ME02021B - Supstituisane soli 2,3-dihidroimidazo[1,2-c]hinazolina - Google Patents

Description

Opis

Ovaj pronalazak se odnosi na:

· Dihidrohloridnu so 2-amino-N-[7-metoksi-8-(3-morfolin-4-ilpropoksi)-2,3-dihidroimidazo-[1,2-c]hinazolin-5-il]pirimidin-5-karboksamida sa formulom (II):

· ili na njen tautomer, solvat ili hidrat,

· (koji je nadalje označen kao "so iz ovoga pronalaska" ili "dihidrohloridna so");

· na postupke za pripremu pomenute soli iz ovoga pronalaska;

· na pomenutu so iz ovoga pronalaska za tretman i/ili profilaksu neke bolesti;

· na upotrebu pomenute soli iz ovoga pronalaska za pripremu leka za tretman i/ili profilaksu neke bolesti, a posebno hiper-proliferativnog poremećaja i/ili poremećaja angiogeneze, još preciznije za tretman ili profilaksu raka, posebno raka pluća, još preciznije nemikrocelularnog karcinoma pluća, kolorektalnog raka, melanoma, raka pankreasa, karcinoma hepatocita, ili raka dojke;

· na farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata pomenutu so iz ovoga pronalaska; i

· na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži pomenutu so iz ovoga pronalaska zajedno sa jednim ili više dodatnih farmaceutskih agenasa.

Pozadina pronalaska

Jedinjenje sa formulom (I):

(koje se nadalje označava kao "jedinjenje sa formulom (I)" ili "slobodna baza"), je neki agens protiv raka sa novim mehanizmom delovanja, koje inhibira fosfatidilinozitol-3-kinaze iz klase I (PI3Ks). Ova klasa kinaza je atraktivna meta zbog toga šta PI3Ks igraju centralnu ulogu u prenosu ćelijskih signala sa površinskih receptora pri čemu pomenuti signali nose informacije o preživljenju i proliferaciji. Jedinjenje sa formulom (I) ima široki raspon delovanja protiv tumora više histoloških tipova, u uslovima in vitro i in vivo.

Pomenuto jedinjenje sa formulom (I) može da se sintetizuje u skladu sa postupcima koje su opisani u internacionalnoj patentnoj aplikaciji PCT/EP2003/010377, koja je objavljena kao dokument WO 04/029055 A1 8 aprila 2004, a opis se nalazi na str. 26 et seq.

Štaviše, pomenuto jedinjenje sa formulom (I) je objavljeno u internacionalnoj patentnoj aplikaciji PCT/US2007/024985, koja je objavljena kao dokument WO 2008/070150 A1 12 juna 2008, (ovaj dokument je ovde uključen u celosti kao referenca), kao jedinjenje iz Primera 13: 2-amino-N-[7-metoksi-8-(3-morfolin-4-ilpropoksi)-2,3-dihidroimidazo[1,2-c]hinazolin-5-il]pirimidin-5-karboksamid. Nadalje, pomenuto jedinjenje sa formulom (I) je, u dokumentu WO 2008/070150, opisano na str. 9 et seq., i može da se sintetizuje u skladu sa postupcima koje su tamo opisani na str. 42 et seq. Podaci bioloških testova za pomenuto jedinjenje sa formulom (I) su tamo prikazani na str. 101 do 107.

Pomenuto jedinjenje sa formulom (I) može da postoji u jednoj ili više tautomernih forma: tautomeri, ponekad označeni kao tautomeri sa protonskim-pomakom, su dva ili više jedinjenja koja su povezana migracijom atoma vodonika šta je praćeno migracijom jedne ili više jednostrukih veza i jedne ili više susednih dvostrukih veza.

Jedinjenje sa formulom (I) može na primer da postoji u tautomernoj formi (Ia), tautomernoj formi (Ib), ili tautomernoj formi (Ic), ili može da postoji kao smeša bilo koje od pomenutih forma, kao šta je opisano ispod. Ovaj pronalazak obuhvata ste takve tautomerne forme.

Pomenuto jedinjenje sa formulom (I) može da postoji kao solvat: solvat za potrebe ovoga pronalaska je kompleks rastvarača i jedinjenja sa formulom (I) u čvrstom stanju. Primeri solvata uključuju, ali bez ograničenja, komplekse jedinjenja iz ovoga pronalaska sa etanolom ili metanolom.

Pomenuto jedinjenje sa formulom (I) može da postoji kao hidrat: Hidrati su specifične forme solvata u kojima je rastvarač voda.

Tehnički problem koji treba da se reši:

Opšte uzeto, kod određenog farmaceutski aktivnog jedinjenja poželjne su farmaceutski prihvatljive forme pomenutog farmaceutski aktivnog jedinjenja, koje povećavaju farmaceutsku efikasnost pomenutog farmaceutski aktivnog jedinjenja, na primer poboljšavaju fizičko-hemijske karakteristike, poput hemijske stabilnosti, fizičke stabilnosti, rastvorljivosti in vivo, poboljšavaju apsorpciju farmaceutski aktivnog jedinjenja in vivo, itd. Dodatno, neka lekovita supstancija idealno se nalazi u nekoj stabilnoj kristalnoj formi koja može da se proizvede na pouzdan način. Amorfne ili kristalne forme nižeg reda (na primer mezomorfne forme) su manje atraktivne jer postoji rizik kasnije promene forme i promene fizičkih karakteristika.

Međutim, pomenuto jedinjenje sa formulom (I) (koje je slobodna baza) može jedino da se pripremu kao mezomorfna forma koja je stabilna kao čvrsta forma, ali nestabilna na 70° C u kiselom vodenom rastvoru i postoji malopre pomenuti rizik kasnije promene forme.

Nastanak kristalitne solne forme pomenute slobodne baze (I) može da reši malopre pomenuti problem ako su karakteristike pomenute forme bolje od karakteristika pomenute slobodne baze (I). U našim naporima da pripremimo kristalitne solne forme od (I) mi smo naučili da priprema kristalitnih solnih forma od (I) nije lako izvediva kao šta može da se očekuje kada se govori o jedinjenju koje poseduje bazne centre.

Štaviše, jedinjenje sa formulom (I) ima veoma malu rastvorljivost u vodi i u većini organskih rastvarača. Sa dva veoma bazna centra (Tabela I, vide infra), rastvorljivost se snažno poboljšava u kiselom medijumu. Kao posledica, prečišćavanje i konačno procesiranje jedinjenja sa formulom (I) postaje zahtevan zadatak.

Sledeće strukture pokazuju jedinjenje sa formulom (I), za koje su izračunate vrednosti pKa prikazane u zagradama.

JEDINJENJE SA FORMULOM (I)

Tabela I: pKa vrednosti jedinjenja sa formulom (I):

funkci. grupa/pKa vrednosti

eksperimentalno

izračunato

pKa (Imidazolinoamindin)

-

10,1

pKa (Morfolin)

-

7,43 - 7,5

pKa (Aminopirimidin)

-

1,99 - 2,11

Preciznije, ako se uzme u obzir jedinstvena hemijska struktura jedinjenja sa formulom (I), vide supra, fizičke karakteristike jedinjenja sa formulom (I) nisu izazov samo u odnosu na hemijski proces, na rukovanje sa lekovitom supstancijom i na proizvodnju lekovitog produkta, već dodatno donose značajan izazov šta se tiče razvoja stabilnog i pouzdanog HPLC postupka.

Bilo bi poželjno da se dobije farmaceutski prihvatljiva i kristalitna forma jedinjenja sa formulom (I) koja dozvoljava pouzdano prečišćavanje, na primer uz pomoć kristalizovanja, kada se uzmu u obzir složeni, specifični tehnički problemi i veoma malu rastvorljivost u vodi, i koja je jednostavna za rukovanje (na primer, koja je prirodna čvrsta materija).

Rešenje tehničkog problema:

Brojni pokušaji su načinjeni sa ciljem da se pripreme kristalitne soli jedinjenja sa formulom (I). Nastanak kristalitnih solnih forma se pokazao složenim procesom, jer se generalno nije postigao nikakav napredak mada su u nekoliko navrata bile dobivene forme od lepljivog materijala koje su bile slične gumi.

Neočekivano je bilo otkriveno, a to predstavlja osnovu ovoga pronalaska, da dihidrohloridna so jedinjenja sa formulom (I), iz ovoga pronalaska (za koju u prijašnjem stanju tehnike ne postoji specifično razotkrivanje, koliko je to poznato podnositeljima ove aplikacije), poseduje tehnički napredne karakteristike, kao šta se vidi inter alia u Eksperimentalnom delu i u Zaključcima iz ovoga teksta.

Ovaj pronalazak se tako odnosi na:

· Dihidrohloridnu so 2-amino-N-[7-metoksi-8-(3-morfolin-4-ilpropoksi)-2,3-dihidroimidazo-[1,2-c]hinazolin-5-il]pirimidin-5-karboksamida sa formulom (II):

· ili na njen tautomer, solvat ili hidrat,

· (koja je ovde označena kao "so iz ovoga pronalaska" ili kao "dihidrohloridna so");

· na postupke za pripremu pomenute soli iz ovoga pronalaska;

· na pomenutu so iz ovoga pronalaska za tretman i/ili profilaksu neke bolesti;

· na upotrebu pomenute soli iz ovoga pronalaska za pripremu leka za tretman i/ili profilaksu neke bolesti, posebno hiper-proliferativnog poremećaja i/ili poremećaja angiogeneze, preciznije za tretman ili profilaksu raka, a posebno nemikrocelularnog karcinoma pluća, kolorektalnog raka, melanoma, raka pankreasa, karcinoma hepatocita ili raka dojke;

· na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži pomenutu so iz ovoga pronalaska; i

· na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži pomenutu so iz ovoga pronalaska zajedno sa jednim ili više dodatnih farmaceutskih agenasa.

Postupci za pripremu soli iz ovoga pronalaska

Ovaj pronalazak takođe se odnosi na postupak za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II) iz ovoga pronalaska, šta uključuje dodavanje hlorovodonične kiseline u jedinjenje sa formulom (I), ili, obrnuto, dodavanje jedinjenja sa formulom (I) u hlorovodoničnu kiselinu.

U skladu sa jednom izvedbom ovoga pronalaska, pomenuti postupak za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II) iz ovoga pronalaska obuhvata dodavanje hlorovodonične kiseline u jedinjenje sa formulom (I):

preferirano u suspenziju,

pri čemu nastaje pomenuta dihidrohloridna so sa formulom (II):

U skladu sa jednom izvedbom iz ovoga pronalaska, pomenuti postupak za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II) iz ovoga pronalaska obuhvata:

a) dodavanje hlorovodonične kiseline, poput na primer vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (32%), u suspenziju pomenutog jedinjenja sa formulom (I) u medijumu, poput vode na primer, na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, poput na primer temperature od 20° C (+/-2°), dok se ne dosegne pH od 3 do 4;

b) mešanje nastale smeše na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, poput na primer sobne temperature, tokom perioda od, na primer više od 10 min; i, ponekad

c) filtriranje nastale čvrste materije i ispiranje filterskog kolača, poput na primer sa vodom, a tada podešavanje pH filtrata na pH 1.8 do 2.0 koristeći hlorovodoničnu kiselinu, na primer vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (32%); i, ponekad,

d) mešanje smeše tokom perioda, od na primer 10 min, na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, kao na primer na sobnoj temperaturi, uz dodavanje etanola, a nakon toga uz mešanje tokom perioda na primer od 10 min; i, ponekad,

e) dodavanje semena kristala, nakon čega ponekad sledi dodavanje etanola tokom perioda od na primer 5 h; i, ponekad,

f) filtriranje nastalog dihidrohlorida sa formulom (II), ponekad uz ispiranje sa smešom voda-etanol i ponekad uz sušenje, kao na primer in vacuo,

pri čemu nastaje dihidrohloridna so sa formulom (II) iz ovoga pronalaska.

U skladu sa jednom izvedbom ovoga pronalaska, pomenuti postupak za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II) iz ovoga pronalaska obuhvata:

a) dodavanje pomenute hlorovodonične kiseline u pomenuto jedinjenje sa formulom (I) u smešu aceton/voda ili etanol/voda, na primer; i, tada, ponekad,

b) grejanje na temperaturi između tačke ključanja i tačke smrzavanja pomenute smeše, poput na primer 40 do 60° C, kao na primer na 50° C, tokom preferiranog perioda od na primer 0,2 do 2 h, kao na primer tokom 0,5 h; a tada, ponekad,

c) grejanje na temperaturi između tačke ključanja i tačke smrzavanja pomenute smeše, kao na primer na 30 do 40° C, kao na primer na 35° C, tokom perioda od primjerice 1 do 4 h, a ponekad uz mešanje pomenute suspenzije na temperaturi između tačke ključanja i tačke smrzavanja pomenute smeše, kao na primer od 10 do 45° C, kao na primer na 35° C, tokom preferiranog perioda od na primer 12 do 72 h, kao na primer tokom 72 h, a ponekad sledi mešanje pomenute suspenzije na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenuta smeše, kao na primer na sobnoj temperaturi, tokom perioda od 0 do 4 h, kao na primer tokom 2 h; i, ponekad,

d) filtriranje, a ponekad ispiranje i sušenje,

pri čemu nastaje dihidrohloridna so sa formulom (II) iz ovoga pronalaska.

U skladu sa jednom izvedbom iz ovoga pronalaska, pomenuti postupak za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II) iz ovog pronalaska je kako sledi:

pomenuta hlorovodonična kiselina je koncentrisani vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (1,33 g, 36% HCl) i se dodaje u pomenuto jedinjenje sa formulom (I) u smeši aceton/voda (50 mL, 8:2 v/v), a nakon toga sledi grejanje na temperaturi od 50° C, na primer tokom perioda od 0,5 h, a tada sledi dodatno grejanje, na temperaturi od 35° C, tokom perioda od 72 h, a tada sledi mešanje pomenute suspenzije na sobnoj temperaturi, tokom period od 2 h, a nakon toga sledi filtracija, ispiranje sa smešom aceton/voda, i sušenje u pećnici pod vakuumom (40° C, 100 mbar, 16 h), pri čemu nastaje pomenuta dihidrohloridna so sa formulom (II) iz ovoga pronalaska.

EKSPERIMENTALNI DEO

Sledeći termini i skraćenice se koriste u daljnjem tekstu:

"jedinjenje sa formulom (I)" ili "slobodna baza" označava 2-amino-N-[7-metoksi-8-(3-morfolin-4-ilpropoksi)-2,3-dihidroimidazo[1,2-c]hinazolin-5-il]pirimidin-5-karboksamid sa formulom (I):

koje je jedinjenje iz Primera 13 iz dokumenta WO 2008/070150 A1 kao šta je navedeno vide supra.

"LS" označava "lekovita supstancija", odnosno, "jedinjenje sa formulom (I)" ili "slobodna baza"

"dihidrohloridna so sa formulom (II)" ili "so sa formulom (II)" označava 2-amino-N-[7-metoksi-8-(3-morfolin-4-ilpropoksi)-2,3-dihidroimidazo[1,2-c]hinazolin-5-il]pirimidin-5-karboksamid dihidrohlorid, koji je dihidrohloridna so sa formulom (II):

"NMP" označava N-metilpirolidinon (rastvarač):

"XRPD" označava "difrakcija X-zraka na prahu": aparat koji se koristi za pomenuta merenja je kako sledi:

STOE Powder Diffraction System:

Difraktometar: Transmisija

Monohromator: Iskrivljeni germanijum (111)

Generator: 45 kV, 35 mA

Talasna dužina: 1.540598 Cu

Detektor: Linearni PSD

Modus skeniranja: Transmisija/Pomični PSD/Fiksna omega

Tip skeniranja: 2Teta:Omega

Sobni uslovi: 25° C, 40-60%rF

"IC" označava "Jonska hromatografija":

Mašina: Merck Ion Chromatograph sa Suppressor System

Detektovanje: Detektor konduktiviteta, Fa. Metrohm

"TGA" označava "Termogravimetrijska analiza":

Mašina: Thermogravimetric Analyzer TGA 7 ili TGA 850e

Producer: Perkin Elmer ili Mettler-Toledo

Rata grejanja: 10 Kmin-1 ili 5 K/min

Gas za ispiranje (Spülgas): azot, 20-30 ml/min

Tigl (Tiegel): otvoren platinski tigl (otvoreni Platin-Tiegel)

Priprema primerka: bez pripreme

"DSC" označava "Diferencijalna skenirajuća kalorimetrija":

Mašina: Differential Scanning Calorimeter DSC 7 ili Piris-1 ili DSC 821 e

Producer: Perkin-Elmer ili Mettler-Toledo

Rata grejanja: 2 i 20 K/min ili 5 K/min

Gas za ispiranje (Spülgas): azot

Tigl (Tiegel): bez-gasni fiksni aluminijumski tigl

Priprema primerka: bez pripreme

"DVS" označava "Dinamička sorpcija pare":

Mašina: Dynamic Vapour Sorption Analyzer IGA Sorp od firme Hiden Analitički.

Radna temperatura je bila 25° C. Priprema primerka: bez pripreme.

"Pred." ili "predom." označava "predominantno".

Ukupan CD: (subjektivno) procena ako se uzme u obzir celokupna hemijska razrada.

Primer 1: dihidrohloridna so sa formulom (II)

U suspenziju jedinjenja sa formulom I (3 g) u smeši aceton/voda (50 mL, 8:2 v/v) je dodan koncentrisani vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (1,33 g, 36% HCl) pri čemu ne dolazi do vidljivih promena. Nastala smeša je mešana na 50° C tokom 0,5 h, a nakon toga na 35° C tokom 3 dana, a tada na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Nastala čvrsta materija je izolovana uz pomoć filtracije, isprana sa smešom aceton/voda (8:2 v/v) i osušena u pećnici pod vakuumom (40° C, 100 mbar, 16 h) sa ciljem da se dobije željeni materijal (3,2 g, 93% prinos). Primedba: čvrste materije poseduju ostvarive filtracijske karakteristike.

karakterizovanje:

analitički postupak

Rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

72,8 wt%, -97,8% površinski%, suma nečistoća -2,2%

Kvalitet je značajno poboljšan u odnosu na Seriju A

IC, wt% formira so

10,3 wt%

∼1:2-so

TGA

13,8% do 70° C

DSC

široki signali (šiljci) (60°, 120° C)

XRPD

kristalit

verovat. razlike zbog integrisanja rastvarača

Mikroskopija

Mikrokristalit, aglomerati

XRPD rezultati su konzistentni sa čvrstim materijama koji nastaju kao kristaliti.

IC rezultati su konzistentni sa formiranjem dihidrohlorida.

TGA rezultati su konzistentni sa čvrstim materijama koje sadrže 13-14% rastvarača i/ili vode.

Analitički HPLC wt% DS je konzistentan sa dihidrohloridom u formi čvrste materije koja sadrži 13-14% rastvarača i/ili vode. Integrisana HPLC površina pokazuje 2,2% nečistoća.

stabilnost čvrste materije:

Dihidrohlorid sa formulom (II) (100 mg iz Primera 4) je uskladišten na 90° C tokom 1 sedmice, a tada je analiziran uz pomoć HPLC.

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

- 65,6 wt%

HPLC, površinskih% DS

- 98,2%; suma nečistoća ~1,8%

Stabilno

rastvorljivost u vodi:

Dihidrohlorid sa formulom (II) (500 mg iz Primera 4) je mešan na 25° C tokom 20 h u vodi (5 mL). Nastala suspenzija je filtrirana kroz membranski filter, pH nastalog rastvora je izmeren, a rastvorljivost je određena uz pomoć HPLC. Čvrsti materijal koji je ostao na filteru je analiziran uz pomoć XRPD i TGA.

analitički postupak

rezultati

Komentari

rastvorljivost

> 8,8 mg/100 ml

pH

- 2,4

Zasićeni rastvor u vodi

XRPD (čvrsti ostatak)

kristalit

Gotovo identičan; blago širenje kristalne rešetke (?)

TGA (čvrsti ostatak)

13,9% do 200° C; 2,4% iznad 200° C

Dodatni podaci o rastvorljivosti:

Dihidrohlorid sa formulom (II) je mešan u 20 mL različitih rastvarača tokom 20 h na 25° C. U svim vodenim rastvaračima približno 2 g pomenutog dihidrohlorida sa formulom (II) je bilo potpuno rastvoreno.

Rastvarač

Rastvorljivost

Aceton

0.3 mg/100 ml posebno nerastvorljiv

Acetonitril

1.1 mg/100 ml posebno nerastvorljiv

Etanol

24.8 mg/100 ml veoma blago rastvorljiv

PEG400

301 mg/100 ml blago rastvorljiv

0,1M HCl

≥ 8800 mg/100 ml rastvorljiv

Pufer pH 4.5

≥ 8900 mg/100 ml rastvorljiv

Pufer pH 7.0

≥ 8700 mg/100 ml rastvorljiv

Voda

≥ 9400 mg/100 ml rastvorljiv

stabilnost u rastvoru:

Hidrolitička stabilnost

Različiti vodeni rastvori (0.05% slobodne baze sa formulom (I); nakon dodavanja 50% 2-propanola, [puferski rastvor filtriran kroz membranski filter od 0.5 µm]) su uskladišteni na 25° C i 70° C tokom 24 h i tokom jedne sedmice.

Uslovi

Pojavljivanje

Organske nečistoće, suma svega [Površinski%]

Organske nečistoće, pojedinačno [Površinski%]

Voda:

Inicijalno

blago obojeni rastvor

2.79

0.25

24 h, 25° C

blago obojeni rastvor

3.43

0.23

24 h, 70° C

blago obojeni rastvor

58.00

25.89

1 sedmica, 25° C

blago obojeni rastvor

5.33

0.54

1 sedmica, 70°C

blago obojeni rastvor

98.59

45.44

Pufer pH 7:

Inicijalno

blago obojeni turbidni rastvor

3.15

0.23

24 h, 25° C

blago obojeni turbidni rastvor

3.22

0.20

24 h, 70° C

blago obojeni rastvor

56.06

23.25

1 sedmica, 25° C

blago obojeni turbidni rastvor

4.85

0.82

1 sedmica, 70° C

blago obojeni rastvor

97.65

39.01

0,9M HCl :

Inicijalno

blago obojeni rastvor

5.87

1.13

24 h, 25° C

blago obojeni rastvor

8.75

1.90

24h, 70° C

blago obojeni rastvor

92.49

22.82

1 sedmica, 25° C

blago obojeni rastvor

24.27

7.15

1 sedmica, 70° C

blago obojeni rastvor

100.00

25.48

0,1M NaOH:

Inicijalno

blago obojeni rastvor

30.72

6.51

24 h, 25° C

blago obojeni rastvor

45.40

10.02

24 h, 70° C

blago obojeni rastvor

99.88

23.94

1 sedmica, 25° C

blago obojeni rastvor

86.64

22.03

1sedmica, 70° C

blago obojeni rastvor

99.90

32.63

IR i Raman spektroskopija

Aparat i uslovi merenja

FT-IR/FT-Raman- Spectrometer

Bruker IFS 66v

/ Bruker RFS 100

Spektralna rezolucija

2 cm-1

/ 2 cm-1

Broj interferograma

32

/ 64

Raspon talasnog broja

4000 - 500 cm-1

/ 3500 - 100 cm-1

Snaga lasera

-

/ 350 mW

Priprema primerka

KBr pelet

/ čvrsta materija u testnoj tubi

Pripisivanje karakterističnih vrpca

Tabela: Pripisivanje karakterističnih aktivnih vibracija na spektar sa ν ≡ vibracije rastezanja; δ ≡ vibracije savijanja; o.o.p. ≡ izvan plohe.";

Pripisana Struktura

Pozicija IR vrpce [cm-1]

Pozicija Raman vrpce [cm-1]

ν N-H

3336

-

ν =C-H

3176

3090

ν C-H

2942

2990 - 2963

ν NH+

2687 - 2474

-

ν Amid I

1669

1664

ν C=C, ν C=N, δ N-H, Amid II

1618 - 1477

1619 - 1476

ν C-O

1285

1291

δ =C-H o.o.p.

812

-

ν ≡ vibracije rastezanja; δ ≡ vibracije savijanja; o.o.p. ≡ izvan plohe

IR spektar je prikazan na Slici 1.

Raman spektar je prikazan na Slici 2.

UV/VIS spektroskopija

Aparat i uslovi merenja

UV/VIS spektrometar

Varian Cary 4

Kiveta

Kvarcna, 1 cm

Raspon talasnog broja

200-800 nm

Priprema primerka

4.67 mg / 500 mL vode

Vrpce

309 nm

UV/VIS spektar je prikazan na Slici 3.

NMR spektroskopija

1H-NMR-spektroskopija

Oprema i eksperimentalni parametri:

NMR spektrometar

Bruker, model Avance

Radna frekvencija

500.13 MHz

Rastvarač

Dimetilsulfoksid (DMSO-d6)

Interno referentno jedinjenje

Tetrametilsilan (TMS)

Koncentracija

3.08 mg/mL rastvora

Dijametar tube za primerak

5 mm

Temperatura

približ. 25° C

Tehnika

Fourier-ov transformacioni modus

Spektralna širina

20.65 ppm

Digitalna rezolucija

0.079 Hz/Pt

Dužina pulsa

4.5 µs, 30° ugao promene pulsa

Vreme akvizicije

6.34 s

Vreme relaksacije

0.5 s

Br. slobodno indukovanih raspada

32

Strukturna Formula za pripisivanje NMR signala

Hemijski pomak, signalno umnožavanje, relativni broj nukleusa:

H-atomi(a)

Hemijski pomak δ (ppm)

Umnožavanje i konstante spajanja (b)

Br. nukleusa H/molekul

H-26

2.32

M

2

H-29; H-33

3.11; 3.48

M; M

2; 2

H-30; H-32

3.83; 3.98

M; M

2; 2

H-27

3.29

M

2

-OCH3

4.00

S

3

H-25

4.37

T

2

H-2; H-3

4.47; 4.19

T; T

2; 2

H-9

7.39

D

1

NH2

7.54

S

2

H-10

8.21

D

1

H-16; H-20

8.97

S

1; 1

HCl

11.1; 12.6

bS; bS

1; 1

H-12

13.4

bS

1

a) Numerisanje se odnosi na strukturnu formulu za pripisivanje NMR-signala.

b) S = Singlet bS = široki Singlet D = Dublet

T = Triplet M = Multiplet

1H-NMR spektar dihidrohlorida sa formulom (II) je prikazan na Slici 4.

13C-NMR-spektroskopija

Oprema i eksperimentalni parametri

NMR spektrometar

Bruker, model Avance

Radna frekvencija

125.76 MHz

Rastvarač

Dimetilsulfoksid-d6 (DMSO)

Interno referentno jedinjenje

Tetrametilsilan (TMS)

Koncentracija

37.2 mg/mL rastvor

Dijametar tube za primerak

5 mm

Temperatura

približ. 27° C

Tehnika

Fourier-ov transformacijski modus

Spektralna širina

240.95 ppm

Digitalna rezolucija

0.4624 Hz/Pt

Dužina pulsa

11.0 µs, 90° ugao promene pulsa

Vreme akvizicije

1.08 s

Vreme relaksacije

4 s

Br. slobodno indukovanih raspada

256

Hemijski pomak, signalno umnožavanje, rel. br. nukleusa:

H-atomi(a)

Hemijski pomak δ (ppm)

Umnožavanje i konstante spajanja (b)

Br. nukleusa H/molekul

C-26

22.73

T

1

C-2; C-3

44.96; 45.65

T;T

1; 1

C-29; C-33

50.84

T

1; 1

C-27

53.01

T

1

OCH3

61.24

Q

1

C-30; C-32

63.03

T

1; 1

C-25

66.81

T

1

C-10a

100.79

S

1

C-9

112.17

D

1

C-15

118.16

S

1

C-10

123.86

D

1

C-6a

132.43

S

1

C-7

133.95

S

1

C-5

148.58

S

1

C-11

156.29

S

1

C-8

156.89

S

1

C-16; C-20

160.20

D

1; 1

C-18

164.61

S

1

C=O

175.65

S

1

a) Numerisanje se odnosi na strukturnu formulu za pripisivanje NMR-signala.

b) S = Singlet (C) D = Dublet (CH) T = Triplet (CH2) Q = Kvadriplet (CH3)

13C-NMR spektari dihidrohlorida sa formulom (II) su prikazani na Slikama 5 i 6.

Masena spektrometrija

Instrumentalni parametri

Maseni spektrometar

Waters ZQ

Jonizacioni modus

ESI (Elektrosprej-Jonizacija)

Rastvarač

CH3CN/H2O

Interpretacija spektra

Masena vrednost (m/z)

Rel. intenzitet (%)

Nastanak jona

481.2

46

(M + H)+

354.1

5

(C16 H16 N7 O3)+

261.7

26

(M + 2H + CH3CN)+2

241.2

100

(M + 2H)+2

Maseni spektar dihidrohlorida sa formulom (II) je prikazan na Slici 7. Za relativne intenzitete signala, pogledajte sam spektar.

Analiza elemenata

Analiza elemenata je provedena uz pomoć Bayer Industry Services, Leverkusen, Nemačka.

Rezultati

Element

Izmereno [%]

Izračunato [%]

Izračunato, uključujući 7.0% vode [%]

Razlika

C

47.5

49.9

46.4

1.1

H

5.7

5.5

5.9

0.2

N

19.1

20.3

18.8

0.3

O

18.1

11.6

17.0

1.1

Cl

11.9

12.8

11.9

0.0

Suma

102.3

100.1

100.0

-

Analiza elemenata je provedena sa dihidrohloridnom soli sa formulom II uz 7% vode.

Primer 2: Dodatni postupak za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II)

U suspenziju od 366 g jedinjenja sa formulom (I) u 1015 g vode, dodano je 183 g vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (32%) uz održavanje temperature na 20° C (+/-2°) do postizanja pH od 3 do 4. Nastala smeša je mešana na sobnoj temperaturi više od 10 min, sve je filtrirano, a filterski kolač je ispran sa dodatna 82 g vode. pH filtrata je podešen na 1.8 do 2.0 uz pomoć vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (32%). Smeša je mešana tokom 10 min na sobnoj temperaturi, dodano je 146 g etanola (100%) i sve je mešano tokom dodatnih 10 min. Dodano je 1 g semena kristala, a nakon toga i 1592 g etanola tokom 5 h. Nastala supstancija je odstranjena uz pomoć filtracije, isprana sa smešom voda-etanol i osušena in vacuo šta daje 410 g (97%) dihidrohlorida sa formulom (II) i čistoćom >99% na osnovu rezultata HPLC.

Komparativni Primer 1: monohidrohlorid jedinjenja sa formulom (I)

U suspenziju jedinjenja sa formulom (I) (0,5 g, 1.04 mmol) u smeši aceton/voda (9 mL, 8:2 v/v) je dodan koncentrisani rastvor hlorovodonične kiseline (89 µL, 1.07 mmol, 1.0 ekviv., 36% HCl). Primećena je vidljiva promena u smeši, ali bistar rastvor nije dobiven. Smeša je grejana uz mešanje na 50° C tokom 0,5 h, a nakon toga na 35° C tokom 3 dana, a tada na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Preostala suspendovana čvrsta materija je odstranjena uz pomoć filtracije, isprana sa smešom aceton/voda, (8:2 v/v) i osušena (40° C, 100 mbar, 16 h) šta daje željeni produkt (0,5 g).

karakterizovanje:

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

- 85,8 wt%, -98,4% površinski%, suma nečistoća -1,6%

Kvaliteta se značajno poboljšala u odnosu na Seriju A

IC, wt% nastanak soli

6,0 wt%

-1:1- so

TGA

6,3% do 200° C

DSC

široki signal na 75° C

XRPD

Predominantno amorfan

Mikroskopija

n. t.

Rezultati pokazuju da je nastao kristalit monohidrohlorida. Mada je čistoća baze poboljšana uz pomoć ovog eksperimenta, daljnje studije nisu provođene, jer je materijal bio predominantno amorfan.

Komparativni Primer 2: Bi(hidrogen sulfatna) so jedinjenja sa formulom (I)

U suspenziju jedinjenja sa formulom (I) (0,5 g, 0.103 mmol) u smeši aceton/voda (9 mL, 9:1 v/v) je dodan rastvor koncentrisane sumporne kiseline (213 mg, 96% H2SO4, 2 ekviv.). primećena je vidljiva promena u smeši, ali bistar rastvor nije dobiven. Smeša je grejana uz mešanje na 50° C tokom 0,5 h, a nakon toga na 35° C tokom 3 dana, a tada na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Preostale suspendovane čvrste materije su izolovane uz pomoć filtracije, isprane (aceton/voda, 9:1 v/v) i osušene (40° C, 100 mbar, 16 h) šta daje približno 30 mg željenog produkta.

Komparativni Primer 3: so limunske kiseline jedinjenja sa formulom (I)

U suspenziju jedinjenja sa formulom (I) (3,0 g, 6.24 mmol) u smeši etanol/voda (50 mL, 1:2 v/v) je dodana limunska kiselina (2,4 g, 10.2 mmol, 1.6 ekviv.). Smeša je grejana uz mešanje do 35° C, dodano je 25 ml vode i 100 ml etanola, a mešanje je nastavljeno na 35° C tokom 2 h. Nastao bistar rastvor je ohlađen do sobne temperature, a mešanje je nastavljeno tokom 3 dana. Nastale čvrste materije su izolovane uz pomoć filtracije, isprane sa 10 ml etanola i osušene (40° C, 100 mbar, 24 h) šta daje željeni produkt (3,8 g, 90% prinos). Primedba: filtracija ovog materijal je bila spora.

karakterizovanje:

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

64,1 wt%, 98,1 površinski%, suma nečistoća 1,9%

IC, wt% nastanak soli

30,2 wt%

> 1:1- so

TGA

3,8% wt% do 50° C; 29,4% na 130 do 200° C

DSC

Široki signali

topi se uz raspadanje

XRPD

Kristalit

značajna količina slobodne baze može da se detektuje

Mikroskopija

Mikrokristalit; aglomerati

Svi rezultati pokazuju da uniformna, realna so nije nastala, već smeša limunske soli, slobodne baze i/ili limunske kiseline.

stabilnost čvrste materije:

So limunske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (100 mg iz Komparativnog Primera 3) je spremljena na 90° C tokom 1 sedmice.

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

62,7 wt%

HPLC, površinski% DS

96,3 %

Blago nestabilno; Suma nečistoća je blago veća (3,7% u odnosu na 1,9%)

rastvorljivost u vodi:

So limunske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (500 mg iz Komparativnog Primera 3) je mešana na 25° C tokom 20 h u vodi (5 mL). Nastala suspenzija je filtrirana kroz membranski filter, pH rastvora je izmeren, a rastvorljivost je određena uz pomoć HPLC. Čvrsti materijal koji je preostao na filteru je analiziran uz pomoć XRPD i TGA.

analitički postupak

rezultati

Komentari

rastvorljivost

∼ 8,5 mg/100 ml

pH

3,9

Zasićeni rastvor u vodi

XRPD (čvrsti ostatak)

Široki signali

Značajna promena; manje kristalita

TGA (čvrsti ostatak)

4,4% na 30° do 120° C; 27% na 120° do 250° C

Komparativni Primer 4: so sukcinske kiseline jedinjenja sa formulom (I)

U suspenziju jedinjenja sa formulom (I) (3,0 g, 6,24 mmol) u smeši aceton/voda (50 mL, 8:2 v/v) je dodana sukcinska kiselina (1,48 g, 12,5 mmol, 2 ekviv.) sa ciljem da se dobije bela suspenzija. Smeša je grejana uz mešanje na 50° C tokom 0,5 h, a nakon toga na 35° C tokom 3 dana, a tada na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Pojavljivanje smeše se nije značajno promenilo tokom ovog perioda. Nastale čvrste materije su odstranjene uz pomoć filtracije, isprane sa nekoliko ml smeše aceton/voda (8:2 v/v) i osušene (40° C, 100 mbar, 16 h) šta daje željeni produkt (3,4 g, 91%).

karakterizovanje:

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

75,6 wt%, ~97,6% površinski%, suma nečistoća ~2,4%

IC, wt% nastanak soli

15,1 wt%

< 1:1- so

TGA

3,2% do 50° C; 17,6% @ 140 - 220° C

Slično slobodnoj bazi

DSC

Široki signali

Slično slobodnoj bazi

XRPD

predom. kristalit

značajna količina slobodne baze može da se detektuje

Mikroskopija

aglomerati

Karakterizovanje sugeriše da uniformna, stehiometrijska so nije nastava, već smeša sukcinata i slobodne baze.

stabilnost čvrste materije:

So sukcinske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (100 mg iz Komparativnog Primera 4) je spremljena na 90° C tokom 1 sedmice.

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

48,4 wt%

kafena čvrsta materija nakon 1 sedmice na 90° C

HPLC, površinski% DS

∼ 97,6% (suma nečistoća ~2,4%)

nije stabilno

rastvorljivost u vodi

So sukcinske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (500 mg iz Komparativnog Primera 4) je mešana u vodi (5 mL) na 25° C tokom 20 h. Nastala suspenzija je filtrirana kroz membranu filtera, pH rastvora je izmeren, a rastvorljivost je određena uz pomoć HPLC. Čvrsti materijal koji je preostao na filteru je analiziran uz pomoć XRPD i TGA.

analitički postupak

rezultati

Komentari

rastvorljivost

~ 5,5 mg/100 ml

pH

4,7

Zasićeni rastvor u vodi

XRPD (čvrsti ostatak)

Delomično kristalit

Značajna promena; delomično amorfno; slobodna baza može da se detektuje

TGA (čvrsti ostatak)

5,5% na 30° do 120° C; 15% na 120° do 240° C

Komparativni Primer 5: so maleinske kiseline jedinjenja sa formulom (I)

U suspenziju jedinjenja sa formulom (I) (3,0 g, 6,24 mmol) u smeši aceton/voda (50 mL, 8:2 v/v) je dodana maleinska kiselina (1,45 g, 12,5 mmol, 2,0 ekviv.) sa ciljem da se dobije gotovo bistri rastvor koji se pretvara u suspenziju nakon 5 min. Smeša je grejana uz mešanje na 50° C tokom 0,5 h, a nakon toga na 35° C tokom 3 dana, a tada na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Nastale čvrste materije su izolovane uz pomoć filtracije, isprane sa smešom aceton/voda (8:2 v/v) i osušene (40° C, 100 mbar, 16 h) šta daje željeni produkt (4,0 g, 90%). Primedba: filtracija ovog materijala se lako provodi.

karakterizovanje:

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

62,7 wt%, ~95,2% površinski%, suma nečistoća ~4,8%

IC, wt% nastanak soli

30,7 wt%

∼1:2- so

TGA

5,8% do 50° C; 3,7% @ 80-150° C; 20,7% @ 160-210° C

DSC

široki signali

XRPD

kristalit

razlika verov. zbog integrisanja rastvarača; slobodna baza ne može da se detektuje

Mikroskopija

kristali

Rezultati pokazuju da je nastao kristalit dimaleata. Čistoća baze se nije poboljšala uz pomoć nastanka soli u ovom slučaju.

stabilnost čvrste materije:

So maleinske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (100 mg iz Komparativnog Primera 5) je spremljena na 90° C tokom 1 sedmice.

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

59,4 wt%

HPLC, površinski% DS

∼ 96,9% (suma nečistoća ∼3,1%)

Stabilno

rastvorljivost u vodi

So maleinske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (500 mg iz Komparativnog Primera 5) je mešana u vodi (5 mL) na 25° C tokom 20 h. Nastala suspenzija je filtrirana kroz membranu filtera, pH rastvora je izmeren, a rastvorljivost je određena uz pomoć HPLC. Čvrsti materijal koji je zaostao na filteru je analiziran uz pomoć XRPD i TGA.

analitički postupak

rezultati

Komentari

rastvorljivost

> 8,1 mg/100 ml

pH

3,1

Zasićeni rastvor u vodi

XRPD (čvrsti ostatak)

kristalit

Gotovo identičan; blago širenje kristalne rešetke (?)

TGA (čvrsti ostatak)

8% na 30°-90° C; 2,5% na 100°-150° C; 14% iznad 150° C

Komparativni Primer 6: so metansulfonske kiseline jedinjenja sa formulom (I)

U suspenziju jedinjenja sa formulom (I) (3,0 g, 6,24 mmol) u smeši aceton/voda (50 mL, 9:1 v/v) je dodana metansulfonska kiselina (1,2 g, 12,5 mmol, 2 ekviv.) sa ciljem da se dobije lepljivi materijal. Smeša je grejana uz mešanje na 50° C tokom 0,5 h, a nakon toga na 35° C tokom 3 dana. Pojavljivanje smeše nije se promenilo značajno tokom ovog perioda. Dodano je još acetona (50 mL) u smešu, a mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom dodatnih 5 dana šta daje suspenziju koja može da se filtrira zajedno sa lepljivim materijalom. Suspenzija je odstranjena uz pomoć filtracije, isprana sa acetonom i osušena (40° C, 100 mbar, 16 h) šta daje željeni produkt (3,5 g, 83,3%).

karakterizovanje:

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

62,9 wt%, ∼96,1% površinski%, suma nečistoća ~3,9%

IC, wt% nastanak soli

26,4 wt%

- 1:2- so

TGA

6,3% @ 30-100° C; 22% @ 220° C (raspa.)

DSC

Široki signali

XRPD

predom. kristalit

delimično amorfno

Mikroskopija

Mikrokrist., aglomerati

Svi rezultati pokazuju da kristalit soli dimesilata može da se formira. Očito, optimalni uslovi kristalizovanja nisu pronađeni i/ili dimesilat je veoma osetljiv šta se tuče uslova nastajanja jer je pomenuti materijal bio delimično amorfan. Polimorfna forma koja je do sada proizvedena se čini da je sposobna da se rastvori u rastvaračima/vodi.

stabilnost čvrste materije:

So metansulfonske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (100 mg iz Komparativnog Primera 6) je spremljena na 90° C tokom 1 sedmice.

analitički postupak

rezultati

Komentari

HPLC, wt% DS

59,5 wt%

HPLC, površinski% DS

∼ 96,7% (suma nečistoća ~3,3%)

Stabilno

rastvorljivost u vodi:

So metansulfonske kiseline jedinjenja sa formulom (I) (500 mg iz Komparativnog Primera 6) je mešana na 25° C tokom 20 h u vodi (5 mL). Primerak je gotovo potpuno rastvoren. Nastala smeša je filtrirana kroz membranu filtera, pH rastvora je izmeren, a rastvorljivost je određena uz pomoć HPLC. Međutim, nakon filtracije nije ostalo dovoljno čvrstog materijala za daljnju analizu.

analitički postupak

rezultati

Komentari

rastvorljivost

> 8,3 mg/100 ml

pH

~ 2,3

Zasićeni rastvor u vodi

XRPD (čvrsti ostatak)

n. t.

TGA (čvrsti ostatak)

n. t.

ZAKLJUČCI

Sa fizičko-hemijske tačke gledanja, dihidrohloridna so sa formulom (II) (Primer 4) iz ovoga pronalaska daje iznenađujuće tehničke rezultate kao šta može da se vidi iz Primera i Komparativnih Primera, supra, kao šta je sažeto prikazano u Tabeli 5, infra:

Tabela 5

Svojstvo

Limunska kiselina (Komp. Pr. 3)

Sukcinska kiselina (Komp . Pr. 4)

Maleinska kiselina (Komp . Pr. 5)

Metansulfonska kiselina (Komp. Pr. 6)

Hlorovodonična kiselina (Pr. 1)

Jedinjenje sa formulom (I) (slobodna baza)

Kriterijum

stehiometrja

∼ 1: 1

∼ 1: 1

∼ 1: 2

∼ 1: 2

1: 2

Na bazi HPLC/IC

hem. proces

○

-

○

-

○

-

prinos, konačno procesiranje

čistoća

+

+

○

○

+

○

površinski% HPLC

stabilnost soli

○

-

+

n.o.

+++

n.p.

raspadanje sa/u vodi

kristalnost

○

-

+

○

++

○

XRPD

hidrati

- 4 H2O

1 w @ 95% r.h.; vod. ratvorljiv.

vod. rastvorljivost

- 8,5.

- 5,5

> 8,1

> 8,3

> 8,8

-

16h @ 25° C (mg/100 ml)

term. stab. rastvora

n.o.

n.o.

n.o.

n.o.

n.o.

○

24 h @ 70° C; 1 w @ 25° C

term. stab. čvrste materije

+

--

+

+

+

++

1 w @ 90° C

Ukupan CD

○

--

○

--

+

○

-- veoma nepovoljno

- nepovoljno

○: neodređeno

+: povoljno

++: veoma povoljno

n.p.: nije primenjivo

n.pr.: nije pronađeno

n.o.: nije određeno; nema bistrog rastvora nakon filtracije, verovatno zbog nastanka micela.

Najpre, kao šta se vidi iz Komparativnih Primera 1, rezultati neočekivano pokazuju da kristalit monohidrohlorida jedinjenja sa formulom (I) nije nastao: bio je uglavnom amorfan. Suprotno, kao šta se vidi iz Primera 1, dihidrohloridna so sa formulom (II) može da formira kristalit, stabilnu dihidrohloridnu so. Kristalit dihidrohloridne soli je stabilan šta se tiče reverzije u slobodnu bazu u vodi.

Nadalje, dihidrohloridna so iz ovoga pronalaska ima superiornu stabilnost u vodi u uporedbi sa drugim pomenutim solima. Ovo znači da pomenuta so ne revertira u slobodnu bazu u vodi u uslovima koji su testirani, tj. precipitacija slobodne baze se ne pojavljuje.

Kristalinost dihidrohloridne soli iz ovoga pronalaska je superiorna u odnosu na monohidrohloridnu so (za koju je pronađeno da je predominantno amorfna u XRPD).

Drugo, kao šta se vidi iz Komparativnog Primera 5 (tabela za karakterizaciju) i iz rezultata za XRPD, komentari govore da postoje razlike u maleatnoj soli jedinjenja sa formulom (I) iz Komparativnog Primera 5: kao šta je već pomenuto, ove razlike su verovatno zbog integrisanja rastvarača. Nadalje, može da se vidi iz Komparativnog Primera 5 da čistoća baze nije poboljšana zbog formiranja maleatne soli. Suprotno, kao šta se vidi iz Primera 1 (dihidrohloridna so iz ovoga pronalaska), može da se kaže da čistoća slobodne baze nije poboljšana zbog nastanka dihidrohloridne soli.

Nadalje, kvalitet lekovite supstancije je poboljšan nakon nastanka dihidrohloridne soli.

Štaviše, dodatna tehnički korisna karakteristika dihidrohloridne soli (II) iz ovoga pronalaska je ta šta će forma kristalitne soli idealno pomoći da se poboljša proces prečišćavanja i konačno procesiranje: stabilna je kao čvrsta materija u rastvoru i se uklapa u galensku strategiju (na primer, so iz ovoga pronalaska se rastvara brže od jedinjenja sa formulom (I) (slobodna baza), šta je jasna tehnička prednost.

Prema tome, sve u svemu, kao šta se vidi iz Tabele 5, vide supra, dihidrohlorid je iznenađujuće koristan kada se govori o čistoći, stabilnosti soli, kristalnosti, i rastvorljivosti u vodi.

Štaviše, veoma važno, kao šta se vidi iz PI3Kα i PI3Kβ biohemijskih testova: slobodna baza i dihidrohloridna so pokazuju slične aktivnosti u oba biohemijska testa, PI3Kα i PI3Kβ. Blago bolji potencijal sa formom dihidrohloridne soli može da bude zbog poboljšane rastvorljivosti. Ovo je veoma jasna prednost.

Farmaceutske formulacije soli iz ovoga pronalaska

Kao šta je malopre pomenuto, so iz ovoga pronalaska može da bude u formi farmaceutske formulacije koja je spremna za upotrebu tako da se administrira simultano, konkurentski, odvojeno ili sekvencijalno. Komponente mogu da se administriraju nezavisno jedan od drugoga preko oralne, intravenozne, topikalne rute, preko lokalnih instalacija, preko intraperitonealne ili nazalne rute.

Pomenute kompozicije mogu da se koriste sa ciljem da se postigne željeni farmakološki efekt uz pomoć administriranja pacijentu koji ima potrebu. Pacijent, za ciljeve ovoga pronalaska, je sisar, uključujući čoveka, koji treba neki tretman za određeno stanje ili bolest. Prema tome, ovaj pronalazak uključuje so iz ovoga pronalaska koja je u formi farmaceutske formulacije (kompozicije) koja se sastoji od nekog farmaceutski prihvatljivog nosioca i neke farmaceutski efektivne količine pomenute soli. Farmaceutski prihvatljivi nosilac je preferirano nosilac koji je relativno ne-toksičan i neškodljiv za pacijenta u koncentracijama koje odgovaraju efektivnom delovanju aktivnog sastojaka tako da nus-pojave koje mogu da se pripišu nosiocu ne poništavaju korisne efekte komponenata, i/ili kompozicije. Farmaceutski efektivna količina kompozicije je preferirano ona količina koja dovodi do rezultata ili uspostavlja uticaj na određeno stanje koje se tretira. Soli iz ovog pronalaska mogu da se administriraju sa farmaceutski-prihvatljivim nosiocima koji su dobro poznati stanju tehnike uz korišćenje bilo koje efektivne konvencionalne dozne pojedinačne forme, uključujući preparate sa momentalnim, sporim i odloženim delovanjem, koji su oralni, parenteralni, topikalni, nazalni, oftalmički, optički, sublingvalni, rektalni, vaginalni, i slično.

Za oralnu administraciju, pomenute soli mogu da se formulišu u čvrste ili tečne preparate poput kapsula, pilula, tableta, trošeja, pastila, topljivih pastila, prahova, rastvora, suspenzija, ili emulzija, i mogu da se pripreme u skladu sa postupcima koji su poznati stanju tehnike, a odnose se na proizvodnju farmaceutskih kompozicija. Čvrste unitarne dozne forme mogu da budu kapsule koje mogu da budu uobičajeno pripremljene u oklopu od tvrdog ili mekog želatina koji sadrže, na primer, surfaktante, lubrikante, i inertne filere poput laktoze, saharoze, kalcijum fosfata, i skroba od kukuruza.

U drugoj izvedbi, so iz ovoga pronalaska može da se pripremi kao tableta sa konvencionalnim tabletnim bazama poput laktoze, saharoze i skroba od kukuruza u kompoziciji sa veznicima poput akacije, skroba od kukuruza ili želatina, agenasa za raspadanje koji su namenjeni da pomognu raspadanje i rastvaranje tablete nakon administracije poput skroba od krumpira, alginske kiseline, skroba od kukuruza, i guar gume, gume tragakant, akacije, lubrikanata koji su namenjeni da poboljšaju protok tabletne granulacije i da spreče adhezije tabletnog materijala na površini tabletnih boja i punčeva, na primer talk, stearinska kiselina, ili magnezijum, kalcijum ili cink stearat, boja, agenasa za bojanje, i agenasa za ukus poput peperminta, ulja zimzelenih biljaka, ili ukusa trešnje, čija je namena da pojačaju estetske kvalitete tableta i da ih načine prihvatljivim za pacijenta. Prikladni ekscipijenti za upotrebu u oralnim tečnim doznim formama uključuju dikalcijum fosfat i razređivače poput vode i alkohola, na primer, etanol, benzil alkohol, i polietilen alkoholi, sa ili bez dodavanja farmaceutski prihvatljivog surfaktanta, agensa za suspendovanje ili agensa za emulziju. Brojni drugi materijali mogu da budu prisutni kao omoti ili da na neki drugi način modifikuju fizičku formu pomenute dozne jedinice. Na primer tablete, pilule ili kapsule mogu da se omotaju sa šelakom, šećerom ili oba.

Prahovi i granule koji mogu da disperguju su prikladni za pripremu vodene suspenzije. Pomenuti obezbeđuju aktivni sastojak koji se nalazi pomešan sa agensom za dispergovanje ili za vlaženje, agensom za suspendovanje i sa jednim ili više prezervativa. Prikladni agensi za dispergovanje ili vlaženje i agensi za suspendovanje su malopre navedeni kroz primere. Dodatni ekscipijenti, na primer agensi za zaslađivanje, ukus i boju, koji su ovde opisani, takođe mogu da budu prisutni.

Farmaceutske kompozicije iz ovoga pronalaska mogu takođe da budu u formi emulzija ulje-u-vodi. Uljana faza može da bude neko biljno ulje poput tečnog parafina ili smeše biljnih ulja. Prikladni agensi za emulziju mogu da budu (1) prirodne gume poput gume akacija i gume tragakant, (2) prirodni fosfatidi poput soje i lecitina, (3) esteri ili delimični esteri koji su izvedeni iz masnih kiselina i heksitol anhidrida, na primer, sorbitan monooleat, (4) produkti kondenzovanja pomenutih delomičnih estera sa etilen oksidom, na primer, polioksietilen sorbitan monooleat. Pomenute emulzije mogu takođe da sadrže agense za zaslađivanje i za ukus.

Uljane suspenzije mogu da se formulišu uz pomoć suspendovanja aktivnog sastojaka u nekom biljnom ulju poput, na primer, ulja od kikirikija, maslinovog ulja, susamovog ulja ili kokosovog ulja, ili u nekom mineralnom ulju poput tečnog parafina. Uljane suspenzije mogu da sadrže agens za ugušćivanje poput, na primer, pčelinjeg voska, tvrdog parafina, ili cetil alkohola. Pomenute suspenzije mogu takođe da sadrže jedan ili više prezervativa, na primer, etil ili n-propil p-hidroksibenzoat; jedan ili više agenasa za bojanje; jedan ili više agenasa za ukus; i jedan ili više agenasa za zaslađivanje poput saharoze ili saharina.

Sirupi i eliksiri mogu da budu formulisani uz pomoć agenasa za zaslađivanje poput, na primer, glicerola, propilen glikola, sorbitola ili saharoze. Takve formulacije mogu takođe da sadrže demulcent, i prezervativ, poput metil i propil parabena i agense za ukus i boju.

So iz ovoga pronalaska može takođe da se administrira delomično, odnosno, supkutano, intravenozno, intraokularno, intrasinovijalno, intramišićno, ili interperitonealno, u formi doza za injektiranje pomenutog jedinjenja preferirano u nekom fiziološki prihvatljivom razređivaču sa nekim farmaceutskim nosiocem koji može da bude sterilna tečnost ili smeša tečnosti poput vode, slanog rastvora, vodene dekstroze i sličnih šećernih rastvora, u alkoholu poput etanola, izopropanola, ili heksadecil alkohola, glikola poput propilen glikola ili polietilen glikola, glicerol ketala poput 2,2-dimetil-1,1-dioksolan-4-metanola, etera poput poli(etilen glikola) 400, ulja, masne kiseline, estera masne kiseline ili, glicerida masne kiseline, ili acetilovanog glicerida masne kiseline, sa ili bez dodavanja farmaceutski prihvatljivog surfaktanta poput sapuna ili deterdženta, agensa za suspendovanje poput pektina, karbomera, metilceluloze, hidroksipropilmetilceluloze, ili karboksimetilceluloze, ili agensa za emulziju i drugih farmaceutskih dodataka.

Primeri za ulja koja mogu da se koriste u parenteralnim formulacijama iz ovoga pronalaska su ona od nafte, životinjska, biljna ulja, ili ulja sintetskog porekla, na primer, ulje od kikirikija, ulje od soje, susamovo ulje, ulje od semenki pamuka, kukuruzno ulje, maslinovo ulje, petrolatum i mineralno ulje. Prikladne masne kiseline uključuju oleinsku kiselinu, stearinsku kiselinu, izostearinsku kiselinu i miristinsku kiselinu. Prikladni esteri masnih kiselina su, na primer, etil oleat i izopropil miristat. Prikladni sapuni uključuju alkalo-metalne masne kiseline, amonijum, i trietanolaminske soli, a prikladni deterdženti uključuju katjonske deterdžente, na primer dimetil dialkil amonijum halide, alkil piridinijum halide, i alkilamin acetate; anjonske deterdžente, na primer, alkil, aril, i olefin sulfonate, alkil, olefin, etar, i monoglicerid sulfate, i sulfosukcinate; ne-jonske deterdžente, na primer, okside masnih amina, alkanolamide masnih kiselina, i poli(oksietilen-oksipropilene) ili etilen oksid ili propilen oksid kopolimere; i amfoterične deterdžente, na primer, alkil-beta-aminopropionati, i 2-alkilimidazolin kvaternarne amonijumove soli, kao i smeše.

Parenteralne kompozicije iz ovoga pronalaska tipično sadrže od oko 0.5% do oko 25% u odnosu na težinu aktivnog sastojaka u rastvoru. Prezervativi i puferi mogu da se koriste tako da donose prednost. Sa ciljem da se minimizuje ili eliminiše iritacija na mestu injekcije, pomenute kompozicije mogu da sadrže ne-jonski surfaktant koji poseduje ravnotežu hidrofil-lipofil (HLB) preferirano od oko 12 do oko 17. Kvantitet surfaktanta u takvoj formulaciji se kreće u rasponu od oko 5% do oko 15% po težini. Pomenuti surfaktant može da bude pojedinačna komponenta koja ima već pomenuti HLB ili može da bude smeša dva ili više komponenti koje imaju željeni HLB.

Primeri za surfaktante koji se koriste u parenteralnim formulacijama su jedna klasa polietilen sorbitan estera masnih kiselina, na primer, sorbitan monooleat i adukti etilen oksida visoke molekularne mase sa hidrofobnom bazom, nastali uz pomoć kondenzacije propilen oksida sa propilen glikolom.

Pomenute farmaceutske kompozicije mogu da budu u formi sterilnih vodenih suspenzija za injektiranje. Takve suspenzije mogu da se formulišu u skladu sa poznatim postupcima koristeći prikladne agense za dispergovanje i vlaženje i agense za suspendovanje poput, na primer, natrijum karboksimetilceluloze, metilceluloze, hidroksipropilmetil-celuloze, natrijum alginata, polivinilpirolidona, gume tragakant i gume akacija; agensi za dispergovanje ili vlaženje mogu da budu prirodni fosfatidi poput lecitina, produkt kondenzovanja alkilen oksida sa nekom masnom kiselinom, na primer, polioksietilen stearat, produkt kondenzovanja etilen oksida sa alifatskim alkoholom dugog lanca, na primer, heptadeka-etilenoksietanol, produkt kondenzovanja etilen oksida sa delimičnim esterom koji je izveden iz neke masne kiseline i heksitola poput polioksietilen sorbitol monooleata, ili produkt kondenzovanja etilen oksida sa delimičnim esterom koji je izveden iz neke masne kiseline i heksitol anhidrida, na primer polioksietilen sorbitan monooleat.

Preparati za sterilnu injekciju mogu takođe da budu sterilni rastvor ili suspenzija za injektiranje u nekom ne-toksičnom parenteralno prihvatljivom razređivaču ili rastvaraču. Razređivači i rastvarači koji mogu da se koriste su, na primer, voda, Ringer-ov rastvor, izotonični rastvori natrijum hlorida i izotonični rastvori glikoze. Dodatno, sterilna fiksna ulja se konvencionalno koriste kao rastvarači ili medijum za suspendovanje. Za tu svrhu, bilo koja mešavina fiksiranog ulja može da se koristi uključujući i sintetičke mono- ili digliceride. Dodatno, masne kiseline poput oleinske kiseline mogu da se koriste za pripremu preparata koji mogu da se injektiraju.

Kompozicija iz ovoga pronalaska može da se takođe administrira u formi čepića za rektalnu administraciju leka. Ove kompozicije mogu da se pripreme uz pomoć mešanja leka sa nekim prikladnim ekscipijentom koji ne iritira i koji je čvrst na uobičajenim temperaturama, ali tečan na temperaturi rektuma i koji će se prema tome rastopiti u rektumu kako bi oslobodio lek. Takvi materijali su, na primer, puter od kakaa i polietilen glikol.

Druga formulacija koja se koristi u postupcima iz ovog pronalaska uključuje naprave za transdermalnu dostavu ("nalepnice"). Takve transdermalne nalepnice mogu da se koriste sa ciljem da se obezbedi kontinuirana ili diskontinuirana infuzija jedinjenja iz ovoga pronalaska sa kontrolisanom količinom. Konstrukcija i upotreba transdermalnih nalepnica za dostavu farmaceutskih agenasa je dobro poznata stanju tehnike (vidi na primer, Američki patentni br. 5,023,252, koji je objavljen 11 juna 1991, a ovde uključen referencom). Takve nalepnice mogu da se konstruišu za kontinuiranu, pulsativnu dostavu farmaceutskih agenasa, ili za dostavu po potrebi.

Formulacije za kontrolisano otpuštanje za parenteralnu administraciju uključuju liposomalne, polimerne mikrosfere i polimerne gel-formulacije koje su poznate stanju tehnike.

Može da bude poželjno ili neophodno da se farmaceutska kompozicija pacijentu uvede preko naprave za mehaničku dostavu. Konstrukcija i upotreba naprava za mehaničku dostavu sa ciljem dostave farmaceutskih agenasa je dobro poznata stanju tehnike. Direktne tehnike za, na primer, administriranje i dostavu leka u mozak uobičajeno uključuju postavljanje katetera za dostavu leka u pacijentov ventrikularni sistem sa ciljem da se zaobiđe krvno-moždana barijera. Jedan takav sistem za dostavu koji može da se implantira, a koji se koristi za transport agenasa u specifične anatomske regione tela, je opisan u Američkom patentnom br. 5,011,472, koji je objavljen 30 aprila 1991.

Kompozicije iz ovoga pronalaska mogu takođe da sadrže druge konvencionalne farmaceutski prihvatljive sastojke, koji se generalno nazivaju nosioci ili razređivaći, ako je potrebno ili poželjno. Mogu da se koriste konvencionalne procedure za pripremu takvih kompozicija u odgovarajućim doznim formama. Takvi sastojci i procedure uključuju one koji su opisani u sledećim navodima, od kojih je svaka ovde uključena referencom: Powell, M.F. et al, "Compendium of Excipients for Parenteral Formulations" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311; Strickley, R.G "Parenterat Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999)-Part-1" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349; i Nema, S. et at, "Excipients and Their Use in Injectable Products" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997, 51(4), 166-171.

Uobičajeno korišćeni farmaceutski sastojci koji mogu da se odgovarajuće koriste sa ciljem da se formuliše kompozicija za njenu namenjenu rutu administracije uključuju:

agense za zakiseljivanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, sirćetnu kiselinu, limunsku kiselinu, fumarnu kiselinu, hlorovodoničnu kiselinu, azotnu kiselinu);

agense za alkalizovanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, rastvor amonijaka, amonijum karbonat, dietanolamin, monoetanolamin, kalijum hidroksid, natrijum borat, natrijum karbonat, natrijum hidroksid, trietanolamin, trolamin);

adsorbense (primeri uključuju, ali bez ograničenja, celulozu u prahu i aktivisani karkoal);

aerosol propelante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, karbon dioksid, CCl2F2, F2ClC-CClF2 i CClF3)

agense za zamenu vazduha (primeri uključuju, ali bez ograničenja, azot i argon);

anti-gljivične prezervative (primeri uključuju, ali bez ograničenja, benzojevu kiselinu, butilparaben, etilparaben, metilparaben, propilparaben, natrijum benzoat);

anti-mikrobne prezervative (primeri uključuju, ali bez ograničenja, benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid, benzil alkohol, cetilpiridinijum hlorid, hlorobutanol, fenol, feniletil alkohol, fenil-živin nitrat i timerosal);

antioksidanse (primeri uključuju, ali bez ograničenja, askorbinsku kiselinu, askorbil palmitat, butilovani hidroksianisol, butilovani hidroksitoluen, hipofosfornu kiselinu, monotioglicerol, propil galat, natrijum askorbat, natrijum bisulfit, natrijum formaldehid sulfoksilat, natrijum metabisulfit);

materijale za vezanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, blok polimere, prirodne i sintetske gume, poliakrilate, poliuretane, silikone, polisiloksane i stiren-butadien kopolimere);

agense za puferovanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, kalijum metafosfat, dikalijum fosfat, natrijum acetat, bezvodni natrijum citrat i natrijum citrat dihidrat)

agense za podlogu (primeri uključuju, ali bez ograničenja, sirup od akacije, aromatski sirup, aromatski eliksir, sirup od trešnje, sirup od kakaa, sirup od pomorandže, sirup, ulje od kukuruza, mineralno ulje, ulje od kikirikija, susamovo ulje, injekciju bakteriostatsku injekciju natrijum hlorida i bakteriostatsku vodu za injekciju)

agense za heliranje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, edetat dinatrijum i EDTA)

kolorante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, FD&C crveno br. 3, FD&C crveno br. 20, FD&C žuto br. 6, FD&C plavo br. 2, D&C zeleno br. 5, D&C narandžasto br. 5, D&C crveno br. 8, karamel i gvožđe(III) oksid);

agense za bistrenje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, bentonit);

agense za emulziju (primeri uključuju, ali bez ograničenja, akaciju, ketomakrogol, cetil alkohol, gliceril monostearat, lecitin, sorbitan monooleat, polioksietilen 50 monostearat);

agense za kapsuliranje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, želatin i celuloza acetat ftalat)

agense za ukus (primeri uključuju, ali bez ograničenja, ulje anisa, ulje cimeta, kokao, mentol, ulje pomorandže, ulje peperminta i vanilin);

humektante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, glicerol, propilen glikol i sorbitol);

agense za povećavanje rastvorljivosti (primeri uključuju, ali bez ograničenja, mineralno ulje i glicerin);

ulja (primeri uključuju, ali bez ograničenja, ulje od kikirikija, mineralno ulje, maslinovo ulje, ulje od kikirikija, susamovo ulje i biljno ulje);

baze za masti (primeri uključuju, ali bez ograničenja, lanolin, hidrofilnu mast, mast polietilen glikola, petrolatum, hidrofilni petrolatum, belu mast, žutu mast, i mast od ružine vode);

pojačivače penetracije (transdermalna dostava) (primeri uključuju, ali bez ograničenja, monohidroksi ili polihidroksi alkohole, mono- ili polivalentne alkohole, zasićene ili nezasićene masne alkohole, zasićene ili nezasićene masne estere, zasićene ili nezasićene dikarboksilne kiseline, esencijalna ulja, derivate fosfatidila, cefalin, terpene, amide, etere, ketone i uree);

plasticizere (primeri uključuju, ali bez ograničenja, dietil ftalat i glicerol);

rastvarače (primeri uključuju, ali bez ograničenja, etanol, ulje od kukuruza, ulje od semenaka pamuka, glicerol, izopropanol, mineralno ulje, oleinsku kiselinu, ulje od kikirikija, prečišćenu vodu, vodu za injektiranje, sterilnu vodu za injektiranje i sterilnu vodu za irigaciju);

agense za učvršćivanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, cetil alkohol, voskove od cetil estera, mikrokristalitne voskove, parafin, stearil alkohol, beli vosak i žuti vosak);

baze za čepiće (primeri uključuju, ali bez ograničenja, puter od kakaa i polietilen glikole (smeše);

surfaktante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, benzalkonijum hlorid, nonoksinol 10, okstoksinol 9, polisorbat 80, natrijum lauril sulfat i sorbitan mono-palmitat);

agense za suspendovanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, agar, bentonit, karbomere, karboksimetilcelulozu natrijum, hidroksietil celulozu, hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metilcelulozu, kaolin, metilcelulozu, tragakant i veegumu);

agense za zaslađivanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, aspartam, dekstrozu, glicerol, manitol, propilen glikol, saharin natrijum, sorbitol i saharozu);

tabletne anti-adherense (primeri uključuju, ali bez ograničenja, magnezijum stearat i talk);

tabletne veznike (primeri uključuju, ali bez ograničenja, akaciju, alginsku kiselinu, karboksimetilcelulozu natrijum, kompresibilni šećer, etilcelulozu, želatin, tečnu glikozu, metilcelulozu, polivinil pirolidon koji nije unakrsno povezan, i pre-želatinirani skrob);

tabletne i kapsularne diluente (primeri uključuju, ali bez ograničenja, dibazni kalcijum fosfat, kaolin, laktozu, manitol, mikrokristalitnu celulozu, celulozu u prahu, precipitovani kalcijum karbonat, natrijum karbonat, natrijum fosfat, sorbitol i skrob);

tabletne agense za omatanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, tečnu glikozu, hidroksietil celulozu, hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metilcelulozu, metilcelulozu, etilcelulozu, celulozu acetat ftalat i šelak);

tabletne ekscipijente za direktnu kompresiju (primeri uključuju, ali bez ograničenja, dibazni kalcijum fosfat);

tabletne dezintegrante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, alginsku kiselinu, karboksimetilcelulozu kalcijum, mikrokristalitnu celulozu, polakrilin kalijum, unakrsno povezani polivinilpirolidon, natrijum alginat, natrijum skrob glikolat i skrob);

tabletne glidante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, koloidnu siliku, kukuruzni skrob i talk);

tabletne lubrikante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, kalcijum stearat, magnezijum stearat, mineralno ulje, stearinsku kiselinu i cink stearat);

tabletne/kapsularne opakuante (primeri uključuju, ali bez ograničenja, titanijum dioksid);

tabletne agense za poliranje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, karnuba vosak i beli vosak);

agense za ugušćivanje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, pčelinji vosak, cetil alkohol i parafin);

agense za tonicitet (primeri uključuju, ali bez ograničenja, dekstrozu i natrijum hlorid);

agense koji povećavaju viskozitet (primeri uključuju, ali bez ograničenja, alginsku kiselinu, bentonit, karbomere, karboksimetilcelulozu natrijum, metilcelulozu, polivinil pirolidon, natrijum alginat i tragakant); i

agense za vlaženje (primeri uključuju, ali bez ograničenja, heptadekaetilen oksiketanol, lecitine, sorbitol monooleat, polioksietilen sorbitol monooleat, i polioksietilen stearat).

Farmaceutske kompozicije u skladu sa ovim pronalaskom mogu da se ilustruju kako sledi:

Sterilni IV rastvor: rastvor (5 mg/mL) željenog jedinjenja iz ovoga pronalaska može da se pripremi uz pomoć sterilne vode za injektiranje, a pH se podešava ako je potrebno. Ovaj rastvor se razređuje za administraciju do 1-2 mg/mL sa sterilnom dekstrozom (5%) pa se administrira kao IV infuzija tokom oko 60 min.

Liofilizovan prah za IV administraciju: sterilni preparat može da se pripremi sa (i) 100-1000 mg željenog jedinjenja iz ovoga pronalaska kao liofilizovani prah, (ii) 32-327 mg/mL natrijum citrat, i (iii) 300-3000 mg dekstrana 40. Ova formulacija se obnavlja sa sterilnim slanim rastvorom za injektiranje ili dekstrozom (5%) do koncentracije od 10 so 20 mg/mL, a sve je dodatno razređeno sa slanim rastvorom ili dekstrozom (5%) do 0.2-0.4 mg/mL, pa se administrira kao IV bolus ili uz pomoć IV infuzije tokom 15-60 min.

Intramišićna suspenzija: sledeći rastvor ili suspenzija može da se pripremi za intramišićnu injekciju:

50 mg/mL željenog jedinjenja iz ovoga pronalaska koje ne može da se rastvara u vodi

5 mg/mL natrijum karboksimetilceluloza

4 mg/mL TWEEN 80

9 mg/mL natrijum hlorid

9 mg/mL benzil alkohol

Kapsule sa tvrdim omotom: veliki broj unitarnih kapsula se priprema uz pomoć punjenja standardnih dvodelnih kapsula od čvrstog želatina pri čemu se u svaku doda 100 mg aktivnog sastojaka u prahu, 150 mg laktoze, 50 mg celuloze i 6 mg magnezijum stearata.

Kapsule od mekog želatina: smeša aktivnog sastojaka u nekom raspadljivom ulju poput ulja soje, ulja semenaka pamuka ili maslinovog se priprema i injektira (uz pomoć pumpe sa aksijalnim tokom) u rastopljeni želatin sa ciljem da se formiraju kapsule od mekog želatina koje sadrže 100 mg aktivnog sastojaka. Kapsule se peru i suše. Aktivni sastojak može da se rastvori u smeši polietilen glikola, glicerina i sorbitola sa ciljem da se pripremi medicinska smeša koja može da se meša u vodi.

Tablete: veliki broj tableta se priprema uz pomoć konvencionalnih procedura tako da dozna jedinica sadrži 100 mg aktivnog sastojaka, 0.2 mg koloidnog silikon dioksida, 5 mg magnezijum stearata, 275 mg mikrokristalitne celuloze, 11 mg skroba, i 98.8 mg laktoze. Odgovarajući vodeni i ne-vodeni omoti mogu da se primene sa ciljem da se poveća ukus, poboljša elegancija i stabilnost ili da se uspori apsorpcija.

Tablete/Kapsule za momentalno otpuštanje: ovo su čvrste oralne dozne forme načinjene uz pomoć konvencionalnih i novih procesa. Ove jedinice se uzimaju oralno bez vode sa ciljem momentalnog rastvaranja i dostave lekarstva. Aktivni sastojak se meša u tečnosti koja sadrži sastojak poput šećera, želatina, pektina i zaslađivaća. Ove tečnosti se prevode u čvrsto stanje tako da se načine tablete ili kapsule uz pomoć smrzavanja-sušenja i tehnika ekstrahovanja čvrstog stanja. Lekovita jedinjenja mogu da se komprimiraju uz pomoć viskoelastičnih i termoelastičnih šećera i polimera ili isparljivih komponenata koje stvaraju porozne matrice namenjene za momentalno otpuštanje, bez potrebe od dodavanja vode.

Postupak za tretman raka

U kontekstu ovoga pronalaska, termin "rak" uključuje, ali bez ograničenja, tumore dojke, pluća, mozak, reproduktivnih organa, digestivnog trakta, urinarnog trakta, jetra, oka, kože, glave i vrata, tiroidne žlezde, paratiroidne žlezde i metasteze pomenutih. Ovi poremećaji takođe uključuju multipni mijelom, limfome, sarkome, i leukemije.

Primeri raka dojke uključuju, ali bez ograničenja, invazivni karcinom duktusa, invazivni lobularni karcinom, in situ karcinom duktusa, i in situ lobularni karcinom.

Primeri tumora respiratornog trakta uključuju, ali bez ograničenja, mikrocelularni i nemikrocelularni karcinom pluća, kao i bronhijalni adenom i pleuropulmonarni blastom.

Primeri tumora mozga uključuju, ali bez ograničenja, gliom moždanih matičnih ćelija i hipoftalmički gliom, cerebelarni i cerebralni astrocitom, meduloblastom, ependimom, kao i neuroektodermalni tumor i tumor hipofize.

Tumori muških reproduktivnih organa uključuju, ali bez ograničenja, rak prostate i testisa. Tumori ženskih reproduktivnih organa uključuju, ali bez ograničenja, rak endometrija, cerviksa, jajnika, vagine, i vulve, kao i sarkom materice.

Tumori digestivnog trakta uključuju, ali bez ograničenja, tumore anusa, debelog creva, kolorektalni tumor, tumore jednjaka, žučnog mehura, želuca, pankreasa, rektuma, tankog creva, i pljuvačnih žlezda.

Tumori urinarnog trakta uključuju, ali bez ograničenja, tumore bešike, penisa, bubrega, bubrežnog pelvisa, uretera, uretre i humani rak bubrežnih papilarnih ćelija.

Tumori oka uključuju, ali bez ograničenja, intraokularni melanom i retinoblastom.

Primeri tumora jetra uključuju, ali bez ograničenja, hepatocelularni karcinom (karcinomi jetrinih ćelija sa ili bez fibrolamelarnom varijantom), holangiokarcinom (karcinom intrahepatičkog duktusa žući), i mešani hepatocelularni holangiokarcinom.

Tumori kože uključuju, ali bez ograničenja, karcinom skvamoznih ćelija, Kaposi-ev sarkom, maligni melanom, rak Merkel-ovih ćelija kože, i rak kože koji nije melanom.

Tumori glave-i-vrata uključuju, ali bez ograničenja, rak grkljana, hipofaringealni rak, nazofaringealni rak, orofaringealni rak, rak usana i oralne šupljine i skvamoznih ćelija.

Limfomi uključuju, ali bez ograničenja, limfom koji je povezan sa AIDS-om, ne-Hodgkin-ov limfom, limfom kutanih T-ćelija, Burkit-ov limfom, Hodgkin-ovu bolest, i limfom centralnog nervnog sistema.

Sarkomi uključuju, ali bez ograničenja, sarkom makog tkiva, osteosarkom, maligni fibrozni histiocitom, limfosarkom, i rabdomiosarkom.

Leukemije uključuju, ali bez ograničenja, akutnu mijeloidnu leukemiju, akutnu limfoblastičnu leukemiju, hroničnu limfocitnu leukemiju, hroničnu mijelogenu leukemiju, i leukemiju koštane srži.

Ovaj pronalazak opisuje postupak za korišćenje soli iz ovoga pronalaska, za tretman raka, kao šta je opisano infra, posebno NSCLC sisara, CRC, melanom, rak pankreasa, rak hepatocita ili rak dojke. Pomenuta so iz ovoga pronalaska može da se koristi sa ciljem da se inhibira, blokira, redukuje, smanji, itd., ćelijska proliferacija i/ili ćelijska deoba, i/ili potakne apoptoza, u tretmanu ili profilaksi raka, a posebno NSCLC, CRC, melanoma, raka pankreasa, hepatocitnog karcinoma ili raka dojke. Ovaj postupak obuhvata administriranje sisaru u potrebi, uključujući čoveka, određene količine kompozicije iz ovoga pronalaska, ili farmaceutski prihvatljive soli, njenog izomera, polimorfa, metabolita, hidrata, solvata ili estera; itd. koja je dovoljna za tretman ili profilaksu raka, a posebno NSCLC, CRC, melanoma, raka pankreasa, hepatocitnog karcinoma ili raka dojke.

Termin "tretirati" ili "tretman", kao šta se ovde koriste, se koriste konvencionalno, na primer, briga za subjekta sa ciljem napadanja, ublažavanja, smanjivanja, oslobađanja, poboljšanja nekog stanja, itd., neke bolesti ili poremećaja, poput karcinoma.

Doza i administracija

Na bazi standardnih laboratorijskih tehnika koje mogu da procene jedinjenja koja su korisna za tretmana ili profilaksu raka, a posebno NSCLC, CRC, melanoma, raka pankreasa, hepatocitnog karcinoma ili raka dojke, uz pomoć standardnih testova toksičnosti i standardnih farmakoloških testova za određivanje tretmana malopre navedenih stanja kod sisara, i uz pomoć uporedbe ovih rezultata sa rezultatima poznatih lekova koji se koriste za tretman pomenutih stanja, može da se odredi efektivna doza soli iz ovoga pronalaska sa ciljem tretmana navedene indikacije. Količina aktivnog sastojaka koji treba da se administrira tokom pomenutog tretmana navedenih stanja može široko da varira zbog više faktora, uključujući, ali bez ograničenja, određeni tip kompozicije i korišćenu doznu jedinicu, modus administracije, period tretmana, dob i pol tretiranog pacijenta, i prirodu i razmere tretiranog stanja.

Ukupna količina aktivnog sastojaka koji se administrira generalno se kreće u rasponu od oko 0.001 mg/kg do oko 200 mg/kg telesne težine po danu, a preferirano od oko 0.01 mg/kg do oko 20 mg/kg telesne težine po danu. Klinički korisni dozni rasporedi se kreću u rasponu od jednom do tri puta na dan pa do jednom svake četiri sedmice. Dodatno, "odmori od tretmana" tokom kojih se pacijent ne tretira kroz određeni vremenski period, mogu da budu korisni za ukupnu ravnotežu između farmakološkog efekta i tolerabilnosti. Unitarna doza može da sadrži od oko 0.5 mg do oko 1,500 mg aktivnog sastojaka, i može da se administrira jednom ili više puta po danu ili manje od jedom na dan. Prosečna dnevna doza za administraciju uz pomoć injekcije, uključujući intravenoznu, intramišićnu, supkutanu i parenteralnu injekciju, i upotreba tehnika infuzije će se preferirano kretati od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni rektalni dozni režim se preferirano kreće od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni vaginalni dozni režim se preferirano kreće od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni topikalni dozni režim se preferirano kreće od 0.1 do 200 mg koji se administriraju između jednom i četiri puta na dan. Kao transdermalna koncentracija je preferirano ona koja je potrebna da održava dnevnu dozu od 0.01 do 200 mg/kg. Prosečna dnevna doza za inhaliranje se preferirano kreće od 0.01 do 100 mg/kg ukupne telesne težine.

Specifični inicijalni i kontinuirani dozni režim za svakog pacijenta će varirati u skladu sa prirodom i snagom stanja prema odlici dijagnostičara, aktivnosti specifične kompozicije koja se koristi, dobi i opšteg stanja samog pacijenta, vremena administracije, rute administracije, rate izlučivanja leka, soli leka, i slično. Željeni modus za tretman i broj doza kompozicije iz ovoga pronalaska ili farmaceutski prihvatljive soli ili estera ili njihova kompozicija mogu da se odrede od strane stručnjaka u polju uz pomoć konvencionalnih testova za tretman.

Terapije koje koriste so iz ovoga pronalaska: jedan ili više dodatnih farmaceutskih agenasa.

So iz ovoga pronalaska može da se administrira kao pojedinačni farmaceutski agens ili zajedno sa jednim ili više dodatnih farmaceutskih agenasa pri čemu nastala kompozicija pomenute soli iz ovoga pronalaska i dodatnog farmaceutskog agensa ne dovodi do pojave neprihvatljivih štetnih efekata. Na primer, so iz ovoga pronalaska može da se kombinuje sa komponentom C, tj. jednim ili više dodatnih farmaceutskih agenasa, poput poznatih agenasa protiv angiogeneze, hiper-proliferacije, zapaljenja, i analgetika, imunoregulatornih agenasa, diuretika, agenasa protiv aritmije, hiperholsterolemije, dislipidemije, dijabetesa ili agenasa protiv virusa, i slično, kao i njihove smeše i soli.

Komponenta C može da uključuje jedan ili više farmaceutskih agenasa poput aldesleukina, alendroničke kiseline, alfaferona, alitretinoina, alopurinola, aloprima, aloksi, altretamina, aminoglutetimida, amifostina, amrubicina, amsakrina, anastrozola, anzmeta, aranespa, arglabina, arsen-trioksida, aromasina, 5-azacitidina, azatioprina, BCG ili tice BCG, bestatina, betametazon acetata, betametazon natrijum fosfata, beksarotena, bleomicin sulfata, broksuridina, bortezomiba, busulfana, kalcitonina, kampata, kapecitabina, karboplatine, kasodeksa, cefesona, celmoleukina, cerubidina, hlorambucila, cisplatine, kladribina, kladribina, klodroničke kiseline, ciklofosfamida, citarabina, dakarbazina, daktinomicina, daunoksoma, dekadrona, dekadron fosfata, delestrogena, denileukin diftitoksa, depo-medrola, deslorelina, deksometazona, deksrazoksana, dietilstilbestrola, diflukana, docetaksela, doksifluridina, doksorubicina, dronabinola, DW-166HC, eligarda, eliteka, elence, emenda, epirubicina, epoetin alfa, epogena, eptaplatine, ergamisola, estrace, estradiola, estramustin fosfat natrijuma, etinil estradiola, etiola, etidroničke kiseline, etopofosa, etoposida, fadrozola, farstona, filgrastima, finasterida, fligrastima, floksuridina, flukonazola, fludarabina, 5-fluorodeoksiuridin monofosfata, 5-fluorouracila (5-FU), fluoksimesterona, flutamida, formestana, fosteabina, fotemustina, fulvestranta, gamagarda, gemcitabina, gemtuzumaba, gliveka, gliadela, goserelina, granisetron HCl, histrelina, hikamtina, hidrokortona, eirtro-hidroksinoniladenina, hidroksiuree, ibritumomab tiuksetana, idarubicina, ifosfamida, interferon alfa, interferon-alfa 2, interferon alfa-2A, interferon alfa-2B, interferon alfa-n1, interferon alfa-n3, interferon beta, interferon gama-1a, interleukin-2, intron A, iresa, iriprimedbakana, kitrila, lentinan sulfata, letrozola, leukovorina, leuprolida, leuprolid acetata, lenalidomida, levamisola, kalcijumove soli levofolinske kiseline, levotroida, levoksila, lomustina, lonidamina, marinola, mehloretamina, mekobalamina, medroksiprogesteron acetata, megestrol acetata, melfalana, menesta, 6-merkaptopurina, mesna, metotreksata, metviksa, miltefosina, minociklina, mitomicin C, mitotana, mitoksantrona, modrenala, mioceta, nedaplatine, neulasta, neumega, neupogena, nilutamida, nolvadeksa, NSC-631570, OCT-43, oktreotida, ondansetron HCl, orapreda, oksaliplatine, paklitaksela (kada komponenta B nije sama paklitaksel), pediapreda, pegaspargaza, pegasisa, pentostatina, picibanila, pilokarpin HCl, pirarubicina, plikamicina, porfimer natrijuma, prednimustina, prednisolona, prednisona, premarina, prokarbazina, prokrita, raltitrekseda, RDEA 119, rebifa, renijum-186 etidronata, rituksimaba, roferon-A, romurtida, salagena, sandostatina, sargramostima, semustina, sizofirana, sobuzoksana, solu-medrola, sparfosinske kiseline, terapije matičnim ćelijama, streptozocina, strontijum-89 hlorida, sintroida, tamoksifena, tamsulosina, tasonermina, tastolaktona, taksotera, teceleukina, temozolomida, tenipozida, testosteron propionata, testreda, tiogvanina, tiotepe, tirotropina, tiludronske kiseline, topotekana, toremifena, tositumomaba, trastuzumaba, treosulfana, tretinoina, treksala, trimetilmelamina, trimetreksata, triptorelin acetata, triptorelin pamoata, UFT, uridina, valrubicina, vesnarinona, vinblastina, vinkristina, vindezina, vinorelbina, virulizina, zinekarda, zinostatin stimalamera, zofrana, ABI-007, akolbifena, aktimuna, afinitaka, aminopterina, arzoksifena, azoprisnila, atamestana, atrasentana, BAY 43-9006 (sorafenib), avastina, CCI-779, CDC-501, celebreksa, cetuksimaba, krisnatola, ciproteron acetata, decitabina, DN-101, doksorubicin-MTC, dSLIM, dutasterida, edotekarina, eflornitina, eksatekana, fenretinida, histamin dihidrohlorida, implanta od histrelin-hidrogela, holmijum-166 DOTMP, ibandroničke kiseline, interferona gama, intron-PEG, iksabepilona, keyhole-limpet hemocijanina, L-651582, lanreotida, lasofoksifena, libre, lonafarniba, miproksifena, minodronata, MS-209, liposomalnog MTP-PE, MX-6, nafarelina, nemorubicina, neovastata, nolatrekseda, oblimersena, onko-TCS, osidema, paklitaksel poliglutamata, pamidronat dinatrijuma, PN-401, QS-21, kvazepama, R-1549, raloksifena, ranpirnaze, 13-cis-retinoičke kiseline, satraplatine, seokalcitola, T-138067, tarceve, taksopreksina, talidomida, timozin alfa 1, tiazofurina, tipifarniba, tirapazamina, TLK-286, toremifena, transMID-107R, valspodara, vapreotida, vatalaniba, verteporfina, vinflunina, Z-100, zoledroničke kiseline ili njihovih soli.

U jednoj izvedbi iz ovoga pronalaska, komponenta C može da uključuje jedan ili više od sledećih: 1311-chTNT, abareliks, abirateron, aklarubicin, aldesleukin, alemtuzumab, alitretinoin, altretamin, aminoglutetimid, amrubicin, amsakrine, anastrozol, arglabin, arsen trioksid, asparaginaza, azacitidin, basiliksimab, BAY 80-6946, BAY 1000394, BAY 86-9766 (RDEA 119), belotekan, bendamustin, bevacizumab, beksaroten, bikalutamid, bisantren, bleomicin, bortezomib, buserelin, busulfan, kabazitaksel, kalcijum folinat, kalcijum levofolinat, capecitabin, karboplatina, karmofur, karmustin, katumaksomab, celekoksib, celmoleukin, cetuksimab, hlorambucil, hlormadinon, hlormetin, cisplatina, kladribin, klodronska kiselina, klofarabin, krisantaspaza, ciklofosfamid, ciproteron, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, darbepoetin alfa, dasatinib, daunorubicin, decitabin, degareliks, denileukin diftitoks, denosumab, deslorelin, dibrospidijum hlorid, docetaksel, doksifluridin, doksorubicin, doksorubicin + estron, ekulizumab, edrekolomab, eliptinijum acetat, eltrombopag, endostatin, enocitabin, epirubicin, epitiostanol, epoetin alfa, epoetin beta, eptaplatina, eribulin, erlotinib, estradiol, estramustin, etopozid, everolimus, eksemestan, fadrozol, filgrastim, fludarabin, fluorouracil, flutamid, formestan, fotemustin, fulvestrant, galijum nitrat, ganireliks, gefitinib, gemcitabin, gemtuzumab, glutoksim, goserelin, histamin dihidrohlorid, histrelin, hidroksikarbamid, I-125 seme, ibandronička kiselina, ibritumomab tiuksetan, idarubicin, ifosfamid, imatinib, imikvimod, improsulfan, interferon alfa, interferon beta, interferon gama, ipilimumab, iriprimedbakan, iksabepilon, lanreotid, lapatinib, lenalidomid, lenograstim, lentinan, letrozol, leuprorelin, levamizol, lisurid, lobaplatina, lomustin, lonidamin, masoprokol, medroksiprogesteron, megestrol, melfalan, mepitiostan, merkaptopurin, metotreksat, metokssalen, metil aminolevulinat, metiltestosteron, mifamurtid, miltefosin, miriplatina, mitobronitol, mitoguazon, mitolaktol, mitomicin, mitotan, mitoksantron, nedaplatina, nelarabin, nilotinib, nilutamid, nimotuzumab, nimustin, nitrakrin, ofatumumab, omeprazol, oprelvekin, oksaliplatin, genska terapija sa p53, paklitaksel, palifermin, paladijum-103 seme, pamidronička kiselina, panitumumab, pazopanib, pegaspargaza, PEG-epoetin beta (metoksi PEG-epoetin beta), pegfilgrastim, peginterferon alfa-2b, pemetreksed, pentazocin, pentostatin, peplomicin, perfosfamid, picibanil, pirarubicin, pleriksafor, plikamicin, poliglusam, poliestradiol fosfat, polisaharid-K, porfimer natrijum, pralatreksat, prednimustin, prokarbazin, hinagolid, raloksifen, raltitreksed, ranimustin, razoksan, regorafenib, risedronička kiselina, rituksimab, romidepsin, romiplostim, sargramostim, sipuleucel-T, sizofiran, sobuzoksan, natrijum glicididazol, sorafenib, streptozocin, sunitinib, talaporfin, tamibaroten, tamoksifen, tasonermin, teceleukin, tegafur, tegafur + gimeracil + oteracil, temoporfin, temozolomid, temsirolimus, teniposid, testosteron, tetrofosmin, thalidomid, tiotepa, timalfasin, tiogvanin, tocilizumab, topotekan, toremifen, tositumomab, trabektedin, trastuzumab, treosulfan, tretinoin, trilostan, triptorelin, trofosfamid, triptofan, ubenimeks, valrubicin, vandetanib, vapreotid, vemurafenib, vinblastin, vinkristin, vindezin, vinflunin, vinorelbin, vorinostat, vorozol, staklene mikrosfere od itrijum-90, zinostatin, zinostatin stimalamer, zoledronička kiselina, zorubicin. Alternativno, pomenuta komponenta C može da uključuje jedan ili više od dodatnih farmaceutskih agenasa koji su izabrani iz gemcitabina, paklitaksela (kada komponenta B nije sama paklitaksel), cisplatine, karboplatine, natrijum butirata, 5-FU, doksirubicina, tamoksifena, etoposida, trastumazaba, gefitiniba, introna A, rapamicina, 17-AAG, U0126, insulina, nekog derivata insulina, PPAR liganda, leka sulfoniluree, nekog inhibitora α-glukozidaze, bigvanida, nekog inhibitora PTP-1 B, nekog inhibitora DPP-IV, nekog inhibitora 11-beta-HSD, GLP-1, nekog derivata GLP-1, GIP, nekog derivata GIP, PACAP, nekog derivata PACAP, sekretina ili nekog derivata sekretina.

Alternativno, pomenuta komponenta C može da uključuje jedan ili više od farmaceutskih agenasa izabranih iz: taksana, poput Docetaksela, Paclitaksela, ili Taksola; nekog epotilona, poput Iksabepilona, Patupilona, ili Sagopilona; Mitoksantrona; Predinisolona; Deksametazona; Estramustina; Vinblastina; Vinkristina; Doksorubicina; Adriamicina; Idarubicina; Daunorubicina; Bleomicina; Etopozida; Ciklofosfamida; Ifosfamida; Prokarbazina; Melfalana; 5-Fluorouracila; Kapecitabina; Fludarabina; Citarabins; Ara-C; 2-Hloro-2'-deoksiadenozina; Tiogvanina; nekog anti-androgena, poput Flutamida, Ciproteron acetata, ili Bikalutamida; Bortezomiba; derivata platine, poput Cisplatine, ili Karboplatine; Hlorambucila; Metotreksata; i Rituksimaba.

Agensi protiv hiper proliferacije, koji mogu ponekad da se koriste, i koji mogu kao komponenta C da se dodaju u pomenutu kompoziciju soli iz ovoga pronalaska uključuju, ali bez ograničenja, jedinjenja koja su izlistana u režimima hemoterapija protiv raka u 11. izdanju Merck Index, (1996), koje je vode uključeno referencom, poput asparaginaze, bleomicina, karboplatine, karmustina, hlorambucila, cisplatine, kolaspaze, ciklofosfamida, citarabina, dakarbazina, daktinomicina, daunorubicina, doksorubicina (adriamicina), epirubicina, etopozida, 5-fluorouracila, heksametilmelamina, hidroksiuree, ifosfamida, iriprimedbakana, leukovorina, lomustina, mehloretamina, 6-merkaptopurina, mesne, metotreksata, mitomicina C, mitoksantrona, prednizolona, prednizona, prokarbazina, raloksifena, streptozocina, tamoksifena, tiogvanina, topotekana, vinblastina, vinkristina, i vindezina.

Drugi anti-hiper-proliferativni agensi prikladni za upotrebu kao komponenta C sa pomenutom kompozicijom iz ovoga pronalaska uključuju, ali bez ograničenja, ona jedinjenja za koje se zna da se koriste u tretmanu neoplazija, a navedena su u The Pharmacological Basis of Therapeutics (9. izdanje) od Goodman & Gilman, urednik Molinoff et al., izdano od McGraw-Hill, str. 1225-1287, (1996), koje je ovde uključeno referencom, poput aminoglutetimida, L-asparaginaze, azatioprina, 5-azacitidin kladribina, busulfana, dietilstilbestrola, 2',2'-difluorodeoksicitidina, docetaksela, eritrohidroksinonil adenina, etinil estradiola, 5-fluorodeoksiuridina, 5-fluorodeoksiuridin monofosfata, fludarabin fosfata, fluoksimesterona, flutamida, hidroksiprogesteron kaproata, idarubicina, interferona, medroksiprogesteron acetata, megestrol acetata, melfalana, mitotana, paklitaksela (kada komponenta B nije sama paklitaksel), pentostatina, N-fosfonoacetil-L-aspartata (PALA), plikamicina, semustina, tenipozida, testosteron propionata, tiotepe, trimetilmelamina, uridina, i vinorelbina.

Drugi anti-hiper-proliferativni agensi prikladni za upotrebu kao komponenta C u kompoziciji sa soli iz ovoga pronalaska uključuju, ali bez ograničenja, druge agense protiv tumora poput epotilona i njegovih derivata, iriprimedbakana, raloksifena i topotekana.

Opšte uzeto, primena citotoksičnih i/ili citostatskih agenasa kao komponenta C u kompoziciji sa soli iz ovoga pronalaska služi za:

(1) postizanje bolje efikasnosti smanjivanja rasta tumora ili čak eliminacije samog tumora upoređeno sa administracijom bilo kojeg agensa samog za sebe,

(2) obezbeđivanje manjih količina hemoterapeutskih agenasa za administriranje,

(3) obezbeđivanje hemoterapeutskog tretmana kojeg pacijent dobro podnosi uz manje štetnih farmakoloških komplikacija u odnosu na hemoterapije sa pojedinačnim agensom i u odnosu na neke druge kombinovane terapije,

(4) ostvarivanje tretmana sa širim spektrom koji se odnosi na različite tipove raka kod sisara, posebno ljudi,

(5) obezbeđivanje više rate odgovora među tretiranim pacijentima,

(6) obezbeđivanje dužeg perioda preživljenja među pacijentima u odnosu na standardne hemoterapeutske tretmane,

(7) obezbeđivanje dužeg perioda progresije tumora, i/ili

(8) postizanje efikasnosti i tolerantnosti koje su dobre barem kod pojedinačnih agenasa u odnosu na poznate instancije kada drugi agensi u formi soli protiv tumora stvaraju antagonističke efekte.

BIOLOŠKI DEO

Test PI3Kα i PI3Kβ radioaktivne lipidne kinaze

p110α biohemijski test je radioaktivni test koji meri ugradnju 33P u p110α supstrat, fosfatidilinzoitol (PI). Ovaj test je modifikacija testa koji je razvijen na RCK (Fuchikami et, al., 2002). His-označena N-terminalno skraćena (ΔN 1-108) p110α i iste skraćene p110β (ΔN 1-108) belančevine kojima nedostaje p85-vezni domen su eksprimirane u Sf9 ćelijama pa su prečišćene do >50% čistoće. Za konstrukciju IC50 kriva, reakcija je provedena u MaxiSorp pločicama sa 384-rupica u sledećim uslovima. Pločice su prekrivene sa 2 µg/rupici fosfatidilinozitola (PI: Avanti #840042C) i fosfatidilserina (PS: Avanti #840032C) u molarnom omeru od 1:1, pri čemu su pomenuti bili razređeni u hloroformu. Organski rastvarač je ostavljen da ispari tako da su pločice ostavljene u digestoru tokom noći. Pločice su tada pokrivene sa specijalnim poklopcima i ostavljene tokom perioda od jednog meseca na 4° C dok nije bilo dovoljno. U svaku rupicu je dodano 7.5 ng skraćene prečišćene p110α belančevine, koja je sadržavala 9 µL reakcionog pufera (50 mM MOPSO pH 7.0, 100 mM NaCl, 4 mM MgCl2, 0.1%(w/v) BSA) izuzimajući rupice za negativnu kontrolu koje su primile samo reakcioni pufer. Jedan mikrolitar svakog testnog jedinjenja u DMSO je prenesen iz osnovnih razređenja sa ciljem da se dobije dozni odgovor od osam tačaka (0.0, 0.003, 0.01 0.03, 0.1, 0.3, 1.0, 3.0 i 10 µM finalna koncentracija BAY jedinjenja). Reakcije su započete uz pomoć dodavanja 5 µL 40 µM rastvora ATP koji je sadržavao 20 µCi/ml [γ-33P]-ATP pa su ostavljene da stoje tokom dva časa na sobnoj temperaturi uz blago mešanje. Reakcije su zaustavljene uz pomoć dodavanja 5µL 25 mM osnovnog rastvora EDTA. Pločice su isprane sa sredstvom za ispiranje pločica sa 384-rupica u puferu bez deterdženta, a nakon toga je dodano 25 µL UltimaGold scincilacijskog koktela u svaku rupicu. Radioaktivnost koja se ugradila u imobilizirani PI supstrat je određena sa aparatom BetaPlate Liquid Scintillation Counter. Inhibicija je izračunata uz pomoć sledeće jednačine:

%inhibicije = 1–(Tcpm – Bcpm)/(Pcpm – Bcpm) x 100.

Tcpm = 33P-cpm u prisustvu testnog jedinjenja

Bcpm = 33P-cpm u pozadinskoj kontroli (bez encima)

Pcpm = 33P-cpm u p110 encimskoj kontroli (bez inhibitora)

Vrednosti IC50 za slobodnu bazu i dihidrohloridnu so iz biohemijskih testova p110α i p110β su prikazani u Tabeli A. Dva jedinjenja su pokazala slične aktivnosti u oba biohemijska testa, PI3Kα i PI3Kβ. Blago bolji potencijal kod dihidrohloride soli može biti zbog poboljšane rastvorljivosti.

Tabela A. Delovanje slobodne baze i dihidrohloridne soli u testu PI3Kα i PI3Kβ

Jedinjenje

PI3Kα IC50 (M)

PI3Kβ IC50 (M)

Slobodna baza

4.96E-10

3.72E-09

Dihidrohloridna so

1.23E-10

1.00E-09

Testovi proliferacije

Ćelijska proliferacija se određuje uz pomoć kompleta hemikalija Cell Titer-Glo luminescent cell viability kit od Promega (Kat. #G7573) nakon izlaganja lekovima tokom 72 h. Ukratko, ćelije su uzgajane u gustoći od 500-1000 ćelija/rupici u pločicama sa 384-rupica u 25 µL medijuma za rast. Za svaku proverenu ćelijsku liniju, ćelije su uzgajane u odvojenoj pločici sa ciljem određivanja luminescencije tokom t = 0 h i t = 72 h (vremenske tačke). Nakon preko-noćne inkubacije na 37° C, vrednosti luminescencije za primerke kod t = 0 su određeni uz pomoć dodavanja 25 µL rastvora Cell Titer-Glo po rupici, pri čemu se pločice prenose na orbitalni šejker tokom 10 min na sobnoj temperaturi, a tada sledi očitanje pločica na aparatu Wallac Victor2 1420 Multilabel HTS Counter koristeći prozor za luminometriju (maksimalna svetlosna detekcija je izmerena kod 428 nM). Dozne pločice kod t = 72 h su tretirane sa jedinjenjima koja su razređena u medijumu za rast u finalnom volumenu od 30 µL. Ćelije su inkubirane tokom 72 h na 37° C. Vrednosti luminescencije za primerke kod t = 72 h su određene uz pomoć dodavanja 30 µL rastvora Cell Titer-Glo od Promega, pri čemu su ćelije držane na šejker tokom 10 min na sobnoj temperaturi, a tada je očitana luminescencija koristeći luminometar Victor. Za potrebe procesiranja podataka, vrednosti kod t = 0 su oduzete iz onih koje su određene kod t = 72 h za tretirane i netretirane primerke. Procentulane razlike između primeraka koji su tretirani sa lekom i kontrola se koriste da se odredi procentualna inhibicija rasta.

U panelu 16 tumorskih ćelijskih linija koje obuhvataju 6 tumorskih indikacija, slobodna baza i dihidrohloridna so su pokazali snažnu anti-proliferativnu aktivnost, a razlika između vrednosti IC50 je bila manja od 3-puta kod svih testiranih linija tumorskih ćelija. Ovi podaci jasno pokazuju da dihidrohloridna so zadržava anti-tumorsko delovanje slobodne baze.

Tabela B. Anti-proliferativna aktivnost slobodne baze i dihidrohlorida u testovima proliferacije linija tumorskih ćelija

Ćelijska linija

Tkivo

IC50 za slobodnu bazu (nM)

IC50 za dihidrohloridnu so (nM)

IC50 omer

KPL4

Dojka

3

3

1,0

BT474

5

10

0,5

T47D

6

2

2,8

BT20

6

2

3,1

MCF7

27

9

3,0

MDA-MB-468

760

256

3,0

SK-Br-3

2

1

1,5

LNCaP

Prostata

69

67

1,0

PC3

100

90

1,1

Colo205

Debelo crevo

48

110

0,4

HT29

27

10

2,7

HCT116

56

72

0,8

A549

Pluća

37

44

0,8

H460

46

67

0,7

U87MG

Mozak

85

85

1,0

786O

Bubreg

116

247

0,5

Reference:

Fuchikami K, Togame H, Sagara A, Satoh T, Gantner F, Bacon KB, Reinemer P. J Biomol Screen. 7(5):441-50 (2002). A versatile high-throughput screen for inhibitors of lipid kinase activity: development of an immobilized phospholipid plate assay for phosphoinositide 3-kinase gamma.

Talasni broj cm-1

SLIKA 1

IR spektar za dihidrohlorid sa formulom (II)

SLIKA 2

Ramanov spektar za dihidrohlorid sa formulom (II)

Talasni broj cm-1

Talasna dužina (nm)

SLIKA 3

UV/VIS spektar za dihidrohlorid sa formulom (II)

1H-NMR spektar za dihidrohlorid sa formulom (II)

SLIKA 4

SLIKA 5

13C-NMR spektar za dihidrohlorid sa formulom (II)

SLIKA 6

13C-NMR spektri za dihidrohlorid sa formulom (II)

SLIKA 7

Maseni spektar za dihidrohlorid sa formulom (II)

56

Claims (16)

1.Dihidrohloridna so 2-amino-N-[7-metoksi-8-(3-morfolin-4-ilpropoksi)-2,3-dihidroimidazo[1,2-c]hinazolin-5-il]pirimidin-5-karboksamida, naznačena time, što ima formulu (II):ili njen solvat, hidrat ili tautomer.

2.Dihidrohloridna so sa formulom (II) u skladu sa zahtevom 1, naznačena time, što se nalazi u formi kristalita.

3.Postupak za pripremu dihidrohloridne soli u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačen time, što pomenuti postupak obuhvata dodavanje hlorovodonične kiseline jedinjenju sa formulom (I): preferirano u suspenziji, pri čemu nastaje pomenuta dihidrohloridna so sa formulom (II):

4.Postupak u skladu sa zahtevom 3, naznačen time, što obuhvata: a)dodavanje hlorovodonične kiseline, poput na primer vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (32%), u suspenziju pomenutog jedinjenja sa formulom (I) u medijumu, poput vode na primer, na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, kao na primer na temperaturi od 20° C (+/-2°), do postizanja pH od 3 do 4; b)mešanje nastale smeše na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, kao na primer na sobnoj temperaturi, tokom perioda više od 10 min na primer; i, ponekad c)filtriranje nastale čvrste materije i ispiranje filterskog kolača, poput na primer sa vodom, a tada podešavanje pH filtrata od 1.8 do 2.0 uz pomoć hlorovodonične kiseline, na primer vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (32%); i, ponekad, d)mešanje pomenute smeše tokom perioda od, na primer, 10 min, na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, kao na primer na sobnoj temperaturi, uz dodavanje etanola, a nakon toga sledi dodatno mešanje tokom perioda od, na primer 10 min; i, ponekad, e)dodavanje semena kristala, a ponekad sledi dodavanje etanola tokom perioda od, na primer 5 h; i, ponekad, f)filtriranje nastalog dihidrohlorida sa formulom (II), ponekad ispiranje sa smešom voda-etanol, a ponekad sušenje, poput na primer in vacuo, pri čemu nastaje dihidrohloridna so u skladu sa zahtevom 1 ili 2.

5.Postupak u skladu sa zahtevom 3, naznačen time, što obuhvata: a)dodavanje pomenute hlorovodonične kiseline u pomenuto jedinjenje sa formulom (I) u smeši aceton/voda ili etanol/voda, na primer; a, tada, ponekad, b)grejanje na temperaturi između tačke ključanja i tačke smrzavanja pomenute smeše, na primer na 40 do 60° C, kao na primer na 50° C, tokom preferiranog perioda od na primer 0,2 do 2 h, kao na primer tokom 0,5 h; a tada, ponekad, c)dodatno grejanje na temperaturi između tačke ključanja i tačke smrzavanja pomenute smeše, poput na primer na 30 do 40° C, kao na primer na 35° C, tokom perioda od na primer 1 do 4 h, ponekad uz mešanje pomenute suspenzije na temperaturi između tačke ključanja i tačke smrzavanja pomenute smeše, kao na primer na 10 do 45° C, kao na primer na 35° C, tokom preferiranog perioda od na primer 12 do 72 h, kao na primer tokom 72 h, a ponekad sledi mešanje pomenute suspenzije na temperaturi između tačke smrzavanja i tačke ključanja pomenute smeše, kao na primer na temperaturi, tokom perioda od 0 do 4 h, kao na primer tokom 2 h; i, ponekad, d)filtriranje, a ponekad ispiranje i sušenje, pri čemu dolazi do nastanka dihidrohloridne soli u skladu sa zahtevom 1 ili 2.

6.Postupak u skladu sa zahtevom 3 ili 5, naznačen time, što je pomenuta hlorovodonična kiselina koncentrisani vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (36% HCl) i kao takva se dodaje u pomenuto jedinjenje sa formulom (I) u smeši aceton/voda (8:2 v/v), a nakon toga sledi grejanje na temperaturi od 50° C, tokom perioda od 0,5 h, a tada sledi dodatno grejanje, na temperaturi od 35° C, tokom perioda od 72 h, a tada sledi mešanje pomenute suspenzije na sobnoj temperaturi, tokom perioda od 2 h, a nakon toga sledi filtracija, ispiranje sa smešom aceton/voda, i sušenje u pećnici u vakuumu (na primer 40° C, 100 mbar, 16 h), pri čemu nastaje pomenuta dihidrohloridna so u skladu sa zahtevom 1 ili 2.

7.Upotreba jedinjenja sa formulom (I): naznačena time, što se pomenuto jedinjenje upotrebljava za pripremu dihidrohloridne soli sa formulom (II):

8.Dihidrohloridna so u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačena time, što se upotrebljava u tretmanu i/ili profilaksi neke bolesti.

9.Upotreba dihidrohloridne soli u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačena time, što se pomenuta so koristi za pripremu leka za tretman i/ili profilaksu neke bolesti, posebno hiper-proliferativnog poremećaja i/ili poremećaja angiogeneze, još preciznije za tretman ili profilaksu raka, posebno raka pluća, još preciznije nemikrocelularnog karcinoma pluća, kolorektalnog raka, melanoma, raka pankreasa, hepatocitnog karcinoma, ili raka dojke.

10.Upotreba dihidrohloridne soli u skladu sa zahtevom 9, naznačena time, što je pomenuti rak neki limfom.

11.Upotreba dihidrohloridne soli u skladu sa zahtevom 10, naznačena time, što pomenuti limfom je izabran iz limfoma koji je povezan sa AIDS-om, ne-Hodgkin-ovog limfoma, limfoma kutanih T-ćelija, Burkitt-ovog limfoma, Hodgkin-ove bolesti, i limfoma centralnog nervnog sistema.

12.Upotreba dihidrohloridne soli u skladu sa zahtevom 10 ili 11, naznačena time, što pomenuti limfom je ne-Hodgkin-ov limfom.

13.Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što obuhvata dihidrohloridnu so u skladu sa zahtevom 1 ili 2.

14.Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži dihidrohloridnu so u skladu sa zahtevom 1 ili 2, i neki dodatni farmaceutski agens.

15.Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što obuhvata dihidrohloridnu so u skladu sa zahtevom 1 ili 2, i jedan ili više dodatnih farmaceutskih agenasa.

16.Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevom 15, naznačena time, što pomenuti dodatni farmaceutski agens je izabran iz: 1311-chTNT, abareliksa, abiraterona, aklarubicina, aldesleukina, alemtuzumaba, alitretinoina, altretamina, aminoglutetimida, amrubicina, amsakrina, anastrozola, arglabina, arsen trioksida, asparaginaze, azacitidina, basiliksimaba, BAY 80-6946, BAY 1000394, BAY 86-9766 (RDEA 119), belotekana, bendamustina, bevacizumaba, beksarotena, bikalutamida, bisantrena, bleomicina, bortezomiba, buserelina, busulfana, kabazitaksela, kalcijum folinata, kalcijum levofolinata, capecitabina, karboplatine, karmofura, karmustina, katumaksomaba, celekoksiba, celmoleukina, cetuksimaba, hlorambucila, hlormadinona, hlormetina, cisplatine, kladribina, klodroničke kiseline, klofarabina, krisantaspaze, ciklofosfamida, ciproterona, citarabina, dakarbazina, daktinomicina, darbepoetin alfa, dasatiniba, daunorubicina, decitabina, degareliksa, denileukin diftitoksa, denosumaba, deslorelina, dibrospidijum hlorida, docetaksela, doksifluridina, doksorubicina, doksorubicina + estrona, ekulizumaba, edrekolomaba, eliptinijum acetata, eltrombopaga, endostatina, enocitabina, epirubicina, epitiostanola, epoetin alfa, epoetin beta, eptaplatine, eribulina, erlotiniba, estradiola, estramustina, etopozida, everolimusa, eksemestana, fadrozola, filgrastima, fludarabina, fluorouracila, flutamida, formestana, fotemustina, fulvestranta, galijum nitrata, ganireliksa, gefitiniba, gemcitabina, gemtuzumaba, glutoksima, goserelina, histamin dihidrohlorida, histrelina, hidroksikarbamida, I-125 semena, ibandroničke kiseline, ibritumomab tiuksetana, idarubicina, ifosfamida, imatiniba, imikvimoda, improsulfana, interferon alfa, interferon beta, interferon gama, ipilimumaba, iriprimedbakana, iksabepilona, lanreotida, lapatiniba, lenalidomida, lenograstima, lentinana, letrozola, leuprorelina, levamizola, lisurida, lobaplatine, lomustina, lonidamina, masoprokola, medroksiprogesterona, megestrola, melfalana, mepitiostana, merkaptopurina, metotreksata, metoksalena, metil aminolevulinata, metiltestosterona, mifamurtida, miltefosina, miriplatine, mitobronitola, mitogvazona, mitolaktola, mitomicina, mitotana, mitoksantrona, nedaplatine, nelarabina, nilotiniba, nilutamida, nimotuzumaba, nimustina, nitrakrina, ofatumumaba, omeprazola, oprelvekina, oksaliplatine, genske terapije sa p53, paklitaksela, palifermina, semena paladijum-103, pamidroničke kiseline, panitumumaba, pazopaniba, pegaspargaze, PEG-epoetin beta (metoksi PEG-epoetin beta), pegfilgrastima, peginterferon alfa-2b, pemetrekseda, pentazocina, pentostatina, peplomicina, perfosfamida, picibanila, pirarubicina, pleriksafora, plikamicina, poliglusama, poliestradiol fosfata, polisaharid-K, porfimer natrijuma, pralatreksata, prednimustina, prokarbazina, hinagolida, raloksifena, raltitrekseda, ranimustina, razoksana, regorafeniba, risedroničke kiseline, rituksimaba, romidepsina, romiplostima, sargramostima, sipuleucel-T, sizofirana, sobuzoksana, natrijum glicididazola, sorafeniba, streptozocina, sunitiniba, talaporfina, tamibarotena, tamoksifena, tasonermina, teceleukina, tegafura, tegafur + gimeracil + oteracila, temoporfina, temozolomida, temsirolimusa, teniposida, testosterona, tetrofosmina, talidomida, tiotepa, timalfasina, tiogvanina, tocilizumaba, topotekana, toremifena, tositumomaba, trabectedina, trastuzumaba, treosulfana, tretinoina, trilostana, triptorelina, trofosfamida, triptofana, ubenimeksa, valrubicina, vandetaniba, vapreotida, vemurafeniba, vinblastina, vinkristina, vindezina, vinflunina, vinorelbina, vorinostata, vorozola, staklenih mikrosfera itrijuma-90, zinostatina, zinostatin stimalamera, zoledroničke kiseline, zorubicina.