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KR19990022354A - 약물 전달용 역 플루오로카본 유제 조성물 - Google Patents

약물 전달용 역 플루오로카본 유제 조성물 Download PDF

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KR19990022354A
KR19990022354A KR1019970708834A KR19970708834A KR19990022354A KR 19990022354 A KR19990022354 A KR 19990022354A KR 1019970708834 A KR1019970708834 A KR 1019970708834A KR 19970708834 A KR19970708834 A KR 19970708834A KR 19990022354 A KR19990022354 A KR 19990022354A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
emulsion
fluorocarbon
formulation
polar liquid
group
Prior art date
Application number
KR1019970708834A
Other languages
English (en)
Inventor
토마스 이. 타라라
제프리 지. 위어스
레오 에이. 트레비노
알렉세이 카발노프
루이스 에이. 델라마리
지나 엠. 호퍼
헬렌 엠. 란니
데이비드 에이치. 클라인
티모시 제이. 펠루라
Original Assignee
펠루라, 티모시, 제이
테오도르 디. 로쓰
얼라이언스 파마슈티칼 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 펠루라, 티모시, 제이, 테오도르 디. 로쓰, 얼라이언스 파마슈티칼 코포레이션 filed Critical 펠루라, 티모시, 제이
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Abstract

본 발명은 치료제 또는 진단제의 전달에 사용하기 위한 퍼플루오르 화학 시약 중 극성 액체 유제 또는 미세유제에 관한 것이다. 이 조성물은 불연속 수성상, 연속 플루오로카본상 및 비플루오르화 계면활성제를 배합함으로써 형성된다. 또한, 플루오르 화학 시약 중 극성 액체 유제는 수성 연속상을 갖는 복합 유제를 형성하는데 사용될 수 있다. 그러한 유제 및 미세유제는 유전자 물질을 포함한 약제를 투여하는데 적합하다.

Description

약물 전달용 역 플루오로카본 유제 조성물
플루오로카본, 불소 치환된 탄화수소 및 퍼플루오로카본, 모든 수소 원자들이 불소로 대체된 플루오로카본은 의학 분야에서 치료제 및 진단제로서 폭넓게 이용되어 왔다. 이러한 액체는 투명하고, 무색이고, 무취이고, 불연성이며 거의 수불용성이다. 또한, 플루오로카본 액체는 물 및 연질 조직 보다 더 밀도가 높으며, 낮은 표면 장력을 가지며, 대개의 경우 낮은 점도를 갖는다.
플루오로카본은 생물학적 적합성, 비교적 낮은 반응성 및 고 산소 수반능을 포함한 바람직한 특성을 갖는다. 브롬화 플루오로카본은 임의 형태의 방사선에 대해 방사선 불투과성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 예를 들면, 롱(Long)에게 허여된 미국 특허 제3,975,512호는 방사선 의학 영상화에서 콘트라스트 증강 매질로서 브롬화 퍼플루오로카본을 비롯한 플루오로카본을 사용한다. 시판되는 플루오로카본 유제 플루오졸(FLUOSOL)(등록상표)(Green Cross Corp., Osaka, Japan)은 경피 루멘 통과 관상동맥 혈관 형성술 중에 산소 운반체로서 사용되어 왔다. 플루오로카본 유제는 또한 핵 자기 공명 및 초음파를 포함한 진단 영상화 용도에서 사용되어 왔다(미국 특허 제5,114,703호). 순수한 퍼플루오로카본은 또한 의학 분야에서도 사용되었다. 순수한 퍼플루오로옥틸 브로마이드(PFOB)로 이루어진 FDA 승인된 진단제인 이미전트(Imagent)(등록상표) GI는 위장 경로를 조영하는데 사용된다. 퍼플루오로카본은 또한 거대 망막 파열을 치료하기 위한 안과 분야에서 이용되며(Aguilar et al., Retina, 15: 3-13), 액체 환기 중에 이용되는 것으로 평가되고 있다.
상기한 플루오로카본의 치료학적 이용은 다른 약제 또는 진단제와 병용된다면 더 큰 잇점을 가질 것이다. 예를 들면, 폐 질환의 일반적인 치료에서 폐의 질병 부분의 불량한 혈행은 약물 전달의 효능을 감소시킨다. 그러나, 폐포 표면을 통한 생물학적 제제의 폐 전달은 액체 환기와 함께 이루어질 때 용이해질 수 있다(Wolfson et al., FASEB J., 4:A1105, 1990 참조). 폐의 약물 투여는 정맥내 투여와비교할 때 일부 약물의 생물학적 반응을 증가시킬 수 있는 것으로 밝혀졌다(Shaffer et al., Art. Cells, Blood Sub. Immob. Biotech., 22:315, 1994 참조).
폐의 약물 투여는 또한 호흡 곤란 증후군(RDS), 손상된 폐 순환, 낭포성 섬유증 및 폐암을 포함한 질환의 치료 및(또는) 진단에 이용된다. 액체 환기를 통한 폐의 약물 전달의 효능 증가는 폐 표면 상의 퍼플루오로카본의 높은 전착 계수, 더욱 효과적인 폐 팽창으로 인한 폐포 표면적의 증가 및 퍼플루오로카본에 의한 산소의 전달에 기인할 수 있다.
퍼플루오로카본 매개된 약물 전달과 관련된 주요 문제점은 약물이 종종 플루오로카본상에 불용성이라는 것이다. 폐의 통상적인 약물 투여법은 약물의 조 분산액의 제조 및 난류 및 분무에 의한 전달을 포함한다. 불행하게도, 모든 약물이 이 방법으로 전달될 수는 없다.
퍼플루오로카본 중 물 역 유제는 퍼플루오르화된 계면활성제를 이용하여 이미 제조되어 왔다. 이러한 역 유제를 비플루오르화된 생물학적 적합성 계면활성제(즉, 인지질)를 이용하여 안정화시키는 능력은 잇점을 제공할 것이다.
따라서, 플루오로카본 결합된 극성 액체 가용성 치료제 및 진단제를 효율적이고 신뢰성 있는 방법으로 전달할 수 있는 조성물 및 방법에 대한 기술을 필요로 하여 왔다. 본 발명은 이러한 요구에 대해 생물학적 적합성 인지질 또는 수소화 계면활성제에 의해 안정화된 플루오로카본 중 극성 액체 유제, 복합 유제 및 미세유제를 제공하는 것에 중점을 두었다.
발명의 요약
본 발명은 극성 액체 가용성 약제의 전달을 위한 플루오로카본 연속상 중의 안정한 역 (플루오로카본 중 극성 액체) 유제 및 열역학적으로 안정한 역 미세유제를 제공한다. 이러한 유제는 플루오로카본 중의 불균질 조 약물 분산액과 관련된 많은 단점을 극복한다. 또한, 본 발명은 안정한 복합(극성 액체 중 플루오로카본 중 극성 액체) 유제를 제공한다.
따라서, 넓은 면에서 본 발명은
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 분산 액체상;
1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및
유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하는 플루오로카본 약제로 이루어진다.
본 발명의 다른 면은 열역학적으로 안정한 제제에 관한 것이다.
본 발명의 또다른 면은
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 액체상을 제공하고;
상기 액체상을 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제 및 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 플루오로카본상과 배합하여 유제 제제를 제공하고;
상기 유제 제제를 유화시켜 치료 또는 진단 제제를 제공하는 것으로 이루어진 치료 또는 진단 제제의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 또다른 면은
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 분산 액체상; 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하는 제약 유제를 제공하고;
상기 제약 유제를 환자에게 투여하는 것으로 이루어진, 치료제 또는 진단제를 환자에게 전달하는 방법에 관한 것이다.
다른 실시태양에서, 상기한 역 유제는 물 중 플루오로카본 중 물 복합 유제를 형성하는데 사용될 수 있다. 상세하게는, 역 유제는 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하는 수용액 중에 분산된다. 비플루오르화 계면활성제는 역 유제를 초기에 형성하는데 사용된 것과 동일하거나 또는 상이할 수 있다.
복합 유제의 제조 방법은 다음 단계로 이루어진다:
a) 1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 액체상을 제공하는 단계;
b) 상기 액체상을 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제 및 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 플루오로카본상과 배합하여 유제 제제를 제공하는 단계;
c) 상기 유제 제제를 유화시켜 치료 또는 진단 역 유제를 제공하는 단계;
d) 상기 치료 또는 진단 역 유제를, 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하며 상기 극성 액체와 동일하거나 또는 상이한 제2 극성 액체에 첨가하여 복합 제제를 제공하는 단계; 및
e) 상기 복합 제제를 유화시켜 복합 유제를 제공하는 단계.
그러한 복합 유제에서, 외부 수성상은 연속적인 반면 역 유제는 불연속적이다. 복합 유제는 무기염, 용제, 분산제, 완충제, 발암성 제제, 삼투성 제제, 영양 제제, 친수성 약제 및 친지성 약제를 더 함유할 수 있다. 이들 첨가제는 내부 또는 외부 수성상, 퍼플루오로카본상 내에 또는 계면에 있을 수 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 약제는 환자를 치료할 때 치료 또는 진단 유용성을 제공하는 제제이다.
본 발명의 또다른 면은
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 분산 액체상; 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 갖는 역 유제를 제공하고;
상기 역 유제를 비친지성 플루오로카본과 배합하여 분산액을 형성하는 것으로 이루어지는 제약 분산액의 제조 방법에 관한 것이다.
마지막으로, 넓은 면에서 본 발명은 플루오르 화학 시약 유제를 함유하는 제제에 관한 것이다.
그러한 제제는
1종 이상의 극성 액체로 이루어진 분산 액체상;
1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및
유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유한다.
상기 바람직한 실시태양에서, 분산 액체상은 물, 알코올, 알킬 술폭시드, 폴리에틸렌 글리콜 또는 그의 혼합물로 이루어진다. 특히 바람직한 실시태양에서, 알코올은 에탄올과 같은 단쇄 알코올이며 알킬 술폭시드는 디메틸술폭시드이다.
바람직하게는, 친지성 플루오로카본은 할로겐화 플루오로카본, 할로겐화 퍼플루오로에테르/폴리에테르, 플루오로카본-탄화수소 디블록, 플루오로카본-탄화수소 에테르 디블록 또는 그의 혼합물이다. 유리하게는, 할로겐화 퍼플루오로카본은 α,ω-디브로모-F-부탄이다.
또한, 플루오로카본상은 플루오로카본상의 친지성을 증가시킬 수 있는 1종 이상의 첨가제를 더 함유할 수 있다. 이러한 첨가제는 바람직하게는 비 표면 활성 오일, 예를 들면 중쇄 트리글리세리드, 장쇄 트리글리세리드, 실란, 실리콘 오일, 탄화수소, 프레온, 알칸, 스쿠알렌, 플루오로카본-탄화수소 디블록 및 친지성 단쇄 플루오로카본이다. 다른 표면 활성 오일은 계면활성제 단일층의 자발 만곡을 감소시키기 위해 첨가될 수 있다. 이것의 예로는 콜레스테롤, 모노글리세리드, 디글리세리드, 장쇄 알코올 및 스테롤을 들 수가 있다. 바람직하게는, 플루오로카본은 브롬화, 염소화 또는 요오드화 플루오로카본이다.
다른 바람직한 실시태양에 따라서, 치료 또는 진단제는 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 화학요법제, 항종양약, 마취제, 안약, 심장혈관 제제, 조영제, 효소, 핵산, 유전자 단백질 또는 바이러스성 벡터이다.
바람직한 실시태양에서, 비플루오르화 계면활성제는 알코올, 지방산염, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딘산, 포스파티딜 에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 난황 인지질, 카르디오리핀, 글리세르글리코리피드, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤 및 아미노에틸포스포노리피드로 이루어진 군에서 선택된다. 바람직하게는, 비플루오르화 계면활성제는 1종 이상의 단불포화 잔기를 함유한다. 특히 바람직한 실시태양에서, 비플루오르화 계면활성제는 1,2-디올레오일포스파틴산 또는 1,2-디올레오일포스파티딜 에탄올아민이다.
유리하게는, 비플루오르화 계면활성제는 낮은 친수성 친지성 발란스를 가질 수 있다. 그러한 계면활성제로는 스팬스(SPANS)(등록상표), 브리즈(BRIJs)(등록상표), 구에르베트 알코올 에톡실레이트, 디알킬 비이온성 계면활성제 및 디알킬 양쪽 이온성 계면활성제를 들 수가 있다. 유제는 계면활성제막의 자발 만곡을 감소시킬 수 있는 표면 활성 오일을 더 함유할 수 있다. 바람직하게는, 표면 활성 오일은 모노글리세리드, 디글리세리드, 장쇄 알코올 또는 스테롤이다.
본 발명의 다른 실시태양은 환자에게 유제를 투여하는 것이다. 당업계의 숙련인은 본 발명의 유제가 전달 장치를 이용하여 환자에게 투여될 수 있다는 것임을 이해할 것이다. 바람직하게는, 전달 장치는 기관(氣管)내 튜브, 폐내 카테테르 및 분무기로 이루어진 군에서 선택된다. 또한, 본 발명은 부분 액체 환기 및 분무 주입법을 이용하여 폐 전달하는데 특히 적합하다는 것을 이해할 것이다.
다른 실시태양에서, 본 발명은 약제를 전달하는데 사용될 수 있다. 바람직하게는, 혼입된 치료제 또는 진단제는 아목시실린, 니트로푸란, 테트라사이클린, 아미노글리코시드, 마크로리드 또는 클라리트로마이신과 같은 항생 물질이다. 선택된 실시태양에서, 감염원체는 헬리오박터 피롤리(Heliobacter pylori) 또는 마이코박테리움 튜베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis)이다.
본 발명은 치료제 및 진단제 전달용 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 퍼플루오르 화학 시약 중 극성 액체 유제, 복합 유제 및 미세유제에 관한 것이다.
도 1은 1.0% w/v 달걀 포스파티딜에탄올아민, 90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄, 0.09% 염화 나트륨, 0.09% 염화 칼슘 및 10% 물을 함유하는 역 유제의 광자 상관 분광학(PCS)에 의해 얻어지는 입도 분포이다. 유제 입도는 x-축 위에 나타나 있으며 상대 체적은 y-축 위에 나타나 있다.
도 2는 역 유제 안정성에 대한 연속 상 굴절률(nD)의 효과를 나타낸다. α,ω-디브로모-F-부탄(DBFB), 트리클로로트리플루오로에탄(CFC-113), n-헥산, 퍼플루오로헥산(PFH) 및 그의 혼합물을 함유하는 역 유제를 분석하였다. 체적 분율은 x-축 위에 나타나 있으며 nD는 y-축 위에 나타나 있다.
도 3은 역 유제 안정성에 대한 연속 상 몰 부피(VM)의 효과를 나타낸다. 역 유제에 사용된 연속상의 오일은 x-축 위에 나타나 있으며 VM은 y-축 위에 나타나 있다.
도 4는 0.051% 젠타마이신 설페이트의 부재(△) 및 존재(◆)하에 1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민, 0.21% w/v 디올레인, 90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄, 0.09% 염화 나트륨, 0.09% 염화 칼슘 및 10% 물을 함유하는 역 유제의 PCS에 의해 얻어진 입도 분포를 나타낸다. 유제 입도는 x-축 위에 나타나 있으며 상대 부피는 y-축 위에 나타나 있다.
도 5는 분산상 5(□), 10(△), 15(○), 20(■) 및 30(●) vol%로 제제화된 α,ω-디브로모부탄 역 유제로부터 얻어진 전단 속도의 함수로서의 점도를 나타낸 것이다. 분산상 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민, 염화 나트륨 및 염화 칼슘 농도는 각각 1.34 mM, 0.9% w/v 및 0.9% w/v로 정하였다. 전단 속도는 x-축 위에 나타나 있으며 유제 점도는 y-축 위에 나타나 있다.
상기한 바와 같이, 본 발명은 극성 액체 가용성 약물의 전달을 위한 플루오로카본 연속 상 중의 안정한 역 (플루오로카본 중 극성 액체) 유제 및 열역학적으로 안정한 역 미세유제를 제공한다. 본 발명의 유제는 플루오로카본 중의 불균질 조 약물 분산액과 관련된 많은 단점을 극복한다. 또한, 본 발명은 안정한 복합(극성 액체 중 플루오로카본 중 극성 액체) 유제, 및 제약학적 나노미립자의 형성 방법을 제공한다.
바람직한 실시태양에서, 역 유제 또는 미세유제계는 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 및(또는) 진단제를 함유하는 분산 수성상, 1종 이상의 플루오로카본으로 이루어진 연속상 및 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제로 이루어진다. 또한, 플루오로카본은 플루오로카본상의 친지성을 증가시킬 수 있는 1종 이상의 용질을 함유할 수 있다. 당업계의 숙련인에 의해 인지될 수 있는 바와 같이, 복합 유제(액체상-플루오로카본-액체상)는 형성된 역 유제와 연속 수성상을 배합함으로써 제조될 수 있다.
미세유제와 통상의 유제 사이의 주요 차이점은 열역학적 안정성이다. 보정 온도, 압력 및 조성이 주어진 경우, 미세유제는 자발적으로 형성될 것이며 시간이 경과함에 따라 굵어지지 않을 것이다. 미세유제는 통상의 유제와 실질적으로 동일한 성분으로부터 형성되지만, 분산상의 상대적인 양은 일반적으로 통상의 유제 보다 더 적다. 통상적으로, 미세유제에서 분산상은 그의 성분에 따라서 총 유제 부피의 10% v/v 미만, 가장 바람직하게는 5% v/v 미만을 구성할 것이다.
유제의 미세 구조는 바람직하게는 물-오일 계면에서 계면활성제 단일층 막으로서 한정된다. 당업계의 숙련인에 의해 이해되는 바와 같이, 물이란 용어는 일반적으로 유제를 논의할 때 수용액에 제한되지 않는다. 계면활성제막의 중요한 특성은 물 또는 오일을 향해 만곡되는 그의 경향이다. 이러한 계면활성제막의 만곡 경향은 다른 인자 중에서 계면활성제 기하학적 구조(즉, 헤드 기 면적, 탄화수소 미부 사슬 길이 및 부피), 계면활성제의 탄화수소 미부로의 오일의 침투도 및 친수성 헤드 기의 수화도에 좌우되는 계면활성제막의 고유 특성인 자발 만곡(H0)에 의해 정량적으로 설명될 수 있다. 자발 만곡의 신호 및 값은 형성된 유제가 정상(물 중 오일) 또는 역(오일 중 물) 분산상계를 나타낼 것을 지시할 뿐만 아니라, 그것이 안정하게 남아있을 정도를 나타낸다. 자발 만곡은 막이 오일상(o/w 유제)을 향해 만곡되기 쉬운 경우 양성으로 고려되고, 막이 수성상(w/o 유제)을 향해 만곡되기 쉬운 경우 음성으로 고려된다.
그러한 조성물에서, 유화제 또는 계면활성제는 그의 기하학적 구조를 기준으로 선택될 수 있다. 즉, 작은 헤드 기 면적 및 큰 미부 부피를 갖는 계면활성제(즉, 역 원뿔대 또는 쐐기형)가 유리하다. 표면 활성 오일은 계면활성제 단일층의 자발 만곡을 감소시키기 위해 계면활성제계에 첨가될 수 있다. 이것의 예로는 모노글리세리드 및 알코올, 특히 장쇄 알코올, 스테롤 및 디글리세리드를 들 수가 있다. 특정의 무기염은 단단한 헤드 기 충전의 촉진을 통해 계면활성제 단일층 자발 만곡을 감소시키기 위해 첨가될 수도 있다. 이것의 예로는 칼슘, 마그네슘 및 알루미늄염을 들 수가 있다.
본 발명의 다른 실시태양은 퍼플루오로옥틸 브로마이드와 같은 비친지성 플루오로카본 중의 약제의 실질적으로 불균질인 콜로이드 분산액의 형성에 관한 것이다. 본 발명에 적합한 다른 비친지성 플루오로카본으로는 퍼플루오로옥틸 클로라이드, F-옥탄 등을 들 수가 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 비친지성이란 용어는 비교적 낮은 친지성을 갖는 퍼플루오르 화학 시약을 의미한다. 콜로이드 분산액에 사용하기에 적합한 바람직한 비친지성 플루오로카본은 일반적으로 6개 이상의 탄소 원자를 함유한다. 콜로이드 분산액은 바람직하게는 평균 직경이 3 ㎛ 미만, 더욱 바람직하게는 1 ㎛ 미만인 입자를 갖는다. 특히 바람직한 실시태양은 500 ㎚ 미만, 특히 100 ㎚ 미만의 평균 직경을 갖는 입자로 이루어진다. 선택된 실시태양에서, 본 발명의 역 유제는 추가로 비친지성 액체 플루오로카본과 배합된다. 역 유제와 비친지성 플루오로카본 사이의 물리적 차이 때문에, 약제는 상 변화를 겪어 효능있는 분산액을 형성한다.
A. 불연속 상
바람직한 실시태양에서, 불연속(분산)상은 약물 가용화를 위해 1종 이상의 극성 액체를 함유한다. 많은 극성 액체가 본 발명의 기술에 적합하지만, 특히 바람직한 실시태양은 물, 단쇄 알코올, 디메틸술폭시드, 폴리에틸렌 글리콜 또는 그의 혼합물을 포함한다. 다른 바람직한 실시태양에서, 분산상의 부피는 유제의 총 부피의 약 0.05% 내지 70%를 구성한다.
분산상은 또한 무기염, 완충제, 안정화제, 팽창 및 침투 제제, 영양 제제, 활성 성분, 제약 활성 물질, 유전자 물질, 또는 유제의 안정성, 치료 효능 및 내성을 포함한 그의 각종 특성을 향상시키도록 고안된 다른 성분을 함유할 수 있다. 특히 바람직한 실시태양에서, 분산상은 RNA 또는 DNA와 같은 핵산 성분으로 이루어질 수 있다. 분산상은 또한 유제 또는 캡슐화된 약물을 안정화시키기 위해 선택된 이온을 포함할 수도 있다. 예를 들면, 계면층이 포스파티딜글리세롤 또는 포스파티딘산을 함유하는 경우, 유제 안정성은 수성상에 칼슘 또는 마그네슘 이온을 첨가함으로써 증가될 수 있다. 다른 예에서, 임의의 효소(예를 들면, DNase)는 안정화를 위해 특정 이온이 포함될 때 더 많은 활성을 유지할 수 있다.
분산상은 역 유제 중에서 오스트발트(Ostwald) 숙성(비가역적인 조악화)을 억제하도록 고안된 첨가제(예를 들면, 부탄올과 같은 장쇄 극성 알코올)를 함유할 수도 있다. 본 발명의 유제 중에서의 임의의 약물(예를 들면, 탁솔(Taxol)(등록상표))의 용해성을 더 개선시키기 위해, 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 수용성 플루로닉스(Pluronics)(등록상표) 또는 디메틸술폭시드는 분산상에 부분적으로 또는 전체적으로 첨가될 수 있다. 역 유제의 유합에 대한 안정성을 더 개선시키기 위하여, 유제 점도는 분산상 부피를 증가시킴으로써 증가될 수 있다.
연속 제2 극성 액체상에 소구체 형태로 분산된, 상기 역 유제를 포함하는 복합 물-오일-물 유제가 기대될 수도 있다. 그러한 복합 유제는 상기 1종 이상의 플루오르화 또는 비플루오르화 계면활성제가 분산된 제2 극성 액체상에 역 유제를 첨가함으로써 제조될 수 있다. 복합 유제를 형성하는데 이용된 계면활성제의 양은 사용된 극성 액체 및 역 유제의 양에 좌우될 것이다. 일반적으로, 역 유제 60% 내지 99.95% v/v를 구성하는 극성 액체상에 대해서, 사용된 계면활성제의 양은 수성상의 약 0.01% 내지 약 10% w/v이다. 물 중 오일 유제에 대해 우수한 유화제로서 현재 당업계에 알려진 계면활성제가 여기에 이용될 수 있다. 이것의 예로는 포스파티딜콜린, 난황 인지질 및 플루로닉스를 들 수가 있다. 외부 극성 액체 연속상은 예를 들면 글리콜, 글리세롤, 디메틸포름아미드 또는 디메틸술폭시드를 포함한 극성 용매 뿐만 아니라 상기 첨가제를 함유할 수도 있다. 이들 첨가제는 제2 극성 액체상 또는 오일상 내에, 2가지 상 사이의 계면에 또는 2가지 상 모두내에 존재할 수 있다.
이하에 더욱 상세히 설명하는 바와 같이, 본 발명의 유제는 소정의 극성 액체 가용성 치료제 및(또는) 진단제를 전달할 수 있다. 바람직한 약제로는 항생 물질, 항바이러스제, 항염증약, 호흡 제제, 유전자 물질, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약 및 심장혈관 제제를 들 수가 있다.
B. 연속 상
바람직한 실시태양에서, 본 발명의 역 유제는 1종 이상의 친지성 플루오르화 또는 퍼플루오르화 유기 화합물로 이루어진 연속 오일상 약 40% 내지 99.95% v/v를 함유한다. 연속 플루오로카본상은 1종 이상의 플루오로카본, 퍼플루오로카본 또는 퍼플루오로카본-탄화수소 혼합물로 이루어질 수 있다. 플루오로카본 연속상 중의 탄화수소 계면활성제의 분산을 용이하게 하는 고친지성 플루오로카본이 바람직하다. 일반적으로, 그러한 친지성 플루오로카본은 할로겐 원자(염소, 브롬 또는 요오드) 또는 탄화수소 성분(예를 들면, C2H5)을 함유한다. 다른 바람직한 실시태양에서, 플루오로카본은 탄소 원자를 8개 까지 함유한다. 특히 바람직한 실시태양에서, 플루오로카본은 4개 내지 6개의 탄소 원자를 함유한다. 이 유제에 사용된 플루오로카본 분자는 문헌[Riess, J., Artificial Organs, 8(1): 44-56, 1984 참조]에 기재된 바와 같이 직쇄 또는 분지쇄 또는 환상 구조를 포함한 각종 구조를 가질 수 있다.
본 발명에 사용할 수 있는 많은 플루오로카본이 있다. 이러한 플루오로카본으로는 할로겐화 퍼플루오로카본(예를 들면, CnF2n+1X, XCnF2nX(여기서, n은 2 내지 8이고, X는 Cl, Br 또는 I임)), 할로겐화 에테르 또는 폴리에테르(예를 들면, XCnF2nOCnF2nX, XCF2OCF2CF2OCF2X(여기서, n은 2 내지 4이고, X는 Cl, Br 또는 I임)), 플루오로카본-탄화수소 디블록(예를 들면, CnF2n+1-CmH2m+1, CnF2n+1-CH=CH-CmF2m+1; n+m〈11, n=3-8, m=2-6임) 및 플루오로카본-탄화수소 에테르 디블록(예를 들면, CnF2n+1-O-CmH2m+1; n+m〈11, n=3-8, m=2-6임)을 들 수가 있다.
다른 적합한 플루오로카본은 브롬화 퍼플루오로카본, 예를 들면 1-브로모-헵타데카플루오로옥탄(C8F17Br), 때로는 퍼플루오로옥틸 브로마이드 또는 PFOB로 칭함, 현재 미국 상품명 퍼플루브론(perflubron)(등록상표)으로 알려짐; α,ω-디브로모-F-부탄; 1-브로모펜타-데카플루오로헵탄(C7F15Br); 1-브로모-노나플루오로부탄(C4F9Br); 및 1-브로모트리데카플루오로헥산(C6F13Br, 때로는 퍼플루오로헥실 브로마이드 또는 PFHB로 알려짐)로부터 선택될 수 있다. 다른 브롬화 플루오로카본이 롱(Long)에게 허여된 미국 특허 제3,975,512호에 기재되어 있다. 퍼플루오로옥틸 클로라이드 또는 퍼플루오로옥틸 하이드리드와 같은 비불소 치환체를 갖는 플루오로카본은 본 발명에 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 다른 수의 탄소 원자, 예를 들면 2 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 유사한 화합물도 사용될 수 있을 것으로 예상된다.
당업계의 숙련인은 에스테르, 티오에스테르, 아민, 아미드 및 기타의 다양하게 변형된 플루오로카본-탄화수소 화합물이 본 발명에 사용하기에 적합한 플루오로카본 물질의 넓은 정의안에 포함된다는 것을 이해할 것이다. 또한, 플루오로카본의 혼합물로부터 연속상을 형성하는 것도 본 발명의 범위내에 드는 것으로 생각된다.
유용한 플루오로카본은 다른 파라메터에 의해 분류될 수도 있다. 바람직한 하나의 실시태양에서, 연속상에 사용된 플루오로카본은 10 ℃ 미만의 헥산에 대한 임계 용액 온도(CSTH)를 가질 것이다. 특히 바람직한 실시태양에서, 선택된 플루오로카본은 -20 ℃ 미만의 CSTH를 가질 것이다. 다른 바람직한 실시태양에서, 플루오로카본은 약 50 ㎤ 미만, 가장 바람직하게는 약 40 ㎤ 미만의 몰 굴절성을 가질 것이다. 또다른 바람직한 실시태양에서, 플루오로카본의 총 사슬 길이(n+m)는 9 미만, 가장 바람직하게는 6 이하이다. 플루오로카본이 특히 바람직한 것을 표시하는 것은 굴절률 nD를 측정함으로써 얻어질 수도 있다. 본 발명의 유제에서, 1.34를 초과하는 굴절률을 갖는 플루오로카본이 특히 바람직하다.
연속 오일상은 그의 친수성을 증가시키기 위해 비친양쪽성 오일을 함유할 수도 있다. 적합한 오일의 예로는 헥산, 트리글리세리드, 프레온(예를 들면, 프레온-113) 및 스쿠알렌을 들 수가 있다. 연속상은 또한 역 유제를 입체적으로 안정화시키도록 고안된 첨가제(예를 들면, 폼블린스(Fomblins)(등록상표)와 같은 퍼플루오로폴리에테르)를 함유할 수도 있다. 유제 분산된 상 내용물의 조절된 또는 지정된 침착은 덜 친지성인 오일상으로 희석시킴으로써 이루어질 수 있다. 즉, 고안정성 유제(몇달 동안 안정함)는 덜 친지성인 화합물의 첨가를 통해 수일 또는 수시간 내에 분해되도록 만들어질 수 있다. 이 공정은 전달하기 이전에 또는 현장에서 수행될 수 있다. 바람직한 실시태양에서, 덜 친지성인 화합물은 투여 직전에 연장된 저장 안정성을 갖는 유제에 첨가된다. 그러한 기술은 유제의 전달 프로파일을 조절하는데 유리하게 사용될 수 있다.
C. 유화제
본 명세서에 기재된 유제의 특별한 잇점은 퍼플루오로카본 중 극성 액체 유제 또는 미세유제의 형성을 위한 비플루오르화 계면활성제의 용도이다. 퍼플루오로카본 중 물 유제의 형성에 이미 사용된 모든 계면활성제는 플루오르화되었다. 플루오로카본 중 물 유제가 수소화 계면활성제에 의해 안정화될 수 있다고 발표한 문헌은 없었다. 보고된 제제와 현저하게 다르게, 본 발명에 유용한 계면활성제로는 비플루오르화 지질 계면활성제를 들 수가 있다. 바람직한 실시태양에서, 이들 계면활성제는 역 원뿔대 또는 쐐기형과 비슷한 기하학적 구조를 나타낸다.
계면활성제는 친수성 헤드 기 및 친지성 미부 모두를 함유하는 친양쪽성 분자이다. 계면활성제 바람직하게는 플루오로카본/극성 액체(물) 계면에서 단분자막을 형성한다. 유제의 안정성은 형성된 막의 자발 만곡에 의해 조절된다. 안정한 플루오로카본 중 물 유제를 형성하기 위해, 그 막은 물 쪽으로 만곡되어야 한다. 이 현상을 일으키기 위하여, 선택된 계면활성제는 바람직하게는 작은 헤드 기 면적 및 큰 미부 부피를 갖는다. 따라서, 비하전된(비이온성) 계면활성제 헤드 기가 바람직하다. 마찬가지로, 계면활성제 미부 면내의 불포화도의 증가는 역 유제 형성의 가능성을 예상케 한다. 따라서, 단포화된 미부(예를 들면, 올레오일)가 특히 바람직하다. 단일 지방 사슬을 함유하는 리소포스포리피드는 이가 양이온과 착체화될 때 사용될 수도 있다.
바람직한 실시태양에서, 역 유제는 비플루오르화 계면활성제 또는 계면활성제 혼합물 0.01% 내지 10% w/v를 함유한다. 그의 우수한 생물학적 특성 때문에, 인지질은 일반적으로 수소화 계면활성제의 가장 바람직한 종류이다. 더욱 특별하게는, 낮은 온도 및 농도에서 역 육각형 상을 선택하기 쉬운 인지질이 바람직하다. 따라서, 포스파티딜에탄올아민 및 포스파티딘산 등이 바람직하다. 특히 바람직한 실시태양에서, 인지질은 연속 오일상 중에 약간의 분자 용해성을 갖는다. 본 발명의 선택된 실시태양은 1종 이상의 단불포화 지방 아실 잔기를 함유하는 포스파티딘산 또는 포스파티딜에탄올아민으로 이루어진다. 가장 바람직하게는, 포스파티딘산 또는 포스파티딜에탄올아민은 각각 1,2-디올레오일포스파티딘산 또는 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민이다.
본 발명의 유제에 사용하기에 적합한 다른 비플루오르화 계면활성제로는, 제한되는 것은 아니지만, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 카르디오리핀, 콜레스테롤, 글리세로글리코리피드, 난황 인지질, 지방산염, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤, 아미노에틸포스포노리피드, 디팔미토일 포스파티딜콜레스테롤, 에테르 결합된 지방 및 디세틸포스페이트를 들 수가 있다.
낮은 친수성-친지성 발란스(약 2-10)를 갖는 통상의 세제는 계면활성제로서 사용될 수도 있다. 그러한 세제로는 스팬스(SPANS)(등록상표)(소르비탄 테트라올레에이트, 소르비탄 테트라스테아레이트, 소르비탄 트리스테아레이트, 소르비탄 트리팔미테이트, 소르비탄 트리올레에이트 및 소르비탄 디스테아레이트) 및 브리즈(BRIJ)(등록상표) 족(예를 들면, 폴리옥시에틸렌 2 스테아릴 에테르)을 들 수가 있다. 베타인 및 술포베타인을 포함한 구에르베트 알코올 에톡실레이트, 디알킬 비이온성 계면활성제 및 디알킬 양쪽 이온성 계면활성제도 또한 유화제로서의 사용에 검토될 수 있다. 또한, 응집에 대한 역 유제의 입체 안정화를 촉진시키는 다른 첨가제도 고려된다. 바람직한 첨가제로는 낮은 HLB를 갖는 블록 공중합체를 들 수가 있다.
형성된 유제의 자발 만곡을 감소시키는 보조 계면활성제 또는 표면 활성 오일은 그의 안정성을 증강시킬 것이다. 그러한 첨가제로는 콜레스테롤, 모노글리세리드(예를 들면, 모노올레인), 디글리세리드(예를 들면, 디올레인) 및 알코올(바람직하게는 장쇄, 예를 들면 올레오일 알코올)을 들 수가 있다. 플루오로카본 중 극성 액체 소적에 임의의 정전 반발 특성이 결핍되어 있기 때문에, 친지성 또는 친불소성 입체 안정화제(예를 들면, 중합체)의 첨가도 또한 예상된다. 그러한 첨가제는 역 유제 응집 및 유합을 감소시키도록 도울 것이다. 임의로, 소량의 플루오르화 또는 비플루오르화 디알킬 양이온성 계면활성제는 계면 막으로 혼입되어 유전자 치료 요법에서의 세포 표적화를 개선시킬 수 있다.
D. 유제의 제조
역 유제의 제조는 연속 플루오로카본상 및 불연속 극성 액체상과 비플루오르화 계면활성제의 연결을 포함한다. 바람직하게는, 비플루오르화 계면활성제는 극성 액체와 혼합되기 전에 플루오르카본에 분산된다. 유화는 이상 비혼화성계를 연속 플루오르카본상 중의 작은 불연속 소적으로 이루어진 분산 극성 액체상으로 전환시키기 위해 대량의 에너지를 필요로 한다. 유화는 저에너지 믹서, 초음파 처리기 또는 고에너지 기계적 균질화기와 같은 당업계에 공지된 기술을 이용하여 성취될 수 있다. 형성에 이어서 역 유제는 극성 연속상에 첨가되어 복합 유제를 제공할 수 있다.
초음파 유화에서, 프로브는 플루오로카본, 유화제, 수성상 및 치료제 또는 진단제로 이루어진 혼합물에 삽입된다. 그후에, 에너지 폭발이 프로브의 팁으로부터 방출된다.
마이크로플루이다이저(Microfluidizer)(등록상표) 장치(Microfluidics, Newton, MA)에 의해 수행되는 것과 같은 기계적 유화 공정에서, 혼합된 유제 성분의 흐름은 고속에서 고압(예를 들면, 15,000 psi) 및 유제를 형성하는 유체 혼합물에 가해지는 기계적 응력으로부터 형성된 캐비테이션 또는 고전단력 하에 장치를 통해 지정된다.
형성된 유제는 연속 플루오로카본 상에 분산된, 계면활성제막에 의해 둘러싸인 물의 극성 용매 소적으로 이루어지는 것으로 생각된다. 선택된 실시태양에서, 퍼플루오로카본 유제 중 극성 액체의 이러한 구조는 수용성 염료를 혼입한 유제를 이용하여 상-대조 광학 현미경에 의해 확인되었다. 또한, 그러한 유제는 플루오로카본상에 쉽게 희석될 수 있지만, 수성상에 쉽게 희석되지는 않는다.
본 발명의 역 유제는 예를 들면 121 ℃에서 15분 동안 오토클레이빙시키거나 또는 0.22 ㎛ 필터를 통해 여과시켜 멸균될 수 있다.
본 발명의 플루오로카본 중 극성 액체 유제는 치료될 질환에 따라서 여러 방법으로 투여될 수 있다. 예를 들면, 비강내 또는 폐내 투여(즉, 기관내 튜브, 폐내 카테테르), 부분 액체 환기, 연무 또는 분무가 호흡 질환의 치료에 고려되고, 전신 투여(즉, 근육내, 피하, 복강내, 경구)는 전신 염증, 감염(즉, 박테리아성, 바이러스성, 기생충성, 곰팡이성) 및 심장혈관 질환의 치료에 고려된다. 안내 투여는 안내 질환의 치료에 고려된다.
또한, 본 발명의 복합 유제 및 역 유제 모두는 무기염, 용제 및 분산제, 완충제, 팽창 및 침투 제제, 영양 제제, 친수성 또는 친지성 약리학적 활성 물질과 같은 첨가제를 함유할 수 있다. 이 참가제는 극성 액체상, (외부) 극성 액체상, 오일상 중의 어느 하나내에, 상 사이의 계면에 또는 임의의 상들내에 존재할 수 있다.
정맥내로 투여될 수 있는, 본 발명의 물 중 플루오로카본 중 물 복합 유제는 항생물질, 결핵균 억제제, 항마이코박테리아제, 항암제, 점액 용해제, 항바이러스제 및 면역활성화제, 폐혈관 작용성 물질 또는 상기한 유전자 물질을 더 함유할 수 있다. 또한 복합 유제는 국소, 피하, 폐동맥, 근육내, 복강내, 코, 질, 직장, 귀, 구강 및 안구 경로로 이루어진 군에서 선택된 기술을 이용하여 투여될 수 있다.
복합 유제 및 역 유제 모두를 이용하여 전달될 수 있는 바람직한 약물로는 항염증약(예를 들면, 소듐 크로몰린, 틸라드(Tilade)(등록상표)), 화학요법약(예를 들면, 시클로포스파미드, 로무스틴(Lomustine)(등록상표)(CCNU), 메토트렉세이트, 아드리아마이신, 시스디아민디클로로플라티눔(시스-플라틴), 항생물질(페니실린, 세팔로스포린, 마크로리드, 퀴놀론, 테트라사이클린, 클로람페니콜, 아미노글리코시드), 계면활성제 및 기관지 확장제를 들 수가 있다.
바람직한 기관지 확장제는 베타-2-아고니스트(즉, 터부탈린, 메타프로테레놀 설페이트, 에피네프린 히드로클로라이드, 아드레날린, 이소프레날린, 살부타몰, 살메테롤, 알부테롤, 포르모테롤); 콜린 억제약(예를 들면, 이프라트로퓸 브로마이드, 옥시트로퓸 브로마이드), 또는 글루코코르티코스테로이드(즉, 베클로메타손, 디프리오프리오네이트, 트리암시놀론 아세토니드, 플루니솔리드, 플루티카손, 부데소니드)로서 분류된다. 항종양약으로는 보조약(예를 들면, 가나이트(Ganite)(등록상표), 조프란(Zofran)(등록상표)); 항생물질 유도체(예를 들면, 독소루비신 히드로클로라이드, 이다마이신); 전신 항생물질(예를 들면, 아미카신 설페이트, 젠타마이신, 스트렙토마이신 설페이트, 세포니시드, 토브라마이신); 항대사물(예를 들면, 소듐 메토트렉세이트); 및 세포독성제(예를 들면, 시스-플라틴, 플라티놀-AQ, 탁솔)를 들 수가 있다.
본 발명에 적합한 심장 혈관 제제로는 α/β 아드레날린 차단물(예를 들면, 노르모딘(Normodyne)(등록상표), 트란데이트(Trandate)(등록상표)); 안지오텐신 전환효소(ACE) 억제제(예를 들면, 바소텍(Vasotec)(등록상표)); 항부정맥약(예를 들면, 아데노카드(Adenocard)(등록상표), 브레틸올)); 베타 차단물(예를 들면, 테노르민(Tenormin)(등록상표); 칼슘 채널 차단물(예를 들면, 카르디젬(Cardizem)(등록상표)); 변력성 제제(예를 들면, 이노코르 락테이트); 기관지 확장제(예를 들면, 파파베린 히드로클로라이드); 및 바소프레서(예를 들면, 아드레날린 클로라이드, 인트로핀)를 들 수가 있다.
특히 바람직한 실시태양에서, 분산상은 DNA 및 RNA와 같은 핵산 성분 형태로 유전자 물질을 함유할 것이다. 물론, 유전자 물질은 치료 또는 진단 계획에 따라서 역 유제 및 복합 유제 둘다에 혼입될 수 있다. 당업계의 숙련인은 본 발명이 유전자 요법을 수행할 때 선택된 유전자 또는 유전자 단편의 도입 및 발현에 특히 유용하다는 것을 이해할 것이다. 특히, 본 발명의 유제는 cDNA, 플라스미드, 바이러스 벡터를 포함한 발현 벡터, mRNA, tRNA 및 안티-센스 작제물 형태의 유전자 물질을 선택된 표적 위치로 도입하는데 사용될 수 있다. 예시적인 표적 위치로는 폐 조직, 근육 조직, 임파 조직, T-세포 및 B-세포를 포함한 순환 세포 및 위장 경로의 세포를 들 수가 있다. 또한 상기 리스트는 단지 예시적인 것이며 설명된 유제를 이용하여 유전자 물질을 기관의 어느 곳에도 도입할 수 있다는 것을 이해할 것이다.
본 발명에서 사용할 수 있는 다른 약물은 마취제(예를 들면, 몰핀 설페이트), 안약(예를 들면, 폴리믹신 B 설페이트, 네오마이신 설페이트, 그라미시딘) 및 DNAse와 같은 효소를 들 수가 있다.
본 발명의 선택된 실시태양은 감염을 억제하기 위해 항생물질을 전달하는데 사용될 수 있다. 특히 바람직한 실시태양에서, 본 발명의 역 유제는 궤양의 치료를 위해 상부 위장 경로의 내면에 항생물질을 전달하는데 사용될 수 있다. 헬리오박터 피롤리라고 불리우는 박테리아가 몇가지 중요한 위십이지장 염증 및 종양 과정의 병인에 주요 역할을 한다는 증거가 늘어나고 있다 ([Blaser, M., in Principles and Practice of Infectious Disease, Fourth Edition, G.L. Mandell et al., eds., Churchill Livingstone, New York, pp. 1956-1964, 1995 참조]). 아목시실린, 니트로푸란, 테트라사이클린, 아미노글리코시드, 이미다졸, 마크로리드 및 클라리트로마이신을 포함한, 에이치. 피롤리 감염에 대해 효과적인 각종 항생물질이 본 발명의 유제에 혼입될 수 있다. 다른 유효 조성물로는 비스무스 염(PEPTO-BISMOL(등록상표)) 및 오메프라졸, 수소 이온 펌프 차단물을 들 수가 있다. 생성된 조성물은 궤양 치료를 필요로 하는 환자에게 경구 투여된다. 바람직한 실시태양에서, 이 항생물질 3 또는 4가지가 10 내지 14일 동안 동시에 투여된다.
상기 실시태양 이외에, 본 발명의 역 플루오로카본 유제는 혼입된 약물의 분산액을 형성하기 위해 퍼플루오로옥틸 브로마이드 및 다른 비친지성 플루오르 화학 시약에 첨가될 수 있다. 바람직하게는, 비친지성 플루오르 화학 시약은 40 ㎤을 초과하는 몰 굴절성을 갖는 반면 친지성 연속상은 40 ㎤ 미만의 몰 굴절성을 가질 것이다. 연속상이 더이상 유제를 안정화시키기에 충분한 친지성이 아니기 때문에 역 유제는 파괴된다. 형성된 제제에서, 불연속상은 바람직하게는 3 ㎛ 이하와 거의 비슷한 평균 직경, 더욱 바람직하게는 1 ㎛ 보다 상당히 적은 평균 직경을 갖는 고상 초미립자로 이루어질 것이다. 특히 바람직한 실시태양에서, 형성된 미립자는 500 ㎚ 미만의 평균 직경을 가지며 10 ㎚ 정도의 평균 직경을 가질 수 있다. 본 발명의 실질적으로 불균질인 분산액의 콜로이드 특성은 표적 위치에서의 그의 신속한 용해에 기인한 향상된 생물학적 이용능을 제공한다.
퍼플루오로카본 중 물 유제 및 물 중 플루오로카본 중 물 복합 유제의 제조는 다음 실시예에 설명될 것이다.
실시예 1
플루오로카본 중 물 역 유제의 제조
다음 역 유제 제제 10 ㎖를 제조하였다:
1.0% w/v 달걀 포스파티딜에탄올아민(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma)
10% v/v 주사용 증류수
달걀 포스파티딜에탄올아민(100 ㎎)을 비브라셀(Vibracell)(등록상표) 초음파 처리기(Sonics Materials, 30 ㎜ o.d. 티타늄 프로브)를 이용하여 약 1분 동안 (T=5-10 ℃) 100 와트의 전력에서 α,ω-디브로모-F-부탄(DBFB; 18 g)에 분산시켰다. 그후에, 전해질 용액(1.0 mL, 10% v/v)을 초음파 처리 중에 적가하였다. 첨가가 완료된 후에, 역 유제를 총 10분 이상 동안 초음파 처리하였다. 전해질 용액은 0.9% w/v NaCl 및 0.9% w/v CaCl2·2H2O를 함유하였다. 플루오로카본 중 물의 유백색 유제를 얻었다. 유제의 입도는 니콤프(Nicomp) 270 광자 상관 분광계(Pacific Scientific) 상의 레이저 광 산란을 통해 분석하였다. 분석은 누적 방법에 의해 이루어졌다. 각 유제 샘플은 처음에 n-옥탄으로 희석되었는데, 그 이유는 연속 및 분산상의 굴절률이 거의 동일하기 때문이다. 형성된 플루오로카본 중 물 역 유제는 약 450±300 ㎚의 중앙 소적 크기를 가졌다(도 1). 유제의 역 특성은 탄화수소 오일(즉, n-옥탄)로 희석한 후에 전도성 및 안정성에 의해 확인되었다.
실시예 2
역 유제에 대한 인지질 종류의 효과
역 유제를 안정화시키는 각종 인지질의 능력을 검사하기 위해 인지질 종류 만을 변화시켜 실시예 1의 유제 제제를 변형시켰다. 유화 절차 및 조건은 실시예 1에 기재된 바와 같다. 그 결과를 표 I에 나타내었다.
성분 양(% w/v) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유화 안정성(일)
난황 인지질 1.0 530 10.0 3-7
달걀 포스파티딜에탄올아민 0.75 450 100 6.0 3-7
80% EPC/20% EPE 1.0 200 95 〉15.0 3-7
50% EPC/50% EPE 1.0 230 120 8.5 3-7
20% EPC/80% EPE 1.0 230 110 8.5 3-7
1,2 디리놀레오일포스파티딜콜린 1.0 210 100 14.0 2
1,2 디리놀레오일포스파티딜에탄올아민 1.0 200 110 10.0 2
카르디오리핀 1.0 150 65 12.0 5
1,2 디리놀레오일포스파티딜글리세롤 1.0 180 85 7.5 2
1,2 디리놀레오일포스파티딜세린 1.0 460 330 6.0 2
1,2 디리놀레오일파티딘산 1.0 130 60 〉15.0 3
1,2 디카프릴포스파티딜에탄올아민 1.0 260 210 4.0 1
1,2 디라우로일포스파티딜에탄올아민 1.0 435 350 6.0 4
1,2 디미리스토일포스파티딜에탄올아민 1.0 2440 840 1.0 2
1,2 디올레오일포스파티딜에탄올아민 1.0 450 100 〉15.0 안정
1,2 디올레오일포스파티딜에탄올아민 0.8 530 250 4.0 안정
1,2 디올레오일포스파티딜콜린 1.0 450 175 12.0 12
1,2 디올레오일포스파티딘산 1.0 430 180 10.5 안정
1,2 디올레오일포스파티딘산 0.8 700 300 5.0 안정
1,2 디아라키도닐포스파티딜에탄올아민 0.8 240 85 〉15.0 1
1-팔미토일, 2-올레오일 포스파티딜에탄올아민 1.0 500 110 8.0 안정
1-팔미토일, 2-리놀레오일 포스파티딜에탄올아민 1.0 320 175 7.0 4
*S.D. - 표준 편차
카비 파마시아사(Sweden, Stockholm 소재 Kabi Pharmacia)로부터 얻은 난황 인지질을 제외하고는, 모든 인지질을 아반티 폴라 리피드사(Avanti Polar Lipids)로부터 얻었다. 입도 분석은 실시예 1과 동일한 절차 및 조건을 이용하여 실시하였다. 유제 충전된 큐벳의 투과율을 모니터함으로써 분광광도법으로 크리밍 시간을 측정하였다. 크리밍 시간은 유제 충전된 큐벳이 0%에서 100%까지의 투과율을 얻는데 필요한 시간이다. 모든 샘플을 30 ℃에서 저장하고 유제 안정성(즉, 총 상 분리)에 대해 매일 모니터하였다.
올레오일 지방산 잔기를 갖는 인지질을 함유하는 제제가 임의의 다른 인지질 혼합물 또는 인지질 분자종에 비해 개선된 특성을 가졌다는 것을 알 수 있었다. 또한, 그 결과는 포스파티딜에탄올아민 또는 포스파티딘산 헤드 기를 갖는 인지질로 제제화된 유제가 향상된 안정성을 나타내었음을 보여준다. 포스파티딘산 및 포스파티딜에탄올아민 지질 계 모두는 단단한 헤드 기 충전이 바람직한, 역전된, 비라멜라 상을 형성하는 강한 성질을 갖는다. 한편, 포스파티딜콜린, 포스파티딜글리세롤 및 포스파티딜세린은 헤드 기 충전이 더욱 확대되며 라멜라 상을 택하기 쉽다.
사슬 길이 및 사슬 불포화도를 증가시키면 라멜라(Lα)가 역전된 육각형(HII) 전이 온도로 낮추어진다. 따라서, 사슬 길이 및 사슬 불포화도를 증가시킴으로써 단일층 자발 만곡(Ho)을 감소시키기 쉬운 사슬 압력 증가의 결과가 생긴다. 불포화도를 증가시킨 것, 예를 들면 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민을 1,2-디리놀레오일포스파티딜에탄올아민으로 전환시킨 것은 새로운 불필요한 상의 형성을 유도할 수 있는 더욱 심각한 충전 압박을 가하기 쉽다. 그러므로, 단불포화된, 예를 들면 올레오일, 지방산 잔기 및(또는) 에탄올아민 또는 포스파티딘산 헤드 기를 갖는 인지질 계면활성제의 사용이 바람직하다.
실시예 3
유제 안정성에 대한 연속상의 효과
다음 역 유제 제제 5 ㎖를 제조하였다:
0.5% w/v 달걀 포스포리피드(Kabi Pharmacia, Stockholm)
90% v/v 오일 또는 오일 혼합물(하기 목록 참조)
0.09% 염화 나트륨(Sigma)
0.09% 염화 칼슘(Sigma)
10% v/v 주사용 증류수
α,ω-디브로모-F-부탄(DBFB), 트리클로로트리플루오로에탄(CFC-113), 퍼플루오로옥틸 브로마이드(PFOB), n-헥산, 퍼플루오로헥산(PFH) 및 그의 혼합물을 함유하는 역 유제를 제조하여 유제 안정성에 대한 연속상의 효과를 검사하였다. 실시예 1에 기재된 유화 절차 및 조건에 따라 행하였다. 유제를 먼저 육안으로 체크하여 오일이 완전히 유화되었는지를 확인하였다. 유제의 역 특성은 탄화수소 오일, 즉, n-옥탄으로 희석한 후에 안정성에 의해 확인되었다. 혼합물의 굴절률(n12)은 문헌(Taslc et al; J. Chem. Eng. Data, 37:310-313, 1992)에 기재된 절차를 통해 평가하였다. 유제 안정성은 일반적으로 연속상의 굴절률(nD)(도 2)과 상관 관계가 있고, 그러므로 약 1.32를 초과하는 nD또는 n12를 갖는 오일 또는 오일 혼합물은 안정한 역 유제를 형성하였다.
굴절률의 바람직한 범위는 계면활성제의 종류에 좌우될 것이다. 디올레오일포스파티딜에탄올아민과 같은 바람직한 계면활성제를 사용하면 사실상 허용되는 굴절률 값을 감소시킬 수 있다.
실시예 4
역 유제 안정성에 대한 연속상의 몰 부피의 효과
실시예 3에 기재된 역 유제 제제 5 ㎖를 다음 오일 각각에 대해 제조하였다: DBFB, CFC-113, PFOB, PFH, n-헥산, n-헵탄, n-옥탄, n-데칸, n-도데칸, n-헵타데칸, 클로로포름(CHCl3), 사염화탄소(CCl4) 및 1,6-디브로모헥산. 실시예 1에 기재된 유화 절차 및 조건에 따라 행하였다. 유제를 먼저 육안으로 체크하여 완전한 유화가 일어났는지를 확인하였다. 유제의 역 특성은 탄화수소 오일, 즉, n-옥탄으로 희석한 후에 확인되었다. 유제 안정성은 연속상(도 3)의 몰 부피(VM)와 관계가 있으며, 약 190 미만의 VM을 갖는 오일은 안정한 역 유제를 형성하였다. 상기한 바와 같이, 연속상에 대한 허용되는 몰 부피 범위는 유화제의 종류에 결정적으로 좌우된다. 일반적으로, 낮은 몰 부피를 갖는 고친지성 플루오로카본이 바람직하다.
실시예 5
인지질/비극성 액체 배합물로 제조된 역 유제
인지질 안정화된 역 유제의 특성에 대한 비극성 액체 첨가제의 효과를 검사하기 위해 계면활성제 성분을 변화시켜 실시예 1의 유제 제제를 변형시켰다. 실시예 1에 기재된 유화 절차 및 조건에 따라 행하였다. 인지질 농도를 1% w/v로 정하였고 추가의 5, 10 또는 25 몰% 비극성 지질을 혼입시켰다. 그 결과를 표 IIa 내지 IIg에 나타내었다.
(모노올레인)
1차 계면활성제 모노올레인 첨가량(몰 %) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPC 5 380 170 5.0 30
DOPC 10 330 150 6.0 30
DOPC 25 250 115 〉15.0 30
DOPE 5 600 195 9.0 안정
DOPE 10 435 220 7.5 안정
DOPE 25 210 95 〉15.0 안정
DOPA 5 400 200 15.0 안정
DOPA 10 500 125 14.5 안정
DOPA 25 165 100 〉15.0 안정
*S.D. - 표준 편차; DOPC = 1,2 디올레오일포스파티딜콜린; DOPE = 1,2 디올레 오일포스파티딜에탄올아민; DOPA = 1,2 디올레오일포스파티딘산
(디올레인)
1차 계면활성제 디올레인 첨가량(몰 %) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPC 5 225 120 11.0 12
DOPC 10 205 110 12.0 12
DOPC 25 230 130 15.0 12
DOPE 5 325 120 15.0 안정
DOPE 10 210 100 〉15.0 안정
DOPE 25 175 100 〉15.0 안정
DOPA 5 790 300 5.0 안정
DOPA 10 860 425 7.0 안정
DOPA 25 470 165 〉15.0 안정
(트리올레인)
1차 계면활성제 트리올레인 첨가량(몰 %) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPC 5 360 170 9.0 12
DOPC 10 250 130 9.0 4
DOPC 25 280 155 ? 12
DOPE 5 670 390 5.0 안정
DOPE 10 470 210 10.0 안정
DOPE 25 675 200 12.0 안정
(중쇄 트리글리세리드)
1차 계면활성제 MCT 오일 첨가량(몰 %) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPC 10 420 200 14.0 10
DOPC 25 470 200 N/D 안정
DOPE 5 670 285 〉15.0 안정
DOPE 10 963 650 10.0 안정
DOPE 25 830 620 10.0 안정
DOPA 10 700 350 〉15.0 안정
DOPA 25 690 480 〉15.0 안정
N/D = 검측되지 않음
(콜레스테롤)
1차 계면활성제 콜레스테롤 첨가량(몰 %) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPC 25 255 140 13.0 30
DOPE 25 170 100 〉15.0 안정
(스쿠알렌)
1차 계면활성제 스쿠알렌 첨가량(몰 %) 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPC 10 200 100 13.0 15
DOPE 10 300 160 〉15.0 안정
(장쇄 알코올)
1차 계면활성제 장쇄 알코올 소적 중앙 크기(㎚) S.D.*(㎚) 크리밍 시간(분) 유제 안정성(일)
DOPE 데실 알코올 220 110 〉15.0 안정
DOPE 올레오일 알코올 290 200 〉15.0 안정
DOPC, DOPE 및 DOPA를 아반티 폴라 리피드사(Avanti Polar Lipids)로부터 얻었다. 모노올레인, 디올레인, 데실 알코올 및 올레오일 알코올은 누-첵 프레프사(Nu-Chek Prep; Elysian, MN)로부터 얻었다. 콜레스테롤, 트리올레인 및 스쿠알렌은 시그마사(Sigma)로부터 얻었다. 중쇄 트리글리세리드(MCT)는 칼샴스(Karlshamns; Janesville, WI)로부터 얻었다. 입도 분석은 실시예 2에 기재된 것과 동일한 절차 및 조건을 이용하여 수행하였다.
개선된 유제 특성은 모노올레인, 디올레인, 콜레스테롤, 스쿠알렌, 데실 알코올 또는 올레오일 알코올과 배합된 DOPE 또는 DOPA로 관찰하였다. 개선점은 계의 유합 감소의 척도인 초기 소적 크기의 감소에 의해 주목된다. 유사한 또는 감소된 유제 특성은 DOPC, 트리올레인 또는 MCTs의 임의의 배합으로 관찰하였다. 일반적으로, 유제 특성은 비극성 지질 함량의 증가에 따라 개선되었다. 비극성 성분은 인지질 분자 사이를 분할하여 단일층 자발 만곡(Ho)을 감소시킴으로써 탄화수소 사슬 부피가 증가되고 및(또는) 사슬 충전 응력이 경감된다. 역 유제의 안정성을 개선시키는 트리올레인 및 MCTs의 무효능은 그것이 계면활성제 단일층으로 분할하는데 필요한 친양쪽성 특질이 결핍되어 있기 때문이다. 트리글리세리드는 플루오로카본 오일에 간단히 용해된다.
그러므로, 역 유제 제제를 함유하는 인지질이 친양쪽성 비극성 첨가제로 보충될 때 개선된 유제 특성이 얻어진다.
실시예 6
역 유제를 함유하는 효소의 제조
실시예 1에 개략된 절차에 따라서 α,ω-디브로모-F-부탄(90% v/v), 펄모짐(PULMOZYME)(등록상표)(Genentech, South San Francisco, CA)(10% v/v), 0.5% 달걀 포스파티딜에탄올아민(PE) 또는 15% w/w 이상의 PE를 함유하는 난황 인지질로 효소를 함유하는 플루오로카본 중 물 역 유제를 제조하였다. 펄모짐은 염수 중의 1.0 ㎎/mL 도르나제 알파 효소를 함유한다. 효소를 함유하는 생성된 플루오로카본 중 물 역 유제는 약 300 ㎚의 중앙 소적 크기를 갖는 투명한 것이다. 캡슐화된 효소는 시험관내 단핵 세포 대식세포 배양물 분석에 의해 그의 활성(즉, 핵으로의 유입, DNA 파괴의 촉진 및 최종적인 세포 괴사)을 유지하는 것으로 나타났다. 펄모짐을 함유하는 역 유제와 접촉한 후에 낭포성 섬유증 환자로부터 모은 생체외 객담 점도의 감소가 관찰되었다.
물론, 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제의 혼입은 유제 또는 미세유제가 형성될 때 펄모짐 대신에 약물 수용액을 사용하여 이루어질 수 있다는 것을 이해할 것이다. 그렇게 할 때, 유제 또는 미세유제 중의 제제의 농도는 수용액 중의 약물 농도를 변화시킴으로써 간단히 조절될 수 있다.
실시예 7
수성상 중에 약물을 함유하는 역 유제의 제조
실시예 1에 기재된 유화 절차 및 조건을 이용하여 약물을 함유하는 다음 역 유제 제제 3 ㎖를 제조하였다:
A: 젠타마이신 설페이트 역 유제
0.051% w/v 젠타마이신 설페이트(Sigma)
1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE; Avanti)
0.21% w/v 디-올레인(Nu-Chek Prep, Elysian, MN)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor)
0.09% 염화 나트륨(Sigma)
0.09% 염화 칼슘(Sigma)
10% v/v 주사용 증류수
B: 시스-플라틴 역 유제
0.025 w/v 시스-플라틴(Sigma)
1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민
0.21% w/v 디-올레인
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄
0.09% 염화 나트륨
0.09% 염화 칼슘
10% v/v 주사용 증류수
C: 아미카신 설페이트 역 유제
0.052% w/v 아미카신 설페이트(Sigma)
0.7% w/v 달걀 PE(Avanti)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄
0.09% 염화 나트륨
0.09% 염화 칼슘
10% v/v 주사용 증류수
D: 터부탈린 설페이트 역 유제
0.046% w/v 터부탈린 설페이트(Sigma)
1.0% w/v 난황 포스파티드(Asahi, Tokyo, Japan)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄
0.09% 염화 나트륨
0.09% 염화 칼슘
10% v/v 주사용 증류수
E: 토브라마이신 설페이트 역 유제
0.03% w/v 토브라마이신 설페이트(Sigma, St. Louis, MO)
1.0% w/v 난황 포스파티드(Asahi, Tokyo, Japan)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
10% v/v 주사용 증류수
입도 분석은 실시예 1에 기재된 절차 및 조건을 이용하여 수행하였다. 크리밍 시간은 실시예 2에 기재된 절차 및 조건을 이용하여 측정하였다. 아미카신 설페이트 및 터부탈린 설페이트에 대한 입도 및 크리밍 속도는 DOPE/디-올레인 계면활성제 배합물과 함께 제제화될 때 아마 개선될 것이다. 비히클에 비교된 유제를 함유하는 젠타마이신 설페이트에서 입도 분포의 약간의 개선이 관찰되었다(도 4). 표 III은 제제의 중앙 소적 직경 및 초기 크리밍 시간을 나타낸다.
제제 중앙 소적 직경(㎚) 초기크리밍 시간(분)
젠타마이신 설페이트(0.051% w/v) 145 ± 70 〉15.0
토브라마이신(0.03% w/v) 125 ± 80 〉15.0
시스-플라틴(0.025% w/v) 200 ± 100 〉15.0
아미키신 설페이트(0.052% w/v) 600 ± 250 4.0
터부탈린 설페이트(0.046% w/v) 460 ± 200 10.0
실시예 8
복합 유제(물/플루오로카본/물)의 제조
실시예 1에 기재된 유화 절차 및 조건을 이용하여 다음 역 유제 제제 5 ㎖를 제조하였다:
1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
0.21% w/v 디-올레인(Nu-Chek Prep, Elysian, MN)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma, St. Louis, MO)
10% v/v 주사용 증류수
60 ㎎ 난황 인지질(EYP)(Kabi Pharmacia, Stockholm, Sweden)을 7 ℃에서 약 2분 동안 초음파 처리하여 주사용 증류수 2.4 g에 분산시켰다. 그후에, 상기 나열한 성분으로 이루어진 역 유제(1.2 g)를 초음파 처리 중에 EYP 분산액에 적가하였다. 첨가가 완료된 후에, 복합 유제를 15분 동안 더 초음파 처리하였다. 유리 오일이 보이지 않는 유백색 유제가 얻어졌다. 형성된 복합 유제는 400±200 ㎚의 평균 입도를 가졌다(원심 침강 분리). 유제 연속상의 특성은 전도성에 의해 또한 물로 분산되는 것에 의해 확인되었다.
실시예 9
역 유제를 함유하는 에탄올의 제조
실시예 1에 기재된 바와 동일한 유화 절차 및 조건을 이용하여 다음 역 유제 제제 5 ㎖를 제조하였다:
1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
0.21% w/v 디-올레인(Nu-Chek Prep, Elysian, MN)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma, St. Louis, MO)
2.5% v/v 에틸 알코올(Spectrum, New Brunswick, NJ)
7.5% v/v 주사용 증류수
25% v/v 에틸 알코올을 함유하는 극성상을 실시예 1에 기재된 계면활성제/플루오로카본 분산액에 첨가하여 유백광의 역 유제를 얻었다. 형성된 플루오로카본 중 에탄올 유제는 130±35 ㎚의 중앙 소적 크기를 가졌다.
실시예 10
역 유제를 함유하는 약물의 시험관내 효능
실시예 1 및 7에 기재된 바와 같이 하여 역 유제 및 유제 비히클을 함유하는 다음 약물 5 ㎖를 제조하였다:
제제 A: 젠타마이신 설페이트 역 유제 제제
0.03% w/v 젠타마이신 설페이트(Sigma, St. Louis, MO)
1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE)
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
0.21% w/v 디-올레인(Nu-Chek Prep, Elysian, MN)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma, St. Louis, MO)
10% v/v 주사용 증류수
제제 B: 토브라마이신 설페이트 역 유제 제제
0.03% w/v 토브라마이신 설페이트(Sigma, St. Louis, MO)
1.0% w/v 난황 포스파티드(Asahi, Tokyo, Japan)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma, St. Louis, MO)
10% v/v 주사용 증류수
제제 C: 역 유제 비히클 제제
1.0% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE)
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
0.21% w/v 디-올레인(Nu-Chek Prep, Elysian, MN)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma, St. Louis, MO)
10% v/v 주사용 증류수
항생물질 및 각종 대조군을 함유하는 약물 유제 제제를 이. 콜리 현탁액 배양액에서 그의 항박테리아 능력에 대해 시험하였다. 폐에서의 박테리아 감염을 모의하기 위하여, 이. 콜리 현탁액 배양물을 정상 인간 기관지/기관(氣管) 상피 조직 세포의 단일층을 함유하는 웰 플레이트에서 유지시켰다. 100 μL 중의 0.3 내지 0.003 ㎎ 농도 범위의 약물을 이. 콜리/세포 현탁액을 함유하는 1 mL 배지에 첨가하였다. 플루오로카본 및 유제 비히클 대조군을 최고 약물 농도 샘플에 존재하는 정도와 비례하는 정도로 첨가하였다. 플레이트를 37 ℃에서 밤새 인큐베이션시켰다. 각 웰을 흡기시키고 두부분 LB 배지로 희석시켰다. 희석된 배약액 혼합물(20 μL)을 LB 플레이트에 첨가하고 이. 콜리의 초기 적정을 위해 37 ℃에서 밤새 인큐베이션시켰다. 이어서, 각 웰의 역가를 측정하기 위해 희석을 실시하였다. 그 결과를 하기 표 IV에 나타내었다.
샘플 처리 이. 콜리 역가 (콜로니/mL)
처리하지 않음 6.3 E 7
염수 7.0 E 7
α,ω-디브로모-F-부탄 1.0 E 7
역 유제 비히클(제제 C) 1.9 E 7
염수 중의 0.3 ㎎ 젠타마이신 설페이트 0
염수 중의 0.03 ㎎ 젠타마이신 설페이트 1.0 E 1
유제 중의 0.3 ㎎ 젠타마이신 설페이트(제제 A) 2.0 E 2
유제 중의 0.03 ㎎ 젠타마이신 설페이트(제제 A) 2.7 E 3
유제 중의 0.003 ㎎ 젠타마이신 설페이트(제제 A) 2.3 E 4
염수 중의 0.3 ㎎ 토브라마이신 설페이트 0
염수 중의 0.03 ㎎ 토브라마이신 설페이트 2.0 E 1
유제 중의 0.3 ㎎ 토브라마이신 설페이트(제제 B) 1.5 E 1
유제 중의 0.03 ㎎ 토브라마이신 설페이트(제제 B) 7.0 E 1
유제 중의 0.003 ㎎ 토브라마이신 설페이트(제제 B) 6.5 E 3
음성 대조군, 즉 염수, α,ω-디브로모-F-부탄, 역 유제 비히클 또는 비처리군은 모두 박테리아 성장을 억제하는 능력이 없는 것으로 나타났다. 역 유제 제제를 함유하는 약물은 모두 그의 상응하는 염수 대조군과 비교하여 동등한 항박테리아 효능을 나타내었다. 또한, 항박테리아 능력의 투여량 의존성 반응을 평가된 두가지 약물에 대해 관찰하였다. 이 결과는 약물의 효능이 계면활성제 단일층 또는 플루오로카본에 의해 억제되지 않는다는 것을 예증한다.
실시예 11
고압 균질화에 의한 플루오로카본 중 물 역 유제의 제조
다음 역 유제 제제 15 ㎖를 제조하였다:
1.0% w/v 달걀 포스파티딜에탄올아민
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
90% v/v α,ω-디브로모-F-부탄(Exfluor, Austin, TX)
0.09% 염화 나트륨(Sigma, St. Louis, MO)
0.09% 염화 칼슘(Sigma, St. Louis, MO)
10% v/v 주사용 증류수
계면활성제, DBFB 및 염수 용액을 먼저 실시예 1에 기재된 절차 및 조건에 따라 초음파 처리하여 또는 저전단력 방법을 이용하여 분산시켰다. 저전단력 방법은 DNA 플라스미드와 같은, 분산 공정-민감성 약리학적 제제에 사용하기 위해 개발되었다. 저전단력 방법에서, 계면활성제 및 α,ω-디브로모-F-부탄은 약 1분 동안 10,000 회전/분에서 저에너지 테크마르(Tekmar) 타입 SD-1810 믹서로 분산시켰다. 분산된 상을 혼합 중에 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 역 유제를 추가로 수분 동안 혼합하였다. 그후에, 초음파 처리 또는 혼합된 유제를 아베스틴사(Avestin; Ottawa, Canada)에 의해 제조된 에멀시플렉스(EmulsiFlex)-CF 균질화기를 사용하여 더 처리하였다. 유제를 다음 처리 조건을 이용하여 균질화시켰다: 12K psi에서 10회 통과. 플루오르 화학 시약 중 물의 투명한 유제를 얻었다. 입도 분석은 체적 가중 모드로 레이저 회절법(Horiba LA-700, Kyoto, Japan)에 의해 실시하였다. 각 샘플 약 20 내지 50 μL의 등분량을 n-도데칸 9 내지 10 mL에서 희석시켰다. 분포 형태 3, 1.1의 굴절률 비 및 단편 세포를 사용하였다. 형성된 역 유제는 200±70 ㎚ 및 205±70 ㎚의 중앙 소적 직경을 가졌다.
실시예 12
고압 균질화에 의해 제조된 역 유제의 안정성
이 연구에서 1차 계면활성제로서 디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE) 또는 디올레오일포스파티딘산(DOPA)을 함유하고 오일로서 1,4-디브로모플루오로부탄(DBFB)을 함유하는 몇가지 역 유제 제제를 그의 입자 성장 및 가수분해 안정성에 대해 평가하였다. 콜레스테롤, 모노올레인, 디올레인 및 1,3-디올레인과 같은 비극성 첨가제의 DOPA 및 DOPE로의 첨가 효과에 대해 평가하였다. 또한, DBFB 중 젠타마이신 설페이트 유제의 안정성을 검사하였다. 1,4-디브로모플루오로부탄(DBFB)은 엑스플루오르 코포레이션(Exfluor Corp.)으로부터 얻었다. 콜레스테롤, 젠타마이신 설페이트는 시그마 케미칼스사(Sigma Chemicals)로부터 얻었다. 디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE) 및 디올레오일포스파티딘산(DOPA)은 아반티 폴라 리피드사(Avanti Polar Lipids)로부터 얻었다. 모노올레인, 디올레인 및 1,3-디올레인은 누체크 프레프사(NuChek Prep)로부터 얻었다. 모든 물질은 제공된 대로 사용하였다.
실시예 11에 기재된 유화 절차 및 조건을 이용하여 다음 유제 제제 15 ㎖를 제조하였다:
성분 농도
염수 용액*10% v/v
DBFB 90% v/v
DOPE 또는 DOPA 1% v/v
비극성 첨가제(포함되는 경우) 1차 계면활성제의 10 몰%
*염수 용액은 0.9% w/v NaCl 및 0.9% w/v CaCl2·2H2O로 이루어진다.
유제를 함유하는 약물의 경우에, 젠타마이신 설페이트는 초음파 처리 전에 염수 용액에 용해시켰다. 제조 또는 충전 중에 산소 또는 대조군 온도를 배제하려는 시도가 이루어지지 않았다. 샘플을 5 ℃ 및 25 ℃에서 크림프 캡 바이알에서 저장하고 밀봉시켰다. 역 유제 유리 지방산(FFA) 농도는 분광광도법을 이용하여 측정하였다(Mahadevan, S., Dillard, C.J. and Tappel, A.L. Anal. Biochem.; 27(1969) 387). 입도 분석은 실시예 1에 기재된 바와 동일한 절차 및 조건을 이용하여 수행하였다. 그 결과를 표 Va 내지 Vc에 나타내었다.
5 ℃
유제 ID 초기 21d. 30d. 49d. 63d. 84d. 114d. 150d. 225d.
DOPE 200 220 220 180 170 170 160 180 170
DOPA 305 350 240 4060 7610 8240 9140 n/d n/d
DOPE/젠타마이신 150 150 210 110 120 120 110 110 120
DOPE/콜레스테롤 166 200 210 130 130 130 150 150 120
DOPA/모노올레인 216 5310 3590 4920 5450 8430 8030 n/d n/d
DOPA/디올레인 5968 5000 7220 6230 7200 8300 8780 n/d n/d
DOPA/1,3 디올레인 304 3320 4890 6830 7360 8510 8870 n/d n/d
n/d = 검측되지 않음
25 ℃
유제 ID 14d. 21d. 30d. 49d. 63d. 77d. 84d. 100d. 114d. 150d. 225d.
DOPE 200 190 230 190 180 250 8000 8740 13010 분해 n/a
DOPA 370 7550 6490 8210 8230 8250 10340 n/d 17400 n/d n/d
DOPE/젠타마이신 150 150 170 150 120 160 8020 8170 7950 8110 분해
DOPE/콜레스테롤 160 160 160 130 130 140 150 130 130 6000 n/d
DOPA/모노올레인 190 5430 6430 8210 8420 8500 8830 n/d 9800 n/d n/d
DOPA/디올레인 3650 6600 7840 8130 8440 8670 9210 n/d 8720 n/d n/d
DOPA/1,3 디올레인 420 6300 7440 8530 8600 8800 9840 n/d 9680 n/d n/d
n/d = 검측되지 않음
유리 지방산 농도(mEq/L) 대 시간 온도
DOPE DOPA DOPE/젠타마이신 DOPE/콜레스테롤 DOPA/모노올레인 DOPA/디올레인 DOPA/1,3 올레인
초기 4.4 4.8 4.25 4.71 5.15 4.92 5.88
5개월 5℃ 5.26 7.94 6.59 6.28 6.55 7.99 10.01
5개월 25℃ 7.35 10.27 7.12 6.75 8.08 8.27 12.07
유사한 초기 중앙 입경(약 150-300 ㎚)을 DOPA/디올레인을 제외한 모든 고압 균질화된 역 유제 제제에 대해 관찰하였다. 1차 계면활성제로서 DOPE를 사용하여 제제화한 역 유제는 5 ℃ 및 25 ℃ 모두에서 DOPA와 비교할 때 유합 및 가수분해에 대해 더 큰 안정성을 나타내었다. 25 ℃에서의 가장 큰 역 유제 안정성은 DOPE/콜레스테롤 제제로 관찰하였다. 5 ℃에서 225일 동안 저장된 DOPE 역 유제 제제에서 확실한 입자 성장은 일어나지 않았다.
역 유제의 입자 성장이 두 상에서 일어나는 것으로 나타났다. 성장의 첫 번째 상은 수일 내지 1주 동안 일어나는 중앙 입경의 크기 변화에 의해 특징지워진다. 신속한 성장 상 후에, 유제 입자 성장은 연장된 기간 동안 안정 수준에서 벗어나는 것으로 보이며 유제의 분해가 이어진다. 초기의 신속한 성장 상은 유합 유도된 공정의 지표이다. 그러나, 이 시점에서 유제 성장이 느려지는 이유는 불분명하다. 이러한 조 (〉1 ㎛) 역 유제의 입도 측정은 부정확할 수 있다.
실시예 13
역 유제에 대한 분산 상 부피의 효과
분산 및 연속 상 부피를 변화시켜 실시예 11의 유제 제제 및 유화 절차를 변형시켰다. 5, 10, 15, 20, 30, 40 및 50 vol%의 분산상을 갖는 역 유제를 제조하였다. 모든 유제 제제에서의 분산상 1,2-디올레오일 포스파티딜에탄올아민(DOPE) 농도를 1.34 mM로 고정하였다. 샘플을 25 ℃에서 크림프 캡 바이알에서 밀봉 저장하였다. 상기 실시예 1에 기재된 바와 동일한 절차 및 조건을 이용하여 입도 분석을 행하였다. 점도 측정은 37 ℃에서 브룩필드(Brookfield) 모델 DV-II 점도계로 행하였다. 그 결과를 하기 표 VI 및 도 5에 나타내었다.
중앙 입경(㎚) 대 시간(일)
분산 상 v/v% 초기 21d. 30d. 60d. 82d. 105d.
5 200 6300 11300 분해 n/a n/a
10 200 190 180 160 180 170
15 180 190 150 120 140 120
20 170 150 140 130 120 130
30 150 120 150 130 150 150
40 170 150 n/d n/d n/d n/d
50 200 180 n/d n/d n/d n/d
n/d = 검측되지 않음
40 및 50% v/v 유제에 대해서는 그의 고점도 및 불충분한 샘플 부피로 인해 점도 측정을 행하지 않았다. 10% 미만의 분산상 농도를 감소시킬 때 소적 안정성의 뚜렷한 저하가 관찰되었다. 예상된 바와 같이, 분산상 부피가 증가할 때 유제 점도가 증가하였다. 분산상 농도를 증가시킴으로써 단위 부피 당 소적의 수가 증가하고 따라서 점도가 증가하는데 그 이유는 소적이 점점 더 밀폐 충전 구조로 밀려들어가기 때문이다. 그러므로, 분산상 부피를 변화시킴으로써 유제 유동학적 특성이 조절될 수 있다. 또한, 유제 점도를 증가시킴으로써 유합(소적 성장)에 대한 유제 안정성이 아주 간단히 억제될 것으로 예상된다.
실시예 14
역 유제 안정성에 대한 분산 상의 효과
분산상 조성 만을 변화시켜 실시예 11의 유제 제제 및 유화 절차를 변형시켰다. 탈이온수, 각종 농도(0.02, 0.1, 0.2M)의 NaCl, 0.02M CaCl2및 0.02M AlCl3를 함유하는 역 유제를 제조하였다. 입도 분석은 실시예 11에 기재된 바와 동일한 절차 및 조건을 이용하여 수행하였다. 그 결과를 하기 표 VII에 나타내었다.
유제 I.D. 중앙 입경(㎛)
DI 수 4.00
0.02M NaCl 0.52
0.1M NaCl 0.22
0.2M NaCl 0.14
0.02M CaCl2 0.22
0.02M AlCl3 0.25
감소된 유제 입경은 NaCl 농도의 함수로서 관찰된다. 또한, 그 결과는 CaCl2또는 AlCl3중 어느 하나를 함유하는 제제가 제공된 NaCl 농도에 비해 더 작은 입도 분포를 갖는 유제를 형성했음을 나타낸다. 분산상의 이온 농도를 증가시키면 라멜라(Lα)가 역전된 육각형(HII) 전이 온도로 낮추어진다. 인산염기의 수화를 감소시킴으로써 그렇게 되며, 다음에 헤드 기 상호작용의 증가 및 단일층 자발 만곡(Ho)의 감소를 촉진시킨다. 상 거동에 대한 이가 및 다가 이온의 효과는 아주 복잡하며 잘 이해되지 않는다. 그러나, 그의 낮은 결합 상수로 인해 그것이 낮은 농도에서 큰 효과를 가질 수 있는 것으로 나타났다(Seddon, J.M., Biochem. Biophys. Acta, 1031 (1990) 1 참조). 그러므로, 소량의 이가 또는 다가 염의 첨가가 유리할 수 있다.
실시예 15
연속상 화학 특성 및 역 유제 안정성 사이의 관계
실시예 1에 기재된 바와 동일한 유화 절차 및 조건을 이용하여 역 유제 제제 3 ㎖를 제조하였다:
1% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE)
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
90% v/v 오일 또는 오일 혼합물(표 VIII 참조)
0.09% 염화 나트륨(Sigma Chemicals)
0.09% 염화 칼슘(Sigma Chemicals)
10% v/v 물
연속상 물리화학적 특성과 유제 안정성 사이의 상호 관계가 있는지를 확인하기 위하여 광범위한 오일로 역 유제를 제조하였다. 실시예 1에 기재된 유화 절차 및 조건에 따라 행하였다. 유제를 먼저 육안으로 체크하여 오일이 완전히 유화되었는지를 확인하였다. 유제의 역 특성은 탄화수소 오일, 즉, n-옥탄으로 희석한 후에 안정성에 의해 확인되었다. 표 II는 검사된 34가지의 오일, 그의 각각의 몰 부피(Vm), 굴절률(nD 20), α-편극성(α), 몰 굴절성(Rm), DOPE 용해성, 브로모헥산 임계 용액 온도(CSTBrHex) 및 유제 안정성 값을 기록하고 있다. 50 내지 600 ㎎의 DOPE를 오일 2 mL에 첨가하고 실온에서 1주일 동안 부드럽게 혼합함으로써 DOPE로 포화된 오일을 제조하였다. 그 용액을 4000 x g에서 30분 동안 원심분리시키고, 그 후에 오일로 포화된 DOPE를 주사기로 제거하였다. DOPE 함량을 문헌[Weers, J.G., Ni, Y., Tarara, T.E., Pelura, T.J., and Arlauskas, R.A., The Effect of molecuclar Diffusion on Initial Particle Size Distributions in Phospholipid-Stabilized Fluorocarbon Emulsions; Colloids and Surfaces, 84 (1994) 81 참조]에 기재된 방법에 따라서 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)에 의해 측정하였다. 샘플을 순수한 용액으로서 또는 2-프로판올:헥산(1:1(v/v))에 희석시킨 후에 주입하였다. 정량화는 외부 DOPE 표준 곡선을 참고로 하여 이루어졌다. nD 20값은 가능할 때 수동 굴절계를 사용하여 측정하였다. α, Rm및 nD 20값〈 1.34는 문헌[Le, T.D., and Weers, J.G., QSPR and GCA Models for Predicting the Normal Boiling Points of Fluorocarbons; J. Phys Chem, 99 (1995) 6739. Le, T.D., and Weers, J.G., Group Contribution-Additivity and Quantum Mechanical models for Predicting the Molar Refractions, Indices of Refraction, and Boiling Points of Fluorochemicals; J. Phys Chem, 99 (1995) 13909 참조]에 기재된 르(Le) 및 워스(Weers)에 의해 제안된 기 영향 활성 모델을 이용하여 계산하였다. CSTBrHex값은 1995년 9월 22일자로 보고된 르 등의 기술로부터 얻었다. 유제 안정성은 유제가 완전히 분해되는데 필요한 시간으로서 정의된다. 초음파 처리 시에 안정한 W/O 분산액을 생성하지 않는 오일 함유 제제를 불안정한 것으로 정의하였다.
유제 안정성은 연속상 nD 20(친지성) 및 그의 DOPE-용해성(표 VIII)과 강한 상관 관계가 있다. α, Rm, Vm또는 CSTBrHex와는 상관 관계가 없었다. 안정한 역 유제 형성은 약 1.34를 초과하는 nD 20을 갖는 오일 및 DOPE가 가용성인 오일에 의해 일어났다. 유제 안정성은 DBFH(약 3일) 및 DBFB(약 60일) 역 유제의 안정성을 비교할 때 입증되는 바와 같이 오일 nD 20의 작은 범위에 걸쳐 급격하게 감소하였다. 연속상 요건(즉, nD 20)은 또한 계면활성제(들) 및(또는) 분산상 조성에 좌우될 것이다. 콜레스테롤과 같은 보조 계면활성제의 사용 및(또는) AlCl3과 같은 다가 이온의 첨가는 사실상 필요한 연속상 nD 20값을 감소시킬 수 있다. 그 결과를 하기 표 VIII에 나타내었다.
연속상 오일 물리화학 특성 및 역 유제 안정성의 요약
화합물 조성 Vm(ml/몰) α-편극성(Å3) Rm(㎤) nD 20 DOPE 용해성(w/w%) CSTBrHex(℃) 유제 안정성(일)
디브로모헥산 C6H12Br 153.83 10.1 43.09 1.507 n/d n/a* 〉60
사염화탄소 CCl4 96.80 7.26 25.35 1.461 n/d n/a* 〉60
클로로포름 CHCl3 80.44 4.92 20.62 1.448 n/d n/a* 〉60
n-헥사데칸 C16H34 292.95 16.5 75.54 1.434 1.10 n/a* 〉60
CFC-113β26b C2F3ClBr2 122.91 7.94 30.57 1.428 n/d n/d 40
n-도데칸 C12H26 227.12 12.32 57.11 1.422 5.60 n/a* 〉60
n-데칸 C10H22 194.92 10.23 47.9 1.411 11.20 n/a* 〉60
n-옥탄 C8H18 162.52 8.14 38.69 1.398 23.40 n/a* 〉60
HCFC-132bβ2 C2H2F2Br2 100.02 5.08 23.84 1.385 22.30 n/d 60
CFC-316bc C4F6Cl4 176.29 11.08 41.28 1.383 2.05 n/d 30
n-헥산 C6H14 130.47 6.04 29.47 1.375 25.10 n/a* 〉60
F6H12 C18F13H25 391.33 20.03 88.07 1.367 n/d n/d 38
CFC-141b C2F4Cl2 93.56 5.41 20.65 1.361 20.80 n/d 30
CFC-113 C2F3Cl3 120.66 6.97 26.15 1.358 1.72 n/d 60
F6H10 C16F13H21 357.95 17.94 78.85 1.356 n/d n/d 23
CFC-317mab C4F7Cl3 165.23 9.53 35.78 1.353 BLQ n/d 40
DBFB C4F8Br2 171.60 8.97 36.68 1.351 0.62 -25.7 60
DBFH C6F12Br2 220.98 11.54 47.30 1345 BLQ -23.4 3
F6H8 C14F13H17 326.00 15.84 69.64 1.344 n/d -31.1 3
F8H8 C16F17H17 378.59 18.42 80.26 1.340 n/d -413 불안정
F6H6 C12F13H13 289.54 13.75 60.43 1.3381 n/d -3.6 불안정
FC-225 ca/cb C3HF5Cl2 130.93 6.31 27.88 1.331 BLQ n/d 불안정
F8H6 C14F17H13 338.62 16.32 71.05 1.331 n/d -14.4 불안정
F8H4 C12F17H9 304.67 14.23 61.83 1.321 n/d 14.4 불안정
PFHE C8F13H5 215.41 9.57 42.00 1.311 BLQ 24.8 불안정
CFC-318-mbb C4F8Cl2 161.30 7.98 30.28 1.311 n/d n/d 불안정
CFC-216ba C3F6Cl2 138.98 6.70 25.96 1.301 n/d n/d 불안정
F4H3 C7F9H7 190.63 8.04 35.98 1.301 n/d -41.5 불안정
PFHB C6F13Br 211.76 9.51 39.59 1.299 n/d 33.2 불안정
퍼플루브론 C8F17Br 261.24 12.08 50.21 1.299 BLQ 68.1 불안정
F4H2 C6F9H5 173.73 7.00 31.38 1.291 n/d -1.9 불안정
PFBB C4F9Br 164.76 6.93 28.97 1.281 BLQ -2.1 불안정
PFH C6F14 200.11 7.47 31.88 1.2511 BLQ 146.9 불안정
1nD값은 발표된 Le 및 Weers의 기술에 의해 계산됨. 다른 모든 값은 측정됨.n/a*= 이용가능하지 않음, 오일은 사용된 모든 브로모알칸과 완전히 혼화성임. 측정 가능하다면 모든 값은 〈-50℃일 것임.n/d = 검측되지 않음; BLQ = 정량화 범위 아래
실시예 16
역 유제 수명에 대한 연속상 굴절률의 효과
실시예 1에 기재된 바와 동일한 유화 절차 및 조건을 이용하여 다음 역 유제 제제 5 ㎖를 제조하였다:
1% w/v 1,2-디올레오일포스파티딜에탄올아민(DOPE)
(Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL)
90% v/v 오일 또는 오일 혼합물(표 IX 참조)
0.09% 염화 나트륨(Sigma Chemicals)
0.09% 염화 칼슘(Sigma Chemicals)
10% v/v 물
유제 수명 및 입도 분포를 퍼플루브론/DBFB 비의 함수로서 결정하였다. 각 유제 제제를 먼저 육안으로 체크하여 극성상이 적어도 몇시간 동안 유화된 채로 남아 있는지를 확인하였다. 유제의 역 특성은 탄화수소 오일, 즉, n-옥탄으로 희석한 후에 안정성에 의해 확인되었다.
0.55 미만의 퍼플루브론/DBFB 비를 갖는 유제는 극히 불안정하며 즉시 분해되었다. 샘플을 25 ℃에서 크림프 캡 바이알에서 밀봉 및 저장시켰다. 입도 분석은 실시예 11에 기재된 바와 동일한 절차 및 조건을 이용하여 수행하였다. 유제 수명 τ은 유제가 완전히 분해되는데 필요한 시간으로서 정의된다. 초음파 처리 시에 안정한 W/O 분산액을 생성하지 않는 오일 함유 제제를 불안정한 것으로 정의하였다. 표 IX는 검사된 퍼플루브론/DBFB 비에 대한 n12, 중앙 소적 직경 및 시간 단위의 유제의 수명을 나타낸다. 혼합물의 굴절률(n12)는 문헌[Taslc et al.; J. Chem. Eng. Data, 37:310-313, 1992]에 기재된 절차에 의해 평가하였다.
이상 오일 혼합물로 제제화된 역 유제의 안정성
χPFOB PFOB/DBFBn12 중앙 직경(㎛) 유제 수명t(시간)
0.000 1.351 0.41 3816
0.100 1.346 0.55 3816
0.200 1.340 0.63 2040
0.300 1.335 0.71 528
0.400 1.330 0.81 264
0.500 1.325 1.50 24
0.550 1.322 10.50 1
0.600 1.320 불안정 불안정
0.700 1.314 불안정 불안정
0.800 1.309 불안정 불안정
0.850 1.307 불안정 불안정
1 1.299 불안정 불안정
τ 값은 연속상 n12및 소적 직경 둘다와 상관 관계가 큰 것으로 밝혀졌으며, 그것은 연속상 분자의 계면활성제 브러쉬로의 침투도로 인한 단일층 자발 만곡(H0)에 대한 변화가 반영된 것이다. H0값은 연속상 친지성 또는 n12의 함수로서 감소된다. 거의 유제 분해 시점 약 n12= 1.320에서 유제 안정성의 급격한 증가가 n12의 작은 변화에 따라 일어난다. 이러한 효과는 다른 계면활성제에 대해서 관찰되었다[Kabalnov, A., and Weers, J., Macroemulsion Stability Within the Winsor III Region: Theory Versus Experiment; Langmuir, 12 (1996) 1931 참조]. 또한, 이 결과는 단일층 자발 만곡의 변화에 대한 유제 안정성에 관한 현재의 유제 안정성 이론과 질적으로 아주 잘 일치한다[Kabalnov, A., and Wennerstroem, H., Macroemulsion Stability: The Orientated Wedge Revisited; Langmuir, 12 (1996) 276 참조]. 유제 안정성 또는 수명은 또한 유제 평균 입도 및 전체 분포와 큰 상관 관계가 있는 것으로 밝혀졌다. 안정성이 불량한, τ≤24시간인 유제는 큰 중앙 직경을 가지며 넓은 입자 분포를 가졌다. DBFB/퍼플루브론 비가 증가할 때, 분포는 좁아지고 중앙 직경은 감소되었다.
덜 친지성인 오일(즉, 퍼플루브론)로 안정한 역 유제를 희석한 결과 유제의 신속한 유합 및 분해가 일어났다. 이러한 유합 및 분해 과정은 연속상 분자의 계면활성제 브러쉬로의 침투 감소가 반영된 것이다. 연속상(nD)의 친지성을 통한 유제의 안정성을 조절하는 능력은 분산상 성분의 침착을 지시하는데 사용될 수 있다.
본 발명을 특별한 바람직한 실시태양을 참고로 하여 설명하긴 하였지만, 본 발명의 범위는 다음 청구 범위에 의해 한정되며 적당한 등가물을 포함하는 것으로 추론되어야 한다.

Claims (39)

1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 분산 액체상;
1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및
유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하는 플루오로카본 제약 제제.
제1항에 있어서, 상기 제제가 열역학적으로 안정한 미세유제인 제제.
제1항에 있어서, 무기염, 완충제, 안정화제, 팽창 및 침투 제제 및 영양 제제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 분산 액체상 첨가제를 더 포함하는 제제.
제1항에 있어서, 상기 1종 이상의 친지성 플루오로카본이 할로겐화 퍼플루오로카본, 할로겐화 퍼플루오로에테르, 할로겐화 폴리에테르, 플루오로카본-탄화수소 디블록, 플루오로카본-탄화수소 에테르 디블록 및 그의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제4항에 있어서, 상기 친지성 플루오로카본이 할로겐화 퍼플루오로카본이고 할로겐화 퍼플루오로카본이 α,ω-디브로모-F-부탄인 제제.
제1항에 있어서, 상기 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제가 알코올, 지방산염, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딘산, 포스파티딜 에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 난황 인지질, 카르디오리핀, 글리세르글리코리피드, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤 및 아미노에틸포스포노리피드로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제1항에 있어서, 상기 비플루오르화 계면활성제가 저 친수성 친지성 발란스를 갖는 제제.
제7항에 있어서, 상기 비플루오르화 계면활성제가 스팬스(SPANS)(등록상표), 브리즈(BRIJs)(등록상표), 구에르베트 알코올 에톡실레이트, 디알킬 비이온성 계면활성제 및 디알킬 양쪽 이온성 계면활성제로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제1항에 있어서, 상기 비플루오르화 계면활성제가 모노불포화 지방산 잔기로 이루어진 인지질인 제제.
제9항에 있어서, 상기 인지질이 디올레오일 포스파티딜에탄올아민, 디올레오일포스파티딘산 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제1항에 있어서, 상기 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제가 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약, 심장혈관 제제, 효소, 핵산, 유전자, 바이러스성 벡터, 단백질 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제1항에 있어서, 유제의 자발 만곡을 감소시킬 수 있는 첨가제를 더 함유하는 제제.
제12항에 있어서, 상기 첨가제가 모노글리세리드, 디글리세리드, 알코올, 스테롤, 트리글리세리드, 알칸, 프레온스( Freons)(등록상표), 스쿠알렌 및 그의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제2항에 있어서, 상기 1종 이상의 친지성 플루오로카본이 할로겐화 퍼플루오로카본, 할로겐화 퍼플루오로에테르, 할로겐화 폴리에테르, 플루오로카본-탄화수소 디블록, 플루오로카본-탄화수소 에테르 디블록 및 그의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제2항에 있어서, 상기 1종 이상의 비플루오로화 계면활성제가 알코올, 지방산염, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딘산, 포스파티딜 에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 난황 인지질, 카르디오리핀, 글리세르글리코리피드, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤 및 아미노에틸포스포노리피드로 이루어진 군에서 선택된 제제.
제2항에 있어서, 상기 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제가 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약, 심장혈관 제제, 효소, 핵산, 유전자, 바이러스성 벡터, 단백질 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 제제.
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 액체상을 제공하고;
상기 액체상을 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제 및 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 플루오로카본상과 배합하여 유제 제제를 제공하고;
상기 유제 제제를 유화시켜 치료 또는 진단 제제를 제공하는 것으로 이루어진 치료 또는 진단 제제의 제조 방법.
제17항에 있어서, 상기 치료 또는 진단 제제가 열역학적으로 안정한 것인 방법.
제17항에 있어서, 상기 극성 액체가 물, 알코올, 폴리에틸렌 글리콜, 알킬 술폭시드 및 그의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제17항에 있어서, 상기 1종 이상의 친지성 플루오로카본이 할로겐화 퍼플루오로카본, 할로겐화 퍼플루오로에테르, 할로겐화 폴리에테르, 플루오로카본-탄화수소 디블록, 플루오로카본-탄화수소 에테르 디블록 및 그의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제17항에 있어서, 상기 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제가 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약, 심장혈관 제제, 효소, 핵산, 유전자, 바이러스성 벡터, 단백질 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제17항에 있어서, 상기 1종 이상의 비플루오로화 계면활성제가 알코올, 지방산염, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딘산, 포스파티딜 에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 난황 인지질, 카르디오리핀, 글리세르글리코리피드, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤 및 아미노에틸포스포노리피드로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제17항에 있어서, 유제의 자발 만곡을 감소시킬 수 있는 첨가제를 더 함유하는 것인 방법.
제17항의 방법에 따라 제조된 치료 또는 진단 제제.
제18항의 방법에 따라 제조된 치료 또는 진단 제제.
제22항의 방법에 따라 제조된 치료 또는 진단 제제.
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 분산 액체상; 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하는 제약 유제를 제공하고;
상기 제약 유제를 환자에게 투여하는 것으로 이루어진, 치료제 또는 진단제를 환자에게 전달하는 방법.
제27항에 있어서, 상기 제약 유제가 열역학적으로 안정한 미세유제인 방법.
제27항에 있어서, 상기 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제가 알코올, 지방산염, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딘산, 포스파티딜 에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 난황 인지질, 카르디오리핀, 글리세르글리코리피드, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤 및 아미노에틸포스포노리피드로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제27항에 있어서, 상기 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제가 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약, 심장혈관 제제, 효소, 핵산, 유전자, 바이러스성 벡터, 단백질 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제27항에 있어서, 상기 제약 유제가 기관내 튜브, 폐내 카테테르 및 분무기로 이루어진 군에서 선택된 전달 장치에 의해 환자에게 투여되는 방법.
제27항에 있어서, 상기 제약 유제가 국소, 피하, 폐, 근육내, 복강내, 코, 질, 직장, 귀, 구강 및 안구 경로로 이루어진 군에서 선택된 투여 경로로 환자에게 투여되는 방법.
a) 1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 액체상을 제공하는 단계;
b) 상기 액체상을 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제 및 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 플루오로카본상과 배합하여 유제 제제를 제공하는 단계;
c) 상기 유제 제제를 유화시켜 치료 또는 진단 역 유제를 제공하는 단계;
d) 상기 치료 또는 진단 역 유제를, 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제로 이루어지며 상기 극성 액체와 동일하거나 또는 상이한 제2 극성 액체에 첨가하여 복합 제제를 제공하는 단계; 및
e) 상기 복합 제제를 유화시켜 복합 유제를 제공하는 단계로 이루어진 복합 유제의 제조 방법.
제28항에 있어서, 상기 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제가 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약, 심장혈관 제제, 효소, 핵산, 유전자, 바이러스성 벡터, 단백질 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
1종 이상의 극성 액체 및 1종 이상의 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제로 이루어진 분산 액체상; 1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및 유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 갖는 역 유제를 제공하고;
상기 역 유제를 비친지성 플루오로카본과 배합하여 분산액을 형성하는 것으로 이루어진 제약 분산액의 제조 방법.
제35항에 있어서, 상기 극성 액체 가용성 치료제 또는 진단제가 호흡 제제, 항생 물질, 항염증약, 항종양약, 마취제, 조영제, 안약, 심장혈관 제제, 효소, 핵산, 유전자, 바이러스성 벡터, 단백질 및 그의 배합물로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제35항에 있어서, 상기 비친지성 플루오로카본이 브롬화 플루오로카본, 염소화 플루오로카본 및 F-알칸으로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
제35항에 있어서, 상기 1종 이상의 비플루오로화 계면활성제가 알코올, 지방산염, 포스파티딜콜린, N-모노메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딘산, 포스파티딜 에탄올아민, N,N-디메틸-포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜 에틸렌 글리콜, 포스파티딜메탄올, 포스파티딜에탄올, 포스파티딜프로판올, 포스파티딜부탄올, 포스파티딜티오에탄올, 디피타노일 포스파티드, 난황 인지질, 카르디오리핀, 글리세르글리코리피드, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤 및 아미노에틸포스포노리피드로 이루어진 군에서 선택된 것인 방법.
1종 이상의 극성 액체로 이루어진 분산 액체상;
1종 이상의 친지성 플루오로카본으로 이루어진 연속 플루오로카본상; 및
유효 유화량의 1종 이상의 비플루오르화 계면활성제를 함유하는 플루오로카본 제제.
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Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999021541A2 (en) * 1997-10-24 1999-05-06 Alliance Pharmaceutical Corp. Amelioration of ischemic damage using synthetic oxygen carriers
WO1999024016A1 (en) * 1997-11-10 1999-05-20 Sonus Pharmaceuticals, Inc. Emulsions for aerosolization and drug delivery
US6127430A (en) * 1998-12-16 2000-10-03 3M Innovative Properties Company Microemulsions containing water and hydrofluroethers
US6159917A (en) * 1998-12-16 2000-12-12 3M Innovative Properties Company Dry cleaning compositions containing hydrofluoroether
US6312665B1 (en) * 1998-12-21 2001-11-06 Generex Pharmaceuticals Incorporated Aerosol formulations for buccal and pulmonary application
US7087215B2 (en) 1998-12-21 2006-08-08 Generex Pharmaceuticals Incorporated Methods of administering and enhancing absorption of pharmaceutical agents
EP1338272A1 (en) * 1998-12-21 2003-08-27 Generex Pharmaceuticals Inc. Aerosol formulations for buccal and pulmonary application comprising chenodeoxycholate or deoxycholate
US6271200B1 (en) 1998-12-21 2001-08-07 Generex Pharmaceuticals Inc. Proteinic drug delivery system using aerosolized membrane-mimetic amphiphiles
US6849263B2 (en) 1998-12-21 2005-02-01 Generex Pharmaceutical Incorporated Pharmaceutical compositions for buccal delivery of pain relief medications
US6294153B1 (en) 1998-12-21 2001-09-25 Generex Pharmaceuticals, Inc. Aerosol pharmaceutical formulation for pulmonary and nasal delivery
US6451286B1 (en) * 1998-12-21 2002-09-17 Generex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions for buccal and pulmonary administration comprising an alkali metal alkyl sulfate and at least three micelle-forming compounds
US6375975B1 (en) * 1998-12-21 2002-04-23 Generex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions for buccal and pulmonary application
US7357937B2 (en) * 2002-09-24 2008-04-15 Therox, Inc. Perfluorocarbon emulsions with non-fluorinated surfactants
GB0307403D0 (en) * 2003-03-31 2003-05-07 Medical Res Council Selection by compartmentalised screening
AU2003903296A0 (en) * 2003-06-30 2003-07-10 Raustech Pty Ltd Chemical compositions of matter
EP1815869A4 (en) * 2004-11-24 2011-04-06 Nanocarrier Co Ltd PROCESS FOR CHANGING THE MORPHOLOGY OF BLOCK COPOLYMERS
EP3913375A1 (en) 2006-01-11 2021-11-24 Bio-Rad Laboratories, Inc. Microfluidic devices and methods of use in the formation and control of nanoreactors
EP2530167A1 (en) 2006-05-11 2012-12-05 Raindance Technologies, Inc. Microfluidic Devices
US9562837B2 (en) 2006-05-11 2017-02-07 Raindance Technologies, Inc. Systems for handling microfludic droplets
FR2903602B1 (fr) * 2006-07-12 2012-10-26 Seppic Sa Formulation injectable a liberation prolongee de principes actifs, procede pour sa preparation
US8772046B2 (en) 2007-02-06 2014-07-08 Brandeis University Manipulation of fluids and reactions in microfluidic systems
US8592221B2 (en) 2007-04-19 2013-11-26 Brandeis University Manipulation of fluids, fluid components and reactions in microfluidic systems
AU2009206391A1 (en) * 2008-01-22 2009-07-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Volatile anesthetic compositions and methods of use
EP2123256A1 (en) 2008-05-19 2009-11-25 Ruhr-Universität Bochum Perfluorcarbon nanoemulsions with endocytosis enhancing surface for gene-transfer
US12038438B2 (en) 2008-07-18 2024-07-16 Bio-Rad Laboratories, Inc. Enzyme quantification
EP2315629B1 (en) 2008-07-18 2021-12-15 Bio-Rad Laboratories, Inc. Droplet libraries
US9399797B2 (en) 2010-02-12 2016-07-26 Raindance Technologies, Inc. Digital analyte analysis
EP4484577A3 (en) 2010-02-12 2025-03-26 Bio-Rad Laboratories, Inc. Digital analyte analysis
EP2587917A4 (en) * 2010-07-01 2015-05-06 Mtm Res Llc THERAPIES USING ANTIFIBROBLASTIC FLUOROCHEMICAL EMULSIONS
WO2012003457A1 (en) * 2010-07-01 2012-01-05 Mtm Research Llc Anti-fibroblastic fluorochemical emulsion therapies
CN103228283A (zh) * 2010-11-29 2013-07-31 千寿制药株式会社 含有二氟泼尼酯和托普霉素的水包油型乳状液组合物
EP3736281A1 (en) 2011-02-18 2020-11-11 Bio-Rad Laboratories, Inc. Compositions and methods for molecular labeling
CA2830324A1 (en) * 2011-03-31 2012-10-04 Konstanze Schafer Perfluorinated compounds for non-viral transfer of nucleic acids
DE202012013668U1 (de) 2011-06-02 2019-04-18 Raindance Technologies, Inc. Enzymquantifizierung
US8658430B2 (en) 2011-07-20 2014-02-25 Raindance Technologies, Inc. Manipulating droplet size
US11901041B2 (en) 2013-10-04 2024-02-13 Bio-Rad Laboratories, Inc. Digital analysis of nucleic acid modification
US9944977B2 (en) 2013-12-12 2018-04-17 Raindance Technologies, Inc. Distinguishing rare variations in a nucleic acid sequence from a sample
WO2015192093A1 (en) * 2014-06-12 2015-12-17 Unger Evan C Phospholipid composition and microbubbles and emulsions formed using same
US9699301B1 (en) * 2015-05-31 2017-07-04 Emma Michaela Siritzky Methods, devices and systems supporting driving and studying without distraction
CN109908085B (zh) * 2019-04-23 2021-12-03 董红燕 一种呼吸道给药的药物载体、其制备方法及其在制备治疗心脏病药物中的应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2720943B1 (fr) * 1994-06-09 1996-08-23 Applic Transferts Technolo Emulsions inverses stables à forte concentration en composé(s) fluoré(s) et leur utilisation pour l'administration pulmonaire de médicaments et pour la fabrication d'émulsions multiples.

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