MX2010011856A

MX2010011856A - Composiciones y métodos para tratar trastornos digestivos.

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Publication number: MX2010011856A
Application number: MX2010011856A
Authority: MX
Inventors: Anthony B Wood; Richard L Watson; Gregory J Archambeau
Original assignee: Revalesio Corp
Priority date: 2008-05-01
Filing date: 2009-04-29
Publication date: 2011-02-15
Also published as: WO2009134929A2; JP2011519861A; US20160008279A1; CN102076327B; EP2285347A2; CA2723215A1; US20100003333A1; IL209032A0; CN103919804A; AU2009243045B2; JP5901291B2; WO2009134929A3; US8980325B2; BRPI0911757A2; CN102076327A; AU2009243045A1; EP2285347A4

Abstract

Se proporcionan fluidos alterados por electrocinética por ejemplo, fluidos electrocinéticos enriquecidos con gas (por ejemplo, enriquecidos con oxígeno) que comprenden una solución acuosa iónica de nanoestructuras que contienen oxígeno estabilizadas por carga en una cantidad suficiente para proporcionar, al contacto con una célula, la modulación de al menos uno de potencial de membrana celular y conductividad de membrana celular, y las composiciones terapéuticas y los métodos para su uso en el tratamiento de trastornos digestivos o al menos un síntoma de éstos. Las composiciones de los fluidos alterados por electrocinética y los métodos incluyen los fluidos acuosos iónicos alterados por electrocinética opcionalmente en combinación con otros agentes terapéuticos. Los aspectos particulares proporcionan la regulación o la modulación de la transducción de la señal intracelular asociada con dichos trastornos digestivos por la modulación de al menos una de las membranas celulares, potencial de membrana, proteínas de la membrana tales como los receptores de membrana, que incluyen pero no se limitan a los receptores acoplados a las proteínas G (GPCR), y uniones intercelulares (por ejemplo, uniones herméticas, uniones comunicantes, unión adherente y desmosomas). Otras modalidades incluyen las rutas particulares de administración o las formulaciones de los fluidos alterados por electrocinética y las composiciones terapéuticas.

Description

POSICIONES Y MÉTODOS PARA TRATAR TRASTORNOS DIGES CAMPO DE LA INVENCIÓN iertas modalidades descritas en la prese ionan con el campo de tratamiento de un tr tivo, o al menos un síntoma de éste, que incl ornos gastrointestinales, gástricos, o gastroesof individuo por la administración de una comp éutica que comprende al menos un fluido alrer rocinética (incluyendo los fluidos alterad rocinética enriquecidos con gas (por e ecidos con oxígeno) como el descrito en la pr odalidades particulares se relacionan con el trat menos una enfermedad o trastorno digestivo desc esente. Ciertas modalidades descritas en la pres ionan con el campo de la regulación o modulació lo, uniones herméticas, uniones comunicantes, ente y desmosomas) .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN os trastornos digestivos pueden incluir enfe rastornos de la boca, esófago, estómago, o inte as enfermedades y/o trastornos gástricos en gastritis, enfermedad de reflujo gastroes ) , esofagitis eosinof lica, reflujo ácido, cas, enfermedad inflamatoria del intestino, síndr tino irritable, e infección por Helicobacter pyl i) . Los síntomas pueden incluir dolor ardiente, os, diarrea, disentería, pérdida del apetito, pér indigestión, y dispepsia flatulenta. os trastornos gástricos pueden ser causad amentos, dietas, factores relacionados con el es dera así, un síndrome de solapámiento . La MCTD ente: dolor de las articulaciones y/o hinchazón ados, malestar, fenómeno de Raynaud (los dedos se os y entumecidos en respuesta al frío o el onal) , inflamación y/o debilidad muscular, cicatr piel de la mano, reflujo ácido, disfunción del e ultades para tragar, respiración entrecort idad, tos seca. Los síntomas de MCTD varían ampl enfermedad en cada persona puede ser muy diferen os tratamientos terapéuticos de los des icos incluyen una extensa lista de antiác ctos farmacéuticos. Sin embargo, la mayoría ientos gástricos disponibles en la actualidad os secundarios considerables, tales como do a, dolor abdominal, diarreas, náuseas, gases, d SUMARIO DE LA INVENCION Las modalidades particulares se relacionan con un tratar una enfermedad o trastorno digestivo, o a ntoma de éste, que comprende administrar a un itado una cantidad terapéuticamente efectiva o acuoso alterado por electrocinética, que compre ión acuosa iónica de nanostructuras que c no estabilizadas por carga, que tienen sustanci iámetro promedio de menos que aproximadamen etros y configuradas establemente en el fluido o en una cantidad suficiente para proporció cto de una célula viva con el fluido, la modula os un potencial de membrana celular y conductiv ana celular, en donde el tratamiento de un t tivo o al menos un síntoma de éste se proporc modo. En as ectos adicionales, las nanoestructu y 95%. En aspectos adicionales, el oxígeno lto se presenta sustancialmente en las nanoestr ontienen oxígeno estabilizadas por carga. De ac tos adicionales, las nanoestructuras que c no estabilizadas por carga sustancialmente ti tro promedio menor que un tamaño seleccionado de onsiste en: 90 nm, 80 nm, 70 nm, 60 nm, 50 nm, 40 0 nm, 10 nm, y menos de 5 nm. De acuerdo con a onales, la solución acuosa iónica comprende una s a. En ciertos aspectos, el fluido es superoxigen tos adicionales, el fluido comprende una fo rones solvatados .

Aspectos particulares proporcionan la alterac acuoso alterado por electrocinética que compr ición del fluido a los efectos electroci izados, inducidos por hidrodinámica. fermedad o trastorno digestivo, o el al menos un te se relaciona con al menos una afección selec rupo consistente de gastritis, úlcera péptica, al, enfermedad de reflujo gastroesof gico jo ácido, esofagitis eosinofílica, enf atoria del intestino incluyendo la enfermedad de rne del intestino irritable, infección o tra gastrointestinal incluyendo la infección i, Salmonella, Shigella, Staphylococcus, Campylo idiu , Escherichia coli, Yersinia, Vibrio, ia, Entamoeba histolytica, rotavirus, nor irus y astrovirus, inflamación en el intestinal, enfermedad mixta del tejido co ) , y colitis ulcerativa. En aún otros aspec edad o trastorno digestivo, o el al menos un sín comprende al menos uno seleccionado del Los aspectos particulares comprenden, además, la ombinación, donde al menos un agente tera onal se administra al paciente. De acuerdo con tos, al menos un agente terapéutico adicio cionado del grupo consistente de inhibidores de 1 protones, incluyendo el omeprazol, pant prazol, esomeprazol, tenatoprazol , y rabe eadores del receptor H2 de histamina, incluy idina, famotidina, cimetidina, y nizatidina anti endo el hidróxido de aluminio, hidróxido de ma nato de aluminio, carbonato de magnesio, carbó o, bicarbonato de sodio, hidrotalcita, y maga icpna; procinéticos , incluyendo la it ridona, metoclopramida, eritromicina, prucalop rida; agentes antidiarreicos , incluyend licilato de bismuto, loperamida, y difeno es biológicos incluyendo infliximab, etan umab, certolizumab, y natalizumab; flamatorios , incluyendo el ácido 4 -aminosalic 5 -aminosalicílico; laxantes incluyendo lubipro rod; ácido algínico; sucralfato; misopros ide y combinaciones de éstos. De acuerdo co tos, al menos un agente terapéutico adicio cionado del grupo consistente de inhibidores de l otones, bloqueadores del receptor H2 de his idos, procinéticos , antidiarreicos, anticoliné osteroides (inhalados o de otro modo) , corticost icos, glucocorticoides, antiespasm moduladores , antibióticos, biológicos, flamatorios , laxantes, y combinaciones de és o con otros aspectos adicionales, al menos un utico adicional es seleccionado del grupo cons les, proteínas de fusión del receptor de TSLP, mo inmunoglobulina TSLPR y combinaciones de éstos. e acuerdo con ciertos aspectos, el fluido ado por electrocinética modula los niveles locali ares del óxido nítrico. En aspectos adiciona acuoso alterado por electrocinética promue ución localizada en el sitio de administració una citoquina seleccionada del grupo que consi eta, IL-8, TNF-alfa, y TNF-beta. Se propo tos adicionales que comprenden una inhibición si sinérgica o la reducción en la inflamación iento del individuo con otro agente anti- infla orma simultánea o como adyuvante. En a nales, la modulación de al menos uno de poten na celular y conductividad de membrana nde; la modulación de la estructura o función integrinas . De acuerdo con aún otros aspec tor transmembrana comprende un receptor acopla ina G (GPCR) . En aún aspectos adicionales, el ado a la proteína G (GPCR) interactúa con la sub proteína G. En ciertos aspectos, la subunidad na G comprende al menos uno seleccionado del gr ste en G s, G ±, Gaq y Gai2. En otros aspectos, a ubunidad a de la proteína G es G q. spectos particulares proporcionados para la mo l menos uno de potencial de membrana cel ctividad de membrana celular comprenden la modula ducción de la señal intracelular que compre ación de un sistema o vía mensajero celular depe lcio. De acuerdo con aspectos adicionales, la mo a señal de transducción intracelular compre ación de la actividad de la fosfolipasa C. De itis, úlcera péptica, úlcera duodenal, enferm jo gastroesofágico (GERD) , reflujo ácido, eso ofílica, enfermedad inflamatoria del in endo la enfermedad de Crohn, síndrome del in ble, infección o trauma del tracto gastrointe endo la infección por H, pylori, Salmonella, Sh lococcus, Campylobacter, Clostridiu , Escherichi ía, Vibrio, Candida, Giardia, Entameba hist irus, norovirus, adenovirus y astrovirus, inflama racto gastrointestinal, enfermedad mixta del tivo (MCTD) , colitis ulcerativa, dolor, náusea, v a, disentería, constipación, hinchazón, g da, irritación laríngea o respiratoria, irr íngea, y pérdida de peso o ganacia de peso. iertos aspectos comprenden la administración a celular, y adem s comprenden la modulación de l do, incluyendo el epitelio o las regiones del O, e íleo de éste. En aún aspectos adiciona o acuoso alterado por electrocinética es oxigenad el oxígeno en el fluido está presente en una c menos 8 ppm, al menos 15 ppm, al menos 25 30 ppm, al menos 40 ppm, al menos 50 ppm, o a m de oxígeno a presión atmosférica. spectos particulares proporcionan el fluido ado por electrocinética que comprende al menos un ectrones solvatados y especies de oxígeno car icadas por electrocinética. En aspectos adiciona de electrones solvatados ; o modificado rocinética o las especies de oxígeno cargada tes en una cantidad de al menos 0.01 ppm, al me al menos 0.5 ppm, al menos 1 ppm, al menos 3 5 ppm, al menos 7 ppm, al menos 10 ppm, al m nasal, inhalación, inyección o inserción de mater sitivos implantadles . En aspectos adiciónal ción es subcutánea, intramuscular, intra-ar eritoneal, intracisternal, intravesical , intrat enosa. En aún otros aspectos, el fluido acuoso a lectrocinética comprende agua enriquecida con oxí En ciertos aspectos, la modulación de la conducta lula entera, comprende modular al menos uno ibucion dependiente de voltaje lineal o no linea ctancia de la célula entera. spectos particulares proporcionan un métod lar un agente terapéutico adecuado para usar iento de una afección o trastorno gástrico, dige sófago que se caracteriza por malestar intestina a de dicha afección o trastorno gástrico, dige sófago, que comprende: obtener un agente tera tro promedio de menos que aproximadamente 100 nan figuradas establemente en el fluido acuoso iónico ad suficiente para proporcionar, al contacto viva con el fluido, la modulación de al menos ial de membrana celular y conductividad de m r, en donde la formulación de un agente tera do para usar en el tratamiento de una afec rno gástrico, digestivo o del esófago teriza por malestar intestinal, o un síntoma d ión o trastorno gástrico, digestivo o del esófago odo proporcionada. iertos aspectos proporcionan un comp éutica, que comprende: un agente terapéutico a usar en el tratamiento de una afección o tr ico, digestivo o del esófago, caracterizado por m tinal, o un síntoma de dicha afección o tr ación ele al menos uno de potencial de membrana ce ctividad de membrana celular.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS La Figura 1 es un diagrama de bloque parcial, ersal parcial, de un dispositivo de mezcla ca anterior.

La Figura 2 es un diagrama de bloque de una mo lar de un dispositivo de mezcla. a Figura 3 es una ilustración de un sistema e la entrega de un primer material al disposi de la Figura 2. a Figura 4 es una vista en sección transversal ntada de una parte superior del dispositivo de Figura 2. a Figura 5 es una vista en sección transversal gura 2, localizada entre la primera parte latera a 5 y la segunda parte lateral de la Figura 6.

La Figura 8 es una vista en perspectiva de un rot r del dispositivo de mezcla de la Figura 2. a Figura 9 es una vista en perspectiva de un i a primera cámara del dispositivo de mezcla de la a Figura 10 es una vista en sección transversal ntada del interior de una primera cáma sitivo de mezcla de la Figura 2 que inclu idad alternativa de la bomba 410. a Figura 11 es una vista en perspectiva del inte gunda cámara del dispositivo de mezcla de la Fig a Figura 12 es una vista en sección transversal ntada de una parte lateral de una modalidad alte spositivo de mezcla.

La Figura 15 es una vista en sección transversa a de mezcla del dispositivo de mezcla de la Fi a a través de un plano ortogonal al eje de rotac senta un patrón de flujo rotatorio provocado j s de cavitación cuando un agujero de paso del róxima a {pero no está alineado) una abert r . a Figura 16 es una vista en sección transversa a de mezcla del dispositivo de mezcla de la Fi a a través de un plano ortogonal al eje de rotac senta un patrón de flujo rotatorio provocado jas de cavitación cuando el agujero de paso del r con la abertura del estator. a Figura 17 es una vista en sección transversa de mezcla del dispositivo de mezcla de la Fi a través de un plano ortogonal al eje de rotac e de rotación del rotor que representa una config nativa de los agujeros de paso formados en el gujeros de paso formados en el estator.

La Figura 20 es una vista en sección tra entada ampliada tomada a través de un plano que s, y se extiende a lo largo del eje de rotac que representa una configuración ' de los aguj formados en el rotor y los agujero de paso form tator .

La Figura 21 es una vista en sección tran entada ampliada tomada a través de un plano que S, y se extiende a lo largo del eje de rotac que representa una configuración alternat zamiento de los agujeros de paso formados en el ujero de paso formados en el estator. a Figura 22 es una ilustración de un molde que S a Figura 25 es una ilustración de un molde que S para construir los agujeros de paso del rotor ras del estator. a Figura 26 es una ilustración de una cap ica ("EDL") formada cerca de la superficie. a Figura 27 es una vista en perspectiva de un terior de la cámara de mezcla. a Figura 28 es una vista en sección transver de la Figura 27. a Figura 29 es una ilustración de un imental . a Figura 30 ilustra los niveles de oxígeno disu ua procesada con el oxígeno en el dispositivo de Figura 2 y almacenada en una botella plástica d a de 500 mi y una botella de vidrio de 1,000 pada a 18.33° C (65° Fahrenheit) .

La Figura 33 ilustra la retención de oxígeno dis olución salina balanceada de Braun de 500 mi p 1 oxígeno en el dispositivo de mezcla de la Figur La Figura 34 ilustra un experimento adicional d sitivo de mezcla de la Figura 2 se usa para ro o del agua mediante el procesamiento del a geno en el dispositivo de mezcla de la Figura 2.

La Figura 35 ilustra el rociamiento de oxígeno d 1 dispositivo de mezcla de la Figura 2 a temper ón normales .

La Figura 36 es una ilustración de una lar .

Las Figuras 37A y B ilustran los efectos de dis yleigh de un fluido enriquecido con oxígeno; La Figura 38 ilustra el perfil de citoquinas o mitogénico en presencia de un fluido enriquec ersales histológicas de la cicatrización de la o de la dermis y la epidermis. a Figura 42 ilustra la expresión de la tinción cicatrización de heridas tratadas y control, ara detectar mucopolisacáridos ácidos, como el ónico; a Figura 43 describe la expresión de la tinci de von Willebrand que se usa para detec énesis en la cicatricaion de heridas trat 1 a Figura 44 ilustra la detección de tinción d e usa para detectar la elastina en la cicatric s tratadas y control; a Figura 45 ilustra el número de mastocitos po para la cicatricaion de heridas tratadas y cont a Figura 46 'ilustra el porcentaje de células ecido con gas de la invención (2) , o el izado control (3) . as Figuras 49-58 muestran los resultados ciones de las citoquinas en la muestra de ta . as Figuras 59-68 muestran los resultados inas correspondientes a las evaluaciones de la puto broncoalveolar (BAL) . · as Figuras 69-75 muestran los estudios do or de membrana B2 de la bradiquinina se inm el biosensor de aminopropilsilano (APS) , La pl a se dispuso como se designó en la Figura 6 de la bradiquinina al receptor inmovilizado se uerdo a la * muestra dispuesta como se designó 71. Los resultados de la unión de la bradiqui an en la Figura 72. La unión de la bradiquin Las Figuras 76-83 muestran los datos que mu capacidad de las modalidades parti gadas en la presente para afectar a las C uiadoras. El estudio involucró la irradia células presentadoras de antígeno, ducción de antígeno y células T.

La Figura 84 muestra que los fluidos ción generados por e 1 ec troe iné t ica dismi ptación sérica de la calcitonina de salmó o animal. Los resultados son consistentes ía de las uniones herméticas. as Figuras 85-89 muestran los nivel sión de proteínas relacionadas con u ticas en el tejido pulmonar en el modelo para generar los datos de la Figura 84. as Figuras 90-94 muestran los datos obten efectos electrocinét icos local a e / corri ente ) que ocurren en un disposit a que comprende los elementos del rotor or aislados, para permitir la detección os del voltaje/corriente durante la gene luido por elec troc iné t ica .

Las Figuras 97A-C muestran los resultados ios de resonancia magnética nuclear cidos para caracterizar, además, la natu mental de los fluidos de la invención ge e lee troc iné t ica . Los fluidos generado rocinética aumentaron las amplitudes de N del soluto reportero de trehalosa. as Figuras 98 y 99 muestran los resulta studios vol t imétrieos (es decir, voltamet cuadrada (Figura 98) y polarograf servaron a -0.9 voltios para los fluidos olas generados por electrocinética, tros de los fluidos control salino y bla ados por electrocinética muestran terísticos en -0.19 y -0.3 voltios que tes en el espectro de los fluidos generad roe iné t i ca .

Las Figuras 100-106 muestran los resulta técnicas de fijación de parches en las aron los efectos del fluido generad rocinética probado sobre la polaridad ana de células epiteliales y la activi iónico. Los resultados indican que los ados por electrocinética de la invención a contribución dependiente de voltaje ctancia de células completas. as Figuras 109-114 muestran los resulta experimentos con la budesonida realizado ar las propiedades an i - inf lamatorias de ratoria de los fluidos generados rocinética de la invención en un mode bilización con ovoalbümina de ratas y . Los fluidos generados por e lee troc inét vención disminuyeron el conteo de eosinó aron una fuerte sinergia con la budesonida nución del conteo de eosinóf ilos , dismi valores Penh, aumentaron el volumen nuyeron los niveles sanguíneos de eot aron significativamente los niveles sang os dos tipos principales de citoquinas matorias, IL-10 e interferón gamma a las 6 és de la exposición como resultad La Figura 115 muestra que el fluido genera rocinética de la invención (por ejemplo, Solas) redujo la expresión del recepto ido por DEP en las células epite uíales (BEC) en aproximadamente 90% y ctivamente, mientras que una solución l (NS) sólo tuvo un efecto marginal. a Figura 116 muestra que el fluido genera rocinética de la invención (por ejemplo, Solas) inhibió los niveles M P-9 de la u uperficie celular inducido por DEP, e as epiteliales bronquiales en aproximad y 70%, respectivamente, mientras la so a normal (NS) sólo tuvo un efecto marginal. as Figuras 117 A-C demuestran los resulta erie de experimentos de fijación de parch imentos que refieren las Figuras 117 A- cos resultantes de la sustracción de los entes de Solas a partir de los datos cor RNS-60 en tres protocolos de voltaj onado desde cero mV; B. escalonado desde - scalonado desde -120 mV) y dos interva o (15 minutos (círculos abiertos) y 2 ulos cerrados) ) .

Las Figuras 119 A-D demuestran los resulta erie de experimentos de fijación de parch aron los efectos del fluido generad rocinética (por ejemplo, Solas (paneles A. -60 (panels C. y D.)) sobre la polaridad ana celular epitelial y la- actividad de o usando diferentes soluciones salinas e iferentes protocolos de voltaje (paneles A COIOS de voltaje (paneles A. y C. esca cero mV; B. y D. escalonado desde -120 mV (paneles A. y B.) y Revera 60 (paneles a Figura 121 A muestra la imagen AFM 1 mm -1 (rns60-l ?µ?? 3D.jpg) . Los picos pe representan nanoburbujas hidrofóbicas q m de ancho y -1.5 nm de altura o más peque a Figura 121 B muestra la imagen de 1 tnm -1 (pp60-l lum 3d.jpg) . Esta imagen reve ("2") (nanoburbujas hidrofóbicas) qu ncialmente más grandes (-60 nm de ancho y tura) que aquellas visibles RNS60-1.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN iertas modalidades divulgadas en la prese Ciertas modalidades de este documento se rel omposiciones terapeúticas y métodos de tratamient o para prevenir o aliviar al menos un síntoma medad o afección asociada con la digestión. lo, las composiciones terapéuticas y/o métodos de presente pueden ser útiles para tratar o preveni afecciones o enfermedades seleccionadas del stente de gastritis, úlcera péptica, úlcera d edad de reflujo gastroesofágico (GERD) , reflujo gitis eosinofílica, enfermedad inflamatori tino (tal como la enfermedad de Crohn) , síndr tino irritable, infección o trauma del intestinal, incluyendo la infección por H. ella, Shigella, Staphylococcus , Campyl ridium, Escherichia coli, Yersinía , Víjbrio, a, Entameba histolytica, rotavirus, no os generados por electrocinética : El "fluido generado por electrocinética," c en la presente, se refiere a los ados por electrocinética del solicitante ción, generados para propósitos de los ej rabajo en la presente, con el disposit a ejemplar descrito en detalle en la pr e también US 20082190088 y W02008 / 052143 , porados en la presente en su totalida encia) . Los fluidos elec trocinét icos , c tró con los datos divulgados y presentados nte, representan fluidos novedoso mentalmente distintos con respecto a la t ior a los fluidos no- elec t rociné yendo los relativos a los fluido rocinéticos oxigenados de la técnica an a iónica de nanoe s t ruc turas que con no estabilizadas por carga, con un di dio de aproximadamente menos que 100 nanó tablemente configuradas en el fluido o en una cantidad suficiente para propo ontacto de una célula viva con el flui ación de al menos el potencial de me ar o la conductividad de la membrana célul En aspectos particulares, los fluidos ge elec t roe iné t ica se refieren a los f ados en presencia de efectos electrociné izados, inducidos por hidrodinámica ío, no uniformidad en relación al volu' o total) , (por ejemplo, pulsos e / corriente ) , tales como efectos local terísticos del dispositivo como se descr os reporteros (por ejemplo, trehalosa) dis l. Los efectos en las amplitudes de lín en el método indirecto de medición ío, el soluto x que se mueve' en un flu a como se describe en la presente e íos de trabajo particulares.

En aspectos particulares, los fluidos a ados por electrocinét ica se caracterizan una de: diferencias distintivas en e métrico de onda cuadrática a uno cualquier , -0.47V, -1,02V y -1.36V; picos polarogr .9 voltios; y ausencia de picos polarogr f y -0.3 voltios, que son únicos para los £ ados por electrocinét ica como se describe nte, en los ejemplos de trabajo particular En aspectos particulares, los fluidos a ígeno en el fluido está presente en una ca 1 menos 15, ppm, al menos 25 ppm, al me al menos 40 ppm, al menos 50 ppm, o al me de oxigeno disuelto a presión atmosféri tos particulares, los fluidos acuosos alt electrocinetica tienen menos que 15 ppm, 0 ppm de oxigeno disuelto a presión atmosf oximadament e niveles de oxígeno ambiental .

En aspectos particulares, los fluidos a ados por electrocinética son oxigenados, ígeno en el fluido está presente en una ca aproximadamente 8 ppm y aproximadamente l este caso algunas veces se refiere nte como "Solas." En aspectos particulares, el fluido ado por electrocinética com rende al men 3 ppm, al menos 5 ppm, al menos 7 ppm, al m, al menos 15 ppm, o al menos 20 ppm.

En aspectos particulares, los fluidos ados por e lee troe iné t ica son adecuados ar la estructura o función de la me ar (por ejemplo, la alteración de rmación, la actividad de unión al ligando, idad catalítica de una proteína asociada ana) suficientes para proporcionar la mod a señal 'de transducción int race lular , don tos particulares, la proteína que se asoci ana comprende al menos uno selecciona consistente de receptores, receptor membrana (por ejemplo, el receptor acoplad ína G (GPCR), receptor TSLP, receptor érgico, receptor de la bradiquinina , ar la señal de t ransducc ion intracelula ende la modulación de un sistema o v jero celular dependiente de calcio (por ej dulación de la actividad de la fosfolipas dulación de la actividad de la adenilato c .

En aspectos particulares, los fluidos a ados por elec trociné t ica se caracteriz s actividades biológicas (por ejempl ación de citoquinas, receptores, enzimas y ínas y vías de señalización intrace itas en los ejemplos de trabajo y en s de este documento.

En aspectos particulares, los fluidos a ados por electrocinética exhiben sinergia to de latiramer, inter f eron- , mitoxan unidos a la superficie celular inducid n las células epiteliales bronquiales (BEC uestra en los ejemplos de trabajo de iento .

En aspectos particulares, los efectos biol s fluidos acuosos alterados por electroci hiben por la toxina diftérica, lo que indi be abloqueadores , los bloqueadores GPCR eador del canal de Ca afectan la activi fluidos acuosos alterados por electroci ejemplo, sobre la función de la cél adora) como se muestran en los ejempl jo de este documento. n aspectos particulares, los efectos fís icos (por ejemplo, la capacidad para alterar la tructura de la membrana celular suficient la producción de un fluido o solución acuosa ox ada por electrocinética, que comprenden: proporci de un material fluido entre dos superficies es vimiento relativo y definir un volumen de mezcl , en donde el tiempo de permanencia de un sólo p ial fluido que fluye dentro y a través del vol a es mayor que 0.06 segundos o mayor que 0.1 segu ducir oxígeno (02) en el material fluido qu del volumen de mezcla bajo condiciones adecuad er al menos 20 ppm, al menos 25 ppm, al menos 40, al menos 50, o al menos 60 ppm de oxígen ial, y alterar el fluido o solución por electroci ertos aspectos, el oxígeno se infunde en el mate de 100 milisegundos , menos de 200 milisegundos 00 milisegundos, o menos de 400 milisegundo idades particulares, la relación del área superfi condiciones adecuadas para infundir al menos 20 25 ppm, al menos 30, al menos 40, al menos 5 60 ppm de oxígeno en el material en menos egundos, menos de 200 milisegundos , menos egundos, o menos de 400 milisegundos. En tos, el tiempo de permanencia del material qu del volume de mezcla es mayor que 0.06 seg que 0.1 segundos. En modalidades particula ión del área superficial al volumen es de al me os 20, al menos 30, al menos 40, o al menos 50. as modalidades adicionales proporcionan un mé cción de un fluido o solución acuosa oxigenada a lectrocinética, que comprende el uso de un disp zcla para crear una mezcla de salida al mez material y un segundo material, el disp nde : una primera cámara configurada para rec ial se proporciona a la cámara de mezcla a travé lidad de agujeros de paso formados en uno del stator; una segunda cámara en comunicación fluida a de mezcla y configurada para recibir el mate a de los mismos; y una primera bomba interna de la primera cámara, la primera bomba inter gurada para bombear el primer material desde la a a la cámara de mezcla. En ciertos aspectos, la interna se configura para impartir una ve nferencial en el primer material antes de que ent a de mezcla .

Las modalidades adicionales proporcionan un méto cir un fluido o solución acuosa oxigenada alter rocinética, que comprende el uso de un disposi a para crear una mezcla de salida al mezclar un ial y un segundo material, el dispositivo compre uno del rotor y el estator; una primera cá Ícacion con al menos una porción mayoritaria del mo abierto de la cámara de mezcla; y una segunda municación con el segundo extremo abierto de la zcla .

Los aspectos adicionales proporcionan un fl ión acuosa oxigenada alterada por electroc ida de acuerdo con cualquiera de los métodos ante mación a inflamación puede ocurrir como una re siva a la invasión del individuo por material e articular de origen microbiano. Además, el ÍCO, las toxinas, y la neoplasia pueden estas inflamatorias. La acumulación y ?? ación de los leucocitos, son eventos centrales ciosos como la meningitis infecciosa, fiebre re enfermedades reumáticas tales como lupus erit mico y artritis reumatoide . Estas enfermedades af nes de personas de todo el mundo cada año, y con orbilidad y mortalidad aumentada. La concepción c spuesta inflamatoria en estos diferentes proc medad hace de su regulación un elemento trascende evención o el tratamiento de las enfermedades hum La sobreproducción de citoquinas pro- inflamatoria cado en la patogenésis de numerosas enfe matorias y autoinmunes . La secreción de TNFa o primario en el inicio de la cascada infl an F . M., y otros Lancet , 1989, 2:244-7; Hawor Eur. J. Inununol, 1991, 21:2575-2579) y co tamente al inicio y mantenimiento de estas enfer citoquinas también juegan un papel, incluy as células del sistema inmune, los macrófag cular, secretan muchas de estas citoquinas en re stímulo de activación. Las células dianas inas se puede localizar en cualquier compartime y pueden actuar mediante mecanismos de cia, o pueden actuar en las células vecinas. las citoquinas pueden regular la inflamación localizada o sistémica. rnos digestivos as modalidades particulares se relacionan iento de los trastornos intestinales con el do por electrocinética de la invención. De acue os particulares, los trastornos intestinales ado de una infección con un organismo. El or zoos . Los protozoos que provocan trastornos intes en pero no se limitan a Giardia y la ameba En lytica . os síntomas de afecciones o trastornos dig almente incluyen dolor, náusea, vómitos, tería, constipación, hinchazón, garganta ir ción laríngea o respiratoria, irritación orofa a de peso o ganacia de peso, y similares. s de Tratamiento El término "tratar" se refiere a, e in tir, aliviar, inhibir el proceso de, o pr nfermedad, trastorno o afección, o de uno rnas de ésta; y "tratamiento" péut icamente" se refiere a la acción de t se define en la presente. na "cantidad terapéuticamente eficaz jeto mediante la prevención o el alivio de al m ma de inflamación asociado con ciertas afecc medades, como un trastorno digestivo. Por ejemp siciones terapéuticas y/o métodos descritos nte que pueden ser útiles para tratar o preveni afecciones o enfermedades seleccionadas del stente de enfermedades y/o trastornos gástricos i itis, enfermedad de reflujo gastroesofágico gitis eosinofílica, reflujo ácido, úlceras pé edad inflamatoria del intestino, síndrome del in able, e infección por Helicobacter pylori (H. pyl Las modalidades adicionales referidas en la pres o de tratamiento usando la terapia de rehidrata sado durante años para combatir la deshidr ada con diarrea y/o disentería, particul arterial (por ejemplo, intravenosa o pe ial) . El personal médico a menudo promoverá la hidratación oral (ORT, , por sus siglas en inglé er el agua perdida en las deposiciones debid ea. La ORT típica . contiene una solución de res. De acuerdo con ciertas modalidades, la solu y azúcares se' prepara con el fluido acuoso alter rocinética de la invención para formar ORT. De tras modalidades, este ORT preparado con el fluid ción se puede administrar de acuerdo con procedi tocolos normales .

Muchas de las afecciones o enfermedades asociadas ación y/o trastornos digestivos se han trat oides, metotrexato, fármacos inmunosupresor en la ciclofosfamida, la ciclosporina, la azatio ármacos de supresión y de neutralización de al. Algunos ejemplos incluyen antiácidos, sucr eadores de H2, inhibidores de la bomba de pr éticos , antidiarreicos , antiespasm omoduladores , agentes biológicos, flamatorios , laxantes, ácido algínico, misopro rida. Los antiácidos generalmente neutralizan e ico, el cual aumenta el pH gastroduodenal. Genera ntiácidos conienen calcio, magnesio, aluminio, reactivos. os bloqueadores de H2 (tales como cime idina, nizatidina, y ranitidina) son bloqu sibles de la secreción de ácido inducida por hi lulas parietales gástricas. Los inhibidores de l protones (incluyendo el omeprazol, lanso azol, pantoprazol, esomeprazol, y tenato lamina, y pirenzepina) suprimen los espasm go e intestinos. os inmunomoduladores (incluyendo azati topurina, y metotrexato) son agentes que aume a - inmune. Los agentes biológicos (inc imab, etanercept, adalimumab, certolizum izumab) son fármacos producidos a partir de org que a menudo modulan el sistema inmune. P rnos intestinales, los agentes más biológicos erpos o derivados de éstos. Los flamatorios (incluyendo ácido 4 -aminosalicílico osalicílico) reducen la inflamación del ivo. Los laxantes (incluyendo lubipros rod) inducen los movimientos del intestino iciones blandas. Estos tratamientos se pueden ación con cualquiera de las modalidades descrita Estos fármacos tienen una variedad de desvent iones · adversas incluyendo las reacciones en el s ción, erupción, infecciones respiratorias supe ciones autoinmunes y susceptibilidad aumentada ciones. Además, muchos fármacos anti -inflam ren de la administración por vía intravenosa t nea (SC) , a diferencia de las rutas oral y , más convenientes y adaptables. En consec aún una necesidad de desarrollar nuevos medícam s de tratamiento para las afecciones y enfermeda lacionan con la inflamación. ía de combinación : spectos adicionales proporcionan los méto invención descritos en la presente, enden, además, la terapia de combinaci al menos un agente terapéutico adició oides (incluyendo corticosteroides, por ej cortisona, hidrocort i sona acetato, co to, tixocortol pivalato, prednis prednisolona, y prednisona) , anti lf ato, bloqueadores de H2 , inhibidores . de protones, proc iné t icos , antidiar spasmódicos, intnunomoduladores, bioló es ant i inf lamatorios , laxantes, ácido alg rostol, y mosaprida. idad anti- inflamatoria de soluciones y ecidos con gas generados por electrocinética : e acuerdo con ciertos aspectos de la p ción, los fluidos y soluciones enriquecidos c itos en la presente, tienen efectos y propiedade atorias y se pueden usar como agentes atorios ara el tratamiento de su etos afli i a producción aumentada de las citoquina atorias se ha implicado en la patogénesis de nu edades inflamatorias y autoinmunes. La secre es un evento primario en el inicio de la atoria (Brennan F. M . , y otros, Lancet, 1989, 2 th C, y otros, Eur. J. Im unol. 1991, 21:2575-ibuye directamente a la iniciación y el mantenimi enfermedades inflamatorias y autoinmunes. inas pro- inflamatorias también desempeñan una f endo la interleuquina 1ß (IL-?ß) , IL-6, IL-8, nítrico, IFN-? y GM-CSF, mientras que citoquina atorias tales como IL-10. pueden reducir la enfe células del sistema inmune, los macrófag ularf secretan muchas de estas citoquinas en re tímulo de activación. na variedad de tipos de células están involucr ncluyen TNF-a, IL-?ß, IL-8, IL-12, óxido nítric GM-CSF, G-CSF, M-CSF y otras. Las células T libe -4, INF-?, y otras citoquinas inflamatorias, uinas activan otras células inmunológicas y én se pueden activar como agentes cito endientes. La liberación excesiva de med atorios derivados del macrofago y la célula T rticular, conducir al daño de las células normale os circundantes. as citoquinas pro- inflamatorias se han implicad ida, y otras infecciones virales que incluy egalovirus, el virus de la influenza, y la fam erpes virus. El TNF mejora la actividad ba tor/intensificador principal inmediato y prec egalovirus humano y puede desempeñar una funció ivación de la infección latente de HCMV en las , J. Clin, Oncol. 1992, 10:1141-1152/ Chapman P J. Clin. Oncol. 1987, 5:1942-1951) junto ción de la expresión génica para la fosfoli ich J., y otros, J. Clin. Invest. 1994, 93:1224- sintasa. a inducción de NO en las células de músculo lis isminución de la presión arterial promedio tencia vascular sistémica durante el shock sépt ugiere un papel fundamental para la NO. De est erapias que accionan los efectos de subregulacio IL-?ß, y NO podrían ser beneficiosas en el trat as enfermedades y alteraciones inflamatoria en la sepsis, el shock séptico y el shock endo a sobreproducción de TNFa contribuye terísticas de numerosas enfermedades autoinmune diabetes artritis reumatoide. El lu us erit mero de células periféricas mononucleares sanguín san el ARNm para TNFa, así como el nivel de meta en el fluido cerebroespinal, se correlacionaron edad grave de NPLE (Svenungsson E., y otro . Dis. 2001, 60 : 372-9) . a IL-1 y el TNFOÍ juegan un papel central en d estas agudas así como crónicas, en los mode les. Adem s, la IL-11, 1 IFN y el IFNp también r ascendentemente las reacciones inflama sámente, varias citoquinas se pueden involucrar ción descendente de las respuestas inflamatori IL-4, IL-10, IL-13, entre otras). Como se expus lo 1, las células que contactaron el fluido enri as de la invención mostraron un aumento en los N-? con el antígeno T3 que en el medio de 1 con el antígeno T3 , mientras que la IL-8 fue m ecido con gas de la invención solo, los niveles ron más altos que en el medio control. Estos res onsistentes con un microambiente anti- inflamatori a NO se reconoce como un mediador y regulador estas inflamatorias. Ésta posee propiedades cito los patógenos, pero también puede tener ctivos en los propios tejidos del individuo (Kor , Curr Drug Targets Infla m Allergy 4(4): 471-9, reacciona con la guanilato ciclasa soluble para ofosfato de guanosina cíclico (cGMP) , que media S efectos de la NO. La NO también puede interact ígeno molecular y el anión superóxido para produ ies reactivas de oxígeno que pueden modificar d nes celulares. Estos efectos indirectos de la NO pel significativo en la inflamación, donde la e en altas cantidades por la NO sintasa in demás, se ha demostrado que la inhibición sis de NO retarda la contracción de la herida, al Ízación del colágeno, y altera el espesor dermis. (Amadeu y Costa, J. Cutan, Pathol . 33: 4 ) . La migración de los mastocitos y la angiogén eridas también se afectan por la inhibición de Sin estar atados a niguna teoría de mecan cular, en ciertas modalidades los fluidos enri as de la invención pueden estar modulando la pro localizada y/o celular, o la degradación, cons l espectro de efectos de cicatrización de rados en la sección de Ejemplos descritos nte. Debido a las vías variables de regulac as modalidades, el fluido enriquecido con gas ción puede aumentar la producción de NO y/o reta dación de NO, mientras que en otras modalida das con la solución salina normal, como se expon lo 9 de este documento. El estudio también mos los d as 15 y 22, las heridas tratadas con la s a enriquecida con oxigeno se diferenciaron a u ápida según se evidenció por la formación más t pas epidérmicas más maduras . En todas las eta Sarniento que ocurre en la epidermis asociado rización normal no ocurrió dentro de las das con la solución salina enriquecida con oxigen e este modo, de acuerdo con este espectro de efe rización de heridas, pero sin el deseo de estar a a teor a en particular, se cree que la solución ecida con oxígeno puede modular el nivel izado y/o celular dentro de las heridas. La NO actores de crecimiento, la deposición del colág ción de los mastocitos, el engrosamiento epidér ntesis de NO (Amadeu y Costa, J. Cutan Pathol 3 2006) . on referencia ahora a la Figura 41A a 41F, raciones comparan los resultados de la cicatriza as en los tejidos epidérmicos porcinos con ión salina enriquecida con oxígeno. Como se ar, la cicatrización de la herida control y que usa la solución salina enriquecida con oxí durante los días 1, 4 y 16. a Figura 41A describe la cicatrización de herid rida control el día 1. Como se puede obser muestra engrosamiento epidérmico/dérmico y una ontorno. La Figura 41B describe la cicatrizació el día 1 para la herida tratada que usa la s enriquecida con oxígeno. La herida mues samientQ epidérmico/dérmico normal y el contorno Figura 41D, se describe un espolón epidérmica s . De este modo, en los primeros 4 días del exper polón epidérmico creado en la herida tratada que ión salina enriquecida con oxígeno muestra una iento epidérmico de dos veces aquella herida qu con la solución salina enriquecida con oxígeno. on referencia ahora a la Figura 41E, se desc a control el día 16. La herida muestra la ep diferenciada con pérdida del c rmico/dérmico que aquella de la herida tratada ión salina enriquecida con oxígeno descrita en la a Figura 41F muestra la epidermis más diferencia rno epidérmico/dérmico más normal en la herida. n las primeras dos fases del proceso inflam ier cuerpo extraño es destruido, por ejemplo, extraño es un organismo, o el tejido alred ncluso antes de que baje la inflamació lastos comienzan a moverse en el área dañada del 1 circundante, donde usualmente existen en una co iva. Éstos migran con un movimiento ameboideo a l S hebras de la fibrina y se distribuyen a todo l ea de cicatrización. Una vez fijados en la posic dañado, comienzan a sintetizar el colágeno y s proteína, que se auto dispone en las fibras. Las ientan con sus ejes longitudinales en la direcc máximo. Como los manojos de colágeno crecen ibroblastos gradualmente se degeneran y se a hámente a los manojos, y el área dañada se tra el tejido de la ci imultáneamente con la formación del tejido iz, las células epidérmicas intactas en el bord comienzan a proliferar y a moverse, como un subendotelial . Las fibras en las hen celulares que se forman en los vasos sanguíneos laquetas y accionan la liberación de mediadore c demás de las plaquetas, las fibras de c stas también interactúan con las proteínas del e filtran a través de los poros de la pared dilat incluyendo la activación del factor de la cas lación sanguínea, la vasodilatación aumenta abilidad del vaso sanguíneo aumentada, y la quimi demás, la cascada del complemento se puede acti sos estímulos: los vasos sanguíneos dañados, las líticas liberadas por las células dañada entes de membrana de cualquier bacteria que par s complejos antígeno-anticuerpo . Algunos entes del complemento activados actúan como f or ele inhibición ele la migración del macrófag or quimiot ctico de macrófago) , LMIF (fac ición de la migración del leucocito) , HRF (faet ación de la histamina) , TF (factores de transfer leuquinas (IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL -9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, TNF- ß , interferones ( IFN-OÍ , IFN-ß, IFN-?, IFN-tc.)# G-CSF (factor estimulante de la colo locitos) , GM-CSF (CSF granulocito-macrófago) , M-C crófago) , multi-CSF (IL-3) , factor de crecimie lasto (aFGF, bFGF) , EGF (factor de cree rmico) , NGF (factor de crecimiento del nervio) r de crecimiento derivado de plaqueta) , VEGF (fa iento del endotelio vascular) , factores de cree formantes (TGF- , TGF-ß, etc.), NAP-2 (prot dora de neutrófilo) , PF-4 (factor 4 plaque tar la producción y/o secreción de moléculas atorias o citoquinas o disminuir la degradación ulas anti-inflamatorias o citoquinas, y por consi ar o prevenir al menos un síntoma de la inflamac ornos digestivos. En otras modalidades, los ecidos con gas y/o las composiciones terapéutica nte invención pueden disminuir la producci ción de las moléculas pro- inflamatorias o citoq tar la degradación de las moléculas pro- inflámat inas, y por consiguiente aliviar o prevenir al m a de la inflamación y/o trastornos digestivos. os estudios previos demostraron un papel cri erpos anti-MOG en el aumento de la desmieliniz gravamiento de la EAE (encefalomielitis aut imental) , en un sistema de modelo animal p rno autoinmune humano de la artritis reum liferación linfocitaria fue mayor en respuesta 0G cuando se cultivó en el fluido reconstituido o de la invención enriquecido con gas que compre roñes solvatados, que cuando se comparó con el ado, comprimido (recipiente presurizado) o el ido desionizado. iones y fluidos enriquecidos con gas genera rocinética de la invención. a difusión o enriquecimiento de un fluido c resultar en una solución o suspensión de 1 s. En particular, el enriquecimiento de un líqu s (por ejemplo, el oxígeno) puede ser beneficio s aplicaciones, incluyendo los trata uticos. Como se utiliza en la presente, la o", en eneral, se uede referir a un lí uido, n modalidades particulares descritas en la prese isuelto comprende el aire ambiental. En una mo ida, el gas disuelto comprende el oxígeno. idad, el gas disuelto comprende el óxido nítrico. xisten varios méto dos de líquidos enriquecidos cidos en la técnica (tales como el agua enriquec o) . Por ejemplo, un sistema de aireación por t liberar aire cerca de un conjunto de aspas que ezclan el aire o el oxígeno con el agua, o el rociar en el aire para aumentar su conten o. Además, otros sistemas en el mercado inyectan o en el agua y someten el agua y el gas a un vór escala. Los niveles de origen natural del oxigen no son típicamente más que 10 ppm (partes por m al se considera un nivel de 100% de oxígeno di ruebas con ciertos dispositivos han mostrado qu sición terapéutica que comprende un fluido enri as de la presente invención y, opcionalmente, a gente terapéutico adicional, tal como un p éutico, un metal, un péptido, un polipépti ína, un nucleótido, un carbohidrato o p silada, una grasa (que incluyen los aceites ), u otro agente que previene o alivia al m a de una afección o enfermedad asociada ación . demás, ciertas modalidades descritas en la p en las composiciones terapéuticas y onados con la inflamación del tracto digestivo, ciones que afectan el tracto digestivo se deb ación incluyendo, pero no se limitan a: gas edad de reflujo gastroesof gico (GERD) , eso fllica, reflujo cido, úlceras pépticas, enf éutico disperso en el material huésped, do ial de infusión comprende micro-burbujas de oxí uido huésped, donde la mayoría de las micro-burbu ores a 0.2 mieras, o de preferencia menores s de tamaño. En ciertas modalidades, el nivel de lto en el material huésped de fluido infundido s ner aproximadamente a más de 30 ppm de férica por al menos 13 horas. En otras moda culares, el nivel de oxígeno disuelto en el m ed de fluido infundido se puede mantener a más de sión atmosférica por al menos 3 horas. n las modalidades adicionales, el material hué o infundido comprende, además, una solución sal idades adicionales, el material huésped de ido mantiene un nivel de oxígeno disuelto de a imadamente 20 m a a roximadamente 40 p m dur rilla a través del mismo durante un periodo de ionado después que el oxígeno se ha difundido al a Tabla 1 describe diversas mediciones parciales nes tomadas en una cicatrización de herida trat olución salina enriquecida con oxígeno y en mues ion salina enriquecida con oxígeno enriquecido presente invención.

Tabla 1 MEDICIONES DEL OXIGENO EN EL TEJIDO Detector En el aire : 23° C Columna Presión Parcial (mmHg) Bl 32-36 B2 169-200 B3 20-180* B4 40-60 *Profundidad mínima de la herida, mayorí inaron un valor umbral de tamaño por debajo d los tamaños de la mayoría de las burbujas. ste valor umbral de tamaño o límite de ta eció por el paso del material de salida 102 te el procesamiento de un fluido y un gas itivo de mezcla 100 a través de un filtro de 0. de 0.1 mieras. En la realización de estas prue n del primer material 110, en este caso, un fl lumen del segundo material 120, en este caso, un n a través del dispositivo de mezcla 100 para lumen del material de salida 102 (es decir, un iene un gas difuso en él) . Sesenta mililitr al de salida 102 se vaciaron en una jeringuill 1 nivel de OD del fluido dentro de la jeringu después usando una Orion 862a. La Orion 862a e dir los niveles de OD dentro de un fluido. El TABLA 2 omo se puede observar, los niveles de OD medidos jeringuilla y los niveles de OD medidos dentro d ecipitados de 50 mi no se modificaron drásticame so del material de salida 102 a través de un fi imento, la solución salina se procesó con el oxí spositivo ele mezcla 100 y una muestra del mate a 102 se colectó en un estado sin filtrar. El n la muestra sin filtrar fue de 44.7 ppm. El mate 102 se filtró usando el filtro de 0.1 miera taron dos muestras adicionales. El nivel de OD ra muestra fue de 43.4 ppm. El nivel de OD de la ra fue de 41.4 ppm. Después, el filtrto fue rem mó una muestra final del material de salida no f La muestra final tenía un nivel de DO de 45.4 ppm tados fueron consistentes con los observados us Millipore de 0.2 mieras. Estos resultados con nclusión de que existe una reducción insignific iveles de OD del material de salida 102 que s del filtro de 0.1 mieras, lo que proporci ción de que la mayoría de las burbujas en la s de líquido o cuerpo poroso. En el dispositivo de las superficies de las burbujas representan un ficativa del área de superficie total presente de mara de mezcla que puede estar disponible p s electrocinéticos de la doble capa. Por lo de los aspectos de área superficial y del ti ión discutidos en otra parte de este documen s relativamente pequeños de la burbuja generadas ezclador 100 en comparación con los dispositivo a anterior 10, también pueden contribuir, al m medida, a los efectos electrocinéticos totales dades del fluido de salida divulgadas en la pr creto, en las modalidades preferidas, como es il l mezclador 100, todo el gas se introduce m ras en el rotor (ningún gas se introduce a tr berturas del estator. Debido a que el rotor gir ior 10 puede ser, por lo tanto, sustancialme e, porque por lo menos la mitad del gas se intro ar de mezcla desde las aberturas del estator es a que el área superficial de una superficie e con r2 , cualquier componente de burbuja del ficie electrocinética del dispositivo de mezc ser sustancialmente mayor que aquel del disposi fusión de la técnica anterior.

Por lo tanto, sin estar atados por la teoría, no de mezcla del dispositivo de mezcla 100 tiene ficie sustancialmente superior a la relación de la del dispositivo de la técnica anterior sitivo de la técnica anterior 10 tiene una rela ficie a . volumen de 10.9, mientras que el me te 100 tiene una relación de superficie a vol , junto con (ii) un tiempo de permanencia 7 veces Con referencia ahora a la Figura 30, se ilust es de OD en el agua enriquecida con oxígeno sitivo de mezcla 100 y almacenados una botella p a pared delgada de 500 mi y una botella de cri mi por más de al menos 365 días. Cada una las se selló y se almacenó a 18.33° C (65° Fahre se puede observar en la figura, los niveles de enriquecido con oxígeno permanecieron equitati ntes por más de al menos 365 días.

Con referencia ahora a la Figura 31, se ilust s de OD en el agua enriquecida con oxígeno sitivo de mezcla 100 y almacenados en una ica con la pared delgada de 500 mi y una bot l de 1000 mi. Ambas botellas se enfriaron a Fahrenheit) . Un vez más, los niveles de OD del ecido con oxígeno permanecieron estables y dismi s que el oxígeno molecular se difunde o se mezcl o y puede operar para estabilizar las carga lo, electrones hidratados (solvatados) ) imparti o. Sin estar atados por la teoría o el mec as modalidades de la presente invención se ref uido enriquecido con oxígeno (material de sali ende las cargas (por ejemplo, electrones hid atados) ) que se adicionan a los materiales c r material se mezcla con el oxígeno en el disp zcla de la invención para proporcionar el mate a combinado. De acuerdo con aspectos partic electrones hidratados (solvatados) (alternati idos en la presente como 'electrones solvatado ilizaron en las soluciones de la invención se ncia por la persistencia de los efectos ens dos por estos electrones hidratados (solva ferroprotoporfirina (grupo Hemo) de las perox ? se combina fácilmente con el peróxido de hidr donadores de hidrógeno para oxidar el sustr lol. Además, como se reconoce en la técnica, ita la degradación auto-oxidativa del ácido i o en ausencia de peróxido de hidrógeno (veás ?, Heme Peroxidases, H. Brian Dunford, Wil Capítulo 6, páginas 112-123, que describe que l ión involucra un mecanismo de cadena ram nte eficiente, incorporado a este document ncia en su totalidad) . La reacción de HRP se en unidades de actividad enzimática, en el idad específica se expresa en términos de unid lol. Una unidad de pirogalol formará 1.0 ogalina a partir del pirogalol en 20 segundos a C. Esta unidad de pur urogalina (20 segundos) e ion con el oxígeno molecular en un fluido (Khaje , PROTEINS: Struct, Funct, Genet. 53: 656-666 ( noce también que el oxígeno se une al bolsillo zima peroxidasa a través de una región hidrofób de la enzima (entre Fe68 y Fel42) , cuya confo lemente determina el acceso del oxígeno al in erdo con aspectos particulares, y sin estar ata canismo, debido a que se conoce en la técnica ínas que las cargas superficiales en las pr ncian la estructura de éstas, los ele ados presentes en el fluido enriquecido con gas ión pueden actuar para alterar la conformación dasa de rábano picante de manera que esto ar en una mayor accesibilidad para el oxíge accesibilidad del oxígeno al bolsillo hemo pro enzima peroxidasa de rábano picante puede, a s on con la carga de tracción superficial (por e oñes) lejos de la superficie en virtud de un léctrico, donde el flujo de material produce u ectrones solvatados , Además, de acuerdo con a nales, sin estar atados por el mecanism tura orbital del oxígeno diatómico crea desequ rga (por ejemplo, los dos electrones no paread n el puente de hidrogeno del agua) en el arre de hidrogeno dentro del material fluido (agua), lectrones se solvatan y estabilizan dentro ilibrios . e realizaron diversas pruebas químicas del ecido con oxígeno de la invención, en presenc do de hidrógeno como se describe a continuac a de estas pruebas fue positiva (sensibilid do de hidrógeno de 0.1 ppm) . De este modo, el 13 para modificar la conformación y/o accesibili hemo de la peroxidasa de rábano picante . io de la glutation peroxidasa El material de salida fluido enriquecido con oxí vención se probó para la presencia de peróx eno mediante la prueba de la reactividad tión peroxidasa usando un ensayo estándar ( ente, el cóctel de enzima glutation peroxid stituyó en agua desionizada y los tampones apro uestras de agua se probaron mediante la adici 1 enzimático y viceversa. La determinación del rofotométrico se hizo a A34o nm, y temperatura a rados centígrados) . Las muestras probadas fuer desionizada (control negativo), 2. fluido enri xígeno de la invención a una baja concentraci La Figura 1 proporciona una vista de la versal parcial, diagrama de bloque parcial sitivo de la técnica anterior 10 para dif ificar uno o dos materiales gaseosos o l eriales de infusión" ) en otro material gaseoso o erial huésped") reproducidos de la patente os Unidos núm. 6,386,751, incorporada a este do referencia en su totalidad. El dispositivo 10 inc iento configurado para alojar un estator 30 y u l estator 30 incluye al rotor 12. Un canal tubula e entre el rotor 12 y el estator 30. El ro dricamente moldeado, tiene un diámetr imadamente 7.500 pulgadas y una longit imadamente 6.000 pulgadas que proporcionan una r ior del rotor 12. El primer material de infusi el interior del rotor 12 y al canal 32 a través lidad de aberturas 22 formadas en el rotor 12. l estator 30 también tiene aberturas 22 f dor de su circunsferencia . Una entrada 36 o material de infusión a un área 35 entre el est alojamiento 34. El segundo material de infusi del área 35 y al canal 32 a través de las abertu na bomba externa (no mostrada) se usa para bom ial huésped a un puerto de entrada simple ial huésped pasa a través de un puerto de entrada del canal 32 donde se encuentran los materi ión primero y segundo, que entran al canal 32 a s aberturas 22. Los materiales de infusión se rizar en su fuente para prevenir que el material través de las aberturas 22. tas ele aquella del flujo axial (por ejemplo, inc irecciones sustancialmente ortogonales) y hacia ació formado entre la primera extremidad del rot oj amiento 34 (es decir, hacia una parte de la idad del rotor adyacente a la entrada 16 e idad del rotor 12 y el alojamiento 34) . El f y ortogonal, y la presencia del material huéspe o entre la primera extremidad del rotor 12 iento 34 provocan una fricción indesea saria. Adem s, es posible que una parte del v d se quede atrapado en las corrientes parásitas linan entre la primera extremidad del rotor iento. Además, en el dispositivo 10, el m d deberá sortear al menos dos ángulos rect en cualquiera de las orientaciones de la del canal tubular 32. da de la salida anular del canal tubular 32 de salida 40. Una bomba externa 42 se usa para ido de salida a través del puerto de salida 40. esafortunadamente, antes de la salida del canal sustancial del material de salida debe viajar ión tortuosa distinta de aquella del flujo axi o, incluyendo las direcciones sustanci nales) y hacia y entre el espacio formado e a extremidad del rotor 12 y el alojamiento , hacia una parte de la segunda extremidad de nte al eje 14 entre la extremidad del rotor i iento 34) . Como se mencionó anteriormente/ el f y ortogonal, y la presencia del material huéspe espacio entre la extremidad (en este caso, la idad) del rotor 12 y el alojamiento 34 prov on adicional indeseable e innecesaria. Adem omo es apreciable por aquellas persona imiento ordinario en la técnica, el puerto de ent imparte un flujo axial al material huésped. 21 imparte un flujo circunferencial en el m d. Adem s, el puerto de salida 40 imparte o prop un flujo axial en el material de salida. Ade de velocidad del flujo circunferencial se imp ial sólo después que éste entra en la entrada an anal tubular 32, y posteriormente el vector d ferencial deberá ser degradado o eliminado cu ial entra al puerto de salida 40. Existe, por lo ecesidad de una aceleración circunferencial pro aterial cuando éste pasa en la dirección axial a anal 32, y una desaceleración circunferencial del material del canal 32. Estos aspect ación con la trayectoria tortuosa que toma el m rocinética a Figura 2 proporciona un diagrama en bloq a algunos de los componentes de un disposi 100 y el flujo del material en, dentro, y fu sitivo. El dispositivo de mezcla 100 combina do iales de entrada para formar un material de sali se puede recibir, por tanto, en un recipie namiento 104. El dispositivo de mezcla 100 ag más materiales de entrada de una manera novedo ir un material de salida 102 que tiene carácter sas. El material de salida 102 puede incluir uspensión de al menos uno de los materiales de menos uno de los otros materiales de entra o, las emulsiones) sino también una cpmb sa ( or e em lo, las combinaciones electrostáti ial 130 proporcionado por una fuente 132 del ial. El primer material 110 puede incluir un 1 como agua, solución salina, suspensiones qu os polares, líquidos no-polares, suspe ales, medios de crecimiento celular, y los sim gunas modalidades, el primer material 110 puede terial de salida 102 reciclado en el disposi 100. El segundo material 120 puede consistir ir un gas, tal como oxígeno, nitrógeno, dió o, monóxido de carbono, ozono, gas de azufre, so, óxido nítrico, argón, helio, bromu aciones de éstos, y los similares. En moda idas, el gas es, o comprende, el oxígeno. El ial opcional 130 puede incluir tanto un líquido En algunas modalidades, el tercer material 13 o incluir el material de salida 102 reciclado al 130 pueden ser almacenados bajo presión en la la fuente 122, y la fuente 132, respectivam ser forzados dentro del dispositivo de mezcla esión. La invención no se limita al método usa erir el primer material 110, el segundo material almente, el tercer material 130 en el disposi 100 de la fuente 112, la fuente 122, r y la fuen tivamente. l dispositivo de mezcla 100 incluye una primera una segunda cámara 320 que flanquean una cá 330. Las tres cámaras 310, 320, y 330 se interc an un volumen continuo. l primer material 110 se transfiere a la primera fluye de ahí a la cámara de mezcla 330. El al 110 en la primera cámara 310 se puede bombea a cámara 310 por una bomba interna 410. El interna 420. Opcionalmente , el material de sal segunda cámara 320 se puede bombear de ahí h iente de almacenamiento 104 por una bomba exte jemplo, sola o en combinación con una bomba inte 0) . n aspectos particulares, un eje de trasmisión co ia tanto la bomba interna 410 como la bomba El eje de trasmisión 500 pasa a través de la c 330 y proporciona la fuerza rotacional, que ezclar el primer material 110, el segundo materi onalmente, el tercer material 130. El eje de tra potencia por un motor 510 acoplado a éste. a Figura 3 proporciona un sistema 512 p stro del primer material 110 al dispositivo de eliminar el material de salida 102 desde el disp zcla 100. En el sistema 512, se combinan el rec a la bomba externa 210 al dispositivo de mezcla al de salida 102 sale del dispositivo de mezcl del conducto de fluido. 518. El conducto de flu opla a un recipiente de almacenamiento combinad nte 112 y transporta el material de salida 102 q dispositivo de mezcla 100 hacia el recipie namiento combinado 104 y la fuente 112. El cónd 518 incluye una válvula 519 que establece una ración o contrapresión dentro del dispositivo de on referencia a las Figuras 2, 4-9, y cionará una descripción más detallada de entes de una modalidad del dispositivo de mezc spositivo de mezcla 100 es escalable. Por lo tan iones proporcionadas con relación a d entes pueden ser usadas para construir una mo r o moverse de otra forma. Opcionalmente, el disp zcla 100 se puede acoplar a una base 106, que s a la superficie tal como el piso para mant itivo de mezcla 100 en una posición sustanci ica . l alojamiento 520 se puede ensamblar a pratir d ecciones de alojamientos. A manera de ejemp iento 520 puede incluir una sección centr eada por un primer alojamiento de cierre mecánic undo alojamiento de cierre mecánico 526. Un aloj ojinete 530 se puede acoplar al primer alojami mecánico 524 opuesto a la sección central iento del cojinete 532 se puede acoplar a un iento de cierre mecánico 526 opuesto a la l 522. Opcionalmente , una sección de alojamiento acoplar a los alojamientos de cojinetes 530.

Los cierres se pueden proporcionar entre las se oj amiento adyacentes. Por ejemplo, el anillo en e la Figura 5) se puede situar entre la sec iento 550 y el alojamiento del cojinete 530, el 562 (véase la Figura 5) se puede situar e r alojamiento de cierre mecánico 524 y la l 522, y el anillo en "O" 564 (veáse la Figur situar entre el segundo alojamiento de cierre m la sección central 522.

CAMARA DE MEZCLA 330 egresando ahora a la Figura 7, la cámara de mez spone dentro de la sección central 522 del aloj ntre la primera cubierta de cierre mecánico 52 a cubierta de cierre mecánico 526. La cámara de el dispositivo de mezcla 100 se puede escal sponder a una solicitud en particular, las mod ispositivo que tienen una pared lateral 604 que a o más delgada que los valores proporcionado del alcance de las presentes enseñanzas. L al 604 incluye una primera extremidad 612 y una midad 614 y una pluralidad de agujeros de p dos entre la primera extremidad 612 y una midad 614. Opcionalmente , la superficie externa red lateral 604 puede incluir otras carácte como aberturas, proyecciones, texturas, y simila ra extremidad 612 tiene una parte a relie gurada para recibir un collar 618 y la midad 614 tiene una parte a relieve 620 configura ir un collar 622.

El rotor 600 se dispone dentro del estator stator 700 se puede formar integralmente miento 520. La pared lateral 704 tiene una midad 712 y una segunda extremidad 714. Opciona luralidad de aberturas 708 se forma en la pared el estator 700 entre la primera extremidad 71 da extremidad 714. Opcionalmente , la superficie de la pared lateral 704 puede incluir terísticas tales como agujeros de paso, proyec ras, y similares.

El rotor 600 rota en relación al estator estát edor de un eje de rotación "a" en una dirección i a flecha "C3" en la Figura 9. Cada uno del roto tator 700 pueden ser, en general, de forma cilín un eje longitudinal. El rotor 600 tiene un o "DI" y el estator 700 puede tener un diámetro El diámetro "DI" puede estar en el interva mara de mezcla 330 puede tener una sección tra rma anular que es de aproximadamente 0.02 pul madamente 0,125 pulgadas de grueso (es dec encia entre el diámetro "D2" y el diámetro "D idades particulares, la cámara de mezcla 330 imadamente 0.025 pulgadas de grueso. El canal 3 tor 12 y el estator 34 del dispositivo de la ior 10 (véase la Figura 1) tiene una sección tra rma anular que es de aproximadamente 0.09 pulg O. Por lo tanto, en modalidades particulares, el . cámara de mezcla 330 es menos que aproximadam o del canal 32 del dispositivo 10 de la ior .

El eje longitudinal del rotor 600 se puede aliñ e de rotación "a". El eje longitudinal del rotor alinear con el eje longitudinal del estator madamente 5 pulgadas a lo largo del eje de r Mientras se ha descrito que el rotor 600 y el tienen una forma -generalmente cilindrica, a ñas con conocimiento ordinario en la técnica a e pueden usar las formas alternativas. Por ejem 600 y el estator 700 pueden ser de forma ica, arbitraria y similar. Además, el rotor 6 or 700 no necesitan tener una forma idéntic lo, el rotor 600 puede ser de forma cilíndric or 700 de forma rectangular o viceversa.

Las aberturas 708 del estator 700 y los agujeros escritos en las Figuras 4—7 son de forma cilindr al. El diámetro de los agujeros de paso 608 pued l intervalo de aproximadamente 0.1 pulgadas imadamente 0.625 pulgadas. El diámetro de las ab or 700 hasta la segunda extremidad 714 del estát diámetros de las aberturas 708 pueden variar, a, a lo largo del estator 700. Uno o más aguj 608 del rotor 600 pueden tener un diámetro que s diámetros de los otros agujeros de paso 6 lo, los agujeros de paso 608 pueden aumentar en la primera extremidad 612 del rotor 600 h da extremidad 614 del rotor 600, los agujeros ueden disminuir en diámetro desde la primera ext el rotor 600 hasta la segunda extremidad 614 de o los diámetros de los agujeros de paso 608 r, de otra manera, a lo largo del rotor 600.

Como se describe a continuación con relación idades alternativas, las aberturas 708 y los aguj 608 pueden tener formas distintas de las gener ricas tales modalidades están dentro del ale ueden incluir una parte estrecha, una parte a arte cónica, y similares.

La Figura 8 proporciona un ejemplo no limitativ amiento adecuado de las aberturas 708 del estato s agujeros de paso 608 del rotor 600. Las abertu estator 700 se pueden ordenar en filas la ncialmente paralelas "SLAT-1" a través de las w ncialmente ortogonales al eje de rotación ? uras 708 del estator 700 también pueden ser orden longitudinales sustancialmente paralelas "SLO S de las "SLONG-7" sustancialmente paralelas al ión " ". En otras palabras, las aberturas 7 or 700 se pueden ordenar en un patrón simi iculado de filas ortogonales (es decir, las les son ortogonales a las filas longitudinal filas longitudinales "SLONG-1" a través de las ncialmente paralelas "RLONG-1" a través de las e extienden longitudinalmente a lo largo de un oidal . Alternativamente, los agujeros de paso . 600 también pueden ser ordenados en ncialmente paralelas "RLONG-1" a través de "RLONG tienden longitudinalmente en un ángulo dist elo con el eje de rotación "a." Las aberturas 708 del estator 700 y los agujeros eí rotor 600 se pueden configurar de tal modo que tor 600 se dispone dentro del estator 700 la ales "SLAT-1" a "SLAT-6" , al menos parcialme an con las filas laterales "RLAT-1" a " ctivamente. De esta manera, como el rotor 6 o del estator 700, los agujeros de paso 608 pa erturas 708.

Los a u eros de aso 608 en cada una de la una de las filas longitudinalmente extendida etamente por las aberturas 708 de la fila spondiente "SLAT-l" delante de los agujeros de p a última fila lateral "RLAT-6" que se almente con las aberturas 708 de la última fila spondiente "SLAT-6" del estator 700. ientras que, en la Figura 8, seis filas late filas longitudinalmente extendidas se han desc ión al rotor 600 y seis filas laterales y siet tudinalmente extendidas se han descrito en rela r 700, se aprecia por aquellas person imiento ordinario en la técnica que los ativos de las filas laterales y/o filas longitu eden usar en relación al rotor 600 y/o estator rse de las presentes enseñanzas. ara asegurar que sólo un par de aberturas en ativamente alrededor de la circunferencia del rot la lateral "SLAT-1" puede tener veinte abertu iadas equitativamente alrededor de la circunferen or 700.

Retornando a la Figura 7 , la cámara de mezcla 33 rimera extremidad abierta 332 y una segunda ext ta 334. Los agujeros de paso 608 formados en l al 604 del rotor 600 conectan la parte interna 600 con la cámara de mezcla 330.

El rotor 600 rota dentro del estator 700 por el isión 500 alineado con el eje de rotación "a" de El eje de transmisión 500 se puede acoplar a la idad 612 y la segunda extremidad 614 del roto erse a través de su parte interna hueca 610. E ras, una parte 720 del eje de transmisión 500 se arte interna hueca 610 del rotor 600, tro "D3" es de aproximadamente 0.625 pulgadas. L tiene un diámetro externo "D4" que pue ncialmente similar al diámetro "D3 , " aunque est ere. El diámetro "D4" puede estar en el inter imadamente 0.375 pulgadas a aproximadamen das .

El rotor 600 se puede fijar sin rotación a la pa parte 722 del eje de transmisión 500 por el colla llar 622, respectivamente. A manera de ejemplo, c S collares 618 y 622 se puede instalar dentro s a relieve 616 y 620, respectivamente. Desp combinado 600 y los collares 618 y 622 se tar para expandirse. A continuación, el isión 500 se inserta a través de los collares 61 ensamblaje se deja enfriar. Como los collares 61 ontraen durante el enfriamiento, ellos se ansmisión 500 a la segunda extremidad 614 del rot e de transmisión 500 y el rotor 600 rotan junt idad única.

El eje de transmisión 500 puede tener una midad 724 (véase la Figura 5) y una segunda ext (véase la Figura 6) . La primera extremidad 72 un diámetro "D5" de aproximadamente 0.5 pul amadamente 1.75 pulgadas. En modalidades parti ámetro "D5" puede ser aproximadamente 1.25 pulga da extremidad 726 puede tener un diámetro "D6" qu ustancialmente similar al diámetro "D5. " El segundo material 120 se puede transportar de mara de mezcla 330 a través de una primera ext la segunda extremidad 726 del eje de transmis 500. La otra primera extremidad 724 y la idad 726 del eje de transmisión 500 se pueden sta en la parte interna 610 del rotor 600. El ca una abertura 730 formada en la primera extremid el dispositivo de mezcla 100 está funciona o material 120 se introduce dentro del canal S de la abertura 730. na válvula 732 se puede disponer dentro de un nal 728 localizado en la primera extremidad 724 ansmisión 500. La válvula 732 puede restringir manera, controlar el retroceso del flujo del ial 120 desde dentro de la parte interna hueca S del canal 728 y/o el flujo hacia adelante del ial 120 dentro del canal 728. La válvula 73 ir cualquier válvula conocida en la técnica que álvula de retención. Una válvula de retención a e un número de pieza "CKFA1876205A, " válv ión libre de flujo de avance, fabricada por la c técnica que múltiples aberturas se pueden us tar el canal 728 con la parte interna 610 del rot Con referencia a la Figura 2, opcionalmente , l na 220 puede bombear el segundo material 120 den sitivo de mezcla 100. La bomba 220 puede ier bomba adecuada conocida en la técnica. A ma lo no limitativo la bomba 220 puede incluir c adecuada conocida en la técnica que incluye un afragma, una bomba química, una bomba peristálti de alimentación por gravedad, una bomba pist de engranaje, una combinación de cualquiera S antes mencionadas, y similares. Si el segundo m s un gas, el gas se puede presurizar y forzar de ertura 730 formada en la primera extremidad 724 ansmisión 500 por la liberación del gas de la Con referencia a la Figura 5 , el dispositivo de ede incluir un ensamblaje de sellado 750 acopla ra extremidad 724 del eje de transmisión 5 blaje de sellado 750 se mantiene dentro de una efinida en el alojamiento 520 . La cámara 752 ti ra extremidad 754 espaciada a través de la cámara da extremidad 756 . La cámara 752 también inc o de entrada 758 y un puerto de salida 7 rciona el acceso dentro de la cámara 752 . La cám ede definir por la sección de alojamiento 55 iento del cojinete 530 . La primera extremidad formar en la sección de alojamiento 550 y la idad 756 puede estar adyacente al alojamie ete 53 0 . El puerto de entrada 758 se puede forma iento del cojinete 53 0 y el puerto de salida formar en la sección de alo amiento 550 . ete 530. El segundo sello estático 766 se edor de una parte 768 de la primera extremidad e transmisión 500.

El ensamblaje de sellado 750 incluye un ensamb ión 770 que se acopla sin rotación a la midad 724 del eje de transmisión 500 entre la pa parte 768. El ensamblaje de rotación 770 rota c d. El ensamblaje de rotación 770 incluye un prime puesto a un segundo sello 774, Un miembro de pres ejemplo, un resorte) se localiza entre el prime el segundo sello 774. El miembro de pres ona el primer sello 772 contra el primer sello e presiona el segundo sello 774 contra el segund ico 766.

Un lubricante de enfriamiento se suministra a la alrededor del ensambla e de rotación 770. El lub ser bombeado . El lubricante bombeado en la cam lubricar el ensamblaje de cojinete 540. El ens sellado 750 puede significativamente, cua emente, reducir las fuerzas de fricción dentro del dispositivo causadas por la rotación del ro de aumentar la vida activa de los sellos 770. Los incluir las superficies construidas usando car io .

Con referencia a la Figura 9, como el rotor 6 edor del eje de rotación "a" en la dirección i a flecha "Cl," el rotor expele el segundo mater cámara de mezcla 330. Las burbujas, gotas, partí res expelidos del segundo material 120 salen de son impartidas con una velocidad circunferenc irección indicada por la flecha "C3") por el rot undo material 120 se uede forzar desde la ca e un motor 510 por un acoplador 900. El eje 78 una forma de sección transversal generalmente c n diámetro "D7" de aproximadamente 0.25 pul imadamente 2.5 pulgadas. En modalidades partic ámetro "D7" puede ser de aproximadamente 0.25 pul imadamente 1.5 pulgadas . Mientras que en la m ita en la Figura 6, el diámetro "D5" de la midad 724 del eje de transmisión 500 es sustanci al diámetro "D7" y al eje 780, las modalidades ?? diámetro "D5" o diámetro "D7" es más grande están dentro del alcance de la presente invención Con referencia también a la Figura 4, puede ser d r o esconder el acoplador 900. En la modalidad d s Figuras 4 y 6, un cárter de la transmisión 91 oplador 900. El cárter de la transmisión 910 pu almente en forma de U con una parte curva 914 fla ado al motor 510 cerca del eje 780. En la m ita, el miembro de apoyo 920 incluye un agujero vés del cual pasa el eje 780. El miembro de apoyo acoplar al motor 510 usando cualquier método c técnica, incluyendo atornillar el miembro de ap tor 510 con uno o más tornillos 940.

El acoplador 900 puede incluir cualquier ac ado para transmitir una cantidad suficiente de el eje 780 al eje de transmisión 500 para r 600 dentro del estator 700. En la .modalidad desc iguras 4 y 6, el acoplador 900 es un acoplador fl oplador flexible puede ser beneficioso si el ej e de transmisión 500 se desalinean. Además, el ac ble puede ayudar a absorber las fuerzas idas sobre el eje de transmisión 500 que podr manera, ser trasladadas al eje 780. Un ac adecuado puede incluir un motor eléctrico d lo de fuerza, que opera a 230/460 voltios y 3 o ("rpm"). Un motor adecuado incluye un 4 C4C" fabricado por la LEESON Electric Corpora n, WI , que opera un sitio web en www.leeson.com.

PRIMERA CAMARA 310 egresando a las Figuras 4 y 7, la primera cámara e dentro la sección central 522 del alojamie la primera cubierta de cierre mecánico 524 ras extremidades 612 y 712 del rotor 600 y el respectivamente. La primera cámara 310 puede ser ne una forma de sección transversal sustanci lar. La primera cámara 310 y la cámara de mez un volumen continuo. Una parte 1020 del isión 500 se extiende a través de la primera ca para bombear el primer material 110 a una ve iente para suministrar a la primera cámara 310.

El puerto de entrada 1010 se orienta sustanci oñal al eje de rotación "a". Por lo tanto, el ial 110 entra a la primera cámara 310 con una ve ncial a la parte 1020 del eje de transmisión 500 nde a través de la primera cámara 310. La di ncial del flujo del primer material 110 que ent ra cámara 310 se identifica por la flecha "TI" . idad descrita en las Figuras 4 y 7, el puerto de se puede compensar a partir del eje de rotaci se aprecia por aquellas personas con conoc rio en la técnica, la dirección de rotación del isión 500 (identificada por la flecha "Cl" en la iene un componente tangencial. El puerto de entra siciona de tal modo que el primer material 110 ra cámara 310 puede desviar el primer material 11 sustancialmente circular (identificado por la en la Figura 9) alrededor de la parte 1020 del misión 500. En tal modalidad, la velocidad ta rimer material 110 puede provocar que viaje al je de rotación "a" a una velocidad circunfe minada al menos en parte por la velocidad tangenc Una vez dentro de la primera cámara 310, el ial 110 se puede bombear desde la primera cámar ñara de mezcla 330 por la bomba 410 que se aloja primera cámara 310. En las modalidades que incl externa 210 (véase la Figura 2) , la bomba exte ede configurar para bombear el primer material 1 ra cámara 310 a una tasa al menos tan alta como cual la bomba 410 bombea el primer material 110 ra cámara 310. ra extremidad abierta completa 332 de la c a 330. La primera cámara 310 se puede etamente con el primer material 110.

La bomba 410 es energizada por la parte 1020 del misión 500 que se extiende a través de la primer La bomba 410 puede incluir cualquier bomba cono cnica que tenga un miembro de bomba rotator do dentro de una cámara (es decir, la primera definida por una cubierta estática (es dec miento 520) . Los ejemplos no limitativos de adas incluyen las bombas rotatorias de desplaz ivo tales como las bombas de cavidad progresi s de tornillo sencillas (por ejemplo, la b lio de Arquímides) , y similares.

La bomba 410 descrita en las Figuras 7 y 9, se aímente a una bomba de tornillo sencilla. nscribe la parte del collar 2030 a lo largo de oidal .

Con referencia a la Figura 9, se ilustra el inte imera cámara 310. La bomba 410 imparte un fluj tificado por la flecha "Al" y la flecha "A2") r material 110 dentro la primera cámara 310 h ra extremidad abierta 332 de la cámara de mezcla axial del primer material 110 impartido por l iene una presión que puede exceder la presión la bomba externa del dispositivo 10 de la ior (véase la Figura 1) .

La bomba 410 también puede estar configurad tir un flujo circunferencial (identificado por la en el primer material 110 cuando este viaja h ra extremidad abierta 332 de la cámara de mezcla circunferencial im artido en el rimer mater mpartir un flujo circunferencial en el primer m Debido a que el primer material 110 se mueve axia dispositivo 10 de la técnica anterior, el ial 110 atraviesa al menos una parte del c do entre el rotor 12 y el estator 30 a una ve nferencial más lenta que la del primer material iesa la cámara de mezcla 330 del dispositivo de En otras palabras, si la velocidad axial del ial 110 es la misma tanto en el dispositivo 1 ca anterior como en el dispositivo de mezcla r material 110 puede completar más revol edor del eje de rotación "x" antes de que atrav tud axial de la cámara de mezcla 330, que etar antes de que atraviese la longitud axial de as revoluciones adicionales exponen el primer TT (y el primer material 110 y segundo materi ciones del primer material 110 (y el primer m segundo material 120 combinados) alrededor del ión "a" . Además, en algunas modalidades, la ve ferencial impartida por la bomba 210 y la ve nferencial impartida por la bomba 410 se combin zar un número suficiente de revoluciones del ial 110 (y el primer material 110 y segundo mater ados) alrededor del eje de rotación " " . ia por aquellas personas con conocimiento ordin cnica, otros elementos estructurales tales como l . sección transversal de la primera cámara 310 ibuir a la velocidad circunferencial impartida 210, la bomba 410, y una combinación de éstas. n una modalidad alternativa descrita en la Fig mba 410 puede incluir una o más aspas 2042 confi im artir un flu o circunferencial en el rimer m or 700, respectivamente. La segunda cámara 320 pu ncialmente similar a la primera cámara 310. Sin e gar del puerto de entrada 1010, la segunda cám incluir un puerto de salida 3010. Una parte 3 e transmisión 500 se extiende a través de la a 320.

La segunda cámara 320 y la cámara de mezcla 330 lumen continuo. Además, la primera cámara 310, la zcla 330, y la segunda cámara 320 forman un uo. El primer material 110 fluye a trav sitivo de mezcla 100 desde la primera cámara 3 a de mezcla 330 y finalmente a la segunda cáma as, en la cámara de mezcla 330 el primer mater zcla con el segundo material 120, para fo ial de salida 102. El material de salida 102 s sitivo de mezcla 100 a través del puerto de salid a 320 desde la cámara de mezcla 330 que ti idad circunferencial (en la dirección indicada a "C3" en la Figura 9) impartida a éste por e La velocidad circunferencial es tangencial a l del eje de transmisión 500 que se extiende a tr gunda cámara 320. En la modalidad representada as 4, 6, y 7, el puerto de salida 3010 se puede je de rotación " " . El puerto de salida 3 iona de tal modo que el material de salida 1 a la segunda cámara 320 viajando sustancialment dirección en la que rota el eje de transmis tificado en la Figura 9 por la flecha "Cl") do hacia el puerto de salida 3010. l material de salida 102 entra a la segunda cám desvía por el interior de la segunda cama dor de la parte 3020 del eje de transmisión uede incluir cualquier bomba conocida en la técni ar el material de salida 102 a una tasa suficie limitar el rendimiento del dispositivo de mezc l modalidad, la bomba externa 430 puede introdu idad tangencial (en una dirección indicada por la en la Figuras 4 y 11) a al menos una parte del lida 102 cuando la bomba externa 430 bombea el lida 102 desde la segunda cámara 320. La ve ncial de la parte del material de salida 10 car que éste viaje alrededor del eje de rotació elocidad circunferencial, determinada en parte, idad tangencial.

BOMBA 420 etornando a las Figuras 6 y 7, la bomba 420 la se unda cámara 320 uede bombear el mate La segunda cámara 320 está en comunicación da extremidad abierta 334 de la cámara de mezcl terial de salida 102 dentro la cámara de mez fluir libremente desde la segunda extremidad la segunda cámara 320. De esta manera, el mate a 102 no sortea ninguna de las esquinas o cur la cámara de mezcla 330 y la segunda cámara 320 idad descrita, la segunda cámara 320 e cación con la segunda extremidad completamente e la cámara de mezcla 330. La segunda cámara llenar completamente con el material de salida 1 a bomba 420 es energizada por la parte 3020 del isión 500 que se extiende a través de la segunda La bomba 420 puede ser sustancialmente idéntic 410. Cualquier bomba descrita anteriorment da para el uso como la bomba 410 se puede usar > el material de salida 102 pueden ser más visco . Por lo tanto, la bomba 410 puede diferir de l La bomba 410 se puede configurar para acomo edades del primer material 110 y la bomba 420 s gurar para acomodar las propiedades del mate a 102.

La bomba 420 descrita en las Figuras 6 y 7, se almente a una bomba de tornillo simple. E idad, el miembro de bomba 4022 incluye una pa r 4030 dispuesta alrededor de la parte 3020 del misión 500. La parte del collar 4030 rota con l del eje de transmisión 500 como una unidad. L ollar 4030 incluye uno o más miembros de desplaz uido 4040. La parte del collar 4030 incluye un splazamiento de fluido simple 4040 que tiene un oidal que circunscribe la parte del collar 403 La bomba 420 se puede configurar para impartir u ferencial (identificado por la flecha "C4") ial de salida 102 cuando este viaja fuera de la midad abierta 334 de la cámara de mezcla 330. E ferencial impartido en el material de salida 10 r a reducir una cantidad de trabajo requerida 600. El flujo circunferencial también direcc ial de salida 102 hacia el puerto de salida 3010. En una modalidad alternativa, la bomba 420 pued ncialmente la misma configuración de la bom ita en la Figura 10. En tal modalidad, una o má están configuradas para impartir un ferencial en el material de salida 102 cuan fuera de la segunda extremidad abierta 334 de l zcla 330.

Como se aprecia, por aquellas personas con conoc la forma del rotor 600, la forma del estator de la cámara de mezcla 330, la longitud de la c a 330, la velocidad de rotación del eje de tra la velocidad axial impartida por la bomba inter locidad circunferencial impartida por la bomba la velocidad axial impartida por la bomba inter locidad circunferencial impartida por la bomba la configuración de las alteraciones (por e ra, proyecciones, depresiones, aberturas, y si das sobre la superficie externa 606 del rotor guración de las alteraciones (por ejemplo, t cciones, depresiones, aperturas, y similares) f la superficie internas 706 del estator ares .

MODALIDAD ALTERNATIVA itos los componentes del dispositivo de mezcla 5 ren de los componentes del dispositivo de mezcla El dispositivo de mezcla 5000 incluye un aloj para alojar el rotor 600 y el estator 5700. El se puede acoplar sin rotación por su primera ext y su segunda extremidad 5714 a la alojamiento 55 a 5800 se define entre la alojamiento 5500 y un del estator 5700 flanqueada por la primera ext y la segunda extremidad 5714. El alojamien e un puerto de entrada 5830 que proporciona el a mara 5800. El puerto de entrada 5830 se puede ncialmente ortogonal al eje de rotación "a" sin e no es un requerimiento.

El estator 5700 incluye una pluralidad de aguj 5708 que se conectan a la cámara 5800 y la cá a 330 (definida entre el rotor 600 y el estator nación de éstos. Como el rotor 600 rota, éste atraer el tercer material 130 desde el canal 58 a de mezcla 330. El tercer material 130 puede e mara de mezcla 330 como burbujas, gotas, partíc ares, que se imparten con una velocidad circunfe 1 rotor 600.

MODALIDAD ALTERNATIVA na modalidad alternativa del dispositivo de mez uede construir usando una sección centra sentada en la Figura 13 y un alojamiento del c representado en la Figura 14. La Figura 13 repres ón central 5900 que tiene en su interior el esta e la Figura 7) . En la presente se han usado nu ncías idénticas para identificar los comp dos con la sección central 5900, qu ejemplo, PET, Teflón, nylon, PVC, policarbonat n, polisulfona, etc.).

Un contacto eléctrico 5910 se acopla a la al 5900 y se configura para entregar una carga cción central 5900 conduce una carga eléctrica a 1 contacto eléctrico 5910 al estator 700. En moda onales, la sección central 5900 se puede fabr ial no conductivo. En tales modalidades, el c rico 5910 puede pasar a través de la sección y acoplarse al estator 700. La carga eléctrica a l contacto eléctrico 5910 al estator 700 puede a itar las reacciones químicas redox u otras de a de mezcla 330. pcionalmente , el aislante (no mostrado) se er alrededor de la sección central 5900 para icamente el ambiente. Además, el aislante se ue a al alojamiento del cojinete 5920. Un cont lla rotativo 5924 proporciona una conexión el el eje de transmisión 500 y el contacto eléctric En esta modalidad, el eje de transmisión 500 y e e construyen de un material conductivo tal como ejemplo, acero inoxidable) . El alojamiento del c se puede construir tanto de un metal conductivo ctivo. Una carga eléctrica se aplica al misión 500 por el contacto eléctrico 5922 y el c cobilla rotativo 5924. La carga eléctrica se cond e de transmisión 500 al rotor 600.

La modalidad alternativa del dispositivo de mez ruido usando la sección central 5900 representad a 13 y el alojamiento del cojinete 5920 represen gura 14 se puede operar en al menos dos ro, los contactos eléctricos 5910 y 5922 se ontactos eléctricos 5910 y 5922 pueden estar acop uente de voltaje DC (no mostrada) que sumini je estable o constante a través de los co ricos 5910 y 5922. El terminal negativo de la fu e DC puede estar acoplado a cualquiera de los co icos 5910 y 5922 y el terminal positivo de la fu je DC puede estar acoplado a otros contactos elé y 5922. El voltaje suministrado a través tos eléctricos 5910 y 5922 puede estar en el in roximadamente 0.0001 voltios a aproximadament s. En modalidades particulares, el voltaje pued l intervalo de aproximadamente 1.8 volt imadamente 2.7 voltios. A manera de otro ejem usar un voltaje DC pulsado que tiene un c o entre aproximadamente 1% a aproximadamente 99% ientras que los ejemplos anteriores de méto MEZCLA DENTRO DE LA CAMARA DE MEZCLA 330 Como se mencionó anteriormente, en el dispositiv cnica anterior (mostrado en la Figura 1) , el ial 110 entró al canal 32 entre el rotor 12 y el través de un puerto de entrada limitado 37 situa solamente de una parte de la segunda extremidad anal 32. Asimismo, el material de salida 102 sa 32 mediante un puerto de salida simple limi do a lo largo solamente de una parte de la midad abierta del canal 32. Este ordenamiento fricción indeseable e innecesaria. Al reempl o de entrada limitado simple 37 y el puerto de ado simple 40 con las cámaras 310 y ctivamente, se redujo la fricción. Además, el ial 110 no sortea una esquina antes de entra de presión entre el puerto de entrada 1010 y el lida 3010 es de sólo aproximadamente 12 psi cu sitivo de mezcla 100 se configura para p imadamente 60 galones del material de salida o. Esto es un progreso sobre el dispositivo 1 ca anterior, representado en la Figura 1, que jo aproximadamente 60 galones del material de sal o fue de al menos 26 En otras palabras, la c ón a través del dispositivo de mezcla 100 es meno que la experimentada por el dispositivo 10 ca anterior. e acuerdo con aspectos adicionales, la inclusión S 410 y 420, que se energizan por el eje de tran proporcionan una configuración que es sustanci ficaz en los materiales de mezcla y que requier ía que las bombas externas usadas en la ial 120 se mezclan dentro de la cámara de mez da entre el rotor 600 y el estator 700. La rotac 600 dentro el estator 700 agita el primer mater segundo material 120 dentro la cámara de mezcla 3 ros de paso 608 formados en el rotor 600 uras 708 formadas en el estator 700 imparten tur flujo del primer material 110 y el segundo mater la cámara de mezcla 330.

Sin estar limitados por la teoría, la efic stencia de la difusión del segundo material 12 r material 110 se cree que sea provocada, en par cro-cavitación, que se describe en relación as 15-17. Siempre que un material fluye so ficie lisa, se establece un flujo relativamente na capa delgada límite que es estática o se mu debido a la tensión superficial entre el fl ón localizada atrae el material huésped y el mate ión, como se muestra en la Figura 15. Cua jas formadas por cavitación se desploman, se p ones extremadamente altas. Como dos aberturas al ejemplo, una de las aberturas 708 y uno de los a so 608) pasan mutuamente, ocurre una sucesión ( e) , generando una energía significativa. La ada con la cavitación y la sucesión mezcla el ial 110 y el segundo material 120 juntos, a u adamente alto, quizás a nivel molecular.

La velocidad tangencial del rotor 600 y el nú ras que pasan mutuamente por rotación pueden di encia del dispositivo de mezcla 100. Se ha déte a operación del dispositivo de mezcla 100 den alo de frecuencia ultrasónica puede ser benefic S aplicaciones. Se cree que la operación del disp rsistencia mucho más larga del segundo mater rial de infusión) en el primer material 110 ( ed) .

Con referencia ahora a la Figura 15, se proporci iclad alternativa del rotor 600, el rotor 60 aciones creadas dentro del primer material 110 a de mezcla 330 pueden estar configuradas para oc entes frecuencias a lo largo de la longitud de la zcla 330. Las frecuencias de las cavitaciones se ar mediante la alteración del número y/o la ubica gujeros de paso 6608 a lo largo de la longitud de Cada uno de los agujeros de paso 6608 pue cialmente similar a los agujeros de pa tidos anteriormente) . manera de ejemplo no limitativo, el rotor subdividir en tres secciones de e em los se de su área en particular a una frecuencia di o a la diferencia de números de agujeros de pa dos en ese lugar. l fabricar el rotor 6000 con un número de aguj 6608 deseado apropiadamente ordenados en un cular, se puede determinar la frecuencia deseada iones dentro de la cámara de mezcla 330. Del mism ecuencia deseada de las cavitaciones se puede det un deseado número de aberturas 708 apropia adas en un área en particular bajo el estator 700 ual el rotor 600 rota. Además, la frecuencia dés encias) de las sucesiones dentro de la cámara de e pueden alcanzar por la selección tanto de un cular, como por el ordenamiento de las abertu as en el estator 700, y un número y orden ular de los agujeros de paso 608 formados en e elo a ninguna línea (por ejemplo, la línea ada a través del eje de rotación "a" del rotor palabras, si el rotor 600 tiene una forma cilí e 7000 no pasa a través del centro del rotor modo, el primer material 110 dentro de la cá a 330 no se orientará perpendicular a las compres presiones creadas por las aberturas 708 y los a so 608. Las compresiones y descompresiones tend ugar, un vector de fuerza que tiene al me nente paralelo al flujo circunferencial (en la di . flecha "C3" de la Figura 9) del primer mater de la cámara de mezcla 330.

Con relación a la alineación de las aberturas 70 ros de paso 608 también pueden afectar la crea ciones en la cámara de mezcla 330. La Figura 17 odalidad en la que las aberturas 708 están en reg En la modalidad descrita en la Figura 18, las a los agujeros de paso 608 se desplazan por una C splazamiento "X" a lo largo del eje de rotación a de ejemplo no limitativo, la cantid azamiento "X" se puede determinar en función del as aberturas 708. Por ejemplo, la canti azamiento "X" puede ser aproximadamente igual a l diámetro de las aberturas 708. Alternativame dad de desplazamiento "X" se puede determinar en amaño de los agujeros de paso 608. Por ejem dad de desplazamiento "X" puede ser aproxim a la mitad del diámetro de los agujeros de paso aracterísticas (por ejemplo, depresiones, proyec distintas de, o adicionales a los agujeros de p aberturas 708 se incluyen en el rotor 600 o or 700, la cantidad de desplazamiento "X" s ial 120 en el primer material 110 dentro la cá a 330.

Con referencia ahora a las Figuras 22-rcionan ejemplos no limitativos de las formas de versal adecuadas para las aberturas 708 y los so 608. La forma de sección transversal uras 708 y/o los agujeros de paso 608 pue adas como se describe en la Figura 22, circular scribe en la Figura 2 , y similares. arias formas de sección transversal de las a /o agujeros de paso 608 se pueden usar para alt del primer material 110 cuando el rotor 600 rota stator 700. Por ejemplo, la Figura 24 represe de sección transversal en lágrima que tiene un cha 7020 opuesta a una parte ancha 7022. Si los a so 608 tienen esa forma de lágrima, cuando el ro /o los agujeros de paso 608 con una configura al como se ilustra en la Figura 25. El mater dentro y fuera de las aberturas 708 y/o de los so 608 con la configuración en espiral experime a de rotación inducida por la configuración en jemplos descritos en las Figuras 22-25 se prop descripciones no limitativas de las mod nativas que se pueden emplear dentro del disposi a 100. Al aplicar los conocimientos ordinarios ca, las aberturas 708 y/o los agujeros de p n estar configurados de numerosas maneras para sas fuerzas sucesivas y de agitación adecuad ar los materiales dentro de la cámara de mezcla 3 EFECTO DE DOBLE CAPA El dispositivo de mezcla 100 puede estar conf roñes solubilizados que se estabilizan dent ial de salida.

La ionización o disociación de los grupos de supe a adsorción de iones de un líquido provocan que ficies sólidas en contacto con el líquido se C eferencia a la Figura 26, una doble capa el ' ) 7100 se forma alrededor de una superficie en contacto con un líquido 7120. En la EDL 71 7122 de una carga (en este caso, iones C ivamente) se adsorben a la superficie 7120 y for de superficie 7124 normalmente denominada como u era. La capa de superficie 7124 atrae los cont (en este caso, iones cargados positivamente) d ta e igual magnitud, que forman una capa de co debajo de la capa de superficie 7124 nor inada como una capa difusa. La capa de contraión iento del líquido 7120 próximo a la superficie Dentro del líquido 7120 (por ejemplo, agua, s a, y similares) , los iones adsorbidos 7122 que fo de superficie 7124 se fijan a la superficie 7120 o el líquido 7120 está en movimiento (por e ndo en la dirección indicada por la flecha "G go, existe un plano de corte 7132 adentro de la aión difusa 7128 espaciada de la superficie 7 modo, como el líquido 7120 se mueve, algunos aiones difusos 7126 se transportan lejos ficie 7120, mientras que los iones adsorbid necen en la superficie 7120. Esto produce la iente de flujo' . entro de la cámara de mezcla 330, el primer m el segundo material 120, y opcionalmente , el ial 130 están sujetos a un campo electromagnético El movimiento del primer material 110 a través a de mezcla 330 en relación a las alteraci ficie (por ejemplo, los agujeros de paso 608 y ab crean cavitaciones en el primer material 110 de mara de mezcla 330, que puede difundir el ial 120 en el primer material 110. Estas cavit n mejorar el contacto entre el primer material gundo material 120 con la doble capa eléctrica la superficie interna 705 del estator 700 y/o l eléctrica formada sobre la superficie externa 600. Las relaciones de superficie mayor a volume a de mezcla, un mayor tiempo de permanencia iales combinados dentro de la cámara de mezcla, y mbinación con un tamaño de burbuja promedio peq llo sustancialmente mayor al área de superf ja) previenen impartir eficazmente los efectos rr Con referencia a la Figura 27, sin estar limitado , se cree que una sección 7140 de la cámara de ntre la superficie interna 705 y la superficie uede ser modelada como un par de platos paralelos Si el primer material 110 es un líquido, el ial 110 entra a la sección 7140 a través de una y sale de la sección 7140 a través de una salida trada "IN" y la salida "OUT" limitan el flujo de salida de la sección 7140.

Con referencia a la Figura 28, el área entre los elos 7142 y 7144 tiene una relación área de super en más alta. Por ello, una parte sustancial de ntraión 7128 (y de contraiones 7126) puede e iento cuando el primer material 110 se mueve en s 7142 y 7144. El número de contraiones 7 iento puede exceder el número permitido para entr cción 7140.. Por lo tanto, la entrada y salida ón 7140 aumenta localmente la corriente de ras que una corriente de flujo de fondo (ident a flecha "BSC" ) provocada por el primer mater 110 sobre cualquier superficie está siempre pres terior del dispositivo de mezcla 100, los platos introducen una corriente de flujo aumentada en w tificada por la flecha "ESC") dentro de la secció Sin una corriente conductora de retorno {ident a flecha "RC" ) en los platos 7142 y 7144 en di ta al flujo del primer material 110, un exceso d con el mismo signo de los iones de absorción 7122 iarse cerca de la entrada "IN" , y un exceso d con el mismo signo que el contraión 7126 iarse cerca de la salida "OUT" . Debido a qu S acumuladas 7146 y 7148, son opuestas y por lo t cción 7140. Por lo tanto, la entrada y salid ón 7140 aumenta localmente la corriente de ras que una corriente de flujo de fondo (ident a flecha "BSC" ) provocada por el primer mater 110 sobre cualquier superficie está siempre pres terior del dispositivo de mezcla 100, los platos introducen una corriente de flujo aumentada en " tificada por la flecha "ESC") dentro de la secció Sin una corriente conductora de retorno (ident a flecha "RC" ) en los platos 7142 y 7144 en di ta al flujo del primer material 110, un exceso d con el mismo signo de los iones de absorción 7122 iarse cerca de la entrada "IN" , y un exceso d con el mismo signo que el contraión 7126 iarse cerca de la salida "OUT" . Debido a qu S acumuladas 7146 y 7148, son opuestas y por lo t echa "ESC" ) en la sección 7140, se alcanza un le con una corriente de flujo en exceso neto de iferencia en el potencial electrostático entre el rga 7146 cerca a la entrada "IN", y el exceso d cerca a la salida "QUT" creando una separación d tado estable entre ellos.

La cantidad de la separación de carga, y por encia de potencial electrostático entre el ex 7146 cerca a la entrada "IN" , y el exceso de car a la salida "OUT" , depende de la energía adicio d de carga suministrada por una bomba (por ejem 600, la bomba interna 410, y/o la bomba exter "empujar" la carga contra el campo eléctrico do por la separación de carga) para producir una líquido que se aproxima a la tasa de flujo obten uido sin iones (es decir, los iones 7122 71 Con el aislamiento de los platos 7142 y 7144, C ente de retorno es puramente una corriente io de iones) , en la que la corriente de retor ucra la conducción de iones a través del primer Si otros mecanismos conductores a través de v ctoras están presentes entre el exceso de car a la entrada "IN", y el exceso de carga 7148 ce a "OUT" , la corriente de retorno puede usar más conductoras. Por ejemplo, los platos me ctores 7142 y 7144 pueden proporcionar las v ctoras; sin embargo, estas v as más conductor iten una corriente de electrones y no la c a .

Como se aprecia por aquellas personas con conoc ario en la técnica, para transferir la carga port n a uno o más electrones en el metal, y vic menté, asumiendo que el primer material (H20) y el segundo material 120 es oxígen jemplo no limitativo de una reacción ye la siguiente reacción de semicelda co odría eliminar la carga negativa de los onducción 7142 y 7144 incluye la sig ión de semicelda conocida: 2H+ +e~ ? H2, Con los platos metálicos de conducción 7142 y 7 que la mayor parte de la corriente de retorno ente de electrones, debido a que los pla cción 7142 y 7144 son más conductores que el ial 110 (que las reacciones redox sean suficien s no es un factor limitante) . Para los platos me ducción 7142 y 7144, se acumula una separación d equeña entre la entrada "IN" y la salida "OUT" , car que el primer material 110 fluya. Sin embargo lo anterior las reacciones redox necesariame en de manera espontánea, y de este modo pueden r ntrada de trabajo, que se puede proporcionar . Por lo tanto, una parte de la EMF (que no se diferencia del potencial electrostático más pequ usar para proporcionar la energía necesari cir a las reacciones redox.

En otras palabras, los mismos diferenciales de rcionados por la bomba para empujar en contra de rico creado por la separación de carga miento de los platos 7142 y 7144,' se pueden usa "empujar" la carga a través de los platos cond 7144 como para accionar las reacciones redox. Con referencia a la Figura 29, los inv rcionan una instalación experimental pa tubo hueco 7156, el electrodo positivo 7158, rodo negativo 7160 se extienden todos desde el e frasco, a través del tapón 7154, y hacia izada 7153 dentro del frasco. El electrodo p y el electrodo negativo 7160 se construyeron d dable. Los tubos huecos 7156 en ambos frascos tenían una parte terminal abierta 7162 acopla istro de oxígeno común 7164. El electrodo positi electrodo negativo 7160 se insertaron en el fras se acoplaron a un extremo positivo y un ivo, respectivamente, de un suministrador de fu Exactamente el mismo aspersor se usó en cada fra El oxígeno fluyó a través de los tubos huecos frascos 7150 y 7152 a una tasa de flujo (alime imadamente 1 SCFH a aproximadamente 1.3 SCFH ( combinada) . El voltaje aplicado a través del el La prueba del agua desionizada 7153 en el fras HRP y pirogalol dio una actividad de reacci alol mediada por HRP, consistente con las propie luidos producidos con las modalidades alternat /estator descritas en la presente. La densidad HRP fue aproximadamente 20% superior con relació iones presurizadas o de burbujeo fino de conte no equivalente. Los resultados de "este expe an que la mezcla dentro de la cámara de mez ucra una reacción redox. De acuerdo con culares, las cámaras de mezcla de la invención se enta para los materiales de salida que co rones adicionales que se estabilizan ya sea ctura de agua rica en oxígeno dentro de las sol lida de la invención o por alguna forma de espe o presentes debido a los efectos eléctricos TIEMPO DE PERMANENCIA El tiempo de permanencia es una cantidad de tie r material 110, el segundo material 120, y opcio rcer material 130 consumido en la cámara de mezc lación entre la longitud de la cámara de mezcla 3 tro de la cámara de mezcla 330 pueden ficativamente el tiempo de permanencia. Mientra a relación, mayor es el tiempo de permanencia. onó en la Sección de Antecedentes, el rotor sitivo 10 de la técnica anterior (véase la Fi un diámetro de aproximadamente 7.500 pulgadas tud de aproximadamente 6.000 pulgadas que prop elación longitud a diámetro de aproximadamente aposición, en modalidades particulares, la long mara de mezcla 330 del dispositivo de mezcla gura para producir aproximadamente 60 galon ial de salida 102 por minuto y el dispositivo de e configura para producir aproximadamente 0.5 aterial de salida 102 por minuto, el dispositiv cnica anterior (véase la Figura 1) tenía un ti nencia del fluido de aproximadamente 0.05 se ras que las modalidades del dispositivo de mez n un tiempo de .permanencia sustancialmente imadamente 7 veces mayor) de aproximadament dos. Este tiempo de permanencia más largo peri r material 110, al segundo material 120, y opcio rcer material 130 interactuar unos con otros ficies 606 y 705 (ver Figura 7) dentro de la cá a 330 por aproximadamente 7 veces más largo que osible en el dispositivo 10 de la técnica anter idades adicionales, el tiempo de permanencia es a ca anterior se configuró para operar a aproxim lones del material de salida por minuto, mientras sitivo de mezcla 100 se configuró para operar valo más amplio de tasa de flujo, que incluy valo óptimo de aproximadamente 0.5 galones del lida por minuto. La tasa de flujo se convirtió de das cúbicas por segundo multiplicando la tasa d lones por segundo por el número de pulgadas cúb alón (es decir, 231 pulgadas cúbicas) . Desp en (12.876 pulgadas cúbicas) del canal sitivo 10 de la técnica anterior se dividió por ujo del dispositivo (231 pulgadas cúbicas/ segund er el tiempo de permanencia (en segundos) y el 3 pulgadas cúbicas) de la cámara de mezcla sitivo de mezcla 100 se dividió por la tasa d 5 pulgadas cúbicas/segundo) del dispositivo (en VELOCIDAD DE INFUSION spectos particulares del dispositivo de mezc rcionan una tasa mejorada de infusión de oxíg ciertos aspectos, un material de salid madamente 43.8 ppm de oxígeno disuelto se madamente 350 milisegundos a través del flujo ción por los métodos no presurizados de la i íente no presurizado) .En contraste, cuando el ial 110 (agua) y el segundo material 120 (oxíg san en un solo paso, a o cerca de 20° centígrados sitivo 10 de la técnica anterior, el material de un nivel de oxígeno disuelto de solamente 35 par en un único paso de 56 milisegundos.

MATERIAL DE SALIDA 102 Cuando el primer material 110 es un liquid lo, agua dulce, salina, GATORADE®, y similares o material 120 es un gas (por ejemplo, o eno, y similares) , el dispositivo de mezcla 10 cidas dentro de la solución salina no son mayo icras en tamaño.

DEGRADACIÓN DE LOS NIVELES DE OXIGENO DISUELTO Con referencia ahora a la Figura 30, se descri es de OD en agua procesada con oxígeno en el dis zcla 100 y almacenada en una botella plástica de >ared delgada y una botella de vidrio de 1000 m e botellas se tapó y almacenó a 65 grados Fahrenh 7900 es el nivel de OD en el embotellado. La lí ibe el estado de equilibrio de la Ley de He la cantidad de oxígeno disuelto que debe estar .gua a 65 grados Fahrenheit) , que es un nivel d amenté menor que 10 ppm. Los puntos 7904 sentan los niveles de OD dentro del agua en la ica a los 65 días y 95 días respectivamente. a los 95 días como se describe en el punto 7 odo, la Figura 30 indica que los niveles de OD de tella plástica como de la botella de vidrio pe ivamente altos a 65 grados Fahrenheit.

Con referencia ahora a la Figura 31, se descri es de OD en el agua enriquecida con oxígeno sitivo de mezcla 100 y almacenada en una ica de 500 mi con pared delgada y una botella de 00 mi por al menos 365 días. Cada una de bote y almacenó a 65 grados Fahrenheit. Como s ar en la figura, los niveles de OD del ecido con oxígeno permanecieron equitati antes por más de al menos 365 días. on referencia a la Figura 33, se describen los en el agua enriquecida con oxígeno en el disposi 100 y almacenada en una botella plástica de 500 Tradicionalmente , se piensa que las prop icas forman parte de las partículas elementales "10 metros, mientras que el mundo macroscópico de cotidiana se refiere como clásico, porque se c las leyes de movimiento de Newton.

Recientemente, se ha descrito que las moléculas amientos que aumentan de tamaño con la dilución amientos miden varios micrómetros de diámetro, tado que aumentan de tamaño de manera no lineal ión. Se ha postulado que los dominios coh icos que miden 100 nanómetros de diámetro surge pura, y las vibraciones colectivas de las moléc en el dominio coherente pueden eventuaimente enga se a las fluctuaciones del campo electromag leciendo oscilaciones estables en el rcionando una forma de 'memoria' en forma de exc ificación electromagnética es corresponclie ficada, reforzando las oscilaciones coherentes 1 agua.

A pesar de las variaciones en el tamaño de agrup s moléculas disueltas y la estructura micr lada del agua, puede existir, no obstant ificidad de las oscilaciones coherentes. Un mode derar los cambios en las propiedades del agua se onsideraciones involucradas 1 con la cristalización Como referencia de la Figura 36, se mues amiento simplificado de agua protonada forma a nanoescala 8700. Un agrupamiento de agua pr normalmente la forma de ?+(?20)?· Algunos agrupa ua protonada se originan naturalmente, tales com foro. Sin estar limitado por la teoría, y de acue tos particulares, otros tipos de agrupamientos de como los compuestos medicinales, se pueden enc propósitos de entrega sostenida. La química esp aterial de la solución y de los compuestos di de de las interacciones de esos materiales.

Se ha demostrado, mediante los experimentos, os procesados por el dispositivo de mezcla 100 terísticas estructurales diferentes que son consi n análisis de fluido en el contexto de una est ada .

Se ha demostrado que el agua procesada a tra sitivo de mezcla 100 tiene diferencias estruc tables cuando se compara con el agua norm sar. Por ejemplo, se ha demostrado que el agua p más dispersión de Rayleigh que la que se observ sin procesar. En los experimentos que se lle las muestras de agua procesada y sin proc En el laboratorio, las dos muestras se colocaro láser con una longitud de onda de 633 nanómet o se había sellado en botellas de vidrios imadamente una semana de prueba. Con relació ra procesada, la Muestra B dispersó la luz a pesa ión relativa a la fuente de láser. Sin emba ra A no lo hizo. Después de dos o tres horas post abertura de la botella, el efecto de dispersió ra B desapareció. Estos resultados implican que ió una memoria que provoca que el agua rete edades y las disipe con el paso del tiempo, tados también implican que la estructura de sada es ópticamente diferente a la estructura del rocesar. Finalmente, estos resultados implican o óptico no está directamente relacionado con e debido a que el nivel de OD al inicio fue de 4 sitivo de mezcla 100 crea en materia de milise nteracción dinámica del fluido no lineal ún r material 110 y el segundo material 120 con turb ica, compleja, proporcionando un mezcla compl cto con un área de superficie efectivamente uyendo aquellas del dispositivo y de las burbujas cionalmente pequeñas de menos de 100 nm) que ga uevos efectos electrocinéticos descritos en la pr S, los efectos electrocinéticos (voltaj e/corrie lementos localizados se demostraron en la p e el Ejemplo de trabajo 20) usando un disposi a especialmente diseñado que comprende los elemen y estator aislados.

Como es bien conocido en la técnica tribuciones de carga y/o electrones solvatados on altamente inestables en solución acuosa. De ejemplo, RNS-60 o Solas) se pueden mantener en un contenedor hermético para gas, lo que in cipación del gas disuelto (por ejemplo, el oxigen para generar y/o mantener, y/o mediar las propie idades de las soluciones de la inv ficativamente , como se describió en los ejem jo en la presente, las redistribuciones de ca roñes solvatados se configuran de forma estable os electrocinéticos acuosos iónicos de la inven antidad suficiente para proporcionar, en conta élula viva (por ejemplo, células de mamíferos) , la modulación de al menos el potencial de m r y la conductividad de membrana celular (véa lo, la fijación de parche celular de los Ejem jo 23 y 24) . omo se describe en la presente bajo "Intera structuras que comprenden oxígeno y/o ele ilizados impartidos a los materiales de salida ción. Sin estar limitado por el mecanismo, y de as propiedades y actividades descritas en la p onfiguración de las nanoestructuras en culares es tal que: comprenden (al menos p ción y/o la estabilidad y/o actividad biológica) lto (por ejemplo, oxígeno) ; permiten a los rocinéticos (por ejemplo, RNS-60 o fluidos de s a Solas) modular (por ejemplo, impartir o recib S y/o efectos de cargas en contacto con una m ar o el componente relacionado de ésta, y en part spectos garantizan la estabilidad (por ejem ortación, el hospedaje, la captura) de ele tados en una forma biológicamente relevante. e acuerdo con aspectos particulares, y c partes de este documento, la capa de hidr iizada por carga puede comprender una jaula o pu de al menos una molécula de gas disuelta (por e no) . De acuerdo con aspectos adicionales, en vir istro de capas de hidratación adecuadas estabi arga, la nanoestructura estabilizada por carga structuras que contienen el oxígeno estabiliz , pueden comprender, además, un electrón solvata lo, electrón solvatado estabilizado) .

Sin estar limitado por el mecanismo o la te cular, después de la fecha de prioridad prese sieron las microburbujas estabilizadas por ilizadas con iones en el líquido acuoso en equ l gas del ambiente (atmosférico) (Bunkin y al of Experimental and Theoretical Physics, 104 :4 incor orado en la resente como referencia De acuerdo con el modelo de microburbu as estab arga, el orden molecular de intervalo corto ctura del agua se destruye por la presencia ula de gas (por ejemplo, una molécula de gas orma un complejo inicialmente con un ión no ads rciona un defecto de orden de intervalo tizando la condensación de las gotas iónicas, d to está rodeado por primeras y segundas esf inación de las moléculas de agua, las cuales se nativamente por los iones de adsorción (por ejem sición de una 'capa de selección de iones N r una doble capa eléctrica) e iones no adsorbent lo, los iones Cl" que ocupan la segunda es inación) ocupando seis y 12 lugares, respectivame sferas de coordinación. En las soluciones ión saturación ( or e em lo, soluciones salinas ión (Bunkin y otros, supra) . En este modelo, el v noestructura se prevé a partir del colapso sión coulómbica entre los iones (por ejemplo, lo adsorbidos a su superficie. Se postuló ilidad de las nanoestruturas que contienen vacío adsorción selectiva de iones disueltos con es sobre la superficie de vacío/burbuja y el equ o entre el gas disuelto y el gas dentro de la b el negativo (la presión electrostática ha ior ejercida por la doble capa eléctrica res rciona la compensación estable de la ficial, y la presión del gas dentro de la bur ibra con la presión ambiental. De acuerdo con el rmación de tales microburbuj as requiere de un com , y en ciertos aspectos, las asociaciones media olisión entre las partículas puede garanti an ser asociados y/o estabilizados por cturas .

De acuerdo con aspectos particulares, los rocinéticos de la invención que comprend structuras estabilizadas por carga y/o nanoest ontienen oxígeno estabilizadas por carga son n mentalmente distintos de los fluidos no electroci iados, de las estructuras de microburbuj as estabi carga atmosférica de acuerdo con el mod urbujas. Significativamente, esta conclus table, derivada, al menos en parte, del hecho de iones salinas control no tienen las · prop gicas descritas en la presente, mientras q structuras estabilizadas por carga del soli rcionan una nueva forma biológicamente act structuras ue contienen oxí eno estabilizad ré, o en cualquiera de los fluidos no genera rocinética. En aspectos particulares, structuras estabilizadas por carga comprend structuras que contienen oxígeno estabilizad En aspectos adicionales, las nanoest ilizadas por carga son todas, o sustancialment anoestructuras que contienen oxígeno estabiliza , o las nanoestructuras que contienen ilizadas por carga de las mayores espec structuras que contienen gas estabilizadas por c uido electrocinético .

De acuerdo con otros aspectos, las nanoest ilizadas por carga y/o las nanoestructuras que c no, estabilizadas por carga pueden comprender u h ectrón solvatado, y por consiguiente proporci oso portador de electrón solvatado estabiliz arreglados son coordinados por las capas de hid ua, en vez de por moléculas orgánicas. De acue tos particulares, un electrón solvatado se dar por la capa de hidratación de las moléculas omodar preferiblemente dentro del vacío Structura distribuido sobre todos los catió os aspectos, las nanostructuras de la i rcionan una nueva estructura super eléctri ión no solamente garantizando ibución/estabilización del electrón solvatado pies cationes de sodio arreglados, sino rcionando la asociación o asociación parci rón solvatado con la(s) molécula (s) de oxígeno at vacío—la distribución del electrón solvatado io de átomos de sodio y al menos un átomo de oxí do con as ectos articulares, por lo tanto, ' el ulada" para estabilizar arreglos de mayor o ión acuosa.

En aspectos particulares, las nanoestructuras ción estabilizadas por carga y/o nanoestructu enen oxígeno estabilizadas por carga son cap actuar con las membranas celulares o los compone o proteínas, etc., para mediar en las acti gicas. En aspectos particulares, las nanoestruct vención estabilizadas por carga y/o las nanoest ontienen oxígeno estabilizadas por carga que hosp rón solvatado son capaces de interactuar c anas celulares o los componentes de ésta, o pro para mediar en las actividades biológicas.

En aspectos particulares, las nanoestructuras ción estabilizadas por carga y/o las nanoestructu enen oxígeno estabilizadas por carga interactuan y/o donante del efecto de la carga (entrega) y arga y/o receptor del efecto de la carga para me ctividades biológicas En aspectos ' particulares, las nanoestructuras ción estabilizadas por carga y/o las nanoestructu enen oxígeno estabilizadas por carga son consi y dan cuenta de la estabilidad observada edades biológicas de los fluidos electrocinético ción, y proporcionan, además, un novedoso elect rodo invertido) que garantiza los electrones sol ilizados en soluciones iónicas acuosas (por ejemp iones salinas, NaCl, etc.).

En aspectos particulares, las nanoestructur enen oxígeno estabilizadas por carga sustanci endidas, toman la forma de, o pueden dar lugar rbujas que contienen oxígeno estabilizadas por ntacto con una superficie hidrofóbica (véase de este documento el EJEMPLO 25) .

En aspectos particulares, las nanoestructur enen oxígeno estabilizadas por carga co ncialmente al menos una molécula de oxígeno. En tos, las nanoestructuras que contienen ilizadas por carga comprenden sustancialmente a menos 2, al menos 3, al menos 4, al menos 5, a menos 15, al menos 20, al menos 50, al menos 10 ulas de oxígeno. En aspectos particulare structuras que contienen oxígeno estabilizadas po enden o dan lugar a nanoburbu as (por ejemp urbujas hidrofóbicas ) de aproximadamente 20 nm x omprenden aproximadamente 12 moléculas de oxíge lo, en función del tamaño de una molécula de x. 0.3 nm por 0.4 nm) , la suposición de un gas stente de mayores que: 0.1%, 1%, 2%, 5%, 10%, 15 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60% y 65%, 70%, 75 90%, y mayor que 95%. Preferiblemente, este por yor que aproximadamente 5%, mayor que aproxim mayor que aproximadamente 15%, o mayo imadamente 20%. En aspectos adicionales, el ncial de las nanoestructuras que contienen ilizadas por carga, o los arreglos de éstas, que onfiguración estabilizada por carga en el fluido o es un tamaño seleccionado del grupo consist de 100 nm, 90 nm; 80 nm, 70 nm, 60 nm, 50 nm, 40 0 nm, 10 nm, 5 nm, 4 nm; 3 nm; 2 nm y riblemente, este tamaño es aproximadamente menor proximadamente menor que 40 nm, aproximadament 0 nm, aproximadamente menor que 20 nm, o aproxima que 10 nm. ertos aspectos, las nanoestructuras estabiliza y/o las nanoestructuras que contienen ilizadas por carga, y/o arreglos de éstas, edades paramagnéticas .

Por el contrario, en relación con los rocinéticos de la invención, los fluidos nados en un recipiente presurizado (flui rocinéticos) y similares, no comprenden structuras estabilizadas por carga biológi as y/o las nanoestructuras que contiene ilizadas por carga biológicamente activas y los de éstas, capaces de modular al menos el po a membrana celular o la conductividad de r . partes por millón) de oxígeno disuelto puede a es de oxígeno disuelto en el intervalo de al madamente 5 ppm, al menos aproximadamente 10 aproximadamente 15 ppm, al menos aproximadame al menos aproximadamente 25 ppm, al imadamente 30 ppm, al menos aproximadamente 35 aproximadamente 40 ppm, al menos aproximadame al menos aproximadamente 50 ppm, al imadamente 55 ppm, al menos aproximadamente 60 aproximadamente 65 ppm, al menos aproximadame al menos aproximadamente 75 ppm, al imadamente 80 ppm, al menos aproximadamente 85 aproximadamente 90 ppm, al menos aproximadame al menos aproximadamente 100 ppm, o cualquier o entre éstos usando los sistemas y/o itos . De acuerdo con una modalidad de TABLA 4 a aplicación inmediata de los fluidos genera rocinética (por ejemplo, el fluido genera rocinética rico en oxígeno es posible para red edad del injerto contra el huésped (EICH) as trasplantables , líneas celulares, te idos y tos particulares, el uso de soluciones electroci uecidas con oxígeno producidas de acuerdo c idades descritas conduce a tiempo de almace y mejores resultados de los trasplantes, incluy ción de la GVHD. Esto puede aplicarse a los mat os, congelados criopreservados , descong dratados , conservados, o procesados que se pueden tar en un sujeto vivo. n ciertas modalidades, el almacenamiento, tra a, entrega, y/o trasplante de órganos con el uecido con gas de la invención · puede garanti en la conservación y/o el trasplante de órga os, debido a la disminución de la infla nución de la necrosis, y/o aumento de la ar. Además, el fluido enriquecido con gas de la p ción puede administrarse por vía intravenosa riblemente un mamífero, y aún más preferiblem O . formas de administración Como se usa en la presente, "sujeto", se puede re ier criatura viva, de preferencia un anima riblemente un mamífero, y aún más preferiblem 0.

En modalidades de ejemplos particulares, el ecido con gas de la presente invención puede fu una composición terapéutica sola o en combinac agente terapéutico, de manera que la comp éutica previene o alivia al menos un síntoma en digestivo. Las composiciones terapéuticas te invención incluyen las composiciones que son ministrarse a un sujeto ue lo necesite. En ial de encapsulación o auxiliar de formulac uier tipo. Algunos ejemplos no limitativos iales que pueden servir como por céuticamente aceptables son los azúcares c sa, glucosa y sacarosa; almidones tales como alm y fécula de patata, celulosa y sus derivados tal ximetilcelulosa de sodio, etil celulosa y ace osa, tragacanto en polvo; malta; gelatina; ientes tales como la manteca de cacao y ce itorio; aceites tales como el aceite de maní, ac on, aceite de cártamo, aceite de sésamo, ac , aceite de maíz y aceite de soja; glicoles, tal lenglicol ésteres tales como oleato de etilo y tilo; agar; agentes tampones como el hidróx sio e hidróxido de aluminio; ácido algínico; agu rógenos; solución salina isotónica; solución de n ser soluciones o fluidos enriquecidos con ga nte invención.

Los portadores farmacéuticamente aceptables descr resente, por ejemplo, los portadores, ady entes o diluyentes, son bien conocidos por a as con conocimiento en la técnica. Normalme dor farmacéuticamente aceptable es químicamente i gentes terapéuticos y no tiene efectos secu diciales o toxicidad bajo las condiciones de u dores farmacéuticamente aceptables pueden incl eros y las matrices de polímeros, nanopart urbujas, y similares. demás de los fluidos terapéuticos enriquecidos presente invención, la composición terapéutic nder, además, diluyentes inertes como agua adici ecida con gas u otros disolventes, imiento ordinario en la técnica, una for osa y mejorada de una composición ter cular, un novedoso fluido terapéutico enriquec y un novedoso método de entrega del nuevo éutico enriquecido con gas, se puede obtener medi tución de uno o más diluyentes inertes con un uecido con gas de composición idéntica, sim ente. Por -ejemplo, el agua convencional se tuir o suplementar por un fluido enriquecido cido por la mezcla de oxígeno en agua o nizada, para proporcionar el fluido enriquecido c En ciertas modalidades, el fluido enriquecido con nvención se puede combinar con uno o más éuticos y/o usarse solo. En modalidades partícula oración del fluido enriquecido con gas puede inc lazo de una o más soluciones conocidas en la t to ele ésta, y al menos un portador farmacé ente . Estas composiciones farmacéuticas se pued profilaxis y el tratamiento de las enferme iones precedentes y en las terapias como se iormente . Preferiblemente, el portador debe céuticamente aceptable y deberá ser compatible no tener un efecto nocivo sobre los otros ingre composición. El portador puede ser un sólido o formula preferiblemente como una formulación d ria, por ejemplo, una tableta que puede contener por peso del ingrediente activo.

Las posibles vías de administración incluyen l ngual, bucal, parenteral (por ejemplo, p tánea, intramuscular, intra-arterial , intraperi cisternal, intravesical , intratecal o intra l , tópica incluyendo la vía transdérmica, intrav ertas modalidades, se prefiere la administración a .

Las formulaciones adecuadas para la administraci ser proporcionadas como unidades discretas , tal tas, c psulas, sellos, jarabes, elixires, g r, formulaciones en "pirulí", microemul iones, suspensiones, pastillas, ampollas revesti cada una conteniendo una determinada cantid ente activo; como polvos o granulos; como soluc siones en los líquidos acuosos y no acuosos; o c iones de agua en aceite o de aceite en agua. as formulaciones adicionales adecuadas p istración oral pueden proporcionarse para s o polvos de partículas finas que se pueden medio de varios tipos de aerosoles presu icadores, atomizadores, nebulizadores , o insufl enden el compuesto activo en una base inerte, tal latina y glicerina o sacarosa de la acacia.

Las formulaciones adecuadas para la adminis teral comprenden típicamente las soluciones iles que contienen una concentración predetermin o activo enriquecido con gas y posiblemente otro éutico; la solución es, de preferencia, isotónica e del receptor deseado. Las formulaciones adic adas para la administración parenteral inclu laciones que contienen co-solventes fisiológi ados y/o agentes de complexión tales como surfact dextrinas. Las emulsiones de aceite en agua n ser adecuadas para las formulaciones p istración parenteral del fluido enriquecido c e tales soluciones se administran preferibleme ntravenosa, también se pueden administrar por i os que forman la base del supositorio, por ejem ea de cacao. Alternativamente, los lavados de co luidos enriquecidos con gas de la presente inven n formular para la administración al colón o rect Las formulaciones adecuadas para la aplicación ocular, intraótica, o intranasal incluyen las S , pastas, lociones, pastas, geles (tales c geles) , atomizadores, polvo y gránulos dispe iones, atomizadores o aerosoles que usan propuls o (tales como los atomizadores liposomales, es, atomizadores nasales, y similares) y los ortadores adecuados para tales formulaciones i ina, lanolina, polietilenglicoles , alcoholes, naciones de éstos . La entrega nasal o intranasa ir dosificadores de cualquiera de estas formulac . Asimismo, la administración intraótica o int necesario, conformando la mezcla resultante en l da .

Por ejemplo, una tableta se puede preparar esion de una mezcla íntima que comprende un IOS del ingrediente activo y uno o más ingre nales, tales como un aglutinante, lubricante, ái e, o agente de dispersión activo de superficie, o ado de una mezcla íntima de ingrediente activo e fluido enriquecido con gas de la presente invenci Las formulaciones adecuadas para la administrac ación incluyen polvos o nieblas de partículas fi eden generar por medio de varios tipos de ae icadores presurizados , nebulizadores , o insuflado cular, los polvos u otros compuestos de los éuticos se pueden disolver o suspender en un ecido con gas de la presente invención.

Los inhaladores dosificadores son los dispensad oles presurizados , típicamente contienen una forr spensión o solución de . un agente terapéutico lsor licuado. En ciertas modalidades, como se a presente, los fluidos enriquecidos con gas nte invención se pueden usar además de, o en lu lsor licuado estándar. Durante el uso, sitivos descargan la formulación a través de una ada para entregar un volumen dosificado, típicam 150 µ?, para producir un atomizado de partícula ontiene el agente terapéutico y el fluido enri gas. Los propulsores adecuados incluyen estos de clorofluorocarbonos , por rodifluorometano, triclorofluor rotetrafluoroetano y mezclas de éstos.

La formulación uede contener, además, uno o sónica. Las formulaciones apropiadas para el uso izadores consisten en otro agente terapéutico o enriquecido con gas y comprenden hasta 40% p/ lación, de preferencia menos que 20% p/p. Ade n utilizar otros portadores, tales como e lada, el agua estéril, o una solución acuosa de do, preferiblemente hecha isotónica con los rales por la adición de sales, tales como el cío . Los aditivos opcionales incluyen los conservan ial si la formulación no se prepara estéril, y ir el metil hidroxi -benzoato, antioxidantes, tizantes, aceites volátiles, agentes tamp etantes .

Las formulaciones apropiadas para la administrae lación incluyen los polvos finamente divididos entregar por medio de un insuflador o administr ente para polvo adecuado, tal como lactosa, etante adicional. El ingrediente activo tipi ende de 0.1 a 100 p/p de la formulación.

Además de los ingredientes específicos anteri onados, las formulaciones de la presente i n incluir otros agentes conocidos por aquellas onocimiento en la técnica, teniendo en cuenta el lación en cuestión. Por ejemplo, las formul adas para la administración oral pueden incl es saborizantes y las formulaciones adecuadas istracion intranasal pueden incluir los perfumes. Las composiciones terapéuticas de la invención se istrar por cualquier método convencional disponib o en conjunto con los compuestos farmacéuticos, agentes terapéuticos individuales ' o en una comb entes tera éuticos. "i. 190 imadamente 0.001 a 1000 miligramos (mg) por k de peso corporal, siendo la dosis preferida d imadamente 30 mg/kg. De acuerdo con ciertos aspec icación diaria de ingrediente activo puede ser d s a 10 litros, siendo la dosis prefer imadamente 0.01 litros a 1 litro.

Las formas de dosificación (composiciones adecua ministración) contienen desde aproximadamente imadamente 500 mg de ingrediente activo por uni composiciones farmacéuticas, el ingrediente á presente ordinariamente en una canti imadamente 0.5-95% de peso basado en el peso tot sición .

Las pomadas, pastas, espumas, oclusiones, cremas én pueden contener excipientes, tales como canto, derivados de celulosa, siliconas, ben esurización o proporcionan un medio para presur iente de la solución, usualmente con un portador e, y pasando el gas presurizado a través de un ño. Los atomizadores pueden contener, adem lsores convencionales tales como nitrógeno, dió no, y otros gases inertes. Adem s, las microes artículas se pueden emplear con las composic os terapéuticos enriquecidos con gas de la ción en cualquiera de las vías requerida istrar los compuestos terapéuticos a un sujeto.

Las formulaciones para usar como inyección se ntar en recipientes sellados con dosis única pies, tales como ámpulas y viales, y se pueden al estado seco por congelación (liofilizado) que de la adición del excipiente líquido estéril, o uecido con gas, inmediatamente antes del us r y Chalmers, Eds . , 238-250 (1982) y ASHP Hand table Drugs, Toissel,\ 4ta edición, 622-630 (1986) Las formulaciones adecuadas para la adminis a incluyen pastillas que comprenden un uecido con gas de la invención y, opcionalme e terapéutico adicional y un saborizante, us osa y acacia o tragacanto; pastillas que compre o enriquecido con gas y un agente terapéutico a nal en una base inerte, tal como gelatina y glice osa y acacia; y lavados bucales o enjuagues ora enden un fluido enriquecido con gas y un éutico adicional opcional en un portador ado; asi como cremas, emulsiones, geles y similar demás, las formulaciones adecuadas pa istración rectal se pueden presentar como supos ando con una diversidad de bases tales como b La dosis administrada a un sujeto, especialm l, en particular, un humano, en el contexto te invención debe ser suficiente para provo esta terapéutica en el animal en un marco de able . Una persona con conocimiento en la ocera que la dosificación dependerá de una divers res que incluyen el estado del animal, el peso nimal, así como la afección a ser tratada. Un ada es aquella que resultará en una concentració sición terapéutica en un sujeto conocida para spuesta deseada.

El tamaño de la dosis también será determinado el tiempo y la frecuencia de administración así encia, naturaleza, y extensión de cualquiera os colaterales adversos que podrían acompa istración de la composición terapéutica y el r ingrediente activo, no debe ser tal que se pi icio de un efecto terapéutico sinérgico nación de los ingredientes activos. De acue as modalidades por cualquier método de adminis (2), se debe administrar la combinación ide zar los resultados de máxima eficacia. En idades por cualquier método de administración (1) be administrar la combinación ideal para alcan ntraciones del pico plasmático de cada uno dientes activos. Un régimen de una pildora una mediante la administración de una co-for nada puede ser factible para algunos pacien de enfermedades y/o desordenes digestivos. De iertas modalidades, las concentraciones plasmátic ivas de los ingredientes activos de la comb estar en el intervalo de aproximadamente 0.00 endo hidróxido de aluminio, hidróxido de ma ato de aluminio, carbonato de magnesio, carbó o, bicarbonato de sodio, hidrotalcita, y maga icona procinéticos , incluyendo itoprida, dompe lopramida, eritromicina, prucaloprida, y cis es antidiarreicos , incluyendo subsalicito de amida, y difenocilato; corticosteroides, inc cortisona, acetato de hidrocortisona, acet sona, tixocortol pivalato, predni rednisolona, y prednisona; antiespasmódicos inc lomina, atropina, atropina metonitrato, mebe olamina, y pirenzepina; inmunomoduladores inc oprina, mercaptopurina, y metotrexato; antibi yendo amoxicilina (penicilinas) , claritro loxacina, metronidazol ; biológicos inc ximab, etanercept, adalimumab, certolizum nativa (2) , se administra una dosificación efec compuesto de manera seriada, donde en la terapi rmulación (1) , las dosificaciones efectivas de do estos se administran juntas.

Las combinaciones de la invención se pueden p nientemente como una formulación farmacéutica de dosificación unitaria. Una formulac icación unitaria conveniente contiene los ingre S en cualquier cantidad desde 1 mg a 1 g ca por ejemplo, no se limita a, 10 mg a 300 os sinérgicos del fluido de la invención en com nhibidores de la bomba de protones, incluyendo, p arse a, pmeprazol, pantoprazol, lanso prazol, tenatoprazol , y rabeprazol; bloqueado tor H2 de histamina, incluyendo, pero sin limit idina, famotidina, cimetidina, y nizatidina; anti costeroides , incluyendo hidrocortisona, acet cortisona, acetato de cortisona, tixocortol ?? solona, metilprednisolona, y pre spasmódicos incluyendo, pero sin limitar lomina, atropina, metonitrato de atropina, meb olamina, y pirenzepina; inmunomoduladores inc sin limitarse a, azatioprina, mercaptopur rexato; antibióticos, incluyendo, pero sin limit cilina (penicilinas) , claritromicina, levofl nidazol; biológicos incluyendo infliximab, eta mumab, certolizumab, y natalizumab; nflamatorios , incluyendo, pero sin limitarse a, salicílico y ácido 5 -aminosalicílico; 1 yendo, pero sin limitarse a, lubiprostona y te algínico; sucralfato; misoprostol; y/o mosaprid reparados en una amplia relación, por ejemplo o, bicarbonato de sodio, hidrotalcita, y mag icona; procinéticos , incluyendo, pero sin limit ida, domperidona, metoclopramida, eritr loprida, y cisaprida agentes antidia yendo, pero sin limitarse a, subsalicito de amida, y difenocilato; corticosteroides, inc sin limitarse a, hidrocortisona, aceta cortisona, acetato de cortisona, tixocortol p isolona, metilprednisolona , y pre spasmódicos incluyendo, pero sin limitar lomina, atropina, metonitrato de atropina, meb olamina, y pirenzepina ; inmunomodu1adores inc sin limitarse a, azatioprina, mercaptopur rexato; antibióticos, incluyendo, pero sin limit cilina (penicilinas) , claritromicina, levofl nidazol; bioló icos inclu endo infliximab, eta de protones, incluyendo, pero sin limita azol, pantoprazol, lansoprazol, esome oprazol, y rabeprazol; bloqueadores del recepto mina, incluyendo, pero sin limitarse a, rani idina, cimetidina, y nizatidina; antiácidos, incl sin limitarse a, hidróxido de aluminio, hidró SÍO, carbonato de aluminio, carbonato de m nato de calcio, bicarbonato de sodio, * hidrotal drato-simeticona; procinéticos , incluyendo, pe arse a, itoprida, domperidona, metoclo omicina, prucaloprida, y cisaprida iarreicos, incluyendo, pero sin limitarse a, subs ismuto, loperamida, y difenocilato ; corticoste yendo hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, cortisona, tixocortol pivalato, predni prednisolona, y prednisona; antiespasmódicos incl limitarse a, ácido 4 -aminosalicílico y ác salicílico laxantes incluyendo, pero sin limit rostona y tegaserod; ácido algínico; suc rostol; y/o mosaprida en una forma de dosifica nación co- formulada, tal como una pildora, t imido o cápsula será aproximadamente 1, es dec dad aproximadamente igual de fluido de la inve idores de la bomba de protones, incluyendo, p arse a, omeprazol, pantoprazol, lans prazol, tenatoprazol , y rabeprazol; bloqueado tor H2 de histamina, incluyendo, pero sin limit idina, famotidina, cimetidina, y nizatidina; anti yendo, pero sin limitarse a, hidróxido de al xido de magnesio, carbonato de aluminio, carbó sio, carbonato de calcio, bicarbonato de talcita, y magaldrato- simeticona; proci lomina, atropina, metonitrato ele atropina, mebe olamina, y pirenzepina; inmunomoduladores inc sin limitarse a, azatioprina, mercaptopur rexato; antibióticos, incluyendo, pero sin limit cilina (penicilinas) , claritromicina , levofl nidazol; biologics incluyendo, pero sin limit ximab, etanercept, adalimumab, certolizum izumab; agentes antiinflamatorios, incluyendo, p arse a, ácido 4 -aminosalicílico y áci salicílico; laxantes incluyendo, pero sin limit rostona y tegaserod; ácido algínico; suc rostol; y/o mosaprida. En otras co-formul lares, puede haber más o menos fluido de la inve idores de la bomba de protones, incluyendo, p arse a, omeprazol, pantoprazol, lans prazol, tenatoprazol , y rabeprazol bloqueado es antidiarreicos , incluyendo, pero sin limit licito de bismuto, loperamida, y difeno costeroides , incluyendo hidrocortisona, acet cortisona, acetato de cortisona, tixocortol pi isolona, metilprednisolona, y pred spasmodicos incluyendo, pero sin limitar lomina, atropina, metonitrato de atropina, mebe olamina, y pirenzepina; inmunomodu1adores incl sin limitarse a, azatioprina, mercaptopur rexato; antibióticos, incluyendo, pero sin limit cilina (penicilinas) , claritromicina , levoflo nidazol; biológicos incluyendo infliximab, eta umab, certolizumab, y natalizumab; nflamatorios , incluyendo, pero sin limitarse a, á salicílico y ácido 5 -aminosalicílico ; 1 yendo, pero sin limitarse a, lubiprostone y teg otones, incluyendo, pero sin limitarse a, ome prazol, lansoprazol, esomeprazol , tenatopra razol; bloqueadores del receptor H2 de his yendo, pero sin limitarse a, ranitidina, fam idina, y nizatidina; antiácidos, incluyendo, p arse a, hidróxido de aluminio, hidróxido de m nato de aluminio, carbonato de magnesio, carbó o, bicarbonato de sodio, hidrotalcita, y mag icona; procinéticos , incluyendo, pero sin limit ida, domperidona, metoclopramida, eritr loprida, y cisaprida; agentes antidia yendo, pero sin limitarse a, subsalicito de amida, y difenocilato ; corticosteroides, inc Cortisona, acetato de hidrocortisona, acet sona, tixocortol pivalato, predni rednisolona, y prednisona; antiespasmódicos incl limitarse a, ácido 4 -aminosalicílico y ác salicílico; laxantes incluyendo, pero sin limit rostona y tegaserod; ácido algínico; suc rostol; y/o mosaprida, o derivados fisiológi onales de cualquiera de éstos, y un p céuticamente aceptable.

Será apreciado por aquellos con conocimiento ca que la cantidad de los ingredientes activos naciones de la invención que se requieren para él ratamiento, variará de acuerdo a una diversi res que incluyen, la naturaleza de la afecció da y la edad y estado del paciente, y será final rio del médico o del profesional de la salud que ciente. Los factores a considerar incluyen la istración y la naturaleza de la formulación, ral del animal, la edad el estado enera as modalidades la combinación de tres partes del invención e inhibidores de la bomba de pr endo, pero sin limitarse a, omeprazol, panto razol, esomeprazol, tenatoprazol , y rabe eadores del receptor H2 de histamina, incluyend limitarse a, ranitidina, famotidina, cimetid idina; antiácidos, incluyendo, pero sin limit ido de aluminio, hidróxido de magnesio, carbó io, carbonato de magnesio, carbonato de onato de sodio, hidrotalcita, y magaldrato-sime éticos, incluyendo, pero sin limitarse a, it idona, metoclopramida, eritromicina, prucalop rida; agentes antidiarreicos , incluyendo, pe rse a, subsalicito de bismuto, loperami cilato; corticosteroides , incluyendo hidrocor to de hidrocortisona, acetato de cortisona, tix umab, certolizumab, y natalizumab ; nflamatorios , incluyendo, pero sin limitarse a, á salicílico y ácido 5 -aminosalicílico ; l endo, pero sin limitarse a, lubiprostone y teg algínico; sucralfato; misoprostol; y/o mosap n administrar en cualquier orden.

Se entiende que los siguientes ejemplos so rativos y en ningún sentido limitativos.

EJEMPLOS Ejemplo 1 Estabilidad del oxígeno disuelto omo se indica en la Figura 30, se ilustran los ígeno disuelto en una botella plástica de 500 del ada y una botella de vidrio de 1000 mi madamente 40 ppm a los 65 días y de aproximadam los 95 días. De este modo, este gráfico indica es de oxígeno disuelto dentro de la botella de p botella de vidrio se mantienen a tasas relati das a 65° Fahrenheit cuando el oxígeno se difunde luido usando el sistema y el método descritos.

Ejemplo 2 riinución del contenido de oxígeno en la solución balanceada a Figura 33 ilustra la retención del oxígeno, d solución salina balanceada de 500 mi que origin un nivel de oxígeno di.suelto de 5 ppm. Desp ecimiento de la solución a la temperatura y ar con el difusor de la presente invención, el n o disuelto fue de aproximadamente 41 ppm. La s Ejemplo 3 Tamaño de la microbur u a os experimentos se realizaron con un fluido enri as con el uso del difusor de la presente invenció inar un límite de tamaño de las microburbuj as mite de tamaño de las microburbuj as se establ fluido enriquecido con gas a través de los fil y 0.1 mieras. En la realización de estas prue un volumen de líquido a través del difusor te invención y se generó un fluido enriquecido c ta mililitros de este fluido se vaciaron guilla de 60 mi. El nivel de oxígeno disuelto del de la jeringuilla se midió después por la tit nkler. El fluido dentro de la jeringuilla se in S de un filtro Millipore Millex GP50 de 0.22 micr so de precipitados de 50 mi. Después, se midió Tabla 5. Niveles de OD omo se puede observar, los niveles de OD on dentro de la jeringuilla y los niveles de OD del vaso de precipitados de 50 mi no se modi icativamente por el paso del material difuso a filtro de 0.22 mieras, lo que implica q or de la presente invención y se recogieron dos onales. Para la primera muestra, el nivel de lto fue de 43.4 ppm. Para la segunda muestra, e ígeno disuelto fue de 41.4 ppm. Finalmente, el fi y se tomó una muestra final de la soluc ar. En este caso, la muestra final tuvo un n no disuelto de 45.4 ppm. Estos resultados stentes con aquellos donde se usó el filtro Milli icras. De este modo, la mayoría de las microbur jas de gas en la solución salina son de aproxima icras de tamaño.

Ejemplo 4 Efectos de la aspersión as Figuras 34 y 35 ilustran los efectos de la as ifusor de la presente invención en un fluido que os, el nivel de oxígeno disuelto fue de aproxima . El nivel de oxígeno disuelto en el agua enri xígeno llegó a un valor mínimo ligeramente ma (0) a aproximadamente 14 minutos después del ini so. Estas cifras ilustran la manera en que el ni ede difundir en el agua para la aspersión del gua . Sin embargo, se podría usar cualquier gas de ier fluido para la aspersión de un gas a partir undir el otro gas en el líquido. El mismo expe a utilizar cualquier material fluido hués ier material de infusión fluido.

Ejemplo 5 Efectos Rayleigh os fluidos procesados a través del disposit ion descrito en la presente presentan diferencias s fue determinar si existe alguna diferencia entre el agua desionizada normal (sin procesa enriquecida por el dispositivo de difusión te invención. as dos muestras se codificaron para manten idades en secreto, y sólo después que se completa s, se identificaron las muestras. Las dos mues ron en un rayo láser de 633 nanómetros de acue agrama que se ilustra en la Figura 37A. La mué ue el fluido enriquecido con gas de acuerdo a idades descritas en la presente, presentó sada, independientemente de su posición respec láser. El fluido de la muestra B se había sel las de vidrio durante aproximadamente una s de dos a tres horas de abierta la botella, el spersión desapareció. De este modo, la estruct Ejemplo 6 Generación de electrones solvatados a evidencia adicional también ha sugerido so de enriquecimiento generado por el disposi ion de la presente invención resulta en ele tados dentro del fluido enriquecido con gas. D resultados de las sondas polarográf icas de lto, se cree que el fluido difuso presenta un ef ra de electrones y, de ese modo, el fluido puede roñes solvatados dentro del material enriquec xisten dos técnicas fundamentales para la medi es de oxígeno disuelto eléctricamente: técni ión galvánica y medición polarográfica . Cada n sistema de electrodos, donde los niveles de lto dentro de la solución que se prueba reaccio drógeno y porta el potencial negativo con resp . La solución de electrolito rodea al par de ele á contenida en la membrana . Cuando no hay nte, el cátodo se polariza por el hidrógeno y res ente de flujo. Cuando el oxígeno pasa a travé ana, el cátodo se despolariza y los electr en. El cátodo reduce electroquímicamente el ox hidroxilo de acuerdo con la siguiente ecuación: H20+4E' = 40H~ l realizar las mediciones del nivel de oxígeno d a solución enriquecida con gas de acuerdo a los s presente invención, se experimentó repetidame ción de sobreflujo donde el medidor de oxígeno d ra una lectura superior que la que el medidor e eer. Sin embargo, la evaluación de la s roñes donde reacciona el oxígeno. Sin embar do a la resonancia de giro del electrón, lo s no están presentes en el fluido. De este m o presumiblemente contiene electrones sol lizados por las especies de oxígeno que tambié ntes en el fluido.

Ejemplo 7 Cicatrización de heridas in vitro os efectos de un fluido enriquecido co uecido con oxígeno) se probaron para la capaci ueratinocitos epidérmicos humanos cultivados de érida . os queratinocitos epidérmicos humanos se aisla ÍOS de recién nacidos que se obtuvieron cisión de rutina y no idenficados. Los prepuc tinocitos humanos (0.2% de hidrocortisona, 0.2 n r de crecimiento epidérmico humano) y el cóc ióticos penicilina/estreptomicina, anfotericin siones celulares de queratinocitos se sembra s de cultivo de 12 pocilios sin recubrimient se reemplazó después de 24 horas, y cada 48 s de la siembra inicial. l alcanzar la confluencia celular, se h zos lineales con una punta de pipeta estéril P10 ó en una herida uniforme libre de célula pas se lavaron varias veces con PBS de Dulbecc ar cualquiera de los residuos celulares. Las mo s se incubaron después en los medios siguient de crecimiento completo (como se de iormente en este ejemplo) , ii) medio de crec to diluido 1:1 con una versión cortada de s 6, 12, 24 y 48 horas después de la heri zaron las mediciones de oxígeno, y se tomaron i s cultivos. eis horas después de la herida, los bordes as en la solución salina y los medios enriqueci e irritaron más que aquellos en el medio control só con el dispositivo de difusión descrito te, pero sin la adición de un gas. Doce horas S heridas, los bordes de las heridas en los tres cieron irregulares, con queratinocitos a lo la ordes que migran hacia el centro de la heri ificación de la migración de queratinocitos imadamente el mismo nivel de migració tinocitos en la solución salina y en el ecido con gas. Los resultados del experime an en las Figuras 40A y 44B. eridas de la biopsia por escisión dérmica porci s embebidas en solución salina enriquecida con o upo control de vendas embebidas en una solución no fue enriquecida con oxigeno. Varios fact aron microscópicamentepor el estudio incluye rmalización; 2) neovascularización, 3) difere rmica, 4) migración de los mastocitos, y 5) mitos Externamente7 las heridas parecieron cicatrizar bles . Las heridas tratadas con la solución uecida con oxígeno mostraron un aumento rización de las heridas en los días 4 al go, ambas heridas parecían completar la cicat imadamente al mismo tiempo. El estudio mostró qu ías 3 y 11, la nueva epidermis de las heridas t a solución salina enriquecida con oxígeno migró d o veces más rápido que la epidermis de las in deseos de estar atados a ninguna teo cular, se cree que la solución salina enriquec o puede aumentar el nivel localizado de NO de eridas. El NO modula los factores de crecimie ición del colágeno, la inflamación, la migración citos, el engrosamiento de la epidermis, scularización en la cicatrización de heridas. Ade nítrico se produce por una enzima inducible ada por el oxígeno. e este modo, aunque no se desea estar atados a en particular, el fluido enriquecido con gas ción puede estimular la producción de NO, lo q e con el espectro de los efectos de cicatrización s observados en estos experimentos. a epidermis cicatrizada de los cerdos experim nciación temprana en el grupo de solución eridas de los tejidos epidérmicos porcinos, co ion salina enriquecida con oxígeno. De este m rizacion de la herida control y de la herida que ion salina enriquecida con oxígeno fue seguida ías 1, 4 y 16. La Figura 41A describe la cicatr herida para la herida control el día 1. a, la herida muestra engrosamiento epidérmico/dé pérdida del contorno. La Figura 4IB descr izacion de la herida el día 1 para la herida sa la solución salina enriquecida con oxígeno. La ra engrosamiento epidérmico/dérmico normal y el c 1 es típico en una nueva herida. on referencia ahora a las Figuras 41C y 4ID, se icatrización de la herida control el día 4 izacion de la herida tratada con la solución ecida con oxígeno el día 4. Para la herida cont rmico de dos veces aquella herida que no se trató ión salina enriquecida con oxígeno. on referencia ahora a la Figura 41E, se ilu a control el día 16. La herida muestra una ep diferenciada con pérdida del c rmico/dérmico que aquella ilustrada por la a con la solución salina enriquecida con rada en la Figura 41F. La Figura 41F mues rmis más diferenciada y un contorno epidérmico/ rmal en la herida. sí, como se ilustra con respecto a las Figura la herida tratada con la solución salina enriquec o muestra características de cicatrización s que la herida sin tratar y muestra una epider nciada con un contorno epidérmico/dérmico más ño zó a ?340 nm, y a temperatura ambiente (25 grados). Las muestras analizadas fueron: 1 nizada (control negativo), 2. fluido enriqueci no de la invención a baja concentración, 3. ecido con oxígeno de la invención a tración, 4. peróxido de hidrógeno (control pos ntrol positivo de peróxido de hidrógeno most e reactividad, mientras que ninguno de los os probados reaccionó con la glutation peroxidasa Ejemplo 10 fluidos superoxigenados generados por electrocin Solas se mostraron para proporcionar los efectos longación sinérgicos (por ejemplo, la supresión oconstricción) con albuterol in vivo en un modelo onocido en la técnica de la broncocons triceion h para entregar la dosis objetivo de 12.5 g de uterol en 250 µ? por animal.

El estudio fue un diseño en bloques aleatorio p es de peso y línea base Penh. Los dos grupos ieron una instilación intratraqueal de 250 µ? de sulfato de albuterol en una o dos dilució A fue agua desionizada que había pasado a tra sitivo de la invención, sin la adición de o ras que el Grupo B fue agua de la invención enri as. Cada grupo se administró por vía intratraqu iones usando un microaspersor Penn Century. Adem les se estratificaron a través de unidad smógrafo Buxco para que cada grupo de tratamie ente representado dentro de los nebulizador tan los pletismógrafos y las unidades de registr os animales que mostraron al menos 75% de su lín Una vez que el animal tenía una broncoconstricció 0% , se consideró que el animal no estaba protegi dica en la Tabla 6 a continuación, el 50% les del grupo B (sombreado) se protegieron oconstriccion a las 10 horas (momento en que ter a) . 6. Protección de la broncoconstricción medida co etacolina Grupo A ; por ciento de protección de l oconstriccion por número de animales po 1 2 3 4 5 6 as ) 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100. O 20.81 23.82 32.89 11.56 7.91 24.95 15.67 9.96 8.53 8.40 81.66 75.60 imento 2 : Evaluación de la broncoconstricción de ulfato de albuterol en conejillos de indias ey : n conjunto adicional de experimentos se ll bo usando un número mayor de animales os conejillos de indias (Cavia porcellus ey albinos, Crl : (HA)BR de Charles River (St. Constant, Quebec, Canadá) . imadamente 325 ± 50 g al inicio del trata mero de grupos fue 32, con 7 animales mach (más otros 24 forman el mismo lo les) . Dieta; Todos los animales tuvieron o a una dieta granulada estándar de labo cial certificada (conejillos de indias ficada por el PMI ; PMI Nutrition Intern , excepto durante los procedimientos desig os : a vía de administración fue la insti traqueal a través de un microaspersor ry y el reto con metacolina a través ación corporal completa. La vía intratraqu animales se sometieron a la exposició ación de metacolina (500 g/ml) , 2 horas d a administración del TA/control . Todo les recibieron un volumen de dosis de 250µ anto, el sulfato de albuterol se diluyó ulo de control y los 4 artículos de pru oncentraciones de 0, 25, 50 y 100 pg/ml . reinta minutos antes de la administració iones de sulfato de albuterol ntraciones diferentes (0, 25, 50 y 100pg/ raron en una solución madre Ox (500pg/ una de estas cuatro soluciones de articu a (RDC1676-00, RDC1676-01, RDC1676-0 76-03) . Estas concentraciones de sulfa erol también se prepararon en un flui ol no generado por e lee troc inét ica (contr Cada animal recibió una instilación intrat artículo de prueba o de control co aspersor Penn Century. Los animales se pr imentos durante toda la noche y se aneste o isoflurano, la laringe se visualizó de un laringoscopio (o alternativa adecú nta del microaspersor se insertó en la tr ministró un volumen de dosis de 250 µ?/ rtículo de prueba o de control.

El aerosol de metacolina se generó en la e ire de una cámara de mezcla con nebuliz sónicos Aeroneb suministrados con el aire de flujo regulado Buxco. Esta cámara de m vez alimenta cuatro pie t ismógrafos indivi odo el cuerpo sin límites, cada uno oper ligera presión negativa mantenida por me les a la metacolina para provocar oconstriccion aguda grave pero no morta o animales se expusieron a la meta g/ml) durante 30 segundos y los pará ratorios se midieron hasta 10 minutos comienzo del aerosol. La concent rae ió izador de metacolina y/o el tiempo de expo erosol se ajustó adecuadamente para induc oconstriccion aguda/ revers ible , grave, p l, que se caracteriza por un aumento trans pene .

Una vez antes de la administración del ar ueba (d a -1) y de nuevo a los 2, 6, 10, 1 26 horas después de la dosis, los anima arón en la cámara y los parámetros ventila men tidal, frecuencia respiratoria, v izador de 500ug/ml durante 30 segundos les se expusieron al aerosol por más os, tiempo durante el cual se evaluar ietros de ventilación de forma continua. ador de broncocons tricción se usó Penh; P alor derivado obtenido a partir del fl ración pico, el flujo de expiración pico o de expiración, Penh = (flujo de expi flujo de inspiración pico) * (Tiem ae ion/ 1 iempo para expirar el 65% del v -1) . os animales que no mostraron oconstricción aguda, grave, durante el re dosis previa de metacolina se reempla uier animal que muestra al menos el 75% PenhPenes de línea base a las 2 horas d lo de los valores medios del grupo aciones estándares (según corresponda) , Tabla 7. Diseño del experimento; 7 conejil s machos por grupo. nea base medios porcentuales, cuando se mi período de 26 horas.

Sorprendentemente, sin embargo, como se n s Figuras 108A-D, la administración de alb muestran los datos representativos par s de 25 pg albuterol/animal ) formulado os generados por e lee t roe iné t i ca de la in odos los niveles de oxígeno probados; amb ra 108-A ) , 20 ppm (Figura 108-B) , 4 ra 108-C) y 60 ppm (Figura 108-D) ) resu prolongación notable de los efectos ocons tr ic t ivos del albuterol, en comparaci luido control. Es decir, los resultados olina mostraron una prolongación d odilatación del albuterol por al menos 26 iguras 108A-D muestran que existían dife rcionan efectos de prolongación sinérgi erol, proporcionando de este modo nución en el uso de albuterol en un pacien permite un uso del fármaco más efic ible, con menos efectos secundarios, ito del período durante el cual un pacie tratar y responder al tratamient erol .

Ejemplo 11 (Se determinó un perfil de citoquinas) os linfocitos mixtos se obtuvieron de un tario sano. Muestras de capas leucocitarias se uerdo con los procedimientos estándares para e plaquetas. Los linfocitos se sembraron tración de 2 x 106 por placa en medio RPMI ( ) diluido, ya sea con el fluido de la i Los sobrenadantes se descongelaron, se centrifug robaron para la expresión de citoquinas usa colo y plataforma de microesferas XMAP® (Luminex) os millones de células se sembraron en 6 poci laca de 24 pocilios en RPMI completo + 50 mtn He on el fluido enriquecido con oxígeno de la i ) (pocilios 1, 3, y 5) o agua destilada (2, 4 y diluido en agua para hacer 1 x) . Las cél UIa-ron con 1 pg/ml de antígeno T3 (pocilios 1 y 2 líos 3 y 4) , Los pocilios de control 5 y 6 ularon. Después de 24 horas, las células se veri la viabilidad y los sobrenadantes se recogí laron. A continuación, los sobrenadant gelaron y se centrifugaron a 8,000 g para gra sobrenadantes clarificados se ensayaron pa inas enumeradas usando un rotocolo lataf tígeno T3. Además, la IL-6, IL-8, y los niveles d n inferiores en el medio enriquecido con gas ción con la PHA, que en el medio de control con ras que los niveles de IL-?ß fueron inferiores o enriquecido con gas de la invención con ración con el medio de control con la PHA. En e ecido con gas de la invención solo, los niveles ron más altos que en el medio control.

Ejemplo 12 coproteína de la mielina de los oligodendrocitos omo se indica en la Figura 48, la proliferac citos en respuesta a los péptidos antigénic tó cuando se cultivaron en la presencia del ecido con gas de la invención cuando se comparó oxigenado presurizado, (recipiente de presión control desionizado. De este modo, el fluido ión enriquecido con gas amplifica la re ferativa de los linfocitos a un antígeno con e lulas fueron previamente estimuladas. l péptido de la glicoproteína de la mielina endrocitOS 35-55 ( OG 35-55) (M-E-V-G-W-Y-R-S-P -L-Y-R-N-G-K) (SEQ ID NO: 1; véase la publ 80139674, incorporada como referencia en la pr nocitos se cultivaron con MOG p35-55 durante 4 , respectivamente. Los cultivos se pulsaron c timidina y se cosecharon 16 horas más tarde. de la incorporación de la timidina [3H] se los cultivos por triplicado. Los resultados se m Figura 48.

Ejemplo 13 Expresión de Citoquinas En los aspectos particulares, los linfocitos os se estimularon con antígeno T3 o PHA en el rocinético de la invención, o fluidos de control os en la IL-?ß, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL L-12(p40)/ IL-12(p70), IL-13, IL-17, eotaxina, F, ???-?ß, MCP-1, G-CSF, FGFb, VEGF, TNF-Oí , na, TNF- ß , TFG-ß y NGF se evaluaron. Como s flamatorias (por ejemplo, ILlR-a, TIMP) ? taron en el fluido de prueba frente a fluido de c Para ampliar estos datos, los solicitantes us a modelo reconocido por la técnica que invol ilización con ovoalbúmina, para evaluar las rea persensibilidad alérgica. Los puntos finales est los componentes citológicos y celulares parti reacción, así como las mediciones serológi ínas y LDH. Se realizó el análisis de las cito endo el análisis de eotaxina, la IL-1A, IL-1B, K P-3, MIP-1A, RANTES, TNF-A, y VCA . n resumen, las ratas machos Brown Norway se iny ía intraperitoneal con 0.5 mi de ovoalbúmina (OVA 503-lG, Sigma) en una solución (2.0 mg/ml) que c ido de aluminio (Al (OH) 3) (200 mg/ml) una 1, 2 y 3. El estudio fue un arreglo factorial na vez al día, los dos grupos se dividieron a la % de las ratas en cada grupo recibió solución s con OVA por inhalación.

En concreto, catorce días después de la serial al, 12 ratas se expusieron a RDC 1676-00 por in te 30 minutos cada día durante 7 días consecuti de flujo de aire a través del sistema se fij s/minuto. Un total de 12 ratas se alinearon a circular, con un único puerto para intro ibuir equitativamente el material nebulizado a ámaras del Aeroneb.

Quince días a continuación de la sensibil al, 12 ratas se expusieron a RDC 1676-ización ultrasónica durante 30 minutos cada día .s consecutivos. El flujo de aire se fijó tambié s/minuto, usando el mismo nebulizador y. la cám gada por medio de la instilación intratraqueal . ente, se repitió el procedimiento con el grupo RD Veinticuatro horas después del reto, todas las r grupo se sacrificaron por sobredosis con pento o. Las muestras de sangre completa se tomaron de inferior, y se colocan en dos tubos diferentes ida de sangre : tubo para ARN de la sangre ne™ y tubo para ADN de la sangre Qiagen PAXgen nes se procesaron para obtener fluido del oalveolar (BAL) y tejido pulmonar para RT-P ar los cambios en los marcadores de la expré inas conocidos por estar asociados con la infl nar en este modelo. Una técnica de lavado unilat ó para preservar la integridad de los cuatro lób ado derecho del pulmón. El lóbulo "grande" uial {"BAL") se separó en dos alícuotas. La ota se centrifugó y el sobrenadante se amente en hielo seco fraccionado, se colocó a -vió al laboratorio para su posterior procesamie dad de proteínas y LDH presentes indican el n ina en el suero de la sangre (la proteína nente del suero que se filtra a través de las me o es retada como en este experimento) y la ar, respectivamente. La parte de la prueba reg ligeramente menos proteína que el control.

La segunda alícuota del fluido de lavado bronq Ó para el contenido de proteína total y LDH, así. ió a un exámen citológico. El grupo tratado mos élulas totales son mayores que el grupo cont ión salina. Además, hubo un aumento de los eosi grupo tratado frente al grupo control. Tambi ifugó durante 10 minutos a 1200 g a temp nte. El suero (sobrenadante) se eliminó y se co ubos limpios, y el suero se almacenó a -80°C.

Para la extracción de ARN usando el Tri-reacti Molecular Research Center, Inc.), 0.2 mi de eta o plasma se añadieron a 0.75 mi de reactivo entado con 20 µ? de ácido acético 5N por cada 0. e completa o plasma. Los tubos se agitaron enaron a -80°C usando PAXgene™, los tubos se i te aproximadamente dos horas a temperatura ambien se colocaron en su posición y se almacenaron lador a -20 °C durante 24 horas, y luego se transí °C para un almacenamiento por largo tiempo. nálisis de Lu inex. Por .la plataforma Lumi sis de microperlas se utilizó como sustrato p ión de unión relacionada con anticuerpos la cual Para la generación ele datos con arreglos d nt# se aisló tejido pulmonar y se sumergió ivo TRI (TR118, Molecular Research Center, Inc. en, se añadió aproximadamente 1 mi de reactivo T g de tejido en cada tubo. Las muestras se homog 1 reactivo TRI, usando un homogeneizador de n™ o Polytron™. Las muestras se almacenaron a -80 ras de sangre : iguras 49-58 muestran los resultados de las eval estras de sangre completa.

La Figura 49 ejemplo muestra el formato de prese tos básicos de la luminosidad para los datos ra de sangre. Las cartas que designan la.identid uina medida (en este caso KC) se encuentran en l ior derecha de cada figura de datos. Los d ntan tanto como puntos de datos (gráfico supe ez más, el sufijo 00 representa el tratamie ión salina y el sufijo 01 representa los grupos l fluido electrocinético de la invención.

Cada muestra de sangre se dividió en dos muestra ras se procesaron al mismo tiempo. Las unid a son unidades de la luminosidad y los grupos y erda a derecha son: controles retados co miento con el fluido electrocinético de la i o con OVA; seguido por el tratamiento con a retado con la solución salina; y el tratamient o electrocinético de la inventiva retado con la a. Para facilitar la revisión, los grupos RDC167 can en gris con fondo sombreado, mientras que los atamiento con solución salina control tienen un f eado .

Generalmente, al comparar los dos grupos La Figura 50 muestra el análisis de RANTES ia IL-8) en los datos de muestras de sangre de aspectos ejemplares particulares. Las unida osidad para dos grupos más a la izquierda (los os con OVA) indican que generalmente los valore tratado RDC1676-01 fueron menores que el grupo 76-00 como se muestra por el gráfico de punto superior del gráfico que muestra de nu encial de 30-35% entre los dos grupos, mientras rupos expuestos solamente a la solución salí es del nivel de citoquina fueron más o menos igu s ligeramente aumentados en el grupo trat 76-01.

La Figura 51 muestra el análisis de MCP-1 en lo uestra de sangre de acuerdo a aspectos ej culares. Las unidades de luminosidad para La Figura 52 muestra el análisis de TNF alfa de muestra de sangre de acuerdo a aspectos eje culares. Las unidades de luminosidad para los dos la izquierda (los grupos retados con OVA) indi almente los valores en el grupo tratado con RD n menores que el grupo control RDC1676-00 ra por el gráfico de puntos en la parte super co mientras que en los grupos expuestos solamen ión salina, los valores del nivel de citoquina menos iguales, o quizás ligeramente aumentado tratado con RDC1676-01.

La Figura 53 muestra el análisis de MIP-1 alfa de muestra de sangre de acuerdo a aspectos eje culares. Las unidades de luminosidad para los dos la izquierda (los grupos retados con OVA) indi almente los valores en el grupo tratado con RDC culares. Las unidades de luminosidad para los dos la izquierda (los grupos retados con OVA) indi almente los valores en el grupo tratado con RD n menores que el grupo control RDC1676-00 ra por el gráfico de puntos en la parte super co mientras que en los grupos expuestos solamen ión salina, los valores del nivel de citoquina menos iguales, o quizás ligeramente aumentado tratado con RDC1676-01.

La Figura 55 muestra el análisis de Vcam en los d ra de sangre de acuerdo a aspectos eje culares. Las unidades de luminosidad para los dos . la izquierda (los grupos retados con OVA) indi almente los valores en el grupo tratado con RD n menores que el grupo control RDC1676-00 ra por el gráfico de puntos en la parte super aímente los valores en el grupo tratado con RD menores que el grupo control RDC1676-00 c ra por el gráfico de puntos en la parte super co mientras que en los grupos expuestos solamen ión salina, los valores del nivel de citoquina menos, iguales, o quizás ligeramente aumentado tratado con RDC1676-01.

Las Figuras 57 y 58 -muestran el análisis de eot t repectivamente en los datos de muestra de sa do a aspectos ejemplares particulares. En cada ca des de luminosidad para los dos grupos más erda (los grupos retados con OVA) indic almente los valores en el grupo tratado con RDC n menores que el grupo control RDC1676-00 c ra por el gráfico de puntos en la parte super co, mientras que en los grupos expuestos solamen a Figura 59 muestra el análisis de KC en los d e acuerdo con aspectos ejemplares particulares. el nivel de respuesta, junto con la variabili reo, no fue concluyente con respecto a una dif el RDC1676-01 y grupos tratados con RDC1676 KC mostró una diferencia relativamente pequeñ grupos, pero las unidades de luminosidad e as . el mismo modo, la Figura 60 muestra el anál S en los datos de BAL de acuerdo con aspectos eje culares, y mostró una marcada variabilidad en e 76-01 con una lectura que fue marcadamente sup emas, desvirtuando los resultados. el mismo modo, la Figura 61 muestra el análisis en los datos de BAL de acuerdo con aspectos eje culares, y mostró una relevancia relativamente datos de BAL de acuerdo con aspectos ej culares y una relevancia relativamente pequeña encia entre los grupo tratados con RDC1676-0 76-01.

En resumen, este ensayo estándar de la matoria a una sensibilización conocida produjo, a as muestras de sangre, una afectación clí ógica marcada. Además, mientras que un ficativo de animales de control se est ógicamente y casi agonizaron en el proceso, nin rupos tratados con RDC1676-01 mostró tales eos del estrés. Esto se reflejó después en los iantes de las citoquinas, con aproximadamente encia entre los grupos tratados con RDC1676-01y e do con RDC1676-01 en los grupos retados con OVA. ario, hubo cambios pequeños y bastante insignif Un biosensor de interferometría de Bicapa, De ada Rápida de Octeto (RED) ( forteBio™) ) , se examinar la afinidad de unión del receptor de m igando de bradiquinina con el receptor B2 bradiq istema del biosensor consiste en una fibra ante embebida en un centro de polipropileno con co especifico en la punta. La fijación del bi una capa de moléculas unidas a la punta de un a que crea un patrón de interferencia en el de uier cambio en el número de moléculas unidas pro o medido en el patrón de la luz .

Como se muestra en la Figura 69, el recep ana B2 de la bradiquinina se inmovilizó en el bi inopropilsilano (APS) . La fijación de la pí ra se designó en la Figura 69 y se analizó en la continuación, la unión de la bradiquinina al r enriquecido con gas registrado de la p ipción en comparación con la solución salina nor ilización de la unión bradiquinina al receptor ra en la Figura 75.

Ejemplo 15 nálisis de células T reguladoras se usó para most tos de los fluidos generados por electrocinética cipn en la modulación de la proliferación de célu laboración de citoquinas (IL-10) y otras proteína lo, GITR, Granzima A, XCL1, pStat5, y Foxp3) ) en células T reguladoras, y de, por ejemplo, tripta PBMC) a capacidad de las modalidades particulares de presente para regular las células T se estudió iación de las células presentadoras de antígen fueron los siguientes: CD3 (HIT3a para cond les) , GITR (conjugado PE) , CD4 (Cy-5 y conjug , CD25 (conjugado con APC) , CD28 (clon CD28.2), Granzima A (conjugado con PE) , FoxP3 (BioLegend) , (control de isotipo), y los anticuerpos XCLl. To erpos se usaron de acuerdo con las instrucció cante . as células T CD4 + se aislaron de sangre c rica con Kit de Rosette CD4+ (Stemcell Technol élulas T CD4+ se incubaron con anticuerpos anti anti-CD25-PE y anti -CD4 - FITC . Las célul ficaron por citometría de flujo usando un FACS iCD127lo/nTreg CD4+ y T células T respondedora os ensayos de supresión se realizaron en pí titulación de 96 pocilios de fondo redondo. 3.7 n colector de célula Tomtec y la incorpora ina-3H se determinó usando un contador de ce n Elmer. Las células presentadoras de antígeno stieron en células mononucleares de sangre per ) agotadas de las células T usando StemSep miento de células T humanas CD3 + (s ologies) , seguido de 40 Gy de radiación.

Las células T reguladoras se estimularon con con CD3 y anti-CD28 y después se tiñeron con tinte ro lidad Viva/Muerta (Invitrogen) , y los marcad ficie CD , CD25 y CD127. Las células se fijaro n Lyze/Fix PhosFlow™ y se permeabilizaron en Pe desnaturalizante. Las células después se tiñe erpos contra cada molécula particular selecciona El análisis estadístico se realizó mediante el s Pad Prism. Las comparaciones entre los dos gr Como se indicó en la Figura 76, la prolifera as T reguladoras se estudió por la estimulación as con el material particulado de escape diesel A) . El eje x de la Figura 76 muestra las ogas T CD4+ efectoras activadas (células respond una barra negra sólida, y las células T regulador barra gris (mostrada para la confirmación de a uales se mezclaron en una proporción de 1:1 ra en la barra blanca. El eje y muestra la prolif una medida del consumo de timidina-3H. Como se quierda a derecha a lo largo del eje x, "PM" ial particulado derivado del escape de diesel, indica PM más un fluido generado por electroc ecido con gas (Rev) de la presente descripción, a un fluido generado por electrocinética de la p ipción y el dispositivo que no es enriquecido s Como se muestra en la Figura 77, las células esti M (sin Rev, sin Solis) resultaron en una disminu -10 secretada, mientras que las células expuest . presencia de los fluidos de la presente desc + Rev") resultaron en una producción mante amenté disminuida de la IL-10 respecto a los c lución Salina y los Medios (sin PM) . Además, la rica (DT390, una molécula de la toxina di ada; dilución 1:50 de concentración comercial es tuló en muestras de fluidos de la invención eo el efecto de aumento en IL-10 mediado por Re a 77. Tenga en cuenta que el tratamiento con R tó en niveles superiores de IL-10 con respecto les con solución salina y medios. simismo, resultados similares, mostrados las , se obtuvieron con GITR, Granzima A, XCL1, p aron altos niveles ele triptasa, mientras que las das con PM en presencia de los fluidos de la ipción (" PM + Rev") resultaron en niveles de t ficativamente inferiores similares a aquellos oles con solución salina y medios. Consistente de las células T-reguladoras , la exposición eo el efecto mediado por Rev en los niveles de tr e resultó en un elevado nivel de triptasa en las se observó para PM solo (menos Rev, sin Rev, sin en cuenta que el tratamiento solo con Rev res es inferiores de triptasa con respecto a los co lución salina y medios.

En resumen, los datos de la Figura 76, que mues ución de la proliferación en la presencia de P especto a PM en el fluido de control (sin R ) , indican que el fluido Rev generad ratamiento de células epiteliales bronquiales pr C) con los fluidos generados por electrocinética nción resultó en la expresión y/o actividad reduc proteínas claves de las rutas inflamatorias de la respiratorias, MMP9 y TSLP) Información general. Como se muestra en el Eje ior (por ejemplo, la Figura 75, que muestr ilización de la unión de bradiquinina al rece 0 el biosensor de Interferometría de Bicapa, De ada Rápida de Octeto (RED) (forteBio™) ) , la unió quinina al receptor B2 fue dependiente tración, y la afinidad de unión aumentó en el ado por electrocinética (por ejemplo, Rev; do por electrocinética enriquecido con gas) te descripción, en comparación con la solución 1. Adem s, como se muestra en el Ejemplo 15, feración relativamente disminuida en el ensayo. posición a los fluidos de la invención resultó cción ligeramente disminuida o mantenida de cto a los controles de solución salina y medi Del mismo modo, en el contexto de los perfiles ica (AA) de células mononucleares de sangre per ) estimuladas con el material particulado (P mostraron que la exposición a los fluidos nte descripción ("PM + Rev") resultaron en niv asa significativamente inferiores similares a a S controles de solución salina y medios. Adem os de la toxina de la difteria (DT390, una ada de la toxina diftérica; dilución 1: tración comercial estándar) se muestran en el las Figuras 76-83, indican que el bloqueo b eo GPCR y el bloqueo de los canales de Ca af inas (por ejemplo, CLDN 3, 5, 7, 8, 9, 10) eína 1 de unión hermética), respectivamente. se muestra en los estudios de fijación de par lo 23, los fluidos generados por electrocinétic ción (por ejemplo, RNS-60) afectan la modulació ctancia de la célula entera (por ejemplo ciones de hiperpolarización) en las Células Epit iales (BEC; por ejemplo, Calu-3) , y de acue tos adicionales, la modulación de la conductanci a entera refleja la modulación de los canales ión En este ejemplo, los solicitantes han ampliad rimientos por la conducción de experimentos adic medir los efectos de la producción de dos pr S de las rutas inflamatorias de las vías respira ncreto, la MMP9 y la TSLP se analizaron en las liales bronquiales primarias (BEC) . a 60 a una dilución 1:10 {lOOul en lml de m miento epitelial de las vías respiratorias) junto ial particulado de escape de diesel (DEP o P ) an sipara para el análisis de FACS, como se describi lo 8 de este documento. Ambos anticuerpos tores de MMP9 y de TSLP se obtuvieron de BD Bios usaron según las especificaciones del fabricante. tados ; En las Figuras 115 y 116, DEP representa las stas al material particulado de escape de dies fuente comercial estándar) , "NS" representa las Stas a una solución salina normal solo, " senta las células tratadas con el material part esencia de solución salina normal, "Revera re a las células expuestas al material de prueb + Revera 60" se refiere a las células tratadas n la expresión del receptor de la TSLP, mient ión la , salina normal falló para producir el ar de reducción en la expresión del recept imadamente 20% de reducción) . El efecto de la s invención en la reducción de la expresión del r LP es un descubrimiento significativo en vista zgos recientes que muestran que la TSLP juega u ental en la patobiología del asma alérgica y el mediado por anticuerpos de la enfermedad a ada en función del receptor TSLP (Liu, YJ, al lymphopoietin : Master switch for a ación, J Exp Med 203:269-273, 2006, Al-Shami y o for TSLP in the development of inflamación in an , J Exp Med 202:829-839, 2005; y Shi y otros de of TSLP receptor alleviated allergic dis ting airway dendritic cells, Clin Immunol 29 de marginal de aproximadamente 20% de reducción. L a de las proteasas principales involucrada ación de las vías respiratorias y el rem ial en el asma. Recientemente, se ha demostrado s de MMP-9 están aumentados de manera significa acientes con asma estable e incluso superior tes asmáticos agudos en comparación con los í sanos. La MMP-9 juega un papel crucial ración de las células inflamatorias de la atorias y la inducción de la . hiperreactividad respiratorias lo que indica que la MMP-9 puede t importante en la inducción y el mantenimiento d la y otros, Sputum metalloproteinase- 9/tissue ir etalloproteinase-1 ratio correlates with ction in asthma and chronic bronchitis, Am J" Care Med 158:1945-1950, 1998; Hoshino y otros, e treatecl with matrix metalloproteinase inhib gy Clin Immunol 108:1021-1026, 2001; y Lee y x metalloproteinase inhibitor regulates infl migration by reducing ICAM-1 y VCAM-1 expressi e model of toluene diisocyanate- induced ast gry Clin Immunol 2003;111:1278-1284).

De acuerdo a los aspectos adicionales, por lo ta os generados por electrocinética de la invención dad terapéutica sustancial para modular (por ir) la expresión del receptor de la TSLP y/o ición de la expresión y/o actividad de MMP ye, por ejemplo, el tratamiento de la inflamaci Ejemplo 17 Los fluidos generados or elec rocinética d ejemplo, RDC-1676-03) en un model bilización con ovoalbúmina en rata Brown ata Brown Norway es un modelo reconocido ca para la determinación de los efectos ial de prueba en la función de las ratorias y esta cepa se ha usado ampli ejemplo, como un modelo del asma alérgi ogia de las vías respiratorias y los c ímicos inducidos por la sens ibi 1 i zació umina en este modelo se parecen a los obse 1 hombre (Elwood y otros, J Allergy Clin 1-60, 1991; Sirois & Bissonnette, Cli ol 126:9-15, 2001) . La vía inhala cionó para maximizar la exposición del pul ial de prueba o la solución de contro les sensibilizados con ovoalbúmina se t íales y métodos : Las ratas Brown Norway de la cepa Bn/ ieron de Charles River Kingston, con u imado de 275 ± 50 g al inicio del experi los estudios de animales se llevaron a ca robación por el Comité Institucional de de Animales PCS-MTL. Durante el estudio, dado de los animales se llevo a cabo de las directrices del Consejo de Investi nal de los Estados Unidos, así como del C iense de Cuidado de Animales.

Sensibilización, En el día 1 del experiment les (14 animales en cada grupo de tratam ns ibi 1 i zaron por la administración de un 1 ción int raperi toneal de una solución rada de 2 mg de ovoalbúmina/ 10 Omg de hid C-1676-03), ya sea administrado solo nación con budesonida, una vez al día dura os durante 7 días consecutivos. Los anima icaron en una cámara de cuerpo ente imadamente 20 1, y la atmósfera de pru ó en la entrada de aire de la cámara izadores ultrasónicos aeroneb suministrad ré de una bomba de flujo regulado Buxco. L ujo de aire se fijó en 10 litros/min. esafío con ovoalbúmina. El día 21, dos h nuación del tratamiento con las solució a, todos los animales se retaron co ión nebulizada de ovoalbúmina 1% duran os (en una cámara de cuerpo entero a un fl de 21/min) .

Toma de muest as . En los puntos de tiempo o el sistema Buxco Electronics BioSystem X tados : Conteo de eosinóf ilos : Como se esperaba, ra en la Figura 109, el tratamient onida ("NS + budesonida 750 pg/Kg" ; gráf s densamente sombreado) redujo el conteo osinófilos en los animales retados con re ratamiento con la normal solución salina de control sola (gráfico de barras abie s, mientras que el tratamiento con el flu nvención " RDC1676 - 03 " solo (gráfico de amente sombreadas) no redujo de ficativa el conteo de eosinófilos, és nte, mostró una sinergia sustancial c onida en la reducción del conteo de eosin 1676-03 + budesonida 750 mg/kg", gráfica ico de barras oscuras sólidas) , Por lo tanto, la Figura 109 y 110 muestr do con los aspectos particulares de la p ción, que los fluidos generados rocinética de la invención (por ej 76-03) demostraron tener una utilidad si ncial en combinación con la budesonida ir de manera significativa el cont ófilos para el asma alérgica humana ( ófilos" y conteo total) en un modelo d ocido por la técnica. ietros Respiratorios: Las Figuras 111 A-C y 112 A-C demuest o observado de los fluidos de prueba en tidal y Penh según se midió inmediatame horas después del reto con ovoalbúmina. P Como es evidente a partir de las figuras li ratamiento con budesonida solo (tanto en ug/kg) ° en combinación con cualquiera os de prueba falló para afectar de ficativa a los valores Penh inmediat és del reto. Sin embargo, 6 horas despu los animales tratados con RDC1676-03 sol nación con budesonida 500 ó 750 traron una disminución significativa e es de Penh. Aunque la magnitud de esta cal en 24 horas después del reto, la tenden ecto sinérgico de la budesonida y el flui servó aún en este punto del tiempo.

El volumen tidal es el volumen de aire tom ulmones durante la inspiración desde la po de la expiración, que sale de los pu nación con budesonida (ambos 500 y 750 ron un efecto aún más pronunciado e iones del volumen tidal en este punt o . Seis horas después del reto, el RDC1 fue suficiente para provocar un ficativo en el volumen tidal y la adic onida al régimen de tratamiento solo nación, no tuvo ningún efecto adicional ien tidal. Cualquier efecto observado en ros puntos de tiempo, sin embargo, se per 24 horas .

En conjunto, estos datos demuestran que RD lo o en combinación con budesonida propo ivio significativo a la inflamación de la ratorias como se evidenció por el aumen en tidal y la disminución en los valores d iones fisiológicas.

Las Figuras 113A y 113B demuestran claramen 0 (o RDC1676-03) solo bajó el nivel en san ina de manera significativa tanto a las después del reto. La budesonida 75 én redujo los niveles de eotaxina en san dos puntos de tiempo, mientras q onida 250 pg/kg solo tuvo un efecto nota unto de tiempo posterior. Sin embarg ión de prueba de Rev 60 solo mostró efeet ignificativamente más potentes (en la red os niveles de eotaxina sanguínea) que ntraciones de budesonida, en ambos pun o . La eotaxina es un quimiocina C-C p ida para acumular en y atraer los eosinóf ulmones de los asmáticos y otros tejidos trado una producción aumentada de eota en el pulmón del asmático, así co lecimiento de un vínculo entre estas moléc hiperreactividad de las vías respira sado en Eotaxin and the attractio ophils to the asthmatic lung, Dolores M Co hy J Williams, Respiratory Research 2001, Es de particular interés señalar que ios concuerdan completamente con los resu s Figuras 109 y 110 en el conteo de eosinóf n conjunto, estos resultados indican fuert el tratamiento con RDC1676-03 solo nación con budesonida puede reducir de ficativa el conteo de eosinófilos totales ngre 24 horas después del reto con ovoalb se correlaciona con un descenso significat muestran tales efectos en el Interferón g , respectivamente. Es evidente a partir de as que el Rev 60 solo o el Rev 60 en combi la budesonida 250 pg/kg f icat ivamente el nivel en sangre de IL-10 les retados hasta 6 horas después del ret modo, el Rev 60 solo o en combinaci onida 250 o 750 pg/kg aumentó s igni f i ca t i niveles sanguíneos de IFN gamma a las 6 és del reto. El aumento de estas cito nflamatorias puede explicar bien, al me , los efectos beneficiosos observados etros respiratorios fisiológicos observa después del reto. El efecto en estas cito e mayor que el observado a las 24 horas d eto (datos no mostrados) . senta un estado de activación alizado. Es también un potente activad olismo oxidat vo específico ¦ para óf i los .

Como se muestra en la Figura 114, el tnico de Rantes se redujo de manera signif S 6 horas, pero no a las 24 horas despu en los animales tratados con Rev 60 sol nación con budesonida 250 o 750 pg/kg. U existe un efecto sinérgico claro de bud 9/kg y Rev 60, que se nota en este conju . Una tendencia descendente similar se un número de otras citoquinas pro - inf lamat como KC o IL8, MCP3 , ILlb, GCSF, TGFb , as se observó tanto a las 6 ó 24 horas despu en los animales tratados con Rev60 solo tilidad sustancial para la modulación de las ticas intercelulares, que incluyen aquellas relac la administración pulmonar y sistémica sponibilidad de los polipéptidos , incluye éptido ejemplo de calcitonina de salmón (sCT) .

Ejemplo general. La calcitonina de salmón (sCT) do de 32 aminoácidos con un peso molecular d n. La administración pulmonar de la calcitonin iado ampliamente en los sistemas modelos (por e istemas de modelo de roedores, los sistemas de mo etc) para investigar los métodos para mej istración de fármacos pulmonares (por ejemp istración intratraqueal de fármacos) . De acue tos ejemplares particulares, el fluido tera sado con el difusor de la invención tiene u cial para modular (por ejemplo, el mejoramien eos . En ciertos aspectos, se usó un disp aspersor Penn Century diseñado para la adminis traqueal del fármaco a roedores, permitie istración satisfactoria al pulmón, pero, como se técnica, con relativa baja deposición alveo ta en una escasa biodisponibilidad sistém dos. De acuerdo con aspectos particulares, este ocido por la técnica se usó para confirmar que el éutico procesado con el difusor de la invenció ad terapéutica sustancial para modular (por ejem miento) las uniones herméticas intercel endo aquellas relacionadas con la adminis ar y sistémica y la biodisponibilidad éptidos .

Grupos de animales y la dosificación. En tos, las ratas son asignadas a uno de los 3 grup rupción hipo-osmótica de las células epitelia s modalidades, sCT se reconstituye separadament ión base y la solución base enriquecida de la i soluciones respectivas se administraron a los ies respectivos por instilación intratraqueal de utos (10 pg sCT en 200 µ? por animal) . nsayos. En aspectos particulares, las muest (por ejemplo, 200 ) se tomaron y se colocaron e iertos con EDTA antes de la administración y en 30, 60, 120 y 240 minutos a continuación icación. El plasma se recolecta y almacena a que se analice por sCT usando un ELISA.

Para la generación de datos con arreglos de t, se aisló tejido pulmonar y se sumergió ivo TRI (TR118, Molecular Research Center, Inc. n, se añadió aproximadamente 1 mi de reactivo TR gas (Rev) de la presente descripción) dismi ga sistémica y la biodisponibilidad de la s do con los aspectos particulares, la entrega si nuida resulta de la adsorción disminuida de la s blemente como resultado de la mejora de las ticas pulmonares. El RDC1676-00 representa una s a estéril procesada de acuerdo con los métodos de ímente pero sin oxigenación. demás, de acuerdo con aspectos particulare inas relacionadas con la unión hermética se re dentemente en el tejido pulmonar. Las Figura ran la sobreregulacion de las moléculas de adhe JAM 2 y 3, GJA1 , 3, 4 y 5 (adherinas de unión dina) , claudinas (por ejemplo, CLDN 3, 5, 7, 8, (proteína 1 de unión hermética), respectivamente. ran los datos obtenidos a partir de los querati epucio humano expuestos a RDC1676-01 (solución il procesada a través del presente disp trado con oxígeno adicional añadido; el fluido lectrocinética enriquecido con gas (Rev) de la ipción) que muestra la sobreregulación de NOS1 in, N0S3. Por el contrario, los datos obtenidos a ejido pulmonar de rata (tejido del ejemplo ado "Expresión de citoquinas") muestran la subre S2 y 3, Nostrin y N0S1AP con Rev (Figuras 93, 94) Ejemplo 20 efectos electrocinét icos localizados (vol rlente) se demostraron usando un dispositi ezcla especial ente di señado que comprende elementos aislados del rotor y el estator) spositivo de mezcla 100 se puede configura el material de salida 102 por la ínte ica compleja y no lineal del fluido y del ial 110 y el segundo material 120 c lencia dinámica compleja, que proporci a compleja que favorece, adem s, los rocinét icos . De acuerdo con as culares, el resultado de estos e rocinéticos se puede presentar dentr ial de salida 102 como las redistribucio y las reacciones redox, que incluyen la s electrones solubi 1 i z ados que se esta o del material de salida. demás de los efectos generales de la dobl ionados con la superficie en la cáma a, los solicitantes ar umentaron, además, e construyó un dispositivo de prueba similar sitivos de mezcla de la invención descritos te, que comprende un rotor de acero inoxidable dos elementos 18 (dispuestos a 180 grados) , r 14 con un elemento único 16 colocado p le rotacionalmente a los elementos del rotor 1 tos del estator 16. De manera significativ tos del rotor y del estator, en cada caso, os de los respectivos cuerpos del rotor y el a 95) . El dispositivo se elaboró para proporcio ción rotor : estator consistente 20 de 0.020 p cumplir con los dispositivos descritos en otro l esente. Existe un contacto de rotación (no mostr tremo del eje del rotor (no mostrado) que prop rayectoria eléctrica para la superficie del rotor lementos aislados del rotor. Del mismo modo, el ja de la alta impedancia de entrada de ficadores. Las salidas del OpAmp se alimentan das de un osciloscopio (por ejemplo, un or til con pilas ejecuta una aplicación de oseiloseo co Scope 3000™) .

Para eliminar la introducción de cualquier tal (por ejemplo, la radiación RF de señales brica y de la línea de alimentación de 60 Hz) ruebas del dispositivo, un compartimento RF- bl lla de cobre fina, (approx. tres por cuatro por se construyó para proporcionar una caja de configuración proporcionó una relación señal ente durante las pruebas experimentales, ya es de interf rencia de ruido de 60 Hz CA (por e roximadamente dos voltios) y RF de alta frecue por debajo de las señales de interés. El us os : El circuito OpAmp se usó para medir el poten je entre los contactos que conectan la sup ior del estator 12 y el elemento aislado del esta i arreglo del circuito en particular, sólo se m cial. La velocidad de rotación del dispositivo r entre aproximadamente 700 a aproximadamente 2 los datos medidos de la Figura 96 con el disp nando a aproximadamente 1800 rpm) .

Para evitar cualquier generación de voltaje a una bomba o una bomba peristáltica, el f a través del dispositivo se realizó con ni e o aire o argón que actúan sobre el fluido s conectados al dispositivo. No hubo contribu je perceptible del mecanismo de flujo, y típicam se usó como la fuerza de bombeo para proporci zaron experimentos separados para ambas direccio n conjunto adicional de experimentos rotacion zaron después con la misma velocidad de flu , y con el rotor del dispositivo rotando a idades de aproximadamente 300 a aproximadamen Para cualquier experimento dado, la tasa de flu idad rotacional se mantuvieron constantes. ados : on respecto a los experimentos no rotacionales, fluyendo a través del dispositivo en cu ión, sin ninguna rotación del rotor, sólo e apenas perceptible (por ejemplo, de 1 a 2 mV) rpo del estator y el elemento aislado. on respecto a los experimentos rotacionales, ncía a la Figura 96, se puede observar que los o, tales pulsos de voltaje se observaron imentos rotacionales, siempre y cuando la cavida uido del dispositivo se llenó con fluido. De acue tos particulares, y sin estar atados por el mec mpresión rápida y violenta (por ejemplo, la cavit eleración y la desaceleración del flujo de fluido laciones de los elementos alineados rotació itivos crearon los respectivos pulsos de voltaje e corresponden exactamente con el período rota se proporciona, al menos en parte, para el ado por electrocinética de acuerdo con . la p ción. Los experimentos adicionales revelaron tud (forma de pico y altura) de los pulsos de tó con el aumento de la velocidad de ro ándose inicialmente a aproximadamente 250 a 300 dispositivo de prueba particular, y aumentando h os picos de voltaje localizados están presen a la corriente de flujo localizada (por ejemp s de corriente) en las inmediaciones de los ele rcionando, al menos en parte, el fluido gener rocinética de acuerdo con la presente invenci lo, sin estar atados por el mecanismo, que prop acciones electroquímicas como se discutió en otr te documento) . e acuerdo con los aspectos adicionales, y si s por el mecanismo, tales efectos localizad lo, los pulsos de voltaje y corriente y/o pu ente) contribuyen a la generación de los dos por electrocinética en combinación con l relacionada con la superficie más general y los . corriente de flujo que se discuten en otra p documento bajo el título de " Efecto de doble d Información general. Los datos de itantes descritos en cualquier otra parte nte soportan la utilidad y el mecanismo fluidos generados por elec t roe iné t ica ción median la regulación o modulación ducción de la señal intracelular p ación de al menos una de las me ares, el potenc ial / conduc tanc ia de me ínas de membrana (por ejemplo, recepto ana, tales como receptores acoplados a pro os sistemas de señalización celular depen lcio, y las uniones intercelulares (por ej es herméticas, uniones comunicantes, ente y desmosomas) . Específicamente, al us dad de sistemas y ensayos de pruebas biol ocidos por la técnica, los datos d el receptor B2 bradiquinina ; la expresi tor TSLP, la conductancia de la célula Además, los efectos de la toxina de la d 0) que se muestran en la presente indican eo beta (receptor beta-2 adrenérgico) , eo GPCR y/o el bloqueo de los canales a la actividad de los fluidos generad rocinética, por ejemplo, la función Treg y Tomados en conjunto, estos efectos indic fluidos generados por elec t roe iné t ica ción no sólo se distinguen fundament alme fluidos de la técnica anterior, sino que rcionan nuevas composiciones y u ncial como las que actualmente se describe ndican en la presente .

En este ejemplo. Los solicitantes en este e losa (que se muestra a continuación con rbono numerados para la referencia) es un trópico y se conoce, por ejemplo, pa cción contra la desnaturalización d inas, la desecación de la membran lidad del organismo al congelarse, etc itantes teniendo en cuenta los datos re iormente, razonaron que la ? ,? - tr a proporcionar una herramienta eficaz tigar más las propiedades/estructura d os generados por elec t roe iné t ica d ción. Los solicitantes razonaron qu os químicos relacionados con al RMN os sobre los anchos de línea se podría evaluar las propiedades de los fluidos ción. Para estos estudios, un fluido ge iales y métodos : Preparación de soluciones. El fosfato ( ) y D-(+)- dihidrato de trehalosa (T953 nido de metal reducido) y 99.9% d niendo 1% de DSS se adquirieron de Sig ción salina normal" es 0.9% de cloruro de 6 (4.5 a 7.0) , de Hospira. Las soluciones , a - trehalosa se prepararon por la disoluc g de trehalosa en 965 µ? de solución l y 35 mide tampón de fosfato salino ( n fosfato en 0.9% NaCl preparado de tal uando 35 µ? de este tampón se añaden a 1.0 mplitud de barrido de 14000 Hz o 7900 Hz untos de datos 64K o 128K y escáner 128 FID resultantes se llenaron de cero dos v ocesaron con un factor de ampliación de lí z. La temperatura se controló usando la temperatura variable de Bruker Biospi ión externa con deuterio se empleó col D20 + 1% DSS + una traza de acetona en u serto coaxial RMN , comprado a Wilmad . Los N se procesaron usando el software iNMR v. strelab Research. 1ados : Espectros de la muestra. Las Figuras 9 ran las expansiones de seis espectros R puestos entre ellos en la parte super al fuera de campo) en comparación co iones de control.

Mediciones de ancho de línea. La Tabla nuación muestra los anchos de líneas de os para los seis carbonos de la trehalos carbono de la acetona a tres tempe entes para la solución salina Solas (un ado por elec trocinét ica de la invención ras de solución salina normal correspon sentan las soluciones de contro rocinéticas a cada temperatura. En iones Solas, los anchos de linea f icat ivamente diferentes de los anchos de solución de control para cada átomo de c nchos de líneas menores en las soluciones peraturas inferiores, probablemente resul uido de ueba emp . ados K) C-l C-2 C-3 C-4 C-5 C-6 las (277) §74 8.22 873 8.15 87~3 11. rma 1 69.9) 15.4 16.1 15.8 14.9 15.4 21. las (293) 9.52 8.7 9.28 9 8.9 11.2 rma 1 92.9) 10.33 10.23 10.23 9.93 10.23 13. i las (310) 2.28 2.03 2.18 2.19 2 2.5 rma 1 309.9) 1.17 0.99 1.1 1.02 0.97 1.4 0 Hz se restó de todos los valores de an ona en el espectro de solución salina espondiente . r en las mediciones de ancho de línea es ro de ±0.30 Hz Los anchos de línea RMN 13C para ? D-tre al y solución salina normal, normalizados e con respecto a la línea de acetona, se m camente en la figura 97A. En conclusió de RMN para los anchos de línea RMN 13C losa Solas y solución salina normal indic olución de la invención tiene una propied a la caída del soluto.

Tomado en conjunto con las actividades biol idas anteriormente y en otras partes d entó, estos efectos del ancho de línea dican que los fluidos generados r electrocinética , los fluidos de la inven erados por electrocinética produj eron perf iferenciales de voltametría de onda cuadrad traron propiedades electroquímicas únicas polarografía de redisolucion) Información general. Los datos de itantes descritos en cualquier parte d iento soportan la utilidad y mecanismo don os generados por electrocinética de ción median la regulación o la modulación ducción intracelular de la señal p ación de al menos una de las me ares, el potencia/conductancia de la me roteínas de membrana (por ejemplo, recepto ana, tales como receptores acoplados ína G) , sistemas de señalización c as T reguladoras; los niveles de citoqu ínas (por ejemplo, IL-10, GITR, Granzy pStatB, y Foxp3 , triptasa, las pro ionadas con la unión hermética, el re MMP9, etc.) ; la unión del ligando bradiq el receptor B2 bradiquinina; la expresi tor TSLP, conductancia de la célula entera s, los efectos de la toxina de la (DT39 estran en la presente indican que el b (receptor beta-2 adrenérgi co ) , y/o el b y/o el bloqueo de los canales de Ca afe idad de los fluidos generados rocinética, por ejemplo, la función Treg y omados en conjunto, estos efectos indic fluidos generados por electrocinét ica ción no sólo se distinguen fundamentalme ción. La voltametría se usa con frecuenci minar el potencial redox o medir las veloc icas y constantes de los fluidos terística común de todos los imétricos es que involucran la aplicación cial a un electrodo y el flujo de cor tante se controla a través de una roquimica. El potencial aplicado produ o en la concentración de una e roactiva en la superficie del ele iendo u oxidando electroquímicamente íes.

Específicamente, los solicitantes útil os vol tamé trieos (es decir, voltametría d ada y polarografía de redisolución) terizar adicionalmente las difer terizar, adic ionalmente , las propiedades s fluidos generados por e lee trociné tica c ion . os solicitantes además razonaron qu encias en la corriente a voltajes especí roducción de diferentes concentraciones esto redox electroactivo, la creación de estos redox, y la posesión de propi roquímicas únicas, se podrían usar para e acterizar las propiedades de los fluidos ción. Para estos estudios, se usó un oxigenado generado por elec trocinét ica (Re fluido generado por elec t roe inét ic oxigenado de la invención (Solas) . iales y métodos : ateriales y preparación de la solució ografía de redisolución, no se rolitos adicionales.

Voltametría de onda cuadrada. Como se iormente, la voltametría se usó para déte tencial redox o medir las velocidades ci nstantes en los fluidos. En el experime metría de onda cuadrada, un potencial de imadamente -1.75 V se aplicó a un electrod oló la corriente de flujo resultante a tra lda electroquímica.

Polarografía de redisolución . El méto ografía de redisolución es similar al mét metría de onda cuadrada. Sin embargo, no rolito como se indicó anteriormente y t ucra una pre-etapa. En la pre-etap rodo estático de gotas de mercurio se tados : Voltametría de onda cuadrada. Como es evide igura 98, los perfiles de corriente a -0. -1.02V y -1.36V difieren entre los di es probados. De acuerdo con as culares, las diferencias en la co ada a diversos voltajes específicos indi una de una concentración diferente esto redox electroactivo y/o un compuesto roactivo nuevo o único, y/o un cambio capa eléctrica con limitación de la di odea la gota de mercurio.

Polarografía de redisolución. La Figu ra que los fluidos generados por electroci invención, Revera y Solas, muestran un es con picos pronunciados a -0.9 voltios , estos resultados muestran propi roquímicas únicas de los fluidos Solas y ados por electrocinét ica de la invenci ración con el fluido de control de s a no generado por electrocinét ica . De aspectos adicionales, los resultados indi ncía o la generación de al meno ntración diferente de un compuesto roactivo y un compuesto r dox electr y/o único en fluidos generados rocinética frente a los no generado rocinét ica . demás de los diversos datos biol ntados en otras partes de este documento, de voltametría diferencial, en part o se consideran junto con los e s composiciones y utilidad sustancial cot actualmente se describen y reivindican nte .

Ejemplo 23 anál ís is de fij ación de parche conducido e las epiteliales bronquiales (BEC) perfundid el fluido generado por e lee t roeinét ica de nción (RNS-60) reveló que la expos icion al ito en una disminución en la conductancia ula entera, y la estimulación con un "cócte st i ulacion cAMP que aumentó dramát icamente ductancia de la célula entera, y también au arte sensible a los fármacos de la conduct a célula entera, que fue diez veces mayor observada en condiciones básales) En este ejemplo, los estudios de fijac dientes de calcio.

Información general . Como se muestra ío 14 anterior (por ejemplo, la Figura 7 ra la estabilización de la uni quinina al receptor B2 usando el biosen ferometría de bicapa, detección ampliada octeto (RED) ( f orteBio™ ) ) , la unión quinina al receptor B2 fue dependiente ntración, y la afinidad de unión aumentó o generado por e 1 ec troc in t i ca (por ej fluido generado por electrocinét ica enri gas) de la presente descripción, en comp la solución salina normal. Además, co ra en el Ejemplo 15 en el contexto as T - reguladoras estimuladas con el ma culado (PM) , los datos mostraron una dismi nvención resultó en una producción lige nuida o mantenida de IL-10 respecto oles de solución salina y medios (sin PM modo, en el contexto de los perfiles d ica (AA) de células mononuc leare s de érica (PBMC) estimuladas con el m culado (PM) , los datos mostraron q ición a los fluidos de la presente desc + Rev" ) resultaron en niveles de t f i cat ivamente inferiores similares a aquel controles de solución salina y medios. efectos de la toxina diftérica (DT390) ran en el Ejemplo 15 y Figuras 76 - 83, i l bloqueo beta, el bloqueo GPCR y el bloq anales de Ca afecta la actividad de los f ados por electrociné t ica en la función 10) , TJP1 (proteína 1 de unión herm ctivamente.

Los estudios de fijación de parche se realizar tigar adicionalmente y confirmar dichas utilidade jales y métodos; La línea epitelial bronquial Calu-3 se usó ios de fijación de parche. Las liales bronquiales Calu-3 (ATCC # HTB- varon en una mezcla 1:1 de medio F12 de DMEM que se suplemento con FBS al objetos de vidrio hasta el momento d imentos . En resumen, un dispositivo de fi oltaje de célula entera se usó para med os sobre las células Calu-3 expuestas os generados por electrocinét ica de la in ejemplo, RNS-60 solución salina normal t uial Calu-3 en una solución de baño que consiste NaCl, 5 mM de KC1, 1.2 mM de CaC12, 0.8 mM de M de HEPES (pH ajustado a 7.4 con N-metil D-Gluc orrientes básales se midieron después de que perfundido en las células . ás concretamente, las pipetas de parches se sac o de borosilicato (Garner Glass Co, Cía ornia) con un tirador vertical Narishige PB-7 S y después se pulieron al fuego a una resistenci 2 Mohms con un micro- fragua Narishige MF-9 (Na ational USA, East Meadow, NY) . Las pipetas se 1 na solución intracelular que contenía (en mM) : 10 de NaCl, 5 de EGTA, 10 de Hepes, el pH se a n NMDG (N-metil-D-glucamina) .

El cultivo de las células Calu-3 se colocó en una ontenía la siguiente solución extracelular (en m IV, y se estimuló con etapas de voltaje entre ± ms/etapa) . Después de recopilar las corrientes a entera en la condición de control, la misma cé dió a través del baño con el fluido de pru endía los mismos solutos extracelulares y pH, o control anterior, y las corrientes de célula en iferentes potenciales básales se registraron S protocolos .

Los datos electrofisiológicos se adquirieron ficador Axon Patch 200B, se filtraron a paso lent Hz y se digitalizaron con 1400A Digidata ments, Union City, CA) . El software pCLAMP 10. uments) se usó para adquirir y analizar los dat iones corriente (I) -a-voltaje ductancia de la célula entera) se obtuvieron por alor de la corriente real a aproximadamente 400 a) y el IBMX (Sigma) se usaron ele una solución D nía 10 mM de forskolina y 200 mM de solución madr tados de la fijación de parche: La. Figura 100 muestra las corrientes de la a bajo condiciones básales (sin cAMP) , colo escalonado de potencial basal desde -100 mV . Los trazos representativos s dio de n = 12 células. Los trazos erda son el control, seguido por los tra lula entera, mientras se perfunde la soluc a (centro) . Los trazos de la derecha esto delta obtenido por la resta de los dio de la prueba, de aquellos baj ciones de control. La conductancia de la a, obtenida a partir de las rela ente - - vol taj e es muy lineal en a entera en condiciones de hiperpolari zac i La Figura 101 muestra las corrientes de la a bajo condiciones básales, con un pro onado de potencial basal -40 mV a ±100 p s representativos son el promedio de n as. Los trazos de la izquierda son el c do por los trazos de la célula entera, mi erfunde la' solución de prueba (centro) s de la derecha son el compuesto delta o a resta de los valores promedio de la prue íos bajo las condiciones de contro ctancia de la célula entera, obtenida a as relaciones corriente - a - vol ta e es muy mbas condiciones, y refleja un cambio mo e significativo, en la conductancia, de condiciones de prueba. La contribución onado de potencial basal -60 mV a ±100 p s representativos son el promedio de n as. Los trazos de la izquierda son el c do por los trazos de la célula entera, mi erfunde la solución de prueba (centro) s de la derecha son el compuesto delta o a resta de los valores promedio de la prue íos bajo las condiciones de contro ctancia de la célula entera, obtenida a as relaciones corriente - a- ol taj e es muy mbas condiciones, y refleja un cambio m e significativo, en la conductancia, de condiciones de prueba. La contribución ctancia de la célula entera, es deci nente inhibido por el fármaco tambi l, y el potencial de inversión es cercano erfunde la solución de prueba (centro) S de la derecha son el compuesto delta o a resta de los valores promedio de la prue íos bajo las condiciones de contro ctancia de la célula entera, obtenida a as relaciones corriente - a- ol taj e es muy mbas condiciones, y refleja un cambio m e significativo, en la conductancia, de condiciones de prueba. La contribución ctancia de la célula entera, es deci nente inhibido por el fármaco tambi l, y el potencial de inversión es cercano Los valores son comparativamente simil íos obtenidos con el protocolo cero mV .

La Figura 104 muestra las corrientes de la a ba o condiciones estimuladas or s valores promedio de la prueba en el fár de aquellos bajo las condiciones de c cAMP) . Los trazos en la parte superi íos obtenidos del protocolo de voltaje y el de abajo, a -40 mV . La conductancia a entera, obtenida a partir de las rela ente - a- voltaj e es muy lineal bajo en tod ciones, y refleja un cambio en la conduct o a las condiciones de prueba.

La Figura 105 muestra las corrientes de la a bajo las condiciones estimuladas por idas con protocolos escalonados de ciales básales a ±100 mV . Los sentativos son el promedio de n=5 célula s de la izquierda son el control, segui trazos de la célula entera des ués a entera, obtenida a partir de las rel ente-a- voltaj e es muy lineal bajo en tod ciones, y refleja un cambio en la conduct o a las condiciones de prueba.

La Figura 106 muestra el efecto del po en las corrientes activadas con cAMP . El fármaco (fluidos de la invención generad rocinética; RNS-60; solución salina da por e 1 ec troe iné t i ca que comprende 60 no disuelto) en la conductancia de la a se observó en diferentes protocolos de -40, -60, -120 mV potenciales básales ciones básales, la corriente de célula bles al fármaco fue idéntica en todo ciales básales (contribución insensib je, panel superior izquierdo) . En Resumen del ejemplo. De acuerdo con los as culares, por lo tanto, los datos indic e un efecto moderado pero constante del f fluidos generados por e 1 e c troe iné t i ca ción; RNS-60; solución salina normal trata rocinética que comprende 60 ppm ele lto) en condiciones "básales. Para mejo o del fármaco en la conductancia de la a, los experimentos se llevaron a cabo t la perfusión del fármaco después ulación con un "cóctel" estimulante cA tó dramáticamente la conductancia de la a. Curiosamente, este protocolo también rte sensible a los fármacos de la conduc célula entera, que fue diez veces superi ctancia, lo que además sugiere, al meno ibución del fármaco a la inhibición de ot ejemplo, el canal de iones, canales de c nados por voltaje, etc.) .

En aspectos particulares, y sin estar atad ecanismo, los datos de los solicitant stentes con los fluidos generados rocinética de la invención (por ejemplo, ión salina normal tratada por electroc comprende 60 ppm de oxigeno disuelto) cen un cambio ya sea en un canal (s) , eado o recuperado de la membrana plasmátic Tomados en conjunto con otros datos d itantes (por ejemplo, los datos de los ej abajo) , los aspectos particulares de la p ción proporcionan composiciones y método 316 ctancia, lo que además sugiere, al meno ibución del fármaco a la inhibición de ot ejemplo, el canal de iones, canales de ca nados por voltaje, etc.) . n aspectos particulares, y sin estar atad ecanismo, los datos de los solicitante stentes con los fluidos generados rocinética de la invención (por ejemplo, R ión salina normal tratada por electroci comprende 60 pni de oxígeno disuelto) cen un cambio ya sea en un canal (s) , eado o recuperado de la membrana plasmátic omados en conjunto con otros datos d itantes (por ejemplo, los datos de los ej abajo) , los aspectos particulares de la pr ción proporcionan composiciones y método 317 tir cambios conf ormacionales y/o electroq as estructuras membranosas (por ejempl ana, y/o proteínas de membrana, los recept componentes) que incluyen pero no se lim y/o proteínas-G. De acuerdo con as onales, estos efectos modulan la ex a, y pueden persistir en dependencia ío, de la vida media de los comp iduales del mensajero, etc.

Será apreciado que los compuestos de la combina n administrar: (1) simultáneamente por la combina ompuestos en una co- formulación, o (2) por alte ecir, la entrega de compuestos de manera s ncial, en . paralelo o simultánea en formul céuticas por separado. En las terapias altérnat do en la administración del segundo, y opcionalm 318 ntraciones del pico plasmático de cada uno dientes activos. Un régimen de una pildora una mediante la administración de una co-for nada puede ser factible para algunos pacien n de enfermedades inflamatorias neurodegenerati do con ciertas modalidades, las concent áticas pico efectivas de los ingredientes activo nación podrán estar en el intervalo de aproxim a 100 µ?. Las concentraciones plasmáticas pico eden alcanzar para una formulación y un rég icación prescrito para un paciente en part én se entenderá que los fluidos de la invenci to de glatiramer, el interferón-beta, la mitox el natalizumab o los derivados fisiológi onales de cualquiera de éstos, si se p tánea o secuencialmente, se pueden admi 319 de dosificación unitaria. Una formulac icación unitaria conveniente contiene los ingr os en cualquier cantidad desde 1 mg a 1 g ca por ejemplo, no se limita a, 10 mg a 300 os sinérgicos del fluido de la invención en com el acetato de glatiramer, el interferón-be antrona, y/o el natalizumab se pueden llevar a mplia relación, por ejemplo 1:50 a 50:1 (fluid ción; acetato de glatiramer, interfer antrona, y/o natalizumab) . En una modalidad la estar en el intervalo de aproximadamente 1:10 ra modalidad, la relación peso/peso del fluid ción con respecto al acetato de glatiramer, int mitoxantrona, y/o natalizumab en una forma co-f sificación combinada, tales como una pildora, t imido o cápsula será aproximadamente 1, es de 320 dades de los compuestos de dichas combinaci mplan dentro del alcance de la invención.

Una forma de dosis unitaria puede comprender, ade o de la invención y acetato de glatiramer, int mitoxantrona, y/o natalizumab, o los de ógicamente funcionales de éstos, y un céuticamente aceptable.

Será apreciado por aquellos con conocimiento ca que la cantidad de los ingredientes activos naciones de la invención que se requieren para el ratamiento, variará de acuerdo a una divers res que incluyen, la naturaleza de la afecció da y la edad y estado del paciente, y será final rio del médico o del profesional de la salud que ciente. Los factores a considerar incluyen la istración y la naturaleza de la formulación, 321 Ístrar en dos o tres administraciones. De acue as modalidades, la combinación de tres partes del invención y el acetato de glatiramer, interfer antrona, y/o natalizumab se puede administ uier orden.

Ejemplo 24 análisis de la fi j acion de parche conduci as células Calu-3 perfundidas con los flui rados por electrocinét ica de la invención ( las) revelaron que (i) la expos ición al RN s resultó en un aumento en la conductancia la entera, (ii) que la exposición de las c RNS-60 produjo un aumento en la conductanci ineal, evidente a los 15 minutos del tiempo ubación, y (iii)que la exposición de las cé RNS-60 produjo un efecto de la solución sa 322 imentos .

El resumen de los datos de la primera se imentos indica que la conductancia de la a (relación corr iente - a - vol t aj e ) obtenida ión salina Solas es muy lineal, para l os de incubación (15 min, 2 horas) , y para protocolos de voltaje. Sin embargo, es e una incubación más larga (2 horas) con tó la conductancia de la célula ente ición de las células al RNS-60 produ to en la conductancia no lineal, como se s corrientes delta (resta Rev-Sol) , que s nte a los 15 minutos del tiempo de incu fecto del RNS-60 en esta corriente no arece, y es, en cambio, muy lineal a l del tiempo de incubación. La contribución 323 l de la célula entera, aunque sensib je, se presenta en ambos protocolos de v dica un efecto de la solución salina RNS anales permeables de calcio.

Primera serie de experimentos (aumento de ductancia; y activación de una conductanci lineal regulada por voltaje) os para la primera serie de experimentos : Ver EJEMPLO 23 para los métodos genera ión de parche. En la primera ser imentos siguiente, los estudios de fijac e se llevaron a cabo para confirmar, adem dad de los fluidos salinos generados rocinética de la invención (RNS-60 y Solas ar las corrientes de la célula entera, qu as Calu-3 en condiciones básales, con prot 324 iones salinas Solas o RNS-60. Los idos se expresan como la media ± SEM co lula entera para 5 a 9 células. tados : Las Figuras 117 A-C muestran los resulta serie de experimentos de fijación de parc aron los efectos del fluido generad rocinética (por ejemplo, RNS-60 y Solas) idad de la membrana de células epiteliale idad del canal iónico en dos puntos de in (paneles de la izquierda) y 2 horas ( a derecha)) y en los diferentes protoco je (A, etapa a etapa desde cero mV ; B, e desde -60 mV, y C, etapa a etapa desd Los resultados indican que el RNS-60 (cí s) tiene un efecto más grande en la conduc 325 colos de voltaje ("corrientes Delta" onado desde cero mV ; B, escalonado desde - escalonado desde -120 mV) y los dos pun o (15 minutos (círculos abiertos) y 2 ulos llenos)) . Estos datos indicaron que de tiempo de 15 minutos con RNS-60, exi nente no lineal dependiente de voltaje qu te en el, punto de tiempo de 2 horas. l igual que en experimentos anteriore n como referencia los datos con solución al" que dieron una conductividad indepen tiempo y muy consistente. Los pre tados se obtuvieron por comparación d s, ya sea con Solas o solución salina RNS an que la exposición de las células Calu-ión salina RNS-60 en condiciones básale 326 la estimulación con el "cóctel" cAM nte, el tiempo de incubación de dos horas onductancia lineal superior para el RNS - 6 íón salina Solas, y en este caso, la so a RNS-60 duplicó la conductancia de la a en comparación con el Solas solo, ncia indica que al menos dos contribucione ctancia de la célula entera se afectan ión salina RNS-60, es decir, la activación ctancia no-lineal regulada por voltaje, ctancia lineal, que es más evidente en t argo de incubación. nda serie de experimentos (efecto en los ca de calcio permeables) os para la segunda serie de experimentos : 327 colos escalonados, desde un potencial basa -120 mV.

La conductancia de las célula entera en cad obtuvo de las relaciones corriente - a- idas a partir de las células incubadas min con cualquier solución salina, minar si existe una contribución de los c alcio permeables a la conductancia de la a, y si esta parte de la conductancia a entera se afecta por la incubació ión salina RNS-60, las células se parchea ión salina normal después del perío ación (conlleva una solución externa co mientras que la solución interna contien La solución salina externa se reemplazó d na solución donde el NaCl, se reemplazó po 328 serie de experimentos de fijación de parc aron los efectos del fluido generad rocinética (por ejemplo, Solas (paneles A 0 (paneles C y D ) ) sobre la polaridad ana celular epitelial y la actividad del o usando diferentes soluciones de sales e iferentes protocolos de voltaje (los panel stran el escalonado desde cero mV, mientr aneles B y D muestran el escalonado desd En estos experimentos se usó un punto de 5 minutos. Para Solas (paneles A y tados indican que: 1) usando CsCl (sí ados) en lugar de NaCl como la solución e tó la conductancia de la célula entera rtamiento lineal cuando se comparó c ol (símbolos de diamantes) y 2) CaCl2 ta 329 olos triángulos) aumentó la conductancia a entera de una manera no-lineal.

Las Figuras 120 A-C muestran los gráfic tan de la resta de los datos de corrie (mostrados en la Figura 119) de 20 mM de olos diamantes) y los datos de corriente aCl2 (símbolos cuadrados) a dos protoco e (paneles A y C, escalonados desde cero , escalonados desde -120 mV) para Solas (p B) y RNS-60 (paneles C y D) . Los resu an que tanto las soluciones Solas y arón una conductancia no lineal de la a inducida por calcio. El efecto fue may 0 (indicando una capacidad de respues ) , y con RNS-60 se incrementó sólo e ntraciones de calcio más altas. Ademá 330 te 15 minutos con cualquier solución ce un efecto distinto en la conductancia a entera, lo que es más evidente con RNS o el calcio externo aumenta, y además indi olución salina RNS-60 aumenta un compone l dependiente de calcio de la conductancia a entera .

La evidencia acumulada sugiere la activaci lución salina Revalesio de los canales ió ace contribuciones diferentes a la conduc de la célula.

Tomado en conjunto con otros datos d itantes (por ejemplo, los datos d itantes de otros ejemplos de trabajo) tos particulares de la presente inv rcionan composiciones y métodos para modu 331 dientes del calcio) , que comprende el soluciones generadas por elec trocinét ica ción, para impartir cambios conformac ional roquímicos en las estructuras membranosa ío, la membrana, y/o proteínas de membran tores u otros componentes de membrana) yen pero no se limitan a GPCR y/o proteí cuerdo con aspectos adicionales, estos an la expresión génica, y pueden persis dencia, por ejemplo, de la vida media nentes individuales del mensajero, etc.

Ejemplo 25 as medieiones de Microscopía de Fuerza Ató FM) del fluido elec trocinét ico de la inven NS-60) indicó la presencia y/o la formació oburbuj as hidrofóbicas de superficie que f 332 íales y métodos : Estudios AFM . Los estudios de AFM se rea na Instalación de Usuario de Nanotec ) reconocida por la técnica. Para los. e una aguja muy pequeña y sensible se sume gota de agua colocada sobre una sup fóbica. Después, la aguja se explora so fase agua/ superf ic ie a tasas de 1 mm2 e os. La aguja registra cualquier imperfecc geometría de la superficie, y e ientemente sensible para registrar la pr queñas burbujas.

El sustrato de silicio en el que se coloca de agua se preparó usando tricloro (1H, 1 rf luorooc t i 1 ) s i laño ) , y la superficie res 333 ende 60 ??p? de oxígeno preparado p ición convencional a un cabezal de o rizado (es decir, fluido oxigenado íente presurizado) . Cada solución de la amponeó inicialmente por la adición d ña cantidad de solución tampón fosfato 7) , y aproximadamente de 60 a 70 µ? d ión tampón de prueba (aproximadamente 22 ó sobre una placa de sílice previ rad .

I tados : Bajo la AFM, las gotas de RNS-60 mostrar ibución de aproximadamente 20 nanobu fóbicas en un área de 1 mm2 , con dimensio nm de ancho y - 1.5 nm de altura o más pe co FM 334 distribución de las nanoburbujas hidrofóbi ficie entre las soluciones de prueba RN 0, donde las nanoburbujas están y almente presentes en, y/o se forman den luidos de prueba durante la medición de la Como se discutió en otras partes de nento, de acuerdo con aspectos particulares nte invención, los fluidos alterado rocinética de la invención comprende ión acuosa iónica de nanoestr ilizadas por carga que contienen o ncialmente con un diámetro promedio de men imadamente 100 nanómetros y establ gurados en el fluido iónico acuoso e dad suficiente para proporcionar, al ent cto con una célula viva por el fluid 335 ita en la presente. De acuerdo con as culares, por lo tanto, mientras qu imentos de AFM en este eemplo de t tan, en base al tamaño y la distribución ción de burbujas hidrofóbicas , que los rocinéticos de la invención (por ejemplo son esencialmente distintos de los flui ol no elec troc iné ticos , las bu fóbicas son probablemente distintas d adas de las nanoes truc turas que con no estabilizado por carga de la inve itas en detalle en otras partes de ento. En cualquier caso, en relación c os elec trocinéticos de la invención, los f ontrol oxigenados en recipiente presuriza enden las nanoe s t ruturas que contienen o 336 jemplo, gastritis, úlcera péptica, úlcera duoden ermedad de reflujo gastroesofágico (GERD) , esofag inofílica, reflujo ácido, enfermedad inflamatori estino(por ejemplo, enfermedad de Crohn) , síndrom stino irritable, infección (incluyendo infección i,) y/o trauma del tracto gastrointestinal, infl del tracto gastrointestinal, colitis ulcerativa) Terapia de rehidratación oral (ORT) . El trat ipal de la gastroenteritis en niños y adultos ia de rehidratación oral (ORT) para reponer la a en las deposiciones. e acuerdo con aspectos particulares, los dos por electrocinética de la invención tienen u cial para el tratamiento de trastornos intest ífreamente , un fluido acuoso alterado 337 jeto. En aspectos particulares/ un promedio de otella (por ejemplo, 500 mi) por día se ad ente. De acuerdo con aspectos adiciónal istran cantidades mayores, por ejemplo 1 lit s, 2 litros o más. Preferiblemente, el bal olito y la rehidratación se controla en el te la rehidratación. De acuerdo con onales, los síntomas de trastorno intestinal yen, pero no se limitan a, dolor, náusea, ea, ¦ disentería, constipación, hinchazón, do ta, irritación respiratoria o de la laringe, ir ríngea, pérdida de peso o ganancia de peso, y si uerdo con ciertos aspectos, la eficacia del trat termina monitorando el balance electrolític ratación en los sujetos, y la eliminación mas de trastorno intestinal en el sujeto. 338 sujetos se monitorearon como se describió anter especto a las ORT. Como será apreciado por una onocimientos ordinarios en la técnica, los com roliticos (por ejemplo, concentración de la s o salino acuoso alterado por electrocinética, ju osificación y la tasa de administración, ógicamente adecuadas para la v a de administrac aspectos adicionales, la administración pue tánea, intraperitoneal , por alimentación naso (por ejemplo, rehidratación a través de un tubo de administración intrarectal, o cualquier vía ocida en la técnica para la administración efec uido de rehidratación.

De acuerdo con aspectos particulares, los tr tinales se pueden causar por gastritis, úlcera a duodenal, enfermedad de reflujo gastroes 339 rial, viral, fúngico o parásito) . Los or ríanos que causan trastornos intestinales incluye e limitan a Salmonella, Shigella, Staphyl lobacter jejuni, Clostridium, Escherichia nía, y Vijbrio. Los organismos virales que ornos intestinales incluyen, pero no se lim irus, norovirus, adenovirus y astrovirus . Los or ciosos fúngicos incluyen, pero no se limitan a organismos parasíticos que provocan tr tinales incluyen, pero no se limitan a Giardia oejba histolytica.

Como se describió en este ejemplo, los tra tinales, que incluyen pero no se limitan a los de iormente se pueden tratar mediante la adminis ada de los fluidos alterados por electrocinétic ción . 340 m y 60 ppm de oxígeno disuelto, respectivamen idades particulares, los fluidos alterado rocinética no son superoxigenados (por ejemplo, , los que comprenden 10 ppm (por imadamente niveles ambientales de oxígeno disuel os aspectos, la salinidad, esterilidad, pH, etc., os alterados por electrocinética de la inven lece en el momento de la producción electrocinét o, y los fluidos estériles se administran por ada. Alternativamente, al menos uno de sal ilidad, pH, etc., de los fluidos se ajusta adecu ejemplo, usando solución salina estéril o di ados) para que sea fisiológicamente compatible e administración . ntes de la administración del íblemente, los diluentes y/o soluciones sali siciones tampones usadas para ajustar al menos 341 Modelo ex- vivo . En aspectos particulare o de rata ex-vivo reconocido en la técni para monitorear la eficacia de los f éuticos alterados por elect roe inét ica ción en la modulación del pH del efluen gástrico así como en la morfología y el rotonina intracelular en el epitelio g str El ensayo basado en ratas mide la secrec gástrico detectada por las mediciones de nte del lumen después de la exposición agos aislados de rata, arterialmente perf a formulación de los fluidos terapé ados por elec trocinética de la invenci oxígeno disuelto o con alto oxígeno di 0 y RDW60, los que comprenden 10 ppm y 60 no disuelto, respectivamente) por hasta 7 342 logía epitelial del estómago y de la act a serotonina intracelular a continuación ición a los fluidos terapéuticos alterad rocinética de la invención.

Métodos: En resumen, ratas macho Sprague- 200-300 g se heparinizaron antes d esiadas por una inyección intraveno nina (35 mg/kg) / xilazina (5 mg/kg) . El es bera a través de una incisión en la línea vasos ramificados vasos ramificados, tale arterias esplénica, pancreática, duode icas comunes, se ligan. Después de la secc vasos, el estómago se aisla y se coloca de órganos por perfusión (ver, por ejemplo ros, Japón J Pharmacol 52: 160-163; 199 sión arterial se alcanzó a través de una 343 ante del estómago de la rata se realiza omba peristáltica (Harvard Apparatus) a a arteria (¾ 1.5ml/min) , La ligadura pre vasos ramificados permite que la solución arteria gástrica izquierda.

La perfusión luminal se realiza insertan a en el orificio cardíaco orífice del estó fluente perfundido se recoge a través d a colocada en el píloro , La región de pil f ic ient emente apretada para permitir una t de *lral/min. El lumen se perfunde prime solución de equilibrio antes de expone ol o a la solución del artículo de dos alterados elec troc iné t icamente d ción) a temperatura ambiente. Se rec otas de 10 mi del efluente del lumen gá 344 ión del ensayo. Un cóctel del inhibi asa (Sigma Aldrich producto #P8340) se a muestras, y después las alícuotas se cong ± 3°C hasta el análisis para los nive uina. El pH se mide en la muestra resulta ícuota, usando un dispositivo Corning 440) . El estómago se perfunde a través de la cá con la solución de Krebs durante el quilibrio, antes de cambiar a la soluc suplementada con 12.5yg/ml de histami litro (1 mi) de efluente vascular perfundi a través de la vena portal se recoge en u tapón de rosca de 2 mi después del equili tivación por histamina así como cada 30 te las 2 primeras horas a continuación ición del lumen gástrico a las sol 345 ndida con una solución de formalina tampon y las porciones del estómago (fondo, cu o) se fijan por al menos 24 horas antes idas en parafina, cortadas y montadas p on H&E, o tratadas por inmunohi s toquímica onina (DAB) . e acuerdo con aspectos particulares, los f éuticos alterados por elect rociné t ica ción tienen utilidad sustancial para modu por ejemplo, mantener un pH fisiológic icioso y/o disminuir el pH en relaci ol) del efluente del lumen gástrico, as mantener y/o restablecer la morfología es de citoquina, y los niveles de sero celular fisiológicamente beneficiosos l io gástrico . 346 e acuerdo con aspectos particulares, un o presenta una historia de dos años de r . Tres meses después de la aparición rnas del reflujo ácido, el pacient osticado con la enfermedad mixta del tivo (MCTD) , e inicia la administración O see™ diariamente. El sujeto también pued otro agente, incluyendo pero sin limit lnflamX ( Me tagenics ) , el cual se caracteri mezcla única de vitaminas, mine ácidos, biof lavonoides , y los fitonutr a, curcuminoide s , y quercetina para cionalmenteel metabolismo saludable d s grasos esenciales.

Inicialmente, el sujeto está libre de sí do Prilosec™, siempre y cuando se evit 347 za la administración oral (ingestió as) de un fluido acuoso alterado rocinétic de la invención adecuado, que ivamente el reflujo ácido y los sínto de estómago del sujeto. Además, de acuer tos adicionales, con el cese de la ingesti o de la invención, el sujeto experime o beneficioso sostenido que puede durar ha antes de que los síntomas de ardor de es eanuden. La reanudación de la ingesti o acuoso alterado por elec troc inét ica ción, adecuado, trata efectivamente otra v rnas de ardor de estómago. De acuerd tos adicionales, los síntomas del reflujo s sujetos que no tienen MCTD (por ejempl os con reflujo ácido debido a cualquier 348 Sin estar atados por el mecanismo, los rece acetilcolina muscar í nicos (receptores M izan en muchos lugares en el cuerpo ío, músculos lisos de los vasos sang nes, células parietales del estómago, gl ares, etc) . Los receptores M3 , como el r rínico Mi, son receptores acoplados a la p usan las proteínas G de la clase Gq, que dentemente la fosfolipasa C y por lo ta sfato de inositol y calcio intracelular co e señalización.

De acuerdo con aspectos adicionales, los f ados por electrociné t ica de la invención jemplo, para afectar el receptor M3 musc l pulmón, y el mismo tipo de receptor a parietal del estómago está involucrado c 349 ñalización mediada por la proteína G (incl ia de la bradiquinina) , que también es par ma secretor de ácido. De acuerdo con as onales, los fluidos generados rocinética de la invención actúan para ombas de intercambio de cationes de la me ionadas para liberar ácido en el estómag EJEMPLOS de trabajo 23 y 24, aquí relaci los estudios de fijación de parche que m eficacia de los fluidos alterados rocinética de la invención para modul ctividad de la membrana de la célula enter De acuerdo con aspectos adicionales, los f éuticos alterados por electrocinét ica ción tienen utilidad sustancial pa miento del reflujo ácido (por ejempl 350 cial de membrana celular y conductivid ana celular. En ciertas modalidades, los f ados por elec trocinét ica son superoxig ejemplo, RNS-20, RNS-40 y RNS-60, IO enden 20 ppm , 40 ppm y 60 ppm de o lto, respectivamente) . En modal culares, los fluidos alterados rocinética no son superoxigenados (por ej o RNS-10, los que comprenden 10 ppm, y ntales de oxígeno disuelto, respectivament os aspectos, la salinidad, esterilidad de los fluidos alterados por electrociné t nvención se establece en el momento cción elec troc inét ica del fluido, y los iles se administran por una vía ade n t ivamente , al menos uno de sali 351 os son también fluidos elect roe inét icos , ro modo, compatibles.

Ejemplo 29 V fluidos terapéuticos alterados por electrocinétic nción tienen utilidad sustancial para el tratamie a inflamación, incluyendo afecciones y enfermeda amatorias del tracto digestivo (por ejemplo, enfe matoria del intestino (por ejemplo, enfermedad de y síndrome del intestino irritable) ) Enfermedad de Crohn, La enfermedad de ién conocida como, colitis granulomat itis regional) es una enfermedad infla puede afectar cualquier parte del ointestinal desde la boca hasta el 352 e que ataca el tracto gastrointestinal y mación en el tracto gastrointestinal ío, un tipo de enfermedad inf lamator i tino) . Se piensa que la enfermedad de Cro nfermedad autoinmune, con inflamación est una respuesta de citoquina Thl hiperactiv go, la evidencia reciente demuestra que 1 mayor importancia en la enfermedad. Tamb so que la enfermedad de Crohn, al me , resulta de una .inmunidad innata dete ejemplo, secreción de citoquina deteriora rnacrófagos ) que conduce a una res matoria inducida microbiana sost cularmente en el colon donde la carga bact pecialmente alta.

Síndrome del intestino irritable (IBS 353 zar después de una infección (pos t - inf ec I) o un evento de vida estresante.

Significativamente no existe cura para e existen tratamientos que intentan alivi rnas (por ejemplo, ajustes dietéticos, medi tervenc iones sicológicas) . Las personas c n comúnmente reflujo gas t roe s of gi co . La a del IBS es desconocida, aunque probabl en anormalidades en la flora intestinal ma inmune. Las formas específicas de res e que se han implicado en los síntomas yen la enfermedad celíaca y otras afeccio ia alimentaria. La enfermedad celíaca (t da "celíaca") es una respuesta alérgica la inmunoglobul ina tipo A- (IgA) a la p ina en los granos de gluten, la cual exhi 354 mplicado en el IBS.

Significativamente, hasta la revelación itantes, no se conocía fármaco o cura qui la enfermedad de Crohn o el síndrom tino irritable (IBS) , y las opcion miento se restringían a controlar los s ejemplo, controlar la inflamación) , mante ión y prevenir la recaída.

De acuerdo con aspectos particulares, y c ibió ampliamente en la presente en los ej rabajo, los fluidos terapéuticos alterad rocinética de la invención tienen ut ncial para el tratamiento de la infla yendo las afecciones y enfer matorias del tracto digestivo (por ej medad inflamatoria del intestino (por ej 355 ana celular. En ciertas modalidades, los f ados por elec troc inét ica están superoxig ejemplo, RNS-20, RNS-40 y RNS-60, lo enden 20 ??t?, 40 p m y 60 ppm de o lto, respectivamente) . . En modal culares, los fluidos alterados rocinética no son superoxigenados (por ej o RNS-10, los que comprenden 10 ppm, y n ntales de oxigeno disuelto, respectivament os aspectos, la salinidad, esterilidad de los fluidos alterados por elec trociné t nvención se establece en el momento cción electrocinética del fluido, y los iles se administran por una v a ade nat ivamen t e , al menos uno de salí ilidad, pH, etc. , de los fluidos se 356 ro modo, compatibles.

Ejemplo 30 fluidos terapéuticos alterados por electrocinétic nción tienen utilidad sustancial para el tratamie esofaguitis eosinofílica (EE)) e acuerdo con aspectos particulares, los éuticos alterados por electrocinética ción tienen utilidad sustancial pa miento de esofaguitis eosinofílica.

La esofaguitis eosinofílica (EE) es una af matoria alérgica del esófago, y e medad crónica asociada con un conteo elev ófilos en el esófago (manifestado po tración de eosinófilos en el epitelio esc 357 cer múltiples anillos en el esófago ("e gado" ) . Un alto número de eosinófil van en el examen microscópico de las muest biopsia. Consistente con los as matorios de EE, algunos pacientes EE suf iones de la piel tales como psoria titis seborreica o afecciones respiratoria o rinitis alérgica. as estrategias de tratamiento incluy icación de la dieta (evaluación alér ia médica, y dilatación mecánica del esófa ia médica comienza con medicación de inhi cido, e inhibidores de la bomba de proton nudo la primera línea de terapia médic ntes con EE, sin embargo, pueden tener sí stentes incluso con la terapia de inhibici 358 esta alérgica (por ejemplo, ant ihis tamina la loratidina, corticoest roides orales c predni solona ) también se usan. Finalmen ación mecánica se puede considerar en los s de EE que ha progresado a estrechez es tenosis grave, pero debe tenerse cuidado rar el esófago por esa dilatación mecánica. De acuerdo con aspectos particulares, y c ibió ampliamente en la presente en los ej rabajo, los fluidos terapéuticos alterad rocinética de la invención tienen ut ncial para el tratamiento de la infla yendo las afecciones y enfer matorias del tracto digestivo. demás, como se describe en otras partes d entó (ver, por ejemplo, el EJEMPLO de trab 359 , los fluidos terapéuticos alterado rocinética de la invención tienen ut ncial para el tratamiento de laesofa of í lica .

En aspectos particulares, los fluidos alt e lec troc inét ica de la invención adminis enden nanos truc turas que contienen o ilizadas por carga en una cantidad suf i proporcionar la modulación de al menos icial de membrana celular y conductivid ana celular. En ciertas modalidades, los f ados por elec trocinética están superoxig ejemplo, RNS-20, RNS-40 y RNS-60, lo enden 20 pptn, 40 ppm y 60 ppm de o lto, respectivamente) . En modal culares, los fluidos alterados 360 nat ivamente , al menos uno de salí ilidad, pH, etc., de los fluidos se adamente (por ejemplo, usando solución il o diluentes adecuados) para qu lógicamente compatible con la ví istración antes de la administración del £ riblemente, los diluentes y/o soluciones s composiciones tampones usadas para ajus uno de salinidad, esterilidad, pH, etc., os son también fluidos elect roe inét icos , ro modo, compatibles. poración como referencia odas las patentes de los Estados Unidos ante caciones de solicitud de patente de los Estados itudes de patentes de los Estados Unidos, p jeras, solicitudes de patentes extranje 361 el contrario, la invención incluye modific onales, cambios, reorganizaciones, sustitu nativas, opciones de diseño, y modalidades e las personas con conocimiento ordinario en la t partarse del espíritu y el alcance de esta inv lo definido por las siguientes reivindicació modo, se pretende que las siguientes reivindicaci reten como que abarcan todas las modific onales, los cambios, reorganizaciones, sustit nativas, opciones de diseño, y modalidades.

Las modalidades descritas anteriormente represen entes componentes contenidos dentro de, o relac otros componentes diferentes. Se debe enten arquitecturas representadas son simplemente eje e, de hecho, muchas otras arquitecturas se entar lo rándose la misma funcionalidad. En un 362 entes cualesquiera así asociados también se pue "operativamente conectados", u "operati ados", entre sí para lograr la funcionalidad dese Mientras las modalidades particulares nte invención se han demostrado y descrito para aquellos con conocimiento en la t en base a las enseñanzas en la presen n hacer cambios y modificaciones sin ap sta invención y sus aspectos más amplios , las reivindicaciones adjuntas abarcan alcance todos los cambios y modif icacione tuvieran dentro del verdadero espíritu y sta invención. Además, se debe entender ción está solamente definida por ndicaciones adjuntas. Se entenderá por a o de la técnica que, en general, los té 363 uye pero no se limita a", etc) . Se en s por aquellos dentro de la técnica que ta un número específico de una declarac ndicación introducida, tal intento rado explícitamente en la reivindicación, cia de tal declaración no estará presen to. Por ejemplo, como ayuda para la compr siguientes reivindicaciones adjuntas ner el uso de las frases introductori uno" y "uno o más" para introduci aciones en la reivindicación. Sin embar e tales frases no debe ser interpretado co ca que la introducción de una declarac ndicación por el artículo indeterminado limita cualquier reivindicación partícul ene tal declaración de reivindi 364 introducir declaraciones de reivindic s, incluso si un número especifico d ración de reivindicación introducid citamente declarado, las personas imiento en la técnica reconocerán q ración deberá interpretarse típicament significa al menos el número declarad ío, la declaración estricta de raciones", sin otros modificadores, tipie fica al menos dos declaraciones, o dos raciones) . En consecuencia, la invención n ada, excepto por las reivindicaciones adju

Claims

365 NOVEDAD DE LA INVENCION ndo descrito el presente invento, se considera c ad y, por lo tanto, se reclama como priori ido en las siguientes: REIVINDICACIONES 1. Un método para tratar una enfermedad o tr tivo, o al menos un síntoma de éste, que co istrar a un sujeto necesitado una C éuticamente efectiva de un fluido acuoso alter rocinética, que comprende una solución acuosa ió tructuras que contienen oxígeno estabilizadas por ienen sustancialmente un diámetro promedio de me imadamente 100 nanómetros y configuradas establem uido acuoso iónico en una cantidad suficien rcionar, al contacto de una célula viva con el 366 3. El método de la reivindicación 1, do taje de moléculas de oxígeno disuelto presente o como las nanoestructuras que contienen ilizadas por carga es un porcentaje seleccion que consiste en más que: 0.01%, 0.1%, 1%, 5% 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60% y 65 80%, 85%, 90 % y 95%. 4. El método de la reivindicación 1, donde el t no disuelto está sustancialmente presente structuras que contienen oxígeno estabilizad . 5. El método de la reivindicación 1, don structuras que contienen oxígeno estabilizadas po cialmente tienen un diámetro promedio de menos o seleccionado del grupo que consiste en: 90 nm, , 60 nm, 50 nm, 40 nm , 30 nm, 20 nm, 10 nm, y me 367 9. El método de la reivindicación 1, do ación del fluido acuoso alterado por electro ende la exposición del fluido a los rocinéticos localizados; inducidos por hidrodinám 10. El método de la reivindicación 9, do ición a los efectos electrocinéticos loc ende la exposición a al menos uno de pulsos de v s de corriente. 11. El método de la reivindicación 9, do ición del fluido a los efectos electroci izados, inducidos por hidrodinámica compre ición del fluido a los elementos estructura en el efecto electrocinético de un dispositiv generar el fluido. 12. El método de la reivindicación 1, do medad o trastorno digestivo, o el al menos un sí 368 ridium, Escherichia coli, Yersinia, Vibrio, ia, Entamoeba histolytica, rotavirus, no virus y astrovirus, inflamación en el ointestinal , enfermedad mixta del tejido c ) , y colitis ulcerativa. 13. El método de la reivindicación 1, do medad o trastorno digestivo, o el al menos un sí comprende al menos uno seleccionado del Stente de reflujo ácido incluyendo la enferm jo gastroesof gico (GERD) , esofaguitis eosinofi mación en el tracto gastrointestinal. 14. El método de la reivindicación 1, do medad o trastorno digestivo, o al menos un sín comprende al menos uno de reflujo ácido que inc medad de reflujo gastroesofágico (GERD) , esof ofílica . 369 mina, incluyendo ranitidina, famotidina, cimeti idina; antiácidos, incluyendo hidróxido de al xido de magnesio, carbonato de aluminio, carbó SÍO, carbonato de calcio, bicarbonato de talcita, y magaldrato-simeticona; proci yendo itoprida, domperidona, metoclo omicina, prucaloprida, y cisaprida; iarreicos, incluyendo subsalicito de amida, y difenocilato ; corticosteroides , inc cortisona, acetato de hidrocortisona, acet sona, tixocortol pivalato, predni prednisolona, y prednisona; antiespasmodicos inc lomina, atropina, metonitrato de atropina, mebe olamina, y pirenzepina; inmunomodu1adores inc oprina, mercaptopurina, y metotrexato; antibi endo amoxicilina (penicilinas) , claritr 370 stente de inhibidores de la bomba de p eadores del receptor H2 de histamina, anti néticoss, antidiarreicos , anticoliné costeroides (inhalados o de otro modo) , corticost micos, glucocorticoides , antiespas omoduládores , antibióticos; biológicos, nflamatorios , laxantes, y combinaciones de éstos. 18. El método de la reivindicación 15, donde un agente terapéutico adicional se selecciona de stente de albuterol, budesonida, esomeprazol (Ne azol (Prilosec) , y derivados activos de éstos. 19. El método de la reivindicación 15, donde un agente terapéutico adicional se selecciona de stente de antagonistas de TSLP, antagonistas de inaciones de éstos. 20. El método de la reivindicación 19, do 3 7 1 22 . El método de la reivindicación 1 , donde el o alterado por electrocinética promueve una dism izada en el sitio de administración de al me ina seleccionada del grupo que consiste en: IL TNF- al f a , y TNF -beta . 23 . El método de la reivindicación 1 , que co S una inhibición o reducción sinérgica o no sinér flamación por el tratamiento simultáneo o adyuva iduo con otro agente anti-inflamatorio . 24 . El método de la reivindicación 1 , do ación de al menos uno de potencial de membrana ce ctividad de membrana celular comprende; modulació ctura o función de la membrana celular por la alt a conformación, actividad de unión al ligando, idad catalítica de una proteína o componente aso brana . 372 26. El método de la reivindicación 25, do tor transmembrana comprende un receptor acop 27. El método de la reivindicación 26, do tor acoplado a la proteína G (GPCR) interactúa idad a de la proteína G. 28. El método de la reivindicación 27, do idad a de la proteína G comprende al men cionado del grupo que consiste en Gas, Gai, Gaq y G 29. El método de la reivindicación 28, donde a ubunidad de la proteína G es Gaq. 30. El método de la reivindicación 1, do ación de al menos uno de potencial de membrana ce ctividad de membrana celular comprende la modula ransducción de la señal intracelular que compr ación de un sistema o vía del mensajero 373 33. El método de la reivindicación 1, do ación de al menos uno de potencial de membrana ce ctividad de membrana celular comprende la modula ansducción de la señal intracelular asociada una afección o síntoma seleccionado del stente de gastritis, úlcera péptica, úlcera d medad de reflujo gastroesofágico (GERD) , reflujo guitis eosinofílica, enfermedad inflamatori tino incluyendo la enfermedad de Crohn, síndr tino irritable, infección o trauma del ointestinal , incluyendo la infección por H. ella, Shigella, Staphylococcus, Campyl ridium, Escherichia coli, Yersinia, Vibrio, a, Entamoeba histolytica , rotavirus, no irus y astrovirus, inflamación en el ointestinal , enfermedad mixta del tejido co 374 35. El método de la reivindicación 34, donde l celular comprende al menos una seleccionada de onsiste en uniones herméticas, uniones comuni adherente y desmosomas. 36. El método de la reivindicación 34, donde la es celulares comprenden al menos uno seleccion consistente de epitelio esofágico, epitelio lio del intestino grueso incluyendo el epitelio es del ciego y colon de éste, epitelio del in do, incluyendo el epitelio o las regiones del O, e íleo de éste. 37. El método de la reivindicación 1, donde el o alterado por electrocinética se oxigena, y d o en el fluido está presente en una cantidad 8 ppm, al menos 15 ppm, al menos 25 ppm, al m al menos 40 ppm, al menos 50 ppm, o al menos 60 375 rocinética o las especies de oxígeno cargada ntes en una cantidad de . al menos 0.01 ppm, al me al menos 0.5 ppm, al menos 1 ppm, al menos 3 5 ppm, al menos 7 ppm, al menos 10 ppm, al m al menos 20 ppm, o al menos 40 ppm. 40. El método de la reivindicación 38, donde el O oxigenado alterado por electrocinética compre rones solvatados estabilizados por el oxígeno mol 41. El método de la reivindicación 1, do istración es por vía oral, sublingual, teral, rectal, tópica, o inyección. 42. El método de la reivindicación 41, donde la istración es transdémica, intravaginal , intr Ótica, intranasal inhalación, inyección o inser íales o dispositivos implantables . 43. El método de la reivindicación 41, donde la 376 ar al menos uno de una contribución dependi je lineal o no lineal de la conductancia de la a . 46. Un método para formular un agente ter ado para usar en el tratamiento de un tras ión gástrico, digestivo o del esófago que se car alestar intestinal, o un síntoma de dicho tras ión gástrico, digestivo o- del esófago, que co er un agente terapéutico adecuado para usar miento de un trastorno o afección gástrico, dige sófago que se caracteriza por malestar intestina ma de dicho trastorno o afección gástrico, dige sófago, de un sujeto; y combinar el agente ter una cantidad de un fluido acuoso altera rocinética que comprende una solución acuosa ió tructuras que contienen oxígeno estabilizadas po 377 sófago que se caracteriza por malestar intestina a de dicho trastorno o afección gástrico, dige sofago, es de este modo proporcionada. 47. Una composición farmacéutica, que compre e terapéutico adecuado para usar en el tratamient orno o afección gástrico, digestivo o del e terizado por malestar intestinal, o un síntoma d orno o afección gástrico, digestivo o del esófago o; y una cantidad de un fluido acuoso alter rocinética que comprende una solución acuosa ió tructuras que contienen oxígeno estabilizadas po ienen sustancialmente un diámetro promedio de me imadamente 100 nanómetros y configuradas establer uido acuoso iónico en una cantidad suficien rcionar, al contacto de una célula viva con el fl ación de al menos uno de potencial de membrana ce 378 RESUMEN DE LA INVENCION Se proporcionan fluidos alterados por electroc ejemplo, fluidos electrocinéticos enriquecidos ejemplo, enriquecidos con oxígeno) que compren ión acuosa iónica de nanoestructuras que c no estabilizadas por carga en una cantidad suf proporcionar, al contacto con una célula, la mo l menos uno de potencial de membrana cel ctividad de membrana celular, y las compos éuticas y los métodos para su uso en el tratami ornos digestivos o al menos un síntoma de ésto siciones de los fluidos alterados por electrocin étodos incluyen los fluidos acuosos iónicos al lectrocinética opcionalmente en combinación co es terapéuticos. Los aspectos particulares propo 379 idades incluyen las rutas particulares de adminis s formulaciones de los fluidos alterad rocinética y las composiciones terapéuticas.