PT535645E

PT535645E - Derivados carbamato de 4-amino-3-isoxazolidonas e 3-amino-1-hidroxipirrolidin-2-onas processo para a sua preparacao e sua aplicacao como medicamentos

Info

Publication number: PT535645E
Application number: PT92116760T
Authority: PT
Inventors: Lawrence Leo Martin; Denise Mary Flanagan
Original assignee: Aventis Pharma Inc
Priority date: 1991-10-01
Filing date: 1992-09-30
Publication date: 2001-09-27
Also published as: CA2079548A1; KR100271416B1; ES2157201T3; US5153193A; KR930007947A; FI981710A0; AU2606592A; FI102178B1; DE69231817T2; HUT65277A; DE69231817D1; NO923803D0; FI102178B; ATE201024T1; EP0535645A2; CZ281982B6; HU215120B; EP0535645A3; MX9205577A; NO923803L

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS CARBAMATO DE 4-AMINO-3-ISOXAZOLIDONAS E 3-AMINO-l-HI-DROXIPIRROLIDIN-2-ONAS, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO E SUA APLICAÇÃO COMO MEDICAMENTOS" A presente invenção refere-se aos derivados do carbamato das 4-amino-3-isoxazolidinonas e 3-amino-l-hidroxipirrolidin-2--onas, ao processo para a sua preparação e à sua utilização como medicamentos. A WO-A-8 808 708 descreve determinados análogos de galantamina e a sua preparação e utilização para o tratamento da doença de Alzheimer. A ΕΡ-Ά-0 253 372 descreve determinados análogos de fisostigmina e a sua preparação e a sua utilização como agentes melhoradores da memória e analgésicos. A presente invenção apresenta os compostos com a Fórmula I descritos abaixo

em que R é

ou

OR5 1

R4 é hidrogénio, ou fenil (alquilo (Ci-C6)}, Rs é hidrogénio ou fenil(alquilo (Οχ-Οβ) ); X é hidrogénio, halogénio, alquilo (Cx—Ce) ou alcoxi (Ci-C6);

Ri é alquilo (Ci-C6) ou fenil (alquilo (Ci~C6) ); R2 é hidrogénio ou alquilo (Οχ-Οε) ; R3 é hidrogénio, alquilo (Ci-Ce) r alcenilo (até C6), alcinilo (até Οβ), fenil (alquilo (Cx-Ce) ), formilo, alquil (Ci~C6) carbonilo, fenil (alquil (Οχ-Οβ)) carbonilo ou alcoxi (Cx-Cs) carbonilo em que fenilo era cada ocorrência é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 substituintes sendo cada um independentemente alquilo (Ci~C6), alcoxi {Οχ-Οβ) , hidroxi, halogénio, trifluorometilo ou nitro; ou um sal destes de adição ácido farmaceuticamente aceitável; compostos estes que são vantajosos para aleviar várias disfunções da memória caracterizado por uma deficiência colinérgica como a doença de Alzheimer.

Os compostos com a Fórmula I da presente invenção agrupa os compostos com a Fórmula IV e VI apresentados abaixo. R,

0R5 (IV)

(VI) 2 Γ ι~ Ν· --t A não ser que estabelecido ou indicado de outra forma, as definições seguintes devem aplicar-se na descrição e nas reivindicações juntas. 0 termo alquilo (Ci—Cg) tem o significado de um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada tendo 1 a 6 átomos de carbono. Os exemplos do referido alquilo (Οχ-Οβ) incluem o metilo, o etilo, o n-propilo, o isopropilo, o isso-butilo, o sec-butilo e o pentilo ou o hexilo de cadeia linear ou ramificada. 0 termo halogénio significa fluoreto, cloro, bromo ou iodo.

Na descrição e nas reivindicações juntas, uma dada fórmula química ou nome deve englobar os isómeros geométricos, estereo, ópticos e tautoméricos quando estes isómeros existam.

Os compostos da presente invenção são preparados por utilização de um ou mais dos passos de síntese descritos abaixo.

Na descrição dos passos de síntese, as notações X, R e R1-R5 tem os significados respectivos dados acima a não ser que seja estabelecido ou indicado de outra forma.

PASSO A

Um composto com a Fórmula VIII (ver por exemplo, Hamer et al., US-A-4 791 107 sobre a síntese deste) é hidrolisado in situ e acoplado a um composto com a Fórmula IX, em que R é definido anteriormente excepto em que nem R4 nem R5 podem ser hidrogénio, para dar um composto com a Fórmula X. 3

(VIII) + R NH2 (IX) R.

Q

V

H / l N—C—0 x

(X)

Esta reacção é tipicamente conduzida deixando primeiro reagir o composto VIII com uma base forte o butóxido terciário de potássio a uma temperatura de 0o a 25°C e adicionando depois carbonildiimidazolo e o composto IX à mistura reaccional e agitando a mistura resultante a uma temperatura de -30° a +25°C.

Em relação à preparação dos compostos de partida com a Fórmula IX em que R é _^

remete-se o leitor, por exemplo para a EP-A-0 318 091 (1989). Em relação á preparação dos

compostos de partida com a Fórmula IX, em que R é , remete-se o leitor para J. Med. Chem., Y5, 1013 (1970). 4 Γ u

PASSO B

Faz-se reagir um composto com a Fórmula XV obtido a partir do PASSO A com 1,4-ciclohexadieno na presença de paládio em carbono para dar um composto com a Fórmula xvi (reacção de transferência de hidrogénio, ver Felix et al., J. Org. Chem., 43, 4194 (1978)). Esta reacçâo é tipicamente conduzida na presença de um solvente adequado como o etanol absoluto a uma temperatura de 0o a 25°. 0

0% (XVI)

PASSO C

Submete-se um composto com a Fórmula XVII obtido no PASSO A a uma reacção de hidrogenação conduzida como em rotina conhecida na técnica para dar um composto com a Fórmula XVIII. 5

u

H2, Pd/C

(XVIII)

Os compostos com a Fórmula I da presente invenção são vantajosos para o tratamento de várias disfunções de memória caracterizadas por uma deficiência colinérgica como a doença de Alzheimer. A actividade para aliviar estas disfunções da memória manifesta-se pela capacidade destes compostos inibirem a enzima acetilcolinesterase e desta forma aumentar os niveis de acetilcolina no cérebro.

Ensaio de Inibição da Colinesterase

As colinesterases encontram-se no corpo, quer no cérebro quer no soro. Contudo, somente a distribuição da acetilcolinesterase do cérebro (AchE) esta correlacionada com a inervação colinérgica central. É sugerido que a mesma inervação que está enfrquecida nos doentes de Alzheimer. Determinou-se in 6 f vitro a inibição da actividade da acetilcolinesterase no striatum do rato.

Inibição in vitro da Actividade da Acetilcolinesterase no Striatum do Rato A acetilcolinesterase (AChE), que é muitas vezes denominada colinesterase verdadeira ou especifica, encontra-se nas células dos nervos, no músculo esquelético, no músculo liso, em várias glândulas e nas células de sangue vermelhas. A AchE pode distinguir-se das outras colinesterases pelas especificidades do substracto e do inibidor e pela distribuição regional. A sua distribuição no cérebro correlaciona-se grosseiramente com a inervação colinérgica e a sua subfraccionação mostra um nível mais elevado nos nervos terminais.

De uma forma geral é aceite que o papel fisiológico da AchE é a hidrólise rápida e a inactivação da acetilcolina. Os inibidores da AchE mostram efeitos colinomiméticos marcantes nos orgãos com efeito colinergicamente inervado e têm sido utilizados terapeuticamente no tratamento do glaucoma, miasténia grave e ileus paralítico. Contudo, os estudos recentes têm sugerido que os inibidores de AchE podem também ser benéficos no tratamento da doença de Alzheimer. 0 método descrito abaixo foi utilizado na presente invenção para ensaiar a actividade da colinesterase. Isto é uma modificação de método de Ellman et al., Biochem. Pharmacol. 7, 88 (1961). 7 Γ U,

Procedimento: A. Reaqentes- 1. Tampão de fosfato 0,05 M, pH 7,2 (a) 6,85 g NaH2P04.H20/100 ml H20 destilada (b) 13,40 g Na2HPO4.7H2O/100 ml H20 destilada (c) adicionar (a) a (b) até o pH atingir 7,2 (d) Diluir 1:10 2. Substracto em tampão (a) 198 mg de cloreto de acetiltiocolina (10 mM) (b) levar para 100 ml com tampão fosfato 0,05 M, pH 7,2 (reagente 1) 3. DTNB em tampão (a) 19,8 mg de ácido 5,5-ditiobisnitrobenzóico (DTNB) (0,5 mM) (b) levar para 100 ml com tampão fosfato 0,05 M pH 7,2 (reagente 1) 4. Faz-se uma solução mãe 2 mM do medicamento a ensaiar e leva-se para o volume com DTNB 0,5 mM (reagente 3). Os medicamentos são diluídos em série (1:10) de forma que a concentração final (em cada cuvete) é 10~4M e varrem-se pela actividade. Se activo, os valores de IC50 são determinados a partir da actividade inibidora das concentrações subsequentes. B. Preparação do Tecido-

Decapitaram-se ratos masculinos Wistar, removeram-se os cérebros imediatamente, dissecou-se livremente corpora striata pesou-se e homogeneizou-se em 19 volumes (aproximadamente 7 mg proteína/ml) de tampão 8 Γ L-Zr de fosfato 0,05 Μ, ρΗ 7,2 utilizando um homogeneizador Potter-Elvehjem. Adicionou-se uma aliquota de 25 microlitro do homogeneizado a 1,0 mililitro de veiculo ou várias concentrações do medicamento a ensaiar e pré-incubou-se durante 10 minutos a 37°C. C. Ensaio-

Mediu-se a actividade da enzima com o espectrofotómetro Beckman DU-50. Este método pode ser utilizado para as determinações de IC50 e para a medição das constantes cinéticas.

Valores estabelecidos no Instrumento Módulo Cinético "Soft-Pac" #598273 (10)

Programa #6 "Kindata":

Fonte - Vis

Comprimento de onda - 412 nm "Sipper" - nenhum

Cuvetes - cuvetes de 2 ml utilizando 6 auto analisadores

Branco - 1 por cada concentração de substracto Intervalo de tempo - 15 segundos (15 ou 30 segundos para a cinética)

Tempo total - 5 minutos (5 ou 10 minutos para a cinética)

Traço - sim

Abertura - escala automática Declive - com incrementos Resultados - sim (dá declive)

Factor - 1 9

Os reagentes são adicionados às cuvetes de branco e de amostra como se segue:

Branco:

Controlo: 0,8 ml Tampão de Fosfato/DTNB 0,8 ml Tampão/Substracto 0,8 ml Tampão Fosfato/DTNB/Enzima 0,8 ml Tampão Fosfato/Substracto

Medicamento: 0,8 ml Tampão Fosfato/DTNB/Medicamen- to/Enzima 0,8 ml Tampão Fosfato/substracto

Os valores do branco foram determinados para cada corrida para controlar a hidrólise não enzímátíca do substracto e estes valores foram automaticamente subtraídos pelo programa "kindata" disponível no módulo "soft-pac" da cinética. Este programa também calcula a velocidade de alteração da absorvância para cada cuvete.

Determinações de ICso A concentração de substracto é 10 mM diluído a 1:2 em ensaio dando uma concentração final de 5 mM. A concentração de DTNB é 0,5 mM dando uma concentração de 0,25 mM. declive do controlo- declive do medicamento x 100 % de Inibição= declive do controlo 10 Γ

Os valores de IC50 são calculados a partir da análise log--"probit".

Os resultados deste ensaio para alguns dos compostos da presente invenção e para a fisostigmina (composto de referência) são apresentados na Tabela 1.

Tabela 1

Composto IC50 (μΜ) (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-Hexahidro-1,3a, 8-trimetilpirrolo[2,3-b]indol~ 5-il[2-oxo-l-(fenilmetoxi)-3R-pirrolidinil]carbamida 0, 067 (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-Hexahidro-1,3a, 8-trimetilpirrolo[2,3-b]indol-5-il[2- (fenilmetil) -3-oxo-4R-isoxazolidinil]carbamato hemi-hidrato 0,50 (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-Hexahidro-1,3a, 8-trimetilpirrolo[2, 3-b]indol-5-il[2-oxo-l-(hidroxi)-3R-pirrolidinil] carbamato, sal de citrato 2,31 (Composto de Referência) Fisostigmina 0,034

Esta utilidade é depois demonstrada pela capacidade destes compostos para repor a deficiência colinérgica de memória no Ensaio de Esquecimento no Escuro descrito abaixo. 11 f

Ensaio de Esquecimento no Escuro

Neste ensaio testam-se ratos em relação à sua capacidade para se lembrarem de estímulos desagradáveis durante um período de 24 horas. Coloca-se um rato numa câmara que contém um compartimento escuro; uma luz forte incandescente condu-lo ao compartimento escuro, onde é provocado um choque eléctrico através dos pratos de metal no chão. Remove-se o animal do dispositivo de ensaio e ensaia-se novamente, 24 horas mais tarde, em relação à capacidade de se lembrar do choque eléctrico.

Se se administrar escopolamina, um agente anticolinérgico que é conhecido por provocar enfraquecimento da memória antes de uma exposição inicial do animal à câmara de ensaio, o animal torna a entrar no compartimento escuro logo após ter sido colocado na câmara de ensaio 24 horas mais tarde. Este efeito da escopolamina é bloqueado por um composto de ensaio activo, resultando num intervalo maior antes da re-entrada no compartimento escuro.

Os resultados para um composto activo são expressos como a percentagem de um grupo de animais nos quais o efeito da escopolamina é bloqueado, manifestado-se por um aumento do intervalo entre ser colocado na câmara de ensaio e a re-entrada no compartimento escuro.

Os resultados deste ensaio para alguns dos compostos da presente invenção e os da tacrina (composto de referência) são apresentados na Tabela 2. 12

Tabela 2

Dose (xag/kg de pe- % de Animais com so de corpo, s.c.) Falta de Memória

Composto

Reversível Induzida pela Escopolamina (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa- 0,3 27 27 hidro-1,3a,8-trimetilpirrol [2,3-b]indol-5-il[2- (fenilmetil)-3-oxo-4R-isoxazolidin.il] carbamato hemi-hidrato (Composto de Referência)

Tacrina 0,63 13

As quantidades efectivas dos compostos da invenção podem ser administradas a um doente por qualquer dos vários métodos, por exemplo, oralmente em cápsulas ou comprimidos, parenteralmente na forma de soluções estéreis ou suspensões, e em alguns casos intravenosamente na forna de soluções estéreis. Os produtos finais isentos de base, quando eles próprios são eficazes, podem ser formulados e administrados na forma dos seus sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis com fins de estabilidade, conveniência de cristalização, aumento de solubilidade.

Os ácidos vantajosos para a preparação dos sais ácidos de adição farmaceuticamente aceitáveis da invenção incluem os ácidos inorgânicos como o ácido clorídrico, o broiuidrico, o sulfúrico, o nítrico, o fosfórico e o perclórico, assim como os ácidos orgânicos como os ácidos tartárico, cítrico, acético succínico, maleíco, fumárico, 2-naftalenossulfónico e oxálico. 13 Γ

Os compostos activos da presente invenção podem ser administrados oralmente, por exemplo, com um diluente inerte ou com um veiculo edível, ou podem ser incluídos em cápsulas de gelatina, ou sob a forma de comprimidos. Com o fim de administração oral terapêutica, os compostos activos da invenção podem ser incorporados com excipientes e utilizados na forma de comprimidos, trociscos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, hóstias, pastilhas elásticas. Estas preparações devem conter pelo menos 0,5% de compostos activos, mas pode variar dependendo da forma particular e podem convenientemente estar entre 4% e 70% em peso da unidade. A quantidade de composto activo nestas composições é tal que uma dose adequada será obtida. As composições e preparações de acordo com a presente invenção são preparadas de forma que uma unidade de dosagem oral contenha entre 1,0 - 300 miligrama de composto activo.

Os comprimidos, as pílulas, as cápsulas, os trociscos e os análogos podem também conter os seguintes ingredientes: um ligante como uma celulose micro-cristalina, goma de tragacanto ou gelatina; um excipiente como o amido ou a lactose, um agente desintegrante como o ácido alginico, o Primogel, o amido de milho; um lubrificante como o estearato de magnésio ou o Sterotex; um glidante como o dióxido de silicone coloidal; e pode ser adicionado um agente adoçante como a sacarose ou a sacarina ou um agente aromatizante como a hortelã-pimenta, o salicilato de metilo; ou o aroma de laranja. Quando a forma da unidade de dosagem é uma cápsula, pode conter, para além dos materiais do tipo acima, um veículo líquido como um óleo gordo. Outras formas de unidade de dosagem podem conter vários outros materiais que modificam a forma física da unidade de dosagem, por exemplo, como revestimentos .Assim, os comprimidos ou as pílulas podem ser revestidos com açúcar, goma-laca, ou outros 14 Γ agentes de revestimento. Um xarope pode conter, para além dos compostos activos, sacarose com agente adoçante e determinados conservantes, tintas, corantes e aromas. Os materiais utilizados na preparação destas composições variadas devem ser farmaceuticamente puros e não tóxicos nas quantidades utilizadas.

Com o fim de administração terapêutica parenteral, os compostos activos da invenção podem ser incorporados numa solução ou suspensão. Estas preparações devem conter pelo menos 0,1% de composto activo, mas podem variar entre 0,5 e 30% do peso deste. A quantidade de composto activo nestas composições é tal que uma dosagem adequada será obtida. As composições e preparações preferidas de acordo cora a presente invenção são preparadas de forma que a unidade de dosagem parenteral contenha entre 0,5 e 100 miligrama de composto activo.

As soluções ou suspensões podem também incluir os seguintes componentes: um diluente estéril como a água para injecção, solução salina, óleos fixos, polietileno glicóis, glicerina, propileno glicol ou outros solventes sintéticos? agentes anti--bacterianos como o álcool benzilico ou os metil parabenos; anti-oxidantes como o ácido ascórbico ou o bissulfito de sódio; agentes quelantes como o ácido etilenodiaminotetracético; tampões como os acetatos, citratos ou fosfatos e agentes para o ajuste da tonicidade como o cloreto de sódio ou a dextrose. A preparação parenteral pode ser colocada em seringas descartáveis ou frasquinhos feitos de vidro ou de plástico de dose múltipla. 15

Os exemplos de compostos da presente invenção incluem: (3aS-cis)-1,2,3, 3a, 8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2- (fenilmetoxi) -3-oxo-4R-isoxazolidinil]carba-mato; (3aS-cis)-1,2,3,3a, 8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2, 3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (fenilmetoxi) -3R-pirrolidinil]carba-mato; (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2, 3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (hidroxi) -3R-pirrolidinil]carbamato; (3aS-cis)-1,2,3,3a, 8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2- (fenilmetil) -3-oxo-4S-isoxazolidinil]carba~ mato; (3aS-cis)-1,2,3, 3a, 8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (fenilmetoxi) -3S-pirrolidinil]carba-rnato; (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (hidroxi) -3S-pirrolidinil]carbamato; (3aS-cis)-1,2, 3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2- (feniletil) -3~oxo-4R-isoxazolidinil]carba-mato; (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (fenilmetoxi) -3R-pirrolidinil]carba-mato; Ϊ (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l, 3a, 8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2- (feniletil) -3-oxo-4S-isoxazolidinil]carba-mato; (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l, 3a, 8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (feniletoxi) -3S-pirrolidinil]carba-mato; (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa~hidro-l, 3a, 8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[3-oxo-4R-isoxazolidinilJcarbamato; e (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirro-lo[2,3-b]indol-5-il[3-oxo-4S-isoxazolidinil]carbamato;

Os exemplos seguintes são apresentados com vista a ilustrar a presente invenção. (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hxdro-l,3a,8-trimetilpxrrolo[2,3-b]indol-5-il[2- (fenilmetil) -3-oxo-4R-xsoxazolidinil] carbamato bemi-hidrato A um sistema reaccional completamente isento de ar e humidade adicionou-se fisostigmina como base livre (0,55 g) e tetra-hidrofurano anidro, desgaseifiçado (THF, 5 ml) . Arrefeceu--se a mistura até 0°C, tratou-se com terc-butóxido de potássio (0,22 g) e agitou-se a esta temperatura durante 20 minutos. Baixou-se a temperatura para -30°C, e tratou-se a mistura com ácido acético glacial (0,10 ml) e carbodiimidazolo (0,26 g), e manteve-se a -30°C durante quatro horas. Preparou-se uma solução a partir de 4-amino-2-(fenilmetil)-3-isoxazolidinona (0,30 g) em 17 y t THF (2 ml) e em seguida adicionou-se ácido acético glacial (0,56 ml), e deixou-se aquecer a mistura agitada até à temperatura ambiente durante a noite. Removeu-se THF num evaporador rotativo e tomou-se o resíduo em acetato de etilo (100 ml) . Lavou-se a mistura sucessivamente com salmoura (2 x 50 ml), NaHC03 saturado (2 x 50 ml) e salmoura (1 x 50 ml). Secaram-se os extractos orgânicos (Na2S04), filtrou-se e concentrou-se até se obter um óleo âmbar escuro que foi purificado por HPLC preparativa (sílica gel) com 5% de metanol em diclorometano como solvente de carga e eluente. Combinaram-se as fracções apropriadas e concentrou-se até se obter uma espuma amarela (0,40 g) que era pura por TLC (sílica gel).

Análise:

Calculado em relação a: C24H28N4O4.I/2 h2o %C 64, 64 %H 6,56 %N 12,58% Obtido: %C 64,94 %H 6,47 %N 12,94%

Exemplo 2 (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hxdro-l,3a,8-trimetilpirrolo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (fenilmetoxi) -3R- pirr o 1 idini 1] carbamato

Fez-se vácuo num frasco redondo de três gargalos de 50 ml e passou-se N2 para excluir completamente o ar e a humidade. Adicionou-se fisostigmina (0,64 g) seguidO de THF anidro (7 ml, desgaseificado recentemente). Arrefeceu-se a solução até -5°C e tratou-sc com terc-butóxido de potássio (0,287 g) através de um tubo de adição de "gooche". A mistura tornou-se amarelo vivo e agitou-se a esta temperatura durante 15 minutos sob N2. Baixou-se a temperatura até -30°C (banho de gelo seco/MeOH) e adicionou-se ácido acético (0,13 ml), seguido de carbonildiimidazolo seco 18 (0,27 g) . A solução tornou-se vermelho vivo para castanho e manteve-se a esta temperatura durante 3,5 horas. Adicionou-se através de uma cânula uma solução de (3R)-3-amino-l-fenil-metoxipirrolidin-2-ona (0,48 g) em THF (2 ml) ao mesmo tempo que ácido acético (0,70 ml). Deixou-se a mistura aquecer gradualmente até à temperatura ambiente e agitou-se durante a noite. Em seguida arrefeceu-se a mistura num banho de gelo e neutralizou-se com solução aquosa saturada de bicarbonato de potássio. Removeu-se o THF num evaporador rotativo e dissolveu--se o resíduo em EtOAc. Extraiu-se a mistura duas vezes com salmoura, secou—se (Na2S04), filtrou-se e concentrou-se até se obter um óleo âmbar. Purificou-se o material através de HPLC preparativa (coluna de sílica gel) com 5% de metanol em DCM utilizado como solvente de carga e eluente. As fracções apropriadas foram combinadas e concentradas para dar 0,27 g de uma espuma, que foi triturada com éter dietílico e hexano para dar um sólido de baixo ponto de fusão, pf 55-65°C.

Análise;

Calculado em relação a: %N 12,44% %N 12,28% C25H30N4O4 %C 66, 65 %H 6,71

Obtido: %C 66,03 %H 6,71

Exemplo 3 (3aS-cxs)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hxdro-l,3a,8-trlmetxlpirrolo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (hidroxx) -3R-pirrolidinil]carbamato, sal de citrato A uma solução de (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8--trimetilpirrolo[2,3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (fenilmetoxi) -3R-pirro-lidinil]carbamato (0,26 g) em etanol absoluto (6 ml) adicionou-se paládio 10% em carvão activado (0,24 g) sob atmosfera de azoto com agitação. Adicionou-se 1,4-ciclohexadieno (0,90 ml) à temperatura ambiente e agitou-se a solução durante 12 horas.

Detectou-se a formação de produto por TLC utilizando uma mancha de FeCl3 a 2% (etanol). Filtrou-se a mistura através de Celite® e lavou-se repetidamente com etanol seguido de diclorometano.

Concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida e purificou-se através de coluna de cromatografia flash (sílica gel) utilizando metanol 30% em DCM como eluente para dar um sólido de cor acastanhada (0,15 g) . Suspendeu-se o material em éter dietílico seco, e adicionou-se metanol gota-a-gota até todo o material ficar em solução. Adícionou-se um equivalente de solução 0,1 M de ácido cítrico em éter dietílico. Filtrou-se o sal precipitado, e secou-se sob pressão reduzida sobre tolueno, p.f. 133°C - 153°C. O material era puro por TLC.

Análise:

Calculado em relação a: %H 5,84 %N 10,14% %H 5,98 %N 10,19% C24H32N4O11 %C 52,17

Obtido: %C 52,05

Lisboa, 11 de Junho de 2001 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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Claims

\) L-Cj REIVINDICAÇÕES 1. Composto com a fórmula I,

em que R é I ou 'N^^O I ORc em que R4 é hidrogénio, ou fenil(alquilo (Ci-Cô) ) ; R5 é hidrogénio ou fenil(alquilo (Ci~C6) ) ; X é hidrogénio, halogénio, alquilo (Ci-C6) ou alcoxi (Ci-C6) ; Ri é alquilo (Ci-C6) ou fenil (alquilo (Ci-C6) ) ; R2 é hidrogénio ou alquilo (Ci-C6) ; e R3 é hidrogénio ou alquilo (Ci-C6), alcenilo (até C6) , alcinilo (até Ce), fenil(alquilo(Ci~C6) ) , formilo, alquil (Ci-C6) carbonilo, fenil (alquil (Ci-C6) ) carbonilo ou alcoxi (Ci-Ce) carbonilo em que fenilo em cada ocorrência é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 substituintes sendo cada um independentemente alquilo (Ci-C6), alcoxi (Ci-C6), hidroxi, halogénio, trifluorometilo ou nitro; ou um sal destes de adição ácido farmaceuticamente aceitável; 1 Γ u t
2. Composto definido de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é fenil (alquilo (Ci-Cê) ), Ri, R2 e R3 são alquilo (Ci-C6) e X é hidrogénio, em que fenilo é opcionalmente substituído como definido na reivindicação 1.
3. Composto definido de acordo com a reivindicação 2, em que Ri, R2 e R3 são metil e X é hidrogénio, R4 é benzilo e R5 é hidrogénio ou benzilo.
4. Composto definido de acordo com a reivindicação 1, que é carbamato de (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-tri-metilpirrolo[2, 3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (fenilmetoxi) -3R-pirro-lidinil] ou um sal deste de adição ácido farmaceuticamente aceitável.
5. Composto definido de acordo com a reivindicação 1, que é carbamato de (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-tri-metilpirrolo[2, 3-b]indol-5-il[2- (fenilmetil) -3-oxo-4R--isoxazolidinil] ou um sal deste de adição ácido farmaceuticamente aceitável.
6. Composto definido de acordo com a reivindicação 1, que é carbamato de (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-hexa-hidro-l,3a,8-trimetilpirrolo[2, 3-b]indol-5-il[2-oxo-l- (hidroxi) -3R-pirrolidinil] ou um sal deste de adição ácido farmaceuticamente aceitável.
7. Composição farmacêutica, que compreende como ingrdiente activo um composto com a fórmula I definido de acordo com qualquer das reivindicações anteriores e um veículo adequado para este. 2
8. Utilização do composto com a fórmula I definido de acordo com qualquer das reivindicações anteriores para a preparação de um medicamento tendo actividade no alivio da disfunção da memória.
9. Processo para a preparação de um composto com a fórmula I definido de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, compreendendo a hidrólise de um composto com a fórmula VIII

em que Ri, R2, R3 e X são definidos de acordo com a reivindicação 1, e a reacção do intermediário resultante com um compostos com a fórmula R NH2, em que R é definido de acordo com a reivindicação 1, na presença de carbonildiimidazolo.
10. Processo definido de acordo com a reivindicação 9, compreendendo a reacção de um composto com a fórmula I, em que R é o grupo ORc e R5 é fenil (alquilo (Cx-Ce) ), em que fenilo é opcionalmente substituído de acordo com a reivindicação 1, com 1,4-ciclo--hexadieno na presença de paládio em carvão, para formar um 3 composto com a fórmula 1, era que R é o grupo indicado acima e R5 é hidrogénio.
11. Processo definido de acordo com a reivindicação 9, compreendendo a hidrogenação de um composto com a fórmula I, em que R é o grupo

em que R5 é fenil (alquilo (Ci~C6) ), em que fenilo é opcionalmente substituído de acordo com a reivindicação 1 para formar um composto com a fórmula I, em que R é o grupo indicado acima e R5 é hidrogénio. Lisboa, 11 de Junho de 2001 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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