PL218592B1

PL218592B1 - Sposób wytwarzania 4'-hydroksy-5,6-benzoflawonu

Info

Publication number: PL218592B1
Application number: PL400807A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Tomasz Popłoński; Ewa Huszcza; Tomasz Tronina; Anna Madej
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2012-09-17
Filing date: 2012-09-17
Publication date: 2015-01-30
Also published as: PL400807A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 4'-hydroksy-5,6-benzoflawonu (4'-hydroksy-β-naftoflawonu), o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Związek ten jest biologicznie czynny i może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym.

Znany jest chemiczny sposób otrzymywania 4'-hydroksy-5,6-benzoflawonu na drodze trzy etapowej, mało wydajnej, syntezy [M.F Springsteel et al, Bioorganic & Medicinal Chemistry 2003, 11, 18, ss. 4113-4120].

Brak jest doniesień literaturowych o otrzymywaniu 4'-hydroksy-5,6-benzoflawonu na drodze mikrobiologicznej.

Istota wynalazku polega na tym, że substrat, którym jest 5,6-benzoflawon, o wzorze 1, poddaje się mikrobiologicznej hydroksylacji, w pozycji 4', grzybem z rodzaju Verticillium namnażanego na podłożu mikrobiologicznym, przez 4 dni. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym, oddziela frakcję organiczną, osusza, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się znanym sposobem.

Korzystnie jest, gdy reakcję prowadzi się wodną kulturą, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 291-303 K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultur Verticillium, następuje reakcja hydroksylacji w pozycji 4'.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, jednoetapowego procesu produktu z wydajnością izolowaną 36,01%

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d. Do kolby o pojemności 300 cm³, w której znajduje się 100 cm³ sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku, wprowadza się grzyby z rodzaju Verticillium. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 300 K i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 15 mg 5,6-ben₃ zoflawonu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 0,5 cm³ tetrahydrofuranu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 20 dni. Następnie uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 22,2 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie używając jako eluentu mieszaniny heksan-octan etylu, w stosunku 8:2.

Na tej drodze otrzymuje się 5,72 mg produktu 4'-hydroksy-5,6-benzoflawonu. Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, THF-d8) δ [ppm]: 6,87 (s, 1H, H-3); 6,92 (m, 2H, J = 8,7 Hz, H-3',5¹); 7,57 (m, 1H, H-7); 7,68 (m, 1H, H-6); 7,69 (d, 1H, J = 9 Hz, H-10); 7,92 (m, 2H, J = 8,7 Hz, H-2',6'); 7,94 (m, 1H, H-8); 8,17 (d, 1H, J = 9,0 Hz, H-9); 8,17 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H-5);

¹³C NMR (150 Hz, THF-d8) δ [ppm]: 179,91 (C-4); 162,00 (C-4'); 161,96 (C-2); 158,19 (C-10a); 135,88 (C-9); 131,93 (C-4b); 131,86 (C-8a); 129,57 (C-6); 129,07 (C-8); 128,80 (C-2', C-6'); 128,18 (C-5); 127,17 (C-7); 123,52 (C-1'); 118,69 (C-10); 118,00 (C-4a); 116,87 (C-31, C-5'); 109,22 (C-3).

Claims

1. Sposób wytwarzania 4'-hydroksy-5,6-benzoflawonu o wzorze 2, znamienny tym, że substrat, którym jest 5,6-benzoflawon, o wzorze 1, poddaje się mikrobiologicznej hydroksylacji, w pozycji 4', grzybem z rodzaju Verticillium namnażanego na podłożu mikrobiologicznym, przez 4 dni, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym, oddziela frakcję organiczną osusza, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się znanym sposobem.

2. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że proces mikrobiologicznej hydroksylacji w pozycji 4' prowadzi się w temperaturze 291-303 K.