de morfolinocarb onilFenNlenor-C-Sta

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se adicionou trietilamina para neutralizar o cloridrato de amina, 104 mg do produto do Exemplo 49B e 106 mg do produto do Exemplo 8C produziram 60 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,4 (acetato de etilo/silica) .

D. 2-Hidroxi-i-butil cetona de morfolinocarbonil-

FenNlenor-C-Sta produto do Exemplo 49C (58 mg) foi dissolvido em 10 ml de 1:1 de ácido acético-metanol e agitado com 100 mg de 10% de Pd/C durante 20 horas a 25°C e 344,74 KPa (50 p.s.i.) de pressão de hidrogénio. A mistura foi filtrada através de Celite, foi concentrada e purificada sobre sílica em acetato de etilo/hexanos pro-115-

duzindo 20 mg de um pó incolor, Rf de CCF de 0,22 (acetato de etilo/silica).

1H RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,88 (t, 3H), 1,27 (s, 6H), 2,76 e 2,87 (d, 1H ea), 3,00 e 3,16 (dd, 1H), 3,26 (m, 4H), 3,63 (m, 4H), 4,16 (br, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,51 (m, 2H), 5,00, 6,62 e 6,73 (d, 1H ea), 7,13-7,36 (m, aromático).

EXEMPLO 50

Éster i.-propílico de 4-hidroxipiperidínocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=4-hidroxipiperidinocarbonilamino; M= =fenilo; Q=H; X=ciclohexilo; W=CHiII0H; e z¹=co₂ch(ch₃)₂)

Uma solução de 150 mg do produto do Exemplo 39 e 40 jal de trietilamina em 0,8 ml de diclorometano foi adicionada a 0°C a uma solução a 0°C de 49 mg de carbonildiimidazole e 20 mg de imidazole em 0,3 ml de diclorometano e a solução resultante foi agitada durante 1 hora a 0°C. Adicionou-se uma solução de 25 mg de 4-hidroxipiperidina em 0,3 ml de diclorometano e a mistura foi agitada durante 1,5 horas a 0°C e a 20°C durante 20 horas, foi diluída com acetato de etilo e lavada com HC1 IN (2x) e salmoura foi seca sobre sulfato de magnésio concentrada e purificada sobre sílica para produzir 26,1 mg duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,22 (acetato de etilo/sílica), CLAR de 3,10 minutos em 60/40 de acetonitri-

lo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,27 e 1,29 (d, 3H ea), 2,10 (s, 3H), 2,73 e 3,30 (dd, 1H ea), 3,03 (m, 3-4H), 3,58 (m, 2H), 3,87 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 4,45 (m, 3H), 4,82 (d, 1H), 5,08 (septeto, 1H), 6,91 e 7,09 (d, 1H ea), 7,19-7,40 (m, aromático) .

EXEMPLO 51

3(S)-(BocFenHisamino)-2(S)-azido-4-ciclohexibutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isomero 3(R), 2(R) (I, Z=Bocamino; M=fenilo; Q=H; R2=imidazol-4-ilmetil;

X=ciclohexilo; W=CH^lN₃; e Z^sC^CH^

A. 3(S)-Bocamino-4-ciclohexil-2(R)-hidroxibutirato de metilo racémico

Dez gramas duma mistura de 80% de N-t-butoxicarbonil-(S)-3-amino-(R)-2-hidroxi-4-fenilbutironitrilo e 20% do isómero 2(S) correspondente (E.U.A. 4.668.769) foram aquecidos ao refluxo durante 18 horas numa mistura de 80 ml de p-dioxano, 30 ml de água e 30 ml de HC1 conc., e evaporados, o resíduo foi dissolvido em água e a solução foi lavada com clorofórmio (3x). A solução aquosa foi arrefecida e levada para pH 7,5 com HG1. 0 precipitado foi filtrado, lavado com água e ace-117-

produzindo 4,10 g dum sólido acastanhado

Este material foi dissolvido em 40 ml de p-dioxa2 com hidróxido parcialmente conlavada 3x com éna presença de a solução aquosa residual depois foi acidificada para pH etilo, foi separada, extraída novamente com etilo, os extractos foram secos sobre sulfato concentrados para produzirem 4,7 g de um sólido Rf de CCF de 0,38 no Sistema C. Este matefoi

1,0

4,58 g de uma

Este matona e seco, claro, no e 20 ml de água, a solução foi levada para pH 11 com hidróxido de sódio e tratada com 5,85 ml de di-t-butildicarbonato. 0 pH foi mantido entre 9,5 e 11 de sódio e após 1,5 horas a mistura foi centrada, ter, acetato de acetato de de sódio e amarelo claro, rial foi dissolvido em 100 ml de metanol contendo 12 ml de ácido acético e foi agitado com 1,1 g de 10% de Rh/C durante 5,5 horas a 25°C e a 399,90 KPa (58 p.s.i.), de hidrogénio, filtrado e evaporado produzindo espuma amarela, Rf de CCF de 0,45 no Sistema C. terial foi dissolvido em éter e foi tratado com diazometano etéreo em excesso e depois com ácido acético para temperar o diazometano em excesso, foi concentrado e purificado sobre sílica (acetato de etilo-hexanos) produzindo 4,3 g dum sólido ceroso, Rf de CCF de 0,5 Sistema A), /~a7^ 20 essencialmente zero (CHCl^, (1:1 no

C=l,l).

B. 3(S)-Bocamino-4-ciclohexil-2(S)-azidobutirato de metilo racémico

Dois gramas do produto do Exemplo 4,16 g de trifenilfosfina de azido de benzeno foi base standard) foram dissolvidos em

51A, drazoico (a partir em benzeno/água, o dio e titulado com e 12,1 mmoles de ácido hisódio e ácido sulfúrico seco sobre sulfato de só60 ml de benzeno total a 0°C e foram tratados com 2,49 ml de dietilazodicarboxilato. A mistura foi agitada durante 30 minutos, foi filtrada, concentrada e purificada sobre sílica (éter-hexanos) produzindo 1,02 g de um sólido ceroso quase branco, Rf de CCF de 0,48 em 1:3 do Sistema A.

C. Cloridrato de 3(S)-amino-4-ciclohexil-2(S)-azidobutirato de metilo racémico produto do Exemplo 51B (430 mg) foi dissolvido em 15 ml de HC1 4N-dioxano, agitado durante 1 hora a 25°C e evaporado produzindo 355 mg de uma espuma quase branca, Rf de CCF de 0,22 no Sistema C.

D. 3(S)-(BocFenHis(im Boc) amino)-2(S)-azido-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura 1:1 com o isómero 3(R), 2(R)

De acordo com o processo de pre paraçao e purificação do produto do Exemplo IC, 340 mg do produto do Exemplo 51C e 710 mg de BocFenHis(ImBoc) produziram 620 mg das substâncias do título, Rf de CCF de 0,45 e 0,47 (5% de etanol-diclorometano) sob a forma de uma espuma incolor.

-119-

E. 3(S)-(BocFenHisamino)-2(S)-azido-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isómero 3(R), 2(R) produto do Exemplo 51D (380 mg) foi dissolvido em 10 ml de 5:1 de ácido acético-água, foi agitado durante 4 horas a 25°C, foi concentrado, co-evaporado primeiro com tolueno adicionado e depois com éter e seco produzindo 280 mg de uma espuma amarela clara.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 1,37 (s, 9H), 3,76 e 3,78 (s, ca. relaçao 1:1, 3H total), 6,80 (s, 1H), 7,53 e 7,55 (s, 1:1, 1H total).

EXEMPLO 52

3(S)-(BocFenHisamino)-2(S)-amino-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isomero 3(R), 2(R) (I, Z=Bocamino; M=fenilo; Q=H; R2=imidazol-4-ilmetilo;

X=cíclohexilo; W=CH-^NH₂; e Z¹=CO₂CH₃) produto do Exemplo 51D (275 mg) foi dissolvido em 20 ml de etanol contendo 0,5 ml de ácido acético e foi agitado com 100 mg de 10% de Pd/C durante 3 horas a 25°C e 344,74 KPa (p.s.i.) de hidrogénio, foi filtrado e concentrado produzindo 240 mg de um sólido castanho claro, CLAR de 5,64 e 7,01 minutos em 60/40 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

-120-

1Η RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta, delta ppm: 1,33 e 1,35 (s, 9H total), 3,72 (s, 3H total), 6,78 (s, 1H total).

EXEMPLO 53

3(S)-(BocFenHisamino)-2(R)-azido-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isomero 3(R), 2(S) (I, Z=Bocamino; M=fenilo; Q=H; R2=imidazol-4-ilmetilo;

X=ciclohexilo; W=CH 1|1 N₃; e Z^C^CH^)

A. 3(S)-Bocamino-4-ciclohexil-2(S)-benzoiloxibu- tirato de metilo racémico

Uma solução de 600 mg do produto do Exemplo 51A, 700 mg de ácido benzóico e 1,5 g de trifenilfosfina em 5 ml de THF foi tratada a 25°C com 0,9 ml de dietilazodicarboxilato. Após 1,5 horas, adicionaram -se 230 mg de ácido benzóico, 0,5 g de trifenilfosfina e 0,3 ml de dietilazodicarboxilato e 3 horas mais tarde a mistura foi arrefecida até 0°C durante 12 horas. A mistura foi purificada sobre sílica (etilacetato/hexanos) produzindo 509 mg de um sólido incolor, Rf de CCF de 0,41 em 1:3 no Sistema A.

-121-

3(S)-Bocamino-4-ciclohexil-2(S)-hidroxibutirato de metilo racémico produto do Exemplo 53A (550 mg) foi dissolvido em 5 ml de metanol e foi tratado a 25°C com 9 mg de carbonato de potássio anidro. Após 1,8 horas, a mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado sobre sílica produzindo 326 mg duma espuma oleosa, Rf de CCF de 0,18 em 1:3 no Sistema A.

C. 3(S)-Bocamino-4-ciclohexil-2(R)-azidobutirato de metilo racémico

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 51B, 320 mg do produto do Exemplo 53B produziram 280 mg de um sólido ceroso incolor, Rf de CCF de 0,50 em 1:3 no Sistema B.

D. Cloridrato de 3(S)-amino-4-ciclohexil-2(R)-azidobutirato de metilo racémico

De acordo com o processo de preparaçao do produto do Exemplo 51C, 260 mg do produto do Exemplo 53C produziram 198 mg de um sólido amarelo claro.

E. 3(S)-(BocFenHis(imBoc)-amino)-2(R)-azido-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isómero 3(R), 2(S)

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 1C, 192 mg do produto do Exemplo 53D e 398 mg de BocFenHis(imBoc) (E.U.A. 4.559.198) produziram 253 mg de uma espuma amarela clara, Rf de CCF de 0,5 (acetato de etilo).

F. 3(S)-(BocFenHisamino)-2(R)-azido-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isómero 3(R), 2(S) produto do Exemplo 53E (211 mg) foi agitado durante 4 horas a 25°C em 12 ml de 5:1 de ácido acético-água, foi concentrado e seco produzindo 210 mg de uma espuma amarela clara, Rf de CCF de 0,1 no Sistema C.

1H RMN, CDC1₃, 300 MHz, parcial, delta ppm: 1,30 e 1,34 (s, relação 3:2, 9H total), 3,76 e 3,81 (s, relaçao 3:2, 3H total), 6,67 e 6,78 (s, relaçao 3:2, 1H total), 7,52 e 7,55 (s, relação 2:3, 1H total).

EXEMPLO 54

3(S)-BocFenHis-amino)-2(R)-amino-4-ciclohexilbutirato de metilo sob a forma duma mistura com o isómero 3(R), 2(S) (I, Z=Bocamino; M=fenilo;Q=H; R₂=imidazol-4-ilmetilo; X=ci clohexilo; W=CHII|NH₂; e Z¹=CO₂CH₃) produto do Exemplo 53F (170 mg) foi dissolvido em 15 ml de etanol e 0,4 ml de ácido acético e foi agitado com 90 mg de 10% de Pd/C durante 1,5 horas a 25°C e 344,74 KPa (50 p.s.i.) de hidrogénio, foi filtrado, concentrado, co-evaporado com éter e tolueno e seco produzindo 170 mg de um sólido castanho claro, CLAR de 5,17 e 6,17 minutos (ca. 1:1) em 35/65 de acetonitrilo-fosfato pH 2,1.

1H RMN, DMSO-dg, 300 MHz, parcial, delta ppm: 1,29 (s, 9H), 3,56 e 3,61 (s, relaçao 3:2, 3H total), 6,80 e 7,50 (s, 1H ea).

EXEMPLO 55

Éster metílico de morfolinocarbonilFenLeunor-C-Sta(I, Z= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₂CH(CH₃)₂;

X=ciclohexilo ; W=CH I I | 0H; e Z^CO^Hp

124-

Α· Cloridrato de éster metilico de nor-C-Sta

Uma solução de 0,15 g de éster metilico de Boc-nor-C-Sta em 4 ml de HC1 4N/dioxano foi agitada à TA durante 1 hora. A reacçao foi concentrada in vacuo para produzir 0,15 g dum sólido branco. 0 material foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 3,65 (s, 3H), 4,17 (m, 1H), 6,47 (d, J=4Hz, 1H).

B. Éster metilico de morfolinocarbonilFenLeu

A uma solução de 0,30 g de morfolinocarbonilFen e 0,22 g de HCl-LeuOMe em 5 ml de Cf^C^ anidro adicionou-se sequencialmente 0,12 g de TEA, 0,18 g de HBT e 0,24 g de DCC. Após agitaçao à TA durante 24 horas, a solução foi filtrada através de Celite e lavada com 2 x 10 ml de hidróxido de sódio 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi cromatografado sobre Si0£ (2:1 de ET0Ac:Hex) para produzir 0,43 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 0,89 (d, J=7Hz, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,48 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 6,25 (d, J=7Hz, 1H).

C, MorfolinocarbonilFenLeu

A uma solução de 0,43 g de morfolinocarbonilFenLeuOMe em 10 ml de MeOH adicionou-se 0,1 g de ^2^θ3 ^{e a s}°l^u9^a0 resultante foi agitada à TA durante

I

horas. A mistura de reacçao foi concentrada In vacuo para um volume de 10 ml e foi acidificada com HC1 IN e foi extraída com 3 x 25 ml de CH₂C1₂. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados para produzirem ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,87 (2d, 6H), 4,45 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 5,36 (d, J=7Hz, 1H).

D. Éster metílico de morfolinocarbonilFenLeunor-

- C - S t a

Condensou-se morfolinocarbonilFenLeu (96 mg) com 80 mg de nor-C-StaOMe-HCl utilizando-se o processo DCC anteriormente descrito. 0 produto em bruto foi cromatográfado sobre Si0₂ (29:1 de CH₂C1₂:ETOH) para produzir 68 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,85 (2d, 6H), 3,72 (s, 3H), 4,28 (m, 1H), 4,41 (m, 2H).

EXEMPLO 56

Éster metílico de morfolinocarbonilFenMetnor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

W=CHIII OH; e Z¹=CO₂CH₃

A. Éster metílico de morfolinocarbonilFenMet

MorfolinocarbonilFen (0,30 g) foi ligado a 0,24 g de HCl-metioninaMe utilizando-se o processo DCC do Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatografado sobre Si0₂ (2:1, EtOAc:Hex) para produzir 0,36 g de dipeptido puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,05 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,57 (m, 2H).

B. MorfolinocarbonilFenMet

Éster metílico de morfolinocarbonilFenMet (0,36 g) foi saponificado utilizando-se o processo do Exemplo 55, produzindo 0,3 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 2,01 (s, 3H), 2,44 (m, 1H), 4,61 (m, 1H).

C, Éster metílico de morfolinocarbonilFenMetnor-

-C-Sta

MorfolinocarbonilFenMet (0,10 g) foi ligado a 0,080 g de nor-C-StaOMe-HCl (Exemplo 55) utilizando-se DCC (Exemplo 1). 0 produto em bruto foi cromatografado sobre SiOC₂ (29:1, CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 50 mg de produto em bruto e 32 mg de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,98 (s, 3H), 4,38 (m, 2H), 4,46 (m, 1H).

i

-127-

EXEMPLO 57

Éster metílico de morfolinocarbonílFenFennor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=benzilo; X= = ciclohexilo W=CH 11|OH; e Z¹=CO₂CH₃

A. Éster metílico de morfolinocarbonilFenFen

MorfolinocarbonilFen (0,30 g) foi condensado com 0,26 g de FeOMe-HCl utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 dipeptido em bruto foi cromatografado sobre SÍO2 (1:2 de ET0Ac:Hex) para produzir 0,37 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 3,65 (s, 3H), 4,49 (m, 1H), 4,78 (m, 1H).

B. MorfolinocarbonilFenFen

Éster metílico de morfolinocarbonilFenFen (0,37 g) foi saponificado como no Exemplo 55 para produzir 0,35 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,59 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 5,10 (d, J=8Hz, 1H).

C. Éster metílico de morfolinocarbonilFenFennor-

-C-Sta

Condensou-se morfolinocarbonil-

FenFen (0,10 g com 0,080 g de nor-C-StaOMe-HCl utilizando-se DCC como descrito no Exemplo 55. 0 produto em bruto foi cromatografado sobre Si0₂ (29:1 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 0,10 g de composto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,74 (s, 3Η), 4,26 (m, 1Η), 4,36 (m, 1H), 4,52 (m, 1H),

EXEMPLO 58

Éster metilico de morfolinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂;

X=ciclohexilo; W=CHHI 0Η; e Z¹=CO₂CH₃)

A. Éster metílico de morfolinocarbonilFen S-MeCis

MorfolinocarbonilFen (0,96 g) e S-MeCisOMe-HCl (0,55 g) foram ligados utilizando-se o reagente solúvel em água DEC, conjuntamente com TEA e HBT como no Exemplo 55. A mistura de reacção foi diluida com 100 ml de EtOAc, foi lavada com 2 x 35 ml de HCl 0,lN e 2 x 35 ml de NaOH 0,1. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada in vacuo. 0 produto em bruto (1,15 g) estava suficientemente puro para ser levado para a etapa seguinte. RMN, (300 MHz, CDC1₃) delta 2,00 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,65 (m, 1H).

-129-

B. MorfolinocarbonilFen S-MeCis i

I

I

Éster metílico de morfolinocar- !

bonilFen SMeCis (1,15 g) foi saponificado como no Exemplo 55, excepto que a reacçao foi inicialmente agitada a 0^o ;

durante 15 minutos e depois a TA. 0 produto em bruto (1,0 g) foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg), delta 2,03 (s, 3H), 4,63 (m, 1H), 4,77 (m, 1H).

C. Éster metílico de morfolinocarbonilFen S-MeCis- nor-Sta

MorfolinocarbonilFen S-MeCis (130 mg) foi ligado a nor-C-StaOMe-HCl (69 mg) utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 produto em bruto foi cromatografado sobre Si0₂ (19:1 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 58 mg do produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 2,06 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,40 (m, 2H).

ι

EXEMPLO 59

Éster metílico de morfolinocarbonilFen S-EtCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CHgCH₂SCH₂-;

X=ciclohexilo; W=CH|||0H; e Z^COgCHg

-130-

A. Éster metílico de morfolinocarbonilFen S-Et-

Cis

MorfolinocarbonilFen (0,20 g) foi ligado a S-EtCisOMe-HCl (0,15 g) utilizando-se DCC como descrito no Exemplo 55. Os compostos em bruto foram cromatografados sobre Si0₂ (3:1 de Et0Ac:Hex) para produzirem 0,20 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,16 (t, J=7Hz, 3H), 2,45 (q, J=7Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 4,64 (m, 2H).

B. MorfolinocarbonilFen S-EtCis

Éster metílico de morfolinocarbonilFen S-EtCis (0,20 g) foi saponificado como no Exemplo 55 para produzir 0,11 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,16 (t, J=7Hz, 3H), 2,50 (q, J=7Hz, 2H), 4,64 (m, 1H), 4,79 (m, 1H).

C. Éster metílico de morfolinocarbonilFen S-Et-

Cis η o r - C-Sta

MorfolinocarbonilFen S-EtCis (0,11 g) foi ligado a nor-C-StaOMe-HCl (75 mg) utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55, 0 composto em bruto foi purificado por cromatografia sobre SiO^ (29:1 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 0,10 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 2,21 (t, J=7Hz, 3H), 2,50 (m, 2H),

I

3,75 (s, 3H), 4,40 (m, 2H).

EXEMPLO 60

Éster metilico de morfolinocarbonilFen O-BSernor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; ;

X=ciclohexilo; W=CH(H0H; e Z^C^CH^)

A, Éster metilico de morfolinocarbonilFen 0-BSer

MorfolinocarbonilFen (0,31 g) foi ligado a O-BSerOMe-HCl (0,25 g) utilizando-se a reacçao DCC padrao descrita no Exemplo 55. 0 composto em bruto foi cromatografado sobre Si0₂ (1:3 de Et0Ac:Hex) para produzir 0,28 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 3,70 (s, 3H), 4,43 (m, 2H), 4,63 (m, 2H).

B. MorfolinocarbonilFen 0-BSer

Éster metilico de morfolinocarbonilFen 0-BSer (0,28 g) foi saponificado como descrito no Exemplo 55. 0 ácido em bruto (0,19 g) foi utilizado sem mais purificações. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,40 (m, 2H), 4,63 (m, 1H), 4,72 (m, 1H).

C. Éster metilico de morfolinocarbonilFen 0-BSernor-C-Sta

MorfolinocarbonilFen O-BSer (0,19 g) foi ligado a nor-C-StaOMe-HCl (0,14 g) utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi purificado por cromatografia sobre SÍO2 (29:1 de Cf^C^íEtOH) para produzir 0,11 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,73 (s, 3H), 4,40 (m, 2H), 4,45 (AB, 2H).

EXEMPLO 61

Éster metilico de morfolinocarbonilFen O-BThrnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=CH(CH₃)0CH₂C₆H₅; X=ciclohexilo; W=CHII|0H; Z¹=C0₂CH₃)

A. Éster metilico de morfolinocarbonilFen 0-BThr

MorfolinocarbonilFen (0,30 g) e OBThrOMe-HCl (0,35 g) foram ligados por meio de utilização do processo DCC (Exemplo 55). 0 material em brito (0,62 g) foi utilizado sem mais purificações. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,13 (d, J=6Hz, 3H), 3,63 (s, 3H), 4,38 (AB, 2H), 4,53 (m, 1H), 4,64 (m, 1H).

-133-

Β. Morfolínocarbonil OBThr

Éster metilico de morfolínocarbonil

Fen OBThr (0,62 g) foi saponificado como descrito no Exemplo 55, produzindo 0,41 g de ácido em bruto que foi utilizado sem mais purificações. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,17 (d, J=6Hz, 3H), 4,43 (AB, 2H), 4,62 (m, 1H), 4,70 (m, 1H).

C. Éster metilico de morfolinocarbonilFen OBThrnor-C-Sta

MorfolinocarbonilFen OBThr (99 mg) e nor-C-Sta-OMe-HCl (44 mg) foram ligados utilizando-se a reacçao DCC padrao (Exemplo 55). 0 material em bruto foi purificado por cromatografia (29:1 de :EtOH) para produzir 97 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,16 (d, J=6Hz, 3H), 3,76 (s, 3H), 4,30 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,46 (AB, 2H).

134-

EXEMPLO 62

Éster metilico de morfolinocarbonilFen Nvanor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H, X=ciclohexilo; W=CHÍHOH; e Z^CC^CH^)

A. Éster metilico de morfolinocarbonilFen Nva

MorfolinocarbonilFen (0,20 g) e NvaOMe-HCl (0,10 g) foram condensados utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatográfado sobre S1O2 (4:1 de EtOAc:Hex) para produzir 0,22 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,92 (t, J=7Hz, 3H), 3,65 (s, 3H), 4,42 (m, 1H), 4,54 (m, 1H).

B. MorfolinocarbonilFen Nva

Éster metilico de morfolinocarbonilFen Nva (0,22 g) foi saponificado pelo processo padrao (Exemplo 55), produzindo 0,17 g de ácido bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,89 (t, J=»7Hz, 3H), 4,46 (m, 1H), 4,62 (m, 1H).

C. fister metílico de morfolinocarbonilFenNvanor-

-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNva (0,10

g) e nor-C-StaOMe-HCl (0,075 g) foram ligados utilizando-se DCC como descrito no Exemplo 55. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia (29:1 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 0,12 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,97 (t, J=7Hz, 3H), 3,72 (m, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,53 (m, 1H).

EXEMPLO 63 n_-Propilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H, R₂=n-butilo; X= =ciclohexilo; W=CHIIl0H; e Z¹=CONH(CH₂)₂CH₃) * A. n-Propilamida de Boc nor-C~Sta

A uma solução de 100 mg de Boc-nor-C-Sta e 21 mg de n-propilamina em 5 ml de CH₂C1₂ seco adicionaram-se 54 mg de HBT e 70 mg de DEC, e a solução resultante foi agitada à TA durante 20 horas. A solução foi diluida com 200 ml de EtOAc, e foi lavada com 2X20 ml de H₂0, 2x20 ml de HC1 0,lN e 2x20 ml de NaOH 0,lN. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada in vacuo para produzir 142 mg de amida em bruto

que foi utilizada sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 0,91 (t, J=7Hz, 3H), 1,40 (s, 9H), 3,85 (m, 1H), 4,04 (d, J=3Hz, 1H).

B. Cloridrato de nor-C-Sta n-propilamida

Uma mistura de 139 mg de Boc-nor-C-StaNHnPr em 3 ml de HC1 4N em dioxano foi agitada à TA durante 3 horas. A solução foi concentrada in vacuo para produzir 96 mg de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 0,85 (t, J=7Hz, 3H), 3,06 (m, 2H), 4,03 (d, J=3Hz, 1H).

C. n-Propilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFen Nle (135 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaNHnPr (96 mg) utilizando o processo DEC descrito no Exemplo 58. 0 produto em bruto foi cromatografado sobre Si0₂ (9:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 113 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 0,90 (t, J=7Hz, 3H), 4,08 (d, J=7Hz, 1H), 4,32 (m, 2H), 4,80 (m, 1H).

137—

EXEMPLO 64 i-Propilamida de morfolinocarbonilFenNle nor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n.-butilo;

X=CH OH; e Z¹=CONHCH(CH₃)₂)

A. i-Propílamida de Boc nor-C-Sta

Isopropilamina (29 mg) foi ligada a Boc-nor-C-Sta (100 mg) utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatografado sobre Si0₂ (9:1 de GH₂C1₂) para produzir 73 mg de amida pura. RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,11 (d, J=5Hz, 3H), 1,12 (d, J=5Hz, 3H), 1,37 (s, 9H), 3,82 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 4,03 (m, 1H).

B. Cloridrato de i-propilamida de nor-C-Sta

Boc-nor-C-StaNHiPr (62 mg) foi desprotegido por agitaçao em 2 ml de HC1 4N-dioxano durante 3 horas. A solução foi concentrada in vacuo para 52 mg dum sólido branco, 0 sal de HC1 em bruto foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,10 (m, 6H), 3,92 (m, 1H), 3,98 (m, 1H).

-138«I

C. i-Propilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-

-C-S t a

MorfolinocarbonilFenNle (48 mg) foi ligado a HCl-nor-C-Sta NHiJPr (48 mg) utilizando o processo DCC descrito no Exemplo 55, 0 material em bruto foi cromatografado sobre Sit^ (19:1 de CI^C^jMeOH) para produzir 60 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,09 (d, J=6Hz, 6H), 4,00 (m, 1H), 4,03 (m, 3H), 4,33 (m, 2H).

EXEMPLO 65 i^-Butilamida de morfolinocarbonilFenNlenor ’C-Sta (I, 1 = =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=n,-butilo; X= =ciclohexilo; W=CH 1110H; e Z¹=CONHCH₂CH(CH₃)₂)

A. i-Butilamida de Boc nor-C-Sta

Isobotilamina (49 1) foi ligada a Boc-nor-C-Sta-NHiBu (100 mg) utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi purificado por cromatografia (9:1 de CH2C12:MeOH) para produzir 75 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 0,89 (d, J=6Hz, 6H), 1,39 (s, 9H), 3,83 (m, 1H), 4,03 (m, 1H).

-139-

B. Cloridrato de i-butilamida de nor-C-Sta

Boc-nor-C-StaNHiBu (173 mg) foi desprotegido como no Exemplo 64 para produzir 170 mg de sal em bruto que foi utilizado sem mais purificações. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,85 (d, J=6Hz, 6H), 2,93 (m, 2H), 4,03 (m, 1H).

C. i-Butilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-

-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (235 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaNHiBu (160 mg) utilizando-se o processo DCC (Exemplo 55). 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia (9:1 de CH2C12:MeOH) para produzir 152 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,87 (d, J=6Hz, 6H), 4,08 (d, J=3Hz, 1H), 4,32 (m, 2H).

EXEMPLO 66

N-metil-N-i.-propilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2⁼—“ -butilo; X=ciclohexilo; W=CHi11 OH; e Z¹=CON(CH₃)CH(CH₃)₂)

A.

N-metilN-i-propilamida de Boc nor-C-Sta

N-metil-N-isopropilamina (44 mg) foi ligada a Boc-nor-Sta (120 mg) utilizando-se o processo DCC (Exemplo 55). 0 produto em bruto foi cromatografado (39:1 de Cl^C^íMeOH) para produzir 56 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,40 (s, 9H), 2,89 (s, 3H), 4,74 (m, 1H).

B. Cloridrato de N-metil-N-i-propilamida de norC-Sta

Boc-nor-C-StaN(Me)iPr (56 mg) foi desprotegido como no Exemplo 64 para produzir 52 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMS0-d₆) delta (3,00 (s, 3H), 4,30 (s, 1H).

C. N-metil-N-i-propilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (73 mg) foi ligado a HCl-nor-C-Sta(Me)iPr (52 mg) utilizando o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi purificado por cromatografia (19:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 99 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 2,84 (s, 3H), 4,12 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,53 (m, 1H).

-141-

EXEMPLO 67

N-metil-N-_i-butilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; ”

-butilo; X=ciclohexilo; W=CH|| I OH; e Z¹=C0N(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)

A. N-i-Butilamida de N-metilo de Boc-nor-C-Sta

N-Metil-N-isobutilamina (56 mg) foi ligado a Boc-nor-C-Sta (128 mg), utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatografado (9:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 130 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,38 (s, 9H), 3,03 (s, 3H), 4,28 (m, 1H).

B. Cloridrato de N-metil-N-i-butilamida de nor-

- C - S t a

Boc-nor-C-StaN(Me)iBu (123 mg) foi desprotegido como descrito no Exemplo 55 para produzir 118 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 3,67 (s, 3H), 4,54 (m, 1H), 4,61 (m, 1H).

-142-

i

C. N-Metil-N-i-butilamida de morfolinocarbonil-

FenNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (173 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaN(Me)iBu (118 mg) utilizando-se o processo DCC descrito no Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatográfado (19:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 184 mg de material puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 3,04 (s, 3H), 4,18 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,57 (m, 1H).

EXEMPLO 68 ja-Pentilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=ii-butilo; X=ciclohexilo; W=CH 111 OH; e Z¹=C0NH(CH₂)₄CH₃

A. n-Pentilamida de Boc-nor-C-Sta

N-Pentilamina (29 mg) foi ligada a Boc-C-Sta (100 mg) utilizando-se o processo DEC descrito no Exemplo 63. 0 material em bruto (128 mg) foi utilizado sem purificação adicionai. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,41 (s, 9H), 3,25 (m, 2H), 3,86 (m, 1H), 4,05 (m, 1H).

Β. Cloridrato de n-pentilamida de nor-C-Sta

Boc-nor-C-StaNHnPn (128 mg) foi desprotegido como no Exemplo 63 para produzir 108 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 3,09 (m, 2H), 4,00 (d, J= =4Hz, 1H).

C. n-Pentilamida de morfolinocarbonilFenNlenor- C - S t a

MorfolinocarbonilFenNle (138 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaNHnPn (108 mg) utilizando-se o processo DEC descrito no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 140 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,08 (m, 1H), 4,32 (m, 2H), 4,74 (m, 1H).

EXEMPLO 69

N, N-Bisetilenooxiamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n_-butilo; X=ciclohexilo; W=CH|I I 0H; e Z¹=C0N(CH₂CH₂)₂0)

-144-

Α. Ν,N-bisetilenooxiamida de Boc-nor-Sta

Morfilina (43 mg) foi ligada a

Boc-nor-C-Sta (100 mg) utilizando-se o processo DCC padrao (Exemplo 55). 0 material em bruto foi cromatografado (4:1 de EtOAc:Hex) para produzir 134 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,36 (s, 9H), 4,06 (d, J-5Hz, 1H), 4,22 (br, 1H).

B, Cloridrato de N,Ν-bisetilenooxiamida de nor-

-C-Sta

Boc-nor-C-StaMr (122 mg) foi desprotegido pelo processo padrao (Exemplo 63) para produzir 125 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,34 (d, J=5Hz, 1H).

C. N,N-bisetilenooxiamida de morfolinocarbonil-

F e η N1enor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (142 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaMr (101 mg) utilizando-se o processo DCC padrao (Exemplo 55). 0 material em bruto foi purificado por cromatografia (19:1 de CH2C12:Et0H) para produzir 72 mg de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,16 (m, 1H), 4,25 (br, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,97 (m, 1H).

145EXEMPLO 70

N,N-bisetileno-N’-metilaza amida de morfolinoFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂ = »=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CHIH0H; e zl=CON(CH₂CH₂)₂N-CH₃)

A. N,N-Bisetileno-N'-metilaza amida de Bocnor-C-

- S t a

1-Metilpiperazina (50 g) foi ligado a Boc-nor-C-Sta (100 mg), utilizando-se a reacçao DCC padrao (Exemplo 55). 0 material em bruto foi cromato- { grafado (9:1 de CH₂Cl₂:Et0H) para produzir 118 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCip delta 1,36 (s, 9H), 2,30 (s, 3H), 3,96 (m, 1H), 4,24 (s, 1H).

) j ί

I ί

B. Cloridrato de N,N-bisetileno-N*-metilaza amida de nor-C-Sta

Boc-nor-C-StaMePip (118 mg) foi desprotegido por utilização das condiçoes padrao (Exemplo 63) para produzir 113 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 3,48 (s, 3H), 4,22 (m, 1H), 4,39 (m, 2H).

146-

C. N,N-Bisetileno-N’-metilaza amida de morfolinocarbonilF enNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (133 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaMePip (105 mg) por utilização da reacçao DCC padrao (Exemplo 55). 0 material em bruto foi cromatografado (9:1 de CE^C^iEtOH) para produzir 110 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,33 (s, 3H), 4,17 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 4,52 (m, 1H).

EXEMPLO 71

Éster jl-propílico de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q—H; R2=n-butilo; X= =ciclohexilo; W=CH|II OH; e Z^C^CHÍCH^^)

A. Cloridrato de éster i-propílico de nor-C-Sta

Uma solução de 100 mg de Boc-nor -C-Sta em 2 ml de isopropanol anidro foi saturada com HC1 anidro e a solução resultante foi agitada a TA durante a noite. A mistura de reacçao foi concentrada in vacuo para produzir 98 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 1,20 (d, J=6Hz, 6H), 3,28 (m, 1H), 4,05 (d, J=5Hz, 1H), 4,92 (m, 1H).

-147-

Β. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (142 mg) foi ligado a HCl-nor-C-StaOiPr (92 mg) por utilização da reacçao DCC padrao (Exemplo 55), 0 material em bruto foi cromatografado (9:1 de CH^C^sEtOH) para produzir 60 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,24 (d, J=7Hz, 6H), 4,06 (br, 1H), 4,19 (m, 1H), 4,43 (m, 2H), 5,00 (m, 1H).

I

EXEMPLO 72 |

Éster _i-propilico de morfolinocarbonilFenO-MeSernor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

X=ciclohexilo; W=CH111 0H; Z^X=C0₂CH(CH₃)₂)

R₂=CH₃OCH₂-;

A. Éster metilico de morfolinocarbonilFenOMeSer

MorfolinocarbonilFen (0,5 g) foi ligado a DL-0-metilserina0Me (0,34 g) por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto (0,37 g) foi utilizado sem purificação adicional. RMN (um isómero) (300 MHz, CDCip delta 3,24 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 4,65 (m, 1H).

Β. MorfolinocarbonilFenO-MeSer

MorfolinocarbonilFenOMSerOMe (0,37 g) foi saponificado como descrito no Exemplo 55 para produzir 0,16 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (um isómero) (300 MHz, CDC1₃) delta 3,18 (s, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,73 (m, 1H).

C. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFenO-MeSernor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenOMeSer (0,15 g) foi ligado a HCl-nor-C-StaOiPr (0,10 g) utilizando-se a reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (29:1 de C^C^^tOH) para produzir 43 mg de produto puro e 36 mg de epímero de serina. RMN (isómero maior) (300 MHz, CDC1₃) delta 3,14 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,45 (m, 2H), 4,96 (m, 2H).

-149-

EXEMPLO 73

Éster i^-propilico de morfolinocarbonilFenO-EtSernor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃CH₂OCH₂-;

X=ciclohexilo; W=CH OH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. BocO-EtSer

A uma solução de 0,94 g de BocSer em 66 ml de THF adicionou-se uma solução de 1,47 g de NaOMe em 2,6 ml de MeOH, seguida por 11,7 g de EtI. Após 15 minutos, adicionaram-se mais NaOMe (0,49 g) e EtI (2 ml) e a reacçao foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Adicionaram-se mais NaOMe e EtI e a reacçao foi agitada durante mais 6 horas. A mistura foi concentrada in vacuo, foi dissolvida em 25 ml de H₂0 e foi lavada com 2x25 ml de éter. A fase aquosa foi acidificada com HC1 concentrado e foi extraída com 4x25 ml de CH₂C1₂. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados in vacuo para 0,34 g de produto em bruto que foi mantido. RMN (300 MHz, CDClg), delta 1,19 (t, J=7Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 3,53 (q, J=7Hz, 2H), 4,43 (m, 1H).

B. Cloridrato de éster metílico de 0-EtSer

Uma solução de 0,51 g de BocOEtSer em 25 ml de MeOH anidro foi saturada com HC1 anidro e foi

agitada à TA durante 18 horas. A solução foi concentrada in vacuo e o residuo sólido foi recristalizado (EtOH/éter) para produzir 0,31 g de sal puro. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,10 (t, J=8Hz, 3H), 3,48 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,28 (m, 1H).

C. Éster metílico de morfolinocarbonilO-EtSer

MorfolinocarbonilFen (0,36 g) foi ligado a HCl-OEtSerOMe (0,25 g) por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CHgClgxEtOH) para produzir 0,22 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,10 (t, J=7Hz, 3H), 3,41 (q, J=7Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 4,62 (m, 2H).

D. MorfolinocarbonilFenO-EtSer

MorfolinocarbonilFenOEtSerOMe (0,22 g) foi saponificado como descrito no Exemplo 55 para produzir 0,15 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,12 (2t, 3H), 4,62 (m, 1H), 4,72 (m, 1H).

ι

E. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFenO-

-EtSernor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenOEtSer (75 mg)

foi ligado a HCl-nor-C-StaOiPr (54 mg) por utilização de reacção DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH^C^EtOH) para produzir 50 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,12 (t, J=7Hz, 3H), 3,44 (q, J=7Hz, 2H), 4,30 (m, 1H), 4,43 (m, 2H), 5,04 (m, 1H).

EXEMPLO 74

Éster i.-propilico de morfolinocarbonilFentetametilenoGlinor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M= fenilo; Q=H; R₂=-(CH₂)₄)-; X=ciclohexilo; W=CHII| 0H; Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. Cloridrato de éster metilico de tetrametilenoglicina

Uma solução de 2,5 g de alfa-tetrametilenoGli em 30 ml de MeOH foi saturada com HC1 anidro e agitada à TA durante 60 horas. A solução foi concentrada in vacuo e o residuo foi recristalizado a partir de éter/etanol para produzir 2,4 g de produto puro. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 3,77 (s, 3H).

B. Éster metilico de morfolinocarbonilFenTMGli

MorfolinocarbonilFen (0,50 g) foi ligado a HCl-TMGliOMe (0,36 g) por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto (0,48

g) foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz,

CDC1₃) delta 3,67 (s, 3H), 4,57 (m, 2H), 5,51 (d, J=6Hz,

1H).

C. MorfolinocarbonilFenTMGli

MorfolinocarbonilFenTMGliOMe (0,48 g) foi saponificado da maneira descrita no Exemplo 55 para produzir 0,43 g de ácido bruto que foi levado para a fase seguinte sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 4,39 (m, 2H), 6,55 (d, J=8Hz, 1H).

D. Éster i-propílico de morfolinocarbonilFenTMGlinor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenTMGli (0,11 g) foi ligado a HCl-nor-C-StaOiPr (0,10 g) por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (3:1 de ET0Ac:Hex) para produzir 70 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,21 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,98 (m, 2H).

EXEMPLO 75

Éster i.-propílica de morfolinocarbonilFenPGlinor-C-Sta (I, Z=mor£olinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; ^2^^3(^2^4^-5 X=ciclohexilo; W=CHI|iOH,· e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A, Éster etílico de PGli

Uma solução de 10 g de GliOET-benzofenona imina, 8 g de iodopentano e 14 g de nBn^NH-HSO^ em 150 ml de CH₂C1₂ e 33 ml de NaOH a 10% foi agitada à TA durante 16 horas. A fase orgânica foi separada, seca sobre MgSO^, filtrada e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi dissolvido em 50 ml de THF e 50 ml de HC1 0,lN e foi agitado à TA durante 24 horas. A mistura foi concentrada numa solução aquosa e foi lavada com 3 x 50 ml de éter. A fase aquosa foi tornada básica e extraída com 3 x 50 ml de CH₂C1₂. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados. 0 resíduo foi cromatografado (1:1 de EtOAc:hex) para produzir 0,51 g de produto puro. 0 sal de HC1 correspondente foi preparado por tratamento da amina anterior com HC1 anidro em éter. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,05 (t, J=7Hz, 3H), 1,77 (m, 2H), 3,97 (m, 1H), 4,20 (m, 2H).

Β. Éster metilico de morfolinocarbonilFenPGli

MorfolinocarbonilFen (0,40 g) foi ligado a HCl-PGliOEt (0,33 g) por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (1:3 de EtOAc:Hex) para produzir0,40 g de produto sob a forma duma mistura de diastereomeros no PGli.

RMN (300 MHz, CDCip delta 4,13 (m, 2H) , 4,42 (m, 1H), 4,57 (m, 1H).

C. MorfolinocarbonilFenGli

MorfolinocarbonilFenPGliOEt foi saponificado da maneira descrita no Exemplo 55 para produzir 0,33 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,43 (m, 2H), 4,72 (m, 1H), 4,93 (m, 1H).

D. Éster i-propílico de morfolinocarbonilFenPGlinor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenGli (0,16

g) foi ligado a HCl-nor-C-StaOiPr (0,10 g) por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (1:1 de Et0Ac:Hex) para produzir 0,11 g do produto-L desejado e 0,078 g do D-isómero. RMN (300 MHz, CDC1 ) delta 2,27 (d, J=7Hz, 6H), 4,25 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 5,03 (m, 2H).

EXEMPLO 76

Éster i_-propilico de morfolinocarbonilFenO-MeHSenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2=CH₃0(CH2)2 X=ciclohexilo; W=CH|(I OH; e Z^=C02CH(CH₃)2)

A. Boc Ometilhomoserina

Boc-homoserina (0,51 g) foi metilado da maneira descrita para Boc-serina do Exmplo 73. Isto produziu 0,45 g de produto em bruto que foi passado para a fase seguinte sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,40 (s, 9H), 3,16 (s, 3H), 3,90 (m, 2H).

B. Éster i-propílico de BocO-MeHSenor-C-Sta

BocOMHse (0,45 g) foi ligado a nor-C-StaOiPr (0,5 g) por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 58, excepto que nao se utilizou TEA. 0 material em bruto foi cromatografado (1:1 de Et0Ac:Hex) para produzir 0,52 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,21 (d, J=7Hz, 6H), 1,38 (s, 9H), 3,27 (s, 3H), 4,19 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,96 (m, 1H).

C. Éster i-propílico de O-MeHSenor-C-Sta

BocOMeHse-nor-C-StaOiPr (0,52

g) foi desprotegido por utilização das condiçoes padrao de HCl/dioxano descritas no Exemplo 63. Isto produziu 0,66 g de produto em bruto que foi utilizado sem mais purificações. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 1,18 (d, J=7Hz, 6H), 3,24 (s, 3H), 4,18 (m, 1H), 4,80 (m, 1H),

D. Éster ji-propílico de morfolinocarbonilFenO-MeHSenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenO (0,19 g) foi ligado a HCl-OMeHse-nor-C-StaOiPr (0,20 g) por utilização do processo DEC padrao descrito no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatográfado (29:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 0,31 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,23 (d, J=7Hz, 3H), 1,25 (d, J=7Hz, 3H), 3,19 (s, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,42 (m, 2H), 5,04 (m, 1H).

EXEMPLO 77

Éster i.-propílico de morfolinocarbonilFenHsenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=H0(CH₂)₂-;

X=ciclohexilo; W=CH|H0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

Á, BocO-benzilhomoserina

BocHse (0,51 g) foi benzilado da maneira descrita para Ser no Exemplo 73. Isto produziu 0,42 g de produto puro que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,38 (s, 9H), 4,10 (m, 1H), 4,45 (AB, 2H).

B. Éster i-propílico de BocO-benzilhomoserinonor-

-C-Sta

BocO-benzilHse (0,40 g) foi ligado a nor-C-StaOiPr (0,50 g) por utilização da reacçao DEC descrita no Exemplo 76. 0 produto em bruto foi cromatografado (1:1 de Et0Ac:Hex) para produzir 0,53 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCip delta 1,22 (d, J=7Hz, 6H), 1,40 (s, 9H), 4,10 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,45 (m, 2H), 4,96 (m, 1H).

I i

( I

C. Cloridrato de éster i-propílico de 0-benzilhomoserino nor-C-Sta

BocO-benzilHse-nor-C-StaOiPr (0,53 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 76 para produzir 0,54 g de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J=7Hz, 3H), 1,18 (d, J=Hz, 3H), 4,21 (m, 1H), 4,47 (m, 2H), 4,80 (m, 1H).

D. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFenO-benzilhomoserinon or-C-Sta

MorfolinocarbonilFen (0,53 g) foi ligado a HCl-O-benzilHse-nor-C-StaOiPr (0,54 g ) por utilização da reacçao DEC descrita no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CI^C^ÍMeOH) para produzir 0,40 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,24 (d, J=7Hz, 3H), 1,27 (d, J=7Hz, 3H), 4,28 (m, 1H), 4,39 (AB, 2H), 4,48 (m, 2H), 5,04 (m, 1H).

E. Éster ji-propílico de morfolinocarbonilFenHsenor-C-Sta

Uma mistura de 0,39 g de morfolinocarbonilFenO-benzil-Hse-nor-C-StaOiPr e 1,0 g de 10% de Pd/C em 10 ml de MeOH foi hidrogenada a 344,74 KPa (50 p.s.i.) durante 7 horas. A mistura foi filtrada e concentrada in vacuo e o resíduo foi cromatografado (19:1 de CH2C12:MeOH) para produzir 91 mg de produto puro, conjuntamente com algum material de partida que nao reagiu. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J=7Hz, 3H), 1,19 (d, J=7Hz, 3H), 4,29 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,83 (m, 1H).

I

-159-

	EXEMPLO 78
Éster jL-propílico	de morfolinocarbonilFenS-MeCis-óxido-

nor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

R₂=CH₃SOCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHIIIOH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

Uma solução de 84 mg de morfolinocarbonilFenSMeCis-nor-StaOiPr (Exemplo 17) e de 24 mg de m-CPBA em 10 ml de CH₂C1₂ foi agitada a 0°C durante 30 minutos. A solução foi diluída com 30 ml de EtOAc e foi lavada 2x com 15 ml de Na₂S0₃ a 10% e lx com 15 ml de NaOH Ο,ΙΝ. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada in vacuo e o resíduo foi cromatografado (17:3 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 40 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,29 (d, J=7Hz, 6H), 2,78 (s, 3H), 4,37 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).

EXEMPLO 79

Éster jL-propílico de morfolinocarbonilFenS-MeCisdióxidonor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

R₂=CH₃S0₂CH-; X=ciclohexilo; W=CH11 | 0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

Uma solução de 20 mg de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-StaOiPr (Exemplo 17) e de 16 mg de m-CPBA em 3 ml de CH₂C1₂ foi agitada a 0° durante

minutos. A reacçao foi tratada da mesma maneira que a do Exemplo 78 e o resíduo foi cromatografado (19:1 de CB^C^ÍEtOH) para produzir 13 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,28 (d, J=7Hz, 3H), 1,30 (d, J=7Hz, 3H), 3,00 (s, 3H), 4,26 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 5,06 (m, 1H).

EXEMPLO 80

Éster .i-propílico de morfolinocarbonilFenSernor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2HOCH2-; X=ciclohexilo; W=CH| 110H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. MorfolinocarbonilFenO-Succinimida

A uma solução de 25 g de morfolinocarbonilFen e 15,5 g de N-hidroxissuccinimida em 800 ml de CH2CI2 adicionaram-se 19 g de DEC. Após agitação durante 20 horas ã TA, a solução foi lavada 2x com 200 ml de NaHC0₃ saturado, foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada in vacuo. Isto produziu 29 g de produto em bruto sob a forma dum sólido branco. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 2,78 (m, 4H), 4,81 (d, J=8Hz, 1H), 5,09 (m, 1H).

Β. MorfolinocarbonilFenSer

Uma solução de 0,50 g de morfolinocarbonilFenOSue em 5 ml de THF foi adicionada a uma solução de 0,30 g de Ser em 10 ml de NaHCO^ saturado, e a mistura resultante foi agitada durante 15 minutos. A reacçao foi diluída com 30 ml de NaOH 0,lN e foi lavada 3x com 40 ml de C^C^. A fase aquosa foi adicionada com HC1 concentrada e foi extraído 6x com 75 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados para produzirem 0,40 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,66 (m, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).

C. Éster i-propílico de morfolinocarbonilFenSernor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenSer (0,39

g) foi ligado a nor-C-StaOiPr (o,33 g) por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (24:1 de C^C^íEtOH) para produzir 0,23 g de produto puro. RMN (300 MHZ, CDC1₃) delta 1,13 (d, J=7Hz, 3H), 1,15 (d, J=7Hz, 3H), 3,94 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 4,80 (m, 1H).

-162-

Éster _i-propílico de morfolinocarbonilFenAlanor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; hexilo; W=CHÍl|0H; e Z¹=CO₂CH(GH₃)₂)

R₂=CH₃;

X=ci.cloΑ. MorfolinoearbonilFenAla

Alanina (0,42 g) e morfolinocarbonilFenOSus (0,50 g) foram deixados reagir da maneira descrita no Exemplo 80 para produzirem 0,15 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta (d, J=7Hz, 3H), 4,20 (m, 1H), 4,32 (m, 1H).

B. Éster i-propílico de morfolinocarbonilFenAlanor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenAla (0,15

g) foi ligado a nor-C-StaOiPr (0,13 g) por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (24:1 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 0,18 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,26 (d, J=7Hz, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,96 (m, 1H),

-163-

EXEMPLO 82

Êsetr jL-propílico de morfolinocarbonilFenGlnnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; ) 2^ΟΝΗ₂ ;

X=ciclohexilo; W=CH|||0H; e Z^Ct^CHCCH^^)

A. MorfolinoacrbonilFenGln

Glutamina (0,30 g) foi deixado reagir com morfolinocarbonilFenOSuc (0,50 g) da maneira descrita no Exemplo 80, para produzir 0,37 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 3,43 (m, 4H), 4,15 (m, 1H), 4,31 (m, 1H).

B. Éster i-propílico de morfolinocarbonilFenGLnnor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenGln (0,37

g) foi ligado a nor-C-StaOiPr (0,24 g) por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatográfado (9:1 de CH2C12:EtOH) para produzir 0,18 g de produto puro. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J=7Hz, 6H), 3,94 (m, 1H), 4,8 (m, 2H), 4,25 (m, 1H),

4,80 (m, 1H).

EXEMPLO 83

Éster 3-metil-2-propanólico de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n-butilo; W=CH111 OH; Z¹=CO₂CH(CH₃)CH(CH₃)₂)

A. Cloridrato de éster 3-metil-2-propanólico de nor-C-Sta

Uma solução de 100 mg de Boc-nor-C-Sta em 5 ml de 3-metil-2-propanol foi saturada com HC1 anidro e foi agitada durante a noite. A solução foi concen trada in vacuo para produzir 89 mg de produto em bruto que foi levado para a fase seguinte sem purificação adicio nal. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J=7Hz, 3H), 4,10 (m, 1H), 4,70 (m, 1H).

B. Éster 3-metil-2-propanol de morfolinocarbonilFenN1enor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (113 mg, Exemplo 63) foi ligado a HCl-nor-C-Sta, éster 3-metil-2-propanólico (89 mg), por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 produto em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 79 mg de produto puro sob a forma duma mistura de diastereómeros no éster metilo. RMN (300 MHz, CDCip delta 1,13 (d, J=6Hz, 3H), 4,15 (m, 1H), 4,71 (m, 1H).

-165-

EXEMPLO 84

Êsetr i-butílico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂-;

X=ciclohexilo; W=CH111 OH; e Z¹=CH₂CH(CH₃)₂)

A. Éster i-butílico de nor-fenilSta

Uma solução de N-Boc-2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-fenilbutanitrilo (1,01 g) em 40 ml de álcool isobutílico foi saturada com HCl anidro e foi agitada durante 48 horas a TA. A solução foi concentrada e o resíduo foi diluido com 100 ml de HCl 0,lN. Após agitaçao durante 15 minutos, a solução foi lavada 2x com 100 ml de éter. A fase aquosa foi tornada básica e foi extraída 2x com 100 ml de EtOAc, Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados in vacuo para produzirem 0,43 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg) delta 0,93 (d, J=6Hz, 3H), 3,34 (m, 1H), 3,97 (m, 2H), 4,07 (d, J=3Hz, 1H).

B· Éster i-butílico de nor-C-Sta

Uma mistura de 95 mg de nor-PhStaOiBu e 190 mg de 10% de Rh/C em 5 ml de meOH foi hidrogenada a 344,74 KPa (50 p.s.i.) durante 36 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e foi concentrada.

— 166—

resíduo foi dissolvido em 50 ml de HC1 O,1N e foi lavado 2x com 50 ml de éter. A fase aquosa foi tornada básica e foi extraída 2x com 50 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados para produzirem 74 mg de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg) delta 0,92 (d, J=6Hz, 3H), 4,03 (m, 2H).

C. Éster i-butílico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenSMeCis (113 mg, Exemplo 58) foi ligado a nor-C-StaOiBu (70 mg) por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CHgCl^MeOH) para produzir 127 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 0,95 (d, J=6Hz, 3H), 2,13 (s, 3H), 3,95 (m, 2H), 4,43 (m, 2H).

EXEMPLO 85

Éster tn-butílico de morfolinocarbonilFenSMeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CHgSCH₂-;

X=ciclohexilo; W=CH(|| 0H; Z¹=CO₂C(CHg)g) —167—

I i

l

A. Éster t-butílico de nor-fenilSta processo para a preparaçao de norPhStaOiBu (exemplo 83) foi seguido para 3,0 g de nitrilo em 200 ml de t-butanol. Isto produziu 184 mg de produ- ' i to em bruto após tratamento, o qual foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg) delta (s, 9H0, 3,64 (m, 1H), 3,83 (d, J=3Hz, 1H).

B. Éster t-butílico de nor-C-Sta ί

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ |

Hidrogenou-se nor-FenStaOtBu (75 mg) da maneira descrita no Exemplo 83 para produzir 64 mg de produto em bruto para tratamento. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,32 (s, 9H), 3,47 (m, 1H), 3,18 (br, 1H).

C. Éster t-butílico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenSMeCis (97 mg, Exemplo 58) foi ligado a 60 mg de nor-C-StaOtBu por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 50 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,35 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 3,98 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,57 (m, 2H).

168-

N-Metilamida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; X=ci-^í clohexilo; W=CH|1|OH; e Z¹=CONHCH₃

A. N-metil amida de Boc-nor-C-Sta

Boc-nor-C-Sta (0,25 g) foi ligado a 57 mg de metilamina-HCl por utilização da reacçao DCC padrao do Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatografado (2:1 de EtOAc:Hex) para produzir 0,16 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCip delta 1,41 (s, 9H), 2,82 (d, J=5Hz, 3H), 3,85 (m, 1H).

B. N-metil amida de nor-C-Sta

Boc-nor-C-StaNHMe (0,16 g) foi desprotegido por utilização de HC1 em dioxano da maneira descrita no Exemplo 63 para produzir 0,13 g de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,62 (s, 3H), 3,97 (d, J=4Hz, 1H).

C. N-metilamida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenSMeCis (98 mg, Exemplo 58) foi ligado a 73 mg de HCl-nor-C-StaNHMe por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 58. , material em bruto foi cromatográfado (19:1 de C^C^:

:EtOH) para produzir 52 mg de produto sob a forma duma mistura dos epímeros SMCis. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,02 (s, 3H), 2,79 (d, J=5Hz, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,57 (m, 2H).

i

EXEMPLO 87

Éster jL-propilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-Ph-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R2= =CH₃SCH₂; X=fenilo; W=CHII | OH; Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Éster i-propilico de nor-fenil-Sta

Nor-Ph-StaOiPr foi preparado a partir de 118 mg do nitrilo duma maneira análoga à do éster isobutílico (Exemplo 84). Isto produziu 89 mg de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCip delta 1,26 (d, J=7Hz, 6H), 3,30 (m, 1H), 4,01 (d, J=2Hz, 1H), 5,10 (m, 1H).

-170-

Β. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-fenil-Sta

MorfolinocarbonilFenSMeCis (0,96 g, Exemplo 58) foi ligado a 0,55 g de nor-PhStaOiPr por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 0,91 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,18 (d, J=7Hz, 3H), 1,21 (d, J=7Hz, 3H), 2,00 (s, 3H), 4,41 (m, 2H), 4,49 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).

EXEMPLO 88

Éster i.-propilico de morfolinocarbonilO-MeTirNlenor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=j)-metoxif enilo; Q=H; R₂ = =n-butilo; X=ciclohexilo; W=CH111 0H; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. Éster metilico de BocO-MeTir

Uma solução de 7,3 g de BocTir em 100 ml de MeOH foi tratada com um granda excesso de diazometano em 250 ml de éter. Adicionou-se mais diazometano ao fim de 24 e 48 horas. Ao fim dum total de 72 horas, a reacçao foi temperada com HOAc, concentrada, diluida com 100 ml de EtOAc e lavada 2x com 50 ml de NaHCO^ saturado. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada . 0 residuo foi cromatografado (9:1 de Hex:EtOAc) para produzir 6,4 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,42 (s, 9H), 3,69 (s, 3H), 3,76 (m, 3H), 4,51 (m, 1H).

B. Cloridrato de éster metílico de 0-MeTir

BocO-MeTirOMe (6,4 g) foi desprotegido por utilização de HC1 em dioxano da maneira descrita no Exemplo 63. Isto produziu 5,1 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMS0-d₆) delta 3,76 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,19 (m, 1H).

C. Isocianato de éster metílico de 0-MeTir

Borbulhou-se fosgénio numa suspensão de 5,1 g de HCl-O-MeTirOMe em 150 ml de tolueno, enquanto a temperatura subia lentamente até ao refluxo. Depois de todo o meterial se ter dissolvido, a solução foi arrefecida e concentrada in vacuo para produzir 7,0 g de isocianato em bruto. RMN (300 MHz, CDClg) delta 3,85 (s, 6H), 4,27 (m, 1H), 6,89 (d, J=8Hz, 2H), 7,14 (d, J=8Hz, 2H).

D. Éster metílico de morfolinocarbonilO-MeTir

A uma solução de 5,0 g de 0-MeTi.r

OMe-isocianato em 150 ml de CI^C^ a 0°C adicionaram-se 2,4 g de morfolina. Após agitaçao durante 15 minutos, a solução foi concentrada e o residuo foi cromatografado (EtOAc) para produzir 3,6 g de produto puro, RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,66 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,67 (m, 1H), 4,91 (d, J=8Hz, 1H).

E. MorfolinocarbonilO-MeTir

MorfolinocarbonilO-MeTirOMe (3,6

g) foi saponificado da maneira descrita no Exemplo 55 para produzir 3,0 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,78 (s, 3H), 4,61 (m, III), 6,82 (d, J=8Hz, 2H), 7,08 (d, J=8Hz, 2H).

F. Ester benzilico de morfolinocarbonilO-MeTirNle

MorfolinocarbonilO-MeTir (0,50 g) foi ligado a 0,42 g de HCl-NleOBn por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de ΟΗ2Ο1₃:ΜθΟΗ) para produzir 0,77 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,76 (s, 3H), 4,50 (m, 2H), 5,13).

G. MorfolinocarbonilO-MeTirNle

Uma mistura de 0,77 g de morfoli-

nocarbonilO-MeTirNleOBn e 0,38 g de 10% de Pd sobre carvao em 60 ml de EtOH foi hidrogenado a 344,74 kPa (50 p.s.i.) durante 3 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e concentrada in vacuo para produzir 0,63 g de ácido bruto RMN (300 MHz, CDCip delta 3,72 (s, 3H), 4,44 (m, 1H), 4,63 (m, 1H).

H. Ester i-propilico de morfolinocarbonilO-MeTirNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilO-MeTirNle (74 mg) foi ligado a 51 mg de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DCC padrao descrita no Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de C^C^íMeOH) para produzir 98 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 3,78 (s, 3H), 4,21 (m, 1H), 4,42 (m, 2H), 5,03 (m, 1H).

EXEMPLO 89

Éster _i-propílico de morfolinocarbonilO-MeTirS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=_q-metoxif enilo;

Q=H; R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH111 OH; e Z^CO^HCCH^

A. Éster metílico de morfolinocarbonilO-MeTirS-

- M e C i s

MorfolinocarbonilO-MeTir (0,25 g, Exemplo 36) foi ligado a 0,36 g de HCl-S-MeCisOMe por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. Isto produziu 0,32 g de produto em bruto que foi utilizado purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 2,01 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,55 (m, 1H), 4,65 (m, 1H).

B. MorfolinocarbonilO-MeTirS-MeCis

MorfolinocarbonilO-MeCisOMe (0,32 g) foi saponificado da maneira descrita no Exemplo 55 para produzir 0,28 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg) delta 2,11 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 4,69 (m, 1H), 4,77 (m, 1H).

C. Éster i-propílico de morfolinocarbonilO-MeTirS-MeCisnor-C-S ta

MorfolinocarbonilO-MeCis (0,17

g) foi ligado a 0,10 g de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:Et0H) para produzir 0,18 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,08 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 4,39 (m, 3H), 5,01 (m, 1H).

EXEMPLO 90

Éster metilico de morfolinocarbonilO-MeTirNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=jo-metoxif enilo; Q=H; R₂ = =ji-butilo; X=ciclohexilo; W=CH||| 0H; e Z^=CO₂CH₃)

MorfolinocarbonilTirNle (100 mg, Exemplo 88) foi ligado a 65 mg de HCl-nor-C-StaOMe (Exemplo 55) por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂C1₂: :Me0H) para produzir 121 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCip delta 3,80 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 4,26 (m, 1H), 4,45 (m, 2H).

EXEMPLO 91

N-Metil amida de morfolinocarbonilO-MeTirNlenor-C-Sta (I,

Z=morf olinocarbonilamino ; M=j)-metoxif enilo ; Q=H ; R₂=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=CH((|OH; e Z^CONHCH^)

MorfolinocarbonilO-MeTirNle (132 mg, Exemplo 88) foi ligado a 78 mg de HCl-nor-C-StaNHMe (Exemplo 86) por utilização da reacçao DCC padrao descrita no Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatográfado (9:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 155 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 2,79 (d, J=5Hz, 3H), 3,75 (s, 3H), 4,22 (m, 1H), 4,30 (m, 2H).

EXEMPLO 92

Éster jt-propílico de morfolinocarbonilTirS-MeCisnor-C-Sta (I; Z=mor f olinocar bonilamino ; M=j)-hidroxif enilo ; Q=H; R₂= =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH11 I OH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Éster i-propílico de Boc-S-MeCisnor-C-Sta

BocS-MeCis (1,1 g) foi ligado a 1,0 g de nor-C-StaOiPr por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 76 para produzir 1,8 g de material em bruto que foi cromatográfado sem purificação adicional.

-177RMN (300 MHz, CDCip delta 1,25 (d, J=6Hz, 6H), 1,43 (s,

9H), 2,14 (s, 9H), 2,14 (s, 3H), 4,08 (m, 1H), 4,43 (m,

1H), 4,98 (m, 1H).

B. Cloridrato de éster i-propílico de S-MeCisnor-

-C-Sta

BocS-MeCis-nor-C-StaOiPr (0,42 g) foi desprotegido por utilização de HC1 em dioxano da maneira descrita no Exemplo 63 para produzir 0,38 g de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,19 (d, J=6Hz, 3H), 1,20 (d, J=6Hz, 3H), 2,16 (s, 3H), 3,95 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,83 (m, 1H).

C. Morfolinocarbonil 0-benzilTir

A uma solução de 0,5 g de 0-benzilTir em 20 ml de dioxano e 5 ml de ΝΟΗ 2N adicionaram-se 0,31 g de morfolinocarbonilCloreto e a mistura resultante foi agitada à TA durante a noite. A solução foi concentrada e o resíduo foi diluído com 200 ml de H₂0 e lavado com 2 x 200 ml de éter. A fase aquosa.foi acidificada e extraída 2x com 200 ml de CHCl^. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados para 0,18 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,13 (m, 1H), 5,04 (s, 2H).

-178-

D· MorfolinocarbonilTir

Uma mistura de 0,18 g de morfolinocarbonilO-benzilTir e 0,18 g de 10% de Pd sobre carvao em 20 ml de MeOH foi hdrogenada a 344,74 KPa (50 p.s.i.) durante 18 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e concentrada para produzir 0,14 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMS0-d₆) delta 4,04 (m, 1H), 6,58 (d, J=8Hz, 2H), 6,95 (d, J=8Hz, 2H).

E. Éster i/-propílico de morfolinocarbonilTirS-MeCisnor-C-Sta

MorfolinocarbonilTir (0,13 g) foi ligado a 0,27 g de HCIS-MeCisnor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 produto em bruto foi cromatografado (9:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 0,15 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 1,24 (d, J=6Hz, 3H), 1,26 (d, J=6Hz, 3H), 4,41 (m, 3H), 5,02 (m, 1H).

EXEMPLO 93

Éster i.-propílico de morfolinocarbonil _o-TirS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=o-hidroxifenilo;

Q=H; R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHI|I OH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. Boc o-Tir

A uma mistura de 1,1 de o_-Tir em 15 ml de THF e 15 ml de Na₂C0₃ a 20% adicionaram-se 2,0 g de Boc₂0 e a mistura resultante foi agitada à TA durante 3 horas. A reacçao foi diluída com 30 ml de H₂0, foi acidificada e extraída 3x com 50 ml de CH₂C1₂. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados. 0 resíduo foi recrostalizado a partir de éter-hexano para produzir 1,2 g de produto puro. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,32 (s, 9H), 4,13 (m, 1H).

B. Éster benzílico de Boc 0-benzil-o-Tir

Uma mistura de 1,2 g de Boc-(>Tir, 1,1 ml de benzilbrometo e 1,3 g de K₂CO₃ em 40 ml de acetona foi aquecida ao refluxo durante 20 horas. Adicionaram-se reagentes adicionais (0,25 ml de benzilbrometo, 0,36 g de K₂CO₃) e o aquecimento continuou durante mais 2 horas. A mistura arrefecida foi diluída com 40 ml de H₂0 e foi extraída 3x com 75 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram lavados 3x com 50 ml de H₂0, foram secos

-180-

sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados, Cromatografia (4:1 de Hex:Et0Ac) produziu 1,25 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,38 (s, 9H), 4,58 (m, 1H), 5,06 (m, 4H).

C. Cloridrato de éster benzílico de 0-benzil-o-

-Tir

Éster benzílico de BocO-benzil-o-Tir (1,25 g) foi desprotegido por utilização de HC1 em dioxano da maneira descrita no Exemplo 63 para produzir 1,1 g de sal em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,24 (m, 1H), 5,02 (AB, 2H), 5,12 (s, 2H).

D. Éster benzílico de morfolinocarbonilO-benzil-

- o - T i r

Éster benzílico de 0-benzil-o,-Tir (1,1 g) foi tratado com fosgénio em tolueno ao refluxo da maneira descrita no Exemplo 88. 0 isocianato em bruto foi dissolvido em 15 ml de CI^C^, foi arrefecido até 0° e tratado com 0,35 g de morfolino. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas, após o que foi díluida com 50 ml de EtOAc e foi lavada com 15 ml de HC1 0,lN e 2 x 15 ml de NaHC0₃ saturado. A fase orgânica (2:3 de Hex:Et0Ac) para produzir 0,60 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,65 (m, 1H), 5,06 (AB, 2H), 5,07 (s, 2H).

Ε. MorfolinocarbonilO-benzil-o-Tir

Uma mistura de 0,60 g de éster benzílico de morfolinocarbonil-O-benzil-o-Tir e 2 g de ^2^θ3 ^em 5 Ίθ ^2θ ^e foi aquecida ao refluxo durante 18 horas. A solução foi concentrada e o resí duo foi diluído com 30 ml de E^O e foi lavado 2x com 25 ml de éter. A camada aquosa foi acidificada e extraída 3x com 50 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados para produzirem 0,35 g de ácido em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,37 (m, 1H), 5,12 (s, 2H).

F. Morfolinocarbonil-o-Tir

Uma mistura de 0,35 g de morfolinocarbonil0-benzil-£-Tir e 0,35 g de 10% de Pd sobre carvao em 30 ml de MeOH foi hidrogenada a 344,74 KPa (50 p.s.i.) durante 18 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e concentrada para produzir 0,33 g de material em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,16 (m, 1H).

G. Éster ji-propílico de morfolinocarbonil-o-Tir-

S-MeCisnor-C-Sta

Morfolinocarbonil-jo-Tir (0,10 g) foi ligado a 0,12 g de S-MeCis-nor-C-StaOiPr por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (9:1 de C^C^^eOH)

para produzir 0,13 g de produto puro sob a forma duma mistura na posição q-Tir. RMN (um isómero) (300 MHz, CDCl^) delta 1,98 (s, 3H), 4,36 (m, 3H), 4,97 (m, 1H).

EXEMPLO 94

Éster .i-propílico de morfolinocarbonil jj-ClTirS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=jj-clorofenilo; Q= =H; R₂=CH₃SCH₂; X=ciclohexilo; W=CHIII OH; Z=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Morfolinocarbonil-p-cloroTir

A uma solução de 0,5 g de £-cloroTir em 5 ml de NaOH 2N e 20 ml de dioxano adicionaram-se 0,36 g de morfolinocarbonilcloreto da maneira descrita no Exemplo 92 para produzir 0,26 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,65 (m, 1H), 6,97 (d, J=8Hz, 2H), 7,19 (d, J=8Hz, 2H).

B. Éster ji-propílico de morfolinocarbonil _q-ClTirS-MeCisnor-C-Sta

Morfolinocarbonil jj-CITir (70 mg) foi ligado a 82 mg de S-MeCisnor-C-StaOiPr por utili183

zaçao de DEC da maneira descrita no Exemplo 76. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CI^C^^eOH) para produzir 118 mg de produto puro sob a forma duma mistura de isómeros na posição pCTir. RMN (um isómero) (300 MHz, CDClo) delta 1,97 (s, 3H), 4,37 (m, 3H), 5,96 (m, 1H).

EXEMPLO 95

Éster χ-propílico de 2-morfolino-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta (I, Z=morfolino; M=fenilo; Q=H; R2=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=CHH|0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. 2-Morfolino-3-fenipropionato de etilo

Uma solução de 2,0 g de 2-bromo-3-fenil-propíonato de etilo e 2,8 g de morfolina em 5 ml de DMF foi agitada durante a noite à TA. A mistura foi diluída com 75 ml de HC1 a 1% e foi lavada 3x com 50 ml de éter. A fase aquosa foi toranada básica e extraída 3x com 100 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados. 0 resíduo foi cromatografado (35% de EtOAciHex) para produzir 0,8 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,12 (t, J=7Hz, 3H), 3,36 (m, 1H), 4,04 (m, 2H).

-184I

Β. Ácido 2-morfolino-3-fenilpropiónico

Uma solução de 0,65 g de éster etílico do Exemplo 95A em 3,7 ml de NaOH IN e 5 ml de Me0H foi submetida a refluxo durante 3 horas. A solução foi acidificada com HC1 anidro e foi concentrada. 0 resíduo foi seco completamente em alto vácuo. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 3,90 (br, 4H), 4,15 (m, 1H).

C, Éster benzílico de 2-morfolino-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo 95B (0,35 g) foi ligado a 0,33 g de éster Nlebenzilico por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (39:1 de C^C^xMeOH) para produzir 0,45 g de produto sob a forma duma mistura de isómeros na posição MPP, RMN (um isómero) (300 MHz, GDC1₃) delta 3,68 (m, 4H), 4,57 (m, 1H), 5,17 (AB, 2H).

D· 2-morfolino-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo 95C (0,55 g) foi desprotegido por hidrogenação 275,79 KPa (40 psi) com 0,28 g de 10% de Pd sobre carvao em 50 ml de MeOH durante 2 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e foi concentrada para produzir 0,41 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMS0-d₆) delta 3,74 (m, 4H), 4,38 (m, 1H).

185I

E. Éster i-propilico de 2-morfolino-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta produto do Exemplo 95D (54 mg) foi ligado a 43 mg de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CHgCl^MeOH) para produzir 49 mg de produto puro e 47 mg do diastereómero MPP. RMN (300 MHz, CDClg) delta 4,12 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).

EXEMPLO 96

Éster i-propilico de 2-(4-metilpiperazino)-3-fenilNlenor-C-Sta (I,Z=4-metilpiperazino; M=fenilo; X=ciclohexilo;

Q=H; R₂=n-butilo; W=CH|U OH; e Z¹=C0₂CH(CHg)₂)

A. Éster etilico do ácido 2-(4-metilpiperazíno)-3-fenilpropiónico

2-Bromo-3-fenilpropionato de etilo (1,95 g) foi tratado com 3,05 g de N-metilpiperazina da maneira descrita no Exemplo 95 para produzir 0,30 g de produto puro após cromatografia (9:1 de CHgClg:Me0H). RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,10 (d, J=7Hz, 3H), 2,26 (s, 3H), 3,37 (m, 1H), 4,00 (m, 2H).

Β. Ácido 2-(4-metilpiperazino)-3-fenilpropiónico

Uma mistura de 0,56 g do éster etilico do Exemplo 96A em 31 ml de NaOH IN e 20 ml de EtOH foi submetida a refluxo durante 16 horas. Borbulhou-se HC1 anidro e a mistura foi concentrada. 0 residuo foi dissolvido em iPrOH-MeOH quente (1:1) e filtrado e o filtrado foi concentrado para produzir 0,55 g de produto puro. RMN (300 MHz, DMSO-dg 2,72 (s, 3H), 3,80 (m, 1H).

C. Éster benzílico de 2-(4-metilpiperazino)-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo\96B (0,55

g) foi ligado a 0,51 g de NleOBn por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de C^C^sMeOH) para produzir 0,42 g de produto sob a forma duma mistura de epímeros MPPP. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,27 (s, 3H), 2,85 (m, 1H), 3,26 (m, 1H), 4,54 (m, 1H).

D. 2-(4-metilpiperazino)-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo 96C (0,42

g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 95 para produzir 0,31 g de ácido bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,48 (s, 3H), 4,32 (m, 1H).

-187-

Ε· Éster i-propilico de 2-(4-metilpiperazino)-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta produto do Exemplo 96D (76 mg) foi ligado a 60 mg de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização de DEC (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (9:1 de CE^C^iMeOH) para produzir 30 mg e 33 mg de epímeros MPPP. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,35 (s, 3H), 4,16 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 5,01 (m,lH).

EXEMPLO 97

Éster .i-propilico de 2-(3,5-dioxomorfolino)-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta (I,Z=3,5-dioxomorfolino; M=fenilo; Q=H; R2=n^-butil°; X=ciclohexilo; W=CHH|0H; e Z^=CO2CH(CH₃)2)

A. Éster benzilico de ácido 2-(3,5-díoxomorfolíno)3-fenilpropiónico

A uma solução de 0,21 g de HC1-FeO-benzilico éster e 0,10 ml de TEA em 10 ml de CI^C^ adicionaram-se 80 mg de anidrido glicólico. A solução foi agitada à TA durante 2 horas. A mistura foi diluida com 200 ml de EtOAc e foi lavada 2x com 20 ml de HC1 0,lN 20 ml de H2O e 20 ml de salmoura. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada para produzir 0,32 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDCl^) delta

-188-

3,14 (m, 2H), 4,12 (m, 4H), 4,95 (m, 1H), 5,13 (AB, 2H).

Uma solução do ácido em bruto anterior e 76 mg de piridina em 5 ml de Ac₂0 foi aquecida até 100° durante 18 horas. A reacçao foi adicionada a 100 ml de H^O e foi extraida 2x com 100 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram lavados com 20 ml de HC1 0,lN, 20 ml de NaOH 0,lN e 20 ml de H₂0. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada para produzir 0,23 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,18 (2AB, 4H), 5,19 (AB, 2H), 5,53 (m, 1H).

B. Ãcido 2-(3,5-dioxomorfolino)-3-fenilpropinico produto do Exemplo 97A foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 95 para produzir 0,15 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,32 (AB, 4H), 5,30 (m, 1H).

C. Éster benzílico de 2-(3,5-dioxomorfolino)-3-

-fenilpropionilNle produto do Exemplo 97B (0,15 g) foi ligado a 0,16 g de HCl-ésterNleObenzilico por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (4:1 de CH₂C1₂: :Me0H) para produzir 0,14 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,18 (AB, 4H), 4,63 (m, 1H), 5,16 (AB, 2H).

-189-

D. 2-(3,5-Dioxomorfolino)-3-fenilpropíonilNle produto do Exemplo 97C (0,14 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 95 para produzir 0,12 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 4,24 (AB, 4H), 4,62 (m, 1H), 5,17 (m, 1H).

E. Éster i-propílico de 2-(3,5-dioxomorfolino)-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta produto do Exemplo 97D (0,12 g) foi ligado a HCl-nor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado para produzir 88 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCip delta 4,18 (m, 1H), 4,32 (s, 4H), 4,48 (m, 1H), 5,02 (m, 1H).

EXEMPLO 98

Éster i-propílico 2-(3-oxomorfolino)-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta (I, Z=3-oxomorf olino; M=fenilo; Q=H; R₂=ii-butilo; X=ciclohexilo; W=CHIII0H; e Z¹=CO₂CH(CH₃)_?)

-190-

Α· Éster benzílico de N-glicoloilfenilalanina

A uma solução de 2,23 g do produto de acilaçao entre éster FeObenzílico e anidrido glicólico (Exemplo 96) em 6,6 ml de THF a 0° adicionaram-se lentamente 1,1 equiv de BH^-DMS e a solução resultante foi agitada durante 5 horas. A mistura foi adicionada a 150 ml de H₂0, foi acidificada e extraída 2x com 150 ml de EtOAc. Os extractos combinados foram levados 2x com 30 ml de NaOH 0,1 e 30 ml de H₂0. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada. 0 resíduo foi cromatografado (39:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 0,43 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 3,99 (AB, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,15 (AB, 2H).

B. Éster benzílico de N-(o-mesilglicolil)fenila- lanina

A uma solução de 0,41 g de álcool anterior e 0,41 g de TEA em 10 ml de CH₂C1₂ a 0° adicionaram-se gota a gota 0,11 ml de cloreto de mesilo, e a solução resultante foi agitada a 0° durante 1 hora. A solução foi diluída com 200 ml de EtOAc e foi lavada com 30 ml de HC1 0,lN, NaOH 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada para produzir 0,25 g de mesilato em bruto. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,92 (s, 3H), 4,29 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 5,13 (AB, 2H).

191-

C. Éster benzílico de N-(ioioetoxiacetil)fenilala- nina

Uma mistura de 0,25 g do mesilato anterior e 0,23 g de Nal em 20 ml de acetona foi submetida a refluxo durante 6 horas. A reacçao foi deitada em 100 ml de 1^0 e foi extraída 2x com 100 ml de EtOAc, Os extractos combinados foram lavados com 50 ml de salmoura, foram secos sobre MgSO^, filtrados e concentrados. 0 material em bruto foi cromatografado (9:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 0,35 g de iodeto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 3,96 (s, 2H), 4,93 (m, 1H), 5,11 (AB, 2H).

D. Éster benzílico do ácido 2-(3-oxomorfolino)-3-fenilprppionico_____

A uma solução de 0,16 g do iodeto anterior em 3 ml de THF a -78° adicionaram-se gota a gota 1,1 equiv de KNTMS₂ e a solução resultante foi agitada durante 5 horas a -78°. Adicionou-se lentamente NH^Cl (1 ml) e a mistura foi deitada em 100 ml de H₂0, foi acidificada e extraída 2x com 100 ml de RtOAc. Os extractos combinados foram lavados com 20 ml de salmoura, foram secos sobre MgSO^, filtrados e concentrados. 0 resíduo foi cromatografado (9:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 71 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,10 (AB, 2H), 5,19 (AB, 2H), 5,27 (m, 1H).

-192-

Ε. Ácido 2-(3-oxomorfolino)-3-fenilpropiónico produto do Exemplo 98C (96 mg) foi desprotegido como descrito no Exemplo 95 para produzir 70 mg de ácido em bruto, RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,92 (AB, 2H), 5,04 (m, 1H).

F. Éster benzílico de 2-(3-oxomorfolino)-3-fenil- propionilNle___ i

produto do Exemplo 98D (90 mg)I foi ligado a 98 mg de éster benzílico de NleO por utili-j zaçao da reacçao DEC padrao descrita no Exemplo 58. 0 ma-;

terial em bruto foi cromatografado (39:1 de C^C^íMeOH) para produzir 127 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,14 (s, 2H), 5,54 (m, 1H), 5,16 (m, 2H), 5,32 (m, 1H).

I

I

I

J

G. 2-(3-0xomorfolino)-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo 98E (127 I mg) fioi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 95 para produzir 114 mg de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,12 (br, 2H), 4,52 (br, 1H). | _r193-

H. Éster i-propílico de 2-(3-oxomorfolino)-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta produto do Exemplo 98F (114 mg) foi ligado a 92 mg de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DEC (Exemplo 58). 0 material em bEuto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 13 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,42 (m, 2H), 5,02 (m, 2H).

EXEMPLO 99

Éster _i-propílico de 3-oxomorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=3-oxomorfolinocarbonilamino; Q=H; M=fenilo; R₂=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CH111 OH; e Z¹=CQ₂CH(CH₃)₂)

A. Éster benzílico de 3-oxomorfolinocarbonllFen

A uma suspensão de 79 mg de Naíi lavado com pentano em 5 ml de THF adicionou-se uma solução de 200 mg de 3-cetomorfolina em 10 ml de THF. A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos à TA e depois foi arrefecida até 0^o. Adicionou-se gota a gota uma solução de 584 mg de FeOBn-isocianato em 15 ml de THF e a solução resultante foi agitada a 0° durante 1 hora. A mistura de reacçao foi deitada em 100 ml de H₂0 e foi extraída 2x com 100 ml de EtOAc. Os extractos combinados

foram lavados com 20 ml de HC1 0,lN e 20 ml de NaOH O,1N, foram secos sobre MgSO^, filtrados e concentrados. 0 material em bruto foi cromatográfado (4:1 de EtOAc:) para produzir 132 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 4,24 (s, 2H), 4,82 (m, 1H), 5,18 (AB, 2H).

B. 3-0xomorfolinocarbonilFen produto do Exemplo 99A (0,64

g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 95 para produzir 0,44 g de ácido em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,22 (s, 2H), 4,51 (m, 1H).

C. Éster benzílico de 3-oxomorfolinocarbonilFen- »

Nle produto do Exemplo 99B (0,44

g) foi ligado a 0,41 g de NleOBn por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58) para produzir 0,73 g de material em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,25 (m, 2H), 4,61 (m, 1H), 4,16 (m, 2H).

D· 3-0xomorfolinocarbonilFenNle produto do Exemplo 99C (0,72

g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 95 pa-195ra produzir 0,56 g de material bruto. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,19 (m, 2H), 4,65 (m, 2H).

E. Éster .i-propílico de 3-oxomorfolinocarbonil-

FenNlenor-C-Sta produto do Exemplo 99D (125 mg) foi ligado a 91 mg de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização de DEC (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂C1₂:MeOII) para produzir 73 mg de produto. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,20 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,52 (m, III), 5,01 (m, 1H).

EXEMPLO 100

Éster i_-propílico de metoxietilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=CH₃O(CH₂)₂NHCONH; M=fenilo; Q=H; X=ciclohexilo; R₂=n-butilo; W=CH||(0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Éster benzílico de metoxíetílaminoçarbonílFen

A uma solução agitada de 0,20 g de FeOBn-isocianato em 10 ml de CH₂C1₂ adicionaram-se 59 mg de 0-Me-etanolamina e a solução foi agitada durante 1 hora. A reacçao foi diluída com 200 ml de eter e foi

-196lavada com 20 ml de HC1 0,lN e 20 ml de NaOH Ο,ΙΝ. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentra- | da para produzir 0,20 g de produto em bruto. RMN (300 MHz,

CDCip delta 3,28 (s, 3H), 4,80 (m, 1H), 5,11 (m, 2H). | ί

I

I ί

B. MetoxietilaminocarbonilFen

Uma mistura de 0,20 g do éster benzílico anterior e 0,10 g de 10% de Pd sobre carvao em 50 ml de MeOH foi hidrogenada a 344,74 KPa (50 p.s.i.) durante 2 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e concentrada para produzir 0,19 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,24 (s, 3H), 4,30 (m, 1H).

C. Éster benzílico de metoxietilaminocarbonilFen-

Nle derivado Fen anterior (0,19

g) foi ligado a 0,14 g de NleOBn por utilização do processo DEC padrao (Exemplo 58). Isto produziu 0,23 g de material em bruto que foi utilizado sem purificação. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,26 (s, 3H), 4,52 (m, 2H), 5,10 (m, 2H).

D. Metoxiet ilaminocarbonilFenNle

Uma mistura de 0,23 g de composto anterior e 0,12 g de 10% de Pd sobre carvao em 50 ml de EtOH foi hidrogenada a 344, 74 KPa (50 p.s.i.) durante 2 horas. A mistura foi filtrada e concentrada para produzir 0,16 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,21 (s, 3H), 4,10 (m, 1H), 4,41 (m, 1H).

E. Éster j^-propílico de metoxietilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta ácido anterior (0,17 g) foi ligado a 0,13 g de HCl-nor-C-Sta OiPr por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 0,18 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 3,28 (s, 3H), 4,32 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 5,03 (m, 1H).

EXEMPLO 101

Éster _i-propílico de hidroxietilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=H0(CH₂)₂NHC0NH; M=fenilo; Q=H; R₂=n-butilo;

X=ciclohexilo; W=CHil|0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

k. Éster benzílico de hidroxietilaminocarbonilFen

A uma solução de 0,50 g de FenOBn-isocianato em 10 ml de CH₂C1₂ adicionaram-se 0,12 g de etanolamina e a solução resultante foi agitada durante 4 horas, A mistura foi diluida com 200 ml de EtOAc e foi lavada com 20 ml de HC1 0,lN e 20 ml de NaOH 0,lN. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada para produzir 0,44 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,79 (m, 1H), 4,12 (m, 2H).

B. Éster benzílico de _t-butildimetilsililoxietilaminocarbonilFen __

A uma solução de 0,44 g do álcool anterior em 10 ml de DMF adicionaram-se 0,24 g de t.-butildimetilsililcloreto e 0,22 g de imidazole. Após 18 horas, a solução foi adicionada a 150 ml de H₂0 e foi extraída 2x com 150 ml de EtOAc. 0s extractos combinados foram lavados com 30 ml de H₂0, ^^orara secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados. 0 residuo foi cromatografado (39:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 0,50 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCip delta 0,89 (s, 9H), 4,98 (m, 1H), 5,13 (m, 2H).

C. t-ButildimetilsililoxietilaminocarbonilFen

Uma mistura do éster benzílico

-199I

anterior (0,18 g) e 0,09 g de 10% de Pd sobre carvao em 30 ml de MeOH foi hidrogenada a 344,74 KPa (50 p.s.i.) durante 3 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e foi concentrada para produzir 0,13 g de material em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,89 (s, 3H), 4,27 (m, 1H).

D. Éster benzílico de t-butildimetilsililoxietil- amino carb o nilFenNle ácido anterior (0,13 g) foi ligado a 96 mg de NleOBn por utilização do processo DEC (Exemplo 58). Cromatografia (19:1 de CH2C12:MeOH) produziu 0,10 g de produto puro. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,91 (s, 9H), 4,50 (m, 2H), 4,72 (m, 1H), 5,11 (s, 2H).

E. t-ButildimetilsililoxietilaminocarbonilFenNle produto anterior foi desprotegido por hidrogenação da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 78 mg de material em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,88 (s, 9H), 4,00 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).

F. Êsetr i-propílico de .t-butildimetilsilioxietilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta ácido anterior (73 mg) foi ligado a 45 mg de HCl-nor-C-StaOiPr (DEC, Exemplo 58) para produzir 116 mg de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 0,86 (s, 9H), 4,38 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 5,02 (m, 1H).

G. Éster i^-propílico de hidroxietilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta material anterior (116 mg) foi desprotegido por tratamento com 1,5 eq. de Bu^NF em 5 ml de THF durante 2 horas. A solução foi diluida com 200 ml de EtOAc e foi lavada com 20 ml de HC1 0,lN e 20 ml de NaOH 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada e o resíduo foi cromatografado (9:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 63 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,41 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 5,07 (m, 1H).

-201-

EXEMPLO 102

Éster i.-propílico de morfolinosulfonilNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinossulfonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=CH||(OH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. Éster benzílico de morfolinossulfonilFenNle

Uma solução de 0,29 g de FenNleOBn, 0,40 g de morfolinossulfonilcloreto e 0,36 g de TEA em 10 ml de CH₂CL₂ foi submetida a refluxo durante 16 horas. Adicionaram-se quantidades adicionais dos últimos dois reagentes e o aquecimento continuou durante 8 horas. A solução foi diluida com 50 ml de EtOAc e foi lavada com 25 ml de HC1 0,lN e 25 ml de NaOH 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada e o resíduo foi cromatografado (2:1 de Hex:Et0Ac) para produzir 0,36 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,04 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,15 (m, 2H).

B. MorfolinossulfonilFenNle material anterior (0,36 g) foi desprotegido (Exemplo 100) para produzir 0,30 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, DMS0-d₆) delta 3,95 (m, 1H), 4,10 (m, 1H).

-202-

C. MorfolinossulfoniloFenNle produto do Exemplo 102B (0,29 g) foi ligado a 0,12 g de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização de DEC (Exemplo 58). Cromatografia (29:1 de CH₂C1₂: :EtOH) produziu 0,29 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,02 (m, III), 4,41 (m, H2H), 5,06 (m, 1H).

I i

I

EXEMPLO 103i

Éster ji-propílico de morfolinometilfosfinicoFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinoP(0CH₃)(0)amino; M=fenilo; Q=H; R₂= =ri-butilo; X=ciclohexilo; W=CH( II 0H; e Z^=CO₂CH(CH₃)₂)j

A. Éster benzílico de morfolinometilfosfonicoFen-

Nle

Uma solução de 0,30 g de FenNleOBn, 0,30 g de TEA e 0,44 g de cloreto de ácido de morfolinometilfosfinico em 10 ml de CH₂C1₂ foi agitada durante 60 minutos. A solução foi diluída com 50 ml de EtOAc e foi lavada com 25 ml de HC1 0,lN e NaOH 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada. 0 residuo foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:EtOH) para produzir 0,18 g de produto sob a forma duma mistura de isómeros no fósfero. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,57 ι203-

(d, J=10Hz, 3H), 4,50 (m, 1H), 5,09 (m, 2H).

B. MorfolinometilfosfinicoFenNle material anterior foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 0,10 g de material em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,57 (d, J=10Hz, 3H), 3,96 (m, 1H).

ι

C. Éster _i-propílico de morfolinometilfosfinico-

FenNlenor-C-St a produto do Exemplo 103B (0,10

g) foi ligado a 58 mg de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização do processo DEC (Exemplo 58). Cromatografia (19:1 de CH2CI2: :EtOH) produziu 28 mg de material puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,61 (d, J=llHz, 3H), 4,44 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,99 (m, 1H).

EXEMPLO 104

Éster .i-propílico de tiomorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=tiomorfolinocarbonilamino; Q=H; M=fenilo; X=ciclohexilo; W=CHíll 0H; Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Éster benzílico de tiomorfolinocarbonilFen

A uma solução de 1,0 g de FenOBn-isocianato em 10 ml de CH₂C1₂ a 0^o adicionaram-se 0,85 TA de tiomorfolina e a solução resultante foi agitada à TA durante 1,5 horas. A solução foi diluida com 50 ml de EtOAc e foi lavada 2x com 25 ml de HC1 Ο,ΙΝ, A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada para produzir 1,26 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,83 (m, 2H), 5,15 (AB, 2H).

B. TiomorfolinocarbonilFen

Uma mistura de 1,26 g do material anterior e 4,5 g de K^CO^ em 15 ml de H₂0 e 70 ml de MeOH foi agitada à TA durante 60 horas e depois foi aquecida até ao refluxo durante 16 horas. A mistura foi concentrada numa solução aquosa e foi lavada 2x com 50 ml de éter. A fase aquosa foi acidificada e extraida 3x com 50 ml de CHC1₂. Os extractos combinados foram secos sobre MgSO^, filtrados e concentrados. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 3,01 (m, 2H), 4,26 (m, 1H).

C. Éster benzílico de tiomorfolinocarbonilFenNle produto do Exemplo 104B (0,72

g) foi ligado a 0,75 g de NleOBn por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58) para produzir 1,1 g de produto

em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDCip delta 4,47 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 5,12 (m, 2H).

D. TiomorfolinocarbonilFenNle produto do Exemplo 104C (1,1 g) foi desprotegido da maneira descrita para o Exemplo 104B anterior. Isto produziu 0,70 g de produto em bruto que foi concentrado. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,59 (m, 4H), 4,46 (m, 1H), 4,73 (m, 1H).

E. Éster jl-propilico de tiomorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta produto do Exemplo 104D (0,70 g) foi ligado a 0,50 g de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DEC (Exemplo 58) e o material em bruto foi cromatografado (29:1 de Cl^C^jEtOH) para produzir 0,65 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,28 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).

206-

EXEMPLO 105

Éster .i-propilico de 1-oxotiomorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta(I, Z=tiomorfolinocarbonilaminosulfoxido; M=fenilo;

Q=H; Rg=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CHI 11 OH; e Z^COgCHCCHg)g)

A uma mistura de 0,10 g de produto do Exemplo 104 E em 5 ml de CH2CI2 a 0° adicionaram-se 35 mg de mCPBA e a solução resultante foi agitada durante 15 minutos. A solução foi diluída com 20 ml de EtOAC e foi lavada 2x com 20 ml de Na₂S0g a 10% e 20 ml de NaOH 0,1 N. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada e o residuo foi cromatografado (9:1 de CHgClg! :EtOH) para produzir 82 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 4,29 (m, 1H), 3,38 (m,lH), 4,59 (m, 1H), 4,94 (m, 1H).

EXEMPLO 106

Éster i.-propilico de 1,1-dioxotiomorfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta(I, Z=tiomorfolinocarbonilaminossulfona; M=fenilo;

Q=H; Rg^-butilo; X=ciclohexílo; W=CH 111 0H; e Z^=C02CH(CHg)2)

A. Éster benzilico de 1,1-dioxotiomorfolinocarbonilFen

A uma solução de 0,64 g do produto do Exemplo 104A em 20 ml de CH2CI2 a 0^o adicionou-se 1,0 g de mCPBA e a solução resultante foi agitada durante 16 horas. A solução foi diluída com 100 ml de EtOAC e foi

-207-

lavada 3x com 50 ml de 10% de I^SO^. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e foi concentrada. 0 material em bruto foi cromatografado (1:1 de EtOAC-Hex) para produzir 0,47 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,79 (m, 1H), 5,16 (AB, 2H).

B. 1,1-DióxotiomorfolinocarbonilFen produto do Exemplo 106A (0,47 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 0,30 g do ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,05 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,15 (AB, 2H).

C. Éster benzílico de 1,1-dioxotiomorfolinocarbonilFen N 1 e produto do Exemplo 106B (0,30 g) foi ligado a 0,29 g de NleOBn por utilização da reacçao DEC descrita no Exemplo 58 para produzir 0,46 g de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,50 (m, 2H), 5,12 (AB, 2H).

D. 1,1-DioxotiomorfolinocarbonilFenLle produto do Exemplo 106C (0,46 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 0,36 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 3,97 (m, 1H), 4,32 (m, 1H).

-208-

E. Éster i-propilico de 1,1-dioxotiomorfolinocarbonilFenNlen or-C-Sta produto do Exemplo 106D (0,26 g) foi ligado a 0,18 g de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização de DEC (Exemplo 58) para produzir 0,31 g de produto puro após purificação por cromatografia (19:1 de CH^C^: EtOH). RMN (300 MHz, CDCip delta 4,28 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,02 (m, 1H).

EXEMPLO 107

Éster benzilico de morfolinocarbonilFenS-Mecisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; X=ciclohexilo ; W=CH | I I 0H; e Z^CO^H^^)

R₂=CH₃SCH₂-;

A. Éster benzilico de Bocnor-C-Sta

Bocnor-C-Sta (0,10 g) foi esterificado com 0,11 g de álcool benzilico por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58) com 0,25 eq. de DMAP. 0 material em bruto foi cromatográfado (39:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 0,10 g de éster puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,39 (s, 9H), 4,10 (s,lH), 4,13 (s, 1H), 5,14 (AB, 2H).

B. Cloridrato de éster benzilico de nor-C-Sta produto do Exemplo 107A (0,10 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 63 para produzir 96 mg de sal em bruto que foi utilizado sem purifi-

caçao adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,16 (m, 1H), 5,12 (m, 2H).

C. Éster benzilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-

- C - S t a produto do Exemplo 107B (0,12 g) foi ligado a 84 mg de HCl-nor-C-StaOBn por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58). 0 material em bruto foi cromatográfado (19:1 de CI^C^^íeOH) para produzir 92 mg de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,08 ( s, 3H/, 4,40 (m, 3H), 5,14 (AB, 2H).

EXEMPLO 108

Éster ciclohexilmetilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; 0=H; R2CH2SCII2;

X=ciclohexilo; W=CH11 I 0H; e Z^=C02CH2C^H|)

A. Éster ciclohexilmetilico de Bocnor-C-Sta

Bocnor-C-Sta (70 mg) foi esterificado com 80 mg de ciclohexilmetanol da maneira descrita no Exemplo 107 para produzir 40 mg de material puro após cromatografia (39:1 de CH₂C1₂:Me0H). RMN (300 MHz, CDCip delta 1,35 (s, 9H), 3,39 (d, J=6Hz, 1H), 4,08 (m, 1H).

B. Cloridrato de éster ciclohexilmetilico de nor-

- C - S t a produto do Exemplo 108A (40 mg) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 63 para produzir 37 mg de sal em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 3,53 (s, 1H), 4,10 (m, 1H).

C. Éster ciclohexilmetilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenS-MeCis (42 mg) foi ligado a 34 mg do produto do Exemplo 108B por utilização da reacçao DEC (Exemplo 58). Cromatografia (19:1 de Cl^C^: :MeOH) produziu 50 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 2,12 (s, 3H), 4,42 (m, 3H).

EXEMPLO 109

Éster i-propilico de 2-(morfolinocarboniloxi)-3-fenilpropionilNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarboniloxi; M=fenilo;

Q=H; R2=ri-butilo; X=ciclohexilo; W=CH l i l 0H; e Z^=C02CH(CH₃)2>

A. Éster metilico de ácido 2-(morfolinocarboniloxi)-

-3-fenilpropiónico_______________

A uma solução de 0,74 g de fenillac tato de metilo em 10 ml de CH2CI2 adicionaram-se 0,60 g de cloreto de morfolinocarbonil e 1,1 g de DMAP, e a solução

-211-

resultante foi agitada à TA durante a noite. Adicionram-se mais 0,60 g de cloreto de morfolinocarbonilo e a agitaçao continuou durante 2 dias. A mistura foi deitada em 100 ml de H₃0 e foi extraída 2x com 100 ml de EtOAC. Os extractos combinados foram lavados com 20 ml de HC1 0,1 N e 20 ml de NaOH 0,1 N, e foram secos sobre MgSO^, foram filtrados e concentrados para produzirem 1,24 g de produto em bruto. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 3,75 (s, 3H), 5,19 (m, III).

B. Ãcido 2-(morfonilocarboniloxi)-3-fenilpropiónico produto do Exemplo 109A (1,2 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 55 para produzir 1,1 g de ácido em bruto. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,22 (m, 1H).

C. Éster benzilico de 2-(morfolinocarboniloxi)-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo 109B (0,12 g) foi ligado a 0,12 g de NleOBn por utilização de DEC da maneira descrita no Exemplo 58. Isto produziu 0,20 g de produto em bruto que foi conservado. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 4,59 (m, 1H), 5,14 (AB, 2H), 5,37 (m, 1H).

D. 2-(Morfolinocarboniloxi)-3-fenilpropionilNle produto do Exemplo 109C (0,20 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 0,16 de ácido em bruto que foi conservado. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,15 (m, 1H), 5,09 (m, 1H).

212-

E. Éster i-propilico de 2-(morfolinocarboniloxi)-3-fenil propionilNle produto do Exemplo 109D (0,15 g) foi ligado a 0,11 g de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização do processo DEC descrito no Exemplo 58. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir 0,16 g de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 4,22 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,28 (m, 1H).

EXEMPLO 110

Éster i-propilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-G-Sta de 0- cetilo (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo;

Q=H; R₂=CH,SCH₂-; W=CHI 11 OCOCHj; X=ciclohexllo; e zLcOjCH(CH₃)₂)

A uma solução de 0,10 g de produto do Exemplo 17 em 1 ml de piridina adicionaram-se 26 mg de Ac₂0 e a solução resultante foi agitada â TA durante a noite. A solução foi diluida com 100 ml de EtOAc e foi lavada 2x com 10 ml de HC1 0,1 N e 2x com 10 ml de NaOH 0,1 N. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada. 0 material em bruto foi cromatografado (19:1 de CH₂Cl₂:MeOH) para produzir 90 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 2,16 (s, 6H), 4,37 (m, 1H), 4,52 (m, 2H), 4,88 (d, J=3Hz, 1H), 4,96 (m, 1H).

I

EXEMPLO 111

Éster i-propilico de metilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=CH₃NHCONH; M=fenilo; Q=H; R₂=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CHHIOH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂

A. Ester benzílico de metilaminocarbonilFen

A uma solução de 0,30 g de FenOBn-isocianato em 20 ml de CH₂C1₂ adicionaram-se 0,51 ml de uma solução de MeNH₂ 2,3M em benzeno e a solução resultante foi agitada durante 4 horas. A solução foi diluída com 200 ml de EtOAc e foi lavada com 20 ml de HC1 0,lN e 20 ml de NaOH 0,1Ν. A fase orgânica foi seca sobre MgSO^, foi filtrada e concentrada para produzir 0,30 g de produto em bruto que foi conservado para a fase seguinte. RMN (300 MHz, CDClg) delta 2,69 (d, J=5Hz, 3H), 4,42 (m, 1H), 4,83 (m, 2H).

B. MetilaminocarbonilFen produto do Exemplo 111A (0,30 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 0,23 g de ácido em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,62 (s, 3H), 4,33 (m, 1H).

-214-

C. fister benzílico de metilamínocarbonilFenNle produto do Exemplo 111B (0,23 g) foi ligado a NleOBn por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58) para produzir 0,38 g de material em bruto que foi conservado para a fase seguinte sem purificação. RMN (300 MHz, CDCip delta 2,51 (br, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 5,14 (s, 2H).

D. MetilaminocarbonilFenNle produto do Exemplo 111C (0,37 g) foi desprotegido da maneira descrita no Exemplo 100 para produzir 0,29 g de ácido em bruto que foi utilizado sem ser purificado. RMN (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,52 (d, J=5Hz, 3H), 4,17 (m, 1H), 4,46 (m, 1H).

E. Éster i-propilico de metilaminocarbonilFenNlenor-

-C-Sta produto do Exemplo 111D (0,15 g) foi ligado a 0,13 g de HCl-nor-C-StaOiPr por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58) para produzir 0,13 g de produto puro após cromatografia (9:1 de CH₂C1₂:Me0H). RMN (300 MHz, CDCip delta 2,77 (d, J=5Hz, 3H), 4,34 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).

-215-

Êster _i-propilico de morfolinocarbonilTalaS-MeCisnor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=2-tienilo;Q=H; R₂ = =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH|llOH; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

A. MorfolinocarbonilTala

A uma solução de 100 mg de 2-tienilalanina em 15 ml de dioxano:água (2:1; V:V), ajustada para pH 11 com hidróxido de sódio, adicionaran-se 96 mg de cloreto de morfolinossulfonilo e a mistura de reacçao foi deixada em agitaçao durante a noite à temperatura ambiente. 0 pH foi novamente ajustado para 11 e adicionaram-se mais 40 mg de cloreto de sulfonilo. Após agitaçao durante duas horas, a solução aquosa foi extraida com cloreto de metileno, o pH foi ajustado para cerca de 2 e foi extraida com acetato de etilo. A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura e seca (Na₂S0₄). 0 solvente foi removido para produzir 66 mg do intermediário.

B. fister i-propilico de morfolinocarbonilTalaSMeCisnor-C-Sta

Seguindo o processo geral do Exemplo 55, 100 mg do produto de 92B, 66 mg do produto do Exemplo 112A, 48 mg de DCC, 32 mg de HBT e 20 mg de N-metilmorfolina produziram 168 mg de produto em bruto. Cromatogra fia sobre silica gel produziu 59 mg de produto puro. RMN (300 Hz, CDC1₃) delta 1,13 (m, 6H), 2,05 (s, 3H), 3,0-3,4 (4H, m), 3,5-3,65 (4H, m) e 6,85-7,15 (m, 3H).

EXEMPLO 113

Éster i.-propilico de morfolinocarbonilNfalaS-MeCisnor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=l-naftilo; Q=H; R₂= =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHi| I OH; e Z^=CO₂CH(CH₃)₂)

A. MorfolinocarbonilNfala

Utilizando-se o processo geral do Exemplo 112A, 420 mg de morfolinosulfonilcloreto, 500 mg de 1-naftilalanina, 3 ml de hidroxido de sódio IN e 200 mg de bicarbonato de sódio em 5 ml de 1:1 de tetrahidrof urano : água produziram 120 mg do intermediário desejado .

B. Éster i-propilico de morfolinocarbonilNfalaS-MeCisnor-C-Sta

Empregando-se o processo de ligaçao normal, 145 mg do produto do Exemplo 93B, 131 mg do produto anterior, 82 mg de DCG, 55 mg de HBT e 45 ul de —217—

N-metilmorfolina em 15 ml de cloreto de metileno produziram 253 mg de produto que foi cromatografado sobre silica gel, utilizando-se 1-1,5% de metanol em clorofórmio, mg. RMN (300 Hz, CDClg) delta 1,2 (d, J=5Hz, 6H), 2,01 (s, 3H), 3,05 (m, 2H), 3,41 (m, 2H) e 6,75-8,18 (7H, m).

EXEMPLO 114

Éster metilico de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I, Z= morfolinocarbonilamino; M=fenilo; R2=CH₃SCH2~;

Q=H; X=ciclohexilo; W=CHll(OH; e Z^=C02CH₃)

Seguindo-se o processo corrente da etapa de ligaçao, 135 mg de cloridrato de ester metilico de S-MeCisnor-C-Sta, 88,2 mg de morfolinocarbonilFen, 32,1 mg de N-metilmorfolina, 42,9 mg de HBT e 65,4 mg de DCC em 20 ml de cloreto de metileno produziram o produto. Cromatografia sobre silica gel com utilização de cloroformio-metanol (99:1; V:V) produziu 103 mg de produto puro, idêntico ao preparado no Exemplo 58. RMN (300 Hz, CDC1₃) delta 2,1 (s, 3H), 3,7 (s, 3H), 3,0-3,4 (m, 4H), 3,5-3,84 (m, 4H) e 7,3 (s, 5H).

EXEMPLO 115

N-Metilamida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I,

Z= morfolinocarbonilamino; Q=H ; M=fenilo;

X=ciclohexilo; W=CH|H0H; e Z¹=CONHCH₃)

R₂=GH₃SCH₂-;

produto do Exemplo 114 (45 mg) dissolvido em 10 ml de metanol foi tratado com metilamina até ficar saturado e a mistura da reacçao foi guardada à temperatura ambiente durante a noite. 0 solvente foi removido e o residuo foi triturado com eter dietílico, 30 mg. 0 produto mostrou-se idêntico ao do Exemplo 86. RMN (300 Hz, CDC1₃) delta 2,1 (s, 3H), 2,65 (3H, s), 2,85 (d, J=5Hz, 2H) e 7,2 (s, 5H).

EXEMPLO 116

N-Trifluoroetil amida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor

-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂= =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHI llOH; Z¹=C0NHCH₂CF₃)

A. N-Trífluoroetilamida de Bocnor-C-Sta

Empregando-se o processo de ligaçao geral, 33 mg de trifluoroetilamina em vez de cloridra-219to, 75,3 mg de Bocnor-C-Sta, 25 mg de N-metilmorfolina, mg de HBT e 51,5 mg de DCC em 20 ml de cloreto de metileno produziram 121 mg do intermediário desejado sob a forma duma espuma.

B. Cloridrato de N-trifluoroetilamida de nor-C-Sta produto do Exemplo 116A foi desbloqueado por utilização de HCl-dioxano (5 ml) á temperatura ambiente durante 90 minutos. A remoção do solvente produziu 87 g de produto.

C. N-trifluoroetilamida de BocS-MeCisnor-C-Sta

Utilizando-se o processo geral de ligaçao, 87 mg do produto do Exemplo 116B, 58,8 mg de BocS-MeCis, 25,3 mg de N-metilmorfolina, 33,8 mg de HBT e 51,5 mg de DCC em 20 ml de cloreto de metileno produziram 146 mg do intermediário desejado.

D. Cloridrato de amida de N-trifluoroetilo de S-MeCisnor-C-Sta produto do Exemplo 116C (146 mg) foi desbloqueado por utilização de 5 ml de dioxano saturado com HC1 durante 90 minutos à temperatura ambiente. A remoção do solvente produziu 121 mg de produto.

-220-

E. N-Trifluoroetíl amida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

Novamente, por utilização do processo de ligaçao, 121 mg do produto do Exemplo 116D, 69,5 mg de morfolinocarbonllFen, 25,3 mg de N-metilmorfolina, 33,8 mg de HBT e 51,5 mg de DCC em 20 ml de cloreto de metileno produziram 123 mg de produto. Cromatografia sobre silica gel por utilização de cloroformio-metanol (99:1, V:V) produziu 57 mg de produto puro. RMN (300 Hz, CDC1₃) delta 3,1-3,5 (m, 4H), 3,5-3,8 (m, 4H), e 7,3 (s, 5H) .

EXEMPLO 117

Éster i-propilico de (2-metoxicarbonilpirrolid-l-il)car bonilFenSMeCisnor-C-Sta (I,Z=l-(2-metoxicarboniIpirrolidil) carbonilamino; M=fenilo; Q=H;

W=CHf|l OH; e Z¹=C0CH(CH₃)₂)

R₂=CH₃SCH₂-;

X=ciclohexilo;

A. Éster benzílico de (2-metoxicarbonilpirrolid-l-il)carbonilFen

Uma solução de 66 mg de cloridra to de éster metilico de prolina em 10 ml de CH₂C1₂ e 70 jil de Ν,Ν-diisopropiletilamina foi tratada com 112 mg de isocianato de l-benziloxicarbonil-2-fenetilo a 0 C e a

-221-

reacçao foi agitada durante a noite. 0 tratamento produziu 153 mg do intermediário desejado.

B. (2-Metoxicarbonilpirrolid-l-il)carboxiFen

Por utilização do processo do

Exemplo 18B, o produto do Exemplo 117A foi desbenzilado para produzir 170 mg de intermediário.

C. Éster i-propilico de (2-metoxicarbonilpirrolid-1-il)carbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

Utilizando-se o processo de ligaçao corrente, o produto do Exemplo 92B (174 mg), o intermediário anterior (140 mg), 82 mg de DCC, 55 mg de HBT e 45 |il de N-metilmorfolina em 10 ml de CH^C^ produziram 230 mg de produto em puro. Cromatografia sobre silica gel por utilização de 1-15% de metanol em clorofórmio produziu 102 g de produto. RMN (300 Mz, CDCl^) delta 1,21 (6H, m), 2,09 (s, 3H), 2,78-2,89 (2H, m), 3,0-3,2 (2H, m), 3,65 (s, 3H) e 7,12-7,32 (m, 5H).

-222-

EXEMPLO 118

Éster i-propilico de N-metil-N-metoxicarbonilmetilaminocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I,Z=CH₃0C0CH2N(CH₃)C0NH; M= fenilo; Q=H; R =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHlllOH; e Z¹= =co₂ch(ch₃)₂)

A. Éster benzilico de N-(metoxicarbonilmetil)-N-

-metilaminocarbonilFen

A mistura da reacçao compreendendo ester benzilico de L-fenilalanina (171 mg), 72 mg de ester metilico de N-metil-N-clorocarbonilglicina e 47 pl de N-metilmorfolino em 15 ml de CE^C^ foi agitada a 0°C e depois durante a noite a temperatura ambiente. Adicionou-se 4-dimetilaminopiridina (10 mg) e a agitaçao con tinuou durante 3 horas.

Adicionou-se mais cloreto de carbamilo (40 mg) e a reacçao foi agitada durante vários dias.

solvente foi removido e o residuo foi cromatografado sobre silica gel por utilização de clorofórmio. 0 intermediário puro, 105 mg, foi isolado nas fracções 22

-30.

B. N-(Metoxicarbonilmetil)-N-metilaminocarbonilFen produto do Exemplo 118A foi desbenzilado seguindo-se o processo geral do Exemplo 18B para produzir 129 mg de intermediário em bruto.

C. Éster i-propilico de N-metil-N-metoxicarbonil~ metilaminocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

Utilizando-se o processo de ligaçao anteriormente descrito, 155 mg do produto do Exemplo 92B, 81 mg de DCC, 53 mg de HBT e 43 jil de N-metilmorfolina em 10 ml de Cl^C^ produziram 251 mg de produto. Cromatografia sobre silica gel com utilização de 1-2% de metanol em clorofórmio produziu 70 mg do produto desejado. RMN (300 Hz, CDC1₃) delta 1,23 (m, 6H), 2,03 (s, 3H), 2,9 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), e 7,1-7,28 (m, 5H).

EXEMPLO 119

Éster i_-propilico de N-metil-N-metoxicarbonilmetilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta (I,Z=CH₃0C0CH₂N(CH₃)C0NH; M=fenilo;

Q=H; R₂=n-butilo; X=ciclohexilo; W=CHIIIOH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Cloridrato de Nlenor-C-Sta

Por utilização do processo de ligaçao normal, BocNle (78 mg), cloridrato de éster .i-pro pilico de nor-C-Sta, 69 mg de DCC, 45 mg de HBT e 37 ^il de N-metilmorfolina em 10 ml de CH₂C1₂ produziram 171 mg de produto.

Boc foi removido a partir do

produto por tratamento com 10 ml de dioxano saturado com HC1 durante 3 horas. 0 tratamento produziu 155 mg do produto do titulo.

B. Éster i-propilico de N-metil-N-metoxicarbonilmetilaminocarbonilFenNlenor-C-Sta

Novamente, empregando-se o processo de ligaçao usual, 101 mg do produto do Exemplo 118B, 155 mg do produto anterior, 70 mg de DCC, 46 mg de HBT e 37 jul de N-metilmorfolina produziram 209 g de produto que foi purificado por cromatografia sobre silica gel utilizandose 0,5 - 1% de metanol em clorofórmio como eluente, 51 mg. RMN (300 Hz, CDC1₃) delta 0,85 (t, J=5Hz, 3H), 1,12 (m, 6H), 2,77 (s, 3H), 3,09-3,19 (m, 2H), 3,62 (s, 3H) e 7,1-7,29.

EXEMPLO 120

Ν-2-metilbutil amida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n_-butilo ;

X=ciclohexilo; W=CHIn0H; e Z¹=CONHCH₂CH(CH₃)C₂H₅

A. Cloridrato de Ν-2-metilbutilamida de nor-C-Sta

Partindo-se de 80,6 mg de Boc

-225-

nor-C-Sta e 22,3 mg de 2-metílbutilamina e utilizando-se o processo de ligação DCC do Exemplo 64A seguido pelo processo de desbloqueamento do Exemplo 64B, obtiveram-se 87 mg do produto do titulo.

B. Ν-2-metilbutilamida de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta

MorfolinocarbonilFenNle (100 mg) foi ligado a Nor-C-Sta Ν-2-metilbutilamida por utilização do processo DEC do Exemplo 55. 0 material em bruto foi cromatográfado sobre silica gel (99:1 de CHCl^:metanol) e depois sobre 80 fracções de 4 ml (97,5:2,5) para produzir 80 mg do produto desejado. RMN (300 Hz, CDCl^) delta 0,8-1,05 (m, 6H), 2,5 (d, J=5Hz, 2H), 3,0-3,4 (m, 4H), 3,4-3,84 (m, 4H), 5,35 (d, J=5Hz, 1H) e 7,3 (s, 5H).

EXEMPLO 121

N-2,2-Dimetil-3-dimetilamino-propil amida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino;

M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH 111 0H; e z¹=conhch₂c(ch₃)₂ch₂n(ch₂)₂)

A. Cloridrato de N-2,2-dimetil-3-dimetilaminopropil amida de nor-C-Sta

Partindo-se de 50 mg de Boc nor-226-

-C-Sta e 22 mg de N,N,2,2-tetrametil-l,3-propandimina e utilizando-se o processo de ligaçao DCC do Exemplo 64A seguido pelo processo de desbloqueamento do Exemplo 64B obtiveram-se 98 mg do intermediário desejado.

B. Cloridrato de 2,2-dimetil-3-dimetilaminopropil anida de S-MeCísnor-C-Sta

Utilizando-se 98 mg do produto do Exemplo 121A e 60 mg de BocS-MeCis e seguindo-se o processo de ligaçao DCC seguido pelo processo de desbloqueamento de Boc obtiveram-se 120 mg de produto.

C. 2,2-Dimetil-3-dimetilaminopropilamida de morfo- linocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta produto do Exemplo 121B (120 mg) e morfolinocarbonilFen (66 mg) foi ligado por utilização do processo DCC do Exemplo 55 para produzir 116 mg.

RMN (300 Hz, CDC1₃ + CHgOD) delta 0,81 (s, 6H), 1,15 (s, 6H), 2,0 (s, 3H), 3,1-3,4 (m, 4H), 3,4-3,64 (m, 4H) e 7,06-7,15 (m, 5H).

EXEMPLO 122

Ν-2-picolil amida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=morfolinocarbonilamino;

X=ciclohexilo; W=CHIH OH; e

M=fenilo; Q=H;

z¹=conhch₂c₅h₄n)

R₂=CH₃SCH₂-;

A. Dicloridrato de Ν-2-picolil amida de nor-C-Sta

Utilizando-se o processo de ligação do Exemplo 64A, 60,2 mg de Boc nor-C-Sta e 21,6 mg de 2-aminometilpiridina produziram 108 mg de Ν-2-picolil amida de Bocnor-C-Sta, que foram desbloqueados por utilização do processo do Exemplo 64B para produzir· 83 mg do intermedijí rio do titulo.

B. Dicloridrato de Ν-2-picolil amida de S-MeCisnor-C-Sta

BocS-MeCis (47 mg) foi ligado a 83 mg do produto anterior por utilização do processo DCC do Exemplo 55 para produzir 126 mg de produto, que foi desbloqueado com cloreto de hidrogénio em dioxano para produzir 78 mg do produto do titulo.

-228-

C. Ν-2-Picolil amida de morfolinocarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

Novamente, por utilização do processo de ligaçao de DCC do Exemplo 55, 78 mg do produto do Exemplo 122 e 44,9 mg de morfolinocarbonilFen produziram 113 mg do produto que foi cromatografado sobre silica gel por utilização de clorofórmio desde 99:1 até 95:5 como eluente, 22 mg. RMN (300 Hz, CDCl^) delta 2,05 (s, 3H), 2,85 (J=5Hz, 2H), 3,0-3,4 (m, 4H), 3,4-3,7 (m, 4H) e 7,0-7,9 (m, 9H).

EXEMPLO 123

Éster i-propilico de 3-hidroxipirid-2-ilcarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I,Z=3-hidroxipirid-2-ilcarbonilamino; M= fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo ;W=CHII I0H; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

De acordo com o processo para a preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizaram 34 ul, 1,2 equivalentes de trietilfamina para neutralizar o cloridrato de amina, 110 mg do produto do Exemplo 39 e 28 mg de ácido 3-hidroxipicolinico produziram 78 mg de pó incolor, Rf de CCF de 0,42 em 2:1 de acetato de etilo-hexano.

1H RMN CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,26 e 1,27 (d, 311 ea), 2,11 (s, 3H), 2,60 e

2,85 (dd, 1H ea), 3,26 (m, 3H), 4,09, 4,37, 4,45, 4,79 e 5,03 (m, 1H ea), 6,5, 6,81 e 8,49 (d, 1H ea), 8,08 (m,

1H).

EXEMPLO 124

Ciclohexilmetil cetona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=n.-butilo; X=ciclohexilo; W=CH 111 OH; e Z^-COCH^H^ )

A. (S)-4-t-butoxicarbonilamino-3(R)-benziloxi-1,5-dicicl oh exil-2-but anona

Uma solução de brometo de ciclohexilímetilmagnésio (a partir de 0,78 ml de brometo de ciclohexilmetilo e 0,14 g de magnésio em 3 ml de eter) foi tratada com 1,00 g de 3(S)-t-butoxicarbonilamino-2(R)benziloxi-4-ciclohexilobutiraldeido (produto do Exemplo 5A, E.U.A. 4.668.769) em 6 ml de eter a 5°C durante 2-3 minutos. Após 25 minutos, a mistura foi tratada com cloreto de amónio aquoso, foi extraída com eter e lavada com HC1 IN e bicarbonato aquoso, foi seca, concentrada e purifi. cada sobre silica, eluindo-se com acetato de etilo/hexanos, produzindo 278 mg duma mistura dos dois isómeros alcoólicos, Rf’s de CCF de 0,48 e 0,41 em 1:3 de acetato de etilo/hexanos. Este produto foi dissolvido em 5 ml de 1:2 de eter-acetona e foi tratado a 0°C com 1 ml de solução de ácido cromico (Org. Syn. Coli. Vol. V, p. 310).

Após 15 minutos, a mistura foi diluida com eter e lavada com NaOH aquoso, foi seca e cromatografada sobre silica em acetato de etilo/hexanos, produzindo 201 mg de óleo amarelo, Rf de CCF de 0,59 em 1:3 de acetato de etilo-hexanos.

B. Cloridrato de 4(S)-amino-3(R)-benziloxi-l,5-diciclohexilo-2-butanona produto do Exemplo 124A (195 mg) foi dissolvido em 2 ml de HC1 4N-dioxono e foi agita do a 25°C durante 1 hora, foi concentrado e seco, produzindo 165 mg de pó incolor, Rf de CCF de 0,56 no siste ma C(placa manchada exposta a NH^ antes da eluição).

C.

Éster benzílico de ciclohexilmetíl cetona de morfolinocarbonilFenMlenor-C-Sta

De acordo com o processo geral de preparaçao do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizaram 1,3 equivalentes de trietilamina para neutralizar o sal de amina, 158 mg do produto do Exemplo 124B e 152 mg do produto do Exemplo 7C produziram, após purificação sobre silica em acetato de etilo-hexanos, 228 mg duma espuma incolor, Rf de CCF de 0,29 em 2:1 do sistema A.

231-

D. Ciclohexilmetil detona de morfolinocarbonilFenNlenor-C-Sta produto do Exemplo 124C (220 mg) foi dissolvido em 20 ml de 1:1 de metanol-ácido acético e foi agitado com 250 mg de 10% de Pd/C durante 22 horas a 25°C e a 344,74 kPa (50 p.s.i.) de hidrogénio, foi filtrado através de Supercel, foi concentrado, co-evaporado com tolueno adicionado e eter, e foi seco, produzindo 179 mg duma espuma âmbar que foi cromatografada sobre silica em acetato de etilo-hexanos, produzindo 131 mg de um pó incolor, Rf de CCF de 0,44 em acetato de etilo.

1H RMN CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,87 (t, 3H), 2,40, 2,53, 3,05, e 3,12 (dd, 1H ea), 3,28 (m), 3,62 (m, 4H), 4,07 (br, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,52 (m, 2H), 5,00, 6,23 e 6,51 (d, 1H ea).

EXEMPLO 125

Etileno cetal de éster i.~P^r°pili^co de 4-oxopiperidinocarbo nilFenS-MeCisnor-C-Sta (I,Z=etileno cetal de 4-oxopiperidinocarbonilamino; M=fenilo; Q=B;

W=CHIU0H; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

R₂=CH₂SCH₂-;

X=ciclohexilo;

De acordo com o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 50, 150 mg do produto do Exemplo 39 e 32 pl de etileno cetal de 4-

-piperidona produziram 60 mg de pó incolor, Rf de CCF de

0,30 em acetato de etilo, CLAR de 2,76 e 3,09 minutos (cai de 2:1) em 80/20 de acetonitrilo-água. 0 componente maior

I foi separado por CLAR de fase invertida semi-preparativaj sobre uma coluna Zorbase C-8 de 9,8 x 250 mm em 70/30 de acetonitrilo-água, 60 mg da mistura produzindo 28 mg do composto eluido em primeiro lugar.;

1H RMN CDC1₃, 250 MHz, parcial, delta ppm: 0,92 (m), 1,26 e 1,28 (d, 3H ea), 2,09 (s, 311), 2,72, 2,93, 3,08 e 3,29 (dd, 1H ea), 3,34 (m), 3,92 (s, 4H), 4,10 (br, 1H), 4,35-4,53 (m, 3H), 4,87 (d, 1H), 5,06 (septeto, 1H), 6,95 e 7,11 (d, 1H ea), 7,18-7,38 (m, aromático).

EXEMPLO 126

Éster .i-propilico de N-BocPiperid-4-ilcarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta (I, Z=N-Bocpiperid-4-ilcarbonilamino ;M=f enilo; Q==H;

R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CHIUOH; Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

Utilizando-se o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizou 1,3 equivalentes de trietilamina para neutralizar o cloridrato de amina, 230 mg do produto do Exemplo 39 e 97 mg de ácido N-Boc-isonipecótico produziram 241 mg de pó incolor, Rf de CCF de 0,49 em acetato de etilo.

1H RMN CDC1₃, 250 MHz, parcial,

-233 delta ppm: 1,28 (d, 6H), 1,46 (s, 911), 2,14 (s, 3H), 2,62,

2,91, 3,05 e 3,16 (dd, 1H ea), 2,70 (m), 3,39, 5,98, 6,53 e 6,75 (d, 1H ea), 4,35 e 4,45 (m, 1H ea), 5,04 (septeto,

1H), 7,13-7,37 (m, aromático).

EXEMPLO 127

Éster ji-propilico de S-MeCisnor-C-Sta de piperid-4-ilcarbonilFen (i,Z=piperid-4-ilcarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂= =CH₃SCH₂-; X=ciclohexilo; W=CH OH; e Z^CO^HfCEpp produto do Exemplo 126 (175 mg) foi dissolvido em HC1 4N-dioxano durante 30 minutos a 25°C, concentrado e seco produzindo 157 g dum pó amarelo claro, Rf de CCF de 0,20 no Sistema C(a placa manchada foi exposta a amónia antes da eluição).

III RMN DMS0-d₆, 250 MHz, parcial, delta ppm: 1,28 e 1,29 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 4,00, 4,21 e 4,45 (m, 1H ea), 4,86 (septeto, 1H), 5,36, 7,69, 8,15 e 8,30 (d, 1H ea).

EXEMPLO 128

Éster i_-propilico de 4-oxopiperidinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I,Z=4-oxopiperidinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂-; X=ciclohex'ilo; W=CHHIOH; e Z¹ ₂')

A. Éster benzílico de 4-oxopiperidinocarbonilFen

Dissolveu-se cloridrato de 4-piperidona (819 mg) em 15 ml de diclorometano e aquele foi tratado a 0°C com 740 pl de trietilamina e 1,50 g do produto do Exemplo 7A (isocianatoFenOBn). Após 1,5 horas, a mistura foi dissolvida em acetato de etilo, foi lavada com HC1 IN (3x), NaHC0₃ aquoso e salmoura, foi seca sobre MgSO^, foi concentrada, foi dissolvida em 10 ml de 2:1 de acetato de etilo-hexanos quentes, foi arrefecida e filtrada para remover 0,6 g de um sólido, Rf de CCF de 0,53 em 1:1 do sistema A. Os licores-mae foram cromatografados sobre silica em 1:1 de acetato de etilo-hexanos, produzindo 322 mg dum óleo claro, Rf de CCF de 0,13 no Sistema A, cujo espectro de RMN estava de acordo com a estrutura pequena.

B · 4-0xopiperidinocarbonilFen produto do Exemplo 128A (297 mg) foi dissolvido em 15 ml de 1:10 de ácido acético-metanol e foi agitado a 25°C e 344,74kPa (50 p.s.i.) de hidro-235-

génio com 150 mg de 10% de Pd/C durante 30 minutos, foi filtrado concentrado e co-evaporado com tolueno adicionado para produzir 227 mg de espuma incolor, Rf de CCF de 0,05 em acetato de etilo.

C. Éster i-propilico de 4-oxopiperidinocarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta

Utilizando-se o processo de preparaçao e purificação do produto do Exemplo 38B, excepto que se utilizou trietilamina para neutralizar o cloridrato de amina, 100 mg de cloridrato de éster de isopropilo de S-MeCisnor-C-Sta (produto do Exemplo 48D) e 73 mg do produto do Exemplo 128 B produziram 116 mg de sólido incolor, Rf de CCF de 0,29 em acetato de etilo.

-236-

EXEMPLO 129

Éster jl-propilico de carboxilbutilcarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I,Z=HO₂C(CH₂)₄CONH-; M=fenilo; Q=H; R^CHgSCH^ X=ciclohexilo; W=CHll( OH; e Z^=C0₂CH(CHg)₂)

A. Éster i-propilico de (CHg )gCO₂C(CIi₂ j^COFe S-MeCisnor-C-Sta

Éster mono terc-butilico de ácido de hexanodicarboxilico (0,10 g) foi condensado com

0,10 g de cloridrato de éster i_^-P^ropili^c° de Fen S-MeCisnor-C-Sta por utilização de DEC, como descrito no Exemplo 58. Cromatografia sobre Si0₂ (1:19 de MeOHrCHgClg) produziu 95 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 1,41 (s, 9H), 4,38 (m, 2H), 4,62 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).

B. Éster i-propilico de carboxibutilcarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta

Uma solução de 90 mg do éster t-butilico anterior em 2 ml de ácido trifluoroacético e 2 ml de CHgClg foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Após tratamento padrao com acido-base, o material em bruto foi purificado por cromatografia (9:1 de CHgClg: MeOH) para produzir 52 mg de produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 2,08 (s, 3H), 4,40 (m, 2H), 4,73 (m, 1H), 4,97 (m, 1H).

-237-

EXEMPLO 130

Éster χ-propilico de aminopentilcarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta (I,Z=H₂N(CH₂)₅CONH-; M=fenilo; Q=H; R₂=CH₃SCH₂;

X=ciclohexilo; W=CHHIOH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

A. Éster i-propilico de BocaninopentilcarbonilFen S-MeCisnor-C-Sta

Ácido N-Boc-6-aminohexanóico (59 mg) foi ligado a cloridrato de i-propilester de FenS-MeCisnor-C-Sta (133 mg) por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 58) para produzir 145 mg de produto em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDC1₃) delta 1,43 (s, 9H), 2,12 (s, 3H), 4,35 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,62 (m, 1ΙΊ), 5,03 (m, III).

B. Éster i-propilico de aminopentilcarbonilFenS-MeCisnor-C-Sta

Uma solução de 140 mg do produto do Exemplo 130A em 3 ml de HC1 4N em dioxano foi agitada durante 45 minutos e concentrado. Tratamento acido-base produziu 100 mg do produto puro. RMN (300 MHz, CDClg) delta 2,07 (s, 3H), 4,36 (m, 2H), 4,64 (m, 1H), 4,98 (m, 1H).

-238-

EXEMPLO 131

Éster i_-propilico de morfolinocarbonilFenAspnor-C-Sta (I,Z= =morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H; clohexilo; W=CHIUOH; e Z¹=C0₂CH(CH₃)₂)

R₂=HO₂CCH₂;

X=ciA· Éster benzílico de morfolinocarbonilFen Asp

Éster beta-benzilico de ácido aspartico (0,4 g) foi tratado com ester de hidroxissuccinimida de morfolinocarbonilFen da maneira descrita no Exemplo 80 para produzir 0,42 g do material em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d^) delta 4,34 (m, 1H), 4,61 (m, 1H), 5,10 (s, 2H).

B. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFen Asp (ésterO-benzílico)nor-C-Sta produto do Exemplo 131A (0,29 g) foi ligado a 0,12 g de éster i-propilico de nor-C-Sta por utilização de reacçao DEC padrao (Exemplo 76) para produzir 0,20 g de material em bruto que foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, CDClg) delta 4,39 (m, 2H), 4,65 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,09 (AB, 2H).

-239-

C. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFen Aspnor-C-Sta

Uma solução de 0,20 g do ester benzilico em bruto anterior e de 0,4 g de 10% de Pd sobre carvao em 30 ml de MeOH foi hidrogenada a 310,26 kPa (45 p.s.i.) durante 30 minutos. A mistura foi filtrada através de Celite e foi concentrada. 0 residuo foi cromatografado (23:1:1 de CHCl^MeOIkAcOH) para produzir 81 mg de produto puro. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) 4,17 (m, 1H) , 4,28 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,84 (m, III).

EXEMPLO 132

Éster i-propilico de morfolinocarbonilFen Asnnor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=fenilo; Q=H;

X=ciclohexilo; W=CHU10H; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

R₂=I-I₂NCOCH₂;

A. MorfolinocarbonilFenAsn

Asparagina (0,5 g) foi tratada com 1,0 g de hidroxi succinimida de morfolinocarbonilFen como descrito no Exemplo 80. 0 material em bruto (0,80 g) foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMS0-d₆) delta 4,10 (m, 1H), 3,34 (m, 1IÍ), 4,53 (m, 1H)_S

-240-

Β. Éster i-propilico de morfolinocarbonilFen Asnnor-C-Sta produto anterior (0,18 g) foi ligado a 0,10 g de ester i-propilico de nor-C-Sta por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 76) para produzir o,17 g de produto puro após cromatografia (9:1 de CE^C^: MeOH). RMN (300 MHz, CDCl^ delta 4,39 (m, 2E), 4,62 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).

EXEMPLO 133

Éster i_-propilico de morfolinocarbonilFenValnor-C-Sta (I,

Z=morfolinocarbonilamino =ciclohexilo; W=CHllí OH;

M=fenilo; Q=H; R₉=CH(CH₃)₂;

e Z^CO^IKCH^p x=

A. MorfolinocarbonilFenVai

Valina (0,40 g) foi tratada com 0,60 g de ester de hidroxissuccinimida de morfolinocarbonilFen como descrito no Exemplo 80. 0 material em bruto foi utilizado sem purificação adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d₆) delta 0,92 (d, J=7Hz, 3H), 4,18 (m, 1H), 4,43 (m, 1H) .

-241-

Β· Éster n-propilico de morfolinocarbonilFenValnor-C-Sta produto anterior (0,17 g) foi ligado a 0,10 g de éster i-propilico de mor-C-Sta por utilização da reacçao DEC padrao (Exemplo 76). 0 material em bruto foi cromatografado (24:1 de CH₂Cl₂:Me0H) para produzir (0,15 g) de produto puro. RMN (300 MHz, CDCl^) delta 0,77 (d, J=6IIz, 3H), 0,84 (d, J=7Hz, 3H), 4,45 (m, 1H), 4,52 (m, III), 5,00 (m, 1H).

EXEMPLO 134

Éster i-propilico de isovalerilFen Nlenor-C-Sta (I,Z=(CII₃)₉

CHCH₂C0NH; M=fenilo; Q=H; R₂=ii-butilo; X=ciclohexilo;W= =CHHI0H; e Z¹=CO₂CH(CH₃)₂)

Empregando-se o processo de ligaçao atrás mencionado do Exemplo 5B, 107 mg de isovalerilFen Nle, 72 mg de éster ji-propilico de nor-C-Sta, 68 mg de HBT e 57 mg de DEC em 1 ml de CH₂C1₂ produziram, após cromatografia sobre Si0₂, utilizando-se 1:1 de acetato de etilo:hexanos como eluente, 121 mg do produto desejado. RMN (300 MHz, CDCip, delta 0,9 (m, 9H), 1,22 (d, 6H), 2,93-3,08 (m, 211), 4,05 (m, 1H), 4,19, 4,40, 4,66 (m, III ea), 4,98 (septeto, 1H), 6,09, 6,25, 6,52 (d, 1H ea) e 7,1-7,24 (m, 5H).

-242-

EXEMPLO 135

Éster i^-propilico de morfolinocarbonilhomoFenNlenor-C-Sta (I,Z=morfolinocarbonilamino; M=benzilo; l^^n-butilo; Q=H;

X=ciclohexilo; Z^CO^HÍCH^; e W=CHH|01I)

Utilizando-se o processo DCC do Exemplo 55, 138 mg de morfolinocarbonilhomoFenNle, 95 mg de cloridrato de ester i.-propilico de nor-C-Sta, 70 mg de DCC, 46 mg de HBT e 38 ul de morfolino de N-metilo produziram, após cromatografia sobre 8102, utilizando-se 1-2% de metanol em clorofórmio, 62 mg do produto desejado. RMN (300 MHz,CDCl₃) delta 1,2 (d, 511), 3,2 (m, 211), 3,5 (m, 2H) e 7,2 (s, 5H).

Claims (9)

1. reivindicações raçao dum composto de

   I^a.- Processo fórmulas para a prepa- (II)

   -244- na qual Z é Rj-(Y)_m~(A)p, em que Rj é alquilo(C|-Cg), amino, alcoxi (C^-C^), alquil (C^-C₄)-amino, alcoxi (Cj-C₃)-alquileno-(C₂-C₄)-amino, carboxialquilo (C^-C^), hidroxialquileno (C₂~C₄)-amino, alcoxi (Cj-C₃)COCH₂N(CH₃), aminoalquilo (C^-Cg), morfolino, piperidilo, hidroxipiperidji no, 4-oxopiperidino, piperazino, 4-oxopiperidino-etileno-cetal, 4-alquil (C^-C^)-piperazino, tiomorfolino, 1-óxido de tiomorfolino, 1,1-dioxido de tiomorfolino, N-alcoxi (C^-C^)-carbonilpiperidilo, 4-alcoxi (C^-C₄)-carbonilpiperazino, 3-oxomorfolino, 3,5-dioxomorfolino, hidroxipiridilo, piridilo, (s)-pirrolid-2-ilo, N-_t-butoxicarbonil-(s)-pirrolid-2-ilo, alcoxi (C^-C₃)carbonil-(s)-pirrolid-2-ilo ou 4-alcanoil (C|-C₄)-piperazino; Y é C=0, P(OCH₃)= =0 ou S0₂; A é N (CHg), NH ou 0; a e j) sao cada um inteiros de 0 a 1; M é fenilo, benzilo, naftilo, tienilo, metoxifenilo, hidroxifenilo, clorofenilo ou cicloalquilo (Cg— -Cy); Q é metilo ou hidrogénio; R₂ e alquilo (C^-Cg), alquil (CjpCg) tio-alquilo (C^-C₂), alcoxi (C^-C^-alquilo-(C^-C₂), benziloxialquilo (C^-C₂), benzilo, hidroxialquilo (Cj-C₂), carboxialquilo (C^-C₂), guanidoalquilo (C^-Cg), alquilo (C^-Cg)-sulfinilalquilo (C^-C^), alquilo (Cj-C^-sulfonilalquilo (Cj-C^), 4-benziloxicarbonilaminobutilo, 4-aminobutilo, imidazol-4-ilmetilo, N-_t-butoxicarbonilimidazol-4-ilmetilo ou carbamilalquilo (C^-C^; X é ciclo-hexilo, _i-propilo ou fenilo; W é CH111 OCO alquil (Ci-C^-di-alquil-CCi-CR^amino, CHHI OCO-alquilCC^-Cg) piperidino, CHHIOH, C=0, CH 111 Ng, CH<< Ng, CH NH₂, CHHINH₂, C(CH₃)II I0H, C(CH₃)^IOH, CH H (OCO-alquilo (^C1~^C2) °^u CHHlOCO-alquileno(C1-C₂) CO₂H; Z¹ é CH₂OH ou R-S-T em que R é C=0, S é 0, NH, N(CH₃), CH_2> ou uma ligaçao quimica ligando R e T; T é alquilo-(C^-Cg), hidroxialquiloCCj-C^), CONH-alquilo(Cj-C^), hidrogénio, trifluoroetilo, cicloalquilo (Cg-Cy), cicloalquil (Cg-Cy)-metilo, fenilo, benzilo, aminoalquilo (C₂~Cg), 0-alquil (C^-C₂)-hidroxilamino, morfolino, 4-alquilo (C_x-C₂)-piperazino ou omega-dialquil (C_x-C₂)-aminoalquilo

   L é CH ou N; é imidazole-4-ilmetilo ou alquilo (C^C^) e R^ é alcoxi (C^-C^) ou alquil (U_x-C₄)-amino, com a condição de que quando m é 0, £ é 0; quando A é 0 , Y é C=0; quando T é CONH-alquilo (CpC^, S e NH, N(CH₃) ou CH₂; quando T é alquilamino (Cg-C^), 0-alquil (C|-C₂)-hidroxilamino, morfolino ou 4-alquil (C|~C₂)-piperazino, S é CH₂ ou uma ligaçao quimica ligando R e T, caracterizado por se formar uma ligaçao amida, C(O)N, por acoplamento com desidrataçao em que os grupos funcionais nao involvidos na reacçao podem ser bloqueados seguida pelos passos facultativos de 1) remoção selectiva dos grupos de bloque amento 2) oxidaçao de um grupo sulfureto até sulfóxido ou sulfona, 3) oxidaçao de W, em que ele é CH/////OH ou CH OH até C=0 4) acilaçao de W em que ele é CH//////OH e, se desejado, preparaçao de um sal farmaceuticamente aceitável do produto.
2. 2^â.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracetrizado por se obter um composto de fórmula I em que a ligaçao amida é formada entre os fragmentos

   X e

   -246-
3. 3^a.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto de fórmula I em que a ligação de amida é formada entre os fragmentos
4. 4^a.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto de formula II em que a ligaçao de amida e formada entre os fragmentos

   -247-
5. 5^a.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o reagente de acoplamento ser 1-hidroxibenzotriazole e diciclo-hexilcarbodi-imida.
6. 6^a.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o reagente de acoplamento ser 1-hidroxibenzotriazole e dimetilaminopropil-etil

   -carbodi-imida.
7. 7^a.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o passo facultativo de oxidaçao dum grupo sulfureto ser efectuada com ácido m-cloroperbenzoico.
8. 8^â.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o passo facultativo de oxidaçao de CH//////OH ou CHOH ser efectuada com dicromato de piridio e anidrido acético.
9. 9^a.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o passo facultativo de acilaçao de CH//////OH ser efectuado com um ácido e com os reagentes de acoplamento das reivindicações 5 ou 6

   -248ou com um haleto de ácido e uma amina terciária orgânica.