NO177187B

NO177187B - Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapautisk aktive N,N'-bis(alkoksy-alkyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamider

Info

Publication number: NO177187B
Application number: NO903235A
Authority: NO
Inventors: Ekkehard Baader; Martin Bickel; Volkmar Gunzler-Pukall
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1989-07-20
Filing date: 1990-07-19
Publication date: 1995-04-24
Also published as: PT94779A; EP0409119B1; CA2021529A1; CZ357690A3; LTIP1462A; LV10430B; HU904549D0; ATE104280T1; IE64438B1; IL95121A; LT3798B; CY1997A; NO177187C; FI94630B; AU624978B2; ES2052112T3; DE3924093A1; HU218274B; NZ234563A; IL95121A0

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører fremstillingen av nye, terapeutisk aktive N,N'-bis(alkoksy-alkyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamider og fysiologisk godtagbare salter derav.

Forbindelser som inhiberer prolin- og lysinhydroksylase bevirker en meget selektiv hemming av kollagenbiosyntesen ved påvirkning av kollagenspesifikke hydroksyleringsreaksjoner. I deres forløp hydroksyleres protein-bundet prolin eller lysin ved enzymene prolin- henholdsvis lysinhydroksylase. Dersom denne reaksjonen forhindres ved hjelp av inhibitorer, så dannes et ikke funksjonsdyktig, underhydroksylert kollagen-molekyl som bare i liten mengde kan avgis fra cellene inn i det ekstracellulære rommet. Det underhydroksylerte kollagenet kan dessuten ikke bygges inn i kollagenmatriksen og nedbrytes meget lett proteolytisk. Som en følge av disse effektene reduseres totalt mengden av ekstracellulært lagringskollagen.

Det er kjent at inhiberingen av prolinhydroksylase ved hjelp av kjente inhibitorer, som oc ,a' -dipyridyl fører til en hemming av Clq-biosyntesen av makrofager (W. Muller et al., FEBS Lett. 90 (1978), 218; Immunbiology 155 (1978) 47). Derved kommer det til et utfall av den klassiske fremgangsmåten for komplementaktivering. Inhibitorer for prolinhydroksylase virker følgelig som immunsuppressiva, f.eks. ved immunkomplekssykdommer.

Det er kjent at prolinhydroksylase kan hemmes effektivt ved pyridin-2,4- og -2,5-dikarboksylsyre (K. Majamaa et al., Eur. J. Biochem. 138 (1984) 239-245). Disse forbindelsene er imidlertid bare virksomme i cellekulturen som hemmestoff i meget høye konsentrasjoner (Tschank, G. et al., Biochem. J. 238, 625-633, 1987).

I DE-A 34 32 094 beskrives pyridin-2,4- og -2,5-dikarboksyl-syrediestere med 1-6 C-atomer i esteralkyldelen som legemiddel for inhibering av prolin- og lysinhydroksylase. . Disse lavalkylerte diesterne har imidlertid den ulempen at de spaltes for raskt til syrene i organismen og ikke i tilstrek-kelig høy konsentrasjon når frem til virkestedet i cellen og dermed er mindre egnet for en eventuell administrering som legemiddel.

DE-A 37 03 959, DE-A 37 03 962 og DE-A 37 03 963 beskriver i generell form blandede ester/amider, høyere alkylerte diestere og diamider av pyridin-2,4- og -2,5-dikarboksylsyrer som virksomt hemmer kollagenbiosyntesen i dyremodell.

Følgelig beskrives i DE-A 37 03 959 blant annet syntesen av N, N'-bis(2-metoksyetyl)-pyr idin-2,4-dikarboksylsyrediamid

(III)

og N,N' -bis( 3-isopropoksypropyl )-pyridin-2 ,4-dikarboksylsyre-diamid (IV)

I de tyske patentpublikasjonene P 38 26 471.4 og P 38 28 140.6 foreslås en forbedret fremgangsmåte for fremstilling av N,N'-bis(2-metoksyetyl)-pyridin-2,4-dikar-boksylsyrediamid (III).

Den enterale resorberbarheten av mange av de i DE-A 37 03 959 omtalte forbindelsene er imidlertid fremdeles utilfredsstil-lende, slik at det består et behov for å tilveiebringe forbindelser som etter oral tilførsel allerede ved lave doseringer virksomt hemmer prolin- og lysinhydroksylasen.

Det er nå funnet at forbindelser med formel (I)

hvori

R<1> er lineært eller forgrenet C1-C4~alkandiyl,

R<2> er uforgrenet C^-C4~alkyl eller hydrogen,

n betyr 1 eller 2 og

R1', R<2>' og n' har de samme betydningene som R<1>, R<2> og n,

hvorved R<1> og R<1>', R<2> og R<2>' og n og n' er identiske

eller forskjellige,

samt deres fysiologisk godtagbare salter, unntatt N,N'-bis(2-metoksyetyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid og N,N<*->bis(2-hydroksyetyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid, oppfyller den ovenfor nevnte oppgaven.

Sammenlignet med de i DE-A 37 03 959 omtalte forbindelsene N,N'-bis(2-metoksyetyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid og N ,N * -bis( 3-isopropoksypropyl )-pyridin-2 ,4-dikarboksylsyre-diamid oppviser forbindelsene med formel (I) både en bedre farmakologisk virksomhet og også en bedre enteral resorberbarhet.

De ovenfor omtalte forbindelsene med formel (I) fremstilles ifølge oppfinnelsen ved en fremgangsmåte kjennetegnet ved at man

1. blander pyridin-2,4-dikarboksylsyre med minst to ekvivalenter av et halogeneringsmiddel, og at man 2. oppløser minst to ekvivalenter hydroksyalkylamin eller alkoksyalkylamin med formel (II) eller (II')

hvori

R<1> og R<1>' betyr lineært eller forgrenet C^—C^alkandiyl, R<2> og R<2>' betyr uforgrenet C-j-C^alkyl eller hydrogen, og n og n' betyr 1 eller 2 og

R1 og R*' , R<2> og R<2>' samt n og n' er identiske eller forskjellige, hvorved imidlertid (II) og (II') er forskjellige,

i et oppløsningsmiddel og at man bringer den ifølge 1. fremstilte oppløsningen til reaksjon med den ifølge 2. fremstilte oppløsningen, og at man eventuelt deretter overfører den oppnådde forbindelsen med formel (I) til dens fysiologisk godtagbare salt.

Ved fremgangsmåten for fremstilling av forbindelser med formel (I) blir den som utgangsstoff kommersielt tilgjenge-lige pyridin-2,4-dikarboksylsyren suspendert i et oppløs-ningsmiddel som toluen og ved romtemperatur blandet med et halogeneringsmiddel, fortrinnsvis et kloreringsmiddel som f.eks. S0C12- Med hensyn på den anvendte molare mengden av pyridin-2,4-dikarboksylsyre anvendes 2-3 ekvivalenter av et halogeneringsmiddel, fortrinnsvis 2,5 ekvivalenter. Den oppnådde reaksjonsblandingen oppvarmes til 90-110°C, fortrinnsvis til 100°C inntil ingen gassutvikling lenger observeres og en klar oppløsning er dannet. Deretter inndampes fra oppløsningen, fortrinnsvis i høyvakuum (inntil IO<3> torr), 10Sé, og det oppnådde karboksylsyrehalogenidet omsettes videre.

Med hensyn på den anvendte molare mengden av pyridin-2,4-dikarboksylsyre oppløses så den 2-4 ganger molare mengden av kommersielt alkoksyalkylamin eller hydroksyalkylamin I et oppløsningsmiddel som toluen og fortrinnsvis tilsettes den 2—4 ganger molare mengden av en base, som trietylamin. Karboksylsyrehalogenidet bringes til reaksjon med alkoksyalkylaminet, henholdsvis hydroksylalkylaminet. Dette skjer fortrinnsvis ved at oppløsningen av det nevnte alkylaminet tilsettes dråpevis til det oppløste pyridin-2,4-dikarboksyl-syrehalogenidet. Det er imidlertid også mulig dråpevis å tilsette oppløsningen av karboksylsyrehalogenidet til oppløsningen av alkoksyalkylaminet henholdsvis hydroksyalkyl-aminet. Tilsatsen foregår ved en temperatur på -5 til +5°C, fortrinnsvis ved 0°C. Reaksjonsblandingen får deretter etterreagere ved at man f.eks. oppvarmer til romtemperatur og omrører ytterligere 2-5 timer, fortrinnsvis 3 timer. Det oppnådde produktet surgjøres deretter for å fraskille overskytende hydroksy- henholdsvis alkoksyalkylamin fra det ønskede produktet. Surgjøringen kan eksempelvis foregå med 0,2 molar sitronsyre. De organiske fasene fraskilles deretter og vaskes med vann. Deretter tørkes den organiske fasen, fortrinnsvis over magnesiumsulfat, og befris endelig for oppløsningsmiddel. Ved fjernelse av oppløsningsmidlet dannes produktet som hvitt faststoff eller som olje.

For fremstilling av N,N'-bis(hydroksyalkyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamidet går man best frem slik at man overfører et tilsvarende bis(alkoksyalkyl)diamid, fortrinnsvis bis(metoksyalkyl)diamid, ved fremgangsmåter som er kjente fra litteraturen, eksempelvis med bortribromid, til det tilsvarende bis(hydroksyalkyljdiamidet.

Usymmetrisk substituerte forbindelser med formel (I) kan eksempelvis syntetiseres på følgende måte: Omsetning av et pyridin-2,4-dikarboksylsyrehalogenid, fortrinnsvis -kloridet, med substituert eller usubstituert benzylalkohol til pyridin-2,4-dikarboksylsyrebenzylester, etterfølgende selektiv forsåpning av esteren i 2-posisjonen (f.eks. i nærvær av en kobberkatalysator, Acta Heiv. 44, 1963, s. 637), overføring av den frie syren i 2-stilling til syrehalogenidet, omsetning med en forbindelse med formel (II<*>) til pyridin-4-karboksylsyrebenzylester-2-karboksylsyre-amid, hydrogenolytisk avspaltning av gjenværende benzyl-beskyttelsesgruppe (f.eks. med B^/Pd, se Houben-Weyl, bind IV/lc (1980),s. 381-82) og etterfølgende overføring av den frie syren i 4-posisjon av pyridinringen til syrehalogenidet. Syrehalogenidet kan så overføres med et amin (II) til det ønskede diaminet (I) (se reaksjonsskjerna).

Eventuelt kan opparbeidelsen av produktene eksempelvis foregå ved ekstraksjon eller ved kromatografi, f.eks. over kiselgel. Det isolerte produktet kan omkrystalliseres og eventuelt omsettes med en egnet syre til fysiologisk godtagbart salt. Som egnede syrer kommer eksempelvis i betraktning: mineralsyrer som hydrogenklorid og hydrogen-bromid samt svovel-, fosfor-, salpeter- eller perklorsyre eller organiske syrer som maursyre, eddiksyre, propionsyre, ravsyre, glykolsyre, melkesyre, eplesyre, vinsyre, sitronsyre, maleinsyre, fumarsyre, fenyleddiksyre, benzosyre, metansulfonsyre, toluensulfonsyre, oksalsyre, 4-aminobenzo-syre, naftalin-1,5-disulfonsyre eller askorbinsyre.

Forbindelsene med formel (I) kan finne anvendelse som medikamenter i form av farmasøytiske preparater som inneholder disse sammen med godtagbare farmasøytiske bærere. Forbindelsene kan finne anvendelse som helbredende midler, f.eks. I form av farmasøytiske preparater som inneholder disse forbindelsene i blanding med en for enteral, perkutan eller parenteral administrering egnet farmasøytisk, organisk eller uorganisk bærer, som f.eks. vann, gummiarabikum, gelatin, melkesukker, stivelse, magnesiumstearat, talk, vegetabilske oljer, polyalkylenglykol, vaseliner osv.

De farmasøytiske preparatene kan foreligge i fast form, f.eks. som tabletter, dragéer, suppositorier eller kapsler; i halvfast form, f.eks. som salver, eller i flytende form, f.eks. som oppløsninger, suspensjoner eller emulsjoner. Eventuelt er de steriliserte og/eller inneholder hjelpe-stoffer, som konserverings-, stabiliserings-, fukte- eller emulgeringsmidler, salter for forandring av det osmotiske trykket eller buffere. De kan også inneholde andre terapeutisk virksomme stoffer.

Det ble funnet at forbindelsene med formel (I) oppviser uvanlig god enteral resorberbarhet. Resorberbarheten ble undersøkt på Wistar-rotter som ble tilført forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen intragastralt. Serumspeilet sank i de første timene etter administrering av stoffet og nådde etter ca. 5 timer et fremdeles lett avtagende platå. Fra det først meget høye serumspeilet direkte etter administrering av stoffene kan man slutte seg til en god resorberbarhet for stoffene.

I det følgende skal oppfinnelsen beskrives ved hjelp av eksempler.

Eksempel 1

Pyridin- 2, 4- dikarboksvlsvre- bls- N, N'-( metoksypropvl) amld

3 6 pyridin-2,4-dikarboksylsyre anbringes i 50 ml toluen og 1 ml DMF og tilsettes dråpevis til en oppløsning av 2,7 ml tionylklorid. Det oppvarmes inntil ingen gassutvikling lenger observeres (ca. 2,5 timer). Det avkjøles, 5 ml toluen avdestilleres og tilsettes dråpevis til en oppløsning av 4,6 ml 3-metoksypropylamin og 5 ml trietylamin. Etter omrøring av oppløsningen ved romtemperatur i 4 timer inndampes det, resten opptas med vann og ekstraheres fire ganger med metylenklorid. De forenede organiske fasene tørkes over magnesiumsulfat og inndampes. Råproduktet kromatograferes med kiselgel (oppløsningsmiddel etylacetat).

Utbytte: 4,3 g; olje

Eksempel 2

Pyridin- 2 . 4- dikarboksylsyre- bis- N , N' -( etoksypropyl ) amld Fremgangsmåte, se eksempel 1; aminkomponent etoksypropylamin;

Utbytte: 4,5 g, frysepunkt: 46-48°C.

<*>H-NMR (CDC13): S = 1,3 (6H, tr); 1,7-2,1 (4H, m);

3.3- 3,8 (12H, m); 7,8-8,0 (1H, m);

8.4- 8,5 (IB, m); 8,5-8,8 (1H, m).

Eksempel 3

Pyridin- 2. 4- dikarboksylsyre- bis- N. N'-( 2- dimetoksyetyl) amid Fremgangsmåte, se eksempel 1; aminkomponent 2-dimetoksyetyl-amin;

Utbytte: 1,6 g (fra 3 g pyridin-2,4-dikarboksylsyre), olje.

H-NMR (CDCI3): S = 3,4 (12H, s); 3,7 (4H, m);

4,5 (2H, m); 7,9-8,0 (1H, m);

8,4-8,5 (1H, m); 8,7-8,8 (1H, m).

Eksempel 4

Pyridin- 2. 4- dikarboksylsyre- bis- N, N,-( 2- metoksyisopropyl) amid Fremgangsmåte, se eksempel 1; aminkomponent 2-metoksypropylamin;

Utbytte: 3,3 g (av 3 g pyridin-2,4-dikarboksylsyre), olje;

H-NMR (CDCI3): S = 1,3 (6H, d); 3,2 (6H, s); 3,5 (4H, d);

4,4 (2H, m); 7,9-8,0 (1H, m);

8,4-8,5 (1H, m); 8,7-8,8 (1H, m).

Eksempel 5

Pyridin- 2, 4- dlkarboksylsyre- bis- N. N'-( 2- etoksyetyl) amld Fremgangsmåte, se eksempel 1; aminkomponent etoksyetylamin;

Utbytte: 7,8 g (fra 10 g pyridin-2,4-dikarboksylsyre), Frysepunkt: 42-44°C.

H-NMR (CDCI3): S = 1,2 (3H, tr); 3,3-3,8 (12H, qu. og m);

7,9 (12, m); 8,4-8,5 (1H, m);

8,7-8,8 (1H, m).

Eksempel 6

P yridin- 2. 4- dikarboksylsyre- bis- N, N'-( 3- hydroksy- etvl) aroid °.5 g pyridin-2,4-dikarboksylsyre-bis-N,N'-(3-metoksyetyl)-amid oppløses i 10 ml diklormetan og tilsettes ved -78°C dråpevis bortribromid (11 ml, 1 molar oppløsning i diklormetan). Etter avsluttet tilsats får blandingen komme til romtemperatur og etteromrøres i 3 timer. Det helles på 100 ml mettet bikarbonatoppløsning og ekstraheres tre ganger med etylacetat. Det samlede organiske oppløsningsmidlet tørkes med magnesiumsulfat og inndampes. Råproduktet kromatograferes på kiselgel.

Utbytte: 0,45 g; olje

^H-NMR (CDC13) S 1,5-2,2 (4H, m); 3,4 (4H, m);

3,6 (4H, m); 7,9-8,0 (1H, m);

8,4-8,5 (1H, m); 8,7-8,8 (1H, m).

Eksempel 7a

Pyrldln- 2. 4- dikarboksylsyredibenzylester 30 g pyridin-2,4-dikarboksylsyre overføres analogt eksempel 1 med 30 ml tionylklorid til syreklorid og omsettes med 43,8 g benzylalkohol. Produktet omkrystalliseres fra diisopropyl-eter.

Utbytte: 42,1 g. Smeltepunkt: 63-65"C.

Eksempel 7b

Pyridln- 2- karboksylsyre- 4- karboksylsyrebenzylester

40 g pyridin-2,4-dikarboksylsyredibenzylester fra eksempel 7a tilsettes til en suspensjon av 27,8 g kobber(II )nitrat i 700 ml metanol. Det kokes i en time under tilbakeløp og etter avkjøling avfUtreres kobberkomplekset. Komplekset suspen-deres i dioksan og karbonsulfid innføres. Det utfelte kobbersulfidet frafUtreres og den organiske fasen inndampes. Produktet utrøres med petroleumseter.

Utbytte: 25,3 g Smeltepunkt: 113-115°C

Eksempel 7c

Pvridin- 2-( 3- metoksypropyl ^- karboksylsyreainid- 4- karboksyl-svrebenzvlester

3,9 g pyridin-2-karboksylsyre-4-karboksylsyrebenzylester fra eksempel 7b overføres analogt eksempel 1 med 1,2 ml tionylklorid til syrekloridet og omsettes med 3-metoksypropylamin til amid. Produktet kromatograferes for rensing over kiselgel med en blanding av cykloheksan/etylacetat (1:1).

Utbytte: 4,3 g Olje

Eksempel 7d

Pyridin- 4- karboksylsvre- 2-( 3- metoksypropvl)- karboksylsvreamld 4,3 g av forbindelsen fra eksempel 7c oppløses i 100 ml dioksan og etterrøres med 500 mg palladium/kull (105t)-katalysator under normaltrykk i 4 timer. Etter avslutning av hydrogenopptaket frasuges det fra katalysatoren og oppløs-ningsmidlet trekkes av.

Utbytte: 3,5 g Smeltepunkt: 124-126'C

Eksempel 7e

Pyr id in- 4- karboksyl syre-( 2- metoksyetyl)- 2- karboksyl svre-( 3-metoksypropyl)- diamid

Tilsvarende eksempel 1 overføres 1,8 g forbindelse fra eksempel 7d med 0,6 ml tionylklorid til syrekloridet og omsettes deretter med 2-metoksyetylamin. Produktet kromatograferes for rensing over kiselgel med en blanding av diklormetan/metanol (20:1).

Utbytte: 1,0 g Olje

1-H-NMR (CDC13): S = 1,9-2,0 (2H, qui); 3,4 (6H, s);

3,5-3,7 (8H, m); 6,9 (1H, s, br);

8,0 (1H, dd); 8,4 (1H, s, br );

8,5 (1H, s); 8,7 (1H, d).

Eksempel 8

Pyr Idi n- 2- karbok svi syre - ( 2- metoksyetyl)- 4- karboksyl syre-( 3-metoksypropyl)- diamid

Analogt eksemplene 7a-e fremstilles forbindelsen ifølge eksempel 8, ved at det i reaksjonstrinn eksempel 7c anvendes 2-metoksyetylamin og i reaksjonstrinn eksempel 7e 3-metoksypropylamin.

Smeltepunkt: 69-72"C

H-NMR (CDC13): S = 1,9-2,0 (2H, qui); 3,4 (3H, s);

3,45 (3H, s); 3,6-3,7 (8H, m);

7,4 (1H, br); 7,9 (1H, dd);

8,3 (1H, br); 8,4 (1H, d); 8,7 (1H, d).

Eksempel 9

Enteral resorberbarhet

Hunnlige Wistar-rotter med kroppsvekt ca. 150 g, fikk 50 mg/kg av stoffet som skulle undersøkes administrert intragastralt ved hjelp av en svelgsonde. Etter 5; 10; 15; 30; 60; 120; 180 og 240 minutter bedøves hver gang 4 rotter og blodet fjernes over Vena cava. Blodet sentrifugeres straks og den administrerte forbindelsen ekstraheres med eter fra serumet. Etter fordampning av eteren opptas resten i 100 ml flyte-middel. Flytemidlet består av 0,05 M fosforsyre og aceto-nitril (4:1). Av denne prøven Injiseres 50 jjI i en HPLC-søyle. Deteksjonen foregår ved TJV 200 nm og en retensjonstid på 2,2 minutter. Resultatene er dokumentert i tabell 1.

Eksempel 10

Farmakologisk virksomhet

For påvisning av den effektive hemmingen av prolin- og lysinhydroksylasen ved hjelp av forbindelsen fremstilt ifølge oppfinnelsen målte man hydroksyprolin-konsentrasjonen i leveren og 7s-(IV)-kollagen-konsentrasjonen i serum fra

a) ubehandlede rotter (kontroll)

b) rotter som var administrert karbontetraklorid (CCI4-kontroll) c) rotter som først var tilført CCI4 og deretter en forbindelse fremstilt ifølge oppfinnelsen,

(denne forsøksmetoden er beskrevet av Rouiller, C, Experimental toxic injury of the liver; i The Liver, C. Rouiller, bind 2, s. 335-476, New York, Academic Press, 1964 ).

Virkestyrken av forbindelsen fremstilt ifølge oppfinnelsen ble bestemt som prosentuell hemming av lever-hydroksyprolin-og serum-7s-(IV)-kollagensyntesen etter oral tilførsel sammenlignet med kontrolldyr som bare var administrert karbontetraklorid (CCl4-kontroll). Resultatene er angitt i tabell 2. Som sammenligningsstoff er også forbindelsene fra eksemplene 2 og 3 i DE-A 37 03 959 (N,N'-bis(2-metoksyetyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid og N,N<*->bis(3-isopropoksypropyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid) oppført. Over-raskende viser forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen allerede etter oral administrering en bedre virksomhet enn den i.p.-administrerte forbindelsen fra eksempel 2 i DE-A 37 03 959.

Claims

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive N ,N * -bis-(alkoksyalkyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamider med formel (I) hvori R<*> er lineært eller forgrenet C1-C4-alkandiyl, R<2> betyr uforgrenet Cj-C4~alkyl eller hydrogen, n betyr 1 eller 2 og R', R<2>' og n' har samme betydninger som Ri, R<2> og n, hvorved R<1> og R1', R2 og R<2>' og n og n' er identiske eller forskjellige samt deres fysiologisk godtagbare salter, unntatt N,N'-bis(2-metoksyetyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid og N,N'-bis(2-hydroksyetyl)-pyridin-2,4-dikarboksylsyrediamid, karakterisert ved at man

1. blander pyridin-2,4-dikarboksylsyre med minst to ekvivalenter av et halogeneringsmiddel, og at man

2. oppløser minst to ekvivalenter hydroksyalkylamin eller alkoksyalkylamin med formel (II) eller (II') hvori R<1> og R<1>' betyr lineært eller forgrenet C-j— C4-alkandiyl, R<2> og R<2>' betyr uforgrenet C1-C4-alkyl eller hydrogen, og n og n<*> betyr 1 eller 2 og R1 og R<1>', R<2> og R<2>' samt n og n' er identiske eller forskjellige, hvorved imidlertid (II) og (II') er forskjellige, i et oppløsningsmiddel og at man bringer den ifølge 1. fremstilte oppløsningen til reaksjon med den ifølge 2. fremstilte oppløsningen, og at man eventuelt deretter overfører den oppnådde forbindelsen med formel (I) til dens fysiologisk godtagbare salt.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av forbindelser med formel (I) hvori R<*> og R<1>', R<2> og R<2>' og n og n' har samme betydning, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av forbindelser med formel (I) hvori substituentene -(R<1>)-(0R<2>)n og -(R1' )-(0R2' )n» er forskjellige, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av forbindelser med formel (I) hvori R<1> betyr lineært eller forgrenet C]—C3-alkyl og R<2> betyr uforgrenet C^-C2-alkyl eller hydrogen, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen eller fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

7. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

8. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

9. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

10. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

11. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.

12. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formelen samt fysiologisk godtagbare salter derav, karakterisert ved at tilsvarende, eventuelt substituerte, utgangsmaterialer anvendes.