NO130322B - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- NO130322B NO130322B NO04595/69A NO459569A NO130322B NO 130322 B NO130322 B NO 130322B NO 04595/69 A NO04595/69 A NO 04595/69A NO 459569 A NO459569 A NO 459569A NO 130322 B NO130322 B NO 130322B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- culture
- strain
- fibrinolysokinase
- nutrient solution
- streptomyces
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 241000187392 Streptomyces griseus Species 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 241000958262 Streptomyces californicus Species 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 17
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 7
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 7
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000186986 Streptomyces anulatus Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/814—Enzyme separation or purification
- Y10S435/816—Enzyme separation or purification by solubility
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Fremgangsmåte til fremstilling av
fibrinolysokinase ved dyrking av mikroorganismer.
Det er kjent at det fra menneskelig urin kan utvinnes
en fibrinolysokinase, urokinase. Denne utvinningsfremgangsmåte er imidlertid omstendelig på grunn av anvendelse av det spesielle ut-gangsmateriale. Dessuten er innholdet av kinaser så lite at det må opparbeides flere hundre liter urin for en terapeutisk dose (Astrup og Sterndorff, Nature, 17_0, 981 (1952)).
Det er videre kjent at det fra hemolytiske streptokokker
kan utvinnes en fibrinolysokinase som betegnes som streptokinase.
Dette stoffs ulemper for den medisinske anvendelse ligger fremfor
alt i dets høye antigene virkning og i den nødvendige, omstendelige renseoperasjon som øker prisen betraktelig (Markus og Ambrus, J. Biol.
Chem. 235, 1673 (1960)).
Videre er det kjent fibrinolysokinaser fra Bacillus subtilis (Shimi og Kelada, Arch. Mikrobiol. 50, nr. 4, 326 (1965))
og Pasteurella pestis (Beesley et al., J. Bacteriol. 1, 19 (1967)). Også ved disse er det ikke mulig med en praktisk anvendelse av
kjente grunner.
Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte til fremstilling av fibrinolysokinase ved dyrkning av en mikroorganisme, idet frem-gangsmåten er karakterisert ved at man som mikroorganisme anvender Streptomyces chrysomallus CBS 670.68 eller CBS 671.68, Streptomyces griseus CBS 669-68 eller ATCC 10.137 eller Streptomyces californicus ATCC 3312, og fra kulturen, eventuelt etter fjerning av proteaser, utvinner fibrinolysokinase etter i og for seg kjente metoder. På denne måte utvinnes en fibrinolysokinase som er'av overordentelig god kjemisk stabilitet. Dette stoffs molekylvekt er relativt lavt, så-ledes at det ikke er å vente noen antigenvirkninger.
De anvendte stammer som produserer lysokinaser er funnet etter følgende metode.
Fra jordprøver isolerer man på kjent måte stammer som anvendes for podning av kulturkolber med næringsoppløsninger som muliggjør vekst av stammene. Man kan f.eks. anvende glyserin-glykokoll-næringsoppløsningen etter von Plotho med sammensetning 2% glyserin, 0,25% glykokoll, 0,1% NaCl, 0,1% KgHPO^, 0,01% FeSO^ . 7 H20, 0,01% MgSO^ . 7 H20 og 0,01% CaCO^. På grunn av den hurtigere vekst tilsetter man hensiktsmessig en slik næringsoppløsning dessuten komplekse karbonkilder som f.eks. maissvellevann (fortrinnsvis i konsentrasjoner på 0,25%) eller soyamel (fortrinnsvis likeledes i konsentrasjoner på 0,25%) eller begge sammen. I dette tilfelle må oppløsningens pH-verdi innstilles. Man foretrekker en begynnelses-pH av næringsoppløsningen mellom 6,0 og 8,0, spesielt mellom 6,5 og 7,5.
Næringsoppløsningens glyserin kan også erstattes med andre karbonkilder som f.eks. glukose eller rørsukker. Istedenfor glykokoll kan man også anvende andre nitrogenkilder, som f.eks. alanin, etylamin eller lysin. Karbon- og nitrogenkildenes konsentrasjoner, som også konsentrasjonen av saltene, kan svinge innen vide grenser. FeSO^, CaCOj og MgSO^ kan også helt utelates.
Av næringsoppløsningen fyller man f.eks. 100 ml i 1 liters Erlenmeyerkolber, steriliserer på kjent måte, poder med stammen som skal undersøkes og dyrker kolben ved 15 til 35°C, fortrinnsvis ved 2 3 til 30°C, på rystemaskiner. Viser kulturen vekst, hvilket vanligvis foregår etter 1 til 10 dager, for det meste etter 3 til 5 dager, så tar man ut en prøve av f.eks. 5 ml, fraskiller i denne prøve mycelet ved filtrering eller sentrifugering og innstiller oppløsningen med ca. 1/10 HC1 på pH 0 til 4. Deretter oppvarmes inntil 15 minutter ved 65°C, avkjøles med en gang og pH-innstilles med ca. 1/10 NaOH
på 5 til 10. Fibrinolysokinase-aktiviteten bestemmes på vanlig måte på Miillertz-Astrup-plate. Eventuelt resterende gjenblivende proteo-lytisk aktivitet bestemmes på kjent måte likeledes på den oppvarmede Miillertz-Astrup-plate.
Etter ovennevnte metode ble det funnet tre nye stammer med tydelig lysokinase-aktivitet.
Disse tre stammer (stammenes omtale se tabell 1) som
alle på grunn av deres sporoforstruktur hører til slekten Streptomyces, viser de i tabell 1-3 oppførte viktige systematiske karakteristika (Hiitter, R., "Systematik der Streptomy ceten", Bibliotheca Micro-biologica, Fase. 6, S. Karger, Basel, New York, 1967).
Stammene som ble kalt St 16, St 18 og St 24 ble deponert
i Centraalbureau voor Schimmelcultures under nummerne CBS 670.68, 671.68 og 669.68
Stammen ATCC 3312 er beskrevet i S.A. Waksman (Actino-myces californicus) IMRU 3312. (ETH 10212, PSA 97, ATCC 19734, ISP 5058) Soil. Type strain (S.A. Waksman, the Actinomycetes. Vol. 2. Classification, Identification and Descriptions of Genera and Species. 1961, p. 187. The Williams and Wilkins Co., Baltimore). Intern. J.Syst. Bacteriol. _18: 93 (1968). Comment: Streptomyces griseus subsp. californicus (Intern.Bull.Bacteriol.Nomen, and Taxon. 15_: 217-218
(1965)).
Stammen ATCC 10137 er beskrevet i S.A. Waksman 4. From Waksman's original streptomycinproducing strain 3463. Proe.Soc.Exptl. Biol.Med. 55: 66-69 (1944).
En "CTA"-enhet refererer til standard f ibrinolysokinase-enheten som er opptatt av Committee on Thrombolytic Agents, National Heart Institute. En CTA-enhet av fibrinolysokinase er definert som å ha en acety1-L-lysin-metylester-esteraseaktivitet til å hydrolysere 0,77 x 10 3/umo1 av acetyi-L-lysinmetylester pr. minutt eller 46,2 x I0~<5>/<umo1> pr. time målt ved metanolmetoden.
For utvinnelse av fibrinolysokinaser dyrkes disse
stammer som nevnt ovenfor. Etter 2 til 3 dagers vekst adskilles mycelet og fra kulturvæsken anrikes lysokinasen på i og for seg kjent måte ved inndampning av oppløsningen og utfelling med organiske opp-løsningsmidler.
De fundne fibrinolysokinaser skal finne anvendelse som legemidler for de kjente indikasjoner. Vedrørende anvendelse og dosering foreligger litteratur (Fletcher et al., J. Lab. and Clin. Med. 65, 713 (1965)).
Eksempel 1.
Man poder med 1 ml av en sporesuspensjon som man får
ved avspyling av en 10 dager gammel skråag^rkultur av stammen St 16
på glyserin-glykokoll-agar etter von Plotho med 12 ml vann, i en 1 liters Erlenmeyerkolbe, som inneholder 100 ml av en næringsoppløs-ning av sammensetning 2% glyserin, 0,25% glykoko' J., 0,4% maissvellevann, 0,4% soyamel, 0,1% NaCl, 0,1% K2HP04, 0,01* MgSO^ . 7 H20,
0,01% FeSO^ . 7 H20 og 0,01% CaCO-j (sterilisering 60 minutter ved 121°C). Kulturen dyrker man på en rystemaskin ved 24°C. Etter 3 dagers dyrkning får man en kulturoppløsning som inneholder 1,9 CTA-enheter/ml. Det omtrent klare sentrifugat innstilles på f.eks. pH
1,5 og holdes i 15 minutter ved 65°C. Etter avkjøling med en gang innstilles på pH 7,5 og sentrifugeres på nytt. Sedimentet kasseres. Det overstående has i fire ganger volumet -20°C kald aceton. Det omrøres i 5 minutter. Deretter holdes blandingen rolig ved +4°C i 3 timer. Det overstående avdekanteres deretter og kasseres.
Sedimentet opptas igjen i kald tørr aceton og dispergeres grundig heri. Deretter sentrifugeres det og det dannede sediment tørkes i vakuum. Utbytte ca. 50 til 80. Anrikning ca. 10 ganger.
Stammen St 16 viser de i tabell 1, 2 og 3 oppførte artskarakteristika og skulle være tilordnet Streptomyces chrysomallus Lindenbein (Lindenbein, W. Arch. Mikrobiol. 17, 36l (1952)).
Eksempel 2.
Poder man en næringsoppløsning ifølge eksempel 1 med
1 ml av en sporesuspensjon som man utvinner ved utspyling av en
10 dager gammel skråagarkultur av stammen St 24 med 12 ml vann og dyrker ifølge eksempel 1, så får man etter 2 dagers kultur en kultur-oppløsning som inneholder 0,51 CTA-enheter/ml.
Det omtrent klare sentrifugat innstilles på f.eks. pH 1,5 og holdes i 15 minutter ved 65°C. Etter omgående avkjøling innstilles på pH 7,5 og sentrifugeres på nytt. Sedimentet kasseres.
Det overstående has i 4 ganger volumet -20°C kald aceton. Det omrøres i 5 minutter. Peretter holdes blandingen rolig ved +4°C 1 3 timer. Det overstående avdekanteres endelig og kasseres.
Sedimentet opptas igjen i kald tørr aceton og dispergeres grundig heri. Deretter sentrifugeres det og det dannede sediment tørkes i vakuum. Utbytte ca. 50 til 80%. Anrikning ca. 10 ganger.
Stammen St 24 viser de i tabellen 1, 2 og 3 oppførte artskarakteristika og skulle være tilordnet Streptomyces griseus Waksman et Henricci (Waksmann, S.A., "The Actinomycetes" Vol II,
The Williams and '-'ilkins Comp., Baltimore (1961)).
Eksempel 3.
Poder nan 100 ml av en næringsoppløsning som inneholder 3% glyserin, 0,4% glykokoll, 0,25% maissvellevann, 0,4% soyamel, 0,1% NaCl, 0,1% I^HPC^, 0,01% MgSO^ .. 7 <H>2<0>, 0,01% FeSO^ . 7 <H>20 og 0,01% CaCOj (sterilisering .'0 minutter ved 121°C)., ifølge eksempel 2 med stammen St 24, så får man etter 3 dagers kultur en næringsopp-løsning som inneholder 10,2 QA-enheter/ml.
Den videre opparbeidelse foregår som angitt i eksempel
1 og 2 .
Eksempel 4.
Poder man 100 ml av en næringsoppløsning ifølge eksempel 3 med 1 ml av en sporesuspensjon, som man utvinner ved avspyling av en 10 dager gammel skråagarkultur av stammen St 18 med glyserin-glykokollagar etter von Plotho, så får man etter 4 dagers kultur på en rystemaskin ved 24°C en kulturvæske som inneholder 5,3 CTA-enheter/ml.
Den videre opparbeidelse foregår som angitt i eksempel
1 og 2.
Stammen St 18 viser de i tabellene 1, 2 og 3 oppførte artskarakteristika og skulle være tilordnet Streptomyces chrysomallus Lindenbein (Lindenbein, W. Arch. Mikrobiol. 17, 36l (1952)).
Eksempel 5-
Poder man 100 ml av en næringsoppløsning av sammensetning 2% glukose, 0,4% glykokoll, 0,25% maissvellevann, 0,25% soyamel, 0,1% NaCl, 0,1% KgH<PO>j,, 0,01% MgSC^ . 7 H20, 0,01% FeS<C>^ . 7 <H>gO og 0,01% CaCO-j (sterilisering 60 minutter ved 121°C), med en sporesus-pens jon ifølge eksempel 4 med stammen St 18 og dyrker i 4 dager ved 24°C så får man en kulturoppløsning som inneholder 4,2 CTA-enheter/ml.
Den videre opparbeidelse foregår som angitt i eksempel 1 og 2.
Eksempel 6.
Poder man som ifølge eksempel 4 næringsoppløsninger som ved siden av 2% glyserin, 0,4% glykokoll, 0,4% soyamel, 0,25% maissvellevann inneholder de i tabell 4 oppførte saltkonsentrasjoner med stammen St 18 får man de i tabell 4 oppførte utbytter.
Den videre opparbeidelse foregår som angitt i eksemplene 1 og 2.
Eksempel 7.
Poder man næringsopløsninger av sammensetning 2% glyserin, 0,25% maissvellevann, 0,25% soyamel, 0,1% NaCl, 0,1% K2HPOi|, 0,01% MgSOjj . 7 H20, 0,01% FeSOjj . 7 H20 og 0,01% CaCO^ (sterilisering
60 minutter ved 121°C) med tilsetninger av forskjellige aminosyrer i konsentrasjoner på 0,4% ifølge eksempel 4 med stamme St 18, får man etter 4 dagers dyrking ved 24°C følgende utbytter:
Den ytterligere opparbeidelse foregår som i eksempel 1
og 2.
Eksempel 8.
Poder man et fermenteringskar som inneholder 60 liter av en næringsoppløsning med sammensetningen 2% glyserin, 0,4% glykokoll, 0,25% maissvellevann, 0,4% soyamel, 0,1% NaCl, 0,1% KgHPO^, 0,01% MgSO^ . 7 H20, 0,01% FeSO^ . 7 H20 og 0,01% CaCO^ (sterilisering
60 minutter ved 121°C) med 15 godt begrodde Erlenmeyerkolber med 100 ml næringsoppløsning av samme sammensetning, podet med stamme St 18, og dyrker under omrøring og lufting ved 24°C, så får man en kulturopp-løsning med følgende CTA-enheter/ml.
Den videre opparbeidelse foregår som angitt i eksempel 1 og 2.
Eksempel 9.
Poder man 100 ml av en næringsoppløsning ifølge eksempel 8 med en sporesuspensjon av stammen Stieptomyces californicus ATCC 3312 og dyrker 90 timer på en rystemaskin ved 23°C, så får man en kulturoppløsning med 1,4 CTA-enheter/ml.
Eksempel 10.
Poder man 100 ml av en næringsoppløsning ifølge eksempel 8 med en sporesuspensjon av stammen Streptomyces griseus ATCC 10.137 og dyrker 65 timer på en rystemaskin ved 23°Cj så får man en kultur-oppløsning med 5>2 CTA-enheter/ml.
Claims (1)
- Fremgangsmåte til fremstilling av fibrinolysokinase ved dyrkning av en mikroorganisme, karakterisert ved at man som mikroorganisme anvender Streptomyces chrysomallus CBS 670.68 eller CBS 671.68, Streptomyces griseus CBS 669.68 eller ATCC 10.137 eller Streptomyces californicus ATCC 3312, og fra kulturen, eventuelt etter fjerning av proteaser, utvinner fibrinolysokinase etter i og for seg kjente metoder.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE1810277A DE1810277C3 (de) | 1968-11-22 | 1968-11-22 | Verfahren zur Gewinnung einer Fibrinolysokinase |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO130322B true NO130322B (no) | 1974-08-12 |
Family
ID=5713985
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO04595/69A NO130322B (no) | 1968-11-22 | 1969-11-20 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3660239A (no) |
| JP (1) | JPS5011470B1 (no) |
| AT (1) | AT286912B (no) |
| BE (1) | BE742043A (no) |
| BR (1) | BR6914390D0 (no) |
| CA (1) | CA920963A (no) |
| CH (1) | CH532121A (no) |
| DE (1) | DE1810277C3 (no) |
| ES (1) | ES373763A1 (no) |
| FI (1) | FI46622C (no) |
| FR (1) | FR2023938B1 (no) |
| GB (1) | GB1240257A (no) |
| IL (1) | IL33273A (no) |
| NL (1) | NL6917593A (no) |
| NO (1) | NO130322B (no) |
| SE (1) | SE376256B (no) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5362240U (no) * | 1976-10-29 | 1978-05-26 | ||
| JPS5764924U (no) * | 1980-10-06 | 1982-04-17 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3140984A (en) * | 1961-11-30 | 1964-07-14 | Univ Alberta | Production of high activity fibrinolytic agents |
| GB1133579A (en) * | 1966-03-09 | 1968-11-13 | Shionogi & Co | Process for preparing proteases and enzymatic composition prepared thereby |
| US3444045A (en) * | 1966-09-20 | 1969-05-13 | American Cyanamid Co | Process for purifying streptokinase |
| US3477913A (en) * | 1967-10-31 | 1969-11-11 | Century Lab Inc | Method of production of urokinase |
-
1968
- 1968-11-22 DE DE1810277A patent/DE1810277C3/de not_active Expired
-
1969
- 1969-10-27 CH CH1605469A patent/CH532121A/de not_active IP Right Cessation
- 1969-10-29 IL IL33273A patent/IL33273A/xx unknown
- 1969-11-06 AT AT1042569A patent/AT286912B/de not_active IP Right Cessation
- 1969-11-14 CA CA067471A patent/CA920963A/en not_active Expired
- 1969-11-18 US US877818A patent/US3660239A/en not_active Expired - Lifetime
- 1969-11-19 FI FI693336A patent/FI46622C/fi active
- 1969-11-20 JP JP44092591A patent/JPS5011470B1/ja active Pending
- 1969-11-20 NO NO04595/69A patent/NO130322B/no unknown
- 1969-11-21 BE BE742043D patent/BE742043A/xx unknown
- 1969-11-21 BR BR214390/69A patent/BR6914390D0/pt unknown
- 1969-11-21 NL NL6917593A patent/NL6917593A/xx not_active Application Discontinuation
- 1969-11-21 ES ES373763A patent/ES373763A1/es not_active Expired
- 1969-11-21 GB GB57146/69A patent/GB1240257A/en not_active Expired
- 1969-11-21 FR FR6940246A patent/FR2023938B1/fr not_active Expired
- 1969-11-24 SE SE6916125A patent/SE376256B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE1810277B2 (de) | 1978-03-09 |
| FR2023938B1 (no) | 1973-12-21 |
| ES373763A1 (es) | 1972-05-16 |
| CH532121A (de) | 1972-12-31 |
| BE742043A (no) | 1970-05-21 |
| IL33273A (en) | 1974-03-14 |
| FI46622B (no) | 1973-01-31 |
| CA920963A (en) | 1973-02-13 |
| DE1810277A1 (de) | 1970-06-11 |
| SE376256B (no) | 1975-05-12 |
| FR2023938A1 (no) | 1970-08-21 |
| BR6914390D0 (pt) | 1973-04-19 |
| GB1240257A (en) | 1971-07-21 |
| DE1810277C3 (de) | 1978-11-02 |
| NL6917593A (no) | 1970-05-26 |
| FI46622C (fi) | 1973-05-08 |
| US3660239A (en) | 1972-05-02 |
| AT286912B (de) | 1970-12-28 |
| JPS5011470B1 (no) | 1975-05-01 |
| IL33273A0 (en) | 1969-12-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6319497B1 (en) | Non-obligate predatory bacterium burkholderia casidaeand uses thereof | |
| IE63272B1 (en) | The glycosidase inhibitor salbostatin, process fo r its preparation and its use | |
| JPS60244295A (ja) | （十）‐トランス‐シクロプロパンカルボン酸の製造方法 | |
| NO130322B (no) | ||
| JP2858799B2 (ja) | γ―イロンの製造方法 | |
| JP3014171B2 (ja) | ４−ハロ−３−ヒドロキシブチルアミドの製造法 | |
| Tsuji et al. | Sporulation of Clostridium botulinum I: Selection of an aparticulate sporulation medium | |
| Patel et al. | Cellulolytic bacteria associated with sloughing spoilage of California ripe olives | |
| Buston et al. | Synthesis of β-linked glucosaccharides by extracts of Chaetomium globosum | |
| Kishimoto et al. | Growth inhibition of Acidiphilium species by organic acids contained in yeast extract | |
| US4430433A (en) | Production of aryl acylamidases | |
| NO136204B (no) | ||
| Rugstad | Kininase production by some microbes | |
| Abdel-Fattah et al. | Production and isolation of milk-clotting enzyme from Aspergillus versicolor | |
| CN106047751A (zh) | 一株拟诺卡氏放线菌及其活性代谢产物的分离方法与应用 | |
| Jeong et al. | Production of an anti-complement exo-polymer produced by Auricularia auricula-judae in submerged culture | |
| SU539538A3 (ru) | Способ получени метаболита "а 27 106 | |
| JPS5920359B2 (ja) | ポリリジンの製造法 | |
| Nimi et al. | Effect of arginine on gramicidin S biosynthesis by Bacillus brevis | |
| Francis et al. | Acetylene reduction by effective and ineffective clover and soybean root nodules | |
| Kosenko et al. | The biological activity of the Sinorhizobium meliloti glucan | |
| JPH0728748B2 (ja) | メナキノン−４の製造法 | |
| SU1735364A1 (ru) | Штамм актиномицета SтRертомUсеS LaVeNDULae - продуцент протеолитических ферментов | |
| RU2078812C1 (ru) | Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды | |
| JPS5918995B2 (ja) | 多糖類の製造方法 |