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KR960017686A - 인터페론-γ의 생산을 유도하는 폴리펩티드, 이 폴리펩티드에 특이적인 모노클로날 항체 및 감수성 질환체 - Google Patents

인터페론-γ의 생산을 유도하는 폴리펩티드, 이 폴리펩티드에 특이적인 모노클로날 항체 및 감수성 질환체 Download PDF

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KR960017686A
KR960017686A KR1019950041520A KR19950041520A KR960017686A KR 960017686 A KR960017686 A KR 960017686A KR 1019950041520 A KR1019950041520 A KR 1019950041520A KR 19950041520 A KR19950041520 A KR 19950041520A KR 960017686 A KR960017686 A KR 960017686A
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Abstract

SDS-DAGE에 의한 분자량 18,500±3,000달톤이고, 크로마토포커싱에 의한 등전점(pI)이 4.9±1.0인 폴리펩티다.
이 폴리펩티드는 소량만이라도 면역담당 세포에 의한 IFN-γ 생산을 강력히 유도하고 인간에게 비교적 많은 양을 투여하더라도 심각한 부작용을 일으키지 않는다. 이것은 하이브리도마에서 수득한 모노클로날 항체를 사용하여 용이하게 제조되며, 악성종양, 바이러스성 질환, 세균성 감염중 및 면역질환 등의 치료 및/또는 예방을 위한 의약에 첨가할 수 있다.

Description

인터페론-γ의 생산을 유도하는 폴리펩티드, 이 폴리펩티드에 특이적인 모노클로날 항체 및 감수성 질환체
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 마우스 간 유래의 단백질을 트립신 소화하여 수득된 팹티드 단편의 HPLC 용출 패턴,
제2도는 발명의 재조합 DNA pHIGIF의 구조를 나타낸 도면.

Claims (47)

  1. 면역담당 세포에 의한 IFN-γ생산을 유도하며, 아래의 SEQ ID NO : 1의 아미노산 배열(여기서 “Xaa”는 “이소로이신” 또는 “트레오닌”을 뜻함)과 이 아미노산 배열에 상동적인 아미노산 배열로 된 군으로부터 선택된 아미노산 배열을 가진 폴리펩티드.
    SEQ ID NO : 1 :
  2. 제1항에 있어서, 소디움 도데실 술페이트 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 (SDS-PAGE)에 의한 분자량이 약 18,500±3,000달톤이고, 크로마토포커싱에 의한 등전점이 약 4.9±1.0인 폴리펩티드.
  3. 제1항의 폴리펩티드를 코우하는 DNA.
  4. 제3항에 있어서, 아래의 SEQ ID NO : 2의 염기배열, 이 염기 배열에 상동적인 염기배열 및 이들 염기배열에 상보적인 염기배열로 된 군으로부터 선택된 염기 배열을 가진 DNA.
    SEQ IN NO:2:
  5. 제4항에 있어서, SEQ ID NO : 1의 아미노산 배열을 바꿈이 없이 유전자 코우드의 축중에 의하여 SEQ ID NO : 2의 염기 하나 이상을 다른 염기로 치환한 DNA.
  6. 제3항에 있어서, 아래의 SEQ ID NO : 6의 염기배열(여기에서 “Xaa”는 “이소로이신” 또는 “트레오닌”을 뜻함)을 가진 DNA.
    SEQ ID NO:6:
  7. 제3항에 있어서, 인간에 유래하는 DNA.
  8. 자체복제 가능한 벡터와, 제1항의 폴리펩티드를 코우드하는 DNA를 함유하는 복제 가능한 재조합 DNA.
  9. 제8항에 있어서, 아래의 SEQ ID NO : 2의 염기배열, 이 염기 배열에 상동적인 염기배열 및 이들 염기배열에 상보적인 염기배열로 된 군으로부터 선택된 염기 배열을 가진 복제 가능한 DNA.
  10. 제9항에 있어서, SEQ ID NO : 1의 아미노산 배열을 바꿈이 없이 유전자 코우드의 축중에 의해 SEQ ID NO : 2의 염기 하나 이상을 다른 염기로 치환한 복제가능한 재조합 DNA.
  11. 제8항에 있어서, SEQ IN NO : 6의 염기배열(여기에서 “Xaa”는 “이소로이신” 또는 “트레오닌”을 뜻함)을 가진 복제 가능한 재조합 DNA.
  12. 제8항에 있어서, 상기 DNA가 인간에서 유래하는 복제 가능한 재조합 DNA.
  13. 제8항에 있어서, 상기 벡터가 플라스미드 백터인 복제 가능한 재조합 DNA.
  14. 제1항의 폴리펩티드를 코우드하는 DNA와 자체복제 가능한 벡터를 함유하는 복제 가능한 재조합 DNA를 적당한 숙주에 도입하여 수득되는 형질 전환체.
  15. 제14항에 있어서, SEQ ID NO : 2의 염기 배열, 이 염기배열에 상보적인 염기 배열 및 이들 염기배열에 상동적인 염기배열로 된 군으로부터 선택된 염기배열을 가진 형질 전환체.
  16. 제15항에 있어서, SEQ ID NP : 1의 아미노산 배열을 바꿈이 없이 유전자 축중에 의해 SEQ IN NO : 2의 염기 하나 이상을 다른 염기로 치환한 형질 전환체.
  17. 제14항에 있어서, SEQ ID NO : 6의 염기 배열(여기에서 “Xaa”는 “이소로이신”또는 “트레오닌”을 뜻함)을 가진 형질 전환체.
  18. 제14항에 있어서, 상기 DNA가 인간에서 유래하는 형질 전환체.
  19. 제14항에 있어서, 상기 벡터가 플라스미드 벡터인 형질 전환체.
  20. 제14항에 있어서, 상기 숙주가 에쉐리히아 콜리종의 미생물인 형질 전환체.
  21. (가)폴리펩티드를 코우드하는 DNA와 자체복제 가능한 벡터를 함유한 복제 가능한 재조합 DNA를 적당한 숙주에 도입하여 제조된 제1항의 폴리펩티드 생성능이 있는 형질 전환체를 영양배지에서 배양하고, (나)생성된 폴리펩티드를 수득한 배양물로부터 채취하여서 되는 폴리펩티드의 제조방법.
  22. 제21항에 있어서, 상기DNA는 SEQ IN NO : 2의 염기배열, 이 염기배열에 상동적인 염기배열 및 이들 염기배열에 상보적인 염기배열로 된 군으로부터 선택된 염기배열을 가진 폴리펩티드의 제조방법.
  23. 제22항에 있어서, SEQ IN NO : 1의 아미노산 배열을 바꿈이 없이 유전자 축중에 의하여 SEQ IN NO : 2의 염기 하나 이상을 다른 염기로 치환한 폴리펩티드의 제조방법.
  24. 제21항에 있어서, 상기 DNA는 SEQ ID NO : 6의 염기배열(여기에서 “Xaa”는 “이소로이신”또는 “트레오닌”을 뜻함)을 가진 것이 폴리펩티드의 제조방법.
  25. 제21항에 있어서, 상기 DNA는 인간에서유래하는 폴리펩티드의 제조방법.
  26. 제21항에 있어서, 상기 벡터는 플리스미드 벡터인 폴리펩티드의 제조방법.
  27. 제21항에 있어서, 상기 숙주는 에쉐리히아 콜리종의 미생물인 폴리펩티드의 제조방법.
  28. 제21항에 있어서, 생성된 폴리펩티드를 농축, 염석, 투석, 분별 침전, 겔여과 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 소수(疎水)크로마토그래피, 어피니티 크로마토그래피, 크로마토포커싱, 겔 전기영동 및 동전점 전기영동으로 된 군으로부터 선택된 한가지 이상의 방법으로 정제하는 폴리펩티드의 제조방법.
  29. 제1항의 폴리펩티드에 특이적인 모노클로날 항체.
  30. 제29항에 있어서, IgG 또는 IgM의 클라스에 속하는 모노클로날 항체.
  31. 제29항에 있어서, H1-1mAb 또는 H-2mAb인 모노클로날 항체.
  32. 제29항의 모노클로날 항체를 생산하는 하이브리도마.
  33. 제32하에 있어서, 하이브리도마 H-1 또는 H-1인 하이브리도마.
  34. 제29항의 모노클로날 항체의 생상능이 있는 하이브리도마를 영양배지중 또는 또는 동물의 체내에서 배양하고, 수득한 배양물 또는 체액으로부터 하이브리도마를 재취하여서 되는 모노클로날 항체의 제조방법.
  35. 제34항에 있어서, 상기 하이브리도마가 하이브리도마 H-1 또는 H-2인 모노클로날 항체의 제조방법.
  36. 제34항에 있어서, 배양물 또는 체액으로부터 상기 모노클로날 항체를 염석, 투석, 여과, 농축, 원심분리, 분별 침번, 겔 여과 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 어피니티 크로마토그래피, 겔 전기영동 및 등전점 전기영동으로 된 군으로부터 선택된 방법중 한가지 이상의 방법으로 채취하는 모노클로날 항체의 제조방법.
  37. 폴리펩티드와 불순물을 함유한 혼합물을 폴리펩티드에 특이적인 모노클로날 항체와 접촉시키고, 모노클로날 항체에 흡착된 폴리펩티드를 탈착시켜서 되는 제1항의 폴리펩티드의 제조방법.
  38. 제37항에 있어서, 상기 모노클로날 항체가 물에 불용성인 담체에 결합해 있는 폴리펩티드의 제조방법.
  39. 폴리펩티드에 특이적인 모노클로날 항체를 샘플과 접촉시켜 면역반응시키는 단계를 포함하는 제1항의 폴리펩티드의 검출방법.
  40. 제39항에 있어서, 모노클로날 항체가 방사성 물질, 효소 및 형광물질로 된 군으로부터 선택된 1종으로 표지되어 있는 폴리펩티드의 검출방법.
  41. 유효성분으로서 제1항의 폴리펩티드를 함유하는 감수성 질환제.
  42. 제41항에 있어서, 폴리펩티드는 킬러 세포에 의한 세포독성의 중강 및/또는 킬러 세포의 생성을 유도하는 성질을 가진 감수성 질환제.
  43. 제42항에 있어서, 킬러 세포는 NK 세포, LAK 세포(림포카인 활성화 킬러세포) 및 세포독성 T 세포로 된 군으로부터 선택되는 1종인 감수성 질환체.
  44. 제41항에 있어서, 인터로이킨 2 및 콘카나발린 A로 된 군으로부터 선택된 1종 이상을 추가로 함유하는 감수성 질환제.
  45. 제41항에 있어서, 항종양 면역요법제인 감수성 질환제.
  46. 제41항에 있어서, 혈청 알부민, 젤라틴, 말토오스 및 트레할로오스로 된 군으로부터 선택된 1종 이상을 안정제로 함유하는 감수성 질환제.
  47. 제41항에 있어서, 폴리펩티드를 건조 고형물 기준으로 0.000001∼100w/w% 함유하는 감수성 질환제.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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