[go: up one dir, main page]

KR20130069653A - Ｓｙｋ 억제제로서 7-(1h-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘 화합물 - Google Patents

Ｓｙｋ 억제제로서 7-(1h-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘 화합물 Download PDF

Info

Publication number
KR20130069653A
KR20130069653A KR1020127031384A KR20127031384A KR20130069653A KR 20130069653 A KR20130069653 A KR 20130069653A KR 1020127031384 A KR1020127031384 A KR 1020127031384A KR 20127031384 A KR20127031384 A KR 20127031384A KR 20130069653 A KR20130069653 A KR 20130069653A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
pharmaceutically acceptable
compound
methyl
fluoro
acceptable salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
KR1020127031384A
Other languages
English (en)
Inventor
프란시스 루이스 아트킨손
마이클 데이비드 바르커
클레멘트 도우아울트
네일 스튜어트 가르톤
존 리들
비풀쿠마르 칸티브하이 파텔
알렉산더 조지 스티븐 프레스톤
데이비드 매튜 윌슨
Original Assignee
글락소 그룹 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 글락소 그룹 리미티드 filed Critical 글락소 그룹 리미티드
Publication of KR20130069653A publication Critical patent/KR20130069653A/ko
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 비장 티로신 키나아제 억제제(Syk)의 억제제이며, 그에 따라서, 비만 및/또는 호중구 세포, 대식세포, 및 B-세포의 부적절한 활성화로부터 유도되는 질환 및 관련된 염증 반응 및 조질 손상, 예를 들어, 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환의 치료에, 그리고, 암의 치료, 특히, 헴 악성종양, 만성 자연적 두드러기 및 자가면역 병태의 치료에 유용한 하기 화학식(I)의 화합물 또는 이의 염을 개시한다:

Description

ＳＹＫ 억제제로서 7-(1H-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘 화합물{7-(1H-PYRAZOL-4-YL)-1,6-NAPHTHYRIDINE COMPOUNDS AS SYK INHIBITORS}
본 발명은 비장 티로신 키나아제(spleen tyrosine kinase: Syk)에 대한 활성을 지니는 신규한 화합물, 이들의 제조 방법, 이들을 함유하는 약제학적으로 허용되는 제형 및 치료에서의 이들의 용도에 관한 것이다.
Syk는 증식, 분화 및 식세포 작용을 포함한 다양한 세포 반응을 매개하는 신호 하류 이벤트(signal downstream event)에 대해서 활성화된 면역 수용체를 커플링시키는데 관련되는 비-수용체 티로신 키나아제이다. Syk는 조혈세포에서 광범위하게 발현된다. Syk 억제제는 효능적인 소염 및 면역조절 활성을 지닌다. 이들은 Syk-매개된 IgG Fc 엡실론 및 감마 수용체 및 BCR 수용체 신호전달을 억제하여 비만세포, 대식세포, 및 B-세포의 활성화 및 관련된 염증성 반응 및 조직 손상의 억제를 유도한다. 따라서, Syk 억제제는 류머티스 관절염, B-세포 림프종 및 천식/비염의 치료를 포함한 다양한 치료 영역에서 주목을 받고 있다.
류머티스 관절염(RA)은 인구의 약 1%가 영향을 받고 있는 자가-면역 질환이다. 이는 뼈와 연골의 파괴를 유도하는 관절의 염증이 특징이다. 가역적 B 세포 고갈을 유발시키는 리툭시맙(rituximab)에 관한 최근의 임상 연구(J.C.W. Edwards et al. New Eng. J. Med., 2004, 350, 25: 2572-2581)는 B 세포 기능을 표적하는 것이 자가-면역 질환, 예컨대, RA의 적절한 치료 전략임을 밝혔다. 임상적 이익은 자가-반응 항체의 감소와 상호 관련이 있으며, 이들 연구는 B 세포 기능 및 사실 자가-항체 생성이 질환의 진행중 병리에 중심이 된다.
Syk이 결핍된 마우스로부터의 세포를 사용한 연구는 B 세포 기능에서의 이러한 키나아제의 비-중복적 역할(non-redundant role)을 입증하고 있다. Syk의 결핍은 B 세포 성숙에서의 차단이 특징이다[문헌: M. Turner et al. Nature, 1995, 378: 298-302 and Cheng et al. Nature, 1995, 378: 303-306]. Syk가 결핍된 성숙한 B 세포에 대한 연구[문헌: Kurosaki et al. Immunol. Rev. 2000, 176:19-29]와 함께 이러한 연구는 Syk가 B 세포의 분화 및 활성화에 필요함을 입증하고 있다. 따라서, RA 환자에서의 Syk의 억제는 B 세포 기능을 차단하는 듯하며, 그에 따라서, 류머티스 인자 생성을 감소시킨다. B 세포 기능에서의 Syk의 역할에 추가로, RA의 치료에는 Fc 수용체 (FcR) 신호전달에서의 Syk 활성에 대한 요구가 관련되어 있다. RA에서의 면역 복합물에 의한 FcR 활성화가 다중 염증전 조절제의 방출에 기여하도록 제안되었다.
RA의 병인에 대한 Syk 의존성 과정의 기여는 문헌[Wong et al. (Expert Opinion Investigational Drugs, 2004, 13 (7): 743-762)]에 의해서 검토되었다.
Syk 억제제 R788(포스타마티닙 디소듐, Rigel)에 대한 12 주 임상 시험의 결과는 문헌[Treatment of rheumatoid arthritis with a syk kinase inhibitor: A twelve-week, randomized, placebo-controlled trial, Arthritis & Rheumatism, 58(11), 2008: 3309-3318]에 공개되었다.
Syk 억제제는 또한 암의 치료, 특히, 헴 악성종양(heme malignancy), 특히,소포(FL), 외투세포(mantle cell), 버킷(Burkitt) 및 미만성 큰 B세포 (diffuse large B cell: DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종을 치료하는데 유용할 수 있다.
연구는 Syk가 다양한 일차 B-림프종 종양에서 및 또한 B-림프종 세포주에서 과발현 및/또는 구성적 활성화에 의해서 이상 조절됨을 밝혔다. Syk는, PI3K/AKT 경로, PLD 경로 및 AKT 독립적 신호전달를 통해서, mTOR (라파마이신의 포유동물 표적)을 활성화시키고, 이는 B-세포 생존 및 증식을 증가시킨다. 시험관내 Syk의 억제는 감소된 mTOR 활성화 및 FL 세포에서의 클론성의 감소를 유도한다. B 림프종(BKS-2)의 뮤린 모델에서의 커쿠민(curcumin)에 의한 Syk 키나아제의 억제는 전체 스플레노사이트(splenocyte) 수로 측정하는 경우, 종양 부담을 상당히 감소시켰다[Leseux L. et al. Blood 15 Dec 2006, 108(13): 4156-4162 and Gururajan M. et al. Journal of Immunology, 2007, 178: 111-121]
재발성 또는 난치성 B-세포 비-호지킨 림프종(NHL)을 지니는 환자에서의 R788(포스타마티닙 디소듐)의 임상 2 단계 시험의 결과는 화합물이 환자에게 관용적일 뿐만 아니라, 미만성 큰 B-세포 림프종(DLBCL) 및 만성 림프구 백혈병/소세포 림프구 림프종(CLL/SLL)을 앓고 있는 환자에서 치료 이익이 있음을 나타내고 있다. 이러한 임상시험에 등록된 환자가 시중 치료에 의한 치료에서 질환이 더 진행되고 그러한 치료에 실패했음에도 불구하고, 이들 중 상당한 수가 R788에 의한 Syk 억제에 특별히 반응적이었다(www.Rigel.com; Friedberg J. W. et al. Blood, 1 April 2010; 115(13): 2578-85)
Syk 억제제는 또한 천식 및 비염의 치료에 유용할 수 있는데, 그 이유는 이들이 가교-연결 FcsR1 및/또는 FcyR1 수용체와 연관된 하류 세포 신호를 전달하는데 중요하며, 이들이 신호의 단계적 반응(signalling cascade)에서 초기에 위치되기 때문이다. 비만 세포에서, 예를 들어, 수용체-IgE 복합물질의 알레르겐 가교-연결에 이어지는 FcsR1 신호전달의 조기 서열은 첫 번째 Lyn(Src 패밀리 티로신 키나아제) 및 이어지는 Syk와 연루된다.
알레르기성 비염 및 천식은 비만 세포, 에오신호성(eosinophil), T 세포 및 수지상 세포를 포함한 다양한 세포 유형과 연관되는 과민성 반응 및 염증 사건과 연관된 질환이다. 알레르기물질에 대한 노출 후에, IgE (FcsRI) 및 IgG (FcyRI)에 대한 높은 친화성 면역글로불린 수용체는 가교-연결되고, 비만 세포 및 다른 세포 유형에서 하류 과정을 활성화시켜서 염증전 매개물 및 기도 스파스노겐(airway spasmogen)의 방출을 유도한다. 비만 세포에서, 예를 들어, 알레르겐(allergen)에 의한 IgE 수용체 가교-연결은 프로스타글란딘 및 류코트리엔을 포함한 새롭게 합성된 지질 매개물의 합성 및 방출뿐만 아니라 사전형성 과립으로부터의 히스타민을 포함한 매개물질의 방출을 유도한다.
알레르기성 비염의 치료를 위한 임상 I/II 연구에서 비내 투여된 Syk 억제제 R112 (Rigel)은 알레르기성 비루(rhinorrhea)에서의 개선과 고도로 상호 연관되는 중요한 면역 매개물질인 PGD2의 통계적 유의수준 감소뿐만 아니라, 지표의 범위에 걸쳐서 안전함을 나타내어, 국소 Syk 억제제의 임상적 안정성 및 효능에 대한 첫 번째 증거를 보이고 있다[참조: Meltzer E. O. et al. "An intranasal Syk kinase inhibitor (R112) improves the symptoms of seasonal allergic rhinitis in a park environment"; Journal of Allergy and Clinical Immunology, 2005, 115(4): 791-796]. 그러나, 추가의 임상 II 시험에서, R112는 위약에 비해서 효능이 없는 것으로 밝혀졌다(www.clinicaltrials.gov Identifier NCT0015089)
급성 및 만성 두드러기는 미국내 전체 국민의 약 25%가 영향을 받는 것으로 생각되는 일반적인 피부 질환이다[참조: "New concepts in chronic urticaria"; Current Opinions in Immunology, 2008, 20: 709-716]. 두드러기는 알레르기성 반응에 의해서 촉발될 수 있지만, 많은 경우가 불명확한 병인을 지닌다. 만성 자연적 두드러기는 광범위한 피부 발진이 6 주 초과 동안 존재하는 경우로 정의된다. 만성 두르러기 환자에서, 피부에서의 피부 발진의 범위 면에서, Ig-E 활성화를 통한 알레르겐-유도된 비만 및 호중구 세포 분해 반응에 의해서, 많은 병인적 유사성이 존재한다. 약 40%의 만성 자연적 두드러기 환자는 혈청 IgG 자가-항체 표적화 IgE 또는 IgE 수용체 (Fc 엡실론 수용체)를 함유하고 있으며, 이들은 비만 및 호중구 과립탈실을 통해서 히스타민 및 다른 매개물질 방출을 유도하는 것으로 생각된다. Syk 억제제는 IgE 매개된 Fc 엡실론 활성화 후 신호전달 반응을 억제할 것이고, 복합 질환에서의 만성 소양증과 연루되는 것으로 공지된 매개물질 방출을 억제할 것이다.
WO03/057695A1 (Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc.)는 Syk 억제 활성을 지니는 신규한 1,6-나프티리딘을 기재하고 있다. 이들은 추가로 문헌["Discovery and SAR of Novel [1,6] Naphthyridines as Potent Inhibitors of Spleen Tyrosine Kinase (SYK)" (Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 13 (2003): 1415-1418]에 기재되어 있다. 이는 두 개의 최근 특허 출원으로 이어졌다.
WO2010/015518A2 및 WO2010/015520 A1 (Boehringer Ingelheim International GmbH)는 각각 4-디메틸아미노-페닐-치환된 나프티리딘 및 치환된 나프티리딘을 기재하고 있다.
WO04/035604A2 (Millennium Pharmaceuticals, Inc.)는 인간 Syk 단백질의 구조적 좌표(structural coordinate)를 개시하고 있다.
그러나, 비장 티로신 키나아제(Syk)의 억제제인 추가의 화합물을 동정할 필요가 여전히 존재한다.
따라서, 본 발명의 첫 번째 관점으로, 본 발명은 화학식(I)의 화합물 또는 이의 염(이하, "본 발명의 화합물")을 제공한다:
Figure pct00001
상기 식에서,
X는 O 또는 NH이고;
R1은 C2 -4 알킬, C3 -7 사이클로알킬, 하이드록시C2 -4 알킬, C1 -2 알콕시C1 -4 알킬, 트리플루오로메틸C1-2 알킬 또는 벤질이다.
한 가지 관점으로, X는 NH이다.
한 가지 구체예에서, R1은 에틸, 이소-프로필, t-부틸, 사이클로펜틸, 메톡시메틸, 메톡시에틸, 하이드록시에틸, 2,2-하이드록시메틸프로필, 2,2,2-트리플루오로에틸 또는 벤질이다. 또 다른 구체예에서, R1은 C2 -4 알킬, C3 - 7사이클로알킬 또는 C1 - 2알콕시C1 - 4알킬이다. 또 다른 구체예에서, R1은 에틸, t-부틸, -CH2OCH3, -CH2C(CH3)2OH, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH(CH3)2, -CH2CF3, 벤질 또는 사이클로펜틸이다. 또 다른 구체예에서, R1은 에틸, t-부틸, 또는 메톡시메틸이다. 또 다른 구체예에서, R1은 에틸 또는 t-부틸이다. 추가의 구체예에서, R1은 t-부틸이다.
본 발명이 상기 기재된 치환기의 모든 조합을 포함함을 이해해야 한다.
화학식(I)의 화합물은 피페리디닐 고리의 3-탄소에서 키랄 중심을 포함함을 인지할 것이다. S 절대 입체화학을 지니는 이들이, 더 우수한 생체이용성(예측 동물 약동학 연구에서 측정됨) 및 더 낮은 hERG 활성을 포함한 더 우수한 약물 개발 특성을 고려하여, 일반적으로 바람직하다.
따라서, 한 가지 구체예에서, 본 발명은 S 절대 입체화학을 지니는 화학식(I)의 화합물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 S 절대 입체화학을 지니는 화학식(I)의 화합물, 즉 화학식(II)의 화합물 또는 이의 염을 제공한다:
Figure pct00002
상기 식에서,
X 및 R1은 상기 정의된 바와 같다.
본 발명의 화합물은 실시예 1 내지 실시예 11의 화합물 및 이들의 염을 포함한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 하기 화합물 및 이들의 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식(I)의 화합물을 제공한다:
7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민;
7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-{1-[(메틸옥시)메틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-아민;
7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}옥시)-1,6-나프티리딘;
1-{4-[5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]-1H-피라졸-1-일}-2-메틸-2-프로판올;
2-{4-[5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]-1H-피라졸-1-일}에탄올;
N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-{1-[2-(메틸옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-아민;
7-(1-사이클로펜틸-1H-피라졸-4-일)-N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-{[(3R)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-7-[1-(페닐메틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-{[3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(1-메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(1-메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민; 및
N-{[(3R)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(1-메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 하기 화합물 및 이들의 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식(I)의 화합물을 제공한다:
7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민;
7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-{1-[(메틸옥시)메틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-아민;
7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}옥시)-1,6-나프티리딘;
1-{4-[5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]-1H-피라졸-1-일}-2-메틸-2-프로판올;
2-{4-[5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]-1H-피라졸-1-일}에탄올;
N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-{1-[2-(메틸옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-아민;
7-(1-사이클로펜틸-1H-피라졸-4-일)-N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-1,6-나프티리딘-5-아민;
N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민; 및
N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-7-[1-(페닐메틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 하기 화합물 및 이들의 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화학식(I)의 화합물을 제공한다:
7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민; 및
7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민.
또 다른 구체예에서, 하기 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 염인 화학식(I)의 화합물을 제공한다:
Figure pct00003
추가의 구체예에서, 본 발명은 하기 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 염을 제공한다:
Figure pct00004
화학식(I)의 화합물 및 이들의 염의 모든 용매화물(수화물을 포함함), 착화합물, 다형체, 전구약물, 방사성 표지된 유도체, 입체 이성질체 및 광학 이성질체가 "본 발명의 화합물"의 범위에 포함된다.
화학식(I)의 화합물 및 이들의 염에 대한 본원에서의 참조는 유리 염기로서, 또는 이들의 염으로서, 예를 들어 이의 약제학적으로 허용되는 염으로서의 화학식(I)의 화합물을 포함함을 이해해야 한다. 따라서, 한 가지 구체예에서, 본 발명은 유리 염기로서의 화학식(I)의 화합물에 관한 것이다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 화학식(I)의 화합물 및 이들의 염에 관한 것이다. 추가의 구체예에서, 본 발명은 화학식(I)의 화합물 및 이들의 약제학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
본 발명의 화합물은 Syk의 억제제로서 유용한다. 본 발명의 화합물은 잠재적인 심장 독성의 중요 척도인 hERG 결합 검정에서 낮은 활성을 나타낸다. 본 발명의 화합물은 또한 유전자 돌연변이(염기쌍 치환 및 프레임시프트(frameshift) 돌연변이)를 유도하는 유전적 손상을 생성시킬 수 있는 광범위한 범위의 화학물질을 검출하도록 설계된 검정인 복귀돌연변이시험(Bacterial Reverse Mutation Test)에서 음성이다.
따라서, 본 발명의 화합물은 일부 암의 치료, 특히, 헴 악성종양(heme malignancy) 뿐만 아니라, B 세포 및/또는 활성화된 대식세포와 연관되는 염증성 병태 및 또한 부적절한 비만세포 활성화로부터 발생되는 질환, 예를 들어, 알러지성 및 염증성 질환을 치료하는데 가능성 있게 유용하다.
본원에서 사용된 용어, "알킬"은 모든 포화된 직쇄 및 분지쇄 이성질체를 포함한다. 예를 들어, C1 -4 알킬은 1 이상 및 최대 4개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기를 의미한다. 이들의 대표적인 예는, 이로 한정되는 것은 아니지만, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소-부틸 및 t-부틸을 포함한다.
본원에서 사용된 용어, "알콕시"는 모든 포화된 직쇄 및 분지쇄 이성질체를 포함한다. 예를 들어, C1 -2 알콕시는 1 이상 및 최대 2개의 탄소원자를 함유하는 직쇄 알콕시기를 의미한다. 본원에서 사용된 용어 "알콕시"의 대표적인 예는, 이로 한정되는 것은 아니지만, 메톡시 및 에톡시를 포함한다.
본원에서 사용된 용어, "사이클로알킬"은, 달리 정의되지 않는 한, 3 내지 7개의 고리 탄소원자를 지니는 카르보사이클릭 고리를 포함한다. 이의 대표적인 예는, 이로 한정되는 것은 아니지만, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸을 포함한다. 바람직하게는, 사이클로알킬 고리는 5 도는 6개의 고리 탄소 원자를 포함한다.
본원에서 사용된 용어, "약제학적으로 허용되는"은 정상적인 의학적 판단의 범위내에서, 합리적인 이익/위험 비에 어울리게, 과도한 독성, 자극, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이, 인간 및 동물의 조직과 접촉 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및 용량형을 나타낸다. 당업자는 본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염이 제조될 수 있음을 인지할 것이다.
본원에서 사용된 용어, "약제학적으로 허용되는 염"은 대상 화합물의 요망되는 생물학적 활성을 유지하고 요망되지 않는 독성학적 효과를 최소로 나타내는 염을 나타낸다. 이들 약제학적으로 허용되는 염은 화합물의 분리 및 정제 동안에 동일반응계내에서, 또는 유리 산 또는 유리 염기 형태로의 정제된 화합물을 각각 적합한 염기 또는 산과 별도로 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 사실, 본 발명의 특정의 구체예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 각각의 유리 염기 또는 유리 산에 비해서 바람직할 수 있는데, 그 이유는 그러한 염이 분자에 더 큰 안정성 또는 가용성을 부여하여, 용량형으로의 제형화를 용이하게 하기 때문이다.
화학식(I)의 화합물은 염기성이며, 그에 따라서, 일반적으로, 적합한 상에 의한 처리에 의해서 약제학적으로 허용되는 산부가염을 형성시킬 수 있다. 적합한 산은 약제학적으로 허용되는 무기산 및 약제학적으로 허용되는 유기산을 포함한다. 대표적인 약제학적으로 허용되는 산부가염은 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 니트레이트, 메틸니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 설파메이트, 포스페이트, 아세테이트, 히드록시아세테이트, 페닐아세테이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 이소부티레이트, 발레레이트, 말레에이트, 히드록시말레에이트, 아크릴레이트, 푸마레이트, 말레이트, 타르트레이트, 시트레이트, 살리실레이트, p-아미노살리시클레이트, 글리콜레이트, 락테이트, 헵타노에이트, 프탈레이트, 옥살레이트, 숙시네이트, 벤조에이트, o-아세톡시벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 히드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 만델레이트, 탄네이트, 포르메이트, 스테아레이트, 아스코르베이트, 팔미테이트, 올레에이트, 피루베이트, 파모에이트, 말로네이트, 라우레이트, 글루타레이트, 글루타메이트, 에스톨레이트, 메탄설포네이트 (메실레이트), 에탄설포네이트 (에실레이트), 2-히드록시에탄설포네이트, 벤젠설포네이트 (베실레이트), p-아미노벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 (토실레이트), 및 나프탈렌-2-설포네이트를 포함한다. 한 가지 구체예에서, 본 발명은 하이드로클로라이드 염인 화학식(I)의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
화학식(I)의 화합물은 키랄 중심을 지니고 있으며, 그에 따라서, 개별적인 거울상이성질체 또는 이들의 혼합물로서 존재한다. 키랄 중심의 입체 화학이 특정되지 않은 경우에, 구조는 각각의 거울상이성질체 및 이들의 모든 혼합물을 포함하는 것이다. 따라서, 화학식(I)의 화합물은 라세미 혼합물 및 라세미체, 거울상이성질체적으로 부화된 혼합물, 또는 거울상이성질체적으로 순수한 개별적인 입체이성질체를 포함한, 라세미 변형물로서 사용될 수 있다. 본 발명은 모든 그러한 혼합물 뿐만 아니라 순수한 개별적인 거울상이성질체를 포함한다. 일반적으로, 정제된 단일의 거울상이성질체, 예를 들어, 화학식(II)의 화합물의 형태로 화학식(I)의 화합물을 사용하는 것이 바람직하다.
화학식(I)의 화합물의 개별적인 거울상이성질체는 당업자에게는 공지된 방법에 의해서 분리될 수 있다. 예를 들어, 그러한 분리는 (1) 부분입체이성질체 염, 착화합물 또는 다른 유도체의 형성에 의해서; (2) 입체 이성질체-특이적 시약과의 반응에 의해서, 예를 들어, 효소적 산화 또는 환원에 의해서; 또는 (3) 키랄 환경에서의, 예를 들어, 키랄 용매의 존재하에 또는 결합된 키랄 리간드를 지닌 실리카와 같은 키랄 지지체 상에서의 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피에 의해서 수행될 수 있다. 당업자는 요망되는 입체이성질체가 상기 기재된 분리 과정 중 하나에 의해서 또 다른 화학적 이성질체로 전환되는 경우에, 추가의 단계가 요망되는 형태를 생성시키기 위해서 요구됨을 인지할 것이다. 대안적으로, 특정의 거울상이성질체는 광학적 활성 시약, 물질, 촉매 또는 용매를 사용하는 비대칭 합성에 의해서 또는 하나의 거울상이성질체를 비대칭 전환에 의한 다른 이성질체로 전환시킴으로써 합성될 수 있다.
본 발명의 화합물은 고체 또는 액체 형태로 존재할 수 있다. 고체 상태에서, 본 발명의 화합물은 결정상 또는 비결정상(비정질) 형태, 또는 이들의 혼합물로 존재할 수 있다. 결정상 형태인 본 발명의 화합물의 경우에, 당업자는 결정화 동안에 용매 분자가 결정상 격자에 혼입되는 약제학적으로 허용되는 용매화물이 형성될 수 있다는 것을 인지할 것이다. 용매화물은 비수성 용매, 예컨대, 이로 한정되는 것은 아니지만, 에탄올, 이소프로판올, n-부탄올, t-부탄올, 아세톤, 테트라하이드로푸란, 디옥산, DMSO, 아세트산, 에탄올아민, 및 에틸 아세테이트를 포함할 수 있거나, 이들은 결정 격자에 혼입되는 용매로서 물을 포함할 수 있다. 물이 결정 격자에 혼입된 용매인 용매화물은 전형적으로는 "수화물"로 일컬어진다. 수화물은 화학양론적 수화물 뿐만 아니라 다양한 양의 물을 함유하는 조성물을 포함한다. 본 발명은 모든 그러한 용매화물을 포함한다. 추가로, 용어 용매화물은 유리 염기 화합물의 용매화물뿐만 아니라 이의 어떠한 염을 포함한다.
당업자는 추가로 다양한 용매화물을 포함한 결정상 형태로 제조하는 본 발명의 화합물이 다형성(즉, 상이한 결정상 구조를 생성시키는 능력)을 나타낼 수 있음을 인지할 것이다. 이들 상이한 결정상 형태는 전형적으로 "다형체"로서 공지되어 있다. 본 발명은 모든 그러한 다형체를 포함한다. 다형체는 동일한 화학적 조성을 지니고 있으나, 결정상 고체 상태의 팩킹(packing), 기하학적 배열, 및 다른 설명적 성질이 상이하다. 따라서, 다형체는 물리적 성질, 예컨대, 모양, 밀도, 경도, 변형성, 안정성 및 용해 성질이 상이하다. 다형체는 전형적으로는 동정을 위해서 이용될 수 있는 상이한 융점, IR 스펙트럼, 및 CX-레이 분말 회절 패턴을 나타낸다. 당업자는 상이한 다형체가, 예를 들어, 화합물을 제조하는데 사용된 반응 조건 또는 시약을 변화 또는 조절함으로써, 생성될 수 있음을 인지할 것이다. 예를 들어, 온도, 압력 또는 용매의 변화가 다형체를 생성시킬 수 있다. 추가로, 하나의 다형체는 특정의 조건하에 또 따른 다형체로 전환될 수 있다.
화학식(I)의 화합물은 이하 기재된 일반적인 합성 도식에 의해서 제조될 수 있다.
도식 1: 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-(아미노메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트의 합성
Figure pct00005
a) 2,6-루티딘, 에틸 2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트, [(S)-(-)-2,2'-비스포스피노)-1,1'-바이나프틸]팔라듐 (II) 디하이드레이트 디트리플레이트, N-플루오로벤젠설폰이미드, EtOH;
b) BH3-THF;
c) BOC20, Et3N, DCM;
d) Tf20, Et3N, DCM;
e) NaN3, DMF;
f) Pd/C, EtOH.
도식 2: 1-(1,1-디메틸에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸의 합성
Figure pct00006
a) 진한, HCl, EtOH;
b) NBS, DCM;
c) 비스(피나콜레이토)디보론, KOAc, Pd2(dba)3, 2-(디사이클로헥실포스피노)-2',4',6'-트리이소프로필바이페닐, 1,4-디옥산.
도식 3: 1-[(메틸옥시)메틸]-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸의 합성
Figure pct00007
a) 로도메틸 메틸 에테르, K2C03, 아세토니트릴.
도식 4 (X= NH )
Figure pct00008
상기 식에서,
R = Et, t-Bu, CH2OMe
a) 2,6-디클로로-4-피리딘아민, 2,2-디메틸프로파노일 클로라이드, Et3N, DCM
b) nBuLi, (2E)-3-(디메틸아미노)-2-프로펜알, THF;
c) 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-(아미노메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (도식 1 참조), DIPEA, NMP;
d) 피라졸 보론산 에스테르, Cs2C03, Pd(PPh3)4, 1,4-디옥산, H20; 또는 피라졸 보론산 에스테르, KOH, PEPPSI 촉매, DME, EtOH, H20;
e) TFA, DCM.
도식 5 (X=0): 7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}옥시)-1,6-나프티리딘의 합성
Figure pct00009
a) 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-(하이드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (도식 1 참조), NaH, DMF;
b) 1-에틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸, Cs2C03, Pd(PPh3)4, 1,4-디옥산, H20;
c) TFA, DCM.
도식 6: 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민의 합성
Figure pct00010
a) (+)-멘톨, DMAP, 톨루엔, 환류;
b) [(S)BINAP]Pd(OTf)2; (PhS02)2NF; 2,6-루티딘; EtOH;
c) (i) BH3.DMS; THF; 환류;
(ii) Boc20;
d) Tf20, 피리딘;
e) NaN3, DMF;
f) Pt/C, 수소, THF, NH3(aq);
g) 화학식(XIX)의 화합물, DIPEA, NMP;
h) 화학식(XIV)의 화합물, Pd(디-t-bpf)Cl2, NaHC03, 디옥산 (aq); i) HCl/디옥산, 톨루엔;
j) (i) NaOH(aq), EtOAc;
(ii) n-BuOAc, TBME.
도식 7: 5,7-디클로로-1,6-나프티리딘의 합성
Figure pct00011
a) Cu(OAc)2, 3차-BuOK, IPA;
b) TEA, THF, ClC02Et;
c) NH3(aq), HCl(aq);
d) POCl3, Me4NCl, 환류.
도식 8: 1-(1,1-디메틸에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸의 합성
Figure pct00012
a) EtOH, HCl, 환류;
b) NBS, DCM;
c) 환류;
d) BuLi, THF
화학식(IV), (X), (XI), (XV), (XVII), (XXVII), (XXVIII), (XXXV) 및 (XXXVI)의 화합물은, 예를 들어, Sigma-Aldrich UK로부터 상업적으로 구입 가능하다.
따라서, 한 가지 구체예에서, 본 발명은, 하기 화학식(III)의 1,6-나프티리딘 화합물을, 보론산 에스테르/산 커플링을 위해서 전형적으로 사용되는 조건하에, 촉매의 존재하에서, 하기 화학식(XXVI)의 피라졸 보론산 에스테르/산 화합물과 반응시키고, 그 후에, 보호기를 제거함을 포함하는, 화학식(I)의 화합물을 제조하는 공정을 제공한다:
Figure pct00013
Figure pct00014
상기 식에서,
P는 보호기이며, X는 상기 정의된 바와 같다.
R3 및 R4는 동일하거나 상이할 수 있으며, 각각 수소, C1-6 알킬이거나, R3과 R4는 결합되어 4개 이하의 메틸기로 임의로 치환된 C1 - 3알킬렌기, 예를 들어, -C(Me)2C(Me)2-를 형성하고;
R1은 상기 정의된 바와 같다.
보호기의 예 및 이들의 제거 수단은 문헌[T. W. Greene 'Protective Groups in Organic Synthesis' (J. Wiley and Sons, 1991)]에서 찾아볼 수 있다. 적합한 아민 보호기는, 이로 한정되는 것은 아니지만, 설포닐(예컨대, 토실), 아실 (예컨대, 벤질옥시카르보닐 또는 t-부톡시카르보닐) 및 아릴알킬 (예컨대, 벤질)을 포함하고, 이들은 적절한 경우 가수분해 또는 가수소분해에 의해서 제거될 수 있다. 그 밖의 아민 보호기는 염기 촉매화된 가수분해에 의해서 제거될 수 있는 트리플루오로아세틸 (-C(0)CF3), 또는 고형 상 수지 결합된 벤질기, 예컨대, 산 촉매화된 가수분해(예를 들어, 트리플루오로아세트산을 사용함)에 의해서 제거될 수 있는 메리필드 수지(Merrifield resin) 결합된 2,6-디메톡시벤질기(Ellman linker)를 포함한다.
본 발명의 한 가지 구체예에서, 보호기(P)는 3차-부틸옥시카르보닐 "BOC" 및 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐 "FMOC"로부터 선택된다.
합성 효율에 대해서, 실질적으로 거울상이성질체적으로 순수한 전구체가 전체 합성에서, 가능한 한 조기에, 예를 들어, 도식 I의 제 1 단계에서 얻어짐이 주지될 것이다. 따라서, 광학적 활성 촉매 ([(S)-(-)-2,2-비스포스피노)-1,1 '-바이나프틸]팔라듐 (II) 디하이드레이트 디트리플레이트)를 사용한 3-위치에서의 피페리딘 핵의 거울상선택적 플루오르화는 거울상이성질체적으로 풍부한 플루오로-생성물을 유도한다. 이어서, 이는, 예를 들어, 제조 키랄 HPLC를 사용함으로써 분리되어 실질적으로 거울상이성질체적으로 순수한 제품을 생성시킨다.
화학식(I)의 화합물은, 도식 I의 제 1 단계에서, 촉매 ([(-)-2,2'-비스포스피노)-1,1 '-바이나프틸]팔라듐 (II) 디하이드레이트 디트리플레이트)의 라세미 화합물을 사용하여 상기 기재된 일반적인 합성 도식에 의해서 제조될 수 있으며, 그에 따라서, 거울상이성질체 부화가 없으며, 그에 따라, 라세미 중간체가 전체적으로 사용된다. 이어서, 화학식(II)의 화합물은 화학식(I)의 상응하는 라세미 화합물 또는 아민 보호된 전구체로부터, 키랄 분리에 대한 본 분야에 공지된 방법, 특히, (제조) 키랄 HPLC에 의해서 제조될 수 있다. 대안적으로, 분리는 요망되는 경우에, 예를 들어, 도식 4에서 더 초기 단계에서, 단계 c) 후에, 1,6-나프티리딘 코어에 대한 라세미 아민의 커플링 후에, 수행될 수 있다.
본 발명의 화합물은 Syk의 억제제로서 유용하고, 따라서, 일부 암의 치료, 특히, 헴 악성종양(heme malignancy) 뿐만 아니라, B 세포와 연관되는 염증성 병태 및 또한 부적절한 비만세포 호중구 세포 활성화로부터 발생되는 질환, 예를 들어, 알러지성 및 염증성 질환, 예컨대, 급성 및 만성 두드러기를 포함한 피부 비만 세포 매개된 질환, 비만세포증(mastocytosis), 아토피 피부염(atopic dermatitis) 및 자가면역 질환, 예컨대, 피부 루푸스(cutaneous lupus) 및 천포창(pemphigus) 및 유사천포창(pemphigoid)을 포함한 자가면역 수포성 병태(autoimmune bullous conditions)을 치료하는데 잠재적으로 유용하다.
이들은 또한 비만 세포, 예컨대, 수술후 장폐색을 포함한 급성 병태의 치료에 유용할 수 있다.
따라서, 한 가지 구체예에서, 본 발명은 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 비장 티로신 키나아제 (Syk)를 억제하는데 유용한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 비장 티로신 키나아제 (Syk)의 억제를 ㅍ피필요로 하는 피검체에 치료 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 비장 티로신 키나아제 (Syk)을 억제하는 방법을 제공한다.
Syk 억제제는 암의 치료, 특히, 헴 악성종양, 특히, 소포(FL), 외투세포(mantle cell), 소림프구 림프종/만성 림프구 림프종(SLL/CLL), 버킷(Burkitt) 및 미만성 큰 B세포 (diffuse large B cell: DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종의 치료에 유용할 수 있다.
따라서, 한 가지 구체예에서, 본 발명은 암, 특히, 헴 악성종양, 특히, 소포(FL), 외투세포(mantle cell), 소림프구 림프종/만성 림프구 림프종(SLL/CLL), 버킷(Burkitt) 및 미만성 큰 B세포(diffuse large B cell: DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 유효량의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 암, 특히, 헴 악성종양, 특히, 소포(FL), 외투세포(mantle cell), 소림프구 림프종/만성 림프구 림프종(SLL/CLL), 버킷(Burkitt) 및 미만성 큰 B세포(diffuse large B cell: DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종을 치료하는 방법을 제공한다.
추가의 구체예에서, 본 발명은 암, 특히, 헴 악성종양, 특히, 소포(FL), 외투세포(mantle cell), 소림프구 림프종/만성 림프구 림프종(SLL/CLL), 버킷(Burkitt) 및 미만성 큰 B세포(diffuse large B cell: DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종의 치료를 위한 약물의 제조에서의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.
본 발명의 화합물은 또한 본 분야에 공지된 다른 종류의 암의 화학 치료제와 함께 암의 화학치료에서 사용될 수 있다. 비-호지킨 림프종을 위한 그러한 조합으로 사용하기 위한 대표적인 제제의 종류는 리툭시맙(rituximab), BEXXAR (토시투모맙(tositumomab) 및 아이오딘 I131 토시투모맙(Iodine I 131 tositumomab)), 픽산트론(pixantrone) 및 화학치료를 포함한다. 본 발명의 화합물의 조합물은 또한 CHOP 약물 섭생 (사이클로포스파미드, 아드리아마이신(adriamycin), 빈크리스틴(vincristine), 프레드니손(prednisone)) 또는 CHOP 플러스 리툭시맙(CHOP plus rituximab: CHOP+R)과의 조합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 B 세포 및/또는 대식세포 활성화와 관련된 자가면역 병태, 예를 들어, 전신홍반루푸스(Systemic Lupus Erythematosus: SLE), 쇼그렌증후군(Sjogren's syndrome), 베게너 육아종증(Wegener's Granulomatosis) 및 그 밖의 혈관병증, 수포성 유사천포창(bullous pemphigoid) 및 천포창(pemphigus), 사구체 신염(glomerulonephritis), 만성 이식거부 반응(chronic transplant rejection) 및 류머티스 관절염을 치료하는데 잠재적으로 유용하다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 자가면역 병태, 예를 들어, 전신홍반루푸스(SLE), 원반형 (피부) 루푸스, 쇼그렌증후군, 베게너 육아종증(Wegener's Granulomatosis) 및 그 밖의 혈관병증, 수포성 유사천포창 및 천포창, 특발성 혈소판 감소성 자반증(idiopathic thrombocytopenic purpura: ITP), 거대세포 동맥염(giant cell arteriosis), 사구체 신염, 만성 이식거부 반응 및 류머티스 관절염의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 류머티스 관절염의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 추가의 구체예에서, 본 발명은 류머티스 관절염의 치료에 사용하기 위한 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 치료 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 자가면역 병태, 예를 들어, 전신홍반루푸스(SLE), 원반형 (피부) 루푸스, 쇼그렌증후군, 베게너 육아종증 및 그 밖의 혈관병증, 수포성 유사천포창 및 천포창, 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP), 거대세포 동맥염, 사구체 신염, 만성 이식거부 반응 및 류머티스 관절염의 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 치료 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 류머티스 관절염을 치료하는 방법을 제공한다. 추가의 구체예에서, 본 발명은 치료 유효량의 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 류머티스 관절염을 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 자가면역 병태, 예를 들어, 전신홍반루푸스(SLE), 원반형 (피부) 루푸스, 쇼그렌증후군, 베게너 육아종증 및 그 밖의 혈관병증, 수포성 유사천포창 및 천포창, 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP), 거대세포 동맥염, 사구체 신염, 만성 이식거부 반응 및 류머티스 관절염의 치료를 위한 약물의 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 류머티스 관절염의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다. 추가의 구체예에서, 본 발명은 류머티스 관절염의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명의 화합물은 자가-항체 상태이거나 그렇지 않은 만성 특발성 두드러기(현재, 만성 자연적 두드러기로 공지됨)를 치료하는데 잠재적으로 유용하다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 만성 자연적 두드러기의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 만성 자연적 두드러기의 치료에 사용하기 위한 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 만성 자연적 두드러기의 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 만성 자연적 두드러기를 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 만성 자연적 두드러기의 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물을 투여함을 포함하여 만성 자연적 두드러기를 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 만성 자연적 두드러기를 치료하기 위한 약물의 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 만성 자연적 두드러기를 치료하기 위한 약물의 제조하기 위한 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물의 용도를 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 B 세포와 관련된 염증성 질환의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 B 세포와 관련된 염증성 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 B 세포와 관련된 염증성 질환의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.
본 발명의 화합물은 부적절한 비만 세포 활성화로부터 발생되는 질환, 예를 들어, 알레르기성 및 염증성 질환을 치료하는데 잠재적으로 유용하다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 피부 소견(skin manifestation)이 있는 질환을 포함한 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 피부 소견(skin manifestation)이 있는 질환을 포함한 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환, 예를 들어, 만성폐쇄폐질환(chronic obstructive pulmonary disease: COPD), 성인호흡곤란증후군(adult respiratory distress syndrome: ARDS), 천식, 중증 천식(severe asthma), 궤양성 대장염(ulcerative colitis), 크론 질환(Crohn's disease), 기관지염(bronchitis), 결막염(conjunctivitis), 건선(psoriasis), 피부 경화증(scleroderma), 피부염(dermatitis), 알레르기, 비염(rhinitis), 피부 루푸스(cutaneous lupus), 천포창 및 유사천포창을 포함한 자가면역 수포성 병태, 비만세포증(mastocytosis) 및 아나필락시스(anaphylaxis)의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환, 예를 들어, 만성폐쇄폐질환(COPD), 성인호흡곤란증후군(ARDS), 천식, 중증 천식, 궤양성 대장염, 크론 질환, 기관지염, 결막염, 건선, 피부 경화증, 피부염, 알레르기, 비염, 피부 루푸스, 천포창 및 유사천포창을 포함한 자가면역 수포성 병태, 비만세포증 및 아나필락시스의 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환, 예를 들어, 만성폐쇄폐질환(COPD), 성인호흡곤란증후군(ARDS), 천식, 중증 천식, 궤양성 대장염, 크론 질환, 기관지염, 결막염, 건선, 피부 경화증, 피부염, 알레르기, 비염, 피부 루푸스, 천포창 및 유사천포창을 포함한 자가면역 수포성 병태, 비만세포증 및 아나필락시스의 치료를 위한 약물의 제조를 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 염증성 질환의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 염증성 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 염증성 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 염증성 질환의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 알레르기성 질환의 치료에 사용하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 알레르시성 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 알레르시성 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 그러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
한 가지 구체예에서, 본 발명은 부적절한 비만 세포 활성화와 연관되는 알레르시성 질환의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 제공한다.
Syk에 의해서 매개되는 것으로 생각되는 질환 및 병적 상태(pathological condition)는 비만 세포 활성화와 연관되는 염증성 및 알레르기성 질환, 예컨대, 만성폐쇄폐질환(COPD), 성인호흡곤란증후군(ARDS), 중증 천식, 궤양성 대장염, 크론 질환, 기관지염, 결막염, 건선, 피부 경화증, 및 만성 자연적 두드러기 및 접촉성 및 물리적 두드러기를 포함한 만성 및 급성 두드러기, 피부염, 알레르기, 비염, 비만세포증 및 아나필락시스를 포함한다.
본 발명의 화합물은 또한 소염제, 항콜린제(anticholinergic agent)(특히, M1/M2/M3 수용체 길항제), β2-아드레날린수용체 효능제(β2-adrenoreceptor agonists), 항감염제(antiinfective agent), 예컨대, 항생제 또는 항바이러스제 및 항히스타민제와 함께 사용될 수 있다.
또 다른 구체예에서, 본 발명의 화합물은 또한 자가면역 질환을 치료하기 위한 본 기술분야에 공지된 다른 종류의 치료제, 예를 들어, 사이클로스포린, 메토트렉세이트(methotrexate), 설파살라진(sulphasalazine), 프레드니손, 레프루노미드(leflunomide) 및 클로로퀸(chloroquine)/하이드로클로로퀸을 포함한 질환 개선 항류머티스 약물(disease modifying anti-rheumatic drugs) 및 생물약제(biopharmaceutical agents), 예컨대, 항-TNF 알파 차단제, 예컨대, 레미케이드(remicade), 엔브렐(enbrel) 및 휴미라(humira)를 포함한 인간화된 모노클로날 항체(humanised monoclonal antibodies)(mabs) 및 B 세포 고갈 치료제(B cell depleting therapies), 예컨대, 리툭시맙 및 오파투무맙(ofatumumab), 및 항-Blys 맙(anti-Blys mabs), 예컨대, 벨리루맙(belilumab)과 함께 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명은 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 하나 이상의 다른 치료 활성 제제, 예를 들어, 소염제, 예컨대, 코르티코스테로이드 또는 NSAID, 항콜린제, β2-아드레날린수용체 효능제, 항감염제, 예컨대, 항생제 또는 항바이러스제, 항히스타민제, 질환 개선 항류머티스 약물 및 생물약제, 예컨대, 인간화된 모노클로날 항체(mabs), B 세포 고갈 치료제, 및 항-Blys 맙으로부터 선택된 하나 이상의 다른 치료 활성 제제와 함께 포함하는 조성물을 제공한다. 본 발명의 한 가지 구체예는 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 β2-아드레날린수용체 효능제, 및/또는 항콜린제, 및/또는 PDE-4 억제제, 및/또는 항히스타민제, 및/또는 질환 개선 항류머티스 약물, 및/또는 생물약제와 함께 포함하는 조성물을 포함한다.
본 발명의 한 가지 구체예는 하나 또는 두 가지의 다른 치료제를 포함하는 조성물을 포함한다.
당업자에게는, 적절한 경우에, 다른 치료 성분(들)이 염의 형태로, 예를 들어, 알칼리금속 또는 아민 염으로서, 또는 산부가염, 또는 전구약물로서, 또는 에스테르로서, 예를 들어, 저급 알킬 에스테르로서, 또는 용매화물, 예를 들어 수화물로서 사용되어 치료 성분의 활성 및/또는 안정성 및/또는 물리적인 특성, 예컨대, 용해성을 최적화시킬 수 있다는 것이 명백할 것이다. 또한, 적절한 경우에, 치료 성분이 광학적으로 순수한 형태로 사용될 수 있다.
β2-아드레날린수용체 효능제의 예는 살메테롤(salmeterol)(이는 라세미체 또는 단일의 거울상이성질체, 예컨대, R-거울상이성질체일 수 있다), 살부타몰(salbutamol)(이는 라세미체 또는 단일의 거울상이성질체, 예컨대, R-거울상이성질체일 수 있다), 포르모테롤(formoterol)(이는 라세미체 또는 단일의 입체이성질체, 예컨대, R,R-입체이성질체일 수 있다), 살메파몰(salmefamol), 페노테롤(fenoterol), 카르모테롤(carmoterol), 에탄테롤(etanterol), 나민테롤(naminterol), 클렌부테롤(clenbuterol), 피르부테롤(pirbuterol), 플레르부테롤(flerbuterol), 레프로테롤(reproterol), 밤부테롤(bambuterol), 인다카테롤(indacaterol), 테르부탈린(terbutaline) 및 이들의 염, 예를 들어, 살메테롤의 크시나포에이트 (1-하이드록시-2-나프탈렌카르복실레이트) 염, 살부타몰의 황산염 또는 유리 염기, 또는 포르모테롤의 푸마레이트 염을 포함한다. 한 가지 구체예에서, β2-아드레날린수용체 효능제는 장시간 작용 β2-아드레날린수용체 효능제, 예를 들어, 약 12 시간 또는 그 초과 동안 효과적인 기관지 확장을 제공하는 화합물이다.
다른 β2-아드레날린수용체 효능제는 WO02/066422호, WO02/070490호, WO02/076933호, WO03/024439호, WO03/072539호, WO03/091204호, WO04/016578호, WO04/022547호, WO04/037807호, WO04/037773호, WO04/037768호, WO04/039762호, WO04/039766호, WO01/42193호 및 WO03/042160호에 기재된 것들을 포함한다.
β2-아드레날린수용체 효능제의 예는
3-(4-{[6-({(2R)-2-하이드록시-2-[4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)페닐]에틸}아미노)헥실]옥시}부틸)벤젠설폰아미드;
3-(3-{[7-({(2R)-2-하이드록시-2-[4-하이드록시-3-하이드록시메틸) 페닐] 에틸}-아미노) 헵틸] 옥시} 프로필) 벤젠설폰아미드;
4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2, 6-디클로로벤질)옥시] 에톡시} 헥실) 아미노]-1-하이드록시에틸}-2-(하이드록시메틸) 페놀;
4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(사이클로펜틸설포닐)페닐]부톡시}헥실)아미노]-1-하이드록시에틸}-2-(하이드록시메틸)페놀;
N-[2-하이드록시l-5-[(1-하이드록시-2-[[2-4-[[(2R)-2-하이드록시-2-페닐에틸]아미노]페닐]에틸]아미노]에틸]페닐]포름아미드;
N-2{2-[4-(3-페닐-4-메톡시페닐)아미노페닐]에틸}-2-하이드록시-2-(8-하이드록시-2(1H)-퀴놀리논-5-일)에틸아민; 및
5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-아미노-2-메틸-프로폭시)-페닐아미노]-페닐}-에틸아미노)-1-하이드록시-에틸]-8-하이드록시-1H-퀴놀린-2-온을 포함한다.
β2-아드레날린수용체 효능제는 황산, 염산, 푸마르산, 하이드록시나프토산(예를 들어, 1- 또는 3-하이드록시-2-나프토산), 신남산, 치환된 신남산, 트리페닐아세트산, 설팜산, 설파닐산, 나프탈렌아크릴산, 벤조산, 4-메톡시벤조산, 2- 또는 4-하이드록시벤조산, 4-클로로벤조산 및 4-페닐벤조산으로부터 선택된 약제학적으로 허용되는 산에 의해서 형성된 염의 형태일 수 있다.
코르티코스테로이드의 예는 WO02/088167호, WO02/100879호, WO02/12265호, WO02/12266호, WO05/005451호, WO05/005452호, WO06/072599호 및 WO06/072600호에 기재된 것들을 포함할 수 있다.
소염 코르티코스테로이드는 본 기술분야에 공지되어 있다. 대표적인 예는 플루티카손 프로피오네이트 (참조예: 미국특허 제4,335,121호), 플루티카손 푸로에이트(참조예: 미국특허 제7,101,866호), 베클로메타손 17-프로피오네이트 에스테르, 베클로메타손 17,21-디프로피오네이트 에스테르, 덱사메타손 또는 이의 에스테르, 모메타손 또는 이의 에스테르 (예, 모메타손 푸로에이트), 시클레소니드(ciclesonide), 부데소나이드(budesonide), 플루니솔리드(flunisolide), 메틸 프레드니솔론, 프레드니솔론, 덱사메타손 및 6α,9α-디플루오로-11β-하이드록시-l 6α-메틸-3-옥소-17α-(2,2,3,3-테트라메틸사이클로프로필카르보닐)옥시-안드로스타-1,4-디엔-17β-카르보티오산 S-시아노메틸 에스테르를 포함한다. 소염 코르티코스테로이드의 추가의 예는 WO02/088167호, WO02/100879호, WO02/12265호, WO02/12266호, WO05/005451호, WO05/005452호, WO06/072599호 및 WO06/072600호에 기재되어 있다.
전이활성보다는 전이억제에 대해서 선택성을 지닐 수 있으며, 조합 요법에서 유용할 수 있는 글루코코르티코이드 효능을 지닌 비-스테로이드성 화합물은 다음 공개 특허출원 및 특허: WO03/082827호, W098/54159호, WO04/005229호, WO04/009017호, WO04/018429호, WO03/104195호, WO03/082787호, WO03/082280호, WO03/059899호, WO03/101932호, WO02/02565호, WO01/16128호, WO00/66590호, WO03/086294호, WO04/026248호, WO03/061651호, WO03/08277호, WO06/000401호, WO06/000398호, WO06/015870호, WO06/108699호, WO07/000334호 및 WO07/054294호에 기재된 것들을 포함한다.
소염제의 예는 비-스테로이드성 소염 약물(NSAID's)를 포함한다.
NSAID'의 예는 소듐 크로모글리케이트(sodium cromoglycate), 네도크로밀 소듐(nedocromil sodium), 포스포디에스테라제(phosphodiesterase)(PDE) 억제제 (예를 들어, 테오필린(theophylline), PDE4 억제제 또는 혼합된 PDE3/PDE4 억제제), 류코트리엔 길항제, 류코트리엔 합성 억제제(예를 들어, 몬텔루카스트(montelukast)), iNOS 억제제, 트립타아제 엘라스타제 억제제, 베타-2 인테그린 길항제 및 아데노신 수용체 효능제 또는 길항제 (예, 아데노신 2a 효능제), 사이토킨 길항제 (예를 들어, 케모킨 길항제, 예컨대, CCR3 길항제) 또는 사이토킨 합성 억제제, 또는 5-리폭시게나아제 억제제를 포함한다. iNOS (유도 가능한 산화질소 신타아제 억제제)는 바람직하게는 경구 투여된다. iNOS 억제제의 예는 WO93/13055호, WO98/30537호, WO02/50021호, W095/34534호 및 WO 99/62875호에 기재된 것들을 포함한다. CCR3 억제제의 예는 WO02/26722호에 기재된 것들을 포함한다.
PDE4 억제제의 예는 시스-4-시아노-4-(3-사이클로펜틸옥시-4-메톡시페닐)사이클로헥산-1-카르복실산, 2-카르보메톡시-4-시아노-4-(3-사이클로프로필메톡시-4-디플루오로메톡시페닐)사이클로헥산-1-온 및 시스-[4-시아노-4-(3-사이클로프로필메톡시-4-디플루오로메톡시페닐)사이클로헥산-1-올]을 포함한다. 또한, 시스-4-시아노-4-[3-(사이클로펜틸옥시)-4-메톡시페닐]사이클로헥산-1-카르복실산(또한, 실로밀라스트(cilomilast)로 공지됨) 및 이의 염s, 에스테르s, 전구약물 또는 물리적인 형태(참조예: 미국특허 제5,552,438호).
다른 화합물은 Elbion으로부터의 AWD-12-281(Hofgen, N. et al. 15th EFMC Int Symp Med Chem (Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98; CAS reference No. 247584020-9); NCS-613로 명명된 9-벤질아데닌 유도체(INSERM); Chiroscience 및 Schering-Plough로부터의 D-4418; Pfizer로부터의 CI-1018로 확인된 벤조디아제핀 PDE4 억제제(PD-168787); Kyowa Hakko의 W099/16766호에서 개시된 벤조디옥솔 유도체; Kyowa Hakko로부터의 K-34; Napp로부터의 V-1 1294A(Landells, L.J. et al. Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (Sept 19-23, Geneva) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28): Abst P2393); Byk-Gulden로부터의 로플루밀라스트(roflumilast)(CAS 참조번호 162401-32-3) 및 프탈라지논(pthalazinone)(참조예: WO99/47505호);푸마펜트린, Byk-Gulden에 의해서 현재는 Altana에 의해서 제조되고 공개된 혼합된 PDE3/PDE4 억제제인 (-)-p-[(4aR*,10bS*)-9-에톡시-1,2,3,4,4a,10b-헥사하이드로-8-메톡시-2-메틸벤조[c][1,6]나프티리딘-6-일]-N,N-디이소프로필벤즈아미드; Almirall-Prodesfarma에 의해서 개발중에 있는 아로필린(arofylline); Vernalis로부터의 VM554/UM565; 또는 T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et al. J Pharmacol Exp Ther,1998, 284(1 ): 162), 및 T2585를 포함한다.
추가의 화합물은 공개된 국제특허출원 WO04/024728호(Glaxo Group Ltd), WO04/056823호(Glaxo Group Ltd) 및 WO04/103998호(Glaxo Group Ltd)에 개시되어 있다.
항콜린제의 예는 무스카린성 수용체에서 길항제로서 작용하는 화합물들, 특히, M1 또는 M3 수용체의 길항제, M2/M3 수용체의 이중 길항제, M1/M2/M3 수용체의 팬-길항제(pan-antagonist)인 화합물들이다. 흡입을 통한 투여를 위한 예시적인 화합물은 이프라트로퓸(ipratropium)(예를 들어, 브로마이드로서, Atrovent이라는 명칭으로 판매중인 CAS 22254-24-6), 옥시트로퓸(oxitropium)(예를 들어, 브로마이드로서, CAS 30286-75-0) 및 티오트로퓸(tiotropium)(예를 들어, 브로마이드로서, Spiriva라는 명칭으로 판매중인 CAS 136310-93-5)을 포함한다. 또한, 레바트로페이트(revatropate) (예를 들어, 하이드로브로마이드로서, CAS 262586-79-8) 및 WO01/04118호에 개시된 LAS-34273가 주목된다. 경구 투여를 위한 예시적인 화합물은 피렌제핀(pirenzepine)(CAS 28797-61-7), 다리페나신(darifenacin)(Enablex라는 명칭으로 판매중인 하이드로브로마이드에 대한 CAS 133099-04-4, 또는 CAS 133099-07-7), 옥시부티닌(oxybutynin)(Ditropan이라는 명칭으로 판매중인 CAS 5633-20-5), 테로딜린(terodiline)(CAS 15793-40-5), 톨테로딘(tolterodine)(Detrol이라는 명칭으로 판매중인 타르트레이트에 대한 CAS 124937-51-5, 또는 CAS 124937-52-6), 오틸로늄(otilonium)(예를 들어, 브로마이드로서, Spasmomen이라는 명칭으로 판매중인 CAS 26095-59-0), 트로스퓸 클로라이드(trospium chloride)(CAS 10405-02-4) 및 솔리페나신(solifenacin)(YM-905로서 또한 공지되고 Vesicare라는 명칭으로 판매중인 CAS 242478-37-1, 또는 CAS 242478-38-2)을 포함한다.
다른 항콜린제는, 예를 들어, 하기 화합물을 포함한 미국특허출원 제60/487981호에 개시된 화합물을 포함한다:
(3-엔도)-3-(2,2-디-2-티에닐에테닐)-8,8-디메틸-8-아조니아바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드;
(3-엔도)-3-(2,2-디페닐에테닐)-8,8-디메틸-8-아조니아바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드; (3-엔도)-3-(2,2-디페닐에테닐)-8,8-디메틸-8-아조니아바이사이클로[3.2.1]옥탄 4-메틸벤젠설포네이트;
(3-엔도)-8,8-디메틸-3-[2-페닐-2-(2-티에닐)에테닐]-8-아조니아바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드; 및
(3-엔도)-8,8-디메틸-3-[2-페닐-2-(2-피리디닐)에테닐]-8-아조니아바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드.
추가의 항콜린제는, 예를 들어, 하기 화합물을 포함한 미국특허출원 제60/511009호에 개시된 화합물을 포함한다:
(엔도)-3-(2-메톡시-2,2-디-티오펜-2-일-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로피오니트릴;
(엔도)-8-메틸-3-(2,2,2-트리페닐-에틸)-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥탄;
3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로피온아미드;
3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로피온산;
(엔도)-3-(2-시아노-2,2-디페닐-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
(엔도)-3-(2-시아노-2,2-디페닐-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드;
3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로판-1-올;
N-벤질-3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로피온아미드;
(엔도)-3-(2-카르바모일-2,2-디페닐-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
1-벤질-3-[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-우레아;
1-에틸-3-[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-우레아;
N-[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-아세트아미드;
N-[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-벤즈아미드;
3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2]옥트-3-일)-2,2-디-티오펜-2-일-프로피오니트릴;
(엔도)-3-(2-시아노-2,2-디-티오펜-2-일-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
N-[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-벤젠설폰아미드;
[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-우레아;
N-[3-((엔도)-8-메틸-8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥트-3-일)-2,2-디페닐-프로필]-메탄설폰아미드; 및
{엔도)-3-{2,2-디페닐-3-[(1-페닐-메타노일)-아미노]-프로필}-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드.
추가의 화합물은
(엔도)-3-(2-메톡시-2,2-디-티오펜-2-일-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
(엔도)-3-(2-시아노-2,2-디페닐-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
(엔도)-3-(2-시아노-2,2-디페닐-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드;
(엔도)-3-(2-카르바모일-2,2-디페닐-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드;
(엔도)-3-(2-시아노-2,2-디-티오펜-2-일-에틸)-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 아이오다이드; 및
(엔도)-3-{2,2-디페닐-3-[(1-페닐-메타노일)-아미노]-프로필}-8,8-디메틸-8-아조니아-바이사이클로[3.2.1]옥탄 브로마이드를 포함한다.
한 가지 구체예에서 본 발명은 H1 길항제와 함께 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물을 제공한다. H1 길항제의 예로는 비제한적으로 아멜레사녹스(amelexanox), 아스테미졸(astemizole), 아자타딘(azatadine), 아젤라스틴(azelastine), 아크리바스틴(acrivastine), 브롬페니라민(brompheniramine), 세티리진(cetirizine), 레보세티리진(levocetirizine), 에플레티리진(efletirizine), 클로르페니라민(chlorpheniramine), 클레마스틴(clemastine), 시클리진(cyclizine), 카레바스틴(carebastine), 시프로헵타딘(cyproheptadine), 카르비녹사민(carbinoxamine), 데스카르보에톡시로라타딘(descarboethoxyloratadine), 독실아민(doxylamine), 디메틴덴(dimethindene), 에바스틴(ebastine), 에피나스틴(epinastine), 에플레티리진(efletirizine), 펙소페나딘(fexofenadine), 히드록시진(hydroxyzine), 케토티펜(ketotifen), 로라타딘(loratadine), 레보카바스틴(levocabastine), 미졸라스틴(mizolastine), 메퀴타진(mequitazine), 미안세린(mianserin), 노베라스틴(noberastine), 메클리진(meclizine), 노라스테미졸(norastemizole), 올로파타딘(olopatadine), 피쿠마스트(picumast), 피릴아민(pyrilamine), 프로메타진(promethazine), 테르페나딘(terfenadine), 트리펠렌아민(tripelennamine), 테멜라스틴(temelastine), 트리메프라진(trimeprazine) 및 트리프롤리딘(triprolidine)이 있고, 특히 세티리진, 레보세티리진, 에플레티리진 및 펙소페나딘이다. 추가의 구체예에서, 본 발명은 H3 길항제 (및/또는 역 효능제)와 함께 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물을 제공한다. H3 길항제의 예로는 예를 들어 WO2004/035556호 및 WO2006/045416호에 기재된 화합물들이 있다. 본 발명의 화학식(I)의 화합물 도는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 함께 사용된 수 있는 다른 히스타민 수용체 길항제로는 H4 수용체의 길항제 (및/또는 역 효능제), 예를 들어 문헌[Jablonowski et al., J. Med. Chem. 46:3957-3960 (2003)]에 기재된 화합물이 있다.
한 가지 구체예에서, 코르티코스테로이드와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 또 다른 구체예에서, NSAID와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 또 다른 구체예에서, 항콜린제와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 또 다른 구체예에서, β2-아드레날린수용체 길항제와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 또 다른 구체예에서, 항감염제와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 또 다른 구체예에서, 항히스타민제와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 또 다른 구체예에서, 질환 개선 항류머티스 약물과 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다. 추가의 구체예에서, 생물약제와 함께 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조합물이 제공된다.
본 발명의 화합물은 일반적으로, 그러나, 반드시 그러한 것은 아니지만, 환자에게 투여 전에 약제학적 조성물로 제형화될 것이다. 따라서, 한 가지 구체예에서, 본 발명은 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 또 다른 구체예에서, 본 발명은 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 안전 및 유효량의 본 발명의 화합물이 추출되고, 이어서, 환자에게 주어질 수 있는 벌크 형태로, 예컨대, 분말 또는 시럽으로 제조되고 패키징될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 약제학적 조성물은 단위 용량형으로 제조되고 패키징될 수 있으며, 그러한 단위 용량형에서, 각각의 물리적인 이산 단위는 안전 및 유효량의 본 발명의 화합물을 함유한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 또한 서브-단위 용량형으로 제조되고 패키징될 수 있으며, 서브-단위 용량형에서, 둘 또는 그 초과의 서브-단위 용량형이 단위 용량형으로 제공된다. 단위 용량형으로 제조되는 경우에, 본 발명의 약제학적 조성물은 전형적으로는 제형의 특성에 따라서 약 0.1 내지 99.9중량%의 본 발명의 화합물을 함유한다.
추가로, 본 발명의 약제학적 조성물은 임의로 하나 이상의 추가의 약제학적 활성 화합물을 추가로 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 부형제"는 약제학적으로 허용되는 물질, 약제학적 조성물에 형태를 부여하거나 일관성을 부여하는데 관련된 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 비히클을 의미한다. 각각의 부형제는 혼합되는 때에 약제학적 조성물의 다른 성분들과 양립 가능하여, 환자에게 투여되는 때에 본 발명의 화합물의 효능을 실질적으로 감소시키고 약제학적으로 허용되지 않는 조성물을 생성시키는 상호작용이 없게 해야 한다. 추가로, 각각의 부형제는 물론 높은 순도를 지녀서 그가 약제학적으로 허용되게 해야 한다.
화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 부형제들을 포함하는 본 발명의 조성물은 전형적으로는 요망되는 투여 경로에 의해서 환자에게 투여되기에 적합한 용량형으로서 제공될 것이다. 예를 들어, 용량형은 (1) 경구 투여, 예컨대, 정제, 캡슐, 당의정(caplet), 환제(pill), 트로키(troche), 분말, 시럽, 엘릭시르, 현탁액, 용액, 에멀젼, 샤세(sachet), 및 카시에(cachet); (2) 국소 피부 투여, 예컨대, 크림, 연고, 로션, 용액, 페이스트, 스프레이, 포말, 및 겔, (3) 흡입, 예컨대, 에어로졸 및 용액; (4) 비내 투여, 예컨대, 용액 또는 스프레이; 및 (5) 비경구 투여, 예컨대, 무균 용액, 현탁액 및 재구성을 위한 분말에 적합한 것들을 포함한다.
경구 투여에 적합한 용량형이 일반적으로는 류머티스 관절염 및 전신 홍반성 루푸스를 포함한 자가면역 질환; 헴 악성종양을 포함한 암; 및 만성 자연적 두드러기를 치료하기 위해서 사용됨이 인지될 것이다. 피부에의 국소 투여에 적합한 용량형은 일반적으로 아토피 피부염, 건선 및 만성 및 급성 두드러기 병태, 및 천포창 및 유사천포창을 포함한 자가면역 수포성 병태를 치료하기 위해서 사용된다. 흡입 또는 경구 투여에 적합한 용량형은 일반적으로 COPD 및 천식을 치료하기 위해서 사용되며; 비내 투여에 적합한 용량형은 일반적으로는 알레르기성 비염을 치료하기 위해서 사용된다.
적합한 약제학적으로 허용되는 부형제는 선택된 특정의 용량형에 따라서 다양할 것이다. 추가로, 적합한 약제학적으로 허용되는 부형제가 이들이 조성물에서 작용할 수 있는 특정의 기능을 위해서 선택될 수 있다. 예를 들어, 특정의 약제학적으로 허용되는 부형제가 균일한 용량형의 생산을 용이하게 하기 위한 이들의 능력에 대해서 선택될 수 있다. 특정의 약제학적으로 허용되는 부형제가 안정한 용량형의 생산을 용이하게 하기 위한 이들의 능력에 대해서 선택될 수 있다. 특정의 약제학적으로 허용되는 부형제가, 신체의 한 기관 또는 부분으로부터 신체의 또 다른 기관 또는 부분으로 환자에게 투여되는 때에, 본 발명의 화합물의 운반 또는 수송을 용이하게 하기 위한 이들의 능력에 대해서 선택될 수 있다. 특정의 약제학적으로 허용되는 부형제가 환자의 이행을 향상시키기 위한 이들의 능력에 대해서 선택될 수 있다.
적합한 약제학적으로 허용되는 부형제는 하기 유형의 부형제를 포함한다: 희석제, 충전제, 결합제, 붕해제, 윤활제, 활택제, 과립화제, 코팅제, 습윤제, 용매, 보조-용매, 현탁화제, 에멀젼화제, 감미제, 풍미제, 맛 풍미 차단제, 착색제, 해산제(anticaking agent), 휴멕턴트(hemectant), 킬레이팅제, 가소화제, 점도 증가제, 항산화제, 보존제, 안정화제, 계면활성제, 및 완충제. 당업자는 특정의 약제학적으로 허용되는 부형제가 하나 이상의 기능을 발휘할 수 있고 얼마나 많은 부형제가 제형에 존재하는지 그리고 어떠한 다른 부형제가 제형에 존재하는지에 따라 대안적인 기능을 발휘할 수 있음을 인지할 것이다.
당업자는 본 발명에 사용하기게 적합한 양의 적합한 약제학적으로 허용되는 부형제를 선택할 수 있는 당 분야의 지식 및 기술을 소유한다. 또한, 약제학적으로 허용되는 부형제를 기술하고 있고 적합한 약제학적으로 허용되는 부형제를 선택하는데 유용할 수 있는, 당업자가 이용가능한 수많은 자원이 존재한다. 예로는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), Remington: The Science and Practice of Pharmacy, (Lippincott Williams & Wilkins), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), and The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)]이 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 당업자에게 공지된 기술 및 방법을 이용하여 제조된다. 당 분야에서 일반적으로 사용되는 방법들 중 일부가 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)]에 기재되어 있다.
경구 고형 용량형, 예컨대, 정제는 전형적으로 예를 들어, 만족할 만한 가공 및 타정 특성을 부여하는 것을 도울 수 있거나 정제에 추가의 요망되는 물질적인 특성을 제공할 수 있는 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함할 것이다. 그러한 약제학적으로 허용되는 부형제는 희석제, 결합제, 활택제, 윤활제, 붕해제, 착색제, 풍미제, 감미제, 폴리머, 왁스 또는 그 밖의 용해도-조절 물질로부터 선택될 수 있다.
피부에 대한 국소 투여용의 용량형은, 예를 들어, 연고, 크림, 로션, 안연고, 점안액, 점이액(ear drops), 함침된 트레싱(impregnated dressings) 및 에어로졸의 형태일 수 있으며, 예를 들어, 보존제, 약물 투과를 보조하는 용매 및 연고 및 크림내의 연화제를 포함한 적절한 통상의 첨가제를 함유할 수 있다. 그러한 국소 제형은 또한 양립 가능한 통상의 담체, 예를 들어, 크림 또는 연고 베이스, 및 로션을 위한 에탄올 또는 올레일 알콜을 함유할 수 있다. 그러한 담체는 제형의 약 1중량% 내지 약 약 98중량%를 구성할 수 있으며, 더욱 일반적으로는 이들은 제형의 약 80중량% 이하를 구성할 것이다.
비경구 투여를 위한 용량형은 일반적으로 유체, 특히, 정맥용 유체, 즉, 혈관계에 의해서 용이하게 운반될 수 있고 동화될 수 있는 단순 화합물, 예컨대, 당, 아미노산 또는 전해질의 무균 용액을 포함할 것이다. 그러한 유체는 전형적으로 주입 USP를 위한 물로 제조된다. 정맥내(IV) 주입에 일반적으로 사용되는 유체는 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, (Lippincott Williams & Wilkins)]에 개시되어 있다. 그러한 IV 유체의 pH는 다양할 수 있고 본 기술분야에 공지된 바와 같이 3.5 내지 8일 것이다.
비내 또는 흡입 투여를 위한 용량형은 통상적으로는 에러로졸, 용액, 점적액, 겔 또는 건조한 분말로서 제형화될 수 있다.
비강으로의 국소 투여(비내 투여)를 위한 용량형은 가압된 에어로졸 제형 및 가압된 펌프에 의해서 코에 투여되는 수성 제형을 포함한다. 비내 투여에 적합하고 비-가압된 제형이 특히 주목된다. 그러한 제형은 그러한 목적으로 희석제 또는 담체로서 물을 함유한다. 코에 투여하기 위한 수성 제형에는 통상의 부형제, 예컨대, 완충제, 및 등장성 조절제 등이 제공도리 수 있다. 수성 제형은 또한 분무기에 의해서 코에 투여될 수 있다.
비내 투여를 위한 용량형은 계량 투여 장치에 제공된다. 용량형은 분배 노즐 또는 분배 오리피스를 지닌 유체 분배기로부터 전달하기 위한 유체 제형으로서 제공될 수 있고, 그러한 분배 노즐 또는 분배 오리피스를 통해서, 계량된 용량의 유체 제형이 유체 분배기의 펌프 메카니즘에 사용자-인가된 힘의 적용시에 분배된다. 그러한 유체 분배기에는 일반적으로 유체 제형의 다중 계량된 용량들의 저장소가 제공되고, 그러한 용량들이 일련의 펌프 작동시에 분배 가능하다. 분배 노즐 또는 분배 오리피스는 비강으로의 유체 제형의 스프레이 분배를 위해서 사용자의 콧구멍으로 삽입하도록 구성될 수 있다. 한 가지 구체예에서, 유체 분배기는 WO2005/044354A1에 기재되고 예시된 일반적인 유형이다. 분배기는 하우징을 지니며, 그러한 하우징은 유체 제형을 함유하는 용기 상에 장착된 압력 펌프를 지닌 유체 배출 장치를 수용하고 있다. 하우징은 하우징에 대해 안쪽으로 이동할 수 있어서 컨테이너를 하우징에서 위쪽으로 왕복운동(cam)시킴으로써 펌프를 압착하고 펌프 대 밖으로 하우징의 비내용 노즐을 통해 제형의 계량된 용량을 펌핑할 수 있는 적어도 하나의 손가락-동작가능한 측면 레버를 지닌다. 일 구체예에서, 유체 디스펜서는 WO05/044354호의 도 30-40에 도시된 일반적인 유형을 지닌다.
예를 들어, 흡입 투여를 위한, 에어로졸 조성물은 약제학적으로 허용되는 수성 또는 비수성 용매중의 활성 물질의 용액 또는 미세 현탁액을 포함할 수 있다. 에어로졸 제형은 밀봉된 용기 내에 무균 형태로 단일 또는 다중투여 양으로 존재할 수 있으며, 그러한 밀봉된 용기는 분무 장치 또는 흡입기와 함께 사용하기 위한 카트리지 또는 리필(refill)의 형태를 취할 수 있다. 대안적으로, 밀봉된 용기는 단일의 분배 장치, 예컨대, 용기 내의 내용물이 소진되면 버려지는 계량 밸브가 구비된 단일 투여 비내 흡입기(계량 투여 흡입기) 또는 에어로졸 분배기일 수 있다.
용량형이 에어로졸 분배기를 포함하는 경우, 이는 바람직하게는 압력하의 적합한 추진제, 에컨대, 가압된 공기, 이산화탄소 또는 유기 추진제, 예컨대, 하이드로플루오로카본(HFC)을 함유한다. 적합한 HFC 추진제는 1,1,1,2,3,3,3-헵타플루오로프로판 및 1,1,1,2-테트라플루오로에탄을 포함한다. 에어로졸 용량형은 또한 펌프-분무기의 형태를 취할 수 있다. 가압된 에어로졸은 활성 화합물의 용액 또는 현탁액을 함유할 수 있다. 이는 분산 xmd성 및 현탁 제형의 균일성을 개선시키기 위한 추가의 부형제, 예컨대, 공-용매 및/또는 표면활성제의 혼입을 필요로 할 수 있다. 용액 제형이 또한 공-용매, 예컨대, 에탄올의 첨가를 필요로 할 수 있다. 다른 부형 개질제가 또한, 예를 들어, 제형의 안정성 및/또는 맛 및/또는 미세 입자 질량 특성(양 및/또는 프로파일)을 개선시키기 위해서 혼입될 수 있다.
흡입 투여에 적합하고/거나 그를 위해서 조절된 약제 조성물의 경우에, 약제학적 조성물은 건조 분말 흡입 가능한 조성물인 것이 바람직하다. 그러한 조성물은 분말 베이스, 예컨대, 락토오스, 글루코스, 트레할로스, 만니톨 또는 전분, 화학식(I) 또는 화학식(II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염(바람직하게는, 입자 크기-감소된 형태로, 예를 들어 미분된 형태로), 및 임의로, 성능 개질제, 예컨대, L-류신 또는 또 다른 아미노산, 셀로바이오즈 옥타아세테이트 및/또는 스테아르산의 금속 염, 예컨대, 마그네슘 또는 칼슘 스테아레이트를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 건조 분말 흡입 가능한 조성물은 락토오스 및 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 건조 분말 배합물을 포함한다. 락토오스는 바람직하게는 락토오스 하이드레이트, 예를 들어, 락토오스 모노하이드레이트이고/거나, 바람직하게는 흡입-등급 및/또는 미세-등급 락토오스이다. 바람직하게는, 락토오스의 입자 크기는 90% 또는 그 초과(중량 또는 부피 기준)의 락토오스 입자가 직경 1000 마이크론(마이크로미터) 미만(예, 10 내지 1000 마이크론, 예, 30 내지 1000 마이크론), 및/또는 50% 또는 그 초과의 락토오스 입자가 직경 500 마이크론 미만(예, 10 내지 500 마이크론)인 것으로 정의된다. 더욱 바람직하게는, 락토오스의 입자 크기는 90% 또는 그 초과의 락토오스 입자가 직경 300 마이크론 미만(예, 10 내지 300 마이크론, 예, 50 내지 300 마이크론), 및/또는 50% 또는 그 초과의 락토오스 입자가 직경 100 마이크론 미만인 것으로 정의된다. 임의로, 락토오스의 입자 크기는 90% 또는 그 초과의 락토오스 입자가 직경 100 내지 200 마이크론, 및/또는 50% 또는 그 초과의 락토오스 입자가 직경 40 내지 70 마이크론인 것으로 정의된다. 가장 중요하게는, 약 3 내지 약 30%(예, 10%)(중량 또는 부피 기준)의 입자가 직경 50 마이크론 미만 또는 직경 20 마이크론 미만인 것이 바람직하다. 예를 들어, 이로 제한하고자 하는 것은 아니지만, 적합한 흡입-등급 락토오스는 E9334 락토오스(10% 미세(fines))(Borculo Domo Ingredients, Hanzeplein 25, 8017 JD Zwolle, Netherlands)이다.
임의로, 건조 분말 흡입 가능한 조성물에서, 흡입 투여용 약제학적 조성물은 적합한 흡입 장치 내부의 스트립 또는 리본으로 세로로 장착된 복수의 밀봉된 투여 용기(예, 건조 분말 조성물을 함유함) 내로 혼입될 수 있다. 용기는 필요시에 파열 가능하거나 벗김-개방 가능(peel-openable)하고, 예를 들어, 건조한 분말 조성물의 용량이 장치, 예컨대, GlaxoSmithKline에 의해서 판매중인 DISKUS® 장치를 통해서 흡입에 의해서 투여될 수 있다. DISKUS® 흡입 장치는, 예를 들어, GB 2242134 A에 기재되어 있으며, 그러한 장치에서 분말 형태의 약제학적 조성물을 위한 하나 이상의 용기(용기 또는 용기들은 바람직하게는 스트립 또는 리본으로 세로로 장착된 복수의 밀봉된 투여 용기임)는 서로 벗김 가능하게 고정된 두 구성원 사이에 규정되며; 장치는 상기 용기 또는 용기들을 위한 개방 스테이션을 규정하는 수단; 개방 스테이션에서 구성원들을 벗겨내서 용기를 개방하는 수단; 및 개방된 용기와 통해 있고, 사용자가 그를 통해서 개방된 용기로부터 분말 형태로 약제학적 조성물을 흡입할 수 있는 출구를 포함한다.
비내 투여를 위한 본 발명의 조성물은 또한 건조 분말 제형으로서 흡인에 의해서 투여하도록 조절될 수 있다.
흡입 투여용 용량형의 경우에, 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 건조 분말 또는 현탁액으로 존재한다면, 입자-크기-감소된 형태인 것이 바람직하다. 바람직하게는, 크기-감소된 형태는 미분화(micronisation)에 의해서 얻어지거나 얻어질 수 있다. 크기-감소된(예, 미분화된) 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염의 바람직한 입자 크기는 약 0.5 내지 약 10 마이크론(예를 들어, 레이저 회절에 의해서 측정됨)의 D50 값으로 정의된다.
본 발명의 화합물이 보통 흡입, 정맥내, 경구, 국소 또는 비내 경로로 투여되는 다른 치료제와 함께 투여되는 경우에, 생성되는 약제학적 조성물은 그와 동일한 경로로 투여될 수 있음이 인지될 것이다.
본 발명의 화합물은 통상적으로는, 예를 들어, 1㎍ 내지 2g의 양으로 투여된다. 정밀한 투약은 물론 환자의 연령 및 상태 및 선택된 특정의 투여 경로에 좌우될 것이다.
생물학적 시험 방법
본 발명의 화합물은 하기 검정에 따라서 시험관내 활성에 대해서 시험될 수 있다:
1. 염기성 SYK 효소 활성
검정 완충액((20mM TRIS pH 7.4, 0.01 % BSA,0.1 % Pluronic F-68)에 16 배 희석된 3㎕의 SYK 용해물을 Greiner 저용적 384 웰 블랙 플레이트 내에 0.1㎕의 다양한 농도의 화합물 또는 DMSO 비히클(1.7% 최종)을 함유하는 웰에 첨가하였다. 실온에서 15분 동안 사전-인큐베이션 후에, 검정 완충액 중에 Y7 Sox 펩티드(Invitrogen Cat. # KNZ3071 , 5μM 최종), ATP (35μM 최종) 및 MgCl2 (10mM 최종)를 함유하는 3㎕의 기질 시약의 첨가에 의해서 반응을 개시시켰다. 반응물을 실온에서 인큐베이션한 후에, 기질 첨가 후 15 분 및 55분에 Envision 플레이트 리더(Envision plate reader)(Perkin Elmer Life Sciences, Waltham, MA, USA)상에서 형광 세기(Aex 360/Aem 485)를 측정하였다.
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9A, 9B, 10, 11A 및 11 B(유리 염기로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 <1μM의 평균 IC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9A, 9B, 10, 11A 및 11 B(유리 염기로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 ≥ 7.0의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 실시예 1, 2, 3 및 4(유리 염기로서)는 각각 7.6 (n = 7), 7.7 (n = 10), 7.2 (n = 11) 및 8.1 (n = 11)의 평균 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 실시예 1, 2, 3 및 6의 화합물의 염산 염을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 ≥ 6.5의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
당업자는 기능적 활성에 대한 시험관내 결합 검정 및 세포-기반 검정이 가변적임을 인지할 것이다. 따라서, 상기 열거된 IC50 및 plC50에 대한 값은 단지 예시적임을 이해해야 한다.
SYK 용해물의 제조
i. Ramos 세포 용해물의 제조
Ramos B 세포(버킷 림프종의 사람 B 세포, 클론 296.4C10, ATCC)를 성장 배지(RPMI-1640, Sigma; 2mM L-글루타민, Gibco; 10mM Hepes, Sigma; 1 mM 소듐 ㅍ피루베이트, Sigma; 10% v/v 열-불활성화된 FCS, Gibco로 보충됨)중의 현탁액에서 배양하였다. 세포를 코닝 셀스택(Corning Cellstack)(6360 cm2)에서 1 리터 부피로 성장시키고, 생존율 및 세포 밀도를 매일 모니터링하였다. 세포는 <1.5 x 10e6/ml 및 >92% 생존율로 유지되었다.
대규모 생산 가동은 동결된 Ramos 세포의 대규모 중간 분취액(Large Scale Intermediate Aliquots: LSIA's)으로부터 생성되었는데, 그 이유는 이것이 Ramos 세포의 연속 성장 배양액으로부터의 생산보다 더 큰 재생성을 보이는 것으로 밝혀졌기 때문이다.
대규모 생산 세포를 4 단계로 생성되었다:
1. 1 x 셀스택 내로 LSIA를 해동시킴;
2. 4 x 셀스택 내로 배양물을 팽창시킴;
3. 4로부터 12 x 셀스택으로 팽창시킴;
4. 모든 12 셀스택을 수거함.
셀스택을 Sorvall Mistral 원심분리기, 2000rpm, 10 분, 4℃를 사용하여 2L 원심분리 병에 수거하였다(2L x 2x106 세포/ml = 4 x 109 세포 전체).
(세포 증가에 대한 주석: 세포 밀도가 1.8 x 10e6/ml를 초과하거나 생존율이 90% 미만으로 떨어지면, 자극 후 얻어진 Syk 제조물은 활성이 낮은 듯했다)
또한, Ramos 세포의 반복된 통과는, 세포 성장이 규모 있게 수행되는 경우에, Syk 활성에 유해한 듯 했으며(이는 소규모 배양의 경우에는 그러하지 않은 듯했다)-대규모 제조의 경우에는 항상 LSIAs 및 모듈러 스캐일-업(modular scale-up)를 사용하는 것이 권장된다.
ii . Syk 및 용해 제조물을 생산하기 위한 항- IgM Ab 에 의한 Ramos 세포의 자극
세포를 15ug/ml(최종 농도) 항-IgM 항체를 사용하여 20x106 세포/ml에서 자극시켰다. (상기 기재된 바와 같은) 수거 후에, 전체 4 x 109 세포를 코닝 500ml 원심분리 병내의 180ml 사전-가온(37℃) DPBS에 재현탁시켰다. 150ug/ml의 20ml 항-IgM 항체를 각각 500ml 원심분리 병(37℃로 사전 가온된 DPBS중에서 제조된 작업 원액)에 첨가하였다. 세포를 항 IgM 항체 첨가 후 37℃에서 정확히 5 분 동안 인큐베이션하였다. 5 분 자극 후에, 300ml 빙냉 DPBS를 각각의 병에 첨가하여 자극을 중단시키고(온도를 약 12℃로 저하시킴), 이어서, 세포를 2000rpm (4℃로 사전 냉각된 Sorvall Legend RT+ 원심분리기)에서 원심분리하였다. 이어서, 세포 펠릿을 1 % 트리톤-x-100을 함유하는 빙냉 용해 완충액에 150ul/1 x 107 세포(즉, 48ml 용해 완충액)의 비로 용해시켰다. 용해 완충액을 첨가한 후에, 세포를 피펫 업 및 다운(pipetted up & down)하고, 얼음상에 15 분 동안 유지시켰다. 이어서, 원심분리(Sorvall Evolution RC (SLA-1500 로터, 약 20,000g (약 14,500rpm), 45분, 4℃)에 의해서 원심 분리된 용해물을 얻었다.
용해물을 분취하여, 드라이아이스 상에서 순간 동결시키고, 검정 전에 -80℃에서 저장하였다.
물질
Ramos 세포: 버킷 림프종의 인간 B 세포, 클론 296.4C10 (ATCC).
성장 배지: 500ml RPMI, 10% 열 불활성화도니 FCS, 2mM L-Glut아민, 2mM HEPES, 1 mM 소듐 피루베이트.
RPMI: Sigma R0883, stores CT5652
소 태아 혈청(Foetal Calf Serum): Gibco 10099-141 , stores CT2509
L-글루타민: 200mM, Gibco 25030, stores CT3005
HEPES: 1 M, Sigma H0887, stores CT5637
소듐 피루베이트: 100mM, Sigma S8636, stores CT7741
항-IgM Ab: PBS중의 염소 항-인간 IgM ((Fab')2 단편). Invitrogen, 주문 제조물(무 아지드 및 낮은 내독소 수준). 카탈로그 번호 NON0687, Lot 141 1913. 2.74mg/ml.
DPBS: 둘베코 포스페이트 완충된 염수(Dulbeccos phosphate buffered saline), Sigma D8537
용해 완충액: 50mM TRIS pH7.5 + 150mM NaCl + 1 % 트리톤-X-100 + 2mM EGTA + 1 :100 희석 억제제 칵테일(포스파타제 억제제 칵테일 세트 II, calbiochem cat no. 524625 & 프로테아제 억제제 칵테일 세트 V, calbiochem cat no. 539137)
트리톤-X-100: Roche 10 789 704 001 (Gl 198233X, SC/159824). 물중의 20% 원액으로서 제조됨.
EGTA: Sigma E4378. 완충액에 직접 첨가된 고형물.
2. B 세포 활성 검정
2.1. Ramos pErk 검정
검정의 원리
Ramos B 세포(버킷 림프종의 인간 B 세포)를 항-IgM을 사용하여 자극시켰다. 이는 B 세포 수용체에 대한 Syk의 동원을 생성시켰다. Syk의 후속 자가 포스포릴화는 Erk MAP 키나아제 경로를 통한 B 세포 활성화를 유도하는 신호의 단계적 반응의 개시를 유도한다. 그 결과, E가가 포스포릴화되고, 세포 용해 후에, 면역 포집 검정에 의해서 검출된다.
항- IgM 에 의한 Ramos 세포의 자극
세포를 96 v-웰 폴리프로필렌 플레이트내 25㎕ 검정 배지(10% 열 불활성화된 소 태아 혈청, 1% L-글루타민을 함유하는 RPMI)의 용적에 2.5x105/웰의 밀도로 플레이팅하였다. 25㎕의 적절히 희석된 화합물 용액을 첨가하고, 플레이트를 5% CO2와 함께 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 세포를 37℃에서 7분 동안 염소-인간 IgM(5㎍/ml 최종)의 5㎕ Fab'2 단편으로 자극시켰다. 세포를 4℃에서 2 시간 동안 55㎕ 2 x RIPA 용해 완충액의 첨가에 의해서 용해시켰다. 용해물을 이러한 시점에서 -80℃에서 동결시킬 수 있다.
pErk MSP 검정
50㎕ 세포 용해물을 항-pErk1/2(Thr/Tyr: 202/204; 185/187) 포획 항체로 코팅된 96 웰 MSD 플레이트에 옮기고, 4℃에서 16 시간 동안 또는 실온에서 3 시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 세척하고, 항 실온에서 항-pErk 검출 항체를 실온에서 1 시간 동안 첨가(25㎕/웰)하였다. 이는 제거하고, 150㎕ MSD 판독 완충액을 첨가하고, 생성되는 전기화학발광 신호를 측정하였다.
화합물 제조
화합물을 DMSO 중의 10mM 원액으로서 제조하고, 9 연속 5 배 희석액을 사용하여 DMSO 중의 희석 시리즈를 제조하였다. 이러한 희석 시리즈를 검정 배지로 1:100으로 추가로 희석시켜 5x10-5 내지 2.56x10-11 M의 시험되는 최종 농도 범위를 생성시켰다. 화합물 희석액을 Biomek 2000 및 Biomek Nx 자동화된 로봇 피펫팅 시스템을 사용하여 제조하였다.
실시예 1, 2, 3 및 4의 화합물(염산염으로서)을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 <1μM의 평균 IC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
실시예 1, 2, 3 및 4(염산염으로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 ≥ 6.5의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 실시예 1, 2, 3 및 4(염산염으로서)는 각각 7.4 (n = 2), 7.2 (n = 4), 7.0 (n = 2) 및 7.5 (n = 4)의 평균값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
당업자는 기능적 활성에 대한 시험관내 결합 검정 및 세포-기반 검정이 가변적임을 인지할 것이다. 따라서, 상기 열거된 IC50 및 plC50에 대한 값은 단지 예시적임을 이해해야 한다.
2.2 CD69 전혈 검정
검정의 원리
전혈 B 세포를 항-IgM을 사용하여 생체외 자극시켰다. 이는 B 세포 수용체에 대한 Syk의 동원을 생성시켰다. Syk의 후속 자가 포스포릴화는 세포 표면상의 활성화 마커 CD69의 발현에 의해서 나타나는 바와 같이 B 세포 활성화를 유도하는 신호의 단계적 반응의 개시를 유도한다. 그 결과, E가가 포스포릴화되고, 세포 용해 후에, 면역 포집 검정에 의해서 검출된다. CD20/CD69+ve 전혈 B 세포는 유세포 분석기(flow cytometry)에 의해서 검출된다.
항- IgM 에 의한 전혈 B 세포의 자극
100㎕ 헤파린이 고정된 인간 혈액을 1㎕의 적절히 희석된 화합물 용액을 함유하는 5ml 폴리프로필렌 튜브에 첨가하고, 5% CO2와 함께 37℃에서 25분 동안 인큐베이션하였다. B 세포를 염소 항-인간 IgM의 10㎕ Fab'2 단편(43㎍/ml 최종 농도)으로 상기 기재된 바와 같은 조건하에 추가로 3.5 시간 동안 자극시켰다. 적혈구를 용해시키고, 모든 다른 세포를 실온에서 10분 동안 2ml 용해/고정 완충액의 첨가에 의해서 고정시켰다.
CD69 검정
세포를 마우스 항-인간 CD20 FITC 및 마우스 항-인간 CD69 PE 컨주게이트된 항체의 칵테일을 사용하여 염색시켰다. 샘플중에 존재하는 CD20/CD69+ve B 세포는 유세포 분석기에 의해서 검출된다.
화합물 제조
화합물을 DMSO 중의 10mM 원액으로서 제조하고, DMSO중에 1mM로 추가로 희석시키고, 7 연속 3 배 희석액을 사용하여 DMSO 중의 희석 시리즈를 제조하여, 1x10-5 내지 4.57x10-9 M의 시험되는 최종 농도 범위를 생성시켰다. 화합물 희석액을 Biomek 2000 자동화된 로봇 피펫팅 시스템을 사용하여 제조하였다.
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9A, 9B, 10, 11A 및 11 B(유리 염기로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 <1μM의 평균 IC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 실시예 1, 2, 3, 4 및 6의 화합물의 염산염을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 <1μM의 평균 IC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9A, 9B, 10, 11A 및 11 B(유리 염기로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 ≥ 6.0의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 실시예 1, 2, 3 및 4의 화합물(유리 염기로서)은 각각 6.5 (n = 2), 6.8 (n = 2), 6.6 (n = 2) 및 6.8 (n = 2)의 평균값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 실시예 1, 2, 3, 4 및 6의 화합물의 염산염을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 ≥ 6.0의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
당업자는 기능적 활성에 대한 시험관내 결합 검정 및 세포-기반 검정이 가변적임을 인지할 것이다. 따라서, 상기 열거된 IC50 및 plC50에 대한 값은 단지 예시적임을 이해해야 한다.
3. hERG 활성- hERG 에 대한 Cy3B 도페틸리드 플루오로 - 리간드 결합 검정
화합물 잠재성을 플루오로-리간드§(Cy3b-도페틸리드(Dofetilide)) 형광 극성화 검정에 의해서 측정하였다.
hERG-발현 CHO-K1 막* (60μg/ml)을 검정 완충액(25mM HEPES, 1.2mM MgCl2, 100mM KCl 및 0.1 % 플루로닉, 5M KOH를 사용하여 7.4로 조정된 pH)중의 1.0 nM 플루오로-리간드§와 함께 인큐베이션하였다. 검정중의 최종 칼륨 농도는 100mM이었다. 암실 내 실온에서 70분 혼합 후에, 10㎕를 DMSO 중의 0.1 ㎕의 시험 화합물을 함유하는 검은 LV Greiner 384-웰 플레이트의 각각의 웰에 분배시켰다. 플레이트를 2 시간 동안 평형시킨 후에, Acquest™/Analyst™ 영상장치상에서 판독하였다. plC50 데이타를 11-포인트 억제 곡선으로부터 생성시키고(50μM의 상부 검정 농도 및 1:3 단계-희석), 6 파라미터 곡선-피트를 ABase 및 XC50을 사용하여 적용시켜 데이타를 분석하고, 곡선 피트를 생성시켰다.
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9A, 9B, 10, 11A 및 11 B(유리 염기로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 10μM 초과의 평균 IC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 실시예 1, 2, 3, 4 및 6의 화합물의 염산염을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 20μM 초과의 평균 IC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9A, 9B, 10, 11A 및 11B(유리 염기로서)의 화합물을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 5.0 초과의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다. 실시예 1, 2, 3, 4 및 6의 화합물의 염산을 기본적으로는 상기 기재된 바와 같이 시험하였고, 이러한 검정에서 각각 5.0미만의 평균 plC50 값을 지니는 것으로 밝혀졌다.
당업자는 기능적 활성에 대한 시험관내 결합 검정 및 세포-기반 검정이 가변적임을 인지할 것이다. 따라서, 상기 열거된 IC50 및 plC50에 대한 값은 단지 예시적임을 이해해야 한다.
* CHO - K1 막
인간 hERG 수용체를 안정적으로 발현하는 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포를 80% 컨플루언시(confluency)까지 성장시키고, 트립신처리에 의해 수거한 후, 10분 동안 500g에서 원심분리시켰다. 세포 펠릿(pellet)을 막 생성 전에 -80℃에서 동결시켰다. 동결된 펠릿을 얼음 상에서 해동시키고, 10부피의 막 완충액(50mM HEPES, pH 7.4, 1 mM EDTA, 1 mM PMSF, 2x10-6M 펩스타틴 A) 중에 재현탁시키고 균질화시켰다. 막 현탁액을 500g에서 20분 동안 원심분리시키고, 펠릿을 폐기하고, 상층액을 30분 동안 48,000g에서 다시 회전시켰다. 두번째 원심분리 후, 막 분획을 함유하는 잔여 펠릿을 적절한 부피(동결된 세포 펠릿의 각 ml 당 4ml)로 재현탁시키고, 단백질 농도를 검정하였다.
§ 플루오로 -리간드( 옥타히드로벤조[2",3"]인돌리지노 [8",7":5',6'] 피라노 [3',2':3,4]피리도[1,2-a]인돌-5- 이움 -2- 설포네이트(국제 출원 번호 PCT/EP2010/050228, 공개공보 번호 WO2010/097248A1(Glaxo Group Ltd), 문헌[J.M.C. 2007, 50(13), 2931-2941]에 기재된 TFA 염).
아세토니트릴 (100μl) 중 용액으로서 N-[4-({2-[(6-아미노헥실)(2-{4-[(메틸설포닐)아미노]페닐}에틸)아미노]에틸}옥시)페닐]메탄설폰아미드(1.508mg)를 실란처리된 4ml 바이얼 중에서 고체 Cy3B-ONSu(14-{2-[(2,5-디옥소-1-피롤리디닐)옥시]-2-옥소에틸}-16,16,18,18-테트라메틸-6,7,7a,8a,9,10,16,18-옥타히드로벤조[2",3"]인돌리지노[8",7":5',6']피라노[3',2':3,4]피리도[1,2-a]인돌-5-이움-2-설포네이트(1.7 mg, W09931181)에 첨가하였다. 아세토니트릴의 두번째 부분(100μl)을 첨가한 후, 휴니그 염기(Hunig's base)(0.9μl)를 첨가하였다. 두 부분(2 x 50μl)의 디메틸포름아미드를 첨가하고, 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 디메틸포름아미드(200μl)에 재용해시켰다. 휴니그 염기(0.9μl)를 첨가하고, 혼합물을 22시간 동안 볼텍스(vortex) 혼합하였다. 반응 혼합물을 건조 증발시키고, 아세토니트릴/물/아세트산(5/4/1 , ~500μl)에 재용해시키고, 여과시키고, 하기 구배로 용리된 반-분취용 Spherisorb ODS2 HPLC 컬럼에 적용시켰다(유속 = 5ml/분, AU 5.0, 214nm, AU 2, 256nm, A= 0.1% TFA/물, B= 90% 아세토니트릴/10% 물/0.1% TFA): t=0분: B=5%; t=10분: B=5%; t=30분: B=25%; t=90분: B=55%; t=105분: B=100%; t=120분: B=100%). 주요 성분은 46%와 48%B 사이에서 용리되었고, 하나의 분획으로 수거하고, 이를 건조 증발시키고, 자주색 고체를 용매로서 메탄올을 이용하는 바이얼로 옮겼다. 메탄올을 감압하에서 제거하고, 자주색 고체를 건조 에테르로 분쇄시켰다. 고체를 건조 피스톨에서 1 mbar에서 밤새 건조시켜, 표제 화합물을 생성시켰다(1.2mg).
N-[4-({2-[(6- 아미노헥실 )(2-{4-[( 메틸설포닐 )아미노] 페닐 }에틸)아미노l에틸} 옥시 ) 페닐 ] 메탄설폰아미드
미정제 N-[4-({2-[[6-(1,3-디옥소-1,3-디히드로-2H-이소인돌-2-일)헥실](2-{4-[(메틸설포닐)아미노]페닐}에틸)아미노]에틸}옥시)페닐]메탄설폰아미드(142mg)를 메틸아민(에탄올 중 33%, 10ml, 0.216)에 용해시키고, 48시간 동안 22℃에서 방치시켰다. 과량의 시약을 감압하에서 증발시키고, 오일성 잔여물을 2개의 추가 부분의 에탄올과 공비화(azeotrope)시켰다. 미정제 생성물을 아세토니트릴/물/아세트산(5/4/, <2ml)에 용해시키고, 절반을 Phenomenex Jupiter C18 HPLC 컬럼에 적용시키고, 하기 구배를 이용하여 용리시켰다(유속 = 10ml/분, AU 20.0, 214nm, AU 10, 256nm, A= 0.1% TFA/물, B= 90% 아세토니트릴/10% 물/0.1% TFA): t=0분: B=5%; t=10분: B=5%; t=100분: B=35%; t=115분: B=100%; t=130분: B = 100%. 보다 느린 용리 성분(>90%)을 주로 함유하는 분획을 푸울링(pooling)시키고, 증발시켜, 표제 화합물(14.9mg)을 생성시켰다. 잔여 미정제물을 구배가 변경된 C18 컬럼에 적용시켰다: t=0분: B=5%; t=10분: B=5%; t=15분: B=10%; t=95분: B=30%; t=110분: B=100%; t=125분: B=100%. 주로 요망되는 생성물을 함유하는 분획을 조합시키고, 상기와 같이 증발시켜, 표제 화합물(21.3mg ~ 80% 순도)을 생성시켰다. 이러한 물질을 추가 정제 없이 이용하였다.
N-[4-({2-[[6-(1,3- 디옥소 -1,3- 디히드로 -2H- 이소인돌 -2-일) 헥실 ](2- f4 -[( 메틸설포닐 )아미노] 페닐 }에틸)아미노]에틸} 옥시 ) 페닐 ] 메탄설폰아미드
2-[6-([2-(4-아미노페닐)에틸]{2-[(4-아미노페닐)옥시]에틸}아미노)헥실]-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온(108.3mg)을 DCM(5 ml)에 용해시키고, 얼음-수조에서 0-4℃로 냉각시켰다. 휴니그 염기(0.227 ml)를 첨가한 후, 메실클로라이드(0.051 ml)를 적가하였다. 반응을 0.5시간 동안 0-4℃에서 유지시킨 후, 실온으로 천천히 가온시켰다. 3시간 후, 반응 혼합물을 건조 증발시키고, 다음 단계에서 미정제로 사용하였다.
2-[6-([2-(4- 아미노페닐 )에틸]{2-[(4- 아미노페닐 ) 옥시 ]에틸}아미노) 헥실 ]-1H-이 소인 돌-1,3(2H)- 디온
2-[6-([2-(4-니트로페닐)에틸]{2-[(4-니트로페닐)옥시]에틸}아미노)헥실]-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온(0.35g)을 에탄올(40ml), 물(5ml) 및 아세트산(5ml)의 혼합물에 용해시키고, 생성된 용액을 감압하에서 탈기시켰다. 10% 탄소상 팔라듐(56% 페이스트, 0.27g)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 12시간 동안 수소 분위기(대기압) 하에서 강하게 교반시켰다. 반응 혼합물을 Celite™을 통해 여과시키고, 에탄올로 세척하였다. 여과액 및 세척액을 건조 증발시켜, 표제 화합물(0.313g)을 생성시키고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
2-[6-([2-(4- 니트로페닐 )에틸]{2-[(4- 니트로페닐 ) 옥시 ]에틸}아미노) 헥실 ]-1H-이 소인 돌-1,3(2H)- 디온
[2-(4-니트로페닐)에틸]{2-[(4-니트로페닐)옥시]에틸}아민(253mg) 및 2-(6-브로모헥실)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온(1186 mg)을 DMF(4ml)에 용해시키고, DIPEA(0.665ml)의 첨가에 의해 염기화시켰다. 반응물을 120시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조 증발시키고, 잔여물을 DCM에 용해시키고, 용액을 실리카 패드에 흡수시키고, 하기 구배로 용리하여 실리카 카트리지(12g) 상에서 정제하였다: (A = DCM, B= 메탄올) t=0분: B=10%; t=7.5분: B=0%; t=22.5분: B=5%. 요망되는 생성물을 ~15%B에서 용리(동용매적으로 용리)시키고, 용액을 건조 증발시켜, 표제 화합물(0.364g)을 생성시켰다.
[2-(4- 니트로페닐 )에틸]{2-[(4- 니트로페닐 ) 옥시 ]에틸}아민
[[2-(4-니트로페닐)에틸]아민(498.9mg) 및 111-[(2-브로모에틸)옥시]-4-니트로벤젠 2-브로모에틸 4-니트로페닐 에테르(513 mg)를 22℃에서 DMF(5ml) 중에 용해시키고, DIPEA(0.872ml)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 22℃에서 60시간 동안 방치시키고, 건조 증발시키고, 잔여물을 DCM에 용해시켰다. 화합물을 실리카 상에 흡수시키고, 메탄올/DCM 구배(0-15%)로 용리하는 2 배치(batch)의 실리카 카트리지(12g)에서 정제시켰다. 순수한 생성물을 함유하는 분획을 푸울링시키고, 용매를 감압하에서 제거하였다. 생성된 표제 화합물을 고 진공(253mg)하에서 부분적으로 고체화되는 진황색(deep yellow) 오일로 분리시켰다.
4. 박테리아 돌연변이 스크리닝 검정(에임스 시험(Ames Test))
박테리아 돌연변이 검정(에임스 시험)은 유전자 돌연변이(염기쌍 치환 및 프레임쉬프트 돌연변이(frameshift mutation))를 초래하는 유전적 손상을 발생시킬 수 있는 광범위한 화학 물질을 검출하기 위해 특별히 설계된 단기 역 돌연변이 검정이다.
상기 시험은 히스티딘 또는 트립토판 오페론 각각의 다양한 유전자 내에 다양한 돌연변이를 각각 갖는 여러 히스티딘 의존성 살모넬라 티피뮤리움(Salmonella typhimurium) 균주 및 에스케리키아 콜리(Escherichia coli)의 여러 트립토판 의존성 균주를 이용한다. 상기 돌연변이는 다양한 메커니즘을 통해 DNA 손상을 야기시키는 돌연변이원에 대한 핫 스팟(hot spot)으로 작용한다.
간단히, 박테리아는 시험 전 10시간 동안 배양된다. 탑 아가(Top agar)에 미량의 히스티딘, 비오틴, 및 트립토판이 보충되고, 필요한 시험 품목을 첨가하기 전, 비히클 또는 양성 대조군, 및 이후 적절한 박테리아 현탁액, 및 외인성 포유동물 산화 대사 시스템(S9-mix) 또는 완충 용액이 분취된다. 최종 혼합물이 최소 아가 플레이트 상에 따라진 후, 역위되고, 인큐베이션시키고, 복귀돌연변이주 집락에 대해 스코어링(scoring)된다.
시험 균주가 미량의 히스티딘 또는 트립토판을 함유하는 최소 배지 아가 플레이트에서 성장되는 경우, 히스티딘 또는 트립토판 독립성으로 복귀된 박테리아만 집락을 형성할 수 있다. 플레이트 당 자발적으로 유도된 복귀돌연변이주 집락의 수는 비교적 일정하다. 그러나, 돌연변이원이 플레이트에 첨가되는 경우, 플레이트 당 복귀돌연변이주 집락의 수는 보통 용량-관련 방식으로 존재한다.
통상적으로 사용되는 박테리아 균주는 살모넬라 티피뮤리움 균주 TA98, TA100 TA1535 및 TA1537 및 에스케리키아 콜리 WP2 uvrA(pKM101)이다.
검정은 포유동물 대사를 모방하는 외인성 포유동물 산화 대사 시스템(S9-mix)의 존재 및 부재하에서 수행된다.
시험되는 가장 높은 농도는 자유롭게 가용성인 화합물에 대한 5000 μg/플레이트까지의 최대 노출을 가능케 하는 농도, 또는 용해도 또는 독성의 한도(어느 것이든 낮은 쪽)이다. 화합물 용해도가 제한 인자인 경우, 선택되는 최대 농도는 인큐베이션 기간의 종료시 처리 플레이트 상에서 화합물 침전이 육안으로 관찰되는 가장 낮은 농도일 것이다.
적절한 비히클 및 양성 대조군이 모든 시험에 포함된다.
단일 돌연변이 검정(플레이트 통합 방법을 이용함)은 S9-mix(비히클 대조군에 대해 4개의 복제 플레이트 및 양성 대조군 및 시험 품목에 대해 2개의 복제 플레이트로 구성됨)의 존재 및 부재하에서 수행된다.
플레이트는 보통 독성의 징후(즉, 기본성장균층(background lawn)의 감소된 성장(감소), 핀-도트/위복귀돌연변이주(pseudorevertant) 집락의 존재 및/또는 집락 수의 감소)에 대해 플레이트의 검사 후 박테리아 집락 형성에 대해 전자적으로 스코어링된다. 플레이트는 또한 화합물 침전에 대해 평가(육안에 의함)될 것이다. 화합물 침전이 발생하는 경우, 각각의 균주에 대한 박테리아 집락 형성의 스코어링은 인큐베이션 기간 종료시 화합물 침전이 시험 플레이트에서 관찰되는 가장 적은 처리 농도에서 정지될 것이다.
각 플레이트 상의 집락의 수가 기록되고, 시험 품목의 각 농도에 대해 계산된 평균 값이 이용된다. 평균 값이 또한 평균 동반 비히클 대조군 값(즉, 증가 배수)의 비로 표현된다. 또한, 임의의 관찰된 침전 또는 독성이 기록된다.
용량 관련 반응과 관련하여 임의의 치료 수준에 대한 데이터가 동반 비히클 대조군 값(TA98, TA100 TA102 WP2 uvrA (pKM101) 및 WP2 (pKM101))의 2배 이상, 또는 동반 비히클 대조군 값(TA1535 및 TA1537)의 3배 이상의 반응을 나타내는 경우, 결과가 양성으로 고려된다.
임의의 균주에 대한 데이터가 상기 상술된 바와 같은 역치의 2 또는 3배에 도달하나 이를 초과하지는 않는 용량 관련 반응을 나타내는 경우, 결과는 다의적인 것으로 간주되고, 명료화를 위해 추가 시험이 필요할 수 있다.
시험 방법은 박테리아 돌연변이유발성 시험에 대한 확립된 절차[Maron, 1983; Green, 1984; Ames, 1975; Garner, 1972; Green, 1976; Ames, 1973]를 기초로 하며, 이는 하기 조절 지침의 일반적 원리를 따른다.
실시예 1, 2, 3 및 4의 화합물(자유 염기로서)은 본 검정에서 음성이었다.
COM (2000) Guidance on a Strategy for Testing of Chemicals for Mutagenicity, Committee on Mutagenicity of Chemicals in Food, Consumer Products and the Environment, December 2000.
ICH-S2A (1996) "Specific Aspects of Regulatory Genotoxicity Tests for Pharmaceuticals", in: Federal Register, April 1996 (61 FR 18199).
ICH-S2B (1997) "A Standard Battery for Genotoxicity Testing of Pharmaceuticals", in: Federal Register, November 1997 (62 FR 62472).
Gatehouse, D.G., Wilcox, P., Forster, R., Rowland, I.R. and Callander, R.D. (1990) Bacterial Mutation Assays. In: D.J. Kirkland (Ed.), Basic Mutagenicity Test: UKEMS Recommended Procedures. Cambridge University Press, Cambridge, UK, pp. 13 61.
OECD (1997) "Bacterial Reverse Mutation Test", in: OECD Guideline for the Testing of Chemicals, Test Guideline 471.
중간체 및 실시예
일반사항
모든 온도는 ℃이다.
비스(피나콜레이토)디보론은 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이-1,3,2-디옥사보롤란을 나타낸다.
BH3.DMS는 보란 디메틸설파이드 착물을 나타낸다.
BH3-THF는 보란 테트라하이드로푸란 착물을 나타낸다.
BINAP는 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸을 나타낸다.
[(S)BINAP]Pd(OTf)2는 (S)-2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1-바이나프틸비스(아세토니트릴)팔라듐 (II) 트리플레이트를 나타낸다.
BOC는 3차-부톡시카르보닐을 나타낸다.
BOC20는 디-3차-부틸 디카보네이트를 나타낸다.
BuOH는 부탄올을 나타낸다.
3차-BuOK는 포타슘 3차-부톡사이드를 나타낸다.
n-BuOAc는 n-부틸 아세테이트를 나타낸다.
ClC02Et는 에틸 클로로포르메이트를 나타낸다.
Cs2C03는 세슘 카보네이트를 나타낸다.
Cu(OAc)2는 구리 아세테이트를 나타낸다.
CV는 컬럼 부피를 나타낸다.
DCM은 디클로로메탄을 나타낸다.
DIPEA는 N,N-디이소프로필에틸아민을 나타낸다.
DMAP는 4-디메틸아미노피리딘을 나타낸다.
DME는 디메톡시에탄을 나타낸다.
DMSO는 디메틸설폭사이드를 나타낸다.
DMF는 N,N-디메틸포름아미드를 나타낸다.
Et3N은 트리에틸아민을 나타낸다.
Et20 또는 에테르는 디에틸 에테르를 나타낸다.
EtOAc는 에틸 아세테이트를 나타낸다.
EtOH는 에탄올을 나타낸다.
FMOC는 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐을 나타낸다.
h는 시간을 나타낸다.
HCl은 염산을 나타낸다.
H20는 물을 나타낸다.
HPLC는 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography)를 나타낸다.
IPA는 이소-프로판올을 나타낸다.
K2C03는 탄산칼륨을 나타낸다.
KOAc는 포타슘 아세테이트를 나타낸다.
KOH는 수산화칼륨을 나타낸다.
LCMS는 액체 크로마토그래피-질량 분광법(liquid chromatography-mass spectroscopy)을 나타낸다.
MDAP는 질량에 의한 자동추출법(mass directed autoprep)을 나타낸다.
Me4NCl은 테트라메틸염화 암모늄를 나타낸다.
MeOD는 중수소 처리된 메탄올을 나타낸다.
min은 분을 나타낸다.
nBuLi은 N-부틸리튬을 나타낸다.
NBS는 N-브로모석신이미드를 나타낸다.
NaHC03는 중탄산나트륨을 나타낸다.
Na2S04는 황산나트륨을 나타낸다.
NaN3는 소듐 아지드를 나타낸다.
NMP는 N-메틸피롤리돈을 나타낸다.
(PhS02)2NF 또는 NFSI는 N-플루오로벤젠설폰아미드를 나타낸다.
Pd/C는 탄소 상 팔라듐을 나타낸다.
PdCl2.dppf는 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐을 나타낸다.
Pd2(dba)3은 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)을 나타낸다.
Pd(PPh3)4는 테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐(0)을 나타낸다.
Pd(디-t-bpf)Cl2는 1,1'-비스(디-3차-부틸포스피노)페로센 팔라듐 디클로라이드를 나타낸다.
PEPPSI는 피리딘-증강된 예비촉매 제조 안정화 및 개시를 나타낸다.
POCl3는 포스포러스 옥시클로라이드를 나타낸다.
Pt/C는 탄소 상 백금을 나타낸다.
r.t.는 실온을 나타낸다.
Rt는 체류 시간을 나타낸다.
TBME는 3차-부틸 메틸 에테르를 나타낸다.
TEA는 트리에틸아민을 나타낸다.
TFA는 트리플루오로아세트산을 나타낸다.
Tf20는 트리플릭산 무수물(트리플릭산 무수물)을 나타낸다.
THF는 테트라하이드로푸란을 나타낸다.
1H NMR 스펙트럼은 테트라메틸실란을 기준으로 하여 Bruker DPX 400MHz를 사용하여 기록하였다.
LC/MS (방법 A)를 암모니아 용액(용매 A) 및 아세토니트릴(용매 B)에 의해 pH 10으로 조절된 수중 10mM 중탄산암모늄으로 용리하되, 1 ml/min의 유속으로 하기 용리 구배: 0-1.5min 1-97% B, 1.5-1.9min 97% B, 1.9-2.0min 100% B를 사용하여 용리하는 Acquity UPLC BEH C18 컬럼 (50mm x 2.1 mm i.d. 1.7㎛ 패킹 직경) 상에서 40℃에서 수행하였다. UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 합쳐진 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이(Alternate-scan Positive and Negative Electrospray)를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계(Waters ZQ Mass Spectrometer)로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
LC/MS (방법 B)를 수 중 0.1% v/v 포름산 용액(용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1% v/v 포름산 용액(용매 B)으로 1 ml/min의 유속으로 하기 용리 구배: 0-1.5min 3-100% B, 1.5-1.9min 100% B, 1.9-2.0min 3% B를 사용하여 용리하는 Acquity UPLC BEH C18 컬럼 (50mm x 2.1 mm i.d. 1.7㎛ 패킹 직경) 상에서 40℃에서 수행하였다. UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 합쳐진 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
LC/MS (방법 C)를 수 중 0.1% v/v 트리플루오로아세트산 용액(용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1% v/v 트리플루오로아세트산 용액(용매 B)으로 1 ml/min의 유속으로 하기 용리 구배: 0-1.5min 3-100% B, 1.5-1.9min 100% B, 1.9-2.0min 3% B를 사용하여 용리하는 Acquity UPLC BEH C18 컬럼 (50mm x 2.1 mm i.d. 1.7㎛ 패킹 직경) 상에서 40℃에서 수행하였다. UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 합쳐진 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
MDAP (방법 A). 암모니아 용액(용매 A) 및 아세토니트릴(용매 B)에 의해 pH 10으로 조절된 수중 10mM 중탄산암모늄으로 하기 용리 구배를 사용하여 용리하는 XBridge C18 컬럼(100mm x 30 mm i.d. 5㎛ 패킹 직경) 상에서 주위 온도에서 HPLC 분석을 수행하였다:
Figure pct00015
UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 평균화된 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
MDAP (방법 B). 암모니아 용액(용매 A) 및 아세토니트릴(용매 B)에 의해 pH 10으로 조절된 수중 10mM 중탄산암모늄으로 하기 용리 구배를 사용하여 용리하는 XBridge C18 컬럼(100mm x 30 mm i.d. 5㎛ 패킹 직경) 상에서 주위 온도에서 HPLC 분석을 수행하였다:
Figure pct00016
UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 평균화된 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
MDAP (방법 C). 수중 0.1 % v/v 트리플루오로아세트산 용액(용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1 % v/v 트리플루오로아세트산 용액(용매 B)으로 하기 용리 구배를 사용하여 용리하는 Sunfire C18 컬럼(150mm x 30 mm i.d. 5㎛ 패킹 직경) 상에서 주위 온도에서 HPLC 분석을 수행하였다:
Figure pct00017
UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 평균화된 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
MDAP (방법 D). 암모니아 용액(용매 A) 및 아세토니트릴(용매 B)에 의해 pH 10으로 조절된 수중 10mM 중탄산암모늄으로 하기 용리 구배를 사용하여 용리하는 Sunfire C18 컬럼(150mm x 30 mm i.d. 5㎛ 패킹 직경) 상에서 주위 온도에서 HPLC 분석을 수행하였다:
Figure pct00018
UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 평균화된 파장이다. 질량 스펙트럼은 얼터네이트-스캔 포지티브 앤 네가티브 일렉트로 스프레이를 사용하는, 워터스 ZQ 질량 분광계로 기록되었다. 이온화 데이터는 가장 가까운 정수로 반올림되었다.
실리카 크로마토그래피 기술(Silica chromatography technique)은 자동화된(Flashmaster, Biotage SP4) 기술 또는 사전-패킹된 카트리지(SPE) 또는 수작업으로 패킹되는 플래쉬 컬럼 상에서의 수작업 크로마토그래피를 포함한다.
상업적 공급업자 명칭이 화합물 또는 시약 명칭 다음에 제시되는 경우, 예를 들어, "화합물 X (Aldrich)" 또는 "화합물 X/Aldrich"의 경우, 이는 화합물 X가 상업적 공급업자, 에컨대 명명된 상업적 공급업자로부터 얻을 수 있음을 의미한다.
유사하게, 문헌 또는 특허 참고문헌이 화합물명 다음에 제시되는 경우, 예를들어, 화합물 Y (EP 0 123 456)의 경우, 이는 화합물의 제법이 명명된 참조문헌에 기재되어 있음을 의미한다.
상기 언급된 예들의 화합물명은 화합물 명명 프로그램 "ACD Name Pro 6.02"으로부터 얻은 것이다.
중간체 1 : 에틸 (3S)-3- 플루오로 -2-옥소-3- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00019
0℃에서 2,6-루티딘 (31.7g, 296mmol) (Aldrich)을 얼음조에서 에탄올 (500ml) 중의 에틸 2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트 (101.2g, 591 mmol) (Aldrich), [(S)-(-)-2,2'-비스포스피노)-1,1'-바이나프틸]팔라듐 (II) 디하이드레이트 디트리플레이트 (3.14g, 2.96mmol) (Sodeoka,M et al. Synlett 1997, 463-466; Fujii,A et al. J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 5450-5458) (Aldrich) 및 N-플루오로벤젠설폰아미드 (242. Og, 768mmol) (Aldrich)의 현탁액에 30분에 걸쳐 적가하였다. 이 온도를 첨가 동안에 대략 10℃로 유지시키고, 얼음에 용융됨에 따라 밤새 실온으로 가온되게 하였다. 견고한 둥근 플라스크(3L) 목의 존재는 발열반응이 가능하게는 밤새 일어날 수 있음을 시사한다. LCMS는 생성물의 존재를 나타내었다. 반응물을 여과하고, 고형물을 에탄올로 세척한 후, DCM(200ml)로 세척하였다. NMR에 의해 고형물 상태의 생성물이 존재하지 않음이 확인되었다. 액체를 증발시키고, DCM (3500ml)에 재용해시켰다. 유기물을 포화된 염화 암모늄 용액 (300ml)으로 세척하고, 수성 물질을 DCM (2x200ml)으로 재추출하였다. 합한 유기물을 증발시키고, DCM (300ml)에 재용해시키고, 셀라이트(celite)를 통해 여과하고, DCM (200ml)로 세척하였다. 유기물 용액을 밤새 방치하자(밀봉됨에 따라 증발 없음), 고은 침전물이 나타났다. 혼합물을 셀라이트를 통해 다시 여과하고, DCM로 세척하였다.
합한 유기층을 1500g 실리카 컬럼 상에 로딩하고, 사이클로헥산 구배 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리하는 컴패니온 XL(companion XL) 상에서 정제하였다. 적합한 분획을 LCMS에 의해 확인하고, 합하고, 용매를 제거하여 상기 표제 화합물을 황색 고형물로서 얻었으며, 이를 1시간 동안 고진공 하에서 건조시켰다(92.2g).
LCMS (방법 B): Rt = 0.52min, MH+ 190
키랄 분석 HPLC (25cm Chiralpak IA, col.no.IAOOCE-MC024, 15%EtOH/C7, 1 ml/min, 파장 215nm, RT)는 빠른 엘루터(eluter)의 농축(enrichment)을 나타내었다 -44% ee. 상기 화합물을 거울상이성질체 농축이 다른 세 개의 다른 배치와 합하고, 99% 초과로 빠른 엘루터의 거울상이성질체 과량을 개선시키기 위해 215g의 물질을 분취용 HPLC를 사용하여 추가로 정제하였다.
샘플을 하기 방법에 따라 배치로 제조하였다: 에틸-3-플루오로-2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트 (25g)를 부드럽게 가열하고, 초음파 처리하면서 에탄올 (450ml) 중에 용해시켰다. 이후, 용액을 1 ㎛ 유리 섬유막을 지닌 Pall Acrodisc 37mm 시린지 필터(syringe filter)를 통해 여과하여 미립물 및 용해되지 않은 물질을 제거하였다. 여과된 용액을 에탄올을 사용하여 500ml의 총 부피로 조절하여 50mg/mL의 공칭 농도를 지닌 용액을 얻었다.
분취용 HPLC 세부사항은 하기와 같다:
Figure pct00020
중간체 2: 1,1-디메틸에틸 (3S)-3- 플루오로 -3-( 하이드록시메틸 )-1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00021
에틸 (3S)-3-플루오로-2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트 (50g, 264mmol)를 THF (100ml)에 용해시키고, 보란-THF 착물 (793ml, 793mmol, 1 M 용액)을 적가하였다. 혼합물을 24시간 동안 가열 환류시키고, 실온으로 냉각시키고, 보란을 메탄올 (150ml)을 첨가함으로써 켄칭시켰다. 2M HCl (200ml)의 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 가열 환류시킨 후, 냉각시키고, 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM (500ml) 중에 현탁시키고, 트리에틸아민 (111 ml, 793mmol)을 첨가한 후, BOC 무수물 (73.6ml, 317mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 교반한 후, 물 (100ml) 및 0.5M HCl (100ml)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-(하이드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트를 연황색 결정질 고형물 (52.85g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.80min, MH+ 234
중간체 3: 1,1-디메틸에틸 (3S)-3- 플루오로 -3-({[( 트리플루오로메틸 ) 설포닐 ]옥시} 메틸 )-1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00022
트리플릭산 무수물 (24.06ml, 142mmol)을 DCM (100ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-(하이드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (30.2g, 129mmol) 및 트리에틸아민 (23.46ml, 168mmol)의 용액에 -10℃에서 20분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반하여 0℃로 가온되게 한 후, 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-({[(트리플루오로메틸)설포닐]옥시}메틸)-1-피페리딘카르복실레이트를 진한 갈색 오일(50.2g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 1.23min, MH+ 366
중간체 4: 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-( 아지도메틸 )-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00023
소듐 아지드 (9.79g, 151 mmol)를 DMF (200ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-({[(트리플루오로메틸)설포닐]옥시}메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (50g, 137mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 80℃로 가열하였다. 샘플을 취하여 물로 켄칭시키고, 에테르로 추출하고, 에테르 층을 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 NMR로 분석하자 출발 물질이 소비되었음을 나타내었다.
혼합물을 냉각시키고, 물 (1 L)로 희석하고, EtOAc (2 x 300ml)로 추출하였다. 용매를 물 (2 x 300ml)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-(아지도메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트를 호박색 오일(36.7g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 1.12min, MH+ 259
중간체 5: 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-( 아미노메틸 )-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00024
1,1-디메틸에틸 (3S)-3-(아지도메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (36g, 139mmol)을 에탄올 (500ml) 중에 용해시키고, 질소 하에 Pd/C (2.6g, 1.222mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 대기압에서 밤새 수소화하였다. 현탁액을 여과하고, 여액을 진공 하에 증발시켜 1,1-디메틸에틸 {3R)-3-(아미노메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트를 연황색 오일(32.7g)로서 얻었다. 1H NMR (CDCl3) 3.75-3.52ppm (2H, 2xm, 2xCH), 3.30ppm (1H, dd, CH), 3.20ppm (1H, m, CH), 2.90-2.73ppm (2H, m, CH2), 1.96-1.72ppm (2H, 2xm, CH2), 1.70-1.58ppm (1H, m, CH), 1.57-1.43ppm (10H, m+s, CH + 3xCH3), 1.32ppm (2H, br.s, NH2).
중간체 6: N-(2,6- 디클로로 -4- 피리디닐 )-2,2- 디메틸프로판아미드
Figure pct00025
2,6-디클로로-4-피리딘아민 (10g, 61.3mmol) (Aldrich) 및 트리에틸아민 (10.69ml, 77mmol)를 디클로로메탄 (DCM) (75ml) 중에서 합하고, 얼음조에서 냉각시켰다. DCM (15ml) 중의 2,2-디메틸프로파노일 클로라이드 (8.30ml, 67.5mmol) (Aldrich)를 적가하고, 밤새 가온시키면서 혼합물을 교반하여 등명한 진한 오렌지색 용액을 생성하였다. LCMS는 생성물로 양호하게 전환되었음을 나타내었다. 용액을 물 및 포화된 NaHC03 (각각 100ml)로 세척하고, Na2S04로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 진한 오렌지색 고형물을 얻었다. 미정제 생성물을 최소의 DCM에 흡수시키고, 2CV 동안 사이클로헥산 중의 0% EtOAc로, 이후 12CV에 걸쳐 사이클로헥산 중의 0-15% EtOAc로, 이후, 2CV 동안 사이클로헥산 중의 15% EtOAc로 용리하는, 320g Companion XL 실리카 컬럼에 가하였다. 적합한 분획을 합하고, 증발시켜 표제 화합물을 황색 고형물(11.59g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 1.13min, MH+ 247/249
중간체 7: 5,7- 디클로로 -1,6- 나프티리딘
Figure pct00026
N-(2,6-디클로로-4-피리디닐)-2,2-디메틸프로판아미드 (1 g, 4.05mmol)를 질소 하에 THF (10ml) 중에 흡수시키고, <-70℃로 냉각시켰다. n-부틸 리튬 (4.05ml, 10.12mmol, 헥산 중 2.5M 용액)을 30분에 걸쳐 -60℃ 미만의 온도를 유지하면서 첨가한 후, 1시간 동안 -70℃ 미만에서 교반하였다. THF (2ml) 중의 (2￡)-3-(디메틸아미노)-2-프로펜알 (0.607ml, 6.07mmol)을 30분에 걸쳐 -60℃ 미만의 온도를 유지하면서 첨가하였다. 반응물을 -70℃ 미만에서 20분 동안 교반한 후, 실온으로 교반되게 하였다. LCMS은 잔류하는 출발 물질이 없음을 나타내었고, 이에 따라 반응물을 5M HCl (5ml)로 켄칭시키고, 밤새 환류시켰다. LCMS은 생성물로의 우수한 전환율을 나타냈으며, 이에 따라 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 고형 K2C03로 염기성화시키고, EtOAc (4x25ml)로 추출하였다. 합한 유기물을 Na2S04로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 갈색 고형물을 얻었다. 미정제 생성물을 샘플릿(samplet)에 적용하고, 2CV 동안 사이클로헥산 중의 12% 디에틸에테르로, 이후 10CV에 걸쳐 사이클로헥산 중의 12%-63% 디에틸 에테르로 컬럼화한 후, 이후, 5CV 동안 사이클로헥산 중의 63% 디에틸에테르로 유지시켰다. 적합한 분획을 합하고, 증발시켜 표제 화합물을 황색 고형물(0.42g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.89min, MH+ 199/201
중간체 8: 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-{[(7- 클로로 -1,6- 나프티리딘 -5-일)아미노]메틸}-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00027

NMP (20ml) 중의 5,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (5.01 g, 25.2mmol) 및 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-(아미노메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (5.32g, 22.90mmol)에 DI PEA (8.00ml, 45.8mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소 하에 72시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 및 물 (각각 200ml) 사이에서 분배시켰다. 수성 물질을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 유기물을 물로 세척하고, 용매를 제거하였다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 100g 실리카 SNAP 컬럼 상에 로딩하고, 17CV에 걸쳐 사이클로헥산 중 0-50% 에틸 아세테이트로 용리하는 SP4 상에서 정제하였다. 적합한 분획을 합하고, 용매를 제거하여 표제 화합물을 연오렌지색 고형물로 얻었으며, 이를 2시간 동안 고 진공 하에 건조시켰다(7.61 g).
LCMS (방법 B): Rt = 1.12min, MH+ 395/397
중간체 9: 1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸
Figure pct00028
에탄올 (10ml) 중의 (1,1-디메틸에틸)하이드라진 하이드로클로라이드 (1.02g, 8.19mmol) (Aldrich), 1,1,3,3-테트라키스(메틸옥시)프로판 (1.344g, 8.19mmol) (Aldrich) 및 염산 (0.672ml, 8.19mmol)의 혼합물을 환류 하게 가열하였다. 용액이 형성되었다. 16시간 후, 반응이 완료되었으며, 이에 따라 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이를 메탄올 중에 용해시키고, 메탄올로 용리되는 아미노프로필 카트리지 (20g)를 통과시켰다. 합한 여액을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 크림색 검(210mg)으로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.74min, MH+ = 125.6
중간체 10: 4- 브로모 -1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸
Figure pct00029
디클로로메탄 (DCM) (200ml) 중의 1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸(6.1 g, 49.1 mmol)의 빙냉된 용액에 N-브로모석신이미드 (8.74g, 49.1 mmol)를 첨가하였다. 이를 주위 온도로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 존재하지 않았고, 이에 따라 반응 혼합물을 소듐 티오설페이트 수용액으로 켄칭시켰다. 유기물을 물 (2 x 500ml)로 세척하고, 소수성 프릿을 통과시켰다. 여액을 진공 하에 농축시켜 오렌지색-갈색 오일을 얻었으며, 이는 방치하자 자주색으로 변하였다(7.402g).
LCMS (방법 B): Rt = 1.03 min, MH+ = 203, 205
중간체 11 : 1-(1,1-디메틸에틸)-4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)-1H- 피라졸
Figure pct00030
1,4-디옥산 (30ml) 중의 4-브로모-1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸 (2.4g, 11.82mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이-1,3,2-디옥사보롤란 (3.00g, 11.82mmol), 포타슘 아세테이트 (2.90g, 29.5mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐 (0) (0.108g, 0.118mmol), 2-(디사이클로헥실포스피노)-2',4',6'-트리이소프로필바이페닐 (0.225g, 0.473mmol)의 혼합물을 질소로 탈기시켰다. 반응 혼합물을 2개의 마이크로파 바이알에 나누고, 마이크로파로 110℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 출발 물질이 잔류하지 않았고, 이에 따라 반응물을 Bond elut 저장소를 통해 여과하고, 잔류물을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이를 DCM 중에 용해시키고, DCM 구배로 0-50% 에틸 아세테이트로 용리되는 실리카 (50g)를 통해 정제하였다. 적합한 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 베이지색 고형물(1.68g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 1.08min, MH+ = 250.8
중간체 12: 1-[( 메틸옥시 ) 메틸 ]-4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)-1H- 피라졸
Figure pct00031
4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (400mg, 2.061 mmol) (Aldrich)을 아세토니트릴 (25ml) 중에 용해시키고, 35℃에서 5분 동안 교반하였다. 아이오도메틸 메틸 에테르 (0.873ml, 10.31 mmol) 및 탄산칼륨 (1424mg, 10.31 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 35℃에서 3시간 동안 교반하였다.
LCMS은 반응이 불완전함을 나타내었다. 혼합물을 추가의 한 시간 동안 35℃에서 교반되게 방치하였다. LCMS은 진행된 바가 없음을 나타내었고, 이에 따라 2eq (349㎕)의 알킬화제를 첨가하고, 혼합물을 35℃에서 30분 동안 교반되게 하였다. 이후, 염화 암모늄를 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물 사이에서 분배시켰다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 재추출하고, 합한 유기 상을 물로 세척하고, 소수성 프릿을 사용하여 건조시키고, 오일로 농축시켰다. 오일을 SP4를 사용하고, 0-100% 에틸 아세테이트/사이클로헥산 구배로 용리되는 50g 실리카 상에서 정제하였다. 생성물이 폐기물 중에서 발견되었고, 이를 농축시켜 표제 화합물을 오일(260mg)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.84min, MH+ = 238.85
중간체 13: 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-({[7-(1-에틸-1H- 피라졸 -4-일)-1,6- 나프티리딘 -5-일]아미노} 메틸 )-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00032
질소 하에 2-5mL 마이크로파 바이알에 탄산세슘 (990mg, 3.04mmol) 및 1-에틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (292mg, 1.317mmol) (Boron Molecular)을 첨가하였다. 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-{[(7-클로로-1,6-나프티리딘-5-일)아미노]메틸}-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (400mg, 1.013mmol)를 1,4-디옥산 (4ml) 및 물 (0.8ml) 중에 용해시키고, 한번에 첨가하였다. 질소를 형성된 현탁액을 통해 ~2분 동안 버블링시켰다. 이후, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0) (117mg, 0.101 mmol)을 한번에 첨가하고, 추가의 ~1분 동안 황색 현탁액을 통해 질소 버블링시켰다. 마이크로파 바이알을 밀봉시키고, 1시간 동안 마이크로파 반응기에서 150℃로 가열하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응물을 물(20m)과 에틸 아세테이트 (20ml) 사이에서 분배시켰다. 수성층을 추가로 에틸 아세테이트(2 x20ml)로 추출하고, 합한 유기물을 염수(10ml)로 세척하였다. 유기물을 건조시키고(Na2S04), 진공 하에서 농축시켰다.
동일 양 및 반응 조건을 사용하여 반응을 상기와 같이 반복하였다. 두개의 미정제 배치를 합하고, 0-100% 에틸 아세테이트/사이클로헥산 구배로 용리되는 100g Biotage 실리카 컬럼을 사용하고 정제하였다. 적합한 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일(811 mg)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.88min, MH+ 455
중간체 14: 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-[({7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸 -4-일]-1,6- 나프티리딘 -5-일}아미노) 메틸 ]-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00033
1,4-디옥산 (10ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-{[(7-클로로-1,6-나프티리딘-5-일)아미노]메틸}-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1.300g, 3.29mmol)의 용액에 1-(1,1-디메틸에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (0.906g, 3.62mmol), 탄산세슘 (2.145g, 6.58mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0) (0.114g, 0.099mmol) 및 물 (2ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로파로 130℃에서 2시간 동안 가열하였다. LCMS은 출발 물질 없이 생성물의 주 피크를 나타내었다. 반응 혼합물을 10g 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트과 물 (100ml X 2) 사이에서 분배시켰다. 유기 층을 염수 (100ml)로 세척하고, 용매를 증발시키고, 최소량의 DCM 중에 용해시켰다. 이를 100g 실리카 컬럼에 로딩하고, 22CV에 걸쳐 사이클로헥산 중 20-90% 에틸 아세테이트로 용리되는 SP4 상에서 정제하였다. 적합한 분획을 수거하고, 용매를 증발시켰다. 생성물을 고진공 하에서 밤새 건조시켜 표제 화합물을 황색 결정질 고형물(1.586g)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 1.OOmin, MH+ 483
중간체 15: 1,1-디메틸에틸 (3R)-3- 플루오로 -3-{[(7-{1-[( 메틸옥시 ) 메틸 ]-1H-피라졸-4-일}-1,6- 나프티리딘 -5-일)아미노] 메틸 }-1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00034
DME (5ml), 물 (2.5ml), 에탄올 (5.00ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-{[(7-클로로-1,6-나프티리딘-5-일)아미노]메틸}-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (650mg, 1.646mmol)에 1-[(메틸옥시)메틸]-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (1.03g 4.33mmol), 수산화칼륨 (3.95ml, 3.95 mmol, 1 M 수용액) 및 PEPPSI (112mg, 0.165mmol)를 첨가하였다. 반응물을 질소 하에 4일밤 동안 130℃에서 환류시켰다. LCMS는 생성물로서 주 피크를 나타내었다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 용매 제거하였다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 25g 실리카 컬럼에 로딩하고, 사이클로헥산 구배로 50-100% 에틸 아세테이트로 용리되는 SP4 상에서 정제하였다. 적합한 분획을 합하고, 용매를 제거하여 황색 오일을 얻었으며, 이를 고진공 하에 밤새 건조시켜 표제 화합물을 황색 고형물/막(813mg)으로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.86min, MH+ 471
중간체 16: 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-{[(7- 클로로 -1,6- 나프티리딘 -5-일) 옥시 ]메틸}-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00035
DMF (20ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-(하이드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (1.406g, 6.03mmol)의 빙냉된 용액에 수소화나트륨 (0.313g, 7.84mmol) (광유 중 60% 분산물)을 첨가하였다. 이를 15분 동안 교반한 후, 5,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1.2g, 6.03mmol)을 첨가하였다. 이를 실온으로 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되었고, 이에 따라 조심스럽게 염화 암모늄 수용액으로 켄칭시킨 후, 염화 암모늄 수용액과 에틸 아세테이트 사이에서 분배시켰다. 층들을 분리시키고, 수성 물질을 에틸 아세테이트로 재추출하였다. 합한 유기물을 염수로 세척하고, 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이를 DCM 중에 용해시키고, DCM 중의 0-50% 에틸 아세테이트의 구배로 용리되는 실리카(50g)를 통해 정제하였다. 적합한 분획을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 크림색의 포움성 검(1.91 g)으로서 얻었다.
LCMS: Rt = 1.18min, MH+ = 395.85
중간체 17: 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-({[7-(1-에틸-1H- 피라졸 -4-일)-1,6- 나프티리딘 -5-일] 옥시 } 메틸 )-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트
Figure pct00036
1,4-디옥산 (16ml) 및 물 (3ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-{[(7-클로로-1,6-나프티리딘-5-일)옥시]메틸}-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1.1 g, 2.78mmol), 1-에틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (0.679g, 3.06mmol) 및 탄산세슘 (2.263g, 6.95mmol)의 혼합물을 질소로 탈기시킨 후, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0) (0.096g, 0.083mmol)를 첨가하였다. 이를 18시간 동안 환류 하에 가열하였다. 반응물을 에틸 아세테이트와 염화암모늄 수용액 사이에서 분배시켰다. 수성 물질을 에틸 아세테이트로 재추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 소수성 프릿을 통과시키고, 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이를 DCM 중에 용해시키고, DCM 중의 에틸 아세테이트의 구배로 용리되는 실리카(20g)을 통해 정제하였다. 생성물을 순수한 에틸 아세테이트로 용리시켰다. 적합한 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 핑크빛깔의 크림색 포움(1.1Og)으로서 얻었다.
LCMS: Rt = 1.21 min, MKT = 456.09
실시예 1. 7-(1-에틸-1H- 피라졸 -4-일)-N-{[(3S)-3- 플루오로 -3- 피페리디닐 ] 메틸 }-1,6- 나프티리딘 -5-아민
Figure pct00037
DCM (6.1 ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-({[7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘-5-일]아미노}메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (811 mg, 1.784mmol)의 용액에 트리플루오로아세트산 (3.16ml, 41.0mmol)을 첨가하고, 이를 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 이 시간 후, 반응이 완료되었고, 이에 따라 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이를 메탄올 중에 용해시키고, 메탄올 (3 컬럼 vol) 및 메탄올 중 2M 암모니아로 용리되는 SCX 카트리지 (70g)에 로딩하였다.
암모니아 분획으로부터의 여액을 진공 하에 농축시켜 황색 오일(653mg)을 얻었다. 유리 염기(553mg)를 고 pH 분취용 MDAP (방법 A)에 의해 정제하였다. 적합한 바이알을 합하고, 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 황색 고형물(265mg)로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 8.65ppm (1H, dd, CH), 8.70ppm (1H, br.d, CH), 8.33ppm (1H, s, CH), 8.05ppm (1H, s, CH), 7.77ppm (1H, br.t, NH), 7.37ppm (1H, dd, CH), 7.25ppm (1H, s, CH), 4.19ppm (2H, q, CH2), 3.95ppm (2H, m, CH2), 2.85-2.50ppm (4H, 3xm, 2xCH2), 1.90-1.54ppm (4H, 2xm, 2xCH2), 1.42ppm (3H, t, CH3).
HPLC (컬럼: Luna 3u C18(2), #409663-12, 1 ml/분으로 8-분 수행 시간, 용리액: 0-95% 구배의 0.05% TFA/물 중 0.05% TFA/아세토니트릴, 파장 220nm): Rt = 2.49min
비선광도(Optical rotation)= -25.9 (메탄올 중 c. 1.1, T=23.6℃)
HCl 염의 제조:
10Omg의 유리 염기를 DCM (1 ml) 중에 용해시키고, 이것에 HCl (Et20 중 1.0M) (0.357mL, 0.357mmol)을 첨가하였다. 즉시 오렌지색 고형물이 침전하였다. 잔류 용매를 블로운 오프(blown off)시키고, 형성된 오렌지색 고형물을 진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 HCl 염(120mg)으로, 오렌지색 고형물로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.45min, MH+ 355
실시예 2. 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸 -4-일]-N-{[(3S)-3- 플루오로 -3-피페리디닐] 메틸 }-1,6- 나프티리딘 -5-아민
Figure pct00038
1,1-디메틸에틸 (3R)-3-[({7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-일}아미노)메틸]-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1.586g, 3.29mmol)를 DCM (5ml) 중에 용해시키고, 트리플루오로아세트산 (5.06ml, 65.7mmol)을 첨가하였다. 반응물을 20분 동안 20℃에서 교반하였다. LCMS는 생성물의 주 피크를 나타내었다. 반응 혼합물을 20g SCX 카트리지에 로딩하고, 메탄올로 세척하였다. 화합물을 2M 메탄올성 암모니아로 용리시켰다. 암모니아 분획으로부터 용매를 증발시키고, 2시간 동안 고진공 하에 유지시켜 황색 결정질 고형물(1.171 g)을 얻었다. 유리 염기(1.12g)를 고 pH 분취용 MDAP (방법 B)에 의해 정제하였다. 적합한 분획을 합하고, 진공 하에 농축시키고, 고진공으로 밤새 유지시켜 표제 화합물을 황색 결정질 고형물(688.1 mg)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.52min, MH+ 383
1H NMR (MeOD) 8.80ppm (1H, dd, CH), 8.58ppm (1H, dd, CH), 8.32ppm (1H, s, CH), 8.08ppm (1H, s, CH), 7.39ppm (1H, dd, CH), 7.25ppm (1H, s, CH), 4.24ppm (1H, dd, CH), 3.82ppm (1H, dd, CH), 2.95-2.63ppm (4H, 2xm, 2xCH2), 2.00-1.69ppm (4H, 3xm, 2xCH2),1.65ppm (9H, s, 3xCH3).
HCl 염의 제조:
50mg의 유리 염기를 디클로로메탄 (DCM) (1 ml) 중에 용해시키고, 이에 HCl (Et20 중 1.0M) (0.13ml)을 첨가하였다. 용매를 밤새 블로운 다운(blown down)시키고, 형성된 생성물을 진공 하에 1시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 HCl 염(56.6mg)으로, 오렌지색 고형물로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.53min, MH+ 383
실시예 2. 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸 -4-일]-N-{[(3S)-3- 플루오로 -3-피페리디닐] 메틸 }-1,6- 나프티리딘 -5-아민 - 대안적 제법
DCM (14ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-[({7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-일}아미노)메틸]-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (2.24g, 4.64mmol)의 용액에 TFA (8.22ml, 107mmol)를 첨가하고, 이를 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 이 시간 후, 반응이 완료되었고, 이에 따라 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이를 메탄올 중에 용해시키고, SCX 카트리지 (50g) 상에 로딩하였다. 이를 메탄올 (3CV)로 용리시키고, 생성물을 메탄올 중 2M 암모니아로 유리 염기로서 용리시켰다.
암모니아 분획으로부터의 여액을 진공 하에 농축시켜 황색 포움(1.55g)을 얻었다.
이것의 일부(305mg)를 고 pH MDAP에 의해 정제하여 표제 화합물(265mg)을 얻었다.
LCMS (방법 C): Rt = 0.56min, MH+ 383
비선광도=-34.2 (메탄올 중 c. 1.01, T=23.6℃).
실시예 3. N-{[(3S)-3- 플루오로 -3- 피페리디닐 ] 메틸 }-7-{1-[( 메틸옥시 ) 메틸 ]-1H-피라졸-4-일}-1,6- 나프티리딘 -5-아민
Figure pct00039
DCM (10ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-플루오로-3-{[(7-{1-[(메틸옥시)메틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-일)아미노]메틸}-1-피페리딘카르복실레이트 (813mg, 1.728mmol)에 트리플루오로아세트산 (2ml, 26.0mmol)을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS은 주 피크로서 생성물을 나타내었다. 용매를 제거하고, 메탄올 중에 용해시키고, 사전-평형된 50g SCX 카트리지에 로딩하였다. 메탄올로 세척하고, 2M 메탄올성 암모니아로 용리시켰다. 암모니아 분획으로부터의 용매를 제거하고, 잔류물을 고진공 하에 밤새 건조시켰다. 잔류물을 대규모 고 pH MDAP (방법 D)에 의해 정제하였다. 적합한 분획을 합하고, 용매를 제거하였다. 형성된 생성물을 1시간 동안 고진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 황색 고형물(349mg)로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.43min, MH+ 371
1H NMR (MeOD) 8.84ppm (1H, br.d, CH), 8.60ppm (1H, br.d, CH), 8.44ppm (1H, s, CH), 8.18ppm, (1H, s, CH), 7.44ppm (1H, dd, CH), 7.31 ppm (iH, s, CH), 5.49ppm (2H, s, CH2), 4.25-3.87ppm (2H, 2xdd, CH2), 3.38ppm (3H, s, CH3), 3.21-2.75ppm (4H, 3xm, 2xCH2), 2.10-1.75ppm (4H, 2xm, 2xCH2).
비선광도=-27.7 (메탄올 중 c. 0.74, T=23.6℃)
HCl 염의 제조:
47mg의 유리 염기를 디클로로메탄 (DCM) (1 ml) 및 소량의 메탄올 중에 용해시키고, HCl (Et20 중 1.0M) (0.127mL, 1 eq)을 첨가하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 고진공 하에 밤새 건조시켜 표제 화합물을 HCl 염(48.5mg)으로, 연한 오렌지색/황색 고형물로서 얻었다.
LCMS (방법 B): Rt = 0.43min, MH+ 371
실시예 4. 7-(1-에틸-1H- 피라졸 -4-일)-5-({[(3S)-3- 플루오로 -3- 피페리디닐 ]메틸} 옥시 )-1,6- 나프티리딘
Figure pct00040
DCM (3ml) 중의 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-({[7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘-5-일]옥시}메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1.1 g, 2.415mmol)의 용액에 트리플루오로아세트산 (3ml, 38.9mmol)을 첨가하고, 이를 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되었고, 이에 따라 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었다. TFA 염을 메탄올 중에 용해시키고, SCX 카트리지 (20g) 상에 로딩하였다. 불순물을 메탄올로 용리시키고, 생성물을 메탄올 중 2M 암모니아로 용리시켰다. 여액을 진공 하에 농축시켜 크림색 검과 같은 고형물(620mg)을 얻었다. 이를 대규모 MDAP (방법 C)에 의해 정제하였다. 적합한 바이알을 합하고, 진공 하에 농축시켜 생성물을 TFA 염으로서 얻었다. 유리 염기를 형성시키기 위해, 이를 메탄올 중에 용해시키고, 메탄올로 용리되는 SCX 카트리지 (20g)를 통해 정제하였다. 생성물을 메탄올 중 2M 암모니아로 용리시켰다. 여액을 진공 하에 농축시켜 표제 화합물을 등명한 유리(500mg)로서 얻었다.
LCMS (방법 C): Rt = 0.51 min, MH+ = 355.9
1H NMR (MeOD) 8.92ppm (1H, dd, CH), 8.57ppm (1H, br.d, CH), 8.30ppm (1H, s, CH), 8.10ppm (1H, s, CH), 7.58ppm (1H, s, CH), 7.51 ppm (1H, dd, CH), 4.68ppm (2H, m, CH2), 4.26ppm (2H, q, CH2), 3.30-2.60ppm (4H, 3xm, 2xCH2), 2.20-1.62ppm (4H, 3xm, 2xCH2), 1.52ppm (3H, t, CH3).
비선광도 = -7.6 (메탄올 중 c. 0.79, T=23.6℃)
HCl 염의 제조:
115mg의 유리 염기를 DCM (2ml) 중에 용해시키고, 이에 디에틸 에테르 중의 1M HCl(0.32ml)을 첨가하였다. 이를 질소 하에 블로운 다운시키고, 진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 HCl 염(74mg)으로, 크림색 고형물로서 얻었다.
LCMS (방법 C): Rt = 0.51 min, MH+ = 356
실시예 5 내지 11
하기 추가의 실시예를 유사하게 제조하였다:
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
* 실시예 11을 BOC 보호된 피페리딘 대신에 FMOC 보호된 피페리딘을 사용하고, FMOC 보호된 화학식(I)에서 거울상이성질체를 분리하여 제조함.
§-알킬화제는 예를 들어 Sigma-Aldrich UK (Aldrich)로부터 구입가능함.
반응식 66에 대한 공정 설명
단계 a): (1S,2R,5S)-5- 메틸 -2-(1- 메틸에틸 ) 사이클로헥실 2-옥소-3- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00044
4-디메틸아미노피리딘 (0.35wt), (+)-멘톨 (0.95wt) 및 에틸 2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트 (1wt)를 톨루엔 (10vol) 중에 용해/현탁시켰다. 혼합물을 가열 환류시키고, 수일 동안 용매를 주기적으로 증류시키고, 새로운 톨루엔을 재주입하면서 교반하였다. 반응 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 5%w/w HCl 수용액 (4 vol), 및 그 다음에 물 (4 vol)의 두 부분으로 세척하였다. 유기 상을 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 얻었다.
[(S)-2,2'- 비스 ( 디페닐포스피노 )-1,1'- 비나프틸 ] 비스 ( 아세토니트릴 )팔라듐 (II) 디트리플레이트 , 단계 b)에 대한 촉매의 제조
팔라듐 아세테이트 (1wt)를 아세토니트릴 (4vol) 중에 용해시키고, 20±3℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0±3℃로 냉각시키고, 트리플루오로메탄설폰산(0.75vol, 1.9eq)을 30분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 15분 동안 0±3℃에서 교반한 후, 반응 혼합물을 20±3℃로 가열하고, 추가의 30분 동안 교반하였다. (S)-BINAP (2.77wt, 1 eq)을 첨가하고, 아세토니트릴 (0.6vol)로 세척하고, 혼합물을 20±3℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 디이소프로필 에테르 (10vol)를 서서히 첨가하여 슬러리를 얻었으며, 이를 30분 동안 에이징시켰다. 고형물을 흡입 하에 여과하고, 아세토니트릴:디이소프로필 에테르 (1:3, 8vol) 및 디이소프로필 에테르 (8vol)로 세척하였다. 이후, 생성물을 진공 하에 20±3℃ 내지 일정한 프로브 온도에서 건조시켰다.
단계 b): (1S,2R,5S)-5- 메틸 -2-(1- 메틸에틸 ) 사이클로헥실 (3S)-3- 플루오로 -2-옥소-3- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00045
(1S,2R,5S)-5-메틸-2-(1-메틸에틸)사이클로헥실 2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트 (1wt)를 에탄올 (1.5vol) 중에 용해시키고, N-플루오로벤젠설폰아미드 (NFSI) (1.07wt)를 20℃에서 첨가한 후, [(S)-BINAP]Pd(CH3CN)2(OTf)2 (0.038wt)를 첨가하였다. 잔류 NFSI 및 촉매를 에탄올 (3vol)로 세척하였다. 쟈켓을 0℃로 냉각시키고, 온도를 20℃ 미만으로 유지시키면서 2,6-루티딘 (0.21 vol)을 서서히 충전하였다. 이후, 쟈켓 온도를 20℃로 상승시켰다. 반응 혼합물을 24시간 동안 교반하고, 0℃로 냉각시키고, 추가의 2시간 동안 교반하였다. 고형물을 여과에 의해 분리시키고, 에탄올 (3vol)로 세척하고, 진공 하에 40℃에서 건조시켰다. 건조된 미정제 고형물을 반응기에 충전하고, 디클로로메탄 (5vol)을 첨가하였다. 디클로로메탄 상을 연속해서 2M NaOH 수용액(3vol), 물 (3vol), 5%w/w HCl 수용액(3vol) 및 물 (3vol)로 세척하였다. 디클로로메탄 추출물을 회전 증발기로 옮기어, 용매를 감압 하에서 n-헵탄로 교환하여 이동성 슬러리 및 약 11 vol의 최종 부피를 얻었다. 생성물을 여과에 의해 분리시키고, 헵탄 (3vol)으로 세척하고, 진공 하에 40℃에서 건조시켰다.
단계 c): 1,1-디메틸에틸 (3S)-3- 플루오로 -3-( 하이드록시메틸 )-1- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00046
(1S,2R,5S)-5-메틸-2-(1-메틸에틸)사이클로헥실 (3S)-3-플루오로-2-옥소-3-피페리딘카르복실레이트 (1 eq, 1wt)를 무수 THF (6vol) 중에 현탁시키고, 보란 디메틸 설파이드 착물 (6eq, 1.9vol)로 처리하였다. 형성된 용액을 63-66℃에서 40-46시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0±5℃로 냉각시키고, 30 내지 90분에 걸쳐 냉각된 (0±5℃) 메탄올 (3vol)에 서서히 첨가하고, 내부 온도를 15℃ 미만으로 유지시켰다. 격렬한 가스 발생 및 포우밍이 관찰되었다. 2M 염산 (4vol)을 10 내지 15분에 걸쳐 첨가하고, 내부 온도를 15℃ 미만으로 유지시켰다. 혼합물을 환류 (60-65℃) 하에 30 내지 90분 동안 교반하고, 20-25℃로 냉각시켰다. 톨루엔 (4vol)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 여과하였다. 여액을 분리하고, 보다 낮은 산성 수성 상을 빼내었다. 필터 케이크를 2M 염산 (2vol)으로 세척하고, 톨루엔 상의 제 2 추출을 위해 세척액을 사용하였다. 보다 낮은 산성 수성상을 빼내고, 제 1 산성 수성 상과 합하고, 5±5℃로 냉각시켰다. 용액을 수산화나트륨 (5eq, 0.668wt)으로 처리하고, 고형물이 용해될 때까지 10-20℃에서 교반하였다. 디클로로메탄 (2vol) 중의 디-3차-부틸-디카르보네이트 (1.1 eq, 0.802wt)의 용액을 첨가하고, 보다 많은 디클로로메탄 (2vol)로 헹구었다. 2상 혼합물을 15시간 동안 격렬하게 교반하고, 여과하고, 필터 케이크를 디클로로메탄 (2vol)으로 세척하였다. 보다 낮은 유기 상을 빼냈다. 필터 케이크를 디클로로메탄 (2vol)으로 세척하고, 이 세척물을 사용하여 수성상을 추출하였다. 디클로로메탄 추출물을 물 (4vol)로 세척하고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류 오일을 Buchi 상에서 40℃에서 건조시켰다. 헵탄 (4vol)을 첨가하고, 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 증발 말기 무렵에, 혼합물을 표제 화합물(0.001 wt)로 시딩하고, 형성된 슬러리를 작은 부피로 농축시키고, 헵탄 (4vol)로 희석하였다. 슬러리를 40℃에서 20-36 분 동안 Buchi로 회전시키고, 냉각시키고, 1시간 동안 20±5℃에서 회전시켰다. 고형물을 흡입 하에 수거하고, 헵탄 (2 x 1vol)으로 세척하고, 진공 하에 35±5℃에서 건조시켰다.
단계 d): 1,1-디메틸에틸 (3S)-3- 플루오로 -3-({[( 트리플루오로메틸 ) 설포닐 ]옥시} 메틸 )-1- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00047
피리딘 (3vol) 중의 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-(하이드록시메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (1wt)를 20℃에서 질소 대기 하에 용해시켰다. 형성된 용액을 -10℃로 냉각시킨 후, 트리플릭산 무수물 (0.80vol)을 내부 온도가 5℃ 미만으로 유지되도록 하는 속도로 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 4시간 동안 교반한 후, 완료 여부를 TLC에 의해 모니터링하였다. 배치를 0℃로 가온시키고, 이소프로필 아세테이트 (8vol)을 첨가하고, 시트르산 수용액(5.8vol 물 중 5.8wt 시트르산)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 15분 동안 교반한 후, 층들을 분리시켰다. 유기 층을 20℃에서 또 다른 시트르산 수용액(5.8vol 물 중 5.8wt 시트르산)으로 연속해서 세척한 후 중탄산나트륨 용액 (물 4.65vol 중 0.35wt NaHC03) 및 물 (5vol)로 세척하였다. 유기 상을 회전 증발기에서 증발 건조시켜 표제 화합물을 오렌지색 오일로서 얻었다.
단계 e): 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-( 아지도메틸 )-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00048
1,1-디메틸에틸 (3S)-3-플루오로-3-({[(트리플루오로메틸)설포닐]옥시}메틸)-1-피페리딘카르복실레이트 (1 wt)를 20℃에서 N,N-디메틸포름아미드 (3vol) 중에 용해시키고, 소듐 아지드 (1.1 eq, 0.20wt)를 첨가하였다. 형성되는 현탁액을 20-30℃에서 6시간 동안 교반하였다. TBME (5vol) 및 물 (9vol)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반하고, 층들을 분리시켰다. 수성 상을 TBME (5vol)로 추출하고, TBME 상들을 합하였다. 합한 유기물을 물 (2 x 5vol)로 세척하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 오렌지색 오일로서 얻었다.
단계 f): 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-( 아미노메틸 )-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00049
수소화 용기를 질소로 퍼어징하였다. 1,1-디메틸에틸 (3S)-3-(아지도메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1wt)를 THF (11 vol) 중에 용해시키고, 용기에 충전하고, THF (2vol)로 헹구었다. 농축된 암모니아 수용액 (-33% wt 용액, 2vol)을 첨가한 후, 탄소상 10% 백금(Johnson Matthey type 128;-50% wet, 8.3%wt)을 첨가하였다. 용기를 소기시키고, 질소로 3회 퍼어징하였다. 반응 용기를 수소로 퍼어징하고, 교반을 시작하고, 20℃의 내부 온도를 38.5시간 동안 유지시키면서 대기압에서 수소화를 수행하였다(반응 완료는 LCMS에 의해 확인됨). 용기를 소기시키고, 질소로 3회 퍼어징하고, 내용물을 CUNO Zetacarbon 필터 (R55SP)를 통과시켰다. 용기를 THF (3vol)로 세척하고, 이를 이전에 사용된 필터를 통과시켰다. 합한 유기물을 회전 증발기에서 농축 건조시켰다.
단계 g): 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-{[(7- 클로로 -1,6- 나프티리딘 -5-일)아미노]메틸}-3- 플루오로 -1- 피페리딘카르복실레이트의 제조
Figure pct00050
NMP (6vol) 중의 5,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1 eq, 1wt), 1,1-디메틸에틸 (3R)-3-(아미노메틸)-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1.1 eq, 1.28wt), 및 디이소프로필에틸아민 (2eq, 1.75vol)의 혼합물을 110±5℃에서 17시간 동안 교반하였다. 용액을 70-75℃로 냉각시키고, 물 (6vol)을 65-75℃에서 47분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 50분 동안 65-75℃에서 에이징시키고, 45℃로 냉각시켜 슬러리를 얻었다. 혼합물을 20-25℃로 서서히 냉각시킨 후, 2.25시간 동안 에이징시켰다. 고형물을 흡입 하에 수거하였다. 필터 케이크를 1:2v/v NMP/물 (2vol)로 세척한 후, 물 (2 x 4vol)로 세척하고, 진공 하에 40±5℃에서 건조시켰다. 고형물이 여전히 상당량의 NMP (16.2%w/w)를 함유함에 따라, 이를 1:1v/v NMP/물 (7.3vol)로 재슬러리화시켰다. 슬러리를 65℃로 가열하고, 65-66℃에서 1시간 동안 교반하였다. 슬러리를 0-25℃로 냉각시키고, 3일 동안 에이징시켰다. 고형물을 흡입 하에 수거하였다. 필터 케이크를 1:2v/v NMP/물 (2vol)로 세척한 후, 물 (2 x 4vol)로 세척하고, 진공 하에서 40±5℃에서 건조시켰다.
단계 h) & i): 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸 -4-일]-N-{[(3S)-3- 플루오로 -3-피 페리디 닐] 메틸 }-1,6- 나프티리딘 -5-아민 디하이드로클로라이드의 제조
Figure pct00051
1,1-디메틸에틸 (3R)-3-{[(7-클로로-1,6-나프티리딘-5-일)아미노]메틸}-3-플루오로-1-피페리딘카르복실레이트 (1wt), 1-(1,1-디메틸에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (0.76wt), 중탄산나트륨 (0.64wt) 및 1,1'-비스(디-3차-부틸포스피노)페로센 팔라듐 디클로라이드 (0.00825wt)을 1,4-디옥산 (8vol) 및 물 (2vol) 중에 용해/현탁시켰다. 혼합물을 가열 환류시키고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 20±3℃로 냉각시켜 현탁액을 형성시켰다. 고형물을 진공 하에 여과해 냈다. 여액을 진공 증류를 통해 2vol로 농축시켰다. 톨루엔 (10vol)을 첨가하였다. 용액을 물 (5vol)로 세척한 후, 60-65℃에서 2시간 동안 실리사이클 Si-티올(Silicycle Si-Thiol) 유도체화된 실리카겔(1wt)로 교반하였다. 혼합물을 60-65℃에서 여과하고, 케이크를 톨루엔 (2vol)로 세척하였다. 이후, 유기 여액을 60-63℃로 가열하고, 1,4-디옥산 (2.9vol) 중의 4M 염화수소를 30분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 5시간 동안 60-63℃에서 교반하였다. 형성된 슬러리를 20±3℃로 냉각시키고, 15.5시간 동안 에이징시켰다. 고형물을 흡입 하에 여과해내고, 톨루엔 (2 x 2vol)으로 세척하였다. 생성물을 진공 하에 40±3℃ 내지 일정한 프로브 온도로 건조시켰다.
단계 i): 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸 -4-일]-N-{[(3S)-3- 플루오로 -3- 피페리디닐 ] 메틸 }-1,6- 나프티리딘 -5-아민( 실시예 2)
Figure pct00052
7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 디하이드로클로라이드 (1wt)를 물 (10vol) 중에 용해/현탁시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 5vol)로 세척하였다. 산성 수성상을 32% NaOH (0.6vol)를 사용하여 pH 10으로 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 5vol)로 추출하였다. 추출물을 수중 5% 염화나트륨(5vol)으로 세척하였다. 합한 추출물을 Buchi에서 고형물로 농축시켰다. 잔류물을 n-부틸 아세테이트 (2.8vol) 중에 현탁시키고, 73-78℃로 가열하여 용해를 완료시켰다. 용액을 0.2vol 라인 세척액으로 5μΜ 돔닉 헌터 필터(domnick hunter filter)를 통해 라인 여과하였다. 용액을 45-50℃로 냉각시키고, 표제 화합물(0.001wt)로 시딩하였다. 혼합물을 40 내지 45℃로 냉각시키고, 50분 동안 에이징시켰다. 슬러리를 30분에 걸쳐 40 내지 45℃에서 TBME (3vol)로 희석하고, 1시간 동안 40 내지 45℃에서 에이징시켰다. 슬러리를 20 내지 23℃에서 냉각시키고, 16시간 동안 에이징시켰다. 고형물을 여과하고, 1:1v/v n-부틸 아세테이트/TBME(1vol)로 세척한 후, TBME(2 x 2vol)로 세척하고, 진공 하에 40±5℃ 내지 일정한 프로브 온도에서 건조시켰다.
반응식 7에 대한 공정 설명
단계 a): 2-(2- 에톡시 -2- 옥소에틸 )니코틴산 및 2-(2- 이소프로폭시 -2- 옥소에틸 )니코틴산의 제조
Figure pct00053
반응기에 질소 대기 하에 30±5℃에서 포타슘 3차-부톡사이드(3eq)를 충전한 후, 이소-프로판올 (9vol)을 첨가하였다. 혼합물을 교반하여 용해시켰다. ~30℃로 냉각시킨 후, 에틸 아세토아세테이트 (2eq)를 질소 대기 하에 40℃ 미만에서 서서히 첨가하였다. 1 내지 2시간 동안 교반한 후, 구리 아세테이트 (0.1 eq)를 35±5℃에서 충전한 후, 2-클로로니코틴산(1 eq)을 충전하였다. 이 다음에 이소프로필 알코올(1 vol)로 충전하였다. 반응 혼합물을 질소 대기 하에서 4시간 이상 동안 78±3℃로 가열한 후, 샘플링하였다. 성공적으로 샘플 결과를 얻으면, 반응물을 30±5℃로 냉각시키고, 물로 켄칭한 후, 희석된 HCl로 켄칭하여 pH를 6-7로 조절하였다.
반응 혼합물을 <50 ℃에서 4-5 vol로 진공 증류에 의해 농축시켰다. 10% NaCl 용액을 첨가한 후, 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 추가의 희석된 HCl를 첨가하여 pH를 2.5-3.0로 조절하였다. 이후, 이상 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하였다(2회). 이후, 에틸 아세테이트 및 수성 층을 분리시킨 후, 수성층을 에틸 아세테이트로 역추출하였다(2회). 에틸 아세테이트 상을 물 및 5% NaCl 수용액으로 세척하였다. 유기 상을 <50℃에서 진공 하에 1-2 vol로 증류시켰다. 톨루엔을 첨가하고, 혼합물을 다시 1-2 vol 미만으로 증류시켰다. 이러한 톨루엔 첨가/증류 단계를 반복하였다. 형성된 톨루엔 현탁액을 30±5℃로 냉각시키고, 헥산(10vol)으로 처리하였다. 현탁액을 1-2시간 동안 30±5℃에서 교반한 후 여과하였다. 고형물을 헥산(2vol)으로 세척한 후, 오프로딩하고, 진공(NLT 650 mm Hg) 하에 52.5±2.5℃에서 10시간 동안 건조시켰다.
단계 b) & c): 1,6- 나프티리딘 -5,7(6H,8H)- 디온의 제조
Figure pct00054
테트라하이드로푸란 (9vol)을 반응기에 충전한 후, 출발 물질 에스테르 (1 eq) 및 테트라하이드로푸란 (1 vol)의 헹굼액을 충전하였다. 혼합물을 질소 대기 하에서 -2.5±7.5℃로 냉각시킨 후, 트리에틸아민 (1.35eq)로 처리하고, 이후 에틸 클로로포르메이트 (1.25eq)로 처리하였다. 반응물을 1시간 동안 -2.5±7.5℃에서 교반한 후, 샘플링하였다. 성공적으로 결과를 얻으면, 반응물을 암모니아 수용액으로 처리하고, 교반한 후, 물을 첨가하였다. 희석된 HCl을 <5℃에서 첨가하여 pH를 6.5-7.5로 조절하였다. 혼합물을 진공 하에 <40℃에서 12-14 vol로 증류시키고, 7.5±2.5℃로 냉각시켰다. 현탁액을 ~1시간 동안 7.5±2.5℃에서 교반한 후, 여과하였다. 고형물을 물 (1 vol)로 세척한 후, 오프로딩하고, 진공 (NLT 650 mm Hg) 하에 52.5±2.5℃에서 12.0시간 동안 건조시켰다.
단계 d) & e): 5,7- 디클로로 -1,6- 나프티리딘의 제조
Figure pct00055
포스포러스 옥시클로라이드 (3vol)를 30±5℃에서 반응기에 충전한 후, 1,6-나프티리딘-5,7(6H,8H)-디온(1 eq), 테트라메틸염화 암모늄 (1.05eq) 및 포스포러스 옥시클로라이드의 헹굼액(0.5vol)을 충전하였다. 혼합물을 103.5±3.5℃로 가열하고, 최소 36시간 동안 교반하였다. 이후, 반응물을 60±5℃로 냉각시키고, 샘플링하였다. 성공적으로 샘플을 얻으면, 톨루엔 (4vol)을 첨가하고, 혼합물을 진공(NLT 650 mm Hg) 및 <60℃의 온도 하에 증류에 의해 2-3 vol로 농축시켰다. 추가의 톨루엔 (2vol)을 첨가하고, 혼합물을 다시 진공 하에 2-3 vol로 증류시켰다. 이러한 톨루엔 첨가/증류 사이클을 한번 더 반복한 후, 혼합물을 47.5±2.5℃로 냉각시키고, 테트라하이드로푸란 (8vol) 및 에틸 아세테이트 (8vol)로 처리하였다. 혼합물을 30±5 ℃로 냉각시키고, 5.0±5.0℃로 사전 냉각된 15% 탄산나트륨 수용액(15vol)에 부었다. 추가의 테트라하이드로푸란 (3vol)을 에틸 아세테이트 (3vol)과 함께 첨가하여 초기 반응 용기를 헹구었다. 여전히 5±5℃ 상태에서, 혼합물을 추가의 15% 탄산나트륨 수용액 (5vol)으로 서서히 처리하고, 15-30분 동안 교반하였다. 온도를 22.5±2.5℃로 증가시키고, 15% 탄산나트륨 수용액 또는 희석된 HCl을 첨가함으로써 pH를 7 내지 8로 조절하였다. 에틸 아세테이트 (5vol)를 첨가한 후, 셀라이트를 첨가하였다. 혼합물을 교반한 후, 여과하였다. 셀라이트층을 에틸 아세테이트 (2x2vol)로 세척하였다. 여액을 진공(NLT 650 mm Hg) 하에 <55℃에서 30±5 vol 미만으로 증류시켰다. 물 (2vol)을 첨가하고, 다시 ~30 vol 미만으로 증류시켰다. 이러한 물 첨가/증류 사이클을 테트라하이드로푸란, 톨루엔 및 에틸 아세테이트 함량이 GC(% w/w)에 의해 각각 NMT 3.0%가 될 때까지 반복하였다. 그러한 시점에서, 물 (10vol)을 첨가하고, 혼합물을 42.5±2.5℃로 가열하고, 30-60분 동안 교반하였다. 생성물을 42.5±2.5℃에서 여과에 의해 분리시키고, 물 (2x3vol)로 세척하였다. 케이크를 흡입 건조시킨 후, 오프로딩하고, 별개의 반응기에 충전하였다. 물 (20vol)을 첨가하고, 현탁액을 42.5±2.5℃로 가열하고, 30-60분 동안 42.5±2.5℃에서 교반하였다. 생성물을 여과하고, 물 (2x3vol)로 세척하고 흡입 건조시킨 후, 진공 오븐에 옮기어 추가로 진공 (NLT 650 mm Hg) 하에 52.5± 2.5℃에서 8±2시간 동안 건조시켰다.
반응식 8에 대한 공정 설명
단계 a): 1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸 (중간체 9)의 제조
Figure pct00056
온도를 50℃ 미만으로 유지하면서 에탄올 (24.54kg) 중의 1,1,3,3-테트라메톡시프로판 (3.82kg, 23.27mol) 및 3차-부틸하이드라진 하이드로클로라이드 (2.9kg, 23.27mol)의 혼합물에, 진한 HCl (4.72kg, 46.55mol)을 첨가하였다. 이후, 반응 혼합물을 신속하게 가열 환류시켰다. 약 2시간 후, 반응물을 샘플링하고, NMR에 의해 분석하였다. 합격 기준은 출발 물질이 <3.0%으로 잔류하는 것이다. 합격 결과를 받으면, 용액을 냉각시키고, 물 (8.29kg)로 희석하고, 원래의 에탄올 거의 전부가 제거될 때까지 진공 (T<50℃, p<-0.08MPa) 하에 증발시켰다. 용액을 10M NaOH(aq)로 염기성화시키고, EtOAc (11.11 kgx2)로 추출하고, 유기 상을 포화된 염화 암모늄 용액 (4.3ml/g x 2) 및 염수 (4.3ml/g)로 세척한 후, 증발시켜 표제 화합물(2.08kg, 72% 수율)을 갈색 액체로서 얻었다(GC 순도 99.70%a/a).
단계 b): 4- 브로모 -1-(1,1-디메틸에틸)-1H- 피라졸(중간체 10)의 제조
Figure pct00057
디클로로메탄 (12.9kg) 중의 1-(3차-부틸)피라졸 (1.75kg, 14.09mol)의 빙냉된 용액(0℃ 내지 10℃)에 NBS (2.63kg, 14.79mol)을 나누어 첨가하였다. 용액을 1-(3차-부틸)피라졸의 함량이 <30% (GC)이 될 때까지 0℃에서 교반한 후, RT로 가온시키고, 취해진 샘플이 GC에 의해 <1.0%을 나타낼 때까지 교반하였다. 합격 결과를 받으면, K1-전분이 청색으로 변하지 않을 때까지 10% 소듐 바이설파이트 수용액을 반응 혼합물에 첨가하였다. 이후, 유기 상을 5% NaCl 용액 및 염수로 연속해서 세척한 후, 증발시켜 표제 화합물을 갈색 액체(2.67kg, 93.4% 수율; GC 순도 99.1 %a/a)로서 얻었다.
단계 c): 이소-프로필 피나콜 보레이트의 제조
Figure pct00058
20L 4목 용기에 트리-이소프로필 보레이트(261.0g, 1.388mol) 및 피나콜(142.5g, 1.207mol)을 첨가하고, 12 내지 16시간 동안 ~90℃로 가열하였다. 반응 완료에 대한 기준은 GC에 의해 피나콜이 <4.0%가 되는 것이다. 완료 후, 반응을 증류로 전환시키고, 생성물 분획(174-178℃에서 비등)을 수거하였다. 이에 따라, 표제 생성물을 수행된 6개의 20L 배치에 걸쳐 80-90% 범위의 수율로 무색 오일로서 얻었다. GC는 순도가 87-96%인 것으로 기록되었지만, 1H NMR에 의해서는 생성물이 매우 순수한 것으로 나타났다[GC 조건에 대한 생성물 불안정성으로 인한 차이임]
단계 d): 1-(1-디메틸에틸)-4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)-1H- 피라졸 (중간체 11)의 제조
Figure pct00059
20L 4목 용기에, 4-브로모-(3차-부틸)피라졸 (1.15kg, 5.66mol) 및 THF (9.2L)을 첨가한 후, 혼합물을 -78℃ 내지 -85℃로 냉각시키고, 이 온도에서 nBuLi (6.23mol)를 적가 처리하였다. 첨가 후, 용액을 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하고, 이소프로필 피나콜 보레이트(1.47kg, 7.92mol)를 적가하였다. 반응이 ~3시간 동안 교반한 후(GC에 의해 출발 물질 <1.0%a/a) 완료되었으며, 물 (2.3L)을 첨가하여 반응물을 켄칭시키고, 3.45kg의 1M HCl를 첨가함으로써 pH를 8 내지 9로 조절하였다. 수성 상을 TBME (3.45L x 2)로 추출하고, 합한 유기 상을 5% NaCl (3.45L x 2) 및 물 (3.45L)로 연속해서 세척하였다. 유기 상을 증발시켜 미정제 생성물을 얻었다. 이후 헵탄으로부터의 재결정화 후, 순수한 생성물을 63.5% 전체 수율로 백색 고형물(GC 순도 99.7%a/a)로서 얻었다(두 개의 20L 반응은 수행된 후, 헵탄 결정화시에 합쳐짐).

Claims (42)

  1. 화학식(I)의 화합물 또는 이의 염:
    Figure pct00060

    상기 식에서,
    X는 O 또는 NH이고;
    R1은 C2 -4 알킬, C3 - 7사이클로알킬, 하이드록시C2 -4 알킬, C1 -2 알콕시C1 -4 알킬, 트리플루오로메틸C1-2 알킬 또는 벤질이다.
  2. 제 1항에 있어서, X가 NH인 화합물 또는 이의 염.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, R1이 C2 -4 알킬, C3 - 7사이클로알킬, 또는 C1 -2 알콕시C1-4 알킬인 화합물 또는 이의 염.
  4. 제 1항에 있어서, R1이 에틸, t-부틸, -CH2OCH3, -CH2C(CH3)2OH, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH(CH3)2, -CH2CF3, 벤질 또는 사이클로펜틸인 화합물 또는 이의 염.
  5. 제 4항에 있어서, R1이 t-부틸인 화합물 또는 이의 염.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, S 절대 입체화학을 지니는 화합물 또는 염.
  7. 하기 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 염:
    7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민;
    7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-{1-[(메틸옥시)메틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-아민;
    7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}옥시)-1,6-나프티리딘;
    1-{4-[5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]-1H-피라졸-1-일}-2-메틸-2-프로판올;
    2-{4-[5-({[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]-1H-피라졸-1-일}에탄올;
    N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-{1-[2-(메틸옥시)에틸]-1H-피라졸-4-일}-1,6-나프티리딘-5-아민;
    7-(1-사이클로펜틸-1H-피라졸-4-일)-N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-{[(3R)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-[(3-플루오로-3-피페리디닐)메틸]-7-[1-(페닐메틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-{[3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(1-메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민;
    N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(1-메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민; 및
    N-{[(3R)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-7-[1-(1-메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-1,6-나프티리딘-5-아민; 및 이들의 염.
  8. 하기 군으로부터 선택된 화합물 또는 이의 염:
    7-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민; 및
    7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민; 및 이의 염.
  9. 하기 화학식의 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민인 화합물 또는 이의 염:
    Figure pct00061
  10. 하기 화학식의 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민인 화합물 또는 이의 염:
    Figure pct00062
  11. 제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서, 염이 약제학적으로 허용되는 염인 화합물 또는 이의 염.
  12. 제 11항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 염이 염산염인 화합물 또는 이의 염.
  13. 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제 조성물.
  14. 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제 조성물.
  15. 치료에 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  16. 비장 티로신 키나아제(Syk)를 억제하는데 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  17. 자가면역 병태의 치료에 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  18. 제 17항에 있어서, 자가면역 병태가 전신홍반루푸스(SLE), 원반형 (피부) 루푸스, 쇼그렌증후군, 베게너 육아종증 및 그 밖의 혈관병증, 수포성 유사천포창 및 천포창, 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP), 거대세포 동맥염, 사구체 신염, 만성 이식거부 반응 및 류머티스 관절염으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  19. 제 18항에 있어서, 가자면역 병태가 류머티스 관절염인 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  20. 류머티스 관절염의 치료에 사용하기 위한 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물.
  21. 만성 자연적 두드러기(chronic spontaneous urticaria)의 치료에 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  22. 만성 자연적 두드러기의 치료에 사용하기 위한 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 화합물.
  23. 암의 치료에 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  24. 제 23항에 있어서, 암이 헴 악성종양(heme malignancies), 특히, 소포(FL), 외투세포(mantle cell), 소림프구 림프종/만성 림프구 림프종(SLL/CLL), 버킷(Burkitt) 및 미만성 큰 B세포(diffuse large B cell: DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  25. 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환의 치료에 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  26. 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환의 치료에 사용하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  27. 제 26항에 있어서, 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환이 만성폐쇄폐질환(COPD), 성인호흡곤란증후군(ARDS), 천식, 중증 천식, 궤양성 대장염, 크론 질환, 기관지염, 결막염, 건선, 피부 경화증, 피부염, 알레르기, 비염, 피부 루푸스, 천포창 및 유사천포창을 포함한 자가면역 수포성 병태, 비만세포증 및 아나필락시스로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  28. 자가면역 병태의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도.
  29. 암의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도.
  30. 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환의 치료를 위한 약물을 제조하기 위한 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 용도.
  31. 비장 티로신 키나아제(Syk)의 억제를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 비장 티로신 키나아제(Syk)를 억제하는 방법.
  32. 자가면역 병태의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 자가면역 병태를 치료하는 방법.
  33. 제 32항에 있어서, 자가면역 병태가 전신홍반루푸스(SLE), 원반형 (피부) 루푸스, 쇼그렌증후군, 베게너 육아종증 및 그 밖의 혈관병증, 수포성 유사천포창 및 천포창, 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP), 거대세포 동맥염, 사구체 신염, 만성 이식거부 반응 및 류머티스 관절염으로부터 선택되는 방법.
  34. 제 33항에 있어서, 자가면역 병태가 류머티스 관절염인 방법.
  35. 류머티스 관절염의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 류머티스 관절염을 치료하는 방법.
  36. 만성 자연적 두드러기의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 만성 자연적 두드러기를 치료하는 방법.
  37. 만성 자연적 두드러기의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 7-[1-(1,1-디메틸에틸)-1H-피라졸-4-일]-N-{[(3S)-3-플루오로-3-피페리디닐]메틸}-1,6-나프티리딘-5-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 만성 자연적 두드러기를 치료하는 방법.
  38. 암의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 암을 치료하는 방법.
  39. 제 38항에 있어서, 암이 헴 악성종양, 특히, 소포(FL), 외투세포, 소림프구 림프종/만성 림프구 림프종(SLL/CLL), 버킷 및 미만성 큰 B세포(DLBCL) 림프종을 포함한 비-호지킨 림프종으로부터 선택되는 방법
  40. 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 부적절한 비만 및/또는 호중구 세포 활성화와 연관된 질환을 치료하는 방법.
  41. 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환의 치료를 필요로 하는 대상자에게 치료 유효량의 제 11항 또는 제 12항에 정의된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여함을 포함하여 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환을 치료하는 방법.
  42. 제 41항에 있어서, 염증성 질환 및/또는 알레르기성 질환이 만성폐쇄폐질환(COPD), 성인호흡곤란증후군(ARDS), 천식, 중증 천식, 궤양성 대장염, 크론 질환, 기관지염, 결막염, 건선, 피부 경화증, 피부염, 알레르기, 비염, 피부 루푸스, 천포창 및 유사천포창을 포함한 자가면역 수포성 병태, 비만세포증 및 아나필락시스로부터 선택되는 방법.
KR1020127031384A 2010-04-29 2011-04-27 Ｓｙｋ 억제제로서 7-(1h-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘 화합물 Withdrawn KR20130069653A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB1007203.1 2010-04-29
GBGB1007203.1A GB201007203D0 (en) 2010-04-29 2010-04-29 Novel compounds
PCT/EP2011/056600 WO2011134971A1 (en) 2010-04-29 2011-04-27 7-(1h-pyrazol-4-yl)-1,6-naphthyridine compounds as syk inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20130069653A true KR20130069653A (ko) 2013-06-26

Family

ID=42289852

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020127031384A Withdrawn KR20130069653A (ko) 2010-04-29 2011-04-27 Ｓｙｋ 억제제로서 7-(1h-피라졸-4-일)-1,6-나프티리딘 화합물

Country Status (17)

Country Link
US (1) US8633319B2 (ko)
EP (1) EP2563789B1 (ko)
JP (1) JP2013525405A (ko)
KR (1) KR20130069653A (ko)
CN (1) CN102947306A (ko)
AR (1) AR081138A1 (ko)
BR (1) BR112012027198A2 (ko)
CA (1) CA2796954A1 (ko)
EA (1) EA201290910A1 (ko)
ES (1) ES2543426T3 (ko)
GB (1) GB201007203D0 (ko)
MX (1) MX2012012614A (ko)
SG (1) SG184513A1 (ko)
TW (1) TW201206925A (ko)
UY (1) UY33359A (ko)
WO (1) WO2011134971A1 (ko)
ZA (1) ZA201207859B (ko)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3489236B1 (en) 2009-12-23 2020-09-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Process for the preparation of fused heteroaromatic pyrrolidinones
WO2012167423A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 Hutchison Medipharma Limited Substituted pyridopyrazines as novel syk inhibitors
WO2012177714A1 (en) 2011-06-22 2012-12-27 Takeda Pharmaceutical Company Limited Substituted 6-aza-isoindolin-1-one derivatives
AU2013337717B2 (en) 2012-11-01 2018-10-25 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cancers using PI3 kinase isoform modulators
WO2014081616A1 (en) * 2012-11-21 2014-05-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Preparation of precursors for leukotriene antagonists
NZ629037A (en) 2013-03-15 2017-04-28 Infinity Pharmaceuticals Inc Salts and solid forms of isoquinolinones and composition comprising and methods of using the same
DK3003309T3 (da) 2013-05-30 2020-12-14 Infinity Pharmaceuticals Inc Behandling af cancer med PI3-kinase-isoform modulatorer
CN105555780B (zh) 2013-07-31 2018-01-23 吉利德科学公司 Syk抑制剂
WO2015051241A1 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
EP3052485B1 (en) 2013-10-04 2021-07-28 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
EA030962B1 (ru) 2013-10-21 2018-10-31 Джиноско Замещенные пиримидиновые соединения и их применение в качестве syk ингибиторов
US20160244452A1 (en) 2013-10-21 2016-08-25 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
EA201691872A1 (ru) 2014-03-19 2017-04-28 Инфинити Фармасьютикалз, Инк. Гетероциклические соединения для применения в лечении pi3k-гамма-опосредованных расстройств
WO2015160986A2 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
WO2016054491A1 (en) 2014-10-03 2016-04-07 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
DK3303348T3 (da) 2015-05-28 2019-11-11 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Naphthyridinforbindelser som JAK-kinaseinhibitorer
WO2017214269A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
CN109640999A (zh) 2016-06-24 2019-04-16 无限药品股份有限公司 组合疗法
IL282535B2 (en) 2018-10-31 2024-05-01 Gilead Sciences Inc Transformed 6-azabanzimidazole compounds as HPK1 inhibitors
US11071730B2 (en) 2018-10-31 2021-07-27 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds
WO2020142748A1 (en) 2019-01-03 2020-07-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods and materials for increasing transcription factor eb polypeptide levels
CA3129665A1 (en) 2019-03-21 2020-09-24 Onxeo A dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
EP3972695A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
JP2023500906A (ja) 2019-11-08 2023-01-11 インサーム（インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシェ メディカル） キナーゼ阻害剤に対する獲得抵抗性を有するがんの処置方法
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
CN115003798A (zh) * 2020-06-17 2022-09-02 兰迪·莱曼·阿伦 用于检测分析物的方法和试剂盒
AR122928A1 (es) * 2020-07-10 2022-10-19 Goldfinch Bio Inc 1,6-naftiridinas sustituidas inhibidoras de cdk5
WO2023102800A1 (en) * 2021-12-09 2023-06-15 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Synthesis of 5, 7-dichloro-1, 6-naphthyridine
CN119325474A (zh) * 2022-04-07 2025-01-17 尤尼奎斯特公司 脾酪氨酸激酶抑制剂

Family Cites Families (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1201114A (en) 1980-02-15 1986-02-25 Gordon H. Phillipps Androstane carbothioates
AU570439B2 (en) 1983-03-28 1988-03-17 Compression Labs, Inc. A combined intraframe and interframe transform coding system
GB9004781D0 (en) 1990-03-02 1990-04-25 Glaxo Group Ltd Device
GB9127376D0 (en) 1991-12-24 1992-02-19 Wellcome Found Amidino derivatives
MX9301943A (es) 1992-04-02 1994-08-31 Smithkline Beecham Corp Compuestos.
ATE229001T1 (de) 1994-06-15 2002-12-15 Wellcome Found Zwischenprodukte verwendbar in der herstellung von enzym-inhibitoren
MY117948A (en) 1997-01-13 2004-08-30 Glaxo Group Ltd Nitride oxide synthase inhibitors.
DE19723722A1 (de) 1997-05-30 1998-12-10 Schering Ag Nichtsteroidale Gestagene
AU9281298A (en) 1997-10-01 1999-04-23 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Benzodioxole derivatives
ES2165711T3 (es) 1997-12-17 2002-03-16 Univ Carnegie Mellon Colorantes de trimetina cianina rigidificada.
US6506766B1 (en) 1998-02-13 2003-01-14 Abbott Laboratories Glucocortiocoid-selective antinflammatory agents
SI1070056T1 (en) 1998-03-14 2004-12-31 Altana Pharma Ag Phthalazinone pde iii/iv inhibitors
GB9811599D0 (en) 1998-05-30 1998-07-29 Glaxo Group Ltd Nitric oxide synthase inhibitors
EP1175422A2 (en) 1999-05-04 2002-01-30 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Tetracyclic progesterone receptor modulator compounds and methods
ES2165768B1 (es) 1999-07-14 2003-04-01 Almirall Prodesfarma Sa Nuevos derivados de quinuclidina y composiciones farmaceuticas que los contienen.
CO5180649A1 (es) 1999-09-01 2002-07-30 Abbott Lab Antagonistas de los receptores de los glucocorticoides para el tratamiento de la diabetes para el tratamiento de la diabetes
OA11558A (en) 1999-12-08 2004-06-03 Advanced Medicine Inc Beta 2-adrenergic receptor agonists.
EP1305330B1 (en) 2000-08-05 2008-12-03 Glaxo Group Limited 17.beta.-carbothioate 17.alpha.-arylcarbonyloxyloxy androstane derivatives as anti-inflammatory agents
HUP0302302A2 (hu) 2000-09-29 2003-12-29 Glaxo Group Limited Morfolin-acetamid-származékok gyulladásos betegségek kezelésére, eljárás az előállításukra és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
WO2002026712A2 (en) 2000-09-29 2002-04-04 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Quaternary amines and related inhibitors of factor xa
GB0031179D0 (en) 2000-12-21 2001-01-31 Glaxo Group Ltd Nitric oxide synthase inhibitors
US6484903B2 (en) 2001-01-09 2002-11-26 Riverwood International Corporation Carton with an improved dispensing feature in combination with a unique handle
GB0103630D0 (en) 2001-02-14 2001-03-28 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
DE60220887T2 (de) 2001-03-08 2008-02-28 Glaxo Group Ltd., Greenford Agonisten von beta-adrenorezeptoren
JP4143413B2 (ja) 2001-03-22 2008-09-03 グラクソ グループ リミテッド β２−アドレナリン受容体アゴニストとしてのホルムアニリド誘導体
IL158222A0 (en) 2001-04-30 2004-05-12 Glaxo Group Ltd Anti-inflammatory 17. beta-carbothioate ester derivatives of androstane with a cyclic ester group in position 17. alpha
DE60227254D1 (de) 2001-06-12 2008-08-07 Glaxo Group Ltd Neue anti inflammatorische 17.alpha.-heterozyklische ester von 17.beta.-carbothioat androstan derivativen
PT1425001E (pt) 2001-09-14 2009-02-18 Glaxo Group Ltd Derivados de fenetanolamina para o tratamento de doenças respiratórias
WO2003042160A1 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Theravance, Inc. Aryl aniline beta-2 adrenergic receptor agonists
US20030158195A1 (en) * 2001-12-21 2003-08-21 Cywin Charles L. 1,6 naphthyridines useful as inhibitors of SYK kinase
JP2005519897A (ja) 2002-01-14 2005-07-07 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド グルココルチコイドミメチックス、その製造方法、それを含む医薬製剤及びその使用
WO2003061651A1 (en) 2002-01-22 2003-07-31 The Regents Of The University Of California Non-steroidal ligands for the glucocorticoid receptor, compositions and uses thereof
GB0204719D0 (en) 2002-02-28 2002-04-17 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
DK1490062T3 (da) 2002-03-26 2008-04-28 Boehringer Ingelheim Pharma Glukokortikoidmimetika, fremgangsmåder til fremstilling deraf, farmaceutiske sammensætninger og anvendelser deraf
AU2003230700A1 (en) 2002-03-26 2003-10-13 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
DE10215316C1 (de) 2002-04-02 2003-12-18 Schering Ag Chinolin- und Isochinolin-Derivate, ein pharmazeutisches Mittel und ihre Verwendung als Entzündungshemmer
JP4570878B2 (ja) 2002-04-11 2010-10-27 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 選択的糖質コルチコイド受容体モジュレーターとしての１Ｈ−ベンゾ［ｆ］インダゾール−５−イル誘導体
ATE381535T1 (de) 2002-04-25 2008-01-15 Glaxo Group Ltd Phenethanolaminderivate
US7186864B2 (en) 2002-05-29 2007-03-06 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
US7074806B2 (en) 2002-06-06 2006-07-11 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
ES2518940T3 (es) 2002-07-08 2014-11-06 Pfizer Products Inc. Moduladores del receptor de glucocorticoides
US6995181B2 (en) 2002-07-18 2006-02-07 Bristol-Myers Squibb Co. Modulators of the glucocorticoid receptor and method
GB0217225D0 (en) 2002-07-25 2002-09-04 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
JP2006504678A (ja) 2002-08-21 2006-02-09 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド グルココルチコイドミメチックス、その製造方法、その医薬組成物、及び使用
GB0220730D0 (en) 2002-09-06 2002-10-16 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
GB0230045D0 (en) 2002-12-23 2003-01-29 Glaxo Group Ltd Compounds
DK1539753T3 (da) 2002-09-16 2010-01-04 Glaxo Group Ltd Pyrazolo(3,4B9pyridin-forbindelser og deres anvendelse som phosphodiesterase-inhibitorer
AU2003270783C1 (en) 2002-09-20 2010-05-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Octahydro-2-H-naphtho[1,2-F] indole-4-carboxamide derivatives as selective glucocorticoid receptor modulators
GB0224084D0 (en) 2002-10-16 2002-11-27 Glaxo Group Ltd Novel compounds
EP1558753A2 (en) 2002-10-16 2005-08-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Spleen tyrosine kinase catalytic domain: crystal structure and binding pockets thereof
DE60315492T2 (de) 2002-10-22 2008-04-24 Glaxo Group Ltd., Greenford Medizinisch verwendbare arylethanolamin verbindungen
ES2302956T3 (es) 2002-10-28 2008-08-01 Glaxo Group Limited Derivado de fenetanolamina para el tratamiento de enfermedades respiratorias.
GB0225030D0 (en) 2002-10-28 2002-12-04 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
GB0225535D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
GB0225540D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
TWI328009B (en) 2003-05-21 2010-08-01 Glaxo Group Ltd Quinoline derivatives as phosphodiesterase inhibitors
GB0316290D0 (en) 2003-07-11 2003-08-13 Glaxo Group Ltd Novel compounds
PL1699512T3 (pl) 2003-11-03 2012-11-30 Glaxo Group Ltd Urządzenie do dozowania płynów
WO2006000398A1 (en) 2004-06-28 2006-01-05 Glaxo Group Limited 2,3-benzoxazin derivatives as non-steroidal glucocorticoid receptor modulators
WO2006000401A1 (en) 2004-06-28 2006-01-05 Glaxo Group Limited Substituted oxazines as glucocorticoid receptor modulators
GB0418045D0 (en) 2004-08-12 2004-09-15 Glaxo Group Ltd Compounds
WO2006038594A1 (ja) 2004-10-04 2006-04-13 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Ｎ型カルシウムチャネル阻害薬
RU2391338C2 (ru) 2004-10-19 2010-06-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Производные хинолина
US20090124588A1 (en) 2005-01-10 2009-05-14 Glaxo Group Limited Androstane 17-Alpha-Carbonate for Use in the Treatment of Inflammatory and Allergic Conditions
ATE517908T1 (de) 2005-01-10 2011-08-15 Glaxo Group Ltd Androstan-17-alpha-carbonat-derivate zur verwendung bei der behandlung allergischer und entzündlicher zustände
JP2008535884A (ja) 2005-04-14 2008-09-04 グラクソ グループ リミテッド グルココルチコイド受容体リガンドとしてのインダゾール
GB0513297D0 (en) 2005-06-29 2005-08-03 Glaxo Group Ltd Novel compounds
GB0522880D0 (en) 2005-11-09 2005-12-21 Glaxo Group Ltd Novel compounds
JP5656634B2 (ja) 2007-08-29 2015-01-21 メチルジーン インコーポレイテッド タンパク質チロシンキナーゼ活性の阻害剤
TW200938542A (en) * 2008-02-01 2009-09-16 Irm Llc Compounds and compositions as kinase inhibitors
WO2010015518A2 (de) * 2008-08-05 2010-02-11 Boehringer Ingelheim Interntional Gmbh 4-dimethylamino-phenyl-substituierte naphthyridine und ihre verwendung als arzneimittel
US20110201608A1 (en) 2008-08-05 2011-08-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh Substituted naphthyridines and use thereof as medicines
WO2010048149A2 (en) 2008-10-20 2010-04-29 Kalypsys, Inc. Heterocyclic modulators of gpr119 for treatment of disease
WO2010070076A1 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Crystax Pharmaceuticals, S.L. Alkanoic acid derivatives and their therapeutic use as hdac inhibitors
BRPI1006162A2 (pt) 2009-01-13 2019-09-24 Glaxo Group Ltd "composto,processo para preparar um composto,formulação farmacêutica,e uso de um composto".
US9278922B2 (en) 2009-04-15 2016-03-08 Abbvie Inc. Anti-viral compounds

Also Published As

Publication number Publication date
CN102947306A (zh) 2013-02-27
JP2013525405A (ja) 2013-06-20
BR112012027198A2 (pt) 2016-07-19
EP2563789B1 (en) 2015-05-20
SG184513A1 (en) 2012-11-29
EP2563789A1 (en) 2013-03-06
UY33359A (es) 2011-12-01
MX2012012614A (es) 2012-12-17
ZA201207859B (en) 2014-03-26
CA2796954A1 (en) 2011-11-03
US20130040984A1 (en) 2013-02-14
ES2543426T3 (es) 2015-08-19
WO2011134971A1 (en) 2011-11-03
GB201007203D0 (en) 2010-06-16
TW201206925A (en) 2012-02-16
US8633319B2 (en) 2014-01-21
EA201290910A1 (ru) 2013-05-30
AR081138A1 (es) 2012-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2563789B1 (en) 7-(1h-pyrazol-4-yl)-1,6-naphthyridine compounds as syk inhibitors
EP2683716A1 (en) Pyrido[3,4-b]pyrazine derivatives as syk inhibitors
KR101564007B1 (ko) 비장 티로신 키나아제（ｓｙｋ）의 억제제로서 유용한 피리디닐­ 및 피라지닐­메틸옥시­아릴 유도체
AU2012228439B9 (en) Pyridinyl- and pyrazinyl -methyloxy - aryl derivatives useful as inhibitors of spleen tyrosine kinase (SYK)
CN108884046A (zh) 作为激酶活性的抑制剂的化学化合物
AU2011247651A1 (en) 7-(1H-pyrazol-4-yl)-1,6-naphthyridine compounds as Syk inhibitors
NZ614199B2 (en) Pyridinyl- and pyrazinyl -methyloxy - aryl derivatives useful as inhibitors of spleen tyrosine kinase (syk)

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20121129

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
PC1203 Withdrawal of no request for examination
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid