LT6270B - Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai - Google Patents
Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai Download PDFInfo
- Publication number
- LT6270B LT6270B LT2014109A LT2014109A LT6270B LT 6270 B LT6270 B LT 6270B LT 2014109 A LT2014109 A LT 2014109A LT 2014109 A LT2014109 A LT 2014109A LT 6270 B LT6270 B LT 6270B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- feed
- prb
- pentosaceus
- acidilactici
- milk
- Prior art date
Links
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title abstract description 6
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title abstract description 6
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title abstract description 5
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 241000191996 Pediococcus pentosaceus Species 0.000 claims abstract description 35
- 241000191998 Pediococcus acidilactici Species 0.000 claims abstract description 30
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 20
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims abstract description 18
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 9
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 13
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 abstract description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 7
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 abstract description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 abstract 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 abstract 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 29
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 24
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 24
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 24
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 9
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 244000309466 calf Species 0.000 description 7
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 5
- 101150071746 Pbsn gene Proteins 0.000 description 5
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 5
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 4
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 4
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 101100243025 Arabidopsis thaliana PCO2 gene Proteins 0.000 description 3
- 108010062877 Bacteriocins Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 241001489200 Fusarium poae Species 0.000 description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 3
- 241001084338 Listeria sp. Species 0.000 description 3
- 241000191936 Micrococcus sp. Species 0.000 description 3
- 241000178960 Paenibacillus macerans Species 0.000 description 3
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 description 3
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 229940023064 escherichia coli Drugs 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 230000001408 fungistatic effect Effects 0.000 description 3
- 150000003893 lactate salts Chemical class 0.000 description 3
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 2
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 2
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 2
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 2
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 2
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 241000607447 Yersinia enterocolitica Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 2
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 229940098232 yersinia enterocolitica Drugs 0.000 description 2
- LXWQKLVAJOMMSN-REOHCLBHSA-N (2s)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl chloride Chemical compound SC[C@H](N)C(Cl)=O LXWQKLVAJOMMSN-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N 2,3,9,10-tetramethoxy-6,8,13,13a-tetrahydro-5H-isoquinolino[2,1-b]isoquinoline Chemical compound C1CN2CC(C(=C(OC)C=C3)OC)=C3CC2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHVPQPYKVGDNFY-DFMJLFEVSA-N 2-[(2r)-butan-2-yl]-4-[4-[4-[4-[[(2r,4s)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1,2,4-triazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]piperazin-1-yl]phenyl]-1,2,4-triazol-3-one Chemical compound O=C1N([C@H](C)CC)N=CN1C1=CC=C(N2CCN(CC2)C=2C=CC(OC[C@@H]3O[C@](CN4N=CN=C4)(OC3)C=3C(=CC(Cl)=CC=3)Cl)=CC=2)C=C1 VHVPQPYKVGDNFY-DFMJLFEVSA-N 0.000 description 1
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001134659 Lactobacillus curvatus Species 0.000 description 1
- 241000186612 Lactobacillus sakei Species 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 241000606860 Pasteurella Species 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102100031269 Putative peripheral benzodiazepine receptor-related protein Human genes 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- 230000007950 acidosis Effects 0.000 description 1
- 208000026545 acidosis disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000002368 bacteriocinic effect Effects 0.000 description 1
- 235000004251 balanced diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004464 cereal grain Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229960004130 itraconazole Drugs 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000021231 nutrient uptake Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000176 sodium gluconate Substances 0.000 description 1
- 235000012207 sodium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005574 sodium gluconate Drugs 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K30/00—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs
- A23K30/10—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder
- A23K30/15—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging
- A23K30/18—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging using microorganisms or enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
- A23K10/35—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms from potatoes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Physiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Šis išradimas yra susijęs su biotechnologijomis, ir skirtas pašarų gamybos sričiai ir gali būti taikomas gaminti didelio antimikrobinio aktyvumo fermentuotų pašarų priedus, pašarų papildus, pašarų premiksus, pašarų žaliavas bei kombinuotus pašarus. Siūloma fermentuotų pašarų gamybai naudoti iš spontaninių Lietuvoje užaugintų grūdinių raugų išskirtas pieno rūgšties bakterijų (PRB) padermes Pediococcus acidilactici BaltBio01 MSCL P1480 ir/arba Pediococcus pentosaceus BaltBio02 MSCL P1481. Aprašytas PRB identifikavimas, jų metabolizmo produktų antimikrobinis poveikis patologinėms bakterijoms ir mikroskopiniams grybams. Pasiūlyta jų gausinimo terpė. Pateikti fermentuotų pašarų panaudojimo pavyzdžiai atrajojančių gyvulių sveikatos gerinimui ir produktyvumo kėlimui.
Description
1
LT 6270 B
Technikos sritis Šis išradimas yra susijęs su biotechnologijomis, ir skirtas pašarų gamybos sričiai ir gali būti taikomas gaminti didelio antimikrobinio aktyvumo preparatus -fermentuotų pašarų priedus, pašarų papildus, pašarų premiksus, pašarų žaliavas bei kombinuotus pašarus.
Technikos Ivais
Pastaruoju metu pašarų gamyboje yra siūloma naudoti probiotinius preparatus, kurių sudėtyje yra pieno rūgšties bakterijų (PRB). PBR paprastai laikomi naudingi (ne patogeniniai) mikroorganizmai, kurie gyvena įvairiose aplinkose, tokiose kaip - dirvožemio, augalų, vabzdžių, gyvūnų ir žmogaus mikrofloroje. Šie mikroorganizmai yra antagonistiški puvimo mikroflorai, taip pat išskiria pieno rūgštį ir antibiotikams tapačias medžiagas - bakteriocinus arba į bakteriocinus panašias medžiagas. Pieno rūgšties bakterijos skatina B grupės vitaminų (biotino, tiamino, riboflavino, nikotininės rūgšties, vitamino B12) ir vitamino K sintezę. Pieno rūgšties bakterijos geriausiai auga, kai terpės pH yra 4-5. Jos veikia daugelį patogeninių bakterijų: Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Pasteurella, Bacillus ir Staphylococcus. Pieno rūgšties bakterijų probiotikai normalizuoja gyvulių virškinamo trakto mikroflorą, stimuliuoja virškinimo procesus, padeda organizmui pasisavinti pašaro maistingąsias medžiagas, daro įtaką gyvulių rezistentiškumui infekcijoms ir produktyvumui.
Viena iš perspektyviausių PRB yra Pediococcus spp. bakterijų gentis ir ypač dvi tos genties artimai susietos grupės bakterijos Pediococcus pentosaceus ir Pediococcus acidilactici.
Trumpas jų morfologinis apibūdinimas yra pateikiamas žinyne (Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, vol.3, Furmicutes, Springer, 2009 p.p. 518,519). Yra žinoma apie šių bakterijų panaudojimą fermentuotų pašarų gamyboje. Žinomas sausų (kietų) fermentuotų pašarų gamybos būdas (žiūr. patentą VVO2013029682).
Jame fermentuotų pašarų gamyboje siūloma naudoti vieną ar kelias PRB iš grupės Enterococcus faecium, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, 2
LT 6270 B
Pediococcus acidililactili ir Pediococcus pentosaceus. Šiame išradime plačiai aprašytas fermentuotų pašarų džiovinimo būdas ir įrenginys. Šio išradimo trūkumas - aukšta fermentuotų pašarų džiovinimo temperatūra, paduodamo į džiovinimo kamerą oro temperatūra yra daugiau kaip +120°C, o išdžiovintų fermentuotų pašarų temperatūra yra daugiau kaip +40°C - kas labai mažina probiotinių bakterijų gyvybingumą.
Taip pat žinomi homofermentuoti skysti pašarai ir jų gamybos būdas (žiūr. patentą EP2056681). Jame fermentuotų pašarų gamyboje siūloma naudoti tas pačias PRB kaip aukščiau aptartame išradime, dar gi nurodomos konkrečios PRB padermės Enterococcus faecium MCIMB 30122, Lactobacillus rhamnosus NCIMB 30121, Lactobacillus plantarum LSI (NCIMB 30083), Pediococcus acidililactili NCIMB 30086 ir Pediococcus pentosaceus HTS (LMG P-22549).
Aprašytas gamybos būdas ir receptūros netinka sausų fermentuotų pašarų gamybai.
Artimiausias analogas siūlomam išradimui yra aprašytas patente US20140037786. Tai sausų fermentuotų pašarų gamybos būdas kuriame naudojamos PRB padermės Enterococcus faecium MCIMB 30122, Lactobacillus rhamnosus NCIMB 30121, Lactobacillus plantarum LSI (NCIMB 30083), Pediococcus acidililactili NCIMB 30086 ir Pediococcus pentosaceus HTS (LMG P-22549). Išradimo esmė Išradimo tikslas - didelio biologinio aktyvumo fermentuotų pašarų priedų gavimas panaudojant naujai atrinktas PRB padermes, išskirtas iš savaiminiu būdu fermentuotos grūdinės žaliavos. Šis tikslas pasiekiamas panaudojant atskirai arba kartu fermentuotų pašarų priedų gamyboje PRB Pediococcus acidilactici BaltBio 01 MSCL P1480 ir/arba Pediococcus pentosaceus BaltBio 02 MSCL P1481. Toliau bus naudojamas sutrumpintas PRB žymėjimas nenurodant registracijos įstaigos ir registracijos numerių.
Lietuvoje auginamų grūdinių kultūrų (rugių, kviečių, miežių, avižų) aplinkoje 3
LT 6270 B dominuoja Pediococcus ir Lactobacillus genčių PRB, kurios pereina į šių kultūrų spontaninius raugus ir juose savaiminiai dauginasi. Bakterinių kultūrų izoliatuose iŠ šių raugų dominuoja Pediococcus ir Lactobacillus genčių pieno rūgšties bakterijos: 39 % - P. pentosaceus, po 18 % - P. acidilactici ir L farciminis, 7 % - L. curvatus, 2 % - L. sakei ir 16 % - nežinomos rūšies Lactobacillus spp. Buvo nustatyta, kad spontaniniuose ruginiuose rauguose 67 % bakterijų yra antibakteriškai aktyvios ir gamina skirtingus bakteriocinus.
BaltBio pieno rūgšties bakterijų išskyrimas
BaltBio pienarūgščių bakterijų padermės išgautos (izoliuotos) iš savaiminiu būdu fermentuotų Lietuvoje užaugintų varpinių grūdų raugų. Padermių izoliavimo techninius darbus pagal sutartis atliko UAB Bioseka. Padermes identifikavo UAB Biosta.
Raugai gaminti laboratorinėmis sąlygomis, keičiant terpės drėgnį ir fermentacijos temperatūrą. Raugai buvo ruošti iš 1370 tipo ruginių miltų bei avižų miltų ir vandens santykiu 1:1 arba 1:2, temperatūra buvo cikliškai keičiama ribose (25-35) °C. 10 g raugo sumaišyta su 90 ml fiziologinio tirpalo (0,9 % NaCI (Balkanpharma-Troyan AD, Troyan, Bulgarija)) homogenizatoriuje BagMixer® 400 P (Interscience for microbiology, Prancūzija). Iš gautos suspensijos ruošti nuo10'2 iki 10'5 skiediniai. Atitinkamai 10*4 ir 10*5 skiediniai pasėti į Petri lėkšteles su mMRS agaru. Lėkštelės laikytos 25 °C, 30 °C arba 35 °C temperatūroje anaerobinėmis sąlygomis. Po trijų parų tikrintas ir nustatytas PRB kolonijas sudarančių vienetų skaičius grame raugo (KSV/g). Atsitiktinai pasirinktos bakterijų kolonijos (iš kiekvieno raugo mėginio išskirta po 30 PRB (iš viso 270)) išgrynintos persėjant į naujas lėkšteles. Bakterijų kultūros laikytos -40 °C ir - 80 °C temperatūroje.
Modifikuota MRS terpė (mMRS) ruošta, ištirpinant po 10,0 g triptono peptono ir mėsos ekstrakto, po 5,0 g mielių ekstrakto ir natrio acetato, po 7,0 g gliukozės, fruktozės ir maltozės, po 2,0 g natrio gliukonato, K2HPO4 ir trisamoniocitrato, 1,0 ml tvino 80, 0,2 g MgS04-7 H2O, 0,05 g MnSC>4-4 H2O, 0,5 g cisteino chlorido, 15,0 g agaro 1 I distiliuoto vandens. Gautas tirpalas (pH 6,3) sterilizuotas 15 min 121 °C temperatūroje. MRS agaro terpė (MRS) ruošta, ištirpinant 66,2 g MRS agaro 1 I distiliuoto 4
LT 6270 B vandens. Gautas tirpalas virtas, kol agaras visiškai ištirps ir sterilizuotas 15 min 118 °C temperatūroje.
BaltBio pieno rūgšties bakterijų identifikavimas PRB charakterizuotos nustačius jų morfologiją, atlikus angliavandenių fermentacijos ir augimo skirtingose temperatūrose testus.
Atlikus Gram reakcijos ir katalazės testus nustatyta, kad iš devynių savaiminių raugų mėginių identifikavimui pasirinktos 67 tiriamos PRB buvo gramteigiamos ir negamino katalazės, kaip būdinga PRB. Mikroskopinių tyrimų rezultatai parodė, kad 31 padermė buvo lazdelės formos, o 36 padermės - rutuliškos formos (kokai).
Pagal sacharozės ir maltozės fermentavimą kokai buvo padalinti į dvi grupes: 1 grupei priklausė 26, o antrai - 10 bakterijų padermių. Visos rutuliškos bakterijos hidrolizavo trehalozę ir gliukozę. Žinoma, kad P. pentosaceus ir P. acidilactici skirtingai fermentuoja maltozę ir trehalozę bei skiriasi galimybe augti 50°C temperatūroje, P. pentosaceus fermentuoja abu angliavandenius ir negali augti šioje temperatūroje, P. acidilactici fermentuoja tik trehalozę ir auga 50 °C temperatūroje. Atsižvelgiant į tai, kad 5 bakterijų padermės fermentavo maltozę ir trehalozę bei neaugo esant 50 °C temperatūrai, jos pripažintos kaip P pentosaceus, o 4 bakterijų padermės identifikuotos kaip P. acidilactici, nes jos nefermentavo maltozės, bet augo 50 °C temperatūroje.
Amplifikacijos PGR metodu buvo identifikuotos šių 9 padermių 16S rDNR geno sekos. Jų sekų palyginimas su tarptautinio biotechnologijos informacijos centro (NCBI) bakterijų banko sekomis parodė ir patvirtino kad su ne mažiau kaip 95 % tikimybe šios PRB padermės priklauso P. acidilactici ir P. pentosaceus.
Joms yra duoti sąlyginiai pavadinimas - P. acidilactici BaltBioOI, P. acidilactici BaltBio034 P. acidilactici BaltBio05, P. acidilactici BaltBio07, P. acidilactici BaltBio09 ir P. pentosaceus BaltBio02, P. pentosaceus BaltBio04, P. pentosaceus BaltBio06, P. pentosaceus BaltBio08. Įvertinus išskirtų P. acidilactici ir P. pentosaceus padermių bakteriocinų aktyvumą į patogeninius mikroorganizmus (Bacillus thuringiensis, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Bacillus macerans, Salmonella 5
LT 6270 B enteritidis, Micrococcus sp, Yersinia enterocolitica, Listeria sp., Pseudomonas aeroginosa), kaip perspektyviausi mikroorganizmai gyvūnų sveikatingumui užtikrinti, panaudojant juos pašarų priedams ir kitiems pašariniams produktams, pasirinkti Pediococcus acidilactici BaltBio 01 ir Pediococcus pentosaceus BaltBio 02. PRB metabolizmo produktų antimikrobinis poveikis bakterijoms
Parinktų pieno rūgšties bakterijų (PRB) P. acidilactici BaltBioOI, P. pentosaceus BaltBio02 metabolizmo produktai (MP) nustatyti antimikrobiškai aktyvūs prieš įvairias patogenines bakterijas (Bacillus thuringiensis, Escherichia coli, Enterococcus faecaiis, Staphylococcus aureus, Bacillus macerans, Salmonella enteritidis, Micrococcus sp, Yersinia enterocolitica, Listeria sp., Pseudomonas aeroginosa).
Antimikrobinis PRB metabolizmo produktų poveikis prieš gram-/+ bakterijas (inhibicijos zonų skersmuo agaro terpėje, mm) parodytas 1 lentelėje.
Nustatyta, kad PRB gali visiškai sustabdyti patogeninių bakterijų dauginimąsi (bakteriocidinis poveikis) arba slopinti ar dalinai stabdyti jų augimą (bakteriostatinis poveikis). Antimikrobinis PRB padermių poveikis prieš gram-/+ bakterijas priklausė nuo PRB padermės ir indikatorinio mikroorganizmo. P. acidilactici BaltBioOI pasižymėjo bakteriocidiniu poveikiu prieš visas tiriamas indikatorines bakterijas (inhibicijos zonos skersmuo agaro terpėje nustatytas nuo 10 ± 0 iki 24,5 ± 0,7 mm), tuo tarpu, bakteriostatiniu poveikiu pasižymėjo P. pentosaceus BaltBio 02. 1 lentelė
Indikatorinis mikroorganizmas P. acidilactici BaltBio 01 P. pentosaceus BaltBio 02 Tetraciklinas 30pg Streptomicinas 10pg E. coli 14,5±0,7 14,5±0,7* 17 13 Ent. faecaiis 13±1,4 11 ±1,4* 29* 10* B. macerans 13±0 12±0* 22 18* S. enteritidis 10±0 11±1,4 20 10 Micrococcus sp. 24,5±0,7 25±0 30 18 Listeria sp. 13±1,4 10±1,4 26 0 P. aeroginosa 15±0 15±2,8 11 7 B. thuringiensis 19,3±0,5 17,7±0,5 — 17,8 Kur - * bakteriostatinis poveikis 6
LT 6270 B
Didžiausias PRB antimikrobinis poveikis nustatytas Micrococcus sp. ir B. thuringiensis bakterijoms (inhibicijos zonų skersmuo agaro terpėje kito nuo 16,2±0,7 iki 25 ± 0 mm). Antimikrobinis P. acidilactici BaltBioOI MP poveikis B. thuringiensis augimui nustatytas 8,4 % didesnis, lyginant su streptomicino antimikrobiniu poveikiu P. acidilactici BaltBioOI pasižymėjo bakteriocidiniu poveikiu E. coli Ent. faecalis (13 ± 1,4 mm). Bakteriostatiniu poveikiu pasižymėjo P. pentosaceus BaltBio02 (11 ±1,4 mm) padermė ir antibiotikai: streptomicinas ir tetraciklinas (10 ir 29 mm, atitinkamai). PRB metabolizmo produktų antimikrobinis poveikis mikroskopiniams grybams
Vertinant PRB antimikrobinj poveikį prieš mikroskopinius grybus, kaip Fusarium genties atstovas buvo pasirinktas Fusarium poae, tuo tarpu, kaip Aspergiiius genties atstovas pasirinktas Aspergiiius niger. Papildomai įvertintas PRB metabolitų poveikis Penicillium chrysogenum grybui. Antimikrobinis PRB, o taip pat ir antigrybinių preparatų poveikis Fusarium, Aspergiiius ir Penicillium genties mikroskopiniams grybams (inhibicijos zonų skersmuo agaro terpėje, mm) pateiktas 2 lentelėje. PRB MP pasižymėjo fungistatiniu ir fungicidiniu poveikiu Fusarium poae augimui, tuo tarpu, Penicillium chrysogenum ir Aspergiiius niger augimui nustatytas tik fungistatinis PRB poveikis. 2 lentelė PRB Indikatorinis mikroorganizmas Fusarium poae Penicillium chrysogenum Aspergiiius niger FS FC FS FC FS FC BaltBioOI 15,3±1,0 10,0±0,8 19,5±1,0 — 11,0±1,8 — BaltBio02 13,5±1,3 — 21,0±1,2 — 11,0±1,2 — Antigrybiniai preparatai Itrakonazolis 9,5±0 7,5±0,7 — Nistatinas 13,5±2,1 31±1,4 16,3±0,4 AFY — — — FS - fungistatinis poveikis, FC - fungicidinis poveikis. 7
LT 6270 B PRB paruošimas fermentavimui
Iki eksperimento PRB buvo laikytos -70 °C temperatūroje (Sanyo, Japonija). Atšildytos PRB pagausintos MRS agare (Sigma Aldrich, Vokietija) arba kitoje alternatyvioje terpėje, išlaikant 48 valandas P. pentosaceus BaltBio02 35 °C temperatūroje, P. acidilactici BaltBioOI 32 °C temperatūroje iki 108-109 PRB KSV/ml.
Grynos PRB gausinamos alternatyvioje terpėje kuri gaminama iš bulvių sulčių, jas autoklavuojant, atvėsinant iki 30°C ir įvedant grynas PRB kultūras (į 0,5 litro sulčių / 1 ml grynų bakterijų kultūrų, pagausintų MRS buljone). Alternatyvi terpė su PRB išlaikoma 30 +/- 2 °C temperatūroje 24; 48 ir 72 h. iki 9,60x1010 PRB KSV/ml. PRB panaudojimas fermentuotų pašarų gamyboje
Prieš fermentavimą paruoštame substrate gali būti nuo 0,5% iki 10% paruoštų fermentavimui PRB. Gali būti naudojamos P. acidilactici BaltBioOI arba P. pentosaceus BaltBio02 arba jų mišinys. Fermentavimo trukmė rekomenduojama nuo 8h iki 72h ir temperatūra nuo 20°C iki 40°C. Biologiškai aktyvaus fermentuoto pašaro priedo sudėtyje turi būti nuo 106 iki 109 PRB KSV/g ir pH nuo 3,0 iki 6,0. PRB panaudojimo pavyzdžiai
Pavyzdys 1. Pieno rūgšties bakterijų Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 mišiniu fermentuoto produkto įtakos veršelių sveikatingumui įvertinimas. Šiuo metu plačiai taikomas intensyvus veršelių auginimas sukelia žarnyno mikrofloros disbalansą, nes virškinamajame trakte nesivysto tinkama mikroflora, kuri natūraliomis sąlygomis auginamų gyvulių virškinamajame trakte susiformuoja iš aplinkos ir gaunama su motinos pienu. Dėl įvairių priežasčių, pasikeitus plonųjų žarnų mikroorganizmų sudėčiai, pradeda daugintis žarnyno lazdelės, kurios užima pienarūgščių bakterijų (PRB) vietą. 8
LT 6270 B
Patogeninių bakterijų sukelta infekcija pažeidžia gleivinę, sumažėja jos apsauginės funkcijos. PRB medžiagos gali normalizuoti žarnyno mikroflora, gerinti apsaugines gleivinės savybes, skatinti maisto medžiagų pasisavinimą ir natūralų rezistentiškumą, sumažinti patirtų stresų padarinius.
Teigiama, kad PRB dėka galvijų jaunikliai greičiau pradeda savarankiškai virškinti augalinės kilmės pašarus, geriau pasisavintų augalinius baltymus ir kitas maistingąsias medžiagas.
Lyginant intensyviai ir normaliai auginamus gyvulius, nustatyta kad fiziologinės virškinamojo trakto savybės pasikeičia tuomet, kai žūva normali mikroflora. Dėl silpniau besivystančio žarnyno sumažėja jo masė, susikaupia per daug skysčių aklojoje ir storosiose žarnose ir veršeliai gali susirgti enteritu ir diarėja.
Bandymui buvo atrinkta 14 veršelių: bandomoji grupė (n=6) ir kontrolinė (n=8). Veršeliai buvo atrinkti analogų principu pagal amžių, laikomi vienodomis sąlygomis, girdomi karvių pienu tris kartus per parą, šeriami specialiu kombinuotu pašaru. Bandomoji grupė 14 dienų, rytinio girdymo metu (apie 07:00 vai.), gavo probiotikų mišinį, įpilant po 50 ml į pieną. Bandymo pradžioje (0 d.) ir pabaigoje (14 d.) kraujo dujų analizatoriumi „Epoc“ (EPOC, Kanada) buvo tiriami šie parametrai: pH; PC02; P02; Na; K; iCa; Glu; Laktatai; Hct; HC03, TC02, cS02, Hb. Kraujo biocheminiu analizatoriumi „Hitachi 705“ (Hitachi, Japonija), naudojant „DiaSys“ (Diagnostic Systems GmbH, Vokietija) reagentus, ištirtas kraujo fermentas aspartataminotransferazė (AST). Bandymo pradžioje ir pabaigoje buvo fiksuojama veršelių svoris. Nustatyta, kad tyrimo metu statistiškai patikimai (p<0,05) kito šie kraujo parametrai: pH; PCO2, laktatai, AST, leukocitai, limfocitai bei veršelių priesvoris. Bandymų rezultatai parodyti 3 lentelėje. 3lentelė
Parametras Kontrolinė gru pė Bandomoji grupė Bandymų pradžia Bandymų pabaiga Bandymų pradžia Bandymų pabaiga Kraujo pH 7,36 7,361 7,33 7,28 PCO2 63,95 70,93 63,08 60,71 Laktatai 3,95 4,29 3,2 2,64 9
LT 6270 B AST, TV/I 50,18 58,9 49,82 33,1 Leukocitai, *106 10,69 10,32 9,37 11,43 Limfocitai, *109/l 4,57 5,55 4,57 6,39 Priesvoris, kg 35,75 49 34,37 45,25 Šeriant PRB P. acidilactici BaltBioOI ir P. pentosaceus BaltBio02 mišiniu 14 dienų po 50 ml: sumažėjo rizika susirgti acidoze (stabilizuojasi kraujo pH, sumažėja laktatu, PCO2 koncentracija); sumažėjo kepenų pažeidimų rizika (sumažėjo AST koncentracija); sustiprėjo organizmo imunitetas (padidėja limfocitų ir leukocitų skaičius kraujyje), kiti parametrai nepasikeitė.
Pavyzdys 2. Pieno rūgšties bakterijų P. acidilactici BaltBioOI ir P. pentosaceus BaltBio02 mišiniu fermentuoto produkto įtakos karvių sveikatingumui įvertinimas.
Bandymui, analogų principu, buvo atrinkta po 20 bandomųjų ir kontrolinių, užtrūkusių karvių, kurioms iki numatomo apsiveršiavimo buvo likę 30 dienų. Bandomosios grupės karvėms buvo šeriama pieno rūgšties bakterijų P. acidilactici BaltBioOI ir P. pentosaceus BaltBio02 mišiniu fermentuoto produkto (kiekis karvei 0,3 kg/per parą).
Prieš užtrukinimą ir po apsiveršiavimo buvo fiksuojama: pieno sudėtis (riebumas %, baltymingumas %, laktozė %, somatinių ląstelių skaičius, (SLS) tūkst./ml), šlapalas, (mg/proc.). Penkias savaites po apsiveršiavimo buvo fiksuojamas pieno kiekis per parą (kg/d.). Kraujas biocheminiam ir morfologiniam tyrimui buvo imamas likus 30 parų iki apsiveršiavimo ir po apsiveršiavimo praėjus 1 parai. Nustatyta, kad tyrimo metu statistiškai patikimai (p<0,05) kito SLS, pieno kiekio, bei fermento ALT koncentracijos. 10
LT 6270 B 4 lentelė
Parametras Kontrolinė gru pė Bandomoji grupė Bandymų pradžia Bandymų pabaiga Bandymų pradžia Bandymų pabaiga SLS, 103/ml 638 602 573 114 Pienas, kg 22,28 27,14 19,17 30,79 Fermentas ALT, TV/I 28,2 21,18 24,75 13,21
Rezultatai. Šeriant PRB P. acidilactici BaltBioOI ir P. pentosaceus BaltBio02 mišiniu fermentuotas produktas turėjo įtakos mažinant bandomųjų karvių sergamumo subklininiais mastifais riziką - dėl karvių pieno SLS sumažėjimo. Taip pat padidėjo primelžiamo pieno kiekis ir pagerėjo jo kokybė.
Pavyzdys 3. Pieno primilžiai ir cheminė sudėtis, karves šeriant Pediococcus pentosaceus priedu.
Pagausintos ir paruoštos fermentacijai PRB Pediococcus pentosaceus BaltBio02 Lietuvos juodmargių karvių šėrimo eksperimento metodika.
Tyrimai atlikti su holšteinizuotomis Lietuvos juodmargėmis karvėmis tvartiniu laikotarpiu. Atsižvelgiant į amžių, laktacijos tarpsnį, primilžius, karvės suskirstytos į dvi grupes: kontrolinę (n=10) ir bandomąją (n=10). Visos karvės buvo šeriamos pagal proteinų ir energijos poreikius subalansuotu racionu, atitinkančiu karvių mitybos fiziologines normas.
Bandomosios karvės buvo šeriamos tuo pačiu racionu. Tačiau kartu su pašaru šios karvės kiekvieną dieną 56 d. gavo 100 g tiriamojo priedo, kurį sudarė Pediococcus pentosaceus BaltBio02 ir ekstruduoti kviečių miltai kuriame PRB kiekis 5,0x108 KSV/g.
Pieno primilžiai tiriamuoju laikotarpiu buvo nustatomi tris kartus, t.y. tyrimo pradžioje, tyrimo viduryje (praėjus pusei tiriamojo laiko) bei tyrimo pabaigoje, atliekant kontrolinius karvių melžimus. Natūralaus riebumo pieno kiekis perskaičiuotas į 4 proc. riebumo (koreguoto) pieno kiekį, vadovaujantis koeficientais. Pieno mėginiai buvo 11
LT 6270 B paimti iš kiekvienos karvės individualiai pagal pieno mėginių ėmimo taisykles (LST EN ISO 707:1999+P:2003 Pienas ir pieno produktai. Mėginių ėmimo taisyklės) tyrimo pradžioje, viduryje ir pabaigoje. Mėginiuose buvo nustatyti pieno riebalai, baltymai, laktozė ir urėja prietaisu „LactoScope FTIR“ (FT1.0.2001; Delta Instruments, Olandija) bei somatinių ląstelių skaičius (SLS) prietaisu „SomaScope“ (CA-3A4, 2004; Delta Instruments, Olandija).
Tyrimų duomenys apdoroti statistinės analizės metodu (Venables and Smith, 2005). Apskaičiuoti požymių aritmetiniai vidurkiai ir jų paklaidos, patikimumo laipsnis p<0,05.
Pieno primilžiai ir cheminė sudėtis, karves šeriant Pediococcus pentosaceus BaltBio02 priedu parodyti 5 lentelėje. 5 lentelė
Rodiklis Kontrolinė grupė Bandomoji grupė 1 2 3 1 2 3 Pienas, kg/d 15,86 15,08 16,60 18,04 18,87 22,38 4% koreguotas pieno kiekis, _ 17,22 16,94 17,83 19,17 19,88 23,43 Riebalų kiekis, % 4,5 4,69 4,56 4,41 4,42 4,40 Riebalų kiekis, kg/d 0,73 0,73 0,75 0,80 0,82 0,97 Laktozės kiekis, % 4,44 4,46 4,38 4,46 4,54 4,46 Laktozės kiekis, kg/d 0,71 0,70 0,74 ,0,80 0,85 1,0
Naudojant Pediococcus pentosaceus BaltBio02 priedą, piene statistikai reikšmingai padidėjo riebalų ir laktozės kiekiai. Riebalų kiekis bandomosios grupės karvių piene bandymo pabaigoje buvo 0,22 kg/d didesnis (p<0,05) nei kontrolinės grupės piene ir 0,17 kg/d didesnis (p<0,05) nei tos pačios grupės bandymo pradžioje. Laktozės kiekis bandomosios grupės karvių piene bandymo pabaigoje buvo 0,26 kg/d didesnis (p<0,05) nei kontrolinės grupės piene ir 0,2 kg/d didesnis (p<0,05) nei tos pačios grupės bandymo pradžioje. Baltymų, šlapalo kiekiai ir SLS bandymo pradžioje ir pabaigoje skyrėsi nežymiai (p>0,05). Išskirtos iš lietuviškos grūdinės žaliavos ir ištirtos PRB padermės P. acidilactici 12
LT 6270 B
BaltBioOI ir P. pentosaceus BaltBio02 yra mikrobiologiškai saugesnės, pasižymi dideliu biologiniu aktyvumu ir gerina gyvūnų sveikatą, didina jų produktyvumą ir sėkmingai gali būti naudojamos fermentuotų pašarų gamyboje.
Claims (3)
13 LT 6270 B IŠRADIMO APIBRĖŽTIS 1. Pieno rūgšties bakterijų padermės Pediococcus acidilactici BaltBioOI MSCL P1480 kaip pradinio fermentacijos mikroorganizmo panaudojimas fermentuotuose pašarų prieduose, papilduose, premiksuose, pašarų žaliavose bei kombinuotuose pašaruose.
2. Pieno rūgšties bakterijų padermės Pediococcus pentosaceus BaltBio02 MSCL P1481 kaip pradinio fermentacijos mikroorganizmo panaudojimas fermentuotuose pašarų prieduose, papilduose, premiksuose, pašarų žaliavose bei kombinuotuose pašaruose.
3. Panaudojimas pagal 1 ir 2 punktus, besiskiriantis tuo, kad fermentuotų pašarų priedų gamybai naudoja pieno rūgšties padermių Pediococcus acidilactici BaltBioOI MSCL P1480 ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 MSCL P1481 mišinius.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2014109A LT6270B (lt) | 2014-09-24 | 2014-09-24 | Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai |
| EP15784768.2A EP3198040A1 (en) | 2014-09-24 | 2015-09-17 | Probiotic fermented feed additives |
| EA201790685A EA201790685A1 (ru) | 2014-09-24 | 2015-09-17 | Пробиотические ферментированные кормовые добавки |
| PCT/IB2015/057168 WO2016046706A1 (en) | 2014-09-24 | 2015-09-17 | Probiotic fermented feed additives |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LT2014109A LT6270B (lt) | 2014-09-24 | 2014-09-24 | Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LT2014109A LT2014109A (lt) | 2016-04-11 |
| LT6270B true LT6270B (lt) | 2016-05-10 |
Family
ID=54347594
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LT2014109A LT6270B (lt) | 2014-09-24 | 2014-09-24 | Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP3198040A1 (lt) |
| EA (1) | EA201790685A1 (lt) |
| LT (1) | LT6270B (lt) |
| WO (1) | WO2016046706A1 (lt) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT6480B (lt) | 2017-04-10 | 2017-12-11 | Aleksandro Stulginskio Universitetas | Dehidratuotos pievų žolės miltai |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT6271B (lt) | 2014-09-24 | 2016-05-10 | Uab "Baltijos Biotechnologijos" | Augalinės kilmės fermentuoti pašarai |
| WO2018224420A1 (en) | 2017-06-06 | 2018-12-13 | Chr. Hansen A/S | A pediococcus acidilactici strain capable of increasing milk yield |
| CN109439565A (zh) * | 2018-09-14 | 2019-03-08 | 湖南师范大学 | 一株戊糖片球菌菌株、其微生态制剂及其制备方法 |
| CN111406856B (zh) * | 2020-03-11 | 2023-04-07 | 天津科技大学 | 一种解酒护肝功能性发酵饮料及其制备方法 |
| CN112159460B (zh) * | 2020-09-29 | 2021-12-17 | 厦门大学 | 一种拟穴青蟹抗菌肽Spamprin4-23及其应用 |
| CN116622580B (zh) * | 2023-05-12 | 2025-02-11 | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一株戊糖片球菌pkc10及其应用 |
| CN118185811B (zh) * | 2024-03-13 | 2024-08-02 | 广东海洋大学 | 一种富含抗菌肽的发酵饲料、制备方法及应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013029682A1 (de) | 2011-09-01 | 2013-03-07 | Schaeffler Technologies AG & Co. KG | Antriebsvorrichtung |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU378405A1 (ru) * | 1971-01-07 | 1973-04-18 | Всесоюзный научно исследовательский институт биосинтеза белковых веществ | Способ выращивания микроорганизмовi2 |
| US20050130288A1 (en) * | 2003-12-11 | 2005-06-16 | Eromlife Co., Ltd. | Novel microorganism Pediococcus pentosaceus EROM101, having immune enhancement, anticancer and antimicrobial activities |
| KR20090038453A (ko) | 2006-07-14 | 2009-04-20 | 레가르트, 론 | 정상발효 제품 |
| WO2012127004A1 (en) | 2011-03-22 | 2012-09-27 | Fermentationexperts A/S | Improved fermentation of protein-rich feed |
| CN103173373B (zh) * | 2012-07-12 | 2015-05-20 | 北京伟嘉人生物技术有限公司 | 一株高抑菌活性的乳酸片球菌及应用 |
| CN103156091B (zh) * | 2013-03-20 | 2014-09-10 | 哈尔滨市乳家科技饲料有限公司 | 在低温条件下制作肉牛秸秆生物发酵营养饲草的方法 |
-
2014
- 2014-09-24 LT LT2014109A patent/LT6270B/lt not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-09-17 EA EA201790685A patent/EA201790685A1/ru unknown
- 2015-09-17 WO PCT/IB2015/057168 patent/WO2016046706A1/en active Application Filing
- 2015-09-17 EP EP15784768.2A patent/EP3198040A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013029682A1 (de) | 2011-09-01 | 2013-03-07 | Schaeffler Technologies AG & Co. KG | Antriebsvorrichtung |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| VOS, P. ET AL.: "Bergeys Manual of Systematic Bacteriology", pages: 518 - 519 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT6480B (lt) | 2017-04-10 | 2017-12-11 | Aleksandro Stulginskio Universitetas | Dehidratuotos pievų žolės miltai |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3198040A1 (en) | 2017-08-02 |
| LT2014109A (lt) | 2016-04-11 |
| EA201790685A1 (ru) | 2017-07-31 |
| WO2016046706A1 (en) | 2016-03-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107312726B (zh) | 一株植物乳杆菌zn-3及应用 | |
| LT6270B (lt) | Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai | |
| DK2754354T3 (en) | A method of using a Bacillus subtilis strain to improve the animal health | |
| US9282761B2 (en) | Bacteria isolated from fresh honey or the honey producing tract of honey bees | |
| KR100860785B1 (ko) | 유산균을 이용한 마늘 발효액을 함유하는 천연 항균제 | |
| KR20010031131A (ko) | 돼지의 경쟁적 독점 배양 | |
| KR101618220B1 (ko) | 신규 바실러스 속 균주 및 그의 용도 | |
| LT6271B (lt) | Augalinės kilmės fermentuoti pašarai | |
| JP4199685B2 (ja) | 新規な乳酸菌 | |
| KR101818859B1 (ko) | 슈도모나스 아조토포만스 균주 kacc 92125p 및 이를 포함하는 조성물 | |
| JP2010136668A (ja) | 新規シュウドモナス属細菌 | |
| JP2008048683A (ja) | 動物用生菌剤、飼料組成物、及びこれらの使用方法 | |
| US10166262B2 (en) | Strain of bacteria and composition comprising the same | |
| EP3168292B1 (en) | New lactobacillus plantarum strain amt14 and composition containing the strain of lactobacillus plantarum amt14 | |
| KR20180131948A (ko) | 슈도모나스 익스트리모리엔탈리스 균주 kacc 81047bp 및 이를 포함하는 조성물 | |
| RU2398872C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus licheniformis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ, ПРЕДНАЗНАЧЕННОЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ВЫСОКОКАЧЕСТВЕННЫХ КОРМОВ, ПОВЫШАЮЩИХ ПРОДУКТИВНОСТЬ И СНИЖАЮЩИХ РИСК ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖИВОТНЫХ, ПТИЦЫ И РЫБ | |
| KR102003822B1 (ko) | 반려동물의 모질을 개선하는 효능을 갖는 유산균과 이를 포함하는 생균제 조성물을 유효성분으로 함유하는 모질 개선을 위한 동물 사료용 첨가제 및 동물 사료 조성물 | |
| RU2579266C1 (ru) | Биотрилакт - биопрепарат для повышения жизнедеятельности и активности пчел в закрытом грунте | |
| Manguntungi et al. | The profile analysis of lactic acid bacteria (LAB) from Sumbawa white honey and its potential producing antibacterial compounds | |
| RU2203947C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы | |
| KR100500397B1 (ko) | 가금 티푸스 원인균 살모넬라 갈리나륨에 대한 항균활성이있는 균주 및 이를 유효성분으로 함유하는 가금용복합미생물제제 | |
| JP2007244372A (ja) | バチルス・チューリンゲンシスを含む動物の腸内感染症予防・治療用の飼料添加剤 | |
| RU2794878C1 (ru) | Биологически активная кормовая добавка | |
| CN115992066B (zh) | 一株用于液体发酵饲料的副干酪乳杆菌NHB-LpD2及应用 | |
| RU2766706C1 (ru) | Пробиотический препарат для сельскохозяйственной птицы |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB1A | Patent application published |
Effective date: 20160411 |
|
| FG9A | Patent granted |
Effective date: 20160510 |
|
| MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 20190924 |