NO166326B

NO166326B - Fremgangsmaate ved fremstilling av terapeutisk aktive 3,7-substituerte-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo-(4,2,0)oct-2-en-2-carboxylater.

Info

Publication number: NO166326B
Application number: NO855356A
Authority: NO
Inventors: Hiroshi Yamauchi; Isao Sugiyama; Isao Saito; Seiichiro Nomoto; Takashi Kamiya; Yoshimasa Machida; Shigeto Negi
Original assignee: Eisai Co Ltd
Priority date: 1985-01-14
Filing date: 1985-12-30
Publication date: 1991-03-25
Also published as: NO166326C; DK64795A; EP0188255B1; FI860154A0; PT81840B; PH23045A; US5010188A; HU195664B; YU45303B; FI85489C; CN1019494B; NZ214759A; IL77458A; KR930004016B1; PT81840A; AU5224086A; HUT41035A; DK13686D0; DK13686A; US5008260A

Description

Foreliggende oppfinnelse angår fremstillingen av nye

cefemderivater som er anvendbare som antibakterielle midler.

Et utall forbindelser er tidligere kjent hvor hver av disse inneholder en substituert thiadiazolylacetamidogruppe eller substituert thiazolylacetamidogruppe ved 7-stilling av cefemskjelettet. Eksempelvis er forbindelsene beskrevet i følgende publikasjoner: Allmenn tilgjengelig japansk patent-søknad 11600/1980, 105689/1980, 24389/1982, 81493/1982, 4789/1983, 41887/1983, 59992/1983, 149296/1981, 102293/1977, 116492/1977, 125190/1977, 154786/1979, 192394/1982, 219292/ 1984, 97982/1985, 197693/1985, 231683/85.

I særdeleshet er 7(3-[ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(1-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat beskrevet i allment tilgjengelig japansk patent-søknad 219292/1984, 197693/1985 og 231683/1985. Denne forbindelse kan imidlertid ikke anvendes ut fra et klinisk synspunkt, fordi dens akutte toksiske verdi [LD50 (mus, intravenøs injeksjon)] oppgår til ca. 100 mg/kg eller mindre, slik at forbindelsen er meget toksisk.

Det er funnet at cefemderivater som hver har den nedenfor beskrevne gruppe ved 3-stilling av cefemskjelettet, utviser glimrende antibakteriell aktivitet, hvilke er gjen-stand for foreliggende oppfinnelse, hvor gruppen er representert ved følgende formel:

hvori n betegner 1 eller 2 og R2 betegner en hydroxylgruppe, en lavere alkylgruppe, en hydroxysubstituert lavere alkylgruppe, eller en carbamoylgruppe.

Et mål ved oppfinnelsen er således å tilveiebringe nye forbindelser som er anvendbare som antibakterielle midler, en fremgangsmåte for fremstilling av disse og anvendelse av disse som antibakterielle midler.

Foreliggende oppfinnelse angår følgelig en analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser av generell formel I:

hvori Y betegner CH eller et nitrogenatom, R betegner en lavere alkylgruppe eller en lavere alkynylgruppe eller en carboxylsubstituert eller en carbamoylsubstituert, eller en cyclopropylsubstituert lavere alkylgruppe, R2 betegner en hydroxylgruppe, en lavere alkylgruppe, en hydroxysubstituert lavere alkylgruppe, eller carbamoylgruppe, og n betegner 1 eller 2, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

Som gruppen representert ved R^ i generell formel (I) kan nevnes lavere alkylgrupper slik som methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, t-butyl og sek.-butyl; lavere alkynylgrupper slik som propargyl. Den carboxy-substituerte lavere alkylgruppe representert ved R^, kan innbefatte car-boxymethyl, 2-carboxyethyl, 3-carboxypropyl, 1-carboxyethyl, 1-carboxy-1-methylethyl. Eksempler på carbamoylsubstituerte lavere alkylgrupper representert ved R^, kan være carbamoyl-methyl, 2-carbamoylethyl, 3-carbamoylpropyl, 1-carbamoyl-l-methylethyl, 1-carbamoylethyl. Eksempler på cyclopropylsub-stituerte lavere alkylgrupper representert ved R^, kan være cyclopropylmethyl, 2-cyclopropylethyl.

Som eksempler på hydroxysubstituerte lavere alkylgrupper representert ved R2, kan nevnes hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl, 1-hydroxyethyl, 3-hydroxypropy1. Eksempler på lavere alkylgrupper representert ved R2, kan innbefatte methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, t-butyl.

Som ikke-toksiske farmasøytisk akseptable salter, kan nevnes deres alkalimetallsalter slik som deres natriumsalter og kaliumsalter; deres jordalkalimetallsalter slik som deres calciumsalter og magnesiumsalter; deres uorganiske syresalter slik som deres hydroklorider, hydrobromider, hydrojodider, sulfater, carbonater og bicarbonater; deres organiske carboxylater slik som deres maleater, laktater og tartrater; deres organiske sulfonater slik som deres methan-sulfonater, benzensulfonater og toluensulfonater; deres aminosyresalter slik som deres argininsalter, lysinsalter, cerinsalter, aspartater og glutamater; deres aminsalter slik som deres trimethylaminsalter, triethylaminsalter, pyridinsalter, procainsalter, picolinsalter, dicyclohexylamin-salter, N, N'-dibenzylethylendiaminsalter, N-methylglucamin-salter, diethanolaminsalter, triethanolaminsalter, tris-(hydroxymethylamino)-methansalter og fenethylbenzylamin-salter..

Analogifremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse er kjennetegnet ved at

a) en forbindelse av generell formel II:

hvori aminogruppen eller carboxylgruppen er blitt beskyttet med en beskyttende gruppe, og hvori Y og R har de ovenfor angitte betydninger og X betegner et halogenatom, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av generell formel III:

eller et salt derav, hvori n og R^ har de ovenfor angitte betydninger, hvoretter eventuelt den beskyttende gruppe fjernes.

Som halogenatomer representert ved X i den ovenfor angitte generelle formel (II), kan nevnes jod, brom og klor. Blant disse er jod og brom særlig foretrukket.

Den ovenfor angitte reaksjon kan utføres ved en reaksjonstemperatur på +10 til 60°C eller fortrinnsvis 0 til 40 °C. Som reaksjonsløsningsmiddel kan fortrinnsvis anvendes et vannfritt organisk løsningsmiddel. Som egnede organiske løsningsmidler kan nevnes lavere alkylnitriler slik som acetonitril og propionitril, halogenerte lavere alkylfor-bindelser slik som klormethan, methylenklorid og kloroform; ethere slik som tetrahydrofuran og dioxan; amider slik som N,N-dimethylformamid; estere slik som ethylacetat; ketoner slik som aceton; og hydrocarboner slik som benzen, så vel som blandede løsningsmidler derav.

Som salter av forbindelsene av generelle formler (II) og (III), og beskyttende grupper for aminogruppen og carboxylgruppen i forbindelsene av generell formel (II), kan slike anvendes som vanligvis anvendes for slike formål så lenge de ikke svekker reaksjonen.

Eksempelvis kan nevnes formyl-, acetyl-, kloracetyl-, dikloracetyl-, t-butoxycarbonyl-, benzyloxycarbonyl-, trityl-, p-methoxybenzyl-, difenylmethylgrupper som beskyttende grupper for aminogruppen, og p-methoxy-, p-nitrobenzyl-, t-butyl-, methyl-, 2,2,2-triklorethyl-, difenylmethyl-, privaloyloxymethylgrupper som beskyttende grupper for carboxylgruppen. Anvendelse av et silyleringsmiddel slik som bis-(trimethylsilyl)-acetamid, N-methyl-N-(trimethylsilyl)-acetamid eller N-methyl-N-tri-methylsilyltrifluoracetamid er hensiktsmessig på grunn av at et slikt silyleringsmiddel kan beskytte både amino- og carboxylgruppene samtidig.

Som salter av forbindelsene av generelle formler (II) og (III) er egnede salter slik som alkalimetallsalter, slik som deres natriumsalter og kaliumsalter; deres jordalkalimetallsalter slik som deres calciumsalter og magnesiumsalter; deres ammoniumsalter, deres uorganiske syresalter slik som deres hydroklorider, hydrobromider, sulfater, carbonater, hydrojodider og bicarbonater; deres organiske carboxylater slik som deres acetater, maleater, laktater og tartrater; deres organiske sulfonater slik som deres methan-sulfonater, benzensulfonater og toluensulfonater; deres aminsalter slik som deres trimethylaminsalter, triethylaminsalter, pyridinsalter, procainsalter, picolinsalter, di-cyclohexylaminsalter, N,N<1->dibenzylethylendiaminsalter, N-methylglucaminsalter, diethanolaminsalter, triethanolaminsalter, tris-(hydroxymethylamino)-methansalter og fenethyl-benzylaminsalter; deres aminosyresalter slik som deres argininsalter, aspartater, lysinsalter, glutamater og serinsalter.

Fjerning av den beskyttende gruppe kan utføres ved en hvilken som helst konvensjonell prosess slik som hydrolyse, reduksjon, avhengig av typen av den anvendte beskyttende gruppe.

b) at en forbindelse av generell formel IV:

hvor gruppen -COO" er blitt beskyttet med en beskytfende gruppe, og hvori n og R har de ovenfor angitte betydninger, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av generell formel V:

eller et reaktivt derivat ved caroxylgruppen derav, eller et salt derav, hvori aminogruppen er blitt beskyttec med en beskyttende gruppe,og hvori Y og R har de ovenfor angitte betydninger, og eventuelt at den beskyttende gruppe fjernes.

Fremgangsmåten kan utføres i henhold til konven-sjonelle N-acyleringsreaksjonsbetingeIser. Eksempelvis kan reaksjonen utføres i et inert løsningsmiddel ved en temperatur på fra +50 til 50°C, fortrinnsvis +20 til 30°c i nærvær eller fravær av en base. Eksempler på egnede inerte løsningsmidler innbefatter aceton, tetrahydrofuran, N,N-dimethylformamid, N,N-dimethylacetamid, dioxan, diklor-methan, kloroform, benzen, toluen, acetonitril, eller blandede løsningsmidler derav. Et eksempel på basen innbefatter N,N-dimethylanilin, triethylamin, pyridin, N-methylmorfolin.

I det tilfelle hvori carboxylsyrene (-COOH) representert ved generell formel (V) anvendes i fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, utføres reaksjonen fortrinnsvis i nærvær av et kondensasjonsmiddel slik som N,N'-dicyclohexyl-carbodiimid, N, N'-diethylcarbodiimid, N-cyclohexyl-N'-morfo-linoethylcarbodiimid, trialkylfosfitt, ethylpolyfosfat, p-toluensulfonsyreklorid. I det tilfelle hvor et reaktivt derivat ved carboxylgruppen i generell formel (V) anvendes, vil eksempler på reaktive derivater innbefatte syrehalogen-ider slik som syreklorid, syrebromid; symmetriske syreanhydrider; blandede syreanhydrider med carboxylsyre slik som ethylklorcarbonat, trimethyleddiksyre, thioeddiksyre, difenyleddiksyrej aktive estere med 2-mercaptopyridin, cyanomethanol, p-nitrofenol, 2,4-dinitrofenol, pentaklor-fenol; og aktive syreamider med saccharin.

Som beskyttende grupper for -C00" i forbindelsen av generell formel (IV) kan det på liknende måte anvendes de grupper som er angitt som beskyttende grupper for carboxylgruppen av forbindelsen av generell formel (II).

Som beskyttende gruppe for aminogruppen av forbindelsen av generell formel (V) kan det anvendes grupper som er illustrert som beskyttende grupper for aminogruppen av forbindelsen av generell formel (II).

Disse beskyttende grupper kan fjernes ved en hvilken som helst egnet måte, slik som hydrolyse eller reduksjon, avhengig av typen på den beskyttende gruppe som anvendes.

Som salter av forbindelsene av formler (IV) og (V) kan det anvendes salter valgt fra de salter som er illustrert som salter for forbindelsene av generelle formler (II) og (III).

Forbindelser av generell formel:

hvori n og R2 har de ovenfor angitte betydninger, a er 0 eller 1, R 3 betegner et hydrogenatom eller en beskyttende gruppe for aminogruppen, A betegner et anion og b betegner 0 når R4 betegner en gruppe -COO", og 1 når R4 betegner en gruppe -COOR5 (R5 er en beskyttende gruppe for carboxylgruppen), eller et salt derav, innbefattende forbindelsene av generell formel (IV), er mellomprodukter for forbindelsene av generell formel (I). Disse forbindelser anvendes for fremstilling av forbindelsene ifølge oppfinnelsen i henhold til fremgangsmåte b).

Eksempler på R3 som er den beskyttende gruppe for aminogruppen i forbindelsene av generell formel (VI), innbefatter de som vanligvis anvendes innen området, f.eks. substituerte eller usubstituerte lavere alkanoylgrupper slik som formyl, acetyl, kloracetyl, dikloracetyl, propionyl, fenylacetal, 2-thienylacetyl, 2-furylacetyl, fenoxyacetyl;

substituerte eller usubstituerte lavere alkoxycarbo-nylgrupper slik som benzyloxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl,' substituerte lavere lavere alkylgrupper slik som trityl, p-methoxybenzyl, difenylmethylj

og substituerte silylgrupper slik som trimethylsilyl, t-butyldimethylsilyl.,

Eksempler på R5 som den beskyttende gruppe for carboxylgruppen innbefatter de som vanligvis anvendes innen området, f.eks. substituerte eller usubstituerte lavere alkylgrupper slik som methyl, ethyl, propyl, t-butyl, 2,2,2-triklorethyl, valeryloxymethy1, privaloyloxymethyl, p-nitro-benzyl, p-methoxybenzyl, difenyl/ og substituerte silylgrupper slik som trimethylsilyl, t-butyldimethylsilyl.

Eksempler på anioner i A innbefatter halogenioner slik som klor, brom, jod<*> og uorganiske syreioner slik som svovelsyreion, salpetersyreion. ;Eksempler på salter av forbindelsene av generell formel (VI) innbefatter uorganiske salter slik som hydroklorid, hydrobromid, hydrojodid, sulfat, carbonat, bicarbonat; organiske carboxylater slik som acetat, maleat, laktat, tartrat, trif luoracetatorganiske sulfonater slik som methansulfonat, benzensulfonat, toluensulfonat*

og aminosyresalter slik som aspartat, glutamat.

Forbindelsene av generell formel (VI) kan fremstilles i henhold til følgende fremgangsmåte.

En forbindelse av generell formel:

hvori a og R 3 har de ovenfor angitte betydninger, R6 betegner hydrogen eller en beskyttende gruppe for carboxylgruppen, og Z er et halogenatom eller en lavere alkanoyloxygruppe, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av generell formel:

hvori n og R2 har de ovenfor angitte betydninger, eller med et salt derav, etterfulgt om nødvendig av fjerning av den beskyttende gruppe og/eller reduksjon av sulfoxydet under dannelse av forbindelsene av generell formel (VI) eller saltene derav.

I det tilfelle hvor Z i generell formel (VII) betegner et halogenatom, kan den ovenfor angitte reaksjon utføres i et inert løsningsmiddel slik som aceton, tetrahydrofuran, N,N-dimethylformamid, methylenklorid, kloroform, acetonitril ved en reaksjonstemperatur på -MO til 50°C.

Når Z i generell formel (VII) betegner en lavere alkanoyloxygruppe, kan den ovenfor angitte reaksjon utføres i et inert løsningsmiddel slik som kloroform, methylenklorid, tetrahydrofuran, N,N-dimethylformamid, dioxan, aceton i nærvær av jodtrimethylsilan ved en reaksjonstemperatur på +20 til 60°C.

Fjerning av de beskyttende grupper kan oppnås etter kjente metoder slik som hydrolyse eller reduksjon, avhengig av type av den anvendte beskyttende gruppe. Enn videre kan reduksjon av sulfoxyd utføres ved anvendelse av et konven-sjonelt reduksjonsmiddel, f.eks. fosfortriklorid.

Eksempler på halogenatomer for Z i forbindelsen av generell formel (VII) innbefatter klor-, brom- eller jod-atomet.

Eksempler på Z lik lavere alkanoyloxy innbefatter acetyloxy, propionyloxy.

Eksempler på Rg lik den beskyttende gruppe for carboxylgruppen innbefatter de som er angitt under beskrivelsen av R5. Enn videre kan et hvilket som helst salt som ikke inhiberer reaksjonen, anvendes som salter av forbindelsene representert ved generelle formler (VII) og (III), og disse salter kan hensiktsmessig velges fra gruppen bestående av f.eks. alkalimetallsalter slik som natrium, kalium, jordalkalimetallsalter slik som calcium, magnesium; ammoniumsalter; uorganiske syresalter slik som hydroklorid, sulfat, carbonat, bicarbonat, hydrobromid, hydrojodid; organiske carboxylater slik som acetat, maleat, laktat, tartrat, trifluoracetat; organiske sulfonater slik som methansulfonat, benzensulfonat, toluensulfonat; aminsalter slik som trimethylamin, triethylamin, pyridin, procain, picolin, dicyclohexylamin, N,N-dibenzylethylen-diamin, N-methylglucamin, diethanolamin, triethanolamin, tris-(hydroxymethylamino)-methan; og aminosyresalter slik som alginat, aspartat, glutamat og lysin, serin. Forbindelsene fremstilt ved analogifremgangsmåten ifølge oppfinnelsen utviser sterk antibakteriell aktivitet overfor både grampositive og gramnegative bakterier. Når det gjelder de etterfølgende forbindelser, ble i tillegg deres akutte toksisitetsnivåer [ld5Q (mus, intravenøs injeksjon)] funnet å være mer enn 3 g/kg.

73-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacet-amido]-3-(4-hydroxy-l,4-methylen-l-piperidinio)-methyl-3-ce fem-4-carboxylat;

73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxy-iminoacetamido]-3-(4-hydroxy-l,4-methylen-l-piperidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat;

7(3- [ (Z) -2- ( 2-aminothiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacet-amido]-3-(4-hydroxy-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat ;

7(3-[ (Z) -2- (5-amino-l, 2,4-thiadiazol-3-yl) -2-methoxy-iminoacetamido]-3-(4-hydroxy-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat;

7(3-1 (Z) - 2- (2-aminothiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacet-amido]-3-(4-carbamoyl-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat;

73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxy-iminoacetamido]-3-(4-carbamoyl-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat. -

Følgende nomenklatur anvendes i foreliggende be-skrivelse:

Oppfinnelsen beskrives ytterligere ved de etterføl-gende fremstillinger og eksempler.

Fremstilling 1:

Fremstilling av 4- hydroxy- l, 4- methylenpiperidin

1) 1-benzyl-4-ethoxycarbony1-4-hydroxypiperidin:

12 ml konsentrert svovelsyre ble tilsatt til 50 ml av en ethanolløsning av 10 g l-benzyl-4-cyano-4-hydroxypiperi-din-hydroklorid, og den resulterende blanding ble oppvarmet til 130°C i 24 timer i et forseglet rør. Etter konsentrering av reaksjonsblandingen ble isvann tilsatt til konsen-tratet. Den resulterende blanding ble tilsatt en vandig løsning av natriumhydrogencarbonat. Etter justering av den således erholdte løsning til pH 7,0 ble den ekstrahert med diethylether. Ekstraktet ble vasket med saltvann og ble deretter tilsatt vannfritt natriumsulfat for å tørke dette. Løsningsmidlet ble destillert fra under dannelse av 9,7 g av det beregnede produkt.

2) l-benzyl-4-hydroxymethyl-4-hydroxypiperidin:

Til 0,5 1 av en diethylethersuspensjon av 19,4 g lithiumaluminiumhydrid ble dråpevis tilsatt 0,5 1 av en diethyletherløsning av 44,6 g av forbindelsen erholdt i avsnitt 1) under isavkjøling. Etter at den dråpevise tilsetning var fullført, ble den resulterende blanding omrørt i 1 1/2 time. Etter tilsetning av 100 ml ethylacetat og 100 ml mettet vandig natriumsulfatløsning til reaksjonsblandingen ble den resulterende blanding filtrert gjennom celitt. Residuet ble vasket med tetrahydrofuran. Filtratet og vaskeløsningen ble kombinert og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved aluminium-oxydkolonnekromatografi (elueringsmiddel: kloroform, 5 % methanol-kloroform og 20 % methanol-kloroform) under dannelse av 31,5 g av det ønskede produkt. 3) l-benzyl-4-hydroxy-l,4-methylenpiperidin-p-toluensulfonat: Til 120 ml av en pyridinløsning av 11,3 g av forbindelsen erholdt i avsnitt 2), ble tilsatt 10,7 g p-toluen-sulfonylklorid ved +30°C. Den resulterende blanding ble oppvarmet til 4°C, ved hvilken temperatur den ble omrørt i 15 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk, og det således erholdte residuum ble oppløst i en liten mengde isvann. Etter tilsetning av 82 ml 2N vandig kaliumhydroxydløsning ble den resulterende løsning ekstrahert med benzen. Vannfritt kaliumcarbonat ble tilsatt til ekstraktet for å tørke dette. Etter koking av løsningen under tilbakeløp i 9 timer ble løsningen avkjølt til romtemperatur. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med absolutt benzen under dannelse av 16,5 g av det ønskede produkt.

4) 4-hydroxy-l,4-methylenpiperidin:

Til 300 ml av en methanolløsning av 16,5 g av forbindelsen erholdt i avsnitt 3), ble tilsatt 10 % palladium-carbon (50 % vanninnhold; 3,3 g), etterfulgt av omrøring i 3 timer i en hydrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Mettet vandig kaliumcarbonatløsning ble tilsatt til residuet, etterfulgt av ekstraksjon med kloroform. Etter tilsetning av vannfritt kaliumcarbonat til ekstraktet for å tørke dette, ble det således tørkede ekstrakt konsentrert under redusert trykk under dannelse av 4,0 g av det ønskede produkt.

Smeltepunkt: 124,0-124,5°C.

Massespektrum: (M<+>): 113.

NMR-spektrum: (CDC13: 6): 1,70 (4H, m), 2,41 (2H, s), 2,75 (2H, m), 3,16 (2H, m).

Eksempel 1

7p-[( Z)- 2-( 2- aminothiazol- 4- yl)- 2- methoxyiminoacetamido]- 3-( 4- hydroxy- l, 4- methylen- l- piperidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

240 mg 7(3-[ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxy-iminoacetamido] -3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 4 ml methylenklorid, etterfulgt av tilsetning av 330 y.1 N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 30 min. Etter isavkjøling ble 200 ul jodtrimethylsilan tilsatt til løsningen, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 15 min. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk under dannelse av det silylerte derivat av 7(3-[ (Z) -2-( 2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre.

Det silylerte derivat ble oppløst i 3 ml acetonitril, etterfulgt av tilsetning av 60 y.1 tetrahydrofuran. Den således erholdte løsning ble tilsatt 72 mg 4-hydroxy-l,4-methylenpiperidin, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. 0,3 ml methanol ble deretter tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med acetonitril. Bunnfallet ble oppløst i 30 % ethanol. Etter konsentrering under redusert trykk ble residuet oppløst i en 7:l-blanding av aceton og vann. Den resulterende løsning ble renset ved silicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: 9:1- og 7:l-blanding av aceton og vann) under dannelse av 39 g av det ønskede produkt.

Eksempel 2

7( 3-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido] - 3- ( 4- hydroxy- l, 4- methylen- l- piperidinio)- methyl-3- cefem- 4- carboxylat

319 mg 7|3-[ (Z)-2-( 5-amino-l, 2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 4 ml methylenklorid, etterfulgt av tilsetning av 877 y.1 N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluor-acetamid. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i en time. Etter isavkjøling ble 268 y.1 jodtrimethylsilan tilsatt, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk under dannelse av det silylerte derivat av 7p-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-méthoxyimino-acetamido]-3-j odmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre.

Det silylerte derivat ble oppløst i 3,6 ml acetonitril. ben således erholdte løsning ble tilsatt 71 mg 4-hydroxy-1,4-methylenpiperidin, og den resulterende blanding ble omrørt i 2 timer under isavkjøling. 0,3 ml methanol ble deretter tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med acetonitril. Bunnfallet ble oppløst i 30 % ethanol. Etter konsentrering under redusert trykk ble residuet oppløst i en 7:l-blanding av aceton og vann. Den resulterende løsning ble renset ved silicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: 7:1- og 5:l-blandinger av aceton og vann) under dannelse av 29 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 3

7( 3-[( Z)- 2-( 2- aminothiazol- 4- yl)- 2- methoxyiminoacetamido]- 3-( 4- hydroxy- 1- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

977 mg 73-[(Z)-2-(2-aminothiazol)-4-yl)-2-methoxy-iminoacetamido ]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 16 ml methylenklorid, etterfulgt av tilsetning av 1350 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i en time. Etter isavkjøling ble 810 y.1 jodtrimethylsilan tilsatt, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk under dannelse av det silylerte derivat av 7|3-[ (Z)-2-( 2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre.

Det silylerte derivat ble oppløst i 12 ml acetonitril, etterfulgt av tilsetning av 240 ul tetrahydrofuran. Den således erholdte løsning ble tilsatt 300 mg 4-hydroxy-kinuclidin, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 1 1/2 time. 1,2 ml methanol ble deretter tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med acetonitril. Bunnfallet ble oppløst i 30 % ethanol. Etter konsentrering under redusert trykk ble residuet oppløst i en 7:l-blanding av aceton og vann. Den resulterende løsning ble renset ved silicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: 7:l-blanding av aceton og vann) under dannelse av 38 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 4

73-[( 2)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido ]- 3-( 4- hydroxy- 1- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

486 mg 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 9 ml methylenklorid, etterfulgt av tilsetning av 980 u.1 N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluor-acetamid. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i en time. Etter isavkjøling ble 410 ul jodtrimethylsilan tilsatt, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk under dannelse av det silylerte derivat av 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyimino-acetamido ]-3-j odmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre.

Det silylerte derivat ble oppløst i 6 ml acetonitril, etterfulgt av tilsetning av 130 ul tetrahydrofuran. Den resulterende løsning ble tilsatt 150 mg 4-hydrokinuclidin, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i en time. 0,6 ml methandl ble deretter tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med acetonitril. Bunnfallet ble oppløst i 30 % ethanol. Etter konsentrering under redusert trykk ble residuet renset ved silicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: 9:l-blanding av aceton og vann) under dannelse av 13 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 5

7g-[( Z)- 2-( 2- aminothiazol- 4- yl)- 2- methoxyiminoacetamido]- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

240 mg 73-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxy-iminoacetamido] -3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 4 ml methylenklorid, etterfulgt av tilsetning av 330 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 30 min. Etter isavkjøling ble 200 ul jodtrimethylsilan tilsatt, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Reaksjonsblandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk under dannelse av det silylerte derivat av 73-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre.

Det silylerte derivat ble oppløst i 3 ml acetonitril, etterfulgt av tilsetning av 60 ul tetrahydrofuran. Den resulterende løsning ble tilsatt 98 mg 4-carbamoylkinuclidin, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. 0,3 ml methanol ble deretter tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 15 min. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med acetonitril. Bunnfallet ble oppløst i 30 % ethanol. Etter konsentrering under redusert trykk ble residuet oppløst i en 7:l-blanding av aceton og vann. Den således erholdte løsning ble renset ved silicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: 7:l-blanding av aceton og vann) under dannelse av 53 mg av det ønskede produkt.

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido ]- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

790 mg 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 10 ml methylenklorid, etterfulgt av tilsetning av 2,1 ml N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluor-acetamid. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i en time. Etter isavkjøling ble 660 u.1 jodtrimethylsilan tilsatt, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk under dannelse av det silylerte derivat av 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyimino-acetamido] -3- jodmethyl-3 -cef em-4-carboxylsyre.

Det silylerte derivat ble oppløst i 9 ml acetonitril, etterfulgt av tilsetning av 240 mg 4-carbamoylkinuclidin. Den resulterende blanding ble omrørt i en time under isav-kjøling. 0,6 ml methanol ble deretter tilsatt til reaksjonsblandingen, og den resulterende blanding ble omrørt i 15 min. Det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble deretter vasket med acetonitril. Bunnfallet ble oppløst i 30 % ethanol. Etter konsentrering under redusert trykk ble residuet oppløst i en 7:l-blanding av aceton og vann. Løsningen ble renset silicagel kolonnekromatografi

(elueringsmiddel: 7:1- og 5:1-blandinger av aceton og vann)

under dannelse av 326 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 7

73-[( 2)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- carboxymethoxy-iminoacetamido]- 3-( 4- hydroxy- l, 4- methylen- l- piperidinio)-methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 73-[(2)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido]-3-j odmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 500 mg 73-[(2)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethy1-3-cefem-4-carboxylsyre og 1,23 ml N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid og 780 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 90 mg 4-hydroxy-l,4-methylenpiperidin under dannelse av 113 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 8

73-[( 2)- 2-( 2- aminothiazol- 4- yl)- 2- methoxyiminoacetamido]- 3-( 4- hydroxvmethyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 73-[(2)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyimino-acetamido] -3- jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 240 mg 73-[(2)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacet-amido] -3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 330 u.1 N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid og 300 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 89 mg 4-hydroxymethylkinuclidin under dannelse av 6 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 9

73-[( Z)- 2-( 2- aminothiazol- 4- yl)- 2- propargyloxy- iminoacet-amido]- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 7(3-[ (Z)-2-( 2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxy-iminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 290 mg 7(3-[ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-propargyloxy-iminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 380 u.1 N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid og 230 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 112 mg 4-carbamoylkinuclidin under dannelse av 10 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 10

7| 3- [ ( Z) - 2- ( 2- aminothiazol- 4- yl) - 2- carbamoylmethoxyiminoacet-amido] - 3- ( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 7(3-[ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-carbamoyl-methoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 110 mg 7B-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-carba-moylmethoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 140 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid og 180 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 41 mg 4-carbamoylkinuclidin under dannelse av 5 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 11

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- ethoxyiminoacet-amido]- 3-( 4- carbamoy1- 1- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 7|3-[ (Z)-2-( 5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 300 mg 7(3-[(Z)-2-( 5-amino-l, 2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 600 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluor-acetamid og 500 y.1 jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 118 mg 4-carbamoylkinuclidin under dannelse av 62 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 12

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2-( 1- carboxy- l-methylethoxy)- iminoacetamido]- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio )- methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(1-carboxy-1-methylethoxy)-iminoacetamido]-3-j odmethy1-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 530 mg 73-[(Z)-2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(1-carboxy-l-methoxyethoxy)-imino-acetamido] -3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 820 y.1 N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid og 390 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 186 mg 4-carbamoylkinuclidin under dannelse av 100 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 13

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- carboxymethoxy-iminoacetamido]- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3-cefem- 4- carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 500 mg 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-carboxymethoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 1,23 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid og 780 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 142 mg 4-carbamoylkinuclidin under dannelse av 36 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 14

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido] - 3-( 4- hydroxymethyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3-cefem- 4- carboxylat

Som beskrevet i eksemplene 1-6, ble det silylerte derivat av 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylsyre erholdt fra 460 mg 73-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-y1)-2-methoxyiminoacetamido]-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre, 640 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluor-acetamid og 390 ul jodtrimethylsilan. Det silylerte derivat ble omsatt med 142 mg 4-hydroxylmethylkinuclidin under dannelse av 8 mg av det ønskede produkt.

Eksempel 15

73- C( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido] - 3-( 4- methyl- 1- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

700 mg p-methoxybenzyl 73-[(Z)-2-(5-amino)-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylat ble oppløst i en blandet løsning av 50 ml ethylacetat og 1 ml methanol. Etter at det hele var isav-kjølt, ble en løsning av 2,8 ml ethylacetat og 114 mg 4-methylkinuclidin tilsatt, og blandingen ble omrørt i 15 min. Det resulterende bunnfall ble gjenvunnet ved filtrering, ble vasket med ethylacetat, hvorved det ble erholdt 770 mg p-methoxybenzyl 73-[(Z)-2-(5-amino)-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(4-methyl-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylatjodil. 770 mg av denne forbindelse ble suspendert i 8 ml methylenklorid. Etter isavkjøling ble 510 ul anisol og 730 ul trifluoreddiksyre tilsatt. Blandingen ble omrørt i 4 timer og ble deretter omrørt i ytterligere 2 1/2 time ved romtemperatur. Den resulterende reaksjonsløsning ble dråpevis helt over i 30 ml diisopropylether, og det resulterende bunnfall ble oppsamlet ved filtrering. Bunnfallet ble opp-løst i 5 ml vann. Løsningen ble justert til pH 5,0 ved tilsetning av natriumhydrogencarbonat. Blandingen ble under-kastet omvendt fasesilicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: vann-»5 % methanol) for rensing under dannelse av 27 mg av det ønskede produkt. Eksempel 16 73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- cyclopropyl-methoxyiminoacetamido]- 3-( 4- c arbamoy1- 1- kinuclidinio)-methyl- 3- ce£em- 4- carboxylat 450 mg p-methoxybenzyl 73-[(Z)-2-(5-t-butoxycarbox-amido-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopropylmethoxyiminoacet-amido] -3- jodmethyl-3-cef em-4-carboxylat ble oppløst i 30 ml ethylacetat. Etter isavkjøling ble en blandet løsning av 1 ml methanol og 5 ml ethylacetat og 80 mg 4-carbamoylkinuclidin tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 min. Det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering, ble vasket med ethylacetat, hvorved det ble erholdt 290 mg p-methoxybenzyl 73-[(Z)-2-(5-t-butoxycarboxamido-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopropylmethoxyiminoacetamido]-3-(4-carbamoyl-l-kinuclidinio )-methyl-3-cefem-4-carboxylatjodi d. 290 mg av denne forbindelse ble oppløst i 6 ml maursyre, og den resulterende løsning ble omrørt i en dag ved romtemperatur. Til reaksjonsløsningen ble det tilsatt 10 ml aceton, 30 ml diisopropylether og 50 ml n-hexan. Det dannede bunnfall ble filtrert fra, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i 10 ml av en vann-methanolløsning, og løsningen ble justert til pH 5,5 ved tilsetning av natriumhydrogencarbonat. Den resulterende løsning ble konsentrert, etterfulgt av rensing via omvendt fasesilicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: vann+5 % methanol) under dannelse av 19 g av det ønskede produkt. Eksempel 17 73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- cyclopropyl-methoxyiminoacetamido]- 3-( 4- hydroxymethyll- kinuclidinio)-methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

Som beskrevet i eksempel 16, ble 450 mg p-methoxybenzyl 73-[(Z)-2-(5-t-butoxycarboxamido-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopropyImethoxyiminoacetamido]-3-jodmethyl-3-cefem-4-carboxylat omsatt med 73 mg 4-hydroxymethylkinuclidin under dannelse av 310 mg p-methoxybenzyl 73-[(Z)-2-(5-t-butoxycarboxamido-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopropyl-methoxyiminoacetamido]-3-(4-hydroxymethyl-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat, etterfulgt av fjerning av den beskyttende gruppe ved hjelp av maursyre, under dannelse av 23 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 2: 7p- formamido- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem-4- carboxylat

1,2 g 7|3-formamido-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble suspendert i 12 ml methylenklorid, hvorpå 815 ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 min. Etter avkjøling med is ble 1,25 ml jodtrimethylsilan tilsatt, og blandingen ble omrørt i 5 min., hvorpå temperaturen på blandingen ble hevet til romtemperatur, og blandingen ble omrørt i ytterligere 15 min. Løsningsmidlet ble destillert fra under redusert trykk fra den resulterende løsning, og residuet ble oppløst i 12 ml acetonitril. 616 mg 4-carbamoylkinuclidin ble tilsatt til løsningen under isavkjøling, hvorpå den ble omrørt i en time. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 3 ml methanol og ytterligere 300 ml diethylether, og det resulterende bunnfall ble filtrert.

Bunnfallet ble renset ved hjelp av silicagel kolonnekromatografi [elueringsmiddel: aceton-vann (7:1) og (5:1)] under dannelse av 140 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 3:

7[ 3- tritylamino- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3-cefem- 4- carboxylat

2,4 g 7B-tritylamino-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble oppløst i 24 ml methylenklorid, hvorpå 960 Ul N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid ble tilsatt, og det hele ble omrørt i 30 min. Etter avkjøling med is ble 720 ul jodtrimethylsilan tilsatt, og blandingen ble omrørt i 5 min., hvorpå temperaturen ble hevet til romtemperatur, og blandingen ble omrørt i ytterligere 15 min. Løsningsmidlet ble destillert fra under redusert trykk, og residuet ble oppløst i 12 ml acetonitril. 756 mg 4-carbamoylkinuclidin ble tilsatt løsningen under isavkjøling, og løsningen ble omrørt i en time. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 3,2 ml methanol og deretter 240 ml diethylether, og det resulterende bunnfall ble filtrert.

Bunnfallet ble renset ved hjelp av silicagel kolonnekromatografi [elueringsmiddel: aceton-vann (7:1), ( 5:1) og (3:1)] under dannelse av 207 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 4: 7B- 2- thienylacetamido) - 3- ( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio) - methyl- 3- cefem- 4- carboxylat

6,0 g 7p-(2-thienylacetamido)-3-acetoxymethyl-3-cefem-4-carboxylsyre ble oppløst i 60 ml methylenklorid, hvorpå 3,08 ml N-methyl-N-(trimethylsilyl)-trifluoracetamid ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 min. Etter av-kjøling av blandingen med is ble 4,73 ml jodtrimethylsilan tilsatt, og blandingen ble omrørt i 5 min., hvorpå blandingen ble ytterligere omrørt ved romtemperatur ytterligere 15 min. Den resulterende løsning ble konsentrert under redusert trykk, og residuet ble oppløst i 60 ml acetonitril. Etter isavkjøling av den resulterende løsning ble 2,3 g 4-carbamoylkinuclidin tilsatt løsningen, og denne ble omrørt i

en time. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 6 ml methanol, hvorpå 600 ml diethylether ble dråpevis tilsatt. Etter omrøring av blandingen i en time ble det resulterende bunnfall filtrert fra.

Bunnfallet ble renset ved hjelp av silicagel kolonnekromatografi [elueringsmiddel: aceton-vann (7:1) og ( 5:1)] under dannelse av 700 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 5: 7 B-amino- 3-( 4- carbamoy1- 1- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat- hydroklorid

130 mg av forbindelsen fremstilt i fremstilling 2, ble suspendert i 5 ml methanol, og 0,52 ml konsentrert saltsyre ble tilsatt til suspensjonen ved romtemperatur og ble omrørt i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk og krystallisert ved hjelp av ethylether-methanol, hvorved 115 mg av det ønskede produkt ble erholdt.

Fremstilling 6: 73- amino- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat- hydroklorid

100 mg av forbindelsen fremstilt i fremstilling 3, ble suspendert i 5 ml 50 % maursyre og ble omrørt ved romtemperatur i 3 1/2 time. Til suspensjonen ble tilsatt 20 ml vann, og løselige bestanddeler ble filtrert fra, hvorpå filtratet ble konsentrert under redusert trykk.

Residuet ble oppløst i 1 ml IN saltsyre, og 5 ml propanol og 10 ml diethylether ble tilsatt. Bunnfallet ble filtrert, vasket med n-hexan og ble deretter tørket, hvorved 45 mg av det ønskede produkt ble erholdt.

Fremstilling 7: 7B- amino- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat- hydroklorid

600 mg av av forbindelsen fremstilt i fremstilling 4, ble suspendert i 30 ml methylenklorid, og 1,24 ml N,N-di-methylanilin og 465 ul klortrimethylsilan ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved 30°C i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til +25°C, hvorpå 1,27 g fosfor-pentaklorid ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i en time. Løsningen ble tilsatt en isavkjølt løsning av 1,3 ml 1,3-butandiol i 25 ml methylenklorid, og blandingen ble omrørt ved samme temperatur i 10 min. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 0°C og ble omrørt i ytterligere 40 min., hvorpå det resulterende bunnfall ble filtrert. Bunnfallet ble oppløst i 7 ml methanol, og løselige bestanddeler ble filtrert fra. Deretter ble 20 ml methylenklorid og 20 ml diethylether tilsatt til filtratet, hvorpå bunnfallet ble filtrert under dannelse av 30 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 8:

t- butyl 73- amino- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3-cefem- 4- carboxylat- 1- oxydbromid

600 mg t-butyl 7S-amino-3-bromethyl-3-cefem-4-carboxylat-l-oxydhydrobromid ble oppløst i 6 ml N,N-dimethylformamid, og 456 mg 4-carbamoylkinuclidin ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i argongass ved romtemperatur i 14 timer. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 120 ml diethylether, det resulterende bunnfall ble filtrert fra og vasket med n-hexan, hvorved 580 mg av det ønskede produkt ble erholdt.

Fremstilling 9:

t- butyl 7P- amino- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3-cefem- 4- carboxylatbromid- hydroklorid

570 mg av forbindelsen fremstilt i fremstilling 8, ble oppløst i 10 ml N,N-dimethylformamid, 500 ul fosfortriklorid ble tilsatt til løsningen ved +25°C, og det hele ble omrørt i 30 min. Til reaksjonsløsningen ble tilsatt 50 ml diethylether, den utskilte olje ble fjernet og vasket med diethylether, hvoretter det resulterende faste materiale ble tørket under redusert trykk under dannelse av 164 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 10:

73- amino- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

Til 150 mg av forbindelsen fremstilt i fremstilling 9, ble tilsatt 1,5 ml maursyre og 0,15 ml konsentrert saltsyre under isavkjøling, hvorpå blandingen ble omrørt i 4 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i 5 ml isvann og ble nøytralisert med natriumbicarbonat. Det resulterende produkt ble renset ved omvendt fasesilicagel kolonnekromatografi (elueringsmiddel: vann) under dannelse av 60 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 11:

p- methoxybenzyl 73- fenylacetamido- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio) - me thy 1- 3 - cef em- 4 - carboxy lat jodid 980 mg p-methoxybenzyl 7B-fenylacetamido-3-klor-methyl-3-cefem-4-carboxylat ble suspendert i 20 ml aceton, og 362 mg natriumjodid ble tilsatt til suspensjonen, og det hele ble omrørt ved romtemperatur i en time. Til den resulterende suspensjon ble tilsatt 313 mg 4-carbamoylkinuclidin under isavkjøling, og blandingen ble omrørt i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert, og 70 ml diethylether ble tilsatt til filtratet. De utskilte faste materialene ble filtrert under dannelse av 500 mg av det ønskede produkt.

Fremstilling 12:

p- methoxybenzyl 73- formamido- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)-methyl- 3- cefem- 4- carboxylatj odid

Til 465 ml av en ethylacetatløsning av 9,3 g p-me thoxybenzy l-7(3-f ormamido- 3 - j odmethyl- 3 -cef em- 4 -carboxylat ble dråpevis tilsatt i løpet av en time og under omrøring og isavkjøling en blandet løsning av 176 ml methanol og ethylacetat (1:4 v/v) av 2,94 g 4-carbamoylkinuclidin. Etter omrøring i 30 min. ble det resulterende bunnfall oppsamlet ved filtrering, ble vasket med ethylacetat og deretter diisopropylether, hvorved 12,0 g av det ønskede produkt ble erholdt.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm-<1>, Nujol): 1780

NMR-spektrum (6, D20-aceton-dg): 1,9-2,4 (m), 3,50 (8H, m), 3,70 (3H, s), 4,16 (1H, d, J=15Hz), 4,54 (1H, d, J=l5Hz), 5,24 (2H, m), 5,78 (1H, d, J=5Hz), 6,87 (2H, d,

Fremstilling 13:

73- formamido- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem-4- carboxylat

11,8 g av forbindelsen erholdt i foregående fremstilling 12, ble oppløst i 50 ml iskald maursyre og ble omrørt i 10 timer ved romtemperatur. Reaksjonsløsningen ble filtrert, og filtratet ble dråpevis tilsatt til 100 ml aceton. Til

den resulterende løsning ble ytterligere 200 ml diisopropylether tilsatt. Det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble vasket med aceton. Bunnfallet ble oppløst i 30 ml dimethylformamid. Løsningen ble dråpevis tilsatt til 150 ml aceton. Det dannede bunnfall ble oppsamlet ved filtrering og ble vasket med aceton og diisopropylether. Det faste materialet ble deretter tørket under redusert trykk under dannelse av 6,66 g av det ønskede produkt.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm-<1>, Nujol): 1770

NMR-spektrum (6, D20): 2,30 (6H, m), 3,2-5,0 (m), 5,39 (1H, d, J=6Hz), 5,89 (1H, d, J=6Hz), 8,35 (1H, s).

Eksempel 18

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido ]- 3-( 4- carbamoy1- 1- kinuclidinio)- methyl-3-cefem-4-carboxylat

En blanding bestående av 46 mg 2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-methoxyiminoeddiksyre, 35 mg 1-hydroxy-lH-benzotriazolhydrat, 52 mg N,N'-dicyclohexylcarbodiimid og 1 ml N,N-dimethylformamid ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer, hvorpå blandingen ble filtrert, og filtratet ble avkjølt til 0°C. Den resulterende løsning ble tilsatt til en isavkjølt løsning av 100 mg 7B-amino-3-(4-carbamoyl-l-kinuclidinio) -methyl-3-cefem-4-carboxylsyre-hydroklorid, 2 ml N,N-dimethylformamid og 72 ul N,N-dimethylanilin. Etter omrøring av den blandede løsning ved romtemperatur i 14 timer ble reaksjonsblandingen filtrert, og filtratet ble dryppet i 100 ml diethylether under omrøring av blandingen. Det dannede bunnfall ble filtrert fra og vasket med diethylether. Til det vaskede bunnfall ble tilsatt 10 ml vann, og løse bestanddeler ble filtrert fra. Det resulterende filtrat ble renset ved omvendt fasesilicagel kolonnekromatografi under dannelse av 3 g av det ønskede produkt.

Infrarødt absorpsjonsspektrum (cm<->^, Nujol): 1775

NMR-spektrum (6, D20): 2,30 (6H, m), 3,1-4,0 (m), 4,16 (3H, s), 5,43 (1H, d, J=6Hz), 5,97 (1H, d, J=6Hz).

Eksempel 19

73-[( Z)- 2-( 5- amino- l, 2, 4- thiadiazol- 3- yl)- 2- methoxyimino-acetamido]- 3-( 4- carbamoyl- l- kinuclidinio)- methyl- 3- cefem- 4-carboxylat

2 g 73-amino-3-(4-carbamoyl-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylsyre-hydroklorid ble oppløst i 40 ml av en aceton-vannblanding (1:1), og 2,08 ml triethylamin ble tilsatt til løsningen. Den resulterende løsning ble avkjølt med is, og 2,55 g 2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-(Z)-2-methoxyiminoacetylklorid ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 50 min. Reaksjonsløsningen ble tilsatt til 200 ml ethanol, de utskilte faste materialer ble filtrert, og det faste materialet ble vasket med ethanol og isopropylether under dannelse av 450 mg av det ønskede produkt.

Infrarødt absorpsjonsspekter så vel som NMR-spekteret av produktet var i overensstemmelse med de tilsvarende ifølge eksempel 18.

Forbindelsene i de etterfølgende eksempler 20-28 ble fremstilt som beskrevet i eksemplene 18 og 19.

Den etterfølgende tabell 5 viser en sammenligning mellom aktivitetene av forbindelser fremstilt ved analogifremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse og referanse-forbindelser ifølge Japansk patentsøknad nr. 59-219,292 (tilsvarende EP søknad nr. 121244).

Som vist i tabellen er forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse overlegne referanseforbindelsene med hensyn til antibakterielle egenskaper, bl.a. antibakteriell aktivitet overfor Pseudomonas aeruginose EP-01. Ved en sammenligning mellom de mest strukturlike forbindelser opp-viser forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse innehold-ende 4-hydroxy-kinuclidiniogrupper (eks. 3) og 4-carbamoyl-kinuclidiniogrupper (eks. 5), fire ganger så høy antibakteriell aktivitet overfor Pseudomonas aeruginosa EP-01, sammen-lignet med den tilsvarende referanseforbindelse innehold-ende usubstituert kinuclidiniogruppe. Dette vil si at når en spesiell substituent innføres i 4-posisjonen av kinuclidinio-gruppen, forberedes de antibakterielle egenskaper vesentlig.

Claims

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser av generell formel I: hvori Y betegner CH eller et nitrogenatom, R betegner en lavere alkylgruppe eller en lavere alkynylgruppe eller en carboxylsubstituert eller en carbamoylsubstituert, eller en cyclopropylsubstituert lavere alkylgruppe, R^ betegner en hydroxylgruppe, en lavere alkylgruppe, en hydroxysubstituert lavere alkylgruppe, eller carbamoylgruppe, og n betegner 1 eller 2, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at a) en forbindelse av generell formel II: hvori aminogruppen eller carboxylgruppen er blitt beskyttet med en beskyttende gruppe, og hvori Y og R^ har de ovenfor angitte betydninger og X betegner et halogenatom, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av generell formel III: eller et salt derav, hvori n og R2 har de ovenfor angitte betydninger, hvoretter eventuelt den beskyttende gruppe fjernes eller b) at en forbindelse av generell formel IV: hvor gruppen -C00 er blitt beskyttet med en beskyttende gruppe, og hvori n og R_ har de ovenfor angitte betydninger, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av generell formel V: eller et reaktivt derivat ved caroxylgruppen derav, eller et salt derav, hvori aminogruppen er blitt beskyttet med en beskyttende gruppe, og hvori Y og R^ har de ovenfor angitte betydninger, og eventuelt at den beskyttende gruppe fjernes.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av: 7(3-[ (2)-2-( 2-aminothiazol-4-yl) -2-methoxyimino-acetamido ]-3-(4-hydroxy-l,4-methylen-l-piperidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat av formelen: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, eller 7(3-[ (2) -2-(5-amino-l, 2,4-thiadiazol-3-yl) -2-methoxy-iminoacetamido] -3-(4-hydroxy-l ,4-methylen-l-piperidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat av formelen: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, eller 7B-[ (Z)-2- (2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacet-amido] -3- ( 4-hydroxy-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat av formelen: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, eller 7B-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxy-iminoacetamido] -3- ( 4-hydroxy-l-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat av formelen: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, eller 7B-[(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacet-amido] -3- ( 4-carbamoyl-l-kinuclidinio) -methyl-3 -cef em-4-carboxylat av formelen: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, eller 7B-[(Z)-2-(5-amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxy-iminoacetamido ]-3-(4-carbamoy1-1-kinuclidinio)-methyl-3-cefem-4-carboxylat av formelen: eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at de tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.