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PT2403832E - Acetamidas n-(hetero)aril, 2-(hetero)aril-substituídas para utilização como moduladores de sinalização de wnt - Google Patents

Acetamidas n-(hetero)aril, 2-(hetero)aril-substituídas para utilização como moduladores de sinalização de wnt Download PDF

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PT2403832E
PT2403832E PT107086704T PT10708670T PT2403832E PT 2403832 E PT2403832 E PT 2403832E PT 107086704 T PT107086704 T PT 107086704T PT 10708670 T PT10708670 T PT 10708670T PT 2403832 E PT2403832 E PT 2403832E
Authority
PT
Portugal
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mmol
pyridin
acetamide
phenyl
methylpyridin
Prior art date
Application number
PT107086704T
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English (en)
Inventor
Shifeng Pan
Dai Cheng
Guobao Zhang
Dong Han
Wenqi Gao
Original Assignee
Irm Llc
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Filing date
Publication date
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Application filed by Irm Llc filed Critical Irm Llc
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Description

ΕΡ2403832Β1
DESCRIÇÃO
ACETAMIDAS N-(HETERO)ARIL, 2—(HETERO)ARIL—SUBSTITUÍDAS PARA UTILIZAÇÃO COMO MODULADORES DE SINALIZAÇÃO DE WNT
Campo Técnico
A ut i1i z presente invenção refere-se a compostos e a ção na modulação da via de sinalização de Wnt. si
J.6L
Antecedentes A faraílicL do gene de Wnt codifica uma grande classe de proteínas segregadas relacionadas com o proto-oncogene Intl/Wntl e Drosophila wingless ("Wg"), um homólogo de Drosophila Wntl (Cadigan et ai, (1997) Genes & Development 11:3286-3305). Wnts são expressos numa variedade de tecidos e órgãos e desempenham um papel principal em muitos processos de desenvolvimento, incluindo segmentação em Drosophila; desenvolvimento de endoderma em C. elegans; e estabelecimento de polaridade de membro, diferenciação de cristã neural, morfogénese de rim, determinação do sexo, e desenvolvimento do cérebro em mamíferos (Parr, et ai. (1994) Curr. Opinion Genetics & Devei. 4:523-528). A via de Wnt é um regulador master no desenvolvimento do animal, tanto durante a embriogénese como no organismo maduro (Eastman, et ai. (1999) Curr Opin Cell Biol 11: 233-240;
Peifer, et al. (2000) Science 287: 1606-1609).
Os sinais de Wnt são transduzidos pela família Frizzled ("Fz") de sete .recetores de domínio transmembrana (Bhanot et ai. (1996) Nature 382:225-230). Os ligandos de
Wnt ligam-se a Fzd, e ao fazer isso, ati vam a proteína citορ1asmática Dishevelled (Dvl-1, 2 e 3 em seres humanos e ratinhos)(Boutros, et ai. (1999) Mech De v r 83: 27-37) e 1 ΕΡ2403832Β1 fosforilam LRP5/6. Um previne a fosforilação sinal é deste modo gerado o qual e degradação de Armadillo/β (beta)- catenina, por sua vez levando à estabilização de β-catenii (Perrimon ocasionada (1994) Ce11 76:781-784). Esta por associaçao de Dvl com ax estabilização é na (Zeng et al. (1997) Cell 90:181-192), várias proteínas juntament catenina, para formar o uma proteína estrutural que e, incluindo GSK3, APC, CK1, complexo de destruição d traz e B-! β- catenina. A via ao recetor de proteína Frizzled do tipo Wingless (Wnt) envolve genes reguladores importantes que possuem polimorfismos associados com carcinomas primários. No curso da sinalização a jusante, -catenina citosólica acumula, transloca-se no núcleo, e então aumenta a expressão génica por meio da complexação com outros fatores de transcrição Uthoff et al., Mol Carcinog, 31:56-62 (2001) . Na ausência de sinais de Wnt, a β-catenina citosólica livre é incorporada num complexo que consiste em Axin, o produto de gene de polipose adenornatosa colí (APC) , e glicogénio i_nt qumase (03Κ)-3β. A fosforilação conjuncior
Cl. ie
Axina, APC, e β-catenina por 0.8Κ-3β designa β-catenina para a via de ubiquitina e degradação por proteossomas Uthoff et al., Mol Carcinog, 31:56-62 (2001); Matsuzawa et al., Mol Cell, 7: 915-926 (2001).
Disheveled (Dvl) é um mediador positivo de sinalização de Wnt posicionado a jusante dos recetores frizzled e a montante de β-catenina. GSK-3 fosforila diversas proteínas na via de Wnt e é instrumental na regulação a jusante de β~. catenina. Mutações no gene APC são um evento de iniciação para ambas tumorigénese colo-rectal esporádica e hereditária. Os mutantes de APC são relevantes em tumorigénese, uma vez que a proteína aberrante é uma parte integral da cascata de sinalização de Wnt. O produto de 2 ΕΡ2403832Β1 proteína contém diversos domínios funcionais que agem como locais de ligação e degradação para a β-catenina. As mutações que ocorrem no segmento amino-terminal de β-catenina estão usualmente envolvidas em degradação mediada por ubiquitina dependente de fosforilação e, assim, estabilizam β-catenina. Qi •ando a catenina ci toplasmática estabilizada se acumula, ela transloca-se ao núcleo interagindo com o grupo de alta mobilidade Tcf/Lef de fatores de t ranscrição que modulam ai expressão de oncogenes tal como c-myc.
Sabe—se que a sinalização de Wnt/β—catenina promove a sobrevivência celular em vários tipos de células Orford et ai., J Cell 155:1 725-17 (2000 ) ; Sat· ai., Journa Chen et al. al., Nat In (1999); Cox et ai., Genetics, et al., Immunity, 13:15-24 (2000); Satoh et al., Nat Genet, 24:245-250 (2000); Shin et of Biological Chemistry, 274:2780-2785 (1999); Chen et al., J Cell Biol, 152:87-96 (2001); Ioannidis et z : 691 .-69 7 (2001) . P 0 π çã o de Wnt este j turno γ- o / Ol j prog ΙΓ Θ S S 8. í ·“? / ” 185 :·ι (2000); Cox >0) ! Bienz et al., * r J Ce] LI Biol, 157:· da vi a de si naliz ssa-se também que vici de òinaiizciçso de Wnt estena associada com (Polakis et al., et ai., Genetics, ]eil, 103:311—320 (2000); ¥ ou et al., J Cell Biol, 157:429—440 (zvvz)) . ativaçao aberrante da via de sinalização de Wnt está associada com uma variedade de cancros humanos, que se correlacionam com a sobre-expressão ou amplificação de c-Myc (Polakis et al.. Genes Dev, 14:1837-1851 (2000); Bienz et al., Cell, 103:311-320 (2000); Brown et al., Breast Câncer Res, 3:351-355 (2001); He et al., Science, 281:1509-1512 (1998); Miller et al., Oncogene, 18:7860-7872 (1999), como um dos alvos células de cancro 509-1512 (1998); de USA, 95: 8847-8851 colo-rectal (He et al., Science, 2í
La. Coste et al. 3 ΕΡ2403832Β1 (1998); Miller et al. , Oncogene, 18:7860-7872 (1999); You et al., J Cell Biol, 157:429-440 (2002)).
Assim, uma necessidade existe de agentes e métodos que modulam a via de sinalização de Wnt, deste modo tratando, diagnosticando, prevenindo, e/ou melhorando os distúrbios relacionados com sinalização de Wnt.
Divulgação da invenção A presente invenção refere-se a compostos e a sua utilização na modulação da via de sinalização de Wnt. A presente invenção é como foi definida nas reivindicações.
Descrevem-se no presente documento compostos que têm a Fórrnula (1) ou (2) :
anel E é um arilo ou heteroarilo opcionalmente substituído; A1 e Az são independentemente um Ch-sheterociclo, quinolinilo, ou um heteroarilo selecionados a partir de:
EP24Q3832B1
em que qualquer heterociclo de A1 e A2 pode ser opcionalmente substituído com -LC(0)RJU; em que o azoto pode ser opcionalmente oxidado (veia-se, por exemplo, composto 156 do quadro 1). B é benzotiazolilo, quinolinilo ou isoquinolinilo, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-3 grupos R°; X1, X2, ΧΛ e X4 são independentemente CR7 ou N; Y é fenilo ou um heteroarilo de 5-6 membros contendo 1-2 heteroátomos selecionados a partir de N, 0 e S; Z é arilo, Ci-5 heterociclo, ou um heteroarilo de 5-6 membros contendo 1-2 heteroátomos selecionados a partir de N, 0 e S; cada Y e Z são opcionalmente substituídos com l-3 grupos R6; R1 e R° são independentemente H ou Ci_6 alquilo; R2 e R3 são independentemente H, Ci-6 alquilo ou halo; r4 é halo, ciano, Ci_6alcoxi, ou um Ci-5 alquilo opcionalmente substituído com halo, alcoxi ou amino; 5 ΕΡ2403832Β1 R6 é hidrogénio, halo, -C (0) R10, -C (0)NR8R9, C!-(. alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente :ox: -C (0) ,10 aiaui. mipn
OU C SUbstitUÍdO com halo, amino, hi .droxilo, alcoxi ou ciano; haLlo, CN, -L-W, NR8R9, -L- -C( 0)R1G, -L-C(0)0R10, - L-C (0)NR8R9, /q-n íO Oi\ ; -L-S(0)2R10 OU -L- -S(0)2NR8R9; R' é H, halo, Ci_6alcoxi, -L-S (0) 2RllJ, ciano, Ci_6alcoxi,
Ci_6alquilo, opcionalmente substituído com halo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; NRsRy, -L-C (0) Ri0, -L- n (0) nr8r9; ou -L-S (0) 2NR8R9; R8 e R9 são independentemente H, -L-W, ou Ci-6 alquilo, C2-6 alquenilo ou C?-6 alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído com halo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; ou R8 e R9 juntamente com os átomos aos quais estão unidos podem formar um anel; RJ° é H, -L-W, ou Ci-6 alquilo, C2-5 alquenilo ou C2-e alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído com hsLlo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; L é um ligação ou (CR2) 1-4 em que R é H ou Ci-6 alquilo; W é C.3-7CÍcloalquilo, Ci-sheterociclo, arilo ou heteroarilo; m é 0-4; n é 0-3; e p é 0-2; e os solvatos, hidratos, derivado n-óxido ou pró-fármacos dos mesmos.
Na Fórmula acima (1) , Y é fenilo, tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo ou pirazinilo, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos R6. Em outros exemplos, Z é fenilo, piridilo, piridazina, 6 ΕΡ2403832Β1 pirimidina, pirazina, piperazinilo, pi morfolinilo, pirazol ou 1,2,3,6-tetrahidropiridi dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 gr
Também se descrevem no presente documento c Fórmula (3):
Também se descrevem no presente documento c Fórrriula (4) :
Em quaisquer das Fórmulas acima (1), (2), A1 e At são independentemente morfolinilo, pi quinolinilo, /-\ B(Oh-z ou um heteroarilo selecionados a partir do grupo peridinilo, na, cada um upos R6. ompostos de como foram ompostos de como foram (3) ou (4), peraz inilo, ΕΡ2403832Β1
Qtd A e K' pode ser O O ín to em que Pc e n são era que qualquer heterociclo opcionairnente substituído com -como foram definidos acima.
Em alguns exemplos, o anel E em quaisquer das Fórmulas acima (1), (2), (3) ou (4) é fenilo, piridilo ou pirimidinilo, cada um dos quais opcionalmente substituído com R7, em que R/ é como foi definido acima. Em exemplos i í a. i. p j particular* R poae s* opcionalmente halogenado.
Também se rescrevem no presente documento compostos de Fórmula (5): em me
é piperazinilo substituído com -C(0)CH3, Ό-2
O selecionados a partir de: 8 ΕΡ2403832Β1
Μ Ν (R\
Ν (R4),
Ν (R4)n (R4), .
ο u t r ο s s a ο C R';
Ρ = γπ de Χ% X , Χ~ e X' é Ν & η q um de Xs, X6, X' e XB é N e os outros são CR11; Z é um heterociclo de 6 membros ou um neteroarilo de 6 membros, cada um contendo 1-2 heteroátomos de azoto e cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos Rb; R1, R2 e RJ são H ou Ci-g alquilo; R’ R6 são independentemente hidrogén: C-1- âílO f 5alcoxi, -S(0)2RllJ, C(0)NRk , -L-C(0)RllJ, -LC(0)0R±u, Ci- . qu 1. SLlquenilo ou C2-6 alquinilo; P.llJ é Ci-6, alquilo ou -L-W; L é um ligação ou (CR2)i-4 em que R é H ou Ci-6 alquilo; W é C 3 - 7 c i c 1 o a 1 qu i 1 o; R' e R11 são independentemente H, halo, ciano, Ci-6alcoxi, -S (0) 2R10, ou um C:-6 alquilo opcionalmente halogenado; eme n são independentemente 0-1.
Em outra forma de realização, com referência à Fórmula 9 ΕΡ2403832Β1 (b), A" ê piperazinilo substituído com -C(0)CH3f Τ^Λ "^v ,3(0)0-2 \_/ selecionado a partir de:
um de Xo, X6, X7 e X8 é N e os outros são CR11; Z é um neterociclo de 6 membros ou um heteroarilo de 6 membros, cada um contendo 1-2 heteroátomos de azoto e cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos R6; R1, R2 e RJ são H ou Ci_6 alquilo; R4 e R6 são independentemente hidrogénio, ciano, Ci-galcoxi, S(O)2R]0, -C(0)NRsR9, -L-C(O)R]0, -L- C(O)OR]0, Ci_ 6alquilo opcionalmente substituído com halo, C2-e alquenilo ou C2_6 alquinilo; R18 é Ci_6 alquilo ou -L-W; L é um ligação ou (CR2) i_4 em que R é H ou C:l-6 alquilo; W é C3-7 cicloalquilo; R' e RJ1 são independentemente H, halo, ciano, Ci_5alcoxi, -S(0)2RllJ, ou um Ci_6 alquilo opcionalmente halogenado; e m e n são independentemente 0-2. im algur
Em nnrro? .s exemplos, mplos, Z em R1J em Fórmula (5) é C2-6 alquilo. Fórmula (5) é um heteroarilo de 6 10 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 de azoto, ou um C4 heteroát orno s de azoto. X , X e X e ti e os do cume nt o c orno o s t o s de membros contendo 2 heteroátomos heterociclo de 6 membros contendo 2 Em ainda outros exemplos, um de X1 outros são CR'. rambém se descrevem no Oresente F ó rmu1a ( 6) :
2, X3 e X4 é selecionado a partir de N 0 , X6, X7 e X8 é N e os outros são CH; X3 Cl a partir de Tsí Θ Cri; Zi é selecionado a fenilo, pirazinilo, piridinilo 0 : em que cada feni lo, pirazini1 O, em qi R6; ; R4 é selecion dif luorc ímetilo, z, e opcionaimente R1, R2 e R3 são iado a partir de partir de p i ρ e r a z i n i 1 o; piridinilo ou piperazinilo de substituído com um qrupo h i dro gé n i o; m R° é selecionado a partir de hidrogénio, halo e C (0) R1U; em que RJ° é met.ilo; e R' é selecionado sl partir de hidrogénio, halo, cismo, metilo e trifluorometilo.
Em qi laisquer das Form u las acima (D, (2), (3), (4) , (5) ou (6) , R1, R2 e R3 pode ser H. Em outros exemplos, R4 e RD são independentemente se lecionados a partir de hidrogénio , halo, trifluorometil o, met ilo e -C(0)CH3. 11 EP24G3832B1
Exemplos dos compostos descritos no presente documenta incluem: terc-butiio 4- (5---(2-- [4--- (2-metilpiridin~4_ il)fenil]acetamido}piridin-2-il)-1,2,3,6- tetrahidropiridina-l-carboxilato; N-[6- (p_ fluorofenil)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-ii) fenil] acetamida; N- (6-metoxi-l, 3-benzotiazol-2-il) -2- [4.. (piridin-4-il)fenil]acetamida; N-(6-metoxi-l,3-benzotiaz0i-2-il)-2-[6-(morfolin-4-il)piridin-3-il]acetamida; ( metoxi-1,3-benzotiazol-2-il)-2-[4-(quinolin-4-il) fenil]acetamida; N-(6-metoxi-l,3-benzotiazol-2-il)-2-í4-^ metilpiridin-4-il) fenil] acetamida; N- (6-metoxi- -1 benzotiazol-2-il)-2-[6-(quinolin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-(6-metanosulfonil-1,3-benzotiazol-2-ii)-2-[4-(piridin-4-il)fenil]acetamida; n-(6-fluoro-n 3 benzotiazo 1-2-il) -2- [4- (piridin-4-i 1) feni 1 ] a.cetamida; N_ (1,3-benzotiazol-2-il)-2-[4-(piridin-4-il)fenil]acetamida. N-(6-metoxi-l,3-benzotiazol-2-il)-2-[6-(piridin-4- il)piridin-3-il]acetamida; N-(6-metoxi-l,3-benzotiazol-2- i 1) -2- [3-met.i 1 -4- (2-metilpiridin-4-il) fenil] acetamida; N_ (6-metoxi-l,3- benzotiazol-2-il)-2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-(6-metoxi-l,3-benzotiazol-2-il)-2-[4-(2-metilpirimidin-4-il)fenil]acetamida; N-[4- (piridin-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-2-[4-(piridin-4-il)fenil]acetamida; N-[4-(piridin-4-il)-1,3-tiazol-2-il]-2-[4-(piridin-4-il)fenil]acetamida; n-(6-metoxi-l,3- b e η z o u i a z o 1 2 11) r [ z --- me 111 4 — (2 metilpiridin — 4 — il) fenil] acetamida; 2- [6- (2-met:ilpiridin-4-il) piri.din-3-11]—N—14-fenir-i,3—tiazol—2—il)acetamida; N—(isoquinolin—3— il)-2-[4-(piridin-4-il)fenil]acetamida; N—(6—fluoro—1,3— benzotiazol-2-il)-2-[6-(2-metilpiridin-4-il) piridin-3- il]acetamida; 2-[4-(piridin-4-il)fenil]-n-(quinolin-2- il)acetamida; N-(6-metoxi-l,3-benzotiazol-2-il)-2-[5-(2-metilpiridin-4-il)pirimidin-2-il]acetamida; N-(6-metoxi-1,3-benzot i a z o1-2 -i1)-2-[5-(2-metilpiridin-4-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[3-metil-4-(2-metilpiridin-4- 12 ΕΡ2403832Β1 il)fenil]-N-(4-fenil-l,3-tiazol-2-il)acetamida; 2 —[4—(2 — metilpiridin-4-il)fenil]-N-(4-fenil-l,3-tiazol-2-il)acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(5- fenilpiridin-2- il)acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(4-fenilpiridin-2-il)acetamida; 2— [4—(2 — metilpiridin-4-il)fenil]-N-[6-(trifluorometoxi)-1,3-benzotiazol-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4- il)fenil]-N-(5-fenil-1,3-tiazol-2-il)acetamida; N-(6- metoxi-1,3-benzotiazol-2-il)-2-[4-(2-metoxipiridin-4-il)fenil]acetamida; 2-[4-(2-etil- piridin-4-il)fenil]-N-(6-metoxi-1, 3-benzotiazol-2-il)acetamida; 2-[2-metil-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(4- fenil-1,3-tiazol-2- il)acetamida; N-[4-(4-metoxifenil)-1,3-tiazol-2-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N-[4-(4-fluorofenil)-1, 3-tiazol-2-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N-[4-(3,4-diflúorofenil)-1,3- tiazol-2-il]-2-[4-(2- metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(6-fenilpiridin-3-il) acetamida; N- (5- fenilpiri.din-2-il) -2- [4- (piridazin-4-il) fenil] acetamida; N-[5-(4-metilfenil)piridin-2-il]-2-[4-(2- metilpiridin-4-il) fenil ] acetamideL; N- [ 5- (3-metoxif enil) piridin-2-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N- [5- (2- metoxifenil)piridin-2-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N-[5-(4-metoxifenil)piridin-2-il]- 2- [4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; 2— [4—(2 — metilpiridin-4-il)fenil]-N-(5-fenilpirazin-2-il)acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[5-(piridin-2-i1)piridin-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil]-N-(4-fenil-l,3-tiazol-2- il)acetamida; N-[5-(3-metilfenil)piridin-2-il]-2-[4-(2- metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4- il)-3-(trifluorometil)fenil]-N-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida; 2-[4-(2-metil- piridin-4-il)fenil]-N-[5-(piridin-3-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[5- (piridin-4-il)piridin-2-il]acetamida; 2- 13 ΕΡ2403832Β1 [4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(6-fenilpiridazin-3-il) acetamida; 2--- [4 - (2-metilpiridin-4-il) fenil] -N- (4-fenilfenil)acetamida; 2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]-N-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(2-fenilpirimidin-5-il)acetamida; 2—[4— (1H— imidazol-l-il)fenil]-N-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida; N-(6-fenilpiridin-3-il)-2-[4-(piridazin-4-il)fenil]acetamida; N-[5-(4-fluorofenil)piridin-2-il]- 2-[4-(2-metilpiridin-4- il)fenil]acetamida; N-[5-(3-fluorofenil)piridin-2-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N-[5- (4- etilpiperazin-l-il)piridin-2-i1]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N-{5-[(2R,65)-2, 6-dimetil- morfolin-4-il]piridin-2-il}-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; 2- [4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[4-(piridin-3- il) fenil ] acetamida; N- (6-f luoro-1,3-benzotiazol-2-.il) -2- [4-(piridazin-4-il)fenil]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-(5-fenilpirimidin-2-il)acetamida; N-(6-metoxi-1,3-benzotiazol-2-il)-N-metil-2-[4-(piridin-4-il) fenil]acetamida; 2-[4-(piridazin-4-il)fenil]-N-[4-(piridin- 3- il)fenil]acetamida; N-(6-fenilpiridazin-3-il)- 2— [ 4— (piridazin-4-il)fenil]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[5-(lH-pirazol-4-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[5-(pirazin-2-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4- il) fenil] -N- [5- (pirirr iidin-5-il) pi ridin-2-il]acetamida; O [4... (2-metilpiridin-4- il) fenil] -N- [4-(piridazin-4- il) fenil]acetamida; 2- [4-(2-meti lpiridin-4-il)fenil]-l i-[5 (1,2,3,6-tetrahidropiridin-i-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[5-(piridazin-3-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[5-metil-6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; 2-[4- (2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[5-(piridazin-4-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[6- (morfolin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-[5- (3- f1uorofen i1)piridi n-2-i1]-2-[5-meti1-6-(piridazin-4- 14 ΕΡ2403832Β1 il)piridin-3-il]acetamida; 2-[3-metil-4-(2-metilpiridin-4-il) fenil ] — N— [5- (piridin-2-il) piridin-2-il ] acetamida; 2--- [3-metil-4-(piridazin-4-il)fenil]-N-[5-(piridin-2-il)piridin- 2- il]acetamida; 2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin- 3-il]-N-[5“(piridazin-3-il)piridin-2-il]acetamida; N-[5-(piridaz in- 3- il) piridin-2-il] ---2--- [ 6- (piridazin-4-il) piridin-3-il] acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)-3- (trifluorometil)fenil]-N-[5-(pirazin-2-il)piridin-2- il] acetamida; N-[5-(3- f luorofenil) piridin-2-il] -2-[5- metil-6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-[5-(3-fluorofenil)piridin-2-i1]- 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]—N—[5-(piridazin-4-il) piridin-2-il]acetamida; N-[5- (3-f luorof enil) piridin-2-il ] --2--- [6--- (2 -metilpiridin-4-i1)ρ i ridi n-3-i1]acetamida; N-[6-(3- f1u o ro fe ni1)pi r i d i n-3-il]-2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]acetamida; 2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[6-(piridazin-4-il)piridin-3-il] acetamida; 2- [5---meti 1---6--- (2-metilpiridin-4-il) piridin-3-il]—N—[5~(pirazin-2-il)piridin-2~i1] acetamida; 2-[5-meti 1-6-(piridazin-4-i1)piridin-3-il]-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; 2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; N-(6-fenilpiridin-3-il)-2-[6-(piridazin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-[6-(1-acetil- 1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; 4-(5- {2-(4-(2- metilpiridin-4-il)fenil]acetamido}piridin-2-il)-1,2,3, 6-tetrahidropiridina-l-carboxilato de metilo; N-[6-(1- metanosulfonil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; N-[6-(1- metil- piperidin-4-il)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamida; 2-[5-metil-6-(piridazin-4-il)piridin-3-il]-N-[5-(piridin-2-il)piridin-2-il]acetamida; 2 —[6 — (piridazin-4-il)piridin-3-il]-N-[5-(piridin-2-il)piridin-2-il]acetamida; 2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]-N-(5-fenilpirimidin-2-il)acetamida; N-[5-(3- 15 ΕΡ2403832Β1 fluorofenil)pirimidin-2-il]- 2-[6-(piridazin-4-il)piridin- 3- il] acetamida; 4--- (5- {2- [4- (2-metilpiridin-4- il) fenil] acetarriidoJpiridin~2~.il) - 1,2,3, 6- tetrahidropiridina-l-carboxilato de etilo; 4 — (5—{2 — [4 — (2 — metilpiridin-4-il)fenil]acetamido}piridin-2-il)- 1,2,3,6- tetrahidropiridina-l-carboxilato de propan-2-ilo; 4— (5—{2 — [4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]acetamido}piridin-2-il)-1,2,3, 6-tetrahidropiridina-l-carboxilato de 1- metilciclopropilo; 2~[4-(2-metilpiridin-4-il)fenil]-N-[6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4- il)piridin-3-il]acetamida; N-[ 6- (3-fluorofenil)piridin-3-il]-2-[5-metil-6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-[6-(3- fluorofenil)piridin-3-il]~2~[5-metil-6-(piridazin-4- il)piridin-3-il]acetamida; N-[6-(3-fluorofenil)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4-il)-3- (trifluorometil)fenil]acetamida; N-[6-(3- fluorofenil)piridin-3-il]-2-[4-(piridazin-4- il)-3- (trifluorometil)fenil]acetamida; N-[6-(1-metil-l,2,3,6- tetrahidropiridin-4-il)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin-4 — i1)fenil]acetamida; N-[6-(1-etil-l,2,3,6- tetrahidropiridin-4-il)piridin-3-il]-2-[4-(2-metilpiridin- 4- il)fenil] acetamida; N-[6-(3-fluorofenil)piridin-3-il]-2- [6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]acetamida; N-(6- fenilpiridazin-3- il)-2-[6-(piridazin-4-il)piridin-3- il]acetamida; 2-[6-(2-metilpiridin-4-il)piridin-3-il]-N-(6-fenilpiridazin-3-il)acetamida; e N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-ciano-4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)acetamida; N-(2,3'-bipiridin-6’-il)-2-(4- (piridazin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida; N-(5-(piridazin-3-il)piridin-2-il)-2-(4-(piridazin-4-il)fenil)acetamida; N-(5-(3-fluorofenil)piridin-2-i1)-2-(6- (piridazin-4-il)piri din-3-il .)acetamida; N- ( 6- (3 fluorofenil)piridin- 3-il)-2- • (6-(piridaz in-4- -il) pir: ] -] ~3~ il)acetamida; N - ( 6 - (1-(2-amino -2-05 coetil)- -1, Z ,3,6 tetrah idropiridin-4- i 1) p i r i .din~3~.il) ~2 - (4- (2 -met i.'. Lpir idin 16 EP24G3832B1 4—i1)fenil)acetamida; N-(6-(3-fluorofenil)pirxdin-3-il)-2-(4-(piridazin-4-il)fenil)acetamida; N-(5-(pirazin-2- il)piridin-2-il)-2-(4-(piridazin-4-il)-3- (trifluorometil)fenil)acetamida; terc-butilo 4-(5- (2- (4- (2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamido)piridin-2-il)piperazina- N-(2,3'-bipiridin-6'-il)-N-(5-(piridazin-3-N-(2-(3- 1- carboxilato; N~(5-(3-fluorofenil)piridin- 2-il)-2- (4-(piridazin-4-il)fenil)acetamida; 2- (4-(2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida; il)piridin-2-il)-2-(4-(piridazin-4-il)-3-(t r i f 1 u o r o me t. i 1) f e η i 1) a c etam i d a; fluorofenil)pirimidin-5-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)acetamida; N-{2,3'-bipiridin-6!-il)-2-(2',3- dimetil-2,4bipiridin-5-il)acetamida; 4-(6-(2- (4- (2-met.ilpiridin-4-i 1) fenil) acetamido) piridin-3-il) piperazina- 1-carboxi) de terc-butilo; N-(2, -bipiridin-6 ! -il) -2- (2’-metil-2,4!-bipiridin-5-il)acetamida; (1- acetilpiperidin-4-il)piridin-3-il)- 2-(4-(2-metxlpiridin-4-il) fenil) acetamida; 2- (2 1 -metil-2,4 ' -bipiridin-5-.il) -N- (5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; N-(5-(pirazin-2- il)piridin-2-il)-2-(6-(piridazin-4-il)piridin-3-il)acetamida; 2-(5-metil-6-(piridazin-4-il)piridin-3- il) -N- (5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; N- (o- (4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metixprridxn-4-il)fenil)acetamida; 4-(6-(2-(4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)acetamido)piridin-3-il)piperazina-l-carboxxlato ae metilo; 2- (3- metil-4-(piridazin-4-il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; 2-(3-metil-4-(piridazin-4- il)fenil)-N-(5-(piridazin-4-il)piridin-2-il)acetamida; 2-(2',3-dimetil-2,4!-bipiridin-5-il)-N-(5-(piridazin-4-il)piridin-2-il) acetamida; 2-(2’,3-dimetil-2,4’-bipiridin-5-il)-N-(6-(piridazin-4-il)piridin-3-il)acetamida; 2-(3-metil-4-(piridazin—4— xl)fenil)—N—(o~(piridazin—3— il)piridin-2-il)acetamida; 4-(6-(2-(4-(2-merilpiridin-4- il) fenil) acetamido) piridin-3-il) piperidina-1-car.ooxxlato de 17 ΕΡ2403832Β1 terc-butilo; 2-(3-metil-4-(piridazin-4-il)fenil)-N-(6- (piridazin-4-il) piridin-3-il) acetamida; 2--- (6- (4- acetilpiperazin-l-il)piridin-3-il)-N-(5-(3- fluorofenil)piridin-2-il)acetamida; 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)—N—(5- (3-oxopiperazin-l-il)piridin-2-il)acetamida; 4- (6-(2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamido)piridin-3-il) piperazina-l-carboxamida; N-(5-(4-metil-lH-imidazol-1-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida; 2-(4-(4-metil-lH-imidazol-l-il)fenil)-N-(5-(pirazin-2- il)piridin-2-il)acetamida; 2-(2',3-dimetil-2,4!-bipiridin- 5- il)—N—(5-(piridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida; 2-(5-metil-6-(piridazin-4-il)piridin-3-il)-N-(5-(piridazin-3-il)piridin-2- il)acetamida; 2-(5-metil-6-(piridazin-4-il) piridin-3-il) -N- (5--- (piridazin-4-il) piridin-2- il) acetamida; N- (5- (4-acetil- piperazin-l-il) piridin~2~.il) -2-(2',3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida; N-(5- ((3 S,5R)“4-acetil-3,5-dimetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2" (4- (2-metilpiridin-4-il) fenil) acetamida; N- (4--- (1- acetilpiperidin-4-il)fenil)-2-(4-(2-metil- piridin-4- il)fenil)acetamida; N-(6-(4-(2-hidroxietil)piperazin-l- il) piridin-3-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil) acetamida; N-(6-(3-fluorofenil)piridin-3-il)-2-(5-metil-6-(piridazin-4-il)piridin-3-il)acetamida; 2-(2',3-dimetil-2, 4’-bipiridin-5-il)-N-(4-(pirazin-2-il)fenil)acetamida; 2-(2',3-dimetil-2,4!-bipiridin-5-il)-N-(4-(piridazin-3-il)fenil)acetamida; 1-óxido de 2-(2-(2',3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamido)-5-(pirazin-2-il)piridina; 1'- óxido de 2',3-dimetil-5-(2- oxo-2-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-ilamino)etil)-2,4!-bipiridina; 2-(2’,3-dimetil-2,41 - bipiridin-5- il)-N-(6-(pirazin-2-il)piridin-3-il)acetamida; N-(5-(4-isobuti r i 1 p i p e r a z i n -1 - i 1) p i r i di η-2-il)-2 - (4 - (2- metilpiridin-4- il) fenil)aceti ami dei } 1 LO 1 £5 acetilpiperazin -1- il)piridin-2-il)-2- (3 -meti1-4- (2- metilpiridin-4- il) fenil)acetamida; N- (6 - (4-aceti lpiperazin 1 - i 1) ρ i r i d i n - 3 - il) -2-(21,3-dimetil-2, 4 ' -bipiridi n-5- 18 ΕΡ2403832Β1 il)acetamida; (R)—N—(6-(4-acetil-3-metil- pipe il)piridin-3-il) -2--- (4 - (2-metilpiridin-4-il) fenil) acetamida; (S)-N-(6-(4-acetil-3-metilpiperazin-l-il)piridin-3-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida; (S)-N-(6-(4- acetil-3-metilpiperazin-l-il)piridin-3-il)-2-(2! , 3-dimetil-2,4’-bipiridin-5-il)acetamida; (R)-N-(6-(4-acetil- 3- metilpiperazin-l-il)piridin-3-il)-2-(2',3-dimetil-2,41 - bi- piridin-5-il)acetamida; N-(5-((3S,5R)-4-acetil-3,5-dimetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2’,3-dimetil-2,4'-bipiridin-5- il)acetamida; metilo 4-(6-(2-(2',3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-i1)acetamido)piridin-3-il)piperazina-1-carboxilato; 4-(6-(2-(3-metil-4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)acetamido)piridin-3-il)piperazina-l-carboxilato de metilo; N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il) -2-(3-f1uoro- 4 -(2 -meti1pi r i d i n-4-i1)fe n i1)acetami da; N-(5-(4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)- 2-(2'-meti1-2,4’- bipiridin-5-il)acetamida; N- (5-(4-acetilpiperazin-l- il )piridin-2-il)-2-(3-cloro-4-(2-metilpiridin-4-il) fenil)acetamida; 4-(6-(2-(2’,3-dimetil-2,41-bipiridin-5-il)acetamido)piridin-3-il)piperazina-l-carboxilato de etilo; N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida; 2-(3-ciano- 4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; 2-(2’,3-dimetil-2,4’-bipiridin-5-il)-N-(5-(4-propionilpiperazin-l-il)piridin-2-il)acetamida; N- (5- (4-(cianometil)piperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il) fenil)acetamida; N-(5-(4-cianopiperazin- 1- il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)acetamida; N— (5— (4— acetilpiperazin-l-il)piridin- 2- il)-2- (4- (2-cloropiridin-4-il)fenil)acetamida; N- (5-(4-acet i1piperaziη-1-i1)pi r i d i n-2- il)-2-(4-(2-f1u oropi ri di n- 4- 11)fenil)acetamida; 2-(3-ciano-4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2- il)acetamida; 2-(3-ciano-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(6-(pirazin-2- (3-ciano-4-(2- il)piridin-3-il)acetamida; 19 ΕΡ2403832Β1 metilpiridin-4-il)fenil)-N-(5-(piridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida; N-(5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3- metoxi-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida; N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-cloro-2'-metil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida; (S)-N-(5-(4-acetil-3- ΕΡ2403832Β1 met ilp ipe ra z i n-me t i 1 p i r i d i n - 4 - -il) pir din-2-il) ---2--- (3--ciano---4-- (2 il)fenil)acetamida; (R)-N-(5-(4-acetil-3- erazin-l-il)pir din-2-il)-2-(2',3-dimetil-2f 4'-ridin-5-il)acetamida; 4-(6-(2-(2’,3-dimetil-2,4 ridin-5-il)acetamido)piridin-3-il)piperazina-1- Ipiperazin- met bip bip carboxilato de isopropilo; N- (5- (4- et il)piridin-2-il)-2-(3-ciano-2'-metil-2,4'-bipiridin-5- il)acetamida; N-(5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-metil-3-(trifluorometil)-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida; N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3- fluoro-2'-metil-2f4'-bipiridin-5-il)acetamida; N- (5-(4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2-fluoro-5-metil-4-(2-metilpiridin-4---il) fenil) acetamida; N- (5- (4- aceti1p iperaziη-1-11)p1r i d1η-2-il)-2-(4-(2-meti1pi rimi din-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida; N- (5- (4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2!-fluoro-3-metil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida; N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il)-2-(2',3-difluoro-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida; N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpirimidin-4-il)fenil)acetamida; N- (5- (4- acet ilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2 -(4-(5-fluoropirimidin-4-11)fenil)acetamida; N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-metil-3-(metilsulfonil)-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida; N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(6-metilpirimidin-4-il)fenil)acetamida; 2-(2'-fluoro-3-metil-2,4'-bipiridin-5-il)-M-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; 2-(4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5- (pirazin-2- il)piridin-2-il)acetamida; N- (5- (4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2- (d 1 f 1 u o r o me t i 1) p i r 1 d i n - 4 - i 1) f e n i 1) a c etamida; N -(6-(4- 20 ΕΡ2403832Β1 acetilpiperazin-1-il)piridin-3-il)-2-(4-(2- (clif luorometil) piridin-4-il) fenil) acetamida; 2--- (4--- (2- (d i f 1 xx o r o me t i 1) p i r i d i n-4-i 1) f e n i 1) -N- (5- (p i raz i n-2-il)piridin-2-il)acetamida; N-(5-(4-acetilpiperazin-l- il)piridin-2-il)- 2-(4-(5-fluoropirimidin-4-il)-3- metilfenil) acetamida; 2--- (2 ! , 3-difluoro-2,4 ! -bipiridin-5-il)—N—(5-(pirazin-2-il)piridin-2- il)acetamida; 2-(3-ciano- 4- (2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2- (3-fluoro-4- (2-fluoropiridin-4-il) fenil) acetamida; 2--- (2 ' ---fluoro-2,4'-bipiridin-5- il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; N- (5- (4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2!-fluoro-2,4!-bipiridin-5-il) acetamida; 2--- (2 1,3-difluoro-2,4 1 -bipiridin- 5- il)—N—(5-(piridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida; N-(5-(4- acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il)-2-(3-ciano-4-(2- fluoropiridin-4-il)fenil)acetamida; 2-(3-fluoro-4- (2- fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2- il)acetamida; 2-(3-fluoro-4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5-(piridazin-3-il)piridin-2- il)acetamida; 2-(3-ciano-4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5-(piridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida; 2-(4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5- (piridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida; e 2-(2'-fluoro-3-metil-2,4'-bipiridin-5-il)-N-(5-(piridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida; ou sais fisiologicamente aceitáveis dos mesmos.
Em outra forma de realização são compostos selecionados sl partir do grupo que consiste em:
21 ΕΡ2403832Β1
Em outra forma cie realização são compostos que têm a Fórmula (10) ou (11):
A2 (11) aceitável do mesmo, (10) ou um sal fisiologicamente em que: anel E é um arilo ou heteroarilo opcionalmente substituído; A1 e Az são independentemente um Ci-sheterociclo, quinolinilo, ou um heteroarilo selecionados a partir do grupo:
22 ΕΡ2403832Β1 em que qualquer heterociclo de A1 e Az pode ser opcionalmente substituído com -LC(0)R1U; em que o azoto pode ser opcionalmente oxidado (veja-se,, por exemplo, composto 156 do quadro 1). B é benzotiazolilo, quinolinilo ou isoquinolinilo, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-3 grupos R°;
XJ X" X’ são independentemente CR' Y é tenilo ou um heteroarilo de 5-6 membros contendo 1-2 heteroátomos selecionados a partir de N, 0 e S; Z é arilo, Cl-5 heterociclo, ou um heteroarilo de 5-6 membros contendo 1-2 heteroátomos selecionados a partir de N, 0 e S; cada Y e Z são opcionalmente substituídos com 1-3 grupos R6; R1 e R° são independentemente H ou Ci-e alquilo;
Rz e R3 são independentemente H, Ci-6 alquilo ou halo; R4 é halo, ciano, Ci-salcoxi, ou um Ci_5 alquilo opcionalmente substituído com halo, alcoxi ou amino; R6 é hidrogénio, halo, :oxi, -S(0)2R10, -C(O)ORi0, -C(O)R10,-C(O)NR8R9, Ci—s alquilo, C2-e alquenilo ou c,_
alquinilo, cada um dos quais pode ser op substituído com halo, amino, hidroxilo, ciano; halo , CN, -L-W, NI í8R9, -I ,-C(0)R1G, -l- L-C (0)NR8R9, o o -L-S(0) o 2R ou -L-S (0) 2NR8R 2-6 te ou ,10 23 EP24G3832B1 R7 é H, halo, Ci-galcoxi, -l-S(0)2R10, ciano, CL-s alcoxi, Ci-galquilo, opcionalmente substituído com EP24G3832B1 halo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ..ano; Q Q NRhR' , (O)R1 -L-C(0)NR8R9, OR10; -L-S (0) 2R1U OU -L-S (0) 2NR8R9;
Ra e R9 são independentemente H, -l-W, ou Ci_6 alquilo, C2-6 alquenilo ou C2_e alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído com halo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; ou R8 e R9 juntamente com os átomos aos quais estão unidos podem formar um anel; R10 é H, -L-W, ou CL-g alquilo, C2-s alquenilo ou C2_6 alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído com halo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; L é um ligação ou (CR2)i~4 em que R é H ou Ci~6 alquilo; W é C3-7Cicloalquilo, Ci-5heterociclo, arilo ou heteroarilo; m e 4; n é 0-3; é 0-2; e os solvatos, hidrate derivado n-óxido ou pró-fármacos dos mesmos.
Sm outra forma de realização são compostos de Fórmulas 10 e 11 selecionados a partir do grupo que consiste em: N-(6- metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-2-(3-(piridin-4-il)fenil)acetamida; N-(6-fenilpiridin-3-il)-2-(3-(piridin-4-i1)fenil) acetamida; 2-(3-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; N- (6-fenilpiridin-3-il)-ΙΟ- (pir.id.azin-4-.il) fenil) acetamida; 2- (3- (2-metoxipiridin-4-il)fenil)-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; N-(5-(4-acetil- piperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida; 2-(3-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(4-(piridazin-3-il)fenil)acetamida; 2-(3-(2-metilpiridin-4- 24 ΕΡ2403832Β1 il)fenil)-N-(4- (pirazin-2-il)fenil)acetamida; 2- (3-(2- metil-piridin-4-il) fenil) --N- (6- (pirazin-2-il) piridin-3-il)acetamida; 2-(2'-meti1-2,4 *-bipiridin-6-il)-N-(6- fenilpiridin-3-il) acetamida; 2- (2 ' -rnetil-2,4 ' -bipiridin-4-il)-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; 2- (4-ciano-3- (2- metilpiridin-4-il)fenil)-N-(6-fenilpiridin-3-il)acetamida; N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-ciano-3-(2-metilpiridin-4-il) fenil)acetamida; 2-(2'-metil-2,4'-bipiridin-4-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida; N-(5-(4-acetilpiperazin-1- il)piridin-2-il)-2-(2'-metil-2,4 '-bipiridin-4-.il) acetamida; e N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il)-2-(2-ciano-2!- metil-3,4!-bipiridin-5-il)acetamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas.
Também se descrevem no presente documento composições farmacêuticas que compreendem um composto que tem a Fórmula (1), (2), (3), (4), (5) ou (6), e um portador fisiologicamente aceitável.
Também se descrevem no presente documento métodos para inibir a sinalização de Wnt numa célula, que compreende colocar em contato a célula com uma quantidade eficaz de um composto que tem a Fórmula (1), (2), (3), (4), (5) ou (6), ou uma composição farmacêutica do mesmo.
Também se descrevem no presente documento métodos para inibir um gene de porco-espinho numa célula, que compreende colocar em contato a célula com uma quantidade eficaz de um composto que tem a Fórmula (1), (2), (3), (4), (5) ou (6), ou uma composição farmacêutica do mesmo.
Também se des ir, melhorar c crevem no presente documento métodos para ru prevenir um distúrbio mediado por Wnt que compreende administrar 25 ΕΡ2403832Β1 ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que tem a Fórmula (1), (2), (3), (4), (5) ou (6), ou uma composição farmacêutica do mesmo, e opcionalmente em combinação com um segundo agente terapêutico. Também se descreve no presente documento a utilizcLção de um composto que tem a Fórmula (1), (2), (3), (4), (5) ou (6), e opcionalmente em combinação com um segundo agente terapêutico, no fabrico de um medicamento para o tratamento de um distúrbio mediado por Wnt.
Os compostos descritos no presente documento podem ser administrados, por exemplo, a um mamífero que sofre de um distúrbio mediado por Wnt selecionados a partir de queloides, fibrose tal como fibrose de pele, fibrose pulmonar idiopática, fibrose intersticial renal e fibrose de fígado; proteinuria, rejeição de enxerto de rim, osteoartrite, doença de Parkinson, edema macular cistoide (EMC) tal como EMC associado com uveíte; retinopatia tal como retinopatia diabética, ou retinopatia de prematuridade; degeneração macular e um distúrbio de proliferação celular associado com atividade de sinalização de Wnt aberrante.
Em exemplos particulares, os compostos descritos no presente documento podem ser utilizados em separado ou em combinação com um agente quimioterápico para tratar um mas não carcinoma de célula distúrbio de proliferação celular, incluindo, limitado a, cancro colo-rectal, cancro de mama, de célula escamosa de cabeça e pescoço, carcinoma escamosa esofágica, cancro pulmonar de célula não pequena, cancro gástrico, cancro pancreático, leucemia, linfoma, neuroblastoma, retinoblastoma, sarcoma, osteossarcoma, condossarcoma, sarcoma de Ewing, rabdomiossarcoma, tumor-cerebral, tumor de Wilm, carcinoma de célula basal, melanoma, cancro de cabeça e pescoço, cancro cervical e cancro de próstata. 26 EP24G3832B1 )ef miçoeí "Alquilo" refere-se a uma fração e como um elemento estrutural cie outros grupos, por exemplo, alquilo halo-substituído e alcoxi, e pode ser de cadeia linear ou ramificada. Um alquilo, alquenilo ou alquinilo opcionalmente substituído como é utilizado no presente documento pode ser opcionalmente halogenado (por exemplo, CF3) , ou pode ter um ou mais carbonos que é substituído ou substituído com um heteroátomo, tal como NR, 0 ou S (por exemplo, -0CH2CH20-, alquiltióis, tioalcoxi, alquilaminas, etc) .
Um "anel carbocíclico" como é utilizado no presente documento refere-se a um anel policíclico, monocíclico, bicíclico fusionado ou unido por ponte saturado ou parcialmente insaturado contendo átomos de carbono, que pode opcionalmente ser substituído, por exemplo, com =0. Exemplos de anéis carbocíclicos incluem, mas não são limitados a ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclopropileno, ciclohexanona, etc.
Um "anel heterocíclico" como é utilizado no presente documento é como foi definido para um anel carbocíclico acima, em que um ou mais carbonos do anel sâo um heteroátomo. Por exemplo, um anel heterocíclico oode conter N, 0, S, —N=, C (0) (veja-se, por exemplo, composto 141, quadro 1), -S-, -S (0) , -S(0)2-, ou -NR- ern qUe R pode ser iioxa-tí-aza- hidrogénio, Ci-4alquilo ou um grupo de proteção. Exemplos de anéis heterocíclicos incluem, mas não são limitados a morfolino, pirrolidinilo, pirrolidinil-2-ona, piPerazinilo, piperidinilo, piperidinilona, l,4_pj- spiro[4,5]dec-8-ilo, etc.
m átomo de H
Como é utilizado no presente documento, v ΕΡ2403832Β1 em quaisquer grupos substituintes (por exemplo, CH2) abrange todas as variações isotópicas adequadas, por exemplo, H, 2H e JH.
Uma "proteína de Wnt" é um ligando da via de sinalização ds componente o.e Wnt que se liga. a um recetor rizzled de moao a ativar a sinalização de Wnt. Exemplos e Wnt incluem pelo menos 19 d< , -í -f ficos de proteínas membros, incluindo: Wnt-1 (RefSeq.: NM_u 04185), NM_0 33131), NM_ 003391), Wnt-3 (ReSeq. Wnt-í (RefSeq. NM_003392), Wnt-5B (RefSeq. NM_00 6522) , Wnt-7A (RefSeq. NM_058238) , Wnt-8A (RefSea. (RefSeq.: NM_005430), Wnt-2 Wnt-2B (Wnt-13) (RefSeq.: NM_0 30753) ,
Wnt3a (RefSeq.: NM_030761), Wnt-5A (RefSeq.: NM_ 032642), Wnt-6 (RefSeq.: NM__u0462o), Wnt-7B (RefSeq.: NM_058244), Wnt-8B (RefSeq.: NM_ 003393), Wnt-9A (Wnt-14) (RefSeq.: NM_003395), Wnt-9B (Wnt-15) (RefSeq.: NM_003396), Wnt-IOA (RefSeq.: NM_0252l6), Wnt-IOB (RefSeq.: NM_003394), Wnt-11 (RefSeq.: NM_ 004626), Wnt-16 (RefSeq.: NM_016087)) . Enquanto cada membro tem graus variados de identidade de sequência, cada um contém 23-24 resíduos ded cisteína conservados que mostram espaçamento altamente conservado. McMahon, A P er al, Trends Genet. 8: 236-242 (1992); Miller J R., Genome Biol. 3 (1): 3001,1-3001,15 (2002). Para os propósitos iriantes ativas da am ECD Frizzled ou o desta invenção, uma proteína de Wn t e mesma é uma proteín a que se liga a u componente de CRD de tal um E< 3D Frz • Um "distúrbio mediado por Wnt e um distúrbio, condição, ou estado de doença caraoterizado por sinalização de wnt aberrante. Num aspeto especifico, a sinalização de Wnt aberrante é um nível d<^ sinal izao30 M n —ae Wnt numa célula ou tecido suspeito de estar doente que excede o nível de sinalização de Wnt numa célula ou tecido não doente similar. Num aspeto específico, um distúrbio mediado por 28 ΕΡ2403832Β1
Wnt inclui cancro. 0 termo "cancro" refere-se à condição fisiológica em mamíferos que é tipicamente caracterizada por crescimento/proliferação celular não regulado. Exemplos de cancro incluem, mas não são limitados a: carcinoma, linfoma, blastoma, e leucemia. Mais exemplos particulares de cancros incluem, mas não são limitados a: leucemia linfocítica crónica (L1C), pulmão, incluindo célula não pequena (NSCLC), mama, do ovário, do colo do útero, do endométrio, próstata, colo-rectal, carcinoide intestinal, bexiga, gástrico, pancreático, hepático (hepatocelular), hepatoblastoma, esofágico, adenocarcinoma pulmonar, mesotelioma, sarcoma sinovial, osteossarcoma, carcinoma de célula escamosa de cabeça e pescoço, angiofibromas nasofaríngeos juvenis, lipossarcoma, tireoide, melanoma, carcinoma de célula basal (BCG), meduloblastoma e desmoide. "Tratar" ou "tratamento" ou "alívio" refere-se a ambos tratamento terapêutico e profilático ou medidas preventivas, em que o objeto é prevenir ou desacelerar (diminuir) a doença patológica alvo ou condição ou disturioio. Aqueles em necessidade de tratamento incluem aqueles já com o distúrbio bem como aqueles propensos a ter o distúrbio ou aqueles em quem o distúrbio é para ser prevenido (profilaxia). Quando o distúrbio mediado por Wnt é cancro, um indivíduo ou mamífero é "tratado" de modo bem-sucedido ou mostra uma carga tumoral reduzida se, após receber uma quantidade terapêutica de um antagonista de Wnt de acordo com os métodos da presente invenção, o paciente mostra redução observável e/ou mensurável em ou ausência de um ou mais dos seguintes: redução no número de células de cancro ou ausência das células de cancro; redução no tamanno do tumor; inibição de infiltração de células de cancro em órgãos periféricos incluindo o espalhamento de 29 ΕΡ2403832Β1 cancro em tecido mol e osso; inibição de metástase de tumor; inibição, até certo ponto, de crescimento do tumor; e/ou alívio até certo ponto, um ou mais dos sintomas associados com o cancro específico; morbidade e mortalidade reduzidas, e melhora em qualidade de problemas da vida. Até o ponto que o antagonista de Wnt possa prevenir o crescimento e/ou destruir células de cancro existentes, pode ser citostática e/ou citotóxica. A redução destes sinais ou sintomas pode também ser sentida pelo paciente. ''Mamífero"· refere-se a qualquer animal classificado como um mamífero, incluindo seres humanos, animais domésticos e de fazenda, e zoo, sports, ou animais de estimação , tal como cães, gatos, gado, cavalos, ovelha, porcos, cabras, coelhos, etc. Em certas fc irmas de realizaçã o, o mamífero é um ser humano. A administração "em combinação com" um ou mais agentes terapêuticos adicionais inclui administração simultânea (concorrente) e consecutiva em qualquer ordem. 0 termo "combinação farmacêutica" como é utilizado no presente documento refere-se a um produto obtido a partir da mistura ou combinação de ingredientes ativos, e inclui ambas as combinações fixas e não fixas dos ingredientes ativos. 0 termo i n gredientes ati vo s (1) e um coagente, simultaneamente na "combinação fixa" significa que os , por exemplo, um composto de Fórmula Scão ambos administrados a um paciente forma de uma única entidade ou dosagem. 0 termo "combinação não fixa" significa que os ingredientes ativos, por exemplo, um composto de Fórmula (1) e um coagente, são ambos administrados a um paciente como entidades separadas simultaneamente, concorrentemente ou sequencialmente sem nenhum limite de tempo específico, em que tal administração fornece níveis terapeuticamente 30 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 ativos no corpo do paciente. 0 a terapêutica de cocktail, por de três ou. mais ingredientes eficazes dos ingredientes último também se aplica exemplo, a administração ativos. 'Porsaaores" como é utilizado no presente documento inciuem portadores fa.rmaceuticam.ente aceitáveis, excipientes, ou estabilizantes que não são tóxicos à célula ou mamnero a ser exposto ao mesmo nas dosagens e concentrações utilizadas. Com frequência o portador i. i s i o .1 ogi cament e ace r t. a.ve 1 tamponado. Exemplos de é uma solução aquosa de pH po rt ado res f i s i o1ogi camente :o, citrato, aceitáveis incluem tampões tais como fos outros ácidos orgânicos; ascórbico; peso molecular antioxidantes incluindo ácido baixo (menos de cerca de 10 resíduos) polipéptido; proteínas, tal como albumina do soro, gexatina, ou imunoglobulinas; polímeros hidrofílicos tais como polivinilpirrolidona; aminoácidos tais como glicina, glutamma, asparagina, arginina ou lisina; monossacáriaos, dissacáridos, e outros hidratos de carbono incluindo glucose, manose, ou dextrinas; agentes quelantes tais como EDTA; álcoois de açúcar tais como manitol ou sorbitoi; contra-iões de formação de sal tais como sódio; e/ou tensioativos não iónicos tais como TWEEN®, polietileno glicol (PEG), e PLURONICS®.
Um "quantidade eficaz" de um composto (por exemplo, um antagonista de Wnt) é uma quantidade suficiente para levar a cabo um propósito especificamente indicado. Uma "quantidade eficaz" pode ser determinada empiricamente e de um modo de rotina, em relação ao propósito indicado. 0 termo "quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se a uma quantidade de um antagonista de Wnt eficaz para "tratar" um distúrbio mediado por Wnt num indivíduo ou 31 ΕΡ2403832Β1 mamífero. No caso de cancro, a quantidade terapeuticamente eficaz do fármaco pode reduzir o número de células de cancro; reduzir o tamanho do tumor; inibir (isto é, desacelerar até certo ponto ou parar) a infiltração de célulcis de cancro em órgãos periféricos; inibir a metástase de tumor; inibir, até certo ponto, o crescimento cio tumor; e/ou aliviar até certo ponto um ou mais dos sintomas associados com o cancro. Veja-se a definição no presente documento de "tratamento". Até o ponto que o fármaco possa prevenir o crescimento e/ou destruir células de cancro existentes, pode ser citostát..ico e/ou citotóxico.
Um "agente quimioterápico" é um composto químico útil no tratamento de cancro. Exemplos de agentes quimioterápicos incluem agentes alquilant.es tais como tiotepa e CYTOXAN® ciclosfosfamida; sulfonatos de alquilo tais como busulfan, improsulfan e piposulfan; aziridinas tais como benzodopa, carboquona, meturedopa, e uredopa; et ilen.im.inas e metilamelaminas incluindo altretamina, t r i e111enome1amin a, trietilenofosfo rami da, trietíiienotiofosforamida e trimetilolomelamina; acetogeninas (especialmente bulatacina e bulatacinona); delta-9-tetrahidr ocanabin o1 (dronabinol, MARINOL®); beta-lapacona; lapacol; colchicinas; ácido betulínico; um camptotecma (incluindo o análogo sintético topotecan (HYCAMTIN®), CPT-11 (irinotecan, CAMPTOSAR®) , acetiicamptotecina, escopolectina, e 9-aminocamptotecina); briost; ;iní ealistatina; CC-1065 (incluindo os
S6US análogos sintéticos adozelesina, carzelesina e bizelesina); podo filotoxina; ácido podofilínico; tenipósido; criptoficinas (particularmente criptoficina 1 e criptoficina 8) ; dolastatina; duocarmicina (incluindo os análogos sintéticos, KW-2189 e CB1-TM1); eleuterobina; pancratistatina; uma sarcodictiina; spongistatina; mostardas de azoto tais como clorambucil, clornafazina, 32 ΕΡ2403832Β1 cholofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, cloridrato de óxido de mecloretamina, melfalano, novembiquina, fenesterina, prednimus t i na, t r o fo s fami da, mostarda de uracilo; nitrosureias tais como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, e ranimnustina; antibióticos tais como os antibióticos enediyna (por exemplo, caliqueamicina, especialmente caliqueamicina gama11 e caliqueamicina ómegall (veja-se, por exemplo, Agnew, Caem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)); dinemicina, incluindo dinemicina A; uma indo morfoli no- ina, 2-pirroli no- ) , epirubicà na, , mit omicinas t ais ico, nogalamici na, cina, puromici na, in, estreptozoci na, zorub icina; ar. ti- luorouracil (b-E u); como denopteri na, análogos de pur ina urina, tiamipri na, s com o ancitabi na, :ur, citarabi na, esperamicma; tem como cromoioro de neocarzinostatina e cromóforos antibióticos de cromoproteína de enediyna relacionados), aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, carabicina, c a mi ηomi c i n a, c a r z i η o fi1i na, cr omomi c inais, dactinomic i n a, daunorubicina, detorubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, ADRIAMICINA® doxorubicina (inc doxorubicina e deoxidoxorubic esorubicina, idarubicina, marcelomic como mitomicina C, ácido micofe olivomicinas, peplomicina, potfi] quelamicina, rodorubicina, estrepton tubercidina, ubenimex, zinostatin; analogos de ácido fólico tais metotrexato, pteropterina, trimetrexato; tais como fludarabina, 6- mercapt tioguanina; análogos de pirimidina i azacitidina, 6-azauridina, car dideoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina; androgenos tais como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; anti-adrenais tais como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; repositor de ácido fólico tal como ácido 33 ΕΡ2403832Β1 frolínico; aceglatona; glicósido de aldofosfamida; ácido aminolevulínico; eniluracil; amsacrina; bestrabucil; bisantreno: edatraxato; defofamina; demecolcina; ΕΡ2403832Β1 diaziquona; elfomitina; ϊ C θ X, 3 d.0 eliptínio; uma epotilona; etoglucid; nitrato de gálio; hidroxiureia; lentinan; lonidainina; maitansinoides tais como maitansina e ansamitocinas; mitoguazona; mitoxantrona; mopidanmol; nitraerina; pentostatina; fenamet; pirarubicina; losoxantrona; 2-etilhidrazida; procarbazina; complexo de polissacárido PSK® (JHS Natural Products, Eugene, Oreg.); razoxano; rhizoxin; sizofuran; spirogermánio; ácido tenuazónico; triaziquona; 2,2', 2"-triclorotrietilamina; trichotecenos (especialmente toxina T-2, verracurina A, roridina A e anguidina); uretano; vindesina (ELDISINE®, FILDESIN®); sazina; mannomust ina; mi t obronit o1; mitolactol; pipobroman; gacitosina; arabinósido ("Ara-C"); tiotepa; taxoides, por exemplo, paclitaxel TAXOL® (Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), formulação de nanopartícula engenheirada de albumina livre de Cremofor ABRAXANE™ de paclitaxel (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, 111.), e TAXOTERE® doxetaxel (Rhône-Poulenc Rorer, Antony, França); clorambucil; gencitabina (GEMZAR®); 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; análogos de platina tais como cisplatina e carboplatina; vinblastina (VELBAN®); platina; etopósido (VP-16); ifosfamida; mitoxantrona; vincristina (ONCOVIN®); oxaliplatina; leucovovin; vinorelbina (NAVELBINE®); novantrona; edatrexato; daunomicina; ammopterina; ibandronato; inibidor de topoisomerase RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO); retinoides tais como ácido retinoico; capecitabina (XELODA®); sais farmaceuticamente aceitáveis, ácidos ou derivados de quaisquer oos acima; bem como combinações de dois ou ma is dos acima tal como CHOP, uma. abreviação pa.ra uma terapêutica combinada de ciclofosfamida, doxorubicina, vincristina, e prednisolona, e FOLFOX, uma abreviação para 34 ΕΡ2403832Β1 um regime de tratamento com oxaliplatina (ELOXATIN™) combinado com 5---FU e leucovovina.
Além disso, um "agente quimioterápico" pode incluir agentes ant i-normonais que cigem parei regular, reduzir, bloquear, ou inibir os efeitos de hormonas que podem promover o crescimento de cancro, e estão com frequência na rorma de tratamento sistémico, ou de corpo inteiro. Podem ser hormonas por si mesmos. Exemplos incluem anti-estrogénios e moduladores seletivos de recetor de estrogénio (SERMs), incluindo, por exemplo, tamoxifen (incluindo NOLVADEX® tamoxifen), EVISTA® raloxifeno, droioxifeno, 4-hidroxitamoxifen, trioxifeno, queoxifeno, LY117018, onapristona, e toremifeno FARESTON®; anti-progesteronas; reguladores negativos de recetor de estrogénio (ERDs); agentes que funcionam para suprimir ou desligar os ovários, por exemplo, agonistas de hormona libertadora de hormona luteinizante (LHRH) tais como LUPRON® e acetato de leuprolido ELIGARD®, acetato de goserelina, acetato de buserelina e tripterelina; outros anti-androgénios tais corno flutamida, nilutamida e bicalutamida; e inibidores de aromatase que inibem a enzima aromatase, que regula a produção de estrogénio nas glândulas adrenais, tal como, por exemplo, 4 (5)-imidazois, aminoglutetimida, acetato de megestrol MEGASE®, AROMASIN® exemestano, formestanie, fadrozol, vorozol RIVISOR®, letrozol FEMARA®, e anastrozol ARIMIDAX®. Além disso, tal definição de agentes quimioterápicos inclui bisfosfonatos tais como clodronato (por exemplo, BONEFOS® ou OSTAC®), eticlronato DIDROCAL®, NE-58095, ácido zoledrónico / zoledronato ZOMETA®, alendronato FOSAMAX®, pamidronato ARE D IA.®, tiludronato SKELID®, ou risedronato AC TONEL®; bem como troxacitabina (um análogo de 1,3-dioxolano nucleósido citosina); oligonucleótidos antissenso, particularmente aqueles que inibem a expressão de genes na sinalização de 35 ΕΡ2403832Β1 vias implicadas em proliferação celular aberrante, tal como, por exemplo, PKC-alfa, Raf, H-Ras, e recetor de fator de crescimento epidérmico (EGF-R); vacinas tais como vacina THERATOPE® e vacinas de terapêutica génica, por exemplo, vacina ALLOVECTIN®, vacina LEUVECTIN®, e vacina VAXID®; inibidor de topoisomerase 1 LURT 0 TE CAN®; ABARELIX® rmRH; ditosilato de lapatinib (um inibidor de molécula pequena de tirosma qumase duplo ErbB—2 e EGFR também conhecido como GW572016); e sais farmaceuticamente aceitáveis, ácidos ou derivados de quaisquer dos acima.
Mo dos de L evar a Cabo a Invenção A presente invenção refere-se a composições e métodos para modular a via de sinalização de Wnt. e documento um composto
Também se descreve no prese que tem a Fórmula (1) ou (2):
Z
0)
xk X2
ou um sal fisioiogicamente aceitável do mesmo, em que: anel E é um arilo ou heteroariio opcionalmente substituído; A1 e A" são independentemente um Ci_5heterociclo, quinolinilo, ou um heteroariio selecionados a partir do grupo:
36 ΕΡ2403832Β1
de A1 e A2 opcionalmente substituído com -LC(0)R1U; benzotiazolilo, quinolinilo ou isoquinolinilo, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-3 grupos R5; em que qualquer heterociclo
pode B er ά X1, X2, XJ e X4 são independentemente CR7 ou N; Y é fenilo ou um heteroarilo de 5-6 membros contendo 1-2 heteroátomos selecionados a partir de N, 0 e S; Zé arilo, Ci-5 heterociclo, ou um heteroarilo de 5-6 membros contendo 1-2 heteroátomos selecionados a partir de N, 0 e S; cada Y e Z são opcionalmente substituídos com 1-3 grupos R°; R1 e Rb são independentemente H ou Ci6 alquilo; R" e R3 são independentemente H, Ci_6alquilo ou halo; R4 é halo, ciano, Ci-6alcoxi, ou um Ci_5 alquilo opcionalmente substituí do com halo, alcoxi OU amino; R:’ é hidrogéni o, halo. C]-6alcoxi, -S (0) 2K °, -C (0) OR10, o o o -C (0) NR8R9, Ci-6 alquilo, C2 -6 alquenilo ou C2_6 alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído 0 om hsLlo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; halo, CN, -L-W, NRSR9, -L- ò 0 tç -C(0)0R10, - L-C (0)NR8R9, OR10; -L-S(0)2R10 ou -L-s (0) 2nr8: O '7 Rd R' e H, , Ci—5 alquilo amino, hidroxilo, -L-C (0) NR8R9, OR10; halo, Ci—e alcoxi, -L-S (0) 2R11 opcionalmente substituído com halo, alcoxi ou ciano; NR8R9, -L-C(0)RiU, -L-S(0)2R10 OU -L-S (0) 2NR8R9; R8 e R9 são independentemente H, -L-W, ou Ci_6 alquilo, C2_6 aLlquenilo ou C2-6 alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído com halo, amino, hidroxilo, 37 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 átomos alcoxi ou ciano; ou RJ e FR juntamente com aos auais estão unidos podem formar um anel; u é H, 1j W, ou Ci-5 aiquiio, C2—g arqueniro ou 02—g alquinilo, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído com halo, amino, hidroxilo, alcoxi ou ciano; L é um ligação ou (CR2) 1-4 em que R é H ou Ci_g alquilo; W é C3.-7cicloalquilo, heteroarilo; m é 0-4; n é C15 heterociclo, j — 3; e "P é 0 — z « ou piridinilo, pode ser fenilo, tiazolilo, piridazinilo, pirimidinilo ou pirazinilo, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos R° e R5 é como foi definido no presente documento. Z pode ser fenilo, piridinilo, piridazina, pirimidina, ρ i razi na, piperazi ni1o, pipe r i d i n i1o, mo r f o1i n i1o, pirazol ou 1,2,3, 6-tetrahidropiridina, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos R6 e R6 é como foi definido no presente documento. A± e A2 pode ser independentemente morfolinilo, piperazinilo, quínolínilo,
38 ΕΡ2403832Β1
em que qualquer heterociclo de Ά1 e Az pode ser opcionalmente substituído com -C (0) CH3; R4, m, n e p são como foram definidos na divulgação da invenção.
Também se descreve no presente documento um composto de Fórmula (3):
R3, X1, X2, X3, X4, A2 e em que RJq R definidos no presente documento. sao como :oram
Também se descreve no presente documento um composto de Fórmula (4):
(4) em que R‘ , Pc, definidos na divulgação da invenção, e Z são como foram
Anel E pode ser fenilo, piridilo ou pirimidinilo, cada um dos quais opcionalmente substituído com R''. R' pode ser H, halo, ciano, Ci~6alcoxi, -S(0)2Rz!h ou um 39 ΕΡ2403832Β1
Ci“5 alquilo opcionalmente halogenado.
Também se descreve
presente documento um composto em que A1 é piperazinilo substituído com -C(0)CH;
7T
,S(0)C
Oi
V^s um de Xo, X6, X7 e X8 é N e os outros são CR11; Z é um heterociclo de 6 membros ou um heteroarilo de 6 membros, cada um contendo 1-2 heteroátomos de azoto e cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos R6; R1, R" e Rb são H ou Ci-e alquilo; R4 e R6 são 40 ΕΡ2403832Β1 independentemente hidrogénio, ciano, Ci_6alcoxi, S(0)2R10, -C(0)NRsR9, -L-C(0)R10, -L--C (0) OR10, Ci-6 alquilo opcionalmente substituído com halo, C2-e alquenilo ou C2-e alquinilo;
Ri0 é Ci-6 alquilo ou -L-W; L é um ligação ou (CR2) 14 em que R é H ou Ci-6 alquilo; W é C3_7cicloalquilo; R' e R11 são independentemente H, halo, ciano, Ci~6alcoxi, ---S(0)2R10, ou um 02-6 alquilo opcionalmente halogenado; e m, n e p são independentemente 0-2. A1 pode ser piperazinilo substituído com -C(0)CH3,
ou selecionado a partir de:
41 ΕΡ2403832Β1
Também se descreve no presente documento um composto de Fórmula (6) : ΕΡ2403832Β1
de N e ou? m de Xo, Xc, X; e X8 é N e os outros são CH; X9 é selecionado a partir de N e CH; Z é selecionado a partir de fenilo, pirazinilo, piridinilo e piperazinilo; em que cada fenilo, pirazinilo, piridinilo ou piperazinilo de Z é opcionalmente substitu ido com um i grupo R6; R1, R2 e R3 são hidrogén i 0; m é -1- / R4 é selecionado a partir de hidrogén j 0 ft ^ "i 0 ^ metilo; R° é se / Γ\ \ 1 \ 1 0 C\0) í\ ; lecionado em que RiU é partir metilo; de hidrogénio, e halo e - R' é se lecionado 3. partir de hidrogénio, met il 0 e trifluorometilo. R3 são H; e R e R são partir de hidrogénio,
Em alguns compostos, R1, Rz e independentemente selecionados a halo, metilo e -C(0)CH3. carb (R) , Em cada uma das ono assimétricos ÍS) ou (R,S) . Os fórmulas acima, quaisquer átomos de podem estar presentes na configuração compostos podem assim estar presentes 42 ΕΡ2403832Β1 como misturas de isómeros ou como isómeros puros, por exemplo, como enantiómeros ou diastereómeros puro. Também se descrevem no presente documento tautómeros possíveis dos compostos inventivos.
Também se descrevem no presente documento todas as variações isotópicas adequadas dos compostos da invenção, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. Uma variação isotópica de um composto da invenção ou ura sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é definido como um em que pelo menos um átomo é substituído por um átomo que tem o mesmo número atómico, mas uma massa atómica diferente da massa atómica usualmente encontrada na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos incluem, mas não são limitados a isótopos de hi drogénio, carbono, azoto θ oxigénio tais como 2H, 3h, 31C, 13n O f 14^ 15n, 170, iSo, 3 5Q 18p 36Γ1 e 13'I. Cert as variações isotópicas dos cornpostos da invenção e sai s farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, por exemplo, aqueles em que um isótopo radioativo tal como 3í-l ou 14C é incorporado, são úteis em estudos de distribuição de fármaco e/ou tecido substrato.
Em exemplos particulares, os isótopos ZH, 3H e 14C podem ser utilizados pela sua facilidade de preparação e detetabilidade. Em outros exemplos, a substituição com isótopos tais como ZH pode propiciar certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, tal como semivida aumentada in vivo ou requisitos de dosagem reduzida. Variações isotópicas dos compostos da invenção ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo podem ser preparadas geralmente por meio de procedimentos convencionais usando variações isotópicas apropriadas de reagentes adequados. Variações isotópicas dos compostos têm 43 EP24G3832B1 EP24G3832B1 de o potencial de mudar um destino metabólico do composto e/ou criar pequenas mudanças em propriedades físicas tais como hidrofobiciaaae, e similares. A variação isotópica têm o potencial de aumentar a eficácia e segurança, aumentar a oxodisponibilidade e semivida, alterar ligação de proteína, mudar a. biodisrnbuição, aumentar a proporção metaool.it os ativos e/ou diminuir a formação de metabolito: reativos ou tóxicos.
Também se descreve no presente documento um método de inibição ae sinalização de Wnt numa célula que compreende colocar em contato a célula com uma quantidade eficaz de um dutagonisLâ de Wnt. A célula pode ser contida dentro de um manuiero, e a quantidade administrada pode ser uma quantxdade terapeuticamente eficaz. A inibição da oinalização de Wnt pode resultar ainda na inibição do uresuxmento d.a célula. A célula pode ser uma célula de cancro. A inibição da proliferação celular é medida >andc métodos conhecidos ao perito na especialidade. Por exemplo, um ensaio conveniente para medir a proliferação celular é o Ensaio de Viabilidade Celular Luminescente CellTiter-Glo™, que está comercialmente disponível de Promega (Madison, Wis.). Esse ensaio determina o número de células viáveis em cultura com base na quantificação de ATP presente, que é uma indicação Crouch et al N° 6.602.677. ou 384 poços de células metaboiicamente ativas. Veia—se (1993) J. xmunol. Met. 160:81 — 88, Patente IJS O ensaio pod.e ser conduzido em formato de 96 , tornando-o recetivo a rastreio de alto rendimento automatizado (HTS). Veja-se Cree et al (1995) AntiCancer Drugs 6:398-404. o procedimento de ensaio envolve adicionar um único reagente (Reagente de CellTiter-Glo®) diretamente a células cultivadas. Isto resulta em li se celular e geração de sinal luminescente produzido 44 EP24G3832B1 EP24G3832B1 inal luminescente é presente, que é d e c é 1 u .1 as v i á v e i s por uma reação de luciferase. 0 s proporcional à quantidade de ATP diretamente proporcional ao número pr esente em cultura. Os dados podem ser lu: minómetro ou dispositivo de formação de i de CCD. 0 resultado de luminescência é registados por magem de câmareL expresso como unidades de luz relativa (RLU). A inibição da proliferação celular pode também ser medida usando ensaios de formação de colónia conhecidos na especialidade.
Também se descrevem, no presente documentos métodos de tratamento de um distúrbio mediado por Wnt num mamífero que sofre do mesmo, que compreende administrar ao mamífero uma quantidade terapeuticamente eficaz de um antagonista de
Wnt. 0 distúrbio pode ser um distúrbio de proliferação celular associado com aberrante, por exemplo, aumentada, expressão de atividade de sinalização de Wnt. 0 distúrbio pode resultar de expressão aumentada de uma proteína de Wnt. 0 distúrbio de proliferação celular pode ser cancro, tal como, por exemplo, cancro de cólon, cancro colo-rectal, cancro de mama, cancro associado com vários distúrbios relacionados com HSC, tais como leucemias e vários outros cancros relacionados com sangue, e cancro relacionado com distúr D iUí> proliferativos íeuronais, incluindo tumores cerebrais, tais como gliomas, astrocitomas, meningiomas, Schwannomas, tumores da pituitária, tumores neuroectodérmicos primitivos (TNEP), meduloblastornas, craniofaringioma, tumores da região pineal, e cancros de pele, incluindo carcinoma de célula basal e carcinoma de célula escamosa. 0 tratamento do distúrbio de proliferação celular pela administração de um antagonista de Wnt resulta numa redução observável e/ou mensurável em ou ausência de um ou mais dos seguintes: redução no número de células de cancro ou 45 ΕΡ2403832Β1 ausência das células de cancro; redução no tamanho do tumor; inibição da infiltração de células de cancro em órgãos periféricos incluindo o espalhamento de cancro em >ode ser )1 0 osso; inibição CU a rnetást. ase de tumor; at é i certo po nto, do cre scimento do tumor; e/ou 0 ce rto poii to, de um ou mais dos s intornas c< om o cancro espe c í f icc '} morbidad e e mort alidade 0 me lhora na quar ida de d e problem as da vi d 3. * A l, 0 qu 0 o antagonista de Wnt pos: s a prev enir o o e / < ou destr uir cél ula .s de cano ‘ "i" Q exis tentes, r-« -i U- -L tost. ático e/ou c i 10+- ó xico. A red ução destes S 1 ] nto mas pode também ser sentida p elo paci ente, alivio
Os parâmetros acima para avaliar tratamento bem sucedido e melhora na doença são prontamente mensuráveis por meio de procedimentos de rotina familiares a um médico.
Para a terapêutica 0 0 "Ci 1” τ' cl o cam v r·, ci cf i -Z\ r* ~\ ci rh r\ —· f CL vt >_- Ci. Ot Ol e s er medida, P or exemplo , por me io da avaliação do tempo até a. progres S cit o da doenc oa (TP D) e/ ou de t ermi n a çã o da ta: xa de respost cl (TR ) . A met oástase p ode ser determinada por mc Ϊ10 de testes da 0 S tágio e pelo exí une ós seo e testes para o nivel de cálcio e outras enzimas para determinar o espalhamen "L 0 η o o s s o. exames de TC P o d em também ser feitos pa ra pesquis ar o espalha mento na pelve e nódulos 1 i n f á t i c os na área. Raios X do tórax e a medrção de niveis de enzima do figado por métodos conhecidos são utilizados para procurar a metástase nos pulmões e fígado, respetivamente. Outros fp,0 t odos de roti na para moni ul t rass onog r a fia transrectal ( tr a n s r e ctal { TRNB ) * Numa f o rma Ά ζΊ m i n i s traç: ão de . ant agonista de (P o r ex :empl o, reduz o tamanho ( ai n pd O- O utra ψ orrna de r e cl 1 r z cl ç ã o de anta goni st a de Wn t destrói o TRUS) e biópsia de agulha de realização especifica, a sm
LyC '13. f 3. 46 ΕΡ240383261
Farmacologia e Utilidade
Também se descrevem no presente documento composições e métodos para modular a via de sinalização de Wnt. Também se descrevem no presente documento composições e métodos que inibem a atividade de transdução de sinal de Wnt por meio da modulação da ativação da via. de Wnt, deste modo tratando, diagnosticando, prevenindo, e/ou melhorando distúrbios relacionsLdos com sinalização de Wnt. 0 presente paradigma para desenvolver terapêuticas para distúrbios relacionados com sinalização de Wnt baseia-se no direcionamento a β-cat ou componentes da via de Wnt a jusante de β-cat. Estudos recentes, no entanto, sugerem que a inibição do componente de interação de recetor - ligando extracelular é eficaz na redução da tumorigenicidade, mesmo embora o evento que inicia a sinalização de Wnt pode ter ocorrido a jusante. Além disso, a transfecç ão de recetor frizzled inoperativo (Frz7 ectodo minio) em 1i nha . de célula. de carci noma (SK-CO- 1) restaurou um fenótipo de β-catenina normal. Ssta linha celulcir tem sinalização de Wnt ativa
Tais células tumor auando devido a uma mutaçao homozigótica APC"_/ também não demonstraram formação de >ifferentiation 2005; transferidas In vivo, Vincan et ai 73: 142-153. Isto demonstra que a inibição da sinalização de Wnt ao nível extracelular pode regular negativamente a sinalização de Wnt resultante da ativação de um componente de via de sinalização de Wnt intracelular a jusante. Isto sugere ainda que inibidores da via de sinalização de Wnt podem ser utilizados no tratamento de qualquer distúrbio mediado por Wnt, independente da maneira particular na qual a sinalização de Wnt foi ativada. 47 ΕΡ2403832Β1
Distúrbios Associados com Atividade de Sinalizaçao de Wnt A desregulação da via de sinalização de Wnt pode ser causada por mutações somáticas em genes que codificam vários componentes da via de sinalização de Wnt. Por exemplo, a atividade de sinalização de Wnt aberrante foi associada com sobre-expressão de ligando de Wnt em cancro de pulmão de célula não pequena (NSCLC) [You et al., Oncogene 2004; 23: 6170-6174], leucemia linfocítica crónica (LLC) [Lu et al. , Proc. Natl. Acaci. Sei. USA 2004; 101: 3118-3123], cancro gástrico [Kim et ai., Exp. Oncol. 2003; 25: 211-215; Saitoh e 19] ., Int. J. Mol. Med. 2002; 9: 515- oi9j, carcinoma de célula escamosa de cabeça e pescoço (HNSCC) [Rhee et ai., Oncogene 2002; 21: 6598-6605], cancro colo-rectal [Holcombe et ai., J. ciin. Pathol-Mol. Pathol. 2002; 55 Ϊ20- do :io cancro Λ i
Endocrinology 2002; 143: 2741-2749], carcinoma de célula basal (BCC) [Lo Muzio et al., Anticancer Res. 2002; 22: 565-576] e cancro de mama. Além disso, a redução de várias moléculas reguladoras de ligando de Wnt tais como sFRP e WIF-1 foi associada com cancro de mama [Klopocki et ai., Int. J. Oncol. 2004; 25: 641-649; Ugolini et ai., Oncogene J. Pathol 2003; 201: 2001; 20: 5810-5817; Wissmann et ai.,
Lab Invest. mesotelioma et supra 204-212], cancro de bexiga [Stoehr 2004; 84: 465-478; Wissmann et ai.
[Lee et ai., Oncogene 2004; 23: 6672-6676], cancro colo- rectal [Suzuki et ai., Natureza Genet. 2004; 36: 417-422;
Kim et al., Mol. Câncer Ther. 2002; 1: 1355-1359; Caldwell et al., Câncer Res. 2004; 64: 883-888], esmero de próstata [Wissman et ai., supra], NSCLC [Mazieres et ai., Câncer Res. 2004; 64: 4717-4720], e cancro de pulmão [Wissman et al., supra]. A sinalização de Wnt aberrante resultante de sobre-expressão de vários componentes do complexo de recetor Frz- 48 ΕΡ2403832Β1 foi também associada com certos cancros. Por exemplo, a soore-expressão de LRP5 foi associada com osteossarcoma [noang et a±., Inu. j. Câncer 2004; 109: 106—111], enquanto a soore-expressão de Frz foi associada com cancros tais como cancro ca próstata [Wissmann et ai., supra], HNSCC [Rhee et ai., Oncogene 2002; 21: 6598-6605], colo-rectal [Holcombe et ai., supra] Supraj, esofágico [TanaKa et ai., Proc. Natl. Acad. Sei. JdA ly98; 95: 10x64-10169] e gástrico [Kirikoshi et ai., Int. J. Oncol. 2u01; 19: 111-115], Adicionalmente, a sobre-expressão de componentes da. via de sinalização de Wnt tais como Disheveliea fox associada com cancros tais como cancro dci próstata do ovário 'Wissman et Câncer
SCI I.Wissman et ai, supra], mama [Nagahata et ai., 2003; 94: 515-518], mesotelioma [Uematsu et a±.r Câncer Res. 2 0 03; 63: 4547-4551] e do colo do útero [Okino et ai, Oncol Rep. 2003; 10: 1219-1223]. A sobre-expressão de Frat-1 foi associada com cancros tais como cancro pancreático, esoiágico, do colo do útero, mama e gástrico. [Saitoh et ai., Int. j. Oncol. 2002; 20: 785-789; Saiton et ai., Int. u. Oncox 2001; 19: 311-315]. A perda de axina de mutações de função (LOF) foi associada com cancro hepatocelular [satoh et ai., Nature Genet. 2000; 24: 245-250; Taniguchi et ai., Oncogene 2002; 21: 4863-4871] e meduloblastoma [Dahmen et ai., Câncer Res. 2001; 61: 7039-7043; Yokota et ai., Int. J. Câncer 2002; 101: 198-201].
Alem disso, uma multitude de cancros foi associada com a ativaçao ae β-catenina através de disrupção do "complexo de aegradação" tal como mutações de ganho-de-função em β-cateruna ou mutações de perda-de-função em APC. Uma redução na degiaaaçao de β-catenina resulta em maiores quantidades de β-catenma funcional na célula, que então produz a transcrição aumentada dos genes alvo, resultando em proliferação celuxar aberrante. Por exemplo, as mutações no gene que codifica β-catenina (isto é, CTNNB1) foram 49 ΕΡ2403832Β1 associadas com cancros tais como cancro gástrico [Clements et ai., Câncer Res. 2002; 62: 3503-3506; Park et ai., Câncer Res. 1999; 59: 4257-4260], colo-rectal [Morin et ai., Science 1997; 275: 1787-1790; Ilyas et ai., Proc.
Natl. Acad. Sei. USA 1997; 94: 10330-10334], carcinoide intestinal [Fujimori et ai.. Câncer Res. 2001; 61 : 6656- 6659], do ovário [Sunaga et ai., Genes Cbrom. Câncer 2001; 30: 316-321], aaenocarcinoma pulmonar [Sunaga et ai., supra], do endométrio [Fukuchi et ai., Câncer Res. 1998; 58: 352 6-3528; Kobayashi et ai., Japan. J. Câncer Res. 1999; 90: 05-59; Mirabelli-Primdahl et ai., Câncer Res. 1999; 59: 3346-3351], hepatocelular [Satoh et ai., supra.; Wong et ar., Câncer 2001; 92: 136-145], hepatoblastoma [Koch et ai., Câncer Res. 1999; 59: 269-273], meduloblastoma [Koch et ai., Int. J. Câncer 2001; 93: 445- 449], pancreático [Abraham et ai., Am. J. Pathol 2002; 160: 1361-1369], tireoide [Garcia- Rostan et ai ., Câncer Res. 1999; 59: 1811-1815; Garcia-Rostan et ai., Am. J. Pathol 2001; 1,58 : 987-996] , próstata. [Chesire et ai. , Próstata 2000; 45: 323-334; Voeller et ai., Câncer Res. 1998; 58: 2520-2523], melanoma [Reifenberger et ai., Int. J. Câncer 2002; 10 0 : 549-556], pilomatricoma [Chan et ai. , Natureza
Genet. 1999; 21: 410-413], tumor de Wilras [Koesters et ai., J. Pathol 2003; 199: 68-76], pancreatoblast.ornas [Abraham et ai., Am. J. ratnoi 2001; 159: 1619-1627], lipossarcomas [Sakamoto et ai., Arch. Pathol. Lab Med. 2002; 126: 1071-1078], angiofibromas nasofaringeos juvenis [Abraham et ai., Am. J. Pathol. 2001; 158: 1073-1078], desmoide [Tejpar et ai., Oncogene 1999; x8: 6615-6620; Miyoshi et ai., Oncol. Res. 1998; 10: 591-594], sarcoma sinovial [Saito et ai., J. Pathol 2000; 192: 342-350]. Enquanto as mutações de perda-de-função foram associadas com cancros tais como colo-rectal [Fearon et ai., Cell 1990; 61: 759-757; Rowan et ai., Proc. Natl. Acad, Sei. USA 2000; 97; 3352-3357], me lanoma [Reifenbergei eí ai., Int. J. Can cer 2002; 100 50 ΕΡ2403832Β1 54 9-55 6; Rubinfeld et al., meduloblastoma [Koch et al 44 9; Huang et al., Am. J desmoides [Tejpar et al., Alman et al., Am J. Pathol.
Science 1997; 275: 1790-1792], Int. J. Câncer 200 1; 93: 445- Pathol 2000; 156: 433-437] e Oncogene 1999; 18: 6615-6620; 1997; 15 1: 329-334].
Outros distúrbios assoe udos com sinalização d <
Wnt aberrante incluem, mas são limitados a osteoporose, osteoartrite, ioenç? ae rim pol: ;ico. diabetes, esquizofrenia, doença proliferativas não neurodegenerativas tais doenças doenças vascular, doença cardíaca, oncogénicas, e como doença de Alzheimer.
Sinalização de Wnt Aberrante em Cancros e Leucemia A ativação da via de Wnt aberrante, através da estabilização de β-catenina, desempenha um papel central em tumorigénese para muitos carcinomas colo-rectais. £ estimado que 80 % de carcinomas colo-rectais (CRCs) albergam mutações de inativação no repressor de tumor APc, que tem em conta a sinalização de Wnt ininterrompida. Além disso, ha uma grande evidência que sugere que a ativação ga via de Wnt pode estar envolvida em melanoma, cancro çe mama, cancro de fígado, cancro de pulmão, cancro gástrico, e outros cancros. A ativação não regulada da via de sinalização de Wnt é também um precursor ao desenvolvimento de leucemia. pa evidência experimental que suporta que o crescimento oncogénico de ambas as linhagens mieloide e linfoide ^ dependente da sinalização de Wnt. A sinalização de Wnt f0j implicada na regulação de ambas as formas crónica e aguda de leucemia mieloide. Os progenitores õq granulócitomacrófago (GMPs) de leucemia mieloide cróniCa pacientes e crise de blastócitos de pacientes resistentes a 51 ΕΡ2403832Β1 terapêutica apresentam sinalização de Wnt ativada. Além disso, a inibição de β-catenina através da expressão ectópica de Axina diminui a capacidade de cobrir novamente de células leucémicas in vitro, sugerindo que precursores de leucemia mieloide crónica são dependentes da sinalização de Wnt para o crescimento e renovação. A sobre-expressão de Wnt também faz com que GMPs adquiram propriedades semelhantes de célula estaminal de autorrenovação a longo prazo, suportando a hipótese de que a sinalização de Wnt é importante para o desenvolvimento normal de linhagens sanguíneas, mas que a sinalização de Wnt aberrante resulta, na transformação de células progenitoras.
Estudos recentes também sugerem que neoplasias linfoides podem também ser influenciadas pela sinalização de Wnt. Wnt-16 é sobre-expresso em linhas de células de leucemia de célula pré-B que portam a translocação de E2A-PbX, sugerindo que atividade autócrina de Wnt pode lonuriDuir :ogénese. Mc Whirter, 'roc. Natl
Acad, Sei. USA 96: 11464-11469 (1999). 0 papel da sinalização de Wnt no crescimento e sobrevivência de progenitores de célula B normais suporta ainda esta noção. Reya et al., Immunity 13: 15-24 (2000); Ranheim et aJ., Blood 105: 2487-2494 (2005). A dependência autócrina de Wnt foi também proposta para regular o crescimento de mieloma múltiplo, um cancro de céluia.s B terminalmente diferenciadas. Derksen et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 101: 61z2—6127 5,2004) . Encontrou—se que mielomas Primários e linhas de célula de mieloma também se expressam de forma estabxlizada (rstc) é, independenze cie compi exc> de degradação) . Embora nenhuma mutação nos componentes de Sinalização de Wnt estivesse presente, a sobre—expressão de diversos componentes, incluindo Wnt-5A e Wnt-IOB sugerem que a dependência de tumor e autorrenovação de cancro não é necessariamente dependente de mutações que aparecem em 52 EP24G3832E31 EP24G3832E31 on entes da via de sina somente após ativaçac de sinalização de Wnt, mas ao invés constitutiva da via por si mesma. A transição de autorrenovação, as células estaminais pluripotentes a progenitores mieloides é conseguida pela regulação negativa de sinalização de Wnt. Reya et ai, Nature 423: 409-414 (2003). De maneira similar, a expressão estável de β-catenina em progenitores linfoides restaurou múltiplas opções de diferenciação, se bem que tais células não possuem marcadores tipicamente associados com o tipo de célula. Baba et al, Immunity 23: 599-609 (2005).
Sinalização de Wnt Aberrante em Distúrbios Neurais onenn gemi
Foi também observado que a ativação de sinalização de Wnt através de β-catenina pode aumentar o ciclo e expansão de progenitores neurais, e essa perda de tal sinalização pode resultar numa perda de compartimento prog et al., Science 297: 365-369 (2002); Zechner et al., Dev. Bioi. 258: 406-418 (2003). Justamente como ativação normal de sinalização de Wnt pode promover a autorrenovação de células estaminais neuronais, a ativação da via de Wnt aberrante pode ser tumorigénica no sistema nervoso. Evidência experimental suportando esta conclusão é a descoberta de que meduloblastorna, um tumor cerebral pediátrico do cerebelo, contém mutações em ambas β-catenina e Axina, deste modo sugerindo que meduloblastornas surgem de progenitores primit ivos gue se ;ransíormam em
SpOStâ cl sinalização de Wnt não controlada. Zurawel et ai., Câncer Res. 58: 89o-899 (1998); Dahmen et ai., Câncer Res. 61: 7039-7043 (.2001) ; Baeza et ai., Oncogene 22: 632-636 (20U3) . Assim, é fortemente sugerido que a inibição da sinalização de Wnt pelos antagonistas de Wnt da invenção pode ser uma terapêutica eficaz no tratamento de vários 53 ΕΡ2403832Β1 distúrbios proliferativos neuronais, incluindo tumores cerebrais, tais como gliomas, astrocítomas, meningiomas, Schwannomas, tumores da pituitária, tumores neuroectodérmicos primitivos (TNEP), meduloblastornas, craniofaringioma, tumores da região pineal, e neurofibromatoses não cancerosas.
Sinalização de Wnt em Células Estaminais Hematopoiéticas
As células estaminais hematopoiéticas dão oriaem às células sanguíneas adultas do sistema circulatório num processo de células progenitoras comprometidas com a linhagem de células estaminais hematopoiéticas multipotenciais (HSC). E também aparente que a sinalização de Wnt contribua à autorrenovação e manutenção de HSC, e que a sinalização de Wnt disfuncional é responsável por vários distúrbios resultantes de HSC, tais como leucemias e vários outros cancros relacionados com sangue. Reya et aí., Natureza 434: 843-850 (2005); Baba et aí., Immunity 23: 599-609 (2005); Jamieson et ai., N. Engl. J. Med. 351 (7): 657-667 (2004) . A sinalização de Wnt é normalmente reduzida à medida que as células estaminais se convertem em células progenitoras mieloides comprometidas. Reya et aí., Nature 423: 409-414 (2003) . Não somente os ligandos de Wnt são por si mesmos produzidos por HSC, mas a sinalização de Wnt é também ativa, deste modo sugerindo regulação autócrina ou parácrina. Rattis et ai., Curr. Opin. Hematol. 11: 88-94 (2004); Reya et aí., Nature 423: 409-414 (2003). Adicionalmente, ambas β-catenina e Wnt3a promovem a autorrenovação de HSC murinas e células progenitoras, enquanto a aplicação de Wnt-5A a progenitores hematopoiéticos humanos promove a expansão de progenitores não diferenciados in vitro. Reya et ai., supra.; Willert et 54 ΕΡ2403832Β1 al., Nature 423: 448-452 (2003); Van Den Berg et ai., Blood 92: 3189-3202 (1998). que células estaminais epidérmicas e células et al., supra; (1998); Sato et d., Cell 95: 605- 2285-2298 (1999) . de Wnt com os :ão pode ser uma
Além de HSC, é aparente embrionárias, células estaminai estaminais epiteliais são respondedoras ou dependentes de sinalização de Wnt para a manutenção num estado de proliferação não diferenciado. Willert Korinek et al., Nat. Genet. 19: 37 9-383 (1998); Sato al.r Nat. Med. 10: 55-63 (2004); 614 (1998); Zhu et al., Developn
Portanto, a inibição da sinalização de Wnt antagonistas de Wnt da presente-terapêutica no tratamento de distúrbios resultantes de hematopoieses disfuncionais, tais como leucemias e vários cancros relacionados com sangue, tal como leucemias mieloide e linfoide aguda e crónica, síndrome mielodisplásica e distúrbios mieloproliferativos. Estes incluem mieloma, linfoma (por exemplo, doença de Hodgkin e doença de não Hodgkin) anemia crónica e não progressiva, progressiva e deficiências de célula sanguínea sintomáticas, policitemia vera, trombocitemia essencial ou primária, mielofibrose idiopática, leucemia mielomonocítica crónica (CMML), linfoma de célula do manto, linfoma de célula T cutâneo, macroglobinemia de Waldenstrom.
Sinalizaçao de Wnt no Envelhecimento A via de sinalização de Wnt pode também desempenhar um papel crítico no envelhecimento e distúrbios relacionados com a idade. Como relatado em Brack A S, et al., Science, 31/ (5839) : «07-10 (2007), as células estaminais musculares de ratinhos envelhecidos foram observadas para converter de uma linhagem miogénica a uma fibrogénica à medida que começassem a proliferar. Esta conversão é associada com um 55 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 via de sinalização de atividade de Wnt canó nica itores miogénicos envelhecidos e pode ser pelos inibidores de Wnt. Adicionalmente, os ; de soro de ratinhos envelhecidos ligam-se às aumento na vi em proq componentes dc
Frizziea e podem representar a sinanzaçao ae Wnt elevada mús cu1o eít células envelhecidas. A injeção de Wnt3A em
Dovem em regeneração reduziu a proliferação e imeni.ou a deposição de tecido conjuntivo. A via de sinalização de Wnt foi implicada ainda no processo de envelhecimento em estudos usando o modelo de ratxnno Klotho de envelhecimento acelerado em que foi determinado que a proteína Klotho interagiu fisicamente com e proteínas inibidas de Wnt. Liu H, et ai., Science, 317 (o839):803-6 (2007). Num modelo de cultura celular, a interação de Wnt-Klotho resultou ena supressão de atividade de Wnt biológica enquanto tecidos e órgãos de animais deficientes de Klotho mostraram evidência de sinalização cie Wnt aumentada.
Administração e Composições Farmacêuticas
Sm geral, os compostos da invenção serão administrados em quantidades terapeuticamente eficazes via qualquer dos modos usuais e aceitáveis conhecidos na especialidade, em separado ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos. Uma quantidade terapeuticamente eficaz pode variar amplamente dependendo da gravidade da doença, a idade e saúde relativa do indivíduo, ει potência do composto utiiizaao e outros fatores. Em geral, resultados satisfatórios são indicados como sendo obtidos sistemicamente em dosagens diárias de desde cerca de 0,03 ate 2,5 mg/kg por peso corporal. Uma dosagem diária indicada num mamífero maior, por exemplo, seres humanos, é no intervalo desde cerca de 0,5 mg até cerca de 100 mg, 56 EP24G3832B1 convenientemente administrada, por exemplo, em doses divididas até quatro vezes ao dia ou em forma retardada. Formas farmacêuticas unitárias adequadas para administração oral compreendem desde cerca de 1 até 50 mg de ingrediente ativo.
Os compostos da invenção podem, ser administrados como composições farmacêuticas por qualquer via convencional, em particular entericamente, por exemplo, oralmente, por exemplo, na forma de comprimidos ou cápsulas, ou parentericamente, por exemplo, na forma de soluções ou suspensões injetáveis, topicamente, por exemplo, na forma de loções, géis, pomadas ou cremes, ou numa forma nasal ou de supositório.
As composições farmacêuticas que compreendem ura composto da presente invenção na forma livre ou numa forma de sal farmaceuticamente aceitável em associação com pelo menos um portador farmaceut icamente aceitável ou diluente pode ser fabricado de uma maneira convencional por meio de métodos de mistura, granulação ou revestimento. Por exemplo, composições orais podem ser comprimidos ou cápsulas de gelatina que compreendem o ingrediente ativo juntamente com a) diluentes, por exemplo, lactose, dextrose, sucrose, manitol, sorbitol, celulose e/ou glicina; b) lubrificantes, por exemplo, sílica, talco, ácido esteárico, o seu sal de magnésio ou cálcio e/ou polietilenoglicol; para comprimidos, juntamente com c) ligantes, por exemplo, silicato de alumínio de magnésio, pasta de amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio e ou polivinilpirrolidona; e se for desejado, d) desintegrantes, por exemplo, amidos, agar, ácido algínico ou o seu sal de sódio, ou misturas efervescentes; e/ou e) absorventes, corantes, aromatizantes e adoçantes. Composições injetáveis podem ser soluções ou 57 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 suspensões isotómcds aquoseis f e supositórios podem ser preparados a partir de emulsões ou suspensões gordas.
As composições cIG j"LIVcLíltΘS , LSIS estabilização, molh solução, sais para i: podem ser esterilizadas e/ou contêm como SLgentes conservantes, de antes ou emulsionantes, promotores de eguiar a pressão osmótica e/ou tampões.
Além disso, podem também conter outras substâncias terapeuticamente valiosas. Formulações adequadas para aplicações transdérmicas incluem uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção com um portador. Um portador pode incluir solventes farmacologicamente aceitáveis absorvíveis para ajudar na passagem através dsL pele do hospedeiro. Por exemplo, dispositivos transdérmicos são na forma de uma bandagem, que compreende um membro de apoio, um reservatório contendo o composto opcionalmente com portadores, opcionalmente uma barreira de controlo de taxa para administrar o composto à pele do hospedeiro numa taxa controlada e predeterminada ao longo de um período prolongado de tempo, e meios para segurar o dispositivo à pele. Formulações transdérmicas de matriz podem também ser utilizadas. Formulações adequadas para aplicação tópica, por exemplo, à pele e olhos, podem ser soluções aquosas, pomadas, cremes ou géis bem conhecidos na especialidade. Tal pode conter solubilizantes, estabilizantes, agentes de aumento de tonicidade, tampões e conservantes.
Os compostos da invenção podem ser administrados em quantidades terapeuticamente eficazes em combinação com um ou mais agentes terapêuticos (combinações farmacêuticas). Por exemplo, efeitos sinergísticos podem ocorrer quando um composto da invenção é utilizado em combinação com um agente quimioterápico. Onde os compostos da invenção são administrados em conjunto com dos compostos coadministrados
Dutras terapêuticas, dosagens variarão claro dependendo do 58 EP24G3832B1 tipo de co fármaco utilizado, do fármaco especifico utilizado, da condição a ser tratada e assim por diante. A invenção também trata de combinações farmacêuticas, por exemplo, um kit, que compreende a) um primeiro agente que é um composto da invenção como revelado no presente documento, na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável, e b) pelo menos um coagente. 0 kit pode compreender instruções para a sua administração.
Processos para Preparar Compostos descritos no presente do c ume n t o
Em geral, os compostos que têm a Fórmula (1) podem ser preparados seguindo qualquer uma das metodologias de síntese descritas nos Exemplos, infra. Nas reações descritas, os grupos funcionais reativos, por exemplo, grupos hidroxi, ammo, imino, tio ou carboxi, onde estes são desejados no produto final, podem ser protegidos para evitar a sua participação indesejada nas reações. Grupos de proteção convencionais podem ser utilizados de acordo com prática padrão (veja-se, por exemplo, T.W. Greene e P. G. M. Wuts em "Protective Groups in Organic Cheinistry", John Wiley e Sons, 1991). Grupos abandonantes adequados para utilização nas metodologias de síntese descritas incluem grupos abandonantes de halogénio (por exemplo, cloro ou bromo), e outros grupos abandonantes convencionais dentro do conhecimento dos peritos na especialidade.
Qg compostos, incluindo os seus sais, sao também obteníveis na forma de bidratos, ou os seus cristais podem incluir, por exemplo, o solvente utilizado para cristalização (presente como solvatos). Sais podem usualmente ser convertidos a compostos na forma livre, por exemp] o, por tratamento coiri a<3entes básicos adequados, por 59 EP24G3832B1 exemplo, com carbonatos de metal alcalino, carbonatos de hidrogénio de metal alcalino, ou hidróxidos de metal alcalino, tais como carbonato de potássio ou hidróxido de sódio. Um composto da invenção numa forma de sal de adição de base pode ser convertido ao correspondente ácido livre por tratamento com um ácido adequado (por exemplo, ácido clorídrico, etc.). Em vista da relação próxima entre os novos compostos na forma livre e aqueles na forma dos seus sais, incluindo aqueles sais que podem ser utilizados como intermediários, por exemplo, na purificação ou identificação dos novos compostos, qualquer referência aos compostos livres é para ser entendida como referindo-se também aos correspondentes sais, conforme for apropriado.
Sais de compostos com um grupo de formação de sal podem ser preparados de um modo conhecido por si mesmo. Sais de adição de ácido de compostos de Fórmula (1), (2), (3), (4) ou (5) podem assim ser obtidos pelo tratamento com um ácido ou com um reagente de permuta de anião adequado. Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos descritos no presente documento podem ser formados, por exemplo, como sais de adição de ácido, com ácidos orgânico inorgânic os, a partir dos compostos de F ó rm tuia (1), (3) , (4) ou (5) com um átomo de azoto básico. Ácidos inorgânicos adequados incluem, mas não são limitados a, ácidos de halogénio, tais como ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ou ácido fosfórico. Ácidos orgânicos adequados incluem, mas não são limitados a, carboxílico, fosfórico, exemplo, ácido acético, ácido decanoico, ácido lático, ácido fumárico sulfónico ou ácidos sulfámico, por ácido propiónico, ácido octanoico, dodecanoico, ácido glicólico, ácido , ácido sucínico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido subérico, ácido azelaico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, aminoácidos, tais 60 ΕΡ2403832Β1 como ácido glutámico ou ácido aspártico, ácido maleico, ΕΡ2403832Β1 ácido hidroximaleico, icido metiIma1e i co, aci cio ciclohexanocarbox11ico, ácido adamantanocarboxílico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido 4-aminosalicílico, ácido itálico, ácido fenilacético, ácido mandelico, ácido cinámico, ácido metano- ou etano-sulfónico, ácido 2-hidroxietanossulfónico, ácido etano-1,2-disulfónico, ácido benzenossulfónico, ácido 2-naftaIenosulfónico, ácido 1,5-naftaleno-disulfónico, ácido 2-, 3- ou 4 metilbenzenossulfónico, ácido metilsulfúrico, ácido etilsulfúrico, ácido dodecilsulfúrico, ácido N-ciclohexilsulfámico, ácido N-metil-, N-etil- ou N-propil-sulfámico, ou outros ácidos protónicos orgânicos, tais como ácido ascórbico. Para os propósitos de isolamento ou purificação, é também possível utilizar sais farmaceuticamente inaceitáveis, por exemplo, picratos ou percloratos, Para utilização teraLpêutica, somente sais farmaceuticamente aceitáveis ou compostos livres são utilizados (onde for aplicável na. forma de preparações farmacêuticas).
Os compostos da invenção em forma não oxidada podem ser preparados a partir de N-óxidos de compostos como descrito no presente documento por tratamento com um agente redutor (por exemplo, enxofre, dióxido de enxofre, fosfino de trifenilo, borohidreto de litro, borohidreto de sódio, tricloreto de fósforo, tribrometo, ou similares) num solvente orgânico inerte adequado (por exemplo, aeetonitrilo, etanol, dioxano aquoso, ou similares) a 0 a 8 0 0 C .
Derivados de pró-fármaco dos compostos da invenção podem ser preparados por meio de métodos conhecidos aos peritos com habilidade ordinária na especialidade (por exemplo, para mais pormenores veja-se Saulnier et al., 61 ΕΡ2403832Β1 (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985). Por exemplo, pró-fármacos apropriados podem ser preparados por meio da reação de um composto não derivatizado da invenção com um agente carbamilante adequeLdo (por exemplo, 1, 1-aciloxialquilcarbanocloridato, carbonato de para-nitrofenilo, ou similares).
Derivados protegidos dos compostos da invenção podem ser feitos por meios conhecidos aos peritos com habilidade ordinária na especialidade. Uma descrição pormenorizada de téc n i cas aplicávei S d. criaçã o de grupos de proteção e a sua rem oç ão pode ser P Ti 0^ ontrada em T, W. Greene, "Protect ing Gro up S 1 n Organic Che: mistry" , 3 a edição, John Wiley e Sons, I n p « ! 19 99. Os compostos da invença lo podem ser preparados como OS seu s est ereoisómer OS individ .uais ; por meio da reação de uma mis tu £3. racémica do composto c om um agente de resolu ção Opt "i Q ame nte ativo para f ormar um par de coinpos tos dia S t ere oisomérico s, SepcilT clÇcí 0 dos diastereómeros Θ rec upera ção dos en ant iómeros opt ieamente puros. A resolu ÇcLO de enantiómeros p ode ser 1 evad a a cabo usando derivados dia st ere oméricos c lova ίlentes dos c o rnp o s t o s da i nve n ção, ou u s a nd 0 complexos dissoci .áveis (por exemplo, s ais dia st ere oméricos cr: J_ S t cl _!_ ΐ Π í jS) . Os diastereómeros têm pro pr ied ades físi cas dist ir atas (por exemplo, pontos de f us 3.0 l pontos de ebulição < s o1ub i1idades, reati vidade, pt' C * ) e podem ser prontament :e separados aproveitando es tas dif er enç as. Os diaste reómerc 'S podem ser separados por m i O “1 0 ou por recn rcas diferenças em puro é então resolução, por resultariam em cecmcas de cristalização fracionada, cromatografia, de separação/resolução com base em solubilidade. 0 enantiómero opticamente recuperado, juntamente com o agente de quaisquer meios práticos que não racemização. Uma descrição mais pormenorizada 62 EP24G3832B1 aplicáveis à resolução de estereoisómeros de compostos a partir da sua mistura racémica pode ser encontrada em Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers,
Racemates and Resolutions", John Wiley e Sons, Inc., 1981.
Em resumo, os compostos da invenção podem ser feitos por um processo como descrito nos Exemplos; e .nvençao num (a)converter opcionalmente um composto da sal farmaceuticamente aceitável; m (b)converter opcionalmente uma forma de sal de composto da invenção a uma formei não de sal; nao oxidada de um farmaceuticamente (c)converter opcionalmente uma forma composto da invenção num N-óxido aceitável; (d)converter opcionalmente uma forma de N-óxido de um composto da invenção à sua forma não oxidada; .m (e)resolver opcionalmente um isómero individual de composto da invenção de uma mistura de isómeros; (f) converter opcionalmente um composto nâo derivatizado da invenção num derivado de pró-fármaco farmaceuticamente aceitável; e (g) converter opcionalmente um derivado de pró-fármaco de um composto da invenção à sua forma não derivatizada.
Na medida em que a produção dos materiais de partida não é particularmente descrita, os compostos são conhecidos ou podem ser preparados de maneira análoga aos métodos conhecidos na especialidade ou como é revelado nos Exemplos 63 ΕΡ240383261 3. seguir no presente documento. Um perito na especiciiidcide apreciará que as transformações acima são somente representativas de métodos para a preparação dos compostos ΕΡ240383261 da presente inven e que outros métodos bem conhecidos podem de maneira similar ser utilizados. A presente invenção é exemplificada ainda, pelo seguinte e os Exemplos que ilustram a preparação dos compostos da invenção e outros compostos descritos no presente documento.
Exemplo 1 N-(6-metoxibenzo[d]tiazol-2-il)-2-(4-(piridin-4-il)fenil)acetamida (3)
DMF 3-2
HATLI DIEA
3-1
Composto 3 A uma mistura de ácido 2-(4-(piridin-4-il) fenil) acético 3-1 (45 mg, 0,21 mmol) , 6- metoxibenzo[d]tiazol-2-amina 3-2 (36 mg, 0,20 mmol), e DlEA (32 mg, 0,25 mmol) em DMF (0,5 ml) sob agitação foi adicionado HATU (84 mg, 0,22 mmol) . A solução foi agitada durante 2 horas antes de ser submetida a HPLC de fase reversa para a purificação para dar o composto 3 como sólido branco. MS m/z 376, 1 (M + 1) ; ] RMN 400 MHz (DMSO d6) δ : 12,60 (s, 1H), 8,70 (m, 2H) , 7, 87 (m, 2H) , 7, 7 8 (m 2H), 7 , 72 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,63 (d, 1H , J = 2, 8 Hz) 7,58 (i m, 2H), 7,11 (dd, 1H, , J1 = 8,8 H Z f J2 = = 2,4 Hz) F F ^ (s, 2 H ) , 3,8 6 (s, 3H) . ΕΡ2403832Β1
Exemplo 2 2- (3-metil-4- (2-metilpiridin-4-il) fen.il) -N- (4-feniltiazol- 2-il)acetamida (24) 1 ^ ^ Xj · ' Sllig *4^ t.#· ... f í'V ": , .A*d * 1 S* > *$ss »S* um ?ΓΎΎ'>! .. ο 'rsM ' l r\J t&S* 1*SÃ ^ ·.< 'i-* n..í> »*·* s*s
Etapa 1: A uma suspensão de ácido 3-metil-4- bromobenzóico 2 4-1 (2,15 g, 10 mmol) em tolueno (15 ml, anidro) foram adicionados S0C12 (1,4 ml, ~ 1,9 eq) e 3 gotas de DMF a temperatura ambiente. A mistura foi submetida a refluxo 2 horas com agitação. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi dissolvido em THE (25 ml f anidi :o) e em seguida a 0°C NEt3 (2,2 ml) e TMSCHN2 ( P ? ml x 2,0 M em hexan 0 s) f 0 r am a d i c i. 0 n a d 0 s . Após 12 h oras de ag • i f- s c~“- ^ Ο Ά v_. UA b-v V_* ._ί mistura foi dei _tada em solução saturada de N a H C 0 3 (6 0 ml) e extraída com acetato de etilo (3x60 ml) Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos em Na2S04 e evaporados para dar o intermediário bruto 24-3. Este i nte rmedi á r i 0 bruto foi adicionado em pequenas porções a uma solução si ibmetida a refluxo de NEt3 (4,2 ml) , PhC02Ag (0,70 g) em t-butanol (50 ml) e tolueno (20 íi nl) com a g i t a ç ã0. Ap ós 1 hora de refluxo, a mistura de rea ção foi arrefecida até temperatur a ambiente. Pó de cs irbono ativado 65 ΕΡ240383261 foi adicionado à mistura de reação que foi em seguida filtrada através de Celite. 0 material filtrado foi diluído com acetato de etilo (100 ml) e lavado com salmoura, Após ser seca em Na2S04, a solução resultante foi concentrada soio pressão reduzida. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em coluna em sílica gel com DCM-EtOAc (30:1) como eluente para proporcionar o éster t-butílico 24-4.
Etapa 2: em DCM (16 adicionado. A durante a noi'
Ester 24-4 (810 mg, 2,84 mmol) foi dissolvido mi) e acido trifluoroacético (2 ml) foi mistura foi agitada a. temperatura ambiente :e. O solvente DCM foi evaporado e o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo (50 ml) e estai solução orgânica foi extraída com solução de Na2C03 (10 % aquoso, 5 0 ml) . A fase aquosa foi acidificada com solução de HC1 até o pH2 e o precipitado foi extraído com acetato de etilo (50 ml) . Após ter sido seco em Na2S04, o solvente orgânico foi evaporado para dar ácido 24-5.
Etapa 3: A urna mistura de composto 24-5 (92 mg, 0,4 mmol), 4-fenil-2-aminotiazol 24-6 (76 mg, 0,44 mmol) e I-IATU (167 mg, 0,44 mol) em DMF (1,6 m) foi adicionado DIEA (100 uL, 0,58 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Então foi redistribuído entre acetato de etilo (50 ml) e água (40 ml) . A fase orgânica foi seca em Na2SC>4 e o solvente foi evaporado. O resíduo foi submetido a cromatografia em sílica gel para dar o composto 24-7.
Etapa 4: Uma mistura de composto 24-7 (33 mg, 0,085 mmol), ácido 2-metilpiridin-4-ilborónico (23 mg, 0,17 mmol), Pd(PPh3)4 (9,8 mg, 0,0085 mmol) e K3P04 (36 mg, 0,17 mmol) em dioxano (0,6 ml) e água (0,06 ml) sob árgon foi agitado a 96°C durante a noite. Após foi arrefecido até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada 66 ΕΡ2403832Β1 através de celite, diluída com SLcetSLto de e tilo (50 ml) solução orgânica 1 avada com água (50 ml x 2) e s e c Na2S04. Após a evap oração, o resíduo obtido f o i submeti HPLC de fase reversa para dar o í oomp osto 2 4 como sólido bran co. MS m/z 400,14 (M + 1 ! f 1H RMN 400 MH z (DMSO-dg) Ô 12,5 8 (s , 1H) , 8,56 (d , 1H, T 5, 6 Hz) , 7,92 (m, 2H) , 7, 63 (s, 1H) , 7,4 6 (m, 2H) , 7,3 6 (m, 1H) "? f ! f 33 (m, 4H), 7,24 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 3,83 (s, 2t i), 2 , 5 6 ( s f 3 H), 2,27 (s, 3 H) .
Exemplo 3 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(5-fenilpiridin-2- il)acetamida (26)
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 2-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (2,2 g, 10 iranol) , 2- (4-iodofenil) acetato de etilo 2 6-1 (2,9 g, 10 mrnol) , Pd(PPh3)4 (0,231 g, 0,2 rrimol) , tolueno (30 ml), etanol (10 ml) e 2 M de Na2C03 (10 ml). A mistura de reação foi esguichada com azoto e agitada a 90°C durante 10 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída em 200 ml de acetato de etilo e lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio e então salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2S04 e então levada 67 EP24G3832B1 até a secura por meio de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica, gel, eluído com 50 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetato de etilo 26-2 como um óleo. MS m/z 256, 1 (M + 1).
&tapa 4.: dm.a mistura de 2-(4-(2-metilpi.ridi.n-4-il)fenil)acetato de etilo 26-2 (1,81 g, 7,1 mmol), Li OH (u,j.7 g, /,1 mmol) em THF (30 ml), metanol (10 ml) e H20 ^ - 0 mi; roi agitada a. 60°C durante 1 nora. Após ser arrefecida até 0°C, a mistura foi neutralizada com HC1 a. 1 N a 0°c e então levada até a secura por meio de evaporação giratória para render ácido 2-(4-(2- metilpilidin-4-ix)fenil; acético 26-3. O produto foi utilizado para a seguinte etapa sem purificação adicional. MS m/z 228,1 (M + D .
Etapa 3 : Uma mi s t ura de acido 2-(4-(( il)fenil)ac ético 26-3 (50 mg, 0,2 mmoI), amina (41 rng, 0,24 mmo 1) e hexaflurof ) , 5-fen.i.lpirid.in-2-.uofato de 0-(7-azabenzotiiazol-l-ix) — N, N, ISH , N' — tetrametilurónio (HATU) (xl4 mg, 0,3 mmol) em 1,5 ml DMF foi adicionada N,N-dxisopropiletilamina (DiEA, 1υ4 ml, 0,6 mmol) a temperatura amoiente. A mistura roi agitada a temperatura ambiente durante z noras. O solvente foi removido por meio de ecaporuçao giratória. O produto bruto foi purificado por meio ae HPLC de rase reversa para dar 2-(4-(2-metilpiridin-4-ii,i fenii) -N- (o-fenilpindin-2-ii) acetamida 26 como sólido branco. MS m/z 380,17 (M + 1); g-ι RMN 400 MHz (DMSO-de) δ 1,0.84 (s, 1H), 8, 0 (d, 1H / ij li 4 Hz) , 8,42 (d, 1H, J - LH, J = 8,8 Hz) , 8, 04 (d.d, : LH, Ji = 00 co f 7 0 (ir i, 2H) , 7, 6: 5 (m, 2H) , 7, f 51 (m, 1H) , (m, lf I) , 3, / 6 (s, r 2H) , 2,46 (s, 3H) . 7,44 (m, 5H), 68 EP24Q3332B1
Exemplo 4 N-(5-fenilpiridin-2-il)-2-(4-(piridazin-4 il)fenil)acetamida (37)
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados ácido 4-(2-etoxi-2-oxoetil)fenilborónico 37-2 (310 mg, 1,5 mmol), 4- bromopiridazina 37-1 (158 mg, 1 mmol), Pd(PPh3) 4 (70 mg, 0,1 mmol), tolueno (4 ml), etanol (1 ml) e 2M de Na2C03 (1,5 ml). A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 2 minutos e agitada a 90°C durante 10 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com acetato de etilo (50 ml), lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio aquosa e salmoura.
Lo concentrada A fase orgânica foi seca em Na2S04 a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído com 50 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(4—(piridazin—4—il)fenil)acetato de etilo 37-3 como sólido amarelo pálido. MS m/z 243,1 (M + 1)
Etapa 2 : 2- (4- (piridazin- 4 - i 1) f eni ] .) âC0 l. ât O de etilo 37-3 (150 mg, 0,62 mrno 1) e 1 Na OH (12 0 mg, 3 mrno 1) foi misturado em dioxano (1,5 ml) e H 2 0 d, 5 ml) e agitado a 80°C durante 1 hora. 1 \pós ser a rrefec ida até 0°C, a mistura *-di 0ratada com soluç ão aquosa de HC 1. 3. 1 N até 0 pH 1, e 69 ΕΡ2403832Β1 levada até a secura por meio de evaporação giratória. 0 produto bruto foi extraído com acetato de etilo (100 ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram concentradas para dar ácido 2-(4-(piridazin-4- il)fenil)acético 37-4 como sólido amarelo pálido. MS m/z 215,1 (M + 1)
Etapa 3: A uma mistura de ácido 2-(4-(piridazin-4-il) fenil) acético 37-4 (43 mg, 0,2 rnmol) , 5-fenilpiridin-2-amina (41 mg, 0,24 rnmol) e hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N, ISM,N'-tetrametilurónio (HATU) (117 mg, 0,3 rnmol) em DMF (1 ml) foi adicionado DIEA (104 ml, 0,6 rnmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 noras. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5- f en .i lpi] C Í d í .n-2- -il)~ 2-2 (4- p i r i d azi . ii” 4-il) fen: il)acetamida 37 como sól -ido bran co. MS m/ z 3 67, 1 (M + 1) ; CH RMN 400 MH z (CE 'Cl3) δ 9, ,45- 9, 44 (m, 1H) , 9 , 22 (dd i L í 1 Λ 1J 1 1,2 Hz, u 2 11, 2 Hz ) , i 3,44 (d, 1H, ij — 2 ,4 H z) , O w ,29 (d, 1H, J - 8,8 Hz) f 1 f 92 (dd, 1H, J 1 = 16, P u/ Hz, J2 = 2,4 Hz) r7 -7 A _ f ' f ! '0 7, 66 (m, 3 H) n t ,5 6- 7,51 (m, 4 H) , 7,46 -7, 4 3 (m, 2 H) 7 7 Q- f 1 ΐ ^ J / f 3 D (m, 1H) , 7 r ^ f 85 (s, 2 H) . 70 EP24G3832B1
Exemplo 5 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)-N-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida (46)
Etapa 1: a um balao contendo 3-triflurometil-4- bromobenzonitrilo 46-1 (5,0 g, 20 mmol ) foram adicionados água (20 ml) e ác ido s ulfúrico concentr ado gota a gota (20 ml) . A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 10 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi deitada em diclorometano (150 ml) e água (100 ml), A mistura foi neutralizada com carbonato de sódio em pó até o pH 9. A camada aquosa foi acidificada com solução aquosa de ácido clorídrico a 1 N até o pH 1, e extraída com acetato de etiio (50 ml x 3) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2S04 e então levadas até a secura por meio de evaporação giratória a ácido 4~bromo-3-(trifluorometil)benzóico 46-2 como sólido branco. MS ra/z 269,1 (M + 1)
Etapa 2: A uma solução de ácido 4-bromo-3-(trifluorometil)benzóico 46-2 (1,35 g, 5 mmol) em THE (10 ml) foi adicionado 1 M BH3THF em THE (20 ml) lentamente a 71 EP24G3832B1 0°C. A mistura foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante 4 horas. A reação foi extinta com água a 0°C. Todo o solvente foi evaporado e o resíduo 101 redissolvido em acetato de etilo (100 ml), lavado c°m soluçõio saturada de NaHCCh aquosa, água e salmoura, seco ern Na2SC>4, e então concentrado. O produto bruto foi purificaa° por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído c°m 40 % de acetato de etilo em hexano para dar (4-bromo"-'" EP24G3832B1 (t ri .uorometil)fenil)metanol 46-3 como sólido branco m m/z 237,1 (M + 1)
Etapa ma solu ç ao ae (4-bromo n-3- (trífiuorometil)fenil)metanol 46-3 (956 mg, 3,75 mmol) trietil- amina (4b5 mg, 4,5 mmol) em :hí (9 ml) £o1 de metanosulfonilo (^--1 0 adicionada uma solução de cloreto mg, 3,75 mmol) em THE (1 ml) a 10°C lentamente. A mistura foi agitada durante 1 hora. 0 sólido foi filtrado e lavada a com etil éter, material filtrado :oi evaporado metanosulfonato de 4-bromo-3-(trifIuorometil)benzilo 46"^ como sólido amarelo pálido. MS m/z 233,1 (M + 1)
Etapa 4: A uma solução de metanosulfonato de 4-bromo-3—(trifIuorometil)benzilo 46—4 (1,295 g? u, /5 mmor) em etanol (10 ml) foi potássio (364 mg, 5 submetida a refluxo durante 2 sido arrefecida até a temperatura ambiente, todo o solvent foi evaporado e o res adicionada uma solução de cianeto de 6 mmol) em água (2 ml). A mistura foi horas. Após a mistura ter ' & duo foi redissolvido em diclorometano (50 ml) , lavado com agua e salmoura, seco em Na2S04, e concentrado até a secura para dar 2~ (4~bromo~3~ (trifluorometil)fenil)acetonitrilo 46-5 como óleo castanho escuro, que foi utilizado para a seguinte etapa diretamente. MS m/z 264,1 (M + 1)
Etapa um balão contendo 2-(4-bromo-3- 72 EP24G3832B1 EP24G3832B1 3,3 mmol) sulfúrico (trifluorometil)fenil)acetonitrilo 46-5 (880 mg, foram adicionados água (4,5 mi) e ácido . A mistura de reação foi Após ser arrefecida até a de reação foi deitada em concentrado gota a gota (4? o nu.) agitada a 115°C durante 4 horas, temperatura ambiente, a mistura água (100 ml) . A solução resultante foi neutralizada com carbonato de sódio em pó até o pH 12, tratada com IN solução de HC1 aquosa até o pH ao redor de 2, e extraída com diclorometano (50 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2S04 e então levadas até a secura por meio de evaporação giratória para dar ácido 2-(4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)acético 46-6 como sólido amarelo pálido. MS m/z 283,1 (M + 1)
Etapa 6: A uma mistura de ácido 2- (4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)acético 46—6 (71 mg, 0,25 mmol), o- fenilpiridin-2-amina (64 mg, 0,38 mmol) e HATU (148 mg, 0,38 mmol) em DMF (1 ml) foi adicionado DIEA (12.5 ml, 0,75 mmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etilo (50 ml ) , lavada com solução saturada de NaHC03 aquosa, água e salmoura, seca em N a2SC'4, e concentrada por meio de ev aporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica gel, eluído com 40 % de acetato de etilo em hexano para dar 2- (4-bromo~3~ (trifluorometil) fenil) -N- (5~ fenilpiridin-2-il)acetamida 46-7 como sólido amarelo pálido, MS m/z 435,2 (M + 1)
Etapa 7: a um tubo vedado foram adicionados 2- (4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)-n-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida 46-7 (73 mg, 0,17 mmol), ácido 2-metilpiridin-4-ilborónico (35 mg, 0,255 mmol), Pd(PPh3)4 (12 mg, 0,017 mmol), tolueno (0,8 ml), etanol (0,2 ml) e 2M de Na2C03 73 ΕΡ2403832Β1 (0,5 ml). A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 2 minutos e agitada a 90°C durante 10 horas. Após ser arrefecida, até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com acetato de etilo (50 ml) e lavada com solução saturada de NaHC03 aquosa e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2S04 e concentrada até a secura por meio <ie evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2 —(4 — (2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil) -N-(5- f 0 ni Ipiri din-2- .11) acetamida 46 como sóli .do branco . MS m/ z 44 8, 1 (M + D ; TH RMN 400 MH z ÍCDCI3) δ 8,4; 8-8,45 (m, 2H) , 8, 2 8 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,92 ! dd, 1H, Jl = 8,4 Hz, J2 = 2, 4 Hz) , 7,75 (s, 1H) , 7, 61 (dd, 1H, Ji = 8 , 0 Hz, j2 - 1,2 Hz ) , 7,54 : -7,52 (m, 2H) , ' 7,47-7,43 (m, : 2H) , 7,3 9- 7,37 (m, 1H ) , 7,28 (d, 1 n, J = 7,6 Hz), 7,14 (s, 1 H) , 7,10 (d, 1: H, J = 5, 2 Hz) , 3,86 (s, 2 H) , 2 ,59 (s, 3H) .
Exemplo 6 2-(4-(lH-imidazol-l-il)fenil)-N-(5-fenilpiridin-2-11)acetamida (53)
Etapa 1: A uma solução de ácido 2-(4-iodofenil)acético , r o /5 53-1 (816 mg, 3,14 rnrnol) , 5-fen.ilpiridin-2-am.ina 53-2 1°34 mg, 3,14 mmol) e HATU (1,19 g, 3,14 mmol) em DMF (1 ml) fo1 adicionado DIEA (1,57 ml, 9,42 mmol) a temperatura 74 ΕΡ2403832Β1 ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etilo (50 ml), lavada com solução saturada de NaHC03 aquosa, água e salmoura, seca em Na2S04, e concentrada por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído com 40 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(4-Iodofenil)-N-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida 53-3 como sólido amarelo pálido. MS m/z 415,2 (M + 1)
Etapa 2: Uma mistura de 2-(4-iodofenil)-N-(5- fenilpiridin-2-il)acetamida 53-3 (41 mg, 0,1 mmol), imidazol (10 mg, 0,15 mmol), fosfato de potássio (41 mg, 0,3 mmol), Cul (2 mg, 0,01 mmol) e L-prolina (2,3 mg, 0,02 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi agitada sob uma atmosfera de árgon seco a 100°C durante 10 horas. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2-(4-(lH-imidazol-l-il)fenil)-N-(5-fenilpiridin-2-il)acetamida 53 como sólido bran co. MS m/z 355, 1 (M + 1) ; J‘H RMN 400 MH z (C dci3) δ 8,47-8,46 (m, 1H), 8, ,29 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7, 99 \ s , 1H) , 7,92 (dd, 1H, Ji - 16 ,8 Hz, J 2 7=7 2,4 Hz) , 7,88 l o \ ^ í 1H ) , 7, 55-7,53 (m, 2 H' ), 7,4 9- ‘7,38 ( m, 6H) , 7,29 (s, 1H) , ' f 23 (s , 1H), 3,83 (s, 2H) .
Exemplo 7 N—(5—(1H—pirazol—4—il)piridin—2—il)—2—(4—(2—metilpiridin—4— il)fenil)acetamida (65)
Composto 65 oh 75 ΕΡ2403832Β1
Etapa 1: A uma solução de ácido 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acético 65-1 (300 mg, 1,3 iranol), 5-iodopiridin-2-amina (344 rag, 1,6 ramol) e HATU (590 mg, 1,6 mmol) em DMF (8 ml) foi adicionado DIEA (503 mg, 3,9 mmol) a temperatura ambiente. Após ser agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, a mistura de reação foi diluída em acetato de etilo e lavada com solução saturada de NaHC03 e então salmoura. A. fase orgânica foi seca em MgSCn, O solvente foi removido e o produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel para proporcionar N-(5-iodopiridin-2-il)-2- (4- (2- metilpiridin-4-il)fenil)acetamida 65-2 como sólido branco pérola. MS rri/z 430,1 (M+l) .
Etapa 2 : N- (5-Iodopiridin-2-il) ---2--- (4--- (2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida 65-2 (20 mg, 0, 046 mmol) , 4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-lH-pirazol (13,5 mg, 0,07 mmol) e Pd(PPh3)4 (5 mg, 0, 004 mmol) foi misturado em tolueno (3 ml) /etanol (1 ml) /Na^CCu (2M, 1 ml) . Ai mistura de reação foi agitada a 90 °C durante 10 horas. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo :oi removido por :oi dissolvido em DMSO. O sal inorgân: meio de filtração. O produto bruto em DMSO foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(lH-pirazol-4-il)piridin-2- il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-ii)fenil)acetamida 65 como sólido branco pérola. MS m/z 370,2 (M+l). 76 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 8 2-(4-(2~metilpiridin-4~il)fenil)—N—(6-mor£olinopiridin~3 il) acefcaraida (73)
Uma mistura de ácido 2- (4--- (2-met ilpiridin-4- il) fenil)acético 73-1 (40 mg, 0,18 mmol), 6- morfolinopiridin-3- arai na (40 mg, 0,22 mmo1) e HATÍJ (80 mg, 0,21 mmol) em 2 ml D ME’ foi adi cionado DIEA ( »v 0 1 1 £ o v—| mmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. 0 solvente foi removido por meio de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar o composto do titulo 73 como sóli do branco. MS m/z 389,19 (M + 1) ; UH RMN 400 MHz (DMSO-d5) δ 11,30 (s, 1H) , 8,82 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 8,57 (d, 1H, 0 = 2,4 Hz), 8,35 (m, 1H), 8,24 (dd , 1H, J i — o,4 Hz, J2 = 6 Hz), 8,19 (dd, 1H, J2 - 10,0 Hz, J2 = 2,8 Hz) , 8,02 (m, 2H ), 7,63 (m, 2H), 7,42 (d, 2 H, J = 9,6 Hz), 3,87 (s, 2H), 3, 75 (m, 4H), 3,66 (m, 4H) , 2,80 (s, 3 H) .
Exemplo 9 N-(5-(3-fluorofenil)piridin-2-il)-2-(5-metil-6-(piridazin- 4-il)piridin-3-il)acetamida (74) 77 EP24G3832B1
i.l) metanol 74—1 (1,57 g, 10 mmol) em diclorometano (15 ml.) foi adicionado cloreto de tionilo gota a gota (3,6 mi, 50 mmol) a 0°C lentamente. A mistura foi agitada durante 2 horõis a temperatura ambiente, diluída com diclorometano (100 ml) e água (100 ml) , neutralizada com carbonato de sódio em pó até o pH 8. A camada aquosa foi extraída, ainda com diclorometano (50 ml) , As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2S04, e concentradas ate a secura por meio de evaporação giratória para proporcionar 2-cloro-5-(clorometil)- 3-metilpiridina 74-2 como sólido amarelo pálido, que foi utilizado para a seguinte etsipa diretamente. MS m/z 176,1 (M + 1) títapa 2: Uma mistura de 2-cloro-5-(clorometil)-3- metilpiridina 74-2 (1, 64 g, 9,4 mmol), cianeto de sódio (1,85 g, 37 mmol) e 15-coroa-5 (0,1 ml, 0,47 mmol) em acetonitrilo (30 ml) foi agitada a 40°C durante 4 horas. Apos a. mistura ter sido arrefecida, até a temperatura ambiente, o solvente foi evaporado e o resíduo foi redissolvido em acetato de etilo (100 ml)? lavado com água e salmoura, seco em Na^SCp, e concentrado até a (6-cloro-5-metilpiridin- 3-il)acetonitri1° 74-3 secura a z- lorao )liao vermelho pálido, que foi utilizado para a seguinte etapa sem purificação adicional. MS m/z 167,1 (M + 1) 78 ΕΡ2403832Β1
Etapa 3: a um balão contendo 2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)acetonitrilo 74-3 (1,12 g, 6,75 mmol) foram adicionados água (9,0 ml) e ácido sulfúrico concentrado gota a gota (9,0 ml) . A mistura de reação foi agitada a 100 °C. durante 4 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi deitada em água (100 ml) . A solução resultante foi neutralizada com carbonato de sódio em pó até o pH ao redor de 3, e extraída com acetato de etilo (50 ml x 3) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2S04 e então levadas até a secura por meio de evaporação giratória Para dar ácido 2-(6-Cloro-5-metilpiridin-3-il)acético 74-4 como sólido amarelo pálido, que foi utilizado diretamente para a seguinte etapa. MS m/z 186,1 (M + 1) uma mistura de ácido 2- (6-Cloro-5- acético 74-4 (222 mg, 1,2 mmo 1) , 5 --- .ina (33 6 mg, 1, 8 mmo1) e HATU (684 mg, (5 ml) foi adiciona ido DIE LA (600 ml, 3,6 ira ambiente. A mi stura foi agitada a
Etapa 4: A me t i lp i r i di n- 3 --· i 1) fenilpiridin- 2-ai 1,8 mmol) em DMF (5 ml) mmol) a tempere temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etilo (100 ml) , lavada com solução saturada 0 de NaH.C03 aquosa, água salmoura, seca em. Na2S04, concentrada por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica gel, eluído com 40 % de acetato de etilo em diclorometano para dar 2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)-N-(5~ (3---fluorotenil)piridin-2-il) acetamida 74-5 como amarelo escuro. MS m/z 356,1 (M + 1).
Etapa 5: a um tubo de reação contendo 2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)~N-(5-(3-fluorofenil)piridin-2-il)acetamida 74-5 (54 mg, 0,15 mmol), 4- (tributilstanil) piridazina (55 mg, 0,15 mmol) e Pd(PPh3)4 (16 mg, 0,015 mmol) sob Árgon roi adicionado DMF (0,8 ml). A mistura foi 79 ΕΡ2403832Β1 agitada a 120°C durante 10 horas. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(3-fluorofenil)piridin-2-il)-2-(5-metil-6-(piridazin-4-il)piridin-3-il)acetamida 74 como sólido branco. MS m/z 400, 1 (M + 1) ; XH RMN 40 r\ \J MH z (CDC.I3) δ 9,42 (dd, 1H, Ji - i4^ co Hz, J2 = 1,2 Hz) , 9, 29 (dd , 1H, Jx = - 10, 4 Hz, J2 ” = 1,2 Hz) , 8,56 (d. 1H, J = = 1 , 6 Hz) , 8,46 (d , 1H, J = 1, 6 Hz) , 8,2 8 (d, 1 ti, J = 8,8 il Δ } f 7, 90 (dd, 1H, Ji = 17, ( > Hz, J2 = 2,4 hz) 7 12 Δ, / f tf , Δ, (d, In, U 1, 6 Hz), 7,70 (dd, 1H, Ji = 10,8 Hz, T —. o r\ U 2 ^ Hz) f ! t 44- -7, 3 9 (m, 1H) , 7,32- -7,30 (m. 1H) , 7,25 -7,21 (m, 1H) , 7, 09- -7, 0 4 (m, 1H) , 3, 82 (s, 2H) , 2,44 (s, 3H) .
Exemplo lí (5-(pirazin-2- 2—(2',3—diraefcil—2,4!—bipiridin—5—il) il)piridin-2-il)acetamida (86) O'"- v N Bfr-3 \jr •1-, , li' λΧ*.jt
Pcfe ríSssU ________ ,, xV Í * v í) v ,V\-,V * cr KYff WA ·* & - : .·: ,vTv, ^ x'·' 1 XV *· >5yx i. 1 ir çsí&íí* γ •V. : Γίίρνν. v r J 4 * I ¥ ,1L ,?í, I Ί i.
Etapa tetrametil-(2,2 g, 10 a um tubo vedado foi adicionado 5-(4,4,5,5- 3,2-dioxaborolan-2-il)piridin- mmo i) 2-i o dop i r a z i n a (2,06 g, 86-1 .0 mmol) ,
Pd (PPh3) 4 (57/ mg, 0,5 mmol), tolueno (70 ml), etanol (15 80 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 :οι ml) e 2 Μ de Na2C03 (15 ml) . a mistura de reação f borburhada com azoto durante 2 minutos e agitada a 90°C durante 10 horas. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e o resíduo foi redissoivido em diclorometano (200 ml) e tratado com solução a 1 M de HC1 aquosa (50 ml). As duas camadas foram separadas e a camada aquosa foi tratada com 10 % de Na OH solução aquosa para ajustar o pH até ao redor de 13. A suspensão resultante foi extraída com acetato de etilo (100 ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com H20 (50 ml) e salmoura (50 ml), secas em Na2S04 e conce ntr adas 1 par a da r 5 -(piraz iin-2 -il )piridin -2-amina 86 -3 como sói .ido bran ICO . MS m/z 17 3,1 (M + D; I RMN 4 0 0 M Hz (DMSO -d6 ) δ 9,12 (d, 1H , J - 1, 6 Hz) , 8,73 (m, 1H) , 8, 60 (m, 1 H) , 8,1 16 (d ., 1H , J = 2,8 Hz) , r 8, 12 (dd, 1H, J = 8 ,8 Hz, J 2 “ 2,4 Hz) , 6,5 5 ( d, 1H, 8,8 Hz), 6, 46 (s, 2H ) ·
Etapa 2: a um tubo vedado foi adicionado 5-bromo-2- cloro -3-metilpiri dina 86-4 (4, 69 QU 22,/2 mmol), 0,5 M (2- terc- butoxi-2-oxo etil) cloreto de zinco(II) em éter 86-5 ti O LO il, 25 mmol) , Pd(dba)2 (262 mg, 0,45 mmol), ζ )-phos (320 mg, í j, 45 mmol) , e THE (75 ml) · A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante X minut° « »9*tadi» a 70°C durante 4 horas, após o arrefecimento até a temperatura evaporado e o resíduo foi etilo, lavado com água e entrado até a secura por 0 produto bruto foi fia flash em sílica gel e ilo em hexano para dar 2- ambiente, todo o solvente foi redissoivido em acetato de salmoura, seco em Na2SC>4 e cone meio de evaporação giratória* purificado por meio de cromatogrd eluído com 20 % de acetato de e (6-cloro-5-metilpiridin-3-i. como óleo vermelho. MS m/z 2 42, il '1 acetato de terc-butilo 86-6 (M + 1) , , n-í5—cloro—5—metiloiridin—3—
Etapa 3: Uma mistura de 2 U t \ r. . u.,4-^ ln (7,8 g, 32 mmol) e TFA (32 il) acetato de terc-duL±io eo—o χ ' 81 ΕΡ2403832Β1 ml) em DCM (32 ml) foi aLgitaLdo a temperatura ambiente durante 3 horas. A solução teve ο ρΗ ajustado até ao redor de 12 por carbonato de sódio e extraída com diclorometano. A fase aquosa foi acidificada até o pH 3 por solução a 1 N de HC1 aquosa e agitada durante 15 minutos. A suspensão foi extraída com diclorometano (100 ml X3). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, c secas em Na2S04 e então secas para dar ácido 2- ( 6- cloro -5- metilpiridin-3-il) ci c é 11 c o 8 6-7 como sólido amare _L O páli do. MS m/z 186,1 (M + 1) ; 1H R MN 4 0 0 Mn z (CD3C1) δ 8, 17 (d, 1H, J = 2,0 Hz) , 7,55 (d, 1H, U — 2,0 Hz), 3,63 (s, O H) , 2 , 38 (s, 3H) . Etapa 4: Uma mistura de ácido 2-( r Ό - Cloro ... 5... metilpiridin-3-il) acético 86-7 (3,0 g, 16,2 rrimol) , 5- (pirazin-2-il)piridin- 2-amina 86-3 (2,80 g, 16,2 mmol),1,3-diciclohexilcarbodiimida (4 g, 19,44 mmol) e 4-
(dimetilamino)piridina (324 mg, 3,24 mmol) em DMF (45 m •1) foi agitada, a temperatura arnb i .ente durante 1 0 horas. A mistura de reaçao foi filt rada para remover 0 solido e O material filtrado foi diluído com acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em N3.2SO4 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de crornatograf ia flash em sílica gel, eluído com 5 % de metanol em diclorometano para dar 2- <6- c 1 oro- 5 ---met i Ip i ridin- --3--Í1) — N— (5 --- (pirazin-2- -il)piridin- 2- il) acetamida 86-8 como sólido amai :elo pálido. MS m/z 340 ,2 (M + 1) ; ΧΗ RMN 4C )0 MHz (DMSO-de) δ 11,09 (s 1H), 9,31 ( d, 1H, J = 1,6 Hz), Q 1 1 f — -1- ( O., 1H , u = 1,6 Hz), CO ro 3 1—' \ } í vO co 3 (m, 1H) , 8,51 (dd, 1H, Ji = 8 ,6 Hz, J 2 = 2,4 Hz) , 8, 21 (m, 2H), 7,76 (d, 1H, J Γ = 1,6 Hz) , 3,82 (s, 2H), 2,33 ( s, 3 H) .
Etapa 5: a um balão de reação contendo 2-(6-cloro-5 metilpiridin-3-il)-N-(5-(3-fluorofenil)piridin-2- 82 ΕΡ2403832Β1 i1)acetamida 86-8 (3,34 g, 9,4 mmo1), (tributilstanil)piri dina (3, 47 g, 9,4 mmo 1) e g, 0,94 mmol) sob árgon f ,'oi adicionado DMF mistura for agitaaa a 120° C d urante 10 horas 2-meti1-4 -Pd (PPh3) 4 (1 (45 ml). A . A solução i e aqitada uosa de KF a 1 N foi adicionada à mistura durante 15 minutos após ter sido arrefecido até a temperatura ambiente, 0 sólido formado foi colhido por meio de filtração e purificado ainda por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído com 10 % de metanol em diclorometano para dar 2-(2' , 3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Composto 86) como s 3 Ó 1 ido 1 jranc ;0 φ MS m/ z 3 97 O f ^ (M + 1); "H RMN 4 0 0 MHz (DMSO- d6: > δ i 1,13 \ s 1H) , 9 ,31 [Cif 1H, J = 1,6 H z) , 9, 11 (d, lr A f J - r, o Hz) , 8,72 (m, 1H) , 8, 62 (d, 1H, 2,8 Hz), 8 R f 3 (m, 3H) , r 8 f 24 (d, 1H, J = 8,8 Hz) , 7,73 ( d, 1 Π f iJ ϊ—! II Hz), 7 ,42 í s f 1H), 7, 35 (dd , 1H, Ji = 4,8 Hz, J2 = M 00 o ), 3 a 7 (s, 2H) f ^ f ò 3 ís, 3H) , 2,34 ( s, 3H) .
Exemplo 11 N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-ciano-4-(2- metilpiridin-4-il)fenil)acetamida (111) 83 ΕΡ2403832Β1 <¥- V . /** X' r% . / X V% ~rrrrr~rrrrr~r<*· \ pÁ' .... m<z > ív/ ίΧ\* ίίί-1 Άν: ·\·..... jsssÇ;·· /“Λi > μ'-' Ι~\
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UM 1
Etapa 1: a u im tubo veda do f o i adicionado 5-bromo-2- nitropiridj Lna 111- -1 (2,3 9b 11,4 mmol) , 1-- (piperazin-1- il)etanona 111-2 ( :i, 6 g, 12,8 mrno 1) , trietilamina (4,8 ml, 34,2 mmol) e DMSO (5 ml) . A re ação : foi aquecida até 120°C e agitada durante 16 horas, A reação foi arrefecida até a temperatura ambiente. Trietilamina foi removida por meio de evaporação giratória. 0 resíduo foi triturado em 15 ml de acetato de etilo. 0 sólido foi colhido por meio de filtração e lavado com uma quantidade pequena de acetato de etilo paira dar 1-(4-(6-nitropiridin-3-il) piperazin-1-il)etanona 111-3 como um ò O -i. i o. o amarelo claro. MS m/z 251,1 (Me 1) .
Etapa 2: a um balão de fundo redondo foi adicionado 1-(4-( 6-nitropiridin-3-il) piperazin-l-il) etanona 111---3 (2, 6 g, 10,4 mrnol), Pd/C (0,5 g) e metanol (50 ml). A reação foi agitada durante 4 horas sob atmosfera de hidrogénio por 84 ΕΡ2403832Β1 ι 1ΐΠι balão de hidrogénio. A reação foi feita meio da unicLO de um 3 v . q e o sólido foi removido por meio de ]te foi removido por meio de evaporação antuar com az
f i 1 tração. 0 s o .1 ve»J giratória. 0 procm jto bruto foi purificado por meio de :romatoqral f laS1 em sílica gel para dar 1-(4-(6-
aminopiridin-3-il)PiPerazÍn”1-Í1)etanona 11]--4 como ™ sólido branco pérola- MS m/z 221,1 (M + 1). ]H RMN 400 MHz (DMSO— ds) δ 7,62 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 7,20 (dd, 1H, 8,8 Hz, J2 = 2,8 Hz), 6,41 (d, 1H, J = II ca) co N b, 4 / 2H) , 3,55 (m, = 5,2 Hz), 2, 4H) , 2,93 (t, 03 (s, 3H). 2H, J - 5,2 Hz), 2,86 (t, 2 J
Etapa 3: Num tubo vedado, urna mistura de 2-cloro-5-iodobenonitrilo 111-5 (i,30 g, 5 mmol), 0,5 M (2-terc- outoxi- 2-oxoetil) cloreto de zinco(TI) 111-6 em éter (n ml, 5,5 mmol), PdíHha-, ,, v^a'’n ^ 144 mg, u,25 mmol), Q-phos (178 mg, 0,2 5 mmol), e Xhp , n . . . ' U0 ml) sob argon foi agitada a 70°c durante 18 horas. o arrefecimento ate a temperatura ambiente, os solvent redissolvido es foram evaporados e o residuo f0i aCetato de etilo, lavado com água p salmoura, seco em Na-,ςη , , . , α^υ·ι e concentrado ate a secura por meio de evciporação giratóri O produto bruto foi purificado por meio de cromatoqrafi= ρ. , , η · Xd fiash em sílica gei, eluido com 3q % de acetato de etí in , . „ , „ ~-L° em hexano para dar 2-(4-cíoro-3- cianofenil) acetato r]p , - +. · η ^ ,.. i ue oerc-outilo 111-7 como um óleo castanho. MS m/z 252 x r 1 (M + 1) .
Etapa 4 :
Uma mistura de 2- (4-cloro-3- cianofenil) acetato ^ ír.„,, ue terc-butilo 111-7 (572 mg, 2,28 mmol), 2-metil-4-(t rr η- j- ·, ..... „ „, lL1-ibutilstanil) piriama 111-8 (8/0 mq 2,2 8 mmol) e Pd(PPh~\ 0 (2z0 mg, 0,2 mmoí) e DMF (9 mi) f acritaaa a lzO^C n , durante 10 horc arrefecimento até s +._ ^ temperatura a: diluída com acetato h-. - u de etno, iava> aquosa de Na?S?03, x ^ ^ o, agua e saimou concentrada até a 01 sob árgon. Após O Lente, a mi st ;ura foi com s o i U Ç cl o satur ada seca em Na^SO^, e evapo ração gi ratór i a. 85 EP24Q3832B1 EP24Q3832B1 em siiica y orometano para aei, eluído com 5 % de metanol em dar 2- (3-c.iano-4- (2-metilpiridin-4- 0 material bruto foi purificado por meio de croinatografia flash d: il)fenil)acetato de terc-butilo 111—9 como um óleo amarelo. MS m/z 309,2 (M + 1).
Etapa 5: Uma mistura de 2- (3-ciano-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetato de terc-butilo 111-9 (656 mg, 2,13 mmol) e TFA (2 ml) em DCM (2 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 3 horas. A solução teve o pH ajustado até ao redor de 12 por NazCCb e extraída com diclorometa.no. A fase aquosa foi acidificada até o pH 3 por solução a 1 N de HC1 aquosa e sigitcida durante 15 minutos. Os solventes foram evaporados e o sólido restante foi extraído com 20 % de metanol em acetato de etilo e filtrado para remover o insolúvel. 0 material filtrado foi concentrado até a secura por meio de evaporação giratória para dar um sólido pegajoso contendo ácido 2-(3-ciano-4-(2-metilpiridin-4-ii)fenil)acético 111—10, que é utilizado diretamente para a seguinte etapa, MS m/z 253,1 (M + 1).
Etapa 6: A uma mistura de ácido 111-10 (150 mg bruto a partir do acima contendo cerca de 25 mg, 0,1 mmol), l-(4-',6- arninopiridin-3-il) piperazin-l-il) etanona (22 mg, 0,1 mraor) 111—4, o- (7-azabenzotriazol-l-.il) -N, N, N ' , N ' - e durante a noite. I Sntão água (30 ml ) e acetato de etilo foi seca em Na.2SC>4 e concent irada a ;e a tetrametii- urónio hexafluorofosfato (HATU, 40 mg, 0,105 mrnor) roram adicionados DMF (1 ml) e diispropiletil amina (DIeA, 38, / mg, 0,3 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Então foi secura por meio de evaporação giratória. 0 resíduo oleoso foi auMeoiao a ambas a HPLC preparativa de fase reversa e a cromatografia em sílica gel para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-ii)piridin-2-il)-2-(3-ciano-4-(2- 86 ΕΡ2403832Β1 metilpiridin-4-il)fenil)acetamida (Composto 111) como um sólido branco. MS m/z 455,3 (M + 1).
Exemplo 12 M-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)-2-(4-(piridazin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (118)
DMF, 120 °G composto 118
Etapa 1: A uma mistura de ácido 2-(4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)acético 46-6 (128 mg, 0,5 mmol), 5- (pirazin- 2-il)piridin-2-amina 86-3 (95 mg, 0,55 mmol) e o-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametilurónio hexafluorofosfato (HATU, 214 mg, 0,55 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionada diispropiletil amima (DIEA, 250 ml, 1,5 mmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etilo (50 ml) , lavada com solução saturada de NaHCCç aquosa, água e salmoura, seca em Na2S04, e concentrada por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica gel, eluído com 5 % de metanol em ciiclorometano para dar 2-(4-bromo-3-(tiifluorometil)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida 118-1 como sólido laranja pálido. MS m/z 438,2 (M + 1) 87 ΕΡ2403832Β1
Etapa 2: a um tubo de reação contendo 2- (4-bromo-3-(trif luorometil) fenil) -N- (5--- (pirazin-2-il) piridin-2-il) acetamida 118-1 (53 mg, 0,12 mmol), 4-(tributilstanil) piridaz ina S? LO 0,14 mmo1) e Pd (PPh3) 4 (14 mg, 0,012 mmol) sob árgon foi adicionado DMI 11 (0, 6 ml) . A mistur a foi d.Q i bd õ- CL 3. 120°C dur ante 10 horas. 0 produto bruto, qu e foi uma solução, foi submetido diretamente a HPLC de fase reversa para dar N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)-2-(4- (pirid. azin- 4-i 1) -3“ (t rif luorometil)f enil)a CG' tami . Ci3- 118 como s ólido b rani 00 . MS m/ z 437,1 (M + 1); 1 H RMN 400 MH z (DMSO-' d6) δ 1 1 (s, 1 H) , 9, 35 (dd, 2H) , ^ f 31 (d, 1H) , 9,27 ( s, 1H), 9, 12 ( d , 1H) , 8,72 (dd, 1H) , P w f 62 (d, 1H) , 8,52 ( dd, 1H) , 8 ,23 (d, 11 0, 7,9 5 (s, 1H) , f . 82- 7,75 (m, 9 H í 7 R 9 (H 1H) f 4, 0 0 (s, 2h) .
Exemplo 13 N~(2,3'-bipiridin~6'—il)—2-il)acetamida (124) ,3~dimetil~2,4'—bipiridin—5- % 4¾ bxpt v /«-'d i * 44 íC.jV’í·^. "\J" * Or-Ç > *a« íau ./'V Γ f 4 1 .... Si 8 'X. vW· il 1 | €£Wj*jKS3$íí (5Ϊ4 X- i
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mo; N " ^ f í:
Etapa 1. A um tubo de reação foram adicionados 5~ (4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (220 mg, 1,00 mmol), 2-iodopiridina (205 mg, 1,00 mmol), Pd (PPI13) 4 (57,7 mg, 0,05 mmol) e K3PO4 (424 mg, 2,00 mmol). O tubo foi submetido a vácuo e preenchido de novo com árgon. Dioxano (3,0 ml) e água (0,3 ml) foram adicionados e a mistura foi aquecida a 96 °C durante a noite. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura de reação 88 ΕΡ2403832Β1 foi iiiuradsi. através de celite (lavada com acetato de etilo) e concentrada por evaporação. 0 resíduo foi redistribuído entre acetato de etilo (40 ml) e 0,1 N solução de HC1 (40 ml) . a fase aquosa ácida foi extraída ainda com acetato de etilo (40 ml x 2) e tratada com Na2C03 para ter pH ao redor de 9 e concentrada por evaporação de agua. O sólido resíduo foi extraído com acetato de etilo em refluxo (40 ml) para dar 2,3'-bipiridin-6'-amina (124-1) que é utilizado para reação sem purificação adicional.
Etapa 2. Uma mistura de ácido 2-(6-Cloro-5- rnetilpiridin-3-il) acético 74-4 (57 mg, 0,31 mmol) , 2,3'- bipiridin-6'- amina 124-1 (51 mg, 0,30 mmol), 1,3- diciclohexilcarbodiimida (75 mg, 0,36 mmol) e 4-(dimetilamino) piridina (6 mg, 0,06 mmol) em DMF (1,2 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 10 horas. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada e diluída com acetato de etilo (30 ml) e extraído com água 930 ml x 2) . A fase orgânica foi seca em Na2S04 e concentrada por evaporação, O resíduo foi submetido a cromatografia em sílica gel em coluna com acetato de etilo como eluente para dar N-(2,3'-bipiridin-6'-il)-2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)acetamida 124-2 como sólido branco.
Etapa 3. A um tubo de reação foram adicionados 5 N-(2,3'-bipiridin-6'-il)-2-(6-cloro-5-metilpiridin-3- il) acetamida 124—2 (52 mg, r\ U f 15 mmol), 2-inet il-4- (t r ibutilstanil)piridina (115 mg, 0,3 mmol), e Pd (PPh3) 4 (35 mg, 0,03 mmo1). 0 tubo foi submetido ci vácuo e
Preenchido de novo com árgon. DMF (1,0 ml) foi adicionado e a mistura foi aquecida em. banho de óleo a 118°C durante a noite. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de celite, lavada e diluída com acetato de etilo (30 mi) e extraída com solução de HC1 a 0,1 N (30 ml). A fase aquosa ácida foi tratada com Na2C03 89 ΕΡ2403832Β1 p 3. X cl ter pn ao r edor de 9 e extraído com ace tato de et i _i_ 0 (3x 2 0 ml) . A fa se orgânica combinada foi seca em Na: Q r\ :i a o 4 0 conce ntrada por evaporação. 0 resíduo f o i submeti .do a croma tografi .a em sílica gel em coluna com o % de Me OH em DCM c orno elr lente para dar N- (2,3'-bipiridin - 6 ' -il)- -2- ( 2', 3 — di 310 t i 1 - 2,4 '-bipi rid in-5 -i D acet ami da 124 c omo só) ! 1 H íd i. -L. Oa p v Ay j.. an co. MS m/ z i 396, 3 ( M + D; 1H : RMN 400 MH z (CDC1; d δ 8, 93 CO 00 1 9 ( m, 1H) , 8 ,72- 8, 66 (m, 1 H) , 8,59 (d , 1 H) , í 3,51 (d r 1 H) , 8 ,37-8, 29 (m, z H) , 8, z o (bS, 1 H), n ,76 (m, : LH) , ' ! 71 (m, 1 H) , 7, 65 (d, 1 H) , 7, 3 s (bs, 1 H) , 1 ,30- -7,24 (m, 1 H) , 3, 81 (s, 2H ) , 2, 63 ( s, 3H) f 2 , 38 1 :s, 3 H)
Exemplo 14 4~(6~(2-(4-(2-metilpiridin-4~il}fenil)acetamido)piridin-3~ il5piperazina-l-carboxilato de terc-butilo (125)
Boc Boc f e
125-3 125-4 Boc
26-3
HÂTU DIEÂ
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 5-bromo-2-nitropiridina 125-1 (5,1 g, 25,2 mmol), piperazina-l-carboxilato de terc-butilo 125-2 (4,7 g, 25,2 mmol), DIEA (12 ml, 75 mmol) e DMSO (20 ml). A reação foi aquecida até 120°C e agitada durante 16 noras. A reação foi arrefecida 90 EP24G3832B1 até a temperatura ambiente. Trietilamina foi removida por meio de evaporação giratória. 0 resíduo foi triturado em 15 mi de acetato de etilo. 0 sólido foi colhido por meio de filtração e lavado com uma quantidade pequena de acetato de etilo para dar 4-(6-nitropiridin-3-il)piperazina-1-carboxilato de terc-butilo 125-3 como sólido amarelo claro. MS ra/z 309, 2 (M + 1) .
Etapa 2: a um balão de fundo redondo foi adicionado 4-(6-nitropiridin-3-il)piperazina-l-carboxilato de terc-butilo 125-3 (3,4 g, 11 mmol), Pd/C (0,5 g) e metanol (100 ml). A reação foi agitada durante 4 horas sob atmosfera de hidrogénio por meio da união de um balão de hidrogénio. A reação foi esguichada com azoto e o sólido foi removido por meio de filtração. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar 4-(6-aminopiridin-3-il)piperazina-l-carboxilato de terc-butilo 125-4 como sólido púrpura. MS m/z 279,2 (M + 1).
Etapa 3: A uma mistura de ácido 2-(4-(2-metilpiridin-4-il) fenil)acético 26-3 (1,1 g, 4,8 mmol), 4-(6-aminopiridin-3-il)piperazina-l-carboxilato de terc-butilo 125-4 (1,3 g, 4,6 mmol) e hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,Ν',N'-tetrametilurónio (HATU) (2,0 g, 5,3 mmol) em DMF (15 ml) foi adicionado DIEA (2,4 ml, 13,8 mmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída em acetato de etilo, lavada com NaHCOa saturado então salmoura, seco em Na2S04. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar 4-(6- (2- (4- (2-met.ilpiridin-4-il) fenil) acetamido) p.irid.in-3- il)piperazina-1- carboxila to de terc-butilo 125. MS m / z 488,2 (M + 1);ΧΗ RMN 400 MH z (DMSO-de) 810,55 (s, 1H) , 8,5 6 (d, 1H) , 8,03 (s , 1H), 7, 93 (d, 1H), 7,81 (d, 1H) , 7,74 1 s, 1H), 7,66 (d, 1 H), 7,51 (d, 2H) , 7,42 (m, 1H) , 3,75 (s, 91 ΕΡ2403832Β1 2H) , 3, 08 (b, 2 m ) 2 2 i (s, 2 H) , 2,5 4 (s, 4H), 2,51 (s, 3H) , 1,42 (s, 9 !H) .
Exemplo 15 2-(5-metil-6-(piridaEin-4-il)piridin-3-il)-N-(5-(pirazin-2-il) piridin-2~-il) acetamida (130)
86-8 composto 130
Etapa 1: a um tubo de reação contendo 2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2- il)acetamida 86-8 (70 mg, 0,21 irimol) , 4-(tributilstanil) pirideLZ ina (7 9 mg, 0,21 mmo1) e Pd(PPh3)4 (2 2 mg, 0,021 mmo1) sob árgon foi adicionado DMF (0,9 ml) . A mistura foi agitada a 120°C durante 10 horas. A solução c ie DMF bruta foi purifi cado por meio d Θ nPLo de fase reversa para dar 2- (5-metil-6-(piridazin-4-il)piridin-3-il)-N-(5-(pirazin-2-11)piridin-2-11)acetamida 130 como sólido branco. MS m/z 2 « 4,1 ! (M + D ; O RMN < 100 MHz (DMSO- -d6) δ 11,15 ( O r 1H) 9, 47 (d, 1H) , 9,34 (dd, ih; ), 9,31 (d, 1H), 9,11 (dd, 1H) 8, 72 (m, 1H) , 8,62 (d, 1H) , 8,56 (m, 1H), 8,52 (dd, 1H) 8, 21 (d, 1H) , 7, 92 (dd. 1H ), 7,79 (s , 1H) , 3,90 (S, 2H) 2, 42 (s, 3H) .
Exemplo 16 N—(5—(4—acetilpiperazin—1—il)piridin—2—il)—2—(4—(2— metilpiridin—4—il)fenil)acetamida (131) 92 ΕΡ2403832Β1 Bgc
y-
Etapa 1: À solução de 4-(6-(2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamido)piridin-3-il)piperazina- 1-carboxilato de terc-butilo (125) (1,5 g, 3 mmol) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (10 ml) . A reação foi agitada durante 2 horas. O TFA em excesso e solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(5-(piperazin- 1-il)piridin-2-il)acetamida 131-1. O composto foi utilizado para a seguinte etapa sem purificação adicional. MS m/z 388,2 (M + 1).
Etapa 2: A solução de 2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N-(5-(piperazin-l-il)piridin-2-il)acetamida 131-1 (20 mg, 0,05 mmol) em THF (1 ml) foi adicionado DIEA (19 mg, 0,15 mmol) e cloreto de acetilo (3,9 ml, 0,055 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 40 min. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil) acetamida 131 como sólido b r a nco pérola. MS m/z 430, r 2 ( M + 1); [H RMN 400 MHz (DM.SO- d6) δ 10,50 (s, - 1H), 8,45 (d, 1H), 7, . 97 (d, 1H) , v, 87 (d, 1H) , 7,71 (d, 2H) , 7,57 (s, 1H), 7, 49 (d, 1H) ! ' t 42 (d, 9 H' J. J. / , 7,37 (dd, 1H), 3,68 (s, 2H), 3, 52 (m, 4H) / 3, 09 (t, 2 H) , 3,02 (t, 2H), 2,48 (s , 3? i), 1,97 (s , 3H) 9 93 EP24G3832B1
Exemplo 17 4-(6-(2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamido)piridin-3-il)piperazina-l-carbOKilato de metilo (132) O 7 Ή
A solução de 2-(4-(2-metilpiridin-4--il) fenil) -N- (5-(piperazin-l-il)piridin-2-il)acetamida 131-1 (20 mg, 0,05 mmol) em THE (1 ml) foi adicionado DIEA (19 mg, 0,15 rranol) e cloroformato de metilo (5,2 mg, 0,055 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 40 min. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2- met ilp i r i di n-4- il) fenil) acetamida 132 como sólido branco pérola. MS m/z 446,: 2 (M + 1); ίΗ RMN 400 I •1Hz (DMSO-ds) δ 10,55 (s, 1H), 8,72 (cl, 1H), 8,18 (s, 1H) , 8,08 (m, 1H), 7,96 (d, 1H) , 7, 90 (d, 2H) , 7,84 (d, 1H) , 7,50 (d, 2H), 7,35 (dd, 1H) , 3,72 (s, 2H) , 3,54 (s. 3H) , 3,43 (t, 4H) , 3,03 (t, 3H), 2,65 (s, 3H). Exemplo 18 2-(3-Metil-4-(piridazin-4-il)fenil)-N-(5-(piridazin-4-il)piridin-2-il)acetamida (134) 94 ΕΡ2403832Β1V4r * Ul m*
$ & /-V 1 ' Λ r~ O> >^'!s K
t'>“\ ,- '“"V/W -TB-- ΑΛΛ,-υ S D-iminc ixtapa x. A um tubo de reaçõLO foram adicionad / r) Δ ^ R — r ^ t -> f ^ -tetrametil 2 0 mg, 1,00 mmol) (PPha) 4 (57,7 mg, trametil-1,3,2-dioxaborolan~2-il)piridin-2- '00 mmoi), 4-bromopiridazina (159 mg, 1,00 mmol), 05 mmol) e K3P04 (424 mg, 2,00 mmol).
Uma 9 6 0 C d tirante a noite . Após ser -:a ambi ente, a m isturc a de reação celite (lavada com acetato de por evaporaçã í~\ Subsequente em co. luna com 5 % de metanol em idazin- -4-il)piri din-2 -amina 134- mistu ra de 2- (4-bromo-3- -butilo (855 mg, 3, 0C i mmol), 4- l (1162 mg, 3,15 mmo 1) , Pd (PPh3) 4 10 ml) foi agita do sc( b atmosfera noite. Após ser arref ecida até a mistu: ra roi < concer itrada por 0 tubo foi sujometiao a vácuo e Preenchido de novo com árgon. Dioxano (3,0 ml) e agua (0,3 ml) foram adicionados e a mistura foi aquecida a arrefecida até a temperati foi filtrada através de etilo) e concentrada cromatografia em sílica ge DCM como eluente deu 5-(pi 1 como sólido castanho. etapa (tributilstanil) piridazii (173 mg, 0,15 mmol) e DMF de árgon a 118°C durante £ temperatura ambiente, a evaporação de DMF, redissolvida em acetato de etilo (50 ml) e lavada com água (50 mlx2) . Após ser seca em Na2S04 e concentrada por evaporação, a mistura foi submetida a cromatografia em sílica gel em coluna com acetato de etiio/hexanos (1:1) como eluente para dar 2-(3-metil-4- 95 ΕΡ2403832Β1 (piridazin-4-il)fenil)acetato de terc- butilo 134-2 come .eo. -2 obi tido na etap. a 2 fo i agitado trif ruoroacético (TF A, 3 ml) a ite a noite. Após ser concentrado foi redistribuído entr e acetato soluç :ão aquosa de Na2C03 (30 ml). cada até o pH ao redor de 2 com raí da com acetato de et i lo (40 ml foi evaporada pa ra dar ácido 2- il) fei nii) cicético 134-3 como um sem purificação
Etapa 3 temperatura ambiente durante a noi por evaporação, o resíc de etilo (30 ml) e 5 % i A fase aquosa foi acidificada até (3-metil-4-(piridazin-4-sólido que é utilizado para reação adicional.
Etapa 4. Uma mistura de 5-(piridazin-4-il)piridin-2-amina 134-1 (53 mg, 0,31 mmol), ácido 2-(3-metil-4- (piridazin-4- il)fenil)acético 134-3 (73 mg, 0,32 mmol), (1,0 nf noit 0 e 3 O, O solu ção trat ada segu ido 3.2CO3 (40 ml) e extraída ml) * A extr ação aquosa tr 0 pH até ao redor de to d e etilo (30 ml x 2). HATU (122 mg, 0,32 mmol) e DIEA (80 uL, 0,46 mmol) em DMF ) foi agitada a temperatura ambiente durante a ntão foi distribuída entre acetato de etilo (40 ml) e solução aquosa de de HC1 a 0,5 N (3 com Na2C03 para ajuí por extração com ace extrações orgânicas combinadas foram secas em Na2S04 e concentradas por evaporação. O resíduo foi submetido a HPLC de fase reversa para render 2-(3-metil-4-(piridazin-4-il)fenil)-N-(5-(piridazin-4-il)piridin-2-il)acetamida 134 como sólido branco pérola. MS m/z 383,2 (M + 1).
Exemplo 19 2-(6-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-3-il)-N-(5-(3 fluorofenil)piridin-2-il)acetamida (140) 96 ΕΡ2403832Β1 /- OH Gl-Λ /)—/ + h2n~
Etapa 1. Uma mistura de cLerdo z — ÍD-cloropiridin-S il)acético (521 mg, 3,03 mmol) , 5-(3-fluo rofenil)piridin-2 arai na (57 0 mg, 3,0 3 mmol) , HATÍJ (1250 mg, 3,29 mmol) e DIE (784 ml, 4,50 mmol) em DMF (10 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A maior parte da DMF foi removida por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (50 ml) , lavado comi 3 % de solução de Na2C03 (30 ml) e água (50 ml) , e seco em Na2S04. Após concentração por evaporação. o resíduo foi submetido a cr orna t ogra f ia em sílica gel em coluna para dar 2-(6- cloropiridin-3-il) -N- (5-(3- fluorofeni 1)piridin-2- il)acetamida 140-1.
Etapa 2 . 2-(6-Cloropiridin-3-il)-N-(5-(3- fluorofenil)piridin-2-il)acetamida 140-1 (100 mg, 0,29 mmol) foi aquecida com 1-(piperazin-l-il)etanona (0,8 ml) a 108 °C durante 4 horas. A mistura foi dissolvida em EtOAc (30 ml), lavada com água (40 ml), e seca em Na2S04. Após concentração por evaporação, o resíduo foi submetido a HPLC de fase reversa para proporcionar 2-(6-(4-acetilpiperazin-l--il) piridin-3-il) -N- (5- (3--f luorof enil) piridin-2 il)acetamida 140 como sólido. 97 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 2( 2-(4-(2~metilpiridin-4~il)fenil)—N—(5-(3-oxopiperazin-l il)piridin—2—il)acetamida (141)
Et a pa 1: a um tub o vedado foram adi C1 _on .ados > ~-j lo rom O- nitro pir idina 141-1 (1 ,01 g, 5 mmol) , pi pera .zin- 2-on a 1 41 — Z (0, 6 g, r Ό mmo 1), DIEA (1,8 ml, 18 m mol ) e DMS( 3 (6 ml ) A L i reaçã o f 0 Ί aqu í e c í q a 3l é 12 0°C e agita o a dr ira .nte 16 h ora s. A reaçã o f oi arrefecida até a temperati ura a rnb ient e. D IEA f oi remov IdO P or me i o de evapor ação gir ar ó ri .a. 0 resíc "Ί Λ Λ Γ\ -j. Li \J f oi tritu rad Q em 15 ml de ace tato de et il .o. 0 sóli .do f oi colhi H η o r meio de f i1tração e 1ava do r'' om uma cru a nt i dade peque κί -'3 iiw de acetato de etilo para dar 4 — (6 nitr :opir idi r-ι — 3_ il)piperazin-2-ona 141-3 como sólido amarelo claro. MS m/z 22 3,2 (M + 1) .
Etapa z: a um balão de fundo redondo for (6-nitropiridin-3-ii)piperazin-2-ona 141-3 adicionado 4- 98 ΕΡ240383261 ΕΡ240383261 leita :oi mm°J}' Fd/C (0'2 e metanol (20 ml). A reação foi agitada durante 4 horas sob atmosfera de hidrogénio por meio da união de um balão de hidrogénio. A reação untiií bm azoto o sólido foi removido por meio de filtração, o solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar 4-(6-aminopiridin-3-il)pioerazin-2--ona 141-4 como sólido púrpura. MS m/z 193,2 (M + i)
Etapa 3: A uma mistura de ácido 2-(4-(2-metilpiridin-4-il) fen.il) acético 26-3 (22 mg, 0,1 mmol) , 4 — (6 — aminopiridin- 3-il)piperazin-2-ona 141-4 (19 mg, 0,1 mmoi) e O-(7-azabenzotriazol-l-il)-n,N,N ' , N ' -tetrametiluróniohexafluro- fosfato (HATU) (40 mg, 0,1 mmol) em DMF (1 ml) foi adie ionado DIEA (52 ml, 0,3 mmol) a temperat ura ambiente . A mistura foi agit 3. d. o 3 temperatura ambiente durante 2 n oras , A mist ura de reaçao for ailuida em DMSO e purificado por meio de HPLC de fase reversa para da r 2- (4 - (2- metilpiridi η ~·4-ϊ. 1)fenil)—N—(5-(3 -oxopiperaz in 1- il ) p i r i i din- 2-il) acetamida 141. MS m/z 402 ,2 (M + 1) . 1 t RM :n 400 M !Hz (DMSO-dg) Ô 10,53 (s, 1H) , 8,4 9 (d, 1H), 8, 05 8, 01 (m, 2H) , 7,94 (d, 1H) , 7,7 5 (d, 2H) , 7,57 (s, 1 H) 7, 48 -7,4 8 (m, 3H), 7,41 (dd, 1H) , 3,74 (s. 1H), 3,71 (s 2H ) ϊ 2,54 -2,5 0 (m, 7H) , 1,24 (S, 2H).
Exemplo 21 N-(5-(4-mefcil-lH-imidazol-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida (143)
99 EP24G3832B1 EP24G3832B1 Etapa reação ioi a um tubo vedado carregado com b-iodopiridin-
2-araina 143-1 (1,1 g, 5 mmol) , (0,61 g, 7,4 mmol), Cul (0,31 g, g, 10 mmol) foi adicionado DMF 4 -me t i 1-1H - irrii da zol 143-2 1,63 mmol) e Cs2C03 (3,25 (10 ml) . O recipiente de esguichado com azoto e vedado. A reaçao foi agitada a temperatura ser aquecida até 11C diluída era acetato de ambiente durante 30 minutos antes de °C durante 24 horas. A reação foi etilo e o sal foi removido por meio de filtração. 0 material filtrado foi seco e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, para. dar ^ — como sol ido eluído com 10 % de metanol em acetato de etilo (4-raetil-lH-imidazol-l-il)piridin-2-amina 143-3 branco pérola. MS m/z 175,2 (M + i).
Etapa 2: A uma mistura de ácido 2-(4-(2-metilp.iridin-4-il)fenil)acético 26-3 (22 mg, 0,1 mmol), 5-(4-metil-lH- imidazol-l-il)piridin-2-amina 143-3 (18 mg, 0,1 mmol) e o-(7-azabenzot riazol-1 - il) -N, 12, N', N' -tetramet ilurónio-hexaflurofosfato (HATU) (40 mg, 0,1 mmol) em DMF (1 ml) foj adicionado DIEA (52 ml, 0,3 mmol) a temperatura ambiente. ^ mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída em DMSO e purificado ρθ£ meio de HPLC de fase reversa para da: r N- (5- (4- metil •~1H- imidazol -l-il)piridin-2-il)-2-(4 -(2- -meti .lpir idin-4 - il)fenil )acetamida 143. MS m/z 384 , 1 (M + D; I RMN 400 MH z (DMS 0-d6) δ 10, 91 (s, 1H) , 8 , 58 (dd, 1H) , 8,43 (d, ΧΗ), 8,10 (m, 2H), 7,99 (m, 1H) , 7, 7 7 (d, 2H) , 7,51 (s, ]-H), 7,43-7,1 0 (m, 4H) , 3,75 (s, 2H ) , 2,46 (s, 3H) , 2,10 í 5¾ f 3 H) . Exemplo 22 2- (2 ', 3-dimetil-2,4 ' -bipiridin-5-il) -N- (5- (pi.razin-2-il)piridin-2-il)acetamida (145) 100 ΕΡ2403832Β1 «ϊ*"·\ / ^ ί Q'*X' 1*·rx m- ί’-Ιίϊ íiC' Ο >. :ν,;:.- Τζ&ίβΠΟ HÃ-â EsOH'isí'<.! „0Η cr-f
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Etapa 1: a um vedado balão foram adicionados 5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaboroian-2-il)piridin-2-amina 145-1 (1,54 g, 7 mmol), 3-cloropiridazina 145-2 (0,8 g, 7 mrnol) , PdíPPhs)/] (500 mg, 0,7 mmol), tolueno (50 ml), etanol (12 ml) e 2M de Na2C03 (11 ml). A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 2 minutos e agitada a 90°C durante 10 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e o resíduo foi redissolvido em diclorometano (200 ml) e tratado com solução a 1 M de HC1 aquosa (50 ml) . As duas camadas foram separadas e a camada aquosa foi tratada com 10 % de NaOH solução aquosa para ajustar o pH até ao redor de 13. A solução resultante foi evaporada e o sólido restante foi extraído com acetato de etilo (100 ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram concentradas para dar 5- (piridazin- 3-il)pirid in-2- -amina 145-3 como sóli do castanho escuro. MS m/z 173,1 (M + D . Etapa 2: Uma mi st ura de ácido 2- (6-Cloro-5- metilpiridi η-3-il)acé tico 86-7 (241 mg, 1,3 mmol), 5- (piridazin- 3-il) pii : i d i n -2-ami na 145-3 (224 mg, 1,3 101 ΕΡ2403832Β1 mmol), 1,3-diciclohexilcarbodiimida (325 mg, 1,6 mmol) e 4-(dimetilamino) piridina (26 mg, 0,26 mmol) em DMF (6 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 10 horas. A mistura de reação foi filtrada para remover o sólido e o material filtrado foi diluído com acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de crornatograf ia flash em sílica gel, eluído com 5 % de metanol em diclorometano para dar 2-( 6-cloro-5-metilpiridin-3-il) -N- (5- (piridazin-3-il) piridin-2-il) acetamida 145-4 como sólido amarelo pálido. MS m/z 340,2 (M + 1)
Etapa 3: a um tubo de reação contendo 2-(6-cloro-5-met i1p i r i d i n-3-i1)-N-(5-(pir i d a z i n-3-i1)pi r i di n-2-il)acetamida 145-4 (68 mg, 0,2 mmol), 2-metil-4- 16 mg, 0,2 mmo1 ) e Pd (PPh3) 4 (22 foi adicionado DMF (0, 9 ml) . A O p durante 10 hora s. 0 pro duto foi purificado por meio de HPLC - (2 ’,3-dimetil- 2,4’ -bipi ridi pi _ 9,_ (tributilstanil) piridina (' mg, 0,02 mmol) sob árgon foi adi mistura foi agitada a 12 bruto, uma solução limpa, de feLse reversa para dar il)-N- (5-(pirazin-2-il)piridin-2-il) acetamida 145 como sói i do branco . MS i tí/z 3 9" ?,2 ( M + 1 \ e í ; RMN 4 0 0 M Hz (DMSO- dg) δ 1 .1,14 (s , 1H) q 99 ! f — ^ (dd, 1H) , 9 , 13 (d, 1H) , 8, 56 (dd, 1H) , 8 ,52 (d, 1H) , 8,49 1 H) , 8, 29 (dd, 1H) , Q ,24 (d, 1H) , 1 ,81 (dd , 1H) , 7,73 (d, Ί -H) , ! t 42 (s, 1H) , 9 ' ! 35 (dd, 1H) 9 ! , ,87 (s, 2 H) , 2,53 ( f 3 JT i) , 2, 35 (s 9 13 ' ! ·5ϋ. \ ) ·
Exemplo 23 N—(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2’,3-dimetil-2,4!-bipiridin-5-il)acetamida (148) 102 ΕΡ2403832Β1
Etapa 1: A uma mistura de ácido 2-(6-Cloro-5- metilpiridin -3-il)acético 74-4 (100 mg, 0,54 mmo 1) , 1 - / Λ (6-aminopiri din-3-il)piperazin-1 -il) etanona 111-4 (140 mg 0,64 mm o1) e hexaf1u r o f o s f ato de 0- (7-azabenzotriazo.1 -1 il)-N,N,Ν',Ν'-tetrametilurónio (HATU) (220 mg, 0,58 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado DIEA (280 ml, 1,62 mmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída em acetato de etilo, lavada com NaHC03 saturado então salmoura, seco em K^SCt, O solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)acetamida 148-1 (210 mg, 100 %). MS m/z 388,1 (M + 1).
Etapa 2: A mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il) piridin~2~.il) -2- ( 6~cloro~5~metilpiridin~3~.il) acetamida 148-1 (80 mg, 0,21 mmol) e 2-meti1-4-
(tributilstanil)piridina 148-2 (75 mg, 0,21 mmol) em DMF (1,5 ml) foi adicionado [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio(II) (30 mg, 0,18 mmol). A reação foi agitada 103 ΕΡ2403832Β1
a 110°C durante 20 horas. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2',3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida 148 como sólido branco pérola. MS m/ z 445,2 (M + 1); λΕ RMN 400 MHz (DMSO-dg) δ 10,57 (s, 1H) , co OD (d, 1H), 8,40 (d, 1H), 7,98 (d, 3 -H) , CO 1H) , 7,64 (d, 1H) , 7,42 (s, 1H) , 7 ,36-7,34 (m, 2H), 3,70 (s, 2H) , 3 ,50 (b, 4H) , 3,09 (t, 2H), Ο Γ\ ^ /4- 3, 0 z 11, 2 H) , 2,49 (s, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 1, 97 (s, 3H) .
Exemplo 24 1-óxido de 2-Htetil-4- (3-metil-5- (2-oxo-2- (5- (pirazin-2-il) piridin-2~ilaraino5 etil)piridin~2-il)piridina (156) O' o o /'Ά COOt!
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Etapa 1: a um balão foram adicionados 5-bromo-2-cloro-3-metilpiridina 156-1 (4,13 g, 20 mmol), Cul (380 mg, 2,00 mrnol), Cs2C03 (18 g, 60 mmol), ácido 2-picolínico (480 mg, 4,0 0 mmol) . O balão foi evacuado e preenchido de novo com árgon 3 vezes. Dioxano anidro (40 ml) foi adicionado a o balão, seguido por malonato de dietilo 156-2 (6 ml, 40 104 EP24G3832B1 irunol) . A mistura foi cLgitaLda a 96°C durante 36 noras sob árgon. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura foi dividida em partições entre acetato de etilo e água, A porção orgânica foi seca em Na2S04, filtrada e concentrada por meio de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash, eluido com 20 % de acetato de etilo em hexanos para dar 2-( 6-cloro-5-metilpiridin-3-il)malonato de dietilo 156-3 como óleo incolor. MS m/z 286,1 (M + 1).
Etapa 2: a um balão de reação contendo 2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)malonato de dietilo 156-3 (1,00 g, 4,00 mmol), 2-metil-4-(tributilstanil)piridina (1,53 g, 4,00 mmol) e Pd(PPh3) 4 (440 mg, 0,4 mmol) sob árgon foi -Or. adicionado DMF (20 ml). A mistura foi agitada a 120°C durante 10 horas. Após a mistura ter sido arrefecida até a temperatura ambiente, a solução aquosa de KF a 1 N foi adicionada à mesma e agitada durante 15 minutos. A mistura foi diluída com acetato de etilo e as duas camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada ainda com água e salmoura, seca em Na2S04, concentrada até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em. sílica gel, eluido com 5 % de metanol em diclorometano para dar 2-(2',3-dimetil-2f 4# _ bipiridin-5-il)malonato de dietilo 156-4 como óleo incolo MS m/z 343, 1 (M 4· 1)
Etapa 3: Uma mistura de 2-(2’ , 3-dimetil-2,4'_ 01 oip.irrdin-5-il) malonato de dietilo 156-4 (935 mg, 3 mino.]) e NaOH (480 mg, 12 mmol) em THF (1,8 ml) e água (1,8 ml) f
50 a 65°C durante 3 horas. Após ser arrefecida até temperatura ambiente, a mistura foi tratada com solução a 3 N de HC1 aquosa para ajustar o pH ao redor de 3, e então agitaaa durante 15 minutos. A solução resultante fc,j_ evaporada a secura e o sólido restante foi extraído Com 20 105 ΕΡ2403832Β1 % de metanol em acetato de etilo. A extração orgânica foi concentrada para dar ácido 2-(2' , 3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-il)acético 156-5 como sólido branco. MS m/z 243,1 (M + D ·
Etapa 4: A uma solução de ácido 2-(2', 3-dimetil-2,41 -bipiridin-5-ii)acético 156-5 (100 mg, 0,41 mmol) em diclorometano (3 ml) e metanol (0,5 ml) foi adicionado mCPBA (91 mg, 0,41 mmol) em pequenas porções a 0°C. A mistura foi agitada durante 3 horas a 0°C, e então foi concentrada até a secura para dar 1-óxido de 4-(5-(carboximetil)-3-metilpiridin-2- il)-2-metilpiridina 156-6 como sólido branco, que foi utilizado para a seguinte etapa sem purificação adicional. MS m/z 259,1 (M + 1).
Etapa 5: Uma mistura de 1-óxido de 4-(5- (carboximetil)-3-metilpiridin-2-il)-2-metilpiridina 156-6 da Etapa 4 (0,41 mmol), 5-(pirazin-2-il)piridin-2-amina 86-3 (141 mg, 0,82 mmol),1,3-diciclohexilcarbodiimida (188 mg, 0,90 mmol) e 4-(dimetilamino)piridina (16 mg, 0,16 mmol) em DMF (2 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 10 horas. O produto bruto foi filtrado para remover o insolúvel e o material filtrado foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 1-óxido de 2- metil-4- (3-metil-5-(2-OXO-2-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-ilamino)etil)piridin-2-il)piridina 156 como sólido branco. MS m / Z 413 ¥ Z (M + 1); ]'H RMN 400 MHz (DMSO- de) δ 11, .i. ti í cr-\ £> r 1H) , Q - f 31 (d, 1H) , 9,11 (d, 1H), 8, 72 (m, 1H) , 8, 62 (d, 1H) , P ^ f 52 (dd , 1H) , 8,4 8 (d, 1H), 8, 31 (d, 1H) , 8, 21 [Cif 1H) , H ! r 7 3 (m, 2H) , 7,52 (dd, 1H), 3, 8 6 (s, 2H) , Z ! 41 ( s , 3H) , 2, 40 (s, 3H) . 106 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 2' ΕΡ2403832Β1 N—(5-(4-acet,ilpiperazin~l-il)piridin-2-il)-2-(3-metil-4~(2 raefcilpiridin—4—il) fenil) acetamida (159)
Composto 159
Etapa 1: A uma mistura de ácido 2-(4-bromo-3-metilfenil)acético 24-5 (100 mg, 0,44 mrnol), 1-(4-(6- aminopiridin- 3-il)piperazin-l-il)etanona 111-4 (96 mg,
0,44 mino 1) e HATU (2 0 0 mg, 0,53 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado DIEA (230 uL, 1,32 mmol) e a mistura foi agit cLCicL a temperatura . an ibiente durante a noite. A mistu: ra de rea ção foi dividida em partições entre acetato de eti] Lo e água . A fase orgânica foi lavada com salmoura e seca em Na2SC>4 e o solvente foi evaporado. O resíduo foi submetido a cromatografia flash em sílica gel para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin- 2-il)-2-(4-bromo-3-metilfenil)acetamida 159-1. MS m/z 431,1 (M + 1).
Etapa 2: À mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-bromo-3-metilfenil)acetamida 159-1 (65 mg, 0,15 mrnol) e 2-meti1-4-(tributilstanil)piridina 159-2 (58 mg, 0,15 mrnol) em DMF (0,8 ml) foi adicionado [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio(II) (30 mg, 0,036 mrnol). A reação foi agitada a 110°C durante 20 horas. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída em DMSO e purificada por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-metil-4-(2-metilpiridin-4- 107 ΕΡ2403832Β1 il) fenil) acetamida 159 como sólido branco pérola, MS ni/z 444, 2 (M + 1) ; 1H Rt IN 400 Mn z (DMSO- d6) δ 1 0,4- 1 (s, 1H) , 8,41 (d, 1H) , ' f ^ ' ( d, 1H) , 7,88 (d, 1H ) , ',37 (dd, 1H), 7,21 -7,18 (m, 2 H) , 7 ,16 (s , 1H), 7,1 2-7 , 0 9 (m, 2 H) , 3,61 (s, 2 H) , 3,52 (m, 4 H) , 3,08 (t, 2H), 3 , 02 ít, 2 H) , 2,1/ is, 3 H) , 1, 97 is, 3H) .
Exemplo 26 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)—2—(3-fluoro-4-(2~metilpiridin~4-il)fenil)acetamida (168)
Composto 168
Etapa 1: A uma mistura de ácido 2-(4-cloro -3- fluorofeni 1)acético 168- •1 (188 mg, 1,0 mmo1), 1- (4- (6- aminopirid in- 3-il)piper az in-l-i 1)etanona 111-4 (220 mg, 1, 0 mmo1) e HATU (400 n ig, 1,0 5 mmol) em DMF (4 ml) f o i adicionado DIEA (521 uL, 3,0 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi dividida em partições entre acetato de etilo e água. A fase orgânica foi lavada com salmoura e seca em Na2S04 e o solvente foi evaporado. 0 resíduo foi submetido a cromatografia flash em sílica gel para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin- 2-il)-2- (4-cloro-3- fluorofenil)acetamida 168-2. MS m/z 391,1 (M + 1).
Etapa 2: À mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l- 108 EP24G3832E31 i 1) piridin-2-il) -2--- (4-cloro-3-f luorofenil) acetamida 168-2 •Λ [1, 1 ' -Bis ( 3 3 mg, 0,04 >0 horas. Após a mistu ra de (80 mg, 0,2 mmol) e 2-metil-4-(tributilstanil)piridina (78 mg, 0,2 mmol) em. DMF (0,6 ml) foi adicionado [1, 1 (difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio(II) (33 mg, mmol) . A reação foi agitada a 110°C durante o arrefecimento até a temperatura ambient· reação foi diluída em DMSO e purificada por meio de HPLC de fase rever sa para dar N- ( 5- ( 4 -aceti1 .pipe razin i-l-il ) piri d in- 2-il] i-2-(3 -fl UOIO 4 ( 2-me til p iridin- -4-il ) fenl .1) acetamid cL 168 como sói: ido bran co. MS m/z 448 , 1 (M + D; 1H [ RMN 400 SMHz (DMSO- d6) δ 10,57 (S, 15 0 , 8,52 (d, 1H) , 8,04 (S, 1 H) , 7, 93 (d, 1H) , 7,59 (m, 1H) f 7,44- 7,29 (m, 5H) , 3,77 (s, 2 H) , 3, 58 (b , 2H), : 3,14 (b f 2H) , 3, 08 (b, 2H) , 2,55 (S, 2H) , 2,51 (s, 3H), 2, 04 ( s, 3 H) . 27
Exernp) N-{5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (172) 182-1
o O
A um recipiente de reação ace tilpiperazin-1- il)piridi η-2-il) -2- (4-broii no-3- (tr ifluorometil)fenil)acetamida 192-1 (300 mg, 0,62 mmol ) , áci do 2-met ilpirid in-4-ilbo rónico 172—1 (127 mg, 0,93 m .mo 1 e F ’d (PPh3) 4 (36 m g, 0,03 i :nmol) f :o.i adi cio nado toluerr "Λ (6 ml) , etanoI (2 ml) e carbor íato de sódio sat urado (2 ml ) . A mis tura de reação foi esgu ichada com azoto e aquecida até 110 °C duran .te 10 I noras. Ap ós a reação ter sido arrefe cida até a teir.pe ratura ambiente, foi di vidida em partições e nt. re ace tato de et ilo e NaHCOs saturado e a fa se orgânica foi 109 ΕΡ2403832Β1 lavada com salmoura e seca em NaaSCg. 0 solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin- 4-i 1) -3- - (t rif 1 .uorometil)fenil) acetamida 172 . MS m/z 4 C\1 CD (M4-1) . 1H RMN 400 MHz (DMS0~d6) δ 10,67 (s, 1H) , 8, 66 (d, 1H), 8, 05 (m, 1H) , 7,94 (m, 2H) , 7,7 5 (d, 1H) , 7,52 (s, 1H), 7, 45 (m, 3H) , 3,88 (s, 2H), 3,58 (b, 4H) , 3,14 (b, 2H), 3, 0 9 íb, 2H), 2,61 (s, 3H), 2,05 (s, 3 H) • Exemplo 28 N-(5-(4-(cianometil)piperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida (175)
Etapa il)fenil)-N-(39 mg, 0,10 1: Uma mistura de 2-(4-(2-metilpiridin-4- (5- (piperazin-l-.il) pirid.in-2-il) acetamida 131-1 mmol), 2-bromoacetonitrilo (8 uL, 0,12 mmol) e
Carbonato de potássio agitada a temperatura foi deitada em água (5 i jr vo ml X 3) . As fases Na2 S04 e concent radas. me i o de HPLC de (28 mg, 0,20 mmol) em DMF (1 ml) foi ambiente durante a noite. A mistura ml) e extraída com acetato de etilo orgânicas combinadas foram secas em O produto bruto foi purificado por fase reversa para dar N-(5-{4- (cianometil)pip erazi P 1—> i H- l·—1 P H- h,' idin·· 2 - i 1) -2- (4- (2- met i lp.i.ridin-4- il) fe nil) acetamida 175. MS m/z 42 7,2 (M + D; λΕ RMN 4 0 0 MHz (MeOD) δ 8,37 (d, 1H) , 7, 94 (s, 1H) , 7,87 (d, 1H) , 7,68 (d, 2H) , Π ! f -J (s, 1H) , 7,48- 7,44 ím, 3H) , 7,36 (dd, 1H) , 3,74 (s, 2H) , 3,67 (s , 2H) , 3, 17 (t, 4H) , 2,69 (t, 4 H) ,2, 54 (s, 3H) 110 29 ΕΡ2403832Β1
Exemplo N- (5-(4-cianopiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2- metilpiridin-4-il)fenil)acetamida(176)
Etapa 1: Uma mistura de 2-(4-(2-metilpiridin-4- il)fenil)-N-(5- (piperazin-l-il)piridin-2-il)acetamida 131-1 (39 mg, 0,10 mmol) , Brometo de cianogénio (13 mg, 0,12 mmol) e Carbonato de potássio (28 mg, 0,20 mmol) em DMF (1 ml) foi agitada a tem.perat.ura ambiente durante a noite. A mistura foi deitada em água (5 ml) e extraída com acetato de etilo (5 ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SOa, e concentradas. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-cianopiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin- 4- il ) feni _i_ ) cL C etamida 17 6. MS m/z 41 3,2 (M + D; d E-l RMN 400 NÍH z (MeOD ) δ 8,39 (d, 1 Hz), 7,96 (s, 1H) , 7,89 (d, 1H) , 7, 68 (d, 2 H) , 7,58 (s, LH), 7,50 (d, 1H) , 7,4 6 (d, 2H) , ' f 37 (da. r 1Í D, 3,74 (s , 2H), 3, 3 5 (t, 4 H) , 3,18 (t, 4H ) f 2,55 (s, 3 H) .
Exemplo N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)—2—(4-(2-cloropiridin-4-il)fenil)acetamida (177) 111 ΕΡ2403832Β1
Composto 177
Etapa 1: A uma mistura de ácido 2-(4-iodofenil)acético 177-1 (524 mg, 2,0 rnmol), 1-(4-(6-aminopiridin-3- il)piperazin-l-il)etanona 111-4 (440 mg, 2,0 mmol) e hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,Ν',Ν' -tetrametilurónio (HATU) (7 98 mg, 2,1 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionado DIEA (1,04 ml, 6,0 mmol) a temperatura ambiente, A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída em acetato de etilo, lavada com NaHCO.s saturado então salmoura, seca em NaaSCç. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar N-(5-(4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-iodofenil)acetamida 177-2 como sólido ocre. MS m/z 4 65,2 (Μ + 1) .
Etapa 2: a um tubo vedado foi adicionado N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-iodofenil)acetamida 177-2 (100 mg, 0,22 mmol), ácido 2-cloropiridin-4- ilborónico 177-3 (52 mg, 0,33 mmol), Pd(PPh3)4 (23 mg, 0,02 mmol), Na2C03 saturado (1 ml), et ano 1 (1 ml) e tolueno (3 ml) . A reação foi aquecida até 110 °C e agitada durante 16 horas. A reação foi arrefecida até a temperatura ambiente, então extraída com acetato de etilo. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído com acetato de etilo para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2- fluoropiridin- 112 ΕΡ2403832Β1 4-il)fenil)acetamida 177 como sólido branco pérola. MS m/z 4 5 0,1 (M + 1) ; 1h i IMN 400 MH z (DMSO-dg) δ 10,51 (s, 1H) , 8,40 (d, 1H) , ' l y ' (d, 1H) "? ΐ ! f Q Ί W 1 (d, 1H), 7,7 8 (d, 1H) , 1 7 g b ' f ' ^ (d, 2H) , 7, 69 (dd, 1H) , 7, 4 3 (d, 2H) , 7,37 (dd, 1H) , 3,68 l o 2H) , 3,52 (m, 4 H ^ Q f ^ r 0 9 (t, 2H) , 3, 02 lE, 2H) , 1, 97 (s, 3H) .
Exemplo 31 N—(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)—2—(4-(2-£luoropiridin—4—il)fenil)acetamida (178)
Composto 178 A um tubo vedado foi adicionado N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-iodofenil)acetamida 177-2 (520 mg, 1,1 mmol), ácido 2-fluoropiridin-4- ilborónico 178-1 (237 mg f , 6 mmol) , Pd (PPh3) 4 (65 mg 0,055 ramo1) f N 3. r Γ) d Λ +- n / -_x vd 5 O <_a o Li . ca do (5 ml), etano1 (5 ml) tolueno (15 ml) , A reação foi aqueciaa ate il0°C e agitad. durante 16 horas. A reação foi arrefecida até a temperatur ambiente, e: nt ao extraída com acetato de etilo. 0 produt bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica gel, eluído com acetato de etilo para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)acetamida 178 como sólido branco pérola. MS m/z 4 3 4,2 : (M + 1) ; :íH RMN 400 5 1Hz (DMSO-d6) δ 1 0,58 / cr- \ & r 1H) , 8, 30 (d, 1H, J : = 5,6 Hz), 8 , U 4 (d, 1H, U = 2,8 l J \ 1 ^ ) í 7, 94 / l 3. f -ΐ Ji, J = 9,2 N Ό CO 4^. 1 82 (m, 2H) , 7,71- -7,69 (m, 1H) , 7, 53- -7,49 (m, 3H ), 7,44 (dd, 1H, J1 - 9,2 Hz, J2 = 2, 8 Hz) , 3, 7 6 (s, 2H), 3, 59 (b, 4H), 3,16 (t, 2H, C/ 2,8 í iz) , 3,09 (t, 2H, J = 2,8 Hz), 2,04 (s, 3H) . 113 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 32 2-(3-ciano~4-(2~-metilpiridin-4--il)fenil)—N—(5-(piridazin-3 il)piridin—2—il)acetamida (181)
Etapa 1: Uma mistura de ácido 2- (3-ciano-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acético 111-10 (50 mg, 0,2 rnrnol), 5- (pirida zin-3-il)piridin-2- -amina 145-3 (3 4 mg, 0,2 mmo 1),1,3 -diciclohexilcarboc iiimida (50 mg, 0,24 mmo1) e 4 - (dimetil- a m i n d) p i r i d i n a (4 mg, 0, 04 mmol) em DMF (0,9 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 10 horas. 0 produto bruto foi filtrado para remover o insolúvel e o material filtrado foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2-(3-ciano-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)-N—(5-(piridazin—3-il)piridin-2-il)acetamida 181 como sólido br an co . MS m/ z 4 ( 17,2 (M + 1) ; 1H RMN 400 MHz (DMSO-· 5-6 ) δ 11 , .1. 3 (S, 1H) , 9, 2 2 (dd, 1H), : 9,13 (d, 1H) , 8, 5 9 (d, 1H) r 8, 5 6 í dd, 1H) P f ^ f 2 9 !dd, 1H) , í 8,23 (d, 1H) , 7, 98 (d, 1H) f ' t 83 -7 ,79 (m, 2 H) ·—> r <~j r / f Ό / (d, 1H ) , ' 7,48 9 s, 1H) , /,42 (dd f 1H ) , •5 , 95 (s, 2H) , , 2,56 (£ 3, 3H) .
Exemplo 33 N— (5- (4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il) -2- (3-metox;i-4-(2-metilpiridin~4-il)fenil)acetamida (182) 114 ΕΡ2403832Β1
Etapa v -f m n -, Ί 1: mg, temperatura ambiente. A solução de ácido 2 —(4 —hidroxi—3— 1) e TEA (404 mg, 4 indo tríflico (564 foi aquecida até a da durante 1 hora a ção foi em seguida o 182-1 (364 mg , 2 mm ri) foi adicionado an ΊηθΓΐί- 0 ^ Λ Op A r e a. ç a c te após adiç ãO e agit ite. A mistu ra de re dividida em partições entre DCM e água. A fase orgânica foi lavada com salmoura e seca em Na2S04. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar ácido 2-(3-metoxi-4-(ttifluorometilsulfoniloxi)fenil)acético 182-2 (5 90 mg, 95 %) .
Etapa 2: A mistura de ácido 2-(3-metoxi-4-(trifluorometilsulfoniloxi)fenil)acético 182-2 (590 mg, 1,9 mraol) e 2-metil-4-(tributilstcinil) piridina. (730 mg, 1,9 mmol) em DMF (2,0 ml) foi adicionado [1,1* — Bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio(II) (33 mg, 0,0 4 mmol). A reação foi agitada a 110°C durante 2 0 noras. Após o arrefecimento aité a temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída em DMSO e purificada por meio de HPLC de fase reversa para dar ácido 2- (3-metoxi-4-(2- 115 ΕΡ2403832Β1 metilpiridin-4-il)fenil)acético 182-3. MS m/z 258,1 (M + D .
Etapa 3: A uma mistura cie ácido 2- (3-metoxi-4- (2-metilpiridin-4-il)fenil)acético 182,3 (26 mg, 0,1 mmol), 1- (4-(6-amiηopirid i n - 3 - i 1) p i p e r a z i n - -1-il)etanona 111-4 (22 mg, 0,1 mmol) e HATU (38 mg, 0,1 mmo1) em DMF (0,6 ml ) f o i adicionado DIEA (52 uL, 0,3 mmol) e a mistura í :oi agit ada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída em DMSO e purificada por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)“2-(3-metoxi-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida 182. MS m/ z 4 6 η o \j f z, (M + 1) . dl RMN 400 MH z (DMSO- d cn CO 10, 52 l o \ ^ ! 1H) O f ^ r 4 3 (d, 1H) , 8,03 (s, 1H ) / 7, 94 (d, 1H) 7 4 3 <n - /, 30 (m, 3 H) t ' f 15 (s, 1H) , 7,04 (d, 1H) , 3, 7 9 (s, 2H) , 3, 72 { \ f 2 H) , 3, 57 í 9 \ -'Ά f 2H) , 3,14 (b, 2H) , f 07 (b, 2H) , 2, 49 l r« \ ^ r 3H) , 2, 04 is, 3 H) , 1,23 (s, 3H ) .
Exemplo 34 N— (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida (183) 116 EP24G3832B1
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Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 5-bromo-2-iodopirimidina 183-1 (114 mg, 0,4 mmol), 2-metil-4- (4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina 183-2 (88 mg, 0,4 mmol), Pd(PPh3) 4 (23 mg, 0,02 mmol), Na2C03 (170 mg, 1,6 mmol), tolueno (0,4 ml), H20 (0,4 ml) e etanol (0,1 ml) . A mistura de reação foi agitada a 1 0 0 °C durante 10 horas. Após o arrefeciment o até a temperati ira ambiente, os s o 1 v e n t. e s f o r am evaporados e o resíduo foi redissolvido em água (3 ml) e extraído < com acetato de 0L Í -L O (5 ml x 3) . As fases orgânicas combi nadas foram secas em Na2S04 »r> concentradas. 0 resíd uo foi purificado por meio de cromatografia fias h em sílica gel e eluido com 20 % de acetato de etilo em hexano para dar 5 bromo-2- (2- met.ilpiridin-4-il) pirimidina 183—3. MS m/z 2 5 0,0 ( SM + 1) .
Etapa 2: a um. tubo vedado foram adicionados 5-bromo-2-(2-metiipiridin-4-il)pirimidina 183-3 (50 mg, 0,20 mmol), cloreto de (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco(II) a 0,5 M em éter (0,60 ml, 0,30 mmo1) , Pd(dba)2 (6 mg, 0,01 mmol), Q~ phos (14 mg, 0, 0 2 mm o1) e THE (1,5 ml). A mistura de reação 117 ΕΡ2403832Β1 foi borbulhada com azoto durante 1 minuto e agitada a 100°C durante 1 hora. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, todo o solvente foi evaporado e o resíduo foi redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de crornatoçrafia flash em sílica gel e eluído com 25 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(2-(2-metilpiridin-4-il)pirimidin-5-il)acetato de terc-butilo 183-4. MS m/z 286,2 (M + 1).
Etapa 3: Uma mistura de 2-(2-(2-metilpiridin-4-il)pirimidin-5-il)acetato de terc-butilo 183-4 (35 mg, 0,12 mmol) e TFA (0,5 ml) em DCM (3 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo, O produto bruto, ácido 2- (2- (2™metilpiridin~4~il)pirimidin-5-il)acético 183-5, foi dissolvido em DMF(2 ml). 1- (4-(6-aminopiridin-3-il) piperazin-l-il) etanona (35 mg, 0,16 mmol) e DIEA (107 uL, 0,61 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,Ν',N'-tetrametilurónio (70 mg, 0,18 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purifi cado por mei o de HPLC de fase rever sa p arai dar N- (5- (4-acet ilpiperazin- 1-il ) piridin- -2-il) -2- (2 -(2- met ilpiridin-4- -il)piri midi η-5-il) a< cetami dcl 183. MS m/ z 4 33 ,2 (M 4 D; RMN 400 MHz (Me OD) δ 8,47 (s, 2H) # 8 ,50 {Cif 1H) , 8 , 22 (s, 1H), 8, 14 i (d, 1H) , 7,97 (d, 1H) , 7, 87 (d, 1H) , 7,38 ídd, 1H) , 3 , 83 (s, 2H) , 3, 68 (tf 2H) , 3, 64 (t, 2 H) , 3,15 (t, Λτ; \ '"Λ zn;, o, 09 (t, 2H) , 2,58 3H) , 2, 09 (s, 118 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 3b N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-metil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida (184)
/=N \ a αζ"-γ°γ; Pd(d ba)2/CT-G- Pftos CIK Vo Ci—% ' n-^ Th A THF,70°C, o/n GHjCI; 1S4-1 se-s 184-S -Va /rl Τ'Ο W Pd(PPhj)4 Cí.... rrv YV M 0 DME/HaO/EtOH 183-2 G 184
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 5-bromo-2,3-dicloropiridina 184,1 (113 mg, 0,50 iranol), cloreto de (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco (II) a 0,5 M 86-5 em éter (1,2 ml, 0,60 mmol), Pd(dba)2 (14 mg, 0,025 mmol) , Q-phos (36 mg, 0,05 mmol) e THE (1,5 ml), A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 1 minuto e agitada a 70°C durante a noite. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, todo o solvente foi evaporado e o resíduo foi redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 20 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(5,6~ dicloropiridin-3-il)acetato de terc-butilo 184-3. MS m/z 2 62, 1 (M 4- 1) . 119 ΕΡ2403832Β1
Etapa 2: Uma mistura de 2-(5,6-dicloropiridin-3-.11) acetato de terc-butilo 184-3 (130 mg, 0,49 romol) e TFA (0,5 ml) em DCM (3 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 2 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo. O produto bruto, ácido 2-(5,6-dicloropiridin-3-il) acético 184-4, foi dissolvido em. DMF (3 ml). 1-(4-(6- ΕΡ2403832Β1 aminopiridin-3- il)piperazin-l-il)etanona (12í mg, i,5í mmol) e DIEA (435 uL, 2,5 rranol) foram adicionados à solução antes de O-(7- azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,N',Ν'-tetrametiluróniohexaflurofosfato (277 mg, 0,73 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. G resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eiuído com 5 % de MeOH em CH2C12 para dar N~ (5- (4-acetiipiperazin-l-il) piridin-2-il.) -2- (5, 6-dicioropiridin-3-il)acetamida 184-5. MS m/z 408,1 (M + 1).
Etapa 3: a um tubo vedado foram adicionados N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(5,6-dicloropiridin-3-il)acetamida 184-5 (65 mg, 0,16 mmol), 2~metil-4-(4,4,5, 5-tet.rametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) piridina 183-2 (42 mg,
0,19 mmol) , Pd(PPh3)4 (9 mg, 0,08 mmol), Na2C03 (84 mg, 0,7 9 mm0l)' DME ml), H20 (0,5 ml) e etanol (0,1 ml). A mistura de reação foi agitada a 100°C durante a noite. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram removidos por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar h-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin- 2-il)-2- (2-(2-metilpiridin-4-il)pirimidin-5-il)acetamida 184. MS m/z 4o5,^ (m + 1); H RMN 400 MHz (MeOD) δ 8,52 (d, 2H) , 8,46 (d, 1H) , 7, 98 -7,95 7,49- -7,46 (rn, 1 Hz) 2H) , 3, 62 (t, 2H) , 3H) , 2, 08 (s, 3H) . m' 2H) , 7, 87 (d, 1H), 7,53 (s, 1H) , 7'36 (dd, 1H), 3,81 (S, 2H) , 3,67 (t, '13 (t, 2H), 3,08 (t, 2H) , 2,56 (s, 120 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 36 N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-metil-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida (188)
DMF/H20
ZníCNÍ; Pd 2(d -Q’P hos
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-cloro-2'-metiΙ 2,4' -bipiridin-5- il)acetamida 184 (46 mg, 0,10 ramol) , cianeto de zinco (14 mg, 0,12 mmo1) , Pd2 (dba) 3 (9 mg, O O O mmo1), Q-ph 0 s (9 mg, 0,022 mmo1) e lml DMF/H2O (99/1, v / v) , Α mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 1 minuto e agitada a 130°C durante a noite, Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e o produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l- i 1 ) pi r idin -2- il) - 2- (3 -ciano-21-rnetil - ? Δ ' — V3 ipir idin -5- il ) ac etami da 188. . MS m/z 456,2 (M + i: >; RMN 400 MH z (M eOD 07 CO P R f ^ ^ (d, 1H) , 8,56 (d, 1H) H 9 , w , — 8 l Ci, 1H) , 7, 98 (s, 1 Hz) r ' } 88 (d, 1H) , 7,78 (s, 1H) , 7,7 3- 7, 70 (m, 1 Hz) , 7, 3 9 (dd, 1H) e 3 « Q r v s (s, 2H) , 3, 69 (t, 2 >H) 3, 65 (t, 2H) , 3, 16 (t, 2 H) , 3,1 1 (t , 2 H), 2,61 (s, 3H) , 2 ,09 (s, 3H) ,
Exemplo 37 N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-metil-3- (trifluorometil)-2,4’-bipiridin-5-il)acetamida (189) 121 ΕΡ2403832Β1F,c
Pd(ti&a)2/CT-Q-PfiGs THF. 100CC. ihr F-Λ
Ptí<PPh3)VNa2C03 Tci/H20/EtOH 100°C ,o/rt
18Ϊ-4 TFA CH2 Cl·
188*5
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 5-bromo-2-cloro-3-(trifluorometil)piridina 189-1 (170 mg, 0,65 mmol), cloreto de (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco (II) a 0,5 M 86-5 em éter (1,57 ml, 0,78 mmol), Pd(dba)2 (19 mg, 0,03 mmol), Q- pnos (4 6 mg, 0,0 6 mmol) e THE (3 ml) , A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 1 minuto e agitada a 100°C durante 1 hora. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, todo o solvente foi evaporado e o resíduo foi redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 2 0 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-( 6-cloro--5“ (trif luorometil) piridin-S-il) acetato de terc-butilo 189-3, MS m/z 296,1 (M + 1).
Etapa 2: a um tubo vedado foram adicionados 2- (6-cloro-5-(trifluorometil) piridin-3-il)acetato de terc- butilo 189-3 (318 mg, 1,08 mmol), 2-metil-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (283 mg, 1,29 mmol), Pd(PPh3)4 (62 mg, 0,05 mmol), Na2C03 (342 mg, 3,22 122 ΕΡ240383261
mmol), Tolueno (3 ml),H20 (3 ml) e etanol (0 f 7 5 ml). A mistura de reação foi agitada a 100°C durante a noite. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e o resíduo foi redissolvido em áctua (10 ml) e extraído com acetato de etilo (10 ml x 3)
As :ases as combinadas foram uo foi purifi cado po gel e eluído com 30 de acetato de etilo em hexano a 2- (2'-meti1-3-(trifluorometil)-2,4'-bipiridin-5-il)acetato de terc-butilo 189-4. MS m/z 35,2 (M + 1).
Etapa 3: íJma mistura de 2-(2'-metil-3- (trifluorometil)-2,4?-bipiridin-S-il)acetato de terc-butilo 189-4 (230 mg, 0,65 mmol) e TFA (1 ml) em D CM (5 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 5 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo. O produto bruto, ácido 2-(2'-metil-3-(trifluorometil)-2,4'-bipiridin-5-il)acético 189-5, foi dissolvido em DMF (4 ml). 1- (4- (6-am.inop.iridin-3-il)piperazin-l-il)etanona (173 mg, 0,78 mmol) e DIEA (910uL, 5,22 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,Ν',N'-tetrametilurónio (372 mg, 0,98 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite.
O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produ Γ+ o bruto foi purif içado por meio de HPLC de fase rever S 3. para dar N- - (o - (4-ace tilpiperaz in-1- - i 1) P i .ridi n - 2 - il) - 2- (2 ' -metil L - 3 - (t r i f 1 uorometil) -2,4 ' -bipi .ridi n — 5 — il) ac et amida 189. MS m/; i 499, 2 (M + 1) ; ]ή RMN 400 MHz (MeOD ) δ 8,7 8 (s, 1H), 8, 48 (d, 1H), 8,26 (s, 1H) , 7, 99 (s, 1H) , 7, 8 8 (d, 1H), 7, 4 9- 7,3 6 (m, 2H) , 7 , 31 (d, 1 H) , 3, 92 (s, 2 H) , 3,69 (t, 2H) , '3 f 65 (t, 2H), 3,16 (t, 2 ri.) f 3,11 (t, 2H) , 2, 57 (s, 3H), 2,( ) 9 ( s, 3 H) 123 ΕΡ240383261
Exemplo 38 ΕΡ240383261 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-j
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 5-bromo~2-cloro-3-fluoropiridina 190-1 (210 mg, 1,0 mmol), cloreto de 86—5 em éter mmol), Q-phos de reação foi itada a 100°C a temperatura o resíduo foi (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco(II) a 0,5 M (2,4 ml, 1,2 mmol), Pd(dba)2 (29 mg, 0,005 (71 mg, 0,10 mmol) e THF (3 ml). A mistura borbulhada com azoto durante 1 minuto e ag durante 1 hora. Após o arrefecimento até ambiente, todo o solvente foi evaporado e redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em NaeSCh e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 20 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(6-cloro-5-fluoropiridin-3-il)acetato de terc-butilo 190-3. MS m/z 246,1 (M + 1).
Etapa
Uma mistura de 2-(6~cloro--o~fluoropiridin-3 124 ΕΡ2403832Β1 il)acetato de terc-butilo 190-3 (123 mg, 0,50 mmol) e TFA (0,5 ml) em D CM (3 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 2 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo. O produto bruto, ácido 2-(6-cloro-5-fluoropiridin-3-il)acético 190-4, foi dissolvido em DMF(3 ml). 1-(4-(6- aminopiridin-3-i1)p ipe r a z i η-1-i1)et aη o n a (110 mg, 0,50 mmol) e DltíA (500 uL, 2,87 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,Ν',N'-tetrametilurónio (285 mg, 0,75 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. G resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 5 % de MeOH em CH2C12 para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(6-cloro-5-fluoropiridin-3-il)acetamida 190-5. MS m/z 392,2 (Μ + 1).
Etapa 3: a um tubo vedado foram adicionados N--(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(6-cloro-5-fluoropiridin-3-il) acetamida 190-5 (59 mg, 0,15 mmol), 2- met i 1-4-(4,4, 5, 5 -tetrameti 1-1,3,2- dioxaborola il)piridina 183- 2 (4 9 mg, 0,23 rnmo 1) , Pd (PPh3 mm o 1 ) , ba2C03 (7! 9 mg, 0,75 mmol), Toli leno (0, ml) e etanol (0 , 2 ml) . A mistura de reação 100° C durant .e a noite. Após l~\ arrefecd temp eratura a mbi ente, os s olventes foram remo de e vaporação gi ratória. 0 produto bruto foi ; me i o de HPLC de fase rever sa para acet ilpiperaz in- 1-il)pi ridin-2- 11)- -2- (3-fl 2,4 ! -bipiridi 1 i o -il)acetamida 190. MS m/z 449 RMN 400 MHz (Me OD) δ 8 ,48-8,46 (m , 2H) , 7,87 (d, 1H), ' f 81 (s, 1H) , 7,75-7,69 (m, 2 1 1H) , 3,84 (s , 2 H), 3,67 (t, 2H), 3, 62 (t, 2H) , 3,08 (t, 2H ) > 2,56 (s , 3H), 2 , 08 (s, 3H) ^vido G 08 meio -meti: 125 ΕΡ2403832Β1
Exemplo 39 N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-i.l) -2- (2-fluoro-5-metil-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetamida (191)
arrí sgado com 4- g, 10 mmol), '"Λ —7 , O / g, i O § o
Etapa 1: a um baião de fundo redondo carregado com Ι-Ιο r omo - 2 - f 1 u o r o - 5 - me t i 1 a n i 1 i n a 191-1 (2,04 g, ácido 2- metilpiridin-4-ilborónico 191-2 (1,37 g, e Pd(PPh3) 4 (0,4 g, 0,3o mmol) foi adicionado tolueno (30 ml), etano1 (10 ml) e carbonato de sódio saturado (10 ml) e a re cL ç ã o foi aquecida Após a reação ter sido ibiente, foi dividida em O balão foi esguichado com azoto e a até refluxo durante 10 horas. Após arrefecida até a temperatura ambien partições entre acetato de etilo e NaHC03 saturado e a fase
OrgdniCâ xoi l3.V3.dcl COITl ScLXÍHCUic^ 0 s0Ccl 01T1 í\j°o. o solvente foi removido por meio de ο-ί-τ-^-λ · j. ^ 1 α.v_.^α.va.u ^iidiona e o resíduo foi purificado por meio de cromar.ografia f] ash ^ sílica gel, eluído com 50 % de acetato de etilo ern hexano a para dar 2-fluoro-5-metil-4-(2-metilpiridin-4-ii)aniii~ 191-3. MS m/z 217,1 (M+l). de ; (1,02 rito
Etapa 2 me t ilpiridin-4 (16 ml) foi À s o 1 u ç a o .1)anilina 191—3 adicionado nit f 1 ια o o o m^e t i l — q_(o _ g, 4, / mmol) em CH2i de isoamilo (6 ml' 126 ΕΡ2403832Β1 lentamente a -10°C. Após 20 minutos, a reação foi aquecida até 100°C durante 2 horas. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e lavado com Na2S205, salmoura e levado até a secura por meio de evaporação giratória. O resíduo foi
purificado por meio de C ¥ OITI3. t ografia flash em sílica gel, eluído com 4 0 % de acet ato de e t i 1 o e m h e x a η o para dar 4- (5-fluoro-4 -iodo-2-metil .fenil) -2-metilpiridina 191-4, MS m/z 328,10 (M+l).
Etapa 3: a um tubo vedado carregado com 4-(5-fluoro-4-iodo-2-metilfenil)-2-metilpiridina 191-4 (200 mg, 0,6 mmol) , Pd2 (dba) 3 (28 mg, 0,03 mmol) , e Q-Phos (21 mg, 0,03 mmol) foi adicionado THE anidro (2,5 ml). O recipiente de reação foi esguichado com azoto e cloreto de (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco(II) a 0,5 M em éter, 1,34 ml, 0,67 mmol) foi adicionado subsequentemente. A reação foi aquecida até 70°C durante 12 horas. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído com 50 % de acetato de etilo em hexano para dar 2- (2-fluoro-5-metil-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acetato de terc-butilo 191-5. MS m/z 316,10 (M+l).
iijtcLp>a 4 i A solução de 2- (2 - f 1 uoro- -5- -met il-4- (2- met ilpiridin-4- il)fenil)acetato d P terc- -but i ,1o 191-5 (80 mg, 0,37 mmo1) 0 jrj L) C M ^ Z Tfl "ί .) foi a d -] Q j 0 X 1 3. d O TF, A (2 m 1) . A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. O solvente e TF A foi removido por meio de evaporação giratória para dar ácido 2-(2-fluoro-5-metil-4-(2- me ti1p iri d i n-4-i1)fe n i1)a cét i c o 191-6. O p ro dut o fo i utilizado para a seguinte etapa sem purificação adicional.
Etapa 5: A uma mistura de ácido 2-(2-fluoro-5-metil-4-(2-metilpiridin-4-il)fenil)acético 191-6 (35 mg, 0,13 127 ΕΡ2403832Β1 mmol), 1“ (4- (6-aminopiridin-3-il)pipe ;razin- -1-rl) e t an iona 111-4 (30 mg, A 'J f 13 mmol) e HATU (50 mg, 0,13 mm o 1) em. DMF (1,0 ml) j r ο Ί .. Vb _L. adi cionado DIEA (67 uL, 0,4 mm o 1) e a mi st ura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída em DMSO e purificada por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l- i 1 )piridin- 2-i1)-2-(2-fluoro -5 “1 metil-· 4- (2- -met ilp i r i d in-4- il )fenil)acetamida 191. MS m/ z Δ 62 O :m + 1) . U: [ RMi J 400 MH z (DMSO-dg) δ 10,51 (s, 1H) , Q f 49 (d, 1H) , 8,03 (s, 1H) , ' ; 91 (d, IH) , 7,43 (m, 1H), H ! r s 2 (d, 1H) , 7,28 (s, 1H) , 7, 21 (d, 1H) , 7,0 8 (d, 1H) , 3, n 1 7 (s, 2H) , 3,53 (b, 4H) , 3f 14 (b, 2 H) , 3,07 (b, 2H) , 2 f D 5 (s, 3H) , 2,2 0 (s, 3H) , 2,04 (s, 3H).
Exemplo 40 N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-metilpirimidin—4—il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (192)
Etapa 1: A uma mistura de ácido 2-(4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)acético 46-6 (5 64 mg, 2,0 mmol), 1- (4--(6-- aminopiridin-3-il) piperazin-l-il) etanona 111-4 (440 128 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 mg, 2,0 mmol) e HATU (798 adicionado DIEA (1,04 mj_ a temperatura ambiente du^ foi dividida em partições fase orgânica foi lavada solvente foi evaporado, cromatografia flash em mg, 2,1 mmol) em DMF (6 ml) foi 6,0 mmol) e a mistura foi agitada :ant.e a noite. A mistura de reação entre acetato de etilo e água. a com salmoura e seca em Na2S04 e o 0 resíduo foi submetido a sílica gel para dar N—(5-(4 — acetilpiperazin-1-(trifluorometil)fenil)acet m/z 485,1 (M + 1).
il)piridin-2-il)-2-(4-bromo-3-mida 192-1 (920 mg, 95 %) . MS N- (5- (4-acetilpiperazin-l- ritapa 2: Uma mistura de il)piridin-2-il)-2-(4-bromo-3- (t r i f 1 u o r o me t i 1) f e n d 1) a r :etamiaa 192-1 4,4,4',4',5, 5,5',5» 192-2 (0,51 g, 2 (dppf)2.CH2CI2 (82 esguichado com azot - o ct ame t. i 1-2,2 '-bi (1, mmol), KOAc (0,29 mg, 0,1 mmol) em o e aquecida até 100 (0,48 g, 1 mmol), 3,2-dioxaborolano) g, 3 mmol) PdCl2 DMSO (5 ml) foi °C durante 2 horas. entre acetato com salmoura e o resíduo foi A misoura de reação foi dividida em partições de etilo e água. a fase orgânica foi lavada seca em Na^SCq. 0 solvente foi evaporado e submetido a cromatografia flash em sílica gel para dar N (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(4,4,5, 5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3-(trifluorometil) fenil)acetamida 192-3. MS m/z 533,2 (M + 1).
Etapa 3: Uma mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il)-2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida 192-3 (53 mg, 0,1 mmol), 4-cloro-2 -metilpirimidina 192-4 (18 mg, 0,14 mmol) Pd(PPh3) 4 (11 mg, 0,01 mmol) e K3PO4 (42 mg, 0,2 mmol) em dioaxano (1,0 ml) foi esguichado com cl 2 O L. 0 e aquecida até 100°C durante 2 horas. 0 sal foi remo vi do por meio de filtração e o material filtrado foi levada até a secura por meio de evaporação giratória. O resíduo foi 129 EP24G3832B1 purificado por meio de HPLC de faLse reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-1-ii)piridin-2-i1)-2-(4-(2-metilpirimidin- 4-ii)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida 192. MS m/z 499,2 (M + 1) . RMN 400 MHz (DMSO-dg) δ 10 , 58 (s, 1H) , 8,77 (d, 1H), 8,02 (s , 1H ), 7,8 9 (m, 2H) , 7,73 ICÍ, 1H), 7,54 (d, 1H) Ί f > l 42 (m, 2H) , 3,76 (s, 2H), 3,66 (b, 4H) , 3,14 (b, 2H) , 3, 07 (b, 2H) , 2,64 (s, 3H), 2, 03 (s, 3H) .
Exemplo 41 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-fluoro-3-metil-2, 4'-bipiridin-5-il)acetamida (193)
Composto 193 ácido 2-1 mmol.) , mg, 1,5 mg, 0,1 A reação
Etapa 1: a um vial de reação foi adicionado (6-Cloro-5-metilpiridin-3-il)acético 74-4 (185 mg, ácido 2- fluoropiridin-4-ilborónico 193-1 (220 mmol), Pd(OAc)2 (12 mg, 0,05 mmol), S-Phos (41 minol) e K3P04 (636 mg, 3 mmol) em 1 ml 2-butanol. foi adoecida até 100°C e agitado durante 2 horas. A reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e então diluída a DMSO. A mistura de reação foi filtrada e o material filtrado foi purificado por meio de HPLC de fase reversa 130 ΕΡ2403832Β1 il)ácidor 1) . Etapa 2: a um vial de reação foi adicionado ácido 2-(2f ~fluoro-3-metil~2,4f -bipiridin-5-il) acético 193-2 (60 mg, 0,17 mmol) , 1-(4-(6-aminopiridin~3--il) piperazin-1- il)etanona 111-4 (50 mg, 0,22 mmol), O- (7-azabenzotriazol- 1-il)-N,N,N', N'-tetrametiluróniohexaflurofosfato (HATU) (115 mg, 0,3 mmol) e DIEA (104 ml, 0,58 mmol) em DMF (1 ml) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. A reação foi diluída com DMSO e então purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-fluoro-3- para i-(2'-fluoro-3-metil-2,4!-bipiridin-5-: acético 193-2 como sólido branco. MS m/ z 24 7
(M meti1-2 , 4 ' - bipiridin- 5 - i 1 )acetamida 193 como SÓ 1 ido branco. MS m/ z 4 4 9, 2 (I> 4 + g \ e 11 ; '!H RMN 400 MHz (DMSO-d -δ) δ 10, 5 8 ( s, 1H) , 8,42 (d, 1H, «.J = 1,6 Hz ), 8,28 (d, 1 w X.XX f J = 5,2 Hz) , 7, 98 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 7, 87 (d, 1 -H, •J 9,2 Hz) —7 f 1 f 67 (d, 1H, J = 1, 6 Hz ) , 7,50-7,48 (m, 1H) , 7 ,37 (dd, 1H, J1 = 9,2 : Hz, J2 = 3, r 2 Hz), 7,30 (s, 1H), 3, / | (s, 2H) , 3,5 0 (b i, 4H) , 3,09 (t, 2H, J = = 5,2 Hz) i, 3,02 (t, 2H, U = b, z Hz) , 2,30 (s, 3H), 1 , 97 is, 3H) .
Exemplo 42 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-i!)-2-(2!,3-difluoro-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida (194) F cvS o f-. o σ H j T B\OH)2 190-6 193-1 A um vial de reação acetilpiperazin-l-il)pi ridin-2-
Composto 194 foi adicionado N- (5- (4-il)-2-(6-cloro-5- 131 ΕΡ2403832Β1
fluorop iridin-3-i 1)acetamida 190-6 (66 íi ig, 0 f 1 mmo D 1 , ácido 2-fluoropi r i d i n - 4 - i 1 b 0 r ó n ico 193-1 (35 mg, A ,25 mmol), Pd(OAc)2 (2 mg, 0, 00 9 mi no 1) , S-Ph os (7 mg, 0, O] [ 7 mmo1) e K3PO4 (10 8 mg, 0,51 mmo1 ) em 2 - but anol (0,3 ml) * A reação foi aqueci da até 100°C e agitado du .rante 2 hc iras A reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e então diluída a DMSO. A. mistura de reação foi filtrada e o material filtrado foi purificado por meio de HPLC de fase reversa parai dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il)“2~(2',3-difluoro-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida 194 . MS m/z 453,1 (Mel).
Exemplo 43 N~(5~(4-acetilpiperazin-l~-il5 piridin-2-il)—2—(4-(5 £luoropiriraidin—4-~il) fenil) acetamida (196)
Etapa 1: Uma mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l- il) piridin-2-il) -2- (4-iodofenil) acetamida 177-2 (398 mg, 0,8 6 KiiTiol), 4,4,4!,4!,5,5, dioxaborolano) 192-2 (380 mg mmol) PdClz (dppf) 2 · CH9CI? (7 ml) foi esguichado com azoto horas. A mi st ura de J£ 0 cl Ç 3.0 acetato de et ilo e água. salmoura 0 seca em I\i a 2 u 0 4
ϊ ες ϊ f — 0 c tame ti1 ^ f r\ z Í_]-U ( ] Q 2- Ί ^ — f mmol), KO Ac ( 2 70 mg, 2 t ' mg, 0, 0 8 6 mm ol) em DMSO (5 aquecida até 90 0 , 0 durante 2 di vidida em par t ÍÇÕ0S 0nt rp ase orgâni . C cL foi lavada c om sol .vente foi ev a porado 0 Q 132 EP24G3832B1 (4,4,5, resxduo foi suometxdo a cromatografia flash em sílica gel para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-.ecrametil-l,3;2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida
196-1. MS m/z 465,2 (M 1) .
Etapa 2: Uma mistura de N~(5-(4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il) -2- (4-(4,4,5, 5-tetramet.il-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenil)acetamida 196—1 (30 mg, 0,065 mmoi) , 4-cloro-5-fluoropirimidina 196-2 (28 mg, 0,21 mraol) Pd(PPh3)4 (12 mg, 0,01 mmol) e K3P04 (90 mg, 0,424 mmol) em dioaxano (0,6 ml) foi esguichada com azoto e aquecida até 110°C durante 2 horas. O sal foi removido por meio de filtração e o material filtrado foi levado até a secura por meio de evaporação giratória. O resíduo foi purificado por meio de H.PLC de fase reversa para dar N- (5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(5-fluoropirimidin- 4 - i 1 )fenil) acetamida 196 . MS m/ z 435, 10 (ly 1 4- 1) • -'· η RMN 400 MHz (DMSO-de) 5 10 , 54 (s, 1H) , 9,06 (d, 1H) , 8, 90 (d, 1H) , 7,98 (m, 3H) , 7, 8 6 (d, 1H) , 7,49 (d, 2H) , 7, 37 (m, 1H) , 3,73 (s, 2n) f 3, 50 (m, 4H) , 3,09 (t, 2H) , 3, 02 (t, 2H) , 1, 97 (s, 3H) .
Exemplo 44 ixj — (5 — (4 — 3.cetíipiperazin 1 ir)piridin 2 xl) 2 (2 ' -raetii —u- (metilsulfonil)-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida (197) 133 ΕΡ2403832Β1
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Etapa 1: 5-bromo-2-cloro-3- (metilsulf onil) piriclina 197-3 foi sintetizada de acordo com o procedimento da literatura a partir de 5-bromo-2-cloropiridin-3-amina 197-
Etapa 2: a um tubo vedado foram adicionados b-bromo-2- CIO ro-3- (meti! Lsulfonil)pir idina 197-3 í 60 mg, 0 , 2 2 mmo 1) f cio reto de (2 - -terc-butoxi- 2-oxoetil) : 2 in .co ( II) a 0,5 M 86- 5 em éter (0 , 5 4 ml, 0,27 mmo1), P d ( dbc 0 2 (6,4 mg, 0,00 1 mmo 1), Q- pho s (16 mg, 0, 0 2 mmo1) e THI • v -* . ml) . A mistur a de reaç ão fo i borbulhada com azoto ò Lura' nte 1 minuto 0 agi tada a 100 °C durante 1 hora. Após 0 arrefecimento até 3. tem perat ura a rnbiente, tod o o solvent ze foi . evaporado e O res i du o foi redissolvido em acetato de et ilo, lavado co m 134 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 até a secura o bruto foi sílica gel e para dar 2-de terc- águci e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado por meio de evaporação giratória. 0 produt purificado por meio de cromatografia flash em eluxdo com 2 0 de acetato de enffo em hexa^o (6-cloro-5-(metilsulfonil)piridin-3-il)acetato butilo 197-5. MS m/z 306,1 (M + i)
Etapa 3: Uma mistura de 2-(6-cloro-5_ (metilsulfonil)piridin-3-il)acetato de terc-butilo 197-5 (40 mg, 0,13 mmol) e TFA (0,5 ml) em DCM (3 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 2 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo. O produto bruto, ácido 2-(6-cloro-5~(metilsulfonil)piridin-3-il) acético 197-6, foi dissolvido em DMF (2 ml). l-(4-(6--aminopiridin-3-il) piperazin-l-il) et anona (35 mg, 0,16 mmol) e DIEA (114 uL, 0,65 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de 0- (7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',Nf-tetrametilurónio (75 mg, 0,20 mmol). A mistura foi aaitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente fo.i removido por meio de evaporação giratória. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eiuído com 5 % de MeOH em CH2C12 para dar N-(5--(4- acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(6-cloro-5-(metilsulfonil)piridin-3-il)acetamida 197-7. MS m/z 452,1 (M + 1) .
Etapa 4: a um tubo vedado foram adicionados N-(5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(6-cloro-5-(tietilsulfon.il) piridin-3-il) acetamida 197-7 (30 mg, 0,07 itmol) , 2-metil-4- (4,4,5, 5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolan-2-il)piridina 183-2 (22 mg, 0,10 mmol), Pd(PPh3)4 (4 mg, 0/·003 mmol), Na2C03 (22 mg, 0,20 mmol), Tolueno (0,4 ml),H20 (0^4 ml) e etanol (0,1 ml). A mistura de reação foi agitada a 100°C durante a noite. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram removidos por meio 135 ΕΡ2403832Β1 de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-metil-3- (met i Is ulfonil - ) ^ r 4 ’ -bipi ridin -5-il)ac amida 197, . MS m/ z 509, 2 ( ;m + i) • ~ H r RMN 4 0 0 MHz (MeOD) δ 8,81 (d, : 1H) f 8,52 (d, 1 H) « A q 1 V , ^ -> (d, 1H), 7, 97 (s , 1H), 7 . 8 7 (d, 1H) , ·“? 4 7 (s, 1H) s í: 1 (dd, 1H) , 7,37 (dd, 1H), 3, 9 s (s, 2H) , '3 f 6 8 (t, 2 H) , 3, 63 (t, 2H) , 3, 15 (t, 2H), 3, ( Ί Q (t, 2H) , 2 r 92 / <-\<J r 3H) , n ^ r 57 (s, 3 H) , 2,09 ( s, 3H ) .
Exemplo 45 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2—(4-(6 metilpirimidin-4-il)fenil)acetamida (198)
Uma mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il )-2-( 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida 196-1 (20 mg, 0,04 mmol), 4-cloro-6- met ilpirimidina 198-1 (8 mg, 0,06 mmol) Pd(PPh3),i (2 mg, 0,002 mmol) e K3P04 (25 mg, 0,12 mmol) em dioaxano (0,6 ml) foi esguichada com azoto e aquecida até 110 °C durante 2 horas. O sal foi removido por meio de filtração e o material filtrado foi levado até a secura por meio de evaporação giratória. O resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para daLr N-(5-(4-acetilpiperazin-l- il)piridin-2- -11)-2-(4-(6 -metil .pirimidin- -4- i1) feni1)acetamida 198. MS m/ z 431,20 (M + 1) . ]'H RMN 400 MHz (DMSO-d6) 5l 0, 5 9 (s, 1H) , 8,16 (d, 2 H) , 8, 04 (d, 1H) , 7,98 (s, 1H) , 7,92 (m, 1H) , 7,51 (d, 2H) , “Ί / ' f 45-7,40 (m, 136 ΕΡ2403832Β1 2η), 3,11 (s, 2Η) , 3,58 (b, 2Η) , 3,15 (b, 2Η) , 3,08 (b, 2Η), 2,55 (s, 3H), 2,53 (s, 2H), 2,04 (s, 3H).
Exemplo 46 2-(2'-fluoro-3-metil-2,4'-bipiridin-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (199)
A mistura de ácido 2~ ( 2’ -fli íoro- -3-metil-2,4'- bipiridin-5-il)acético 193-2 (50 mg, 0,2 mm o 1) e 5 — (pirazin- 2-il)piridin- -2-amina 86-3 (36 mg, 0,2 mmol) em DCM (1 ml) foi adicionada N,N!-Diis opropi .Icarbodiimida (46 ml, 0,3 mmol) a tempera tura ambiente . A mj _stu: ra foi agitada a temperatura ambiente durante 24 horas . 0 solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi dissolvido em DMSO e então purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2-(2'-fluoro-3- metil-2,4'-bipiridin- 5 -il ) -N- (5- (p: iraz i _n-2- -il)piridin-2-i .1) ac etamid a 199 como s óli do branco . MS m/z 401,2 (M + 1) f “· RMN 4 00 MHz (DMSO- d 6) δ 11 , 07 ( Q 1 ° r H) , 9,25 (d, 1H, J - 1,6 1 Iz) , 9, rid (rn 1 H) , 8, 6 6 (m, 1H) , - 8, 57 (d. 1H, J - 2,4 Hz) , o J , 47-8, 4 5 (m, a, H) , 8,2 8 (d, 1H, J : = 5,2 M Z ) , 8 , .!. 6 (d , 1H, = 8, 8 Hz) , 7 f 1 -1- (d, 1H, J = 1, 6 Hz) , 7 ,51-7,49 (m, 1H) , 7, 31 (s , 1H) , 3 r 82 (s, 2 H) , 2,3] - (s, , 3H) .
Exemplo 47 N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2-(difluorometil)piridin-4~il)fenil)acetamida (201) ΕΡ2403832Β1
Etapa 1: Uma mistura de ácido 2-(4-(2- (difluorometil)piridin-4-il)fenil) acético 203-5 (30 mg, 0,11 mmol), 1-(4-(6- aminopiridin-3-il)piperazin-1- i.l)etanona 111-4 (28 mg, 0,13 mmol), N,N- diisopropiletilamina (99 ml, 0,57 mmol) e hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,Ν',Ν'-tetrametilurónio (65 mg, 0,17 mmol) em DMF (2 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de H.PLC de fase reversa para dar 2 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(4-(2- (difluorometil)piridin-4-il)fenil) acetamida 201. MS m/z 418, 2 (M + 1); ]Ή RMN 400 MH z (MeOD) δ 8,61 (d, 1H) , 8,25 (d, 1H), 7,91 (d, 1H),7,80-7, 72 (m, 4H) , 7,49 (d, 2H) , 6,79 (d, 1H) , 6,73 (t, 1H), 3,70 (s, 2H) , 3, 66-3, 58 (m, 4H) , 3,52-3,47 (m, 2H) , 3,45-3,40 (m, 2H) , 2,09 (s, 3H) .
Exemplo 48 2-(4-(2-(difluorometil)piridin-4-il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin—2—il)acetamida (203) 138 ΕΡ2403832Β1 $fc'. M p-i * í >'0 ·*;¥·
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Etapa 1; iodopiridina um tubo vedado foram adicionados 2---bromo-4-1 (568 mg, 2,0 mmo 1), 2-(4-(4,4,5,5- tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fen il)acetato de etilo 203-2 (580 mg, 2,0 mmol ) , Pd (PPh3) 4 (116 mg, 0 , 1 mmol), N a 2 b- 0 3 ^ 6 J> h mg, 6,0 mmol ) , tolueno ( 4 ml), H20 (4 ml) e etanol (1 m d). A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 2 minutos e agitada a 80°C durante 10 horas. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e o resíduo foi redissolvido em água (5 ml) e extraído com acetato de etilo (5 ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 15 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(4-(2-bromopiridin-4-il)fenil)acetato de etilo 203 -3. MS m/z 320,1 (M + 1) . Etapa 2 : a um tubo vedado fora m adie i 0 nad0 s 2- (4- (2- .0 n 0 mopiridin-4 -il)fenil)acetato de etilo 203-3 (440 mg, 1, 3 7 mmol), 2- -bromo -2,2-difluoroacetato de etilo (1,7 ml, 13, 7 mmol) , Cu (1,3 g, 2 0,6 mmol) e DMF (5 ml) . A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 1 minuto e
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£5> 139 ΕΡ2403832Β1 agitada a 8 0 °C durante 1 hora. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de um camada de Celite e concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 20 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(4-(4-(2-etoxi-2--oxoetil) fenil) piridin-2-il) ~2,2-dif luoroacetato de etilo 203-4. MS m/z 364,2 (M + 1).
Etapa 3: 2-(4-(4-(2-etoxi-2-oxoetil)fenil)piridin-2-il)-2,2-difluoroacetato de etilo 203-4 (476 mg, 1,3 mmol) foi dissolvido em 5 ml MeOH e 2 ml LiOH a 2 N. A mistura de X Θ cx Ç 3.0 foi agitada a 55°C durante 12 h. Após arrefeci mento até a temperatura ambiente, a mistura f redissol vi do em 5 ml de DMF e 1,5 ml concent rado HC1. solução foi agit ada a 130°C durante 3 h. Após arrefeci mento até a temperatura ambiente, a solução f deitada em 5 ml de água e extraí do com acetato de etilo ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2S04, e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica gel e eluído com 5 % de MeOH em CH2C12 para dar ácido 2-(4-(2-(difluorometil)piridin-4-il) fenil) acético 203-5. MS m/z 2 64,1 (M + 1) .
Etapa 4: Uma mistura de ácido 2-(4-(2- (difluorometil)piridin-4-il)fenil) acético 203-5 (70 mg, 0,27 mmol), 5-(pirazin- 2-il)piridin-2-amina (55 mg, 0,32 mmol), N,N-diisopropiletilamina (139 ml, 0,80 mmol) e O-(7-azabenzotriazol-1- il)-N,N,N', N' - tetrametiluróniohexaflurofosfato (152 mg, 0,40 mmol) em DMF (2 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2-(4-(2-(difluorometil)piridin-4-
il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida 203. MS 140 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 m/ z 418,2 (M + 1); ¥ RMN 400 MH z (CDC 13) δ 8, 99 (d, 1H), 8, 90 (dd. 1H) , 8,70 (d, 1H),8,6 3 (dd, 1H) , 8,53 E 8,40 ~8,33 (m, 2H), 8,30 (s, 1H), 7, 8 4 (s, 1H) , 7,70-7,68 (m, 2H) , 7, 62-7, 60 (rn, 1H) , 7,50- 7,49 (m, 2H) , 6,70 (t, 1H) , 3, 87 (s, 2H) .
Exemplo 4 9 2- (2’, 3-difluoro-2,4’-bipiridin-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2~il)acetamida (205) J's t Ç}' O iaí.j-sifcai- Cáfttv gr........^ , 1 ^ €5 * iCOHf j ' mçDAcu i i 2^moi w*c. \L n v rt-r ?s é 2SS1 :mz<% 2&S-3 2SS--Í
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Composto 205
Etapa 1: Num tubo vedado, uma mistura de 5-bromo-2-cloro-3-fluoropiridina 205-1 (631 mg, 3 mmol), cloreto de (2-terc- butoxi-2-oxoetil) de zinco(II) a 0,5 M 205-2 em éter (6,6 ml, 3,3 mmol), Pd (dba) 2 (87 mg, 0,15 mmol), 1,2,3,4,5-penta- fenil-1!-(di-t-butilfosfino)ferroceno (Q-pnos, 107 mg, 0,15 mmol), e THE (12 ml) sob árgon foi agitado a 70°C durante 18 noras, Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, os solventes foram, evaporados e o resíduo foi redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado até a secura EP24G3832B1 por me io de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purific :ado por meio de cromatograf ia J__L ash em sílica gel, e1u í do com 30 % de acetato de etilo em hexano para dar 2- (6-cloro-b-fluoropiridin-3-il)acetato de terc- butilo 205-3 corno um óleo castanho. MS m/z 246, 1 (M + 1) .
Etapa 2: a um balão contendo 2-(6-cloro-5- fluoropiridin-3-il)acetato de terc-butilo 205-3 (370 mg, 1,5 mmol), ácido 2~ fluoropiridin-4-ilborónico 205-4 (318 mg, 2,25 mmol), Pd(0Ac)2 (17 mg, 0,075 mmol), Ιό i c i c 1 o h e x i 1 f o s f i no-2 ', 6 ' - d i me t. o x i b i f e η i 1 o (62 mg, 0, 15 mmol), K3PO4 (800 mg, 9 mmol) sob árgon foi adicionado 2-butanol (1,5 ml). A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 10 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com acetato de etilo, lavada com água e salmoura, seca em Na2S04, e concentrada até a secura por meio de evaporação giratória. O material bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flasn em sílica gel, eluido com 20 % de acetato de etilo em diclorometano para dar 2-(2', 3-difluoro-2,4'-bipiridin-5-il)acetato de terc-butilo 205-5 como um óleo amarelo. MS m/z 307,1 (M + 1) .
Etapa 3: Uma mistura de 2-(2',3-aifluoro-2,4'-bipiridin-5-il) acetato de terc-butilo 205-5 (248 mg, 0,8.1 mmol) e TFA (0,8 ml) em DCM (0,8 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 3 horas. A solução teve o pH ajustado até ao redor de 12 por Na2C03 e extraído com diclorometano. A fase aquosa foi acidificada ate o pH 3 por solução a 1 N de HC1 aquosa e agitada durante 15 minutos. Os solventes foram evaporados e o sólido restante foi extraído com 20 % de metanol em acetato de etilo e filtrado para remover o insolúvel. O material filtrado foi concentrado até a secura por meio de evaporação giratória para dar ácido 2-(2',3-difluobO-2,4 -bxpiridin-5-il) 142 ΕΡ2403832Β1 acético 205-6, que foi utilizado diretamente para a seguinte etapa. MS m/z 2 51,1 (M + 1) .
Etapa 4: Uma mistura de ácido 2-(2',3-difluoro-2,4'-bipiridin-5-il) acético 205-6 (50 mg, 0,2 mmol), 5-(pirazin-2-il) piridin-2-amina 86-3 (34 mg, 0,2 mmol), 1,3-diciclohexilcarbodiimida (50 mg, 0,24 mmol) e 4- (dimetilamino) piridina (4 mg, 0,04 mmol) em DMF (0,9 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 10 horas. O produto bruto foi filtrado e o material filtrado foi submetido diretamente for HPLC de fase reversa para dar 2- (2’, -3 -dif luoro -2,4’- bip iridin -5 -i 1) -N- ! (5- (pirazin- -2- il ) piri d in-2 -il) a cet ami .da 205 co: mo sói ido branco . MS m/ z 4 05, 2 (M + i- ) r ] H RM1 Ni 400 MHz (DMSO -d e) δ 11, 16 (s, 1H) , o f -1 1 (d. 1H) , 9, 12 (d, 1H) , « 7 ^ f 2 (dd, 1 H) f 8, 6 3 (d, 1H) , 8, 61 - 8,60 (m, 1 H) , 8,52 (dd, 1H) , 8,41 (d, 1H) , 8,21 \ f 1H ) , 7, 94 (dd, 1H) , 7,88 (dd, 1H) , 7,64 / f 1 H) , 4,01 ( s, 21 D .
Exemplo 50 N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-ciano-4-(2- fluoropiridin-4-il)fenil)acetamida (206) 143 ΕΡ2403832Β1
36-5 28g-5
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 5---bromo---2---iodobenzonitrilo 206-1 (500 mg, 1,6 mmol) , ácido 2-fluoropiridin- 4-ilborónico 205-4 (229 mg, 1,6 mmol),
Pd(PPh3)4 (94 mg, 0,08 mmol), Na2C03 (516 mg, 4,9 mmol), tolueno (2 ml), H20 (2 ml) e etanol (0,5 ml), A mistura de reação foi agitada a 120 °C durante a noite. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e o resíduo foi redissolvido em água (5 ml) e extraídos com acetato de etilo (8 ml x 3). As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 15 % de acetato de etilo em hexano para dar 5-bromo-2-(2-fluoropiridin-4-il)benzonitrilo 206-3. MS m/z 277,1 (M + 1).
Etapa 2: a um tubo vedado foram adicionados 5-bromo-2-(2-fluoropiridin-4-il)benzonitrilo 206-3 (42 mg, 0,16 mmol), cloreto de (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco (II) a 0,5 M 86-5 em éter (0,46 ml, 0,23 mmol), Pd(dba)2 (4,4 mg, 0, 008 mmol), Q- phos (10,8 mg, 0,015 mmol) e THE’ (1 ml). A mistura de reação foi borbulhada com azoto durante 1 minuto ΕΡ2403832Β1 e agitada a. 100°C durante 1 nora. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, todo o solvente foi evaporado e C) resíduo foi redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2SC>4 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eiuído com 2 0 % de acetato de etilo em hexa.no para dar 2-(3-ciano-4-(2—fluoropiridin-4-il)fenil)acetato de terc-butilo 206-5. MS m/z 313,2 (M + 1).
Etapa 3: Uma mistura de 2-(3-ciano-4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)acetato de terc-butilo 206-5 (35 mg, 0,11 mmol) e TF A (0,5 ml) em D CM (3 ml) foi agitado a temperatura ambiente durante 5 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo. O produto bruto, ácido 2-(3-ciano-4-(2-fluoropiridin-4-il) fenil) cicético 206-6, foi dissolvido em DMF(2 ml). 5-(pirazin-2-il)piridin-2-amina (23 mg, 0,13 mmol) e DIEA (98 uL, 0,56 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l~il)~ Ν,Ν,Ν',N'-tetrametilurónio (64 mg, 0,17 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. 0 solvente foi removido por meio de evaporação giratória. 0 produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar N- (5- (4-acetilpiperazin- 1-il)piridin-2-il)-2-(3-ciano-4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)acetamida 206. MS m/z 4 :11,2 (I 4 + ' i); lh RMN 40C ) MHz (m< sOD) δ 9,09 (s, 1H) 9, 0 i (s, 1H) , 8,66 (dd, 1H) , 8 ,52 (d, 1H) , 8,42 (dd, 1H) 8,32 (d, 1H) , 8,25 (d, 1H), Ί, 92 (d, 1H) , 7,81 (dd, 1H) 7,64 (d, 1H) , 7 , 52 (dt, 1H), 7, 28 (s, 1 H) , 3,93 (s, 2H) • Exemplo 51 N- (5-(4- acetilf >iperazin- 1 - i 1) p i ridin-2- il)- 2- (3-fluoro- -4- (2-fluor opiridi r\—4 — il)fe in.i 1) ace tamida ( 207) 145 ΕΡ2403832Β1 Bf-
2D7-1
Pd(PPtij)4
Na2C03 ToWHjO/EtOH 205-4
αζη'-^γ0^ o '
Ptf(d ba yCT -Q -Phos
TNF 86-5 207-5
Etapa 1: a um tubo vedado foram adicionados 4-bromo-2-fluoro-l-iodobenzeno 207-1 (600 mg, 2,0 mmol), ácido 2- fluoropiridin-4-ilborónico 205-4 (282 mg, 2,0 mmol),
Pd(PPh3)4 (116 mg, 0,1 mmol), Na2C03 (636 mg, 6,0 mmol), tolueno (2 ml),H20 (2 ml) e etanol (0,5 ml), A mistura de reação foi agitcida a 120 °C durante a noite. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados e ml) e extraído com orgânicas combinadas 0 resíduo foi purifi sílica gel e eluido para dar 4-(4-bromo- o resíduo foi redissolvido em água (5 acetato de etilo (8 ml x 3) . As fases foram secas em Na2SC>4, e concentradas, cado por meio de cromatografia flash em com 15 % de acetato de etilo em hexano 2-fluorofenil)-2~ fluoropiridina 207-3. MS m/z 270,1 (M + 1).
Etapa 2: a um tubo vedado foram adicionados 4-(4-bromo-2-fluorofenil)-2-fluoropiridina 207-3 (210 mg, 0,76 mmol), cloreto de (2-terc-butoxi-2-oxoetil) zinco(II) a 0,5 M 86-5 em éter (2,3 ml, 1,14 mmol), Pd(dba)2 (22 mg, 0,04 mmol), Q- phos (54 mg, 0,07 mmol) e THF (5 ml). A mistura 146 ΕΡ2403832Β1 de reação foi borbulhada com SLZoto durante 1 minuto e agitada a 100°C durante 1 hora. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, todo o solvente foi evaporado e o resíduo foi redissolvido em acetato de etilo, lavado com água e salmoura, seco em Na2S04 e concentrado até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel e eluído com 2 0 % de acetato de etilo em hexano para dar 2-(3-fluoro-4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)acetato de terc-butilo 207-5. MS m/z 306,2 (M + 1).
Etapa 3: Uma mistura de 2-(3-fluoro-4-(2- fluoropiridin-4-il)fenil)acetato de terc-butilo 207-5 (100 mg, 0,33 mmol) e TFA (0,5 ml) em DCM (3 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante 5 horas. Os solventes foram evaporados à secura sob alto vácuo. O produto bruto, ácido 2- (3-fluoro-4-- (2-fluoropiridin-4-il) fenil) acético 207-6 (50 mg, 0,20 mmol), foi dissolvido em DMF(2 ml), 1-(4-(6-aminopiridin-3-il)piperazin-l-il)etanona (53 mg, 0,24 mmol) e DIEA (174uL, 1,0 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)- N, N, ISU , N' -tetramet ilurónio (114 mg, 0,30 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase rever S 3. pa ZTcl dar N- (5- (4-a cet il P iperaz in- 1 - i 1) piridin-2- i 1) - 2 “ ( 3-fl uor 0-4- (2 -fluo ropi r i d i n - 4 - i D f eni 1) ace tamida 207. MS m/ z 45 2,2 (M : + 1) / n RMN 4 00 MH z (MeOD) δ 8,21 (d, 1H) , “Ί / ' f 96 í :a, 1H) , 7,88 (d, 1H) , d 5' 7~7, 51 (m, 1H), 7, 48- 7,45 (m, lí 1), 7,3’ 1 (dd, 1H) , 7,3 n - /, 21 (m. 3H) , , 3,75 (s, 2 H) , 3, 68 ( L- Ϊ Zn.) , 3 , 63 ( t, 2 H), 3 f 14 (t, Z ri. ), 3, 0 9 í t- J J \ L- ! 2H, J = 5 ! 2 Hz) f 3 ,09 (s , 3H) 147 ΕΡ240383261
Exemplo 52 ΕΡ240383261 2- (2 ' -.f iuoro-2,4 ' -bipiridin~5-.il) —($- ( (o- (pirazm-
208-1 205-4
DCC, 4-DMAP EMF 208-2
Etapa 1: a um balão contendo 2-(6-cloropiridin-3-il)acetato de etilo 208-1 (300 mg, 1,5 mmol), ácido 2- fluoropiridin- 4-ilborónico 205-4 (318 mg, 2,25 mmol),
Fd (OAi_) 2 (1 / mg, 0, 0 75 mraoi; , 2—o.icic.lohexilfosfino—2 ' , 6 ' — . U0"C durante 10 horas. Após ser a mistura foi dimetoxibifenilo (62 mg, 0,15 mmol), k3PQ4 (800 mg, 9 mmol) sob árgon foi adicionado 2-butanol (1,5 nil) A mistura de reação foi agitada a arrefecida até a temperatura ambiente, dj_luíaa com acetato de etilo, lavaaa com água e salmoura seca em Na2S04, e concentrada até a secura por meio de evaporação giratória. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluído com 40 % de acetato de etilo em diclorometano para dar 2-(2'-fluoro-2,4'-bipiridin-5-il)acetato de etilo 208-2 como um amarelo. MS m/z 261,1 (M + 1).
Etapa 2: Uma mistura de 2-(2'-fluoro-2,4'-bipiridin-5-il) acetato de etilo 208-2 (93 mg, 0,36 mmol) e NaOH (.57 mo 1,4 3 mmol) em THE (0,5 ml) e água (0,5 ml) foi agitada a 65°C durante 3 horas. Após ser arrefecida até a temperatura 148 EP24G3832B1 ambiente, a mistura foi tratada com solução a 3 N de HC1 aquosa para ajustar o pH ao redor de 3, e então agitada durante 15 minutos. A solução resultante foi evaporada a secura e o sólido restante foi extraído com 20 % de metanol em acetato de etilo. A porção orgânica foi concentrada para dar ácido 2- (2'-fluoro-2,4'-bipiridin-5-il) acético 208-3 como sólido branco pálido. MS m/z 233,1 (M + 1).
Etapa 3: Uma mistura de ácido 2-(2!-fluoro-2,4 bipiridin-5-il) acético 208-3 (42 mg, 0,18 mmol), í 31 mg, 0 ,18 mmo1),1 C-! -> 0,22 mmo1) e 4- mmol) em . DMF (0,9 ml) durante 10 horas. 0 (pirazin-2-il)piridin- 2-amina 86-3 diciclonexilcarbodiimida (45 mg, (dimetilamino)piridina (4 mg, 0,03< foi agitada a temperatura ambient produto bruto foi filtrado e o material filtrado foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2- (2 fluoro-2,4'-bipiridin-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2- il ) ac etamida 208 como sólido branc o. MS m/z 387,1 (M + D XH RMN 400 MHz (DMSO- -de) δ : 11,14 (S / 1H) , 9, 31 (d, 1H) 9, 11 (d, 1H) , 8, 73-8, 71 (m, 2H) , 8, 62 (d, 1H) , 8 ,52 (dd 1H \ ) , 8,36 (d, lí 1) , 8, 23-8,17 (m, 2H) , 8,06 -8, 02 (m, 1H) 7, 95 (dd, 1H), 7, .82 (s , 1H), ' 7, 64 (s, lf i), 3, ,94 (s, 2H) .
Exemplo 53 N—(5—(4—acetilpiperazin—1—il)piridin—2—il)-2-(2'-fluoro-2,4'-bipiridin-5-il)acetamida (209)
HATU/DIEA DMF
composto 209 etapa
A ama mistura, de ácido 2-(2'-fluo.ro- 149 ΕΡ2403832Β1 oipiridin 5 il) acético 208-3 (42 mg, 0,18 irimol), 1-(4-(6- ΕΡ2403832Β1 imi nopiri cli n - -1)Piperazin-1-il)etanona 111-4 (4í mg, >,18 mrnoi) , nexaf.luorofosfato de o-(7-azabenzotr.i.azol-l-il) -N, N, N' , N'-tet. ramet ilurónio (HATU, 68 mg, 0,18 mmol) foram aaicionados uMF (1 ml) e diispropiletil amina (DISA, 0,15 mi, 0,9 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O produto bruto, uma solução limpa de DMF, foi submetido diretamente for HPLC de fase reversa para dar N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'-fluoro-2,4'-bipiridin-5- il)acetamida 209 como sólido branco. MS m/z 435, 2 (M + 1); RMN 400 MH z (DMSO- d6) δ 10,65 (s, 1H) , 8,69 (d, 1H), 8,36 (d, 1H) , 8,15 (d, 1H), 8,05-8,02 (m, 2H) , 7 , 94-7, 90 (m, 2H) , 7,81 (s, 1H), 7,42 (dd, 1H) , 3,83 (s, 2H) , 3,57-3,54 (m, 4H) , 3,15-3,13 (m, 2H) , 3, 09-3, 06 (m, 2H) , 2,03 (s, 3H) .
Exemplo 54 2— (2 ', 3-difluoro-2,4 ' -bipiridin-5-il) -N- (5- (pi.ridazin-3-il)piridin-2-il)acetamida (210)
Etapa 1: A uma mistura de acido 4 ! —r.-; p-j ridí n—5 —il) acético r0o —6 (,25 2- (2 ' , 3-d.if luoro- ' -mg, 0,1 mmol), 5-(piridazin-3- il)piridin-2-amina 145-3 (17 mg, 0,1 mmol), foi agitada a temperatura ambiente hexafluorofosfato de o-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N’-tetrametilurónio (HATU, 38 mg, 0,1 mmol) foram adicionados DMF (0,5 rnl) e diispropiletil amina (DIEA, 0,05 ml, 0,3 mmol) e a misruia 150 ΕΡ2403832Β1 durante a noite. A solução de DMF bruta foi diretamente purificada por meio de HPLC de fase reversa para dar 2- (2 ’, 3-d.i.f luoro -2,4'- -bipiridin- - 5 - i 1) -N- (5 - (Pi .ridazi n-3- il )piridi η-2-i 1) acei zamida 210 como sólido branco . MS m/ z 4 0 5,1 (M + 1) ; xh RMN 4 0 0 Mi íz (DM ISO- d ) δ 11, 18 (s, 1H) , 9, 23 (d, 1H) , 9, 14 (d, 1H) , 8, 61 (m, 1 -H) , 8,5 6 (dd, 1H) , 8, 41 (d, 1H) , 8,29 (dd, 1H) , 8,23 (d-? 1-H) , 7, 95 (dd, 1H) , ' f 91-7,86 (m, 1H) , 7,81 (dd, 1H) , 7, 65 ( s , 1H) , 4,02 í s,
Exemplo 50 N—(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-ciano-4- (2-fluoropiridin~4~il)fenil)acetamida (211)
Etapa 1: ácido 2-(3-ciano-4-(2 —f luorop.iridin-4-il)fenil) acético 206-6 (50 mg, 0,20 mmol) foi dissolvido em DMF' (2 ml). 1-(4-(6-aminopiridin-3-il) piperazin-1-il)etanona (52 mg, 0,23 mmol) e DIEA (170 uL, 0,98 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν’,N'-tetrametilurónio (111 mg, 0,29 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. 0 solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por me i 0 de HPLC de fa Se rever sa para dar N-(5 -(4- acet i lpiperazin-1-il)piridin-2-il) -2-(3- cian 10—4 — (2- f 1 u 0 r op i r i di n - 4 - i 1) f e n i 1) acetamida 211. MS m/z 459,2 (M + D); RMN 400 MH z (DM [SO~dg) δ 10, 64 (s, 1H), 8,41 (d, 1H) , 8,05 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7, 91 (d, 1H), 7,81 (dd, 1H) , 7,71 (d, 1H) , 7,62 (dt, 1H) , 7,49 (s, 1H) , 7,42 (dd, 151 ΕΡ2403832Β1 1Η) , 3,85 (s, 2H) , 3,59-3,54 (m, 4H) , 3,15 (t, 2H) , 3, (t, 2H) , 2,04 (s, 3H) .
Exemplo 56 2- (3-fluoro-4- (2 — fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5-(pirazin-2-i1)ρ i ri di n-2-i1)acetami da (212)
HATU/DÍ EA/DMF
Etapa 1: ácido 2-(3-fluoro-4-(2 — fluoropiridin-4-il)fenil) acético 207-6 (50 mg, 0,20 mmol), foi dissolvido em DMF (2 ml), 5-(pirazin-2-il)piridin-2-amina (41 mg, 0,24 mmol) e DIEA (174 uL, 1,0 mmol) foram adicionados à solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametilurónio (114 mg, 0,30 mmol), A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante sl noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2-(3-fluoro-4-(2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5- (pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida 212. MS m/ z 404,1 (M + 1) ; 1H RMN 4 00 MHz (DMSO-dg) δ 11,10 (s, 1H) 9,31 (d, 1H), 9,11 (dd, ] - n ) f 8,' 73-8,71 (m, 1H) , 8,63 (d 1H) , 8,52 (dd, 1H), 8,34 ( H \ f 1H) , 8,21 (d, ipi ί 7n-7 ^ ± XX } f , f t W tf'-' (m, 2H) , 7 ,43-7,34 ( m, 3H) t 3 , 8 9 (S, 2H).
Exemplo 57 2- (3-fluoro-4 - (2-fluoropiridin-4-il)fenil)-N-(5-(piridazin- 3- il)piridin-2-il)acetamida (213) 152 ΕΡ2403832Β1
Etapa 1: ácido 2-(3 — fluoro-4-(2 — fluoropiridin-4- il)fenil) acético 207-6 (37 mg, 0,15 mmol), foi dissolvido em DMF (2 ml), 5-(piridazin-3-il)piridin-2-amina (31 mg, 0,18 mmol) e DIEA (131uL, 0,75 mmol) foram adicionados à
solução antes de hexaflurofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,Ν',Ν'-tetrametilurónio (86 mg, 0,23 mmol). A mistur ιοί temperatu] ambiente dur; it ite iqi t
O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto b ruto foi purificado por mei .0 de HPLC de fase reversa para dar 2-(3 -fluoro-4 - (2-fluoropi rid in-4- i 1) f e nil) - -N- (5- (pir idazin-3-il )piridaz i η-2-il) a cetamida 213. MS m/z 4 0 4,2 (M + 1)); ]-H RMN 400 MH z (DM :so- d6) δ 11,11 ( S f 1 m 9 ? ? (dd, 1H), 9,13 (dd, 1H), 8,55 ( dd, 1H) , 8,34 (d, 1H) , 8,29 (dd, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,02 (d, 1H) , 7,83- 7,78 (m, 1H) , 7,71-7,65 (m, 1H) , 7,60-7,57 (m, 1H) , 7, 44- 7,35 (m, 3H) , 3,90 (s, 2H ) .
Exemplo 58 2- (3-ciano-4- (2-tluoropyidin-4-il) fenil) -N- (5--- (piridazin-3- i1)ρ i r i di n-2-i1)a cetami da (214)
Etapa 1: ácido 2--- (3-ciano-4-(2 — fluoropiridin-4- il)fenil) acético 206-6 (38 mg, 0,15 mmol), foi dissolvido em DMF (2 ml), 5-(piridazin-3-il)piridin-2-amina (31 mg, 153 EP24G3832B1 0,18 mmol) e qtea (131uL, 0,75 mmol) foram adicionados à solução ariLes dg hexaflurofosfato de O- (7~azafenzotnazoi-1-ii)-Ν,Ν,Ν',N'-tetrametilurónio (86 mg, 0,23 mmol). A mxstura foi agitacja a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase rever sa p. ara da .r ; l-(3 - c i ano-4 N- (5- (pir I. d <3.2 X pj -3- - i 1) p i r idin- 411,2 (M + D; 1 RMN ' i o o m: 9, 23 (dd, 1H) , 9, 13 (d, 1H) , 8,30 (dd, 1H) , 8, 23 (d, 1H) , 2H) , 7,74 \ ^ l 1H) , 7,63 (dt, 2 H) . (2-fluoropi r i di n-4-i1 .) fen il) - -il) acetamida 214. MS m/z z (DMSO-de) δ 11,14 (s, 1H) , 8,56 (dd, 1H) , 8,42 (d, 1H) , 1 00 ** í— 1X3 τί CN o 00 7,7 8 (m, 1H) , 7,50 (s, 1H) , 3, 97 (s,
Exemplo 59 N-(6-(3-fluorofenil)piridin-3-il)-2-(S,S-dioxo-6-tiomorfolinopiridin-3-il)acetamida (219)
ΐ: I κ SyJfAyíSA ...... r~\ % Pi tsprm* A,, jr* OÍU-íS^d
Etapa 1. A um balão de fundo redondo foram adicionados 154 ΕΡ2403832Β1 2-cloro-5-nitropiridina (3,2 g, 20 mmol), ácido (3-j.j.uoroienil) borómco (2,8 g, 20 mmol), Pd(PPh3)4 (0,46 g, 0,4 mmoi), tolueno (60 ml), etanol (20 ml) e Na2C03 (2 M, 2u ml) , A mistura o.e reaçao foi borbulhada com azoto durante 2 minutos e submetida a refluxo a 110°C durante 2 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a rro.suura de reação foi diluída com acetato de etilo (500 ml) e lavada com solução saturada de NaHC03 aquosa e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2S04 e concentrada até a secura por meio de evaporação giratória. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel, eluíao com 50 % to 100 % de acetato de etilo em hexano 2-(3- fluorofenil)-5-nitropiridina como sólido amarelo. MS m/z 219,1 (Μ -í- 1) .
Etapa 2. A um balão de fundo redondo foi adicionado 2-(3-fluorofenil)-5-nitropiridina (3,8 g, 17 mmol), Pd/C (0,5 g) e metanol (100 ml). A reação foi agitada durante 4 horas sob atmosfera de hidrogénio por meio da união de um. balão de hidrogénio. A reação foi esguichada com azoto e o sólido foi removido por meio de filtração. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória para dar 6--(3--fluorofenil)piridin-3-amina 219-1 como sólido castanho. MS m/z 18 9,1 (M + D .
Etapa 3. Uma mistura de tiomorfolina (1,03 g, 10,0 mmol), 5-bromo-2-iodopí ridina. (3,69 g, 13 mmol), Pd2 (dba) 3 (200 mg, 0,2 mmol), xantphos (510 mg, 0,6 mmol) e t-BuONa (1,44 gf 15 mmol) em tolueno (50 ml) foi agitado sob árgon a 98 °C durante 3 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a m ± s l. u a roi filtrada a t.o ve a de celite e lavada foi evaporado e sílica gel em hexanos como com acetato de etilo. O material filtrado o resíduo foi submetido a cromatografia em coluna com 0-5 % de acetato de etilo em eluente para dar 4-(5-brom.opirid.in-2- 155 EP24G3832B1 EP24G3832B1 z como solido. il)tiomorfolina 219- 4- (5 -bro mopir i diri 2- mmo) U , ma lonat o de (102 mg, 0,46 mmo1 \ } í mg, 0, 9 mmol) e 4- L.. (4 5 ml) foi agitada ser arre fecida até a f ilt rada através de
Etapa 4. Uma mistura de il)tiomorfolina 219-2 (2,37 g, 9,1 dietiio (z,U4 g, 12,8 mmol), Pd(OAc) .Oiienil-z-ii-ai-terc-but ilf osf ino (2 BuONa (-!.,7 6 g, 18,3 mmol) em. toluer soo árgon a 9«°c durante 1 hora. Apc temperatura ambiente, a mistura fo celite e lavada com acetato de etilo. 0 material filtrado ιοί evaporado e o resíduo foi submetido a cromatografia em srlxca gel em coluna para dar 2-(6-tiomorfolinopiridin-3-il)malonato de dietilo 219-3.
Etapa 5. 2- (6-1iomorfolinopiridin-3-il)malonato 219-3 (564 mg, 1,67 mmol) foi agitado com NaOH (334 mg, 8,35 mmox) em dioxano (5 ml) e água (5 ml) durante 4 noras. A solução de HCr foi adicionada para ajustar o pH ao redor de 1 e a mistura de reação aquecida a 88°C durante 1 hora. Então Na2C03 foi utilizado para ajustar o pH até ao redor de 4 antes dos solventes serem evaporados. 0 resíduo foi extraído com acetato de etilo e a extração orgânica seco em Na2S04 e concentrado por meio de evaporação giratória. A purificação com HPLC de fase reversa proporcionou ácido 2— (6-tiomorfolinopiridin-3-il) acético 219-4.
Etapa 6. Uma mistura de ácido 2-(6-tiomorfolinopiridin-3-il) acético 219-4 (92 mg, 0,39 mmol), 6-(3-fluorofenil) piridin-3-amina 219-1 (73 mg, 0,39 mmol), HATU (162 mg, 0,43 mmol) e DIEA (104 ml, 0,6 mmol) em DMF (i,0 mi) foi agitada a temperatura ambiente durante a noite, nntao foi redistribuída entre água (30 ml) o acetato de etilo (4J ml) . A fase orgânica foi seca em Na2S04 e concentrada por meio de evaporação Giratória. Cromatografia em sílica gel em coiuna (com acefato de et ilo/hexa.nos de 156 ΕΡ2403832Β1 1:10 a 2:1 como eluente) deu N-(6-(3-fluorofenil)piridin-3-il) ---2--- (6-tiomorfolinopiridin-3-il) acetamida 219-5 como sólido. _din -3 -il) -2- (6- (11M [ mg, Q N) CO O O 3. A m ist ura te a noi te · A (30 ml) , lavada 4 e c once nt r ada f o i s ubme t id o a i de LI N- (6- (3- -2- ( S, S-dioxo -6- SÓJ Lido. I ylS m/ z 1 fi r- 3 (s, -1 H) , H) , 7 QQ ! ! J (d , 1 ) (m i 1 H) , 7 ; 22 3, 61 (s, Á H) ,
Etapa 7. N-(6-(3-fluorofenil)p. tiomorfolinopiridin-3-il)acetamida 219-5 (114 mmol) foi tratada com mCPBA em DCM (2 ml) foi agitada a temperatura ambiente dui mistura foi diluída com acetato de etili com solução de Na2C03 a 5 %, seca em Na2SO< por meio de evaporação giratória. O resíduo purificação por HPLC de fase reversa i fluorofenil) piridin-3-il)- tiomorfolinopiridin-3-il)acetamida 219 como 396,3 (M + 1); G RMN 400 MHz (DMSO-d6) δ 8,82 (d, 1 H) , 8,16 (dd, 1 H) , 8,11 (d, 1 H) , 7, 92-7, 80 (m, 2 H) , 7,60 (dd, 1 H) , 7,5( (m, 1 H) , 7,02 (d, 1 H) , 4,06-4,01 (m, 4 H) , 3,61 (s, 3, 10 -3,05 (m, 4 H) .
Exemolo 60 2—(2'—fluoro—3—metil—2,4'—bipíridín—5—il)—N—(5—(píridazin— F N ll í li 1 + o O DIC F N íl 1 ! O fé' ll N . 1 H;,N '^OH 2 ""''ν'" H jj 193 -2 145- -3 Composto 221 À mistura oe 3. C.1QO 2 - (2'-fluoro- 3-metil- -2,4'- bipiridi η-5-il)acét: ico 193-2 (25 mg, 0,1 mmo 1) e 5- (piridazin- 3-il)piridin-2-amina 145-3 (17 mg, 0,1 mmol) em DCM (1 ml) foi adicionada N,N'-Diisopropilcarbodiimida (22 157 ΕΡ2403832Β1
ml, 0,15 mmol) a temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 24 horas. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo foi dissolvido em DMSO e então purificado por meio de HPLC de fase s v 0 r í sa para da r 2 - (2 ' -fluoro- 3-meti1-2 r 4 '- bipi ridin- -5- il) - -N- (5- (pi razi .n- -2- il) piridin-2 -il)acetami da 221 como só lido branco. MS m / z 40 + nZ-t 1—1 1—1 1) ; ΧΗ RMN 400 MH z (DMSO -d?, ) δ 11,09 (s , 1H ) , 9 t 17 (dd, 1H) , 9,07 (d, 1H) , 8, 51 (dd, 1H) , 8,4 6 (d, 1H) ¥ 8, 28 (d, 1H), 8,25 (dd, 1H) , 8, 18 (d, 1H ), 7,76 (m, 1H) f 7, 71 (d, 1H), 7,51 (m, 1H) , 7, 31 (s, 1H) , 3, 83 (s, 2 H) , 2, , 31 (s 1, 3H) .
Exemplo 61 N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-metil-2'-(trifluorometil)-2,4 ' -~bipiridin~5-il) acetamida (222) ci
148-1
N- (5- (4-32 mmol), A um tubo vedado foram adicionados acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)~2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il) acetamida 148-1 0-23 mg, 0, ónico (61 mg, 0, 2,6-Dimetoxi-l,1 mg, 0,032 mmo 1) ácido 2- (trifluorometil) pirid.in-4-iíbor mmol), Pd(OAc)2 (3,6 mg, 0,016 mmol), bifenil-2-il)diciclohexilfosfino (13, 0 0 tubo e os seus conteúdos foram Ap ós tol u e n 0 de s g a s e i f i c a d 0 (1,0 a mx s tu ra foi agitada a 12 0 0 C ar refeciment .0 até a temper atura deitada em água e extraída com 3) . As fa ses orgânicas combi nadas e concentradas. 0 resíduo foi K3PO4 (202 mg, 0,95 mmol). então purgados com azoto, ml) ter sido adicionado, durante a noite. Após o ambiente, a mistura foi acetato de etilo (8 ml x foram secas em Na2S04, 158 EP24G3832B1 purificado por meio de HPLC de fase reversa para. dar N-(! (4-acetilpiperazin-l-il) piridin-2-il) -2- (3--metil-2 ' - (trif luorometil)-2, 4 1 -1 )ipiridi n-5- i1)acetamida 222 • MS m/ z 4 98, 8 (M+l);ΧΗ RMN 400 MHz (CD 'Cl3) δ 8,81 (d, 1H) , 8, 51 (d, 1H) , 8,35 (s, 1H) , P w f 11 (d, 1H) , 7,91 (s, 1H) , 7, 89 l o \ ^ í 1H) , 7,68-7,64 (m, 2H) , 7, 30 (dd, 1H), 3,80- -3,75 (m u 4H) , 3, 63 (t, 2H), 3,14 ít , 2H) , 3,11 (t, 2H), 2,39 (s f 3H) , 2,14 (s, 3H) . Exemp lo 62 2-(3-metil-2'-(trifluorometil)-2,4'-bipiridin-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (223)
A um tubo vedado foram adicionados 2-(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il) acetamida 86--8 (85 mg, 0,25 mmol) , acido 2- (trif luorometi 1) piridin-4-ii.borónico (48 mg, 0,25 mmol), Pd(OAc)2 (2,8 mg, 0,013 mmol), 2,6-Dimetoxi-l,1'-bifenil-2-ii)diciclohexilfosfino (10,2 mg, 0,025 mmol) e K3P04 (159 mg, 0,75 mmol). O tubo e os seus conteúdos foram então purgados com. azoto. Após tolueno desgaseificado (1,0 ml) ter sido adicionado, a mistura foi agitada a 10U°C durante 2 horas. Após o arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura foi deitada em água e extraída com acetato de etilo (8 ml x 3) . As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO<j. e concentradas. O resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa para dar 2-(3-metil-2' - (trifluorometil)-2,4'-bipiridin-5-il)(5-(pirazin-2- ii)piridin-2-il)acet im ide '2 3
MS m/z 4ου, 8 (M+l) ; H RMN 159 ΕΡ2403832Β1 400 MHz (CDC13) δ 9,01 (d, 1H) P f w r 95 (s, 1H) , 8, 81 (d, 8,76 (s, 1H), 8, 63 (dd, 1H) , LO CO CO ,51 (m, 2H), 8,3 2H), 7,89 (s, 1H), 7,69-7,65 (m, 2H ) , 3, 84 (s, 2H) , ÍS, 3 H ) . Exemplo 63 N—(5—(4—acetilpiperazin—1—il)piridin—2—il)—2—(4—ciano—3—(2— metilpiridin—4—il)fenil)acetamida (237)
• (CF3so2)2o- ΌΗ
NEt3 DCM
237-1
JUJ f*=\ /-\ / H2N—^ ff— HAÍU/DIEA , „ pd(ppm)·. N + Zn(CN[2 -2—*, DMI;
SnBu, 237-3
HATU/DIEA , DMF
237-2
Composto 237
Etapa 1. A uma mistura de ácido 2- (3-cloro-4- hidroxifenil) acético (560 mg, 3, 00 mmol), anidrido trif luorometanossulf ónico (888 mg, 3,15 mmol) em DO! (30 ml) foi adicionado trietilamina (1,1 mil, 8,0 6 mmol) e a misture 5 θ' η +— ^ /“N ,·“\ ig 11 ο.ο.o :a£ a temperatura ambiente. Ei ιοί lavada com solução de HC1 (IN, 30 ml x 2), seca em Na2S04 e concentrada por meio de evaporação giratória para dar ácido 2-(3-cloro-4-(trifluorometilsulfoniloxi)fenil) acético 237-1 (749 mg, bruto) que foi utilizado diretamente para a reação sem purificação adicional.
Etapa 2. Uma solução de ácido 2-(3-cloro-4-(trifluorometilsulfoniloxi)fenil) acético 237-1, 1-(4-(6- 160 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 111-4 (112 mo; aminopiridin- 3-il) piperazin-l~i]g e^anona 0,51 mmol), HATU (232 mg, 0,61 mmol) e DIEA (0,26 ml, 1,49 mmol) em DMF (2,0 ml) foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A solução foi submetida diretamente a HPLC de fase reveria para. dcLr trifluorometanosuifonato de 4 — (z — (5 - (4—a c e r i 1 i p e r a z α n—1 — ir) p i r i οι ί ~ 2 ~ i l am i η o) —2 — oxoetil) — 2 — clorofenilo 237-2. utapa 0. Uma mistura de trifj_u0rometanosulfonato de 4-(2- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin_2_ilamin0) ~2-oxoetil)-2-clorofenrlo 237-2 (6b mg, 0,125 mmol), Zn(CN)2 (30 mg, 0,255 mmol), Pd(PPh3)4 (l4 mgg 0,012 mmol) em DMF gj,6 ml) for agxtada a 80 C sob árgon durante 96 horas. 1\ρ03 ser arrefecida aoé a temperatura ambiente, foi frltrada através ae celite, lavada com acetato de etilo, e concentrada por evaporação de solventes. O resíduo foi submetido a purificação por HPLC de fase reversa para dar N- (5- (4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-cloro-4- cianofenil)acetamida como sólido 237-3.
Et apcL
Umé mistura de N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(3-cloro-4-cianofenil)acetamida como sólido 237-3 (17 mg, 0,043 mmol), 2-metil-4- (tributilstanil) piridina (24,5 mg, 0, 064 mmol), Pd(PPh-,),a (5 mg, 0,0043 mmol) em DMF (0,6 mi) foi agitada a 118°C sob árgon durante a noite. Após ser arrefecida 3-1-é a temperatura ambiente, foi filtrada através de celite enquanto lavada e diluída com acetato de etilo (3η Rii) Então foi lavada com água (40 ml) e extraída com hci a 0 5 N (30 ml) . Após a extração aquosa ter sido tratada com Na2C03 para ter o pH ajustado até ao redor cie ’ aquosa foi extraída com acetato de etilo (3q mq fases orgânicas combinadas foram secas a fase X 2) . As em concentradas por meio de evaporação giratória e
Na2S04, resíduo submetido a cromatografia em sílica gel em c:
oiuna com MeOH 161 ΕΡ2403832Β1 ΕΡ2403832Β1 \L ±-a cet ilpipe £3. me ;t i lpi ridin- 4 — 4: 35, 2 ( M + 1) F [Cif 1 í n x 1 / F ^ f 02 7, . 53 ___H ! r 4 7 (m, n .j f 82 (s, 2 h 0 , 3, 16 — ^ --7 ΐ 0 8 (m, 4 H RMN 400 M :hz (cdci3) δ 8,62 (d, 1 H) , 8,08 (bs, 1 H), 7, 91 (d, 1 H) , 7,79 (d, 1 H), H), 7,34 { Ι'Λ O f 1 H) , 7,31- 7,26 (m, 2 H) , -3,75 (m, 2 Η) , 3, 65-3, 60 (m, 2 Η) ,
Exemplo 64 2- (2 !-metil-2, 4'-bipiridin-4-íl)-Ν-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)aeetamida (238)
Et cLp a 1: a um bale io contendo 2- (2-clori opiridi n-4- 11 ) 3- cetat o de i net 1 .lo 238-1 (1, 00 g, 5 , 3 8 rnrno 1) , 2-meti 1-4- (t r 1 but 11 st ani ] -) pi ridina (Z, r 0 b Cf f 5 ,38 mmol), Pd (PI 3h3) 4 (5 94 mg, U F 54 n imo 1 ) sob ár gon foi adio :ionado DMF (15 ml ) · A mi st ura de reação foi ag itada a 120 °C durante 10 ho ras , Ap 0 ^ ser ai :ref ecida até a temperatura ambiente, a mis tura f 0 i dilu 3 C :om acetato de etilo, 1.0. v a d 3. c om águ a θ S cl lm oura, S6Câ em Na2S04, e concentrada até a secura por me io de svap O £ clÇ3O Cj'l £ atória. 0 material bruto foi pu ri ficado por meio de cr omatografia flash em sílica gel, Θ .1 u 1 do com 5 % de metano em diclorometano para dar 2- (2 ' - 162 ΕΡ2403832Β1 metil- 2,4 ' -bipiridin-4-il) acetato cie metilo 238—2 como óleo laranja escuro. MS m/z 243,1 (M + 1).
Etapa 2: Uma mistura de 2-(2'-meti1-2,4!-bipiridin-4-il)acetato de metilo 238—2 (621 mg, 2,56 mmol) e NaOH (409 mg, 10,24 mmol) em 1,4-dioxano (6 ml) e água (6 ml) agitada a 80 °C durante 3 horas. Após ser arrefecida até a temperatura ambiente, a mistura foi tratada com solução a 3 N de HC1 aquosa para ajustar o pH até ao redor de 4, e então agitada durante 15 minutos. A solução resultante roi evaporaaa a secur; e o sólido restante foi extraído com 20 foi de metanol em acetato de etilo. A extraçao orgânica concentrada psLra dar ácido 2-(2 ! -metil-2,4 ' -bipiridin-4 i-U1 acético 238-3 como sólido branco pálido. MS m/z 229,1 (M +
Etapa 3: Uma mistura de ácido 2-(2,-metil-2,4'-Pipiridin 4 iD acético 238-3 (46 mg, 0,2 nunol), 5-(pirazin-2-il)piridin- 2-amina 86-3 (34 mg, 0,2 mmol), 1,3-diciclohexilcarbodiimida (50 mg, 0,24 mmol) e 4-(dimetilamino)piridina (4 mg, 0,04 mmol) em DMF (0,9 mi) foi agitada a temperatura ambiente durante 10 horas. O produto bruto foi filtrado para remover o insolúvel e o material filtrado foi submetido diretamente para purificação por HPLC de fase reversa para dar 2-(2'-metil-2,4'-bipiridin- 4-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2- il) a· cetamida 238 como CG O i—1 1-1- q, O branco. MS m/z 383,1 (M D; 1 H RMN 400 MHz (DMSO- de) δ 1 .1, 14 (s, 1H), 9,30 (d, ih), ^ > ,11 (dd, 1H), 8, 73' -8,71 (m, 1H) , 00 7 (d, 1H), 8,62 (d, 1H), 8,5 '6 (d, 1H), 8,52 (dd, 1H), 8,21 (d, 1H) , 8,09 (s, 1H), 7,93 (S, IR), 7 ,84 (dd, 1 P' 7,45 (dd, 1H) , 3,95 (S, 2H) , 2,56 (s, 311) .
Os compostos exemplificados são sumarizados no Quadro 1, com valores de IC50 medidos usando ensaios de repórter
Wnt-Luc. 163 ΕΡ2403832Β1
Quadro 1
Comp. Estrutura MS (m/z) (M+l) tempo de retenção de LC (min) IC50 (nM) 1 χ/ I H 485,30 1,465 1 f 5 H 398,2 1,48 3 \ O Çj^ zyw Ον z Z^vJ 376,10 1,445 1,6 4 r? H>1 Γ*Ν sAn^o H 385,2 1,342 774 5 v Ti u ^Vh / 0 N"~\ f~° 426,12 1,730 481,3 164 ΕΡ2403832Β1 6 ΛΟΟ-* Ο7 \=5V /\V—. 390,12 1,581 0,5 7 TÍ^ ^1 ! H <ν. N C T YH / 0 N'O“° 427,12 1,573 405, 9 8 ,0 q/ Ύ“νη O çy N 424,07 1,195 13, 8 9 F-'-rí^V"SK ! /V-NH Υ-λ o' /=\ \_) Q 364,08 1,526 18,6 10 /=N M vP" fPY Y~NH 346,09 1, 487 5 81,4 165 ΕΡ2403832Β1 11 ° Q_ N 377,10 1,361 20,0 12 0 {~y~- b- \rrrrfg 404,14 1,562 2,4 13 ^°'swX5**s UL/“Nj>L Q K \=N 391,12 1,372 15,1 14 0 Q V-n (/ ^ IS3 391,12 2,098 54,9 15 0 S"3\ N=\ ΙμλΗ} H 373,10 0,92 4 669 16 fl ^'Λ/^ν Η 373,10 1,203 110,6 166 ΕΡ2403832Β1 17 (~\-~ \=N 404,14 1,552 CO 18 N _/ H 387,12 1,590 22,2 19 fj^N H v—i O ---3-1 CO 1,45 211,1 20 /=N yj~~ N—/ o 0 FV*'Y'S\ ' k^JL, NH 379,10 1,528 114, 9 21 H 340,14 1,258 834,8 22 -^^''-V''^ÍSN·'' S !| | tf—NH 0' )=N \J (\~- \=N OQO 11 ^ -* ~ f — — 1,515 1243 167 ΕΡ2403832Β1 23 >v \=N 391,12 1,454 34,6 2 4 XXanaVQ H 400,14 1,777 5,0 9 ^ ^UJi.x>-o H 386,12 1, 686 19, 5 26 ''''''^^ 0 N<:í,vV^i^ H 380,17 1,717 ✓'9 ί '"J r -t 2 7 N·^ 0 L^v^«/9vv H U 380,17 2,518 8 0 6, 6 28 N \_J~~ f~\ Fy°'-19''N-'-s, y~^ F 1 l! /}—NH F 444,09 1, 988 505,4 29 H 386,12 1, 641 Ί Q C, .1. 0 , .> 168 ΕΡ2403832Β1 30 rw \==Ν 406,11 2,051 19,0 31 /=Ν / S ^ 1 |í —NH N 404,14 1,57 6 28,0 32 Ν'^ o S'A__ /=\ H 400,14 1,776 16,0 33 H Δ. ' Ç· 1 4 1,722 19, 4 34 "^XIIXWf Λ_^Γ^Ρ H 404,12 1,773 92,3 35 N^ 0 V J-L 3¾ \ v— f H \ F 422,11 1, 857 24,7 3 β N J0) H 380,17 1,916 <0, 11 169 ΕΡ2403832Β1 ο η •j / η, ^ι Η 36 /,15 1, 934 28 38 Η 394,18 1,441 0 r 85 39 Αλνα/ Η 41 0 1 p 1,591 1,4 40 Ν^Λ ^ τΑ Α-Υ^ 0 N^jjA5^ Η 410,18 1,508 92,9 41 Ν^Ι ^γ°\ Η 410,18 1,606 0,88 42 jCjL 0 0^λνλΑ Η 381,16 1,747 4,0 43 Ν^, Ν<ίΓ'^|| ΑΑγ^ 0 N^yAA H 381,16 1,016 4,7 44 F ! H Γ 454,11 2,086 2,5 170 ΕΡ2403832Β1 45 Η 394,18 1,635 Γ\ Q ''J [J 1 b / 46 F fJ[ η F Ν Υ^]ι ο Ν 448,16 1, 838 0,68 47 Ν^| f j] •-''''Ιΐ^ 0 Ní?rV^:^ Η 381,16 0,892 0,07 48 f^N IAanaJ Η 381,16 0,899 2,8 4 9 Q Η 381,16 1, 470 0, 14 50 Q ííSÍ?Tí^ Μ^Λ XJ Η 379,17 2, 086 0,24 51 Ν·^ jf *1 ® Ν ιΐ Η 381,16 1,392 <0, 14 52 ΑΧρ, ρ *»γζ) ^Α^κ,Λ^Ν Η 381,16 1,53 5,5 171 ΕΡ2403832Β1 53 H 355,15 1,394 0, 62 54 N^i] A ν^Λ^χ 0 H 367,15 1,296 1,6 55 H 398,16 1,594 0,89 5 6 o ^•^íx^\í^~v'p H 398,16 1, 651 <0,0 9 57 <'''"^Ϊ5^^ 0 AAANÃ^ H 416,24 0,764 40, 3 58 fA) ,ΑχΑχχ, 0 N1Af’N's^',,í', kXXNÃJ H 417,22 1, 015 5 65,2 5 9 N^ r^S ^lAU9nXj' H 380,17 0,935 <0,11 172 ΕΡ2403832Β1 60 ))—NH ζΛ N-N 365,08 1,703 OD O :-\ 61 p N";ÍXs||xJ<5^ kAJ6NAN4 H 381,16 1,436 16,0 62 11 i N N ^^ \ r 390,12 1,572 18 8,8 6 3 Λ 0 H 367,15 1,004 0, 948 64 N'ííVPi kAAN-M H 368,14 1,708 0 f 6 8 65 N"^! fs=N JL JL ^ ^ Inh o 3¾¾^ H 370,16 1,75 2, 0 6 6 Ν'^'Ρ N ^""i] H 382,16 1, 124 0,36 173 ΕΡ2403832Β1 67 Ν-^jl Λ Η 382,16 1, 148 0,42 68 7^7 Η 381,16 1, 149 1,4 69 N'í?Tj r^NH Η 385,19 0, 806 41,8 70 νϊ?7ι ν'νί ο Ν'ί:ίνγ^^ Η 382,16 0,585 0, 15 71 Η 395,18 1, 110 0 , 71 η η / ζ. Ν*^ Λ 0 "^jj^ Η 382,16 0,431 1,1 7 3 Ν-^Τι ^Ο q 7^ 17^ Η 389,19 0,823 615,7 7 4 Η NV Ly F 4 0 0,1 1, 655 <0,1 174 ΕΡ2403832Β1 7 5 395,20 1—; Ο Ch 00 0,1 7 6 Η 382,20 1,159 0,12 Η 383,20 0,859 -L í Ο 7 8 Η 370,10 0,878 9 79 ϊΓι rv 450,20 1,251 0,13 80 ‘ί,-^Λ^,,Ν.ν -Λ. & 1ι ην ν 413,20 1,538 0,13 81 F ρ 4 65,2 0 1 f 837 0,2 175 ΕΡ2403832Β1
9,20 1, 0,06 ΧΗ RMN 4 0 0 MH z (DMSO-d 5) δ 1 (\ -L vJ , 95 (s, 1H) , 8, 67 (t , 1H) , 8 , 62 (d, 1H) , 8, 49 (d, 1H) , 8, 0 9 (d , 2H) , 8 ,02 (d, 1Η) F ! f 87 (m, 2I-I) , η ' r 78 (r 1H) F Ί R “ ' F ^ _ '-l f 51 (m, 2H) F 7,48- η ! f 44 (rr , 1H) , n ,15 (rr., 1H) , 3, 84 (s, 2h) , 2, 4 9 (s , 3 H) . ΧΗ RK N 4 0 0 MH z (DMS 0-d6) δ 10 59 (s, 1H) 8, 78 (d, 1H) , 8 ,56 (rr., 1H) , 8,46 (rr., 1H) 8, 28 (d, IR) , 8,2 2 (d, 1H) , 8 , 13 (dd lí í) , 7,9 5 (d, 1H) , 7,84 -7,81 (m, 2H) 7, ί 7 (rn, 1H) , 7 ,70 (rr., 1H) , 7,47 -7,42 ί ΓΓί lí í), ! t 1. 8-7,13 (rr, 1H) , 3,78 (s, 2 H) 29 (s, 3h) .
176 ΕΡ2403832Β1 8 6 Jj hn^ist 397,20 1,074 0,38 87 H 382,20 1,428 0,72 88 H 381,2 1,15 0,38 89 H 368,2 1,19 2,8 90 H 427,1 0,931 0, 6 6 91 H 443, 1 1,089 0,3 92 vp Η 4 63,1 1, 052 31 177 ΕΡ2403832Β1 93 Η 4 01,2 0,775 705 94 Η 383,20 0,983 2,1 95 Η 369,2 1,23 1,8 96 Η 382 , 1 1,274 2,5 97 .JL^N F ιΓΐΛ Ν^Ν*Τ> Η 387,10 1, 901 98 Η 4 57,2 1,159 99 Η 471,2 1,277 178 ΕΡ2403832Β1 100 ^°Α0^ Η 4 83,2 1,280 101 Η 385,2 0,791 6 6 102 413,20 1,393 0,23 103 F Η 400,20 1,496 0,59 104 Ν'''^ F 466,20 1,669 0,2 9 105 453,10 1, 94 0 0,11 106 Η 399,2 0,781 19 179 ΕΡ2403832Β1 107 Η 413,2 0,810 35 108 F JL Η 399,2 1,354 0,2 109 Η 369,2 1,74 — ! —' 110 Η 382,2 1 f 3 6 0,08 111 Η ^JL-ííJ 0 Í! Τι I 1 ΟΝ 455,2 0, 11 112 N^JJ 436,10 1, 915 0, 1 113 Η 369,20 1,759 0,8 114 ^ (Γί^ Js^isi >i >4 ·0 Η 386,10 1,709 0,6 180 ΕΡ2403832Β1 115 Η 386,10 4,545 - ! Ό 116 H^Q^_ xjjíX iA 442,20 0,781 12,4 117 N'^,^s‘n'^o H 385,10 1,611 1,1 118 JAJ O N-^JA t I I f| Ν^χ1 4 3 7 , 10 1,395 0,1 119 1 H 488,20 1,234 1,3 12 0 N^N'’x> H 385,10 1,7 87 0,1 121 Λ _ íj n" hn n F 449,20 1,230 0,1 181 ΕΡ2403832Β1 122 Ν* J* 437,10 1,459 0,2 12 3 F H 399,10 1, 611 0, 9 124 396,20 0, 94 9 0,2 125 H 488,20 1,408 0,2 12 6 H 382,20 0,947 0,5 "\Xq^^qXX H 429,20 0,801 780 128 jÍ H 383,20 1,080 0,4 129 lí> lf> H 370,20 1,173 7, 1 182 ΕΡ2403832Β1 130 (Τι ο Η 384,20 2,383 0,7 131 Ο Ρι ι Η 430,20 0,880 0,3 132 j|^ ^ Η 446,20 1, 042 0,1 13 3 383,20 1,36 9 0, 1 134 Η 383,20 0, 95 8 0,8 135 V9 397,20 2,197 ο% 9 136 397,10 0,918 127 137 Η 383,20 1,22 0 0, 9 183 ΕΡ2403832Β1
138 H 487,20 1,545 2,7 139 H 383,20 1,221 10,3 140 ^ο Π H N 434,20 1,433 4,3 141 H'Ô' (Q( H 402,10 0, 826 19, 5 142 HaN-^ljT--1 fj^fcl H 431,20 0,885 1,4 143 hri Ί p\ H 384,10 0,94 8 0,6 144 ifk r=y. Ν^γχ q H 430,20 0,843 17,4 145 W l JIT jl N 397,20 0,950 -; r·, -L , \J 184 ΕΡ2403832Β1 146 Η 384,20 1,004 5,7 14 7 Η 384,20 0,97 9 148 ^"ΝΊΓ)ι 1 Η 445,20 0,772 — F C' 149 Η 458,20 0,990 4,2 150 Η 428,20 1,271 65 151 Η(Χ*^μ'’λ'ν| ,^¾½ kXyN^ 1 Η 432,20 0,750 163 152 F Η 400,20 1,459 0,3 153 396,20 1,160 0,8 185 ΕΡ2403832Β1 154 lA» ff^pS‘NfrN 396,20 1,011 2,5 155 12, J3L J jT jl 413,20 0,8 64 156 Η 413,20 1,027 η λ, O f 'u 157 ΚΓ% (ι^Γ'ίί 397,20 1,040 1, 6 158 'rVi, fx H 4 5 8,2 0 1, 075 5 0 f 6 159 -Vi A N H 4 4 4,2 0 0, 942 0,2 16 0 Λ H 445,20 0,4 62 67 186 ΕΡ2403832Β1 161 Λ γΛ Η 444,20 0,802 45 162 Λ rA Η 444,20 1, 070 1 f\ 1. \J 163 Ajl^J Λ Η 4 5 9,2 0 0,747 164 XS f*f Η 459,20 0,726 51 165 ΛΛ r\ Η 473,20 0,965 14 16 6 h^n ^XfiL χ Η 474,20 1, 818 ο,ι 167 ο κι η ||'‘ν Η 460,20 1, 161 0,1 168 Λ^ if> X ίΎ^ Η 448,10 0,963 Ο,ι 187 ΕΡ2403832Β1 169 Vi A H 431,20 0,479 258 170 V A i Xx'^' H 464,10 0,999 0,1 171 H 475,20 1,084 0,2 ''“V'! |ί% Ογ-j „ j-^Λλ. H F F 498,20 1, 071 0,1 173 H jl^N 405,20 1,250 0,1 174 H 459,20 0,822 0,5 175 h 427,20 1,076 1,1 176 V1 a H 413,20 1,09 7 0,4 188 ΕΡ2403832Β1 -Vi η I ίΥ^* 450,10 1,433 0,2 178 Λ H 434,20 1,367 0,1 179 N'"’’ 407,20 1,124 0,1 18 0 ^^Ay\A0 407,20 1, 111 0, 1 181 407,20 1,036 0,1 182 r> λΟ A 460,20 0,92 8 0,1 183 Λ Ι^Ύ^] n ^'W^A. 12¾. Ji^ H 433,20 0,598 0,3 189 ΕΡ2403832Β1 184 [Γΐ >-{ 465,20 1,046 0,1 185 ΑΑ λ ^ΥΊί 1 Η 'νΝ 469,20 0 f 126 0,1 18 6 Αί η ^ΊΤΧ í Χχ'^'' Η 459,20 0,885 ! f O 187 (ί^Ν ^ΝΥΑι Η Ν ί\ 489,20 1,202 0,1 188 |f> XX X j Η 'Hi 456,2 0,889 0,2 189 ffA H /> 499,2 1, 084 0,1 190 ^ΝΥΑ| fl N^N ^'^Xi£Í^'F H 449,2 0,922 0,2 191 Ao^^yGk 462,20 0,97 0 0,04 190 ΕΡ2403832Β1 192 499,20 1,319 0,2 193 N J 449,20 1,080 0,1 194 Vi a ^ΝΥΊ] fl H 453,10 1,311 1,3 195 Λπ A H 431,20 1,042 14 196 Λ^ν ^ ¥ i li f >Ρίν;ΑΑ^ Γ Η 435,10 1,215 6,7 197 ^ο λ Jl* H 509,2 0,742 71 198 γΆ 431,20 1,289 63 19 9 H 401,10 1,388 0,2 191 ΕΡ2403832Β1 200 Η 386,10 1,837 0,2 201 Ν 4 66,3 1,339 2,5 202 -^Y^l rf% Η 4 66,3 1,43 0 2 03 Οχλ xXJ®^ Η 418,2 1,860 4,7 204 Α0 \ i\r'N,^s^s' F Η 449,10 1,239 205 ά „ rr^ 405,20 1, 851 0,1 206 N*"k| H|"K< N*·'' ® 411,2 1,888 0,2 207 XQ H 452,2 1,752 0,2 192 ΕΡ2403832Β1 208 Η 387,10 1,683 0,4 209 Η 435,20 1,331 5,4 210 Η 405,10 1,725 0,4 211 4 5 9,2 1,638 0,1 212 Γ ί| | Λ jj^i^Svr 4 04,1 2,043 0,2 213 (S jCj^'n H^Tv] 404,2 2,069 0,1 214 Ól_ iV® N^ 0 411,2 1,905 0,2 193 ΕΡ2403832Β1 215 0¾—ι irV^ W-v, „Λ^ 422,20 1,72 0 4,2 216 cFf 1 |f^T ^nX!Xa^n 422,20 1,444 2,1 217 Hijr^ 424,20 1,086 6,7 218 rf3 H 425,20 0,272 2,3 219 j^f° H 441,20 0,331 0,8 220 °xxjuoA 386,10 1, 644 0,3 221 H 401,10 1,216 0,3 194 ΕΡ2403832Β1
195 ΕΡ2403832Β1
196 ΕΡ2403832Β1
197 ΕΡ2403832Β1
198 ΕΡ2403832Β1
Ensaios
Inibição de Via da
Ensaio de Repórter Wnt-Luc paira a sinalização de Wnt
As células TM3 de célula leydig de ratinho (obtidas a partir ae Coleção Americana de Cultura Tipo, ATCC, Manassas, VA) sao cultivadas em mistura 1:1 de meio Fi: Ham e meio de
Lz ae
Eagle modificado por Dulbecco (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) suplementado com 2,5 % de FBS (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) e 5 % de Soro de C, Manassas, VA; cultivadas l) Li lbecco (G: Lbco/Invitrogen, com 10 % de FBS CA) e 50 uni dades/ml de cavalo (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA), 50 unidades/ml de penicilina e 50 mg/ml de estreptomicina (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) a 37°c com 5 % de CO2 em atmosfera de ar. As células TM3 num disco de 10 cm são co-transfectadas com 8 mg de plásmido repórter STF contendo um gene de luciferase acionado por elementos respondedores a Wnt e 2 mg de pcDNA3.1-Neo (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) com 30 ml de FuGENE6 (Rocne Diagnostics, Indianápolis, EM) seguindo o protocolo do fabricante. Linhas celulares estáveis (TM3 Wnt-Luc) foram selecionadas com 400 mg/ml de G418 (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA). As células TM3 Wnt-Luc e células Wnt3a de célula L (obtidas a partir de Coleção Americana de Cultura Tipo, ATC em meio de Eagle modificado por Carlsbad, CA) suplementado (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) penicilina e 50 mg/ml de estreptomicina (Gibco/Invitrogen, 199 ΕΡ240383261
Carlsbad, CA) a 37°C com 5 % de C02 em atmosfera de ar) são tripsinizadas e co-cultivadas n .uma placa de 384 poços com meio DMEM suplementado com 2 Ό de FBS, e tratada com concentrações diferentes de um composto da invenção. Após 24 horas, as atividades de lucif erase de pirilampo são ensaiadas com o Sistema de Ensaio de Luciferase Bright do™ (Promega, Madison, wi) . 0 IC50 é medido quando o efeito do composto reduz o sinal de luminescência em 50 %.
Ensaio Relatado de Wnt-Luc para a Inibição de Via da sinalização de Wnt
As células 293 de Rim Embrionário Humano (obtidas a partir da Coleção Americana de Cultura Tipo, ATCC, Manassas, VA) são cultivadas em meio DMEM (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) suplementado com 10 % de FBS (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA), 50 unidades/rnl de penicilina e 50 mg/ml de estreptomicina (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) a 37°C com 5 % de C02 em atmosfera de ar. As células 2 93 num disco de 10 cm são co-transfectadas com 8 mg de plásmido de repórter STF contendo um gene de luciferase acionado por elementos respondedores a Wnt e 2 mg de pcDNA3.1-Neo (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) com 30 ml de FuGENEd (Roche Diagnostics, Indianápolis, EM) seguindo o protocolo do fabricante. As linhas celulares estáveis (293 Wnt-Luc) foram selecionadas com 400 mg/ml de G418 (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA) . As células 293 Wnt-Luc e células Wnt3a de célula L (obtidas a partir da Coleção Americana de Cultura Tipo, ATCC, Manassas, VA) são tripsinizadas co-cultivadas numa placa de 384
Poços com meio DMEM suplementado com 2 % de FBS, e tratadas com concentrações direrentes de um composto da invenção. Após 24 horas, as atividades de luciferase de pirilampo são ensaiadas com o Sistema de Ensaio de Luciferase Bright-Glo™ (Promega, Madison, WI). O ICso é medido quando o efeito do 200 ΕΡ2403832Β1 composto reduz o sinal de luminescência em 50 %.
DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO
Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.
Documentos de patente referidos na descrição * US 6602677 B [0125]
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Lisboa, 16 de Janeiro de 2014 207

Claims (10)

  1. ΕΡ2403832Β1 REIVINDICAÇÕES
    nu um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: em que X1, X3, X3 e X4 é selecionado a partir de N e CR?; um de Xo, XD, X7 e X8 é N e os outros são CH; X9 é selecionado a partir de N e CH; Z é selecionado a partir de fenilo, pirazinilo, piridinilo, piridazinilo e piperazinilo; em que cada fenilo, pirazinilo, piridinilo, piridazinilo ou piperazinilo de Z é opcionalmente substituído com um grupo R6; R1, R.3 e R3 são hidrogénio; m é 1; R4 é selecionado a partir de hidrogénio, halo, difluorometilo, trifluorometilo e metilo; R6 é selecionado a partir de hidrogénio, halo e -C (0) R10; em que R11J é metilo; e R? é selecionado a partir de hidrogénio, halo, ciano, 1 ΕΡ2403832Β1 metilo e trifluorometilo 2. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dito composto é selecionado a partir de
    2 ΕΡ2403832Β1
    3
    ΕΡ2403832Β1
    5 ΕΡ2403832Β1
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    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. 3. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dito composto é 2-(2', 3-dimetil-2, 4'-bipiridin-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il) piridin- 2-il)acetamida, ou um sslí farmaceuticamente aceitável da mesma. 4. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dito composto é N-(2,3'-bipiridin-6'-il)-2-(2',3-dimetil-2,4'-bipiridin-5-il) acetamida, ou um sal farmaceuticamente a c e i t á v e 1 d a rae s m a . 5. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dito composto é N-(5-(4-acetilpiperazin-l-il)piridin-2-il)-2-(2'~fluoro-3-metil- 2,4'-bipiridin-5-il)acetamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma. 6 composto que tem a Fórmula (5):
    Um (5) jue: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em em que A1 é piperazinilo substituído com -C(0)CH3, 12 ΕΡ2403832Β1 Λ s{Q}o-2 \.....- / ou selecionado a partir de:
    anel E é fenilo ou um de X1, Xz, X3 e X'1 é N e os outros são CR'; ím de X' Xc X X" :r[ Z é um heterociclo de 6 membros ou um heteroarilo de 6 membros, cada um contendo 1-2 heteroátomos de azoto e cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1-2 grupos R6; R1, R2 e R3 são H; R4 e R6 são independentemente hidrogénio, ciano, Ci_ 6alcoxi, -S (0) 2R10, -C (0)NR8R9, -L-C (O)R10, -L-C (0) OR10, Ci-6 alquilo opcionalmente substituído com halo, C2_6 alquenilo ou C2-e alquinilo; R e n ou C^—5 arquiro; L é um ligação ou (CR2)i~4 em que R é H ou C]-6 alquilo; W é C3-7cicloalquilo; 13 ΕΡ2403832Β1 R7 e Pt1 são independentemente H, halo, cismo, Ci-6alcoxi, -S (0) 2Rl0/ ou um C:L---6 alquilo opcionalmente halogenado; R1 e R9 são independentemente H, -L-W, ou Ci_6 alquilo, C 2 - 6 alquenilo ou C2-6 alquinilo, cada um dos quais podem ser opcionalmente substituído com halo, amino, nidroxilo, alcoxi ou ciano; ou R1 e R9 juntamente com os átomos aos quais estão unidos podem formar um anel; RJ° é Ci—s alquilo ou -L-W; e m, n e p são independentemente 0-2. 7. 0 composto de acordo com a reivindicação 6 ou um S 3.1. farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que A1 é piperazinilo substi tuído com - o o o ,S(0)o-2
    e m é 0 -1. 14 1 0 composto de acordo com qualquer uma das ΕΡ2403832Β1 reivindicações 6-7, em que o dito composto é selecionado a partir de:
    15 ΕΡ2403832Β1
    ΕΡ2403832Β1
    ΕΡ2403832Β1
    18 ΕΡ2403832Β1
    ΕΡ2403832Β1
    ΕΡ2403832Β1 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. g a. s de-que lilo 9. 0 composto de acordo com qualquer uma reivindicações 6-7, em que Z é selecionado a partir pirazinilo, piridinilo, piridaLzinilo e piperazinilo; em cada pirazinilo, piridinilo, piridazinilo ou pipera.zir de Z é opcionalmente substituído com um grupo R6. 21 EP24G3832B1
  2. 10. O composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-9 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o dito sal f armaceut icamente aceitável é um ácido fumárico sal do dito composto.
  3. 11. Uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeut.icamente eficaz de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-9 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um portador fisiologicamente aceitável.
  4. 12. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica de acordo com. a reivindicação 11, no fabrico de um medicamento para o tratamento de um distúrbio mediado por Wnt.
  5. 13. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para utilização num método de tratamento de um distúrbio mediado por Wnt.
  6. 14. A utilização de acordo com a reivindicação 12 ou o composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, parai utilização num método de traitamento de acordo com a reivindrcação 13, em que o distúrbio mediado por Wnt que érO-i-des, fibrootí, proternurie, rejeição de enxerto d.e rim, osteoartrite, doença de Parkinson, edema macular cistoide, retinopatia, degeneração macular ou um distúrbio de proliferação celular associado com atividade de sinalização de Wnt aberrante. f ci rmaceut icamente num método de 14, em que o dito 1b. A utilização ou o composto ou um Scil aceitável do mesmo, para utilização tratamento de acordo com a reivindicação 22 ΕΡ2403832Β1 dxsLÚrD_i_o é um disuurbio de proliferação celular associado -.om cioiviaaae de finalização de Wnt aberrante selecionado a partir do grupo cancro colo-rectal, carcinoma colo-rectal cancro de mama, Carcinoma de célula escamosa de cabeça e pescoço, Cancro esofágico, carcinoma de célula escamosa esofagica, cancro pulmonar de célula não pequena, cancro gásrrico, cancro pancreatico, leucemia, linfoma, neuroblao a orna, retinoblastoma, sarcoma, osteossarcoma, conaossarcoma, sarcoma de Ewing, rabdomiossarcoma, tumor cerebrai, tumor de Wiim, carcinoma de célula basal, melanoma, cancro ae cabeça e pescoço, cancro do colo do útero e cancro de próstata.
  7. 16. Utilrzação de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações i — ί o ou U.ÍTi S3.J. farmaceuticamente cl C Θ 11 cl V el do mesmo, ou uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 11, no fabrico de um medicamento para o tratamento de um dist úrbio trat ável por meio da inibiçã o da sinalização de Wnt.
  8. 17. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para utilização num método de tratamento de um dxstúroio tratavei por meio da inibição da sinalização de Wnt.
  9. 18. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 ou um sal farmaceuticamente aceitdvel do mesmo, ou uma composição farmacêutica de acordo com a reivinaicação 11, no fabrico de um medicamento para o tratamento de um distúrbio tratável por meio da inibição de um gene de porco-espinho.
  10. 19. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 ou ura sal farmaceut icamente aceitável 23 ΕΡ2403832Β1 do mesmo, para utilização num método de tratamento de um distúrbio tratável por meio da inibição de um gene de porco-espinho. jisboa, 16 de janeiro de 2014 24
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