NO180491B

NO180491B - Anti-endotoksinforbindelser, mellomprodukter for disse, et farmasöytisk preparat som inneholder dem, fremgangsmåte til kobling av en alkylsidekjede til et azidosakkarid som har en fri hydroksyl, og anvendelse av nevnte forbindelser

Info

Publication number: NO180491B
Application number: NO923939A
Authority: NO
Inventors: William J Christ; Lynn D Hawkins; Osamu Asano; Tsutomu Kawata; Seiichi Kobayashi; Daniel P Rossignol
Original assignee: Eisai Co Ltd
Priority date: 1991-10-11
Filing date: 1992-10-09
Publication date: 1997-01-20
Also published as: CA2079971A1; JP3865411B2; EP0536969A2; CN1071668A; US5843918A; NO923939L; FI924579A; FI924579A0; RU2095366C1; EP0536969A3; US5756718A; US5612476A; NZ244643A; AU2526692A; HU9203204D0; NO180491C; JPH05194470A; AU660325B2; IL103298A0; NO923939D0

Description

Denne oppfinnelse vedrører forbindelser som kan anvendes som anti-endotoksinmedikamenter, spesielt analoger av lipid A, mellomprodukter i fremstillingen av disse, fremgangsmåte til kobling av en alkylsidejede til et azidosakkarid som har en fri hydroksyl, og anvendelse av nevnte forbindelser ved fremstilling av et medikament for behandling av en sykdom hos et pattedyr for hvilket en lipid A reseptorantagonist er effektiv, for behandling av septisk sjokk hos et pattedyr, eller for behandling av en virusinfeksjon hos et pattedyr.

Forekomsten av gram-negativ bakteriemi i De Forente

Stater er blitt anslått til å være ca. 100.000 til 300.000 tilfeller pr. år, med en mortalitet på 30-60% (Dudley, Am. J. Hosp. Pharm. 47, Supp. 3:S3. 1990). Antibiotika anvendes vanligvis som den primære kjemoterapi for denne sykdom; deres baktericide virkning fører imidlertid til spregning av bakterien og ledsagende frigjøring av endotoksin, dvs. lipo-polysakkaridgruppen (LPS) fra bakteriens yttermembran. Det frigjorte LPS induserer flere patofysiologiske fenomener hos pattedyr (kollektivt referert til som gram-negativ endo-toksemia eller sepsissyndrom): disse omfatter feber, generalisert betennelse, disseminert intravaskukær koagulasjon (DIC), hypotensjon, akutt nyresvikt, akutt åndenødsyndrom (ARDS), hepatocellulær destruksjon og hjertesvikt (Dudley, supra.- Braunwald et al., redaktører, Harrison's Principles of Internal Medicine, 11. utgave, MacGraw-Hill Book Co., New

York, 1987) .

Selv om endotoksinet initierer sepsis, har det liten eller ingen direkte virkning på vevene; isteden utløser det en kaskade av biologiske mediatorer som fører til sepsis og septisk sjokk. Endotoksin stimulerer monocytter og makrofager til å fremstille tumornekrosefaktor og interleukin-1, to viktige primære mediatorer. Disse mediatorer forårsaker så sepsissyndrom ved stimulering av inflammatoriske eller andre celler, såsom endotelceller, til å sekretere en kaskade av sekundære mediatorer (f.eks. prostaglandiner, leukotriener, interferonser, blodplateaktiverende faktor, endorfiner og kolonistimulerende faktorer). Disse inflammatoriske mediatorer påvirker vasomotortonen, mikrovaskulær permeabilitet, og aggregasjon av leukocytter og blodplater. Selv om virkningene og interaksjonene av disse substanser synes å være komplekse, synes deres netto virkning til å initiere septisk sjokk å være svært signifikant (Braunwald et al., supra).

Som rapportert av DiPiro (Am. J. Hosp. Pharm. 47, Supp. 3:S6, 1990), har det bakterielle lipopolysakkaridmolekyl tre hovedregioner: en langkjedet polysakkaridregion (0 anti-gen) en kjerneregion og en lipid A-region. Hele lipopoly-sakkaridmolekylet og noen av dets komponenter har toksiske virkninger. De fleste av disse toksiske virkninger antas imidlertid å kunne føres tilbake til lipid A-delen. Strukturelt er lipid A sammesatt av et disakkarid og acylert med langkjedede fettsyrer.

Terapier for endotoksinrelaterte sykdommer er vanligvis blitt rettet mot kontroll av den inflammatoriske respons. Slik terapi omfatter: kortikosteroid behandling, antydet å forbedre endotoksinmediert cellemembranskade og å redusere produksjonen av visse biologiske mediatorer (Bone, N. Eng. J. Med. 317:653, 1987; Veterans Administration Systemic Sepsis Cooperative Study Group, N. Eng. J. Med. 317:659, 1987; Braunwald et al., sura); administrasjon av antistoffer utformet til å nøytralisere det bakterielle LPS-endotoksin (se f.eks. Ziegler et al., N. Eng. J. Med. 307:1225, 1982); behandling med nalokson, som tilsynelatende blokkerer de hypotensive virkninger i forbindelse med sepsissyndromet (Sheagren et al., Shock Syndromes Related to Sepsis. I: Wyngaarden ogSjnith, redaktører, Cecil Textbook of Medicine, 18. utgave, Philadelphia, 1988, pp. 1538-41); og behandling med ikke-steroidale anti-inflammatoriske medikamenter som påstås å blokkere cyklo-oksygenaser og derved redusere produksjonen av visse sekundære mediatorer, såsom prostaglandiner og tromboksan (DiPiro, supra).

Generelt er oppfinnelsen kjennetegnet ved en forbindelse med formelen:

hvor L er 0; M er NH; E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; 12 3 4 hver av de gjenværende R , R , R og R uavhengig er: hvor L er 0; x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02;

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5;

X er (<CH>2t<O>(<CH>2)v<CH>3 eller ^ 2,

hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og

hvor W er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. 12 3 4 Fortrinnsvis vil minst en R , R , R eller R være: hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og for p og g uavhengig Os (p + q) s 12; hver av de gjenværende R 1, R 2 , R 3 og R 4 uavhengig er:

hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; og G uavhengig er SO eller S02;

hvor Al ,2 ,

og A uavhengig er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2;

X er (CH2)tO(CH2)vCH3, hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6; og

Y er OH eller et halogenatom.

12 3 4 Snevrere foretrukket vil minst en R , R , R eller R være: hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10, mest fortrinnsvis 6; og 6 < (p + q) < 10, og 12 3 4 hver av de gjenværende R , R , R og R uavhengig er: hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11, mest fortrinnsvis 6 eller 10; og G uavhengig er SO eller SO„ ,-12 hvor A og A uavhengig er:

X er CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3, og

Y er OH.

12 3 4 Videre foretrukket er at minst en av R , R , R eller R

hvor L er 0, M er NH; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; 12 3 4 hver av de gjenværende R , R , R og R uavhengig er:

hvor L er 0, M er NH; E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og g uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02;

l 2

hver A og A uavhengig er OH,

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5;

X er (CH2)tO(CH2)vCH3,

hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og

Y er OH, 0(CH,) CH,, et halogenatom,

hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, og særlig at minst én av R<1>, R<2>, R3 eller R<4> er: hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og for p og g uavhengig, 0 s (p + g) s 12; 12 3 4 hver av de gjenværende R , R , R og R uavhengig er:

hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3;

l 2

hver A og A uavhengig er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2;

Y er OH.

Særlig foretrukket er at

(i) n er 6 ; (ii) q er 5; (iii) x er 6 eller 10; (iv) eller en kombinasjon derav, og at nevnte forbindelse er et lysinsalt, et Tris-salt, et ammoniumsalt eller et natriumsalt.

Helt spesielt foretrukne enkeltforbindelser er

Av forbindelsene ifølge det første aspekt (ovenfor), vil de som kan isoleres fra naturlige kilder (f.eks. fra Rhodopseudomonas capsulata eller Rhodopseudomonas sphaeroides) være mindre foretrukket i oppfinnelsen.

I et andre aspekt, vedrører oppfinnelsen en terapeputisk blanding om omfatter en av disse og en fysiologisk akseptabel bærer.

Et foretrukket aspekt innenfor det først definerte omfang er også forbindelser hvor minst én av R<2> eller R<4> er

hvori hver L er 0, hver M er NH; hver E er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver m er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver n er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver p er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver q er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 10; hver x er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver y er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; og hver z er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver A<1> og A<2> er uavhengig OH, 0CH3;

hvori hver d uavhengig er et heltall fra og med 0 tilogmed 5,

X er (C<H>2)tO(C<H>2)vCH3, (CH2)t0P0(CH)2,

hvori hver t og v uavhengig er et heltall fra og med 0 til og med 14; og

Y er H, OH, 0(CH2)WCH3, et halogenatom, eller

hvori w er et heltall fra og med 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

Særlig foretrukne utførelsesformer herunder er angitt i krav 11 til 19.

I et tredje aspekt vedrører oppfinnelsen en forbindelse med formelen:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er 0; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02;

P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A^gruppe, hvor A<1->gruppen uavhengig er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; P 2 er en halogengruppe, OH, en beskyttet OH, 0(CH2)wCH3

hvor w er^et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. Disse kan anvendes i fremstillingen av de forut definerte forbindelser.

Fortrinnsvis vil R<2> være:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; hvor G uavhengig er SO eller S02; og for p og q uavhengig, Os (p + q) s 12;

P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A1-gruppe, hvor A1-gruppen er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; og P<2> er OH, en beskyttet OH eller 0(CH2)wCH3, hvor w er et helt tall fra 0 til og med 3, og særlig vil R<2> være hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; hvor G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10; og 6 s (p + g) s 10;

p 2 er OH, en beskyttet OH eller OCH3.

I et fjerde aspekt, vedrører oppfinnelsen en forbindelse med formelen:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er D; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og ned 14; hvor m uavhengig er et helt tall .fra 0 til og med 14; ivor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p aavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er 2t helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt

tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10;.,. og G uavhengig er SO eller S02 ;

Z er OH, en beskyttet OH, en aktivert OH, eller en utgående gruppe som kan erstattes;

3 2 '

P er OH, en beskyttet OH, OCH,, A , eller en beskyttet

2 i 2 '

A , hvor nevnte A gruppe er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5;

X' er X eller en beskyttet X gruppe, hvor nevnte X gruppe er (CH2)tO(C<H>2)vCH3, (CH2)t0P0(OH)2,

hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

4

Fortrinnsvis vil R være:

3 2 '

hvor P er H, OH, en beskyttet OH, A eller en beskyttet

2 ' 2 '

A , hvor A er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; og

X<1> er (CH2) 0(CH2)VCH3 eller (CH2)tCH3,

hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6.

Enda snevrere foretrukket vil R 4 være:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10; og 6 s (p + q) s 10; 3 2 ' hvor P er OH, en beskyttet OH, A , eller en beskyttet A , hvor A er

X' er CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3.

I et femte aspekt, vedrører oppfinnelsen en forbindelse med formelen:

2 4 A hvor R <2> og R uavhengig er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er 0; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; hvor Q uavhengig er N_ eller NH_; 1 1 P er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A gruppe; og 3 2 ' P er OH, en beskyttet OH, en A -gruppe, eller en be-2 ' 12' skyttet A -gruppe, hvor A og A gruppen uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; P 2 er et halogenatom, OH, en beskyttet OH, 0(CH2)wCH3,

hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14;

X' er X eller en beskyttet X gruppe, hvor nevnte X-gruppe er H, eller (CH2)tO(CH2)VCH3,

hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og R 5 er hvilken som helst av de muligheter som er oppført ovenfor for R 1 -R 4, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

2 4

Fortrinnsvis vil R og R uavhengig være:

1 1

P er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A gruppe; og

3 2 '

P er OH, en beskyttet OH, en A -gruppe, eller en be-

2 ' 1 2 1 skyttet A gruppe, hvor A og A gruppen uavhengig er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2;

P 2 er OH,^en beskyttet OH, eller 0(CH2)w<CH>3, hvor w er et helt tall fra 0 til og med 3; og

X' er (CH2)tO(CH2)vCH3,

2 4

Snevrere foretrukket vil R og R uavhengig være:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10 og 6 s (p + q) s 10;

P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A1 gruppe, og

3 2 '

P er OH, en beskyttet OH, en A gruppe, eller en be-

2 ' 12' skyttet A gruppe, hvor A og A gruppen, uavhengig er:

2

P er OH; og

X' er CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3.

I et sjette aspekt, vedrører oppfinnelsen en forbindelse med formelen:

12 3 4 hvor R , R , R og R uavhengig er:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er 0; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra

0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02;

i 1 P er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A gruppe; og

3 2 '

P er OH, en beskyttet OH, en A gruppe, eller en be-2 ' 12'

skyttet A gruppe, hvor A og A gruppen uavhengig er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; og A3 uavhengig er: hvor j uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og P<2> er et halogenatom, OH, en beskyttet OH, 0(CH2)wCH3,

hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14; og X' er X eller en beskyttet X-gruppe, hvor nevnte X-gruppe

er (CH2)tO(CH2)vCH3,

hvor t og ,v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

17 2 4

Fortrinnsvis vil R , R , R og R uavhengig være.-

P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A1 gruppe; og

3 2 '

P er OH, en beskyttet OH, en A -gruppe, eller en beskyttet A 2 ' - gruppe, hvor A 1 - og A 2 '-gruppen uavhengig er:

hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2;

P<2> er OH, en beskyttet OH eller 0(CH,) CH,( hvor w er et helt tall fra 0 til og med 3; og

X' er (CH2)tO(CH2)vCH3,

12 3 4 Sterkest foretrukket vil hver R , R , R og R uavhengig være:

hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10; og 6 s (p + g) s 10;

P<1> er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A<1->gruppe; og

3 2 '

P er OH, en beskyttet OH, en A gruppe, eller en beskyttet A gruppe, hvor A - og A -gruppen uavhengig er:

2

P er OH; og

X' er CH2OH, CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3.

I et syvende aspekt, vedrører oppfinnelsen en fremgangsmåte for kobling av en alkylsidekjede til et azidosakkarid som har en fri hydroksyl, karakterisert ved omsetning av nevnte azidosakkarid med et alkalimetallsalt og en sulfonyl mono-aktivert alkyldiol under anaerobe betingelser.

Et åttende aspekt er en anvendelse av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-9 ved fremstilling a et medikament for behandling av sykdom hos et pattedyr for hvilket en lipid A reseptorantagonist er effektiv, for behandling av septisk sjokk hos et pattedyr, eller for behandling a den LPS-medierte aktivering av en virusinfeksjon hos et pattedyr.

En forbindelse med formelen

kan fremstilles ved (a) å fremstille et mannopyranosid med

formelen (b) å omsette nevnte mannopyranosid med en katalytisk mengde naftalen i nærvær av litium.

En forbindelse med formelen

kan fremstilles ved (a) å tilveiebringe en forbindelse med formelen (b) å omsette denne forbindelse med ammoniumceriumnitrat og et azidalkalimetallsalt, fortrinnsvis natriumazid.

I en foretrukket utførelse, vil fremgangsmåten dessuten omfatte trinn for å omsette

med natriumnitrat til å danne a-stereoismoren av forbindelsen med formelen

kan fremstilles selektivt ved:

(a) å tilveiebringe en forbindelse med formelen (b) å løse denne forbindelse i trikloracetonitril; og (c) å omsette den løste forbindelse med litium bis(trimetylsilyl)-amid.

En 3,4-dimetoksybenzylbeskyttelsesgruppe kan kobles til et aktivert azidosakkarid ved omsetning av azidosakkaridet først med dimetoksybenzylalkohol og deretter med bortrifluorideterat. I en foretrukket utførelse vil azidosakkaridet være

En allyloksykarbonatbeskyttelsesgruppe kan kobles til en hydroksylsidekjede av et sakkarid ved omsetning av sakkaridet først med fosgen og deretter med allylalkohol.

I foretrukne utførelser vil sakkaridet være et azidosakkarid med formelen

med formelen og med formelen

En t-butyldimetylsilyl-beskyttelsesgruppe kan selektivt fjernes fra et acylbeskyttet sakkarid ved omsetning av sakkaridet med hydrogenfluoridsyre.

I foretrukne utførelser, vil sakkaridet være et disakkarid; acylbeskyttelsesgruppen er en allyloksykarbonat-gruppe,- det acylbeskyttede sakkarid er

det acylbeskyttede sakkarid omfatter dessuten en 3,4-dimetoksybenzylbeskyttelsesgruppe,- og det acylbeskyttede sakkarid er

En bis(alkoksy)fosfonylsidekjede kan kobles til et sakkarid som omfatter omsetning av sakkaridet først med et bis(alkoksy)(diisopropylamino)fosfin og tetrazol og deretter med et oksydasjonsmiddel.

I foretrukne utførelser vil bis(alkoksy)fosfonylside-kjeden være en allyloksybeskyttet fosfatgruppe; oksydasjons-middelet er m-klorperoksybenzosyre; sakkaridet er et disakkarid, fortrinnsvis et azidosakkarid; azidosakkaridet har formelen

azidosakkaridet har formelen azidosakkaridet har formelen azidosakkaridet har formelen

En 3,4-dimetoksybenzylbeskyttelsesgruppe kan fjernes fra et azidosakkarid ved omsetning av azidosakkaridet med 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzokinon i mørke under anerobe betingelser.

a

En 3,4-dimetoksybenzylbeskyttelsesgruppe kan fjernes fra et azidosakkarid ved omsetning av azidosakkaridet med ammoniumceriumnitrat.

I en foretrukket utførelse av disse to omsetninger vil azidosakkaridet være

En a-triklorimidataktiveringsgruppe kan selektivt kobles til et azidosukker ved omsetning av azidosukkeret med trikloracetonitril og cesiumkarbonat.

I en foretrukket utførelse vil azidosukkeret ha formelen

Et disakkarid kan fremstilles ved trinnene:

(a) å tilveiebringe et azidomonosakkarid som har en 3,4-dimetoksybenzylbeskyttelsesgruppe og en fri hydroksylgruppe ; og (b) å omsette det 3,4-dimetoksybenzylbeskyttede azidomonosakkarid med et andre aktivert azidomonosakkarid under argon-atomosfære i nærvær av bortrifluorideterat eller trimetylsilyltrifluormetansulfonat.

I foretrukne utførelser vil azidomonosakkaridene være

og azidomonosakkaridene være

Reduksjon av en azidosidekjede i et sakkarid kan utføres uten å redusere en umettet sidekjede ved omsetning av azidosakkaridet med et tinn(II)tris-aryltiolattrialkylaminkompleks i mørke under anerobe betingelser.

I foretrukne utførelser vil tinn(II)trisbenzentiolattri-alkylaminet være tinn(II)tris-benzentiolattrietylamin; azidosakkaridet vil være et disakkarid; disakkaridet vil ha

formelen

disakkaridet har formelen og disakkaridet har formelen

En allyloksybeskyttelsesgruppe kan fjernes fra et sakkaridmolekyl ved trinnene: (a) å tilveiebringe et sakkarid som har en allyloksybeskyttet hydroksylgruppe; og (b) å omsette det beskyttede sakkarid med et

palladiumkompleks.

I foretrukne utførelser vil palladiumkomplekset være tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0); sakkaridet vil ha formelen

og sakkaridet har formelen

Cfa,-h<y>droks<y>len i en heksose kan alkyleres uten alkylering av andre frie hydroksylgrupper ved omsetning av heksosen med et sølvsalt og et alkylhalogenid.

I foretrukne utførelser vil sølvsaltet være sølvoksyd eller sølvkarbonat; alkylhalogenidet vil være metyljodid; og heksosen vil ha formelen

C1-karbonet i et sakkarid som har en amidosidekjede omfattende en S-sulfoksygruppekan fosforyleeres ved omsetning av amidosakkaridet først med en litiumbase under anerobe betingelser kaldt, og deretter med dialkyl-klorfosfat.

I foretrukne utførelser vil litiumbasen være litium (bis)trimetylsilyl)amid; dialkylklorfosfatet vil være diallylklorfosfat; og sakkaridet vil ha formelen

Et C-^-dialkylfosfonatsakkarid kan fremstilles ved

(a) først å omsette sakkaridet med trikloraceto-nitril og karbonat under anerobe betingelser; og deretter (b) å behandle med en Lewis syre og et trialkylfosfitt under anerobe betingelser. I foretrukne utførelser, vil karbonatet være cesiumkarbonat; trialkylfosfittet vil være triallylfosfitt; og sakkaridet vil ha formelen

I foretrukne utførelser av det syvende aspekt vil alkalimetallsaltet være natriumhydrid; og den sulfonylmono-aktiverte alkyldiol vil være monotosylalkyldiol.

En sykdom hos et pattedyr, for hvilken en lipid A-reseptorantagonist er effektiv, kan behandles ved administrasjon til pattedyret av en terapeutisk blanding ifølge denne oppfinnelse i en dosering som effektivt vil redusere bindingen av LPS til en lipid A-reseptor.

Septisk sjokk hos et pattedyr kan behandles ved administrasjon til pattedyret av en terapeutisk blanding ifølge denne oppfinnelse i en dosering som effektivt vil antagonisere LPS-mediert målcelleaktivering.

LPS-mediert aktivering av en virusinfeksjon hos et pattedyr kan behandles ved administrering til pattedyret av en terapeutisk blanding ifølge denne oppfinnelse i en dosering som effektivt vil antagonisere LPS-mediert målcelleaktivering .

I foretrukne utførelser, omfatter viruset et NF-kappa B-bindingssete i en replikasjonskontrollsekvens; viruset er et humant immunsviktvirus, f.eks. HIV-1 eller HIV-2; viruset er et herpesvirus, f.eks. et Herpes simplex virus; og viruset er et influensavirus.

En "beskyttet" gruppe som anvendt heri, betyr en gruppe (f.eks. en hydroksylgruppe bundet til en mellomproduktforbindelse ifølge denne oppfinnelse) som er forhindret fra å delta i en kjemisk omsetning; den spesielle omsetning som blokkeres og betingelsene hvorunder den beskyttende gruppe blir fjernet, er spesielle for hver mellomproduktforbindelse og gjøres åpenbare for fagfolk på dette området ved de syntesefremgangsmåter som er beskrevet heri. Eksempler på foretrukne beskyttelsesgrupper omfatter, men er ikke begrenset til, metyl, benzyl, substituert benzyl, silyl, alkylsilyl, metoksymetyl, alkylacyl, alkyloksykarbonyl og aromatiske acylgrupper.

Med "aktivert" menes å ha et karbonsenter inntil en "utgående gruppe som kan erstattes". Valget av en egnet utgående gruppe gjøres åpenbart for fagfolk på dette området ved de syntesefremgangsmåter som er beskrevet heri. Eksempler på foretrukne utgående grupper omfatter, men er ikke begrenset til, acyloksy, iminoeteroksy, iminokarbonatoksy, fenoksy, sulfonyloksy, alkyltio og aryltio, aryloksy, Se alkyl og halogengrupper.

Med "monoaktivert" menes en forbindelse (f.eks. en mellomproduktforbindelse ifølge denne oppfinnelse) som har bare en aktivert gruppe (som definert ovenfor) bundet til seg.

De lipid A-analoger som er beskrevet heri, gir spesielt virksomme teraputika for behandling eller forebygging av LPS-medierte forstyrrelser. Uten å være bundet til noen spesiell teori, vil analogene sannsynligvis virke ved å blokkere adgang til LPS-målseter på mediatormolekyler, og derved konkurrere direkte med bakterielt LPS. Fordi denne blokkering foregår i et svært tidlig trinn i mediatorkaskaden, er terapien uvanlig effektiv, og ledsages av få eller ingen sidevirkninger. Dessuten er de relativt billige å fremstille, fordi lipid A^-analogene ifølge den foreliggende oppfinnelse syntetiseres kjemisk, og er av uvanlig høy renhet og definert kjemisk konstitusjon, hvilket fører til lav immunoreaktivitet.

Andre trekk og fordeler ifølge denne oppfinnelse vil være åpenbare ut i fra følgende beskrivelse av de foretrukne utførelser og ut i fra kravene.

Beskrivelse av de foretrukne utførelser

Det følger nå eksempler på syntetiske forbindelser som anvendes spesielt i denne oppfinnelse. Disse eksempler er utformet til å illustrere, ikke begrense oppfinnelsen.

Tabell 1 gir forkortelser som blir anvendt gjennom hele beskrivelsen.

Eksempel 1

Dette eksempel illustrerer syntesen av lipid A-analogene beskrevet heri, samt syntesene av nye mellomprodukter som også kreves i oppfinnelsen.

Del A

Fremstilling av monosakkarider og disakkarider

Til en 0°C løsning av D-mannose (dvs. Forbindelse 1; 1,5 kg, 8,33 mol; Lancaster Chemical Co., Windham, NH) løst i vannfri pyridin (3,5 kg, 126,0 mol, Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI) ble tilsatt 5,6 kg (54,9 mol) eddiksyreanhydrid (Aldrich Chemical Co.) i løpet av fire timer med en hastihet som holder reaksjonstemperaturen mellom 20-40°C. Den resulterende løsning ble deretter omrørt ved romtemperatur over natten; 5,0 g (40,9 mmol) av 4-dimetylaminopyridin (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt; den resulterende blanding ble omrørt i ytterligere 48 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter helt over i 14,0 liter isvann under kraftig omrøring, og ekstrahert med 12,0 liter diklormetan (J.T. Baker, Inc., Phillipsburg, NJ). Det organiske sjikt ble vasket først med IN saltsyre (10,0 liter,- Fisher Scientific Co., Pittsburgh, PA), deretter med mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning (20,0 liter; Fisher Scientific Co.), og tilslutt med 5,0 liter mettet vandig natriumkloridløsning og tørket over 3 kg natriumsulfat (Fischer Scientific Co.). Løsningen ble deretter filtrert gjennom en glass-sintertrakt og konsentrert under redusert trykk ved 40°C, og ga 3,5 kg av Forbindelse 2 {Rf: 0,39 [etylacetat (J.T. Baker, Inc.): heksaner (J.T. Baker, Inc.), 1:1 (v/v)]} som en brun olje som ble anvendt i det neste trinn uten rensing.

Forbindelse 2 (3,0 kg, 7,3 mol) ble blandet med tiofenol (Aldrich Chemical Co.) (1,5 liter, 11,0 mol), løst i 8,0 liter kloroform (J.T. Baker, Inc.), og bortrifluorideterat (1,6 liter, 12,9 mol, Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt med en slik hastighet at reaksjonstemperaturen holdt seg under 40°C. Etter fullstendig forbruk av utgangsmaterialet [som målt ved tynnsjiktkromatografisk analyse ved anvendelse av heksaner:-etylacetat, 1:1 (v/v)], ble blandingen avkjølt til romtemperatur og langsomt helt under rask mekanisk omrøring, over i 15,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning. Den resulterende blanding ble ekstrahert med 18,0 liter diklormetan, og det organiske sjikt vasket først med 15,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og deretter med 10,0 liter mettet vandig natriumkloridløsning, og den resulterende løsning tørket over 3 kg natriumsulfat og filtrert gjennom en glass-sintertrakt. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk ved 40°C, og ga 4,99 kg av Forbindelse 3_ {R^: 0,63 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v) ] } ; som en mørkebrun olje som ble anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing.

Til en mekanisk omrørt løsning av Forbindelse 3 (6,28 kg, 4,3 mol) løst i metylalkohol (13,0 liter; Aldrich Chemical Co.) ble gradvis tilsatt 750,0 ml (3,28 mol) av en 25% (wt/v) natriummetoksyd/metylaclkoholløsning (Aldrich Chemical Co.), mens reaksjonstemperaturen ble holdt under 40°C. Den resulterende blanding ble omrørt ved 40°C inntil fullstendig omseting, dvs. inntil bare materiale med en R_ på 0,05 (ved tynnsjiktkromatografisk analyse ved anvendelse av etylacetat), ble påvist. Blandingen ble deretter avkjølt til romtemperatur og nøytralisert ved tilsetning av Dowex sur 50X 8-200 ione-bytterharpiks (Aldrich Chemical Co.). Den nøytraliserte reaksjonsblanding ble filtrert gjennom en glass-sintertrakt og deretter konsentrert under redusert trykk ved 40°C, og ga en brun olje. Oljen ble delvis renset ved tilsetning under omrøring av to 10,0 liter alikvoter av 5:1 (v/v) etylacetat/- heksaner; supernatanten ble kastet etter hver vasking. Produktet, Forbindelse 4 {Rf: 0,05 [etylacetat]}, ble oppnådd som en brun olje etter tørking under vakuun.

Forbindelse 4 (3,0 kg) ble løst i vannfritt N,N-dimetylformamid (6,0 liter, Aldrich Chemical Co.) ved romtemperatur. Til denne løsning ble først tilsatt 1,0 kg (4,3 mol) (+)-10-kamfersulfonsyre (Aldrich Chemical Co.), og deretter tilsatt (langsomt i løpet av 48 timer) 8,0 liter av 2,2-dimetoksypropan (Aldrich Chemical Co.). Tynnsjikt-kromatografisk analyse [etylacetat:heksaner, 1:4 (v/v)] anga fullstendig omsetning. Den ferdige reaksjonsblanding ble helt over i 10,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 12,0 liter diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket først med 5,0 liter vann, og deretter med 10,0 liter mettet vandig natriumkloridløsning, og tørket over 3,0 kg natriumsulfat. Den tørkede løsning ble filtrert gjennom en glass-sintertrakt og konsentrert under redusert trykk ved 40°C, og ga Forbindelse 5 som en svart olje. Den rå olje ble løst i 10,0 liter kokende etylacetat, avkjølt til romtemperatur, og fikk krystallisere over natten. Den krystallinske masse ble avkjølt til 5°C, filtrert og vasket med 5,0 liter heksaner ved 0°C, og ga 2,0 kg av delvis renset Forbindelse 5. som lysebrune nåler. Det gjenværende filtrat ble konsentrert under redusert trykk ved 40°C, den resulterende olje løst i 2,0 liter diklormetan, og løsningen påsatt på en kort søyle av silikagel (2,0 kg,- J.T. Baker, Inc.) og eluert med 1:4 (v/v) etylacetat/heksaner. Filtratet ble konsentrert og omkrystallisert fra etylacetat, og ga ytterligere 1,5 kg krystallinsk produkt. De samlede krystaller ble omkrystallisert fra etylacetat, og ga tilsammen 2,8 kg av Forbindelse 5 {Rf: 0,60 [etylacetat:heksaner, 1:4 (v/v)]} i 66% samlet utbytte fra Forbindelse 1.

Forbindelse 5 (1,98 kg, 6,0 mol) ble løst i vannfri tetrahydrofuran (6,0 liter,- Aldrich Chemical Co.), og 40,0 g (0,31 mol) av naftalen (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt ved romtemepratur under nitrogenatmosfære. Til denne løsning ble deretter tilsatt 20,0 g (2,9 mol) av litiumtråd (3,2 mm diameter, 0,01% natrium; Aldrich Chemical Co.), kappet i 20 cm lange stykker, og den resulterende blanding ble underkastet rask mekanisk omrøring. Etter fullstendig omsetning {overvåket ved tynnsjiktkromatografisk analyse [etylacetat:-heksaner, 1:1 (v/v)]}, ble overskudd av litiumtråd fjernet, og reaksjonsblandingen ble helt over i 10,0 liter mettet vandig ammoniumkloridløsning (Fisher Scientific Co.). Blandingen ble deretter ekstrahert med 10,0 liter diklormetan; det organiske sjikt ble vasket med 7,0 liter mettet vandig natriumklorid-løsning, tørket over 2,0 kg natriumsulfat, filtrert gjennom en sintret glasstrakt og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga 1,4 kg av den rå Forbindelse 6. {Rf: 0,50 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]}.

Forbindelse 6. (3,5 kg) ble langsomt tilsatt til en mekanisk omrørt blanding av 0,5 liter eddiksyreanhydrid og 4,5 liter vannfri pyridin. Tilsetningen ble utført i et is-vann-bad for å holde en reaksjonstemperatur under 25°C. 48 timer senere, ble reaksjonsblandingen konsentrert til tørrhet under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en sirupslignende krystallinsk masse som ble filtrert på en sintret glasstrakt og vasket med 1,0 liter heksaner (ved 0°C), og ga 2,25 kg av Forbindelse 7 som hvite nåler {Rf: 0,5 [etylacetat:heksaner, 1:4 (v/v)]}.

Forbindelse 7 (50,6 g, 0,22 mol) ble løst i 1,3 liter vannfri acetonitril (Aldrich Chemical Co.), og en blanding av fint pulverisert ammoniumceriumnitrat (550,0 g, 1,0 mol, Aldrich Chemical Co.), og natriumazid (40,0 g, 0,62 mol, Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt ved -30°C ved anvendelse av en trakt for faste tilsetninger. Under tilsetningen steg reaksjonstemperaturen til -26°C. Etter omrøring ved -28°C i 4 timer, ble reaksjonsblandingen helt langsomt over i 4,0 liter isvann. Gassutvikling ble observert under denne fremgangsmåte. Blandingen ble deretter fortynnet med 4,0 liter etylacetat, og de to sjikt ble adskilt. Det organiske sjikt ble vasket først med en 1,0 liter porsjon vann, deretter med 2,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, og tilslutt med 1,0 liter mettet vandig natriumkloridløsning; den resulterende løsning ble deretter tørket over 500,0 g natrium-sulf at, filtrert gjennom en sintret glasstrakt, og konsentrert til tørrhet under redusert trykk ved romtemperatur, og ga ca. 70,0 g rått produkt som en lys gul olje. Oljen ble ledet gjennom en kort matte av silikagel (1,0 kg) med en blanding av 1:2 (v/v) etylacetat:heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikt-kromatografi i sk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 56,0 g (0,169 mol) av (Forbindelse 8.) som et fargeløst skum i 77% utbytte.

Forbindelse 8 (56,0 g, 0,168 mol) ble løst i en blanding av dioksan (1,47 liter; Aldrich Chemical Co.) og vann (600,0 ml), og 64,5 g (0,93 mol) natriumnitritt (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet med tilbakeløp i 1 time, avkjølt til romtemperatur, og fortynnet med etylacetat (2,0 liter). De to sjikt ble adskilt, og det vandige sjikt ekstrahert med 2,0 liter etylacetat. De samlede organiske sjikt ble vasket først med 1,0 liter vann, deretter med 1,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, og tilslutt med 1,0 liter mettet vandig natriumkloridløsnig; løsningen ble tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en sintrert glasstrakt og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en gul olje. Oljen ble ledet gjennom en kort pakning av silikagel (1,0 kg) med en blanding av 1:1 (v/v) etylacetat/heksaner. Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakkum ved romtemperatur, ga 55,0 g (0,168 mol) av Forbindelse 9 {Rf: 0,14 [etylacetat:heksaner, 1:4 (v/v)]} som et fargeløst skum i nesten kvantitativt utbytte.

Forbindelse 9 (1,50 g, 5,20 mmol) ble løst i vannfritt tetrahydrofuran (20,0 ml) og trikloracetonitril (14 ml, 0,14 mol; Aldrich Chemical Co.). Til denne løsning ble tilsatt 1,8 ml (1,8 mmol) av en 1,0 M løsning av litium bis(trimetyl-silyl)-amid (Aldrich Chemical Co.) i heksaner tilsatt ved 0°C i løpet av 4 timer. Reaksjonen ble undertrykket med 10,0 ml mettet vandig ammoniumkloridløsning og ekstrahert med 200,0 ml etyl-acetat..Qet organiske sjikt ble vasket med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Det rå produkt ble renset på silikagelkolonne (150,0 g), og eluert med 1:3 (v/v) etylacetat/- heksaner, og ga 1,40 g (3,2 mmol) av a-triklorimidatet, dvs. Forbindelse 10a {Rf: 0,37 [heksaner:etylacetat, 3:1 (v/v)]} som en sirup i 67% utbytte, og 0,47 g (1,09 mmol) av £-triklorimidatet, dvs. Forbindelse 10b {Rf: 0,45 [heksaner:etylacetat, 3:1 (v/v)]} som krystallinske nåler i 25% utbytte.

Forbindelse 10a (130,0 mg, 0,30 mmol) ble blandet med 3,4-dimetoksybenzylalkohol (65,0 ml, 0,45 mmol; Aldrich Chemical Co.) og vannfri diklormetan (5,0 ml). Til denne blanding ble tilsatt 200,0 mg finpulverisert AW-300 molekyl-sikter (Aldrich Chemical Co.). Blandingen ble omrørt i 1 time ved romtemperatur, avkjølt til -78°C, og 1,0 ml av en 0,02 M diklormetanløsning av bortrifluorideterat tilsatt i løpet av en periode på 6 timer. Reaksjonen ble undertrykket med 1,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 50,0 ml diklormetan. De organiske sjikt ble tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en sintret glasstrakt, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Rensing på en silikagelkolonne ved eluering med 2:1 (v/v) heksaner/etylacetat, ga en 6:l-blanding av Forbindelse 11b {Rf: 0,28 [heksaner:etylacetat, 3:1 (v/v)]} og Forbindelse lia {Rf: 0,31 [heksaner:etylacetat, 3:1 (v/v)]} som et krystallinsk fast stoff. Det faste stoff ble omkrystallisert fra 2:1 (v/v) heksaner/etylacetat som beskrevet ovenfor. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjikt-kromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 91,9 mg (0,21 mmol) av den rene Forbindelse 11b i 70% utbytte.

Til en løsning av Forbindelse 11b (18,48 g, 0,04 mol) i metylalkohol (200,0 ml) ble tilsatt 2,0 ml av en 25% (w/v) natriummetoksyd/metylalkoholløsning; den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble nøytralisert med 10,0 ml mettet vandig ammoniumklorid-løsning og ekstrahert med 500,0 ml etylacetat. Det organiske sjikt ble vasket først med 100,0 ml vann, og deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning og tørket over 50,0 g natriumsulfat. Filtrering gjennom en bomullsplugg og fordampning av løsningsmiddelet under redusert trykk ved romtemperatur, ga et rått produkt som ble påsatt på en silikagelkolonne (2,0 kg) og eluert med 2:1 (v/v) heksaner/etylacetat, og ga 15,1 g (0,038 mol) av Forbindelse 12 {Rf: 0,19 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 90% utbytte.

Forbindelse 12. (15,1 g, 0,038 mol) ble løst i vannfri diklormetan (2Q0,0 ml). Til denne løsning ble i rekkefølge . tilsatt 12,4 g (0,038 mol) av Forbindelse A6 (se nedenfor), 9,5 g (0,046 mol) 1,3-dicykloheksylkarbodiimid (Aldrich Chemical Co.), og 50,0 mg (0,41 mmol) av 4-dimetylaminopyridin, ved 0°C, med magnetisk omrøring. Etter 30 minutter ble blandingen fortynnet med 100,0 ml heksaner og filtrert gjennom 100,0 g celitt 545 (Aldrich Chemical Co.). Filtratet ble inndampet under redusert trykk ved romtemperatur, og resten renset på silikagelkolonne (2,0 kg) ved eluering med 1:4 (v/v) etylacetat/heksaner. Fordampning av løsnings-middelet fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 22,1 g (0,034 mol) av Forbindelse 13 {Rf: 0,41 [etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 89% utbytte.

Forbindelse 13 (22,0 g, 0,034 mol) ble løst i iseddiksyre (90,0 ml; Fisher Scientific Co.) og vann (10,0 ml) og magnetisk omrørt ved romtemperatur i 36 timer. Blandingen ble deretter inndampet under redusert trykk ved romtemperatur, og destillert azeotropisk tre ganger med 50,0 ml porsjoner av toluen (J.T. Baker, Inc.). Resten ble renset på en silikagelkolonne (2,0 kg) ved eluering med en lineær gradient av 1:99 (v/v) til 5:95 (v/v) metylalkohol/kloroform, og ga 22,7 g (0,037 mol) av Forbindelse 14 {Rf: 0,15 [kloroform^etylalkohol, 98:2 (v/v)]} i kvantitativt utbytte. Forbindelse 14 ble anvendt til det neste trinn uten ytterligere rensing.

Forbindelse 14 (20,6 g, 0,034 mol) ble løst i N,N-dimetylformamid (33,9 ml) under nitrogenatmosfære ved 0°C.

Til denne løsning ble tilsatt 11,5 g (0,17 mol) imidazol (Aldrich Chemical Co.), etterfulgt av 5,5 g (0,037 mol) av tert-butyldimetylsilylklorid (Lithco Corporation of America, Gastonia, NC). Den resulterende blanding ble omrørt i en time, fortynnet med 500,0 ml etylacetat, og helt over i 500,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning. Det organiske sjikt ble vasket først med 200,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, deretter med 200,0 ml vann, og tilslutt med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Det organiske sjikt ble tørket over 200,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en bomullsplugg, og inndampet under redusert trykk ved romtemepratur. Resten ble deretter renset ved silikagelkolonnekromatografi (2,0 kg), eluering med 1:4 (v/v) etylacetat/heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse), ga 24,2 g (0,033 mol) av Forbindelse 15 {Rf: 0,76 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]} i 98% utbytte.

Forbindelse 15 (24,1 g, 0,033 mol) ble løst i vannfri toluen (300,0 ml) og vannfri pyridin (30,0 ml) ved 0°C under nitrogenatmosfære. Til denne løsning ble langsomt tilsatt (dvs. i løpet av 10 minutter) 24,1 ml (0,046 mol) av en 1,93 M løsning av fosgen i toluenen (Fluka Chemical Corp., Ronkonkoma, NY). 30 minutter senere ble tilsatt 24,0 ml (0,353 mol) allylalkohol (Fluka Chemical Corp., Ronkonkoma, NY) i løpet av en fem minutters periode, og den resulterende reaksjonsblanding ble omrørt i ytterligere 10 minutter. Reaksjonen ble undertrykket ved tilsetning av 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, og fortynnet med 1,0 liter etylacetat. Det organiske sjikt ble vasket først med 500,0 ml vann, deretter med 500,0 ml mettet vandig natrium-kloridløsning, tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en bomullsplugg, og deretter inndampet under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset ved silikagel-kolonnekromatograf i (2,0 kg), eluering med 1:4 (v/v) etylacetat/heksaner, og ga 25,3 g (0,031 mol) av Forbindelse 16 {Rf: 0,60 [etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 95% utbytte.

I et 250,0 ml polypropylenrør ble løst 25,3 g (0,031 mol) av Forbindelse JL6 i 100,0 ml acetonitril (Aldrich Chemical Co.). Til denne løsning ble tilsatt ved romtemperatur og med magnetrøring, 100,0 ml av en 4 M løsning av hydrogenfluoridsyre (Aldrich Chemical Co.) i acetonitril. Etter 30 minutter ble reaksjonen undertrykket med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 500,0 ml kloroform. Det organiske sjikt ble vasket med 100,0 ml vann, etterfulgt av 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, og deretter tørket over 100,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en bomullsplugg, og løsningsmiddelet fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset ved silikagelkolonnekromatografi (2,0 kg), eluering med 2:3 (v/v) etylacetat/heksaner, og ga 19,9 g (0,029 mol) av Forbindelse 17 {Rf: 0,53.{etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]} i 91% utbytte.

Forbindelse 12 (20,0 g, 50,1 mmol) ble løst i vannfri diklormetan (500,0 ml) ved 0°C, og 19,4 g (52,7 mmol) av Forbindelse B6 (se nedenfor), 20,8 g (100,9 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid og 120,0 mg (0,98 mmol) av 4-dimetylaminopyridin ble tilsatt. Etter omrøring i 20 minutter ved romtemperatur, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 500,0 ml heksaner, filtrert gjennom 100,0 g celitt 545, og de faste stoffer vasket med 100,0 ml heksaner. De samlede filtrater ble deretter konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur, og den oppnådde rest ble renset ved silikagelkolonne-kromatograf i (2,0 kg), og eluering med 1:3 (v/v) etylacetat/- heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 35,0 g (47,0 mmol) av Forbindelse 18. {Rf: 0,54 [etylacetat-.heksaner, 1:4 (v/v)]} i 93 % utbytte.

En løsning av 35,0 g (47,0 mmol) av Forbindelse 18 i en blanding av 240,0 ml iseddiksyre og 60,0 ml vann, ble magnetisk omrørt i 14 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og det rå produkt destillert azeotropisk med tre 50,0 ml porsjoner av toluen. Produktet ble renset ved silikagelkolonnekromatografi (3,0 kg), eluering først med 1:1 (v/v) heksaner/dietyleter (Mallinckrodt Chemical Co., St. Louis, MO), etterfulgt av eluering med etylacetat, og ga 29,3 g (41,6 mmol) av Forbindelse 19. {Rf: 0,62 [diklormetan: - metylalkolol, 95:5 (v/v)]} i 89% utbytte.

Forbindelse 19 (4,9 g, 6,94 mmol) ble løst i vannfri toluen (50,0 ml) og vannfri pyridin (12,0 ml) ved 0°C under nitrogenatmosfære. Til denne løsning ble tilsatt 1,31 ml (12,3 mmol) allylklorformiat (Aldrich Chemical Co.). Etter 7,5 timer ble blandingen fortynnet med 100,0 ml etylacetat og vasket, først med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonat løsning, deretter med 100,0 ml vann, og til slutt med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Blandingen ble deretter tørket over 50,0 g natriumsulfat, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble løst i 10,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (500,0 g) og eluert med 1:2 (v/v) etylacetat:heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkolonnekromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 4,2 g (5,32 mmol) av Forbindelse 20 {Rf: 0,70 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]} i 77% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 18,26 g (0,02 mol) av

Forbindelse 20. i 200,0 ml vannfri tetrahydrofuran, ble tilsatt 17,02 ml (0, 069__.mol) bis (allylosky) (diisopropylamino) f osf in (fremstilt ved metoden til Brannwarth og Kung, Tetrahedron Lett. 30/ 4219, 1989) og 14,58 g (0,208 mol) lH-tetrazol (Amresco Chemical Co., Solon, OH) ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Etter 1 time ble blandingen avkjølt til

-78°C, og en løsning av 11,95 g 3-klorperoksybenzosyre (Aldrich Chemical Co.) i 80,0 ml vannfri diklormetan ble tilsatt. Reaksjonstemperaturen ble justert til 0°C, og blandingen omrørt i 20 minutter. Reaksjonen ble undertrykket med 50,0 ml av en 10% vandig natriumtiosulfatløsning; og etter 10 minutters omrøring ved romtemperatur ble blandingen oppvarmet til romtemperatur. Blandingen ble deretter helt over i 200,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 500,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket først med 100,0 ml vann, og deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 200,0 g natriumsulfat, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (2,0 kg), og ved eluering med etylacetat:heksaner [1:2 (v/v)]. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 17,64 g (0,0186 mol) av Forbindelse 21 {Rf: 0,32 [etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 80,5% utbytte.

Forbindelse 21 (35,0 g, 0,0369 mol) ble løst i 40,0 ml tert-butylalkohol (Aldrich Chemical Co.), 40,0 ml pH 7,0 fosfatbufferkonsentrat (Fischer Scientific Co.) og 200,0 ml diklormetan. Til denne løsning ble tilsatt 33 g (0,145 mol) 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzokinon (Aldrich Chemical Co.) ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Blandingen ble omrørt i mørke ved romtemperatur i 14 timer. Reaksjonen ble undertrykket med 200,0 ml 10% natriumtiosulfatløsning (Fischer Scientific Co.), helt over i 100,0 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning, og ekstrahert med 1,0 liter kloroform. Det organiske sjikt ble vasket først med 200,0 ml vann og deretter med 200,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 500,0 g natriumsulfat, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Blandingen ble renset på en silikagelkolonne (3,0 kg) ved eluering med 98:2 (v/v) diklormetan/metylalkohol. Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynn-sjiktkromatografi isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 27,5 g (0,0344 mol) av Forbindelse 22. {Rf: 0,57 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 94% utbytte.

Til en mekanisk omrørt løsning av 52,8 g (0,066 mol) av Forbindelse 22 i 1,32 liter trikloracetonitril, ble tilsatt 53,0 g (0,163 mol) cesiumkarbonat (Aldrich Chemical Co.) ved romtemperatur under nitrogenatomsfære. Etter 8 timer ble blandingen filtrert gjennom 100,0 g celitt 545, vasket med 500,0 ml diklormetan, og løsningsmiddelet fordampet under redusert trykk ved romtemepratur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (3,0 kg), eluert med 95:5 (v/v) diklormetan/- dietyleter. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 30,0 g

(0,03 mol) av Forbindelse 23A (a-isomer) {Rf: 0,79 [diklormetan rdietyleter, 9:1 (v/v)]} og 10,0 g (0,01 mol) av Forbindelse 23B (S-isomer) {Rf: 0,76 [diklormetan:dietyleter, 9:1 (v/v)]}. Forbindelse 23B ble igjen underkastet reaksjonen ovenfor og påfølgende rensing, og ga et andre utbytte av Forbindelse 23A. De to utbytter ble slått sammen, og ga tilsammen 32,2 g (0,034 mol) av ren Forbindelse 23A i 52% utbytte.

En blanding av 6,0 g (6,3 mmol) av Forbindelse 23A og 4,5 g av forbindelse 17 (6,5 mmol) ble tørket under vakuum i 14 timer, og løst i 100,0 ml vannfri diklormetan. Til denne løsning ble tilsatt 10,0 g pulverisert AW-300 molekylsikter (som var blitt flammetørket under vakuum), og den resulterende blanding magnetisk omrørt i 1 time ved romtemperatur under argon. Blandingen ble avkjølt til -23°C, og 9,45 ml (1,89 mmol) av en 0,2 M bortrifluorideterat:diklormetanløsning [fremstilt ved å løse 0,25 ml (2,03 mmol) bortrifluorideterat i 10,0 ml vannfri diklormetan og omrøring med 200,0 mg pulverisert AW-300 molekylsikter i 1 time ved romtemperatur] ble tilsatt ved anvendelse av en sprøytepumpe over en seks timers periode. Reaksjonen ble undertrykket med 30,0 ml av mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, fortynnet med 500,0 ml diklormetan, og filtrert gjennom 50,0 g celitt 545. Filtratet ble vasket først med 200,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonat løsning, deretter med 200,0 ml vann, og tilslutt med 200,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning; filtratet ble deretter tørket over 300,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom_.en bomullsplugg, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende rest ble renset på silikagelkolonne (1,0 kg) ved eluering med 1:3 (v/v) etylacetat/heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 5,42 g (3,67 mmol) av Forbindelse 24 {Rf: 0,34 [etylacetat:-heksanser, 1:2 (v/v)]} i 59% utbytte.

Forbindelse 24 (2,11 g, 1,43) mmol) ble løst i vannfri diklormetan (22,0 ml), og 1,9 g av tinn(II)tris-benzentiolat-trietylaminkompleks (fremstilt ved fremgangsmåten til Barta et al., Tetrahedron Lett. 47, 5941, 1987) ble tilsatt. Den resulterende blanding ble omrørt i 8 timer ved romtemperatur under nitrogenatomosfære i fravær av lys. Tynnsjiktkromatografisk analyse [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)] viste at alt utgangsmateriale var forbrukt. Reaksjonsblandingen ble påsatt direkte på en silikagelkolonne (200,0 g) og eluert først med 4:1 (v/v) heksaner/etylacetat for å fjerne biprodukter, og deretter med 200,0 ml etylacetat. Fordampning av løsnings-middel fra dejoroduktholdige fraksjoner (som bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 0,91 g (1,34 mmol) av Forbindelse 25 {Rf: 0,34 [etylacetat:heksanser, 1:1 (v/v)]} i 93,5% utbytte.

Forbindelse 25 (1,91 g, 1,34 mmol) ble løst i 10,0 ml vannfri diklormetan. Til denne blanding ble tilsatt 1,7 g (4,65 mmol) av Forbindelse C6 (se nedenfor) og 1,98 g (9,60 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid ved romtemperatur. 14 timer senere viste tynnsjiktkromatografisk analyse [heksaner:-etylacetat, 1:1 (v/v)] at reaksjonen var fullstendig. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 50,0 ml etylacetat og filtrert gjennom 10,0 g celitt 545, de faste stoffer vasket med 20,0 ml etylacetat, og filtratet inndampet under redusert trykk ved romtemperatur, hvilket ga en sirupsaktig rest. Denne sirup ble løst i 5,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert, først med 1:2 (v/v) etylacetat/heksaner og deretter med 1:1 (v/v) etylacetat/- heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 2,0 g (0,95 mmol) av Forbindelse 26 {Rf: 0,5 [etylacetat:heksanser, 1:1 (v/v)]} i 71% utbytte.

Forbindelse 26. (817,0 mg, 0,386 mmol) ble blandet med 13,5 ml diklormetan, 1,4 ml av tert-butylalkohol og 1,4 ml av pH 7,0 fosfatbufferkonsentrat. Til denne blanding ble tilsatt 439,0 mg (1,9 mmol) av 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzokinon. Den resulterende blanding ble magnetisk omrørt under nitrogenatmosfære i mørke inntil tynnsjiktkromatografisk analyse [diklormetan :metylalkohol, 95:5 (v/v)] anga fullstendig forbruk av utgangsmateriale (ca. 4,5 timer). Reaksjonen ble deretter undertrykket med 10,0 ml 10% vandig natriumtiosulfatløsning, fortynnet med 100,0 ml diklormetan, og helt over i 50,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning. Det organiske sjikt ble fraskilt, vasket med 50,0 ml mettet vandig natrium-kloridløsning, tørket over natriumsulfat, og filtrert gjennom en bomullsplugg. Den rå reaksjonsblanding ble påsatt direkte på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med 95:5 (v/v) diklormetan/metylalkohol, og ga 606,0 mg (0,35 mmol) av Forbindelse 27 {Rf: 0,42 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 91 utbytte.

For fremstilling av lipid A-analogen B274- 32. ble Forbindelse 27 avbeskyttet generelt som beskrevet nedenfor for fremstilling av Forbindelse 31, og det frie syreprodukt ble omsatt med L-lysin som beskrevet nedenfor for analog B214- 32.

Til en løsning av 408,4 mg (0,237 mmol) av Forbindelse 27 i vannfri tetrahydrofuran (5,0 ml), ble langsomt tilsatt 0,265 ml (0,262 mmol) av 0,99 M n-butyllitium (Aldrich Chemical Co.) i heksaner under nitrogenatmosfære, ved -78°C under omrøring. Etter fem minutter ble tilsatt 0,71 ml (0,355 mmol) av 0,5 M diallylklorfosfat (fremstilt ved metoden til Hayakawa et al., Tetrahedron Lett. 28, 2259, 1987) i vannfri toluen, og blandingen ble omrørt i 10 minutter. Blandingen ble deretter oppvarmet til 0°C, omrørt i 15 minutter, og reaksjonen undertrykket med 0,1 ml iseddiksyre. Reaksjonsblandingen ble helt over i 20,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 100 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket med 20 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og deretter med 20,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en bomullsplugg, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) ved eluering med 1:1 (v/v) diklormetan/etylacetat, og ga 298,2 mg (0,158 mmol) av Forbindelse 28. {Rf: 0,38 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 66,8% utbytte.

For fremstilling lipid A-analogene B231- 31 og B231- 32, ble Forbindelse 28 avbeskyttet generelt som beskrevet nedenfor for fremstilling av Forbindelse 31. Lipid A-analogen B231- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet nedenfor for analog B214- 32. Lipid A-analogen B231- 31 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med Tris som beskrevet nedenfor for B214- 31.

289,0 mg (0,92 mmol) 1,1,1-tris(acetoksy)-1,1-dihydro-1, 2-benzjodoksol-3(1H)-on (fremstilt ved fremgangsmåten til Dess og Martin, J. Org. Chem. 48:4156, 1983) ble løst i 9,1 ml vannfri diklormetan, og 600,0 mg av flammetørket pulverisert 4Å molekylsikter (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt. Til denne reaksjonsblanding ble deretter langsomt tilsatt en løsning av 287,2 mg (0,15 mmol) av Forbindelse 28. løst i 2,9 ml diklormetan, ved 0°C under argon. To timer senere ble langsomt tilsatt 5,0 ml (0,50 mmol) av en 0,1 M diklormetan-løsning av 1,1,1-tris(acetoksy)-1,1-dihydro-l,2-benzjodoksol-3(lH)-on, og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere to timer. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 10,0 ml dietyleter, og 20,0 ml av en 1:1 (v/v) blanding av 10% vandig natriumtiosulfatløsning og mettet vandig natriumhydrogenkarbonat løsning ble tilsatt. Den resulterende blanding ble ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket med 50,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemepratur. Resten ble renset på seks 0,5 mm silikagelpreparative tynnsjiktkromatografiplater (E.M. Science, Gibbstown, NJ) ved anvendelse, som elueringsløsnings-middel, av 95:5 (v/v) diklormetan/metylalkohol. Produkt-båndene ble eluert fra silikagelen med etylacetat, og ga 110,0 mg (0,058 mmol) av Forbindelse 29. {Rf: 0,59 [diklormetan:-metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 38,2% utbytte og 120,0 mg (0,064 mmol) av Forbindelse 30 {R^: 0,53 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 42% utbytte.

For fremstilling av lipid A-analogene B218- 31 og B218- 32. ble Forbindelsen 29. avbeskyttet generelt som beskrevet nedenfor for fremstilling av Forbindelse 31. Lipid A-analogen B218- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet nedenfor for analog B214- 32. Lipid A-analogen B218- 31 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med Tris som beskrevet nedenfor for B214- 31.

Forbindelse 30. (332,0 mg, 0,176 mmol) ble løst i 40,0 ml vannfri tetrahydrofuran:96% maursyre (Aldrich Chemical Co.)

(10:1 (v/v)) under nitrogenatmosfære i mørke. Til denne løsning ble tilsatt tetrakis(trifenylfosfin)palladium(O) (2,07 g, 1,76 mmol), Aldrich Chemical Co.) og trifenylfosfin (1,45 g, 5,28 mmol, Aldrich Chemical Co.). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i to timer, løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtemperatur, og den resulterende rest destillert azeotropisk med 5,0 ml toluen tre ganger. Resten ble deretter løst i 10,0 ml metylalkohol, og hydrogensulfid-gass ble boblet gjennom løsningen i fem minutter. Løsnings-middel ble deretter fjernet ved fordampning under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble renset på en DEAE-cellulosekolonne (100,0 g; Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) ved anvendelse av 0 til 0,1 M ammoniumacetat- (Aldrich Chemical Co.) saltgradient i en 3:2:1 (v/v/v) blanding i metylalkohol/kloroform. Fraksjoner inneholdende produktet (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) ble slått sammen, og et like stort volum av kloroform tilsatt. Det organiske sjikt ble fraskilt og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga produktet i form av sitt ammoniumsalt. Produktet ble deretter løst i 100,0 ml vann, og overskuddet av ammoniumacetat ble fjernet ved lyofilisering. Det oppnådde produkt er lipid A-analogen B214- 33.

Det lyofiliserte produkt ble omdannet til den frie syre ved å lede det gjennom en CM-cellulosekolonne (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO), ved eluering med 3:2:1 (v/v/v) metylalkohol /kloroform/ vann. Løsningen av fritt syreprodukt ble inndampet til tørrhet under redusert trykk ved romtemperatur,

og en nøyaktig vekt oppnådd.

Produktet ble deretter løst i 5,0 ml metylalkohol, og 73 mg (0,49 mmol) L-lysin (Sigma Chemical Co., "cellekultur-kvalitet" løst i 5,0 ml vann, ble tilsatt. Den resulterende blanding ble inndampet til tørrhet under redusert trykk ved romtemperatur, det oppnådde produkt løst om igjen i 300,0 ml pyrogenfritt avionisert vann, filtrert gjennom et Teflon HPLC-filter med 0,2 /xm porestørrelse (Rainin Instruments, Woburn, MA), og lyofilisert, og ga 256,7 mg (0,124 mmol) av et tetra-lysinsalt {dvs. Forbindelse 31; R^: 0,64 [kloroform:metylalkohol:iseddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]} som et hvitt hydroskopisk skum i 71% utbytte. Dette produkt, Forbindelse 3_1, er lipid A-analogen B214- 32 .

Lipid A-analogen B214- 31 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt oppnådd ovenfor med tris(hydroksymetyl)-aminometan (Sigma Chemical Co.). Den resulterende blanding ble inndampet til tørrhet under redusert trykk ved romtempera-tur, det oppnådde produkt løst igjen i pyrogenfritt avionisert vann, filtrert gjennom et Teflon HPLC-filter, med en pore-størrelse på 0,2 /xm (Rainin Instruments, Woburn, MA) og lyofilisert, og ga tris(hydroksymetyl)aminometansaltet, B214-31.

Forbindelse 25. (3,90 g, 2,74 mmol) ble løst i 40,0 ml vannfri diklormetan ved romtemperatur. Til denne løsning ble tilsatt ved romtemperatur, 3,6 g (10,9 mmol) av Forbindelse C8 (se nedenfor) og 4,50 g (21,9 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Omsetningen fikk foregå i 14 timer, hvoretter omsetningen ble bestemt å være fullstendig ved tynnsjiktkromatografisk analyse (heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)). Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 100,0 ml heksaner og filtrert gjennom 20,0 g celitt 545, de faste stoffer vasket med 100,0 ml etylacetat, og filtratet inndampet under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en sirupsaktig rest. Sirupen ble løst i 5,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (400,0 g) og eluert først med 1:4 (v/v) etylacetat/heksaner, og deretter med 1:1 (v/v) etylacetat/heksaner, og ga 3,36 g (1,64 mmol) av Forbindelse 32. {Rf: 0,51 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]} i 60% utbytte.

Forbindelse 32. (3,46 g, 1,69 mmol) ble løst i 35,0 ml diklormetan og 3,5 ml tert-butylalkohol. Til denne løsning ble tilsatt 3,5 ml av pH 7,0 fosfatbufferkonsentrat, etterfulgt av 957,0 mg (4,2 mmol) av 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzokinon. Den resulterende heterogene blanding ble magnetisk omrørt under nitrogenatmosfære i mørke i ca. 12 timer eller inntil fullstendig omsetning (som angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse ved anvendelse av diklormetan: metylalkohol 19:1 (v/v). Reaksjonen ble undertrykket med 30,0 ml 10% vandig natriumtiosulfatløsning, fortynnet med 200,0 ml diklormetan, og helt over i 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning. Det organiske sjikt ble fraskilt, vasket med 100,0 ml mettet vandig natriumklorid-løsning, tørket over 100,0 g natriumsulfat, og filtrert gjennom en bomullsplugg. Den rå reaksjonsblanding ble deretter påsatt direkte på en silikagelkolonne (400,0 g) og eluert med en diklormetan:metylalkoholtrinngradient (99:1-50:1-19:1-4:1 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som bestemt ved tynnsjiktkromato-graf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 2,8 g (1,47 mmol) av Forbindelse 33. {Rf: 0,32 [diklormetan:-metylalkohol, 19:1 (v/v)]} i 87% utbytte.

Til en løsning av Forbindelse 33. (716,4 mg, 0,377 mmol) i vannfri tetrahydrofuran (71 ml), ble langsomt tilsatt 1,1 M n-butyllitium (377,0 /il, 0,415 mmol) i heksaner med omrøring under nitrogenatmosfære ved -78°C. Etter fem minutter ble tilsatt 0,5 M diallylklorfosfat (1,13 ml, 0,566 mmol) i vannfri toluen, og blandingen ble omrørt i 10 minutter. Blandingen ble deretter oppvarmet til 0°C, omrørt i ytterligere 10 minutter, og undertrykket med iseddiksyre (716,0 itl). Reaks jonsblandingen ble helt over i 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 500,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket først med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 300,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en bomullsplugg, og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk ved romtempera-tur. Den oppnådde rest ble renset ved eluering fra en silika-gelkolonne (100,0 g) med 3:1 (v/v) toluen/etylacetat. For-dampriing av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 450,4 mg (0,219 mmol) av Forbindelse 3_4 {Rf: 0,50

[diklormetan:metylalkohol, 19:1 (v/v)]} i 58% utbytte.

Forbindelse 34. (810,0 mg, 0,40 mmol) ble løst i acetonitril (10,0 ml), og 1,0 ml vann ble tilsatt. Til den resulterende løsning ble tilsatt rødt kvikksølv(II)oksyd (693,0 mg, 3,20 mmol, Aldrich Chemical Co.), etterfulgt av kvikksølv(II)klorid (434,4 mg, 1,60 mmol, Aldrich Chemical Co.), og den resulterende blanding omrørt ved romemperatur under nitrogenatmosfære i 1 time. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 20,0 ml metylalkohol,- hydrogensulfid ble boblet gjennom blandingen i fem minutter,- og løsningen ble filtrert gjennom en matte av silikagel (10,0 g) som var blitt forkondisjonert med 4:1 (v/v) diklormetan/metylalkohol. Filtratet ble inndampet til tørrhet under redusert trykk ved romtemperatur, og renset på en silikagelkolonne (100,0 g) ved eluering først med 7:4 (v/v) heksaner/dietyleter og deretter med 4:1 (v/v) diklormetan/metylalkohol. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 539,0 mg (0,287 mmol) av Forbindelse 30. {Rf: 0,53 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 72% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 9 (380,0 g, 1,3 mol) løst i 1,5 liter av N,N-dimetylformamid, ble først tilsatt 227,0 g (3,25 mol) av imidazol under nitrogen ved 0°C, og deretter tilsatt 263,0 g (1,7 mol) av tert-butyldimetylsilylklorid. Løsningen ble omrørt i 1,5 timer, fortynnet med 2,0 liter etylacetat og helt over i 2,0 liter mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning. Det organiske sjikt ble fraskilt og vasket først med 2,0 liter mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning, deretter med 2,0 liter vann, og tilslutt med 1,0 liter mettet vandig natriumkloridløsning. Det organiske sjikt ble deretter tørket over 500,0 g natrium-sulf at, filtrert gjennom en glass-sintertrakt og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble deretter renset på en silikagelkolonne (4,0 kg) og eluert med etylacetat:heksaner (1:4 (v/v)). Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 411,0 g (1,0 mol) av Forbindelse 36 [etylacetat:heksaner, 1,4 (v/v)] i 78% utbytte.

Til en løsning av Forbindelse 36. (411,0 g,- 1,0 mol) løst i 8,0 liter metylalkohol ble tilsatt 50,0 ml av en løsning av 25% (vekt/v) natriummetoksyd i metylalkohol, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter nøytralisert med 1,0 liter mettet vandig ammoniumkloridløsning og ekstrahert med 8,0 liter etylacetat. Det organiske sjikt ble fraskilt, vasket først med 1,0 liter vann, deretter med 1,0 liter mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 1,5 kg natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Det rå produkt ble renset på en silikagelkolonne (4,0 kg) og eluert med en trinnvis gradient, begynnende med en 5:1 (v/v), etterfulgt av en 4:1, en 3:1 og tilslutt med en 2:1-blanding av heksaner:etylacetat. Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 339,8 g (0,95 mol) av Forbindelse 37 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)] i 93% utbytte.

Til en løsning av Forbindelse 3_7 (0,5 g; 1,4 mmol) i 10,0 ml vannfri diklormetan ble tilsatt: 0,38 g (1,4 mmol) av Forbindelse A6 (se nedenfor), 0,35 g (1,7 mmol) 1,3-dicykloheksylkarbodiimid, og 1,8 mg (0,02 mmol) av 4-dimetylaminopyridin i rekkefølge, ved 0°C, med magnetrøring. Blandingen ble omrørt i ytterligere tre timer, fortynnet med 20,0 ml heksaner og filtrert gjennom 5,0 g celitt 545. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og resten renset på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med etylacetat :heksaner (1:7 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som angitt ved tynnsjikt-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 0,63 g (1,02 mmol) av Forbindelse 38. {Rf: 0,64 [etylacetat:-heksaner, 1:4 (v/v)]} i 73% utbytte.

Forbindelse 38. (0,63 g; 1,02 mmol) ble løst i 8,0 ml iseddiksyre og 2,0 ml vann ved magnetrøring ved romtemperatur i 12 timer. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og destillert azeotropisk tre ganger med 10,0 ml porsjoner toluen. Resten ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med 1:2 (v/v) etylacetat:heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 0,57 g (0,99 mmol) av Forbindelse 39 {Rf: 0,22 ^etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 98% utbytte.

En blanding av Forbindelse 23A (113,4 mg; 0,134 mmol) og Forbindelse 39 (321,5 mg; 0,61 mmol) ble tørket under vakuum i 14 timer og løst i 10,0 ml vannfri toluen. Til denne løsning ble tilsatt 300,0 mg pulverisert AW-300 molekylsikter som var flammetørket under vakuum, og den resulterende blanding magnetisk omrørt i 1 time ved romtemperatur under argonatmosfære. Blandingen ble deretter avkjølt til -35°C og 8,0 ml (0,32 mmol) av en løsning av 0,04 M bortrifluorideterat i toluen (fremstilt ved å løse 200,0 itl (1,6 mmol) bortrifluorideterat i 40,0 ml toluen og omrøring med 200,0 mg pulverisert AW-300 molekylsikter i 1 time ved romtemperatur) ble tilsatt i løpet av en 2,5 timers periode ved anvendelse av en sprøytepumpe. Reaksjonen ble undertrykket med 10,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, fortynnet med 100,0 ml diklormetan, og filtrert gjennom 20,0 g celitt 545. Filtratet ble vasket først med 100,0 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning, deretter med 100 ml vann og tilslutt med 100 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en glass-sintertrakt, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med etylacetat:heksaner (1:2 (v/v)). Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 119,1 g (0,094 mmol) av Forbindelse 40. {Rf: 0,44 [etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 70% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 40 (110,0 mg; 0,09 mmol) løst i 1,0 ml vannfri toluen og 33,0 ill (0,34 mmol) vannfri pyridin ved 0°C, ble tilsatt dråpevis 68,0 fil (0,13 mmol) 1,93 M fosgen i toluen, og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 15 minutter. Til denne løsning ble tilsatt dråpevis 100,0 fil (1,47 mmol) allylalkohol, reaksjonen ble omrørt i ytterligere 30 minutter, og reaksjonen ble undertrykket ved tilsetning ved 0°C av 10,0 ml mettet natriumhydrogenkarbonat løsning og oppvarmet til 25°C. Reaksjonsblandingen ble deretter ekstrahert med 100,0 ml etylacetat, det organiske sjikt vasket med 10,0 ml mettet vandig natrium-kloridløsning, tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom glass-sintertrakt og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på en silika-gelkolonne (100,0 g) og eluert med en 1:3 (v/v) blanding av etylacetat:heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 75,0 mg (0,06 mmol) av Forbindelse 41 {Rf: 0,75 [heksaner:etylacetat, 3:1 (v/v)]} i 64% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 41 (75,0 mg,- 0,056 mmol) løst i 4,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 250,0 mg (0,45 mmol) av tinn(II)tris-benzentiolattrietylamin-kompleks, og den resulterende blanding omrørt ved romtempera-tur under nitrogen i mørke, inntil tynnsjiktkromatografisk analyse (heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)) viste at utgangsmaterialet var forbrukt (dvs. i 2 timer). Reaksjonsblandingen ble påsatt direkte på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert først med en 4:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat og deretter med etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking under vakuum ved romtemperatur i 30 minutter, ga 64,4 mg (0,05 mmol) av Forbindelse 42 {Rf: 0,57 [etylacetat:-heksaner, 1:1 (v/v)]} i 90% utbytte.

Til en magnetisk omrørt 0°C løsning av Forbindelse 42.

(64,4 mg,- 0,05 mmol) i 3,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 67,0 mg (.0,28 mmol) av Forbindelse D2 og 70,0 mg (0,34 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Etter 1 time, da tynnsjikt-kromatografisk analyse (heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)) anga at omsetningen var fullstendig, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 50,0 ml etylacetat og filtrert gjennom 10,0 g celitt 545. De oppnådde faste stoffer ble vasket med 20,0 ml etylacetat, og filtratet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, hvilket ga en sirupsaktig rest. Denne sirup ble løst i 1,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert først med 1:9 (v/v) etylacetat:heksaner for å fjerne reagensrester, og deretter med 1:1 (v/v) etylacetat:-heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-

holdige fraksjoner (som angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 87,0 mg (0,04 mmol) av Forbindelse 43 {Rf: 0,95 [etylacetat: heksaner, 1:1 (v/v)]} i 85% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 12,0 ml av 2 M hydrogenfluorid i acetonitril i en Teflon-reaksjonsbeholder, ble tilsatt 70,0 mg (0,036 mmol) av Forbindelse 43 løst i 0,5 ml diklormetan ved romtemperatur. Den resulterende blanding ble omrørt i 18 ytterligere timer, fortynnet med 20,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble fraskilt og vasket først med 20,0 ml vann og deretter med 10,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Det organiske sjikt ble tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert gjennom en glass-sintertrakt, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert med diklormetan:metylalkohol (98:2 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 60,3 mg (0,035 mmol) av Forbindelse 44 {Rf: 0,78 [diklormetan:metylalkohol, 98:2 (v/v)]} i 97% utbytte.

For fremstilling av lipid A-analogen B276- 32, ble Forbindelse 44. avbeskyttet generelt som beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelse 3JL, og det frie syreprodukt ble omsatt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Til en magnetisk rørt løsning av Forbindelse 44 (65,0 mg; 0,038 mmol) i 5,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 70,0 mg (0,28 mmol) av bis(allyloksy)(diisopropylamino)fosfin og 70,0 mg (1,0 mmol) av lH-tetrazol ved 0°C under nitrogenatmosfære. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i ytterligere 1 time. Blandingen ble deretter avkjølt til

-78°C, og en løsning av 11,95 mg (0,12 mmol) 3-klorperoksybenzosyre løst i 0,80 ml diklormetan, ble tilsatt. Blandingen ble oppvarmet til 0°C, omrørt i ytterligere 20 minutter, og 10,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning ble tilsatt. Den. resulterende blanding ble ekstrahert med 100,0 ml diklormetan, og det organiske sjikt fraskilt og vasket først med 10,0 ml vann, og deretter med 10,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, og tørket over 25,0 g natriumsulfat. Det tørkede produkt ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, renset på en silikagelkolonne (10,0 g) , og eluert med etylacetat:heksaner (1:1 (v/v)). Fordampning av

løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 53,0 mg (0,028 mmol) av Forbindelse 30. {Rf: 0,29 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]} i 74% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 37 (19,0 g; 0,05 mol) løst i 65,0 ml vannfri diklormetan under argonatmosfære ved 0°C, ble tilsatt 2,75 g (0,11 mol) 60% natrium-hydridoljedispersjon (Aldrich Chemical Co.). Blandingen ble omrørt først i 5 minutter ved 0°C, og deretter i 15 minutter ved romtempratur. Under argon ble deretter tilsatt dråpevis en løsning av 20,5 g (0,06 mol) A10 løst i 30,0 ml vannfri diklormetan til reaksjonsblandingen gjennom en sprøytepumpe over en 2 timers periode. Etter omrøring i 30 minutter, ble reaksjonsblandingen avkjølt til 0°C, 5,0 ml metylalkohol ble tilsatt dråpevis for å undertrykke eventuelt uomsatt natriumhydrid, og reaksjonsblandingen ble fortynnet med 300,0 ml diklormetan og vasket først med 300,0 ml mettet vandig ammoniumkloridløsning, deretter med 300,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Det organiske sjikt ble fraskilt, tørket over 100,0 g natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk, og ga et rått sirupslignende produkt. Produktet ble renset på silikagelkolonne (2,0 kg) og eluert med en trinngradient av heksaner:etylacetat (12:1 til 9:1 til 8:1 til 5:1 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromato-graf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 20,1 g (0,04 mmol) av Forbindelse 45 {Rf: 0,53 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 68% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 45 (13,69 g,- 26,5 mmol) og Forbindelse B4 (6,3 g; 31,8 mmol) (se nedenfor) løst i 76,0 ml vannfri diklormetan ved romtemepratur under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 11,0 g (53,0 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Til den resulterende blanding ble tilsatt 5,26 ml (0,26 mmol) av 0,5 M 4-dimetylaminopyridin i vannfri diklormetan over en tidsperiode på 1 time. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 9 timer ved romtemperatur, filtrert gjennom en matte av 100,0 g celitt 545, og de frafiltrerte faste stoffer vasket med 200,0 ml etylacetat. Det samlede filtrat og etylacetatvaskingen ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og det rå produkt renset på en silikagelkolonne (2,0 kg) og eluert med heksaner:etylacetat (9:1 (v/v)). Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 17,4 g (25,1 mmol) av Forbindelse 46 {R^: 0,80 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 94% utbytte.

En løsning av Forbindelse 46. (17,4 g; 25,0 mmol), løst i 100,0 ml av en 8:1 (v/v) blanding av iseddiksyre og vann, ble oppvarmet til 60°C med magnetrøring i 12 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk ved 40°C, og det rå produkt renset på en silikagelkolonne (2,0 kg) ved eluering med en trinnvis gradient av heksaner:etylacetat (først 6:1 (v/v), deretter 2:1 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 15,0 g (22,9 mmol) av Forbindelse 47. {Rf: 0,13 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 91% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 47 (8,85 g; 12,7 mmol) løst i 60,0 ml av en 4:1 (v/v) blanding av vannfri toluen og vannfri pyridin ved 0°C under nitrogen, ble tilsatt 1,75 ml (16,5 mmol) allylklorformiat dråpevis over en 30 minutters periode. Den resulterende blanding ble fortynnet med 300,0 ml etylacetat, vasket med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, 100 ml vann og 100 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 100,0 g natrium-sulf at, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble løst i 10,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med etylacetat:heksaner (1:9 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 8,1 g (10,9 mmol) av

Forbindelse 48.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 48 (1,6 g; 2,06 mmol), løst i 10,0 ml vannfri diklormetan ved romtempera-tur under nitrogenatmosfære, ble først tilsatt 757,0 mg (3,1 mmol) bis(allyloksy)(diisopropylamino)fosfin, og deretter tilsatt (i en porsjon) 650,0 mg (9,3 mmol) lH-tetrazol. Etter 10 minutter, ble reaksjonsblandingen avkjølt til -78°C, og en løsning av 550,0 mg (2,2 mmol) av 55% 3-klorperoksybenzosyre løst i 5,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt dråpevis over en 10 minutters periode. Reaksjonen ble undertrykket ved -78°C ved tilsetning av 50,0 ml mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning. Den resulterende blanding ble deretter ekstrahert med 200,0 ml diklormetan, og det organiske ekstraktsjikt vasket først med 50,0 ml vann, deretter med 50,0 ml mettet vandig natriumklorid, og tørket over 50,0 g natrium-sulf at. Konsentrering under redusert trykk ved romtemperatur, ga det rå produkt som ble renset på en silikagelkolonne (300,0 g) og eluert med etylacetat:heksaner (1:4 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk-ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 1,7 g (1,8 mmol) av Forbindelse 49.

Til en magnetisk omrørt løsning av 70,0 ml av 6 M hydrogenfluorid i acetonitril i en Teflon-reaksjonsbeholder, ble tilsatt 10,5 g (11,6 mol) av Forbindelse 49 løst i 10,0 ml diklormetan ved romtemperatur. Den resulterende blanding ble omrørt i ytterligere 18 timer, helt over i 400,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning ved 0°C, og ekstrahert med 500,0 ml diklormetan. Det organiske ekstraktsjikt ble vasket ført med 100,0 ml vann og deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Det organiske sjikt ble tørket over 250,0 g natriumsulfat, filtret gjennom en glass-sintertrakt, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med heksaner:etylacetat (3:1 (v/v)). Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 7,9 g (10,1 mmol) av Forbindelse 50.

Til en mekanisk omrørt løsning av Forbindelse 50 (1,1 g; 1,4 mmol) i 10,0 ml trikloracetonitril, ble tilsatt 2,6 g (8,0 mmol) cesiumkarbonat ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Etter 2 timer ble blandingen filtrert gjennom 25,0 g celitt 545, de frafiltrerte faste stoffer vasket med 100,0 ml diklormetan, og de samlede filtrater konsentrert under redusert trykk & ed romtemperatur. Det rå produkt ble renset på en silikagelkolonne (200,0 g) og eluert med diklormetan:-dietyleter (19:1 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjikt-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 600,7 mg (0,65 mmol) av Forbindelse 5IA (a-isomer) og 500,0 mg (0,54 mmol) av Forbindelse 51B (fi-isomer) i et samlet utbytte på 85%.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 45 (13,8 g; 26,8 mmol) løst i 100,0 ml av en 4:1 (v/v) blanding av vannfri toluen og vannfri pyridin ved romtemperatur under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 21,0 ml (40,2 mmol) av 1,93 M fosgen i toluen dråpevis over en 30 minutters periode. Den resulterende blanding ble omrørt i ytterligere 15 minutter, 16,1 ml (214,4 mmol) allylalkohol ble tilsatt, og blandingen omrørt 1 time lenger. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 300,0 ml etylacetat. Det organiske ekstraktsjikt ble vasket først med 200,0 ml vann, deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, og tørket over 200,0 g natriumsulfat. Det tørkede organiske ekstraktsjikt ble filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det oppnådde råprodukt ble løst i 10,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med etylacetat:heksaner (1:9 (v/v)). Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 15,6 g (26,1 mmol) av Forbindelse 52. i 97% utbytte.

En løsning av Forbindelse 52 (15,6 g; 2 6,1 mmol) løst i 50,0 ml iseddiksyre og 2,0 ml vann, ble magnetisk omrørt ved romtemperatur i 12 timer. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og destillert azeotropisk tre ganger med 10,0 ml porsjoner av toluen. Resten ble renset på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert ved anvendelse av en totrinnsgradient: 1:2 (v/v) etylacetat:heksaner og deretter etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromato-graf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 12,1 g (21,6 mmol) av Forbindelse 53. i 83% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 53. (10,3 g; 18,5 mmol) løst i 400,0 ml vannfri diklormetan under nitrogenatmosfære ved 0°C, ble tilsatt 2,9 g (42,6 mmol) imidazol, etterfulgt av 3,6 g (24,1 mmol) av tert-butyldimetylsilylklorid. Den resulterende blanding ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble helt over i 1,0 liter mettet vandig ammoniumkloridløsning, og produktet ekstrahert med 1,0 1 diklormetan. Det organiske ekstraktsjikt ble vasket først med 200,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, deretter med 200,0 ml vann, og tilslutt med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Det vaskede organiske sjikt ble tørket over 300,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Det rå produkt ble renset på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med etylacetat:heksaner (1:8 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 10,6 g (15,8 mmol) av Forbindelse 54 {Rf: 0,70 [etylacetat:heksaner, 1:4 (v/v)]} i 85% utbytte.

Til en mekanisk omrørt løsning av Forbindelse 54 (8,9 g; 13,2 mmol) løst i 270,0 ml vannfri toluen og 4,2 ml vannfri pyridin ved 0°C under nitrogenatmosfære, ble langsomt tilsatt 10,2 ml (26,4.mmol) av 1,93 M fosgen i toluen i løpet av en 10 minutters periode. 20 minutter senere ble tilsatt 8,0 ml (105,6 mmol) allylalkohol over en 5 minutters periode, og den resulterende reaksjonsblanding omrørt i ytterligre 15 minutter. Reaksjonsblandingen ble undertrykket med 200,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, fortynnet med 1,0 liter etylacetat, og det organiske sjikt fraskilt og vasket med 500,0 ml vann og deretter 500,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med etylacetat:heksaner (1:19 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra.de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 9,5 g (12,5 mmol) av Forbindelse 55 {Rf: 0,68 [etylacetat:heksaner, 1:9 (v/v)]} i 95% utbytte.

I en 1,0 liter Teflon-reaksjonsbeholder, ble Forbindelse 55 (5,8 g; 7,6 mmol) løst i 200,0 ml diklormetan. Til denne løsning ved romtemperatur, ble tilsatt 150,0 ml av en 1 M løsning av hydrogenfluoridsyre i acetonitril under magnetom-røring. Etter 7 timer ble reaksjonsblandingen undertrykket ved å helle den over i 200,0 ml mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning ved 0°C, og ekstrahert med 500,0 ml diklormetan. Det organisje sjikt ble fraskilt, vasket med 100,0 ml vann og deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumklorid-løsning, tørket over 300,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på en silikagelkolonne (600,0 g) og eluert med etylacetat:heksaner (1:4 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikt-kromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 4,5 g (6,7 mmol) av Forbindelse 56. {Rf: 0,33 [etylacetat:-heksaner, 1:4 (v/v)]} i 88% utbytte.

En heterogen blanding av 8,0 g (12,2 mmol) av Forbindelse 47, 11,3 g (48,8 mmol) sølv(I)oksyd (Aldrich Chemical Co.) og 120,0 ml (1,92 mol) metyljodid (Aldrich Chemical Co.) ble mekanisk omrørt ved 39°C i 12 timer under nitrogen i møreke. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, filtrert gjennom 100,0 g celitt 545, og de frafiltrerte faste stoffer vasket med 200,0 ml etylacetat. Det samlede filtrat og vaskingen ble deretter konsentrert under redusert trykk ved 40°C, og ga et rått produkt som deretter ble løst i 50,0 ml diklormetan og avkjølt til 0°C. Til den avkjølte reaksjonsblanding ble tilsatt i en porsjon, 1,0 g (14,69 mmol) imidazol, etterfulgt av tert-butylklordifenylsilan over en 5 minutters periode. Reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til romtemperatur, omrørt i ytterligere 1 time, undertrykket med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, og ekstrahert med 500,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket først med 100,0 ml vann og deretter med 100,0 ml mettet vandig natriumklorid-løsning, tørket over 300,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) ved eluering med etylacetat-.heksaner (1:9 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 6,85 g (10,2 mmol) av Forbindelse 57A {Rf: 0,63 [diklormetan:dietyleter, 19:1 (v/v)]} i 84% utbytte og 1,11 g (1,22 mmol) av Forbindelse 57B {Rf: 0,90 [diklormetan:dietyleter, 19:1 (v/v)]} i 10% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 57A (8,7 g; 0,013 mol) løst i 46,0 ml vannfri diklormetan ved romtemperatur under nitrogenatmosfære, ble først tilsatt 4,8 ml (0,02 mol) bis(allyloksy)(diisopropylamino)fosfin og deretter tilsatt (i en porsjon) 4,1 g (0,06 mol) lH-tetrazol. Etter 5 minutter ble reaksjonsblandingen avkjølt til -78°C, og en løsning av 3,35 g (0,02 mol) 55%-ig 3-klorperoksybenzosyre løst i 37,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt dråpevis over en 10 minutters periode. Reaksjonen ble deretter undertrykket ved -78°C ved tilsetning av 100,0 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning. Den resulterende blanding ble deretter ekstrahert med 500,0 ml diklormetan, og det organiske ekstraktsjikt vasket først med 200,0 ml vann, deretter med 200,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, og tørket over 300,0 g natriumsulfat. Konsentrering under redusert trykk ved romtemperatur ga det rå produkt som ble renset på en silika-gelkolonne (1,0 kg) og eluert med etylacetat:heksaner (1:6 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 8,8 g (0,011 mmol) av Forbindelse 58. {Rf: 0,28 [etylacetat-.heksaner, 1:4

(v/v)]} i 85% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 80,0 ml 6 M hydrogenfluorid i acetonitril i en Teflon-reaksjonsbeholder, ble tilsatt ved romtemperatur 8,8 g (10,6 mol) av Forbindelse 58 løst i 30,0 ml diklormetan. Den resulterende blanding ble omrørt i 9 timer, helt over i 200,0 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning ved 0°C, og ekstrahert med 300,0 ml diklormetan. Det organiske ekstraktsjikt ble vasket med 100,0 ml med mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 100,0 g natriumsulfat, filtret og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble deretter renset på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med heksaner:etylacetat (1:1 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 5,7 g (7,95 mmol) av Forbindelse 59 {Rf: 0,37 [diklormetan-metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 75% utbytte.

Til en mekanisk omrørt løsning av 10,32 g (14,5 mmol) av Forbindelse 59 .i 200,0 ml trikloracetonitril, ble tilsatt 8,80 g (63,7 mmol) kaliumkarbonat ved romtemperatur under nitrogen. Etter 20 minutter, ble blandingen filtrert gjennom 100,0 g celitt 545, de frafiltrerte faste stoffer vasket med 100,0 ml diklormetan, og de samlede filtrater konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det oppnådde råprodukt ble renset på en silikagelkolonne (10,0 g) ved eluering med heksaner:etylacetat (1:1 (v/v)). Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtempera-tur, ga 11,1 g (12,9 mmol) av 6OB (S-isomer) og 6OA (a-isomer)

{Rf: 0,61 og 0,53 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]} i et

samlet utbytte på 89%.

En blanding av 465,0 mg (0,492 mmol) av Forbindelse 5IA og 374,0 mg (0,541 mmol) av Forbindelse 17 ble tørket under vakuum i 14 timer, løst i 10,0 ml vannfri diklormetan, og til denne løsning ble tilsatt 800,0 mg pulverisert AW-300 molekyl-sikter, som var blitt flammetørket under vakuum. Den resulterende blanding ble magnetisk omrørt i 1 time ved romtemperatur under argonatmosfære, avkjølt til -23°C, og 740,0 fil (0,147 mmol) av en 0,2 M bortrif luorideterat: vannfri diklormetanløsning (fremstilt ved å løse 250,0 fil (2,03 mmol) av bortrifluorideterat i 10,0 ml vannfri diklormetan og omrøring med 200 mg pulverisert AW-300 molekylsikter i 1 time ved romtemepratur) ble langsomt tilsatt over en 1 times periode. Omsetningen ble undertrykket med 5,0 ml av mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, fortynnet med 100,0 ml diklormetan og filtrert gjennom 10,0 g celitt 545. Filtratet ble vasket først med 50,0 ml mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning, deretter med 50 ml vann, og tilslutt med 50 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende rest ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med etylacetat:heksaner (1:3 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 430\ 0 mg (0,292 mmol) av Forbindelse 62 {Rf: 0,2 [etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 60% utbytte.

En blanding av 250,0 mg (0,265 mmol) av Forbindelse 23A og 205,0 mg (0,265 mmol) av Forbindelse 14 ble tørket under vakuum i 14 timer og løst i 15,0 ml vannfri diklormetan. Til denne løsning ble tilsatt 600,0 mg pulverisert AW-300 molekyl-sikter, som var blitt flammetørket under vakuum, og den resulterende blanding magnetisk omrørt i 1 time ved romtemperatur under argonatmosfære. Blandingen ble avkjølt til

-23°C og 400,0 fil (0,265 mmol) av en 0,2 M bortrif luorideterat :vannfri diklormetanløsning (fremstilt ved å løse 250,0 fil (2,03 mmol) av bortrif luorideterat i 10,0 ml vannfri diklormetan og omrøring med 200 mg pulverisert AW-300 molekyl-sikter i 1 time ved romtemperatur) ble langsomt tilsatt over

en 30 minutters periode. Omsetningen ble undertrykket med 5,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, fortynnet med 100,0 ml diklormetan og filtrert gjennom 10,0 g celitt 545. Filtratet ble vasket først med 50,0 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning, deretter med 50 ml vann, og tilslutt med 50 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende rest ble renset på en silikagelkolonne (200,0 g) og eluert med etylacetat og heksaner (1:3 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromato-graf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 210,0 mg (0,152 mmol) av Forbindelse 63 {Rf: 0,23 [etylacetat:-heksaner, 1:2 ( v/ v)]} i 62% utbytte.

En blanding av 601,4 mg (0,636 mmol) av Forbindelse 5IA og 769,3 mg (1,38 mmol) av Forbindelse 39. ble tørket under vakuum i 14 timer og løst i 40,0 ml vannfri toluen. Til denne løsning ble tilsatt 1,0 g pulverisert AW-300 molekylsikter, som var blitt flammetørket under vakuum, og den resulterende blanding magnetisk omrørt i 1 time ved romtemperatur under argonatmosfære. Blandingen ble avkjølt til -35°C og 10,0 ml (0,190 mmol) av en 0,02 M bortrifluorideterat:vannfri diklor-metanløsning (fremstilt ved å løse 250,0 til (2,03 mmol) av bortrifluorideterat i 10,0 ml vannfri diklormetan, fortynning av den resulterende blanding med 91,5 ml vannfri toluen og omrøring med 200 mg pulverisert AW-300 molekyl-sikter i 1 time ved romtemperatur), ble langsomt tilsatt over en periode på 1,5 timer. Reaksjonen ble undertrykket med 10,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, fortynnet med 200,0 ml diklormetan og filtrert gjennom 10,0 g celitt 545. Filtratet ble vasket først med 50,0 ml mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning, deretter med 50 ml vann, og tilslutt med 50 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende rest ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med etylacetat:heksaner (1:2 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 297,5 mg (0,152 mmol) av Forbindelse 64 {Rf: 0,42 [diklormetan-.dietyleter, 9:1 (v/v)1\ i 34% utbvtte.

65

En blanding av 7,35 g (8,5 mmol) av Forbindelse 60 (aS-blanding) og 5,0 g (7,4 mmol) av Forbindelse 5_6 som var blitt tørket under vakuum i 14 timer, ble løst i 200,0 ml vannfri diklormetan. Til denne løsning ble tilsatt 8,2 g pulverisert AW-300 molekylsikter (tidligere flammetørket under vakuum) , og den resulterende blanding magnetisk omrørt i 1 time ved romtemperatur under argon. Blandingen ble deretter avkjølt til

-35°C, og 8,7 ml (0,50 mmol) av en 0,05 M trimetylsilyltrifluormetansulfonat (Aldrich Chemical Co.) -.diklormetanløsning (fremstilt ved å løse 310,0 ttl (2,03 mmol) av trimetylsilyl-metyltrifluormetansulfonat i 40,0 ml vannfri diklormetan og

omrøring med 1,0 g pulverisert AW-300 molekylsikter i 1 time ved romtemperatur), ble langsomt tilsatt over en 8 timers periode. Reaksjonen ble undertrykket med 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, deretter fortynnet med 500,0 ml diklormetan, og filtrert gjennom 50,0 g celitt 545. Filtratet ble deretter vasket med 100,0 ml porsjoner av mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, vann, og mettet vandig natriumkloridløsning i rekkefølge, tørket over 100,0 g natriumsulfat, filtrert og deretter konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende rest ble renset på en silikagelkolonne (200,0 g) ved eluering med etylacetat og heksaner (1:4 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtempera-tur, ga 8,1 g (0,006 mol) av Forbindelse 65 {Rf: 0,42 [etylacetat:heksaner, 1:2 (v/v)]} i 82% utbytte.

66

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 65 (1,99

g; 1,48 mmol) løst i 10,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 250,0 mg (0,45 mmol) av tinn(II)tris-benzentiolattrietylamin-kompleks, og den resulterende blanding omrørt ved romtempera-tur under nitrogenatmosfaere i fravær av lys i 30 minutter, hvoretter tynnsjiktkromatografisk analyse (heksaneretylacetat, 1:1 (v/v)) viste at utgangsmaterialet var forbrukt. Reaksjonsblandingen ble påsatt direkte på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert først med en 4:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat for å fjerne biprodukter og deretter med

etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking under vakuum ved romtemperatur i 30 minutter, ga delvis renset Forbindelse 66 (1,72 g (1,33 mmol)) {Rf: 0,48 [diklormetan:-metylalkohol, 95:5 (v/v)]} som var egnet for anvendelse i påfølgende reaksjon, i 90% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av Forbindelse 66 (1,72 g,- 1,33 mmol) i 10,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C, ble tilsatt 1,1 g (4,44 mmol) av Forbindelse D2 (se nedenfor) og 1,83 g (8,88 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Etter 30 minutter, da tynnsjiktkromatografisk analyse (diklormetan:-metylalkohol, 95:5 (v/v)) anga at det hadde foregått fullstendig omsetning, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 50,0 ml etylacetat, filtrert gjennom 10,0 g celitt 545, de faste stoffer vasket med 20,0 ml etylacetat, og filtratet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en sirupsaktig rest. Den rå sirup ble løst i 5,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert til å begynne med med en 1:4 (v/v) blanding av etylacetat:heksaner for å fjerne reagensrester, og deretter med en 1:2 (v/v) blanding av etylacetat:hekaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikt-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 1,82 g (1,04 mmol) av Forbindelse 67 {Rf: 0,54 [diklormetan^etylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 71% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 8,0 ml 6 M hydrogenfluorid i acetonitril i en Teflon-reaksjonsbeholder, ble tilsatt 390,0 mg (0,224 mmol) av Forbindelse 67 løst i 0,5 ml diklormetan ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt i 1,5 time, fortynnet med 20,0 ml mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning, og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. Det organiske ekstraktsjikt ble vasket først med 20,0 ml vann, og deretter med 10,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (50,0 g) og eluert med diklormetan:metylalkohol (98:2 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjikt-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 325,0 mg (0,20 mmol) av Forbindelse 68 {Rf: 0,52 [diklormetan og metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 89% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 50,0 mg (0,03 mmol) av Forbindelse 68 i 1,0 ml vannfri diklormetan, ble først tilsatt 11,3 mg (0,045 mmol) bis(allyloksy)(diisopropylamino)fosfin, etterfulgt av 9,4 mg (0,135 mmol) lH-tetrazol ved 0°C under nitrogenatmosfære. Den resulterende blanding ble oppvarmet til romtemperatur, omrørt i 20 minutter, avkjølt til -78°C, og en løsning av 9,5 mg (0,036 mmol) 3-klorperoksybenzosyre løst i 100,0 /il diklormetan, ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i ytterligere 20 minutter. En 0,5 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning ble deretter tilsatt, og den resulterende blanding ekstrahert med 10,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble fraskilt og vasket først med 10,0 ml vann og deretter med 5,0 ml mettet vandig natriumkloridløsnig, og tørket over 5,0 g natriumsulfat. Konsentrering av det tørkede organiske ekstrakt under redusert trykk ved romtemperatur, ga det rå produkt som ble renset på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert med etylacetat:kloroform (1:1 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking i 1 time under vakuum ved romtemperatur, ga 41,7 mg (0,023 mmol) av Forbindelse 69. {Rf:

0,40 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 78% utbytte.

Til en løsning av Forbindelse 69. (130,0 mg, 0,072 mmol) løst i 10,0 ml^tetrahydrofuran:96% maursyre (10:1 (v/v)) under nitrogenatmosfære, i fravær av lys, ble tilsatt 843,0 mg (0,72 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) og 575,0 mg (2,19

mmol) trifenylfosfin. Den resulterende blanding ble omrørt i tilsammen 1 time, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende rest ble blandet med 5,0 ml toluen og inndampet under redusert trykk ved romtemperatur til

en tykk pasta, oppslemmet i 10,0 ml metylalkohol, og hydrogen-sulfidgass boblet gjennom løsningen i flere minutter. Løsningsmiddelet ble fjernet ved fordampning under redusert trykk ved romtemperatur, og råproduktet ble tatt opp i 10,0 ml av en 3:2:1 (v/v/v) blanding av metylalkohol:kloroform:vann, og filtrert gjennom et 0,2 /im Teflon HPLC-filter (Rainin Instruments Co.). Filtratet ble påsatt på en DEAE-cellulosekolonne (100,0 g (Sigma Chemical Co.)) og eluert med 2,0 liter av en 3:2:1 (v/v/v) blanding av metylalkohol:kloroform:vann ved anvendelse av en lineær saltgradient på 0 til 0,1 M ammoniumacetat. De rensede produktholdige fraksjoner (som identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) ble slått sammen, og et like stort volum kloroform ble tislatt. Det organiske sjikt ble fraskilt og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga det rensede produkt som ammoniumsaltet. Produktet ble tatt opp i 100,0 ml vann og lyofilisert for å fjerne gjenværende spor av ammoniumacetat. Det lyofiliserte produkt ble slemmet opp i 40,0 ml vann, omrørt med 6,0 g av Chelex-100 harpiks (natriumform (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA))', ledet gjennom en 10,0 g kolonne av Chelex-100 harpiks (natriumform), og eluert med 20,0 ml vann. Løsningen ble filtrert gjennom et 0,2 /im Teflon HPLC-filter (Rainin Instrument Co.) og lyofilisert, og ga 98,0 mg (0,063 mmol) av tetranatriumsaltet, dvs. Forbindelse 70 {Rf: 0,60 [kloroform:metylalkohol:iseddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]} som et hvitt hydroskopisk skum i 87% utbytte.

Forbindelse 70 er lipid A-analogen B531- 35. Lipid A-analogen B531- 32 ble oppnådd ved fremstilling av den frie syreform av analogen, og omsetning av denne med L-lysin som generelt beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelse 31 og analog B2l4r32.

Til en magnetisk omrørt løsning av 510,0 mg (0,358 mmol) av Forbindelse 66. i 6,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C, ble tilsatt 245,0 mg (0,895 mmol) av Forbindelse E3 (se nedenfor) og 740,0 mg (1,79 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Etter 30 minutter, da tynnsjiktkromatografisk analyse (diklormetan: metylalkohol, 95:5. (v/v)) viste at reaksjonen hadde foregått fullstendig, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 50,0 ml etylacetat, filtrert gjennom 10,0 g celitt 545, de oppnådde faste stoffer vasket med 20,0 ml etylacetat, og filtratet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en sirupsaktig rest. Den rå sirup ble løst i 5,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert, til å begynne med med en 1:3 (v/v) blanding av etylacetat:heksaner for å fjerne reagensrester, og deretter med en 2:1 (v/v) blanding av etylacetat:heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 447,0 mg (0,24 mmol) av Forbindelse 71 {Rf: 0,40 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 67% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 6,0 ml 6 M hydrogenfluorid i acetonitril i en Teflon-reaksjonsbeholder, ble tilsatt 447,0 mg (0,24 mmol) av Forbindelse 7JL løst i 2,3 ml diklormetan ved romtemperatur. Den resulterende blanding ble omrørt i 2 timer, fortynnet med 20,0 ml mettet vandig natrium-hydrogenkarbonatløsning, og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. Det organiske ekstraktsjikt ble vasket først med 2 0,0 ml vann, og deretter med 10,0 ml mettet vandig natriumklorid-løsning, tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) og eluert med diklormetan:metylalkohol (100:4 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 404,0 mg (0,23 mmol) av Forbindelse 72 {Rf: 0,37 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 96% utbytte.

Til en løsning av 20,0 mg (0,011 mmol) av Forbindelse 72 i 1,0 ml vannfri tetrahydrofuran, ble langsomt tilsatt 12,5 fil (0,012 mmol) av 1,0 M litium bis(trimetylsilyl)amid i tetrahydrofuran under nitrogenatmosfære ved -78°C, under omrøring. Etter 5 minutter ble tilsatt 34,0 fil (0,017 mmol) av 0,5 M diallylklorfosfat i vannfri toluen, og omrørt i 10 minutter. Blandingen ble^oppvarmet til 0°C, omrørt i ytterligere 10 minutter, og undertrykket med 40,0 fil iseddiksyre. Reaksjonsblandingen ble helt over i 10,0 ml av en mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 50,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket først med 10,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og deretter med 10,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 30,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på en silika-gelkolonne (10,0 g) og eluert med en blanding av diklormetan:-metylalkohol (100:4 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikt-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 15,0 mg (0,008 mmol) av Forbindelse 73 {Rf: 0,29 [diklormetan:-metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 69% utbytte.

Forbindelse 24. (51,5 mg; 0,035 mmol) ble løst i 1,0 ml diklormetan, 0,1 ml av t-butylalkohol og 0,1 ml av pH 7,0 fosfatbufferkonsentrat. Til denne heterogene blanding ble tilsatt 100,0 mg (0,43 mmol) av 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzokinon. Blandingen ble mangetisk omrørt under nitrogenatmosfære i mørke inntil tynnsjiktkromatografisk analyse (heksaner:etylacetat, 1:2 (v/v)) viste fullstendig forbruk av utgangsmateriale (ca. 4 timer). På dette tidspunkt ble omsetningen undertrykket med 2,0 ml 10% vandig natriumtio-sulfatløsning, fortynnet med 10,0 ml diklormetan og helt over i 5,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning. Det organiske sjikt ble fraskilt, vasket med 5,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 5,0 g natriumsulfat og filtrert. Den rå reaksjonsblanding ble påsatt direkte på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert med diklormetan:metylalkohol (98:2 (v/v)). Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 40,0 mg (0,03 mmol) av Forbindelse 74 (Rf: 0,3 6 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 87% utbytte.

Til en mekanisk omrørt løsning av 93,6 mg (0,07 mmol) av Forbindelse 74 i 1,0 ml trikloracetonitril, ble tilsatt 58,0 mg (0,175 mmol) av cesiumkarbonat ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Etter 1 time ble blandingen filtrert gjennom 5,0 g celitt 545, de frafiltrerte faste stoffer vasket med 10,0 ml diklormetan, og de samlede filtrater konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det oppnådde råprodukt ble renset på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert først med diklormetan:dietyleter (9:1 (v/v)) for å fjerne reagensrelaterte forurensninger og deretter med etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 43,2 mg (0,029 mmol) av Forbindelse 75. {Rf: 0,56 [diklormetan:dietyleter, 9:1 (v/v)]} i 42% utbytte.. ^

Til en blanding av 68,2 mg (0,046 mmol) av Forbindelse 75 og 19,0 iil (0,092 mmol) triallylf osf itt (Alfa Products) løst i 2,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 11,0 /il trimetylsilyltrif luormetansulf onat. Etter omrøring i 1 time ved 0°C, ble reaksjonsblandingen undertrykket med 1,0 ml mettet natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 50,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Rensing på en silika-gelkolonne (25,0 g) og eluering med en 4:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat og fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse), ga 37,0 mg (0,025 mmol) av Forbindelse 76 {Rf: 0,45 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 30% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 37,0 mg (0,025 mmol) av Forbindelse 76 løst i 0,5 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 42,0 mg (0,076 mmol) av tinn(II)tris-benzentiolat-trietylaminkomDleks, og den resulterende blanding omrørt ved romtemperatur under nitrogenatmosfære i mørke i 30 minutter, hvoretter tynnsjiktkromatografisk analyse (diklormetan^etylalkohol, 95:5 (v/v)) viste at utgangsmaterialet var forbrukt. Reaksjonsblandingen ble påsatt direkte på en silikagelkolonne (5,0 g) og eluert først med en 4:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat for å fjerne biprodukter, og deretter med

100% etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromato-graf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking under vakuum ved romtemperatur i 30 minutter, ga 31,9 mg (0,023 mmol) av delvis renset Forbindelse 77 {Rf: 0,42 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]}, som var egnet for anvendelse i den påfølgende syntesereaksjon, i 90% utbytte.

Til en magnetisk omrørt løsning av 31,9 mg (0,23 mmol) av Forbindelse 77 i 0,5 ml vannfri diklormetan ved 0°C, ble tilsatt 18,0 mg (0,92 mmol) av Forbindelse D2 (se nedenfor) og 23,0 mg (1,38 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Etter 30 minutter, da tynnsjiktkromatografisk analyse (diklormetan:-metylalkohol, 95:5 (v/v)) viste at omsetningen hadde foregått fullstendig, ble reaksjonsblandingen fortynnet med 10,0 ml etylacetat, filtrert gjennom 1,0 g celitt 545, de oppnådde faste stoffer vasket med 5,0 ml etylacetat, og filtratet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en sirupsaktig rest. Den rå sirup ble løst i 1,0 ml diklormetan, påsatt på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluert, til å begynne med med en 1:4 (v/v) blanding av etylacetat:heksaner for å fjerne reagensrester og deretter med en 1:2 (v/v) blanding av etylacetat -.heksaner. Fordampning av løsnings-middel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktkromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 15,1 mg (1,04 mmol) av Forbindelse 78 {Rf: 0,48 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} i 32% utbytte.

For fremstilling av lipid A-analogen B380- 32, ble Forbindelse 78 avbeskyttet generelt som beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelse 3JL, og produktet ble omsatt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32 .

Til en blanding av 1,13 g (2,58 mmol) av Forbindelse 10b og 500,0 ixl (0,45 mmol) allylalkohol løst i 50,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 1,0 g finpulverisert AW-300 molekyl-sikter. Etter omrøring i 1 time ved romtemperatur ble blandingen avkjølt til -78°C, og 15,0 ml av en 0,02 M diklor-metanløsning av trimetylsilyltrifluormetansulfonat ble tilsatt i løpet av 1 time. Reaksjonsblandingen ble avbrutt med 10,0 ml mettet natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble tørket over 25,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Rensing på en silikagelkolonne (100,0 g), eluering med en 4:1 (v/v) blanding av heksaner:-etylacetat, og fordampning av løsningsmiddelet fra de produktholdige fraksjoner (angitt ved tynnsjiktkromatografisk analyse), ga 380,0 mg (0,85 mmol) av ren Forbindelse 79b {Rf: 0,58 [heksaner:etylacetat, 3:1 (v/v)]} i 33 % utbytte, og 143,0 mg (0,34 mmol) av Forbindelse 79b {Rf: 0,54 [heksaner:-etylacetat, 3:1 (v/v)]} i 13 % utbytte.

Til en løsning av 3,25 g (17,2 mmol) av Forbindelse 79a i 220,0 ml (10:1, v/v) aceton:vann ble først tilsatt 6,0 g (51,2 mmol) 4-metylmorfolin N-oksyd (Aldrich Chemical Co.), etterfulgt av 20,0 mg (0,08 mmol) osmiumtetroksyd (Aldrich Chemical Co.). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2,5 døgn ved romtemperatur i fravær av lys. Reaksjonen ble deretter undertrykket ved tilsetning av 100,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumtiosulfat, omrørt i ytterligere 1 time, og deretter ekstrahert med 200,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble vasket først med 100,0 ml vann, deretter med 100,0 ml mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga det rå produkt.

Råproduktet ble løst i 200,0 ml av en 1:1 (v/v) blanding av metylalkohol og vann. Til den resulterende løsning ble tilsatt 6,0 g (28,1 mmol) natriumperiodat (Aldrich Chemical Co.) ved 0°C under kraftig omrøring. Etter 1 time ble reaksjonen fortynnet med diklormetan. Det organiske sjikt ble vasket først med 100,0 ml vann, deretter med 100,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga igjen det rå produkt som en gulaktig olje.

Det rå produkt ble deretter løst i 50,0 ml metylalkohol, avkjølt til 0°C og tilsatt porsjonsvis 1,5 g (39,7 mmol) natriumborhydrid (Aldrich Chemical Co.). Etter 1 time ble reaksjonen undertrykket ved tilsetning av 50,0 ml mettet vandig ammoniumklorid og ekstrahert med 200,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble vasket med 50,0 ml mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 20,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk romtemperatur, og ga det rå produkt som en gulbrun olje.

Det rå produkt ble deretter løst i 50,0 ml metylalkohol, og 100,0 iil (25%, wt/wt) natriummetoksyd ble tilsatt. Etter 2,5 døgn ble reaksjonen undertrykket ved tilsetning av 50,0 ml mettet vandig ammoniumkloridløsning, og ekstrahert med 200,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble vasket med 50,0 ml mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga det rå produkt. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi på en silikagelkolonne (100,0

g) ved eluering med en 1:1 (v/v) blanding av heksaner og etylacetat, og ga 3,0 g (9,06 mmol) av Forbindelse 80 {Rf: 0,27

[heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]} i et samlet utbytte på 53%.

Til en løsning av 1,0 g (3,02 mmol) av Forbindelse 80 løst i 10,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C, ble tilsatt 411 mg (6,04 mmol) imidazol, etterfulgt av tilsetning av 0,55 g (3,62 mmol) t-butyldimetylsilylklorid. Etter omrøring i 30 minutter, ble reakaksjonen undertrykket med 10,0 ml av en mettet vandig ammoniumkloridløsning og ekstrahert med 100,0 ml acetat. De organiske sjiktene ble tørket over 50,0 g natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga det rå produkt som en fargeløs olje. Råproduktet ble deretter løst i 30,0 ml vannfri diklormetan, avkjølt til 0°C, og 0,97 g (3,62 mmol) av A6 ble tilsatt, etterfulgt av tilsetning av 0,75 g (3,63 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid og 20 mg (163,7 iimol) 4-dimetylaminopyridin. Etter 2 timer ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur.pg omrørt i ytterligere 2 timer, undertrykket med 50,0 ml mettet vandig ammoniumkloridløsning og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur til en olje. Den rå olje ble renset ved kolonnekromatografi på en silikagelkolonne (100,0 g), ved eluering med 1:6 (v/v) blanding av etylacetat og heksaner. Inndampning av de produktholdige fraksjoner under redusert trykk ved romtemperatur, ga 1,25 g (1,90 mmol) av Forbindelse 81 {Rf: 0,88 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 63% utbytte.

Til en løsning av 11,2 mg (17,0 iimol) av Forbindelse 81 løst i 4,0 ml vannfri tetrahydrofuran ved romtemperatur, ble først tilsatt 10 /il (173 /imol) eddiksyre, etterfulgt av tilsetning av 20 mg (76,5 /imol) fast tetrabutylammoniumfluorid (Aldrich Chemical Co.). Etter 1 time ble tilsatt en ytterligere porsjon av 20 mg (76,5 iimol) tetrabutylammoniumfluorid. Reaksjonen ble omrørt i 1 time lenger, deretter avbrutt ved tilsetning av 2,0 ml av en mettet vandig ammonium-kloridløsning og ekstrahert med 50,0 ml etylacetat. De organiske sjiktene ble vasket med 20,0 ml av en mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 10,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur, og ga 8,1 mg (14,9 iimol) av Forbindelse 82 {Rf: 0,28 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 87% utbytte.

Til en løsnng av 8,1 mg (14,9 /imol) av Forbindelse 82, løst i 1,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C, ble tilsatt 7,4 mg (30,2 /imol) bis (allyloksy) (diisopropylamino) f osf in og deretter tilsatt 6,5 mg (92,8 /imol) lH-tetrazol. Etter 30 minutter ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur, en ytterligere mengde på 7,4 mg (30,2 mmol) bis(allyloksy)diisopropylamino) f osf in ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter. Blandingen ble deretter avkjølt til -78°C, en løsning av 6,6 mg (38,2 /imol) 3-klorperoksybenzosyre løst i 300,0 /il vannfri diklormetan ble tilsatt, og den resulterende blanding omrørt i ytterligere 10 minutter. Reaksjonsblandingen ble deretter undertrykket ved tilsetning av 2,0 ml av en 1:1 (v/v) blanding av en mettet vandig natriumtiosulfatløsning og en mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning. Den resulterende blanding ble oppvarmet til romtemperatur og ekstrahert med 10,0 ml diklormetan. De organiske ekstrakter ble vasket med 5,0 ml av en mettet vandig natriumkloridløsning og tørket over 5,0 g natriumsulfat. Filtrering og konsentrering av det tørkede ekstrakt under redusert trykk ved romtemperatur, ga 8,9 mg (12,6 /imol) av Forbindelse 83. {Rf: 0,28 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]} i 85% utbytte.

En løsning av 0,82 g (1,165 mmol) av Forbindelse 83. løst i 100,0 ml av en 1:1 (v/v) blanding av iseddiksyre og vann ble omrørt ved romtemperatur i 8 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den resulterende olje ble løst i 50,0 ml toluen og tørket ved azeotropisk fjerning av det tilsatte toluen under redusert trykk ved romtemperatur.

Den rå olje ble deretter løst i 20,0 ml vannfri diklormetan, avkjølt til 0°C, og til oljen ble tilsatt 1,0 g (14,7 mmol) imidazol, etterfulgt av 0,2 g (1,3 mmol) av tert-butyldimetylsilylklorid. Etter omrøring i 30 minutter, ble reaksjonsblandingen undertrykket ved tilsetning av 2 0,0 ml av en mettet vandig ammoniumkloridløsning, og ekstrahert med 100,0 ml etylacetat. De organiske sjiktene ble tørket over 20,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga dét rå produkt som en fargeløs olje. Den rå olje ble renset på en silikagelkolonne (100,0 g) ved eluering med en 2:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat. Konsentrering av de produktholdige fraksjoner under redusert trykk ved romtemperatur, ga 0,65 g (0,835 mmol) av Forbindelse 84 i 72% utbytte.

En løsning av 0,58 g (0,746 mmol) av Forbindelse 84 løst i 10,0 ml vannfri toluen ble avkjølt til 0°C, deretter ble tilsatt 1,0 ml (12,4 mmol) vannfri pyridin, etterfulgt av 1,0 ml (1,93 mmol) av en 1,93 M løsning av fosgen i toluen. Den resulterende blanding ble omrørt i 30 minutter, og deretter ble tilsatt 400,0 til (5,88 mmol) av allylalkohol. Etter ytterligere 3 0 minutters omrøring ved romtemperaur, ble tilsatt 5,0 ml av en mettet vandig ammoniumkloridløsning. Blandingen ble deretter ekstrahert med 50,0 ml diklormetan, og de organiske sjiktene vasket med 10,0 ml av en mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 10,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur, og ga 0,7 g (0,81 mmol) av Forbindelse 85. {Rf: 0,85 [diklormetan:dietyleter, 4:1 (v/v)]}.

Til en løsning av 0,60 g (0,696 mmol) av Forbindelse 85. løst i 5,0 ml vannfri diklormetan, ble tilsatt 0,5 g (1,1 mmol) tinn(II)tris-benzentiolattrietylaminkompleks. Etter omrøring i 5 minutter, ble tilsatt ytterligere 0,5 g (1,1 mmol) av tinn(II)tris-benzentiolattrietylaminkompleks, og blandingen ble omrørt i ytterligere 5 minutter. Reaksjonen ble deretter påsatt direkte på en kort silikagelkolonne (20,0

g) og eluert først med 4:1 (v/v) heksaner:etylacetat og deretter med 1:19 (v/v) metylalkohol:diklormetan, og ga det rå

amin.

Det rå amin ble løst i 3,0 ml vannfri diklormetan, avkjølt til 0°C, og 290 mg (0,872 mmol) av C8 ble tilsatt, etterfulgt av 200,0 mg (0,969 mmol) av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Etter 1 time fikk reaksjonsblandingen varme seg opp til romtemperatur, ble omrørt i ytterligere 2 timer, fortynnet med 10,0 ml heksaner, filtrert og konsentrert til en olje under redusert trykk ved romtemperatur. Rensing på en silika-gelkolonne (100,0 g) ved eluering med en 8:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat, ga 380 mg (0,330 mmol) av Forbindelse 86.

Til en løsning av 3,0 ml 6 M hydrogenfluorid løst i 30,0 ml acetonitril, inneholdt i en Teflon-reaksjonsbeholder, ble tilsatt dråpevis ved 0°C en løsning av 300,5 mg (0,261 mmol) av Forbindelse 86 løst i 2,0 ml acetonitril. Etter omrøring i 1 time, ble reaksjonsblandingen helt over i 100,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. De organiske sjiktene ble vasket med 50,0 ml av en mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, tørket over 10,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur til en olje. Rensing ved silikagelkolonnekromatografi ved eluering med en 1:1 (v/v) blanding av heksaner:etylacetat, ga 200 mg (0,193 mmol) av Forbindelse 87.

Forbindelsene .88 og 89 ble syntetisert ved de generelle metoder beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelsene 33. og 34.

Til en omrørt romtemperaturoppslemming av Forbindelse .89 (102,5 mg, 48,6 iimol) i en blanding av acetonitril (1,5 ml) og vann (100 /il) ble tilsatt kvikksølv(II) oksyd (96 mg, 443 /imol) og kvikksølg(II) klorid (61 mg, 224 /imol) . Etter 1 time ble blandingen fortynnet med 1:1 (v/v) metylalkohol:diklormetan for å indusere utfelling. Blandingen ble filtrert gjennom celitt 545, filtratet oppsamlet, og hydrogensulfid boblet gjennom dette i 1 time. Blandingen ble filtrert igjen, og de samlede filtrater vasket med mettet vandig natriumhydrogenkarbonat, deretter med mettet vandig natriumklorid, tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk til en olje. Oljen ble renset ved direkte påsetning av oljen på en silikagelkolonne (10,0 g) og eluering med 1:19 (v/v) metylalkohol:kloroform, etterfulgt av en andre silika-gelkolonne- (10,0 g) kromatografi, ved eluering med 1:4 (v/v) heksaner:etylacetat. 54,5 mg (28,3 iimol) av Forbindelse £0 ble oppnådd.

Forbindelse 90 (37,5 mg, 19,5 iimol) ble løst i 10:1 (v/v) tetrahydrofuran:96% maursyre under nitrogenatmosfære i mørke, og til denne løsning ble tilsatt tetrakis (trifenylfosfin)-palladium(0) og trifenylfosfin. Reaksjonen ble utført som generelt beskrevet ovenfor for Forbindelse 30. (fremgangsmåte a) og ga 15,0 mg (9,91 /imol) av Forbindelse 91 som fri syre. For fremstilling av lipid A-analogen B377- 34. ble Forbindelse 91 omsatt med L-lysin generelt som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 54 ble først acylert ved anvendelse av en standard betingelse på 1:1 (v/v) eddiksyreanhydrid:pyridin og en katalytisk mengde av 4-dimetylaminopyridin tilsatt; reaksjonen ble utført ved romtemperatur. Fordampning av overskuddet av acyleringsreagenser ved romtemperatur under vakuum, ga det rå produkt acylert i 4-stilling. Dette produkt ble anvendt i den påfølgende omdanning uten noen som helst ytterligere rensing. Det rå produkt acylert i 4-stilling ble underkastet de syntese- og rensetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for omdanning av Forbindelsene 55 til 56, og ga Forbindelse 92. {Rf: 0,23 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]}.

Forbindelse 47 ble metylert og behandlet som beskrevet ovenfor, bortsett fra at det ble anvendt tert-butylklordimetylsilan som silyleringsmiddel. En 2,2 g (2,8 mmol) porsjon av isolert 4-metylert 6-silylert produkt ble deretter løst i 20,0 ml av en 9:1 (v/v) blanding av aceton og vann. Til denne blanding ble tilsatt 0,7 g (5,7 mmol) 4-metylmorfolin N-oksyd og 10,0 mg (0,04 mmol) osmiumtetroksyd, bg den resulterende reaksjonsblanding ble omrørt i 2,5 timer. Reaksjonen ble deretter undertrykket ved tilsetning av 100,0 ml mettet natriumtiosulfatløsning og ekstrahert med 100,0 ml diklormetan. Det organiske sjikt ble tørket over 20,0 g natrium-sulf at og inndampet under redusert trykk ved romtemperatur, og ga det rå produkt.

Det rå produkt (oppnådd i det tidligere trinn) ble deretter løst i 20,0 ml metylalkohol og omrørt med 2,0 g kaliumkarbonat i 25 minutter. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 100,0 ml diklormetan, filtrert gjennom 10,0 g celitt, og vasket med 100,0 ml 0,1 N saltsyre. Det organiske sjikt ble vasket med 25,0 ml mettet natriumklorid-løsning, tørket over 30,0 g natriumsulfat, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga det rå produkt. Produktet oppnådd på denne måte ble renset på 200,0 g silikagel ved eluering med en blanding av 9:1 heksaner og etylacetat. Det ønskede produkt ble oppnådd i 80% utbytte {Rf: 0,46 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]}. Det ovenfor oppnådde mellomprodukt ble deretter underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for omdanning av Forbindelse 45 til 52, etterfulgt av de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for omdanning av Forbindelse 55. til 56 for å gi det endelige ønskede mellomprodukt, Forbindelse 93 {Rf: 0,33 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]}.

3,4, 6-triacetoksygalaktose (Pfanstiehl Labs., Inc.) ble underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for omdanningen av Forbindelse 7 til 9. Det resulternde produkt ble deretter beskyttet i den anomere posisjon som

generelt beskrevet ovenfor for Forbindelse 36. Behandling av dette produkt for fjerning av de 3-, 4- og 6-acetatbeskyttende grupper og den påfølgende beskyttelse av 4- og 6-posisjonene med acetonid, ble utført som generelt beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelsene henholdsvis 36 og 5. Dette produkt ble så underkastet de syntesetrinn som generelt er beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 3_7 til 45, etterfulgt av syntesetrinnene for fremstilling av Forbindelsene 45 til 5_4.

En 10,5 g (15,6 mmol) porsjon av dette produkt ble løst i 500 ml vannfri diklormetan ved romtemperatur under nitrogen, og 18,6 ml (140,7 mmol) av 2,4,6-kollidin (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt. Til denne blanding ble dereter tilsatt en løsning av 4,8 ml (36,3 mmol) dietylaminosvoveltrifluorid (Aldrich Chemical Co.) løst i 120,0 ml vannfri diklormetan dråpevis i løpet av 1,5 timer. Den resulterende blanding ble omrørt 2 timer lengere og deretter undertrykket ved tilsetning av 100 ml vannfri metylalkohol. Reaksjonsblandingen ble deretter helt over i 200 ml mettet natriumhydrogenkarbonat-løsning og ekstrahert med 500 ml diklormetan. Det organiske ekstrakt ble deretter vasket med 200 ml mettet vandig natrium-kloridløsning, deretter tørket over 100 g natriumsulfat. Det rå produkt ble renset på 500 g silikagel ved eluering med en 10 til 1 (v/v) blanding av heksaner og etylacetat, som ga det ønskede 4-stillings fluorerte produkt i 65% utbytte {Rf: 0,77 [heksaner:etylacetat, 10:1 (v/v)]}.

Dette produkt ble deretter underkastet de syntesetrinn som er generelt beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelse 55 til 56 for å gi Forbindelse 94 {Rf: 0,78 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i godt utbytte.

Forbindelse 95 ble oppnådd ved behandling av Forbindelse 80 ved anvendelse av silyleringsbetingelsene beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 54, etterfulgt av alkylering med sidekjeden AlO (se nedenfor) ved anvendelse av betingelsene beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 45. Det alkylerte produkt ble deretter underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 80 til 85, etterfulgt av de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 86 til 87, for å gi mellomproduktforbindelsen 95 {Rf: 0,09 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]}.

Forbindelse Al_ ble metylert og behandlet som beskrevet ovenfor, bortsett fra at tert-butylklordimetylsilan ble anvendt som silyleringsreagens. Det isolerte 4-metylerte 6-silylerte produkt ble deretter underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelse 56 fra 55, etterfulgt av fosforylering av den frie 6-stilling ved den fremgangsmåte som er beskrevet ovenfor for syntesen av Forbindelse 49. Dette produkt ble deretter ovenført til den ønskede mellomproduktf orbindelse 96. (som en afi-blanding) ved den totrinnssekvens som er beskrevet ovenfor for syntesen av Forbindelsene 5IA og 5IB (fra Forbindelse 49 via Forbindelse

50). Forbindelse 96 (en aS-blanding) {Rf: 0,50 og 0,83 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]}.

Mellomproduktf orbindelse 9_7 ble syntetisert ut i fra Forbindelse 47 på følgende måte. En blanding av 2,0 g (3,1 mmol) av Forbindelse 47, 1,0 g pulverisert 300 AW molekyl-sikter, 300,0 mg (1,29 mmol) (+)-10-kamfersulfonsyre, 1,0 g (8,7 mmol) heptaldehyd og 6,0 ml vannfri toluen, ble omrørt i 45 minutter ved romtemperatur under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 50,0 ml diklormetan, vasket først med 20,0 ml mettet vandig natriumhydrogen-karbonatløsning, og deretter med 20 ml mettet vandig natrium-kloridløsning. Det organiske sjikt ble tørket over 30,0 g natriumsulfat, løsningsmiddelet fjernet under redusert trykk ved romtemperatur, og det resulterende råprodukt renset på 200,0 g silikagel ved eluering med 1,0 liter heksaner, etterfulgt av 1 liter 99:1 (v/v) heksaner:etylacetat og tilslutt med 1 liter 97:3 (v/v) heksaner:etylacetat. Det ønskede produkt ble oppnådd i 85% utbytte (1,96 g, 2,6 mmol) {Rf: 0,47 [heksaner:etylacetat, 19:1 (v/v)]}.

Det ovenfor oppnådde produkt ble tørket under vakuum over natten, og deretter løst i 10,0 ml vannfri diklormetan. Til denne blanding ble først tilsatt 625,0 /il (3,9 mmol) trietyl-silan (Aldrich Chemical Co.), og deretter ble tilsatt 2,8 ml (2,8 mmol) av en 1,0 M titan(IV)kloriddiklormetanløsning (Aldric Chemical Co.) i løpet av 5 minutter ved romtemperatur under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 50,0 ml diklormetan, og vasket først med 50 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning og deretter med 20 ml mettet vandig natriumkloridløsning. Det organiske sjikt ble tørket over 10,0 g natriumsulfat, løsningsmiddelet fjernet under redusert trykk ved romtemperatur, og det resulterende råprodukt renset på 200,0 g silikagel ved eluering med 19:1 (v/v) heksaner -.etylacetat. Det ønskede produkt ble oppnådd i 74% utbytte (1,4 g, 1,9 mmol) {Rf: 0,14 [heksaner:etylacetat, 19:1 (v/v)]}.

Dette 6-stillings alkylerte produkt ble deretter underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for den tretrinns syntetiske omdanning av Forbindelsene 6OA og 60B fra 57A (via 58. og 59.) for å gi Forbindelsen £7 (som en aS-blanding) {Rf: 0,55 og 0,67 [heksaner.-etylacetat, 2:1 (v/v)]} i sammenlignbare utbytter.

Forbindelse 12 ble først omsatt med Forbindelse A25 (generelt som beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 13), og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 13 til 23.. Det resulterende a-isomere produkt ble deretter omsatt med Forbindelse 17 (som generelt beskrevet ovenfor for syntesen av Forbindelse 24) , og det resulterende produkt ble underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 25, 32 - 34, 30. (fremgangsmåte b) og 31. Lipid A-analog B235- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32. Analog B235- 31 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med Tris som beskrevet ovenfor for B214- 31.

Forbindelse 12 ble omsatt med Forbindelse A6 (generelt som beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 18), og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 19 til 23. Det resulterende a-isomere produkt ble omsatt med Forbindelse 17 (generelt som beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 24), og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 25 til 30 (fremgangsmåte a), med det unntak at Forbindelse 26 først ble omsatt med en ekvivalent av en allylkarbonatbeskyttet sidekjede (fremstilt som beskrevet nedenfor for sidekjedene A4-A6 ved anvendelse av C4 som utgangsmateriale) , etterfulgt av kondensasjon med C6. Det resulterende produkt ble deretter avbeskyttet som generelt beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 31. Lipid A-analogen B272- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 25 ble omsatt med E-2-tetradekensyre (beskrevet i Mimura et al., J. Pharmacobio-Dyn 1983 6(8):527, 1983) generelt som beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 26, og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som er generelt beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 27, 28 og 31. Lipid A-analogen B286- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 25. ble omsatt først med Forbindelse C6 og deretter med Forbindelse Hl (se nedenfor) ved selektiv kondensasjon generelt som beskrevet for ovenfor for fremstilling av Forbindelse 26, og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som generelt er beskrevet ovenfor for fremstilling av Forbindelsene 27 - 30 (fremgangsmåte a), 31. Lipid A-analogen B287- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse Hl ble fremstilt generelt som beskrevet for

B6 ved å kondensere Forbindelse C4 med Z-7-tetradekensyre, som selv ble laget ved den samme generelle fremgangsmåte som ble anvendt til fremstilling av Forbindelse B4.

Forbindelse H2 (nedenfor) ble omsatt med Forbindelse 17 (generelt som beskrevet ovenfor for syntese av Forbindelse 24), og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 25. - 21. Lipid A-analogen B288- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analoge B214- 32 .

Forbindelse H2 er identisk i struktur med Forbindelse 23A, bortsett fra at den allyloksy-beskyttede fosfatgruppe (i 23A) ble erstattet med en allyloksykarbonatbeskyttet hydroksy-gruppe (i H2); Forbindelse H2 ble fremstilt i alt vesentlig som beskrevet ovenfor for Forbindelse 23A.

Forbindelse 12. ble omsatt med Forbindelse A17 (se nedenfor) generelt som beskrevet ovenfor for fremstilling av

Forbindelse 18, og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 19-23.. Det resulterende a-isomere produkt ble deretter omsatt med Forbindelse 17 (generelt som ovenfor beskrevet for fremstilling av Forbindelse 24.) , og produktet ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 25.-31. Lipid A-analogen B294- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 12. ble omsatt med Forbindelse Al7 (se nedenfor) som ovenfor beskrevet generelt for syntese av Forbindelse 18. Det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 19 - 29, og deretter avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for Forbindelse 31. Lipid A-analogen B300- 32 ble fremstilt ved omsetning av det fri syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 25. ble omsatt først med E-2-tetradekensyre (beskrevet i Mimura et al., J. Pharmacobio-Dyn 6( 8) :527, 1983) og deretter med Forbindelse C5 ved selektiv kondensasjon (som ovenfor generelt beskrevet for Forbindelse 26) , og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 27, 28. og 31. Lipid A-analogen B313- 32 ble fremstilt ved omsetning av det fri syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 25. ble omsatt først med Forbindelse H3 (ved selektiv kondensasjon) og deretter med Forbindelse C6 (se nedenfor) ved selektiv kondensasjon som ovenfor generelt beskrevet for syntese av Forbindelse 26., og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for Forbindelsene 27 - 31. Lipid A-analog B314- 32 ble fremstilt ved omsetning av det fri syreprodukt med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214-32.

Forbindelse H3 ble fremstilt som nedenfor generelt beskrevet for Forbindelse B6, bortsett fra at Forbindelse C4 ble kondensert med dekansyre (Aldrich Chemical Co.) .

Forbindelse 25 ble omsatt med en racemisk blanding av E3 og E5 som ovenfor generelt beskrevet for syntese av Forbindelse 26., og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av Forbindelsene 27., 28., 31. Lipid A-analog B318- 32 ble fremstilt ved omsetning av det fri syreprodukt med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 23A ble omsatt med Forbindelse 87 som ovenfor generelt beskrevet for syntese av Forbindelse 24. Det resulterende produkt ble deretter underkastet først de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av Forbindelsene 32 - 34, 30. (fremgangsmåte b) og 31 (i denne rekkefølge) og deretter avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for Forbindelse 31. Lipid A-analog B377- 34 ble fremstilt ved omsetning av det fri syreprodukt med L-lysin som ovenfor generelt beskrevet for analog B214- 32. bortsett fra at det fremstilles et dilysinsalt (istedenfor et tetra-lysinsalt).

Forbindelse 12 ble omsatt med Forbindelse A23 (se nedenfor) som ovenfor generelt beskrevet for syntese av Forbindelse 18., og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av Forbindelsene 19 - 23.. Det resulterende of-isomere produkt ble deretter omsatt med Forbindelse 17 som ovenfor generelt beskrevet for syntese av Forbindelse 24, og produktet ble underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 32. - 34, 30 (fremgangsmåte b) og 3JL (i denne rekkefølge) . Lipid A-analogen B379- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreprodukt med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 25 ble omsatt med Forbindelse A30 (nedenfor) som ovenfor generelt beskrevet for Forbindelse 26.. Det resulterende produkt ble først i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av Forbindelsene 27. og 28, og deretter avbeskyttet som ovenfor beskrevet for fremstilling av Forbindelse 31. Lipid A-analogen B385- 32 ble fremstilt ved omsetning av frisyreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214-32.

Forbindelse 25. ble først omsatt med Forbindelse A31 (nedenfor) som ovenfor generelt beskrevet for Forbindelse 26. Det resulterende produkt ble først i rekkefølge underkastet syntesetrinn som ovenfor beskrevet generelt for fremstilling av Forbindelsene 27 og 28, og deretter avbeskyttet som ovenfor beskrevet for fremstilling av Forbindelse 31. Lipid A-analogen B387- 32 ble fremstilt ved omsetning av frisyreproduktet med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214-32 .

Forbindelse 25. ble først omsatt med Forbindelse C8 og deretter omsatt med E-2-tetradekensyre (beskrevet i Mimura et al., J. Pharmacobio-Dyn 6( 8):527. 1983) som ovenfor generelt beskrevet f or. syntese av Forbindelse 26.. Det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av Forbindelsene 27, 28, 30 (fremgangsmåte b) og 31. Lipid A-analogen B388- 32 ble fremstilt ved omsetning av frisyreproduktet med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 25. ble omsatt med Forbindelse G2 som ovenfor generelt beskrevet for syntese av Forbindelse 32.. Det resulterende produkt ble først i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av Forbindelsene 33. og 34, og deretter ble oksytio-langruppene avbeskyttet ved den fremgangsmåte som er beskrevet for fremstilling av Forbindelse 30 (fremgangsmåte b) ovenfor, og fosfat- og hydroksylgruppene ble avbeskyttet ved den fremgangsmåte som er beskrevet for Forbindelse 31 ovenfor. Lipid A-analog B398- 32 ble fremstilt ved omsetning av frisyreproduktet med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214-32..

Forbindelse 12 ble først omsatt med trans-2-decensyre (Lancaster Synthesis Inc.) som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 18, og det resulterende produkt i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 19-23. Det resulterende o-isomere orodukt ble deretter omsatt: med forbindelse 17 (som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 24), og produktet underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 25.. Det oppnådde produkt ble deretter omsatt som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 32., det resulterende produkt underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 33, 34. og 3_0 (fremgangsmåte b) (i denne rekkefølge) , og fosfat- og hydroksylgruppene avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 31. Lipid A analog B400- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 12 ble omsatt med forbindelse A6 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 18), og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 19-23.. Det a-isomere produkt ble betegnet

H12A.

Forbindelse 12. ble omsatt med Hl (se fremstilling av forbindelse B287) som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 13, og produktet først underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelse 19, og deretter de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 15 - 17 (i denne rekkefølge). Produktet ble betegnet H13.

H12A ble omsatt med H13 som beskrevet generelt for fremstilling av forbindelse 24/ og produktet ble først underkastet de syntesetrinn som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 25, deretter de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelsene 32 - 34 (i denne rekkefølge). Endelig ble ditiangruppene i produktet avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for forbindelse 3_0 (fremgangsmåte b) , og fosfat- og hydroksylgruppene ble avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for syntesen av forbindelse 31. Lipid A analog B406- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 53. ble først omsatt med forbindelse 23A (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 40), og det resulterende produktet i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelsene 41-44. Det oppnådde produktet ble deretter fosforylert som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 3_0 (fremgangsmåte b) , og fosfat- og hydroksylgruppene avbeskyttet som generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 31. Lipid A analog B410- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 5IA ble først omsatt med forbindelse 39 (som ovenfor generelt beskrevet for syntesen av forbindelse 40.) , og det resulterende produkt i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 41-44. Det oppnådde produkt ble deretter fosforylert som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 3_0 (fremgangsmåte b) , og fosfat- og hydroksylgruppene avbeskyttet som generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 3_1. Lipid A analog B415- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 42 ble omsatt med 1,3-dicykloheksylkarbodiimid og E7 som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 43., og det resulterende produkt først underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 44, deretter fosforylert som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 30 (fremgangsmåte b), og til slutt avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 31. Analogen B425-32 ble deretter fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214-32 .

Et mindre anomert glykosideringsprodukt av syntese-reaksjonen som frembringer forbindelse 40 (ovenfor) ble først i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelsene 41 - 44, fosforylert som ovenfor generelt beskrevet for forbindelse 30

(fremgangsmåte c), og avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for forbindelse 3_1. Analogen B426- 32 ble deretter fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 51A ble først omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65), og det resulterende produktet i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66-69. Det oppnådde produktet ble deretter avbeskyttet som generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 31. Lipid A analog B427- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 56 ble først omsatt med forbindelse 23A (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 24), og det resulterende produktet underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 25. Det resulterende produkt ble deretter omsatt med en blanding av forbindelsene E3 og E5 (se nedenfor) som ovenfor generelt beskrevet for forbindelse 43.. Produktet ble deretter underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 44, fosforylert som ovenfor generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 28., og produktet avbeskyttet generelt som beskrevet for fremstilling av forbindelse 31. Lipid A analog B442- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 19. ble underkastet de samme syntesetrinn som for syntese av forbindelse 58 fra forbindelse 47. Det resulterende produktet ble avbeskyttet som ovenfor generelt beskrevet for forbindelse 22. og deretter aktivert som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 23A. Dette produktet ble først omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65), og det resulterende produkt underkastet de syntestrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelse 66. Produktet ble deretter omsatt med forbindelse E3 (se nendenfor) generelt som beskrevet for fremstilling av forbindelse 67 og produktet underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelsene 68., 69., 3_1 (i denne rekke-følge) . Lipid A analog B451- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 25. ble først omsatt med forbindelse E3 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 26), og det resulterende produkt underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 27, 28, 31 (i denne rekkefølge). Lipid A analog B452- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 5IA ble først omsatt med forbindelse 5_6 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65), og det resulterende produkt underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 66. Produktet ble deretter omsatt med en blanding av forbindelsene E3 og E5 som ovenfor generelt beskrevet for syntesen av forbindelse 67, og produktet underkastet syntesetrinnene generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 68, 69.

31 (i denne rekkefølge). Lipid A analog B459- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som beskrevet ovenfor for analog B214- 32.

Forbindelse 5IA ble først omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65.) , og det resulterende produktet underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 66.. Det resulterende produkt ble deretter omsatt med forbindelsene E3 (se nedenfor) som generelt beskrevet for syntese av forbindelse 67, og produktet i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 68 og 69. Det oppnådde produkt ble deretter avbeskyttet som generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 3_1. Lipid A analog B460- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 5IA ble først omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 62), og det resulterende produkt underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse

66. Det resulterende produkt ble deretter omsatt med forbindelse E5 (se nedenfor) som generelt beskrevet for syntese av forbindelse 67, og produktet i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelsene 68 og 69. Det oppnådde produkt ble deretter avbeskyttet generelt som beskrevet for fremstilling av forbindelse 3_1. Lipid A analog B465- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

En blanding av forbindelsene 6OA og 60B ble først omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65.) , og det resulterende produkt underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelse 66. Produktet ble deretter omsatt med forbindelse E5 som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 67, og produktet underkastet de syntesetrinn som er beskrevet generelt for fremstilling av forbindelsene 68., 69 og 31 (i denne rekkefølge). Lipid A analog B477- 32 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

En blanding av forbindelsene 6OA og 60B ble først omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65), og det resulterende produkt i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor generelt er beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66 - 6_8. Produktet (tilsva-rende forbindelse 68. ovenfor) ble deretter avbeskyttet generelt som beskrevet for syntese av forbindelse 31. Lipid A analog B479- 33 ble fremstilt ved omsetning av det frie syreproduktet med L-lysin som ovenfor beskrevet for analog B214- 32.

Forbindelse 52 ble først i rekkefølge underkastet de reaksjoner som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 46 og 42 og deretter i rekkefølge underkastet de reaksjoner som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 52-60. Det resulterende produkt ble deretter omsatt med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65), og det resulterende produkt ble i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor generelt er beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66 - 20 ror fremstilling av analog B510- 35.

Analog B464 er identisk i struktur med forbindelse 70, med det unntak at ved fremstilling av forbindelse 45 ble det anvendt en analog av A10 med en sidekjede forlenget med ett karbonatom (fremstillingen av A10 ble modifisert ved anvendelse av oktylcyanid).

Forbindelse 92. ble koblet med forbindelse .60. (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65). Det resulterende produkt ble deretter i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66. - 70 for fremstilling av analog B718- 35.

Forbindelse 93 ble koblet med forbindelse 60. (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65). Det resulterende produktet ble deretter i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 6_6 - 70. for fremstilling av analog B587- 35.

Forbindelse 94 ble koblet med forbindelse 60. (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65.) . Det resulterende produkt ble deretter i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66 - 70 for fremstilling av analog B737- 35.

Forbindelse 95 ble koblet med forbindelse 60 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65). Det resulterende produkt ble deretter i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66.- 20 for fremstilling av analog B736- 35.

Forbindelse 96 ble koblet med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntesen av forbindelse 65). Det resulterende produkt ble deretter i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66. - 20 for fremstilling av analog B725- 35.

Forbindelse 97 ble koblet med forbindelse 56 (som ovenfor generelt beskrevet for syntese av forbindelse 65). Det resulterende produkt ble deretter i rekkefølge underkastet de syntesetrinn som ovenfor er generelt beskrevet for fremstilling av forbindelsene 66 - 70 for fremstilling av analog B763- 35.

DEL B

Fremstilling av sidekjeder

Til tilbakeløpende vannfri tetrahydrofuran (500,0 ml) ble i rekkefølge tilsatt: aktivert sink (101,0 g, 1,54 mol; Fisher Scientific), etylbromacetat (3,0 ml; Aldrich Chemical Co.), og, i én porsjon, heptylcyanid (47,4 ml, 0,308 mol; Aldrich Chemical Co.). Til den resulterende blanding ble deretter tilsatt dråpevis 134,0 ml (1,232 mol) etylbromacetat i løpet av 3 timer. Blandingen ble oppvarmet med tilbakeløp i ytterligere 10 min., avkjølt til romtemperatur og undertrykket ved langsom tilsetning av mettet vandig kaliumkarbonatløsning (160,0 ml). Etter rask omrøring i 30 min. ble løsningen filtrert gjennom 500,0 g Celite 545, hvilket ga en klar gul løsning av rå enaminoester. Denne løsning ble surgjort med 1,0 N saltsyre (300,0 ml), omrørt i 3 timer, fortynnet med 2,0 1 heksaner, og nøytralisert med tilsetning av 300,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonat. Det organiske sjikt ble vasket med mettet vandig natriumkloridløsning (400,0 ml), tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert og inndampet. Resten ble renset ved påsetning på en silikagelkolonne

(1,0 kg) og eluering med 6:1 (v/v) heksaner/etylacetat.

Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (som bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 64,0 g (0,298 mol) av forbindelse Al. {Rf: 0,7 [heksaner:etylacetat, 4:l(v/v)]} i 97% utbytte.

[R]-(+)-2,2'-bis(difenylfosfino)-1,1'-binaftyl (653,5 mg, 1,05 mmol; Aldrich Chemical Co.) og cyklooktadienylrutheniumdiklorid (279,8 mg, 1,0 mmol; Alfa Chemical Co., Ward Hill, MA) ble slått sammen i en 125 ml rundbundet flaske med side-arm-hane, utstyrt med magnetrører og kaldfingervannkondensator i en tørr boks. Flasken ble fjernet fra den tørre boks og

plassert under argon. Vannfri toluen (40,0 ml) og trietylamin (1,7 ml, 10,0 mmol; Aldrich Chemical Co.), som begge var blitt deoksygeneret ved gjennomblåsning med nitrogen, ble injisert i flasken, og blandingen ble oppvarmet med tilbakeløp under

argon under omrøring i 15 timer. Den dypt karmosinrøde løs-ning fikk avkjøle seg til 20°C, og dannet en rødaktig gel. Overskudd av løsningsmidlet ble fjernet fra blandingen ved anvendelse av en 30 cm 22-gauge nål, og restinnholdet av flyktige bestanddeler ble fjernet ved anvendelse av vakuum i løpet av flere timer (idet man var svært omhyggelig med å utelukke luft)* Resten bestående av rød-svart faststoff ble løst i vannfri, oksygenfri tetrahydrofuran ved omrøring under nitrogenatmosfære ved 25°C i 1 time. Den resulterende klare orange-brune løsning av [R]-2,2 ' -bis(difenylfosfino)-1,1'-binaftylrutheniumdiklorid-hemitrietylaminkompleks ble anvendt direkte i neste reaksjon.

Forbindelse Al (334,2 g, 1,15 mol) ble løst i vannfri metylalkohol (330,0 ml) og deoksygenert ved 3 fryse-tine-vakuumavgassingscykler, ved anvendelse av flytende nitrogen og nitrogenatmosfære. Løsningen av [R]-2,2'-bis(difenylfosfino)-1,1'-binaftylrutheniumdiklorid-hemitrietylaminkompleks-katalysator (fremstilt ovenfor), ble tilsatt til reaksjons-løsningen ved anvendelse av en sprøyte. Reaksjonsblandingen ble pumpet inn i en argon-gjennomstrømmet 2,0 1 hydrogene-ringsbombe inneholdende metylalkohol-vasket Dowex 50x8-200 H+<->harpiks (3,0 g,- Aldrich Chemical Co.) ved anvendelse av et kateter under argon. Bomben ble fylt til 10,2 MPa med hydrogengass (Liquid Carbonic, Tewskbury, MA) og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 66 timer. Når trykket i bomben hadde sunket 2,1 MPa, ble hydrogenoverskuddet sluppet ut, reaksjonsblandingen ble filtrert, og flyktige substanser ble fjernet under redusert trykk, til å gi 334,0 g (1,15 mol) av forbindelse A2 {R2: 0,31 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 99% utbytte.

Forbindelse A2 (89,6 g, 0,347 mol) ble løst i tetrahydrofuran (800,0 ml). Til denne løsning ble tilsatt 2,5 M vandig natriumhydroksyd (300,0 ml, 0,75 mol), og den resulterende blanding kraftig omrørt under nitrogenatmosfære ved 25°C i 1,5 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 1,0 1 av 1:1 (v/v) dietyleter/heksaner, og det vandige sjikt ble fraskilt. Den organiske fase ble videre ekstrahert med 200,0 ml vann, og de samlede vandige faser surgjort med konsentrert saltsyre 67 ml. Den surgjorte blanding ble deretter ekstrahert med 2,0 1 dietyleter, og ekstraktet vasket først med 1,0 1 vann, deretter med 1,0 1 mettet vandig natriumklorid-løsning, og til slutt tørket over 500,0 g magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, og det resulterende gråaktige faste stoff løst i 2,0 1 80°C acetonitril. Til denne løsningen ble ved 80°C tilsatt dicykloheksylamin (80,0 ml, 0,40 mol; Aldrich Chemical Co.). Blandingen ble avkjølt til -20°C og ga 104,7 g (0,24 mol) av forbindelse A3 {Rf: 0,38 [heksaner:etylacetat:iseddiksyre, 1:1:0,1 (v/v/v)]} som svakt nesten hvite fine nåler, i 71% utbytte.

Forbindelse A3 (104,7 g, 246,0 mmol) ble slemmet opp i etylacetat (2,0 1), og til denne oppslemmingen ble først tilsatt trietylamin (37,2 g, 369,0 mmol) etterfulgt av 2-bromacetofenon (48,9 g, 246,0 mmol, i én porsjon; Aldrich Chemical Co.),- tilsetningene ble gjort under nitrogenatmosfære, ved 0°C. Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur, omrørt i 6 timer, og deretter vakuumfiltrert. Resten ble vasket med 400,0 ml etylacetat, og filtratet ble vasket først med 500,0 ml av 0,8 M saltsyre, deretter med 500 ml vann, og til slutt med 1,0 1 mettet vandig natriumkloridløsning, og deretter tørket over 500,0 g magne-siumsulf at. Løsningsmidlet ble fordampet under redusert trykk ved 50°C, og ga et størknet grått fast stoff som ble omkrystallisert fra 1,1 1 heksaner og tørket i en vakuumovn ved 50°C, og ga 81,05 g (223,9 mmol) av forbindelse A4 {Rf: 0,65

[kloroform:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} som et nesten hvitt fast stoff i 91% utbytte.

Forbindelse A4 (20,2 g, 65,9 mmol) ble løst i vannfri toluen (300,0 ml) og vannfri pyridin (30,0 ml) ved 0°C, og til denne løsning ble tilsatt dråpevis 1,93M fosgen i toluen (50,0 ml 96,5 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i

10 min., og deretter ble dråpevis tilsatt allylalkohol

(20,2 ml, 297,0 mmol). Etter ytterligere 10 min. omrøring, ble reaksjonen undertrykket ved 0°C, ved tilsetning av 100,0 ml mettet natriumhydrogenkarbonatløsning. Løsningen ble deretter oppvarmet til 25°C og ekstrahert med 1,0 1 etylacetat. Det organiske sjikt ble vasket med 500,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert og inndampet. Resten ble renset på en silikagelkolonne (2,0 kg), ved eluering med 1:9 (v/v) etylacetat/- heksaner. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (som bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 16,1 g (41,2 mmol) av forbindelse A5 {Rf: 0,9 [heksaner:etylacetat, 2:l(v/v)]} i 62% utbytte.

Forbindelse A5 (16,07 g, 41,17 mmol) ble løst i iseddiksyre (150,0 ml), i en Mortonflaske ved 0°C, og til denne løsning ble tilsatt sinkstøv (24,2 g, 371,0 mmol). Løsningen ble oppvarmet til 25°C, omrørt i 1 time, og deretter filtrert gjennom en 50,0 g Celite 545 plugg og inndampet. Resten ble renset på en silikagelkolonne, ved eluering først med 4:1 (v/v) etylacetat/heksaner og deretter med 10:40:1 (v/v/v) metylalkohol/kloroform/eddiksyre. Fordampning av løsnings-midlet fra de produktholdige fraksjoner (som bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga A6 {10,8 g; 39,65 mmol; Rf: 0,34 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)] i 96% utbytte.

Til en mekanisk omrørt oppslemming av 1003,0 g

(15,33 mol) aktivert sinkpulver i 2,5 1 vannfri tetrahydrofuran under nitrogenatmosfære ved romtemperatur, ble tilsatt dråpevis 56,0 ml (0,59 mol) metylbromacetat (Lancaster Chemical Co., Windham, NH) over en 10-min. periode. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløpstemperatur, og 496,3 g (3,96 mol) av n-heptylcyanid (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt dråpevis over en 5 min. periode, og ytterligere 700,0 ml (7,39 mol) metylbromacetat ble deretter tilsatt (dråpevis) over en 4 timers periode. Blandingen ble oppvarmet til til-bakeløp i ytterligere 1 time, fikk avkjøle seg til romtempera-tur, ble langsomt helt over i 3,0 1 av en omrørt, mettet vandig løsning av kaliumkarbonat, og 1,0 kg Celite 545 ble tilsatt. Den heterogene blanding ble filtrert over en matte av 200,0 g av Celite 545, og eluert med fire 1,0 1 porsjoner

av etylacetat. Filtratet ble separert, og det vandige sjikt ekstrahert med to 500,0 ml porsjoner av etylacetat. De samlede organiske sjikt ble vasket med 500,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 2,0 kg natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Den rå orange olje ble kraftig omrørt ved romtemperatur i et to-fasesystem av 1,5 1 av heksaner og 500,0 ml av en 1,0 N vandig løsning av saltsyre med en dråpevis tilsetning av 250 ml konsentrert saltsyre over en 40 min. periode. Etter omrøring av den endelige heterogene løsning i ytterligere 20 min., ble sjiktene separert og det vandige sjikt ekstrahert med to 200,0 ml porsjoner av heksaner. De samlede organiske sjikt ble vasket med 500,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Den rå organge væske ble destillert ved anvendelse av et destillasjonsapparat med roterende børste ved en bade-temperatur på 110°C under 1,0 mm Hg vakuum. Den delvis rensede klare gule olje ble fraksjonsmessig vakuum-destillert, og ga 652,8 g [3,26 mol, 82,3%, kokepunkt (k.p.) 86-88°C/0,4 mm Hg) av forbindelse A7 (Rf: 0,65 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} som en klar fargeløs væske.

I en oksygenfri-tørr boks ble 1,54 g (2,47 mmol) av [R]-( + )-2,2'-bis(difenylfosfino)1-1,1'-binaftyl og 662,0 mg

(2,36 mmol) diklor(cyklookta-1, 5-dien)ruthenium (II) polymer oppslemmet i 100,0 ml avgasset toluen og 4,0 ml oksygenfritt trietylamin i en 250 ml Schlenk-flaske utstyrt med magnetisk

rørestav og en kondensator. Reaksjonsbeholderen ble forseglet under den inerte atmosfære, fjernet fra den tørre boks, og oppvarmet med tilbakeløp under argonatmosfære inntil det ble oppnådd et orange fast stoff (ca. 24 timer). Reaksjonsblandingen ble avkjøt langsomt til 0°C over en 2-timers-periode, hvoretter det gelatinøse røde halvfaste stoff ble slemmet opp i 50,0 ml tørr avgasset toluen. Oppslemmingen ble forsiktig omvirvlet for å vaske de krystallinske flak, fikk stå i 10 min., og overskuddet av løsningsmiddel ble dekantert fra det faste stoff ved anvendelse av en 50 ml sprøyte med en 2 0-gauge nål. Utgnidningen ovenfor ble gjentatt ytterligere én gang, og denne ble etterfulgt av inndamping av den endelige katalysator til tørrhet under et vakuum på 1 mm Hg over en 2-timers periode. Det orange-røde faste stoff ble slemmet opp i 100,0 ml vannfri, oksygen-fri tetrahydrofuran, og omrørt under argonatmosfære i 1 time, hvorunder blandingen ble en klar rød løsning. Denne katalysatorløsning ble overført via en kanyle, under argonatmosfære til den avgassede løsning av forbindelse A7 beskrevet nedenfor.

Forbindelse A7 (365,3 g; 1,824 mol) ble løst i 500,0 ml av en nylig åpnet flaske av metylalkohol av HPLC-kvalitet, under argonatmosfære, i en 2 1 tre-halset rundbundet flaske. Flasken ble forseglet med en vakuumadapter og to gummisepta, og løsningen ble avkjølt med flytende nitrogen til et hvitt fast stoff, hvorunder flasken ble evakuert under redusert trykk. Det faste stoff ble deretter plassert under argonatmosfære og oppvarmet til romtemperatur ved hjelp av en varmepistol. Denne avkjølings-, evakuerings-, og oppvarmings-prosess ble gjentatt ytterligere tre ganger. Etter den endelige avgassingsrosess ble den chirale katalysator i 100,0 ml vannfri, oksygen-fri tetrahydrofuran tilsatt som beskrevet ovenfor. Den endelige reaksjonsblanding ble overført ved anvendelse av en Teflon-kanyle under argonatmosfære i en 2,0 1 reaksjonsbombe som inneholdt 1,0 g (5,21 mmol) av para-toluen-sulfonsyremonohydrat (Aldrich Chemical Co.) og som var blitt gjennomspylt med argon i 2 timer. (Reaksjonsbomben var utstyrt med en mekanisk rører og manometer). Reaksjonsbomben ble evakuert ved anvendelse av vannstrålepumpe og gjennomspylt to ganger med hydrogengass av 690 kPa. Reaksjonstrykket ble hevet til 10,3 MPa med hydrogengass og ble omrørt i 72 timer; trykket i systemet ble hevet igjen etter de første 15 min. omrøring. Etter tap av 2,5 MPa hydrogengass, ble den fullstendige reaksjon langsomt avgasset og gjennomspylt tre ganger med argon. Den metanoliske løsningen ble inndampet under redusert trykk, og den resulterende rest ble løst i etylacetat og omrørt med 300,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat i 15 min.. Sjiktene ble adskilt, og det organiske sjikt vasket med 100,0 ml av en mettet vandig løs-ning av natriumklorid, tørket over 100,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Resten ble renset over 2,5 kg silikagel ved eluering først med 32,0 1 heksaner, deretter med 8,0 1 av 19:1(v/v) heksaner:etylacetat, deretter med 16,0 1 av 9:1(v/v) heksaner :etylacetat, og til slutt med 8,0 1 av 3:1 (v/v) heksaner :etylacetat. Fordampning av løsningsmidlet fra de produkt-holdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 325,0 g (1,61 mol, 88,1% utbytte, 98+% enantiomert overskudd) av forbindelse A8 {Rf: 0,46 [heksaner:etylacetat, 3:1(v/v)]} som en klar fargeløs olje.

Til en omrørt oppslemming av 31,5 g (0,83 mol) av litium-aluminiumhydrid (Aldrich) i 500,0 g vannfri dietyleter, under nitrogenatmosfære ved 0°C, ble tilsatt dråpevis 159,0 g

(0,78 mol) av forbindelse A8 i 200,0 g vannfri dietyleter over en 3,5 timers periode. Etter omrøring i ytterligere 15 min. ved romtemperatur, ble den fullstendige reaksjon avkjølt til 0°C, og undertrykket ved dråpevis tilsetning av 1,0 1 av en 1,0 N vandig løsning av saltsyre, etterfulgt av tilsetning av 200,0 ml konsentrert saltsyre. De resulterende klare sjikt ble adskilt, og det vandige sjikt ble ekstrahert 3 ganger med 300,0 ml porsjoner av dietyleter. De samlede ekstrakter ble vasket først med 200,0 ml vann og deretter med 200,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid. De vandige sjikt ble tilbakeekstrahert 3 ganger med 300,0 ml porsjoner kloroform. De samlede organiske sjikt ble tørket over 500,0 g natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga en klar gul olje. Råproduktet ble renset på 500,0 g silikagel ved eluering først med 5,0 1 av 9:1(v/v) heksaner:etylacetat, deretter med 20,0 1 av 4:1 (v/v) heksaner -.etylacetat, deretter med 8,0 1 av 3:1 (v/v) heksaner :etylacetat, deretter med 1,0 1 kloroform, deretter med 6,0 1 av 9:1 (v/v) kloroform:metylalkohol, og til slutt med 4,0 1 av 4:1 (v/v) kloroform:metylalkohol. Fordampning av

løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 94,2 g (0,54 mol, 69% utbytte) av forbindelse A9 {Rf: 0,33 [etylacetat:heksaner, 1:1 (v/v)]} som en klar farge-løs olje.

Til en omrørt løsning av 114,1 g (0,65 mol av forbindelse

A9 i 3,6 1 vannfri pyridin ved 2,0°C under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 136,6 g (0,72 mol) paratoluensulfonylklorid (99+%, Aldrich Chemical Co.) i 10,0 g porsjoner over en 15 min. periode. Reaksjonen fikk varme seg opp langsomt til romtemperatur, ble omrørt i 8 timer under nitrogenatmosfære, konsentrert under vakuuminndampingsbetingelser, og destillert azeotropisk til tørrhet med tre 500,0 ml porsjoner av toluen ved anvendelse av vakuumfordampning. Den rå sirup ble løst i 2,5 1 etylacetat og 500,0 ml mettet vandig løsning av natriumklorid. Sjiktene ble adskilt, og det organiske sjikt vasket med 500,0 ml av en mettet vandig natriumkloridløsning. De samlede vandige sjikt ble ekstrahert to ganger med 500,0 ml porsjoner kloroform. De samlede organiske sjikt ble tørket over 500,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset over 1,5 kg silikagel ved eluering først med 12,0 1 av 9:1 (v/v) heksaner:etylacetat, deretter med 12,0 1 av 17:3 (v/v) heksaner:etylacetat, deretter med 20,0 1 av 4:1 (v/v) heksaner:etylacetat, deretter med 4,0 1 diklormetan, og til slutt med 16,0 1 av 9:1 (v/v) diklormetan:metylalkohol. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 96,9 g (0,29 mol) av forbindelse A10 {Rf:0,45 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} som en gul olje i 45% utbytte.

Til en omrørt løsning av 20,0 ml (0,136 mol) av 1-oktyn (Aldrich Chemical Co.) i 300,0 ml vannfri tetrahydrofuran ble dråpevis tilsatt 70,5 ml (0,177 mol) av en 2,5 M løsning av n-butyllitium i heksaner (Aldrich Chemical Co.), under nitrogenatmosfære ved 0°C over en 30 minutters periode. Blandingen fikk varme seg opp til romtemperatur over en periode på 1 time, hvoretter reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0°C, og 35,9 ml (0,272 mol) av 1,4-dijodbutan (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt dråpevis i løpet av en 20 minutters periode. Blandingen fikk varme seg opp til romtemperatur, ble omrørt i ytterligere 16 timer, fortynnet med 300,0 ml heksaner, helt over 400 g is, og de resulterende sjikt skilt fra hverandre. Det organiske sjikt ble vasket med 300,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 150,0 g natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble frigjort for overskudd av dijodbutan ved vakuumdestillasjon under 0,1 mm Hg ved 70-80°C, og den gjenværende rest ble renset på 500,0 g silikagel ved eluering med 2,0 1 heksaner. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtempera-tur, og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 23,0 g (0,078 mol) av forbindelse All {Rf: 0,6 [heksaner]} i 58% utbytte.

Til en omrørt løsning av 6,53 g (37,5 mmol) av forbindelse A9 i 45,0 ml vannfri pyridin ble tilsatt 11,58 g (37,5 mmol) av 4-metoksy-trifenylmetylklorid (Aldrich Chemical Co.), under nitrogenatmosfære ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4,5 timer, fortynnet med 200,0 ml diklormetan, og den organiske løsning vasket med 100,0 ml vann, tørket over 150,0 g natriumsulfat, filtrert, konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og destillert azeotropisk til tørrhet med tre 100 ml porsjoner av toluen under vakuuminndamping. Det rå produkt ble renset på 300,0 g silikagel ved eluering med 2,0 1 av 6:1 (v/v) heksaner :etylacetat. Etter fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ble produktet løst i 200 ml heksaner, filtrert, og filtratet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur og tørket over natten under vakuum ved romtemperatur, og ga 16,5 g (36,9 mmol) av forbindelse Al2 {R^: 0,49 [heksaner: etylacetat, 4:1(v/v)]} i 98% utbytte.

Til en omrørt løsning av 17,1 g (0,038 mol) av forbindelse A12 i 60,0 ml vannfri N,N-dimetylformamid under nitrogenatmosfære, ved 0°C, ble tilsatt (i små porsjoner) 2,94 g (0,076 mol) natriumhydrid (60% i olje, Aldrich Chemical Co., vasket med heksaner). Blandingen ble omrørt ved 0°C i ytterligere 15 min.A 12,3 g (0,042 mol) av forbindelse All ble dråpevis tilsatt over en 30 minutters periode, reaksjonsblandingen fikk varme seg opp til romtemperatur, ble omrørt i ytterligere 16 timer, og undertrykket ved langsom tilsetning av 10,0 ml metylalkohol ved 0°C. Blandingen ble omrørt i ytterligere 30 min., fortynnet med 300,0 ml diklormetan, og den resulterende organiske løsning vasket med 200,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 150,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på 500,0 g silikagel ved eluering først med 1,5 1 heksaner og deretter med 2,5 1 av 30:1 (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifiserst ved tynn-sj iktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 2,5 g (4,1 mmol) av forbindelse A13 {Rf: 0,5 [heksaner:etylacetat), 10:1 (v/v)]} i 11% utbytte.

Til en omrørt løsning av 2,6 g (4,26 mmol) av forbindelse A13 i 80,0 ml diklormetan ble tilsatt 1,0 ml konsentrert saltsyre. Løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time, fortynnet med 400,0 ml etylacetat, den organiske løsning vasket fire ganger med 100,0 ml porsjoner av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 60,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Resten ble renset på 300,0 g silikagel ved eluering med 2,0 1 av 5:1 (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løs-ningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 1,69 g (>4,26 mmol) av forbindelse Al4 {Rf: 0,4 [heksaner:etylacetat, 4/1(v/v)]} som også inneholdt en liten mengde av 4-metoksytrifenylmetylklorid. Produktet ble anvendt i påfølgende syntesereaksjoner uten ytterligere rensing.

Til en omrørt løsning av 0,55 g (1,62 mmol) av forbindelse A14 i 50,0 ml vannfritt diklormetan, under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 3,0 g av flammetørket 3 Ångstrøms molekylsikter (Aldrich Chemical Co.). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 15 min., 3,05 g (1,62 mmol) av pyridinium-dikromat (Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt i én porsjon, reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 40 min., oppslemmingen ble fortynnet med 50,0 ml diklormetan, og den organiske oppslemmingen ble vasket først med 50 ml av en 10% (w/v) vandig løsning av natriumtiosulfat og deretter med 50 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 60,0 g natriumsulfat, filtrert over 20,0 g celite 545, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på 50,0 g silikagel ved eluering med 300 ml av 7:1 (v/v) heksaner :etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikts-kromatograf isk analyse under redusert trykk ved romtemperatur og tørking i 30 min. under vakuum ved romtemperatur, ga 0,46 g (1,37 mmol) av forbindelse Al5 {Rf: 0,88 [heksaner:etylacetat, 2/1 (v/v)]} i 84% utbytte som ble anvendt direkte i neste reaksjon.

Til en omrørt løsning 0,46 g (1,37 mmol) av forbindelse A15 i 12,0 ml tert-butylalkohol og 3,0 ml (28,3 mmol) av 2-metyl-2-buten (Aldrich Chemical Co.) ved 0°C ble dråpevis tilsatt 10,0 ml av en vandig løsning inneholdende 1,04 g (8,22 mmol) av natriumklorittdihydrat (Eastman Kodak. Co., Rochester, NY) og 1,11 g (8,04 mmol) énbasisk natriumfosfat (Fisher Scientific Co.). Oppslemmingen ble omrørt ved 0°C i 20 min., reaksjonsblandingen ble undertrykket med 30,0 ml av en 10% (w/v) vandig løsning av natriumtiosulfat, fortynnet med 100,0 ml dietyleter, og de resulterende sjikt skilt fra hverandre. Det organiske sjikt ble vasket med 50 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 60,0 g natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på 100,0 g silikagel ved eluering først med 300 ml av 4:1 (v/v) heksaner:etylactat, deretter med 300 ml av 2:1 (v/v) heksaner:etylacetat, og til slutt med 500 ml av 1:1 (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 342,0 mg (0,97 mmol) av forbindelse Al6 {Rf: 0,28 [heksaner:etylacetat, 2:l(v/v)]} (Rf: 0,45 [heksaner :etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 70,8% utbytte.

Til en omrørt løsning av 342,0 mg (0,97 mmol) av forbindelse Al6 i 16,0 ml metylalkohol og 0,5 ml (4,23 mmol) kinolin (Aldrich Chemical Co.) ved romtemperatur, ble tilsatt 100,0 mg av 5% (wt/wt) palladium på kalsiumkarbonat, forgiftet med bly (Aldrich Chemical Co.) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble evakuert under redusert trykk ved romtempera-tur, gjennomspylt med hydrogengass tre ganger, og omrørt under en atmosfære av hydrogengass ved atmosfærisk trykk i 2,5 timer. Den resulterende reaksjonsblanding ble gjennom-strømmet med nitrogen og filtrert over 50,0 g Celite 545 ved eluering med tre 10,0 ml porsjoner av metylalkohol. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og fortynnet med 100,0 ml diklormetan. Den organiske løsning ble vasket to ganger med 60,0 ml porsjoner av en 1,0 N vandig løsning av saltsyre, og deretter én gang med 50,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 60,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert udner redusert trykk ved romtemperatur og tørket over natten under vakuum ved romtemperatur, og ga 340,0 mg (0,96 mmol) av rå forbindelse Al7 {Rf: 0,50 [heksaner:etylacetat, 2/1 (v/v)]} i 99% utbytte. Forbindelse Al7 ble anvendt i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.

Til en omrørt løsning av 10,0 g (64,8 mmol) av decyn-l-ol (Farchan Chemical Co., Gainesville, FL) i 10 ml vannfri pyridin ved 0°C under nitrogenatmosfære, ble langsomt tilsatt 18,5 g (97,0 mmol) para-toluensulfonylklorid (99+%, Aldrich Chemical Co.) over en 5 min. periode. Reaksjonen fikk varme seg langsomt opp til romtemperatur, ble omrørt i 4 timer, og fortynnet med 200,0 ml etylacetat. Den organiske løsningen ble vasket med 50,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert, konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur og destillert azeotropisk til tørrhet med tre 50,0 ml porsjoner av toluen ved anvendelse av vakuuminndamping, og ga 23,0 g av den rå forbindelse Al8 {Rf: 0,60 [heksaner:etylacetat, 4:l(v/v)]} som ble anvendt i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.

Til en omrørt løsning av 18,0 g (+ 50,7 mmol) av forbindelse Al8 i 240,0 ml vannfritt dimetylsulfoksyd (Fisher Scientific Co.) ble tilsatt 36,0 g (194,6 mmol) av kaliumftalimid (Aldrich Chemical Co.) ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Reakjsonsblandingen ble oppvarmet til 50°C, omrørt i tre timer, og fortynnet med 1,0 1 etylacetat. Den resulterende organiske løsning ble vasket først med 200,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og deretter med 200,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 150,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk, ved romtemperatur. Resten ble renset på 300,0 g silikagel ved eluering med 3,0 1 av 6:1(v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 13,0 g

(45,8 mmol) av forbindelse Al9 {Rf: 0,39 [heksaner:etylacetat, 6/1(v/v)]} i 84% utbytte.

Til en omrørt løsning av 13,0 g (45,8 mmol) av forbindelse A19 i 200,0 ml metylalkohol og 8,1 ml (68,5 mmol) kinolin ved romtemperatur, ble tilsatt 1,0 g av 5% (wt/wt) palladium på kalsiumkarbonat, forgiftet med bly, under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble evakuert under redusert trykk, gjennomspylt med hydrogengass ved romtemperatur tre ganger, og omrørt under en atmosfære av hydrogengass ved atmosfærisk trykk i 1 time. Den resulterende reaksjonsblandingen ble gjennomspylt med nitrogen og filtrert over 100,0 g Celite 545 ved eluering med tre 50,0 ml porsjoner av metylalkohol. Filtratet ble konsentrert uner redusert trykk ved romtemperatur, og fortynnet med 500,0 ml diklormetan. Den organiske løsningen ble vasket med to 100,0 ml porsjoner av en 1,0 N vandig løsning av saltsyre, og deretter med 100,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 150,0 g natriumsulfat, filtrert, konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur og tørket over natten under vakuum ved romtemperatur, og ga 13,0 g (45,6 mmol) av den rå forbindelse A20 {Rf: 0,39 [heksaner:etylacetat, 6/1 (v/v)} i 99,6% utbytte. Forbindelse A20 b^.e anvendt i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.

Til en omrørt løsning av 6,0 g (21,0 mmol) av forbindelse A20 i 200,0 ml absolutt etylalkohol (Quantum Chemical Co., Cincinnati, OH), ved romtemperatur, ble tilsatt 5,1 ml (105,0 mmol) av hydrazinhydrat (98%, Lancaster Chemical Co.). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 75°C, omrørt i 75 min., avkjølt til romtemperatur, og fortynnet med 300,0 ml diklormetan og 100 ml vann. De resulterende sjiktene ble skilt fra hverandre, og det vandige sjikt ekstrahert med to 50,0 ml porsjoner av diklormetan. De samlede organiske sjikt ble tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga 3,2 g av den rå forbindelse A21 {Rf: 0,08 [kloroform:metylalkohol, 10:1 (v/v)]} i 100% utbytte. Det rå produktet ble anvendt i den neste reaksjon uten ytterligere rensing. Til en mekanisk omrørt løsning av 4,8 g (15,6 mmol) av forbindelse A4 i 60,0 ml vannfri toluen, under, nitrogenatmosfære ved 0°C, ble tilsatt 6,0 ml (74,2 mmol) av vannfritt pyridin etterfulgt av dråpevis tilsetning av 8,9 ml (17,2 mmol) ay^en 1,93 M løsning av fosgen i toluen over en 20 min. periode. Blandingen ble omrørt ved 0°C i ytterligere 15 min., hvoretter 2,7 g (17,2 mmol) av forbindelse A21 i 30,0 ml vannfri toluen ble tilsatt dråpevis over en 5 min. periode. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 15 min., undertrykket med 30,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, og fortynnet med 100,0 ml etylacetat. Den organiske oppslemming ble vasket med 50,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på 200,0 g silikagel ved eluering med 3,0 1 av 6:1 (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 5,2 g (10,6 mmol) av forbindelse A22 {Rf: 0,55 [heksaner:etylacetat), 10:1 (v/v)]} i 68,3% utbytte.

Til en mekanisk omrørt løsning av 5,2 g (10,7 mmol) av forbindelse A22 i 200 ml iseddiksyre i en tre-halset Morton reaksjonsflaske ble tilsatt 14,0 g (214,1 mmol) aktivert sinkpulver under nitrogenatmosfære ved romtemperatur. Reaksjonen ble omrørt i 30 min., oppslemmingen filtrert gjennom en matte av 60,0 g Celite 545, og eluert med fire 50,0 ml porsjoner av metylalkohol. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og destillert azeotropisk til tørrhet med tre 50 ml porsjoner av toluen under vakuuminndamping. Den rå gule olje ble renset på 200,0 g silikagel ved eluering med 2,0 1 av 6:1 (v/v) heksaner:etylacetat, og deretter med 5>0 1 av l-.l (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk, ved romtemperatur, og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 3,55 g (9,63 mmol) av forbindelse A23 {Rf: 0,08 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 90% utbytte.

Til en omrørt løsning av 23,7 g (0,118 mol) dodekansyre (Aldrich Chemical Co.) og 32,9 g (0,107 mol) av forbindelse A4 løst i 250,0 ml vannfri diklormetan, ved 0°C, ble tilsatt 0,03 g (0,2 mmol) 4-dimetylaminopyridin, deretter 29,2 g (0,143 mol) 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Etter omrøring i 2,5 timer ved 25°C ble reaksjonsblandingen fortynnet med 100,0 ml heksaner (200,0 ml), filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på en silikagelkolonne (2,0 kg) ved eluering med en 1:9 (v/v) blanding av etylacetat:heksaner. Fordampning av løs-ningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 48,7 g (0,10 mol) av forbindelse A24 {Rf: 0,6 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 84% utbytte.

Til en mekanisk omrørt løsning av forbindelse A24

(16,07 g, 32,99 mmol) løst i 150,0 ml iseddiksyre i en Morton-

flaske ved 0°C ble tilsatt 24,2 g (371,0 mmol) av sinkstøv. Etter oppvarming til 25°C og omrøring i 1 time, ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom 50,0 g av Celite 545 og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Den oppnådde rest ble renset på silikagel (1,0 kg) ved eluering først med etylacetat:heksaner [4:1(v/v)], og deretter metylalkohol :kloroform.-eddiksyre [10 :40 :1 (v/v/v) ] . Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga (10,8 g, 39,35 mmol) av forbindelse A25 {Rf: 0,34 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 96% utbytte.

Til en omrørt løsning av 1,0 ml (3,39 mmol) av 1-tridecyn (Lancaster Synthesis) i 20,0 ml vannfri tetrahydrofuran ved 0°C under en nitrogenatmosfære, ble dråpevis til satt 1,5 ml (3,73 mmol) av en 2,51 M løsning av n-butyllitium i heksaner over en 5 min. periode. Reaksjonen ble omrørt ved 0°C i 1 time, hvoretter den samlede løsning ble overført via en kanyle til en. omrørt løsning av 0,46 ml (6,74 mmol) av metyl-klorformiat (Aldrich Chemical Co.) i 10,0 ml vannfri tetrahydrofuran ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Den resulterende reaksjonsblanding ble omrørt i ytterligere 3 0 min., hvoretter blandingen ble undertrykket med 10,0 ml av en mettet løsning av ammoniumklorid. Den resulterende blanding ble ekstrahert med tre 20 ml porsjoner av etylacetat, og de samlede organiske sjikt ble vasket med én 10 ml porsjon av mettet natriumklorid, tørket over 20,0 g vannfritt natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt, 0,69 g (2,89 mmol) av forbindelse A2 6 i 85,4% utbytte, ble anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing etter tørking over natten under vakuum ved romtemperatur {Rf: 0,78 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]}.

Til en omrørt oppslemming av 4,39 g (23,07 mmol) av kopper(I)jodid (99,9%, Aldrich Chemical Co.) i 40,0 ml vannfri dietyleter ved 0°C under nitrogenatmosfære, ble dråpevis tilsatt 30,0 ml (46,2 mmol) av en 1,5 M løsning av metyllitium i dietyleter (Aldrich Chemical Co.) over en 15 min. periode, inntil det ble oppnådd en klar, fargeløs løsning. Reaksjons-løsningen ble raskt overført via en kanyle til en omrørt løsning av 5,0 g (20,97 mmol) av forbindelse A26 i 50,0 ml vannfri dietyleter ved romtemperatur under nitrogenatmosfære. Etter omrøring i ytterligere 5 min., ble den resulterende reaksjonsblanding undertrykket med 60,0 ml av en mettet løs-ning av ammoniumklorid og omrørt i 1 time. Den resulterende blanding ble fortynnet med 50,0 ml heksaner, filtrert over en 50 g matte av Celite 545 og eluering med 50 ml heksaner, og sjiktene skilt fra hverandre. Det vandige sjikt ble ekstrahert med to 50 ml porsjoner av heksaner, og de samlede organiske sjiktene ble vasket med én 50 ml porsjon av mettet natriumklorid, tørket over 100,0 g vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Resten ble renset på to PrepPAK 500/silikapatroner (Waters Associates) forbundet i tandem, eluering med 10,0 1 av en 98,5 til 2,5 (v/v) løsning av dietyleter:heksaner ved en strømningshastighet på 2 00 ml/min. ved anvendelse av PrepLC/System 500 væskekromatografiutstyret (Waters Associates) som pumpe- og påvisningssystem. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 1,25 g (4,93 mmol) av forbindelse A27 {R : 0,28 [dietyleter: heksaner, 1:19 (v/v)]} i 23,5% utbytte og 2,55 g (10,08 mmol) av forbindelse A28 {Rf: 0,22 [dietyleter:heksaner, 1:19 (v/v)]} i 48,1% utbytte.

Til en omrørt løsning av 2,30 g (9,08 mmol) av forbindelse A27 i 8,0ml vannfri diklormetan ved 0°C under nitrogenatmosfære, ved tilsatt dråpevis 18,1 ml (18,1 mmol) av en 1,0 M løsning av diisobutylaluminiumhydrid i heksaner (Aldrich Chemical Co.) over en 15 min. periode. Reaksjonsblandingen ble undertrykket med 60,0 ml av en mettet løsning av ammoniumklorid, og omrørt i ytterligere 45 min.. Den resulterende blanding ble ekstrahert med tre 50 ml porsjoner av etylacetat, og de samlede organiske sjikt ble vasket med én 50 ml porsjon av en mettet løsning av natriumklorid, tørket over 100,0 g vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på 150,0 g silikagel ved eluering med 2,0 1 av en 7:3 (v/v) blanding av heksaner og dietyleter. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendelse av tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 1,29 g (5,70 mmol) av forbindelse A29 {Rf: 0,19 [dietyleter:heksaner, 3:7 (v/v)]} i 62,8% utbytte.

Til en omrørt løsning av 1,20 g (5,30 mmol) av forbindelse A28 i 6,0 ml kloroform ved romtemperatur under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 4,6 g (53,00 mmol) av aktivert mangan-dioksyd (Aldrich Chemical Co.) i én porsjon. Reaksjonssuspen-sjonen ble oppvarmet med tilbakeløp i 30 min., hvoretter blandingen ble avkjølt til romtemperatur, filtrert over en 50 g matte av Celite 545, og eluert med 20 ml kloroform. De samlede filtrater ble konsentrert uner redusert trykk ved romtemperatur. Det resulterende rå mellomprodukt ble løst i 50 ml tetrahydrofuran og avkjølt til 0°C, hvoretter 4,0 ml av 2-metyl-2-buten ble tilsatt i én porsjon. Reaksjonsløsningen ble behandlet med dråpevis tilsetning av 10,0 ml av et 1:0,09:1 forhold (w/w/v) av tobasisk natriumfosfat (Fisher Scientific Co.), natriumkloritt (Eastman Kodak Co.), og vann i løpet av en 5. min. periode. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 30 min. ved 0°C, hvoretter blandingen ble undertrykket med 50,0 ml av en 10% løsning av natriumtiosulfat og omrørt i ytterligere 10 min.. Den resulterende blanding ble surgjort til en pH på 3,0 ved anvendelse av 1,0 N vandig saltsyre og ekstrahert med tre 50 ml porsjoner av etylacetat. De samlede organiske sjikt ble vasket med én 50 ml porsjon av en mettet løsning av natriumklorid, tørket over 100,0 g vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på 200,0 g silikagel, ved eluering med 2,0 1 av en 3:1 (v/v) blanding av heksaner og dietyleter. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved anvendels av tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 1,01 g (4,22 mmol) av forbindelse A30 {Rf: 0,21 [dietyleter: heksaner, 3:7 (v/v)]} i 79,6% utbytte.

Til en omrørt løsning av 20,8 mg (0,09 mmol) av forbindelse A30 i 5,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 15,7 fil (0,18 mmol) av oksalylklorid (Aldrich Chemical Co.) dråpevis over en 2 min. periode. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 40 min. ved 0°C, hvoretter blandingen ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur under vannfrie betingelser, og tørket i 1 time under vakuum ved romtemperatur, og ga forbindelse A31 som en rå sirup som ble anvendt i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.

Til en omrørt løsning av 1-oktyn (31,6 g, 0,287 mol; Aldrich Chemical Co.) i vannfri tetrahydrofuran (250,0 ml), ble tilsatt n-butyllitium (163,5 ml, 0,315 mol) dråpevis ved 0°C under nitrogenatmosfære over en 40 min. periode. Løsnin-gen ble omrørt ved 25°C i 1 time, 1,3-dijodpropan (103,0 g, 0,349 mol; Aldrich Chemical Co.) ble tilsatt dråpevis over en 10 min. periode, og den resulterende blanding ble omrørt i 20 timer. Den fullstendige reaksjonsblanding ble fortynnet med 250,0 ml heksaner og helt over i 400,0 ml isvann. Produktet ble vasket to ganger med 300,0 ml porsjoner av mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 500,0 g natrium-sulf at, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (1,0 kg), ved eluering med heksaner. Fordampning av løsnings-midlet fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynn-sj iktskromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 59,5 g (0,21 mol) av forbindelse Bl {Rf: 0,8 [heksaner]} i 78% utbytte.

Til en omrørt løsning av kaliumcyanid (55,0 g, 0,845 mol; Aldrich Chemical Co.) i dimetylsulfoksyd (750,0 ml) ble dråpevis tilsatt 135,0 g (0,485 mol) av forbindelse Bl over en 30 min. periode. Løsningen ble deretter omrørt 5 timer ved 50°C, fortynnet med 250,0 ml heksaner, og vasket med 250,0 ml vann. Det organiske sjiktet ble tørket over 50,0 g magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert ved romtemperatur under redusert trykk. Resten ble renset på en silikagelkolonne (2,0 kg), ved eluering med 95:5 (v/v) heksaner/etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel fra de produkt-holdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 51,4 g (0,29 mol) av forbindelse B2 {Rf: 0,3 [etylacetat:heksaner, 5:95(v/v)]} i 81% utbytte.

Forbindelse B2 (9,36 g, 0,053 mol) ble løst i etylen-glykol (90,0 ml; Aldrich Chemical Co.) og til denne løsning ble tilsatt 8,89 g (0,158 mol) kaliumhydroksyd (Fisher Scientific) . Etter omrøring i 4 timer ved 140°C og deretter av-kjøling til 25°C ble reaksjonsblandingen fortynnet med 90,0 ml vann og deretter vasket to ganger med 90,0 ml porsjoner av diklormetan. Det vandige sjikt ble surgjort med 200,0 ml IN saltsyre, og produktet ble ekstrahert med heksaner (250,0 ml). Ekstraktet ble tørket over 50 g magnesiumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga 8,58 g (0,04 mol) av forbindelse B3 (Rf: 0,2 [heksaner-.etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 82% utbytte.

Forbindelse B3 (20,0 g, 0,102 mol) og Lindlar-katalysator (dvs. 5% palladium på kalsiumkarbonat, forgiftet med bly; 86,0 g) ble tilsatt til en løsning av kinolin (10,0 ml, 0,084 mol) i heksaner (190,0 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt under hydrogengass i 5 timer, filtrert og inndampet. Resten ble fortynnet med 10,0 ml diklormetan, gjort basisk med 150,0 ml av IN natriumhydroksyd, og det vandige sjikt ble vasket med 50,0 ml diklormetan. Det vandige sjiktet ble deretter surgjort med 20,0 ml 6N saltsyre, og ekstrahert med etylacetat (200,0 ml). Ekstraktet ble vasket med 200,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 100,0 g nat-riumsulf at, filtrert, og konsentrert under redusert trykk, og ga 19,8 g (0,1 mol) av forbindelse B4 {Rf: 0,2 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 98% utbytte.

Forbindelse B4 (23,7 g, 0,119 mol) og forbindelse A4 (32,9 g, 0,107 mol) ble løst i 250,0 ml vannfri diklormetan ved 0°C, og til denne løsning ble først tilsatt 0,03 g (0,2 mmol) 4-dimetylaminopyridin etterfulgt av 29,2 g (0,143 mol) 1,3-dicykloheksylkarbodiimid. Løsningen ble omrørt i 2,5 timer ved 25°C, fortynnet med heksaner (100,0 ml), filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (2,0 kg) ved eluering med 1:9 (v/v) etylacetat/heksaner. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjikts-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtempera-tur, ga 48,7 g (0,10 mol) av forbindelse B5 {Rf: 0,6 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 84% utbytte.

Forbindelse B5 (16,1 g, 0,412 mol) ble løst i 150,0 ml iseddiksyre, og til denne løsning ble tilsatt 24,2 g (0,370 mol) sinkmetallpulver ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt kraftig i 40 min. ved 25°C, fortynnet med 150,0 ml etylacetat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (1,0 kg) og eluert med 9:1 (v/v) heksaner/etylacetat. Fordampning av løsningsmidlet fra de produkt-holdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 10,8 g (0,04 mol) av forbindelse B6 {Rf: 0,3 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 96% utbytte.

Til 101,0 g (1,54 mol) av aktivert sink i 500,0 ml til-bakeløpende vannfri tetrahydrofuran ble tilsatt 3,0 ml etyla-bromacetat og 67,5 ml (0,308 mol) undecylcyanid (i én porsjon,-Aldrich Chemical Co.). Til den resulterende blanding ble dråpevis tilsatt 134,0 ml (1,232 mol) av etylbromacetat over 3 timer. Blandingen ble oppvarmet med tilbakeløp i ytterligere 10 min., avkjølt til romtemperatur, og reaksjonen undertrykket ved langsom tilsetning av 160,0 ml mettet vandig kaliumkarbonatløsning. Den resulterende heterogene blanding ble raskt omrørt i 3 0 min. og deretter filtrert gjennom 500,0 g Celite 545, hvilket ga en klar gul løsning av rå enaminoester. Løsningen ble deretter surgjort med 300,0 ml av 1,0 N saltsyre, omrørt i 3 timer, fortynnet med 1,0 1 heksaner, og nøytralisert ved tilsetning av 1,0 1 mettet vandig natriumhydrogenkarbonat. Det organiske sjikt ble deretter vasket med 400,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 1,0 kg natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset på silikagel (1,0 kg) ved eluering med 6:1 (v/v) heksaner/etylacetat, og ga 80,6 g (0,298 mol) av produkt Cl {Rf: 0,7 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]} i 97% utbytte.

[R]-2,2' -bis(difenylfosfino)-1,1'-binaftylrutheniumdi-kloridhemitrietylaminkompleks, som en klar orange-brun løs-ning, ble fremstilt ut i fra [R]-(+)-2,2'-bis(difenylfosfino)-1,1'-binaftyl og cyklooktadienylrutheniumdiklorid som beskrevet ovenfor.

En løsning av 311,0 g (1,15 mol) av forbindelse Cl i 330,0 ml vannfri metylalkohol ble deoksygenert ved tre fryse-tine-vakuumavgassingscykler i flytende nitrogen under nitrogenatmosfære. Løsningen av [R]-2,2'-bis(difenylfosfino)-l,l'-binaftylrutheniumdikloridhemitrietylaminkomplekskatalysator ble tilsatt til den forbindelse Cl-holdige løsning ved anven-deise av en sprøyte. Ved anvendelse av et kateter under argon ble reaksjonsblandingen pumpet inn i en argongjennomstrømmet 2,0 1 hydrogeneringsbobme inneholdende 3,0 g metylalkohol-vasket Dowex 50x8-200 H+<->harpiks. Bomben ble fylt til 10,2 MPa med hydrogengass, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 25°C i 66 timer. Når trykket hadde sunket 2,1 MPa, ble overskudd av hydrogengass sluppet ut, reaksjonsblandingen ble filtrert, og de flyktige bestanddeler ble fjernet under redusert trykk, og ga 310,2 g (1,14 mol) av forbindelse C2 i 99% utbytte.

Forbindelse C2 (94,4 g, 0,347 mol) ble løst i tetrahydrofuran (800,0 ml) og til denne løsning ble tilsatt 2,5 M vandig natriumhydroksyd (300,0 ml, 0,75 mol). Den resulterende blanding ble kraftig omrørt under nitrogenatmosfære ved 25°C i 1,5 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 1,0 1 av 1:1 (v/v) dietyleter/heksaner, og det vandige sjikt fraskilt. Den organiske fase ble videre ekstrahert med 200,0 ml vann, de vandige faser slått sammen, og de samlede vandige faser surgjort med 20,0 ml av 6N saltsyre. Den surgjorte blanding ble deretter ekstrahert med 2,0 1 dietyleter, og ekstraktet vasket først med 1,0-1 vann, og deretter med 500,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, og tørket over 200,0 g magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og det oppnådde gråaktige faste stoff ble løst i 2,0 1 varm 60°C acetonitril. Til denne løsning ved 60°C ble tilsatt dicykloheksylamin (80,0 ml, 0,40 mol), og den resulterende blanding avkjølt til -20°C, hvilket ga 102,1 g

(0,24 mol) av forbindelse C3 {Rf: 0,38 [heksaner:etylacetat :iseddiksyre, 1:1:0,1 (v/v/v)]}, som nesten hvite, fine nåler i 71% utbytte.

Forbindelse C3 (102,1 g, 0,24 mol) ble oppslemmet i 2,0 1 stylacetat under nitrogenatmosfære ved 0°C. Til denne oppslemming ble tilsatt 37,2 g (369,0 mmol) trietylamin, etterfulgt av 48,9 g (246,0 mmol) 2-bromacetofenon (i én porsjon). Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur og omrørt i ytterligere 6 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter vakuumfiltrert. Resten ble vasket med 400,0 ml etylacetat. Filtratet ble vasket først med 500,0 ml 0,8 M saltsyre, deretter med 500,0 ml vann, og til slutt med 200,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, og tørket over 300,0 g magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fordampet ved 50°C under redusert trykk, og ga et gråaktig størknet fast stoff som ble omkrystallisert fra 1,1 1 heksaner og tørket i en vakuumovn ved 50°C, og ga 81,09 g (223,9 mmol) av forbindelse C4 {Rf: 0,65 [kloroform:metylalkohol, 95:5 (v/v)]} som et nesten hvitt fast stoff i 91% utbytte. Til en oppslemming av 2,5 g (9,18 mmol) C4 og 1,0 g 4Ångstrøms molekylsikter i 28,0 ml av 3:1 (v/v) heksaner/- diklormetan under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 3,8 ml (13,4 mmol) av 4-metoksybenzyltriklorimidat (fremstilt ved fremgangsmåten til Audia et al., J Org. Chem. 1989 54:3738) . Reaks jonsblandingen ble avkjølt til 0°C, og 63,0 fil (0,51 mmol) rent bortrifluorideterat ble tilsatt dråpevis. Etter 5 min. ble reaksjonen undertrykket med 2,0 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning, og reaksjonsblandingen oppvarmet til 25°C. Blandingen ble deretter ekstrahert med 100,0 ml etylacetat, vasket med 50,0 ml mettet vandig natrium-kloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert, og løsningsmidlet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (300,0 g) ved eluering med 1:9 (v/v) etylacetat/heksaner. Fordampning av løsningsmiddel fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 3,1 g (7,97 mmol) av forbindelse C5 {Rf: 0,7 [etylacetat:heksaner, 3:17 (v/v)]} i 87% utbytte.

Forbindelse C5 (3,1 g) ble løst i tetrahydrofuran

(30,0 ml) og til denne løsning ble tilsatt 16,0 ml (40,0 mmol) 2,5N natriumhydroksyd. Reaksjonsblandingen ble omrørt i

6 dager ved 25°C, fortynnet med 100,0 ml heksaner, og pH justert til 5,0 med 40,0 ml IN saltsyre. Reaksjonsblandingen ble deretter ekstrahert med 300,0 ml etylacetat, vasket med 100,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over

200,0 g natriumsulfat, filtrert, og løsningsmidlet konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble renset på en silikagelkolonne (300,0 g) ved eluering med en gradient av metylalkohol/kloroform [3:17(v/v) til 1:9(v/v)]. Hver gradientblanding inneholdt også 2 dråper iseddiksyre pr. 100,0 ml løsningsmiddel. Til sammen 1,46 g (4,0 mmol) av forbindelse C6 {Rf: 0,14 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} ble oppnådd i 50% utbytte.

Forbindelse Cl (2,04 g, 7,96 mmol) ble løst i 25,0 ml tørr dietyleter. Til denne løsning ble tilsatt 1,3-propandi-tiol (0,8 ml, 7,97 mmol; i én porsjon; Aldrich Chemical Co.) under en nitrogenatmosfære ved 0°C. Deretter ble tilsatt dråpevis 1,0 ml (8,13 mmol) av bortrifluorideterat over en 2 min. periode. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 30 min. ved romtemperatur i 48 timer, helt over i en mettet vandig natriumhydrogenkarbonatløsning (200,0 ml), og omrørt i ytterligere 30 min.. Løsningen ble ekstrahert tre ganger med 50,0 ml porsjoner av heksaner. De samlede organiske fraksjoner ble vasket med 50,0 ml av mettet vandig natriumklorid-løsning, tørket over 50,0 g magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Produktet ble renset på en silikagelkolonne (200,0 g) ved eluering med 2,0 1 av en 0 til 5:95 (v/v) gradient av etylacetat/heksaner. Fraksjonene som inneholdt renset forbindelse C_7 {Rf: 0,44 [heksaner:etylacetat, (95:5)]} ble konsentrert og anvendt i påfølgende syntesereaksjoner.

Forbindelse C7 (2,88 g,- 8,01 mmol) ble løst i tetrahydrofuran (20,0 ml) og til denne løsning ble tilsatt 10,0 ml av 2,5 M vandig natriumhydroksydløsning. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 100°C, omrørt i 16 timer, avkjølt til romtemperatur, justert til pH 2,0 med 10,0 ml 1,0N saltsyre, og ekstrahert med 200,0 ml etylacetat. Det organiske sjikt ble vasket med 50,0 ml mettet vandig natriumkloridløsning, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Rensingen ble gjennomført på en silikgelkolonne (300,0 g) ved eluering først med 1,0 1 av 4:1 (v/v) heksaner/etylacetat, og deretter med 1,0 1 av 9:1:0,1 (v/v/v) kloroform/metylalkohol/iseddiksyre. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (bestemt ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur, ga 2,10 g (6,33 mmol) av forbindelse C8 {Rf: 0,20 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]} i 79% utbytte.

Til en mekanisk omrørt oppslemming av 1004,0 g (15,4 mol) av aktivert sinkpulver i 2,5 1 vannfri tetrahydrofuran under nitrogenatmosfære ved romtemperatur, ble tilsatt dråpevis 3 0,0 ml (0,19 mol) benzylbromacetat over en 10 min. periode. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp, 712,0 ml (3,25 mol) av n-undecylcyanid (Aldrich Chemical Co.) tilsatt dråpevis over en 15 min. periode, og ytterligere 1,00 1 (6,3 mol) benzylbromacetat (Aldrich Chemical Co.) tilsatt over en 4 timers periode. Etter ytterligere 1 times tilbakeløp, ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur og langsomt helt over i 3,0 1 av en omrørt mettet vandig løsning av kaliumkarbonat. Til den resulterende løsning ble tilsatt 1,0 kg Celite 545, og den heterogene blanding filtrert gjennom en matte av 200,0 g Celite 545 ved eluering med fire 1,0 1 porsjoner av etylacetat. Filtratet ble separert, og det vandige sjikt ekstrahert med to 500,0 ml porsjoner av etylacetat. De samlede organiske sjikt ble vasket med en 500,0 ml porsjon av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over nat-riumsulf at 100 g, filtrert, og konsentrert under vakuum til tørrhet. Den rå orange olje ble kraftig omrørt ved romtemperatur i et to-fasesystem av 1,0 1 heksaner og 1,0 1 av 1,0 N saltsyre med dråpevis tilsetning av 80 ml konsentrert saltsyre over en 3 timers periode. Etter omrøring av den endelige heterogene løsning i ytterligere 20 min., ble sjiktene separert, og det vandige sjikt ekstrahert med to 200,0 ml porsjoner av heksaner. De samlede organiske sjikt ble vasket først med 500,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og deretter med 500,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, tørket over natriumsulfat 100 g, filtrert, og konsentrert under vakuum til tørrhet. Den rå orange væske ble renset over 2,5 kg silikagel ved eluering med 12,0 1 av 9:1 (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikts-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 884,7 g (2,66 mol) av forbindelse Dl {R^: 0,67 [heksaner:etylacetat, 4:l(v/v)]} som et gult fast stoff i 82% utbytte.

Til en omrørt løsning av 17,9 g (53,9 mmol) av forbindelse Dl i 110,0 ml metylalkohol under nitrogenatmosfære, ble tilsatt 0,9 g av 20% palladiumhydroksyd på karbon (Aldrich Chemical Co.). Den resulterende oppslemming ble gjennomboblet med hydrogengass og evakuert under redusert trykk tre ganger, etterfulgt av omrøring under en atmosfære av hydrogengass ved atmosfærisk trykk og romtemperatur i 1 time. Den ferdige reakjsonsblanding ble fortynnet med 100 ml diklormetan, filtrert over en 50,0 g matte av Celite 545 og den resulterende filterkake vasket med to 50,0 ml porsjoner av diklormetan. De samlede filtrater ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble raskt renset over 200,0 g silikagel ved eluering med 2,0 1 av 9:1 (v/v) kloroform: metylalkohol. Fordampning av løsningsmidlet fra de produkt-holdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking i 30 min. under vakuum ved romtemperatur, ga 11,5 g (47,5 mmol) av forbindelse D2 {R^:0,56 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre, 9:1:0,1 (v/v/v)]} som et hvitt fast stoff i 88% utbytte. Forbindelse D2 ble anvendt umiddelbart i den neste reaksjonen for å unngå spalting.

Til en kraftig omrørt løsning av 1000,0 g (9,42 mol) av metyltioglykolat (Aldrich Chemical Co.) i 2,0 1 vannfri tetrahydrofuran under nitrogenatmosfære, ved 0°C, ble tilsatt 1312,0 ml (9,41 mol) trietylamin etterfulgt av dråpevis tilsetning av 2138,0 ml (9,42 mol) av 1-jodundekan (Aldrich Chemical Co.) over en 12 timers periode. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur, omrørt i ytterligere 24 timer, fortynnet med 2,0 1 etylacetat, og vasket først med 1,0 1 av en 1,0 N vandig løsning av saltsyre, deretter med 1,0 1 av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, og til slutt med 1,0 1 av en mettet vandig løsning av natriumklorid. Det organiske sjikt ble tørket over 500,0 g natrium-sulf at, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og ga 2230,0 g av forindelse El {Rf: 0,69 [heksaner:etylacetat, 4:1(v/v)]} som ble anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing.

Til en omrørt løsning av 2100,0 g (*8,07 mol) av den rå forbindelse El i 5,2 1 aceton og 5,2 1 vann ved -10°C, ble tilsatt porsjonsvis 5,0 kg (8,13 mol) kaliumperoksymonosulfat (OXONE, Aldrich Chemical Co.) over en 3 timers periode ved anvendelse av en pulvertilsetningstrakt. Blandingen ble oppvarmet til_ 0°C, omrørt i ytterligere 2 timer, og langsomt under trykket ved 0°C med 3,0 1 av en 3,0 M vandig løsning av natriumtiosulfat. Blandingen ble fortynnet med 8,0 1 diklormetan og 4,0 1 vann, filtrert gjennom en 500,0 g matte av Celite 545, og den resulterende filterkaken eluert med tre 500,0 ml porsjoner av kloroform. De samlede filtrater ble vasket først med 10,0 1 av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og deretter med 20,0 1 av en mettet vandig løsning av natriumklorid, og det organiske sjikt tørket over 2,5 kg natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble renset ved vasking av det resulterende faste stoff med 8,0 1 heksaner, og ga 1541,0 g (5,58 mol) av forbindelse E2 [smelte-punkt (smp.) 62,6-63,5°C] {Rf: 0,2 [heksaner: etylacetat, 1:1 (v/v)]} som et hvitt fast stoff i 69% utbytte.

Til en omrørt blanding av 1644,0 g (5,95 mol) av forbindelse E2 i 6,0 1 toluen og 48,0 1 av en vandig løsning av 0,05 M fosfatbuffer ble tilsatt 12,0 g lipase (PS-800, Amano Int. Enzyme Co., Troy, VA) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer, ytterligere 11,9 g lipase (PS-800) tilsatt, og den endelige oppslemming omrørt i 96 timer. Den resulterende blanding ble surgjort til pH 1,0 med ca. 4,0 1 av en vandig løsning av 1,0 N saltsyre, fortynnet med 6,0 1 kloroform, og sjiktene skilt fra hverandre. Det vandige sjikt ble ekstrahert med fem 1,0 1 porsjoner av kloroform, og de samlede organiske sjikt ble tørket over 500,0 g natriumsulfat7^filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produktet ble slemmet opp i 6,0 1 etylacetat, oppvarmet til 60°C, avkjølt til romtemperatur, filtrert, og det resulterende faste stoff vasket med to 500,0 ml porsjoner av etylacetat. Det rå faste stoff ble omkrystallisert 2 ganger fra 10,0 1 etylacetat, og ga 305,0 g (1,16 mol, smp. 80,4-81,8°C) av forbindelse E3 i 19,5% utbytte. De samlede morvæsker ble konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur, og renset over 2,0 kg silikagel ved eluering først med 4,0 1 heksaner, deretter med 6,0 1 av 4:1 (v/v) heksaner:etylacetat, deretter med 4,0 1 kloroform, og til slutt med 10,0 1 av 9:1:0,1 (v/v/v) kloroform :metylalkohol:eddiksyre. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjikts-kromatograf isk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 90,0 g (0,34 mol, 5,8% utbytte) av E3 {Rf: 0,12 [kloroform :metylalkohol:eddiksyre, 9:1:0,1 (v/v/v)]}, 300,0 g av en blanding av E3 og E4/ og 500,0 g (1,81 mol, 30,4% utbytte) av E4 {Rf: 0,63 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre, 9:1:0,1 (v/v/v)]}.

Til en løsning av 500,0 g (1,81 mol) av forbindelse E4 i 5,0 1 metylalkohol ved romtemperatur, ble tilsatt dråpevis 2,0 1 av en 2,0 N vandig løsning av natriumhydroksyd inntil det ble oppnådd et pH område på 11 til 12. Blandingen ble omrørt i 1 time, blandingen surgjort til en pH på 2,0 - 3,0 med 2,0 1 av en 2,0 N vandig løsning av saltsyre, og fortynnet med 4,0 1 kloroform. Sjiktene ble skilt fra hverandre, og det vandige sjikt ekstrahert med tre 1,0 1 porsjoner av kloroform. De samlede organiske sjikt ble tørket over 500,0 g natrium-sulf at, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå faste stoff ble omkrystallisert fire ganger fra 6,0 1 etylacetat, og ga 167,0 g (0,64 mol, smp. 81,2-82,1°C) av ren E5 {Rf: 0,12 [kloroform: metylalkohol: eddiksyre, 9:1:0,1 (v/v/v)]} i 35,2% utbytte. Konsentrering av morlutene under redusert trykk ved romtemperatur ga ytterligere 250,0 g av rå E5.

Til en omrørt løsning av 1,07 g (3,85 mmol) av rå forbindelse El i 20,1 ml vannfri diklormetan ved 0°C, ble tilsatt porsjonsvis 2,86 g (7,7 mmol) av 3-klorperoksybenzosyre over en 10 min. periode. Blandingen ble omrørt i 1 time og langsomt undertrykket ved 0°C med 10,0 ml av en 3,0 M vandig løsning av natriumtiosulfat. Blandingen ble så fortynnet med 100,0 ml diklormetan, og det organiske sjikt vasket med 100,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, 100,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumklorid, og det resulterende organiske sjikt ble tørket over 100,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble renset ved krys-tallisering fra heksaner, og ga 970,0 mg (3,32 mmol) av forbindelse E6 {Rf: 0,67 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]}.

Til løsningen av 970,0 mg (3,32 mmol) av forbindelse E6 i 15,0 ml metylalkohol ved romtemperatur, ble tilsatt 4,0 ml av en 1,0 N vandig løsning av natriumhydroksyd. Blandingen ble omrørt i 1 time, hvoretter den resulterende blanding ble surgjort med 4,0 ml av en 2,0 N vandig løsning av saltsyre. Den endelige blanding ble fortynnet med 100,0 ml kloroform, sjiktene ble skilt fra hverandre, og det vandige sjikt ble ekstrahert med tre 100,0 ml porsjoner av kloroform. De samlede organiske sjiktene ble tørket over 100,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtempera-tur. Den rå faste forbindelse E7 ble anvendt uten ytterligere rensing.

Til en tilbakeløpende, mekanisk omrørt oppslemming av

5,5 g (84,1 mmol) av aktivert sinkpulver i 50 ml vannfri tetrahydrofuran, ble tilsatt dråpevis 1,0 ml (9,0 mmol) av etylbromacetat over en periode på 1 min., under nitrogenatmosfære. 3,0 g (16,9 mmol) av forbindelse B2 ble deretter tilsatt i én porsjon, etterfulgt av dråpevis tilsetning av 7,4 ml (66,7 mmol) av etylbromacetat over en 45 min. periode. Etter

10 min. tilbakeløp ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur, fortynnet med 170,0 ml tetrahydrofuran, og undertrykket ved dråpevis tilsetning av 22,0 ml av en 50% mettet vandig løsning av kaliumkarbonat over en 10 min. periode. Den resulterende oppslemming ble omrørt i 30 min. (hvoretter omrøringen ble avbrutt), tetrahydrofuranløsningen dekantert fra det faste sink, og det faste sink vasket med ytterligere fire 50,0 ml

porsjoner av tetrahydrofuran. De resulterende produkt-

løsninger ble slått sammen og kraftig omrørt med 17,0 ml av 1,0 N saltsyre, omrørt i 2 timer, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Resten ble løst i 200,0 ml diklormetan, og den organiske løsning vasket med en 50,0 ml porsjon av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble renset over 200,0 g silikagel ved eluering med 3,0 1 av 10:1 (v/v) heksaner:etylacetat. Fordampning av løsningsmidlet fra de produktholdige fraksjoner (identifisert ved tynnsjiktskromatografisk analyse) under redusert trykk ved romtemperatur og tørking over natten under vakuum ved romtemperatur, ga 3,52 g (13,2 mol) av forbindelse Gl {Rf: 0,65 [heksaner:etylacetat, 4:1(v/v)]} som en klar, fargeløs olje i 78,2% utbytte.

Til en omrørt løsning av 1,5 g (5,64 mmol) av forbindelse Gl i 7,0 ml vannfri dietyleter og 434,0 fil (6,22 mmol) mer-kaptoetanol (Aldrich Chemical Co.), ved 0°C under nitrogenatmosfære, ble tilsatt dråpevis 762,0 fil (6,20 mmol) bortri-fluoreterat over en 5 min. periode. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur, omrørt ved romtemperatur i 16 timer, av-kjølt til 0°C, undertrykket med 10,0 ml av en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, og omrørt i ytterligere 5 min.. Den resulterende blanding ble ekstrahert med tre 50,0 ml porsjoner av dietyleter, og de samlede organiske sjikt ble vasket med 50,0 ml mettet vandig natriumklorid, tørket over 50,0 g natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur. Det rå produkt ble løst i 14,0 ml tetrahydrofuran, blandet med 7,0 ml av en 2,5 M vandig løsning av natriumhydroksyd, og omrørt ved 80°C i 16 timer. Den endelige reaksjonsblanding ble avkjølt til romtemperatur, ekstrahert med tre 10,0 ml porsjoner av dietyleter, og det vandige sjikt surgjort til en pH på 2,0 med en 1,0 N vandig løsning av saltsyre. Den resulterende vandige oppslemming ble ekstrahert med tre 10,0 ml porsjoner av dietyleter, og de samlede organiske sjikt vasket med 10,0 ml mettet vandig natriumklorid, tørket over 20,0 g natriumsulfat, filtrert, konsentrert under redusert trykk ved romtemperatur og tørket over natten under vakuum ved romtemperatur, og ga 1,40 g (4,68 mmol) av den rå forbindelse G2 {Rf: 0,6 [heksaner]} i 83% utbytte. Produktet ble anvendt i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.

Det følger nå en karakterisering av de forbindelser som er beskrevet heri, og en beskrivelse av undersøkelser som er anvendt for å teste deres effektivitet. Disse eksempler er gitt for å illustrere, ikke for å begrense oppfinnelsen.

EKSEMPEL 2

Forbindelse Karakterisering

Forbindelse 2

<1>H NMR (CDCI3) 5: 6.08 ppm (lHa,d,J= 1.71 Hz) , 5.8(lHp.d,J=1.22 Hz), 5.48-5.10(3H,m). 4.32-3.80(3H.m), 2.33-1.92(15H,m.s).

Forbindelse 3

<l>H NMR (CDCI3) 5: 7.52-7.30 ppm (5H,m), 5.52(2H,d), 5.32(2H, m) , 4.61(lH,m), 4.33(lH,dd), 4.12(lH,dd)( 2.18(3H,s). 2.09(3H,s), 2.05(3H,s), 2.03(3H,s).

Forbindelse 4

<X>H NMR (CD3OD) 6: 7.48-7". 12 ppm (5H,m), 5.51(lH,s), 4.20(lH,s), 4.02(lH,s), 3.97-3.68 (4H,m).

Forbindelse 5

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.49-7.39 ppm (5H,m), 5.78(lH,s), 4.39(lH,d), 4.26(lH,dd), 4.01(1H,ddd), 3.81(lH.dd). 3.77(2H,m), 1.52(3H,s), 1.50(3H,s). 1.43(3H,s), 1.37(3H,s).

Forbindelse 6

lK NMR (CDCI3) 5: 6.30 ppm (lH.dd, J=1.50,6.11 Hz). 4.72(lH.dd,J=1.79,6.07 Hz), 4.34(1H,d,J=7.39 Hz), 3.94 (lH,dd,J=5.48,10.92 Hz) , 3.84-3.71(3H,m), 1.53(3H,s), 1.43(3H,s).

Forbindelse 7

lti NMR (CDCl3> 6: 6.33 ppm (1H,dd,J=l.46,6.1 Hz), 5.32(lH,dt,J = l.7,1.7,7.8 Hz), 4 . 75(1H,dd,J = 2.0,6.1 Hz), 4.03 (lH,dd,J = l .71,7.81 Hz), 3.97(lH,m), 3.87 -3.76(2H,m) , 2.09(3H,s), 1.52(3H,s), 1.41(3H,s).

Forbindelse 8

Rf: 0,21 [metylalkohol:kloroform, 5:95 (v/v)]

<X>H NMR (CDCI3) 5: 5.61 ppm (lH,d,J=8.79 Hz), 5 .13 (1H, t, J=9 . 5 Hz), 3.91(lH,dd,J=5.37,10.98 Hz), 3.75(1H,t,J=10.25 Hz), 3.68(1H,t,J=9.76 Hz), 3.56(1H,dd,J=8.79.9.52 Hz), 3.49(lH,m), 2.15(3H,s), 1.46(3H,S), 1.38(3H,s).

Forbindelse 9

<1>H NMR (CDCI3) 5: 5.46 ppm (1H|J, t, J=10 . 0 Hz), 5.34(lHa,t), 5.00(lHfj,t,J=9.7 Hz), 4.78(lHa,dd,J=5.1,7.8 Hz), 4.04-3.64(mH), 3.41-3.23(mH),2.12(3H,s), 1.45(3Ha,s), 1.44(3Ha,s), 1.39(lHp,s), 1.35(3Hp,s).

Forbindelse 10a

<:>H NMR (CDCI3) 5: 8.78 ppm (lH,s), 6 . 42 (1H, d. J = 3 . 9 Hz), 5.48(lH.C,J=9.52 Hz), 3.95-3.86 (2H,m) , 3.82-3.79(2H, m), 3.59(lH,dd,J=3.67,10.3 Hz), 2.15(3H.s). 1.47(3H.s), 1.39(3H,s).

Forbindelse 10b

<l>H NMR (CDCI3) 8: 8.80 ppm (lH.s), 5.88(1H,d,J=7.9 Hz), 5.09(lH,t, J=10.0 Hz), 3.95(lH,dd), 3.75(2H,m), 3.48(1H,ddd), 2.05(3H,s), 1.68(3H,s), 1.39(3H,s).

Forbindelse lia

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.43ppm (1H,m),6.76(2H,m), 5.46(lH,t), 4 .99 (lH.d) , . 4 .75 (lH,d) , 4.70(lH,d), 4.51(lH,t), 3.97(3H,s)

3.94(3H,s), 3.81(lH,m),2.76CH,m), 3.10(lH,dd), 2.10(3H,s), 1.46(3H,s), 1.35(3H,s).

Forbindelse 11b

<l>H NMR (C DC13) 5: 6.95-6.80 ppm (3H,m), 5.92(1H,t,J = 10 . 0 Hz), 4.85(lH,d), 4.61(lH,d), 4.50(1H,d,J=8.0 Hz), 3.95(lH,dd), 3.88(1H,c,J = 10.4 Hz), 3.80 (1H,t,J = 9.3 Hz), 3.63 (1H,t,J = 9.0 Hz), 3.46(lH.dd,J=9.0,10.0 Hz), 3.29(lH,m), 2.11(3H,s), 1.46(3H,s), 1.35(3H,s).

Forbindelse 12

^H NMR (CDCI3) 5: 6.98-6.84ppm (3H,m), 4.86(lH,d), 4.62(lH,d), 4.46(lH,d), 3.96(lH,dd), 3.90(6H,s), 3.83(lH,t), 3.60(lH,t), 3.50-3.40(2H,m), 3.23(lH,m ), 1.52(3H,s), 1.42(3H,s).

Forbindelse 13

^-H NMR (CDCI3) 5: 6.94-6.82 ppm (3H,m), 5.93(lH,m), 5.35(lH,d,J=17.09 Hz), 5.25(1H,d,J=10.26 Hz), 5.09(lH,m), 4.92 (1H.C, J = 9.53 Hz), 4 . 84 (lH,-d, J=l 1. 23 Hz), 4.60(2H,m), 4.50(lH,d,J=7.81 Hz), 3.95(lH,dd, J=5.35.10.99 Hz), 3.88(3H,s), 3.87(3H,s), 3.79(1H,t,J=4.88 Hz), 3.62(1H,c.J=9.77 Hz), 3.21(lH,m). 2.78(lH,m), 2.62(lH,m), 1.7-1.56(mH), 1.45(3H,s), 1.35(3H,s), 1.27-1.24(mH), 0.86(3H,t).

Forbindelse 14

<X>H NMR (CDCI3) 5: 6.98-6.82 ppm (3H,m), 5.91(lH,m), 5.37 (lH.dd) ... A5.29(lH,d) , 5.10(lH,m), 4 . 88-4 .79 (2H. m) , 4.68-4.60(2H,m). 4.50(lH,d), 3.94(lH,m), 3.89(3H,s), 3.88(3H.s), 3.84(lH,m), 3.64(lH,m), 3.48-3.35(2H,m), 2.75-2.62(2H,m), 1.80-1.62(2H,m), 1. 42 -1.20(mH), 0.86(3H,t).

Forbindelse 15

<l>H NMR (CDCI3) 8: 6.95-6.81 ppm (3H,m), 5.90(lH,m), 5.35(1H,dd,J=l.46,17.33 Hz), 5.30(1H,dd,J=l.22,10.49 Hz),

5.08(lH,m), 4.86(lH,d,J=11.47 Hz), 4.82(lH,t,J=9.1Hz), 4.60(3H,m), 4.43(lH,d,J=7.55 Hz), 3.91(lH.m), 3.83(3H,s), 3.87(3H.s), 3 . 52 (1H, åt,J = 2.0,9.28,9.23 Hz), 3.42(lH,dd,J=8.05,10.5 Hz), 3.35(lH,m),

2.75(lH,dd,J=7.57,15..39 Hz), 2 . 66 (1H, dd, J = 4 . 88 , 15 . 38 Hz), 1.78-1.62 !mH) , 1. 40-1. 20 (mH) , 0.91(9H,s), 0 . 86 ( 3H, t) \ j 0.10(3H.s), 0.09(3H,s) .

Forbindelse 16

<l>H NMR (CDCI3) 8: 6.94-6.82 ppm (3H,m).5.99-5.84 (2H, m) , 5.33(2H,m), 5.26(2H,m), 5.06(lH,m), 5.00(lH,t), 5.88(lH,d), 5.81(lH,t), 4.66-4.56(5H,m), 4.44(lH,d,J=8.05 Hz).' 3.88(3H,s), 3.87(3H,s). 3.80(lH.m), 3.56-3.48(2H,m), 2.71-2.59(2H,m), 1.65(mH), 1.49-1.29(mH), 0.90(9H,s). 0.89-0.86(3H,m), 0.86(6H,s).

Forbindelse 17

<l>H NMR (CDCI3) 8: 6.94-6.82 ppm (3H,m), 5.95-5.86(2H,m), 5.36(2H,d), 5.25(2H,t), 5.04(2H,m), 4.86(?H,m). 4.62(5H.m). 4.50 (lH,d,J=8.05 Hz), 3.88(3H,s), 3.87(3H,s), 3.84(lH,m). 3.67(lH.dd,J=4.15,12.7 Hz), 3.48(lH,m), 2.72-2.60(2H,m), 1.73-1.50(mH), 1.40-1.28(mH), 0.91-0.82(3H,m).

Forbindelse 18

!K NMR (CDCI3) 8: 6.96-6.80 ppm (3H,m), 5.39(lH,m), 5.30(lH,m), 5.20(lH,m), 4.90(lH,t), 4.84(lH,d), 4.61(lH,d), 4.51(lH,d), 3.96(lH,dd), 3.89(3H,s), 3.88(3H,s), 3.80(lH,t), 3.65(lH,t), 3.46(lH,dd), 3.29(lH.m). 2.69(lH,dd), 2.58(lH,dd), 2.28^(lH,t!, 2 .10-1.96 (2H,m) , 1.72-1.58 (2H.m) . 1.42(3H,s), 1.35(3H,s), 1.32-1.18(mH), 0.89-0.82(6H,m).

Forbindelse 19

<l>H NMR (CDCI3) 8: 6.98-6.82 ppm (3H,m), 5.42(lH,m), 5.30(lH,m), 5.12(lH,m), 4.88(lH,d), 4.82(lH,t), 4.65(lH,d), 4.49(lH,d), 3.94(lH,m), 3.90(3H,s), 3.89(3H,s), 3.83(lH,m),

3.60(lH,t), 3.46-2.35(2H,m), 2.30(2H,-), 2 . 09 -1.93(4H,m) , 1.67(mH), 1.40-1.22(mH), 0.91-0.85(6K.m).

Forbindelse 20

<l>H NMR (CDCI3) 8: 6.94-6.81 ppm (3H,m), 5.94(lH,m)/ 5.39-5.26(4H.m). 5.13(lH,m). 4.86(lH,d), 4.79(lH,m), 4.68-4.59(mH). 4.52(lH,d), 4.42(2H,m), 3.88(3H,s), 3.87(3H,s), 3.52(2H,m), 3.45 (1H,t.J=8.06 Hz), 2.60(2H,m), 2.30(2H.t), 2.10-1.95(4H,m), 1.70-1.53(mH), 1.40-1.27(mH), 0.88-0.84(6H,m).

Forbindelse 21

J-H NMR (CDCI3) 8: 6.94-6.80 ppm (3H,m), 5 . 97-5 . 83 (3H, m) , 5.40-5.22(8H(m), 4.96(lH,dd,J=9.28,10.26 Hz), 4.84(1H,d.J=ll.48 Hz), 4.68-4.29(llH,m), 3.87(3H,s), 3.86(3H,s), 3.60(lH,m), 3.49(lH.dd,J=8.06,10.26 Hz),2.68(2H,c), 2.26(2H,q), 2.08-1.90(4H,m). 1.70-1.65(mH), 1.32-1.18(mH), 0.84(6H,m).

Forbindelse 22

<*>H NMR (CDCI3) 8: 5.95-5.84 pm (3H,m). 5.=9(lH3p,t) , 5.40-5.21(9H,m), 5.03(lH3a,t). 4.76-4.22(10H,m),

1.42(lH2p,dd,J=8.05,10.5Hz), 3.20(lH2a,dd,J=3.17,10.5 Hz),

2.76-2.62(2H,m), 2.30-2.23(2H,m), 2.09-1.95(4H,m). 1.70-1.65(mH), 1.35-1.18(mH), 0.90-0.80(6H,m).

Forbindelse 23A

<!>H NMR (CDCI3) 8: 8.85 ppm (lH.s), 6.45(lH,d,J=3.66 Hz), 5.96-5.84(3H.m).s 5 . 57 (1H, dd, J=9 .03 .10.74 Hz), 5 .41-5 . 22 (9H. m) . 4.60-4.42(8H,m), 4.32(1H,dd,J=3.91,11.97 Hz), 4.18(lH,d,J=8.79 Hz). 3.58(1H,dd.J=3.0.10.0 Hz). 2.80-2.67(2H,m), 2.29(2H,t), 2.06-1.95(4H,m), 1.70-1. 59(mH), 1.35-1.25(mH), 1.81-1.90(6H.m).

Forbindelse 23B

^■H NKR (CDCi3) 8: 8.30 pp- CH,s), 5 . 98-5 . 32 ( 3h\ m) , 5.72(lH,d), 5.42 -5.22(9H,m), 5.15(lH,t), 4.62-4 . 41 (8H,m) , 4.23(2H,m), 3.72(lH,t), 2.31-2.53(2H,m), 2.30(2H,m), 2.10-1.96(4H,m), 1.71-1.52imH), 1.37-1.15(mH) , 0.38(6H,m).

Forbindelse 24

<l>H NMR (CDC13) 8: 5.95-5.86 ppm (3H,m)( 5.99-5.83(5H,m), 5.40-5.22(12H,m), 5.10 - 5.22(2H,m) , 4.91(lH.d,J = 10.7 Hz), 4.68(lH,dd), 4.64-4.43(10H,m), 4.33(lH,q),

4.27{lH,dd,J=4.9,12.8 Hz), 4.00(1H,d,J=9.9 Hz), 3.89(3H,s), 3.88(3H,s), 3.75(2H,m), 3.60(lH,m), 3.54(1H,dd,J=7.9,9.8 Hz) , 3.47(lF.dd.J=8.6.11.0 Hz), 2.78-2.58(4H,m), 2.30-2.23(2H, t). ' 2.03-1.95(4H,m), 1.70-1.59(2H,m), 1.39-1.25(mH). 0.90-0.82(9H,m).

Forbindelse 25

^H NMR (CDC13) 8: 7.23 ppm (lH,m), 6.92-6.82(2H,m), 5.98-5.85(5H,m), 5.40-5.21(12H,m), 5.08-4.99(2H,m), 4.85(lH,m), 4.62-4.42(lOH.m), 4.38-4.23(2H,m), 3.89(6H,s), 3.75-3.61(2H,m), 2.96(lH,dd), 2.72(lH,dd), 2.61(2H,m), 2.29-2.15(2H,m),2.02-1.94(4H,m), 1.70-1.52(mH), 1.38-1.20(mH), 0.91-0.82(9H,m).

Forbindelse 26

lK NMR (CDCI3) 8: 7.29 ppm (2H,d), 7.16(2H,d), 6.91-6.85(7H,m), 6.40(lH.d), 6.08(lH,d), 5.98-5.85(5H,m), 5.40-5.15(13H.m).5.07(lH,t). 4.98(lH.m). 4.76-4.23(mH), 3.98(lH,q). (3H,s), 3.83(2H,m), 3.82(3H<s), 3.79(3H,s), 3.77(3H,s). 3.82(3H,m). 3.60-3.50(2H,m), 2.70-2.42(4H,m),2.36-2.22(4H,m), 2.07-1.96(2H,m), 1.68-1.36(mH), 1.33-1.15(mH), 0.91-0.82(15H,m).

Forbindelse 27

<l>H NMR (CDCI3) 8: 6.35 ppm (lH,d), 6.12(lH,d), 5.98-5.82(5H,m), 5.44-5.21(13H,m), 5.00(lH,m), 4.94(lH,d), 4.68-

4.48(mH), 4.32(lH,dd), 4.26-4.15(2H.m) , 4.00(lH,m), 3.92-3.82(2H,m), 3.79 - 3.65(2H.m), 3.58(lH.dd), 2 . 68-2.49(4H,m), 2.41-2.22(6H,m), 2.09-1.97(4H.m). 1.70-1.19(mH) ,0. 91-0.80(15H.m).

Forbindelse 28

<L>H NMR (C DC 13 ) 5: 6.80 ppm (lH,d,J = 3.2 Hz), 6 . 52 (1H, d, J = 7 . 5 Hz), 6.01-5.84(5H,m), 5.72(1H,dd,J=2.7,5.4Hz), 5.45-5.17(13H,m), 5.02-4.90(2H,m), 4.94(1H,d,J=8.1 Hz), 4.67-4.33(mH), 4.39-4.28(3H,m), 4.12(lH.m), 3.99-3.85 (3H,m), 3.89-3.68(4H,m), 2.64-2.52(4H,m), 2.36-2.12(6H,m). 2.10-1.95(4H,m), 1.70-1.15(mH), 0.91-0.81(15H,m).

Forbindelse 29

<1>H NMR (CDC13) 8: 7.30 ppm (lH,d), 6.55(lH.d), 6.00-5.85(5H,m), 5.78(lH,dd), 5.44-5.19(13H,m). 5.10-4.82(3H,m), 4.67-4.46(mH), 4.38-4.28(2H,m), 4.15(lH,m), 4.00-3.86(2H,m) ,3.86 - 3.60(mH), 3.40-3.34(4H,m), 2.66-2.42(6H,m), 2.37-2.22(6H,m), 2.08-1.96(4H,m), 1.69-1.20(mH), 0.87 (15H,m).

Forbindelse 30

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.38 ppm (lH,d), 7.09<lH,d), 6.00-5.83(5H,m), 5.71(lH,m), 5.43-5.19(13H,m), 5.01(lH,m), 4.87(2H,m), 4.68-4.44(mH), 4.40-4.36(mH), 4.18(lH,m), 3.93(lH,dd), 3.76(lH,q), 3.71-3.62(2H,m), 3.38(2H,q), 3.32(2H,q), 2.68-2.41(8H,m), 2.28-2.20(2H,C), 2.07-1.95 (4H,m) , "1\ 68-1. 48 (mH) , 1. 35-1.12 (mH) . 0 . 90-0 . 81 (15H, m) .

Analog 6214 (Forbindelse 31)

Rf: [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann,. 125:75:10:20 (v/v/v/)]

RT(HPLC) 12.22 min

<*>H NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 5.40 ppm (lH,m), 5.17{lH,m),

V

5.09(lH,m), 5.00(2H,m), 4.96(1H,t,J=10.0 Hz), 4.43(lH,d), 4.02(2H,m), 3.90-3.60(mH), 3.45(lH,m), 3.34(1H,t,J = 9.6 Hz), 3.26-3.13(mH), 2.48-2.20(mH), 2.06(2H,t), 1.84(4H,m), 1.45-1.00(mH), 0.65(15H,m).

<13>C NMR (CDC13:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 205.26 ppm, 205.16, 173.71, 172.57, 170.52, 168.10, 167.45, 130.63, 127.93, 100.63, 94.55, 74.64, 72.74, 72.42, 71.60, 69.82, 67.95, 67.64, 59.95, 53.57, 43.03, 42.79, 41.74, 38.26, 36.78, 34.63, 33.91, 33.47, 31.51, 31.46, 31.43, 31.38, 29.25, 29.21, 29.15, 29.12, 29.08, 29.06, 28.96, 28.93, 28.86, 28.74, 28.65, 28.56, 26.79, 26.12, 25.15, 24.78, 24.53, 23.00, 22.91, 22.24, 22.22, 13.51.

<31>P NMR (CDCI3 :CD3OD 3:1, v/v) 8: 1.31 ppm, -1.40.

Forbindelse 32

<*>H NMR (CDCI3) 8: 6.89-6.80 ppm (3H,m), 6.68(lH,d,J=8.79 Hz), 6.56 (lH,d.J=8.05 Hz), 5.95-5.86(5H.m), 5.41-5.28(13H,m), 4.97(lH,m), 4.80(lH,t,J = 9.7 Hz), 4.72(1H,d,J=8.5 Hz) , 4.60(mH), 4.48(2H,m). 4.30(2H,m), 3.97(2H,t), 3.89(3H,s), 3.85(3H,s), 3.77-3.74(2H,m), 3.68-3.60(2H,m), 3.00-2.56 (mH), 2.26(2H,C), 2.09-1.04(mH), 0.88-0.84(15H,m).

Forbindelse 33

J-H NMR (CDCI3) 8: 6.83 ppm (lH,d,J=7.33 Hz), 6 . 59 (1H, d, J = 9 . 03 Hz), 5.94-5.86(5H,m), 5.47(1H,t,J=7.1 Hz), 5.40-5.30(12H,m), 5.00(lH,m), 4 . 68-4.45(mH), 4.38(lH,q), 4.32-4.20(2H,m), 3.83-3.69(2H,m), 3.41(lH,q), 2.98-2.56(8H,m), 2.27(2H,t), 2.07-1.90(mH), 1.67-1.52(mH), 1.35-1.15(mH), 0.89-0. QikISH,m).

Forbindelse 34

lH NMR (CDCI3) 5: 7.39 ppm CH,d), 7.03(lH,d), 6.00-5.83(7H,m), 5.70(lH,dd), 5.43-5.20(13H.m), 5.01(lH,m), 4.88(lH.m), 4.65-4 .45 (.hk; , 4 . 40-4 . 25 (2H, m) , 4.18CH,m), 3.92(lH,dd), 3.75(lH,q), 3.67(lH.m). 3.39(2H.d). 3.32(2H,q), 2.67-2.42(4H,m) , 2.24(2H,t), 2.07 - 1.92(2H,m), 1.74-1.46(mH) , I.35-1.24(mH), 0.91-0.82(15H,m) .

Forbindelse 3 6

Rf: 0,77 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 4.92 ppm (lH,t,J=9.0 Hz), 4.62(lH,d, J=7.9 Hz), 3.88(lH,dd), 3.77(lH,t). 3.64(lH.t), 3.30(2H,m), 2.2K3H.S), 1.44(3H,s), 1.35(3H,s), 0.89(9H,s), 0.12(3H,s). 0.11(3H,s).

Forbindelse 37

Rf: 0,37 [(heksaner:etylactat, 3:1 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 6: 4.70 ppm (lH,d,J=7.5 Hz), 3.86 (1H,dd,J=3.0,8.35 Hz), 3.77(1H,t,J=10.3 Hz)3.57(1H,t,J=9.29 Hz), 3.45(lH,m), 3.30(2H,m), 1.50(3H,s), 1.42(3H,s), 0.9K9H.S), 0.14(3H,s), 0.13(3H,s).

Forbindelse 38

<l>H NMR (CDCI3) 8: 5.90 ppm (lH,m), 5 . 35(lH, dd,J = l.46,17.36 Hz), 5.23 (lH,,d,J=10.49 Hz) , 5.08(lH,m), 4 . 90 (1H, t, J=10 . 01 Hz), 4.60(3H,m), 3.86(1H,dd,J=5.61,10.98 Hz). 3.74(lH,t,J=10.5 Hz), 3.62(1H,t,J=9.52 Hz), 3.30(2H,m), 2.75(lH,dd,J=7.0,15.8 Hz), 2.63(1H,dd,J=6.35,15.63 Hz), 1.65(mH), 1.42(3H,s), 1.32(3H,s), 1.24(mH). 0.89(9H,s), 0.86(3H,c), 0.12(3H,s), 0.10(3H,s).

Forbindelse 39

<l>H NMR (CDCI3) 6: 5.90 ppm (lH,m), 5.38(lH,dd), 5.29(lH,d). 5.07(lH,m), 4.81(lH,t), 4.62(2H,m), 3.88(lH,m), 3.80(lH,m), 3.62(lH,m), 3.40(lH,m), 3.31(lH,dd), 2.79(2H,m), 1.98(lH.t). 1.72(lH,m), 1.65(lH,m), ,1.27(mH), 0.9H9H.S), 0.88(3H,t), 0.18(3H,s), 0.17(3H,s).

Forbindelse 40

<l>H NMR (CDCI3) 8: 5.96-5.85 ppm (4H,m), 5 . 42-5 . 22 (11H, m) , 5.05(lH,m), S.OOdH.t), 4.80(lH,dd), 4 . 66-4 . 42 (mH) , 4.35-4.22(2H,m). 4.10(lH,d). 3.61(lH.m). 3.52{lH,m), 3.42(lH,dd), 3.31(lH,dd). 2.78-2.62(4H,m). 2.28(2H,t), 2.09-1.95(4H,m),

1.69-1.87(4H,m), 1.38-1.19(mH). 0.92(9H,s), 0.85(15H,m), 0.16(6H,s) .

Forbindelse 41

<l>H NMR (CDCL3) 8: 5.9^-5.86 ppm (5H,m), 5.38-5.21(12H.m), 5.19-4.97(2H,m), 4.72-4.42(mH), 4.38(1H,d,J=8.06 Hz). 4.32-4.23(2H,m), 3.88(lH,m) 3.75(lH,dd), 3.60(lH,m), 3.40(2H,m), 2.76(6H.m). 2.28(2H,t), 2.09-1.95(4H,m). 1.70-1.63(4H.m), 1.35-1.19(mH). 0.92(9H.s), 0.87-0.86(15H,m). 0.17(3H,s), 0.16(3H,s).

Forbindelse 43

lH NMR (CDCI3) 8: 7.20 ppm (lH.d), 7.00(lH.d). 5.95(5H,m), 5.30(mH). 4.95(lH.q). 4.75(lH.t). 4.55(mH), 4.30(mH), 3.90(lH,dd), 3.70(mH), 3.45(mH), 3.35(2H.s). 3.28(2H.s), 2.60(lH,dd), 2.45(mH), 2.25(2H.t), 1.95(mH), 1.65(mH), 1.50(mH), 1.20(mH). 0.85(15H,m). 0.80(9H.s), 0.08(6H,2s).

Forbindelse 44

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7 .20 ppm (lH.d) . 6.82(lH,d). 5.95(5H.m). 5.30(mH). 5.10(mH), 4.58(mH). 4.47(mH). 4.30(mH), 3.70(mH), 3.35(mH), 2.50(mH>, 2.25(2H,C), 2.00(mH), 1.50(mH). 1.25(mH), 0.85(15H,m).

Forbindelse 45

Rf: 0,53 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]

lH NMR (CDCI3) 6: 4.53 ppm (lH(d,J=7.42 Hz), 3.99(lH,m), 3.87-3.73(2H,m), 3.60 (lH,t,J = 9.2 Hz), 3.26-3.14(2H,m), 1.70-1.63(2H,m>, 1.48(3H,s), 1.40(3H,s), 1.27(mH,br.s), 0.9K9H.S). 0.90-0.85(3H,m) , 0.13(3H,s), 0.2K3H.S).

Forbindelse 46

Rf: 0,80 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 5: 5.43-5.28 ppm (2H,m), 5.03(lH,m), 4.49(lH,d,J=7.46 Hz), 3.86-3.73(2H,m), 3.66-3.56(2H,m), 3.22-3.10(2H,m) , ] 2.30-2.26(2H,t) , 2.09-1.97(mH), 1.83-1.54(mH), 1.48(3H,s), 1.38(3H,s), 1.26(mH,br.s), 0.91(9H,s), 0.89-0.85(6H,m), 0.13(3H,s), 0.12(3H,s).

Forbindelse 47

Rf: 0,13 [heksaner-.etylacetat, 4:1 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 5.44-5.28 ppm (2H,m), 5.10-5.04(lH,m), 4.53(1H, d,J=7.6 Hz), 3.91-3.85(2H,m), 3.77-3.66 (2H,m), 3.43(lH,m), 3.33(lH,m), 3.18(1H,dd,J=7.6,9.9 Hz), 3.01(lH,dd,J=9.3,9.8 Hz). 2.32-2.26(2H,t), 2.10-1.48(mH), 1.34-1.25(mH), 0.92(9H,s), 0.92-0.85(6H,m). 0.15(3H.s). 0.14(3H,s).

Forbindelse 48

Rf: 0,45 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 5.95 ppm (lH,m), 5.33(2H,m). 5.30(2H,m), 5.07(lH,m), 4.62(2H,d), 4.48(1H,d,J=7.8 Hz), 4.44(lH,dd,J=2.2,11.3 Hz), 4.33(1H,dd,J=6.1,11.7 Hz), 3.85(lH,m), 3.68(lH.m' 3.58 ( 1H0h.d,J=3.2 Hz) 3.45(lH,m), 3.37(lH.m). 3.18(1H,t,J=9.1 Hz), 2.98(1H,t,J=10.1 Hz), 2.28(2H,C), 2.06(mH), 1.82(mH). 1.65(mH), 1.25(mH), 0.9K9H.S). 0.85(6H,m), 0.13(6H,2s).

Forbindelse 49

Rf: 0,29 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]

<1>H NMR (CDCI3) 6: 5.95 ppm (3H,m), 5 . 41 - 5 : 2 6 (3H, m) , 5.00(lH,m), 4.63-4.47(mK), 4.30(1H,dd.J=6.6,11.7 Hz), 4.13(lH,q), 3.72(lH,m), 3.55(lH,m), 3.25<2H,t,J=7.9,10.3Hz), 3.15(1H,t,J=3.8,10.8 Hz), 2.25(2H.t), 2.00(4H,m), 1.65(mH). 1.50(mH), 1.25(mH), 0.9K9H.S). 0.85(6H,m), 0.01(6H.2s).

Forbindelse 50

Rf: 0,25 & 0,20 [dietyleter:diklormetan, 1:9 (v/v)].

<X>H NMR (CDCI3) 5: 5.95 ppm (3H.m), 5.35(mH), 5.25(mH), 4.95(mH), 4.59(mH), 4.30(mH), 3.75(mH), 3.60(mH), 3.35(mH), 2.25(2H,c), 2.00(mH), 1.65(mH), 1.25(mH), 0.85(6H,m).

Forbindelse 5IA

Rf: 0,50 [dietyleter:diklormetan, 1:9 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 8: 8.77 ppm (lH.s), 6.38(1H,d,J=2.41Hz), 5.95(3H,m), 5.30(mH). 4.98(lH,m), 4.55'-*H), 4.40(mH), 4.05(lH,m), 3.85(lH,m), 3.75(lH,m), 3.60(lH,dd.J=3.42,9.5 Hz), 2.27(2H,c), 2.00(mH), 1.65(mH), 1.25(mH), 0.85(6H,m).

Forbindelse 5IB

Rf: 0,37 [dietyleter:diklormetan, 1:9 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 8.80 ppm (lH.s). 5.95(3H.m). 5.72(lH.d), 5.30(mH), 5.15(lH,t), 4.62(lH,d), 4.50(mH), 4.32(lH,dd), 3.80(lH,m), 3.<A>70(lH,t), 2.70(2H,t), 2.25(2H,c), 1.95(mH), 1.60(mH), 1.25(mH), 0.85(6H,m).

Forbindelse 52

Rf: 0,38 [etylacetat:heksaner, 1:9 (v/v)]

J-H NMR (CDC13) 5: • 5 . 98-5 . 88 ppm (lH,m), 5.32(lH,m), 5.25(lH,m), 4.88(lH,m), 4.62(2H,d), 4.48(1H,d,J=7.46 Hz), 3.86 -3.66(mH), 3.59(1H,c.J = 9.4 Hz). 3.23 - 3.10(mH), 1.37-1.80(2H,m), 1.64-1.56(2H,m), 1.48(3H,s), 1.38(3H.s). 0.91(9H,s). 0.90-0.86(3H,t), 0.13(3H,s), 0.12(3H,s).

Forbindelse 53

Rf: 0,12 [etylacetat:heksaner, 1:4 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 5: 5.93 ppm (lH,m), 5.37(lH,m), 5.27(lH,m), 4.90(lH,m), 4.67-4.58(2H,m), 4.54(lH,d,J=7.5 Hz), 4.12(lH,q), 3.94(lH,m), 3.87(lH,dd,J=3.4,11.5 Hz), 3.78-3.69(2H,m). 3.50-3.43(2H,m), 3.34-3.30(lH,m), 3.21 (1H,dd,J=7.6,10.0 Hz), 3.03(lH,t,J=9.2 Hz), 2.05-2.01(lH,m), 1.96-1.50(mH), 1.36-1.23(mH), 0.92(9H,s), 0.88-0.85(3H,m), 0.15(3H,s), 0.14 (3H.s) .

Forbindelse 54

<:>H NMR (CDCI3) 8: 5.91 ppm (lH,m), 5 . 3 7-5 . 3 2 (] H, m) , 5.26-5.23(lH,m), 4.92-4.87(lH,m), 4.65-4.55(2H,m), 4.47(lH,d,J = 7.64 Hz), 3 . 90-3.74(mH),

3.48(lH,ddd,J=2.1,9.3,11.2 Hz), 3 . 42 ( 1H0h-d.J=2.1 Kz), 3.28(lH,m), 3.18(lH,dd,J=7.6,9.9 Hz), 3.00(1H,dd,J=8.7,9.8 Hz), 1.89(mH), 1.60-1.20(mH), 0.91(18H,s). 0.90-0.84(3H,m), 0.065(6H,s), 0.059(6H,s).

Forbindelse"55

^H NMR (CDCI3) 8: 5.97-5.87 ppm (2H,m), 5.37-5.31(2H,m), 5.28-5.23(2H,m), 4.81(lH,m), 4.69(1H,t,J=10.0 Hz), 4.68-4.57(2H,m), 4.48(lH,d,J=7.5 Hz), 3.79(lH,q), 3.75-3.65 (2H,d), 3 .64-3 .58 (lH,m) , 3 . 3 6 (1H, m) 3 . 27 (1H, dd, J = 7 . 7 , 10.1 Hz), 3.17(1H,t,J=9.3 Hz), 1.80(2H,q), 1.61-1.52(mH), 1.31-1.25(mH), 0.91(18H,m) , 0 . 92-0.84 (3H,m), 0.025(6H,s), C.010(6H,s) .

Forbindelse 56

<l>H NMR (CDCI3) 5: 5.96-5.87 ppm (2H.ni), 5.38-5.20(4".m), 4.80(lH,m), 4.69-4.56(mH), 4.52(1H,d,J=7.4 Hz), 3.81-3.59(3H,m), 3.36(lH,m). 3.30-3.26(1H,dd,J=7.64,9.88 Hz), 3.20(lH,t,J = 9.25 Hz) , 2.19 (1HCH,t,J = 5.71 Hz) , 1.82(2H,q), 1.68-1.50(mH), 1.24(mH,br.s), 0.92(9H,s), 0.85(3H,m), 0.14(6H,s).

Forbindelse 57A

^•H NMR (CDCI3) 5: 5.43-5.28 ppm (2H,m), 5.06(lH,m), 4.47(lH,d, J=7.68Hz), 3.83(lH,m), 3.73(lH,m), 3.66-3.56(2H,m), 3.47(lH,m), 3.38(3H.s), 3.34(lH,m), 3.20(1H. t.J=7.9 Hz), 2.98(1H,C,J=8.9 Hz), 2.29(2H,t), 2.09-1.50(mH), 1.34-1.25(mH), 0.92(9H;s), 0.91-0.85(6H,m), 0.14(6H,s).

Forbindelse 57B

<*>H NMR (CDCI3) 8: 7.89-7.34 ppm (lOH.m), 5.43-5.29(2H,m), 5.00(lH,m), 4.44(lH,d,J=7.74 Hz), 3.84-3.70(3H,m), 3.46(3H,s), 3.28(lH,q), 3.18(2H,m), 3.04(1H,C,J=9.5 Hz), 2.30(2H,C), 2.11-2.00(4H,m) . 1.89(2H,m), 1.70'.2H,m). 1.58(2H,m), 1.27(mH). 1.07(9H,s), 0.95(9H.s). 0.87(6H,m), 0.16(3H.S), 0.15(3H.s).

Forbindelse 58

<!>H NMR (CDCI3) 8: 5.96-5.87 ppm (2H,m), 5.41-5.23(mH), 5.00(lH,m), 4.58(4H,m), 4.46(1H,d.J=7.50 Hz), 4.23(lH,q), 3.77-3.68(mH), 3.57(1H,dd,J=5.13,10.91 Hz), 3.41(lH,m), 3.35(3H,s), 3.24(lH.dd,J=7.7,10.1Hz). 3.12(1H,dd,J=8.8.9.7 Hz). 2.28-2:26(2H,t). 2.07-1.52(mH), 1.32-1.12(mH), 0.9K9H.S), 0.90-0.85 (6H,m) . 0.13(6H.s).

Forbindelse 59

^-H NMR (CDCI3) 8: 5.97-5.90 ppm (2H.m). 5 . 41-5 . 25 (4H. m) , 4.97(lH,m), 4.61-4.54(4H,m), 4.27-4.07(2H,m), 3.81-3.40(mH), 3.38(3H,s), 3.32(2H,m), 3.22(1H,C,J=9.9 Hz), 2.29-2.24(2H,m), 2.08-1.52(mH), 1.33-1.23(mH) , 0.88-0.84(6H,m) .

Forbindelse 60A og B

Rfctf3: 0,53 [heksaner:etvlacetat' 1:1 (v/v^

lH NMR (CDCI3) 8: 8.74 ppm {Hla>pf2s), 6 . 3 9 (lHa, d, , j= 3 . 4 6 Hz), 6.00-5.91(2H,m), 5.58(IHp,d,J=8.46 Hz), 5.42-5.25(mH), 5.0C(lH,m), 4.63-4.36(mH), 3.99-3.50(mH), 3.37(3Hp,s), 3.36(3Ha,s), 3.34 -3.30 (mH), 2.35-2.25(2H,m) , 2.03-1.80(mH) , 1.70-1.54(mH) , 1.27-1.23(mH), 0.89-0.85(6H,m).

Forbindelse 62

<X>H NMR (CDCI3) 8: 6.96 ppm (lH,s), 6.85(2H,m), 5.95(5H,m). 5.30(mH), 5.00(mH), 4.60(mH), 4.35(lH,d), 4.27(lH,dd), 4.20(lH,,q), 3.98(lH,d), 3.85(6H,2s), 3.75(mH), 3.52(2H,m), 3.35(lH,t) 3.15(1H,C), 2.60(2H,m), 2.25<2H,t), 2.00(4H,m), 1.60(mH), 1.25(mH), 0.85(9H,m).

Forbindelse 63

<L>H NMR (CDCI3) 8: 6.98 ppm (lH,d,J=1.71 Hz), 6.90(1H,d,J=8.30 Hz), 6.85(lH,d,J=8.30 Hz), 5.95(4H,m), 5.30(mH), 5 .00 (1H, t, J=9 .03 Hz), 4.90(mH), 4.55 (luH! 4.30(mH), 3.85(6H,2s), 3.70(mH). 3.62(lH,m). 3.50(mH), 3.35(mH), 3.00(1H,t,J=9.8 Hz), 2.69(2H,C,), 2.25(2H.t), 2.00(mH). 1.60(mH), 1.25(mH). 0.85(9H.m).

Forbindelse 64

^H NMR (CDCI3) 8: 5.95 ppm (4H.m). 5.40-5.22(10H,m). 4.96(lH.m), 4.90(lH,m), 4.55(mH). 4.32(lH.d). 4.30-4.22(2H,m), 4.18(lH,q), 4.10(lH,dd). 3.90(mH), 3.75(mH), 3.50(mH). 3.33(2H,m), 3.20(mH), 3.00(lH,t). 2.25(2H,t), 2.00(4H.m), 1.80 (mH). 1.50(mH), 1.25(mH), 0.9K9H.S), 0.85(9H,m), 0.15(6H,s).

Forbindelse 65

<l>H NMR (CDCI3) 6: 5.98-5.87 ppm (4H,m), 5.42-5.23(mH), 4.95(lH,m), 4.80(2H,m), 4.65-4.50(mH), 4.49(lH,d,J=7.6 Hz), 4.27(lH.d,J = 8.1 Hz), 4.26(lH,m),3.87(1H,d,J=9.95 Hz) , 3.83-3.54(mH), 3.36(3H,s), 3.30-3.13(4H,m), 2.28-2.23(2H. t), 2.07-1.78(mH). 1.73-1.53(mH), 1.40-1.23(mH), 0.92(9H,s), 0.91-0.77(9H,m), 0.17 (6H,s) .

Forbindelse 67

<l>H NMR (CDCI3) 6: 7.32 ppm (lH,d,J=8.2 Hz), 7.24(1H,d,J=9.8 Hz), 5.97-5.89(4H,m), 5.37-5.23(mH), 4.91(2H,m), 4.81(lH,m), 4.71(lH,m), 4.63-4.54(mH). 4.24(lH,q), 3.88-3.43(mH), 3.39(3H,s), 2.53-2.50(4H,m), 2.26-2.23(2H,t), 2.06-1.54(mH), 1.2(mH), 0.88-0.83(mH), 0.08(3H,s), 0.05(3H,s).

Forbindelse 68

Rf: 0,52 [diklormetan:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.25 ppm (lH,d,J=7.6 Hz), 7.22(1H,d,J=8.4 Hz), 5.97-5.85(4H,m), 5.41-5.20(mH), 5.05(1H,d,J=8.0 Hz). 4.93(lH,m), 4.78(lH,m), 4.65-4.51(mH), 4.28(lH,q), 4.11(lH,m), 3.79-3.57(mH), 3.52-3.39(mH), 3.37(3H,s), 2.50(4H,c), 2.25(2H,t), 2.07-1.96(4H,m). 1.78-1.48(mH), 1.24(mH), 0.86(15H,m).

Forbindelse 69

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.55 ppm (lH,d), 7.05(lH,d), 6.00-5.86(6H,m), 5?79(lH,m), 5.42-5.20(mH). 4.91(lH,m), 4.84(2H,m), 4.75(lH,t), 4.67-4.52(mH), 4.28(lH,q). 4.13(lH,m), 4.05(lH,m), 3.91(lH,d), 3.80-3.40(mH). 3.39(3H,s), 2.52(4H,m), 2.26(2H,t), 2.10-1.95'4H,m), 1.82-1.43(mH), 1.38-1.24(mH),0.37(15H,m).

Analog B531 (Forbindelse 70)

RT(HPLC): 13,87 min.

<1>H NMR (CDCI3:CD3OD,3:1, v/v) 5: 5.29 ppm (1H,dd,J=3.3,6.3 Hz), 5.20(lH,m), 5.10(lH,m), 4.70(lH,m), 4.45(1H,d,J=3.2 Hz) 3.86(2H,m), 3.72-3.30(mH), 3.20(3H,s), 3.18(lH,t), 2.38(4H,m), 2.10(2H,t), 1.82(4H,m), 1.72-0.95(mH), 0.68 (15H,c) •

<13>C NMR (CDCI3:CD3OD,3:1, v/v) 5: 205.9 ppm, 174.1, 168.0, 167.6, 130.6, 127.8, 100.3, 94.6, 80.1, 78.9, 74.6, 73.6, 72.8, 71.1, 70.6, 69.7, 69.2, 69.1, 69.08, 67.3, 58.3, 54.9, 52.2, 52.1, 48.8, 47,5, 43.0, 42.9, 37.3, 36.6, 34.4, 34.1, 33.6, 31.4, 31.3, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.9, 28.8, 28.7, 28.6, 28.5, 26.7, 26.1, 25.3, 24.8, 24.6, 22.9, 22.8, 22.2, 13 .4.

<31>P NMR (CDCI3:CD3OD,3:1, v/v) 8: -0.58 ppm, -1.24.

Forbindelse 71

^-H NMR (CDCI3) 8: 7.10 ppm (lH,d), 6.95(lH,d), 5.95(4H,m), 5.25(mH), 4.92(lH,d), 4.82(lH,d), 4.75(lH,m), 4.65(mH), 4.50(mH), 4.38(lH,q), 3.85(lH,m), 3.45(mH), 3.35(3H,s), 2.80(4H,m), 2.63(2H,m), 2.20(2H,t), 1.95(mH), 1.65(mH), 1.20(mH), 0.80(24H,m), 0.05(6H.2s).

Forbindelse 72

<X>H NMR (CDCI3) 8: 7.22 ppm (lH,d), 6.65(lH,d), 5.90(4H,m), 5.40-5.23(mH)^ 4.90(lH,m), 4.83(lH,m), 4.70(lH,d), 4.60-4.50(mH). 4.40(lH,q), 4.lO(lH,m), 4.02(lH,m), 3.95(lH,q), 3.80-3.62(mH), 3.47(3H.m). 3.39(3H,s). 3.36(lH.t), 2.98-2.83(4H,m), 2.24(2H,t), 2.00(4H,m), 1.80-1.20(mH), 0.85(15H,m).

Forbindelse 73

lK NMR (CDCI3) 8: 7.55 ppm (2H,m), 5.95(6H,m), 5.80(lH,m), 5.35(mH), 4.90(lH,m), 4.60(mH), 4.32(lH,q), 4.15(lHm),

3.65(mH), 3.45(lH,m), 3.35(3H,s), 2.85(4H,m), 2.25(2H,C), 2.00(4H,m), 1.80(mH), 1.25(mH), 0.35(15H,m).

Forbindelse 74

1H NMR (CDCI3) 8: 5.95 ppm (5H,m), 5.60(lH,t), 5.30(mH), 5.05(3H.m), 4.75(2H,m), 4.60(mH), 4.50(mH), 4.40(mH), 4.30(mH), 3.90CH,m), 3.75(mH), 3 .60 (nvH) , 3.47(mH), 3.28(lH,dd), 2.68(4H,m), 2.25(2H,t), 2.00(4H,m), 1.60(mH). i . 25 (mH), 0.85(9H,m) .

Forbindelse 75

<1>H NMR (CDCI3} 8: 8.85 ppm (lH,s), 6.45(lH,d,J=3.6 Hz), 5.92(5H,m), 5.60(1H,t,J=10.2 Hz), 5.30(mH), 5.10(mH). 5.03(lH,dt,J=4.3,10.1,10.1 Hz), 4.62(mH), 4.50(mH), 4.30(lH,q), 4.25(lH,m), 4.00 (lH,d,J=10.8 Hz), 3.75(lH,dd,J=4.3,11.5 Hz), 3.70(1H,dd,J=3.6,11.0 Hz), 3.61(lH,m), 3.40(lH,dd,J=7.9,9.7 Hz), 2.65(4H,m), 2.25(2H,C), 2.00(4H,m), 1.60(mH). 1.25(mH), 0.85(9H,C).

Forbindelse 76

<:>H NMR (CDCI3) 8: 5.98 ppm (7H,m), 5.75(lH.C,J=8.2 Hz), 5.35(mH), 5.07(lH,m), 5.04(1H,dd,J=9.2,10.1 Hz),

4.95 (1H,t,J=9.8 Hz), 4.62(mH), 4.50(mH), 4.47(1H,d,J=7.5 Hz), 4.30(mH), 4.00(2H,m), 3.70(1H,dd,J=3.9,11.4 Hz), 3.60(lH,m), 3.42(lH,dd,J=7.5,9.8 Hz), 2.70(4H,m), 2.25(2H,C), 2.00(4H,m), 1.62(mH), 1.30(mH), 0.85(9H,t).

Forbindelse 77

1-H NMR (CDC13)^ 8: 5.95 ppm (7H,m), 5.55(lH,t). 5.35(mH), 5.05(mH), 4.90(lH,t). 4.62(mH), 4.50(mH), 4.28(mH), 4.20(mH), 4.05(mH), 3.65(mH), 3.35(lH,q), 2.92(lH,t), 2.70(mH), 2.60(2H,d), 2.25(2H,t), 2.00(mH), 1.75(mH), 1.60(mH), 1.30(mH), 0.85(9H,C).

Forbindelse 78

<1>H NMR (CDCI3) 6: 7.36 ppm CH,d,J = 8.5 Hz), 7 28(lH,d), 5.90(7H,m), 5.60(1H,dd,J = 10.6,11.6 Hz), 5.30(mH), 5.05(1H,m), 4.90(2H,m), 4.75(1H,t,J=9.5 Hz), 4.55(mH), 4.30(mH). 4.08(2H,m), 3.85(mK), 3.68(mH), 3.35(mH), 2.65(mH), 2.50(2H,t), 2.45(2H,c), 2.25(2H,t), 2.00(mH), 1.60(mH), 1.30(mH), 0.85(15H,m).

Forbindelse 79a

<X>H NMR (CDCI3) S: 5.94 ppm (lH,m), 5.45(1H,d,J=9.5 Hz), 5.35(lH,dd,J=l.47,17.1 Hz), 5.25 (1H,d,J=10.0 Hz), 4.98(lH,d,J=3.66 Hz), 4.97(lH,m), 4.25(1H,dd,J=5.2,12.7 Hz), 4.06(lH,dd,J = 1.2,14.7 Hz), 3 . 90-3.60(mH),

3.14(lH,dd,J=3.4, 10.2 Hz), 2.12(3H,s), 1.45(3H,s), 1.37(3H,s).

Forbindelse 79b

<X>H NMR (CDCI3) 5: 5.94 ppm (lH,m), 5.35(1H,dd,J=l.5,17.1 Hz), 5.25(lH.dd,J=1.2,17.1 Hz), 4 . 95 (2H,t,J=9.76 Hz), 4.47 (lH,d,J = 7.81 Hz), 4 . 40(lH,dd,J=5.1,11.7 Hz), 4.16(lH,dd,J=6.5,12.4 Hz), 3.95 (1H,dd,J=5.4,10.8 Hz), 3.80(1H,t,J=10.7 Hz), 3.65(lH,t,J=9.76 Hz), 3 . 43 UH,dd, J=8 .1, 10.0 Hz) , 3.27(lH,m), 2.12(3H,s), 1.45(3H,s), 1.37(3H,s).

Forbindelse 80

<1>H NMR (CDCI3) 5: 4.95 ppm (lH,d,J=3.9 Hz), 4.12(lH,m), 3.80(mH), 3.60(mH), 3.28 (1H,dd,J=3.66,10.0 Hz) , 2.62(lH,d,J=2.44 Hz), 2.22(lHOH,t) 1.51(3H,s), 1.44(3H.s).

Forbindelse ^81

<*>H NMR (CDCI3) 8: 5.92 ppm (lH,m), 5.44(1H,t,J=9.52 Hz), 5.37(lH,dd,J=1.46,17.4 Hz), 5 . 27(lH,dd,J=l.2,10.5 Hz), 5.11(mH), 5.02 (lH,d,J = 3.42 Hz), 4.61(2H,m), 3.85(mH)', 3.65(mH), 3.05(lH.dd,J=3.66,10.5 Hz), 2.79(1H,dd,J=7.08,14.5 Hz), 2.65(lH,dd,J=6.35,15.4 Hz), 1.65(mH), 1.45(3H,s), 1.36(3H,s), 1.25(mH), 0.90(12H,m), 0.08(6H,2s).

Forbindelse 82

<l>H NMR (COCI3) 6: 5.95 ppm (lH,m), 5 . 45(lH, t, J=9 . 3 Hz), 5.37(1H,dd,J = l.47,15.8 Hz), 5.27 (1H,dd,J = l.22,10.5 Hz), 5.12(lH,m), 4.99(lH,d,J=3.66 Hz), 4.62(2H,m), 3.80(mH), 3.65(mH), 3.16(lH,dd,J=3.62,10.5Hz), 2.78(1H,dd,J=7.02,15.4 Hz), 2.63(1H, dd,J=6.30,15.6 Hz), 1.65(mH), 1.46(3H,s), 1.37(3H,s), 1.26(mH), 0.86(3H,t).

Forbindelse 83

<X>H NMR (CDCI3) 8: 5.95 ppm (3H,m), 5.41(mH), 5.27(mH), 5.12(lH,m), 5.02(lH.d,J=3.4 Hz), 4.55(mH), 4.25(mH), 3.90(mH), 3.65(lH,t,J=8.8 Hz), 3.10(1H,dd,J=3.67,10.5 Hz), 2.79(lH,dd,J=5.4,14.4 Hz), 2.63(1H,dd,J=6.6,15.6 Hz), 1.65(mH), 1.45(3H,s), 1.36(3H,s), 1.26(mH), 0.86(3H,t).

Forbindelse 84

Rf: 0,6 [metylenklorid:dietyleter, 4:1 (v/v)]

•3

<l>H NMR (CDCI3) 5: 5.95 ppm (3H,m), 5.40(mH), 5,25(lH,dd), 5.13(lH,m), 4.98(lH,d,J=3.4 Hz), 4.55(mH), 4.25(mH). 3.80(mH), 3.65(lH,t), 3.38(mH). 3.13(lH,dd), 2.75(lH,dd), 2.65(lH,dd), 1.68(mH), 1.45(2H,q), 1.25(mH). 0.85(12H,m), 0.10(6H,s).

Forbindelse 85

<l>H NMR (CDC13) 8: 5.95 ppm (4H,m), 5.55(2H,m). 5.35(8H,m), 5.10(lH.m). 5.01(2H,m), 4.95(lH,t). 4.90(lH.t), 4.55(mH). 4.23(2H,m). 3.90(2H.m). 3.68(mH). 3.25(lH,dd). 2.68(lH,dd). 2.58(lH.dd). 2.15(2H,q). 1.25(mH), 0.85(mH), 0.10(6H,s).

Forbindelse 86

Rf: 0,80 [metylenklorid:dietyleter, 4:1 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.55 ppm (lH,d,J=8.8 Hz), 5.95(4H,m), 5.10(mH), 4.95(mH). 4.85(1H,t,J=10.0 Hz), 4.78(1H.d.J=3.6

Hz), 4.55(mH), 4.35(lH,mj, 4.25(mK;, 3.85(mH), 3.71(2H,d), 3.62(lH,m), 3.20(lH,d,J=13.9 Hz), 3.I6(lH,m), 2.85(lH,d,J=13.9 Hz), 2.50(2H,m), 2.01(2H,m), 1.55(mH), 1.20(mH), 0.85(mH), 0.10(5H,2s).

Forbindelse 87

Rf: 0,08 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDC13) 5: 7.51 ppm (lH,d,J=9.52 Hz), 5.95(4H,m), 5.30(mH), 4.95(lH,m), 4.82(2H,m), 4.55(mH). 4.35(lH,m), 4.25(2H,m), 3.85(mH), 3.65(mH), 3.16(mH), 2.84(lH.d,J=14.41 Hz), 2.55(mH), 2.01(mH), 1.55(mH), 1.20(mH), 0.85(6H,t).

Forbindelse 90

Rf: 0,39 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.62 ppm (lH,d,J=8.0 Hz), 7.20 (lH,d,J=8.1 Hz), 5.90(7H,m), 5.46(1H,t,J=10.0 Hz), 5.40-5.15(mH), 5.05(lH,m), 4.85(mH), 4.50(mH), 4.30(mH), 4.25(mH), 4.15(mH 3.90(mH), 3.70(lH,m), 3.60(lH,m), 3.53(lH,dd), 3.35(mH). 2.70-2.42(8H,m), 2.25(2H,t), 2.00(mH), 1.80-1.45(mH), 1.37-1.07(mH), 0.85(15H,m).

Analog B235

R^: 0,47 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 \v/v/v/v)]

RT(HPLC) :13 . 43 min.

<X>H NMR (CDCI3:CD30D, 1:1, v/v) 8: 5.15 ppm (2H,m), 5.00-4.80(3H,m), 3.94-3.45(mH), 3.20-3.00(mH), 2.40-1.95(lOH.m). 1.31-0.75(mH), 0.55(15H,br.s).

<13>C NMR (CDCI3:CD3OD, 1.1, v/v) 5: 208.3 ppm, 207.8, 175.6, 174.1, 172.4, 170.0, 169.4, 102.8, 95.2, 76.8, 74.8, 74.3, "2.6, 71.8, 70.0, 61.5, 55.0, 52.2, 43.8, 43.5, 43.0, 40.2, 38.5, 35.7, 33.2, 30.8, 30.6, 30.4, 30.2, 26.9, 26.5, 26.4, 26.3, 24.3, 23.9, 23.7, 15.0.

Analog B235 (fullstendig beskyttet)

Rf: 0,39 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 5: 7.40 ppm (lH,d), 7.13(lH,d), 5.93(7H,m), 5.70(lH,m), 5.46-5.16(mH), 5.00(lH,m), 4.86(2H,m), 4.67-4.46(mH), 4.38-4.27(mH), 4.18(lH,m), 3.93(lH,d), 3.80-3.60(mH), 3.40-3.30(mH), 2.68-2.42(mH) , 2.22(2H,t), 1.80-0.80(mH).

Analog B272

Rf: 0,48 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14.13 min.

Analog B272 (fullstendig beskyttet)

Rf: 0,66 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v/v/v)]

<l>H NMR (CDCla^ 5: 7.13 ppm (lH.d), 7.05(lH,d), 5.92(8H,m), 5.69(lH,dd), 5.32(mH), 5.09(lH,m), 4.88(lH,d). 4.80(lH,t), 4 .65-4.45(mH), 4.38-4.20(mH) , 3.88-3.62(mH), 3.32(2H,q), 2.58(mH), 2.43(2H,m), 2.25(2H,t), 2.00(4H,m), 1.58(mH). 1.23(mH), 0.85(15H,m).

Analog B286

Rf: 0,43 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC) : 14 .70 min.

-H NKP. (CDCI3 :CD30D,' 3:1, v/v) 5: 6.58 ppm (2H,m), 5.6K2H, d, J=15.3 Hz), 5.28(lH,dd,J=2.9,5.7 Hz), 5.20-5.07(2H,m), 5.00-4.88(3H,m), 4.52(1H,d,J=8.2 Hz), 4.20-4.05(mH), 3.85-3.20(mH), 2.48-1.75(mH), 1.40(mH), 1.20-1.00(mH), 0.67(15H,m).

<31>P NMR (CDCl3:CD30D 3:1, v/v) 5: 1.24 ppm, -1.61.

Analog B286 (fullstendig beskyttet)

Rf: 0,60 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<1>H NMR (CDCI3) 8: 6.88-6.73 ppm (4H,m), 5.98-5.85(7H,m), 5.83(lH,d), 5.71(2H,m), 5.42-5.20(16H,m), 5.16(lH,t), 4.98(lH,m), 4.85(2H,dd), 4.67-4.45(mH), 4.41-4.29(2H,m), 4.18(lH,m), 3.95(lH,dd), 3.88(lH,d). 3.75(lH,m), 3.67(lH,m), 2.63-2.46(3H,m). 2.22(2H,t), 2.12(2H,t), 2.00(2H,m), 1.78-1.15(mH), 0.84(15H,m).

Analog B287

Rf: 0,49 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20^ (v/v/v/v)]

RT(HPLC):13.70 min.

<L>H NMR (CDCI3:CD30D, 3:1, v/v) 8: 5.28 ppm (lH,dd,J = 3.6,6 . 0 Hz), 5.12(2H,m), 4.96(2H,m), 4.87(lH,m), 4.50(1H,d,J=8 . 7 Hz), 4.05(mH), 3.80(mH), 3.60-3.24(mH), 2.40-2.10(mH), 1.80(mH), 0.65(15H,m).

31P NMR (CDCl3:CD30D 3:1, v/v) 5: C.31 ppm, -1.66.

Analog B287 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,68 [metylenklorid:metylalkhol, 95:5 (v/v)]

^-K NM?. (CDC13) 8: 7.14 ppm (lH,d,J=7.9 Hz), 6 . 80 (1H, d, J = 3 . 0 Hz), 5.92(8H,m), 5.70(lH,m), 5.45-5.17(mH), 5.05(lH,m), 5.02(lH,m), 4.93(lH,d,J=7.9 Hz), 4.86(lH,t), 4.67-4.47(mH), 4.32(mH), 4.19(lH,dd), 3.87(lH,d), 3.66(mH), 3.32(2H,q), 2.70-2.24(mH), 2.00(mH), 1.55(mH), 1.25(mH), 0.85(15H,m).

Analog B288

Rf:0,82 [kloroform:metylalkohol .-eddiksyre: vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC) :13 .48 min.

<:>H NMR (CDC13:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 5.30 ppm (lH.br.s), 5.25-5.10(2H,m). 4.99(lH.t.J=9.5 Hz). 4.74(1H,t,J=9.4 Hz), 4.39(lH,d,J=8.3 Hz), 4.02(lH,m), 3.82(2H,m), 3.71-3.10(mH), 2.50-2.10(mH), 1.90-1.70(6H,m), 1.50-0.90(mH), 0.70(15H,t).

<13>C NMR (CDC13:CD30D, 3:1, v/v) 8: 205.13 ppm, 205.02, 173.56,-172.44, 170.78, 167.76, 167.32, 130.64, 130.54, 100.68, 94.57, 75. 1~ S\ 74.65, 72.58, 72.26, 70.10, 68.01, 67.83, 67.55, 60.74, 53.24, 51.04, 42.87, 41.62, 38.46, 38.31, 36.64, 33.74, 33.60, 33.33, 33.18, 32.02, 31.71, 31.63, 31.37, 31.32, 31.27, 31.20, 31.04, 30.86, 29.15, 29.11, 29.08, 29.00, 28.97, 28.93, 28.88, 28.83, 28.80, 28,70, 28.59, 28.51, 28.43, 28.30, 26.67, 25.00, 24.59, 24.37, 22.85, 22.78, 22.11, 21.97, 13.37.

3 lp NMR (CDCl3:CD30D 3:1. v/v) 5: -1.49 ppm.

Analog B294

Rf:0,69 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)] -

Analog B294 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,40 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

RT(HPLC) :15 . 07 min.

<1>H NMR (CDCI3) 8: 7.41 ppm (lH,d,J=8.2 Hz), 7.09(1H,d,J=8.5 Hz), 6.00-5.82(7H,m), 5.70(lH,m), 5.43-5.20(mH), 5.02(lH,m), 4.87(2H,m), 4.69-4.44(mH). 4.40-4.28(3H,m), 4.18{lH,dd). 3.94(lH,d). 3.78-3.61(4H,m). 3.46(2H,m), 3.38-3.28(5H,m), 2.65-2.42(mH), 2.00(5H,m), 1.64-1.25(mH), 0.86(15H,m).

Analog B300

Rf:0,51 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):13.65 min.

Analog B300 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,36 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 8: 7.31 ppm (lH,d,J=8.0 Hz), 6.50(1H,d,J=8.1 Hz), 6.00-5.83(7H,m), 5.78(lH,m), 5.46-5.20(14H,m), 5.00-4.84(3H,m), 4.64-4.46(mH), 4.39-4.28(2H.m). 4.13(lH,m). 3.99(lH,d), 3.90(lH,m), 3.75-3.60(3H.m), 3.47(lH,m), 3.38-3.30(2H,m). 2.65-2.43(6H.m), 2.30(lH,dd), 2.18(lH.dd). 2.00(2H,t), 1.60-1.20(mH), 0.87(15H.m).

Analog B313

Rf:0,57 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):11,75 min.

Analog B313 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,71 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 6: 7.37 ppm (lH,d), 6.82(2H,m), 5.91(7H,m), 5.75(1H,C). 5.7(lH.d). 5.41-5.19(mH), 4.96-4.87(2H,m), 4.63-4._48(mH), 4.45-4.30(mH) , 4.18(lH,m), 3.95(lH,d), 3.80-3.60(mH), 3.38(2H,q), 2.65-2.48(6H, m) , 2.24(2H,t), 2.17-1.95(6H,m), 1.70-1.10(mH). 0.85(15H.m).

Analog B314

Rf:0,48 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):27.93 min.

<1>H NMR (CDCI3: CD3OD, 3:1. v/v) 8: 5.26 ppm (lH.m), 5.17(lH,m), 5.08(lH,m), 5.00(lH.m), 4.93(2H,m), 4.48(1H,d,J=7.9 Hz), 4.00(mH), 3.85-3.20(mH), 1.80(4H,m), 1.40-1.00(mH), 0.70(18H.m).

Analog B314 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,46 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 8: 7.38 ppm (lH,d.J=7.8 Hz), 6.14(1H,d,J=8.0 Hz), 6.05-5.82(7H,m), 5.70(lH,t), 5.45-5.20(mH), 5.11-4.98(lH,m), 4.90-4.82(2H,m), 4.67-4.42(mH), 4.39-4.22(mH), 4.10(lH,dd), 3.98-3.85(2H,m), 3.83-3.62(mH), 3.38(2H,q),

2.68-2.30(mH), 2.25(mH), 2.00(4H,m), 1.55(mH), 1.25(mH), 0.85(15H,m).

Analog B318

Rf:0,48 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC): 14,05 min.

Analog B318 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,44 [metylenklorid.-metylalkohol, 19:1 (v/v)]

lK NMR (CDCI3) 8: 7.40 ppm (lH.d), 6.99(lH,d), 6.05-5.82(7H,m), 5.78(lH,q), 5.46-5.15(mH), 5.02(lH,m), 4.91-4.80(3H,m), 4.70-4.42(mH), 4.38-4.20(mH), 3.90-3.25(mH), 2.93-2.50(mH), 2.25(2H,t), 2.00(mK), 1.90-x.10(mH), 0.85(15H,m).

Analog B377

Rf:0,52 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

Analog B377 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,39 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v)] ,

iH NMR (CDCI3) 8: 7.62 ppm (lH,d,J=8.0 Hz), 7.20(lH,d,J=8.1 Hz), 5.90("H,m). 5.46(1H,t,J=10.0 Hz). 5.40-5.15(mH), 5.05(lH,m), 4.85(mH), 4.50(mH), 4.30(mH), 4.25(mH), 4.15(mH), 3.90(mH), 3.70(lH,m), 3.60(lH,m), 3.53(lH,dd), 3.35(mH),

2.70-2.42(8H,m), 2.25(2H,t), 2.0C(mK), 1.80-1.45(mH), 1.37-1.07(mH), 0.85(15H,m).

Analog B379

Rf:0,55 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):9.12 min.

<l>H NMR 'CDCI3:CD3OD. 3:2, v/v) 8: 5.14 ppm (2H,m), 5.05(lH,m), 4.92(lH,t), 4.78(2H,m), 4.43(2H,m), 3.92-3.44(mH), 3.13(2H,m), 2.93(lH,m), 2.70(lH,m), 2.35(3H,m), 2.22(4H,m), 2.12(lH,dd), 1.94(2H,m), 1.74(2H,m), 1.30-0.90(mH), 0.58(15H,C).

Analog B379 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,28 [metylenklorid:metylalkohol, 100:3 (v/v)]

lU NMR (CDCI3) 8: 7.62 ppm (lH,d), 7.08(lH,d), 5.90(7H,m),

5.70(lH,dd), 5.40-5.20 (17H,m) , 5.0o/(lH,m), 4.82(2H,m), 4.65-4.46(15H,m), 4.35(2H,m), 4.20(lH,dd), 3.90(lH,m), 3.67(lH,m), 3.35(3H,m), 3.20(lH,m), 3.10(lH,m), 2.70(lH,dd). 2.58(2H,m), 2.47(3H,m), 2.26(2H,m), 2.03(2H,m), 1.65-1.10(mH), 0.85(15H,t) .

Analog B385

Rf:0,58 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):18,55 min.

Analog B385 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,40 [metylenklorid:metylalkohol, 97,3 (v/v)]

-H NMR ;CDC13) 8: 6.52 ppm (lH.d), 5 . 93 -5 . 85 (7H. m) , 5.7l(iH,m), 5.59(lH.br.s), 5.47(1H,br.s), 5.45-5.21(mH), 5.18(lH,m), 4.99(lH,m), 4.83(2H,m), 4.66 - 4.45(mH), 4.40-4.25(mH), 4.18(lH,m), 3.95-3.65(mH), 2.70-2.46(mH), 2.25(2H,t), 2.15-1.99(mH), 1.67-1.20(mH), 0.85(15H,m).

Analog B387

Rf:0,50 [klorform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):19,05 min.

Analog B387 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,75 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<!>H NMR (CDC13) 8: 6.60 ppm (lH,d), 5 . 99-5 . 86 (7H, m) , 5.70(lH,m), 5.44(lH,m), 5.42-5.21(mH), 5.12(lH,d), 4.65-4.44(mH), 4.35-4.26(mH), 4.05(mH), 3.90(mH), 2.72-2.48(mH), 2.35 (r.-n), 2.25(mH), 2 .14-1. 94 (mH) , 1. 58-1.18 (mH) , 0.89(15H,m).

Analog B388

Rf: 0,60 [kloroform: etylalkohol '.eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):13,92 min.

Analog B388 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,80 [metylenkloridmetylalkohol, 19:1 (v/v)]

<X>H NMR (CDCI3) 5: 7.09 pprn^ (lH.d), 6.84(2H,m), 6.00-5.86(7K.m), 5.84(lH,dd,J=3.0,17.0 Hz), 5.69(lH,dd,J=3.9,5.2 Hz), 5.46-5.22(mH), 5.18(lH,dd), 5.01(lH,m), 4.86(1H,d,J=7.4 Hz), 4.80(1H,t,J=9.4 Hz), 4.68-4.46(mH), 4.40-4.25(2H,m), 4.20(lH,m), 3.99(lH,q), 3.87(lH,d,J=ll.5 Hz), 3.75(lH,dd), 3.68(lH,m), 3.58(2H,dd), 3.34(2H,d), 2.69-2.50(4H,m), 2.45(2H,t). 2.23(2H,t). 2.12(2H,m), 2.08-1.98(4H.m). 1.67-1.16(mH), 0.88(15H,m).

Analog B398

Rf:0,49 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):7.12 min.

<X>H NMR (CD3OD) 8: 5.42 ppm (lH,m), 5.37(lH,t), 5.38(lH,m), 5.26(lH,m), 5.18(lH,m), 4.70(1H,d,J=8.6 Hz), 4.22-3.82(mH),

3.76(lH,d,J=11.4 Hz), 3.55(lH.t,J=11.0 Hz), 3.42(1H,d,J=10.3 Hz), 2.72-2.60(5H,m), 2.42(1H,dd,J=8.6,17.1 Hz), 2.31(2H,t), 2.18-2.00(6H,m), 1.77-1.58(4H,m), 1.50-1.23(mH), 0.87(15H,m).

<13>C NMR (CD3OD) 8: 207.2 ppm, 206.8, 176.0. 174.7, 173.0. 170.8, 170.2,* 133 .0, 130.8. 103.6. 96.2, 82.5, 82.4. 81.0. 80.8, 78.0, 77.9, 77.8, 75.7, 75.6, 75.5, 74.8, 74.7, 73.3, 72.4, 72.1, 70.4, 70.2, 69.9, 62.4, 56.8, 54.2, 44.5, 44.2, 44.0. 41.0, 39.7, 36.4, 35.6, 33.8, 33.5, 32.0, 31.7, 31.2, 30.8, 29.0, 28.5, 27.8, 27.4, 27.3, 25.3, 25.1, 24.8, 20.3, 20.0, 19.9, 15.5.

Analog B400

Rf:0,3 6 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14,27 min.

Analog B400 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,21 [metylenklorid:metylalkohol, 98:2 (v/v)]

lE NMR (CDCI3) 8: 7.43 ppm (lH.d), 7.08(lH,d), 6.98 (lH.ddd) , 6.92(7H,m), 6.80(lH,dd), 6.70(lH,dd). 5.43-5.18 (17H,m), 5.00(lH,m), 4.87(2H,m), 4.65-4.30(mH), 4.18(1H.ddd), 3.93(lH,dd), 3.82(lH,q), 3.70(?H,m), 3.33(4H,m). 2.58(2H,m), 2.46(4H,q), 2.17(2H,q), 1.64-1.20(mH), 0.85(12H,c).

Analog B406

Rf: 0,35 [kloroform: metylalkohol-.eddiksyre: vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):13,95 min.

Analog B406 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,33 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 8: 7.32 ppm (lH.d), 7.17(lH.t), 6.05-5.85(7H,m). 5.73(lH.m). 5.45-5.20(mH), 5.22(lH,m). 4.91-4.8(2H,m), 4.68-4.43(mH), 4.40-4.28(mH), 4.20(lH,m), 3 .91 (lH.dd)'. 3 . 82-3 .75 (mH) , 3.59(lH,q), 3 . 42-3 . 29 (mH) .

2.72(2H,d). 2.35-2.20(mH), 2.25(2H.t). 2 .10-1.91(mH). 1.65(2H.t). 1.50(mH). 1.25(mH), 0.85(15H,m).

Analog B410

Rf:0,51 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):13.70 min.

<*>H NMR (CDCI3 :CD30D, 3:1, v/v) 8: 5.28 ppm (lH.br.s). 5.17(lH,m), 5.09(lH,m), 5.00(lH,m), 4.95(1H,t.J=9.6 Hz), 4.46 (lH,d,J=8.1 Hz), 4.09(lH,m), 3.85-3.46(mH), 3.25(3H,m), 2.45-2.25(6H,m), 2.06(2H,t), 1.80(4H,m), 0.65(15H,m).

<31>P NMR (CDCl 3: CD3OD, 3:1, v/v) 8: 1.32 ppm, -1.12.

Analog B410 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,41 [metylenklorid:metylalkohol, 97:3 (v/v)]

^H NMR (CDCI3) 8: 7.50 ppm (2H,dd), 5.92(7H,m), 5.80(lH,m), 5. ,2-5.23(17H,m), 4.80(2H,m), 4.74(lH,t), 4.62 -5.00 (15H,m), 4.33(2H,m), 4.11(2H,m), 3.85(lH,t), 3.68(2H,m), 3.42(2H,d). 3.36(2H,s), 2.78(2H,d), 2.50(4H,q), 2.22(2H,t). 2.00(4H,m), 1.80-1.50(lH,m), 1.25(mH), 0.85(15H,m).

Analog B415

Rf:0,50 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):12,62 min.

Analog B415 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,20 [metylenklorid-.metylalkohol, 98:2 (v/v)]

<l>.H NMR (CDCI3) 8: 7.53 ppm (IH,d), 7.04(lH,d), 5.94(7H,m), 5.73(lH,m), 5.43 -5.20 (I7H,m) , 5.02(lH,m), 4.88(2H,m),

4.53(15H,m), 4.37(lH,m). 4.23(IK,dd) , 4.18CH.O. 4.12UH.C), 3.95 (lH.dd) . 3.86(lH,c). 3.73CH,dd), 3.67viH!m), 3.59(2H,m), 3.44(3H,m), 3.32(2H,q), 2.55(4H,m), 2.45(2H,t), 2.02(4H.m), 1.78(2H,m), 1.68-1.20(mH), 0.87(15H,m).

Analog B42 5

Rf: 0,6 2 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14.05 min.

<X>H NMR (CD30D:CDC13, 2:1, v/v) 5: 5.40-5.12 ppm (mH), 4.18-3.70(mH), 3.45-3.19(mH), 2.60(mH), 2.25(2H,t), 2.00(mH), 1.80(mH), 1.65-1.15(mH), 0.85(15H,m).

Analog B425 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,75 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<*->H NMR (CDCI3) 8: 7.45 ppm (lH,d), 6.84(lH,d), 5.95(7H,m), 5.80(lH,m), 5.46-5.22(mH), 5.05(lH,m), 4.85(mH). 4.67-4.48(mH), 4.30(mH), 3.95-3.80(mH), 3.75(2H,d), 3.65(lH,m), 3.25(mH), 3.15(2H,t), 2.65(mH), 2.60(lH,d), 2.55(lH,d), 2.25(2H,t). 2.00(mH), 1.80(mH). 1.65-1.20(mH), 0.85(15H,m).

Analog B426

Rf:0,44 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14,63 min.

Analog B426 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,50 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<X>H NMR (CDC13) 5: 7.38 ppm CH,d) , 7.11(lH,d). 5.95{7H.m). 5.72(lH,m), 5.65(mK), 5.42-5.18(mH), 5.05(mH), 4.95(lH.t), 4.85(lH.d). 4.68-4.25(mH), 3.95(lH,m), 3.79(mH), 3.55-3.30(mH), 2.68(2H,t), 2.58(2H,t), 2.45(mH), 2.25(2H,c), 2.00(mH), 1.69-1.45(mH), 1.30-1.15(mH), 0.85(15H,m).

Analog B427

:0,62 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14.17 min.

H NMR (CDC13:CD3OD, 3:1, v/v) 5: 5.37 ppm (lH,m), 5.27(lH,m), 5.17(lH,m), 4.78(lH,m), 4.53(1H,d,J=6.3 Hz), 4.04-3.20(mH), 2.43(4H,m), 2.15(2hYo, 1. 95-1. 83 (4H, m) , 1.70-0 . 95 (mH) , 0.75(15H,t).

<31>P NMR (CDCI3 :CD30D, 3:1, v/v) 8: 1.24 ppm, -1.40.

Analog B442

<*->H NMR (CDCI3 :CD30D, 2:1, v/v) 8: 5.20 ppm (mH) , 5.13 (mH), 4.95(mH), 4.75(mH), 3.85-3.28(mH), 2.68(mH), 2.40(mH), 2.10(2H,t) S1.80(mH) . 1. 65-1. 00 (mH) , 0.70(15H,m).

Analog B442 (fullstendig beskyttet)

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.60-7.50 ppm (2H,2d), 5.95(7H,m), 4.88(lH,m), 4.70-4.45(mH), 4.35(2H,m), 4.15(mH), 3.85-

3.45(mH), 2.88(mH), 2.65(2H.c), 2.25(2H,t), 2.00(mH), 1.78-1.23(mH), 0.85(15H,m).

Analog B451

Rf:0,45 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann,

125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):12.37 min.

lK NMR (CDCI3:CD30D. 3:1. v/v) 8: 5.35 ppm (1H,dd,J=3.4,6.6 Hz), 5.17(lH,m), 5.09(lH,m), 4.92(1H,t,J=10.3 Hz), 4.90(lH,m), 4.56(1H,J=8.4 Hz). 4.00(2H,m), 3.80-3.20(mH), 3.18(3H,s), 3.17(1H,C), 2.68(4H,m),

2.36(2H,ABX,J=4.5,8.4,16.1 Hz), 2.10(2H,t), 1.80(4H,m), 1.55-1.05(mH), 0.67 (15H,m) .*

<31>P NMR (CDCI3 :CD3OD, 3:1, v/v) 8: -0.51 ppm, -1.41.

Analog B451 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,19 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)

<X>H NMR (CDCI3) 8: 7.74 ppm (lH,d), 7.54(lH.d), 5.92(6H,m), 5.85(lH,m), 5.44-5.20(16H,m), 4.86(2H,m), 4.70(lH,t), 4.63(9H,m), 4.50(4H.m), 4.38(lH,q), 4.17(lH,m), 4.08(lH,m), 3.82-3.46(8.H.m) , 3.38(3H,s). 2 . 96-2 .73 (4H,m) , 2.62(2H,m), 2.26(2H,m), 2.00(4H,m), 1.80-1.18(mH), 0.85(15H,m).

Analog B452

Rf: 0,4 4 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT (HPLC) : 10 . 30 mm.

<l>H NMR (CDClj:CD30D, 3:1. v/v) 5: 5.34 ppm (lH.m), 5.18(lH,m), 4.95tlH.t,J=9.6 Hz), 4.93(lH,m), 4.50(1H,d,J=8.3 Hz), 4.05(lH,mi, 3.92-3.60(mH). 3.50-3.20(mH), 2.65(2H,m), 2.40-2.10(mH), 1.85(4H,m), 1.55-1.00(mH), 0.70(15H,m).

<13>C NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 173.52 ppm, 172.22, 170.24, 164.80, 164.62, 130.71, 127.87, 100.08, 94.05. 74.49, 73.09, 72.26, 71.68, 69.72, 68.01, 67.49, 66.94, 59.99, 57.58, 56.96, 55.94, 53.83, 51.80, 42.15, 38.61, 36.90, 34.07,

33.43, 32.03, 31.49. 31.40, 29.25, 29.20. 28.93. 28.83.

28.58, 28.37, 28.27, 26.81, 26.12, 25.20, 24.70, 24.54,

23.68, 22.24, 21.37, 13.52.

<31>P NMR (CDCI3 : CD3OD, 3:1, v/v) 8: 1.24 ppm, -1.65.

Analog B452 (fullstendig beskyttet) Rf:0,47 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5, (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 8: 7.48 ppm (lH,d), 7.03(lH,d), 5.95(7H,m), 5.79(lH,m), 5.45-5.18(mH), 5.03(lH,m), 4.85(mH), 4.75-4.50(mH), 4.30(mH), 4.25(lH,m), 3.91(lH,dd), 3.78-3.60(mH), 3.55 (mH). 3-.<30 (2H,d) , 2 . 90-2 . 50 (mH) , 2.25(2H.t). 2.00(mH), 1.80-1.15(mH), 0.85(15H,m).

Analog B459

Rf:0,49 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC)13,37-14,13 min. (multiple topper)

<l>H NMR (CDCI3:CD30D, 3:1, v/v) 6: 5.42 ppm(1H,br.s), 5.25(lH,m), 5.17(lH,m), 4.75 (1H,m) , 4.64 (1H,d,J = 7.7 Hz), 4.53(lH,m), 4.00(lH,m), 3.90 - 3.20 (mH) , 2.80(4H,m), 2.15(2H,c), 1.90-1.80(4H,m), 1.70-1.00(mH), 0.75(15H,br.s).

<31>P NMR (CDC13:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 1.39 ppm, -1.51.

Analog B459 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,43 [metylenklorid, 95:5 (v/v)]

<*>H NMR {CDCI3) 8: 7.68-7.50 ppm (2H,m), 5.95(7H,m), 5.85(lH,m), 5.42-5.23(12H,m), 4.93(lH,m), 4.82(lH,m), 4.76(lH,m), 4.66-4.55(mH), 4.31(lH,m), 4.26(lH,q), 4.12(2H,m), 3.83-3.42(mH), 2.95-2.84(4H,m), 2.26(2H,t), 2.00(4H,m), 1.80-1.18(mH), 0.85(15H,m).

Analog B460

Rf:0,63 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14.52 min.

lK NMR (CDCl3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 5.34 ppm (lH,m), 5.19(lH,m), 5.11(lH,m), 4.68(lH.m), 4.41(lH,d,J=8.1 Hz), 3.90(lH.m), 3.81-3.12(mH\, 2.70(4H,q), 2.10(2H.t), 1.80(4H,m), 1.58-0.90(mH), 0.65(15H,t).

<31>P NMR (CDCI3:CD30D, 3:1, v/v) 8: 1.38 ppm, -1.30.

Analog B460 (fullstendig beskyttet)

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.68 ppm (lH,d), 7.53(lH,d), 5.95(7H,m), 5.S3(lH,m), 5.45-5.21(mH), 4.95(lH,m), 4.82(mH). 4.12(2H.q).

4.55(mK). 4.28(mK), 4. 10 (.Tri!. 3.80(iH,d), 3 . "0-3 . 55 (mH) , 3.51-3.45(mH), 2.95-2.81(mH). 2.25(2H.c), 2.00(mH). 1.75(mK). 1.45(mH), 1.25(mH), 0.85(15H,m).

Analog B465

Rf:0,8 3 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC) :13 .53 min.

<*>H NMR (CDCi3 :CD30D, 2:1, v/v) 5: 5.34 ppm (1H, dd, J=3 . 3 , 6 . 7 Hz), 5.19(lH,m), 5.11(lH,m), 4.69(lH,m), 4.54(1H,d,J=7.9 Hz), 3.92(lH,m), 3.83-3.24(mH), 2.70(4H,m), 2.10(2H,t), 1.80(4H,m), 1.60-0.95(mH), 0.65(15H,m).

31P NMR (CDCl3 :CD30D, 2:1, v/v) 6: 1.32 ppm, -1.40.

Analog B465 (fullstendig beskyttet)

^H NMR (CDC13) 5:7.55ppm (2H,m), 5.93(7H,m), 5.80(lH,m), 5.50-5.25(mH), 4.90(2H,m), 4.75-4.50(mH), 4.30(2H.m). 4.13(lH,m), 3.85-3.40(mH), 2.95-2.80(4H,m), 2.26(2H.t). 2.00(4H,m), 1.80-0.80(mH).

Analog B466

Rf: 0,51 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):14,45 min.

<*>H NMR (CDCl3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 5.36 ppm (1H,dd.J=3.2,6.7 Hz), 5.18(lH,m), 5.09(lH,m). 4.65(lH,m), 4.48(1H,d,J=8.3 Hz), 3.90-3.24(mH), 3.17(3H,s), 2.70(4H,q), 2.10(2H.t), 1,8-(4H,m), 1.55-1.00(mH), 0.65(15H,t).

31? NMR (CDC13:CD30D, 3:1, v/v) 8: -0.67 ppm, -1.50.

Analog B466 (fullstendig beskyttet)

<1>H NMR (CDCI3) 8: 7.67 ppm CH,d), 7.55(lH,d), 6.03-5.38;6H,m), 5.84(lH,m), 5.46-5.21 (mH) , 4.92(1H.m) , 4.88-4.50(mH), 4.32(lH,q), 4.10(lH,m), 3.88 - 3.43(mH) , 3.37(3H,s), 3.0-2.79(2H,m), 2.30(2H,C), 2.10-1.25(mH), 0.85(15H,m).

Analog B477

Rf:0,53 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v/)]

RT(HPLC):13.48 min

<!>H NMR (CDCI.3 :CD3OD, 3:1, v/v) 8: 5.36 ppm (lH, dd, J = 3 . 3 , 6 . 8 Hz), 5.18(lH,m), 5.10(lH,m), 4.70(lH,m), 4.57(1H,d,J=8.2 Hz), 3.90-3.25(mH), 3.20(3H,s), 2.73(4H,m), 2.10(2H,t), 1.80(4H,m), 1.65-0.90(mH), 0.70(15H,t).

<31>P NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: -0.64 ppm, -1.44.

Analog B477 (fullstendig beskyttet)

Rf:0,41 [metylenklorid:metylalkohol, 95:5 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.56 ppm (2H,m), 5.93(6H,m), 5.82(lH,m), 5.44-5.24(12H,m), 4.90(lH,m). 4.70(lH,t), 4.66-4.53(mH), 4.32(lH,q)."4.12(lH.m), 3.85-3.42(mH), 3.38(3H,s), 2.93-2.82(mH). 2.26(2H,t), 2.00(4H,m), 1.80-1.20(mH), 0.85(15H,m).

Analog B479

Rf:0,97 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

Analog B510

Rf:0,47 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):6.37 min.

<:>H NMR (CDCI3 :CD3OD, 3:1, v/v) 5: 5.36 ppm (lH.br.s). 4.55(lH,d,J=8.2 Hz), 4.00-3.20(mH), 3.23(3H,s), 2.40(4H,br.s), 1.60-0.70(mH).

<13>C NMR (CDCl3:CD3OD, 3:1, v/v) 5: 205.96 ppm, 205.80, 167.85, 167.19, 100.14, 94.74, 80.13, 78.70, 74.03, 73.61, 73.18, 70.50, 69.56, 69.16, 68.85, 67.08, 58.21, 54.45, 52.20, 52.13, 42.89, 42.76, 37 '6, 37.23, 36.62, 36.36, 31.36, 30.42, 29.21, 29.09, 29'f01, 28.95, 28.78, 28.57, 28.51, 25.20, 25.10, 22.79, 22.09, 13.25.

<31>P NMR (CDCI3:CD30D, 3:1, v/v) 8: -0.72 ppm, -1.49.

Analog B464

Rf:0,51 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):17.62 min.

1-H NMR (CDCI3 :CD3OD, 3:1, v/v) 5: 5.29 ppm (lH,m), 5.18(lH,m), 5.09(lH,m), 4.70(lH,m), 4.44(mH), 3.88(2H,m), 3.72-3.12(mH), 3.16(3H,s), 2.36(4H,m), 2.07(2H,t), 1.87-1.76(4H,m), 1.60-0.92(mH), 0.65(15H,m).

<13>c NMR (CDCI3 :CD30D, 3:1, v v) 0: 2Ub.U/ ppm, lUb . <•■'!, i /4.1b, 167.99, 167.15, 130.69, 127.32, 100.22, 94.98, 80.12, 78.86, 74.83, 74.82, 73.72, 72.84, 71.81, 70.70, 69.74, 69.17,

67.28, 58.38, 55.12, 54.21, 52.12, 43.08, 42.93, 42.78,

37.37, 36.65, 34.47, 34.19, 33.63, 32.14, 31.48, 31.35,

29.41, 29.25, 29.22, 29.14, 29.08, 29.05, 28.93, 28.91,

2S.37, 23.72, 28.52, 28.54, 26.78, 26.13, 25.32, 24.82, 24.63, 22.94, 22.88, 22.22, 13.47.

<3>lp NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 5: -0.629 ppm, -1.431.

Analog B587

Rf:0,62 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC) : 14 .80 min.

<l>H NMR (CDCI3 :CD30D, 3:1, v/v) 6: 5.26 ppm CH m) , 5.17(lH,m), 5.10(lH,m), 4.70(lH,m), 4.49(1H,d,J=8.10 Hz), 3.91-3.29(mH), 3.26(3H,s), 3.24-3.20(mH). 3.17(3H,s), 3.12(mH), 2.89(lH,t,J=9.30 Hz), 2.34(4H,m), 2.08(2H,t), 1.89-1.75(4H,m), 1.62-0.92 (mH). 0.64(15H,m).

<13>c NMR (CDCl3:CD3OD, 3:1, v/v) 6: 206.41 ppm, 205.56, 174.17, 167.80, 167.18, 130.69, 127.83, 99.93, 94.62, 80.18, 79.50, 78.92, 74.78, 73.84, 72.31, 71.83, 70.77, 69.84, 69.06,

68.27, 67.88, 66.93, 64.48, 61.86, 59.96, 58.49, 54.98. 52.53. 50.60. 43.15. 42.89. 37.30. 36.99. 34.44. 34.17. 33.64. 31.48, 31.40, 31.35, 29.34, 29.22, 29.13, 29.08, 28.93, 28.84, 28.70, 28.61, 28.54, 26.79, 26.14, 25.29, 24.81, 24.62, 22.92, 22.86, 22.22, 13.49.

<3>lp NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 5: -0.673 ppm, -1.509.

Analog B718

Rf:0,40 [kloroform:metyalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT (HPLC) : 13 . 65 min.

<l>H NMR (CDCI3 : CD3OD, 3:1 v/v) 6: 5.34 ppm (lH.br.s), 5.20(lH,m), 5.12(lH,m), 4.70(2H,m), 4.32(1H,d,J=8.0 Hz), 4.0-3.85(mH), 3.70-3.20(mH), 3.18(3H,s), 3.22-3.13(mH), 2.35(mH), 2.08(2H.t), 1.90(3H,s), 1.90-1.77(4H,m), 1.63-1.00(mH), 0.67(mH,t) .

<13>C NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1 v/v) 6: 206.35 ppm, 205.88, 174.23, 169.94, 168.25, 167.20, 130.80, 127.94, 100.45, 94.44, 80.48, 74.68, 74.38, 73.93, 71.89, 70.65, 69.70, 69.28, 69.20, 68.39, 67.02, 58.59, 54.85, 52.19, 43.23, 43.07, 37.31, 36.97, 34.50, 34.26, 33.74, 31.50, 31.45, 31.08, 29.43, 29.37, 29.32, 29.28, 29.20, 29.17, 29.14, 29.04, 29.01, 28.94, 28.84, 28.71, 28.64, 26.89, 26.25, 25.37, 24.89, 24.72, 23.03, 22.97, 22.33, 22.30, 20.43, 13.78, 11.98.

<31>P NMR (CDCI3: CD3OD, 3:1, v/v) 8: -0.63 ppm, -1.59.

Analog B725

Rf:0,58 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):17.58 min.

<1>H NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 6: 5.32 ppm (lH.br.s), 5.24(lH,m), 5.12(lH,m), 4.78(lH,m), 4.36(lH,d), 4.04-3.00(mH), 3.34(3H,s), 2.36(4H,m), 2.10(2H,t), 1.85(4H,m), 1.60-1.10(mH), 0.67(15H,t).

<13>C NMR (CDCI3:CD30D, 3:1, v/v) 5: 206.06 ppm, 205.94, 174.02, 167.82, 167.20, 130.97, 127.82, 101.11, 94.88, 81.24, 79.45, 78.93, 77.30, 73.59, 72.58, 71.53, 70.04, 69.82, 69.40, 69.01, 68.02, 64.72, 59.95, 55.31, 52.30, 49.00, 43.78, 48.57, 48.36, 48.14, 47.93, 47.72, 43.15, 43.07, 37.39, 36.57, 34.89, 34.21, 33.75, 31.54, 31.45, 31.42, 29.41, 29.27, 29.20, 29.15, 23.99, 28.88, 28.77, 28.70, 28.61, 26.87, 26.22, 25.37, 24.89, 24.74, 23.03, 22.96, 22.29, 22.26, 13.57.

<3>lp NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8:0.74 ppm, -1.27.

Analog B736

Rf:0,57 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC) :12 .57 min.

<l>H NKP. (CDCI3 : CD3OD, 3:1, v/v) 8: 5.20 ppm (lH,m), 5.10(lH,m), 4.70(lH,m), 4.53(lH,d,J=3.5 Hz), 4.40(1H,d,J=7.7 Hz), 3.90-3.20(mH), 3.18(3H,s), 2.34(4H,q). 2.10(2H,t), 1.85(4H.m), 1.70-0.90(mH), 0.65(15H,m).

<13>C NMR (CDCl3:CD30D, 3:1, v/v) 8: 206.00 ppm, 205.81, 174.05, 167.52, 167.01, 130.62, 127.71, 100.47, 97.33, 80.00, 79.66, 74.71, 73.69, 71.67, 70.67, 70.56, 69.64, 69.42, 69.24, 69.12, 67.84, 66.51, 65.00, 58.35, 58.34, 55.21, 52.02, 43.05, 42.88.^37.23, 36.60, 34.42, 34.10, 33.55, 31.39. 31.37, 31.30, 31.25. 29.26. 29.17, 29.12. 29.08, 29.03, 28.99, 28.95, 28.86, 28.84, 28.81, 28.74, 28.63, 28.55, 28.45, 26.70, 26.04, 25.23, 24.74, 22.88,22.80, 22.13, 22.10, 13 .38 .

<31>P NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 0.99 ppm, -0.48.

Analog B737

Rf:0,71 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC) : 12 .45 min.

<:>H NMR. (CDC13 :CD30D, 3:1, v/v) 8: 5.31 ppm (lH,m), 5.29(lH,m), 5.10(lH,mi, 4.71(lH,m), 4.46(1H,d,J = 8 . 0 Hz), 4.20(lH,t), 4.07(IK,t,J=4.14 Hz), 3.98-3.81(mH), 3.72-3.27(mH), 3.17(3H,s), 3.12(mH), 2.33(4H,m), 2.07(2H,c), 1.90-1.78(mH), 1.60-0.98(mH), 0.65(15H,m).

<13>C NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 206.1 ppm, 179.7, 174.1, 168.0, 167.2, 130.7, 127.8, 100.3, 94.2, 90.3, 84.0, 80.1, 74.8, 73.8, 71.8, 70.6, 70.4, 70.1, 69.5, 69.1, 68.1, 66.9, 66.7, 64.7, 58.2, 55.1, 51.9, 43.0. 42.9, 37.3, 36.7, 34.4, 34.2, 33.6, 32.5, 31.5, 31.4, 31.3, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.9, 28.8, 28.7, 28.6, 28.5, 28.4, 26.8, 26.1, 25.3, 24.8, 24.6, 22.9, 22.2, 13.5.

<31>P NMR (CDCI3 :CD3<0D, 3:1, v/v) 8: -0.635 ppm, -1.634.

<19>F NMR (CDCI3:CD3OD, 3:1, v/v) 8: 1.62 ppm.

Analog B7 63

R^:0,91 [kloroform:metylalkohol:eddiksyre:vann, 125:75:10:20 (v/v/v/v)]

RT(HPLC):13,70 \ttin.

Forbindelse 92

Rf:0,26 [heksaner:etylacetat, 4:1 (v/v)]

<X>H NMR (CDC13)' 8: 5.95 ppm (lH,m), 5 . 32 (1H, d, J=17 . 2 Hz), 5.28(lH,d,J=10.4 Hz), 4.80(mH), 4.58(2H,d), 4.50(lH,d,J=7.40 Hz), 4.08(lH,q), 3.78-3.49(mH), 3.30-3.13(mH), 2.30 ( IHqh-s), 2.06(3H,s), 1.80(mH). 1.55(mK), l.25(mH), 0.89(9H,s), 0.83(3H,C), 0.11(6H.s).

Forbindelse 93

<l>H NMR (CDC13) 5: 5.92 ppm (lH,m). 5.36(1H.dd,J=l.4, 17.3 Hz), 5.28 (lH.dd, J = 1.2, 10.5 Hz), -4.88(lH,m), 4.62(2H,m), 4.4S(lH,d,J=7.6 Hz), 3.87-3.67(mH), 3.50(3H,s), 3.22-3.13(3H,m), 3.07(1H,dd,J=8.3, 9.7 Hz), 1.90(3H,m), 1.60(2H,m), 1.23(mH), 0.90(9H,s), 0.85(3H,t), 0.12(6H,2s).

Forbindelse 94

Rf:0,69 [heksaner:etylacetat, 2:1 (v/v)]

<*>H NMR (CDCI3) 5: 5.94(lH,m), 5 . 35 (lH, d, J=15 . 5 Hz), 5.25(lH, d,J=9.3 Hz), 4.89(lH,m), 4.62(2H,m), 4.54(1H,d,J=7 . 4 Hz), 4 . 46-4.28(lH,ddd,J=7.7,10.1,50.0 Hz), 3.90-3.68 (mH), 3.43(lH,m), 3.33-3.19(2H,m), 1.88(2H,m), 1.77(lH,t), 1.26(mH. br.s), 0.88(9H,s), 0.86(3H,t), 0.15(6H,2s).

Forbindelse 95

Rf:0,06 [heksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]

lK NMR (CDCI3) 8: 5.93 ppm (4H,m), 5.27(8H,m), 4.92(lH,d,J=3.5 Hz), 4.78(lH,m), 4.70-4.55(8H,m), 4.21(lH.m). 3.88-3.60(mH), 3.59(lH,dd,J=4.6.13.0 Hz), 3.30(1H,dd,J=3.5,10.1 Hz), 1.83(2H,m), 1.54(2H.m). 1.26(mH), 0.85(3H,m).

Forbindelse 96

Rfa:0,52 theksaner:etylacetat, 1:1 (v/v)]

Rf^:0,30 [heksaher:etylacetat, 1:1 (v/v)]

<l>H NMR (CDCI3) 5: 8.69 ppm (lH,s), 6 . 33 (lHa, d, J=3 . 4 Hz), 5.92(2H,m), 5.56 (lHp,d,J=8.5 Hz), 5.30(6H,m), 5.02(lH,m). 4.53(4H,m), 4.31(lH,m), 4.22(2H.m), 3.82(3H.m). 3.71(lH,c,J=8.5 Hz), 3.57(3Ha,s), 3.56(3Hp,s), 3.49(2H.m),

3.25(3H,n), 2.10(2H,m), 2.04(4H(m), 1.88(2H,m)( 1.65(2.4, m) , 1.56(lH,s), 1.25(mH). 0.86(6K.m).

Forbindelse 97

<l>H NMR {CDCI3) 5: 8.74 ppm (1H,S),

6.40(lH;a.d),5.59(lHp,d,J=8.5 Hz), 5.40-5.23(6H,m), 5.0(lH,m), 4.57(4H,m), 4.50(lH4a.q), 4.36(lH4p,q), 3.80(3H,m), 3.63(3H,m), 3.42(2H,m), 3.30(1H,t,J=9.3Hz), 2.28(2H,c), 2.08-1.82(mH), 1.70-1.20(mH), 0.83(9H,m).

Forbindelse Al

<*>H NMR (CDCI3) 5: 4.96 ppm (lHenone-H, s) , 4.19 (2H,q), 3.74(2H,s), 3.43(2H,s), 2.52(2H,t), 2 .17 (2<H>en0ne form. t) , 1.68-1.51(2H,m), 1.37-1.18(9H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse A2

<l>H NMR (CDCI3) 8: 4.16 ppm (2H,q), 3.98(lH,m), 2.95(lH,d). 2.52(1H,dd,J=2.9,5.8 Ks), 2.49(2H,dd), 1.55-1.51(2H,m), 1.47-1.37(2H,m), 1.30-1.11(lOH.m), 0.87(3H,t).

Forbindelse A3

MP: 105.6-106.2°C

<l>H NMR [CDCI3) 8: 3.86-3.78 ppm (lH,m), 2.96-2.86(2H,m), 2.33, 2.16(2K,ABX,J=2.4,9.5,15.6 Hz). 2.03-1.94(4H,br.d), 1.83-1.74(4H.br.d), 1.66-1.60(2H,br.d), 1.54-1.10(22H,m), 0.86(3H.C).

Forbindelse h\

H NMR (CDCI3) 8: 7.92 ppm (2H, dd, J=l. 1, 7 .7 Hz), 7.63(lH,td,Jt=7.6 Hz,Jd=1.2 Hz), 7.50(2H," J=7.7 Hz), 5.49, 5.38(2H,A3,J=16.5 Hz). 4.14(lH,m), 3.50(1H,br.s), 2.69-2.58(2H,ABX,J=2.9.9.4.15.1 Hz), 1.65-1.45(2H,m), 1.4-1.2(10H,m) , 0.88 (3H,c) .

Forbindelse A5

<*>H NMR (COCi3) 6: 7.91 ppm ( 2H, dd, J= 1. 2 , 6 . 4 Hz), 7.61(1H,Cd,Jt = 7.6 Hz,Jd=1.2 Hz), 7.50 (2H,c,J = 7.8 Hz), 5.99-5.89(lH,m), 5.42,5.38(2H,AB,J=15.1 Hz), 5.27(2H,d), 5.24(lH,m), 4.6(2H,dd), 2.33,2.76(2H,ABX,J=5.37,7.56,21.7 Hz), 1.75-1.65(2H,m), 1.41-1.26(10H,m), 0.87(3H,C).

Forbindelse A6

*H NMR (CDCl 3 : CD3OD, 15:1) 6: 5.90 ppm (lH,m), 5.32(2H,dd), 5.19-5.01 (lH,m) , 4.57{2H,dt), 2.61-2.56(2H,ABX,J=5.37,7.57,19.7 Hz), 1.65-1.55(2H.m), 1.31-1.21(10H,m), 0.82(3H,t).

Forbindelse A7

<l>H NMR (CDCl 3) 6: 4.90 ppm (lHenone.H, s ) , 3.74(3H,s), 3.45(2H,s), 2.52(2H,t), 2 .18 (2Henone Corm,t), 1.62-1.52(2H,m), 1.35-1.20(8H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse A8

lH NMR 'CDCl 2) 8: 4.08 ppm (lH,m), 3.71(3H,s), 2 . 88 (1H, d, J=3 . 8 Hz), 2.49(lH,dd,J=3.1,16.4 Hz), 2.41(1H,dd,J=9.1,16.5 Hz), 1.58-1.47(2H,m), 1.44-1.38(2H,m), 1.37-1.23(10H,m), 0.87 (3H,t) .

Forbindelse A9

lH NMR (CDCI3) 6: 3.91-3.75 ppm (3H,m), 2 . 62-2 . 38 (2H0h, m) , 1.75-1.61(2H,m), 1.55-1.36(2H,m), 1.35-1.23(10H,m), 0.87(3H,t).

Forbindelse A10

lH NMR (CDCI3) 8: 7.86 ppm (2H,d,J=8.3 Hz). 7.34(2H,d,J=8.1 Hz), 4.27(lH,m). 4.13(lH,m), 3.72(lH,m), 2.44(3H,s), 1.89-1.81(lH,m), 1.68-1.62(2H,m), 1.39-1.25(12H,m), 0.87(3H,t).

13C NMR (CDCI3) 8: 144.44 ppm, 132.59, 129.49. 127.49. 67.60, 37.14, 35.86, 31.39, 29.11, 28.83, 25.11, 22.25, 21.26, 13.70.

Forbindelse All

<*>H NMR (CDCI3) 5:.3.21 ppm (2H.C), 2 . 20-2 . 10 ( 4H, m) , 1.93(2H,m), 1.58(2H,m), 1.46?2H,m), 1.40-1.22(6H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse A12

<X>H NMR (CDCI3) 5: 7.43 ppm (2H,d), 7 . 3 3-7 . 20 (10H, m) , 5.84(2H,d), 3.79(3H,s), 3.74(1H,br.s), 3.38(lH,m), 3.22(lH,m), 2.98 (lH,d,J=2.9 Hz) , 1.72(lH,m), 1.56-1.24(10H,m), 0.87(3H,C).

Forbindelse A13

<*>H NMR (CDCI3) 8: 7.44 ppm (2H,d), 7 . 33-7 .19 (10H, m) , 6.82(2H,d), 3.79(3H,s). 3.40(2H,m), 3.28(lH,m), 3.15(2H,t), 2.11(4H,q), 1.75(2H,q), 1.55-1.25(29H.m), 0.88(6H,t).

Forbindelse A14

<:>H NMR (CDCI3) 8: 3.80 ppm (2H,m), 3.52(2H,m), 3.42(lH,m), 2.72(lH,m), 2.17(4H,m), 1.80-1.25(26H,m), 0.88(6H,t).

Forbindelse A16

l-H NMR (CDCI3) 8: 3.68 ppm . (lH.m) . 3.48(2H,t), 2.52(2H.m), 2.14(4H,m), 1.68-1.26(24H,m), 0.87(6H.t).

Forbindelse Al7

<!>H NMR (CDCI3) 8: 5.33 ppm (2H,m), 3.68(lH.m). 3.52(2H,m), 2.56(2H,m), 2.02(2H.m), 1.98-1.27(27H,m), 0.88(6H,t).

Forbindelse Ål8

<X>H NMR (CDCI3) 8: 7.80 ppm (2H,d). 7.34(2H,d). 4.05(2H.C). 2.51(2H,m), 2.45(3H,s). 2.06(2H.m). 1.41(2H,m), 1.27(6H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse A19

lK NMR (CDCI3) 8: 7.84 ppm (2H,m), 7.72!2H/m). 3.83(2H,t), 2.56(2H,m), 2.06(2H.m), 1.34(2H,m), 1.20(6H,m), 0.84(3H,t).

Forbindelse A20

H NMR (CDCI3) 8: 7.82 ppm (2H,m), 7.71(2H,m), 5.44(iH,m). 5.37(lH.m), 3.72(2H,t), 2.44(2H,q), 1.95(2H,m), 1.13(8H,m), 3.83 (3H,c) .

Forbindelse A21

<!>h NMR (CDCI3) 8: 5.48 ppm (lH,m), 5.34(lH,m), 2.71(2H,t), 2.18(2H,q). 2.03(2H,m), 1.27(8H,m), 0.87(3H.t).

Forbindelse A22

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.91 ppm (2H,d), 7.6K1H. t,J = 7.3 Hz), 7.56(2H,t), 5.50(lH,m), 5.35(2H,s), 5.30(lH.m), 5.15(lH,t), 4.78(lH,t), 3.17(2H,m), 2.74(2H.t). 2.24(2H,t). 2.01(2H,q), 1.58(2H.m), 1.57(2H,d). 1.26(16H,m), 0.87(6H,t).

Forbindelse A23

<l>H NMR (CD3OD) 8: 6.85 ppm (lH,m), 5.45(lH,m), 5.32(lH,m). 5.06(2H,m), 4.92(lH,d). 3.15-3.00(mH), 2.45(2H.t>, 2.32(lH,d), 2.20(mH), 2.03(mH), 1.59(mH), 1.28(mH), 0.85(6H,m).

Forbindelse A24

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.90 ppm (2H.dK 7.61(lH,t), 7.49(2H,t), 5.34(2H.s). 5.30(lH.m). 2.74(2H,m), 2.3K2H.U, 1.69-1.57(4H,m). 1.37-1.20(28H,m), 0.88(6H,t).

Forbindelse A25

H NMR (CDCI3) 8: 5.21 ppm (lH.m). 2.62(2H(m), 2.29(2H.t). 1.61(4H,m), 1.36-1.18(26H,m). 0.89(6H.t).

Forbindelse A26

<l>H NMR (CDCI3) 8: 3.76 ppm (3H,s). 2.32(2H.t). 1.56(2H.m). 1.40-1.35(mH), 1.30-1.22(mH), 0.88(3H,t).

Forbindelse A27

<X>H NMR (CDCl 3) 8: 5.65 ppm (lH.s), 3.67(3H,s), 2.6K2H.O. 1.88(3H,s), 1.50-1.40(mK), 1.35-1.20(mH), 0.88(3H.t).

Forbindelse A28

<l>H NMR (CDC13) 8: 5.66 ppm (lH,s), 3.68(3H,S), 2.15(2H,C), 1 . 50-1.40(mH) , 1.34-1.20(mH) , 0.88(3H,t).

Forbindelse A29

<*>H NMR (CDCI3) 8: 5.40 ppm (lH,t,J=7.1 Hz), 4.15(2H,t), _2.00(2H,t), 1.66(3H,s), 1. 40-1. 20 (18H, m) , 0.88(3H,t).

Forbindelse A30

<1>H NMR (CD3OD) 8: 5.64 ppm (lH.s), 4.91 (lH.br.s), 2.15(2H,t), 2.1K3H.S), 1.48(4H,m), 1.29(14H,m), 0.89(3H,t).

Forbindelse A31

Rf: 0,76 [heksaner:etylacetat, 3:2 (v/v)]

lU NMR (CDCl 3) 8: 6.02 ppm (lH.s). 2.19(2H,m), 2.13(3H,s), 1.48(2H,m), 1.26(16H.m). 0.88(3H.t).

Forbindelse Bl

<X>H NMR (CDCI3) 8: 3.30 ppm (2H,m), 2.26(2H,m), 2.13(lH,m), 1.95(lH,m), 1.47(mH), 1.28(mH), 0.88(3H,t).

Forbindelse B2

<l>H NMR (CDCI3) 8: 2.50 ppm (2H,t), 2.33(2H,m), 2.13(2H,m), 1.83(2H,m), l.'4^(2H,m), 1. 30-1. 25 (6H, m) , 0.89(3H,t).

Forbindelse B3

<l>H NMR (CDCI3) 8: 2.49 ppm (2H,t). 2.24(2H,m), 2.13(2H,m), 1.80(2H,m), 1.45(2H.m), 1.37-1.26(6H,m). 0.88(3H,t).

Forbindelse B4

<l>H NMR (CDCI3) 8: 5.42 ppm CH,m), 5.32(lH,m). 2.37(2H,c), 2.10(2H,m), 2.01(2K,m), 1.70(2H,m), 1.28(8H,m), 0.89I3H,t).

Forbindelse B5

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.90 ppm (2H,d), 7.61(lH,t), 7.49(2H,m), 5.38(lH,m), 5'.30(2H,m), 2.75(2H,m), 2.31 (2H.m) , 2.06(2H,m), i.99(2H,m), 1.68(2H,m), 1.27(mH), 0.88(6H,t).

Forbindelse B6

<*>H NMR (CDCI3) 8: 5.38 ppm (lH,m), 5.21(lH,m), 2.61(2H,m), _2.29(2H,t). 2.05(2H,m), 1.99(2H,m), 1.67(2H,m), 1.62(2H.m), 1.26(15H.m) , 0.87(6H,c).

Forbindelse Cl

<X>H NMR (CDCI3) 8: 4.19 ppm (2H,q), 3.43(2H,s), 2.52{2H,m), l,60(3H,m), 1.29(18H,m), 0.87(3H,t).

Forbindelse C2

Rf:0,35 [heksaner:etylacetat, 4:i(v/v)]

<L>H NMR (CDCI3) 8: 4.16 ppm (2H,q), 3.97(lH,m),

2.46(lH.dd,J=3. 2,16.4 Hz), 2.38(1H,dd,J=9.0,16.4 Hz) , 1.54-1.10(23H,m), 0.86(3H,c).

Forbindelse C3

<l>H NMR (CDCI3) 8: 3.84 ppm (lH,m), 2.96(2H,m), 2.36(lH.dd,J=2.7,15.9 Hz), 2.17(1H,dd.J=9.3.15.6 Hz), 2.02(4H,m), l,7^8(4H,m), 1.66(2H,m). 1.41(mH), 1.25(mH), 0.87(3H.t).

Forbindelse C4

<l>H NMR (CDCI3) 8: 7.93 ppm (2H,d), 7 . 63 (1H, t, J=7 . 3 Hz), 7.50(2H,t), 5.43(2H,q), 4.14(lH,m), 2.70(lH,dd,J=2.9,14.9

Hz), 2.53(lH,dd,J=9.3,15.1 Hz), 1.40-1.20(20H,m), 0.88(3H,

t) .

Forbindelse C5

<l>H NMR (CDCl 3 ) 5: 7.91 ppm (2H,2d), 7 . 59 (1H, t, J=5 . 5 Hz), 7.49(2H,t), 7.27(2H,d), 5.8€(2H,d), 5.33(2H,q), 4.51(2H,q), 3.94(lH,m), 3.79(3H,s), 2.79 (IK,dd,J = 7.0,15.2 Hz), 2.66(1H, dd,J=5.5,15.3 Hz), 1.62(2H,m), 1.40-1.26(1SH,m), 0.88(3H.t).

Forbindelse C6

<X>H NMR (CDCI3) 8: 6.87 ppm (4H,2d), 4.50(2H,s), 3.85(lH,p,J=5.9 Hz), 3.79(3H,s), 2.60-2.55(2H,m), 1.69-1.60(lH,m), 1.59-1.50(lH,m), 1.40-1.18(18H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse C7

<:>H NMR (CDCl 3) 8: 4.15 ppm (2H,q), 3.05(4H,m), 2.70(2H,m) 2.04(3H,m), 1.87(lH,m), 1.31-1.21(21H,m), 0.87(3H,t).

Forbindelse C8

<1>H NMR (CDCl 3) 8: 3.12 ppm (2H,s), 3.03(2H,t), 2.76(2H,t), 2.13-2.01(mH), 1.89(mH), 1.54(mH), 1.26(mH), 0.88(3H,t).

Forbindelse Dl

<L>H NMR (CDCI3) 8: 7.36 ppm (5H,s), 5.17(2H,s), 3.48(2H,s), 2.50(2H,t), 1.56(6H,s), 1.24(12H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse D2

<X>H NMR (CDCl3) 8 3.52 ppm (2H,s), 2.56(2H,t), 1.16(2H,m), 1.25(14H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse El

<!>H NMR (CDCI3P8: 3.74 ppm (3H,s), 3.22(2H,s), 2.62(2H.t), 1.59(2H,m). 1.35(2H,m), 1.25(14H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse E2

<L>H NMR (CDCI3) 8: 3.80 ppm (3H,s), 3.68(2H,m). 2.82(2H,m), 1.77(2H,m), 1.50-1.40(2H,m), 1.26(14H,m). 0.88(3H,c).

Forbindelse E3

<X>K NMR (CDCi3) 5: 3.34 pen (IK, d, J = I4.5 Hz), 3.49!lH.d,J=14 . 4 Hz), 3 . 08-3 . 03(1H,m) , 2.39-2.31(1H,m), 1.79-1.74(2H,m), 1.51-1.40(2H,m), 1.35-1.25(14K,mi, 0.33(3H,C).

Forbindelse E4

lH NMR (CDC13) 6: 3.30 ppm (3H,s), 3.63(2H,m), 2.34(2H,m), 1.77(2»,m). 1.50-1.40(2H,m), 1.25(14H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse E5

<*>H NMR (CDCI3) 5: 3.82-3.68 ppm (2H,m), 3.07-2.86(2H,m), 1.75(2H,m), 1.45(2H,m), 1.29(mH), 0.87(3H,t).

Forbindelse E6

<l>H NMR (CDCI3) 5: 3.96 ppm (2H,s), 3.82(3H,s), 3.24{2H,m), 1.86(2H,m), 1.44(mH), 1.25(mH), 0.87(3H,t).

Forbindelse E7

Rf: 0,33 [metylenklorid:metylalkohol, 19:1 (v/v)] l

<l>H NMR (CDCI3) 5: 4.01 ppm (2H,s), 3.27(2H,m), 1.87(2H,m), 1.47-1.26 (16H,m), 0.88(3H,C).

Forbindelse 61

<!>H NMR (CDCI3) 5: 4.19 ppm (2H,q), 3.45(2H,s), 2.67(2H,t), 2.20(2H,m), 2.12(2H,m), 1.76(2H,m), 1.45(2H,m), 1.35-1.25(9H,m), 0.88(3H,t).

Forbindelse G2

<l>H NMR (CDCl3) 8: 4.21 ppm (2H,m), 3.06(2H,m), 2.94(2H,q),

2.20-2.01(mH), 1.80-1.50(mH), 1.48-1.43(mH), 1.39-1.22(mH),

0 . 8 8 ( 3 H, t) .

EKSEMPEL 3

In vitroinhibering av LPS-indusert produksjon av

tumor nekrosefaktor (TNF) og IL-1B

Både bakterielt LPS og bakterielt lipid A utløser produksjon av tumor nekrosefaktor (TNF) og IL-1/3 i dyrkede humane monocytter (J. Immunol. 139:429, 1987). De lipid A-analoger som er beskrevet heri, vil inhibere slik LPS- og/eller lipid A-mediert induksjon som demonstrert ved følgende eksperimenter.

Monocytter ble isolert fra humant blod ved Percoll tett-hets-gradientsentrifugering, utplatet i ca. lx IO<6 >celler/brønn på en 48-brønners plate i RPMI 1640 medium (GIBCO, Grand Island, NY) inneholdende 10% humant serum (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO), og inkubert i 2 - 3 timer. Bakterielt LPS (dvs. fra E. coli 0111:B4; Sigma Chemicals, St. Louis, MO) i 10 ng/ml eller lipid A (Daiichi Chemicals, Tokyo, Japan) i 1,0 ng/ml i RPMI 1640 medium ble kombinert med

0,45 ml av RPMI 1640 medium inneholdende 1% humant serum og tilsatt til de dyrkede monocytter. I eksperimenter omfattende en lipid A-analog, ble analogen tilsatt umiddelbart før tilsetning av LPS eller lipid A i varierende konsentrasjoner (f .eks. mellom 0 og 100 /xM i en 50 /il alikvot) . Etter en inkuberingsperiode på 3 timer, ble en 0,1 ml alikvot av kul-tursupernatanten undersøkt på tilstedeværelse av TNF og IL-1)3. TNF og IL-1/3 ble bestemt ved anvendelse av ELISA-undersøkelsen fra R & D Systems (Minneapolis, MN) og produsentens instruksjoner, en hvilken som helst annen standard ELISA kit kan imidlertid anvendes, f.eks. den kit som er tilgjengelig fra Genzyme, Cambridge, MA. Eksperimentene ble gjennomført i triplikat.

Lipid A-analogene inhiberte LPS-indusert produksjon av TNF i humane monocytter på en konsentrasjonsavhengig måte. Av de testede lipid A-analoger ble lipid A analog B531- 35 funnet å være én av de mest effektive forbindelser til å inhibere LPS-indusert produksjon av *TNF, med en ED5Q på ca. 0,02 nM.

« J— ~ "I w t j . "l ~ — ~ ~ _ — — i, i _ a- A 4 ~1~ 4 "U ~ — t rtr> -i — J.. — i-

B452- 32. B427- 32. B459- 32. B460- 32. B464- 32. B464- 34, B464- 35. B465- 32, B466- 32, B477- 32, B477- 35, B718- 35. B587- 35. B737- 35. B736- 35. B725- 35, og B763- 35; disse forbindelser hadde en ED5Q på mellom 0,03 nM og 129 nM.

Lipid A-analogene inhiberte på lignende måte den LPS-induserte produksjon av IL-1/9 i humane monocytter. LPS ble tilsatt i 10 ng/ml, og lipid A-analoger ble tilsatt i en konsentrasjon på mellom 0 og 10 /zM. Inibering av IL-l/3-produksjon ble også funnet å være konsentrasjonsavhengig.

I et separat sett eksperimenter ble LPS-indusert TNF-produksjon inhibert med lipid A-analoger i makrofager isolert fra marsvin og mus. Hartley-White marsvin (Eim Hill Breeders, Ghelmsford, MA) og C57BL/6 mus (Jackson Labs, Bar Harbor, ME) makrofager ble isolert fra buken av primede dyr. Primingen ble gjennomført ved intraperitoneal injeksjon av 2 mg av Bacillus calmette guerin (BCG; RIBI Immunochemical Research, Inc., Hamilton, MT) ved en konsentrajson på 10 mg/ml i fysiologisk saltløsning for mus og 2 mg BCG ved en konsentrasjon på 2 mg/7 ml i mineralolje for marsvin. 3 dager etter injeksjon ble peritoneale makrofager isolert fra dyrenes buk ved standard teknikk. Cellene fikk hefte seg til dyrkingsplater i 2 - 3 timer, og ble så brakt i kontakt med RPMI 1640 medium inneholdende 10% føtalt kalveserum og LPS (i 10 ng/ml). For å teste inhiberingen ble lipid A-analoger (i en konsentrasjon på mellom 0 og 100 /iM) tilsatt til dyrkingsmediet rett før LPS-tilsetningen. Etter en 3 timers inkuberingsperiode ble marsvin- og mus TNF-innholdet undersøkt ved den cytolytiske bioundersøkelse beskrevet i Lymphokines 2:235, 1981. Lipid A-analogene B214- 32. B410- 32, B442- 32. B451- 32. B452- 32. B427-32, B459- 32. B46t)- 32. B464- 32. B464- 34. B464- 35. B465- 32. B466- 32. B477- 32, B477- 35 og B718- 35 (alle analoger testet til dato) inhiberte på lignende måte LPS-indusert TNF-produksjon i både marsvin og mus. Analogene B464- 34 og B531- 35 ga den mest effektive inhibering hos marsvin (ED50 = hhv. 0,04 nM og

0,66 nM); analogene B477- 32 og B531- 35 ga svært effektiv inhibering hos mus (ED5Q = hhv. 1,3 nM og 2,26 nM). Lipid A-analogene B214- 32. B410- 32. B442- 32. B451- 32. B452- 32. B427-32, B459- 32. B460- 32. B464- 32, B464- 34. B464- 35. B465- 32.

B466- 32. B477- 32. B477- 35 og B718- 35 (alle analoger testet til dato) inhiberte LPS-indusert TNF-produksjon. ED5Q-verdier målt i eksperimentene omfattende marsvinmakrofager lå i området fra ca. 0,04 nM til 18,5 nM. ED5Q-verdier målt i eksperimentene omfattende musmakrofager lå i området fra ca. 1,0 nM til 1,0 mM.

EKSEMPEL 4

In vivo-undersøkelser

BCG-primede mus (som beskrevet ovenfor) ble anvendt som et in vivo undersøkelsessystem for overvåking av de inhibi-tor i ske virkninger av lipid A-analoger på (1) LPS-indusert TNF-produksjon og (2) LPS-indusert letalitet som følger. 5 uker gamle hannmus C57BL/6 mus ( supra) ble primet ved intravenøs haleveneinjeksjon med 2 mg av BCG. 10 dager etter injeksjonen ble administrert E. coli LPS ( supra) i pyrogen-fri 5% glukoseløsning (Otsuka^Pharmaceuticals Inc., Tokyo, Japan) intravenøst gjennom halevenen hos de BCG-primede mus. LPS ble administrert i en konsentrasjon på 1-3 /ug/mus for både TNF-produksjon og mortalitetstudier. I eksperimenter omfattende en lipid A-analog ble analogen administrert som en komponent av den injiserte LPS-løsning i en konsentrasjon på mellom 10 og 300 /xg/mus. Plasma ble oppnådd 1 time etter LPS injeksjon, og TNF ble undersøkt ved ELISA-undersøkelsen beskrevet ovenfor. Mortalitet som skriver seg fra septisk sjokk ble regis-trert i 3 6 timer etter LPS injeksjon.

Lipid A-analoger undertrykket effektivt produksjonen av TNF etter administrasjon av LPS. Analogene B318- 32 og B531- 35 inhiberte effektivt TNF-produksjonen in vivo hos mus (ED5Q = hhv. 5,4 /ig/mus og 16,2 Mg/mus) . Analogene B214- 31.

B214- 32, B214- 33. B218- 32. B231- 32. B235- 32. B262- 32. B274- 32. B278- 32. B286- 32. B294- 32. B313- 32. B314- 32. B318- 32. B379- 32. B380- 32. B398- 32. B399- 32. B400- 32. B406- 32. B410- 32. B415- 32. B425- 32 og B426- 32 inhiberte også TNF-produksjonen.

I parallelle eksperimenter utført med marsvin var disse analogene også effektive inhibitorer for LPS-indusert TNF-produksjon in vivo (optimale ED -verdier = hhv. 7,5 /xg/mar-

svin og 5 /xg/marsvin målt for analog B214- 32) .

EKSEMPEL 5

Lipid A-analoger undertrykker

LPS-stimulert virusproduksjon

LPS stimulerer kraftig produksjonen av virus som finnes (i sin latente fase) i monocytter eller makrofager (se f.eks. Pomerantz et al, J. Exp. Med. 172:253, 1990; Mashihi et al., J. of Acquired Imm. Deficiency Syndromes 3:200, 1990). I tilfellet HIV-1 vil øket virusproduksjon sannsynligvis skrive seg fra aktivering av celler ved både en direkte aktivering med LPS og den LPS-medierte forhøyelse av TNF-a-innholdet. Cellulær aktivering befordrer øket binding av trans-virkende faktorer til HIV-1 NF-kappaB bindingssetet; dette fører i sin tur til øket viral transkripsjon og replikasjon (se f.eks. Duh et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 86:5974. 1989).

Lipid A-analogene beskrevet heri inhiberte en LPS-mediert økning i HIV-l-replikasjonen. Dette ble vist ved anvendelse av et in vitro modellsystem som overvåket HIV-1 lang terminal repeat (LTR) transkripsjon. Fordi aktivering av transkrip-sjonsenhanceren for HIV-1 lang terminal repeat (LTR) er blitt korrelert med virusreplikasjon (Colman et al., AIDS 2.: 185, 1988; Nabel og Baltimore, Nature 326:711, 1987), gir denne undersøkelse et pålitelig mål for virusreplikasjonen, og således for virusproduksjonen.

Plasmid HIV-1-LTR-CAT (Pomerantz et al., 1990, supra). et konstrukt som omfatter den HIV-1 LTR som er sammensmeltet, i rammen, med kloramfenikolacetyltransferasegenet (CAT), ble propagert i HB-101 celler (Gibco-BRL, Grand Island, NY). Plasmid ble renset fra vertcelleekstrakt ved anvendelse av en Qiagen affinitetskolonne og produsentens instruksjoner (Qiagen Inc., Chatsworth, CA) og transient transfektert over i U937 celler (ATCC Adgangsnr. CRL 1593; American Type Culture Col-lection; Rockville, MD) generelt ved fremgangsmåten til Pomerantz et al. (1990, supra) , bortsett fra at 80 /zM kloro-quine. (Promega Biotech, Madison, WI) var tilstede gjennom hele transfeksjonsprosedyren, og IO<6> U937 celler ble transfektert med enten 20 /ug av HIV-1-LTR-CAT eller 10 jig av pCAT (dvs. et kontrollplasmid som utelukkende bærer CAT-genet; Promega Biotech, Madison, WI). 24 timer post-transfeksjon ble cellene inkubert med eller uten en lipid A-analog (typisk ved en konsentrasjon på mellom 0,0 og 1,0 /xM. Etter 30 min. inkubasjon ble forbolmyristatacetat (PMA; Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) i 50 ng/ml og E. coli 0111:B4 LPS (beskrevet ovenfor) i 100 ng/ml tilsatt til cellene, og inkuberingen fikk gå videre i ytterligere 24 timer. Cellene ble så høstet og lyset som beskrevet i Ausubel et al. (Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, New York, 1987), ekstraktproteinkonsentrasjonen ble bestemt ved anvendelse av Micro BCA Protein Assay System til Pierce Chemical Co. (Rockford, IL), og CAT-aktiviteten undersøkt som acety-leringshastigheten for kloramfenikol (i DPM/min.) som beskrevet i Biotech Update 5( 2):28 (Novel Fluor Diffusion CAT Assay Facilitates Sample Processing and Analysis, DuPont Co. Publi-cation, Biotechnology Systems, Wilmington, DE), Lipid A-analog B398- 32 inhiberte den LPS-medierte induksjon av LTR-CAT-transkripsjon med en gjennomsnittlig IC5Q på 85 nM.

Lignende resultater ble oppnådd ved anvendelse av U937 cellelinjer stikktransfektert med et HIV-1 LTR-CAT fusjonsgen. Eksperimenter ble utført ved anvendelse av én slik stikktransfektert cellelinje, dvs. U938 cellelinjen til Latham et al.

(Cell. Immunol. 129:513, 1990). Cellene ble dyrket som beskrevet hos Latham et al. (1990, supra). og IO<6> celler ble behandlet med en lipid A-analog (ved en konsentrasjon på mellom 0,0 og 1,0 /xM) . 30 min. etter tilsetning av analogen, ble cellene behandlet med forbolmyristatacetat (ved en konsentrasjon på 0,33" ^ng/ml; beskrevet ovenfor) og E. coli 0111:B4 LPS (ved en konsentrasjon på 33 ng/ml; beskrevet ovenfor). Cellene ble dyrket i ytterligere 24 timer, høstet, og under-søkt på CAT-aktivitet som beskrevet ovenfor. Resultatene viser at B477 undertrykker den LPS-stimulerte aktivering av HIV LTR ved en IC5Q på 15 nM. Analogene B398- 32, B400- 32, B427- 32. B464- 32 og B466- 32. undertrykket på lignende måte LPS-stimulert HIV LTR aktivering med IC5Q-verdier i området fra 15 til 260 nM. B464- 32 inhiberte på lignende måte aktive-

ringen av HIV LTR mediert av LPS fra andre gram-negative bakterier (f.eks. Salmonella typhimurium).

NF-kappaB-regulert transkripsjonskontroll er ikke unik for HIV-1. Andre virale genomer, omfattende det for Simian Virus-40 (SV-40), omfatter et NF-kappaB bindingssete inne i et enhancerelement av sin tidlige promotor (Nakamura et al., J. Biol. Chem. 264:20189, 1989). Et plasmidkonstrukt inneholdende et SV40 promotor enhancer-CAT fusjonsgen, betegnet pCAT (Promega Biotech), ble transient transfektert over i U937 celler som beksrevet ovenfor. IO<6> celler/plate ble behandlet med en lipid A-analog (ved en konsentrasjon på 0,0, 0,1 eller 1,0 /iM) . 30 min. etter tilsetning av analogen, ble cellene behandlet med forbolmyristatacetat (ved en konsentrasjon på

50 ng/ml) og E. coli 0111:B4 LPS (ved en konsentrasjon på

100 ng/ml). Cellene ble dyrket i ytterligere 24 timer, høs-tet, og undersøkt på CAT aktivitet som beskrevet ovenfor. LPS-stimulert CAT-ekspresjon ble inhibert eller fullstendig blokkert av lipid A analog B398- 32. I et annet "Experiment 4", ble LPS-stimulert CAT-ekspresjon inhibert eller fullstendig blokkert av lipid A-analog B466- 32♦ Disse resultater viste at lipid A-analogene beskrevet heri effektivt undertrykket den LPS-medierte økning av SV-40-replikasjonen.

Lipid A-analogene beskrevet heri kan på lignende måte undertrykke aktiveringen av et hvilket som helst virus med en replikasjon som er direkte eller indirekte kontrollert av en NF-kappaB regulatorisk region. Slike virus omfatter uten begrensning cytomegalovirus eller Herpes virus (f.eks. Herpes simplex). Dessuten, fordi influensavirusaktivering (i monocytter og makrofager) blir forsterket av LPS (Nain et al., J. Immunol. 145:19*2<*>1, 1990) og en øket frigjøring av TNF-a er blitt implikert i observerte komplikasjoner av kombinerte influensa A og bakterieinfeksjoner, vil de foreliggende lipid A-analoger sannsynligvis også undertrykke influensavirusaktivering.

TERAPI

Lipid A-analogene som er beskrevet heri, er nyttige terapeutika for behandling eller forebyggelse av en hvilken som helst LPS-mediert forstyrrelse. Slike forstyrrelser omfatter uten begrensning: endotoxemi (eller sepsis syndrom) som skriver seg fra en gram bakteriemi (med sine ledsagende symptomer av feber, generalisert betennelse, utbredt intravas-kulær koagulasjon, hypotensjon, akutt nyresvikt, akutt ånde-nødssyndrom, hepatocellulær destruksjon, og/eller hjertesvikt) ; og LPS-mediert exacerbasjon av latente eller aktive virusinfeksjoner (f.eks. infeksjon med HIV-1, cytomegalovirus, herpes simplex virus og influensavirus).

Lipid A-analogen administreres typisk i en farmasøytisk akseptabel formulering, f.eks. løst i fysiologisk saltløsning eller fysiologisk saltløsning som kan omfatte 5% glukose (med den hensikt å øke analogløseligheten). Administrasjonen foregår på en hvilken som helst hensiktsmessig måte, men vanligvis vil den bli administrert intravenøst, enten ved intravenøs injeksjon eller transfusjon. Når lipid A-analogen tilveiebringes for behandling av en virusinfeksjon, kan den administreres i forbindelse med hensiktsmessige viricidale midler. Lipid A analogene kan lagres som frysetørkede formu-leringer.

Lipid A analogene administreres i doser som gir passende inhibering av LPS aktivering av målceller; generelt vil disse doser fortrinnsis være mellom 0,001 og 500 mg/pasient, mer fortrinnsvis mellom 0,01 og 300 mg/pasient og mest fortrinnsvis mellom 0,01 og 100 mg/pasient.

Claims

1. Forbindelse, karakterisert ved formelen: hvor minst én R<1>, R<2>, R<3> eller R<4> er: hvor L er 0; M er NH; E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hver av de gjenværende R t , R o , R ~ i og R 4uavhengig er: hvor L er 0; x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; 1 2 hvor A og A uavhengig er OH, OCH3 hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; X er (<CH>2)t<O>(<CH>2)v<CH>3 eller ^ ^ W) ^ hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og Y er OH, 0(CH2)wCH3, et halogenatom, hvor W er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved minst én R 1, R 2 , R 3 eller<4> er: R er: hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og for p og q uavhengig Os (p + q) s 12; hver av de gjenværende R 1, R 2 , R 3 og R 4uavhengig er: hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; og G uavhengig er SO eller S02;1 2 hvor A og A uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; X er (CH2)tO(CH2)yCH3, hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6; og Y er OH eller et halogenatom.

3. Forbindelse ifølge krav 2, 12 3 karakterisert ved at minst én av R , R , R 4 eller R er: hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10; og 6 s (p + q) s 10; hver av de gjenværende R<1>, R2, R<3> og R<4> uavhengig er: hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor A<1> og A<2> uavhengig er X er CH20CH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3; og Y er OH.

4. Forbindelse ifølge krav 1,, karakterisert ved at: 12 3 4 minst én av R , R , R eller R er: hvor L er 0, M er NH; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; 12 3 4 hver av de gjenværende R , R , R og R uavhengig er: hvor L er 0, M er NH; E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og q uavhengig er et 5 helt tall fra 0 til og med 10; x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; hver A 1 og A 2 uavhengig er OH, hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; X er (CH2)tO(CH2)vCH3, hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og Y er OH, 0(CH2)w<CH>3, et halogenatom, eller hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

5. Forbindelse ifølge krav 4, karakterisert ved at minst én av R , R , R eller R 4 er: hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og for p og q uavhengig, 0 < (p + q) < 12; hver av de gjenværende R<1>, R<2>, R<3> og R<4> uavhengig er: hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; hver A 1 og A 2 uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; X er (CH2)tO(CH2)vCH3, hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6; og Y er OH.

6. Forbindelse ifølge kravene 2, 3 eller 5, karakterisert ved at (i) n er 6; (ii) q er 5; (iii) x er 6 eller 10; (iv) eller en kombinasjon derav.

7. Forbindelse ifølge hvilke som helst av kravene 1-6, karakterisert ved at nevnte forbindelse er et lysinsalt, et Tris-salt, et ammoniumsalt eller et natriumsalt.

8. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-6, karakterisert ved at nevnte forbindelse er

9. Terapeutisk blanding karakterisert ved at den omfatter en forbindelse ifølge hvilke som helst av kravene 1-6, og en fysiologisk-akseptabel bærer.

10. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at minst en av R<2> eller R<4 >er hver av de gjenværende R<2> og R<4> er uavhengig: hvori hver L er 0, hver M er NH; hver E er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver m er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver n er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver p er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver q er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 10; hver x er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver y er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; og hver z er uavhengig et heltall fra og med 0 tilogmed 14; hver A<1> og A<2> er uavhengig OH, OCH3; hvori hver d uavhengig er et heltall fra og med 0 tilogmed 5, X er (CH2)tO(CH2)vCH3, (CH2)t<O>PO(CH)2, hvori hver t og v uavhengig er et heltall fra og med 0 til og med 14; og Y er H, OH, 0(<CH>2)WCH3, et halogenatom, eller hvori w er et heltall fra og med 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

11. Forbindelse ifølge krav 10, karakterisert ved at minst en av R<2> eller R<4>og hver gjenværende R<2> og R<4> er uavhengig: hvori hver x uavhengig er et heltall fra og med 0 til og med 14, hver z er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 10; hver m er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 14; hver n er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 14; og for hver p og q uavhengig Osp sl2 * 0 s q s 12.

12. Forbindelse ifølge krav 10, karakterisert ved at R<2> er hvori x er et heltall fra og med 0 til og med 14; z er et heltall fra og med 0 til og med 10; m er et heltall fra og med 0 til og med 14; n er et heltall fra og med 0 til og med 14; og for hver p og q uavhengig 0 £ p < 12, 0 <; q < 12.

13. Forbindelse ifølge krav 12, karakterisert ved at hver R<1> og R<3> uavhengig er hvori hver x uavhengig er et heltall fra og med 0 til og med 14; og hver z er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 10.

14. Forbindelse ifølge krav 12, karakterisert ved at z er 1, m er 1, n er 6, p er 3, q er 5, og hver x er uavhengig enten 6 eller 10.

15. Forbindelse ifølge krav 10, karakterisert ved at R<4> er hvori hver x uavhengig er et heltall fra og med 0 til og med 14; hver y er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 14; hver z er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 10; hver m er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 14; hver n er uavhengig et heltall fra og med 0 til og med 14; og for hver p og q uavhengig 0 s p < 12, 0 < q < 12.

16. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at hver av R<2> og R<4> uavhengig er valgt fra de følgende formler: hver av R<1> og R<3> er uavhengig valgt fra de følgende formler: hver av A<1> og A<2> er uavhengig valgt fra OH, og de føl-gende formler: og X er (CH2) t0 (CH2) VCH3 •

17. Forbindelse ifølge krav 1, k karakterisert ved at hver av R<2> og R<4> uav-1AC hengig er valgt fra de følgende formeler: hver av R<1> og R<3> er uavhengig valgt fra de følgende ^ o:s formeler: hver av A<1> og A<2> er uavhengig valgt fra H, OH og de følgende formler: og X er (CH2) t0 (CH2) VCH3 .

18. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at forbindelsen har formelen : og farmasøytisk akseptable salter derav.

19. Forbindelse ifølge krav 18, karakterisert ved at forbindelsen har formelen :

20. Forbindelse, k karakterisert ved formelen: 2 hvor R er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er 0; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; P<1> er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A<1->gruppe, hvor A<1->gruppen uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; P 2 er f<t>, en halogengruppe, OH, en beskyttet OH, 0(CH2)wCH3 hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

21. Forbindelse ifølge krav 20, karakterisert ved at R 2 er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; hvor G uavhengig er SO eller S02; og for p og q uavhengig, 0 < (p + q) < 12; P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A^-gruppe, hvor A1-gruppen er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; og P<2> er OH, en beskyttet OH eller 0(CH») CH0, hvor w er et 2 w 3 helt tall fra 0 til og med 3.

22. Forbindelse ifølge krav 21, karakterisert ved at R 2 er hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; hvor G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10; og 6 < (p + q) < 10; P<2> er OH, en beskyttet OH eller OCH3.

23. Forbindelse, karakterisert ved formelen: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er 0; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; Z er OH, en beskyttet OH, en aktivert OH, eller en utgående gruppe som kan erstattes; P<3> er OH, en beskyttet OH, OCH , A<2>', eller en beskyttet 2 ' 2 ' A , hvor nevnte A gruppe er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; X' er X eller en beskyttet X gruppe, hvor nevnte X gruppe er (CH2)tO(C<H>2)vCH3, (CH2)tOPO(OH)2, hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

24. Forbindelse ifølge krav 23, karakterisert ved at R 4 er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; hvor G uavhengig er SO eller S02; og for p og q uavhengig, Os (P + q) s 12; 3 2 ' hvor P er H, OH, en beskyttet OH, A eller en beskyttet A 2 ' , hvor A 2 'er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; og X' er (CH2)tO(CH2)vCH3 eller (CH2)tCH3, hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6.

25. Forbindelse ifølge krav 24, karakterisert ved at R 4 er hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10; og 6 s (p + q) <, 10; 3 2 ' hvor P er OH, en beskyttet OH, A , eller en beskyttet A 2 ' , hvor A er X' er CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3.

26. Forbindelse, karakterisert ved formelen-. hvor R<2> og R<4> uavhengig er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er 0; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; hvor Q uavhengig er N_ eller NH„ ; P 1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A <1>gruppe; og P <3> er OH, en beskyttet OH, en A 2 '-gruppe, eller en be-2 ' 12' skyttet A -gruppe, hvor A og A gruppen uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; P<2> er et halogenatom, OH, en beskyttet OH, 0(CH2)wCH3, hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14; X' er X eller en beskyttet X gruppe, hvor nevnte X-gruppe er H, eller (CH2) 0(CH2)vCH3, hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og R<5> er hvilken som helst av de muligheter som er oppført ovenfor for R 1 -R 4, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. i

27. Forbindelse ifølge krav 26, 2 4 karakterisert ved at R og R uavhengig er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; hvor G uavhengig er SO eller S02; og for p og q uavhengig, Os (p + q) s 12; P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A<1> gruppe; og 3 2 ' P er OH, en beskyttet OH, en A -gruppe, eller en be-2 ' 12' skyttet A gruppe, hvor A og A gruppen uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; P 2 er OH, en beskyttet OH, eller 0(CH £ „) W CH^ j, hvor w er et helt tall fra 0 til og med 3; og X' er (CH2)tO(CH2)vCH3, hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6.

28. Forbindelse ifølge krav 27, karakterisert ved at R 2 og R 4 er hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 10 og 6 s (p + q) s 10; P 1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A 1 gruppe, og

3 2 ' P er OH, en beskyttet OH, en A gruppe, eller en be-2 ' 12' skyttet A gruppe, hvor A og A gruppen, uavhengig er:

2 " A P er OH; og X' er CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3.

29. Forbindelse, karakterisert ved formelen: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor L er O; hvor M er NH; hvor E uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor p uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor q uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor y uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; og G uavhengig er SO eller S02; P<1> er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A1 gruppe; og P 3 er OH, en beskyttet OH, en A 2 'gruppe, eller en be-2 ' 12' skyttet A gruppe, hvor A og A gruppen uavhengig er: 3hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 5; og A uavhengig er: hvor j uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; og P<2> er et halogenatom, OH, en beskyttet OH, 0(CH2)w<CH>3, hvor w er et helt tall fra 0 til og med 14; og X' er X eller en beskyttet X-gruppe, hvor nevnte X-gruppe er (CH2)tO(CH2)vCH3, hvor t og v uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 14; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

30. Forbindelse ifølge krav 29, 12 3 4 karakterisert ved at R , R , R og R er: hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor m uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor n uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor x uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 10; hvor z uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 3; hvor G uavhengig er SO eller S02; og for p og q uavhengig, Os (p + q) s 12; P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A1 gruppe; og P 1 er OH, en beskyttet OH, en A 2 '-gruppe, eller en beskyttet A 2 ' - gruppe, hvor A 1 - og A 2 '-gruppen uavhengig er: hvor d uavhengig er et helt tall fra 0 til og med 2; P 2 er OH, en beskyttet OH eller 0(CH2)wCH3, hvor w er et helt tall fra 0 til og med 3; og X' er (CH2)tO(CH2)vCH3, hvor t er et helt tall fra 0 til og med 6 og v er et helt tall fra 0 til og med 6.

31. Forbindelse ifølge krav 30, karakterisert ved at R 1, R 2 , R <3> og R <4>er hvor J uavhengig er OH eller en beskyttet OH; hvor x uavhengig er et helt tall fra 6 til og med 11; og G uavhengig er SO eller S02; hvor n uavhengig er et helt tall fra 6 til og • med 10; og 6 s (p + q) s 10; P1 er OH, en beskyttet OH, eller en beskyttet A<1->gruppe; og

3 2 ' P er OH, en beskyttet OH, en A gruppe, eller en beskyttet A 2 ' gruppe, hvor A 1 - og A 2 '-gruppen uavhengig er:

2 P er OH; og X' er CH2OH, CH2OCH3 eller CH20(CH2)vCH3, hvor v er et helt tall fra 1 til og med 3.

32. Fremgangsmåte til kobling av en alkylsidekjede til et azidosakkarid som har en fri hydroksyl, karakterisert ved omsetning av nevnte azidosakkarid med et alkalimetallsalt og en sulfonyl mono-aktivert alkyldiol under anaerobe betingelser.

33. Anvendelse av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-9 ved fremstilling av et medikament for behandling av en sykdom hos et pattedyr for hvilket en lipid A reseptorantagonist er effektiv, for behandling av septisk sjokk hos et pattedyr, eller for behandling av den LPS-medierte aktivering av en virusinfeksjon hos et pattedyr.

34. Anvendelse ifølge krav 33, hvor nevnte virus omfatter et NF-kappaB bindingssete i en replikasjonskontrollsekvens, hvor nevnte virus er et humant immunsviktvirus, hvor nevnte virus er et herpes virus, eller nevnte virus er et influensavirus.