MX2010014060A - Proceso para preparar un agonista de receptor de adenosina a2a y sus polimorfas. - Google Patents

Abstract

Se describe una síntesis adecuada para elaborar a gran escala un agonista de receptor de A2A-adenosina y se refiere también a las polimorfas de ese compuesto y a métodos para aislar una polimorfa especifica.

Description

PROCESO PARA PREPARAR UN AGONISTA PE RECEPT ADENOSINA A2A Y SUS POLIMORFAS Esta solicitud reivindica la prioridad para la Provisional de Patente de E.U. No. de Serie 60/765,114, pr el 3 de febrero de 2006, cuya descripción completa se inco la presente así por referencia.

Campo de la Invención La presente invención se refiere a un proceso preparación a gran escala de un agonista de receptor adenosina, y se refiere también a polimorfas de ese compu métodos para aislar una polimorfa especifica.

Antecedentes La adenosina es un nucleósido que ocurre naturalrr cual ejerce sus efectos biológicos mediante la interacción familia de receptores de adenosina conocidos como ???2?. todos los cuales modulan procesos fisiológicos importantes. enfermedad de las arterias coronarias. La ventaja de tal té que evita el método más tradicional de inducir la vasod coronaria mediante ejercicio en una caminadora, lo claramente indeseable para un paciente que tiene una enf coronaria.

Sin embargo, la administración de adenosina tien desventajas. La adenosina tiene una vida media muy corta humanos (menos de 10 segundos), y tiene también todos lo asociados con agonismo de receptor Ai, A2A, A2B y A3. As de un agonista de receptor de adenosina A2A proporcionaría un método superior para producir vasod coronaria, particularmente una con una vida media más prol pocos o sin efectos colaterales.

Una clase de compuestos que tienen estas pro deseables se describe en la patente de E. U. No. 6,403,5 descripción completa se incorpora en la presente por refere particular, un compuesto descrito en esta patente, (l-{9-[(4S, cantidades del material con buen rendimiento y alta pur patente que descri be el compuesto de i nterés (patente de E 6,403, 567) proporciona varios métodos para preparar el co Sin em bargo, aunq ue estos métodos son adecuados para s f pequeña escala, todos los métodos de síntesis descrito patente utilizan grupos protectores, lo cual es indesea síntesis a gran escala.

Adicional mente, se descubrió que el producto dese decir (l-{9-[(4S , 2R, 3R, 5R)-3,4-dihidroxi-5-( hidroximetil)oxo 6-ami nopurin-2-il}-pirazol-4-il)-N-metilcarboxam ida) es ca existir en por lo menos tres formas cristalinas diferentes, estable de las cuales es un monohidrato. Esta polimorfa e bajo condiciones de tensión de h umedad relativa, hasta su fusión. En consecuencia, es deseable q ue el produ prod ucido en las nuevas síntesis se obtenga como el mo estable.

Breve Descri pción de la I nvención Fórmula I Que comprende: poner en contacto un compuesto de la (3) ejemplo dimetilsulfóxido, adición de agua purificada, filtraci pasta así formada, lavado del contenido del filtro con agua por etanol, y secado del sólido que permanece al vací temperatura que no exceda de 40° C.

En un segundo aspecto, la invención se refier preparación de un compuesto de la fórmula (3): (3) (3) que comprende: poner en contacto un compues fórmula (2): En un tercer aspecto, la invención se refiere a la pre compuesto de la fórmula (2): (2) que comprende: poner en contacto un compuesto de la fórmula (2); es decir, el compuesto de la fórmula: Aunque esta impureza puede ser removida del produ mediante cristalización, se decidió buscar una síntesis al que tuviera todas las ventajas de la síntesis anterior, per diera el compuesto de la fórmula (2) como una impure producto final.

Así, en un cuarto aspecto, la invención se refiere a u de síntesis de (l-{9-[(4S, 2R, 3R, 5R)-3,4-dih (hidroximetil)oxolan-2-il]-6-aminopurin-2-il}-pirazol-4-il)-N-m carboxamida, poniendo en contacto un compuesto de la fórm con meti lamina.

En una modalidad , la reacción se conduce en una acuosa de metilami na, inicialmente a una temperat aproxi madamente 0 a 5°C, seguido por calentamie aproxi madamente 50 a 70°C. De preferencia, la reac conduce en un reactor de presión sellado .

En una segunda modalidad , el producto se a isla monohidrato puro disolviendo el producto en un solve ejemplo sulfoxido de di metilo, agrega ndo agua purificada, filt pasta así formada, lavando el contenido del filtro con agua por etanol , y secando el sólido que permanece al vací temperatura q ue no exceda de 40°C.

En un quinto aspecto, la invención se refiere a un mét sintetizar un com puesto de la fórmula (4): (2): (2) Con un exceso de 2-formil-3-oxopropionato de preferencia aproximadamente un exceso de 2 a 1 0 vec preferiblemente un exceso de aproximadamente 5 a 1 0 vece En una modalidad , la reacción se conduce en etano tem peratura de aproximadamente 80° C. El 2-formi l-3-oxopr de etilo está presente en un exceso de 5 a 1 0 veces.

Defi niciones y Parámetros Generales La Figura 1 es un espectro de RM N H1 de monohidra La Figura 4 muestra el patrón de difracción de rayos (1-{9-[(4S, 2R, 3R, 5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)-oxola aminopurin-2-il}-pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida Forma B.

La Figura 5 muestra el patrón de difracción de rayos (1-{9-[(4S, 2R, 3R, 5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)-oxola aminopurin-2-il}-pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida Forms comparación con la Forma A.

Como se usa en la presente especificación, las si palabras y frases pretenden generalmente tener los signific se exponen más adelante, excepto cuando el contexto en el usan indique otra cosa.

"Opcional" u "opcionalmente" significa que el eve circunstancia descrito subsiguientemente puede o no ocurri la descripción incluye casos donde ocurre dicho e circunstancia y casos en los cuales no ocurre.

El término "cantidad terapéuticamente efectiva" se aquella cantidad de un compuesto de la fórmula I que es s tratam iento de una enfermedad en un mam ífero, incl uyendo: (i) prevenir la enfermedad , es decir, no permitir desarrollen los síntomas cl ínicos de la enfermedad ; (ii) inhibir la enfermedad , es decir, detener el desarrol síntomas cl ínicos; y/o (Mi) aliviar la enfermedad , es decir, causar la regresió síntomas cl ínicos.

Como se usa en la presente, "portador farmacéuti aceptable" incluye cualquiera y todos los solventes, m dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y anti agentes isotónicos y retardadores de absorción y los si m il uso de tales medios y agentes para sustancias farmacéuti activas es bien conocido en la técnica. Excepto en la med id cualesquier medios o agente convencional sea incompati bl ingrediente activo, se contempla su uso en las comp terapéuticas. También se pueden incorporar a las comp ingredientes activos de manera suplementaria. purin-2-il}pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida a partir de s próticos, por ejemplo etanol o mezclas de etanol/agua, o a un solvente polar, por ejemplo sulfóxido de dimetilo/agua. L A ha mostrado que es un monohidrato, y es la más establ varias polimorfas a temperaturas ambiente. Es esta condiciones de tensión de humedad relativa hasta su p fusión.

Forma B: esta polimorfa se produce evaporando al v solución de 1 -{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximeti 2-il]-6-aminopurin-2-il}pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida en etanol a temperaturas ambientales. El análisis de rayos cristales que fue distintivamente diferente de cuaiqu polimorfa (de Figura 4), pero fue difícil determinar su con ya que el análisis de rayos X dio picos amplios desordena polimorfa contenía cantidades variables de agua. Se enco es difícil reproducir confiablemente la preparación de esta p Forma C: esta polimorfa se produce haciendo una pa polimorfa es inestable en la presencia de humedad atm formando hidratos variables.

Técnicas de Análisis Para las Formas A, B, C y Difra Polvo de Rayos X de Material Amorfo.

Los análisis de difracción de polvo de rayos X (X llevaron a cabo en un difractómetro de polvo de rayos X S XRD-6000 usando radiación de Cu Ka. El instrumento equipado con un tubo de rayos X de enfoque fino, y el amperaje del tubo se colocaron en 40 kV y 40 mA respecti Las hendiduras de divergencia y dispersión se colocaron a 2 la hendidura de recepción se colocó a 0.15 mm. Se radiación difractada mediante un detector de destellos Nal. un explorador continuo theta-dos theta a 3°/min (paso seg/0.02°) desde 2.5 hasta 40°. Se usó un estándar de sili verificar la alineación del instrumento. Los datos se recole analizaron usando software XRD-6000 v.4.1.

Se realizaron también análisis de difracción de polvo cabeza de goniómetro que está motorizada para permitir el capilar durante la adquisición de datos. Se recolectaron tiempo real usando radiación de Cu-Ka a una resolución de Típicamente, se recolectaron datos durante un periodo segundos. Solamente los puntos de datos en el rango de 2 2T se exhiben en ios patrones de XRPD graficados.

Análisis Térmicos Se llevaron a cabo análisis termogravimétricos analizador termogravimétrico TA Instruments 2050 o 295 estándares de calibración fueron níquel y Alumel™. Se c las muestras en una charola de aluminio para muestras, inse el horno TG y pesadas con precisión. Las muestras se ca en nitrógeno a un régimen de 10°/min a 300 o 350° C. A m se establezca otra cosa, tos pesos de las muestras se equili 25° C en el horno de TGA antes del análisis.

Se llevaron a cabo análisis de calorimetría de ex diferencial (DSC) en un calorímetro 2920 de exploración di infrarrojo de transformada de Fourier (FT-I R) Magna 860® I nstru ment Corp. ) equi pado con una fuente Ever-Glo mid/f divisor de haces de bromu ro de potasio de rango extendi detector de sulfato de triglicina con deuterio ( DTGS) . A m se establezca otra cosa, se usó un accesorio de reflectanci (el Colector™) de Spectra-Tech, I nc. , para el m uestreo. espectro representa 256 exploraciones co-agregadas resolución espectral de 4"1. La preparación de m uestras com puesto consistió de colocar la m uestra en una m icr nivelar el material con una platina de vidrio congelada . S un conjunto de datos de fondo con un espejo de alineaci l ugar. Los espectros presentan una relación del conjunto de haz sencillo de m uestra con el conjunto de datos de haz de fondo. La calibración de la longitud de onda del instru realizó usando poliestireno.

Espectrocopía de RMN Se obtuvieron espectros de RMN H1 en fase de so promediadas. Los espectros se procesaron utilizando GRA S 132 Al, versión 6.00. La decadencia de induce (FID) fue de cero lleno a cuatro veces el número de puntos y multiplicado exponencialmente con un factor de ampli línea de 0.61 Hz antes de la transformación de Fouri espectros de H fueron referenciados internamen tetrametilsilano (0 ppm) que se agregó como un estándar int Alternativamente, se llevó a cabo análisis de R N describe en el Ejemplo 4.

Análisis de Absorción/Desabsorción de Humedad Se recogieron datos de absorción/desabsorción de en un Analizador de Absorción de Vapor VTI SGA-100. Los absorción y desabsorción se recogieron en un rango de 5 de humedad relativa (RH) a intervalos de 10% de RH bajo u de nitrógeno. Se usaron cloruro de sodio (NaCI) y pirrolidona (PVP) como los estándares de calibración. Los de equilibrio utilizados para análisis fueron menores que 0.0 oxolan-2-M1-6-amino-puri n-2-il)pirazol-4-i l)-N-meti lcarbox Un método para la síntesis a gran escala d [(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidrox¡metil)oxolan-2-il]-6-a purin-2-il}pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida se muestra en el de Reacción I.

Esquema de Reacción 1 Paso 1 - Preparación de la Fórmula (2) El compuesto de la fórmula (2) se prepara a p compuesto de la fórmula (1) mediante reacción con monohidratada en ausencia de un solvente. La reacción se a una temperatura de aproximadamente 40°C más/men Cuando la reacción se completa, el producto de la fórmul aisla mediante agitación con un solvente prótico en el compuesto de la fórmula (2) tiene solubilidad limitada, por etanol o isopropanol. La mezcla se agita durante aproxima 1 a 5 horas, y después se filtra. El sólido se purifica agitación con agua, filtración y se lava con agua seg isopropanol y se seca al vacío, el cual se toma en el siguie sin purificación.

Paso 2 - Preparación de la Fórmula (3) El compuesto de la fórmula (2) se convierte despu compuesto de la fórmula (3) mediante reacci aproximadamente 1 a 1.2 equivalentes molares de 2- El producto final se prepara a partir del compuest fórmula (3) haciéndolo reaccionar con metilamina, de pre metilamina acuosa. La reacción se lleva cabo a aproximada temperatura ambiente, durante 4 horas. El producto de la F se aisla por medios convencionales, por ejemplo mediante fi se lava el sólido con etanol frío y se seca bajo presión reduc Preparación de los Materiales de Partida El (4S,2R,3R,5R)-2-(6-amino-2-c!oropurin-9-il)-5-(hidro oxolan-3,4-diol se usa como un material de partida en el Este compuesto está disponible comercialmente.

El 2-formil-3-oxopropanoato de etilo se usa como un de partida en el paso 2. Está disponible comercialmente, o hacer como se muestra en el Esquema de Reacción II.

Esquema de Reacción II éter t-butilmetílico, la acidificación de la fase acuosa ejemplo, ácido clorhídrico, seguido por extracción con un tal como diclorometano, y la remoción del solvente del secado bajo presión reducida.

Un método preferido para la síntesis a gran escala [(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]-6-a purin-2-il}pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida se muestra en el de Reacción III.

Esquema de Reacción III monohidratada en ausencia de un solvente. La reacción se a una temperatura de aproximadamente 45 a 55°C más/me Cuando la reacción está com pleta, el prod ucto de la fórmu l a isla mediante agitación con un solvente prótico en el Com puesto o de la fórmula (2) tiene solubilidad li mitada, por etanol o isopropanol . La mezcla se agita durante aproxima 1 a 5 horas y se filtra. El sólido se purifica mediante agita agua , se filtra y se lava con agua seguido por etanol o isopr se seca al vacío, el cual se toma para el siguiente purificación.

Paso 2 - Preparación de la Fórmula (4) El compuesto de la fórm ula (2) se convierte despu compuesto de la fórm ula (4) haciéndolo reacciona r con un e 2-formil-3-oxopropionato de etilo, por ejem plo un exceso d veces, de preferencia aproximadamente de 5 a 1 0 veces de La reacción se conduce en un solvente prótico, por ejemplo aproximadamente la temperatura de reflujo, reacción; es decir: conocido como (2Z)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dih¡droxi-5-metil)oxolan-2-il]-2-[4-(etoxicarbonil)pirazolil]purin-6-il}amin formilprop-2-enoato.

En consecuencia, aunque el compuesto de la fórmula representado como el derivado de alqueno (2E) solam término "compuesto de la fórmula (4)" está entendido qu Paso 3 - Preparación del Producto Final El producto final se prepara a partir del compuest fórmula (4) haciéndolo reaccionar con metilamina, de pr metilamina acuosa. La reacción se lleva cabo inicial aproximadamente 0 a 5°C durante aproximadamente 8 h preferencia en un reactor a presión, seguido por elevaci temperatura hasta 50 a 60°C durante aproximadamente 1 manteniendo la temperatura durante 15 a 20 minutos. El se aisla por medios convencionales, por ejemplo enfriamiento a 0 a 5°C y manteniendo un vacío aproximadamente 1 hora, removiendo así la metilamina. El interrumpe, y los contenidos restantes se mantienen a durante por lo menos 30 minutos, seguido por filtración. así obtenido se lava con agua seguido por etanol, y se s presión reducida.

Este proceso proporciona (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3J4-dih (hidroximetil)oxolan-2-il]-6-aminopurin-2-il}pirazol-4-il)-N-me Un matraz de fondo redondo de tres o cuatro cuellos con barra de agitación magnética , termopar, termómetro entrada y salida para gas y embudo de adición se inundó co Se cargaron 3, 3-dietoxi propionato de etilo (64.5 tetrahidrofurano en el embudo de adición . Se cargó hidruro (21 .2 g de una dispersión al 60%) en el matraz de reacción por tetrahidrofurano. Los contenidos del matraz se enfriar 5°C en un baño de hielo, y se agregó formato de etilo (25 mezcla se enfrió a 0 a 5°C y los contenidos del embudo d se agregaron gota a gota, manteniendo u na tem peratura in menos de 5°C. Se removió el baño de hielo y los conte dejaron calentar a tem peratura am biente. El consumo dietoxipropionato de etilo se monitoreo mediante análisis La reacción se apagó mediante adición de hielo-agua ( 1 0.6 Ejemplo 2 A. Preparación de 2-hidrazinoadenosina (2) Un matraz equipado con un agitador mecánico, entrada salida de gas y termopar se inundó con argón. Se a cloroadenosina hemihidratada (53.1 g), seguido por monohidratada (134 g). La mezcla se agitó mientras se c 40-45°C durante 2 horas. El progreso de la reacción s mediante análisis de TLC. Cuando la reacción se completó, la fuente de calor y se agregó etanol (800 mi). La mezcla durante 2 horas a temperatura ambiente, después se re pureza).

B. Preparación Alternativa de 2-Hidrazinoadenosina (2) Un recipiente de reacción que contiene hidrazina h (258 g, 250 mi) se calentó a 40-55°C. A la mezcla cal agregó 2-cloroadenosina hemihidratada (100 g) en porcion mantuvo la temperatura entre 45 a 55°C. La temper mantuvo a esta temperatura durante dos horas, y después s agua desionizada (500 mi) en un periodo de 30 manteniendo temperatura de 45 a 55°C. La mezcla s después gradualmente hasta 0 a 5°C en un periodo de después se agitó a esta temperatura durante 30 minutos i sólido se separó por filtración entonces y se lavó con agua desionizada fría (2 a 5 C), seguido por etanol (400 mi). El secó al vacío durante 12 horas, para dar 2-hidrazinoadenosi Ejemplo 3 Preparación de 1-(9 (4S,2R,3R,5R)-3^-dihidroxi-5-(hidr oxolan-2-iH-6-am¡nopurin-2-il)pirazol-4-¡n-4-carboxilato de et Se colocó 2-formil-3-oxopropionato de etilo (23.93 g, 0 en un matraz equipado con agitador mecánico, entrada salida de gas y condensador de reflujo. Se agregó 2-pro matraz seguido por 2-hidrazinoadenosina (44.45 g, 0.15 mezcla se calentó a reflujo bajo agitación durante 2 a 4 h siguió ei progreso de la reacción mediante análisis de TLC. reacción se juzgó completa, se removió la fuente de ca mezcla se enfrió a temperatura ambiente. La suspensión bajo agitación en un baño de hielo durante 1.5 a 2 hor sólidos se aislaron mediante filtración al vacío y se lavaro propanol enfriado con hielo. El producto, 1-{9-[(4S,2R,3R, dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]-6-aminopurin-2-il}pirazol carboxilato de etilo, se secó bajo presión reducida has constante. Rendimiento 54.29 g, pureza (mediante HPLC) 9 Ejemplo 4 Preparación de (1 -(9 (4S,2R,3R,5R^3,4-dihidroxí-5-(hidr oxolan-2-in-6-aminopurin-2-il|pirazol-4-in-N-metilcarboxamid Una mezcla de 1 -{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidroxi-5-metil)oxolan-2-il]-6-aminopurin-2-il}pirazol-4-il)-4»carbox¡lato (46.4 g) y metilamina (40% en agua, 600 mi) se agitó a tem ambiente durante aproximadamente 4 horas, siguiendo el de la reacción mediante análisis de HPLC. Se removió la del exceso de metilamina bajo presión reducida y la mezcla se enfrió a 0°C durante 2 horas. El material sólido se se filtración, se lavó con etanol 200 proof enfriado con hielo y bajo presión reducida para dar 1 -{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dih (hidroximetil)oxolan-2-il]-6-aminopurin-2-il}pirazol-4-il)-4-met carboxamida como su monohidrato, 36.6 g, pureza 99.6%.

La estructura del material se confirmó mediante RMN Figura 1 más adelante). El análisis térmico (ver Fi proporcionó resultados consistentes con la presencia molécula de agua. Se obtuvieron patrones de difracción de rayos X (Figura 3). manera. Se pesaron dos muestras del material anteriormente y se disolvieron en d6-DMSO - se usaron 5.3 el espectro de H1 y se usaron 20.8 mg para el espectro Todos los espectros se obtuvieron a temperatura ambient espectrómetro JEOL Eclipse*400 operando a 400 MHz para MHz para C 3.

Etiqueta Cambio C13 Cambio H1 Multiplici ppm ppm hendidura 2 150.5 o 150.3 - 4 156.4 _ 4a 117.9 - 6 140.0 8.41 s 7a 150.5 o 150.3 - V 86.9 5.94 D, 6. 2' 73.7 4.62 M 2 -OH 5.50 D, 6. 3' 70.5 4.17 m ' E 25.6 2.76 D, 4.

NH2 - 7.77 br s NH 8.35 Q, 4.

Purificación de M -(9-f(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidro oxQlan-2-in-6-aminopurin-2-il)pirazol-4-in-N-metilcarboxamid monohidratada Una solución de (1 -{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dih (hidroximetil)-oxolan-2-¡l]-6-aminopurin-2-il}pirazol-4-!l)-N-m carboxamida monohidratada (100 g) en sulfóxido de dime mi) se filtró a través de un prefiltro de 0.6 a 0.8 micrones y de 0.2 micrones para remover cualesquiera impurezas sóli filtrado se agregó después lentamente en un periodo de agua deionizada (1 litro) con agitación y la pasta así prod agitó durante no menos de 1 hora. El sólido se separó por f se lavó con agua deionizada (2 x 1 litro) y se secó al vacío no menos de 1 hora. El producto seco se hizo pasta enton Preparación de (2E)-3-((9-í(4S,2R,3R.5R)-3,4-dihidroxi-5-metil)-oxolan-2-ill"2-f4"(etoxicarbonil)-pirazoíin"Purin-6-il)"am formil rop-2-enoato Una mezcla de 2-hidrazinoadenosina (100 g, 0.34 formil-3-oxopropionato de etilo (242 g, 1.7 mol) y etanol ab cargaron en un reactor y la mezcla se calentó a reflujo d horas. Cuando la reacción se consideró completa, se re fuente de calor y la mezcla se enfrió gradualmente hasta 18.45%; O, 27.09%. El análisis cae dentro de los límites experimental para el hemihidrato del producto deseado. (C, H, 4.81%; N, 18.1%; O, 28.12%.

Se obtuvieron espectros de RMN de H1 y C13 de la manera. 20.2 mg del compuesto de la fórmula (4) se disolv aproximadamente 0.75 mi de DMSO-d6 y los espectros obt temperatura ambiente en un espectrómetro de RMN JEOL operando a 400 MHz para H1 y 100 MHz para C13. Los químicos fueron referenciados al solvente de DMSO, 2.50 p H y 39.5 ppm para C13.

Resultados Los cambios químicos de H1 y C13 están enlistados en I. Se observaron dos isómeros en una propor aproximadamente 60/30 en ambos espectros de H etiquetados como mayor y menor en la tabla.

Atomo3 Cambio químico Cambio químico Multipl de C13 ppm de H1 ppm hendid (menor) 149.4 - 2 (mayor) 149.3 - 9 (menor) 148.0 9.22 d, (menor) 147.9 - 4 (mayor) 147.8 - 9 (mayor) 147.5 9.26 d, 12. 8 (mayor) 144.9 8.87 8 (menor) 144.7 8.85 12 143.1 8.20-8.23 4 (menor) 132.8 9.20 m , 4 (mayor) 132.6 9.12 m , 5 (mayor) 120.7 - 5 (menor) 120.6 - 13 116.7 - 0 (menor) 107.2 - 0 (mayor) 106.1 - V (mayor) 87.9 6.07 d, ' 18 (mayor) - 12.51 d, 18 (menor) - 11.47 d, 2'-OH - 5.63 d, (mayor) 2'-OH - 5.62 d, (menor) 3'. OH - 5.30 d, 5'-OH - 5.08 t, Se confirmó que el compuesto de la fórmula (4) siguientes dos isómeros: Se colocó una solución acuosa de metilamina al 40% ( en un reactor a presión, se enfrió a 0 a 5°C y se agregó el del Ejemplo 5, (2E)-3-({9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidrox¡-5-metil)-oxolan-2-il]-2-[4-(etoxicarbonil}-pirazolil]-purin-6-il}ami formilprop-2-enoato (100 g). La mezcla se agitó a 0 a 5°C por lo menos 8 horas, monitoreando la reacción hasta su Cuando se completó, la mezcla se calentó, manteni temperatura entre 50 y 60°C durante 1 hora y después hasta menos de 30°C en un periodo de 1 hora. Cu aminopurin-2-il}pirazol-4-¡Í]-N-metilcarboxam¡da como monohidrato.

Se obtuvieron espectros de RMN de H1 y C13 de la manera. Se pesaron dos muestras del material anteriormente y se disolvieron en d6-DMSO - se usaron 5.3 el espectro de H1 y se usaron 20.8 mg para el espectro Todos los espectros se adquirieron a temperatura ambient espectrómetro JEOL Eclipse" 400 operando a 400 MHz para MHz para C13.

Etiqueta Cambio C13 ppm Cambio H1 ppm Multip hendid 2 150.5 o 150.3 - 4 156.4 - 4a 117.9 - 6 140 8.41 7a 150.5 o 150.3 - r 86.9 5.94 D, E 25.6 2.76 D, NH2 7.77 b NH - 8.35 Q.

Un análisis elementa! dio los siguientes resultados: C, H, 4.94%; N, 27.94. Teórico: C, 44.12%; H, 4.94%; N, 27. 27.09%. El análisis cae dentro de ios límites del error expe para el monohidrato.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para la preparación a gran escala [{4S,2R,3R)5R)-3)4-dihidroxi-5-(hidrox¡metil)oxolan-2-il]-6-purin-2-il}pirazol-4-il)-N- metilcarboxamida: Que comprende: hacer reaccionar un compuesto de I 3. El método de la reivindicación 1, en donde la rea conduce en un reactor a presión sellado. 4. El método de la reivindicación 1, en donde el produ (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il aminopurin-2-M}pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida se aisla monohidrato puro mediante: (a) disolver el producto en un solvente, (b) agregar agua purificada, (c) filtrar la pasta así formada, (d) lavar los contenidos del filtro con agua seguido por etano (e) secar el sólido que permanece al vacío a una temperatur exceda de 40°C. 5. El método de la reivindicación 4, en donde el usado en el paso (a) es sulfóxido de dimetilo. 6. Un método para preparar un compuesto de la fórmu con 2-formil-3-oxopropionato de etilo. 7. El método de la reivindicación 6, en donde la rea conduce in etanol. 8. El método de la reivindicación 7, en donde la reacc lugar a una temperatura de aproximadamente 80°C. 9. El método de la reivindicación 6, en donde aproximadamente 1.1 equivalente molar de 2-formil-3-oxopr de etilo. 10. Un método para la preparación de un compues fórmula (2): que comprende: hacer reaccionar un compuesto de la (1): con hidrazina. 11. Un método para sintetizar (1-{9-[(4S,2R,3R, dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]-6-aminopurin-2-il}pirazol metilcarboxamida poniendo en contacto un compuesto de la (4): de la fórmula (4) se hace reaccionar con una solución ac metilamina a una temperatura inicial de aproximadamente seguido por calentamiento hasta aproximadamente 50 a 70° 13. El método de la reivindicación 11, en donde la rea conduce en un reactor a presión sellado. 14. El método de la reivindicación 11, en donde el final (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4- dihidroxi-5-(hidroximetil)oxo 6-aminopurin-2-il}pirazol-4-il)-N-metilcarboxamida se aisla monohidrato puro mediante: (a) disolver el producto de la reivindicación 11 en un solvent (b) agregar agua purificada, (c) filtrar la pasta así formada, (d) lavar los contenidos del filtro con agua seguido por etano (e) secar el sólido, que permanece, al vacío a una tempera no exceda de 40°C. 15. El método de la reivindicación 14, en donde el que se usa en el paso (a) es sulfóxido de dimetilo. 18. El método de la reivindicación 17, en donde la tiene lugar a una temperatura de aproximadamente 80°C. 19. El método de la reivindicación 16, en donde aproximadamente un exceso molar de 2 a 10 veces de 2-oxopropionato de etilo. 20. El método de la reivindicación 19, en donde se exceso molar de aproximadamente 5 a 10 veces de 2-oxopropionato de etilo.