PL194390B1 - Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu - Google Patents

Abstract

1. Sposób wytwarzania 11a-hydroksy-1- -dehydrotestosteronu, o wzorze 2, z 1-dehy- drotestosteronu, o wzorze 1, na drodze mikro- biologicznej, znamienny tym, ze substrat pod- daje sie biotransformacji kultura grzyba z ga- tunku Beauveria bassiana. PL PL PL

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 11a-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Związek ten jest biologicznie czynny i może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym.

Znane są metody otrzymywania 11o-hydroksypochodnej 1-dehydrotestosteronu podczas transformacji mikrobiologicznych przez grzyby z gatunku Rhizopus arrhizus (H. R. Holland, P. Chinna Chenchaiah, Can. J. Chem., 1985, vol. 63, s. 1127) i grzyby będące patogenami mrówek Acromyrmex octospinosus (E. R. H. Jones, G. D. Meakins, J. O. Miners, J. H. Pragneli, A. L. Wilkins, J. C. S. Perkin I, 1975, s, 1552), z wydajnością nie przekraczającą odpowiednio: 51% i 13%.

W metodzie pierwszej jako substratu użyto 1-dehydrotestosteronu, a w drugiej - 3p-hydroksy-5o-androstan-17onu.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania 11o-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, o wzorze 2, z substratu, którym jest 1-dehydrotestosteron.

Istota wynalazku polega na tym, że substrat, poddaje się biotransformacji kulturą grzyba z gatunku Beauveria bassiana.

Korzystnie jest gdy reakcję prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 285-313 K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Beauveria bassiana, następuje wprowadzenie grupy hydroksylowej w 11α pozycję szkieletu steroidowego. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję chloroformem.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością 56-62%, a więc wyższą niż w znanych, opisanych wyżej metodach.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w dwóch przykładach wykonania.

Przykład 1. Do kolby o pojemności 2 dm , w której znajduje się 300 cm sterylnej pożywki zawierającej 9 g glukozy i 3 g aminobaku, wprowadza się szczep Beauveria bassiana. Po dwóch dniach wzrostu szczepu w temperaturze 303 K i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 100 mg 1-dehydrotestosteronu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 3 cm³ acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 5 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 110 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan-aceton w stosunku 2:1.

Na tej drodze otrzymuje się 56 mg 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu (wydajność 56%).

P r z y k ł a d 2. Postępuje się analogicznie tak jak w przykładzie 1, z tym że biotransformację prowadzi się w temperaturze 298 K. Otrzymuje się 114 mg surowego produktu, z którego, po oczyszczeniu chromatograficznym, uzyskuje się 62 mg 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu (wydajność 62 %).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi: ¹H NMR (CDCl₃) d: 0,78 (3H, s, C-18H); 1,27 (3H, s, C-19H); 3,60 (1H, t, J=8,4 Hz, C-17H); 4,00 (1H, m, J=10,1 Hz, C-11H); 6,03 (1H, s, C-4H); 6,09 (1H, dd, J-8,3 Hz; J=1,9 Hz; C-2H); 7,76 (1H, d, J=10,3 Hz, C-1H).

Claims (3)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, o wzorze 2, z 1-dehydrotestosteronu, o wzorze 1, na drodze mikrobiologicznej, znamienny tym, że substrat poddaje się biotransformacji kulturą grzyba z gatunku Beauveria bassiana.
2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że reakcję prowadzi się wodną kulturą grzyba przy ciągłym mieszaniu.
3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że reakcję prowadzi się w temperaturze 285-313 K.