MXPA99004278A - Vacuna de pertusis acelular con toxoides de difteria y tetanos - Google Patents

Abstract

La invención provee una vacuna de difteria, tétanos y pertusis que comprende una baja dosis de cada uno de toxoide de difteria (D), toxoide de tetanos (T) toxina de pertusis (PT), hemaglutinina filamentosa (FHA) y pertactina (69K). La vacuna contiene una capacidad de evitar pertusis mientras que muestra excepcionalmente baja reactogenicidad. También se proveen vacunas de combinación que comprenden antígenos adicionales.

Description

VACUNA DE PERTUSIS ACELULAR CON TOXO1DES DE DIFTERIA Y TÉTANOS La presente invención de refiere a nuevas formulaciones de vacuna, que comprenden una baja dosis de la proteína de membrana externa de 69kda de Bordetella pertussis (de aquí en adelante denominada "69K" o "antígeno de 69K" o pertactina, descrita en la Patente Europea 0 162 639. La 69K recombinante (P69) se ha descrito por N F Fairweather y otros, Symposium On Pertussis (Bethesda), 26-28 de Septiembre de 1990). La invención en particular se refiere a una vacuna que comprende más de un antígeno, especialmente una vacuna multivalente, la cual es: una vacuna para disminuir o tratar más de un estado de enfermedad, en el cual está presente una baja dosis de 69K. La presente invención también se refiere a la producción y uso de dichas vacunas en la medicina. Se sabe que 69K es un componente importante de vacunas de pertusis acelulares (vacunas Pa) para la prevención efectiva de pertusis. Un estudio sobre las repuestas de dosis de 5 vacunas de pertusis acelulares en adultos acelulares se publicó por US National Institutes of Health (N I H) en Mayo de 1996 en Keitel, W. y otros. Las vacunas que contienen 69K que incluyen vacunas "trivalentes" que comprenden antígenos contra difteria (D), tétanos (T) y pertusis (Pa) se han descrito en análisis clínicos conducidos en Italia y Suecia y se comercializan [por ejemplo bajo la Marca Comercial INFANRIX-DTPa (SmithKIine Beecham Biologicals)] . Normalmente el componente de pertusis de dichas vacunas comprende toxina de pertusis (PT por sus siglas en inglés) , haemaglutinina filamentosa (FHA por sus siglas en inglés) y 69K. En I N FANRIX-DTPa (Marca Comercial) las cantidades de D:T: PT: FHA:69K normalmente son 25 Lf: 10Lf: 25ug:25ug:8ug por 0.5 mi dosis de volumen vacuna. Otras vacunas multívalentes que comprenden 69K también son conocidas, por ejemplo vacunas que comprenden un antígeno contra hepatitis B y antígenos contra difteria, tétanos y pertusis (Hep B, DTPa) que se describieron en WO 93/24148. En dichas formulaciones la cantidad de D:T: PT: FHA:69K se le dio como 24 Lf: 10Lf: 25ug:25ug:8ug por 0.5 mi en dosis de volumen de vacuna. Se ha encontrado ahora que una vacuna para difteria, tétanos y pertusis que contiene una baja dosis de cada toxoide de difteria (D), toxoide de tétano (T), PT, FHA y 69K (en la presente, una formulación con dosis bajas se abrevia a una vacuna de dtpa) mantiene la capacidad de evitar pertusis (y es altamente efectiva a este respecto) mientras que tiene la ventaja de mostrar reactogenicidad excepcionalmente baja. Dentro de los limites descritos en la presente, dichas vacunas son seguras cuando se administran a sujetos humanos e inducen la protección rápida contra infección. En la combinación de vacunas que comprenden dtpa y otros antígenos, se ha encontrado que no hay interferencia, es decir, que dichas vacunas no muestran perdida de inmunogenicidad y son efectivas cuando se administran a seres humanos. En particular, las vacunas de esta invención son adecuadas para administrarse a niños como un refuerzo después de una administración previa de una o más dosis (normalmente hasta aproximadamente 3) de una vacuna que comprende una dosis superior de antígenos de D, T, y Pa tales como vacuna de IN FANRIX-DTPa descrita antes (D:T: PT: FHA:69K=25 Lf: 10 Lf: 25ug:25ug:8ug por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna). Las vacunas de esta invención también son de gran valor para la administración a los adultos y adolescentes. Consecuentemente, la presente invención provee una composición de vacuna que comprende una baja dosis de cada uno de los antígenos D, T, PT, FHA y 69K (es decir una composición de vacuna de dtpa). Se entenderá que la composición de vacuna de la invención se formuló con un vehículo o adyuvante adecuado. Por vacuna de dtpa o composición de vacuna de dtpa, se entiende una dosis en donde la concentración de D por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna n-o excede 5 Lf y preferiblemente 1 -4 LF, más preferiblemente aproximadamente 2 Lf; (a concentración de T por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna no excede 10 Lf y preferiblemente es 2.5 - 7.5 Lf, más preferiblemente aproximadamente 5 Lf: la concentración de PT por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna no excede 10 ug y preferiblemente 2-10ug, más preferiblemente aproximadamente 8ug; la concentración de FHA por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna no excede 10 ug y preferiblemente 2- 1 0ug, aún más preferiblemente aproximadamente 8ug ; y la concentración de 69K no excede 4 microgramos por 0.5 m i de dosis de volumen de vacuna y preferiblemente está en la escala de 0.5ug a 3 ug por 0.5 m i de dosis de volumen de vacuna. Más preferiblemente la concentración de 69K en la vacuna está en la escala de 2 a 3ug, más preferiblemente de aproximadamente 2.5ug de pertactina por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna. En un aspecto, las composiciones de vacuna de la invención , por ejemplo, pueden comprender (aproximadamente) PT (2.5ug) , FHA (2.5ug) , 69K (0.8ug) por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna. En un aspecto preferido, las composiciones de vacuna de la invención comprenden (aproximadamente) PT (8ug) , FHA (8ug) , 69 K (2.5ug) por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna. En un aspecto especialmente preferido, las composiciones de vacuna de la invención comprenden PT (8ug) , FHA (8ug) , 69K (2.5ug) , D (2 Lf) y (T (5 Lf) por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna. Este se uso en el estudio de "dtpa 005" reportado más adelante. En otro aspecto preferido la composición de vacuna de la invención tiene la cantidad del componente D incrementado a 2.5Lf .

En un aspecto adicional preferido, la composición de vacuna de tres componentes de dtpa es la sig uiente: PT 8 µg FHA 8 µg 69K 2.5 µg toxoide de difteria >=2 I U toxoide de tétano >=20 I U sales de aluminio 0.3 mg fenoxietanol 2.5 mg Esta se uso en el estudio en adolescentes conocido como "dtpa 003", los resultados de los cuales se da más adelante. Opcionalmente, el componente de PT puede ser recombinante (por ejemplo como se describe en las Solicitudes de Patente Europea EP 306 318, EP 322 533, EP 0 396 694, EP 0 322 1 15 y EP 0 275 689) o el componente de PT puede ser con toxoides, por ejemplo, como se describe en EP 0 515 415. Ver también EP 0427 462 y WO 91 /12020 para la preparación de antígenos de pertusis. En un aspecto adicional la invención provee una composición de vacuna que comprende dtpa (como se definió antes) en combinación con uno o más antígenos adicionales, particularmente un antígeno contra hepatitis B (Hep B) (es decir una vacuna de Hep B - dtpa). Dichas vacunas multivalentes generalmente se describen en WO 93/24148 excepto que en la formulación se usa una baja dosis de D, T, PT, FHA y 69K, como se define más adelante. Como se describe en WO 93/24148 el antígeno de hepatitis B preferiblemente es antígeno superficial de hepatitis B. Las dosis del antígeno superficial de hepatitis B normalmente está en la escala de 5-20 ug por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna.

La preparación del antígeno superficial de Hepatitis B (HBsAg) está bien documentada. Ver por ejemplo, Harford y otros en Develop.

Biol. Standard 54, página 125 (1983), Gregg y otros en Biotechnoloqy 5, página 479 (1987), EP-A-0 226 846, EP-A-0 299 108 y las referencias en la misma. Como se usa en la presente, la expresión "antígeno superficial de Hepatitis B" o "H BsAg" incluye cualquier antígeno de HBsAg o fragmento del mismo que exhibe la antigenicidad del antígeno superficial de H BV. Se entenderá que además de la secuencia de 226 aminoácidos del antígeno de HBsAg (ver Tiollais y otros, Nature, 317, 489 (1985) y referencias de la misma), HBsAg como se describe en la presente, si se desea, puede contener toda o parte de una secuencia pre-S como se describió en las referencias anteriores y en EP-A-0 278 940. HBsAg como se describió en la presente también se refiere a variantes, por ejemplo la "mutante de escape" descrita en WO 91/14703. En un aspecto adicional el HBsAg puede comprender una proteína descrita como L* en la Solicitud de Patente Europea Número 0 414 374, es decir una proteína, las secuencia de aminoácidos la cual consiste de partes de la secuencia de aminoácidos de la proteína grande (L) de virus de hepatitis B (subtipo de ad o ay), caracterizado en que la secuencia de aminoácidos de la proteína consiste de: (a) residuos 12-52, seguido por los residuos 133-145, seguido por los residuos 175-400 de la dicha proteína L; o (b) residuo 12, seguido por residuos 14-52, seguido por residuos 1 33- 145, seguido por residuos 1 75-400 de dicha proteína L. H BsAg también se puede referir a los polipéptidos descritos en EP 0 198 474 o EP 0 304 578. Normalmente H BsAg puede estar en forma de partícu las. Esto puede comprende proteína S sola o puede ser partículas m ixtas, por ejemplo (L*, S) en donde L* es como se definió antes y S detona la proteína S del antígeno su perficial de hepatitis B. Preferiblemente H BsAg se absorberá sobre fosfato de aluminio como se describe en WO93/24148. Otros antígenos pueden adsorberse en fosfato de aluminio o hidróxido de aluminio pero en algunos casos los resultados obtenidos son satisfactorios solamente si otro antígeno se absorbe sobre fosfato de alumin io . Otros antígenos pueden incluir las vacunas de la invención para proveer otras vacunas multivalentes para uso pediátrico, en adolescentes o adultos. Dichos otros antígenos adecuados, por ejemplo, pueden comprender aq uellos conocidos en la técnica para proveer protección contra Haemophilus influenzae b (H ib) y/o poli (I PV) y/o hepatitis A, como se describió en WO 93/24148. Los componentes adecuadas para usarse en estas vacunas ya están comercialmente disponibles y se pueden obtener detalles de la Organización Mundial de la Salud. Por ejemplo el componente de I PV puede ser la vacuna de polio inactivada Salk. El componente que da protección contra Hepatitis A preferiblemente es el producto conocido como "Havrix" (Smith KIine Beecham Biologicals) que es una vacuna atenuada muerta derivada de la cepa HP-174 de HAV [ver "Inactivated Candidate Vaccines for Hepatitis A" por F. E. Andre, A Hepburn y E. D'Hondt, Proq. Med. Virol. Vol 37, páginas 72-95 (1990) and the product monograph "Havrix" publicado por SmithKIine Beecham Biologicals (1991 )]. Convenientemente, el componente de Hepatitis B puede comprender el antígeno "S" dado que ya está presente en la vacuna comercial "Engerix-B" (SmithKIine Beecham Biologicals). La cantidad de antígeno en cada dosis de vacuna se selecciona como una cantidad que induce una respuesta inmunoprotectora sin efectos laterales adversos significativos en vacunas típicas. Dicha cantidad variará dependiendo de cuales inmunogenos específicos son empleados. Generalmente se espera que cada dosis comprenda de 15-50ug del inmunogeno total. Pueden aplicarse inyecciones de refuerzo. Las inyecciones de refuerzo de las vacunas de acuerdo con la invención en sujetos iniciando con una vacuna que comprende la célula completa de pertusis (Pw) son tan eficaces que si los sujetos iniciados con una vacuna que comprende pertusis acelular (Pa). En general las formulaciones de vacuna de cualquier aspecto de la invención puede prepararse de la siguiente manera. Los componentes requeridos se absorben en un adyuvante adecuado, más especialmente hidróxido de aluminio o fosfato de aluminio. Después de permitir un tiempo completo y adsorción estable de los componentes respectivos. Los diferentes componentes se pueden combinar mejor bajo condiciones apropiadas.

En un aspecto preferido para preparar una composición de vacuna que contiene Hepatitis B combinada de acuerdo con la invención se provee un método el cual implica mezclar H BsAg absorbido en fosfato de aluminio con uno o más antígenos absorbidos con hidróxido de aluminio o fosfato de aluminio. Los siguientes ejemplos ilustran la invención : Ejemplo 1 : Preparación de una formulación de vacuna de dtpa y estudio en adultos La vacuna de dtpa de acuerdo con la invención se preparó por metodología normal de acuerdo con el procedimiento para formular una vacuna de DTPa de dosis inferior descrita en WO 93/24148. Los resultados obtenidos con la vacuna en un estudio clínico en adultos codificado "dtpa 005" se muestran en las figuras anexas, en las cuales dtpa se usa para significar una vacuna de acuerdo con la invención y PRN es una abreviatura para pertactina (69K). La abreviatura dT se usa para significar la vacuna de difteria-tétanos normal obtenida de Behringwerke que comprende una baja dosis de toxoide de difteria y una gran dosis de toxoide de tétanos. Un estudio abierto, aleatorizado con una sola dosis se llevo acabo en adultos en edad de 18-45 en Bélgica usando dtpa formulado como se describió antes en 60 sujetos comparado con dT (Behring) en 60 sujetos. Para el grupo dtpa, se estudiaron 28 mujeres (edad media de 33 años) y 32 hombres (edad media 33 años). Para el grupo de dT se estudiaron 32 mujeres (edad media de 34 años) y 28 hombres (edad media 35 años) . Se excluyeron aquellos que tuvieron una vacuna de difteria , tétanos o pertusis dentro de los últimos 1 0 años o enfermedad de pertusis dentro de los últimos 5 años. Se obtuvieron fueron antes y 1 mes en la vacuna con u n seguimiento solicitado después de 1 5 días y un seguimiento no solicitado después de 30 d ías. Los datos de reactogenicidad , respuestas de anticuerpos , resultados de anti-PT, resultados de anti-FHA y resultados de anti-PRN (pertactina) se muestran en las figuras anexas. En las figuras anexas, también se muestran resultados para vacu na de pa monovalente usadas en los estudios N I H (AAPT) reportado por Keitel y otros. Las referencias a formulaciones altas de Smith KIine Beecham (SB) , medias (Med-SB) y bajas contienen , respectivamente, PT: (25ug) y 69K (8ug) (Alto) ; PT (8ug) , FHA (8ug) y 69K (2.5ug) (Medio) ; y PT (2.5ug) , FHA (2.5ug) y 69K (0.8ug) (Bajo) . La abreviatura "ug" es para microgramos. Se puede observar que una vacuna de dtpa de acuerdo con la invención fue segura e inmunogénica en adultos. Además las respuestas inmunes a vacunas candidatas de la invención en adultos parecieron ser por lo menos varias veces superiores que las observadas para dosis superiores conocidas de vacunas de DTPa administradas previamente en niños de Estados Unidos, Alemania, e Italia. Ejemplo 2: Estudio en adolescentes ("dtpa 003") Se llevó a cabo un estudio abierto de una sola dosis aleatorizada en adolescentes entre la edad 10-12 en Finlandia usando dtpa formulado como se describió antes en 120 sujetos comparado con dT (Finlandia) en 120 sujetos. El mismo lote de vacunas de dtpa de la invención se usó en ambos de dtpa 005 y dtpa 003. El dT comercialmente disponible (Finlandia) contuvo: toxoide de difteria>=4 I U toxoide de tetanos>=40 I U . Para el grupo de dtpa se estudiaron 70 mujeres (edad media 10.9 años) y 49 hombres (edad media 10.8 años). Para el grupo dT se estudiaron 62 mujeres (edad media 10.9 años) y 56 hombres (edad media 1 1 .0 años). Los sujetos incluidos en el análisis recibieron hasta cuatro dosis de DTPw dentro de los 2 primeros años de vida. Los sujetos excluidos del estudio fueron aquellos quienes habían tenido vacunas de D, T o P después del segundo año de vida o una historia enfermedad de difteria, tétanos o pertusis. Se obtuvieron sueros antes y después de 1 mes de la vacuna con un seguimiento solicitado después de 15 días y un seguimiento no solicitado después de 30 días.

Los datos de reactogenicidad, respuestas de anticuerpo^ resultados anti-PT, resultados anti-FHA y resultados anti-PRN (pertactina) se muestran en las figuras anexas . Se puede observar a partir de los resultados que una vacuna de dtpa de acuerdo con la invención fue segura e inmunogénica en adolescentes. Nota: En las figuras, los resultados que se refieren a las respuestas de anticuerpos para el estudio en adultos (dtpa 005) y el estudio en adolescentes (dtpa 003) muestra la distribución las titulaciones individuales de anticuerpos, anti-difteria y anti-tétanos antes y después de la vacuna de sujetos incluidos en el análisis global de inmunogenicidad (>=0.1 l U/ml siendo el corte determinado para protección). También se dan las titulaciones medias geométricas de anticuerpos anti-difteria y anti-tétanos en l U/ml. Las cifras para los estudios de dtpa 005 y dtpa 003 que ilustran las titulaciones anti-PT, anti-FHA y anti-PRN , muestran el régimen de respuesta de las vacunas (en porcentaje del número total de sujetos -n-) y las titulaciones medias geométricas de anticuerpos (TMG, en EU/ml) para los componentes de vacuna PT, FHA y PRN de los sujetos incluidos en el análisis global de inmunogenicidad . Ejemplo 3: Preparación de una vacuna de Hep B-dtpa La formulación se preparó exactamente como en el Ejemplo 5 de WO93/24148 excepto que las dosis bajas de D, T, PT, FHA y 69K como se definió antes, se usaron para formar hasta 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna.

En una composición preferida, las cantidades de dtpa fueron aproximadamente las siguientes: PT (8ug), FHA (8ug), 69K (2.5ug) , D (2 Lf) y T (5 Lf) por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna. En otra composición preferida, la cantidad de D se incrementó a 2.5 Lf. La cantidad de antígeno superficial de hepatitis B en la composición de vacuna puede varia de 5-20 ug y normalmente es 10ug por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna.

Claims (9)

1. REIVIN DICACIONES 1 . Una composición de vacuna que comprende antígenos de difteria (D) , tétanos (T) y pertusis acelular (Pa) y un adyuvante, en donde la concentración de D por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna es 1 -4 LF; la concentración de T por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna es de 2.5-7.5 Lf y el componente PT (toxoide de pertusis), de Pa FHA (filamentos de haemaglutinina) y pertactina (69K) en donde la concentración de PT por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna es 2-10 µg; la concentración de FHA por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna es 2-10 µg; y la concentración de 69K está en la escala de 0.5 µg a 3 µg por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna. 2. Una composición de vacuna de acuerdo con la reivindicación 1 , que tiene la composición: PT (8µg), FHA (8µg), 69K (
2. 2.5µg) , D (2 Lf) y T (5Lf) por 0.5 mi de dosis de volumen de vacuna.
3. 3. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, que adicionalmente comprende uno o más antígenos adicionales.
4. 4. U na composición de acuerdo con la reivindicación 3, en donde un antígeno adicional es antígeno superficial de hepatitis B.
5. 5. Una composición de acuerdo con la reivindicación 4, en donde el antígeno superficial de hepatitis B es el antígeno S de H BsAg.
6. 6. Una composición de acuerdo con la reivindicación 3 o reivindicación 4, en donde está presente un antígeno adicional el cual provee inmunidad contra uno o más de infección por Hib, polio o hepatitis A.
7. 7. Una composición de acuerdo con cualquier reivindicación previa, en donde el adyuvante usado en la formulación comprende hidróxido de aluminio.
8. 8. Una composición de acuerdo con cualquier reivindicación previa, en donde el adyuvante usado en la formulación comprende fosfato de aluminio.
9. 9. Un método de enfermedad para evitar la enfermedad en niños, adolescentes o adultos, el cual comprende vacunar a sujetos con una composición de vacuna de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.